WO2018112579A1 - Método para aumento da toleráncia de plantas a seca e plantas transgênicas - Google Patents

Método para aumento da toleráncia de plantas a seca e plantas transgênicas Download PDF

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WO2018112579A1
WO2018112579A1 PCT/BR2017/000152 BR2017000152W WO2018112579A1 WO 2018112579 A1 WO2018112579 A1 WO 2018112579A1 BR 2017000152 W BR2017000152 W BR 2017000152W WO 2018112579 A1 WO2018112579 A1 WO 2018112579A1
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plants
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scbhlh47
drought
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PCT/BR2017/000152
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Inventor
Vanessa Regina GONÇALVES
Isabella de Oliveira POLETO
Glaucia Mendes Souza
Carolina LEMBKE
Marcelo Menossi Teixeira
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Universidade Estadual De Campinas - Unicamp
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/12—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield
    • A01H1/122—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • A01H1/1225—Processes for modifying agronomic input traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold or salt resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)

Definitions

  • This invention fits into the field of biotechnology, specifically plant yield, and describes a method for increasing plant tolerance to drought by overexpressing sugarcane gene in other species. of plants.
  • the present invention relates to transgenic plants obtained according to the method described and comprising the sugarcane target gene polynucleotide sequence.
  • Drought is one of the major abiotic stresses in sugarcane cultivation. climate instability has drastically altered drought periods in different regions of the planet, and the reduction in soil water availability is a major cause of economic damage to agriculture. Still, with the increase of. global temperature due to climate change, the effects of drought on plants are expected to grow.
  • transcription factors act upstxeam in regulatory pathways; iii) there is a " crosstalk "with other functionally related genes for stress tolerance; (ii) are conserved, with which they can be validated in other plants and (iv) there are already reports in the literature of. genes homologous to sugarcane genes that protect against stress.
  • the present invention 'proposes a method for increasing drought tolerance in plants, in particular Arabidopsis thaliana, by placing a vector containing the polynucleotide sequence of ScbHLH.47 sugarcane.
  • the Scbl-ILH47 gene is homogeneous with.
  • the ⁇ bHLH47 gene known in A, thaliana and overexpressing plants can increase field productivity under water stress conditions. Further, the invention may be extended to homologous genes of other plant species.
  • transgenic plants overexpressing the bHLH122 and bHLH35 genes also confer severe drought stress tolerance, however, the overall identity percentage between proteins encoded by the ScbHLH47 and ⁇ HLH122 genes is 14. , 58% and between Scb LH47 and PebHLHSS is 12.9%.
  • the present 'invention provides a method for increasing plant tolerance to drought, which is conferred by overexpression of the gene & ScbHLM47 the cane sugar
  • said invention relates to the obtained transgenic plants, which comprise the SCbHLH 7 polynucleotide sequence.
  • Figure 1 schematically depicts vector pGWB608: containing the SchB H47 gene controlled by the CamV35S promoter.
  • FIG. 2 graphically represents the quantitative PCR analysis (qPCR) of Scbl ⁇ LAle gene expression in two sugarcane varieties, in. that the black bar indicates irrigated conditions and the gray bar indicates water stress conditions.
  • Figure 3 shows the expression of the ScbU H47 gene in transgenic A. thal ⁇ ana plants by RT-PCR of 3 independent homozygous events.
  • Figure 4 shows the irrigation suspension survival trial, where IBll ', ⁇ 12 : ', Biy and ⁇ ⁇ 1 ? Independent homozygous events for the ScbH.LH47 gene and 'l' ,% VV2 "indicate independent events containing only the empty vector.
  • Figure 5 graphically analyzes the leaf area of .3 independent events overexpressing the ScbHLH47 gene, and VV containing only the empty vector under moderate stress to water stress.
  • Figures 6 & 6B graph the chlorophyll 'a' and 'b' content in 3 independent events overexpressing the ScbHLH47 gene after moderate watering treatment.
  • This invention describes a method for increasing drought tolerance as well as said transgenic plants obtained.
  • Transgenic plants comprise the sequence of a sugar cane polynucleotide which encodes a polypeptide having 33.3% homologous to A. thiana protein called bHLH47. Further, the invention may be extended to homologous genes. of other plant species.
  • polynucleotide sequence is indicated in SEQ. ID No. 1 and the polypeptide translated from this sequence is indicated in SEQ, ID. No. 2.
  • Polynucleotide directly or indirectly controls the response of plants to water stress.
  • the method comprises the steps of:
  • step (a) amplification of the sugarcane gene sequence ScbHLH47 was performed using the specific oligonucleotides indicated in SEQ. ID No. 3 and in SEQ. ID No. 4.
  • the recombinant construct includes the Cauliflower Mosaic Virus 35S promoter (Cam.V35S) and the Nopalinasintase (OS) gene terminator, as shown in Figure 1.
  • step (d) wild plants of A. thaliana are transformed using the floral dip method, or if Agrobacterium-mediated a, in particular Agrobacterium tumefaciens GV31Q1.
  • the transgenic plants obtained following the ScbHLH47 comprise sugarcane, as defined in SEQ tale .. :. ID No. 1. which translates the polypeptide indicated in SEQ. ID, # 2.
  • A. thaliana wild seeds were incubated for 4 days and then sown directly into the soil, the transformation being performed by the floral dip method. The leaves of the transgenic plants were collected for DNA extraction and confirmation of the transgene presence by PCR. Plant seeds with confirmed insertion of the ScbHLH47 gene were cultivated for event selection with single copies of the ScbH H47 gene. Then single copy events were selected for homozygous event production and homozygous plant leaves were used for RNA extraction after 3 weeks of germination,
  • FIG. 4 shows that one of the events of the A. tiana plants overexpressing the ScbHLH47 gene, called "B12", had a 50% survival rate after rehydration and no control plant survived (VV). Thus, we can conclude that overexpression of the ScbHLH47 gene in A plants. thal iran contributes to greater survival of water stress by suspension of irrigation.
  • A. thalianatxgens homozygous and A. tfraian plants containing only the empty vector ( ⁇ V) were grown on a specific substrate. The plants grew under normal conditions and were subjected to moderate stress (1.2 g water / g dry soil) for 21 days. At the end of the treatment, rosettes were collected for analysis of: leaf area and chlorophyll.
  • Chlorophyll extraction was done with 80% acetone from 200 mg fresh leaf, according to Arnon protocol (1949). The supernatant was read at 645 nm and espectrofotôraetro for the chlorophyll a and 663 nm for chlorophyll H f.

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Abstract

A presente invenção descreve ura método para aumento da tolerância de plantas a seca, a qual è conferida por meio da superexpressão do gene ScbHLH47, homólogo ao gene AtbHLH4 7 de Arabidopsisthaliana. Ainda, a invenção pode ser ampliada para os genes homólogos de outras espécies de plantas. Ainda, esta invenção se refere às plantas transgênicâs obtidas, as quais compreendem a sequência de. polinucleotideo ScbHLH47 da cana-de-açúcar.

Description

MÉTODO PARA AUMENTO DA TOLERÂNCIA DE PLANTAS A SECA E
PLANTAS TRANSGÊNI CAS
Caapo da. xnvenção:
[1] Esta invenção se insere no campo da biotecnologia, mais especificamente no que diz respeito à produtividade vegetal, e descreve.- -ura método para aumento da tolerância de plantas a seca pela superexpressão de gene da cana-de-açúcar em outras espécies de plantas.
[2] Adicionalmente, a presente invenção se refere às plantas transqênicas obtidas de acordo com o método descrito e compreendendo a sequência de polinucíeotídeedo gene alvo da cana-de-açuea .
Fundamentos da Invenção:
[3] O aumento do crescimento populacional, bem como a redução de terras disponíveis para a agricultura, afeta a produção total das plantas cultivadas.
[4] Adicionalmente, um fator importante que reduz produtividade, são os estresses abióticos, sendo que, de todos os recursos físico-químicos utilizados pelas plantas (água, nutrientes, gás carbónico, oxigénio e luz solar) , a água é o recurso roais límitante.
[5] A seca é um dos principais estresses abióticos no cultivo da cana-de-açúcar. As instabilidadesclimáticas alterara drasticamente os períodos de seca em diferentes regiões do planeta e a redução da disponibilidade de água no solo é a principal causa de prejuízos económicos na agricultura. Ainda, com o aumento da. temperatura global decorrente das mudanças climáticas, espera-se que os efeitos da seca nas plantas cresçam.
[6] Tendo em- ista os eventos de escassez hídrica que ocorrem em todas as áreas cultivadas, faz-se necessário o desenvolvimento de variedades que apresentem uma tolerância ao déficit hídrico melhorada.
[7] Em vista desse fato, a análise do conhecimento adquirido acerca dos fatores de transcrição pode contribuir para modular a tolerância ao déficit hídrico, pois: (íí os fatores de transcrição atuam "upstxeam" nas vias de regulação; íii) existe um "crosstalk" com outros genes relacionados funcionalmente para conferir tolerância a estresses; (iíi) são conservados, com o qual podem ser validados em outras plantas e (iv) já existem relatos na literatura de. genes homólogos aos genes da cana que protegem contra o estresse.
[8] Sendo assim, a presente invenção' propõe um método para aumento da tolerância de plantas à seca, em especial a Arabidopsís thaliana, pela inserção de um vetor contendo a sequência de polinucleotideo ScbHLH.47 de cana-de-açúcar .
[9] O uso da Ã. haliana na validação de genes da cana- de-açúcar é uma alternativa interessante, devido ao amplo conhecimento adquirido sobre essa planta nos estudos funcionais de genes.
[10] O gene Scbl-ÍLH47 tem homoiogia com. o gene ÃtbHLH47 conhecido em A, thaliana e as plantas que o superexpressam podem aumentar a produtividade no campo em condições de estresse hídrico. Ainda, a invenção pode ser ampliada para os genes homólogos de outras espécies de plantas.
Estado da téc-nxca:
[11] Alguns documentos do estado da técnica descrevem a superexpressâo de genes para conferir tolerância às mais diversas situações, tais como os documentos US 2015/0197764 Al e US 2015/0101079 Ai.
[12] No estudo "0sbBLHl4S, a basichelix-loop- helixprot in , inteiactswithOsJAZprot ins in a j asmona tesígnalingpathwayleadingtodrough 11o1erance in ríce" (Seo, J. S. et ai., 2011), plantas transgênicas su e expre-ssando o gene OsbHLH148 também conferem tolerância ao estresse por seca severa. Entretanto, a porcentagem de identidade global entre as proteínas codificadas pelos genes ScbHLH47 e OsbHLH148 é de apenas 13,75%.
[13] Era "bELH122 ísimpoxtant for droughtandosmotic stress resistance in Arabidopsisand in therepressíonof ASA catabolism" (Líu, ., 2014) e A novel bHLHtranscriptíonfactor PebHLH.35 fromPopul useuphra ticaconfersdro ght tol erançethroughregula ti ngstorna ta1deveiopment, photosynthesisandgxowth in
Azabidopsís" {Dong, ' Y.., 2014), plantas transgênicas superexpressando os genes bHLH122 e bHLH35 também conferem tolerância ao estresse por seca severo, no entanto, a porcentagem de identidade global entre as proteínas codificadas pelos genes ScbHLH47 e ÒHLH122 é de 14,58% e entre Scb LH47 e PebHLHSS é de 12, 9%.
[14] Genes como o bHLH92 e o ÂtMYC2 também, conferem, respectivamente, tolerância ao estresse osmótico por manitol (Jiang, Y. et al. , 2009) e sensibilidade ao ABA (Abe, H . et ai., 2003), mas não foi identificada tolerância à seca nas plantas transgênicas superexpressando os referidos genes.
Breve descxição da invenção:
[15] A presente' invenção descreve um método para aumento da tolerância de plantas a seca, a qual é conferida por meio da superexpressão do gene ScbHLM47&a cana-de- açúcar .
[16] Ainda, a referida invenção se refere às plantas transgênícas obtidas, as quais compreendem a sequência de polinuc1eotídeoScbHLH 7.
Breve descrição das figuras:
[17] A Figura 1 representa esquematicamente o vetor pGWB608: contendo o gene SchB H47control.ado pelo promoto CamV35S.
[183 A Figura 2 representa graficamente a análise po PCR quantitativa (qPCR) da expressão do gene ScblíLAle duas variedades de cana-de-açúcar , em. que a barra preta indica condições irrigadas e a barra cinza condições de estresse hídrico .
[19] A Figura 3 mostra a expressão do gene ScbU H47 em plantas transgênícas de A. thalíana por RT-PCR de 3 eventos homozi góticos independentes.
[20] A Figura 4 mostra o ensaio de sobrevivência com suspensão de rega, em que IBll' , Β12:' , Biy e λΒ1 ? 5§ο eventos homozigóticos independentes para o gene ScbH.LH47 e ' l' e ,%VV2" indicam eventos independentes contendo somente o vetor vazio.
[21] A Figura 5 representa graficamente a análise de área foliar de .3 eventos independentes superexpressando o gene ScbHLH47, e VV contendo somente o vetor vazio sob estresse moderado ao estresse hídrico.
[22] As Figuras 6& e 6B representam, graficamente o teor de clorofílas 'a' e 'b' em 3 eventos independentes superexpressando o gene ScbHLH47 após o tratamento de rega moderada .
Descrição detalhada da invenção: [23] Esta invenção descreve um método para aumento da tolerância de plantas a seca, bem como as referidas plantas transgênicas obtidas .
[24] As plantas transgênicas compreendem a sequência de um polinucleotídeoda cana-de~açúcar o qual codifica um polipeptídeo apresentando 33,3% de homologiá com a proteína de A.thãliana denominada bHLH47.Ainda, a invenção pode ser ampliada para os genes homólogos de outras espécies de plantas .
[25] A sequência do polinucleotideo está indicada na SEQ. ID. n° 1 e o polipeptideo traduzido a partir desta sequência está indicado na SEQ, ID. n° 2. 0 polinucleotideo controla: direta ou indiretamente a resposta de plantas contra o estresse hídrico.
[26] 0 método compreende as etapas de:
(a) Amplificação da sequência do gene ScbHLH47 da cana- de-açúcar;
(b) Inserção^ do produto da amplificação no vetor Gateway; Ce) Extraçâo do plasmídeo resultante e clonagem no vetor pGWBGOS, de forma que a região codificante do gene ScbHLH 7 {Seq ID No 1) este a operacio almente ligada a um promotor e um terminador; e
(d) Transformação das plantas.
[27] Na etapa (a), a amplificação da sequência do gene ScbHLH47 da cana-de-açúcar foi realizada, por meio do uso dos oligonucleotideos específicos indicados na SEQ . ID. n° 3 e na SEQ . ID. n° 4.
[28] Ao final da etapa (c) , a construção recombinante inclui o promotor 35S do vírus do mosaico de couve-flor (Cam.V35S) e o terminador do gene da Nopalinasintase ( OS), tal como mostrado na Figura 1.
[2.9] Por fim, na etapa (d), as plantas selvagens de A. thaliana sã transformadas utilizando o método "floral dip" , ou se a, mediado por Agrobacterium, em especial Agrobacterium tumefaciens GV31Q1.
[30] As plantas transgênicas obtidas compreendem a sequência ScbHLH47 da cana-de-açúcar, tal conto.. definida na SEQ:. ID. n° 1,. a qual traduz o polípeptideo indicado na SEQ. ID, n° 2.
T&st&s realizadas :
- Avaliação da expressão gênica de ScbHI.H47 -em_piantas §__ cana ~de-açúcar :
[ 31] Para avaliar o nível de expressão do gene Scb L 47, foram utilizadas folhas de dois cultivares de cana-de- açúcar, a saber, RB86751S (maior tolerância à seca) e RB855536 (menor tolerância à seca), crescidas sob irrigação ou suspensão de rega (sequeiro) .
[32 ] Como gene de referência, foi utilizado o gene que codifica a poliubiqu.it ina da cana-de-açúcar. As. folhas foram coletadas 7 meses após o plantio e as reações de PCR quantitativo (qPCR) usou oligonucleotídeos específicos.
[33] 0 resultado da qPCR mostrou que o gene ScbHLH47 é induzido por estresse de déficit hídrico nas duas variedades de cana analisadas. Os valores estatísticos foram significativos no cultivar mais tolerante ao estresse por seca. (RB867515), conforme mostrado na Figura 2.
Produção das plan tas, trarisgêxii cas e análise da expressão do gene ScbKLH47 ;
[34] As sementes selvagens de A. thaliana foram incubadas por 4 dias e depois semeadas diretamente no solo, sendo a transformação realizada peio método "floral dip". As folhas das plantas transgênicas foram coletadas para extraçâo de DNA e confirmação da presença do transgene por PCR. As sementes das plantas com inserção confirmada do gene ScbHLH47 foram cultivadas para sèleção de eventos com cópias únicas do gene ScbH H47. Em seguida, os eventos de cópias únicas foram selecionados para a produção de eventos em homozigose e as folhas de plantas homozigóticas foram utilizadas na extraçâo de RNA após 3 semanas de germinação,
[35] O resultado da amplificação de cD A confirmando a expressão do gene ScbHLH47 em plantas de Arabidopsis é mostrado na Figura 3.
- Teste de sobrevivência por suspensão de rega
[36] Sementes de 3 eventos das plantas de Arabidopsis transgênicas homozigotas e plantas de Arabidopsis contendo somente o vetor vazio (VV) fo am cultivadas .era. substrato especifico. As plantas cresceram em condições normais e, após 10 dias de rega normal, o peso dos potes foi normalizado para 100% da capacidade de água e a rega foi suspensa por 2 semanas, até a maioria das plantas apresentarem sinais claros de murchamento .
[37] Após esse período, as plantas foram reid atadas e, após 48h, foi determinado o número de plantas que sobrevi eram.
[38] A Figura 4 mostra que um dos eventos das plantas de A. t alianasuperexpressando o gene ScbHLH47, chamado de "B12", apresentou uma taxa de sobrevivência de 50% após a reidratação e nenhuma planta usada como controle sobreviveu (VV) . Assim, podemos concluir que a superexpressão do gene ScbHLH47 em plantas de A . thal íanacontribui para maior sobrevivência ao estresse hídrico por suspensão de rega.
- Teste de sobrevivência em ensaio de reg moderada :
[39] Sementes de 3 eventos das plantas de
A. thalianatxãnsgênxcas homozígotas e plantas de A. tfraíianacontendo somente o ·-vetor · vazio (¥V) foram cultivadas em substrato específico. As plantas cresceram era condições normais e foram submetidas ao estresse moderado (1,2 g de água / g de solo seco) por 21 dias. Ao finai do tratamento, as rosetas foram coletadas para análises de: área foliar e clorofila.
[40'] Para medição de área foliar, as folhas foram cortadas e a área da roseta foi medida cora o programa ImageJ (http : / Imagej . ni . gov./ij } . Os eventos transgênícos apresentaram .maior área foliar do que o vetor vazio sob condições de rega moderada com diferenças estatísticas (conforme pode ser observado na Figura 5).
- Ensaio de teor de clorofila :
[41] A extração de clorofila foi feita com Acetona 80 % a partir de 200 mg de folha fresca, conforme protocolo de Arnon (1949). O sobrenadante foi lido e espectrofotôraetro a 645 nm para a clorofila a' e 663 nm para a clorofila ^hf .
[42] A medição das clo ofilas- demonstrou que os eventos transgênicos apresentaram diferença estatística ao serem comparados ao vetor vazio para ambos o pigmentos, sendo que os níveis de clorofila "hr foram ainda mais elevados (vicie Figura 6) .

Claims

REIVINDICAÇÕES
1. Método para aumento da tolerância de plantas a seca earacter zado pelo fato dê compreender as etapas de:
(a) Amplificação da sequência do gene ScbHLH47 da Canade,-açúcar ;
(b; Inserção do produto da amplificação no vetor Gateway;
(c) Extração do plasmldeo resultante e clonagem no vetor pGWB608, de forma que a região codificante do gene ScbHLH47 (Seq ID No 1) esteja operacionalmente ligada a um. promotor e um terminador; e
(d) Transformação das plantas.
2. Método, de acordo com. a reivindicação 1, caracterizado peio fato de, na etapa (a) , a amplificação da sequência do gene ScbHLH4? da cana-de-açúcar ser realizada por meio do uso dos oligonucleotideos específicos indicados na SEQ. ID. n° 3 e na SEQ. ID. n° 4.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de, ao finai da etapa (d) , a construção recombinar*te incluir o promotor 353 do vírus do mosaico de couve-flor (CaraV35S) e o terminador do gene da Nopaiinasintase (NOS) .
4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado peio fato de, na etapa (e) , as sementes selvagens de Ã.thaliana serem transformadas utilizando o método "floral dip" .
5. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de o método "floral dip" ser mediado po Agrobacterium, era especial Agrobacteri m tmnafaciens GV3101.
6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracter!zado pelo fato de ser aplicável aos genes homólogos de outras espécies de plantas.
7. Plantas transgênícas caracterizadas pelo fato de serem transformadas de acordo com o método tal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.
. Plantas transgênícas, de acordo com a reivindicação "', caracterizadas pelo fato de compreender o gene ScbELB47 da cana-de-açúcar, tal como definido na SEQ. ID. n° 1, que codifica o polipeptideo indicado na SEQ. ID. n° 2, em que o referido polipeptideo apresenta 83,3% de omologia com o gene AtbHLH47.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111118024A (zh) * 2020-01-16 2020-05-08 四川农业大学 一种密罗木基因MfbHLH44及其应用
CN113817039A (zh) * 2021-11-01 2021-12-21 海南大学 一种增强植物抗旱性蛋白VaPBP2-L及应用
CN114717245A (zh) * 2022-04-12 2022-07-08 湖南农业大学 MsbHLH35基因及其编码蛋白在调控紫花苜蓿产量和耐渍性中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060015972A1 (en) * 1999-03-23 2006-01-19 Mendel Biotechnology, Inc. Plant transcriptional regulators of drought stress
US20140033368A1 (en) * 2011-02-28 2014-01-30 Valerie Frankard Plants Having Enhanced Yield-Related Traits and Producing Methods Thereof
WO2015054106A1 (en) * 2013-10-07 2015-04-16 Monsanto Technology Llc Transgenic plants with enhanced traits

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060015972A1 (en) * 1999-03-23 2006-01-19 Mendel Biotechnology, Inc. Plant transcriptional regulators of drought stress
US20140033368A1 (en) * 2011-02-28 2014-01-30 Valerie Frankard Plants Having Enhanced Yield-Related Traits and Producing Methods Thereof
WO2015054106A1 (en) * 2013-10-07 2015-04-16 Monsanto Technology Llc Transgenic plants with enhanced traits

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CASTLLHOS ET AL.: "Possible roles of basic helix-loop-helix transcription factors in adaptation to drought", PLANT SCIENCE, vol. 223, June 2014 (2014-06-01), pages 1 - 7, XP028640705 *
POLETTO ET AL.: "Caracterização molecular do gene ScbHLH47 de cana-de-açûcar", XXIV CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTIFICA DA UNICAMP, 19 October 2016 (2016-10-19), XP055496227 *
SEO ET AL.: "OsbHLH148, a basic helix-loop-helix protein, interacts with OsJAZ proteins in a jasmonate signaling pathway leading to drought tolerance in rice", PLANT J, vol. 65, no. 6, March 2011 (2011-03-01), pages 907 - 921, XP055496233 *
ZHAI ET AL.: "The wheat transcription factor, TabHLH39, improves tolerance to multiple abiotic stressors in transgenic plants", BBRC, vol. 473, 16 April 2016 (2016-04-16), pages 1321 - 1327, XP055496229 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111118024A (zh) * 2020-01-16 2020-05-08 四川农业大学 一种密罗木基因MfbHLH44及其应用
CN111118024B (zh) * 2020-01-16 2021-03-30 四川农业大学 一种密罗木基因MfbHLH44及其应用
CN113817039A (zh) * 2021-11-01 2021-12-21 海南大学 一种增强植物抗旱性蛋白VaPBP2-L及应用
CN113817039B (zh) * 2021-11-01 2022-12-02 海南大学 一种增强植物抗旱性蛋白VaPBP2-L及应用
WO2023070936A1 (zh) * 2021-11-01 2023-05-04 海南大学 一种增强植物抗旱性蛋白VaPBP2-L及应用
CN114717245A (zh) * 2022-04-12 2022-07-08 湖南农业大学 MsbHLH35基因及其编码蛋白在调控紫花苜蓿产量和耐渍性中的应用
CN114717245B (zh) * 2022-04-12 2023-08-11 湖南农业大学 MsbHLH35基因及其编码蛋白在调控紫花苜蓿产量和耐渍性中的应用

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