WO2014208184A1 - 分析装置 - Google Patents
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Abstract
Description
DNA分子の実質的な移動速度=外部電場による移動速度-温度差導入による速度トなる。これにより封鎖電流計測においても、外部電場力に拮抗する温度駆動力を与えることにより、DNA分子702のナノポア通過速度を制御し、低減することが可能となる。
(b)フローセルに2本鎖DNAを注入する。
(c)フローセル内を温度T1に加熱し、2本鎖DNAを1本鎖DNAに解離させる
(d)外部電場によりナノポア近傍まで1本鎖DNAを電気で移動させる
(e)ナノポア膜を温度T2に冷却する
(f)1本鎖DNAのナノポア内への侵入を外部電場による封鎖電流により確認する
(g)外部電場の印加を停止する
(h)温度差による1本鎖DNA移動由来のトンネル電流を計測する
(i)1本鎖DNAの温度T1をT2、ナノポア膜の温度T2をT1に反転させ、同一分子内リシーケンシングを行う
ただし、このワークフローはあくまでも1例であり、本発明の適用方法は本ワークフローに限定されるものではない。
002…羽根車
006、 013…爪車
004、011…壁
005、 012…留め金
007…荷重
003…軸
520…恒温槽
515、 506、 507、 815、 806、 807…ペルチェ素子
514…アルミプレート
532, 832…サーマルプロテクタ
516、 508、 509、 816、 808、 809…フィン
517、 510、 511、 817、 810、 811…ファン
518、 512、 513、 818、 812、 813…測温抵抗体
531、 211、 709、 841…フローセル
502、 601…2本鎖DNA分子
602、 201、 301、 701、 802、 901…1本鎖センスDNA分子
603…1本鎖アンチセンスDNA分子
504、 505、 814、 804、 805…ヒートブロック
503、 604、 302、 403、 702、 803…ナノポア膜
501、 605、 202、 902…ナノポア
212、 213、 312、 313、 712、 713…外部電極
304, 307…微小電極
203、 303…バネ機構
215…電流計
209…溶液
842…カバー
821、 822…断熱材
Claims (10)
- 微小物質が含まれた溶液を保持する容器を有する分析装置において、
容器を二つの領域に分ける微小孔を有する膜と、
溶液に電圧を印加する電極と、
溶液の温度を第一の温度に管理する第一の温調機構と、
膜の温度を第二の温度に管理する第二の温調機構と、
微小物質が微小孔を通過する状態を検出する検出手段を有し、
微小孔は微小物質の通過を制御するバネ機構を有することを特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
検出手段は非対称かつ周期的である微小物質の状態を検出することを特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
第一の温度は第二の温度とは異なることを特徴とする分析装置。 - 請求項3記載の分析装置において、
第一の温度は第二の温度よりも大きいこと特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
第一の温調機構と第二の温調機構は、ペルチェ素子、フィン及びファンから構成されることを特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
第二の温調機構は容器内に熱の移動が発生することを防止する断熱材を有することを特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
容器は断熱材で囲まれていることを特徴とする分析装置。 - 請求項1記載の分析装置において、
DNAである微小物質が含まれた溶液を保持する容器を有することを特徴とする分析装置 - 請求項1記載の分析装置において、
検出手段は、DNAである微小物質が含まれた溶液を保持する容器を有することを特徴とする分析装置。 - DNAの塩基配列を解読する分析方法において、
微小孔を有する膜によって二つの領域に分けられた容器内の一方の領域にDNAを含む溶液を保持し、
第一の温調機構によってDNA分子を含む溶液を第一の温度に温調し、
第二の温調機構によって膜を第二の温度に温調し
容器内に電圧を印加することによって、微小孔にDNA分子を誘導し、
微小孔が有するバネ機構によってDNA分子の微小孔移動を制御し、
DNA分子の微小孔移動中に、孔の封鎖電流あるいは前記膜上に配置された電気回路により検出されるトンネル電流を検出することを特徴とする分析方法。
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