WO2014202851A1 - Composition cicatrisante et utilisation - Google Patents

Composition cicatrisante et utilisation Download PDF

Info

Publication number
WO2014202851A1
WO2014202851A1 PCT/FR2014/051123 FR2014051123W WO2014202851A1 WO 2014202851 A1 WO2014202851 A1 WO 2014202851A1 FR 2014051123 W FR2014051123 W FR 2014051123W WO 2014202851 A1 WO2014202851 A1 WO 2014202851A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
composition according
honey
treatment
composition
hyaluronic acid
Prior art date
Application number
PCT/FR2014/051123
Other languages
English (en)
Inventor
Fabien QUERO
Carmen MALEPEYRE
Anaïs RAYNAUD
Jean-Michel Petit
Original Assignee
Melipharm
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Melipharm filed Critical Melipharm
Priority to ES14731686T priority Critical patent/ES2703530T3/es
Priority to EP14731686.3A priority patent/EP3010516B1/fr
Priority to US14/900,504 priority patent/US20160367605A1/en
Publication of WO2014202851A1 publication Critical patent/WO2014202851A1/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63—Arthropods
    • A61K35/64—Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • A61K35/644—Beeswax; Propolis; Royal jelly; Honey
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/716—Glucans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Definitions

  • the present invention relates to a particular composition consisting of honey and at least one constituent of the extracellular matrix and / or at least one beta-glucan, and its use on the skin or the mucous membranes for a healing and / or antibacterial activity.
  • a wound is a break in the skin barrier, which, in addition to damage to underlying organs, can lead to the entry of infectious agents into the body.
  • Human and animal tissues are able to repair a wound through their own repair processes, and scarring is a natural biological phenomenon. This ability, however, remains subject to many variations, the speed and quality of healing of a wound depending on the general state of the body, the state and location of the wound, and the occurrence or the absence of an infection.
  • Some of these healing products act by maintaining a moist environment to promote healing, such as hydrocolloids consisting of absorbent polymers and other gelling agents, alginates, consisting of calcium and sodium alginate, hydrogels, absorbent dressings or dressings with hyaluronic acid.
  • hydrocolloids consisting of absorbent polymers and other gelling agents
  • alginates consisting of calcium and sodium alginate
  • hydrogels absorbent dressings or dressings with hyaluronic acid.
  • These products even if they promote healing by generating a moist environment, do not have antibacterial properties. Variants of these products based on silver or iodine have therefore been developed to counteract this deficiency.
  • silver dressings often have the disadvantage of being cytotoxic. They induce cell death of cells involved in wound healing. It is therefore not recommended to use silver-based dressings for long periods of time because of their cytotoxicity.
  • the present invention aims to provide a honey-based composition overcoming the disadvantages of the prior art, simple to manufacture, economical, easy to apply and generating both a moist environment and antibacterial activity in order to create favorable conditions for rapid and efficient healing without generating the toxicity of the aforementioned products.
  • the invention provides a composition comprising a mixture of honey and at least one constituent of the extracellular matrix chosen from collagen, elastin and glycosaminoglycans, in particular hyaluronic acid and / or at least one a beta-glucan, especially for use as a health care product healing and / or antibacterial topical application.
  • honey has antibacterial and antifungal properties and that it reduces the healing time without infection or side effects.
  • the mixture according to the invention has a significant and surprising synergistic effect, which makes it possible to provide a healing, restorative and antibacterial composition, with good tolerance and without known side effects, and with properties that exceed those of existing products currently.
  • the invention therefore relates to a composition for use as a healing and / or antibacterial health product for topical application to the skin or the mucous membranes, comprising honey and at least one component of the extracellular matrix selected from collagen, elastin and glycosaminoglycans, in particular hyaluronic acid and / or at least one beta-glucan.
  • honey in the sense of the invention is meant a natural honey or an artificial honey, or a mixture of several natural and / or artificial honeys.
  • artificial honey is meant at least one sugar. It can also be the combination of at least two sugars.
  • honey is a natural honey chosen from honeys of thyme, honeydew, buckwheat, manuka and their mixtures. It may be for example a honey as described in the application FR1258722. If the honey used in the composition is an artificial honey, it is preferably a saccharide mixture comprising mainly glucose and / or fructose and / or sucrose.
  • composition according to the invention in addition to the honey, comprises:
  • At least one component of the extracellular matrix chosen from collagen, elastin and glycosaminoglycans such as hyaluronic acid, heparan sulphates, keratan sulphates or chondroitin sulphates, and / or
  • At least one beta-glucan at least one beta-glucan.
  • the beta-glucans present in the composition are polysaccharides consisting of glucose units connected by ⁇ (1,3) and / or ⁇ (1,4) and / or ⁇ (1,6) bonds.
  • beta-glucans having a molecular weight of between 0.5 ⁇ 10 6 Da and 1 ⁇ 10 6 Da.
  • the glycosaminoglycans present in the composition may be chosen from hyaluronic acid, heparan sulphates, keratan sulphates and / or chondroitin sulphates.
  • the hyaluronic acid present in the composition is preferably a hyaluronic acid salt or a hyaluronic acid derivative, even more preferably a sodium salt of hyaluronic acid with a molecular weight greater than 20 kDa.
  • the hyaluronic acid present in the composition has a molecular weight greater than 100,000 Da.
  • the collagen present in the composition is preferably a collagen peptide derived from hydrolyzate of fish, pork or beef collagens or a biomimetic peptide of collagen.
  • the elastin present in the composition is preferably a beef tendon hydrolyzate or an elastin biomimetic.
  • the composition comprises between 5% and 99.8% of honey by weight of dry matter of the composition.
  • composition comprises hyaluronic acid
  • it is present between 0.05% and 10% by weight of dry matter of the composition, more preferably between 0.05% and 1%.
  • composition comprises collagen, it is present between 0.001% and 50% by weight of dry matter of the composition, more preferably between 0.001% and 5%. If the composition comprises elastin, it is present between 1% and 25% by weight of dry matter of the composition, even more preferably between 5% and 10%.
  • composition comprises a glycosaminoglycan other than hyaluronic acid
  • it is present between 0.1% and 20% by weight of dry matter of the composition, more preferably between 0.1% and 10%.
  • composition comprises a beta-glucan
  • it is present between 0.01% and 10% by weight of dry matter of the composition, more preferably between 0.01% and 5%.
  • composition can be composed exclusively:
  • It may also contain in addition to lactoferrin glucose oxidase, zinc oxide, lactoperoxidase, thiocyanates, lysozyme, xylitol, vanillin, sugars such as galactose, dextrose, rhamnose, mannose teflose ® , oligosaccharides, lactobionic acid, bisabolol, allantoin, aloe vera, propolis, squalane, vitamins, panthenol, ceramides, bentonite and / or kaolin .
  • excipients chosen from excipients which are dermatologically compatible and / or applicable to the mucous membranes in order to obtain a liquid composition such as a lotion, or semi-solid such as a cream, an ointment, a spray or a gel. , a paste, a suppository, an egg or a powder.
  • excipients such as sugars and sugar derivatives, polysaccharides (pectins, starch and derivatives, alginates and derivatives, chitosan and derivatives, cellulose derivatives, gums), synthetic polymers, waxes, natural or non-natural oils, butters, waxes, mineral products (silica, talc, clays, titanium oxide), glycerides and other fatty esters, surfactants, water, ethanol, propylene glycol, butylene glycol, polyethylene glycol, glycerol, sorbitol, hydrocarbons and silicones, proteins and peptides and other excipients known to those skilled in the art.
  • excipients such as sugars and sugar derivatives, polysaccharides (pectins, starch and derivatives, alginates and derivatives, chitosan and derivatives, cellulose derivatives, gums), synthetic polymers, waxes, natural or non-natural oils, butters, waxes, mineral products (silica
  • the composition may also contain auxiliary formulation additives such as surfactants, gelling agents, absorbing agents, humectants, solvents, leveling agents, stabilizers, complexing agents, rheological modifiers, preservatives, anti-oxidants and antimicrobials, dyes and fragrances.
  • auxiliary formulation additives such as surfactants, gelling agents, absorbing agents, humectants, solvents, leveling agents, stabilizers, complexing agents, rheological modifiers, preservatives, anti-oxidants and antimicrobials, dyes and fragrances.
  • the composition further comprises honey, at least hyaluronic acid and at least one beta-glucan.
  • composition according to the invention may be sterile, that is to say that it has undergone a sterilization process. Sterilization is preferably carried out by gamma radiation.
  • composition according to the invention can be obtained by simple mixing of the constituents.
  • the composition contains:
  • a glycosaminoglycan it is obtained by dispersing a powder (for example a fine hyaluronic acid powder) or a solution (for example a hyaluronic acid solution) in a honey composition,
  • a beta-glucan it is obtained by dispersing beta-glucan in a honey composition either in powder form or in the form of a beta-glucan solution,
  • collagen it is obtained by adding collagen to a honey composition either in powder form or in the form of a solution,
  • elastin it is obtained by dispersing an elastin solution in a honey composition.
  • the heating temperature of the honey or honey-containing mixture must be less than 40 ° C.
  • composition according to the invention may be in powder form or in different liquid or semi-liquid forms, in particular lotion, cream, emulsion, gel, ointment, spray, vaginal egg, suppositories.
  • composition is used as a healing and / or antibacterial product.
  • honey and beta-glucan and / or component of the extracellular matrix acts in synergy for both:
  • fibroblasts and keratinocytes increase the proliferation and migration of skin cells, in particular fibroblasts and keratinocytes
  • honey alone or beta-glucans alone or a component of the extracellular matrix alone can increase the proliferation of fibroblasts and keratinocytes, but when used together, the increase in fibroblast and keratinocyte proliferation is greater than the sum of the proliferations induced by the constituents alone (see in particular the test results of points 3 to 6 ).
  • the bacterial level neither hyaluronic acid, nor beta-glucans, nor honey when they are highly diluted, have an antibacterial activity.
  • the combination of the constituents according to the invention in particular the combination of hyaluronic acid with honey or beta-glucan with honey or hyaluronic acid and beta-glucan with honey, at the same concentration shows a significant inhibition of bacterial proliferation (see Table 1).
  • the composition can therefore be advantageously used as a topically applied health product on the skin or mucous membranes in humans or animals, very preferably as:
  • composition for example a medical device or a dermatological composition, for the treatment of dermatitis, acne or diaper rash, impetigo, folliculitis, furuncle, paronychia, mycosis,
  • medical device is meant a product intended to be used in humans or animals for purposes including prevention, control, treatment and / or mitigation of a disease or injury.
  • composition according to the invention can in particular be applied according to the use protocol next :
  • Example 1 is a hyperosmotic gel. It consists of:
  • Example 2 The composition is obtained by mixing the two compounds. 2.
  • Example 2 is an ointment consisting of:
  • the percentages being percentages by weight relative to the total weight of the dry matter of the composition.
  • composition is obtained by the implementation of the following steps:
  • Example 3 is a cream consisting of:
  • composition is obtained by the implementation of the following steps:
  • Example 4 is a hyperosmotic gel. It consists of:
  • the percentages being percentages by weight relative to the total weight of the dry matter of the composition.
  • composition is obtained by the implementation of the following steps:
  • Example 5 is a hyperosmotic gel. It consists of:
  • the percentages being percentages by weight relative to the total weight of the dry matter of the composition.
  • Example 6 is a hyperosmotic gel. It consists of:
  • the percentages being percentages by weight relative to the total weight of the dry matter of the composition.
  • the composition is obtained by mixing the two compounds.
  • Example 7 is a hyperosmotic gel. It consists of:
  • the percentages being percentages by weight relative to the total weight of the dry matter of the composition.
  • the composition is obtained by mixing the three compounds.
  • Tests have been carried out to demonstrate the healing and antibacterial effectiveness of several compositions according to the invention on the one hand and compare this efficiency to that of the constituents alone.
  • the objective of this study is to evaluate the antibacterial activity of the composition according to the invention (Examples 1, 6 and 7), in comparison with that of honey alone.
  • the samples were tested at 3, 5, 7 and 9% v / v.
  • the operating protocol is as follows.
  • the bacterial proliferation in the presence of the products to be tested is determined by a 96-well microplate method. Each well is inoculated with 50 ⁇ l of test bacterial suspension made in Muller-Hinton broth (MH) + 150 ⁇ l of diluted test product solution. The bacterial concentration in the well is set at 10 6 CFU / mL.
  • the positive control 150 ⁇ l of bacterial suspension + 50 ⁇ l of MH medium
  • the negative control 200 ⁇ l of culture medium
  • Each sample is tested in triplicate.
  • the optical densities (OD) are read a first time at time 0 (TO) at 450 nm. The plates are then incubated 24h at 37 ° C. with stirring. At the end of the incubation the OD is remeasured at 450 nm (T24).
  • the percentage of proliferation is calculated as follows:
  • composition example 1 3 25%
  • Composition example 6 3 28%
  • Composition example 7 3 27%
  • compositions according to the invention exhibit an improvement in the antibacterial activity. In addition, this activity is more important than that of honey alone. 2. Assessment of healing activity - cellular proliferation of hyaluronic acid
  • the objective of this study is to evaluate the healing activity of a composition according to the invention, in comparison with that of honey alone and that of hyaluronic acid alone, and to verify the stability of the composition after sterilization. by gamma radiation.
  • the tested samples are as follows:
  • composition consisting of raw honey of thyme in which 0.2% or 0.5% of hyaluronic acid has been added,
  • composition consisting of raw thyme honey in which 0.2% of hyaluronic acid was added, and treated by gamma irradiation (30kGy).
  • the products are diluted to a concentration of 5.12% v / v of the sample.
  • the operating protocol is as follows:
  • composition according to the invention promotes the proliferation of fibroblasts and thus healing and that this effect is significantly improved in comparison with that of honey alone or that of hyaluronic acid alone.
  • Berenbaum test makes it possible to determine additive, synergistic or antagonistic effects between two products mixed with cell contacts (Berenbaum, 1977). This test was developed to determine the impact of several mixed compounds using experimental data inserted into a mathematical formula. It is applicable to many areas of biology.
  • honey and hyaluronic acid For this test, ranges of HA and honey are used to stimulate fibroblasts for 48 hours. Honey and HA are placed in the culture medium at concentrations below the maximum stimulation. After 48 hours of stimulation, the cells are counted and the percentage of proliferation is calculated. The analysis of the count results is based on an equivalent activity search for each compound. For example, the activity sought is proliferation of 150%. The dose of honey required to obtain 150% proliferation (in the case of our example) is designated by Aeq for honey. Beq is the dose needed to achieve the same effect (150% proliferation) with ⁇ . This search for equivalent concentrations is done through the realization of the range of honey alone and the range of HA alone.
  • the mixture of the two compounds makes it possible to determine the doses of each product to be introduced together to obtain the same effect (150% proliferation) as with Aeq or Beq.
  • concentrations tested correspond to the concentrations of hyaluronic acid found in the culture wells once the products of the diluted examples. These dilutions are necessary for carrying out this test.
  • the Berenbaum index is less than 1. This result indicates a synergy between the honey and the hyaluronic acid inducing an increase in the proliferation of fibroblasts at these concentrations.
  • Collagen III is one of the major components of the extracellular matrix. Collagen provides the fibrillar structure of the extracellular matrix allowing the mechanical maintenance of the cellular tissue.
  • Tgblegu 6 Bilgn of the results obtained on the dosgge of the collagen III (pgr dosgge type ELISA) dgns the growth surnggegnt of fibroblgstes gygnt imitated with the different formulas pendgnt 48h. The results are expressed in terms of relativity relative to untreated control.
  • Type of collagen tested bovine collagen (dose used in the composition 5%)
  • the products are diluted to obtain a concentration of 0.1% v / v of the sample.
  • the operating protocol is as follows:
  • a keratinocyte cell line is inoculated in 48-well microplates at a rate of 20,000 cells per well with a volume of complete culture medium (10% of serum) of 500 ⁇ l. The cells will then adhere to the bottom of the wells for 24 hours. The medium will then be replaced by the test product diluted to 0.1% in culture medium containing 2.5% of serum. The product is tested at 500 ⁇ per well and incubated for 24 hours at 37 ° C + 5% C0 2 . The cells are then peeled off with trypsin and then counted on Malassez's slide with an exclusion dye (Trypan blue). The percentage of keratinocyte proliferation is determined relative to a control not treated with the samples.
  • Table 9 A beneficial effect of the association between honey and beta-glucans is observed on the proliferation of keratinocytes.
  • Collagen III is one of the major components of the cell matrix. Collagen provides the fibrillar structure of the extracellular matrix allowing the mechanical maintenance of the cellular tissue.
  • Table 10 review of the results obtained on the collagen III assay (by ELISA type assay) in the case of fibroblast growths which have been imitated with the different formulas for 48 hours. The results are expressed in terms of relative reliance on untreated control.
  • the amount of collagen III produced by fibroblasts is significantly greater than that obtained with honey alone or beta-glucans alone. This result indicates that honey mixed with beta-glucans have a synergistic effect on the production of collagen III by fibroblasts. 6. Evaluation of the synergistic effect of a mixture honey + hvaluronia acid + beta-glucan
  • association honey + hyaluronic acid + beta-glucans induces an increase in the proliferation of fibroblasts compared to the compounds alone.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

L'objet de l'invention est une composition cicatrisante et/ou antibactérienne comprenant notamment du miel pour son utilisation comme produit de santé à application topique sur la peau ou les muqueuse.

Description

COMPOSITION CICATRISANTE ET UTILISATION
La présente invention concerne une composition particulière constituée de miel et au moins un constituant de la matrice extracellulaire et/ou au moins un béta-glucane, et son utilisation sur la peau ou les muqueuses pour une activité cicatrisante et/ou antibactérienne. Une plaie est une rupture de la barrière cutanée, qui, outre la lésion d'organes sous-jacents, peut entraîner la pénétration d'agents infectieux dans l'organisme. Les tissus humains et animaux sont capables de réparer une plaie par des processus de réparation qui leurs sont propres, et la cicatrisation est un phénomène biologique naturel. Cette capacité reste cependant soumise à de nombreuses variations, la rapidité et la qualité de la cicatrisation d'une plaie dépendant de l'état général de l'organisme atteint, de l'état et de la localisation de la plaie, et de la survenue ou de l'absence d'une infection.
Aussi, en cas de lésion cutanée, il est nécessaire de recourir à l'application de produits favorisant la cicatrisation. Il existe actuellement plusieurs produits cicatrisants.
Certains de ces produits cicatrisants agissent en maintenant un environnement humide pour favoriser la cicatrisation, comme par exemple des hydrocolloïdes constitués de polymères absorbants et d'autres gélifiants, des alginates, constitués d'alginate de calcium et de sodium, des hydrogels, des pansements absorbants ou des pansements à l'acide hyaluronique. Ces produits, même s'ils favorisent la cicatrisation en générant un environnement humide, ne présentent pas de propriétés antibactériennes. Des variantes de ces produits à base d'argent ou d'iode ont donc été développées pour contrecarrer cette lacune. Cependant, bien que très antibactériens les pansements à l'argent présentent souvent l'inconvénient d'être cytotoxiques. Ils induisent la mort cellulaire des cellules impliquées dans la cicatrisation des plaies. Il est par conséquent, déconseillé d'utiliser les pansements à base d'argent sur de longues périodes en raison de leur cytotoxicité. Quant aux produits à base d'iode ils sont également cytotoxiques et leur activité antimicrobienne diminue fortement en présence de matière organique (pus, fibrine ou nécrose). De plus, il existe des risques de sensibilisation avec eczéma de contact et allergie à ces produits. C'est pourquoi, la présente invention a pour objectif de proposer une composition à base de miel palliant les inconvénients de l'art antérieur, simple de fabrication, économique, facile d'application et générant à la fois un environnement humide et une activité antibactérienne afin de réunir les conditions favorables à une cicatrisation rapide et efficace sans générer la toxicité des produits précités.
A cet effet, l'invention vise une composition comprenant un mélange de miel et d'au moins un constituant de la matrice extracellulaire choisi parmi le collagène, l'élastine et les glycosaminoglycanes en particulier l'acide hyaluronique et/ou d'au moins un béta-glucane, notamment pour son utilisation comme produit de santé cicatrisant et/ou antibactérien à application topique.
L'utilisation de pansements et de soins au miel pour le traitement de certaines infections au niveau des plaies est connue. On sait en particulier que le miel présente des propriétés antibactériennes et antifongiques et qu'il permet de réduire le temps de cicatrisation, sans infection ni effets secondaires.
Toutefois, le mélange selon l'invention présente un effet synergique important et surprenant, qui permet de proposer une composition cicatrisante, réparatrice et antibactérienne, avec une bonne tolérance et sans effets secondaires notoires, et avec des propriétés qui dépassent celles des produits existants actuellement.
D'autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description en détails de l'invention qui va suivre.
L'invention vise donc une composition pour son utilisation comme produit de santé cicatrisant et/ou antibactérien à application topique sur la peau ou les muqueuses, comprenant du miel et au moins un constituant de la matrice extracellulaire choisi parmi le collagène, l'élastine et les glycosaminoglycanes en particulier l'acide hyaluronique et/ou au moins un béta-glucane.
Par miel au sens de l'invention, on entend un miel naturel ou un miel artificiel, ou encore un mélange de plusieurs miels naturel(s) et/ou artificiel(s).
Par miel artificiel on entend au moins un sucre. Il peut s'agir également de la combinaison d'au moins deux sucres.
Préférentiellement, le miel est un miel naturel choisi parmi les miels de thym, de miellat, de sarrasin, de manuka et leurs mélanges. Il peut s'agir par exemple d'un miel tel que décrit dans la demande FR1258722. Si le miel utilisé dans la composition est un miel artificiel, il s'agit préférentiellement d'un mélange saccharidique comprenant majoritairement du glucose et/ou du fructose et/ou du saccharose.
La composition selon l'invention, en plus du miel comprend :
- au moins un constituant de la matrice extracellulaire choisi parmi le collagène, l'élastine et les glycosaminoglycanes tels que l'acide hyaluronique, les héparanes sulfates, les kératanes sulfates ou les chondroïtines sulfates, et/ou
au moins un béta-glucane.
Les béta-glucanes présents dans la composition sont des polysaccharides constitués d'unités glucose reliées par des liaisons β(1,3) et/ou β(1,4) et/ou β(1,6).
Il peut s'agir par exemple de béta-glucanes ayant un poids moléculaire compris entre 0,5.106 Da et l.106 Da.
Les glycosaminoglycanes présents dans la composition peuvent être choisis parmi l'acide hyaluronique, les héparanes sulfates, les kératanes sulfates et/ou les chondroïtines sulfates. L'acide hyaluronique présent dans la composition est préférentiellement un sel d'acide hyaluronique ou un dérivé d'acide hyaluronique encore plus préférentiellement un sel sodique d'acide hyaluronique de poids moléculaire supérieur à 20 kDa.
Selon un mode de réalisation adapté l'acide hyaluronique présent dans la composition présente un poids moléculaire supérieur à 100 000 Da.
Le collagène présent dans la composition est préférentiellement un peptide de collagène issu d'hydrolysat de collagènes de poisson, de porc ou de bœuf ou un peptide biomimétique de collagène.
L'élastine présente dans la composition est préférentiellement un hydrolysat de tendon de bœuf ou un biomimétique d'élastine.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, la composition comprend entre 5% et 99,8% de miel en poids de matière sèche de la composition.
Si la composition comprend de l'acide hyaluronique, il est présent entre 0,05% et 10% en poids de matière sèche de la composition, encore plus préférentiellement entre 0,05% et 1%.
Si la composition comprend du collagène, il est présent entre 0,001% et 50% en poids de matière sèche de la composition, encore plus préférentiellement entre 0,001% et 5%. Si la composition comprend de l'élastine, il est présent entre 1% et 25% en poids de matière sèche de la composition, encore plus préférentiellement entre 5% et 10%.
Si la composition comprend un glycosaminoglycane autre que l'acide hyaluronique, il est présent entre 0,1% et 20% en poids de matière sèche de la composition, encore plus préférentiellement entre 0,1% et 10%.
Si la composition comprend un béta-glucane, il est présent entre 0,01% et 10% en poids de matière sèche de la composition, encore plus préférentiellement entre 0,01% et 5%.
La composition peut être composée exclusivement :
de miel, et
- de collagène et/ou d'élastine et/ou de glycosminoglycanes (notamment d'acide hyaluronique) et/ou de béta-glucane, ou d'un mélange de ceux-ci.
Elle peut également contenir en plus de la lactoferrine de la glucose-oxydase, de l'oxyde de zinc, de la lactoperoxydase, des thiocyanates, du lysozyme, du xylitol, de la vanilline, des sucres tels que galactose, dextrose, rhamnose, mannose, téflose®, des oligosaccharides, de l'acide lactobionique, du bisabolol, de l'allantoïne, de l'aloe vera, de la propolis, du squalane, des vitamines, du panthénol, des céramides, du bentonite et/ou du kaolin.
Elle peut aussi contenir des excipients choisis parmi les excipients dermatologiquement compatibles et/ou applicables sur les muqueuses afin d'obtenir une composition liquide telle qu'une lotion, ou semi-solide tels qu'une crème, une pommade, un spray, un gel, une pâte, un suppositoire, un ovule ou une poudre. Il peut s'agir par exemple d'excipients tels que des sucres et dérivés de sucres, des polysaccharides (pectines, amidon et dérivés, alginates et dérivés, chitosan et dérivés, dérivés de cellulose, des gommes), des polymères de synthèse, des cires, des huiles naturelles ou non, des beurres, des cires, des produits minéraux (silice, talc, argiles, oxyde de titane), des glycérides et autres esters gras, des tensio-actifs, l'eau, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le polyéthylène glycol, le glycérol, le sorbitol, des hydrocarbures et silicones, des protéines et peptides et autres excipients connus de l'homme de métier.
La composition peut aussi contenir des additifs auxiliaires de formulation tels que des tensioactifs, des agents gélifiants, des agent absorbants, des agents humectants, des solvants, des agents d'étalement, des stabilisants, des complexants, des modificateurs rhéologiques, des conservateurs, des anti-oxydants et antimicrobiens, des colorants et des parfums. Selon une variante particulièrement adaptée de l'invention, la composition comprend en plus du miel, au moins de l'acide hyaluronique et au moins un béta-glucane.
La composition selon l'invention peut être stérile, c'est-à-dire qu'elle a subit un procédé de stérilisation. La stérilisation est préférentiellement réalisée par rayonnement gamma.
La composition selon l'invention peut être obtenue par simple mélange des constituants. Préférentiellement, si la composition contient :
- un glycosaminoglycane : elle est obtenue par la dispersion d'une poudre (par exemple une poudre fine d'acide hyaluronique) ou d'une solution (par exemple une solution d'acide hyaluronique) dans une composition de miel,
- un béta-glucane : elle est obtenue par dispersion du béta-glucane dans une composition de miel soit sous forme de poudre soit sous forme d'une solution de béta- glucane,
- du collagène : elle est obtenue par ajout du collagène dans une composition de miel soit sous forme de poudre soit sous forme d'une solution,
- de l'élastine : elle est obtenue par dispersion d'une solution d'élastine dans une composition de miel.
Si le procédé est un procédé à chaud, la température de chauffe du miel ou du mélange contenant du miel doit être inférieure à 40°C.
La composition selon l'invention peut se présenter en poudre ou sous différentes formes liquides ou semi-liquides, notamment lotion, crème, émulsion, gel, pommade, spray, ovule vaginal, suppositoires.
La composition est utilisée comme produit cicatrisant et/ou antibactérien. En effet, le mélange de miel et de béta-glucane et/ou de composant de la matrice extracellulaire, agit en synergie pour à la fois :
- augmenter la prolifération et la migration des cellules de la peau, en particulier des fibroblastes et des kératinocytes,
diminuer la charge bactérienne, et ainsi favoriser indirectement la cicatrisation.
Les effets obtenus sont bien meilleurs que ceux obtenus avec le miel seul ou les béta- glucanes seuls ou un composant de la matrice extracellulaire seul. Il existe un effet synergique surprenant. Au niveau cellulaire, le miel seul ou les béta-glucanes seuls ou les composants de la matrice extracellulaire seuls permettent d'augmenter la prolifération des fibroblastes et des kératinocytes, mais lorsqu'ils sont utilisés ensemble, l'augmentation de la prolifération des fibroblastes et des kératinocytes est plus importante que la somme des proliférations induites par les constituants seuls (voir notamment les résultats d'essais des points 3 à 6). De plus, au niveau bactérien, ni l'acide hyaluronique, ni les béta-glucanes, ni le miel lorsqu'ils sont fortement dilués, ne présentent une activité antibactérienne. Cependant, l'association des constituants selon l'invention, en particulier l'association de l'acide hyaluronique avec le miel ou de béta-glucane avec le miel ou de l'acide hyaluronique et de béta-glucane avec le miel, à la même concentration montre une inhibition importante de la prolifération bactérienne (voir tableau 1).
Selon l'invention, la composition peut donc être avantageusement utilisée comme produit de santé à application topique sur la peau ou les muqueuses chez l'homme ou l'animal, très préférentiellement comme:
- dispositif médical destiné à être appliqué sur des irritations ou des lésions cutanées notamment pour :
· le traitement des brûlures de premier et second degré,
• le traitement et/ou la prévention des désunions post opératoires de cicatrice,
• le traitement et/ou la prévention post-opératoire des cavités résiduelles des sinus pilonidaux,
· le traitement des cicatrices chirurgicales infectées après mise à plat,
• le traitement des ulcères et escarres,
• le traitement des plaies traumatiques et/ou chirurgicales,
• le traitement des plaies aiguës et chroniques,
• le traitement des plaies cancérologiques,
· le traitement des emplacements de stomies,
• le traitement des dermabrasions,
• le traitement des plaies superficielles.
- une composition, par exemple un dispositif médical ou une composition dermatologique, pour le traitement des dermatites, de l'acné ou des érythèmes fessiers, impétigo, folliculites, furoncle, panaris, mycoses,
- gel buccal, notamment destiné à traiter les aphtes et les mucites,
- stick ou baume à lèvre destiné à traiter les gerçures, - crème pour les mains et les pieds destinée notamment au traitement des crevasses et des engelures,
- baume destiné à la prévention, au soin et/ou au traitement des crevasses du mamelon,
- gel vaginal,
- gel rectal, suppositoire ou crème rectale.
Par dispositif médical on entend un produit destiné à être utilisé chez l'homme ou l'animal à des fins notamment de prévention, de contrôle, de traitement et/ou d'atténuation d'une maladie ou d'une blessure.
S'il s'agit d'un dispositif médical pour la cicatrisation de lésions cutanées se présentant sous forme de poudre, spray, gel, crème ou pommade, la composition selon l'invention peut en particulier s'appliquer selon le protocole d'utilisation suivant :
- rincer la plaie et sécher doucement,
- recouvrir l'intégralité de la plaie ou le pansement secondaire d'une pellicule de la composition selon l'invention,
- recouvrir de compresses et d'un pansement occlusif durant les premières applications pour les plaies très exsudatives.
En phase de détersion, et en fonction de l'état de la plaie, il est conseillé de refaire le pansement une à deux fois par 24 heures.
En phase de bourgeonnement, il est conseillé de refaire le pansement toutes les 48 à 72 heures.
En phase d'épithélialisation, il est conseillé de refaire le pansement tous les 3 ou 4 jours. L'invention est à présent illustrée par des exemples de composition et des résultats d'essais démontrant son efficacité.
A. Exemples de composition selon l'invention
1. Exemple 1
La composition de l'exemple 1 est un gel hyperosmotique. Elle est constituée de :
- 99,8% d'un mélange de miels de thym, miellat, sarrasin et manuka,
- 0,2% de hyaluronate de sodium.
les pourcentages étant donnés en poids par rapport au poids total de matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par mélange des deux composés. 2. Exemple 2
La composition de l'exemple 2 est un pommade constituée de :
- qsp 100% de miel de thym,
- 25% de triglycérides,
- 11% de cire d'abeille,
- 7,5% de beurre de karité,
- 1,83% de tocophérol acétate,
- 5% de glyceryl stéarate,
- 0,2% de hyaluronate de sodium,
- 0,07% de tocophérol.
les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par la mise en œuvre des étapes suivantes :
disperser finement le hyaluronate de sodium dans le miel,
- chauffer le mélange à moins de 40°C,
chauffer la phase lipophile (cire, beurre et glycéride) à environ 70°C pour faire fondre les solides,
quand la phase lipophile a atteint la température de 40°C, ajouter le tocophérol acétate et le tocophérol et le mélange de miel et de hyaluronate de sodium,
- mélanger la pommade jusqu'à refroidissement.
3. Exemple 3
La composition de l'exemple 3 est une crème constituée de :
- qsp 100% de miel artificiel,
- 30% de glycérol,
- 10,3% de beurre de karité,
- 5% de cetearyl alcohol et cetearyl glucoside,
- 2% de cire d'abeille blanche,
- 1,82% de tocophérol acétate,
- 0,8% d'acide stéarique,
- 0,2% de hyaluronate de sodium,
- 0,07% de tocophérol,
- 0,01% de palmitate d'ascorbyle, les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par la mise en œuvre des étapes suivantes :
disperser finement le hyaluronate de sodium dans le miel,
- chauffer le mélange à moins de 40°C,
chauffer la phase lipophile (cire, beurre) et le glycérol séparément à environ 70°C, ajouter la phase lipophile au glycérol et quand ce mélange atteint environ 40°C, ajouter le tocophérol acétate, le tocophérol, le palmitate d'ascorbyle, puis le mélange de miel et de hyaluronate de sodium,
- mélanger la crème jusqu'à refroidissement.
4. Exemple 4
La composition de l'exemple 4 est un gel hyperosmotique. Elle est constituée de :
- 90% de miel de sarrasin,
- 9,8% de glycérol,
- 0,2% de hyaluronate de sodium.
les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par la mise en œuvre des étapes suivantes :
une solution de hyaluronate de sodium à 2% dans un mélange eau/glycérol/éthanol (dans un ratio 10/10/3) est préparée puis déshydratée par distillation sous vide ;
cette solution de hyaluronate de sodium glycérolée est ensuite mélangée dans le miel à température ambiante.
5. Exemple 5
La composition de l'exemple 5 est un gel hyperosmotique. Elle est constituée de :
- 94,8% d'un mélange de miels de thym, miellat, sarrasin et manuka,
- 5% d'un collagène de poisson,
- 0,2% de hyaluronate de sodium.
les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par le mélange des trois composés. 6. Exemple 6
La composition de l'exemple 6 est un gel hyperosmotique. Elle est constituée de :
- 95% d'un mélange de miels de thym, miellat, sarrasin et manuka,
- 5% d'une solution de béta-glucanes.
les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par le mélange des deux composés.
7. Exemple 7
La composition de l'exemple 7 est un gel hyperosmotique. Elle est constituée de :
- 94,8% d'un mélange de miels de thym, miellat, sarrasin et manuka,
- 5% d'une solution de béta-glucanes,
- 0,2% de hyaluronate de sodium.
les pourcentages étant des pourcentages en poids par rapport au poids total de la matière sèche de la composition.
La composition est obtenue par le mélange des trois composés.
B. Evaluation de l'efficacité de la composition selon l'invention
Des essais ont été réalisés pour démontrer l'efficacité cicatrisante et antibactérienne de plusieurs compositions selon l'invention d'une part et comparer cette efficacité à celle du constituants seuls.
1. Evaluation de l'activité antibactérienne de la composition selon l'invention et comparaison par rapport aux ingrédients seuls
L'objectif de cette étude est d'évaluer l'activité antibactérienne de la composition selon l'invention (exemples 1, 6 et 7), en comparaison à celle du miel seul. Les échantillons ont été testés à 3, 5, 7 et 9% v/v.
Le protocole opératoire est le suivant.
La prolifération bactérienne en présence des produits à tester est déterminée par une méthode en microplaque 96 puits. Chaque puits est inoculé avec 50 μί de suspension bactérienne à tester réalisée dans un bouillon Muller-Hinton (MH) + 150 μί de solution de produit à tester dilué. La concentration bactérienne dans le puits est fixée à 106 CFU/mL. Le témoin positif (150 μί de suspension bactérienne + 50 μί de milieu MH) correspond au 100% de prolifération bactérienne. Le témoin négatif (200 μί de milieu de culture) correspond au 0% de prolifération bactérienne. Chaque échantillon est testé en triplicata. Les densités optiques (DO) sont lues une première fois au temps 0 (TO) à 450 nm. Les plaques sont ensuite incubées 24h à 37°C sous agitation. Au terme de l'incubation la DO est remesurée à 450 nm (T24). Le pourcentage de prolifération est calculé ainsi :
Prolifération = (DOT24 - DOT0) / (DOT2 Témoin + - DOT0 Témoin +)
Les résultats obtenus en pourcentage de prolifération bactérienne sont présentés dans le tableau 1 suivant.
Tableau 1 : Evaluation de l'activité antibactérienne
Concentration testées Pourcentage de prolifération
(en % v/v) bactérienne (Staphylococcus aureus)
Miel seul 3 32%
5 25%
7 19%
9 15%
Composition exemple 1 3 25%
5 15%
7 13%
9 1%
Composition exemple 6 3 28%
5 23%
7 11%
9 2%
Composition exemple 7 3 27%
5 20%
7 13%
9 6%
On constate que les compositions selon l'invention présentent une amélioration de l'activité antibactérienne. En outre, cette activité est plus importante que celle du miel seul. 2. Evaluation de l'activité cicatrisante - prolifération cellulaire de l'acide hyaluronique
L'objectif de cette étude est d'évaluer l'activité cicatrisante d'une composition selon l'invention, en comparaison à celle du miel seul et à celle de l'acide hyaluronique seul, et de vérifier la stabilité de la composition après stérilisation par rayonnement gamma.
Les échantillons testés sont les suivants :
- miel brut : miel de thym,
- acide hyaluronique testé seul à 0,5%,
- composition constituée de miel brut de thym dans lequel on a ajouté 0,2% ou 0,5% d'acide hyaluronique,
- composition constituée de miel brut de thym dans lequel on a ajouté 0,2% d'acide hyaluronique, et traitée par irradiation gamma (30kGy).
Les produits sont dilués pour obtenir une concentration de 5,12% v/v de l'échantillon.
Le protocole opératoire est le suivant :
Les cultures primaires de fibroblastes humains PAF 08052 sont ensemencées dans des microplaques 48 puits à raison de 10 000 cellules par puits avec un volume de milieu de culture complet de 500 μί. Les cellules vont ensuite adhérer au fond des puits durant 24 heures. Le milieu sera ensuite remplacé par la composition selon l'invention diluée dans du milieu de culture privé de sérum. La concentration testée est 1,3% v/v à raison de 500 μί par puits et incubé pendant 48 heures à 37°C + 5% C02. Les cellules sont ensuite décollées avec de la trypsine puis comptées sur lame de Malassez avec un colorant d'exclusion (bleu Trypan). Les résultats sont indiqués en nombre de cellules par puits.
Les résultats obtenus, sont présentés dans le tableau 2 suivant.
Tableau 2 : Evaluation de l'activité cicatrisante
Figure imgf000014_0001
On constate que la composition selon l'invention favorise la prolifération des fibroblastes et donc la cicatrisation et que cet effet est nettement amélioré en comparaison à celui du miel seul ou à celui de l'acide hyaluronique seul.
En outre, cette activité est maintenue même après stérilisation par rayonnement gamma.
3. Evaluation de l'effet synergique d'un mélange miel + acide hyaluronique
Ces essais ont pour objectif de démontrer l'effet synergique du mélange selon l'invention. Le pourcentage de prolifération fibroblastique est déterminé par rapport à un témoin non traité avec la composition.
a) Test de Berenbaum
Le test de Berenbaum permet de déterminer des effets additifs, synergiques ou antagonistes entre deux produits mis en mélanges aux contacts de cellules (Berenbaum, 1977). Ce test fut développé afin de déterminer à l'aide de données expérimentales insérées dans une formule mathématique l'impact de plusieurs composés mélangés. Il est applicable à de nombreux domaines de la biologie.
Ce test est appliqué ici au miel et à l'acide hyaluronique (AH). Pour cela, des gammes d'AH et de miel sont utilisées pour stimuler les fibroblastes durant 48 h. Le miel et l'AH sont mis dans le milieu de culture à des concentrations inférieures au maximum de stimulation. Après 48 h de stimulation, les cellules sont dénombrées et le pourcentage de prolifération est calculé. L'analyse des résultats de dénombrements se fait sur la base d'une recherche d'activité équivalente pour chaque composé. Par exemple, l'activité recherchée est prolifération de 150%. La dose de miel nécessaire pour obtenir 150% de prolifération (dans le cas de notre exemple) est désignée par Aeq pour le miel. Beq désigne la dose nécessaire pour obtenir le même effet (150% de prolifération) avec ΓΑΗ. Cette recherche de concentrations équivalentes se fait grâce à la réalisation de la gamme de miel seul et de la gamme d'AH seul.
Dans un second temps, le mélange des deux composés permet de déterminer les doses de chaque produit à introduire ensemble pour obtenir le même effet (150% de prolifération) qu'avec Aeq ou Beq. On désigne alors la dose nécessaire de miel comme dose de A et celle d'AH comme dose de B.
Par la suite, il est possible d'introduire ces données dans l'équation suivante :
Dose de A + Dose de B
Aeq Beq
Si le résultat de cette équation est égal à 1, l'effet des 2 composés sera additif. Si le résultat est inférieur à 1, nous pourrons parler de synergie. En revanche si le résultat est supérieur à 1 les composés sont désignés comme antagonistes.
b) Réalisation d'une gamme d'acide hyaluronique (AH)
Durée du traitement = 48 h
Cellules testées = fibroblastes
Les concentrations testées correspondent aux concentrations en acide hyaluronique retrouvées dans les puits de culture une fois les produits des exemples dilués. Ces dilutions sont nécessaires pour la réalisation de ce test.
Tableau 3
Figure imgf000015_0001
c) Réalisation d'une gamme de miel de thym
Durée du traitement = 48 h
Cellules testées = fibroblastes Quantité de miel (%) 0% 0,3% 0,6% 1,28% 2,56%
Pourcentage de prolifération (%) 100% 138% 145% 154% 163% d) Réalisation de mélanges miel de thym + AH
Durée du traitement = 48 h
Cellules testées = fibroblastes
Tableau 5 : Bilan des résultats obtenus et calcul des concentrations à utiliser dans la composition - Bilan des concentrations ayant des effets synergiques
Figure imgf000016_0001
Pour chacune des compositions comportant entre 0,05% et 0,2% d'acide hyaluronique, l'indice de Berenbaum est inférieur à 1. Ce résultat indique une synergie entre le miel et l'acide hyaluronique induisant une augmentation de la prolifération des fibroblastes à ces concentrations.
e) Résultgts sur la stimulgtion de la synthèse de collggène III
Le collagène III est un des composés majoritaire de la matrice extracellulaire. Le collagène assure la structure fibrillaire de la matrice extracellulaire permettant le maintien mécanique du tissu cellulaire.
Tgblegu 6 : Bilgn des résultgts obtenus sur le dosgge du collggène III (pgr dosgge de type ELISA) dgns les surnggegnt de culture de fibroblgstes gygnt été imités gvec les différentes formules pendgnt 48h. Les résultgts sont exprimés en gugntité relgtive pgr rgpport gu témoin non traité
Quantité relative de Collagène III Quantité relative de Collagène III Quantité relative de Collagène III dosée dans le témoin non traité dosée dans le surnageant de dosée dans le surnageant de culture traité avec le miel seul culture traité avec le miel + HA
100% 106% 125% Les effets observés avec le miel et l'acide hyaluronique sur la production de collagène III sont supérieurs aux effets induits par le miel seul. Un effet de bénéfique de cette composition est observé sur la production de collagène III par les fibroblastes.
4. Evaluation de l'effet synergique d'un mélange miel + collagène
a. Prolifération fibroblastique
Type de collagène testé = collagène bovin (dose utilisée dans la composition 5%)
Concentration en composition testée = 1,28% v/v
Durée du traitement = 48 h
Cellules testées = fibroblastes
Tableau 7
Figure imgf000017_0001
Un effet synergique du miel et du collagène est observé sur la prolifération des fibroblastes. b. Principe des tests de prolifération sur kératinocytes
Les produits sont dilués pour obtenir une concentration de 0,1 % v/v de l'échantillon.
Le protocole opératoire est le suivant :
Une lignée cellulaire de kératinocytes est ensemencées dans des microplaques 48 puits à raison de 20 000 cellules par puits avec un volume de milieu de culture complet (10% de sérum) de 500 μί. Les cellules vont ensuite adhérer au fond des puits durant 24 heures. Le milieu sera ensuite remplacé par le produit à tester dilué à 0,1% dans du milieu de culture contenant 2,5% de sérum. Le produit est testé à raison de 500 μί par puits et incubé pendant 24 heures à 37°C + 5% C02. Les cellules sont ensuite décollées avec de la trypsine puis comptées sur lame de Malassez avec un colorant d'exclusion (bleu Trypan). Le pourcentage de prolifération kératinocytaire est déterminé par rapport à un témoin non traité avec les échantillons.
c. Prolifération kératinocytes
Type de collagène testé = peptide de collagène dose utilisée dans la composition 1,5% Concentration en composition testée = 0,1% v/v
Durée du traitement = 24 h
Cellules testées = kératinocytes Échantillons Miel Collagène Collagène + miel
Pourcentage de prolifération kératinocytes (%) 143% 129% 186%
Un effet synergique de l'association miel et collagène est observé sur la prolifération kératinocytaire.
5. Evaluation de l'effet synergique d'un mélange miel + béta-glucane
a) Prolifération kératinocytes
Concentration en composition testée = 0,1% v/v
Durée du traitement = 24 h
Cellules testées = kératinocytes
Tableau 9
Figure imgf000018_0001
Un effet bénéfique de l'association miel et béta-glucanes est observé sur la prolifération des kératinocytes.
b) Résultats sur la stimulation de la synthèse de collagène III
Le collagène III est un des composés majoritaire de la matrice cellulaire. Le collagène assure la structure fibrillaire de la matrice extracellulaire permettant le maintien mécanique du tissu cellulaire.
Tableau 10 : bilan des résultats obtenus sur le dosage du collagène III (par dosage de type ELISA) dgns les surnggegnt de culture de fibroblgstes gygnt été imités gvec les différentes formules pendgnt 48h. Les résultgts sont exprimés en gugntité relgtive pgr rgpport gu témoin non traité.
Figure imgf000018_0002
La quantité de collagène III produite par les fibroblastes est notablement plus importante que celle obtenue avec le miel seul ou les béta-glucanes seuls. Ce résultat indique que le miel en mélange avec les béta-glucanes ont un effet synergique sur la production de collagène III par les fibroblastes. 6. Evaluation de l'effet synergique d'un mélange miel + acide hvaluroniaue + béta- glucane
Concentration en échantillon testée = 1,28% v/v
Durée du traitement = 48 h
Cellules testées = fibroblastes
Tableau 11
Figure imgf000019_0001
L'association miel + acide hyaluronique + béta-glucanes induit une augmentation de la prolifération des fibroblastes par rapport aux composés seuls.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition comprenant :
du miel, et
au moins un constituant de la matrice extracellulaire choisi parmi le collagène, l'élastine et les glycosaminoglycanes et/ou au moins un béta-glucane,
pour son utilisation comme produit de santé cicatrisant et/ou antibactérien à application topique.
2. Composition selon la revendication 1 caractérisée en ce que le au moins un constituant de la matrice extracellulaire est l'acide hyaluronique.
3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le au moins un constituant de la matrice extracellulaire est un glycosaminoglycane choisi parmi les héparanes sulfates, les kératanes sulfates et les chondoïtines sulfates.
4. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 5% et 99,8% de miel.
5. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le miel est du miel d'origine naturelle.
6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que le miel est du miel de thym et/ou de miellat et/ou de sarrasin et/ou de manuka et/ou leurs mélanges.
7. Composition selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que le miel est du miel artificiel.
8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que le miel artificiel est constitué majoritairement de glucose et/ou fructose et/ou saccharose.
9. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle se présente en poudre ou sous forme liquide ou semi-liquide.
10. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de poudre, gel, pommade, spray, crème, émulsion ou ovule.
11. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle a été traitée par irradiation gamma.
12. Composition selon l'une des précédentes revendications pour son utilisation comme dispositif médical destiné au traitement des plaies.
13. Composition selon la précédente revendication pour son application comme dispositif médical destiné au traitement des brûlures de premier et second degré, au traitement et/ou à la prévention des désunions post opératoires de cicatrice, au traitement et/ou à la prévention post-opératoire des cavités résiduelles des sinus pilonidaux, au traitement des cicatrices chirurgicales infectées après mise à plat, au traitement des ulcères et escarres, au traitement des plaies traumatiques, au traitement des plaies aiguës et chroniques, au traitement des plaies cancérologiques, au traitement des emplacements de stomies, au traitement des dermabrasions, et/ou au traitement des plaies superficielles.
14. Composition selon l'une des précédentes revendications pour son utilisation comme composition pour le traitement des dermatites, de l'acné, des érythèmes fessiers, de l'impétigo, de furoncles, de panaris ou de mycoses, comme gel buccal destiné à traiter les aphtes et les mucites, stick ou baume à lèvre destiné à traiter les gerçures, crème pour les mains et les pieds destinée notamment à la réparation ou au traitement des crevasses et des engelures, baume destiné à la prévention et/ou au traitement des crevasses du mamelon, gel vaginal ou suppositoire ou crème rectale.
15. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,05 et 10% d'acide hyaluronique en poids de matière sèche.
16. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,05 et 1% d'acide hyaluronique en poids de matière sèche.
17. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend de l'acide hyaluronique de poids moléculaire supérieur à 100 000 Da.
18. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend de l'acide hyaluronique et au moins un béta-glucane.
19. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend des béta-glucanes constitués d'unités glucose reliées par des liaisons β(1,3) et/ou β(1,4) et/ou β(1,6).
20. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,01% et 5% de béta-glucanes en poids de matière sèche.
21. Composition selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 0,001% et 50% de collagène en poids de matière sèche.
PCT/FR2014/051123 2013-06-20 2014-05-14 Composition cicatrisante et utilisation WO2014202851A1 (fr)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES14731686T ES2703530T3 (es) 2013-06-20 2014-05-14 Composición cicatrizante y utilización
EP14731686.3A EP3010516B1 (fr) 2013-06-20 2014-05-14 Composition cicatrisante et utilisation
US14/900,504 US20160367605A1 (en) 2013-06-20 2014-05-14 Healing composition and use thereof

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1355810 2013-06-20
FR1355810A FR3007291B1 (fr) 2013-06-20 2013-06-20 Composition cicatrisante et utlisation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2014202851A1 true WO2014202851A1 (fr) 2014-12-24

Family

ID=48980160

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2014/051123 WO2014202851A1 (fr) 2013-06-20 2014-05-14 Composition cicatrisante et utilisation

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20160367605A1 (fr)
EP (1) EP3010516B1 (fr)
ES (1) ES2703530T3 (fr)
FR (1) FR3007291B1 (fr)
WO (1) WO2014202851A1 (fr)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITUB20155902A1 (it) * 2015-11-25 2017-05-25 Nathura S P A Composizione farmaceutica cicatrizzante per uso topico
WO2020058113A1 (fr) * 2018-09-18 2020-03-26 Fadim Ltd Composition pour le traitement de la cavité buccale

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017151835A1 (fr) * 2016-03-03 2017-09-08 Access Business Group International Llc Composition pour inhiber la déshydratation de la peau comportant un humectant et du miel

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1258722A (fr) 1960-06-03 1961-04-14 Boehler & Co Ag Geb Appareil de forage par choc
US20030021834A1 (en) * 1996-08-07 2003-01-30 Petito George D. Method for use of hyaluronic acid in wound management
US6630442B1 (en) * 1997-01-10 2003-10-07 Theodore Hersh Reparatives for chemosurgery and laser (thermal) therapy
CH699182A1 (fr) * 2008-07-17 2010-01-29 Care Cosmeceuticals Sarl Mélanges de miel d'abeilles pour le traitement dermatologique des plaies chroniques.
US20110104279A1 (en) * 2009-11-04 2011-05-05 Marraccini Philip A Healing powder and method of use thereof

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1258722A (fr) 1960-06-03 1961-04-14 Boehler & Co Ag Geb Appareil de forage par choc
US20030021834A1 (en) * 1996-08-07 2003-01-30 Petito George D. Method for use of hyaluronic acid in wound management
US6630442B1 (en) * 1997-01-10 2003-10-07 Theodore Hersh Reparatives for chemosurgery and laser (thermal) therapy
CH699182A1 (fr) * 2008-07-17 2010-01-29 Care Cosmeceuticals Sarl Mélanges de miel d'abeilles pour le traitement dermatologique des plaies chroniques.
US20110104279A1 (en) * 2009-11-04 2011-05-05 Marraccini Philip A Healing powder and method of use thereof

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALANDEJANI T ET AL: "Effectiveness of honey on Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa biofilms", OTOLARYNGOLOGY AND HEAD AND NECK SURGERY, vol. 141, no. 1, 1 July 2009 (2009-07-01), ROCHESTER, US, pages 114 - 118, XP026251754, ISSN: 0194-5998, [retrieved on 20090309], DOI: 10.1016/J.OTOHNS.2009.01.005 *
COOPER R A ET AL: "Antibacterial activity of honey against strains of Staphylococcus aureus from infected wounds", JOURNAL OF THE ROYAL SOCIETY OF MEDICINE, vol. 92, no. 6, 1 June 1999 (1999-06-01), ROYAL SOCIETY OF MEDICINE, LONDON, GB, pages 283 - 285, XP008092256, ISSN: 0141-0768 *
DAVIS S C ET AL: "Cosmeceuticals and natural products: wound healing", CLINICS IN DERMATOLOGY, vol. 27, no. 5, 1 September 2009 (2009-09-01), J.B. LIPPINCOTT, PHILADELPHIA, PA, US, pages 502 - 506, XP026471181, ISSN: 0738-081X, [retrieved on 20090818], DOI: 10.1016/J.CLINDERMATOL.2009.05.015 *
LEON-VILLAPALOS J ET AL: "Topical management of facial burns", BURNS, vol. 34, no. 7, 1 November 2008 (2008-11-01), BUTTERWORTH HEINEMANN, GB, pages 903 - 911, XP025479836, ISSN: 0305-4179, [retrieved on 20080605], DOI: 10.1016/J.BURNS.2008.01.025 *
MOLAN P C: "Potential of honey in the treatment of wounds and burns", AMERICAN JOURNAL OF CLINICAL DERMATOLOGY, vol. 2, no. 1, 1 February 2001 (2001-02-01), ADIS, US, pages 13 - 19, XP009168009, ISSN: 1175-0561 *
SINGH ONKAR ET AL: "Collagen dressing versus conventional dressings in burn and chronic wounds: a retrospective study.", January 2011 (2011-01-01), pages 3PP, XP002729702, Retrieved from the Internet <URL:http://www.jcasonline.com/article.asp?issn=0974-2077;year=2011;volume=4;issue=1;spage=12;epage=16;aulast=Singh> [retrieved on 20140915] *
SOLDATI D ET AL: "Mucosal wound healing after nasal surgery. A controlled clinical trial on the efficacy of hyaluronic acid containing cream", DRUGS UNDER EXPERIMENTAL AND CLINICAL RESEARCH, vol. 25, no. 6, 1999, pages 253 - 261, XP009172538, ISSN: 0378-6501 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITUB20155902A1 (it) * 2015-11-25 2017-05-25 Nathura S P A Composizione farmaceutica cicatrizzante per uso topico
WO2017089475A1 (fr) 2015-11-25 2017-06-01 Nathura S.P.A. Composition pharmaceutique cicatrisante à usage topique
WO2020058113A1 (fr) * 2018-09-18 2020-03-26 Fadim Ltd Composition pour le traitement de la cavité buccale
US11701381B2 (en) 2018-09-18 2023-07-18 Fadim Ltd Composition for the treatment of the oral cavity

Also Published As

Publication number Publication date
US20160367605A1 (en) 2016-12-22
EP3010516B1 (fr) 2018-09-26
ES2703530T3 (es) 2019-03-11
FR3007291B1 (fr) 2015-07-17
EP3010516A1 (fr) 2016-04-27
FR3007291A1 (fr) 2014-12-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2473577T3 (es) Composición antioxidante que comprende galactomanano y N-acetil-ciste�na
EP3142687A1 (fr) Composition antimicrobienne comprenant un glucide, de la glucose oxydase et de l&#39;oxyde de zinc
EP2739275B1 (fr) Composition antiseptique
CA2897518C (fr) Composition dermatologique topique comportant un peptide antimicrobien cationique couple a un lipide et de l&#39;acide hyaluronique.
EP3010516B1 (fr) Composition cicatrisante et utilisation
RU2470640C1 (ru) Средство для лечения воспалительных заболеваний полости рта и способ лечения воспалительных заболеваний полости рта
Wargala et al. Snail mucus as an innovative ingredient used in the cosmetology and medical industry
US20130259852A1 (en) Lysozyme gel formulations
RU2428174C1 (ru) Смазка для интимной гигиены женщин
EP3925636A1 (fr) Membranes composites contenant un cytoprotecteur à libération intelligente ciblant le tissu enflammé et leur utilisation
WO2020151900A1 (fr) Composition cosmetique/dermatologique
JP3233504B2 (ja) 化粧料
WO2019080983A1 (fr) Nouvelle formulation a base de chitosane et son procede de preparation.
CA3210393A1 (fr) Gel a base d&#39;hemoglobine d&#39;annelides
FR3106057A1 (fr) Composition cosmétique comprenant des extraits de Padina Pavonica pour améliorer cicatrisation de la peau
JP6853547B2 (ja) コラーゲン分解阻害用組成物
EP2563376B1 (fr) Composition dermatologique à base d&#39;huile d&#39;argan et d&#39;acide hyaluronique
EP2714706A1 (fr) Sucroses octasulfates de calcium, leur préparation et leurs applications pharmaceutiques et cosmétiques
FR3025426A1 (fr) Extrait d&#39;algue rouge particulier et son utilisation pour le traitement de la peau
EP2965745A1 (fr) Composition cosmétique ou pharmaceutique à application topique comprenant une association de pectine et d&#39;un extrait de centella asiatica et applications

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 14731686

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2014731686

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 14900504

Country of ref document: US