WO2012053928A1 - Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe, pharmaceutical composition, diagnostics and treatment methods - Google Patents

Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe, pharmaceutical composition, diagnostics and treatment methods Download PDF

Info

Publication number
WO2012053928A1
WO2012053928A1 PCT/RU2011/000093 RU2011000093W WO2012053928A1 WO 2012053928 A1 WO2012053928 A1 WO 2012053928A1 RU 2011000093 W RU2011000093 W RU 2011000093W WO 2012053928 A1 WO2012053928 A1 WO 2012053928A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
tissue
individual
organ
autoantibodies
species
Prior art date
Application number
PCT/RU2011/000093
Other languages
French (fr)
Russian (ru)
Inventor
Вадим Юльевич ШАНИН
Original Assignee
Shanin Vadim Yulyevich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanin Vadim Yulyevich filed Critical Shanin Vadim Yulyevich
Publication of WO2012053928A1 publication Critical patent/WO2012053928A1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders

Definitions

  • the claimed group of inventions relates to biotechnology, can be used in medicine, veterinary medicine, laboratory diagnostics, immunology, in particular, for diagnosing an individual's tissue condition, early diagnosis of individual tissue diseases, as well as for treating tissue diseases of individual organs that can be characterized by uncontrolled cell growth tissue (including tissue of tumors of a malignant or benign nature, intactly developing in the body).
  • autoantibodies are a “mirror reflection” of autoantigens that are characteristic of various organs and tissues, their number and totality reflect the general picture. It is known that in healthy people the number of various autoantibodies is approximately the same. A prolonged increase or decrease in their number indicates problems in the relevant authorities. Thus, autoantibodies are harbingers of not only autoimmune diseases, but also
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) many others, in particular cardiovascular diseases, diseases of the gastrointestinal tract, kidneys, liver, lungs, etc.
  • a pharmaceutical composition for the treatment of immune diseases containing a protein or non-protein substance having activity in modulating signal transduction mediated by AILIM and a pharmaceutically acceptable carrier (RF patent application N ° 20011 14516, IPC: A61K39 / 395).
  • the substance is active in inhibiting the proliferation of AILIM-expressing cells or in inhibiting the production of cytokine by AILIM-expressing cells.
  • a cytokine is interferon which is a cytokine produced by TY type T cells, or interleukin 4, which is a cytokine produced by T2 type T cells.
  • the proteinaceous substance may be selected from the group consisting of an antibody that binds to or part of AILIM; a polypeptide containing the whole or partially extracellular region of AILIM; a fusion polypeptide comprising a fully or partially extracellular region of AILIM and a fully or partially constant region of an immunoglobulin heavy chain; and a polypeptide that binds to AILIM.
  • the non-proteinaceous substance may be DNA, RNA, or a chemically synthesized compound.
  • the substance can be used to treat or prevent arthrosis, hepatitis, to treat or prevent the graft versus host reaction and the immune rejection accompanying the graft versus host reaction or transplantation of a tissue or organ.
  • the substance can also be used to prevent an immune response triggered by a foreign antigen or autoantigen.
  • the claimed pharmaceutical composition has a different focus in the treatment of immune diseases and belongs to a different class of substances (substances that prevent the immune response of antigens or autoantigens by affecting signal transmission (signal transduction)), has other goals of treatment and therapeutic effect, cannot be simultaneously a substance suitable for diagnosis and treatment, and also does not imply individualization of diagnosis and treatment, cannot use microprobes of an individual's tissue to obtain substances but.
  • a known method of assessing the risk of development and predisposition to the development of pathology associated with the presence of autoantibodies against yers RF patent application N ° 2006132064, MIlK: G01N33 / 564.
  • the method consists in determining the presence of high levels of anti-PC / activated PC (EPCR) endothelial receptor autoantibodies in a sample taken from an individual and quantifies the in vitro anti-EPCR autoantibodies in said sample, for which a serum or plasma sample can be used.
  • the method further comprises comparing the levels of anti-EPCR autoantibodies determined in the normal sample.
  • Quantification of these anti-EPCR autoantibodies can be carried out using immunoassay using a marker or using an ELISA assay, which includes: immobilizing on a solid support a polypeptide containing the amino acid sequence of the EPCR or its fragment, comprising at least one epitope that can recognized by anti-EPCR autoantibodies; incubating the immobilized polypeptide with a sample, which is supposed to contain anti-EPCR autoantibodies and which was taken from the indicated individual, for a period of time sufficient to bind the antibodies to the immobilized polypeptide and the formation of polypeptide-anti-EPCR autoantibody complexes; removing the remaining sample not bound to the immobilized polypeptide; incubation of the complexes "polypeptide - anti-EPCR autoantibody” with a "second” antibody conjugated to an enzyme, where the "second” antibody is able to bind to these anti-EPCR autoantibodies.
  • a polypeptide containing the amino acid sequence of a full-length EPCR or the amino acid sequence of an EPCR fragment comprising at least one epitope that can be recognized by an anti-EPCR antibody can be used.
  • a fusion protein may be used comprising region A, consisting of a polypeptide containing the EPCR amino acid sequence or a fragment thereof, comprising at least one epitope that can be recognized by an anti-EPCR antibody; or region B, consisting of a polypeptide containing the amino acid sequence used to isolate or purify the specified hybrid protein, and / or the amino acid sequence used to immobilize the specified hybrid protein on a solid carrier.
  • the specified polypeptide may be a hybrid protein, the amino acid sequence of which is presented in SEQ ID NO: 3.
  • Amino acid sequence may be selected from Arg- Tags His tags FLAG tags Strep tags an epitope that can be recognized by an antibody; SBP tags 3-labels; calmodulin binding peptide; cellulose binding domain; chitin binding domain; glutathione-3-transferase label; protein binding to maltose; NusA, ThxA, DsbA, Avi-tags; Ala-His-Gly-His-Arg-Pro (SEQ ID NO: 4) (2, 4, and 8 copies), Pro-Ile-His-Asp-His-Asp-His-Pro-His-Leu-Val-Ile -His-Ser (SEQ ID NO: 5), Gly-Met-Thr-Cys-X-
  • the specified "second" antibody specific for an immunoglobulin of a particular isotype is selected from an anti-human IgG antibody, an anti-human IgM antibody, an anti-human IqA antibody, and mixtures thereof.
  • autoimmune disease antiphospholipid syndrome, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis and autoimmune vasculitis
  • vascular disease arterial vascular disease, venous vascular disease, capillary blood vessels thrombosis, cerebrovascular disease, blood circulation, limb ischemia, atherosclerosis, aneurysm, venous thrombosis and pulmonary embolism
  • pregnancy complications macarriages , Intrauterine fetal death, premature birth, delayed fetal development, eclampsia and preeclampsia).
  • the claimed technical solution is used only as a diagnosis of certain nosological forms of diseases or a combination of several diseases.
  • the known technical solution cannot be considered as a group of inventions representing a universal method and tool used both for diagnosis and treatment, for monitoring the progress of treatment, for screening health by health profile, for identifying patients at risk of developing adverse reactions and predicting carrying out mass vaccinations and (or) carrying out treatment with immunoactive substances.
  • it does not present a scale for evaluating the result, which makes it possible to judge the stage or course of diseases of the studied tissues.
  • the inventive technique can give conclusions about the disease and / or diseases, but does not give an opinion on the state of health of the tissues of the organs of the individual and cannot directly assess the levels of their damage.
  • the invention in question cannot be used to treat cancer.
  • the method includes contacting said test sample with a variety of different amounts of antigen specific for said antibody, detecting the specific binding of said antibody and said antigen, plotting or plotting a curve of said specific binding against the amount of antigen for each amount of antigen, and determining the presence or absence of the indicated disease state or predisposition to the disease based on the magnitude specific binding of said antibody and said antigen for each individual antigen concentration used.
  • the antibody may be an autoantibody specific for a tumor marker protein, and the antigen may be a tumor marker protein or antigen fragment or epitope thereof.
  • the tumor marker protein is MUC 1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, APC, HER2, PSA, SBA, CA19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA , PSCA, EpCat, cytokeratin, reverin, kallikrein, annexation, AFP, GRP78, CA125, mammoglobin or raf.
  • the method can be used in the diagnosis, prognosis or monitoring of cancer, where the conclusion is drawn by the results of comparing the level of autoantibodies in the examined individuals with the values accepted as normal.
  • the method can also be used in the choice of anticancer treatment for a particular human patient, where the method is carried out using a panel of two or more antigens corresponding to different tumor marker proteins to determine the relative magnitude of the patient's immune response to each of these different tumor marker proteins where the protein or protein markers of the tumor, which cause the strongest immune response or significant reactions in the patient, are selected to develop the basis for anticancer treatment of the specified patient.
  • the anticancer treatment is vaccination, and the protein or protein markers of the tumor that cause the strongest immune response or significant reactions in the patient are selected to develop the basis for an anti-cancer vaccine for the specified patient.
  • An antibody can be an autoantibody characteristic of an autoimmune disease or associated with an autoimmune disease (rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus (SLE), primary biliary cirrhosis (PBC), autoimmune thyroiditis, autoimmune disease, and autoimmune disease Addison's, autoimmune hypoparathyroidism, autoimmune diabetes, or severe myasthenia gravis), for kidney or liver disease leading to organ failure or organ failure, or associated with such a disease, as well as for an autoimmune disease or associated with an autoimmune disease.
  • an autoimmune disease rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus (SLE), primary biliary cirrhosis (PBC), autoimmune thyroiditis, autoimmune disease, and autoimmune disease Addison's, autoimmune hypoparathyroidism, autoimmune diabetes, or severe myasthenia gravis
  • kidney or liver disease leading to organ failure or organ failure or associated with such a disease, as well
  • An antigen is a natural protein or polypeptide, a recombinant protein or polynucleotide, a synthetic protein or polypeptide, a synthetic peptide, peptidomimetic, polysaccharide or nucleic acid.
  • the antibody can be an autoantibody specific for a tumor marker protein, and the antigen can be a tumor marker protein or its antigenic fragment or epitope .
  • tumor marker protein which may be MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, APC, HER2, PSA, CEA, CA19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, EpCat, cytokeratin, recoverin, kallikrein, annexation, AFP, GRP78, CA125, mammoglobin or raf ...
  • the disadvantage of this solution is the absence of substances with partial syngenesis, and if the antibody (autoantibody specific for the tumor marker protein, and the tumor marker protein antigen or its antigenic fragment or epitope) also have a partially (partially) syngenic region (epitope) in their structure to the tumor tissue and it is a test agent.
  • Another disadvantage of this method is the fact that the antigen substance is not considered as a glycoprotein, in response to the introduction of which the body is able to produce antibodies belonging to at least the class of immunoglobulins M and G, as well as entering into immune reactions with at least anti-M and anti-G immunoglobulins in the laboratory, having a partial (partial) syngenicity to the tissue from which it is obtained, and devoid of sites responsible for the individual characteristics of the original tissue.
  • a known method of obtaining substances from tissues and organs of mammals with autoimmune activity in vitro and in vivo (RF patent for the invention _Ns2240807, IPC: A61K35 / 12, G01N33 / 53).
  • the method consists in the fact that the starting material is typed, homogenized with quartz sand and 0.9% sodium chloride solution in the ratio of 1: 5, extracted according to Grasse with a five-fold freezing cycle at -17 ° C and thawed at + 37 ° C, centrifuged homogenate and isolate the supernatant, standardize the protein in it with a spectrometric method of 20-22 mg / ml, freeze-dried.
  • a gamma-quantum treatment of the substance is carried out with ⁇ quanta with an energy of 0.37 kJ, an integral dose 1.8-104 gr., For 20-25 minutes. Obtained by the claimed method, the substance retains the original organ specificity of the tissue and is deprived of the individual properties of the isoantigenic form of the source material of the donor. The combination of these properties provides greater accuracy of tissue identification in in vitro reactions, and manifests its activity in vivo.
  • the disadvantage of this method is its complexity in the implementation, because use of special equipment is required.
  • the method uses radiation (gamma-quantum) technology, which requires special regulations for use, licensing, specific equipment, calibration and control devices.
  • the inventive method uses microwave technology, in which "household" ultrahigh frequencies are used to influence the tissue, which makes the use of the technology cheaper, more affordable and safer, in comparison with the radiation methods of influencing the prototype fabric.
  • the inventive method for processing tissue the operation of disinfecting the tissue is used, which makes working with the starting materials safe, in contrast to the prototype method.
  • the initial tissue sample in the inventive method before typing and processing the fabric in order to obtain a substance, can be preserved by freezing (up to -24 ° C) and stored for a long time at this temperature (up to 6 months), until it is used as a raw material for substances without changing the quality of the obtained substance, which also distinguishes the claimed technology from the prototype.
  • the substance has an individual set of properties and structure that can be used exclusively in laboratory diagnostics and which cannot be extended to the treatment of tissue diseases.
  • the substances of the prototype method are devoid of the properties of partial organ and species syngenesis while maintaining the original organ properties.
  • Substances obtained by the method according to patent for invention N22240807 have the initial organ specificity of the tissue, which is devoid of the individual properties of the isoantigenic form of the source material of the donor tissue.
  • the feedstock tissue is subjected to various physical influences that cause various transformations in the source tissue.
  • the radiation effect of gamma rays has a cross-linking, ordering and strengthening the rigid structure (intermolecular bonds) of the source material effect, and the microwave effect affects the hydrophilic bonds inside the tissue biostructures, “freeing free water” located in the tissue, causing the release of hydrophilic bonds within the tissue and the mobilization of free water molecules, leading to increasing dehydration of the tissue.
  • the combination of these positions allows us to say that the substances obtained by the method - the prototype, and the claimed substances obtained by the claimed technology are fundamentally different. It was found that the substances of the above method can manifest their activity under laboratory conditions of indirect hemagglutination reactions (RNGA), which assess the state of autoimmune organism.
  • RNGA indirect hemagglutination reactions
  • RNGA being a routine method of immune reactions, at the moment cannot be considered a standardizing method in immune studies.
  • other methods for the detection of specific autoantibodies such as enzyme-linked immunosorbent assay, analysis of the immune interactions of the antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) on solid carriers in the prototype method is not shown, as well as the possibilities of their use by other methods are not described.
  • the disadvantage of the considered technical solution is the lack of substance prototype ability to partial and isolated tissue lysis.
  • the substances described in this patent are not able to act on living tissue of the body without causing its death and therefore cannot be used to formulate pharmaceutical compositions, including for cancer treatment. They are not universal for diagnosis and treatment (substance - substance cannot be used for pharmaceutical and laboratory production).
  • the objective of the group of inventions is to create a new biotechnology that can be used in medicine, veterinary medicine, laboratory diagnostics, immunology, pharmaceuticals for general and individual, personalized diagnosis of the state of an organ’s tissue or organs of an individual, treatment of diseases of these tissues, which can be characterized by uncontrolled growth of tissue cells (including tissue of tumors of a malignant or benign nature, intactly developing in the body) and requiring the cessation of such growth, their local destruction within a living organism when implementing compulsory control in treating one and the same substance, which may be the basis for laboratory test and pharmaceutical compositions.
  • tissue cells including tissue of tumors of a malignant or benign nature, intactly developing in the body
  • the technical result consists in the possibility of implementing a universal comprehensive direct diagnosis of the state of the tissue of one or more internal organs of an individual, while it is possible to quickly obtain an opinion on the state of health of the tissue or the degree of damage to it in a living organism, which in turn allows one to judge the general state of health of the individual’s body by personifying the diagnosis and treatment.
  • the diagnostic conclusion with the claimed method is formed faster, has a more accurate information and prognostic result, laboratory control data can detect pathological and morphological changes 24-72 hours before their clinical manifestation and the development of diseases of the internal organs.
  • a quantitative scale for assessing the state of damage to tissue of internal organs allows you to more accurately determine the levels of pathological disorders that occur within this tissue.
  • the method for producing substances is technically simpler, has a lower cost per unit time in production, is safer in production, because eliminates radiation sources of radiation, more affordable, allows for preservation and long-term storage of the source material, includes the stages of disinfection of the intermediate product, which makes the method safe for personnel when working with it.
  • the claimed technical solutions are based on the creation of a new class of substances with immune activity, obtained from tissue of an internal, transient or transplanted organ, neoplasm (tumor) of an individual’s body, which have specific activity against antibodies / autoantibodies and are characterized by the presence of properties that make it possible to identify the state of the tissue by laboratory methods internal organs in the examined individual by detecting the antigen-antibody reaction, autoantigen-autoantibody, occurring between and biological fluid taken from the examined individual, having partial organ and species syngenesis, which allows for an immune response of the organism of the individual upon parenteral administration, leading to local lysis of tissue having organ and species tropism to the substance being introduced.
  • the inventive substance has new properties, manifests itself as a glycoprotein that provokes the formation of antibodies within the body during parenteral administration, which are immunoglobulins (M, G), and capable of forming antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) complexes with anti-G anti-M immunoglobulins.
  • the antibodies produced against the substance due to the properties of the partial organ syngenism, are anti-tissue and anti-organ autoantibodies of living body tissues.
  • the substances described in the analogues do not have such properties.
  • Tissues of any animal world object cannot be used as the raw material for obtaining the substance, and any tissue located in a living organism, in a non-living organism, in a remote organ, in a puncture, in a transient organ, if there is no tissue signs of biological lysis (decomposition) and there is the possibility of typing and isolation of at least 1 000 mg of the original tissue.
  • a group of substances is obtained having new properties, based on the organ and specific partial syngenesis of the original tissue, allowing the use of the resulting substance as the basis for diagnostic and pharmaceutical agents used simultaneously.
  • a substance as a pharmaceutical agent, its action is realized as a vaccine, which is capable of causing a cascade of physiological reactions in which the body’s immune and autoimmune systems participate, leading to localized isolated lysis of the tissue inside a living organism that does not lead to its death.
  • a quick and accurate diagnostic result (up to 90 minutes), an immediately predicted level of health status of the tissue of internal organs and an estimated state of health of the body in the next 24-48 hours, the identification of latent health disorders or damage to internal organs, an easily accessible and easily realized possibility of a diagnostic technique allow you to use this method to identify possible complications and adverse reactions when conducting mass vaccinations with other vaccines and to select patients for these purposes.
  • the technical result also consists in: a specific effect on the isolated source tissue of a biological individual, which allows preserving the organ and species specificity of the source tissue, leveling its allogeneic characteristics, and obtaining a new substance with a partial organ and species syngenicity to the source tissue; obtaining a new substance with other properties allows it to be used for early direct diagnosis of the state of the tissue from which it is obtained, using it as part of a laboratory test, and locally lytically affect the tissue using the substance as part of a pharmaceutical composition for parenteral administration using the property of organ and species syngenesis of a substance devoid of allogeneic properties for an accurate, local controlled lysis of the same tissue, while simultaneously monitoring the result and step No effect on this tissue by the same substance included in the laboratory test used to control treatment.
  • the controllability and accuracy of local exposure to the substance allows you to personalize and individualize the treatment in each case, to select an individual dose of the substance (amount of substance; amount, time and need for repeated administration of the substance ), not leading to the death of the body; in the laboratory control of the treatment carried out by the same substance, its ability to detect antibodies - autoantibodies in biological samples during treatment due to the fact that the substance has high sensitivity, specificity, which are due to the properties of its partial organ and species syngenesis to the identical tissue from which it was obtained , and capable of detecting minimal changes (lytic lesions) of tissue that do not lead to life-incompatible consequences within the body, without significantly changing his general condition, precision dosing and accurately estimating the required levels of lytic effect on the fabric.
  • the immunologically active substance is a protein substrate obtained from the supernatant of a modified source tissue of an individual organ, characterized by partial syngenicity, having full organ and species antigenic similarity to the original tissue, lacking allogeneic antigenic properties of this tissue, exhibiting the properties of both the antigen and autoantigen to the tissue from which it was obtained, and having specific activity against antibodies - autoantibodies found in biological fluids of other individuals one species.
  • An immunologically active substance contains macromolecules of a protein substrate in the range of molecular weight 10 - 90 kDa, in which specific regions in the form of at least two major bands corresponding to values of the molecular weight scale from the interval 9.0-1 1.0 are detected during denaturing electrophoresis and 59-61 kDa.
  • An immunologically active substance contains at least one immunologically active syngeneic epitope with antigenic - autoantigenic properties of the original organ and species of the individual.
  • the set of properties of IAV is determined by the formula:
  • ' ⁇ ⁇ is the organ set of similarity, the set of substances that determine tissue similarity by organ characteristics (vt), t is the type of tissue;
  • ⁇ ⁇ is the species aggregate of similarity, the totality of substances that determine tissue similarity by species ( ⁇ ), n is the species of the individual;
  • lSav t is the organ set of differences, the set of substances that determine the differences in tissue based on organ affiliation (avt), t is the type of organ tissue;
  • nL avv is the species totality of differences, the totality of differences of substances that determine the differences in tissue by species (avv), n is the type of individual;
  • An immunologically active substance is characterized by the presence during the performance of high-performance liquid chromatography of two or three dominant fractions of alkaline components, weakly interacting with the anion column at a pH of 7.2, and differing in charge of acidic major components, eluting in the middle and at the end of the chromatography process, and manifesting themselves on the chromatography curve in the form of peaks corresponding to the ranges of 33.5 ⁇ 2.5 and 52.5 ⁇ 2.5 mAU for the two dominant fractions of alkaline components or the corresponding range am values 17 ⁇ 2.5; 33.5 ⁇ 2.5; 52.5 ⁇ 2.5 for the three dominant fractions of alkaline components.
  • a method of obtaining an immunologically active substance includes sampling the source tissue, typing it, repeatedly freezing it at a temperature of -24 - 28 ° C and thawing, while thawing is carried out by exposure to microwave radiation at a frequency of 2450-2500 MHz with the removal of moisture generated during thawing to reduce the mass of the original tissue by 30-60%, the initial tissue obtained as a result of such processing, characterized by syngenicity to the species and organ antigenic codes of the original tissue and devoid of allogeneic antigenic properties of the original tissue individual, crushed, homogenized, disinfected and extracted according to Grasse, the resulting supernatant is subjected to standardization by protein from 20 - 25 mg per 1 ml and freeze-dried.
  • Tissue disinfection is carried out by adding to the tissue homogenate a 0.5% aqueous formalin solution up to 5% -10% of the total volume of the starting material, followed by mixing and exposure of the mixture for 4-6 hours.
  • Microwave exposure is carried out at a radiation source power of 600 -1000 W for a time that is set at a rate of 10-50 s per 100 g of the mass of the original tissue, while in the process of microwave exposure, these parameters are set based on the condition of preventing the source tissue from heating to temperature 41 ° C.
  • Microwave action is carried out during the time at which the water crystallized on the surface of the frozen tissue goes into a liquid state.
  • An immunologically active substance is used as a marker of the state of tissue of the internal, transient or transplanted organs of an individual.
  • a biosonde can also be made, including a solid phase with an immunologically active substance deposited on its surface.
  • An immunologically active substance is applied to the solid phase of the biosonde in the form of a series of dilutions in the concentration range from 12.5 to 200 ⁇ g of dry matter per 1 ml of physiological solution.
  • a set of series of immunologically active substances obtained from different tissues of an individual's organs can be applied to the solid phase of a biosonde.
  • a method for diagnosing the state of tissue of an internal organ of an individual includes collecting a sample of an individual’s biological fluid, contacting the biological fluid with the IAS according to claim 1 (see the claims) or a bioprobe according to claim 11 in a series of dilutions of a sample of the studied fluid within the titer from 1 : 4 to 1: 2048, determination in the credits of the interactions that took place between antibodies and / or autoantibodies located in a diluted sample of an individual’s biological fluid and an immunologically active substance according to claim 1, while the conclusion about the state of the tissue of an internal organ of an individual is made by the marginal positive result of interaction in a series of dilutions of a sample of the studied fluid, if interaction is detected within the dilution of the test sample within the values of [1: 4 -1: 8] - make a conclusion about the healthy state of the tissue; within the values of [1: 16-1: 32] - conclude that there are minor damage to the tissue, within the values of [1:
  • the pharmaceutical composition is a solution comprising the immunologically active substance according to claim 1 and an acceptable solvent, while for parenteral administration, 1 ml of the solution contains 100 ⁇ g of substance.
  • a method for the treatment of tissue diseases of an individual’s organs caused by uncontrolled growth of tissue cells of a malignant or benign nature includes administering to the individual a Parents randomly pharmacological composition according to claim 15, containing the substance according to claim 1, starting with a dose of 50 ⁇ g of the substance, followed by an increase to an amount that provides sensitization of the body and obtaining a response of the immune system of the body of the individual, which is judged by the formation of anti-tissue antibodies - autoantibodies to the administered substance according to p.
  • the introduction of the pharmacological composition is carried out while monitoring the level of formation of antibodies - autoantibodies in the biological fluids of the patient, the sampling of which is carried out after each injection of the composition, the number of introductions is limited when the level of antibody titers - autoantibodies, lying in the range from 1: 256 to 1: 512.
  • FIG. 1 shows an electron diffraction pattern of guinea pig liver tissue ultrastructure in a control sample with an increase of x8000
  • FIG. 2 is an electron diffraction pattern of a local lesion of a guinea pig liver (the result of the exposure of a substance to a local portion of liver tissue of a guinea pig) that arose after the cessation of the claimed substance, an increase of x7500, in Fig.
  • 3 - 6 are electron diffraction patterns of a liver tissue ultrastructure guinea pigs exposed to the test substance, one of which fell after 100 hours of the experiment, an increase of x8000 (Fig. 3), the other 72 hours after the start of the experiment after repeated administration the analyte, an increase of x5600 (Fig. 4), the third - 72 hours after the start of the experiment after repeated administration of the analyte, an increase of x8200 (Fig. 5), the fourth - 132 hours after the start of the experiment, and received a double administration of the analyte, an increase x8000 (FIG. 6), in FIG.
  • FIG. 7 presents the results of HPLC (high performance liquid chromatography) of a substance obtained by the method of claim 1 from a human liver
  • FIG. - the results of HPLC of the substance obtained by the method of claim 1 from human kidneys
  • figure 9 - presents the results of electrophoresis of samples of the claimed substances according to claim 1, obtained by the method of claim 6,
  • figure 10 the results of immunodot analysis, .11 - ELISA results (enzyme-linked immunosorbent assay), showing the dependence of optical density on dilution of antigen (substance - liver), at a wavelength of 490 nm
  • FIG. 12 is the result of the RNGA reaction, demonstrating the possibility of detecting anti-tissue autoantibodies by a number of substances obtained from tissues of different organs in dilutions of human blood serum.
  • Antigens characteristic only of this organism are called alloantigens (Greek allos - another). These include tissue antigens compatibility - the products of the genes of the main tissue compatibility complex of the MHC (Major Histocompatibiliti Complex), characteristic of each individual. Antigens of different individuals that do not have differences are called syngenic. Organs and tissues, in addition to other antigens, possess organ and tissue antigens specific to them. Antigenic similarities are possessed by the tissues of the same name of biological species, for example, humans and animals. There are stage-specific antigens that appear and disappear at the individual stages of tissue or cell development. Each cell contains antigens characteristic of the outer membrane, cytoplasm, nucleus, and other components. Incomplete antigens are found in nature quite often.
  • Incomplete antibodies are found against Escherichia, Brucella, Salmonella and other microorganisms; against red blood cells and other cells. According to the classification of antigens, exogenous (coming from the outside of the body) and endogenous (forming inside the body) antigens are distinguished. For the case under consideration, endogenous antigens were selected.
  • Antigens are divided into full and incomplete (haptens).
  • the complete antigen includes a carrier protein and a determinant group, they can induce the formation of antibodies and lobby with them.
  • the property of an incomplete antigen devoid of a carrier protein is known to react with antibodies, but these substances cannot stimulate their formation inside the body. Incomplete antigens (including haptens), entering the body, can combine with the protein of the body and become full antigens.
  • the antigens of each organism normally do not cause immunological reactions in it, since the organism is tolerant to them. However, under certain conditions, they acquire signs of foreignness and become autoantigens, and the reaction that arose against them is called autoimmune.
  • the cells of malignant tumors are variants of normal body cells with antigenic structure, which is practically no different from the antigenic structure of the body. They are characterized by antigens of the tissues from which they originated, as well as antigens that are specific for the tumor and make up a small fraction of all cell antigens. In the course of carcinogenesis, dedifferentiation of cells occurs; therefore, some antigens may be lost, antigens characteristic of immature cells may appear, even embryonic (fetoproteins). Antigens that are characteristic only of a tumor are specific only for a given type of tumor, and often for a tumor in a given tumor. faces. Tumors induced by viruses can have viral antigens that are the same for all tumors induced by this virus. Under the influence of antibodies in a growing tumor, its antigenic composition may change.
  • the protein structure of an individual contains at least three, relatively stable and informationally significant antigenic sites that encode species, individual and organ specificity. Recognition of protein foreignness within the body occurs by evaluating sites of protein structures that carry information about the organ, species and individual compatibility of the tissue.
  • the analysis of the data obtained, according to the claimed invention, and the analysis of the body's reactions confirmed the presence of at least three sections encoding a species, organ and individual feature in the protein structure.
  • the author has proved that changes in these areas allow one to obtain new substances that are capable of detecting organically and species-specific sections of protein structures in biological fluids of individuals, entering into immune reactions with them, and identifying “seeing” to the internal link of immunity, marking identical tissue, leading to its lysis, if this substance enters the body.
  • the result of the studies proves that the complex structure of the protein substrate carries information about who the protein object belongs to (human, animal, or belongs to the world of simple organisms).
  • the protein has information about which tissue it belonged to, because it contains information about its organ affiliation.
  • the protein carries a unique code of the individual, allowing you to accurately recognize which particular individual it belongs to.
  • Organ assembly of similarity is the similarity of functionally identical organ tissues, where (vt) are the signs of organ similarity of these tissues.
  • liver tissue is functionally similar in animals and humans, because performs similar functions.
  • Liver tissue is morphologically similar, as can be similarly structurally divided into - hepatocytes 60-70%, bile ducts and pathways 12-18%, blood vessels - 20-25%, stroma 2-3% in humans and animals, and the percent structure will vary with slight errors from the main representation of the structure of cells entering the tissue of an organ. All fabrics organs of the same type in different species are united by a single anatomical and morphological structure, physiological and functional purpose. The same reasoning will be true for tissues of other organs: stomach, intestines, brain, heart, glands, etc.
  • the species totality of similarity ( ⁇ ⁇ ) is the similarity of the structure of cells, tissues and organs in individuals of one species, and ( ⁇ ) are the signs of the species similarity of these tissues. Interspecific similarity of the structure and functions of the liver, heart, lungs, glands, etc. between people, between dogs, between horses, etc.
  • ⁇ ⁇ is the similarity of protein structures of various organs within one single living organism, where (vi) are signs of tissue identity in one organism.
  • the information image of the fabric will represent the term of the introduced sets, and it can be represented by the formula in the form:
  • C L vt + ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ ⁇ , where C is the information image of the fabric, based on the totality of their similarity.
  • Organ set of differences ( ⁇ ⁇ - differences in the morphological, structurally cellular, tissue and functional structures of different organs, and (avt) - signs that determine organ differences, for example, liver tissue has differences from tissue of the stomach, heart, etc.
  • the information image of the fabric will represent the term of the introduced sets, and it can be represented by the formula in the form:
  • the following is a systematic analysis of information images and typing of arbitrarily selected tissues of three objects: (the first object is guinea pig (liver), the second object is man I. (liver), the third object is man P. (liver)). Leveling the analysis of significant differences in the characteristics of these tissues (structural, morphological, functional, etc.), the species and individual collections of interest were selected and combined according to the signs of similarity and differences. In the course of mathematical modeling of the information image of the tissue of objects, during the analysis, comparisons of similarities and differences of objects are used, which are described by the above formula. Below are the resulting conclusions and the following postulates (without intermediate reasoning).
  • the tissue of the animal’s liver (guinea pig) is similar to that of the human liver (the first object is similar to the second and third objects), since the liver of all the studied objects has similar functions and has a fundamentally similar structure in all mammals.
  • a general pattern is the similarity in the structure of protein structures of tissues of similar organs in different species and within each species - the similarity of organs in terms of the set of characteristics, functional load, and structure in individuals between and within species.
  • tissue objects have a common similar set, similar in the set of signs that reflect their functional purpose and structure of organs.
  • Tissues have a certain common feature - a common information code, reflected in the protein structure, and characterizing its essence - “liver”.
  • the second postulate Differences in the tissues of the three studied objects are available by species affiliation code. Moreover, the tissue samples (liver) of the first object differ from the samples of the second and third objects (differences in the structure of the organisms of guinea pigs and humans, individuals I. and P.). The bioobjects we are analyzing (second and third) belong to the same species - man, and the first the object belongs to another species - the animal.
  • the general pattern is the differences in the protein structures of organ tissues in different species.
  • the analyzed objects have a common set of differences between organs and tissues, species differences between objects.
  • the tissues of the objects are separated by a specific information code inherent in each type of living fauna, in our example, man and animal.
  • the protein structures of tissues within species are endowed with such differences; the separation carries informationally significant differences between the typed object and the species affiliation of the tissue.
  • Protein structures of tissues of one biological species when ingested by another biological species will be identified and destroyed by the autoimmune system as foreign by species.
  • the third postulate When comparing three samples of the analyzed tissues of the liver, animal and people, it was revealed that they differ from the tissues of other organs
  • tissue of the stomach, heart, lungs, glands for functional purpose, structure, etc. This is an axiom that does not require proof, which means that there is a totality of differences in the protein structures of cells of organs and tissues within one organism.
  • the analyzed objects have a common set of differences between organs and tissues, tissue differences between the organs of one organism.
  • Organ tissues are separated by an organ information code inherent in every organ and tissue within the body.
  • the protein structures of tissues and organs inside each living organism are endowed with such differences, the separation carries informationally significant differences between the typed object in terms of tissue and organ affiliation. Protein structures of tissues of various organs, outside their cell pool, can be recognized and destroyed by the autoimmunity system.
  • Two samples - liver tissue I. and P. liver tissue have similar species and organ characteristics, but have intraspecific and organ differences according to an individual typological characteristic. Macroorganisms and individuals I. and P. differ in the totality and set of genetic and informational characteristics inherent in each of the individuals individually. There is a similarity of the characteristics of the species and organ codes of the samples and the totality of differences between the protein structures of organs by unique individual typological characteristics, of each individual individually, within the same biological species or subspecies.
  • the analyzed objects have a common set of similarities between the intraspecific and organ-tissue protein structures, but they have tissue differences at the level of individual typological differences between organisms. Organ tissues are separated by a unique individual typological code inherent in each organism individually.
  • the fifth postulate If we compare three samples of analyzed tissues (liver) with a sample of stomach tissue, as was done in the third postulate taken from one of the studied organisms, it is possible to highlight another important detail. Based on the addition that we introduced, the assumption that a sample of stomach tissue could belong to or belong to one of the analyzed organisms, despite the difference in the structural differences and codes of the protein characterizing liver tissue and stomach tissue, with an organ or species difference between the samples, one of individuals, to whom it belonged earlier and was subsequently taken for research, the tissue will not be foreign. She is “her own” despite the difference in the organ protein code. It is “its own” according to the individual typological protein code and according to the species code to which this organism belongs.
  • the analyzed objects have a set of differences in organs and tissues, differences in the tissues of organs within one organism, in all three cases analyzed, but in one case of tissue, having differences in the organ code, have a single unique individual typological code inherent in one organism.
  • the tissues of the organs are separated by the organ informational code inherent in each organ and tissue, if they are inside one organism, then they have a matching unique individual typological species code belonging to this organism.
  • the body reacts to a suddenly “degenerated” protein structure that mutates under external influence, leading to the formation of tumor cancerous tissue.
  • She is this fabric, “not a stranger”, she is her own, her unique, individually-typological code, the code of the host-individual is saved and coincides with it.
  • the changes affected the organ - structural code of the tissue, the tissue became a "foreign organ”, the functional purpose of this tissue changed, which no longer allows the cell to perform its previous functions, and deprived of its functional purpose and loads, this (not torn away and not disposed of) cell begins to be intensively maintained and developed inside this organism.
  • a new process begins, the growth and development of such “own” tissue is intensified, which “without knowing” the boundaries of tissue and organ pools, eventually captures the entire host organism, causing its inevitable death.
  • the antigenic image that defines the informational mosaic of tissue attributes (C) can be represented by a mathematical expression, using the analysis of aggregates consisting of signs of similarities and differences in tissue.
  • ⁇ ' ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ ⁇ + ⁇ avt + " ⁇ 3 ⁇ + ⁇ ⁇ 3 ⁇ ⁇ >
  • ⁇ is the informational image of the fabric, based on the totality of their similarity and differences in their attributes inherent in one species, one type of fabric located in one organism. If we have another fabric with a formula that we can describe in a similar way, then the formula for the information image of the fabric will have the following form:
  • ⁇ * ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ ⁇ + ⁇ avt + ⁇ ⁇ 3 ⁇ ⁇ + ⁇ 3 ⁇ ⁇ , where ⁇ is the information image of another tissue, based on the totality of their similarity and differences in their attributes inherent in one species, one type of tissue located in the body of a particular individual.
  • the considered mathematical expressions characterizing the tissues are identical and completely identical, therefore, the informational images of the compared tissues characterized by these expressions are identical, which means that the antigenic sets of tissue signs — syngenous tissues — also coincide.
  • the inventive method allows to obtain substances that can be described by the formula:
  • C is an antigenic set of signs of a substance that determines the informational image of tissue, based on sets of signs of similarity and difference;
  • 'Lvt- organ set of similarity set of substances that determine tissue similarity by organ characteristics (vt), where t is the type of tissue;
  • ⁇ ⁇ - a species set of similarity, a set of substances that determine the signs of tissue similarity within a single species ( ⁇ ), where n is the type of individual;
  • ⁇ ⁇ is an individual totality of similarity, a set of substances that determine the signs of tissue similarity by individual typological characteristics (vi), where N is an individual;
  • organ plurality of differences a plurality of substances that determine the signs of differences in organ accessories (avt) tissue;
  • ⁇ ⁇ , ⁇ - plurality of species differences a plurality of substances differences, detect signs of differences tissue specific accessory (avv);
  • inventive substances are determined by the antigenic set of features of the source tissue, but meet the requirements of the formula:
  • IIA immunologically active substances
  • C * ⁇ ⁇ ⁇ + ⁇ ⁇ ⁇ + ⁇ avt + ⁇ ⁇ 8 ⁇ ⁇
  • IAV obtained by the claimed technology retain a combination of signs of organ and species similarity and tissue differences (organ and species syngenesis), the tissue from which they are obtained, and can simultaneously exhibit the properties of direct tissue antigen or direct autoantigen to identical tissue depending on methods of its use and application.
  • IAS exhibits the properties of a direct autoantigen of the identical tissue of which it is a marker, and is able to detect the level of anti-tissue autoantibodies in the body’s biological fluids.
  • IAV In an organism of the same species, when administered parenterally, IAV exhibits the property of a direct antigen of identical tissue, the marker of which it is, leading to a cascade of immune and autoimmune reactions that lead to the production of antibodies that are at the same time in response to its introduction into the body - autoantibodies to the identical tissue located in the living organism of the individual, leading to indirect damage and lysis of this tissue in the living the body of the individual due to the effect of antibodies formed on it - autoantibodies.
  • the described immunologically active substance (IIA) has the properties of an “incomplete” antigen of the tissue of the individual from which it is derived.
  • the claimed variants of the substance belong to biotechnologically created substances, they have a protein nature, are able to induce the formation of highly specific anti-body anti-tissue antibodies (autoantibodies) upon parenteral administration, not being the complete antigen of the original tissue from which it is obtained. In his code there is no site responsible for individual tissue compatibility. At the same time, due to the syngenicity of the organ and species code of the antibody-autoantibodies of an individual donor or an individual of the same species, substances are able to undergo immune reactions with him in the laboratory.
  • autoantibodies highly specific anti-body anti-tissue antibodies
  • the substance has a complete set of codes responsible for the organ and species affiliation of the antigen (it is syngenic to the original tissue according to the set of organ and species characteristics), but it differs from it in the fact that the codes of the substance do not have a set of signs of allogeny - individual histocompatibility of compatibility.
  • the inventive method of obtaining IAV ensures the achievement of the above characteristics.
  • the IAVs obtained by us exhibit the properties of antigen and autoantigen under various conditions of their use. IAVs acquire allogeneic properties and are identified by the immune system of an individual of the same species, or by the immune system of the body of a tissue donor, as foreign, and autoantibodies are produced against them that can destroy identical tissue.
  • IAWs in laboratory reactions exhibit the properties of autoantigen, and are able to detect the level of anti-tissue autoantibodies in biological fluids of an individual’s body, and they are also able to exhibit the properties of direct tissue antigen upon parenteral administration of the same species into the body, leading to a cascade of immune and autoimmune transformations that lead to the development in response to its introduction into the body - antibodies, which are at the same time - autoantibodies to identical tissues that are present in the living organism of the individual. It is the increasing level of an individual’s autoantibodies that leads to damage and lysis of antigenically identical (organosyngenous) tissue in a living organism of an individual.
  • the substances according to the claimed method can be obtained from tissue of any organ (except blood) of an organism of any kind, from tissue of a transient organ (placenta), from mutable (tumor), but intactly developing tissue in an individual (donor), and used as a diagnostic substance or as part of a pharmacological composition, of the same individual or individuals of the same biological species, for the diagnosis of the health status of the tissue from which it is obtained, for the treatment (by lysis) of a portion or all of the tissue in the body, for monitoring the degree of tissue lysis and evaluating the results of treatment with the same substance.
  • a pharmaceutical composition based on IAV When introduced into the body, a pharmaceutical composition based on IAV causes a cascade of immunological responses of the individual’s organism, leading to controlled damage to tissue and cells of the same tissue within the individual’s body, isolated lysis of tissue cells, characterized in that IAV, which is part of the pharmacological composition, can cause a chain immunological responses from the body’s immune system, in which antibodies are formed on the introduced pharmacological composition, which, being antibodies against the introduced antigen are simultaneously highly specific autoantibodies to the tissue from which the IAV is obtained, or the marker of which is IAV, which is part of the pharmacological composition.
  • the pharmacological composition containing the substance according to claim 1 exhibits properties that lead to sequential and isolated tissue lysis, under the action of specific antibodies formed - autoantibodies that occur in the body in response to its introduction. These properties of the claimed substances can be used for treatment as an antitumor agent in cancer pathology, when removal of tumor tissue from the body is required.
  • the pharmacological composition containing IAV is capable of marking and damaging tissue that, prior to the introduction of the substance, grew and developed without control by the immune system of this organism, was intact, i.e. not participated in immune responses, had uncontrolled growth, was not lysed, was not rejected and was not disposed of by the body on its own, and could not be detected by immune laboratory control methods.
  • the same substance, used for diagnostic purposes, is able to detect such tissue in the body (to be a tumor marker) and at the same time be a substance that in laboratory conditions can assess the degree of damage to the same tissue, i.e. can be used to control the level of lytic processes occurring in the body, allowing to assess the degree of tissue rejection.
  • a method for diagnosing a state of health of a tissue (tissues) of an internal organ of an individual is based on a quantitative determination of autoantibodies produced by an organism to an investigated tissue of an examined organ or organs.
  • the method includes examining a sample of an individual’s biological fluid sample and determining the amount of antibodies (autoantibodies) formed in the biological fluid after contact with the IAS of the examined internal organ tissue (internal organs tissues) (anti-tissue antibodies (autoantibodies)) by the magnitude of the interactions between the autoantibodies present in the sample the biological fluid of the individual and IAV, which is a marker of tissue.
  • the health status of the tissue (tissues) of the internal organs is determined by comparing the digital values (levels) found in the sample of anti-tissue antibodies (autoantibodies) with the proposed scale of the level of health or tissue damage.
  • both qualitative and quantitative reactions can be used.
  • a quantitative reaction enzyme-linked immunosorbent reaction
  • autoantibody autoantigen
  • the minimum (at least one) antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) interaction is recorded in the maximum dilution (titer) of the biological sample (in liquid media such as RNGA) or the reaction on a solid carrier when the antigen-interaction occurs antibody (autoantigen-autoantibody) may be detected on a solid support, for example, by a color change indicating a reaction has occurred.
  • a qualitative reaction to the presence (absence) of detectable antibodies (autoantibodies) is taken into account as follows: if at least one antigen-antibody interaction occurs in the original sample or in the obtained dilution (titer) of the sample, which can be detected during laboratory testing, then it is considered that the sample has these antibodies (autoantibodies) and the reaction is positive. In the case when at least one antigen-antibody interaction does not occur in the laboratory study in the obtained dilution (titer) of the sample, it is considered that the sample does not have these antibodies (autoantibodies) and the reaction is negative.
  • a quantitative reaction to the presence (absence) of the level of detectable antibodies (autoantibodies) is carried out in reactions in which the total number (level) of antibodies - autoantibodies is detected, can be estimated and taken into account in absolute values, and directly in the original sample of biological fluid without dilution, in physical values ( ⁇ g / ml, ⁇ g / L etc.).
  • a qualitative response can also be quantified. Then the last positive qualitative antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) reaction that occurred in the maximum dilution of the original sample should be taken into account.
  • the coincidence of the obtained indicators in the reaction of the sample with one of the values of the sets of the scale is considered a coincidence with this set, and the number of detected autoantibodies corresponding to the level of the identified set (Example N ° l, below).
  • the obtained titer determines the quantitative content (level) of antibodies - autoantibodies in a diluted sample and may indicate the initial level of detected antibodies-autoantibodies in an undiluted sample. After receiving the result and comparing it with the scale tissue health levels, an opinion is given on the initial state of health and the degree of tissue damage.
  • Tissue health level scale a scale that has a digital ranking (gradation of dilution levels (titers)) from zero (the sample is not diluted) to the maximum dilution level (maximum to 1: 2048), the sample is diluted 2048 times and has units corresponding to and multiple dilution rates.
  • the coincidence of the titer of the reaction with the boundaries of the titers of the scale is considered the coincidence of the multiple dilutions (titers) of the original sample.
  • a set of digital dilution values corresponding to the degree of dilution of the original test sample are highlighted.
  • the sequence of sets of dilution values in the scale determines the digital indicators identified in immune responses, and which can be associated with or associated with dilutions (titers) of a sample of biological fluid. These sets of values belong to the sets of dilutions of the original sample. The sets of values are within the dilution (titers) of the test sample and represent the five main sets of dilutions of the original sample of the test fluid, with which you can detect the level of antibodies - autoantibodies and determine the state of the test tissue. These sets are presented below in the form of a scale in table 3.
  • the result indicates the level of autoantibody antibodies above normal, may indicate a chronic pathological process without exacerbation or a recent adverse effect on the tissue.
  • the state of tissue health in this case can be interpreted as a variant of an individual norm; at the level of detected autoantibodies belonging to the set [1: 64 - 1: 128], the result indicates an exacerbation of the chronic pathological process of the tissue or the beginning of the process of acute tissue damage, direct cytotoxic effect of a foreign agent on the tissue, or a combination of these factors.
  • the health status of the tissue should be interpreted as damage and pathology; at the level of identified autoantibodies belonging to the set [1: 256 - 1: 512] - the result indicates a severe acute pathological process occurring in the internal organ and severe tissue damage to this organ, the state of tissue health is treated as a disease, tissue treatment is required; at the level of detected autoantibodies belonging to the set [1: 1024-1: 2948] - the result indicates the onset of complete or partial lysis of the tissue, its death and rejection. The sharply arisen and (or) maintained level of autoantibodies belonging to this set, as a rule, is not compatible with the life of the whole organism.
  • the state of health of the tissue of the organ and body should be regarded as critical.
  • the coincidence of the obtained indicators in the reaction of dilutions of the sample with one of the values of the sets of the scale is considered a coincidence with this set, and the number of detected autoantibodies corresponding to the level of the identified set.
  • the absence of a result with a qualitative reaction, or the detection of reaction results in biological fluid equal to zero, indicates tissue organ and (or) species asingeness of the sample and the marker used, the reaction is considered negative and indicates the absence of detectable antibodies (autoantibodies) in the test sample.
  • option 2 the tissue has partially or completely changed its antigenic structure, which can be in cases of the formation of ⁇ -tissue and the oncological process is ongoing; option 3) in the samples of biological fluids of the body of the individual there are substances that block the formation of anti-tissue antibodies - autoantibodies (there was a reception or administration of drugs that block or reduce the reaction of antibody formation - autoantibodies or transplant rejection).
  • tissue autoimmune superelevation the state of tissue health in this case requires an in-depth clinical and morphological diagnosis (biopsy, in-depth hardware examination). After receiving the results An in-depth diagnosis can be given to determine the state of health or disease of the tissue of an internal, transplanted or transient organ.
  • the result of the interaction for each of the used IAV obtained from different tissues and the biological fluid of the sample should be evaluated .
  • the result of the interaction for each substance is taken into account separately and the conclusion on the state of health for each tissue is carried out separately.
  • the set of results in the sample and the result obtained for each substance determines the profile of the health status of the tissues included in the sample. Based on the result of the test, a conclusion can be made about the general health status of not only the tissue, organ, but the individual’s body (if a sufficient amount of IAV is used).
  • the conclusion about the individual’s state of health is made on the basis of the results obtained and the proposed scale, for each body.
  • the quantitative determination of the level of antibodies is carried out using an enzyme-linked immunosorbent assay, the result is taken into account in the obtained absolute digital expression or conventionally accepted units.
  • the values of the scale can differ and take absolute digital expressions in different units of measurement if different options, techniques or apparatuses for immune reactions are used. Then the digital, quantitative values detected in a different way in the immune responses should be compared with the quantitative value of the antibodies — autoantibodies in the sample dilution titer — by a scale of sample dilution levels, and then interpreted.
  • An enzyme-linked immunosorbent assay is a high-quality, highly sensitive reaction that allows the detection according to claim 1 of the minimum levels of specific antibodies (autoantibodies) to tissues in samples of biological fluids. The result is taken into account as positive or negative, and quantitative conversions are carried out using the proposed scale.
  • solid-phase immunoassay methods allowing to detect the occurring antigen-antibody reactions (autoantigen-autoantibody), variants of the substance according to claim 1 obtained by the method according to claim 2 can be used.
  • the use of solid carriers for the implementation of the reaction allows one to significantly simplify the analysis.
  • tubes for example, glass, polystyrene, polypropylene
  • granules for example, activated polystyrene
  • fine particles for example, polyacrylamide, cellulose, sepharose
  • microplates or strips e.g. polystyrene
  • dipsticks cards, rods (e.g. polystyrene)
  • electrodes for example, platinum, carbon
  • films or fibers for example, glass, quartz
  • the inventive IAV can be used for individualized (personified) treatment of diseases of tissues of organs of an individual, which can be characterized by uncontrolled growth of tissue cells (including tumor tissue of a malignant or benign nature), requiring the cessation of the development of the growth process and the formation of cells of the same tissue, from which received IAV; requiring complete or partial lysis and removal of tissue or its cells from the body, including sensitization of the body with an increasing titer of the pharmacological composition in order to cause a response of the body's immune system to form anti-tissue antibodies - autoantibodies containing IAV obtained from the tissue of the same individual and introduced into the same parenterally by Infinite, controlling the levels of antibody formation by the same means - autoantibodies in the biological fluids of the patient, observing precautions and prevention of unwanted damage to other tissues aimed at preventing the formation of biological body fluids levels of titers of antibodies - autoantibodies exceeding the values of the set [1: 256 - 1: 512] in
  • the pathogenetic mechanism of action of the proposed method of treatment consists in the directed activation of the immune (autoimmune) system and the production of highly specific antibodies, which, having antigenically identical (syngeneic) regions (organ-specific) and the allogeneic region of the individual's body in its structure, in response to the introduction of a pharmacological composition, containing IAV, are anti-tissue - autoantibodies.
  • Autoantibodies formed by the body have anti-tissue properties and are capable of damaging in isolation and direction the tissue with which they have completely syngenic areas - epitopes in which the organ, species and individual properties of the individual's tissue are encrypted.
  • antibodies having identical organ and species characteristics of IAS are at the same time identical to the set of antigenic characteristics of an individual's body tissue.
  • the antibodies produced are able to act on the same tissue inside the body, which indirectly begins to enter an immune response under the influence of antibodies, which in fact become autoantibodies to the body’s own tissue of the individual.
  • antibodies formed in the body of autoantibodies are highly specific only to the tissue from which they are obtained, syngenic to only one tissue according to the organ and species set of antigenic properties. Other organ syngenias (matches in the organ code) are excluded in the IAB. Therefore, the response of the immune system, in which the formation of antibodies with a different antigenic structure that can damage other tissues of the body, is also excluded.
  • Antibodies - autoantibodies interact precisely precisely, and only with the tissue from which they are obtained (organ and species syngenia). Damage to other body tissues is excluded.
  • a pharmacological composition which will include IAV - a tissue marker obtained by the claimed method from the patient’s body or IAV obtained by the claimed method from the tissue of another patient (donor) of the same biological species, if it is revealed that the antigenic characteristics of the donor tissue and the future patient match.
  • Puncture of a vein should be accompanied by a mandatory blood sampling (at least 3.0 ml) for analyzes to determine the health status of substances by.
  • p. 1 the method of claim 8.
  • the content of the level of antibodies (autoantibodies) to the tissue of the individual organism to which the treatment is applied in the primary sample may be negative or belong to many values] 0-1: 4].
  • the finished form of the pharmacological composition is not compiled, and other instructions for administration are not provided, it is necessary to sterilize 1 mg of dry lyophilized IAV obtained by the present method, dilute 1 mg of the substance in 1 ml of 0.9% saline. Select 0.25 ml of the resulting solution and dissolve in 4.75 ml of 0.9% saline, obtaining a concentration of 50 ⁇ g / ml. Select 0.1 ml of the solution and dilute to a volume of 10 ml, obtaining a concentration of 0.5 ⁇ g / ml.
  • a substance in the amount of 0.1 ml is administered intradermally in the forearm (upper third of the inner surface) to assess the sensitivity of the body to the drug. After 30 minutes, sensitivity is measured by measuring the diameter of the papule. If the diameter of the papule at the injection site is not more than 1 cm, then another 0.1 ml of diluted serum is administered subcutaneously. In the absence of reaction, after 30 minutes, the dose of the substance is dissolved so that the concentration of the solution does not exceed 0.50 ⁇ g in 1.0 ml (for example, 50 ⁇ g-1 ml of the solution of the substance according to claim 1, dissolved in 100 ml of 0.9% physiological solution).
  • the prepared pharmacological composition for infusion is slowly (20–40 cap / min, 1-2 ml / min) administered intravenously at the rate of not more than 0.01 ⁇ g / kg body weight.
  • infusion control monitoring
  • the state of vital body functions respiration, pulse, blood pressure
  • the number of heart contractions, change blood pressure, patient anxiety, discomfort - substance management is stopped and symptoms are stopped by the administration of glucocorticoid substances, antihistamines.
  • the occurrence of the above symptoms is regarded as an interaction reaction that has occurred between the body’s immune system and the substance.
  • the patient should be left under stationary observation for at least 24 hours after the procedure of administration of the substance.
  • an analysis of the biological fluid is carried out, assessing the state of health of the tissues of the internal organs and the presence of damage to the tissue of the individual, for which treatment is carried out.
  • the assessment of the state of tissue health is also carried out according to the claimed method.
  • analyzes of samples of biological fluid in which the values of the levels of the sets of autoantibodies at titers [1: 4 -1: 8] were revealed; [1: 16 - 1: 32]
  • therapeutic effects are considered practicable enough.
  • the body of the individual patient is monitored and the tissue, which is exposed until the desired result is obtained, are repeated sessions of the introduction of IAV.
  • the therapeutic effect is highly effective, repeated sessions of the substance administration are stopped. Monitor the patient.
  • the therapeutic effect is considered excessive and measures are taken to reduce the set of values of autoantibody levels by introducing glucocorticoid hormones, desensitizing and antihistamines, conduct infusion therapy with crystalloid solutions at the rate of 15-20 ml / kg, detoxification methods are used, up to plasmapheresis, until the normalization of many levels of autoantibody levels in samples of biological fluids.
  • Exceeding the values of the levels of autoantibodies belonging to the set [1: 1024 - 1: 2048] is not permissible, and may be accompanied by the death of the whole organism.
  • the diameter of the papule is 30 minutes after the initial administration of a diluted pharmacological composition containing IAV intradermally more than 1 cm, then the following actions are performed: iv administration of 1-2 mg / kg glucocorticoid hormone (prednisone), subcutaneous administration is carried out sequentially with an interval of 30 minutes diluted pharmacological composition containing the substance according to claim 1, in an amount of 0.2 ml, 0.5 ml, 1.0 ml, 2.0 ml, 5.0 ml, then an intravenous infusion is carried out, as described above.
  • glucocorticoid hormone prednisone
  • an analysis of the biological fluid sample is carried out on the level of autoantibodies.
  • the developed technology allows to obtain new immunologically active substances specific for typed tissue of almost any organ of a human or animal. They are substances of a protein nature, namely immunoglobulins, mainly belonging to class M. It has been found that IAVs are specific autoantigens to typed tissue, characterized by signs of protein structures of class G immunoglobulins (Ig M), participating in urgent reactions in blood serum, having high individual, organ and species specificity, circulating constantly in the blood serum and having a quantitative dependence on the vital processes and the state of the tissue under study. The number of tissue autoantibodies detected in serum can vary, having a linear dependence on the morphological state of the substrate.
  • the levels of detected autoantibodies characterize not only the level of metabolic processes in the tissue or organ, but also reflect the state of their damage under the influence of exo and endogenous factors affecting this tissue or organ.
  • An increase in the number of detectable autoantibodies in the blood serum can consistently characterize the state of health of the investigated tissue.
  • the inventive method allows to differentiate the levels of practical health, the state of chronic or latent organ damage, the state of acute organ damage and their involvement in the pathological process, to predict the threat of autoimmune damage and organ tissue rejection.
  • the study is able to identify the state of the body: latently current disease, an impending impending catastrophe of health or a critical position of the tissue.
  • the determination of autoantibodies in blood serum opens up new prospects for laboratory diagnostics of the state of organs and tissues of humans and animals, allowing direct assessment of the state of health or damage to organs and tissues in the test sample.
  • the claimed group of technical solutions allows you to create a complete line of diagnostic kits for quantifying the level of autoimmune markers in the blood serum of animal tissues and human ELISA, to determine the autoimmune status of organs of the whole organism.
  • This technique is a new addition to existing diagnostic methods.
  • a distinctive feature of this laboratory method is not an indirect (mediated through vital products and organ functions) assessment of their morphological state, but a direct quantitative determination of autoantibodies produced by the body to the organ or tissue under study.
  • Circulating autoantibodies in serum are determined for each organ and have their own quantitative values.
  • the number of detected autoantibodies in the blood serum of the studied organs or tissues in the body can be considered as a new biological constant characterizing the autoimmune system of the body, with an inherent and varying characteristic in humans and animals.
  • more than 20 such new biological characteristics were established and used that made it possible to evaluate the autoimmune profile of organs in the human body and more than 70 indicators that allowed us to characterize the autoimmune state of animal health.
  • a series of 20 immunologically active substances was obtained, which were used to diagnose diseases of the internal organs of humans and animals by direct laboratory monitoring of the condition of the internal organs determined in blood serum.
  • the substances were adapted to conduct an enzyme-linked immunosorbent assay, and were able to detect organ dysfunctions in the early stages.
  • a method for interpreting the results of laboratory tests was developed and unified.
  • the claimed IAV has the fully preserved antigenic characteristics of the original organ and the species code of the original tissue (partial, partial syngenesis) from which it was obtained, then a feature of the substance will be the “incompleteness” of the initial antigenic code inherent in all the tissue from which this substance is obtained. This "incompleteness” will determine the partial syngenism.
  • the IAV obtained by the claimed method with fully preserved properties of the antigenic characteristics of the organ tissue, the individual antigenic properties of the same source tissue must be leveled so that it will be able to enter into the immune response antigen-antibody, autoantigen-autoantibody in biological fluids taken from different individuals of one biological species, only with specific autoantibodies of the organ, without entering into non-specific reactions that may be triggered by the characteristics of indie visual differences in samples from different subjects. If a substance is capable of influencing the activity of the body’s immune and autoimmune systems, it is only through a cascade of immune and autoimmune reactions that will produce antibodies (autoantibodies) in response to the introduction of IAS indirectly, affecting elevated levels of antiorgan autoantibodies on the tissue itself.
  • Antibodies to a substance that has partial organ syngenesis, which are formed in response to its administration, will be identical to the tissue of the organ from which this substance is derived.
  • the production of antibodies by the body’s immune system, in response to the introduction of IAV, has strict patterns.
  • Antibodies in their information code are identical to the tissues of the organ from which the substance is obtained.
  • Antibodies produced by the body are antibodies against a substance. But the substance has complete antigenic similarity (organ syngness) with the tissue of the organ from which it is obtained. Therefore, the antibodies produced will already have the properties of autoantibodies to the tissue of the organ of the body with a tissue which is similar to the IAV from which it is derived.
  • anti-organ autoantibodies will have an individual body code, which allows them not to enter into cross-immune reactions and not damage cells of tissues of other organs of the individual, but to have only an anti-organ anti-tissue damaging effect.
  • the object of the study was IAV, obtained by the claimed method from liver tissue of guinea pig.
  • the initial tissue was taken, typed, and preserved by freezing, after which the initial tissue was subjected to a multiple process of freezing and thawing.
  • Thawing of the tissue was carried out by the action of microwave radiation with the removal of moisture formed during the thawing process.
  • the tissue was dehydrated by 43% (until the parameters of the residual moisture content of 57%?).
  • Microwave exposure was carried out at a frequency of a wavelength of 2450-2500 MHz with a radiation source power of 700-900 W for a time of 20 s, at which the water crystallized on the surface of a frozen tissue turned into a liquid state.
  • the initial tissue obtained as a result of this treatment was crushed, homogenized, disinfected by adding a 0.5% aqueous formalin solution to the tissue homogenate to 5% - 10% of the total volume of the starting material, followed by mixing and exposure of the mixture for 4 hours and extracted according to Grasse, The obtained supernatant was subjected to protein standardization from 20-25 mg per 1 ml and freeze-dried.
  • the experimental material thus obtained in the form of a substance of IAS was parenterally administered to laboratory animals — guinea pigs and laboratory rats randomly selected without syngenic inbred lines.
  • the experiment involved 27 healthy animals (14 guinea pigs (350-450 g) and 13 laboratory rats (250-400 g)).
  • the experiment was conducted on young (2-3 months) apatogenic animals. Animals were kept in accordance with the rules of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for scientific purposes.
  • the animals were slaughtered by the method of cervical dislocation in compliance with the "Rules for the use of experimental animals", approved by order of the Ministry of Health of Russia.
  • liver tissue samples were fixed in a 2.3% glutaraldehyde solution in 0.1 M cacodilate buffer for 1 h with additional fixation in 1% Os04 according to G. Palade (1952). After dehydration, the drug was poured into epoxy resins by A. Spurr (1969). The tissue was contrasted in pieces of a 0.5% solution of uranyl acetate and on nets according to F. Reynolds (1963). Slices were prepared on an LKB ultratome. The preparations were examined using a Hitachi HU-12 A microscope at an accelerating voltage of 75 kV.
  • Figure 1-6 presents electron diffraction patterns of the tissue structure of the liver of animals in the control sample and in the experimental group.
  • FIG. 1 shows the ultrastructure of the liver of a guinea pig in a control sample with an 8,000-fold increase.
  • FIG. 1 shows fat droplets (G); sinusoid lumen (C); Disse space (D); parenchymal liver cells (P); lipocyte nucleus (I); mitochondria (M).
  • Hepatic cells make up about 50-60% of the guinea pig liver mass. They have a polymorphic polygonal shape and a diameter of approximately 30-50 microns. These are one or two nuclear, less often multinucleated cells that divide by mitosis.
  • the life span of hepatocytes in experimental animals is about 150 days. The hepatocyte borders on the sinusoid and the Disse space, on the gall canaliculi and neighboring hepatocytes.
  • hepatocytes are clearly defined, have contouring rounded nuclei and good chromatin condensation.
  • Membranes are contoured, structural, well defined.
  • the nucleus of a stellate cell (lipocyte) has an oval shape and a well-structured nuclear membrane.
  • the cytoplasm has clearly distinguishable outgrowths and deposits in the form of fat “spots”.
  • the cytoplasm is filled with electron-dense granules with an inhomogeneous density.
  • Figure 1 distinguishes mitochondria and the structural site of the endothelial cell (sinusoid).
  • Dilutions of the inventive IAV of 0.1 ⁇ g -10 ml were obtained.
  • the resulting solution of the substance was administered to animals at the rate of a total dose of 0.01 ⁇ g for every 100 g of animal body weight fractionally, subcutaneously and intramuscularly with an interval of 30 minutes, starting with a dose of 0.01 ⁇ g.
  • Prednisone 5 mg intramuscularly 1 hour before the substance was used as premedication for all animals without regard to body weight and type of animal.
  • the blood of the animal was taken before the introduction of the substance and then again after a day, determining the values of the levels of autoantibodies to liver tissue, heart and lungs. Observation of the animals was carried out during the entire action exerted by the substance on the animal, after the introduction of the initial dose.
  • FIG. 1 presents the electron diffraction pattern of the local damage to the liver of the guinea pig, intravitally arising under the influence of IAV from the liver tissue of the guinea pig (magnification x7500).
  • FIG. 2 shows the result of the damaging effect of the claimed IAV on the identical liver tissue of a guinea pig of another individual.
  • tissue changes could occur under the action of only a highly specific agent having almost complete genetic affinity for the tissue.
  • the changes are intravital and the tissue, devoid of specific areas (liver parenchyma), is sclerosed.
  • the liver tissue, which survived the damaging effect of the claimed IAV is a cytoskeleton from endothelial cells of the liver tissue that does not contain hepatocytes, containing remnants of membranes and contents of stellate cells that completely lose fat droplets, resembling the structures of fibroblasts and myofibroblasts, i.e., scar tissue of the liver.
  • Fibrinous inflammation of the liver capsule is found with abundant deposition of fibrin on the surface of the liver, which changed color, in the form of gelatinous easily separated masses.
  • the liver itself is thus increased in volume, flabby consistency.
  • Gall bladder with viscous dark red-brown bile.
  • the kidneys are swollen, the capsule is easily removed, the cortical substance is dark red, the brain is gray-red.
  • the urinary bladder contains rich yellow urine.
  • the heart has a rounded shape, tightly elastic, red-brown in cross section, blood clots in the cavities.
  • the myocardium is red, the valves are not changed, without hemorrhage.
  • the lungs are pink, somewhat full-blooded, with dense patches raised above the surface, without hemorrhages under the pleura.
  • a small amount of mucus In the bronchi, a small amount of mucus.
  • the mucous membrane of the stomach is not changed.
  • the mucosa of the small intestine is covered with a layer of thick mucus.
  • the brain is moist, the convolutions are well contoured, the white and gray matter of the brain differentiates.
  • Pathological diagnoses Jaundice. Regional hemorrhagic lymphadenitis. Acute hepatitis. Signs of biliary cirrhosis.
  • liver tissue preparations for electron microscopy were prepared according to the method described above. Studies of liver tissue were carried out in stages in dead animals.
  • Fig.3 presents an electron diffraction pattern of the tissue structure of the liver of a guinea pig, subjected to a twofold administration of the test substance, and fallen after 100 hours of the start of the experiment. X8000 magnification.
  • liver tissue of an experimental animal (guinea pig) that has undergone and died 100 hours after the start of the experiment (liver tissue at 8000-fold magnification using an electron microscope).
  • Fig.3 the result of the damaging effect of the agent (the test substance according to claim 1) is visible. Visible balloon dystrophy of hepatic cells, lysis and damage to cell membranes, destruction and death of the nuclear apparatus, cytoplasm and cellular elements, with a complete or partial release of lysis products into the interstitial tissue and internal environments of the organ and body, are visible.
  • the inventive IAV has a specific damaging effect on liver tissue. Such changes can lead to subsequent destruction of the tissue, disruption of cellular relationships within the tissue, with the possibility of sclerotherapy of damaged areas.
  • Fig. 5 is an electron diffraction pattern with an 8,200-fold increase
  • filament accumulation zones of a mosaic ordered shape characterizing cytoplasmic condensation of protein structures are visible, collagenization of the Disse space, disparate sections of filaments and chromatin nuclei located outside the cell membrane, droplets of fat and a picture of balloon dystrophy of liver cells, conglo a merate of shadow cells, dystrophically altered parenchyma cells.
  • hepatocytes of various sizes are visualized, their polymorphic and heart-shaped forms are absent. All hepatocytes have a circular oval shape, which may indicate an increase in intracellular pressure in response to the damage to the intracellular structure and cellular elements. These circumstances may be due to a different degree of chromatin concentration inside the cell. Damage to cell membranes is visible. The membranes have different thicknesses, which also indicates their participation in the process of cell damage. Some hepatocytes have signs of balloon dystrophy, and in a number of cells lysis of their cytoplasm is visible. The nuclei of stellate cells are deformed, their membranes are heterogeneous and damaged, and the cytoplasm is heterogeneous.
  • FIG. Figure 6 shows the electron diffraction pattern of the guinea pig liver tissue ultrastructure that died 132 hours after the start of the experiment and received a double dose of the test substance.
  • the electron diffraction pattern was made at 8000 - fold magnification.
  • FIG. Figure 6 shows the compaction of the interstitial tissue, the Disse space, the compaction of the intracellular structures and cytoplasm, and the sclerosis of the hepatocyte.
  • a rupture of the lipocyte membrane and pronounced areas of its thickening, along with condensation and densification of the internal structure of the stellate cell, can be characterized as the onset of sclerotherapy of tissue undergoing dystrophy and necrosis. This may indicate the intravital processes that began in vivo, leading to the restoration of tissue viability after damage, locality of damage.
  • liver tissue of a guinea pig leads to isolated damage to the parenchyma of the liver tissue of the experimental animal guinea pig without damaging other internal tissues of the animal’s body. Damage caused by the substance is isolated, but irreversible, can be regulated by the strength and volume of damage.
  • An experimental animal is able to tolerate the administration of a substance.
  • the experimental subgroup of laboratory rats was more difficult to administer the test substance. Among the animals of this subgroup, there were no surviving individuals who underwent a double administration of the substance. All animals died without surviving 50 hours of the experiment. After 120 hours of the experiment, the only animal (control) remained alive in the experimental subgroup of laboratory rats. The control animal was observed up to 10 days and had no signs of disease or lifestyle changes.
  • the spleen is hyperplastic: dense, with round edges, a tense capsule, with a bulging dense pulp; the color under the capsule is lilac, in section red-brown.
  • the liver is swollen, dense, brittle, orange-brown in color, the edges are rounded.
  • the gallbladder is filled with viscous dark red-brown bile.
  • the kidneys are flabby, swollen, the capsule is easily removed, the edges of the incision do not converge, the cortical substance is dark red, and the medulla is gray-red.
  • the urinary bladder contains urine of a thick red color with a brown tint that does not clear when it settles, that is, it is stained with hemoglobin.
  • the mucous membrane of the bladder is swollen, with hemorrhages.
  • the heart has a rounded shape and loose pale red clots in the cavities.
  • Myocardium is gray-pink with yellowish patches, dull, easily crushed by a scalpel handle; under the epicardium - hemorrhages.
  • the bronchi contain a thick pink foam.
  • the mucous membrane of the stomach is dotted with hemorrhages painted in black.
  • the mucosa of the small intestine is thickened, hyperemic, covered with a layer of thick yellowish mucus.
  • the brain is slightly swollen, moist, the gyrus is smoothed.
  • Pathological diagnoses Hemorrhagic diathesis, spleen hyperplasia, serous hemorrhagic lymphadenitis, acute hepatitis, jaundice, anemia, protein nephrosis, hemoglobinuria, acute alternative myocarditis, hemorrhagic pneumonia, catarrhal enteritis, cerebral edema.
  • the test substance has a severe general effect on the body of an experimental animal of a different species, leading to incompatible consequences and damage to internal organs.
  • the damaging effect of the substance is based on a typical anaphylactic reaction leading to shock and death of the animal, developing in response to its introduction, as a highly alien antigen.
  • the predominant site of damage is the vital organs of the body of the experimental animal. Existing liver damage in an experimental animal cannot convincingly indicate locally applied damage to only this tissue.
  • the claimed IAV is deprived of the allogeneic properties of the original organ tissue due to which it has a highly specific effect on the body's immune (autoimmune) system, which is manifested in the fact that the body's immune system is capable of producing antibodies in response to its introduction.
  • autoimmune body's immune
  • the claimed IAV has at least one antigenic (partially or partially syngeneic, organosyngeneous) region in its composition that causes an isolated highly specific response of the body’s immune (autoimmune) system of the same species, which is manifested in the fact that a similar tissue is lysed inside a living organism, response to its parenteral administration (immunization).
  • antigenic partially or partially syngeneic, organosyngeneous
  • the claimed IAV causes a highly specific response of the immune (autoimmune) system in the organisms of individuals of other species, manifested in the fact that anaphylactic shock reaction of a living organism occurs in response to its parenteral administration (immunization), leading to the death of the body as a reaction to the introduction of a foreign antigen.
  • the claimed IAV has at least one antigenic (syngeneic) region in its composition that is capable of detecting highly specific antibodies (autoantibodies) against the tissue of a living organism, circulating in the body’s internal body fluids (including blood serum) of the same species, in laboratory immune responses, forming antigen-antibody complexes.
  • antigenic region in its composition that is capable of detecting highly specific antibodies (autoantibodies) against the tissue of a living organism, circulating in the body’s internal body fluids (including blood serum) of the same species, in laboratory immune responses, forming antigen-antibody complexes.
  • the occurring isolated lysis of similar tissue inside a living organism in response to the parenteral administration (immunization) of the claimed substance is due to the increasing titer of partially syngenic to the substance of the anti-tissue, anti-organ antibodies (autoantibodies).
  • the claimed substance is characterized by the following set of properties: the ability to induce an immune response, to cause isolated lysis of typical cells of the tissue to which it belongs and (or) from which it is obtained without causing damage to non-typical tissue (organ stroma tissue) and other organs in a living organism.
  • the inventive combination of properties allows you to use the claimed IAV as a marker in the implementation of laboratory control for:
  • Example 1 Identification of a marker of human liver tissue using enzyme-linked immunosorbent assay.
  • Example 2 The use of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, for assessing the level of antibodies-autoantibodies of organ tissues in RIGA (indirect hemocoagulation reaction).
  • the reaction of indirect hemocoagulation is carried out according to the classical method.
  • the substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2 are selected.
  • the result of the interaction of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, and anti-organ antibodies-autoantibodies in dilutions of the patient's blood serum was evaluated visually after 90 minutes. after staging the reaction.
  • Kidneys (tissue + + + ⁇ ⁇
  • the protocol contains high titers of antibodies - autoantibodies to placental tissue (chorion and blood vessels).
  • placenta is a transient organ that is rejected during childbirth.
  • the subject has a pregnancy of 40 weeks.
  • the patient has entered into labor. This patient started labor after 6 hours after the analysis.
  • Example 3 HPLC analysis of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2 from human liver and kidney tissue.
  • HPLC analysis was performed using a SmartLine 5000 chromatographic system (ICnauer) on a TSK Bioassist-Q column (5> ⁇ 50 mm), under the following conditions: buffer — 25 mM Tris-HCl (pH 7.2); linear gradient - 0-e - 1 M NaCl for 60 min; speed - 0.5 ml / min; photometric detection at a wavelength of 280 nm; the volume of the applied sample is 1 ml.
  • Example 4 Electrophoretic analysis of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6.
  • samples of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, were selected from rabbit stomach tissue, human stomach tissue, human liver tissue, human kidney tissue, human brain tissue, human testicular tissue. Samples are arranged for electrophoresis in the order described above, from left to right, and from right to Fig. 8, the scale of assessment in atomic units of mass (kDa) is given. Electrophoretic analysis of samples of substances was carried out by the standard method in a 12.5% polyacrylamide gel in the presence of sodium dodecyl sulfate; after electrophoresis, the gels were stained with silver nitrate. The analysis revealed the presence of characteristic for all samples of at least two major bands with mm of about 10 and 60 kDa (Fig.9).
  • Example 5 ELISA on a solid carrier, immuno-DOT analysis.
  • the inventive technology can also be used to prevent complications during vaccination.
  • the diagnosis of the state of health of the intended patient is carried out and a laboratory test is carried out immediately with several substances according to claim 1, obtained from tissues of different organs.
  • the level of anti-tissue, anti-organ antibodies to autoantibodies to the main (vital) organs of an individual is determined by one of the methods described in the application.
  • the result is analyzed and if the detected levels of the detected antibodies-autoantibodies (on a scale) do not exceed the dilution titers of 1: 32, and the absolute values of the indicators are determined below 25 ⁇ g / ml for all the tissues examined, then a conclusion is made about the possibility of vaccination for this patient without the risk of severe complications. If dilution titers exceeding the above indicators are detected in at least one laboratory line characterizing the level of antibody antibodies of the tissues listed above, then such a patient should not be vaccinated due to the risk of developing complications.
  • the mechanism of early diagnosis is based on the ability to detect levels of specific IgM tissues of organs in biological samples of a patient using substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, which are laboratory precursors of future exacerbations during the development of a serious illness and are detected in the blood within 48-120 hours to its clinical manifestation.
  • Biochemical blood test total. protein-72.9 g / l, albumin-39.3 g / l, globulins-33.6 g / l, total. bilirubin-14.5 ⁇ mol / l, creatinine-68.0 ⁇ mol / l, urea-5.0 mmol / l, glucose-4.22 mmol / l, Alt-30.6 units / l, AcT-28, 8 units / l, TG-1.59 mmol / l, HDL-0.61 mmol / l, LDL-7.0 mmol / l, cholesterol-5.4 mmol / l, IA-7.8, alpha amylase-52.0 U / ml, uric acid - 219.0 ⁇ mol / L.
  • urinalysis count-200 ml, color s / f, beats. weight-1010, transparent, protein traces, sugar, acetone, gall. pig-you-from-ritz., r-tion-kis-i, leykots. -2-4-6 p / sp., Erythr. -20-30-30-50 in p / sp., Epit. pl.-in the sky. to-ve.
  • ECG N ° 396 from 10.20.09.
  • Diagnosis Arnold Chiari syndrome in the stage of subcompensation. Hypoplasia of the spinal cord. Cerebellar syndrome. Dysmetabolic polyneuropathy, mixed form.
  • An additional blood test was performed on the level of specific anti-tissue antibodies-autoantibodies to tissues of internal organs in this patient by decision of a consultation of doctors.
  • the state of tissues of 7 organs was investigated. High levels of anti-tissue antibodies-antibodies to the thyroid gland, thymus gland (thymus), and liver were revealed.
  • the level of anti-tissue antibodies-autoantibodies to kidney tissue indicates the onset of an acute process, and the detected titer value of 1: 1024 to brain tissue indicates its severe damage, which began the processes of lysis and tissue rejection. Signs of chronic damage to the tissue of the thyroid and thymus glands, liver were revealed. Acute damage to kidney tissue. Severe damage to the tissue of the white matter of the brain, accompanied by its partial lysis and the beginning of rejection. The revealed value of this indicator is not a favorable prognostic sign and can pose a threat to the life of the whole organism.
  • a positive effect in diagnostics is achieved by solving a number of problems: - expanding the range of substances determined in laboratory conditions that allow direct assessment of the health status of body tissues;
  • the claimed technical solutions can be applied not only to mammals, but also to other objects of the animal world (reptiles, amphibians, birds, etc.), which allows them to be used in veterinary medicine of objects of the animal world - not mammals.
  • Substances with improved (other) properties do not have a direct lytic effect on the tissue, and do not immediately cause a hyperergic reaction, tissue lysis and death of the individual.
  • the inventive substance obtained by a technically different method described in the application has new properties, manifested in that it can simultaneously exhibit the properties of a direct tissue antigen, contributing to the production of antibodies, which, due to the properties of the partial organ and species syngenesis to the original tissue, are also anti-tissue ( anti-organ) autoantibodies of the body involved in acute and chronic reactions of the body in which the immune (or autoimmune) system manifests its reactivity.
  • Antibodies autoantibodies
  • autoimmune the immune response produced in response to a substance
  • the same substance can and should be used as a marker of laboratory control to assess the effectiveness and depth of exposure to tissue.
  • the substance is capable of partial and isolated lysis (according to electron microscopy).
  • New substances act not directly, but indirectly, and therefore can be used as medicines, including for cancer treatment.
  • the substances are universal - these are both diagnostics and medicines (one substance of the SUBSTANCE according to claim 1 is suitable for use as a pharmacological composition and for implementation as a diagnostic test system).
  • Such properties of the substance make it possible to realize the dream of many doctors about the individualization of the possibilities of diagnosis, medicine and therapeutic effects.
  • the claimed biotechnology subject to the relevant ethical standards and rules, allows us to consider the object of the upcoming diagnostics and treatment, as well as a possible source of source ingredients (source tissue) for obtaining the substance.
  • the main characteristics of the IAS constituting the syngeneic composition are given the main characteristics of the IAS constituting the syngeneic composition.
  • the signs of organ and species syngenesis of the tissue obtained from the specific allogeneic tissue of an individual of one species for a similar organ of all individuals of the same species were identified, established, systematized and fixed in the lines of tissue compositions.
  • Antigenic similarity was established and differences in the lines of syngeneic compositions obtained from antigenically different tissues of internal organs in different species of animals and humans were determined. Criteria are defined and a new sign of specific immune activity in the substances that make up and are included in the syngeneic composition, providing high specificity and the result of the reaction, is revealed.
  • syngeneic compositions as direct markers of tissue damage levels of the studied internal organs, methods for laboratory detection of quantitative and qualitative levels of damage to the studied organs, and a method for assessing, with the possibility of predicting the state of health or disease, the studied organ (organs) and the body of the individual as a whole, are described.
  • a characteristic and classification of each line of syngeneic compositions obtained from tissues of the internal organs of an animal or human is given.
  • the use of syngeneic composition lines for the production of new types of laboratory diagnosticums - direct immunoactive markers of tissues of internal organs is disclosed.
  • the use of markers obtained from syngeneic tissue composition allows rapid diagnostics and identification of health conditions, damage or tissue diseases of an individual’s internal organs arising from him, without differentiating various forms of diseases of both infectious and non-infectious nature.
  • the inventive IAW can be used as the basis for creating tools for high-precision and early diagnosis of cancer, as well as drugs and systems for the treatment of cancer.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

The claimed group of inventions relates to bioengineering and can be used in medicine, veterinary medicine, laboratory diagnostics and immunology in the treatment of tumors of the internal organs of a malignant or benign nature. The claimed technical solutions are based on the production of a novel class of substances having immune activity which are obtained from the tissue of an internal, transitory or transplanted organ, a neoplasm (tumor) in the organism of an individual, have specific activity in relation to antibodies/autoantibodies and are characterized by the presence of properties which make it possible to identify, using a laboratory procedure, the condition of the tissue of the internal organs in an individual under examination by means of identifying an antigen-antibody or autoantigen-autoantibody reaction occurring between the substance and a biological liquid taken from the individual under examination and which have partial organ and species synergy, which makes it possible to induce a response of the immune system of an organism of an individual on parenteral administration which results in local lysis of the tissue having organ and species affinity to the administered substance.

Description

ИММУНОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, БИОЗОНД, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СПОСОБЫ  IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE, METHOD OF ITS PRODUCTION, BIOSPOND, PHARMACEUTICAL COMPOSITION, METHODS
ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ  DIAGNOSIS AND TREATMENT
Область техники, к которой относится изобретение FIELD OF THE INVENTION
Заявляемая группа изобретений относится к биотехнологии, может быть использована в медицине, ветеринарии, лабораторной диагностике, иммунологии, в частности, для диагностики состояния ткани индивида, ранней диагностики заболеваний тканей индивида, а также для лечения заболеваний тканей органов индивида, которые можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в т.ч. ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы, интактно развивающихся в организме). The claimed group of inventions relates to biotechnology, can be used in medicine, veterinary medicine, laboratory diagnostics, immunology, in particular, for diagnosing an individual's tissue condition, early diagnosis of individual tissue diseases, as well as for treating tissue diseases of individual organs that can be characterized by uncontrolled cell growth tissue (including tissue of tumors of a malignant or benign nature, intactly developing in the body).
Уровень техники  State of the art
В последнее время активно проводятся исследования аутоантител, их роли в качестве предсказателей развивающихся в организме процессов. Известны публикации, в которых рассматривается связь между аутоантителами и онкологическими заболеваниями. Известны публикации, в которых по наличию определенных аутоантител у больных с атеросклерозом предсказывают риск инсульта, изучаются и предсказатели тромбоза или невынашивания беременности у больных с антифосфолипидным синдромом. Проводятся научные исследования по поиску аутоантител в качестве маркеров других заболеваний. Recently, studies of autoantibodies, their role as predictors of processes developing in the body, have been actively conducted. Publications are known in which the relationship between autoantibodies and oncological diseases is examined. There are publications in which, by the presence of certain autoantibodies in patients with atherosclerosis, they predict the risk of stroke, and predictors of thrombosis or miscarriage in patients with antiphospholipid syndrome are also studied. Research is underway to search for autoantibodies as markers of other diseases.
Из уровня техники известны иммунологически активные вещества и способы их получения из тканей и органов млекопитающих, а также известны технические решения, связанные с диагностикой и лечением различных заболеваний. Поскольку аутоантитела являются «зеркальным отражением» аутоантигенов, которые характерны для тех или иных органов и тканей, то их количество и совокупность отражают общую картину. Известно, что у здоровых людей количество тех или иных аутоантител примерно одинаково. Длительное увеличение или уменьшение их числа, свидетельствует о проблемах в соответствующих органах. Таким образом, аутоантитела являются предвестниками не только аутоиммунных заболеваний, но и  The prior art immunologically active substances and methods for their preparation from tissues and organs of mammals are known, as well as technical solutions related to the diagnosis and treatment of various diseases. Since autoantibodies are a “mirror reflection” of autoantigens that are characteristic of various organs and tissues, their number and totality reflect the general picture. It is known that in healthy people the number of various autoantibodies is approximately the same. A prolonged increase or decrease in their number indicates problems in the relevant authorities. Thus, autoantibodies are harbingers of not only autoimmune diseases, but also
1 one
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) многих других, в частности сердечно - сосудистых заболеваний, заболеваний желудочно-кишечного тракта, почек, печени, легких и др. SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) many others, in particular cardiovascular diseases, diseases of the gastrointestinal tract, kidneys, liver, lungs, etc.
В частности, известна фармацевтическая композиция для лечения иммунных заболеваний, содержащая белковое или небелковое вещество, обладающее активностью в модулировании сигнальной трансдукции, опосредованной AILIM, и фармацевтически приемлемый носитель (заявка на изобретение РФ N°20011 14516, МПК:А61К39/395). Вещество обладает активностью в ингибировании пролиферации AILIM-экспрессирующих клеток или в ингибировании продукции цитокина AILIM-экспрессирующими клетками. Цитокином является интерферон который является цитокином, продуцируемым Т-клетками ТЫ-типа, или интерлейкин 4, который является цитокином, продуцируемым Т-клетками Тп2-типа. Белковое вещество может быть выбрано из группы, состоящей из антитела, которое связывается с AILIM или его частью; полипептида, содержащего полностью или частично внеклеточный район AILIM; слитого полипептида, содержащего полностью или частично внеклеточный район AILIM и полностью или частично константный район тяжелой цепи иммуноглобулина; и полипептида, который связывается с AILIM. Небелковое вещество может являться ДНК, РНК или химически синтезируемым соединением. Вещество может быть использовано для лечения или профилактики артроза, гепатита, для лечения или профилактики реакции трансплантат против хозяина и иммунного отторжения, сопровождающего реакцию трансплантат против хозяина или трансплантацию ткани или органа. Вещество может быть использовано также для предотвращения иммунного ответа, запускаемого чужеродным антигеном или аутоантигеном .  In particular, a pharmaceutical composition for the treatment of immune diseases is known, containing a protein or non-protein substance having activity in modulating signal transduction mediated by AILIM and a pharmaceutically acceptable carrier (RF patent application N ° 20011 14516, IPC: A61K39 / 395). The substance is active in inhibiting the proliferation of AILIM-expressing cells or in inhibiting the production of cytokine by AILIM-expressing cells. A cytokine is interferon which is a cytokine produced by TY type T cells, or interleukin 4, which is a cytokine produced by T2 type T cells. The proteinaceous substance may be selected from the group consisting of an antibody that binds to or part of AILIM; a polypeptide containing the whole or partially extracellular region of AILIM; a fusion polypeptide comprising a fully or partially extracellular region of AILIM and a fully or partially constant region of an immunoglobulin heavy chain; and a polypeptide that binds to AILIM. The non-proteinaceous substance may be DNA, RNA, or a chemically synthesized compound. The substance can be used to treat or prevent arthrosis, hepatitis, to treat or prevent the graft versus host reaction and the immune rejection accompanying the graft versus host reaction or transplantation of a tissue or organ. The substance can also be used to prevent an immune response triggered by a foreign antigen or autoantigen.
Однако заявленная фармацевтическая композиция имеет другую направленность в лечении иммунных заболеваний и относится к другому классу веществ (вещества, предотвращающие иммунный ответ антигенов или аутоантигенов, воздействуя на передачу сигнала (сигнальная трансдукция)), имеет другие цели лечения и лечебного воздействия, не может являться одновременно субстанцией, пригодной для диагностики и лечения, а также не предполагает индивидуализации диагностики и лечения, не может использовать микропробы ткани индивида для получения вещества.  However, the claimed pharmaceutical composition has a different focus in the treatment of immune diseases and belongs to a different class of substances (substances that prevent the immune response of antigens or autoantigens by affecting signal transmission (signal transduction)), has other goals of treatment and therapeutic effect, cannot be simultaneously a substance suitable for diagnosis and treatment, and also does not imply individualization of diagnosis and treatment, cannot use microprobes of an individual's tissue to obtain substances but.
Известен способ оценки риска развития и предрасположенности к развитию патологии, ассоциированной с присутствием аутоантител против ерсг (заявка на изобретение РФ N°2006132064, MIlK:G01N33/564). Способ заключается в определении присутствия высоких уровней аутоантител против эндотелиального рецептора PC/активированного PC (EPCR) в образце, взятого у индивидуума, и предусматривает количественную оценку аутоантител против EPCR in vitro в указанном образце, в качестве которого может быть использована проба сыворотки или плазмы крови. Способ дополнительно предусматривает сравнение уровней анти- EPCR аутоантител, определенных в образце с нормой. Количественная оценка указанных анти-EPCR аутоантител может быть осуществлена с помощью иммуноанализа с использованием маркера или с помощью ELISA-анализа, предусматривающего: иммобилизацию на твердом носителе полипептида, содержащего аминокислотную последовательность EPCR или ее фрагмент, включающий, по меньшей мере, один эпитоп, который может распознаваться анти- EPCR аутоантител ом; инкубирование иммобилизованного полипептида с образцом, который, как предполагается, содержит анти-EPCR аутоантитела и который был взят от указанного индивидуума, в течение периода времени, достаточного для связывания антител с иммобилизованным полипептидом, и образования комплексов "полипептид - анти-EPCR аутоантитело"; удаление оставшегося образца, не связанного с иммобилизованным полипептидом; инкубирование комплексов "полипептид - анти-EPCR аутоантитело" со "вторым" антителом, конъюгированным с ферментом, где "второе" антитело способно связываться с указанными анти-EPCR аутоантителами. В качестве указанного полипептида может использоваться полипептид, содержащий аминокислотную последовательность полноразмерного EPCR, или аминокислотную последовательность фрагмента EPCR, включающего, по меньшей мере, один эпитоп, который может распознаваться анти-EPCR антителом. В качестве полипептида может быть использован гибридный белок, содержащий область А, состоящую из полипептида, содержащего аминокислотную последовательность EPCR или ее фрагмент, включающий, по меньшей мере, один эпитоп, который может распознаваться анти-EPCR антителом; или область В, состоящую из полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, используемую для выделения или очистки указанного гибридного белка, и/или аминокислотную последовательность, используемую для иммобилизации указанного гибридного белка на твердом носителе. Указанным полипептидом может быть гибридный белок, аминокислотная последовательность которого представлена в SEQ ID NO:3. Аминокислотная последовательность может быть выбрана из Arg- метки; His-метки; FLAG-метки; Strep-метки; эпитопа, который может распознаваться антителом; SBP-метки; 3-метки; кальмодулин-связывающего пептида; домена, связывающегося с целлюлозой; хитин-связывающего домена; глутатион-3-трансферазной метки; белка, связывающегося с мальтозой; NusA, ТгхА, DsbA, Avi-метки; Ala-His-Gly-His-Arg-Pro (SEQ ID NO:4) (2, 4 и 8 копий), Pro-Ile- His-Asp-His-Asp-His-Pro-His-Leu-Val-Ile-His-Ser (SEQ ID NO:5), Gly-Met-Thr-Cys-X- A known method of assessing the risk of development and predisposition to the development of pathology associated with the presence of autoantibodies against yers (RF patent application N ° 2006132064, MIlK: G01N33 / 564). The method consists in determining the presence of high levels of anti-PC / activated PC (EPCR) endothelial receptor autoantibodies in a sample taken from an individual and quantifies the in vitro anti-EPCR autoantibodies in said sample, for which a serum or plasma sample can be used. The method further comprises comparing the levels of anti-EPCR autoantibodies determined in the normal sample. Quantification of these anti-EPCR autoantibodies can be carried out using immunoassay using a marker or using an ELISA assay, which includes: immobilizing on a solid support a polypeptide containing the amino acid sequence of the EPCR or its fragment, comprising at least one epitope that can recognized by anti-EPCR autoantibodies; incubating the immobilized polypeptide with a sample, which is supposed to contain anti-EPCR autoantibodies and which was taken from the indicated individual, for a period of time sufficient to bind the antibodies to the immobilized polypeptide and the formation of polypeptide-anti-EPCR autoantibody complexes; removing the remaining sample not bound to the immobilized polypeptide; incubation of the complexes "polypeptide - anti-EPCR autoantibody" with a "second" antibody conjugated to an enzyme, where the "second" antibody is able to bind to these anti-EPCR autoantibodies. As the indicated polypeptide, a polypeptide containing the amino acid sequence of a full-length EPCR or the amino acid sequence of an EPCR fragment comprising at least one epitope that can be recognized by an anti-EPCR antibody can be used. As the polypeptide, a fusion protein may be used comprising region A, consisting of a polypeptide containing the EPCR amino acid sequence or a fragment thereof, comprising at least one epitope that can be recognized by an anti-EPCR antibody; or region B, consisting of a polypeptide containing the amino acid sequence used to isolate or purify the specified hybrid protein, and / or the amino acid sequence used to immobilize the specified hybrid protein on a solid carrier. The specified polypeptide may be a hybrid protein, the amino acid sequence of which is presented in SEQ ID NO: 3. Amino acid sequence may be selected from Arg- Tags His tags FLAG tags Strep tags an epitope that can be recognized by an antibody; SBP tags 3-labels; calmodulin binding peptide; cellulose binding domain; chitin binding domain; glutathione-3-transferase label; protein binding to maltose; NusA, ThxA, DsbA, Avi-tags; Ala-His-Gly-His-Arg-Pro (SEQ ID NO: 4) (2, 4, and 8 copies), Pro-Ile-His-Asp-His-Asp-His-Pro-His-Leu-Val-Ile -His-Ser (SEQ ID NO: 5), Gly-Met-Thr-Cys-X-
X-Cys (SEQ ID NO:6) (6 повторов), ^-галактозидазы и VSV-гликопротеина. Указанное "второе" антитело, специфичное к иммуноглобулину определенного изотипа, выбрано из антитела против человеческого IgG, антитела против человеческого IgM, антитела против человеческого IqA и их смесей. X-Cys (SEQ ID NO: 6) (6 repetitions), ^ -galactosidase and VSV-glycoprotein. The specified "second" antibody specific for an immunoglobulin of a particular isotype is selected from an anti-human IgG antibody, an anti-human IgM antibody, an anti-human IqA antibody, and mixtures thereof.
Присутствие высоких уровней аутоантител ассоциируется с патологией аутоиммунного заболевания (антифосфолипидный синдром, системная красная волчанка, ревматоидный артрит и аутоиммунный васкулит), сосудистого заболевания (артериальное сосудистое заболевание, венозное сосудистое заболевание, тромбоз капиллярных кровеносных сосудов, инфаркт миокарда, инсульт головного мозга, преходящее нарушение мозгового кровообращения, ишемия конечностей, атеросклероз, аневризма, венозный тромбоз и эмболия легких) и осложнений беременности (выкидыш, внутриутробная смерть плода, преждевременные роды, замедленное внутриутробное развития, эклампсия и преэклампсия).  The presence of high levels of autoantibodies is associated with the pathology of autoimmune disease (antiphospholipid syndrome, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis and autoimmune vasculitis), vascular disease (arterial vascular disease, venous vascular disease, capillary blood vessels thrombosis, cerebrovascular disease, blood circulation, limb ischemia, atherosclerosis, aneurysm, venous thrombosis and pulmonary embolism) and pregnancy complications (miscarriages , Intrauterine fetal death, premature birth, delayed fetal development, eclampsia and preeclampsia).
Однако заявленное техническое решение используется только в качестве диагностики определенных нозологических форм заболеваний или совокупностей нескольких заболеваний. Также известное техническое решение не может рассматриваться как группа изобретений представляющих универсальный метод и средство, используемые как для диагностики, так и для лечения, для контроля за ходом лечения, для скрининга здоровья по профилю здоровья, для выявления пациентов с риском развития неблагоприятных реакций и прогноза перед проведением массовых вакцинаций и (или) проведения лечения иммуноактивными веществами. При этом в нем не представлена шкала оценки результата, позволяющая судить о стадии или течении заболеваний исследуемых тканей. Заявляемая методика может выдавать заключения о болезни и/или болезнях, но не дает заключения о состоянии здоровья тканей органов индивида и прямо не может оценить уровни их повреждения. Рассматриваемое техническое решение не способно быть строго персонифицированным и индивидуализированным, т.е. неприменимо для ситуации, когда индивидуум сам может быть источником (донором) ткани и эта ткань может быть использована как средство диагностики и лечения у него самого (Индивидуум XI - донор = Индивидуум XI - пациент). Кроме того, рассматриваемое решение не может быть использовано у индивидов того же биологичекого вида, в этом случае любой представитель вида может быть донором, а другие пациентами (Индивидуум XI- донор = Индивидуум Хп - пациент Индвидуум, где XI - один индивидуум, а Хп - другие индивидуумы того же вида). Кроме того, рассматриваемое изобретение не может использоваться для лечения онкопатологии. However, the claimed technical solution is used only as a diagnosis of certain nosological forms of diseases or a combination of several diseases. Also, the known technical solution cannot be considered as a group of inventions representing a universal method and tool used both for diagnosis and treatment, for monitoring the progress of treatment, for screening health by health profile, for identifying patients at risk of developing adverse reactions and predicting carrying out mass vaccinations and (or) carrying out treatment with immunoactive substances. At the same time, it does not present a scale for evaluating the result, which makes it possible to judge the stage or course of diseases of the studied tissues. The inventive technique can give conclusions about the disease and / or diseases, but does not give an opinion on the state of health of the tissues of the organs of the individual and cannot directly assess the levels of their damage. The considered technical solution is not able to be strictly personified and individualized, i.e. not applicable for a situation where an individual himself can be a source (donor) of tissue and this tissue can be used as a means of diagnosis and treatment for himself (Individual XI - donor = Individual XI - patient). In addition, the solution in question cannot be used in individuals of the same biological species, in this case any representative of the species can be a donor and others as patients (Individual XI - donor = Individual Xp - individual patient, where XI - one individual, and Xp - other individuals of the same species). In addition, the invention in question cannot be used to treat cancer.
Известны также способы им уноанализа (Международная заявка на изобретение WO2006126008, заявка на изобретение РФ J b2007149281 , Патент Великобритании JN°2426581 , МПК: G01N33/564; G01N33/574; G01N33/564; G01N33/574) согласно которым выявляют болезненное состояние или предрасположенность к заболеванию у млекопитающих. Способы основаны на выявлении антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма указанного млекопитающего, где указанное антитело является биологическим маркером болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию. Способ включает в себя контактирование указанного тестируемого образца со множеством различных количеств антигена, специфичного в отношении указанного антитела, выявление величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена, построение графика или вычисление кривой зависимости величины указанного специфического связывания от количества антигена для каждого количества антигена, и определение наличия или отсутствия указанного болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию на основе величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена для каждой отдельной используемой концентрации антигена.  Methods of unanalysis by him are also known (International application for invention WO2006126008, application for invention of the Russian Federation J b2007149281, UK patent JN ° 2426581, IPC: G01N33 / 564; G01N33 / 574; G01N33 / 564; G01N33 / 574) according to which a painful condition or predisposition is detected to the disease in mammals. The methods are based on the detection of antibodies in a test sample containing body fluid of a specified mammal, where the specified antibody is a biological marker of a disease state or predisposition to the disease. The method includes contacting said test sample with a variety of different amounts of antigen specific for said antibody, detecting the specific binding of said antibody and said antigen, plotting or plotting a curve of said specific binding against the amount of antigen for each amount of antigen, and determining the presence or absence of the indicated disease state or predisposition to the disease based on the magnitude specific binding of said antibody and said antigen for each individual antigen concentration used.
Антитело может представлять собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген - белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп. Белок-маркер опухоли представляет собой MUC 1, MUC16, с- myc, EGRF, р53, ras, BRCA1 , BRCA2, АРС, HER2, PSA, СБА, СА19.9, NY-ESO-1 , 4- 5, CAGE, PSMA, PSCA, ЕрСат, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексии, AFP, GRP78, СА125, маммоглобин или raf. Способ может быть использован в диагностике, прогнозировании или мониторинге рака, где вывод делают по результатам сравнения уровня аутоантител у обследуемых индивидов со значениями, принятыми за норму. Способ может быть также применен в выборе противоракового лечения для конкретного пациента-человека, где способ осуществляют с применением панели из двух или более антигенов, соответствующих разным белкам-маркерам опухоли, для определения относительной величины иммунной реакции пациента на каждый из указанных разных белков-маркеров опухоли, где белок- или белки-маркеры опухоли, которые вызывают наиболее сильную иммунную реакцию или значительные реакции у пациента, отбирают для разработки основы для противоракового лечения указанного пациента. Противораковое лечение представляет собой вакцинацию, а белок- или белки-маркеры опухоли, которые вызывают наиболее сильную иммунную реакцию или значительные реакции у пациента, отбирают для разработки основы для противораковой вакцины для указанного пациента. The antibody may be an autoantibody specific for a tumor marker protein, and the antigen may be a tumor marker protein or antigen fragment or epitope thereof. The tumor marker protein is MUC 1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, APC, HER2, PSA, SBA, CA19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA , PSCA, EpCat, cytokeratin, reverin, kallikrein, annexation, AFP, GRP78, CA125, mammoglobin or raf. The method can be used in the diagnosis, prognosis or monitoring of cancer, where the conclusion is drawn by the results of comparing the level of autoantibodies in the examined individuals with the values accepted as normal. The method can also be used in the choice of anticancer treatment for a particular human patient, where the method is carried out using a panel of two or more antigens corresponding to different tumor marker proteins to determine the relative magnitude of the patient's immune response to each of these different tumor marker proteins where the protein or protein markers of the tumor, which cause the strongest immune response or significant reactions in the patient, are selected to develop the basis for anticancer treatment of the specified patient. The anticancer treatment is vaccination, and the protein or protein markers of the tumor that cause the strongest immune response or significant reactions in the patient are selected to develop the basis for an anti-cancer vaccine for the specified patient.
Антитело может представлять собой аутоантитело, характерное для аутоиммунного заболевания или связанное с аутоиммунным заболеванием (ревматоидный артрит, системную красную волчанку (SLE), первичный билиарный цирроз (РВС), аутоиммунный тиреоидит, тиреоидит Хашимото, аутоиммунный гастрит, злокачественную анемию, аутоиммунное воспаление надпочечников, болезнь Аддисона, аутоиммунный гипопаратиреоз, аутоиммунный диабет или тяжелую миастению), для заболевания почек или печени, приводящего к недостаточности или отказу органа, или связанное с таким заболеванием, а также для аутоиммунного заболевания или связанное с аутоиммунным заболеванием. Антиген представляет собой природный белок или полипептид, рекомбинантный белок или полинуклеотид, синтетический белок или полипептид, синтетический пептид, пептидомиметик, полисахарид или нуклеиновую кислоту.  An antibody can be an autoantibody characteristic of an autoimmune disease or associated with an autoimmune disease (rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus (SLE), primary biliary cirrhosis (PBC), autoimmune thyroiditis, autoimmune disease, and autoimmune disease Addison's, autoimmune hypoparathyroidism, autoimmune diabetes, or severe myasthenia gravis), for kidney or liver disease leading to organ failure or organ failure, or associated with such a disease, as well as for an autoimmune disease or associated with an autoimmune disease. An antigen is a natural protein or polypeptide, a recombinant protein or polynucleotide, a synthetic protein or polypeptide, a synthetic peptide, peptidomimetic, polysaccharide or nucleic acid.
Однако в перечисленных выше способах представлен механизм иммунноанализа и отсутствует информация о веществе, с помощью которого можно осуществить данный механизм.  However, in the above methods, an immunoassay mechanism is presented and there is no information about the substance by which this mechanism can be implemented.
В техническом решении по заявке на изобретение WO2006126008 вещество, участвующее в лабораторной реакции, не может одновременно выступать еще и в качестве фармацевтической композиции, когда а) имеются причины, требующие ответа иммунной системы животного организма; б) продуцируемые организмом антитела должны быть антителами не только против нашего вещества, но должны являться аутоантителами против ткани самого организма, приводящим к ее локальному лизису. В данном решении не используются вещества с парциальной сингенностью, когда одно из веществ, участвующих в диагностике, способно быть маркером собственных антител и аутоантител, возникающих при его введении, и ткани органа обследуемого организма, и с теми и с другими поддерживая иммунные реакции в лабораторных условиях, вступая параллельно в специфические реакции антиген-антитело. Кроме того в описании к данной заявке имеется определение: «Антитело может представлять собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген - белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп ..», и далее, « белок-маркер опухоли который может представлять собой MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, р53, ras, BRCA1, BRCA2, АРС, HER2, PSA, СЕА, СА19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, ЕрСат, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексии, AFP, GRP78, СА125, маммоглобин или raf...». Недостатком решения является отсутствие веществ, имеющих парциальную сингенность, и если антитело (аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли, а антиген белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп) также имеют парциально (частично) сингенный участок (эпитоп) в своей структуре к ткани опухоли и он является тестируемым агентом. Также недостатком рассматриваемого способа является то обстоятельство, что вещество-антиген не рассматривается как гликопротеин, в ответ на введение которого организм способен продуцировать антитела, относящиеся как минимум к классу иммуноглобулинов М и G, а также вступающие в иммунные реакции как минимум с анти-М и анти-G иммуноглобулинами в лабораторных условиях, имеющие парциальную (частичную) сингенность к ткани из которой оно получается, и лишенные участков, отвечающих за индивидуальные особенности исходной ткани. In the technical solution for the application for the invention WO2006126008, a substance participating in a laboratory reaction cannot simultaneously act as a pharmaceutical composition, when a) there are reasons requiring a response from the immune system of the animal organism; b) antibodies produced by the body must be antibodies not only against our substance, but must be autoantibodies against the tissue of the body itself, leading to its local lysis. This solution does not use substances with partial syngenicity, when one of the substances involved in the diagnosis is capable of being a marker of its own antibodies and autoantibodies arising from its introduction, and the organ tissue of the body under examination, and supporting immune reactions in laboratory conditions with both of them. entering parallel to specific antigen-antibody reactions. In addition, in the description of this application there is a definition: "The antibody can be an autoantibody specific for a tumor marker protein, and the antigen can be a tumor marker protein or its antigenic fragment or epitope ..", and further, "tumor marker protein which may be MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, APC, HER2, PSA, CEA, CA19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, EpCat, cytokeratin, recoverin, kallikrein, annexation, AFP, GRP78, CA125, mammoglobin or raf ... ” The disadvantage of this solution is the absence of substances with partial syngenesis, and if the antibody (autoantibody specific for the tumor marker protein, and the tumor marker protein antigen or its antigenic fragment or epitope) also have a partially (partially) syngenic region (epitope) in their structure to the tumor tissue and it is a test agent. Another disadvantage of this method is the fact that the antigen substance is not considered as a glycoprotein, in response to the introduction of which the body is able to produce antibodies belonging to at least the class of immunoglobulins M and G, as well as entering into immune reactions with at least anti-M and anti-G immunoglobulins in the laboratory, having a partial (partial) syngenicity to the tissue from which it is obtained, and devoid of sites responsible for the individual characteristics of the original tissue.
Известен способ получения веществ из тканей и органов млекопитающих, обладающих аутоиммунной активностью in vitro и in vivo (патент РФ на изобретение _Ns2240807, МПК: А61К35/12, G01N33/53). Способ заключается в том, что исходный материал типируют, гомогенизируют с кварцевым песком и 0,9% раствором натрия хлорида в соотношении 1 :5, экстрагируют по Грассе с пятикратным циклом замораживания при -17°С и оттаивают - при +37°С, центрифугируют гомогенат и выделяют супернатант, стандартизируют белок в нем спектрометрическим методом 20-22 мг/мл, лиофильно высушивают. При этом дополнительно на этапе четвертого цикла замораживания проводят гамма- квантовую обработку вещества ^-квантами энергией 0.37 кДж, интегральной дозой 1.8-104 гр., в течение 20-25 минут. Полученное заявленным способом вещество сохраняет исходную органную специфичность ткани и оказывается лишенным индивидуальных свойств изоантигенной формы исходного материала донора. Совокупность этих свойств обеспечивает большую точность тканевой идентификации в реакциях in vitro, и проявляет свою активность in vivo. A known method of obtaining substances from tissues and organs of mammals with autoimmune activity in vitro and in vivo (RF patent for the invention _Ns2240807, IPC: A61K35 / 12, G01N33 / 53). The method consists in the fact that the starting material is typed, homogenized with quartz sand and 0.9% sodium chloride solution in the ratio of 1: 5, extracted according to Grasse with a five-fold freezing cycle at -17 ° C and thawed at + 37 ° C, centrifuged homogenate and isolate the supernatant, standardize the protein in it with a spectrometric method of 20-22 mg / ml, freeze-dried. In addition, at the stage of the fourth freezing cycle, a gamma-quantum treatment of the substance is carried out with ^ quanta with an energy of 0.37 kJ, an integral dose 1.8-104 gr., For 20-25 minutes. Obtained by the claimed method, the substance retains the original organ specificity of the tissue and is deprived of the individual properties of the isoantigenic form of the source material of the donor. The combination of these properties provides greater accuracy of tissue identification in in vitro reactions, and manifests its activity in vivo.
Недостатком способа является его сложность при реализации, т.к. требуется использование специального оборудования. В способе применена радиационная (гамма-квантовая) технология, требующая специального регламента использования, лицензирования, специфической аппаратуры, приборов калибрации и контроля. По сравнению с известным, в заявляемом способе использована технология СВЧ- воздействия, в котором применяются «бытовые» сверхвысокие частоты, для воздействия на ткань, что делает применение технологии дешевле, доступнее и безопаснее, по сравнению с радиационными способами воздействия на ткань прототипа. Кроме этого, в заявляемом способе обработке ткани применяется операция обеззараживания ткани, что делает работу с исходными веществами безопасным, в отличие от способа прототипа. Исходный образец ткани в заявляемом способе до начала типирования и обработки ткани с целью получения вещества, может быть законсервирован путем замораживания (до -24°С) и длительно храниться при этой температуре (до 6 месяцев), до момента использования его в качестве сырья для получения вещества без изменения качества получаемого вещества, что также отличает заявляемую технологию от прототипа.  The disadvantage of this method is its complexity in the implementation, because use of special equipment is required. The method uses radiation (gamma-quantum) technology, which requires special regulations for use, licensing, specific equipment, calibration and control devices. Compared with the known method, the inventive method uses microwave technology, in which "household" ultrahigh frequencies are used to influence the tissue, which makes the use of the technology cheaper, more affordable and safer, in comparison with the radiation methods of influencing the prototype fabric. In addition, in the inventive method for processing tissue, the operation of disinfecting the tissue is used, which makes working with the starting materials safe, in contrast to the prototype method. The initial tissue sample in the inventive method, before typing and processing the fabric in order to obtain a substance, can be preserved by freezing (up to -24 ° C) and stored for a long time at this temperature (up to 6 months), until it is used as a raw material for substances without changing the quality of the obtained substance, which also distinguishes the claimed technology from the prototype.
Кроме того, получаемое по известному способу вещество имеет индивидуальный набор свойств и структуру, которые могут быть использованы исключительно в лабораторной диагностике и которые не могут быть распространены на лечение заболеваний тканей. Вещества способа прототипа лишены свойств частичной органной и видовой сингенности при сохраненных исходных органных свойствах. Вещества, полученные способом по патенту на изобретение N22240807, имеют исходную органную специфичность ткани, которая лишена индивидуальных свойств изоантигенной формы исходного материала ткани донора. Исходное сырье ткани подвергается разным физическим воздействиям, которые вызывают различные превращения в исходной ткани. Радиационное воздействие гамма лучами оказывает сшивающий, упорядочивающий и упрочняющий жесткую структуру (межмолекулярные связи) исходного материала эффект, а СВЧ воздействие влияет на гидрофильные связи внутри тканевых биоструктур, «освобождая свободную воду», находящуюся в ткани, вызывая освобождение гидрофильных связей внутри ткани и мобилизацию свободных молекул воды, приводя к нарастающему дегидратированию ткани. Совокупность этих позиций позволяет говорить о том, что вещества, полученные по способу - прототипу, и заявляемые вещества, получаемые по заявляемой технологии, являются принципиально различными. Установлено, что вещества вышеуказанного способа, могут проявлять свою активность в лабораторных условиях реакций непрямой гемагглютинации (РНГА), по которым оценивают состояние аутоиммуннитета организма. РНГА, являясь рутинным методом иммунных реакций, в настоящий момент не может рассматриваться стандартизирующим методом при иммунных исследованиях. Однако, других способов выявления специфических аутоантител, таких как иммуноферментный анализ, анализ иммунных взаимодействий антиген- антитело (аутоантиген-аутоантитело) на твердых носителях в способе - прототипе не продемонстрировано, также, как и не описаны возможности их использования другими способами. Кроме того, недостатком рассматриваемого технического решения является отсутствие у вещества-прототипа способности к частичному и изолированному лизису ткани. Вещества, описанные в данном патенте, не способны действовать на живую ткань организма, не вызывая его гибели и поэтому не могут быть использованы для составления фармацевтических композиций, в т.ч. для лечения рака. Они не являются универсальными для диагностики и лечения (вещество - субстанция не может быть применено для фармацевтического и лабораторного производства). In addition, obtained by a known method, the substance has an individual set of properties and structure that can be used exclusively in laboratory diagnostics and which cannot be extended to the treatment of tissue diseases. The substances of the prototype method are devoid of the properties of partial organ and species syngenesis while maintaining the original organ properties. Substances obtained by the method according to patent for invention N22240807 have the initial organ specificity of the tissue, which is devoid of the individual properties of the isoantigenic form of the source material of the donor tissue. The feedstock tissue is subjected to various physical influences that cause various transformations in the source tissue. The radiation effect of gamma rays has a cross-linking, ordering and strengthening the rigid structure (intermolecular bonds) of the source material effect, and the microwave effect affects the hydrophilic bonds inside the tissue biostructures, “freeing free water” located in the tissue, causing the release of hydrophilic bonds within the tissue and the mobilization of free water molecules, leading to increasing dehydration of the tissue. The combination of these positions allows us to say that the substances obtained by the method - the prototype, and the claimed substances obtained by the claimed technology are fundamentally different. It was found that the substances of the above method can manifest their activity under laboratory conditions of indirect hemagglutination reactions (RNGA), which assess the state of autoimmune organism. RNGA, being a routine method of immune reactions, at the moment cannot be considered a standardizing method in immune studies. However, other methods for the detection of specific autoantibodies, such as enzyme-linked immunosorbent assay, analysis of the immune interactions of the antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) on solid carriers in the prototype method is not shown, as well as the possibilities of their use by other methods are not described. In addition, the disadvantage of the considered technical solution is the lack of substance prototype ability to partial and isolated tissue lysis. The substances described in this patent are not able to act on living tissue of the body without causing its death and therefore cannot be used to formulate pharmaceutical compositions, including for cancer treatment. They are not universal for diagnosis and treatment (substance - substance cannot be used for pharmaceutical and laboratory production).
Раскрытие изобретения  Disclosure of invention
Задачей группы изобретений является создание новой биотехнологии, которая может быть использована в медицине, ветеринарии, лабораторной диагностике, иммунологии, фармацевтике для общей и индивидуальной, персонифицированной диагностики состояния ткани органа или тканей органов индивида, лечения заболеваний этих тканей, которые можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в т.ч. ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы, интактно развивающихся в организме) и требующих прекращения такого роста, путем их локального лизиса внутри живого организма при осуществлении обязательного контроля при лечении одним и тем же веществом, которое может являться основой для проведения лабораторного тестирования и фармацевтической композиции. Технический результат заключается в возможности осуществления универсальной комплексной прямой диагностики состояния ткани одного или нескольких внутренних органов индивида, при этом обеспечивается возможность оперативного получения заключения о состоянии здоровья ткани или степени ее поврежденности в живом организме, что в свою очередь позволяет судить об общем состоянии здоровья организма индивида, персонифицировав диагностику и лечение. Диагностическое заключение при заявляемой методике формируется быстрее, имеет более точный информационный и прогностический результат, данные лабораторного контроля способны выявлять патологические и морфологические изменения за 24-72 часа до их клинического проявления и развития заболевания внутренних органов. Количественная шкала оценки состояния повреждения ткани внутренних органов, позволяет более точно определять уровни патологических расстройств, происходящие внутри этой ткани. Способ получения веществ технически проще, имеет меньшую себестоимость на единицу времени при производстве, безопаснее в производстве, т.к. исключает радиационные источники облучения, доступнее, позволяет осуществлять консервацию и длительное хранение исходного материала, включает в себя этапы обеззараживания промежуточного продукта, что делает способ безопасным для персонала при работе с ним. The objective of the group of inventions is to create a new biotechnology that can be used in medicine, veterinary medicine, laboratory diagnostics, immunology, pharmaceuticals for general and individual, personalized diagnosis of the state of an organ’s tissue or organs of an individual, treatment of diseases of these tissues, which can be characterized by uncontrolled growth of tissue cells (including tissue of tumors of a malignant or benign nature, intactly developing in the body) and requiring the cessation of such growth, their local destruction within a living organism when implementing compulsory control in treating one and the same substance, which may be the basis for laboratory test and pharmaceutical compositions. The technical result consists in the possibility of implementing a universal comprehensive direct diagnosis of the state of the tissue of one or more internal organs of an individual, while it is possible to quickly obtain an opinion on the state of health of the tissue or the degree of damage to it in a living organism, which in turn allows one to judge the general state of health of the individual’s body by personifying the diagnosis and treatment. The diagnostic conclusion with the claimed method is formed faster, has a more accurate information and prognostic result, laboratory control data can detect pathological and morphological changes 24-72 hours before their clinical manifestation and the development of diseases of the internal organs. A quantitative scale for assessing the state of damage to tissue of internal organs allows you to more accurately determine the levels of pathological disorders that occur within this tissue. The method for producing substances is technically simpler, has a lower cost per unit time in production, is safer in production, because eliminates radiation sources of radiation, more affordable, allows for preservation and long-term storage of the source material, includes the stages of disinfection of the intermediate product, which makes the method safe for personnel when working with it.
Заявляемые технические решения базируются на создании нового класса веществ, обладающих иммунной активностью, получаемых из ткани внутреннего, транзиторного или трансплантированного органа, новообразования (опухоли) организма индивида, обладающих специфической активностью в отношении антител/аутоантител и характеризующихся наличием свойств, позволяющих выявлять лабораторным методом состояние ткани внутренних органов у обследуемого индивида путем выявления реакции антиген-антитело, аутоантиген- аутоантитело, происходимой между веществом и биологической жидкостью, забранной у обследуемого индивида, имеющих парциальную органную и видовую сингенность, которая позволяет вызывать ответ иммунной системы организма индивида при парентеральном введении, приводящий к локальному лизису ткани имеющей органную и видовую тропность к вводимому веществу.  The claimed technical solutions are based on the creation of a new class of substances with immune activity, obtained from tissue of an internal, transient or transplanted organ, neoplasm (tumor) of an individual’s body, which have specific activity against antibodies / autoantibodies and are characterized by the presence of properties that make it possible to identify the state of the tissue by laboratory methods internal organs in the examined individual by detecting the antigen-antibody reaction, autoantigen-autoantibody, occurring between and biological fluid taken from the examined individual, having partial organ and species syngenesis, which allows for an immune response of the organism of the individual upon parenteral administration, leading to local lysis of tissue having organ and species tropism to the substance being introduced.
Заявляемое вещество обладает новыми свойствами, проявляет себя как гликопротеин, провоцирующий образование антител внутри организма при парентеральном введении, которые относятся к иммуноглобулинам (М, G), и способное образовывать комплексы антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело) с анти-G анти-М иммуноглобулинами. Причем, продуцируемые против вещества антитела, за счет свойства парциальной органной сингенности, являются противотканевыми и противорганными аутоантителами живых тканей организма. Таких свойств у веществ, описываемых в аналогах, нет. Исходным сырьем для получения вещества не могут использоваться ткани любого объекта животного мира, а также источником получения для вещества не может служить любая ткань, находящаяся в живом организме, в неживом организме, в удаленном органе, в пунктате, в транзиторном органе, если в ткани нет признаков биологического лизиса (разложения) и имеется возможность проведения типирования и выделения не менее 1 ООО мг исходной ткани. The inventive substance has new properties, manifests itself as a glycoprotein that provokes the formation of antibodies within the body during parenteral administration, which are immunoglobulins (M, G), and capable of forming antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) complexes with anti-G anti-M immunoglobulins. Moreover, the antibodies produced against the substance, due to the properties of the partial organ syngenism, are anti-tissue and anti-organ autoantibodies of living body tissues. The substances described in the analogues do not have such properties. Tissues of any animal world object cannot be used as the raw material for obtaining the substance, and any tissue located in a living organism, in a non-living organism, in a remote organ, in a puncture, in a transient organ, if there is no tissue signs of biological lysis (decomposition) and there is the possibility of typing and isolation of at least 1 000 mg of the original tissue.
В заявляемом изобретении получена группа веществ, имеющих новые свойства, опирающиеся на органную и видовую парциальную сингенность исходной ткани, позволяющие использовать получаемое вещество как основу для диагностического и фармацевтического средств, используемых одновременно. При использовании вещества в качестве фармацевтического средства, его действие реализуется как вакцина, которая способна, вызывая каскад физиологических реакций, в которых участвует иммунная и аутоиммунная системы организма, приводить к локальному изолированному лизису ткани внутри живого организма не приводящее к его гибели. При использовании этого же вещества в качестве диагностического средства в момент лечения (вакцинации) индивида этим же веществом, оно способно выявлять величину ответной реакции организма на его введение (выявлять величину вакцинации веществом), вступая в иммунные реакции в антителами-аутоантителами, образующимися в организме в ответ на его парентеральное введение. Эти свойства вещества позволяют осуществить персонифицированное - индивидуализированное лечение, когда исходным сырьем для получения вещества может являться один индивид. Предлагаемые способ получения вещества и его применения, позволяют использовать микроколичества исходного материала, что крайне важно для реализации принципов малоинвазивного лечения.  In the claimed invention, a group of substances is obtained having new properties, based on the organ and specific partial syngenesis of the original tissue, allowing the use of the resulting substance as the basis for diagnostic and pharmaceutical agents used simultaneously. When using a substance as a pharmaceutical agent, its action is realized as a vaccine, which is capable of causing a cascade of physiological reactions in which the body’s immune and autoimmune systems participate, leading to localized isolated lysis of the tissue inside a living organism that does not lead to its death. When using the same substance as a diagnostic tool at the time of treatment (vaccination) of an individual with the same substance, it is able to detect the magnitude of the body's response to its administration (detect the magnitude of vaccination with the substance), entering into immune reactions in autoantibodies formed in the body response to its parenteral administration. These properties of a substance make it possible to carry out a personalized - individualized treatment, when the source of raw materials for obtaining the substance can be one individual. The proposed method for producing the substance and its use allows the use of trace amounts of starting material, which is extremely important for the implementation of the principles of minimally invasive treatment.
Быстрый и точный результат диагностики (до 90 минут), немедленно прогнозируемый уровень состояния здоровья ткани внутренних органов и оцениваемое состояния здоровья организма в период ближайших 24-48 часов, выявление скрытых расстройств здоровья или повреждения внутренних органов, легко доступная и просто реализуемая возможность методики диагностики позволяют применять этот способ для выявления возможных осложнений и нежелательных реакций при проведении массовых вакцинаций другими вакцинами и осуществлять отбор пациентов для этих целей. A quick and accurate diagnostic result (up to 90 minutes), an immediately predicted level of health status of the tissue of internal organs and an estimated state of health of the body in the next 24-48 hours, the identification of latent health disorders or damage to internal organs, an easily accessible and easily realized possibility of a diagnostic technique allow you to use this method to identify possible complications and adverse reactions when conducting mass vaccinations with other vaccines and to select patients for these purposes.
Технический результат также заключается: в специфическом воздействии на изолированную исходную ткань биологического индивида, позволяющем сохранить органную и видовую специфичность исходной ткани, нивелировав ее аллогенные характеристики, и получить новое вещество с парциальной органной и видовой сингенностью к исходной ткани; получение нового вещества, обладающего иными свойствами, позволяют использовать его для ранней прямой диагностики состояния ткани, из которой оно получено, применяя его в составе лабораторного теста, и локально литически воздействовать на ткань, применяя вещество в составе фармацевтической композиции для парентерального введения, используя свойство органной и видовой сингенности вещества, лишенного аллогенных свойств, для точного, локального контролируемого лизиса этой же ткани, проводя одновременно с этим контроль результата и степени воздействия на эту ткань этим же веществом, включенным в состав лабораторного теста, используемого для контроля лечения. Контролируемость и точность локального воздействия веществом, минимизируя вредное и токсическое влияние, неизбежно возникающее при локальном лизисе ткани внутри живого организма, позволяет персонализировать и индивидуализировать лечение в каждом конкретном случае, осуществлять подбор индивидуальной дозы вещества (количество вещества; количество, время и необходимость повторного введения вещества), не приводящее к гибели организма; в осуществлении лабораторного контроля лечения, проводимого же этим веществом, его способности выявлять антитела - аутоантитела в биологических пробах при проведении лечения за счет того что вещество обладает высокой чувствительностью, специфичностью, которые обусловлены свойствами его парциальной органной и видовой сингенности к идентичной ткани из которой оно получено, и способного выявлять минимальные изменения (литические повреждения) ткани, не приводящие к несовместимым с жизнью последствиям внутри организма, значимо не изменяя его общее состояние, прецизионно точно дозируя и оценивая необходимые уровни литического воздействия на ткань.  The technical result also consists in: a specific effect on the isolated source tissue of a biological individual, which allows preserving the organ and species specificity of the source tissue, leveling its allogeneic characteristics, and obtaining a new substance with a partial organ and species syngenicity to the source tissue; obtaining a new substance with other properties allows it to be used for early direct diagnosis of the state of the tissue from which it is obtained, using it as part of a laboratory test, and locally lytically affect the tissue using the substance as part of a pharmaceutical composition for parenteral administration using the property of organ and species syngenesis of a substance devoid of allogeneic properties for an accurate, local controlled lysis of the same tissue, while simultaneously monitoring the result and step No effect on this tissue by the same substance included in the laboratory test used to control treatment. The controllability and accuracy of local exposure to the substance, minimizing the harmful and toxic effects that inevitably occur during local tissue lysis inside a living organism, allows you to personalize and individualize the treatment in each case, to select an individual dose of the substance (amount of substance; amount, time and need for repeated administration of the substance ), not leading to the death of the body; in the laboratory control of the treatment carried out by the same substance, its ability to detect antibodies - autoantibodies in biological samples during treatment due to the fact that the substance has high sensitivity, specificity, which are due to the properties of its partial organ and species syngenesis to the identical tissue from which it was obtained , and capable of detecting minimal changes (lytic lesions) of tissue that do not lead to life-incompatible consequences within the body, without significantly changing his general condition, precision dosing and accurately estimating the required levels of lytic effect on the fabric.
Поставленная задача решается тем, что иммуннологически активное вещество (ИАВ) представляет собой белковый субстрат, полученный из супернатанта модифицифированной исходной ткани органа индивида, характеризующийся парциальной сингенностью, имеющий полную органную и видовую антигенную схожесть с исходной тканью, лишенный аллогенных антигенных свойств этой ткани, проявляющий свойства и антигена и аутоантигена к ткани из которой оно получено, и обладающий специфической активностью в отношении антител - аутоантител, находящихся в биологических жидкостях других индивидов одного биологического вида. Иммуннологически активное вещество содержит макромолекулы белкового субстрата в интервале молекулярного веса 10 - 90 кДа, в котором при денатурирующем электрофорезе выявляются специфичные участки в виде, по меньшей мере, двух мажорных полос, соответствующих значениям шкалы молекулярной массы из интервала 9,0-1 1,0 и 59-61 кДа. The problem is solved in that the immunologically active substance (IAV) is a protein substrate obtained from the supernatant of a modified source tissue of an individual organ, characterized by partial syngenicity, having full organ and species antigenic similarity to the original tissue, lacking allogeneic antigenic properties of this tissue, exhibiting the properties of both the antigen and autoantigen to the tissue from which it was obtained, and having specific activity against antibodies - autoantibodies found in biological fluids of other individuals one species. An immunologically active substance contains macromolecules of a protein substrate in the range of molecular weight 10 - 90 kDa, in which specific regions in the form of at least two major bands corresponding to values of the molecular weight scale from the interval 9.0-1 1.0 are detected during denaturing electrophoresis and 59-61 kDa.
Иммуннологически активное вещество содержит, по меньшей мере, один иммунноактивный сингенный эпитоп с антигенными - аутоантигенными свойствами исходного органа и вида индивида.  An immunologically active substance contains at least one immunologically active syngeneic epitope with antigenic - autoantigenic properties of the original organ and species of the individual.
Совокупность свойств ИАВ определяется формулой: The set of properties of IAV is determined by the formula:
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000014_0001
где 'ΣνΓ органная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по органным признакам (vt), t - тип ткани; where 'Σν Γ is the organ set of similarity, the set of substances that determine tissue similarity by organ characteristics (vt), t is the type of tissue;
ηΣνν- видовая совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по видовым признакам (νν), п - вид индивида; ηΣ νν is the species aggregate of similarity, the totality of substances that determine tissue similarity by species (νν), n is the species of the individual;
lSavt- органная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих отличия ткани по признаку органной принадлежности (avt), t - тип ткани органа; nLavv- видовая совокупность различий, совокупность различий веществ, определяющих отличия ткани по признаку видовой принадлежности (avv), п - вид индивида; lSav t is the organ set of differences, the set of substances that determine the differences in tissue based on organ affiliation (avt), t is the type of organ tissue; nL avv is the species totality of differences, the totality of differences of substances that determine the differences in tissue by species (avv), n is the type of individual;
Иммуннологически активное вещество характеризуется наличием при проведении высоко эффективной жидкостной хроматографии двух или трех доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при значении рН 7,2, и различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце процесса хроматографии, и проявляющиеся на кривой хромотографии в виде пиков, соответствующих диапазонам значений 33,5±2,5 и 52,5±2,5 mAU для двух доминирующих фракций щелочных компонентов или соответствующих диапазонам значений 17±2,5; 33,5±2,5; 52,5±2,5 для трех доминирующих фракций щелочных компонентов. Способ получения иммуннологически активного вещества включает забор исходной ткани, ее типирование, многократное замораживание при температуре -24 - 28° С и оттаивание, при этом оттаивание осуществляют воздействием СВЧ излучения на частоте 2450-2500 МГц с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги до снижения массы исходной ткани на 30 - 60%, полученную в результате такой обработки исходную ткань, характеризующуюся сингенностью к видовым и органным антигенным кодам исходной ткани и лишенную аллогенных антигенных свойств исходной ткани индивида, измельчают, гомогенизируют, обеззараживают и экстрагируют по Грассе, полученный супернатант подвергают стандартизации по белку от 20 - 25 мг на 1 мл и лиофильно высушивают. Обеззараживание ткани осуществляют путем добавления в гомогенат ткани 0,5 % водного раствора формалина до 5%-10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4 - 6 часов. СВЧ - воздействие осуществляют при мощности источника излучения 600 -1000 Вт в течение времени, которое задают из расчета 10-50 с на 100 г массы исходной ткани, при этом в процессе СВЧ - воздействия указанные параметры устанавливают исходя из условия предотвращения нагрева исходной ткани до температуры 41°С. СВЧ - воздействие осуществляют в течение времени, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходит в жидкое состояние. An immunologically active substance is characterized by the presence during the performance of high-performance liquid chromatography of two or three dominant fractions of alkaline components, weakly interacting with the anion column at a pH of 7.2, and differing in charge of acidic major components, eluting in the middle and at the end of the chromatography process, and manifesting themselves on the chromatography curve in the form of peaks corresponding to the ranges of 33.5 ± 2.5 and 52.5 ± 2.5 mAU for the two dominant fractions of alkaline components or the corresponding range am values 17 ± 2.5; 33.5 ± 2.5; 52.5 ± 2.5 for the three dominant fractions of alkaline components. A method of obtaining an immunologically active substance includes sampling the source tissue, typing it, repeatedly freezing it at a temperature of -24 - 28 ° C and thawing, while thawing is carried out by exposure to microwave radiation at a frequency of 2450-2500 MHz with the removal of moisture generated during thawing to reduce the mass of the original tissue by 30-60%, the initial tissue obtained as a result of such processing, characterized by syngenicity to the species and organ antigenic codes of the original tissue and devoid of allogeneic antigenic properties of the original tissue individual, crushed, homogenized, disinfected and extracted according to Grasse, the resulting supernatant is subjected to standardization by protein from 20 - 25 mg per 1 ml and freeze-dried. Tissue disinfection is carried out by adding to the tissue homogenate a 0.5% aqueous formalin solution up to 5% -10% of the total volume of the starting material, followed by mixing and exposure of the mixture for 4-6 hours. Microwave exposure is carried out at a radiation source power of 600 -1000 W for a time that is set at a rate of 10-50 s per 100 g of the mass of the original tissue, while in the process of microwave exposure, these parameters are set based on the condition of preventing the source tissue from heating to temperature 41 ° C. Microwave action is carried out during the time at which the water crystallized on the surface of the frozen tissue goes into a liquid state.
Иммуннологически активное вещество применяют в качестве маркера состояния ткани внутренних, транзиторных или трансплантированных органов индивида.  An immunologically active substance is used as a marker of the state of tissue of the internal, transient or transplanted organs of an individual.
Может быть также изготовлен биозонд, включающий твердую фазу с нанесенным на ее поверхность иммуннологически активным веществом. Иммуннологически активное вещество нанесено на твердую фазу биозонда в виде серии из разведений в интервале концентраций от 12,5 до 200 мкг сухого вещества на 1 мл физиологического раствора. На твердую фазу биозонда может быть нанесен набор серий иммунологически активных веществ, полученных из разных тканей органов индивида.  A biosonde can also be made, including a solid phase with an immunologically active substance deposited on its surface. An immunologically active substance is applied to the solid phase of the biosonde in the form of a series of dilutions in the concentration range from 12.5 to 200 μg of dry matter per 1 ml of physiological solution. A set of series of immunologically active substances obtained from different tissues of an individual's organs can be applied to the solid phase of a biosonde.
Способ диагностики состояния ткани внутреннего органа индивида включает забор пробы образца биологической жидкости индивида, обеспечение контакта биологической жидкости с ИАВ по п.1 (см. формулу изобретения) или биозондом по п.11 в серии из разведений образца исследуемой жидкости в пределах значений титра от 1 :4 до 1 :2048, определение в титрах произошедших взаимодействий между антителами и/или аутоантителами, находящимися в разведенном образце биологической жидкости индивида и иммуннологически активным веществом по п.1 , при этом вывод о состоянии ткани внутреннего органа индивида делают по предельному позитивному результату взаимодействия в серии разведений образца исследуемой жидкости, при этом, если взаимодействие выявлено в пределах разведения исследуемого образца в пределах значений [1 :4 -1 :8] - делают вывод о здоровом состоянии ткани; в пределах значений [1 :16- 1 :32] - делают вывод о наличии несущественных повреждений ткани, в пределах значений [1 :64 - 1 :128] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для хронического воспаления, в пределах значений [1 :256 - 1 :512] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для острого воспаления, в пределах значений [1 :1024- 1 :2048] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для лизиса и/или отторжения ткани. A method for diagnosing the state of tissue of an internal organ of an individual includes collecting a sample of an individual’s biological fluid, contacting the biological fluid with the IAS according to claim 1 (see the claims) or a bioprobe according to claim 11 in a series of dilutions of a sample of the studied fluid within the titer from 1 : 4 to 1: 2048, determination in the credits of the interactions that took place between antibodies and / or autoantibodies located in a diluted sample of an individual’s biological fluid and an immunologically active substance according to claim 1, while the conclusion about the state of the tissue of an internal organ of an individual is made by the marginal positive result of interaction in a series of dilutions of a sample of the studied fluid, if interaction is detected within the dilution of the test sample within the values of [1: 4 -1: 8] - make a conclusion about the healthy state of the tissue; within the values of [1: 16-1: 32] - conclude that there are minor damage to the tissue, within the values of [1: 64 - 1: 128] - conclude that there is tissue damage typical of chronic inflammation within the [ 1: 256 - 1: 512] - conclude that there is tissue damage typical of acute inflammation, within the values of [1: 1024-1: 2048] - conclude that tissue damage typical of lysis and / or tissue rejection is present.
Фармацевтическая композиция представляет собой раствор, включающий иммунологически активное вещество по п.1 и приемлемый растворитель, при этом для парентерального введения 1 мл раствора содержит 100 мкг вещества.  The pharmaceutical composition is a solution comprising the immunologically active substance according to claim 1 and an acceptable solvent, while for parenteral administration, 1 ml of the solution contains 100 μg of substance.
Способ лечения заболеваний тканей органов индивида, вызванных неконтролируемым ростом клеток ткани злокачественной или доброкачественной природы, включает введение индивиду парентерально по Безредке фармакологической композиции по п.15, содержащей вещество по п. 1, начиная с дозы 50 мкг вещества с последующим увеличением до количества, обеспечивающего сенсибилизацию организма и получение ответной реакции иммунной системы организма индивида, о которой судят по образованию противотканевых антител - аутоантител к вводимому веществу по п.1, при этом введение фармакологической композиции осуществляют при мониторинге уровня образования антител - аутоантител в биологических жидкостях пациента, забор которых осуществляют после каждого введения композиции, количество введений ограничивают при достижении уровня титров антител - аутоантител, лежащего в интервале значений от 1 :256 до 1 :512.  A method for the treatment of tissue diseases of an individual’s organs caused by uncontrolled growth of tissue cells of a malignant or benign nature, includes administering to the individual a Parents randomly pharmacological composition according to claim 15, containing the substance according to claim 1, starting with a dose of 50 μg of the substance, followed by an increase to an amount that provides sensitization of the body and obtaining a response of the immune system of the body of the individual, which is judged by the formation of anti-tissue antibodies - autoantibodies to the administered substance according to p. 1, the introduction of the pharmacological composition is carried out while monitoring the level of formation of antibodies - autoantibodies in the biological fluids of the patient, the sampling of which is carried out after each injection of the composition, the number of introductions is limited when the level of antibody titers - autoantibodies, lying in the range from 1: 256 to 1: 512.
Краткое описание чертежей  Brief Description of the Drawings
Группа изобретений поясняется чертежами, на которых представлены электроннограммы ультраструктуры ткани печени животных в контрольном образце и в экспериментальной группе, а именно: на фиг. 1 представлена электроннограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки в контрольном образце с увеличением x8000, на фиг.2 - электроннограмма участка локального повреждения печени морской свинки (результат произошедшего воздействия веществом на локальный участок ткани печени морской свинки), возникшего после прекращения действия заявляемого вещества, увеличение х7500, на фиг.З - 6 - электроннограммы ультраструктуры тканей печени морских свинок, подвергшихся воздействию исследуемым веществом, одна из которых пала через 100 часов эксперимента, увеличение х8000 (фиг.З), другая - через 72 часа после начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества, увеличение х5600 (фиг.4), третья - через 72 часа после начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества, увеличение х8200 (фиг.5), четвертая - через 132 часа после начала эксперимента, и получившая двукратное введение исследуемого вещества, увеличение х8000 (фиг.6), на фиг. 7 представлены результаты ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) вещества, полученного по способу п.1 из печени человека, на фиг.8. - результаты ВЭЖХ вещества, полученного по способу п.1 из почек человека, на фиг.9 - представлены результаты электрофореза образцов заявляемых веществ по п.1, полученные способом по п. 6, на фиг.10 - результаты иммуннодот-анализа, на фиг.11 - результаты ИФА (иммуноферментный анализ), демонстрирующие зависимость значений оптической плотности от разведения антигена (вещества - печени), при длине волны 490 нм, на фиг. 12 - результат реакции РНГА, демонстрирующий возможность выявления противотканевьгх аутоантител рядом веществ, полученных из тканей разных органов, в разведениях сыворотки крови человека. The group of inventions is illustrated by drawings, in which electron diffraction patterns of an animal liver tissue ultrastructure are presented in a control sample and in an experimental group, namely: in FIG. 1 shows an electron diffraction pattern of guinea pig liver tissue ultrastructure in a control sample with an increase of x8000, in Fig. 2 is an electron diffraction pattern of a local lesion of a guinea pig liver (the result of the exposure of a substance to a local portion of liver tissue of a guinea pig) that arose after the cessation of the claimed substance, an increase of x7500, in Fig. 3 - 6 are electron diffraction patterns of a liver tissue ultrastructure guinea pigs exposed to the test substance, one of which fell after 100 hours of the experiment, an increase of x8000 (Fig. 3), the other 72 hours after the start of the experiment after repeated administration the analyte, an increase of x5600 (Fig. 4), the third - 72 hours after the start of the experiment after repeated administration of the analyte, an increase of x8200 (Fig. 5), the fourth - 132 hours after the start of the experiment, and received a double administration of the analyte, an increase x8000 (FIG. 6), in FIG. 7 presents the results of HPLC (high performance liquid chromatography) of a substance obtained by the method of claim 1 from a human liver, in FIG. - the results of HPLC of the substance obtained by the method of claim 1 from human kidneys, figure 9 - presents the results of electrophoresis of samples of the claimed substances according to claim 1, obtained by the method of claim 6, figure 10 - the results of immunodot analysis, .11 - ELISA results (enzyme-linked immunosorbent assay), showing the dependence of optical density on dilution of antigen (substance - liver), at a wavelength of 490 nm, in FIG. 12 is the result of the RNGA reaction, demonstrating the possibility of detecting anti-tissue autoantibodies by a number of substances obtained from tissues of different organs in dilutions of human blood serum.
Причинно-следственная связь признаков формулы с достигаемым результатом.  The causal relationship of the features of the formula with the achieved result.
Для раскрытия механизма влияния новых признаков, выявленных у веществ, получаемых по данной заявке, позволяющих использовать их согласно заявляемой формуле, подтвержденных ходом дальнейших исследований и экспериментов. Ниже представлен ход системного анализа с формально-логическими выкладками, позволяющими реализовать их практически и перенести полученные результаты на заявляемый объект. Приведены также теоретические предпосылки и системный анализ антигенных участков тканевых белков, имеющих возможность проявлять парциальную сингенность.  To reveal the mechanism of influence of new signs identified in substances obtained by this application, allowing them to be used according to the claimed formula, confirmed by further research and experiments. Below is the progress of a system analysis with formal logical calculations that allow them to be implemented in practice and to transfer the results to the claimed object. Theoretical prerequisites and system analysis of antigenic sites of tissue proteins that have the ability to exhibit partial syngenesis are also given.
Антигены, свойственные только данному организму, называют аллоантигенами (греч. аллос - другой). К ним относятся антигены тканевой совместимости - продукты генов главного комплекса тканевой совместимости МНС (Major Histocompatibiliti Complex), свойственные каждому индивидууму. Антигены разных лиц, не имеющие отличий, называют сингенными. Органы и ткани помимо других антигенов обладают специфичными для них органными и тканевыми антигенами. Антигенным сходством обладают одноименные ткани биологических видов, например, человека и животных. Существуют стадиоспецифические антигены, появляющиеся и исчезающие на отдельных стадиях развития тканей или клеток. Каждая клетка содержит антигены, характерные для наружной мембраны, цитоплазмы, ядра и других компонентов. Неполные антигены встречаются в природе довольно часто. Неполные антитела обнаружены против эшерихий, бруцелл, сальмонелл и других микроорганизмов; против эритроцитов и иных клеток. Согласно классификации антигенов различают экзогенные (поступающие извне организма) и эндогенные (образующиеся внутри организма) антигены. Для рассматриваемого случая выбраны эндогенные антигены. Antigens characteristic only of this organism are called alloantigens (Greek allos - another). These include tissue antigens compatibility - the products of the genes of the main tissue compatibility complex of the MHC (Major Histocompatibiliti Complex), characteristic of each individual. Antigens of different individuals that do not have differences are called syngenic. Organs and tissues, in addition to other antigens, possess organ and tissue antigens specific to them. Antigenic similarities are possessed by the tissues of the same name of biological species, for example, humans and animals. There are stage-specific antigens that appear and disappear at the individual stages of tissue or cell development. Each cell contains antigens characteristic of the outer membrane, cytoplasm, nucleus, and other components. Incomplete antigens are found in nature quite often. Incomplete antibodies are found against Escherichia, Brucella, Salmonella and other microorganisms; against red blood cells and other cells. According to the classification of antigens, exogenous (coming from the outside of the body) and endogenous (forming inside the body) antigens are distinguished. For the case under consideration, endogenous antigens were selected.
Антигены подразделяются на полные и неполные (гаптены). Полный антиген включает в себя белок-носитель и детерминантную группу, они могут индуцировать образование антител и лоббировать с ними. Известно свойство неполного антигена, лишенного белка-носителя, реагировать с антителами, но эти вещества не могут стимулировать их образование внутри организма. Неполные антигены (в т.ч. гаптены), попадая в организм, могут соединяться с белком организма и становиться полными антигенами.  Antigens are divided into full and incomplete (haptens). The complete antigen includes a carrier protein and a determinant group, they can induce the formation of antibodies and lobby with them. The property of an incomplete antigen devoid of a carrier protein is known to react with antibodies, but these substances cannot stimulate their formation inside the body. Incomplete antigens (including haptens), entering the body, can combine with the protein of the body and become full antigens.
Антигены каждого организма в норме не вызывают в нем иммунологических реакций, поскольку организм к ним толерантен. Однако при определенных условиях они приобретают признаки чужеродности и становятся аутоантигенами, а возникшую против них реакцию называют аутоиммунной.  The antigens of each organism normally do not cause immunological reactions in it, since the organism is tolerant to them. However, under certain conditions, they acquire signs of foreignness and become autoantigens, and the reaction that arose against them is called autoimmune.
Клетки злокачественных опухолей представляют собой варианты нормальных клеток организма с антигенной стуктурой, фактически не отличающейся от антигенной структуры организма. Им свойственны антигены тех тканей, из которых они произошли, а также антигены, специфичные для опухоли и составляющие малую долю всех антигенов клетки. В ходе канцерогенеза происходит дедифференцировка клеток, поэтому может происходить утрата некоторых антигенов, появление антигенов, свойственных незрелым клеткам, вплоть до эмбриональных (фетопротеины). Антигены, свойственные только опухоли, специфичны только для данного вида опухоли, а нередко для опухоли у данного лица. Опухоли, индуцированные вирусами, могут иметь вирусные антигены, одинаковые у всех опухолей, индуцированных данным вирусом. Под влиянием антител у растущей опухоли может меняться ее антигенный состав. The cells of malignant tumors are variants of normal body cells with antigenic structure, which is practically no different from the antigenic structure of the body. They are characterized by antigens of the tissues from which they originated, as well as antigens that are specific for the tumor and make up a small fraction of all cell antigens. In the course of carcinogenesis, dedifferentiation of cells occurs; therefore, some antigens may be lost, antigens characteristic of immature cells may appear, even embryonic (fetoproteins). Antigens that are characteristic only of a tumor are specific only for a given type of tumor, and often for a tumor in a given tumor. faces. Tumors induced by viruses can have viral antigens that are the same for all tumors induced by this virus. Under the influence of antibodies in a growing tumor, its antigenic composition may change.
Белковая структура особи содержит как минимум три, относительно устойчивых и информационно значимых антигенных участков, которые кодируют видовую, индивидуальную и органную специфичность. Распознавание белковой чужеродности внутри организма происходит путем оценки участков белковых структур, несущих информацию об органной, видовой и индивидуальной совместимости ткани.  The protein structure of an individual contains at least three, relatively stable and informationally significant antigenic sites that encode species, individual and organ specificity. Recognition of protein foreignness within the body occurs by evaluating sites of protein structures that carry information about the organ, species and individual compatibility of the tissue.
Проведенный анализ полученных данных, согласно заявляемому изобретению, и анализ реакций организма подтвердили наличие как минимум трех участков, кодирующих видовую, органную и индивидуальную особенность в структуре белка. Автором доказано, что изменения этих участков позволяют получить новые вещества, которые способны выявлять органо и видоспецифичные участки белковых структур в биологических жидкостях индивидуумов, вступая с ними в иммунные реакции, а внутреннему звену иммунитета выявлять - «видеть», маркировать идентичную ткань, приводя к ее лизису, в случае поступления этого вещества в организм. Результат проведенных исследований доказывает, что сложная структура белкового субстрата несет информацию о том, кому принадлежит этот белковый объект (человеку, животному или относится к миру простейших организмов). Помимо этого белок имеет сведения о том, какой ткани он принадлежал, т.к. в нем содержатся сведения его органной принадлежности. Также белок несет уникальный код индивидуума, позволяющий точно распознать, какому именно индивидууму он принадлежит.  The analysis of the data obtained, according to the claimed invention, and the analysis of the body's reactions confirmed the presence of at least three sections encoding a species, organ and individual feature in the protein structure. The author has proved that changes in these areas allow one to obtain new substances that are capable of detecting organically and species-specific sections of protein structures in biological fluids of individuals, entering into immune reactions with them, and identifying “seeing” to the internal link of immunity, marking identical tissue, leading to its lysis, if this substance enters the body. The result of the studies proves that the complex structure of the protein substrate carries information about who the protein object belongs to (human, animal, or belongs to the world of simple organisms). In addition, the protein has information about which tissue it belonged to, because it contains information about its organ affiliation. Also, the protein carries a unique code of the individual, allowing you to accurately recognize which particular individual it belongs to.
Теоретические основы и ход анализа сопровождался введением следующих системных утверждений, дающих основания для его проведения:  The theoretical foundations and the course of the analysis were accompanied by the introduction of the following systemic statements that give reason for its implementation:
Органная совокупность схожести (Σνί) - схожесть функционально идентичных тканей органов, где (vt) - признаки органных схожестей этих тканей. Например, ткань печени функционально схожа у животных и человека, т.к. выполняет схожие функции. Ткань печени, морфологически схожа, т.к. может быть схоже структурно разделена на - гепатоциты 60-70%, желчевыводящие протоки и пути 12-18%, сосуды - 20-25%, строма 2-3% и у человека и у животного, причем проценты структуры будут варьировать с незначительными погрешностями от основного представительства структуры входящих в ткань органа клеток. Все ткани однотипных органов у разных видов объединены единой анатомо-морфологической структурой, физиологическим и функциональным предназначением. Такие же рассуждения будут справедливы для тканей других органов: желудка, кишечника, головного мозга, сердца, желез и т.д. Organ assembly of similarity (Σ νί ) is the similarity of functionally identical organ tissues, where (vt) are the signs of organ similarity of these tissues. For example, liver tissue is functionally similar in animals and humans, because performs similar functions. Liver tissue is morphologically similar, as can be similarly structurally divided into - hepatocytes 60-70%, bile ducts and pathways 12-18%, blood vessels - 20-25%, stroma 2-3% in humans and animals, and the percent structure will vary with slight errors from the main representation of the structure of cells entering the tissue of an organ. All fabrics organs of the same type in different species are united by a single anatomical and morphological structure, physiological and functional purpose. The same reasoning will be true for tissues of other organs: stomach, intestines, brain, heart, glands, etc.
Видовая совокупность схожести (Σνν) - схожесть строения клеток, тканей и органов у особей одного вида, a (νν) - признаки видовой схожести этих тканей. Межвидовая схожесть строения и функций печени, сердца, легких, желез и т.д. между людьми, между собаками, между лошадьми и т.д. The species totality of similarity (Σ νν ) is the similarity of the structure of cells, tissues and organs in individuals of one species, and (νν) are the signs of the species similarity of these tissues. Interspecific similarity of the structure and functions of the liver, heart, lungs, glands, etc. between people, between dogs, between horses, etc.
Индивидуально-типологическая совокупность схожести клеток внутри одного организма (Σν - схожесть белковых структур различных органов внутри одного единого живого организма, где (vi) - признаки индивидуальности тканей в одном организме. An individually-typological set of similarity of cells within one organism (Σ ν is the similarity of protein structures of various organs within one single living organism, where (vi) are signs of tissue identity in one organism.
Исходя из введенных совокупностей схожести, информационный образ ткани, будет представлять слагаемое введенных совокупностей, и его можно представить формулой в виде:  Based on the introduced sets of similarities, the information image of the fabric will represent the term of the introduced sets, and it can be represented by the formula in the form:
С = Lvt+ Σνν+ Σνι , где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их схожести. C = L vt + Σ νν + Σ ν ι, where C is the information image of the fabric, based on the totality of their similarity.
Совокупности разности (различия, отличия):  Difference sets (differences, differences):
Видовая совокупность различий (Σ8νν) - различия в строении ткани у особей различных видов, при (avv) - признаках видовых различий сравниваемых тканей, например, отличия в строении человека и лошади. Species totality of differences (Σ 8νν ) - differences in the structure of the tissue in individuals of various species, with (avv) - signs of species differences in the compared tissues, for example, differences in the structure of man and horse.
Органная совокупность различий (ΣΗν - различия в морфологическом, структурно клеточном, тканевом и функциональном строении разных органов, а (avt) - признаки определяющие органные различия, например, ткань печени имеет отличии от ткани желудка, сердца и т.д. Organ set of differences (Σ Ην - differences in the morphological, structurally cellular, tissue and functional structures of different organs, and (avt) - signs that determine organ differences, for example, liver tissue has differences from tissue of the stomach, heart, etc.
Индивидуальная совокупность различий (Σ„νϊ) - различия в индивидуальных особенностях организмов особей одного вида, где (avi) - признаки индивидуальных различий между идентичньми тканями у индивидов одного вида, например, отличия особей по группам крови, количеству пигмента и т.д. Individual set of differences (Σ „ ν ϊ) - differences in the individual characteristics of the organisms of individuals of one species, where (avi) - signs of individual differences between identical tissues in individuals of the same species, for example, differences in individuals by blood groups, amount of pigment, etc.
Исходя из введенных совокупностей различий, информационный образ ткани, будет представлять слагаемое введенных совокупностей, и его можно представить формулой в виде:  Based on the introduced sets of differences, the information image of the fabric will represent the term of the introduced sets, and it can be represented by the formula in the form:
С = Σ„νΐ+ ΣΗνν+ 3νί, где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их различий. Безусловно, можно ввести еще ряд совокупностей схожести и различий между анализируемыми объектами по другим признакам (видовым, половым, возрастным и т.д.). Однако, эти совокупности не несут значимого влияния на предмет анализа, не могут существенно повлиять на общий ход рассуждений, и, поэтому, их значения были исключены из анализа. С = Σ „ νΐ + Σ Ην ν + 3νί , where С is the information image of the tissue, based on the totality of their differences. Of course, one can introduce a number of sets of similarities and differences between the analyzed objects according to other characteristics (species, sex, age, etc.). However, these aggregates do not have a significant impact on the subject of analysis, cannot significantly affect the general course of reasoning, and, therefore, their values were excluded from the analysis.
Далее представлен системный анализ информационных образов и типирование произвольно выбранных тканей трех объектов: (первый объект - морская свинка (печень), второй объект - человек И. (печень), третий объект - человек П. (печень)). Нивелируя в анализе значимые различия характеристик этих тканей (структурных, морфологических, функциональных и т.д.), выбраны и объединены интересующие видовые и индивидуальные совокупности по признакам схожести и различий. В ходе математического моделирования информационного образа тканей объектов, при проведении анализа, применены сравнения схожести и различий объектов, которые описаны представленной выше формулой. Ниже приведены результирующие выводы и следующие из них постулаты (без промежуточных рассуждений).  The following is a systematic analysis of information images and typing of arbitrarily selected tissues of three objects: (the first object is guinea pig (liver), the second object is man I. (liver), the third object is man P. (liver)). Leveling the analysis of significant differences in the characteristics of these tissues (structural, morphological, functional, etc.), the species and individual collections of interest were selected and combined according to the signs of similarity and differences. In the course of mathematical modeling of the information image of the tissue of objects, during the analysis, comparisons of similarities and differences of objects are used, which are described by the above formula. Below are the resulting conclusions and the following postulates (without intermediate reasoning).
Первый постулат. Ткань печени животного (морской свинки) схожа с тканью печени человека (первый объект схож со вторым и третьим объектами), так как печень всех исследуемых объектов несет схожие функции и имеет принципиально схожее строение у всех млекопитающих. Общей закономерностью является схожесть строения белковых структур тканей схожих органов у разных видов и внутри каждого вида - схожесть органов по совокупности признаков, функциональной нагрузки и строению у особей между и внутри видов.  The first postulate. The tissue of the animal’s liver (guinea pig) is similar to that of the human liver (the first object is similar to the second and third objects), since the liver of all the studied objects has similar functions and has a fundamentally similar structure in all mammals. A general pattern is the similarity in the structure of protein structures of tissues of similar organs in different species and within each species - the similarity of organs in terms of the set of characteristics, functional load, and structure in individuals between and within species.
Таким образом, три анализируемых объекта ткани имеют общую схожую совокупность, схожи по совокупности признаков, отражающих их функциональное предназначение и строение органов. Ткани имеют некий общий признак - общий информационный код, отраженный в белковом строении, и характеризующий его сущность - «печень».  Thus, the three analyzed tissue objects have a common similar set, similar in the set of signs that reflect their functional purpose and structure of organs. Tissues have a certain common feature - a common information code, reflected in the protein structure, and characterizing its essence - “liver”.
Второй постулат. Отличия тканей трех исследуемых объектов имеются по видовой принадлежности кода. Причем образцы ткани (печени) первого объекта отличаются от образцов и второго, и третьего объектов (различия в строении организмов морской свинки и человека, индивидуумов И. и П.). Анализируемые нами биообъекты (второй и третий) относятся к одному виду - человек, а первый объект относится к другому виду - животное. Общая закономерность - различия белковых структур тканей органов у разных видов. The second postulate. Differences in the tissues of the three studied objects are available by species affiliation code. Moreover, the tissue samples (liver) of the first object differ from the samples of the second and third objects (differences in the structure of the organisms of guinea pigs and humans, individuals I. and P.). The bioobjects we are analyzing (second and third) belong to the same species - man, and the first the object belongs to another species - the animal. The general pattern is the differences in the protein structures of organ tissues in different species.
Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность различий органов и тканей, видовые различия между объектами. Ткани объектов разделены видовым информационным кодом, присущим каждому виду живой фауны, в нашем примере человек и животное. Такими различиями наделены белковые структуры тканей внутри видов, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по видовой принадлежности ткани. Thus, the analyzed objects have a common set of differences between organs and tissues, species differences between objects. The tissues of the objects are separated by a specific information code inherent in each type of living fauna, in our example, man and animal. The protein structures of tissues within species are endowed with such differences; the separation carries informationally significant differences between the typed object and the species affiliation of the tissue.
Белковые структуры тканей одного биологического вида при попадании внутрь другого биологического вида будут идентифицированы и уничтожены аутоиммунной системой как чужеродные по видовому признаку. Protein structures of tissues of one biological species when ingested by another biological species will be identified and destroyed by the autoimmune system as foreign by species.
Третий постулат. При сравнении трех образцов анализируемых тканей печени, животного и людей, выявлено, что они отличаются от тканей других органов The third postulate. When comparing three samples of the analyzed tissues of the liver, animal and people, it was revealed that they differ from the tissues of other organs
(ткани желудка, сердца, легких, желез) по функциональному предназначению, строению и др. Это аксиома, не требующая доказательств, а значит, имеется совокупность различий белковых структур клеток органов и тканей внутри одного организма. (tissue of the stomach, heart, lungs, glands) for functional purpose, structure, etc. This is an axiom that does not require proof, which means that there is a totality of differences in the protein structures of cells of organs and tissues within one organism.
Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность различий органов и тканей, различия тканей между органами одного организма. Ткани органов разделены органным информационным кодом, присущим каждому органу и ткани внутри организма. Такими различиями наделены белковые структуры тканей и органов внутри каждого живого организма, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по тканевой и органной принадлежности. Белковые структуры тканей различных органов, вне своего клеточного пула могут распознаваться и уничтожаться системой аутоиммуннитета.  Thus, the analyzed objects have a common set of differences between organs and tissues, tissue differences between the organs of one organism. Organ tissues are separated by an organ information code inherent in every organ and tissue within the body. The protein structures of tissues and organs inside each living organism are endowed with such differences, the separation carries informationally significant differences between the typed object in terms of tissue and organ affiliation. Protein structures of tissues of various organs, outside their cell pool, can be recognized and destroyed by the autoimmunity system.
Четвертый постулат. Два образца - ткань печени И. и ткань печени П. имеют схожие видовые и органные характеристики, но имеют внутривидовые и органные отличия по индивидуально-типологическому признаку. Макрорганизмы и индивидуумы И. и П. различаются по совокупности и набору генетических и информационных признаков, присущих каждому из индивидуумов в отдельности. Имеется схожесть признаков видового и органного кодов образцов и совокупность различий между белковыми структурам органов по уникальным индивидуально- типологическим признакам, каждой особи в отдельности, внутри одного биологического вида или подвида. Таким образом, анализируемые объекты имеют общую совокупность схожести внутривидовой и органно-тканевой белковой структуры, но имеют различия тканей на уровне индивидуально-типологических отличий между организмами. Ткани органов разделены уникальным индивидуально- типологическим кодом, присущим каждому организму в отдельности. Такими различиями наделены все белковые структуры тканей и органов внутри каждого индивидуума, каждой особи внутри каждого биологического вида или подвида, независимо от его положения на биологической иерархической лестнице. Разделение несет информационно значимые различия белковых структур типируемых объектов по уникальному индивидуальному генетическому коду, позволяющему определять, своя или чужая белковая структура находится внутри организма. Организм идентифицирует такие отличия и может отторгать такие объекты, несмотря на схожесть видового и органного кодов белковых структур (реакции отторжения трансплантатов) . The fourth postulate. Two samples - liver tissue I. and P. liver tissue have similar species and organ characteristics, but have intraspecific and organ differences according to an individual typological characteristic. Macroorganisms and individuals I. and P. differ in the totality and set of genetic and informational characteristics inherent in each of the individuals individually. There is a similarity of the characteristics of the species and organ codes of the samples and the totality of differences between the protein structures of organs by unique individual typological characteristics, of each individual individually, within the same biological species or subspecies. Thus, the analyzed objects have a common set of similarities between the intraspecific and organ-tissue protein structures, but they have tissue differences at the level of individual typological differences between organisms. Organ tissues are separated by a unique individual typological code inherent in each organism individually. All protein structures of tissues and organs within each individual, each individual within each biological species or subspecies are endowed with such differences, regardless of their position on the biological hierarchical ladder. Separation carries informationally significant differences in the protein structures of typed objects by a unique individual genetic code that allows you to determine whether your own or another protein structure is inside the body. The body identifies such differences and can reject such objects, despite the similarity of the species and organ codes of protein structures (graft rejection reactions).
Пятый постулат. Если провести сравнение трех образцов анализируемых тканей (печени) с образцом ткани желудка, как было сделано в третьем постулате, забранного у одного из исследуемых организмов, то возможно выделить еще одну важную деталь. Опираясь на введенное нами дополнение-допущение, что образец ткани желудка мог принадлежать или принадлежит одному из анализируемых организмов, то, несмотря на разность в структурных отличиях и кодах белка, характеризующего ткань печени и ткань желудка, при органной или видовой разнице между образцами, одному из индивидуумов, тому, кому она принадлежала ранее и впоследствии была забрана для исследования, ткань не будет чужеродной. Она «своя» несмотря на разность органного белкового кода. Она «своя» по индивидуально-типологическому белковому коду и по коду вида, какому принадлежит этот организм. Это общность информационного индивидуально- типологического кода белковой структуры тканей различных органов внутри одного организма. Такие ткани, имея различный органный код, не дифференцируются системой аутоиммуннитета как «чужие», не уничтожаются и не утилизируются, несмотря на имеющуюся органную разность и непохожесть функционального предназначения исходного белкового субстрата.  The fifth postulate. If we compare three samples of analyzed tissues (liver) with a sample of stomach tissue, as was done in the third postulate taken from one of the studied organisms, it is possible to highlight another important detail. Based on the addition that we introduced, the assumption that a sample of stomach tissue could belong to or belong to one of the analyzed organisms, despite the difference in the structural differences and codes of the protein characterizing liver tissue and stomach tissue, with an organ or species difference between the samples, one of individuals, to whom it belonged earlier and was subsequently taken for research, the tissue will not be foreign. She is “her own” despite the difference in the organ protein code. It is “its own” according to the individual typological protein code and according to the species code to which this organism belongs. This is a community of informational individual typological code of the protein structure of tissues of various organs within one organism. Such tissues, having a different organ code, are not differentiated by the system of autoimmunity as “aliens”, they are not destroyed and not utilized, despite the existing organ difference and the dissimilarity of the functional purpose of the original protein substrate.
Таким образом, анализируемые объекты имеют совокупность различий органов и тканей, различия тканей органов внутри одного организма, во всех трех анализируемых случаях, но в одном случае ткани, имея различия по органному коду, имеют единый уникальный индивидуально-типологический код, присущий одному организму. Ткани органов разделены органным информационным кодом, присущим каждому органу и ткани, если они находятся внутри одного организма, то они имеют совпадающий уникальный индивидуально-типологический видовой код, принадлежащий этому организму. Такими сходствами наделены белковые структуры тканей и органов внутри одного живого организма, разделение несет информационно значимые различия типированного объекта по тканевой и органной принадлежности, но имеет полностью идентичный уникальный код организма - одного «хозяина» и не распознается системой аутоиммуннитета как «чужой», не влияет на их отторжение и не уничтожается. Thus, the analyzed objects have a set of differences in organs and tissues, differences in the tissues of organs within one organism, in all three cases analyzed, but in one case of tissue, having differences in the organ code, have a single unique individual typological code inherent in one organism. The tissues of the organs are separated by the organ informational code inherent in each organ and tissue, if they are inside one organism, then they have a matching unique individual typological species code belonging to this organism. The protein structures of tissues and organs inside one living organism are endowed with such similarities, the separation carries informationally significant differences between the typed object in terms of tissue and organ affiliation, but it has a completely identical unique body code - one “host” and is not recognized by the system of autoimmunity as “alien”, does not affect their rejection is not destroyed.
Таким образом, организм реагирует на внезапно «переродившуюся», мутировавшую под внешним воздействием белковую структуру, приводящую к образованию опухолевой раковой ткани. Она - эта ткань, «не чужая», она своя собственная, ее уникальный индивиудуально - типологический код, код хозяина- индивидуума сохранен и совпадает с ним. Изменения коснулись органного - структурного кода ткани, ткань стала «чужой органу», изменилось функциональное предназначение этой ткани, которое уже не позволяет клетке выполнять прежние функции, а лишенная функционального предназначения и нагрузок такая (не отторгнутая и не утилизированная) клетка начинает интенсивно поддерживаться и развиваться внутри этого организма. Начинается новый процесс, усиливается рост и развитие такой «своей» ткани, которая «не зная» границ тканевых и органных пулов, со временем захватывает весь организм хозяина, вызывая его неизбежную гибель.  Thus, the body reacts to a suddenly “degenerated” protein structure that mutates under external influence, leading to the formation of tumor cancerous tissue. She is this fabric, “not a stranger”, she is her own, her unique, individually-typological code, the code of the host-individual is saved and coincides with it. The changes affected the organ - structural code of the tissue, the tissue became a "foreign organ", the functional purpose of this tissue changed, which no longer allows the cell to perform its previous functions, and deprived of its functional purpose and loads, this (not torn away and not disposed of) cell begins to be intensively maintained and developed inside this organism. A new process begins, the growth and development of such “own” tissue is intensified, which “without knowing” the boundaries of tissue and organ pools, eventually captures the entire host organism, causing its inevitable death.
Проведенный нами анализ позволяет сделать следующие выводы: антигенный образ, определяющий информационную мозаику признаков ткани (С), можно представлять математическим выражением, используя анализ совокупностей состоящую признаков сходств и различий ткани.  Our analysis allows us to draw the following conclusions: the antigenic image that defines the informational mosaic of tissue attributes (C) can be represented by a mathematical expression, using the analysis of aggregates consisting of signs of similarities and differences in tissue.
Используя предлагаемую формулу можно описать ткань печени (t) конкретной (N) морской свинки (п). Если ткань принадлежит одному виду (п), одному типу (t) ткани и одному организму (N), то формула информационного образа ткани будет иметь следующий вид:  Using the proposed formula, we can describe the liver tissue (t) of a specific (N) guinea pig (n). If the tissue belongs to one species (n), one type (t) of tissue and one organism (N), then the formula for the information image of the tissue will have the following form:
С = 'Σνί+ ηΣνν+ ΝΣνϊ + ^avt+ "Σ3νν+ ΝΣ3νϊ > где С - информационный образ ткани, исходя из совокупностей их схожести и различий их признаков, присущих одному виду, одному типу ткани, находящейся в одном организме. Если мы имеем другую ткань с формулой, которую можем описать аналогичным образом, то формула информационного образа ткани будет иметь следующий вид: С = 'Σ νί + η Σνν + Ν Σ ν ϊ + ^ avt + "Σ 3 νν + Ν Σ 3ν ϊ > where С is the informational image of the fabric, based on the totality of their similarity and differences in their attributes inherent in one species, one type of fabric located in one organism. If we have another fabric with a formula that we can describe in a similar way, then the formula for the information image of the fabric will have the following form:
С = *Σνί+ ηΣνν+ ΝΣνί + ^avt+ ηΣ3νν+ Ν 3νί , где С - информационный образ другой ткани, исходя из совокупностей их схожести и различий их признаков, присущих одному виду, одному типу ткани, находящейся в организме конкретного индивида. С = * Σ νί + η Σ νν + Ν Σ ν ί + ^ avt + η Σ 3ν ν + Ν 3ν ί , where С is the information image of another tissue, based on the totality of their similarity and differences in their attributes inherent in one species, one type of tissue located in the body of a particular individual.
Таким образом, рассматриваемые математические выражения, характеризующие ткани, идентичны и полностью совпадают, следовательно, и информационные образы сравниваемых тканей, характеризуемые этими выражениями, идентичны, а значит совпадают и антигенные наборы признаков ткани - ткани сингенные.  Thus, the considered mathematical expressions characterizing the tissues are identical and completely identical, therefore, the informational images of the compared tissues characterized by these expressions are identical, which means that the antigenic sets of tissue signs — syngenous tissues — also coincide.
Если мы рассмотрим другую формулу информационного образа ткани, имеющую вид:  If we consider another formula for the information image of the tissue, which has the form:
С = αΣνί+ ηΣνν+ ΝΣνϊ + αΣ3νί+ η 8νν+ ^avi , где tl - ткань другого органа, то мы можем утверждать, используя схожую модель рассуждений, приведенную выше, что изменен признак совокупностей органных различий и сходств (vt, avt), а значит ткань аллогенна данному организму. С = α Σ νί + η Σνν + Ν Σ ν ϊ + α Σ 3 νί + η 8ν ν + ^ avi, where tl is the tissue of another organ, we can state, using the similar model of reasoning given above, that the attribute of organ differences and similarities (vt, avt), which means that tissue is allogeneic to a given organism.
Если рассматривать другую формулу информационного образа ткани, имеющую вид: С = ΗΣνι+ "Σνν+ ι1 8νι+ ηΣ3νν, где значения совокупностей ΝΣ8νί и ΝΣνΐ, изменены (нивелированы признаки индивидуальных сходств и различий) настолько, что значения в формуле могут быть приравнены к нулевому значению, то мы можем утверждать, что это информационный образ, характеризующий другую субстанцию и это математическое выражение относится к другому веществу, имеющему полные наборы совокупностей органных и видовых признаков сходств и различий ткани, но лишенному признаков индивидуальности конкретного организма. Можно утверждать, что вещества, определяющие антигенную характеристику такой субстанции, имеют полное совпадение совокупностей сходств и различий признаков органных и видовых характеристик первоначального вещества, полученного из ткани конкретного индивида, т.е. имеется частичная (парциальная) сингенность описываемых тканей по совокупности признаков органной и видовой схожести и различий. Вещество, имеющее такую исходную формулу, не идентично сравниваемому, это другое вещество. Таким образом, можно, опираясь на описания совокупностей сходств и различий тканей, привести заключения системного анализа к общей практике, и сделать вывод о том, что: If we consider another formula for the informational image of the fabric, which has the form: C = Η Σ ν ι ι + "Σ νν + ι1 8ν ι + η Σ 3νν , where the values of the sets Ν Σ 8ν ί and Ν Σ ν ΐ are changed (signs of individual similarities and differences) so much so that the values in the formula can be equated to a zero value, we can argue that this is an information image characterizing another substance and this mathematical expression refers to another substance that has complete sets of organ and species features of similarities and differences of tissue, but l It can be argued that the substances that determine the antigenic characteristic of such a substance have a complete coincidence of the totality of similarities and differences in the characteristics of the organ and species characteristics of the original substance obtained from the tissue of a particular individual, i.e. there is a partial (partial) syngenesis of the described tissues according to the totality of signs of organ and species similarity and differences. A substance having such an initial formula is not identical to the one being compared, it is another substance. Thus, it is possible, based on descriptions of sets of similarities and differences in tissues, to bring the conclusions of system analysis to general practice, and to conclude that:
1. Имеются антигенные отличия в строении белковых структур тканей особей различных видов.  1. There are antigenic differences in the structure of protein structures of tissues of individuals of various species.
2. Имеются антигенные отличия между белковыми структурами ткани органов внутри организма.  2. There are antigenic differences between the protein structures of the tissue of organs inside the body.
3. Имеются антигенные отличия в строении белковых структур тканей особей одного вида. Они могут полностью нивелировать «похожесть» строения белковой структуры этого вида в целом.  3. There are antigenic differences in the structure of protein structures of tissues of individuals of one species. They can completely neutralize the “similarity” of the structure of the protein structure of this species as a whole.
4. Уникальный индивидуально-типологический антигенный код организма, присутствующий в каждой белковой структуре ткани целостного организма, нивелирует разность структурных различий белка по органному признаку, делая похожей для системы аутоиммуннитета все коды белковых структур, не совпадающих по признаку единства и функционального предназначения ткани.  4. The unique individual typological antigenic code of an organism that is present in each protein structure of the tissue of the whole organism eliminates the difference in structural differences of a protein by its organ sign, making all codes of protein structures that do not coincide on the basis of unity and functional purpose of the tissue similar to the autoimmunity system.
Правильность проведенного системного анализа и приведенных логических постулатов подтверждена практически.  The correctness of the system analysis and logical postulates given is practically confirmed.
Заявляемый способ позволяет получать вещества, которые можно описывать формулой:  The inventive method allows to obtain substances that can be described by the formula:
С = 'ΣνΓ^ ηΣνν"'~ ΝΣνί + 'Savf-t- "Ziavv+ ΝΣ3νϊ , где C = 'ΣνΓ ^ η Σνν "' ~ Ν Σ ν ί + 'Savf-t-" Zi a vv + Ν Σ 3ν ϊ , where
С - антигенный набор признаков вещества, определяющий информационный образ ткани, исходя из совокупностей признаков схожести и различий;  C is an antigenic set of signs of a substance that determines the informational image of tissue, based on sets of signs of similarity and difference;
'Lvt- органная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по органным признакам (vt), где t - тип ткани;  'Lvt- organ set of similarity, set of substances that determine tissue similarity by organ characteristics (vt), where t is the type of tissue;
"Σνν- видовая совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих признаки схожести тканей внутри одного вида (νν), где п- вид индивида; "Σ νν - a species set of similarity, a set of substances that determine the signs of tissue similarity within a single species (νν), where n is the type of individual;
ΝΣγΐ- индивидуальная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих признаки схожести ткани по индивидуально-типологическим характеристикам (vi), где N - индивид; Ν Σγΐ is an individual totality of similarity, a set of substances that determine the signs of tissue similarity by individual typological characteristics (vi), where N is an individual;
'Σί,νΓ органная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих признаки отличия ткани по органной принадлежности (avt); 'Σ ί, νΓ organ plurality of differences, a plurality of substances that determine the signs of differences in organ accessories (avt) tissue;
"Σί,νν- видовая совокупность различий, совокупность различий веществ, определяющаяся признаками отличий ткани по видовой принадлежности (avv); Lav индивидуальная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих признаки отличия ткани по индивидуально-типологическим характеристикам (avi). "Σ ί, νν- plurality of species differences, a plurality of substances differences, detect signs of differences tissue specific accessory (avv); L av plurality of individual differences, a plurality of substances that determine signs of tissue differences for individual typological characteristics (avi).
Заявляемые вещества определяются антигенным набором признаков исходной ткани, но отвечают требованиям формулы:  The inventive substances are determined by the antigenic set of features of the source tissue, but meet the requirements of the formula:
С = ιΣ,^+ ηΣνν+ 'ΣανΓ1" ηΣ8νν , в которой значения индивидуальных совокупностей признаков схожести и различий исходной ткани Σ8νί и ΝΣνϊ модифицированы заявляемым способом, не проявляют своих свойств, и имеют значения равные нулю, при сохранении полных значений совокупностей признаков сходств и различий исходной ткани по органным и видовым характеристикам. В заявляемых веществах индивидуально-типологические свойства исходного вещества нивелированы (минимизированы) настолько, насколько свойства этих веществ могут определять признаки индивидуально-типологических сходств и различий этой ткани в живом организме, который способен их распознавать как «свои». C = ι Σ, ^ + η Σ ν ν + 'ΣανΓ 1 " η Σ 8ν ν, in which the values of individual sets of signs of similarity and differences of the original tissue Σ 8ν ί and Ν Σ ν ϊ are modified by the claimed method, do not show their properties, and have values equal to zero, while maintaining the full value of the totality of signs of similarities and differences in the source tissue according to organ and species characteristics. Ki individual-typological similarities and differences of this tissue in a living organism, which is able to recognize them as "their own."
Сущность группы изобретений заключается в получении новых иммунологически активных веществ (ИАВ), проявляющих новые свойства, которые можно описывать формулой: С = *Σνι+ ηΣνν+ ^avt + ηΣ8νν, и которые ложатся в основу диагностики состояния тканей и их лечения. Вся группа веществ, которые могут быть описаны по формуле совокупности сходства и различий, могут быть использованы для целей данного технического решения. The essence of the group of inventions is to obtain new immunologically active substances (IIA), exhibiting new properties that can be described by the formula: C = * Σ ν ι + η Σ νν + ^ avt + η Σ 8ν ν, and which form the basis for diagnosing the state of tissues and their treatment. The whole group of substances that can be described by the formula of the totality of similarities and differences, can be used for the purposes of this technical solution.
Все ИАВ, получаемые по заявляемой технологии, сохраняют совокупность признаков органной и видовой схожести и различий ткани (органную и видовую сингенность), той ткани, из которой они получаются, и могут проявлять одновременно свойства прямого антигена ткани или прямого аутоантигена к идентичной ткани в зависимости от способов его использования и применения. В лабораторных реакциях ИАВ проявляет свойства прямого аутоантигена идентичной ткани, маркером которой оно является, и способно выявлять уровень противотканевых аутоантител, в биологических жидкостях организма индивида. В организме того же вида, при парентеральном введении ИАВ проявляет свойство прямого антигена идентичной ткани, маркером которой оно является, приводящее к каскаду иммунных и аутоиммунных реакций, которые ведут к выработке в ответ на его введение в организм - антител, которые являются в то же время - аутоантителами к идентичной ткани, расположенной в живом организме индивида, приводящее к опосредованному повреждению и лизису этой ткани в живом организме индивида за счет воздействия на нее образовавшихся антител - аутоантител. All IAV obtained by the claimed technology retain a combination of signs of organ and species similarity and tissue differences (organ and species syngenesis), the tissue from which they are obtained, and can simultaneously exhibit the properties of direct tissue antigen or direct autoantigen to identical tissue depending on methods of its use and application. In laboratory reactions, IAS exhibits the properties of a direct autoantigen of the identical tissue of which it is a marker, and is able to detect the level of anti-tissue autoantibodies in the body’s biological fluids. In an organism of the same species, when administered parenterally, IAV exhibits the property of a direct antigen of identical tissue, the marker of which it is, leading to a cascade of immune and autoimmune reactions that lead to the production of antibodies that are at the same time in response to its introduction into the body - autoantibodies to the identical tissue located in the living organism of the individual, leading to indirect damage and lysis of this tissue in the living the body of the individual due to the effect of antibodies formed on it - autoantibodies.
Описываемое иммунологически активное вещество (ИАВ) обладает свойствами «неполного» антигена ткани индивида, из которого оно получено.  The described immunologically active substance (IIA) has the properties of an “incomplete” antigen of the tissue of the individual from which it is derived.
Заявляемые варианты вещества относятся к биотехнологически создаваемым веществам, они имеют белковую природу, способны индуцировать образование высокоспецифических противоорганных противотканевых антител (аутоантител) при парентеральном введении, не являясь полным антигеном исходной ткани, из которой оно получено. В его коде отсутствует участок, отвечающий за индивидуальную совместимость ткани. В то же время за счет сингенности органного и видового кода антител-аутоантител индивида- донора или индивида того же вида, вещества способны вступают с ним иммунные реакции в лабораторных условиях. Таким образом, вещество, имеет полный набор кодов отвечающих за органную и видовую принадлежность антигена (оно сингенно исходной ткани по набору органных и видовых признаков), но отлично от него тем, что в кодах вещества отсутствует набор признаков аллогении - индивидуальной гистосовместимости совместимости. Заявляемый способ получения ИАВ обеспечивает достижение перечисленных выше характеристик.  The claimed variants of the substance belong to biotechnologically created substances, they have a protein nature, are able to induce the formation of highly specific anti-body anti-tissue antibodies (autoantibodies) upon parenteral administration, not being the complete antigen of the original tissue from which it is obtained. In his code there is no site responsible for individual tissue compatibility. At the same time, due to the syngenicity of the organ and species code of the antibody-autoantibodies of an individual donor or an individual of the same species, substances are able to undergo immune reactions with him in the laboratory. Thus, the substance has a complete set of codes responsible for the organ and species affiliation of the antigen (it is syngenic to the original tissue according to the set of organ and species characteristics), but it differs from it in the fact that the codes of the substance do not have a set of signs of allogeny - individual histocompatibility of compatibility. The inventive method of obtaining IAV ensures the achievement of the above characteristics.
Полученные нами ИАВ проявляют свойства антигена, и аутоантигена в различных условиях их применения. ИАВ приобретают аллогенные свойства и идентифицируются иммунной системой индивида этого же вида, или иммунной системой организма донора ткани, как чужеродные и против них вырабатываются антитела-аутоантитела, которые способны разрушать идентичную ткань.  The IAVs obtained by us exhibit the properties of antigen and autoantigen under various conditions of their use. IAVs acquire allogeneic properties and are identified by the immune system of an individual of the same species, or by the immune system of the body of a tissue donor, as foreign, and autoantibodies are produced against them that can destroy identical tissue.
ИАВ в лабораторных реакциях, проявляют свойства аутоантигена, и способны выявлять уровень противотканевых аутоантител в биологических жидкостях организма индивида, и, они же, способны проявлять свойства прямого антигена ткани при парентеральном введении в организм того же вида, приводя реакцию организма к каскаду иммунных и аутоиммунных превращений, которые ведут к выработке в ответ на его введение в организм - антител, являющиеся в то же время - аутоантителами к идентичной ткани, имеющимися в живом организме индивида. Именно нарастающий уровень аутоантител индивида ведет к повреждению и лизису антигенноидентичной (органносингенной) ткани в живом организме индивида.  IAWs in laboratory reactions exhibit the properties of autoantigen, and are able to detect the level of anti-tissue autoantibodies in biological fluids of an individual’s body, and they are also able to exhibit the properties of direct tissue antigen upon parenteral administration of the same species into the body, leading to a cascade of immune and autoimmune transformations that lead to the development in response to its introduction into the body - antibodies, which are at the same time - autoantibodies to identical tissues that are present in the living organism of the individual. It is the increasing level of an individual’s autoantibodies that leads to damage and lysis of antigenically identical (organosyngenous) tissue in a living organism of an individual.
Осуществление изобретения Вещества по заявляемому способу могут быть получены из ткани любого органа (кроме крови) организма любого вида, из ткани транзиторного органа (плаценты), из видоизменной (опухолевой), но интактно развивающейся ткани у индивидуума (донора), и использованы в качестве диагностического вещества или в составе фармакологической композиции, у того же индивида или индивидов такого же биологического вида, для диагностики состояния здоровья ткани из которой оно получено, для лечения (путем лизиса) участка или всей ткани, находящейся в организме, для контроля за степенью лизиса ткани и оценки результатов лечения этим же веществом. The implementation of the invention The substances according to the claimed method can be obtained from tissue of any organ (except blood) of an organism of any kind, from tissue of a transient organ (placenta), from mutable (tumor), but intactly developing tissue in an individual (donor), and used as a diagnostic substance or as part of a pharmacological composition, of the same individual or individuals of the same biological species, for the diagnosis of the health status of the tissue from which it is obtained, for the treatment (by lysis) of a portion or all of the tissue in the body, for monitoring the degree of tissue lysis and evaluating the results of treatment with the same substance.
Более подробно этапы способа получения ИАВ раскрыты в нижеследующей таблице 1.  In more detail, the steps of the method of obtaining IAV are disclosed in the following table 1.
Таблица 1.  Table 1.
Figure imgf000029_0001
9 Фракционирование экстракта Центрифугирование 22300 q в течение 15 мин.
Figure imgf000029_0001
9 Fractionation of the extract Centrifugation of 22300 q for 15 min.
10 Удаление осадка Удаление образовавшейся влаги  10 Removing sludge Removing moisture
11 Выделение супернатанта Стандартизация по белку 22 мг/мл  11 Isolation of Supernatant Protein Standardization 22 mg / ml
12 Обработка супернатанта Лиофильное высушивание  12 Processing the supernatant Lyophilized drying
13 Получение целевого вещества Хранение  13 Obtaining the target substance Storage
Примеры получения веществ по п.1 формулы из тканей различных органов и видов приведены в Таблице 2. Examples of the preparation of substances according to claim 1 of the formula from tissues of various organs and species are shown in Table 2.
Таблица 2.  Table 2.
Figure imgf000030_0001
Гладком -28 °С , 2450 Удален -28 °С , 5,8 Введени Центрифу Разлив ышечна 54 часа МГц, ие 1,5 24 часа, грамма е 0,75 гировани в я ткань 800 мл. 2450 ткани + мл 0,5% е 15 маркир желудка Вт, 10 талой МГц, 10 р-ра минут, ованны трупа сек. жидкое 800 Вт, грамм формали отбор 9, 2 е кролика, ти 10 сек. песка + на в мл ампулы
Figure imgf000030_0001
Smooth -28 ° C, 2450 Removed -28 ° C, 5.8 Introduce Centrifu Spill muscle 54 hours MHz, 1.5 1.5 24 hours, gram 0.75 grams in 800 ml tissue. 2450 tissue + ml 0.5% e 15 markers of the stomach W, 10 thawed MHz, 10 r-ra minutes, ovanna corpse sec. liquid 800 W, gram formali selection 9, 2 e rabbit, ty 10 sec. sand + on in ml ampoules
10 после Двукрат 5 мл. гомоген надосадка по 3 мл, грамм. 30 мин. но, 0,9% ат на 4 лиофил оттаива удалено NaCl в часа определе ьное ния 2,3 мл. течени ние белка вакуум талой е 2 в ное жидкое часов жидкости высуши ти и вание, добавлен стериль ие 3 мл. ная10 after twice 5 ml. homogen supernatant of 3 ml, grams. 30 minutes. however, 0.9% at for 4 lyophilic ottaiva was removed with NaCl in an hour of determination of 2.3 ml. The flow of the protein is vacuum thawed e 2 into the liquid, liquid is dried, and sterilization is added 3 ml. naya
0,9% гермети0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С)22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С)
Гладком -24 °С , 2450 Удален -28 °С , 21 ,9 Введени Центрифу Разлив ышечна 96 МГц, ие 4,5 24 часа, грамм е 2,5 мл гировани в я ткань часов 900 мл. 2450 ткани + 0,5% р- е 15 маркир желудка Вт, 22 талой МГц, 50 ра минут, ованны трупа сек. жидкое 900 Вт, грамм формали отбор 18, е человек ти 22 сек. песка + на в 0 мл ампулы а, 35 после Двукрат 10 мл. гомоген надосадка по 3 мл, грамм. 30 мин. но, 0,9% ат на 4 лиофил оттаива удалено NaCl в часа определе ьное ния 6,7 мл. течени ние белка вакуум талой е З в ное жидкое часов жидкости высуши ти и вание добавлен стериль ие 6,4 мл. наяSmooth -24 ° C, 2450 Removed -28 ° C, 21, 9 Introduce Centrifu Spill muscle 96 MHz, 4.5 4.5 24 hours, gram 2.5 ml dipping into 900 ml watch tissue. 2450 tissues + 0.5% r-15 stomach markers W, 22 melt MHz, 50 minutes, ovann dead body sec. liquid 900 W, gram formali selection 18, e people ty 22 sec. sand + on in 0 ml ampoules a, 35 after two times 10 ml. homogen supernatant of 3 ml, grams. 30 minutes. however, 0.9% at for 4 lyophilic ottaiva was removed with NaCl at an hour of determination of 6.7 ml. The flow of the protein is vacuum melt into the liquid of the liquid, and the sterilization of 6.4 ml is added. naya
0,9% гермети0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С) Трупная -24 °С , 2500 Удален -24 °С , 39,9 Введени Центрифу Разлив ткань 38 МГц, ие 9,5 24 часа, грамм е 3,1 мл гировани в печени часов 700 мл. 2500 ткани + 0,5% р- е 15 маркир человек Вт, 30 сукрови МГц, 70 ра минут, ованны а, 62 сек. цы 700 Вт, грамм формали отбор 34, е грамма после 30 сек. песка + на в 0 мл ампулы 22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С) Cadaveric -24 ° C, 2500 Deleted -24 ° C, 39.9 Injection of Centrifu Spilling tissue 38 MHz, 9.5 24 hours, gram 3.1 ml of liver ligation for 700 hours. 2500 tissue + 0.5% r-15 markir man T, 30 sucrose MHz, 70 minutes, ovanny a, 62 sec. Tsy 700 W, grams of formal selection 34, e grams after 30 seconds. sand + on in 0 ml ampoules
30 мин. Двукрат 15 мл. гомоген надосадка по 3 мл, оттаива но, 0,9% ат на 4 лиофил ния удалено NaCl в часа определе ьное  30 minutes. Twice 15 ml. homogenous supernatant of 3 ml, thawed, 0.9% at 4 lyophilia removed NaCl per hour determined
18,7 мл. течени ние белка вакуум сукрови е З в ное цы часов жидкости высуши и вание добавлен стериль ие 9,7 мл. ная 18.7 ml. Protein flow Vacuum at 3 o'clock for hours of liquid to dry and sterilization was added 9.7 ml. naya
0,9% гермети0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С)22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С)
Трупная -24 °С , 2500 Удален -24 °С , 27,1 Введени Центрифу Разлив ткань 86 МГц, ие 6,5 24 часа, грамм е 2,0 мл гировани в почек часов 700 мл. 2500 ткани + 0,5% р- е 15 маркир человек Вт, 20 сукрови МГц, 20 ра минут, ованны а, 42 сек. цы 700 Вт, грамм формали отбор 23, е грамма после 20 сек. песка + на в 5 мл ампулы Cadaveric -24 ° C, 2500 Deleted -24 ° C, 27.1 Injection of Centrifu Spilling tissue 86 MHz, 6.5 6.5 hours, gram 2.0 ml of renal clocking 700 ml. 2500 tissues + 0.5% r-15 markir man T, 20 sucrose MHz, 20 minutes, ovannah a, 42 sec. Tsy 700 W, grams of formal selection 23, e grams after 20 seconds. sand + on in 5 ml ampoules
30 мин. Двукрат 10 мл. гомоген надосадка по 3 мл, оттаива но, 0,9% ат на 4 лиофил ния удалено NaCl в часа определе ьное  30 minutes. Twice 10 ml. homogenous supernatant of 3 ml, thawed, 0.9% at 4 lyophilia removed NaCl per hour determined
10,2 мл. течени ние белка вакуум сукрови е 2 в ное цы часов жидкости высуши и вание добавлен стериль ие 4,7 мл. ная 10.2 ml. the course of the protein vacuum is succeeded at 2 o'clock for hours of liquid drying and sterilization is added 4.7 ml. naya
0,9% гермети0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С) Трупная -24 °С , 2450 Удален -24 °С , 23,2 Введени Центрифу Разлив ткань 120 МГц, ие 4,5 24 часа, грамма е 2,15 гировани в белого часов 700 мл. 2450 ткани + мл 0,5% е 15 маркир веществ Вт, 10 талой МГц, 50 р-ра минут, ованны а сек. жидкое 700 Вт, грамм формали отбор 17, е головно ти 10 сек. песка + на в 0 мл ампулы го мозга после Двукрат 18 мл. гомоген надосадка по 3 мл, человек 30 мин. но, 0,9% ат на 4 лиофил а, 31 оттаива удалено NaCl в часа определе ьное грамм ния 7,7 мл. течени ние белка вакуум талой е З в ное жидкое часов жидкости высуши ти и вание добавлен стериль ие 11,1 ная мл. 0,9% гермети22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С) Cadaveric -24 ° C, 2450 Removed -24 ° C, 23.2 Injection of Centrifu Spill the tissue 120 MHz, 4.5 4.5 24 hours, gram 2.15 g. In white hours 700 ml. 2450 tissue + ml 0.5% e 15 markers of substances W, 10 thawed MHz, 50 minutes, ovanny sec. liquid 700 W, gram formali selection 17, head 10 sec. sand + on in 0 ml ampoules of the brain after Twice 18 ml. homogenous supernatant of 3 ml, person 30 min. however, 0.9% at 4 lyophil a, 31 thawed NaCl per hour determined gram of 7.7 ml was removed. The flow of the protein is vacuum thawed into the liquid of the liquid, and the sterilization of 11.1 ml is added. 0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С)22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С)
Операци -24 °С , 2450 Удален -24 °С , 3,2 Введени Центрифу Разлив онный 96 МГц, ие 1,2 24 часа, грамма е 0,3 мл гировани в материа часов 700 мл. 2450 ткани + 0,5% р- е 15 маркир л ткани Вт, 10 талой МГц, 10 ра минут, ованны паренхи сек. жидкое 700 Вт, грамм формали отбор 3,1 е мы ти 10 сек. песка + на в мл ампулы яичка после Двукрат 3 мл. гомоген надосадка по 3 мл, человек 30 мин. но, 0,9% ат на 4 лиофил а, 7 оттаива удалено NaCl в часа определе ьное грамм ния 1,7 мл. течени ние белка вакуум талой е 1 в ное жидкое часа жидкости высуши ти и вание добавлен стериль ие 1,2 ная мл. 0,9% герметиOperation -24 ° C, 2450 Deleted -24 ° C, 3.2 Administration of Centrifuge Draft 96 MHz, 1.2 to 24 hours, gram 0.3 grams of weighing in the material hours 700 ml. 2450 tissue + 0.5% p-e 15 markers of tissue W, 10 thawed MHz, 10 minutes, ovanny parenchy sec. liquid 700 W, gram formali selection 3.1 e we ty 10 sec. sand + on in ml of ampoule of a testicle after Twice 3 ml. homogenous supernatant of 3 ml, person 30 min. but, 0.9% at 4 lyophil a, 7 thawed NaCl per hour, a specific gram of 1.7 ml was removed. the flow of protein vacuum thawed e 1 into the liquid liquid hour of the drying liquid and sterilization of 1.2 ml. 0.9% seal
NaCl до зацияNaCl before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С) Ткань -28 °С , 2500 Удален -28 °С , 9,6 Введени Центрифу Разлив хориона 30 МГц, ие 8,2 24 часа, грамм е 2,1 мл гировани в плацент часов 900 мл. 2500 ткани + 0,5% р- е 15 маркир ы Вт, 25 сукрови МГц, 30 ра минут, ованны человек сек. цы 900 Вт, грамм формали отбор е а, 27 после 25 сек. песка + на в 16,5 мл ампулы грамм 30 мин. Двукрат 10 мл. гомоген надосадка по 3 мл, оттаива но, 0,9% ат на 4 лиофил ния удалено NaCI в часа определе ьное 22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С) Tissue -28 ° C, 2500 Deleted -28 ° C, 9.6 Dose Centrifu Chorionic spill 30 MHz, 8.2 8.2 hours, gram 2.1 ml dosing into the placenta of 900 ml hours. 2500 tissue + 0.5% r-15 markers W, 25 sucrose MHz, 30 minutes, ovanny person sec. Tsy 900 W, gram formali selection ea, 27 after 25 sec. sand + on in 16.5 ml ampoules gram 30 min. Twice 10 ml. homogenous supernatant of 3 ml, thawed, 0.9% at 4 lyophilia removed NaCI per hour determined
7,7 мл. течени ние белка вакуум сукрови е 1 в ное цы часа жидкости высуши и вание добавлен стериль ие 4,4 мл. ная 7.7 ml. The flow of the protein vacuum is at 1 o'clock for a new hour of liquid drying, and sterilization of 4.4 ml is added. naya
0,9% гермети0.9% seal
NaCI до зацияNaCI before
22 мг/мл веществ белка в а в суперната ампуле нте хранени е (2°С) 22 mg / ml protein substances in a in supernatant ampoule storage (2 ° С)
При введении в организм фармакологическая композиция на основе ИАВ вызывает каскад иммунологических ответов организма индивидуума, приводящий к контролируемому повреждению ткани и клеток этой же ткани внутри организма индивида, изолированному лизису клеток ткани, характеризующийся тем, что ИАВ, входящее в состав фармакологической композиции, способны вызывать цепь иммунологических ответных реакций со стороны иммунной системы организма, при котором образовываются антитела на введенную фармакологическую композицию, которые, являясь антителами против введенного антигена, являются одновременно и высокоспецифичными аутоантителами к той ткани, из которой получено ИАВ, или маркером которой является ИАВ, входящее в состав фармакологической композиции. Фармакологическая композиция, содержащая вещество по п. 1, проявляет свойства, которые приводят к последовательному и изолированному лизису ткани, под действием образующихся специфических антител - аутоантител, возникающих в организме в ответ на его введение. Данные свойства заявляемых веществ могут быть использованы для лечения в качестве противоопухолевого средства при онкологической патологии, когда требуется удаление из организма опухолевой ткани. Фармакологическая композиция, содержащая ИАВ, способна маркировать и повреждать ткань, которая до введения вещества, росла и развивалась без контроля со стороны иммунной системы этого организма, была интактна, т.е. не участвовала в иммунных реакциях, имела не контролируемый рост, не лизировалась, не отторгалась и не утилизировалась организмом самостоятельно, и не могла быть выявлена способами иммунного лабораторного контроля. Это же вещество, примененное для целей диагностики, способно выявлять такую ткань в организме (быть онкомаркером) и одновременно быть веществом, которое в лабораторных условиях способно оценивать степень повреждения этой же ткани, т.е. может быть использовано для целей контроля за уровнем литических процессов, происходящих в организме, позволяющих оценивать степень отторжения ткани. When introduced into the body, a pharmaceutical composition based on IAV causes a cascade of immunological responses of the individual’s organism, leading to controlled damage to tissue and cells of the same tissue within the individual’s body, isolated lysis of tissue cells, characterized in that IAV, which is part of the pharmacological composition, can cause a chain immunological responses from the body’s immune system, in which antibodies are formed on the introduced pharmacological composition, which, being antibodies against the introduced antigen are simultaneously highly specific autoantibodies to the tissue from which the IAV is obtained, or the marker of which is IAV, which is part of the pharmacological composition. The pharmacological composition containing the substance according to claim 1, exhibits properties that lead to sequential and isolated tissue lysis, under the action of specific antibodies formed - autoantibodies that occur in the body in response to its introduction. These properties of the claimed substances can be used for treatment as an antitumor agent in cancer pathology, when removal of tumor tissue from the body is required. The pharmacological composition containing IAV is capable of marking and damaging tissue that, prior to the introduction of the substance, grew and developed without control by the immune system of this organism, was intact, i.e. not participated in immune responses, had uncontrolled growth, was not lysed, was not rejected and was not disposed of by the body on its own, and could not be detected by immune laboratory control methods. The same substance, used for diagnostic purposes, is able to detect such tissue in the body (to be a tumor marker) and at the same time be a substance that in laboratory conditions can assess the degree of damage to the same tissue, i.e. can be used to control the level of lytic processes occurring in the body, allowing to assess the degree of tissue rejection.
Способ диагностики состояния здоровья ткани (тканей) внутреннего органа индивида основан на количественном определении аутоантител, вырабатываемых организмом к исследуемой ткани обследуемого органа или органов. Способ включает исследование пробы образца биологической жидкости индивида и определение количества образовавшихся в биологической жидкости после контакта с ИАВ антител (аутоантител) к исследуемой ткани внутреннего органа (тканям внутренних органов) (противотканевых антител (аутоантител)) по величине произошедших взаимодействий между аутоантителами, находящимися в образце биологической жидкости индивида и ИАВ, являющимся маркером ткани. Состояние здоровья ткани (тканей) внутренних органов определяют путем сравнения цифровых значений (уровней), выявленных в образце противотканевых антител (аутоантител), с предложенной шкалой уровня здоровья или повреждения ткани.  A method for diagnosing a state of health of a tissue (tissues) of an internal organ of an individual is based on a quantitative determination of autoantibodies produced by an organism to an investigated tissue of an examined organ or organs. The method includes examining a sample of an individual’s biological fluid sample and determining the amount of antibodies (autoantibodies) formed in the biological fluid after contact with the IAS of the examined internal organ tissue (internal organs tissues) (anti-tissue antibodies (autoantibodies)) by the magnitude of the interactions between the autoantibodies present in the sample the biological fluid of the individual and IAV, which is a marker of tissue. The health status of the tissue (tissues) of the internal organs is determined by comparing the digital values (levels) found in the sample of anti-tissue antibodies (autoantibodies) with the proposed scale of the level of health or tissue damage.
Для целей диагностики могут использоваться и качественная и количественная реакции. Причем когда выполняется количественная реакция (иммуноферментная), то выявляется максимально возможное число произошедших взаимодействий антиген-антитело, аутоантиген (аутоантитело) в контролируемой лабораторной реакции, до полного извлечения антител (аутоантител) из образца биологической жидкости и определяется абсолютный уровень антител - аутоантител в образце.  For diagnostic purposes, both qualitative and quantitative reactions can be used. Moreover, when a quantitative reaction (enzyme-linked immunosorbent reaction) is performed, the maximum possible number of antigen-antibody, autoantigen (autoantibody) interactions that occur in a controlled laboratory reaction is detected until antibodies (autoantibodies) are completely removed from the biological fluid sample and the absolute level of antibodies - autoantibodies in the sample is determined.
Когда проводится качественная иммунная реакция, то регистрируется минимальное (хотя бы одно) взаимодействие антиген-антитело (аутоантиген - аутоантитело) в максимальном разведении (титре) образца биологической пробы (в жидких средах например РНГА) или реакция на твердом носителе, когда произошедшее взаимодействие антиген-антитело (аутоантиген -аутоантитело) может быть обнаружено на твердом носителе, например, по изменению цвета, свидетельствующей о произошедшей реакции. When a high-quality immune reaction is carried out, the minimum (at least one) antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) interaction is recorded in the maximum dilution (titer) of the biological sample (in liquid media such as RNGA) or the reaction on a solid carrier when the antigen-interaction occurs antibody (autoantigen-autoantibody) may be detected on a solid support, for example, by a color change indicating a reaction has occurred.
Качественная реакция на наличие (отсутствие) выявляемых антител (аутоантител) учитывается следующим образом: если в исходном образце или в полученном разведении (титре) образца происходит хотя бы одно взаимодействие антиген-антитело, которое может быть зарегистрировано в ходе лабораторного исследования, то считается, что образец имеет данные антитела (аутоантитела) и реакция позитивна. В случае, когда в полученном разведении (титре) образца не происходит хотя бы одного взаимодействия антиген-антитело, которое не регистрируется в ходе лабораторного исследования, то считается, что образец не имеет данные антитела (аутоантитела) и реакция негативна.  A qualitative reaction to the presence (absence) of detectable antibodies (autoantibodies) is taken into account as follows: if at least one antigen-antibody interaction occurs in the original sample or in the obtained dilution (titer) of the sample, which can be detected during laboratory testing, then it is considered that the sample has these antibodies (autoantibodies) and the reaction is positive. In the case when at least one antigen-antibody interaction does not occur in the laboratory study in the obtained dilution (titer) of the sample, it is considered that the sample does not have these antibodies (autoantibodies) and the reaction is negative.
Количественная реакция на наличие (отсутствие) уровня выявляемых антител (аутоантител) осуществляется в реакциях, при которых выявляется общее количество (уровень) антител - аутоантител, может быть оценен и учтен в абсолютных значениях, и непосредственно в исходном образце биологической жидкости без разведения, в физических величинах (мкг/мл, мкг/л т.д.).  A quantitative reaction to the presence (absence) of the level of detectable antibodies (autoantibodies) is carried out in reactions in which the total number (level) of antibodies - autoantibodies is detected, can be estimated and taken into account in absolute values, and directly in the original sample of biological fluid without dilution, in physical values (μg / ml, μg / L etc.).
Качественная реакция может быть также оценена количественно. Тогда должна учитываться последняя позитивная качественная реакция антиген-антитело (аутоантиген-аутоантитело), произошедшая в максимальном разведении исходного образца.  A qualitative response can also be quantified. Then the last positive qualitative antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) reaction that occurred in the maximum dilution of the original sample should be taken into account.
В случаях, когда работа производится с разведениями (титрами) исходного образца, производится учет конечной позитивной качественной реакции, произошедшей в максимальном разведении (титре) исходного образца. Тогда позитивная реакция, произошедшая в этом разведении (титре) должна быть отнесена к тому множеству шкалы, в котором выявлена (произошла) эта реакция. Шкала приведена ниже в таблице 2.  In cases when work is done with dilutions (titers) of the initial sample, the final positive qualitative reaction that occurs at the maximum dilution (titer) of the original sample is taken into account. Then the positive reaction that occurred in this dilution (titer) should be attributed to that set of scales in which this reaction is revealed (occurred). The scale is shown in table 2 below.
Совпадение полученных показателей в реакции образца с одним из значений множеств шкалы считается совпадением с этим множеством, а количество выявленных аутоантител, соответствующих уровню выявленного множества (Пример N°l, приведен ниже). Полученный титр определяет количественное содержание (уровень) антител - аутоантител в разведенном образце и может свидетельствовать об исходном уровне выявляемых антител-аутоантител в неразведенном образце. После получения результата и его сравнения со шкалой уровней здоровья ткани дается заключение об исходном состоянии здоровья и степени повреждения ткани. The coincidence of the obtained indicators in the reaction of the sample with one of the values of the sets of the scale is considered a coincidence with this set, and the number of detected autoantibodies corresponding to the level of the identified set (Example N ° l, below). The obtained titer determines the quantitative content (level) of antibodies - autoantibodies in a diluted sample and may indicate the initial level of detected antibodies-autoantibodies in an undiluted sample. After receiving the result and comparing it with the scale tissue health levels, an opinion is given on the initial state of health and the degree of tissue damage.
Шкала уровней здоровья ткани - шкала, имеющая цифровое ранжирование (градацию уровней разведения (титров)) от нулевого значения (образец не разведен) до максимального уровня разведения (максимально до 1 :2048), образец разведен в 2048 раз, и имеет единицы измерения, соответствующие и кратные степени разведения. Совпадение титра произошедшей реакции с границами титров шкалы, считается совпадением множеств разведений (титров) исходного образца. Внутри шкалы выделены множества цифровых значений разведений, соответствующих степени разведения исходного исследуемого образца. Если при учете качественной реакции выявлено отсутствие реакции антиген - антитело (аутоантиген- аутоантитело) в исследуемом разведении, то результат считается негативным, делается вывод об отсутствии антител-аутоантител в этом разведении.  Tissue health level scale - a scale that has a digital ranking (gradation of dilution levels (titers)) from zero (the sample is not diluted) to the maximum dilution level (maximum to 1: 2048), the sample is diluted 2048 times and has units corresponding to and multiple dilution rates. The coincidence of the titer of the reaction with the boundaries of the titers of the scale is considered the coincidence of the multiple dilutions (titers) of the original sample. Inside the scale, a set of digital dilution values corresponding to the degree of dilution of the original test sample are highlighted. If, when taking into account the qualitative reaction, the absence of the antigen-antibody (autoantigen-autoantibody) reaction in the test dilution was detected, then the result is considered negative, the conclusion is made about the absence of autoantibody antibodies in this dilution.
Множества разведений исходного образца определяются пограничными цифрами внутри шкалы. Минимальные количественные показатели взаимодействий антиген - антитело, аутоантиген - аутоантитело, принадлежат множеству четырехкратных разведений образца до титра 1 :4 и составляют множество ]0-1 :4] (не разведенный образец, разведение образца в 2 -3 -4 раза).  Many dilutions of the original sample are determined by the border numbers within the scale. The minimum quantitative indicators of the antigen – antibody, autoantigen – autoantibody interactions belong to the set of four-fold dilutions of the sample to a titer of 1: 4 and are many] 0-1: 4] (undiluted sample, dilution of the sample 2 -3 -4 times).
Последовательности множеств значений разведения в шкале определяют цифровые показатели, выявленные в иммунных реакциях, и которые могут быть связаны или ассоциированы с разведениями (титрами) образца биологической жидкости. Эти множества значений принадлежат множествам разведений исходного образца. Множества значений находятся в пределах разведения (титров) исследуемого образца и представляют пять основных множеств разведений исходного образца исследуемой жидкости, с помощью которой можно выявить уровень антител - аутоантител и определить состояние исследуемой ткани. Эти множества представлены ниже в виде шкалы в таблице 3.  The sequence of sets of dilution values in the scale determines the digital indicators identified in immune responses, and which can be associated with or associated with dilutions (titers) of a sample of biological fluid. These sets of values belong to the sets of dilutions of the original sample. The sets of values are within the dilution (titers) of the test sample and represent the five main sets of dilutions of the original sample of the test fluid, with which you can detect the level of antibodies - autoantibodies and determine the state of the test tissue. These sets are presented below in the form of a scale in table 3.
Таблица 3. Шкала множеств разведений исходного образца, уровней  Table 3. Scale of sets of dilutions of the initial sample, levels
выявленных антител-аутоантител и состояния ткани.  identified autoantibodies and tissue conditions.
Figure imgf000037_0001
Предельны 12.5 25 50 100 200 й уровень
Figure imgf000037_0001
Limit 12.5 25 50 100 200 level
антител- аутоантител  antibodies autoantibodies
в мкг/мл  in mcg / ml
Уровень нормальны выше нормы высокий чрезмерный критический антител- й  Level normal above normal high excessive critical antibody
аутоантител autoantibodies
Состояние ткань несущественны повреждения повреждени повреждени ткани здорова е повреждения ткани я ткани я ткани ткани типичное для типичное типичное хроническог для острого для лизиса о воспаления воспаления и/или отторжения ткани  Condition of the tissue minor damage damage tissue damage healthy tissue damage tissue tissue typical typical typical chronic acute inflammation and / or tissue rejection lysis
Таким образом, внутри шкалы выделяются пять основных множеств разведений исходного вещества, по которым определяют уровни выявляемых антител - аутоантител и определяют состояние исследуемой ткани. Получаемые результаты сравнивают со шкалой, определяя множество, которому они принадлежат, а выявив нужное множество, определяют полученное значение результата, делают заключение об уровне антител - аутоантител к ткани в исследуемом образце. Множества определяют выявляемые уровни антител - аутоантител. После определения уровня аутоантител в образце, можно делать вывод о состоянии здоровья или степени повреждения ткани индивида. Thus, five main sets of dilutions of the starting substance are distinguished within the scale, which determine the levels of detectable antibodies - autoantibodies and determine the state of the tissue under study. The results are compared with the scale, determining the set to which they belong, and identifying the desired set, determine the obtained value of the result, make a conclusion about the level of antibodies - autoantibodies to the tissue in the test sample. Many determine the detectable levels of antibodies - autoantibodies. After determining the level of autoantibodies in the sample, we can conclude on the state of health or the degree of damage to the tissue of the individual.
При уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1 :4 -1 :8] - говорят о здоровом состоянии ткани; при уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1 :16 - 1 :32] - результат свидетельствует об уровне антител-аутоантител выше нормы, может свидетельствовать о хроническом патологическом процессе вне обострения или недавнем неблагоприятном воздействии на ткань. Состояние здоровья ткани в этом случае может трактоваться как вариант индивидуальной нормы; при уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1 :64 - 1 : 128] - результат свидетельствует об обострении хронического патологического процесса ткани или начинающемся процессе острого повреждения ткани, прямом цитотоксическом воздействии инородным агентом на ткань или совокупностью этих факторов. Состояние здоровья ткани должно трактоваться как повреждение и патология; при уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1 :256 - 1 :512] - результат свидетельствует о тяжелом остром патологическом процессе, происходящим во внутреннем органе и тяжелом повреждении ткани этого органа, состояние здоровья ткани трактуется как заболевание, требуется лечение ткани; при уровне выявляемых аутоантител, принадлежащих множеству [1 :1024- 1 :2948] - результат свидетельствует о начавшемся полном или частичном лизисе ткани, ее гибели и отторжении. Остро возникший и (или) поддерживаемый уровень аутоантител, принадлежащий этому множеству, как правило, не совместим с жизнью всего организма. Состояние здоровья ткани органа и организма должно быть расценено как критическое. At the level of identified autoantibodies belonging to the set [1: 4 -1: 8] - they speak of a healthy state of tissue; at the level of detected autoantibodies belonging to the set [1: 16 - 1: 32], the result indicates the level of autoantibody antibodies above normal, may indicate a chronic pathological process without exacerbation or a recent adverse effect on the tissue. The state of tissue health in this case can be interpreted as a variant of an individual norm; at the level of detected autoantibodies belonging to the set [1: 64 - 1: 128], the result indicates an exacerbation of the chronic pathological process of the tissue or the beginning of the process of acute tissue damage, direct cytotoxic effect of a foreign agent on the tissue, or a combination of these factors. The health status of the tissue should be interpreted as damage and pathology; at the level of identified autoantibodies belonging to the set [1: 256 - 1: 512] - the result indicates a severe acute pathological process occurring in the internal organ and severe tissue damage to this organ, the state of tissue health is treated as a disease, tissue treatment is required; at the level of detected autoantibodies belonging to the set [1: 1024-1: 2948] - the result indicates the onset of complete or partial lysis of the tissue, its death and rejection. The sharply arisen and (or) maintained level of autoantibodies belonging to this set, as a rule, is not compatible with the life of the whole organism. The state of health of the tissue of the organ and body should be regarded as critical.
Совпадение полученных показателей в реакции разведений образца с одним из значений множеств шкалы, считается совпадением с этим множеством, а количество выявленных аутоантител, соответствующим уровню выявленного множества.  The coincidence of the obtained indicators in the reaction of dilutions of the sample with one of the values of the sets of the scale is considered a coincidence with this set, and the number of detected autoantibodies corresponding to the level of the identified set.
Отсутствие результата при качественной реакции, или обнаружение результатов реакции в биологической жидкости, равных нулю, свидетельствует о тканевой органной и (или) видовой асингенности образца и использованного маркера, реакция считается негативной и свидетельствует об отсутствии выявляемых антител (аутоантител) в исследуемом образце.  The absence of a result with a qualitative reaction, or the detection of reaction results in biological fluid equal to zero, indicates tissue organ and (or) species asingeness of the sample and the marker used, the reaction is considered negative and indicates the absence of detectable antibodies (autoantibodies) in the test sample.
Если при проведении качественной реакции в неразведенном образце результат негативен, уровень антител-аутоантител не определяется, то результат реакции считается равным нулю, считают что антител - аутоантител в пробе биологической жидкости нет. В этом случае считают, что ткань индивида:  If, when conducting a qualitative reaction in an undiluted sample, the result is negative, the level of antibodies-autoantibodies is not determined, then the result of the reaction is considered equal to zero, it is believed that there are no antibodies-autoantibodies in the sample of biological fluid. In this case, it is believed that the tissue of the individual:
вариант 1) практически не имеет повреждений, а процесс образования клеток превалирует над их деструкцией;  option 1) has practically no damage, and the process of cell formation prevails over their destruction;
вариант 2) ткань частично или полностью изменила свою антигенную структуру, что может быть в случаях образования ΝΕΟ-ткани и идет онкопроцесс; вариант 3) в образцах биологических жидкостей организма индивида присутствуют вещества, блокирующие образование противотканевых антител - аутоантител (был прием или введение лекарственных препаратов, блокирующих или уменьшающих реакции образования антител - аутоантител или отторжения трансплантата) .  option 2) the tissue has partially or completely changed its antigenic structure, which can be in cases of the formation of ΝΕΟ-tissue and the oncological process is ongoing; option 3) in the samples of biological fluids of the body of the individual there are substances that block the formation of anti-tissue antibodies - autoantibodies (there was a reception or administration of drugs that block or reduce the reaction of antibody formation - autoantibodies or transplant rejection).
При любом из трех вариантов в организме индивида возникает состояние ткани, названное автором «тканевой аутоиммунный вираж», состояние здоровья ткани в этом случае требует углубленной клинико-морфологической диагностики (биопсия, углубленное аппаратное обследование). После получения результатов углубленной диагностики может быть дано определение состояния здоровья или заболевания ткани внутреннего, трансплантируемого или транзиторного органа. With any of the three options, the state of the tissue arises in the individual’s body, which the author called “tissue autoimmune superelevation,” the state of tissue health in this case requires an in-depth clinical and morphological diagnosis (biopsy, in-depth hardware examination). After receiving the results An in-depth diagnosis can be given to determine the state of health or disease of the tissue of an internal, transplanted or transient organ.
При исследовании пробы образца биологической жидкости индивида, при анализе которой использовались одновременно несколько маркеров, и где в качестве маркера использованы сразу несколько ИАВ, полученных из разных тканей, следует оценивать результат взаимодействия по каждому из применяемых ИАВ, полученных из разных тканей, и биологической жидкостью образца. Результат взаимодействия по каждому веществу учитывается отдельно и заключение о состоянии здоровья по каждой ткани проводится отдельно. Совокупность результатов в пробе и результат, полученный по каждому веществу, определяет профиль состояния здоровья тканей, входящих в пробу. По результату пробы может быть дано заключение об общем состоянии здоровья не только ткани, органа, но организма индивида (в случае если использовано достаточное количество ИАВ). Заключение о состоянии здоровья индивида делается исходя из полученных результатов и предложенной шкалы, по каждому органу.  When examining a sample of a sample of an individual’s biological fluid, in the analysis of which several markers were used simultaneously, and where several IAV obtained from different tissues were used as a marker at once, the result of the interaction for each of the used IAV obtained from different tissues and the biological fluid of the sample should be evaluated . The result of the interaction for each substance is taken into account separately and the conclusion on the state of health for each tissue is carried out separately. The set of results in the sample and the result obtained for each substance determines the profile of the health status of the tissues included in the sample. Based on the result of the test, a conclusion can be made about the general health status of not only the tissue, organ, but the individual’s body (if a sufficient amount of IAV is used). The conclusion about the individual’s state of health is made on the basis of the results obtained and the proposed scale, for each body.
При исследовании пробы образца биологической жидкости индивида, при анализе которой использовались одновременно несколько маркеров, и где в качестве маркера использованы сразу несколько ИАВ, полученных из разных тканей, в случаях: 1) выявления высоких титров уровней антител - аутоантител во всей пробе биологической жидкости (титр 1 :64 и выше по каждому из анализируемых веществ); 2) при получении результатов проб, где в серии использованы варианты веществ по п.1 и результаты по каждому из них (все значения уровней-титров высокие или все низкие), считают, что в организме имеется ряд биологически и (или) иммуноактивных веществ, приводящих к срыву иммунологической толерантности и (или) гиперсенсибилизация организма веществами, способными приводить к дисфункции иммунной системы (состояния тканей при аллергических заболеваниях, ряде аутоиммунных заболеваний (аутоиммунный тиреоидит и т.д.), лечении фармакологическими композициями, содержащими высокие дозы лекарственной субстанции, влияющей на иммунные реакции (глюкокортикоидные гормоны, иммунодепрессанты, цитостатические вещества и т.д.).  When examining a sample of a sample of a biological fluid of an individual, in the analysis of which several markers were used at the same time, and where several IAVs obtained from different tissues were used as a marker, in the cases of: 1) the detection of high titers of antibody levels - autoantibodies in the entire biological fluid sample (titer 1: 64 and higher for each of the analyzed substances); 2) upon receipt of the results of the tests, where the series used the variants of the substances according to claim 1 and the results for each of them (all values of the titer levels are high or all low), consider that the body has a number of biologically and (or) immunoactive substances, leading to disruption of immunological tolerance and (or) hypersensitivity of the body with substances that can lead to dysfunction of the immune system (tissue conditions in allergic diseases, a number of autoimmune diseases (autoimmune thyroiditis, etc.), treatment with pharmacological agents positions containing high doses of a drug substance that affects immune responses (glucocorticoid hormones, immunosuppressants, cytostatic substances, etc.).
Количественное определение уровня антител (аутоантител) осуществляют с помощью реакции иммуноферментного анализа, результат учитывают в полученных абсолютном цифровом выражении или условно принятых единицах. Значения шкалы могут отличаться и принимать абсолютные цифровые выражения в различных единицах измерения, если используются различные варианты, методики или аппараты для иммунных реакций. Тогда цифровые, количественные значения, выявленные другим способом в иммунных реакциях, должны быть сравнены с количественным значением антител - аутоантител в титре разведения образца - шкалой уровней разведения образца, а затем интерпретированы. The quantitative determination of the level of antibodies (autoantibodies) is carried out using an enzyme-linked immunosorbent assay, the result is taken into account in the obtained absolute digital expression or conventionally accepted units. The values of the scale can differ and take absolute digital expressions in different units of measurement if different options, techniques or apparatuses for immune reactions are used. Then the digital, quantitative values detected in a different way in the immune responses should be compared with the quantitative value of the antibodies — autoantibodies in the sample dilution titer — by a scale of sample dilution levels, and then interpreted.
Качественной высокочувствительной реакцией, позволяющей проводить выявление с помощью веществ по п.1 минимальных уровней специфических антител (аутоантител) к тканям в образцах биологических жидкостей, являются реакции иммуноферментного анализа. Результат учитывают как позитивный или негативный, а количественные пересчеты проводят при помощи предложенной шкалы. В твердофазных методиках иммуноанализа, позволяющих выявлять происходящие реакции антиген-антитело (аутоантиген - аутоантитело), могут использоваться варианты вещества по п.1, полученные способом по п.2. Использование для реализации реакции твердых носителей позволяет существенно упростить проведение анализа. Возможно использовать следующие типы носителей: 1) трубки (например, стеклянные, полистирольные, полипропиленовые); 2) гранулы (например, активированного полистирола); 3) мелкие частицы (например, полиакриламида, целлюлозы, сефарозы); 4) микропланшеты или полоски (например, полистирольные); 5) дипстики, карточки, стержни (например, полистирольные); 6) электроды (например, платиновые, углеродные); 7) пленки или волокна (например, стеклянные, кварцевые). Если система включает электрод, то ее можно назвать био- или иммуносенсором (биочипом). Пример реализации иммуноДОТ анализа на нитроцеллюлозной мембране приведен ниже.  An enzyme-linked immunosorbent assay is a high-quality, highly sensitive reaction that allows the detection according to claim 1 of the minimum levels of specific antibodies (autoantibodies) to tissues in samples of biological fluids. The result is taken into account as positive or negative, and quantitative conversions are carried out using the proposed scale. In solid-phase immunoassay methods, allowing to detect the occurring antigen-antibody reactions (autoantigen-autoantibody), variants of the substance according to claim 1 obtained by the method according to claim 2 can be used. The use of solid carriers for the implementation of the reaction allows one to significantly simplify the analysis. It is possible to use the following types of media: 1) tubes (for example, glass, polystyrene, polypropylene); 2) granules (for example, activated polystyrene); 3) fine particles (for example, polyacrylamide, cellulose, sepharose); 4) microplates or strips (e.g. polystyrene); 5) dipsticks, cards, rods (e.g. polystyrene); 6) electrodes (for example, platinum, carbon); 7) films or fibers (for example, glass, quartz). If the system includes an electrode, then it can be called a bio- or immunosensor (biochip). An example of the implementation of immunodot analysis on a nitrocellulose membrane is given below.
Заявляемое ИАВ может быть использовано для индивидуализированного (персонифицированного) лечения заболеваний тканей органов индивида, которое можно охарактеризовать неконтролируемым ростом клеток ткани (в т.ч. ткани опухолей злокачественной или доброкачественной природы), требующих прекращения развития процесса роста и образования клеток такой же ткани, из которой получено ИАВ; требующий полного или частичного лизиса и удаления из организма ткани или ее клеток, включающий сенсибилизацию организма нарастающим титром фармакологической композиции с целью вызвать ответную реакцию иммунной системы организма по образованию противотканевых антител - аутоантител, содержащей ИАВ, полученным из ткани этого же индивида, и вводимого этому же индивиду парентерально по Безредка, контролируя этим же средством уровни образования антител - аутоантител в биологических жидкостях пациента, соблюдая меры предосторожности и профилактики нежелательных повреждений других тканей, направленные на предотвращение образования в биологических жидкостях организма уровней титров антител - аутоантител, превышающих значения множества [1 :256 - 1 :512] в лабораторном контроле. The inventive IAV can be used for individualized (personified) treatment of diseases of tissues of organs of an individual, which can be characterized by uncontrolled growth of tissue cells (including tumor tissue of a malignant or benign nature), requiring the cessation of the development of the growth process and the formation of cells of the same tissue, from which received IAV; requiring complete or partial lysis and removal of tissue or its cells from the body, including sensitization of the body with an increasing titer of the pharmacological composition in order to cause a response of the body's immune system to form anti-tissue antibodies - autoantibodies containing IAV obtained from the tissue of the same individual and introduced into the same parenterally by Infinite, controlling the levels of antibody formation by the same means - autoantibodies in the biological fluids of the patient, observing precautions and prevention of unwanted damage to other tissues aimed at preventing the formation of biological body fluids levels of titers of antibodies - autoantibodies exceeding the values of the set [1: 256 - 1: 512] in the laboratory control.
Патогенетический механизм действия предложенного метода лечения заключается в направленной активации иммунной (аутоиммунной) системы и продуцировании высокоспецифичных антител, которые, имея антигенно идентичные (сингенные) участки (органно-видовые) и аллогенный участок организма индивида в своем строении, в ответ на введение фармакологической композиции, содержащей ИАВ, являются противотканевыми - аутоантителами. Образованные организмом аутоантитела, имеют противотканевые свойства и способны изолированно и направленно повреждать ту ткань, с которой имеют полностью сингенные участки - эпитопы, в которых зашифрованы органные, видовые и индивидуальные свойства ткани индивида. Эти аутоантитела не могут быть выделены из организма и применены для лечения у другого индивида того же биологического вида, но могут быть определены в его биологических жидкостях с помощью ИАВ, лишенного аллогенных свойств исходной ткани индивида (донора) этого же биологического вида, когда в диагностической системе способно происходить выявление аутоантител, только по сингенным участкам органной и видовой специфичности. Эти свойства фармакологической композиции, содержащей ИАВ, являются ключевыми при проведении лечебного воздействия на ткань, так как позволяют проводить лечение и контролировать его результат одним и тем же ИАВ, которое в случае его введения в организм пациента является основной действующей субстанцией, и являющееся основным компонентом диагностической лабораторной системы, позволяющей дозировать и контролировать ход лечебного процесса.  The pathogenetic mechanism of action of the proposed method of treatment consists in the directed activation of the immune (autoimmune) system and the production of highly specific antibodies, which, having antigenically identical (syngeneic) regions (organ-specific) and the allogeneic region of the individual's body in its structure, in response to the introduction of a pharmacological composition, containing IAV, are anti-tissue - autoantibodies. Autoantibodies formed by the body have anti-tissue properties and are capable of damaging in isolation and direction the tissue with which they have completely syngenic areas - epitopes in which the organ, species and individual properties of the individual's tissue are encrypted. These autoantibodies cannot be isolated from the body and used to treat another individual of the same biological species, but can be determined in their biological fluids using IAV, devoid of allogenic properties of the original tissue of the individual (donor) of the same biological species, when in the diagnostic system the detection of autoantibodies is possible only in syngeneic areas of organ and species specificity. These properties of the pharmacological composition containing IAV are key when conducting a therapeutic effect on the tissue, since they allow the treatment and its result to be controlled by the same IAV, which, if introduced into the patient’s body, is the main active substance and is the main component of the diagnostic laboratory system that allows you to dose and control the course of the treatment process.
Это возможно, во-первых, потому, что отсутствие аллогенного кода гистосовместимости в ИАВ способно вызывать образование антител в организме другого индивида того же вида, т.к. его организм расценивает введенное ИАВ как прямой чужеродный антиген, против которого начинает вырабатывать антитела и запускает иммунные реакции антиген-антитело. Во-вторых, полная схожесть (исходная органная и видовая сингенность ткани) антигенных органных и видовых характеристик (кодов) ткани, из которых получено ИАВ, и которыми обладает это ИАВ, требует от иммунной системы организма выработки строго идентичных органному и видовому антигенному набору ткани характеристик, которые реализуются в выработке антител, в ответ на введенное вещество. This is possible, firstly, because the absence of an allogeneic histocompatibility code in IAS can cause the formation of antibodies in the body of another individual of the same species, because his body regards the introduced IAS as a direct foreign antigen, against which it begins to produce antibodies and triggers the antigen-antibody immune responses. Secondly, the complete similarity (the initial organ and species syngenesis of the tissue) of the antigenic organ and species characteristics (codes) of the tissue from which IAV is obtained and which IAV has, requires the body’s immune system to develop characteristics that are strictly identical to the organ and species antigenic set of tissue that are realized in the production of antibodies, in response to the injected substance.
В-третьих, антитела, имеющие идентичные органные и видовые характеристики ИАВ, в то же время идентичны набору антигенных характеристик ткани организма индивида. Вследствие чего вырабатывающиеся антитела способны воздействовать на такую же ткань внутри организма, которая опосредованно начинает вступать в иммунную реакцию под воздействием антител, которые фактически становятся аутоантителами к собственной ткани организма индивида.  Thirdly, antibodies having identical organ and species characteristics of IAS are at the same time identical to the set of antigenic characteristics of an individual's body tissue. As a result, the antibodies produced are able to act on the same tissue inside the body, which indirectly begins to enter an immune response under the influence of antibodies, which in fact become autoantibodies to the body’s own tissue of the individual.
В-четвертых, образовавшиеся в организме антитела-аутоантитела высокоспецифичны только той ткани, из которой они получены, сингенны только одной ткани по органному и видовому набору антигенных свойств. Другие органные сингении (совпадения по органному коду) в ИАВ исключены. Следовательно, ответ иммунной системы, в котором образование антител с иной антигенной структурой, способной повреждать другие ткани организма, также исключен. Антитела - аутоантитела взаимодействуют прецизионно точно, и только с той тканью, из которой они получены (органная и видовая сингения). Повреждения других тканей организма исключены.  Fourth, antibodies formed in the body of autoantibodies are highly specific only to the tissue from which they are obtained, syngenic to only one tissue according to the organ and species set of antigenic properties. Other organ syngenias (matches in the organ code) are excluded in the IAB. Therefore, the response of the immune system, in which the formation of antibodies with a different antigenic structure that can damage other tissues of the body, is also excluded. Antibodies - autoantibodies interact precisely precisely, and only with the tissue from which they are obtained (organ and species syngenia). Damage to other body tissues is excluded.
Для лечебного воздействия на ткань организма необходимо следующее:  For therapeutic effects on body tissue, the following is necessary:
1. Получение образца ткани, к которой будет применяться лечебное воздействие, и получение ИАВ заявляемым способом;  1. Obtaining a tissue sample to which the therapeutic effect will be applied, and obtaining IAV by the claimed method;
2. Создание фармакологической композиции, в состав которой будет входить ИАВ - маркер ткани, полученное заявляемым способом из организма пациента или ИАВ, полученное заявляемым способом из ткани другого пациента (донора) этого же биологического вида, если выявлено, что антигенные характеристики ткани донора и будущего пациента совпадают.  2. The creation of a pharmacological composition, which will include IAV - a tissue marker obtained by the claimed method from the patient’s body or IAV obtained by the claimed method from the tissue of another patient (donor) of the same biological species, if it is revealed that the antigenic characteristics of the donor tissue and the future patient match.
3. Активация иммунной и аутоиммунной системы организма пациента, путем введения фармакологической композиции, содержащей ИАВ способом, применяемым при введении чужеродных сывороток (модифицированный способ Безредка A.M.). ' Перед началом лечения проводят обследование пациента. Если состояние здоровья пациента позволяет начать проведение лечения (лабораторные исследования, согласно заявляемой методике, не выявили расстройства здоровья индивида или повреждения других тканей), то перед началом постановки проб и первичном введении фармакологической композиции, содержащей ИАВ, необходимо провести премедикацию (0,05 - 0,1 мг/кг массы тела глюкортикоидного вещества ввести в/м за 30-45 мин до постановки проб, и наладить внутривенную инфузию изотонического раствора любого кристаллоида, так чтобы к началу пробы его было введено не менее 0,1 мл/кг массы тела). Пункция вены должна сопровождаться обязательным забором крови (не менее 3,0 мл) для анализов на определение состояния здоровья веществами по. п. 1, способом по п.8. Содержание уровня антител (аутоантител) к ткани организма индивида, к которой применяется лечение, в первичной пробе может быть отрицательным или принадлежать множеству значений ]0-1 :4]. 3. Activation of the immune and autoimmune system of the patient’s body, by introducing a pharmacological composition containing IAV by the method used for the introduction of foreign sera (modified method Unlimited AM). '' Before starting treatment, a patient examination is performed. If the patient’s state of health allows the initiation of treatment (laboratory tests, according to the claimed method, did not reveal an individual’s health disorder or damage to other tissues), then premedication should be carried out prior to the preparation of the samples and the initial administration of the pharmacological composition (0.05 - 0 , 1 mg / kg of body weight of a glucorticoid substance should be administered i.v. 30-45 min before the samples are taken, and intravenous infusion of an isotonic solution of any crystalloid should be established, so that by the beginning of the sample it will be administered Deno not less than 0.1 ml / kg body weight). Puncture of a vein should be accompanied by a mandatory blood sampling (at least 3.0 ml) for analyzes to determine the health status of substances by. p. 1, the method of claim 8. The content of the level of antibodies (autoantibodies) to the tissue of the individual organism to which the treatment is applied in the primary sample may be negative or belong to many values] 0-1: 4].
Если не составлена готовая форма фармакологической композиции, и не предусмотрена иная инструкция по введению, необходимо стерильно взять 1 мг сухого лиофилизированного ИАВ, полученного по заявляемому способу, развести 1 мг вещества в 1 мл 0,9 % физиологического раствора. Отобрать 0,25 мл полученного раствора и растворить в 4,75 мл 0,9 % физиологического раствора, получив концентрацию 50 мкг/мл. Отобрать 0,1 мл раствора и развести до объема 10 мл, получив концентрацию 0,5 мкг/мл.  If the finished form of the pharmacological composition is not compiled, and other instructions for administration are not provided, it is necessary to sterilize 1 mg of dry lyophilized IAV obtained by the present method, dilute 1 mg of the substance in 1 ml of 0.9% saline. Select 0.25 ml of the resulting solution and dissolve in 4.75 ml of 0.9% saline, obtaining a concentration of 50 μg / ml. Select 0.1 ml of the solution and dilute to a volume of 10 ml, obtaining a concentration of 0.5 μg / ml.
Разведенное таким образом вещество в количестве 0,1 мл вводят внутрикожно в предплечье (верхняя треть внутренней поверхности) для оценки чувствительности организма к препарату. Через 30 минут оценивают чувствительность измерением диаметра папулы. Если диаметр папулы на месте введения не более 1 см, то еще 0,1 мл разведенной сыворотки вводят подкожно. При отсутствии реакции через 30 минут дозу вещества растворяют таким образом, чтобы концентрация раствора не превышала 0,50 мкг в 1,0 мл (например, 50 мкг-1 мл раствора вещества по п.1, растворяют в 100 мл 0,9% физиологического раствора). Подготовленную фармакологическую композицию для инфузии медленно (20 - 40 кап/мин, 1-2 мл/мин) вводят внутривенно из расчета не более 0, 01 мкг/кг массы тела. При проведении инфузии проводят контроль (мониторирование) состояния жизненно важных функций организма (дыхание, пульс, АД). При первых признаках изменений числа дыхательных движений, числа сердечных сокращений, изменении артериального давления, беспокойстве пациента, дискомфорте - ведение вещества прекращают и симптомы купируют введением глюкокортикоидных веществ, антигистаминных веществ. Возникновение вышеописанных симптомов расценивают как реакцию взаимодействия, произошедшую между иммунной системой организма и веществом. Пациент должен быть оставлен под стационарным наблюдением не менее чем на 24 часа после процедуры введения вещества. Diluted in this way, a substance in the amount of 0.1 ml is administered intradermally in the forearm (upper third of the inner surface) to assess the sensitivity of the body to the drug. After 30 minutes, sensitivity is measured by measuring the diameter of the papule. If the diameter of the papule at the injection site is not more than 1 cm, then another 0.1 ml of diluted serum is administered subcutaneously. In the absence of reaction, after 30 minutes, the dose of the substance is dissolved so that the concentration of the solution does not exceed 0.50 μg in 1.0 ml (for example, 50 μg-1 ml of the solution of the substance according to claim 1, dissolved in 100 ml of 0.9% physiological solution). The prepared pharmacological composition for infusion is slowly (20–40 cap / min, 1-2 ml / min) administered intravenously at the rate of not more than 0.01 µg / kg body weight. During the infusion control (monitoring) of the state of vital body functions (respiration, pulse, blood pressure) is carried out. At the first sign of changes in the number of respiratory movements, the number of heart contractions, change blood pressure, patient anxiety, discomfort - substance management is stopped and symptoms are stopped by the administration of glucocorticoid substances, antihistamines. The occurrence of the above symptoms is regarded as an interaction reaction that has occurred between the body’s immune system and the substance. The patient should be left under stationary observation for at least 24 hours after the procedure of administration of the substance.
По показаниям, но не реже чем через 12 - 24 - 48 часов после введения проводят анализ биологической жидкости (сыворотки крови), оценивая состояние здоровья тканей внутренних органов и наличие повреждений ткани индивида, по поводу которой проводится лечение. При этом оценку состояния здоровья тканей также проводят по заявляемому способу. В частности, при получении анализов проб биологической жидкости, в которых выявлены значения уровней множеств аутоантител при титрах [1 :4 -1 :8]; [1 :16 - 1 :32], лечебное воздействия считается реализуемым достаточно. В этом случае проводится наблюдение за организмом индивида-пациента и тканью, на которую оказывается воздействие до получения требуемого результата, проводятся повторные сеансы введения ИАВ. Если выявлены значения уровней множеств аутоантител [1 :64-1 :128], то считают, что лечебное воздействие высокоэффективно, повторные сеансы введения вещества прекращают. Проводят наблюдение за пациентом. При уровне выявленных аутоантител, принадлежащих множеству [1 :256 - 1 :512] - лечебное воздействие считают чрезмерным и принимают меры к снижению множества значений уровней аутоантител, вводя глюкокортикоидные гормоны, десенсибилизирующие и антигистаминные лекарства, проводят инфузионную терапию растворами кристаллоидов из расчета 15-20 мл/кг, применяют методы детоксикации, вплоть до проведения плазмафереза, до нормализации множества значений уровней аутоантител в пробах биологических жидкостей. Превышение значений уровней аутоантител, принадлежащих множеству [1 : 1024 - 1 : 2048] не допустимо, и может сопровождаться гибелью всего организма.  According to the testimony, but not less than 12 - 24 - 48 hours after administration, an analysis of the biological fluid (blood serum) is carried out, assessing the state of health of the tissues of the internal organs and the presence of damage to the tissue of the individual, for which treatment is carried out. In this case, the assessment of the state of tissue health is also carried out according to the claimed method. In particular, when obtaining analyzes of samples of biological fluid, in which the values of the levels of the sets of autoantibodies at titers [1: 4 -1: 8] were revealed; [1: 16 - 1: 32], therapeutic effects are considered practicable enough. In this case, the body of the individual patient is monitored and the tissue, which is exposed until the desired result is obtained, are repeated sessions of the introduction of IAV. If the values of the levels of the sets of autoantibodies are revealed [1: 64-1: 128], then it is considered that the therapeutic effect is highly effective, repeated sessions of the substance administration are stopped. Monitor the patient. At the level of identified autoantibodies that belong to the set [1: 256 - 1: 512], the therapeutic effect is considered excessive and measures are taken to reduce the set of values of autoantibody levels by introducing glucocorticoid hormones, desensitizing and antihistamines, conduct infusion therapy with crystalloid solutions at the rate of 15-20 ml / kg, detoxification methods are used, up to plasmapheresis, until the normalization of many levels of autoantibody levels in samples of biological fluids. Exceeding the values of the levels of autoantibodies belonging to the set [1: 1024 - 1: 2048] is not permissible, and may be accompanied by the death of the whole organism.
Если диаметр папулы через 30 минут после первичного введения разведенной фармакологической композиции, содержащей ИАВ внутрикожно более 1 см, тогда выполняются следующие действия: в/в введение 1-2 мг/ кг глюкокортикоидного гормона (преднизолон), последовательно с интервалом в 30 минут проводится подкожное введение разведенной фармакологической композиции, содержащей вещество по п.1, в количестве 0,2 мл, 0,5 мл, 1,0 мл, 2,0 мл, 5,0 мл, далее проводится внутривенная инфузия, как было описано выше. If the diameter of the papule is 30 minutes after the initial administration of a diluted pharmacological composition containing IAV intradermally more than 1 cm, then the following actions are performed: iv administration of 1-2 mg / kg glucocorticoid hormone (prednisone), subcutaneous administration is carried out sequentially with an interval of 30 minutes diluted pharmacological composition containing the substance according to claim 1, in an amount of 0.2 ml, 0.5 ml, 1.0 ml, 2.0 ml, 5.0 ml, then an intravenous infusion is carried out, as described above.
При появлении реакции на какую-либо дробную дозу сыворотки вводят 2 мг/кг массы тела глюкокортикоидного гормона (преднизолон) в/в и проводят анализ пробы биологической жидкости на уровень аутоантител.  When a reaction to any fractional dose of serum appears, 2 mg / kg of body weight of glucocorticoid hormone (prednisone) is administered iv and an analysis of the biological fluid sample is carried out on the level of autoantibodies.
Разработанная технология позволяет получать новые иммунологически активные вещества, специфичные для типированной ткани практически любого органа человека или животного. Они представляют собой вещества белковой природы, а именно иммуноглобулины, относящиеся в основном к классу М. Обнаружено, что ИАВ являются специфическими аутоантигенами к типируемой ткани, характеризующимися признаками белковых структур иммуноглобулинов класса G (Ig М), участвующими в срочных реакциях в сыворотке крови, имеющими высокую индивидуальную, органную и видовую специфичность, циркулирующими постоянно в сыворотке крови и имеющими количественную зависимость от процессов жизнедеятельности и состояния исследуемой ткани. Количество выявляемых в сыворотке аутоантител ткани может варьироваться, имея линейную зависимость от морфологического состояния субстрата. Причем уровни выявляемых аутоантител характеризуют не только уровень обменных процессов в ткани или органе, но и отражают состояние их повреждения под действием экзо и эндогенных факторов, влияющих на эту ткань или орган. Увеличение количества определяемых аутоантител в сыворотке крови может последовательно характеризовать состояние здоровья исследуемой ткани. Заявляемая методика позволяет дифференцировать уровни практического здоровья, состояния хронического или латентного повреждения органов, состояния острого повреждения органов и их вовлечения в патологический процесс, прогнозировать угрозы аутоиммунного поражения и отторжения тканей органов. Таким образом, исследование способно выявить состояние организма: латентно текущую болезнь, предстоящую грозящую катастрофу здоровья или критическое положение ткани.  The developed technology allows to obtain new immunologically active substances specific for typed tissue of almost any organ of a human or animal. They are substances of a protein nature, namely immunoglobulins, mainly belonging to class M. It has been found that IAVs are specific autoantigens to typed tissue, characterized by signs of protein structures of class G immunoglobulins (Ig M), participating in urgent reactions in blood serum, having high individual, organ and species specificity, circulating constantly in the blood serum and having a quantitative dependence on the vital processes and the state of the tissue under study. The number of tissue autoantibodies detected in serum can vary, having a linear dependence on the morphological state of the substrate. Moreover, the levels of detected autoantibodies characterize not only the level of metabolic processes in the tissue or organ, but also reflect the state of their damage under the influence of exo and endogenous factors affecting this tissue or organ. An increase in the number of detectable autoantibodies in the blood serum can consistently characterize the state of health of the investigated tissue. The inventive method allows to differentiate the levels of practical health, the state of chronic or latent organ damage, the state of acute organ damage and their involvement in the pathological process, to predict the threat of autoimmune damage and organ tissue rejection. Thus, the study is able to identify the state of the body: latently current disease, an impending impending catastrophe of health or a critical position of the tissue.
Определение аутоантител в сыворотке крови открывает новые перспективы для лабораторной диагностики состояния органов и тканей человека и животных, позволяющих напрямую оценивать состояние здоровья или поражения органов и тканей в исследуемой пробе. Заявляемая группа технических решений позволяет создать полную линейку диагностических наборов для количественной оценки уровня аутоиммунных маркеров в сыворотке крови тканей органов животных и человека способом ИФА, для определения аутоиммунного статуса органов всего организма. The determination of autoantibodies in blood serum opens up new prospects for laboratory diagnostics of the state of organs and tissues of humans and animals, allowing direct assessment of the state of health or damage to organs and tissues in the test sample. The claimed group of technical solutions allows you to create a complete line of diagnostic kits for quantifying the level of autoimmune markers in the blood serum of animal tissues and human ELISA, to determine the autoimmune status of organs of the whole organism.
Проведение анализа по определению аутоиммунного статуса тканей и органов позволит напрямую судить о состоянии здоровья, угрозах и степени заболевания внутренних органов, отслеживать динамику выздоровления всего организма или его отдельных органов.  Carrying out an analysis to determine the autoimmune status of tissues and organs will directly judge the state of health, threats and the degree of disease of internal organs, and monitor the dynamics of recovery of the whole organism or its individual organs.
Данная методика является новым дополнением к уже имеющимся способам диагностики. Отличительной особенностью данного лабораторного метода является не косвенная (опосредованная через продукты жизнедеятельности и функции органов) оценка их морфологического состояния, а прямое количественное определение аутоантител, вырабатываемых организмом к исследуемому органу или ткани.  This technique is a new addition to existing diagnostic methods. A distinctive feature of this laboratory method is not an indirect (mediated through vital products and organ functions) assessment of their morphological state, but a direct quantitative determination of autoantibodies produced by the body to the organ or tissue under study.
Циркулирующие аутоантитела в сыворотке крови определяются к каждому органу и имеют свои количественные значения. Число выявляемых аутоантител в сыворотке крови к исследуемым органам или тканям в организме может рассматриваться как новая биологическая константа, характеризующая аутоиммунную систему организма, с присущей и варьирующейся у человека и животных характеристикой. Для подтверждения возможности реализации группы изобретений и достижения заявленного технического результата было установлено и использовано более 20 таких новых биологических характеристик, позволяющих оценивать аутоиммунный профиль органов в организме человека и более 70 показателей, позволяющих характеризовать аутоиммунное состояние здоровья животного.  Circulating autoantibodies in serum are determined for each organ and have their own quantitative values. The number of detected autoantibodies in the blood serum of the studied organs or tissues in the body can be considered as a new biological constant characterizing the autoimmune system of the body, with an inherent and varying characteristic in humans and animals. To confirm the feasibility of implementing the group of inventions and achieve the claimed technical result, more than 20 such new biological characteristics were established and used that made it possible to evaluate the autoimmune profile of organs in the human body and more than 70 indicators that allowed us to characterize the autoimmune state of animal health.
Согласно заявляемому способу был получен ряд из 20 иммуннологически активных веществ, которые были использованы для диагностики заболеваний внутренних органов человека и животных путем прямого лабораторного контроля за состоянием внутренних органов, определяемых в сыворотке крови. Вещества были адаптированы к проведению иммуноферментного анализа сыворотки крови, и были способны выявлять дисфункции органов на ранних стадиях. В процессе проведения исследований полученных ИАВ был разработан и унифицирован способ трактовки результатов лабораторных тестов.  According to the claimed method, a series of 20 immunologically active substances was obtained, which were used to diagnose diseases of the internal organs of humans and animals by direct laboratory monitoring of the condition of the internal organs determined in blood serum. The substances were adapted to conduct an enzyme-linked immunosorbent assay, and were able to detect organ dysfunctions in the early stages. In the process of researching the obtained IAS, a method for interpreting the results of laboratory tests was developed and unified.
Ниже представлено описание проведенных экспериментов и результатов экспериментов, подтверждающих наличие парциальной (частичной) органной и видовой сингенности иммуноактивного вещества с описанием их свойств. В процессе исследований были проверены следующие предположения. Below is a description of the experiments performed and the results of experiments confirming the presence of partial (partial) organ and species syngenesis of the immunoactive substance with a description of their properties. In the process of research, the following assumptions were verified.
Если заявляемое ИАВ имеет полностью сохраненные антигенные характеристики исходного органа и видовой код исходной ткани (частичная, парциальная сингенность), из которой оно было получено, то особенностью вещества будет являться «неполнота» исходного антигенного кода присущей всей ткани из которой это вещество получено. Эта «неполнота» и будет определять частичную сингенность. Причем у ИАВ, получаемого заявляемым способом, при полностью сохраненных свойствах антигенных характеристик ткани органа, индивидуальные антигенные свойства этой же исходной ткани должны быть нивелированы настолько, что оно будет способно вступать в иммунную реакцию антиген-антитело, аутоантиген-аутоантитело в биологических жидкостях, взятых у различных индивидуумов одного биологического вида, только со специфическими аутоантителами органа, без вступления в неспецифические реакции, которые могут провоцироваться особенностями индивидуальных различий в пробах у разных субъектов. Если вещество способно будет влиять на активность иммунной и аутоиммунной систем организма, то только через каскад иммунных и аутоиммунных реакций, которые будут продуцировать антитела (аутоантитела) в ответ на введение ИАВ опосредованно, влияя повышенными уровнями противорганных аутоантител на саму ткань. Антитела к веществу, имеющему частичную органную сингенность, которые образуются в ответ на его введение, будут идентичны ткани органа, из которого получено это вещество. Продуцирование антител иммунной системой организма, в ответ на введение ИАВ, имеет строгие закономерности. Антитела по своему информационному коду идентичны ткани органа, из которой получено вещество. Продуцируемые организмом антитела являются антителами против вещества. Но вещество имеет полную антигенную схожесть (органную сингенность) с тканью органа из которого оно получено. Поэтому продуцируемые антитела будут иметь свойства уже аутоантитела к ткани органа организма с тканью которой схоже ИАВ, из которого оно получено. Значит продуцируемые иммунной системой антитела в ответ на введение вещества будут иметь противоорганные, противотканевые характеристики и свойства. Эти противоорганные аутоантитела будут иметь индивидуальный код организма, что позволяет им не вступать в перекрестные иммунные реакции и не повреждать клетки тканей других органов индивида, а оказывать только противорганное противотканевое повреждающее действие. В качестве объекта исследования выступало ИАВ, полученное заявляемым способом из ткани печени морской свинки. If the claimed IAV has the fully preserved antigenic characteristics of the original organ and the species code of the original tissue (partial, partial syngenesis) from which it was obtained, then a feature of the substance will be the “incompleteness” of the initial antigenic code inherent in all the tissue from which this substance is obtained. This "incompleteness" will determine the partial syngenism. Moreover, the IAV obtained by the claimed method, with fully preserved properties of the antigenic characteristics of the organ tissue, the individual antigenic properties of the same source tissue must be leveled so that it will be able to enter into the immune response antigen-antibody, autoantigen-autoantibody in biological fluids taken from different individuals of one biological species, only with specific autoantibodies of the organ, without entering into non-specific reactions that may be triggered by the characteristics of indie visual differences in samples from different subjects. If a substance is capable of influencing the activity of the body’s immune and autoimmune systems, it is only through a cascade of immune and autoimmune reactions that will produce antibodies (autoantibodies) in response to the introduction of IAS indirectly, affecting elevated levels of antiorgan autoantibodies on the tissue itself. Antibodies to a substance that has partial organ syngenesis, which are formed in response to its administration, will be identical to the tissue of the organ from which this substance is derived. The production of antibodies by the body’s immune system, in response to the introduction of IAV, has strict patterns. Antibodies in their information code are identical to the tissues of the organ from which the substance is obtained. Antibodies produced by the body are antibodies against a substance. But the substance has complete antigenic similarity (organ syngness) with the tissue of the organ from which it is obtained. Therefore, the antibodies produced will already have the properties of autoantibodies to the tissue of the organ of the body with a tissue which is similar to the IAV from which it is derived. This means that antibodies produced by the immune system in response to the administration of a substance will have anti-organ, anti-tissue characteristics and properties. These anti-organ autoantibodies will have an individual body code, which allows them not to enter into cross-immune reactions and not damage cells of tissues of other organs of the individual, but to have only an anti-organ anti-tissue damaging effect. The object of the study was IAV, obtained by the claimed method from liver tissue of guinea pig.
При этом для получения ИАВ был осуществлен забор исходной ткани, ее типирование, консервация замораживанием, после чего исходную ткань повергали многократному процессу замораживания и оттаивания. Оттаивание ткани осуществляли воздействием СВЧ излучения с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги. Ткань дегидратировали на 43% (до достижения параметров остаточной влажности 57 %?). СВЧ - воздействие осуществляли при частоте длины волны 2450-2500 МГц мощностью источника излучения 700 -900 Вт в течение времени 20 с, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходила в жидкое состояние. Полученную в результате такой обработки исходную ткань измельчали, гомогенизировали, обеззараживали путем добавления в гомогенат ткани 0,5 % водного раствора формалина до 5% - 10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4 часов и экстрагировали по Грассе, полученный супернатант подвергали стандартизации по белку от 20 - 25 мг на 1 мл и лиофильно высушивали.  At the same time, to obtain IAV, the initial tissue was taken, typed, and preserved by freezing, after which the initial tissue was subjected to a multiple process of freezing and thawing. Thawing of the tissue was carried out by the action of microwave radiation with the removal of moisture formed during the thawing process. The tissue was dehydrated by 43% (until the parameters of the residual moisture content of 57%?). Microwave exposure was carried out at a frequency of a wavelength of 2450-2500 MHz with a radiation source power of 700-900 W for a time of 20 s, at which the water crystallized on the surface of a frozen tissue turned into a liquid state. The initial tissue obtained as a result of this treatment was crushed, homogenized, disinfected by adding a 0.5% aqueous formalin solution to the tissue homogenate to 5% - 10% of the total volume of the starting material, followed by mixing and exposure of the mixture for 4 hours and extracted according to Grasse, The obtained supernatant was subjected to protein standardization from 20-25 mg per 1 ml and freeze-dried.
Полученный таким образом экспериментальный материал в виде субстанции ИАВ парентерально вводили лабораторным животным - морским свинкам и лабораторным крысам, отобранным случайным образом, не имеющим сингенных инбредных линий. В эксперименте участвовало 27 здоровых животных (14 морских свинок (350-450 г) и 13 лабораторных крыс (250-400 г)). Эксперимент проводили на молодых (2-3 месяцев) апатогенных животных. Животные содержались в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для научных целей. По окончании эксперимента животных забивали методом цервикальной дислокации с соблюдением «Правил работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных приказом МЗ России.  The experimental material thus obtained in the form of a substance of IAS was parenterally administered to laboratory animals — guinea pigs and laboratory rats randomly selected without syngenic inbred lines. The experiment involved 27 healthy animals (14 guinea pigs (350-450 g) and 13 laboratory rats (250-400 g)). The experiment was conducted on young (2-3 months) apatogenic animals. Animals were kept in accordance with the rules of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for scientific purposes. At the end of the experiment, the animals were slaughtered by the method of cervical dislocation in compliance with the "Rules for the use of experimental animals", approved by order of the Ministry of Health of Russia.
В группе морских свинок определили контроль, группу из 3 животных, у одного из которых был осуществлен забор ткани печени, из которой было получено заявляемым способом ИАВ. Эта ткань также исследовалась электронной микроскопией и была принята за ультраструктурный контрольный образец и эталон неповрежденной ткани нормальной печени животного, с которым сравнивались экспериментальные образцы. Образцы тканей печени фиксировали в 2,3 % растворе глютаральдегида на 0,1 М какодилатном буфере в течение 1 ч с дофиксацией в 1% Os04 по G. Palade (1952). После дегидратации препарат заливали в эпоксидные смолы методом A. Spurr (1969). Ткань контрастировали в кусочках 0,5 % раствора уранилацетата и на сеточках по F. Reynolds (1963). Срезы готовили на ультратоме LKB. Препараты исследовали на микроскопе Hitachi HU-12 А при ускоряющем напряжении 75 кВ. In the group of guinea pigs, a control was determined, a group of 3 animals, one of which was sampled by liver tissue, from which IAV was obtained by the claimed method. This tissue was also examined by electron microscopy and was taken as the ultrastructural control sample and the standard of intact tissue of the normal liver of the animal, with which experimental samples were compared. Liver tissue samples were fixed in a 2.3% glutaraldehyde solution in 0.1 M cacodilate buffer for 1 h with additional fixation in 1% Os04 according to G. Palade (1952). After dehydration, the drug was poured into epoxy resins by A. Spurr (1969). The tissue was contrasted in pieces of a 0.5% solution of uranyl acetate and on nets according to F. Reynolds (1963). Slices were prepared on an LKB ultratome. The preparations were examined using a Hitachi HU-12 A microscope at an accelerating voltage of 75 kV.
У всех животных забиралась кровь для исследования сыворотки на уровень противорганных противопеченочных аутоантител и противотканевых аутоантител к тканям сердца, легких, мозга и почек. Ниже приведена таблица 4 усредненных значений исходных титров аутоантител к тканям внутренних органов в подгруппах экспериментальных животных - тканям сердца, легких, печени и почек.  Blood was taken from all animals to examine the serum for the level of anti-organ antihepatic autoantibodies and anti-tissue autoantibodies to the tissues of the heart, lungs, brain and kidneys. Below is a table of 4 averaged values of the initial titers of autoantibodies to tissues of internal organs in subgroups of experimental animals - tissues of the heart, lungs, liver and kidneys.
Таблица 4.
Figure imgf000050_0001
Table 4.
Figure imgf000050_0001
Для выявления уровня противотканевых противорганных аутоантител у крыс проводились классические серологические иммунологические реакции, а также использовались методы иммунных реакций, в которых позитивные реакции выявлялись колорометрически и могли быть приведены к качественным или количественным показателям в зависимости от текущей лабораторной задачи. Реакции проводились по традиционной методике, в которой в качестве маркера использовалось ИАВ, полученное заявляемым способом. Для интерпретации значений титров были использованы ранее приведенные рекомендации. Следует сделать общее заключение, что уровень титров аутоантител к обследуемым тканям внутренних органов экспериментальных животных не выходит за рамки физиологической нормы. Внутренние органы не имеют лабораторных данных, позволяющих расценивать их как поврежденные или больные.  Classical serological immunological reactions were carried out to identify the level of antitumor organ-specific autoantibodies in rats, and immune response methods were used in which positive reactions were detected colorimetrically and could be brought to qualitative or quantitative indicators depending on the current laboratory task. The reactions were carried out according to the traditional method, in which IAV obtained by the claimed method was used as a marker. For the interpretation of the titer values, the previously given recommendations were used. A general conclusion should be made that the level of titers of autoantibodies to the examined tissues of the internal organs of experimental animals does not go beyond the physiological norm. Internal organs do not have laboratory data to treat them as damaged or diseased.
Далее всем животным экспериментальной группы (11 морских свинок и 12 крыс) было введено заявляемое ИАВ в начальной расчетной дозе 0,01 мкг. Через 4 - 6 часов двигательная и пищевая активность всех животных уменьшилась, в экспериментальной подгруппе крыс расстройства возникли на 1-1,5 часа раньше. Через 12-18 часов двигательная и пищевая активность морских свинок стала восстанавливаться до исходной. Все животные пережили первичную дозу введенного вещества в течение минимум 48 часов. В экспериментальной группе крыс двигательная и пищевая активность полностью не восстановилась через 24 часа, двое животных пали, 10 животных пережили 48 часов. Further, all the animals of the experimental group (11 guinea pigs and 12 rats) were injected with the claimed IAV in an initial calculated dose of 0.01 μg. After 4-6 hours, the motor and nutritional activity of all animals decreased; in the experimental subgroup of rats, disorders arose 1-1.5 hours earlier. After 12-18 hours, the motor and nutritional activity of guinea pigs began to recover to the original. All animals survived the initial dose of the administered substance for a minimum of 48 hours. In the experimental group rats motor and nutritional activity did not fully recover after 24 hours, two animals died, 10 animals survived 48 hours.
Через 48 часов 6 морским свинкам и 7 крысам, введена повторно расчетная полная доза исследуемого вещества, по ранее разработанной схеме после премедикации преднизолоном. Через 24 часа после повторного введения вещества (72 час эксперимента) в экспериментальной подгруппе морских свинок пало 2 животных, четверо животных перенесли введение препарата повторно. Двое из пяти животных, которым было осуществлено введение вещества 72 часа назад, вновь снизили двигательную и пищевую активность, трое животных, которым не проводилось повторное введение препарата, не проявляли расстройства здоровья, снижение двигательной и пищевой активности в сравнении с контрольной группой. Через 120 часов в экспериментальной подгруппе морских свинок оставались живыми 8 животных (пало животное, получившее однократно введение вещества 100 часов назад), Двое животных, из числа получивших повторное введение вещества, имели болезненный вид: не двигались и не питались. Они пали в течение ближайших 12-16 часов. Через 168 часов (семь суток) пали все свинки, получившие повторное введение вещества и одна свинка, получившая однократное введение вещества в первые 24 часа эксперимента.  After 48 hours, 6 guinea pigs and 7 rats were re-injected with the calculated full dose of the test substance, according to a previously developed scheme after premedication with prednisolone. 24 hours after the repeated administration of the substance (72 hours of the experiment), 2 animals died in the experimental subgroup of guinea pigs, four animals rescheduled the drug. Two out of five animals that were injected 72 hours ago again reduced motor and nutritional activity, three animals that had not been re-administered showed no health problems, and decreased motor and nutritional activity compared with the control group. After 120 hours, 8 animals remained alive in the experimental subgroup of guinea pigs (the animal died, which received a single injection of the substance 100 hours ago). Two of the animals that received the repeated administration of the substance had a painful appearance: they did not move and did not eat. They fell over the next 12-16 hours. After 168 hours (seven days), all the mumps that received repeated administration of the substance and one mumps that received a single injection of the substance in the first 24 hours of the experiment fell.
Через 48 часов, в экспериментальной подгруппе лабораторных крыс, через 1- 2 часа после введения препарата повторно погибло 3 животных, остальные пали через 6-8 часов после повторного введения вещества. Павшие животные были вскрыты и у них исследованы внутренние органы. У всех животных обнаружены признаки, которые характеризовали реакцию организма крысы на токсико- аллергическую форму шока (анафилаксический шок). Экспериментальные животные (3 крысы), которым не проводилось повторное введение вещества также пали в течение 72-80 часов эксперимента. Таким образом, в экспериментальной группе крыс погибли все животные, которым осуществлялось введение вещества. Повторное введение вещества резко усугубило состояние экспериментального животного и привело к его гибели в течение максимально 6 часов после повторного введения. Живыми остались, через 240 часов (через 10 суток), все животные из контрольных групп (крыса и морские свинки) и две свинки из экспериментальной подгруппы, получившие однократное ведение вещества в первые сутки эксперимента. Животные из экспериментальной группы морских свинок, пережившие однократное введение вещества были забиты, и у них было произведено исследование внутренних органов. При вскрытии были обнаружены локальные зоны поражения печеночной ткани у обоих животных. Они имели звездчатую форму рубцовой ткани с зоной умеренного воспаления. Эти участки из стромы печени были подвергнуты обычной и электронной микроскопии. 48 hours later, in the experimental subgroup of laboratory rats, 1–2 hours after the administration of the drug, 3 animals died again, the rest fell 6–8 hours after the repeated administration of the substance. Fallen animals were opened and their internal organs were examined. All animals showed signs that characterized the reaction of the rat organism to the toxic-allergic form of shock (anaphylaxis). Experimental animals (3 rats), which were not re-injected, also fell within 72-80 hours of the experiment. Thus, in the experimental group of rats, all animals that were injected died. Repeated administration of the substance sharply aggravated the condition of the experimental animal and led to its death within a maximum of 6 hours after repeated administration. All animals from the control groups (rat and guinea pigs) and two pigs from the experimental subgroup who received a single administration of the substance on the first day of the experiment remained alive after 240 hours (after 10 days). Animals from the experimental group of guinea pigs that survived a single injection of the substance were slaughtered, and they had a study of the internal organs. An autopsy revealed local areas of damage to the liver tissue in both animals. They had a star-shaped form of scar tissue with a zone of moderate inflammation. These sections from the stroma of the liver were subjected to conventional and electron microscopy.
На фиг.1 - 6 представлены электроннограммы ультраструктуры ткани печени животных в контрольном образце и в экспериментальной группе.  Figure 1-6 presents electron diffraction patterns of the tissue structure of the liver of animals in the control sample and in the experimental group.
В качестве основного контрольного образца ткани приведена одна из типичных микро электроннограмм образца ткани интактной печени морской свинки. На фиг. 1 представлена ультраструктура печени морской свинки в контрольном образце с 8000-кратным увеличением.  One of the typical microelectron diffraction patterns of a tissue sample of an intact guinea pig liver is given as the main control tissue sample. In FIG. 1 shows the ultrastructure of the liver of a guinea pig in a control sample with an 8,000-fold increase.
На фиг.1 видны жировые капли (Ж); просвет синусоида (С); пространство Диссе (Д); паренхиматозные печеночные клетки (П); ядро липоцита (Я); митохондрии (М). Печёночные клетки (гепатоциты) составляют около 50 - 60% массы печени морской свинки. Они имеют полиморфную полигональную форму и диаметр, равный приблизительно 30-50 мкм. Это одно-двух ядерные, реже многоядерные клетки, которые делятся путём митоза. Продолжительность жизни гепатоцитов у экспериментальных животных составляет около 150 дней. Гепатоцит граничит с синусоидом и пространством Диссе, с жёлчным канальцем и соседними гепатоцитами.  Figure 1 shows fat droplets (G); sinusoid lumen (C); Disse space (D); parenchymal liver cells (P); lipocyte nucleus (I); mitochondria (M). Hepatic cells (hepatocytes) make up about 50-60% of the guinea pig liver mass. They have a polymorphic polygonal shape and a diameter of approximately 30-50 microns. These are one or two nuclear, less often multinucleated cells that divide by mitosis. The life span of hepatocytes in experimental animals is about 150 days. The hepatocyte borders on the sinusoid and the Disse space, on the gall canaliculi and neighboring hepatocytes.
В контроле - неповрежденная ткань печени животного - паренхиматозные печеночные клетки гепатоциты четко выражены, имеют контурирующие округлые ядра и хорошую конденсацию хроматина. Мембраны контурированы, структурны, хорошо очерчены. Ядро звездчатой клетки (липоцита) имеет овальную форму и хорошо структурированную ядерную мембрану. Цитоплазма имеет хорошо различимые выросты и отложения в виде жировых «пятен». Цитоплазма заполнена электронно-плотными гранулами с неоднородной плотностью. На фиг.1 различимы митохондрии и структурный участок эндотелиальной клетки (синусоид).  In the control — intact liver tissue of the animal — parenchymal hepatic cells, hepatocytes are clearly defined, have contouring rounded nuclei and good chromatin condensation. Membranes are contoured, structural, well defined. The nucleus of a stellate cell (lipocyte) has an oval shape and a well-structured nuclear membrane. The cytoplasm has clearly distinguishable outgrowths and deposits in the form of fat “spots”. The cytoplasm is filled with electron-dense granules with an inhomogeneous density. Figure 1 distinguishes mitochondria and the structural site of the endothelial cell (sinusoid).
Были получены разведения заявляемого ИАВ 0,1 мкг -10 мл. Полученный раствор вещества вводился животным из расчета полной дозы 0,01 мкг на каждые 100 г массы тела животного дробно, подкожно и внутримышечно с интервалом 30 мин, начиная с дозы 0,01 мкг. В качестве премедикации применяли преднизолон 5 мг внутримышечно за 1 час до введения вещества, всем животным без учета массы тела и вида животного. Кровь животного забирали до введения вещества и далее повторно через сутки, определяя значения уровней аутоантител к ткани печени, сердца и легких. Наблюдение за животными проводили в период всего действия, оказываемого веществом на животное, после введения начальной дозы. Dilutions of the inventive IAV of 0.1 μg -10 ml were obtained. The resulting solution of the substance was administered to animals at the rate of a total dose of 0.01 μg for every 100 g of animal body weight fractionally, subcutaneously and intramuscularly with an interval of 30 minutes, starting with a dose of 0.01 μg. Prednisone 5 mg intramuscularly 1 hour before the substance was used as premedication for all animals without regard to body weight and type of animal. The blood of the animal was taken before the introduction of the substance and then again after a day, determining the values of the levels of autoantibodies to liver tissue, heart and lungs. Observation of the animals was carried out during the entire action exerted by the substance on the animal, after the introduction of the initial dose.
При микроскопическом исследовании были выявлены участки склероза ткани, ограниченные зоной воспаления. При углубленном электронномикроскопическом исследовании была получена картина повреждения, возникающая в ткани при парентеральном введении заявляемого вещества, которое носит не обратимый характер и полностью лишает ткань типичных клеток. На фиг.2 представлена электроннограмма участка локального повреждения печени морской свинки, прижизненно возникшего под действием ИАВ из ткани печени морской свинки (увеличение х7500).  Microscopic examination revealed areas of tissue sclerosis limited to the area of inflammation. An in-depth electron microscopic examination yielded a picture of the damage that occurs in the tissue upon parenteral administration of the inventive substance, which is not reversible and completely deprives the tissue of typical cells. Figure 2 presents the electron diffraction pattern of the local damage to the liver of the guinea pig, intravitally arising under the influence of IAV from the liver tissue of the guinea pig (magnification x7500).
На фиг.2 виден результат повреждающего действия заявляемого ИАВ на идентичную ткань печени морской свинки другой особи. Такие изменения ткани могли возникнуть под действием только высокоспецифичного агента, имеющего практически полное генетическое сродство с тканью. Причем изменения носят прижизненный характер и ткань, лишенная специфических участков (паренхимы печени), склерозируется. Ткань печени, пережившая повреждающее действие заявляемым ИАВ, представляет собой цитоскелет из эндотелиальных клеток ткани печени, не содержащий гепатоцитов, содержащий остатки мембран и содержимого звездчатых клеток, полностью утративших жировые капли, напоминающих собой структуры фибробластов и миофибробластов, т.е рубцовую ткань печени.  Figure 2 shows the result of the damaging effect of the claimed IAV on the identical liver tissue of a guinea pig of another individual. Such tissue changes could occur under the action of only a highly specific agent having almost complete genetic affinity for the tissue. Moreover, the changes are intravital and the tissue, devoid of specific areas (liver parenchyma), is sclerosed. The liver tissue, which survived the damaging effect of the claimed IAV, is a cytoskeleton from endothelial cells of the liver tissue that does not contain hepatocytes, containing remnants of membranes and contents of stellate cells that completely lose fat droplets, resembling the structures of fibroblasts and myofibroblasts, i.e., scar tissue of the liver.
С учетом того, что препарат для исследования забран у живого животного, не имевшего признаков заболевания, а точнее пережившее повреждение, можно с уверенностью говорить о том, что исследуемое ИАВ из ткани печени морской свинки, при парентеральном введении оказывает изолированное воздействие на ткань печени. Причем, при вскрытии экспериментального животного не обнаружены выраженные изменения других внутренних органов, которые бы выходили за рамки принятых норм. Это обстоятельство еще раз подтверждает утверждения о том, что исследуемое вещество оказывает изолированное воздействие только на специфичную ткань, ту из которой оно получено.  Given the fact that the study drug was taken from a live animal that did not have signs of the disease, or rather survived the damage, we can confidently say that the investigated IAV from the guinea pig liver tissue, when administered parenterally, has an isolated effect on the liver tissue. Moreover, when opening an experimental animal, pronounced changes in other internal organs were not found that would go beyond the accepted standards. This circumstance once again confirms the assertion that the test substance exerts an isolated effect only on the specific tissue, the one from which it was obtained.
В ходе эксперимента все трупы животных экспериментальной подгруппы морских свинок поэтапно вскрывали и проводили патоморфологическое и патологоанатомическое исследование. Результаты вскрытия не имели выраженных отличий. Животные пали от поражения ткани печени. При вскрытии обнаруживались признаки острого некроза ткани печени, острой дистрофии, гепатита, билиарного цирроза, желтухи. Все животные потеряли от 10 % до 25 % исходного веса. During the experiment, all the corpses of animals of the experimental subgroup of guinea pigs were gradually opened and a pathomorphological and pathological study was performed. The autopsy results did not have pronounced differences. Animals fell from damage to the liver tissue. An autopsy revealed signs of acute necrosis of the liver tissue, acute dystrophy, hepatitis, biliary cirrhosis, jaundice. All animals lost 10% to 25% of their original weight.
Ниже представлен типичный результат и заключение патоморфологического и патологоанатомического исследования трупа экспериментального животного - морской свинки, павшей после введения ИАВ.  Below is a typical result and conclusion of a pathomorphological and pathoanatomical study of the corpse of an experimental animal - a guinea pig that died after the introduction of IAV.
Обнаружены единичные кровоизлияния слизистой и брюшины, выпота в плевральной полости нет, умеренный отек внутренних органов, набухание и отек лимфатических узлов портальной зоны, кровоизлияния в лимфоузлы, лимонный цвет склер и слизистых. Селезенка увеличена, плотная на ощупь с плотной полнокровной пульпой; цвет под капсулой лилово-бурый, на разрезе красно-бурый. Печень отечна, кровенаполненна, мозаичный рисунок на фоне общего краснобуро- коричневого цвета, имеются небольшие ограниченные участки оранжево-желто- белого цвета, края закруглены. Обнаруживается фибринозное воспаление капсулы печени с обильным отложением фибрина на участках поверхности печени, изменившей цвет, в виде студневидных легко отделяющихся масс. Сама печень при этом увеличена в объеме, дряблой консистенции. Желчный пузырь с тягучей темной красно-коричневой желчью. Почки отечны, капсула легко снимается, корковое вещество - темно-красное, мозговое - серо-красное. В мочевом пузыре содержится моча насыщенно желтого цвета. Сердце имеет округлую форму, плотно-эластичное, на разрезе красно-бурого цвета, сгустки крови в полостях. Миокард красного цвета, клапаны не изменены, без кровоизлияний. Легкие - розовые, несколько полнокровны, с приподнятыми над поверхностью плотными участками, без кровоизлияний под плеврой. В бронхах небольшое количество слизи. Слизистая оболочка желудка не изменена. Слизистая тонкого отдела кишечника покрыта слоем густой слизи. Головной мозг влажный, извилины хорошо контурируются, дифференцируется белое и серое вещество мозга.  Single hemorrhages of the mucous membrane and peritoneum were found, there was no effusion in the pleural cavity, moderate swelling of the internal organs, swelling and swelling of the lymph nodes of the portal area, hemorrhages in the lymph nodes, lemon color of the sclera and mucous membranes. The spleen is enlarged, tight to the touch with a dense full-blooded pulp; the color under the capsule is lilac-brown, in the section red-brown. The liver is swollen, blood-filled, a mosaic pattern on the background of a general red-brown-brown color, there are small limited areas of orange-yellow-white color, the edges are rounded. Fibrinous inflammation of the liver capsule is found with abundant deposition of fibrin on the surface of the liver, which changed color, in the form of gelatinous easily separated masses. The liver itself is thus increased in volume, flabby consistency. Gall bladder with viscous dark red-brown bile. The kidneys are swollen, the capsule is easily removed, the cortical substance is dark red, the brain is gray-red. The urinary bladder contains rich yellow urine. The heart has a rounded shape, tightly elastic, red-brown in cross section, blood clots in the cavities. The myocardium is red, the valves are not changed, without hemorrhage. The lungs are pink, somewhat full-blooded, with dense patches raised above the surface, without hemorrhages under the pleura. In the bronchi, a small amount of mucus. The mucous membrane of the stomach is not changed. The mucosa of the small intestine is covered with a layer of thick mucus. The brain is moist, the convolutions are well contoured, the white and gray matter of the brain differentiates.
Патологоанатомические диагнозы: Желтуха. Региональный геморрагический лимфаденит. Острый гепатит. Признаки билиарного цирроза.  Pathological diagnoses: Jaundice. Regional hemorrhagic lymphadenitis. Acute hepatitis. Signs of biliary cirrhosis.
Экспериментальное заключение: Первичное острое изолированное повреждение ткани печени, вторичные изменения тканей внутренних органов.  Experimental conclusion: Primary acute isolated damage to the liver tissue, secondary changes in the tissues of the internal organs.
Лабораторные данные оценки уровней аутоантител к тканям внутренних органов в образце сыворотки крови морской свинки, павшей через 70 часов от начала эксперимента и получившей двукратное введение исследуемого вещества, представлены в Таблице 5. Таблица 5. Laboratory data on the assessment of levels of autoantibodies to tissues of internal organs in a blood serum sample of guinea pig that fell after 70 hours from the start of the experiment and received a twofold injection of the test substance are presented in Table 5. Table 5.
Figure imgf000055_0001
Figure imgf000055_0001
Из таблицы 5 видно, что титры аутоантител к ткани сердца и легких выше нормы, также как и значения титров аутоантител к ткани почек, что может свидетельствовать об остром повреждении или заболевании внутренних органов. Но прежде всего, обращает на себя внимание титр аутоантител к ткани печени, который свидетельствует о прямом остром и тяжелом ее повреждении и лизисе. Следует отметить, что в качестве маркера лабораторного агента в иммунной реакции использовано исследуемое вещество.  From table 5 it is seen that the titers of autoantibodies to the tissue of the heart and lungs are higher than normal, as well as the values of the titers of autoantibodies to the tissue of the kidneys, which may indicate acute damage or disease of the internal organs. But first of all, the titer of autoantibodies to liver tissue, which indicates direct acute and severe damage and lysis, is noteworthy. It should be noted that the test substance was used as a marker of a laboratory agent in the immune response.
Далее представлены результаты этапной электронной микроскопии ткани печени, подвергшейся воздействию исследуемого вещества. Препараты ткани печени для электронной микроскопии готовили по выше описанной методике. Исследования ткани печени проводились этапно у павших животных.  The following are the results of step electron microscopy of liver tissue exposed to the test substance. Liver tissue preparations for electron microscopy were prepared according to the method described above. Studies of liver tissue were carried out in stages in dead animals.
На фиг.З представлена электроннограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки, подвергшейся двукратному введению исследуемого вещества, и павшей через 100 часов начала эксперимента. Увеличение х8000.  On Fig.3 presents an electron diffraction pattern of the tissue structure of the liver of a guinea pig, subjected to a twofold administration of the test substance, and fallen after 100 hours of the start of the experiment. X8000 magnification.
Приводим данные исследования ткани печени экспериментального животного (морской свинки), подвергшейся, и павшей через 100 часов после начала эксперимента (ткань печени при 8000 -кратном увеличении электронным микроскопом).  We present the data of a study of the liver tissue of an experimental animal (guinea pig) that has undergone and died 100 hours after the start of the experiment (liver tissue at 8000-fold magnification using an electron microscope).
На фиг.З виден результат повреждающего действия агента (исследуемого вещества по п.1). Видна возникающая баллонная дистрофия печеночных клеток, лизис и повреждения клеточных мембран, разрушение и гибель ядерного аппарата, цитоплазмы и клеточных элементов, с полным или частичным выходом продуктов лизиса в межуточную ткань и внутренние среды органа и организма. Заявляемое ИАВ оказывает специфическое повреждающее воздействие на ткань печени. Такие изменения могут приводить к последующей деструкции ткани, нарушению клеточных отношений внутри ткани, с возможностью склерозирования поврежденных участков.  In Fig.3, the result of the damaging effect of the agent (the test substance according to claim 1) is visible. Visible balloon dystrophy of hepatic cells, lysis and damage to cell membranes, destruction and death of the nuclear apparatus, cytoplasm and cellular elements, with a complete or partial release of lysis products into the interstitial tissue and internal environments of the organ and body, are visible. The inventive IAV has a specific damaging effect on liver tissue. Such changes can lead to subsequent destruction of the tissue, disruption of cellular relationships within the tissue, with the possibility of sclerotherapy of damaged areas.
На электроннограмме (фиг. 4, увеличение х5600) другого препарата - видно повреждение, возникшее в ткани печени морской свинки, павшей через 72 часа начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества. На фиг. 4 видно скопление ядерного хроматина и участки разрыва, повреждения клеточных мембран. On the electron diffraction pattern (Fig. 4, magnification x5600) of another drug - damage is seen that occurred in the liver tissue of the guinea pig, which fell 72 hours after the start of the experiment after repeated administration of the test substance. In FIG. four accumulation of nuclear chromatin and rupture sites, damage to cell membranes are visible.
На следующем препарате, полученном из ткани печени морской свинки, также павшей через 72 часа начала эксперимента после повторного введения исследуемого вещества (фиг.5 - электроннограмма с 8200-кратным увеличением) видны зоны скопления филаментов, мозаично упорядоченной формы, характеризующие цитоплазмическую конденсацию белковых структур, коллагенизация пространства Диссе, разрозненные участки филаментов и ядра хроматина, расположенные за пределами клеточной мембраны, капли жира и картина баллонной дистрофии печеночных клеток, конгломерат клеток-теней, дистрофически измененных клеток паренхимы. Ультраструктурный анализ клеток- теней показал, что первым признаком деструкции являлось разрушение ядерной мембраны, затем возникал лизис хроматина при еще относительно сохранной цитоплазме, трансформация цитоплазмы и последовательная ее дистрофия, с формированием картины баллонной дистрофии гепатоцита. Такая стадийность повреждения печеночных клеток видна на фиг. 5.  On the next preparation, obtained from liver tissue of guinea pig, which also died 72 hours after the start of the experiment after repeated administration of the test substance (Fig. 5 is an electron diffraction pattern with an 8,200-fold increase), filament accumulation zones of a mosaic ordered shape characterizing cytoplasmic condensation of protein structures are visible, collagenization of the Disse space, disparate sections of filaments and chromatin nuclei located outside the cell membrane, droplets of fat and a picture of balloon dystrophy of liver cells, conglo a merate of shadow cells, dystrophically altered parenchyma cells. Ultrastructural analysis of shadow cells showed that the first sign of destruction was the destruction of the nuclear membrane, then chromatin lysis occurred while the cytoplasm was still relatively intact, transformation of the cytoplasm and its subsequent degeneration, with the formation of a pattern of balloon dystrophy of hepatocyte. Such staged damage to the liver cells is visible in FIG. 5.
Таким образом, визуализируются гепатоциты различных размеров, отсутствуют их полиморфные и сердцевидные формы. Все гепатоциты имеют круглоовальную форму, что может свидетельствовать о повышении внутриклеточного давления в ответ на возникшее повреждение внутриклеточной структуры и клеточных элементов. Этими обстоятельствами может обуславливаться и различная степень концентрации хроматина внутри клетки. Видны повреждения клеточных мембран. Мембраны имеют различную толщину, что также свидетельствует об их участии в процессе повреждения клетки. Часть гепатоцитов имеет признаки баллонной дистрофии, а в ряде клеток виден лизис их цитоплазмы. Ядра звездчатых клеток деформированы, их мембраны неоднородны и повреждены, цитоплазма неоднородна. Капли жира и ядра хроматина в межуточной ткани. Отсутствия ядер внутри подавляющего количества гептоцитов. Картина свидетельствует об этапности повреждения ткани, что в свою очередь позволяет говорить о возможности осуществлять этапное и дозированное воздействие на процессы лизиса ткани, возможности оценивать и эффективно влиять на силу и величину наносимого повреждения.  Thus, hepatocytes of various sizes are visualized, their polymorphic and heart-shaped forms are absent. All hepatocytes have a circular oval shape, which may indicate an increase in intracellular pressure in response to the damage to the intracellular structure and cellular elements. These circumstances may be due to a different degree of chromatin concentration inside the cell. Damage to cell membranes is visible. The membranes have different thicknesses, which also indicates their participation in the process of cell damage. Some hepatocytes have signs of balloon dystrophy, and in a number of cells lysis of their cytoplasm is visible. The nuclei of stellate cells are deformed, their membranes are heterogeneous and damaged, and the cytoplasm is heterogeneous. Drops of fat and chromatin core in the interstitial tissue. The absence of nuclei within the vast majority of heptocytes. The picture indicates the stages of tissue damage, which in turn allows us to talk about the possibility of a staged and dosed effect on the processes of tissue lysis, the ability to evaluate and effectively influence the strength and magnitude of the damage done.
На фиг. 6 приведена электроннограмма ультраструктуры ткани печени морской свинки, павшей через 132 часа после начала эксперимента и получившая двухкратную дозу исследуемого вещества. Электроннограмма сделана при 8000 - кратном увеличении. In FIG. Figure 6 shows the electron diffraction pattern of the guinea pig liver tissue ultrastructure that died 132 hours after the start of the experiment and received a double dose of the test substance. The electron diffraction pattern was made at 8000 - fold magnification.
На фиг. 6 видно уплотнение межуточной ткани, пространства Диссе, уплотнение внутриклеточных структур и цитоплазмы, склерозирование гепатоцита. Разрыв мембраны липотоцита и выраженные участки ее утолщения, наряду с конденсацией и уплотнением внутренней структуры звездчатой клетки, может характеризоваться как начавшийся процесс склерозирования ткани, подвергавшейся дистрофии и некрозу. Это может свидетельствовать о прижизненно начавшихся процессах внутри органа, ведущих к восстановлению жизнеспособности ткани после повреждения, локальности повреждения.  In FIG. Figure 6 shows the compaction of the interstitial tissue, the Disse space, the compaction of the intracellular structures and cytoplasm, and the sclerosis of the hepatocyte. A rupture of the lipocyte membrane and pronounced areas of its thickening, along with condensation and densification of the internal structure of the stellate cell, can be characterized as the onset of sclerotherapy of tissue undergoing dystrophy and necrosis. This may indicate the intravital processes that began in vivo, leading to the restoration of tissue viability after damage, locality of damage.
Таким образом, можно сделать вывод о том, что введение исследуемого заявляемого вещества, полученного из ткани печени морской свинки, приводит к изолированному повреждению паренхимы ткани печени экспериментального животного морской свинки, без повреждения других внутренних тканей организма животного. Повреждение, наносимое веществом, носит изолированный, но необратимый характер, может регулироваться по силе и объему повреждения. Экспериментальное животное способно переносить введение вещества. Экспериментальная подгруппа, объединявшая лабораторных крыс, тяжелее перенесла введение исследуемого вещества. Среди животных этой подгруппы, выживших особей, перенесших двукратное введение вещества, не было. Все животные пали не пережив 50 часов эксперимента. Через 120 часов эксперимента в экспериментальной подгруппе лабораторных крыс осталось живым единственное животное (контрольное). Контрольное животное наблюдалось до 10 суток и не имело признаков заболевания или изменений образа жизни.  Thus, we can conclude that the introduction of the studied inventive substance obtained from liver tissue of a guinea pig leads to isolated damage to the parenchyma of the liver tissue of the experimental animal guinea pig without damaging other internal tissues of the animal’s body. Damage caused by the substance is isolated, but irreversible, can be regulated by the strength and volume of damage. An experimental animal is able to tolerate the administration of a substance. The experimental subgroup of laboratory rats was more difficult to administer the test substance. Among the animals of this subgroup, there were no surviving individuals who underwent a double administration of the substance. All animals died without surviving 50 hours of the experiment. After 120 hours of the experiment, the only animal (control) remained alive in the experimental subgroup of laboratory rats. The control animal was observed up to 10 days and had no signs of disease or lifestyle changes.
Ниже представлен типичный результат и заключение патоморфологического и патологоанатомического исследования трупов экспериментальных животных - крыс.  Below is a typical result and conclusion of a pathomorphological and pathoanatomical study of the corpses of experimental animals - rats.
Обнаружены кровоизлияния слизистых и брюшины, транссудат красного цвета в плевральной полости, выраженный отек внутренних органов, набухание и отек лимфатических узлов, которые имеют сглаженность строения и серо-розовый или серо-желтый цвет, кровоизлияния в лимфоузлы, лимонный цвет склер и слизистых. Селезенка гиперплазирована: плотная, с круглыми краями, напряженной капсулой, с выбухающей плотной пульпой; цвет под капсулой лиловый, на разрезе красно-бурый. Печень припухшая, плотная, ломкая, оранжево-коричневого цвета, края закруглены. Желчный пузырь переполнен тягучей темной красно-коричневой желчью. Почки дряблые, набухшие, капсула легко снимается, края разреза не сходятся, корковое вещество - темно-красное, мозговое - серо-красное. В мочевом пузыре содержится моча густого красного с бурым оттенком цвета, не просветляющаяся при отстаивании, то есть окрашенная гемоглобином. Слизистая оболочка мочевого пузыря набухшая, с кровоизлияниями. Сердце имеет округлую форму и рыхлые бледно-красные сгустки в полостях. Миокард серо-розовый с желтоватыми участками, тусклый, легко раздавливается ручкой скальпеля; под эпикардом - кровоизлияния. Легкие - розовые, крепитирующие, с приподнятыми над поверхностью плотными участками красными и белыми с геморрагическим ободком; с диффузными кровоизлияниями под пульмональной плеврой; с небольшими очагами эмфиземы. В бронхах содержится густая розовая пена. Слизистая оболочка желудка усеяна окрашенными в черный цвет кровоизлияниями. Слизистая тонкого отдела кишечника утолщена, гиперемирована, покрыта слоем густой желтоватой слизи. Головной мозг слегка набухший, влажный, извилины сглажены. Hemorrhages of the mucous membranes and peritoneum, red transudate in the pleural cavity, severe edema of the internal organs, swelling and swelling of the lymph nodes, which have a smooth structure and gray-pink or gray-yellow color, hemorrhages in the lymph nodes, lemon color of the sclera and mucous membranes were found. The spleen is hyperplastic: dense, with round edges, a tense capsule, with a bulging dense pulp; the color under the capsule is lilac, in section red-brown. The liver is swollen, dense, brittle, orange-brown in color, the edges are rounded. The gallbladder is filled with viscous dark red-brown bile. The kidneys are flabby, swollen, the capsule is easily removed, the edges of the incision do not converge, the cortical substance is dark red, and the medulla is gray-red. The urinary bladder contains urine of a thick red color with a brown tint that does not clear when it settles, that is, it is stained with hemoglobin. The mucous membrane of the bladder is swollen, with hemorrhages. The heart has a rounded shape and loose pale red clots in the cavities. Myocardium is gray-pink with yellowish patches, dull, easily crushed by a scalpel handle; under the epicardium - hemorrhages. Lungs - pink, crepitus, with dense patches of red and white raised above the surface with a hemorrhagic rim; with diffuse hemorrhages under pulmonary pleura; with small foci of emphysema. The bronchi contain a thick pink foam. The mucous membrane of the stomach is dotted with hemorrhages painted in black. The mucosa of the small intestine is thickened, hyperemic, covered with a layer of thick yellowish mucus. The brain is slightly swollen, moist, the gyrus is smoothed.
Патологоанатомические диагнозы: Геморрагический диатез, гиперплазия селезенки, серозно-геморрагический лимфаденит, острый гепатит, желтуха, анемия, белковый нефроз, гемоглобинурия, острый альтеративный миокардит, геморрагическая пневмония, катаральный энтерит, отек мозга.  Pathological diagnoses: Hemorrhagic diathesis, spleen hyperplasia, serous hemorrhagic lymphadenitis, acute hepatitis, jaundice, anemia, protein nephrosis, hemoglobinuria, acute alternative myocarditis, hemorrhagic pneumonia, catarrhal enteritis, cerebral edema.
Экспериментальное заключение: Острое токсико-аллергическое поражение тканей внутренних органов, с преимущественным поражением легких, печени, почек.  Experimental conclusion: Acute toxico-allergic damage to tissues of internal organs, with predominant damage to the lungs, liver, and kidneys.
Лабораторные данные оценки уровней аутоантител (значения титров аутоантител) к тканям внутренних органов в образце сыворотки крови лабораторной крысы - самца, посмертно забранной через 50 часов после начала эксперимента, и павшего через 2 часа после повторного введения заявляемого вещества представлены в Таблице 6.  Laboratory data on the assessment of levels of autoantibodies (values of titers of autoantibodies) to tissues of internal organs in a blood serum sample of a laboratory rat - a male, posthumously posthumous 50 hours after the start of the experiment, and who died 2 hours after the repeated administration of the claimed substance are presented in Table 6.
Таблица 6.  Table 6.
Figure imgf000058_0001
Анализ значений титров аутоантител к тканям внутренних органов экспериментальной крысы позволяет сделать заключение об остром тяжелом общем поражении тканей внутренних органов, не совместимых с жизнью. Электронная микроскопия ткани печени крыс не проводилась.
Figure imgf000058_0001
An analysis of the titers of autoantibodies to tissues of the internal organs of an experimental rat allows us to conclude that there is an acute, severe, general damage to tissues of internal organs that are incompatible with life. Electron microscopy of rat liver tissue was not performed.
Совокупность полученных данных обследования, наблюдения и лабораторных исследований позволяют сделать следующее заключение.  The totality of the data obtained from the examination, observation and laboratory studies allow us to draw the following conclusion.
Исследуемое вещество оказывает тяжелое общее воздействие на организм экспериментального животного другого вида, приводя к несовместимым с жизнью последствиям и повреждениям внутренних органов. Поражающее действие вещества основано на типичной анафилактической реакции, приводящей к шоку и гибели животного, развивающейся в ответ на его введение, как высокочужеродного антигена. Преимущественным местом повреждения являются органы жизнеобеспечения организма экспериментального животного. Имеющееся поражение печени экспериментального животного не может убедительно свидетельствовать о локально наносимом повреждении только этой ткани.  The test substance has a severe general effect on the body of an experimental animal of a different species, leading to incompatible consequences and damage to internal organs. The damaging effect of the substance is based on a typical anaphylactic reaction leading to shock and death of the animal, developing in response to its introduction, as a highly alien antigen. The predominant site of damage is the vital organs of the body of the experimental animal. Existing liver damage in an experimental animal cannot convincingly indicate locally applied damage to only this tissue.
Проведенные исследования и эксперименты свидетельствуют о том, что: Studies and experiments indicate that:
- заявляемое ИАВ лишено аллогенных свойств исходной ткани органа за счет чего оказывает высокоспецифическое действие на иммунную (аутоиммунную) систему организма, проявляющееся в том, что иммунная система организма способна продуцировать антитела в ответ на его введение. - the claimed IAV is deprived of the allogeneic properties of the original organ tissue due to which it has a highly specific effect on the body's immune (autoimmune) system, which is manifested in the fact that the body's immune system is capable of producing antibodies in response to its introduction.
- заявляемое ИАВ имеет хотя бы один антигенный (частично или парциально сингенный, органносингенный) участок в своей композиции, который вызывает изолированный высокоспецифический ответ иммунной (аутоиммунной) системы организма того же вида, проявляющийся в том, что происходит лизис аналогичной ткани внутри живого организма, в ответ на его парентеральное введение (иммунизацию) .  - the claimed IAV has at least one antigenic (partially or partially syngeneic, organosyngeneous) region in its composition that causes an isolated highly specific response of the body’s immune (autoimmune) system of the same species, which is manifested in the fact that a similar tissue is lysed inside a living organism, response to its parenteral administration (immunization).
- заявляемое ИАВ вызывает высокоспецифический ответ иммунной (аутоиммунной) системы в организмах индивидов других видов, проявляющийся в том, что происходит анафилактическая шоковая реакция живого организма в ответ на его парентеральное введение (иммунизацию), приводящая к гибели организма как реакция на введение чужеродного антигена.  - the claimed IAV causes a highly specific response of the immune (autoimmune) system in the organisms of individuals of other species, manifested in the fact that anaphylactic shock reaction of a living organism occurs in response to its parenteral administration (immunization), leading to the death of the body as a reaction to the introduction of a foreign antigen.
- заявляемое ИАВ имеет хотя бы один антигенный (сингенный) участок в своей композиции, который способен выявлять высокоспецифические антитела (аутоантитела) против ткани живого организма, циркулирующие во внутренних биологических жидкостях организма (в том числе сыворотке крови) того же вида, в лабораторных иммунных реакциях, образуя комплексы антиген-антитело. - the claimed IAV has at least one antigenic (syngeneic) region in its composition that is capable of detecting highly specific antibodies (autoantibodies) against the tissue of a living organism, circulating in the body’s internal body fluids (including blood serum) of the same species, in laboratory immune responses, forming antigen-antibody complexes.
- происходящий изолированный лизис аналогичной ткани внутри живого организма в ответ на парентеральное введение (иммунизацию) заявляемого вещества обусловлен нарастающим титром частично сингенных веществу противотканевых, противорганных антител (аутоантител).  - the occurring isolated lysis of similar tissue inside a living organism in response to the parenteral administration (immunization) of the claimed substance is due to the increasing titer of partially syngenic to the substance of the anti-tissue, anti-organ antibodies (autoantibodies).
Таким образом, заявляемое вещество характеризуется следующей совокупностью свойств: способностью вызывать иммунный ответ, вызывать изолированный лизис типичных клеток той ткани, к которой оно принадлежит и (или) из которой оно получено, не вызывая повреждения не типичной ткани (стромы ткани органа) и других органов в живом организме. Заявляемая совокупность свойств позволяет использовать заявляемое ИАВ в качестве маркера при осуществлении лабораторного контроля за:  Thus, the claimed substance is characterized by the following set of properties: the ability to induce an immune response, to cause isolated lysis of typical cells of the tissue to which it belongs and (or) from which it is obtained without causing damage to non-typical tissue (organ stroma tissue) and other organs in a living organism. The inventive combination of properties allows you to use the claimed IAV as a marker in the implementation of laboratory control for:
- уровнем повреждения ткани, путем выявления уровня продуцируемых организмом аутоантител к веществу и являющихся противотканевыми аутоантителами организма к такой же ткани; - the level of tissue damage, by detecting the level produced by the body of autoantibodies to the substance and which are anti-tissue autoantibodies of the body to the same tissue;
- состоянием здоровья индивидуума, путем выявления повреждений тканей внутренних органов путем лабораторного определения уровня продуцируемых организмом противотканевых аутоантител при болезни и в состоянии здоровья.  - the state of health of the individual, by detecting damage to tissues of the internal organs by laboratory determination of the level of anti-tissue autoantibodies produced by the body in case of illness and in health.
Пример 1. Выявление маркера ткани печени человека с помощью иммуноферментного анализа.  Example 1. Identification of a marker of human liver tissue using enzyme-linked immunosorbent assay.
Выявление антител на маркер вещества ткани печени человека в сыворотке крови с помощью иммуноферментного анализа.  Detection of antibodies to a marker of a substance of human liver tissue in blood serum using enzyme-linked immunosorbent assay.
Наличие специфических аутоантител (класса IgM) к ткани печени человека в сыворотке крови человека было протестировано и установлено с помощью проведения иммуноферментного анализа. Проведены серии экспериментов с веществом, полученным из ткани печени человека. На фиг.1 1 представлены кривые полученных данных. При ИФА выявлены: Специфические аутоантитела к ткани печени человека класса IgM.  The presence of specific autoantibodies (IgM class) to human liver tissue in human serum was tested and established using enzyme-linked immunosorbent assay. A series of experiments were carried out with a substance obtained from human liver tissue. Figure 1 1 presents the curves of the obtained data. When ELISA revealed: Specific autoantibodies to human liver tissue of the IgM class.
Пример 2. Использование веществ по п.1, полученных способом по п. 2, для оценки уровня антител-аутоантител тканей органов в РИГА (реакции непрямой гемокоагуляции). Реакция непрямой гемокоагуляции проводится по классической методике. Для сенсибилизации формализированных эритроцитов барана выбираются вещества по п.1, полученные способом по п.2. В приводимом примере использованы вещества, полученные из тканей сердца, печени, почек, желудка, ткани сосудов плаценты и хориона. Результат произошедшего взаимодействия веществ по п.1, полученных способом по п.2, и противоорганных антител-аутоантител в разведениях сыворотки крови пациента оценивали визуально через 90 мин. после постановки реакции. Example 2. The use of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, for assessing the level of antibodies-autoantibodies of organ tissues in RIGA (indirect hemocoagulation reaction). The reaction of indirect hemocoagulation is carried out according to the classical method. For sensitization of formalized sheep erythrocytes, the substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, are selected. In this example, we used substances obtained from tissues of the heart, liver, kidneys, stomach, vascular tissue of the placenta and chorion. The result of the interaction of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, and anti-organ antibodies-autoantibodies in dilutions of the patient's blood serum was evaluated visually after 90 minutes. after staging the reaction.
Результат вносили в протокол. Исходили из следующих положений:  The result was recorded in the protocol. We proceeded from the following provisions:
+ - положительный результат, оценивается визуально по характерной форме «зонтик»;  + - a positive result, evaluated visually by the characteristic shape of the "umbrella";
± - пограничный результат, «не зонтик и не кольцо»;  ± - borderline result, “not an umbrella and not a ring”;
D - негативный результат, оценивается визуально по характерной форме «кольцо». Для исследования была отобрана сыворотка крови пациента, после проведения исследования выявлен титр аутоантител к тканям исследованных органов (фиг. 12).  D - negative result, evaluated visually by the characteristic shape of the "ring". The patient's blood serum was selected for the study, after the study, the titer of autoantibodies to the tissues of the organs examined was revealed (Fig. 12).
Результат обобщен протоколом, который приведен ниже в таблице 7.  The result is summarized by the protocol, which is shown below in table 7.
Таблица 7. Протокол уровней антител-аутоантител к тканям в реакции РИГА Table 7. Protocol levels of antibodies-autoantibodies to tissues in the reaction of RIGA
Пациент О., возраст 36 лет, диагноз - беременность 40 нед, гестоз средней степени Patient O., age 36 years, diagnosis - pregnancy 40 weeks, moderate gestosis
Figure imgf000061_0001
Желудок (гладко + + ±
Figure imgf000061_0001
Stomach (smooth + + + ±
мышечная ткань) muscle)
С ГаЗ With gas
Почки (ткань + + + ±  Kidneys (tissue + + + ± ±
паренхимы) В JV» 2 parenchyma) In JV »2
Кожа (Эпидерма) Исследование не проводилось  Skin (epidermis) study not conducted
Яички Testis Исследование не проводилось Testis Testis Not Conducted
(муж.) (husband.)
Плацента + + + + + + + + Placenta + + + + + + + + +
(сосуды) D JV»4 (vessels) D JV »4
Плацента Исследование не проводилось The placenta No study
(оболочки) (shell)
Плацента (хорион) + + + + + + + + FJV26 Placenta (Chorion) + + + + + + + + + FJV26
В протоколе имеются высокие титры антител - аутоантител к ткани плаценты (хорион и сосуды). Плацента - транзиторный орган, который отторгается при родах. У обследуемого беременность 40 недель. Заключение: зрелая плацента, идет ее отторжение. Пациент вступил в роды. У данного пациента началась родовая деятельность через 6 часов после проведения анализа. The protocol contains high titers of antibodies - autoantibodies to placental tissue (chorion and blood vessels). The placenta is a transient organ that is rejected during childbirth. The subject has a pregnancy of 40 weeks. Conclusion: mature placenta, is rejection. The patient has entered into labor. This patient started labor after 6 hours after the analysis.
Пример 3. ВЭЖХ анализ веществ по п.1, полученных способом по п.2 из ткани печени и почек человека.  Example 3. HPLC analysis of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2 from human liver and kidney tissue.
Были проведены исследования преподготовленных лиофилизированных образцов веществ по п.1, полученных способом по п.2, из тканей различных органов. Образцы растворяли в 25 mM Tris-HCl буфере (рН 7.2) до концентрации 0,5 мг/мл, дополнительно обессоливали на колонке PD-10 (содержащей Sephadex G-25). ВЭЖХ анализ проводили с помощью хроматографической системы SmartLine 5000 (ICnauer) на колонке TSK Bioassist-Q (5><50мм), в следующих условиях: буфер - 25 mM Tris- HCl (рН 7.2); линейный градиент - 0-е- 1 М NaCl в течение 60 мин; скорость - 0,5 мл/мин; детекция фотометрическая на длине волны 280 нм; объем наносимого образца - 1 мл.  Studies were conducted on prepared lyophilized samples of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 2, from tissues of various organs. Samples were dissolved in 25 mM Tris-HCl buffer (pH 7.2) to a concentration of 0.5 mg / ml, further desalted on a PD-10 column (containing Sephadex G-25). HPLC analysis was performed using a SmartLine 5000 chromatographic system (ICnauer) on a TSK Bioassist-Q column (5> <50 mm), under the following conditions: buffer — 25 mM Tris-HCl (pH 7.2); linear gradient - 0-e - 1 M NaCl for 60 min; speed - 0.5 ml / min; photometric detection at a wavelength of 280 nm; the volume of the applied sample is 1 ml.
В процессе исследования было обнаружено, что характерным для всех образцов веществ по п. 1, получаемых способом по п.2, является наличие 2-3 доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при использованном значении рН, а также различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце хроматографии, при устойчивых цифрах ранжирования пиков в диапазонах 17±2,5; 33,5±2,5 и 52,5±2,5 mAU (фиг.7 и 8 ( почки и печень, графики ВЭЖХ). During the study, it was found that characteristic of all samples of substances according to p. 1, obtained by the method according to p. dominant fractions of alkaline components that interact weakly with the anionic column at the used pH value, and also differ in the charge of acidic major components, eluting in the middle and at the end of chromatography, with stable peak ranking numbers in the ranges of 17 ± 2.5; 33.5 ± 2.5 and 52.5 ± 2.5 mAU (Figs. 7 and 8 (kidneys and liver, HPLC plots).
Пример 4. Электрофоретический анализ веществ по п.1, полученных способом по п.6.  Example 4. Electrophoretic analysis of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6.
Для электрофореза отобраны образцы веществ по п.1, полученные способом по п.6, из ткани желудка кролика, ткани желудка человека, ткани печени человека, ткани почек человека, ткани мозга человека, ткани яичек человека. Образцы расположены для электрофореза в порядке, приведенном выше, слева направо, и справа на фиг.8, приведена шкала оценки в атомных единицах массы (кДа). Электрофоретический анализ образцов веществ, осуществляли стандартным методом в 12,5%-ном полиакрилаламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия, по окончании электрофореза гели окрашивали с помощью азотнокислого серебра. Полученный анализ выявил наличие характерных для всех образцов, по меньшей мере, двух мажорных полос с Мм примерно 10 и 60 кДа (Фиг.9).  For electrophoresis, samples of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, were selected from rabbit stomach tissue, human stomach tissue, human liver tissue, human kidney tissue, human brain tissue, human testicular tissue. Samples are arranged for electrophoresis in the order described above, from left to right, and from right to Fig. 8, the scale of assessment in atomic units of mass (kDa) is given. Electrophoretic analysis of samples of substances was carried out by the standard method in a 12.5% polyacrylamide gel in the presence of sodium dodecyl sulfate; after electrophoresis, the gels were stained with silver nitrate. The analysis revealed the presence of characteristic for all samples of at least two major bands with mm of about 10 and 60 kDa (Fig.9).
Пример 5. ИФА на твердом носителе, иммуноДОТ-анализ.  Example 5. ELISA on a solid carrier, immuno-DOT analysis.
Последовательные двойные разведения анализируемых веществ (взятых в исходной концентрации 100 мкг/мл) наносили на нитроцеллюлозную мембрану в центр очерченного квадрата со стороной 5 мм и выдерживали образцы в сухожаровом шкафу в течение 5 мин при 40°С. После блокирования мест неспецифической сорбции в течение 30 мин при комнатной температуре в 1%-ном растворе БСА (бьший сывороточный альбумин), образцы помещали в конверт из пленки «Parafilm» и инкубировали в сыворотке крови пациента, внесенной в забуференный фосфатами раствор (ЗФР) (1 : 1), содержащий 0.01% БСА и 0.02% Твин-20 и инкубировали в течение ночи при 4°С. После отмывания ЗФР, содержащим 0.02% Твин-20 (3 раза по 15 мин), образцы помещали в раствор меченых пероксидазой овечьих антител к IgG или IgM человека, содержащий 0.01% БСА и 0.02% Твин-20 (конечная концентрация данных антител составляла 2 мкг/мл). После двукратного отмывания ЗФР (содержащим 0.02% Твин-20) мембраны с нанесенными образцами помещали в раствор субстрата для оценки пероксидазной активности, представляющий собой 0.03% диаминобензидина и 0.02% перекиси водорода в Трис-HCl буфере (рН 8.2). Оценивали полученные результаты. Было установлено, что даже кратковременная иммобилизация образцов на твердой фазе позволяет получать достоверный результат по выявлению противоорганных, противотканевых антител у здоровых людей, давать заключения о состоянии здоровья, обследуемых тканей, прогнозировать ближайшие результаты здоровья. Serial double dilutions of the analyzed substances (taken at the initial concentration of 100 μg / ml) were applied to the nitrocellulose membrane in the center of the outlined square with a side of 5 mm and the samples were kept in a dry oven for 5 min at 40 ° C. After blocking the sites of non-specific sorption for 30 min at room temperature in a 1% solution of BSA (higher serum albumin), the samples were placed in an envelope from Parafilm film and incubated in the patient's blood serum in phosphate-buffered solution (PBS) ( 1: 1) containing 0.01% BSA and 0.02% Tween-20 and incubated overnight at 4 ° C. After washing off PBS containing 0.02% Tween-20 (3 times 15 min), the samples were placed in a solution of peroxidase-labeled sheep antibodies to human IgG or IgM containing 0.01% BSA and 0.02% Tween-20 (the final concentration of these antibodies was 2 μg / ml). After washing twice with PBS (containing 0.02% Tween-20), membranes with deposited samples were placed in a substrate solution for assessing peroxidase activity, which was 0.03% diaminobenzidine and 0.02% hydrogen peroxide in Tris-HCl buffer (pH 8.2). The results were evaluated. It was found that even short-term immobilization of samples on the solid phase allows one to obtain a reliable result in identifying anti-organ, anti-tissue antibodies in healthy people, to give conclusions about the state of health, the tissues being examined, and to predict the immediate health results.
Приводим примеры результата иммуноДОТ анализа у здоровых волонтеров И. и Ш. (фиг. 10), проведенного на твердом носителе с анти IgM и анти IgG, при разведении веществ по по п. 1, полученных способом по п.6, от 200 мкг/мл до 12,5 мкг/мл, из 5 тканей (желудка кролика, печени, почек, яичек и мозга человека).  We give examples of the result of the immunodot analysis in healthy volunteers I. and Sh. (Fig. 10), carried out on a solid carrier with anti IgM and anti IgG, when diluting substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, from 200 μg / ml up to 12.5 μg / ml, from 5 tissues (rabbit stomach, liver, kidneys, testicles and human brain).
Заявляемая технология может быть использована также для профилактики осложнений при вакцинации.  The inventive technology can also be used to prevent complications during vaccination.
Применение заявляемого способа диагностики для отбора пациентов при проведении массовых вакцинации позволяет выявить пациентов со скрытой патологией, у которых нет клинических признаков имеющихся заболеваний. Большинство вакцин предназначено для введения здоровым людям или пациентам, на течение заболеваний или состояние которых вакцина не окажет негативного влияния. Ситуация, когда «осложнения после вакцинации перевешивают положительные эффекты» возможна, но только в том случае, если организм не в состоянии перенести вакцину (имеются скрытые расстройства здоровья или заболевания внутренних органов, которые на момент вакцинации не имеют клинического проявления и не могут быть выявлены обычными способами лабораторной диагностики). Поэтому вакцинопрофилактика имеет долю риска для внешне здорового организма и существует вероятность того, что иммунизация не даст желаемого результата, когда факторы риска могут значительно усугубить скрыто протекающие заболевания в организме человека, либо даже привести к его смерти. В настоящее время введены относительные (временные) противопоказания при массовых вакцинациях людям, страдающим любыми острыми заболеваниями или имеющими обострения хронических болезней. Таким людям вакцины не вводят для обеспечения их максимальной безопасности и уменьшения риска развития осложнений при действии вакцины, т.к. их болезнь может быть значительно усилена негативным действием этих препаратов и привести к тяжелым осложнениям. Однако, надежных способов выявления обострения хронических заболеваний или скрытого периода (продромы) острого заболевания в настоящий момент нет. Использование веществ по п.1, полученных способом по п.6, может применяться для выявления острых заболеваний и для выявления ожидаемых фаз обострения хронических болезней в латентной фазе процесса (период мнимого клинического благополучия). Для этих целей проводится диагностика состояния здоровья предполагаемого пациента и осуществляется постановка лабораторной пробы сразу с несколькими веществами по п.1, полученными из тканей разных органов. Определяют уровень противотканевых, противоорганных антител-аутоантител к основным (жизненно важным) органам индивидуума (сердцу, сосудам, печени, почкам, легким, желудку, кишечнику, вилочковой, щитовидной и поджелудочной железам) одним из описанных в заявке способом. Полученный результат анализируется и если выявленные уровни выявленных антител-аутоантител (по шкале) не превышают значений титров разведения 1 :32, а абсолютные значения показателей определяются ниже чем 25 мкг/мл, по всем исследованным тканям, то делается заключение о возможности проведения вакцинации данному пациенту без риска возникновения тяжелых осложнений. Если хотя бы в одной лабораторной линии, характеризующей уровень антител-аутоантител перечисленных выше тканей, выявляются титры разведения, превышающие приведенные выше показатели, то такой пациент не должен подвергаться вакцинации из-за риска развития у него осложнений. The use of the proposed diagnostic method for the selection of patients during mass vaccination allows to identify patients with hidden pathology who have no clinical signs of existing diseases. Most vaccines are intended for administration to healthy people or patients whose course of illness or the condition of the vaccine will not adversely affect them. A situation where “complications after vaccination outweigh the positive effects” is possible, but only if the body is not able to tolerate the vaccine (there are hidden health problems or diseases of the internal organs that at the time of vaccination are not clinically manifest and cannot be detected as usual laboratory diagnostic methods). Therefore, vaccine prophylaxis has a share of risk for an apparently healthy organism and it is likely that immunization will not give the desired result when risk factors can significantly aggravate latent diseases in the human body, or even lead to his death. At present, relative (temporary) contraindications have been introduced during mass vaccinations for people suffering from any acute diseases or having exacerbations of chronic diseases. Vaccines are not given to such people to ensure their maximum safety and reduce the risk of complications from the vaccine, as their disease can be significantly exacerbated by the negative effects of these drugs and lead to serious complications. However, there are currently no reliable ways to detect an exacerbation of chronic diseases or a latent period (prodrome) of an acute disease. The use of substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, can be used for detection of acute diseases and to identify the expected phases of exacerbation of chronic diseases in the latent phase of the process (period of alleged clinical well-being). For these purposes, the diagnosis of the state of health of the intended patient is carried out and a laboratory test is carried out immediately with several substances according to claim 1, obtained from tissues of different organs. The level of anti-tissue, anti-organ antibodies to autoantibodies to the main (vital) organs of an individual (heart, blood vessels, liver, kidneys, lungs, stomach, intestines, thymus, thyroid and pancreas) is determined by one of the methods described in the application. The result is analyzed and if the detected levels of the detected antibodies-autoantibodies (on a scale) do not exceed the dilution titers of 1: 32, and the absolute values of the indicators are determined below 25 μg / ml for all the tissues examined, then a conclusion is made about the possibility of vaccination for this patient without the risk of severe complications. If dilution titers exceeding the above indicators are detected in at least one laboratory line characterizing the level of antibody antibodies of the tissues listed above, then such a patient should not be vaccinated due to the risk of developing complications.
Механизм ранней диагностики основан на способности выявлять уровни специфических IgM тканей органов в биологических пробах пациента с помощью веществ по п.1, получаемых способом по п.6, которые являются лабораторными предвестниками будущих обострений при развития тяжелого заболевания и обнаруживаются в крови за 48-120 часов до его клинического проявления.  The mechanism of early diagnosis is based on the ability to detect levels of specific IgM tissues of organs in biological samples of a patient using substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, which are laboratory precursors of future exacerbations during the development of a serious illness and are detected in the blood within 48-120 hours to its clinical manifestation.
В качестве примера раннего выявления высоких уровней антител-аутоантител у пациента, имеющего нормальные лабораторные общеклинические и биохимичесикие показатели в пробах биологических жидкостей, приводим клинический случай.  As an example of the early detection of high levels of antibody antibodies in a patient with normal laboratory general clinical and biochemical parameters in samples of biological fluids, we present a clinical case.
Клиническое наблюдение. История болезни СарНИИТО.  Clinical observation. SarnIIITO case history.
(Разрешение на опубликование данных истории болезни согласовано с лечащим врачом, руководителем лечебного учреждения и родственниками пациента). (Permission to publish case history data is agreed with the attending physician, the head of the medical institution, and the patient’s relatives).
Пациент Д., 38 лет, диагноз: Синдром Арнольда Киари. Гипоплазия спинного мозга. Данные истории болезни: Болен в течение 11 лет, когда на фоне полного здоровья появилась мышечная слабость правой верхней конечности и после длительного обследования установлен вышеуказанный диагноз. Симптомы нарастали несмотря на лечение. Последовательно присоединилась мышечная слабость во всех конечностях, мышцах туловища, дыхательной мускулатуре. Оперирован в 2006 г. на позвоночнике. Отмечалась короткая ремиссия. Последнее обострение возникло 14 дней назад, пациент госпитализирован в стационар. Состояние удовлетворительное. Жалобы на выраженную слабость, субъективное чувство нехватки воздуха из-за недостатка сил для дыхания и ограничение в возможности сделать глубокий вдох, слабость в конечностях и сильную утомляемость. Patient D., 38 years old, diagnosis: Arnold Chiari syndrome. Hypoplasia of the spinal cord. Data from the medical history: Sick for 11 years, when, against the background of full health, muscle weakness of the right upper limb appeared and after a long examination the above diagnosis was established. Symptoms increased despite for treatment. Muscle weakness in all extremities, trunk muscles, and respiratory muscles has consistently joined. Operated in 2006 on the spine. A short remission was noted. The last exacerbation occurred 14 days ago, the patient was hospitalized in a hospital. The condition is satisfactory. Complaints of severe weakness, a subjective feeling of lack of air due to lack of strength for breathing, and limited ability to take a deep breath, weakness in the limbs, and severe fatigue.
Объективно: х°= 36,0° С. Сознание ясное, ориентирован, адекватен. Общее состояние удовлетворительное. Нормостенического типа телосложения, нормального питания. Кожные покровы чистые, телесного цвета, обычной влажности. Видимые слизистые обычной влажности, бледно-розовые. Костно-мышечная система, грудные железы не изменены. Периферические лимфоузлы, щитовидная железа не увеличены. Грудная клетка правильной формы, обе половины синхронно принимают участие в акте дыхания. Форсированный вдох выполняется, в его участии принимает брюшная стенка и диафрагма. Одышки нет. ЧДД - 18-20 в 1 мин. Перкуторно над легкими ясный легочный звук, хрипов, крепитации нет; нижние границы легких не изменены. Аускультативно дыхание везикулярное. Границы сердца перкуторно не изменены. Тоны звучные, ритмичные. АД - 120/70 мм рт. ст. Пульс - 72 уд. в 1 мин, синхронный, ритмичный, удовлетворительного наполнения и напряжения. Язык обложен белым налетом, влажный. Зев не гиперемирован. Глоточные миндалины не увеличены. Живот обычной формы, при пальпации мягкий, безболезненный. Печень не увеличена. Селезенка не пальпируется. Физиологические отправления не нарушены. Симптом поколачивания по поясничной области отрицательный с обеих сторон. Снижение сухожильных рефлексов. Симптомы раздражения мозговых оболочек отсутствуют. Грубой неврологической симптоматики нет.  Objectively: x ° = 36.0 ° C. Consciousness is clear, oriented, adequate. General condition is satisfactory. Normostenic type of physique, normal nutrition. The skin is clean, flesh-colored, normal moisture. Visible mucous membranes of normal humidity, pale pink. The musculoskeletal system, the mammary glands are not changed. Peripheral lymph nodes, thyroid gland are not enlarged. The chest is of the correct form, both halves simultaneously participate in the act of breathing. A forced breath is performed, in his participation takes the abdominal wall and diaphragm. There is no shortness of breath. NPV - 18-20 in 1 min. Percussion over the lungs clear pulmonary sound, wheezing, no crepitus; the lower boundaries of the lungs are not changed. Auscultatory vesicular breathing. The borders of the heart are not percussion changed. The tones are sonorous, rhythmic. HELL - 120/70 mm RT. Art. Pulse - 72 beats. in 1 min, synchronous, rhythmic, satisfactory filling and tension. The tongue is coated in white, wet. The pharynx is not hyperemic. The pharyngeal tonsils are not enlarged. The abdomen is of the usual form, on palpation it is soft, painless. The liver is not enlarged. The spleen is not palpable. Physiological administration is not disturbed. The symptom of lumbar effusion is negative on both sides. Decreased tendon reflexes. Symptoms of irritation of the meninges are absent. There are no gross neurological symptoms.
Лабораторные данные: Laboratory data:
Общ, анализ крови: Эр.-4,96х1012/л, НЬ-155 г/л, ЦП-0,94, СОЭ-17 мм/ч; Лейкоц.- 5,7x10%, эоз.-2%, п/я-8%, с/я-61%, лимф.-22%, мон.-7%. General, blood test: Er.-4.96x10 12 / l, Hb-155 g / l, CP-0.94, ESR-17 mm / h; Leukocytosis - 5.7x10%, eos.-2%, p-I-8%, s / I-61%, lymph-22%, mon.-7%.
Биохимический анализ крови: общ. белок-72,9 г/л, альбумины-39,3 г/л, глобулины- 33,6 г/л, общ. билирубин- 14,5 мкмоль/л, креатинин-68,0 мкмоль/л, мочевина-5,0 ммоль/л, глюкоза-4,22 ммоль/л, АлТ-30,6 ед./л, АсТ-28,8 ед./л, ТГ-1,59 ммоль/л, ЛПВП-0,61 ммоль/л, ЛПНП-7,0 ммоль/л, холестерин-5,4 ммоль/л, ИА-7,8, альфа- амилаза-52,0 Ед/мл, моче-вая к-та-219,0 мкмоль/л. Общ, анализ мочи: кол-во-200 мл, цвет-с/ж, уд. вес-1010, прозр., белок-следы, сахар, ацетон, желчн. пиг-ты-от-риц., р-ция-кис-я, лейкоц. -2-4-6 в п/зр., эритр.-20-30-50 в п/зр., эпит. пл.-в неб. к-ве. Biochemical blood test: total. protein-72.9 g / l, albumin-39.3 g / l, globulins-33.6 g / l, total. bilirubin-14.5 μmol / l, creatinine-68.0 μmol / l, urea-5.0 mmol / l, glucose-4.22 mmol / l, Alt-30.6 units / l, AcT-28, 8 units / l, TG-1.59 mmol / l, HDL-0.61 mmol / l, LDL-7.0 mmol / l, cholesterol-5.4 mmol / l, IA-7.8, alpha amylase-52.0 U / ml, uric acid - 219.0 μmol / L. General, urinalysis: count-200 ml, color s / f, beats. weight-1010, transparent, protein traces, sugar, acetone, gall. pig-you-from-ritz., r-tion-kis-i, leykots. -2-4-6 p / sp., Erythr. -20-30-30-50 in p / sp., Epit. pl.-in the sky. to-ve.
Рентгенография ОГК N°N° 1904-5 На R-грамме ОГП в 2-х пр-ях легочные поля прозрачны, кор-ни имеют нечеткую структуру, синусы свободны. Сог - умеренно расширен левый желудочек. Отмечаются признаки остеопатии и деформирующего спондилеза шейного и грудного отдела позвоночника. Закл.: Хр. бронхит. Консульт. невропатолога.  X-ray analysis of OGK N ° N ° 1904-5 On the R-gram of the OGP in 2 pr-lungs, the pulmonary fields are transparent, the roots have a fuzzy structure, the sinuses are free. Sog - moderately expanded left ventricle. Signs of osteopathy and deforming spondylosis of the cervical and thoracic spine are noted. Closed: Chr. bronchitis. Consult neuropathologist.
УЗИ органов брюшной полости. Заключение: Диффузные изменения в печени и в поджелудочной железе.  Ultrasound of the abdominal cavity. Conclusion: Diffuse changes in the liver and pancreas.
УЗИ почек. Заключение: Солитарная киста правой почки 45x42 мм. Синусная киста правой почки 26x24 мм. Солитарная киста левой почки d-22 мм.  Ultrasound of the kidneys. Conclusion: Solitary cyst of the right kidney 45x42 mm. Sinus cyst of the right kidney 26x24 mm. Solitary cyst of the left kidney d-22 mm.
УЗИ щитовидной железы. Заключение: Диффузное увеличение щитовидной железы. Ultrasound of the thyroid gland. Conclusion: Diffuse enlargement of the thyroid gland.
ЭКГ N° 396 от 20.10.09 г. Заключение: Синусовый ритм с ЧСС 75 в 1 мин. ЭОС влево (угол альфа=+10°). Переходная зона V4. Компенсированная гипертрофия предсердий, гипертрофия левого желудочка, косвенные признаки не-полной блокады правой ножки п. Гиса. Признаки хронической субэндокардиальной ишемии миокарда. PQ=0,19", Р=0,12", QRS=0,10", QT=0,37" (N =0,30"). ECG N ° 396 from 10.20.09. Conclusion: Sinus rhythm with a heart rate of 75 in 1 min. EOS to the left (angle alpha = + 10 °). Transitional zone V 4 . Compensated atrial hypertrophy, left ventricular hypertrophy, indirect signs of incomplete blockade of the right leg of P. His. Signs of chronic subendocardial myocardial ischemia. PQ = 0.19 ", P = 0.12", QRS = 0.10 ", QT = 0.37" (N = 0.30 ").
Консультация невролога. Неврологически: D=S, глазные рефлексы обычные, фотореакция сохранена, движения в полном объеме, нистагма нет, неустойчивости и головокружений нет, в позе Ромберга устойчив, патологических и менингеальн х патологических симптомов нет, имеется умеренное снижение тактильной и болевой чуствительности, больше выраженное в конечностях, уменьшение мышечной силы (до 60%) в конечностях, в мышечных группах сгибателей и разгибателей, выраженных двигательных расстройств нет, тонус мускулатуры снижен. Парезов и параличей нет. По данным электромиографии имеются признаки выраженных нарушений в нервно-мышечной проводимости по всем группам мышечных волокон. Офтальмолог: Острота зрения на оба глаза 1.0. Поля зрения без патологии. Признаки легкой внутричерепной гипертензии. ЭХО Энцефалоскопия - смещения срединных структур не выявлено.  Neurologist consultation. Neurologically: D = S, eye reflexes are normal, photoreaction is preserved, movement is complete, there is no nystagmus, instability and dizziness are not present, Romberg is stable, there are no pathological and meningeal pathological symptoms, there is a moderate decrease in tactile and pain sensitivity, more pronounced in extremities, a decrease in muscle strength (up to 60%) in the limbs, in the muscle groups of the flexors and extensors, there are no pronounced motor disorders, muscle tone is reduced. There are no paresis and paralysis. According to electromyography, there are signs of severe disturbances in neuromuscular conduction in all groups of muscle fibers. Ophthalmologist: Visual acuity in both eyes 1.0. Fields of vision without pathology. Signs of mild intracranial hypertension. ECHO Encephaloscopy - displacement of the middle structures was not detected.
Диагноз: Синдром Арнольда Киари в стадии субкомпенсация. Гипоплазия спинного мозга. Мозжечковый синдром. Дисметаболическая полинейропатия, смешанная форма. Проведено дополнительно исследование крови на уровень специфических противотканевых антител-аутоантител к тканям внутренних органов у данного пациента по решению консилиума врачей. Исследовалась сыворотка крови пациента, которая осталась после проведения биохимических исследований (использовано 0,4 мл. сыворотки). Протокол с результатами исследования приведен ниже в таблице 8.Diagnosis: Arnold Chiari syndrome in the stage of subcompensation. Hypoplasia of the spinal cord. Cerebellar syndrome. Dysmetabolic polyneuropathy, mixed form. An additional blood test was performed on the level of specific anti-tissue antibodies-autoantibodies to tissues of internal organs in this patient by decision of a consultation of doctors. We studied the patient's blood serum, which remained after biochemical studies (0.4 ml of serum was used). The protocol with the results of the study is shown below in table 8.
Таблица 8. Протокол оценки уровней выявленных антител-аутоантител и состояния тканей органов: 21.10.08, пациент: Д., возраст 38 лет, диагноз: Синдром Арнольда Table 8. Protocol for assessing the levels of detected antibodies-autoantibodies and the state of organ tissues: 10.21.08, patient: D., age 38 years old, diagnosis: Arnold’s syndrome
Киари (обследование).  Chiari (examination).
Figure imgf000068_0001
Figure imgf000068_0001
Исследовано состояние тканей 7 органов. Выявлены высокие уровни противотканевых антител-аутоантител к щитовидной железе, вилочковой железе (тимусу), печени. Уровень противотканевых антител-аутоантител к ткани почек свидетельствует о начале острого процесса, а выявленное значение титра 1 :1024 к ткани головного мозга свидетельствует о ее тяжелом повреждении, начавшихся процессах лизиса и отторжения ткани. Выявлены признаки хронического повреждения ткани щитовидной и вилочковой желез, печени. Острое повреждение ткани почек. Тяжелое повреждение ткани белого вещества головного мозга, сопровождающееся ее частичным лизисом и начавшимся отторжением. Выявленное значение данного показателя является не благоприятным прогностическим признаком и может представлять угрозу для жизнедеятельности всего организма. Через 32 часа после проведенного исследования началось резкое ухудшение общего состояния пациента, потребовавшее мероприятий реанимации и интенсивной терапии. Больной переведен в реанимационное отделение и несмотря проводимые мероприятия и интенсивную терапию при нарастающих признаках почечно- печеночной недостаточности через 120 часов наступил летальный исход. Данное клиническое наблюдение подтверждает возможность получения лабораторных данных о состоянии здоровья и уровне повреждения тканей. Иллюстрирует возможность выявления ранних признаков нарушения ткани и повреждения органов, при которых другие способы лабораторной и инструментальной диагностики не выявляют выраженных нарушений во внутренних структурах, органах и системах организма. Возможность выявлять ранние признаки возникающих расстройств здоровья во внутренних органах у пациентов, не имеющих клинических признаков заболевания, с помощью веществ по п.1, полученных способом по п. 6, , применима для выявления пациентов с риском развития осложнений при массовых вакцинациях с целью предупреждения развития этих осложнений. The state of tissues of 7 organs was investigated. High levels of anti-tissue antibodies-antibodies to the thyroid gland, thymus gland (thymus), and liver were revealed. The level of anti-tissue antibodies-autoantibodies to kidney tissue indicates the onset of an acute process, and the detected titer value of 1: 1024 to brain tissue indicates its severe damage, which began the processes of lysis and tissue rejection. Signs of chronic damage to the tissue of the thyroid and thymus glands, liver were revealed. Acute damage to kidney tissue. Severe damage to the tissue of the white matter of the brain, accompanied by its partial lysis and the beginning of rejection. The revealed value of this indicator is not a favorable prognostic sign and can pose a threat to the life of the whole organism. 32 hours after the study, a sharp deterioration in the general condition of the patient began, requiring resuscitation and intensive care. The patient was transferred to the intensive care unit, and despite ongoing measures and intensive care with increasing signs of renal and hepatic failure, a fatal outcome occurred after 120 hours. This clinical observation confirms the possibility of obtaining laboratory data on the state of health and the level of tissue damage. It illustrates the possibility of detecting early signs of tissue damage and organ damage, in which other methods of laboratory and instrumental diagnostics do not reveal pronounced disorders in the internal structures, organs and systems of the body. The ability to detect early signs of emerging health disorders in internal organs in patients who do not have clinical signs of the disease, using the substances according to claim 1, obtained by the method according to claim 6, is applicable to identify patients at risk of complications during mass vaccinations in order to prevent development these complications.
Положительный эффект  Positive effect
Положительный эффект в диагностике достигается решением ряда задач: - расширения круга определяемых в лабораторных условиях веществ, позволяющих прямо оценивать состояние здоровья тканей организма;  A positive effect in diagnostics is achieved by solving a number of problems: - expanding the range of substances determined in laboratory conditions that allow direct assessment of the health status of body tissues;
- повышения чувствительности полученных антигенов, возможность получения маркеров нативного типа и их использование в жидкофазных или твердофазных методах иммуноанализа, в ручных, полуавтоматических или автоматических лабораторных аналитических системах.  - increasing the sensitivity of the obtained antigens, the possibility of obtaining markers of the native type and their use in liquid-phase or solid-phase immunoassay methods, in manual, semi-automatic or automatic laboratory analytical systems.
- расширения рабочего диапазона концентраций, что позволяет обходиться без разбавления образца и проб биологических жидкостей; - сокращения времени, повышение эффективности, точности и прогностической ценности результатов исследования при проведении анализа с использованием аппаратных средств; - expanding the working range of concentrations, which allows you to do without diluting the sample and samples of biological fluids; - reducing time, improving the efficiency, accuracy and prognostic value of the research results when conducting analysis using hardware;
- возможность создания диагностических наборов на твердых носителях, не требующих специальных приборов и аппаратных средств, позволяющих применять метод во внелабораторных или домашних условиях;  - the ability to create diagnostic kits on solid media that do not require special instruments and hardware that allow the method to be used in non-laboratory or home conditions;
- реализация методики одновременного определения нескольких веществ, в одной биологический пробе взятой у одного индивида, позволяет создать представление об общем состоянии здоровья целостного организма, оцениваемого по степени уровней регенерации или повреждения ткани основных органов или систем организма.  - the implementation of the methodology for the simultaneous determination of several substances in one biological sample taken from one individual, allows you to create an idea of the overall health of the whole organism, assessed by the degree of regeneration or damage to the tissue of the main organs or systems of the body.
Заявляемые технические решения могут применяться не только у млекопитающих, но и у других объектов животного мира (пресмыкающиеся, земноводные, птицы и т.д.), что позволяет применять их в ветеринарии объектов животного мира - не млекопитающих.  The claimed technical solutions can be applied not only to mammals, but also to other objects of the animal world (reptiles, amphibians, birds, etc.), which allows them to be used in veterinary medicine of objects of the animal world - not mammals.
Вещества с улучшенными (другими) свойствами, не оказывают прямое литическое воздействие на ткань, и не вызывают немедленно гиперэргическую реакцию, лизис ткани и смерть индивидуума. Заявляемое вещество, получаемое технически иным способом, описанным в заявке, обладает новыми свойствами, проявляющимися в том, что может одновременно проявлять свойства прямого антигена ткани, способствуя продукции антител, которые за счет свойств парциальной органной и видовой сингенности к исходной ткани, являются и противотканевыми (противоорганными) аутоантителами организма, участвующими в острых и хронических реакциях организма, в которых проявляет свою реактивность иммунная (или аутоиммунная) система. Антитела (аутоантитела) - иммунного (аутоиммунного) ответа, вырабатывающиеся в ответ на вещество, способны вызывать локальный лизис (повреждение и утилизацию) части ткани органа индивида, без нарушения его жизненно важных функций и не приводящие к гибели всего организма. Это же вещество может и должно использоваться в качестве маркера лабораторного контроля для оценки эффективности и глубины воздействия на ткань. Вещество обладает способностью к частичному и изолированному лизису (по данным Электронной микроскопии).  Substances with improved (other) properties do not have a direct lytic effect on the tissue, and do not immediately cause a hyperergic reaction, tissue lysis and death of the individual. The inventive substance obtained by a technically different method described in the application has new properties, manifested in that it can simultaneously exhibit the properties of a direct tissue antigen, contributing to the production of antibodies, which, due to the properties of the partial organ and species syngenesis to the original tissue, are also anti-tissue ( anti-organ) autoantibodies of the body involved in acute and chronic reactions of the body in which the immune (or autoimmune) system manifests its reactivity. Antibodies (autoantibodies) - the immune (autoimmune) response produced in response to a substance can cause local lysis (damage and utilization) of a part of the tissue of an individual’s organ, without disrupting its vital functions and not leading to the death of the whole organism. The same substance can and should be used as a marker of laboratory control to assess the effectiveness and depth of exposure to tissue. The substance is capable of partial and isolated lysis (according to electron microscopy).
Новые вещества действуют не прямо, а опосредованно, и поэтому могут быть использованы как лекарства, в т.ч. для лечения рака. Вещества универсальны - это и диагностики и лекарства (одна субстанция ВЕЩЕСТВА по п.1 пригодна для использования в качестве фармакологической композиции и для реализации в качестве диагностической тест системы). Такие свойства вещества позволяют реализовать мечту многих врачей об индивидуализации возможностей диагностики, лекарства и лечебного воздействия. В дополнение к этому заявляемая биотехнология, при соблюдении соответствующих этических норм и правил, позволяет рассматривать объект предстоящей диагностики и лечения, еще и в качестве возможного источника исходных ингредиентов (исходной ткани) для получения вещества. New substances act not directly, but indirectly, and therefore can be used as medicines, including for cancer treatment. The substances are universal - these are both diagnostics and medicines (one substance of the SUBSTANCE according to claim 1 is suitable for use as a pharmacological composition and for implementation as a diagnostic test system). Such properties of the substance make it possible to realize the dream of many doctors about the individualization of the possibilities of diagnosis, medicine and therapeutic effects. In addition to this, the claimed biotechnology, subject to the relevant ethical standards and rules, allows us to consider the object of the upcoming diagnostics and treatment, as well as a possible source of source ingredients (source tissue) for obtaining the substance.
Таким образом, в заявляемых технических решениях даны основные характеристики ИАВ, составляющих сингенную композицию. Выявлены, установлены, систематизированы и закреплены в линиях композиций ткани признаки органной и видовой сингенности ткани, получаемых из специфической аллогенной ткани индивидуума одного вида для схожего органа всех особей того же вида. Установлена антигенная схожесть и определены различия в линиях сингенных композиций, получаемых из антигенноразличных тканей внутренних органов у разных видов животных и человека. Определены критерии и выявлен новый признак специфичной иммунной активности в субстанциях, составляющих и входящих в сингенную композицию, обеспечивающие высокую специфичность и результат реакции. Приведены способ использования сингенных композиций как прямых маркеров уровней повреждения ткани исследуемых внутренних органов, способы лабораторного выявления количественных и качественных уровней повреждений исследуемых органов, и способ оценки, с возможностью прогнозирования состояния здоровья или болезни, исследуемого органа (органов) и организма индивидуума в целом. Дана характеристика и классификация каждой линии сингенных композиций, получаемых из тканей внутренних органов животного или человека. Раскрыто использование линий сингенных композиций для производства новых видов лабораторных диагностикумов - прямых иммуноактивных маркеров тканей внутренних органов.  Thus, in the claimed technical solutions are given the main characteristics of the IAS constituting the syngeneic composition. The signs of organ and species syngenesis of the tissue obtained from the specific allogeneic tissue of an individual of one species for a similar organ of all individuals of the same species were identified, established, systematized and fixed in the lines of tissue compositions. Antigenic similarity was established and differences in the lines of syngeneic compositions obtained from antigenically different tissues of internal organs in different species of animals and humans were determined. Criteria are defined and a new sign of specific immune activity in the substances that make up and are included in the syngeneic composition, providing high specificity and the result of the reaction, is revealed. The method of using syngeneic compositions as direct markers of tissue damage levels of the studied internal organs, methods for laboratory detection of quantitative and qualitative levels of damage to the studied organs, and a method for assessing, with the possibility of predicting the state of health or disease, the studied organ (organs) and the body of the individual as a whole, are described. A characteristic and classification of each line of syngeneic compositions obtained from tissues of the internal organs of an animal or human is given. The use of syngeneic composition lines for the production of new types of laboratory diagnosticums - direct immunoactive markers of tissues of internal organs is disclosed.
Использование маркеров, полученных из сингенной композиции ткани, позволяет проводить экспресс- диагностику и выявлять состояния здоровья, повреждения или заболевания ткани внутренних органов индивидуума, возникающих у него, без дифференциации различных форм заболеваний как инфекционной, так и неинфекционной природы. Заявляемое ИАВ может использоваться в качестве основы для создания средств по высокоточной и ранней диагностики онкологических заболеваний, а также лекарственных средств и систем для лечения рака. The use of markers obtained from syngeneic tissue composition allows rapid diagnostics and identification of health conditions, damage or tissue diseases of an individual’s internal organs arising from him, without differentiating various forms of diseases of both infectious and non-infectious nature. The inventive IAW can be used as the basis for creating tools for high-precision and early diagnosis of cancer, as well as drugs and systems for the treatment of cancer.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ CLAIM
1. ИММУННО ЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО, представляющее собой белковый субстрат, полученный из супернатанта модифицифированной исходной ткани органа индивида, характеризующийся парциальной сингенностью, имеющий полную органную и видовую антигенную схожесть с исходной тканью, лишенный аллогенных антигенных свойств этой ткани, проявляющий свойства и антигена и аутоантигена к ткани из которой оно получено, и обладающий специфической активностью в отношении антител - аутоантител, находящихся в биологических жидкостях других индивидов одного биологического вида. 1. IMMUNALLY LOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE, which is a protein substrate obtained from the supernatant of a modified source tissue of an individual organ, characterized by partial syngeny, having complete organ and species antigenic similarity to the source tissue, lacking allogenic antigenic properties of this tissue, exhibiting properties and antigen and antigen tissue from which it is obtained, and having specific activity against antibodies - autoantibodies located in biological fluids of other individuals biological species.
2. ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО по п.1, характеризующееся тем, что оно содержит макромолекулы белкового субстрата в интервале молекулярного веса 10 - 90 кДа, в котором при денатурирующем электрофорезе выявляются специфичные участки в виде, по меньшей мере, двух мажорных полос, соответствующих значениям шкалы молекулярной массы из интервала 9,0-11,0 и 59-61 кДа.  2. IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1, characterized in that it contains macromolecules of a protein substrate in the range of a molecular weight of 10 - 90 kDa, in which specific regions in the form of at least two major bands corresponding to the scale values are detected by denaturing electrophoresis molecular weight from the range of 9.0-11.0 and 59-61 kDa.
3. ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО по п.1, характеризующееся тем, что оно содержит, по меньшей мере, один иммунноактивный сингенный эпитоп с антигенными - аутоантигенными свойствами исходного органа и вида индивида.  3. IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1, characterized in that it contains at least one immunologically active syngeneic epitope with antigenic and autoantigenic properties of the original organ and species of the individual.
4. ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО по п.1, характеризующееся тем, что совокупность свойств определяется формулой 4. IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1, characterized in that the combination of properties is determined by the formula
Figure imgf000073_0001
где 'ΣνΓ органная совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих схожесть ткани по органным признакам (vt), где t - тип ткани;
Figure imgf000073_0001
where 'Σ νΓ is the organ set of similarity, the set of substances that determine tissue similarity by organ characteristics (vt), where t is the type of tissue;
ηΣνν- видовая совокупность схожести, совокупность веществ, определяющих признаки схожести тканей внутри одного вида (νν), где п- вид индивида; ηΣ νν - a species set of similarity, a set of substances that determine the signs of tissue similarity within one species (νν), where n is the type of individual;
'Lavt- органная совокупность различий, совокупность веществ, определяющих признаки отличия ткани по органной принадлежности (avt), где t - тип ткани;  'Lavt- organ set of differences, a set of substances that determine the signs of difference in tissue by organ affiliation (avt), where t is the type of tissue;
ηΣ8νν- видовая совокупность различий, совокупность различий веществ, определяющаяся признаками отличий ткани по видовой принадлежности (aw), где п- вид индивида; ηΣ 8ν ν - species totality of differences, totality of differences of substances, determined by the signs of differences in tissue by species (aw), where n is the type of individual;
5. ИММУННО ЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО по п.1, характеризующееся наличием при проведении высоко эффективной жидкостной хроматографии двух или трех доминирующих фракций щелочных компонентов, слабо взаимодействующих с анионной колонкой при значении рН 7,2 , и различающихся по заряду кислых мажорных компонентов, элюируемых в середине и в конце процесса хроматографии, и проявляющиеся на кривой хромотографии в виде пиков, соответствующих диапазонам значений 33,5±2,5 и 52,5±2,5 mAU для двух доминирующих фракций щелочных компонентов или соответствующих диапазонам значений 17±2,5; 33,5±2,5; 52,5±2,5 для трех доминирующих фракций щелочных компонентов. 5. IMMUNE LOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1, characterized by the presence of two or three dominant fractions of alkaline components during highly efficient liquid chromatography that weakly interact with an anion column at a pH of 7.2 and differ in charge of acidic major components, eluting in the middle and at the end of the chromatography process, and appearing on the chromatography curve as peaks corresponding to the ranges of 33.5 ± 2.5 and 52.5 ± 2.5 mAU for the two dominant fractions of alkaline components or the corresponding x ranges of values of 17 ± 2,5; 33.5 ± 2.5; 52.5 ± 2.5 for the three dominant fractions of alkaline components.
6. Способ получения ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА, включающий забор исходной ткани, ее типирование, многократное замораживание при температуре -24 - 28° С и оттаивание, при этом оттаивание осуществляют воздействием СВЧ излучения на частоте 2450-2500 МГц с удалением образующейся в процессе оттаивания влаги до снижения массы исходной ткани на 30 - 60%, полученную в результате такой обработки исходную ткань, характеризующуюся сингенностью к видовым и органным антигенным кодам исходной ткани и лишенную аллогенных антигенных свойств исходной ткани индивида, измельчают, гомогенизируют, обеззараживают и экстрагируют по Грассе, полученный супернатант подвергают стандартизации по белку от 20 - 25 мг на 1 мл и лиофильно высушивают.  6. A method of obtaining an IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE, including sampling the initial tissue, typing it, repeatedly freezing it at a temperature of -24 - 28 ° C and thawing, while thawing is carried out by exposure to microwave radiation at a frequency of 2450-2500 MHz with the removal of moisture generated during thawing to decrease in the mass of the initial tissue by 30-60%, the resulting tissue obtained as a result of such processing, characterized by syngenicity to the species and organ antigenic codes of the original tissue and devoid of allogeneic antigenic properties of the original Ani individual pulverized, homogenized, extracted and disinfected by Grasse, resulting supernatant was subjected to standardize the protein of 20 - 25 mg per 1 ml and freeze-dried.
7. Способ по п.6, характеризующийся тем, что обеззараживание ткани осуществляют путем добавления в гомогенат ткани 0,5 % водного раствора формалина до 5%-10% от общего объема исходного материала с последующим смешением и экспозицией смеси в течение 4 - 6 часов.  7. The method according to claim 6, characterized in that the disinfection of the tissue is carried out by adding to the tissue homogenate a 0.5% formalin aqueous solution up to 5% -10% of the total volume of the starting material, followed by mixing and exposure of the mixture for 4 to 6 hours .
8. Способ по п.6, характеризующийся тем, что СВЧ - воздействие осуществляют при мощности источника излучения 600 -1000 Вт в течение времени, которое задают из расчета 10-50 с на 100 г массы исходной ткани, при этом в процессе СВЧ - воздействия указанные параметры устанавливают исходя из условия предотвращения нагрева исходной ткани до температуры 41°С.  8. The method according to claim 6, characterized in that the microwave effect is carried out at a radiation source power of 600 -1000 W for a time that is set at a rate of 10-50 s per 100 g of the mass of the original tissue, while in the process of microwave exposure these parameters are set based on the conditions for preventing the initial tissue from heating to a temperature of 41 ° C.
9. Способ по п.8, характеризующийся тем, что СВЧ - воздействие осуществляют в течение времени, при котором кристаллизовавшаяся на поверхности замороженной ткани вода переходит в жидкое состояние. 9. The method according to claim 8, characterized in that the microwave effect is carried out during the time at which the water crystallized on the surface of the frozen tissue becomes liquid.
10. Применение ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА в качестве маркера ткани внутренних, транзиторных или трансплантированных органов индивида. 10. The use of IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE as a marker of tissue of internal, transient or transplanted organs of an individual.
11. Биозонд, включающий твердую фазу с нанесенным на ее поверхность ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ВЕЩЕСТВОМ по п.1.  11. A bioprobe, comprising a solid phase with an IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE deposited on its surface according to claim 1.
12. Биозонд по п.1 1, характеризующийся тем, что ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО на твердую фазу нанесено в виде серии из разведений в интервале концентраций от 12,5 до 200 мкг сухого вещества на 1 мл физиологического раствора.  12. The biosonde according to claim 1, characterized in that the IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE on the solid phase is applied as a series of dilutions in the concentration range from 12.5 to 200 μg of dry matter per 1 ml of physiological solution.
13. Биозонд по п.12, характеризующийся тем, что на твердую фазу нанесен набор серий иммунологически активных веществ, полученных из разных тканей органов индивида.  13. The biosonde according to claim 12, characterized in that a set of series of immunologically active substances obtained from different tissues of the individual organs is applied to the solid phase.
14. Способ диагностики состояния ткани внутреннего органа индивида, включающий забор пробы образца биологической жидкости индивида, обеспечение контакта биологической жидкости с ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ВЕЩЕСТВОМ по п.1 или биозондом по п.11 в серии из разведений образца исследуемой жидкости в пределах значений титра от 1 :4 до 1 :2048, определение в титрах произошедших взаимодействий между антителами и/или аутоантителами, находящимися в разведенном образце биологической жидкости индивида и ИММУННОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ВЕЩЕСТВОМ по п.1, при этом вывод о состоянии ткани внутреннего органа индивида делают по предельному позитивному результату взаимодействия в серии разведений образца исследуемой жидкости, при этом, если взаимодействие выявлено в пределах разведения исследуемого образца в пределах значений [1 :4 -1 :8]— делают вывод о здоровом состоянии ткани; в пределах значений [1 :16- 1 :32] - делают вывод о наличии несущественных повреждений ткани, в пределах значений [1 :64 - 1 :128] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для хронического воспаления, в пределах значений [1 :256 - 1 :512] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для острого воспаления, в пределах значений [1 :1024— 1 :2048] - делают вывод о наличии повреждения ткани, типичного для лизиса и/или отторжения ткани.  14. A method for diagnosing the state of tissue of an internal organ of an individual, including taking a sample of a sample of a biological fluid of an individual, ensuring contact of the biological fluid with the IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1 or a bioprobe according to claim 11 in a series of dilutions of a sample of the studied fluid within the titer from 1: 4 to 1: 2048, determining in the credits of the interactions that occurred between antibodies and / or autoantibodies located in a diluted sample of an individual’s biological fluid and an IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE according to claim 1, when ohm, the conclusion about the state of tissue of the internal organ of an individual is made by the marginal positive result of the interaction in a series of dilutions of the sample of the studied fluid, and if the interaction is detected within the dilution of the studied sample within the values of [1: 4 -1: 8] - they conclude about a healthy state tissue; within the values of [1: 16-1: 32] - conclude that there are minor damage to the tissue, within the values of [1: 64 - 1: 128] - conclude that there is tissue damage typical of chronic inflammation within the [ 1: 256 - 1: 512] - make a conclusion about the presence of tissue damage typical of acute inflammation, within the values of [1: 1024-1: 2048] - make a conclusion about the presence of tissue damage typical of lysis and / or tissue rejection.
15. Фармацевтическая композиция, представляющая собой раствор, включающий иммунологически активное вещество по п.1. и приемлемый растворитель, при этом для парентерального введения 1 мл раствора содержит 100 мкг вещества. 15. The pharmaceutical composition, which is a solution comprising the immunologically active substance according to claim 1. and an acceptable solvent, while for parenteral administration, 1 ml of the solution contains 100 μg of substance.
16. Способ лечения заболеваний тканей органов индивида, вызванных неконтролируемым ростом клеток ткани злокачественной или доброкачественной природы, включающий введение индивиду парентерально по Безредке фармакологической композиции по п.15, содержащей вещество по п. 1, начиная с дозы 50 мкг вещества с последующим увеличением до количества, обеспечивающего сенсибилизацию организма и получение ответной реакции иммунной системы организма индивида, о которой судят по образованию противотканевых антител - аутоантител к вводимому веществу по п.1, при этом введение фармакологической композиции осуществляют при мониторинге уровня образования антител - аутоантител в биологических жидкостях пациента, забор которых осуществляют после каждого введения композиции, количество введений ограничивают при достижении уровня титров антител - аутоантител, лежащего в интервале значений от 1 :256 до 1 :512. 16. A method for the treatment of tissue diseases of an individual’s organs caused by uncontrolled growth of tissue cells of a malignant or benign nature, comprising administering to the individual a Parents randomly pharmacological composition according to claim 15, containing the substance according to claim 1, starting with a dose of 50 μg of the substance, followed by an increase in quantity providing sensitization of the body and obtaining a response of the immune system of the body of the individual, which is judged by the formation of anti-tissue antibodies - autoantibodies to the administered substance according to claim 1, the introduction of the pharmacological composition is carried out while monitoring the level of formation of antibodies - autoantibodies in biological fluids of the patient, the sampling of which is carried out after each injection of the composition, the number of introductions is limited when the level of antibody titers - autoantibodies, lying in the range from 1: 256, is reached up to 1: 512.
PCT/RU2011/000093 2010-10-20 2011-02-18 Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe, pharmaceutical composition, diagnostics and treatment methods WO2012053928A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201001525A EA018848B1 (en) 2010-10-20 2010-10-20 Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe based thereon, method for diagnostics of health state using bioprobe, pharmaceutical composition and method of treatment using pharmaceutical composition
EA201001525 2010-10-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2012053928A1 true WO2012053928A1 (en) 2012-04-26

Family

ID=45908210

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2011/000093 WO2012053928A1 (en) 2010-10-20 2011-02-18 Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe, pharmaceutical composition, diagnostics and treatment methods

Country Status (2)

Country Link
EA (1) EA018848B1 (en)
WO (1) WO2012053928A1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2040273C1 (en) * 1993-05-28 1995-07-25 Камалов Глеб Хафизович Method for producing cattle necrobacteriosis antigen
RU2177325C1 (en) * 2000-09-19 2001-12-27 Цепелев Виктор Львович Method of preparing substance eliciting immunostimulating activity
RU2240807C2 (en) * 2002-10-02 2004-11-27 Шанин Вадим Юльевич Method for obtaining substances out of mammalian tissues and organs being of autoimmune activity both in vitro and in vivo

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6455283B1 (en) * 1998-03-17 2002-09-24 Genentech, Inc. Nucleic acids encoding vascular endothelial cell growth factor-E (VEGF-E)
ES2239532B1 (en) * 2004-02-06 2006-11-01 Proyecto De Biomedicina Cima S.L. METHOD FOR ASSESSING THE RISK AND PREDISPOSITION TO DEVELOP A PATHOLOGY RELATED TO THE PRESENCE OF AUTOANTIBODIES AGAINST EPCR.
GB2426581A (en) * 2005-05-27 2006-11-29 Univ Nottingham Immunoassay methods
CN100388954C (en) * 2005-10-14 2008-05-21 刘帆 Method for disinfecting dental high-speed turbine handpiece back-suction polluted area

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2040273C1 (en) * 1993-05-28 1995-07-25 Камалов Глеб Хафизович Method for producing cattle necrobacteriosis antigen
RU2177325C1 (en) * 2000-09-19 2001-12-27 Цепелев Виктор Львович Method of preparing substance eliciting immunostimulating activity
RU2240807C2 (en) * 2002-10-02 2004-11-27 Шанин Вадим Юльевич Method for obtaining substances out of mammalian tissues and organs being of autoimmune activity both in vitro and in vivo

Also Published As

Publication number Publication date
EA018848B1 (en) 2013-11-29
EA201001525A1 (en) 2012-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kyle Multiple myeloma: an odyssey of discovery.
Fisher et al. Anti-Hu antibody in a neuroblastoma-associated paraneoplastic syndrome
CN103987729B (en) The antibody of carcinomebryonic antigen relevant cell adhesion molecule (CEACAM)
Makari Use of Schultz—Dale Test for Detection of Specific Antigen in Sera of Patients with Carcinoma
Dayan et al. Immune complexes and visceral deposits of measles antigens in subacute sclerosing panencephalitis
Sung et al. Melatonin attenuated brain death tissue extract-induced cardiac damage by suppressing DAMP signaling
Gonzalez-Estrada et al. Incidence of and risk factors for perioperative or periprocedural anaphylaxis in the United States from 2005 to 2014
Lahita et al. Lupus Q&A: Everything You Need to Know
Chevret et al. Design of the DREPAGREFFE trial: A prospective controlled multicenter study evaluating the benefit of genoidentical hematopoietic stem cell transplantation over chronic transfusion in sickle cell anemia children detected to be at risk of stroke by transcranial Doppler (NCT 01340404)
Li et al. Vertebrobasilar artery dissection manifesting as Millard-Gubler syndrome in a young ischemic stroke patient: a case report
WO2012053928A1 (en) Immunologically active substance, process for preparing same, bioprobe, pharmaceutical composition, diagnostics and treatment methods
Gonatas et al. Virus-like particles in sub-acute sclerosing encephalitis
Khan et al. Solitary extramedullary plasmacytoma presenting as an adrenal tumor: case report and literature review
Sevinç et al. the Age and Gender Presentation in the Formations of Gallstones
Hackett et al. Serum detection of carcinoma
Hammam et al. Anti-hu paraneoplastic syndrome presenting as bilateral sixth cranial nerve palsies
RU2608658C1 (en) Method for prediction of peritoneal adhesions in children suffered abdominal surgery
Saaf et al. Cardiac Myxoma as a Rare Cause of an Ischemic Stroke of the Vertebrobasilar Territory in a Young Adult: A Case Report
Lavranos et al. Still’s-like disease induced by breast implants in a middle-aged female health professional
Rafiei et al. Determining the frequency of cystic echinococcosis among suspected cases referred to health centers southwest Iran, and post-treatment serologic follow-up
Sun et al. A Pseudo Elevation of CEA Caused by Epidemic Hemorrhagic Fever.
Li et al. Langerhans cell histiocytosis involving only the thymus in an adult: A case report
RU2205410C2 (en) Method for obtaining antiidiotypical serum for predicting malignant tumors
Hammad et al. 8. False positive mumps serology in a patient with cerebral systemic lupus erythematosus
Ergashov et al. Assessment of Youth Health in Uzbekistan According to the Results of Immunological Screening

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 11834697

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 14/10/2013)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 11834697

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1