WO2011071359A3 - Modification covalente de protéines pour leur visualisation instantanée et leur caractérisation postérieure par une spectrométrie de masse - Google Patents

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WO2011071359A3
WO2011071359A3 PCT/MX2010/000144 MX2010000144W WO2011071359A3 WO 2011071359 A3 WO2011071359 A3 WO 2011071359A3 MX 2010000144 W MX2010000144 W MX 2010000144W WO 2011071359 A3 WO2011071359 A3 WO 2011071359A3
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Marco Arnulfo MATA GÓMEZ
Matthew Thomas Yasui
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Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey
Cantu Ortiz, Francisco Javier
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Abstract

La présente invention porte sur la modification covalente de protéines pour leur visualisation instantanée et leur caractérisation subséquente. Le mécanisme chimique employé est basé sur l'addition nucléophile. Le mécanisme de la réaction chimique est expliqué, ainsi que le rattachement de celui-ci aux résidus spécifiques d'acides aminés. L'identification et la caractérisation par spectrométrie de masse des protéines colorées peuvent être menées à bien en prenant en compte les changements de masse des résidus modifiés par Uniblue A. Un grand avantage de la coloration utilisée dans cette invention réside dans le fait qu'elle présente une compatibilité élevée avec l'analyse de spectroscopie de masse, en plus du fait qu'il n'est pas nécessaire d'enlever le colorant des protéines après la coloration comme dans le cas des colorations de coomassie ou à l'argent. De plus, la transformation en dérivés des acides aminés donne lieu à un changement des modèles d'hydrolyse protéolytique, ce qui peut accroître la couverture dans le séquençage de peptides. Par ailleurs, l'amélioration de la couverture du séquençage dans une analyse de MS/MS peut être atteinte en prenant en compte les changements de masse de groupes amino terminaux des acides aminés transformés en dérivés. En outre, l'invention porte sur un procédé plus court pour l'identification des protéines. Par l'utilisation des procédés proposés pour la coloration et l'analyse des protéines, le temps nécessaire pour l'analyse des protéines peut être réduit sensiblement et en même temps, la qualité de l'analyse peut être améliorée.
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