WO2011010721A1 - 細胞電位測定容器及びその製造方法 - Google Patents

細胞電位測定容器及びその製造方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2011010721A1
WO2011010721A1 PCT/JP2010/062422 JP2010062422W WO2011010721A1 WO 2011010721 A1 WO2011010721 A1 WO 2011010721A1 JP 2010062422 W JP2010062422 W JP 2010062422W WO 2011010721 A1 WO2011010721 A1 WO 2011010721A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
container
cell potential
measurement
container body
substrate
Prior art date
Application number
PCT/JP2010/062422
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
慎二 森元
由以 萩原
Original Assignee
ニプロ株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ニプロ株式会社 filed Critical ニプロ株式会社
Priority to US13/386,583 priority Critical patent/US20120119762A1/en
Priority to EP10802341A priority patent/EP2458373A1/en
Priority to JP2011523707A priority patent/JPWO2011010721A1/ja
Publication of WO2011010721A1 publication Critical patent/WO2011010721A1/ja

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483—Physical analysis of biological material
    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/48707—Physical analysis of biological material of liquid biological material by electrical means
    • G01N33/48728—Investigating individual cells, e.g. by patch clamp, voltage clamp

Definitions

  • the present invention relates to a cell potential measuring container for measuring a cell potential mounted on a potential measuring device and a method for manufacturing the same.
  • toxicity In modern new drug development, it is required to determine early on the toxicity caused by drugs.
  • One type of toxicity is drug-induced (acquired) QT prolongation syndrome, a disease that causes severe arrhythmias in patients.
  • Non-Patent Document a measurement method for observing the influence of the drug on the activity of the ion channel from the change in the potential of the cell in the culture medium to which the drug is administered has been disclosed (Non-Patent Document). 1).
  • This measurement method is performed by mounting a cell potential measuring container on a potential measuring device.
  • the cell potential measurement container includes a plurality of wells that contain cells together with a culture solution, and a measurement electrode and a reference electrode are disposed on the bottom of each well.
  • the baseline of the measurement data as shown in FIG. 5B may swell, and it may be difficult to obtain an accurate measurement result. there were.
  • An object of the present invention is to provide a cell potential measurement container in which baseline undulation does not occur and accurate measurement results can be easily obtained in cell potential measurement using a cell potential measurement container.
  • the present invention includes a container body part and an electrode substrate, wherein the electrode substrate is joined to the lower end of the container body part to form a plurality of wells, and is mounted on a potential measuring device.
  • a container for measuring a cell potential wherein the container body portion includes a plurality of cylindrical portions having an upper end and a lower end opened, and a joining margin at the lower end, and the electrode substrate includes a substrate body, A plurality of measurement electrodes and a plurality of reference electrodes are disposed on one side of the substrate body, and the bonding margin is formed on a surface of the substrate body on which the plurality of measurement electrodes and the plurality of reference electrodes are disposed.
  • a cell potential measuring container and a method for manufacturing the cell potential measuring container characterized in that the container body part is joined with a double-sided tape at a location.
  • the cell potential measurement container of the present invention is a disposable part used in a system for measuring cell potential changes for a plurality of novel drug candidate compounds in each well.
  • the cell potential measuring container of the present invention is used by being mounted on a dedicated potential measuring device (not shown).
  • the configuration has a plurality of wells.
  • the plurality of wells are formed by bonding an electrode substrate to the lower end of the container body. That is, the container body is the side wall of each well, and the electrode substrate is the bottom of each well.
  • the formed well is liquid-tight to the extent that it can accommodate a medium (usually a culture medium) used for measurement.
  • a measurement electrode and a reference electrode are provided on the bottom surface of each well. Thereby, the potential of the cell can be measured in each well.
  • the term “cell” should be interpreted as including not only one cell but also a cell mass (spheroid) in which a plurality of cells are aggregated.
  • the cell potential measuring container of the present invention is disposable as described above. Therefore, in order to make the product inexpensive, it is desirable that at least the container body is made of resin.
  • the resin is not particularly limited in the present invention as long as the container body can be molded and is electrically insulating. If the specific example of resin is given, a polypropylene, a polystyrene, polyester, a polycarbonate, etc. will be mentioned, for example. In particular, from the viewpoint of low material cost, high transparency, and good appearance, the resin is preferably polystyrene.
  • the manufacturing method of the container body part is not necessarily limited as long as the container body part can be easily manufactured. However, considering the complicated structure of the container body part, it is usually manufactured by injection molding. It is desirable to do.
  • the container body is provided with a cylindrical portion that becomes a side wall of each well and a joining margin.
  • the upper and lower ends of the cylindrical part are open.
  • the upper end is opened to accommodate cells and culture medium at the time of measurement, and the lower end is opened to make an electrode substrate described later a bottom surface.
  • the shape of the cylindrical portion is not particularly limited in the present invention, but is preferably a cylindrical shape from the viewpoint of easy manufacture.
  • the joining margin is arranged at the lower end of the container body.
  • the joining margin not only serves as a location for joining with a double-sided tape described later, but also serves to hold a plurality of cylindrical portions. In order to increase the bonding strength of the double-sided tape, it is desirable that all the portions other than the lower end of the cylindrical portion be bonded on the lower surface of the container body portion.
  • the present invention is not necessarily limited by the area of the joint.
  • the electrode substrate includes a substrate body, and a plurality of measurement electrodes and a plurality of reference electrodes are disposed on one side of the substrate body.
  • the substrate body is made of a so-called electrically insulating material.
  • the material include polypropylene, polystyrene, polyester, fluororesin, polycarbonate, acrylic resin, glass composite including paper phenol, paper epoxy, glass epoxy, and alumina, but the measurement electrode and reference electrode can be easily constructed.
  • glass epoxy is often selected from the viewpoint of high conductivity, mechanical strength, and low cost.
  • the present invention is not limited to these substrate body materials.
  • the measurement electrode is an electrode that contacts the cell and measures the activity of the ion channel of the cell as a potential.
  • the reference electrode contacts the medium used for the measurement (usually the culture solution) and measures the so-called reference potential. Electrode.
  • the measurement electrode and the reference electrode are arranged at positions such that one each exists on the bottom surface of each well when the electrode substrate is joined to the container body to form a well. Of course, the measurement electrode and the reference electrode are not electrically connected even at the bottom of each well.
  • the material for the measurement electrode and the reference electrode include gold, silver, carbon, platinum, ruthenium oxide, and palladium. In particular, gold is preferably used from the viewpoint of high electrical conductivity, but the present invention is not limited to these electrode materials.
  • the measurement electrode and the reference electrode can be appropriately constructed by a method such as a screen printing method, an inkjet method, sputtering, or vapor deposition. Therefore, the present invention is not limited by these electrode construction methods.
  • the container body and the electrode substrate are joined with a double-sided tape. Joining is performed at the joining margin in the container body. The bonding is performed so that the double-sided tape does not exist at least at the lower end of the cylindrical portion of the container body. That is, the shape of the double-sided tape is adjusted according to the shape of the joining margin of the container body.
  • the type of the double-sided tape is not particularly limited as long as the bonding strength between the container body and the electrode substrate is sufficient and has electrical insulation, water resistance (water repellency) and chemical resistance. is not.
  • a double-sided tape such as a Nichiban double-sided tape (manufactured by Nichiban Co., Ltd.) or a structural bonding tape (manufactured by Sumitomo 3M Limited) can be suitably used. Further, after joining one side of the double-sided tape to the joining margin of the container body, the other side of the double-sided tape may be joined to the electrode substrate, or vice versa. Furthermore, in order to perform bonding accurately, for example, it is desirable to provide holes for positioning in the container body, the electrode substrate, and the double-sided tape, respectively, but the present invention is not necessarily limited to the presence or absence of the holes for positioning. Is not to be done. The use of this double-sided tape surprisingly eliminated the baseline undulations in cell potential measurements.
  • the baseline of measurement data does not swell, and it is easy to obtain accurate measurement results.
  • FIG. 6 is a cross-sectional view (cross section taken along the line X-X ′ in FIG. 4) in one well of the cell potential measuring container of the present invention. It is a top view in one well with a cell potential measuring container of the present invention.
  • A) is a figure which shows the result of having measured the potential of the cell using the cell potential measuring container of the present invention.
  • (B) is a figure which shows the result of having measured the electric potential of the cell using the cell electric potential measurement container adhere
  • FIG. 1 is an exploded perspective view of a cell potential measuring container of the present invention.
  • the cell potential measuring container of the present invention is mainly composed of a container body 1, an electrode substrate 2, and a double-sided tape 3.
  • the resin container body portion 1 includes a plurality of cylindrical cylindrical portions 11 having an upper end and a lower end opened, and a joining margin 12. The structure of the lumen of each cylindrical portion 11 will be described later.
  • Each cylindrical portion 11 constitutes a side wall of the well.
  • the joining margin 12 is disposed at the lower end of the container body 1.
  • the joining margin 12 will be described with reference to FIG.
  • FIG. 2 is a partial bottom view (for 9 wells) of the container body 1.
  • the slanted line is the joining margin 12 and is also a place to be joined to the double-sided tape 3 described later.
  • the electrode substrate 2 constitutes the bottom surface of the well.
  • the electrode substrate 2 includes a substrate body 21 made of an electrically insulating material, and a plurality of measurement electrodes 22 and reference electrodes 23 are disposed on the electrode substrate 21.
  • the measurement electrode 22 on the electrode substrate 2 in FIG. 1 is disposed at substantially the center of the C-shaped reference electrode 23. Since the measurement electrode 22 has a fine structure that is difficult to understand in FIG. 1, the details will be described with reference to FIGS. 3 and 4. All the measurement electrodes 22 and the reference electrodes 23 are lead to the connectors 25 arranged in a line on one side of the electrode substrate by independent lead wires 24.
  • the connector 25 is also disposed on the back surface of the electrode substrate 2 (the surface on which the measurement electrode 22 and the reference electrode 23 are not disposed).
  • the connector 25 on the back surface of the electrode substrate 2 is electrically connected to the dedicated potential measuring device. Allows measurement of cell potential.
  • the shape of the double-sided tape 3 is adjusted according to the shape of the joining margin 12 of the container body 1. That is, the part corresponding to the lower end opening of the cylindrical part 11 of the container body part 1 of the double-sided tape 3 is cut out. Thereby, the electrode substrate 2 is exposed as the bottom surface of the well.
  • FIG. 3 is a cross-sectional view of one well. The measurement unit 111, the measurement hole 112, and the holding unit 113 in FIG. 3 will be described later because it is easier to understand with reference to FIG.
  • FIG. 4 is a preferred embodiment of the cell potential measuring container of the present invention, and is a top view of one well 4.
  • the well 4 has the cylindrical portion 11 of the container body portion 1 as a side wall and the electrode substrate 2 as a bottom surface.
  • a measurement electrode 22 and a reference electrode 23 are provided on the bottom surface of each well 4.
  • the cylindrical portion 11 serving as the side wall of the well 4 is provided with a measuring portion 111 having a circular measuring hole 112 and four holding means 113.
  • the measurement electrode 22 having a fine structure is exposed.
  • the cell placed in the measurement unit 111 can move to the measurement hole 112 due to its own weight, and can come into contact with the measurement electrode 22 exposed in the measurement hole 112.
  • the reference electrode 23 is exposed on the outer periphery of the measurement unit 112 on the bottom surface of the well 4.
  • FIG. 5 (a) shows the results of measuring the potential (baseline) using the cell potential measuring container of the present invention (using a structural bonding tape (manufactured by Sumitomo 3M) as the double-sided tape 3).
  • FIG. 5B shows the result of measuring the potential (baseline) using a cell potential measuring container adhered with a liquid adhesive Loctite 401 (Henkel) instead of the double-sided tape 3.
  • the results of the cell potential measurement container bonded with the liquid adhesive showed undulations in the baseline, whereas the undulation disappeared brilliantly in the results using the cell potential measurement container of the present invention.
  • the method of measuring the cell potential using the cell potential measuring container of the present invention can almost refer to the method using the conventional cell potential measuring container.
  • the cell potential measurement container of the present invention is an embodiment including the measurement unit 111 as shown in FIGS. 3 and 4, the point that the cells are placed on the measurement unit 111 is different from the conventional method.
  • the cell placed in the measurement unit 111 can move to the measurement hole 112 due to the reduced diameter structure of the measurement unit 111 and the weight of the cell, and can contact the measurement electrode 22 exposed in the measurement hole 112.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

　本発明は、細胞電位測定容器を用いた細胞の電位測定において、ベースラインのうねりが生じず、正確な測定結果を得ることが容易である細胞電位測定容器を提供することを課題とする。本発明は、容器胴体部及び電極基板を含み、前記容器胴体部の下端に前記電極基板を接合して複数のウェルを形成してなり、電位測定装置に搭載して細胞の電位を測定するための容器であって、前記容器胴体部は、上端及び下端が開口した複数の筒状部と、下端に接合しろを備え、前記電極基板は、基板本体を備え、前記基板本体の片面に複数の測定電極及び複数の参照電極が配設されてなり、前記基板本体における前記複数の測定電極及び前記複数の参照電極が配設された面上に、前記接合しろの箇所で、前記容器胴体部を両面テープにより接合したことを特徴とする細胞電位測定容器及び細胞電位測定容器の製造方法を提供する。

Description

細胞電位測定容器及びその製造方法
　本発明は、電位測定装置に搭載して細胞の電位を測定するための細胞電位測定容器及びその製造方法に関する。
　現代の新規薬物開発においては、薬物が引き起こす毒性について早期に見極めを行うことが求められている。この毒性の一種として、患者が重篤な不整脈を引き起こす疾患である薬物誘発性（後天性）ＱＴ延長症候群が知られている。
　薬物誘発性ＱＴ延長症候群は、薬物の投与後に心電図上でのＱＴ間隔の延長がおこり、TdP（Torsades de pointes、トルサード・ド・ポアンツ＝非持続性多形性心室頻脈）から、しばしば心室細動が起こり、失神、突然死をきたす重篤な疾患である。実際、1980年以降に米国市場で販売中止となった25品目の薬物のうち、5品目は薬物誘発性ＱＴ延長症候群を引き起こす疑いが認められた。
　このため、薬物が引き起こす毒性を見極めるために、薬物を投与した培養液中の細胞の電位の変化から、薬物がイオンチャネルの活動に与える影響を観察する測定方法が開示されている（非特許文献１）。この測定方法は、細胞電位測定容器を電位測定装置に搭載して行われる。この細胞電位測定容器は、培養液と共に細胞を収容する複数のウェルを備え、かつ、各ウェルの底面には、測定電極及び参照電極が配設されている。
　しかしながら、液体接着剤により接着させた細胞電位測定容器では、図５（ｂ）に示すような測定データのベースラインにうねりが生じることがあり、正確な測定結果を得ることが困難となる場合があった。
URL:http://www.brck.co.jp/MCS/qtscreencataloguejp1.pdf
　本発明は、細胞電位測定容器を用いた細胞の電位測定において、ベースラインのうねりが生じず、正確な測定結果を得ることが容易である細胞電位測定容器を提供することを課題とする。
　かかる課題を解決するために、本発明は、容器胴体部及び電極基板を含み、前記容器胴体部の下端に前記電極基板を接合して複数のウェルを形成してなり、電位測定装置に搭載して細胞の電位を測定するための容器であって、前記容器胴体部は、上端及び下端が開口した複数の筒状部と、下端に接合しろを備え、前記電極基板は、基板本体を備え、前記基板本体の片面に複数の測定電極及び複数の参照電極が配設されてなり、前記基板本体における前記複数の測定電極及び前記複数の参照電極が配設された面上に、前記接合しろの箇所で、前記容器胴体部を両面テープにより接合したことを特徴とする細胞電位測定容器及び細胞電位測定容器の製造方法を提供する。
　本発明の細胞電位測定容器は、各ウェルにおいて複数の新規薬物候補の化合物に対する細胞の電位変化を測定するためのシステムに用いる使い捨ての一部品である。本発明の細胞電位測定容器は、専用の電位測定装置（図示せず）に搭載して用いられる。その構成は、複数のウェルを有する。この複数のウェルは、容器胴体部の下端に電極基板を接合することにより形成される。つまり、容器胴体部は各ウェルの側壁となり、電極基板は各ウェルの底面となる。形成されたウェルは測定時に用いる媒体（通常は培養液）を収容することができる程度に液密である。そして、各ウェルの底面にはそれぞれ測定電極及び参照電極が配設されている。これにより、各ウェルにおいて細胞の電位を測定することができる。尚、本発明において、「細胞」とは、１の細胞のみだけではなく、複数の細胞が凝集した細胞塊（スフェロイド）も含むものとして解釈しなければならない。
　本発明の細胞電位測定容器は、上述したように使い捨てのものである。したがって、製品を安価とすべく、少なくとも容器胴体部は全て樹脂製であることが望ましい。樹脂は、容器胴体部が成型可能であり、電気絶縁性であれば、本発明においては特に限定されるものではない。樹脂の具体例を挙げるとするならば、例えば、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリエステル及びポリカーボネート等が挙げられる。特に、材料費が安価であり、かつ透明性が高く、見た目がよい観点から、樹脂はポリスチレンが好ましい。また、容器胴体部の製造方法は、当該容器胴体部の製造が容易であれば必ずしも限定されるものではないが、容器胴体部の構造が複雑であることを考慮すると、通常は射出成型で製造するのが望ましい。
　容器胴体部は、各ウェルの側壁となる筒状部及び接合しろを備える。
　筒状部は、上端及び下端が開口している。上端が開口しているのは、測定時における細胞や培養液を収容するためであり、下端が開口しているのは、後述する電極基板を底面とするためである。尚、筒状部の形状は、本発明においては特に限定されるものではないが、製造が容易である観点から、円筒形であることが望ましい。
　接合しろは、容器胴体部の下端に配設される。接合しろは、後述する両面テープによる接合の箇所となるだけでなく、複数の筒状部を保持する役割もある。両面テープによる接合強度を高めるために、容器胴体部の下面においては、筒状部の下端以外の箇所は全て接合しろであることが望ましい。但し、本発明は、必ずしも接合しろの面積によって限定されるものではない。
　一方、電極基板は、基板本体を備え、当該基板本体の片面上に複数の測定電極及び複数の参照電極が配設されている。
　基板本体は、いわゆる電気絶縁性の材料からなる。その材料は、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリエステル、フッ素樹脂、ポリカーボネート、アクリル樹脂、紙フェノール、紙エポキシ、ガラスエポキシ等を含むガラスコンポジット及びアルミナ等が挙げられるが、測定電極及び参照電極の構築が容易であり、導電性が高く、機械的強度があり、コストが安価である観点から、一般的にはガラスエポキシが選定されることが多い。但し、本発明は、これら基板本体の材料に限定されるものではない。
　測定電極は、細胞が接触して、細胞のイオンチャネルの活動を電位として測定する電極であり、参照電極は、測定時に用いる媒体（通常は培養液）と接触していわゆる基準となる電位を測定する電極である。測定電極及び参照電極は、電極基板が容器胴体部と接合してウェルを形成した際に、各ウェルの底面においてそれぞれ１つずつ存在するような位置に配設されている。勿論、各ウェルの底面においても測定電極及び参照電極は電気的に接続されるものではない。測定電極及び参照電極の材料は、例えば、金、銀、炭素、白金、酸化ルテニウム及びパラジウム等が挙げられる。特に、電気伝導度が高い観点から金が好適に用いられるが、本発明は、これら電極の材料に限定されるものではない。また、測定電極及び参照電極は、例えば、スクリーン印刷法、インクジェット法、スパッタリング又は蒸着等の手法により適宜構築可能である。したがって、本発明は、これら電極の構築方法によっても限定されるものではない。
　そして、容器胴体部及び電極基板の接合は、両面テープにより行われる。接合の箇所は、容器胴体部における接合しろで行う。接合は、少なくとも容器胴体部の筒状部の下端においては両面テープが存在しないように接合する。つまり、両面テープの形状は容器胴体部の接合しろの形状にあわせて調整される。尚、両面テープの種類に関しては、容器胴体部と電極基板との接合強度が十分であり、かつ電気絶縁性、耐水性（撥水性）及び耐薬品性を有するものであれば特に限定されるものではない。例えば、ニチバン両面テープ（ニチバン社製）、構造用接合テープ（住友スリーエム社製）の両面テープが好適に使用できる。また、接合は、両面テープの片面を容器胴体部の接合しろと接合した後、両面テープのもう片面を電極基板に接合してもよいし、又はその逆であってもよい。さらに、接合を正確に行うために、例えば、位置決めをする孔を、容器胴体部、電極基板及び両面テープにそれぞれ設けておくことが望ましいが、本発明は、位置決めをする孔の有無に必ずしも限定されるものではない。この両面テープの使用により、驚くべきことに、細胞の電位の測定におけるベースラインのうねりが無くなった。
　本発明の細胞電位測定容器によれば、測定データのベースラインのうねりが生じず、正確な測定結果を得ることが容易となる。
本発明の細胞電位測定容器の分解斜視図である。 本発明の細胞電位測定容器の容器胴体部の部分下面図（９ウェル分）である。 本発明の細胞電位測定容器のある１つのウェルにおける断面図（図４におけるＸ－Ｘ’の断面）である。 本発明の細胞電位測定容器のある１つのウェルにおける上面図である。 （ａ）は、本発明の細胞電位測定容器を用いて細胞の電位を測定した結果を示す図である。（ｂ）は、液体接着剤により接着させた細胞電位測定容器を用いて細胞の電位を測定した結果を示す図である。
　以下、本発明の実施態様について図を用いて説明するが、本発明は、以下に説明する実施態様に限定して解釈してはならない。
　図１は、本発明の細胞電位測定容器の分解斜視図である。本発明の細胞電位測定容器は、主として容器胴体部１、電極基板２及び両面テープ３により構成される。樹脂製の容器胴体部１は、上端及び下端が開口した複数の円筒形の筒状部１１及び接合しろ１２を備える。各筒状部１１の内腔の構造に関しては後述する。各筒状部１１は、ウェルの側壁を構成する。接合しろ１２は、容器胴体部１の下端に配設される。接合しろ１２に関しては、図２も参照して説明する。図２は、容器胴体部１の部分下面図（９ウェル分）である。斜線は、接合しろ１２であって、後述する両面テープ３と接合する箇所でもある。
　一方で、電極基板２は、ウェルの底面を構成する。電極基板２は、電気絶縁性の材料からなる基板本体２１を備え、当該電極基板２１上に複数の測定電極２２及び参照電極２３が配設されている。図１における電極基板２における測定電極２２は、Ｃ字型の参照電極２３の略中心に配設されている。測定電極２２は、図１ではわかりにくいほど微細な構造であるため、詳細は図３及び図４において説明する。そして、全ての測定電極２２及び参照電極２３はそれぞれ独立したリード線２４により電極基板の一辺に一列に並んだコネクタ２５までリード（ｌｅａｄ）される。参照電極２３の形状がＣ字型であるのは、測定電極２２をコネクタ２５までリード（ｌｅａｄ）するために、リード線を配設するためのスペースを確保するためでもある。コネクタ２５は、図示しないが、電極基板２の裏面（測定電極２２及び参照電極２３が配設されていない面）にも配設されている。そして、専用の電位測定装置（図示せず）に本発明の細胞電位測定容器を載置した際に、電極基板２の裏面におけるコネクタ２５は、当該専用の電位測定装置と電気的に接続され、細胞の電位の測定を可能とする。
　両面テープ３の形状は、容器胴体部１の接合しろ１２の形状に従って調整する。つまり、両面テープ３の容器胴体部１の筒状部１１の下端開口に対応する部分は、切り抜かれている。これにより、電極基板２は、ウェルの底面として露呈される。この点は、図３を参照すると理解が容易である。図３は、ある１つのウェルの断面図である。図３における測定部１１１、測定孔１１２及び保持手段１１３に関しては、図４も参照にして説明した方が、理解が容易であるため、後述する。
　図４は、本発明の細胞電位測定容器の好ましい実施態様であって、ある１つのウェル４の上面図である。ウェル４は、容器胴体部１の筒状部１１を側壁とし、電極基板２を底面とする。各ウェル４の底面において、測定電極２２及び参照電極２３がそれぞれ配設されている。ウェル４の側壁となる筒状部１１には、円形の測定孔１１２を有する測定部１１１及び４つの保持手段１１３が具備される。測定孔１１２には、微細な構造の測定電極２２が露呈される。この構造により、測定部１１１に置かれた細胞は、当該細胞の自重によって測定孔１１２まで移動し、当該測定孔１１２に露呈された測定電極２２と接触することができる。一方、参照電極２３は、ウェル４の底面において、測定部１１２の外周において露呈される。
　図５（ａ）は、本発明の細胞電位測定容器（両面テープ３として、構造用接合テープ（住友スリーエム社製）を使用）を用いて電位（ベースライン）を測定した結果である。比較として、両面テープ３の代わりに液体接着剤Ｌｏｃｔｉｔｅ４０１（ヘンケル社製）により接着させた細胞電位測定容器を用いて電位（ベースライン）を測定した結果を図５（ｂ）に示す。液体接着剤により接着させた細胞電位測定容器の結果は、ベースラインにうねりが生じているのに対して、本発明の細胞電位測定容器を用いた結果は、このうねりは見事に消えていた。
　尚、本発明の細胞電位測定容器を用いた細胞の電位の測定方法は、従来の細胞電位測定容器を用いた方法をほぼ参照できる。但し、本発明の細胞電位測定容器が、図３及び４に示されるように、測定部１１１を備える態様である場合は、細胞を測定部１１１に置く点が従来の方法と相違する。測定部１１１に置かれた細胞は、測定部１１１の縮径構造及び当該細胞の自重によって測定孔１１２にまで移動し、当該測定孔１１２に露呈された測定電極２２と接触することができる。
　本発明は、正確に細胞の電位の測定を可能とするため、迅速な薬物のスクリーニングを実現し、新薬開発の一助となるであろう。
　１　　　容器胴体部
　１１　　筒状部
　１１１　測定部
　１１２　測定孔
　１１３　保持手段
　１２　　接合しろ
　２　　　電極基板
　２１　　基板本体
　２２　　測定電極
　２３　　参照電極
　２４　　リード線
　２５　　コネクタ
　３　　　両面テープ
　４　　　ウェル

Claims (2)

  1. 　容器胴体部及び電極基板を含み、前記容器胴体部の下端に前記電極基板を接合して複数のウェルを形成してなり、電位測定装置に搭載して細胞の電位を測定するための容器であって、
    前記容器胴体部は、
    　上端及び下端が開口した複数の筒状部と、
    　下端に接合しろを備え、
    前記電極基板は、
    　基板本体を備え、前記基板本体の片面に複数の測定電極及び複数の参照電極が配設されてなり、
    前記基板本体における前記複数の測定電極及び前記複数の参照電極が配設された面上に、前記接合しろの箇所で、前記容器胴体部を両面テープにより接合した
    ことを特徴とする細胞電位測定容器。
  2. 　容器胴体部及び電極基板を含み、前記容器胴体部の下端に前記電極基板を接合して複数のウェルを形成してなり、電位測定装置に搭載して細胞の電位を測定するための容器であって、
    前記容器胴体部は、
    　上端及び下端が開口した複数の筒状部と、
    　下端に接合しろを備え、
    前記電極基板は、
    　基板本体を備え、前記基板本体の片面に複数の測定電極及び複数の参照電極が配設されてなり、
    前記基板本体における前記複数の測定電極及び前記複数の参照電極が配設された面上に、前記接合しろの箇所で、前記容器胴体部を両面テープにより接合する
    ことを特徴とする細胞電位測定容器の製造方法。
PCT/JP2010/062422 2009-07-24 2010-07-23 細胞電位測定容器及びその製造方法 WO2011010721A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13/386,583 US20120119762A1 (en) 2009-07-24 2010-07-23 Container for Measuring Cell Potential and Method for Producing Same
EP10802341A EP2458373A1 (en) 2009-07-24 2010-07-23 Container for measuring cell potential and method for producing same
JP2011523707A JPWO2011010721A1 (ja) 2009-07-24 2010-07-23 細胞電位測定容器及びその製造方法

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2009173016 2009-07-24
JP2009-173016 2009-07-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2011010721A1 true WO2011010721A1 (ja) 2011-01-27

Family

ID=43499193

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2010/062422 WO2011010721A1 (ja) 2009-07-24 2010-07-23 細胞電位測定容器及びその製造方法

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20120119762A1 (ja)
EP (1) EP2458373A1 (ja)
JP (1) JPWO2011010721A1 (ja)
WO (1) WO2011010721A1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012200225A (ja) * 2011-03-26 2012-10-22 Nipro Corp 細胞電位測定容器遠心分離補助具及び遠心分離方法
WO2021095393A1 (ja) 2019-11-14 2021-05-20 Nok株式会社 細胞外電位測定装置

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5761028B2 (ja) * 2009-12-01 2015-08-12 ニプロ株式会社 細胞電位測定容器及びその製造方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004534226A (ja) * 2001-06-29 2004-11-11 メソ スケイル テクノロジーズ，エルエルシー 発光試験測定用のアッセイプレート、リーダシステム及び方法
WO2005001018A1 (ja) * 2003-06-27 2005-01-06 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. 薬理測定装置およびシステム並びにそれに用いるウェル容器
WO2009038079A1 (ja) * 2007-09-18 2009-03-26 Biotec Co., Ltd. 細胞測定容器、細胞外電位測定方法、薬品検査方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004534226A (ja) * 2001-06-29 2004-11-11 メソ スケイル テクノロジーズ，エルエルシー 発光試験測定用のアッセイプレート、リーダシステム及び方法
WO2005001018A1 (ja) * 2003-06-27 2005-01-06 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. 薬理測定装置およびシステム並びにそれに用いるウェル容器
WO2009038079A1 (ja) * 2007-09-18 2009-03-26 Biotec Co., Ltd. 細胞測定容器、細胞外電位測定方法、薬品検査方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"QT-Screen High Throughput QT Encho Jido Sokutei System", XP008135797, Retrieved from the Internet <URL:http://www.brck.co.jp/MCS/qtscreencataloguejpl.pdf> *
TSUNEYOSHI SAITO ET AL.: "ES Saibo o Tsukatta Soyaku, Screening Business ni Tsuite", GEKKAN MEDICAL SCIENCE DIGEST, vol. 33, no. 14, 25 December 2007 (2007-12-25), pages 1272 - 1295, XP008142323 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012200225A (ja) * 2011-03-26 2012-10-22 Nipro Corp 細胞電位測定容器遠心分離補助具及び遠心分離方法
WO2021095393A1 (ja) 2019-11-14 2021-05-20 Nok株式会社 細胞外電位測定装置
US11946847B2 (en) 2019-11-14 2024-04-02 Nok Corporation Extracellular potential measurement device

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2011010721A1 (ja) 2013-01-07
US20120119762A1 (en) 2012-05-17
EP2458373A1 (en) 2012-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5823291B2 (ja) 細胞電位測定容器
KR102205435B1 (ko) 나노기공 감지를 위한 절연체-막-절연체 장치의 웨이퍼-척도 어셈블리
WO2011010721A1 (ja) 細胞電位測定容器及びその製造方法
JP2008534965A5 (ja)
US20180217127A1 (en) Sensor array
TW201448360A (zh) 用於具有導電軌之基板的電連接器
JP5635364B2 (ja) センサカートリッジ、及び計測装置
CN103837586A (zh) 生物传感器
US20150107994A1 (en) Biosensor
CN101308134A (zh) 一种全血乳酸/血糖测试条及一体化采血针
JP5761028B2 (ja) 細胞電位測定容器及びその製造方法
JP2012200225A (ja) 細胞電位測定容器遠心分離補助具及び遠心分離方法
KR102277642B1 (ko) 탄소나노튜브 기반 가스 센서의 제조방법 및 탄소나노튜브 기반 가스 센서
EP2253951B1 (en) Biomaterial measuring device and manufacturing method thereof
JP7231168B2 (ja) 細胞外電位測定装置
CN109557156A (zh) 微流控电化学生物传感器及其制作方法
TW201415015A (zh) 量測生物液體的測試片製作方法及其結構
TWM494910U (zh) 用於檢測血糖、尿酸、膽固醇之試片
TWI531354B (zh) 開蓋結構及生理檢測裝置
CN209559809U (zh) 测试电极
JP2011112594A (ja) センサチップとこれを用いたセンサデバイス
CN209559810U (zh) 微流控电化学生物传感器
US10732138B2 (en) Biosensor strip
CN106124651B (zh) 一种色谱仪
CN112379085A (zh) 一种新型便携式即时检测生化仪

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 10802341

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2011523707

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 13386583

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

REEP Request for entry into the european phase

Ref document number: 2010802341

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2010802341

Country of ref document: EP