WO2008108843A3 - Procédés et kits pour amplifier l'adn - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne de nouveaux procédés de synthèse de plusieurs copies d'une séquence cible d'acide nucléique, qui sont autocatalytiques (à savoir, capables d'effectuer des cycles automatiquement sans nécessité de modifier les conditions de réaction telles que la température, le pH ou la force ionique et en utilisant le produit d'un cycle dans le suivant). En particulier, l'invention concerne des procédés d'amplification d'acide nucléique, qui sont robustes et efficaces, tout en réduisant l'apparition de produits secondaires. De manière générale, les procédés utilisent des oligonucléotides amorces, qui ciblent seulement un sens de l'acide nucléique cible, un oligonucléotide promoteur modifié pour prévenir l'extension par polymérase depuis son extrémité 3' et le cas échéant, un moyen pour terminer une réaction d'extension d'amorce, pour amplifier des molécules d'ARN ou d'ADN in vitro, tout en réduisant ou en éliminant sensiblement la formation de produits secondaires. Les procédés décrits minimisent ou éliminent sensiblement l'émergence de produits secondaires, produisant ainsi un niveau élevé de spécificité. De plus, l'apparition de produits secondaires peut compliquer l'analyse de la réaction d'amplification par différentes techniques de détection moléculaire. Les procédés décrits minimisent ou éliminent sensiblement ce problème, procurant ainsi des niveaux amplifiés de sensibilité.
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