WO2008015325A2 - Systeme de depot de cellules sur une plaque d'analyse - Google Patents
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- G01N2001/2846—Cytocentrifuge method
Definitions
- the present invention relates to a system for depositing cells on an analysis plate.
- cellular samples are taken which are suspended for analysis.
- these samples can be made using specific brushes, needles or any other suitable means and are then introduced into a bottle containing a cell fixator so that the cells removed are fixed by the fixer and form with this one a suspension. The cells must then be deposited on an assay plate.
- centrifugation and filtering means have been used to obtain this deposit of cells on the plate.
- centrifugation and filtering means are relatively complex, bulky, expensive and inconvenient use.
- Deposition of the cells can also be obtained by simple decantation.
- the cell suspension comprising the cellular fixative and the cells is poured into a reception chamber placed above the analysis plate and whose bottom is open and extends facing a deposit zone. of cells of the analysis plate.
- the document FR-A-2 792 333 proposes a system for depositing cells on an analysis plate, said cells being contained in a cell suspension comprising a cellular fixer and said cells, said suspension being poured into a bedroom receiver placed above the analysis plate, and whose bottom is open and extends facing a cell deposition area of the analysis plate.
- the bottom of the chamber is in fluid communication with a material for absorbing the fixer to progressively absorb it and allow homogeneous deposition of the cells on the cell deposition area of the analysis plate.
- the subject of the invention is a system for depositing on a cell analysis plate contained in a cell suspension comprising a cellular fixer and said cells, comprising a suspension receiving chamber placed above the plate.
- the system comprises one or more of the following characteristics: -
- the control means are adapted to control the fixing and clamping means to apply the first high pressure for a predetermined
- the predetermined period of time is equal to approximately 30 minutes.
- the fixing and clamping means comprise means forming a jack.
- the analysis plate is designated by the general reference 1 and is formed by any appropriate plate already known in the state of the art.
- This plate is received in a corresponding cavity 2 of a part 3 forming a base, which will be described in more detail later.
- a cell suspension designated by the general reference 4, is poured into a reception chamber 5, placed above the analysis plate and the bottom of which is open and extends facing a cell deposition zone. the analysis plate.
- This receiving chamber 5 is for example carried by a support piece 6 which will be described in more detail later, and which extends facing the base part 3.
- the bottom of the chamber 5 for receiving the suspension The cell is placed at a distance from the analysis plate 1 and is in fluid communication with a cellular fixative absorption material in order to progressively absorb it and allow a homogeneous deposition of the cells on the cell deposition zone of the cell. plate.
- This absorption material is designated by the general reference 7 in this figure and is for example in the form of a sheet of blotting paper the thickness of the liquid deposit (approximately 5 / 10th of a mm), provided with a hole 8 adapted to extend facing the cell deposition area of the analysis plate.
- the absorption material then extends around the cell deposit zone of the plate between the latter and the reception chamber 5, so as to allow the progressive absorption of the fixer.
- This sheet of absorption material 7 is therefore placed between the parts forming base 3 and support 6 facing the receiving chamber 5 of the suspension.
- Fixing and clamping these parts one on the other then makes it possible to hold the sheet of absorption material in position, by clamping therebetween. It is also conceivable that the rate of absorption of the fixer by the absorption material depends inter alia, for example, on the quality of the latter and the stress or pressure exerted on the latter by the base and supporting parts. , which makes it possible to optimize the absorption of the fixative without disturbing the homogeneous deposition of cells on the analysis plate.
- the fastening and clamping means 9 and 10 may for example be controlled to apply a variable pressure over time between a first high pressure to limit the absorption rate of the fixer by the absorption material in order to optimizing the deposition of cells homogeneously on the analysis plate and a second lower pressure allowing, once the deposition of the cells is already well engaged, to increase the rate of absorption of the fixer by the absorption material , which reduces the time required for the operation of depositing the cells on the plate.
- the fastening and clamping means 9 and 10 may for example comprise actuator means whose operation is controlled by an information processing unit or control unit designated by the general reference 11 in this figure, receiving by example input two pressure instructions P1 and P2 and a time information t.
- this information processing unit 11 can be adapted to control the fixing and clamping means so that they apply a first high pressure P1 and, at after this predetermined period of time, a lower pressure P2, which accelerates the absorption of the fixer.
- the pressure applied by the fastening and clamping means is switched between two values, one high and one low, at the end of the predetermined period of time.
- Other embodiments may be envisaged, such as, for example, a gradual variation over time of the pressure.
- the predetermined period of switching time may be of the order of 30 minutes. Indeed, tests have shown that from 30 minutes, the cells are already in place and it is then possible to accelerate the absorption of the fixer to save time on the deposit operation.
- struts or deformable lips delimiting a predetermined spacing between the chamber and the plate and absorption paths of the fixer may be integral with the wall of this chamber.
- this structure makes it possible to rapidly obtain a homogeneous deposition of the cells on the analysis plate, in particular in the form of a monolayer, which facilitates the subsequent analysis thereof and that this structure is particularly well adapted to the analysis of cytological suspensions.
Abstract
Ce système comportant une chambre de réception (5) d'une suspension cellulaire dont le fond ouvert, s'étend en regard d'une zone de dépôt de la plaque, et est en communication avec un matériau (7) d'absorption du fixateur, disposé autour de la zone de dépôt, et maintenu en position par serrage entre deux pièces (3, 6) associées à des moyens (9, 10) de fixation de l'une sur l'autre, dont l'une (6) est associée à la chambre de réception (5) et l'autre (3) est associée à la plaque, est caractérisé en ce que les moyens (9,10) de fixation sont raccordés à des moyens de commande (11) de la pression de serrage pour faire varier celle-ci dans le temps entre une première pression élevée (P1), au début du dépôt, et une seconde pression (P2) moins élevée.
Description
Système de dépôt de cellules sur une plaque d'analyse
La présente invention concerne un système de dépôt de cellules sur une plaque d'analyse.
Pour le dépistage ou le diagnostic des lésions, on réalise des prélèvements cellulaires qui sont mis en suspension en vue de leur analyse. De façon générale, ces prélèvements peuvent être réalisés à l'aide de brosses spécifiques, d'aiguilles ou de tout autre moyen adapté et sont ensuite introduites dans un flacon contenant un fixateur cellulaire afin que les cellules prélevées soient fixées par le fixateur et forment avec celui-ci une suspension. Les cellules doivent ensuite être déposées sur une plaque d'analyse.
On connaît déjà dans l'état de la technique, différents procédés et systèmes de dépôt pour ce type d'applications.
C'est ainsi par exemple que des moyens de centrifugation et de filtrage ont été mis en oeuvre pour obtenir ce dépôt de cellules sur la plaque. Cependant, de tels moyens sont relativement complexes, encombrants, coûteux et d'une utilisation peu commode.
Le dépôt des cellules peut également être obtenu par une simple décantation.
Dans ce cas, la suspension cellulaire comprenant le fixateur cellulaire et les cellules, est versée dans une chambre de réception placée au- dessus de la plaque d'analyse et dont le fond est ouvert et s'étend en regard d'une zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse.
Les cellules se déposent alors progressivement sur la plaque, puis le fixateur est retiré de la chambre. On conçoit cependant que cette opération qui consiste à enlever le fixateur sans déplacer les cellules est très longue et délicate.
Pour résoudre ces problèmes, le document FR-A- 2 792 333 propose un système de dépôt de cellules sur une plaque d'analyse, lesdites cellules étant contenues dans une suspension cellulaire comprenant un fixateur cellulaire et lesdites cellules, ladite suspension étant versée dans une chambre
de réception placée au-dessus de la plaque d'analyse, et dont le fond est ouvert et s'étend en regard d'une zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse. Selon ce système, le fond de la chambre est en communication fluidique avec un matériau d'absorption du fixateur afin d'absorber progressivement celui-ci et permettre un dépôt homogène des cellules sur la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse.
Cependant, à l'usage, un tel système a également présenté un certain nombre d'inconvénients, notamment au niveau du temps requis pour assurer l'absorption du fixateur et donc le dépôt des cellules sur la plaque d'analyse.
Le but de l'invention est donc de résoudre ces problèmes. A cet effet, l'invention a pour objet un système de dépôt sur une plaque d'analyse de cellules contenues dans une suspension cellulaire comprenant un fixateur cellulaire et lesdites cellules, comportant une chambre de réception de la suspension placée au-dessus de la plaque d'analyse, et dont le fond est ouvert et s'étend en regard d'une zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse, le fond de la chambre étant en communication fluidique avec un matériau d'absorption du fixateur afin d'absorber progressivement celui-ci et permettre un dépôt homogène des cellules sur la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse, le matériau d'absorption du fixateur étant disposé autour de la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse, et le matériau d'absorption du fixateur étant maintenu en position par serrage entre deux pièces associées à des moyens de fixation et de serrage de l'une sur l'autre, dont l'une est associée à la chambre de réception de la suspension et dont l'autre est associée à la plaque d'analyse, caractérisé en ce que les moyens de fixation et de serrage sont raccordés à des moyens de commande de la pression de serrage afin de faire varier celle-ci dans le temps, entre une première pression élevée, au début du dépôt, et une seconde pression moins élevée que la première. Suivant des modes particuliers de réalisation, le système comporte une ou plusieurs des caractéristiques suivantes :
- les moyens de commande sont adaptés pour piloter les moyens de fixation et de serrage afin d'appliquer la première pression élevée pendant une période de temps prédéterminée, puis la seconde pression moins élevée ;
- la période de temps prédéterminée est égale à environ 30 minutes ; et
- les moyens de fixation et de serrage comprennent des moyens formant vérin.
L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre, donnée uniquement à titre d'exemple et faite en se référant au dessin annexé qui représente une vue en coupe schématique d'un exemple de réalisation d'un dispositif de dépôt selon l'invention.
On a en effet représenté sur cette figure, un système de dépôt de cellules sur une plaque d'analyse.
La plaque d'analyse est désignée par la référence générale 1 et est formée par toute plaque appropriée déjà connue dans l'état de la technique.
Cette plaque est reçue dans une empreinte correspondante 2 d'une pièce 3 formant socle, qui sera décrite plus en détail par la suite.
Une suspension cellulaire, désignée par la référence générale 4 est versée dans une chambre de réception 5, placée au-dessus de la plaque d'analyse et dont le fond est ouvert et s'étend en regard d'une zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse.
Cette chambre de réception 5 est par exemple portée par une pièce de support 6 qui sera décrite plus en détail par la suite, et qui s'étend en regard de la pièce formant socle 3. Le fond de la chambre 5 de réception de la suspension cellulaire est placé à distance de la plaque d'analyse 1 et est en communication fluidique avec un matériau d'absorption du fixateur cellulaire afin d'absorber progressivement celui-ci et permettre un dépôt homogène des cellules sur la zone de dépôt de cellules de la plaque. Ce matériau d'absorption est désigné par la référence générale 7 sur cette figure et se présente par exemple sous la forme d'une feuille de papier buvard de l'épaisseur du dépôt liquidien (environ 5/10ème de mm), munie d'un
trou 8 adapté pour s'étendre en regard de la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse.
Le matériau d'absorption s'étend alors autour de la zone de dépôt de cellules de la plaque entre celle-ci et la chambre de réception 5, de manière à permettre l'absorption progressive du fixateur.
Cette feuille de matériau d'absorption 7 est donc placée entre les pièces formant socle 3 et de support 6 en regard de la chambre de réception 5 de la suspension.
Ces pièces peuvent être fixées et serrées l'une sur l'autre par l'intermédiaire de moyens de fixation et de serrage désignés par les références générales 9 et 10 sur cette figure.
La fixation et le serrage de ces pièces l'une sur l'autre permet alors de maintenir la feuille de matériau d'absorption en position, par serrage entre celles-ci. On conçoit également que la vitesse d'absorption du fixateur par le matériau d'absorption dépend entre autres par exemple de la qualité de celui-ci et de la contrainte ou pression qui est exercée sur celui-ci par les pièces formant socle et de support, ce qui permet d'optimiser l'absorption du fixateur sans perturber le dépôt homogène de cellules sur la plaque d'analyse. A cet effet, les moyens de fixation et de serrage 9 et 10 peuvent par exemple être pilotés pour appliquer une pression variable dans le temps entre une première pression élevée pour limiter la vitesse d'absorption du fixateur par le matériau d'absorption afin d'optimiser le dépôt de cellules de façon homogène sur la plaque d'analyse et une seconde pression moins élevée permettant, une fois que le dépôt des cellules est déjà bien engagé, d'augmenter la vitesse d'absorption du fixateur par le matériau d'absorption, ce qui permet de réduire le temps nécessaire à l'opération de dépôt des cellules sur la plaque.
A cet effet, les moyens de fixation et de serrage 9 et 10 peuvent par exemple comporter des moyens formant vérin dont le fonctionnement est piloté par une unité de traitement d'informations ou de commande désignée par la référence générale 11 sur cette figure, recevant par exemple en entrée deux
consignes de pression P1 et P2 et une information de temps t. Ainsi, par exemple, pendant une période de temps prédéterminée au début du dépôt, cette unité de traitement d'informations 11 peut être adaptée pour piloter les moyens de fixation et de serrage afin qu'ils appliquent une première pression P1 élevée et, à l'issue de cette période de temps prédéterminée, une pression P2 moins élevée, ce qui permet d'accélérer l'absorption du fixateur.
Dans l'exemple de réalisation qui vient d'être décrit, la pression appliquée par les moyens de fixation et de serrage est commutée entre deux valeurs l'une élevée et l'autre moins élevée au bout de la période de temps prédéterminée. D'autres modes de réalisation peuvent être envisagés, comme par exemple une variation progressive au cours du temps de la pression.
A titre d'exemple, la période de temps prédéterminée de commutation, telle qu'elle a été mentionnée précédemment peut être de l'ordre de 30 minutes. En effet, des tests ont montré qu'à partir de 30 minutes, les cellules sont déjà bien en place et qu'il est alors possible d'accélérer l'absorption du fixateur pour gagner du temps sur l'opération de dépôt.
Il va de soi bien entendu que différents modes de réalisation de ce dispositif peuvent être envisagés, en particulier au niveau de la mise en communication fluidique du fond de la chambre de réception de la suspension cellulaire et du matériau d'absorption.
Ainsi par exemple, des entretoises ou des lèvres déformables délimitant un écartement prédéterminé entre la chambre et la plaque et des trajets d'absorption du fixateur, peuvent être venus de matière avec la paroi de cette chambre.
On conçoit alors que cette structure permet d'obtenir rapidement un dépôt homogène des cellules sur la plaque d'analyse, notamment sous forme de monocouche, ce qui facilite l'analyse ultérieure de celles-ci et que cette structure est particulièrement bien adaptée à l'analyse de suspensions cytologiques.
Claims
1. Système de dépôt sur une plaque d'analyse de cellules contenues dans une suspension cellulaire (4) comprenant un fixateur cellulaire et lesdites cellules, comportant une chambre de réception (5) de la suspension placée au- dessus de la plaque d'analyse (1), et dont le fond est ouvert et s'étend en regard d'une zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse, le fond de la chambre (5) étant en communication fluidique avec un matériau (7) d'absorption du fixateur afin d'absorber progressivement celui-ci et permettre un dépôt homogène des cellules sur la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse (1), le matériau d'absorption du fixateur étant disposé autour de la zone de dépôt de cellules de la plaque d'analyse (1), et le matériau (7) d'absorption du fixateur étant maintenu en position par serrage entre deux pièces (3, 6) associées à des moyens (9, 10) de fixation et de serrage de l'une sur l'autre, dont l'une (6) est associée à la chambre de réception (5) de la suspension et dont l'autre (3) est associée à la plaque d'analyse, caractérisé en ce que les moyens (9,10) de fixation et de serrage sont raccordés à des moyens de commande (11) de la pression de serrage afin de faire varier celle- ci dans le temps, entre une première pression élevée (P1), au début du dépôt, et une seconde pression (P2) moins élevée que la première.
2. Système selon la revendication 1 , caractérisé en ce que les moyens de commande (11) sont adaptés pour piloter les moyens (9, 10) de fixation et de serrage afin d'appliquer la première pression élevée (P1) pendant une période de temps prédéterminée, puis la seconde pression (P2) moins élevée.
3. Système selon la revendication 2, caractérisé en ce que la période de temps prédéterminée est égale à environ 30 minutes.
4. Système selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les moyens de fixation (9, 10) et de serrage comprennent des moyens formant vérin.
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