WO2006038320A1 - 揮散性物質の機能性の評価方法 - Google Patents

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    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
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    • G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
    • G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates

Definitions

  • the present invention relates to a method for evaluating the functionality of a volatile substance. More specifically, the present invention relates to a method for evaluating the functionality of a volatile substance with high accuracy using an experimental animal.
  • the conventional method of using an open breeding cage eliminates the problems of oxygen deficiency and increased temperature and humidity, but volatilized volatile substances are discharged outside the breeding cage, and the concentration of volatile substances in the atmosphere in the breeding cage
  • the functionality of the volatile substance cannot be accurately evaluated because it fluctuates with the passage of breeding time.
  • the volatilization rate of each volatile compound in the volatile substance is Due to the difference, the distribution of the volatile compounds mixed in the breeding cage changed over time, and the functionality of the volatile substances could not be evaluated correctly.
  • Non-Patent Document 1 Mitsatsuka Tanida, Mieko Doshi, “Effects of essential oils on the momentum of mice and their volatility”, Journal of the Wood Society, Vol.31, No.5, p.409-417, 1985
  • an object of the present invention is to solve the above-mentioned problems of the prior art. That is, the present invention aims to provide a method for evaluating the functionality of a volatile substance with high accuracy in vivo.
  • the present inventors diligently studied to solve the above-mentioned problems.
  • the air in which the volatile substance has been volatilized in advance at a predetermined concentration is supplied into the breeding room and the air in the breeding room is discharged.
  • the inside of the breeding room at a certain volatile substance concentration, raising a laboratory animal in such a breeding room and observing the effect on the laboratory animal, It was found that the functionality of a substance can be evaluated with high accuracy.
  • the present invention has been developed through further studies based on such knowledge.
  • the present invention provides the following inventions:
  • Item 1 A method for evaluating the functionality of a volatile substance
  • the said evaluation method containing.
  • Item 2 The evaluation method according to Item 1, wherein the volatile substance is a fragrance.
  • the evaluation method of the present invention evaluates the functionality of a volatile substance.
  • a volatile substance means a volatile substance under normal use conditions (normal temperature and normal pressure). That is, a substance that is volatile at room temperature.
  • the volatile substance to be evaluated in the present invention may be a substance having a known structure or composition, or a substance having an unknown structure or composition.
  • the volatile substance may be composed of a plurality of compounds in addition to that composed of a single compound.
  • the evaluation method of the present invention is advantageous in that even if a volatile substance composed of a plurality of compounds is evaluated, the adverse effect due to the difference in the volatilization speed of each compound can be eliminated and the functionality of the volatile substance can be accurately evaluated. From this point of view, a volatile substance composed of multiple compounds can be cited as one of the suitable evaluation targets.
  • a plant-derived essential oil component is specifically exemplified.
  • the volatile substance is used in a state of being volatilized in advance, and therefore, even if the volatile substance has a low degree of volatilization at normal temperature and normal pressure, the experimental animal is affected.
  • the volatilization concentration of the substance can be adjusted to an appreciable level, and this has the advantage that the functionality of the volatile substance can be evaluated with high accuracy. Examples include low volatility substances with a pressure of lOmmHg or less.
  • volatile substances specifically, volatile substances known as fragrances, deodorant substances, bactericidal substances, insecticidal substances, insect repellent substances, sedative substances, arousal substances, etc. Can be mentioned.
  • fragrances are known to have various physiological activities including an aromatherapy effect, and the method of the present invention is suitable as a method for evaluating new properties and safety of fragrances. It is. Note that a volatile substance whose functionality (use) is not known at all can be applied to the evaluation method of the present invention to evaluate the presence or degree of new functionality.
  • the functionality to be evaluated is a functional characteristic that can be estimated by measuring behavioral characteristics and physiological parameters of experimental animals.
  • Specific examples of such functionality include sleep promoting effects, awakening effects, diuretic effects, appetite enhancing effects, anti-allergic effects, dieting effects, digestion promoting effects, and the like.
  • the experimental animal used in the evaluation method of the present invention is not particularly limited as long as it is an animal that can reflect the presence or absence and degree of functionality to be evaluated.
  • Specific examples of the experimental animals include mammals such as rats, mice, rabbits, monkeys, and dogs; birds such as chickens and pigeons; And the like.
  • mammals, particularly mice, rats and rabbits, are widely used as experimental animals and are preferred.
  • a disease model animal or an animal improved for an experiment can be used according to the functionality to be evaluated.
  • step (1) the air in which the volatile substance has been volatilized in advance at a predetermined concentration is supplied to the breeding room containing the experimental animals, and the air in the breeding room is exhausted to achieve a certain volatility.
  • the experimental animal is raised in a substance concentration atmosphere.
  • Air in which a volatile substance has been volatilized at a predetermined concentration (hereinafter referred to as supply air) used in this step can be prepared according to a method known or commonly used in the technical field. .
  • supply air used in this step
  • put a volatile substance in an amount of the desired concentration in a container with a predetermined capacity heat the container after sealing it, and completely evaporate the entire volatile substance in the container. A method is mentioned.
  • the concentration of the volatile substance in the atmosphere in the breeding room is substantially maintained at the concentration of the volatile substance in the supply air. Therefore, the concentration of the volatile substance in the supply air is appropriately set based on the concentration of the volatile substance exposed to the laboratory animal.
  • the oxygen content and humidity of the supply air can be appropriately adjusted within a range that does not impede the growth of experimental animals.
  • Supply air can be supplied to the nursery room by using a known or conventional air supply means.
  • the supply speed of the supply air into the breeding room depends on the residence time of the supply air, the type of test animal to be used, the capacity of the breeding room, the type and concentration of the volatile substance contained in the supply air, etc. Is set as appropriate.
  • the residence time of the supply air is usually 0.5 to 30000 minutes, preferably 5 to 3000 minutes.
  • the “supply air residence time” here is calculated as XZY, where Xml is the capacity of the breeding room and Yml / min is the supply speed of the supply air.
  • the air in the breeding room is discharged together with the supply air.
  • Breeding room As a method for discharging the air in the room, for example, a method of naturally discharging from the air outlet in the breeding room, a method of providing air discharging means such as an air outlet fan in the breeding room, and forcibly discharging by the means, etc. Is mentioned.
  • the air discharge speed is set to the same speed as the supply speed of the supply air.
  • the concentration of the volatile substance in the atmosphere in the breeding room is kept constant.
  • the laboratory animal breeding temperature and feeding method are set as appropriate according to the type of animal and the purpose of evaluation.
  • the functionality to be evaluated is a sleep promoting effect or awakening effect, the sleep time, momentum, electroencephalogram or electromyogram status of the experimental animal; if the functionality to be evaluated is a diuretic effect, The amount of urine excreted in the laboratory animal; if the functionality of the evaluation target is an appetite-enhancing effect, the amount of feeding of the experimental animal; if the functionality of the evaluation target is an anti-allergic effect, If the functionality to be evaluated is a diet effect, the body weight of the experimental animal;
  • the breeding atmosphere of the experimental animal is maintained at a constant volatile substance concentration, so the function of the volatile substance in vivo with high accuracy. Sex can be evaluated.
  • the volatile substance composed of a plurality of volatile compounds having different vapor pressures is used. Even so, a breeding room atmosphere is created that accurately reflects the composition ratio of each compound in the volatile substance so that the distribution of each volatile compound in the breeding room does not change over time. Therefore, it is possible to evaluate the functionality of volatile substances composed of multiple volatile compounds with different vapor pressures with high accuracy.
  • FIG. 1 is a diagram showing the change over time in the temperature of the breeding room during the breeding period in Example 1 and Comparative Example 1.
  • Fig. 2 is a graph showing changes over time in humidity in the breeding room during the breeding period in Example 1 and Comparative Example 1.
  • FIG. 3 is a graph showing changes over time in the concentration of ⁇ -santalol (instrument measurement value) in the breeding room during the breeding period in Example 1 and Comparative Example 1.
  • Example 1
  • Sedation ' ⁇ Santalol which has a sleep effect, was evaluated as a volatile substance model for its sedation and sleep effect according to the following method.
  • a Wistar male rat (1 rat) weighing 240 g is raised under the following conditions, and the time-dependent changes in the room temperature, room humidity, and ⁇ -santalol concentration in the room are measured during the breeding period. At the same time, the behavior of the rats during the breeding period was observed, and the sedative / sleeping effect of ⁇ -santalol was evaluated (Example 1). The ⁇ -santalol concentration in the breeding room was measured by gas chromatography.
  • a breeder equipped with a cylindrical breeding room (capacity 17L) with an air supply port and an air discharge port was used.
  • the animals were placed in the breeding room for free consumption of food and water, and the experimental animals were placed in the breeding room for 120 minutes for breeding.
  • Example 1 Similarly to Example 1, during the breeding period, the time-dependent changes in the breeding room temperature, the breeding room humidity, and the ⁇ -santalol concentration in the breeding room were measured, and the behavior of the rat during the breeding period was observed (comparison). Example 1).
  • Figure 1-13 shows the measurement results of temperature, humidity and ⁇ -santalol concentration in the breeding room. Shown in As can be seen from FIGS. 1 to 3, in Example 1, the temperature, humidity and ⁇ -santalol concentration in the breeding room were kept constant during the breeding period. In Comparative Example 1, as the breeding time passed, It was confirmed that the temperature, humidity and ⁇ -santalol concentration in the breeding room increased. Therefore, in Example 1, it was clear that the action of a-santalol could be accurately reflected in the rat. On the other hand, in Comparative Example 1, since the temperature and humidity change with the ⁇ -santalol concentration during the breeding period, the effect of a single santalol can be accurately reflected in the rat. confirmed.
  • Table 1 shows the results of observation of rat behavior during the breeding period.
  • Example 1 there was no abnormality in the behavior of the rats in the breeding room.
  • Comparative Example 1 there was an abnormality in the body surface, behavior, and feeding status of the rats. It was confirmed that it was under stress.
  • Example 1 since the rats had more sleep time and frequency than usual during the breeding period, it was confirmed that a-santalol had a sedative sleep effect.
  • Comparative Example 1 since the behavior of rats was abnormal, a-santalol was not able to confirm the sedative sleep effect. From the above results, it was confirmed that the functionality of the volatile substance can be accurately evaluated according to the method of the present invention.

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Abstract

　【課題】　本発明の目的は、in vivoにおいて揮散性物質の機能性を高い精度で評価する方法を提供することである。 　【解決手段】　飼育室内に予め所定の濃度に揮散性物質を揮散させた空気を供給させると共に、該飼育室内の空気の排出を行うことにより、該飼育室内を一定の揮散性物質濃度に保ち、このような飼育室内で実験動物を飼育して、その実験動物に及ぼされる影響を観察することによって、該揮散性物質の機能性を高い精度で評価できる。 　

Description

明 細 書
揮散性物質の機能性の評価方法
技術分野
[0001] 本発明は、揮散性物質の機能性の評価方法に関する。より詳細には、本発明は、 実験動物を用いて揮散性物質の機能性を高!、精度で評価する方法に関する。 背景技術
[0002] 常温で揮散する物質の中には、揮散された状態で、芳香、消臭、殺菌、殺虫性、害 虫忌避、鎮静、覚醒等の種々の活性を発揮するものが知られている。このような活性 を有する揮散性の物質は、揮散性薬剤として、芳香剤、香水、化粧料、浴用剤、防腐 剤、抗菌剤、防虫剤等に利用されている。力かる揮散性薬剤を開発する上では、 in vivoでの揮散性物質の安全性や特性を確認し、該物質の機能性を高!ヽ精度で評価 する技術が不可欠である。
[0003] 従来、揮散性物質の機能性を in vivoで評価するには、密閉系又は開放系の実験 動物飼育ケージに実験動物と共に揮散性物質を入れて揮散性物質が該実験動物 に与える影響を確認する方法が採用さている (例えば、非特許文献 1参照)。しかしな がら、密閉系の飼育ケージを使用する従来法では、飼育時間の経過と共にケージ内 の酸素濃度が欠乏するだけでなく実験動物の体温による飼育ゲージ内の温度の上 昇、呼吸による飼育ゲージ内の湿度の上昇によって実験動物が悪影響を受けて、揮 散性物質の影響が実験動物に正しく反映されないという欠点がある。また、開放系の 飼育ケージを使用する従来法では酸素欠乏、温湿度上昇という問題は解消されるが 、揮散された揮散性物質が飼育ケージ外に排出し、飼育ケージ内雰囲気の揮散性 物質濃度が飼育時間の経過と共に変動するため、揮散性物質の機能性を正確に評 価できないという問題点がある。また、上記従来の評価方法では、蒸気圧が異なる複 数の揮散性化合物から構成されて!ヽる揮散性物質を評価対象とする場合、該揮散 性物質中の各揮散性化合物の揮散速度が異なるため、飼育ケージ内に揮散された 揮散性ィ匕合物の分布が経時的に変化し、揮散性物質の機能性を正しく評価できな いという不都合もあった。 [0004] このような従来技術を背景として、揮散性物質の安全性や特性を確認し、該物質の 機能性を高!ヽ精度で評価する技術の開発が望まれて!/ヽた。
非特許文献 1 :谷田貝光克、土師美恵子、「精油のマウスの運動量におよぼす影響と その揮散度について」、木材学会誌、 Vol.31、 No.5、 p.409-417, 1985年
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] そこで、本発明の目的は、上記従来技術の課題を解決することである。即ち、本発 明は、 in vivoにおいて揮散性物質の機能性を高い精度で評価する方法を提供する ことを目的とする。
課題を解決するための手段
[0006] 本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討したところ、飼育室内に予め所定 の濃度で揮散性物質を揮散させた空気を供給させると共に、該飼育室内の空気の 排出を行うことにより、該飼育室内を一定の揮散性物質濃度に保ち、このような飼育 室内で実験動物^!司育して、その実験動物に及ぼされる影響を観察することによつ て、該揮散性物質の機能性を高い精度で評価できることを見出した。本発明は、か かる知見に基づいて、更に検討を重ねて開発されたものである。
[0007] 即ち、本発明は、下記に掲げる発明を提供するものである：
項 1. 揮散性物質の機能性の評価方法であって、
(1)実験動物を入れた飼育室内に予め所定の濃度で揮散性物質を揮散させた空気 を供給させると共に、該飼育室内の空気の排出を行うことにより、一定の揮散性物質 濃度雰囲気下で該実験動物の飼育を行う工程、及び
(2)該揮散性物質が実験動物に与える影響を観察し、該揮散性物質の機能性を評価 する工程、
を含有する、上記評価方法。
項 2. 揮散性物質が香料である、項 1に記載の評価方法。
[0008] 以下に、本発明を詳細に説明する。
[0009] 本発明の評価方法は、揮散性物質の機能性にっ 、て評価するものである。
[0010] 本発明において、揮散性物質とは、通常の使用状態 (常温常圧下）において揮散 する物質、即ち、常温揮散性の物質のことである。本発明において評価対象となる揮 散性物質は、構造や組成が公知の物質であっても、また構造や組成が未知の物質 であってもよい。
[0011] また、該揮散性物質は、単一の化合物から構成されるものの他、複数の化合物から 構成されるものであってもよい。本発明の評価方法では、複数の化合物から構成され る揮散性物質を評価対象としても、各化合物の揮散速度の違いによる悪影響を排除 して、揮散性物質の機能性を正確に評価できるという利点があり、かかる観点から、 好適な評価対象の 1つとして複数の化合物から構成される揮散性物質が挙げられる
。このような揮散性物質として、具体的には植物由来の精油成分が例示される。
[0012] また、本発明の評価方法では、揮散性物質は予め揮発させた状態で使用されるた め、常温常圧下で揮散の程度が低い揮散性物質であっても、実験動物に影響が認 められる程度に該物質の揮散濃度を調整でき、これによつて該揮散性物質の機能性 を高い精度で評価できるという利点もあるので、かかる観点から、好適な評価対象の 1つとして蒸気圧 lOmmHg以下の低揮散性の物質が挙げられる。
[0013] 揮散性物質として、具体的には、香料、消臭性物質、殺菌性物質、殺虫性物質、害 虫忌避性物質、鎮静性物質、覚醒性物質等として知られている揮散性物質が挙げら れる。中でも、香料は、ァロマセラピー効果を初めとする種々の生理活性を有してい ることが知られており、本発明の方法は、香料の新たな特性や安全性を評価するた めの方法として好適である。なお、機能性 (用途)が全く知られていない揮散性物質 についても、本発明の評価方法に適用して、新たな機能性の有無や程度の評価を 行うことができる。
[0014] また、本発明にお 、て、評価対象となる機能性とは、実験動物の行動特性や生理 学的パラメーターを測定することにより推定可能な機能特性のことである。かかる機能 性の具体例として、睡眠促進効果、覚醒効果、利尿効果、食欲増進効果、抗アレル ギー効果、ダイエット効果、消化促進効果等が例示される。
[0015] 本発明の評価方法で使用する実験動物としては、評価の対象となる機能性の有無 や程度を反映可能な動物でることを限度として、特に制限されない。該実験動物とし て、具体的には、ラット、マウス、ゥサギ、猿、犬等の哺乳動物;鶏、ハト等の鳥類;蛙 等の両性類等が例示される。これらの中で、ほ乳類、特にマウス、ラット及びゥサギは 、実験動物として汎用されており、好適である。
[0016] また、当該実験動物は、評価対象の機能性に応じて、疾患モデル動物や実験用に 改良された動物を使用することもできる。
[0017] 以下、本発明の評価方法を工程毎に説明する。
工程
本工程 (1)では、実験動物を入れた飼育室内に予め所定の濃度で揮散性物質を揮 散させた空気を供給させると共に、該飼育室内の空気の排出を行うことにより、一定 の揮散性物質濃度雰囲気下で該実験動物の飼育を行う。
[0018] 本工程で使用する「所定の濃度で揮散性物質を揮散させた空気」（以下、供給空 気と表記する）の調製は、当該技術分野で公知又は慣用の方法に従って行うことが できる。その製法の一例として、所定の容量の容器内に目的の濃度となる分量の揮 散性物質を入れて、該容器を密閉した後に加熱し、容器内で揮散性物質の全量を 完全に揮散させる方法が挙げられる。
[0019] 本工程において、飼育室内雰囲気の揮散性物質の濃度は、実質的に、供給空気 中の揮散性物質の濃度に保持される。故に、供給空気中の揮散性物質の濃度は、 実験動物に暴露する揮散性物質の濃度に基づいて適宜設定される。
[0020] 該供給空気の酸素含量や湿度については、実験動物の生育を妨げない範囲で適 宜調整することができる。
[0021] 供給空気^!司育室内に供給するには、公知又は慣用の空気供給手段を使用する ことにより行うことができる。
[0022] 供給空気の飼育室内への供給速度としては、供給空気の滞留時間、使用する実 験動物の種類、飼育室の容量、供給空気に含まれる揮散性物質の種類や濃度等に 応じて、適宜設定される。また、供給空気の滞留時間としては、通常 0. 5— 30000分 、好ましくは 5— 3000分が挙げられる。なお、ここでいう「供給空気の滞留時間」とは 、飼育室の容量を Xml、供給空気の供給速度を Yml/minとすると、 XZYとして算出さ れる。
[0023] 本工程では、上記供給空気の供給と共に、飼育室内の空気の排出を行う。飼育室 内の空気を排出させる方法としては、例えば、飼育室内の空気排出口から自然排出 させる方法や、飼育室内の空気排出口ファン等の空気排出手段を設け、該手段によ り強制排出させる方法等が挙げられる。なお、飼育室内の空気を強制排出する場合 には、その空気排出速度は、上記供給空気の供給速度と同速度に設定する。
[0024] なお、供給空気の供給と飼育室内の空気の排出は、飼育室内の雰囲気を一定の 揮散性物質濃度に保つ観点から、連続的に実施することが望ましい。しかし、本発明 の効果を妨げず、実験動物の飼育全期間の平均として算出した供給空気の滞留時 間が上記範囲を具備することを限度として、供給空気の供給と飼育室内の空気の排 出を断続的に実施してもよい。
[0025] 上記のように、供給空気の供給と飼育室内の空気の排出を行うことにより、飼育室 内の雰囲気の揮散性物質濃度が一定に保たれる。力かる雰囲気下で所定の期間、 実験動物の飼育を行うことによって、揮散性物質の作用効果が実験動物に、正確に 反映される。なお、実験動物の飼育温度や給餌方法については、実験動物の種類 や評価目的等に応じて適宜設定される。
[0026] 工程 (2)
本工程では、揮散性物質が実験動物に与える影響を観察し、該揮散性物質の機 能性の評価を行う。
[0027] 揮散性物質が実験動物に与える影響は、該揮散性物質の機能性に応じて種々異 なる。そのため、本工程における「揮散性物質が実験動物に与える影響」の観察は、 評価対象の機能性に基づいて変動する実験動物の行動特性や生理学的パラメータ 一を測定することにより実施される。例えば、評価対象の機能性が睡眠促進効果や 覚醒効果の場合であれば、実験動物の睡眠時間、運動量、脳波又は筋電図の状態 ；評価対象の機能性が利尿効果の場合であれば、実験動物の排出尿量;評価対象 の機能性が食欲増進効果の場合であれば、実験動物の接餌量;評価対象の機能性 が抗アレルギー効果であれば、実験動物の血中ヒスタミン濃度;評価対象の機能性 がダイエット効果であれば、実験動物の体重；消化促進効果であれば、胃液分泌量 もしくは腸管のぜん動運動の変化を測定すればよい。
[0028] このように実験動物の行動特性や生理学的パラメーターを測定し、その測定結果 に基づいて、評価対象の機能性の有無や程度を推定できる。斯くして、「揮散性物質 が実験動物に与える影響」の観察結果に基づいて、該揮散性物質の機能性の評価 を行うことができる。
発明の効果
[0029] 本発明の揮散性物質の機能性の評価方法によれば、実験動物の飼育雰囲気が一 定の揮散性物質濃度に保持されるので、高い精度で、 in vivoにおける揮散性物質の 機能性を評価することができる。
[0030] また、本発明の評価方法において、揮散性物質を予め揮散させた空気を実験動物 の飼育室内に供給するので、蒸気圧が異なる複数の揮散性化合物から構成される 揮散性物質を使用しても、飼育室内の各揮散性化合物の分布が経時的に変化する ことがなぐ揮散性物質中の各化合物の組成比を正確に反映した飼育室雰囲気が作 成される。それ故、蒸気圧が異なる複数の揮散性化合物から構成される揮散性物質 に対しても、高い精度でその機能性を評価できる。
[0031] 更に、本発明の評価方法では、揮散性物質を予め揮散させた空気の供給と飼育室 内の空気の排出が、継続的に行われているため、動物飼育期間中に、飼育室を開 放してサンプリングを行ったとしても、サンプリング後速やかに実験動物の飼育雰囲 気を、所定の揮散性物質濃度に戻すことができる。そのため、本発明の評価方法に よれば、サンプリングを行うことにより生じる実験誤差を最小限に抑えることができる。 図面の簡単な説明
[0032] [図 1]図 1は、実施例 1及び比較例 1における、飼育期間中の飼育室内の温度の経時 的変化を示す図である。
[図 2]図 2は、実施例 1及び比較例 1における、飼育期間中の飼育室内の湿度の経時 的変化を示す図である。
[図 3]図 3は、実施例 1及び比較例 1における、飼育期間中の飼育室内の α—サンタロ ールの濃度 (機器測定値)の経時的変化を示す図である。
発明を実施するための最良の形態
[0033] 以下、実施例及び試験例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例 に限定されるものではない。 実施例 1
鎮静'睡眠効果を有する α サンタロールを揮散性物質のモデルとして、その鎮静 •睡眠効果につ!、て下記方法に従って評価した。
[0034] 下記の条件下で体重 240gの Wistar系雄性ラット（ 1匹）を飼育し、飼育期間中、飼 育室内温度、飼育室内湿度、飼育室内の α -サンタロール濃度の経時変化を測定 すると共に、飼育期間中の該ラットの行動を観察し、 α -サンタロールの鎮静 ·睡眠効 果について評価した (実施例 1)。なお、飼育室内の α サンタロール濃度は、ガスク 口マトグラフィ一により測定した。
(編音器
空気供給口と空気排出口を有するの円柱形の飼育室 (容量 17L)を備えた飼育器 を利用した。
95重量0 /0ひ サンタロール含有溶液をパルプ製濾紙に 0. 15g含浸させ、これを無 臭袋に入れ、更に窒素:酸素 (容量比) 4 : 1の工業用エアーを 25L入れて、該無臭袋 を密閉した。これを 40°Cで 8時間静置させた後、室温で 1時間放置して、 a サンタロ ールが 5. 7mgZLの濃度で揮散して 、る供給空気を製した。
(iii) ffi ¾の ffi 俪 ¾の 屮，
空気供給ポンプ（GLサイエンス社製、 SP206-AC)を用いて、流速 500mL/minで飼 育期間中連続的に供給空気の供給を行った。飼育室内空気の排出は、飼育室に設 けられた排出口から自然排出により実施した。
(iv)飼音条件
餌及び水を自由に摂取できるよう飼育室内に入れて、 120分間、飼育室内に実験 動物を入れ、飼育した。
[0035] また、比較として、下記の条件下で体重 240gの Wistar系雄性ラット（1匹）を飼育し
、実施例 1と同様に、飼育期間中、飼育室内温度、飼育室内湿度、飼育室内の α— サンタロール濃度の経時変化を測定すると共に、飼育期間中の該ラットの行動を観 察した (比較例 1)。
[0036] 飼育室内の温度、湿度及び α サンタロール濃度の測定結果について、図 1一 3に に示す。図 1〜3から分かるように、実施例 1では、飼育期間中、飼育室内の温度、湿 度及び α—サンタロール濃度は一定に保持されていた力 比較例 1では、飼育時間 の経過に伴って、飼育室内の温度、湿度及び α—サンタロール濃度が上昇すること が確認された。従って、実施例 1では、 a—サンタロールの作用をラットに正確に反 映できてレ、ることが明ら力となった。一方、比較例 1では、飼育期間中に α—サンタロ ール濃度と共に温度や湿度が変化してレヽるので、 a一サンタロールの作用をラットに 正確に反映できてレヽなレ、こと力 S確認された。
[0037] また、飼育期間中にラットの行動を観察した結果を表 1に示す。この結果、実施例 1 では、飼育室内のラットの行動に異常は認められな力 た力 比較例 1では、ラットの 体表、行動、接餌状況に異常がみられ、飼育室内の環境変化によりストレスを受けて レ、ることが確認された。また、実施例 1では、ラットは、飼育期間中、通常よりも睡眠時 間及び睡眠回数が多力 たことから、 a—サンタロールには鎮静'睡眠効果があるこ と力 S確認できた。一方、比較例 1では、ラットの行動に異常が見られたため、 a—サン タロールには鎮静'睡眠効果については確認できなカゝつた。以上の結果から、本発 明の方法によれば、揮散性物質の機能性を正確に評価できることが確認された。
[0038] [表 1]
Figure imgf000010_0001
訂正された 敏 (纖 1)

Claims

請求の範囲 [1] 揮散性物質の機能性の評価方法であって、
(1)実験動物を入れた飼育室内に予め所定の濃度で揮散性物質を揮散させた空気 を供給させると共に、該飼育室内の空気の排出を行うことにより、一定の揮散性物質 濃度雰囲気下で該実験動物の飼育を行う工程、及び
(2)該揮散性物質が実験動物に与える影響を観察し、該揮散性物質の機能性を評価 する工程、
を含有する、上記評価方法。
[2] 揮散性物質が香料である、請求項 1に記載の評価方法。
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CN108398524A (zh) * 2018-01-15 2018-08-14 宁波高新区鹏博科技有限公司 一种农药杀虫效果的检测装置

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