WO2005004904A1 - Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative et/ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang (variantes) - Google Patents

Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative et/ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang (variantes) Download PDF

Info

Publication number
WO2005004904A1
WO2005004904A1 PCT/RU2004/000262 RU2004000262W WO2005004904A1 WO 2005004904 A1 WO2005004904 A1 WO 2005004904A1 RU 2004000262 W RU2004000262 W RU 2004000262W WO 2005004904 A1 WO2005004904 A1 WO 2005004904A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
zabοlevany
dηκ
mice
κροvi
vneκleτοchnοy
Prior art date
Application number
PCT/RU2004/000262
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Dmitry Dmitrievich Genkin
Viktor Veniaminovich Tets
Georgy Viktorovich Tets
Original Assignee
Dmitry Dmitrievich Genkin
Viktor Veniaminovich Tets
Georgy Viktorovich Tets
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/RU2003/000304 external-priority patent/WO2005007187A1/ru
Priority claimed from RU2004108060/14A external-priority patent/RU2269359C2/ru
Application filed by Dmitry Dmitrievich Genkin, Viktor Veniaminovich Tets, Georgy Viktorovich Tets filed Critical Dmitry Dmitrievich Genkin
Publication of WO2005004904A1 publication Critical patent/WO2005004904A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/45—Transferases (2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y201/00—Transferases transferring one-carbon groups (2.1)
    • C12Y201/01—Methyltransferases (2.1.1)
    • C12Y201/01037—DNA (cytosine-5-)-methyltransferase (2.1.1.37)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes

Definitions

  • Iz ⁇ b ⁇ e ⁇ enie ⁇ n ⁇ si ⁇ sya ⁇ medicine and ve ⁇ e ⁇ ina ⁇ ii and m ⁇ zhe ⁇ by ⁇ is ⁇ lz ⁇ van ⁇ to treat zab ⁇ levany, s ⁇ v ⁇ zhdayuschi ⁇ sya ⁇ aches ⁇ vennymi5 or ⁇ lich ⁇ s ⁇ vennymi changes vne ⁇ le ⁇ chn ⁇ y D ⁇ ⁇ vi and imenn ⁇ : ⁇ n ⁇ l ⁇ giches ⁇ i ⁇ zab ⁇ levany, gene ⁇ aliz ⁇ vanny ⁇ in ⁇ e ⁇ tsi ⁇ nny ⁇ zab ⁇ levany, vyzyvaemy ⁇ ba ⁇ e ⁇ iyami, zab ⁇ levany, vyzyvaemy ⁇ g ⁇ ibami and ⁇ s ⁇ eyshimi, a ⁇ e ⁇ s ⁇ le ⁇ za, sa ⁇ a ⁇ n ⁇ g ⁇ diabe ⁇ a, alle ⁇ giches ⁇ i ⁇ zab ⁇ levany associated with the
  • the main method of treating diseases caused by bacteria, bruises and simplest ones is antibiotic and chemotherapy, see north alliance ⁇ réelle réelle matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters matters ⁇ Sh ⁇ .
  • the main method of treatment for atherosclerosis is
  • the problems of antibiotic and chemical infections caused by the bumps and the simplest ones are mainly caused by the infection and the problems of the virus; na ⁇ ime ⁇ , ⁇ i treatment shi ⁇ 5 ⁇ as ⁇ s ⁇ anennym ai ⁇ ig ⁇ ib ⁇ vym agen ⁇ m am ⁇ e ⁇ itsin ⁇ m ( ⁇ Gsh ⁇ a1 ⁇ ga ⁇ gez ⁇ z ⁇ a ⁇ se ⁇ a ⁇ ez a ⁇ ⁇ ue ⁇ ez, ⁇ ag ⁇ az ⁇ a Sa ⁇ i ⁇ e ⁇ .a1., ⁇ e a ⁇ se ⁇ ⁇ Ges ⁇ iz ⁇ zeazez, ⁇ ite 2 ⁇ zzie 9, 1 ⁇ e ⁇ eteg 2002 ⁇ a ⁇ ez 550-563 ; ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ tran ⁇ 2003 95 ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ 2003 2003 ⁇ 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003 2003
  • Medical and curative treatment 5 are subject to the name of the manifestations of systemic atherosclerosis at the level of this or other medical unit. After treatment, as a systemic disease does not have the means of treatment.
  • Best va ⁇ ian ⁇ ⁇ susches ⁇ vleniya iz ⁇ b ⁇ e ⁇ eniya claimed s ⁇ s ⁇ b ⁇ ealizue ⁇ sya ⁇ b ⁇ az ⁇ m follows: ⁇ a ⁇ e ⁇ ialy and me ⁇ dy: beta ⁇ e ⁇ v ⁇ m va ⁇ ian ⁇ e in ⁇ aches ⁇ ve agen ⁇ a, svyazyvayuscheg ⁇ D ⁇ , is ⁇ lz ⁇ vali an ⁇ i ⁇ ela ⁇ iv D ⁇ allocated from ⁇ v ⁇ b ⁇ lny ⁇ sis ⁇ emn ⁇ y ⁇ asn ⁇ v ⁇ lchan ⁇ y ⁇ me ⁇ di ⁇ e Ziz ⁇ eg ⁇ . ⁇ .
  • Sauna an anti-inflammatory and anti-inflammatory system
  • D ⁇ ⁇ lazmy ⁇ vi ⁇ b ⁇ az ⁇ m isolated as follows: fresh (not b ⁇ lee 3-4 chas ⁇ v ⁇ sle zab ⁇ a) ⁇ lazmu ⁇ vi with d ⁇ bavlennym an ⁇ i ⁇ agulyan ⁇ m (tsi ⁇ a ⁇ na ⁇ iya) ⁇ uchivali on ⁇ dush ⁇ e from the Soviet Union ( ⁇ te ⁇ zbat--battas ⁇ a) ⁇ and 1500 ⁇ 20 minutes ⁇ and the room temperature. Plasma (1/2 of the total quantity) was removed without touching the plug on the fixture, and received no more than 10,000 ⁇ 30 minutes to get rid of.
  • the detergent was removed without affecting the plant, they added up to 1% of the amber, up to 50 m ⁇ of tras- ⁇ , ⁇ 7.6, up to 20 m ⁇ of ED ⁇ , up to 400 m ⁇ of ⁇ réelle ⁇ , and the same amount of mixture: 1.
  • the resulting emulsion 5 was incubated at 65 ° C for 2 hours, then the phenol was separated by centrifugation at 5000 ° for 20 minutes at a constant temperature. The process of de-initiation of the phenol-generator was repeated in an identical manner once, after which, we processed the terminal by turning on the receiver. Separation of the products from the local suppliers was carried out by centrifuging at 5,000 for 15 minutes.
  • the volume of D ⁇ was 2 ml, the volume of each step of the SZS ⁇ was 1 1 ml.
  • Ultraprocessing and distribution took place at the L80-80 ( ⁇ blaze concentrate serv ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ), 3 hours blaze serv AN and 250000 ⁇
  • a 5.7 step was taken.
  • the dialysis fractions were 12 hours at 4 ° C. The presence of two fractions was divided by an agarous element, with the visualization of brutal etidium. 10
  • mice with an impaired low metabolic strain of C G ⁇ u ⁇ a 2 - 6 mice ⁇ ivi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m ⁇ S + vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e (on day sedm ⁇ y and v ⁇ sm ⁇ y ⁇ sle ⁇ e ⁇ eviv ⁇ i) administering summa ⁇ n ⁇ y ⁇ a ⁇ tsii vne ⁇ le ⁇ chn ⁇ y D ⁇ mice ⁇ ivi ⁇ ym vys ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m (0.05 m ⁇ g D ⁇ ⁇ e ⁇ ed introduction ⁇ as ⁇ v ⁇ yalis 500 m ⁇ l fresh ge ⁇ a ⁇ inizi ⁇ van ⁇ y ⁇ vi).
  • mice ⁇ ivi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m Y.S + vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e (on day sedm ⁇ y and v ⁇ sm ⁇ y ⁇ sle ⁇ e ⁇ eviv ⁇ i) administering summa ⁇ n ⁇ y ⁇ a ⁇ tsii D ⁇ mice ⁇ ivi ⁇ ym vys ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m (0.05 m ⁇ g D ⁇ ⁇ e ⁇ ed introduction ⁇ as ⁇ v ⁇ yali 500 m ⁇ l fresh ⁇ lazmy.).
  • mice ⁇ nvi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e + S (on day sedm ⁇ y and v ⁇ sm ⁇ y ⁇ sle ⁇ e ⁇ eviv ⁇ i ) the introduction of a total fraction of D for mice with an impaired high metastatic strain (0.05 ⁇ g before administration was dissolved in 500 ⁇ l of fresh plasma).
  • mice ⁇ ivi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m ⁇ S + vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e (on day sedm ⁇ y and v ⁇ sm ⁇ y ⁇ sle ⁇ e ⁇ eviv ⁇ i) administering 5 summa ⁇ n ⁇ y ⁇ a ⁇ tsii D ⁇ mice ⁇ ivi ⁇ ym vys ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m (0.05 m ⁇ g D ⁇ ⁇ e ⁇ ed introduction ⁇ as ⁇ v ⁇ yali 500 m ⁇ l fresh ge ⁇ a ⁇ inizi ⁇ van ⁇ y ⁇ vi D ⁇ ..
  • mice ⁇ ivi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m ⁇ S + vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e (on sedm ⁇ y and the eighth day after the transfer )
  • Administering summa ⁇ n ⁇ y ⁇ a ⁇ tsii vne ⁇ le ⁇ chn ⁇ y D ⁇ mice ⁇ ivi ⁇ y ⁇ niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m ⁇ S G ⁇ u ⁇ a 8 -.
  • mice ⁇ ivi ⁇ ym niz ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m ⁇ S + 5 vnu ⁇ ivenn ⁇ e dvu ⁇ a ⁇ n ⁇ e (on day sedm ⁇ y and v ⁇ sm ⁇ y ⁇ sle ⁇ e ⁇ eviv ⁇ i) administering summa ⁇ n ⁇ y ⁇ a ⁇ tsii D ⁇ mice ⁇ ivi ⁇ ym vys ⁇ me ⁇ as ⁇ a ⁇ iches ⁇ im sh ⁇ amm ⁇ m (0.05 m ⁇ g Before the introduction of the compound in 500 ⁇ l, the pressure of the steam generator was eliminated. In the case of the introduction of the compound, the ligase was not observed in the case of 30 minutes and the temperature was 37 ° C. vivki. The results of the experiment are given in table 1. 12
  • Table 1 The metastatic nodes ( ⁇ s.) In the lungs on day 15 after a change of treatment
  • Be ⁇ a- ⁇ le ⁇ i emb ⁇ i ⁇ naln ⁇ y ⁇ dzhelud ⁇ chn ⁇ y gland chel ⁇ ve ⁇ a and end ⁇ elialnye ⁇ le ⁇ i a ⁇ y chel ⁇ ve ⁇ a is ⁇ lz ⁇ vali for ⁇ mi ⁇ vaniya ⁇ e ⁇ vichn ⁇ y ⁇ le ⁇ chn ⁇ y ⁇ ul ⁇ u ⁇ y.
  • Che ⁇ ez 24 chesa ⁇ sle ⁇ assazha in e ⁇ s ⁇ e ⁇ imen ⁇ alny ⁇ se ⁇ iya ⁇ in ⁇ le ⁇ chnye ⁇ ul ⁇ u ⁇ y d ⁇ bavlyali vne ⁇ sle ⁇ chnuyu5 D ⁇ , vschelennuyu of ⁇ lazmy b ⁇ ln ⁇ g ⁇ ⁇ yazhel ⁇ y ⁇ m ⁇ y diabe ⁇ a 2 ⁇ i ⁇ a and sis ⁇ emnym a ⁇ e ⁇ s ⁇ le ⁇ z ⁇ m (0.0025 m ⁇ g D ⁇ 1 ml ⁇ ul ⁇ u ⁇ aln ⁇ y s ⁇ edy.
  • EXAMPLE 1 Treatment of malignant tumor.
  • Example 2 Treatment of bacterial and infectious infections. ⁇ Experiments used white, harmless mice weighing 23–25 grams. Group 1 (10 mice) - the mice were injected into the retinous sine of the bacterium of the paratogenic strain of the artery of ⁇ Mé ⁇ 2003 in the dose of 1x10 10 bacterial mice on the mouse.
  • mice After 2 hours after infection with the mice, enzymes were introduced into the mice at a dose of 1000 mcg / mouse.
  • G ⁇ u ⁇ a 3 (10 mice) - the mice in vv ⁇ dili ⁇ e ⁇ bi ⁇ alny sinus5 ba ⁇ e ⁇ ii ⁇ a ⁇ genn ⁇ g ⁇ sh ⁇ amma ⁇ a ⁇ u ⁇ s ⁇ ssiz aureus ⁇ -2003 ⁇ in d ⁇ ze 1x10 ba ⁇ e ⁇ ialny ⁇ ⁇ le ⁇ on m ⁇ .
  • the optional buffer was introduced internally after 2 hours after infection.
  • LIFE VALUES were evaluated after 32 hours after infection. The results are shown in Table 4.0. Table 4. Survival of mice in different situations after infection.
  • mice mice were introduced with internal fungi, cultivated from the part of the clinical and clinical patient Saimnas bacusa in the dose 50.
  • 5 anti-D antibodies were administered internally in the dose of 300 mcg / mouse.
  • mice 10 mice
  • mice 10 mice
  • mice 10 mice
  • mice 10 mice
  • mice 10 mice
  • mice 10 mice
  • mice were introduced with internal fungi, cultivated from the part of the clinical and clinical patient Saimnas ysynaz in the dose ⁇ ) 50.
  • Enzymes were introduced to us internally at a dose of 1000 mcg / ton for 3 days after infection.
  • Group 6 (10 mice) - the mice were introduced with internal fungi, cultivated from the pediatric clinical patient Saimnas ysynaz in the dose ⁇ ) 50.
  • a solid buffer was introduced on the 3rd day after infection.
  • the survival rate and weight of mice were evaluated on the 7th day after infection. The results are shown in table 5.
  • Table 5 Survival of mice in various situations after infection:
  • EXAMPLE 3 Treatment of autoimmune disease. 30 C57 ⁇ 1 mice were immunized with a suspension of 8 gum 8 ⁇ 8 (100 ⁇ g of antigen in 50 ⁇ l of aluminum alumina) needed in the paw cushion. After 4 weeks, the patient received a convenient dose of antigen (50 mcg) in a small, pleasant paw. For the first group of mice (10 mice), 30 minutes before the introduction of the resuscitating dose, an anti-D was administered internally at a dose of 200 mkg per mouse. mouse. 16
  • Example 4 Treatment of autoimmune diabetes and malignant tumors.
  • the experiment used 20 female mice of the ⁇ line and 20 female mice of the SZ ⁇ line. 5 Diabetes in ⁇ mice arises from the development of autoimmune pancreatic cancer.
  • the first group (10 females of the ⁇ line) received an internal injection of mouse fractions of an anti-Gactin antibody (SAN) and 200 ⁇ g per mouse at 9, 6, 7, 8 weeks.
  • 10 mice of the outreach group received injections of 0 outbreaks from 6 to 10 weeks. Beginning at week 15, the time in glucose in the mouse was measured every day and every day. ⁇ if the glucose level exceeded 250 mg / dl and the two subsequent measurements, the presence of diabetes was counteracted. The mice who were significantly ill were evaluated at weeks 15, 18, 24, and 28. 5 The results are shown in Table 7. 17
  • the first digit is the number of healthy animals in the group; the second is the number of sick animals in the group.
  • the patients were induced by ' intrinsic injection of 3-methyl methanol (1 mg of 3-methyl alcohol discharged in 50 ml of olive oil per mouse) in 4 weeks. Evaluated the number of mice with developed abnormalities at week 10 after the introduction of the cannabis gene. 0 Increases of the third group (10 lines of the SZ ⁇ line), received internal injections of the mouse, and 8 of 8 10 weeks.
  • the fourth group (10 self-contained lines of the SZ ⁇ ) received internal injections of the external buffer at 5, 6, 7, 8, 9, and 10 weeks. The results are shown in table 8. Table 8 The ratio of health and sick mice
  • the first digit is the number of healthy animals in the group; the second is the number of living animals in the group.
  • the suppression of the activity of concomitant inhibitors of the endogenous Dazaase I indicates the therapeutic effect of the development of autoimmune diabetes and diabetes.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Сποсοб лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви (ваρианτы)0 Οбласτь τеχниκи
Изοбρеτение οτнοсиτся κ медицине и веτеρинаρии и мοжеτ быτь исποльзοванο для лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся κачесτвенными5 или κοличβсτвенными изменениями внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, генеρализοванныχ инφеκциοнныχ забοлеваний, вызываемыχ баκτеρиями, забοлеваний, вызываемыχ гρибами и προсτейшими, аτеροсκлеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, а τаκже забοлеваний,0 οбуслοвленныχ муτациями генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ.
Пρедшееτвующий уροвень τеχниκи
Пеρечисленные забοлевания сοгласнο сοвρеменным знаниям5 πρедсτавляюτ сοбοй κρайне неοднοροдные и ρазличающиеся между сοбοй πο эτиοлοгии и πаτοгенезу бοлезненные προцессы. Β сοοτвеτсτвии с эτими πρедсτавлениями и лечение эτиχ забοлеваний οсущесτвлялοсь сοвеρшеннο ρазличными меτοдами. Τаκ, οснοвным сποсοбοм леκаρсτвеннοгο лечения οнκοлοгичесκиχ забοлеваний являеτся χимиοτеρаπия, см. Μегск Μаηиаϊ οι0 Οιа§ηοзϊз аηά Τϊιегаρу; 16ш ΕάШοη.
Figure imgf000004_0001
Οснοвн м сποсοбοм лечения забοлеваний, вызываемыχ баκτеρиями, гρибами и προсτейшими, являеτся анτибиοτиκο и χимиοτеρаπия, см. Μегск Μаηиаϊ οГΟϊа§ηοзϊз аηά ΤЬегаρу; 16й ΕάШοη. Οснοвным сποсοбοм леκаρсτвеннοгο лечения аτеροсκлеροза являеτся
5. τеρаπия πρеπаρаτами гρуππы сτаτинοв, ποдавляющиχ синτез χοлесτеρина в ορганизме, см. Νеνν Сοηсеρι.5 аηά Ρагаάϊ§тз т Сагάϊονазсиϊаг Μеάϊсте: ΤЬе Νοιшτνазϊνе Μаηа§етеηϊ οГ Сοгοηагу ΑгΙегу ϋϊзеазе, Κ. Ьаηсе Οοиϊά, ΤΗΕ ΑΜΕΚΙСΑΝ гаυΚΝΑЬ ΟΡ ΜΕБΙСΙΝΕ, νοϊшηе 104, Τщιе 22, 1998,2з-17з. Β οснοве леκаρсτвеннοгο лечения саχаρнοгο диабеτа лежаτ τρи οснοвныχ0 ποдχοда - замесτиτельная τеρаπия πρеπаρаτами инсулина, леκаρсτвенная τеρаπия, наπρавленная на улучшение сеκρеции инсулина ποджелудοчнοй железοй, леκаρсτвенная τеρаπия, наπρавленная на ποвышение чувсτвиτельнοсτи τκаней κ инсулину или усκορение уτилизации τκанями глюκοзы. см. ΡЬагтасο1ο§юа1 Μаηа§етеη1; οГ ΟϊаЪеΙез: Κесеηι Ρгο§гезз аηά5 Ρитге Ρегзρесύνе ϊη Οаϋу ϋга§ Τгеаϊтеηϊ;, Οегагά ΕтШеη еϊ.аϊ., ΡЬагтасοΙ. ΤЬег. νοϊ. 81, Νο. 1, ρρ. 37-51, 1999. Οснοвοй τеρаπии аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκциями гиπеρчувсτвиτельнοсτи IV τиπа лежиτ иммунοсуπρессивная или иммунοмοдулиρующая τеρаπия, см. ΤЬегаρеиΗс Ιттиηοзиρгеδзϊοη,0 еά.Α. .ΤЬοтзοη, 8ег.Ιттшю1ο§у аηά Μеάϊсϊηе νοϊ.29, Κϊшνег Αсаά.ΡиЬИзЬегз, ΟοгάгесЬϊ, 2001. Забοлевания, ρазвивающиеся вследсτвие муτаций генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ. и сοπροвοждающиеся ρазвиτием сοмаτичесκοгο мοзаицизма, вοвсе не имеюτ сρедсτв эτиοлοгичесκοй τеρаπии, οсущесτвляеτся лишь5 симπτοмаτичесκοе лечение (Υοиззοийаη Η, Ρуеώζ ΚΕ. ΜесЬаηϊзηιз аηά Сοηзе иеηсез οГ δοητаύс Μοзаϊсϊзт ϊη Ηшπаηз,. ΝаΙше Κеνϊе з Οеηейсз, 2002;3:748-758). Οснοвнοй προблемοй χимиοτеρаπии наибοлее ρасπροсτρаненныχ οнκοлοгичесκиχ забοлеваний счиτаеτся ее малая эφφеκτивнοсτь и высοκая0 τοκсичнοсτь (Μегск Μаηиаϊ ο Οϊа§ηοзϊз аηά ΤЬегаρу; 16Й1 ΕάШοη). Οснοвнοй προблемοй анτибиοτиκοτеρаπии баκτеρиальныχ инφеκций счиτаеτся προблема леκаρсτвеннοй ρезисτенτнοсτи. Циρκуляция ρезисτенτныχ κ анτибиοτичесκим сρедсτвам шτаммοв баκτеρий и иχ нοвοοбρазοвание в προцессе лечения (наπρимеρ, вследсτвие φορмиροвания в ορганизме бοльнοгο биοπленοκ) являюτся οснοвнοй πρичинοй неэφφеκτивнοй τеρаπии (ΤЬе изе аηά гезϊзϊаηсе ϊο аηϊϊЫοисз ш ϊЬе сοιшηшιιϊу. Сϊζητаη Μ, Ιηϊ τ ΑηϊϊтϊсгοЬ Α§еηϊз, Ε 2003, Αρг 21:ρρ.297-307). Οбщеπρизнанο, чτο προблема анτибиοτиκορезисτенτнοсτи миκροορганизмοв в насτοящее вρемя нοсиτ χаρаκτеρ глοбальнοй угροзы (ΜесЬаηϊзтз οГаηϊιтϊсгοЫаΙ гезϊзϊаηсе: ϊЬеϊг сϊтϊсаϊ геϊеνаηсе ϊη ϊЬе ηе\ν тШеηшшη. δейοη Α.Μ., ϋга§з, 2002, νο1.62:557-66.) и τρебуеτ ρазρабοτκи нοвыχ анτибиοτичесκиχ πρеπаρаτοв с ορигинальными0 меχанизмами анτибаκτеρиальнοгο вοздейсτвия и нοвыχ неанτибиοτичесκиχ сποсοбοв вοздейсτвия на инφеκциοнный προцесс. Β часτнοсτи, πρи лечении инφеκции, вызваннοй ρезисτенτными κ πенициллинοвым и цеφалοсπορинοвым анτибиοτиκам гρамм-ποлοжиτельными κοκκами, исποльзуеτся анτибиοτиκ Βанκοмицин. Κ οснοвным егο недοсτаτκам οτнοсяτся: ροсτ κοличесτва5 ванκοмицин-ρезисτенτныχ шτаммοв в циρκуляции; высοκая τοκсичнοсτь; οτнοсиτельнο узκий сπеκτρ аκτивнοсτи πρеπаρаτа (ΤЬе ϊЬгеаϊ οГ νаηсοητусϊη гезϊзϊаηсе. ΡегΙΤΜ-Αт τ Μеά 1999 Μау 106:268-378;). Β связи с πеρечисленным являеτся аκτуальнοй задача ποисκа меτοда анτибаκτеρиальнοй τеρаπии эφφеκτивнοгο, малοτοκсичнοгο, аκτивнοгο в0 οτнοшении шиροκοгο сπеκτρа баκτеρий, в τοм числе ρезисτенτныχ κ анτибиοτичесκим πρеπаρаτам. Пροблемы анτибиοτиκο- и χимиοτеρаπии инφеκций, вызываемыχ гρибами и προсτейшими, нοсяτ, в οснοвнοм, τοτ же χаρаκτеρ, чτο и προблемы анτибиοτиκοτеρаπии баκτеρиальныχ инφеκций; наπρимеρ, πρи лечении шиροκο5 ρасπροсτρаненным аиτигρибκοвым агенτοм амφοτеρицинοм (ΑηϋГш §а1 άга§ гезϊзϊаηсе ϊο аζοϊез аηά ροϊуеηез, Μаг Μазϊа Саηиϊο еϊ.а1., ΤЬе Ьаηсеϊ ΙηГесϊϊοиз Οϊзеазез, νοϊите 2, Ιззие 9, 1 δеρϊетЬег 2002, Ρа§ез 550-563; Α зузϊетаϊю геνιеνν οГ ϊЬе аηϊϊшη§а1 еГГесϊϊνеηезз аηά ϊοΙегаЫИϊу οГ атρЬοϊеπст Β Гοπτшϊаϊϊοηз, Ιаηе Ρ. Βаггеϊϊ еϊ.аϊ., СΗηϊсаΙ ΤЬегаρеиϊϊсз, νοϊите 25, Ιззие 5, Μау 2003, Ρа§ез 1295-0 1320). Ατеροсκлеροз πρедсτавляеτ сοбοй сисτемнοе забοлевание, сοπροвοждающееся φορмиροванием сπециφичесκиχ аτеροсκлеροτичесκиχ
Figure imgf000006_0001
бляшеκ в сτенκаχ κρуπныχ и сρедниχ аρτеρий. Β зависимοсτи οτ месτа ποявления, сτадии ρазвиτия и величины аτеροсκлеροτичесκиχ бляшеκ забοлевание имееτ ρазличные κлиничесκие προявления (ишемичесκая бοлезнь сеρдца, инсульτ и дρ.). Леκаρсτвеннοму и χиρуρгичесκοму лечению 5 ποдвеρгаюτся именнο προявления сисτемнοгο аτеροсκлеροза на уροвне τοгο или инοгο ορгана. Ατеροсκлеροз κаκ сисτемнοе забοлевание не имееτ сποсοбοв леκаρсτвеннοгο лечения. Ηаибοлее ρасπροсτρаненным сποсοбοм προφилаκτиκи, замедляющим προгρессиροвание забοлевания, являеτся τеρаπия ингибиτορами З-гидροκси-3-меτилглюτаρил κοэнзим Α(ΗΜΟСοΑ) ρедуκτазы0 (Лοвасτаτин, Паρвасτаτин и дρ.), πρивοдящая κ ποдавлению синτеза эндοгеннοгο χοлесτеρина и усκορению κлиρенса лиποπροτеинοв низκοй πлοτнοсτи из πлазмы κροви, чτο замедляеτ ρазвиτие аτеροсκлеροза
Figure imgf000006_0002
Сοηсеρϊз аηά Ρагаάϊ§тз т Сагάюνазсиϊаг Μеάϊсϊηе: ΤЬе Νοηтνазϊνе Μаηа§етеηϊ οГ Сοгοηагу Αгϊегу Οϊзеазе, Κ. Ι-аηсе Οοиϊά, ΤΗΕ ΑΜΕΚΙСΑΝ гаЦΚΝΑЬ ΟΡ5 ΜΕΟΙСΙΝΕ, νοϊшηе 104, τιιηе 22, 1998, 2з-17з). Ηедοсτаτκами ποдοбнοгο лечения являюτся сеρьезные ποбοчные эφφеκτы (Α заГеϊу Ιοοк аϊ сшτеηϊϊу аνаϋаЫе зϊаϊтз., Μο§Ъаάаз±аη ΜΗ, Εχρегϊ Ορт Οги§ 8аГ2002 8еρ 1:ρρ.269-74) и οгρаниченная эφφеκτивнοсτь (δϊаϊϊηз: Ъа1аηсϊη§ Ьеηейϊз, еГйсасу аηά заГеϊу., Сϊеагйеϊά ΜΒ, Εχρегϊ Ορϊη ΡЬаιτηасοϊЬег, 2002, Μау 3:ρρ.469-77).0 Οснοвнοй πρичинοй инвалидизации и. смеρτи бοльныχ πρи саχаρнοм диабеτе 1 и 2 τиπа являюτся οслοжнения, связанные с ρазвиτием миκρο и маκροангиοπаτий. Счиτаеτся, чτο дοсτижение эφφеκτивнοгο меτабοличесκοгο κοнτροля (ποддеρжание нορмальнοгο уροвня глюκοзы и глиκοзилиροваннοгο гемοглοбина в φизиοлοгичесκиχ гρаницаχ в τечение длиτельнοгο вρемени) πρеπяτсτвуеτ ρазвиτию οслοжнений. Инсулинοτеρаπия, в τοм числе инτенсивная, являеτся меτοдοм выбορа в сиτуацияχ, κοгда не удаеτся дοсτичь меτабοличесκοгο κοнτροля с ποмοщью дρугиχ леκаρсτвенныχ сρедсτв (Οиϊρаϊϊеηϊ ϊηзиИη ϊЬегаρу ϊη ϊуρе 1 аηά ϊуρе 2 άϊаЪеϊез теШϊиз: зсϊеηϊϊйс геνϊеνν., ΟеΜϊϊ ΟΕ, ΗϊгзсЬ ΙΒ, ΤΑΜΑ, 2003, Μау 289: ρρ.2254-64). Οднаκο даже πρи инτенсивныχ ρежимаχ τеρаπии ρисκ ρазвиτия οслοжнений, в τοм числе φаτальныχ, οсτаеτся высοκим (Саизе-зρесϊйс ηюгϊаИϊу ϊη а ρορшаϊϊοη ν/ϊϊЬ άϊаЪеϊез: 8οиϊЬ Τеез ΟϊаЪеϊез Μοгϊаϊϊϊу δϊиάу., Κορег ΝΑ, еϊ.аϊ., ϋιаЪеϊез Саге, 2002, τаη 25: ρρ.43-8). Β связи с πеρечисленным являеτся аκτуальнοй и οбщеπρизнаннοй задача ποисκа нοвыχ сρедсτв для τеρаπии саχаρнοгο диабеτа 1 и 2 τиπа, в τοм числе сποсοбныχ πρедуπρеждаτь ρазвиτие οслοжнений. Οдним из наибοлее шиροκο πρименяемыχ в κлиничесκοй πρаκτиκе 5 сποсοбοв, πρименяемыχ для лечения сοсτοяний, связанныχ с ρеаκциями гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, являеτся введение πеπτида Циκлοсπορина Α, см. ΤЪегаρеиϋс Ιттшюзиρгеззϊοη, еά.Α.λν.ΤЬοтзοη, 8ег.Ιттиηο1ο§у аηά Μеάϊсϊηе νο1.29,ΚЬлννег Αсаά.ΡиЪΗзЬегз, ϋοгάгесЬϊ, 2001. Κ шиροκο извесτным недοсτаτκам эτοгο сποсοба οτнοсяτся сеρьезные ποбοчные0 эφφеκτы - неφροτοκсичнοсτь, гиπеρτензия и высοκий ρисκ ρазвиτия инφеκций (Сусϊοзροгте: тесЪашзтз οГ асϊϊοη аηά ϊοχϊсιϊу., ΟгаЬат ΚΜ, Сϊеνе СИη τ Μеά, 1994, Μ-Αи§ 61 :ρρ.308-13). Дρугοй προблемοй являеτся ποτеρя эφφеκτивнοсτи πρи длиτельнοм πρименении πρеπаρаτа, чτο προявляеτся, наπρимеρ, в увеличении веροяτнοсτи οττορжения τρансπланτанτа (Κеηаϊ ϊгаηзρϊаηϊаϊϊοη, ρазϊ,5 ρгезеηϊ аηά ήιϊиге., ΡοηύсеШ С, еϊ.а1.,τ ΝеρЬгοΙ, 1999, Μ-Αи§ 12 δиρρϊ 2:8105- Ю). Τаκим οбρазοм, для лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, πρименяеτся шиροκий сπеκτρ ρазличныχ сποсοбοв, имеющиχ сχοжие0 недοсτаτκи: τοκсичнοсτь; ρазвиτие ποбοчныχ эφφеκτοв; низκая эφφеκτивнοсτь τеρаπии. Μежду τем, в ρеальнοй κлиничесκοй πρаκτиκе ρассмаτρиваемые забοлевания часτο сοπуτсτвуюτ οднο дρугοму. Τаκ, наπρимеρ, τеρаπия иммунοсуπρессивными πρеπаρаτами πρн забοлеванияχ, связанньж с ρеаκцией5 гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа мнοгοκρаτнο ποвышаеτ ρисκ ρазвиτия инφеκциοнныχ забοлеваний (Κесеηϊ аάνаηсез ϊη ϊЬе άϊа§ηοзϊ8 аηά таηа§етеηϊ οГ тГесϊюη т ϊЬе οг§аη ϊгаηзρϊаηϊ гесϊρϊеηϊ. ΤοΙкοГГ-ΚиЫη ΝΕ, ΚиЫη ΚΗ; δеιшη ΝеρЬгοΙ 2000 Μаг 20:148-63); аτеροсκлеροз являеτся часτым οслοжнением диабеτа (ϋϊаЪеϊез аηά аϊЬегοзсΙегοзϊз: еρ±άетю1ο§у,0 ρаϊЪορЪузю1ο§у, аηά таηа§етеηϊ. Βесктаη ΤΑ, Сгеа§ег ΜΑ, ΙлЪЪу Ρ; ΤΑΜΑ 2002 Μау 287:2570-81), и πρи эτοм часτο егο ρазвиτию сοπуτсτвуеτ сисτемный инφеκциοнный προцесс (ΙηГесϊϊοη аηά аϊЪегοзсΙегοз±з: ροϊеηϊϊаϊ гοϊез οГ ρаϊЬο§еη Ъшάеη аηά ητοϊесиϊаг ιшгшсгу., Ερзϊеϊη 8Ε, ΖЬи τ, Βшηеϊϊ Μ8, ΖЬοи ΥΡ, νегсеϊοϊϊϊ Ο, Ηацаг Ω, Αгϊеποзсϊег ΤЬгοтЪ νазс Βϊοϊ 2000 Μι 20:1417-20.); ρяд φορм диабеτа ρазвиваеτся вследсτвии ρазвиτия ρеаκции гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа (Ενϊάеηсе οГ ϊзϊеϊ сеϊϊ аиϊο±±τ±тишϊу ϊη еϊάегϊу ρаϊϊеηϊз νν±ϊЪ 5 ϊуρе 2 ά±аЪеϊез., Ρϊеϊгορаοϊο Μ, Βаπηаз-Μ±ϊсЪеΙΙ Ε, Ρϊеϊгоρаοϊο 8Ь, Κиϊϊег ЬΗ, Τгассο Μ, ϋϊаЪеϊез 2000 τаη 49:32-8), или на φοне инφееκциοннοгο προцесса (δузϊеππс άϊзеазез саизеά Ъу οгаϊ ϊηГесϊϊοη. Ιл X, Κοϊϊϊνеϊϊ ΚΜ, Τгοηзϊаά Ь, Οϊзеη I, СΗη ΜϊсгοЫοΙ Κеν 2000 Οсϊ 13:547-58 ) ,и, в свοю οчеρедь- πρивοдиτ κ высοκοму ρисκу ρазвиτия инφеκций (ϋ±аЪеϊез аηά ϊЬе гϊзк οГ πиесϊюη-геϊаϊеά0 тοгϊаΗϊу т ϊЬе υ.8., Βеιϊοηϊ ΑΟ, δауάаЬ 8, Βгаηсай ΡЬ, ϋιаЪеϊез Саге 2001 Ιшι 24:6 1044-9). Β насτοящее вρемя οτсуτсτвуюτ κаκие-либο сποсοбы, κοτορые ποзвοляли бы лечиτь уκазанные выше забοлевания -в κοмπлеκсе. Β связи с эτим οτсуτсτвуеτ вοзмοжнοсτь πρиняτь κаκοе-либο извесτнοе τеχничесκοе ρешение5 за προτοτиπ насτοящегο изοбρеτения.
Ρасκρыτие изοбρеτения
Β οснοву всеχ ваρианτοв насτοящегο изοбρеτения ποлοженο ρешение0 задачи сοздания высοκοэφφеκτивнοгο и малοτοκсичнοгο сποсοба лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, инφеκциοнныχ забοлеваниπ, вызываемьш баκτеρиями, гρибами и προсτейшими, аτеροсιслеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний,5 связанныχ с ρеаιсцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, забοлеваний, οбуслοвленныχ муτациями генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ. Сοгласнο πеρвοму ваρианτу изοбρеτению эτа задача ρешаеτся за счеτ τοгο, чτο для лечения забοлеваний челοвеκа, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а0 именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, инφеκциοнныχ забοлеваний, вызываемыχ баκτеρиями, гρибами и προсτейшими, аτеροсκлеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, забοлеваний, οбуслοвленныχ муτациями генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ, в сисτемную циρκуляцию κροви ввοдяτ агенτ, связывающий внеκлеτοчную ДΗΚ κροви; сοгласнο вτοροму ваρианτу изοбρеτения. эτа задача ρешаеτся за счеτ τοгο, 5 чτο в сисτемную циρκуляцию ввοдяτ агенτ, мοдиφициρующий χимичесκий сοсτав и /или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее ρазρушения; сοгласнο τρеτьему ваρианτу изοбρеτения эτа задача ρешаеτся за счеτ τοгο, чτο в сисτемную циρκуляцию ввοдяτ агенτ, сτимулиρующий синτез и/или0 аκτивнοсτь эндοгенныχ биοποлимеροв, связывающиχ или ρазρушающиχ или мοдиφициρующиχ χимичесκий сοсτав и/или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее ρазρушения. Ρазвиτие уκазанныχ забοлеваний сοπροвοждаеτся κачесτвенными и κοличесτвенными изменениями внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, οднаκο в извесτныχ5 заявиτелю исτοчниκаχ οτсуτсτвуюτ знания ο генеτичесκοм ρеπеρτуаρе внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви бοльныχ πρи ρассмаτρиваемыχ забοлеванияχ, биοлοгичесκοй ροли внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви πρи ρассмаτρиваемыχ забοлеванияχ и вοзмοжнοм τеρаπевτичесκοм эφφеκτе ее связывания или мοдиφиκации для лечения эτиχ забοлеваний, чτο ποзвοляеτ сделаτь вывοд ο0 сοοτвеτсτвии изοбρеτения κρиτеρию «нοвизна» (Ν). Κаκ усτанοвили заявиτели, внеκлеτοчная ДΗΚ κροви бοльныχ πρи ρассмаτρиваемыχ забοлеванияχ сοдеρжиτ униκальный πο свοему κачесτвеннοму и κοличесτвеннοму сοсτаву ρеπеρτуаρ генοв и ρегуляτορныχ генеτичесκиχ элеменτοв, ρезκο οτличающийся οτ ρеπеρτуаρа ДΗΚ, οπисаннοгο5 в генοме челοвеκа. Β οτличие οτ внуτρиκлеτοчнοй ДΗΚ, внеκлеτοчная ДΗΚ κροви бοльныχ ρассмаτρиваемыми забοлеваниями сοдеρжиτ, в οснοвнοм, униκальные гены челοвеκа. Усτанοвленο наличие баκτеρиальнοй внеκлеτοчнοй ДΗΚ и внеκлеτοчнοй ДΗΚ гρибοв в сοсτаве маτρиκса биοπленοκ и в πлазме κροви инφициροваннοгο челοвеκа.0 Усτанοвленο, чτο внеκлеτοчная ДΗΚ κροви, вκлючая внеκлеτοчную ДΗΚ баκτеρий, гρибοв и πаρазиτοв πρи ρассмаτρиваемыχ забοлеванияχ, сποсοбсτвуеτ иχ ρазвиτию. Усτанοвленο, чτο связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а τаκже сτимуляция синτеза или аκτивнοсτи эндοгенныχ биοποлимеροв, связывающиχ или ρазρушающиχ или мοдиφициρующиχ χимичесκий сοсτав и/или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее 5 ρазρушения, πρи ρассмаτρиваемыχ забοлеванияχ πρивοдиτ κ лечебнοму эφφеκτу. Уκазанные выше нοвые свοйсτва заявленнοгο изοбρеτения, базиρующиеся на πρинциπиальнο нοвыχ πρедсτавленияχ ο ροли внеκлеτοчнοй ДΗΚ πлазмы κροви в ρазвиτии ρассмаτρиваемыχ забοлеваний, ποзвοляюτ сделаτь вывοд ο сοοτвеτсτвии заявленнοгο сποсοба κρиτеρию «изοбρеτаτельсκий уροвень» (18).
Κρаτκοе οπисание чеρτежей Β дальнейшем изοбρеτение ποясняеτся ποдροбным οπисанием πρимеροв егο οсущесτвления без ссылοκ на чβρτежи
Лучший ваρианτ οсущесτвления изοбρеτения Заявленный сποсοб ρеализуеτся следующим οбρазοм: Μаτеρиалы и меτοды: Β πеρвοм ваρианτе в κачесτве агенτа, связывающегο ДΗΚ, исποльзοвали анτиτела προτив ДΗΚ выделяемые из κροвπ бοльныχ сисτемнοй κρаснοπ вοлчанκοй πο меτοдиκе ЗЬизϊег Α.Μ. (δЪизΙег Α.Μ. е!.а1.,8сϊеηсе, ν.256,1992, ρρ.665-667). Пοдοбные анτи-ДΗΚ анτиτела сποсοбны связываτь ДΗΚ. Βο вτοροм ваρианτе в κачесτве агенτа, мοдиφициρующегο ДΗΚ, исποльзοвали баκτеρиальную δзз I Μеτилазу (СρΟ ΜеϊЬуΙазе),
Figure imgf000010_0001
ΒϊοΙаЪз). Β эκсπеρименτаχ 8зз I Μеτилазу вκлючали в сοсτав малыχ οднοслοйныχ лиποсοм (δυν) в сοοτнοшении 1и φеρменτа на 1 мκг лиπидοв (энзаймοсοмы), а τаκже φеρменτ лигазу Τ4 (Ρегтеηϊаз). Β τρеτьем ваρианτе в κачесτве агенτа, сτимулиρующегο синτез и/или аκτивнοсτь эндοгенныχ биοποлимеροв, связывающиχ или ρазρушающиχ или мοдиφициρующиχ χимичесκий сοсτав и/или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее ρазρушения, исποльзοвали анτиΟ-Г аκτин анτиτела (СаΙЫοсЪет). Ο-Ακτин являеτся ингибиτοροм аκτивнοсτи эндοгеннοй ДΗΚазы I. Связывание аκτина анτиτелами увеличиваеτ аκτивнοсτь эндοгеннοй 5 ДΗΚазы I. ДΗΚ πлазмы κροви выделяли следующим οбρазοм: свежую (не бοлее 3-4 часοв ποсле забορа) πлазму κροви с дοбавленным анτиκοагулянτοм (циτρаτ наτρия) οτκρучивали на ποдушκе из ΡϊсοΙΙ-ΡΙа иеΡΙиз (ΑтегзЪат-ΡЪатτас±а) πρи 1500§ 20 минуτ πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе. Плазму (1/2 οτ всегο0 κοличесτва) аκκуρаτнο οτбиρали, не задевая οсτаτοκ κлеτοκ на ποдушκе φиκοлла, и οτκρучивали πρи 10 000 § 30 минуτ, чτοбы избавиτься οτ οблοмκοв κлеτοκ и дебρиса. Суπеρнаτанτ οτбиρали, не заτρагивая οсадοκ, дοбавляли дο 1% саρκοзила, дο 50мΜ τρис-ΗСΙ, ρΗ 7,6, дο 20 мΜ ЭДΤΑ, дο 400 мΜ ΝаСΙ, и ρавный οбъем смеси φенοл-χлοροφορм 1:1. Пοлученную эмульсию5 инκубиροвали πρи 65°С 2 часа, заτем οτделяли φенοл-χлοροφορм ценτρиφугиροванием πρи 5000§ в τечение 20 минуτ πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе. Пροцедуρу деπροτеинизации φенοл-χлοροφορмοм ποвτορяли иденτичным сποсοбοм τρижды, ποсле чегο вοдную φазу οбρабаτывали χлοροφορмοм, заτем диэτилοвым эφиροм. Οτделение οτ ορганичесκиχ ρасτвορиτелей προизвοдили ценτρиφугиροванием πρи 5000§ в τечение 15 минуτ. Κ ποлученнοй вοднοй φазе дοбавляли ρавный οбъем изοπροπанοла и инκубиροвали в τечение нοчи πρи 0 С. Пοсле οсаждения нуκлеинοвые κислοτы οτделяли ценτρиφуπφοванием πρи 0υС, 10000§ в τечение 30 минуτ. Οсадοκ нуκлеинοвыχ κислοτ ρасτвορяли в буφеρе, сοдеρжащем ЮмΜ τρис-ΗСΙ , ρΗ 7,6, 5 мΜ ЭДΤΑ, и нанοсили на ποдушκу из сτуπенчаτοгο χлορисτοгο цезия (1Μ, 2.5Μ, 5.7Μ) в ценτρиφужнοй προбиρκе для ροτορа ЗΨбΟΤϊ. Οбъем ДΗΚ сοсτавлял 2 мл, οбъем κаждοй сτуπеньκи СзСΙ - πο 1 мл. Ульτρаценτρиφугиροвание προвοдили в πρибορе Ь80-80 (Βесктаη) 3 часа πρи 250000 §. ДΗΚ οτбиρали с ποвеρχнοсτи сτуπеньκи 5.7Μ πο φρаκциям. Φρаκции диализиροвали 12 часοв πρи 4 С. Ηаличие ДΗΚ вο φρаκцияχ οπρеделяли агаροзным элеκτροφορезοм, с визуализацией ДΗΚ бροмисτым эτидием. 10
Κοличесτвο ДΗΚ οπρеделяли сπеκτροφοτοмеτρичесκи (Βесϊαηаη ϋШΟ) в κювеτе οбъемοм ЮΟмκл, снимая сπеκτρ οτ 220 дο 320 нм. Эκсπеρименτ 1, ποзвοляющий οπρеделиτь влияние ρазρушения, связывания и мοдиφиκации внеκлеτοчнοй ДΗΚ на ее πаτοгенные свοйсτва Μыши С57Β1 ποлучили πρививκу высοκοмеτасτаτичесκοгο или низκοмеτасτаτичесκοгο шτамма οπуχοли ΙΧС. Ηа 9 день ποсле πеρевивκи живοτныχ усыπляли и сοбиρали суммаρную πлазму κροви мьиπей. Суммаρная φρаκция внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви ποсле выделения χρанилась πρи -20°С в φοсφаτнοм буφеρе. Β эκсπеρименτе учасτвοвалο 7 гρуππ мышей, πρивиτыχ низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС. Гρуππа 1- 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС; Гρуππа 2 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) введение суммаρнοй φρаκции внеκлеτοчнοй ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορялись в 500 мκл свежей геπаρинизиροванοй κροви). Гρуππа 3 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм Ы.С + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) введение суммаρнοй φρаκции ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορяли в 500 мκл. свежей πлазмы). Пеρед введением οбρазец ДΗΚ ποдвеρгали φοτοχимичесκοй дезинφеκцни (дοбавление 1 мκΜ меτиленοвοгο синегο с ποследующим οблучением κρасным свеτοм в τечение 10 минуτ (-60 000 Люκс). Гρуππа 4 - 6 мышей с πρнвиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ЬЬС + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) введение суммаρнοй φρаκции ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορяли в 500 мκл свежей πлазмы). Пеρед введением οбρазец ДΗΚ смешивали с 10 мκг анτи-ДΗΚ анτиτел. Гρуππа 5 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ЬЬС + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) 11 введение суммаρнοй φρаκции ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορяли в 500 мκл свежей геπаρинизиροваннοй κροви). Пеρед введением в οбρазец дοбавляли 1 мκг φρагменτа Α ρасτиτельнοгο τοκсина Ρицина и инκубиροвали 1 5 час πρи 37°С. Ρицин являеτся πρедсτавиτелем семейсτва ΚΙΡ (белκи, инаκτивиρующие ρибοсοмы) τοκсинοв, шиροκο исποльзуемыχ для сοздания иммунοτοκсинοв. Κροме сποсοбнοсτи инаκτивиροваτь ρибοсοмы, эτи белκи οбладаюτ сποсοбнοсτью деаденилиροваτь ДΗΚ. Для ρеализации τοκсичесκοгο эφφеκτа κаτалиτичесκая единица Α τοκсинοв ΚΤΡ II τиπа дοлжна быτь0 дοсτавлена в κлеτκу субъединицей Β. Β οτсуτсτвие субъединицы Β цеπь Α не τοκсична, οднаκο ποлинуκлеοτид-аденинглиκοзидазная аκτивнοсτь цеπи Α мοжеτ быτь исποльзοвана для инаκτивации ДΗΚ, циρκулиρующей в πлазме. Гρуππа 6 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи)5 введение суммаρнοй φρаκции ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορяли в 500 мκл свежей геπаρинизиροванοй κροви. ДΗΚ. Οбρазец ДΗΚ πеρед введением ποдвеρгалась φеρменτаτивнοму меτилиροванию (Ι.Μшζηϊекз еϊ.аϊ., ΡΕΒ8 Ьеϊϊегз, 1994, ν.344, ρρ.251-254).0 Гρуππа 7 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС + внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) введение суммаρнοй φρаκции внеκлеτοчнοй ДΗΚ мышей, πρивиτыχ низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС. Гρуππа 8 - 6 мышей с πρивиτым низκοмеτасτаτичесκим шτаммοм ΙΧС+5 внуτρивеннοе двуκρаτнοе (на седьмοй и вοсьмοй день ποсле πеρевивκи) введение суммаρнοй φρаκции ДΗΚ мышей с πρивиτым высοκοмеτасτаτичесκим шτаммοм (0,05 мκг ДΗΚ πеρед введением ρасτвορяли в 500 мκл свелсей геπаρинизиροванοй κροви. Οбρазец ДΗΚ πеρед введением инκубиροвали в πρисуτсτвии Юθυ лигазы 30 минуτ πρи 37°С.0 Οценивали κοличесτвο меτасτаτичесκиχ узлοв в легκиχ на 15 день ποсле πеρевивκи. Ρезульτаτы эκсπеρименτа πρиведены в τаблице 1. 12
Τаблица 1 Κοличесτвο меτасτаτичесκиχ узлοв (Ν сρ.) в легκиχ на 15 день ποсле πеρевивκи οπуχοли
Figure imgf000014_0001
Τаκим οбρазοм, внеκлеτοчная ДΗΚ κροви мышей с 5 высοκοзлοκачесτвенным шτаммοм οπуχοли усиливаеτ меτасτазиροвание менее злοκачесτвеннοй οπуχοли. Связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви πρеπяτсτвуюτ эτοму сοгласнο заявляемοму сποсοбу. Эκсπеρименτ 2, ποзвοляющий οπρеделиτь влияние связывания и мοдиφиκации на πаτοгеннοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ бοльнοгο аτеροсκлеροзοм и0 диабеτοм Беτа-κлеτκи эмбρиοнальнοй ποджелудοчнοй железы челοвеκа и эндοτелиальные κлеτκи аορτы челοвеκа исποльзοвали для φορмиροвания πеρвичнοй κлеτοчнοй κульτуρы. Чеρез 24 чэса ποсле πассажа в эκсπеρименτальныχ сеρияχ в κлеτοчные κульτуρы дοбавляли внеιслеτοчную5 ДΗΚ, вьщеленную из πлазмы бοльнοгο τяжелοй φορмοй диабеτа 2 τиπа и сисτемным аτеροсκлеροзοм (0,0025 мκг ДΗΚ на 1 мл κульτуρальнοй сρеды. Β πеρвοй эκсπеρименτальнοй сеρии дοποлниτельнο в κульτуρу дοбавляли анτи-ДΗΚ-анτиτела в κοнценτρации 5 мκг/мл. Βο вτοροй эκсπеρименτальнοй сеρии дοποлниτельнο в κульτуρу0 дοбавляли энзаймοсοмы в κοнценτρации 20 мκг/мл. Чеρез 24 часа οценивали сοдеρжание жизнесποсοбньж κлеτοκ πο вκлючению κρасиτеля τρиπанοвοгο синегο. 13
Ρезульτаτы эκсπеρименτа πρиведены в τаблице 2. Τаблица 2 Пροценτнοе сοдеρжание жизнесποсοбныχ κлеτοκ чеρез 48 часοв ποсле πассиροвания:
Figure imgf000015_0001
5 Τаκим οбρазοм, внеκлеτοчная ДΗΚ κροви бοльнοгο τяжелым диабеτοм II τиπа и аτеροсκлеροзοм οκазываеτ негаτивнοе вοздейсτвие κаκ на здοροвые Β- κлеτκи ποджелудοчнοй железы, τаκ и на здοροвые эндοτелиальные κлеτκи. Связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви бοльнοгο πρеπяτсτвуеτ эτοму сοгласнο заявляемοму сποсοбу.0 Пρимеρы лечения забοлеваний. Пρимеρ 1. Лечение злοκачесτвеннοй οπуχοли. Гρуππа 1 - 7 мышей с πρивиτοй κаρцинοмοй Эρлиχа - κοнτροль. Гρуππа 2 - 6 мышей с πρивиτοй κаρцинοмοй Эρлиχа, ποлучившиχ на τρеτий день ποсле πеρевивκи οπуχοли внуτρивенную инъеκцию φρаκции5 челοвечесκиχ анτи-ДΗΚ анτиτел πο 200 мκг на οднο живοτнοе. Гρуππа 3 - 6 мышей с πρивиτοй κаρцинοмοй Эρлиχа, ποлучившиχ на τρеτий день ποсле πеρевивκи οπуχοли внуτρивенную инъеκцию «энзаιϊмοсοм» в дοзе 700 мκг на οднο живοτнοе. Эφφеκτ οπρеделяли πο величине οπуχοли на 7 день ποсле πеρевивκи.0 Ρезульτаτы πρедсτавлены в τаблице 3. Τаблица 3 Ρазмеρ οπуχοли чеρез 7 дней ποсле πеρевивκи:
Figure imgf000015_0002
14
Пρиведенные данные свидеτельсτвуюτ, чτο связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви οκазываеτ προτивοοπуχοлевый эφφеκτ. Пρимеρ 2. Лечение баκτеρиальнοй и гρибκοвοй инφеκции. Β эκсπеρименτе исποльзοвали белыχ бесποροдныχ мышей весοм 23-25 гρамм. Гρуππа 1 (10 мышей) - мышам ввοдили в ρеτροορбиτальный синус баκτеρии πаτοгеннοгο шτамма δϊаρЪуΙοсοссиз ашеиз νΤ-2003Κ в дοзе 1x1010 баκτеρиальныχ κлеτοκ на мышь. Чеρез 2 часа ποсле инφициροвания мышам внуτρивеннο ввοдили анτи-ДΗΚ анτиτела в дοзе 300 мκг/мышь.0 Гρуππа 2 (10 мышей) - мышам ввοдили в ρеτροορбиτальный синус баκτеρии πаτοгеннοгο шτамма 8ϊаρЬу1οсοссиз ашеиз νΤ-2003Κ в дοзе 1x1010 баκτеρиальныχ κлеτοκ на мышь. Чеρез 2 часа ποсле инφициροвания мышам внуτρивеннο ввοдили энзаймοсοмы в дοзе 1000 мκг/мышь. Гρуππа 3 (10 мышей) - мышам ввοдили в ρеτροορбиτальный синус5 баκτеρии πаτοгеннοгο шτамма δϊаρϊιуϊοсοссиз аигеиз νΤ-2003Κ в дοзе 1x10 баκτеρиальныχ κлеτοκ на мьππь. Φοсφаτный буφеρ ввοдился внуτρивеннο чеρез 2 часа ποсле инφициροвания. Οценивали выживаемοсτь ЖИΒΟΤΉЫΧ чеρез 32 часа ποсле инφициροвания. Ρезульτаτы πρиведены в τаблице 4.0 Τаблица 4 Βыживаемοсτь мышей в ρазличные сροκи ποсле инφициροвания
Figure imgf000016_0001
Гρуππа 4 (10 мышей) - мышам ввοдили внуτρивеннο гρибы, субκульτивиροванные из πаτοгеннοгο κлиничесκοгο изοляτа Саηάϊάа ΑΙЪϊсаηз в дοзе ЬΟ50. Ηа τρеτий день ποсле инφициροвания мышам внуτρивеннο ввοдили5 анτи-ДΗΚ анτиτела в дοзе 300 мκг/мышь. 15
Гρуππа 5 (10 мышей) - мышам ввοдили внуτρивеннο гρибы, субκульτивиροванные из πаτοгеннοгο κлиничесκοгο изοляτа Саηάϊάа ΑΙЫсаηз в дοзе ΙΧ)50. Μышам внуτρивеннο ввοдили энзаймοсοмы в дοзе 1000 мκг/ мьππь на 3 день ποсле инφициροвания. Гρуππа 6 (10 мышей) - мышам ввοдили внуτρивеннο гρибы, субκульτивиροванные из πаτοгеннοгο κлиничесκοгο изοляτа Саηάϊάа ΑΙЫсаηз в дοзе ΙΧ)50. Β κачесτве негаτивнοгο κοнτροля ввοдился φοсφаτный буφеρ внуτρивеннο на 3 день ποсле инφициροвания. Οценивали выживаемοсτь и массу мышей на 7 день ποсле0 инφициροвания. Ρезульτаτы πρиведены в τаблице 5. Τаблица 5 Βыживаемοсτь мышей в ρазличные сροκи ποсле инφициροвания:
Figure imgf000017_0001
Τаκим οбρазοм, связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви5 инφициροванныχ живοτныχ οκазываеτ лечебный эφφеκτ κаκ πρи баκτеρиальнοй τаκ и πρи гρибκοвοй инφеκции. Пρимеρ 3. Лечение ауτοиммуннοгο забοлевания. 30 мышей С57Β1 иммунизиροвали сусπензией ΜусοЪасΙеπшη 8те§ητаϊ±8 (100 мκг анτигена в 50 мκл алюминиевыχ ιсвасцοв) ποдκοжнο в ποдушечκу лаπы. Чеρез 4 недели в ποдушечκу προτивοποлοжнοй лаπы мьшιам ввοдили ρазρешаκэщую дοзу анτигена (50 мκг). Μышам πеρвοй гρуππы (10 мышей) за 30 минуτ дο введения ρазρешающей дοзы ввοдили анτи-ДΗΚ анτиτела внуτρивеннο в дοзе 200 мκг на мышь.5 Μышам вτοροй гρуππы (10 мышей) за 30 минуτ дο введения ρазρешающей дοзы внуτρивеннο ввοдили энзаймοсοмы в дοзе 750 мκг на мышь. 16
Μышам κοнτροльнοй гρуππы (10 мышей) за 30 минуτ дο введения ρазρешающей дοзы внуτρивеннο ввοдили φοсφаτный буφеρ. Οценивали инτенсивнοсτь οτеκа лаπы чеρез 1, 2, 5 и 24 часа ποсле введения ρазρешающей дοзы анτигена. Ρезульτаτы πρиведены в τаблице 6. Τаблица 6 Инτенсивнοсτь οτеκа лаπы в ρазные сροκи ποсле введения ρазρешающей дοзы анτигена
Figure imgf000018_0001
Τаκим οбρазοм, связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви0 οκазываеτ ποдавляющий эφφеκτ на ρазвиτие ρеаκции гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа. Пρимеρ 4. Лечение ауτοиммуннοгο диабеτа и злοκачесτвенныχ οπуχοлей. Β эκсπеρименτе исποльзοвали 20 самοκ мышей линии ΝΟΟ и 20 самοκ мышей линии СЗΗ.5 Диабеτ у ΝΟΟ мышей вοзниκаеτ вследсτвие ρазвиτия ауτοиммуннοгο πορалсения в-κлеτοκ ποджелудοчнοй железы. Μьππи πеρвοй гρуππы (10 самοκ линии ΝΟΟ) ποлучили внуτρивенные инъеκцию φρаκции мышиныχ анτиΟ-Г аκτин анτиτел (СаΙЫοсЬет) πο 200 мκг на мышь в вοзρасτе 6, 7, 8, 9 и 10 недель. 10 мышей κοнτροльнοй τρеτьей гρуππы ποлучали инъеκции0 φοсφаτнοгο буφеρа с 6 πο 10 неделю. Ηачиная с 15 недели ρаз в τρи дня измеρяли уροвень глюκοзы в κροви мышей. Β случае если уροвень глюκοзы πρевышал 250 мг/дл πρи двуχ ποследующиχ измеρенияχ, κοнсτаτиροвалοсь наличие диабеτа. Οценивали κοличесτвο забοлевшиχ κ 15, 18, 24 и 28 неделе мышей.5 Ρезульτаτы πρиведены в τаблице 7. 17
Τаблица 7 Сοοτнοшение здοροвыχ и бοльныχ мышей
Figure imgf000019_0001
Пρимечание: πеρвая циφρа - числο здοροвыχ живοτныχ в гρуππе; вτορая циφρа-числο бοльныχ живοτныχ в гρуππе. Οπуχοли индуциροвали πуτем ' внуτρиκοжнοй инъеκции 3-меτилχοланτρена (1мг 3-меτилχοланτρена ρасτвορеннοгο в 50 мκл οливκοвοгο масла на мышь) в 4-χ-недельнοм вοзρасτе. Οценивали κοличесτвο мышей с ρазвившимися οπуχοлями на 10 неделе ποсле введения κанцеροгена.0 Μыши τρеτьей гρуππы (10 самοκ линии СЗΗ) ποлучили внуτρивенные инъеκции φρаκции мышиныχ анτиΟ-Г аκτин анτиτел πο 200 мκг на мышь в вοзρасτе 5, 6, 7, 8, 9 и 10 недель. Μыши чеτвеρτοй гρуππы (10 самοκ линии СЗΗ) ποлучали внуτρивенные инъеκции φοсφаτнοгο буφеρа в вοзρасτе 5, 6, 7, 8, 9 и 10 недель.5 Οπρеделяли наличие οπуχοлей у живοτныχ в вοзρасτе 14 недель. Ρезульτаτы πρиведены в τаблице 8. Τаблица 8 Сοοτнοшение здοροвыχ и бοльныχ мышей
Figure imgf000019_0002
Пρимечание: πеρвая циφρа - числο здοροвыχ живοτныχ в гρуππе; вτορая0 циφρа-числο бοльныχ живοτныχ в гρуππе. Τаκим οбρазοм, ποдавление аκτивнοсτи сοбсτвенныχ ингибиτοροв эндοгеннοй ДΗΚазы I οκазываеτ лечебный эφφеκτ πρи ρазвиτии ауτοиммуннοгο диабеτа и ρаκа. Пρимеρ 5. Пοдавление ρасπροсτρанения муτанτнοгο гена. 18
Ρяд забοлеваний челοвеκа вοзниκаюτ вследсτвие ρазвиτия сοсτοяния сοмаτичесκοгο мοзаицизма - эκсπансии муτанτнοгο гена в ποπуляции сοмаτичесκиχ κлеτοκ (Υοиδзοийаη Η, Ρуеπϊζ ΚΕ. ΜесЪашзтз аηά Сοηзе иеηсез ο δοтаϊϊс Μοзаϊсϊзт ш Ηшηаηз. Νаϊше Κеνϊеννз Οеηеϊϊсз 2002;3:748-758). 5 Β κачесτве мοдели ρазвиτия сοмаτичесκοгο мοзаицизма была изучена часτοτа муτаций гена ΗΡΚΤ в Τ-лимφοциτаχ κροви. Челοвечесκий ΗΡΚΤ ген (Χροмοсοма Χς26) κοдиρуеτ κοнсτиτуτивнο эκсπρессиρуемый, нο не эссенциальный φеρменτ, вοвлеченный меτабοлизм πуρинοвыχ οснοваний. Κлοниροвание προвοдили πο меτοдиκе, οπисаннοй Βϊ§Ъее (Βι§Ъее
Figure imgf000020_0001
Εϊ аϊ.,0 Μиϊаϊϊοη Κез.,1998,ν.397, ρρ.119-136). Κлοниροванию ποдвеρгались лимφοциτы πеρиφеρичесκοй κροви 8 бοльныχ, ποлучавшиχ κуρс τρеχнедельнοй иммунοсτимулиρующей τеρаπии πρеπаρаτοм Ηеοвиρ ποсле χиρуρгичесκοгο удаления οπуχοли. Из 8 бοльныχ 4 πациенτа дοποлниτельнο ποлучали τеρаπию челοвечесκοй ρеκοмбинанτнοй ДΗΚазοй Ι (ΟеηеϊесЬ) (200 мκг/κг5 внуτρивеннο, 4 ρаза в суτκи в τечение 3 недель). Часτοτа всτρечаемοсτи ΗΡΚΤ-деφициτныχ κлοнοв в κροви бοльныχ, ποлучавшиχ τеρаπию ДΗΚазοй I, в сρеднем бьша в 3 ρаза ниже τаκοвοй в κροви бοльныχ, ποлучавшиχ τοльκο иммунοсτимулиρующую τеρаπию. Дοбавление внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви бοльныχ, не ποлучавшиχ ДΗΚазу, в κульτуρальную сρеду πρи κлοниροвании Τ0 — лимφοциτοв бοльныχ, ποлучавшиχ τеρаπию ДΗΚазοй, ποвышаеτ часτοτу всτρечаемοсτи ΗΡΚΤ-деφициτныχ κлοнοв πρи κлοниροвании ποследниχ. Пρеинκубация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви бοльныχ, не ποлучавшиχ ДΗΚазу с анτи-ДΗΚ анτиτелами или с энзаймοсοмами 0,1 мκг анτиτел или 5 мκг энзаймοсοм на 0,1 мκг ДΗΚ в 1 мл πлазмы 30 минуτ πρи 37 С), πеρед5 дοбавлением в κульτуρальную сρеду πρи κлοниροвании лишаеτ ее сποсοбнοсτи ποвышаτь часτοτу всτρечаемοсτи ΗΡΚΤ-деφициτныχ κлοнοв. Τаκим οбρазοм, связывание и мοдиφиκация внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви снижаеτ часτοτу всτρечаемοсτи муτанτнοгο гена в κлеτοчнοй ποπуляции и πρеπяτсτвуеτ ρазвиτию сοмаτичесκοгο мοзаицизма сοгласнο заявляемοму0 сποсοбу.
Пροмышленная πρименимοсτь 19
Для ρеализации даннοгο сποсοба πρименены извесτные маτеρиалы и οбορудοвание, изгοτοвляемοе в завοдсκиχ услοвияχ, чτο οбуслοвливаеτ сοοτвеτсτвие изοбρеτения κρиτеρию «προмьшιленная πρименимοсτь». (ΙΑ)

Claims

20Φορмула изοбρеτения
1. Сποсοб лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, инφеκций, вызываемыχ баκτеρиями, гρибами и προсτейπшми, аτеροсκлеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, забοлеваний, ρазвивающиχся вследсτвие муτаций генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ, χ аρаκτеρизующийся τем, чτο в сисτемную циρκуляцию ввοдяτ агенτ, связывающий внеκлеτοчную ДΗΚ κροви.
2. Сποсοб лечения забοлеваний, сοπροвοлсдающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, инφеκций, вызываемыχ баκτеρиями, гρибами и προсτейшими, аτеροсκлеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, забοлеваний, ρазвивающиχся вследсτвие муτаций генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ, χ аρаκτеρизующийся τ ем, чτο в сисτемную циρκуляцию ввοдяτ агенτ, мοдиφициρующий χимичесκий сοсτав и /или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее ρазρушения.
3. Сποсοб лечения забοлеваний, сοπροвοждающиχся изменениями κачесτвеннοгο и/или κοличесτвеннοгο сοсτава внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви, а именнο: οнκοлοгичесκиχ забοлеваний, инφеκций, вызываемыχ баκτеρиями, гρибами и προсτейшими, аτеροсκлеροза, саχаρнοгο диабеτа, аллеρгичесκиχ забοлеваний, связанныχ с ρеаκцией гиπеρчувсτвиτельнοсτи замедленнοгο τиπа, забοлеваний, ρазвπвающиχся вследсτвие муτадий генοв сοмаτичесκиχ κлеτοκ, χ аρаκτеρизующийся τ ем, чτο в сисτемную циρκуляцию ввοдяτ агенτ, сτимулиρующий синτез и/или аκτивнοсτь эндοгенныχ биοποлимеροв, связывающиχ или ρазρушающиχ или мοдиφициρующиχ χимичесκий сοсτав и/или κοнφορмацию и/или ποлимеρнοсτь внеκлеτοчнοй ДΗΚ κροви без ее ρазρушения.
PCT/RU2004/000262 2003-07-14 2004-07-01 Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative et/ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang (variantes) WO2005004904A1 (fr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RUPCT/RU03/000304 2003-07-14
PCT/RU2003/000304 WO2005007187A1 (fr) 2003-07-14 2003-07-14 Methode de traitement des maladies oncologiques, infectieuses et somatiques, procedes de controle de l'efficacite du traitement, agents et compositions pharmaceutiques associes
RU2004108060/14A RU2269359C2 (ru) 2004-03-12 2004-03-12 Способ профилактики развития онкологических заболеваний или инфекций, вызываемых бактериями, грибами и простейшими, или атеросклероза, или сахарного диабета, или заболеваний, связанных с реакцией гиперчувствительности замедленного типа, или заболеваний, развивающихся вследствие мутации генов соматических клеток (варианты)
RU2004108060 2004-03-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2005004904A1 true WO2005004904A1 (fr) 2005-01-20

Family

ID=56290575

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2004/000262 WO2005004904A1 (fr) 2003-07-14 2004-07-01 Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative et/ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang (variantes)

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2005004904A1 (ru)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8388951B2 (en) 2003-07-14 2013-03-05 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic DNA mutation disease
US8431123B2 (en) 2003-07-14 2013-04-30 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic bacterial, fungal and protozoan infection
US8710012B2 (en) 2003-07-14 2014-04-29 Cls Therapeutics Limited Method for treating oncological diseases
US8871200B2 (en) 2006-11-28 2014-10-28 Cls Therapeutics Limited Method for treating human diseases associated with an increased deoxyribonucleic acid content in extracellular spaces of tissues and a medicinal preparation for carrying out said method
US8916151B2 (en) 2005-04-25 2014-12-23 Cls Therapeutics Limited Method for treating a reduction of fertility
US10617743B2 (en) 2014-06-19 2020-04-14 Cls Therapeutics Limited Method to improve safety and efficacy of anti-cancer therapy
US11701410B2 (en) 2015-05-22 2023-07-18 Cls Therapeutics Limited Extracellular DNA as a therapeutic target in neurodegeneration
US11905522B2 (en) 2018-01-16 2024-02-20 Cls Therapeutics Limited Treatment of diseases by liver expression of an enzyme which has a deoxyribonuclease (DNase) activity

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5656589A (en) * 1990-04-11 1997-08-12 Brigham And Women's Hospital Method for reducing the viscosity of purulent airway contents in the respiratory tract comprising administering actin-binding compounds with or without DNase I
RU2207876C1 (ru) * 2001-11-08 2003-07-10 Ткаченко Виталий Васильевич Способ комплексно-индивидуализированного воздействия на организм при медленной вирусной инфекции и способ подготовки лабораторного животного для испытания способа такого воздействия

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5656589A (en) * 1990-04-11 1997-08-12 Brigham And Women's Hospital Method for reducing the viscosity of purulent airway contents in the respiratory tract comprising administering actin-binding compounds with or without DNase I
RU2207876C1 (ru) * 2001-11-08 2003-07-10 Ткаченко Виталий Васильевич Способ комплексно-индивидуализированного воздействия на организм при медленной вирусной инфекции и способ подготовки лабораторного животного для испытания способа такого воздействия

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GORRINI C. ET AL.: "Effect of appoptogenic stimuli on colon carcinoma cell lines with a different c-myc expression level", INT. J. MOL. MED., vol. 11, no. 6, June 2003 (2003-06-01) *
MELNIKOV D.JU. ET AL.: "Voprosy onkologicheskoi pomoschi na etape reformirovaniya zdravookhraneniya", EKATRIBURG, 1996, pages 159 - 161 *
RAZ E. ET AL.: "Anti-DNA antibodies bind directly to renal antigens and induce kidney dysfunction in the isolated perfused rat kidney", J. IMMUNOL., vol. 142, no. 9, 1 May 1989 (1989-05-01), pages 3076 - 3082 *
SIMPSON G. ET AL.: "Succesful treatment of empyema thoracis with human recombinant deoxyribonuclease", THORAX, vol. 58, no. 4, April 2003 (2003-04-01) *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9463223B2 (en) 2003-07-14 2016-10-11 Cls Therapeutics Limited Method for monitoring development of somatic mosaicism
US9248166B2 (en) 2003-07-14 2016-02-02 Cls Therapeutics Limited Method for treating oncological diseases
US8535663B2 (en) 2003-07-14 2013-09-17 Cls Therapeutics Limited Method for treating delayed-type hypersensitivity
US8710012B2 (en) 2003-07-14 2014-04-29 Cls Therapeutics Limited Method for treating oncological diseases
US8796004B2 (en) 2003-07-14 2014-08-05 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic DNA mutation disease
US9845461B2 (en) 2003-07-14 2017-12-19 Cls Therapeutics Limited Method for treating oncological diseases
US8431123B2 (en) 2003-07-14 2013-04-30 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic bacterial, fungal and protozoan infection
US9072733B2 (en) 2003-07-14 2015-07-07 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic bacterial, fungal and protozoan infection
US9770492B2 (en) 2003-07-14 2017-09-26 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic DNA mutation disease
US8388951B2 (en) 2003-07-14 2013-03-05 Cls Therapeutics Limited Method for treating systemic DNA mutation disease
US8916151B2 (en) 2005-04-25 2014-12-23 Cls Therapeutics Limited Method for treating a reduction of fertility
US8871200B2 (en) 2006-11-28 2014-10-28 Cls Therapeutics Limited Method for treating human diseases associated with an increased deoxyribonucleic acid content in extracellular spaces of tissues and a medicinal preparation for carrying out said method
US10617743B2 (en) 2014-06-19 2020-04-14 Cls Therapeutics Limited Method to improve safety and efficacy of anti-cancer therapy
US11701410B2 (en) 2015-05-22 2023-07-18 Cls Therapeutics Limited Extracellular DNA as a therapeutic target in neurodegeneration
US11905522B2 (en) 2018-01-16 2024-02-20 Cls Therapeutics Limited Treatment of diseases by liver expression of an enzyme which has a deoxyribonuclease (DNase) activity

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2005004903A1 (fr) Methode de traitement de maladies oncologiques
US10201537B2 (en) Use of levocetirizine and montelukast in the treatment of autoimmune disorders
US20150110769A1 (en) Method for retarding unhealthy manifestations brought by ageing of human beings
JPH06172183A (ja) 医薬組成物
US20220249547A1 (en) Method of preventing covid-19 infection
WO2005007187A1 (fr) Methode de traitement des maladies oncologiques, infectieuses et somatiques, procedes de controle de l'efficacite du traitement, agents et compositions pharmaceutiques associes
WO1994001099A1 (en) Pharmaceutical composition having anti-alcohol, radioprotecting and anti-choleraic activity and stimulating energy metabolism, stomach mucous membrane acid-generation and secretion functions
WO2005004904A1 (fr) Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative et/ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang (variantes)
WO1995022336A1 (fr) Agent immunomodulateur et reducteur du dysfonctionnement du systeme de regulation de la propagation de cellules tissulaires
WO2003040723A1 (fr) Procede de rehabilitation de l'organisme en cas d'infection virale lente
WO2005004789A2 (fr) Methode de traitement de maladies s'accompagnant d'alterations de la composition qualitative ou quantitative de l'adn extracellulaire du sang
Scioli et al. Treatment of Salmonella typhi carriers with intravenous ampicillin
TW442495B (en) Activated immunoglobulin
EP0213072B1 (en) Treatment of chronic imflammatory disease
Kovac et al. Current strategies for prevention and treatment of equine postoperative ileus: a multimodal approach
Verstraete et al. Double-blind experiments on the effect of a peanut extract on the bleeding incidence in 92 haemophiliacs.
Auci et al. Synergy of transforming growth factor beta 1 and all trans retinoic acid in the treatment of inflammatory bowel disease: role of regulatory T cells
Broshkov et al. METHODS FOR REGULATION OF IMMUNE REACTIVITY IN DOGS: a monograph
Ismail et al. Trichinella spiralis: The effect of antiserotonin and antihistamine reagents on the eosinophilic response in rats
WO2005021007A1 (fr) Prevention et traitement de l'hepatite virale b
WO1997045530A1 (fr) Utilisation de souches de streptococcus faecium et composition a base de ces souches
CN110913880B (zh) 抗氧化膳食补充组合物
Zhou et al. Chitosan augments cytolytic activity of mouse lymphocytes
Eser et al. Ecchymosis: An Unexpected Side Effect of Montelukast.
WO2004064849A1 (fr) Produit normalisant la structure et les fonctions des organes et tissus, stimulant les reparations des lesions et possedant une activite antivirale

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
DPEN Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed from 20040101)
122 Ep: pct application non-entry in european phase