WO2002095015A1 - Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique - Google Patents

Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique Download PDF

Info

Publication number
WO2002095015A1
WO2002095015A1 PCT/FR2002/001730 FR0201730W WO02095015A1 WO 2002095015 A1 WO2002095015 A1 WO 2002095015A1 FR 0201730 W FR0201730 W FR 0201730W WO 02095015 A1 WO02095015 A1 WO 02095015A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
catalytic
immunogenic
antibody
compound
compounds
Prior art date
Application number
PCT/FR2002/001730
Other languages
English (en)
Inventor
Alain Friboulet
Bérangère AVALLE-BIHAN
Hélène DEBAT
Daniel Thomas
Original Assignee
Gradient
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gradient filed Critical Gradient
Priority to BR0209934-9A priority Critical patent/BR0209934A/pt
Priority to EP02732880A priority patent/EP1390478A1/fr
Priority to JP2002592478A priority patent/JP2004527579A/ja
Priority to CA2448174A priority patent/CA2448174C/fr
Priority to AU2002304489A priority patent/AU2002304489B2/en
Priority to MXPA03010694A priority patent/MXPA03010694A/es
Publication of WO2002095015A1 publication Critical patent/WO2002095015A1/fr
Priority to US10/716,030 priority patent/US7109291B2/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0002—Antibodies with enzymatic activity, e.g. abzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6878—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids in eptitope analysis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/901—Antibodies with enzymatic activity; e.g. abzymes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the invention relates to novel compounds capable of modulating the activity and stimulating the production of catalytic antibodies.
  • the invention relates in particular to a compound capable of increasing the activity of a catalytic antibody characterized in that it has a specific affinity for the catalytic site of said antibody, and in that it is not immunogenic.
  • Such compounds are useful in particular for the therapeutic treatment or prevention of a pathology linked to an enzymatic deficiency, to stimulate in vivo the hydrolysis of xenobiotics, drugs, medicaments or any other molecule potentially toxic for the organism or again to prevent or prevent allergic reactions.
  • Antibodies and enzymes have in common the property of specifically recognizing molecules. With the exception of pathological cases, the antibody recognizes an antigen or a molecule which is foreign to the organism producing the antibody. The binding of the antibody to the antigen generally leads to the neutralization of the foreign molecule in the organism. Enzymes are biological catalysts that bind to a molecule so that the activation energy of a reaction involving the molecule is lowered, thereby increasing the speed of the reaction.
  • antibodies with catalytic activity could be isolated from the serum of patients suffering from different pathologies.
  • the first demonstrations were carried out by purifying the antibodies from human sera. These “natural” catalytic antibodies in particular have DNAse or protease activities.
  • catalytic antibodies exhibiting protease activity against the intestinal vasoactive peptide (VIP) were thus isolated from the serum of patients suffering from asthma. These same antibodies were obtained by the immunization of mice with the same immunogenic peptide (Paul et al., J Neuroimmunol (1989) 23: 133-142).
  • catalytic antibodies are multiple.
  • such catalytic antibodies would be useful for the catalysis of chemical reactions which are not carried out by natural enzymes, in particular for acting in vivo on the metabolism (medical application) or carrying out specific chemical reactions (industrial application).
  • One of the applications which has been developed relates to the use of the hydrolytic properties of catalytic antibodies to activate non-toxic compounds into cytotoxic compounds (Zeneca Ltd, 1998, US 5807688). By targeting this activity at the level of target cells, molecules whose cytotoxicity is masked by a chemical group could be activated on contact with tumor cells for anti-cancer treatments (ADAPT method, Antibody-directed Abzyme Prodrug Therapy). Another example concerns the ability of certain antibodies to hydrolyze cocaine. The development of an antibody with these properties could allow its use in the treatment of overdoses and cocaine addiction.
  • the patent describes a method of inducing the stimulation of catalytic antibody using the immunization of a mammal with a hapten, analog of transition states (Barber et al., 2000, US 6,017,541).
  • a third example is developed by Advanced Biotech, which produces catalytic antibodies for the treatment of infections with gram-negative bacteria by targeting endotoxin (Genetic Engineering News (1999) vol. 19 no. 20 page 15).
  • the invention results from the discovery that it is possible to modulate in vivo the activity of a catalytic antibody using a non-immunogenic compound and having a specific affinity for the catalytic site of said antibody.
  • Such compounds have a direct effect on catalytic activity by inducing conformational change of antibodies already produced.
  • the inventors have found that, in spite of the non-immunogenic nature of these compounds, they could indirectly increase the production of catalytic antibodies, by shifting the balance of the immune system towards the production of antibodies. with increased catalytic activity, this displacement being induced by the conformational change of the pre-existing antibodies.
  • the invention relates to a compound capable of modulating the activity of a catalytic antibody, said compound being characterized in that it has a specific affinity for the catalytic site of said antibody, and in that it is not not immunogenic.
  • It also relates to a method of modulating the activity of a catalytic antibody comprising bringing said antibody into contact with a non-immunogenic compound and having a specific affinity for the catalytic site of said antibody.
  • a catalytic antibody is an antibody capable of recognizing in a specific but not exclusive manner, two types of molecules: the antigen or immunogen, that is to say a molecule capable of inducing a direct immune response by the activation of B lymphocytes or T specific according to the nature of the antigen, and, the substrate, which specifically recognizes the catalytic site of the antibody and, as its name indicates, is the substrate for the chemical reaction catalyzed by the catalytic antibody.
  • non-immunogenic compound a compound incapable of directly activating specific B or T lymphocytes
  • the catalytic antibodies can be presented in two isoforms: an isoform known as “inactive” or “slightly active” (hereinafter called Ab), and an isoform known as “active” (hereinafter called Ab *).
  • the active isoform (Ab *) has a catalytic activity (hereinafter called kcat *) greater than that of the non-active isoform (hereinafter called kcat).
  • kcat * catalytic activity
  • the change in conformation induced by the compound according to the invention thus leads to the in vivo modulation of the catalytic activity of the antibody which goes from a kcat value to a value kcat *, the value kcat * being different from the value k ⁇ t.
  • a modulation of the catalytic activity can thus be obtained on catalytic antibodies present in the serum of patients by the injection in the form of a well of the compounds according to the invention, according to methods analogous to those implemented for a vaccine.
  • a compound according to the invention is capable of increasing the activity of a catalytic antibody.
  • a compound according to the invention as defined above is capable of stimulating the production of the catalytic antibody whose activity it increases.
  • a compound of the invention it is advantageously chosen from a group comprising: - a substrate of an enzyme or one of its analogs, inhibitor or activator;
  • enzyme substrate analog is meant the non-immunogenic substrates of an enzyme and derived molecules, and in particular the stable analogs of non-immunogenic transition states of an enzyme or non-immunogenic inhibitors or activators of that enzyme .
  • the enzyme substrate analogs according to the invention may in particular be fragments of antibodies specifically recognizing the catalytic site of an enzyme.
  • Such compounds are capable of increasing, in vivo, the catalytic activity and / or the production , of the catalytic antibodies for which they exhibit an affinity and can thus compensate for a deficient or reduced enzymatic activity following a pathology or a therapeutic treatment, by example.
  • the enzymatic activities deficient or reduced following a pathology or a therapeutic treatment can be for example activities of the hydrolase type and in particular peptidase, protease activities, oxidoreductase type activities (for example dehydrogenase, oxidase or oxygenase), isomerase activities, lyase activities and in particular decarboxylase, transferase activities and in particular kinase activities, or else ligase activities.
  • pathologies include:
  • leukemia which is the consequence of a deficit in keto-acid decarboxylase
  • Lesch-Nyhan syndrome which is the consequence of a deficit in hypoxanthine guanine phosphorisbosyl-transferase
  • inhibitor of an enzyme is capable of increasing the catalytic activity of a catalytic antibody mimicking the activity of this enzyme, via its specific properties with respect to catalytic antibodies, described above, despite its inhibitory properties.
  • An enzyme or analogous substrate falling within the definition of the compounds according to the invention can therefore be, for example, depending on the nature of the enzyme of which it is the substrate, a peptide, but also a sugar or one of its derivatives , a lipid or one of its derivatives, a nucleotide or one of its derivatives or also a steroid or one of its derivatives.
  • a compound according to the invention is in particular a peptide having an affinity for the active site of ⁇ -lactamase, and more preferably, characterized in that it specifically inhibits the ⁇ -lactamase activity.
  • the invention also relates to a compound capable of increasing in vivo the physiological level of an enzymatic activity, characterized in that it comprises a non-immunogenic substrate of a catalytic antibody having said enzymatic activity or one of its analogs activators or inhibitors and in that it has a specific affinity for the catalytic site of said antibody.
  • a compound according to the invention is a ligand which binds to a receptor and in particular a hormone, a drug, a drug, or one of their fragments or analogs.
  • the compounds described above are capable of increasing the catalytic activity of catalytic antibodies degrading the drugs, hormones or drugs from which they are derived or from which they are analogous.
  • the invention also relates to a compound capable of stimulating in vivo the degradation of medicaments or drugs by specific catalytic antibodies, characterized in that it is non-immunogenic, that it comprises a drug or a medicament or the one of their fragments or analogs and in that it has a specific affinity for the catalytic site of said antibody.
  • fragments of a ligand falling within the definition of a compound according to the invention are chosen from the fragments which have retained the properties of attachment to the receptor.
  • fragments of the ligand are peptides retaining the binding properties to the receptor.
  • a ligand analog is a molecule capable of binding to the same receptor as the ligand. In particular, it is an agonist or an antagonist of the receptor on which the ligand binds. Such an analog can be a natural or artificial molecule isolated using a screening of molecules which bind to a receptor.
  • An example of such a ligand is a fragment of TNF ⁇ falling within the definition of the compounds according to the invention and capable of binding to the cellular receptors p55 and p75.
  • a preferred compound is characterized in that it comprises a peptide derived from the cytokine TNF ⁇ , said compound being non-immunogenic and having a specific affinity for the catalytic site of a catalytic antibody and said peptide containing one of the sequences of the following amino acids:
  • LNRRA LNRRA, IASVY or LFA.
  • Another example of a preferred compound is characterized in that it comprises a peptide derived from thyroglobulin.
  • Another example of a preferred compound is codeine, a cocaine analog capable of stimulating by repeated injection, the production of cocaine degrading catalytic antibodies.
  • a compound according to the invention is chosen from antibiotics or their analogs.
  • antibiotic analogue it is necessary to understand a molecule with a structure different from the antibiotic molecule of which it is the analog but capable of reproducing a similar “antibiotic” function.
  • a compound according to the invention is chosen from a viral, bacterial or parasitic peptide.
  • Such compounds are thus capable of stimulating catalytic production degrading the bacterial or parasitic viral proteins and allow thus to fight against the corresponding viral, bacterial or parasitic infections.
  • peptides are non-immunogenic peptides derived from surface epitopes or virulence proteins from pathogenic organisms such as HIV, HSV or HBV viruses, from pathogenic bacteria such as Legionella, Listeria, Staphylococcus, or from parasites such as P. faciparum, Echinococcus, Leishmania or Trypa ⁇ osoma.
  • an example of such a compound according to the invention is a compound characterized in that it comprises a non-immunogenic peptide derived from an epitope of a Herpes virus.
  • a compound according to the invention is a recalcitrant and potentially toxic xenobiotic or one of its fragments.
  • xenobiotic recalcitrant means any molecule foreign to the organism capable of accumulating in the tissues or the interior environment of a man or an animal. Some of these molecules, and in particular pesticides (organophosphorus compounds), dioxin or organochlorines (PCB, DDT 7), are potentially toxic for the organism, in particular in the long term.
  • the accumulation in the body of certain xenobiotics is in particular carcinogenic or neurotoxic.
  • the invention therefore relates to a compound capable of stimulating in vivo the hydrolysis of potentially toxic xenobiotics by specific catalytic antibodies, said compound being characterized in that it is non-immunogenic, that it comprises a recalcitrant and potentially toxic xenobiotic, or one of its fragments and in that it has a specific affinity for the catalytic site of said antibody. It also relates to the use of a non-immunogenic recalcitrant xenobiotic or one of its fragments having a specific affinity for the catalytic site of an antibody to stimulate the hydrolysis of said xenobiotic by said catalytic antibodies.
  • a compound according to the invention is an allergen analog.
  • An allergen is understood to mean any product capable of triggering an allergic reaction.
  • An allergen analog is a molecule whose structure mimics the allergen but is not immunogenic.
  • Such allergen analogs according to the invention by increasing the catalytic activity of antibodies capable of degrading, in particular by hydrolysis, the allergens and by indirectly stimulating the production of serum and secretory antibodies, are thus capable of partially desensitizing or totally an allergic subject.
  • the invention also relates to a compound capable of preventing or reducing an allergic reaction linked to an allergen, characterized in that it comprises a non-immunogenic analog of said allergen and in that it has a specific affinity for the site. catalytic of said antibody.
  • It also relates to the use of a non-immunogenic analog of an allergen having a specific affinity for the catalytic site of an antibody to prevent or reduce an allergic reaction linked to said allergen.
  • composition comprising as active ingredient any compound described above also forms part of the invention.
  • pharmaceutical composition means any composition capable of being administered to humans or to animals.
  • the active principle can be, if necessary, associated with another active molecule whose function is to modulate or stimulate the biological activity of the compound according to the invention, or even reduce any side effects thereof.
  • composition further comprises a pharmaceutically acceptable vehicle.
  • the vehicles used in the preparation of the pharmaceutical compositions are preferably chosen from those generally used in the vaccine preparations. They are of course chosen according to the mode of administration of the composition and its use.
  • the invention also relates to a use of a compound according to the invention in the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of a pathology linked to an enzyme deficiency.
  • It also relates to the use of a compound according to the invention in the preparation of a composition for stimulating the hydrolysis of xenobiotics, drugs, medicaments or any other molecule potentially toxic to the organism.
  • the catalytic antibodies in addition to their catalytic properties, recognize by their Fc region, the cellular receptors, and in particular the receptors present on the antigen presenting cells, the cytotoxic cells and the macrophages, and more generally the various cells of the immune system. It is therefore important to emphasize that by stimulating the production of catalytic antibodies by the compounds according to the invention, it is possible to target a given catalytic activity at the level of a cell recognizing the catalytic antibody. In the case of non-specific type recognition, that is to say by the Fc regions of the antibodies, the catalytic activity can be targeted on cells of the cellular type immune system, this then adding to the action on the humoral system (synthesis of antibodies sought by B lymphocytes).
  • the compounds according to the invention make it possible to target the catalytic activity on a chosen target, said target comprising said epitope.
  • targets are antibodies with double specificity both for a specific epitope and for the enzyme substrate.
  • the compounds according to the invention make it possible to target a catalytic activity to effectors of the immune and / or inflammatory system.
  • the invention finally relates to a method for selecting a compound according to the invention comprising the selection and isolation of a natural or induced catalytic antibody by repeated injection of an immunogenic molecule, characterized in that it further comprises the following steps: a) synthesis and / or extraction of compounds derived from an immunogenic molecule recognized by the isolated catalytic antibody; b) if necessary, a first screening using a biological and / or biochemical test of the compounds interacting with the catalytic site of said catalytic antibody, c) the selection of non-immunogenic compounds having a specific affinity for the catalytic site of the antibody among the compounds synthesized or extracted in step a) or selected in step b), using a test allowing the measurement of said affinity.
  • step (a) of the process of the invention it is a question of obtaining compounds derived from an immunogenic molecule recognized by the catalytic antibody selected and isolated beforehand.
  • the compounds can be synthesized in particular by combinatorial chemistry, by biosynthesis or by bioconversion.
  • the chemical structure of the compounds synthesized in (a) can also be predicted using bioinformatic methods for predicting chemical structure.
  • the compounds are derived from an immunogenic peptide and are synthesized by mutagenesis of a DNA encoding said immunogenic peptide and by the expression of the mutated DNA in a host cell according to biological methods molecular known to those skilled in the art such as those described by Sambrook et al. (Molecular Cloning: a laboratory manual, 3 rd Ed. Cold Spring Harbor, Laboratory press, New York, 2001).
  • the method may include a first screening step (step (b) of the method) using a biological test and / or biochemical of compounds interacting with the catalytic site of said antibody.
  • This step consists, after having generated a large number of compounds derived from the immunogenic compound, to first select the compounds which have retained the property of binding to the catalytic antibody in order to reduce the number of compounds to be screened in step (c). Any test making it possible to identify, among a set of compounds, the compound or compounds interacting specifically with a given catalytic antibody can be used in the method of the invention.
  • the compounds synthesized or extracted in step (b) are peptides and are selected using a biochemical screening of the catELISA test type (Tawfik et al. 1993, supra). ), a screening on a protein chip or a screening by measuring the resonant plasmonic surface.
  • a protein chip consists of a support on which are fixed at determined positions the different peptides to be screened.
  • the labeling of the catalytic antibody and the contact with the protein chip under conditions allowing protein-protein interactions allow the selection of the peptides interacting specifically with the catalytic antibody.
  • any biochemical method making it possible to test the interaction of a peptide with an antibody and in particular the methods derived from the Western blot, can be used in the method of the invention to carry out the biochemical screening of the compounds interacting with the antibody.
  • the peptide compounds are selected by the phage display technique or by the double-hybrid technique. These methods are well known to those skilled in the art and are described in Sambrook et al. (2001, supra).
  • the compounds according to the invention are then selected in step (c) of the process, using a test allowing the measurement of the affinity for the catalytic site of the antibody.
  • a compound according to the invention can be selected by measuring the speed of the reaction catalyzed by the catalytic antibody in the presence of either the test compound or the reference immunogenic compound.
  • the speed of the reaction catalyzed by the antibody, measured in the presence of the test compound is significantly higher than that measured in the presence of the reference immunogenic compound, the test compound is selected.
  • any type of test making it possible to measure the affinity constant of the compound-antibody complexes can be used to select the non-immunogenic compounds according to the invention.
  • Another aspect of the invention relates to new methods of therapeutic treatment.
  • the invention relates to a method:
  • the methods comprise the administration to an organism of a pharmaceutical composition comprising, as active principle, a compound according to the invention, alone or in combination with another pharmacologically active substance capable of increasing in vivo. activity of a catalytic antibody, in combination with an appropriate pharmaceutical vehicle.
  • the modes of administration, the composition of the vehicle and the dosage of the compounds administered for the treatment will be chosen according to the therapeutic or preventive effect sought.
  • the forms of administration can be local or systemic and in particular oral, sublingual, intravenous, nasal, aerosol, intramuscular, subcutaneous or food.
  • treatment methods of the invention will in general be similar to vaccine methods, the person skilled in the art may refer in particular to vehicles conventionally used in this field.
  • Figure 1 illustrates the induced fit mechanism allowing a non-immunogenic compound to shift the balance of conformational states of a catalytic antibody from inactive or inactive catalytic forms to active isomeric forms .
  • the shift in equilibrium leads in vivo to an increase in the catalytic activity of the catalytic antibody and indirectly to a stimulation of its production.
  • EXAMPLE 1 Compound capable of increasing the catalytic activity of the secreted IgAs directed against epitopes of the Herpes virus to fight against infections with the Herpes virus.
  • IgA secreted IgA are the main effectors of the mucosal immune system. They are notably involved in the recognition of bacterial, viral or protozoan antigens. It has been shown in particular that IgA extracted from healthy breast milk can possess catalytic activities of protein kinase, DNase or RNase type (Buneva VN et al. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol. 75: 63-76, Nevinsky GA et al. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol. 75: 77-91).
  • the production of a catalytic antibody directed against epitopes of the Herpes simplex virus type 1 virus could be stimulated by the cutaneous application of non-immunogenic peptides in the form of patches.
  • the non-immunogenic peptides chosen represent the specific sequences of the known epitopes of I ⁇ SV1.
  • a similar approach can be implemented to stimulate the production of catalytic antibodies hydrolyzing peptides from HSV2, responsible for genital herpes, or from herpes Zoster, responsible for shingles.
  • EXAMPLE 2 Compound capable of increasing the catalytic activity of an antibody hydrolyzing certain peptide sequences of TNF ⁇ for the treatment of rheumatoid arthritis.
  • TNF ⁇ tumor necrosis factor
  • TNF ⁇ The inflammatory action of TNF ⁇ is linked to its attachment to two cellular receptors, p55 and p75. This fixation involves TNF ⁇ loops formed by residues 29-34, 84-91 and 143-148.
  • Non-immunogenic peptides having a specific affinity with a catalytic antibody capable of hydrolyzing TNF ⁇ are selected from peptides containing the sequences LNRRA (29-33), IASVY (83-87) and LFA (143-145).
  • LNRRA 29-33
  • IASVY 83-87
  • LFA 143-145
  • EXAMPLE 3 Compound capable of increasing the catalytic activity of an antibody hydrolyzing cocaine to treat drug addiction phenomena.
  • Drug use in a subject causes addiction.
  • the amount of drug circulating in the blood after administration is directly related to the amazing effect and the addiction that follows.
  • Immunization of a subject using immunogenic peptides directly stimulating the production of catalytic antibodies hydrolyzing cocaine makes it possible to reduce, even eliminate, the quantity of circulating cocaine.
  • low concentrations of codeine, a non-immunogenic compound similar to cocaine could be injected repeatedly, intravenously.
  • EXAMPLE 4 Compound capable of increasing the catalytic activity of an antibody with ⁇ -lactamase activity.
  • This antibody allows the production of a second generation of Ab2 antibodies, anti-idiotypic, and carrying an activity close to that of ⁇ -lactamase.
  • the lethality linked to the repeated injection of penicillin should be reduced, by stimulating the production of anti-idiotypic antibodies with ⁇ -lactamase activity by the administration of non-immunogenic peptides mimicking the paratope of the antibody induced in the presence of active site of ⁇ -lactamase.
  • EXAMPLE 5 Compound capable of increasing the catalytic activity of antibodies hydrolyzing an allergen to reduce or prevent an allergic reaction.
  • Specific desensitization induces both an increase in serum and secretory blocking antibodies, a decrease in production specific IgE and modification of the response of mast cells, basophils and lymphocytes.
  • the administration to a sensitive subject of an allergen of a nonimmunogenic molecule derived from the allergen should make it possible to modify the immunological response towards the increase in the production of catalytic antibodies directed against this allergen, an indirect increase in the production of serum and secretory blocking antibodies and. the decrease in the production of specific IgE, taking into account the hydrolysis of the allergen. All of these responses help reduce or prevent the allergic reaction.
  • Non-immunogenic peptides to prevent or reduce allergies to anti-infective drugs.
  • Antibiotics are the molecules most often implicated in reactions of allergies to anti-infective drugs (50% of cases). We know in particular that allergenicity is in the vast majority of cases carried by the ⁇ -lactam cycle. By being cleaved during metabolism, the ⁇ -lactam cycle gives the penicilloyl hapten which is capable of inducing the production of IgE.
  • Non-immunogenic peptides that inhibit ⁇ -lactamase activity injected in oral form, to induce the production of non-IgE antibodies capable of hydrolyzing antibiotics with a ⁇ -lactam nucleus, thereby preventing the production of IgE antibodies.
  • a peanut allergy is affecting an increasing number of people.
  • the severity of the shocks to which it gives rise as well as its frequency are increasing.
  • a 17 kD protein, Ara h II has been identified as a major and characterized allergen. Sequence comparisons made it possible to identify sequence homologies with proteins of different foods from the legume family that could cause cross-sensitization.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)

Abstract

L'invention a trait à des nouveaux composés capables de moduler l'activité et de stimuler la production des anticorps catalytiques. L'invention porte en particulier sur un composé capable d'augmenter l'activité d'un anticorps catalytique caractérisé en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps, et en ce qu'il n'est pas immunogène. De tels composés sont utiles en particulier pour le traitement thérapeutique ou la prévention d'une pathologie liée à une déficience enzymatique, pour stimuler in vivo l'hydrolyse de xénobiotiques, de drogues, de médicaments ou toute autre molécule potentiellement toxique pour l'organisme ou encore pour prévenir ou empêcher des réactions allergiques.

Description

COMPOSES CAPABLES DE MODULER L'ACTIVITE ET DE STIMULER LA PRODUCTION D'UN ANTICORPS CATALYTIQUE
L'invention a trait à des nouveaux composés capables de moduler l'activité et de stimuler la production des anticorps catalytiques. L'invention porte en particulier sur un composé capable d'augmenter l'activité d'un anticorps catalytique caractérisé en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps, et en ce qu'il n'est pas immunogène. De tels composés sont utiles en particulier pour le traitement thérapeutique ou la prévention d'une pathologie liée à une déficience enzymatique, pour stimuler in vivo l'hydrolyse de xénobiotiques, de drogues, de médicaments ou toute autre molécule potentiellement toxique pour l'organisme ou encore pour prévenir ou empêcher des réactions allergiques.
Anticorps et enzymes ont en commun la propriété de reconnaître spécifiquement des molécules. A l'exception des cas pathologiques, l'anticorps reconnaît un antigène ou une molécule qui est étrangère à l'organisme produisant l'anticorps. La liaison de l'anticorps à l'antigène conduit généralement à la neutralisation de la molécule étrangère à l'organisme. Les enzymes sont des catalyseurs biologiques qui se lient à une molécule de telle sorte que l'énergie d'activation d'une réaction impliquant la molécule est abaissée, augmentant ainsi la vitesse de la réaction.
En 1946, Linus Pauling proposa le concept suivant: Les anticorps lieraient de façon préférentielle les états stables des molécules tandis que les enzymes lieraient de façon préférentielle l'état de transition d'état énergétique plus élevé plutôt que la molécule de substrat dans son état de basse énergie. Selon l'hypothèse de Pauling (Pauling, L., Nature (1948) 161 :707), l'enzyme stabiliserait l'état de transition des molécules, réduisant l'énergie d'activation d'une réaction et augmentant ainsi la vitesse de cette réaction.
En poursuivant cette hypothèse, il a été proposé une stratégie pour l'obtention de nouvelles activités catalytiques, basée sur la production d'anticorps dirigés contre un haptène qui mime l'état de transition d'une réaction donnée, encore appelé « Analogue d'Etat de Transition » ou TSA (Transition State Analogue). Ainsi, un anticorps dirigé, contre de tels antigènes devrait acquérir des propriétés catalytiques similaires à celles des enzymes.
Cette stratégie fut confirmée de nombreuses fois depuis 1986. Des anticorps catalytiques peuvent en effet être induits par l'immunisation d'un animal avec un analogue d'état de transition (TSA) rendu immunogène (Pollack et al., J Am Chem Soc (1988) 110 : 8713, Jackson et al., PNAS (1988) 85 : 4953, Shokat et al., Chem Int Ed Engl (1988) 27 : 1172) et sont capables de catalyser différents types de réaction chimique. Depuis les premiers résultats démontrant la possibilité d'induire la production d'anticorps catalysant des réactions d'hydrolyse d'esters et de carbonates, plus de 70 réactions différentes ont pu être catalysées par des anticorps. Ces réactions concernent aussi bien l'hydrolyse de liaisons chimiques (esters, amides, additions de Diels-Alder,...) que des réactions d'isomérisation, de décarboxylation, d'oxydo-réduction, etc ..
En parallèle, des anticorps possédant une activité catalytique ont pu être isolés à partir du sérum de malades atteints de différentes pathologies. Les premières démonstrations ont été réalisées en purifiant les anticorps à partir de sérums humains. Ces anticorps catalytiques « naturels » ont notamment des activités DNAse ou protéase. En particulier, des anticorps catalytiques présentant une activité protéase contre le peptide vasoactif intestinal (VIP) furent ainsi isolés du sérum de patients atteints d'asthme. Ces mêmes anticorps ont pu être obtenus par l'immunisation de souris avec le même peptide immunogène (Paul et al., J Neuroimmunol (1989) 23 : 133-142). D'autres activités protéases ont été extraites, qui clivent la thyroglobuline chez des patients atteints de la Thyroïdite d'Hashimoto ou le facteur VIII chez des hémophiles traités par ce facteur de coagulation (INSERM, Bayer Pharma, 1999, EP 1074842). Une activité catalytique d'hydrolyse de l'ADN a été montrée dans le sérum de patients atteints de lupus érythémateux ou d'arthrite rhumatoïde (Shuster A.M. et al., Science (1992) 256 : 665-667). Il semble que cette activité DNAse soit corrélée aux symptômes de ces pathologies.
II a récemment été proposé une autre voie pour la production d'anticorps catalytiques fondée sur la préparation d'anticorps anti-idiotypiques mimant le site catalytique d'une enzyme. Par exemple, il a été montré qu'il est possible d'induire in vivo la production d'anticorps catalytique anti- idiotypique à activité β-lactamase par immunisation avec un anticorps dirigé contre le site actif de la β-lactamase (Avalle B. et al., Faseb J, (1998)
12 .-1055-1060).
Les applications des anticorps catalytiques sont multiples. En particulier, de tels anticorps catalytiques seraient utiles pour la catalyse de réactions chimiques qui ne sont pas réalisées par les enzymes naturelles, notamment pour agir in vivo sur le métabolisme (application médicale) ou réaliser des réactions chimiques particulières (application industrielle).
Compte tenu du vaste répertoire de spécificité des anticorps et aussi de leurs implications dans les processus d'immunité acquise, d'allergies et d'auto-immunité, on comprend l'intérêt de produire in vivo des anticorps catalytiques, notamment pour leurs applications thérapeutiques.
Une des applications qui a été développée concerne l'utilisation des propriétés hydrolytiques des anticorps catalytiques pour activer des composés non toxiques en composés cytotoxiques (Zeneca Ltd, 1998, US 5,807,688). En ciblant cette activité au niveau de cellules cibles, des molécules dont la cytotoxicité est masquée par un groupement chimique pourraient être activées au contact de cellules tumorales pour des traitements anti-cancéreux (méthode ADAPT, Antibody-directed Abzyme Prodrug Therapy). Un autre exemple concerne la capacité de certains anticorps à hydrolyser la cocaïne. Le développement d'un anticorps ayant ces propriétés pourrait permettre son utilisation dans le traitement d'overdoses et d'addiction à la cocaïne. Le brevet décrit une méthode d'induction de la stimulation d'anticorps catalytique à l'aide de l'immunisation d'un mammifère avec un haptène, analogue d'états de transition ( Barber et al., 2000, US 6,017,541). Un troisième exemple est développé par Advanced Biotech qui produit des anticorps catalytiques pour le traitement des infections par des bactéries gram-négatives en visant l'endotoxine (Genetic Engineering News (1999) vol. 19 n° 20 page 15).
Théoriquement, les recherches visant à produire des anticorps capables d'hydrolyser une molécule spécifique et en particulier un polypeptide pourraient déboucher sur la conception de nouveaux traitements thérapeutiques, notamment de traitements d'un déficit enzymatique particulier, de traitements anti-viraux, de traitements des xénobiotiques potentiellement toxiques pour l'organisme ou encore de méthodes de prévention des allergies.
Cependant, pour être efficaces dans de telles applications, les activités catalytiques de ces anticorps doivent être suffisamment significatives au regard de l'effet recherché.
Des méthodes basées sur la conception des haptènes susceptibles d'induire la production in vivo d'anticorps catalytiques (Igen International Inc., 1989, EP 0 413 762), les stratégies d'immunisation (Boston Biomédical Research Institute, 2000, US 6,140,091), la modification site- dirigée d'anticorps ou les méthodes de criblage (catELISA, Tawfik et al., PNAS (1993) 90 : 373-377) et de sélection (phage-display) (Smith et al., 1999, US 5,855,885) ont permis d'améliorer de façon significative les propriétés catalytiques de certains anticorps et/ou leur production in vivo.
Cependant, ces méthodes s'appliquent au cas par cas et s'avèrent insuffisantes dans de nombreux cas pour obtenir une efficacité compatible avec une utilisation médicale ou industrielle. Il existe donc toujours un besoin d'identifier de nouvelles méthodes permettant d'améliorer les propriétés catalytiques des anticorps catalytiques ou d'induire de nouvelles activités catalytiques.
Il a été montré récemment que les substrats des anticorps catalytiques peuvent former in vitro un complexe d'interaction stéreospecifique différent du complexe antigène-anticorps et induire une modification de la conformation des anticorps, ladite modification augmentant l'affinité de l'anticorps catalytique pour son substrat (Lindner et al., J Mol Biol (1999)
285 : 421-430). En particulier, l'analyse des anticorps anti-idiotypiques a permis de montrer que le site catalytique cohabite dans l'espace contenant la zone de reconnaissance de l'immunogène sans se confondre avec elle. Il a en outre été montré qu'il est possible de garder la fonction immunitaire et perdre la fonction catalytique d'un anticorps (Kolesnikov et al., PNAS
(2000) 97 : 13526-13531 ), suggérant ainsi que la zone fonctionnelle de l'anticorps catalytique réalise deux fonctions nettement différenciées (réponse immunitaire spécifique ou catalyse) et qu'il existe au niveau de cette zone, une compétition pour complexer des molécules potentiellement différentes (antigène ou substrat).
L'invention résulte de la découverte qu'il est possible de moduler in vivo l'activité d'un anticorps catalytique à l'aide d'un composé non immunogène et présentant une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps. De tels composés ont un effet direct sur l'activité catalytique en induisant un changement conformationnel des anticorps déjà produits. De plus, de façon particulièrement surprenante, les inventeurs ont constaté que, en dépit du caractère non immunogène de ces composés, ceux-ci pourraient augmenter indirectement la production des anticorps catalytiques, en déplaçant l'équilibre du système immunitaire vers une production d'anticorps à activité catalytique augmentée, ce déplacement étant induit par le changement conformationnel des anticorps pré-existants.
Ainsi, l'invention porte sur un composé capable de moduler l'activité d'un anticorps catalytique, ledit composé étant caractérisé en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps, et en ce qu'il n'est pas immunogène.
Elle porte également sur un procédé de modulation de l'activité d'un anticorps catalytique comprenant la mise en contact dudit anticorps avec un composé non immunogène et ayant une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
Un anticorps catalytique est un anticorps capable de reconnaître de manière spécifique mais non exclusive, deux types de molécules : l'antigène ou immunogène, c'est à dire une molécule susceptible d'induire une réponse immunitaire directe par l'activation des lymphocytes B ou T spécifiques selon la nature de l'antigène, et, le substrat, qui reconnaît spécifiquement le site catalytique de l'anticorps et, comme son nom l'indique, est le substrat de la réaction chimique catalysée par l'anticorps catalytique.
Par « composé non immunogène », il faut comprendre un composé incapable d'activer directement des lymphocytes B ou T spécifiques
(sélection clonale). Bien entendu, il faut garder à l'esprit que de tels composés non immunogènes sont cependant capables d'augmenter in vivo la production d'anticorps catalytiques de manière indirecte lorsqu'ils ont une affinité spécifique pour le site catalytique de l'anticorps, par le mécanisme décrit ci-dessous :
Les anticorps catalytiques peuvent se présenter sous deux isoformes : une isoforme dite « non active » ou « peu active » (ci-après nommé Ab), et une isoforme dite « active » (ci-après nommé Ab*). L'isoforme active (Ab*) présente une activité catalytique (ci-après nommé kcat*) supérieure à celle de l'isoforme non active (ci-après nommé kcat). En présence d'un composé (S) selon l'invention, la fixation dudit composé à l'anticorps catalytique pour former le complexe (Ab.S) déplace l'équilibre vers la formation du complexe (Ab*.S), phénomène qui s'apparente au comportement allostérique illustré à la figure 1. Le changement de conformation induit par le composé selon l'invention conduit ainsi à la modulation in vivo de l'activité catalytique de l'anticorps qui passe d'une valeur kcat à une valeur kcat*, la valeur kcat* étant différente de la valeur k^t.
Une modulation de l'activité catalytique peut ainsi être obtenue sur des anticorps catalytiques présents dans le sérum de patients par l'injection sous forme de puise des composés selon l'invention, selon des méthodes analogues à celles mises en œuvre pour un vaccin.
De préférence, un composé selon l'invention est capable d'augmenter l'activité d'un anticorps catalytique.
Le changement conformationnel de l'isoforme Ab vers l'isoforme Ab* peut aussi conduire in vivo à une stimulation indirecte de la production de nouveaux anticorps. Ainsi, dans un mode de réalisation préféré de l'invention, un composé selon l'invention tel que défini plus haut est capable de stimuler la production de l'anticorps catalytique dont il augmente l'activité.
Par stimulation de la production, il faut bien comprendre qu'il ne s'agit pas d'une production de novo de l'anticorps mais d'une augmentation de la production d'anticorps préexistant, par exemple suite à une première immunisation avec un antigène.
Selon les applications recherchées d'un composé de l'invention, celui-ci est avantageusement choisi dans un groupe comprenant : - un substrat d'une enzyme ou l'un de ses analogues, inhibiteur ou activateur ;
- un ligand se fixant sur un récepteur et notamment une hormone, une drogue, un médicament ou l'un des ses fragments ou analogues ;
- un antibiotique ou l'un de ses analogues ; - un polypeptide viral, bactérien ou parasitaire ;
- un xénobiotique récalcitrant et potentiellement toxique ; ou,
- un analogue d'allergène.
Par analogue de substrat d'enzyme, il faut comprendre les substrats non immunogènes d'une enzyme et molécules dérivées, et en particulier les analogues stables d'états de transition non immunogènes d'une enzyme ou des inhibiteurs ou activateurs non immunogènes de cette enzyme. Les analogues de substrat d'enzyme selon l'invention peuvent être notamment des fragments d'anticorps reconnaissant spécifiquement le site catalytique d'une enzyme.
De tels composés sont capables d'augmenter in vivo l'activité catalytique et/ou la production, des anticorps catalytiques pour lesquels ils présentent une affinité et peuvent ainsi compenser une activité enzymatique déficiente ou réduite suite à une pathologie ou à un traitement thérapeutique, par exemple.
Les activités enzymatiques déficientes ou réduites suite à une pathologie ou à un traitement thérapeutique peuvent être par exemple des activités de type hydrolase et en particulier des activités peptidase, protéase, des activités de type oxydoréductase (par exemple déshydrogénase, oxydase ou oxygénase), des activités isomerases, des activités lyases et en particulier décarboxylase, des activités transférase et en particulier des activités kinase, ou encore des activités ligase.
A titre d'exemples de pathologies, on peut citer :
• l'anémie hémolytique chronique qui est la conséquence d'un déficit en triose phosphage isomérase,
• la leucémiose qui est la conséquence d'un déficit en céto-acide décarboxylase, • le syndrome de Lesch-Nyhan qui est la conséquence d'un déficit en hypoxanthine guanine phosphorisbosyl-transférase,
• l'acidurée glutarique type II qui est la conséquence d'un déficit en acétyl-CoA déshydrogénase, ou encore
• l'hyperglycérolémie qui est la conséquence d'un déficit en glycérol kinase.
Il est important de souligner à ce stade que, de manière surprenante, un composé selon l'invention, inhibiteur d'une enzyme est capable d'augmenter l'activité catalytique d'un anticorps catalytique mimant l'activité de cette enzyme, via ses propriétés spécifiques vis-à-vis des anticorps catalytiques, décrites ci-dessus, en dépit de ses propriétés inhibitrices.
Un substrat d'enzyme ou analogue entrant dans la définition des composés selon l'invention peut donc être par exemple, selon la nature de l'enzyme dont il est le substrat, un peptide, mais aussi un sucre ou l'un des ses dérivés, un lipide ou l'un de ses dérivés, un nucléotide ou l'un de ses dérivés ou encore un stéroïde ou l'un de ses dérivés.
Un exemple d'un tel analogue de substrat d'enzyme est un inhibiteur non immunogène de l'activité β-lactamase, dont l'injection sous forme orale peut induire la production d'anticorps hydrolysant les antibiotiques à noyau β-lactame. Ainsi un composé selon l'invention est en particulier un peptide ayant une affinité pour le site actif de la β-lactamase, et de manière encore préférée, caractérisé en ce qu'il inhibe spécifiquement l'activité β- lactamase.
L'invention a trait aussi à un composé apte à augmenter in vivo le niveau physiologique d'une activité enzymatique, caractérisé en ce qu'il comprend un substrat non immunogène d'un anticorps catalytique ayant ladite activité enzymatique ou l'un de ses analogues activateurs ou inhibiteurs et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
Dans une autre forme de réalisation préférée de l'invention, un composé selon l'invention est un ligand se fixant sur un récepteur et notamment une hormone, une drogue, un médicament, ou un de leurs fragments ou analogues.
Selon les modes de réalisation, les composés décrits ci-dessus sont capables d'augmenter l'activité catalytique d'anticorps catalytiques dégradant les drogues, hormones ou médicaments dont ils dérivent ou dont ils sont analogues.
Ainsi, l'invention porte également sur un composé apte à stimuler in vivo la dégradation de médicaments ou de drogues par des anticorps catalytiques spécifiques, caractérisé en ce qu'il est non immunogène, qu'il comprend une drogue ou un médicament ou l'un de leurs fragments ou analogues et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
Les fragments d'un ligand entrant dans la définition d'un composé selon l'invention sont choisis parmi les fragments ayant retenu les propriétés de fixation au récepteur. Lorsque le ligand est un polypeptide, des fragments du ligand sont des peptides gardant les propriétés de fixation au récepteur. Un analogue d'un ligand est une molécule capable de se fixer au même récepteur que le ligand. En particulier, il s'agit d'un agoniste ou d'un antagoniste du récepteur sur lequel se fixe le ligand. Un tel analogue peut être une molécule naturelle ou artificielle isolée à l'aide d'un criblage de molécules se fixant sur un récepteur. Un exemple d'un tel ligand est un fragment du TNFα entrant dans la définition des composés selon l'invention et capable de se fixer aux récepteurs cellulaires p55 et p75.
En particulier, un composé préféré est caractérisé en ce qu'il comprend un peptide dérivé de la cytokine TNFα, ledit composé étant non immunogène et présentant une affinité spécifique pour le site catalytique d'un anticorps catalytique et ledit peptide contenant l'une des séquences d'acides aminés suivantes :
LNRRA, IASVY ou LFA.
Un autre exemple de composé préféré est caractérisé en ce qu'il comprend un peptide dérivé de la thyroglobuline.
Un autre exemple de composé préféré est la codéine, analogue de la cocaïne et capable de stimuler par injection répétée, la production d'anticorps catalytiques dégradant la cocaïne.
Dans une autre forme de réalisation préférée de l'invention, un composé selon l'invention est choisi parmi les antibiotiques ou leurs analogues. Par analogue d'antibiotique, il faut comprendre une molécule de structure différente de la molécule antibiotique dont elle est l'analogue mais capable de reproduire une fonction « antibiotique » similaire.
Dans une autre forme de réalisation préférée de l'invention, un composé selon l'invention est choisi parmi un peptide viral, bactérien ou parasitaire.
De tels composés sont ainsi capables de stimuler la production catalytique dégradant les protéines virales bactériennes ou parasitaires et permettent ainsi de lutter contre les infections virales, bactériennes ou parasitaires correspondantes.
Des exemples de peptides particulièrement préférés sont les peptides non immunogènes dérivés d'épitopes de surface ou de protéines de virulence d'organismes pathogènes tels que les virus HIV, HSV ou HBV, de bactéries pathogènes telles que Legionella, Listeria, Staphylococcus, ou de parasites tels que P. faciparum, Echinococcus, Leishmania ouTrypaηosoma.
En particulier, un exemple d'un tel composé selon l'invention est un composé caractérisé en ce qu'il comprend un peptide non immunogène dérivé d'un épitope d'un virus Herpès.
Dans une autre forme de réalisation préférée de l'invention, un composé selon l'invention est un xénobiotique récalcitrant et potentiellement toxique ou l'un de ses fragments. On entend par xénobiotique récalcitrant toute molécule étrangère à l'organisme susceptible de s'accumuler dans les tissus ou le milieu intérieur d'un homme ou d'un animal. Certaines de ces molécules, et notamment les pesticides (composés organophosphorés), la dioxine ou les organochlorés (PCB, DDT...), sont potentiellement toxiques pour l'organisme, en particulier sur le long terme.
L'accumulation dans l'organisme de certains xénobiotiques est en particulier cancérigène ou neurotoxique.
L'invention vise par conséquent un composé apte à stimuler in vivo l'hydrolyse de xénobiotiques potentiellement toxiques par des anticorps catalytiques spécifiques, ledit composé étant caractérisé en ce qu'il est non immunogène, qu'il comprend un xénobiotique récalcitrant et potentiellement toxique, ou l'un de ses fragments et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps. Elle vise également l'utilisation d'un xénobiotique récalcitrant non immunogène ou l'un de ses fragments ayant une affinité spécifique pour le site catalytique d'un anticorps pour stimuler l'hydrolyse dudit xénobiotique par lesdits anticorps catalytiques.
Selon encore une autre forme de réalisation de l'invention, un composé selon l'invention est un analogue d'allergène.
On entend par allergène tout produit susceptible de déclencher une réaction allergique. Un analogue d'allergène est une molécule dont la structure mime l'allergène mais n'est pas immunogène. De tels analogues d'allergènes selon l'invention, en augmentant l'activité catalytique d'anticorps capables de dégrader, en particulier par hydrolyse, les allergènes et en stimulant indirectement la production d'anticorps sériques et secrétaires, sont ainsi susceptibles de désensibiliser partiellement ou totalement un sujet allergique.
Par conséquent, l'invention porte également sur un composé apte à prévenir ou à diminuer une réaction allergique liée à un allergène caractérisé en ce qu'il comprend un analogue non immunogène dudit allergène et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
Elle vise également l'utilisation d'un analogue non immunogène d'un allergène ayant une affinité spécifique pour le site catalytique d'un anticorps pour prévenir ou diminuer une réaction allergique liée audit allergène.
Toute composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif un quelconque composé décrit ci-dessus fait également partie de l'invention. Par composition pharmaceutique, on entend toute composition apte à être administrée à l'homme ou à l'animal. Le principe actif peut être, le cas échéant, associé à une autre molécule active dont la fonction est de moduler ou stimuler l'activité biologique du composé selon l'invention, ou encore d'en diminuer les effets secondaires éventuels.
La composition comprend en outre un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
Les véhicules utilisés dans la préparation des compositions pharmaceutiques sont choisis de préférence parmi ceux généralement utilisés dans les préparations vaccinales. Ils sont bien entendu choisis en fonction du mode d'administration de la composition et de son utilisation.
L'invention porte également sur une utilisation d'un composé selon l'invention dans la préparation d'une composition pharmaceutique pour le traitement ou la prévention d'une pathologie liée à une déficience enzymatique.
Elle vise aussi une utilisation d'un composé selon l'invention dans la préparation d'une composition pour la stimulation de l'hydrolyse de xénobiotiques, de drogues, de médicaments ou de toute autre molécule potentiellement toxique pour l'organisme.
Elle vise en outre une utilisation d'un composé selon l'invention dans la préparation d'une composition pour la prévention ou la désensibilisation aux réactions allergiques.
Les anticorps catalytiques, outre leur propriétés catalytiques, reconnaissent par leur région Fc, les récepteurs cellulaires, et en particulier les récepteurs présents sur les cellules présentatrices d'antigènes, les cellules cytotoxiques et les macrophages, et plus généralement les différentes cellules du système immunitaire. Il est donc important de souligner qu'en stimulant la production d'anticorps catalytiques par les composés selon l'invention, il est possible de cibler une activité catalytique donnée au niveau d'une cellule reconnaissant l'anticorps catalytique. Lorsqu'il s'agit d'une reconnaissance de type non spécifique, c'est-à-dire par exemple par les régions Fc des anticorps, l'activité catalytique peut être ciblée sur les cellules du système immunitaire de type cellulaire, celle-ci s'ajoutant alors à l'action sur le système humoral (synthèse des anticorps recherchés par les lymphocytes B).
Lorsqu'il s'agit d'une reconnaissance spécifique d'un épitope donné, c'est- à-dire par les régions paratopiques du Fab'2, l'un des épitopes reconnus n'étant pas le substrat enzymatique de l'anticorps catalytique, les composés selon l'invention permettent alors de cibler l'activité catalytique sur une cible choisie, ladite cible comprenant ledit épitope. Il s'agit ici d'anticorps présentant une double-spécificité à la fois pour un épitope spécifique et pour le substrat enzymatique. Ainsi, les composés selon l'invention permettent de cibler une activité catalytique à des effecteurs du système immunitaire et/ou inflammatoire.
L'invention porte enfin sur un procédé de sélection d'un composé selon l'invention comprenant la sélection et l'isolement d'un anticorps catalytique naturel ou induit par l'injection répétée d'une molécule immunogène, caractérisé en ce qu'il comprend en outre les étapes suivantes : a) la synthèse et/ou l'extraction de composés dérivés d'une molécule immunogène reconnue par l'anticorps catalytique isolé ; b) le cas échéant, un premier criblage à l'aide d'un test biologique et/ou biochimique des composés interagissant avec le site catalytique dudit anticorps catalytique, c) la sélection des composés non immunogènes présentant une affinité spécifique pour le site catalytique de l'anticorps parmi les composés synthétisés ou extraits à l'étape a) ou sélectionnés à l'étape b), à l'aide d'un test permettant la mesure de ladite affinité. De nombreuses méthodes de sélection et d'isolement d'un anticorps catalytique naturel ou induit par l'injection répétée d'une molécule immunogène ont été décrites dans l'état de la technique et peuvent être utilisées. L'homme du métier pourra en particulier se reporter aux publications scientifiques décrivant l'isolement d'anticorps catalytiques naturels ou induits et notamment : Blackburn G. M. et Garçon A. (2000) in « Biotechnology » Vol. 8b, 2"d édition Wiley VCH pp 404-490, ainsi qu'aux technologies d'isolement des anticorps monoclonaux corinus de l'homme du métier, et en particulier la technique des cultures d'hybridomes développées par Kohler et Milstein (1975).
A l'étape (a) du procédé de l'invention, il s'agit d'obtenir des composés dérivés d'une molécule immunogène reconnue par l'anticorps catalytique sélectionné et isolé préalablement. Les composés peuvent être synthétisés en particulier par chimie combinatoire, par biosynthèse ou par bioconversion. La structure chimique des composés synthétisés en (a) peut aussi être prédite à l'aide de méthodes bio-informatiques de prédiction de structure chimique.
Dans un mode de mise en œuvre particulier, les composés sont dérivés d'un peptide immunogène et sont synthétisés par mutagenèse d'un ADN codant ledit peptide immunogène et par l'expression de l'ADN muté dans une cellule hôte selon les méthodes de biologie moléculaire connues de l'homme du métier telles que celles décrites par Sambrook et al. (Molecular Cloning : a laboratory manual, 3rd Ed. Cold Spring Harbor, Laboratory press, New York, 2001 ).
Le cas échéant, en particulier lorsque les composés susceptibles d'interagir avec le site catalytique sont mal connus, le procédé peut comporter une première étape de criblage (étape (b) du procédé) à l'aide d'un test biologique et/ou biochimique des composés interagissant avec le site catalytique dudit anticorps. Cette étape consiste, après avoir généré un grand nombre de composés dérivés du composé immunogène, à sélectionner dans un premier temps les composés ayant gardé la propriété de se fixer à l'anticorps catalytique afin de réduire le nombre de composés à cribler à l'étape (c). Tout test permettant d'identifier parmi un ensemble de composés le ou les composés interagissant spécifiquement avec un anticorps catalytique donné peut être utilisé dans le procédé de l'invention.
Dans un mode de mise en œuvre particulier du procédé, les composés synthétisés ou extraits à l'étape (b) sont des peptides et sont sélectionnés à l'aide d'un criblage biochimique de type test catELISA (Tawfik et al. 1993, supra), un criblage sur puce à protéines ou un criblage par mesure de la surface plasmonique de résonance.
Une puce à protéine est constituée d'un support sur lequel sont fixés à des positions déterminées les différents peptides à cribler. Le marquage de l'anticorps catalytique et la mise en contact avec la puce à protéine dans des conditions permettant les interactions protéines-protéines permettent la sélection des peptides interagissant spécifiquement avec l'anticorps catalytique.
Les techniques de mesure de la surface plasmonique de résonance sont connues de l'homme du métier et permettent d'en déduire les constantes d'affinité entre deux molécules. De telles techniques peuvent être mises en œuvre aisément, notamment à l'aide du dispositif BIAcore (Silin V. et Plant A (1997) Trends Biotechol. 15 : 353-359).
De manière générale, toute méthode biochimique permettant de tester l'interaction d'un peptide avec un anticorps, et en particulier les méthodes dérivées du Western blot, peuvent être utilisées dans le procédé de l'invention pour procéder au criblage biochimique des composés interagissant avec l'anticorps. On choisira de préférence des méthodes utilisables en routine et permettant un criblage à haut débit des molécules.
On peut aussi utiliser les différents tests biologiques développés pour détecter des interactions moléculaires et en particulier les interactions entre deux peptides ou deux polypeptides.
Dans un mode de mise en œuvre préféré du procédé de l'invention, les composés peptidiques sont sélectionnés par la technique du phage display ou par la technique du double-hybride. Ces méthodes sont bien connues de l'homme du métier et sont décrites dans Sambrook et al. (2001 , supra).
Parmi l'ensemble des composés synthétisés et éventuellement sélectionnés par le premier criblage, les composés selon l'invention sont ensuite sélectionnés à l'étape (c) du procédé, à l'aide d'un test permettant la mesure de l'affinité pour le site catalytique de l'anticorps.
Par exemple, un composé selon l'invention peut être sélectionné par mesure de la vitesse de la réaction catalysée par l'anticorps catalytique en présence soit du composé à tester, soit du composé immunogène de référence. Lorsque la vitesse de la réaction catalysée par l'anticorps, mesurée en présence du composé testé, est significativement supérieure à celle mesurée en présence du composé immunogène de référence, le composé testé est sélectionné.
Par conséquent, tout type de tests permettant de mesurer la constante d'affinité des complexes composés-anticorps peut être utilisé pour sélectionner les composés non immunogènes selon l'invention.
Un autre aspect de l'invention concerne des nouvelles méthodes de traitement thérapeutique. En particulier, l'invention porte sur une méthode :
- de traitement thérapeutique ou de prévention d'une pathologie liée à une déficience enzymatique,
- de stimulation de l'hydrolyse de xénobiotiques, de drogues, de médicaments ou de toute autre molécule potentiellement toxique pour l'organisme, ou
- de prévention ou de désensibilisation aux réactions allergiques.
Dans tous les cas, les méthodes comprennent l'administration à un organisme, d'une composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif un composé selon l'invention, seul ou en association avec une autre substance pharmacologiquement active capable d'augmenter in vivo l'activité d'un anticorps catalytique, en combinaison avec un véhicule pharmaceutique approprié.
Les modes d'administration, la composition du véhicule et le dosage des composés administrés pour le traitement seront choisis en fonction de l'effet thérapeutique ou préventif recherché. Selon les cas, les formes d'administrations peuvent être locales ou systemiques et en particulier orale, sublinguale, intraveineuse, nasale, aérosol, intramusculaire, sous- cutané ou alimentaire.
On remarquera que les méthodes de traitements de l'invention s'apparenteront en général aux méthodes vaccinales, l'homme du métier pourra se reporter notamment aux véhicules classiquement utilisés dans ce domaine.
Les exemples qui suivent permettent d'illustrer certains modes de réalisation de l'invention sans être toutefois limitatifs. LEGENDES DES FIGURES
Figure 1 : La figure 1 illustre le mécanisme d'adaptation induite (induced fit) permettant à un composé non immunogène de déplacer l'équilibre des états conformationnels d'un anticorps catalytique des formes catalytiques peu actives ou non actives vers des formes des isomères actives. Le déplacement de l'équilibre conduit in vivo à une augmentation de l'activité catalytique de l'anticorps catalytique et indirectement à une stimulation de sa production.
EXEMPLES
EXEMPLE 1 : Composé capable d'augmenter l'activité catalytique des IgA sécrétées dirigées contre des épitopes du virus Herpès pour lutter contre les infections au virus Herpès.
Les IgA sécrétées sont les principaux effecteurs du système immunitaire des muqueuses. Elles sont notamment impliquées dans la reconnaissance des antigènes bactériens, viraux ou des protozoaires. Il a été montré en particulier que des IgA extraites du lait maternel sain peuvent posséder des activités catalytiques de type protéine kinase, DNase ou RNase (Buneva V.N. et al. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol. 75 : 63-76, Nevinsky G.A. et al. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol. 75 : 77-91).
Parmi les IgA sécrétées, la production d'un anticorps catalytique dirigé contre des épitopes du virus Herpès simplex virus type 1 pourrait être stimulée par l'application cutanée de peptides non immunogènes sous formes de patches. Les peptides non immunogènes choisis représentent les séquences spécifiques des épitopes connus de IΗSV1. Une approche similaire peut être mise en œuvre pour stimuler la production d'anticorps catalytiques hydrolysant des peptides de HSV2, responsable de l'herpès génital, ou de l'herpès Zoster, responsable du zona.
EXEMPLE 2 : Composé capable d'augmenter l'activité catalytique d'un anticorps hydrolysant certaines séquences peptidiques du TNFα pour le traitement de l'arthrite rhumatoïde.
Le TNFα (tumor necrosis factor) est une cytokine qui joue un rôle central dans les phénomènes inflammatoires rencontrés dans les maladies auto- immunes comme l'arthrite rhumatoïde ou la myocardie auto-immune. Il joue aussi un rôle en tant que régulateur d'autres cytokines pro-inflammatoires.
L'action inflammatoire du TNFα est liée à sa fixation à deux récepteurs cellulaires, p55 et p75. Cette fixation met en jeu des boucles du TNFα formées par les résidus 29-34, 84-91 et 143-148.
Des peptides non immunogènes et ayant une affinité spécifique avec un anticorps catalytique capable d'hydrolyser le TNFα sont sélectionnés parmi des peptides contenant les séquences LNRRA (29-33), IASVY (83-87) et LFA (143-145). L'injection répétée de ces peptides chez un patient souffrant d'arthrite rhumatoïde devrait permettre de stimuler in vivo la production d'anticorps catalytiques hydrolysant le TNFα au niveau des séquences de reconnaissance des récepteurs cellulaires, réduisant ainsi les mécanismes inflammatoires liés à l'arthrite rhumatoïde.
EXEMPLE 3 : Composé capable d'augmenter l'activité catalytique d'un anticorps hydrolysant la cocaïne pour traiter les phénomènes d'accoutumance aux drogues.
La consommation de drogues chez un sujet provoque un phénomène d'accoutumance. La quantité de drogue circulant dans le sang après administration est directement reliée à l'effet stupéfiant et à l'accoutumance qui s'en suit. L'immunisation d'un sujet à l'aide de peptides immunogènes stimulant directement la production d'anticorps catalytiques hydrolysant la cocaïne permet de diminuer, voire éliminer, la quantité de cocaïne circulante. Afin d'augmenter l'activité catalytique de ces anticorps et de stimuler indirectement leur production, il pourrait être injecté, de manière répétée, par voie intraveineuse, de faibles concentrations de codéine, un composé non immunogène proche de la cocaïne.
EXEMPLE 4 : Composé capable d'augmenter l'activité catalytique d'un anticorps à activité β-lactamase.
Le développement d'anticorps catalytiques à partir de sites actifs enzymatiques par utilisation du réseau idiotypique a été démontré (Avalle B. et al., Faseb J (1998) 12 :1055-1060). En particulier, à partir du site actif de la β-lactamase, il a été obtenu un anticorps (Ab1 ) spécifique, inhibiteur de l'activité β-lactamase (Kosnikov et al., PNAS (2000) 97 : 13526-13531 ).
Cet anticorps permet la production d'une seconde génération d'anticorps Ab2, anti-idiotypiques, et porteurs d'une activité proche de celle de la β- lactamase.
Ainsi, la létalité liée à l'injection répétée de pénicilline devrait être diminuée, en stimulant la production d'anticorps anti-idiotypique à activité β-lactamase par l'administration de peptides non immunogènes mimant le paratope de l'anticorps induit en présence du site actif de la β-lactamase.
EXEMPLE 5 : Composé capable d'augmenter l'activité catalytique d'anticorps hydrolysant un allergène pour diminuer ou prévenir une réaction allergique.
Une désensibilisation spécifique induit à la fois l'augmentation des anticorps bloquants sériques et sécrétoires, la diminution de la production d'IgE spécifiques et la modification de la réponse des mastocytes, des basophiles ainsi que des lymphocytes.
L'administration à un sujet sensible d'un allergène d'une molécule non immunogène dérivée de l'allergène devrait permettre de modifier la réponse immunologique vers l'augmentation de la production d'anticorps catalytiques dirigés contre cet allergène, une augmentation indirecte de la production d'anticorps bloquant sériques et secrétaires et. la diminution de la production d'IgE spécifiques, compte tenu de l'hydrolyse de l'allergène. L'ensemble de ces réponses permet de diminuer ou de prévenir la réaction allergique.
Les trois exemples ci-après illustrent cette application :
A. Peptides non immunogènes pour prévenir ou diminuer les allergies aux médicaments anti-infectieux.
Les antibiotiques sont les molécules les plus souvent incriminées dans les réactions d'allergies aux médicaments anti-infectieux (50% des cas). On sait notamment que l'allergénicité est dans la grande majorité des cas portée par le cycle β-lactame. En étant clivé au cours du métabolisme, le cycle β-lactame donne l'haptène pénicilloyl qui est capable d'induire la production d'IgE.
Il serait donc possible à l'aide de peptides non immunogènes inhibiteurs de l'activité β-lactamase, injectés sous forme orale, d'induire la production d'anticorps non IgE capables d'hydrolyser les antibiotiques à noyau β- lactame, empêchant alors la production d'anticorps IgE. B. Peptides non immunogènes stimulant la production d'anticorps catalytique hydrolysant la serotonine pour prévenir ou diminuer les allergies alimentaires.
Depuis plusieurs années, on assiste à une augmentation alarmante des allergies alimentaires. Ce phénomène est apparu de façon concomitante avec une modification de nos habitudes alimentaires : on assiste à une augmentation importante de la quantité de certains médiateurs histamino- libérateurs dans divers aliments frais : l'histamine, la serotonine, la tyramine etc.. Ces produits peuvent circuler dans le sang, d'autant plus facilement que la paroi intestinale est immature (cas du jeune enfant) et induire des phénomènes d'allergie par médiation cellulaire. La serotonine (5- hydroxytryptamine) par exemple est dérivée du tryptophane et dégradée en 5-hydroxyindole acétique.
Il serait donc possible de sélectionner des peptides non immunogènes dérivés de la serotonine et ayant une affinité spécifique pour un anticorps catalytique hydrolysant la serotonine. L'injection par voie orale de tels peptides stimulant la production d'anticorps catalytique dégradant l'excès de serotonine devrait permettre de réduire les phénomènes allergiques liés à l'alimentation.
C. Peptides non immunogènes stimulant la production d'anticorps catalytiques hydrolysant les protéines d'arachide.
L'allergie à l'arachide affecte un nombre de plus en plus important d'individus. La gravité des chocs auxquels elle donne lieu ainsi que sa fréquence sont en augmentation. Parmi les nombreux allergènes détectés sinon caractérisés, une protéine de 17 kD, l'Ara h II a été identifiée comme allergène majeur et caractérisé. Des comparaisons de séquences ont permis d'identifier des homologies de séquences avec des protéines de différents aliments de la famille des légumineuses qui pourraient provoquer des sensibilisations croisées.
L'absorption par voie orale de tels peptides non immunogènes stimulant la production d'anticorps catalytiques dégradant les protéines des légumineuses responsables de ces allergies devrait permettre de réduire ces phénomènes allergiques.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composé capable de moduler l'activité d'un anticorps catalytique, ledit composé étant caractérisé en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps, et en ce qu'il n'est pas immunogène.
2. Composé selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il est capable de stimuler la production dudit anticorps catalytique.
3. Composé selon la revendication 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il est choisi dans un groupe comprenant : - un substrat d'une enzyme ou l'un de ses analogues, inhibiteur ou activateur ; un ligand se fixant sur un récepteur et notamment une hormone, une drogue, un médicament ou l'un des ses fragments ou analogues ; - un antibiotique ou l'un de ses analogues ; un peptide viral, bactérien ou parasitaire ; un xénobiotique récalcitrant et potentiellement toxique ou l'un de ses fragments; ou, un analogue d'allergène.
4. Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comprend un peptide non immunogène dérivé d'un épitope du virus Herpès.
5. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il comprend un peptide dérivé de la cytokine TNFα, ledit peptide contenant l'une des séquences d'acides aminés suivantes :
LNRRA, IASVY ou LFA.
6. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il comprend un peptide dérivé de la thyroglobuline.
7. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il s'agit d'un peptide ayant une affinité pour le site-actif de la β-lactamase.
8. Composé selon la revendication 7 caractérisé en ce qu'il inhibe spécifiquement l'activité β-lactamase.
9. Composé apte à augmenter in vivo le niveau physiologique d'une activité enzymatique, caractérisé en ce qu'il comprend un substrat non immunogène d'un anticorps catalytique ayant ladite activité enzymatique ou l'un de ses analogues activateurs ou inhibiteurs et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
10. Composé apte à stimuler in vivo l'hydrolyse de xénobiotiques potentiellement toxiques par des anticorps catalytiques spécifiques, caractérisé en ce qu'il est non immunogène, qu'il comprend un xénobiotique récalcitrant et potentiellement toxique ou l'un de ses fragments et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
11. Composé apte à stimuler in vivo la dégradation de médicaments ou de drogues par des anticorps catalytiques spécifiques, caractérisé en ce qu'il est non immunogène, qu'il comprend un médicament ou une drogue ou l'un de leurs fragments ou analogues et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
12. Composé pour prévenir ou diminuer une réaction allergique liée à un allergène, caractérisé en ce qu'il comprend un analogue non immunogène dudit allergène et en ce qu'il a une affinité spécifique pour le site catalytique dudit anticorps.
13. Utilisation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 3 à la préparation d'une composition pharmaceutique pour le traitement ou la prévention d'une pathologie liée à une déficience enzymatique.
14. Utilisation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 3 à la préparation d'une composition pharmaceutique pour la stimulation de l'hydrolyse de xénobiotiques, de drogues, de médicaments ou de toute autre molécule potentiellement toxique pour l'organisme.
15. Utilisation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 3 à la préparation d'une composition pharmaceutique pour la prévention ou la désensibilisation aux réactions allergiques.
16. Procédé de sélection d'un composé selon l'une des revendications 1 à 3, comprenant la sélection et l'isolement d'un anticorps catalytique naturel ou induit par l'injection répétée d'une molécule immunogène, caractérisé en ce qu'il comprend en outre les étapes suivantes : a) la synthèse et/ou l'extraction de composés dérivés d'une molécule immunogène reconnue par l'anticorps catalytique isolé ; b) le cas échéant, un premier criblage à l'aide d'un test biologique et/ou biochimique des composés interagissant avec le site catalytique dudit anticorps catalytique, c) la sélection des composés non immunogènes présentant une affinité spécifique pour le site catalytique de l'anticorps parmi les composés synthétisés ou extraits à l'étape a) ou sélectionnés à l'étape b), à l'aide d'un test permettant la mesure de ladite affinité.
17. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que les composés dérivés d'une molécule immunogène sont synthétisés par chimie combinatoire, par biosynthèse ou par bioconversion.
18. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce que les composés sont dérivés d'un peptide immunogène et sont synthétisés par mutagenèse d'un ADN codant pour ledit peptide immunogène et par l'expression de l'ADN muté dans une cellule hôte.
19. Procédé selon l'une des revendications 16 à 18, caractérisé en ce que les composés synthétisés ou extraits d'une molécule immunogène sont des peptides et sont sélectionnés à l'aide d'un premier criblage de types test catELISA, criblage sur puce à protéines ou criblage par mesure de la surface plasmonique de résonance (BIAcore).
20. Procédé selon l'une des revendications 16 à 18, caractérisé en ce les composés synthétisés ou extraits d'une molécule immunogène sont des peptides et sont sélectionnés à l'aide d'un premier criblage de type phage display ou double-hybride.
21. Procédé selon l'une des revendications 16 à 18, caractérisé en ce qu'un composé non immunogène est sélectionné à l'étape (c) par mesure de la vitesse de la réaction catalysée par l'anticorps catalytique en présence soit du composé à tester, soit du composé immunogène dont le composé à tester dérive et sélection du composé en présence duquel la vitesse de la réaction est significativement supérieure à celle mesurée en présence du composé immunogène dont il dérive.
22. Composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif un composé selon l'une des revendications 1 à 12 en combinaison avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
23. Composition pharmaceutique selon la revendication 22, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une autre molécule active dont la fonction est de moduler ou stimuler l'activité biologique dudit composé, ou d'en diminuer les effets secondaires éventuels.
PCT/FR2002/001730 2001-05-22 2002-05-22 Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique WO2002095015A1 (fr)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BR0209934-9A BR0209934A (pt) 2001-05-22 2002-05-22 Composto, utilização de um composto, processo de seleção de um composto, e composição farmacêutica.
EP02732880A EP1390478A1 (fr) 2001-05-22 2002-05-22 Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique
JP2002592478A JP2004527579A (ja) 2001-05-22 2002-05-22 触媒抗体の活性を調整し、且つその産生を刺激することが可能な化合物
CA2448174A CA2448174C (fr) 2001-05-22 2002-05-22 Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique
AU2002304489A AU2002304489B2 (en) 2001-05-22 2002-05-22 Compounds capable of modulating the activity and stimulating the production of a catalytic antibody
MXPA03010694A MXPA03010694A (es) 2001-05-22 2002-05-22 Compuestos capaqces de modular la actividad y estimular la produccion de un anticuerpo catalitico.
US10/716,030 US7109291B2 (en) 2001-05-22 2003-11-17 Compounds capable of modulating the activity and stimulating the production of a catalytic antibody

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR01/06754 2001-05-22
FR0106754A FR2825154B1 (fr) 2001-05-22 2001-05-22 Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
US10/716,030 Continuation US7109291B2 (en) 2001-05-22 2003-11-17 Compounds capable of modulating the activity and stimulating the production of a catalytic antibody

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2002095015A1 true WO2002095015A1 (fr) 2002-11-28

Family

ID=8863562

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2002/001730 WO2002095015A1 (fr) 2001-05-22 2002-05-22 Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique

Country Status (10)

Country Link
US (1) US7109291B2 (fr)
EP (1) EP1390478A1 (fr)
JP (1) JP2004527579A (fr)
AU (2) AU2002304489B2 (fr)
BR (1) BR0209934A (fr)
CA (1) CA2448174C (fr)
FR (1) FR2825154B1 (fr)
MX (1) MXPA03010694A (fr)
TN (1) TNSN03120A1 (fr)
WO (1) WO2002095015A1 (fr)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014037785A3 (fr) * 2012-09-06 2014-05-01 Institute Of Cell Biology, National Academy Of Sciences Of Ukraine Anticorps catalytiques et leurs utilisations

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1907423A4 (fr) * 2005-07-13 2010-01-13 Coimmune Inc Immunoglobulines catalytiques

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5948658A (en) * 1996-06-25 1999-09-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Anti-cocaine catalytic antibody
WO1999048925A1 (fr) * 1998-03-23 1999-09-30 University Of Nebraska Board Of Regents Methodes pour identifier des inducteurs et des inhibiteurs d'anticorps proteolytiques, et compositions et leurs utilisations
US6048717A (en) * 1989-04-25 2000-04-11 Igen International, Inc. Inhibitors of catalytic antibodies

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4504906A (en) * 1982-11-30 1985-03-12 Anritsu Electric Company Limited Multiprocessor system
US5349690A (en) * 1988-05-11 1994-09-20 Digital Equipment Corporation Fair arbitration scheme for arbitrating between multiple nodes in a computer system seeking control of a common bus
DE3841767A1 (de) * 1988-12-12 1990-06-13 Basf Ag Neue tnf-peptide
AU5654096A (en) * 1995-05-05 1996-11-21 Imperial College Of Science, Technology And Medicine Antisense peptides
US6560712B1 (en) * 1999-11-16 2003-05-06 Motorola, Inc. Bus arbitration in low power system

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6048717A (en) * 1989-04-25 2000-04-11 Igen International, Inc. Inhibitors of catalytic antibodies
US5948658A (en) * 1996-06-25 1999-09-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Anti-cocaine catalytic antibody
WO1999048925A1 (fr) * 1998-03-23 1999-09-30 University Of Nebraska Board Of Regents Methodes pour identifier des inducteurs et des inhibiteurs d'anticorps proteolytiques, et compositions et leurs utilisations

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DU M ET AL: "A New Monoclonal Anti-idiotypic Catalytic Antibody with a CPA-like Activity", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, OXFORD, GB, vol. 9, no. 11, 7 June 1999 (1999-06-07), pages 1487 - 1492, XP004169616, ISSN: 0960-894X *
LEFEVRE S ET AL: "A suicide-substrate mechanism for hydrolysis of beta-lactams by an anti-idiotypic catalytic antibody.", FEBS LETTERS, (2001 JAN 26) 489 (1) 25-8., XP004239391 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014037785A3 (fr) * 2012-09-06 2014-05-01 Institute Of Cell Biology, National Academy Of Sciences Of Ukraine Anticorps catalytiques et leurs utilisations

Also Published As

Publication number Publication date
CA2448174A1 (fr) 2002-11-28
FR2825154A1 (fr) 2002-11-29
TNSN03120A1 (fr) 2005-12-23
CA2448174C (fr) 2015-04-21
MXPA03010694A (es) 2005-03-07
US20040138124A1 (en) 2004-07-15
JP2004527579A (ja) 2004-09-09
AU2002304489B2 (en) 2009-07-02
US7109291B2 (en) 2006-09-19
BR0209934A (pt) 2004-04-06
EP1390478A1 (fr) 2004-02-25
AU2009202300A1 (en) 2009-07-02
FR2825154B1 (fr) 2004-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xu et al. Arginase and autoimmune inflammation in the central nervous system
Masuda et al. Syk inhibitors as treatment for allergic rhinitis
US5976529A (en) Methods of enzyme therapy by orally administering crosslinked enzyme crystals
Nevinsky et al. Catalytic antibodies in healthy humans and patients with autoimmune and viral diseases
JP2007524105A (ja) 結合物質
KR20080014936A (ko) 퍼록시좀 프로리퍼레이터-활성화 수용체
JPH08508399A (ja) ホスホリパーゼ及びヒアルロニダーゼのようなスズメバチ毒酵素のクローニング及び組換え体の生産並びにそれに基づく免疫学的治療
JP2004504053A (ja) 肥満症の治療および／または予防に好適である化合物の発見法
CA2277778C (fr) Inhibiteurs specifiques de la lipase pancreatique et leurs applications
CA2448174C (fr) Composes capables de moduler l'activite et de stimuler la production d'un anticorps catalytique
BE1011331A6 (fr) Polypeptide associe au peroxysome, sequence nucleotidique encodant ledit polypeptide et leur utilisation dans le diagnostic et/ou le traitement de maladies ou de lesions pulmonaires.
EP0675197A1 (fr) Support solide fixant l'acétylcholinestérase et/ou un récepteur à acétylcholinestérase stabilisé et procédé pour son obtention
Ramos et al. Time-resolved fluorescence allows selective monitoring of Trp30 environmental changes in the seven-Trp-containing human pancreatic lipase
WO2003080864A1 (fr) Histone deacetylase: nouvelle cible moleculaire de la neurotoxicite
Tellier Exploiting antibodies as catalysts: potential therapeutic applications
Prendergast et al. IDO in inflammatory programming and immune suppression in cancer
Powroznik et al. Enhancement of lysozyme stability and activity by polyamines
WO2003057709A2 (fr) Methode et reactif de detection de proteines et de peptides
EP0719265B1 (fr) Derives de nucleosides, procedes de fabrication de ces derives de nucleosides et anticorps polyclonaux et monoclonaux specifiques de ces derives
WO1991006671A1 (fr) Moyens pour la detection de cellules hautement proliferatives
CN112641792A (zh) 一种胰蛋白酶激活剂及其在胰腺外分泌不足方面的应用
Ivanova et al. Polyclonal antibodies against a structure mimicking the covalent linkage unit between picornavirus RNA and VPg: An immunochemical study
US20050043212A1 (en) Differential inhibition of p38 map kinase isoforms
Bouvet et al. 5. Crucial involvement of advanced glycation end-products in experimental diabetes-associated arterial elastocalcinosis.
CA2467853A1 (fr) Anticorps stimulant la production d'il-1ra

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NO NZ OM PH PL PT RO RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 10716030

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2448174

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: PA/a/2003/010694

Country of ref document: MX

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2002732880

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2002592478

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2002304489

Country of ref document: AU

Ref document number: 529901

Country of ref document: NZ

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2002732880

Country of ref document: EP

REG Reference to national code

Ref country code: DE

Ref legal event code: 8642