WO1999007408A1 - Protein factor associated with a neuro-degenerative or autoimmune and/or inflammatory disease - Google Patents

Protein factor associated with a neuro-degenerative or autoimmune and/or inflammatory disease Download PDF

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WO1999007408A1
WO1999007408A1 PCT/IB1998/001195 IB9801195W WO9907408A1 WO 1999007408 A1 WO1999007408 A1 WO 1999007408A1 IB 9801195 W IB9801195 W IB 9801195W WO 9907408 A1 WO9907408 A1 WO 9907408A1
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WO
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fragment
polypeptide
seq
protein
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PCT/IB1998/001195
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French (fr)
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François Rieger
James F. Belliveau
Hervé Perron
Original Assignee
Bio Merieux
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy

Definitions

  • the present invention relates to the determination, detection and quantification in a biological sample of a protein factor associated with a neurodegenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease.
  • the present invention relates to the use of a polypeptide or of a specific ligand of said polypeptide, for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a disease as mentioned above. .
  • neurodegenerative disease is meant a disease in which a process of cell death or cell destruction is associated with physiological and / or clinical disorders.
  • autoimmune disease means a disease in which manifests a hyperreactivity of the immune system with respect to one or more autoantigen (s).
  • MS multiple sclerosis
  • RA rheumatoid arthritis
  • lupus erythematosus are classified.
  • inflammatory disease is generally meant any disease resulting from a reaction of the organism to one or more aggressive agent (s).
  • biological sample in particular a sample of the biological fluid, living tissue, tissue fragment, mucus, organ or organ fragment type, or any culture supernatant obtained using a sample.
  • biological fluid in particular serum, plasma, urine or cerebrospinal fluid (CSF).
  • cells of the central nervous system is meant in particular the neuronal cells and not neuronal, such as glial cells or neuroglial-like cells.
  • the polypeptide has a sequence which corresponds at least to the primary sequence of at least one fragment of a protein, said protein having in its native state a primary amino acid sequence corresponding to the sequence identified SEQ ID N °:
  • polypeptide has a sequence which corresponds at least to the primary sequence of at least one fragment of said protein, the latter having in its native state a primary amino acid sequence corresponding to the sequence identified SEQ ID No:
  • polypeptide according to the invention has a sequence which corresponds to the primary sequence of the protein identified under any of the references SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, said fragment comprising at least 6 amino acid residues, advantageously at least 8 amino acid residues, consecutive or non-consecutive, included in SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or its equivalent sequences.
  • polypeptide according to the invention has a sequence that corresponds to at least the s' primary sequence of a fragment of about 16 KD of such protein qu'identroze according to any one of seqs ID NO: 1 and 2.
  • polypeptide is chosen from polypeptides comprising the amino acid sequence starting at amino acid 95 and ending at amino acid 233, as identified under the reference SEQ ID N °: 3 or an equivalent sequence.
  • said polypeptide consists of SEQ ID No: 3, or an equivalent sequence of SEQ ID No: 3.
  • the polypeptide has an amino acid sequence comprising the sequence identified under any one of the references SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2.
  • the polypeptide according to the invention preferably exhibits antigenic activity.
  • the polypeptide according to the invention preferably exhibits a specific recognition activity of the surface receptor of the TRAIL protein.
  • the invention particularly relates to the use of a polypeptide as defined above to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition.
  • polypeptide according to the invention denotes a polypeptide in the isolated state having a sequence of a variable number of amino acids, such as an oligopeptide, a protein, a fusion protein and their fragments, a fusion peptide or of synthesis and their fragments.
  • polypeptide according to the invention may be a fragment of a native protein obtained by enzymatic digestion or chemical cleavage or the like, or a defined polypeptide obtained by various techniques well known to those skilled in the art, and in particular by chemical synthesis or by genetic recombination techniques.
  • Equivalent sequence of the polypeptide according to any one invention describes addition and / or substitution and / or deletion with respect to a primary sequence with reference to amino acids. These addition, substitution or deletion can be generated by spontaneous or induced mutations in the gene coding for said polypeptide, or even be introduced during the production of said polypeptide by chemical synthesis or genetic recombination.
  • the term “equivalent sequence” is intended to mean, in particular the sequences in which one or more amino acids are substituted by one or more other amino acids; sequences in which one or more amino acids of the L series are replaced by one or more amino acids of the D series; the sequences into which a modification of the side chains of the amino acids has been introduced, such as an acetylation of the amino functions, a carboxylation of the thiol functions, an esterification of the carboxylic functions, a substitution of an oxygen atom by an atom of sulfur, or the like; a modification of the peptide bonds, such as the carba, retro, inverso, retro-inverso, reduced and methylene-oxy bonds; and adding one or more glycosylated chains.
  • fragment of a protein is meant a chain of at least 6 amino acids, advantageously at least 8 amino acids, consecutive or non-consecutive, defining an epitope, an active site or a specific interaction domain, included in the sequence of said protein or of a protein of equivalent structure and / or activity.
  • sequence of the protein in the native state is meant the succession of amino acids as found in the primary structure of the native protein.
  • Said protein is a protein called TRAIL or Apo-2L which is a member of the TNF family (Tumor Ne'crosis Factors).
  • the TRAIL protein is known to induce rapid apoptosis of transformed cell lines of various origins (SR iley et al., Immunity, 3: 673-682 (1995) and RM Pitti et al., The Journal of Biological Chemistry, Vol 271, No. 22, 12687-12690 (1996)).
  • a diagnostic composition especially comprises at least one polypeptide as defined above for detecting and / or quantifying ligands specific for said polypeptide in a biological sample, in particular a receptor.
  • a prophylactic or therapeutic composition comprises in particular at least one polypeptide having an equivalent sequence, as defined above, with a view to blocking access to the receptor for said naturally occurring polypeptide or the physiological cascade leading to cell death by apoptosis.
  • the subject of the present invention is also a ligand specific for a polypeptide as defined above and its use for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or self- immune and / or inflammatory.
  • ligand according to the invention is understood to mean in particular a monoclonal or polyclonal antibody and its fragments, or a mixture of said antibodies or fragments, capable of forming with said polypeptide an immunological complex.
  • a monoclonal or polyclonal antibody or its fragments can be obtained by well known techniques, such as immunization of an animal or techniques of genetic recombination.
  • a diagnostic composition comprises no 'MENT at least one polyclonal or monoclonal antibody or fragment thereof to detect and / or quantify a polypeptide naturally present in a biological sample.
  • ligand according to the invention is also meant a protein factor, such as a receptor, its fragments or derived molecules, capable of forming with said polypeptide a receptor / polypeptide complex.
  • the present inventors have demonstrated the existence of such a protein factor, in the form of a soluble receptor, present in the biological fluid of patients affected by at least one of the diseases previously described.
  • Said receptor is a soluble protein which has an average molecular mass of 47,769 D (Pan G et al., Sciences, Vol. 276, 111-113 (1997), found by the present inventors in the cerebrospinal fluid and the serum of MS patients.
  • the subject of the present invention is also the use of such a receptor at least in one of its soluble forms, of its fragments or of molecules derived in a therapeutic or prophylactic composition.
  • fragment of the receptor according to the present invention is understood in particular to mean a soluble fragment of said receptor having an average molecular mass of 19938 D.
  • derivative molecule is meant a receptor, as defined above or a fragment of said receptor, modified in structure but which retains its capacity to bind to the polypeptide, naturally present in a biological sample to form the modified receptor / polypeptide complex or odified receptor fragment / polypeptide.
  • Such a receptor, its fragments, or derivatives can be obtained by known techniques, such as chemical synthesis or the technique of genetic recombination.
  • the subject of the present invention is the use of said receptor, at least in one of the soluble forms, said receptor having an average molecular mass of 47,769 D, or a fragment of said receptor, for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, as defined above, characterized in that the ligand is chosen among the receptor in soluble form of the TRAIL protein, the fragments in soluble form of said receptor and the molecules derived from said receptor or from said fragments.
  • the present invention relates to the use of a soluble receptor having an average molecular weight of 47,769 D, or a fragment of said receptor having an average molecular weight of 19,938 D, or their derived molecules.
  • a subject of the invention is also a therapeutic or prophylactic composition of the invention comprising said receptor, its fragments or their derived molecules, in a predetermined amount, in such a way that it is capable of binding to the naturally occurring polypeptide in a biological sample, to interact with the latter and block, by a phenomenon of competition, the interaction between said polypeptide and its naturally present receptor or influence the physiological cascade leading to cell death by apoptosis.
  • the subject of the invention is also the use of an anti-ligand specific for a ligand itself specific for a polypeptide as defined above for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a condition pathological associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, characterized in that the anti-ligand is chosen from the antibodies directed against the TRAIL protein receptor, the fragments of said receptor and the molecules derived from said receptor or said fragments.
  • the antibodies are directed against the soluble form of the receptor, of its fragments or of the molecules derived from said receptor or of said fragments.
  • Another subject of the invention is the use of a nucleotide fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition.
  • nucleotide fragment means in particular a fragment whose DNA sequence codes for the polypeptide as defined above or the corresponding messenger RNA sequence and their complementary sequences, as well as a fragment whose DNA sequence codes for the receptor as defined above, or the corresponding messenger RNA sequence and their complementary sequences.
  • a nucleotide fragment is a chain of monomers, or a biopolymer, characterized by the informational sequence of natural nucleic acids, capable of hybridizing to any other nucleotide fragment under predetermined conditions, the chain which may contain monomers with different chemical structures and be obtained from a natural nucleic acid molecule and / or by genetic recombination and / or by chemical synthesis.
  • a monomer can be a natural nucleotide of nucleic acid, the constituent elements of which are a sugar, a phosphate group and a nitrogenous base; in 1 r RNA the sugar is ribose, in DNA the sugar is deoxy-2-ribose; depending on whether it is DNA or RNA, the nitrogen base is chosen from adenine, guanine, uracil, cytosine, thymine; or the nucleotide can be modified in at least one of the three constituent elements; for example, the modification can occur at the level of the bases, generating bases modified such as inosine, methyl-5-deoxycytidine, deoxyuridine, dimethylamino-5-deoxyuridine, diamino-2, 6-purine, bromo-5-deoxyuridine and any other modified base promoting hybridization; at the sugar level, the modification may consist in the replacement of at least one deoxyribose by a polyamide, and at the phosphate group level, the modification
  • informational sequence is meant any ordered sequence of monomers, the chemical nature and order in a reference sense or not constitute functional information of the same quality as that of natural nucleic acids,
  • hybridization is meant the process during which, under appropriate operating conditions, two nucleotide fragments, having sufficiently complementary sequences, combine to form a complex structure, in particular double or triple.
  • a preferred embodiment according to the invention comprises the use of at least one nucleotide fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune disease and / or inflammatory, according to which said nucleotide fragment has a nucleic sequence of DNA or mRNA coding for at least one fragment of a protein according to SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or an equivalent sequence of said sequences reference SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, or a nucleic sequence complementary to said DNA or RNA sequence, said fragment coding for a polypeptide exhibiting apoptic activity with respect to cells of the central nervous system .
  • the nucleotide fragment codes for a polypeptide having a sequence which corresponds at least to the sequence of a fragment of said protein, said fragment comprising at least 6, and advantageously at least 8 acid residues amines, consecutive or non-consecutive, of the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or their equivalent sequences.
  • the nucleotide fragment has a nucleic sequence coding for at least one 16 KD fragment of the protein according to SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the sequence nucleotide complementary to said fragment.
  • the nucleotide fragment comprises a nucleic sequence chosen from the nucleotide sequences coding for the amino acid sequence starting at amino acid 95 and ending at amino acid 233, or the nucleotide sequence complementary to said fragment.
  • the nucleotic fragment has a sequence which codes for the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the complementary sequence of said fragment.
  • the invention also relates to a method for detecting a protein associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a biological sample, characterized in that the biological sample is brought into contact with a ligand, as defined above, specific for a first object polypeptide according to the invention.
  • the invention also relates to a method for detecting an antibody associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a sample.
  • biological characterized in that the biological sample is brought into contact with a polypeptide as defined in the first object according to the invention.
  • the degenerative or autoimmune disease is multiple sclerosis and its possibly associated forms.
  • the biological sample is chosen from cerebrospinal fluid, urine and serum.
  • the invention also relates to a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a polypeptide as defined according to the invention.
  • the invention also relates to a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition
  • a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a ligand as defined above or an anti-ligand as defined above.
  • the invention also relates to a diagnostic composition comprising a nucleotic fragment complementary to a fragment as defined above.
  • the invention relates to a therapeutic composition
  • a therapeutic composition comprising an antisense nucleotide fragment capable of hybridizing at least partially to the DNA or mRNA coding for expression of a polypeptide as defined in the first object according to the invention r , or a receiver as defined in a preferred mode according to the invention.
  • the present inventors have unexpectedly found that at least one fragment of this protein or the protein is implicated in diseases of neurodegenerative and / or autoimmune and / or inflammatory type.
  • the present inventors have demonstrated the existence of a soluble receptor, as defined above, in the biological fluid of patients affected by at least one of the diseases described above and the involvement of said receptor or its fragments in associated pathologies.
  • the inventors carried out the separation and the fractionation of the various compounds contained in a pool of CSF of MS patients, according to the usual techniques well known to those skilled in the art (elimination of human IgG by protein G, fractionation by charge on column DEAE chromatography and size separation by electrophoresis on SDS-PAGE gel in one dimension).
  • One of the fractions coming from this systematic analysis made it possible to visualize on gel in one dimension a protein band of an apparent molecular mass of between 15 and 20 KD.
  • This strip was cut and analyzed after electro-transfer on a Western-blot membrane. The 15-20 KD protein band was subjected to trypsin digestion and the trypsin digestion profiles of the proteins contained in this band were analyzed by mass spectrometry.
  • the analysis was carried out using software calibrated on the peptide profiles of known proteins listed in the databases.
  • the results obtained show that one of the protein constituents of the 15-20 KD fraction analyzed exhibits an identifiable trysic digestion profile with a high probability (probability less than 1 per thousand determined from the analysis of data from mass spectroscopy) at a region of approximately 16 KD (average molecular mass of 16,165 D) included in the native protein TRAIL, which has an average molecular mass of 32,507 D.
  • the inventors have also demonstrated the presence of the soluble receptor of the TRAIL protein in the CSF of MS patients.
  • the inventors carried out the separation and the fractionation of the various compounds contained in the CSF of MS patients from the same pool as that used for the detection of the TRAIL protein, according to the usual techniques.
  • One of the fractions from this systematic analysis made it possible to visualize on gel a protein band of apparent molecular mass between 47 and 48 KD.
  • Mass spectrometry analysis of this protein according to the technique described by Jens S. Andersen et al. (Electrospray ionization and matrix assisted laser desorption / ionization mass spectrometry: Powerful analytical tools in recombinant protein chemistry, Nature Biotechnology, Vol.
  • said receptor at least in one of its soluble forms or its fragment is usable in a therapeutic or prophylactic composition with a view to countering the toxic effect of the TRAIL protein or of its fragments in a disease as described previously. It is thus possible to block the phenomenon of apoptosis using an anti-receptor or anti-receptor fragment antibody which binds to the receptor released in the medium, or expressed on the surface of the cell, and prevents thus the formation of the natural complex. It is also possible to block apoptosis using a molecule derived from said receptor or its fragment, resulting from a genomic deletion, said derivative molecule then binding to the TRAIL protein or its fragment and inhibiting the formation of the natural complex.

Abstract

The invention concerns the use of a polypeptide having a sequence corresponding at least to the primary sequence of at least one protein fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition for detecting, preventing or treating a pathological condition associated with a degenerative and/or autoimmune and/or inflammatory disease, said protein having, in native state, an amino acid sequence corresponding to the SEQ ID No: 1, or a sequence equivalent to said reference sequence SEQ ID No: 1, said polypeptide having an apoptosis activity with respect to cells of the central nervous system.

Description

FACTEUR PROTEIQUE ASSOCIE A UNE MALADIE NEURO- DEGENERATIVE ET/OU AUTO-IMMUNE ET/OU INLAMMATOIRE. PROTEIN FACTOR ASSOCIATED WITH NEURODENGENERATIVE AND / OR AUTOIMMUNE AND / OR INLAMMATORY DISEASE.
La présente invention concerne la détermination, la détection et la quantification dans un échantillon biologique d'un facteur proteique associé à une maladie neuro-dégérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire. En particulier, la présente invention concerne l'utilisation d'un polypeptide ou d'un ligand spécifique dudit polypeptide, pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie telle que précédemment citée .The present invention relates to the determination, detection and quantification in a biological sample of a protein factor associated with a neurodegenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease. In particular, the present invention relates to the use of a polypeptide or of a specific ligand of said polypeptide, for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a disease as mentioned above. .
Par "maladie neuro-dégénérative" , on entend une maladie dans laquelle un processus de mort cellulaire ou de destruction cellulaire est associé à des troubles physiologiques et/ou cliniques.By "neurodegenerative disease" is meant a disease in which a process of cell death or cell destruction is associated with physiological and / or clinical disorders.
Par "maladie auto-immune" , on entend une maladie dans laquelle se manifeste une hyperréactivité du système immunitaire vis à vis d'un ou plusieurs auto-antigène (s) . On classe notamment parmi les maladies auto-immunes la SEP (slérose en plaques) , la PR (polyarthrite rhumatoïde) et le lupus érythémateux.By "autoimmune disease" means a disease in which manifests a hyperreactivity of the immune system with respect to one or more autoantigen (s). Among the autoimmune diseases, MS (multiple sclerosis), RA (rheumatoid arthritis) and lupus erythematosus are classified.
Par "maladie inflammatoire", on entend généralement toute maladie résultant d'une réaction de l'organisme à un ou des agent(s) agressant (s) .By "inflammatory disease" is generally meant any disease resulting from a reaction of the organism to one or more aggressive agent (s).
Par " échantillon biologique " on entend notamment un prélèvement du type fluide biologique, tissu vivant, fragment de tissu, mucosité, organe ou fragment d'organe, ou tout surnageant de culture obtenu à l'aide d'un pré1èvement .By “biological sample” is meant in particular a sample of the biological fluid, living tissue, tissue fragment, mucus, organ or organ fragment type, or any culture supernatant obtained using a sample.
Par " fluide biologique " , on entend notamment le sérum, le plasma, l'urine ou le liquide céphalo-rachidien (LCR) .By "biological fluid" is meant in particular serum, plasma, urine or cerebrospinal fluid (CSF).
Par " cellules du système nerveux central " on entend notamment les cellules neuronales et non neuronales, telles que les cellules gliales ou les cellules de type neurogliales.By "cells of the central nervous system" is meant in particular the neuronal cells and not neuronal, such as glial cells or neuroglial-like cells.
Selon l'invention, le polypeptide présente une séquence qui correspond au moins à la séquence primaire d'au moins un fragment d'une protéine, ladite protéine présentant à l'état natif une séquence primaire en acides aminés correspondant à la séquence identifiée SEQ ID N° :According to the invention, the polypeptide has a sequence which corresponds at least to the primary sequence of at least one fragment of a protein, said protein having in its native state a primary amino acid sequence corresponding to the sequence identified SEQ ID N °:
1, en fin de description, ou une séquence équivalente de ladite séquence de référence SEQ ID N° : 1, ledit polypeptide présentant une activité apoptique vis à vis des cellules du système nerveux central.1, at the end of the description, or an equivalent sequence of said reference sequence SEQ ID No: 1, said polypeptide having apoptic activity with respect to cells of the central nervous system.
Particulièrement, le polypeptide présente une séquence qui correspond au moins à la séquence primaire d'au moins un fragment de ladite protéine, cette dernière présentant à l'état natif une séquence primaire en acides aminés correspondant à la séquence identifiée SEQ ID N° :In particular, the polypeptide has a sequence which corresponds at least to the primary sequence of at least one fragment of said protein, the latter having in its native state a primary amino acid sequence corresponding to the sequence identified SEQ ID No:
2, en fin de description, ou une séquence équivalente de ladite séquence de référence SEQ ID N° : 2. Le polypeptide selon l'invention présente une séquence qui correspond à la séquence primaire de la protéine identifiée sous l'une quelconque des références SEQ ID N° :1 et SEQ ID N° : 2, ledit fragment comprenant au moins 6 résidus d'acides aminés, avantageusement au moins 8 résidus d'acides aminés, consécutifs ou non consécutifs, compris dans SEQ ID N°:l ou SEQ ID N° : 2, ou ses séquences équivalentes.2, at the end of the description, or an equivalent sequence of said reference sequence SEQ ID No: 2. The polypeptide according to the invention has a sequence which corresponds to the primary sequence of the protein identified under any of the references SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, said fragment comprising at least 6 amino acid residues, advantageously at least 8 amino acid residues, consecutive or non-consecutive, included in SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or its equivalent sequences.
En particulier, le polypeptide selon l'invention présente une séquence qui correspond au moins à la s'équence primaire d'un fragment d'environ 16 KD de la protéine telle qu'identifiée selon l'une quelconque des SEQs ID N° : 1 et 2.In particular, the polypeptide according to the invention has a sequence that corresponds to at least the s' primary sequence of a fragment of about 16 KD of such protein qu'identifiée according to any one of seqs ID NO: 1 and 2.
Le polypeptide est choisi parmi les polypeptides comprenant la séquence en acides aminés commençant à l'acide aminé 95 et se terminant à l'acide aminé 233, telle qu'identifiée sous la référence SEQ ID N° : 3 ou une séquence équivalente.The polypeptide is chosen from polypeptides comprising the amino acid sequence starting at amino acid 95 and ending at amino acid 233, as identified under the reference SEQ ID N °: 3 or an equivalent sequence.
Préférentiellement, ledit polypeptide consiste en la SEQ ID N° : 3, ou une séquence équivalente de SEQ ID N° : 3.Preferably, said polypeptide consists of SEQ ID No: 3, or an equivalent sequence of SEQ ID No: 3.
Le polypeptide présente une séquence en acides aminés comprenant la séquence identifiée sous l'une quelconque des références SEQ ID N° : 1 et SEQ ID N° : 2.The polypeptide has an amino acid sequence comprising the sequence identified under any one of the references SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2.
Le polypeptide selon l'invention présente de manière préférentielle une activité antigénique.The polypeptide according to the invention preferably exhibits antigenic activity.
D'autre part, le polypeptide selon l'invention présente de manière préférentielle une activité de reconnaissance spécifique du récepteur de surface de la protéine TRAIL. L'invention a notamment pour objet l'utilisation d'un polypeptide tel que défini ci-dessus pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique.On the other hand, the polypeptide according to the invention preferably exhibits a specific recognition activity of the surface receptor of the TRAIL protein. The invention particularly relates to the use of a polypeptide as defined above to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition.
Par polypeptide selon l'invention on désigne un polypeptide à l'état isolé présentant un enchaînement d'un nombre variable d'acides aminés, tel qu'un oligopeptide, une protéine, une protéine de fusion et leurs fragments, un peptide de fusion ou de synthèse et leurs fragments.By polypeptide according to the invention denotes a polypeptide in the isolated state having a sequence of a variable number of amino acids, such as an oligopeptide, a protein, a fusion protein and their fragments, a fusion peptide or of synthesis and their fragments.
Le polypeptide selon l'invention peut être un fragment d'une protéine native obtenu par digestion enzymatique ou coupure chimique ou analogue, ou un polypeptide défini obtenu par différentes techniques bien connues de l'homme de l'art, et notamment par synthèse chimique ou par des techniques de recombinaison génétique.The polypeptide according to the invention may be a fragment of a native protein obtained by enzymatic digestion or chemical cleavage or the like, or a defined polypeptide obtained by various techniques well known to those skilled in the art, and in particular by chemical synthesis or by genetic recombination techniques.
Par séquence équivalente du polypeptide selon l1 invention on désigne toute addition et/ou substitution et/ou délétion par rapport à une séquence primaire en acides aminés de référence. Ces addition, substitution ou délétion peuvent être générées par des mutations spontanées ou induites au niveau du gène codant pour ledit polypeptide, ou encore être introduites lors de la production dudit polypeptide par synthèse chimique ou recombinaison génétique.Equivalent sequence of the polypeptide according to any one invention describes addition and / or substitution and / or deletion with respect to a primary sequence with reference to amino acids. These addition, substitution or deletion can be generated by spontaneous or induced mutations in the gene coding for said polypeptide, or even be introduced during the production of said polypeptide by chemical synthesis or genetic recombination.
Ainsi, on entend par " séquence équivalente ", notamment les séquences dans lesquelles un ou plusieurs acides aminés sont substitués par un ou plusieurs autres acides aminés ; les séquences dans lesquelles un ou plusieurs acides aminés de la série L sont remplacés par un ou plusieurs acides aminés de la série D ; les séquences dans lesquelles on a introduit une modification des chaînes latérales des acides aminés, telle qu'une acétylation des fonctions aminés, une carboxylation des fonctions thiols, une estérification des fonctions carboxyliques, une substitution d'un atome d'oxygène par un atome de soufre, ou autres ; une modification des liaisons peptidiques, telles que les liaisons carba, rétro, inverso, retro-inverso, réduites et méthylène-oxy ; et l'addition d'une ou plusieurs chaînes glycosylées.Thus, the term “equivalent sequence” is intended to mean, in particular the sequences in which one or more amino acids are substituted by one or more other amino acids; sequences in which one or more amino acids of the L series are replaced by one or more amino acids of the D series; the sequences into which a modification of the side chains of the amino acids has been introduced, such as an acetylation of the amino functions, a carboxylation of the thiol functions, an esterification of the carboxylic functions, a substitution of an oxygen atom by an atom of sulfur, or the like; a modification of the peptide bonds, such as the carba, retro, inverso, retro-inverso, reduced and methylene-oxy bonds; and adding one or more glycosylated chains.
Par fragment d'une protéine, on entend un enchaînement d'au moins 6 acides aminés, avantageusement au moins 8 acides aminés, consécutifs ou non consécutifs, définissant un épitope, un site actif ou un domaine d'interaction spécifique, compris dans la séquence de ladite protéine ou d'une protéine de structure et/ou d'activité équivalente. Par séquence de la protéine à l'état natif, on entend la succession d'acides aminés telle que retrouvée dans la structure primaire de la protéine native.By fragment of a protein is meant a chain of at least 6 amino acids, advantageously at least 8 amino acids, consecutive or non-consecutive, defining an epitope, an active site or a specific interaction domain, included in the sequence of said protein or of a protein of equivalent structure and / or activity. By sequence of the protein in the native state is meant the succession of amino acids as found in the primary structure of the native protein.
Ladite protéine est une protéine dénommée TRAIL ou Apo-2L qui est un membre de la famille des TNFs (Tumor Ne'crosis Factors) . La protéine TRAIL est connue pour induire une apoptose rapide des lignées de cellules transformées d'origines diverses (S R iley et al., Immunity, 3 : 673-682 (1995) et R M Pitti et al., The Journal of Biological Chemistry, Vol. 271, n°22, 12687- 12690 (1996)). Une composition diagnostique comprend notamment au moins un polypeptide tel que défini ci-dessus pour détecter et/ou quantifier des ligands spécifiques dudit polypeptide dans un échantillon biologique, notamment récepteur .Said protein is a protein called TRAIL or Apo-2L which is a member of the TNF family (Tumor Ne'crosis Factors). The TRAIL protein is known to induce rapid apoptosis of transformed cell lines of various origins (SR iley et al., Immunity, 3: 673-682 (1995) and RM Pitti et al., The Journal of Biological Chemistry, Vol 271, No. 22, 12687-12690 (1996)). A diagnostic composition especially comprises at least one polypeptide as defined above for detecting and / or quantifying ligands specific for said polypeptide in a biological sample, in particular a receptor.
Par ailleurs, une composition prophylactique ou thérapeutique comprend notamment au moins un polypeptide présentant une séquence équivalente, telle que définie précédemment, en vue de bloquer l'accès au récepteur dudit polypeptide présent naturellement ou la cascade physiologique conduisant à une mort cellulaire par apoptose.Furthermore, a prophylactic or therapeutic composition comprises in particular at least one polypeptide having an equivalent sequence, as defined above, with a view to blocking access to the receptor for said naturally occurring polypeptide or the physiological cascade leading to cell death by apoptosis.
La présente invention a également pour objet un ligand spécifique d'un polypeptide tel que défini précédemment et son utilisation pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire.The subject of the present invention is also a ligand specific for a polypeptide as defined above and its use for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or self- immune and / or inflammatory.
Par ligand selon l'invention, on entend notamment un anticorps monoclonal ou polyclonal et ses fragments, ou un mélange desdits anticorps ou fragments, susceptibles de former avec ledit polypeptide un complexe immunologique. Un tel anticorps monoclonal ou polyclonal ou ses fragments peut être obtenu par des techniques bien connues, telles que l'immunisation d'un animal ou les techniques de recombinaison génétique.The term “ligand according to the invention” is understood to mean in particular a monoclonal or polyclonal antibody and its fragments, or a mixture of said antibodies or fragments, capable of forming with said polypeptide an immunological complex. Such a monoclonal or polyclonal antibody or its fragments can be obtained by well known techniques, such as immunization of an animal or techniques of genetic recombination.
Ainsi, une composition diagnostique comprend no'tamment au moins un anticorps polyclonal ou monoclonal ou ses fragments pour détecter et/ou quantifier un polypeptide présent naturellement dans un échantillon biologique.Thus, a diagnostic composition comprises no 'MENT at least one polyclonal or monoclonal antibody or fragment thereof to detect and / or quantify a polypeptide naturally present in a biological sample.
Par ligand selon l'invention, on entend également un facteur proteique, tel qu'un récepteur, ses fragments ou molécules dérivées, susceptibles de former avec ledit polypeptide un complexe récepteur/polypeptide.By ligand according to the invention is also meant a protein factor, such as a receptor, its fragments or derived molecules, capable of forming with said polypeptide a receptor / polypeptide complex.
Comme décrit plus en détail ci-après, les présents inventeurs ont mis en évidence l'existence d'un tel facteur proteique, sous la forme d'un récepteur soluble, présent dans le fluide biologique de patients affectés par au moins une des maladies précédemment décrites.As described in more detail below, the present inventors have demonstrated the existence of such a protein factor, in the form of a soluble receptor, present in the biological fluid of patients affected by at least one of the diseases previously described.
Ledit récepteur est une protéine soluble qui présente une masse moléculaire moyenne de 47769 D (Pan G et al., Sciences, Vol. 276, 111-113 (1997), retrouvée par les présents inventeurs dans le liquide céphalo-rachidien et le sérum de patients SEP.Said receptor is a soluble protein which has an average molecular mass of 47,769 D (Pan G et al., Sciences, Vol. 276, 111-113 (1997), found by the present inventors in the cerebrospinal fluid and the serum of MS patients.
Aussi, la présente invention a également pour objet l'utilisation d'un tel récepteur au moins sous une de ses formes solubles, de ses fragments ou de molécules dérivées dans une composition thérapeutique ou prophylactique .Also, the subject of the present invention is also the use of such a receptor at least in one of its soluble forms, of its fragments or of molecules derived in a therapeutic or prophylactic composition.
Par fragment du récepteur selon la présente invention, on entend notamment un fragment soluble dudit récepteur présentant une masse moléculaire moyenne de 19938 D.By fragment of the receptor according to the present invention is understood in particular to mean a soluble fragment of said receptor having an average molecular mass of 19938 D.
Par molécule dérivée, on entend un récepteur, tel que défini ci-dessus ou un fragment dudit récepteur, modifié en structure mais qui conserve sa capacité de se lier au polypeptide, présent naturellement dans un échantillon biologique pour former le complexe récepteur modifié/polypeptide ou fragment de récepteur odifié/polypeptide .By derivative molecule is meant a receptor, as defined above or a fragment of said receptor, modified in structure but which retains its capacity to bind to the polypeptide, naturally present in a biological sample to form the modified receptor / polypeptide complex or odified receptor fragment / polypeptide.
Un tel récepteur, ses fragments, ou dérivés peuvent être obtenus par des techniques connues, telles que la synthèse chimique ou la technique de recombinaison génétique.Such a receptor, its fragments, or derivatives can be obtained by known techniques, such as chemical synthesis or the technique of genetic recombination.
Ainsi, la présente invention a pour objet l'utilisation dudit récepteur, au moins sous une des formes solubles, ledit récepteur présentant une masse moléculaire moyenne de 47769 D, ou un fragment dudit récepteur, pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, telle que définie précédemment, caractérisée en ce que le ligand est choisi parmi le récepteur sous forme soluble de la protéine TRAIL, les fragments sous forme soluble dudit récepteur et les molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments. Plus particulièrement, la présente invention concerne l'utilisation d'un récepteur soluble présentant une masse moléculaire moyenne de 47769 D, ou un fragment dudit récpeteur présentant une masse moléculaire moyenne de 19938 D, ou leurs molécules dérivées. L'invention a également pour objet, une composition thérapeutique ou prophylactique de l'invention comprenant ledit récepteur, ses fragments ou leurs molécules dérivées, dans une quantité prédéterminée, de telle manière à ce qu'il soit susceptible de se lier au polypeptide présent naturellement dans un échantillon biologique, pour interagir avec ce dernier et bloquer, par un phénomène de compétition, l'interaction entre ledit polypeptide et son récepteur naturellement présent ou influer sur la cascade physiologique conduisant à une mort cellulaire par apoptose.Thus, the subject of the present invention is the use of said receptor, at least in one of the soluble forms, said receptor having an average molecular mass of 47,769 D, or a fragment of said receptor, for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, as defined above, characterized in that the ligand is chosen among the receptor in soluble form of the TRAIL protein, the fragments in soluble form of said receptor and the molecules derived from said receptor or from said fragments. More particularly, the present invention relates to the use of a soluble receptor having an average molecular weight of 47,769 D, or a fragment of said receptor having an average molecular weight of 19,938 D, or their derived molecules. A subject of the invention is also a therapeutic or prophylactic composition of the invention comprising said receptor, its fragments or their derived molecules, in a predetermined amount, in such a way that it is capable of binding to the naturally occurring polypeptide in a biological sample, to interact with the latter and block, by a phenomenon of competition, the interaction between said polypeptide and its naturally present receptor or influence the physiological cascade leading to cell death by apoptosis.
L'invention a également pour objet l'utilisation d'un anti-ligand spécifique d'un ligand lui même spécifique d'un polypeptide tel que défini précédemment pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique où thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, caractérisée en ce que l' anti-ligand est choisi parmi les anticorps dirigés contre le récepteur de la protéine TRAIL, les fragments dudit récepteur et les molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments. Dans un mode de réalisation préférentiel selon l'invention, les anticorps sont dirigés contre la forme soluble du récepteur, de ses fragments ou des molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments.The subject of the invention is also the use of an anti-ligand specific for a ligand itself specific for a polypeptide as defined above for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a condition pathological associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, characterized in that the anti-ligand is chosen from the antibodies directed against the TRAIL protein receptor, the fragments of said receptor and the molecules derived from said receptor or said fragments. In a preferred embodiment according to the invention, the antibodies are directed against the soluble form of the receptor, of its fragments or of the molecules derived from said receptor or of said fragments.
L'invention a aussi pour objet l'utilisation d'un fragment nucléotidique pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique.Another subject of the invention is the use of a nucleotide fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition.
Par fragment nucléotidique, on entend notamment un fragment dont la séquence d'ADN code pour le polypeptide tel que défini précédemment ou la séquence d'ARN messager correspondante et leurs séquences complémentaires, ainsi qu'un fragment dont la séquence d'ADN code pour le récepteur tel que défini précédemment, ou la séquence d'ARN messager correspondante et leurs séquences complémentaires .The term “nucleotide fragment” means in particular a fragment whose DNA sequence codes for the polypeptide as defined above or the corresponding messenger RNA sequence and their complementary sequences, as well as a fragment whose DNA sequence codes for the receptor as defined above, or the corresponding messenger RNA sequence and their complementary sequences.
Par ailleurs, selon l'invention un fragment nucléotidique est un enchaînement de monomères, ou un biopolymère, caractérisé par la séquence informationnelle des acides nucléiques naturels, susceptibles de s'hybrider à tout autre fragment nucléotidique dans des conditions prédéterminées, l'enchaînement pouvant contenir des monomères de structures chimiques différentes et être obtenu à partir d'une molécule d'acide nucléique naturelle et/ou par recombinaison génétique et/ou par synthèse chimique.Furthermore, according to the invention, a nucleotide fragment is a chain of monomers, or a biopolymer, characterized by the informational sequence of natural nucleic acids, capable of hybridizing to any other nucleotide fragment under predetermined conditions, the chain which may contain monomers with different chemical structures and be obtained from a natural nucleic acid molecule and / or by genetic recombination and / or by chemical synthesis.
Ainsi un monomère peut être un nucléotide naturel d'acide nucléique, dont les éléments constitutifs sont un sucre, un groupement phosphate et une base azotée; dans 1 rARN le sucre est le ribose, dans l 'ADN le sucre est le désoxy-2-ribose; selon qu'il s'agit de l'ADN ou l'ARN, la base azotée est choisie parmi l'adénine, la guanine, l'uracile, la cytosine, la thymine; ou le nucléotide peut être modifié dans l'un au moins des trois éléments constitutifs ; à titre d'exemple, la modification peut intervenir au niveau des bases, générant des bases modifiées telles que l'inosine, la méthyl-5- désoxycytidine, la désoxyuridine, la diméthylamino-5- désoxyuridine, la diamino-2 , 6-purine, la bromo-5- désoxyuridine et toute autre base modifiée favorisant l'hybridation; au niveau du sucre, la modification peut consister dans le remplacement d'au moins un désoxyribose par un polyamide, et au niveau du groupement phosphate, la modification peut consister dans son remplacement par des esters, notamment choisis parmi les esters de diphosphate, d'al yl et arylphosphonate et de phosphorothioate.Thus a monomer can be a natural nucleotide of nucleic acid, the constituent elements of which are a sugar, a phosphate group and a nitrogenous base; in 1 r RNA the sugar is ribose, in DNA the sugar is deoxy-2-ribose; depending on whether it is DNA or RNA, the nitrogen base is chosen from adenine, guanine, uracil, cytosine, thymine; or the nucleotide can be modified in at least one of the three constituent elements; for example, the modification can occur at the level of the bases, generating bases modified such as inosine, methyl-5-deoxycytidine, deoxyuridine, dimethylamino-5-deoxyuridine, diamino-2, 6-purine, bromo-5-deoxyuridine and any other modified base promoting hybridization; at the sugar level, the modification may consist in the replacement of at least one deoxyribose by a polyamide, and at the phosphate group level, the modification may consist in its replacement by esters, in particular chosen from esters of diphosphate, al yl and arylphosphonate and phosphorothioate.
Par "séquence informationnelle", on entend toute suite ordonnée de monomères, dont la nature chimique et l'ordre dans un sens de référence, constituent ou non une information fonctionnelle de même qualité que celle des acides nucléiques naturels,By "informational sequence" is meant any ordered sequence of monomers, the chemical nature and order in a reference sense or not constitute functional information of the same quality as that of natural nucleic acids,
Par hybridation, on entend le processus au cours duquel, dans des conditions opératoires appropriées, deux fragments nucléotidiques, ayant des séquences suffisamment complémentaires, s'apparient pour former une structure complexe, notamment double ou triple.By hybridization is meant the process during which, under appropriate operating conditions, two nucleotide fragments, having sufficiently complementary sequences, combine to form a complex structure, in particular double or triple.
Un mode de réalisation préférentiel selon l'invention comprend l'utilisation d'au moins un fragment nucléotidique pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, selon laquelle ledit fragment nucléotidique présente une séquence nucléique d'ADN ou ARNm codant pour au moins un fragment d'une protéine selon SEQ ID N°l ou SEQ ID N° : 2, ou une séquence équivalente desdites séquences de référence SEQ ID N° : 1 et SEQ ID N° : 2, ou une séquence nucléique complémentaire de ladite séquence d'ADN ou d'ARN, ledit fragment codant pour un polypeptide présentant une activité apoptique vis à vis des cellules du système nerveux central. Dans un mode préférentiel selon l'invention, le fragment nucléotidique code pour un polypeptide présentant une séquence qui correspond au moins à la séquence d'un fragment de ladite protéine, ledit fragment comprenant au moins 6, et avantageusement au moins 8 résidus d'acides aminés, consécutifs ou non consécutifs, de la séquence SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou leurs séquences équivalentes .A preferred embodiment according to the invention comprises the use of at least one nucleotide fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune disease and / or inflammatory, according to which said nucleotide fragment has a nucleic sequence of DNA or mRNA coding for at least one fragment of a protein according to SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or an equivalent sequence of said sequences reference SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, or a nucleic sequence complementary to said DNA or RNA sequence, said fragment coding for a polypeptide exhibiting apoptic activity with respect to cells of the central nervous system . In a preferred embodiment according to the invention, the nucleotide fragment codes for a polypeptide having a sequence which corresponds at least to the sequence of a fragment of said protein, said fragment comprising at least 6, and advantageously at least 8 acid residues amines, consecutive or non-consecutive, of the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or their equivalent sequences.
Dans un mode de réalisation encore plus préférentiel selon l'invention, le fragment nucléotidique présente une séquence nucléique codant pour au moins un fragment de 16 KD de la protéine selon SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou la séquence nucléotidique complémentaire dudit fragment. Dans un autre mode de réalisation plus préférentiel selon l'invention, le fragment nucléotidique comprend une séquence nucléique choisie parmi les séquences nucléotidiques codant pour la séquence en acides aminés commençant à l'acide aminé 95 et se terminant à l'acide aminé 233, ou la séquence nucléotidique complémentaire dudit fragment.In an even more preferred embodiment according to the invention, the nucleotide fragment has a nucleic sequence coding for at least one 16 KD fragment of the protein according to SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the sequence nucleotide complementary to said fragment. In another more preferred embodiment according to the invention, the nucleotide fragment comprises a nucleic sequence chosen from the nucleotide sequences coding for the amino acid sequence starting at amino acid 95 and ending at amino acid 233, or the nucleotide sequence complementary to said fragment.
Dans encore un autre mode de réalisation selon l'invention, le fragment nucléotique présente une séquence qui code pour la séquence SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou la séquence complémentaire dudit fragment.In yet another embodiment according to the invention, the nucleotic fragment has a sequence which codes for the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the complementary sequence of said fragment.
L'invention concerne également un procédé pour détecter une protéine associée à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, dans un échantillon biologique, caractérisé en ce que l'on met en contact l'échantillon biologique avec un ligand, tel que défini précédemment, spécifique d'un polypeptide en premier objet selon l'invention.The invention also relates to a method for detecting a protein associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a biological sample, characterized in that the biological sample is brought into contact with a ligand, as defined above, specific for a first object polypeptide according to the invention.
L'invention concerne également un procédé pour détecter un anticorps associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, dans un échantillon biologique, caractérisé en ce que l'on met en contact l'échantillon biologique avec un polypeptide tel que défini en premier objet selon l'invention.The invention also relates to a method for detecting an antibody associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a sample. biological, characterized in that the biological sample is brought into contact with a polypeptide as defined in the first object according to the invention.
Dans un mode de réalisation préféré selon l'invention, la maladie dégénérative ou auto-immune est la sclérose en plaques et ses formes éventuellement associées.In a preferred embodiment according to the invention, the degenerative or autoimmune disease is multiple sclerosis and its possibly associated forms.
Dans un autre mode de réalisation préférentiel selon l'invention, l'échantillon biologique est choisi parmi le liquide céphalo-rachidien, l'urine et le sérum.In another preferred embodiment according to the invention, the biological sample is chosen from cerebrospinal fluid, urine and serum.
L'invention concerne également une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique comprenant un polypeptide tel que défini selon l'invention.The invention also relates to a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a polypeptide as defined according to the invention.
L'invention concerne également une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique comprenant un ligand tel que défini précédemment ou un anti-ligand tel que défini précédemment.The invention also relates to a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a ligand as defined above or an anti-ligand as defined above.
L'invention concerne encore une composition diagnostique comprenant un fragment nucléotique complémentaire d'un fragment tel que défini précédemment.The invention also relates to a diagnostic composition comprising a nucleotic fragment complementary to a fragment as defined above.
Enfin, l'invention concerne une composition thérapeutique comprenant un fragment nucléotidique antisens susceptible de s'hybrider au moins partiellement à l'ADN ou l'ARNm codant pour l'expression d'un polypeptide tel que défini selon le premier objet selon lrinvention, ou d'un récepteur tel que défini dans un mode préférentiel selon l'invention.Finally, the invention relates to a therapeutic composition comprising an antisense nucleotide fragment capable of hybridizing at least partially to the DNA or mRNA coding for expression of a polypeptide as defined in the first object according to the invention r , or a receiver as defined in a preferred mode according to the invention.
Les présents inventeurs ont trouvé de manière tout à fait inattendue qu'au moins un fragment de cette protéine ou la protéine était impliqué dans des maladies de type neuro-dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire .The present inventors have unexpectedly found that at least one fragment of this protein or the protein is implicated in diseases of neurodegenerative and / or autoimmune and / or inflammatory type.
Par ailleurs, les présents inventeurs ont mis en évidence l'existence d'un récepteur soluble, tel que défini précédemment, dans le fluide biologique de patients affectés par au moins une des maladies décrites ci-dessus et l'implication dudit récepteur ou de ses fragments dans les pathologies associées.Furthermore, the present inventors have demonstrated the existence of a soluble receptor, as defined above, in the biological fluid of patients affected by at least one of the diseases described above and the involvement of said receptor or its fragments in associated pathologies.
Exemple :Example:
Les inventeurs ont réalisé la séparation et le fractionnement des différents composés contenus dans un pool de LCR de patients SEP, selon les techniques habituelles bien connues de l'homme du métier (élimination des IgG humaines par la protéine G, fractionnement par la charge sur colonne de chromatographie DEAE et séparation par la taille par électrophorèse sur gel SDS-PAGE en une dimension) . Une des fractions provenant de cette analyse systématique a permis de visualiser sur gel en une dimension une bande proteique d'une masse moléculaire apparente comprise entre 15 et 20 KD. Cette bande a été découpée et analysée après électro-transfert sur une membrane de Western-blot. La bande proteique de 15-20 KD a été soumise à digestion par la trypsine et les profils de digestion par la trypsine des protéines contenues dans cette bande ont été analysés par spectrométrie de masse. L'analyse a été effectuée à l'aide de logiciels calibrés sûr des profils peptidiques de protéines connues répertoriées dans les banques de données. Les résultats obtenus montrent que l'un des constituants protéiques de la fraction de 15-20 KD analysée présente un profil de digestion trysique identifiable avec une grande probabilité (probabilité inférieure à 1 pour mille déterminée à partir de l'analyse de données de spectroscopie de masse) à une région d'environ 16 KD (masse moléculaire moyenne de 16165 D) incluse dans la protéine native TRAIL, laquelle présente une masse moléculaire moyenne de 32507 D. Ces éléments ont permis de conclure qu'un fragment d'environ 16 KD de la protéine TRAIL est présent dans le LCR de patients atteints de SEP, voire la protéine TRAIL dans son entier, car ces fragments peuvent être générés par un phénomène de protéolyse naturelle ou induits par une protéolyse post- traductionnelle physiologique ou liée à une pathologie.The inventors carried out the separation and the fractionation of the various compounds contained in a pool of CSF of MS patients, according to the usual techniques well known to those skilled in the art (elimination of human IgG by protein G, fractionation by charge on column DEAE chromatography and size separation by electrophoresis on SDS-PAGE gel in one dimension). One of the fractions coming from this systematic analysis made it possible to visualize on gel in one dimension a protein band of an apparent molecular mass of between 15 and 20 KD. This strip was cut and analyzed after electro-transfer on a Western-blot membrane. The 15-20 KD protein band was subjected to trypsin digestion and the trypsin digestion profiles of the proteins contained in this band were analyzed by mass spectrometry. The analysis was carried out using software calibrated on the peptide profiles of known proteins listed in the databases. The results obtained show that one of the protein constituents of the 15-20 KD fraction analyzed exhibits an identifiable trysic digestion profile with a high probability (probability less than 1 per thousand determined from the analysis of data from mass spectroscopy) at a region of approximately 16 KD (average molecular mass of 16,165 D) included in the native protein TRAIL, which has an average molecular mass of 32,507 D. These elements made it possible to conclude that a fragment of approximately 16 KD of the TRAIL protein is present in the CSF of MS patients, or even the TRAIL protein as a whole, because these fragments can be generated by a phenomenon of natural proteolysis or induced by a physiological or translational post-translational proteolysis pathology.
Il ressort clairement des éléments qui précèdent qu'un fragment de 16 KD de la protéine TRAIL ou la protéine TRAIL inductrice d' apoptose est présent dans le LCR de patients SEP en phase active de la maladie, ce qui en fait un marqueur potentiel de la maladie mais également une cible thérapeutique en vue de contrer les effets toxiques. Il est ainsi possible de marquer l'antigène TRAIL avec un anticorps anti-TRAIL agoniste. Il est par ailleurs possible de bloquer le phénomène d ' apoptose avec un anticorps antagoniste anti-TRAIL ou anti-fragment TRAIL ou de bloquer 1 ' apoptose à l'aide d'un équivalent de la protéine TRAIL ou d'un équivalent d'un fragment de ladite protéine résultant d'une délétion génomique, ledit équivalent se fixant sur le récepteur de surface de la cellule ou son fragment, défini ci-après, en inhibant la formation du complexe naturel.It is clear from the foregoing that a 16 KD fragment of the TRAIL protein or the apoptosis-inducing TRAIL protein is present in the CSF of MS patients in the active phase of the disease, which makes it a potential marker of the disease. disease but also a therapeutic target in order to counter the toxic effects. It is thus possible to label the TRAIL antigen with an anti-TRAIL agonist antibody. It is also possible to block the phenomenon of apoptosis with an antagonistic anti-TRAIL antibody or anti-TRAIL fragment or to block apoptosis using an equivalent of the TRAIL protein or an equivalent of a fragment of said protein resulting from a genomic deletion, said equivalent binding to the cell surface receptor or its fragment, defined below, by inhibiting the formation of the natural complex.
Les inventeurs ont par ailleurs mis en évidence la présence du récepteur soluble de la protéine TRAIL dans le LCR de patients SEP.The inventors have also demonstrated the presence of the soluble receptor of the TRAIL protein in the CSF of MS patients.
Les inventeurs ont réalisé la séparation et le fractionnement des différents composés contenus dans le LCR de patients SEP à partir du même pool que celui utilisé pour la mise en évidence de la protéine TRAIL, selon les techniques habituelles. Une des fractions provenant de cette analyse systématique a permis de visualiser sur gel une bande proteique de masse moléculaire apparente comprise entre 47 et 48 KD. L'analyse par spectrométie de masse de cette protéine, selon la technique décrite par Jens S. Andersen et al. (Electrospray ionization and matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry : Powerful analytical tools in recombinant protein chemistry, Nature Biotechnology, Vol. 14, 449-457 1996)) a permis de montrer qu'il s'agissait d'une protéine transmenbranaire de surface présentant une masse moléculaire moyenne de 47769 D, correspondant à la protéine décrite par Pan G et al., Sciences, Vol. 276, 111-113 (1997) . La bande proteique de 47-48 KD a ensuite été soumise à digestion par la trypsine et les produits de digestion ont été analysés selon la technique de Jens S. Andersen et al. citée précédemment. Les résultats montrent que l'un des constituants protéiques de la fraction de 47-48 KD correspond à un fragment soluble de 19938 D, identifié comme un fragment du récepteur de la protéine TRAIL. Ces résultats ont permis de conclure que ledit récepteur de la protéine TRAIL ou son fragment de 19938 D sont présents, à l'état soluble, dans le LCR de patients atteints de SEP.The inventors carried out the separation and the fractionation of the various compounds contained in the CSF of MS patients from the same pool as that used for the detection of the TRAIL protein, according to the usual techniques. One of the fractions from this systematic analysis made it possible to visualize on gel a protein band of apparent molecular mass between 47 and 48 KD. Mass spectrometry analysis of this protein, according to the technique described by Jens S. Andersen et al. (Electrospray ionization and matrix assisted laser desorption / ionization mass spectrometry: Powerful analytical tools in recombinant protein chemistry, Nature Biotechnology, Vol. 14, 449-457 1996)) made it possible to show that it was a transmenbran protein of surface with an average molecular mass of 47,769 D, corresponding to the protein described by Pan G et al., Sciences, Vol. 276, 111-113 (1997). The 47-48 KD protein band was then subjected to trypsin digestion and the digestion products were analyzed according to the technique of Jens S. Andersen et al. cited above. The results show that one of the protein constituents of the 47-48 KD fraction corresponds to a soluble fragment of 19938 D, identified as a fragment of the receptor for the TRAIL protein. These results made it possible to conclude that said receptor of the TRAIL protein or its fragment of 19938 D are present, in the soluble state, in the CSF of patients suffering from MS.
Il ressort des éléments qui précèdent que ledit récepteur au moins dans une de ses formes solubles ou son fragment est utilisable dans une composition thérapeutique ou prophylactique en vue de contrer l'effet toxique de la protéine TRAIL ou de ses fragments dans une maladie telle que décrite précédemment. Il est ainsi possible de bloquer le phénomène d' apoptose à l'aide d'un anticorps anti- récepteur ou anti-fragment du récepteur qui se fixe sur le récepteur libéré dans le milieu, ou exprimé à la surface de la cellule, et empêche ainsi la formation du complexe naturel. Il est également possible de bloquer 1 ' apoptose à l'aide d'une molécule dérivée dudit récepteur ou de son fragment, résultant d'une délétion génomique, ladite molécule dérivée se fixant alors sur la protéine TRAIL ou son fragment et inhibant la formation du complexe naturel. It appears from the foregoing elements that said receptor at least in one of its soluble forms or its fragment is usable in a therapeutic or prophylactic composition with a view to countering the toxic effect of the TRAIL protein or of its fragments in a disease as described previously. It is thus possible to block the phenomenon of apoptosis using an anti-receptor or anti-receptor fragment antibody which binds to the receptor released in the medium, or expressed on the surface of the cell, and prevents thus the formation of the natural complex. It is also possible to block apoptosis using a molecule derived from said receptor or its fragment, resulting from a genomic deletion, said derivative molecule then binding to the TRAIL protein or its fragment and inhibiting the formation of the natural complex.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'un polypeptide qui présente une séquence correspondant au moins à la séquence primaire d'au moins un fragment d'une protéine, pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, ladite protéine présentant, à l'état natif, une séquence en acides aminés correspondant à la SEQ ID N°: 1, ou une séquence équivalente de ladite séquence de référence SEQ ID N° : 1, ledit polypeptide présentant une activité apoptique vis à vis des cellules du système nerveux central.1. Use of a polypeptide which has a sequence corresponding at least to the primary sequence of at least one fragment of a protein, for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, said protein having, in its native state, an amino acid sequence corresponding to SEQ ID No: 1, or an equivalent sequence of said reference sequence SEQ ID No: 1, said polypeptide having apoptic activity with respect to cells of the central nervous system.
2. Utilisation d'un polypeptide selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente une séquence correspondant au moins à la séquence primaire d'au moins un fragment d'une protéine présentant à l'état natif une séquence en acides aminés correspondant à la SEQ ID N° : 2, ou une séquence équivalente à ladite séquence de référence SEQ ID N° : 2.2. Use of a polypeptide according to claim 1, characterized in that it has a sequence corresponding at least to the primary sequence of at least one fragment of a protein having in the native state a corresponding amino acid sequence to SEQ ID No: 2, or a sequence equivalent to said reference sequence SEQ ID No: 2.
3. Utilisation d'un polypetide selon la revendication 1 ou 2 , caractérisé en ce qu'il présente une séquence qui correspond au moins à la séquence d'un fragment de ladite protéine, ledit fragment comprenant au moins 6, et avantageusement au moins 8 résidus d'acides aminés, consécutifs ou non consécutifs, de la séquence SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou leurs séquences équivalentes .3. Use of a polypetide according to claim 1 or 2, characterized in that it has a sequence which corresponds at least to the sequence of a fragment of said protein, said fragment comprising at least 6, and advantageously at least 8 amino acid residues, consecutive or non-consecutive, of the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or their equivalent sequences.
4. Utilisation d'un polypeptide selon l'une quelconque des revendications 1, 2 ou 3 , caractérisé en ce qu'il présente une séquence qui correspond au moins à la séquence d'un^ fragment de ladite protéine d'un poids moléculaire d'environ 16 KD, ou une séquence équivalente.4. Use of a polypeptide according to any one of claims 1, 2 or 3, characterized in that it has a sequence which corresponds at least to the ^ a sequence fragment of said protein having a molecular weight of about 16 KD, or an equivalent sequence.
5. Utilisation d'un polypeptide selon l'une des revendications 1 à 3 , caractérisé en ce que le polypeptide est choisi parmi les polypeptides comprenant la séquence en acides aminés commençant à l'acide aminé 95 et se terminant à l'acide aminé 233, telle qu'identifiée sous la référence SEQ ID N° : 3, ou une séquence équivalente.5. Use of a polypeptide according to one of claims 1 to 3, characterized in that the polypeptide is chosen from polypeptides comprising the amino acid sequence starting at amino acid 95 and ending at amino acid 233 , as identified under the reference SEQ ID N °: 3, or an equivalent sequence.
6. Utilisation d'un polypeptide selon la revendication 5, caractérisé en ce que sa séquence consiste en la SEQ ID N° : 3, ou une séquence équivalente.6. Use of a polypeptide according to claim 5, characterized in that its sequence consists of SEQ ID No: 3, or an equivalent sequence.
7. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le polypeptide présente une séquence en acides aminés comprenant une séquence choisie parmi SEQ ID N° : 1 et SEQ ID N° : 2, ou une séquence équivalente.7. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the polypeptide has an amino acid sequence comprising a sequence chosen from SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, or an equivalent sequence.
8. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le polypeptide présente une activité antigénique.8. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the polypeptide has antigenic activity.
9. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le polypeptide présente une activité de reconnaissance spécifique du récepteur de surface de la protéine TRAIL.9. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the polypeptide has a specific recognition activity of the surface receptor of the TRAIL protein.
' 10. Utilisation d'un ligand spécifique d'un polypeptide pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, caractérisée en ce que le ligand est choisi parmi le récepteur sous forme soluble de la protéine TRAIL, les fragments sous forme soluble dudit récepteur et les molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments . '10. The use of a ligand specific for a polypeptide to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition for detecting, preventing or treating a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory, characterized in that the ligand is selected from the receptor in soluble form of the protein TRAIL, the fragments in soluble form of said receptor and the molecules derived from said receptor or from said fragments.
11. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que le ligand est le récepteur de la protéine TRAIL présentant une masse moléculaire moyenne de 47769 daltons, ou un fragment dudit récepteur présentant une masse moléculaire moyenne de 19938 daltons, ou leurs molécules dérivées.11. Use according to claim 10, characterized in that the ligand is the receptor for the TRAIL protein having an average molecular weight of 47,769 daltons, or a fragment of said receptor having an average molecular weight of 19,938 daltons, or their derived molecules.
12. Utilisation d'un anti-ligand spécifique d'un ligand lui même spécifique d'un polypeptide tel que défini dans les revendications 1 à 9 pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, caractérisée en ce que 1 ' anti-ligand est choisi parmi les anticorps dirigés contre le récepteur de la protéine TRAIL, les fragments dudit récepteur et les molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments.12. Use of an anti-ligand specific for a ligand itself specific for a polypeptide as defined in claims 1 to 9 for obtaining a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat an associated pathological condition to a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, characterized in that the anti-ligand is chosen from antibodies directed against the TRAIL protein receptor, fragments of said receptor and molecules derived from said receptor or said fragments.
13. Utilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que les anticorps sont dirigés contre la forme soluble du récepteur, de ses fragments ou des molécules dérivées dudit récepteur ou desdits fragments.13. Use according to claim 12, characterized in that the antibodies are directed against the soluble form of the receptor, of its fragments or of molecules derived from said receptor or from said fragments.
14. Utilisation d'au moins un fragment nucléotidique pour obtenir une composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique destinée à détecter, prévenir ou traiter un état pathologique associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, selon laquelle ledit fragment nucléotidique présente une séquence nucléique d'ADN ou ARNm codant pour au moins un fragment d'une protéine selon SEQ ID N°l ou SEQ ID N° : 2, ou une séquence équivalente desdites séquences de référence SEQ ID N° : 1 et SEQ ID N° : 2, ou une séquence nucléique complémentaire de ladite séquence d'ADN ou d'ARN, ledit fragment codant pour un polypeptide présentant une activité apoptique vis à vis des cellules du système nerveux central.14. Use of at least one nucleotide fragment to obtain a diagnostic, prophylactic or therapeutic composition intended to detect, prevent or treat a pathological condition associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, according to which said nucleotide fragment has a DNA or mRNA nucleic sequence coding for at least one fragment of a protein according to SEQ ID No 1 or SEQ ID No: 2, or an equivalent sequence of said reference sequences SEQ ID No: 1 and SEQ ID No: 2, or a nucleic sequence complementary to said DNA or RNA sequence, said fragment coding for a polypeptide exhibiting apoptic activity with respect to cells of the system central nervous.
15. Utilisation d'un fragment nucléotidique selon la revendication 14, caractérisé en ce qu'il code pour un polypeptide tel que défini dans la revendication 3.15. Use of a nucleotide fragment according to claim 14, characterized in that it codes for a polypeptide as defined in claim 3.
16. Utilisation selon la revendication 14 ou 15, caractérisé en ce que le fragment nucléotidique présente une séquence nucléique codant pour au moins un fragment de 16 KD de la protéine selon SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou la séquence nucléotidique complémentaire dudit fragment.16. Use according to claim 14 or 15, characterized in that the nucleotide fragment has a nucleic sequence coding for at least one 16 KD fragment of the protein according to SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the nucleotide sequence complementary to said fragment.
17. Utilisation selon l'une des revendications 14 à 16, caractérisé en ce que le fragment nucléotidique comprend une séquence nucléique choisie parmi les séquences nucléotidiques codant pour la séquence en acides aminés commençant à l'acide aminé 95 et se terminant à l'acide aminé 233, ou la séquence nucléotidique complémentaire dudit fragment.17. Use according to one of claims 14 to 16, characterized in that the nucleotide fragment comprises a nucleic sequence chosen from the nucleotide sequences coding for the amino acid sequence starting with amino acid 95 and ending with acid amino 233, or the nucleotide sequence complementary to said fragment.
18. Utilisation selon l'une des revendications 14 à 17, caractérisé en ce que le fragment nucléotique présente une séquence qui code pour la séquence SEQ ID N° : 1 ou SEQ ID N° : 2, ou la séquence complémentaire dùdit fragment.18. Use according to one of claims 14 to 17, characterized in that the nucleotic fragment has a sequence which codes for the sequence SEQ ID No: 1 or SEQ ID No: 2, or the complementary sequence of said fragment.
19. Procédé pour détecter une protéine associée à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, dans un échantillon biologique, caractérisé en ce que l'on met en contact l'échantillon biologique avec un ligand, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 10 et 11, spécifique d'un polypeptide tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 9.19. Method for detecting a protein associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a biological sample, characterized in that the biological sample is brought into contact with a ligand, as defined in any of claims 10 and 11, specific for a polypeptide as defined in any one of claims 1 to 9.
20. Procédé pour détecter un anticorps associé à une maladie dégénérative et/ou auto-immune et/ou inflammatoire, dans un échantillon biologique, caractérisé en ce que l'on met en contact l'échantillon biologique avec un polypeptide tel que défini dans l'une des revendications 1 à 9.20. Method for detecting an antibody associated with a degenerative and / or autoimmune and / or inflammatory disease, in a biological sample, characterized in that the biological sample is brought into contact with a polypeptide as defined in 'one of claims 1 to 9.
21. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la maladie dégénérative ou auto-immune est la sclérose en plaques et ses formes éventuellement associées.21. Method according to one of the preceding claims, characterized in that the degenerative or autoimmune disease is multiple sclerosis and its possibly associated forms.
22. Procédé selon la revendication 19, caractérisé en ce que l'échantillon biologique est choisi parmi le liquide céphalo-rachidien, l'urine et le sérum.22. Method according to claim 19, characterized in that the biological sample is chosen from cerebrospinal fluid, urine and serum.
23. Composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique comprenant un polypeptide tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 9.23. A diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a polypeptide as defined in any one of claims 1 to 9.
24. Composition diagnostique, prophylactique ou thérapeutique comprenant un ligand tel que défini dans l'une des revendications 10 et 11 ou un anti-ligand tel que défini dans les revendications 12 et 13.24. A diagnostic, prophylactic or therapeutic composition comprising a ligand as defined in one of claims 10 and 11 or an anti-ligand as defined in claims 12 and 13.
25. Composition diagnostique comprenant un fragment nucléotique complémentaire d'un fragment tel que défini dans l'une quelconque des revendications 14 à 18.25. A diagnostic composition comprising a nucleotic fragment complementary to a fragment as defined in any one of claims 14 to 18.
26. Composition thérapeutique comprenant un fragment nucléotidique antisens susceptible de s'hybrider au moins partiellement à l'ADN ou l'ARNm codant pour l'expression d'un polypeptide tel que défini selon l'une quelconque des_ revendications 1 à 19 ou d'un récepteur tel que défini selon l'une quelconque des revendication 10 à 12. 26. A therapeutic composition comprising an antisense nucleotide fragment capable of at least partially hybridizing to DNA or mRNA coding for the expression of a polypeptide as defined according to one any of claims 1 to 19 or a receiver as defined in any of claims 10 to 12.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6284236B1 (en) 1995-06-29 2001-09-04 Immunex Corporation Cytokine that induces apoptosis
EP1870464A2 (en) * 1999-06-02 2007-12-26 Genentech, Inc. Methods and compositions for inhibiting neoplastic cell growth
US9388230B2 (en) 2010-09-28 2016-07-12 Kahr Medical(2005) Ltd Compositions and methods for treatment of hematological malignancies

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU766984B2 (en) * 1999-09-30 2003-10-30 Trustees Of The University Of Pennsylvania, The Trail: an inhibitor of autoimmune inflammation and cell cycle progression
DE10054279A1 (en) * 2000-11-02 2002-05-16 Apotech Res & Dev Ltd Use of ligands from death receptors or RIP to trigger caspase-independent cell death and compounds to inhibit caspase-independent cell death
DE60209832T2 (en) * 2002-05-29 2007-01-25 Charité - Universitätsmedizin Berlin A method of identifying Ifn-beta responsive multiple sclerosis patients by determining the expression of Trail

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997001633A1 (en) * 1995-06-29 1997-01-16 Immunex Corporation Cytokine that induces apoptosis
WO1997033899A1 (en) * 1996-03-14 1997-09-18 Human Genome Sciences, Inc. Apoptosis inducing molecule i
WO1997046686A2 (en) * 1996-06-07 1997-12-11 Amgen Inc. Tumor necrosis factor-related polypeptide

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997001633A1 (en) * 1995-06-29 1997-01-16 Immunex Corporation Cytokine that induces apoptosis
WO1997033899A1 (en) * 1996-03-14 1997-09-18 Human Genome Sciences, Inc. Apoptosis inducing molecule i
WO1997046686A2 (en) * 1996-06-07 1997-12-11 Amgen Inc. Tumor necrosis factor-related polypeptide

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BELLIVEAU J ET AL: "Presence of the cytokine, APO-2L ( TRAIL ), in the cerebrospinal fluid of multiple sclerosis patients.", 27TH ANNUAL MEETING OF THE SOCIETY FOR NEUROSCIENCE, NEW ORLEANS, LOUISIANA, USA, OCTOBER 25-30, 1997. SOCIETY FOR NEUROSCIENCE ABSTRACTS 23 (1-2). 1997. 2207, XP002082922 *
PAN G ET AL: "THE RECEPTOR FOR THE CYTOTOXIC LIGAND TRAIL", SCIENCE, vol. 276, no. 5306, 4 April 1997 (1997-04-04), pages 111 - 113, XP000676684 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6284236B1 (en) 1995-06-29 2001-09-04 Immunex Corporation Cytokine that induces apoptosis
US6521228B1 (en) 1995-06-29 2003-02-18 Immunex Corporation Antibodies directed against trail
US7736637B2 (en) 1995-06-29 2010-06-15 Immunex Corporation Use of TRAIL polypeptides to induce apoptosis
US7972812B2 (en) 1995-06-29 2011-07-05 Immunex Corporation DNA encoding a soluble fragment of TRAIL polypeptide
EP1870464A2 (en) * 1999-06-02 2007-12-26 Genentech, Inc. Methods and compositions for inhibiting neoplastic cell growth
EP1870464A3 (en) * 1999-06-02 2008-03-12 Genentech, Inc. Methods and compositions for inhibiting neoplastic cell growth
US9388230B2 (en) 2010-09-28 2016-07-12 Kahr Medical(2005) Ltd Compositions and methods for treatment of hematological malignancies
US10000549B2 (en) 2010-09-28 2018-06-19 Kahr Medical Ltd. Compositions and methods for treatment of hematological malignancies

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