UA85641U - Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver - Google Patents

Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver Download PDF

Info

Publication number
UA85641U
UA85641U UAU201307005U UAU201307005U UA85641U UA 85641 U UA85641 U UA 85641U UA U201307005 U UAU201307005 U UA U201307005U UA U201307005 U UAU201307005 U UA U201307005U UA 85641 U UA85641 U UA 85641U
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
liver
metastases
suspension
metastasis
malignant tumors
Prior art date
Application number
UAU201307005U
Other languages
Russian (ru)
Ukrainian (uk)
Inventor
Лариса Михайловна Скивка
Александр Григорьевич Федорчук
Людмила Михайловна Гриценко
Владимир Константинович Позур
Сергей Александрович Тихомиров
Original Assignee
Киевский Национальный Университет Имени Тараса Шевченко
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Киевский Национальный Университет Имени Тараса Шевченко filed Critical Киевский Национальный Университет Имени Тараса Шевченко
Priority to UAU201307005U priority Critical patent/UA85641U/en
Publication of UA85641U publication Critical patent/UA85641U/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

A method for modeling of malignant tumors to the liver provides a suspension of tumor cells in Hanks solution or 199 medium and its inoculation with laboratory animals. The tumor cell suspension is previously standardized to a concentration in the range of 8'106-2 cells/ml is administered intrasplenicly.

Description

Корисна модель належить до галузі медицини та експериментальної онкології, а зокрема до способів моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку і може бути використана для розробки способів медикаментозної дії на метастази і метастазування та дослідження нових лікарських засобів для лікування і профілактики злоякісних пухлин та їх метастазування.The useful model belongs to the field of medicine and experimental oncology, and in particular to the methods of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver and can be used for the development of methods of drug action on metastases and metastasis and research of new drugs for the treatment and prevention of malignant tumors and their metastasis.

Відомий спосіб моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, який передбачає отримання суспензії пухлинних клітин в розчині Хенкса або середовищі 199 та її інокуляцію лабораторним тваринам. (А.М. Козлов, 3.П. Софьина. Частота, сроки и тип метастазирования различньїх перевиваємьх опухолей мьшей. Бюлетень зкспериментальной биологиий и медициньі - 1978, Мо 12, с. 715-718). Згідно зі способом, пухлинну тканину аденокарциноми товстої кишки АКАТОЛ подрібнювали ножицями до гомогенної консистенції, розбавляли середовищем Мо 199 у співвідношенні 1:10 їі 0,5 мл одержаної суспензії інокулювали підшкірно в область пахвової западини мишам-самцям лінії ВАЇ-В/с. Аутопсійний матеріал досліджувався тільки макроскопічним методом. Метастази в органах визначались візуально. Для визначення термінів метастазування був використаний метод, пов'язаний з видаленням первинного пухлинного вузла в різні терміни після перещеплення.There is a known method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver, which involves obtaining a suspension of tumor cells in Hanks' solution or medium 199 and its inoculation into laboratory animals. (A.M. Kozlov, 3.P. Sof'ina. Frequency, timing and type of metastases of various regrowth tumors of mosses. Bulletin of experimental biology and medicine - 1978, Mo 12, pp. 715-718). According to the method, colon adenocarcinoma tumor tissue ACATOL was chopped with scissors to a homogeneous consistency, diluted with Mo 199 medium in a ratio of 1:10, and 0.5 ml of the obtained suspension was inoculated subcutaneously into the axillary region of male mice of the VAY-V/s line. Autopsy material was examined only by the macroscopic method. Metastases in organs were determined visually. The method associated with the removal of the primary tumor node at different times after transplantation was used to determine the timing of metastasis.

Недоліком вказаного способу є низький відсоток лабораторних тварин з метастазами у печінці, внаслідок метастазування аденокарциноми товстої кишки АКАТОЛ за змішаним типом.The disadvantage of this method is the low percentage of laboratory animals with metastases in the liver, due to the metastases of adenocarcinoma of the large intestine ACATOL of the mixed type.

Зі 100 95 тварин виразні метастази в печінці виявлялись лише у 60 95 тварин. Ще одним недоліком способу є його довготривалість, зумовлена необхідністю проведення серійного пасажування іп мімо для набуття цією пухлиною здатності утворювати метастази в печінці. Без цього аденокарцинома товстої кишки АКАТОЛ метастазує за лімфогенним типом у регіонарні і віддалені лімфовузли.Out of 100 95 animals, clear metastases in the liver were detected only in 60 95 animals. Another disadvantage of the method is its long duration, due to the need to carry out serial passage of IP mimo in order for this tumor to acquire the ability to form metastases in the liver. Without this adenocarcinoma of the large intestine, ACATOL metastasizes according to the lymphogenic type in regional and distant lymph nodes.

Більш близьким до запропонованої корисної моделі є технічне рішення, вибране як найближчий аналог, спосіб моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, який передбачає отримання суспензії пухлинних клітин в розчині Хенкса або середовищі 199 та її інокуляцію лабораторним тваринам (Е.В. Фадеева. Зкспериментальная модель меланоми Ніби методьі иммунотерапии. ГОУ ВПО "Пермская государственная медицинская академия им. акад.Closer to the proposed useful model is the technical solution chosen as the closest analogue, a method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver, which involves obtaining a suspension of tumor cells in Hanks’ solution or medium 199 and its inoculation into laboratory animals (E.V. Fadeeva. Experimental model of melanoma As if immunotherapy methods. GOU VPO "Perm State Medical Academy named after Acad.

Е.А. Вагнера Росздрава" Пермь, Россия). Згідно зі способом меланома В16 перещеплюється на самицях і самцях лінії мишей С57Віє шляхом підшкірного або внутрішньочеревного введення 0,5E.A. Wagner Roszdrav" Perm, Russia). According to the B16 melanoma method, it is transplanted into females and males of the C57Vie line of mice by subcutaneous or intraperitoneal injection of 0.5

Зо мл суспензії пухлинної тканини в розчині Хенкса або середовищі 199 (1:10).Three ml of tumor tissue suspension in Hanks' solution or medium 199 (1:10).

Недоліком вказаного способу є низький відсоток лабораторних тварин з метастазами у печінці, внаслідок підшкірного або внутрішньочеревного введення нестандартизованої суспензії пухлинних клітин лабораторним тваринам. Зі 100 95 тварин виразні метастази виявлялись переважно в легенях у 90 95 тварин і в печінці - у 40 95 тварин.The disadvantage of this method is the low percentage of laboratory animals with metastases in the liver, as a result of subcutaneous or intraperitoneal administration of a non-standardized suspension of tumor cells to laboratory animals. Out of 100 95 animals, obvious metastases were detected mainly in the lungs in 90 95 animals and in the liver - in 40 95 animals.

В основу корисної моделі поставлена задача створити спосіб моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, який за рахунок стандартизації суспензії пухлинних клітин та нового способу інокуляції суспензії лабораторним тваринам забезпечив би спрямоване метастазування злоякісних пухлин у печінку у 100 95 лабораторних тварин у короткий термін.The useful model is based on the task of creating a method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver, which, due to the standardization of the suspension of tumor cells and a new method of inoculation of the suspension in laboratory animals, would ensure the directed metastasis of malignant tumors in the liver in 100 95 laboratory animals in a short period of time.

Поставлена задача вирішується тим, що в способі моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, який включає отримання суспензії пухлинних клітин в розчині Хенкса або середовищі 199 та її інокуляцію лабораторним тваринам, згідно з корисною моделлю, суспензію пухлинних клітин одержують з меланоми В16б, клітинам якої властивий гематогенний шлях метастазування, стандартизують до концентрації в діапазоні 2-8х105 клітин/мл для підрахунку кількості пухлинних клітин на тварину, що забезпечує індивідуальну варіабельність показників пухлинного росту і відтворюваність результатів досліджень, а інокуляцію пухлинних клітин здійснюють внутрішньоселезінковим введенням, яке завдяки існуванню судинного сполучення між печінкою і селезінкою (воротна вена) забезпечує спрямоване метастатичне поширення пухлини у короткий термін.The task is solved by the fact that in the method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver, which includes obtaining a suspension of tumor cells in Hanks' solution or medium 199 and its inoculation into laboratory animals, according to a useful model, the suspension of tumor cells is obtained from melanoma B16b, the cells of which are characterized by hematogenous the path of metastasis, standardized to a concentration in the range of 2-8x105 cells/ml for counting the number of tumor cells per animal, which ensures individual variability of tumor growth indicators and reproducibility of research results, and inoculation of tumor cells is carried out by intrasplenic injection, which due to the existence of a vascular connection between the liver and spleen (portal vein) provides directed metastatic spread of the tumor in a short time.

Приклад 1:Example 1:

Суспензію пухлинних клітин для інокуляції лабораторним тваринам одержують шляхом культивування клітин меланоми В16 іп міго (Культура животньїх клеток. Методь / (пер.с англ. / под ред. Р. Фрешни)|. - М.: Мир, 1989. - 333 с.) в Ошбессо тодаійеа Еадіе тедішт (ОМЕМ, Зідта) додають 10 95 сироватки ембріонів телят (ЕТС, бідта), пеніциліну (110 О/тп/) та стрептоміцину (100 Ші/ті) при 37 "С в атмосфері з 5 956 СО». На наступному етапі моделювання суспензію пухлинних клітин стандартизують до концентрації 5х105 клітин/мл, і вводять 100 мкл з концентрацією 5х109 клітин/мл (загальна кількість пухлинних клітин на тварину - 5х105) під капсулу нижньої третини селезінки на глибину 0,5 мм мишам лінії С57Віб. Появу метастазів у печінці реєструють на 10-14 добу після перещеплення. На 14 добу метастази у печінці виявляють у 100 95 тварин. Показники пухлинного росту і виживаності тварин після бо внутрішньоселезінкового перещеплення меланоми В16 наведено у таблиці 1.A suspension of tumor cells for inoculation of laboratory animals is obtained by cultivating melanoma cells B16 and migo (Culture of animal cells. Method / (per.s. English / under the editorship of R. Freshny)|. - M.: Mir, 1989. - 333 p. ) in Oshbesso todaiye Eadiye tedisht (OMEM, Zidta) add 10 95 calf embryo serum (ETS, bidta), penicillin (110 O/tp/) and streptomycin (100 Shi/ti) at 37 "C in an atmosphere with 5 956 CO" At the next stage of modeling, the suspension of tumor cells is standardized to a concentration of 5x105 cells/ml, and 100 μl with a concentration of 5x109 cells/ml (the total number of tumor cells per animal is 5x105) is injected under the capsule of the lower third of the spleen to a depth of 0.5 mm to mice of the C57Vib line . The appearance of metastases in the liver is recorded on the 10-14th day after transplantation. On the 14th day, metastases in the liver are detected in 100 95 animals. The indicators of tumor growth and survival of animals after intrasplenic transplantation of B16 melanoma are shown in Table 1.

Таблиця 1 (Кількістьживихтварин./////77777777111111 201120 | 20 | 6 НВ(Table 1 (Number of live animals./////77777777111111 201120 | 20 | 6 HB(

Кількістьтваринз метастазами, 96/10 10175 | 100 | 100Number of animals with metastases, 96/10 10175 | 100 | 100

Кількістьметастазівупечінці 1 0 / 234ж34 | 87-50 | 119,5:83 (Кількістьметастазівулегеняхї//-: 0 1.0 | щЩ 0 | 0 (Кількістьметастазівуіншихорганах8ї | 0 | 0 | 0 / 0The number of metastases in the liver 1 0 / 234zh34 | 87-50 | 119.5:83 (Number of metastases in lungs//-: 0 1.0 | ЩЩ 0 | 0 (Number of metastases in other organs 8th | 0 | 0 | 0 / 0

Приклад 2:Example 2:

Суспензію пухлинних клітин для інокуляції лабораторним тваринам одержують з пухлинноїA suspension of tumor cells for inoculation of laboratory animals is obtained from the tumor

Б тканини сингенних тварин. Для цього фрагменти пухлинної тканини мишей С57Вів без ділянок некрозу видаляють хірургічним шляхом, промивають стерильним фізіологічним розчином, подрібнюють ножицями і гомогенізують до утворення клітинної суспензії. Отриманий гомогенат пухлинної тканини промивають центрифугуванням для видалення клітинного дебрису, готують суспензію пухлинних клітин у розчині Хенкса або середовищі 199 і стандартизують до концентрації 5х105 клітин/мл.B tissues of syngeneic animals. To do this, fragments of tumor tissue of C57Viv mice without areas of necrosis are surgically removed, washed with sterile physiological solution, chopped with scissors and homogenized to form a cell suspension. The resulting tumor tissue homogenate is washed by centrifugation to remove cellular debris, a suspension of tumor cells is prepared in Hanks' solution or medium 199 and standardized to a concentration of 5x105 cells/ml.

На наступному етапі моделювання 100 мкл суспензії пухлинних клітин з концентрацієюAt the next stage of simulation, 100 μl of tumor cell suspension with concentration

Бх106 клітин/мл (загальна кількість пухлинних клітин на тварину - 5х105) вводять під капсулу нижньої третини селезінки на глибину 0,5 мм мишам лінії С57Вівб. Появу метастазів у печінці реєструють на 10-14 добу після перещеплення. На 14 добу метастази у печінці виявляють у 100Bx106 cells/ml (total number of tumor cells per animal - 5x105) are injected under the capsule of the lower third of the spleen to a depth of 0.5 mm to mice of the C57Vivb line. The appearance of metastases in the liver is recorded 10-14 days after transplantation. On the 14th day, metastases in the liver are detected in 100

Фо тварин. Показники пухлинного росту і виживаності тварин після внутрішньоселезінкового перещеплення меланоми В16 наведено у таблиці 2.Fo animals. Tumor growth and animal survival rates after intrasplenic B16 melanoma transplantation are shown in Table 2.

Таблиця 2 (Кількістьживихтварин.//////77777 | 20 | 201.20 | 6Table 2 (Number of live animals.//////77777 | 20 | 201.20 | 6

Кількістьтварин з метастазами, 96 | 0 | 75 | 700 | ло ЖNumber of animals with metastases, 96 | 0 | 75 | 700 | lo Zh

Кількістьметастазівупечінці | 0 | 24и1х7,2 | 87,9.411,9 | 1203120The number of metastases in the liver 0 | 24x1x7.2 | 87.9.411.9 | 1203120

Кількістьметастазівулегенях.ї | 0 | 0 / 0 | 0 (Кількістьметастазівуіншихорганах8ї | 0 | 0 | 0 | 0The number of metastases in the lungs 0 | 0 / 0 | 0 (Number of metastases in other organs 8th | 0 | 0 | 0 | 0

Печінка являє собою найбільш поширену локалізацію гематогенних метастазів злоякісних новоутворень, не залежно від того чи дренуються вони судинами системи воротної вени або інших судин великого кола кровообігу. Метастази в печінці виявляють приблизно у однієї третини усіх хворих на рак. При цьому у хворих на рак молочної залози, рак легені, товстої кишки або шлунка метастази у печінці виявляються у 50 95 пацієнтів. Після перелічених видів раку наступними за частотою метастазування у печінку є рак підшлункової залози і стравоходу, а також меланома.The liver is the most common localization of hematogenous metastases of malignant neoplasms, regardless of whether they are drained by the vessels of the portal vein system or other vessels of the great blood circulation. Liver metastases are found in approximately one third of all cancer patients. At the same time, liver metastases are found in 50-95 patients with breast cancer, lung cancer, colon cancer or stomach cancer. After the listed types of cancer, the following in frequency of liver metastasis are pancreatic and esophageal cancer, as well as melanoma.

Отже, порівняно з відомими способами, спосіб моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, що заявляється, дозволяє отримати модельну систему пухлинного росту з первинним пухлинним вузлом у селезінці і метастазами у печінці у 100 95 лабораторних тварин, що у 2 рази більше ніж в найближчому аналогу, і скоротити тривалість дослідженняTherefore, compared to known methods, the proposed method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver allows obtaining a model system of tumor growth with a primary tumor node in the spleen and metastases in the liver in 100 95 laboratory animals, which is 2 times more than in the closest analogue. and shorten the duration of the study

Зо ефективності протипухлинних засобів загального призначення та таргетних протипухлинних засобів, спрямованих на лікування і профілактику метастазування злоякісних новоутворень у печінку у два рази.From the effectiveness of anticancer drugs of general purpose and targeted anticancer drugs aimed at the treatment and prevention of metastasis of malignant neoplasms in the liver twice.

Claims (1)

ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІUSEFUL MODEL FORMULA Спосіб моделювання метастазування злоякісних пухлин у печінку, який передбачає отримання суспензії пухлинних клітин в розчині Хенкса або середовищі 199 та її інокуляцію лабораторним тваринам, який відрізняється тим, що суспензію пухлинних клітин, попередньо стандартизовану до концентрації в діапазоні 2-8х105 клітин/мл, вводять внутрішньоселезінково.The method of modeling the metastasis of malignant tumors in the liver, which involves obtaining a suspension of tumor cells in Hanks' solution or medium 199 and its inoculation into laboratory animals, which differs in that the suspension of tumor cells, pre-standardized to a concentration in the range of 2-8x105 cells/ml, is injected intrasplenically .
UAU201307005U 2013-06-04 2013-06-04 Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver UA85641U (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU201307005U UA85641U (en) 2013-06-04 2013-06-04 Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU201307005U UA85641U (en) 2013-06-04 2013-06-04 Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA85641U true UA85641U (en) 2013-11-25

Family

ID=52285158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAU201307005U UA85641U (en) 2013-06-04 2013-06-04 Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA85641U (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2799132C1 (en) * 2023-03-28 2023-07-04 федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of creating liver cancer model on immunodeficient mice

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2799132C1 (en) * 2023-03-28 2023-07-04 федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of creating liver cancer model on immunodeficient mice

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102184473B1 (en) Method for providing vascular system in biological tissue
Manzotti et al. Importance of orthotopic implantation for human tumors as model systems: relevance to metastasis and invasion
Fidler Rationale and methods for the use of nude mice to study the biology and therapy of human cancer metastasis
Giavazzi et al. Metastatic behavior of tumor cells isolated from primary and metastatic human colorectal carcinomas implanted into different sites in nude mice
Daphu et al. In vivo animal models for studying brain metastasis: value and limitations
CN103212071B (en) Stem cell fusion model of carcinogenesis
An et al. Development of a high metastatic orthotopic model of human renal cell carcinoma in nude mice: benefits of fragment implantation compared to cell-suspension injection
Fidler Host and tumour factors in cancer metastasis
CN102766600A (en) Application of esophageal squamous cell carcinoma primary tumor line CH-H-2
CN114698595A (en) Modeling method of tumor in-situ tumor animal model and tumor in-situ tumor animal model
CN101856496B (en) Placenta stem-cell anti-tumor vaccine, preparation method and application thereof
CN104894072A (en) Preparation method and application of autologous natural killer cell proliferation
RU2615908C1 (en) Method for murine melanoma lymphatic and hematogenous metastasis b16 simulation for nonlinear white rats
Nicolson Cancer metastasis
UA85641U (en) Method for simulation of malignant tumors metastasis in liver
Scotlandi et al. Murine model for skeletal metastases of Ewing's sarcoma
CN108853123A (en) Application of the aspirin in colon cancerous precaution or treatment
Palacios-Acedo et al. Cancer animal models in thrombosis research
CN110177868A (en) Method for cancer stem cell (CSC) amplification
Nunez-Olle et al. In vivo assessment of metastatic cell potential in prostate cancer
RU2750127C1 (en) A method for modeling the primary multiple growth of malignant tumors with the suppression of one tumor by another in the conditions of primary immunodeficiency
RU2538243C1 (en) Method for simulating liver metastases experimentally
CN114196617B (en) Organ-specific breast cancer metastasis model, and establishment method and application thereof
JP6436669B2 (en) Uterine sarcoma metastasis model animal
RU2725273C1 (en) Method of human pancreatic neuroendocrine tumor fragment transplantation into immunodeficiency mice pancreatic gland