UA80111C2 - Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies (variants) - Google Patents
Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies (variants) Download PDFInfo
- Publication number
- UA80111C2 UA80111C2 UA20040806943A UA20040806943A UA80111C2 UA 80111 C2 UA80111 C2 UA 80111C2 UA 20040806943 A UA20040806943 A UA 20040806943A UA 20040806943 A UA20040806943 A UA 20040806943A UA 80111 C2 UA80111 C2 UA 80111C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- composition according
- liposomes
- groups
- disease
- bodies
- Prior art date
Links
- XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N Glycerol-phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.OCC(O)CO XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 64
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 170
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 106
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 59
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 36
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 claims description 54
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 53
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 49
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 47
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 34
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 22
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 17
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 16
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 13
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 11
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 10
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 8
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 claims description 7
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims description 7
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims description 7
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 7
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 claims description 6
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 claims description 5
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 claims description 5
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 5
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 claims description 5
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 claims description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims description 4
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 claims description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 claims description 3
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 3
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 claims description 3
- 206010044688 Trisomy 21 Diseases 0.000 claims description 3
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010047281 Ventricular arrhythmia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 3
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000002455 vasospastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010034620 Peripheral sensory neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000029033 Spinal Cord disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010049418 Sudden Cardiac Death Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005518 mononeuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 claims description 2
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 claims description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005572 sensory peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims 2
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 claims 2
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 claims 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 abstract description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002669 organ and tissue protective effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 48
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 48
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 34
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 description 28
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 26
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- -1 diphosphate ethers Chemical class 0.000 description 14
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 10
- 230000008753 endothelial function Effects 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 8
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 8
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 8
- 206010014025 Ear swelling Diseases 0.000 description 7
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 230000027928 long-term synaptic potentiation Effects 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Natural products CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 4
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 4
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 3
- 208000036110 Neuroinflammatory disease Diseases 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 230000000435 effect on ear Effects 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 3
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 3
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-M linolenate Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-M 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 2
- LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C([N+]([O-])=O)=C1 LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-M Arachidonate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC([O-])=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-M 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 2
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 2
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 2
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-M behenate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001947 dentate gyrus Anatomy 0.000 description 2
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000036749 excitatory postsynaptic potential Effects 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N halothane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Br BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003132 halothane Drugs 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 210000001871 perforant pathway Anatomy 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 2
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003956 synaptic plasticity Effects 0.000 description 2
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 2
- QZZGJDVWLFXDLK-UHFFFAOYSA-M tetracosanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O QZZGJDVWLFXDLK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- FHYAUNJNVMGZQN-NHCUHLMSSA-N (2r,3r)-5-iodo-3-(4-phenylpiperidin-1-yl)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol Chemical compound C1CN([C@@H]2CC3=C(I)C=CC=C3C[C@H]2O)CCC1C1=CC=CC=C1 FHYAUNJNVMGZQN-NHCUHLMSSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-M 9-cis,12-cis-Octadecadienoate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-M 0.000 description 1
- 208000000884 Airway Obstruction Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100023962 Bifunctional arginine demethylase and lysyl-hydroxylase JMJD6 Human genes 0.000 description 1
- 241000283725 Bos Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 229910004709 CaSi Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 101150000569 DNA-M gene Proteins 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 102100024737 Deoxynucleotidyltransferase terminal-interacting protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102000017930 EDNRB Human genes 0.000 description 1
- 101150001833 EDNRB gene Proteins 0.000 description 1
- 244000078127 Eleusine coracana Species 0.000 description 1
- 235000013499 Eleusine coracana subsp coracana Nutrition 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000626071 Homo sapiens Deoxynucleotidyltransferase terminal-interacting protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101100125155 Homo sapiens HUNK gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031449 Hormonally up-regulated neu tumor-associated kinase Human genes 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000087799 Koma Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004302 Microvascular Angina Diseases 0.000 description 1
- 208000026018 Microvascular coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 1
- 241001079606 Paches Species 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920002614 Polyether block amide Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 241000159610 Roya <green alga> Species 0.000 description 1
- 241000168254 Siro Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- 102100024553 Telomerase protein component 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 1
- 231100000230 acceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N alstonine Natural products C1=CC2=C3C=CC=CC3=NC2=C2N1C[C@H]1[C@H](C)OC=C(C(=O)OC)[C@H]1C2 WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229940114078 arachidonate Drugs 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940116224 behenate Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004637 cellular stress Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 231100000481 chemical toxicant Toxicity 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000010217 densitometric analysis Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfoxide Natural products CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical group OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- ZUBDGKVDJUIMQQ-ZTNLKOGPSA-N endothelin i Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-ZTNLKOGPSA-N 0.000 description 1
- 210000001353 entorhinal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 230000000297 inotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 229940049918 linoleate Drugs 0.000 description 1
- 229940040452 linolenate Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012907 medicinal substance Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 1
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940105132 myristate Drugs 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000003891 oxalate salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003899 penis Anatomy 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- WRLGYAWRGXKSKG-UHFFFAOYSA-M phenobarbital sodium Chemical compound [Na+].C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC([O-])=NC1=O WRLGYAWRGXKSKG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000004633 phorbol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002644 phorbol ester Substances 0.000 description 1
- 108010077613 phosphatidylserine receptor Proteins 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 239000005015 poly(hydroxybutyrate) Substances 0.000 description 1
- 229920000218 poly(hydroxyvalerate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002463 poly(p-dioxanone) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 239000000622 polydioxanone Substances 0.000 description 1
- 229920001855 polyketal Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006324 polyoxymethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 235000002079 ragi Nutrition 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical class OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000006442 vascular tone Effects 0.000 description 1
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 208000003663 ventricular fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 206010047302 ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000007279 water homeostasis Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід стосується тривимірних синтетичних і напівсинтетичних композицій, що мають біологічну активність, 2 іх застосування у лікуванні і/або профілактиці різних захворювань у ссавців. Зокрема, винахід стосується препаратів і областей застосування синтетичних і напівсинтетичних тіл, які після введення у тіло пацієнта забезпечують сприятливі протизапальні, органозахисні і імунорегуляторні ефекти. Винахід також стосується способів лікування і композицій для полегшення запальних і аутоїмунних захворювань і їх симптомів.The invention relates to three-dimensional synthetic and semi-synthetic compositions having biological activity, 2 their use in the treatment and/or prevention of various diseases in mammals. In particular, the invention relates to preparations and areas of application of synthetic and semi-synthetic bodies, which after introduction into the patient's body provide favorable anti-inflammatory, organ protective and immunoregulatory effects. The invention also relates to methods of treatment and compositions for alleviating inflammatory and autoimmune diseases and their symptoms.
Професійні антиген-представляючі клітини (АРСз5), включаючи дендритні клітини (ОС) і макрофаги (Мр), 70 активно захоплюють і перетравлюють антигени (Адз), уламки клітин і видаляють інфекційні організми і вмираючі клітини, включаючи залишки вмираючих клітин. Під час цього процесу АРСз можуть стимулювати вироблення домінованих відповідей прозапальних цитокінів ТИ! (11-12, 1-1, ІМЕ-Г, ТМЕ-А і т.д.) або регуляторних цитокінів ТИ2/ТАЗ (таких як 1-10, ТОР-В, 1/-4 і т.д.); у залежності від природи антигена (Ад) або фагоцитозного матеріалу і рівня зрілості/активації АРС. 12 АРС видаляють уламки клітин, частина з яких утворені з клітинних мембран власного організму, частина - з клітин бактеріальних і паразитичних інфекцій і симбіотичних організмів, таких як кишкові бактерії. Тоді як деякі з цих клітинних уламків ініціюють прозапальну відповідь, інші ініціюють захисну і протизапальну відповідь.Professional antigen-presenting cells (APCs), including dendritic cells (DCs) and macrophages (Mp), 70 actively capture and digest antigens (ADs), cell debris, and remove infectious organisms and dying cells, including remnants of dying cells. During this process, ARS can stimulate the production of dominated responses of pro-inflammatory cytokines YOU! (11-12, 1-1, IME-G, TME-A, etc.) or regulatory cytokines TI2/TAZ (such as 1-10, TOR-B, 1/-4, etc.); depending on the nature of the antigen (Ad) or phagocytosed material and the level of maturity/activation of ARS. 12 ARS remove cell debris, some of which are formed from the cell membranes of the body's own body, some from cells of bacterial and parasitic infections and symbiotic organisms, such as intestinal bacteria. While some of these cellular debris initiate a pro-inflammatory response, others initiate a protective and anti-inflammatory response.
Нормально функціонуюча імунна система здатна розрізняти антигени чужорідних впроваджених організмів (не свої), і антигени "своїх тканин або уламків, розвиваючи імунну відповідь тільки проти чужорідних антигенів. Коли імунна система пацієнта перестає розрізняти "свої" і "не свої" антигени, починається аутоїмунне захворювання.A normally functioning immune system is able to distinguish between antigens of foreign introduced organisms (not its own) and antigens of its own tissues or fragments, developing an immune response only against foreign antigens. When the patient's immune system stops distinguishing between "its" and "not its own" antigens, an autoimmune disease begins .
МУО-А-90/11781 описує використання ліпосом як носіїв лікарської речовини для місцевого лікування ран, порізів та садин, наприклад, рогівки або глазної поверхні (реферат).MUO-A-90/11781 describes the use of liposomes as carriers of a medicinal substance for the local treatment of wounds, cuts and wounds, for example, the cornea or the ocular surface (abstract).
М/О-А-95/23592 описує використання одношарових ліпосом, що мають середній діаметр у діапазоні від с -400нм до 15Онм та які не зв'язані з діючою речовиною, для переміщення холестеролу з атеросклеротичних Ге) бляшек для лікування атеросклерозу, (стор.б, рядки 6-11).M/O-A-95/23592 describes the use of single-layered liposomes having an average diameter in the range from -400 nm to 15 Ohm and which are not bound to the active substance, for the transfer of cholesterol from atherosclerotic He) plaques for the treatment of atherosclerosis, (p .b, lines 6-11).
О5-А-5262405 описує використання фосфоліпідів певного стану для лікування непрохідності дихальних шляхів пацієнта. Звідсі випливає, що принцип дії базується на ефекті взаємодії великого обсягу між фосфоліпідами та слизової для зниження адгезивних властивостей слизової (колонка 4, рядки 47-50). -O5-A-5262405 describes the use of phospholipids of a certain condition for the treatment of airway obstruction in a patient. It follows that the principle of action is based on the effect of a large volume of interaction between phospholipids and the mucosa to reduce the adhesive properties of the mucosa (column 4, lines 47-50). -
Даний винахід визначений в кінці у прикладеній формулі винаходу. «-This invention is defined at the end in the attached claims. "-
Винахід стосується відкриття того факту, що фармацевтично прийнятні тіла, такі як ліпосоми, кульки або подібні частинки, які включають фосфатно-гліцеринові групи, після ведення пацієнту-ссавцю викликають -- протизапальний ефект і тому можуть бути застосовані для лікування ряду захворювань. Ці тіла також можуть Га») включати у якості неосновного компонента неактивну складову і/або складову, що виявляє активність шляхомThe invention relates to the discovery of the fact that pharmaceutically acceptable bodies, such as liposomes, beads or similar particles, which include phosphate-glycerol groups, after administration to a mammalian patient, cause an anti-inflammatory effect and therefore can be used for the treatment of a number of diseases. These bodies can also include as a minor component an inactive component and/or a component that exhibits activity by
Іншого механізму. соAnother mechanism. co
В одному варіанті здійснення винахід стосується композиції, здатної виробляти протизапальну відповідь іп мімо у ссавців, при цьому згадана композиція включає фармацевтично прийнятні тіла розміром від 7520 нанометрів (нм) до 500 мікрометрів (мкм), які містять множину фосфатно-гліцеринових груп або груп, що можуть « перетворюватися на такі групи. Переважно, ці тіла по суті не містять неліпідних фармацевтично активних З компонентів. Переважно, фосфатно-гліцеринові групи складають 6095-10095 активних груп цих тіл. За с припущенням, після введення ссавцеві ці тіла через фосфатно-гліцеринові групи взаємодіють з імунною з» системою. В результаті після такого введення виробляється протизапальна відповідь.In one embodiment, the invention relates to a composition capable of producing an anti-inflammatory ip mimo response in a mammal, wherein said composition comprises pharmaceutically acceptable bodies having a size of 7520 nanometers (nm) to 500 micrometers (μm) that contain a plurality of phosphate-glycerol groups or groups that can "turn into such groups. Preferably, these bodies are essentially free of non-lipid pharmaceutically active C components. Mostly, phosphate-glycerol groups make up 6095-10095 active groups of these bodies. It is assumed that after administration to a mammal, these bodies interact with the immune system through phosphate-glycerol groups. As a result, after such an introduction, an anti-inflammatory response is produced.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується тривимірних синтетичних або напівсинтетичних тіл, що також називаються тут фармацевтично прийнятними тілами, які мають розмір у діапазоні від 2онм до 50Омкм і модифіковані таким чином, що вони містять у якості основного компонента щонайменше один протизапальний бо промоторний ліганд, при цьому згаданий ліганд включає фосфатно-гліцеринові групи. ав | В наступному варіанті здійснення винахід стосується тривимірних синтетичних або напівсинтетичних тіл, що також називаються тут фармацевтично прийнятними тілами, які мають розмір у діапазоні від 2онм до 50Омкм і - містять фосфатно-гліцеринові групи на своїй поверхні. -к 70 Винахід полегшує спосіб лікування захворювання, опосередненого функцією Т-клітин, який включає введення пацієнту-ссавцю ефективної кількості фармацевтично прийнятних тіл, що несуть ефективну кількість та фосфатно-гліцеринових груп, для інгібування і/або вповільнення прогресування захворювання, опосередненого функцією Т-клітин.In another embodiment, the invention relates to three-dimensional synthetic or semi-synthetic bodies, also referred to herein as pharmaceutically acceptable bodies, which have a size in the range of 2 nm to 50 µm and are modified in such a way that they contain as a main component at least one anti-inflammatory or promoter ligand, while said ligand includes phosphate-glycerol groups. av | In the following embodiment, the invention relates to three-dimensional synthetic or semi-synthetic bodies, also referred to here as pharmaceutically acceptable bodies, which have a size in the range from 2 nm to 50 μm and - contain phosphate-glycerol groups on their surface. -k 70 The invention facilitates a method of treating a disease mediated by T-cell function, which comprises administering to a mammalian patient an effective amount of a pharmaceutically acceptable body bearing an effective amount of phosphate-glycerin groups to inhibit and/or slow the progression of a disease mediated by T-cell function cells
Винахід також полегшує спосіб лікування запального захворювання, який включає введення пацієнту 29 ефективної кількості фармацевтично прийнятних тіл, що несуть ефективну кількість фосфатно-гліцериновихThe invention also facilitates a method of treating an inflammatory disease, which comprises administering to a patient an effective amount of 29 pharmaceutically acceptable bodies carrying an effective amount of phosphate-glycerin
ГФ) груп, для інгібування і/або вповільнення прогресування запального захворювання. юю Винахід також полегшує спосіб лікування розладу ендотеліальної функції який включає введення пацієнту-ссавцю ефективної кількості фармацевтично прийнятних тіл, що несуть ефективну кількість фосфатно-гліцеринових груп, для інгібування і/або вповільнення прогресування розладу ендотеліальної функції. 60 Також винахід полегшує спосіб лікування імунного захворювання, що відрізняється неадекватною екпресією цитокінів, який включає введення пацієнту-ссавцю ефективної кількості фармацевтично прийнятних тіл, що несуть ефективну кількість фосфатно-гліцеринових груп, для інгібування і/або вповільнення прогресування імунного захворювання.HF) groups, to inhibit and/or slow down the progression of an inflammatory disease. The invention also facilitates a method of treating a disorder of endothelial function which includes administering to a mammalian patient an effective amount of pharmaceutically acceptable bodies carrying an effective amount of phosphate-glycerol groups to inhibit and/or slow the progression of the disorder of endothelial function. 60 The invention also facilitates a method of treating an immune disease characterized by inadequate cytokine expression, which includes administering to a mammalian patient an effective amount of pharmaceutically acceptable bodies carrying an effective amount of phosphate-glycerol groups to inhibit and/or slow the progression of the immune disease.
Винахід також полегшує спосіб лікування або профілактики кардіологічного захворювання ссавців, наявність 62 якого або схильність до якого може бути визначена на основі видовженого інтервала ОТ-с на електрокардіограмі пацієнта, при цьому вказаний спосіб включає введення пацієнту-ссавцю, що страждає на таке захворювання або схильний до нього, фармацевтичної композиції, яка включає фармацевтично прийнятні біосумісні синтетичні або напівсинтетичні тіла, що також називаються тут фармацевтично прийнятними тілами, і фармацевтично прийнятний носій, при цьому щонайменше частина згаданих тіл мають розмір у діапазоні від «2Онм до 50Омкм, і при цьому поверхні згаданих тіл модифіковані таким чином, що вони містять у якості основного компонента щонайменше одну протизапальну промоторну груну, причому згадана група являє собою фосфатно-гліцеринову групу.The invention also facilitates a method of treating or preventing a cardiac disease in mammals, the presence of which or susceptibility to which can be determined based on a prolonged OT-s interval on a patient's electrocardiogram, while the specified method includes administration to a mammalian patient suffering from such a disease or prone to it, a pharmaceutical composition that includes pharmaceutically acceptable biocompatible synthetic or semi-synthetic bodies, also referred to herein as pharmaceutically acceptable bodies, and a pharmaceutically acceptable carrier, wherein at least a portion of said bodies have a size in the range of "2 Ohm to 50 Ohm, and at the same time the surfaces of said bodies modified in such a way that they contain as the main component at least one anti-inflammatory promoter group, and the mentioned group is a phosphate-glycerol group.
В іншому варіанті здійснення винахід стосується фармацевтичної композиції в одиничній дозованій формі для /о введення пацієнту-ссавцю, яка включає фармацевтично прийнятні тіла і фармацевтично прийнятний носій, при цьому щонайменше частина згаданих тіл мають розмір у діапазоні від «20нм до 500мкм і при цьому поверхні згаданих тіл включають фосфатно-гліцеринові групи або групи, що можуть бути перетворені на фосфатно-гліцеринові групи, причому згадана одинична дозована форма містить від 500 до «2,5 х 109 тіл,In another embodiment, the invention relates to a pharmaceutical composition in a unit dosage form for /o administration to a mammalian patient, which includes pharmaceutically acceptable bodies and a pharmaceutically acceptable carrier, while at least part of said bodies have a size in the range from "20 nm to 500 µm and at the same time the surface of said bodies include phosphate-glycerol groups or groups that can be converted into phosphate-glycerol groups, and said unit dosage form contains from 500 to "2.5 x 109 bodies,
В наступному варіанті здійснення винахід стосується фармацевтичної композиції, яка включає 75 фармацевтично прийнятні біосумісні синтетичні або напівсинтетичні тіла (які також називаються тут фармацевтично прийнятними тілами) і фармацевтично прийнятний носій, при цьому щонайменше частина згаданих тіл мають розмір у діапазоні від «2Онм до 500мкм і при цьому поверхні згаданих тіл модифіковані таким чином, що вони містять у якості основного компонента щонайменше одну протизапальну промоторну груну, причому згадана група являє собою фосфатно-гліцеринову груну.In a further embodiment, the invention relates to a pharmaceutical composition comprising 75 pharmaceutically acceptable biocompatible synthetic or semi-synthetic bodies (also referred to herein as pharmaceutically acceptable bodies) and a pharmaceutically acceptable carrier, wherein at least a portion of said bodies have a size in the range of 2 Ohm to 500 µm and the surfaces of the said bodies are modified in such a way that they contain at least one anti-inflammatory promoter group as the main component, and the mentioned group is a phosphate-glycerin group.
В наступному варіанті здійснення винахід стосується фармацевтичної композиції, яка включає фармацевтично прийнятні біосумісні синтетичні або напівсинтетичні тіла (які також називаються тут фармацевтично прийнятними тілами) і фармацевтично прийнятний носій, при цьому щонайменше частина згаданих тіл має розмір від «2Онм до 500мкм і включає кардіоліпін.In a further embodiment, the invention relates to a pharmaceutical composition that includes pharmaceutically acceptable biocompatible synthetic or semi-synthetic bodies (which are also referred to herein as pharmaceutically acceptable bodies) and a pharmaceutically acceptable carrier, while at least a portion of said bodies has a size of 2 Ohm to 500 μm and includes cardiolipin.
Тіла, описані вище, додатково можуть включати неактивну поверхневу груну і/або поверхневу груну, що сучThe bodies described above may additionally include an inactive surface layer and/or a surface layer that
Виявляє активність шляхом іншого механізму, наприклад, фосфатидилсерин. |Див., наприклад, Радок еї аї.,It shows activity through another mechanism, for example, phosphatidylserine. |See, for example, Line ei ai.,
Міжнародна публікація УУО 01/667851. і9)International publication UUO 01/667851. i9)
Винахід стосується ліофілізованих або висушених сублімацією фармацевтично прийнятних тіл, що несуть фосфатно-гліцеринові групи або групи, які можуть бути перетворені на фосфатно-гліцеринові групи, і комплектів, що включають ліофілізовані або висушені сублімацією фармацевтично прийнятні тіла, що містять «ч- фосфатно-гліцеринові групи або групи, які можуть бути перетворені на фосфатно-гліцеринові групи, і фармацевтично прийнятний носій. --The invention relates to lyophilized or freeze-dried pharmaceutically acceptable bodies bearing phosphate-glycerol groups or groups that can be converted to phosphate-glycerol groups, and kits including lyophilized or freeze-dried pharmaceutically acceptable bodies containing "h-phosphate-glycerol groups or groups that can be converted to phosphate-glycerol groups, and a pharmaceutically acceptable carrier. --
Винахід стосується способу лікування захворювання, опосередненого функцією Т-клітин, який включає «ч- введення пацієнту-ссавцю, що страждає на це захворювання або має підвищений риск захворювання, опосередненого функцією Т-клітин, ефективної кількості композиції, яка включає фармацевтично прийнятні тіла о розміром від «2Онм до «500мкм, які містять на своїй поверхні множину фосфатно-гліцеринових груп абогруп, що об можуть бути перетворені на згадані фосфатно-гліцеринові групи, так що після цього введення прогресування захворювання, опосередненого функцією Т-клітин, інгібується і/або вповільнюється.The invention relates to a method of treating a disease mediated by T-cell function, which comprises administering to a mammalian patient suffering from the disease or at increased risk of a disease mediated by T-cell function, an effective amount of a composition that includes pharmaceutically acceptable bodies of from "2 Ohm to "500 µm, which contain on their surface a plurality of phosphate-glycerin groups or groups that can be converted into said phosphate-glycerin groups, so that after this introduction, the progression of the disease, mediated by the function of T cells, is inhibited and/or slowed down .
Винахід стосується способу лікування розладу ендотеліальної функції який включає введення « пацієнту-ссавцю, що страждає на цей розлад або має підвищений риск розладу ендотеліальної функції, ефективної кількості композиції, що включає фармацевтично прийнятні тіла розміром від «2Онм до У5О0ОмМкм, які -щ-й с містять на своїй поверхні множину фосфатно-гліцеринових груп або груп, що можуть бути перетворені на згадані ц фосфатно-гліцеринові групи, так що після цього введення прогресування розладу ендотеліальної функції "» інгібується і/або вповільнюється.The invention relates to a method of treating an endothelial function disorder, which includes administering to a mammalian patient suffering from this disorder or having an increased risk of endothelial function disorder, an effective amount of the composition, which includes pharmaceutically acceptable bodies with a size of from "2Om to U5O0OmMcm, which -sh-th s contain on their surface a number of phosphate-glycerol groups or groups that can be converted into the mentioned phosphate-glycerol groups, so that after this introduction, the progression of the disorder of endothelial function "" is inhibited and/or slowed down.
В наступному варіанті здійснення винахід стосується способу лікування імунного захворювання у пацієнта-ссавця, що страждає на це захворювання або має підвищений риск імунного захворювання, який (ее) включає введення згаданому пацієнту-ссавцю ефективної кількості композиції що включає фармацевтично прийнятні тіла розміром від «2Онм до «50Омкм, які містять на своїй поверхні множину фосфатно-гліцеринових о груп або груп, що можуть бути перетворені на згадані фосфатно-гліцеринові групи, так що після введення - прогресування імунного захворювання інгібується і/або вповільнюється.In a further embodiment, the invention relates to a method of treating an immune disease in a mammalian patient suffering from the disease or at increased risk of the immune disease, which (ee) comprises administering to said mammalian patient an effective amount of a composition comprising pharmaceutically acceptable bodies ranging in size from "2Onm to "50μm, which contain on their surface a number of phosphate-glycerin o groups or groups that can be transformed into the mentioned phosphate-glycerin groups, so that after the introduction - the progression of the immune disease is inhibited and/or slowed down.
З іншого боку, цей винахід також може розглядатися як застосування рецептора на клітинах імунної системи - ссавців, наприклад, макрофагах, який специфічно зв'язується з фосфатно-гліцериновою групою. Винахід - М стосується тіл, що включають ліганди і групи, які можуть зв'язуватися з таким рецептором і, в результаті, виробляти протизапальну відповідь. Відповідно, тіла за винаходом можуть бути визначені як тіла, що включають ліганди або їх активні групи, які конкурують зі зв'язуванням або поглинанням тіл, експресуючих фосфатно-гліцеринові групи, описаних тут, антиген-представляючими клітинами. Фахівець у відповідній технології легко може визначити, чи є конкретне тіло таким, що здатне конкурувати описаним чином, шляхом о проведення простих тестових досліджень. Наприклад, тіло може бути досліджене за допомогою легкодоступної ко моноцитарної клітинної лінії, такої як ШО37. У першому досліді клітини 0937 інкубують тільки з міченими флуоресцентною міткою ліпосомами РО, а в решті дослідів клітини 0937 інкубують у присутності мічених бо флуоресцентною міткою ліпосом РО і різних кількостей тестової сполуки. Якщо поглинання мічених флуоресцентною міткою ліпосом РО в решті дослідів знижується порівняно з першим дослідом, тоді тестову сполуку вважають такою, що конкурує за рецептор і входить в область цього винаходу.On the other hand, this invention can also be considered as the application of a receptor on the cells of the immune system - mammals, for example, macrophages, which specifically binds to the phosphate-glycerol group. The invention - M relates to bodies that include ligands and groups that can bind to such a receptor and, as a result, produce an anti-inflammatory response. Accordingly, bodies according to the invention can be defined as bodies that include ligands or their active groups that compete with the binding or absorption of bodies expressing phosphate-glycerol groups, described here, by antigen-presenting cells. A person skilled in the art can easily determine whether a particular body is capable of competing in the manner described by conducting simple test studies. For example, the body can be studied using a readily available co-monocytic cell line, such as SHO37. In the first experiment, 0937 cells were incubated only with fluorescently labeled PO liposomes, and in the remaining experiments, 0937 cells were incubated in the presence of fluorescently labeled PO liposomes and various amounts of the test compound. If the absorption of fluorescently labeled PO liposomes in the rest of the experiments is reduced compared to the first experiment, then the test compound is considered to compete for the receptor and is included in the scope of the present invention.
Фіг.1 являє собою стовпчасту діаграму, яка представляє результати дослідів наведеного нижче Прикладу 1 з гіперчутливістю мишей (СН, модель гострого запального захворювання, опосередненого Т-клітинами) при 65 використанні ліпосом за переважним варіантом здійснення винаходу, порівняно з іншими ліпосомами і контрольними дослідами.Fig. 1 is a bar chart representing the results of the experiments of the following Example 1 with hypersensitivity mice (CH, a model of acute inflammatory disease mediated by T cells) when using liposomes according to the preferred embodiment of the invention, compared to other liposomes and control experiments.
Фіг2 являє собою подібне графічне представлення, що показує використання ліпосом з різним вмістом фосфатидилгліцерину (РО) у моделі СН5 мишей, Приклад 2.Figure 2 is a similar graphical representation showing the use of liposomes with different phosphatidylglycerol (PO) content in the CH5 mouse model, Example 2.
Фіг.3 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу 3, в якому були використані різні концентрації 7595 РО-ліпосом у моделі СНЗ мишей.Fig. 3 is a similar graphic representation of the results of Example 3, in which different concentrations of 7595 PO-liposomes were used in the model of SNH of mice.
Фіг.А4 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу 4, в якому були використані різні концентрації 10095 РО-ліпосом у моделі СНЗ мишей.Fig.A4 is a similar graphic presentation of the results of Example 4, in which different concentrations of 10095 PO-liposomes were used in the mouse SNH model.
Фіг5 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу 5, в якому були використані ліпосоми різних розмірів у моделі СН5. 70 Фіг.б6 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу б, в якому була використана модель гіперчутливості мишей уповільненого тину (ОН, модель хронічного запального захворювання, опосередненого Т-клітинами).Fig5 is a similar graphical representation of the results of Example 5, in which liposomes of different sizes were used in the CH5 model. 70 Fig. b6 is a similar graphic representation of the results of Example b, in which the model of hypersensitivity of mice of delayed tin (OH, a model of chronic inflammatory disease mediated by T-cells) was used.
Фіг.7 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу 7, в якому були використані ліпосоми з кардіоліпіном у моделі ОНЗ мишей.Fig. 7 is a similar graphic representation of the results of Example 7, in which liposomes with cardiolipin were used in the mouse ONZ model.
Фіг.8 являє собою подібне графічне представлення результатів Прикладу 8, в якому були використані ліпосоми з кардіоліпіном у моделі СНЗ мишей.Fig. 8 is a similar graphic representation of the results of Example 8, in which liposomes with cardiolipin were used in the model of HF in mice.
Фіг.9 показує процентну зміну спаду збуджуючого постсинаптичного потенціалу (ЕРБР) у контрольних і оброблених мишей, що є показником ефекту на довготривале потенціювання (І ТР), Приклад 9.Fig. 9 shows the percentage change in the decline of the excitatory postsynaptic potential (ERBP) in control and treated mice, which is an indicator of the effect on long-term potentiation (LTP), Example 9.
Фіг.10 представляє дані, показані на Фіг.9, у форматі стовпчастої діаграми, Приклад 9.Figure 10 represents the data shown in Figure 9 in bar chart format, Example 9.
Фіг.11 показує різницю у концентрації протизапального цитокіну 1-4 у гіпокампі контрольних і оброблених тварин, Приклад 10.Fig. 11 shows the difference in the concentration of anti-inflammatory cytokine 1-4 in the hippocampus of control and treated animals, Example 10.
Фіг.12 показує різницю у концентрації прозапального цитокіну ІЇ-ІВ у суспензії однорідних клітин селезінки контрольних і оброблених тварин, Приклад 11.Fig. 12 shows the difference in the concentration of the pro-inflammatory cytokine II-IV in the suspension of homogeneous cells of the spleen of control and treated animals, Example 11.
Фіг.13 показує різницю у концентрації ТМЕ-А у моноцитарній клітинній лінії 0937, обробленій різними с ов Концентраціями 7595 РО-ліпосом, Приклад 12.Fig. 13 shows the difference in the concentration of TME-A in the monocytic cell line 0937 treated with different concentrations of 7595 PO-liposomes, Example 12.
Фіг.14 являє собою графічне представлення результатів Прикладу 13 - вміст ендотеліну-ї у вухах мишей, і) оброблених згідно з переважним варіантом здійснення винаходу, порівняно з контрольним дослідом.Fig. 14 is a graphical representation of the results of Example 13 - the content of endothelin-i in the ears of mice i) treated according to the preferred embodiment of the invention, compared to the control experiment.
Фіг.15 являє собою графічне представлення результатів Прикладу 14 -ІСАМ-1-позитивні клітини з культурFig. 15 is a graphical representation of the results of Example 14 - ISAM-1-positive cells from cultures
НОМЕС у присутності і у відсутність композицій за переважним варіантом здійснення винаходу. «- зо За винаходом, пацієнтам вводять фармацевтично прийнятні тіла, що несуть на своїй поверхні фосфатно-гліцеринові групи. Не вдаючись в теорію, можна припустити, що ці тіла взаємодіють з імунною (87 системою пацієнта із супроводжуючими сприятливими ефектами, такими як інгібування прозапальних цитокінівій о пе мімо і/або промотування протизапальних цитокінів. Клітинами, що вступають у реакції, можуть бути імунні клітини, такі як професійні або непрофесійні антиген-представляючі клітини, ендотеліальні клітини, о регуляторні клітини, наприклад, МК-Т-клітини та інші. соNOMES in the presence and in the absence of compositions according to the preferred embodiment of the invention. According to the invention, patients are injected with pharmaceutically acceptable bodies that carry phosphate-glycerin groups on their surface. Without going into theory, it can be assumed that these bodies interact with the immune system of the patient with accompanying beneficial effects, such as inhibition of pro-inflammatory cytokines and/or promotion of anti-inflammatory cytokines. The cells involved in the reaction can be immune cells, such as professional or non-professional antigen-presenting cells, endothelial cells, o regulatory cells, for example, MK-T cells and others.
Ці фармацевтично прийнятні тіла включають синтетичні і напівсинтетичні тіла, які мають різні форми, здебільшого, але не виключно, сфероїдальну, циліндричну, еліпсоїдальну форму, включаючи сплющену і довгасту сфероїдальну форму, змієподібну, ниркоподібну форму і т.д., і розміри від 720нм до «500мкм у діаметрі при вимірюванні переважно вздовж найдовшої осі тіла, і містять на своїй поверхні « фосфатно-гліцеринові групи. з с Фармацевтично прийнятні тіла містять на поверхні фосфатно-гліцеринові групи із заздалегідь заданими . характеристиками. Не вдаючись в теорію, можна припустити, що ці групи здатні взаємодіяти з відповідним и?» рецептором (рецепторами) (не тільки з Ре-рецептором) на антиген-представляючих клітинах іп мімо. Структура цих груп може бути змінена синтетичним шляхом і може включати всю, частину або модифікований варіант початкової фосфатно-гліцеринової групи. Наприклад, негативно заряджений кисень фосфатної групиThese pharmaceutically acceptable bodies include synthetic and semi-synthetic bodies having various shapes, mostly, but not exclusively, spheroidal, cylindrical, ellipsoidal, including flattened and elongated spheroidal, serpentine, kidney-like, etc., and sizes from 720nm to "500 μm in diameter when measured mainly along the longest axis of the body, and contain phosphate-glycerin groups on their surface. Pharmaceutically acceptable bodies contain phosphate-glycerol groups on the surface with predetermined . characteristics. Without getting into the theory, we can assume that these groups are able to interact with the appropriate and? receptor (receptors) (not only with the Re-receptor) on antigen-presenting cells and mimo. The structure of these groups can be changed synthetically and can include all, part or a modified version of the initial phosphate-glycerol group. For example, the negatively charged oxygen of the phosphate group
Го! фосфатно-гліцеринової групи може бути перетворений на фосфатно-ефірну груну (наприклад, І-ОР(ІОХОКХОК"), де Ї являє собою залишок о фосфатно-гліцеринової групи, К' являє собою -СН «СН(ОН)СНООН і К" являє собою алкіл з 1-4 атомів вуглецю - або гідроксизаміщений алкіл з 2-4 атомів вуглецю і 1-3 гідроксильних груп, за умови, що К" легше 5о Підролізується іп мімо, ніж група К; на дифосфатну груну, включаючи дифосфатні ефіри (наприклад, - Г-ОР(ФОХОКЗОР(ОХОК")», де І і К відповідають визначеним вище, а кожний К" незалежно від інших являє як собою водень, алкіл з 1-4 атомів вуглецю або гідроксизаміщений алкіл з 2-4 атомів вуглецю і 1-3 гідроксильних груп, за умови, що друга фосфатна група І-Р(ІОХХОК")2| легше гідролізується іп мімо, ніж група К; або на трифосфатну групу, включаючи трифосфатні ефіри (наприклад, Г-ОРІЮОХОК)ОР(ОХОКОР(ОХОК")», де | іGo! phosphate-glycerin group can be transformed into a phosphate-ester group (for example, I-OR(IOHOCHHOK"), where Y is the residue o of the phosphate-glycerin group, K' is -CH "CH(OH)СНООН and K" is is an alkyl of 1-4 carbon atoms - or a hydroxy-substituted alkyl of 2-4 carbon atoms and 1-3 hydroxyl groups, provided that K" is more easily pyrolyzed than the K group; on a diphosphate group, including diphosphate ethers (for example , - Г-ОР(ФОХОКЗОР(ОХОК")", where I and K correspond to those defined above, and each K" independently of the others represents hydrogen, an alkyl of 1-4 carbon atoms or a hydroxy-substituted alkyl of 2-4 carbon atoms and 1-3 hydroxyl groups, provided that the second phosphate group I-P(IOXXOK")2| is more easily hydrolyzed by ip mimo than group K; or to a triphosphate group, including triphosphate esters (for example, Г-ОРИЯУОХОК)ОР(ОХОКОР( OKOK")", where | i
КЕ відповідають визначеним вище, а кожний К" незалежно від інших являє собою водень, алкіл з 1-4 атомів вуглецю або гідроксизаміщений алкіл з 2-4 атомів вуглецю і 1-3 гідроксильних груп, за умови, що друга і третяKE are as defined above, and each K" independently of the others represents hydrogen, an alkyl of 1-4 carbon atoms or a hydroxy-substituted alkyl of 2-4 carbon atoms and 1-3 hydroxyl groups, provided that the second and third
Ф) фосфатні групи легше гідролізуються іп о омімо, ніж група ЕК; і топ. Такі синтетично змінені ка фосфатно-гліцеринові групи здатні експресувати фосфат-гліцерин іп мімо і, відповідно, такі змінені групи являють собою фосфатно-гліцеринові групи, здатні до перетворення. во Фосфатидилгліцерин є відомою сполукою. Він може бути отриманий, наприклад, шляхом обробки природної димерної форми фосфатидилгліцерину, кардіоліпіну, фосфоліпазою Ю. Він також може бути отриманий шляхом ферментативного синтезу з фосфатидилхоліну з використанням фосфоліпази О |див., наприклад, патент США 5,188,951 Тгетріау, еї аїЇ. Його хімічна структура включає фосфатно-гліцеринову групу і пару подібних, але різних ланцюгів жирних кислот С.в8-Сго. 65 Вираз "РО" тут означає фосфоліпіди, що несуть фосфатно-гліцеринову групу, з широким діапазоном ланцюгів щонайменше однієї жирної кислоти, за умови, що утворений РО-компонент може діяти як структурний компонент ліпосоми. Переважно, такі РОо-сполуки можуть бути представлені Формулою І: в і то й де БК і БК" незалежно один від одного вибирають з вуглеводневих ланцюгів С.4-Сод, насичених або ненасичених, прямих або таких, що містять обмежену кількість розгалужень, при цьому щонайменше один ланцюг містить від 10 до 24 атомів вуглецю. По суті, ліпідні ланцюги В і 2" утворюють структурний, а не активний 79 компонент ліпосом. Відповідно, ці ланцюги можуть варіюватися і включати один або два такі ліпідні ланцюги, однакові або різні, за умови, що вони виконують структурну функцію. Переважно, ліпідні ланцюги можуть мати від «10 до «24 атомів вуглецю у довжину, насичених, мононенасичених або поліненасичених, прямих або з обмеженою кількістю розгалужень. Лаурат (С12), мірістат (С14), пальмітат (С16), стеарат (С18), арахідат (С20), бегенат (С22) і лігноцерат (С24) є прикладами придатних насичених ліпідних ланцюгів для РО для застосування у цьому винаході. Пальмітолеат (С16), олеат (С18) є прикладами придатних мононенасичених ліпідних ланцюгів. Лінолеат (С18), ліноленат (С18) і арахідонат (С20) є прикладами придатних поліненасичених ліпідних ланцюгів для застосування у РО в ліпосомах за винаходом. Фосфоліпіди з одним таким ліпідним ланцюгом, також придатні у цьому винаході, відомі як лізофосфоліпіди. Винахід також стосується застосування ліпосом, у яких активним компонентом є димерна форма РО, а саме, кардіоліпін, проте інші димери Формули | с також придатні. Переважно, такі димери не є синтетично зшитими за допомогою синтетичного зшиваючого г) засобу, такого як малеїмід, а є зшитими за рахунок видалення гліцеринової ланки, як описано у Іеппідег,Ф) phosphate groups are more easily hydrolyzed ip o omimo than the EC group; and top Such synthetically modified ka phosphate-glycerin groups are capable of expressing phosphate-glycerol ip mimo and, accordingly, such modified groups are phosphate-glycerin groups capable of conversion. in Phosphatidylglycerol is a known compound. It can be obtained, for example, by processing the natural dimeric form of phosphatidylglycerol, cardiolipin, with phospholipase Y. It can also be obtained by enzymatic synthesis from phosphatidylcholine using phospholipase O | see, for example, US patent 5,188,951 Tgetriau, ei aiYi. Its chemical structure includes a phosphate-glycerol group and a pair of similar but different chains of fatty acids С.в8-Сго. 65 The term "PO" here refers to phospholipids bearing a phosphate-glycerol group with a wide range of chains of at least one fatty acid, provided that the resulting PO component can act as a structural component of the liposome. Preferably, such POo-compounds can be represented by Formula I: where BC and BC" are independently selected from C.4-Sod hydrocarbon chains, saturated or unsaturated, straight or those containing a limited number of branches, with at least one chain contains from 10 to 24 carbon atoms. Essentially, lipid chains B and 2" form a structural, not an active, 79 component of liposomes. Accordingly, these chains may vary and include one or two such lipid chains, the same or different, provided that they perform a structural function. Preferably, the lipid chains can be from "10 to "24 carbon atoms in length, saturated, monounsaturated or polyunsaturated, straight or with a limited number of branches. Laurate (C12), myristate (C14), palmitate (C16), stearate (C18), arachidate (C20), behenate (C22) and lignocerate (C24) are examples of suitable saturated lipid chains for PO for use in the present invention. Palmitoleate (C16), oleate (C18) are examples of suitable monounsaturated lipid chains. Linoleate (C18), linolenate (C18) and arachidonate (C20) are examples of suitable polyunsaturated lipid chains for use in PO in liposomes according to the invention. Phospholipids with one such lipid chain, also useful in this invention, are known as lysophospholipids. The invention also relates to the use of liposomes, in which the active component is a dimeric form of PO, namely, cardiolipin, but other dimers Formula | with are also suitable. Preferably, such dimers are not synthetically cross-linked with a synthetic d) cross-linking agent such as maleimide, but are cross-linked by removing the glycerol link as described in Ieppideg,
Віоспетізігу, р. 525 (1970) і показано нижче на реакційній схемі:Viospetizig, p. 525 (1970) and is shown below in the reaction scheme:
Кк я - 7Kk I - 7
ЩІ с ЇЙ ьл «в) їїSCHI s ІІ л «c) her
РО г)RO d)
І -And -
Ї. банні кінні ий Санін Я ц А ;» шва і ! «ЕНрят : І ! (ее) («в) й - шу 70 сага йірівY. banni kinny iy Sanin Ya ts A ;" seam and ! "Enryat: And ! (ee) («c) y - shu 70 saga yiriv
КУKU
-ь посьсконинОоН 25 де кожний з В і В незалежно один від одного мають значення, наведені вище.25 where each of B and B independently of each other have the values given above.
Ге! Як зазначено вище і, знову-таки, без спроби створення будь-якої теорії, Ро-група і її димер здогадно являють собою ліганд, оскільки, очевидно, вона зв'язується із специфічною ділянкою білка або іншої молекули де (С РО-рецептора"), і, відповідно, ця молекула фосфатидилгліцерину (і її димерна форма) іноді згадується тут як "ліганд" або "зв'язуюча група". Таке зв'язування, очевидно, відбувається через фосфатно-гліцеринову груну бо -О-Р(ХОХХОН)-О-СНО-СН(ОН)-СНО-ОН, яка іноді згадується тут як "головна група", "активна група" або "зв'язуюча група". Згідно з цим, вирази "зв'язування", "зв'язуюча група" або "ліганд" тут не стосуються будь-якого механізму або принцину дії. Тим не менше, є принущення, що описані вище фосфатно-гліцеринові групи розташовані на зовнішніх поверхнях тіл за винаходом для взаємодії з компонентами імунної системи пацієнта. Слід зазначити, що ця взаємодія відрізняється від специфічної взаємодії апоптотичних клітин з б5 фосфатидилсериновим рецептором на антиген-представляючих клітинах.Gee! As stated above and, again, without attempting to create any theory, the Po-group and its dimer presumably represent a ligand, since it apparently binds to a specific region of a protein or other molecule where (C of the PO-receptor ), and accordingly this phosphatidylglycerol molecule (and its dimeric form) is sometimes referred to herein as a “ligand” or “linking group.” Such binding apparently occurs through the phosphate-glycerol group because -O-P(HOCHON )-O-CHO-CH(OH)-CHO-OH, which is sometimes referred to herein as a "headgroup," "active group," or "linking group." Accordingly, the terms "linking," "linking "binding group" or "ligand" herein does not refer to any mechanism or principle of action. However, it is suggested that the phosphate-glycerol groups described above are located on the external surfaces of the bodies of the invention to interact with components of the patient's immune system. It should be noted , that this interaction differs from the specific interaction of apoptotic cells with the b5 phosphatidylserine receptor for an antigen-present egg cells.
Приклади "частин тривимірного тіла" або "фармацевтично прийнятних тіл" включають біосумісні синтетичні або напівсинтетичні структури, такі як ліпосоми, тверді кульки, порожнисті кульки, наповнені кульки, крупинки, гранули і мікросфери з біосумісних матеріалів, природних або синтетичних, що звичайно використовуються у фармацевтичній промисловості. Кульки можуть бути твердими або порожнистими, або наповненими біосумісним матеріалом. Вираз "біосумісні" стосується речовин, які у застосовуваних кількостях є або нетоксичними, або мають прийнятні профілі токсичності, так що їх застосування іп мімо є прийнятним.Examples of "three-dimensional body parts" or "pharmaceutically acceptable bodies" include biocompatible synthetic or semi-synthetic structures such as liposomes, solid spheres, hollow spheres, filled spheres, granules, granules, and microspheres of biocompatible materials, natural or synthetic, commonly used in the pharmaceutical industry. industry Balls can be solid or hollow, or filled with a biocompatible material. The term "biocompatible" refers to substances that, in the quantities used, are either non-toxic or have acceptable toxicity profiles such that their use is acceptable.
Подібним чином, вираз "фармацевтично прийнятні" стосовно "фармацевтично прийнятних тіл", тут означає тіла, що включають один або більше матеріалів, що є фармацевтично прийнятними і придатними для доставки іп мімо.Similarly, the expression "pharmaceutically acceptable" in reference to "pharmaceutically acceptable bodies" herein refers to bodies comprising one or more materials that are pharmaceutically acceptable and suitable for intravenous delivery.
Такі тіла можуть включати ліпосоми, утворені з ліпідів, одним з яких є РО. В альтернативі, фармацевтично 7/0 прийнятні тіла можуть являти собою тверді кульки, порожнисті кульки, наповнені кульки, крупинки, гранули і мікросфери з біосумісних матеріалів, що включають один або більше біосумісних матеріалів, таких як поліетиленгліколь, полі(метилметакрилат), полівінілпіролідон, полістирол і широкий діапазон інших природних, напівсинтетичних і синтетичних матеріалів, з прикріпленими до них фосфатно-гліцериновими групами.Such bodies may include liposomes formed from lipids, one of which is PO. Alternatively, the 7/0 pharmaceutically acceptable bodies may be solid spheres, hollow spheres, filled spheres, granules, granules and microspheres of biocompatible materials comprising one or more biocompatible materials such as polyethylene glycol, poly(methyl methacrylate), polyvinylpyrrolidone, polystyrene and a wide range of other natural, semi-synthetic and synthetic materials with phosphate-glycerin groups attached to them.
Як зазначено вище, аналоги фосфатидилгліцерину з модифікованими активними групами, які також /5 взаємодіють з РоО-рецепторами на антиген-представляючих клітинах, через той же рецепторний шлях, що й РО, або іншим чином, з виробленням протизапальної реакції в організмі реципієнта, вважаються включеними у межі виразу "фосфатидилгліцерин". Цей вираз включає, без обмежень, сполуки, в яких одна або більше гідроксильних груп і/або фосфатних груп дериватизовані або знаходяться у формі солі. Багато таких сполук утворюють вільні гідроксильні групи іп мімо, відразу після введення або пізніше і, відповідно, включаютьAs noted above, phosphatidylglycerol analogs with modified active groups that also /5 interact with PoO receptors on antigen-presenting cells, through the same receptor pathway as PO, or otherwise, to produce an anti-inflammatory response in the recipient's body, are considered included within the expression "phosphatidylglycerol". This term includes, without limitation, compounds in which one or more hydroxyl groups and/or phosphate groups are derivatized or in salt form. Many such compounds form free hydroxyl groups immediately after administration or later and, accordingly, include
РоО-трупи, здатні до перетворення.RoO corpses capable of transformation.
Переважними композиціями за винаходом є ліпосоми, що можуть складатися з різноманітних ліпідів. Проте, переважно, ні один з ліпідів не є позитивно зарядженим. У випадку ліпосом, фосфатидилгліцерин РО може складати майже весь або весь шар (шари) або стінку (стінки) ліпосоми, причому його фосфатно-гліцеринова група орієнтована назовні, для того щоб діяти у якості зв'язуючої групи, а ліпідний ланцюг або ланцюги сч утворюють структурну стінку.Preferred compositions according to the invention are liposomes, which can consist of various lipids. However, mostly none of the lipids is positively charged. In the case of liposomes, phosphatidylglycerol PO may make up almost all or the entire layer(s) or wall(s) of the liposome, with its phosphate-glycerol group facing outward to act as a linking group, and the lipid chain or chains forming structural wall.
Ліпосоми, або ліпідні везікули, являють собою закриті мішки, розміром у мікронному або субмікронному і) діапазоні, стінки (моношари або мультишари) яких включають придатні амфіфільні речовини. Звичайно вони містять водне середовище, хоча для цього винаходу внутрішній вміст не є важливим, і загалом неактивні.Liposomes, or lipid vesicles, are closed bags with a size in the micron or submicron i) range, the walls (monolayers or multilayers) of which include suitable amphiphilic substances. Usually they contain an aqueous environment, although for the present invention the internal content is not important, and they are generally inactive.
Відповідно, у переважному варіанті здійснення, ліпосоми, а також інші фармацевтично прийнятні тіла, по суті «- зо Не містять неліпідних фармацевтично активних компонентів (наприклад, містять «190) і більш переважно, взагалі не містять неліпідних фармацевтично активних компонентів. Такі ліпосоми отримують і обробляютьтаким (7 чином, що активні групи знаходяться ззовні ліпосомного тіла. Таким чином, РО у ліпосомах переважного варіанту -" де здійснення винаходу служить як лігандом, так і структурним компонентом самої ліпосоми.Accordingly, in a preferred embodiment, liposomes, as well as other pharmaceutically acceptable bodies, essentially "do not contain non-lipid pharmaceutically active components (for example, contain "190) and more preferably, do not contain non-lipid pharmaceutically active components at all. Such liposomes are obtained and processed in such a way that the active groups are located outside the liposome body. Thus, PO in liposomes of the preferred variant -" where the implementation of the invention serves as both a ligand and a structural component of the liposome itself.
Таким чином, переважний варіант здійснення винаходу стосується ліпосомних тіл, які мають на своїх о зв поверхнях, або можуть бути оброблені або індуковані таким чином, щоб мати на своїх поверхнях одну або со більше фосфатно-гліцеринових груп, що діють як зв'язуючі групи. Фосфатидилгліцерин є переважнимThus, a preferred embodiment of the invention relates to liposome bodies that have on their surfaces, or can be processed or induced to have on their surfaces one or more phosphate-glycerol groups acting as binding groups. Phosphatidylglycerol is preferred
РО-лігандом, і такі ліпіди повинні складати від 1095 до 10095 ліпосоми, а решту - неактивний компонент, наприклад, фосфатидилхолін РС, або компонент, що має інший механізм дії, наприклад, фосфатидилсерин Р, або їх суміші. Неактивні складові, такі як РС, є переважними. «PO-ligand, and such lipids should be from 1095 to 10095 liposomes, and the rest - an inactive component, for example, phosphatidylcholine RS, or a component with a different mechanism of action, for example, phosphatidylserine P, or their mixtures. Inactive ingredients such as RS are preferred. "
Щонайменше 109595 ваг. такої ліпосоми складається з РО, переважно щонайменше 5095, більш переважно від шщ с 60 до 10095 і найбільш переважно від 70 до 9095, при цьому в одному з найбільш переважних варіантів здійснення ліпосома містить 7595 ваг. РО. ;» Також можуть бути використані суміші РО-ліпосом з неактивними ліпосомами і/або з ліпосомами з фосфоліпідів, що мають інший механізм дії, за умови, що загальна кількість РО у суміші залишається вище Мінімуму 71095 і переважно вище 60905. о Що стосується неліпосомних тіл для застосування у винаході, то, як зазначено вище, вони включають біосумісні тверді або порожнисті кульки придатного розміру. Біосумісні неліпосомні синтетичні або о напівсинтетичні тіла можуть бути вибрані з поліетиленгліколю, полі(метилметакрилату), полівінілпіролідону, - полістиролу і широкого діапазону інших природних, напівсинтетичних і синтетичних матеріалів, з прикріпленими 5о до них фосфатно-гліцериновими групами. Такі матеріали включають полімери, що біорозкладаються, такі як - описані у |(Оипп, еї аіІ., патент США 4,938,763), що включений у цю заявку у вигляді посилання у всій його повноті. як Полімери, що біорозкладаються, описані в літературі і включають, наприклад, полімери з прямими ланцюгами, такі як полілактиди, полігліколіди, полікапролактони, поліангідриди, поліаміди, поліуретани, поліефіраміди, поліортоефіри, полідіоксанони, поліацеталі, полікеталі, полікарбонати, поліортокарбонати, дв Пполіфосфазени, полігідроксибутирати, полігідроксивалерати, поліалкіленоксалати, поліалкіленсукцинати, полі(яблучна кислота), полі(амінокислоти), полівінілпіролідон, поліетиленгліколь, полігідроксицелюлоза,At least 109595 kg. such a liposome consists of PO, preferably at least 5095, more preferably from 60 to 10095, and most preferably from 70 to 9095, and in one of the most preferred embodiments, the liposome contains 7595 wt. RO. ;" Mixtures of PO-liposomes with inactive liposomes and/or with liposomes from phospholipids having a different mechanism of action can also be used, provided that the total amount of PO in the mixture remains above Minimum 71095 and preferably above 60905. o Regarding non-liposomal bodies for use in the invention, as indicated above, they include biocompatible solid or hollow beads of suitable size. Biocompatible non-liposomal synthetic or o semi-synthetic bodies can be selected from polyethylene glycol, poly(methyl methacrylate), polyvinylpyrrolidone, - polystyrene and a wide range of other natural, semi-synthetic and synthetic materials, with phosphate-glycerol groups attached to them. Such materials include biodegradable polymers such as those described in U.S. Patent No. 4,938,763, incorporated herein by reference in its entirety. as Biodegradable polymers are described in the literature and include, for example, straight chain polymers such as polylactides, polyglycolides, polycaprolactones, polyanhydrides, polyamides, polyurethanes, polyetheramides, polyorthoesters, polydioxanones, polyacetals, polyketals, polycarbonates, polyorthocarbonates, polyphosphazenes, polyhydroxybutyrates, polyhydroxyvalerates, polyalkylene oxalates, polyalkylenesuccinates, poly(malic acid), poly(amino acids), polyvinylpyrrolidone, polyethylene glycol, polyhydroxycellulose,
Ф) хітин, хітозан і їх сополімери, терполімери і комбінації. Інші полімери, що біорозкладаються, включають, ка наприклад, желатин, колаген і т.д.F) chitin, chitosan and their copolymers, terpolymers and combinations. Other biodegradable polymers include, for example, gelatin, collagen, etc.
Придатні речовини для дериватизації з метою прикріплення фосфоліпіду (фосфоліпідів) або його частин з бо групами або зв'язуючими групами, до тривимірних тіл, серійно винускаються, наприклад, компанією |РоїузсіепсезSuitable substances for derivatization in order to attach the phospholipid(s) or its parts with bo groups or binding groups to three-dimensional bodies are produced serially, for example, by the company |Roiuzsiepsez
Іпс., 400 Маїеу Коайд, УМагіпдіоп, РА 18976, або Зідта АЇагіспй Ріпе СНетісаІ5). Способи їх дериватизації відомі у хімічній технології. Окремі переважні приклади таких способів описані у Міжнародній патентній заявціIps., 400 Maieu Coide, UMagipdiop, RA 18976, or Zidta Alagispy Ripe SNetisaI5). Methods of their derivatization are known in chemical technology. Certain preferred examples of such methods are described in International Patent Application
РСТ/САО2/01398 Мазодетп Ігеїіапа І ітпіед, що включена в цю заявку у вигляді посилання.PCT/САО2/01398 Mazodetp Igeiiapa I itpied, which is included in this application in the form of a reference.
Винахід передбачає, що пацієнт може бути ссавцем, включаючи, але не тільки, людей і свійських тварин, б5 таких як корови, коні, свині, собаки, кішки і т.п.The invention provides that the patient can be a mammal, including, but not limited to, humans and domestic animals, such as cows, horses, pigs, dogs, cats, etc.
Фосфоліпіди являють собою амфіфільні молекули (тобто, амфіфіли), що означає, що сполука включає молекули, які містять полярну водорозчинну груну, прикріплену до водонерозчинного вуглеводневого ланцюга.Phospholipids are amphiphilic molecules (ie, amphiphiles), meaning that the compound includes molecules that contain a polar water-soluble group attached to a water-insoluble hydrocarbon chain.
Амфіфіли, що служать у якості шарів матриці, мають визначені полярні і аполярні області. Амфіфіли можуть включати, на додаток до РО за винаходом, інші природні ліпіди, що використовуються разом з фосфоліпідом, що несе активну груну, окремо або у суміші з іншим ліпідом. Амфіфіли що служать у якості шару (шарів) ліпосоми, можуть являти собою інертні, структуроутворюючі синтетичні сполуки, такі як поліоксиетилен-алкілефіри (прості), поліоксиетилен-алкілефіри (складні) і сахароза-діефіри.Amphiphiles serving as matrix layers have defined polar and apolar regions. Amphiphiles may include, in addition to the PO according to the invention, other natural lipids used together with a phospholipid carrying an active group, alone or in admixture with another lipid. Amphiphiles serving as a liposome layer(s) can be inert, structure-forming synthetic compounds, such as polyoxyethylene alkyl ethers (simple), polyoxyethylene alkyl ethers (complex) and sucrose diesters.
Способи отримання ліпосом відповідного розміру відомі у науці і не утворюють частини цього винаходу.Methods of obtaining liposomes of the appropriate size are known in science and do not form part of the present invention.
Можна навести посилання на різні посібники і літературні статті з цього предмету, наприклад, оглядову статтю 7/0 ГМірозотез аз РНагтасеціїсаї Оозаде ГРогтз", Бу УеспегКе! Вагеппої2 і Овап 9. А. Спготтеїп, і літературні джерела, наведені тут, наприклад Мем, К.С. "Ірозотев: А Ргасіїса! Арргоасі", ІК. Ргезз аї Охіога ОпімегейуReferences can be made to various manuals and literature on this subject, for example, the review article 7/0 GMirozotez az RNagtaseciisai Oozade Grogtz", Bu UespegKe! Vageppoi2 and Ovap 9. A. Spgotteip, and the literary sources listed here, for example Mem, K .S. "Irozotev: And Rgasiisa! Arrgoasi", IC. Rgezz ai Ohio Opimegeiu
Ргезз (1990)|.Rgezz (1990)|.
Діаметр ліпосоми, а також інших фармацевтично прийнятних тіл у переважному варіанті здійснення винаходу становить від «20нм до 7500мкм, більш переважно від 72О0нм до «100Онм, ще більш переважно від 75О0нм до 7/5. 790ОНМ, Ї найбільш переважно від у"8Онм до «120нм (переважно при вимірюванні вздовж найдовшої осі тіла). В одному з варіантів здійснення діаметр ліпосоми становить від бонм до 500мкм.The diameter of the liposome, as well as other pharmaceutically acceptable bodies, in the preferred embodiment of the invention is from 20nm to 7500μm, more preferably from 7200nm to 1000nm, even more preferably from 7500nm to 7/5. 790 nm, and most preferably from 8 nm to 120 nm (preferably when measured along the longest axis of the body).
Фармацевтично прийнятні тіла можуть бути суспендовані у фармацевтично прийнятному носії, такому як стерильний фізіологічний розчин, стерильна вода, апірогенна вода, ізотонічний сольовий розчин і розчини, буферизовані фосфатом (наприклад, стерильні водні розчини, що містять фосфатний буфер), разом з іншими 2о нетоксичними біосумісними речовинами, що використовуються у фармацевтичних складах, такими як допоміжні фармацевтичні засоби, буфери, консерванти і т.п. Переважно, фармацевтично прийнятні тіла виготовляють у вигляді рідкої суспензії у стерильній біосумісній рідині, такій як буферизований сольовий розчин, і вводять пацієнту будь-яким придатним шляхом, який дає можливість їх взаємодії з одним або більше компонентами імунної системи, наприклад, внутрішньоартеріальним, внутрішньовенним або, найбільш переважно, сч ов ВНнутрішньом'язовим або підшкірним введенням.Pharmaceutically acceptable bodies can be suspended in a pharmaceutically acceptable carrier, such as sterile saline, sterile water, pyrogen water, isotonic saline, and phosphate-buffered solutions (eg, sterile aqueous solutions containing phosphate buffer), together with other non-toxic, biocompatible substances used in pharmaceutical formulations, such as auxiliary pharmaceuticals, buffers, preservatives, etc. Preferably, the pharmaceutically acceptable bodies are prepared as a liquid suspension in a sterile biocompatible fluid, such as buffered saline, and administered to the patient by any suitable route that allows them to interact with one or more components of the immune system, for example, intra-arterially, intravenously, or most preferably, by intramuscular or subcutaneous injection.
Винахід передбачає, що фармацевтично прийнятні тіла можуть бути висушені сублімацією або ліофілізовані і) таким чином, щоб пізніше вони могли бути пересуспендовані для введення. Винахід також стосується комплекту частини, що включає ліофілізовані або висушені сублімацією тіла, що несуть зв'язуючі групи, і фармацевтично прийнятного носія, такого як стерильний фізіологічний розчин, стерильна вода, апірогенна вода, ізотонічний «- зо сольовий розчин і розчини, буферизовані фосфатом (наприклад, стерильні водні розчини, що містять фосфатний буфер), а також інших нетоксичних біосумісних речовин, що використовуються у фармацевтичних складах, таких 77 як допоміжні фармацевтичні засоби, буфери, консерванти і т.п. Також у склад можуть бути включені захисні «- засоби для сублімаційної сушки, відомі у фармацевтичній технології, наприклад, лактоза або сахароза.The invention provides that pharmaceutically acceptable bodies can be freeze-dried or lyophilized i) so that they can later be resuspended for administration. The invention also relates to a kit of parts comprising lyophilized or freeze-dried binding-bearing bodies and a pharmaceutically acceptable carrier such as sterile saline, sterile water, pyrogen-free water, isotonic saline, and phosphate-buffered saline ( for example, sterile aqueous solutions containing phosphate buffer), as well as other non-toxic biocompatible substances used in pharmaceutical formulations, such as pharmaceutical excipients, buffers, preservatives, etc. The composition may also include protective "- agents for freeze-drying, known in pharmaceutical technology, for example, lactose or sucrose.
Переважним способом введення фармацевтично прийнятних тіл пацієнту є ін'єкція, яку вводять щоденно, о декілька разів на тиждень, раз на тиждень або раз на місяць, протягом періоду від тижня до декількох місяців. соThe preferred method of administration of pharmaceutically acceptable bodies to a patient is by injection, which is administered daily, several times a week, once a week, or once a month, for a period of one week to several months. co
Частота і тривалість лікувального курсу будуть змінюватися у залежності від особливостей конкретного пацієнта і конкретного стану, що лікується, його тяжкості і того, чи лікування є профілактичним, оздоровчим або цілющим. Планування і оптимізація лікування знайомі досвідченим лікарям. Внутрішньом'язова ін'єкція, особливо у сідничний м'яз, найбільш переважна. Один з окремих ін'єкційних курсів, щонайменше для деяких показань за « винаходом, являє собою ін'єкцію у сідничний м'яз відповідної кількості тіл у день 1, наступну ін'єкцію у день з с 2, наступну ін'єкцію у день 14, і потім "бустерні" ін'єкції через місячні інтервали, якщо це доречно. . За принущенням, у багатьох варіантах здійснення винаходу фармацевтично прийнятні тіла, що містять на и?» своїй поверхні РО-групи у якості зв'язуючих груп, діють як модифікатори імунної системи пацієнта, на зразок дії вакцини. Відповідно, їх застосовують у таких кількостях і такими способами введення, щоб забезпечити достатню локалізовану концентрацію тіл на ділянці введення. Кількості таких тіл, придатні для модифікаціїThe frequency and duration of the treatment course will vary depending on the characteristics of the specific patient and the specific condition being treated, its severity, and whether the treatment is preventive, curative, or curative. Planning and optimization of treatment are familiar to experienced doctors. Intramuscular injection, especially in the gluteal muscle, is the most preferred. One of the separate injection courses, at least for some indications according to the invention, is an injection into the gluteal muscle of the corresponding number of bodies on day 1, the next injection on day c 2, the next injection on day 14 , and then "booster" injections at monthly intervals, if appropriate. . By implication, in many embodiments of the invention, pharmaceutically acceptable bodies containing on its surface RO groups as binding groups, act as modifiers of the patient's immune system, similar to the effect of a vaccine. Accordingly, they are used in such quantities and by such methods of introduction as to ensure a sufficient localized concentration of bodies at the site of introduction. Quantities of such bodies suitable for modification
Го! імунної системи, можуть безпосередньо не корелювати з розміром тіла реципієнта і тому можуть помітно відрізнятися від доз лікарських засобів, що розроблені для забезпечення терапевтичних рівнів активних речовин о у кровообігу і тканинах пацієнта. Відповідно, дози лікарських засобів повинні бути набагато більші, ніж дози - модифікаторів імунної системи.Go! of the immune system, may not directly correlate with the recipient's body size and therefore may differ markedly from the doses of drugs designed to provide therapeutic levels of active substances in the patient's bloodstream and tissues. Accordingly, doses of medicines should be much higher than doses of immune system modifiers.
Кореляцію між вагою ліпосом і кількостями ліпосом досвідчений фахівець у ліпосомних композиціях може - визначити на основі тієї інформації, що двошарова везікула діаметром 10Онм містить 81230 ліпідних молекул на як 1 везікулу, розподілених приблизно 50:50 між шарами |див. Кіспага Наїтідап - 1992 Опімегейу ої ВпйізАThe correlation between the weight of liposomes and the number of liposomes can be determined by an experienced specialist in liposome compositions based on the information that a bilayer vesicle with a diameter of 10 Ohm contains 81,230 lipid molecules per 1 vesicle, distributed approximately 50:50 between the layers | see Kispaga Naitidap - 1992 Opimegeyu oi VpyizA
СоІштріа РИО Тпезіз "Ттапвтетбргапе рН агадіепів іп ІПрозотевз (птісгоїогт): агид-мевісіе іпіегасіопе і ргоїопSoIstria RIO Tpeziz "Ttapvtetbrgape pH agadiepiv ip IProzotevs (ptisgoiogt): agid-mevisie ipiegasiope and rgoiop
Пих", рибіїзней ру Майопа! (ібгагу ої Сапада, ОНЧаужша, Сапада (1993); МОпімегейу Місгоїйтв огдег по.Pih", ribiiznei ru Mayopa! (ibgagu oi Sapada, ONChauzsha, Sapada (1993); MOpimegeyu Misgoiitv ogdeg po.
ОМІО0406756; Сападіапа по. 942042220, ІБВМ 0315796936). Звідси можна розрахувати, наприклад, що дозаOMIO0406756; Sapadiapa by. 942042220, IBVM 0315796936). From here you can calculate, for example, that the dose
ЗХ108 везікул (порядок дози, що використовується іп мімо в окремих прикладах, наведених нижче) еквівалентна о 4,06х1073 ліпідних молекул. Використовуючи число Авогадро для кількості молекул ліпідів у грам-молекулі о (моль), 6,023х1023, можна визначити, що це становить 6,74хХ1077! моль, що при молекулярній масі РО 729 складає приблизно 3,83х10 8 г, або 38,Знг РО для такої дози. 60 Кількості фармацевтично прийнятних тіл, що мають бути введені, будуть варіюватися у залежності від природи захворювання ссавця, що підлягає лікуванню, і від природи і особливостей пацієнта. Переважно, ефективна кількість фармацевтично прийнятних тіл є нетоксичною для пацієнта, і не настільки велика, щоб зашкодити імунній системі. При використанні внутрішньоартеріального, внутрішньовенного, підшкірного або внутрішньом'язового введення стерильної водної суспензії фармацевтично прийнятних тіл переважним є бо введення, на кожну дозу, від 70,1 до 50мл рідини, яка містить кількість тіл, загалом еквівалентну 1095-100090 кількості лейкоцитів, що звичайно міститься в еквівалентному об'ємі суцільної крові. Переважно, кількість тіл, що вводиться за одну доставку пацієнтові-людині, становить від 500 до -2,5Х10 9 («25Онг тіл у випадку ліпосоми і пропорціонально різниці у щільності для інших варіантів тіл), більш переважно від 1000 до 71500000000, ще більш переважно від 10000 до "50000000 і найбільш переважно від 7200000 до «2000000.ХХ108 vesicles (the order of the dose used ip mimo in the individual examples below) is equivalent to 4.06x1073 lipid molecules. Using Avogadro's number for the number of lipid molecules in a gram-molecule o (mol), 6.023x1023, we can determine that this is 6.74x1077! mol, which at the molecular weight of PO 729 is approximately 3.83x10 8 g, or 38.Zng PO for such a dose. 60 The amounts of pharmaceutically acceptable bodies to be administered will vary depending on the nature of the mammalian disease to be treated and the nature and characteristics of the patient. Preferably, an effective amount of pharmaceutically acceptable bodies is non-toxic to the patient, and is not so great as to harm the immune system. When using intra-arterial, intravenous, subcutaneous or intramuscular administration of a sterile aqueous suspension of pharmaceutically acceptable bodies, it is preferable to administer, for each dose, from 70.1 to 50 ml of liquid, which contains the number of bodies, in general, equivalent to 1095-100090 of the number of leukocytes, which is usually contained in an equivalent volume of whole blood. Preferably, the number of bodies administered per delivery to a human patient is from 500 to -2.5X10 9 ("25Ong bodies in the case of a liposome and proportionally to the difference in density for other body variants), more preferably from 1000 to 71500000000, even more preferably from 10,000 to "5,000,000 and most preferably from 7,200,000 to "2,000,000.
Оскільки фармацевтично прийнятні тіла у способі за винаходом діють як модифікатори імунної системи, подібно до вакцини, кількість таких тіл, що вводиться на ділянці ін'єкції за кожне введення, може являти собою більш значуще кількісне визначення, ніж кількість або вага тіл на одиницю ваги тіла пацієнта. З тієї ж причини, можна принустити, що ефективні кількості або числа тіл, використані для малої тварини, можуть не 70 переводитися безпосередньо за ваговим співвідношенням у ефективні кількості для більших ссавців (тобто, більше 5кг).Because the pharmaceutically acceptable bodies in the method of the invention act as immune system modifiers, similar to a vaccine, the number of such bodies injected at the injection site per administration may represent a more meaningful quantification than the number or weight of bodies per unit body weight the patient For the same reason, it can be argued that effective amounts or body numbers used for a small animal may not translate directly on a weight basis to effective amounts for larger mammals (ie, greater than 5 kg).
Цей винахід придатний для застосування у профілактиці і/або лікуванні широкого діапазону захворювань ссавців, у яких задіяні функція Т-клітин, запалення, ендотеліальна дисфункція і невідповідна експресія цитокінів. Для лікування може бути вибраний пацієнт, що страждає на таке захворювання або схильний до нього. 75 Вираз "лікування" означає зниження симптомів, наприклад, але не тільки, зниження тяжкості або кількості симптомів конкретного захворювання або обмеження подальшого прогресування симптомів.This invention is suitable for use in the prevention and/or treatment of a wide range of mammalian diseases involving T-cell function, inflammation, endothelial dysfunction and inappropriate cytokine expression. A patient suffering from such a disease or prone to it may be selected for treatment. 75 The term "treating" means reducing symptoms, such as, but not limited to, reducing the severity or number of symptoms of a particular disease or limiting further progression of symptoms.
Що стосується розладів функції Т-клітин (захворювань, опосереднених Т-клітинами), ці розлади включають усі і будь-які захворювання, опосереднені щонайменше частково Т-клітинами, і включають, наприклад, виразки, рани і аутоімунні захворювання, в тому числі, але не тільки, діабет, склеродермію, псоріаз і ревматоїдний артрит.With respect to disorders of T cell function (diseases mediated by T cells), these disorders include all and any diseases mediated at least in part by T cells, and include, for example, ulcers, wounds, and autoimmune diseases, including but not limited to not only, diabetes, scleroderma, psoriasis and rheumatoid arthritis.
Винахід придатний для застосування при запальних алергічних реакціях, реакціях при трансплантаціях органів і клітин і мікробних інфекціях, що викликають запальні реакції. Винахід також придатний для застосування у профілактиці проти окислювального стресу і/або ішемічного реперфузійного ураження, прийняття отрут, дії токсичних хімікатів, радіаційного пошкодження і дії подразнюючих речовин, що передаються повітрям або водою, наприклад, таких, що викликають запалення. Винахід також придатний для застосування при с запальних, алергічних і опосереднених Т-клітинами захворюваннях внутрішніх органів, таких як нирки, печінка, серце і т.д. і9)The invention is suitable for use in inflammatory allergic reactions, organ and cell transplant reactions, and microbial infections causing inflammatory reactions. The invention is also suitable for prophylactic use against oxidative stress and/or ischemic reperfusion injury, ingestion of poisons, exposure to toxic chemicals, radiation damage, and exposure to airborne or water-borne irritants, such as those that cause inflammation. The invention is also suitable for use in inflammatory, allergic and T-cell-mediated diseases of internal organs, such as kidneys, liver, heart, etc. i9)
Що стосується захворювань, які включають невідповідну експресію цитокінів, для яких цей винахід є придатним, вони включають усі і будь-які захворювання, в яких задіяна невідповідна експресія цитокінів, наприклад, нейродегенеративні захворювання. Нейродегенеративні захворювання, включаючи синдром Дауна, «- хворобу Альцгеймера і хворобу Паркінсона, пов'язані з підвищеними рівнями певних цитокінів, включаючи інтерлейкін-1В (1-18) (див. Сгійіп МУЗТ еї аїЇ. (1989); Моді М. еї аї. (1996)). Також було показано, що 1-18 -- інгібує довготривале потенціювання у гіпокампі |Мигтгау, С. А. еї аї. (1998)). Довготривале потенціювання у «ч- гіпокампі являє собою певну форму синаптичної пластичності і звичайно розглядається як придатна модель пам'яті і навчання |Віїв5, Т. М. Р. еї аї. (1993)). Таким чином, невідповідна експресія цитокінів у мозку на о цей час вважається задіяною у розвитку і прогресуванні нейродегенеративних захворювань і нейрозапальних с захворювань.Diseases involving inappropriate cytokine expression for which the present invention is applicable include any and all diseases involving inappropriate cytokine expression, such as neurodegenerative diseases. Neurodegenerative diseases, including Down's syndrome, Alzheimer's disease and Parkinson's disease, are associated with increased levels of certain cytokines, including interleukin-1B (1-18) (see Sgiyip MUZT ei aiYi. (1989); Mody M. ei ai (1996)). It was also shown that 1-18 inhibits long-term potentiation in the hippocampus. (1998)). Long-term potentiation in the hippocampus represents a certain form of synaptic plasticity and is usually considered a suitable model of memory and learning. (1993)). Thus, inappropriate expression of cytokines in the brain is currently considered to be involved in the development and progression of neurodegenerative diseases and neuroinflammatory diseases.
Таким чином, винахід є придатним для лікування і профілактики широкого діапазону нейродегенеративних та інших неврологічних захворювань ссавців, включаючи синдром Дауна, хворобу Альцгеймера, хворобу «Thus, the invention is suitable for the treatment and prevention of a wide range of neurodegenerative and other neurological diseases of mammals, including Down's syndrome, Alzheimer's disease, "
Паркінсона, сенільну деменцію, депресію, хворобу Хантінггона, периферичні невропатії, синдромParkinson's disease, senile dementia, depression, Huntington's disease, peripheral neuropathies, syndrome
Джуліана-Барра, хвороби спинного мозку, невропатичні захворювання суглобів, хронічне запальне демієлінуюче с захворювання, невропатії, включаючи мононевропатію, поліневропатію, симетричну дистальну сенсорну ц невропатію, захворювання нервово-м'язових синапсів, міастенії і аміотрофічний латеральний склероз (АЛЛО). "» Лікування і профілактика цих нейродегенеративних захворювань являє собою особливо переважний варіант здійснення винаходу, при цьому лікування хвороби Альцгеймера, хвороби Паркінсона і АЛС є найбільш переважним. (ее) Що стосується захворювань, що включають ендотеліальну дисфункцію, винахід є придатним для лікування і профілактики широкого діапазону таких захворювань ссавців, включаючи усі і будь-які захворювання, о опосереднені щонайменше частково ендотеліальною дисфункцією, наприклад, кардіоваскулярні захворювання, - такі як атеросклероз, периферичне артеріальне захворювання або оклюзійне ураження артерій, застійна серцева недостатність, цереброваскулярне захворювання (інсульт), інфаркт міокарда, стенокардія, гіпертонія і - т.д., вазоспастичні захворювання, такі як хвороба Рейно, серцевий синдром Х, мігрень і т.д., а також - М пошкодження в результаті ішемії (ішемічне ураження або ішемічне реперфузійне ураження). Загалом, це може бути по суті будь-яке захворювання, патологія якого включає невідповідно функціонуючий ендотелій.Juliana-Barra, spinal cord diseases, neuropathic joint diseases, chronic inflammatory demyelinating disease, neuropathies including mononeuropathy, polyneuropathy, symmetric distal sensory neuropathy, neuromuscular synapse disease, myasthenia gravis, and amyotrophic lateral sclerosis (ALS). "» Treatment and prevention of these neurodegenerative diseases is a particularly preferred embodiment of the invention, with the treatment of Alzheimer's disease, Parkinson's disease and ALS being the most preferred. (ee) With respect to diseases involving endothelial dysfunction, the invention is suitable for the treatment and prevention of a wide range of a range of such mammalian diseases, including all and any diseases mediated at least in part by endothelial dysfunction, for example, cardiovascular diseases - such as atherosclerosis, peripheral arterial disease or arterial occlusive disease, congestive heart failure, cerebrovascular disease (stroke), myocardial infarction , angina pectoris, hypertension, etc., vasospastic diseases such as Raynaud's disease, cardiac syndrome X, migraine, etc., and - M damage as a result of ischemia (ischemic damage or ischemic reperfusion damage). In general, this can be essentially any disease, the pathology of which in an inappropriately functioning endothelium is keyed.
Інші показання для композицій і способів за винаходом включають введення пацієнтам з метою прискорення загоєння ран і виразок, а також введення пацієнтам перед хірургічними операціями для прискорення швидкості їх відновлення після операцій, включаючи швидкість загоєння хірургічних ран і швів.Other indications for the compositions and methods of the invention include administration to patients to accelerate the healing of wounds and ulcers, as well as administration to patients before surgery to accelerate the speed of their recovery after operations, including the speed of healing of surgical wounds and sutures.
Ф, Що стосується "сердечних захворювань", цей винахід є придатним для лікування і профілактики широкого ко діапазону таких захворювань ссавців, включаючи усі і будь-які захворювання, пов'язані із серцем, наприклад, аритмії шлуночків (тахікардія або фібриляція шлуночків) і раптова смерть від серцевого захворювання. бо Схильність пацієнтів до серцевих захворювань, таких як аритмії і раптова смерть від серцевого захворювання, часто може бути визначена за подовженими інтервалами ОТ-с у ритмі серцебиття. Введення композицій за переважними варіантами здійснення винаходу повинно зменшити інтервали ОТ-с у пацієнтів-ссавців, що буде показником зниження схильності до аритмії і раптової смерті від серцевого захворювання.F. With respect to "cardiac diseases", the present invention is suitable for the treatment and prevention of a wide range of such mammalian diseases, including all and any diseases related to the heart, for example, ventricular arrhythmias (ventricular tachycardia or fibrillation) and sudden cardiac death. death from heart disease. Because the predisposition of patients to heart diseases, such as arrhythmias and sudden death from heart disease, can often be determined by prolonged intervals of OT-c in the rhythm of the heartbeat. Administration of the compositions according to preferred embodiments of the invention should reduce OT-s intervals in mammalian patients, which will be an indicator of reduced susceptibility to arrhythmia and sudden death from heart disease.
Далі винахід описаний, з ілюстративною метою, за допомогою необмежуючих прикладів. 65 ПрикладиNext, the invention is described, for illustrative purposes, by means of non-limiting examples. 65 Examples
У наведених далі прикладах скорочення мають значення, визначені нижче. Якщо скорочення не визначене, то воно має загальноприйняте значення. мкг - мікрограм мкл - мікролітрIn the following examples, abbreviations have the meanings defined below. If the abbreviation is not defined, it has the generally accepted meaning. μg - microgram μl - microliter
МКМ - мікромолярнийMKM - micromolar
СНнЗ - контактна гіперчутливість см - сантиметрСНнЗ - contact hypersensitivity cm - centimeter
ОМ5О - диметилсульфоксидOM5O - dimethyl sulfoxide
ОМЕВ - 2,4-динітрофторбензол 70 рнз - гіперчутливість уповільненого тинуOMEV - 2,4-dinitrofluorobenzene 70 rnz - hypersensitivity of delayed tin
ЕЮН - етанол ге грам год. - годинаEUN - ethanol he gram h. - an hour
НІ - Герц в.м. - внутрішньом'язово і.п. - інтраперитонеально кг - кілограмNO - Hertz v.m. - intramuscularly i.p. - intraperitoneally kg - kilogram
І РЗ - ліпополісахаридAnd RZ - lipopolysaccharide
Г ТР - довготривале потенціювання мг - міліграм хв. - хвилина мл - мілілітрG TR - long-term potentiation mg - milligram min. - minute ml - milliliter
ММ - мілімолярний мес - мілісекунда сч нг - нанограм щі нм - нанометр і)MM - millimolar mes - millisecond ng - nanogram schi nm - nanometer i)
НМ - наномолярнийNM - nanomolar
РВ5 - сольовий розчин, буферизований фосфатомРВ5 - saline solution, buffered with phosphate
ПЛР - полімеразна ланцюгова реакція «- зо РОРЗ - 1-пальмітоїл-2-олеоїл-зп-гліцеро-3-І(фосфо-1| -серині, тут має назву Р5PCR - polymerase chain reaction "- with RORZ - 1-palmitoyl-2-oleoyl-zp-glycero-3-I(phospho-1| -serine, here it is called P5
РОРО - 1-пальмітоїл-2-олеоїл-зп-гліцеро-3-Іфосфо-рац-(І -гліцерин)|), тут має назву РО --POPO - 1-palmitoyl-2-oleoyl-zp-glycero-3-Iphospho-rac-(I -glycerin)|), here it has the name PO --
РОРСО - 1-пальмітоїл-2-олеоїл-зп-гліцеро-3-фосфохолін, тут має назву РС об/хв.- обертів на хвилину «- с - секундаRORSO - 1-palmitoyl-2-oleoyl-zp-glycero-3-phosphocholine, here it has the name RS rpm - revolutions per minute "- s - second
Якщо не вказане інше, точна форма ліпідів, використовуваних у дослідах, являла собою РОРБ5, РОРО і оUnless otherwise specified, the exact form of lipids used in the experiments was РОРБ5, РОРО and o
РОРС, що визначені вище. соRORS defined above. co
Приклад 1Example 1
Ліпосоми середнього діаметру 100--20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і мали такий склад:Liposomes with an average diameter of 100--20 nm were obtained according to standard methods known in science and had the following composition:
Група А-100965 Р5 «Group A-100965 P5 «
Група В-10095 РО 8 с Група С - контрольна, без ліпосом. ц Загальну суспензію кожної ліпосомної композиції, що містила 4,8 х 1077 ліпосом/мл, розбавили РВЗ з -» отриманням ін'єкційної суспензії, що містила б х 10 9 часток/мл. Ліпосомні суспензії використовували для ін'єкцій самицям мишей ВАЇ В/с (даскгоп І арогайюгіез) віком 6-8 тижнів і вагою 19-23г, для визначення ефекту на розпухання вух в моделі контактної гіперчутливості (СН5) мишей. Модель СНО тестували на (ее) Тп1-опосереднені запальні реакції. о Тварин розподіляли на три групи, по 5 тварин у кожній групі. Групи А і В отримували близько З х 105 вищеописаних ліпосом (тобто, 10095 РС і 10095 РО, відповідно), в об'ємі близько 5Омкл. Група С була -й контрольною групою, що не отримувала ліпосом. -л 20 ПротоколGroup B-10095 PO 8 s Group C - control, without liposomes. The total suspension of each liposome composition containing 4.8 x 1077 liposomes/ml was diluted with RVZ to obtain an injection suspension containing x 10 9 particles/ml. Liposome suspensions were used for injections into female mice of VAI V/s (duskgop and arogaiyugiez) aged 6-8 weeks and weighing 19-23g, to determine the effect on ear swelling in the model of contact hypersensitivity (CH5) of mice. The CHO model was tested for (ee) Tp1-mediated inflammatory reactions. o The animals were divided into three groups, 5 animals in each group. Groups A and B received about 3 x 105 of the above-described liposomes (that is, 10095 RS and 10095 PO, respectively), in a volume of about 5 Ωcl. Group C was the control group that did not receive liposomes. -l 20 Protocol
Виконували такі експерименти: -The following experiments were performed: -
Ф) іме) 60 б5 птн тестя йо ето дент їй ї н- х т є сет ; - пету ЖЕ ; - МЕбина ГЯйшоє (деки! дено |Денеа лденей ден ІДеНКЄ Гдеву, з | І се ! | | ово |. Е - тк | зай з ст сла п 7 сплю : ее ву фс їн гео т те я пита Перлкняа сет ; й й З одрденся У І 2 г, І СУ Й І. : : зеееноМВі» : чуровое: |, ; пдв. ; . | Кенія -Ш й .Ф) име) 60 b5 ptn father-in-law his eto dent her her n-x t is set ; - Petu ZHE; - MEbyna Gyaishoe (deky! deno |Denea ldenei den IDeNKYE Gdevu, z | I se ! | | ovo |. E - tk | zay z st sla p 7 sleep: ee vu fs yn geo t te I ask Perlknyaa set; y y From oderdensya U I 2 g, I SU Y I. : : zeeenoMVi" : churovoe: |, ; pdv. ; . | Kenya -Sh and .
Я сш Ді шо ЕЕ, М Ин КОМА ДАО КА у тя Зо ди и стю совет вими т отв тт УллюТИТНКАТ пяче поки я я - пон анкотиг яI ssh Di sho EE, M In KOMA DAO KA u tya Zodi i styu sovet vimy t otv tt UllyuTITNCAT pache until I I - Mon ankotig I
У дні 1-6 мишам Груп А і В вводили ін'єкцію відповідного препарату ліпосом. Близько 300000 ліпосом вводили у 50-мкл об'ємі шляхом внутрішньом'язової (ІМ) ін'єкції, до загальної кількості за весь тестовий період близько 1800000 ліпосом. Мишам контрольної групи (Група С) не вводили ліпосом, але сенсибілізували, провокували і тестували таким же чином, що й Групи А і В, як описано нижче. ера ай ко- хі р шк сій я ке сів соня пиніні іній прі стіні опититтуннтрнй и Ддсі існнтт 4 бін нні бін птн обідній - їні інт ііі: таня Янь пе На пре р са ее й р овиичевде я ве нен ах СЕ ЕВ р ДЕ, Що Шк жі вай гOn days 1-6, the mice of Groups A and B were injected with the corresponding drug liposomes. About 300,000 liposomes were administered in a 50-μl volume by intramuscular (IM) injection, for a total of about 1,800,000 liposomes over the entire test period. Mice in the control group (Group C) were not injected with liposomes, but were sensitized, challenged and tested in the same manner as Groups A and B, as described below. era ay kohi r shk sii i ke siv sonya pinini inii by the wall opitittunntrnj i Ddsi isnntt 4 bin nni bin ptn lunch - ini int iii: tanya Yan pe Na pre r sa ee y r ovyychevde i ve nen ah SE EV r DE , What Shk zhi wai g
І - г Ц фан кон - й т : ти 7 й и опнйкряають У |! й з ! " : намзннянн | й 7 ввесь ЇЇ, Я ч- : Ж "-НІЗаЦі ; . ; ЩІ ацЦЕ Її : і - ШІ Я й вич в | ЕТ Б М сон к Ех ШУ щ Меч 1 Я ав) лав До и Клеван | Тейсеокеє | Теибсшннянн | Тебе Бен 7 рення | Бреектть ен зя КВТ 0б56 | бек; | ТСЕКЦі | Тек | ЛИ'Овіь: | Я | ПРЕКЩЯ, ВИМРЕУЄЇ с : Щ Її док І Е Ч ча т : : . Мізаця ! ї Ч жая: 1 ; ше ДІ т0 Сенсибілізація 8 с У день 1, після ліпосомної ін'єкції у цей день, мишей анестезували 0,2мл розчину Б5мг/мл натрію "з пентобарбіталу шляхом і.п. ін'єкції. Абдомінальну шкіру миші обприскали 7095 ЕН і застосували лезо " . . - . . скальпеля для видалення ділянки волосся діаметром близько 1 дюйма з абдомену. Тоді на виголену ділянку нанесли 25мкл 0,595 2,4-динітрофторбензолу (ОМЕВ) у суміші 4:1 ацетонуюливкової олії з використанням піпетки.I - g Ts fan con - y t : you 7 y y opnykryaaut U |! and with ! " : namznnann | and 7 all HER, I h- : Ж "-NIZaTsi ; . ; SCHI acCE Her : and - ШИ I and vych in | ET B M son k Eh SHU sh Mech 1 I av) lav Do i Klevan | Teiseokee | Teibsshnnann | You Ben 7 rennia | Breektt en zya KVT 0b56 | back; | TSEKTSi | Tek | LI'Ovii: | I | PREKSHYA, DYING s : Щ Her doc IE Ч cha t : : . Mizatsa! ХХ жая: 1 ; ш DI t0 Sensitization 8 s On day 1, after liposome injection on this day, mice were anesthetized with 0.2 ml of a solution of B5mg/ml sodium pentobarbital by i.p. injection. The abdominal skin of the mouse was sprayed with 7095 EN and a blade was used ". . - . scalpel to remove an area of hair about 1 inch in diameter from the abdomen. Then, 25 μl of 0.595 2,4-dinitrofluorobenzene (OMEV) in a 4:1 mixture of acetone and olive oil was applied to the shaved area using a pipette.
Провокація бо Після ліпосомної ін'єкції у день б мишам робили провокаційну пробу ОМЕВ шляхом нанесення 1Омкл 0,290 ав | ОМЕВ на дорсальну поверхню правого вуха піпеткою і нанесення 1Омкл носія на ліве вухо піпеткою. з РезультатиProvocation bo After the liposome injection on day b, mice were given a provocation test of OMEV by applying 1 omcl 0.290 av | OMEV on the dorsal surface of the right ear with a pipette and application of 1 omcl carrier on the left ear with a pipette. with Results
У день 7, через 24 години після провокації, кожну тварину анестезували галотаном і виміряли товщину вуха - о з використанням підпружиненого мікрометра Реасоск. Результати представили як різницю між товщиною щ обробленого ОМЕВ правого вуха і товщиною обробленого носієм лівого вуха. Експерименти повторювали тричі "7 на подібних тваринах. Збільшення розпухання вуха використовували як міру СНоЗ-відповіді. Значущість результатів визначали на основі подвійної вибірки Ї-тесту Ст'юдента. Величину Р «0,05 вважали значущою.On day 7, 24 hours after challenge, each animal was anesthetized with halothane and ear thickness was measured using a Reasosk spring-loaded micrometer. The results were presented as the difference between the thickness of the OMEV-treated right ear and the thickness of the vehicle-treated left ear. The experiments were repeated three times 7 on similar animals. The increase in ear swelling was used as a measure of the SNOZ-response. The significance of the results was determined on the basis of a two-sample Student's χ-test. A P value of 0.05 was considered significant.
Результати представлені на Фіг.1, у вигляді стовпчастої діаграми, що показує середні величини розпухання 25 вух з трьох експериментів, у мкм.The results are presented in Fig. 1, in the form of a bar chart showing the average swelling values of 25 ears from three experiments, in μm.
ГФ) Фіг.1 показує, що за допомогою ін'єкції ліпосом за винаходом було досягнуто значне зниження розпухання кю вух. Зниження, досягнуте за допомогою 100906 Ро-ліпосом суттєво вище, ніж для 10095 Ре-ліпосом.GF) Fig. 1 shows that with the help of injection of liposomes according to the invention, a significant reduction in the swelling of the ears was achieved. The reduction achieved with 100906 Rho-liposomes is significantly higher than for 10095 Re-liposomes.
Приклад 2Example 2
Ліпосоми середнього діаметру 100-20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і 60 мали такий склад:Liposomes with an average diameter of 100-20 nm were obtained according to standard methods known in science, and 60 had the following composition:
Група А-10095 РОGroup A-10095 RO
Група В - 7595 РО, 2595 РОСGroup B - 7595 RO, 2595 RUS
Група С - 5095 РО, 5095 РСGroup C - 5095 RO, 5095 RS
Група О - 2595 РО, 75965 РС бо Група Е - тільки РВ5Group O - 2595 RO, 75965 RS because Group E - only RV5
Група Е - без ін'єкційGroup E - without injections
Загальну суспензію кожної ліпосомної композиції, що містила 4,8 х 1077 ліпосом/мл, розбавили РВ5 з отриманням ін'єкційної суспензії, що містила 12 х 106 ліпосом /мл. Ліпосомні суспензії використовували для ін'єкцій мишам для визначення ефекту на розпухання вух у моделі СНЗ мишей, біологічній системі, корисній для дослідження ТП1-опосереднених запальних реакцій. Для цих експериментів використовували самиць мишейThe total suspension of each liposome composition containing 4.8 x 1077 liposomes/ml was diluted with PB5 to obtain an injection suspension containing 12 x 106 liposomes/ml. Liposome suspensions were used for injection into mice to determine the effect on ear swelling in the murine model of CHD, a biological system useful for studying TP1-mediated inflammatory responses. Female mice were used for these experiments
ВАЇ В/с (дасКвгоп І арогайгіез) віком 6-8 тижнів і вагою 19-23Гг.VAI V/s (dasKvgop I arogaigiez) aged 6-8 weeks and weighing 19-23Hg.
Тварин розподілили на 6 груп (Групи А-Е, описані вище) по 10 тварин у кожній групі. Також у дослідження включили контрольні групи, що не отримували ін'єкцій (Група Е) або отримували ін'єкції РВ5 без ліпосом (Група 70. Е). Тваринам Груп А-О вводили ін'єкції ХОмкл вищеописаних ліпосомних суспензій, кожна з яких містила близько 6 х 105 ліпосом.The animals were divided into 6 groups (Groups A-E, described above) with 10 animals in each group. Control groups that did not receive injections (Group E) or received injections of RV5 without liposomes (Group 70. E) were also included in the study. Animals of Groups A-O were injected with 10 ml of the above-described liposome suspensions, each of which contained about 6 x 105 liposomes.
ПротоколProtocol
Тест включав сенсибілізацію (Зепв) речовиною, що потенційно викликає запалення, ін'єкції ліпосом (Іпі) тестовим тваринам або РВ5 контрольним тваринам і провокацію (Спа!) речовиною, що потенційно викликає 75 запалення, з наступним вимірюванням вух (Меавз) для визначення того, чи є ін'єкція ліпосом ефективною проти розвитку запалення, викликаного провокацією.The test involved sensitization (Zepv) with a potentially inflammatory substance, injection of liposomes (Ipi) into test animals or PB5 into control animals, and provocation (Spa!) with a potentially inflammatory substance followed by ear measurements (Meavs) to determine whether , whether liposome injection is effective against the development of provocation-induced inflammation.
Виконували такі експерименти:The following experiments were performed:
Груна |Ліпосоме | Деме 7 | Дене-?. День Я День; | Денв5 | Деввб | День? ( 201 Тк Ч. І І і ! | її;Soil | Liposome | Deme 7 | Dan-?. Day I am Day; | Denv5 | Devvb | Day? ( 201 Tk Ch. I I i ! | her;
І! у йеРО барви і |) ої 1 ба) Ме 1/9AND! in yeRO colors and |) oi 1 ba) Me 1/9
Ї щі | ! | І Щі | ! , ЦИ ТО, : ке Ї іEat more ! | And Shchi | ! , CI TO, : ke Y i
Ї вот ее уст НЕО Я Кс НН етики неви ен як на ЕК ет ств скиту зсуви: ПИЙHere is her mouth NEO I Ks NN of ethics nev en as on EK et sv skit of landslides: DRINK
ОВ рр бенн | Зб | Ж о) о у ба; Ме оOV yr benn | Зб | Z o) o u ba; Me o
І Ж І : Й ї Ід) Ї і ! Ка | | 7 Шо з | | Ки шк І Що Що. й. 1. Й | З соI Ж I : І і Id) І і ! Ka | | 7 Sho with | | What is it and what is it. and. 1. And | With co
Ера евддвнс нквстасн НН: НЕ УТ Ж кн ств СВ як пеніс. пит Та ШЕ ТИВНЕ пис НЕ с УНН тової Ар, ЇЇ | І | Її « ! т більки: з З і; |!Era evddvns nkvstasn NN: NOT UT J same kn st SV as penis. pyt Ta SHE TIVNE pis NOT with UNN of your Ar, HER | And | Her " ! t signs: with Z and; |!
Ки В. Е ; ; г, ! : Ї т ш ! Б МносВи. ! Її ; Ї Ї і 45. МК Її і ї п ша Мч РН ИН Да т -жк лик х клини лих тиви пи то спос т Зв, рт. со вв з нВс ев рій Зно ПО ресокні м пи п вл ЕЕ В яоістатя я я кт Й т со У дні 1-6 мишам вводили відповідні ліпосоми, як вказано вище. Ліпосоми вводили шляхом в.м. ін'єкції вKi V.E. ; g, ! : Y t sh ! B Plural. ! Her ; І І i 45. MK Her i і p sha Mch RN YN Da t -zhk lyk x klyny lyh tivy pi to spost t Sv, rt. On days 1-6, mice were injected with the corresponding liposomes as indicated above. Liposomes were administered by i.m. injections in
І ав | об'ємі 5Омкл, тобто, 600000 ліпосом на ін'єкцію, до загальної кількості за весь тестовий період близько з 3600000 ліпосом. Мишам контрольної групи не вводили ліпосом, але сенсибілізували, провокували і тестували таким же чином, що й інші групи мишей, як описано нижче. - 70 Сенсибілізація (Зепв) га У день 1, після ліпосомної ін'єкції у цей день, мишей анестезували 0,2мл розчину Б5мг/мл натрію фенобарбіталу шляхом і.п. ін'єкції. Абдомінальну шкіру миші обприскали 7095 ЕЮН і застосували скальпель для видалення ділянки волосся діаметром близько 1 дюйма з абдомену. Тоді на виголену ділянку нанесли 25мМкл 0,595 2,4-динітрофторбензолу (ОМЕВ) у суміші 41 ацетону:оливкової олії з використанням піпетки. 99 Провокація (Спаї)And av | volume of 5Omcl, that is, 600,000 liposomes per injection, to the total amount for the entire test period of about 3,600,000 liposomes. Mice in the control group were not injected with liposomes, but were sensitized, challenged and tested in the same manner as the other groups of mice as described below. - 70 Sensitization (Zepv) ha On day 1, after liposome injection on this day, mice were anesthetized with 0.2 ml of B5 mg/ml sodium phenobarbital solution by i.p. injections. The abdominal skin of the mouse was sprayed with 7095 EUN and a scalpel was used to remove an area of hair about 1 inch in diameter from the abdomen. Then, 25 µl of 0.595 2,4-dinitrofluorobenzene (OMEV) in a mixture of 41 acetone:olive oil was applied to the shaved area using a pipette. 99 Provocation (Spai)
ГФ) У день 6, після ліпосомної ін'єкції у цей день, мишам робили провокаційну пробу (Спа!) ОМЕВ таким чином: з 10мкл 0,296 ОМЕВ наносили піпеткою на дорсальну поверхню правого вуха, а 1Омкл носія наносили піпеткою на ліве вухо.GF) On day 6, after liposome injection on this day, mice were challenged (Spa!) with OMEV as follows: from 10 µl 0.296 OMEV was pipetted onto the dorsal surface of the right ear, and 1 µl of the vehicle was pipetted onto the left ear.
Результати 60 У день 7, через 24 години після провокації, кожну тварину анестезували галотаном і виміряли товщину вуха (Меаз) з використанням підпружиненого мікрометра Реасоск. Збільшення розпухання вуха використовували як міру СН5З-відповіді. Результати представили як різницю між товщиною обробленого правого вуха і товщиною обробленого носієм лівого вуха. Значущість результатів між двома групами визначали на основі подвійної вибірки і-тесту Стюдента. Величину Р «0,05 вважали значущою. бо Результати представлені графічно на Фіг.2, у вигляді стовпчастої діаграми, що показує розпухання вух у мкм. При побудові діаграми використовували середню величину з відповідних експериментів.Results 60 On day 7, 24 hours after challenge, each animal was anesthetized with halothane and ear thickness (Meaz) was measured using a Reasosc spring-loaded micrometer. The increase in ear swelling was used as a measure of the CH53 response. Results were presented as the difference between the thickness of the treated right ear and the thickness of the vehicle-treated left ear. The significance of the results between the two groups was determined on the basis of a two-sample Student's i-test. A P value of 0.05 was considered significant. The results are presented graphically in Fig. 2, in the form of a bar chart showing the swelling of the ears in microns. When constructing the diagram, the average value from the corresponding experiments was used.
Фіг.2 показує, що за допомогою 100 і 7595 РО було досягнуте значне зниження розпухання вух, що свідчить про те, що обидві ці концентрації забезпенують захист проти розвитку запалення від контакту з алергенноюFig. 2 shows that with the help of 100 and 7595 PO, a significant reduction in ear swelling was achieved, which indicates that both of these concentrations provide protection against the development of inflammation from contact with the allergen
Вечовиною, ОМЕВ. 5095 ії 2595 РО-ліпосоми також показали зниження порівняно з обома контрольними дослідами, але різниця в цьому експерименті не досягла статистичної значущості.Ingredient, OMEV. 5095 and 2595 PO-liposomes also showed a decrease compared to both control experiments, but the difference in this experiment did not reach statistical significance.
Приклад ЗExample C
Ліпосоми середнього діаметру 100-20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і мали склад 75956 РО, 25956 РОС. Загальну суспензію, що містила 4,8 х 1014. ліпосом/мл, використовували, як 70 описано вище, і розбавляли у РВ5 з отриманням ін'єкційної суспензії, що містила такі концентрації ліпосом:Liposomes with an average diameter of 100-20nm were obtained according to standard methods known in science, and had a composition of 75956 РО, 25956 РОС. A total suspension containing 4.8 x 1014 liposomes/ml was used as described above and diluted in PB5 to obtain an injectable suspension containing the following concentrations of liposomes:
Група й й ; о це тера і ція «ІН тя о со М на; роя и ко Її гру "Й. І : | І їн'єкцію і ІGroup y y ; o ce tera i tia "IN tia o so M na; roya i ko Her game "Y. I : | And injection and I
Ж | во. 4 ! : :F | in 4! : :
ЧО | 7596 РО, гою Да и а! в 250 ііннвтентвінаятіннх ї- ання нн ти винна: нс тт а ПН пи т ннХО | 7596 RO, goy Yes and a! in 250 iinnvtentvinayatinnh i- annia nn ti guilty: ns tt a PN pi t nn
Кедр інв я НЕ те тин ПЕ ення 5 пе Ро ве т ВИ ЕЕ Є їв шля т Ре Е іCedar inv i NE te tin PE enie 5 pe Rove t YOU EE E ev slia t Re E i
І Бай : шаAnd Bai: sha
Е знатні ян Ко о Е зл яння лівих ЗК ї вия дповжвнях нт --2 т --- у че:E notable jan Ko o E anger of the left ZK i vya dpovzhvnyakh nt --2 t --- in che:
ТЕ "Беаліпосом. | | І 16; есTE "Bealiposom. | | I 16; es
Мишей ВАїІВ-С розподілили на шість груп (Групи А-Р), включаючи контрольну груну, яка не отримувала ліпосом, але отримувала ін'єкції бОмкл РВЗ (Група Р). Мишей сенсибілізували на боку, вводили вибрану дозу ліпосом, внутрішньом'язово у м'яз правого стегна, у той самий день, але після сенсибілізації (день 1) і у дні « 2, 3, 4, і 5. У день б мишам робили ін'єкцію і провокацію на вусі, як описано у Прикладі 1. Товщину вуха -о с вимірювали, як описано, через 24 години після провокації. й Результати (Фіг.3) показують значну різницю між контрольною групою (Група Е) і Групою С (12 х 108 "» ліпосом/мл), між контрольною групою і Групою О (12 х 107 ліпосом/мл), а також між контрольною групою іVAiIV-C mice were divided into six groups (Groups A-P), including a control group that did not receive liposomes, but received injections of bOmcl RVZ (Group P). Mice were sensitized on the side, the selected dose of liposomes was injected intramuscularly into the right thigh muscle on the same day, but after sensitization (day 1) and on days 2, 3, 4, and 5. On day b, mice were injection and provocation on the ear as described in Example 1. The thickness of the ear -o s was measured as described 24 hours after the provocation. and The results (Fig. 3) show a significant difference between the control group (Group E) and Group C (12 x 108 "» liposomes/ml), between the control group and Group O (12 x 107 liposomes/ml), as well as between the control group and
Групою Е (12 х 109 ліпосом/мл). Між контрольною групою і Групами А або В (12 х 1071 і 12 х 109 ліпосом/мл,Group E (12 x 109 liposomes/ml). Between the control group and Groups A or B (12 x 1071 and 12 x 109 liposomes/ml,
Відповідно) була дуже мала різниця, що наводить на думку про існування оптимального діапазону концентрацій (ее) ліпосом, вище якого сприятливий ефект може знижуватися. В інших експериментах зниження ефекту також о спостерігалося при зменшенні концентрації ліпосом нижче 12 х 107 ліпосом/мл.Accordingly) there was very little difference, suggesting the existence of an optimal concentration range (ee) of liposomes, above which the beneficial effect may decrease. In other experiments, a decrease in the effect was also observed when the concentration of liposomes was reduced below 12 x 107 liposomes/ml.
Приклад 4 - Ліпосоми складу 10095 РО із середнім розміром 100-20нм отримували за стандартними методиками. Чотири -л 20 групи з 10 мишей (Групи А-0) сенсибілізували, робили ін'єкції і провокації за методикою і графіком, описаними у Прикладі 3, з такими кількостями 10095 РО-ліпосом у 50мкл суспензії: ть Групад -6 х 107Example 4 - Liposomes of composition 10095 RO with an average size of 100-20 nm were obtained according to standard methods. Four -l 20 groups of 10 mice (Groups A-0) were sensitized, injected and challenged according to the method and schedule described in Example 3, with the following amounts of 10095 PO-liposomes in 50 μl of suspension: Group -6 x 107
Група В - 6 х 109Group B - 6 x 109
Група С - 6 х 109 52 Група О - 6 х 107Group C - 6 x 109 52 Group O - 6 x 107
ГФ! Результати, разом з контрольним дослідом із РВЗ5 з Прикладу 4, представлені у формі стовпчастої діаграми на Фіг.4. Суттєве зниження розпухання вух, порівняно з контрольною групою, можна помітити для кожної тестової о групи, але різниця між різними групами дуже мала.GF! The results, together with the control experiment with RVZ5 from Example 4, are presented in the form of a bar chart in Fig.4. A significant reduction in ear swelling compared to the control group can be seen for each test group, but the difference between the different groups is very small.
Приклад 5 бо Ліпосоми композиції 7590 РО, 25906 РОС із середнім розміром 50,100, 200 і 400нм отримували за стандартними методиками. Їх тестували у моделі СНЗ мишей, як описано у Прикладах З і 4, з використанням 6 х 10? ліпосом уExample 5 Liposomes of the composition 7590 РО, 25906 РОС with an average size of 50, 100, 200 and 400 nm were obtained according to standard methods. They were tested in a murine model of CKD as described in Examples 3 and 4, using 6 x 10? liposomes in
БОмкл суспензій на кожну ін'єкцію і з використанням методики і графіка "сенсибілізація-ін'єкція-провокація", описаних у Прикладі 3. Групи утворювали таким чином:BOmcl of suspensions for each injection and using the "sensitization-injection-challenge" methodology and schedule described in Example 3. Groups were formed as follows:
Група А - 50-нм ліпосоми бо Група В - 100-нм ліпосомиGroup A - 50-nm liposomes, while Group B - 100-nm liposomes
Група С - 200-нм ліпосомиGroup C - 200-nm liposomes
Група 0 - 400-нм ліпосомиGroup 0 - 400-nm liposomes
Група Е - без ліпосомGroup E - without liposomes
Результати представлені на Фіг.5. Результати для Групи 0, з використанням ліпосом діаметром 40Онм, мало відрізнялися від контрольної групи (Групи Е), що показує можливість існування критичного діапазону розміру в цій моделі.The results are presented in Fig.5. The results for Group 0, using liposomes with a diameter of 40 Ohm, were little different from the control group (Group E), indicating the possibility of a critical size range in this model.
Приклад 6Example 6
Загальну суспензію 75956 РО-ліпосоми із середнім діаметром 100-2Онм, що містила 4,8 х 10 ліпосом/мл, 70 розбавили з отриманням ін'єкційної суспензії що містила 6 х 10 5 ліпосом/мл. Ліпосомну суспензію використовували для введення мишам для визначення ефекту на розпухання вух у моделі ОН5 мишей. Як і уThe total suspension of 75,956 PO-liposomes with an average diameter of 100-2 Ohm, containing 4.8 x 10 liposomes/ml, was diluted 70 to obtain an injection suspension containing 6 x 10 5 liposomes/ml. The liposome suspension was used to administer to mice to determine the effect on ear swelling in the OH5 mouse model. As in
Прикладі 1, використовували самиць мишей ВАЇ В/с (даскзгоп І арогайогієв) віком 6-8 тижнів і вагою 19-23Гг.In example 1, we used female mice VAY V/s (daskzgop and arogayogiev) aged 6-8 weeks and weighing 19-23 kg.
Тварин розподілили на З групи по 10 тварин у кожній групі. Контрольна група (Група С) отримувала тільки ін'єкції РВ5. Тварини Груп А і В отримували ін'єкції ХОмкл суспензії, що містила 6 х 109 ліпосом.The animals were divided into 3 groups of 10 animals in each group. The control group (Group C) received only injections of RV5. Animals of Groups A and B received injections of HOmcl suspension containing 6 x 109 liposomes.
ПротоколProtocol
У дні 13-18 мишам вводили 7595 РО-ліпосоми, як вказано нижче. Ліпосоми вводили у 50-мкл об'ємі шляхом в.м. ін'єкції, тобто, 600000 ліпосом на ін'єкцію, до загальної кількості за весь тестовий період близько 3600000 ліпосом. Сенсибілізацію і провокацію проводили, як описано у Прикладі 2. в (Прововця сч о - зо - «-On days 13-18, mice were injected with 7595 PO-liposomes as indicated below. Liposomes were administered in a 50-μl volume by i.m. injection, i.e., 600,000 liposomes per injection, for a total of about 3,600,000 liposomes during the entire test period. Sensitization and provocation were carried out as described in Example 2.
Результати оThe results of
Результати графічно представлені на Фіг.б і показують, що 7595 РО ефективна у моделі ОНЗ на день 16,The results are graphically presented in Fig. b and show that 7595 RO is effective in the ONZ model on day 16,
Через 24 години після третьої ін'єкції, зробленої після другої провокації. (ее)24 hours after the third injection made after the second provocation. (uh)
Приклад 7Example 7
Ліпосоми складу 10095 кардіоліпін (СІ) і з середнім діаметром 100-2О0нм отримували за стандартними методиками. їх використовували при дозі 6 х 107 ліпосом на 50-мкл ін'єкцію в моделі ОНЗ мишей, описаній у «Liposomes with a composition of 10095 cardiolipin (SI) and an average diameter of 100-2O0nm were obtained according to standard methods. they were used at a dose of 6 x 107 liposomes per 50-μl injection in the mice ONZ model described in "
Прикладі 6. Дані, отримані для тварин, яким вводили ін'єкції Сі -ліпосом (Група А; 10 тварин) порівнювали з даними, отриманими для тварин, яким вводили тільки РВ5 (Група В; 10 тварин). Методики сенсибілізації, З с ін'єкцій і провокації відповідали описаним у Прикладі 2. Результати вимірювання товщини вух на день 19, через "» 24 год. після шостої ін'єкції, представлені на Фіг.7. Результати показали значне зниження розпухання вух в " тестовій групі з ін'єкціями СІ. (Група А).Example 6. Data obtained for animals that were injected with C-liposomes (Group A; 10 animals) were compared with data obtained for animals that were injected with only PB5 (Group B; 10 animals). The methods of sensitization, injections and provocations corresponded to those described in Example 2. The results of measuring the thickness of the ears on day 19, 24 hours after the sixth injection, are presented in Fig. 7. The results showed a significant decrease in swelling of the ears in the test group with SI injections. (Group A).
Приклад 8Example 8
Ліпосоми середнього діаметру 100нм, що включали 10095 кардіоліпіну або 7595 кардіоліпіну і 2595 РОС, со отримували за стандартними методиками. Три групи (Групи А-С) з 10 мишей сенсибілізували у день 1. о Контрольна група отримувала ін'єкції РВЗ у дні 1, 2 і 6 (Група С). Інші дві групи отримували ін'єкції ліпосом: б х з 105 10095 кардіоліпіну (Група А) або 6 х 105 7595 кардіоліпіну (Група В), в об'ємі БОмкл, згідно з тим же графіком. Мишам робили провокацію у день 7 і вимірювали товщину вух, як описано у попередніх прикладах. - 70 Фіг.8 показує середні виміри у кожній групі. Обидві групи, що отримували Сі -ліпосоми, показали щк статистично знануще пригнічення СН5 порівняно з контрольною групою.Liposomes with an average diameter of 100 nm, which included 10095 cardiolipin or 7595 cardiolipin and 2595 ROS, were obtained according to standard methods. Three groups (Groups A-C) of 10 mice were sensitized on day 1. o The control group received RVZ injections on days 1, 2 and 6 (Group C). The other two groups received injections of liposomes: b x 105 10095 cardiolipin (Group A) or 6 x 105 7595 cardiolipin (Group B), in a volume of BOmcl, according to the same schedule. Mice were challenged on day 7 and ear thickness was measured as described in previous examples. - 70 Fig. 8 shows the average measurements in each group. Both groups receiving C-liposomes showed a statistically significant suppression of CH5 compared to the control group.
Приклад 9Example 9
Для дослідження клітинного і молекулярного механізмів когнитивної функції використовували тваринну модель довготривалого потенціювання (ІТР). ТР являє собою певну форму синаптичної пластичності, що 25 відбувається у гіпокампальному утворенні, яке вважають біологічним субстратом навчання і пам'яті |Віїв5 еїAn animal model of long-term potentiation (LTP) was used to study the cellular and molecular mechanisms of cognitive function. TR is a certain form of synaptic plasticity that occurs in the hippocampal formation, which is considered the biological substrate of learning and memory.
ГФ) аі. Майте 361: 31-39 (1990)). Проводять електрофізіологічне дослідження ТР у щурів способами, добре юю відомими фахівцям. Тоді тварин вмертвляють для дослідження біохімічних змін у гіпокампальних тканинах.GF) AI. Mayte 361: 31-39 (1990)). Conduct an electrophysiological study of TR in rats by methods well known to experts. Then the animals are killed to study biochemical changes in the hippocampal tissues.
Порівняння електрофізіологічних даних з біохімічними гіпокампальними змінами корисно для визначення того, як клітинні події, що лежать в основі ТР, можуть бути змінені у тварин, що страждають на захворювання або 60 розлади, пов'язані з нейрозапаленням, такі як старіння, стрес, хвороба Альцгеймера і бактеріальна інфекція.Comparison of electrophysiological data with biochemical hippocampal changes is useful for determining how the cellular events underlying TR may be altered in animals suffering from diseases or 60 disorders associated with neuroinflammation, such as aging, stress, Alzheimer's disease and bacterial infection.
Системне введення ліпополісахариду (І Р5), компонента клітинної стінки грам-негативних бактерій, провокує активацію імунної системи шляхом індукування збільшення прозапальних цитокінів, таких як ІІ -18. Як зазначено вище, одним з прикладів нейронного дефіциту, індукованого ГРЗ і 1/-18, є погіршення І ТР у гіпокампі.Systemic administration of lipopolysaccharide (II P5), a component of the cell wall of gram-negative bacteria, provokes activation of the immune system by inducing an increase in pro-inflammatory cytokines, such as II-18. As mentioned above, one of the examples of neuronal deficits induced by ARZ and 1/-18 is the deterioration of I TR in the hippocampus.
Показником ТР є середній нахил понуляційного збуджуючого пост-синаптичного потенціалу (ерзр). Після бо тетанічної стимуляції нахил ерзр (95) різко підвищується, що показує підвищену синаптичну активність.The TR indicator is the average slope of the post-synaptic excitatory potential (ERP). After tetanic stimulation, the slope of erzr (95) sharply increases, which shows increased synaptic activity.
І Р5-індуковане інгібування І ТР знижує підвищення нахилу і/або викликає швидше повернення нахилу ерзр до базової лінії, що означає, що підвищена синаптична активність є короткочасною. Відповідні виміри нахилу ерзр (95) через певні часові інтервали після тетанічної стимуляції можуть бути використані для відображення пам'яті і її втрати після запального стимулу, а також запалення у гіпокампі мозку.I P5-induced inhibition of I TR reduces the increase in slope and/or causes a faster return of the erzr slope to the baseline, which means that the increased synaptic activity is short-lived. Appropriate measurements of the slope of erzr (95) at certain time intervals after tetanic stimulation can be used to reflect memory and its loss after an inflammatory stimulus, as well as inflammation in the hippocampus of the brain.
Ліпосоми середнього діаметру 100--20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і мали склад 7595 РО і 2595 РОС. Загальну суспензію ліпосом, що містила ч2,9 х 1074 ліпосом/мл, розбавили РВ5 з отриманням ін'єкційної суспензії, що містила «1,2 х 107 ліпосом/мл. її використовували для введення щурам з метою визначення ефекту на І Р5-індуковане погіршення І ТР. Для цих експериментів використовували самців 70 щурів М/ізіаг (Віокезоигсез Опії, Тгіпку СоПеде, Юибіїп) вагою близько ЗООг.Liposomes with an average diameter of 100--20 nm were obtained according to standard methods known in science, and had a composition of 7595 RO and 2595 ROS. The total liposome suspension containing 2.9 x 1074 liposomes/ml was diluted with PB5 to obtain an injection suspension containing 1.2 x 107 liposomes/ml. it was used for administration to rats in order to determine the effect on I P5-induced deterioration of I TR. For these experiments, 70 male M/iziag rats (Viokezoigsez Opii, Thipku Sopede, Yuibiip) weighing about ZOOg were used.
Тварин розподілили на чотири групи по 8 тварин у кожній групі для такої обробки:The animals were divided into four groups of 8 animals in each group for the following treatment:
Група А - сольовий розчин т контрольний дослідGroup A - saline solution and control experiment
Група В - сольовий розчин ї- РОGroup B - salt solution и-РО
Група С - ІГРБ ж контрольний дослідGroup C - IGBR is the control experiment
Група С-ІРБ - РО 150мкл кожного з вищеописаних препаратів вводили шляхом в.м. ін'єкції у дні 1, 13 і 14. ГрупиВіоЇ отримали загальну кількість 5400000 ліпосом (1800000 ліпосом в одній ін'єкції). Процедуру ІТР і процедуру препарування тканини проводили у день 0.Group C-IRB - RO 150 μl of each of the above drugs was administered by i.m. injections on days 1, 13, and 14. VioY groups received a total of 5,400,000 liposomes (1,800,000 liposomes per injection). The ITR procedure and the tissue preparation procedure were performed on day 0.
Процедура І ТРProcedure I TR
Щурів анестезували шляхом і.п. ін'єкції уретану (1,5г/к). Щури отримували або І РБ5 (10Омкг/кг), або сольовий розчин інтраперитонеально. Через три години біполярний стимулюючий електрод і однополярний записуючий електрод розмістили у перфорантному путі і в клітинному тілі дорсальної області зубчатої звивини, відповідно. Завдавали тестових розрядів частотою 0,033 Н?і і відповіді записували за 1Охв. до і через 45Ххв. після високочастотної стимуляції (З серії стимулів проводили з З0-секундними інтервалами, 250 Н2 за 200Омс). ГеRats were anesthetized by i.p. urethane injections (1.5 g/k). Rats received either I RB5 (10 Ωkg/kg) or saline intraperitoneally. Three hours later, a bipolar stimulating electrode and a unipolar recording electrode were placed in the perforant path and in the cell body of the dorsal region of the dentate gyrus, respectively. Test discharges with a frequency of 0.033 N?i were applied and responses were recorded for 1 Ohv. before and after 45Xmin. after high-frequency stimulation (S series of stimuli was performed with 30-second intervals, 250 H2 for 200 Ohms). Ge
Щурів вмертвили шляхом обезголовлювання. Гіпокамп, тетанізовані і нететанізовані зубчаті звивини, кору і о енторинальну кору препарували на льоду, розрізали на зразки і заморозили в мл розчину Кребса (композиціяRats were killed by decapitation. The hippocampus, tetanized and non-tetanized dentate gyrus, cortex and entorhinal cortex were prepared on ice, cut into samples and frozen in ml of Krebs solution (composition
Кребса в мМ: Масі 136, КСІ 2,54, КНоРО, 1,18, Ма5О,-7Н.О 1,18, МансСо» 16, глюкоза 10, СаСі» 1,13), що містив 1095 ЮМ5О.Krebs in mm: Mass 136, KSI 2.54, KNoRO, 1.18, Ma5O,-7H.O 1.18, MansSo» 16, glucose 10, CaSi» 1.13), which contained 1095 ЮМ5О.
Результати -Results -
Результати представлені на Фіг.9. Діаграма показує різницю у збуджуючому постсинаптичному потенціалі «- (ерзр), записаному у клітинних тілах лаброцитів. Дані являють собою середні величини 7-8 спостережень у кожній групі обробки і представлені у вигляді середньої процентної зміни нахилу ерзр кожні Збс, - нормалізованої по відношенню до середньої величини за 5 хвилин до тетанічної стимуляції. оThe results are presented in Fig.9. The diagram shows the difference in the excitatory postsynaptic potential "- (erzr) recorded in the cell bodies of labrocytes. The data represent the average values of 7-8 observations in each treatment group and are presented in the form of the average percentage change in the slope of erzr per Zbs, - normalized in relation to the average value 5 minutes before tetanic stimulation. at
Фіг.9 показує, що І РоЗ-індуковане інгібування І ТР у синапсах перфорантного путі-лаброцитів було пригнічене шляхом передобробки РОз-ліпосомами. Чорні трикутники представляють Групу А (сольовий розчин ж (ее) контрольний дослід), білі трикутники представляють Групу В (сольовий розчин ж- РО), чорні квадратики представляють Груну С (І РБ5 ж контрольний дослід) і білі квадратики представляють Груну О(ІРЗ Ро).Fig. 9 shows that I RoZ-induced inhibition of I TR in the synapses of the perforant path of labrocytes was inhibited by pretreatment with Roz liposomes. Black triangles represent Group A (salt solution and (ee) control experiment), white triangles represent Group B (saline solution and РО), black squares represent Soil C (I RB5 and control experiment) and white squares represent Soil О (IRZ Ro ).
Фіг.10 представляє аналіз середніх величин через 40-45 хвилин після тетанічної стимуляції, який показує, « що популяційний ерзр-нахил знизився у контрольній-І Р5 групі (білі стовпці) Її що РО ліпосоми (заштриховані стовпці) суттєво змінили цей ефект у зворотному напрямку ("р«0,01). Як показник функціональності пам'яті і - с навчання, покращення в уповільненні ТР, продемонстроване у цьому Прикладі, означає придатність такого ч лікування у випадку деменцій, наприклад, хвороби Альцгеймера і погіршення пам'яті. є» Приклад 10Fig. 10 presents an analysis of average values 40-45 minutes after tetanic stimulation, which shows that the population erzr-slope decreased in the control-I P5 group (white columns) and that PO liposomes (shaded columns) significantly reversed this effect direction ("p" 0.01). As an indicator of the functionality of memory and learning, the improvement in TR slowing demonstrated in this Example means the suitability of such a treatment in the case of dementias, for example, Alzheimer's disease and memory impairment. is" Example 10
І -4 є одним з декількох цитокінів, що виробляються підкласом Тй2 лімфоцитів і відомі своїми протизапальними ефектами. Фіг.11 показує, що концентрація ІІ -4 в гіпокампі суттєво підвищилася у І Ро-групі, (ее) передобробленій РО-ліпосомами ("р«0,05). Білі стовпці представляють контрольну груну (Група Е), а о заштриховані стовпці представляють Ро-оброблену груну (Група Р). ІІ -4 вимірювали шляхом ЕГ ІЗА і результати представили у пг (пікаграмах) ІІ-4/мг загального білка. Така апрегуляція протизапального цитокіну 1-4 у -й мозку є показником можливості застосування способу і композиції за переважним варіантом здійснення винаходу щу 90 у лікуванні широкого діапазону нейрозапальних захворювань, включаючи хворобу Паркінсона, АЛС, хронічне запальне демієлінуюче захворювання СІРО і синдром Джуліана-Барра. - Приклад 11I-4 is one of several cytokines produced by the T2 subclass of lymphocytes and known for their anti-inflammatory effects. Fig. 11 shows that the concentration of II-4 in the hippocampus significantly increased in the 1st Po-group, (ee) supplemented with PO-liposomes ("p" 0.05). The white columns represent the control group (Group E), and the shaded columns represent the Ro-treated group (Group P). II-4 was measured by EG ISA and the results were presented in pg (picgrams) II-4/mg of total protein. Such an upregulation of anti-inflammatory cytokine 1-4 in the brain is an indicator of the possibility of using the method and A preferred embodiment of the composition of the invention is 90 in the treatment of a wide range of neuroinflammatory diseases, including Parkinson's disease, ALS, chronic inflammatory demyelinating disease SIRO and Julian Barr syndrome - Example 11
І-18 є одним з декількох цитокінів, що виробляються підкласом ТИ1 лімфоцитів і відомі своїми прозапальними ефектами. Селезінки тварин, оброблених як описано у Прикладі 9, групи С і 0, витягли і зібрали клітини селезінки. їх препарували таким чином: о Фіг.12 показує, що концентрація І./-1В8 у клітинах селезінки була суттєво знижена у І Р5-групі, що була передоброблена РО-ліпосомами ("р«0,05). І -18 вимірювали шляхом ЕГІЗА і представили у пг 1І/-18/МГ іме) загального білка. Це показує системний протизапальний ефект способу і композицій за переважним варіантом здійснення винаходу. бо Приклад 12I-18 is one of several cytokines produced by the TI1 subclass of lymphocytes and known for their pro-inflammatory effects. Spleens of animals treated as described in Example 9, groups C and 0, were removed and spleen cells were collected. they were prepared as follows: o Fig. 12 shows that the concentration of I./-1B8 in the cells of the spleen was significantly reduced in the I P5-group, which was reformulated with PO-liposomes ("p" 0.05). I-18 was measured by EGISA and presented in pg 1I/-18/MG of the total protein. This shows the systemic anti-inflammatory effect of the method and compositions according to the preferred embodiment of the invention. Because Example 12
ШЦ937 являє собою лейкозну моноцитарну клітинну лінію, що може бути диференційована у макрофаги шляхом застосування форболових ефірів. Обробка ліпополісахаридом (І Р5), компонентом клітинної стінки грам-негативних бактерій, стимулює запальну відповідь у клітинах ШО937, з апрегуляцією експресії ряду запальних молекул, включаючи ТМЕо. Ця модель являє собою експериментальну систему для оцінки 65 протизапальних терапій. Макрофаги можна вирощувати у середовищі культури у присутності протизапальної композиції, що досліджується, при цьому може бути виміряна експресія ТМЕсо.ShC937 is a leukemic monocytic cell line that can be differentiated into macrophages by using phorbol esters. Treatment with lipopolysaccharide (I P5), a component of the cell wall of gram-negative bacteria, stimulates an inflammatory response in SHO937 cells, with upregulation of the expression of a number of inflammatory molecules, including TMEo. This model is an experimental system for evaluating 65 anti-inflammatory therapies. Macrophages can be grown in a culture medium in the presence of an anti-inflammatory composition under investigation, and TMEco expression can be measured.
Ліпосоми середнього діаметру 100--20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і мали склад 7595 фосфатидилгліцерину (РО) і 2595 фосфатидилхоліну (РОС). Загальна концентрація ліпосом складала «40мММ ліпідів і була розбавлена до таких кінцевих концентрацій для аналізу: 100мкМ фосфатидилгліцерину (РО) 40мМкМ РО 10мМкМ РО 4,0МкМ РО 1мМмкМ РО 70 Клітини ШУО37 культивували шляхом вирощування у середовищі КРМІ (С5ІВСО ВК), доповненому 1090 ембріональної бичачої сироватки (ЕВ) і 195 пеніциліну/стрептоміцину, і вирощували при 372С у атмосфері, що містила 595 СО». 5 х 10 клітин засіяли у чарунки б-ч-арункових пластин і викликали диференціацію у макрофаги шляхом обробки 150нм форболу міристату ацетату (РМА) протягом 2-3 днів. Клітинне середовище замінили повним середовищем, після того як клітини ШОЗ7 диференціювали у макрофаги. Тоді клітини інкубували ще 75 24год. для мінімізації плеотропних ефектів внаслідок обробки РМА.Liposomes with an average diameter of 100--20 nm were obtained according to standard methods known in science and had a composition of 7595 phosphatidylglycerol (PO) and 2595 phosphatidylcholine (ROS). The total concentration of liposomes was 40 mM of lipids and was diluted to the following final concentrations for analysis: 100 µM phosphatidylglycerol (PO) 40 µM РО 10 µM РО 4.0 µM РО 1 mM µM РО 70 SHUO37 cells were cultured by growing in KRMI medium (C5IVSO VK) supplemented with 1090 embryonic bovine serum (EB) and 195 penicillin/streptomycin, and grown at 372C in an atmosphere containing 595 CO. 5 x 10 cells were seeded into the cells of b-h-arun plates and caused differentiation into macrophages by treatment with 150 nm of phorbol myristate acetate (PMA) for 2-3 days. The cell medium was replaced with complete medium after SHOZ7 cells were differentiated into macrophages. Then the cells were incubated for another 75 24 hours. to minimize pleotropic effects due to PMA treatment.
Потім клітини інкубували з такими сполуками:The cells were then incubated with the following compounds:
Група А Сольовий розчин, буферизований фосфатом (РВ5) - негативний контрольний дослід,Group A Saline solution, buffered with phosphate (РВ5) - negative control experiment,
Група В 1Онг/мл І Р - позитивний контрольний дослід,Group B 1Ong/ml IR - positive control experiment,
Група С 1Онг/мл ГР - 100мкМ РО,Group C 1Ong/ml GR - 100μM RO,
Група О 1Онг/мл ГРБ5 - 40мкМ РО,Group O 1Ong/ml GRB5 - 40μM RO,
Група Е ТІОнг/мл РБ - 10мкМ РО,Group E TIOng/ml RB - 10μM RO,
Група Е 1Онг/мл І Р я 4,0мкМ РО, абоGroup E 1Ong/ml I R and 4.0 μM PO, or
Група ОС 1Онг/мл І Р ї- 1МмкМ РО.Group OS 1Ong/ml I R y- 1MmkM RO.
Клітини інкубували, як описано вище, при 372 у 590 СО». Через 18год. супернатанти з кожної групи обробки су зібрали і проаналізували на ТМЕ-5 з використанням стандартного аналітичного комплекту ОпапіїКіпе оCells were incubated as described above at 372°C to 590°C. After 18 hours Supernatants from each treatment group were collected and analyzed on TME-5 using a standard analytical kit of OpapiyaKipe o
Епгуте-і іпкей Іттипозогрепі Аззау (ЕГІЗА) (КО зувіетв, Міппеароїїв, ОБА).Epgute-i ipkei Ittipozogrepi Azzau (EGIZA) (KO zuvietv, Mippearoiv, OBA).
РезультатиThe results
Фіг.13 показує кількість виробленого ТМЕ-А у РО на мл. Ці результати демонструють, що и937-диференційовані макрофаги експресують дуже низькі рівні ТМЕ-5 у нормальних умовах. Проте після - обробки /Р5 вони секретують великі кількості ТМЕ-5 в оточуюче середовище, що є показником клітинного «- стресу. Інкубація клітин РО-ліпосомами інгібує секрецію ТМЕ- 5 дозозалежним чином, при цьому найвища концентрація 100мкМ забезпенує 98905 зниження, і навіть найнижча концентрація їмкМ викликає 5895 зниження - експресії ТМЕ-о. оFig. 13 shows the amount of produced TME-A in PO per ml. These results demonstrate that i937-differentiated macrophages express very low levels of TME-5 under normal conditions. However, after /P5 treatment, they secrete large amounts of TME-5 into the environment, which is an indicator of cellular stress. Incubation of cells with PO-liposomes inhibits the secretion of TME-5 in a dose-dependent manner, while the highest concentration of 100 μM provides a 98905 decrease, and even the lowest concentration of iμM causes a 5895 decrease in TME-o expression. at
Приклад 13 3о Для визначення ефекту РО-ліпосом за переважним варіантом винаходу на ендотеліальну функцію, со визначали вміст ендотеліну-ї (ЕТ-1) у вухах мишей, що приймали участь у СНЗ-дослідженнях, описаних уExample 13 3o In order to determine the effect of PO-liposomes according to the preferred variant of the invention on endothelial function, the content of endothelin-y (ET-1) was determined in the ears of mice that participated in the SNZ studies described in
Прикладі 3. Ендотелій-ї являє собою потужний судинозвужуючий засіб, виявляє інотропну і мітогенну дію, модулює сольовий і водний гомеостаз і відіграє важливу роль у підтриманні тонусу судин і кров'яного тиску. «Examples 3. Endothelium is a powerful vasoconstrictor, exhibits inotropic and mitogenic effects, modulates salt and water homeostasis and plays an important role in maintaining vascular tone and blood pressure. "
Різноманітні свідчення підтверджують, що ендогенний ЕТ-1 може приймати участь у патофізіології станів, З пов'язаних з уповільненим звуженням судин, таким як серцева недостатність. При серцевій недостатності с спостерігаються підвищені рівні циркулюючих ЕТ-1 і рБід-ЕТ-1 |Сіаппеззі Ю, Оє! Ку 5, Міаіе КІ. "Тпе гоЇе оїA variety of evidence supports that endogenous ET-1 may be involved in the pathophysiology of conditions associated with slow vasoconstriction, such as heart failure. In heart failure, elevated levels of circulating ET-1 and rBid-ET-1 are observed |Ciappezzi Yu, Oye! Ku 5, Miaie KI. "Tpe goYe ohi
Із» епдоїпеїїпз апа (Неїг гесеріоге іп Неагі Тайиге" РПаптасо! Кез 2001 Ре 43: 2 111-26)ї. Таким чином, ЕТ-1 є маркером ендотеліальної функції, а підвищене вироблення ЕТ-1 у тканині є показником погіршення ендотеліальної функції.Thus, ET-1 is a marker of endothelial function, and the increased production of ET-1 in the tissue is an indicator of the deterioration of endothelial function.
Для визначення експресії ЕТ-1 вуха мишей (праве провоковане вухо) збирали через 24год. після провокації у бо СНз-експериментах. Вуха брали у мишей, що отримували в.м. ін'єкції РВ5 протягом 6 днів (Група А) і мишей, що ав! отримували в.м. ін'єкції ліпосом 75956 РО/2595 РОС (600000 ліпосом/ін'єкцію; Група В). Вуха зберігали у КМАЇаїег з при -202С до екстракції РНК. РНК екстрагували і генерували кДНК з використанням зворотної транскриптази (КТ) разом з ЕТ-1-специфічними праймерами, у якості внутрішнього контрольного досліду, а також провели ПЛР з - 70 використанням щрактин-специфічних праймерів. Продукти ПЛР відокремили на 1,595 гелі агарози і смуги ДНК - М підрахували шляхом денситометричного аналізу. Розрахували співвідношення ЕТ-1/В-актину.To determine the expression of ET-1, the ears of mice (right provoked ear) were collected after 24 hours. after provocation in bo CH3-experiments. Ears were taken from mice receiving i.m. injections of RV5 for 6 days (Group A) and mice that av! received in.m. injection of liposomes 75956 РО/2595 РОС (600000 liposomes/injection; Group B). Ears were stored in KMAIaieg at -202C until RNA extraction. RNA was extracted and cDNA was generated using reverse transcriptase (RT) together with ET-1-specific primers, as an internal control experiment, and PCR was performed with - 70 using shrachtin-specific primers. PCR products were separated on a 1,595 agarose gel and DNA-M bands were counted by densitometric analysis. The ET-1/B-actin ratio was calculated.
Склад ПЛР:PCR composition:
ПЛР-суміш (ЕТ-1) ПЛР-суміш (В-актин) бмкл ПЛР-буфера (10х) бмкл ПЛР-буфера (10х) (Ф. 1,Бмкл. Масіг(БОММ) 1,5мкл. Масіг(5ОММ) ко їмкл аМТР (10ММ) їмкл аМТР (10ММ)PCR mixture (ET-1) PCR mixture (B-actin) bml of PCR buffer (10x) bml of PCR buffer (10x) (F. 1, Bml. Masig(BOMM) 1.5μcl. Masig(5OMM) co imcl aMTR (10MM) imcl aMTR (10MM)
О,Бмкл праймера 1 (25мкМ) їмкл праймера 1 (10мкМ) во О,Бмкл праймера 2 (25мкМ) мкл праймера 2 (10мкМ)0.1 µl of primer 1 (25 µM) 1 µl of primer 1 (10 µM) in 0.5 µl of primer 2 (25 µM) µl of primer 2 (10 µM)
О,2Бмкл ТАЙ О,2Бмкл ТАЙ 2,5мкл кКДдНК 2,5мкл кКДдНКO.2Bmcl TAY O.2Bmcl TAY 2.5mcl kKDdNK 2.5mk kKDdNK
ЗВмкл води 37,75мкл водиZVmcl of water 37.75mcl of water
Усього 5мкл Усього 5Омкл б5Total 5µl Total 5Omcl b5
Праймери: |Як описано вище - див., наприклад, Мапо, !; Низаїп, М; і Зіемжмат. 0. у. "Сопайопаї! сагаіас омегехргезвіоп ої епдоїпеїїп-1 іп (гапздепіс тісе", ЕАБЕВ У 15(53:А1138-А1138 Рагі 2, МАКВ 20011.Primers: |As described above - see, for example, Mapo, !; Nizaip, M; and Ziemzhmat. 0. in "Sopaiopai! sagaias omegehrgesviop oi epdoipeiiip-1 ip (gapzdepis tise), EABEV U 15(53:А1138-А1138 Ragi 2, MAKV 20011.
ЕТ-1 () 5-САС САС ТТС ТО Тест т Тоо-3ET-1 () 5-САС САС TTS TO Test t Too-3
ЕТ-1 (ФД) 5-ССА ДОС АОС ТСС АСА дДАС дО-3!ET-1 (FD) 5-SSA DOS AOS TSS ASA dDAS dO-3!
Р-актин (Р) 5-СТО БОС СОС ТСТ АСО САС САА-3P-actin (P) 5-STO BOS SOS TST ASO SAC SAA-3
Р-актин (г) 5-СТС ТТТ САТ ТС АСО САС САТ ТТО-3P-actin (g) 5-STS TTT SAT TS ASO SAS SAT TTO-3
Параметри ПЛР: 9420-5 хвилин 9490-30 с 602С-30с ЗО циклів 729060 -60с 7220-10 хвилин 420 - витримкаPCR parameters: 9420-5 minutes 9490-30 s 602C-30s ZO cycles 729060 -60s 7220-10 minutes 420 - exposure time
Після шести щоденних ін'єкцій 7595 РО-ліпосом рівень ЕТ-1 знизився на 3695 порівняно з контрольною групою 75 мишей, що отримували РВ5 у тому ж режимі ін'єкцій. Результати графічно представлені на Фіг.14. Це зниження означає сприятливий ефект ін'єкцій ліпосом за переважним варіантом здійснення винаходу на ендотеліальну функцію пацієнта-ссавця, за рахунок зниження Тп1-опосередненого запалення.After six daily injections of 7595 PO-liposomes, the ET-1 level decreased by 3695 compared to a control group of 75 mice receiving PB5 in the same injection regimen. The results are graphically presented in Fig. 14. This reduction means a beneficial effect of liposome injections according to the preferred embodiment of the invention on the endothelial function of the mammalian patient, due to the reduction of Tp1-mediated inflammation.
Приклад 14Example 14
Молекула міжклітинної адгезії-ї (ІСАМ-1) являє собою молекулу клітинної поверхні, яку експресують декілька типів клітин, включаючи лейкоцити і ендотеліальні клітини. Вона приймає участь в адгезії моноцитів до ендотеліальних клітин і виконує певну роль у запальних процесах і у системі імунного захисту, опосередненого Т-клітинами. Експресія ІСАМ-1, здогадно, приймає участь у клінічних виявах різноманітних захворювань, здебільшого шляхом перешкоджання нормальній імунній функції. Серед цих захворювань - злоякісні утворення (наприклад, меланома і лімфоми), багато запальних захворювань (наприклад, астма і с аутоіїмунні захворювання), атеросклероз, ішемія, деякі неврологічні захворювання і аллогенні трансплантації Ге) органів (Мап де БіоіІре А, мап дег 5ааод РТ, "ІпіегсеїІшаг адпевіоп тоіесціе-1" у). Мої. Мед. (1996) 74:1 13-33).Intercellular adhesion molecule-1 (ISAM-1) is a cell surface molecule expressed by several types of cells, including leukocytes and endothelial cells. It takes part in the adhesion of monocytes to endothelial cells and plays a certain role in inflammatory processes and in the system of immune protection mediated by T cells. ISAM-1 expression is believed to be involved in the clinical manifestations of various diseases, mostly by interfering with normal immune function. Among these diseases are malignant formations (for example, melanoma and lymphomas), many inflammatory diseases (for example, asthma and autoimmune diseases), atherosclerosis, ischemia, some neurological diseases and allogeneic transplants of He) organs (Map de BioiIre A, map deg 5aaod RT , "IpiegseiIshag adpeviop toiescie-1" in). My. Honey. (1996) 74:1 13-33).
Людські ендотеліальні клітини пупкової вени (НОМЕСзв) є основною клітинною лінією ендотеліальних клітин, яку виділяють з нуповин таким чином.Human umbilical vein endothelial cells (HOMESv) are the primary endothelial cell line isolated from umbilical cords in this manner.
Колби 775 підготували шляхом нанесення покриття 0,296 желатину (5-7 мл/колбу) протягом мінімум 15/20 - хвилин або протягом ночі. Залишок видалили. Пуповину обприскали перед процедурою 7095 етанолом і зрізали «- залишки плаценти, що були на нуповині. Тоді пуповину відрізали до приблизної довжини 5-6 дюймів. Пуповина містить дві артерії, що мають товсті стінки, і одну вену, що є більшою і має тонкі стінки. Знайшли вену і (57 вмістили в неї рифлений край пробки. Тоді використали близько 20см мотузки, щоб прив'язати пуповину до о пробки.775 flasks were prepared by coating with 0.296 gelatin (5-7 ml/flask) for a minimum of 15/20 minutes or overnight. The remainder was removed. The umbilical cord was sprayed with ethanol before the 7095 procedure and the remnants of the placenta that were on the umbilical cord were cut off. The umbilical cord was then cut to an approximate length of 5-6 inches. The umbilical cord contains two thick-walled arteries and one larger, thin-walled vein. A vein was found and the grooved edge of the cork was inserted into it. Then about 20 cm of rope was used to tie the umbilical cord to the cork.
Зо Потім пуповину промили сольовим розчином, буферизованим фосфатом (РВ5), декілька разів, доки со промивальний РВ5 не став виглядати чистим. Після цього на пуповину вмістили 15-20мл розчину колагенази, завернули її в олов'яну фольгу і інкубували 15 хвилин при 372С. Після інкубації зав'язаний кінець пуповини відрізали і злили колагеназу в 50-мл пробірку. Тоді колагеназу знову пронустили через пуповину, нуповину « масажували для вивільнення ендотеліальних клітин і тоді через нуповину пронустили РВ5 і зібрали в ту саму пробірку, що містила розчин колагенази. її центрифугували при 16б00об/хв., супернатант видалили і краплю З с осадку пересуспендували у 10-12мл повного середовища М199. Потім середовище, що містило клітини, додали "з у желатинізовані колби. " Ліпосоми середнього діаметру 100-20нм були отримані за стандартними методиками, відомими у науці, і мали склад 7595 фосфатидилгліцерину (РО) і 2595 фосфатидилхоліну (РОС). Загальна концентрація ліпосом складала 40мМ і була розбавлена до 100мМкМ для проведення аналізу. бо Клітини НОМЕС розподілили по колбах для тканинної культури, дали прикріпитися до поверхні колб і тоді ав! обробили таким чином: з Група А - РВ5 - негативний контрольний дослід,Then the umbilical cord was washed with phosphate-buffered saline (PB5) several times until the washing PB5 looked clean. After that, 15-20 ml of collagenase solution was placed on the umbilical cord, wrapped in tin foil and incubated for 15 minutes at 372C. After incubation, the tied end of the umbilical cord was cut off and the collagenase was poured into a 50-ml test tube. Collagenase was then passed through the umbilical cord again, the umbilical cord was massaged to release endothelial cells, and then PB5 was passed through the umbilical cord and collected in the same tube containing the collagenase solution. it was centrifuged at 16,000 rpm, the supernatant was removed, and a drop of C from the sediment was resuspended in 10-12 ml of complete medium M199. The medium containing the cells was then added to the gelatinized flasks. Liposomes with an average diameter of 100-20 nm were obtained by standard techniques known in the art and had a composition of 7595 phosphatidylglycerol (PO) and 2595 phosphatidylcholine (ROS). The total concentration of liposomes was 40 mM and was diluted to 100 mM for analysis. because the NOMES cells were distributed among flasks for tissue culture, allowed to attach to the surface of the flasks, and then aw! processed as follows: with Group A - RV5 - negative control experiment,
Група В - 50Онг/мл І Р - позитивний контрольний дослід, -к 70 Група С - 50Онг/мл І РЗ ї- 100МКМ РО щ Група 0 - 5О0Онг/мл І РБ5 ї- 100мкМ РОС 7" Клітини інкубували при 372С, 5956 СО». Через 18год. супернатанти кожної групи обробки зібрали і проаналізували на ЕТ-1 з використанням стандартного комплекту ЕГІЗА (від Аззау Оезідпв), а клітини зібрали для аналізу на ІСАМ-1 таким чином: 99 Клітини спочатку промили РВЗ і тоді інкубували з буфером клітинної дисоціації при 372С протягом 25-3О0хв.Group B - 50Ong/ml I R - positive control experiment, -k 70 Group C - 50Ong/ml I RZ i- 100MCM RO sh Group 0 - 5O0Ong/ml I RB5 i- 100μM ROS 7" Cells were incubated at 372С, 5956 СО After 18 h, the supernatants of each treatment group were collected and analyzed for ET-1 using a standard EGISA kit (from Azzau Oezidpv), and the cells were collected for analysis for ISAM-1 as follows: 99 Cells were first washed with RVZ and then incubated with cell culture buffer dissociation at 372C for 25-300 minutes.
ГФ) Клітини промили шляхом центрифугування і інкубували з анти-СО54 (ІСАМ-1) антитілом протягом ЗО хвилин. 7 Тоді додали вторинне РІТС-антитіло і інкубували з клітинами, як перед цим. Потім їх пересуспендували в їмлGF) Cells were washed by centrifugation and incubated with anti-CO54 (ISAM-1) antibody for 30 minutes. 7 The secondary RITS antibody was then added and incubated with the cells as before. Then they were resuspended in them
РВЗ і проаналізували на флуоресценцію на проточному цитометрі.RVZ and analyzed for fluorescence on a flow cytometer.
Результати 60 Результати наведені на Фіг.15, що являє собою графічне представлення процентної кількості клітин, позитивно забарвлених у аналізі на ІСАМ-1 у відповідних культурах. Слід зазначити, що кількості клітин, позитивно забарвлених у культурі, яка містить РО-ліпосоми, знижені до рівня негативного контрольного досліду, і є набагато нижчими за рівень позитивного контрольного досліду.Results 60 The results are shown in Fig. 15, which is a graphical representation of the percentage of cells positively stained in the ISAM-1 assay in the respective cultures. It should be noted that the number of positively stained cells in the culture containing PO-liposomes is reduced to the level of the negative control experiment, and is much lower than the level of the positive control experiment.
Приклад 15 бо Мікрогліальні клітини (макрофаги мозку) культивували і вимірювали вироблення ними ТМЕ-о, запального цитокіну. Клітини стимулювали імуноглобуліном (Ід) пацієнтів, що страждають на АЛС, в результаті чого вироблення ТМЕ-о, збільшилося у «800 разів. Коли такі ж клітини вирощували у присутності АЛС-ІдО і ліпосомExample 15 because Microglial cells (macrophages of the brain) were cultivated and their production of TME-o, an inflammatory cytokine, was measured. Cells were stimulated with immunoglobulin (Id) from patients suffering from ALS, resulting in an 800-fold increase in TME-o production. When the same cells were grown in the presence of ALS-IdO and liposomes
РО, вироблення ТМЕ-о, знизилося на «75905, що показує потенціал переважних варіантів здійснення винаходу для лікування АЛС. Результати представлені на Фіг.16.PO, the production of TME-o, decreased by "75905, which shows the potential of the preferred embodiments of the invention for the treatment of ALS. The results are presented in Fig.16.
Claims (59)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US37210602P | 2002-04-15 | 2002-04-15 | |
PCT/CA2003/000065 WO2003061667A1 (en) | 2002-01-21 | 2003-01-21 | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA80111C2 true UA80111C2 (en) | 2007-08-27 |
Family
ID=38578829
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UA20040806943A UA80111C2 (en) | 2002-04-15 | 2003-01-21 | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies (variants) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
UA (1) | UA80111C2 (en) |
-
2003
- 2003-01-21 UA UA20040806943A patent/UA80111C2/en unknown
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20080160074A1 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies | |
JP3835811B2 (en) | Pharmaceutical composition comprising phosphatase or a derivative thereof | |
US6953591B2 (en) | Apoptosis-mimicking synthetic entities and use thereof in medical treatment | |
KR20070026796A (en) | Drug having regulatory cell ligand contained in liposome | |
US20060008517A1 (en) | Treatment of age-related memory impairment | |
JPH09511216A (en) | Method of treatment with unilamellar liposomal arachidonic acid metabolite agents | |
US20080124386A1 (en) | Apoptosis-mimicking synthetic entities and use thereof in medical treatment | |
UA80111C2 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies (variants) | |
US20070238708A1 (en) | Acute Inflammatory Condition Treatment | |
AU2003201569B2 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies | |
US20050058698A1 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies and uses relating to Parkinson's Disease | |
US20080075764A1 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies | |
AU2003201569A1 (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies | |
ZA200405702B (en) | Pharmaceutically acceptable phosphate-glycerol carrying bodies | |
CA2793985C (en) | Proangiogenic compositions, method for preparing same, and uses thereof | |
MXPA04007041A (en) | Phospholipid bodies and use thereof in the treatment of inflammatory and autoimmune diseases. | |
AU2003201568A1 (en) | Phospholipid bodies and use thereof in the treatment of inflammatory and autoimmune diseases |