UA77549U - method for increasing the efficiency of embryo implantation in women - Google Patents

method for increasing the efficiency of embryo implantation in women Download PDF

Info

Publication number
UA77549U
UA77549U UAU201206479U UAU201206479U UA77549U UA 77549 U UA77549 U UA 77549U UA U201206479 U UAU201206479 U UA U201206479U UA U201206479 U UAU201206479 U UA U201206479U UA 77549 U UA77549 U UA 77549U
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
implantation
women
increasing
efficiency
autologous
Prior art date
Application number
UAU201206479U
Other languages
Russian (ru)
Ukrainian (uk)
Inventor
Олена Михайлівна Мозгова
Віталій Васильович Ковпак
Original Assignee
Олена Михайлівна Мозгова
Віталій Васильович Ковпак
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Олена Михайлівна Мозгова, Віталій Васильович Ковпак filed Critical Олена Михайлівна Мозгова
Priority to UAU201206479U priority Critical patent/UA77549U/en
Publication of UA77549U publication Critical patent/UA77549U/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

A method for increasing the efficiency of embryo implantation in women using intrauterine administration of autologous peripheral blood mononuclear cells. The advantage of the use is provided to patients with diagnosed disorder of implantation immunology. The cells culturing is performed within 24 hours of making autologous serum and without the addition of human chorionic gonadotropin.

Description

Останні десятиріччя характеризуються стрімким розповсюдженням допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ) для лікування різних форм безпліддя. Удосконалення техніки проведення ДРТ, зокрема стандартної процедури екстракорпорального запліднення та переносу ембріонів - запліднення іп мйго (ЗІВ - ПЕ), дало можливість підвищити частоту настання вагітностей і зафіксувати її, за даними ЕЗНЕАЕ (Європейське товариство з репродукції людини) на рівні 30 95 на цикл ЗІВ та біля 70 95 сумарно за три перші спроби ЗІВ. Однак близько 20-30 95 жінок зазнають чисельних невдач при ЗІВ.The last decades have been characterized by the rapid spread of assisted reproductive technologies (ART) for the treatment of various forms of infertility. The improvement of the DRT technique, in particular the standard procedure of extracorporeal fertilization and embryo transfer - intrauterine insemination (IVF - IVF), made it possible to increase the frequency of pregnancies and record it, according to EZNEAE (European Society for Human Reproduction), at the level of 30 95 per cycle of IVF and about 70 95 in total for the first three attempts of ZIV. However, about 20-30 95 women experience multiple IVF failures.

Вважається, що це пов'язано з ембріональним або імплантаційним факторами, серед яких найбільш значущими є дефекти в ендометрії та порушення імунологічної відповіді на імплантацію. На сьогоднішній день відомі різноманітні способи діагностики і лікування змін ендометрію, що перешкоджають імплантації. Однак незважаючи на чисельні дослідження останніх років, що стосуються імунології імплантації, не існує достовірно ефективних методів впливу на покращення показників імплантації.It is believed to be related to embryonic or implantation factors, the most significant of which are defects in the endometrium and impaired immunological response to implantation. To date, various methods of diagnosis and treatment of endometrial changes that prevent implantation are known. However, despite numerous studies in recent years concerning the immunology of implantation, there are no reliably effective methods of influencing the improvement of implantation indicators.

Корисна модель належить до медицини, а саме до гінекології і може бути використана для покращення результативності лікування безпліддя методами ДРТ.A useful model belongs to medicine, namely to gynecology and can be used to improve the effectiveness of infertility treatment by DRT methods.

Аналогом способу є введення у порожнину матки аутологічних мононуклеарних клітин периферійної крові (МКПК), культивованих протягом 48 годин з додаванням хоріонічного гонадотропіну (ХГ) серед пацієнтів з багаторазовими невдалими програмами ДРТ ГМовніокКа 5.,An analogue of the method is the introduction into the uterine cavity of autologous peripheral blood mononuclear cells (PBMC), cultured for 48 hours with the addition of chorionic gonadotropin (HCG) among patients with multiple unsuccessful DRT programs GMovniokKa 5.,

Ецімагта Н., МаКауата ТТ. єї аїЇ. Іпігашегпе айтіпівіайоп ої ашоіодоив регірпега! Біоса топописієаг сеї рготоїе5 ітріапіайоп гаїе5 іп раїйєпіб м/ййп гереаївй Тайиге ої ІМЕ етргуо їапеїег // Нитап Нергодисійоп.-2006. - М. 21. - Р. 3290-3294).Etsimagta N., MaKauata TT. sheyyyyy Ipigashegpe aitipiviaiop oi ashoioidoiv rehirpega! Biosa topopisieag sei rgotoie5 itriapiaiop gaiie5 ip raiiyepib m/yip gereaivy Tayige oi IME etrguo iapeieg // Nytap Nergodisiyop.-2006. - M. 21. - R. 3290-3294).

Суть методу полягає у продукуванні мононуклеарними клітинами периферійної крові цитокінів (інтерлейкін-17, інтерлейкін -1р та інтерлейкін -8), які сприяють розвитку та імплантації ембріону.The essence of the method is the production of cytokines (interleukin-17, interleukin-1p and interleukin-8) by peripheral blood mononuclear cells, which contribute to the development and implantation of the embryo.

Основними недоліками способу є: 1. Культивування МКІПК здійснюють протягом 48 годин, в той час, як концентрація інтерлейкінів вища після 24-годинного культивування (Аївив5Ні Ідеїа, ЗПіп-існі Запаї, МітніThe main disadvantages of the method are: 1. Cultivation of MKIPK is carried out for 48 hours, while the concentration of interleukins is higher after 24 hours of cultivation (Aiviv5Ni Ideia, ZPip-isni Zapai, Mitni

МаКатитга. еї аї. /Аатіпівігайоп ої регіртєга! Біоса топописіваг сеїІ5 іпіо Ше шегіпе пот ю ітргоме ргедпапсу гаїє юїПом/іпд роміпе етргуо ігапвїег // Апіта! Вергодисіюп 5сієепсе. - 2010. - М. 117. - Р.MaKatitga. oh oh /Aatipivigayop oh regirtyega! Biosa topopisivag seiI5 ipio She chegipe pot yu itrgome rgedpapsu haiye yuyPom/ipd romipe etrguo igapvieg // Apita! Verhodisiup 5sieepse. - 2010. - M. 117. - R.

Коо) 18-23. 2. Культуральне середовище містить компоненти тваринного походження (ембріональна сироватка теляти), що може бути фактором переносу чужорідних патогенів та антигенів до порожнини матки. 3. Використання хоріонічного гонадотропіну при культивування клітин і уведення суспензії клітин з ХГ до порожнини матки може призвести до порушення синхронного розвитку ендометрію та ембріонів. 4. Методика не передбачає переваг її застосування пацієнтам, безпліддя яких пов'язане з порушенням імунології імплантації та виключення інших можливих причин невдалої імплантації.Co., Ltd.) 18-23. 2. The culture medium contains components of animal origin (embryonic calf serum), which can be a factor in the transfer of foreign pathogens and antigens to the uterine cavity. 3. The use of chorionic gonadotropin during cell cultivation and the introduction of a suspension of cells with HCG into the uterine cavity can lead to disruption of the synchronous development of the endometrium and embryos. 4. The method does not foresee the advantages of its application to patients whose infertility is associated with a violation of the immunology of implantation and the exclusion of other possible causes of unsuccessful implantation.

Задачею корисної моделі є розробка способу покращення результативності лікування безпліддя методами ДРТ у жінок з чисельними невдалими спробами ЗІВ.The task of a useful model is to develop a way to improve the effectiveness of infertility treatment by DRT methods in women with numerous failed IVF attempts.

Поставлена задача вирішується тим, що після комплексного обстеження (гістероскопія, імунограма, визначення антифосфоліпідних антитіл, пайпель-біопсія з електронною мікроскопією, каріотипування) та виключення інших можливих причин невдалої імплантації, крім порушення імунології імплантації, пацієнтам проводять внутрішньоматкове введення аутологічних МКПК у концентрації 30-40 млн., попередньо культивованих протягом 24 годин у живильному середовищі Ігла, модифікованому Дульбеко (ОМЕМ) з додаванням 20 95 аутологічної сироватки крові.The task is solved by the fact that after a comprehensive examination (hysteroscopy, immunogram, determination of antiphospholipid antibodies, Pipel biopsy with electron microscopy, karyotyping) and exclusion of other possible causes of unsuccessful implantation, in addition to a violation of the immunology of implantation, patients undergo intrauterine administration of autologous MCPC at a concentration of 30- 40 million, previously cultured for 24 hours in Dulbecco's modified Eagle's nutrient medium (OMEM) with the addition of 20 95 autologous blood serum.

Через 48 год. після аспірації яйцеклітин у пацієнток відбирають 20 см3 венозної крові. Для відділення фракції мононуклеарних клітин від еритроцитів обережно нашаровують 7 см свіжеотриманої крові (з додаванням антикоагулянту) на розчин фіколу з градієнтом щільності 1,077 та об'ємом З см", попередньо внесеного в стерильну центрифужну пробірку об'ємом 15 см3. Центрифугування проводять при 300 9 протягом 20 хв. Після центрифугування відбирають кільце мононуклеарних клітин, що знаходяться на межі надосадової рідини та розчину фіколу, і тричі відмивають від залишків фіколу. Для цього шар мононуклеарних клітин переносять в нову стерильну пробірку, з додають 10 см" фосфатно-буферного розчину. Клітини розпіпетовують та центрифугують при 300 4 протягом 5 хв., після чого відбирають надосадову рідину, а до осаду мононуклеарних клітин знову додається 10 см? фосфатно-буферного розчину.After 48 hours after egg aspiration, 20 cm3 of venous blood is taken from patients. To separate the fraction of mononuclear cells from erythrocytes, carefully layer 7 cm of freshly obtained blood (with the addition of an anticoagulant) on a Ficoll solution with a density gradient of 1.077 and a volume of 3 cm", previously introduced into a sterile centrifuge tube with a volume of 15 cm3. Centrifugation is carried out at 300 9 for 20 min. After centrifugation, a ring of mononuclear cells located at the border of the supernatant and the Ficol solution is selected and washed three times from Ficol residues. For this, the layer of mononuclear cells is transferred to a new sterile test tube, and 10 cm" of phosphate buffer solution is added. The cells are pipetted and centrifuged at 300 4 for 5 min., after which the supernatant is removed, and 10 cm? phosphate buffer solution.

Культивування мононуклеарних клітин здійснюють в концентрації 4-6 млн. на см живильного середовища (ДМЕМ з додаванням 20 9о аутологічної сироватки крові), при Т-37 С бо та концентрації СО - 5 відсотків. Після 24 годин культивування живильне середовище з клітинами переноситься у стерильну центрифужну пробірку та віддентрифуговується при 300 9 протягом 5 хв. Після чого в центрифужній пробірці залишають осад мононуклеарних клітин та 200 мкл. живильного середовища, осад клітин розпіпетовують. Суспензію клітин за допомогою катетера для переносу ембріонів вводять в порожнину матки і здійснюють зрошення.Cultivation of mononuclear cells is carried out at a concentration of 4-6 million per cm of nutrient medium (DMEM with the addition of 20 9o of autologous blood serum), at T-37 С and a CO concentration of 5 percent. After 24 hours of cultivation, the culture medium with cells is transferred to a sterile centrifuge tube and centrifuged at 300 9 for 5 min. After that, leave a sediment of mononuclear cells and 200 μl in a centrifuge tube. nutrient medium, the cell sediment is pipetted out. Cell suspension is introduced into the uterine cavity with the help of a catheter for embryo transfer and irrigation is carried out.

Ембріотрансфер здійснюється на 5-ту добу (стадія бластоцисти).Embryo transfer is carried out on the 5th day (blastocyst stage).

Запропонований спосіб впроваджується на базі медичних репродуктивних центрів м. Києва та дає змогу покращити імплантацію ембріонів у пацієнтів причиною безпліддя яких було порушення імунології імплантації в 2 рази і зафіксувати частоту настання вагітності на рівні 30- 35 9о на лікувальний цикл.The proposed method is implemented on the basis of medical reproductive centers in Kyiv and makes it possible to improve the implantation of embryos in patients whose infertility was caused by a violation of the immunology of implantation by 2 times and to record the frequency of pregnancy at the level of 30-35 9o per treatment cycle.

Таким чином, при використанні внутрішньоматкового введення аутологічних МКПК за запропонованою методикою було отримано достовірно більшу кількість випадків настання вагітності і частоту імплантації, ніж у пацієнток з порушенням імунології імплантації яким таке лікування не проводилось.Thus, with the use of intrauterine introduction of autologous ICP according to the proposed method, a significantly higher number of pregnancy and implantation frequency was obtained than in patients with impaired implantation immunology who were not treated.

Claims (1)

ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб підвищення ефективності імплантації ембріонів у жінок їз застосуванням внутрішньоматкового введення аутологічних мононуклеарних клітин периферійної крові, який відрізняється тим, що перевага застосування надається пацієнтам із діагностованим порушенням імунології імплантації, культивування клітин проводиться протягом 24 годин з внесенням аутологічної сироватки крові та без додавання хоріонічного гонадотропіну.USEFUL MODEL FORMULA A method of increasing the efficiency of embryo implantation in women with the use of intrauterine administration of autologous peripheral blood mononuclear cells, which is distinguished by the fact that the advantage of use is given to patients with a diagnosed violation of the immunology of implantation, cell cultivation is carried out within 24 hours with the introduction of autologous blood serum and without the addition of chorionic gonadotropin.
UAU201206479U 2012-05-29 2012-05-29 method for increasing the efficiency of embryo implantation in women UA77549U (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU201206479U UA77549U (en) 2012-05-29 2012-05-29 method for increasing the efficiency of embryo implantation in women

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU201206479U UA77549U (en) 2012-05-29 2012-05-29 method for increasing the efficiency of embryo implantation in women

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA77549U true UA77549U (en) 2013-02-25

Family

ID=51586373

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAU201206479U UA77549U (en) 2012-05-29 2012-05-29 method for increasing the efficiency of embryo implantation in women

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA77549U (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2646578C1 (en) * 2017-02-13 2018-03-05 Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) Method for improving efficiency of embryo implantation in natural cycle of conception and in assisted reproductive technology (art) protocols

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2646578C1 (en) * 2017-02-13 2018-03-05 Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) Method for improving efficiency of embryo implantation in natural cycle of conception and in assisted reproductive technology (art) protocols

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105861430B (en) A kind of excretion body, the preparation method of excretion body and its application in preparation treatment medication for treating pyemia or preparation
LU500561B1 (en) In vitro construction method and use of liver organoids
JP2021182941A (en) Use of stem cells for reducing leucocyte extravasation
Fadel et al. Protocols for obtainment and isolation of two mesenchymal stem cell sources in sheep
CN105769916B (en) Application of the source for mesenchymal stem cells excretion body in preparation treatment preeclampsia drug or preparation
WO2018038180A1 (en) Sperm activator and uses thereof
CN103562378A (en) Compositions and methods for autologous germline mitochondrial energy transfer
CN109943520A (en) The separation and culture of sweat gland cells obtain the method and its application of sweat gland organoid
Pipino et al. Identification and characterization of a stem cell-like population in bovine milk: a potential new source for regenerative medicine in veterinary
US20180245036A1 (en) Oocytes derived from ovarian culture initially containing no oocytes
You et al. The biological characteristics of human third trimester amniotic fluid stem cells
CN109481466A (en) Use the method and cell preparation of placenta mesenchyma stem cell treatment premature ovarian failure
CN109652366A (en) For treating the placenta mesenchyma stem cell preparation of premature ovarian failure
Reali et al. Multipotent stem cells of mother's milk
CN109893541A (en) Application of the excretion body of menses source of human stem cell in the drug of preparation treatment Asherman's syndrom
Rusu et al. Precursor and interstitial Cajal cells in the human embryo liver
US20180116956A1 (en) Composition for use in treating celiac disease
Medvinsky et al. Analysis and manipulation of hematopoietic progenitor and stem cells from murine embryonic tissues
UA77549U (en) method for increasing the efficiency of embryo implantation in women
CN110090227A (en) Purposes of the human amnion membrane in treatment graft versus host disease(GVH disease)
CN110731970A (en) cell preparation for treating allergic rhinitis
TW202319536A (en) Mesenchymal stem cells for use in the treatment of chronic kidney disease
CN110124029B (en) Application of IL-6R antibody and amniotic fluid stem cells in preparation of medicines for treating NEC
Xiao et al. Primary cultivation and identification of vascular smooth muscle cells from the spiral modiolar artery of guinea pigs
CN111965370A (en) Biomarker for predicting pregnancy outcome of infertility patient and application thereof