UA76106C2 - Formulation containing factor viia and factor xiii, set for intravenous administration, method for increasing generation of fibrin clots, method for treatment or prophylaxis of bleeding episodes, use of factor viia or factor xiii for manufacturing drug for treatment or prophylaxis of bleeding episodes - Google Patents
Formulation containing factor viia and factor xiii, set for intravenous administration, method for increasing generation of fibrin clots, method for treatment or prophylaxis of bleeding episodes, use of factor viia or factor xiii for manufacturing drug for treatment or prophylaxis of bleeding episodes Download PDFInfo
- Publication number
- UA76106C2 UA76106C2 UA2002118784A UA2002118784A UA76106C2 UA 76106 C2 UA76106 C2 UA 76106C2 UA 2002118784 A UA2002118784 A UA 2002118784A UA 2002118784 A UA2002118784 A UA 2002118784A UA 76106 C2 UA76106 C2 UA 76106C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- factor
- miia
- xii
- effective amount
- bleeding
- Prior art date
Links
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 title claims abstract description 78
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 title claims abstract description 78
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 title claims abstract description 78
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 229940012444 factor xiii Drugs 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 59
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 41
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 34
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 title claims description 33
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 title claims description 33
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 title claims description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 23
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 title claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 10
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 title claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title abstract description 4
- 229940012414 factor viia Drugs 0.000 title abstract 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title description 2
- 108010071289 Factor XIII Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 claims description 79
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 claims description 79
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 52
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 42
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 24
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 22
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 21
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 17
- 230000035602 clotting Effects 0.000 claims description 14
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 claims description 6
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 6
- 230000001667 episodic effect Effects 0.000 claims 3
- 108010054265 Factor VIIa Proteins 0.000 abstract 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 39
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 33
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 22
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 18
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 16
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 14
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 13
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 13
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 13
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 13
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 13
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 10
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 10
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 10
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 9
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 9
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 9
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 9
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 9
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 9
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 8
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 8
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 8
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 7
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 7
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 7
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 7
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 7
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 7
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 7
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 7
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 7
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 7
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 7
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 6
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 5
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 5
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 5
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- -1 /-aminocaproic acid Chemical compound 0.000 description 4
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 4
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 4
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 4
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 4
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010074864 Factor XI Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 3
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 3
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 description 3
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000003462 zymogenic effect Effects 0.000 description 3
- MYLBTCQBKAKUTJ-UHFFFAOYSA-N 7-methyl-6,8-bis(methylsulfanyl)pyrrolo[1,2-a]pyrazine Chemical compound C1=CN=CC2=C(SC)C(C)=C(SC)N21 MYLBTCQBKAKUTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 206010067787 Coagulation factor deficiency Diseases 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- 108010071241 Factor XIIa Proteins 0.000 description 2
- 206010017866 Gastritis haemorrhagic Diseases 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000004221 Multiple Trauma Diseases 0.000 description 2
- 208000023637 Multiple injury Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 206010073391 Platelet dysfunction Diseases 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102100030951 Tissue factor pathway inhibitor Human genes 0.000 description 2
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 2
- 206010046788 Uterine haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 230000001112 coagulating effect Effects 0.000 description 2
- 208000014763 coagulation protein disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 210000003027 ear inner Anatomy 0.000 description 2
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 2
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 2
- 239000003805 procoagulant Substances 0.000 description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 2
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 2
- HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 1-aminopropan-2-ol Chemical compound CC(O)CN HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100029117 Coagulation factor X Human genes 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 101100291267 Drosophila melanogaster Miga gene Proteins 0.000 description 1
- 241000402754 Erythranthe moschata Species 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 208000032371 Glanzmann thrombasthenia 1 Diseases 0.000 description 1
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010090444 Innovin Proteins 0.000 description 1
- 108010077861 Kininogens Proteins 0.000 description 1
- 102000010631 Kininogens Human genes 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 1
- 244000234179 Myrtus ugni Species 0.000 description 1
- 235000012093 Myrtus ugni Nutrition 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000113 Plasma Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000000392 Thrombasthenia Diseases 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 101710139626 Tissue factor pathway inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 1
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- NHJPVZLSLOHJDM-UHFFFAOYSA-N azane;butanedioic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O NHJPVZLSLOHJDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940105756 coagulation factor x Drugs 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 238000004453 electron probe microanalysis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- JPKNLFVGUZRHOB-YUMQZZPRSA-N epsilon-(gamma-glutamyl)lysine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O JPKNLFVGUZRHOB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000004835 fabric adhesive Substances 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940005809 human factor xiii Drugs 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 108010013555 lipoprotein-associated coagulation inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000005541 medical transmission Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 230000033885 plasminogen activation Effects 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 229940124592 pro-hemostatic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011471 prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011473 radical retropubic prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 229940019333 vitamin k antagonists Drugs 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 1
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Даний винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить фактор Мііа та фактор ХІІ. Винахід також 2 стосується застосування комбінації фактора Ма з фактором ХІЇЇ для одержання медикаменту для лікування суб'єктів, які страждають від нападів кровотечі, або профілактики таких нападів. Винахід також стосується способу лікування нападів кровотечі у суб'єктів та підвищення зсілості крові у суб'єкта. Даний винахід також стосується комплектів, які включають ці сполуки.The present invention relates to a pharmaceutical composition containing factor Miia and factor XII. The invention also relates to the use of a combination of factor Ma with factor XII for the preparation of a medicament for the treatment of subjects suffering from bleeding attacks or the prevention of such attacks. The invention also relates to a method of treating bleeding attacks in a subject and increasing blood salinity in a subject. The present invention also relates to kits that include these compounds.
Гемостаз викликається утворенням комплексу між тканинним фактором (ТЕ), підданим дії циркулюючої крові 70 внаслідок пошкодження стінки судини, та ЕМіІІа, присутнім у кровообігу в кількості, яка відповідає приблизно 195 загальної маси білка ЕМІІ. Цей комплекс закріплюється на клітині, що містить ТЕ, і активує ЕХ до ЕХа і ГРІХ до РіІХа на поверхні клітин. ЕХа активує протромбін до тромбіну, який активує ЕМІЇЇ, ЕМ, ЕХІ та ЕХ. Крім того, обмежена кількість тромбіну, утвореного на цьому першому етапі гемостазу, також активує тромбоцити.Hemostasis is caused by the formation of a complex between tissue factor (TE), exposed to the action of circulating blood 70 due to damage to the vessel wall, and EMIIIa present in the blood circulation in an amount that corresponds to approximately 195 of the total weight of the EMIII protein. This complex is fixed on the cell containing TE and activates EX to EX and GRIX to RiIX on the cell surface. EXa activates prothrombin to thrombin, which activates EMI, EM, EXI, and EX. In addition, the limited amount of thrombin generated in this first step of hemostasis also activates platelets.
Після дії тромбіну на тромбоцити вони змінюють форму і відкривають заряджені фосфоліпіди на своїй поверхні. 12 Ця поверхня активованих тромбоцитів утворює зразок для подальшої активації ЕХ та повного вироблення тромбіну. Подальша активація ЕХ на поверхні активованих тромбоцитів відбувається через комплекс РІХа-ЕМ Ша, утворений на поверхні активованого тромбоциту, і ЕХа після цього перетворює протромбін на тромбін, усе ще перебуваючи на поверхні. Тромбін після цього перетворює фібриноген на фібрин, який є нерозчинним і який стабілізує первісну тромбоцитну пробку. Цей процес є компартменталізованим, тобто обмежується місцем експресії або дії ТЕ, таким чином, зводячи до мінімуму ризик системної активації системи коагуляції.After the action of thrombin on platelets, they change shape and open charged phospholipids on their surface. 12 This surface of activated platelets forms the template for further activation of the EC and complete generation of thrombin. Further activation of EX on the surface of activated platelets occurs through the RIXa-EM Sha complex formed on the surface of the activated platelet, and EXa then converts prothrombin to thrombin while still on the surface. Thrombin then converts fibrinogen to fibrin, which is insoluble and which stabilizes the original platelet plug. This process is compartmentalized, that is, limited to the site of TE expression or action, thus minimizing the risk of systemic activation of the coagulation system.
Нерозчинний фібрин, який утворює пробку, крім того, стабілізується каталізованим ЕХІЇ шляхом зшивання волокон фібрину.Insoluble fibrin, which forms the plug, is additionally stabilized by EHI-catalyzed cross-linking of fibrin fibers.
ЕМііа існує у плазмі здебільшого як одноланцюговий зимоген, який розщеплюється ЕХа на його дволанцюгову активовану форму, ЕМііа. Рекомбінантний активований фактор Мііа (Тема) виявляє себе як прогемостатичний с агент. Введення гема забезпечує швидку і високоефективну прогемостатичну реакцію у суб'єктів з гемофілією, (3 що страждають від кровотечі, при якій не допомагають продукти, що містять фактор коагуляції, через утворення антитіл. ЕМІа також успішно може бути застосований для суб'єктів, що страждають від кровотечі, з дефіцитом фактора МІЇ, або суб'єктів, які мають нормальну систему коагуляції, але зазнали надмірної кровотечі. У цих дослідженнях не спостерігалося несприятливих побічних ефектів ГЕМІІа (зокрема, випадків тромбоемболії). ее,EMiia exists in plasma mostly as a single-chain zymogen, which cleaves EXa into its two-chain activated form, EMiia. Recombinant activated factor Miia (Tema) reveals itself as a prohemostatic agent. Administration of heme provides a rapid and highly effective prohemostatic response in subjects with hemophilia, (3 suffering from bleeding that is not helped by products containing coagulation factors due to the formation of antibodies. EMIa can also be successfully used in subjects suffering from from bleeding, with MIII deficiency, or subjects who have a normal coagulation system but have experienced excessive bleeding. No adverse side effects of MIIIa (including thromboembolic events) were observed in these studies.
Додаткове екзогенне введення ЕМііа збільшує вироблення тромбіну на поверхні активованих тромбоцитів. Це «з відбувається у суб'єктів з гемофілією, що мають дефіцит ГРІХ або РМІЇЇ, а отже, позбавлені найефективнішого шляху повного вироблення тромбіну. Також за наявності зменшеної кількості тромбоцитів або тромбоцитів з -- недостатньою функцією додатковий ЕМІІа збільшує вироблення тромбіну. Ге)Additional exogenous administration of EMI increases the production of thrombin on the surface of activated platelets. This occurs in subjects with hemophilia who are deficient in SIN or RMIII, and therefore are deprived of the most efficient pathway for complete thrombin production. Also, in the presence of a reduced number of platelets or platelets with insufficient function, additional EMIIa increases the production of thrombin. Gee)
ЕХ, фібриностабілізуючий фактор, є трансглутаміназою, яка зшиває фібринові мономери, таким чином 3о забезпечуючи структуру фібрину, стійкішу до розчинення плазміном та іншими протеолітичними ферментами. вEX, a fibrin-stabilizing factor, is a transglutaminase that cross-links fibrin monomers, thereby providing a fibrin structure more resistant to dissolution by plasmin and other proteolytic enzymes. in
Фактор ХІІ також є відомим як "фібринолігаза" та "фібриностабілізуючий фактор". Активований ЕХШа може утворювати міжмолекулярні гамма-глутаміл-епсилон-лізинові поперечні зв'язки між боковими ланцюгами молекул фібрину та між іншими субстратами. ЕХІЇЇ виявляють у плазмі та у тромбоцитах. Цей фермент існує у « плазмі як тетрамерний зимоген, який складається з двох альфа-субодиниць та двох бета-субодиниць З 70 (позначається а2р2), і у тромбоцитах як зимоген, який складається з двох альфа-субодиниць (позначається с ао-димер).Factor XII is also known as "fibrin ligase" and "fibrin-stabilizing factor". Activated EHS can form intermolecular gamma-glutamyl-epsilon-lysine cross-links between side chains of fibrin molecules and between other substrates. EHIIA is found in plasma and platelets. This enzyme exists in plasma as a tetrameric zymogen consisting of two alpha-subunits and two beta-subunits of C 70 (denoted a2p2), and in platelets as a zymogen consisting of two alpha-subunits (denoted c ao-dimer).
Із» Обидва зимогени активуються тромбіном та Сак. Кальцій вивільнюється з тромбоцитів і накопичується у місці пошкодження. Тромбін відщдеплюється від 1-37 М-кінцевих амінокислотних залишків (а о-димеру). У разі а»бо-зимогену бета-субодиниці відокремлюються від активованих альфа-субодиниць. Кальцій однаково добре зв'язується з зимогеном та зміненою тромбіном молекулою. Після тромбінової та кальцієвої активації цистеїн 7 активного центру на альфа-ланцюгу відкривається і утворюється повністю активований фермент. БулоFrom" Both zymogens are activated by thrombin and Sak. Calcium is released from platelets and accumulates at the site of damage. Thrombin is cleaved from 1-37 M-terminal amino acid residues (a o-dimer). In the case of abo-zymogen, the beta subunits are separated from the activated alpha subunits. Calcium binds equally well to zymogen and thrombin-modified molecule. After thrombin and calcium activation, cysteine 7 of the active site on the alpha chain is opened and a fully activated enzyme is formed. It was
Ге») виявлено, що суб'єкти з важкою тромбоцитопенією мають низький рівень ЕХІЇ! у плазмі.Ge") subjects with severe thrombocytopenia were found to have low levels of EHIA! in plasma
Загальновідомим є те, що суб'єкти, які зазнали надмірної кровотечі у зв'язку з хірургічним втручанням або - значною травмою і потребують переливання крові, створюють більше ускладнень, ніж ті, які взагалі не зазнають ав! 20 кровотечі. Однак навіть помірна кровотеча, яка вимагає введення людської крові або продуктів крові (тромбоцитів, лейкоцитів, похідних від плазми концентратів для лікування від порушень коагуляції тощо) може щи призводити до ускладнень, пов'язаних з ризиком передачі людських вірусів (гепатиту, ВІЛ, парвовірусу та інших, донині невідомих вірусів). Широка кровотеча, яка вимагає переливання крові у великих обсягах, може призводити до розвитку поліорганної недостатності включаючи порушення функцій легенів та нирок. З 25 розвитком цих серйозних ускладнень у суб'єкта починається низка явищ, пов'язаних із багатьма цитокінами таIt is well known that subjects who have experienced excessive bleeding due to surgery or significant trauma and require blood transfusions develop more complications than those who do not experience av! 20 bleeding. However, even moderate bleeding that requires the administration of human blood or blood products (platelets, leukocytes, plasma-derived concentrates for the treatment of coagulation disorders, etc.) can lead to complications associated with the risk of transmission of human viruses (hepatitis, HIV, parvovirus and other, still unknown viruses). Extensive bleeding, which requires blood transfusion in large volumes, can lead to the development of multiple organ failure, including impaired lung and kidney function. With the development of these serious complications in the subject, a series of phenomena associated with many cytokines and
ГФ) запальними реакціями, що робить будь-яке лікування надзвичайно важким і часто, на жаль, марним. Отже, головною метою як хірургічного втручання, так і лікування у разі значного пошкодження тканин є уникнення о кровотечі або зведення Її до мінімуму.HF) inflammatory reactions, which makes any treatment extremely difficult and often, unfortunately, useless. Therefore, the main goal of both surgical intervention and treatment in case of significant tissue damage is to avoid bleeding or to reduce it to a minimum.
Для уникнення або зведення до мінімуму такої кровотечі важливо забезпечити утворення стійких і твердих 60 кровоспиняючих пробок, які не можуть бути легко розчинені фібринолітичними ферментами. Крім того, важливо забезпечити швидке й ефективне утворення таких пробок та згустків.To avoid or minimize such bleeding, it is important to ensure the formation of persistent and firm 60 hemostatic plugs that cannot be easily dissolved by fibrinolytic enzymes. In addition, it is important to ensure the rapid and efficient formation of such plugs and clots.
Японська патентна заявка Мо2-167234 А стосується адгезиву для біологічної тканини, який характеризується тим, що містить фібриноген, протромбін, фактор коагуляції крові МІІ, фактор коагуляції крові ІХ, фактор коагуляції крові Х, фактор коагуляції крові ХІІ, антитромбін, інгібітор протеїнази та іон кальцію. бо Японська патентна заявка Мо59-116213А стосується аерозольної композиції для застосування як тканинного клею, який містить коагулянт для крові як активний компонент. Коагулянт для крові вибирають з-поміж факторів коагуляції крові І, І, Ш, ІМ, М, МІ, МІЇ, ІХ, Х, Хі, ХіИ та ХІШ, прекалікреїн, високомолекулярний полімер кініноген та тромбін. Перевагу віддають комбінації Е ХІІ! та тромбіну.Japanese patent application Mo2-167234 A relates to an adhesive for biological tissue, which is characterized by containing fibrinogen, prothrombin, blood coagulation factor II, blood coagulation factor IX, blood coagulation factor X, blood coagulation factor XII, antithrombin, proteinase inhibitor and calcium ion . because Japanese patent application Mo59-116213A relates to an aerosol composition for use as a fabric adhesive, which contains a blood coagulant as an active ingredient. The coagulant for blood is chosen from blood coagulation factors I, I, Sh, IM, M, MI, MII, IX, X, Xi, Xii, and XIS, prekallikrein, high-molecular polymer kininogen, and thrombin. Preference is given to combinations of E XII! and thrombin.
МО 93/12813 (2утосСепеїйісв) стосується використання Е ХІЇ для зменшення періопераційної втрати крові суб'єктом, підданим хірургічній операції. Композиція також може містити апротинін. ЕХ вводять суб'єктові у формі болюсного вливання, як правило, за день до операції.MO 93/12813 (2utosSepeiiisv) refers to the use of E XII to reduce perioperative blood loss by a subject undergoing surgery. The composition may also contain aprotinin. EX is administered to the subject in the form of a bolus infusion, as a rule, the day before surgery.
Європейський патент Мо225.160 (Момо МогаїзК) стосується композицій ЕМіІІа та способів лікування пов'язаних із кровотечею порушень, викликаних не пошкодженням коагулюючого фактора і не інгібіторами коагулюючого 7/0 фактора.European patent Mo225.160 (Momo MogaizK) relates to EMIIIa compositions and methods of treatment of bleeding-related disorders caused not by damage to the coagulation factor and not by inhibitors of coagulation factor 7/0.
Європейський патент Мо82.182 (Вахіег Тгамепої! І ар.) стосується композиції фактора Мііа для використання з метою протидії дефіцитові косагулюючих факторів або впливові інгібіторів коагулюючих факторів на організм суб'єкта.European patent Mo82.182 (Vahieg Tgamepoi! I ar.) relates to the composition of the Miia factor for use in order to counteract the deficiency of coagulating factors or the influence of inhibitors of coagulating factors on the subject's body.
Міжнародна патентна публікація Мо МО 93/06855 (Момо МогаїзК) стосується місцевого нанесення ЕМІІа.International patent publication Mo MO 93/06855 (Momo MogaizK) concerns the local application of EMIIa.
Робота КіаїКе еї аІ., Тиготрозіз апа Наетозіавзіз, 1999 (Зиррі), 095 1, стосується введення додаткового екзогенного ЕМіа та впливу на вироблення тромбіну на поверхні активованих тромбоцитів на динамічних моделях з імітацією станів гемофілії А або В.The work of KiaiKe ei AI., Tygotrosis apa Naetosiavziz, 1999 (Zirri), 095 1, concerns the introduction of additional exogenous EMI and the effect on thrombin production on the surface of activated platelets in dynamic models with imitation of hemophilia A or B conditions.
Ї досі у даній галузі зберігається потреба у вдосконаленому, надійному і широко застосовуваному способі підвищення коагуляції, швидкого утворення стійких кровоспиняючих пробок та досягнення повного гемостазу у 2о суб'єктів, зокрема, у суб'єктів з порушенням вироблення тромбіну. Також необхідним є спосіб, який би потребував меншої кількості ЕМІЇа для досягнення повного гемостазу.There is still a need in this field for an improved, reliable and widely used method of increasing coagulation, rapid formation of stable hemostatic plugs and achieving complete hemostasis in 20 subjects, in particular, in subjects with impaired thrombin production. Also needed is a method that would require less EMI to achieve complete hemostasis.
Однією з цілей даного винаходу є забезпечення композицій, які ефективно можуть бути застосовані для лікування або профілактики нападів кровотечі та порушень коагуляції.One of the purposes of this invention is to provide compositions that can be effectively used to treat or prevent bleeding attacks and coagulation disorders.
Другою метою даного винаходу є забезпечення композицій в одній дозованій формі, які ефективно можуть сч бути застосовані для лікування чи профілактики нападів кровотечі або як прокоагулянти.A second object of this invention is to provide compositions in a single dosage form that can be effectively used for the treatment or prevention of bleeding attacks or as procoagulants.
Іншою метою даного винаходу є забезпечення композицій, способів лікування або комплектів, які виявляють і) синергетичний ефект.Another object of this invention is to provide compositions, methods of treatment or kits that exhibit i) a synergistic effect.
Ще однією метою даного винаходу є забезпечення композицій, способів лікування або комплектів, які не виявляють значних побічних ефектів, таких як високий рівень системної активації системи коагуляції. Ге зо Інші цілі даного винаходу стануть зрозумілими по ознайомленні з представленим описом.Another object of the present invention is to provide compositions, methods of treatment or kits that do not exhibit significant side effects, such as a high level of systemic activation of the coagulation system. Other objects of this invention will become clear after reading the description presented.
Автори даного винаходу показали, що комбінація фактора Мііа та фактора ХІЇЇ може знизити час згортання о нормальної плазми людини ефективніше, ніж будь-який з факторів Мііа або ХІІ, взятий окремо. Було також «- продемонстровано, що комбінація фактора Мііа та фактора ХІЇЇ може збільшити стійкість згустка ефективніше, ніж будь-який з факторів Ма або ХІІ, взятий окремо. Поєднання фактора Мііа у концентрації, за якої не ісе) спостерігається подальшого збільшення стійкості згустка, з фактором ХІІ, також у концентрації, за якої не ї- спостерігається подальшого збільшення стійкості згустка несподівано виявило, що в цьому разі досягається подальше збільшення стійкості згустка. Було також продемонстровано, що комбінація фактора Ма та фактораThe authors of this invention have shown that the combination of factor Miia and factor XII can reduce the clotting time of normal human plasma more effectively than either factor Miia or XII taken alone. It has also been "- demonstrated that the combination of factor Miia and factor XIII can increase the stability of the clot more effectively than either factor Ma or XII taken alone. The combination of factor Miia in a concentration at which no further increase in clot stability is observed with factor XII, also in a concentration at which no further increase in clot stability is observed, unexpectedly revealed that in this case a further increase in clot stability is achieved. It was also demonstrated that the combination of the Ma factor and the factor
ХП може подовжити час лізису згустка іп міго у нормальній плазмі людини ефективніше, ніж будь-який з інгібіторів факторів Ма або Хі, взятих окремо. Таким чином, шляхом збільшення коагуляції можна « ефективніше лікувати кровотечі у суб'єктів. Крім того, пацієнти можуть бути піддані лікуванню за нижчих ств) с концентрацій фактора МПа, що знижує потребу у відносно високих витратах, пов'язаних із традиційним лікуванням самим фактором Мііа. ;» У першому аспекті винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить фактор Ма та фактор ХІЇ, і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій.CP can prolong the time to lysis of an ip migo clot in normal human plasma more effectively than either of the inhibitors of factors Ma or Xi taken alone. Thus, by increasing coagulation, it is possible to treat bleeding subjects more effectively. In addition, patients can be treated with lower concentrations of factor MPa, which reduces the need for relatively high costs associated with traditional treatment with factor Miia alone. ;" In the first aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition containing factor Ma and factor XII, and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier.
В іншому аспекті винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить фактор Ма та фактор ХІІ як -І єдині активні агенти і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій.In another aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition containing factor Ma and factor XII as the only active agents and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier.
В іншому аспекті винахід стосується фармацевтичної композиції, рецептованої для внутрішньовенногоIn another aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition prescribed for intravenous use
Ме, введення, яка включає фактор Мііа та фактор ХІІ! і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій. - В іншому аспекті винахід стосується фармацевтичної композиції, рецептованої для внутрішньовенного 5о введення, яка включає фактор Міїа та фактор ХІЇ!Ї як єдині активні агенти і, необов'язково, фармацевтично о прийнятний носій.Me, input that includes factor Miia and factor XII! and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier. - In another aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition formulated for intravenous administration, which includes factor Miia and factor XIII as the only active agents and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier.
Ф В одному варіанті втілення фактор Ма є рекомбінантним фактором Мііа, а фактор ХІЇЇ є рекомбінантним фактором ХІЇ.Ф In one embodiment, the Ma factor is a recombinant Miia factor, and the XII factor is a recombinant XII factor.
В одному варіанті втілення винаходу фактор Ма є рекомбінантним фактором Мііа. В іншому варіанті ов Втілення фактор Ма є рекомбінантним людським фактором Ма. В іншому варіанті втілення фактор Ма є різновидом фактора Ма.In one embodiment of the invention, the Ma factor is a recombinant Miia factor. In another embodiment of this embodiment, the Ma factor is recombinant human Ma factor. In another embodiment, the Ma factor is a variant of the Ma factor.
Ф) В одному варіанті втілення різновиди фактора Мііа є різновиди амінокислотних послідовностей, які мають не ка більше 20 заміщених, видалених або вставлених амінокислот порівняно з природним фактором Мііа (тобто, поліпептидом, який має амінокислотну послідовність, описану у патенті США Мо4,784,950). В іншому варіанті во втілення різновиди фактора Ма мають не більше 15 заміщених, видалених або вставлених амінокислот; в іншому варіанті втілення різновиди фактора Ма мають не більше 10 заміщених, видалених або вставлених амінокислот; в іншому варіанті втілення різновиди фактора Ма мають не більше 8 заміщених, видалених або вставлених амінокислот; в іншому варіанті втілення різновиди фактора Ма мають не більше 6 заміщених, видалених або вставлених амінокислот; в іншому варіанті втілення різновиди фактора Ма мають не більше 5 65 заміщених, видалених або вставлених амінокислот; в іншому варіанті втілення різновиди фактора Ма мають не більше З заміщених, видалених або вставлених амінокислот порівняно з природним фактор Ма. В одному варіанті втілення різновиди фактора Ма є вибраними з-поміж |Г/305М1-ЕМІТа, ІС3О05М/М3060/530951-ЕМ Па,F) In one embodiment, the variant Miia factor is a variant amino acid sequence that has no more than 20 substituted, deleted, or inserted amino acids compared to the natural Miia factor (ie, a polypeptide having the amino acid sequence described in US Pat. No. 4,784,950). In another embodiment, the variants of factor Ma have no more than 15 substituted, deleted or inserted amino acids; in another embodiment, variants of the Ma factor have no more than 10 substituted, deleted or inserted amino acids; in another embodiment, variants of the Ma factor have no more than 8 substituted, deleted or inserted amino acids; in another embodiment, variants of the Ma factor have no more than 6 substituted, deleted or inserted amino acids; in another embodiment, varieties of the Ma factor have no more than 5 65 substituted, deleted or inserted amino acids; in another embodiment, variants of the Ma factor have no more than 3 substituted, deleted or inserted amino acids compared to the natural Ma factor. In one version of the embodiment, the varieties of the Ma factor are selected from among |G/305M1-EMITA, IS3O05M/M3060/530951-EM Pa,
І-30511-ЕМПа, (С305711-ЕМІа, (Е374Р|-ЕМІа, (М1587/М29801-ЕМ Па, (М1580/Е296М/М29891-ЕміІІа та (КЗЗ7А1-ЕМПа.I-30511-EMPa, (C305711-EMIa, (E374Р|-EMIa, (M1587/M29801-EM Pa, (M1580/E296M/M29891-EmiIIa) and (KZZ7A1-EMPa.
В одному варіанті втілення фактором ХІіЇЇ є ЕХІЇЇ а2р2. В іншому варіанті втілення фактором ХІІ є ЕХІЇ а2. В іншому варіанті втілення фактором ХІІ є активований фактор ХІІ (ЕХШа). В одному варіанті втілення фактором ХІІ є різновид фактора ХП. В одному варіанті втілення фактором Хі є фактор ХІЇЇ людини. В одному варіанті втілення фактором ХІЇ! є рекомбінантний фактор ХІІ. В одному варіанті втілення фактором ХІЇ є рекомбінантний фактор ХІІ людини. В одному варіанті втілення фактором ХІЇЇ є а2-димер людини.In one embodiment, the XIIII factor is EHIII a2r2. In another version of the embodiment, factor XII is EHIII a2. In another embodiment, the factor XII is activated factor XII (EHSHa). In one embodiment, factor XII is a variant of factor CP. In one embodiment, the Xi factor is a human XII factor. In one version of the embodiment of the XII factor! there is a recombinant factor XII. In one embodiment, factor XII is recombinant human factor XII. In one embodiment, the HII factor is a human α2-dimer.
В одному аспекті композиція також містить інгібітор ТЕРІ. В іншому аспекті композиція також містить 7/0 фактор МІЇІ. В іще одному аспекті композиція також містить фактор МІ! та інгібітор ТЕРІ.In one aspect, the composition also comprises a TERI inhibitor. In another aspect, the composition also contains a 7/0 MIII factor. In yet another aspect, the composition also contains the MI factor! and a TERI inhibitor.
В одному варіанті втілення композиція також включає інгібітор фібринолітичної системи, наприклад, апротинін, /-амінокапронову кислоту або транексамову кислоту.In one embodiment, the composition also includes an inhibitor of the fibrinolytic system, for example, aprotinin, /-aminocaproic acid, or tranexamic acid.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці. В одному аспекті комплект включає а) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; в) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у третій формі с ДдОЗОВаної одиниці; і г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм. і)In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms. In one aspect, the kit includes a) an effective amount of factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; c) an effective amount of the TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the third form of the DdOZO unit; and d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms. and)
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Мііа та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; Ге зо б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і о в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці. «-In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor Miia and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; (b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and o c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms. "-
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі ісе) дозованої одиниці; ї- б) ефективну кількість фактора ХІЇ! та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці. В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає « а) ефективну кількість фактора Ма та фактора ХІЇ! і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у з с першій формі дозованої одиниці;In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the first form of a) dosage unit; i- b) the effective amount of the KHI factor! and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms. In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes "a) an effective amount of factor Ma and factor XII! and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the first dosage unit form;
Й б) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі и? дозованої одиниці; і в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці.And b) an effective amount of the TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second form and? dosage unit; and c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає -І а) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці;In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes -I a) an effective amount of factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the first form of a dosage unit;
Ме, б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі - дозованої одиниці; і в) ефективну кількість фактора МІ ії, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у третій дозованій о формі; іMe, b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second form - a dosage unit; and c) an effective amount of the MI factor, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a third dosage form; and
Ф г) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у четвертій дозованій формі; і е) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої, третьої та четвертої дозованих форм.F d) an effective amount of the TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the fourth dosage form; and e) a container for placing the aforementioned first, second, third and fourth dosage forms.
В іншому аспекті комплект включає а) ефективну кількість фактора Ма та фактора ХІЇ! і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій уIn another aspect, the kit includes a) an effective amount of factor Ma and factor XII! and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier
Ф) першій формі дозованої одиниці; ка б) ефективну кількість фактора МІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; 60 в) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у третій формі дозованої одиниці; і г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм.F) the first form of the dosage unit; ka b) an effective amount of the MI factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; 60 c) an effective amount of the TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the third dosage unit form; and d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Мііа та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у 65 першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і в) ефективну кількість фактора МІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у третій формі дозованої одиниці; і г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм.In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of a Miia factor and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c) an effective amount of the MI factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the third dosage unit form; and d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Ма та фактора МІ ії, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі 70 дозованої одиниці; і в) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ ії, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм.In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor Ma and factor MI, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second form of 70 dosage units; and c) an effective amount of the TERI inhibitor, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора Ма та фактора ХІЇ! і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора МІ! та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці.In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor Ma and factor XII! and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the first dosage unit form; b) the effective amount of the MI factor! and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора МІ та фактора ХІЇЇ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і с в) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі о дозованої одиниці; і г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм.In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor MI and factor HII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of the TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c c) an effective amount of the Miia factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість фактора ХІЇ! та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у Ге зо першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора МІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі о дозованої одиниці; і «- в) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і ре) г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм. ї-In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of factor XII! and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the first dosage unit form; b) an effective amount of the MI factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and "- c) an effective amount of the Miia factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and re) d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms. uh-
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ та фактора МІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора Мііа і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі « дозованої одиниці; і з с в) ефективну кількість фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі . дозованої одиниці; і и?» г) тару для вміщення вищезгаданих першої, другої та третьої дозованих форм.In another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of a TERI inhibitor and an MI factor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second form of a "dosage unit; and c) an effective amount of factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second form. dosage unit; and and?" d) container for placing the aforementioned first, second and third dosage forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає а) ефективну кількість інгібітора ТЕРІ та фактора ХІЇ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у -І першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора МІ та фактора Мііа і, необов'язково, а фармацевтично прийнятний носій уIn another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes a) an effective amount of a TERI inhibitor and factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in a first dosage unit form; b) an effective amount of factor MI and factor Miia and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in
Ме, другій формі дозованої одиниці; і - в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці.Me, the second form of dosage unit; and - c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms.
В іншому аспекті винахід стосується комплекту для лікування нападів кровотечі, який включає о а) ефективну кількість фактора Мііа та інгібітора ТЕРІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій уIn another aspect, the invention relates to a kit for the treatment of bleeding attacks, which includes o a) an effective amount of factor Miia and a TERI inhibitor and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in
Ф першій формі дозованої одиниці; б) ефективну кількість фактора МІ та фактора ХІІ і, необов'язково, фармацевтично прийнятний носій у другій формі дозованої одиниці; і в) тару для вміщення вищезгаданих першої та другої форм дозованої одиниці.F of the first form of the dosage unit; b) an effective amount of factor MI and factor XII and, optionally, a pharmaceutically acceptable carrier in the second dosage unit form; and c) a container for placing the aforementioned first and second dosage unit forms.
В іншому аспекті винахід стосується використання фактора у комбінації з фактором ХІЇЇ для одержання (Ф) медикаменту для лікування нападів кровотечі. ка В іншому аспекті винахід стосується використання фактора у комбінації з фактором ХІЇЇ для одержання медикаменту для скорочення часу згортання у суб'єкта. во В іншому аспекті винахід стосується використання фактора у комбінації з фактором ХІЇЇ для одержання медикаменту для подовження часу лізису згустка у плазмі ссавців.In another aspect, the invention relates to the use of a factor in combination with an XII factor to obtain (F) a medicament for the treatment of bleeding attacks. In another aspect, the invention relates to the use of a factor in combination with an XII factor to provide a medicament for reducing clotting time in a subject. In another aspect, the invention relates to the use of a factor in combination with an XII factor to provide a medicament for prolonging clot lysis time in mammalian plasma.
В іншому аспекті винахід стосується використання фактора у комбінації з фактором ХІЇЇ для одержання медикаменту для збільшення міцності згустка у плазмі ссавців.In another aspect, the invention relates to the use of a factor in combination with an XII factor for the preparation of a medicament for increasing the strength of a clot in mammalian plasma.
В іншому аспекті винахід стосується використання фактора у комбінації з фактором ХІЇЇ для одержання 65 медикаменту для посилення згортання фібрину у плазмі ссавцівIn another aspect, the invention relates to the use of a factor in combination with an XIII factor to produce a medicament for enhancing fibrin coagulation in mammalian plasma
В одному варіанті втілення плазма ссавця є плазмою людини. В іншому варіанті втілення плазма ссавця є нормальною плазмою; в іншому варіанті втілення плазма є нормальною плазмою людини; в одному варіанті втілення плазма є плазмою суб'єкта з порушенням вироблення тромбіну. В одному варіанті втілення плазма є плазмою суб'єкта зі зниженою концентрацією фібриногену.In one embodiment, the mammalian plasma is human plasma. In another embodiment, the mammalian plasma is normal plasma; in another embodiment, the plasma is normal human plasma; in one embodiment, the plasma is the plasma of a subject with impaired thrombin production. In one embodiment, the plasma is the plasma of a subject with a reduced concentration of fibrinogen.
В одному варіанті втілення фактор Мііа та фактор ХІЇЇ подовжують час лізису згустка іп міго у нормальній плазмі людини.In one embodiment, factor Miia and factor XIII prolong the time of lysis of a migo clot in normal human plasma.
В іншому аспекті винахід стосується способу посилення згортання фібрину у суб'єкта, включаючи введення суб'єктові ефективної кількості фактора у комбінації з ефективною кількістю фактора ХІПІ.In another aspect, the invention relates to a method of enhancing fibrin coagulation in a subject, including administering to the subject an effective amount of the factor in combination with an effective amount of the HIPI factor.
В іншому аспекті винахід стосується способу лікування нападів кровотечі у суб'єкта, включаючи введення 70 суб'єктові ефективної кількості фактора у комбінації з ефективною кількістю фактора ХІПІ.In another aspect, the invention relates to a method of treating bleeding episodes in a subject, including administering to the subject an effective amount of the factor in combination with an effective amount of the HIPI factor.
В іншому аспекті винахід стосується способу скорочення часу згортання плазми ссавця, включаючи контакт плазми з ефективною кількістю фактора Ма у комбінації з ефективною кількістю фактора ХІІ. В одному варіанті втілення ефективну кількість фактора у комбінації з ефективною кількістю фактора Хі! вводять суб'єктові, який потребує такого лікування. В іншому аспекті винахід стосується способу посилення утворення фібрину у суб'єкта, включаючи введення суб'єктові ефективної кількості фактора у комбінації з ефективною кількістю фактора ХП.In another aspect, the invention relates to a method of reducing the clotting time of mammalian plasma, including contacting the plasma with an effective amount of factor Ma in combination with an effective amount of factor XII. In one embodiment, the effective amount of the factor in combination with the effective amount of the factor Chi! administered to a subject in need of such treatment. In another aspect, the invention relates to a method of enhancing fibrin formation in a subject, including administering to the subject an effective amount of the factor in combination with an effective amount of the CP factor.
В одному варіанті втілення способів винаходу фактор Мііа та фактор ХІЇЇ є єдиними активними агентами, які вводять суб'єктові. В іншому варіанті втілення винаходу фармацевтична композиція включає фактор Мііа та фактор ХІЇЇ як єдині активні агенти.In one embodiment of the methods of the invention, factor Miia and factor XIII are the only active agents that are administered to the subject. In another embodiment of the invention, the pharmaceutical composition includes factor Miia and factor XIII as the only active agents.
В одному варіанті втілення винаходу фактор Ма та фактор ХІЇЇ вводять одночасно і у формі одиничної дози. В іншому варіанті втілення фактор Міїа та фактор ХІІ вводять послідовно. В іншому варіанті втілення фактор Мііа та фактор ХІЇ! вводять з інтервалом у межах приблизно 1-2 годин між ними, наприклад, у межах 30 хвилин між ними, наприклад, у межах 10 хвилин між ними, наприклад, у формі комплекту, який включає факторIn one embodiment of the invention, factor Ma and factor XIII are administered simultaneously and in the form of a single dose. In another embodiment, factor Miia and factor XII are administered sequentially. In another embodiment, the Miia factor and the XII factor! administered approximately 1 to 2 hours apart, e.g., 30 minutes apart, e.g., 10 minutes apart, e.g., in the form of a kit that includes the factor
Мііа у першій формі дозованої одиниці та фактор ХІІІ у другій формі дозованої одиниці. счMiia in the first dosage unit form and factor XIII in the second dosage unit form. high school
В одному варіанті втілення ефективна кількість фактора Ма становить від О,О5мг/день до 50Омг/день (при масі суб'єкта 7Окг). В одному варіанті втілення ефективна кількість фактора ХІІ становить від 0,О05мг/день до і) 5ООмг/день (при масі суб'єкта 7Окг).In one embodiment, the effective amount of the Ma factor ranges from 0.05 mg/day to 50 Ω/day (at a subject's weight of 7 Оkg). In one embodiment, the effective amount of factor XII is from 0.005mg/day to i) 500mg/day (at a subject's weight of 7Okg).
В одному варіанті втілення даного винаходу фармацевтична композиція (у формі єдиного препарату) складається, головним чином, з фактора Мііа та фактора ХІІ, і, необов'язково, принаймні одного фармацевтично Ге зо прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази. оIn one embodiment of the present invention, the pharmaceutical composition (in the form of a single preparation) consists mainly of factor Miia and factor XII, and, optionally, at least one pharmaceutically acceptable excipient or carrier and/or stabilizer and/or detergent and /or neutral salt and/or antioxidant and/or preservative and/or protease inhibitor. at
В іншому варіанті втілення даного винаходу фармацевтична композиція (у формі єдиного препарату) «- складається, головним чином, з фактора Мііа та фактора ХІІ, і, необов'язково, принаймні одного фармацевтично прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або ісе)In another variant of the embodiment of this invention, the pharmaceutical composition (in the form of a single preparation) "- consists mainly of factor Miia and factor XII, and, optionally, at least one pharmaceutically acceptable filler or carrier and/or stabilizer and/or detergent and /or neutral salt and/or ice)
Зз5 антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази та/або інгібітора ТЕРІ. чаЗз5 antioxidant and/or preservative and/or protease inhibitor and/or TERI inhibitor. Cha
В іншому варіанті втілення даного винаходу фармацевтична композиція (у формі єдиного препарату) складається, головним чином, з фактора Мііа та фактора ХІІ, і, необов'язково, принаймні одного фармацевтично прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази та/або інгібітора ТЕРІ та/або фактора МІ. «In another embodiment of the present invention, the pharmaceutical composition (in the form of a single preparation) consists mainly of factor Miia and factor XII, and, optionally, at least one pharmaceutically acceptable excipient or carrier and/or stabilizer and/or detergent and/or neutral salt and/or antioxidant and/or preservative and/or protease inhibitor and/or TERI inhibitor and/or MI factor. "
В іншому варіанті втілення фармацевтична композиція (якщо має форму комплекту) складається з першої з с форми дозованої одиниці, яка складається, головним чином, з фактора Міга і, необов'язково, принаймні одного фармацевтично прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної ;» солі та/або антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази, та другої форми дозованої одиниці, яка складається, головним чином, з фактора Хі, і, необов'язково, принаймні одного фармацевтично прийнятного наповнювача чи носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або -І антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази.In another embodiment, the pharmaceutical composition (if in the form of a kit) consists of the first dosage unit form c, which consists mainly of Mig factor and, optionally, at least one pharmaceutically acceptable excipient or carrier and/or stabilizer and/or detergent and/or neutral;" salt and/or antioxidant and/or preservative and/or protease inhibitor, and a second dosage unit form consisting primarily of factor Xi, and optionally at least one pharmaceutically acceptable excipient or carrier and/or stabilizer and/ or a detergent and/or a neutral salt and/or an antioxidant and/or a preservative and/or a protease inhibitor.
В іншому варіанті втілення фармацевтична композиція (якщо має форму комплекту) складається з першої ме) форми дозованої одиниці, яка складається, головним чином, з фактора Міга і, необов'язково, принаймні одного - фармацевтично прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази та/або інгібітора ТЕРІ, та другої о форми дозованої одиниці, яка складається, головним чином, з фактора ХІЇЇ, і, необов'язково, принаймні одногоIn another embodiment, the pharmaceutical composition (if in the form of a kit) consists of a first me) form of a dosage unit, which consists mainly of Mig factor and, optionally, at least one - a pharmaceutically acceptable filler or carrier and/or stabilizer and/ or a detergent and/or a neutral salt and/or an antioxidant and/or a preservative and/or a protease inhibitor and/or a TERI inhibitor, and a second dosage unit form that consists primarily of a HYII factor, and, optionally, at least one
Ф фармацевтично прийнятного наповнювача або носія та/або стабілізатора та/або детергента та/або нейтральної солі та/або антиоксиданта та/або консерванта та/або інгібітора протеази та/або інгібітора ТЕРІ та/або фактораF of a pharmaceutically acceptable filler or carrier and/or stabilizer and/or detergent and/or neutral salt and/or antioxidant and/or preservative and/or protease inhibitor and/or TERI inhibitor and/or factor
М.M.
В іншому варіанті втілення суб'єкт є людиною; в іншому варіанті втілення суб'єкт має порушення вироблення тромбіну; в одному варіанті втілення суб'єкт має знижену концентрацію фібриногену у плазміIn another embodiment, the subject is a human; in another embodiment, the subject has impaired thrombin production; in one embodiment, the subject has a reduced plasma fibrinogen concentration
Ф) (наприклад, суб'єкт, підданий неодноразовому переливанню). ка В іншому аспекті композиція також містить фактор МИ. В одному варіанті втілення фактор МІ є активованим фактором МІ! (фактором МіПа). В іншому варіанті втілення фактор МІ! є рекомбінантним фактором бо Ма. В іншому варіанті втілення фактор МП! є рекомбінантним фактором МіІїа людини.F) (for example, a subject subjected to multiple transfusions). ka In another aspect, the composition also contains the MI factor. In one embodiment, the MI factor is an activated MI factor! (by the MiPa factor). In another embodiment, the MI factor! is a recombinant factor because Ma. In another embodiment, the MP factor! is a recombinant human MiIia factor.
В іншому аспекті композиція також включає інгібітор фібринолітичної системи, наприклад, апротинін, /-амінокапронову кислоту або транексамову кислоту.In another aspect, the composition also includes an inhibitor of the fibrinolytic system, for example, aprotinin, /-aminocaproic acid, or tranexamic acid.
На Фігурі 1 показано, що спонтанне утворення згустка у нормальній плазмі людини (МНР), розведеній у співвідношенні 1/10 у буфері, що містив 2О0нМ Нерез, 150мМ Масі та 5мМ Сасі», рН 7,4 у мікротитрувальній 65 лунці (загальний об'єм 250мкл) досягалося за приблизно 2500-300Осек. Згортання фібрину простежувалося за збільшенням оптичної густини при бООнм у Зресгатах 340. МоїІесшціаг Оемісез, Зиппу-маіе СА. На Фіг.1 показано,Figure 1 shows that spontaneous clot formation in normal human plasma (NHP) diluted 1/10 in a buffer containing 2O0nM Nerez, 150mM Masi, and 5mM Sasi, pH 7.4 in a 65-well microtitre (total volume with a volume of 250 μl) was reached in approximately 2500-300 Osek. The coagulation of fibrin was traced by an increase in optical density at bOOnm in Zresgat 340. MoiIesshciag Oemisez, Zippu-maye SA. Figure 1 shows
що ТОнНМ рекомбінантного фактора Міїа (ТЕМПа) від Момо МогаїзкК А/5 Вадзуаега, Оептагк скорочували час утворення згустка до 1600сек (п-2). Подальше скорочення часу утворення згустка досягалося при додаванніthat TONNM of recombinant Miia factor (TEMPa) from Momo MogaizkK A/5 Wadzuaega, Oeptagk reduced the time of clot formation to 1600 seconds (p-2). A further reduction in clot formation time was achieved by adding
ЗОнНМ фактора ХІЇЇ (ЕХІІІ) від Атегісап Оіадповіїса іпс, Сгеепжісп, СТ разом із ЛОНМ гЕМіІа (п-3). Згусток, утворений у присутності ЕХ, був прозорішим (мав нижчу максимальну оптичну густину), ніж за його відсутності, вказуючи на те, що додавання ЕХІЇЇ внаслідок забезпечує дрібнішу гелеву структуру фібрину з тоншими волокнами.ZONNM of factor XIII (EXIII) from Ategisap Oiadpoviisa ips, Sgeepzhisp, ST together with LONM hEMiIa (p-3). The clot formed in the presence of EH was more transparent (had a lower maximum optical density) than in its absence, indicating that the addition of EHIA resulted in a finer fibrin gel structure with thinner fibrils.
На Фігурі 2 показано, що додатковий ЕХ (ЗОНМ) подовжує час лізису фібрину згустків, утворених у присутності ГЕМмІІа та активатора тканинного плазміногену (РА). Утворення згустка викликали у присутності або уо за відсутності ЗОНМ ХІЇ шляхом додавання від 25мкл МНР до 225мкл 2О0нНМ Нерез, 150МмМ Масі, 5мМ Сасі», рн 7,4 що містив 5ОНМ гЕМіІІіа та О0,5нНМ рекомбінантного (ІРА від Момо Могаїзк А/5 Вадзмазга, Оептагк. Утворення згустка та наступний лізис згустка, викликаний опосередкованою (РА активацією плазміногену, спостерігали за допомогою Зресігатах 340 при бООнм як збільшення ОО содонм 3 наступним поверненням траєкторії до базового рівня. На Фіг.2 показано, що час лізису згустка за цих умов значно подовжувався завдяки присутності ЕХІІЇ.Figure 2 shows that additional EX (ZONM) prolongs the time of fibrin lysis of clots formed in the presence of HEMmIIa and tissue plasminogen activator (PA). Clot formation was induced in the presence or in the absence of ZONM XIA by adding from 25 μl of MNR to 225 μl of 200nM Nerez, 150mM Masi, 5mM Sasi", pH 7.4, containing 5ONM hEMiIIia and 0.5nM recombinant (IRA from Momo Mogaizk A/5 Vadzmazga , Oeptagk. Clot formation and subsequent clot lysis caused by RA-mediated activation of plasminogen were observed using Zresigates 340 at bOOnm as an increase in OO sodonm 3 followed by a return of the trajectory to the baseline level. Fig. 2 shows that the time of clot lysis under these conditions is significantly was extended due to the presence of EHIIA.
На Фігурі З показано вплив гЕМІа та ЕХІЇЇ на максимальну твердість згустка (МСЕ), а також стійкість згустка до опосередкованого ЕРА лізису. Перед додаванням гЕМіїа та/або ЕХІЇЇ досягнутий показник МСЕ становив 25мм, і час, необхідний для лізису половини згустка, становив 12,3 хвилини (Фіг.3). Додавання збільшених концентрацій ЕХ (0-40нМ) не змінювало МСЕ; однак спостерігали залежне від дози подовження часу лізису половини згустка, причому оптимальне спостерігалося при ЗОНМ ЕХІЇ! (час лізису половини згустка: 14,3хв, Фіг.3). Так само, додавання гЕМіїа (1НМ) внаслідок забезпечує захист згустка від опосередкованогоFigure 3 shows the effect of hEMIA and EHIIA on maximum clot firmness (MCE) and clot resistance to ERA-mediated lysis. Prior to the addition of hEMIia and/or EHIIA, the achieved MCE was 25mm, and the time required to lyse half of the clot was 12.3 minutes (Figure 3). Addition of increased concentrations of EX (0-40 nM) did not change MSE; however, a dose-dependent prolongation of the lysis time of half of the clot was observed, and the optimal one was observed with ZONM EHIY! (time of lysis of half of the clot: 14.3 min, Fig. 3). Similarly, the addition of hEMiia (1NM) as a result provides protection of the clot from mediated
ІРА фібринолізу (час лізису половини згустка; 16,4хв) без будь-якого впливу на МСЕ (Фіг.3). Однак після додавання гЕМіІа (ІНМ) разом з ЕХНІ (ЗОнНМ) спостерігали збільшення МСЕ (29мм), а також надійний захист від фібринолізу (час лізису половини згустка; 27,1хв) (Фіг.3). Взяті разом, ці результати демонструють, що додавання гЕМіІїа та ЕХ до плазми синергетично поліпшує механічну міцність згустка та стійкість до сч ов опосередкованого ЕРА фібринолізу.IRA of fibrinolysis (time of lysis of half of the clot; 16.4 min) without any effect on MSE (Fig. 3). However, after the addition of hEMiIa (INM) together with EHNI (ZonNM) an increase in MSE (29 mm) was observed, as well as reliable protection against fibrinolysis (time of lysis of half of the clot; 27.1 min) (Fig. 3). Taken together, these results demonstrate that addition of hEMiIa and EX to plasma synergistically improves clot mechanical strength and resistance to ERA-mediated fibrinolysis.
Даний винахід забезпечує композицію, яка включає комбінацію фактора Мііа та фактора ХІІ. Винахід також і) забезпечує композицію, яка включає комбінацію фактора Мііа та фактора ХІІ! як окремих активних інгредієнтів.The present invention provides a composition that includes a combination of factor Miia and factor XII. The invention also i) provides a composition that includes a combination of factor Miia and factor XII! as individual active ingredients.
Композиція може існувати у формі окремої композиції або у формі багатокомпонентного комплекту. Дані композиції корисні як терапевтичні і профілактичні прокоагулянти та агенти стабілізації фібринового згустка і Ге зо утворюють швидкі фібринові згустки у ссавців, включаючи приматів, таких як людина.The composition can exist in the form of a separate composition or in the form of a multi-component set. These compositions are useful as therapeutic and prophylactic procoagulants and fibrin clot stabilization agents, and Ghezo forms rapid fibrin clots in mammals, including primates such as humans.
При згадуванні першої, другої або третьої і т. д. дозованої одиниці в цьому описі вказується не на о оптимальний порядок введення; це робиться лише для зручності. «-When mentioning the first, second or third, etc. dosage unit in this description, it is not indicated about the optimal order of administration; this is for convenience only. "-
Даний винахід також забезпечує спосіб лікування (включаючи профілактичне лікування або запобігання) нападів кровотечі у суб'єктів, включаючи людину, викликаних, наприклад, травмою або хірургічним втручанням, ісе) або у суб'єктів, у яких фактори коагуляції крові ГРІХ або ЕМ чи тромбоцити відсутні або пошкоджені. чаThe present invention also provides a method for the treatment (including prophylactic treatment or prevention) of bleeding episodes in subjects, including humans, caused by, for example, trauma or surgery, ise) or in subjects with blood coagulation factors SIN or EM or platelets missing or damaged. Cha
Було виявлено, що комбінація фактора Ма та фактора ХПШа є корисним продуктом, який забезпечує утворення твердих і стійких кровоспиняючих пробок, що швидко утворюються.A combination of factor Ma and factor KPSa has been found to be a useful product that ensures the formation of hard and stable hemostatic plugs that form rapidly.
Повне вироблення тромбіну є необхідним для утворення твердої стійкої кровоспиняючої пробки. Структура фібрину такої пробки залежить як від кількості утвореного тромбіну, так і від швидкості початкового « вироблення тромбіну. При порушенні вироблення тромбіну утворюється пориста фібринова пробка, яка має в с велику проникність. Фібринолітичні ферменти, які зазвичай є присутніми на поверхні фібрину, легко розчиняють таку фібринову пробку. Утворення стійкої фібринової пробки також залежить від наявності фактора ХПа, який ;» активується тромбіном, а отже, також залежить від повного вироблення тромбіну. Крім того, описаний вище активований тромбіном фібринолітичний інгібітор, ТАРІ, вимагає досить великої кількості тромбіну для його активації. Отже, за недостатнього вироблення тромбіну ТАРІ не може бути активований, внаслідок чого -І утворюється кровоспиняюча пробка, яка легше за нормальну розчиняється у разі звичайної фібринолітичної активності.Complete production of thrombin is necessary for the formation of a solid, stable hemostatic plug. The fibrin structure of such a plug depends on both the amount of thrombin formed and the rate of initial thrombin generation. When the production of thrombin is disturbed, a porous fibrin plug is formed, which has high permeability. Fibrinolytic enzymes, which are normally present on the surface of fibrin, easily dissolve such a fibrin plug. The formation of a stable fibrin plug also depends on the presence of the KhPa factor, which is activated by thrombin and therefore also depends on the complete generation of thrombin. In addition, the above-described thrombin-activated fibrinolytic inhibitor, TARI, requires a fairly large amount of thrombin for its activation. Therefore, with insufficient production of thrombin, TARI cannot be activated, as a result of which a hemostatic plug is formed, which dissolves more easily than normal in the case of normal fibrinolytic activity.
Ме, Через збільшення вироблення тромбіну фактор Мііа забезпечує основу для повної активації фактора ХІЇЇ, що - є найважливішим для утворення повністю стабілізованої кровоспиняючої пробки, а отже, для підтримання 5р гемостазу. У випадках зниженої кількості тромбоцитів, тромбоцитопенії, прискорення вироблення тромбіну о викликають введенням екзогенного додаткового фактора МПа. Однак загальне вироблення тромбіну неMe, Due to the increase in the production of thrombin, the Miia factor provides the basis for the full activation of the XIA factor, which is the most important for the formation of a fully stabilized hemostatic plug, and therefore, for the maintenance of 5p hemostasis. In cases of reduced number of platelets, thrombocytopenia, acceleration of thrombin production is caused by the introduction of exogenous additional factor MPa. However, total thrombin production does not
Ф нормалізується фактором Мііа навіть у високих концентраціях.Ф is normalized by the Miia factor even in high concentrations.
Поєднуючи фактор Мііа та фактор ХІІ, зокрема, альфа-ланцюг фактора ХІЇ! (а2-димер), забезпечують повну активацію фактора ХІЇЇ, що збільшує кровоспиняючий вплив фактора МіІІа.Combining factor Miia and factor XII, specifically the alpha chain of factor XII! (a2-dimer), ensure full activation of factor ХІІІ, which increases the hemostatic effect of factor MiІІІa.
Крім того, у суб'єктів зі зниженою концентрацією фібриногену у плазмі (суб'єктів, підданих неодноразовому переливанню внаслідок множинних травм або широкого хірургічного втручання) повна активація фактора ХІІ неIn addition, in subjects with a reduced concentration of fibrinogen in plasma (subjects exposed to repeated transfusions due to multiple injuries or extensive surgery), full activation of factor XII is not
Ф) трапляється. Ефективнішого гемостазу досягають шляхом введення комбінації фактора Мііа та фактора ХІІ. ка Іншим способом збільшення стійкості фібринових кровоспиняючих пробок є забезпечення повної присутності фактора ХІПа (активованого фактора ХП). во Суб'єкти з тромбоцитопенією мають порушення вироблення тромбіну, а також порушення стабілізації фібринових пробок, внаслідок чого кровоспиняючі пробки стають схильними до передчасного розчинення. Крім того, у суб'єктів, які зазнали значної травми або пошкодження органів і через це піддавалися частому переливанню крові, нерідко знижується кількість тромбоцитів, а також знижується кількість фібриногену, фактора МІ та інших коагуляційних білків. У цих суб'єктів порушується (або знижується) вироблення тромбіну. 65 Крім того, знижений рівень фібриногену негативно впливає на активацію фактора ХІІ. Отже, ці суб'єкти мають недостатній або менш ефективний гемостаз, внаслідок чого утворені фібринові пробки легко і передчасно розчиняються протеолітичними ферментами; крім того, ці ферменти широко вивільнюються у випадках значних травм та пошкодження органів.F) happens. More effective hemostasis is achieved by introducing a combination of factor Miia and factor XII. ka Another way to increase the stability of fibrin hemostatic plugs is to ensure the full presence of the KIP factor (activated KPI factor). in Subjects with thrombocytopenia have impaired thrombin production, as well as impaired stabilization of fibrin plugs, as a result of which hemostatic plugs become prone to premature dissolution. In addition, subjects who have suffered significant trauma or organ damage and have therefore received frequent blood transfusions often have low platelet counts, as well as low levels of fibrinogen, MI factor, and other coagulation proteins. Thrombin production is impaired (or reduced) in these subjects. 65 In addition, the reduced level of fibrinogen negatively affects the activation of factor XII. Therefore, these subjects have insufficient or less effective hemostasis, as a result of which the formed fibrin plugs are easily and prematurely dissolved by proteolytic enzymes; in addition, these enzymes are widely released in cases of significant trauma and organ damage.
Для сприяння утворенню повністю стабілізованих пробок з повною здатністю до підтримання гемостазу суб'єкту вводять композицію згідно з винаходом. Ця композиція є особливо корисною для суб'єктів зі зниженою кількістю тромбоцитів та для суб'єктів зі зниженим рівнем фібриногену та/або інших коагуляційних білків у плазмі.To promote the formation of fully stabilized plugs with full ability to maintain hemostasis, the subject is administered a composition according to the invention. This composition is particularly useful for subjects with reduced platelet counts and for subjects with reduced plasma levels of fibrinogen and/or other coagulation proteins.
У присутності фактора ХІІ нижчої концентрації фактора МПа може бути достатньо для забезпечення потрібного гемостазу.In the presence of factor XII, a lower concentration of MPa factor may be sufficient to provide the required hemostasis.
Як зазначалося вище, фактор ХІЇЇ існує у плазмі як тетрамерний зимоген, який складається з двох 70 альфа-субодиниць та двох бета-субодиниць (позначається а2 р2), але міститься в іншій тканині (наприклад, тромбоцитах) як а2-димер. У межах даного винаходу може застосовуватися будь-яка з цих форм зимогену або активований фактор ХІІ (фактор ХіІПа), а також генетично змінені різновиди фактора ХІЇЇ, які зберігають характерну для них здатність до зшивання. В одному варіанті втілення фактором ХІІ є фактор ХІЇЇ людини; в іншому варіанті втілення фактором ХІІ є а2-димером людини; у ще одному варіанті втілення фактором Хі! є /5 активований фактор ХШа людини.As noted above, factor XII exists in plasma as a tetrameric zymogen consisting of two 70 alpha subunits and two beta subunits (denoted a2 p2), but is found in other tissue (eg, platelets) as an a2 dimer. Within the scope of this invention, any of these forms of zymogen or activated factor XII (factor HiIPa) can be used, as well as genetically modified varieties of factor XII, which retain their characteristic ability to cross-link. In one embodiment, factor XII is human factor XIII; in another embodiment, factor XII is a human a2-dimer; in another version of the implementation of the factor Chi! is /5 activated factor of human CSH.
Фактор ХІІ та фактор Мііа, застосовувані у даному винаході, можуть бути виділені з крові або одержані рекомбінантним способом. Очевидно, що практичне втілення описаних нами способів є незалежним від походження очищеного фактора ХІЇ! та фактора Мііа, а отже, даний винахід розглядається як такий, що охоплює застосування будь-якої композиції фактора ХІІ та фактора Ма, придатної для застосування за даним 2о винаходом. Перевагу віддають факторові Ма та факторові ХІЇЇ людини. У даному винаході також можуть бути застосовані генетично змінені різновиди фактора МПа та фактора ХІЇЇ, які зберігають характерну для них активність, пов'язану з гемостазом. Фрагменти різновидів фактора Ма або фактора ХІІ, або фактора Мііа-, або фактора ХІПІ-, які зберігають характерну для них пов'язану з гемостазом активність, також можуть бути застосовані у даному винаході. Пов'язану з гемостазом активність фактора Ма вимірюють, наприклад, сч ов Застосовуючи аналіз активності фактора Мііа, представлений у даному описі. Пов'язану з гемостазом активність фактора ХІІ! вимірюють, наприклад, застосовуючи аналіз активності фактора ХІІІ, представлений у даному описі. і)Factor XII and factor Miia, used in this invention, can be isolated from blood or obtained by a recombinant method. It is obvious that the practical implementation of the methods described by us is independent of the origin of the purified XIA factor! and factor Miia, and therefore the present invention is intended to encompass the use of any combination of factor XII and factor Ma suitable for use in the present invention. The preference is given to the human factor Ma and the factor XII. The present invention can also be used genetically modified varieties of the MPa factor and the XII factor, which retain their characteristic activity associated with hemostasis. Fragments of variants of factor Ma or factor XII, or factor Miia-, or factor HIPI-, which retain their characteristic hemostasis-related activity, can also be used in this invention. Hemostasis-related activity of factor Ma is measured, for example, by applying the analysis of activity of factor Miia presented in this description. Hemostasis-related activity of factor XII! measured, for example, using the factor XIII activity assay presented in this description. and)
Прикладами різновидів фактора МІІ, які мають практично таку саму або кращу біологічну активність порівняно з природним фактором Мііа, є, крім інших, описані у Датських патентних заявках МоМо РА 2000 00734,Examples of variants of the Mii factor that have substantially the same or better biological activity compared to the natural Mii factor are, among others, those described in Danish patent applications MoMo RA 2000 00734,
РА 2000 01360, РА 2000 01361 та РА 2001 00477. Прикладами, крім інших, є (|(/305М1-ЕМІа, Ге зо 1.З05М/М3060/230951-РМНа, ІС3ЗО511-ЕМПа, І-305Т1-ЕМІа, ІЕЗ374РІ-РМІа, (М1587/М29891-ЕМ Па, (М1580/Е296М/М29801-ЕМІа та (КЗ37А1-ЕМ а. оRA 2000 01360, RA 2000 01361 and RA 2001 00477. Examples, among others, are RMIa, (M1587/M29891-EM Pa, (M1580/E296M/M29801-EMIa and (KZ37A1-EM a. o
У даному контексті трилітерні або однолітерні позначення амінокислот застосовуються в їх традиційному «- значенні, як вказано у Таблиці Якщо прямо не вказано іншого, згадані авторами амінокислотни єIn this context, the three-letter or one-letter designations of amino acids are used in their traditional "- meaning, as indicated in the Table. Unless otherwise indicated, the amino acids mentioned by the authors are
І -амінокислотами. Слід розуміти, що перша літера, наприклад, у КЗ37, представляє амінокислоту, яка в природі ісе) зв присутня у вказаній позиції природного фактора МІІ, ії що, наприклад, (КЗ337А|-ЕМіІїа означає різновид РМІЇ, у ї- якому представлена однолітерним кодом К амінокислота, яка в природі присутня у вказаній позиції, заміщується амінокислотною, представленою однолітерним кодом А. « ю З - ї» пе 00011161 - зелено 1111611And - amino acids. It should be understood that the first letter, for example, in KZ37, represents an amino acid that is naturally present in the indicated position of the natural factor MII, and that, for example, (KZ337A|-EMiIia means a variant of RMII, in which it is represented by a one-letter code K amino acid, which is naturally present in the specified position, is replaced by an amino acid represented by the one-letter code A.
ФF
- зо о т ов ГЕН НН тя НО УНН тювмио 011 зи1а щі юю (Аспарапнова кислота! др | 0 60- zo o t ov GEN NN tya NO UNN tyuvmio 011 zi1a shchi yuyu (Aspartic acid! dr | 0 60
Термін "фактор Ма" або "ГМІІа" може вживатися переміжно. Термін "фактор Мііа" включає зимогенний факторThe term "Ma factor" or "HMIIIa" can be used interchangeably. The term "Miia factor" includes a zymogenic factor
МІ (одноланцюговий фактор МІ). Термін "фактор ХІІ або "ЕХІМ" може вживатися переміжно. Термін "фактор МІ! або "РМІМ" може вживатися переміжно.MI (single-chain MI factor). The term "XII factor" or "EXHIM" can be used interchangeably. The term "MI factor! or "RMIM" can be used interchangeably.
Спеціалістові у даній галузі стане зрозуміло, що заміщення можуть відбуватися за межами ділянок, які 65 відповідають за функцію молекули фактора МіІа або фактора ХІЇ! і все одно внаслідок забезпечують активний поліпептид. Амінокислотні залишки, суттєві для активності поліпептиду фактора Мііа або фактора ХІЇ, а отже,It will be clear to a person skilled in the art that substitutions can occur outside the regions that are responsible for the function of the factor MiIa or factor XII molecule! and still provide an active polypeptide as a result. Amino acid residues essential for the activity of the polypeptide of factor Miia or factor XII, and therefore
можуть не підлягати заміщенню, розпізнають згідно з відомим спеціалістам процедурами, такими, як сайт-специфічний мутагенез або аланіноскануючий мутагенез |див., наприклад, Сиппіпапат апа УМеїЇз, 1989,may not be subject to substitution, are recognized according to procedures known to those skilled in the art, such as site-specific mutagenesis or alanine-scanning mutagenesis |see, e.g., Sippipapat apa UMeiYiz, 1989,
Зсіепсе 244:1081-1085). Згідно з останнім способом, мутації здійснюють у кожному позитивно зарядженому Залишку молекули, і отримані внаслідок мутантні молекули випробують на коагуляцію, і, відповідно, здатність до зшивання для розпізнання амінокислотних залишків, які відповідають за активність молекули. Місця взаємодії субстрату з ферментом також визначають шляхом аналізу тривимірної структури, визначеним згідно з цим способом як аналіз на основі ядерного магнітного резонансу, кристалографія або ковалентна фіксація мічених субстратів |див., наприклад, де Моз еї аїії, 1992, Зсіепсе 255: 306-312; тій еї аїЇї, 1992, доцгпа!Ї ої 70 Моїіесшіаг Віоіоду 224: 899-904; УМодамег еї аї, 1992, РЕВЗ5З І еЦегз 309: 59-64.Zsiepse 244:1081-1085). According to the latter method, mutations are carried out in each positively charged residue of the molecule, and the resulting mutant molecules are tested for coagulation, and, accordingly, the ability to cross-link to recognize the amino acid residues that are responsible for the activity of the molecule. Enzyme-substrate interaction sites are also determined by three-dimensional structure analysis, defined by this method as nuclear magnetic resonance analysis, crystallography, or covalent fixation of labeled substrates |see, for example, de Moze et al., 1992, Zsiepse 255: 306-312 ; 1992, pp. 70, 224, 899-904; UModameg eyi ai, 1992, REVZ5Z I eTsegz 309: 59-64.
Внесення мутації у нуклеїново-кислотну послідовність для заміни одного нуклеотиду на інший може здійснюватися шляхом сайт-специфічного мутагенезу з застосуванням будь-яких відомих спеціалістам способів.Introduction of a mutation in a nucleic acid sequence to replace one nucleotide with another can be carried out by site-specific mutagenesis using any methods known to specialists.
Особливо доцільною є процедура з застосуванням надспірального, дволанцюгового вектора ДНК з потрібною вставкою та двома синтетичними праймерами, що містять потрібну мутацію. Олігонуклеотидні праймери, кожен з /5 яких є комплементарним протилежному ланцюгові вектора, розкручуються під час термоциклування за допомогою Ріш ДНК-полімерази. Після включення праймерів утворюється мутована плазміда, яка містить розташовані в шаховому порядку ніки (розриви одного ланцюга у дволанцюговій молекулі нуклеїнової кислоти).A procedure using a supercoiled, double-stranded DNA vector with the desired insert and two synthetic primers containing the desired mutation is particularly appropriate. Oligonucleotide primers, each of which is complementary to the opposite strand of the vector, are unwound during thermocycling with Risch DNA polymerase. After the inclusion of primers, a mutated plasmid is formed, which contains staggered nicks (breaks of one chain in a double-stranded nucleic acid molecule).
Після термоциклування продукт обробляють Орлі, який є специфічним до метильованої та геміметильованоїAfter thermocycling, the product is treated with Orli, which is specific for methylated and hemimethylated
ДНК, для дигерування зразка батьківської ДНК та відбору синтезованої ДНК, що містить мутацію. Також можуть бути застосовані інші відомі спеціалістам способи створення, розпізнання та виділення різновидів, наприклад, переміщення генів або виявлення фагів.DNA, to digest a sample of parental DNA and select synthesized DNA containing the mutation. Other techniques known to those skilled in the art to create, recognize, and isolate varieties may also be used, such as gene transfer or phage detection.
Термін "фактор МИ" або "ЕМП" включає активований фактор МІ! (позначається фактор МіІа), різновиди та зрізані форми фактора МІП, які зберігають характерну для них коагулянтну активність. В одному варіанті втілення фактор МІ є фактором МІ людини. счThe term "MI factor" or "EMF" includes activated MI factor! (denoted MiIa factor), varieties and truncated forms of the MIP factor, which retain their characteristic coagulant activity. In one embodiment, the MI factor is a human MI factor. high school
Термін "інгібітор ТЕРІ" означає сполуки, які інгібують протикоагулянтну активність ТЕРІ (інгібітора шляху тканинного фактора). Цей термін включає сполуки на зразок тих, які описано у Європейському патенті Мо 558529, і)The term "TERI inhibitor" refers to compounds that inhibit the anticoagulant activity of TERI (Tissue Factor Pathway Inhibitor). This term includes compounds such as those described in European patent Mo 558529, i)
МО 96/28153 та 05 5,622,988. "ТЕР!" та "ЕРІ" (інгібітор зовнішнього шляху) може вживатися переміжно.MO 96/28153 and 05 5,622,988. "TER!" and "ERI" (extrinsic pathway inhibitor) can be used interchangeably.
Згідно з даним винаходом, "ефективна кількість фактора Ма та "ефективна кількість" фактора ХІЇ визначається як кількість фактора Мііа та фактора ХІІ, достатня для запобігання чи зниження кровотечі або Ге зо втрати крові, з метою лікування, послаблення або часткового припинення хвороби та її ускладнень.According to the present invention, an "effective amount" of factor Ma and an "effective amount" of factor XII is defined as an amount of factor Miia and factor XII sufficient to prevent or reduce bleeding or blood loss, for the purpose of treating, alleviating or partially stopping the disease and its complications .
Кількість фактора Мііа та кількість фактора ХІІ, які вводять згідно з даним винаходом, може бути різною, о від приблизно 1:100 до приблизно 100:1 (мкг фактора Міа:/мкг фактора ХІЇ). «-The amount of factor Mia and the amount of factor XII administered according to the present invention may vary from about 1:100 to about 100:1 (μg of factor Mia:/μg of factor XII). "-
У цьому контексті "суб'єкти з порушенням вироблення тромбіну" означає суб'єктів, які не можуть виробляти повного тромбіну на поверхні активованих тромбоцитів, і включає суб'єктів, у яких тромбін виробляється у ісе) меншій кількості, ніж у суб'єктів, які мають повністю функціонуючу, нормальну кровоспиняючу систему, ї- включаючи нормальну кількість та функцію факторів коагуляції, тромбоцитів та фібриногену, а також включає суб'єктів, у яких відсутні ГРІХ та/або ЕМ (гемофілія А та В) або суб'єктів з дефіцитом РІХ та/(або ЕМ! або з інгібіторами проти РІХ та/або ЕМ; суб'єктів, у яких відсутній ЕХІ; суб'єктів зі зниженою кількістю тромбоцитів або тромбоцитами з недостатньою функцією (наприклад, тромбоцитопенією чи тромбастенією «In this context, "subjects with impaired thrombin production" means subjects who cannot produce complete thrombin on the surface of activated platelets and includes subjects in whom thrombin is produced in ise) lower amounts than subjects who have a fully functioning, normal coagulation system, including normal amounts and function of coagulation factors, platelets, and fibrinogen, and includes subjects who do not have SIN and/or EM (hemophilia A and B) or subjects with deficiencies RICH and/or EM! or with inhibitors against RICH and/or EM; subjects who lack EHI; subjects with reduced platelet counts or platelets with insufficient function (eg, thrombocytopenia or thrombasthenia "
Гланцманна або суб'єктів з надмірною кровотечею); а також суб'єктів, які мають знижений рівень протромбіну, з с ЕХ або МІ. . Суб'єкти зі зниженою концентрацією фібриногену у плазмі (наприклад, піддані багаторазовому переливанню и?» крові суб'єкти внаслідок множинних травм або широкого хірургічного втручання) також страждають від утворення м'яких і нестійких фібринових пробок, які легко розчиняються.Glanzmann or subjects with excessive bleeding); as well as subjects who have a reduced level of prothrombin, with EX or MI. . Subjects with reduced plasma fibrinogen concentrations (for example, subjects exposed to repeated transfusions of blood due to multiple injuries or extensive surgery) also suffer from the formation of soft and unstable fibrin plugs that dissolve easily.
Термін "повний гемостаз" означає утворення у місці пошкодження стійкого і твердого фібринового згустка -І або пробки, який ефективно спиняє кровотечу і який не може бути легко розчинений фібринолітичною системою.The term "complete hemostasis" means the formation at the site of damage of a persistent and solid fibrin clot -I or plug, which effectively stops bleeding and which cannot be easily dissolved by the fibrinolytic system.
Термін "активність фактора Мііа" означає здатність до вироблення тромбіну; термін також включає здатністьThe term "factor Miia activity" means the ability to produce thrombin; the term also includes ability
Ме, до вироблення тромбіну на поверхні активованих тромбоцитів за відсутності тканинного фактора. - Термін "посилення нормальної кровоспиняючої системи" означає посилення здатності до вироблення тромбіну. о Вжитий авторами термін "пов'язане з кровотечею порушення" означає будь-яке порушення, уроджене, набутеMe, to the production of thrombin on the surface of activated platelets in the absence of tissue factor. - The term "enhancement of the normal hemostatic system" means an increase in the ability to produce thrombin. o The term "bleeding-related disorder" used by the authors means any disorder, congenital, acquired
Ф або викликане, яке має клітинне або молекулярне походження і виявляє себе у кровотечах. Прикладами є дефіцит коагулюючих факторів (наприклад, гемофілія А та В або дефіцит факторів коагуляції Хі чи МІЇ), інгібітори коагулюючих факторів, порушення функції тромбоцитів, тромбоцитопенія або хвороба фонF or caused, which has a cellular or molecular origin and manifests itself in bleeding. Examples are coagulation factor deficiency (eg, hemophilia A and B or coagulation factor X or MI deficiency), coagulation factor inhibitors, platelet dysfunction, thrombocytopenia, or von
Віллебранда (псевдогемофіл ія).Willebrand (pseudohemophilia).
Термін "напади кровотечі" включає неконтрольовану і надмірну кровотечу, яка є головною проблемою, щоThe term "bleeding attacks" includes uncontrolled and excessive bleeding, which is the main problem that
Ф) виникає у зв'язку як з хірургічним втручанням, так і з іншими формами пошкодження тканин. Неконтрольована та ка надмірна кровотеча може траплятися у суб'єктів, які мають в цілому нормальну систему коагуляції (однак у цих суб'єктів розвивається коагулопатія внаслідок кровотечі - розчинення коагуляційних білків, збільшення во фібринолізу та зменшення тромбоцитів через розчинний вплив кровотечі), та суб'єкти, які мають порушення коагуляції або пов'язані з кровотечею порушення. Дефіцит коагулюючих факторів (гемофілія А та В, дефіцит факторів коагуляції ХІ або МІ!) або інгібітори косагулюючих факторів можуть спричинити пов'язані з кровотечею порушення. Надмірна кровотеча також трапляється у суб'єктів з нормально функціонуючим каскадом згортання крові (без дефіциту коагулюючого фактора або інгібіторів проти будь-якого з факторів коагуляції) і може бути 65 Викликана порушенням функції тромбоцитів, тромбоцитопенією або псевдо гемофілією фон Віллебранда. У таких випадках кровотеча може бути порівняна з кровотечею, спричиненою гемофілією, оскільки кровоспиняюча система, як і при гемофілії, відчуває брак або відхилення у "сполуках", які відповідають за зсілість (таких як тромбоцити або білок фактора фон Віллебранда), що спричинює значні кровотечі. У суб'єктів, які зазнали значного пошкодження тканин у зв'язку з хірургічним втручанням або значною травмою, нормальний кровоспиняючий механізм може бути послаблений через необхідність негайного гемостазу, і у них може посилюватися кровотеча, незважаючи на в цілому нормальний (до травми) кровоспиняючий механізм.F) occurs in connection with both surgical intervention and other forms of tissue damage. Uncontrolled and excessive bleeding can occur in subjects with a generally normal coagulation system (however, these subjects develop coagulopathy due to bleeding - dissolution of coagulation proteins, increased fibrinolysis, and decreased platelets due to the soluble effect of bleeding), and subjects subjects who have coagulation disorders or bleeding disorders. Deficiency of coagulation factors (hemophilia A and B, deficiency of coagulation factors XI or MI!) or inhibitors of coagulation factors can cause bleeding disorders. Excessive bleeding also occurs in subjects with a normally functioning coagulation cascade (without coagulation factor deficiency or inhibitors against any of the coagulation factors) and may be 65 Caused by platelet dysfunction, thrombocytopenia, or von Willebrand pseudohemophilia. In such cases, the bleeding can be compared to bleeding caused by hemophilia, because the coagulation system, as in hemophilia, experiences a deficiency or abnormality in the "compounds" responsible for coagulation (such as platelets or von Willebrand factor protein), causing significant bleeding. . In subjects who have sustained significant tissue damage due to surgery or significant trauma, the normal hemostatic mechanism may be impaired due to the need for immediate hemostasis, and they may experience increased bleeding despite a generally normal (pre-injury) hemostatic mechanism. .
Досягнення задовільного гемостазу також є проблемою, коли кровотеча трапляється в таких органах, як мозок, зона внутрішнього вуха та очі, де обмежується можливість хірургічного гемостазу. Така сама проблема може виникнути у процесі біопсії з різних органів (печінки, легенів, пухлинних тканин, шлунково-кишкового тракту), /о а також при лапароскопічних операціях. Спільними для всіх цих ситуацій є труднощі, пов'язані з забезпеченням гемостазу хірургічними способами (накладання швів, скоб тощо), що трапляється також при розсіяній кровотечі (геморагічний гастрит та профузна маткова кровотеча). Гострі та профузні кровотечі також можуть траплятися у суб'єктів при антикоагулянтній терапії, у яких порушення гемостазу були викликані наданою терапією. Такі суб'єкти можуть потребувати хірургічного втручання у разі коли вимагається швидка протидія /5 антикоагулянтному впливові. Для суб'єктів з локалізованим раком передміхурової залози зазвичай застосовують радикальну ретролобкову простатектомію. Операція часто ускладнюється значною, часом дуже великою втратою крові. Значна втрата крові під час простатектомії найчастіше буває пов'язана з ускладненим анатомічним розташуванням, з різними густо васкуляризованими ділянками, які є важкодоступними для хірургічного гемостазу і можуть призвести до розсіяної кровотечі з великої площі. Іншою ситуацією, яка може 2ор Викликати проблеми у разі незадовільного гемостазу, є ситуація, коли суб'єкти з нормальним кровоспиняючим механізмом піддаються антикоагулянтній терапії для запобігання тромбоемболії. Така терапія може включати застосування гепарину, інших форм протеогліканів, варфарину або інших форм антагоністів вітаміну К, а також аспірину та інших інгібіторів агрегації тромбоцитів.Achieving satisfactory hemostasis is also a challenge when bleeding occurs in organs such as the brain, inner ear, and eyes, where surgical hemostasis is limited. The same problem can arise in the process of biopsy from various organs (liver, lungs, tumor tissues, gastrointestinal tract), and also during laparoscopic operations. Common to all these situations are the difficulties associated with ensuring hemostasis by surgical methods (applying sutures, staples, etc.), which also occurs with diffuse bleeding (hemorrhagic gastritis and profuse uterine bleeding). Acute and profuse bleeding can also occur in subjects on anticoagulant therapy in whom hemostasis disorders were caused by the given therapy. Such subjects may require surgical intervention when rapid reversal of the anticoagulant effect is required. For subjects with localized prostate cancer, radical retropubic prostatectomy is usually used. The operation is often complicated by significant, sometimes very large, blood loss. Significant blood loss during prostatectomy is often associated with a complicated anatomical location, with various densely vascularized areas that are difficult to access for surgical hemostasis and can lead to scattered bleeding from a large area. Another situation that can cause problems in the case of unsatisfactory hemostasis is when subjects with a normal hemostatic mechanism undergo anticoagulant therapy to prevent thromboembolism. Such therapy may include the use of heparin, other forms of proteoglycans, warfarin or other forms of vitamin K antagonists, as well as aspirin and other platelet aggregation inhibitors.
В одному варіанті втілення винаходу кровотеча пов'язана з гемофілією. В іншому варіанті втілення сч ов Кровотеча пов'язана з гемофілією через набуті інгібітори. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з тромбоцитопенією. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з псевдогемофілією. В іншому варіанті і) втілення кровотеча пов'язана з важким пошкодженням тканин. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з важкою травмою. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з хірургічним втручанням. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з лапароскопічним хірургічним втручанням. В іншому варіанті втілення кровотеча ГеIn one embodiment of the invention, bleeding is associated with hemophilia. In another embodiment of the disease, bleeding is associated with hemophilia due to acquired inhibitors. In another embodiment, bleeding is associated with thrombocytopenia. In another embodiment, bleeding is associated with pseudohemophilia. In another variant i) embodiment, bleeding is associated with severe tissue damage. In another embodiment, bleeding is associated with severe trauma. In another embodiment, bleeding is associated with surgical intervention. In another embodiment, bleeding is associated with laparoscopic surgery. In another embodiment, He bleeding
Зо пов'язана з геморагічним гастритом. В іншому варіанті втілення кровотеча є профузною матковою кровотечею. В іншому варіанті втілення кровотеча трапляється в органах з обмеженою можливістю механічного гемостазу. В о іншому варіанті втілення кровотеча трапляється у мозку, зоні внутрішнього вуха або очах. В іншому варіанті «- втілення кровотеча пов'язана з процесом біопсії. В іншому варіанті втілення кровотеча пов'язана з антикоагулянтною терапією. ісе)Zo is associated with hemorrhagic gastritis. In another embodiment, the bleeding is profuse uterine bleeding. In another embodiment, bleeding occurs in organs with a limited possibility of mechanical hemostasis. In another embodiment, bleeding occurs in the brain, inner ear area, or eyes. In another embodiment, bleeding is associated with the biopsy process. In another embodiment, bleeding is associated with anticoagulant therapy. ise)
Композиція згідно з винаходом також може включати інгібітор ТЕРІ. Така композиція в оптимальному варіанті ї- має вводитись суб'єктам з гемофілією А або В.The composition according to the invention may also include a TERI inhibitor. Such a composition in its optimal version should be administered to subjects with hemophilia A or B.
Композиція згідно з винаходом також може включати фактор МІ. Таку композицію в оптимальному варіанті вводять суб'єктам, які не мають інгібіторів фактора МІП.The composition according to the invention may also include an MI factor. Such a composition is optimally administered to subjects who do not have inhibitors of the MIP factor.
У Цьому контексті термін "лікування" включає як запобігання можливій кровотечі, наприклад, при « Хірургічному втручанні, так Її регулювання кровотечі, яка вже відбувається, наприклад, при гемофілії або з с травмі, з метою стримування або мінімізації кровотечі. Профілактичне введення фактора МіІа та фактора ХІЇ, таким чином, охоплюється терміном "лікування". ;» Вжитий авторами термін "суб'єкт" означає будь-яку тварину, зокрема, ссавця, такого як людина, і може у певному випадку вживатися переміжно з терміном "пацієнт". -І СкороченняIn this context, the term "treatment" includes both the prevention of possible bleeding, for example, during surgery, and the regulation of bleeding that is already occurring, for example, with hemophilia or with trauma, in order to control or minimize bleeding. Prophylactic administration of factor MiIa and factor XII is therefore covered by the term "treatment". ;" As used by the authors, the term "subject" means any animal, in particular, a mammal such as a human, and may in some cases be used interchangeably with the term "patient". -I Abbreviations
ТЕ тканинний фактор (о) МІ фактор МІЇ в його одноланцюговій неактивованій формі - ЕМпа фактор МІ! в його активованій формі гема рекомбінантний фактор МІ! в його активованій формі ге ШИ ЕХ й ій ій і фактор ХІЇЇ в його зимогенній неактивованій формі 4») ЕХШа фактор ХІЇЇ в його активованій форміTE tissue factor (o) MI factor MII in its single-chain non-activated form - EMPA factor MI! in its activated form heme recombinant factor MI! in its activated form ге ШХ ЭХ и ий ий and factor ХИЯ in its zymogenic non-activated form 4") ЭХШ factor ХЯІ in its activated form
ТЕХ рекомбінантний ЕХІЇЇ гЕхХхШа рекомбінантний. ЕХШа а? альфа- або а-ланцюг ЕХ або гЕХІЇ р2 бета- або р-ланцюг ЕХІЇЇ або гЕХП!TEH recombinant EHIII gEhHhSha recombinant. Ehsha huh? alpha- or a-chain of ЕХ or гЭХІ p2 beta- or p-chain of ЭХІІ or гЭЫ!
Ф) ЕХШа?2 димерна форма ЕХІЇ, яка містить два а-ланцюги ко ЕХШаг2р2 тетрамерна форма ЕХІЇЇ, яка містить два а- та два Бр-ланцюгиФ) ЕХШа?2 dimeric form of EHIIA, which contains two α-chains and EХШаг2р2 tetrameric form of EHIIA, which contains two α- and two Br-chains
МІ! фактор МІ в його зимогенній неактивованій формі 60 ТЕМИ рекомбінантний ЕМП!E! MI factor in its zymogenic non-activated form 60 TOPICS recombinant EMF!
ЕМШа фактор МІ! в його активованій формі гЕМШа рекомбінантний. ЕМ ШаEMsha factor MI! in its activated form, hEMSh is recombinant. EM Sha
ТЕРІ інгібітор шляху тканинного фактора 65 Одержання сполукTERI inhibitor of the tissue factor 65 pathway Preparation of compounds
Очищений фактор Мііа людини, придатний для застосування у даному винаході, в оптимальному варіанті одержують способом рекомбінантних ДНК, наприклад, як описано в роботі Надеп еї аї!., Ргос.Мак.Асайд.Зсі. ОА 83:2412-2416,1986 або як описано в європейському патенті Мо200,421 (7утосепеїйісв, Іпс.). Фактор Мііа, одержаний рекомбінантним способом, може бути автентичним фактором Міїа або більше чи менше модифікованим фактором Мііа, за умови, що такий фактор Мііа має практично таку саму біологічну активність для коагуляції крові що й автентичний фактор Міїа (природний фактор Ма). Такий модифікований фактор МіІІа одержують шляхом модифікації нуклеїново-кислотної послідовності, що кодує природний фактор МІЇ, або шляхом зміни амінокислотних кодонів, або шляхом видалення деяких із амінокислотних кодонів у нуклеїновій кислоті, що кодує природний фактор МІ! відомими способами, наприклад, шляхом сайт-специфічного мутагенезу. 70 Фактор МІЇ також одержують способами, описаними в роботах Вгале апа Ма/егив, 9У.ВіоІ.Спет. 255 (4): 1242-1247,1980, та Неадпег апа Ківієї, У.Сііп.іпмеві. 71:1836-1841,1983. Ці способи забезпечують фактор МІЇ без помітної кількості інших факторів коагуляції крові. Ще більше очищений фактор МІЇ одержують шляхом включення додаткової гель-фільтрації як кінцевого етапу очищення. Фактор МІ! у цьому разі перетворюється на активований фактор Мііа відомими способами, наприклад, кількома різними білками плазми, такими як фактор 7/5 Хіа, Ха або Ха. В альтернативному варіанті, як описано в роботі Віоегп еї аі. (Кезеагспй Оівзсіозиге, 269Purified human Miia factor, suitable for use in this invention, is optimally obtained by the method of recombinant DNA, for example, as described in the work Nadep eyi ai!., Rgos.Mak.Asayd.Zsi. OA 83:2412-2416, 1986 or as described in European patent Mo200,421 (7utosepiiisv, Ips.). The recombinant Miia factor can be an authentic Miia factor or a more or less modified Miia factor, provided that such Miia factor has substantially the same biological activity for blood coagulation as the authentic Miia factor (natural Ma factor). Such a modified MiIIa factor is obtained by modifying the nucleic acid sequence encoding the natural MII factor, or by changing the amino acid codons, or by deleting some of the amino acid codons in the nucleic acid encoding the natural MI factor! by known methods, for example, by site-specific mutagenesis. 70 The MII factor is also obtained by the methods described in the works of Vgale apa Ma/egiv, 9U.VioI.Spet. 255 (4): 1242-1247, 1980, and Neadpeg apa Kiviei, U. Siip. ipmevi. 71:1836-1841, 1983. These methods provide the MII factor without appreciable amounts of other blood coagulation factors. Even more purified MII factor is obtained by including additional gel filtration as a final purification step. MI factor! in this case, it is converted to activated factor Miia by known methods, for example, by several different plasma proteins, such as factor 7/5 Hia, Xa or Xa. In an alternative version, as described in the work of Vioegp ei ai. (Kezeagspy Oivzsiosyge, 269
Зеріетрег 1986, рр. 564-565), фактор МІ! активують шляхом пропущення його через іонообмінну хроматографічну колонку, таку як Мопо О (РНпагтасіа їїіпе Спетісаї!в) або іншу подібну колонку.Zerietreg 1986, pp. 564-565), MI factor! activated by passing it through an ion-exchange chromatographic column, such as a Mopo O (RNpagtasia iiipe Spetisai!v) or other similar column.
Фактор ХІЇЇ для застосування згідно з даним винаходом одержують із плазми згідно з відомими способами, такими як описані в роботах СооКе апа Ноїбгоок (Віоспет. .). 141:79-84,1974) та Сигаз апа Гогапа (Меїподз Епгутої. 45:177-191,1976), на які автори посилаються. Димерну форму а2 фактора ХІЇЇ одержують із плаценти, як описано у патентах США МоМо 3,904,751; 3,931,399; 4,597,899 та 4,285,933, на які автори посилаються. Однак перевагу віддають застосуванню рекомбінантного фактора ХІІ для уникнення застосування продуктів кров'яного або тканинного походження, пов'язаного з ризиком перенесення хвороб. Способи одержання рекомбінантного фактора ХІІ є відомими спеціалістам. Див., наприклад, ЮОаміе ей а), ЕР 268,772; ОСгипдтапп еї аї., счThe XII factor for use according to the present invention is obtained from plasma according to known methods, such as those described in the works of Sooke apa Noibgook (Viospet. .). 141:79-84,1974) and Sygaz apa Gogapa (Meipodz Epgutoi. 45:177-191,1976), to which the authors refer. The dimeric form of the a2 factor of the XIII factor is obtained from the placenta, as described in US patents MoMo 3,904,751; 3,931,399; 4,597,899 and 4,285,933 to which the authors refer. However, preference is given to the use of recombinant factor XII to avoid the use of blood or tissue products associated with the risk of disease transmission. Methods of obtaining recombinant factor XII are known to specialists. See, for example, Joamie ei a), EP 268,772; OSgypdtapp ei ai., sch
АЦ-А-69896/87; Вівпор ей аї.,, Віоспетівігу 1990,29:1861-1869; Воага еф аїЇ.,, ТиготБ. Наетові. 1990, 63:235-240; дададеезжагап еї аі., Сепе 1990, 86:279-283; та ВгоКег ейаі., РЕВ5 Гей. 1989,248:105-110, на які (8) автори посилаються в їх повному обсязі. В одному варіанті втілення а2-димер фактора ХІЇЇ одержують цитоплазматично у дріжджах Засспаготусез сегемівіае, як описано у патентній заявці США Мо07/741,263, яка також перебуває у стадії розгляду і на яку автори посилаються в її повному обсязі). Клітини збирають і Ге зо піддають лізисові, одержуючи прозорий лізат. Цей лізат фракціонують шляхом аніонообмінної хроматографії при рН від нейтрального до слабко лужного, застосовуючи колонку дериватизованої агарози, такої як швидкоплинна о сефароза ОЕАЕ Раві-Ріом Зернагозе. ТМ. (РНагтасіа) або ін. Фактор ХІЇЇ після цього осаджують з елюату колонки - п шляхом його концентрування та доведення рН до 5,2-5,5, наприклад, шляхом діафільтрації на сукцинатно-амонієвому буфері. Осад далі розчиняють і очищають, застосовуючи традиційні способи ісе) хроматографії, такі як гель-фільтрація та хроматографія з гідрофобною взаємодією. ї-AC-A-69896/87; Vivpor ei ai.,, Viospetivhigu 1990, 29:1861-1869; Voaga ef aiYi.,, TygotB. Naetov 1990, 63:235-240; dadadeezzhagap ei ai., Sepe 1990, 86:279-283; and VgoKeg eyai., REV5 Hey. 1989,248:105-110, to which (8) the authors refer in their entirety. In one embodiment, the α2-dimer of factor XII is produced cytoplasmically in the yeast Zasspagotuses segemiviae as described in US Patent Application No. 07/741,263, which is also pending and to which the authors refer in its entirety). Cells are collected and Hezo is subjected to lysis, obtaining a clear lysate. This lysate is fractionated by anion-exchange chromatography at neutral to slightly alkaline pH using a column of derivatized agarose, such as OEAE Ravi-Riom Zernagose fast-flow Sepharose. TM. (RNagtasia) or others. After that, the XII factor is precipitated from the eluate of the -n column by concentrating it and bringing the pH to 5.2-5.5, for example, by diafiltration on a succinate-ammonium buffer. The precipitate is further dissolved and purified using traditional chromatography techniques such as gel filtration and hydrophobic interaction chromatography. uh-
Як стане зрозуміло спеціалістам, перевагу віддають застосуванню білків фактора Хі та фактора Мііа, сингенним із суб'єктом, для зниження ризику викликання імунної реакції. Одержання та характеристики фактораAs will be understood by those skilled in the art, the use of factor X and factor Miia proteins syngeneic to the subject is preferred to reduce the risk of triggering an immune response. Obtaining and characteristics of the factor
ХІІ не людського походження описано в роботі Макатига еї а). (9. Віоспет. 78:1247-1266,1975). Даний винахід також охоплює застосування таких білків фактора ХІІ! та фактора Мііа у ветеринарних процедурах. «XII of non-human origin is described in Makatig's work a). (9. Viospet. 78:1247-1266, 1975). The present invention also covers the use of such factor XII proteins! and Miia factor in veterinary procedures. "
Введення та фармацевтичні композиції з с Для лікування у зв'язку з запланованим хірургічним втручанням фактор МІ та фактор ХІЇЇ, як правило, вводять у межах приблизно 24 годин до здійснення втручання і протягом 7 днів або більше після нього. ;» Введення як коагулянта здійснюють різними шляхами, як описано уданому винаході.Administration and Pharmaceutical Compositions With c For treatment in connection with planned surgical intervention, the MI factor and the HII factor are generally administered within about 24 hours before the intervention and for 7 days or more after it. ;" Administration as a coagulant is carried out in various ways, as described in the successful invention.
Доза фактора МІ! становить від приблизно 0,05мг до приблизно 50Омг/день, наприклад, від приблизно 1мг до приблизно 200Омг/день, або, наприклад, від приблизно 1Омг до приблизно 175мг/день для суб'єкта масою 7Окг як -І ударні та підтримуючі дози, залежно від маси суб'єкта, стану та його тяжкості.A dose of the MI factor! is from about 0.05mg to about 50mg/day, for example from about 1mg to about 200mg/day, or for example from about 1mg to about 175mg/day for a 7kg subject as loading and maintenance doses, depending from the subject's weight, condition and severity.
Доза фактора ХІЇ! становить від приблизно 0,05мг до приблизно 50Омг/день, наприклад, від приблизно 1мг до ме) приблизно 200Омг/день, або, наприклад, від приблизно 1Омг до приблизно 175мг/день для суб'єкта масою 7Окг як - ударні та підтримуючі дози, залежно від маси суб'єкта, стану та його тяжкості.A dose of the XIA factor! is from about 0.05mg to about 50mg/day, for example from about 1mg to me) about 200mg/day, or for example from about 1mg to about 175mg/day for a 7kg subject as loading and maintenance doses, depending on the subject's weight, condition and severity.
Композиції та комплекти даного винаходу корисні для медицини та ветеринарії, наприклад, для лікування або о профілактики, розрахованих на суб'єктів, які страждають нападів кровотечі або порушень коагуляції. ДляThe compositions and kits of the present invention are useful in medicine and veterinary medicine, for example, for the treatment or prevention of subjects suffering from bleeding attacks or coagulation disorders. For
Ф застосування згідно з даним винаходом фактор Мііа та фактор ХІІ! рецептують необов'язково з фармацевтично прийнятним носієм. В оптимальному варіанті фармацевтичні композиції вводять парентерально, тобто внутрішньовенно, підшкірно або внутрішньом'язово, або шляхом безперервного або пульсуючого вливання.F application according to this invention factor Miia and factor XII! prescribed optionally with a pharmaceutically acceptable carrier. In the optimal version, pharmaceutical compositions are administered parenterally, that is, intravenously, subcutaneously or intramuscularly, or by continuous or pulsatile infusion.
Композиції також можуть включати один або кілька розріджувачів, емульгаторів, консервантів, буферів, наповнювачів тощо і можуть існувати в таких формах, як рідини, порошки, емульсії, форма контрольованогоThe compositions may also include one or more diluents, emulsifiers, preservatives, buffers, fillers, etc. and may exist in forms such as liquids, powders, emulsions, controlled release
Ф) вивільнення і т. ін. Спеціаліст у даній галузі може рецептувати композиції винаходу відповідним чином і ка згідно з загальноприйнятою практикою, наприклад, як описано у Кетіпдіоп'з Рпагтасеціїса! Зсіепсез, Сеппаго, ед., Маск Рибіїзпіпд Со., Еавіоп, РА, 1990. Композиції для парентерального введення включають фактор МІЇ та бо фактор ХП у комбінації в оптимальному варіанті - розчинені у фармацевтично прийнятному носії, в оптимальному варіанті - водному носії. Використовують різні водні носії, такі як вода, буферована вода, 0,490 сольовий розчин, 0,395 гліцин тощо. Різновиди фактора МІ! згідно з винаходом також можуть бути рецептовані у ліпосомні композиції для введення або спрямування на місця пошкоджень. Загальний опис ліпосомних композицій міститься, наприклад, у О.5. 4,837,028, 0.5. 4,501,728 та О.5. 4,975,282. 65 Типова фармацевтична композиція для внутрішньовенного вливання містить 250мл стерильного розчинуF) release, etc. A person skilled in the art can prescribe the compositions of the invention in a suitable manner and in accordance with generally accepted practice, for example, as described in Ketipdiop's Rpagtaseciis! Zsiepsez, Seppago, ed., Mask Rybijzpipd So., Eaviop, RA, 1990. Compositions for parenteral administration include the MII factor and the CP factor in combination, preferably dissolved in a pharmaceutically acceptable carrier, preferably an aqueous carrier. Various aqueous media are used, such as water, buffered water, 0.490 saline, 0.395 glycine, etc. Varieties of the MI factor! according to the invention can also be formulated into liposomal compositions for administration or targeting to sites of damage. A general description of liposome compositions is contained, for example, in O.5. 4,837,028, 0.5. 4,501,728 and O.5. 4,975,282. 65 A typical pharmaceutical composition for intravenous infusion contains 250 ml of sterile solution
Рингера та 1Омг фактора Міа та/або фактора Хі. Фактичні способи приготування композицій для парентерального введення відомі або зрозумілі спеціалістам і описані детальніше, наприклад, у Кетіпдіоп'зRinger and 1Omg of factor Mia and/or factor Xi. Actual methods of preparation of compositions for parenteral administration are known or understood by those skilled in the art and are described in more detail, for example, in Ketipdiop's
Рпагтасеціїса! Зсіепсевз, 181й ед., Маск Рибіїзпіпд Сотрапу, Еазіоп, РА (1990).Rpagtaseciisa! Zsiepsevs, 181st ed., Musk Rybiizpipd Sotrapu, Easiop, RA (1990).
Коротко, фармацевтичні композиції, придатні для застосування згідно з даним винаходом, одержуютьBriefly, pharmaceutical compositions suitable for use according to the present invention are obtained
Шляхом змішування фактора Мііа або фактора ХІЇЇ або фактора Мііа у комбінації з фактором ХІЇЇ, в оптимальному варіанті - в очищеній формі, з підходящими адювантами та підходящим носієм або розріджувачем. До підходящих фізіологічно прийнятних носіїв або розріджувачів належать стерильна вода та розсіл. Композиції можуть містити фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, необхідні для наближення до фізіологічних умов, такі як агенти регулювання рН та буферні агенти, агенти регулювання тонусу та ін., наприклад, ацетат натрію, /о0 лактат натрію, хлорид натрію, хлорид калію, хлорид кальцію та ін. До підходящих ад'ювантів також належать кальцій, білки (наприклад, альбуміни) або інші інертні пептиди (наприклад, гліцилгліцин) чи амінокислоти (наприклад, гліцин або гістидин) для стабілізації очищеного фактора Міа та/(або фактора ХІПІ. Іншими фізіологічно прийнятними ад'ювантами є невідновні цукри, поліспирти (наприклад, сорбіт, маніт або гліцерин), полісахариди, такі як декстрини з низькою молекулярною масою, детергенти (наприклад, полісорбат) та /5 антиоксиданти (наприклад, бісульфіт та аскорбат). Ад'юванти, як правило, присутні у концентрації від 0,001 до 495 (маса/об'єм). Фармацевтична композиція також може містити інгібітори протеази, наприклад, апротинін або транексамову кислоту, та консерванти. Крім того, композиція також може містити інгібітор ТЕРІ та/або факторBy mixing factor Miia or factor XIII or factor Miia in combination with factor XIII, preferably in purified form, with suitable adjuvants and a suitable carrier or diluent. Suitable physiologically acceptable carriers or diluents include sterile water and saline. The compositions may contain pharmaceutically acceptable excipients necessary to approximate physiological conditions, such as pH-adjusting agents and buffering agents, tone-adjusting agents, etc., for example, sodium acetate, /o0 sodium lactate, sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride and others Suitable adjuvants also include calcium, proteins (e.g., albumins), or other inert peptides (e.g., glycylglycine) or amino acids (e.g., glycine or histidine) to stabilize purified factor Mia and/or factor HIPI. Other physiologically acceptable adjuvants excipients are non-reducing sugars, polyalcohols (eg, sorbitol, mannitol, or glycerol), polysaccharides, such as low molecular weight dextrins, detergents (eg, polysorbate), and antioxidants (eg, bisulfite and ascorbate). Adjuvants typically , present at a concentration of 0.001 to 495 (w/v). The pharmaceutical composition may also contain protease inhibitors, such as aprotinin or tranexamic acid, and preservatives. In addition, the composition may also contain a TERI inhibitor and/or factor
М.M.
Композиції стерилізують традиційними загальновідомими способами стерилізації. Одержані внаслідок стерилізації водні розчини розфасовують для застосування або фільтрують в асептичних умовах і ліофілізують, ліофілізовану композицію перед введенням комбінують зі стерильним водним розчином.The compositions are sterilized by traditional well-known sterilization methods. Aqueous solutions obtained as a result of sterilization are packaged for use or filtered under aseptic conditions and lyophilized, the lyophilized composition is combined with a sterile aqueous solution before administration.
Концентрація фактора Мііа, фактора ХІІ або фактора у комбінації з фактором ХІІ у цих композиціях може бути різною в широких межах, тобто, від меншої за приблизно 0,595 за масою, зазвичай або принаймні приблизно 196 за масою, до 15 або 2095 за масою, і визначається, насамперед, об'ємом, в'язкістю рідини тощо згідно з сч Конкретним вибраним способом введення.The concentration of factor Miia, factor XII, or factor in combination with factor XII in these compositions can vary widely, i.e., from less than about 0.595 by weight, usually or at least about 196 by weight, to 15 or 2095 by weight, and is determined , first of all, the volume, viscosity of the liquid, etc. according to the specific selected method of administration.
Перевагу віддають введенню шляхом ін'єкції або вливання, краще - ін'єкції. Таким чином, фактор Ма та і) фактор ХІІ одержують у формі, підходящій для внутрішньовенного введення, такій як композиція, яка є або розчиненим ліофілізованим порошком, або рідкою композицією, яка містить як фактор Мііа, так і фактор ХІЇ! в одній дозованій формі, або розчиненим ліофілізованим порошком, або рідкою композицією, яка містить фактор Ге зо Міа та розчинений ліофілізований порошок в одній дозованій формі, або рідкою композицією, яка містить факторPreference is given to administration by injection or infusion, better - injections. Thus, factor Ma and (i) factor XII are provided in a form suitable for intravenous administration, such as a composition that is either a dissolved lyophilized powder or a liquid composition that contains both factor Mia and factor XII! in a single dosage form, or a dissolved lyophilized powder, or a liquid composition containing Hezo Mia factor and a dissolved lyophilized powder in a single dosage form, or a liquid composition containing the factor
ХІІ! в іншій дозованій формі. оXII! in a different dosage form. at
Місцеве введення фактора Міїа та фактора ХІЇЇ, наприклад, місцеве нанесення, здійснюють, наприклад, «- шляхом розпилювання, перфузії, подвійних балонних катетерів, розширювача, введеного у судинні трансплантати, гідрогелів, які застосовують для вкривання балонних катетерів, або інших традиційно ісе) з5 застосовуваних способів. Для амбулаторних пацієнтів, які вимагають щоденного підтримуючого введення, ча фактор Мііа та фактор ХІЇЇ може застосовуватися шляхом безперервного вливання за допомогою, наприклад, портативної насосної системи. В усякому разі, фармацевтична композиція має передбачати кількість фактораLocal introduction of factor Miia and factor XIII, for example, local application, is carried out, for example, "- by spraying, perfusion, double balloon catheters, dilator introduced into vascular grafts, hydrogels used to cover balloon catheters, or other traditional means) c5 applied methods. For ambulatory patients who require daily maintenance administration, factor Ia and factor XIII can be administered by continuous infusion using, for example, a portable pump system. In any case, the pharmaceutical composition should provide for the amount of the factor
Міга та фактора ХІІ, достатню для ефективного лікування суб'єкта.Miga and factor XII, sufficient for effective treatment of the subject.
Комбінація фактора Мііа та фактора ХІЇЇ виявляє синергетичний ефект в іп міїго аналізі твердості згустка « та часу фібринолізу. Крім того, комбінація фактора Ма та фактора ХІЇЇ виявляє синергетичний ефект в з с утворенні стійких фібринових згустків, збільшуючи час лізису половини згустка, збільшуючи міцність згустка та стійкість до фібринолізу. ;» Композиції, які містять фактор МІЇ та фактор ХІІ, вводять для профілактичного та/або терапевтичного лікування. При терапевтичному застосуванні композиції вводять суб'єктові, який уже страждає від хвороби, як описано вище, у кількості, достатній для виліковування, послаблення або часткового призупинення хвороби та її -І ускладнень. Достатню для цього кількість визначають як "ефективну кількість" або "терапевтично ефективну кількістьї. Як стане зрозуміло спеціалістові ефективна кількість залежить від тяжкості хвороби абоThe combination of factor Miia and factor XIII shows a synergistic effect in the miigo analysis of clot firmness and fibrinolysis time. In addition, the combination of the Ma factor and the XII factor shows a synergistic effect in the formation of stable fibrin clots, increasing the lysis time of half of the clot, increasing the strength of the clot and resistance to fibrinolysis. ;" Compositions containing factor MII and factor XII are administered for prophylactic and/or therapeutic treatment. When used therapeutically, the composition is administered to a subject who is already suffering from the disease as described above, in an amount sufficient to cure, alleviate, or partially suspend the disease and its -I complications. The amount sufficient for this purpose is defined as an "effective amount" or "therapeutically effective amount. As will become clear to the skilled person, the effective amount depends on the severity of the disease or
Ме. пошкодження, а також маси та загального стану суб'єкта. Слід зважати, що матеріали даного винаходу зазвичай - застосовують у разі серйозної хвороби або пошкодження, тобто коли існує або може існувати загроза для життя.Me. damage, as well as the mass and general condition of the subject. It should be taken into account that the materials of this invention are usually used in case of serious illness or damage, that is, when there is or may be a threat to life.
У цих випадках для зменшення побічних ефектів і за умов загального браку імуногенності фактора МіІа та о фактора ХІЇЇ у людини, лікар може вважати можливим і бажаним введення значної надлишкової кількості цихIn these cases, in order to reduce side effects and under the conditions of the general lack of immunogenicity of the MiIa factor and the XII factor in humans, the doctor may consider it possible and desirable to introduce a significant excess amount of these
Ф композицій.F compositions.
При профілактичному застосуванні композиції, які містять фактор Ма та фактор ХІІ, вводять суб'єктові, сприйнятливому або іншим чином підданому ризикові хвороби або пошкодження, для підвищення його здатності дв до коагуляції. Така кількість визначається як "профілактично ефективна доза."When used prophylactically, compositions containing factor Ma and factor XII are administered to a subject who is susceptible or otherwise at risk of disease or injury to increase their ability to coagulate. This amount is defined as the "prophylactically effective dose."
Одно - або багаторазове введення композицій здійснюють у дозах і за схемою, які визначаються лікарем (Ф) Композиції можуть вводитись один або кілька разів на день або тиждень Ефективною кількістю такої ка фармацевтичної композиції є кількість, яка забезпечує клінічно значущий ефект проти нападів кровотечі. Така кількість частково залежить від конкретного стану, який піддають лікуванню, віку, маси та загального стану во здоров'я суб'єкта, а також інших чинників, які є очевидними для спеціалістів.Single or repeated administration of the compositions is carried out in doses and according to the scheme determined by the doctor (F). The compositions can be administered one or more times a day or a week. The effective amount of such a pharmaceutical composition is the amount that provides a clinically significant effect against bleeding attacks. This amount depends in part on the specific condition being treated, the age, weight and general health of the subject, as well as other factors that are apparent to those skilled in the art.
Композицію, як правило, вводять однією окремою дозою до передбачуваної кровотечі або на початку кровотечі. Однак вона також може вводитись | кількома дозами, в оптимальному варіанті - з інтервалами 2-4-6-12 годин, залежно від дози та стану суб'єкта.The composition, as a rule, is administered in a single dose before the expected bleeding or at the beginning of the bleeding. However, it can also be entered | in several doses, ideally at intervals of 2-4-6-12 hours, depending on the dose and the condition of the subject.
Композиція може існувати у формі окремого препарату, який містить як фактор МіІа, так | фактор ХІІ у 65 підходящих концентраціях. Композиція також може існувати у формі комплекту, який складається з першої форми дозованої одиниці, яка включає фактор Мііа, та другої форми дозованої одиниці, яка включає фактор ХІЇЇ і, необов'язково, одну або кілька інших форм дозованих одиниць, які включають фактор МІ! та/або інгібіторThe composition can exist in the form of a separate preparation, which contains both factor MiIa and | factor XII in 65 suitable concentrations. The composition can also exist in the form of a kit consisting of a first dosage unit form that includes factor Miia and a second dosage unit form that includes factor XIII and, optionally, one or more other dosage unit forms that include factor MI! and/or inhibitor
ТЕРІ. У цьому разі фактор Ма та фактор ХІЇЇ вводять послідовно, в оптимальному варіанті - з інтервалом приблизно 1-2 години між ними, наприклад, у межах 30 хвилин між ними, краще - у межах 10 хвилин, ще краще - у межах 5 хвилин між ними. Будь-яка з цих двох форм дозованих одиниць може бути введена першою.TERI. In this case, the Ma factor and the XII factor are administered sequentially, in the optimal version - with an interval of approximately 1-2 hours between them, for example, within 30 minutes between them, better - within 10 minutes, even better - within 5 minutes between them . Either of these two dosage unit forms may be administered first.
Оскільки даний винахід стосується профілактики або лікування нападів кровотечі або забезпечення коагуляції шляхом лікування комбінацією активних інгредієнтів, які можуть вводитися окремо, винахід також стосується поєднання окремих фармацевтичних композицій у формі комплекту. Комплект включає принаймні дві окремі фармацевтичні композиції. Він також включає тару для окремих композицій, таку як флакон з 7/0 перегородкою або пакет із фольги з перегородкою. Як правило, комплект включає інструкцію з введення окремих компонентів. Форма комплекту є особливо вигідною у разі, коли перевагу віддають введенню окремих компонентів у різних дозованих формах, з різними інтервалами між дозами, або коли лікар вважає бажаним титрування окремих компонентів комбінації.Since the present invention relates to the prevention or treatment of bleeding attacks or to the provision of coagulation by treatment with a combination of active ingredients that can be administered separately, the invention also relates to the combination of separate pharmaceutical compositions in the form of a kit. The kit includes at least two separate pharmaceutical compositions. It also includes packaging for individual formulations, such as a 7/0 septum vial or a septum foil bag. As a rule, the kit includes instructions for the introduction of individual components. The kit form is particularly advantageous when it is preferred to administer the individual components in different dosage forms, with different intervals between doses, or when the physician considers it desirable to titrate the individual components of the combination.
АналізиAnalyzes
Випробування на активність фактора Ма:Test for the activity of factor Ma:
Підходящий аналіз для випробування на активність фактора Мііа, а отже, й відбір підходящих різновидів фактора Мііа, здійснюють як просте попереднє іп міго випробування:A suitable assay for Miia factor activity testing, and therefore the selection of suitable Miia factor variants, is carried out as a simple preliminary IP migo test:
Іп міго гідролітичний аналізIP migo hydrolytic analysis
Природний (дикого типу) фактор Ма та різновид фактора Мііа (далі обидва вказуються як "фактор Мііа") 2о Можуть бути піддані аналізові на специфічну активність. Вони також можуть бути паралельно піддані аналізові для прямого порівняння їхньої специфічної активності. Аналіз здійснюють у мікротитрувальному планшеті (Махібогр, Мипс, Данія). Хромогенний субстрат О-Пе-Рго-Аго-р-нітроанілід (5-2288, СПпготодепіх, Швеція), кінцева концентрація ММ, додають до фактора Мііа (кінцева концентрація ТО0О0НМ) у 5ОмММ Нерез, рН 7,4, що містить 0,1М Масі, 5мм Сасі» та мг/мл альбуміну сироватки великої рогатої худоби. У пристрої для зчитування сч ов планшетів ЗресігаМах 340 (Моїесшаг Оемісез, США) безперервно вимірюють оптичну густину при 405нм. Від значення оптичної густини, виявленого під час 20-хвилинної інкубації, віднімають значення оптичної густини у і) чистій лунці, що не містить ферменту, і різницю застосовують для розрахунку співвідношення показників активності різновиду та природного фактора Мііа:Natural (wild-type) factor Ma and a variant of factor Miia (hereinafter both referred to as "factor Miia") 2o Can be assayed for specific activity. They can also be assayed in parallel for direct comparison of their specific activity. The analysis is carried out in a microtiter tablet (Mahibogr, Mips, Denmark). The chromogenic substrate O-Pe-Pho-Ago-p-nitroanilide (5-2288, SPpgotodepih, Sweden), final concentration of MM, is added to the Miia factor (final concentration of ТО0О0НМ) in 5 ОМММ Nerez, pH 7.4, containing 0.1 M Masi, 5mm Sasi" and mg/ml bovine serum albumin. Optical density at 405 nm is continuously measured in a ZresigaMach 340 plate reader (Moiesschag Oemisez, USA). From the value of the optical density detected during the 20-minute incubation, the value of the optical density in i) a clean well that does not contain the enzyme is subtracted, and the difference is used to calculate the ratio of the activity indicators of the variety and the natural factor Miia:
Співвідношення - (Адо5ну різновиду фактора Мііа)Х Адовнм фактора Мііа дикого типу). Ге зо На основі даного рівняння можуть бути ідентифіковані різновиди фактора Мііа з активністю, приблизно рівною або вищою від природного фактора Мііа, наприклад, різновиди, у яких співвідношення між активністю о різновиду та активністю природного фактора МІЇ, як показано на Фіг.1, становить приблизно 1,0, але не більше. «-The ratio - (Addition of the type of Miia factor)X Addition of the wild-type Miia factor). On the basis of this equation, variants of the Miia factor with activity approximately equal to or higher than the natural Miia factor can be identified, for example, varieties in which the ratio between the activity of the variant and the activity of the natural Miia factor, as shown in Fig. 1, is approximately 1.0, but not more. "-
Активність фактора Мііа або різновидів фактора Мііа також вимірюють, застосовуючи фізіологічний субстрат, такий як фактор Х, в оптимальному варіанті - у концентрації 100-1000нМ, причому вироблений фактор Ха ісе) вимірюють після додавання підходящого хромогенного субстрату (наприклад, 5-2765). Крім того, аналіз ї- активності може здійснюватися при фізіологічній температурі.The activity of factor Miia or varieties of factor Miia is also measured using a physiological substrate, such as factor X, in the optimal version - at a concentration of 100-1000nM, and the produced factor Xa ise) measured after adding a suitable chromogenic substrate (for example, 5-2765). In addition, the analysis of its activity can be carried out at physiological temperature.
Здатність фактора Мііа або різновидів фактора Ма до вироблення тромбіну також може бути виміряна шляхом аналізу, який включає всі відповідні фактори коагуляції, інгібітори у фізіологічних концентраціях (мінус фактор МІЇЇ при імітації умов гемофілії А) та активовані тромбоцити (як описано на стор. 543 роботи «The ability of factor Miia or variants of factor Ma to generate thrombin can also be measured by an assay that includes all relevant coagulation factors, inhibitors at physiological concentrations (minus factor Miia to mimic hemophilia A conditions), and activated platelets (as described on page 543 of
Мопгое еї а. (1997) Вгіїї. У. Наетайі. 99, 542-547, на яку автори посилаються). з с Випробування на активність фактора ХІП!: . Підходящий аналіз з випробуванням на активність трансглутамінази фактора ХІІ, а отже, вибір підходящих и?» різновидів фактора ХІІ, здійснюють як просте іп міго випробування, як описано, наприклад, у роботі Меййоадз ої Епгутоіоду, т.45 (1976), Ргоїеоїміс Епгутевз, ч.В, стор.177-191 (Ед. І огапа, |).Mopgoe her a. (1997) Vgyii. U. Naetayi. 99, 542-547, to which the authors refer). with c Test for the activity of the KIP factor!: . A suitable analysis with a test for factor XII transglutaminase activity, and therefore the selection of suitable and? varieties of factor XII, are carried out as a simple ip migo test, as described, for example, in the work of Meiyoadz oi Epgutoiodu, vol. 45 (1976), Rgoieomis Epgutevs, ch. V, p. 177-191 (Ed. I ogapa, |).
Даний винахід далі пояснюється за допомогою наведених прикладів, які, однак, не повинні тлумачитись як -І такі, що обмежують обсяг захисту. Особливості, описані вище, та нижчеподані приклади можуть, як окремо, такі і у будь-якій комбінації, бути суттєвими для розуміння винаходу в його різних формах. ме) Приклади - Приклад 1.The present invention is further illustrated by the following examples, which, however, should not be construed as limiting the scope of protection. The features described above and the examples below may, either individually or in any combination, be essential to an understanding of the invention in its various forms. me) Examples - Example 1.
Фактор ХІЇЇ посилює викликану фактором Мііа зсілість фібрину . о Нормальну плазму людини (МНР) розводили 1/10 у буфері, що містив 20нМ НЕРЕ5, 150мМ Масі, 5мММThe XII factor enhances fibrin salinity caused by the Miia factor. o Normal human plasma (NHP) was diluted 1/10 in a buffer containing 20 nM HERE5, 150 mM Masi, 5 mM
Ф Сасі», рН 7,4, у мікротитрувальній лунці (загальний об'єм 25Омкл) і зсілість фібрину простежувалася за збільшенням оптичної густини при бООнм у Зресгатах 340 (Моіесцаг Оемісез, Зиппумаіе СА).F Sasi", pH 7.4, in a microtiter well (total volume 25 Ωcl) and fibrin salinity was monitored by an increase in optical density at bOOnm in Zresgat 340 (Moiessag Oemisez, Zippumaie SA).
Спонтанне утворення згустка досягалося за приблизно 2500-300Осек. На Фіг.1 показано, що 1ОнМ рекомбінантного фактор Мііа (ТЕМІПа) (Момо МогаїзкК А/5 Вадзуаега, Данія) скорочували час утворення згустка до 1600сек (п-2). Подальше скорочення часу утворення згустка досягалося, коли додавали ЗОНМ фактора ХПSpontaneous formation of a clot was achieved in approximately 2500-300 seconds. Fig. 1 shows that 1OnM of recombinant Miia factor (TEMIPa) (Momo MogaizK A/5 Wadzuaega, Denmark) reduced the time of clot formation to 1600 seconds (p-2). A further reduction in clot formation time was achieved when CP factor ZONM was added
Ф) (ЕХ) (Атегісап Оіадповіїса іпс, Сгеепжісп, СТ) разом з ТОНМ гЕМіІІа (п-3). Згусток, утворений у присутності ка ЕХІШ, був прозорішим (мав нижчу максимальну оптичну густину), ніж за його відсутності, вказуючи на те, що додавання ЕХІЇЇ забезпечує дрібнішу гелеву структуру фібрину з тоншими волокнами. во Приклад 2.F) (EX) (Ategisap Oiadpoviisa ips, Sgeepzhisp, ST) together with TONM gEMiIIa (p-3). The clot formed in the presence of EHIA was clearer (had a lower maximum optical density) than in its absence, indicating that the addition of EHIA provides a finer fibrin gel structure with thinner fibrils. in Example 2.
Присутність додаткового фактора Хі під час викликаного фактором Ма утворення згустка забезпечує збільшення стійкості до фібринолітичного розпаду.The presence of additional factor Xi during clot formation caused by factor Ma provides increased resistance to fibrinolytic breakdown.
Фібриновий згусток, який складається з тонких волокон, є механічно міцнішим і важче піддається розпадові, ніж згусток, який містить таку саму кількість фібрину, але складається з товстих волокон або меншої кількості б5 поперечно зшитих волокон. Результати експерименту, наведені на Фіг.2, свідчать про те, що додатковий ЕХ (ЗОНМ) подовжує час лізису фібрину згустків, утворених у присутності "ЕМІПа та активатора тканинного плазміногену (ЕРА, Атегісап Оіадпозіїса). Утворення згустка ініціювали у присутності або за відсутності ЗОНМA fibrin clot that consists of thin fibers is mechanically stronger and more difficult to disintegrate than a clot that contains the same amount of fibrin but consists of thick fibers or fewer b5 cross-linked fibers. The results of the experiment, shown in Fig. 2, indicate that additional EH (ZONM) prolongs the time of fibrin lysis of clots formed in the presence of EMIP and tissue plasminogen activator (EPA, Ategisap Oiadpoisis). Clot formation was initiated in the presence or absence of ZONM
ЕХІЇЇ шляхом додавання 25мкл МНР до 225мкл 20НМ НЕРЕБ, 150мМ Масі, 5мм Сасі», рН 7,4, що містив 50ОНМEHIIA by adding 25 μl of MNR to 225 μl of 20NM NEREB, 150mM Masi, 5mm Sasi", pH 7.4, containing 50OHM
ГЕМІа та О,5нНМ рекомбінантного І-РА. Утворення згустка та наступний лізис згустка, викликані опосередкованоюHEMIa and 0.5 nM of recombinant I-RA. Clot formation and subsequent clot lysis are caused by mediated
ЕРА активацією плазміногену, спостерігали за допомогою Зресігатах 340 при бООнм як збільшення ОЮ ворнм. З наступним поверненням траєкторії до базового рівня. На Фіг.2 показано, що час лізису згустка за цих умов значно подовжувався завдяки присутності ЕХІПЇІ.ERA by plasminogen activation was observed with the help of Zresigat 340 at bOOnm as an increase in ОЯ vornm. With the subsequent return of the trajectory to the base level. Figure 2 shows that the time of clot lysis under these conditions was significantly extended due to the presence of EHIPIII.
Приклад 3.Example 3.
Фактор МПа у комбінації з фактором ХІІ збільшує максимальну твердість згустка і стійкість згустка до 7/0 фібринолізу.Factor MPa in combination with factor XII increases the maximum hardness of the clot and resistance of the clot to 7/0 fibrinolysis.
Тромбеластографічні вимірювання здійснювали на нормальній плазмі людини, до якої додавали бнМ рекомбінантного активатора плазміногену тканинного типу (-РА, Атегісап Оіадповіїса), і аналізувати вплив додавання 1НМ гЕМііа (Момо МогаїзкК А/5, Вадзуаега, Данія), окремо або у комбінації з різними концентраціями фактора ХІЇЇ (ЕХ, Наептаїйоіодіс Тесппоіодіег, НОСХП-0О160, ої М1212). Зсілість викликали додаванням 7/5 Інновіну (Іппоміп) (кінцева концентрація 2000-разового розчинення, ОСаде Вепйгіпд Ж 526945) та кальцію (кінцева концентрація 15мМ) у 20мМ буфера НЕРЕ5, 150мМ масі, рН 74.Thromboblastographic measurements were performed on normal human plasma to which bnM of recombinant tissue-type plasminogen activator (-RA, Ategisap Oiadpowiisa) was added, and to analyze the effect of adding 1NM hEMiia (Momo MogaizkK A/5, Wadzuaega, Denmark), alone or in combination with different concentrations factor XII (EH, Naeptaioiodis Thesppoiodieg, NOSHP-0O160, oi M1212). Salinity was induced by adding 7/5 Innovin (Ippomip) (final concentration of 2000-fold dilution, OSade Vepygipd Zh 526945) and calcium (final concentration 15 mM) in 20 mM NERE5 buffer, 150 mM mass, pH 74.
Тромбеластографічні вимірювання застосовували для аналізу впливу гєМІПа та ЕХІЇЇ на максимальну твердість згустка (МСЕ), а також стійкість згустка до опосередкованого Ї-РА лізису. Перед додаванням гЕМІІа та/або ЕХІЇЇ досягнутий показник МСЕ становив 25мм, і час, необхідний для лізису половини згустка, становив 12,3 хвилини (Фіг.3). Додавання збільшених концентрацій ЕХІЇЇ (0-4ОНМ) не змінювало МСЕ; однак спостерігалося залежне від дози подовження часу лізису половини згустка, причому оптимальні дані спостерігалися при ЗОНМThrombelastographic measurements were used to analyze the effect of heMIP and EHIIA on maximum clot hardness (CME), as well as clot resistance to Y-RA mediated lysis. Before the addition of hEMIIa and/or EHIIA, the achieved MCE was 25 mm, and the time required to lyse half of the clot was 12.3 minutes (Figure 3). Addition of increased concentrations of EHIIA (0-4 ONM) did not change MSE; however, a dose-dependent prolongation of half-clot lysis time was observed, and optimal data were observed with ZONM
ЕХ (час лізису половини згустка: 14,3хв, Фіг.3). Так само додавання гЕМіїа (ІНМ) забезпечує захист згустка від опосередкованого І-РА фібринолізу (час лізису половини згустка 16,4хв) без будь-якого впливу на МСЕ (Фіг.3). Однак після додавання гЕМіІІа (1НМ) разом з ЕХІ! (ЗОНМ) спостерігали збільшення МСЕ (29мм), а також сч надійний захист від фібринолізу (час лізису половини згустка 27,їхв) (Фіг.3). Разом ці результати демонструють, що додавання гЕМіІа та ЕХІЇЇ до плазми синергетично поліпшує механічну міцність згустка та і) стійкість до опосередкованого І-РА фібринолізу.EX (time of lysis of half of the clot: 14.3 min, Fig. 3). Likewise, the addition of hEMiia (INM) provides protection of the clot from mediated I-RA fibrinolysis (lysis time of half of the clot 16.4 min) without any effect on MSE (Fig. 3). However, after adding hEMiIIa (1NM) together with EHI! (ZONM) observed an increase in MSE (29mm), as well as a reliable protection against fibrinolysis (time of lysis of half of the clot 27.uh) (Fig. 3). Together, these results demonstrate that the addition of hEMiIa and EHIIA to plasma synergistically improves the mechanical strength of the clot and i) resistance to I-RA-mediated fibrinolysis.
Claims (21)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DKPA200000778 | 2000-05-10 | ||
PCT/DK2001/000322 WO2001085198A1 (en) | 2000-05-10 | 2001-05-10 | tHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING A FACTOR VIIA AND A FACTOR XIII |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA76106C2 true UA76106C2 (en) | 2006-07-17 |
Family
ID=29594967
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UA2002118784A UA76106C2 (en) | 2000-05-10 | 2001-10-05 | Formulation containing factor viia and factor xiii, set for intravenous administration, method for increasing generation of fibrin clots, method for treatment or prophylaxis of bleeding episodes, use of factor viia or factor xiii for manufacturing drug for treatment or prophylaxis of bleeding episodes |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2272648C2 (en) |
UA (1) | UA76106C2 (en) |
ZA (1) | ZA200208695B (en) |
-
2001
- 2001-05-10 RU RU2002133046/15A patent/RU2272648C2/en not_active IP Right Cessation
- 2001-10-05 UA UA2002118784A patent/UA76106C2/en unknown
-
2002
- 2002-10-28 ZA ZA200208695A patent/ZA200208695B/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2272648C2 (en) | 2006-03-27 |
ZA200208695B (en) | 2003-05-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1282439B1 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING A FACTOR VIIa AND A TFPI INHIBITOR | |
US8394768B2 (en) | Synergistic therapeutic use of Prothrombin Complex Concentrates with FVIII concentrates | |
US20030073638A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising factor VIIa and anti-TFPI | |
KR20030078901A (en) | Combined use of factor ⅶ polypeptides and factor ⅷ polypeptides | |
AU2001258228A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising a factor VIIA and a factor XIII | |
Liebman et al. | Increased fibrinolysis and amyloidosis | |
JP2005526004A (en) | A pharmaceutical composition comprising a Factor VII polypeptide and tranexamic acid | |
JP5236952B2 (en) | FXIII variant with improved properties | |
UA76106C2 (en) | Formulation containing factor viia and factor xiii, set for intravenous administration, method for increasing generation of fibrin clots, method for treatment or prophylaxis of bleeding episodes, use of factor viia or factor xiii for manufacturing drug for treatment or prophylaxis of bleeding episodes | |
EP1128842B1 (en) | Use of human protein c for the manufacture of a medicament for treating heparin-induced thrombocytopenia | |
EP1137432B1 (en) | Use of protein c for the treatment of thrombocytopenic purpura and hemolytic uremic syndrome | |
Perry | Factor X and Factor X deficiency | |
TWI287452B (en) | Pharmaceutical composition comprising a factor VIIa and a factor XIII | |
MXPA03005641A (en) | Use of activated coagulation factor vii for treating thrombolytic therapy-induced major bleedings. | |
KR20020092469A (en) | Pharmaceutical composition comprising a factor viia and a factor xiii | |
MXPA02011042A (en) | tHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING A FACTOR VIIA AND A FACTOR XIII | |
JP2004513150A (en) | Methods for treating type B hemophilia | |
JP2005515175A (en) | Pharmaceutical compositions comprising a factor VII polypeptide and an alpha2-antiplasmin polypeptide | |
JPH09176041A (en) | Dic-treating medicine containing alpha2 plasmin inhibitor | |
MXPA01005689A (en) | Method of treating thrombocytopenic purpura and hemolytic uremic syndrome |