UA61200A - Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes - Google Patents
Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes Download PDFInfo
- Publication number
- UA61200A UA61200A UA2002065099A UA2002065099A UA61200A UA 61200 A UA61200 A UA 61200A UA 2002065099 A UA2002065099 A UA 2002065099A UA 2002065099 A UA2002065099 A UA 2002065099A UA 61200 A UA61200 A UA 61200A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- ceruloplasmin
- same
- sodium chloride
- solution
- chloride solution
- Prior art date
Links
- 108010075016 Ceruloplasmin Proteins 0.000 title claims abstract description 50
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 title claims abstract description 50
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 53
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 41
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 4
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethanol Chemical compound CCO.ClC(Cl)Cl UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 abstract 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000020856 Copper Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091004554 Copper Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101100110026 Danio rerio ascl1b gene Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 208000015710 Iron-Deficiency Anemia Diseases 0.000 description 1
- 206010029783 Normochromic normocytic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010031253 Osteomyelitis acute Diseases 0.000 description 1
- 206010031256 Osteomyelitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 1
- 241000710779 Trina Species 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002542 deteriorative effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 201000007119 infective endocarditis Diseases 0.000 description 1
- 229940082629 iron antianemic preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 235000020079 raki Nutrition 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 208000037974 severe injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- SETMGIIITGNLAS-UHFFFAOYSA-N spizofurone Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)C)=CC=C2OC21CC2 SETMGIIITGNLAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001870 spizofurone Drugs 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід відносится до технології одержання ферменту крові людини - церулоплазміну і може бути 2 використаний при виробництві медичних препаратів.The invention relates to the technology of obtaining the human blood enzyme - ceruloplasmin and can be used in the production of medical preparations.
Церулоплазмін - мідьвмісний фермент плазми крові. Він виконує функцію транспорту міді, будучи донором іонів Си?" для ферментів дихання; окислює більшість біологічно активних сполук; має антиоксидантні і радіопротекторні властивості; необхідний для кровотворення. Цей фермент відноситься до групи білків "гострої фази", що здійснюють захист організму від шкідливого впливу чинників хімічної, фізичної та біологічної природи. 70 Як лікарський препарат, церулоплазмін був створений вченими Інституту експериментальної патології, онкології і радіобіології їм. Р.Є. Кавецького НАН України та спеціалістами Київського державного підприємства по виробництву бактерійних препаратів "Біофарма" і зареєстрований в Україні 11.10.1996 року за Мо11/96/322/6.Ceruloplasmin is a copper-containing enzyme of the blood plasma. It performs the function of copper transport, being a donor of "C" ions for respiratory enzymes; oxidizes most biologically active compounds; has antioxidant and radioprotective properties; is necessary for hematopoiesis. This enzyme belongs to the group of "acute phase" proteins that protect the body from harmful effects factors of a chemical, physical and biological nature. 70 As a drug, ceruloplasmin was created by scientists of the Institute of Experimental Pathology, Oncology and Radiobiology named after R. E. Kavetsky of the National Academy of Sciences of Ukraine and specialists of the Kyiv State Enterprise for the Production of Bacterial Preparations "Biopharma" and registered in Ukraine on 11.10. .1996 according to Mo11/96/322/6.
Церулоплазмін - ефективний препарат для лікування важкохворих (септичні процеси, серцево-судинні, онкологічні захворювання) і надання допомоги в екстремальних ситуаціях (важкі травми, опіки, опромінення). 79 Особливо показане застосування церулоплазміну у хворих, що перенесли термінальний стан різного генезу (патент України Мо22022, 1997). Хороші результати застосування церулоплазміну одержані при лікуванні хворих з гострим та хронічним остеомієлітом, ревматизмом, інфекційним ендокардитом, ішемічною хворобою серця.Ceruloplasmin is an effective drug for the treatment of seriously ill patients (septic processes, cardiovascular, oncological diseases) and assistance in extreme situations (severe injuries, burns, exposure). 79 The use of ceruloplasmin is especially indicated in patients who have suffered a terminal condition of various genesis (patent of Ukraine Mo22022, 1997). Good results of using ceruloplasmin have been obtained in the treatment of patients with acute and chronic osteomyelitis, rheumatism, infectious endocarditis, coronary heart disease.
Церулоплазмін рекомендований МОЗ України для лікування залізодефіцитних, гемолітичних, а також нормохромних анемій у осіб, які працювали і продовжують працювати в зоні Чорнобильської АЕС, при цьому лікування іншими засобами, в тому числі препаратами заліза, у цих хворих, як правило, не ефективне (Информационное письмо Мо165-95 МОЗ Украйинь "0 нововведениях в системе здравоохранения!'").Ceruloplasmin is recommended by the Ministry of Health of Ukraine for the treatment of iron-deficiency, hemolytic, and normochromic anemias in persons who worked and continue to work in the zone of the Chernobyl nuclear power plant, while treatment by other means, including iron preparations, is usually not effective in these patients (Information letter Mo165-95 of the Ministry of Health of Ukraine "0 innovations in the health care system!'").
Випускається церулоплазмін Київським державним підприємством по виробництву бактерійних препаратів "Біофарма".Ceruloplasmin is produced by the Kyiv state enterprise for the production of bacterial preparations "Biopharma".
Відомі способи одержання церулоплазміну грунтуються на сорбції його на ДЕАЕ-сорбенті з наступним 29 очищенням методами сольового або спиртового осадження, гельфільтрації, перекристалізації (патент ОА «Known methods of obtaining ceruloplasmin are based on its sorption on a DEAE sorbent followed by purification by methods of salt or alcohol precipitation, gel filtration, recrystallization (patent OA "
Мо2019, 1994).Mo2019, 1994).
Суттєвим недоліком відомих промислових способів одержання церулоплазміну є великі втрати його в процесі виділення на різних технологічних етапах, відсутність стадії термічної обробки для забезпечення вірусологічної безпеки у відповідності з вимогами міжнародних стандартів. оA significant drawback of the known industrial methods of obtaining ceruloplasmin is its large losses in the process of isolation at various technological stages, the absence of a heat treatment stage to ensure virological safety in accordance with the requirements of international standards. at
Найбільш близьким способом того ж призначення до заявленого способу, який ми беремо за прототип, є «в спосіб одержання церулоплазміну, що включає гомогенізацію відходів виробництва імуноглобулінів в розчині хлористого натрію, сорбцію на іонообміннику, елюцію і очищення препарату етиловим спиртом і сумішшю см хлороформ-етиловий спирт, стерилізуючу фільтрацію та ліофілізацію (Патент України Мо1319, МПК? АбІКЗ5/16, ж 1989). Ця технологія забезпечує досить низький вихід церулоплазміну (в межах 0,4-0,5г на Ткг осаду). сThe closest method of the same purpose to the claimed method, which we take as a prototype, is "in the method of obtaining ceruloplasmin, which includes homogenization of immunoglobulin production waste in a sodium chloride solution, sorption on an ion exchanger, elution and purification of the preparation with ethyl alcohol and a mixture of cm chloroform-ethyl alcohol, sterilizing filtration and lyophilization (Patent of Ukraine Mo1319, IPC? AbIKZ5/16, same 1989). This technology ensures a fairly low yield of ceruloplasmin (in the range of 0.4-0.5 g per Tkg of sediment). with
Причини, що перешкоджають при використанні прототипу одержати очікуваний технічний результат, обумовлені тим, що умови сорбції і елюції церулоплазміну з іонообмінника не дозволяють досягти оптимального виходу церулоплазміну і очистки його від баластних білків. Крім того, за відомою технологією не забезпечуються необхідні вимоги міжнародного стандарту щодо вірусологічної безпеки препаратів, оскільки, « 70 недостатня очистка церулоплазміну за відомим способом призводила б до втрати ферментативної активності в -в умовах довготривалого витримування його при високій температурі. с В основу винаходу, що заявляється покладено завдання удосконалення способу одержання церулоплазміну :з» шляхом зміни рН та молярності розчину хлористого натрію при сорбції та елюції, умов ультрафільтрації та стерилізуючої фільтрації забезпечити збільшення виходу кінцевого продукту, не погіршуючи його фізико-хімічних 415 характеристик, спрощення і здешевлення технології та дотримання міжнародних норм стерилізації для бо одержання лікарського апірогенного препарату.The reasons preventing the use of the prototype from obtaining the expected technical result are due to the fact that the conditions of sorption and elution of ceruloplasmin from the ion exchanger do not allow achieving the optimal yield of ceruloplasmin and its purification from ballast proteins. In addition, according to the known technology, the necessary requirements of the international standard regarding the virological safety of the preparations are not provided, since insufficient purification of ceruloplasmin by the known method would lead to the loss of enzymatic activity in the conditions of its long-term exposure at high temperature. c The basis of the claimed invention is the task of improving the method of obtaining ceruloplasmin: c" by changing the pH and molarity of the sodium chloride solution during sorption and elution, the conditions of ultrafiltration and sterilizing filtration, to ensure an increase in the yield of the final product without deteriorating its physico-chemical 415 characteristics, simplification and lowering the cost of the technology and complying with international sterilization standards for the production of medicinal pyrogenic preparations.
Поставлене завдання вирішується тим, що у відомому способі одержання церулоплазміну шляхом -й гомогенізації відходів виробництва імуноглобулінів в розчині хлористого натрію, сорбції на іонообміннику,The task is solved by the fact that in the known method of obtaining ceruloplasmin by homogenization of immunoglobulin production waste in sodium chloride solution, sorption on an ion exchanger,
ГФ елюції і очищення етиловим спиртом і сумішшю хлороформ-етиловий спирт, стерилізуючої фільтрації та ліофілізації, згідно з винаходом сорбцію церулоплазміну проводять розчином хлористого натрію при рН 5,0-5,2, («в») а елюцію проводять 0,24-0,26М розчином хлористого натрію при рН 5,5, а розчин церулоплазміну після о спиртового і спирт-хлороформного очищення піддають ультрафільтрації на порожнистих волокнах від 100 до 150кКД і витримують при (-607С протягом 10 годин.HF elution and purification with ethyl alcohol and a mixture of chloroform-ethyl alcohol, sterilizing filtration and lyophilization, according to the invention, sorption of ceruloplasmin is carried out with a solution of sodium chloride at pH 5.0-5.2, ("c") and elution is carried out at 0.24-0 ,26 M sodium chloride solution at pH 5.5, and the ceruloplasmin solution after alcohol and alcohol-chloroform purification is subjected to ultrafiltration on hollow fibers from 100 to 150 kKD and kept at -607C for 10 hours.
При сорбції 0,07-0,09М розчином хлористого натрію при рН 5,0-5,2 досягається оптимальна сорбція церулоплазміну і не відбувається суттєвої сорбції інших білків.At sorption with 0.07-0.09M sodium chloride solution at pH 5.0-5.2, optimal sorption of ceruloplasmin is achieved and no significant sorption of other proteins occurs.
Елюція 0,24-0,26М розчином хлористого натрію при рН 5,5 перешкоджає вимиванню баластних білків з вн. іонообмінника, що дозволяє на даному етапі одержати максимально чистий розчин церулоплазміну.Elution with a 0.24-0.26 M sodium chloride solution at pH 5.5 prevents the washing out of ballast proteins from the external ion exchanger, which allows to obtain the purest solution of ceruloplasmin at this stage.
На етапі ультрафільтрації на порожнистих волокнах від 7100 до 15О0кД після спиртового і спирт-хлороформного очищення доводять ступінь очистки до такого рівня, що подальше витримування його при во 1-60"С протягом 10 годин, як це вимагається за міжнародним стандартом для досягнення вірусологічної безпеки, не призводить до втрати церулоплазміном фізико-хімічних властивостей і його ферментативної активності.At the stage of ultrafiltration on hollow fibers from 7100 to 15O0kD, after alcohol and alcohol-chloroform cleaning, the degree of purification is brought to such a level that its further exposure at 1-60"C for 10 hours, as required by the international standard to achieve virological safety, does not lead to ceruloplasmin losing its physical and chemical properties and its enzymatic activity.
Спосіб одержання церулоплазміну здійснюється шляхом гомогенізації відходів виробництва імуноглобулінів або альбумінів, як донорської так і ретроплацентарної крові в О005М розчині хлористого натрію, сорбції церулоплазміну на ДЕАЕ-целюлозі при рН 5,0-5,2 і відмивання баластних білків 0,07-0,09М розчином хлористого ве натрію при рН 5,0-5,2, елюції церулоплазміну 0,24-0,26М розчином хлористого натрію при рН 5,5, осадження білків етанолом в кінцевій концентрації 65-75 обов, розчинення осаду в 0,25 М розчині хлористого натрію,The method of obtaining ceruloplasmin is carried out by homogenization of immunoglobulin or albumin production waste, both donor and retroplacental blood in О005M sodium chloride solution, sorption of ceruloplasmin on DEAE-cellulose at pH 5.0-5.2 and washing of ballast proteins 0.07-0.09M sodium chloride solution at pH 5.0-5.2, elution of ceruloplasmin 0.24-0.26M with sodium chloride solution at pH 5.5, precipitation of proteins with ethanol at a final concentration of 65-75%, dissolution of the precipitate in 0.25 M sodium chloride solution,
осадження баластних денатурованих білків сумішшю етанол-хлороформ (24-26о696 і 2-406905 відповідно) при рН 5,2-5,3 і 1-24-26"С, відділення осаду центрифугуванням, осадження кінцевого продукту із надосадної рідини, витримуючи її протягом 12 годин при (- -107С7 в присутності етилового спирту з кінцевою концентрацією 45-550695, розчинення осаду в фізіологічному розчині, ультрафільтрації розчину на порожнистих волокнах від 100 до 150кД та прогрівання розчину при (-607С протягом 10 годин. Одержаний розчин церулоплазміну після стерилізуючої фільтрації розливають в ампули чи флакони і зберігають у вигляді розчину чи ліофілізують.precipitation of ballast denatured proteins with an ethanol-chloroform mixture (24-26o696 and 2-406905, respectively) at pH 5.2-5.3 and 1-24-26"С, separation of the precipitate by centrifugation, precipitation of the final product from the supernatant, keeping it for 12 hours at (- -107С7 in the presence of ethyl alcohol with a final concentration of 45-550695, dissolution of the sediment in a physiological solution, ultrafiltration of the solution on hollow fibers from 100 to 150kD and heating of the solution at (-607С for 10 hours. The obtained solution of ceruloplasmin after sterilizing filtration pour into ampoules or vials and store in the form of a solution or lyophilize.
Цей спосіб повністю задовольняє вимоги міжнародних стандартів щодо вірусологічної безпеки препаратів.This method fully meets the requirements of international standards regarding the virological safety of drugs.
Суть винаходу пояснюється конкретними прикладами виконання. 70 Приклад І.The essence of the invention is explained by concrete examples. 70 Example I.
Зкг фракції ІМ по Кону сироватки донорської крові гомогенізують в ЗбОл 0,05М розчину хлористого натрію при 1-5"С. До гомогенату додають 0,Зкг ДЕАЕ-целюлози. Доводять рН до 5,0 додаванням 0,135л 1н соляної кислоти.3 kg of the MI fraction of donor blood serum is homogenized in ZbOl 0.05M sodium chloride solution at 1-5"С. 0.3 kg of DEAE-cellulose is added to the homogenate. The pH is brought to 5.0 by adding 0.135 l of 1N hydrochloric acid.
Суміш залишають при слабкому перемішуванні на 18 годин при (-57"С. Церулоплазмін, сорбований целюлозою відмивають від баластних білків на нутч-фільтрі через бавовняну тканину охолодженим до Ї1-57С 0,07М розчином 7/5 Хлористого натрію при рН 5,0 до тих пір, поки оптична щільність промивної рідини на виході стане не менше 0,1 при Еово. Потім сорбент переносять в хроматографічну колонку і проводять елюцію церулоплазміну 0,25М розчином хлористого натрію при рН 5,5 і 120"С, Одержують 1,3л елюату з оптичною щільністю при Евіо рівною 0,275 і рН 5,42. Доводять рН суміші до 6,8 додаванням 2мл 1н лугу (МаонН), додають З,9л охолодженого до (- -2700 9695 етилового спирту (кінцева концентрація 750690) і перемішують протягом 1 години. Після витримування 2о протягом 1 години при ї- -2"С суміш центрифугують протягом 2-х годин при 16000об/хв. Потім 51г осаду розчиняють в О,бл 0,25М розчину хлористого натрію при (2БЕ5"С і центрифугують протягом 2-х годин при 16000боб/хв для відокремлення денатурованих баластних білків, що не розчинилися. Доводять рН надосадної рідини до 5,2 Ін розчином соляної кислоти і додають 0,1Зл 96905 етилового спирту і 0,28л хлороформу (кінцева концентрація спирту 24-26о6б95 і хлороформу 2-40695). Суміш перемішують протягом 30 хвилин і осад, що ов утворився, відділяють центрифугуванням при 1600боб/хв протягом 1 години. 0,б65л центрифугату перемішують зThe mixture is left with gentle stirring for 18 hours at (-57"C. Ceruloplasmin sorbed by cellulose is washed from ballast proteins on a nut filter through a cotton cloth with a 0.07M solution of 7/5 sodium chloride at pH 5.0 to until the optical density of the washing liquid at the outlet becomes at least 0.1 at Eovo. Then the sorbent is transferred to a chromatographic column and elution of ceruloplasmin is carried out with a 0.25M sodium chloride solution at pH 5.5 and 120"C. 1.3 liters of eluate are obtained with an optical density at Evio equal to 0.275 and a pH of 5.42. Adjust the pH of the mixture to 6.8 by adding 2 ml of 1N alkali (MaonN), add 3.9 l of cooled to (- -2700 9695) ethyl alcohol (final concentration 750690) and stir for 1 hours. After standing at 2°C for 1 hour at -2"C, the mixture is centrifuged for 2 hours at 16,000 rpm. Then 51 g of the precipitate is dissolved in O.bl 0.25M sodium chloride solution at (2B5"C and centrifuged for 2 -x hours at 16,000 bob/min to separate denatured b elastic proteins that did not dissolve. Adjust the pH of the supernatant to 5.2 with hydrochloric acid solution and add 0.1 L of 96905 ethyl alcohol and 0.28 L of chloroform (final concentration of alcohol 24-26о6б95 and chloroform 2-40695). The mixture is stirred for 30 minutes and the resulting precipitate is separated by centrifugation at 1600 rpm for 1 hour. 0.65 l of the centrifuge is mixed with
О,89л 9695 етилового спирту (кінцева концентрація спирту 5595), витримують 12 годин при (- -107С і « центрифугують 1 годину при 16000об/хв. Осад церулоплазміну, що утворився розводять в 70905 етиловому спирті і відділлють центрифугуванням протягом 1 години при З00Ооб/хв і потім розчиняють його в 0,155л 0,85М фізіологічного розчину хлористого натрію і центрифугують протягом 30 хвилин при З0О0Обоб/хв. о зо Для видалення слідів хлороформу і спирту церулоплазмін піддають ультрафільтрації через порожнисті волокна від 100 до 150кД. Одержують 0,15бл розчину церулоплазміну з концентрацією 20,1мг/мл. Вихід о цільового препарату приблизно 1,3г на їкг осаду, оптичний коефіцієнт 0,036 біологічна активність 16 одиниць. с0.89 l of 9695 ethyl alcohol (final concentration of alcohol 5595), kept for 12 hours at (- -107C and centrifuged for 1 hour at 16000 rpm. The ceruloplasmin precipitate formed was diluted in 70905 ethyl alcohol and separated by centrifugation for 1 hour at 3000 rpm min and then dissolve it in 0.155 l of 0.85M physiological sodium chloride solution and centrifuge for 30 minutes at 3000 rpm. o zo To remove traces of chloroform and alcohol, ceruloplasmin is subjected to ultrafiltration through hollow fibers from 100 to 150 kD. 0.15 ml of ceruloplasmin solution is obtained with a concentration of 20.1 mg/ml. The yield of the target drug is approximately 1.3 g per kg of sediment, the optical coefficient is 0.036, the biological activity is 16 units.
Розчин церулоплазміну витримують протягом 10 годин при (-60"С, піддають стерилізуючій фільтрації і розливають в ампули. --The ceruloplasmin solution is kept for 10 hours at (-60"C, subjected to sterilizing filtration and poured into ampoules. --
Приклад ІІ. «оExample II. "at
ЗОокг фракції ІЇЇ по Кону сироватки ретроплацентарної крові гомогенізують в ЗОбл 0,05М розчину хлористого натрію при (-57С. До гомогенату додають Зкг ДЕАЕ-целюлози. Доводять рН суміші до 5,0 додаванням 1,350л Тн соляної кислоти. Суміш залишають при слабкому помішуванні на 18 годин при 1-57. Целюлозу з сорбованим на ній церулоплазміном відмивають від баластних білків на нутч-фільтрі через бавовняну тканину охолодженим до « ї-5"С розчином 0,09М хлористого натрію при рН 5,2 до того часу, поки оптична щільність промивної рідини на Ше) с виході не стане меншою 0,1 при Е280П Потім сорбент переносять в хроматографічну колонку і проводять . елюцію церулоплазміну 0,26М розчином хлористого натрію при рН 5,5 і (20"С. Одержують 12л елюату з и? оптичною щільністю 0,275 при Евіо. Доводять рН суміші до 6,8 додаванням 20мл ін лугу (Маон), додають Збл охолодженого до ї- -27С 9695 етилового спирту (кінцева концентрація 7506905). Після витримування протягом 1300 kg of fraction III according to Kohn of retroplacental blood serum is homogenized in 300 ml of 0.05M sodium chloride solution at -57C. 30 kg of DEAE-cellulose is added to the homogenate. The pH of the mixture is brought to 5.0 by adding 1.350 liters of hydrochloric acid. The mixture is left with gentle stirring at 18 hours at 1-57. Cellulose with ceruloplasmin adsorbed on it is washed from ballast proteins on a nutch filter through a cotton cloth with a 0.09M sodium chloride solution at pH 5.2 cooled to -5"C until the optical density of the washing liquid on Sh) with the output will not be less than 0.1 at E280P. Then the sorbent is transferred to a chromatographic column and elution of ceruloplasmin with a 0.26M sodium chloride solution at pH 5.5 and (20"C is carried out. 12 l of eluate with an optical with a density of 0.275 at Evio. Bring the pH of the mixture to 6.8 by adding 20 ml of alkaline (Maon), add Zbl cooled to -27C 9695 ethyl alcohol (final concentration 7506905). After standing for 1
Години при (- -2'С суміш центрифугують при 1600боб/хв протягом 2-х годин. Потім 470г осаду розчиняють в блHours at (- -2'C, the mixture is centrifuged at 1600 rpm for 2 hours. Then 470 g of sediment is dissolved in bl
Ге» 0,25М розчину хлористого натрію при (-5"7С і центрифугують при 16000боб/хв протягом 2-х годин для відділення денатурованих білків, що не розчинилися. Доводять рН надосадної рідини до 5,2 додаванням 1н розчину соляної - кислоти і підігрівають до (-257С додають 1,3л 9695 етилового спирту і О,28л хлороформу (кінцева концентрація ко спирту 24-26о6б95 і хлороформу 2-40695 відповідно) Суміш перемішують протягом 30 хвилин і осад, що 5р утворився, відділяють центрифугуванням при 16000об/хв протяюм 1 години. бл центрифугату перемішують з о 7,9л 9695 етилового спирту (кінцева концентрація 5595), витримують 12 годин при (- -107С і центрифугують 1 о годину при 16000об/хв. Осад церулоплазміну, що утворишся, розводять в 70 95 етиловому спирті і відділяють центрифугуванням проїягом 1 години при З0Обоб/хв, потім розчиняють його в 1,550л 0,85М розчином хлористого натрію і центрифугують протягом 30 хвилин при 3000 об/хв.Ge" 0.25 M sodium chloride solution at (-5"7C and centrifuged at 16,000 rpm for 2 hours to separate denatured proteins that did not dissolve. Adjust the pH of the supernatant to 5.2 by adding 1 N hydrochloric acid solution and heat to (-257C, add 1.3 l of 9695 ethyl alcohol and 0.28 l of chloroform (the final concentration of alcohol is 24-26o6b95 and chloroform is 2-40695, respectively) The mixture is stirred for 30 minutes and the precipitate that has formed is separated by centrifugation at 16,000 rpm For 1 hour, the centrifuge tube is mixed with 7.9 liters of 9695 ethyl alcohol (final concentration 5595), kept for 12 hours at (- -107C and centrifuged for 1 hour at 16000 rpm. The resulting ceruloplasmin precipitate is diluted in 70 95 ethyl alcohol and separate by centrifugation for 1 hour at 30 rpm, then dissolve it in 1.550 l of 0.85 M sodium chloride solution and centrifuge for 30 minutes at 3000 rpm.
Для видалення слідів хлороформу і етилового спирту розчин церулоплазміну піддають ультрафільтрації через порожнисті волокна від 100 до 150кКД з розміром пор 0,220мкм. Одержують 1,530л розчину церулоплазмінуTo remove traces of chloroform and ethyl alcohol, the ceruloplasmin solution is subjected to ultrafiltration through hollow fibers from 100 to 150 kKD with a pore size of 0.220 μm. 1,530 liters of ceruloplasmin solution are obtained
Р з концентрацією 20,2мг/мл.P with a concentration of 20.2 mg/ml.
Вихід цільового препарату приблизно ї1г на їкг осаду, оптичний коефіцієнт 0,04, біологічна активність 18 одиниць. Розчин церулоплазміну витримують протягом 10 годин при (-60"С, піддають стерилізуючій фільтрації і бр розливають в ампули.The yield of the target drug is approximately 11g per 1kg of sediment, the optical coefficient is 0.04, and the biological activity is 18 units. The ceruloplasmin solution is kept for 10 hours at (-60"C, subjected to sterilizing filtration and then poured into ampoules.
Як видно з прикладів, вихід цільового продукту збільшився майже в два рази в порівнянні зі способом-прототипом, при цьому біологічна активність препарату не знизилась.As can be seen from the examples, the yield of the target product increased almost twice compared to the prototype method, while the biological activity of the drug did not decrease.
Заявлений спосіб одержання церулоплазміну не вимагає додаткового обладнання і фінансових витрат.The claimed method of obtaining ceruloplasmin does not require additional equipment and financial costs.
Київське державне підприємство по виробництву бактерійних препаратів "Біофарма" має всі можливості для 65 одержання церулоплазміну заявленим способом. Результати дослідної перевірки церулоплазміну наведені в таблиці. В результаті перевірки дослідних серій церулоплазміну встановлено, що його фізико-хімічні характеристики відповідають вимогам Фармкомітету і Тимчасової фармакопейної статті і зберігаються протягом 2-х років.The Kyiv state enterprise for the production of bacterial preparations "Biopharma" has all the possibilities for obtaining ceruloplasmin by the declared method. The results of the experimental test of ceruloplasmin are shown in the table. As a result of testing the experimental series of ceruloplasmin, it was established that its physicochemical characteristics meet the requirements of the Pharmaceutical Committee and the Provisional Pharmacopoeia article and are preserved for 2 years.
Результати випробувань п'ята серій препарату "Розчин цєрулоплазміну" 295 виготовленого на ДержавномуTest results of the fifth series of the drug "Ceruloplasmin solution" 295 manufactured at the State
Київському підприємстві "Біофарма" в процесі зберіганняKyiv enterprise "Biopharma" in the process of storage
ТаблицяTable
Ї Н Й Нейме покхіннків Іа вимог АНД ШЗШ000070ШТОШТШ0053 і і Сн Справжність Пра |Ко | ме |в По | Но. | Стеру Пірс Ток- ЗКіль-| На (КЕ ер Блек: ЗІ Н І Неиме починнкив и и и и и и и и и и и и и и и и Д ШЗШШ000070ШТОШТШ0053 и и СН Справжнысть Пра|Ко | me | in Po | But. | Steru Piers Tok- ZKil-| On (KE er Black: Z
Я зе | ліякро- і ха- ти- фо» | льинісрттк шим Місто | тріна ЕФЕ Іюсте| роюI ze | liakro- and ha- ti- fo» | linisrttk shim City | trina EFE Ijuste| swarm
Немері Дати Па» | І шеть | вісглу» І ніч- іжяе луки | ї іст) ність у- | хлюо- Р ВО тк- | тей 710 Ї серії Ї ировен «ін і ' Ї ні івай Їй |в лошлан! ряд «р склад , і ян : Я : - ' вкл і антв-ї об'єм) | з нміжу : ість)Nemeri Daty Pa» | And shet | howl" And the night- and the meadows | its essence in-| hluo- R VO tk- | tey 710 І series І iroven «in i ' І ni ivay І |v loshlan! row «r composition , and yan : I : - ' incl and antv-th volume) | from nmizh: ist)
Іо нення рон 1 пиши пе щ ! ро: | | век)! ! | і ; ще | - || ши | | ! в | | з 1 .Ion nie ron 1 write pe sh ! ro: | | century)! ! | and more | - || shi | | ! in | | from 1
І ! | | | і ре: Грядя вк п ватя |Не Від 165- | Анті Не те. т бла тв | ВстаAnd! | | | and re: Gryadya vk p vatya | Not From 165- | Anti Not that. t bla tv | Get up
Я : ва оо фовжаєПере-| ДЕН) | пові Та о |геногне- пь- шен ок 4-0 ме рве | глобулін : Й бТЖУ |жхт- зр Звтуу нм | ді тд. зведе вн іс те о ! ре щи 1 Яеженше ' ! лев | на вщи | стало мене | ки Ї «ут» І 5 Міна фнка 1 З пол іе9 зи, Й. 17 І Шіюжює блок | пу МЕ яке. вині І ній мл ; іт; МУ слобіпі- рі ЩЕ і озз || | : тв | тів- хебі-I: va oo fovzhaePere-| DAY) | povi Ta o |genogne- p-shen ok 4-0 me rve | globulin: Y bTZHU |zhht- zr Zvtuu nm | yes etc. will bring it in! rest 1 Less than ' ! lion | on the ears | became me | ki Y "ut" I 5 Mina fnka 1 Z pol ie9 zi, Y. 17 I Shiyuzhue block | pu ME what. blame And her ml ; it; MU slobipiri STILL and ozz || | : tv | tiv- hebi-
І : сь 1 ; . ДЯ і | і і : льше 506 бо раки. р і і шин ще вого |і. ши ще щеAnd: here 1; . ДЯ and | and i: only 506 bo raki. r i i shin still vogo |i. Shi still more
І | Фтьо-Ї | | 93 Ї : 25 . НИ що : йAnd | Ftyo-Y | | 93 Y: 25. NI that: y
ГЕ: реє ве |юри в вмів півнів ую и «GE: flying birds in the style of roosters and "
І ; вк : Е Е : : Ши розте Ж5О5 Ви Біре ПозитяцТози- Пачнтні Не 0285 рВія- 725 |Від | Вія- | Єте- Ашб| Бе! ООНЕ Ф 111 :10ю- ' тала 1 пора р рутина |вінх : перо- ; повіє ї леве- певк| ва- бро І ак ЩО | е У. вза фідеца! 1 І вА- ря лат | дасо льно Ігемо| «Кох І Гей р. лак»! | те І" чив | чий ! «оз («в») ! бе | ! І щ я ШИ | | | | ще о : їж | І ! | | | ї Е І о винен те тн те те вя ери же тире ре вет т ЖІ р4А.03.906 8--46,38аAnd вк : Е Е : : Ши розте Ж5О5 Вы Бире ПозитяцТозы- Пачнтни Не 0285 rViya- 725 |From | Eyelash- | Yete- Ashb| Beh! OONE F 111:10yu- ' tala 1 pora r routine |vinh : pero- ; whore and lion-singer wa- bro I ak WHAT | e U. for fidets! 1 I vArya lat | daso lno Igemo| "Koh I Gay r. lak"! | te I" chiv | whose ! "oz ("in") ! be | ! And sch i SHY | | | | more o: eat | И ! | | | и E I o vinen te tn te te vya ery same tire re vet t Zhi r4A.03.906 8--46,38a
Ве і ай аа дій ій Кай Бай Ба ай іі й Ба Б рах 1КИНВЯVe i ai aa dyin iy Kai Bai Ba ai ii y Ba Br rah 1KINVYA
У ото Гу Ї с взе .1097. | міс. | 5 | В-АбдвIn oto Gu Yi s vze .1097. | miss. | 5 | V-Abdv
І і 90 |і Ї й Ї Теж І Тежі038 Теж 6,05 | Теж! Теж | Теж Теж Теж! 01 |0045| 026110 | а-53,6298 ! Р.0498 і міс! Теж! Теж | Теж! ! | ' | ШИ | (1 8-468У " 23-17 І " Теж Теж | 0,36 Тежі7,0 Теж! Теж! Теж Тежі Теж! 0,1 10046|0,025110 | а -53,6295 1 « ' Б.0898 | міс.| Теж! Теж | Теж ! ' | ! ! | В -46,3895 | пс; -И и 90 |и И и И Теж И Тежи038 Теж 6.05 | Also! Also | Too Too Too! 01 |0045| 026110 | a-53.6298! R.0498 and miss! Also! Also | Also! ! | ' | AI | (1 8-468U " 23-17 I " The same The same | 0.36 The same 7.0 The same! The same! The same The same The same! 0.1 10046| 0.025110 | a -53.6295 1 « ' B.0898 | month .| Also! Also | Also ! ' | ! ! | V -46.3895 | ps; -
Опа- Позити: Не 10,5 Від- | 7,06 | Від- | Від- | Сте- | Апі-ІНето- | 004 1003 | 15, | «а -53,6295 с лесців вна дере- пові- пові-! пові-|ри- |ро- Ксич- ро; 4 2 41 8-463895 щ юча ви- дає дає дає льни | ген- ний и"? ріди- щує Я ний ї на бліOpposites: Not 10.5 From | 7.06 | From- | From- | Ste- | Api-INEto- | 004 1003 | 15, | "and -53.6295 s lestsiv vna dere- povi-povi-! powi-|ry- |ro- Ksych-ro; 4 2 41 8-463895 gen- ny i?
І | кит- ! ного ! ко- (2) льор; ре5- ІПозити- Пози. тд 40496 10.06.96 Вих. вна Іі тивна вва в я а ій мо са іі вай ій БД БШ Н ЕБ ко 1712.96І16 міс! Теж| Теж | Теж 8 В -46.3855 (ав) ро.05.97 | міє.; Теж! Теж / Теж! 5 р -46,3895And | whale- ! foot! ko- (2) lyor; re5- IPositions - Poses. td 40496 10.06.96 Ex. vna Iitivva vva vya a yy mo sa ii vay yy BD BSH N EB ko 1712.96I16 months! Also Also | Also 8 V -46.3855 (av) ro.05.97 | has.; Also! Too / Too! 5 r -46.3895
Тежі| Теж | Теж| Теж |Тежі|048 Теж | 7/5 | Теж | Теж | Теж | Те вртежр оте от а-53,6250 2 | Р.1297 | міс. ' | | : й | 0 В -463895 , ! И18.05- 24 Теж: Теж | Теж! Теж /Теж/045 |Теж!|70 |Тежі!і Теж ТежіТеж Теж! 01 |0044|0027| 13, а-53,625 І ' йОбО8 мі! : : її ! | І | | І 6 | В-я63895 -ІВА- 27 Теж, Теж Теж Теж Тежіб45 Тежі70 /Тежі Теж ТежітТеж Теж 0.1 10044. 0027113. а-53655 1 дв 10 сБеою мс | | й ! о НИКИ 075) в-ва з» НОДОНН ЗНО ПОЛО ОНИ ПОН ПООНИНННМ ПОН КОМННННЯ ПОН ОНИ: НОСОК КОНОНКО КОН НАННЯ ЗАНОНННЯ КОНЯ ЛАН МОНО КОНЯ НОКОНОН бо б5The same Also | Also Also |Also|048 Also | 7/5 | Also | Also | Also | The rotation is 53.6250 2 | R.1297 | miss. ' | | : and | 0 V -463895 , ! И18.05- 24 Also: Also | Also! The same /The same/045 |The same!|70 |The same!and The same The same The same The same! 01 |0044|0027| 13, a-53,625 I ' yObO8 mi! : : her ! | And | | And 6 | В-я63895 -IVA- 27 Same, Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same Same | and ! o NIKY 075) in-va z» NODONN ZNO POLO ONY PON POONINNNM PON KOMNNNNYA PON ONY: NOSOK KOONONKO KON NANNYA ZANONNNYA HORSE LAN MONO HORSE NOKONON bo b5
1297 2.12- |Вих.Про- Шозитич Пож- Пози- | Не 0,426 | Від- 17,12 |Відної Від- | Сте- (Дпі | Не- ||: ря. . 26.12.97 зора івна тив | тивна | пере пові- відає Її пові- ри- (ро- | ток- |. | сі рідина на вищ дає дає | льни Іген | сич- з їч а-53 91 блаки: ує й |ний | ний 2 ї В 19 | р-увоз тного ЗІ кольо ч «У 18.06.98 міс. | : | їж ЗІ5 9 9 в'Явоз 8.2- Теж |Теж | Теж Теж ІТежі041 іТежі7і ІТеж Теж Теж Те Теж 1 00810,02 17, | «-53,9790 22.12.98 П2міс І | | ж | З 4 19 |0 вВ-аботіІ 7.06- Теж Теж |Теж|Теж Теж | Теж Теж|Те |Теж він 0,02 117, ї. а -53,9795 21.06.99 М ж ЗІ 8 о В -46,0355 13.12- |24 |Теж |Теж | Теж теж ртежувю теж) мо Теж (Теж |Теж|Те | Теж В 0,02 | 15,1. с -53,9799 ую міс ж -4 18 9 | В-46,0355 1402-27 |Теж |Теж | Теж Теж Теж | Теж |Те | Теж ВІ 0,02 | 15. | Ф-53,975 28.02.00 Міс ж 5 іб 5 | 8В-46,0351297 2.12- |Ex. Pro- Shozitych Pozh-Pozy- | Not 0.426 | From- 17,12 |Vidnoy From- | Ste- (Dpi | Ne- ||: rya. . 26.12.97 visionary sich- z ich a-53 91 blaky: ue y |ny | ny 2 y V 19 | r-imported ZI quantity "On 18.06.98 month | : | iz ZI5 9 9 v'Yavoz 8.2- Same | | Same Same ITezhi041 andTezhi7i ITe same Same Same That Same 1 00810.02 17, | «-53.9790 22.12.98 P2month I | | same | Z 4 19 |0 vV-abotiI 7.06- Same Same |Same|Same Same | Same The same | The same | The same he 0.02 117, i. a -53.9795 21.06.99 M same ZI 8 o V -46.0355 13.12- | 24 | The same | The same | The same also rtezhuvyu too) mo The same (The same | The same | The same | The same B 0.02 | 15.1. s -53.9799 uyu mis the same -4 18 9 | The same | The same | The same The same The same | The same | The same | The same VI 0.02 | 15. | F-53,975 28.02.00 Mis same 5 and 5 | 8B-46,035
ІЙ пс.ІІ ps.
Зберігання: В сухому місці при температурі не вище 5"СStorage: In a dry place at a temperature not higher than 5"C
Пакування: Серії30396,40496 по 5мл в ампули типу іп-5, ТУ У 004809-005-96Packaging: Series 30396, 40496 of 5 ml in ampoules of IP-5 type, TU U 004809-005-96
Серії 50696,10997, 21297 у флакон ФО ТУ-64-2-10-87Series 50696, 10997, 21297 in a bottle of FO TU-64-2-10-87
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002065099A UA61200A (en) | 2002-06-20 | 2002-06-20 | Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002065099A UA61200A (en) | 2002-06-20 | 2002-06-20 | Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA61200A true UA61200A (en) | 2003-11-17 |
Family
ID=34391286
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002065099A UA61200A (en) | 2002-06-20 | 2002-06-20 | Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA61200A (en) |
-
2002
- 2002-06-20 UA UA2002065099A patent/UA61200A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4396608A (en) | Intravenously injectable immune serum globulin | |
| US4499073A (en) | Intravenously injectable immune serum globulin | |
| EP0413188B1 (en) | Method for producung an unmodified intravenous IgM- and/or IgA-containing immunoglobulin preparation | |
| EP3406716A1 (en) | Antibody and antibody-containing composition | |
| JPS63192724A (en) | Liquid pharmaceutical of gamma-globulin | |
| RU2015155470A (en) | HIGH-PERFORMANCE PHARMACEUTICAL PANCREATIN COMPOSITIONS | |
| CN114470167A (en) | Interferon eye drops and preparation method thereof | |
| CN103007258A (en) | Medical composition containing fish serine protease and antibacterial compound, and uses thereof | |
| EP2695620B1 (en) | Caprylate viral deactivation | |
| UA61200A (en) | Method for producing ceruloplasmin for pharmaceutical purposes | |
| CN101003539A (en) | Trometamol salt in compound of cillin category, and preparation method | |
| JPH04346934A (en) | Liquid preparation of gamma-globulin | |
| CN104940135A (en) | Fluconazole injection and preparation method thereof | |
| HU214059B (en) | Process for producing pharmaceutical composition containing immunoglobulin a, immunoglobulin b and transferine, and the active components | |
| CN102391107A (en) | Method for preparing gallic acid quinolone drug salt and preparation method thereof | |
| US20180161436A1 (en) | Nerve growth factor composition and powder injection | |
| US10100086B2 (en) | Peptide and uses thereof | |
| CN101768156A (en) | Pidotimod arginine salt and preparation thereof | |
| US9446060B2 (en) | Method of producing therapeutic agent | |
| Sultanova et al. | Chitosan-Based Hydrogel Composition with Megosine | |
| RU2752169C1 (en) | Pharmaceutical based on compound of antimony with biocompatible matrix | |
| AU705718B2 (en) | Antibacterial compositions | |
| JPH029600B2 (en) | ||
| CN114515297B (en) | Composite preparation of periplaneta americana extract combined with amikacin as well as preparation method and application thereof | |
| CN108272755B (en) | A kind of hydrochloride for injection mycophenolate mofetil lyophilized preparation and preparation method thereof |