UA58727A - Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби - Google Patents
Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби Download PDFInfo
- Publication number
- UA58727A UA58727A UA2002097159A UA200297159A UA58727A UA 58727 A UA58727 A UA 58727A UA 2002097159 A UA2002097159 A UA 2002097159A UA 200297159 A UA200297159 A UA 200297159A UA 58727 A UA58727 A UA 58727A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- serum
- purification
- centrifugation
- filtration
- bovine serum
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 title abstract description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 28
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 abstract description 4
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 4
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000702673 Bovine rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 101001125496 Homo sapiens Pre-mRNA-processing factor 19 Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100029522 Pre-mRNA-processing factor 19 Human genes 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 206010067470 Rotavirus infection Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби шляхом очистки від γ - глобулінової фракції розчином поліетиленгліколю, отримання надосадової рідини центрифугуванням. Надосадову рідину просвітлюють центрифугуванням або сепарацією, або фільтрацією, потім стерилізують фільтрацією.
Description
Опис винаходу
Винахід відноситься до ветеринарії та медицини, а саме до вірусології, та стосується отримання клітинних 2 культур, які використовуються з вірусологічною метою.
На цей час жодна сучасна вірусологічна лабораторія не може обійтися без використання культур клітин.
Для росту та розмноження клітин поза організму необхідним є великий комплекс фізико-хімічних факторів, присутність амінокислот та сироваткових білків. Наявність у сироватці крові біологічно активних речовин, таких як коензими, вітаміни комплексу В, гормони, мікроелементи та інші визначає біологічне значення 70 сироватки для клітин та стимулює їх ріст (В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. Ветеринарная вирусология
М.: Колос", 1984.-376 с.1).
Поряд з біологічними речовинами сироватка містить у своєму складі різні фракції імуноглобулінів.
Гама-глобуліни є специфічними до різних інфекційних збудників, тому при індикації або накопиченні вірусів з використанням культур клітин, наявність 7 -глобулінів у сироватці знижує інфекційний титр вірусів, а іноді 12 взагалі перешкоджає їх реплікації в клітинах. Наприклад, при накопиченні ротавірусів великої рогатої худоби в культурі клітин нирки теляти з використанням сироватки крові великої рогатої худоби, яка вміщувала специфічні до ротавірусів глобуліни, інфекційний титр вірусу знижувався на 2-3 Ід ТЦД 50/см? (Букринская Ротавирусная инфекция /М.: "Наука", 1990.- 213 с.).
Вилучення "- глобулінів з сироватки дозволяє використовувати Її для вірусологічної мети без попередньої перевірки на наявність специфічних до вірусів глобулінів.
В Україні сироватка великої рогатої худоби виробляється комерційними виробниками або цехами м'ясокомбінатів, де вона не очищується від гама-глобулінової фракції білків.
Прототипом способу очистки, що патентується, є спосіб очистки сироватки великої рогатої худоби, який запропонований Л.І. Інгундіним, С.Д. Орловим, Н.В. Шалуновою та іншими (Способ очистки сьіроватки крови 29 крупного рогатого скота. Л.М. Игудин, С.Д. Орлов, Н.В. Шалунова и др. // Вопр. виросологии.-1980.- Мо5.-С. « 640.). Для очистки від "7 - глобулінової фракції сироватку крові великої рогатої худоби обробляли стерильним 4095 водним розчином поліетиленгліколю (ПЕГ) з мол. м. 5500-7000 (фірма ,Зегма", ФРГ). Кінцеву концентрацію
ПЕГ у сироватці доводили до 6-85 з експозицією 16-18 годин при плюс 4"С. Далі сироватку центрифугували при 2000-3000об/хв протягом 20 хвилин для отримання надосадової рідини. Вміст білку в сироватці після обробки -
ПЕГом знижувався у 2 рази. Ге
Основним недоліком цього способу очистки є робота з сироваткою у стерильних флаконах, об'єм яких не перевищує О,5л або потребує додаткової стерилізації сироватки. Під час роботи з такими невеликими об'ємами - виробництво сироватки, яка була оброблена ПЕГ, економічно не виправдано, так як кількість очищеної за один (се) раз сироватки не перевищує 2-3 літрів. Цей спосіб очистки придатен для одержання невеликих об'ємів сироватки в лабораторних умовах. й
В основу винаходу, що передбачається поставлено задачу розробити спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби шляхом очистки 7 - глобулінової фракції розчином поліетиленгліколю, отримання надосадової рідини центрифугуванням, після чого надосадову рідину освітлюють центрифугуванням, або сепарацією, або « дю фільтрацією, потім стерилізують фільтрацією, щоб забезпечити очистку сироватки крові великої рогатої худоби. -о
Спосіб виконується таким чином: до сироватки, яка була освітлена центрифугуванням на поточній або кутовій с центрифугах, або сепарацією на кров'яному сепараторі АСГ-ЗМ, або фільтруванням через фільтр-пластіни типу :з» »"Ф" додають 5095 водний розчин ПЕГа-115 або 4095 водний розчин ПЕгГа з мол. м. 10000 в співвідношенні 1:5,6 (1 частина розчину ПЕгГа та 5,6 частин сироватки). Сироватка повинна бути охолоджена до температури від плюс 2 до плюс 8"С. Суміш інтенсивно перемішують до отримання гомогенної суспензії, яка містила відділену масу сл 395 глобулінів. Суспензію витримують 72-96 годин при температурі 2-8"С. Надосадову рідину освітлюють центрифугуванням, або сепарацією, або фільтрацією після чого сироватку піддають стерилізуючій фільтрації (ее) скрізь фільтри зета-плюс, зета-фор або інші фільтри з перепускною здібністю 0,2-0,25 нм.
Приклад 1.
Аглобулінову сироватку розфасовували в стерильні скляні ємності об'ємом 0,25-5,0 літрів. Розфасовану ко 50 сироватку піддавали провокуванню на наявність контамінації бактеріальною та грибковою флорою при «мч температурі плюс Зо протягом 5-6 діб. Далі аглобулінову сироватку великої рогатої худоби використовували з вірусологічною метою.
Приклад 2.
При вивченні ростових властивостей різних серій аглобулінової сироватки в порівнянні з нативною 59 сироваткою великої рогатої худоби суттєвої різниці не було. При культивуванні первинне трипсинізованої в. (фібробласти курячих ембріонів) та перещеплюваних ліній культур клітин (СНЕВ, НТ, ТртТ) строки формування моношару в експерименті та в контролі співпадали, а також культури не відрізнялись морфологією клітин.
Спосіб очистки нативної сироватки великої рогатої худоби експериментально обгрунтований на первинно трипсинізованих та перещеплюваних культурах клітин. бо Запропонований спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби дозволяє вилучати гама-глобулінову фракцію. Спосіб придатен для використання у промисловому виробництві.
Claims (1)
- Формула винаходу б5Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби шляхом очистки від Г - глобулінової фракції розчином поліетиленгліколю, отримання надосадової рідини центрифугуванням, який відрізняється тим, що надосадову рідину просвітлюють центрифугуванням або сепарацією, або фільтрацією, потім стерилізують фільтрацією. Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2003, М 8, 15.08.2003. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. « ча с ча (ее) ІС в) -с . и? 1 (ее) -І з 50 що 60 б5
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002097159A UA58727A (uk) | 2002-09-03 | 2002-09-03 | Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002097159A UA58727A (uk) | 2002-09-03 | 2002-09-03 | Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA58727A true UA58727A (uk) | 2003-08-15 |
Family
ID=74219589
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002097159A UA58727A (uk) | 2002-09-03 | 2002-09-03 | Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA58727A (uk) |
-
2002
- 2002-09-03 UA UA2002097159A patent/UA58727A/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4216205A (en) | Process of preparing a serum protein composition for intravenous application | |
| DK168030B1 (da) | Vandige proteinoploesninger, som er bestandige over for denaturering, fremgangsmaade til deres fremstilling og deres anvendelse samt fremgangsmaade til behandling af hydrophobe overflader. | |
| RU2461629C2 (ru) | Среды для культур клеток млекопитающих, которые содержат надосадочную жидкость стадий фракционирования по кону, и их применение | |
| Rappaport | Monolayer Cultures of Trypsinized Monkey Kidney Cells in Synthetic Medium. Application to Poliovirus Synthesis. | |
| CN115232783A (zh) | 抗人t细胞猪免疫球蛋白的制备方法及醛化胎盘 | |
| Thurman et al. | Lymphocyte activation in subacute sclerosing panencephalitis virus and cytomegalovirus infections: in vitro stimulation in response to viral-infected cell lines | |
| WO2013043032A2 (es) | Extracto dializado de leucocitos de origen bazo de tiburón para la obtención de factor de transferencia potencializado, específicamente diseñado para su uso como inmunomodulador y método de extracción, comprobación y conteo del mismo | |
| UA58727A (uk) | Спосіб очистки сироватки крові великої рогатої худоби | |
| US20060223988A1 (en) | High Resolution Methods and Precipitating Reagents for Isolating Proteins from Proteinaceous Material | |
| RU2080124C1 (ru) | Способ получения живой гриппозной вакцины | |
| EP0048283A1 (en) | Virus-inhibiting substance and process for preparing the same | |
| EP0148770B1 (en) | Composition for cell cultivation, production and use thereof | |
| RU2460786C1 (ru) | Способ получения сыворотки крови взрослого крупного рогатого скота для культивирования клеток животных и человека | |
| RU2054039C1 (ru) | Способ очистки и стерилизации культурального вируса ящура | |
| RU2703537C2 (ru) | Способ изготовления полуфабрикатов иммуноглобулиновых и альбуминовых биопрепаратов из боенской, трупной крови животных, абортной и плацентарной крови человека | |
| RU2708394C2 (ru) | Способ получения иммуноглобулинов | |
| EP0115284A2 (en) | Tissue culture medium | |
| RU2066188C1 (ru) | Способ получения человеческого лейкоцитарного интерферона | |
| KR101512383B1 (ko) | 탯줄혈액 혼합물의 분획화 방법 및 이로부터 얻어진 분획을포함하는 세포배양 배지 보충용 조성물 | |
| RU2189833C2 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
| RU2252780C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
| RU2082432C1 (ru) | Способ получения вакцины против клещевого энцефалита | |
| UA58719A (uk) | Спосіб одержання аглобулінової сироватки крові великої рогатої худоби | |
| RU2352358C1 (ru) | Способ приготовления вирусинактивированных растворов иммуноглобулинов | |
| UA24297U (en) | Method for manufacturing blood serum of cattle free of specific antibodies |