UA58719A - Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle - Google Patents
Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle Download PDFInfo
- Publication number
- UA58719A UA58719A UA2002086989A UA200286989A UA58719A UA 58719 A UA58719 A UA 58719A UA 2002086989 A UA2002086989 A UA 2002086989A UA 200286989 A UA200286989 A UA 200286989A UA 58719 A UA58719 A UA 58719A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- serum
- blood
- aglobulin
- cattle
- centrifugation
- Prior art date
Links
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 6
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 238000005352 clarification Methods 0.000 claims description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 abstract description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 abstract 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 abstract 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 abstract 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010015719 Exsanguination Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 101001125496 Homo sapiens Pre-mRNA-processing factor 19 Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100029522 Pre-mRNA-processing factor 19 Human genes 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід, що передбачається відноситься до вірусології, та стосується отримання клітинних культур, які 2 використовують в ветеринарії та медицині.The invention, which is supposed to be related to virology, concerns the production of cell cultures that are used in veterinary medicine and medicine.
Аглобулінова сироватка крові великої рогатої худоби (ВРХ) компонентом живильних середовищ для культивування первинно трипсінизованих та перещеплюваних ліній клітин.Agglobulin bovine blood serum (BHC) as a component of nutrient media for the cultivation of primary trypsinized and transplanted cell lines.
Культури клітин використовуються з вірусологічною метою в лабораторіях та біотехнологічних підприємствах, наукових установах. 70 Клітини поза організму розмножуються та ростуть завдяки комплексу фізико-хімічних факторів та присутності амінокислот та сироваткових білків.Cell cultures are used for virological purposes in laboratories and biotechnological enterprises, scientific institutions. 70 Cells outside the body reproduce and grow thanks to a complex of physicochemical factors and the presence of amino acids and serum proteins.
Сироватка містить у своєму складі різні фракції імуноглобулінів. До різних інфекційних збудників гама-глобуліни є специфічними. Сироватку, з якої вилучені у-глобуліни використовують для вірусологічної мети без перевірки на наявність специфічних до вірусів глобулінів. 12 Існує спосіб одержання аглобулінової сироватки крові, який запропонований Л.І. Ігудіним (Вопр. виросологии. - 1980. - Моб. - С.640.), для відокремлення "-глобулінової фракції сироватку крові ВРХ обробляють поліетиленгліколем (ПЕГ), після чого її центрифуговують для отримання надосадової рідини. Після обробкиThe serum contains different fractions of immunoglobulins. Gamma globulins are specific for various infectious agents. Serum from which γ-globulins have been extracted is used for virological purposes without checking for the presence of virus-specific globulins. 12 There is a method of obtaining aglobulin blood serum, which was proposed by L.I. Igudin (Vopr. virosologii. - 1980. - Mob. - P.640.), to separate the "-globulin fraction" of bovine blood serum, it is treated with polyethylene glycol (PEG), after which it is centrifuged to obtain the supernatant. After treatment
ПЕГОом вміст білку в сироватці крові зменшився в 2 рази. Цей спосіб придатний для одержання сироватки крові тільки в лабораторних умовах, що є недоліком.With PEGO, the protein content in blood serum decreased by 2 times. This method is suitable for obtaining blood serum only in laboratory conditions, which is a disadvantage.
Існує інструкція на ,Сироватку ВРХ нативну без консервантів, вільну від специфічних антитіл", що затверджена 21.03.2002 р., Київ, ДНКІБШМ.. це технічне рішення може бути прототипом. Тому для покращення якості сироватки додають енробіофлокс чи енроксил, а недоліком прототипу є неможливість використання сироватки в промисловому виробництві.There is an instruction for "Native bovine serum without preservatives, free of specific antibodies", which was approved on March 21, 2002, Kyiv, DNAIBSHM.. this technical solution can be a prototype. Therefore, to improve the quality of the serum, enrobioflox or enroxil is added, and the disadvantage of the prototype is impossibility of using serum in industrial production.
В основу винаходу, що передбачається, поставлено задачу розробити спосіб одержання аглобулінової сироватки крові великої рогатої худоби шляхом відбирання крові у клінічно здорової ВРХ, отримання « надосадової рідини центрифугуванням, після освітлення центрифугуванням до сироватки додають енробіофлокс чи енроксіл 1:20000 діючої речовини, а фільтрацію проводять крізь апарати розподільчі з щільністю волокон 100 КДТ, щоб забезпечити відділення " -глобулінової фракції, одержання аглобулінової сироватки крові ВРХ - компонента живильних середовищ для культивування первинно трипсинізованих та о перещеплюваних ліній клітин. «-The basis of the proposed invention is the task of developing a method of obtaining aglobulin blood serum of cattle by collecting blood from clinically healthy cattle, obtaining the supernatant by centrifugation, after clarification by centrifugation, enrobioflox or enroxil 1:20000 of the active substance is added to the serum, and filtration is carried out through the distribution devices with a fiber density of 100 KDT to ensure the separation of the "-globulin fraction, obtaining the aglobulin blood serum of cattle - a component of nutrient media for the cultivation of primary trypsinized and transplanted cell lines. "-
Аналіз відомих технічних рішень в галузі ветеринарної вірусології дозволяє зробити висновок про відсутність ознак, що схожі з суттєвими відмінними ознаками способу, що заявляється, та признати це рішення, - відповідним критерію ,суттєві ознаки". сThe analysis of known technical solutions in the field of veterinary virology allows us to conclude that there are no features that are similar to the essential distinguishing features of the claimed method, and to recognize this solution as meeting the criterion, essential features." p.
Спосіб виконується таким чином.The method is performed as follows.
Зо У тварин відбирають кров, методом тотального знекровлення чи перманентною експлуатацією при відбиранні о крові по бл кожні 12-14 днів.Zo Blood is taken from the animals, by the method of total exsanguination or permanent exploitation during blood sampling every 12-14 days.
Кров, що відбирали, розміщують в ємності, витримують 1 годину при температурі 377"С20,57С, відділяють згусток від стінок ємності та розміщують його у холодильнику при 2-87С на 4-6 години. «The collected blood is placed in a container, kept for 1 hour at a temperature of 377°С20.57С, the clot is separated from the walls of the container and placed in a refrigerator at 2-87С for 4-6 hours.
Сироватку віддаляють від згустку, визволяють від формених елементів центрифугуванням при 5200-300 та З додають енробіофлокс чи енроксил 1:20000 діючої речовини. с Завчасно готують замкнуту систему роздільної фільтрації що містить скляну ємність, насосThe serum is removed from the clot, freed from the formed elements by centrifugation at 5200-300 and enrobioflox or enroxyl 1:20000 of the active substance is added. c A closed system of separate filtration containing a glass container and a pump is prepared in advance
Із» перистальтичний, апарат роздільний з волокнами УПВ та з перепускною здібністю 1О0ОКДТ, ємність для приймання аглобулінової сироватки."Iz" is peristaltic, the apparatus is separated with UPV fibers and with a throughput capacity of 1О0OKDT, a capacity for receiving aglobulin serum.
Ці дві ємності стерилізують автоклавуванням (1,5атм, 45хв.), а апарат роздільний сумішшю 7095 мурашиної кислоти та 5095 пергидролю 24 години після його наповнення. Апарат промивають 20-ю об'ємами деїіонізованої і-й води.These two containers are sterilized by autoclaving (1.5 atm, 45 min.), and the apparatus is separated with a mixture of 7095 formic acid and 5095 perhydrol 24 hours after its filling. The apparatus is washed with 20 volumes of deionized water.
Ге | Для одержання аглобулінової сироватки першу ємність заповнюють на 17» об'єму сироваткою крові та за -1 допомогою перистальтичного насосу методом циркуляційного подавання під тиском 0,25-0,Затм відфільтровують крізь апарат роздільний розчин аглобулінових фракцій (аглобулінову сироватку) до - 70 концентрації рідини в першій ємності до початкового об'єму х10. с Аглобулінову сироватку використовують як домішку до живильного середовища.Ge | To obtain aglobulin serum, the first container is filled to a volume of 17" with blood serum and -1 with the help of a peristaltic pump by the method of circulation feeding under a pressure of 0.25-0. Then the separated solution of aglobulin fractions (aglobulin serum) is filtered through the apparatus to -70 liquid concentration in the first container to the initial volume x10. c Agglobulin serum is used as an admixture to the nutrient medium.
Приклад 1.Example 1.
Аглобулінову сироватку розфасовували в стерильні скляні ємності об'ємом 0,25-0,45 літрів. Розфасовану сироватку піддавали провокуванню на наявність контамінації бактеріальною та грибковою флорою при 59 температурі плюс 35-37"С протягом 5-6 діб. Далі аглобулінову сироватку великої рогатої худоби в. використовували з вірусологічною метою.Agglobulin serum was packaged in sterile glass containers with a volume of 0.25-0.45 liters. The packaged serum was subjected to provocation for the presence of contamination by bacterial and fungal flora at a temperature of 59 degrees plus 35-37"C for 5-6 days. Then, aglobulin bovine serum was used for virological purposes.
Приклад 2.Example 2.
При вивченні ростових властивостей різних серій аглобулінової сироватки в порівнянні з нативною сироваткою великої рогатої худоби суттєвої різниці не було. При культивуванні первинно трипсинізованої бо (фібробласти курячих ембріонів) та перещеплюваних ліній культур клітин (СНЕВ, НТ, ТртТ) строки формування моношару в експерименті та в контролі співпадали, а також культури не відрізнялись морфологією клітин.When studying the growth properties of different series of aglobulin serum in comparison with native bovine serum, there was no significant difference. During the cultivation of primary trypsinized bo (chicken embryo fibroblasts) and transplantable lines of cell cultures (SNEV, NT, TrtT), the times of monolayer formation in the experiment and in the control coincided, and the cultures did not differ in cell morphology.
Спосіб очистки нативної сироватки великої рогатої худоби експериментально обгрунтований на первинно трипсинізованих та перещеплюваних культурах клітин.The method of purification of native bovine serum is experimentally based on primary trypsinized and transplanted cell cultures.
Запропонований спосіб одержання аглобулінової сироватки крові великої рогатої худоби є ефективним та бо придатний для використання у промисловому виробництві.The proposed method of obtaining aglobulin blood serum of cattle is effective and suitable for use in industrial production.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002086989A UA58719A (en) | 2002-08-27 | 2002-08-27 | Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002086989A UA58719A (en) | 2002-08-27 | 2002-08-27 | Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA58719A true UA58719A (en) | 2003-08-15 |
Family
ID=74219625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002086989A UA58719A (en) | 2002-08-27 | 2002-08-27 | Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA58719A (en) |
-
2002
- 2002-08-27 UA UA2002086989A patent/UA58719A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2522890T3 (en) | Method to collect placental stem cells | |
| KR102015933B1 (en) | Systems and methods of virus propagation in cell culture for vaccine manufacture | |
| KR102282939B1 (en) | High-density cell banking methods | |
| EP2566951B1 (en) | Method of reseeding adherent cells grown in a hollow fiber bioreactor system | |
| CN107475190B (en) | Method for clinical-level efficient preparation and cryopreservation of fat SVF cells and application thereof | |
| KR101307672B1 (en) | Method for controlling propagation of umbilical cord blood hematopoietic stem cells and use thereof | |
| US20100034783A1 (en) | Medical kit and using method thereof | |
| CN104004708A (en) | Method for separation and purification, long-term passage cultivation, cryopreservation and recovery of sheep spermatogonia stem cells | |
| CN115777690A (en) | Method for cryopreservation of umbilical cord blood and peripheral blood, and solution for cryopreservation | |
| BR112018068820B1 (en) | METHOD FOR ISOLATING STEM CELLS FROM ADIPOSE TISSUE AND DEVICE FOR PERFORMING SAID METHOD | |
| CN114765957A (en) | Method and equipment for obtaining amniotic mesenchymal stem cells from amniotic fluid and cells derived from amniotic mesenchymal stem cells | |
| CN113046317A (en) | Method for extracting platelet-rich plasma based on preparation of umbilical cord blood hematopoietic stem cells | |
| KR101091052B1 (en) | Device for centrifugal separation and method using the same | |
| CN104630135B (en) | Method for preparing hepatic stem cells on large scale and application thereof | |
| UA58719A (en) | Method for preparing aglobulin serum from blood of the cattle | |
| CN114736855B (en) | High-purity extraction method of stem cell exosomes | |
| AU2012229889A1 (en) | Cell processing method and device | |
| JP2019103401A (en) | Methods for detecting mycoplasma | |
| ES2525273T3 (en) | High security process for the preparation of purified stem cell fractions | |
| RU2460786C1 (en) | Method for preparing blood serum of grown cattle for animal and human cell culture | |
| CN106566802A (en) | Preparation method for preparing culture kit of umbilical cord blood mesenchemal stem cells | |
| RU2039816C1 (en) | Preparation for detaching contact-dependent cells from substrate | |
| CN100410368C (en) | Pretreating method for chromosome nuclear type analysis lymphocyte culture specimen | |
| RU2590688C2 (en) | Method of producing suspension of nuclear cells of umbilical blood with standard concentration | |
| CN114558005B (en) | Medical application of largehead atractylodes rhizome lactam Taenialactam A and B |