UA28644U - Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin - Google Patents
Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin Download PDFInfo
- Publication number
- UA28644U UA28644U UAA200706295U UAU200706295U UA28644U UA 28644 U UA28644 U UA 28644U UA A200706295 U UAA200706295 U UA A200706295U UA U200706295 U UAU200706295 U UA U200706295U UA 28644 U UA28644 U UA 28644U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- collagen
- state
- skin
- solution
- assessment
- Prior art date
Links
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 52
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 52
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 13
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 11
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 10
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 8
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 3
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 2
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 201000010251 cutis laxa Diseases 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 2
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 2
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 2
- AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-aminophenyl)-(4-imino-3-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]aniline;hydron;chloride Chemical compound Cl.C1=CC(=N)C(C)=CC1=C(C=1C=CC(N)=CC=1)C1=CC=C(N)C=C1 AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010051392 Diapedesis Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039796 Seborrhoeic keratosis Diseases 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 238000000280 densification Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 125000002587 enol group Chemical group 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 description 1
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 1
- 230000036732 histological change Effects 0.000 description 1
- 238000012735 histological processing Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 210000001724 microfibril Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000001732 sebaceous gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 208000009056 telangiectasis Diseases 0.000 description 1
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring And Recording Apparatus For Diagnosis (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель відноситься до галузі медицини, а саме до дерматології, Ї може бути використана для 2 визначення якісного стану колагенового волокна.A useful model refers to the field of medicine, namely to dermatology, It can be used to determine the qualitative state of the collagen fiber.
Відомий спосіб визначення якісного стану колагену у мокро-солоній сировині (1), згідно з яким досліджують стан нативного колагенового волокна, виділеного зі шкіри великої рогатої худоби.There is a well-known method for determining the quality of collagen in wet-salted raw materials (1), according to which the condition of native collagen fibers isolated from the skin of cattle is investigated.
Вивчення скорочення колагенових волокон під дією 0,13 М НСІ проводиться у біоптатах фіксованих в 1095 розчині Масі. Вирізають лоскути шкіри, виділяють колагенові волокна і наносять на предметні скельця. 70 Вимірюють за допомогую об'єкт-мікрометра довжину колагенових волокон, які знаходяться у полі зору мікроскопа. На препарат наносять 0,13 М розчин НСІ, покривають його покривним скельцем і інкубують 2хв при кімнатній температурі. Наступним етапом є визначення середнього відсотка скорочення колагенового волокна.The study of the reduction of collagen fibers under the influence of 0.13 M NSI is carried out in biopsies fixed in 1095 mass solution. Flaps of skin are cut out, collagen fibers are isolated and applied to slides. 70 Measure the length of collagen fibers that are in the field of view of the microscope with the help of an object micrometer. A 0.13 M solution of NSI is applied to the drug, covered with a coverslip and incubated for 2 min at room temperature. The next step is to determine the average percentage of collagen fiber reduction.
За відсотком скорочення волокна визначається якість сировини, що використовується для виготовлення галантерейної і технічної шкіри. 12 При використанні відомого способу в дерматологічній практиці були виявлені нові його властивості, а саме можливість визначення якісного стану колагену.The percentage of fiber reduction determines the quality of raw materials used for the production of haberdashery and technical leather. 12 When using the known method in dermatological practice, its new properties were discovered, namely the possibility of determining the qualitative state of collagen.
Обстежено шкіру 20 осіб обох статей. Згідно з віковою періодизацією практично здорові особи були розподілені на чотири групи, по 5 осіб у кожній. Перші З групи (І, ІІ, ПП) - практично здорові особи, які не мали ознак старечої в'ялості шкіри лиця. | група - обстежені зрілого віку (22 - З5 років; | період); ІІ група 20. особи зрілого віку (36-55 років; І період); Ш група - люди похилого віку (61 - 74 роки) з віковими змінами шкіри лиця. До ІМ групи ввійшли особи зрілого віку (36 - 55 років; Ії період), які мали ознаки старечої в'ялості шкіри лиця у вигляді зморшок, зниження еластичних властивостей шкіри, телеангіектазій, ангіом, посиленої пігментації, сенільних кератом.The skin of 20 people of both sexes was examined. According to age periodization, practically healthy individuals were divided into four groups, 5 people in each. The first C group (I, II, PP) are practically healthy individuals who did not have signs of senile facial skin laxity. | group - examinees of mature age (22-35 years; | period); II group 20. persons of mature age (36-55 years; period I); Ш group - elderly people (61 - 74 years old) with age-related changes in the skin of the face. The MI group included persons of mature age (36 - 55 years; period I), who had signs of senile laxity of the skin of the face in the form of wrinkles, a decrease in the elastic properties of the skin, telangiectasias, angiomas, increased pigmentation, senile keratoma.
Для підготовки даного винаходу було досліджено операційні залишки шкіри, які отримували з 25 привушно-жувальної і пупкової областей. Вибір місця біопсії зумовлений, з одного боку, відсутнісю (чи -о наявністю) дії зовнішніх чинників, а з іншого - використанням стандартного операційного доступу при оперативних втручаннях. Міркування про характер морфофункціональних змін проводили за умов суворої стандартизації. Клінічна організація дослідження і підбір матеріалу включали експертну оцінку історії хвороби спеціалістами різного профілю. Біопсію шкіри проводили за допомогою одноразових біоптаторів фірми Мінех З 30 |пвігитепі Со (США), шляхом висікання лоскутів розміром 4хЗмм разом з верхньою частиною підшкірної основи. «ЇїFor the preparation of this invention, surgical remnants of skin obtained from 25 parotid-chewing and umbilical regions were studied. The choice of the biopsy site is determined, on the one hand, by the absence (or presence) of external factors, and on the other hand, by the use of standard operative access during surgical interventions. Reasoning about the nature of morphofunctional changes was carried out under conditions of strict standardization. The clinical organization of the study and the selection of material included an expert evaluation of the medical history by specialists of various profiles. A skin biopsy was performed using disposable bioptators of the company Minekh Z 30 | pwigitepi So (USA), by cutting out flaps of 4xZmm size together with the upper part of the subcutaneous base. "Her
Досліджували біаптовану шкіру за вищевказаним способом.Biapted skin was studied according to the above method.
Отримані біоптати шкіри для досліджень на світлооптичному рівні фіксували в 1095-му розчині нейтрального о формальдегіду і піддавали рутинній гістологічній обробці. Гістологічні зрізи фарбувалися гематоксиліном і с еозином, за ван Гізоном, метиленовим синім, альдегідфуксином за Гоморі. 3о Екстракція колагену | типа виконувалася за методом, запропонованим 5. Зігот і співавт. |2| зі шкіри сч людини. Нативну шкіру відсепаровували від підшкірної клітковини і відмивали дистильованою водою до чистих промивних вод. Матеріал вносили у 0,1 М розчин оцтової кислоти (ЗООмл на 1г матеріалу) і залишали при постійному перемішуванні на 48 годин при температурі 492С. Розчин фільтрували через скляний фільтр і « розводили у 20 разів бідистильованою водою. Залишки оцтової кислоти видаляли за допомогою роторного З7З випарювача протягом 48 годин. Висушування проводили у чашках Петрі при температурі 372С до постійної маси. с Зв'язування кислот і лугів колагеновою біоматрицею визначали шляхом її обробки різними об'ємами 0,13 М :з» розчинами НСІ та МабнН з наступним вимірюванням рн.The obtained skin biopsies for research at the light-optical level were fixed in a 1095 solution of neutral formaldehyde and subjected to routine histological processing. Histological sections were stained with hematoxylin and eosin, according to van Gieson, methylene blue, aldehyde fuchsin according to Gomori. 3o Collagen extraction | type was performed according to the method proposed by 5. Zygot et al. |2| from human skin. The native skin was separated from the subcutaneous tissue and washed with distilled water to clean washing water. The material was added to a 0.1 M solution of acetic acid (ZOO ml per 1 g of material) and left with constant stirring for 48 hours at a temperature of 492C. The solution was filtered through a glass filter and diluted 20 times with bidistilled water. Residues of acetic acid were removed using a rotary Z7Z evaporator for 48 hours. Drying was carried out in Petri dishes at a temperature of 372C to a constant mass. c The binding of acids and alkalis by the collagen biomatrix was determined by treating it with various volumes of 0.13 M:z» solutions of NCI and MabN followed by pH measurement.
Вивчення скорочення колагенових волокон під дією 0,13 М НСІ проводилося на нативних біоптатах і фіксованих у 1095 розчині Масі протягом 24 годин. За допомогою кріомікротому вирізали лоскути, виділяли юю 75 колагенові волокна, наносили на предметні скельця, вимірювали за допомогую об'єкт-мікрометра довжину колагенових волокон, які знаходяться у полі зору мікроскопа. На препарат наносили 0,13 М розчин НОЇ, (ее) покривали його покривним скельцем і інкубували 2хв при кімнатній температурі. Наступним етапом дослідження б» було визначення середнього відсотка скорочення волокна.The study of the reduction of collagen fibers under the influence of 0.13 M NSI was carried out on native biopsies and fixed in 1095 Massey solution for 24 hours. With the help of a cryomicrotome, flaps were cut, 75 collagen fibers were isolated, applied to glass slides, and the length of collagen fibers in the field of view of the microscope was measured with the help of an objective micrometer. A 0.13 M solution of NOI was applied to the preparation, (ee) it was covered with a cover glass and incubated for 2 min at room temperature. The next stage of the study was to determine the average percentage of fiber reduction.
Гістологічні зміни, які виявлялися на парних зрізах фіксованих у 1090-му розчині нейтрального ї 50 формальдегіду і 1095 розчині Масі були ідентичними. В осіб І групи роговий шар складається з 4-5 рядів роговихThe histological changes that were detected on paired sections fixed in 1090 solution of neutral and 50 formaldehyde and 1095 solution of Massey were identical. In individuals of the I group, the stratum corneum consists of 4-5 rows of stratum corneum
ГТ» лусочок, цитоплазма яких повністю заповнена кератином. Кератиноцити щільно з'єднані між собою і не мають виразних міжклітинних просторів. Ядра в клітинах рогового шару не ідентифікуються. Між кератиноцитами остистого та зернистого шарів виявляються міжклітинні простори. Базальні епідермоцити циліндричної форми, мають дещо видовжене ядро. Артеріоли та посткапілярні венули спостерігаються поза межами дермальних сосочків. У дермі виявляється значна кількість фібробластів. У сосочковому шарі дерми колагенові волокна с тонковолокнисті, мають щільне розташування. В межі з сітчастим шаром виявляється їх розрихлення та помірне збільшення. У сосочковому шарі, особливо у нижній частині, колагенові волокна широкі та щільні. Еластичні волокна помірно виражені, структуровані, звивисті, розташовані між колагеновими фібрилами. Виялений міцний зв'язок між епітеліальними і сполучнотканинними утвореннями. Особливості морфології шкіри обличчя не мали 60 статевих відмінностей, що збігається з літературними даними |1-2статьи єлектронки)|.GT" scales, the cytoplasm of which is completely filled with keratin. Keratinocytes are tightly interconnected and do not have distinct intercellular spaces. Nuclei in stratum corneum cells are not identified. Intercellular spaces are found between the keratinocytes of the spinous and granular layers. Basal epidermocytes are cylindrical in shape and have a slightly elongated nucleus. Arterioles and postcapillary venules are observed outside the dermal papillae. A significant number of fibroblasts is found in the dermis. In the papillary layer of the dermis, collagen fibers are thin and densely arranged. Their loosening and moderate increase is found in the border with the mesh layer. In the papillary layer, especially in the lower part, collagen fibers are wide and dense. Elastic fibers are moderately expressed, structured, tortuous, located between collagen fibrils. A strong connection between epithelial and connective tissue formations is withered. Features of the morphology of the skin of the face did not have 60 gender differences, which coincides with the literature data |1-2 of the electronic article)|.
У обстежених осіб І - ІМ дослідних груп епідерміс витончений. Загальне витончення епідермісу супроводжується потовщенням рогового шару, зменшенням товщини остистого. Проміжки між роговими лусочками дещо розширені. Ці зміни більш виражені у осіб ПІ групи. В епідермоцитах шилоподібного та зернистого шарів виявляється порушення процесів кератинізації. Міжклітинні проміжки в базальному та бо шиповатому шарі розширені. Кератинові гранули виявлялися у вигляді глибок, нерівномірно розподілених у цитоплазмі. В клітинах базального шару епідермісу ядра набувають неправильних контурів. Просвіти капілярів сосочкового шару дерми звужені. У дермі зменшується кількість клітин фібробластичного ряду. В сітчатому шарі дерми сітка колагенових пучків розрихлюється. Колагенові волокна дерми розташовувані рихло порівняно з такими у контрольній групі. Колагенові волокна розділені локусами аморфної речовини, фрагментовані та слабо контуровані. В осіб І групи спостерігалася значна кількість незрілих колагенових волокон, які зливалися у глибки аморфної речовини. В еластичних волокнах дерми виявляються ділянки потовщення та дезорганізації фібрил, локусів лізису, гомогенізації та фрагментації, що свідчить про дистрофічні зміни. Деякі ділянки еластичних волокон перетворюються в безструктурні гомогенізовані маси. У сітчастому шарі дерми, особливо на /о межі з підшкірною основою, виявляється виражена дилатація венул. Має місце діапедез еритроцитів, а інколи мікрокрововиливи. Кількість волосяних фолікулів і сальних залоз зменшена. Виявлені зміни були більш вираженими у привушно-жувальної області. У зразках фіксованих 1095 розчином Масі виявляється помірне ущільнення структури колагенових волокон, зменшення ядерно-цитоплазматичного індекса Гертвіга у базальних епідермоцитах, зменшення товщини дерми. Тобто вікові зміни сполучної тканини шкіри у всіх групах ідентичні та /5 характеризуються ознаками фіброзу. У дермі виявлено збільшення кількості колагенових волокон з ознаками їх дегенеративних змін. Фіксація 1095 розчином Масі призводить до зневоднення об'єкта, що сприяє, на нашу думку, зменшенню кількості водневих зв'язків поліпептидів "бахроми" і утворенню пептидних зв'язків між її фібрилами.The epidermis is thin in the examined persons of the I - IM research groups. The general thinning of the epidermis is accompanied by a thickening of the stratum corneum, a decrease in the thickness of the spinous layer. The spaces between the horny scales are slightly widened. These changes are more pronounced in individuals of the PI group. A violation of keratinization processes is found in the epidermocytes of the styloid and granular layers. The intercellular spaces in the basal and spinous layers are widened. Keratin granules were found in the form of deep, unevenly distributed in the cytoplasm. In the cells of the basal layer of the epidermis, the nuclei acquire irregular contours. The lumens of the capillaries of the papillary layer of the dermis are narrowed. In the dermis, the number of fibroblast cells decreases. In the reticular layer of the dermis, the network of collagen bundles loosens. The collagen fibers of the dermis are loosely arranged compared to those in the control group. Collagen fibers are separated by loci of amorphous substance, fragmented and weakly contoured. A significant number of immature collagen fibers, which merged into the depths of the amorphous substance, were observed in the individuals of the 1st group. In the elastic fibers of the dermis, there are areas of thickening and disorganization of fibrils, lysis loci, homogenization and fragmentation, which indicates dystrophic changes. Some areas of elastic fibers turn into structureless homogenized masses. In the reticular layer of the dermis, especially on the /o border with the subcutaneous base, pronounced dilatation of venules is revealed. There is diapedesis of erythrocytes, and sometimes microhemorrhages. The number of hair follicles and sebaceous glands is reduced. The detected changes were more pronounced in the parotid-chewing region. In samples fixed with 1095 Massey's solution, a moderate compaction of the structure of collagen fibers, a decrease in Hertwig's nuclear-cytoplasmic index in basal epidermocytes, and a decrease in the thickness of the dermis are found. That is, age-related changes in the connective tissue of the skin in all groups are identical and /5 are characterized by signs of fibrosis. An increase in the number of collagen fibers with signs of their degenerative changes was found in the dermis. Fixation of 1095 with Masi's solution leads to dehydration of the object, which contributes, in our opinion, to the reduction of the number of hydrogen bonds of the "fringe" polypeptides and the formation of peptide bonds between its fibrils.
Для визначення механізму дії лугів на колагенове волокно проводили обробку нативного колагену 0,1 М 2о розчином МаОН. Крива зв'язування 0,1 М розчину МасН колагеновою біоматрицею представлена на Фіг.1.To determine the mechanism of action of alkalis on collagen fibers, native collagen was treated with a 0.1 M 20 solution of MaOH. The binding curve of a 0.1 M solution of MasN with a collagen biomatrix is presented in Fig.1.
Встановлено, що крива між рН 4,5 і 10,1 показує спочатку повільне, а потім більш швидке зв'язування лугу (викликається кислотними групами колагену). У межах рН від 10,1 до 12,9 лежить ділянка нового зв'язування лугу, обумовлена, на нашу думку, утворенням єнольної форми зв'язку в поліпептиді. Тобто зв'язування іде не лише за кінцевими ділянками поліпептидів "бахроми", але й за пептидними групами молекулярного скелету об Колагенового волокна, що не дає можливості дослідити фізико-хімічні процеси, які відбуваються на його - поверхні.It was established that the curve between pH 4.5 and 10.1 shows first slow and then faster alkali binding (caused by acid groups of collagen). In the range of pH from 10.1 to 12.9, there is a region of new alkali binding, due, in our opinion, to the formation of the enol form of the bond in the polypeptide. That is, the binding goes not only to the end sections of the "fringe" polypeptides, but also to the peptide groups of the molecular skeleton of the collagen fiber, which does not allow to investigate the physicochemical processes that take place on its surface.
Крива зв'язування 0,1 М розчину НСІ колагеновою біоматрицею представлена на Фіг.2, При вивченні дії соляної кислоти на колаген встановлено, що у межах рН від 2,5 до 4,5 існує залежність між зв'язуванням кислоти і зниженням величини рН виражається практично прямою лінією. «Е зо При збільшенні об'єму соляної кислоти її поглинання зростає до певного максимуму, після чого практично не змінюється. Тобто збільшення водневої оболонки при набуханні у розчині соляної кислоти пояснює зміну форми - волокна з повздовжньої у кулеподібну, що виявляється скороченням лінійних розмірів волокна. ГеThe binding curve of a 0.1 M solution of NCI with a collagen biomatrix is presented in Fig. 2. When studying the effect of hydrochloric acid on collagen, it was established that in the range of pH from 2.5 to 4.5 there is a dependence between the binding of acid and a decrease in the value of pH is expressed by an almost straight line. When increasing the volume of hydrochloric acid, its absorption increases to a certain maximum, after which it practically does not change. That is, the increase in the hydrogen shell during swelling in a solution of hydrochloric acid explains the change in shape - the fiber from longitudinal to spherical, which is manifested by a reduction in the linear dimensions of the fiber. Ge
Набухання колагену в соляній кислоті представлено на фігурі 3. При вивчені кривої набухання колагену в розчині соляної кислоти (0,2г колагену на 20см З розчину кислоти) виявлена залежність від її концентрації. соThe swelling of collagen in hydrochloric acid is presented in figure 3. When studying the curve of swelling of collagen in a solution of hydrochloric acid (0.2 g of collagen per 20 cm of the acid solution), a dependence on its concentration was found. co
Соляна кислота при низькій концентрації (0,02 М) показує максимум набухання, за яким при збільшенні с концентрації кислоти йде різке падіння кривої набухання. Як видно з наведеного графіка (Фіг.3), максимум набухання співпадає з максимумом поглинання кислоти. Це означає, що при підвищенні концентрації кислоти набухання і поглинання кислоти збільшується до певного рівня. При подальшому зростанні концентрації кислоти « набухання знову зменшується.Hydrochloric acid at a low concentration (0.02 M) shows a swelling maximum, followed by a sharp drop in the swelling curve as the acid concentration increases. As can be seen from the given graph (Fig. 3), the swelling maximum coincides with the acid absorption maximum. This means that when the concentration of acid increases, the swelling and absorption of acid increases to a certain level. With a further increase in the acid concentration, the swelling decreases again.
Експериментально було встановлено, що 0,13 М розчин НСІ є найбільш прийнятним, оскільки при збільшенні с концентрації соляної кислоти виникає швидка гомогенізація колагенових волокон з утворенням безструктурної й маси, що не дозволяє визначити їх контури. "» Середній відсоток вкорочення колагенових волокон у препаратах контролю, фіксованих 1095 розчином Масі під дією соляної кислоти у контролі коливався від 25 до 4095 і не мав істотних відмінностей в різних анатомічних зонах. У парних нативних препаратах цієї групи відсоток сили контракції мав ко менші значення і становив 15 - 3095. Відмінності у контракції можна пояснити тим, що консервація сіллю призводить до часткового гідролізу поліпептидів бахроми і зменшення їх резистентності, тобто сольова фіксація бо призводить до часткової втрати водневих зв'язків, які є стабілізаторами колагенового волокна. При збільшенніIt was experimentally established that a 0.13 M solution of NCI is the most acceptable, because when the concentration of hydrochloric acid increases, rapid homogenization of collagen fibers occurs with the formation of a structureless mass that does not allow determining their contours. "» The average percentage of shortening of collagen fibers in control preparations fixed with 1095 Massey solution under the influence of hydrochloric acid in the control ranged from 25 to 4095 and had no significant differences in different anatomical zones. In paired native preparations of this group, the percentage of contraction force had lower values and was 15 - 3095. The differences in contraction can be explained by the fact that preservation with salt leads to partial hydrolysis of fringe polypeptides and a decrease in their resistance, that is, salt fixation leads to a partial loss of hydrogen bonds, which are collagen fiber stabilizers.
Ге») експозиції засолювання контракція волокон збільшується.Ge") exposure to salinity, the contraction of fibers increases.
У шкірі осіб дослідних груп, яка піддавалася засолюванню, відсоток вкорочення не мав статевих ве відмінностей і коливався від 40 до 6095 у пупкової області та 44 - 7095 у привушно-жувальній. На нашу думку,In the skin of the subjects of the experimental groups, which was subjected to salinization, the percentage of shortening had no gender differences and ranged from 40 to 6095 in the umbilical region and 44 to 7095 in the parotid-chewing region. In our opinion,
Чл» при дії кислоти виникають явища інертної дегідратації, що призводить до руйнуваня водневих зв'язків між колагеновими фібрилами і розщеплення поліпептидного ланцюга на мікрофібрили з одночасним спіралеподібним зкручуванням. Таким чином, колагенові волокна осіб похилого віку мають меншу сталість до діїChl" under the action of acid, phenomena of inert dehydration occur, which leads to the destruction of hydrogen bonds between collagen fibrils and the splitting of the polypeptide chain into microfibrils with simultaneous spiral twisting. Thus, the collagen fibers of the elderly have a lower resistance to action
КиИслот, Що виявляється більшим відсоток скорочення. Отримані дані дозволили встановити залежність між показниками гістоструктури колагенового волокна і цифрових показників контракції. с Процес контракції колагенового волокна у кислотному середовищі слід пояснювати, виходячи з положення, що колаген є кислоторозчинним гідрофільним поліелектролітом. У звичайному стані, зокрема у водному розчині, існує максимально невимушена рівновага у розгалуженні полімерних ланцюгів. Має місце максимальне бо віддалення бокових відгалужень, а також сусідніх макроланцюгів. Є необхідним також врахування факту існування "бахроми", яка теж є стабілізатором макроструктури колагенових ланцюгів, глобул, спіралей та інших агрегацій. Доречно зауважити, що бокові відгалуження, які формують "бахрому", мають збільшену реакційну здатність у порівнянні з основними макроланцюговими спіралеподібними утвореннями.KiIslot, which turns out to be a greater percentage of reduction. The obtained data made it possible to establish a relationship between the histostructure of the collagen fiber and digital indicators of contraction. c The process of collagen fiber contraction in an acidic environment should be explained based on the premise that collagen is an acid-soluble hydrophilic polyelectrolyte. In the normal state, in particular in an aqueous solution, there is a maximally relaxed equilibrium in the branching of polymer chains. There is maximum distance of side branches, as well as neighboring macrochains. It is also necessary to take into account the fact of the existence of a "fringe", which is also a stabilizer of the macrostructure of collagen chains, globules, spirals and other aggregations. It is appropriate to note that the side branches that form the "fringe" have an increased reactivity compared to the main macrochain spiral formations.
Під впливом НСІ виникає кислотний гідроліз поліпептидних зв'язків і у першу чергу в бахромчастій частині 65 макромолекул. У результаті цього відбувається руйнування бахроми, яка виступає стабілізатором, буфером, між основними макроланцюгами. Макроланцюги, позбавлені своїх стабілізаторів, набувають певної механічної рухливості. Оскільки колагенові волокна є жорсткими каркасними утвореннями, вони мають певне механічне напруження, яке є основним структуруючим чинником фібрилярної системи колагенового каркасу. Відсутність стабілізаційного впливу бахроми призводить до рухомості макроланцюгів, вони набувають можливості наближатися щільніше один до одного, що відбивається у загальній контракції (скороченні) колагенових волокон.Under the influence of NSI, acid hydrolysis of polypeptide bonds occurs, primarily in the fringed part of 65 macromolecules. As a result, the fringe, which acts as a stabilizer and buffer between the main macrochains, is destroyed. Macrochains, deprived of their stabilizers, acquire a certain mechanical mobility. Since collagen fibers are rigid framework formations, they have a certain mechanical tension, which is the main structuring factor of the fibrillar system of the collagen framework. The lack of stabilizing influence of the fringe leads to the mobility of macrochains, they gain the ability to approach each other more tightly, which is reflected in the general contraction (shortening) of collagen fibers.
Слід зауважити, що контракція під впливом НСІ не є безкінечною. Пояснюється це тим, що використана концентрація кислоти обмежує гідролітичну здатність розчину. Концентрація НСІ є достатньою для гідролізу поверхневої бахромчастої структури. При цьому жорсткі основні макроланцюги не підпадають під процес гідролізу достатньо слабкої соляної кислоти. 70 Для колагену, що визначає морфологічну структуру дерми, реакція на соляну кислоту виражається у вираженому ущільненні зразка. Причина ущільнення - розрив поперечних зв'язків, що призводить до контракції структурних елементів волокна.It should be noted that the contraction under the influence of NSI is not infinite. This is explained by the fact that the used acid concentration limits the hydrolytic capacity of the solution. The concentration of NSI is sufficient for the hydrolysis of the surface fringed structure. At the same time, rigid main macrochains are not subjected to the hydrolysis process of sufficiently weak hydrochloric acid. 70 For collagen, which determines the morphological structure of the dermis, the reaction to hydrochloric acid is expressed in a pronounced densification of the sample. The reason for the compaction is the rupture of the transverse bonds, which leads to the contraction of the structural elements of the fiber.
Фізико-хімічні параметри колагену змінюються з віком. Метод кислотного набухання дозволяє виявити вікові зміни у фізико-хімічному стані колагенового волокна шкіри, які практично неможливо визначити у зафарбованих 7/5 Гістологічних препаратах, а також виявити ступень його ураження. Кислотне набухання колагену дає можливість об'єктивізувати функціональні зміни, що є особливо важливим у дослідженні патогенезу старечої в'ялості шкіри і, зокрема, зморшок.Physicochemical parameters of collagen change with age. The method of acid swelling makes it possible to detect age-related changes in the physical and chemical state of collagen fibers of the skin, which are practically impossible to determine in stained 7/5 Histological preparations, as well as to detect the extent of its damage. Acid swelling of collagen makes it possible to objectify functional changes, which is especially important in the study of the pathogenesis of senile skin laxity and, in particular, wrinkles.
Джерела інформації 1. Вольперт Г.Р. Определение качественного состояния коллагена в мокро-соленом сьірье.- Легкая промьшленность.- 1948.- Мо8.- С.14-15. 2. Микроскопическая техника: Руководство/Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова.- М.: Медицина, 1996.- 544с.Sources of information 1. Wolpert G.R. Determination of the qualitative state of collagen in wet-salt gray matter. - Light industry. - 1948. - Mo8. - P.14-15. 2. Microscopic technique: Manual/Under the editorship. D.S. Sarkisova and Yu.L. Perova. - M.: Medicine, 1996. - 544 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA200706295U UA28644U (en) | 2007-06-07 | 2007-06-07 | Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA200706295U UA28644U (en) | 2007-06-07 | 2007-06-07 | Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA28644U true UA28644U (en) | 2007-12-25 |
Family
ID=39229130
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA200706295U UA28644U (en) | 2007-06-07 | 2007-06-07 | Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA28644U (en) |
-
2007
- 2007-06-07 UA UAA200706295U patent/UA28644U/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Blair et al. | Skin structure–function relationships and the wound healing response to intrinsic aging | |
| Chithra et al. | Influence of Aloe vera on the healing of dermal wounds in diabetic rats | |
| Jor et al. | Computational and experimental characterization of skin mechanics: identifying current challenges and future directions | |
| Van Zuijlen et al. | Collagen morphology in human skin and scar tissue: no adaptations in response to mechanical loading at joints | |
| JP2019023218A (en) | Method for acquiring mixture of neutral oligosaccharides extracted from flaxseed | |
| CN113015904B (en) | Method for screening personal care products | |
| EP3673270A1 (en) | Diagnostic method of a skin showing signs of aging | |
| CN114317661B (en) | Method for preparing multiple active collagen | |
| Daithankar et al. | Moisturizing efficiency of silk protein hydrolysate: Silk fibroin | |
| Zong et al. | An ionic liquid-functionalized near-infrared fluorescent hydrogel dressing for promoting wound healing and real-time monitoring hypochlorous acid at the diabetic wound site | |
| JP5653783B2 (en) | Evaluation method of water retention ability in skin epidermis | |
| Lachapelle | Comparative study of 3H‐thymidine labelling of the dermal infiltrate of skin allergic and irritant patch test reactions in man | |
| RU2293324C2 (en) | Method for obtaining biological liquid for morphological investigation | |
| TWI595235B (en) | Method for evaluating rough skin | |
| UA28644U (en) | Use of assessment of qualitative state of collagen for diagnosing functional state of human skin | |
| KR102216910B1 (en) | Minimally invasive kit diagnosing skin wrinkle or skin elasticity including microneedle patch | |
| CN103808940B (en) | The evaluation method of coarse skin | |
| JP2021117164A (en) | Method of evaluating skin inflammatory conditions | |
| JP5535571B2 (en) | Method for evaluating skin turnover and its use | |
| CN116209397A (en) | Minimally invasive skin condition diagnostic kit including microneedle patch | |
| ATE499611T1 (en) | METHOD FOR DIAGNOSIS OF DISEASES DETERMINING APOLIPOPROTEIN C-I | |
| CN110609140A (en) | Detection method for predicting and detecting skin inflammatory diseases by using keratin 1 and application thereof | |
| Mussi et al. | Influence of skin area, age and sex on corneometric determinations | |
| JP7370909B2 (en) | Method for preparing hyaluronic acid, method for detecting hyaluronic acid, and kits thereof | |
| Nicander et al. | Lipid content and electrical impedance |