UA22507U

UA22507U - Method for treatment of organic lesions of central nervous system with use of allogenic embryonic nerve cells

Info

Publication number: UA22507U
Application number: UAU200612309U
Authority: UA
Inventors: Leonid Dmytrovych Pichkur; Vitalii Ivanovych Tsymbaliuk
Original assignee: Univ Oo Bohomolets Nat Medical
Priority date: 2006-11-23
Filing date: 2006-11-23
Publication date: 2007-04-25

Abstract

A method for treatment of organic lesions of the central nervous system with the use of allogenic embryonic nerve cells includes the purveyance of the latters and injection thereof endolumbal introduction to the patient. A patient before treatment isadditionally inspected with the purpose of determination of signs of autoimmunity to nerve albumen. At presence of such signs the allogenic embryonic livers cells are intravenously introduced once. After the repeated immunological inspection, in case of absence of signs of autoimmunity to nerve albumen, allogenic embryonic nerve cells as cellular suspension are transplanted.

Description

Опис винаходуDescription of the invention

Корисна модель, що заявляється, стосується медицини, точніше нейрон-хірургії, і призначена для лікування 2 органічних уражень ЦНС у дорослих та дітей шляхом використання ін'єкцій клітинних суспензій, що містять алогенні ембріональні клітини.The claimed utility model relates to medicine, more specifically neurosurgery, and is intended for the treatment of 2 organic lesions of the CNS in adults and children by using injections of cell suspensions containing allogeneic embryonic cells.

До органічних уражень ЦНС відносять дитячий церебральний параліч (ДЦП), розсіяний склероз (РОС), та інші захворювання. Термін ДЦП поєднує групу синдромів, що виникають як наслідок ушкодження мозку в перинатальному періоді і проявляються нездатністю дитини утримувати нормальну позу та вільно виконувати 70 рухи (1). Рухові розлади (паралічі, парези, порушення координації, примусові рухи) у дітей з ДЦП можуть супроводжуватися змінами психіки, мови, зору, слуху, судомними нападами). РОС - це невиліковне автоїмунне захворювання нервової системи з невідомою етіологією, в ініціюванні якого важливу роль відіграють вірусна інфекція, спадкова схильність, що реалізується полігенною системою, відповідальною за формування імунної відповіді, і особливості типу метаболізму, а також досі невідомі географічні фактори (21. 12 Характерною для органічних уражень ЦНС є наявність у хворих ознак антигенспецифічних реакцій на білкиOrganic lesions of the central nervous system include cerebral palsy (CP), multiple sclerosis (MS), and other diseases. The term cerebral palsy combines a group of syndromes that arise as a result of brain damage in the perinatal period and are manifested by the inability of the child to maintain a normal posture and freely perform 70 movements (1). Movement disorders (paralysis, paresis, impaired coordination, forced movements) in children with cerebral palsy may be accompanied by changes in the psyche, speech, vision, hearing, seizures). ROS is an incurable autoimmune disease of the nervous system with an unknown etiology, in the initiation of which an important role is played by a viral infection, a hereditary predisposition implemented by a polygenic system responsible for the formation of an immune response, and peculiarities of the type of metabolism, as well as still unknown geographical factors (21. 12 Characteristic for organic lesions of the CNS is the presence of signs of antigen-specific reactions to proteins in patients

ЦНС, які можуть впливати на перебіг захворювання.CNS, which can affect the course of the disease.

У численних дослідженнях було висунуто припущення, що в репаративний процес при органічних ураженняхIn numerous studies, it was suggested that the reparative process in organic lesions

ЦНС включається загальний попередник усіх клітин нервової тканини - нейрогенні стовбурові клітини, дефіцит яких є визначальною ознакою, наприклад, РОС. Це й зумовило застосування для лікуванні органічних ураженьThe central nervous system includes the common precursor of all cells of nervous tissue - neurogenic stem cells, the deficiency of which is a defining feature, for example, ROS. This led to its use for the treatment of organic lesions

ЦНС клітин ранніх термінів гестації, бо в ці строки розвитку ембріон містить багато стовбурових клітин.CNS cells of the early stages of gestation, because during these periods of development the embryo contains many stem cells.

На сьогодні одним з підходів до лікування органічних уражень ЦНС є застосування алогенної ембріональної нервової тканини та клітин, отриманих з алогенної нервової тканини ембріону. Цей підхід є ефективним з точки зору застосування ембріональних нервових клітин з високим відновлювальним потенціалом, які можуть продукувати трофічні фактори та самі інтегруватися в ЦНС реципієнта. Вони можуть здійснювати замісний 29 ефект, поповнюючи кількісний склад попередників клітин нервової системи, забезпечуючи тим самим умови для в ремієлінізації аксонів, зменшення моторного дефіциту у хворих на РС, покращення основних рухових комплексів, та створення передумов для посилення локомоторної активності хворих на ДЦП, зменшення інтелектуальних порушень.Today, one of the approaches to the treatment of organic lesions of the CNS is the use of allogeneic embryonic nervous tissue and cells obtained from allogeneic embryonic nervous tissue. This approach is effective in terms of using embryonic nerve cells with high regenerative potential, which can produce trophic factors and integrate themselves into the recipient's CNS. They can have a substitute effect, replenishing the quantitative composition of precursor cells of the nervous system, thereby providing conditions for remyelination of axons, reducing motor deficits in patients with MS, improving basic motor complexes, and creating prerequisites for strengthening the locomotor activity of patients with cerebral palsy, reducing intellectual violations

Одним з обмежень, які стримують використання вищеописаного підходу до лікування хворих з органічними - 30 ураженнями ЦНС, є наявність у частини хворих ознак нейроантигенспецифічних процесів в імунній системі Вони «з виявляються при імунологічному обстеженні периферичної крові перед початком та на етапах лікування. Ознаки антигенспецифічних реакцій на нейробілки виявляються у третини хворих на ДЦП |З та у 7095 хворих на РС |4, о 5). Існує думка, що наявність антигенспецифічних реакцій у неврологічних хворих, наприклад у хворихна РС, не су тільки віддзеркалює ступінь ураження тканини ЦНС, але й корелює з варіантом стану імунної системи 3о конкретного хворого |4|Ї. Більш того, антитіла до білків ЦНС або їх імунологічно активні фрагменти вже сч використовуються як ремієлінізуючі сполуки в лікуванні демієлінізуючих захворювань людини (6). Проте прямих доказів клінічної значущості автоантитіл до ОБМ при РС ще замало |5), остаточно не доведено, що фактори автоіїмунітету (антитіла) не сприяють хронізації патологічного процесу в ЦНС та не погіршують його перебіг. «One of the limitations that prevent the use of the above-described approach to the treatment of patients with organic - 30 lesions of the CNS is the presence in some patients of signs of neuroantigen-specific processes in the immune system. Signs of antigen-specific reactions to neuroproteins are found in a third of patients with cerebral palsy |Z and in 7095 patients with MS |4, o 5). There is an opinion that the presence of antigen-specific reactions in neurological patients, for example, in patients with MS, not only reflects the degree of damage to the central nervous system tissue, but also correlates with the variant of the state of the immune system of a particular patient. Moreover, antibodies to CNS proteins or their immunologically active fragments are already used as remyelinating compounds in the treatment of human demyelinating diseases (6). However, direct evidence of the clinical significance of autoantibodies to OBM in MS is still insufficient |5), it has not been conclusively proven that factors of autoimmunity (antibodies) do not contribute to the chronicity of the pathological process in the CNS and do not worsen its course. "

Тому, на нашу думку, важливо запобігати застосуванню методик клітинної терапії при захворюваннях ЦНС у З 50 хворих з вираженими ознаками автоімунітету до нейробілків. Крім того, не можна залишити без уваги є той факт, с що лікування органічних уражень ЦНС у частини хворих може опосередковано (через зміни балансу цитокінів іTherefore, in our opinion, it is important to prevent the use of cell therapy methods for CNS diseases in 350 patients with pronounced signs of autoimmunity to neuroproteins. In addition, we cannot ignore the fact that the treatment of organic lesions of the central nervous system in some patients can be indirect (through changes in the balance of cytokines and

Із» регуляторних лімфоцитів) створювати умови для розвитку імунної відповіді на циркулюючі антигени, внаслідок чого можуть з'являтися лабораторні ознаки автоімунітету до нейробілків і, відповідно, виникають сумніви що до призначення чергового курсу клітинної терапії. Це ускладнює лікування, особливо в тих випадках, коли 45 попередні курси лікування ембріональними нейроклітинами привели до значного покращення. Отже, існуючі о підходи до лікування органічних уражень методами трансплантації алогенних ембріональних нейроклітин мають ка суттєве обмеження у застосуванні - їх не бажано застосовувати у хворих з ознаками автоімунітету, які можуть з'являтися на етапах лікування, навіть, якщо їх не було перед операцією, а це ускладнює тактику подальшого і-й лікування хворих. ав! 20 Найближчим аналогом (прототипом) способу лікування запально-дегенеративних захворювань ЦНС, що заявляється, є спосіб, що передбачає використання стовбурових клітин, в якості яких застосовують алогенні тм ембріональні нейроклітин. Цей спосіб включає заготівлю, кріоконсервування, ін'єкційне ендолюмбальне введення цих клітин в кількості 30-40млн. за одну трансплантацію, яких може бути 1-3 на курс лікування (71.from" regulatory lymphocytes) create conditions for the development of an immune response to circulating antigens, as a result of which laboratory signs of autoimmunity to neuroproteins may appear and, accordingly, doubts arise as to the appointment of another course of cell therapy. This makes treatment difficult, especially in cases where 45 previous courses of treatment with embryonic neuron cells have resulted in significant improvement. Therefore, the existing approaches to the treatment of organic lesions by methods of transplantation of allogeneic embryonic neuron cells have a significant limitation in their application - they are not desirable to be used in patients with signs of autoimmunity, which may appear at the stages of treatment, even if they were not present before the operation, but this complicates the tactics of further treatment of patients. aw! 20 The closest analogue (prototype) of the method of treatment of inflammatory-degenerative diseases of the central nervous system, which is claimed, is a method that involves the use of stem cells, which are used as allogeneic tm embryonic neurocells. This method includes harvesting, cryopreservation, and endolumbar injection of these cells in the amount of 30-40 million. for one transplant, of which there may be 1-3 per course of treatment (71.

Описаний спосіб дозволяє досягти лікувального ефекту тільки у частини пацієнтів, а саме у тих з них, хто не мав ознак автоімунітету до початку лікування. Це можна пояснити тією обставиною, що спосіб не передбачає с врахування вихідного стану імунної системи хворих з запально-дегенеративними ураженнями ЦНС і, зокрема, не встановлює наявності ознак автоіїмунітету до нейроантигенів. За умови наявності ознак автоіїмунітету до нейроантигенів ембріональні нейроклітини, що вводяться ендолюмбально, можуть швидко інактивуватись чи гинути, їх відновний вплив може бути мало суттєвим, а результат лікування - незначним. 60 Завдання, яке вирішує корисна модель, що заявляється, полягає в удосконаленні способу лікування органічних уражень ЦНС з використанням алогенних ембріональних нейроклітин за рахунок введення додаткового етапу лікування - усунення лабораторних ознак автоіїмунітету перед власне лікуванням шляхом внутрішньовенного введення клітин печінки ембріону людини (строк гестації 7-9 тижнів), які вміщують гемопоетичні стовбурові клітини, здатні індукувати толерантність до автоантигенів. Таким чином, будуть бо створюватися умови для більш ефективного відновного впливу алогенних ембріональних нейроклітин.The described method makes it possible to achieve a therapeutic effect only in part of the patients, namely in those of them who did not have signs of autoimmunity before the start of treatment. This can be explained by the fact that the method does not take into account the initial state of the immune system of patients with inflammatory-degenerative lesions of the CNS and, in particular, does not establish the presence of signs of autoimmunity to neuroantigens. Given the presence of signs of autoimmunity to neuroantigens, embryonic neurocells injected endolumbarly can quickly inactivate or die, their regenerative effect may be insignificant, and the result of treatment insignificant. 60 The task solved by the proposed useful model is to improve the method of treating organic lesions of the CNS using allogeneic embryonic neurons by introducing an additional stage of treatment - the elimination of laboratory signs of autoimmunity before the actual treatment by intravenous injection of human embryonic liver cells (gestation period 7- 9 weeks), which contain hematopoietic stem cells, capable of inducing tolerance to autoantigens. Thus, conditions will be created for a more effective restorative effect of allogeneic embryonic neurons.

Нейроклітини зможуть функціонувати в ЦНС хворого на тлі толерогенної дії гемопоетичних клітин на автоіїмунітет. Це буде сприяти продукції трофічних факторів та інтеграції нейроклітин в ЦНС реципієнта, замісному ефекту, поповненню кількісного складу клітин-попередників, забезпечуючи тим самим умови для ремієлінізації аксонів, відновлення нервової тканини і зменшення моторного дефіциту у хворих на запально-дегенеративні ураження ЦНС.Neurons will be able to function in the patient's CNS against the background of the tolerogenic effect of hematopoietic cells on autoimmunity. This will contribute to the production of trophic factors and the integration of neurons in the recipient's CNS, a replacement effect, replenishment of the quantitative composition of progenitor cells, thereby providing conditions for remyelination of axons, restoration of nervous tissue and reduction of motor deficits in patients with inflammatory-degenerative lesions of the CNS.

Технічний результат, що досягається корисною моделлю, буде полягати у зменшенні обмежень до застосування алогенних ембріональних нейроклітин в лікуванні органічних уражень ЦНС та у створенні передумов для посилення локомоторної активності цих хворих. 70 Поставлене завдання досягається тим, що у відомому способі лікування органічних уражень ЦНС з використанням алогенних ембріональних нейроклітин, який включає заготівлю останніх та їх ін'єкційне ендолюмбальне введення, згідно корисної моделі, хворого до лікування додатково обстежують з метою виявлення ознак автоімунітету до нейробілків і, за наявності таких ознак, одноразово внутрішньовенно вводять алогенні ембріональні клітини печінки (строк гестації 7-9 тижнів) в кількості 90-10О0млн. за одну ін'єкцію, 7/5 Після чого через 2-3 місяці, після повторного імунологічного обстеження, за відсутності ознак автоімунітету до нейробілків, трансплантують алогенні ембріональні нейроклітини у вигляді клітинної суспензії у кількості 30-4Омлн. за одну ін'єкцію, яких всього може бути 2-3.The technical result achieved by the useful model will be to reduce restrictions on the use of allogeneic embryonic neurons in the treatment of organic lesions of the central nervous system and to create prerequisites for strengthening the locomotor activity of these patients. 70 The task is achieved by the fact that in the known method of treating organic lesions of the CNS using allogeneic embryonic neuron cells, which includes the harvesting of the latter and their endolumbar injection, according to a useful model, the patient is additionally examined before treatment in order to detect signs of autoimmunity to neuroproteins and, in the presence of such signs, allogeneic embryonic liver cells (gestation period 7-9 weeks) in the amount of 90-10O0 million are injected intravenously once. for one injection, 7/5 After that, 2-3 months later, after a repeated immunological examination, in the absence of signs of autoimmunity to neuroproteins, allogeneic embryonic neurocells are transplanted in the form of a cell suspension in the amount of 30-4Omln. for one injection, of which there may be 2-3 in total.

Відмінною особливістю способу, що заявляється, є те, що хворому з органічним захворюванням ЦНС перед лікуванням додатково проводять обстеження імунної системи для виявлення лабораторних ознак автоімунітету дО нейробілків, при необхідності усувають ці прояви за допомогою внутрішньовенного введення клітин ембріональної алогенної печінки, а вже потім трансплантують алогенні ембріональні нейроклітини. Такий підхід забезпечує поновлення структури нервової тканини в умовах створеної на час лікування відсутності у хворого виражених антигенспецифічних реакцій на нейробілки, а на наступному етапі лікування - доставку необхідних клітинних субстанцій у місця руйнування тканини ЦНС, що суттєво знижує небажані втрати лікувального ефекту, ов пов'язані з можливим швидким розпадом трофічних факторів та загибеллю стовбурових клітин, які становлять більшість серед ембріональних нейроклітин даного строку гестації. Це дозволяє суттєво покращити результати т лікування рухових порушень у хворих і знизити частоту розвитку ускладнень, зменшити ступінь рухового дефіциту, покращити зір, інтелектуальні можливості, поновити інші втрачені функції.A distinctive feature of the claimed method is that, before treatment, a patient with an organic disease of the CNS is additionally examined for the immune system to detect laboratory signs of autoimmunity to neuroproteins, if necessary, these manifestations are eliminated with the help of intravenous injection of embryonic allogeneic liver cells, and only then allogeneic liver cells are transplanted embryonic neurons. This approach ensures the renewal of the nervous tissue structure in conditions of the patient's absence of pronounced antigen-specific reactions to neuroproteins created during the treatment, and at the next stage of treatment - the delivery of the necessary cellular substances to the places of destruction of the CNS tissue, which significantly reduces unwanted losses of the therapeutic effect, which are related with a possible rapid breakdown of trophic factors and the death of stem cells, which constitute the majority of embryonic neurocells at this gestation period. This makes it possible to significantly improve the results of the treatment of motor disorders in patients and reduce the frequency of complications, reduce the degree of motor deficits, improve vision, intellectual abilities, and restore other lost functions.

За відомими літературними даними такий спосіб лікування органічних уражень ЦНС не відомий. М зо Запропонований спосіб лікування здійснюється наступним чином. Забір печінки і мозку ембріону людини проводять під час переривання фізіологічної 7-9 тижневої вагітності з дотриманням вимог чинного законодавства оAccording to known literary data, such a method of treatment of organic lesions of the central nervous system is not known. M zo The proposed method of treatment is carried out as follows. The liver and brain of a human embryo are taken during the termination of a physiological 7-9 week pregnancy in compliance with the requirements of the current legislation on

України та міжнародних правових норм. Тканину печінки та закладку кори ембріонального мозку суспендують ю фізичним методом (кожну тканину окремо). Одну частину клітин кожного із зразків використовують для кріоконсервування, а другу частину обстежують на вірусну та бактеріологічну інфікованість. Перед с зв ВиКористанням суспензій гепатоцитів і нейроклітин визначають їх фізико-хімічні властивості, концентрацію с клітин, життєздатність, морфологічні показники, функціональну повноцінність, адгезивний потенціал.of Ukraine and international legal norms. The tissue of the liver and the laying of the cortex of the embryonic brain are suspended by a physical method (each tissue separately). One part of the cells of each of the samples is used for cryopreservation, and the second part is examined for viral and bacteriological infection. Before using suspensions of hepatocytes and neurocells, their physicochemical properties, cell concentration, viability, morphological indicators, functional completeness, and adhesive potential are determined.

Хворого з органічним ураженням ЦНС перед лікуванням додатково обстежують імунологічно з метою визначення імунного статусу та лабораторних ознак автоімунітету (виявлення підвищеного антитілоутворення до білків ЦНС). У разі виявлення ознак автоімунітету до нейробілків хворому проводять лікування клітинами « алогенної ембріональної печінки (строк гестації 7-9 тижнів), які вводять внутрішньовенно в кількості з с 90-100млн. за одну ін'єкцію. Для цього в умовах маніпуляційної ембріональні клітини печінки попередньо розморожують згідно інструкції (температура води 38-402С). Через 2-3 міс. після ін'єкції проводять повторне ;» імунологічне обстеження, і у разі відсутності лабораторних ознак автоіїмунітету хворому проводиться операція.Before treatment, a patient with an organic lesion of the central nervous system is additionally examined immunologically in order to determine the immune status and laboratory signs of autoimmunity (detection of increased antibody formation to proteins of the central nervous system). In case of detection of signs of autoimmunity to neuroproteins, the patient is treated with cells of "allogeneic embryonic liver" (gestation period 7-9 weeks), which are injected intravenously in the amount of 90-100 mln. for one injection. To do this, in the conditions of manipulation, embryonic liver cells are pre-thawed according to the instructions (water temperature 38-402C). After 2-3 months. after the injection, a repeat is performed;" immunological examination, and in the absence of laboratory signs of autoimmunity, the patient undergoes surgery.

Під місцевим знеболюванням о). І ідосаїіпі 0,595 2,О0мл в проміжку між З та 4 остистими виростами поперекових хребців проводять пункцію субарахноїдального простору. Після отримання під контролем мандрена Тмл ко прозорого ліквору для клінічних досліджень вводять їмл (30-40х10 9) ембріональних нейроклітин у вигляді 7 суспензії. Введення менше ніж 30х1092 ембріональних клітин є малоефективним, а застосування більшої кількості клітин може супроводжуватися негативними побічними явищами. Пункційну голку витягають. Накладають 1 асептичну пов'язку. В горизонтальному положенні з опущеним головним кінцем ліжка хворий знаходиться 2 о 50 години.Under local anesthesia o). And idosaiipi 0.595 2.O0ml in the space between the 3rd and 4th spinous processes of the lumbar vertebrae, a puncture of the subarachnoid space is performed. After obtaining, under the control of a mandrel, Tml of clear cerebrospinal fluid for clinical studies, they are injected with 1 ml (30-40x10 9) of embryonic neurocells in the form of 7 suspensions. The introduction of less than 30x1092 embryonic cells is ineffective, and the use of more cells may be accompanied by negative side effects. The puncture needle is pulled out. Apply 1 aseptic bandage. The patient is in a horizontal position with the head end of the bed lowered for 2:50 hours.

Таких трансплантацій на курс лікування може бути 1-3 в залежності від індивідуальної реакції. "м Конкретний приклад втілення.There may be 1-3 such transplants per course of treatment, depending on the individual response. "m A concrete example of embodiment.

Хвора К-а М.С., історії хвороби Моб046, поступила у відділення відновної нейрохірургії Інституту нейрохірургії ім. акад. А.ПЛ.Ромоданова АМН України 11.10.2004 з діагнозом РС, цереброспинальна форма, вторинно-прогресуючий перебіг, 4-ий ступінь тяжкості. На МРТ в білій речовині паравентрикулярно виявлено с вогнища демієлінізації приблизно 0,5см в діаметрі. Оцінка ступеня неврологічного дефіциту по шкалі ЕОЗ5 - 5,5 балів. За З місяці до госпіталізації пройшла амбулаторне імунологічне обстеження, виявлені порушення імунного статусу (дисбаланс імунорегуляторних клітин) та ознаки автоімунітету - підвищений рівень автоантитіл до основного білка мієліну (32,6 проти 26,05-1,5у.од. у здорових осіб). Прийнято рішення про необхідність 60 проведення хворій лікування ембріональними клітинами печінки людини з метою усунення ознак антигенспецифічних реакцій. В умовах маніпуляційної хворій внутрішньовенно введені кріоконсервовані ембріональні клітини печінки людини після розморожування згідно інструкції (температура води 38-402С). ЧерезPatient K. M.S., medical history Mob046, was admitted to the department of reconstructive neurosurgery of the Institute of Neurosurgery named after Acad. A. PL. Romodanova of the AMS of Ukraine on 11.10.2004 with a diagnosis of MS, cerebrospinal form, secondary-progressive course, 4th degree of severity. On MRI, a paraventricular white matter with a focus of demyelination approximately 0.5 cm in diameter was detected. Assessment of the degree of neurological deficit on the EOZ5 scale - 5.5 points. In the 3rd month before hospitalization, an outpatient immunological examination was performed, which revealed disorders of the immune status (imbalance of immunoregulatory cells) and signs of autoimmunity - an increased level of autoantibodies to the main myelin protein (32.6 vs. 26.05-1.5 units in healthy individuals). A decision was made about the need to treat the patient with human embryonic liver cells in order to eliminate the signs of antigen-specific reactions. In the conditions of manipulation, cryopreserved human embryonic liver cells were intravenously administered to the patient after thawing according to the instructions (water temperature 38-402C). By

З місяці повторне імунологічне обстеження засвідчило відсутність ознак автоімунітету до білків ЦНС - рівень автоантитіл до основного білку мієліна складав 26,8у.од.. Таким чином, у хворої були усунуті обмеження до бо операції. Протокол операції. Назва операції - ін'єкційне ендолюмбальне введення суспензії кріоконсервованих нейроклітин ембріону. Кріоконсервовані нейроклітини ембріону людини розморожено згідно інструкціїA month later, a repeated immunological examination confirmed the absence of signs of autoimmunity to proteins of the central nervous system - the level of autoantibodies to the main protein of myelin was 26.8 units. Thus, the patient's restrictions before surgery were removed. Operation protocol. The name of the operation is endolumbar injection of a suspension of cryopreserved embryo neurocells. Cryopreserved neurons of the human embryo were thawed according to the instructions

(температура води 38-40). Під місцевим знеболюванням Зої. І ідосаіїпі 0,596 2,О0мл в проміжку між З та 4 остистими виростами поперекових хребців проведено пункцію субарахноїдального простору. Отримано прозорий ліквор. Лікворний тиск 120мм в. ст. Ендолюмбально введено 1мл суспензії ембріональних нейроклітин (30х1059), Голка витягнена. На шкіру накладено асептичну пов'язку. Через добу після маніпуляції стан хворої задовільний, скарг немає, температура 36,72С. Хвору виписано у задовільному стані. 21.03.2005 хвора поступила для чергового курсу лікування. 5 місяців тому пройшла курс лікування операцією ендолюмбального введення нейроклітин ембріону людини. Обстеження хворої засвідчило незначне (обсяг відновлення неврологічних функцій 0,5 бала) зменшення рухового дефіциту, зменшилася хиткість, наросла сила 70 У кінцівках. При огляді - черепно-мозкові нерви без патології. М'язова сила у кінцівках 4 бали. Спастичний тетрапарез. Симптоми Бабінського з обох боків. Черевні рефлекси відсутні. Оцінка за шкалою ЕОЗ5 - 5,0 балів.(water temperature 38-40). Zoe is under local anesthesia. A puncture of the subarachnoid space was performed with 0.596 2.O0ml in the space between the 3rd and 4th spinous processes of the lumbar vertebrae. A clear liquor was obtained. Liquefied pressure 120 mm in. Art. 1 ml of embryonic neurocell suspension (30x1059) was injected endolumbically, the needle was pulled out. An aseptic bandage is placed on the skin. A day after the manipulation, the patient's condition is satisfactory, there are no complaints, the temperature is 36.72C. The patient was discharged in satisfactory condition. On March 21, 2005, the patient was admitted for another course of treatment. 5 months ago, she underwent a course of treatment with an endolumbar injection of human embryonic neurocells. Examination of the patient showed a slight (extent of recovery of neurological functions 0.5 points) decrease in motor deficit, reduced shakiness, increased strength 70 In the limbs. During examination - cranial nerves without pathology. Muscle strength in the limbs 4 points. Spastic tetraparesis. Babinski's symptoms on both sides. Abdominal reflexes are absent. Evaluation on the EOZ5 scale - 5.0 points.

Імунологічне обстеження свідчить на користь наявності ознак автоімунітету - підвищений рівень автоантитіл до білка 5-100 (18,7 проти 12,6--0,35у.од. у здорових осіб) та білка М5Е (35,7 проти 23,1-0,6у.од. у здорових осіб).The immunological examination testifies to the presence of signs of autoimmunity - an increased level of autoantibodies to protein 5-100 (18.7 vs. 12.6--0.35 units in healthy individuals) and protein M5E (35.7 vs. 23.1-0 ,6 units in healthy individuals).

Таким чином, у хворої в сироватці виявлено збільшення автоантитіл до нейробілків 5-100 та М5Е, перед 75 лікуванням ці показники не перевищували показники здорових осіб. Хворій проведено курс лікування ембріональними клітинами печінки людини з метою усунення автоїмунних змін, через З місяці проведено повторне імунологічне обстеження, яке підтвердило усунення лабораторних ознак автоїмунітету, після чого хвора пройшла черговий курс лікування шляхом ендолюмбального введення нейроклітин ембріону людини.Thus, the patient's serum showed an increase in autoantibodies to neuroproteins 5-100 and M5E, before 75 treatment these indicators did not exceed those of healthy individuals. The patient underwent a course of treatment with embryonic human liver cells in order to eliminate autoimmune changes, after 3 months, a repeated immunological examination was performed, which confirmed the elimination of laboratory signs of autoimmunity, after which the patient underwent another course of treatment by endolumbar injection of human embryonic neurons.

Спостереження триває.Observation continues.

За період з 2004 по 2006 рік в клініці відновної нейрохірургії Інституту нейрохірургії імені акад.During the period from 2004 to 2006, in the clinic of reconstructive neurosurgery of the Institute of Neurosurgery named after Acad.

А.П.Ромоданова АМН України проліковано 43 хворих з органічними ураженнями ЦнсС методом ендолюмбального введення нейроклітин ембріону людини. 14 з цих хворих оперувалися після попереднього усунення лабораторних ознак автоімунітету до білків ЦНС шляхом внутрішньовенного введення ембріональних клітин печінки людини. Ці 14 хворих після лікування мали помірне покращення неврологічного стану, яке було досягнуто завдяки попереднього застосування ембріональних клітин печінки людини з метою усунення ознак з автоіїмунітету. Такий метод дозволив проводити операційне лікування багаторазово в умовах стану толерантності до автоантигенів, що сприяло збільшенню ефективності лікування.A.P. Romodanova of the Medical Academy of Ukraine treated 43 patients with organic lesions of the CNS by the method of endolumbar injection of human embryonic neurons. 14 of these patients underwent surgery after preliminary elimination of laboratory signs of autoimmunity to CNS proteins by intravenous injection of embryonic human liver cells. These 14 patients had a moderate improvement in their neurological condition after treatment, which was achieved thanks to the previous application of human embryonic liver cells to eliminate signs of autoimmunity. This method made it possible to carry out surgical treatment multiple times in conditions of tolerance to autoantigens, which contributed to increasing the effectiveness of treatment.

Список літератури: 1. Бадалян Л.О., Журба Л.Т., Тимонина О.В. Детские церебральнье параличи /Киев, Здоров'я". -1988. -327 6. - 2. Гусев Е.И., Демина Т.Л., Бойко А.Н. Рассеянньй склероз. /Москва. - 1997. -463с. оReferences: 1. Badalyan L.O., Zhurba L.T., Timonina O.V. Children's cerebral palsy / Kyiv, Health". - 1988. - 327 6. - 2. Husev E. I., Demina T. L., Boyko A. N. Multiple Sclerosis. / Moscow. - 1997. - 463 p. at

З. Івуапу М.І., Магкома О.М., Кидепко М.А. Тпе гоїе ої ашозепзйігайоп о пеигоапідепе іп (Пе раїподепезіз ої еріерзу апа іпгапіЦе сегебга! рагаїувів /). ої Меигоїттипо|оду. -1994. -54/1-2. -Р.177. ів) 4. Лисяньїй Н.Й. Иммунология и иммунотерапия рассеянного склероза. Киев. - 2003. -2516. сч 5. Сучков СВ., Мисиков В.К., Дурова О.М., Черепахина Н.Е., Кимова М.В., Введенская О.Ю., ПономаренкоZ. Ivuapu M.I., Magkoma O.M., Kydepko M.A. Tpe goye oi ashozepzyigayop o peigoapidepe ip (Pe raipodepeziz oi erierzu apa ipgapiCse segebga! ragaiuviv /). Hey Meigoittipodu. -1994. -54/1-2. - R.177. iv) 4. Lysyanii N.Y. Immunology and immunotherapy of multiple sclerosis. Kyiv. - 2003. -2516. 5. Suchkov S.V., Mysykov V.K., Durova O.M., Cherepakhina N.E., Kimova M.V., Vvedenskaya O.Yu., Ponomarenko

НА., Пронина О.А., Котов СВ., Габибов А.Г. Аутоантитела при рассеяном склерозе патогенетическая и с клиническая значимость /Невролог, журн. -2005. -Т.10, Мо4. -с.49-54. 6. Карлик С.Д., Плисс М.А., Конради А.В. и др. Композиция для лечения демиелинизирующих заболеваний и паралича путем введения ремиелинизирующих средств / Пат. Мо2005126728 (КУ). - Опубл. 2006.01.26. « 7. Цимбалюк В.І., Маркова О.В., Пічкур Л.Д., Вотякова І.А. Спосіб лікуван ня розсіяного склерозу з використанням стовбурових клітин / Пат.Мо15356 (ОА). - Опубл. 15.06.2006.- Бюл. Моб. -бс. ші с зNA., Pronina O.A., Kotov SV., Gabybov A.G. Autoantibodies in multiple sclerosis have pathogenetic and clinical significance /Neurologist, journal. -2005. - Volume 10, Mo4. - p. 49-54. 6. Karlyk S.D., Plyss M.A., Konrady A.V. etc. Composition for the treatment of demyelinating diseases and paralysis by introducing remyelinating agents / Pat. Mo2005126728 (KU). - Publ. 2006.01.26. " 7. Tsymbalyuk V.I., Markova O.V., Pichkur L.D., Votyakova I.A. Method of treatment of multiple sclerosis using stem cells / Pat.Mo15356 (OA). - Publ. 15.06.2006.- Bull. Mob. -bs. shi with z

Claims

The formula of the invention is a method of treating organic lesions of the central nervous system using allogeneic co-embryonic neuron cells, which includes the harvesting of the latter and their endolumbar injection to the patient, which differs in that the patient is additionally examined before treatment in order to detect signs of autoimmunity to neuroproteins and, according in the presence of such signs, allogeneic embryonic cells of 1 liver (gestation period of 7-9 weeks) in the amount of 90-100 million for one injection are administered once intravenously, after which 2-3 months, at 50 o'clock after a repeated immunological examination, in case in the absence of signs of autoimmunity to neuroproteins, allogeneic embryonic neurocells are transplanted in the form of a cell suspension in the amount of 30-40 million per injection, of which there may be 2-3 in total.

Official bulletin "Industrial Property". Book 1 "Inventions, useful models, topographies of integrated microcircuits", 2007, M 5 04/25/2007. State Department of Intellectual Property of the Ministry of Education and Science of Ukraine. 60 b5