UA13712U - Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures - Google Patents
Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures Download PDFInfo
- Publication number
- UA13712U UA13712U UAU200509673U UAU200509673U UA13712U UA 13712 U UA13712 U UA 13712U UA U200509673 U UAU200509673 U UA U200509673U UA U200509673 U UAU200509673 U UA U200509673U UA 13712 U UA13712 U UA 13712U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- proteins
- staining
- oxidative modification
- placenta
- blue
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 title abstract description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000001634 microspectroscopy Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 abstract 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 2
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- WVVOBOZHTQJXPB-UHFFFAOYSA-N N-anilino-N-nitronitramide Chemical compound [N+](=O)([O-])N(NC1=CC=CC=C1)[N+](=O)[O-] WVVOBOZHTQJXPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004252 chorionic villi Anatomy 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель відноситься до галузі медицини, а саме до патологічної анатомії, судової медицини та 2 акушерства може бути використана для морфологічної діагностики патології плаценти - органа, який має провідне значення для нормального перебігу вагітності.A useful model refers to the field of medicine, namely to pathological anatomy, forensic medicine and 2 obstetrics, it can be used for morphological diagnosis of the pathology of the placenta - an organ that is of leading importance for the normal course of pregnancy.
Діагностика різних елементів клітин плаценти з використанням різних методів дослідження гістологічних зрізів дозволяє достовірно встановлювати патологію цього органу, яка може спричинити невиношування вагітності або народження неповноцінної дитини. Визначення окиснювальної модифікації білків в тканині 710 плаценти є принципово важливим для встановлення і диференціювання різних видів недостатності цього органу.Diagnosis of various elements of cells of the placenta using various methods of histological sections allows to reliably establish the pathology of this organ, which can cause miscarriage or the birth of a defective child. Determination of oxidative modification of proteins in tissue 710 of the placenta is fundamentally important for establishing and differentiating various types of insufficiency of this organ.
Прототипом корисної моделі є спосіб визначення карбонільних груп білків шляхом забарвлення гістологічного препарату специфічними барвниками та візуальною оцінкою білкових груп (7из5іеггее! Р.І.М., Кибеп Н., КоеїйоївThe prototype of a useful model is the method of determining the carbonyl groups of proteins by staining the histological preparation with specific dyes and visual evaluation of protein groups (7iz5ieggee! R.I.M., Kibep N., Koeiyoiv
Н.М.). Ргоїеіп сагропіїв іп десідцаз апа ріасепіа ої рге-есіатрієс мотеп аз тагКеге їог охідайме вігезв //N.M.). Rgoieip sagropiiv ip desidtzaz apa riasepia oi rge-esiatries motep az tagKege iog ohidaime vigezv //
РіІасепіа. 2001. - Мої. 22 - Р.213-219). Необхідно відмітити, що спосіб-прототип для інших органів окрім 72 плаценти не апробований, тому може бути для них неадекватним. Спосіб-прототип полягає у імуногістохімічному визначенні карбонільних груп білків у гістологічних препаратах шляхом проведення імуногістохімічної реакції з динітрофенілгідразином з наступним виявленням останнього за допомогою антитіл до нього та системи пероксидазно-бензидинової візуалізації.Riiasepia. 2001. - Mine. 22 - R.213-219). It should be noted that the prototype method has not been tested for organs other than the 72 placenta, so it may be inadequate for them. The prototype method consists in the immunohistochemical determination of carbonyl groups of proteins in histological preparations by conducting an immunohistochemical reaction with dinitrophenylhydrazine followed by detection of the latter using antibodies to it and the peroxidase-benzidine visualization system.
Недоліком прототипу є те, що кількість карбонільних груп може свідчити не тільки про збільшення окиснювальної модифікації білків (ОМБ), але і про збільшення загального вмісту білка. В той же час для оцінки збільшення окиснювальної модифікації білків насправді найбільш принципово вияснити співвідношення між карбонільними та аміногрупами протеїнів. Прототип цього зробити не дозволяє. Окрім того прототип відрізняється високою вартістю.The disadvantage of the prototype is that the number of carbonyl groups can indicate not only an increase in the oxidative modification of proteins (OMB), but also an increase in the total protein content. At the same time, in order to assess the increase in the oxidative modification of proteins, it is actually the most fundamental thing to clarify the ratio between the carbonyl and amino groups of proteins. The prototype does not allow this. In addition, the prototype has a high cost.
Нами пропонується спосіб, який усуває вказані недоліки, тобто дозволяє в одному гістологічному зрізі визначити співвідношення між карбонільними та аміногрупами білків та по цьому співвідношенню у відносних /-птв) величинах виміряти ступінь окиснювальної модифікації білків.We propose a method that eliminates the indicated shortcomings, that is, it allows to determine the ratio between carbonyl and amino groups of proteins in one histological section and to measure the degree of oxidative modification of proteins based on this ratio in relative /-ptv) values.
В основу корисної моделі поставлене завдання удосконалити спосіб вимірювання окиснювальної модифікації білків в структурах плаценти шляхом використання забарвлення гістологічних зрізів бромфеноловим синім за методикою Мікель-Кальво і введення додаткової операції - проведення комп'ютерної мікроспектрометрії. счThe basis of a useful model is the task of improving the method of measuring the oxidative modification of proteins in the structures of the placenta by using staining of histological sections with bromophenol blue according to the Michel-Calvo method and introducing an additional operation - computer microspectrometry. high school
Поставлена задача вирішується тим, що у способі вимірювання окиснювальної модифікації білків у «- структурах плаценти шляхом фарбування гістологічного препарату специфічними барвниками та візуальною оцінкою білкових груп, згідно до корисної моделі, фарбування гістологічного препарату проводять в бромфеноловим синім за методикою Мікель-Кальво, а візуальну оцінку білкових груп проводять комп'ютерною со мікроспектрометрією за оцінкою кольору КОВ по співвідношенню величин зеленого та синього спектрів 3о забарвлення. --The task is solved by the fact that in the method of measuring the oxidative modification of proteins in "placental structures by staining the histological preparation with specific dyes and visual assessment of protein groups, according to a useful model, the staining of the histological preparation is carried out in bromophenol blue according to the Michel-Calvo method, and the visual assessment of protein groups is carried out by computer microspectrometry based on the assessment of the color of KOV by the ratio of the values of the green and blue spectra of the 3o color. --
Спільними ознаками прототипу та рішення, що заявляється є те, для визначення білкових груп проводять фарбування препаратів та візуальну оцінку білкових груп. Корисна модель від прототипу відрізняється тим, що препарати фарбуються бромфеноловим синім, після чого проводиться комп'ютерна мікроспектрометрія « цифрових копій мікроскопічного зображення. З 50 Спосіб що заявляється, здійснюється наступним чином. Фарбують бромфеноловим синім при низькому рН с гістологічний зріз плаценти, після чого отримують цифрову копію мікроскопічного зображення. Потім, цікавлячіCommon features of the prototype and the proposed solution are that, to determine the protein groups, staining of the preparations and visual assessment of the protein groups are carried out. The useful model differs from the prototype in that the drugs are stained with bromophenol blue, after which computer microspectrometry is performed on "digital copies of the microscopic image." C 50 The claimed method is carried out as follows. A histological section of the placenta is stained with bromophenol blue at low pH, after which a digital copy of the microscopic image is obtained. Then, interesting
Із» ділянки мікроскопічного зображення (клітини, міжклітинний матрикс, волокна тощо) аналізують методом комп'ютерної мікроспектрометрії за допомогою системи аналізу кольору КОВ, завдяки чому з роздільною здатністю у 256 градацій отримують дві конкретні величини: інтенсивність зеленого кольору та синього кольору.From" sections of the microscopic image (cells, intercellular matrix, fibers, etc.) are analyzed by computer microspectrometry using the KOV color analysis system, thanks to which two specific values are obtained with a resolution of 256 gradations: the intensity of green color and blue color.
Далі величину інтенсивності забарвлення зеленого кольору ділять на величину інтенсивності забарвлення - синього кольору і таким чином отримують співвідношення (коефіцієнт) між цими величинами, яке і дозволяє оз виміряти ступінь окиснювальної модифікації білків.Next, the value of the intensity of the green color is divided by the value of the intensity of the blue color and in this way the ratio (coefficient) between these values is obtained, which allows us to measure the degree of oxidative modification of proteins.
Таким чином, наведений спосіб дозволяє в гістологічному препараті виміряти окиснювальну модифікацію 7 білків в конкретних структурах плаценти. - 70 Використання способу пояснюється конкретними прикладами.Thus, the given method allows measuring the oxidative modification of 7 proteins in specific structures of the placenta in a histological preparation. - 70 The use of the method is explained by specific examples.
Приклад використання способу Мо1. Отримана плацента від жінки 24 років, у якої вагітність перебігала з із тяжким пізнім гестозом, коли виникає гіпоксія тканин плаценти і закономірно в ній зростають процеси вільнорадикального окислення. Шматочок тканини народженої плаценти зафіксували у нейтральному забуференому розчині формаліна протягом 24 годин, потім здійснили зневонювання взірця тканини і його 29 заливку у парафін. На санному мікротомі виготовили гістологічний зріз товщиною 5 мікрометрів. Цей зріз с пофарбували бромфеноловим синім при рН 2,0 за Мікель-Кальво. За допомогою цифрового фотоапарата та світлооптичного мікроскопа отримали цифрову копію зображення, яку записали на носій комп'ютера. Далі цифрову копію зображення завантажили у середовище комп'ютерної програми "СЗІМР 2.0" (США). Засобами цієї програми в синцитіотрофобласті хоріальних ворсин плаценти виміряли середню інтенсивність зеленого кольору 60. 128 одиниць та середню інтенсивність синього кольору - 87 одиниць. Поділивши першу величину на другу (128/87) отримали ступінь окиснювальної модифікації білка в синцитіотрофобласті плаценти цієї жінки - 1,47.An example of using the Mo1 method. The placenta was obtained from a 24-year-old woman whose pregnancy was accompanied by severe late gestosis, when placenta tissue hypoxia occurs and free radical oxidation processes naturally increase in it. A piece of the tissue of the born placenta was fixed in a neutral buffered formalin solution for 24 hours, then the tissue sample was deodorized and embedded in paraffin. A histological section with a thickness of 5 micrometers was made on a sled microtome. This section was stained with bromophenol blue at pH 2.0 according to Michel-Calvo. With the help of a digital camera and a light-optical microscope, a digital copy of the image was obtained, which was recorded on a computer medium. Next, a digital copy of the image was loaded into the environment of the computer program "SZIMR 2.0" (USA). By means of this program, the average intensity of green color 60.128 units and the average intensity of blue color - 87 units were measured in the syncytiotrophoblast of chorionic villi of the placenta. Dividing the first value by the second (128/87), we obtained the degree of oxidative modification of the protein in the syncytiotrophoblast of the placenta of this woman - 1.47.
Ця величина дозволила не тільки встановити факт переважання карбонільних груп над аміногрупами, про що свідчить величина коефіцієнта більша за "1", але і виміряти це переважання - в 1,47 раза. б5This value made it possible not only to establish the fact of the predominance of carbonyl groups over amino groups, as evidenced by the value of the coefficient greater than "1", but also to measure this predominance - 1.47 times. b5
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200509673U UA13712U (en) | 2005-10-14 | 2005-10-14 | Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200509673U UA13712U (en) | 2005-10-14 | 2005-10-14 | Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA13712U true UA13712U (en) | 2006-04-17 |
Family
ID=37457215
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200509673U UA13712U (en) | 2005-10-14 | 2005-10-14 | Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA13712U (en) |
-
2005
- 2005-10-14 UA UAU200509673U patent/UA13712U/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3688330T2 (en) | ARRANGEMENT AND METHOD FOR ANALYZING BIOLOGICAL SPECIMES. | |
| Li et al. | The effects of chemical fixation on the cellular nanostructure | |
| JP5631999B2 (en) | System and method for generating bright field images using fluorescent images | |
| DE3853254T2 (en) | Equipment set and method for analysis of biological samples. | |
| DE60200248T2 (en) | Procedure for solution-based diagnosis | |
| EP2208068B1 (en) | Method for end-titre determination and the evaluation thereof by means of an indirect immunofluorescence assay | |
| De Cecco et al. | Nuclear protein accumulation in cellular senescence and organismal aging revealed with a novel single-cell resolution fluorescence microscopy assay | |
| Aran et al. | Serum ischemia-modified albumin as a novel marker of ovarian torsion: an experimental study | |
| Noaman et al. | Coomassie does it (better): A Robin Hood approach to total protein quantification | |
| Conrad et al. | Post-electrophoretic identification of oxidized proteins | |
| Mayhew | Morphomics: An integral part of systems biology of the human placenta | |
| Bonilla et al. | Simultaneous immunofluorescent imaging of gliadins, low molecular weight glutenins, and high molecular weight glutenins in wheat flour dough with antibody-quantum dot complexes | |
| Bay et al. | Tissue processing and optimal visualization of cerebral infarcts following sub-acute focal ischemia in rats | |
| Li et al. | Histo-ELISA technique for quantification and localization of tissue components | |
| DE69027982T2 (en) | QUANTITATIVE IMMUNOCYTOCHEMICAL TEST | |
| UA13712U (en) | Method for measuring oxidative modification of proteins in placental structures | |
| JPH01210863A (en) | Counting of spermatid and ratio of living spermatid or fast determination method and apparatus for either thereof | |
| Eaton et al. | Quantitative imaging of tissue sections using infrared scanning technology | |
| US5571643A (en) | Spectrophotometric quantitation of images in X-ray film and electrophoresis gel bands | |
| Frolikova et al. | A sample preparation procedure enables acquisition of 2-channel super-resolution 3D STED image of an entire oocyte | |
| Baidoo et al. | Histochemical and biochemical analysis of collagen content in formalin-fixed, paraffin embedded colonic samples | |
| Christoffersen | Immunohistochemical staining of human sperm cells in smears from sexual assault cases | |
| JP5302054B2 (en) | Method for detecting apoptotic cells fragmented with DNA, cell image analyzer, and program | |
| GLIADINS | SIMULTANEOUS IMMUNOFLUORESCENT IMAGING OF GLIADINS, LOW MOLECULAR WEIGHT GLUTENINS, AND HIGH MOLECULAR WEIGHT GLUTENINS IN WHEAT FLOUR DOUGH WITH ANTIBODY-QUANTUM DOT COMPLEXES | |
| RU2730947C1 (en) | Method for determining integrity of chromatin/dna in spermatozoons |