UA127257C2

UA127257C2 - THE METHOD OF TREATMENT OF MEN WITH AUTOIMMUNE AZOOSPERMIA WITH DRUGS FROM MATERIAL OF EMBRYOFETAL ORIGIN AND CELLS ISOLATED FROM IT

Info

Publication number: UA127257C2
Application number: UAA201911358A
Authority: UA
Inventors: Наталія Сергіївна Сич; Антон Сергійович Глебов; Олена Віталіївна Іванкова; Марія Олексіївна Клунник; Марія Петрівна Демчук; Ірина Георгіївна Матіящук; Марина Вікторівна Скалозуб; Андрій Аркадійович Сінельник; Христина Ігорівна Сорочинська
Original assignee: Товариство З Обмеженою Відповідальністю "Центр Ембріональних Тканин "Емселл"
Priority date: 2019-11-22
Filing date: 2019-11-22
Publication date: 2023-06-28

Abstract

Винахід стосується способу лікування чоловіків з аутоімунною азооспермією, що включає приготування та введення трьох препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин, кожна з яких містить терапевтично ефективну кількість стовбурових клітин, виділених з матеріалу фетуса людини 7-11 тижня гестації. При цьому основна суспензія містить стовбурові клітини з фетальної печінки, друга суспензія містить стовбурові клітини фетального головного мозку, а третя суспензія містить стовбурові клітини хоріона, причому основну суспензію, яка містить стовбурові клітини з фетальної печінки, вводять внутрішньовенно крапельно в об'ємі не менше за 0,4 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,8×106 в 1 мл та відсотком живих клітин не менше 71 % за одне введення, другу суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин фетального головного мозку вводять підшкірно в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю клітин не менше за 0,3×106 в 1 мл за одне введення, а третю суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з хоріона вводять в органи-мішені, такі як мошонка, простата, в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,3×106 в 1 мл.The invention relates to a method of treating men with autoimmune azoospermia, which includes the preparation and administration of three drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it in the form of stem cell suspensions thawed after cryopreservation, each of which contains a therapeutically effective amount of stem cells isolated from the material of a human fetus 7 - 11 weeks of gestation. At the same time, the main suspension contains stem cells from the fetal liver, the second suspension contains stem cells from the fetal brain, and the third suspension contains stem cells from the chorion, and the main suspension, which contains stem cells from the fetal liver, is administered intravenously by drip in a volume of at least 0.4 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.8×106 in 1 ml and the percentage of living cells at least 71% for one injection, the second suspension of cryopreserved fetal brain stem cells is injected subcutaneously in a volume of at least for 0.2 ml per course of treatment with the number of cells not less than 0.3×106 in 1 ml for one injection, and the third suspension of cryopreserved stem cells from the chorion is injected into target organs, such as the scrotum, prostate, in a volume not less than 0.2 ml per course of treatment with the number of nucleated cells not less than 0.3×106 in 1 ml.

Description

суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з хоріона вводять в органи-мішені, такі як мошонка, простата, в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,3х1052 в 1 мл.a suspension of cryopreserved stem cells from the chorion is injected into target organs, such as the scrotum, prostate, in a volume of at least 0.2 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.3x1052 in 1 ml.

Винахід належить до галузі медицини, а саме: до урології, андрології та клітинної терапії, та може бути використаний при лікуванні чоловіків з гормональною (аутоїмунною) азооспермією шляхом введення препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді суспензій, що містять стовбурові клітини, зокрема стовбурові клітини з фетальної печінки, стовбурові клітини фетального мозку фетуса людини та хоріону на фоні стандартної терапії.The invention belongs to the field of medicine, namely: to urology, andrology and cell therapy, and can be used in the treatment of men with hormonal (autoimmune) azoospermia by introducing drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it in the form of suspensions containing stem cells , in particular stem cells from fetal liver, stem cells from human fetal brain and chorion against the background of standard therapy.

Азооспермія - це порушення сперматогенезу, що виявляється у відсутності сперматозоїдів в насінній рідині.Azoospermia is a violation of spermatogenesis, manifested in the absence of spermatozoa in the seminal fluid.

Виділяють наступні різновиди азооспермії: - Обструктивна азооспермія. При даному діагнозі сперматозоїди не потрапляють в еякулят із-за непрохідності сім'явивідних каналів. Саме на цю різновид патології припадає 40 95 випадків азооспермії. - Секреторна (необструктивна) азооспермія. Діагностується частіше, ніж обструктивна, характеризується порушенням утворення сперматозоїдів. - Поєднана. Виявляється, якщо у пацієнта відслідковуються симптоми і секреторної, і обструктивної азооспермії (1, 21.The following types of azoospermia are distinguished: - Obstructive azoospermia. With this diagnosis, spermatozoa do not enter the ejaculate due to obstruction of the vas deferens. This type of pathology accounts for 40 95 cases of azoospermia. - Secretory (non-obstructive) azoospermia. It is diagnosed more often than obstructive, characterized by a violation of the formation of spermatozoa. - Combined. It appears if the patient has symptoms of both secretory and obstructive azoospermia (1, 21.

Застосовувані методи і препарати, що використовують для лікування азооспермії, та їх ефективність залежать від форми патологічного стану та причин, якими вона обумовлена. Якщо причиною обструкції є запальні процеси (орхіт, простатит) проводиться протизапальна терапія.The applied methods and drugs used for the treatment of azoospermia and their effectiveness depend on the form of the pathological condition and its causes. If the cause of obstruction is inflammatory processes (orchitis, prostatitis), anti-inflammatory therapy is performed.

При наявності варикоцеле, крипторхизма, серединної кісти передміхурової залози проводяться відповідні оперативні втручання |З, 41.In the presence of varicocele, cryptorchidism, median cyst of the prostate gland, appropriate surgical interventions are performed |Z, 41.

Якщо є порушення прохідності сім'явивідної протоки набутого характеру, наявність кіст придатків та ін., здійснюється хірургічне усунення перешкоди за допомогою мікрохірургічних операцій (відновлення прохідності сім'явиносних шляхів, висічення або розсічення кіст і т. д.).If there is a violation of the patency of the vas deferens of an acquired nature, the presence of adnexal cysts, etc., the obstruction is surgically removed with the help of microsurgical operations (restoration of the patency of the vas deferens, excision or dissection of cysts, etc.).

Ефективність лікування необструктивних порушень складає близько 70 95 і теж безпосередньо залежить від причини. Курси терапії гонадотропними гормонами при ендокринних розладах, а також неспецифічна стимуляція сперматогенезу особливо результативні на тлі гіпогонадотропного гіпогонадизму.The effectiveness of treatment of non-obstructive disorders is about 70-95 and also directly depends on the cause. Courses of therapy with gonadotropic hormones for endocrine disorders, as well as nonspecific stimulation of spermatogenesis, are particularly effective against the background of hypogonadotropic hypogonadism.

Неспецифічна гормональна стимуляція сперматогенезу при азооспермії здійснюється зNonspecific hormonal stimulation of spermatogenesis in azoospermia is carried out with

Зо допомогою антиестрогенних препаратів. Для цієї мети, зокрема, використовується Клостилбегіт (кломіфену цитрат) протягом 1,5-3-х місяців у добовій дозі 25-50 мг. Застосування цього препарату сприяє нормалізації вмісту в крові загального тестостерону, ЛГ та ФСГ, а також усунення симптомів гіпогонадизму, збільшення кількості сперматозоїдів при олігозооспермії, але ефективність його при азооспермії непереконлива |З, 4).With the help of anti-estrogen drugs. For this purpose, in particular, Clostilbegit (clomiphene citrate) is used for 1.5-3 months in a daily dose of 25-50 mg. The use of this drug contributes to the normalization of the content of total testosterone, LH and FSH in the blood, as well as the elimination of symptoms of hypogonadism, an increase in the number of spermatozoa in oligozoospermia, but its effectiveness in azoospermia is unconvincing |Z, 4).

Відомий спосіб, запропонований Божедомовим В.А., Сухих Г.Т., Ніколаєвою М.А. "Спосіб фармакологічного лікування аутоїмунного чоловічого безпліддя" (патент ВО Мо 2149021, дата публікації - 20.05.2000 р.). Суть способу полягає в тому, що протягом 2-3 тижнів в фолікулярну фазу циклу партнерки чоловіка призначають протеолітичні ферменти - хімотрипсин, трипсин, бромелайн, папаїн, панкреатин у ваговому співвідношенні 1:3:5:6:10 - три рази в день перорально за 30-40 хв до їди в сумарній добовій дозі 35-90 мг/кг.The known method proposed by V. A. Bozhedomov, G. T. Sukhikh, and M. A. Nikolaeva. "Method of pharmacological treatment of autoimmune male infertility" (patent VO Mo 2149021, publication date - 05/20/2000). The essence of the method is that during 2-3 weeks in the follicular phase of the male partner's cycle, proteolytic enzymes are prescribed - chymotrypsin, trypsin, bromelain, papain, pancreatin in a weight ratio of 1:3:5:6:10 - three times a day orally according to 30-40 minutes before meals in a total daily dose of 35-90 mg/kg.

Спосіб дозволяє зменшити утворення антиспермальних антитіл (АСАТ) та їх зв'язування зі сперматозоїдами.The method allows to reduce the formation of antisperm antibodies (ASAT) and their binding to spermatozoa.

Недоліками даного способу є пероральний прийом препаратів, не зменшується утворення антиспермальних антитіл, тільки зменшується кількість антиспермальних антитіл, адгезованих до сперматозоїдів.The disadvantages of this method are the oral administration of drugs, the formation of antisperm antibodies does not decrease, only the amount of antisperm antibodies attached to spermatozoa decreases.

Також схожим по цілі є спосіб, запропонований Кореньковою Д.Г., Александровим В.П.,The method proposed by D.G. Korenkova, V.P. Aleksandrov, is also similar in purpose.

Михайличенко В.В., Марусановим В.Є. "Спосіб лікування аутоїмунного безпліддя у чоловіків" (патент на винахід, ВО Мо 2185211, дата публікації - 20.07.2002 р.). Спосіб полягає в тому, що проводять внутрішньовенне ультрафіолетове опромінення крові периферичних вен за допомогою апарата ОВК-3- (04). Кров опромінюють ультрафіолетовим випромінюванням, тривалість опромінення 30 хв. Курс лікування складається з 6 щоденних сеансів. Починаючи з другого дня, через 30 хв після опромінення крові, застосовують безперервний мембранний плазмаферез через день. Курс плазмаферезу складається з З процедур.Mykhailychenko V.V., Marusanov V.E. "Method of treatment of autoimmune infertility in men" (invention patent, VO Mo 2185211, publication date - 07/20/2002). The method consists in carrying out intravenous ultraviolet irradiation of the blood of peripheral veins with the help of the OVK-3- (04) device. The blood is irradiated with ultraviolet radiation, the duration of irradiation is 30 minutes. The course of treatment consists of 6 daily sessions. Starting from the second day, 30 minutes after blood irradiation, continuous membrane plasmapheresis is used every other day. The course of plasmapheresis consists of 3 procedures.

Спосіб дозволяє відновити сперматогенез і поліпшити здатність до запліднення сперматозоїдів. Недоліками є необхідність використання дорогого устаткування, високий ризик зараження вірусними гепатитами, інвазивність.The method allows to restore spermatogenesis and improve the ability to fertilize spermatozoa. Disadvantages are the need to use expensive equipment, high risk of infection with viral hepatitis, invasiveness.

Схожим за програмними цілями є спосіб, запропонований Коренькова Д.Г., АлександровимThe method proposed by D.G. Korenkova and Aleksandrov is similar in terms of program objectives

В.П., Михайличенко В.В., Марусановим В.Є., Кузіним Г.Г. "Спосіб лікування аутоімунного безпліддя у чоловіків" (патент на винахід, ВО Мо 2238096, дата публікації - 20.10.2004 р.). Суть 60 способу полягає в тому, що вводять преднізолон в добовій дозі 1,2 мг на кг маси тіла хворого протягом 5 днів. Потім проводять курс плазмаферезу до нормалізації кількості АСАТ в крові пацієнта.V.P., Mykhailychenko V.V., Marusanov V.E., Kuzinim H.G. "Method of treatment of autoimmune infertility in men" (invention patent, VO Mo 2238096, publication date - 10/20/2004). The essence of the 60th method is that prednisone is administered in a daily dose of 1.2 mg per kg of the patient's body weight for 5 days. Then a course of plasmapheresis is carried out until the amount of ASAT in the patient's blood normalizes.

Використання запропонованого способу дозволяє поліпшити кількісні і якісні показники сперматогенезу за рахунок виведення АСАТ з еякуляту, а також попереджати ускладнення глюкокортикоїдної терапії. Недоліками є висока вартість лікування, необхідність використання дорогого устаткування, високий ризик зараження вірусними гепатитами, висока інвазивність методики, можливість розвитку побічних ефектів від гормональної терапії.The use of the proposed method allows to improve the quantitative and qualitative indicators of spermatogenesis due to the removal of ASAT from the ejaculate, as well as to prevent complications of glucocorticoid therapy. Disadvantages are the high cost of treatment, the need to use expensive equipment, the high risk of infection with viral hepatitis, the high invasiveness of the technique, the possibility of developing side effects from hormone therapy.

Відомий спосіб відновлення тканин або клітин хворого, зокрема хворого на необструктивну азооспермію, що включає перепрограмування комітованих аутологічних клітин, отриманих від хворого для отримання перепрограмованих клітин, при якому аутологічні клітини отримані методом, який включає аферизацію 2-3 рази повного об'єму крові хворого, доки не отримані клітини-мішені, та введення перепрограмованих клітин хворому шляхом внутрішньовенної інфузії в шийну вену чи вену руки або стегна (патент на винахід, ВО Мо 2635317, дата публікації - 10.11.2017 р.). При цьому перепрограмовані клітини, що містять клітини-мішені, містять плюрипотенціальні стовбурові клітини, ембріональні стовбурові клітини.A known method of restoring tissues or cells of a patient, in particular a patient with non-obstructive azoospermia, which includes reprogramming committed autologous cells obtained from the patient to obtain reprogrammed cells, in which autologous cells are obtained by a method that includes apherization of 2-3 times the patient's full blood volume, until the target cells are obtained, and the introduction of reprogrammed cells to the patient by intravenous infusion into the jugular vein or the vein of the arm or thigh (patent for the invention, VO Mo 2635317, publication date - 11/10/2017). At the same time, reprogrammed cells containing target cells include pluripotent stem cells, embryonic stem cells.

Недоліком способу є його складність та травматичність при отриманні аутологічних клітин, необхідність перепрограмування клітин для подальшого їх введення.The disadvantage of the method is its complexity and trauma when obtaining autologous cells, the need to reprogram the cells for their further introduction.

Найбільш близьким до способу лікування аутоімунної азооспермії, є спосіб лікування аутоїмунного чоловічого безпліддя, запропонований Сухих Г.Т., Божедомовим В.А., КулаковимThe closest to the method of treatment of autoimmune azoospermia is the method of treatment of autoimmune male infertility proposed by Sukhikh G.T., Bozhedomov V.A., Kulakov

В.І. (патент ВО Мо 2155596, дата публікації - 10.09.2000 р.). Спосіб полягає в трансплантації фетальних тканин фетуса 16-20 тижнів гестації. Суспензію клітин і клітинних асоціатів плаценти, мезенхіми і слизової кишечнику вводять внутрішньом'язово одномоментно окремо. Сумарна доза 10-100 млн клітин.V.I. (patent VO Mo 2155596, publication date - September 10, 2000). The method consists in the transplantation of fetal tissues of a fetus of 16-20 weeks of gestation. A suspension of cells and cell associates of the placenta, mesenchyme and intestinal mucosa is administered intramuscularly at one time separately. The total dose is 10-100 million cells.

Спосіб дозволяє знизити продукцію АСАТ всіх класів - ІА, ЗМ, ІдС. Це підвищує ефективність лікування захворювання. Недоліком способу є складність відтворення даної методики в широкій медичній практиці.The method allows to reduce the production of ASAT of all classes - IA, ZM, IDS. This increases the effectiveness of the treatment of the disease. The disadvantage of the method is the difficulty of reproducing this technique in wide medical practice.

Задачею винаходу, що заявляється, є удосконалення способу лікування аутоімунної азооспермії у чоловіків препаратами з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин, в якому за рахунок запропонованої послідовності проведення лікування зThe object of the claimed invention is to improve the method of treatment of autoimmune azoospermia in men with preparations made from material of embryofetal origin and cells isolated from it, in which due to the proposed sequence of treatment with

Зо використанням розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин емпірично підібраного складу, забезпечується підвищення ефективності лікування чоловіків з гормональною азооспермією, зокрема покращення гормонального стану чоловіка, покращення кількості та якості сперматозоїдів без необхідності підбору донора за антигенами гістосумісності. В результаті - підвищується ймовірність до запліднення. Крім того, забезпечується запобігання виникненню алергійних реакцій чоловіків з гормональною азооспермією при проведенні лікування.The use of stem cell suspensions thawed after cryopreservation of an empirically selected composition improves the effectiveness of treatment of men with hormonal azoospermia, in particular, improving the male's hormonal status, improving the number and quality of spermatozoa without the need to select a donor based on histocompatibility antigens. As a result, the probability of fertilization increases. In addition, prevention of allergic reactions in men with hormonal azoospermia during treatment is ensured.

Поставлена задача вирішується запропонованим способом лікування чоловіків з аутоїмунною азооспермією, що включає приготування та введення препарату з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин, в якому виготовляють та вводять щонайменше три препарати з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин, кожна з яких містить терапевтично ефективну кількість стовбурових клітин, виділених з матеріалу фетуса людини 7-11 тижня гестації при цьому основна суспензія містить стовбурові клітини з фетальної печінки, друга суспензія містить стовбурові клітини фетального головного мозку, а третя суспензія містить стовбурові клітини хоріону, причому основну суспензію, яка містить стовбурові клітини з фетальної печінки, вводять внутрішньовенно крапельно в об'ємі не менше за 0,4 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,8х106 в 1 мл та відсотком живих клітин не менше 71 9о за одне введення, другу суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин фетального головного мозку вводять підшкірно в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю клітин не менше за 0,3х105 в 1 мл за одне введення, а третю суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з хоріону вводять в органи-мішені (мошонка, простата) в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за0,3х106в8в 1 мл.The task is solved by the proposed method of treatment of men with autoimmune azoospermia, which includes the preparation and administration of a drug from material of embryofetal origin and cells isolated from it, in which at least three drugs from material of embryofetal origin and cells isolated from it are manufactured and administered in the form of suspensions thawed after cryopreservation stem cells, each of which contains a therapeutically effective amount of stem cells isolated from material of a human fetus of 7-11 weeks of gestation, with the main suspension containing stem cells from the fetal liver, the second suspension containing stem cells from the fetal brain, and the third suspension containing stem cells from the chorion , and the main suspension, which contains stem cells from the fetal liver, is injected intravenously in a volume of at least 0.4 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.8x106 in 1 ml and the percentage of living cells at least 71 9o for one injection, the second suspension of cryopreserved fetal brain stem cells is injected subcutaneously in a volume of at least 0.2 ml per course of treatment with the number of cells at least 0.3x105 in 1 ml for one injection, and the third suspension of cryopreserved stem cells cells from the chorion are injected into the target organs (scrotum, prostate) in a volume of at least 0.2 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.3x106v8 in 1 ml.

При цьому кріоконсервовані суспензії стовбурових клітин вводять одночасно з проведенням стандартної терапії. Як стандартну терапію призначають індивідуально налаштований курс магнітотерапії та/або антибіотикотерапію, та/або протизапальну терапію, та/або гормональну терапію, та/або дезінтоксикаційну терапію.At the same time, cryopreserved stem cell suspensions are administered simultaneously with standard therapy. An individually adjusted course of magnetic therapy and/or antibiotic therapy, and/or anti-inflammatory therapy, and/or hormonal therapy, and/or detoxification therapy are prescribed as standard therapy.

Основну суспензію вводять на фоні 200 мл 0,9 95 фізіологічного розчину натрію хлориду зі швидкістю 20-40 крапель за хвилину.The main suspension is injected against the background of 200 ml of 0.9 95 physiological sodium chloride solution at a rate of 20-40 drops per minute.

Перед внутрішньовенним введенням основної суспензії додатково проводять премедикацію шляхом внутрішньовенного струминного введення 10 мг димедролу та 30 мг преднізолону.Before the intravenous administration of the main suspension, premedication is additionally carried out by means of intravenous injection of 10 mg of diphenhydramine and 30 mg of prednisolone.

До введення препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин пацієнт додатково проходить повне загальноклінічне лабораторне обстеження.Before the introduction of drugs from the material of embryo-fetal origin and the cells isolated from it, the patient additionally undergoes a complete general clinical laboratory examination.

До введення препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин пацієнт додатково проходить додаткові лабораторні обстеження. Як додаткові лабораторні обстеження проходить імунограму, визначення гормонального стану, вірусологічні дослідження, визначення онкомаркерів.Before the introduction of drugs from the material of embryo-fetal origin and the cells isolated from it, the patient additionally undergoes additional laboratory examinations. As additional laboratory examinations, an immunogram, determination of hormonal status, virological studies, and determination of tumor markers are performed.

До введення препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин пацієнт додатково проходить огляд суміжних спеціалістів, залежно від причини азооспермії, перелік яких встановлює лікуючий лікар індивідуально (ендокринолог- репродуктолог, генетик).Before the introduction of drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient additionally undergoes an examination of related specialists, depending on the cause of azoospermia, the list of which is established by the attending physician individually (endocrinologist-reproductive specialist, geneticist).

Після проведення комплексного лікування препаратами з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин здійснюють контроль стану здоров'я пацієнта за індивідуальним протоколом.After comprehensive treatment with drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient's health is monitored according to an individual protocol.

Шляхом довготривалого спостереження за чоловіками, що страждають на гормональну азооспермію, ми встановили, що за рахунок введення суспензій емпірично підібраного складу, що містять кріоконсервовані стовбурові клітини ембріофетального походження, а саме внутрішньовенного крапельного введення основної суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки в об'ємі не менше за 0,4 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,8х106 в 1 мл та відсотком живих клітин не менше 71 95 за одне введення, підшкірного введення другої суспензії стовбурових клітини з фетального головного мозку в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю клітин не менше за 0,3х105 в 1 мл за одне введення та введення в органи мішені (калитка, простата) третьої суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з хоріону в об'ємі не менше за 0,2 мл на курс лікування з кількістю ядровмісних клітин не менше за 0,3х105 в 1 мл за одне введення, забезпечується цілеспрямований вплив на органи, що потребують відновлення клітинного мікрооточення та заміщення пошкоджених і виснажених спеціалізованих клітин відповідного органа новими життєздатними стовбуровими клітинами, за рахунок чого відбувається підвищення регенеративної здатності органів та систем,Through long-term observation of men suffering from hormonal azoospermia, we established that due to the introduction of suspensions of an empirically selected composition containing cryopreserved stem cells of embryo-fetal origin, namely intravenous drip administration of the main suspension of stem cells from the fetal liver in a volume of at least for 0.4 ml per course of treatment with the number of nucleated cells not less than 0.8x106 in 1 ml and the percentage of living cells not less than 71 95 for one administration, subcutaneous administration of the second suspension of stem cells from the fetal brain in a volume of not less than 0.2 ml per course of treatment with a cell count of at least 0.3x105 in 1 ml for one administration and administration of the third suspension of cryopreserved stem cells from the chorion in a volume of at least 0.2 ml into the target organs (valve, prostate) per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.3x105 in 1 ml for one administration, a targeted effect on organs that require restoration of the cellular microenvironment and replacement of damaged and exhausted specialized cells of the relevant organ with new viable stem cells is ensured, due to which there is an increase regenerative capacity of organs and systems,

Зо забезпечується стимуляція роботи власних біологічно активних речовин хворого у природних умовах за рахунок різноманітних нейротрофічних факторів, що виділяють стовбурові клітини, та забезпечується потрапляння оптимальної кількості стовбурових клітин до всіх органів та систем. Крім того, відбувається утворення та проростання сітки нових кровоносних судин до ураженого органа та м'язів, що створюють додатковий кровотік, в результаті чого покращується механізм сперматогенезу і збільшується кількість та якість сперматозоїдів. При цьому покращується якість життя чоловіків з гормональною азооспермією. Крім того, проведення премедикації перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки дозволяє запобігти виникненню алергійних реакцій хворих під час проведення лікування при хорошій переносимості лікування.This ensures the stimulation of the patient's own biologically active substances in natural conditions due to various neurotrophic factors secreted by stem cells, and ensures that the optimal number of stem cells reach all organs and systems. In addition, a network of new blood vessels is formed and sprouts to the affected organ and muscles, which create additional blood flow, as a result of which the mechanism of spermatogenesis improves and the number and quality of spermatozoa increases. At the same time, the quality of life of men with hormonal azoospermia improves. In addition, premedication before the introduction of a suspension of stem cells from the fetal liver, thawed after cryopreservation, allows to prevent the occurrence of allergic reactions in patients during the treatment with good tolerability of the treatment.

Відомо, що клітини ембріофетального походження здатні до росту, розмноження, диференціації, міграції та встановлення зв'язків 3 іншими клітинами. Порівняно з клітинами зрілих тканин, вони мають кращу здатність до проліферації, їх введення є ефективнішим також з огляду на утворення великої кількості ростових факторів. Клітини з фетальної печінки можуть виробляти значну кількість факторів росту, нейротрофічного фактора, цитокінів, інтерлейкінів, що сприяють виживанню та росту, проліферації, диференціації та можуть стимулювати регенерацію за рахунок оточуючих клітин хазяїна.It is known that cells of embryo-fetal origin are capable of growth, reproduction, differentiation, migration and establishment of connections with 3 other cells. Compared to the cells of mature tissues, they have a better ability to proliferate, their introduction is more effective also due to the formation of a large number of growth factors. Cells from the fetal liver can produce a significant amount of growth factors, neurotrophic factor, cytokines, interleukins, which promote survival and growth, proliferation, differentiation, and can stimulate regeneration at the expense of surrounding host cells.

Крім цього, клітини з фетальної печінки мають здатність виживати при нижчому рівні кисню, ніж їх повністю диференційовані аналоги, що робить їх більш стійкими до ішемічного ушкодження як під час маніпуляцій іп міо, так і після їх введення. Проліферуючі або незрілі клітини з фетальної печінки переважно не мають довгих відростків або сильної міжклітинної адгезії і тому зазнають менших пошкоджень під час приготування суспензії стовбурових клітин.In addition, cells from fetal liver have the ability to survive at lower oxygen levels than their fully differentiated counterparts, making them more resistant to ischemic injury both during ip myo manipulations and after their administration. Proliferating or immature cells from the fetal liver mostly do not have long processes or strong intercellular adhesion and therefore suffer less damage during the preparation of the stem cell suspension.

Ці властивості дозволяють вводити стовбурові клітини з фетальної печінки шляхом внутрішньовенної ін'єкції у вигляді суспензії. Ці характеристики можуть пояснити і підвищене виживання клітин і тканин фетальної печінки, в порівнянні з дорослими, після кріоконсервації.These properties make it possible to introduce stem cells from the fetal liver by intravenous injection in the form of a suspension. These characteristics can also explain the increased survival of fetal liver cells and tissues, compared to adults, after cryopreservation.

Основні лікувальні ефекти базуються на здатності стовбурових клітин впливати на метаболізм та імунну систему, а також на відновлення пошкоджених клітин і тканин.The main therapeutic effects are based on the ability of stem cells to influence metabolism and the immune system, as well as to restore damaged cells and tissues.

Використання клітинних технологій в лікуванні чоловічого безпліддя впливає на судинний, гормональний, метаболічний та запальний фактори, при цьому досягаючи позитивного ефекту в клінічних випадках, що були безперспективні для традиційної терапії.The use of cellular technologies in the treatment of male infertility affects vascular, hormonal, metabolic and inflammatory factors, while achieving a positive effect in clinical cases that were unpromising for traditional therapy.

Стовбурові клітини плода (Е5С), що використовуються для лікування, при таргетному (цільовому) введенні позитивно впливають на орган-мішень (мошонку, простату), покращуючи постачання крові та кисню і, як результат, відбувається заміна пошкоджених клітин та активне формування нових артерій (відновлення та покращення судинної системи органу).Fetal stem cells (E5C) used for treatment, when administered in a targeted manner, have a positive effect on the target organ (scrotum, prostate), improving blood and oxygen supply and, as a result, replacement of damaged cells and active formation of new arteries ( restoration and improvement of the organ's vascular system).

Стимулююча та протекторна дія стовбурових клітин плода у віддаленій перспективі знижує ризик розвитку та/або рецидиву хронічних захворювань статевої системи чоловіка, що в свою чергу підвищує якість його репродуктивної здатності. Таким чином клітинна терапія не тільки усуває наявні патології, прискорює відновлення після перенесених захворювань, але й захищає в подальшому (знижує вірогідність) від негативних впливів повсякденного оточуючого середовища, шляхом посилення власних місцевих протекторних функцій статевої системи чоловіка.The stimulating and protective effect of fetal stem cells in the long term reduces the risk of development and/or recurrence of chronic diseases of the male reproductive system, which in turn increases the quality of his reproductive capacity. In this way, cell therapy not only eliminates existing pathologies, accelerates recovery after transferred diseases, but also protects in the future (reduces the probability) from the negative effects of the everyday environment, by strengthening the own local protective functions of the male reproductive system.

Покращення репродуктивних показників, які можна очікувати після терапії стовбуровими клітинами: - стимуляція сперматогенезу (підвищення кількості сперматозоїдів в еякуляті, чи навіть початок вироблення сперматозоїдів при попередній азооспермії); - покращення рухливості сперматозоїдів; збільшення кількості морфологічно повноцінних (без дефектів) сперматозоїдів в еякуляті; - зменшення вираженості або повне усунення запальних змін в еякуляті; - збільшення тривалості безрецидивного періоду (в порівнянні з традиційною терапією) при запальних захворюваннях чоловічої статевої системи; - покращення лібідо, еректильної функції.Improvement of reproductive indicators that can be expected after stem cell therapy: - stimulation of spermatogenesis (increase in the number of sperm in the ejaculate, or even the beginning of sperm production in case of previous azoospermia); - improvement of sperm motility; an increase in the number of morphologically complete (without defects) spermatozoa in the ejaculate; - reduction of severity or complete elimination of inflammatory changes in the ejaculate; - increase in the duration of the relapse-free period (compared to traditional therapy) in inflammatory diseases of the male reproductive system; - improvement of libido, erectile function.

При цьому виключається необхідність підбору донора за антигенами гістосумісності та забезпечується можливість введення суспензії стовбурових клітин фетальної печінки, головного мозку та хоріону повторно. Крім того, проведення премедикації перед введенням суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки дозволяє запобігти виникненню алергічних реакцій та запобігти відторгненню стовбурових клітин з фетальної печінки організмом хворих під час проведення лікування. Причому, введення вказаних трьох суспензій стовбурових клітин одночасно з проведенням стандартної медикаментозної терапії дозволяє підсилити ефективність лікування азооспермії.At the same time, the need to select a donor based on histocompatibility antigens is eliminated and the possibility of re-introducing the suspension of stem cells of the fetal liver, brain, and chorion is ensured. In addition, premedication before the introduction of the suspension of stem cells from the fetal liver prevents the occurrence of allergic reactions and prevents the rejection of the stem cells from the fetal liver by the patient's body during the treatment. Moreover, the introduction of the specified three suspensions of stem cells simultaneously with the standard medical therapy allows to increase the effectiveness of the treatment of azoospermia.

Зо Спосіб лікування чоловіків з аутоїмунною азооспермією використовують наступним чином.The method of treatment of men with autoimmune azoospermia is used as follows.

Для цього виготовляють три препарати у вигляді суспензії стовбурових клітин, основна суспензія з яких містить стовбурові клітини з фетальної печінки, друга суспензія містить стовбурові клітини з фетального головного мозку, а третя суспензія містить стовбурові клітини хоріону, виділені з матеріалу фетусу людини 7-11 тижня гестації. Ембріони отримують після штучного переривання вагітності по соціальних показаннях у здорових жінок.For this, three preparations are made in the form of a suspension of stem cells, the main suspension of which contains stem cells from the fetal liver, the second suspension contains stem cells from the fetal brain, and the third suspension contains stem cells of the chorion isolated from the material of a human fetus of 7-11 weeks of gestation . Embryos are obtained after artificial termination of pregnancy for social reasons in healthy women.

В кріобанку підбирають суспензію стовбурових клітин з фетальної печінки з потрібними характеристиками, а саме: термін гестації 7-11 тижнів, кількість ядровмісних клітин не менше 0,вх105/мл, відсоток живих клітин не менше 71 95 за одне введення, загальний об'єм суспензії не менше 0,4 мл на курс лікування, враховувати стать обов'язково.A suspension of stem cells from the fetal liver with the required characteristics is selected in the cryobank, namely: gestation period of 7-11 weeks, the number of nucleated cells at least 0.105/ml, the percentage of living cells at least 71 95 per injection, the total volume of the suspension not less than 0.4 ml per course of treatment, gender must be taken into account.

В кріобанку підбирають суспензії стовбурових клітин з фетального головного мозку та хоріону з потрібними характеристиками, а саме: термін гестації 7-11 тижнів, кількість ядровмісних клітин не менше 0,3х105/мл, загальний об'єм суспензії не менше 0,2 мл на курс лікування, враховувати стать обов'язково.Suspensions of stem cells from the fetal brain and chorion with the required characteristics are selected in the cryobank, namely: the gestation period is 7-11 weeks, the number of nucleated cells is not less than 0.3x105/ml, the total volume of the suspension is not less than 0.2 ml per course treatment, gender must be taken into account.

Суспензії підбирають індивідуально для кожного пацієнта. Розморожування суспензій проводять за стандартним протоколом. Контейнери безпосередньо перед введенням виймають з рідкого азоту, занурюють у водяну баню при температурі «37 "С та витримують до появи рідкої фази. Подальші маніпуляції проводять при кімнатній температурі з суворим дотриманням правил асептики. Час перебування розморожених суспензій стовбурових клітин при кімнатній температурі не повинен перевищувати 2 години. При цьому, перед введенням суспензій стовбурових клітин здійснюють додатковий контроль їх якості, зокрема, проводять мікроскопію та здійснюють підрахунок кількості життєздатних клітин за допомогою автоматичного клітинного аналізатора чи візуально під мікроскопом в лічильній камері.Suspensions are selected individually for each patient. Thawing of suspensions is carried out according to a standard protocol. Containers are removed from liquid nitrogen immediately before introduction, immersed in a water bath at a temperature of "37"C and held until the liquid phase appears. Further manipulations are carried out at room temperature with strict adherence to the rules of asepsis. The time of thawed suspensions of stem cells at room temperature should not exceed 2 hours. At the same time, before the introduction of stem cell suspensions, additional quality control is carried out, in particular, microscopy is carried out and the number of viable cells is counted using an automatic cell analyzer or visually under a microscope in a counting chamber.

Основну суспензію, що містить стовбурові клітини з фетальної печінки, вводять внутрішньовенно крапельно через систему для переливання крові на фоні 200 мл 0,995 фізіологічного розчину натрію хлориду після попередньої премедикації внутрішньовенно струминно 10 мг димедролу та 30 мг преднізолону. Швидкість введення клітин 20-40 крапель за хвилину. Другу суспензію, що містить стовбурові клітини фетального мозку, вводять підшкірно, а третю суспензію, що містить клітини хоріону, вводять в органи-мішені (мошонка, простата).The main suspension containing stem cells from the fetal liver is injected intravenously through a blood transfusion system against a background of 200 ml of 0.995 physiological sodium chloride solution after premedication with an intravenous stream of 10 mg of diphenhydramine and 30 mg of prednisolone. The rate of introduction of cells is 20-40 drops per minute. The second suspension containing fetal brain stem cells is injected subcutaneously, and the third suspension containing chorion cells is injected into target organs (scrotum, prostate).

Всі суспензії що знаходяться в кріобанку для клінічного застосування, пройшли 60 бактеріологічний та вірусологічний контроль (НІМІ, НІМ2, НВМУ, НСУ, НОМ, СМУ, ЕВУ, ННУб,All suspensions in the cryobank for clinical use have passed 60 bacteriological and virological controls (NIMI, NIM2, NVMU, NSU, NOM, SMU, EVU, NNUb,

НЗМ 1,2, ВибеїІа, Раг/оміги5 В19, Ттеропета раїїдит, Тохоріазта допаїї, Спіатіадіа ігаснпотаї 5,NZM 1,2, Vibeiiia, Rag/omigi5 B19, Tteropeta raidit, Tochoriazta dopaii, Spiathiadia igasnpotai 5,

Мусоріазхта Ппотіпі5, Мусоріазта депіїаійит, Огеаріаєта Раг/ит, Огеаїуїїсит), мають визначену кількість ядровмісних клітин та СО34ж, кількість КУО, визначену життєздатність клітин до кріозаморожування.Musoriazhta Ppotipii5, Musoriazhta depiiaiiit, Ogeariaeta Rag/it, Ogeaiuiyisit), have a determined number of nucleated cells and CO34, the number of CFU, determined viability of cells before cryo-freezing.

Основну суспензію з фетальної печінки з визначеними характеристиками взірця підбирають індивідуально залежно від даних спермограми. Повторний курс клітинної терапії препаратами ембріофетального походження - можливий.The main suspension from the fetal liver with defined characteristics of the sample is selected individually depending on the spermogram data. A repeated course of cell therapy with drugs of embryo-fetal origin is possible.

На один курс лікування, як правило, використовують суспензії, виготовлені з матеріалу фетуса одного ембріона людини.For one course of treatment, as a rule, suspensions are used, made from the material of the fetus of one human embryo.

Перед початком проведення комплексного лікування чоловіків з гормональною азооспермією шляхом застосування препаратів ембріофетального походження та виділених з нього клітин оцінюють стан здоров'я пацієнта шляхом проведення повного загальноклінічного лабораторного обстеження.Before starting the complex treatment of men with hormonal azoospermia by using preparations of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient's health is assessed by conducting a full general clinical laboratory examination.

Для цього усі пацієнти проходять передінфузійне обстеження, до якого входять: 1. Загальноклінічні обстеження: - загальноклінічний огляд, який включає антропометричні дані (зріст, вага, окружність талії, окружність стегон, рівень артеріального тиску, пульс); - загальний аналіз крові з лейкоцитарною формулою (забір - натще); - загальний аналіз сечі; - спермограма (на фоні чотириденного утримання); - гормони крові (тестостерон загальний, тестостерон вільний, пролактин, ФСГ, ЛГ, ДГТ, секс- зв'язуючий глобулін, естрадіол, хоріонічний гонадотропін - забір бажано натще, вранці); - аналіз крові на РБА ІгеєелЛоїа! (за тиждень до забору крові утриматись від сексу/мастурбації, прийому алкоголю, м'яса, трансректальних механічних подразнень, підйому температури тіла); - аналіз крові на альфа-фетопротеїн (забір вранці, натще); - біохімічний аналіз крові: креатинін, сечовина, сечова кислота, загальний білок, ліпідограма, глюкоза, глікозилований гемоглобін, білірубін загальний/прямий, коагулограма, група та резус крові (забір - натще); - електрокардіограма;For this, all patients undergo a pre-infusion examination, which includes: 1. General clinical examinations: - general clinical examination, which includes anthropometric data (height, weight, waist circumference, hip circumference, blood pressure level, pulse); - general blood test with leukocyte formula (taking on an empty stomach); - general analysis of urine; - spermogram (on the background of four-day abstinence); - blood hormones (total testosterone, free testosterone, prolactin, FSH, LH, DHT, sex-binding globulin, estradiol, chorionic gonadotropin - preferably taken on an empty stomach, in the morning); - blood test for RBA IgeeelLoia! (one week before blood sampling, refrain from sex/masturbation, alcohol, meat, transrectal mechanical irritations, rise in body temperature); - blood test for alpha-fetoprotein (taken in the morning, on an empty stomach); - biochemical blood analysis: creatinine, urea, uric acid, total protein, lipidogram, glucose, glycosylated hemoglobin, total/direct bilirubin, coagulogram, blood group and rhesus (fasting); - electrocardiogram;

Зо - ультрасонографія - органи черевної порожнини (печінка, жовчний міхур, підшлункова залоза, селезінка), нирки, сечовий міхур, щитовидна залоза, органи калитки, статевого члена; - транректальна ультрасонографія простати; - пальцеве ректальне дослідження простати; - мікроскопія зскрібка з уретри, секрету передміхурової залози; - комплексна діагностика геніальних екскретів на захворювання, що передаються статевим шляхом та умовно-патогенну флору (Андрофлор). 2. Анкета-опитувальник, яка складається з 29 запитань і оцінюється в балах: 1. Вік пацієнта. 2. Зріст/вага, індекс маси тіла. 3. Перенесені хірургічні втручання. 4. Алергічні реакції в анамнезі. 5. Наявність хронічних захворювань. 6. Прийом медикаментів на систематичній основі. 7. Частота сексуальних контактів (середня протягом місяця). 8. Задоволеність якістю сексуального життя (по 10-бальній шкалі: 0 - зовсім незадоволений, 10 - повністю задоволений). Що конкретно не задовольняє в якості сексуального життя? 9. Відчуття дискомфорту/болю в області промежини, заднього проходу, мошонки, статевого члена, позадулонної області? Якщо так, то вказати тривалість та частоту появи даних скарг. 10. Сечовипускання: натужування при сечовипусканні, відчуття неповно опорожнения сечового міхура, дискомфорт при сечовипусканні, імперативні (наказові) позиви до сечовипускання, помащене сечовипускання (вказати кількість за добу), нічні підйоми до сечовипускання (вказати кількість за ніч). 11. Тривалість незахищених статевих контактів (без контрацепції). 12. Наявність запліднень/вагітностей у статевої партнерки (якщо так - вказати роки і протікання вагітності). 13. Побутові/професійні шкідливості (перегрівання/переохолодження, контакти з хімікатами, опромінення, малорухомий образ життя). 14. Шкідливі звички. 15. Якість нічного сну (при незадоволенні якістю - описати скарги). бо 16. Апетит.Zo - ultrasonography - organs of the abdominal cavity (liver, gall bladder, pancreas, spleen), kidneys, bladder, thyroid gland, organs of the portal vein, penis; - transrectal ultrasonography of the prostate; - digital rectal examination of the prostate; - microscopy of a scraping from the urethra, secretion of the prostate gland; - complex diagnosis of genial excreta for sexually transmitted diseases and conditionally pathogenic flora (Androflor). 2. Questionnaire, which consists of 29 questions and is evaluated in points: 1. Age of the patient. 2. Height/weight, body mass index. 3. Postponed surgical interventions. 4. Allergic reactions in history. 5. Presence of chronic diseases. 6. Taking medications on a systematic basis. 7. Frequency of sexual contacts (average during the month). 8. Satisfaction with the quality of sexual life (on a 10-point scale: 0 - completely dissatisfied, 10 - completely satisfied). What specifically does not satisfy the quality of sex life? 9. A feeling of discomfort/pain in the perineum, anus, scrotum, penis, or pubic area? If so, indicate the duration and frequency of these complaints. 10. Urination: straining during urination, a feeling of incomplete emptying of the bladder, discomfort during urination, imperative urges to urinate, lubricated urination (indicate the number per day), nocturnal urges to urinate (indicate the number per night). 11. Duration of unprotected sexual contact (without contraception). 12. The presence of fertilizations/pregnancies in the sexual partner (if so, indicate the years and course of pregnancy). 13. Household/professional hazards (overheating/hypocooling, contact with chemicals, radiation, sedentary lifestyle). 14. Harmful habits. 15. Quality of night's sleep (if dissatisfied with quality - describe complaints). because 16. Appetite.

17. Фізична активність/наявність спортивних тренувань (якщо так, то вказати, які саме фізичні навантаження, тривалість одного тренування та частота тренувань в тиждень, прийом спортивного харчування).17. Physical activity/availability of sports training (if so, specify what kind of physical activity, duration of one workout and frequency of training per week, intake of sports nutrition).

Причому, вказані суспензії стовбурових клітин вводять одночасно з проведенням стандартної терапії. Як стандартну терапію призначають індивідуально налаштований курс магнітотерапії та/або антибіотикотерапію, та/або протизапальну терапію, та/або гормональну терапію, та/або дезінтоксикаційну терапію.Moreover, these suspensions of stem cells are administered simultaneously with standard therapy. An individually adjusted course of magnetic therapy and/or antibiotic therapy, and/or anti-inflammatory therapy, and/or hormonal therapy, and/or detoxification therapy are prescribed as standard therapy.

Після проведення лікування чоловіків з аутоїмунною азооспермією шляхом застосування препаратів ембріофетального походження та виділених з нього клітин оцінюють стан здоров'я пацієнта через 6 і 12 місяців, а потім щорічно здійснюють контроль стану здоров'я пацієнта за індивідуально розробленим протоколом. При цьому точки спостереження вибирають на основі клінічного досвіду, згідно з протоколом введення препаратів ембріофетального походження та виділених з нього клітин.After treatment of men with autoimmune azoospermia by using preparations of embryofetal origin and cells isolated from it, the patient's health is assessed after 6 and 12 months, and then the patient's health is monitored annually according to an individually developed protocol. At the same time, observation points are chosen on the basis of clinical experience, according to the protocol for the administration of preparations of embryo-fetal origin and cells isolated from it.

До основного переліку обстежень входить: 1. Загальноклінічне обстеження. 2. Загальноклінічні лабораторні дослідження: загальний аналіз крові, загальний аналіз сечі, біохімічне дослідження крові (печінкові, ниркові проби, білок та його фракції), коагулограма, глюкоза крові, ліпідограма - двічі на рік. 3. Серологічні дослідження: вірус гепатиту В, гепатиту С, віруси герпесу - раз на рік. 4. Визначення рівня гормонів: дегідроепіандростерону (ОНЕА) та кортизолу; гормонів щитовидної залози (тиреотропний (Т5Н), тироксин вільний (Егее Т4), трийодтиронін (Егеє Т3), визначення рівня мелатоніну, тест з соматомедином-сС - двічі на рік. 5. Імунограма - двічі на рік. 6. Визначення онкомаркерів: АЕР (АФП - альфафетопротеїн), СЕА (раковоембріональний антиген), СА 27-29 (пухлина молочних залоз), 500 (антиген плоскоклітинної карциноми (рак шийки матки та ін.), СА125 (пухлина яєчника), СА19-9 (пухлини шлунка та підшлункової залози),The main list of examinations includes: 1. General clinical examination. 2. General clinical laboratory tests: general blood test, general urinalysis, biochemical blood test (liver, kidney samples, protein and its fractions), coagulogram, blood glucose, lipidogram - twice a year. 3. Serological tests: hepatitis B virus, hepatitis C virus, herpes viruses - once a year. 4. Determination of the level of hormones: dehydroepiandrosterone (ONEA) and cortisol; thyroid hormones (thyrotropin (T5H), free thyroxine (Egee T4), triiodothyronine (Egee T3), determination of melatonin level, test with somatomedin-cS - twice a year. 5. Immunogram - twice a year. 6. Determination of tumor markers: AER (AFP - alphafetoprotein), CEA (carcinoembryonic antigen), CA 27-29 (mammary gland tumor), 500 (antigen of squamous cell carcinoma (cervical cancer, etc.), CA125 (ovarian tumor), CA19-9 (tumors of the stomach and pancreas glands)

РБЗА (простатспецифічний антиген у чоловіків). 7. Визначення окислювальних стрес маркерів: МОА (окислювально модифіковані ліпопротеїди низької щільності), ізопростан, 500 (супероксиддисмутаза), 8-ОН-дезоксигуанозинRBZA (prostate-specific antigen in men). 7. Determination of oxidative stress markers: MOA (oxidatively modified low-density lipoproteins), isoprostane, 500 (superoxide dismutase), 8-OH-deoxyguanosine

Зо (8-ОНнАаС) - модифікований нуклеозид (канцерогенез). 8. Електрокардіографія. Ехокардіографія - раз на рік. 9. Спірометрія - раз на рік. 10. Аудіометрія - раз на рік. 11. Динамометрія - раз на рік. 12. Огляд офтальмолога - раз на рік. 13. УЗД органів черевної порожнини, органів малого таза та щитовидної залози - раз на рік. 14. Рентгенографія ОГП - раз на рік. 15. Огляд суміжних спеціалістів (за показами). 16. Додаткові інструментальні методи дослідження (за показами).Zo (8-OHnAaS) is a modified nucleoside (carcinogenesis). 8. Electrocardiography. Echocardiography - once a year. 9. Spirometry - once a year. 10. Audiometry - once a year. 11. Dynamometry - once a year. 12. Examination by an ophthalmologist - once a year. 13. Ultrasound of abdominal organs, pelvic organs and thyroid gland - once a year. 14. X-ray of OHP - once a year. 15. Review of related specialists (according to testimony). 16. Additional instrumental research methods (as indicated).

Так, з 2017 по 2019 роки у клініці клітинної терапії були проліковані 14 чоловіків, хворих на аутоїмунну азооспермію. У всіх хворих спостерігалось покращення показників спермограми, підвищення фертильності. Після проведеного введення суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки в жодному випадку не спостерігались ускладнення чи побічні явища, в тому числі реакція "трансплантат проти хазяїна" (РТПГ).Thus, from 2017 to 2019, 14 men with autoimmune azoospermia were treated at the cell therapy clinic. Improvement of spermogram indicators and increase of fertility were observed in all patients. After the introduction of the suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver, no complications or side effects were observed in any case, including graft-versus-host disease (GVHD).

Також, після проведеного лікування спостерігалось покращення еректильної функції пацієнтів, зниження частоти рецидивів запального процесу сечостатевої системи чоловіків.Also, after the treatment, there was an improvement in the erectile function of the patients, a decrease in the frequency of relapses of the inflammatory process of the genitourinary system in men.

Починаючи з 6 місяця, в порівнянні з показниками до лікування, відмічалось підвищення рівня тестостерону крові.Starting from the 6th month, in comparison with the indicators before the treatment, an increase in the blood testosterone level was noted.

Винахід, що заявляється, пояснюється наступними прикладами.The claimed invention is illustrated by the following examples.

Приклад 1Example 1

Пацієнт Ш., 1987 р.н., історія хвороби Мо 158989. Хворий знаходився в клініці клітинної терапії з метою лікування азооспермії. Із анамнезу авідомо, що протягом п'яти років безплідний шлюб. Неоднорзове лікування у репродуктологів - без ефекту. Пацієнт пройшов курс антибактеріальної терапії (перелік препаратів на надав) - без видимого ефекту.Patient Sh., born in 1987, medical history No. 158989. The patient was in the cell therapy clinic for the treatment of azoospermia. It is known from the anamnesis that the marriage has been fruitless for five years. Non-medical treatment by reproductive specialists has no effect. The patient underwent a course of antibacterial therapy (the list of drugs was provided) - without any visible effect.

Анамнез життя: ТЬс, вірусний гепатит, малярію, цукровий діабет, венеричні захворювання - заперечує. В анамнезі - операція з приводу гнійного ексудативного плевриту, в дитинстві - паротит, атрофоване/гіпоплазоване праве яєчко. Об'єктивно: Правильної будови тіла, ходить самостійно. Шкірні покриви та слизові оболонки чисті, звичайного кольору. Язик чистий, вологий. Доступні огляду лімфовузли не пальпуються. Перкуторно: межі серця без змін. бо Мелодія серцевої діяльності правильна, тони звучні. При перкусії легень - на симетричних ділянках -легеневий ясний звук. В легенях вислуховується везикулярне дихання без хрипів, жорстке. Живіт при пальпації м'який, безболісний. Петлі кишечнику без змін. Печінка та селезінка не збільшені, безболісні при пальпації. Симптом Пастернацького негативний з обох боків. Фізіологічні відправлення не порушені, регулярні. Пульсація периферичних артерій збережена.Life history: TB, viral hepatitis, malaria, diabetes, venereal diseases - denies. In the anamnesis - surgery for purulent exudative pleurisy, in childhood - parotitis, atrophied/hypoplastic right testicle. Objectively: Correct body structure, walks independently. Skin and mucous membranes are clean, normal color. The tongue is clean, moist. Lymph nodes available for examination are not palpable. Percussion: the borders of the heart are unchanged. because the melody of cardiac activity is correct, the tones are sonorous. When percussing the lungs - in symmetrical areas - a clear lung sound. In the lungs, vesicular breathing is heard without wheezing, hard. The abdomen is soft and painless on palpation. Intestinal loops unchanged. The liver and spleen are not enlarged, painless on palpation. Pasternacki's symptom is negative on both sides. Physiological discharges are not disturbed, regular. Pulsation of peripheral arteries is preserved.

Хворому було проведено курс лікування відповідно до способу, що заявляється. Перед введенням розмороженої після кріоконсервації основної суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки хворому була проведена премедикація шляхом внутрішньовенного введення мг димедролу і 30 мг преднізолону. Введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин 10 з фетальної печінки в об'ємі 2,7 мл шляхом внутрішньовенного крапельного введення. На другий день введено другу суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку підшкірно в об'ємі 0,9 мл та суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з клітин хоріону в мошонку та простату під УЗД контролем в об'ємі 0,5 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки: вік фетуса - 8 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 9,42х105 в 1 мл.The patient underwent a course of treatment according to the claimed method. Before the introduction of the main suspension of stem cells from the fetal liver thawed after cryopreservation, the patient was premedicated by intravenous administration of mg of diphenhydramine and 30 mg of prednisone. A suspension of cryopreserved stem cells 10 from the fetal liver in a volume of 2.7 ml was introduced by intravenous drip. On the second day, a second suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain was injected subcutaneously in a volume of 0.9 ml and a suspension of cryopreserved stem cells from chorion cells into the scrotum and prostate under ultrasound control in a volume of 0.5 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver: fetal age - 8 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 9.42x105 in 1 ml.

Характеристика введених суспензій кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального головного мозку та хоріону: вік фетуса - 8 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 2,14х106 в 1 мл.Characteristics of injected suspensions of cryopreserved stem cells from the fetal brain and chorion: fetal age - 8 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 2.14x106 in 1 ml.

Протягом 6 місяців після введення вказаних суспензій не було зафіксовано будь-яких ознак побічних ефектів лікування.Within 6 months after the introduction of the specified suspensions, no signs of side effects of the treatment were recorded.

Після проведеного лікування через б місяців спостерігалось статистично значуще покращення показників спермограми - концентрація сперматозоїдів загальна склала 4,8 млн, в 1 мл - 1,6 млн, 40 96 морфологічно нормальних форм, активно рухомих - 12 9б.After the treatment, a statistically significant improvement in spermogram indicators was observed after 2 months - the total concentration of spermatozoa was 4.8 million, in 1 ml - 1.6 million, 40 96 morphologically normal forms, actively moving - 12 9b.

Також, після проведеного лікування спостерігалась нормалізація показників мікроскопії секрету простати хворого, зниження лейкоцитарної інфільтрації з 80 лейкоцитів у полі зору, до 15 лейкоцитів у полі зору.Also, after the treatment, there was a normalization of the microscopic indicators of the patient's prostate secretion, a decrease in leukocyte infiltration from 80 leukocytes in the field of vision to 15 leukocytes in the field of vision.

Приклад 2Example 2

Пацієнт Л, 1988 р.н., історія хвороби Мо 10044. Хворий знаходився в клініці клітинної терапії з метою лікування олігоастенозооспермії. Із анамнезу відомо, що протягом шести роківPatient L, born in 1988, medical history No. 10044. The patient was in the cell therapy clinic for the treatment of oligoasthenozoospermia. From the anamnesis it is known that for six years

Зо безплідний шлюб, неодноразове лікування у репродуктологів - без ефекту.Because of an infertile marriage, repeated treatment by reproductive specialists has no effect.

Анамнез життя: Трс, вірусний гепатит, малярію, цукровий діабет, венеричні захворювання - заперечує. Алергічні реакції на медикаменти - не відмічає. Епідеміологічний анамнез - не обтяжений. Загальноклінічні лабораторні аналізи (загальний аналіз крові, біохімічний аналіз крові, коагулограма, статеві гормони) -в межах норми. Аналіз секрету простати - в межах норми.Life history: TB, viral hepatitis, malaria, diabetes, venereal diseases - denies. Allergic reactions to medications - not noted. Epidemiological anamnesis - not burdensome. General clinical laboratory tests (general blood test, biochemical blood test, coagulogram, sex hormones) are within normal limits. Prostate secretion analysis is within normal limits.

Статеві гормони - в нормі.Sex hormones are normal.

Об'єктивно: Правильної будови тіла, ходить самостійно. Шкірні покриви та слизові оболонки чисті, звичайного кольору. Язик чистий, вологий. Доступні огляду лімфовузли не пальпуються.Objectively: Correct body structure, walks independently. Skin and mucous membranes are clean, normal color. The tongue is clean, moist. Lymph nodes available for examination are not palpable.

Перкуторно: межі серця без змін. Мелодія серцевої діяльності правильна, тони звучні. При перкусії легень - на симетричних ділянках - легеневий ясний звук. В легенях вислуховується везикулярне дихання без хрипів, жорстке. Живіт при пальпації м'який, безболісний. Петлі кишечнику без змін. Печінка та селезінка не збільшені, безболісні при пальпації. СимптомPercussion: the borders of the heart are unchanged. The melody of cardiac activity is correct, tones are sonorous. When percussing the lungs - in symmetrical areas - a clear lung sound. In the lungs, vesicular breathing is heard without wheezing, hard. The abdomen is soft and painless on palpation. Intestinal loops unchanged. The liver and spleen are not enlarged, painless on palpation. Symptom

Пастернацького негативний з обох боків. Фізіологічні відправлення не порушені, регулярні.Pasternakskyi is negative from both sides. Physiological discharges are not disturbed, regular.

Пульсація периферичних артерій збережена.Pulsation of peripheral arteries is preserved.

Хворому було проведено курс лікування відповідно до способу, що заявляється. Перед введенням розмороженої після кріоконсервації основної суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки хворому була проведена премедикація шляхом внутрішньовенного введення 10 мг димедролу і 30 мг преднізолону. Введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки в об'ємі 2,45 мл шляхом внутрішньовенного крапельного введення. На другий день введено другу суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку підшкірно в об'ємі 0,8 мл та суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з клітин хоріону в органи калитки та простату під УЗД контролем в об'ємі 0,4 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки: вік фетуса - 9 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 7,57х106 в 1 мл.The patient underwent a course of treatment according to the claimed method. Before the introduction of the thawed after cryopreservation of the main suspension of stem cells from the fetal liver, the patient was premedicated by intravenous administration of 10 mg of diphenhydramine and 30 mg of prednisolone. A suspension of cryopreserved fetal liver stem cells in a volume of 2.45 ml was introduced by intravenous drip. On the second day, a second suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain was injected subcutaneously in a volume of 0.8 ml and a suspension of cryopreserved stem cells from chorion cells into the portal vein and prostate organs under ultrasound control in a volume of 0.4 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver: the age of the fetus is 9 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 7.57x106 in 1 ml.

Характеристика введених суспензій кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального головного мозку та хоріону: вік фетуса - 9 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 2,01х106 в 1 мл.Characteristics of injected suspensions of cryopreserved stem cells from the fetal brain and chorion: fetal age - 9 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 2.01x106 in 1 ml.

Після проведеного лікування через б місяців спостерігалось статистично значуще бо покращення показників спермограми - концентрація сперматозоїдів загальна зросла з 9,6 млн до 45 млн, в 1 мл - з 2,4 млн до 12.5 млн, морфологічно нормальних форм з 20 95 до 37 Об, активно рухомих - з 0 Фо до 8 95.After the treatment, a statistically significant improvement was observed in the spermogram indicators - the total concentration of spermatozoa increased from 9.6 million to 45 million, in 1 ml - from 2.4 million to 12.5 million, morphologically normal forms from 20 95 to 37 Ob, actively moving - from 0 Fo to 8 95.

Таким чином, запропонований спосіб лікування чоловіків з аутоїмунною азооспермією дозволяє забезпечити покращення гормонального стану чоловіка, покращення кількості таThus, the proposed method of treatment of men with autoimmune azoospermia allows to improve the male's hormonal status, improve the number and

Б якості сперматозоїдів без необхідності підбору донора за антигенами гістосумісності. В результаті - підвищується чоловіча фертильність, збільшується вірогідність запліднення.As spermatozoa without the need to select a donor based on histocompatibility antigens. As a result, male fertility increases, the probability of fertilization increases.

Джерела інформації: 1. Азооспермія: що це, причини, види, симптоми, діагностика і лікування патології, перу//тедпем.сот.ца/агоозрептіїа-5по-се-ргіспіпі-міді-вітріоті-діадповіїКа-1і-ІКумаппіа-раюо|одіуї/. 2.Азооспермия, пиерз //ги.міКіредіа.огдлмікі/яеро 9590 У50р0о 9587 9500 958Е9500 958Е9501 9581 яоро дов Е950рОо 9585 9501 9580 95600 95809500 9588 9501 9581. 3. Гамидов С.І., Попова О.Ю., Овчинников Р.1І. "Необструктивна азооспермія:Sources of information: 1. Azoospermia: what it is, causes, types, symptoms, diagnosis and treatment of pathology, peru//tedpem.sot.tsa/agoozreptiiia-5po-se-rgispipi-midi-vitrioti-diadpoviiKa-1i-IKumappia-rayuo| odiui/. 2. Azoospermia, pierz //gy.miKiredia.ogdlmiki/yaero 9590 U50r0o 9587 9500 958E9500 958E9501 9581 yaoro dov E950rОo 9585 9501 9580 95600 95809500 9588 9501 9581. 3. Hamidov S.I., Popova O.Yu., Ovchinnikov R. 1I. "Non-obstructive azoospermia:

КЛІНІЧНІ рекомендації", ппр//мертеагтатіу.ога/паех.рир/2014-02-28-13-06-CLINICAL RECOMMENDATIONS", ppr//merteagtatiu.oga/paeh.ryr/2014-02-28-13-06-

Ба4/пеїгоіодіма/віаїі-і-Іеківії/671-пеобзіпиКімпа-агоозрептіуа-Кіїпісппі--еКотепоааївіїї. 4. "Причини азооспермії і є шанс лікування?», Інформаційний портал "Я Здоров!"Ba4/peigoiodima/viaii-i-Iekivii/671-peobzipyKimpa-agoozreptiua-Kiipisppi--eKotepoaaiviii. 4. "Causes of azoospermia and is there a chance of treatment?", Information portal "I'm Healthy!"

Claims

FORMULA OF THE INVENTION

1. The method of treatment of men with autoimmune azoospermia, which includes the preparation and administration of a preparation from material of embryofetal origin and cells isolated from it, which is characterized by the fact that at least three preparations from material of embryofetal origin and cells isolated from it are made and administered in the form of thawed after cryopreservation of stem cell suspensions, each of which contains a therapeutically effective amount of stem cells isolated from human fetal material at 7-11 weeks of gestation, with the main suspension containing stem cells from the fetal liver, the second suspension containing stem cells from the fetal brain, and the third suspension contains stem cells of the chorion, and the main suspension, which contains stem cells from the fetal liver, is administered intravenously by drip in a volume of at least 0.4 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.8x105 in 1 ml and the percentage of live cells at least 71 95 per Zo one injection, the second suspension of cryopreserved fetal brain stem cells is injected subcutaneously in a volume of at least 0.2 ml per course of treatment with the number of cells at least 0.3x105 in 1 ml for one injection, and the third suspension of cryopreserved stem cells from the chorion is injected into target organs, such as the scrotum, prostate, in a volume of at least 0.2 ml per course of treatment with the number of nucleated cells at least 0.3x105 in 1 ml. 35

2. The method according to claim 1, which differs in that stem cell suspensions are administered simultaneously with standard therapy.

3. The method according to claim 2, which differs in that an individually adjusted course of magnetic therapy and/or antibiotic therapy, and/or anti-inflammatory therapy, and/or hormonal therapy, and/or detoxification therapy is prescribed as standard therapy. 40

4. The method according to claim 1, which differs in that the main suspension is injected against the background of 200 ml of 0.9 95 physiological sodium chloride solution at a rate of 20-40 drops per minute.

5. The method according to claim 1, which differs in that before the intravenous injection of the main suspension, premedication is additionally carried out by intravenous jet injection of mg of diphenhydramine and 30 mg of prednisolone.

b. The method according to claim 1, which is distinguished by the fact that before the introduction of drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient additionally undergoes a full general clinical laboratory examination.

7. The method according to claim 1, which is distinguished by the fact that before the introduction of preparations from the material of embryo-fetal origin and the cells isolated from it, the patient additionally undergoes BO additional laboratory examinations.

8. The method according to claim 7, which differs in that, as additional laboratory tests, the patient undergoes an immunogram, determination of hormonal status, virological studies, determination of tumor markers.

9. The method according to claim 1, which differs in that before the introduction of drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient additionally undergoes an examination of related specialists, depending on the cause of azoospermia, the list of which is established by the attending physician individually, in particular, an endocrinologist-reproductive specialist, a geneticist.

10. The method according to claim 1, which is characterized by the fact that after carrying out complex treatment with drugs from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, the patient's health is monitored after 6 and 12 months, and then the patient's health is monitored annually individual protocol.