UA120723C2 - METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS - Google Patents
METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS Download PDFInfo
- Publication number
- UA120723C2 UA120723C2 UAA201802934A UAA201802934A UA120723C2 UA 120723 C2 UA120723 C2 UA 120723C2 UA A201802934 A UAA201802934 A UA A201802934A UA A201802934 A UAA201802934 A UA A201802934A UA 120723 C2 UA120723 C2 UA 120723C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- honey
- colonies
- antibacterial activity
- growth
- solution
- Prior art date
Links
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 title abstract 2
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 title abstract 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 claims abstract description 91
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 40
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 27
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 24
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 24
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 24
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 22
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 17
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 15
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000013068 control sample Substances 0.000 claims description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 8
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 8
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000002277 temperature effect Effects 0.000 claims description 2
- 101150034533 ATIC gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 206010048038 Wound infection Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000009341 apiculture Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Винахід стосується способу визначення антибактеріальної активності меду відносно Proteus vulgaris.The invention relates to a method for determining the antibacterial activity of honey against Proteus vulgaris.
Description
(57) Реферат:(57) Abstract:
Винахід стосується способу визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеи5 уУцідагів.The invention relates to a method of determining the antibacterial activity of honey in relation to Psoriasis and Ucidags.
Винахід належить до мікробіології і призначений для визначення ступеня антибактеріальної активності меду різного ботанічного походження. Може бути використаний у технології ведення бджільництва, ветеринарно-санітарній експертизі, харчовій та фармацевтичній промисловості, медицині.The invention belongs to microbiology and is intended for determining the degree of antibacterial activity of honey of various botanical origin. It can be used in beekeeping technology, veterinary and sanitary expertise, food and pharmaceutical industry, medicine.
Лікувально- профілактичний вплив меду на стан кишкової мікрофлори та гнійно-запальні процеси у шлунково-кишковому тракті, сечовидільних шляхах, ранах за участю інфекцій, що викликані мікроорганізмами кишкової групи, відомий давно. Так, Ргоїеи5 миїЇдагіх вважається представником санітарно-показової мікрофлори. Як більшість грам-негативних бактерій, не формує спори, але його пригнічення у більшості патологічних станів потребує надсучасних і витратних антибіотиків, пробіотиків, бактеріофагів. Крім того, Ргоїеи5 мцЇдагіє виділяє ендотоксин і має гемолітичні властивості.The therapeutic and preventive effect of honey on the state of intestinal microflora and purulent-inflammatory processes in the gastrointestinal tract, urinary tract, and wounds involving infections caused by microorganisms of the intestinal group has been known for a long time. Thus, Rgoiei5 miiYidagih is considered a representative of the sanitary-indicative microflora. Like most gram-negative bacteria, it does not form spores, but its suppression in most pathological conditions requires advanced and expensive antibiotics, probiotics, and bacteriophages. In addition, Rgoiei5 mtsYdagiye releases endotoxin and has hemolytic properties.
Найчастіше інфекції, викликані протеєм, зустрічаються у дітей раннього віку і особливо з ослабленим імунітетом. При цьому, мед з його імуностимулюючою, детоксикуючою та антибактеріальною активністю має ооптимістичну перспективу застосування як засобу профілактики та лікування гастриту, гастроентериту, коліентериту, захворювань органів сечовиділення, ранових інфекцій, як самостійного засобу, так і комбіновано з антибіотичними препаратами, бактеріофагами. При цьому важливою є оцінка ступеня антибактеріальної активності меду.Most often, infections caused by proteus occur in young children and especially those with weakened immunity. At the same time, honey with its immunostimulating, detoxifying and antibacterial activity has an optimistic prospect of use as a means of prevention and treatment of gastritis, gastroenteritis, choleenteritis, diseases of the urinary organs, wound infections, both as an independent remedy and in combination with antibiotic drugs and bacteriophages. At the same time, it is important to assess the degree of antibacterial activity of honey.
Антибактеріальну активність речовин оцінюють за наявністю видимого росту тест-штаму мікроорганізму на середовищі, що є найбільш придатним для його вирощування і подальшої ідентифікації.The antibacterial activity of substances is assessed by the presence of visible growth of the test strain of the microorganism on the medium that is most suitable for its cultivation and further identification.
Відомий спосіб визначення антимікробної активності антибіотиків, що включає засів живильного середовища суспензією тест-штаму мікроорганізму, інкубацію та облік результатів за ознаками росту - помутнінь в лунках планшета. При цьому, стандартизовану в ізотонічному розчині натрію хлориду суспензію тест-штаму мікроорганізму з концентрацією 1,5 х 108 колонієутворюючих одиниць (КУО) у см" вносять у лунки планшета, додають приготовлені методом серійних мікророзведень розчини антибіотиків та після інкубації визначають його антимікробну активність за ознаками росту тест-штаму мікроорганізму в лунках планшета (див. патент України на корисну модель 104386, МПК АбІТК 35/00, С120О 1/04, АбТР 31/04, 2016 р.).There is a known method of determining the antimicrobial activity of antibiotics, which includes seeding the nutrient medium with a suspension of the test strain of the microorganism, incubation and recording the results based on signs of growth - turbidity in the wells of the tablet. At the same time, a standardized suspension of the test strain of the microorganism with a concentration of 1.5 x 108 colony-forming units (CFU) per cm" in an isotonic sodium chloride solution is introduced into the wells of the tablet, antibiotic solutions prepared by the serial microdilution method are added, and after incubation, its antimicrobial activity is determined by growth of the test strain of the microorganism in the wells of the tablet (see patent of Ukraine for a utility model 104386, IPC AbITK 35/00, C120O 1/04, AbTR 31/04, 2016).
Зо Однак, використання даної методики для визначення антибактеріальних властивостей меду є непридатним з причини природної мутності розчинів меду.However, the use of this method to determine the antibacterial properties of honey is unsuitable due to the natural turbidity of honey solutions.
Відомий спосіб визначення антимікробної активності ефірних олій шляхом їх дифузії в живильне середовище і затримки росту мікроорганізмів. При цьому, ефірні олії розчиняють у димексиді, потім у визначеній концентрації з нейтральним барвником вносять у лунки живильного середовища і після добової інкубації по співвідношенню зон дифузії барвника і затримки росту мікроорганізмів оцінюють чутливість збудників інфекційного процесу (див. деклараційний патент України на корисну модель Мо 60475, МПК 5098 23/00, АбІК 36/00, 2003 р.).There is a known method of determining the antimicrobial activity of essential oils by their diffusion into the nutrient medium and delaying the growth of microorganisms. At the same time, essential oils are dissolved in dimexide, then in a specified concentration with a neutral dye, they are introduced into the wells of the nutrient medium, and after a day's incubation, the sensitivity of the pathogens of the infectious process is evaluated based on the ratio of the dye diffusion zones and the growth retardation of microorganisms (see the declaration patent of Ukraine for the utility model Mo 60475 , IPC 5098 23/00, AbIK 36/00, 2003).
Але, правомірність використання при визначенні антимікробної активності ефірних олій димексиду викликає сумніви, підставою чого є його власні антибактеріальні властивості.However, the legality of using dimexide in determining the antimicrobial activity of essential oils raises doubts, the basis of which is its own antibacterial properties.
Відомий спосіб визначення антибактеріальних властивостей меду, при якому готують стерильний розчин меду в рідкому живильному середовищі - звичайному м'ясопептонному бульйоні (МПБ) шляхом розбавлення однієї частини меду 5, 10, 20, 40, 80, 160 частинами цього бульйону. У пробірки з двома частинами розбавлення засівають одну краплю 18-годинної культури тест-штаму Ргоїви5 миїдагіз. Після витримки в термостаті протягом 24-48 годин при 37 "С, враховують результати за ростом бактерій відповідно до помутніння бульйону. З пробірок, у яких не виявляється росту, роблять перепосів на тверде живильне середовище.There is a known method of determining the antibacterial properties of honey, in which a sterile solution of honey is prepared in a liquid nutrient medium - ordinary meat peptone broth (MPB) by diluting one part of honey with 5, 10, 20, 40, 80, 160 parts of this broth. One drop of an 18-hour culture of the test strain Rgoiva5 myidagiz is sown in test tubes with two parts of the dilution. After holding in a thermostat for 24-48 hours at 37 "С, the results of bacterial growth are taken into account according to the turbidity of the broth. From the test tubes, in which no growth is detected, reseeding is done on a solid nutrient medium.
Пробірки з виявленим ростом бактерій вважають розбавленням без антибактеріальної дії.Tubes with detected bacterial growth are considered dilutions without antibacterial activity.
Пробірки без виявленого росту, але який з'явився після перепосіву на тверде живильне середовище, вважають розбавленням, яке призупиняє розвиток і розмноження бактерій (бактеріостатична дія). Розбавлення, в якому не було росту ні в пробірках, ні в перепосівах, вважають розбавленням з бактерицидним ефектом (посіяні бактерії знищені розчином меду) (див. Младенов С. Мед и медолечениєеє: пер. с болг. / С Младенов. - София: Земиздат, 1969, со. 72-19).Test tubes without detectable growth, but which appeared after reseeding on a solid nutrient medium, are considered a dilution that stops the development and reproduction of bacteria (bacteriostatic effect). A dilution in which there was no growth either in the test tubes or in the re-inoculations is considered a dilution with a bactericidal effect (the inoculated bacteria are destroyed by the honey solution) (see Mladenov S. Honey and honey treatment: trans. from Bolg. / S Mladenov. - Sofia: Zemizdat , 1969, pp. 72-19).
Однак, для визначення антибактеріальної активності меду відносно штаму Ргоїеци5 миЇдагіб використовують його розчини у живильному середовищі 1:5 і більше, не враховуючи важливість дослідження розчинів менших значень (від 1:1 до 1:4), що виключає можливість дослідження меду ботанічного походження, що має низьку антимікробну активність. Крім того, в прототипі мед стерилізують, що відбувається при температурі понад 38 "С, коли починаються незворотні бо зміни у хімічній будові речовин у складі меду. Це може вплинути на рівень його антибактеріальної активності. Також, візуальний контроль ступеня мутності рідини після витримки суміші розчину меду з тест-штамом Ргоїеи5 миїЇдагі5 у термостаті протягом 24 годин при 37 "С перед наступним перепосівом на тверде живильне середовище не має доцільності, оскільки помутніння цієї суміші через розвиток мікроорганізмів об'єксивно неможливо виявити шляхом візуального спостереження, бо сам розчин меду має певний рівень мутності.However, to determine the antibacterial activity of honey against the Rgoietsy5 strain, we use its solutions in a nutrient medium of 1:5 and more, not taking into account the importance of studying solutions of smaller values (from 1:1 to 1:4), which excludes the possibility of studying honey of botanical origin, which has low antimicrobial activity. In addition, in the prototype, honey is sterilized, which happens at a temperature above 38 "C, when irreversible changes in the chemical structure of substances in the composition of honey begin. This can affect the level of its antibacterial activity. Also, visual control of the degree of turbidity of the liquid after standing the mixture of the solution of honey with the test strain Rgoiei5 miiYidagi5 in a thermostat for 24 hours at 37 "С before the next transfer to a solid nutrient medium is not expedient, since the turbidity of this mixture due to the development of microorganisms is objectively impossible to detect by visual observation, because the honey solution itself has a certain level turbidity
В основу винаходу поставлена задача з розробки способу визначення антибактеріальної активності меду з підвищеною достовірністю результатів, що охоплює весь ряд меду різного ботанічного походження, у тому числі - з низькою антибактеріальною активністю відносноThe invention is based on the task of developing a method for determining the antibacterial activity of honey with increased reliability of the results, covering the entire range of honey of different botanical origin, including - with low antibacterial activity relatively
Ргоїєиз миїдагів.Rgoieiz miidagiv.
Поставлена задача вирішується тим, що при реалізації способу визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеи5 миЇдагіх, при якому готують однакові за об'ємом розчини меду в м'ясопептонному бульйоні 1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, засівають культурою тест-штаму Ргоїеи5 миїЇдагіх5, інкубують протягом 24-48 годин при 37 "С їі далі здійснюють перепосів засіяних розчинів меду на тверде живильне середовище, інкубують перепосіви протягом 24-48 годин при 37 "С, і визначають антибактеріальну активність меду відносно Ргоїеи5 миїЇдагі5 за критеріями: перепосіви, в яких не виявили ріст колоній, вважають пригніченими розчином меду із бактерицидними властивостями, перепосіви з виявленим ростом колоній мікроорганізмів, вважають пригніченими розчином меду із бактеріостатичними властивостями, а перепосіви з виявленим інтенсивним ростом колоній мікроорганізмів вважають утвореними розчином меду без антибактеріальної дії, відповідно до винаходу додатково готують аналогічні за об'ємом розчини меду в м'ясопептонному бульйоні 1:1, 1:22, 13, 14 та контрольний зразок м'ясопептонного бульйону, які засівають культурою тест-штамуThe task is solved by the fact that when implementing the method of determining the antibacterial activity of honey in relation to Ргоией5 миДагих, in which the same volume solutions of honey are prepared in meat peptone broth 1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1: 80, 1:160, inoculate with the culture of the test strain Rgoiei5 miiYidagih5, incubate for 24-48 hours at 37 "C and then carry out re-inoculation of the inoculated honey solutions on a solid nutrient medium, incubate the re-inoculations for 24-48 hours at 37 "C, and determine the antibacterial activity of honey in relation to Rgoiei5 miiYidagi5 according to the criteria: re-inoculations in which no colony growth was detected are considered to be suppressed by a honey solution with bactericidal properties, re-inoculations with detected growth of colonies of microorganisms are considered to be suppressed by a honey solution with bacteriostatic properties, and re-inoculations with an intensive growth of micro-organism colonies are considered formed by a solution of honey without antibacterial action, in accordance with the invention additionally prepare solutions similar in volume of honey in meat peptone broth 1:1, 1:22, 13, 14 and a control sample of meat peptone broth, which are inoculated with the culture of the test strain
Ргоїеиз миїЇдагіх5, при цьому як тверде живильне середовище використовують агар Плоскірева, а перепосів засіяних та інкубованих розчинів меду і контрольного зразка м'ясопептонного бульйону на агар Плоскірева та їх наступну інкубацію проводять для кожного розчину меду і контрольного зразка м'ясопептонного бульйону, при цьому використовують мед, що зберігався в умовах, які виключають зміни хімічного складу меду та його фізичних і антибактеріальних властивостей, причому кінцеве визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеи5 миЇдагіз здійснюють, виходячи з концентрацій меду, що виявляють бактеріостатичну дію заRgoieiz miiYidagih5, while Ploskirev agar is used as a solid nutrient medium, and re-inoculation of seeded and incubated solutions of honey and a control sample of meat peptone broth on Ploskirev agar and their subsequent incubation are carried out for each solution of honey and a control sample of meat peptone broth, while using honey that was stored under conditions that exclude changes in the chemical composition of honey and its physical and antibacterial properties, and the final determination of the antibacterial activity of honey in relation to Rgoiei5 myYidagiz is carried out based on the concentrations of honey that show bacteriostatic action according to
Зо критеріями: перепосіви з виявленим слабким ростом колоній мікроорганізмів, вважають пригніченими розчином меду із помірними бактеріостатичними властивостями, а перепосіви з виявленим помірним ростом колоній мікроорганізмів, вважають пригніченими розчином меду із слабкими бактеріостатичними властивостями.According to the criteria: reseedings with detected weak growth of colonies of microorganisms are considered suppressed by honey solution with moderate bacteriostatic properties, and reseedings with detected moderate growth of colonies of microorganisms are considered suppressed by honey solution with weak bacteriostatic properties.
Поставлена задача вирішується також за рахунок того, що кожен розчин меду в м'ясопептонному бульйоні та контрольний зразок м'ясопептонного бульйону можуть готувати в кількості 2 мл, а їх засів можуть проводити 1-ю краплею 18-годинної культури тест-штаму мікроорганізму Ргоїеи5 миЇдагіє з розведенням м'ясопепгонним бульйоном до 105-105 м.т./мл, причому як меду, антибактеріальну активність якого визначають, можуть використовувати мед, що не піддавався температурному впливу вище 37 "С, та дії хімічних сполук, крім того можуть визначати слабкий ріст колоній мікроорганізмів - при кількості колоній від 1 до 10, помірний ріст колоній мікроорганізмів - при кількості колоній від 11 до 100, а інтенсивний ріст колоній мікроорганізмів - при кількості колоній більше 100.The task is also solved due to the fact that each solution of honey in meat peptone broth and a control sample of meat peptone broth can be prepared in the amount of 2 ml, and their inoculation can be carried out with 1 drop of an 18-hour culture of the test strain of the microorganism Rgoiei5 myYidagie with dilution with meat pepgon broth to 105-105 m.t./ml, and as honey, the antibacterial activity of which is determined, you can use honey that has not been exposed to temperature effects above 37 "C, and the effects of chemical compounds, in addition, you can determine a weak growth of colonies of microorganisms - with the number of colonies from 1 to 10, moderate growth of colonies of microorganisms - with the number of colonies from 11 to 100, and intensive growth of colonies of microorganisms - with the number of colonies more than 100.
Додаткове готування аналогічних за об'ємом розчинів меду в м'ясопептонному бульйоні 1:1, 1:22, 1:3, 1:4 та контрольного зразка м'ясопептонного бульйону, які засівають культурою тест- штаму Ргоїеи5 миЇдагіх, при цьому використання як твердого живильного середовища агаруAdditional preparation of similar volume solutions of honey in meat peptone broth 1:1, 1:22, 1:3, 1:4 and a control sample of meat peptone broth, which are inoculated with the culture of the test strain Rgoiei5 myYidagih, while using as solid agar nutrient medium
Плоскірева, і перепосів засіяних та інкубованих розчинів меду і контрольного зразка м'ясопептонного бульйону на агар Плоскірева та проведення їх наступної інкубації проводять для кожного розчину меду і контрольного зразка м'ясопептонного бульйону, при цьому використання меду, що зберігався в умовах, які виключають зміни хімічного складу меду та його фізичних і антибактеріальних властивостей, причому здійснення кінцевого визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеи5 мцЇдагі5, виходячи з концентрацій меду, що виявляють бактеріостатичну дію за критеріями: перепосіви з виявленим слабким ростом колоній мікроорганізмів, вважають пригніченими розчином меду із помірними бактеріостатичними властивостями, а перепосіви з виявленим помірним ростом колоній мікроорганізмів, вважають пригніченими розчином меду із слабкими бактеріостатичними властивостями, дозволяє проводити дослідження антибактеріальної активності меду з підвищеною достовірністю результатів відносно Ргоїєеи5 миЇдагзе, що охоплює весь ряд меду різного ботанічного походження, у тому числі - з низькою антибактеріальною активністю, що забезпечує підвищення об'єктивності, інформативності, точності при дослідженні меду і додатково позитивно впливає 60 на зменшення енергетичних і трудових витрат.Ploskirev, and reseeding of inoculated and incubated solutions of honey and a control sample of meat peptone broth on Ploskirev agar and carrying out their subsequent incubation is carried out for each solution of honey and a control sample of meat peptone broth, while using honey stored in conditions that exclude changes chemical composition of honey and its physical and antibacterial properties, and the implementation of the final determination of the antibacterial activity of honey in relation to Rgoiei5 mtsYdagi5, based on the concentrations of honey that show bacteriostatic action according to the criteria: reseeding with detected weak growth of colonies of microorganisms, are considered to be suppressed by a solution of honey with moderate bacteriostatic properties, and re-inoculations with the detected moderate growth of colonies of microorganisms are considered to be suppressed by a solution of honey with weak bacteriostatic properties, it allows to conduct research on the antibacterial activity of honey with increased reliability of the results relative to Rgoyeey5 miYidagze, which covers the entire range of honey of different botanical origin, including - with low antibacterial activity, which provides increased objectivity, informativeness, accuracy in the study of honey and additionally has a positive effect 60 on reducing energy and labor costs.
Застосування пропонованого способу визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеи5 миЇдагі5 дозволяє забезпечити наступний технічний результат: підвищується достовірність результатів дослідження антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеци5 миЇдагі5 за рахунок відміни стерилізації меду, що сприяє збереженню усіх його властивостей; з'являється можливість дослідження сортів меду з низькою антимікробною активністю; з'являється можливість охоплення всього ряду сортів меду, у тому числі - з низькою антибактеріальною активністю, що забезпечує підвищення об'єктивності, інформативності, точності висновків при дослідженні меду; спрощується і уточнюється встановлення результатів дослідження за рахунок оцінки результатів шляхом підрахунку кількості колоній на твердому живильному середовищі для всього ряду сортів меду; з'являється можливість зменшення енергетичних і трудових витрат при визначенні антибактеріальної активності меду.The application of the proposed method of determining the antibacterial activity of honey in relation to Rgoieci5 and MyYidagi5 allows to ensure the following technical result: the reliability of the results of the study of the antibacterial activity of honey in relation to Rgoieci5 and MyYidagi5 is increased by canceling the sterilization of honey, which contributes to the preservation of all its properties; there is an opportunity to research varieties of honey with low antimicrobial activity; there is an opportunity to cover a whole range of honey varieties, including those with low antibacterial activity, which ensures increased objectivity, informativeness, and accuracy of conclusions when studying honey; the establishment of research results is simplified and clarified by evaluating the results by counting the number of colonies on a solid nutrient medium for the entire range of honey varieties; there is an opportunity to reduce energy and labor costs when determining the antibacterial activity of honey.
Крім того: підвищується ефективність роботи персоналу.In addition: staff efficiency increases.
Спосіб визначення антибактеріальної активності меду відносно Ргоїеци5 миЇдагі5 здійснюють наступним чином:The method of determining the antibacterial activity of honey in relation to Rgoietsi5 and MyYidagi5 is carried out as follows:
На першому етапі готують м'ясопептоний бульйон (МПБ) за стандартною методикою.At the first stage, meat peptone broth (MPB) is prepared according to the standard method.
На другому етапі готують розчини меду різного ступеня (1:1, 1:2, 1:3, 1:4 і далі - 1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160) у м'ясопептонному бульйоні з наважками по 1,0 г досліджуваного меду (при приготуванні розведення 1:1, загальний об'єм суміші доводиться м'ясопептонним бульйоном до 2 мл). Готують також контрольну пробірку. Як меду, антибактеріальну активність якого визначають, використовують мед, що зберігався при температурі, яка не перевищувала 37 "С, та не піддавався дії хімічних сполук.At the second stage, honey solutions of various degrees are prepared (1:1, 1:2, 1:3, 1:4 and further - 1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160 ) in meat peptone broth with measurements of 1.0 g of the studied honey (when preparing a 1:1 dilution, the total volume of the mixture is brought up to 2 ml with meat peptone broth). A control tube is also prepared. As honey, the antibacterial activity of which is determined, honey that was stored at a temperature that did not exceed 37 "С and was not exposed to the action of chemical compounds is used.
Отримані розчини розливають у стерильні пробірки по 2 мл в послідовності зростання їх концентрацій. Далі вміст кожної пробірки засівають однією краплею суспензії 18-годинної культури тест-штаму Ргоїеиз миЇдагіб5. У контрольну пробірку вливають 2 мл бульйону і 1 краплю 18-годинної культури тест-штаму мікроорганізму Ргоїеи5 миїдагі5 з розведенням м'ясопептоннимThe resulting solutions are poured into sterile tubes of 2 ml in order of increasing concentrations. Next, the content of each test tube is inoculated with one drop of a suspension of an 18-hour culture of the test strain Rgoieiz myYidagib5. 2 ml of broth and 1 drop of an 18-hour culture of the test strain of the microorganism Rgoiei5 myidagi5 diluted with meat peptone are poured into a control tube
Зо бульйоном до 105-105 м.т./мл. Усі пробірки інкубують при 37 "С протягом 24 годин.With broth up to 105-105 m.t./ml. All tubes are incubated at 37 °C for 24 hours.
Наступний етап - перепосів умісту кожної окремої пробірки газоном на тверде живильне середовище - агар Плоскірева завтовшки 4-5 мм у чашках Петрі та інкубація протягом 24 годин у термостаті при 37 "С.The next step is to inoculate the contents of each individual test tube with a lawn onto a solid nutrient medium - Ploskireva agar 4-5 mm thick in Petri dishes and incubate for 24 hours in a thermostat at 37 "C.
Оцінку результатів проводять відповідно до росту колоній тест-штаму Ргоїеи5 мицЇдагі5 на поверхнях агара Плоскірева, при цьому: перепосіви, в яких не виявляється росту колоній, вважають пригніченими розчином меду із бактерицидними властивостями; перепосіви з виявленим слабким ростом бактерій (при кількості колоній від 1 до 10) вважають пригніченими розчином меду із помірними бактеріостатичними властивостями; перепосіви з виявленим помірним ростом бактерій (при кількості колоній від 11 до 100) вважають пригніченими розчином меду із слабкими бактеріостатичними властивостями; перепосіви з виявленим інтенсивним ростом бактерій (при кількості колоній більше 100) вважають утвореними розчином меду без антибактеріальної дії.The evaluation of the results is carried out according to the growth of colonies of the test strain Rgoiei5 mycYidagi5 on the surfaces of Ploskirev agar, while: re-inoculations in which the growth of colonies is not detected are considered to be inhibited by a solution of honey with bactericidal properties; re-inoculations with detected weak growth of bacteria (with the number of colonies from 1 to 10) are considered suppressed by a honey solution with moderate bacteriostatic properties; re-inoculations with detected moderate growth of bacteria (with the number of colonies from 11 to 100) are considered suppressed by a honey solution with weak bacteriostatic properties; re-inoculations with detected intensive growth of bacteria (when the number of colonies is more than 100) are considered to be formed by a honey solution without an antibacterial effect.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA201802934A UA120723C2 (en) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA201802934A UA120723C2 (en) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA120723C2 true UA120723C2 (en) | 2020-01-27 |
Family
ID=71113950
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201802934A UA120723C2 (en) | 2018-03-23 | 2018-03-23 | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA120723C2 (en) |
-
2018
- 2018-03-23 UA UAA201802934A patent/UA120723C2/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Islam et al. | Isolation and identification of Escherichia coli and Salmonella from poultry litter and feed | |
| Cook et al. | Selective medium for culture of Mycoplasma hyopneumoniae | |
| RU2505813C1 (en) | Method for determining microorganism sensitivity to antimicrobial substances | |
| RU2014111125A (en) | METHOD FOR OBTAINING BACTERIOPHAGE STRAIN, SPECIFIC BACTERIOPHAGE STRAINS AND THEIR APPLICATION | |
| CN110151752A (en) | A kind of tea polyphenols composition and its preparing the application in anti-streptococcus suis drug | |
| Lichstein et al. | The inhibition of the spreading growth of Proteus and other bacteria to permit the isolation of associated streptococci | |
| UA120723C2 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY REGARDING PROTEUS VULGARIS | |
| Suegara et al. | Ecological determinants in microbial colonization of the murine gastrointestinal tract: adherence of Torulopsis pintolopesii to epithelial surfaces | |
| UA120724C2 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY AGAINST STAPHYLOCOCCUS AUREUS | |
| UA120402C2 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY AGAINST SALMONELLA TYPHIMURIUM | |
| UA121681C2 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY AGAINST ESCHERICHIA COLI | |
| Chauhan et al. | Microbiological Methods for Water, Soil and Air Analysis | |
| Islam et al. | Prevalence and antimicrobial resistance patterns of Vibrio Cholerae from Bangladesh Agricultural University dairy farm | |
| UA120725C2 (en) | METHOD FOR DETERMINATION OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HONEY AGAINST KLEBSIELLA PNEUMONIAE | |
| Shrestha et al. | Presence of E. coli in Raw and Pasteurized Milk in Bagmati Province, Nepal | |
| Hakalehto et al. | Development of microbiological field methodology for water and food-chain hygiene analysis of Campylobacter spp. and Yersinia spp. in Burkina Faso, West Africa | |
| RU2435864C1 (en) | Method of probiotic cell treatment with contained small non-productive animals in veterinary hospital environment | |
| RU2818369C1 (en) | Method for assessing lactobacillus viability preservation under effect of various antiseptic concentrations | |
| Michael et al. | Evaluation of prevalence and antimicrobial resistance of Salmonella spp isolated from chicken eggs sold in Ilorin, Nigeria | |
| Kovalenko et al. | Sanitary microbiology: learning guide | |
| Alsaraf et al. | In vitro Evaluation the effect of Natural Products against Vibrio cholerae | |
| Frances et al. | Antimicrobial efficiency of commonly used disinfectants against Escherichia coli and Staphylococcus aureus | |
| Kourany et al. | Salmonella and Arizona infections of alimentary and reproductive tracts of Panamanian lizards | |
| RU2794355C1 (en) | Method for primary plating of periodontal pockets | |
| Hasan | Determination of prevalence and antibiotic susceptibility pattern of the bacterial isolates collected from different parts of domestic refrigerators |