TWI835730B

TWI835730B - Ｔｃｒ及肽

Info

Publication number: TWI835730B
Application number: TW107113927A
Authority: TW
Inventors: 馬里亞奇亞拉波尼尼; 伊力亞納魯吉洛; 祖爾瑪艾琳馬格納尼; 路卡艾爾多艾多爾都法哥; 阿提力歐邦答恩薩; 法畢歐西瑟里
Original assignee: 義大利聖拉斐爾醫院; 聖拉斐爾基金會
Priority date: 2017-04-24
Filing date: 2018-04-24
Publication date: 2024-03-21

Abstract

本發明係關於一種T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞的威爾姆氏(Wilms)腫瘤1蛋白(WT1)肽。

Description

ＴＣＲ及肽

本發明係關於T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體呈遞之源自威爾姆氏(Wilms)腫瘤1蛋白(WT1)之肽。就此而言，本發明係關於特異性識別WT1肽之互補決定區(CDR)。本發明另外係關於源自WT1之免疫原性肽。

T細胞受體(TCR)基因療法係基於高抗體親抗原性腫瘤特異性TCR基因至T淋巴細胞之基因轉移，因此使能特異性靶向所需腫瘤相關抗原並導致較少毒性且更具特異性及更有效治療。此方法已顯示於臨床試驗中之前景。限制TCR基因療法用於臨床治療癌症之開發之主要障礙之一為缺少腫瘤特異性T-細胞及對應TCR。因此，腫瘤特異性TCR之低可得性仍保留限制基於TCR之免疫治療方法之廣泛開發的開放性問題。大多數腫瘤相關抗原(TAA)為自體抗原，因此特異性針對此等分子之T-細胞由於中樞及外周耐受被破壞或無反應。儘管如此，仍於健康供體及患者中，特定言之於感染有血液惡性病之患者中於同種異體造血幹細胞移植(異體-HSCT)後觀察到自然產生之腫瘤特異性T-細胞，其中腫瘤特異性淋巴細胞之頻率與疾病消退相關聯(Kapp, M.等人，Bone Marrow Transplantation 43,399-410 (2009)；及Tyler, E.M.等人，Blood 121,308-317 (2013))。待藉由免疫治療方法所靶向之腫瘤抗原之選擇仍為討論之話題。理想TAA在腫瘤細胞上高度表現，而於健康組織中最低限度地表現。威爾姆氏腫瘤1 (WT1)為編碼鋅指轉錄因子之細胞內蛋白，其於細胞生長及分化中起著重要作用(Yang, L.等人，Leukemia 21, 868-876 (2007))。WT1在各種血液及實體腫瘤上廣泛表現，而顯示在各種健康組織(例如，性腺、子宮、腎臟、間皮、不同組織中之祖細胞)上之有限表現。最近證據表明WT1於白血病發生及腫瘤發生中之作用。若干正在進行之臨床試驗依賴於細胞毒性T淋巴細胞(CTL)對利用WT1肽之疫苗接種後產生反應。然而，儘管認識到WT1可用於免疫療法，但是少數WT1抗原決定基(其受限於有限數目之HLA對偶基因)目前係用於疫苗接種目的(Di Stasi, A.等人，Front. Immunol. (2015))。一個此抗原決定基為WT1 126-134抗原決定基(RMFPNAPYL；SEQ ID NO: 255)，其係藉由HLA-A*0201對偶基因編碼之MHC呈遞(即，該抗原決定基係HLA-A*0201限制)。 HLA-A*0201限制抗原決定基及對應TCR係受關注，因為具有HLA-A*0201單倍型之主要組織相容性複合體(MHC)於絕大多數(60%)高加索(Caucasian)人群中表現。因此，靶向HLA-A*0201限制WT1抗原決定基之TCR係特別有利，因為使用此等TCR之免疫療法可經廣泛應用。已於若干試驗中單獨或與額外腫瘤抗原組合廣泛研究WT1 126-134抗原決定基。然而，最近報告強調關於此特定抗原決定基之加工之主要問題，該加工可損害其用於免疫療法目的之用途。顯著地，該WT1 126-134抗原決定基藉由免疫蛋白酶體相較於利用標準蛋白酶體更有效加工 (Jaigirdar, A.等人，J Immunother. 39(3):105-16 (2016))，其導致許多HLA-A*0201腫瘤細胞系或內源表現WT1之原發性白血病細胞之差的識別。因此，仍需新的WT1抗原決定基，特定言之由具有流行性HLA單倍型(例如，HLA-A*0201)之MHC呈遞之彼等。一個經識別之自然加工之HLA-A*0201限制抗原決定基為WT1 37-45，其具有胺基酸序列VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157，參見例如，Smithgall等人，2001；Blood 98 (11第1部分): 121a)。然而，針對此肽序列具特異性之很少TCR胺基酸序列(特定言之CDR序列)經報告(Schmitt, T.M.等人，(2017) Nat Biotechnol 35: 1188-1195)。因此，仍需新的WT1抗原決定基(特定言之受常見HLA對偶基因限制之彼等)及需求能結合至WT1抗原決定基之新的TCR。

吾人已識別結合至MHC呈遞之WT1肽之新穎TCR。另外，吾人已測定TCR之胺基酸序列，包括其CDR區之胺基酸序列，該等CDR區對WT1之結合特異性負責。此外，吾人已證實表現根據本發明之TCR之T-細胞特異性靶向並殺死過度表現WT1蛋白之細胞。此外，已顯示本發明之TCR受限於由高加索人群中常見之HLA 1及2類對偶基因(諸如HLA-A*0201及HLA-B*3501或HLA-B*3502)編碼之MHC。因此，於第一態樣中，本發明提供一種T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR： (i)包括包含CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (ii)包括包含CVVNLLSNQGGKLIF (SEQ ID NO: 36)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSQDYLVSNEKLFF (SEQ ID NO: 41)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (iii)包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (iv)包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (v)包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (vi)包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (vii)包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (viii)包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASTQTPYEQYF (SEQ ID NO: 63)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (ix)包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSTVGGEDYGYTF (SEQ ID NO: 69)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (x)包括包含CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO:57)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xi)包括包含CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASTQTPYEQYF (SEQ ID NO: 63)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xii)包括包含CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSTVGGEDYGYTF (SEQ ID NO: 69)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xiii)包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CAISVGQGALYEQYF (SEQ ID NO: 80)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xiv)包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSVARDRRNYGYTF (SEQ ID NO: 86)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xv)包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xvi)包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xvii) 包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xviii)包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xix)包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xx)包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxi)包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxii) 包括包含CAVTVGNKLVF (SEQ ID NO: 175)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASRGWREQFF (SEQ ID NO: 180)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxiii)包括包含CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSWGYQETQYF (SEQ ID NO: 196)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxiv)包括包含CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSPTGGEYYGYTF (SEQ ID NO: 202)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxv)包括包含CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSSYPLRTGRYNSYNSPLHF (SEQ ID NO: 208)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxvi)包括包含CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSWGYQETQYF (SEQ ID NO: 196)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxvii)包括包含CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSPTGGEYYGYTF (SEQ ID NO: 202)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxviii)包括包含CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSSYPLRTGRYNSYNSPLHF (SEQ ID NO: 208)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxix)包括包含CAASGGRDDKIIF (SEQ ID NO: 214)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSYSRTESTDTQYF (SEQ ID NO: 219)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxx)包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxi)包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxii)包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxiii)包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxiv)包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxv)包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxvi)包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxvii)包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxviii)包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxix)包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxx)包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β； (xxxxi)包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β；或 (xxxxii)包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β。於一實施例中，本發明提供一種本發明之TCR，其包含下列CDR序列： (i) CDR1α - KALYS (SEQ ID NO: 1)、 CDR2α - LLKGGEQ (SEQ ID NO: 2)、 CDR3α - CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3)、 CDR1β - SGHDY (SEQ ID NO: 6)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 7)及 CDR3β - CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (ii) CDR1α - NSASQS (SEQ ID NO: 34)、 CDR2α - VYSSGN (SEQ ID NO: 35)、 CDR3α - CVVNLLSNQGGKLIF (SEQ ID NO: 36)、 CDR1β - LGHNA (SEQ ID NO: 39)、 CDR2β - YSLEER (SEQ ID NO: 40)及 CDR3β - CASSQDYLVSNEKLFF (SEQ ID NO: 41)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (iii) CDR1α - SSVPPY (SEQ ID NO: 12)、 CDR2α - YTSAATLV (SEQ ID NO: 13)、 CDR3α - CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)、 CDR1β - SGHAT (SEQ ID NO: 22)、 CDR2β - FQNNGV (SEQ ID NO: 23)及 CDR3β - CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (iv) CDR1α - SSVPPY (SEQ ID NO: 12)、 CDR2α - YTSAATLV (SEQ ID NO: 13)、 CDR3α - CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)、 CDR1β - SGHTA (SEQ ID NO: 28)、 CDR2β - FQGNSA (SEQ ID NO: 29)及 CDR3β - CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (v) CDR1α - TSESDYY (SEQ ID NO: 17)、 CDR2α - QEAYKQQN (SEQ ID NO: 18)、 CDR3α - CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO:19)、 CDR1β - SGHAT (SEQ ID NO: 22)、 CDR2β - FQNNGV (SEQ ID NO: 23)及 CDR3β - CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (vi) CDR1α - TSESDYY (SEQ ID NO: 17)、 CDR2α - QEAYKQQN (SEQ ID NO: 18)、 CDR3α - CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO:19)、 CDR1β - SGHTA (SEQ ID NO: 28)、 CDR2β - FQGNSA (SEQ ID NO: 29)及 CDR3β - CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (vii) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 45)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 46)、 CDR3α - CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)、 CDR1β - MNHNS (SEQ ID NO: 55)、 CDR2β - SASEGT (SEQ ID NO: 56)及 CDR3β - CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (viii) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 45)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 46)、 CDR3α - CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)、 CDR1β - MNHNY (SEQ ID NO: 61)、 CDR2β - SVGAGI (SEQ ID NO: 62)及 CDR3β - CASTQTPYEQYF (SEQ ID NO: 63)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (ix) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 45)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 46)、 CDR3α - CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)、 CDR1β - SGHNS (SEQ ID NO: 67)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 68)及 CDR3β - CASSTVGGEDYGYTF (SEQ ID NO: 69)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (x) CDR1α - DSAIYN (SEQ ID NO: 50)、 CDR2α - IQSSQRE (SEQ ID NO: 51)、 CDR3α - CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)、 CDR1β - MNHNS (SEQ ID NO: 55)、 CDR2β - SASEGT (SEQ ID NO: 56)及 CDR3β - CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xi) CDR1α - DSAIYN (SEQ ID NO: 50)、 CDR2α - IQSSQRE (SEQ ID NO: 51)、 CDR3α - CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)、 CDR1β - MNHNY (SEQ ID NO: 61)、 CDR2β - SVGAGI (SEQ ID NO: 62)及 CDR3β - CASTQTPYEQYF (SEQ ID NO: 63)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xii) CDR1α - DSAIYN (SEQ ID NO: 50)、 CDR2α - IQSSQRE (SEQ ID NO: 51)、 CDR3α - CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)、 CDR1β - SGHNS (SEQ ID NO: 67)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 68)及 CDR3β - CASSTVGGEDYGYTF (SEQ ID NO: 69)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xiii) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 73)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 74)、 CDR3α - CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)、 CDR1β - ENHRY (SEQ ID NO: 78)、 CDR2β - SYGVKD (SEQ ID NO: 79)及 CDR3β - CAISVGQGALYEQYF (SEQ ID NO: 80)、或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xiv) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 73)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 74)、 CDR3α - CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)、 CDR1β - SGDLS (SEQ ID NO: 84)、 CDR2β - YYNGEE (SEQ ID NO: 85)及 CDR3β - CASSVARDRRNYGYTF (SEQ ID NO: 86)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xv) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 90)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 91)、 CDR3α - CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)、 CDR1β - SGHNS (SEQ ID NO: 95)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 96)及 CDR3β - CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xvi) CDR1α - DSSSTY (SEQ ID NO: 101)、 CDR2α - IFSNMDM (SEQ ID NO: 102)、 CDR3α - CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 161)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 162)及 CDR3β - CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xvii) CDR1α - DSSSTY (SEQ ID NO: 101)、 CDR2α - IFSNMDM (SEQ ID NO: 102)、 CDR3α - CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)、 CDR1β - SQVTM (SEQ ID NO: 167)、 CDR2β - ANQGSEA (SEQ ID NO: 168)及 CDR3β - CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xviii) CDR1α - DSVNN (SEQ ID NO:106)、 CDR2α - IPSGT (SEQ ID NO: 107)、 CDR3α - CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 161)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 162)及 CDR3β - CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xix) CDR1α - DSVNN (SEQ ID NO:106)、 CDR2α - IPSGT (SEQ ID NO: 107)、 CDR3α - CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)、 CDR1β - SQVTM (SEQ ID NO: 167)、 CDR2β - ANQGSEA (SEQ ID NO: 168)及 CDR3β - CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xx) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 111)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 112)、 CDR3α - CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 161)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 162)及 CDR3β - CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxi) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 111)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 112)、 CDR3α - CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)、 CDR1β - SQVTM (SEQ ID NO: 167)、 CDR2β - ANQGSEA (SEQ ID NO: 168)及 CDR3β - CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxii) CDR1α - VGISA (SEQ ID NO: 173)、 CDR2α - LSSGK (SEQ ID NO: 174)、 CDR3α - CAVTVGNKLVF (SEQ ID NO: 175)、 CDR1β - MNHNS (SEQ ID NO: 178)、 CDR2β - SASEGT (SEQ ID NO: 179)及 CDR3β - CASRGWREQFF (SEQ ID NO: 180)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxiii) CDR1α - VGISA (SEQ ID NO: 184)、 CDR2α - LSSGK (SEQ ID NO: 185)、 CDR3α - CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)、 CDR1β - SGHTS (SEQ ID NO: 194)、 CDR2β - YDEGEE (SEQ ID NO: 195)及 CDR3β - CASSWGYQETQYF (SEQ ID NO: 196)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxiv) CDR1α - VGISA (SEQ ID NO: 184)、 CDR2α - LSSGK (SEQ ID NO: 185)、 CDR3α - CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)、 CDR1β - KGHSH (SEQ ID NO: 200)、 CDR2β - LQKENI (SEQ ID NO: 201)及 CDR3β - CASSPTGGEYYGYTF (SEQ ID NO: 202)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxv) CDR1α - VGISA (SEQ ID NO: 184)、 CDR2α - LSSGK (SEQ ID NO: 185)、 CDR3α - CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)、 CDR1β - MNHEY (SEQ ID NO: 206)、 CDR2β - SVGAGI (SEQ ID NO: 207)及 CDR3β - CASSSYPLRTGRYNSYNSPLHF (SEQ ID NO: 208)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxvi) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 189)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 190)、 CDR3α - CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)、 CDR1β - SGHTS (SEQ ID NO: 194)、 CDR2β - YDEGEE (SEQ ID NO: 195)及 CDR3β - CASSWGYQETQYF (SEQ ID NO: 196)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxvii) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 189)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 190)、 CDR3α - CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)、 CDR1β - KGHSH (SEQ ID NO: 200)、 CDR2β - LQKENI (SEQ ID NO: 201)及 CDR3β - CASSPTGGEYYGYTF (SEQ ID NO: 202)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxviii) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 189)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 190)、 CDR3α - CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)、 CDR1β - MNHEY (SEQ ID NO: 206)、 CDR2β - SVGAGI (SEQ ID NO: 207)及 CDR3β - CASSSYPLRTGRYNSYNSPLHF (SEQ ID NO: 208)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxix) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 212)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 213)、 CDR3α - CAASGGRDDKIIF (SEQ ID NO: 214)、 CDR1β - MNHEY (SEQ ID NO: 217)、 CDR2β - SVGAGI (SEQ ID NO: 218)及 CDR3β - CASSYSRTESTDTQYF (SEQ ID NO: 219)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxx) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 90)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 91)、 CDR3α - CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)、 CDR1β - SGHRS (SEQ ID NO: 269)、 CDR2β - YFSETQ (SEQ ID NO: 270)及 CDR3β - CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxi) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 264)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 265)、 CDR3α - CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)、 CDR1β - SGHNS (SEQ ID NO: 95)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 96)及 CDR3β - CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxii) CDR1α - NSMFDY (SEQ ID NO: 264)、 CDR2α - ISSIKDK (SEQ ID NO: 265)、 CDR3α - CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)、 CDR1β - SGHRS (SEQ ID NO: 269)、 CDR2β - YFSETQ (SEQ ID NO: 270)及 CDR3β - CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxiii) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 275)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 276)、 CDR3α - CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 161)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 162)及 CDR3β - CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxiv) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 275)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 276)、 CDR3α - CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)、 CDR1β - SQVTM (SEQ ID NO: 167)、 CDR2β - ANQGSEA (SEQ ID NO: 168)及 CDR3β - CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxv) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 275)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 276)、 CDR3α - CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 280)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 281)及 CDR3β - CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxvi) CDR1α - TSINN (SEQ ID NO: 275)、 CDR2α - IRSNERE (SEQ ID NO: 276)、 CDR3α - CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)、 CDR1β - SGHDY (SEQ ID NO: 286)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 287)及 CDR3β - CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxvii) CDR1α - DSSSTY (SEQ ID NO: 101)、 CDR2α - IFSNMDM (SEQ ID NO: 102)、 CDR3α - CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)、 CDR1β - SGHDY (SEQ ID NO: 286)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 287)及 CDR3β - CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxviii) CDR1α - DSVNN (SEQ ID NO: 106)、 CDR2α - IPSGT (SEQ ID NO: 107)、 CDR3α - CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)、 CDR1β - SGHDY (SEQ ID NO: 286)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 287)及 CDR3β - CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxix) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 111)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 112)、 CDR3α - CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)、 CDR1β - SGHDY (SEQ ID NO: 286)、 CDR2β - FNNNVP (SEQ ID NO: 287)及 CDR3β - CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxx) CDR1α - DSSSTY (SEQ ID NO: 101)、 CDR2α - IFSNMDM (SEQ ID NO: 102)、 CDR3α - CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 280)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 281)及 CDR3β - CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體； (xxxxi) CDR1α - DSVNN (SEQ ID NO: 106)、 CDR2α - IPSGT (SEQ ID NO: 107)、 CDR3α - CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 280)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 281)及 CDR3β - CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體；或 (xxxxii) CDR1α - DSASNY (SEQ ID NO: 111)、 CDR2α - IRSNVGE (SEQ ID NO: 112)、 CDR3α - CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)、 CDR1β - DFQATT (SEQ ID NO: 280)、 CDR2β - SNEGSKA (SEQ ID NO: 281)及 CDR3β - CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)，或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。於一實施例中，本發明提供一種本發明之TCR，其包含： (i)包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (ii)包含SEQ ID NO: 37之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 42之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (iii)包含SEQ ID NO: 15之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 25之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (iv)包含SEQ ID NO: 15之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 31之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (v)包含SEQ ID NO: 20之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 25之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (vi)包含SEQ ID NO: 20之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 31之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (vii)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (viii)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 64之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (ix)包含SEQ ID NO: 48之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 70之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (x)包含SEQ ID NO: 53之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 58之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xi)包含SEQ ID NO: 53之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 64之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xii)包含SEQ ID NO: 53之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 70之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xiii)包含SEQ ID NO: 76之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 81之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xiv)包含SEQ ID NO: 76之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 87之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xv)包含SEQ ID NO: 93之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 98之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xvi)包含SEQ ID NO: 104之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 164之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xvii)包含SEQ ID NO: 104之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 170之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xviii)包含SEQ ID NO: 109之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 164之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xix)包含SEQ ID NO: 109之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 170之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xx)包含SEQ ID NO: 114之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 164之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxi)包含SEQ ID NO: 114之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 170之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxii)包含SEQ ID NO: 176之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 181之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxiii)包含SEQ ID NO: 187之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 197之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxiv)包含SEQ ID NO: 187之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 203之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxv)包含SEQ ID NO: 187之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 209之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxvi)包含SEQ ID NO: 192之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 197之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxvii)包含SEQ ID NO: 192之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 203之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxviii)包含SEQ ID NO: 192之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 209之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxix)包含SEQ ID NO: 215之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 220之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxx)包含SEQ ID NO: 93之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 272之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxi)包含SEQ ID NO: 267之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 98之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxii)包含SEQ ID NO: 267之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 272之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxiii)包含SEQ ID NO: 278之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 164之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxiv)包含SEQ ID NO: 278之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 170之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxv)包含SEQ ID NO: 278之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 283之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxvi)包含SEQ ID NO: 278之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 289之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxvii)包含SEQ ID NO: 104之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 289之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxviii)包含SEQ ID NO: 109之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 289之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxix)包含SEQ ID NO: 114之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 289之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxx)包含SEQ ID NO: 104之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 283之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域； (xxxxi)包含SEQ ID NO: 109之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 283之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域；或 (xxxxii)包含SEQ ID NO: 114之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈可變域；及包含SEQ ID NO: 283之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈可變域。於一實施例中，本發明提供一種本發明之TCR，其包含： (i)包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 10及11之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (ii)包含SEQ ID NO: 38之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 44及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 43及44之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (iii)包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 26及27之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (iv)包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 32及33之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (v)包含SEQ ID NO: 21之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 27及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 26及27之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (vi)包含SEQ ID NO: 21之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 33及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 32及33之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (vii)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 59、SEQ ID NO: 60及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 59及60之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (viii)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 65、SEQ ID NO: 66及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 65及66之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (ix)包含SEQ ID NO: 49之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 72及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 71及72之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (x)包含SEQ ID NO: 54之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 59、SEQ ID NO: 60及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 59及60之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xi)包含SEQ ID NO: 54之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 65、SEQ ID NO: 66及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 65及66之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xii)包含SEQ ID NO: 54之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 72及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 71及72之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xiii)包含SEQ ID NO: 77之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 82、SEQ ID NO: 83及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 82及83之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xiv)包含SEQ ID NO: 77之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 89及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 88及89之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xv)包含SEQ ID NO: 94之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 99、SEQ ID NO: 100及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 99及100之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xvi)包含SEQ ID NO: 105之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 165及166之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xvii) 包含SEQ ID NO: 105之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 171及172之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xviii)包含SEQ ID NO: 110之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 165及166之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xix)包含SEQ ID NO: 110之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 171及172之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xx)包含SEQ ID NO: 160之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 165及166之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxi)包含SEQ ID NO: 160之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 171及172之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxii)包含SEQ ID NO: 177之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 183及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 182及183之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxiii)包含SEQ ID NO: 188之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 199及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 198及199之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxiv)包含SEQ ID NO: 188之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 204、SEQ ID NO: 205及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 204及205之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxv)包含SEQ ID NO: 188之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 211及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 210及211之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxvi)包含SEQ ID NO: 193之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 199及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 198及199之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxvii)包含SEQ ID NO: 193之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 204、SEQ ID NO: 205及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 204及205之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxviii)包含SEQ ID NO: 193之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 211及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 210及211之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxix)包含SEQ ID NO: 216之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 221、SEQ ID NO: 222及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 221及222之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxx)包含SEQ ID NO: 94之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 273、SEQ ID NO: 274及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 273及274之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxi)包含SEQ ID NO: 268之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 99、SEQ ID NO: 100及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 99及100之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxii)包含SEQ ID NO: 268之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 273、SEQ ID NO: 274及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 273及274之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxiii)包含SEQ ID NO: 279之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 166及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 165及166之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxiv)包含SEQ ID NO: 279之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 171、SEQ ID NO: 172及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 171及172之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxv)包含SEQ ID NO: 279之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 284、SEQ ID NO: 285及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 284及285之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxvi)包含SEQ ID NO: 279之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 290、SEQ ID NO: 291及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 290及291之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxvii)包含SEQ ID NO: 105之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 290、SEQ ID NO: 291及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 290及291之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxviii)包含SEQ ID NO: 110之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 290、SEQ ID NO: 291及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 290及291之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxix)包含SEQ ID NO: 160之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 290、SEQ ID NO: 291及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 290及291之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxx)包含SEQ ID NO: 105之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 284、SEQ ID NO: 285及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 284及285之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈； (xxxxi)包含SEQ ID NO: 110之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 284、SEQ ID NO: 285及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 284及285之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈；或 (xxxxii)包含SEQ ID NO: 160之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含選自由SEQ ID NO: 284、SEQ ID NO: 285及與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之SEQ ID NO: 284及285之變異體組成之群之胺基酸序列的β鏈。於一實施例中，本發明提供一種本發明之TCR，其包含：包含SEQ ID NO: 257之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含SEQ ID NO: 259之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈。於一實施例中，本發明提供一種本發明之TCR，其包含：包含SEQ ID NO: 261之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之α鏈；及包含SEQ ID NO: 263之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%(較佳地至少75%)序列同一性之其變異體之β鏈。本發明之TCR可結合至WT1肽，該WT1肽包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。於另一態樣中，本發明提供一種T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該WT1肽包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。於一實施例中，本發明之TCR結合至MHC I及/或MHC II肽複合體。於一實施例中，本發明之TCR受限於人類白血球抗原(HLA)對偶基因。於一實施例中，本發明之TCR受限於HLA-A或HLA-B對偶基因。於一實施例中，本發明之TCR受限於選自由HLA-A*0201、HLA-A*0101、HLA-A*2402及HLA-A*0301組成之群之HLA-A對偶基因或選自由HLA-B*0702、HLA-B*3501及HLA-B*3502組成之群之HLA-B對偶基因。於一實施例中，本發明之TCR受限於HLA-A*0201。於一實施例中，本發明之TCR受限於HLA-B*3502。於一實施例中，本發明之TCR受限於HLA-B*3501。於一實施例中，本發明之TCR受限於HLA-C對偶基因。於一實施例中，本發明之TCR受限於選自由HLA-C*07:01、HLA-C*03:04、HLA-C*04:01、HLA-C*05:01、HLA-C*06:02及HLA-C*07:02組成之群之HLA-C對偶基因。於一實施例中，本發明之TCR包括一或多個突變在α鏈/β鏈介面，使得當該α鏈及該β鏈於T-細胞中表現時，在該等鏈與內源TCR α及β鏈之間之錯配頻率減少。於一實施例中，本發明之TCR包括一或多個突變在α鏈/β鏈介面，使得當該α鏈及該β鏈於T-細胞中表現時，該TCR α及β鏈之表現水平增加。於一實施例中，該一或多個突變體將半胱胺酸殘基引入該α鏈及該β鏈各者之恆定區域，其中該半胱胺酸殘基能在該α鏈與該β鏈之間形成二硫鍵。本發明之TCR可包括鼠源化恆定區。於一實施例中，本發明之TCR為可溶TCR。於另一態樣中，本發明提供一種編碼本發明之T-細胞受體(TCR)之α鏈及/或本發明之TCR之β鏈之分離多核苷酸。於另一態樣中，本發明提供一種分離之多核苷酸，其包含SEQ ID NO: 256之核苷酸序列及/或SEQ ID NO: 258之核苷酸序列或與其具有至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%序列同一性之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種分離之多核苷酸，其包含SEQ ID NO: 260之核苷酸序列及/或SEQ ID NO: 262之核苷酸序列或與其具有至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%序列同一性之其變異體。於一實施例中，該分離之多核苷酸編碼連接至β鏈之α鏈。於一實施例中，該分離之多核苷酸編碼一或多個短干擾RNA (siRNA)序列及/或能減少或防止一或多個內源TCR基因表現之一或多種其他因子。於另一態樣中，本發明提供一種包含本發明之多核苷酸之載體。於一實施例中，該載體包含多核苷酸，該多核苷酸編碼一或多個CD3鏈、CD8、自殺基因及/或可選標誌物。於另一態樣中，本發明提供一種包含本發明之TCR、本發明之多核苷酸或本發明之載體之細胞。於一實施例中，該細胞另外包含編碼一或多個CD3鏈、CD8、自殺基因及/或可選標誌物之載體。於一實施例中，該細胞為T-細胞、淋巴細胞或幹細胞(諸如造血幹細胞或誘導多能幹細胞(iPS))。該T-細胞、該淋巴細胞或該幹細胞可係選自由以下組成之群：CD4細胞、CD8細胞、Th0細胞、Tc0細胞、Th1細胞、Tc1細胞、Th2細胞、Tc2細胞、Th17細胞、Th22細胞、γ/δ T-細胞、自然殺手(NK)細胞、自然殺手T (NKT)細胞、雙陰性T-細胞、初始T-細胞、記憶幹T-細胞、中樞記憶T-細胞、效應記憶T-細胞、效應T-細胞、造血幹細胞及多能幹細胞。於一實施例中，該細胞為已自個體分離之T-細胞。於一實施例中，細胞中編碼TCR α鏈之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因被破壞，較佳地使得編碼TCR α鏈之該內源基因及/或編碼TCR β鏈之該內源基因不表現。於一實施例中，編碼TCR α鏈之該內源基因及/或編碼TCR β鏈之該內源基因藉由插入包含編碼本發明之TCR之多核苷酸序列之表現盒而被破壞。於一實施例中，細胞中編碼MHC之一或多個內源基因被破壞，較佳地其中該細胞為非同種異體反應性全適(universal) T-細胞。於一實施例中，細胞中涉及持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之內源基因被破壞，較佳地其中涉及持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之該內源基因係選自由PD1 、 TIM3 、 LAG3 、 2B4 、 KLRG1 、 TGFbR 、 CD160 及CTLA4 組成之群。於一實施例中，涉及持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之該內源基因藉由表現盒之整合而被破壞，其中該表現盒包含編碼本發明之TCR之多核苷酸序列。於另一態樣中，本發明提供一種製備細胞之方法，其包括於活體外、離體或活體內(例如)藉由轉染或轉導將本發明之載體引入細胞中之步驟。於另一態樣中，本發明提供一種製備細胞之方法，其包括於活體外、離體或活體內利用本發明之一或多種載體轉導細胞之步驟。於一實施例中，待利用一或多種載體轉導之細胞係選自由T-細胞、淋巴細胞或幹細胞(諸如造血幹細胞或誘導多能幹細胞(iPS))組成之群，視情況該T-細胞、該淋巴細胞或該幹細胞可係選自由以下組成之群：CD4細胞、CD8細胞、Th0細胞、Tc0細胞、Th1細胞、Tc1細胞、Th2細胞、Tc2細胞、Th17細胞、Th22細胞、γ/δ T-細胞、自然殺手(NK)細胞、自然殺手T (NKT)細胞、雙陰性T-細胞、初始T-細胞、記憶幹T-細胞、中樞記憶T-細胞、效應記憶T-細胞、效應T-細胞、造血幹細胞及多能幹細胞。於一實施例中，該方法包括T-細胞編輯之步驟，其包括利用人工核酸酶破壞內源基因(例如，編碼TCR α鏈之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因)，較佳地其中該人工核酸酶係選自由鋅指核酸酶(ZFN)、類轉錄活化子效應子核酸酶(TALEN)及CRISPR/Cas系統組成之群。於一實施例中，該方法包括T-細胞編輯之步驟，其包括利用人工核酸酶破壞編碼TCR α鏈之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因，較佳地其中該人工核酸酶係選自由鋅指核酸酶(ZFN)、類轉錄活化子效應子核酸酶(TALEN)及CRISPR/Cas系統組成之群。於一實施例中，該方法包括將表現盒靶向整合至由人工核酸酶破壞之編碼TCR α鏈基因之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因之步驟，其中該表現盒包含編碼本發明之TCR之多核苷酸或本發明之多核苷酸序列。於一實施例中，該方法包括破壞編碼MHC之一或多個內源基因之步驟，較佳地其中藉由該方法製備之該細胞為非同種異體反應性全適T-細胞。於一實施例中，該方法包括破壞一或多個內源MHC基因之步驟，較佳地其中藉由該方法製備之該細胞為非同種異體反應性全適T-細胞。於一實施例中，該方法包括破壞一或多個內源基因以修改持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之步驟，較佳地其中該方法包括將表現盒靶向整合至藉由人工核酸酶破壞之涉及持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之內源基因的步驟，其中該表現盒包含編碼本發明之TCR之多核苷酸序列，較佳地其中該內源基因係選自由PD1 、 TIM3 、 LAG3 、 2B4 、 KLRG1 、 TGFbR 、 CD160 及CTLA4 組成之群。於另一態樣中，本發明提供一種本發明之細胞或藉由本發明之方法製備之細胞，其係用於授受性細胞轉移，較佳地授受性T-細胞轉移，視情況該授受性T-細胞轉移可為同種異體授受性T-細胞轉移、全適非同種異體反應性授受性T-細胞轉移或自體授受性T-細胞轉移。於另一態樣中，本發明提供一種本發明之TCR、一種本發明之分離多核苷酸、一種本發明之載體、一種本發明之細胞、一種藉由本發明之方法製備之細胞或一種本發明之嵌合分子，其係用於治療。於另一態樣中，本發明提供一種本發明之TCR、一種本發明之分離之多核苷酸、一種本發明之載體、一種本發明之細胞、一種藉由本發明之方法製備之細胞，其係用於治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病。於另一態樣中，本發明提供一種經基因改造(基因編輯)以修改持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能的T-細胞，其中該T-細胞表現本發明之TCR α鏈及/或本發明之TCR β鏈。於另一態樣中，本發明提供一種藉由一種方案來基因改造之(基因編輯之) T細胞，該方案包括將表現盒靶向整合至藉由人工核酸酶破壞之涉及持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之內源基因的步驟，其中該表現盒包含編碼本發明之TCR α鏈及/或本發明之TCR β鏈之多核苷酸序列。於另一態樣中，本發明提供一種治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法，其包括對有需要之個體投與本發明之TCR、本發明之分離之多核苷酸、本發明之載體、本發明之細胞、藉由本發明之方法製備之細胞或本發明之嵌合分子之步驟。與WT1之表現相關之疾病可為增生性病症。較佳地該增生性病症可係選自由以下組成之群：血液惡性病，諸如急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、淋巴母細胞性白血病、骨髓增生異常症候群、多發性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤。該增生性病症可係選自由以下組成之群：實體腫瘤，諸如肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、結腸癌、膽管癌、胰癌、卵巢癌、頭頸癌、滑膜肉瘤、血管肉瘤、骨肉瘤、甲狀腺癌、子宮內膜癌、神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、軟組織肉瘤、尿路上皮癌、膽道癌、膠質母細胞瘤、間皮瘤、子宮頸癌及結腸直腸癌。於一較佳實施例中，與WT1之表現相關之疾病為急性骨髓性白血病(AML)。於另一較佳實施例中，與WT1之表現相關之疾病為慢性骨髓性白血病(CML)。於另一態樣中，本發明提供一種分離免疫原性WT1肽，其包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。

如本文中所用，術語「包括(comprising/comprises/comprised of)」係與「包含(including/includes)」或「含有(containing/contains)」同義，且係包含性或開放且不排除額外、未詳述成員、要素或步驟。術語「包括(comprising/comprises/comprised of)」亦包含術語「由…組成」。T- 細胞受體 在抗原處理期間，抗原於細胞內部降解及然後由主要組織相容性複合體(MHC)分子攜帶至細胞表面。T-細胞能夠識別抗原呈遞細胞之表面處之此肽:MHC複合體。存在兩種不同類別之MHC分子：MHC I及MHC II，各類別自不同細胞隔室遞送肽至細胞表面。 T細胞受體(TCR)為可在T-細胞之表面發現之分子，其對識別結合至MHC分子之抗原負責。自然產生之TCR雜二聚體在約95% T細胞中由α (α)及β (β)鏈組成，然而約5% T細胞具有由γ (γ)及δ (δ)鏈組成之TCR。 TCR與抗原及MHC之接合導致T淋巴細胞之激活，在該T淋巴細胞上該TCR通過藉由相關聯酵素、共受體及專門輔助分子介導之一系列生化事件表現。自然TCR之各鏈為免疫球蛋白超家族之成員且擁有一個N-末端免疫球蛋白(Ig)-可變(V)域、一個Ig-恆定(C)域、橫跨膜/跨細胞膜區及C-末端處之短胞質尾。 TCR α鏈及β鏈二者之可變域具有三個超可變或互補決定區(CDR)。TCR α鏈或β鏈(例如)包含以胺基至羧基末端順序之CDR1、CDR2及CDR3。一般而言，CDR3為對識別經處理抗原負責之主要CDR，雖然α鏈之CDR1亦顯示與抗原肽之N-末端部分相互作用，然而β鏈之CDR1與肽之C-末端部分相互作用。認為CDR2識別MHC分子。 TCR之恆定域可由短連接序列組成，其中半胱胺酸殘基形成二硫鍵，使在兩條鏈之間形成連接。本發明之TCR之α鏈可具有由TRAC基因編碼之恆定域。由TRAC基因編碼之α鏈恆定域之胺基酸序列實例係如下所示： IQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKTVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESSCDVKLVEKSFETDTNLNFQNLSVIGFRILLLKVAGFNLLMTLRLWSS (SEQ ID NO: 128) 本發明之TCR可包括包含SEQ ID NO: 128之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%序列同一性(較佳地與之至少75%序列同一性)之其變異體之α鏈。本發明之TCR之β鏈可具有藉由TRBC1或TRBC2基因編碼之恆定域。藉由TRBC1基因編碼之β鏈恆定域之胺基酸序列實例係如下所示：DLNKVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFFPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSVSYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDF (SEQ ID NO: 129) 藉由TRBC2基因編碼之β鏈恆定域之胺基酸序列實例係如下所示：DLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSESYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDSRG (SEQ ID NO: 130) 本發明之TCR可包括包含SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 130之胺基酸序列或與其具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%序列同一性(較佳地與之至少75%序列同一性)之SEQ ID NO: 129及130之變異體的β鏈。本發明之TCR可具有α及β鏈各者中之一或多個額外半胱胺酸殘基使得該TCR可包括恆定域中之兩個或更多個二硫鍵。該結構允許TCR與其他分子(如CD3)相關聯，該CD3擁有哺乳動物中之三種獨特鏈(γ、δ及ε)及ζ-鏈。此等輔助分子具有帶負電跨膜區且對自TCR傳播信號至細胞係至關重要。CD3-及ζ-鏈與TCR一起形成稱作T細胞受體複合體之其等。來自T細胞複合體之信號係藉由特異性共受體同時結合MHC分子增強。針對輔助T-細胞，此共受體為CD4(特定針對II類MHC)；然而針對細胞毒性T-細胞，此共受體為CD8(特定針對I類MHC)。該共受體允許在抗原呈遞細胞與T細胞之間長期接合且招募涉及激活T淋巴細胞之信號傳導之細胞內部之必要分子(例如，LCK)。因此，如本文中所用，術語「T-細胞受體」(TCR)係指能識別MHC分子呈遞之肽之分子。該分子可為兩種鏈α及β (或視情況γ及δ)之雜二聚體或其可為單鏈TCR構築體。本發明之TCR可為可溶TCR(例如，省略或更改一或多個恆定域)。本發明之TCR可包括恆定域。本發明亦提供來自此中T細胞受體之α鏈或β鏈。本發明之TCR可為包含源自一個物種以上之序列之雜化TCR。例如，出人意料地發現鼠TCR於人類T細胞中較人類TCR更有效地表現。因此TCR可包括人類可變區及恆定區內之鼠序列。此方法之缺點為鼠恆定序列可觸發免疫反應，其導致轉移T-細胞之排斥。然而，為患者進行授受性T-細胞療法作準備使用之調理方案可導致充分免疫抑制以允許表現鼠序列之T-細胞之移植。互補決定區 (CDR) 建立與結合至主要組織相容性複合體(MHC)之抗原肽之大多數接觸之TCR的部分為互補決定區3 (CDR3)，其對於各T細胞純系係獨特的。CDR3區在體細胞重排事件時產生，該等事件於胸腺中發生且涉及屬於可變(V)、多樣性(D，針對β及δ鏈)及接合(J)基因之非鄰近基因。此外，在各TCR鏈基因之重排基因座處插入/缺失之隨機核苷酸極大增加高度可變CDR3序列之多樣性。因此，生物樣本中之特定CDR3序列之頻率指示特異性T細胞群體之豐度。健康人類中之TCR庫之大的多樣性提供對由抗原呈遞細胞之表面上之MHC分子呈遞之各種外來抗原的寬範圍保護。就此而言，應注意理論上多達10¹⁵ 種不同TCR可於胸腺中產生。 T-細胞受體多樣性集中在CDR3且此區域主要負責抗原識別。本發明之TCR之CDR3區之序列可係選自下表1中列出之彼等。TCR可包括包含下述CDR3α與CDR3β對或由該CDR3α與CDR3β對組成之CDR。該CDR可(例如)包含自給定序列之一個、兩個或三個取代、添加或缺失，只要TCR保留結合MHC分子呈遞之WT1肽之能力。如本文中所用，術語「蛋白質」包含單鏈多肽分子以及多個多肽複合體，其中個別組成多肽係藉由共價或非共價方式連接。如本文中所用，術語「多肽」係指聚合物，其中單體為胺基酸且通過肽鍵或二硫鍵接合在一起。變異體、衍生物、類似物、同系物及片段 除了本文中提及之特異性蛋白質及多核苷酸，本發明亦涵蓋其變異體、衍生物、類似物、同系物及片段之用途。於本發明之上下文中，任何給定序列之變異體為其中殘基(無論胺基酸或核酸殘基)之特定序列以使得討論中之多肽或多核苷酸實質上保留其內源功能中之至少一者之方式經修改之序列。變異體序列可藉由存在於自然產生蛋白質中之至少一個殘基之添加、缺失、取代、修改、置換及/或變化獲得。稱作具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之本發明之變異體胺基酸序列可具有(例如)一個、兩個或三個胺基酸取代、添加或缺失。如本文中所用，與本發明之蛋白質或多肽有關之術語「衍生物」包含來自序列或至序列之一個(或多個)胺基酸殘基之任何取代、變化、修改、置換、缺失及/或添加，只要所得蛋白質或多肽實質上保留其內源功能中之至少一者。如本文中所用，與多肽或多核苷酸有關之術語「類似物」包含任何擬似物，即，擁有其擬似之多肽或多核苷酸之內源功能中之至少一者的化學化合物。本發明中使用之蛋白質亦可具有胺基酸殘基之缺失、插入或取代，其產生沉默變化且導致功能等效蛋白質。故意胺基酸取代可根據殘基之極性、電荷、溶解度、疏水性、親水性及/或兩親性之相似性作出，只要保留內源功能。例如，帶負電荷胺基酸包括天門冬胺酸及麩胺酸；帶正電荷胺基酸包括離胺酸及精胺酸；及具有相似親水性值之具有不帶電極性頭部基團的胺基酸包括天冬醯胺酸、麩胺醯胺、絲胺酸、蘇胺酸及酪胺酸。取代可涉及胺基酸針對相似胺基酸之置換(保守取代)。相似胺基酸為具有當歸類在一起時具有相關性質之側鏈部分者，例如，如下所示： (i)鹼性側鏈：離胺酸(K)、精胺酸(R)、組胺酸(H)； (ii)酸性側鏈：天門冬胺酸(D)及麩胺酸(E)； (iii)不帶電極性側鏈：天冬醯胺酸(N)、麩胺醯胺(Q)、絲胺酸(S)、蘇胺酸(T)及酪胺酸(Y)；或 (iv)非極性側鏈：甘胺酸(G)、丙胺酸(A)、纈胺酸(V)、白胺酸(L)、異白胺酸(I)、脯胺酸(P)、苯基丙胺酸(F)、甲硫胺酸(M)、色胺酸(W)及半胱胺酸(C)。任何胺基酸變化應維持TCR結合由MHC分子呈遞之WT1肽之能力。變異體序列可包括胺基酸取代、添加、缺失及/或插入。變化可集中在一或多個區域(諸如α或β鏈之恆定區、連接子或框架區)，或其可廣佈在整個TCR分子中。保守取代、添加或缺失可(例如)根據下表作出。第二列中之相同方塊中及較佳地第三列中之相同行之胺基酸可彼此取代：本發明亦涵蓋同源取代(本文中使用取代及置換二者意指現有胺基酸殘基與替代殘基之互換)，例如，相似取代，諸如鹼性對鹼性、酸性對酸性、極性對極性等。非同源取代亦可發生，例如，自殘基之一個類別至另一個或或者涉及包含非天然胺基酸(諸如鳥胺酸)。如本文中所用，術語「變異體」可意指具有與野生型胺基酸序列或野生型核苷酸序列之一定同源性之實體。術語「同源性」可等同於「同一性」。變異體序列可包括可係與個體序列至少50%、55%、65%、75%、85%或90%相同，較佳地至少95%、至少97%或至少99%相同之胺基酸序列。通常，該等變異體將包括與個體胺基酸序列相同之活性位點等。雖然同源性亦可根據相似性(即，具有相似化學性質/功能之胺基酸殘基)考慮，但是於本發明之上下文中，較佳地根據序列同一性表示同源性。變異體序列可包括可係與個體序列至少40%、45%、50%、55%、65%、75%、85%或90%相同，較佳地至少95%、至少97%或至少99%相同之核苷酸序列。雖然同源性亦可根據相似性考慮，但是於本發明之上下文中，較佳地根據序列同一性表示同源性。較佳地，提及具有與本文中詳述之SEQ ID NO中之任一者之百分比同一性的序列係指具有在提及SEQ ID NO之全長上之指定百分比同一性之序列。同一性比較可藉由眼睛實施或，更通常，藉助容易獲得之序列比較程式來實施。此等可市面上購得之電腦程式可計算兩個或更多個序列之間之百分比同源性或同一性。百分比同源性可在鄰近序列上計算，即，一個序列與其他序列比對及一個序列中之各胺基酸直接與其他序列中之對應胺基酸比較，一次一個殘基。此係稱作「無空隙」比對。通常，此等無空隙比對僅在相對較短數目之殘基上進行。雖然此為非常簡單且一致方法，但是考慮到以下，其無效：例如，於另外相同對序列中，核苷酸序列中之一個插入或缺失可造成隨後密碼子比對不保，因此潛在地導致當進行總體比對時百分比同源性之大的降低。因此，大多數序列比較方法經設計以產生考慮到可能插入及缺失之最優比對而無不適當整體同源性罰分。此係藉由於序列比對中插入「空隙」以試圖使局部同源性最大化來達成。然而，此等更複雜方法分配「空隙罰分」給比對中產生之各空隙，使得針對相同數目之相同胺基酸，具有儘可能少空隙之序列比對(這反映兩個比較序列之間更高關聯性)將達成較具有許多空隙者更高分數。通常使用「仿射空隙成本」，其對空隙之存在收取相對高成本及對空隙中之各後續殘基收較小罰分。此為最常用空隙評分系統。高空隙罰分當然將產生具有更少空隙之最優比對。大多數比對程式允許修改空隙罰分。然而，當使用此軟體進行序列比較時較佳地使用預設值。例如，當使用GCG Wisconsin Bestfit套裝軟體時，胺基酸序列之預設空隙罰分為針對空隙‑12及針對各延伸-4。因此最大百分比同源性之計算首先需產生考慮到空隙罰分之最優比對。用於實施此比對之適宜電腦程式為GCG Wisconsin Bestfit套裝軟體(University of Wisconsin, U.S.A.；Devereux等人，(1984)Nucleic Acids Res. 12: 387)。可進行序列比較之其他軟體之實例包括(但不限於) BLAST套裝軟體(參見Ausubel等人，(1999)ibid - Ch. 18)、FASTA (Atschul等人，(1990)J. Mol. Biol. 403-410)及比較工具之GENEWORKS套件。BLAST及FASTA二者可用於離線及線上搜索(參見Ausubel等人，(1999)ibid ，第7-58至7-60頁)。然而，針對一些應用，較佳地使用GCG Bestfit程式。稱作BLAST 2序列之另一種工具亦可用於比較蛋白質及核苷酸序列(參見FEMS Microbiol. Lett . (1999) 174: 247-50；FEMS Microbiol. Lett. (1999) 177: 187-8)。雖然最終百分比同源性可根據同一性量測，但是比對過程自身通常不基於全有或全無配對比較。相反，一般使用放大相似性評分矩陣，其基於化學相似性或進化距離分配分數給各逐對比較。通常使用之此種矩陣之實例為BLOSUM62矩陣，用於BLAST程式套件之預設矩陣。GCG Wisconsin程式一般使用公共預設值或定制符號比較表(若提供) (其他細節參見使用者手冊)。針對一些應用，較佳地使用GCG套裝軟體之公共預設值，或於其他軟體之情況下，使用預設矩陣，諸如BLOSUM62。一旦軟體已產生最優比對，即可計算百分比同源性，較佳地百分比序列同一性。軟體通常進行此作為序列比較之一部分並產生數值結果。「片段」亦為變異體及該術語通常係指多肽或多核苷酸之選定區，其係功能上或(例如)於檢定中受關注。因此「片段」係指為全長多肽或多核苷酸之一部分之胺基酸或核酸序列。此等變異體可使用標準重組DNA技術(諸如定點誘變)製備。在進行插入之情況下，可製備編碼該插入的合成DNA，與對應於插入位點之自然發生序列任一側之5'及3'側端區一起。側端區將包含對應於自然發生序列中之位點之方便限制位點使得該序列可用適宜酵素切割及合成DNA連接至切口。然後DNA根據本發明表現以製備編碼之蛋白質。此等方法僅說明用於操縱DNA序列之技術中已知之眾多標準技術且亦可使用其他已知技術。主要組織相容性複合體 (MHC) 分子通常，TCR結合至作為肽:MHC複合體之一部分的肽。 MHC分子可為MHC I或II類分子。該複合體可係在抗原呈遞細胞(諸如樹突細胞或B細胞或任何其他細胞(包括癌細胞))之表面上，或其可藉由(例如)塗覆在珠或板上固定。人類白血球抗原系統(HLA)為基因複合體之名字，該基因複合體編碼人類中之主要組織相容性複合體(MHC)且包含HLA I類抗原(A、B及C)及HLA II類抗原(DP、DQ及DR)。HLA對偶基因A、B及C呈遞主要源自細胞內蛋白質(例如，於細胞內表現之蛋白質)之肽。此係特別相關，因為WT1為細胞內蛋白質。在活體內T-細胞發育期間，T-細胞經歷陽性選擇步驟以確保自身MHC之識別，接著陰性步驟以移除太強而無法與呈遞自身抗原之MHC結合之T-細胞。因而，某些T-細胞及TCR表現將僅識別由某些類型之MHC分子(即，藉由特定HLA對偶基因編碼之彼等)呈遞之肽。此係稱作HLA限制。所關注之一個HLA對偶基因為HLA-A*0201，其於絕大多數(＞50%)高加索人群中表現。因此，結合藉由HLA-A*0201編碼之MHC呈遞之WT1肽之TCR(即，係HLA-A*0201限制)係有利的，因為利用此等TCR之免疫療法將適用於治療大比例高加索人群。所關注之其他HLA-A對偶基因為HLA-A*0101、HLA-A*2402及HLA-A*0301。所關注之廣泛表現之HLA-B對偶基因為HLA-B*3501、HLA-B*0702及HLA-B*3502。本發明之TCR可係HLA-A*0201限制。於一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CVVNLLSNQGGKLIF (SEQ ID NO: 36)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSQDYLVSNEKLFF (SEQ ID NO: 41)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAASGGRDDKIIF (SEQ ID NO: 214)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSYSRTESTDTQYF (SEQ ID NO: 219)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於另一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-A*0201限制。於一實施例中，HLA-A*0201限制之本發明之TCR結合至包含胺基酸序列APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。於一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CVVNLLSNQGGKLIF (SEQ ID NO: 36)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSQDYLVSNEKLFF (SEQ ID NO: 41)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAASGGRDDKIIF (SEQ ID NO: 214)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSYSRTESTDTQYF (SEQ ID NO: 219)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-A*0201限制，且其中該WT1肽包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。所關注之另一廣泛表現之HLA對偶基因為HLA-B*3501。本發明之TCR可係HLA-B*3501限制。於一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CAISVGQGALYEQYF (SEQ ID NO: 80)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-B*3501限制。因此，於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CAISVGQGALYEQYF (SEQ ID NO: 80)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-B*3501限制，且其中該WT1肽包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。於一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSVARDRRNYGYTF (SEQ ID NO: 86)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-B*3501限制。因此，於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSVARDRRNYGYTF (SEQ ID NO: 86)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-B*3501限制，且其中該WT1肽包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。所關注之另一廣泛表現之HLA對偶基因為HLA-B*3502。本發明之TCR可係HLA-B*3502限制。於一態樣中，其中本發明之TCR包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR係HLA-B*3502限制。因此，於另一態樣中，本發明提供一種TCR，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，其中該TCR係HLA-B*3502限制，且其中該WT1肽包含EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體。吾人已證實，表現結合至包含EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)之胺基酸序列之WT1肽的本發明之TCR的T-細胞可選擇性地消除表現HLA-B*3502對偶基因之癌(AML)細胞，參見實例4及圖4c。於一態樣中，其中本發明之TCR結合至包含EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽，該TCR係HLA-B*3502限制。於一實施例中，其中本發明之TCR結合至包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽，該TCR係HLA-A*0201限制。於一實施例中，其中本發明之TCR結合至包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽，該TCR係HLA-B*3501限制。威爾姆氏腫瘤 1 (WT1) 蛋白威爾姆氏腫瘤1 (WT1)為編碼鋅指轉錄因子之細胞內蛋白質，其於細胞生長及分化中起著重要作用(Yang, L.等人，Leukemia 21, 868-876 (2007))。其在各種血液及實體腫瘤上廣泛表現，而顯示在其他組織(性腺、子宮、腎臟、間皮、不同組織中之祖細胞)上之有限表現。最近證據表明WT1於白血病發生及腫瘤發生中起作用。 WT1具有若干同工異型物，其中之一些產生於編碼WT1之mRNA轉錄本之選擇性剪接。WT1同工異型物之完整胺基酸序列先前已公開(Gessler, M.等人，Nature ; 343(6260):774-778; (1990))。此特定同工異型物由575個胺基酸組成且包含在N末端處的前126個胺基酸，該126個胺基酸於WT1之外顯子5+及KTS+同工異型物中缺乏。實例WT1蛋白具有UniProt條目J3KNN9中闡述之胺基酸序列。另一實例WT1蛋白具有以下闡述之胺基酸序列： SRQRPHPGALRNPTACPLPHFPPSLPPTHSPTHPPRAGTAAQAPGPRRLLAAILDFLLLQDPASTCVPEPASQHTLRSGPGCLQQPEQQGVRDPGGIWAKLGAAEASAERLQGRRSRGASGSEPQQMGSDVRDLNALLPAVPSLGGGGGCALPVSGAAQWAPVLDFAPPGASAYGSLGGPAPPPAPPPPPPPPPHSFIKQEPSWGGAEPHEEQCLSAFTVHFSGQFTGTAGACRYGPFGPPPPSQASSGQARMFPNAPYLPSCLESQPAIRNQGYSTVTFDGTPSYGHTPSHHAAQFPNHSFKHEDPMGQQGSLGEQQYSVPPPVYGCHTPTDSCTGSQALLLRTPYSSDNLYQMTSQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVKWTEGQSNHSTGYESDNHTTPILCGAQYRIHTHGVFRGIQDVRRVPGVAPTLVRSASETSEKRPFMCAYPGCNKRYFKLSHLQMHSRKHTGEKPYQCDFKDCERRFSRSDQLKRHQRRHTGVKPFQCKTCQRKFSRSDHLKTHTRTHTGKTSEKPFSCRWPSCQKKFARSDELVRHHNMHQRNMTKLQLAL (SEQ ID NO: 131)WT1 肽如本文中所用，術語肽係指藉由肽鍵連接之複數個胺基酸殘基。如本文中所定義，肽可由長度少於約30個、小於約25個、少於約20個、少於19個、少於18個、少於17個、少於16個、少於15個、少於14個、少於13個、少於12個、少於11個、少於10個、少於9個、少於8個、少於7個、少於6個或少於5個胺基酸殘基組成。較佳地，肽長度係約5至20個胺基酸，更佳地，肽長度係約8至15個胺基酸殘基。本發明之TCR結合至MHC呈遞之WT1肽。如本文中所用，術語WT1肽應理解為意指包含源自WT1蛋白之胺基酸序列之肽。例如，WT1肽可包含WT1蛋白胺基酸序列之至少5個、至少6個、至少7個、至少8個、至少9個、至少10個、至少11個、至少12個、至少13個、至少14個、至少15個、至少16個、至少17個、至少18個、至少19個、至少20個或至少25個鄰近胺基酸殘基。 WT1肽可包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成。包含該胺基酸序列之WT1肽之實例為AAQWAPVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 115)及APVLDFAPPGASAYG (SEQ ID NO: 116)。 WT1肽可包含選自由QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之SEQ ID NO: 118至120之變異體組成之群之胺基酸序列或由其組成。 WT1肽可包含選自由EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之SEQ ID NO: 123及126之變異體組成之群之胺基酸序列或由其組成。實例WT1肽可具有選自由以下組成之群之胺基酸序列：TCVPEPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 121)、EPASQHTLRSGPGCL (SEQ ID NO: 122)、HSTGYESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 124)及YESDNHTTPILCGAQ (SEQ ID NO: 125)。 WT1肽可包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成。 WT1肽可包含NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成。實例WT1肽可具有選自由CMTWNQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 248)及NQMNLGATLKGVAAG (SEQ ID NO: 249)組成之群之胺基酸序列。 WT1肽可包含DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成。 WT1肽可包含選自由NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之SEQ ID NO: 252、253及254之變異體組成之群之胺基酸序列或由其組成。於一些實施例中，針對結合至藉由HLA-A*0201對偶基因編碼之MHC分子之WT1肽，可較佳地在該肽之位置2處之胺基酸(即，來自N-末端之第二胺基酸)為白胺酸或甲硫胺酸，雖然異白胺酸、纈胺酸、丙胺酸及蘇胺酸亦可係較佳。亦可較佳地在位置9或10處之胺基酸為纈胺酸、白胺酸或異白胺酸，雖然丙胺酸、甲硫胺酸及蘇胺酸亦可係較佳。其他HLA對偶基因之較佳MHC結合性基序揭示於Celis等人(Molecular Immunology，第31卷，8，1994年12月，第1423至1430頁)中。本發明設想本文中所述WT1肽之各種用途。例如，本文中所述WT1肽可對個體(例如，人類個體)投與。本發明之WT1肽之投與可引起對表現或過度表現WT1蛋白之細胞之免疫反應，即，該WT1肽為免疫原性WT1肽。因此於另一態樣中，本發明提供一種分離之免疫原性WT1肽，其包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。本文中所述WT1肽(例如，包含選自由EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)之胺基酸序列及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體組成之群之WT1肽)可用於篩選及/或識別結合至WT1細胞之新的TCR序列。例如，T2細胞可用本發明中提及之WT1肽脈衝及用自供體分離之T-細胞群體培育。於此方法中，細胞活素(例如，CD107a及IFNγ)之表現可指示識別WT1肽之T-細胞。因此，於一態樣中，本發明提供一種T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該WT1肽包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)、YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)、QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)、SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)、APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)、NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)、DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)、NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)、KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)、PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)及各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。TCR 序列吾人已測定結合至本文中所述WT1肽之TCR之胺基酸序列。特定言之，吾人已測定TCR CDR之胺基酸序列，該等胺基酸序列對於WT1肽識別及結合係重要的。因此，於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。因此，於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CVVNLLSNQGGKLIF (SEQ ID NO: 36)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSQDYLVSNEKLFF (SEQ ID NO: 41)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。因此，於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。因此，於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSVGGSGSYNEQFF (SEQ ID NO: 169)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。因此，於一實施例中，本發明提供一種TCR，其包括包含CAASGGRDDKIIF (SEQ ID NO: 214)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSYSRTESTDTQYF (SEQ ID NO: 219)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明亦提供一種TCR，其包含以下：包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β；包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β；包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β；包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β；其中該TCR結合至MHC呈遞之包含選自由以下組成之群之胺基酸序列或由其組成之WT1肽：QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)、EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)及SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)或各具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體。因此，於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAVRLSGSARQLTF (SEQ ID NO: 14)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLLGDEQYF (SEQ ID NO: 24)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含QCLSAFTVHFSGQFT (SEQ ID NO: 118)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含EDPMGQQGSLGEQQY (SEQ ID NO: 119)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。於一實施例中，提供一種TCR，其包括包含CAYRSLKYGNKLVF (SEQ ID NO: 19)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLVALQGAGEQYF (SEQ ID NO: 30)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含SQLECMTWNQMNLGA (SEQ ID NO: 120)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CATDAYSGNTPLVF (SEQ ID NO: 47)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體之CDR3α，及包含CASRAAGLDTEAFF (SEQ ID NO: 57)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞的包含EPASQHTLRSG (SEQ ID NO: 123)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之變異體或由其組成之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASTQTPYEQYF (SEQ ID NO: 63)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAVRAEIYNQGGKLIF (SEQ ID NO: 52)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSTVGGEDYGYTF (SEQ ID NO: 69)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含YESDNHTTPIL (SEQ ID NO: 126)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體或由其組成之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CAISVGQGALYEQYF (SEQ ID NO: 80)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASMAGAGSYQLTF (SEQ ID NO: 75)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSVARDRRNYGYTF (SEQ ID NO: 86)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 127)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAVTVGNKLVF (SEQ ID NO: 175)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASRGWREQFF (SEQ ID NO: 180)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含DPGGIWAKLGAAEAS (SEQ ID NO: 251)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAARSYNTDKLIF (SEQ ID NO: 186)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSWGYQETQYF (SEQ ID NO: 196)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NHTTPILCGAQYRIH (SEQ ID NO: 252)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPTGGEYYGYTF (SEQ ID NO: 202)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含KRHQRRHTGVKPFQC (SEQ ID NO: 253)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASYNNARLMF (SEQ ID NO: 191)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSSYPLRTGRYNSYNSPLHF (SEQ ID NO: 208)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含PSCQKKFARSDELVR (SEQ ID NO: 254)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAANNARLMF (SEQ ID NO: 92)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSDTRAREQFF (SEQ ID NO: 97)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAASATGNQFYF (SEQ ID NO: 266)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSPGQHGELFF (SEQ ID NO: 271)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAVEATDSWGKLQF (SEQ ID NO: 108)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAVRTSYDKVIF (SEQ ID NO: 113)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CASSLGLSISQETQYF (SEQ ID NO: 288)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含NQMNLGATLKG (SEQ ID NO: 250)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CAERLNTDKLIF (SEQ ID NO: 103)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDSVSGNTIYF (SEQ ID NO: 163)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。本發明另外提供一種TCR，其包括包含CATDGDSSYKLIF (SEQ ID NO: 277)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3α，及包含CSARDVLTGDYGYTF (SEQ ID NO: 282)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之CDR3β，該TCR結合至MHC呈遞之包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之胺基酸序列或具有多達三個胺基酸取代、添加或缺失之其變異體之WT1肽。表1中提供本發明之TCR胺基酸序列實例。表 1 供體：HD1 供體：HD2 供體：HD3 供體：HD4 供體：HD5 供體：HD6 供體：HD7 供體：HD8 供體：HD9 供體：HD10 因此，本發明提供包含選自由SEQ ID NO: 1至114及160至222、其片段、變異體及同系物組成之群之一或多個胺基酸序列之分離多肽。於一態樣中，本發明提供一種TCR，其包含選自由表1之HD1-HD10 α鏈序列組成之群之TCR α鏈序列及獨立地選自由表1之HD1-HD10 β鏈序列組成之群之TCR β鏈序列。減少錯配及改善 TCR 表現本發明之TCR可於T-細胞中表現以更改T-細胞之抗原特異性。TCR-轉導之T-細胞可表現至少兩條TCR α及兩條TCR β鏈。當內源TCR α/β鏈形成自身耐受的受體時，引入TCR α/β鏈形成針對給定靶抗原具有限定特異性之受體。然而，TCR基因療法需轉移之TCRs之充分表現。轉移之TCR可能由內源TCR之存在稀釋，導致腫瘤特異性TCR之次優表現。此外，在內源鏈與引入鏈之間之錯配可能發生而形成新穎受體，當轉移至患者時，該新穎受體可能顯示對自身抗原之意外特異性並造成自體免疫損傷。因此，已探討若干策略以減少內源與引入TCR鏈之間之錯配風險。TCR α/β介面之突變係一種目前用來減少非所需錯配的策略。例如，半胱胺酸引入α及β鏈之恆定域中允許二硫鍵之形成並增強引入鏈之配對同時減少與野生型鏈之錯配。因此，本發明之TCRs可包含一或多個突變在α鏈/β鏈介面，使得當該α鏈及該β鏈於T-細胞中表現時，在該等鏈與內源TCR α及β鏈之間之錯配頻率降低。於一個實施例中，該一或多個突變引入半胱胺酸殘基至α鏈及β鏈各者之恆定區域，其中該等半胱胺酸殘基能在該α鏈與該β鏈之間形成二硫鍵。減少錯配之另一策略依賴於編碼siRNA之多核苷酸序列之引入，添加至編碼腫瘤特異性TCR α及/或β鏈之基因中並設計以限制內源TCR基因之表現(Okamoto S.Cancer research 69, 9003-9011, 2009)。因此，編碼本發明之TCRs之載體或多核苷酸可包含一或多個siRNA或目的為限制或廢除內源TCR基因表現之其他因子。亦可組合人工核酸酶，諸如鋅指核酸酶(ZFN)、類轉錄活化子效應子核酸酶(TALEN)或CRISPR/Cas系統，經設計以靶向內源基因(例如TCR基因(TRAC及/或TRBC))之恆定區以獲得內源TCR α及/或β鏈基因之永久性破壞，因而允許腫瘤特異性TCR之完全表現及因而減少或廢除TCR錯配之風險。此過程稱作TCR基因編輯，證明優於活體外及活體內之TCR基因轉移(Provasi E., Genovese P.,Nature Medicine May; 18(5):807-15; 2012)。因此，本發明之TCR可係用於藉由TCR破壞及腫瘤特異性TCR之基因添加來編輯T細胞特異性。此外，基因組編輯技術允許將包含編碼本發明之TCR之多核苷酸及視情況可選的一或多個啟動子區及/或其他表現控制序列之表現盒靶向整合至藉由人工核酸酶破壞之內源基因(Lombardo A.,Nature biotechnology 25, 1298-1306; 2007)。因此，本發明之TCR可係用於藉由編碼本發明之TCR之多核苷酸在基因組區之靶向整合來編輯T-細胞特異性。該整合可藉由人工核酸酶靶向。為增加轉移之TCR之表現並減少TCR錯配所開發之另一策略包括「鼠源化」，該鼠源化藉由其鼠科配對物代替人類TCR α及TCR β恆定區(例如，TRAC、TRBC1及TRBC2區)。TCR恆定區之鼠源化係述於(例如) Sommermeyer及Uckert J Immunol; 2010 (184:6223-6231)中。因此，本發明之TCR可經鼠源化。分離多核苷酸 本發明係關於編碼本發明之TCR受體或其部分(諸如α鏈及/或β鏈、可變域或其部分)之分離多核苷酸。該分離多核苷酸可係雙股或單股，且可為RNA或DNA。熟習此項技術者應瞭解，眾多不同多核苷酸可編碼相同多肽，這是由於遺傳密碼簡併之結果。此外，應瞭解，熟習此項技術者可使用常規技術進行核苷酸取代、添加或缺失，其不影響藉由本發明之多核苷酸編碼之多肽序列來反映任何特定宿主生物體之密碼子用法，該生物體中本發明之多肽將表現。本文中所述多核苷酸可藉由此項技術者可獲得之任何方法改性。可實施此等改性以增強本發明之多核苷酸之活體內活性或壽命。多核苷酸(諸如DNA多核苷酸)可重組地、合成地或藉助熟習此項技術者可獲得之任何方法產生。其亦可藉由標準技術選殖。較長多核苷酸一般將使用重組方法(例如，使用聚合酶鏈反應(PCR)選殖技術)產生。此將涉及製備一對側端有期望選殖之靶序列之引物(例如，約15至30個核苷酸)，使該等引物與自動物或人類細胞獲得之Mrna或Cdna接觸，在帶來所需區域之擴增之條件下進行聚合酶鏈反應，分離所擴增片段(例如，藉由利用瓊脂糖凝膠純化反應混合物)及回收所擴增DNA。引物可經設計以包含適宜限制性酶識別位點使得所擴增DNA可經選殖至適宜載體中。表2中提供編碼根據本發明之TCR之核苷酸序列之實例。表 2 因此，本發明提供一種分離多核苷酸，其包含選自由以下組成之群之一或多種核苷酸序列：SEQ ID NO: 132至156、223至247及292至299或與其具有至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%序列同一性之其變異體。本發明亦提供一種TCR，其包含由選自由以下組成之群之核苷酸序列編碼之α鏈：SEQ ID NO: 132、135、138、141、144、147、152、223、226、227、228、233、236、237、238、245、292、295及與其具有至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%序列同一性之其變異體。本發明亦提供一種TCR，其包含由選自由以下組成之群之核苷酸序列編碼之β鏈：SEQ ID No: 133、134、136、137、139、140、142、 143、145、146、148、149、150、151、153、154、155、156、224、225、229、230、231、232、234、235、239、240、241、242、243、244、246、247、293、294、296至299及與其具有至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%序列同一性之其變異體。本發明另外提供源自表2中展示之序列之分離多核苷酸序列。例如，本發明提供一種編碼根據本發明之TCR之可變區之分離多核苷酸，其中該分離多核苷酸包含SEQ ID No: 132至156、223至247及292至299中任一者之一段多核苷酸。該變異體序列可具有一或多個鹼基之添加、缺失或取代。若變化涉及添加或缺失，則其可發生三次或經平衡(即，針對各缺失之添加)使得該變化不引起用於轉譯序列剩餘部分之框移。該等變化中之一些或所有可係在不影響編碼蛋白質之序列(由於遺傳密碼之簡併性)意義上為「沉默」。該等變化中之一些或所有可產生如上所解釋之保守胺基酸取代、添加或缺失。該變化可集中在一或多個區域(諸如α或β鏈之編碼恆定區之區域、連接子或框架區)或其可廣佈在整個分子中。該變異體序列應保留編碼結合至WT1肽之TCR胺基酸序列之所有或部分的能力。密碼子最優化 本發明中使用之多核苷酸可經密碼子最優化。密碼子最優化先前述於WO 1999/41397及WO 2001/79518中。不同細胞在其特定密碼子之用法方面不同。此密碼子偏差對應於細胞類型中之特定tRNA之相對豐度之偏差。藉由更改序列中之密碼子使得該等密碼子經定制以與對應tRNA之相對豐度匹配，可增加表現。出於同樣原因，可藉由故意選擇密碼子來減少表現，已知該等密碼子之對應tRNA於特定細胞類型中係罕見的。因此，額外程度之轉譯控制係可得的。許多病毒(包括HIV及其他慢病毒)使用大量罕見密碼子及藉由改變此等以對應於常用哺乳動物密碼子，可達成哺乳動物生產者細胞中之包裝組件之增加表現。針對哺乳動物細胞以及針對各種其他生物體之密碼子使用表係相關技術中已知的。密碼子最優化亦可涉及mRNA不穩定性基序及隱秘剪接位點之移除。載體本發明提供一種包含本文中所述多核苷酸之載體。載體為允許或促進實體自一個環境轉移至另一個之工具。根據本發明且舉例而言，於重組核酸技術中使用之一些載體允許實體(諸如核酸片段(例如，異源DNA片段，諸如異源Cdna片段))轉移至靶細胞。載體可用於維持細胞內之異源核酸(DNA或RNA)、促進包含核酸片段之載體之複製或促進藉由核酸片段編碼之蛋白質之表現之目的。載體可係非病毒或病毒。於重組核酸技術中使用之載體之實例包括(但不限於)質粒、染色體、人工染色體及病毒。載體可係單股或雙股。其可係直鏈及視情況該載體包含一或多個同源臂。載體亦可為(例如)裸核酸(例如，DNA)。以其最簡單形式，載體自身可為所關注之核苷酸。本發明中使用之載體可為(例如)質粒或病毒載體且可包含用於表現多核苷酸之啟動子及視情況可選的啟動子之調節子。可使用此項技術中已知之各種技術(諸如轉化、轉染及轉導)將本發明中使用之包含多核苷酸之載體引入細胞中。若干技術係此項技術中已知，例如，利用重組病毒載體(諸如逆轉錄病毒、慢病毒、腺病毒、腺相關病毒、桿狀病毒及單純皰疹病毒載體、睡美人(Sleeping Beauty)載體)之轉導、核酸之直接注射及基因槍轉化(biolistic transformation)。非病毒遞送系統包括(但不限於)DNA轉染方法。此處，轉染包括使用非病毒載體遞送基因至靶細胞之過程。典型轉染方法包括電穿孔、DNA基因槍、脂質介導之轉染、緊湊型DNA介導之轉染、脂質體、免疫脂質體、脂質轉染劑(lipofectin)、陽離子劑介導之轉染、陽離子面部兩親試劑(CFA) (Nature Biotechnology 1996 14; 556)及其組合。術語「轉染」應理解為涵蓋藉由病毒及非病毒遞送二者遞送多核苷酸至細胞。此外，本發明可採用基因靶向方案，例如，DNA-改性劑之遞送。術語「載體」包括表現載體，即，能於活體內或活體外/離體表現之構築體。表現可藉由載體序列控制，或例如，於靶位點處插入之情況下，表現可藉由靶序列控制。載體可整合至或栓至細胞之DNA。病毒遞送系統包括(但不限於)腺病毒載體、腺相關病毒(AAV)載體、皰疹病毒載體、逆轉錄病毒載體、慢病毒載體及桿狀病毒載體。逆轉錄病毒為具有不同於裂解病毒之生命週期之生命週期的RNA病毒。就此而言，逆轉錄病毒為通過DNA中間體複製之傳染性實體。當逆轉錄病毒感染細胞時，其基因組藉由逆轉錄酶酵素轉變成DNA形式。該DNA複本用作用於產生用於傳染性病毒粒子組裝所必需之新的RNA基因組及病毒編碼蛋白質之模板。存在許多逆轉錄病毒，例如，鼠白血病病毒(MLV)、人類免疫缺陷病毒(HIV)、馬傳染性貧血病毒(EIAV)、小鼠乳腺腫瘤病毒(MMTV)、勞氏(Rous)肉瘤病毒(RSV)、弗吉納米(Fujinami)肉瘤病毒(FuSV)、莫洛尼(Moloney)鼠白血病病毒(Mo-MLV)、FBR鼠骨肉瘤病毒(FBR MSV)、莫洛尼鼠肉瘤病毒(Mo-MSV)、艾貝爾森(Abelson)鼠白血病病毒(A-MLV)、禽骨髓細胞瘤病毒-29 (MC29)及禽成紅細胞增多症病毒(AEV)及所有其他逆轉錄病毒科，包括慢病毒。逆轉錄病毒之詳細清單可見於Coffin等人(「Retroviruses」1997 Cold Spring Harbour Laboratory Press編輯：JM Coffin、SM Hughes、HE Varmus 第758至763頁)。雖然慢病毒亦屬於逆轉錄病毒家族，但是其可感染分裂及未分裂細胞二者(Lewis等人(1992) EMBO J. 3053-3058)。載體可能夠將編碼本文中所述WT1-特異性TCR之核苷酸序列轉移至細胞(諸如T-細胞)，使得該細胞表現WT1-特異性TCR。較佳地，該載體將能於T-細胞中持續高水平表現，使得引入之TCR可與內源TCR成功競爭CD3分子之限制池。增加CD3分子之供應可增加(例如)於經改性以表現本發明之TCR之細胞中之TCR表現。因此，本發明之載體可另外包含一或多個編碼CD3-γ、CD3-δ、CD3-ε及/或CD3-ζ之基因。於一實施例中，本發明之載體包含編碼CD3-ζ之基因。載體可包含編碼CD8之基因。載體可編碼可選標誌物或自殺基因以增加基因改造細胞(例如，本發明之細胞或經改性以表現本發明之TCR之細胞)之安全特性(Bonini, Science 1997, Ciceri, Bonini Lancet Oncol. 2009, Oliveira等人，STM 2015)。本發明之載體中包含之基因可藉由自切割序列(諸如2A自切割序列)連接。或者，可提供一或多個編碼CD3基因之單獨載體用於同時、依序或分開與一或多個本發明之載體(例如，一或多個編碼本發明之TCR之載體)共轉移至細胞。細胞本發明係關於包含根據本發明之多核苷酸或載體之細胞。該細胞可為T-細胞、淋巴細胞或幹細胞。該T-細胞、該淋巴細胞或該幹細胞可係選自由以下組成之群：CD4細胞、CD8細胞、初始T-細胞、記憶幹T-細胞、中樞記憶T-細胞、雙陰性T-細胞、效應記憶T-細胞、效應T-細胞、Th0細胞、Tc0細胞、Th1細胞、Tc1細胞、Th2細胞、Tc2細胞、Th17細胞、Th22細胞、γ/δ T-細胞、自然殺手(NK)細胞、自然殺手T (NKT)細胞、造血幹細胞及多能幹細胞。可選擇細胞之類型以為本發明之細胞提供所需及有利活體內持久性及提供所需及有利功能及特性。該細胞可已自個體分離。可提供本發明之細胞用於授受性細胞轉移。如本文中所用，術語「授受性細胞轉移」係指對患者投與細胞群體。通常，該等細胞為自個體分離及然後經基因改造及在投與患者之前經活體外培養以表現本發明之TCR之T-細胞。授受性細胞轉移可係同種異體或自體。應瞭解「自體細胞轉移」為起始細胞群體(其然後根據本發明之方法轉導，或利用根據本發明之載體轉導)係自與所轉導T-細胞群體進行投與之個體相同的個體獲得。自體轉移係有利的，因為其避免與免疫學不相容性相關聯之問題及對個體可得，不管基因匹配供體之可得性。應瞭解「同種異體細胞轉移」為起始細胞群體(其然後根據本發明之方法轉導，或利用根據本發明之載體轉導)係自與所轉導細胞群體進行投與之個體不同的個體獲得。較佳地，供體將與投與該等細胞之個體基因匹配，以最小化免疫學不相容性之風險。或者，供體可與患者錯配且與患者無關。所轉導細胞群體之適宜劑量係如此為治療上及/或預防上有效。待投與之劑量可依賴於個體及待治療之病狀，且可由熟習此項技術者容易確定。該細胞可源自自個體分離之T-細胞。該T-細胞可為自個體分離之混合細胞群體(諸如外周血淋巴細胞(PBL)群體)之部分。PBL群體內之T-細胞可藉由此項技術中已知之方法(諸如使用抗-CD3及/或抗-CD28抗體或與抗-CD3及/或抗-CD28抗體共軛之細胞尺寸的珠)激活。該T-細胞可為CD4⁺ 輔助T細胞或CD8⁺ 細胞毒性T細胞。該細胞可係於CD4⁺ 輔助T細胞/CD8⁺ 細胞毒性T-細胞之混合群體中。例如，使用抗-CD3抗體(視情況與抗-CD28抗體組合)之多株激活將觸發CD4⁺ 及CD8⁺ T-細胞之增殖。該細胞可自個體分離至待授受性轉移之經基因改造細胞。就此而言，該細胞可藉由以下製得：自個體分離T-細胞，視情況激活該T-細胞，離體將TCR基因轉移至細胞。然後可藉由TCR-轉導之細胞之授受性轉移實施個體之後續免疫療法。如本文中所用，此過程係指自體T-細胞轉移，即，對T-細胞原始來源相同的個體投與該等TCR-轉導之細胞。或者，該T-細胞可自不同個體分離，使得其係同種異體。該T-細胞可自供體個體分離。例如，若個體經歷同種異體造血幹細胞移植(Allo-HSCT)或實體器官移植或細胞移植或幹細胞療法，則該細胞可源自器官、組織或細胞所衍生之供體。供體及經歷治療之個體可係同胞。或者，該細胞可為或可源自幹細胞(諸如造血幹細胞(HSC))。轉移至HSC之基因不導致細胞表面處之TCR表現，因為幹細胞不表現CD3分子。然而，當幹細胞分化成遷移至胸腺之淋巴細胞前驅體時，CD3表現之引發導致胸腺中之引入之TCR之表面表現。此方法之一個優點為成熟T-細胞(一旦產生)僅表現引入之TCR且很少或無內源TCR鏈，因為引入之TCR鏈之表現抑制內源TCR基因片段之重排來形成功能TCR α及β基因。另一益處為經基因改造之幹細胞為具有所需抗原特異性之成熟T-細胞之連續來源。因此該細胞可為經基因改造之幹細胞，較佳地經基因改造之造血幹細胞，在分化時，其產生表現本發明之TCR之T-細胞。可使用此項技術中已知之其他方法以減少、限制、防止、使沉默或廢除本發明之細胞或藉由本發明之方法製備之細胞中之內源基因之表現。如本文中所用，術語「破壞」係指減少、限制、防止、使沉默或廢除基因之表現。熟習此項技術者能夠使用此項技術中已知之任何方法破壞內源基因，例如，用於基因組編輯、基因沉默、基因敲掉或基因敲除之任何適宜方法。例如，可利用人工核酸酶破壞內源基因。人工核酸酶為(例如)經改造以選擇性地靶向特定多核苷酸序列(例如，編碼所關注基因者)及引起該多核酸序列中之雙股斷裂之人工限制酶。通常，該雙股斷裂(DSB)將藉由易錯非同源端接合(NHEJ)修復，從而導致非功能多核苷酸序列之形成，該非功能多核苷酸序列不能表現內源基因。於一些實施例中，該人工核酸酶係選自由以下組成之群：鋅指核酸酶(ZFN)、類轉錄活化子效應子核酸酶(TALEN)及CRISPR/Cas (例如，CRISPR/Cas9)。製備本發明之細胞(例如，T-細胞)之方法可包括將表現盒靶向整合至內源基因(例如，內源TCR α鏈基因及/或內源TCR β鏈基因)之步驟。如本文中所用，術語表現盒係指多核苷酸序列(例如，DNA多核苷酸序列)，其包括編碼一或多個所關注基因之一或多個多核苷酸序列使得該等所關注基因能表現。內源序列可促進自表現盒之表現及/或表現盒內之轉錄控制序列可促進表現。例如，表現盒可包含本發明之多核苷酸序列或編碼本發明之TCR之多核苷酸序列，該多核苷酸序列以可操作方式連接至表現控制序列(例如，啟動子或增強子序列)。該一或多個所關注基因可在一或多組限制位點之間定位。適宜地，該等限制位點可促進表現盒整合至(例如)載體、質粒或基因組DNA(例如，宿主細胞基因組DNA)。例如，本發明之表現盒可藉由「切」(例如，切除)自第一多核苷酸序列(例如，在載體上)轉移至另一個，該表現盒使用一或多個適宜限制酶及「黏貼」(例如，整合)表現盒至第二多核苷酸序列。該表現盒可包含本發明之多核苷酸。該表現盒可包含編碼本發明之一或多個TCR之多核苷酸。該表現盒可另外包含抗生素抗性基因或允許識別將表現盒成功整合至其DNA之細胞之其他可選標誌物基因。包含於表現盒中之多核苷酸序列以可操作方式連接至表現控制序列，例如，適宜啟動子或增強子序列。熟習此項技術者將能夠選擇適宜表現控制序列。本發明亦涵蓋表現本發明之TCR之細胞，該細胞可經改造以破壞一或多個內源MHC基因。內源MHC基因之破壞可減少或防止MHC在經改造細胞表面上之表現。因此，具有減少或無MHC表現之此經改造細胞將具有有限或無呈遞其細胞表面上之抗原的能力。此種細胞係特別有利於授受性細胞轉移，因為該細胞將係非同種異體反應性，例如，該細胞將不呈遞可藉由接收該授受性轉移細胞之個體之免疫系統識別之抗原。因此，該轉移之細胞將不被認作「非自身」及可避免對該細胞之不良免疫反應。此種細胞被稱作「全適細胞」，因為其適用於授受性轉移至各種不同宿主，不管HLA類型。因此，本發明提供一種製備非同種異體反應性全適T-細胞之方法，該全適T-細胞表現本發明之TCR。本發明另外提供非同種異體反應性全適T-細胞，該全適T-細胞表現本發明之TCR。本發明另外涵蓋經改造以破壞一或多個內源基因以將細胞改性從而增強細胞之有利性質、特性或功能及/或減少非所需性質、特性或功能之細胞。例如，藉由破壞內源細胞，可修改持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號之抗性、歸巢能力或其他細胞功能。如上下文中所用，術語「改性」係指相對於等效未經改性細胞(例如，內源基因未被破壞之細胞)之一或多個特性之變化。例如，該變化可為細胞之特性或功能相對於等效未經改性細胞之增加、增強或引入。或者，該變化可為細胞之特性或功能相對於等效未經改性細胞之減少、抑制或廢除。本發明之多核苷酸及載體可轉移至特定T-細胞子集(包含CD4及/或CD8、初始、記憶幹T細胞、中樞記憶、效應記憶或效應細胞)或其他細胞子集以便促進本發明之細胞之持久性及功能之不同活體內長度。本發明之多核苷酸及載體亦可轉移至T-細胞子集，諸如初始、記憶幹T細胞、中樞記憶細胞、效應記憶細胞或效應子。本發明之多核苷酸及載體亦可轉移至具有不同極化之T-細胞子集(諸如Th0/Tc0、Th1/Tc1、Th2/Tc2、Th17、Th22)或其他，端視最適宜靶向特定腫瘤類型之細胞活素背景而定。此外，為獲得治療效果，可將編碼本發明之TCR之抗原特異性區之本發明之多核苷酸及載體轉移至其他細胞子集(包含γ/δ T-細胞、NK細胞、NKT細胞、造血幹細胞或其他細胞)。本發明另外提供一種製備細胞之方法，其包括利用本發明之載體活體外或離體轉導細胞之步驟。利用載體轉導細胞之各種方法係此項技術中已知(參見，例如，Sambrook等人)。本發明亦提供一種藉由誘導幹細胞分化產生表現本發明之TCR之T-細胞之方法，該幹細胞包含本發明之多核苷酸或載體。可選擇性地純化表現出特異性表現型或特性之細胞的細胞群體，及從不表現出該表現型或特性或較少程度表現出該表現型或特性之其他細胞。例如，表現特異性標誌物(例如，CD3、CD4、CD8、CD25、CD127、CD152、CXCR3或CCR4)之細胞群體可自起始細胞群體純化。或者或另外，可純化不表現另一標誌物之細胞群體。應瞭解「增濃」某個類型之細胞之細胞群體為該類型細胞之濃度係於群體中增加。其他類型細胞之濃度可伴隨地減少。純化或增濃可導致細胞群體為實質上純而無其他類型細胞。表現特異性標誌物(例如，CD3、CD4、CD8、CD25、CD127、CD152、CXCR3或CCR4)之細胞群體之純化或增濃可藉由使用結合至該標誌物，較佳地實質上特異性結合至該標誌物之物劑達成。結合至細胞標誌物之物劑可為抗體，例如，結合至CD3、CD4、CD8、CD25、CD127、CD152、CXCR3或CCR4之抗體。術語「抗體」係指能結合至選定靶之完全抗體或抗體片段，且包括Fv、ScFv、F(ab’)及F(ab’)₂ 、單株及多株抗體、經改造抗體(包括嵌合、CDR-接枝及人源化抗體)及使用噬菌體呈現或替代技術產生之人工選擇抗體。此外，經典抗體之替代亦可用於本發明，例如，「艾菲爾抗體(avibodies)」、「艾菲爾親和聚體(avimer)」、「抗運載蛋白(anticalin)」、「奈米抗體(nanobody)」、「DARPin」。結合至特異性標誌物之物劑可經標記以便可使用此項技術中已知之許多技術中之任一者識別。該物劑可經固有標記，或可藉由與之共軛標記物改性。「共軛」應理解為物劑與標記物以可操作方式連接。此意指物劑與標記物以使二者能實施其功能(例如，結合至標誌物、允許螢光識別或當放置於磁場中時允許分離)而實質上不受阻礙之方式連接在一起。共軛之適宜方法係此項技術中熟知且可由熟習此項技術者容易識別。標籤可允許(例如)經標示劑及與其結合之任何細胞自其環境(例如，物劑可用磁珠或親和標記(諸如抗生物素蛋白)標示)純化、檢測到或二者。適用於用作標籤之可檢測標誌物包括螢光團(例如，綠色、櫻桃色、青色及橙色螢光蛋白)及肽標記(例如，His標記、Myc標記、FLAG標記及HA標記)。用於分離表現特異性標誌物之細胞群體之許多技術係此項技術中已知。此等包括基於磁珠之分離技術(例如，基於閉路磁珠之分離)、流式細胞儀、螢光激活之細胞分選(FACS)、親和標記純化(例如，使用親和管柱或珠(諸如生物素管柱)以分離抗生物素蛋白標記之物劑)及基於顯微鏡之技術。亦可使用不同技術之組合進行分離，諸如基於磁珠之分離步驟，接著藉由流式細胞儀針對一或多個額外(陽性或陰性)標誌物將所得細胞群體分選。可(例如)使用CliniMACS^® 系統(Miltenyi)進行臨床等級分離。此為基於閉路磁珠之分離技術之實例。亦設想可使用染料排斥性質(例如，側群或羅丹明標記)或酵素活性(例如，ALDH活性)來增濃HSC。嵌合分子 於另一態樣中，本發明提供一種共軛至非細胞受質之包含本發明之TCR、藉由本發明之多核苷酸編碼之TCR或其部分之嵌合分子。該共軛可係共價或非共價。非細胞受質可為奈米顆粒、胞外體或此項技術中已知之任何非細胞受質。本發明之嵌合分子可係可溶的。於另一態樣中，本發明提供一種共軛至毒素或抗體之包含本發明之TCR、藉由本發明之多核苷酸編碼之TCR或其部分之嵌合分子。該毒素或抗體可係細胞毒性的。該毒素可為細胞毒性分子或化合物，例如，放射性分子或化合物。嵌合分子之TCR部分可賦予識別表現WT1蛋白或肽之細胞之能力。因此，嵌合分子可特異性地識別及/或結合至表現WT1之腫瘤細胞。因此，本發明之嵌合分子可提供細胞毒性毒素、抗體及/或化合物之WT1靶向遞送。WT1 相關疾病 WT1在各種血液及實體腫瘤上廣泛表現，而顯示在各種健康組織(例如，性腺、子宮、腎臟、間皮、不同組織中之祖細胞)上之有限表現。本發明者已識別並測定識別WT1肽之TCR之胺基酸序列。此外，其已證實表現根據本發明之TCR之T-細胞靶向並殺死呈遞WT1肽或過度表現WT1蛋白之細胞。因此，本發明提供一種治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法，其包括對有需要之個體投與本發明之TCR、分離多核苷酸、載體或細胞之步驟。本發明亦提供一種治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法，其包括對有需要之個體投與藉由本發明之方法製備之細胞之步驟。本發明另外提供一種本發明之TCR、一種本發明之分離多核苷酸、一種本發明之載體、一種根據本發明之細胞或一種藉由本發明之方法製備之細胞，其係用於治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病。術語「預防」意欲係指防止、延遲、阻止或阻礙疾病之害病。治療可(例如)防止或降低發展或害病與WT1之表現相關之疾病之可能性。如本文中所用，「治療」係指為改善、治癒或減少疾病之症狀或為減少、暫停或延遲疾病之進展而照顧患病個體。該個體可為人類個體。該人類個體可為兒童。例如，該兒童可係不到10歲、不到9歲、不到8歲、不到7歲、不到6歲、不到5歲、不到4歲、不到3歲或不到2歲。該人類個體可為嬰兒。該個體可基於WT1之表現先前確定為需要本發明之TCR、分離多核苷酸、載體或細胞或藉由本發明之方法製備之細胞。例如，該個體可具有表現出相對於健康對照細胞群體之WT1之增加表現之細胞群體。此項技術中已知各種技術可用於測定WT1表現-例如，定量RT-PCR可用於測定WT1 RNA轉錄本之量，該量指示WT1蛋白表現。熟習此項技術者亦將瞭解WT1蛋白表現可藉由進行西方墨點(western blot)使用可市面上可購得之特異性針對WT1之抗體測定。該個體亦可先前經識別為具有WT1基因中之更改(例如，突變或缺失)。此更改可係遺傳性。因此，與WT1之表現相關之疾病可為遺傳性疾病。與WT1之表現相關之遺傳性疾病之實例包括(但不限於) WAGR (威爾姆氏腫瘤-無虹膜-泌尿生殖器畸形-生長延遲)症候群、Denys-Drash症候群(DDS)、Frasier症候群(FS)、泌尿生殖異常(生殖及泌尿系統異常)症候群。患有與WT1之表現相關之遺傳性疾病之個體可有發展增生性病症(例如，癌症)之較高風險。與WT1之表現相關之疾病可為增生性病症。該增生性病症可為血液惡性病或實體腫瘤。該血液惡性病可係選自由以下組成之群：急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、淋巴母細胞性白血病、骨髓增生異常症候群、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤及霍奇金氏淋巴瘤。該實體腫瘤可係選自由以下組成之群：肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、結腸癌、膽管癌、胰癌、卵巢癌、頭頸癌、滑膜肉瘤、血管肉瘤、骨肉瘤、甲狀腺癌、子宮內膜癌、神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、軟組織肉瘤、尿路上皮癌、膽道癌、膠質母細胞瘤、間皮瘤、子宮頸癌及結腸直腸癌。與WT1之表現相關之疾病可係選自由以下組成之群：急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、淋巴母細胞性白血病、骨髓增生異常症候群、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤及霍奇金氏淋巴瘤、肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、結腸癌、膽管癌、胰癌、卵巢癌、頭頸癌、滑膜肉瘤、血管肉瘤、骨肉瘤、甲狀腺癌、子宮內膜癌、神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、軟組織肉瘤、尿路上皮癌、膽道癌、膠質母細胞瘤、間皮瘤、子宮頸癌及結腸直腸癌。醫藥組合物 本發明之TCR、本發明之多核苷酸、本發明之載體、本發明之細胞、藉由本發明之方法製備之細胞、本發明之嵌合分子及本發明之混合細胞群體可利用醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑調配用於對個體投與。適宜載劑及稀釋劑包括等滲鹽水溶液(例如，磷酸鹽緩衝鹽水)及可能地含有人類血清白蛋白。細胞療法產品之處理較佳地遵從針對細胞療法之FACT-JACIE國際標準進行。治療方法 於另一態樣中，本發明提供一種治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法，其包括對有需要之個體投與本發明之TCR、本發明之分離之多核苷酸、本發明之載體、本發明之細胞、藉由本發明之方法製備之細胞、本發明之嵌合分子或本發明之混合細胞群體之步驟。該個體可為人類個體。該個體可為非人類動物個體。該個體可患有與WT1之表現相關之疾病。該個體可有發展與WT1之表現相關之疾病之風險。該個體可先前經確定為有發展與WT1之表現相關之疾病之風險。該個體可具有發展與WT1之表現相關之疾病之增加風險。該增加風險可藉由基因篩選及/或藉由回顧個體之家族史確定。該個體可表現指示發展與WT1之表現相關之疾病之增加風險的基因標記。適宜地，熟習此項技術者將意識到與發展與WT1相關之疾病之增加風險相關聯之基因風險因子(例如，基因標記)。熟習此項技術者可使用此項技術中已知之任何適宜方法或技術確定個體是否具有發展與WT1之表現相關之疾病之增加風險。該個體可先前接受針對與WT1之表現相關之疾病之治療。該個體可處於緩解中。該個體可抗化療。該個體可抗抗-WT1療法。於一實施例中，治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法包括對個體投與化療之步驟。該化療可與本發明之TCR、本發明之分離多核苷酸、本發明之載體、根據本發明之細胞、藉由本發明之方法製備之細胞或本發明之嵌合分子同時、依序或分開對個體投與。於另一態樣中，本發明提供一種治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之方法，其包括投與混合細胞群體之步驟，其中該混合細胞群體包含複數個細胞群體，各者表現本發明之不同TCR。於另一態樣中，本發明提供一種混合細胞群體，其包含複數個細胞群體，各者表現本發明之不同TCR。於另一態樣中，本發明提供一種製備包含複數個細胞群體之混合細胞群體的方法，各細胞群體表現本發明之不同TCR，其中該方法包括利用本發明之載體活體外或離體轉導細胞之步驟。於另一態樣中，本發明提供一種用於治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之混合細胞群體，其中該混合細胞群體包含複數個細胞群體，各者表現本發明之不同TCR。例如，該混合細胞群體可包含表現本發明之第一TCR之第一細胞群體及表現本發明之第二TCR之第二細胞群體。例如，該混合細胞群體可包含表現本發明之第一TCR之第一細胞群體、表現本發明之第二TCR之第二細胞群體及表現本發明之第三TCR之第三細胞群體等。混合細胞群體之各細胞群體可(例如)僅表現本發明之單一TCR。混合細胞群體中之細胞群體之內源TCR基因可被破壞或缺失。混合細胞群體中之細胞之內源TCR基因之表現可(例如)藉由人工核酸酶之基因編輯被破壞。於另一態樣中，本發明提供本發明之TCR、本發明之分離多核苷酸、本發明之載體、本發明之細胞、藉由本發明之方法製備之細胞、本發明之嵌合分子或本發明之混合細胞群體的用途，其用於製造用於治療與WT1之表現相關之疾病之藥劑。人類及獸醫用治療係均在本發明之範圍內。除非另有指明，否則本發明之實務將採用細胞生物學、分子生物學、組織學、免疫學、腫瘤學之習知技術，其係於一般技術者之能力內。於文獻中解釋此等技術。參見，例如，Sambrook, J.、Fritsch, E.F.及Maniatis, T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press；Ausubel, F.M.等人(1995及定期增刊) Current Protocols in Molecular Biology，第9、13及16章，John Wiley & Sons；Roe, B., Crabtree, J.及Kahn, A. (1996) DNA Isolation and Sequencing: Essential Techniques, John Wiley & Sons；Polak, J.M.及McGee, J.O’D. (1990) In Situ Hybridization: Principles and Practice, Oxford University Press；Gait, M.J. (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press；及Lilley, D.M.及Dahlberg, J.E. (1992) Methods in Enzymology: DNA Structures Part A: Synthesis and Physical Analysis of DNA, Academic Press。此等一般文本各者以引用的方式併入本文中。現將藉由非限制性實例描述本發明之各種較佳特徵及實施例。實例實例 1- 來自健康供體 (HD) 之功能 WT1- 特異性細胞毒性 T- 淋巴細胞 (CTL) 之產生 為識別特異性針對受限於不同HLA對偶基因之WT1抗原決定基之新穎TCR，吾人利用具有跨越WT1蛋白全序列之11個胺基酸重疊之十五肽(15 mer)之池刺激來自十個不同HD之外周血單核細胞(PBMC) (參見材料及方法)。此肽設計確保CD4⁺ 及CD8⁺ T-細胞二者之最優刺激。於刺激26至30小時後，吾人將表現CD137之T-細胞增濃。CD137為T-細胞受體接合時上調之分子且先前顯示為用於抗原特異性記憶及初始CD4⁺ 及CD8⁺ T-細胞之活體外快速識別、分離及擴增之可靠標誌物。CD137-陰性部分係CD3部分之進一步耗盡，然後在30 Gy下照射及用作CD137⁺ 部分之抗原呈遞細胞(APC)。將分選之CD137⁺ 細胞於活體外擴增~9天並每7至14天用負載有肽池之由CD3-耗盡細胞或由永生化自體B細胞表示之自體APC再刺激。此程序導致WT1-特異性T淋巴細胞之增濃，如藉由圖1 (a至j)中呈現之細胞螢光結果所示。T細胞之功能表徵係在不同時間點進行。更詳細而言，T細胞係與負載肽池之自體APC共培養及，於共培養6小時後，T-細胞群體中之CD107a及IFNγ之表現係藉由細胞內染色識別。CD107a於抗原相遇後之表現指示抗原誘導之去顆粒及裂解潛力。作為陰性對照，將細胞用無關肽池刺激。對照刺激導致源自各健康供體之T-細胞之IFNγ及CD107a之最小分泌。實例 2- 引起 T 細胞反應之 WT1 抗原決定基之定位 為識別藉由T-細胞識別之WT1抗原決定基，於WT1-刺激/增濃T-細胞與負載有肽子池(根據定位網格，各者含有多達12種肽)之自體APC之活體外共培養6小時後，定量IFNγ分泌。該定位網格由24個子池組成，其中各肽獨特地包含於兩個相交子池中(Doubrovina, E.等人，Blood 120, 1633-1646 (2012))。結果總結於圖2a中。 FACS分析顯示於利用子池4、5及16刺激後HD1-、HD3-、HD6-、HD7-、HD10-來源T-細胞之IFNγ及CD107a之大量表現(圖2b、d、g、h、k)。針對藉由子池6、16、17及20刺激之HD2-來源T-細胞觀察到IFNγ之大量表現(圖2c)，而子池4、5、6、14、18、21刺激HD4-來源T-細胞之IFNγ及CD107a之表現(圖2e)及子池5、11、12、21、22刺激HD5中IFNγ之表現(圖2f)。針對HD7，於利用子池7、8、20刺激後，吾人額外觀察到IFNγ及CD107a之增加表現，即使相較於利用子池4、5及16觀察到者在更低水平(圖2h)。此外，於利用子池12及14刺激HD8-來源T細胞(圖2i)及利用子池5、13、21刺激HD9-來源T細胞(圖2j)後吾人觀察到IFNγ及CD107a之增加表現。之後，將該等HD-來源T-細胞用APC刺激6小時，該等APC用藉由引起最高免疫反應且具有至少一個無關15mer之子池共用之單一十五肽脈衝。FACS分析指示如下的CD107a及/或IFNγ之增加表現，針對HD1 T-細胞中之肽40及41 (圖3a)、針對HD2 T-細胞之肽54、77、90 (圖3b)、針對HD3 T-細胞之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157；其為由SEQ ID NO: 117表示之肽之九聚體) (圖3c)、針對HD4之肽17、18、99、100 (圖3d、e)、針對HD5之肽101 (圖3f)、針對HD6 T-細胞之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157；其為由SEQ ID NO: 117表示之肽之九聚體) (圖3g)、針對HD9 T-細胞之肽101、125及137 (圖3h)、針對HD10 T-細胞之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157；其為由SEQ ID NO: 117表示之肽之九聚體) (圖3i)。以此方式，顯性免疫原性序列經識別。於與無關對照肽共培養後未觀察到相關免疫反應(即，CD107a及/或IFNγ之增加表現)。針對HD7及HD8，由於降低之細胞適應度，不可進行培養實驗以識別免疫原性肽。吾人仍將藉由定位網格之反褶積預測經識別肽。吾人識別針對HD7之肽41及42 (源自SP4、5、16)之重疊序列及肽91及92 (源自SP7、8、20)之重疊序列及針對HD8之肽24。為測定藉由自HD4、HD5及HD10擴增之T-細胞識別之WT1免疫原性肽之HLA-限制，將來自此等之T-細胞與各者表現不同HLA-A或HLA-B對偶基因之不同靶EBV-BLCL細胞小組共培養6小時，該等靶EBV-BLCL細胞已利用相關肽(針對HD4之肽17、針對HD5之肽101、針對HD10之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)或無關對照肽脈衝。此實驗之結果顯示肽17係藉由HLA-B*3502對偶基因呈遞且由源自HD4之T-細胞識別(圖3j)，肽101係藉由HLA-B*3501呈遞且由源自HD5之T-細胞識別(圖3k)；肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)係藉由HLA-A*0201呈遞且由源自HD10之T-細胞識別(圖3l)。藉由自HD1至HD10擴增之WT1-特異性T-細胞識別之WT1肽之序列示於下表3中。表 3 實例 3 -WT1- 特異性 T- 細胞選擇性消除表現 WT1 之細胞 為測定WT1特異性T-細胞之HLA限制及其消除表現WT1之細胞之能力，將T-細胞與不同靶細胞共培養。HD1- 來源 T- 細胞意識到HD1攜帶HLA-A*0201對偶基因，吾人將增濃WT1-特異性T-細胞與以下不同靶細胞共培養：利用包含肽40及41之重疊肽池脈衝之T2細胞(參見表3)；利用MelanA/MART1池脈衝之T2細胞作為陰性對照(T2 MelanA/MART1池)；或經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因及過度表現WT1蛋白二者之K562細胞(K562 HLA-A*0201 WT1)。於共培養6小時後，藉由FACS建立CD107a之表現。HD1之結果指示與利用WT1池脈衝之T2細胞共培養後＞60% CD8⁺ T-細胞中CD107a表現(圖4a)。類似地，WT1特異性T-細胞與經基因改造之K562細胞(表現HLA-A*0201對偶基因及WT1蛋白)之共培養導致＞60% CD8⁺ T-細胞之CD107a表現(圖4a)。相反，與利用陰性對照MelanA/MART1池脈衝之T2細胞共培養之CD8⁺ T-細胞之CD107a表現係最小(圖4a)。此等結果證實當藉由由HLA-A*0201對偶基因編碼之MHC分子呈遞時，分離之HD1-來源T-細胞特異性識別包含序列APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之WT1肽。此外，該等結果顯示HD1-來源T-細胞能夠特異性靶向過度表現WT1蛋白之細胞。因此，此等實驗資料證實藉由HD1-來源T-細胞表現之TCR特異性結合至包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)胺基酸序列之肽且此等TCR係HLA-A*0201限制。HD3- 來源 T- 細胞意識到HD3攜帶HLA-A*0201對偶基因，吾人將增濃WT1-特異性T-細胞與以下不同靶細胞共培養：利用先前測定含有引起免疫反應之免疫原性肽之子池16脈衝之T2細胞(T2-SP16)；利用MelanA/MART1池脈衝之T2細胞作為陰性對照(T2-Melan A)；野生型K562細胞(K562)作為陰性對照；或經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因及過度表現WT1蛋白二者之K562細胞(K562 A2+WT1+)。於共培養4天後，HD3-來源T-細胞殺死靶細胞之能力以消除指數表示，該消除指數計算為與WT1-特異性T-細胞共培養後仍存在之靶細胞之總數目除以單獨靶細胞之總數目。結果證實WT1-特異性T-細胞消除表現經識別特異性WT1抗原決定基之靶細胞之能力(圖4b)。特定言之，HD3-來源T-細胞消除約95%之利用包含APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)胺基酸序列之WT1肽(子池16、SP16)脈衝之T2細胞。此外，HD3-來源T-細胞消除約78%之表現藉由HLA-A*0201對偶基因編碼之MHC分子及過度表現WT1蛋白之K562細胞。相反，經陰性對照MelanA/MART1池脈衝之T2細胞無一者被HD3-來源T-細胞消除。類似地，存在對照野生型K562細胞之最小消除(圖4b)。此等結果證實分離HD3-來源T-細胞特異性識別包含胺基酸序列APVLDFAPPGA (SEQ ID NO: 117)之WT1肽。此外，該等結果顯示HD3-來源T-細胞能夠經由HLA-A*0201編碼之MHC之肽呈遞特異性靶向並殺死過度表現WT1蛋白之細胞。因此，此等實驗資料證實WT1肽針對藉由HD3-來源T-細胞表現之TCR之特異性且HD3-來源TCR係HLA-A*0201限制。HD4- 來源 T- 細胞 HD4-來源T-細胞消除靶細胞之能力係藉由該T-細胞與自急性骨髓性性白血病(AML)患者分離之原發性白血病母細胞(CD33⁺ 細胞)共培養來評估，該患者係根據WT1抗原及HLA分型(HLA-B*3502)之高表現選擇。作為陰性對照，將HD4-來源T-細胞與來自不表現HLA-B*3502對偶基因之AML患者之白血病母細胞共培養。於共培養三天後，在10:1之效應子：靶比率下，FACS分析顯示與HD4 WT1-特異性T-細胞(CD3⁺ 細胞)共培養後自表現HLA-B*3502對偶基因之AML患者收穫之白血病母細胞(CD33⁺ )之接近完全清除(圖4c，上圖)。的確，僅0.54%之剩餘總細胞群體對於CD33表現呈陽性。相反，WT1-特異性T-細胞與無關對照AML母細胞共培養後未看到CD33⁺ 細胞之清除(圖4c，下圖)。的確，與HD4-來源WT1-特異性T-細胞共培養後，於對照樣本中7.9%之總細胞群體對於CD33表現呈陽性。重要地，此等結果證實源自HD4之WT1-特異性T-細胞特異性靶向並殺死過度表現WT1及藉由HLA-B*3502編碼之MHC之白血病母細胞(AML癌細胞)之能力。因此，源自HD4之TCR能夠以受限於HLA-B*3502之方式特異性靶向並殺死癌細胞。實例 4 -WT1 特異性 T- 細胞之 Vβ 序列之免疫剖析 為更好識別涉及藉由自HD1至6及10之WT1特異性T-細胞之抗原識別之TCR(針對HD7、HD8及HD9，不可進行Vβ免疫剖析分析，由於降低之細胞適應度)，吾人首先進行多參數FACS分析以定量測定TCR Vβ庫。因此，為測定經擴增WT1-特異性T-細胞之純系型，吾人根據製造商之建議使用IO Test Beta Mark TCR Vβ庫套組。此套組允許檢測8個單管中之24種不同Vβ基因之表現。特定言之，完整Vβ庫之75%之覆蓋率係藉由使用此方法保證。FACS染色之結果指示針對HD1、HD2、HD3、HD5之特異性Vβ之極大盛行率，參見圖5。針對HD4、HD6及HD10，優勢Vβ之詳盡測定係不可能，可能由於包含覆蓋現有Vβ蛋白之75%之抗體之套組的固有限制。實例 5- 自 WT1- 特異性 T 細胞分離之 TCR α 及 β 鏈之高通量定序 WT1-特異性T-細胞係在共培養時間框架之不同時間點收集及其RNA係藉由使用Arcturus Pico Pure RNA提取套組提取。WT1-特異性T-細胞之CDR3序列係藉由使用改良RACE方法擴增，其中於cDNA合成後包含磁捕獲以增加反應之特異性及消除非所需模板(Ruggiero等人，Nat. Commun. 6, 8081 (2015))。樣本係使用Illumina MiSeq定序儀定序及CDR3純系型係使用MiXCR軟體識別(Bolotin, DA等人，Nature Methods 12, 380-381 (2015))。此外，CDR1、CDR2及CDR3係使用IMGT V-探索工具進一步測定(Brochet, X.等人，Nucl. Acids Res. 36, W503-508 (2008). PMID: 18503082；Giudicelli, V.、Brochet, X.、Lefranc, M.-P., Cold Spring Harb Protoc. 2011年6月1日；2011(6). pii: pdb.prot5633. doi: 10.1101/pdb.prot5633。PMID: 21632778摘要亦於具有自Cold Spring Harbor (CSH)協定之包容條款之IMGT小冊子中)。定序結果證實針對HD1至10中之兩條TCR鏈，WT1-特異性T細胞群體中之特異性CDR3純系型隨時間之增加占優勢。圖6中提供占優勢α及β鏈基因型及CDR3序列。此外，源自HD1至10之TCR之全長α及β鏈胺基酸序列經測定，參見表1。對應核苷酸序列亦經測定，參見表2。實例 6- 新識別之 TCR 之功能驗證 自HD1及HD3分離並識別藉由HLA-A*0201對偶基因呈遞的WT1 VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)肽之TCR α及β序列在雙向啟動子之控制下經選殖至慢病毒載體以促進兩條TCR鏈於經轉導淋巴細胞中之穩健及協調表現。將來自健康個體之T細胞用編碼HD1 TCR或HD3 TCR之病毒載體轉導。作為對照，吾人亦用WT1 126-134 TCR轉導細胞。經轉導之T細胞係藉由與不同靶細胞共培養進行功能驗證，該等靶細胞由以下表示：利用2種經識別肽(針對HD1及HD3 TCR之VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)；針對WT1 126-134 TCR之RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 255))中之一者脈衝之T2細胞(圖7a)、野生型或經改造以表現HLA-A*0201對偶基因之K562細胞(圖7b)、源自3個AML患者及根據HLA-A*0201對偶基因之表現及WT1表現選擇之原發性AML母細胞(圖7c)。共培養3天後，吾人觀察到各經轉導之T細胞群體在特異性識別當由HLA-A*0201對偶基因呈遞的靶肽方面之能力(圖7a)及HD1 T細胞在介導經改造之K562細胞之接近完全消除方面之較大潛力。HD1 TCR在識別靶抗原方面之較高效力係進一步藉由與pAML母細胞之共培養結果證實。此處，吾人觀察到與HD1 TR T細胞共培養後攜帶HLA-A*0201對偶基因之兩種pAML母細胞相較於其中使用HD3 TR及WT1 126-134 TR T淋巴細胞作為效應細胞之條件更大之消除。材料及方法 使用先前由Gessler等人(Gessler, M.等人(1990) Nature 343: 774-778)公開之WT1蛋白序列來設計用於WT1-特異性T細胞之刺激及分離之肽。此序列含有575個胺基酸且於N-末端中包含WT1之(外顯子5+、KTS+)同工異型物中缺失之前126個胺基酸。吾人設計跨WT1蛋白之全序列之141種十五肽，其各者與下一者重疊11個胺基酸。肽係藉由PRIMM合成至經驗證序列之規格，70%純度、無菌性及不存在內毒素。此等肽係於WT1池中在每種肽1 μg/ml之濃度下以等量混合。此外，根據特定定位矩陣產生24個子池，各者含有多達12個肽(每種肽4.17 μg/ml)，以具有包含於僅兩個重疊子池中之各肽，如表4中所示(參見Doubrovina, E.等人，Blood 120, 1633-1646 (2012)中之定位網格策略)。表4. 外周血單核細胞之分離 外周血係自San Raffaele醫院經知情同意之10個健康供體獲得。外周血單核細胞係使用Ficoll-Hypaque密度梯度離心分離。永生化 B 細胞自體B細胞係使用CD19微珠(Miltenyi Biotech)自健康供體之PBMC分離。細胞係利用攜帶BCL-6/BCL-XL轉殖基因(Kwakkenbos, M. J.等人，Nat. Med.16, 123 (2009))及H/F假型(Lévy, C.等人，Molecular Therapy20 9, 1699-1712, (2012))之慢病毒載體轉導及於補充有10%胎牛血清(FBS)、盤尼西林-鏈黴素(penicillin-streptomycin)及10 ng/ml IL21 (Miltenyi Biotech)之IMDM中培養。B-細胞係每5天藉由與經照射(50 Gy)之表現CD40L之小鼠L-細胞纖維母細胞(3T3-CD40L)以10:1之B-細胞:3T3-CD40L比率之共培養物再刺激。細胞系 吾人於補充有盤尼西林、鏈黴素、麩胺醯胺及10% FBS (BioWhittaker)之RPMI 1640 (GIBCO-BRL)中培養T2及K562細胞系。白血病細胞 原發性AML細胞係自San Raffaele醫院(OSR)白血病生物庫獲得且根據藉由定量PCR測得之WT1表現及HLA分型選擇。所有EBV-BLCL及原發性白血病細胞係在OSR之HLA實驗室下在高解析度下針對HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DR及HLA-DQ對偶基因分型。流式細胞儀 吾人使用針對人類CD3、CD4、CD8、CD107a、IFNγ、TNFα、CD33、CD117、CD34、CD14、Vβ21.3、Vβ8、Vβ7.2及HLA-A2之FITC-、PE-、PerCP-、APC-、PE-細胞色素7-、APC細胞色素7-、太平洋藍(Pacific Blue)及亮紫(Brillant Violet)-共軛之抗體。按照製造商之說明使用APC螢光標記之WT1 VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)及PE螢光標記之WT1 RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 255) dextramer。將細胞在4℃下用抗體培育15分鐘並用含有1% FBS之磷酸鹽緩衝鹽水洗滌。將樣本通過螢光激活之細胞分選器(FACS) Canto II流式細胞儀(BD Biosciences)運行，及藉由Flow Jo軟體(Tree star Inc)分析資料。針對細胞活素分泌及去顆粒標誌物之表現之細胞內評價，根據製造商說明使用Fix/Perm緩衝套(Biolegend)。WT1- 特異性 T- 細胞之刺激、分離及擴增 將新分離PBMC再懸浮於補充有5%人類AB血清、2 mM麩胺醯胺及1 μg/ml CD28單株抗體之X-VIVO中，以10⁷ 個細胞/ml之密度接種及用WT1重疊肽池刺激，各肽以1 μg/ml之濃度存在。抗原特異性T-細胞係藉由CD137表現於26至30小時後分離。更具體而言，細胞係用PE-共軛之CD137抗體染色並用抗-PE微珠(Miltenyi Biotech)分選。CD137^- 部分係使用CD3-微珠(Miltenyi Biotech)耗盡CD3細胞，在30 Gy下照射並用作負載肽之APC與CD137⁺ 部分以當可能時100:1或至少20:1之比率及5 x 10⁶ 個細胞/ml之最終密度共培養。補充有5%人類AB血清、5 ng/ml IL7、5 ng/ml IL15及10 ng/ml IL21之X-VIVO係用作培養基。包含細胞活素之培養基係每2至3天更換。經擴增抗原特異性 T- 細胞之再刺激 每7至14天用WT1-脈衝之自體APC (PBMC CD3-耗盡細胞；永生化B細胞)再刺激細胞。於初始再刺激中，細胞2天前經洗滌並平板接種於無細胞活素培養基中。APC係用30 Gy照射，用肽池脈衝過夜並與效應細胞於補充有5%人類AB血清、1 μg/ml CD28單株抗體及IL7 (5 ng/ml)、IL15 (5 ng/ml)、IL21 (10 ng/ml)之X-VIVO中共培養。T 細胞反應之評估 對應於WT1肽池之T-細胞之百分比係藉由進行效應細胞與利用所需抗原(WT1肽池、WT1子池、WT1個別肽、作為對照之無關肽池)脈衝之自體APC (至少1:1之比率)之6小時共培養量測。將共培養物接種於補充有5%人類AB血清及補充有CD28單株抗體(1 μg/ml)、Golgi Stop (BD)及CD107a-FITC抗體之X-VIVO中來評估去顆粒。然後細胞經固定、透化並細胞內染色以測定表現IFNγ及CD107a之CD3⁺ CD8⁺ 或CD3⁺ CD4⁺ 細胞之百分比。免疫原性肽之定位 將利用WT1池刺激之T-細胞接種於不同孔中並與負載有WT1子池各者中之一者之自體APC以至少1:1之比率共培養。如先前所述藉由FACS分析量測T-細胞對各子池之反應。定位網格之反褶積對確定哪些共用肽可引起T細胞反應係必不可少。一旦確定免疫原性肽，就將T-細胞用負載個別肽之APC進一步刺激以證實其免疫原性。T 細胞識別表現 WT1 之細胞之能力的評價 T-細胞識別靶細胞之WT1-特異性及受HLA-限制能力係用不同實驗程序量測。針對源自HD1之T-細胞，CD107a之分泌係與靶細胞共培養6小時後藉由FACS分析測定；針對源自HD3之T-細胞，消除指數係計算為與WT1-特異性T-細胞共培養4天後仍存在之靶細胞之總數目除以單獨靶細胞之總數目；針對源自HD4之T-細胞，與CD3⁺ WT1-特異性T細胞共培養3天後仍存在之CD33⁺ 靶細胞(攜帶所關注HLA對偶基因之AML原發性細胞及作為對照之不攜帶特異性HLA對偶基因之AML原發性細胞)之百分比係藉由細胞螢光測定分析評估。T 細胞純系性評估 為測定經擴增WT1-特異性T細胞之純系性，根據製造商之建議使用IO Test Beta Mark TCR Vβ庫套組。TCR 庫定序 WT1-特異性T細胞係在共培養時間框架之不同時間點收集及RNA係藉由使用Arcturus Pico Pure RNA提取套組提取。WT1-特異性T細胞之互補決定區(CDR) 3序列係藉由使用改良RACE方法(Ruggiero, E等人，Nat. Commun. 6,8081 (2015))擴增。樣本係藉由使用IlluminaMiSeq定序儀定序及CDR3純系型係使用MiXCR軟體 (Bolotin, DA等人，Nature Methods 12, 380-381 (2015))識別。慢病毒載體 自HD1及HD3分離之TCR α及β鏈基因經密碼子最優化、半胱胺酸改性及在雙向啟動子下於慢病毒載體(LV)中經選殖。胺基酸(aa)及核苷酸(nt)序列為： LV係由整合酶勝任之第三代構築體包裝及藉由水泡性口炎病毒(VSV)套膜假型化。作為對照，吾人包含編碼識別RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 255)肽之WT1 126-134 TCR之LV。載體轉導 針對利用WT1-TCR慢病毒載體之轉導，將自健康個體分離之T淋巴細胞激活並按照製造商說明使用共軛至CD3及CD28抗體(ClinExVivo CD3/CD28；Invitrogen)之磁珠分選，及於補充有盤尼西林、鏈黴素、10% FBS及5 ng ml⁻¹ 之各IL-7及IL-15 (PeproTech)之伊斯科夫氏改良杜貝科氏培養基(Iscove's Modified Dulbecco's Media，IMDM) (GIBCO-BRL)中培養。針對轉導，將T淋巴細胞以2.5 × 10⁶ 個細胞ml⁻¹ 平板接種並用LV感染24小時。之後，將T細胞以10⁶ 個細胞ml⁻¹ 培養並擴增。藉由量測表現特異性dextramer之CD3 T細胞之百分比測定轉導效率。按照製造商說明，使用抗-APC或抗-PE微珠(Miltenyi Biotec)，使用特異性針對VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)或RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 255)肽(Immudex)之APC或PE-螢光標記之HLA-A*0201 dextramer將細胞分選。功能檢定 HD1、HD3及WT1 126-134 TCR-轉移之T-細胞識別表現WT1之靶細胞之能力係與以下細胞共培養後量測：(a)利用WT1 126-134肽或利用VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)肽脈衝之T2細胞(效應子:靶比率=1:1)；(b)野生型K562細胞(K562)或經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因之K562細胞(效應子:靶比率=1:1)；(c)根據HLA-A*0201對偶基因及WT1抗原之表現選擇之3種不同原發性AML母細胞(效應子:靶比率=5:1)。針對與T2及K562細胞系之共培養，吾人包含未經轉導T細胞作為對照。於培養3天後，靶細胞之百分比係藉由細胞螢光測定分析評估。消除指數係如下計算：1-(與WT1-特異性T-細胞共培養3天後仍存在之靶細胞之總數目/單獨靶細胞之總數目)。以上說明書中提及之所有公開案以引用的方式併入本文中。在不背離本發明之範圍及精神下，本發明所述各種修改及變化對於熟習此項技術者將顯而易見。雖然本發明係結合特定較佳實施例進行描述，但是應瞭解所主張之本發明不應過度限於此等特定實施例。的確，對於熟習細胞生物學、免疫學、免疫療法、分子生物學、腫瘤學或相關領域者顯然之用於實施本發明之所述模式之各種修改意欲於以下申請專利範圍之範圍內。

圖 1. 顯示來自十個健康供體之外周血之功能 WT-1 特異性 T- 細胞之活體外擴增結果的圖 將十個健康供體(HD)之外周血單核細胞用彙集的重疊WT1 15-mer肽刺激26至30小時，增濃CD137⁺ 細胞，及擴增9至19天。將經擴增T-細胞用負載無關肽池或WT1肽池之自體抗原呈遞細胞(APC)再刺激6小時。此外，陰性(未經刺激之T-細胞)及陽性(於PMA及離子黴素(Ionomycin)存在下培養之T-細胞)對照包含於實驗設置中(未顯示)。點圖指示針對IFNγ產生及CD107a暴露於細胞表面上之細胞內染色之結果。在利用負載WT1肽池之自體APCs若干次再刺激後，如先前所述藉由細胞內染色測試T-細胞特異性。結果顯示WT1-特異性T-細胞於CD8 T細胞隔室中增濃針對HD1 (a )、HD3 (c )、HD4 (d )、HD5 (e )、HD6 (f )、HD7 (g )及HD10 (j )以及於CD4 T細胞隔室中增濃針對HD2 (b )、HD8 (h )及HD9 (i )。WT1，威爾姆氏腫瘤1；PMA，佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate)；IFNγ，干擾素-γ；S，刺激。圖 2. 顯示藉由定位網格策略 (mapping grid strategy) 識別 WT1- 免疫原性肽之網格 (grid) 及圖利用重疊WT1肽之池重複刺激活體外致敏之T-細胞識別之抗原決定基係藉由細胞內染色鑑識。特別地，評估對於APCs上負載之WT1十五肽子池之定位網格反應之特異性T-細胞的百分比。此外，陰性(未經刺激之T-細胞及與負載無關肽池之APCs共培養之T-細胞)及陽性(於PMA及離子黴素存在下培養之T-細胞)對照包含於實驗設置中(未顯示未經刺激之T-細胞及PMA/離子黴素(Iono)條件)。 (a)反褶積網格指示與負載不同子池(表示SP1-24)之APCs共培養後表現IFNγ及CD107a之T-細胞之百分比。粗體之IFNγ及CD107a值表示含有T-細胞識別之WT1抗原決定基之子池。報告關於T-細胞與負載反應性子池之APCs共培養及指示IFNγ及CD107a表現之代表性點圖。針對以下觀察到顯性反應：HD1 (b )、HD3 (d )、HD6 (g )、HD7 (h )、HD10 (k )中之子池4、5、16；HD2 (c )中之子池6、16、17、20、23；HD4 (e )中之子池4、5、6、14、18、21；HD5 (f )中之子池5、11、12、21、22；HD8 (i )之子池12、14；HD9 (j )之子池5、13、21。針對HD7，吾人亦觀察到對於子池7、8、20反應增加之IFNγ分泌及CD107a表現，即使在相較於利用子池4、5、16觀察到之反應更低的百分比。SP，子池；WT1，威爾姆氏腫瘤1；APC，抗原呈遞細胞；PMA，佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯；IFNγ，干擾素-γ。圖 3. 藉由利用彙集肽致敏產生之 WT1- 特異性 T 細胞之抗原決定基特異性 為證實WT1免疫原性肽，於負載於定位網格之反褶積後識別之肽及至少一個無關肽作為陰性對照之APC存在下，將自各HD擴增之T-細胞共培養6小時。此外，陰性(未經刺激之T-細胞)及陽性(於PMA及離子黴素存在下培養之T-細胞)對照包含於實驗設置中(未顯示)。點圖顯示針對各HD針對IFNγ及/或表面CD107a之細胞內染色之結果。針對與以下共培養之T-細胞各自觀察CD107a及/或IFNγ陽性細胞之增濃：針對HD1 (a )之肽40及41觀察到及針對肽42及43 (無關肽)未觀察到；針對HD2 (b )之肽54、77、90觀察到及針對肽42及138 (無關肽)未觀察到；針對HD3 (c )之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157，VLD，其為由SEQ ID NO: 117表示之肽(圖3c中稱作「11 mer」)之九聚體)觀察到及利用肽PVLDFAPPG (SEQ ID NO: 158，PVL，其為由SEQ ID NO: 117表示之肽之另一種九聚體)及LDFAPPGAS (SEQ ID NO: 159，LDF，其為由SEQ ID NO: 116表示之肽(先前經描述為免疫原性肽(Doubrovina, E.等人，(2012) Blood 120: 1633-1646))之九聚體)觀察到低反應；針對HD4 (d 、 e )之肽17、18、99、100觀察到及針對無關肽(15、16、63至66、101、102及132)未觀察到；針對HD5 (f )之肽101觀察到及針對無關肽(63、107、108、113、119及120)未觀察到；針對HD6 (g )之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157，VLD，其為由SEQ ID NO: 117表示之肽(圖3c中稱作「11 mer」)之九聚體)及肽PVLDFAPPG (SEQ ID NO: 158，PVL，其為由SEQ ID NO: 117表示之肽之另一種九聚體) 觀察到及針對肽LDFAPPGAS (SEQ ID NO: 159，LDF，其為由SEQ ID NO: 116表示之肽(先前經描述為免疫原性肽(Doubrovina, E.等人，(2012) Blood 120: 1633-1646))之九聚體)未觀察到；針對HD9 (h )之肽101、125、137觀察到；針對HD10 (i )之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157，VLD，其為由SEQ ID NO: 117表示之肽(圖3c中稱作「11 mer」)之九聚體) 觀察到及針對無關肽未觀察到。針對HD7及HD8，由於T細胞之減少適應度，不可進行功能測試以證實藉由定位網格之反褶積所預測之肽，即，針對HD7之肽40、41、91、92及針對HD8之肽24。為測定針對HD4、HD5及HD10 T-細胞識別之WT1抗原決定基之HLA限制，對供體DNA定序以確定HLA分型。之後，將WT1-特異性T-細胞與不同抗原呈遞EBV-BLCL細胞系共培養，該等細胞系各者攜帶藉由HD4、HD5或HD10 DNA之定序識別之所關注之特異性HLA對偶基因。將該等EBV-BLCL細胞用針對HD4之肽17、針對HD5之肽101以及肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)或用無關對照肽脈衝。於共培養6小時後，吾人觀察到WT1-特異性T-細胞對WT1之實質反應，該等WT1-特異性T-細胞已與表現HLA-B*3502對偶基因之EBV-BLCL細胞共培養及用針對HD4 (j )之肽17脈衝，與表現HLA-B*3501對偶基因之EBV-BLCL細胞共培養及用針對HD5 (k )之肽101脈衝及與表現HLA-A*0201對偶基因之EBV-BLCL細胞共培養及用針對HD10 (l )之肽VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)脈衝。(m )表格顯示藉由自HD1至HD10擴增之T-細胞識別之肽。針對HD3、HD6及HD10，顯示重疊肽40及41及引起免疫反應之特定九聚體。威爾姆氏腫瘤1； APC，抗原呈遞細胞；PMA，2；佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯；IFNγ，干擾素-γ；S，刺激。圖 4. 顯示 HD1 、 HD3 及 HD4 之擴增 T- 細胞識別經自然處理之 WT1 抗原決定基之圖表及圖 (a )圖表描繪於與利用WT1池脈衝之T2細胞、經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因及過度表現WT1蛋白之K562細胞或利用作為陰性對照之非特異性對照MelanA/MART1池脈衝之T2細胞共培養後自HD1擴增之CD8⁺ T-細胞之CD107表現。 (b )圖表描繪測定HD3擴增T-細胞靶向表現WT1之細胞之能力之實驗結果。結果以消除指數表示，該消除指數計算為與WT1-特異性T-細胞共培養後仍存在之靶細胞之總數目除以單獨靶細胞之總數目。將HD3 T-細胞與利用含有引起免疫反應之免疫原性肽之子池16 (SP16)脈衝之T2細胞、利用作為陰性對照之MelanA/MART1池(Melan A)脈衝之T2細胞、野生型(K562)或經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因及過度表現WT1蛋白二者(K562 A2+WT1+)之K562細胞共培養。 (c )圖描繪測定來自HD4之WT1-特異性T-細胞消除靶細胞之能力之實驗結果。將HD4 T-細胞與自HLA-B*3502患者收穫之原發性CD33+母細胞以10:1之比率共培養或作為對照，與來自不攜帶HLA-B*3502對偶基因之患者之白血病細胞共培養。於共培養3天後，結果指示當用WT1-特異性T-細胞(CD3⁺ 細胞)接種時CD33+ HLA-B*3502母細胞之接近完全清除。E，效應子；T，靶。圖 5. 顯示 WT1- 特異性 T- 細胞之 Vβ 剖析結果之圖表 將自不同HD生成之WT1-特異性T-細胞於利用WT1池之若干刺激後用Vβ免疫剖析套組進行染色以測定群體之純系性。特定言之，β鏈之可變(V)基因之表現係藉由FACS分析測定。結果指示HD1 (TRBV12-3；12-4)、HD2 (TRBV11-2)、HD3 (TRBV4-3)、HD5 (TRBV20-1)中之高度顯性Vβ基因之表現，然而針對HD4、HD6、HD10，未檢測到限定Vβ之明確增濃。HD4 SP14指示利用含有肽17-18之子池14刺激之T細胞引起最高免疫反應；HD4 SP18+21指示利用各自含有肽63-64-65-66及99-100-101-102之子池18及21刺激之T細胞引起最小免疫反應，如圖3中所示。針對HD7、HD8及HD9，由於降低之細胞適應度，不可進行Vβ免疫剖析分析。圖 6. 顯示增濃 WT1- 特異性 T- 細胞隨時間之 TCR 定序之結果的圖表 包含於實驗設置中之自各健康供體生成之T-細胞於利用WT1池之若干刺激後藉由TCR αβ定序來表徵。定序結果指示針對HD1 (a )、HD2 (b )及HD3 (c )、HD4 (d )、HD5 (e )、HD6 (f )、HD7 (g )、HD8 (h )、HD9 (i )、HD10 (j )之優勢純系型之存在。條形圖描繪在各時間點識別之十個最優勢CDR3胺基酸序列(例如，S9對應於第9輪刺激後獲得之定序結果)。針對各條，自x-軸開始，底部段表示最優勢CDR序列。下九個最優勢序列堆在底部段上方並藉由向上遞減頻率排序。剩餘序列於頂部段中聚集在一起。WT1，威爾姆氏腫瘤1；CDR3，互補決定區3；S，刺激。圖 7. 經基因改造之 T 淋巴細胞之功能活性 利用編碼自HD1及HD3分離之TCR之α及β鏈之雙向慢病毒載體轉導自健康個體之PBMC分離之T細胞。作為對照，吾人利用識別HLA-A*0201對偶基因呈遞之WT1 126-134 (RMFPNAPYL; SEQ ID NO: 255)肽之先前公開之TCR轉導T細胞。將轉移(TR) T淋巴細胞與以下細胞共培養3天：(a)利用WT1 126-134肽或利用VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 157)肽脈衝或不脈衝之T2細胞(效應子:靶比率=1:1)；(b)野生型(K562)或經基因改造以表現HLA-A*0201對偶基因之K562細胞(效應子:靶比率=1:1)；(c)根據HLA-A*0201對偶基因及WT1抗原之表現選擇之3種不同原發性AML母細胞(效應子:靶比率=5:1)。針對與T2及K562細胞系之共培養，吾人包含未經轉導之T細胞作為對照。結果指示各TCR識別HLA-A*0201對偶基因呈遞之靶肽之能力(圖7a)及HD1 TCR-轉導之T細胞於介導攜帶HLA*A0201對偶基因之K562細胞之特定及接近完全消除方面相較於HD3-TR T細胞之更大潛力。應注意，於K562 HLA*A0201細胞與WT1 126-134 TR T細胞之共培養中未觀察到靶細胞之實質殺死(圖7b)。此等結果進一步由使用作為靶細胞之源自3種不同AML患者之原發性AML母細胞(pAML1母細胞：WT1-/HLA-A*0201+；pAML2及pAML3母細胞：WT1+/HLA-A*0201+)進行之共培養實驗的結果證實。於此實驗設置中，在與靶共培養之前，將各個別T細胞群體利用特異性dextramer分選以增濃效應細胞之純度。吾人觀察到，當與HD1 TR T細胞共培養時攜帶HLA-A*0201對偶基因之pAML母細胞二者之更大消除，然而僅來自pAML3之母細胞係由HD3 T及WT1 126-134 T細胞識別。UT，未經轉導，pAML，原發性急性骨髓性白血病；TR，轉移；Dx，dextramer。

<110> 義大利聖拉斐爾醫院(OSPEDALE SAN RAFFAELE S.R.L.) 義大利商聖拉斐爾基金會(FONDAZIONE CENTRO SAN RAFFAELE)

<120> TCR及肽

<130> P111125TW

<150> US 62/489,226

<151> 2017-04-24

<160> 299

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR(T-細胞受體)胺基酸序列，供體HD1

<400> 1

<210> 2

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 2

<210> 3

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 3

<210> 4

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 4

<210> 5

<211> 272

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 5

<210> 6

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 6

<210> 7

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 7

<210> 8

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 8

<210> 9

<211> 136

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 9

<210> 10

<211> 312

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 10

<210> 11

<211> 314

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD1

<400> 11

<210> 12

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 12

<210> 13

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 13

<210> 14

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 14

<210> 15

<211> 134

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 15

<210> 16

<211> 274

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 16

<210> 17

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 17

<210> 18

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 18

<210> 19

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 19

<210> 20

<211> 136

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 20

<210> 21

<211> 276

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 21

<210> 22

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 22

<210> 23

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 23

<210> 24

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 24

<210> 25

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 25

<210> 26

<211> 308

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 26

<210> 27

<211> 310

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 27

<210> 28

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 28

<210> 29

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 29

<210> 30

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 30

<210> 31

<211> 136

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 31

<210> 32

<211> 312

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 32

<210> 33

<211> 314

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD2

<400> 33

<210> 34

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 34

<210> 35

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 35

<210> 36

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 36

<210> 37

<211> 134

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 37

<210> 38

<211> 274

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 38

<210> 39

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 39

<210> 40

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 40

<210> 41

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 41

<210> 42

<211> 138

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 42

<210> 43

<211> 314

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 43

<210> 44

<211> 316

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD3

<400> 44

<210> 45

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 45

<210> 46

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 46

<210> 47

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 47

<210> 48

<211> 133

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 48

<210> 49

<211> 273

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 49

<210> 50

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 50

<210> 51

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 51

<210> 52

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 52

<210> 53

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 53

<210> 54

<211> 275

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 54

<210> 55

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 55

<210> 56

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 56

<210> 57

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 57

<210> 58

<211> 133

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 58

<210> 59

<211> 309

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 59

<210> 60

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 60

<210> 61

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 61

<210> 62

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 62

<210> 63

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 63

<210> 64

<211> 131

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 64

<210> 65

<211> 307

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 65

<210> 66

<211> 309

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 66

<210> 67

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 67

<210> 68

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 68

<210> 69

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 69

<210> 70

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 70

<210> 71

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 71

<210> 72

<211> 313

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD4

<400> 72

<210> 73

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 73

<210> 74

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 74

<210> 75

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 75

<210> 76

<211> 134

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 76

<210> 77

<211> 274

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 77

<210> 78

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 78

<210> 79

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 79

<210> 80

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 80

<210> 81

<211> 134

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 81

<210> 82

<211> 310

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 82

<210> 83

<211> 312

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 83

<210> 84

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 84

<210> 85

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 85

<210> 86

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 86

<210> 87

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 87

<210> 88

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 88

<210> 89

<211> 313

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD5

<400> 89

<210> 90

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 90

<210> 91

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 91

<210> 92

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 92

<210> 93

<211> 136

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 93

<210> 94

<211> 276

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 94

<210> 95

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 95

<210> 96

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 96

<210> 97

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 97

<210> 98

<211> 133

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 98

<210> 99

<211> 309

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 99

<210> 100

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 100

<210> 101

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 101

<210> 102

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 102

<210> 103

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 103

<210> 104

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 104

<210> 105

<211> 272

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 105

<210> 106

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 106

<210> 107

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 107

<210> 108

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 108

<210> 109

<211> 131

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 109

<210> 110

<211> 271

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 110

<210> 111

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 111

<210> 112

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 112

<210> 113

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 113

<210> 114

<211> 131

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 114

<210> 115

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 威爾姆氏腫瘤1(WT1)肽40

<400> 115

<210> 116

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽41

<400> 116

<210> 117

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽重疊序列

<400> 117

<210> 118

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽54

<400> 118

<210> 119

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽77

<400> 119

<210> 120

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽90

<400> 120

<210> 121

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽17

<400> 121

<210> 122

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽18

<400> 122

<210> 123

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽重疊序列

<400> 123

<210> 124

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽99

<400> 124

<210> 125

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽100

<400> 125

<210> 126

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽重疊序列

<400> 126

<210> 127

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽101

<400> 127

<210> 128

<211> 140

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 藉由TRAC基因編碼之α鏈恆定域之序列

<400> 128

<210> 129

<211> 176

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 藉由TRBC1基因編碼之β鏈恆定域之序列

<400> 129

<210> 130

<211> 178

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 藉由TRBC2基因編碼之β鏈恆定域之序列

<400> 130

<210> 131

<211> 575

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1蛋白序列

<400> 131

<210> 132

<211> 816

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD1

<400> 132

<210> 133

<211> 936

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD1

<400> 133

<210> 134

<211> 942

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD1

<400> 134

<210> 135

<211> 822

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-1

<400> 135

<210> 136

<211> 924

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-1

<400> 136

<210> 137

<211> 930

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-1

<400> 137

<210> 138

<211> 828

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-2

<400> 138

<210> 139

<211> 936

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-2

<400> 139

<210> 140

<211> 942

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD2-2

<400> 140

<210> 141

<211> 822

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD3

<400> 141

<210> 142

<211> 942

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD3

<400> 142

<210> 143

<211> 948

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD3

<400> 143

<210> 144

<211> 819

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-1

<400> 144

<210> 145

<211> 927

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-1

<400> 145

<210> 146

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-1

<400> 146

<210> 147

<211> 825

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-2

<400> 147

<210> 148

<211> 921

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-2

<400> 148

<210> 149

<211> 927

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-2

<400> 149

<210> 150

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-2

<400> 150

<210> 151

<211> 939

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD4-2

<400> 151

<210> 152

<211> 822

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD5

<400> 152

<210> 153

<211> 930

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD5

<400> 153

<210> 154

<211> 936

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD5

<400> 154

<210> 155

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD5

<400> 155

<210> 156

<211> 939

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD5

<400> 156

<210> 157

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 九聚體肽VLD

<400> 157

<210> 158

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 九聚體肽PVL

<400> 158

<210> 159

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 九聚體肽LDF

<400> 159

<210> 160

<211> 271

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 160

<210> 161

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 161

<210> 162

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 162

<210> 163

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 163

<210> 164

<211> 142

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 164

<210> 165

<211> 318

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 165

<210> 166

<211> 320

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 166

<210> 167

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 167

<210> 168

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 168

<210> 169

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 169

<210> 170

<211> 131

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 170

<210> 171

<211> 307

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 171

<210> 172

<211> 309

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 172

<210> 173

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 173

<210> 174

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 174

<210> 175

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 175

<210> 176

<211> 130

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 176

<210> 177

<211> 270

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 177

<210> 178

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 178

<210> 179

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 179

<210> 180

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 180

<210> 181

<211> 130

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 181

<210> 182

<211> 306

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 182

<210> 183

<211> 308

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD8

<400> 183

<210> 184

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 184

<210> 185

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 185

<210> 186

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 186

<210> 187

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 187

<210> 188

<211> 272

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 188

<210> 189

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 189

<210> 190

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 190

<210> 191

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 191

<210> 192

<211> 138

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 192

<210> 193

<211> 278

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 193

<210> 194

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 194

<210> 195

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 195

<210> 196

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 196

<210> 197

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 197

<210> 198

<211> 308

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 198

<210> 199

<211> 310

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 199

<210> 200

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 200

<210> 201

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 201

<210> 202

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 202

<210> 203

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 203

<210> 204

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 204

<210> 205

<211> 313

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 205

<210> 206

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 206

<210> 207

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 207

<210> 208

<211> 22

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 208

<210> 209

<211> 141

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 209

<210> 210

<211> 317

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 210

<210> 211

<211> 319

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD9

<400> 211

<210> 212

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 212

<210> 213

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 213

<210> 214

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 214

<210> 215

<211> 139

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 215

<210> 216

<211> 279

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 216

<210> 217

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 217

<210> 218

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 218

<210> 219

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 219

<210> 220

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 220

<210> 221

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 221

<210> 222

<211> 313

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD10

<400> 222

<210> 223

<211> 828

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 223

<210> 224

<211> 927

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 224

<210> 225

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 225

<210> 226

<211> 816

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 226

<210> 227

<211> 813

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 227

<210> 228

<211> 813

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 228

<210> 229

<211> 954

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 229

<210> 230

<211> 960

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 230

<210> 231

<211> 921

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 231

<210> 232

<211> 927

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 232

<210> 233

<211> 810

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD8

<400> 233

<210> 234

<211> 918

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD8

<400> 234

<210> 235

<211> 924

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD8

<400> 235

<210> 236

<211> 816

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 236

<210> 237

<211> 834

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 237

<210> 238

<211> 834

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 238

<210> 239

<211> 924

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 239

<210> 240

<211> 930

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 240

<210> 241

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 241

<210> 242

<211> 939

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 242

<210> 243

<211> 954

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 243

<210> 244

<211> 957

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD9

<400> 244

<210> 245

<211> 837

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD10

<400> 245

<210> 246

<211> 933

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD10

<400> 246

<210> 247

<211> 939

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD10

<400> 247

<210> 248

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽91

<400> 248

<210> 249

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽92

<400> 249

<210> 250

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽重疊序列

<400> 250

<210> 251

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽24

<400> 251

<210> 252

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽101

<400> 252

<210> 253

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽125

<400> 253

<210> 254

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1肽137

<400> 254

<210> 255

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> WT1 126-134抗原決定基

<400> 255

<210> 256

<211> 816

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HD1a TCR序列

<400> 256

<210> 257

<211> 272

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> HD1a TCR序列

<400> 257

<210> 258

<211> 942

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HD1b TCR序列

<400> 258

<210> 259

<211> 314

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> HD1b TCR序列

<400> 259

<210> 260

<211> 822

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HD3a TCR序列

<400> 260

<210> 261

<211> 274

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> HD3a TCR序列

<400> 261

<210> 262

<211> 948

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> HD3b TCR序列

<400> 262

<210> 263

<211> 316

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> HD3b TCR序列

<400> 263

<210> 264

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 264

<210> 265

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 265

<210> 266

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 266

<210> 267

<211> 138

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 267

<210> 268

<211> 278

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 268

<210> 269

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 269

<210> 270

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 270

<210> 271

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 271

<210> 272

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 272

<210> 273

<211> 308

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 273

<210> 274

<211> 310

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD6

<400> 274

<210> 275

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 275

<210> 276

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 276

<210> 277

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 277

<210> 278

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 278

<210> 279

<211> 272

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 279

<210> 280

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 280

<210> 281

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 281

<210> 282

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 282

<210> 283

<211> 142

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 283

<210> 284

<211> 319

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 284

<210> 285

<211> 321

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 285

<210> 286

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 286

<210> 287

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 287

<210> 288

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 288

<210> 289

<211> 136

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 289

<210> 290

<211> 312

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 290

<210> 291

<211> 314

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> TCR胺基酸序列，供體HD7

<400> 291

<210> 292

<211> 837

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 292

<210> 293

<211> 924

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 293

<210> 294

<211> 930

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD6

<400> 294

<210> 295

<211> 816

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 295

<210> 296

<211> 957

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 296

<210> 297

<211> 963

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 297

<210> 298

<211> 936

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 298

<210> 299

<211> 942

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 編碼TCR之核苷酸序列，供體HD7

<400> 299

Claims

一種T-細胞受體(TCR)，其結合至主要組織相容性複合體(MHC)呈遞之威爾姆氏(Wilms)腫瘤1蛋白(WT1)肽，其中該TCR包含下列CDR序列：CDR1α-KALYS(SEQ ID NO：1)、CDR2α-LLKGGEQ(SEQ ID NO：2)、CDR3α-CGTAWINDYKLSF(SEQ ID NO：3)、CDR1β-SGHDY(SEQ ID NO：6)、CDR2β-FNNNVP(SEQ ID NO：7)及CDR3β-CASRKTGGYSNQPQHF(SEQ ID NO：8)。
如請求項1之TCR，其包含：α鏈可變域，其包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列或與其具有至少75%序列同一性之變異體；及β鏈可變域，其包含SEQ ID NO：9之胺基酸序列或與其具有至少75%序列同一性之變異體。
如請求項1之TCR，其包含：α鏈，其包含SEQ ID NO：5之胺基酸序列或與其具有至少75%序列同一性之變異體；及β鏈，其包含選自由SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11及與其具有至少75%序列同一性之SEQ ID NO：10及11之變異體組成之群之胺基酸序列。
如請求項1之TCR，其結合至MHC I肽複合體。
如請求項1之TCR，其受限於人類白血球抗原(HLA)-A*0201對偶基因。
如請求項1之TCR，其包含一或多個突變在α鏈/β鏈介面，使得當該α鏈及該β鏈於T-細胞中表現時，減少該等鏈與內源TCR α及β鏈之間之錯配頻率。
如請求項6之TCR，其中該一或多個突變將半胱胺酸殘基引入該α鏈及該β鏈各者之該恆定區結構域，其中該等半胱胺酸殘基能在該α鏈與該β鏈之間形成二硫鍵。
如請求項1之TCR，其包含鼠源化(murinized)恆定區。
如請求項1之TCR，其中該TCR為可溶TCR。
一種分離之多核苷酸，其編碼如請求項1至9中任一項之T-細胞受體(TCR)之α鏈及如請求項1至9中任一項之TCR之β鏈。
如請求項10之分離之多核苷酸，其中該多核苷酸編碼連接至β鏈之α 鏈。
如請求項10之分離之多核苷酸，其進一步編碼一或多個短干擾RNA(siRNA)或能減少或防止一或多個內源TCR基因表現之其他因子。
一種載體，其包含如請求項10至12中任一項之多核苷酸。
如請求項13之包含多核苷酸之載體，其編碼一或多個CD3鏈、CD8、自殺基因及/或可選標誌物。
一種細胞，其包含如請求項1至8中任一項之TCR、如請求項10至12中任一項之多核苷酸或如請求項13或14之載體。
如請求項15之細胞，其中該細胞為T-細胞、淋巴細胞或幹細胞。
如請求項16之細胞，其中該細胞為已自個體分離之T-細胞。
如請求項15之細胞，其中編碼TCR α鏈之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因被破壞。
一種製備細胞之方法，其包括於活體外(in vitro)或離體(ex vivo)將如請求項13或14之載體引入細胞中之步驟。
如請求項19之製備細胞之方法，其包括T-細胞編輯之步驟，該T-細胞編輯包括利用人工核酸酶破壞編碼TCR α鏈之內源基因及/或編碼TCR β鏈之內源基因。
如請求項20之製備細胞之方法，其包括將表現盒(expression cassette)靶向整合至由該人工核酸酶破壞之編碼該TCR α鏈之內源基因及/或編碼該TCR β鏈之內源基因之步驟，其中該表現盒包含編碼如請求項1之TCR之多核苷酸序列。
如請求項19之製備細胞之方法，其包括破壞編碼MHC之一或多個內源基因之步驟。
如請求項19之製備細胞之方法，其包括破壞一或多個內源基因以修改持久性、擴增、活性、對衰竭/衰老/抑制信號抗性、歸巢能力或其他T-細胞功能之步驟。
如請求項15之細胞，其係用於授受性(adoptive)細胞轉移。
一種藉由如請求項19至23中任一項之方法製備之細胞，其係用於授受性(adoptive)細胞轉移。
一種嵌合分子，其包含如請求項1至9中任一項之TCR，其共軛至非細胞受質、毒素及/或抗體。
一種如請求項1至9中任一項之TCR、如請求項10至12中任一項之分離之多核苷酸、如請求項13或14之載體、藉由如請求項19至23中任一項之方法製備之細胞或如請求項26之嵌合分子之用途，其係用於製備治療及/或預防與WT1之表現相關之增生性病症之醫藥品。
一種如請求項15之細胞之用途，其係用於製備治療及/或預防與WT1之表現相關之增生性病症之醫藥品。
一種如請求項1至9中任一項之TCR、如請求項10至12中任一項之分離之多核苷酸、如請求項13或14之載體、藉由如請求項19至23中任一項之方法製備之細胞或如請求項26之嵌合分子之用途，其係用於製備治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之醫藥品。
一種如請求項15之細胞之用途，其係用於製備治療及/或預防與WT1之表現相關之疾病之醫藥品。
如請求項29之用途，其中與WT1之表現相關之疾病為血液惡性病或實體腫瘤，其中該血液惡性病係選自由以下組成之群：急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、淋巴母細胞性白血病、骨髓增生異常(myelodisplastic)症候群、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)及霍奇金氏淋巴瘤；且其中該實體腫瘤係選自由以下組成之群：肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、結腸癌、膽管癌、胰癌、卵巢癌、頭頸癌、滑膜肉瘤、血管肉瘤、骨肉瘤、甲狀腺癌、子宮內膜癌、神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、軟組織肉瘤、尿路上皮癌(urothelial cancer)、膽道癌、膠質母細胞瘤、間皮瘤、子宮頸癌及結腸直腸癌。
如請求項30之用途，其中與WT1之表現相關之疾病為血液惡性病或實體腫瘤，其中該血液惡性病係選自由以下組成之群：急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、淋巴母細胞性白血病、骨髓增生異常症候群、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤及霍奇金氏淋巴瘤；且其中該實體腫瘤係選自由以下組成之群：肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、結腸癌、膽管癌、胰癌、卵巢癌、頭頸癌、滑膜肉瘤、血管肉瘤、骨肉瘤、甲狀腺癌、子宮內膜癌、神經母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、肝癌、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、軟組織肉瘤、尿路上皮癌、膽道癌、膠質母細胞瘤、子宮頸癌、間皮瘤及結腸直腸癌。