TWI818301B - 寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明揭露式(I)之寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途：X1X2X3X4X5X6 (I)其中X1係甘胺酸(Gly；G)或離胺酸(Lys；K)；X2係麩胺酸(Glu；E)或蘇胺酸(Thr；T)；X3係K或T；X4係G或K；X5係絲胺酸(Ser；S)、苯丙胺酸(Phe；F)或不存在；且X6係F或不存在。
Description
本發明關於醫藥領域且特別是關於寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途。
TW I448306 B揭露一種口腔保健組成物，其包含呈游離或鹽型式之鹼性胺基酸和氟化物離子源。
TW I432206 B揭露一種口腔用組成物，其包含選自紅石榴、肉豆蔻、生薑及洋棗中至少3者之萃取物的混合物。
TW 201538729 A揭露一種治療牙齦損傷之方法，其包含向口腔施予包含經分離之非球根真皮鞘(NDBS)細胞。
TW I631141 B揭露N端和C端經取代之含有6個胺基酸的寡肽於治療口腔黏膜之用途。
TW 201806602 A揭露一種口腔軟組織抗發炎痠痛劑，其包含促腎上腺皮質激素或抗炎抑制化合物。
先前技術未教示或建議未經取代之含有4、5或6個胺基酸的寡肽可用於治療牙齦發炎和牙齦萎縮且修復口腔黏膜。
本發明揭露下式(I)之寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途：X1X2X3X4X5X6 (I)
其中X1係甘胺酸(Gly；G)或離胺酸(Lys；K)；X2係麩胺酸(Glu；E)或蘇胺酸(Thr；T)；X3係K或T；X4係G或K；X5係絲胺酸(Ser；S)、苯丙胺酸(Phe；F)或不存在；且X6係F或不存在。
於一較佳體系中，該式(I)之寡肽係GEKGF及/或GEKG。
於另一較佳體系中，該式(I)之寡肽係GEKG。
於一較佳體系中，該式(I)之寡肽係KTTKS及/或KTTKSF。
於另一較佳體系中，該式(I)之寡肽係KTTKS。
於一較佳體系中，該式(I)之寡肽係GEKG與KTTKS之組合。
於一較佳體系中，該藥劑包含0.1至10重量%之GEKG和0.1至10重量%之KTTKS及一或多種醫藥上可接受之載體，其中該藥劑較佳地包含0.2至2重量%之GEKG和0.2至2重量%之KTTKS。
於另一較佳體系中，該一或多種醫藥上可接受之載體包括固體載劑、半固體載劑及液體載劑，其中該等固體載劑、半固體載劑及液體載劑的種類和用量已為此技術領域所習知。
於一較佳體系中，該藥劑係呈粉末、氣溶膠、軟膏、凝膠、糊劑或溶液之型式，其中該溶液可呈水溶性緩衝液之型式，其中該水溶性緩衝液包括但不限於磷酸鹽或檸檬酸鹽之水溶液。
於一較佳體系中，該藥劑係經口施予，其包括但不限於經黏膜吸收和口服吸收。
於一較佳體系中，該藥劑係緩釋型，特別是經黏膜吸收和
口服吸收緩釋型。
於一較佳體系中，該GEKG和GEKGF及KTTKS和KTTKSF可依據先前技術(諸如TW 201129368 A1和TW 201333045 A1)記載之方法進行製備。
為使 貴審查委員能進一步了解本發明的構成、特徵及其他目的，以下乃舉本發明之若干較佳實施例，並配合圖式詳細說明如後，同時讓熟悉該項技術領域者能夠具體實施。
圖1顯示不同稀釋倍數之KTTKS的L929細胞分析腫瘤壞死因子-alpha(TNFα)抑制率和細胞毒性。
圖2顯示不同稀釋倍數之GEKG的L929細胞分析TNFα抑制率和細胞毒性。
圖3顯示KTTKS抑制發炎反應誘導物(LPS)誘導巨噬細胞產生一氧化氮(NO)。
圖4顯示GEKG抑制發炎反應誘導物(LPS)誘導巨噬細胞產生NO。
圖5顯示GEKG和KTTKS抑制發炎反應誘導物(LPS)誘導巨噬細胞產生過氧化氫(H2O2)。
圖6顯示不同濃度的GEKG和KTTKS促進口腔上皮初始細胞之增生。
圖7顯示不同濃度的GEKG和KTTKS活體外降低H2O2自由基造成的口腔上皮細胞死亡。
圖8A顯示不同濃度的GEKG和KTTKS對於活體外人類牙齦成纖維母細胞(HGF)之增生的影響。
圖8B顯示不同濃度的GEKG和KTTKS對於活體外I型
膠原蛋白之生成的影響。
圖9A顯示RT-PCR產物TGF-β1和GAPDH的凝膠電泳圖。
圖9B顯示不同濃度的GEKG和KTTKS促進TGF-β1之表現且存有劑量依循性關係。
圖10顯示TGF-β1與KTTKS或GEKG誘導人類牙齦成纖維母細胞(HGF)合成細胞外基質(ECM)。
圖11顯示使用包含KTTKS或GEKG之牙齦修護液後之牙齦增生的照片。
本發明係一種寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途，以下藉由特定的具體實施形態說明本發明之技術內容，使熟悉此技藝之人士可由本說明書所揭示之內容輕易地瞭解本發明之優點與功效。然本發明亦可藉由其他不同的具體實施形態加以施行或應用。
實施例1. 通過活體外L929細胞增生/細胞毒性分析評估GEKG和KTTKS的TNFα抑制活性及細胞毒性
活體外L929細胞增生/細胞毒性分析在微量滴定盤上進行。於含有10%牛血清、1% P/S及1%非必需胺基酸之Eagle氏最低基本培養基(EMEM)中培養L929細胞。利用2ml PBS溶液沖洗匯合之L929細胞並經胰蛋白酶處理，隨後再懸浮於EMEM中。抽氣吸取200μl細胞懸浮液以進行計數細胞密度，並於1500rpm下離心其餘之懸浮液達5分鐘。除去上清液並將EMEM加入至該稀釋細胞以形成最終濃度1.5 x 105細胞/ml。將100μl細胞懸浮液加入至96孔槽平底微滴量盤之每一個孔槽中，並於37℃和5%CO2大氣下培育24小時(h)。
TNFα抑制活性
將GEKG和KTTKS分別先以1×PBS回溶至濃度相當於1mg GEKG/ml和1mg KTTKS/ml，再以1×PBS溶液分別稀釋GEKG和KTTKS至濃度分別為500、125、31.25及7.81μg/ml，經稀釋的溶液再與等體積的TNFα溶液混合，孵溫1h，取此4種混合溶液各50μl加入至上述培養L929細胞24小時的96孔槽平底微滴量盤，並調整培養液中放線菌素D(ActD)之終濃度為2μg/ml和TNFα之終濃度為0.1ng/ml。分別以只加入2μg/ml ActD和0.1ng/ml TNFα的測試孔槽作為陽性對照組和空白對照組。上述96孔槽平底微滴量盤置於37℃和5%CO2大氣下繼續培養24h。利用酶標儀O.D.490/630nm下進行讀數測量，TNFα抑制作用計算公式如下：
細胞毒性
將GEKG和KTTKS分別先以1×PBS回溶至濃度相當於1mg GEKG/ml和1mg KTTKS/ml，再以1×PBS溶液分別稀釋GEKG和KTTKS至濃度分別為500、125、31.25及7.81μg/ml，取此4種稀釋溶液各50μl加入至上述培養L929細胞24小時的96孔槽平底微滴量盤，並調整培養液中ActD之終濃度為2μg/ml。上述96孔槽平底微滴量盤置於37℃和5%CO2大氣下繼續培養24h。之後將50μl的2,3-二(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-5-[(苯基胺基)羰基]-2H-四唑鎓氫氧化物(XTT)加入至每一個孔槽，培育4小時。利用酶標儀O.D.490/630nm下進行讀數測量，細胞毒性計算公式如下：
結果
表1顯示不同稀釋倍數之KTTKS的L929細胞分析結果。KTTKS之TNFα抑制率為179.4%，表示KTTKS顯現優異的TNFα抑制作用且無細胞毒性，如圖1。
表2顯示不同稀釋倍數之GEKG的L929細胞分析結果。GEKG之TNFα抑制率為182.3%，表示GEKG顯現優異的TNFα抑制作用且無細胞毒性，如圖2。
實施例2. 通過活體外抑制發炎反應誘導物(LPS)誘導產生之一氧化氮(NO)(巨噬細胞實驗模型)評估GEKG和KTTKS捕捉NO自由基的能力(抗發炎作用)
通過習知的發炎反應誘導物(LPS)誘導巨噬細胞產生NO之實驗模型，活體外評估GEKG和KTTKS之抗發炎能力。
KTTKS和GEKG之實驗結果分別示於圖3和4。證實KTTKS和GEKG均能抑制LPS引起的NO生成(即抗發炎作用)且顯示存有藥物劑量依循性(dose-dependent)關係。
實施例3. 通過活體外發炎反應誘導物(LPS)誘導產生之過氧化氫(H2O2)(巨噬細胞實驗模型)評估GEKG和KTTKS捕捉H2O2的能力(抗發炎型氧化壓力作用)
通過習知的發炎反應誘導物(LPS)誘導巨噬細胞產生H2O2之實驗模型，活體外評估GEKG和KTTKS之抗發炎型氧化壓力能力。
KTTKS和GEKG之實驗結果示於圖5。證實KTTKS和GEKG均能抑制LPS引起的H2O2生成(即抗發炎型氧化壓力作用)且顯示存有藥物劑量依循性關係。
實施例4. 促進口腔上皮初始細胞之增生的評估
圖6顯示不同濃度的GEKG和KTTKS能促進活體外口腔上皮初始細胞之增生且顯示存有藥物劑量依循性關係。證實GEKG和KTTKS能用於口腔黏膜傷口之癒合。
實施例5. 抗自由基/發炎反應誘導之口腔上皮初始細胞死亡的評估
圖7顯示不同濃度的GEKG和KTTKS能活體外降低H2O2自由基造成的口腔上皮細胞死亡且顯示存有藥物劑量依循性關係。證實
GEKG和KTTKS能用於預防口腔上皮細胞死亡並可進一步保護口腔上皮細胞、防止黏膜病變、預防口腔癌及治療口腔潰瘍。
實施例6. 促進人類牙齦成纖維母細胞(HGF)之增生和I型膠原蛋白之生成的評估
圖8A顯示不同濃度的GEKG和KTTKS對於活體外HGF的增生無顯著影響。
於圖8B中，RT-PCR產物的凝膠電泳圖顯示GAPDH和I型膠原蛋白的DNA帶分別在467bp和409bp位置，表示GEKG和KTTKS在轉錄上刺激I型膠原蛋白基因的表現，且於人類牙齦成纖維母細胞中可觀察到I型膠原蛋白形成，且該I型膠原蛋白之表現量與GEKG和KTTKS的濃度為0至40μl時存有劑量依循性關係。
證實GEKG和KTTKS增生牙齦I型膠原蛋白之作用不是藉由增生人類牙齦成纖維母細胞的數量而是藉由刺激或活化人類牙齦成纖維母細胞以增生I型膠原蛋白所達成。
實施例7. 促進人類牙齦成纖維母細胞(HGF)之TGF-β1的基因表現的評估
已知TGF-β1能調節牙齦纖維母細胞和成骨細胞的增生並促進細胞外基質(ECM)及I型和III型膠原蛋白的合成。
活體外促進人類HGF之TGF-β1的基因表現
於圖9A中，RT-PCR產物的凝膠電泳圖顯示GAPDH和TGF-β1的DNA帶分別在467bp和161bp位置，表示GEKG和KTTKS在轉錄上刺激TGF-β1基因的表現。
圖9B顯示TGF-β1之表現量與GEKG和KTTKS的濃度存有劑量依循性關係。
證實GEKG和KTTKS可藉由刺激人類HGF以促進TGF-
β1的表現。
以TGF-β1誘導人類HGF合成細胞外基質
使用單獨TGF-β1(0.5或5ng/ml)或同時KTTKS或GEKG(50μM)處理人類HGF以確認KTTKS和GEKG與習知的細胞外基質合成刺激因子TGF-β1是否具有合成細胞外基質的協同作用。
令人類HGF在含有0.2%血清的良伊格爾氏培養基(DMEM)中預培養24小時，並以3種TGFβ1濃度(0、0.5及5ng/ml)處理24小時，且以不存在(實線)或存在50μM KTTKS或GEKG(虛線)之情況下繼續培養24小時。
圖10分別顯示以不存在(實線)或存在50μM KTTKS或GEKG(虛線)之情況下被合成的膠原量及纖維蛋白量。
證實TGFβ1與KTTKS和GEKG是通過獨立機制以上調ECM的生物合成，且KTTKS和GEKG誘導人類HGF合成ECM的能力超過TGFβ1。另一可能機制是TGFβ1與KTTKS或GEKG協同增加ECM生物合成。
實施例8. 包含KTTKS或GEKG之牙齦修護液的製備和於牙齦增生之功效
依據下表3記載之成分和配量製備牙齦修護液。
稱取去離子水至乳化鍋，保持該乳化鍋溫度於20℃，依次投入稱量的EDTA.2Na、苯甲酸鈉及檸檬酸，開啟攪拌器溶解均勻，依次再投入甘油和山梨糖醇，持續攪拌均勻，將薄荷精油和PEG-40氫化蓖麻油混合後投入該乳化鍋，並攪拌均勻，最後投入KTTKS和GEKG且攪拌均勻。
該牙齦修護液的使用方式為每日施予2次，每次施予約5至6ml且口含約10至15分鐘後吐出。
圖11顯示未經治療前之A齒牙齦呈現明顯萎縮；經使用該牙齦修護液後1個月，該A齒牙齦不再萎縮且呈現增長，並經使用該牙齦修護液後6個月，該A齒牙齦呈現明顯增長且牙間隙縮小。
證實該牙齦修護液具有刺激已萎縮的牙齦增生的功能。
藉此，可以理解到本發明為一創意極佳之創作，除了有效解決習式者所面臨的問題，更大幅增進功效，且在相同的技術領域中未見相同或近似的產品創作或公開使用，同時具有功效的增進，故本發明已符合發明專利有關「新穎性」與「進步性」的要件，乃依法提出申請發明專利。
<110> 富比積生物科技股份有限公司
<120> 寡肽於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜之用途
<140> TW 110130832
<141> 2021-08-20
<160> 4
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
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<212> PRT
<213> 人工序列
<223> 合成胜肽
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<210> 2
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<212> PRT
<213> 人工序列
<223> 合成胜肽
<400> 2
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<212> PRT
<213> 人工序列
<223> 合成胜肽
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<210> 4
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<223> 合成胜肽
<400> 4
Claims (10)
- 一種寡肽GEKG或GEKGF於製備用於治療牙齦發炎和牙齦萎縮及修復口腔黏膜的藥劑之用途，其中G係甘胺酸(Gly)、E係麩胺酸(Glu)、K係離胺酸(Lys)且F係苯丙胺酸(Phe)，且其中該藥劑係經口施予。
- 如請求項1所述之用途，其中該寡肽係GEKG且該藥劑係經黏膜吸收。
- 如請求項1所述之用途，其中該寡肽係GEKGF且該藥劑係經口服吸收。
- 如請求項2所述之用途，其中該寡肽進一步與另一寡肽KTTKS組合，其中K係離胺酸(Lys)、T係蘇胺酸(Thr)且S係絲胺酸(Ser)。
- 如請求項3所述之用途，其中該寡肽GEKGF進一步與另一寡肽KTTKSF組合，其中K係離胺酸(Lys)、T係蘇胺酸(Thr)、S係絲胺酸(Ser)且F係苯丙胺酸(Phe)。
- 如請求項4所述之用途，其中該藥劑包含0.1至10重量%之GEKG和0.1至10重量%之KTTKS及一或多種醫藥上可接受之載體。
- 如請求項6所述之用途，其中該藥劑包含0.2至2重量%之GEKG和0.2至2重量%之KTTKS及一或多種醫藥上可接受之載體。
- 如請求項5所述之用途，其中該藥劑包含0.1至10重量%之GEKGF和0.1至10重量%之KTTKSF及一或多種醫藥上可接受之載體。
- 如請求項8所述之用途，其中該藥劑包含0.2至2重量%之GEKGF和0.2至2重量%之KTTKSF及一或多種醫藥上可接受之載體。
- 如請求項1至9中任一項所述之用途，其中該藥劑係呈粉末、氣溶膠、軟膏、凝膠、糊劑或溶液之型式。
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| TWI660735B (zh) * | 2016-07-13 | 2019-06-01 | 富比積生物科技股份有限公司 | 四／五胜肽ｇｅｋｇ（ｆ）於治療退化性關節炎之用途 |
-
2021
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|---|---|---|---|---|
| TW201521758A (zh) * | 2013-03-13 | 2015-06-16 | Neocutis Sa | 用於使皮膚回春之胜肽及其使用方法 |
| TWI660735B (zh) * | 2016-07-13 | 2019-06-01 | 富比積生物科技股份有限公司 | 四／五胜肽ｇｅｋｇ（ｆ）於治療退化性關節炎之用途 |
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| 網路文獻 Leslie J. Farer, "OralTidePRO™ - the latest peptide technologyfor dental care" OralTidePRO™, 2014年11月15日 (https://oraltidepro.com/oraltide-pro-the-latest-peptide-technology-for-dental-care/) * |
| 網路文獻 Leslie J. Farer, "OralTidePRO™ − the latest peptide technologyfor dental care" OralTidePRO™, 2014年11月15日 (https://oraltidepro.com/oraltide-pro-the-latest-peptide-technology-for-dental-care/) |
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