TWI715225B

TWI715225B - 葡萄糖濃度的檢測方法、及用於檢測葡萄糖濃度的組成物及其製備方法

Info

Publication number: TWI715225B
Application number: TW108135378A
Authority: TW
Inventors: 陳嘉勻; 蕭伯諼; 魏大程
Original assignee: 國立成功大學
Priority date: 2019-09-30
Filing date: 2019-09-30
Publication date: 2021-01-01
Also published as: TW202115398A

Abstract

一種葡萄糖濃度的檢測方法，包括：提供葡萄糖顯色材料，葡萄糖顯色材料包括複數個銀碳核殼奈米粒子及酸性緩衝溶液；將葡萄糖待測液與葡萄糖氧化酶溶液混合，形成氧化溶液；混合葡萄糖顯色材料與氧化溶液，使葡萄糖顯色材料呈現顏色；提供色卡組合，色卡組合包括複數張色卡，各色卡的顏色與其他色卡不同，且各色卡具有一葡萄糖濃度值；將葡萄糖顯色材料的顏色與色卡組合進行比對，且比對出色卡中之一者與顏色相同或最相近，且由該色卡取得葡萄糖待測液之葡萄糖濃度值。一種用於檢測葡萄糖濃度的組成物及一種用於葡萄糖濃度的組成物的製備方法亦在此揭露。

Description

葡萄糖濃度的檢測方法、及用於檢測葡萄糖濃度的組成物及其製備方法

本發明係與葡萄糖濃度的檢測方法有關，尤其是關於葡萄糖濃度的檢測方法、及用於檢測葡萄糖濃度的組成物及其製備方法。

一般葡萄糖濃度大多係利用特定儀器分析及檢測。進一步來說，葡萄糖濃度通常係以電化學裝置進行測定，以提供較為精確的葡萄糖濃度數值。然而，電化學裝置需要供應電力才能作動，且需配合試片操作，因此若電池沒電或不便攜帶電化學裝置時，則無法及時量測待測樣品的葡萄糖濃度。

舉例來說，現有的血糖機都是應用電化學原理，進行人體血糖數值的測定；然而，若血糖機的電池沒電或不便攜帶血糖機(如外出運動)時，則無法及時量測使用者的血糖數值，而導致使用者因血糖過低或過高而發生突發且不良的生理病狀。

另一方面，現代人提倡低糖飲食，例如在食物或飲品中，盡量避免醣類(如葡萄糖)的攝取，以避免罹患代謝性慢性病(如糖尿病)。然而，一般食物或飲品中的葡萄糖含量(濃度)無法即時且定量地檢測，以致人們仍然攝取過多醣分，而增加罹患代謝性慢性病的風險。

綜上可知，現有的葡萄糖濃度的檢測方法、及用於檢測葡萄糖濃度的組成物及其製備方法仍有待改良，以提升葡萄糖濃度檢測的便利性。

有鑑於此，本發明之目的在於提供一種葡萄糖濃度的檢測方法，其可先將葡萄糖待測液與葡萄糖氧化酶溶液混合混合成氧化溶液，再與含有銀碳核殼奈米粒子的葡萄糖顯色材料混合，且使葡萄糖顯色材料呈現一顏色，接著將該顏色與色卡組合進行比對，進而由顏色最相近的色卡判別葡萄糖待測液所具有的葡萄糖濃度數值。

緣以達成上述目的，本發明提供的一種葡萄糖濃度的檢測方法，包括至少以下步驟：提供一葡萄糖顯色材料，該葡萄糖顯色材料包括複數個銀碳核殼奈米粒子及一酸性緩衝溶液；將一葡萄糖待測液與一葡萄糖氧化酶溶液混合，形成一氧化溶液；混合該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液，使該葡萄糖顯色材料呈現一顏色；以及提供一色卡組合，該色卡組合包括複數張色卡，各該色卡的顏色與其他該些色卡不同，且各該色卡具有一葡萄糖濃度值；將該葡萄糖顯色材料的該顏色與該色卡組合進行比對，且比對出該些色卡中之一者與該顏色相同或最相近，且由該色卡取得該葡萄糖待測液之該葡萄糖濃度值。

本發明的另一方面在於提供一種用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其包括複數個碳奈米粒子、一銀包覆層、一酸性緩衝溶液及一葡萄糖氧化酶溶液，其中該銀包覆層包覆各該碳奈米粒子，以構成複數個銀碳核殼奈米粒子；該些銀碳核殼奈米粒子係分散於該酸性緩衝溶液中，以構成一葡萄糖顯色材料；該葡萄糖氧化酶溶液用以與一葡萄糖待測液混合反應，形成一氧化溶液；其中，該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合後，根據該葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，該葡萄糖顯色材料呈現一顏色。

本發明的再一方面在於提供一種用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其包括至少以下步驟：提供一奈米碳粒子水溶液；加入一銀還原溶液與該奈米碳粒子水溶液進行反應，以形成一銀碳核殼奈米粒子水溶液；加入一酸性緩衝溶液至該銀碳核殼奈米粒子水溶液中，以形成一葡萄糖顯色材料；將一葡萄糖氧化酶溶液與一葡萄糖待測液混合反應，形成一氧化溶液；以及混合該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液，根據該葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，使該葡萄糖顯色材料呈現一顏色。

本發明之效果在於，利用已製備完成的葡萄糖顯色材料，可直接將由葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖待測液混合的氧化溶液與該葡萄糖顯色材料混合；當該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合後，會呈現一顏色。將該顏色與色卡組合進行比對，且比對出色卡中之一者與該顏色相同或最相近，且由色卡上的資訊可判別葡萄糖待測液所含有的葡萄糖之濃度數值。因此，本發明所提供的葡萄糖濃度檢測方法可不受限於檢測及分析環境，可即時且簡便地進行葡萄糖濃度的檢測及分析。

為能更清楚地說明本發明，茲舉一較佳實施例並配合圖式詳細說明如後。請參考圖１及圖４，圖１為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的核殼結構示意圖；圖４為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的核殼結構顯微照片。在圖１及圖４中，用於檢測葡萄糖濃度的組成物1包括碳奈米粒子14、銀包覆層12、酸性緩衝溶液及葡萄糖氧化酶溶液。在本發明實施例中，銀包覆層12包覆每一碳奈米粒子14，以構成複數個銀碳核殼奈米粒子1。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的粒徑W範圍為10~30奈米。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的平均粒徑W範圍為14.5~15.5奈米。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的界達電位(zeta potential)範圍為-54~-52 mV。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的品質穩定期係大於40天。

銀碳核殼奈米粒子1係分散於酸性緩衝溶液中，以構成葡萄糖顯色材料。在本發明實施例中，酸性緩衝溶液的濃度為0.01~0.1 M。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子於葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。在本發明實施例中，酸性緩衝溶液包括醋酸、硼酸、磷酸、硫酸或其組合；本發明較佳實施例中，酸性緩衝溶液為醋酸、硼酸及磷酸以比例1:1:1混合而成。

當欲測定一葡萄糖待測液中的葡萄糖濃度時，葡萄糖氧化酶溶液係用以與葡萄糖待測液混合反應，形成氧化溶液。接著，當葡萄糖顯色材料與氧化溶液混合後，根據葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，葡萄糖顯色材料會呈現一顏色。在本發明實施例中，葡萄糖氧化酶溶液的濃度為0.5~1.5 mg/ml。在本發明實施例中，葡萄糖氧化酶溶液於氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。在本發明實施例中，葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合時的pH值範圍為6~7。

圖２為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法流程圖。用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，包括至少以下步驟：步驟S11：提供奈米碳粒子水溶液，在本發明實施例中，奈米碳粒子水溶液的濃度範圍為0.1~1.0 mg/ml，較佳為0.4~0.6 mg/ml；步驟S12：加入銀還原溶液與奈米碳粒子水溶液進行反應，以形成銀碳核殼奈米粒子水溶液，在本發明實施例中，銀還原溶液與奈米碳粒子水溶液係先混合後靜置5~10分鐘，再加熱至80~120 ^oC持續50~70分鐘，接著冷卻至室溫；步驟S13：加入酸性緩衝溶液至銀碳核殼奈米粒子水溶液中，以形成葡萄糖顯色材料；步驟S14：將葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖待測液混合反應，形成氧化溶液；步驟S15：混合葡萄糖顯色材料與氧化溶液，根據葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，使葡萄糖顯色材料呈現一顏色。

在步驟S12中，銀還原溶液與奈米碳粒子水溶液進行反應係形成複數個銀碳核殼奈米粒子1，其中各銀碳核殼奈米粒子1包括碳奈米粒子及銀包覆層包覆碳奈米粒子。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的粒徑W範圍為10~30奈米。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1的平均粒徑W範圍為14.5~15.5奈米。

在步驟S12中，銀還原溶液包括一含銀鹽類溶液及氨水，且氨水濃度為1~5 μl/ml, 35%。在本發明實施例中，含銀鹽類溶液包括硝酸銀溶液或硫酸銀溶液；較佳實施例中，含銀鹽類溶液為硝酸銀溶液，且濃度為0.1~2.0 mg/ml。在本發明實施例中，含銀鹽類溶液與氨水反應，使銀還原溶液具有二氨銀正離子(Ag(NH ₃) ₂ ⁺)。

在步驟S13中，酸性緩衝溶液的濃度為0.01~0.1 M。在本發明實施例中，銀碳核殼奈米粒子1於該葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。在本發明實施例中，酸性緩衝溶液包括醋酸、硼酸、磷酸、硫酸或其組合；本發明較佳實施例中，酸性緩衝溶液為醋酸、硼酸及磷酸以比例1:1:1混合而成。

在步驟S14中，葡萄糖氧化酶溶液的濃度為0.5~1.5 mg/ml。在本發明實施例中，葡萄糖氧化酶溶液於該氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。

圖３為本發明一較佳實施例的檢測葡萄糖濃度的方法流程圖。檢測葡萄糖濃度的方法，包括至少以下步驟：步驟S21：提供葡萄糖顯色材料，葡萄糖顯色材料包括複數個銀碳核殼奈米粒子及酸性緩衝溶液，在本發明實施例中，奈米碳粒子水溶液的添加量為0.7~1.1 ml，較佳為0.9 ml；酸性緩衝溶液的濃度為0.01~0.1 M，且添加量為0.8~1.2 ml，較佳為1 ml；步驟S22：將葡萄糖待測液與葡萄糖氧化酶溶液混合，形成氧化溶液，在本發明實施例中，葡萄糖氧化酶溶液的濃度為0.5~1.5 mg/ml，且添加量為0.1~0.5 ml，較佳為0.3 ml；葡萄糖待測液的添加量為0.1~0.5 ml，較佳為0.3 ml；步驟S23：混合葡萄糖顯色材料與氧化溶液，使葡萄糖顯色材料呈現一顏色；步驟S24：提供色卡組合，色卡組合包括複數張色卡，各色卡的顏色與其他色卡不同，且各色卡具有葡萄糖濃度值；將葡萄糖顯色材料的顏色與色卡組合進行比對，且比對出色卡中之一者與顏色相同或最相近，且由該色卡取得葡萄糖待測液之葡萄糖濃度值。

在步驟S21中，銀碳核殼奈米粒子1於葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。

在步驟S22中，葡萄糖氧化酶溶液於氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。在本發明實施例中，葡萄糖待測液的葡萄糖濃度範圍為0.5 mM至20 mM，此範圍已涵蓋涵蓋人類血糖值範圍(4 mM至7 mM)，因此本發明實施例所提供的檢測葡萄糖濃度的方法可用於檢測人類血糖值。在本發明實施例中，將葡萄糖待測液與葡萄糖氧化酶溶液混合，形成氧化溶液後，置於37 ^oC反應20~30分鐘。

在步驟S23中，氧化溶液與該葡萄糖顯色材料的體積比範圍為1:2.5至1:3.5。在本發明實施例中，混合葡萄糖顯色材料與氧化溶液，置於37 ^oC反應20~30分鐘，使葡萄糖顯色材料呈現該顏色。

接著，將該葡萄糖顯色材料呈現該顏色與色卡組合進行比對，如步驟S24所述。出色卡中之一者與葡萄糖顯色材料的顏色相同或最相近，則可由該色卡得到葡萄糖待測液之葡萄糖濃度值。

圖５為本發明一較佳實施例的使用組成物檢測葡萄糖濃度的反應途徑示意圖。在圖５中，葡萄糖待測液與葡萄糖氧化酶溶液混合反應，形成含有過氧化氫(H ₂O ₂)的氧化溶液，而葡萄糖待測液會反應形成葡萄糖酸。接著，氧化溶液中的過氧化氫(H ₂O ₂)與銀碳核殼奈米粒子1反應，使銀碳核殼奈米粒子1上的銀殼層氧化形成氧化銀，進而使葡萄糖顯色材料變色。

影響葡萄糖顯色材料變色程度的因素可歸納出二者：酸性緩衝溶液的濃度及葡萄糖待測液的葡萄糖濃度。圖６為本發明實施例的不同濃度的葡萄糖待測液反應後顯色照片；圖７為圖６中不同濃度的葡萄糖待測液下的銀包覆層吸收光譜圖，其中在不同葡萄糖濃度下反應的銀包覆層吸收光譜彼此不同。

在圖６中，隨著葡萄糖待測液的葡萄糖濃度越高，則氧化溶液與該葡萄糖顯色材料混合溶液的顏色由黃色轉變為紅色，而當葡萄糖待測液中的葡萄糖濃度為7 mM時，則混合溶液的顏色呈淡紅；甚至當葡萄糖待測液中的葡萄糖濃度為10 mM時，則混合溶液的顏色呈無色。在圖７中，葡萄糖待測液的葡萄糖濃度係由0 M至10 mM，而人類血糖值範圍約為4 mM至7 mM，因此本發明實施例所提供的檢測葡萄糖濃度的方法已涵蓋人類血糖值範圍，可用於檢測人類血糖值。

在圖７中，隨著葡萄糖待測液中的葡萄糖濃度越高，則銀碳核殼奈米粒子1的銀包覆層12吸收光譜的吸收度越低，意即葡萄糖待測液中的高葡萄糖濃度已使銀包覆層12完全反應為氧化銀，故使銀包覆層12吸收光譜的吸收度降低。

圖８為本發明實施例的各種酸性緩衝溶液的葡萄糖氧化反應能力的折線圖。在圖８中，因硝酸和鹽酸會與銀碳核殼奈米粒子1上的銀殼層反應，使銀殼層氧化，故不適合以硝酸和鹽酸作為酸性緩衝溶液的組成成分；反觀，磷酸、硫酸、醋酸及硼酸與銀碳核殼奈米粒子1上的銀殼層反應性低，不易使銀殼層氧化，故適合以磷酸、硫酸、醋酸及硼酸作為酸性緩衝溶液的組成成分。在本發明實施例中，各種酸性緩衝溶液的濃度均為0.02 M。

圖９為本發明實施例的不同濃度的緩衝溶液下的葡萄糖氧化反應能力的折線圖。在圖９中，隨著酸性緩衝溶液的濃度越高，則葡萄糖反應速率越高，而可檢測的葡萄糖濃度範圍越窄。舉例來說，當酸性緩衝溶液的濃度為0.04M時，其可檢測的葡萄糖濃度範圍約為0~10 mM；然而，當酸性緩衝溶液的濃度為0.01M時，其可檢測的葡萄糖濃度可大於20 mM；當酸性緩衝溶液的濃度為0.02M時，其可檢測的葡萄糖濃度約為0~20 mM。由此可知，當酸性緩衝溶液的濃度為0.01M或0.02M時，其具有較大的可檢測的葡萄糖濃度範圍。值得一提的是，當酸性緩衝溶液的濃度為0 M(即未添加酸性緩衝溶液)時，則葡萄糖不會氧化成葡萄糖酸，即無法檢測葡萄糖待測液的葡萄糖濃度。

本發明實施例的設計在於，利用已製備完成的葡萄糖顯色材料，可直接將由葡萄糖氧化酶溶液與葡萄糖待測液混合的氧化溶液與該葡萄糖顯色材料混合；當該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合後，會呈現一顏色。將該顏色與色卡組合進行比對，且比對出色卡中之一者與該顏色相同或最相近，且由色卡上的資訊可判別葡萄糖待測液所含有的葡萄糖之濃度數值。因此，本發明所提供的葡萄糖濃度檢測方法可不受限於檢測及分析環境，可即時且簡便地進行葡萄糖濃度的檢測及分析。

以上所述僅為本發明較佳可行實施例而已，舉凡應用本發明說明書及申請專利範圍所為之等效變化，理應包含在本發明之專利範圍內。

1:銀碳核殼奈米粒子

12:銀包覆層

14:碳奈米粒子

W:粒徑(平均粒徑)

S11、S12、S13、S14、S15、S21、S22、S23、S24:步驟

圖１為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的核殼結構示意圖；圖２為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法流程圖；圖３為本發明一較佳實施例的檢測葡萄糖濃度的方法流程圖；圖４為本發明一較佳實施例的用於檢測葡萄糖濃度的組成物的核殼結構顯微照片；圖５為本發明一較佳實施例的使用組成物檢測葡萄糖濃度的反應途徑示意圖；圖６為本發明實施例的不同濃度的葡萄糖待測液反應後顯色照片；圖７為圖６中不同濃度的葡萄糖待測液下的銀包覆層吸收光譜圖，其中在不同葡萄糖濃度下反應的銀包覆層吸收光譜彼此不同；圖８為本發明實施例的各種酸性緩衝溶液的葡萄糖氧化反應能力的折線圖；圖９為本發明實施例的不同濃度的緩衝溶液下的葡萄糖氧化反應能力的折線圖。

S21、S22、S23、S24:步驟

Claims

一種用於檢測葡萄糖濃度的組成物，包括：複數個碳奈米粒子；一銀包覆層，包覆各該碳奈米粒子，以構成複數個銀碳核殼奈米粒子；一酸性緩衝溶液，該些銀碳核殼奈米粒子係分散於該酸性緩衝溶液中，以構成一葡萄糖顯色材料，其中該酸性緩衝溶液包括醋酸、硼酸、磷酸、硫酸或其組合；以及一葡萄糖氧化酶溶液，用以與一葡萄糖待測液混合反應，形成一氧化溶液；其中，該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合後，根據該葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，該葡萄糖顯色材料呈現一顏色。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該些銀碳核殼奈米粒子的粒徑範圍為10~30奈米。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該些銀碳核殼奈米粒子的平均粒徑範圍為14.5~15.5奈米。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該些銀碳核殼奈米粒子的界達電位(zeta potential)範圍為-54~-52mV。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該酸性緩衝溶液的濃度為0.01~0.1M。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該葡萄糖氧化酶溶液的濃度為0.5~1.5mg/ml。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該葡萄糖氧化酶溶液於該氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該銀碳核殼奈米粒子於該葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。
如請求項1所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物，其中該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液混合時的pH值範圍為6~7。
一種用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，包括：提供一奈米碳粒子水溶液；加入一銀還原溶液與該奈米碳粒子水溶液進行反應，以形成一銀碳核殼奈米粒子水溶液；加入一酸性緩衝溶液至該銀碳核殼奈米粒子水溶液中，以形成一葡萄糖顯色材料，其中該酸性緩衝溶液包括醋酸、硼酸、磷酸、硫酸或其組合；將一葡萄糖氧化酶溶液與一葡萄糖待測液混合反應，形成一氧化溶液；以及混合該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液，根據該葡萄糖待測液的葡萄糖濃度，使該葡萄糖顯色材料呈現一顏色。
如請求項10所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該銀還原溶液與該奈米碳粒子水溶液進行反應係形成複數個銀碳核殼奈米粒子，其中各該銀碳核殼奈米粒子包括一碳奈米粒子及一銀包覆層包覆該碳奈米粒子。
如請求項11所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該些銀碳核殼奈米粒子的粒徑範圍為10~30奈米。
如請求項11所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該些銀碳核殼奈米粒子的平均粒徑範圍為14.5~15.5奈米。
如請求項10所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該銀還原溶液包括一含銀鹽類溶液及氨水。
如請求項14所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該含銀鹽類溶液包括硝酸銀溶液或硫酸銀溶液。
如請求項14所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該銀還原溶液具有二氨銀正離子(Ag(NH₃)₂ ⁺)。
如請求項10所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該葡萄糖氧化酶溶液於該氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。
如請求項10所述之用於檢測葡萄糖濃度的組成物的製備方法，其中該銀碳核殼奈米粒子於該葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。
一種葡萄糖濃度的檢測方法，包括：提供一葡萄糖顯色材料，該葡萄糖顯色材料包括複數個銀碳核殼奈米粒子及一酸性緩衝溶液，其中該酸性緩衝溶液包括醋酸、硼酸、磷酸、硫酸或其組合；將一葡萄糖待測液與一葡萄糖氧化酶溶液混合，形成一氧化溶液；混合該葡萄糖顯色材料與該氧化溶液，使該葡萄糖顯色材料呈現一顏色；以及提供一色卡組合，該色卡組合包括複數張色卡，各該色卡的顏色與其他該些色卡不同，且各該色卡具有一葡萄糖濃度值；將該葡萄糖顯色材料的該顏色與該色卡組合進行比對，且比對出該些色卡中之一者與該顏色相同或最相近，且由該色卡取得該葡萄糖待測液之該葡萄糖濃度值。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該氧化溶液與該葡萄糖顯色材料的體積比範圍為1：2.5至1：3.5。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該葡萄糖待測液的葡萄糖濃度範圍為0.5mM至20mM。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該酸性緩衝溶液的濃度範圍為0.01M至0.10M。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該葡萄糖氧化酶溶液的濃度為0.5~1.5mg/ml。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該葡萄糖氧化酶溶液於該氧化溶液中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。
如請求項19所述之葡萄糖濃度的檢測方法，其中該銀碳核殼奈米粒子於該葡萄糖顯色材料中的體積百分濃度範圍為40~60 v/v%。