TWI570116B - 取代的吡唑酮化合物及其使用方法 - Google Patents

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取代的吡唑酮化合物及其使用方法

本發明是關於新的取代的吡唑酮化合物及其鹽，用於治療高增殖性的疾病，例如與哺乳動物有關的癌症。本發明尤其是關於抑制蛋白酪氨酸激酶活性的化合物，通過使用本發明化合物抑制蛋白酪氨酸激酶的活性，從而抑制細胞間或細胞內的信號回應。本發明同樣是關於使用本發明的化合物或藥學上包含本發明化合物的組合物來治療哺乳動物，尤其是人類高增殖性疾病的方法。

蛋白激酶代表了一大類在對細胞功能保持控制和各種細胞病變的調控中起重要作用的蛋白質。通過調節信號回應途徑，蛋白激酶掌控著細胞的代謝，細胞分裂週期的進行，細胞增殖及細胞凋亡、分化和存活。目前已有500種人類激酶組，其中達150種之多與人類各種疾病相關，如炎性疾病，心血管疾病，代謝類疾病，神經退行性疾病和癌症。

其中所述激酶部分清單包括abl、AATK、ALK、Akt、axl、bmx、bcr-abl、Blk、Brk、Btk、csk、c-kit、c-Met、c-src、c-fins、CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8、CDK9、CDK10、cRaf1、CSF1R、CSK、DDR1、DDR2、EPHA、EPHB、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、Erk、Fak、fes、FER、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGFR5、Fgr、flt-1、Fps、Frk、Fyn、GSG2、GSK、Hck、ILK、INSRR、IRAK4、ITK、IGF-1R、INS-R、Jak、KSR1、KDR、LMTK2、LMTK3、LTK、Lck、Lyn、MATK、MERTK、MLTK、MST1R、MUSK、NPR1、NTRK、MEK、PLK4、PTK、 p38、PDGFR、PIK、PKC、PYK2、RET、ROR1、ROR2、RYK、ros、Ron、SGK493、SRC、SRMS、STYK1、SYK、TEC、TEK、TEX14、TNK1、TNK2、TNNI3K、TXK、TYK2、TYRO3、tie、tie2、TRK、Yes和Zap70。

蛋白酪氨酸激酶為蛋白激酶的亞科，亦可以歸類於生長因數受體(如：Axl、VEGFR、c-Met(HGFR)、Ron、EGFR、PDGFR和FGFR)或非受體(如：c-src和bcr-abl)激酶。受體酪氨酸激酶為跨膜蛋白，能使生長因數跨越細胞膜保持細胞外結合區域，跨膜區和細胞內部分作為具有激酶的功能，磷酸化作用於一個具體蛋白酪氨酸殘基，從而影響細胞增殖。異常的表達或蛋白激酶活性會直接牽涉眾多人類癌症的發病機理。

血管生成是從預存血脈形成新的毛細血管的過程，這對於女性/雌性動物生殖循環系統中胚胎的器官發育起著關鍵性的作用，同時也對炎性疾病和創傷的癒合也起著很重要的作用。眾所周知，某些疾病與失控的血管生成有關，例如眼新血管形成，視網膜病(包括糖尿病性視網膜病)，與年齡有關的黃斑變性，牛皮癬，成血管細胞瘤，血管瘤，動脈硬化，炎性疾病，例如類風濕性或風濕性炎性疾病，特別是關節炎(類風濕性關節炎)，或者其它慢性炎症，例如慢性哮喘，動脈或移植後動脈粥樣硬化，子宮內膜異位和增生性疾病，例如通常所述的實體腫瘤和液體腫瘤(例如白血病)。實體腫瘤，特別依賴於血管生成來給其供給營養、養分、及廢物處理。另外，血管生成同樣會促進細胞或其他位置轉移腫瘤的生長。

新的血管生成是一個高度複雜且高度協調的過程，其要求有大量的生長因數刺激，但血管內皮生長因數(VEGFR)信號回應通常在生理學和病理學血管生成中代表關鍵性的限速階段。VEGF結合並活化受體型酪氨酸激酶。已經被人類確認的VEGFR亞型有三種：VEGFR-1(Flt-1)，VEGFR-2(KDR/Flk-1)和VEGFR-3(Flt-4)。VEGFR-2介導VEGF的主要細胞應答，尤其是有絲分裂和血管生成。VEGFR-1調節VEGFR-2信號傳導或是作為虛擬/誘捕受體隔離VEGF與VEGFR-2。VEGFR-1的表達受缺氧正向調節，其機理與VEGF受HIF-1調節類似；它的功能基於細胞的類型和發展階段而變化。(Stuttfeld E,Ballmer-Hofer K(September 2009),"Structure and function of VEGF receptors".IUBMB Life 61(9)：915-22.)

VEGFR-2是主要介導血管內皮細胞(EC)的有絲分裂和存活，同時保持血管生成和微血管的滲透性。因此，直接抑制激酶VEGFR-2的活性將會減少血管生成和腫瘤的生長，並且抑制VEGFR-2靶向作用於遺傳學上較穩定的宿主上皮細胞的活性，而非抑制易變的腫瘤組織，將會減少耐藥性發展的幾率。

一些藥物靶向作用於VEGFR信號回應，無論是單獨給藥，抑或與其它化學治療藥物聯用，均對晚期惡性腫瘤患者有效(“VEGF-targeted therapy：mechanisms of anti-tumor activity,”Nature Reviews Cancer, 2008, 8,579；“Molecular basis for sunitinib efficacy and future clinical development,”Nature Reviews Drug Discovery,2007,6,734；and“Angiogenesis：an organizing principle for drug discovery？”Nature Reviews Drug Discovery,2007,6,273)。

c-Met，即肝細胞生長因數受體(HGFR)，其主要的作用點是在內皮細胞，並已證實其在內皮細胞，肌原細胞，造血細胞和運動神經元內均有表達。c-Met天然的配體為肝細胞生長因數(HGF)，其為一個多功能生長因數，即分散因數(SF)。在胎兒和成人中，啟動c-Met可促進某些形態的形成，譬如，侵襲性生長將會導致細胞的快速生長，細胞間的分裂，和細胞向其周圍遷移(“From Tpr-Met to Met,tumorigenesis and tubes,”Oncogene,2007,26,1276；and“Met Receptor Tyrosine Kinase as a Therapeutic Anticancer Target,”Cancer Letter,2009,280,1-14)。

廣泛存在的人類惡性腫瘤存在持久的c-Met刺激、過表達或變異，包括乳腺癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、腎癌、甲狀腺癌、結腸癌、惡性膠質瘤、前列腺癌等。c-Met同樣牽涉動脈粥樣硬化和肺纖維化。通過腫瘤間質的相互作用，包括HGF/c-Met途徑，使這些癌細胞的侵襲性生長速度徹底提高了。因此，大量證據顯示c-Met信號回應與一些癌症疾病的發展速度有關，並提高了其在與以c-Met為主要靶點的癌症藥物開發中的角色地位(“Molecular cancer therapy：can our expectation be MET,”Euro.J.Cancer,2008,44,641-651；and“Targeting the c-Met Signaling Pathway in Cancer,”Clin.Cancer Res.,2006,12,3657).Agents targeting c-Met signaling pathway are now under clinical investigation.(“Novel Therapeutic Inhibitors of the c-Met Signaling Pathway in Cancer,”Clinical Cancer Research,2009,15,2207),and“Drug development of MET inhibitors：targeting oncogene addiction and expedience,”Nature Review Drug Discovery, 2008,7,504)。

Axl屬於酪氨酸激酶受體(RTKs)的亞科，包括Tyro3和Mer(TAM)。其中TAM受體通過在胞外區和細胞質激酶區聯合2個免疫球蛋白類似物區域和二元纖連蛋白III型來進行表徵的。TAM受體的配體是Gas6(growth arrest-specific 6)和蛋白S，兩種維生素K依賴性蛋白存在43%的氨基酸序列，並具有相似的區域結構(“The anticoagulation factor protein S and its relative,Gas6,are ligands for the Tyro 3/Axl family of receptor tyrosine kinases,”Cell,1995,80,661-670；and“Axl receptor tyrosine kinase stimulated by the vitamin K-dependent protein encoded by growth-arrest-specific gene 6,”Nature,1995,373,623-626)。

充分的證據顯示Gas6/Axl體系在推進正常細胞和癌細胞生長和存活中扮演著重要的角色(“TAM receptor tyrosine kinases：biologic functions,signaling,and potential therapeutic targeting in human cancer,”Adv Cancer Res,2008,100,35-83)。Axl過表達和信號響應牽涉幾種人類惡性腫瘤，如結腸癌、乳腺癌、神經膠質瘤、甲狀腺癌、胃癌、黑色素瘤、肺癌、和腎細胞癌(RCC)。Axl在生物學中更具體的作用已在神經膠質瘤的研究中得到證實，即降低Axl的信號回應將會減少神經膠質瘤和乳腺腫瘤的生長，其中Axl將會促進細胞遷移、管道形成、新生血管形成及腫瘤生長。Axl已被證實在腫瘤生成中扮演著多重角色，而抗體療法來抑制Axl不僅會阻斷Axl在惡性腫瘤細胞中的功能，同時也會阻斷其在間質腫瘤細胞中的功能。Axl的抑制作用和抗VEGF的附加效應表明阻斷Axl的功能將會是提高抗血管生成治療的有效途徑(“Axl as a potential therapeutic target in cancer：role of Axl in tumor growth,metastasis and angiogenesis.”Oncogene,2009,28,3442-3455；and“TAM Receptor Tyrosine Kinases：Biologic Functions,Signaling,and Potential Therapeutic Targeting in Human Cancer,”Adv Cancer Res,2008,100,35-83)。

RON(MST1R,recepteur d'origine nantais)是MET家族的另一成員，是 配體巨噬細胞刺激蛋白(MSP,也被稱為MSTI或類肝細胞生長因數(HGFL))的一種受體酪氨酸激酶，它與體外和體內的細胞分化、遷移和基質侵襲相關-所有這些過程都是具有轉移潛能的侵襲性生長腫瘤表型的替代標記物。RON主要調節在肺、甲狀腺、胰腺、前列腺癌、結腸和乳腺癌細胞中的腫瘤表型並且能預測人類乳腺癌的不良預後。RON和MET的共表達和通過HGF-MET信號誘導的RON表達都在肝細胞癌的研究中描述過。此外，RON和MET在卵巢癌、乳腺癌和膀胱癌中的共表達預示著一種更壞的預後。考慮到RON和MET的信號冗長，最可能的方式是抑制MET的信號回應，而主要由RON信號回應來調節(“RON(MST1R)is a novel prognostic marker and therapeutic target for gastroesophageal adenocarcinoma.”Cancer Biol Ther.2011 July 1；12(1)：9-46.)。

MSP-RON信號軸在癌症發病機理中所起的作用在各種疾病模型系統中被廣泛研究過。體內和體外的研究結果都顯示MSP-RON信號回應在不同類型癌症的侵襲性生長中都是很重要的。由蛋白質的過度表達和致癌亞型的產生所誘導的以及多細胞內信號轉導的持續啟動所表明的異常的RON啟動作用存在於各種不同類型癌症中。RON信號回應對於癌症細胞的生長和生存也是必要的。這些特性使RON成為癌症治療的一個藥物靶點(“MSP-RON signalling in cancer：pathogenesis and therapeutic potential.”Nature Reviews Cancer,2013,13,466-481)。

眾所周知，癌細胞往往會採用多種機制來避免細胞緊密調節過程，如細胞增殖、凋亡及衰老。因此，很多腫瘤會從單個激酶抑制作用中逃離出來。通過對腫瘤廣闊的系統分析表明，酪氨酸激酶受體(RTK)共活化作用通過癌細胞完成化學抗性，並作為重要的生物機理。其中一個方法是，克服RTK共活化作用，可能會同時牽涉在治療上靶向作用於多重RTKs，從而來阻斷致癌的RTK信號回應，並克服代償機制。(“Receptor Tyrosine Kinase Coactivation Networks in Cancer,”Cancer Research,2010,70,3857)。靶向作用於VEGFR，c-Met，Ron和/或Axl信號回應的抗腫瘤方法可以防止腫瘤細胞克服VEGFR，c-Met(HGFR)，Ron和/或Axl的單獨抑制作用，從而提高癌症的治療效果。

本發明涉及新的取代的吡唑酮化合物和治療細胞增殖性疾病的方法。本發明的化合物對蛋白酪氨酸激酶活性有抑制作用。更讓人滿意的是，本發明的化合物具有多重的抑制劑功能，可以抑制像VEGFR，c-Met(HGFR)，Ron和/或Axl信號回應。相應地，本發明還提供了一些新的蛋白酪氨酸激酶受體信號回應的抑制劑，如VEGF受體信號回應，HGF受體信號回應，Ron受體信號回應和/或Axl受體信號回應。

特別地，本發明所涉及的化合物，及其藥學上可接受的組合物，都可以有效地作為酪氨酸激酶受體抑制劑，如VEGFR，c-Met，Ron和/或Axl的抑制劑。

一方面，本發明涉及一種如式(I)所示的化合物： 或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，氮氧化物，水合物，溶劑化物，代謝產物，藥學上可接受的鹽或它的前藥，其中，式(I)中Q，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶，W，X，Y和Z的定義如下所示。

在一些實施方案，式(I)中：Q為H，NR^aR^b，OR^a，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；W為CR⁷或N；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基，C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b， R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F，Cl，Br，CN，N₃，OR^a，C_1-6烷基，C_1-6鹵代烷基，C_2-6烯基或C₂-₆炔基；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為H，C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基或C_6-10芳基，當R¹，R²，R³，R⁵(或R⁴)，R⁶和R⁷同時為H，R⁴(或R⁵)為F時，R^d不為C_3-7雜環基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基和C_6-10芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-6烷基，C_2-6烯基，C_2-6炔基，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a。

在另外一些實施方案，式(I)中各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基，5-10個原子組成的雜芳基，苯基-C_1-2亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基-C_1-2亞烷基，(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，苯基和5-10個原子組成的雜芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-4烯基，C_2-4炔基，OR^a， NR^aR^b，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F或Cl。

在另外一些實施方案，式(I)中各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-3鹵代烷基，C_1-3烷氧基或C_1-3烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中R^d為H，D，C_1-4烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，當R¹，R²，R³，R⁵(或R⁴)，R⁶和R⁷同時為H，R⁴(或R⁵)為F時，R^d不為C_3-6雜環基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-3烷基，C_2-4烯基，C_2-4炔基，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為NH₂或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(I)中各X，Y和Z獨立地為H，D，CH₃，CH₂CH₃，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為：

在另外一些實施方案，本發明化合物具有式(II)所示結構： 其中，式(II)中Q，X，Y和Z的定義如下所示。

在一些實施方案，式(II)中：Q為NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-7雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-7雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基，C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4 亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為C_1-6烷基，其中，所述C_1-6烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，OH，NH₂，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為NR^aR^b或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(II)中各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基或苯基，其中，所述C_1-4烷基和苯基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基和C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中R^d為Me，Et，n-Pr，i-Pr，n-Bu，i-Bu或t-Bu。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為NH₂或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(II)中各X，Y和Z獨立地為H，D，Me，CH₂D，CHD₂，CD₃，乙基，丙基，異丙基，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為：

另一方面，本發明涉及一種藥物組合物，其包含(1)本發明化合物和 (2)藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物，或它們的組合。

在一些實施方案，本發明所述的藥物組合物，更進一步地包含附加治療劑，這些附加治療劑選自化學治療藥物，抗增殖劑，用於治療動脈粥樣硬化的藥物，用於治療肺纖維化的藥物，或它們的組合。

在另外一些實施方案，本發明所述的藥物組合物，其中所涉及的附加治療劑是阿黴素(Adriamycin)，雷怕黴素(Rapamycin)，Temsirolimus，依維莫司(Everolimus)，Ixabepilone，吉西他濱(Gemcitabin)，環磷醯胺(cyclophosphamide)，地塞米松(dexamethasone)，依託泊苷(etoposide)，氟尿嘧啶(fluorouracil)，阿法替尼(afatinib)，alisertib，amuvatinib，阿西替尼(axitinib)，波舒替尼(bosutinib)，brivanib，cabozantinib，西地尼布(cediranib)，crenolanib，克卓替尼(crizotinib)，dabrafenib，dacomitinib，達沙替尼(dasatinib)，danusertib，dovitinib，厄洛替尼(erlotinib)，foretinib，ganetespib，吉非替尼(gefitinib)，ibrutinib，伊馬替尼(imatinib)，iniparib，拉帕替尼(lapatinib)，lenvatinib，linifanib，linsitinib，馬賽替尼(masitinib)，momelotinib，莫替沙尼(motesanib)，來那替尼(neratinib)，niraparib，尼洛替尼(nilotinib)，oprozomib，olaparib，帕唑帕尼(pazopanib)，pictilisib，ponatinib，quizartinib，regorafenib，rigosertib，rucaparib，ruxolitinib，塞卡替尼(saracatinib)，saridegib，索拉非尼(sorafenib)，舒尼替尼(sunitinib)，tasocitinib，telatinib，tivantinib，tivozanib，tofacitinib，trametinib，凡德他尼(vandetanib)，veliparib，vemurafenib，vismodegib，volasertib，干擾素(an interferon)，卡鉑(carboplatin)，托泊替康(topotecan)，紫杉醇(taxol)，長春堿(vinblastine)，長春新堿(vincristine)，替莫唑胺(temozolomide)，托西莫單抗(tositumomab)，trabedectin，belimumab，貝伐單抗(bevacizumab)，brentuximab，cetuximab，gemtuzumab，ipilimumab，ofatumumab，panitumumab，ranibizumab，rituximab，tositumomab，曲妥單抗(trastuzumab)或它們的組合。

另一方面，可以使用本發明化合物或藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者增殖性疾病的藥品的用途。

在一些實施方案，本發明所述的增殖性疾病是轉移癌、結腸癌，胃腺 癌，膀胱癌，乳腺癌，腎癌，肝癌，肺癌，皮膚癌，甲狀腺癌，腦瘤，頸癌，前列腺癌，胰腺癌，CNS(中樞神經系統)的癌症，惡性膠質瘤，骨髓增生病，動脈粥樣硬化或肺纖維化。

另一方面，本發明涉及使用本發明化合物或藥物組合物來製備用於在生物標本內抑制或調節蛋白激酶活性的用途，所述用途包含使用本發明化合物或藥物組合物與所述的生物標本接觸。

在其中一些實施方案，本發明所述蛋白激酶為受體酪氨酸激酶。

在另外一些實施方案，本發明所述受體酪氨酸激酶為VEGFR，c-Met，Ron，Axl或它們的組合。

另一方面，本發明提供一些藥物組合物，其包含本發明作為酪氨酸激酶受體抑制劑的化合物，或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，代謝產物，或其藥學上可接受的鹽，藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物，或它們的組合。在一些實施方案中，本發明所提供藥物組合物包含可作為VEGF受體信號回應，HGF受體信號回應，Ron受體信號回應和Axl受體信號回應抑制劑的化合物，或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，代謝產物，或其藥學上可接受的鹽，或藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物，或它們的組合。在另外一些實施方案中，本發明藥物組合物更進一步地包含附加治療劑。

另一方面，本發明涉及一種抑制蛋白酪氨酸激酶活性的方法，該方法包含本發明化合物或其藥物組合物與所述激酶接觸。在其中一些實施方案中，本發明涉及抑制VEGF受體信號回應，HGF受體信號回應，Ron受體信號回應和Axl受體信號響應的方法，該方法包含本發明化合物或其藥物組合物與所述受體接觸。抑制受體蛋白激酶活性，特別是VEGF，HGF，Ron和Axl受體信號回應，可以在單細胞或多細胞有機體中進行。如果存在於多細胞有機體，本發明所描述的方法包含使用本發明的化合物或組合物對有機體進行給藥。其中一些實施例是，所述有機體是哺乳動物，另外一些實施例是，所述有機體是人類。另外一些實施例是，所述方法更進一步地包含蛋白激酶與附加治療劑的接觸。

另一方面，本發明涉及一種抑制細胞增殖活性的方法，所述方法包含本發明化合物或其藥物組合物能有效抑制細胞增生的劑量與細胞接觸。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步地包含附加治療劑與細胞的接觸。

另一方面，本發明涉及一種治療患者細胞增殖性疾病的方法，所述方法包含患者需要有效治療所需本發明的化合物或其組合物給藥的劑量。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步包含附加治療劑的給藥。

另一方面，本發明涉及一種抑制患者腫瘤生長的方法，所述方法包含患者需要有效治療所需本發明的化合物或其組合物給藥的劑量。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步地包含附加治療劑的給藥。

另一方面，本發明涉及式(I)或式(II)所包含的化合物的製備、分離和純化的方法。

前面所述內容只概述了本發明的某些方面，但並不限於這些方面。這些方面及其他的方面的內容將在下面做更加具體完整的描述。

定義和一般術語

本發明將會把確定的具體化的內容所對應的文獻詳細列出，實施例都伴隨有結構式和化學式的圖解。本發明有預期地涵蓋所有的選擇餘地、變體和同等物，這些可能像申請專利範圍所定義的那樣包含在現有發明領域。所屬領域的技術人員將識別許多類似或等同於在此所描述的方法和物質，這些可以應用於本發明的實踐中去。本發明絕非限於方法和物質的描述。有很多文獻和相似的物質與本發明申請相區別或抵觸，其中包括但絕不限於術語的定義，術語的用法，描述的技術，或像本發明申請所控制的範圍。

本發明將應用以下定義除非其他方面表明。根據本發明的目的，化學元素根據元素週期表，CAS版本和化學藥品手冊，75，^thEd，1994來定義。 另外，有機化學一般原理見"Organic Chemistry",Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito：1999,and "March's Advanced Organic Chemistry," by Michael B.Smith and Jerry March,John Wiley&Sons,New York：2007，因此所有的內容都融合了參考文獻。

像本發明所描述的，本發明的化合物可以任選地被一個或多個取代基所取代，如上面的通式化合物，或者像實施例裡面特殊的例子，子類，和本發明所包含的一類化合物。應瞭解“任選取代的”這個術語與“取代或非取代的”這個術語可以交換使用。一般而言，術語“任選地”不論是否位於術語“取代的”之前，都表示所給結構中的一個或多個氫原子被具體取代基所取代。除非其他方面表明，一個任選的取代基團可以在基團各個可取代的位置進行取代。應注意在本發明中，R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，即R^a，R^b和與他們相連的氮原子一起，可以形成3-8個原子的雜環，也可以不形成雜環，為本領域技術人員熟知的其他結構，如N-R^a-R^b或R^a-N-R^b等。當所給出的結構式中不只一個位置能被選自具體基團的一個或多個取代基所取代，那麼取代基可以相同或不同地在各個位置取代。其中所述的取代基可以是，但並不限於，D，F，Cl，Br，N₃，NO₂，CN，OH，NH₂，OR^a，CH₂D，CHD₂，CD₃，R^aO-C_1-4亞烷基，SR^a，NR^aR^b，R^aR^bN-C_1-4亞烷基，-C(=O)NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)R^d，-N(R^c)S(=O)NR^aR^b，-N(R^c)S(=O)R^a，-N(R^c)S(=O)₂NR^aR^b，-N(R^c)S(=O)₂R^a，甲基，乙基，正丙基，異丙基，甲氧基，苯基，苯基-C_1-2亞烷基，C_1-6烷基，C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷基氨基，C_2-6烯基，C_2-6炔基，C_3-8環烷基，C_3-7雜環基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，或5-10個原子組成的雜芳基，其中，R^a，R^b和R^c具有如本發明所述定義。

本發明使用的術語“脂肪族的”或“脂肪族基團”，表示直鏈(即非支鏈)或支鏈，取代或非取代的完全飽和或含有一個或多個不飽和度的烴鏈。除非另外詳細說明，脂肪族基團含有1-20個碳原子，其中一些實施例是，脂 肪族基團含有1-10個碳原子，另外一些實施例是，脂肪族基團含有1-8個碳原子，另外一些實施例是，脂肪族基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，脂肪族基團含有1-3個碳原子。合適的脂肪族基團包括，但並不限於，直鏈或支鏈，取代或非取代的烷基，烯基或炔基基團，如C_1-6脂肪族基團，包括直鏈或支鏈，取代或非取代的C_1-6烷基，C_2-6烯基，或C_2-6炔基基團。這樣的實例包括，但並不限於，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，乙烯，丙烯，丁烯，2-丁烯，乙炔，丙炔，丁炔，2-丁炔，等等，並且所述脂肪族基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

本發明使用的術語“烷基”或“烷基基團”，表示含1-20個碳原子的飽和直鏈或支鏈的一價碳氫化合物原子團。除非另外詳細說明，烷基基團含有1-20個碳原子，其中一些實施例是，烷基基團含有1-10個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-8個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-4個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-3個碳原子。

烷基基團的實例包含，但並不限於，甲基(Me，-CH₃)，乙基(Et，-CH₂CH₃)，正丙基(n-Pr，-CH₂CH₂CH₃)，異丙基(i-Pr，-CH(CH₃)₂)，正丁基(n-Bu，-CH₂CH₂CH₂CH₃)，異丁基(i-Bu，-CH₂CH(CH₃)₂)，仲丁基(s-Bu，-CH(CH₃)CH₂CH₃)，叔丁基(t-Bu，-C(CH₃)₃)，正戊基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)，2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)，3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)，2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)，3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)，2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)，正己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)，2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)，3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃))，2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)，4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)，3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)，2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)，2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃)，正庚基，正辛基，等等，其中所述烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多 個本發明所描述的取代基所取代。

本發明所使用的術語“烷基”和其首碼“烷”，都包含直鏈和支鏈的飽和碳鏈。

術語“亞烷基”表示從直鏈或支鏈的飽和烴基中去掉兩個氫原子所得到的飽和的二價烴基基團。除非另外詳細說明，亞烷基基團含有1-10個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-4個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-2個碳原子。這樣的實例包括亞甲基(-CH₂-)，亞乙基(-CH₂CH₂-)，亞異丙基(-CH(CH₃)CH₂-)等等，其中所述亞烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“鏈烯基”表示2-12個碳原子，或2-8個碳原子，或2-6個碳原子，或2-4個碳原子的直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為不飽和狀態，即一個C-C為sp²雙鍵，其中鏈烯基的基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代，包括基團有“反”“正”或"E" "Z"的定位，其中具體的實例包括，但並不限於，乙烯基(-CH=CH₂)，烯丙基(-CH₂CH=CH₂)等等。

術語“炔基”表示2-12個碳原子，或2-8個碳原子，或2-6個碳原子，或2-4個碳原子的直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為不飽和狀態，即一個C-C為sp三鍵，其中炔基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代，具體的實例包括，但並不限於，乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(-CH₂C≡CH)，1-丙炔基(-C≡C-CH₃)等等。

術語“烷氧基”表示烷基基團通過氧原子與分子其餘部分相連，其中烷基基團具有如本發明所述的含義。除非另外詳細說明，所述烷氧基基團含有1-20個碳原子，其中一些實施例是，烷氧基基團含有1-10個碳原子，另外一些實施例是，烷氧基基團含有1-8個碳原子，另外一些實施例是，烷氧基基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，烷氧基基團含有1-4個碳原子，另外一些實施例是，烷氧基基團含有1-3個碳原子。

烷氧基基團的實例包含，但並不限於，甲氧基(MeO,-OCH₃)，乙氧基(EtO,-OCH₂CH₃)，1-丙氧基(n-PrO,n-丙氧基，-OCH₂CH₂CH₃)，2-丙氧基(i-PrO,i-丙氧基，-OCH(CH₃)₂)，1-丁氧基(n-BuO,n-丁氧基，-OCH₂CH₂CH₂CH₃)，2-甲基-1-丙氧基(i-BuO,i-丁氧基，-OCH₂CH(CH₃)₂)，2-丁氧基(s-BuO,s-丁氧基，-OCH(CH₃)CH₂CH₃)，2-甲基-2-丙氧基(t-BuO,t-丁氧基，-OC(CH₃)₃)，1-戊氧基(n-戊氧基，-OCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)，2-戊氧基(-OCH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)，3-戊氧基(-OCH(CH₂CH₃)₂)，2-甲基-2-丁氧基(-OC(CH₃)₂CH₂CH₃)，3-甲基-2-丁氧基(-OCH(CH₃)CH(CH₃)₂)，3-甲基-1-丁氧基(-OCH₂CH₂CH(CH₃)₂)，2-甲基-1-丁氧基(-OCH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)，等等，其中所述烷氧基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“鹵代烷基”，“鹵代烯基”或“鹵代烷氧基”表示烷基，烯基或烷氧基基團被一個或多個鹵素原子所取代，這樣的實例包含，但並不限於，三氟甲基，三氟甲氧基等。

術語“碳環”、“碳環基”或“環狀脂肪族”是指有一個或多個連接點連接到分子的其餘部分，非芳香族的，飽和或部分不飽和的，包括3-12個碳原子，或3-10個碳原子，或3-8個碳原子，或3-6個碳原子的單環，雙環和三環體系。合適的環狀脂肪族基團包括，但並不限於，環烷基，環烯基和環炔基。環狀脂肪族基團的實例進一步包括，但絕不限於，環丙基，環丁基，環戊基，1-環戊基-1-烯基，1-環戊基-2-烯基，1-環戊基-3-烯基，環己基，1-環己基-1-烯基，1-環己基-2-烯基，1-環己基-3-烯基，環己二烯基，環庚基，環辛基，環壬基，環癸基，環十一烷基，環十二烷基，等等。

術語“環烷基”是指有一個或多個連接點連接到分子的其餘部分，飽和的，含3-12個碳原子的單環，雙環或三環體系。其雙環體系包含螺雙環和稠合雙環。其中一些實施例是含3-10個碳原子的環體系，另外一些實施例是含3-8個碳原子的環體系，另外一些實施例是含3-6個碳原子的環體系，另外一些實施例是含5-6個碳原子的環體系，且所述環烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“環烷基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個環烷基基團所取 代，其中烷基和環烷基基團具有如本發明所述的含義。其中一些實施例是，環烷基亞烷基基團是指“較低級的環烷基亞烷基”基團，即環烷基基團連接到C_1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，環烷基基團連接到C_1-4的烷基基團上。另外一些實施例是，環烷基基團連接到C_1-3的烷基基團上。另外一些實施例是，環烷基基團連接到C_1-2的烷基基團上。這樣的實例包括，但並不限於，環丙基乙基，環戊基甲基，環己基甲基等等。所述環烷基亞烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。這樣的實例包括，但並不限於，環丙基乙基，環戊基甲基，環己基甲基等等。

術語“雜環”、“雜環基”或“雜環的”在此處可交換使用，都是指單環，雙環，或三環體系，其中環上一個或多個原子獨立任選地被雜原子所替換，環可以是完全飽和的或包含一個或多個不飽和度，但絕不是芳香族類，只有一個連接點連接到分子的其餘部分。其雙環體系包含螺雙環和稠合雙環，並且其中一個環可以是單碳環或單雜環。其中一個或多個環上的氫原子獨立任選地被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。其中一些實施例是，“雜環”“雜環基”或“雜環的”基團是3-7個原子組成的單環(2-6個碳原子和選自N，O，P，S的1-3個雜原子，在此S或P任選地被一個或多個氧原子所取代得到像SO，SO₂，PO，PO₂的基團)，另外一些實施例是，3-6個原子組成的單環(2-5個碳原子和選自N，O，P，S的1-3個雜原子，在此S或P任選地被一個或多個氧原子所取代得到像S=O，SO₂，PO，PO₂的基團，當所述的環為三元環時，其中只有一個雜原子)，或7-10個原子組成的雙環(4-9個碳原子和選自N，O，P，S的1-3個雜原子，在此S或P任選地被一個或多個氧原子所取代得到像SO，SO₂，PO，PO₂的基團)。

雜環基可以是碳基或雜原子基。“雜環基”同樣也包括雜環基團與飽和或部分不飽和環或雜環稠合所形成的基團。雜環的實例包括，但並不限於，吡咯烷基，四氫呋喃基，二氫呋喃基，四氫噻吩基，四氫吡喃基，二氫吡喃基，四氫噻喃基，呱啶基，嗎啉基，硫代嗎啉基，噻噁烷基，呱嗪基，高呱嗪基，氮雜環丁基，氧雜環丁基，硫雜環丁基，高呱啶基，環氧丙基，氮雜環庚基，氧雜環庚基，硫雜環庚基，氧氮雜卓基，二氮雜卓基，硫氮 雜卓基，2-吡咯啉基，3-吡咯啉基，二氫吲哚基，2H-吡喃基，4H-吡喃基，二氧雜環己基，1,3-二氧戊基，吡唑啉基，二噻烷基，二噻茂烷基，二氫噻吩基，吡唑烷基咪唑啉基，咪唑烷基，1,2,3,4-四氫異喹啉基。雜環基團的實例還包括，1,1-二氧硫代嗎啉基，和其中環上兩個碳原子被氧原子所取代如嘧啶二酮基。

術語“雜環基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個雜環基基團所取代，其中烷基和雜環基基團具有如本發明所述的含義。其中一些實施例是，雜環基亞烷基基團是指“較低級的雜環基亞烷基”基團，即雜環基基團連接到C_1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，雜環基基團連接到C_1-4的烷基基團上。另外一些實施例是，雜環基基團連接到C_1-2的烷基基團上。這樣的實例包括，但並不限於，2-吡咯烷乙基，3-氮雜環丁烷甲基等等。所述雜環基亞烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“雜原子”是指O，S，N，P和Si，包括N，S和P任何氧化態的形式；伯、仲、叔胺和季銨鹽的形式；或者雜環中氮原子上的氫被取代的形式，例如，N(像3，4-二氫-2H-吡咯基中的N)，NH(像吡咯烷基中的NH)或NR(像N-取代的吡咯烷基中的NR)。

術語“鹵素”是指F，Cl，Br或I。

術語“H”表示單個氫原子。這樣的原子團可以與其他基團連接，譬如與氧原子相連，形成羥基基團。

術語“D”或“²H”表示單個氘原子。一個這樣的原子團與一個甲基相連，形成單-氘代甲基(-CDH₂)，兩個氘原子與一個甲基相連，形成雙-氘代甲基(-CD₂H)，以及三個氘原子與一個甲基相連，形成三-氘代甲基(-CD₃)。

術語“N₃”表示一個疊氮結構。這種基團可以與其他基團相連接，例如，可與一個甲基相連形成疊氮甲烷(MeN₃)，或者與一個苯基相連形成疊氮苯(PhN₃)。

術語“芳基”可以單獨使用或作為“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”的一大部分，表示共含有6-14個環原子，或6-12個環原子，或6-10個環 原子的單環，雙環，和三環的碳環體系，其中，至少一個環體系是芳香族的，其中每一個環體系包含3-7個原子組成的環，且只有一個附著點與分子的其餘部分相連。術語“芳基”可以和術語“芳香環”交換使用，如芳香環可以包括苯基，萘基和蒽。所述芳基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“芳基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個芳基基團所取代，其中烷基和芳基基團具有如本發明所述的含義，其中一些實施例是，芳基亞烷基基團是指“較低級的芳基亞烷基”基團，即芳基基團連接到C_1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，芳基亞烷基基團是指含C_1-4的烷基的“苯烷撐”。另外一些實施例是，芳基亞烷基基團是指芳基基團連接到C_1-2的烷基基團上。其中具體實例包括苄基，二苯基甲基，苯乙基等等。所述芳基亞烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“雜芳基”可以單獨使用或作為“雜芳基烷基”或“雜芳基烷氧基”的一大部分，表示共含有5-14個環原子，或5-12個環原子，或5-10個環原子的單環，雙環，和三環體系，其中至少一個環體系是芳香族的，且至少一個環體系包含一個或多個雜原子，其中每一個環體系包含5-7個原子組成的環，且只有一個附著點與分子其餘部分相連。術語“雜芳基”可以與術語“芳雜環”或“雜芳族化合物”交換使用。

另外一些實施例是，芳雜環包括以下的單環，但並不限於這些單環：2-呋喃基，3-呋喃基，N-咪唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基，3-異噁唑基，4-異噁唑基，5-異噁唑基，2-噁唑基，4-噁唑基，5-噁唑基，N-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-嘧啶基，4-嘧啶基，5-嘧啶基，噠嗪基(如3-噠嗪基)，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基，四唑基(如5-四唑基)，三唑基(如2-三唑基和5-三唑基)，2-噻吩基，3-噻吩基，吡唑基(如2-吡唑基)，異噻唑基，1,2,3-噁二唑基，1,2,5-噁二唑基，1,2,4-噁二唑基，1,2,3-三唑基，1,2,3-硫代二唑基，1,3,4-硫代二唑基，1,2,5-硫代二唑基，吡嗪基，1,3,5-三嗪基；也包括以下的雙環，但絕不限於這些雙環：苯並咪唑基，苯並呋喃基，苯並噻吩基，吲哚基(如2-吲哚基)，嘌呤基，喹啉基(如2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉基)，和異喹 啉基(如1-異喹啉基，3-異喹啉基或4-異喹啉基)。所述雜芳基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“雜芳基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個雜芳基基團所取代，其中烷基和雜芳基基團具有如本發明所述的含義，其中一些實施例是，雜芳基亞烷基基團是指“較低級的雜芳基亞烷基”基團，即雜芳基基團連接到C_1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，雜芳基基團連接到C_1-4的烷基基團上。另外一些實施例是，雜芳基基團連接到C_1-2的烷基基團上。其中具體實例包括2-吡啶甲基，3-呋喃乙基等等。所述雜芳基亞烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。

術語“羧基”，無論是單獨使用還是和其他術語連用，如“羧烷基”，表示-CO₂H；術語“羰基”，無論是單獨使用還是和其他術語連用，如“氨基羰基”或“醯氧基”，表示-(C=O)-。

術語“烷基氨基”包括“N-烷基氨基”和“N,N-二烷基氨基”，其中氨基基團分別獨立地被一個或兩個烷基基團所取代。其中一些實施例是，烷基氨基是一個或兩個C_1-6烷基連接到氮原子上的較低級的烷基氨基基團。另外一些實施例是，烷基氨基是C_1-3的較低級的烷基氨基基團。合適的烷基氨基基團可以是單烷基氨基或二烷基氨基，這樣的實例包括，但並不限於，N-甲氨基，N-乙氨基，N,N-二甲氨基，N,N-二乙氨基等等。

術語“芳氨基”表示氨基基團被一個或兩個芳基基團所取代，這樣的實例包括，但並不限於N-苯氨基。其中一些實施例是，芳氨基上的芳環可以進一步被取代。

術語“氨基烷基”包括被一個或多個氨基所取代的C_1-10直鏈或支鏈烷基基團。其中一些實施例是，氨基烷基是被一個或多個氨基基團所取代的C_1-6“較低級的氨基烷基”，這樣的實例包括，但並不限於，氨甲基，氨乙基，氨丙基，氨丁基和氨己基。

在本發明中所使用的術語“不飽和的”表示基團中含有一個或多個不飽和度。

術語“包含”為開放式表達，即包括本發明所指明的內容，但並不排除其 他方面的內容。

除非其他方面表明，本發明所描述的結構式包括所有的同分異構形式(如對映異構，非對映異構，和幾何異構(或構象異構))：例如含有不對稱中心的R、S構型，雙鍵的(Z)、(E)異構體，和(Z)、(E)的構象異構體。因此，本發明的化合物的單個立體化學異構體或其對映異構體，非對映異構體，或幾何異構體(或構象異構體)的混合物都屬於本發明的範圍。

本發明所使用的術語“互變異構體”或“互變異構形式”表示具有不同能量的結構同分異構體可以越過低能壘，從而互相轉化。譬如，質子互變異構體(即質子移變)包括通過質子遷移進行互變，如酮-烯醇式互變和亞胺-烯胺同分異構化作用。化合價互變異構體包括通過一些成鍵電子重組而進行互變。

除非其他方面表明，本發明的化合物的所有互變異構形式都包含在本發明的範圍之內。另外，除非其他方面表明，本發明所描述的化合物的結構式包括一個或多個不同的原子的富集同位素。

本發明所使用的術語“前藥”，代表一個化合物在體內轉化為式(I)或式(II)所示的化合物。這樣的轉化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經酶轉化為母體結構的影響。本發明前體藥物類化合物可以是酯，在現有的發明中酯可以作為前體藥物的有苯酯類，脂肪族(C_1-24)酯類，醯氧基甲基酯類，碳酸酯，氨基甲酸酯類和氨基酸酯類。例如本發明裡的一個化合物包含羥基，即可以將其醯化得到前體藥物形式的化合物。其他的前體藥物形式包括磷酸酯，如這些磷酸酯類化合物是經母體上的羥基磷酸化得到的。關於前體藥物完整的討論可以參考以下文獻：T.Higuchi and V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems,Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series,Edward B.Roche,ed.,Bioreversible Carriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987,J.Rautio et al.,Prodrugs：Design and Clinical Applications,Nature Review Drug Discovery,2008,7,255-270,and S.J.Hecker et al.,Prodrugs of Phosphates and Phosphonates,Journal of Medicinal Chemistry,2008,51，2328-2345。

“代謝產物”是指具體的化合物或其鹽在體內通過代謝作用所得到的產 物。一個化合物的代謝產物可以通過所屬領域公知的技術來進行鑒定，其活性可以通過如本發明所描述的那樣採用試驗的方法進行表徵。這樣的產物可以是通過給藥化合物經過氧化，還原，水解，醯氨化，脫醯氨作用，酯化，脫脂作用，酶裂解等等方法得到。相應地，本發明包括化合物的代謝產物，包括將本發明的化合物與哺乳動物充分接觸一段時間所產生的代謝產物。

本發明中立體化學的定義和慣例的使用通常參考以下文獻：S.P.Parker,Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；and Eliel,E.and Wilen,S.,"Stereochemistry of Organic Compounds",John Wiley & Sons,Inc.,New York,1994.本發明的化合物可以包含不對稱中心或手性中心，因此存在不同的立體異構體。本發明的化合物所有的立體異構形式，包括但絕不限於，非對映體，對映異構體，阻轉異構體，和它們的混合物，如外消旋混合物，組成了本發明的一部分。很多有機化合物都以光學活性形式存在，即它們有能力旋轉平面偏振光的平面。在描述光學活性化合物時，首碼D、L或R、S用來表示分子手性中心的絕對構型。首碼d、l或(+)、(-)用來命名化合物平面偏振光旋轉的符號，(-)或l是指化合物是左旋的，首碼(+)或d是指化合物是右旋的。這些立體異構體的化學結構是相同的，但是它們的立體結構不一樣。特定的立體異構體可以是對映體，異構體的混合物通常稱為對映異構體混合物。50：50的對映體混合物被稱為外消旋混合物或外消旋體，這可能導致化學反應過程中沒有立體選擇性或立體定向性。術語“外消旋混合物”和“外消旋體”是指等摩爾的兩個對映異構體的混合物，缺乏光學活性。

術語“互變異構體”或“互變異構的形式”是指不同能量的結構的同分異構體可以通過低能壘互相轉化。例如質子互變異構體(即質子移變的互變異構體)包括通過質子遷移的互變，如酮式-烯醇式和亞胺-烯胺的同分異構化作用。原子價(化合價)互變異構體包括重組成鍵電子的互變。

本發明所使用的“藥學上可接受的鹽”是指本發明的化合物的有機鹽和無機鹽。藥學上可接受的鹽在所屬領域是為我們所熟知的，如文獻：S.M.Berge et al.,describe pharmaceutically acceptable salts in detail in J. Pharmaceutical Sciences,1977,66：1-19.所記載的。藥學上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但並不限於，與氨基基團反應形成的無機酸鹽有鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，高氯酸鹽，和有機酸鹽如乙酸鹽，草酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，丙二酸鹽，或通過書籍文獻上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽，藻酸鹽，抗壞血酸鹽，天冬氨酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重硫酸鹽，硼酸鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環戊基丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，反丁烯二酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，葡萄糖酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基-乙磺酸鹽，乳糖醛酸鹽，乳酸鹽，月桂酸鹽，月桂基硫酸鹽，蘋果酸鹽，丙二酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，撲酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，特戊酸鹽，丙酸鹽，硬脂酸鹽，硫氰酸鹽，對甲苯磺酸鹽，十一酸鹽，戊酸鹽，等等。通過適當的堿得到的鹽包括鹼金屬，鹼土金屬，銨和N⁺(C_1-4烷基)₄的鹽。本發明也擬構思了任何所包含N的基團的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產物可以通過季銨化作用得到。鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉，鋰，鉀，鈣，鎂，等等。藥學上可接受的鹽進一步包括適當的、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物，氫氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C_1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。

本發明的“溶劑化物”是指一個或多個溶劑分子與本發明的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但並不限於，水，異丙醇，乙醇，甲醇，二甲亞碸，乙酸乙酯，乙酸，氨基乙醇。術語“水合物”是指溶劑分子是水所形成的締合物。

術語“保護基團”或“Pg”是指一個取代基與別的官能團起反應的時候，通常用來阻斷或保護特殊的功能性。例如，“氨基的保護基團”是指一個取代基與氨基基團相連來阻斷或保護化合物中氨基的功能性，合適的氨基保護基團包括乙醯基，三氟乙醯基，叔丁氧羰基(BOC)，苄氧羰基(CBZ)和9-芴亞甲氧羰基(Fmoc)。相似地，“羥基保護基團”是指羥基的取代基用來阻斷或保護羥基的功能性，合適的保護基團包括乙醯基和甲矽烷基。“羧基保 護基團”是指羧基的取代基用來阻斷或保護羧基的功能性，一般的羧基保護基包括-CH₂CH₂SO₂Ph，氰基乙基，2-(三甲基矽烷基)乙基，2-(三甲基矽烷基)乙氧基甲基，2-(對甲苯磺醯基)乙基，2-(對硝基苯磺醯基)乙基，2-(二苯基膦基)乙基，硝基乙基，等等。對於保護基團一般的描述可參考文獻：T W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley&Sons,New York,1991；and P.J.Kocienski,Protecting Groups,Thieme,Stuttgart,2005.

本發明的化合物的描述

本發明涉及取代的吡唑酮化合物，其藥學上可接受的鹽，及其藥物製劑，對酪氨酸激酶受體，尤其是VEGFR，c-Met，Ron和/或Axl受體介導的疾病或病症的治療有潛在的用途。特別是，本發明涉及一種如式(I)所示的化合物： 或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，氮氧化物，水合物，溶劑化物，代謝產物，藥學上可接受的鹽或它的前藥，其中，式(I)中Q，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶，W，X，Y和Z的定義如下所示。

在一些實施方案，式(I)中：Q為H，NR^aR^b，OR^a，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；W為CR⁷或N；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基，C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b， R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F，Cl，Br，CN，N₃，OR^a，C_1-6烷基，C_1-6鹵代烷基，C_2-6烯基或C_2-6炔基；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為H，C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基或C_6-10芳基，當R¹，R²，R³，R⁵(或R⁴)，R⁶和R⁷同時為H，R⁴(或R⁵)為F時，R^d不為C_3-7雜環基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基和C_6-10芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-6烷基，C_2-6烯基，C_2-6炔基，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a。

在另外一些實施方案，式(I)中各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基，5-10個原子組成的雜芳基，苯基-C_1-2亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基-C_1-2亞烷基，(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，苯基和5-10個原子組成的雜芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-4烯基，C_2-4炔基，OR^a， NR^aR^b，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F或Cl。

在另外一些實施方案，式(I)中各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基，C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-3鹵代烷基，C_1-3烷氧基或C_1-3烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中R^d為H，D，C_1-4烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，當R¹，R²，R³，R⁵(或R⁴)，R⁶和R⁷同時為H，R⁴(或R⁵)為F時，R^d不為C_3-6雜環基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，C_3-6雜環基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-3烷基，C_2-4烯基，C_2-4炔基，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為NH₂或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(I)中各X，Y和Z獨立地為H，D，CH₃，CH₂CH₃，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。

在另外一些實施方案，式(I)中Q為：

在另外一些實施方案，本發明化合物具有式(II)所示結構： 其中，式(II)中Q，X，Y和Z的定義如下所示。

在一些實施方案，式(II)中：Q為NR^aR^b，-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-7雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-7雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基，C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_6-10芳基，5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4 亞烷基和(5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為C_1-6烷基，其中，所述C_1-6烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，OH，NH₂，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為NR^aR^b或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(II)中各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基或苯基，其中，所述C_1-4烷基和苯基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基或C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基和C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。

在另外一些實施方案，式(II)中R^d為Me，Et，n-Pr，i-Pr，n-Bu，i-Bu或t-Bu。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為NH₂或-N(R^c)C(=O)R^d。

在另外一些實施方案，式(II)中各X，Y和Z獨立地為H，D，Me，CH₂D，CHD₂，CD₃，乙基，丙基，異丙基，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。

在另外一些實施方案，式(II)中Q為：

在另外一些實施方案，本發明涉及到以下其中之一的化合物或其立體 異構體，幾何異構體，互變異構體，氮氧化物，水合物，溶劑化物，代謝產物，藥學上可接受的鹽或它的前藥，但絕不限於這些化合物：

本發明還包含本發明的化合物及其藥學上可接受的鹽的應用，即用於生產醫藥產品治療急慢性高增殖性疾病和/或血管發生介導的疾病，包括那些本發明所描述的。本發明的化合物在生產抗癌藥物中的應用。本發明的化合物同樣用於生產一種醫藥用品通過抑制蛋白激酶活性來減輕，阻止，控制或治療疾病。本發明包含藥物組合物，該藥物組合物包括式(I)或式(II)所代表的化合物與至少一個藥學上可接受的載體，輔劑或稀釋劑的結合所需的有效治療用量。

本發明同樣包含治療患者血管發生介導的疾病，或對此病症敏感的方法，該方法包含使用式(I)或式(II)所代表化合物的治療有效量對患者進行治療。

除非其他方面表明，本發明的化合物所有的立體異構體，幾何異構體，互變異構體，氮氧化物，水合物，溶劑化物，代謝產物，鹽和藥學上可接受的前藥都屬於本發明的範圍。

具體地說，鹽是藥學上可接受的鹽。術語“藥學上可接受的”包括物質或組合物必須是適合化學或毒理學地，與組成製劑的其他組分和用於治療的哺乳動物有關。

本發明的化合物的鹽還包括用於製備或純化式(I)或式(II)所示化合物的中間體或式(I)或式(II)所示化合物分離的對映異構體的鹽，但不一定是藥學上可接受的鹽。

如果本發明的化合物是鹼性的，則想得到的鹽可以通過文獻上提供的任何合適的方法製備得到，例如，使用無機酸，如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸和磷酸等等。或者使用有機酸，如乙酸，馬來酸，琥珀酸，扁桃酸，富馬酸，丙二酸，丙酮酸，草酸，羥乙酸和水楊酸；吡喃糖酸，如葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸；α-羥酸，如檸檬酸和酒石酸；氨基酸，如天門冬氨酸和谷氨酸；芳香族酸，如苯甲酸和肉桂酸；磺酸，如對甲苯磺酸，乙磺酸，等等。

如果本發明的化合物是酸性的，則想得到的鹽可以通過合適的方法製備得到，如，使用無機堿或有機堿，如氨(伯氨，仲氨，叔氨)，鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物，等等。合適的鹽包括，但並不限於，從氨基酸得到的有機鹽，如甘氨酸和精氨酸，氨，如伯氨、仲氨和叔氨，和環狀氨，如呱啶，嗎啉和呱嗪等，和從鈉，鈣，鉀，鎂，錳，鐵，銅，鋅，鋁和鋰得到無機鹽。

本發明的化合物的組合物，製劑和給藥

根據另一方面，本發明的藥物組合物的特點包括式(I)或式(II)的化合物，本發明所列出的具體化合物，或實施例1-31的化合物，和藥學上可接受的載體，輔劑，或媒介物。本發明的組合物中化合物的量能有效地可探測地抑制生物標本或患者體內的蛋白激酶。

本發明的化合物存在自由形態，或合適的、作為藥學上可接受的衍生 物。根據本發明，藥學上可接受的衍生物包括，但並不限於，藥學上可接受的前藥，鹽，酯，酯類的鹽，或能直接或間接地根據患者的需要給藥的其他任何加合物或衍生物，本發明其他方面所描述的化合物，其代謝產物或他的殘留物。

像本發明所描述的，本發明藥學上可接受的組合物進一步包含藥學上可接受的載體，輔劑，或賦形劑，這些像本發明所應用的，包括任何溶劑，稀釋劑，或其他液體賦形劑，分散劑或懸浮劑，表面活性劑，等滲劑，增稠劑，乳化劑，防腐劑，固體黏合劑或潤滑劑，等等，適合於特有的目標劑型。如以下文獻所描述的：In Remington：The Science and Practice of Pharmacy,21st edition,2005,ed.D.B.Troy,Lippincott Williams& Wilkins,Philadelphia,and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds.J.Swarbrick and J.C.Boylan,1988-1999,Marcel Dekker,New York，綜合此處文獻的內容，表明不同的載體可應用於藥學上可接受的組合物的製劑和它們公知的製備方法。除了任何常規的載體媒介與本發明的化合物不相容的範圍，例如所產生的任何不良的生物效應或與藥學上可接受的組合物的任何其他組分以有害的方式產生的相互作用，它們的用途也是本發明所考慮的範圍。

可作為藥學上可接受載體的物質包括，但並不限於，離子交換劑，鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白，如人血清蛋白，緩衝物質如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠體矽，三矽酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸脂，蠟，聚乙烯-聚氧丙烯-阻斷聚合體，羊毛脂，糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；澱粉如玉米澱粉和土豆澱粉；纖維素和它的衍生物如羧甲基纖維素鈉，乙基纖維素和乙酸纖維素；樹膠粉；麥芽；明膠；滑石粉；輔料如可哥豆脂和栓劑蠟狀物；油如花生油，棉子油，紅花油，麻油，橄欖油，玉米油和豆油；二醇類化合物，如丙二醇和聚乙二醇；酯類如乙基油酸酯和乙基月桂酸酯；瓊脂；緩衝劑如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；無熱原的水；等滲鹽；林格(氏)溶液；乙醇，磷酸緩衝溶液，和其他無毒的合適的潤滑劑如月桂硫酸鈉和硬脂酸鎂，著 色劑，釋放劑，包衣衣料，甜味劑，調味劑和香料，防腐劑和抗氧化劑。

本發明的組合物可以是口服給藥，注射給藥，噴霧吸入法，局部給藥，經直腸給藥，經鼻給藥，含服給藥，陰道給藥或通過植入性藥盒給藥。此處所使用的術語“經注射的”包括皮下的，靜脈的，肌內的，關節內的，滑膜(腔)內的，胸骨內的，膜內的，眼內的，肝內的，病灶內的，和顱內的注射或輸注技術。優選的組合物為口服給藥，向腹膜內給藥或靜脈注射。本發明的組合物無菌的注射方式可以是水的或油脂性的懸浮液。這些懸浮液可以根據公知技術採用合適的分散劑、濕潤劑和懸浮劑按配方製造。無菌注射劑可以是無菌注射液或懸浮液，是注射無毒的可接受的稀釋劑或溶劑，如1,3-丁二醇溶液。這些可接受的賦形劑和溶劑可以是水，林格溶液和等滲氯化鈉溶液。更進一步地，無菌的非揮發性的油按照慣例可以作為溶劑或懸浮介質。

以此為目的，任何溫和的非揮發性的油可以是合成的單或二葡基甘油二酯。脂肪酸，如油酸和它的甘油酯衍生物可用於血管注射劑的製備，作為天然的藥學上可接受的油脂，如橄欖油或蓖麻油，特別是它們的聚氧乙烯衍生物。這些油溶液或懸浮液可以包含長鏈醇稀釋劑或分散劑，如羧甲基纖維素或相似分散劑，一般用於藥學上可接受劑型的藥物製劑包括乳化液和懸浮液。其他常用的表面活性劑，如吐溫類，司盤類和其他乳化劑或生物藥效率的強化劑，一般用於藥學上可接受的固體，液體，或其他劑型，並可以應用於目標藥物製劑的製備。

本發明藥學上可接受的組合物可以是以任何可接受的口服劑型進行口服給藥，其中包括，但並不限於，膠囊，片劑，水製懸浮液或溶液。關於片劑口服使用，載體一般包括乳糖和玉米澱粉。潤滑劑，如硬脂酸鎂，都典型地被添加。對於膠囊口服給藥，合適的稀釋劑包括乳糖和幹的玉米澱粉。當口服給藥為水製懸浮液時，其有效成分由乳化劑和懸浮劑組成。如果想得到這些劑型，某些甜味劑、調味劑或著色劑也可以被添加。

另外，本發明藥學上可接受的組合物可以以栓劑的形式直腸給藥。這些可以通過將試劑與合適的非灌注輔藥混合製備而成，這種輔藥在室溫下為固體但在直腸的溫度下則為液體，從而在直腸中熔化並釋放藥物。這樣 的物質包括可哥豆脂，蜂蠟，和聚乙二醇類。本發明藥學上可接受的組合物可以是局部給藥，特別是局部用藥時，涉及到區域或器官的治療目標容易達到，如眼、皮膚或下腸道的疾病。合適的局部用藥製劑可以製備得到並應用於這些領域或器官。

直腸栓劑(見以上內容)或合適的灌腸劑可以應用於下部腸道的局部用藥。局部皮膚斑也可以這樣用藥。對於局部用藥，藥學上可接受的組合物可以按製劑方法製備成合適的軟膏，該軟膏包含活性成分懸浮於或溶解於一個或多個載體。本發明局部給藥的載體化合物包括，但並不限於礦物油，液體石蠟，白凡士林，丙二醇，聚氧乙烯，聚氧丙烯化合物，乳化蠟和水。另外，藥學上可接受的組合物可以製備成合適的洗劑或乳劑，該洗劑或乳劑包含活性成分懸浮於或溶於一個或多個藥學上可接受的載體。合適的載體包括，但並不限於，礦物油，司盤-60(脫水山梨醇單硬脂酸酯)，吐溫60(聚山梨酯60)，十六烷基酯蠟，棕櫚醇，2-辛基十二烷醇，苯甲醇和水。

對於眼用的、藥學上可接受的組合物可以製備成製劑，如等滲的微粒化懸浮液，pH調節的無菌鹽水或其他水溶液，優選地，等滲溶液和pH調節的無菌鹽水或其他水溶液，可以添加消毒防腐劑如苯紮氯銨。另外，對於眼用的，藥學上可接受的組合物可以按製劑配方製備成軟膏如凡士林油。本發明藥學上可接受的組合物可以通過鼻的氣溶劑或吸入劑進行給藥。這樣的組合物可以根據製劑配方的公知技術製備得到，或可以製備成鹽溶液，使用苯甲醇或其他合適的防腐劑、吸收促進劑、碳氟化合物或其他常規增溶劑或分散劑來提高生物利用度。

口服給藥的液體劑型包括，但並不限於，藥學上可接受的乳劑，微乳劑，溶液，懸浮液，糖漿劑和酏劑。除活性化合物外，液體劑型可以包含公知的一般的惰性稀釋劑，例如，水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑，如乙醇，異丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲醯胺，油脂(特別是棉籽，落花生，玉米，微生物，橄欖，蓖麻和麻油)，甘油，2-四氫呋喃甲醇，聚乙二醇，去水山梨糖醇脂肪酸酯，以及它們的混合物。除惰性的稀釋劑之外，口服組合物也可以包含 輔劑如濕潤劑，乳化劑或懸浮劑，甜味劑，調味劑和芳香劑。

注射劑，如無菌注射液或油脂性的懸浮液可以根據公知技術採用合適的分散劑、濕潤劑和懸浮劑按製劑配方製備得到。無菌注射劑可以是無毒的經注射地可接受的稀釋劑或溶劑製成的無菌注射液、懸浮液或乳液，例如，1,3-丁二醇溶液。可接受的賦形劑和溶劑可以是水，林格(氏)溶液，U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的非揮發性的油按照慣例作為溶劑或懸浮介質。以此為目的任何溫和的非揮發性的油可以包括合成的單或二葡基甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可以應用於注射劑。

注射劑可以是無菌的，如通過細菌防衛篩檢程式過濾，或以無菌固體組合物的形式摻入滅菌劑，在使用前滅菌劑可以溶解於或分散於消毒水或其他無菌注射介質中。為了延長本發明的化合物的效果，通常需要通過皮下注射或肌內注射來減緩化合物的吸收。這樣可以實現利用液體懸浮液解決晶體或非晶體物質水溶性差的問題。化合物的吸收率取決於它的溶出度，依次取決於晶粒大小和晶體形狀。另外，可以通過化合物在油類賦形劑中溶解或分散來完成化合物注射給藥的延遲吸收。

注射劑儲藏形式是通過可生物降解的聚合物，如多乳酸-聚乙醇酸交酯形成化合物的微膠囊基質完成的。化合物的控釋比例取決於化合物形成聚合物的比例和特殊聚合物的性質。其他可生物降解聚合物包括聚(正酯類)和聚(酸酐)。注射劑儲藏形式也可以通過化合物嵌入與身體組織相容的脂質體或微乳劑製備得到。

其中一些實施例是，直腸或陰道給藥的組合物為栓劑，栓劑可以通過將本發明的化合物與合適的非灌注的輔料或載體混合來製備得到，如可哥豆脂，聚乙二醇，或栓劑蠟狀物，它們在室溫為固體但在體溫下則為液體，因此在陰道或鞘膜腔內便熔化釋放活性化合物。

口服給藥的固體劑型包括膠囊，片劑，丸劑，粉劑和粒劑。在這些劑型中，活性化合物與至少一種藥學上可接受的惰性賦形劑或載體混合，如檸檬酸鈉或磷酸鈣或充填劑或a)填充劑如澱粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和矽酸，b)黏合劑如羧甲基纖維素，藻酸鹽，明膠，聚乙烯吡咯酮，蔗糖和阿拉伯膠，c)保濕劑如甘油，d)崩解劑如瓊脂，碳酸鈣，土豆澱粉或木 薯澱粉，海藻酸，某些矽酸鹽和碳酸鈉，e)阻滯劑溶液如石蠟，f)吸收促進劑如季胺類化合物，g)濕潤劑如十六醇和單硬脂酸甘油酯，h)吸收劑如白陶土和皂土，i)潤滑劑如滑石粉，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，月桂硫酸鈉，及它們的混合物。至於膠囊，片劑和丸劑，這些劑型可以包含緩衝劑。

相似類型的固體組合物可以是填充劑充滿於軟的或硬的膠囊，所使用的輔料有乳糖和高分子的聚乙二醇等等。固體劑型像片劑，錠劑，膠囊，丸劑和粒劑可以通過包衣、加殼如腸溶包衣和其他藥物製劑上公知的包衣方法製備得到。它們可以任選地包含遮光劑，或優選地，在腸道的某一部分，任意地，以延遲的方法釋放組合物中的唯一活性成分。如植入組合物可以包含多聚體物質和蠟狀物。

活性化合物可以與本發明所描述的一個或多個賦形劑一起形成微膠囊劑型。固體劑型像片劑、錠劑、膠囊、丸劑和粒劑可以通過包衣或加殼，如腸溶包衣、控釋包衣和其他公知的藥物製劑方法。在這些固體劑型中，活性化合物可以與至少一種惰性稀釋劑混合，如蔗糖，乳糖或澱粉。這樣的劑型作為一般的應用也可以包含除惰性稀釋劑之外的添加物質，如壓片潤滑劑和其他壓片助劑如硬脂酸鎂和微晶纖維素。至於膠囊，片劑和丸劑，這些劑型可以包含緩衝劑。它們可以任選地包含鎮靜劑，或優選地，在腸道的某一部分，以任意延遲的方法釋放組合物中的唯一活性成分。可應用的植入組合物可以包括，但並不限於，多聚體和蠟狀物。

本發明的化合物通過局部的或經皮膚給藥的劑型包括軟膏，糊劑，乳劑，洗劑，凝膠劑，粉劑，溶液，噴霧劑，吸入劑，貼片。活性成分在無菌的條件下與藥學上可接受的載體和任何必需的防腐劑或必需的緩衝劑相混合。眼科的藥物製劑，滴耳劑和滴眼劑都是本發明考慮的範圍。另外，本發明還考慮透皮貼劑的應用，它在控制化合物傳遞到體內方面有著更多的優點，這樣的劑型可以通過溶解或分散化合物到合適的介質中來製備得到。吸收促進劑可以增加化合物穿過皮膚的流量，通過速率控制薄膜或將化合物分散於聚合體基質或明膠來控制其速率。

本發明的化合物優選地按製劑配方製備成劑量單位型以減輕給藥量和 劑量的均勻性。術語“劑量單位型”在此處是指患者得到適當治療所需藥物的物理分散單位。然而，應瞭解本發明的化合物或組合物每日總的用法將通過主治醫生根據可靠的醫學範圍判斷來確定。具體的有效劑量水準對於任何一個特殊的患者或有機體將取決於許多因素包括被治療的病症和病症的嚴重性，具體化合物的活性，所用的具體組合物，患者的年齡、體重、健康狀況、性別和飲食習慣，給藥時間，給藥途徑和所用具體化合物的排泄速率，治療的持續時間，藥物應用於聯合用藥或與有特效的化合物聯用，以及其他一些藥學領域公知的因素。

可以結合載體物質產生單個劑型組合物的本發明的化合物的用量的改變取決於主治和特殊的給藥模式。其中一些實施例是，組合物可以按製劑方法製備成劑量在0.01-200mg/kg體重/天的抑制劑，通過患者接受組合物的量來進行給藥。

本發明的化合物可以以僅有的藥學試劑或結合一個或多個其他附加治療(藥學的)劑來給藥，其中聯合用藥引起可接受的不良反應，這對於高增生性疾病如癌症的治療具有特殊的意義。在這種情況下，本發明的化合物可以結合已知的細胞毒素劑，單個轉導抑制劑或其他抗癌試劑，以及它們的混合物和組合。像本發明所使用的，附加治療劑正常給藥治療特殊的疾病，就是已知的“合適地治療疾病”。本發明所使用的“附加治療劑”包括化學治療藥物或其他抗增殖的藥物可以結合本發明的化合物治療增殖性疾病或癌症。

化學治療藥物或其他抗增殖藥物包括組蛋白去乙醯化酶(HDAC)抑制劑，包括但並不限於，SAHA，MS-275，MGO103，以及那些以下專利所描述的化合物：WO 2006/010264,WO 03/024448,WO 2004/069823,US 2006/0058298,US 2005/0288282,WO 00/71703,WO 01/38322,WO 01/70675,WO 03/006652,WO 2004/035525,WO2005/030705,WO 2005/092899，和脫甲基化試劑包括，但並不限於，5-雜氮-2′-去氧胞苷(5-aza-dC)、阿紮胞苷(Vidaza)、地西他濱(Decitabine)和以下文獻所描述的化合物：US 6,268137,US 5,578,716,US5,919,772,US 6,054,439,US 6,184,211，US 6,020,318,US 6,066,625,US 6,506,735,US 6,221,849,US 6,953,783,US 11/393,380。

另外一些實施例是，化學治療藥物或其他抗增殖藥物可以結合本發明的化合物治療增殖性疾病和癌症。已知的化學治療藥物包括，但並不限於，其他療法或抗癌劑可以聯合本發明的抗癌劑與包括外科，放射療法(少許例子如γ輻射，中子束放射療法，電子束放射療法，質子療法，近距離放射療法和系統放射性同位素療法)，內分泌療法，紫杉烷類(紫杉醇，多西紫杉醇等等)，鉑的衍生物，生物反應調節劑(干擾素，白細胞間素，腫瘤壞死因數(TNF)，TRAIL受體靶向作用和媒介物)，過熱和冷凍療法，稀釋任何不良反應的試劑(如止吐藥)，和其他認可的化學治療藥物，包括但並不限於，烷化藥物(氮芥，苯丁酸氮芥，環磷醯胺，苯丙氨酸氮芥，異環磷醯胺)，抗代謝物(甲氨蝶呤，培美曲塞(Pemetrexed)等等)，嘌呤拮抗劑和嘧啶拮抗劑(6-巰嘌呤(6-Mercaptopurine)，5-氟尿嘧啶，Cytarabile，吉西他濱(Gemcitabine))，紡錘體抑制劑(長春堿，長春新堿，長春瑞濱，紫杉醇)，鬼臼毒素(依託泊苷，伊立替康(Irinotecan)，托泊替康(Topotecan))，抗生素(多柔比星(Doxorubicin)，博萊黴素(Bleomycin)，絲裂黴素(Mitomycin))，亞硝基脲(卡莫司汀(Carmustine)，洛莫司汀(Lomustine))，無機離子(順鉑，卡鉑)，細胞分裂週期抑制劑(KSP通過有絲分裂驅動蛋白抑制劑，CENP-E和CDK抑制劑)，酵素(天門冬醯胺酶)，荷爾蒙(它莫昔芬(Tamoxifen)，亮丙瑞林(Leuprolide)，氟他胺(Flutamide)，甲地孕酮(Megestrol))，格列衛(GLEEVEC^®)，阿黴素(Adriamycin)，地塞米松(Dexamethasone)，和環磷醯胺。抗血管生成因數(阿瓦斯丁(Avastin)及其他)。單抗類(貝利木單抗(Belimumab,BENLYSTA^®)，Brentuximab(ADCETRIS^®)，西妥昔單抗(Cetuximab,ERBITUX^®)，吉妥單抗(Gemtuzumab,MYLOTARG^®)，伊匹單抗(Ipilimumab,YERVOY^®)，奧法木單抗(Ofatumumab,ARZERR^®)，帕尼單抗(Panitumumab,VECTIBIX^®)，雷珠單抗(Ranibizumab,LUCENTIS^®)，利妥昔單抗(Rituximab,RITUXAN^®)，托西莫單抗(Tositumomab,BEXXAR^®)，曲妥珠單抗(Trastuzumab,HERCEPTIN^®))。激酶抑制劑(伊馬替尼(Imatinib,GLEEVEC^®)，舒尼替尼(Sunitinib,SUTENT^®)，索拉非尼(Sorafenib,NEXAVAR^®)，西妥昔單抗(Cetuximab,ERBITUX^®)，曲妥珠單抗 (Trastuzumab,HERCEPTIN^®)，厄洛替尼(Erlotinib,TARCEVA^®))，達沙替尼(Dasatinib,SPRYCEL^®)，tivozanib，dovitinib，axitinib，motesanib，帕唑帕尼(pazopanib)，吉非替尼(gefitinib,IRESSA^®)，cediranib，brivanib，替拉替尼(telatinib)，masitinib，來那替尼(neratinib)，lenvatinib,ruxolitinib,linifanib,linsitinib,crizotinib,regorafenib,ponatinib，博舒替尼(bosutinib)，塞卡替尼(saracatinib),afatinib,amuvatinib,ponatinib,quizartinib，威羅菲尼(vemurafenib,ZELBORAF^®)，凡德他尼(Vandetanib,CAPRELSA^®),olaparib,veliparib,iniparib，易瑞沙(Iressa)及其他)。藥物抑制或啟動癌症的途徑如mTOR，HIF(缺氧誘導因數)途徑及其他。癌症治療較廣泛的論壇見http：//www.nci.nih.gov/，FDA認可的腫瘤學藥物清單見http：//www.fda.gov/cder/cancer/druglist-rame.htm，和默克手冊，第十八版.2006，所有的內容都是結合了參考文獻。

另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合細胞毒素抗癌劑。這樣的抗癌劑可以在第十三版默克索引(2001)裡找到。這些抗癌劑包括，但絕不限於，門冬醯胺酶(Asparaginase)，博來黴素(Bleomycin)，卡鉑，卡莫司汀(Carmustine)，苯丁酸氮芥(Chlorambucil)，順鉑，L-天冬醯胺酶(Colaspase)，環磷醯胺，阿糖胞苷(Cytarabine)，達卡巴嗪(Dacarbazine)，放線菌素D(Dactinomycin)，柔紅黴素(Daunorubicin)，阿黴素(多柔比星)，表柔比星(Epirubicin)，依託泊苷(Etoposide)，5-氟脲嘧啶，六甲基三聚氰胺，羥基脲，異環磷醯胺，伊立替康，亞葉酸，環己亞硝脲，氮芥，6-巰基嘌呤，美司鈉(Mesna)，甲氨蝶呤(Methotrexate)，絲裂黴素C(Mitomycin C)，米托蒽醌(Mitoxantrone)，潑尼松龍(Prednisolone)，潑尼松(Prednisone)，丙卡巴肼(Procarbazine)，雷洛昔芬(Raloxifen)，鏈唑黴素(Streptozocin)，他莫昔芬(Tamoxifen)，硫鳥嘌呤(Thioguanine)，托泊替康，長春堿，長春新堿，長春地辛。

與本發明的化合物聯合用藥的其他合適的細胞毒類藥物包括，但並不限於，這些公認地應用於腫瘤性疾病治療的化合物，如以下文獻中所描述的：Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics(Ninth Edition,1996,McGraw-Hill.)；這些抗癌劑包括，但絕不限於，氨魯米特 (Aminoglutethimide)，L-門冬醯胺酶，硫唑嘌呤，5-氮雜胞苷，克拉屈濱(Cladribine)，白消安(Busulfan)，己烯雌酚，2'，2'-二氟去氧胞二磷膽鹼，多西紫杉醇，赤羥基壬烷基腺嘌呤(Erythrohydroxynonyladenine)，乙炔雌二醇，5-氟尿嘧啶去氧核苷，5-氟去氧尿苷單磷酸，磷酸氟達拉濱(Fludarabine phosphate)，氟甲睾酮(Fluoxymesterone)，氟他胺(Flutamide)，己酸羥孕酮，伊達比星(Idarubicin)，干擾素，醋酸甲羥孕酮，醋酸甲地孕酮，美法侖(Melphalan)，米托坦(Mitotane)，紫杉醇，噴司他丁(Pentostatin)，N-磷酸乙醯基-L-天冬氨酸(PALA)，普卡黴素(Plicamycin)，甲基環己亞硝脲(Semustine)，替尼泊苷(Teniposide)，丙酸睾丸酮，塞替派(Thiotepa)，三甲基三聚氰胺，尿核苷和長春瑞濱。

其他合適的與本發明的化合物聯合應用的細胞毒素類抗癌劑包括新發現的細胞毒素物質，其中包括，但並不限於，奧沙利鉑(Oxaliplatin)，吉西他濱(Gemcitabine)，卡培他濱(Capecitabine)，大環內酯類抗腫瘤藥及其天然或合成的衍生物，替莫唑胺(Temozolomide)(Quinn et al.,J.Clin.Oncology,2003,21(4),646-651)，托西莫單抗(tositumomab,BEXXAR^®)，Trabedectin(Vidal et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3181)，和驅動蛋白紡錘體蛋白抑制劑Eg5(Wood et al.,Curr.Opin.Pharmacol.2001,1,370-377)。

另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合其他信號轉導抑制劑。有趣的是信號轉導抑制劑把EGFR家族作為目標，如EGFR，HER-2和HER-4(Raymond et al.,Drugs, 2000,60(Suppl.l),15-23；Harari et al.,Oncogene,2000,19(53),6102-6114)和它們各自的配體。這樣的試劑包括，但絕不限於，抗體療法如赫賽汀(曲妥單抗)，西妥昔單抗(Erbitux)，和帕妥珠單抗(Pertuzumab)。這樣的療法也包括，但絕不限於，小分子激酶抑制劑如易瑞沙(Gefitinib)，它賽瓦(Erlotinib)，Tykerb(Lapatinib)，CANERTINIB(CI1033)，AEE788(Traxler et al.,Cancer Research,2004,64,4931-4941)。

另外一些實施例是，本發明的化合物結合其他信號轉導抑制劑靶向作用於分裂激酶領域家族的受體激酶(VEGFR,FGFR,PDGFR,flt-3,c-kit, c-fins，等等)，和它們各自的配體。這樣的試劑包括，但並不限於，抗體如貝伐單抗(Avastin)。這樣的試劑包括，但絕不限於，小分子抑制劑如Gleevec/Imanitib，Sprycel(Dasatinib)，Tasigna/Nilotinib，Nexavar(Vandetanib)，Vatalanib(PTK787/ZK222584)(Wood et al.,Cancer Res. 2000,60(8),2178-2189),Telatinib/BAY-57-9352,BMS-690514,BMS-540215,Axitinib/AG-013736,Motesanib/AMG706,Sutent/Sunitinib/SU-11248,ZD-6474(Hennequin et al.,92nd AACR Meeting,New Orleans,Mar.24-28,2001,abstract 3152),KRN-951(Taguchi et al.,95th AACR Meeting,Orlando,FIa,2004,abstract 2575),CP-547,632(Beebe et al.,Cancer Res.2003,63,7301-7309),CP-673,451(Roberts et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 3989),CHIR-258(Lee et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 2130),MLN-518(Shen et al.,Blood,2003,102,11,abstract 476)。

另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合其他信號轉導抑制劑。有趣的是信號轉導抑制劑把EGFR家族作為目標，如EGFR，HER-2和HER-4(Raymond et al.,Drugs, 2000,60(Suppl.l),15-23；Harari et al.,Oncogene,2000,19(53),6102-6114)和它們各自的配體。這樣的試劑包括，但絕不限於，抗體療法如曲妥珠單抗(Trastuzumab,HERCEPTIN^®)，西妥昔單抗(Cetuximab,ERBITUX^®)，伊匹單抗(Ipilimumab,YERVOY^®)和帕妥珠單抗(Pertuzumab)。這樣的療法也包括，但絕不限於，小分子激酶抑制劑如伊馬替尼(Imatinib,GLEEVEC^®)，舒尼替尼(Sunitinib,SUTENT^®)，索拉非尼(Sorafenib,NEXAVAR^®)，厄洛替尼(Erlotinib,TARCEVA^®)，吉非替尼(Gefitinib,IRESSA^®)，達沙替尼(Dasatinib,SPRYCEL^®)，尼洛替尼(Nilotinib,TASIGNA^®)，拉帕替尼(Lapatinib,TYKERB^®)，克卓替尼(Crizotinib,XALKORI^®)，Ruxolitinib(JAKAFI^®)，Vemurafenib(ZELBORAF^®)，Vandetanib(CAPRELSA^®)，Pazopanib(VOTRIENT^®)，阿法替尼(Afatinib)，alisertib,amuvatinib，阿西替尼(axitinib)，波舒替尼(bosutinib)，brivanib，canertinib，cabozantinib，西地尼布(cediranib)，dabrafenib，dacomitinib，，danusertib，dovitinib，foretinib，ganetespib，ibrutinib，iniparib，lenvatinib，linifanib，linsitinib，馬賽替尼(masitinib)， momelotinib，莫替沙尼(motesanib)，來那替尼(neratinib)，niraparib，oprozomib，olaparib，pictilisib，ponatinib，quizartinib，regorafenib，rigosertib，rucaparib，塞卡替尼(saracatinib)，saridegib，tandutinib，tasocitinib，telatinib，tivantinib，tivozanib，tofacitinib，trametinib，vatalanib，veliparib，vismodegib，volasertib，BMS-540215，BMS777607，JNJ38877605，TKI258，GDC-0941(Folkes,et al.,J.Med.Chem.,2008,51,5522)，BZE235，等等。

另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合組蛋白脫乙醯基酶抑制劑。這樣的試劑包括，但絕不限於，辛二醯苯胺氧肟酸(SAHA)，LAQ-824(Ottmann et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004,23,abstract 3024),LBH-589(Beck et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3025),MS-275(Ryan et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research, 2004,45,abstract 2452),FR-901228(Piekarz et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3028)和MGCDOI 03(US 6,897,220)。

另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合其他抗癌劑如蛋白酶體抑制劑和m-TOR抑制劑。這些包括，但絕不限於，硼替佐米(Bortezomib)(Mackay et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,Abstract 3109)，和CCI-779(Wu et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 3849)。本發明的化合物還可以結合其他抗癌劑如拓撲異構酶抑制劑，包括但絕不限於喜樹堿。

那些附加治療劑可以與包含本發明的化合物的組合物分開給藥，作為多給藥方案的一部分。或者，那些治療劑可以是單劑型的一部分，與本發明的化合物混合在一起形成單個組合物。如果給藥作為多給藥方案的一部分，兩個活性劑可以同時連續地或在一段時間內互相傳遞，從而得到目標試劑活性。

可以結合載體物質產生單劑型的化合物和附加治療劑的用量(那些包含一個附加治療劑的組合物像本發明所描述的)的改變取決於主治和特殊給藥模式。正常地，本發明的組合物附加治療劑的量將不超過組合物包含治療劑作為唯一的活性劑的正常給藥的量。另一方面，現公開的組合物附 加治療劑的量的範圍大約是現有組合物正常量的50%-100%，包含的試劑作為唯一活性治療劑。在那些包含附加治療劑的組合物中，附加治療劑將與本發明的化合物起協同作用。

本發明的化合物和組合物的用途

本發明的藥物組合物的特徵包括式(I)或式(II)所示的化合物或本發明所列出的化合物，以及藥學上可接受的載體，輔劑或媒介物。本發明的組合物中化合物的量可以有效地可探測地抑制蛋白激酶如VEGFR，c-Met，Ron或Axl的活性。本發明化合物將作為抗腫瘤藥物對患者進行治療或減小VEGFR，c-Met，Ron和/或Axl受體信號回應的有害作用。

本發明的化合物將應用於，但絕不限於，使用本發明的化合物或組合物的有效量對患者給藥來預防或治療患者增殖性疾病。這樣的疾病包括癌症，尤其是轉移癌，動脈粥樣硬化，和肺纖維化。

本發明的化合物將應用於瘤的治療包括癌症和轉移癌，進一步包括但並不限於，癌症如膀胱癌，乳腺癌，結腸癌，腎癌，肝癌，肺癌(包括小細胞肺癌)，食道癌，膽囊癌，卵巢癌，胰腺癌，胃癌，宮頸癌，甲狀腺癌，前列腺癌，和皮膚癌(包括鱗狀細胞癌)；淋巴系統造血腫瘤(包括白血病，急性淋巴囊腫性白血病，急性成淋巴細胞性白血病，B細胞淋巴瘤，T細胞淋巴瘤，何傑金(氏)淋巴瘤，非何傑金(氏)淋巴瘤，多毛細胞白血病和伯基特淋巴瘤)；骨髓系統造血腫瘤(包括急慢性骨髓性粒細胞性白血病，骨髓增生異常綜合症，和前髓細胞白血病)；間充質細胞起源的腫瘤(包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤，和其他肉瘤，如軟組織和軟骨)；中樞末梢神經系統瘤(包括星形細胞瘤，成神經細胞瘤，神經膠質瘤，和神經鞘瘤)；和其他腫瘤(包括黑素瘤，精原細胞瘤，畸胎癌，骨肉瘤，xenoderoma pigmentosum，keratoctanthoma，甲狀腺濾泡瘤和卡波濟(氏)肉瘤)。

本發明的化合物還可用於治療眼科病症例如角膜移植排斥，眼的新生血管形成，視網膜新生血管形成包括損傷或感染後的新生血管形成；糖尿病性視網膜病；晶狀體後纖維組織增生症，和新生血管性青光眼；視網膜缺血；玻璃體出血；潰瘍性疾病如胃潰瘍；病理學的但非惡性狀況如血管瘤，包括嬰兒血管內皮細胞瘤，鼻咽和無血管性骨壞死的血管纖維瘤；雌 性生殖系統紊亂如子宮內膜異位。這些化合物同樣也用於治療水腫和脈管通透性過高的狀況。

本發明的化合物可以用於處理與糖尿病相關的情況如糖尿病性視網膜病和微血管病。本發明的化合物同樣用於癌症患者血流量減少的情況。本發明的化合物對患者腫瘤轉移減少也有有益效果。

本發明的化合物除了對人類治療有益以外，還可應用於獸醫治療寵物、引進品種的動物和農場的動物，包括哺乳動物，齧齒類動物等等。另外一些動物的實例包括馬、狗和貓。在此，本發明的化合物包括其藥學上可接受的衍生物。

在將複數形式應用於化合物，鹽等的情況下，其也意指單一的化合物，鹽等。

包含本發明的化合物或組合物給藥的治療方法，進一步包括對患者附加治療劑(聯合治療)的給藥，其中附加治療劑選自：化學療法、抗增殖劑或抗炎劑，其中附加治療劑適用於所治療的疾病，且附加治療劑可以和本發明的化合物或組合物聯合給藥，本發明的化合物或組合物作為單個劑型，或分開的化合物或組合物作為多劑型的一部分。附加治療劑可以與本發明的化合物同時給藥或不同時給藥。後者的情況，給藥可以錯開進行如6小時，12小時，1天，2天，3天，1周，2周，3周，1個月或2個月進行。

本發明同樣包含對表達VEGFR，c-Met，Ron或Axl的細胞生長抑制的方法，此方法包括本發明的化合物或組合物與細胞接觸，從而抑制細胞生長。能被抑制生長的細胞包括：乳腺癌細胞，結腸直腸癌細胞，肺癌細胞，乳頭狀癌細胞，前列腺癌細胞，淋巴瘤細胞，結腸癌細胞，胰腺癌細胞，卵巢癌細胞，子宮頸癌細胞，中樞神經系統癌細胞，成骨肉瘤細胞，腎癌細胞，肝細胞癌細胞，膀胱癌細胞，胃癌細胞，頭或頸鱗癌細胞，黑色素瘤細胞和白血病細胞。

本發明提供了在生物標本內抑制VEGFR，c-Met，Ron或Axl激酶活性的方法，此方法包括將本發明的化合物或組合物與生物標本接觸。本發明所使用的術語“生物標本”是指活體外部的標本，包括但絕不限於，細胞培養 或細胞提取；從哺乳動物或其提取物得到的活組織檢查物質；血液，唾液，尿液，糞便，精液，眼淚，或其他活組織液體物質及其提取物。抑制生物標本中激酶活性，特別是VEGFR，c-Met，Ron和Axl激酶活性，可用於所屬領域技術人員公知的多種用途。這樣的用途包括，但絕不限於，輸血法，器官移植，生物標本儲藏和生物鑒定。

本發明的化合物或藥學上可接受的組合物的“有效量”或“有效劑量”是指處理或減輕一個或多個本發明所提到病症的嚴重度的有效量。根據本發明的方法，化合物和組合物可以是任何給藥量和任何給藥途徑來有效地用於處理或減輕疾病的嚴重程度。必需的準確的量將根據患者的情況而改變，這取決於種族，年齡，患者的一般條件，感染的嚴重程度，特殊的因素，給藥方式，等等。化合物或組合物可以和一個或多個其他治療劑聯合給藥，如本發明所討論的。

本發明的化合物或其藥物組合物可以應用於可植入的內科裝置的包衣，如假體，人工瓣膜，人造血管，莖和導尿管。例如，脈管莖，已經被用於克服再狹窄(損傷後血管壁的再收縮)。然而，患者使用莖或其他可植入裝置將會有血塊形成或血小板啟動的風險。這些不利的作用可以通過使用包含本發明的化合物的藥學上可接受的組合物預塗漬裝置來阻止或減輕。

合適的包衣和可植入裝置的包衣的一般製備方法在文獻US 6,099,562，US 5,886,026和US 5,304,121中有所描述，包衣是有代表性地生物相容的多聚體材料如水凝膠聚合體，聚甲基二矽醚，聚已酸內酯，聚乙二醇，聚乳酸，乙烯-乙酸乙烯酯，及其混合物。包衣可以任選地更進一步地被合適的包衣所覆蓋，如氟代二甲矽油，多糖酶，聚乙二醇，磷脂類，或它們的組合，來表現組合物控制釋放的特徵。本發明的另一方面包括使用本發明的化合物塗敷的可植入裝置。本發明的化合物也可以塗敷在可植入體內的醫療用具上，如珠狀物，或與聚合物或其他分子混合來提供“藥物儲藏所”，因此與藥物水溶液給藥方式比較，允許藥物釋放有更長的時間期限。

一般合成過程

一般地，本發明的化合物可以通過本發明所描述的方法製備得到，除非有進一步的說明，其中取代基的定義如式(I)或式(II)所示。下面的反應方案和實施例用於進一步舉例說明本發明的內容。

所屬領域的專業人員將認識到：本發明所描述的化學反應可以用來合適地製備許多本發明的其他化合物，且用於製備本發明的化合物的其它方法都被認為是在本發明的範圍之內。例如，根據本發明那些非例證的化合物的合成可以成功地被所屬領域的技術人員通過修飾方法完成，如適當的保護干擾基團，通過利用其他已知的試劑除了本發明所描述的，或將反應條件做一些常規的修改。另外，本發明所公開的反應或已知的反應條件也公認地適用於本發明其他化合物的製備。

下面所描述的實施例，除非其他方面表明所有的溫度定為攝氏度。試劑購買於商品供應商如Aldrich Chemical Company,Arco Chemical Company and Alfa Chemical Company，使用時都沒有經過進一步純化，除非其他方面表明。一般的試劑從汕頭西隴化工廠，廣東光華化學試劑廠，廣州化學試劑廠，天津好寓宇化學品有限公司，天津市福晨化學試劑廠，武漢鑫華遠科技發展有限公司，青島騰龍化學試劑有限公司，和青島海洋化工廠購買得到。

無水四氫呋喃，二氧六環，甲苯，乙醚是經過金屬鈉回流乾燥得到。無水二氯甲烷和氯仿是經過氫化鈣回流乾燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N,N-二甲基乙醯胺和N,N-二甲基甲醯胺是經無水硫酸鈉事先乾燥使用。

以下反應一般是在氮氣或氬氣正壓下或在無水溶劑上套一乾燥管(除非其他方面表明)，反應瓶都塞上合適的橡皮塞，底物通過注射器打入。玻璃器皿都是乾燥過的。

色譜柱是使用矽膠柱。矽膠(300-400目)購於青島海洋化工廠。核磁共振光譜以CDCl₃、DMSO-d ₆ 、CD₃OD或丙酮-d ₆ 為溶劑(以ppm為單位)，用TMS(0ppm)或氯仿(7.25ppm)作為參照標準。當出現多重峰的時候，將使用下面的縮寫：s(singlet，單峰)、d(doublet，雙峰)、t(triplet，三重峰)、m(multiplet，多重峰)、br(broadened，寬峰)、dd(doublet of doublets，雙二 重峰)、dt(doublet of triplets，雙三重峰)。偶合常數，用赫茲(Hz)表示。

低解析度質譜(MS)資料的條件是：Agilent 1200 Series LCMS(Zorbax SB-C18,2.1×30mm,4微米，10min，流速為0.6mL/min,5%-95%(0.1%溶於H₂O的蟻酸)中的(0.1%溶於CH₃CN的蟻酸))，在210/254nm用UV檢測，用低回應電噴模式(ESI)。

純的化合物的表徵方式為：Agilent 1100 Series高性能液相色譜(HPLC)，在210nm和254nm用UV檢測。柱在40℃下操作。

下面簡寫詞的使用貫穿本發明：Ac₂O 乙酸酐

ATP 三磷酸腺甙

BBr₃ 三溴化硼

BINAP 2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯萘

BSA 牛血清白蛋白

BOC,Boc 叔丁氧基羰基

Ca(SO₃CF₃)₂ 三氟甲基硫酸鈣

Cs₂CO₃ 碳酸銫

CHCl₃ 氯仿

CDCl₃ 氘代氯仿

CH₂Cl₂,DCM 二氯甲烷

Cu 銅

CuI 碘化亞銅

Et₂O 乙醚

EtOH 乙醇

DBU 1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯

D₂ 氘氣

DIBAL 二異丁基氫化鋁

DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯

DIEA，DIPEA，iPr₂Net N,N-二異丙基乙胺

DEAD 偶氮二甲酸二乙酯

DMF N，N-二甲基甲醯胺，二甲基甲醯胺

DMAP 4-二甲氨基吡啶

DMSO 二甲基亞碸

DPPA 疊氮磷酸二苯酯

DTT 二巰基蘇糖醇

EDC,EDCI 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽

EDTA 乙二胺四乙酸

EtOAc，EA 乙酸乙酯

Et₃N,TEA 三乙胺

FBS 胎牛血清

g 克

h 小時

HATU 2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

HBr 氫溴酸

HCl 鹽酸

HOAc 乙酸

HOAT N-羥基-7-氮雜苯並三氮唑

HOBt 1-羥基苯並三唑水合物

H₂ 氫氣

H₂O 水

H₂O₂ 過氧化氫

H₃PO₄ 磷酸

H₂SO₄ 硫酸

HNO₃ 硝酸

HCOOK 甲酸鉀

Fe 鐵

LiHMDS 六甲基二矽基基鋰

LDA 二異丙基胺基鋰

MBP 髓磷脂鹼性蛋白

MCPBA 間氯過氧苯甲酸

MeCN,CH₃CN 乙腈

MgSO₄ 硫酸鎂

Mg ATP 腺苷三磷酸鎂

MeOH,CH₃OH 甲醇

MeI 碘甲烷

MOPS 3-(N-嗎啉代)丙磺酸

mL,ml 毫升

N₂ 氮氣

NMP N-甲基吡咯烷酮

NaHCO₃ 碳酸氫鈉

NaBH₄ 硼氫化鈉

NaBH₃CN 氰基硼氫化鈉

NaOtBu 叔丁醇鈉

NaOH 氫氧化鈉

NaClO₂ 亞氯酸鈉

NaCl 氯化鈉

NaH₂PO₄ 磷酸二氫鈉

NaH 氫化鈉

NaI 碘化鈉

Na₂SO₄ 硫酸鈉

NBS N-溴丁二醯亞胺

Nonidet 諾乃洗劑

NH₃ 氨

NH₄Cl 氯化氨

Pd/C 披鈀/碳

Pd₂(dba)₃ 三(二亞苄基丙酮)二鈀

Pd(OAc)₂ 醋酸鈀

Pd(OH)₂ 氫氧化鈀

Pd(PPh₃)₄ 四(三苯基膦)鈀

Pd(dppf)Cl₂ 1,1’-二(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀

P(t-Bu)₃ 三(叔丁基)膦

PE 石油醚(60-90℃)

PBS 磷酸鹽緩衝鹽水

POCl₃ 三氯氧磷

PhI(OAc)₂ 二乙酸碘苯

K₂CO₃ 碳酸鉀

KOH 氫氧化鉀

RT,rt,r.t. 室溫

Rt 保留時間

SOCl₂ 氯化亞碸

t-BuOK 叔丁醇鉀

TBTU O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯

THF 四氫呋喃

TFA 三氟乙酸

TBAI 四丁基碘化銨

TBS 三羥甲基氨基甲烷緩衝鹽水

TEAC 二(四乙基銨)碳酸鹽

Tris 三羥甲基氨基甲烷

所述合成方案1-4是製備下述實施例化合物的典型合成方案。各X，Y，Z，W，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵和R⁶具有本發明所述的含義。

合成方案1

本發明的化合物可以通過上述合成方案1製備得到，具體合成方案見實施例描述。在合成方案1中6-氨基吡啶-3-醇(1)首先和取代的吡唑酮化合物(2)縮合反應生成化合物(3)。在鹼性條件下(例如，使用t-叔丁醇鉀或氫化鈉)，吡啶甲醯胺(4)與化合物(3)在升高溫度和極性溶劑(如DMF)的條件下反應得到醯胺化合物(5)。在氧化劑二乙酸碘苯或NaClO作用下醯胺化合物(5)發生重排反應得到氨基吡啶化合物(6)，化合物(6)進一步乙醯化得到目標激酶抑制劑(7)。

合成方案2

本發明的化合物也可以通過上述合成方案2製備得到，具體合成方案見實 施例描述。在合成方案2中，硝基衍生物(8)在催化加氫條件下被還原為苯胺化合物(9)。取代的苯胺化合物(9)與4-氯吡啶-2-胺(10)溶於二甲亞碸，並置於微波條件下，反應得到二芳基醚化合物(11)。化合物(11)和取代的吡唑酮化合物(2)縮合反應生成氨基吡啶化合物(12)。在鹼性條件下，化合物(12)可進一步在鹼性條件下轉化為目標激酶抑制劑(13)。

合成方案3

本發明的化合物也可以通過上述合成方案3製備得到，具體合成方案見實施例描述。在合成方案3中，芳基化合物(14)先與取代的吡啶化合物(15)在升高溫度的條件下發生耦合反應，得到二芳基醚化合物(16)。化合物(16)和取代的吡唑酮化合物(2)發生縮合反應生成醯胺吡啶化合物(17)。化合物(17)在氧化劑二乙酸碘苯或NaClO作用下發生重排反應得到目標激酶抑制劑(18)。

合成方案4

本發明的另一些化合物也可以通過上述合成方案4製備得到，氨基吡啶化合物(18)與乙醯化試劑(如，乙酸酐或乙醯氯)在鹼性條件下發生醯化反應生成目標激酶抑制劑(19) 。

實施例 實施例1 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)4-氨基苯酚

將4-硝基酚(7g,50.3mmol)和HCOOK(1.8g,21.48mmol)溶解在THF(210mL)和水(70mL)中，然後向其中加入Pd/C(110mg,10% Pd含量，53%~55%水含量)。反應液在50℃攪拌反應24小時後，真空濃縮。殘餘反應液用二氯甲烷(100mL)稀釋後通過矽藻土過濾。濾液通過真空濃縮得到標題化合物為淡橙色固體(3.28g,60%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：110.1[M+H]⁺。

步驟2)4-(4-氨基苯氧基)吡啶-2-胺

將4-氨基苯酚(218mg,2mmol)和4-氯吡啶-2-胺(256mg,2mmol)溶於二甲亞碸(2.5mL)中，然後加入固體甲醇鈉(216mg,4mmol)。將反應液置於微波下，180℃反應40分鐘後，冷卻至室溫，用水(10mL)淬滅。反應混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取，合併的有機相用無水硫酸鈉 乾燥並真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=30/1)純化得到標題化合物為褐色固體(103mg,26%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：202.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)3.65(s,2H),4.37(s,1H),5.89-5.90(d,J=2.04Hz,1H),6.25-6.27(dd,J=2.08Hz,5.88Hz,1H),6.68-6.71(m,2H),6.86-6.89(m,2H),7.88-7.89(d,J=5.88Hz,1H)。

步驟3)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-(4-氨基苯氧基)吡啶-2-胺(101mg,0.5mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(118mg,0.51mmol)溶於二氯甲烷(5mL)，然後加入EDCI(115mg,0.6mmol)和HOAT(13.6mg,0.1mmol)。反應液在45℃攪拌反應3小時後，用水(20mL)淬滅反應。有機相分離後真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=20/1)純化得到標題化合物為淺灰色固體(110mg,49.2%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：416.4[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.36(s,3H),5.80-5.81(d,J=2.16Hz,1H),5.92(s,2H),6.12-6.14(dd,J=2.24Hz,5.8Hz,1H),7.08-7.10(m,2H),7.42-7.45(m,2H),7.51-7.53(m,1H),7.57-7.61(m,2H),7.65-7.67(m,2H),7.77-7.79(d,J=5.8Hz,1H)。

實施例2 N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)N-(4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-氨基苯酚(1.09g,10mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(2.37g,10.2mmol)溶於二氯甲烷(30mL)，然後加入 EDCI(2.3g,12mmol)和HOAT(0.27g,2mmol)。反應混合物在46℃攪拌反應4小時後，冷卻至室溫，並用乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)稀釋。反應混合物室溫攪拌1小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(1.7g,52.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：324.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.68(s,3H),3.32(s,3H),6.72(d,J=8.8Hz,2H),7.36-7.42(m,4H),7.49(t,J=7.4Hz,1H),7.57(t,J=7.6Hz,2H),9.21(s,1H),10.46(s,1H)。

步驟2)3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺

將2,2,6,6-四甲基呱啶(6.2mL,37.2mmol)溶於二乙醚(50mL)，然後在0℃通過注射器在15分鐘內加入溶於己烷(2.5M,23mL,57.5mmol)的正丁基鋰。反應液在0℃攪拌0.5小時後，降至-78℃保持0.5小時，然後通過注射器在15分鐘內向反應液中加入溶於乙醚(20mL)的3,4-二氯吡啶(5.00g,33.8mmol)溶液。反應液在-78℃攪拌2小時後，加入異氰酸三甲基矽烷(94%純度，6.7mL,50.7mmol)。反應混合物升至室溫並攪拌2小時，然後用醋酸(6.76g,112.6mmol)和35mL水淬滅。繼續攪拌過夜，析出白色固體，過濾收集。濾液用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(50mL)洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮。將所得固體合併，並用35mL乙醚洗滌得到標題化合物為淡黃色固體(2.20g,34.0%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：191.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)8.48(d,J=5.2Hz,1H),8.09(br s,1H),7.82(s,1H),7.81(d,J=5.2Hz,1H)。

步驟3)3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺

將N-(4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(356mg,1.1mmol)溶於二甲亞碸(4mL)，並置於一個微波小瓶內，然後室溫加入NaH(88mg,2.2mmol,60%分散於礦物油中)。反應液室溫攪拌30分鐘後加入3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺(191mg,1.0mmol)。反應混合物置於微波下，160℃反應2小時後，冷卻至室溫，用水稀釋(10mL)。所得混合 物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。合併的有機相用食鹽水(30mL x 3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥後，真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淡黃色固體(140mg,29%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：478.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.35(s,3H),6.82(d,J=5.4Hz,1H),7.19(d,J=9.0Hz,2H),7.44(d,J=7.5Hz,2H),7.53(m,1H),7.59(m,2H),7.74(m,3H),8.02(s,1H),8.33(d,J=5.4Hz,1H),10.84(s,1H)。

步驟4)N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺(140mg,0.29mmol)溶於乙酸乙酯(2.5mL)、乙腈(2.5mL)和水(1.3mL)的混合溶液中，然後在0℃加入二乙酸碘苯(113mg,0.35mmol)。反應液在0℃攪拌30分鐘後，升至室溫繼續攪拌4小時。反應混合物用二氯甲烷(30mL)稀釋後，用食鹽水(20mL x 3)洗滌，並真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淡黃色固體(37mg,26.8%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：450.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.70(s,3H),3.37(s,3H),5.95(d,J=5.6Hz,1H),6.36(s,2H),7.10(d,J=8.5Hz,2H),7.44(d,J=7.6Hz,2H),7.51(m,1H),7.59(m,2H),7.66(d,J=8.5Hz,2H),7.75(d,J=5.6Hz,1H),10.79(s,1H)。

實施例3 N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)4-(4-氨基-2-氟苯氧基)-3-氯吡啶醯胺

將4-氨基-2-氟苯酚(254mg,2.0mmol)溶於二甲基甲醯胺(5mL)中，加入叔丁醇鉀(359mg,3.2mmol)。反應液在室溫攪拌30分鐘，然後加入3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺(420mg,2.2mmol)。將反應混合物置於微波下，120℃反應2小時，冷卻至室溫後，用25mL水稀釋。所得混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(30mL x 3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥後，真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=2/1)純化得到標題化合物為淡黃色固體(306mg,54.4%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：282.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)8.30(d,J=5.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.73(s,1H),7.03(t,J=9.0Hz,1H),6.72(dd,J=0.8Hz,5.6Hz,1H),6.53(dd,J=2.4Hz,13.2Hz,1H),6.44(dd,J=1.8Hz,8.7Hz,1H),5.55(s,2H)。

步驟2)3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺

將4-(4-氨基-2-氟苯氧基)-3-氯吡啶醯胺(306mg,1.40mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(390mg,1.68mmol)懸浮於二氯甲烷(6mL)中，然後加入EDCI(322mg,1.68mmol)和HOAT(38mg,0.28mmol)。反應混合物在45℃攪拌14.5小時後，冷卻至室溫，並用5mL水淬滅。反應混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(10mL x 3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥後，真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=1/4)純化得到標題化合物為淡黃色固體(647mg,93.2%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：496.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.98(s,1H),8.33(d,J=5.6Hz,1H),8.06(br s,1H),7.99(dd,J=2.2Hz,13.2Hz,1H),7.75(br s,1H),7.60(t,J=7.2Hz,2H),7.52(m,1H),7.45(d,J=5.6Hz,2H),7.35(m,2H),6.84(d,J=5.5Hz,1H),3.37(s,3H),2.71(s,3H)。

步驟3)N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺 基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺(437mg,0.88mmol)懸浮於乙酸乙酯(5mL)、乙腈(5mL)和水(2.5mL)的混合溶液中，然後在0℃加入二乙酸碘苯(341mg,1.06mmol)。反應液在0℃攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌3小時。反應混合物進行真空濃縮，殘留物通過矽膠柱層析(PE/EtOAc(v/v)=1/3)純化得到標題化合物為黃色固體(290mg,70.6%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：468.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.93(s,1H),7.92(d,J=12.6Hz,1H),7.74(d,J=5.7Hz,1H),7.59(t,J=7.4Hz,2H),7.52(m,1H),7.43(d,J=7.6Hz,2H),7.28(d,J=4.3Hz,2H),6.40(s,2H),5.92(d,J=5.6Hz,1H),5.86(d,J=1.9Hz,1H),3.36(s,3H),2.70(s,3H)。

實施例4 N-(4-((2-乙醯氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)N-(4-((2-(N-乙醯基乙醯氨基)-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

化合物N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(0.22g,0.47mmol)，乙酸酐(1.3mL,13.75mmol)和Et₃N(0.51g,5.04mmol)的混合物在60℃攪拌反應24小時後，加入飽和Na₂CO₃水溶液(50mL)淬滅反應，得到的混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(50mL x 3)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的粗產物未經進一步純化直接用於下一步反應。

MS(ESI,pos.ion)m/z：552.1[M+H]⁺。

步驟2)N-(4-((2-乙醯氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-(N-乙醯基乙醯氨基)-3-氯吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(259mg,0.47 mmol)溶解在CH₃OH(20mL)中，然後向反應液中加入Na₂CO₃(59.8mg,0.56mmol)的水(1mL)溶液。室溫攪拌反應15分鐘後，減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(CH₃OH/EtOAc(v/v)=1/50)純化，得到標題化合物為米黃色固體(160mg,66.7%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：510.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.97(s,1H),10.27(s,1H),8.20(d,J=5.6Hz,1H),7.98(dd,J=2.3Hz,13.2Hz,1H),7.60(m,2H),7.54(m,1H),7.44(d,J=7.3Hz,2H),7.38(m,1H),7.33(dd,J=2.0Hz,9.0Hz,1H),6.67(d,J=5.4Hz,1H),3.40(s,3H),2.71(s,3H),2.08(s,3H)。

實施例5 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,3-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)1-(苄氧基)-2,3-二氟-4-硝基苯

將2,4,5-三氟硝基苯(5.00g,28.2mmol)和苯甲醇(3.07g,28.4mmol)溶於二甲基甲醯胺(10mL)中，然後加入碳酸鉀(5.87g,42.5mmol)。反應液在室溫攪拌72小時後，用水(35mL)稀釋，4℃繼續攪拌過夜。過濾，得到的沉澱用水(20mL)洗，然後再通過矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=1/20)純化得到標題化合物為淡黃色固體(2.15g,28.7%)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)7.90(m,1H),7.43(s,2H),7.42(s,2H),7.39(m,1H),6.86(m,1H),5.27(s,2H)。

步驟2)4-氨基-2,3-二氟苯酚

將1-(苄氧基)-2,3-二氟-4-硝基苯(1.93g,0.73mmol)懸浮於甲醇(45mL)和四氫呋喃(9mL)的混合溶液中，然後加入Pd/C(333mg,6% Pd含量，53%~55%水含量)。反應混合物在H₂條件下於32℃攪拌13小時後，通過矽藻土過濾，濾餅用50mL乙酸乙酯洗滌。濾液真空濃縮後得到的粗產物用30mL二氯甲烷洗滌後，得到標題化合物為深褐色固體(0.89g,84%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：146.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)6.49(m,1H),6.38(m,1H),4.71(s,2H)。

步驟3)4-(4-氨基-2,3-二氟苯氧基)吡啶醯胺

將4-氨基-2,3-二氟苯酚(208mg,1.43mmol)溶於二甲基甲醯胺(4mL)，然後加入叔丁醇鉀(257mg,2.29mmol)。反應液在室溫攪拌30分鐘後，加入4-氯吡啶甲醯胺(249mg,1.59mmol)。將反應混合物置於微波下，120℃反應3小時後，冷卻至室溫，並用25mL水稀釋。所得到的混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(30mL x 3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥後真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(PE/EtOAc(v/v)=1/2)純化得到標題化合物為橙色固體(110mg,41.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：266.0[M+H]⁺,283.2[M+NH₄]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)8.42(d,J=5.6Hz,1H),7.84(br s,1H),7.65(d,J=2.5Hz,1H),7.03(m,1H),6.77(m,1H),6.56(m,1H),5.56(br s,1H),3.08(s,2H)。

步驟4)4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,3-二氟苯氧基)吡啶醯胺

將4-(4-氨基-2,3-二氟苯氧基)吡啶醯胺(180mg,0.68mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(161mg,0.69mmol)懸浮於二氯甲烷(4mL)，然後加入EDCI(157mg,0.82mmol)和HOAT(19mg,0.14mmol)。反應混合物在45℃攪拌反應12小時後，再加入1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(87mg,0.37mmol)，反應混合物繼續在45℃攪拌反應5小時後，冷卻至室溫後，用5mL水淬滅反應，用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。合併的有機相用食鹽水(10mL x 3)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(純EtOAc)純化得到標題化合物為橙色固體(108mg,33.2%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：480.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.2(s,1H),8.55(d,J=5.7Hz,1H),8.34(m,1H),8.16(br s,1H),7.76(br s,1H),7.64(m,3H),7.59(d,J=7.8Hz, 1H),7.46(m,3H),7.28(m,1H),3.38(s,3H),2.71(s,3H)。

步驟5)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,3-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,3-二氟苯氧基)吡啶醯胺(108mg,0.22mmol)懸浮於乙酸乙酯(2.5mL)、乙腈(2.5mL)和水(1.5mL)混合溶液中，然後在0℃下加入二乙酸碘苯(96mg,0.30mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌4小時。反應混合物真空濃縮，殘留物通過矽膠柱層析(EtOAc/CH₃OH(v/v)=10/1)純化得到標題化合物為淡黃色固體(32mg,32.3%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：452.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.12(s,1H),8.27(m,1H),7.81(d,J=5.8Hz,1H),7.60(m,2H),7.54(m,1H),7.44(d,J=7.4Hz,2H),7.16(m,1H),6.19(m,1H),5.98(s,2H),5.86(d,J=1.9Hz,1H),3.34(s,3H),2.70(s,3H)。

實施例6 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-2,3-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,3-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(135mg,0.3mmol)懸浮在乙酸酐(6mL)中，然後向反應液中加入三乙胺(0.4mL,2.9mmol)，在35℃攪拌反應4小時後，抽濾，濾餅依次用PE(5mL)，EtOAc(5mL)和CH₃OH(2mL)洗，得到標題化合物為米黃色固體(102mg,68.9%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：494.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.16(s,1H),10.60(s,1H),8.31(m,1H),8.20(d,J=5.8Hz,1H),7.70(d,J=2.0Hz,1H),7.61(m,2H),7.52(m,1H),7.45(m,2H),7.22(m,1H),6.73(dd,J=2.4Hz,5.7Hz,1H),3.38(s,3H),2.71(s,3H),2.04(s,3H)。

實施例7 N-(4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,3-二氟苯氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,3-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(224mg,0.50mmol)懸浮在THF(3mL)中，然後向反應液中加入三乙胺(0.138mL,0.99mmol)，接下來再逐滴加入氯甲酸苯酯(0.125mL,1.00mmol)，混合物在室溫條件攪拌反應2小時後，再加入嗎啉(0.4mL,5.00mmol)，混合物在室溫條件攪拌反應36小時後，加入飽和的NH₄Cl水溶液(20mL)和CH₂Cl₂(20mL)淬滅反應，得到的混合物在室溫條件攪拌10分鐘後，用CH₂Cl₂(20mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(20mL x 3)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=20/1)純化得到標題化合物為橙色固體(148mg,52.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：565.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.16(s,1H),9.32(s,1H),8.30(m,1H),8.14(d,J=5.8Hz,1H),7.60(m,2H),7.53(m,1H),7.44(m,3H),7.20(m,1H),6.66(dd,J=2.4Hz,5.7Hz,1H),3.55(dd,J=4.4Hz,5.1Hz,4H),3.41(dd,J=4.1Hz,4.8Hz,4H),3.38(s,3H),2.71(s,3H)。

實施例8 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)1-(苄氧基)-2,5-二氟-4-硝基苯

將2,4,5-三氟硝基苯(5.4g,30.5mmol)和苯甲醇(3.2mL,30.5mmol)混合溶液溶於二甲基甲醯胺(20mL)，然後加入碳酸鉀(6.33g，46.1 mmol)。反應液在室溫攪拌反應72小時。在0℃下加入水(60mL)後，所得反應混合物繼續在4℃攪拌24小時。過濾收集固體，並用30mL水洗滌，45℃真空乾燥得到標題化合物為淡黃色固體(6.0g,74%)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)5.22(s,2H),6.85-6.89(m,1H),7.40-7.43(m,5H),7.89-7.94(m,1H)。

步驟2)4-氨基-2,5-二氟苯酚

將1-(苄氧基)-2,5-二氟-4-硝基苯(1.06g,4mmol)懸浮於甲醇(25mL)和四氫呋喃(5mL)的混合溶液中，然後加入Pd/C(50% Pd含量，185mg)。反應液在H₂條件下於32℃攪拌反應10小時。反應混合物通過矽藻土過濾，濾液進行真空濃縮。所得殘留物用二氯甲烷(15mL)洗滌，得到標題化合物為深褐色固體(500mg,86%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：146.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)4.68(s,2H),6.53-6.65(m,2H),9.06(br,1H)。

步驟3)4-(4-氨基-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺

將4-氨基-2,5-二氟苯酚(100mg,0.64mmol)和4-氯吡啶甲醯胺(110mg,0.71mmol)溶於二甲基甲醯胺(2mL)，然後加入NaH(80mg,1.3mmol,60%分散於礦物油中)。將反應液置於微波下，120℃反應1.5小時。反應混合物冷卻至室溫，用水(20mL)稀釋，用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。合併的有機相用食鹽水(80mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，並真空濃縮。殘留物通過快速柱層析(EtOAc/PE(v/v)=4/1)純化得到標題化合物為褐色固體(52mg,26%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：266.2[M+H]⁺。

步驟4)4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺

將4-(4-氨基-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺(200mg,0.76mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(165mg,0.75mmol)的混合溶液溶於二氯甲烷(10mL)中，然後加入EDCI(175mg,0.93mmol)和HOAT (26mg,0.15mmol)。反應液在45℃攪拌16小時，冷卻至室溫，並用乙酸乙酯(20mL)稀釋。過濾，所得固體，於45℃真空乾燥過夜，得到標題化合物為白色固體(230mg,63.7%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：480.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.24(s,1H),8.53-8.57(m,2H),8.15(s,1H),7.75(s,1H),7.53-7.59(m,4H),7.44-7.45(m,3H),7.24-7.25(d,J=5.2Hz,1H),3.43(s,3H),2.70(s,3H)。

步驟5)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺(80mg,0.17mmol)溶於乙酸乙酯(2mL)、乙腈(2mL)和水(1mL)的混合溶液中，然後加入二乙酸碘苯(70mg,1.2mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌8小時。反應混合物通過矽藻土過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌(30mL)。濾液進行真空濃縮，所得殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=20/1)純化得到標題化合物為白色固體(51mg,68%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：452.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.18(s,1H),8.45-8.50(dd,J=7.4Hz,12.8Hz,1H),7.79-7.81(d,J=5.76Hz,1H),7.57-7.61(m,2H),7.43-7.54(m,4H),6.16-6.18(m,1H),5.96(s,2H),5.83-5.83(d,J=2.16Hz,1H),3.37(s,3H),2.70(s,3H)。

實施例9 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(220mg,0.48mmol)溶解在乙酸酐(8mL)中，然後向反應液中加入Et₃N(0.5mL,1.32mmol)，室溫攪拌反應8 小時後，減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=10/1)純化得到標題化合物為白色固體(175mg,73%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：494.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ(ppm)11.21(s,1H),10.58(s,1H),8.49-8.54(dd,J=7.3Hz,12.8Hz,1H),8.18-8.20(d,J=5.7Hz,1H),7.67-7.68(m,1H),7.51-7.61(m,4H),7.43-7.45(m,2H),6.70-6.72(dd,J=2.4Hz,5.7Hz,1H),3.32(s,3H),2.70(s,3H),2.04(s,3H)。

實施例10 N-(4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,5-二氟苯氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(250mg,0.56mmol)和Et₃N(0.25mL,1.68mmol)懸浮在THF(10.0mL)中，然後向反應液中加入氯甲酸苯酯(0.25mL,1.68mmol)，室溫攪拌2小時後，加入嗎啉(0.35mL,3.46mmol)，混合物在室溫攪拌反應24小時後，加入NH₄Cl水溶液(40mL)和DCM(40mL)，分液，水相用DCM(40mL x 3)萃取，合併的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=4/1)純化得到標題化合物為白色固體(70mg,21%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：565.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.20(s,1H),9.28(s,1H),8.47-8.52(dd,J=7.3Hz,12.8Hz,1H),8.12-8.14(d,J=5.7Hz,1H),7.57-7.61(m,2H),7.50-7.54(m,2H),7.39-7.45(m,3H),6.63-6.65(dd,J=2.5Hz,5.6Hz,1H),3.53-3.56(m,4H),3.40-3.41(m,4H),3.35(s,3H),2.70(s,3H)。

實施例11 N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺

將化合物N-(2,5-二氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(395mg,1.1mmol)溶解在DMF(5.0mL)中，然後向反應液中加入t-BuOK(202mg,1.8mmol)，室溫攪拌30分鐘後，加入3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺(190mg,1.0mmol)，混合物於微波條件下在120℃攪拌反應2小時後，冷卻至室溫，加入水(30mL)淬滅反應，混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(50mL x 3)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(MeOH/DCM(v/v)=1/30)純化得到標題化合物為淡黃色固體(310mg,60%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：514.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.70(s,3H),3.38(s,3H),6.96(d,J=5.5Hz,1H),7.45(d,J=7.0Hz,2H),7.51-7.55(m,1H),7.58-7.66(m,3H),7.75(s,1H),8.05(s,1H),8.34(d,J=5.5Hz,1H),8.53-8.58(m,1H),11.25(s,1H)。

步驟2)N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2,5-二氟苯氧基)吡啶醯胺(310mg,0.60mmol)懸浮在EtOAc(6.0mL)，CH₃CN(6.0mL)和H₂O(3.0mL)的混合溶劑中，冷卻至0℃，然後向反應液中加入PhI(OAc)₂(234mg,0.72mmol)，在0℃攪拌30分鐘後，升至室溫並攪拌反應4小時，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(MeOH/DCM(v/v)=1/70)純化得到標題化合物為淡黃色固體(200mg,69%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：486.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.70(s,3H),3.38(s,3H),6.01(d,J= 5.6Hz,1H),6.42(s,2H),7.43(d,J=7.2Hz,2H),7.50-7.55(m,2H),7.60(t,J=7.4Hz,2H),7.75(d,J=5.6Hz,1H),8.48-8.53(m,1H),11.19(s,1H)。

實施例12 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)4-(4-氨基-3-氯苯氧基)吡啶醯胺

將4-氨基-2-氯苯酚鹽酸鹽(446mg,2.4mmol)溶於二甲亞碸(4mL)，然後加入NaH(280mg,7.0mmol,60%分散於礦物油中)。反應液在室溫攪拌30分鐘後，加入4-氯吡啶甲醯胺(345mg,2.2mmol)。將反應液置於微波下，160℃反應2小時後，冷卻至室溫，用水(20mL)稀釋。所得混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，並真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=1/1)純化得到標題化合物為橙色固體(170mg,29%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：264.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)5.45(s,2H),6.89(d,J=8.7Hz,1H),6.92(m,1H),7.11(m,1H),7.16(d,J=2.6Hz,1H),7.34(d,J=2.6Hz,1H),7.68(s,1H),8.10(s,1H),8.47(d,J=5.6Hz,1H)。

步驟2)4-(3-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺

將4-(4-氨基-3-氯苯氧基)吡啶醯胺(191mg,0.72mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(168mg,0.72mmol)懸浮於二氯甲烷(10mL)中，然後加入EDCI(166mg,0.86mmol)和HOAT(20mg,0.14mmol)。反應液在46℃攪拌6小時後，加入1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(32mg,0.14mmol)和EDCI(27mg,0.14mmol)。反應混合物在46℃繼續攪拌13小時，冷卻至室溫，並用水(10mL)稀釋。所得混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(10mL)洗 滌，無水硫酸鈉乾燥，並真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淡黃色固體(160mg,46.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：478.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.37(s,3H),7.19(m,1H),7.23(m,1H),7.43(m,3H),7.50(m,2H),7.60(m,2H),7.72(s,1H),8.13(s,1H),8.52(d,J=5.6Hz,1H),8.63(d,J=9.1Hz,1H),11.19(s,1H)。

步驟3)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-(3-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺(160mg,0.33mmol)溶於乙酸乙酯(3mL)、乙腈(2.5mL)和水(1.3mL)混合溶液中，然後在0℃下加入二乙酸碘苯(130mg,0.40mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌3小時。反應混合物進行真空濃縮，所得殘留物通過矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=25/1)純化得到標題化合物為淺褐色固體(100mg,67%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：450.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.43(s,3H),5.83(d,J=2.1Hz,1H),5.95(s,2H),6.16(m,1H),7.14(m,1H),7.45(d,J=7.3Hz,2H),7.52(t,J=7.3Hz,1H),7.60(t,J=7.3Hz,2H),7.80(d,J=5.8Hz,2H),8.56(d,J=9.1Hz,1H),11.12(s,1H)。

實施例13 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(125mg,0.28mmol)懸浮在乙酸酐(6.0mL)中，然後向反應液中加入三乙胺(0.4mL)，35℃攪拌反應13小時後，抽濾，濾餅依次用石油醚(6mL)，MeOH(3mL)和乙酸乙酯(6mL) 洗，得到標題化合物為淡藍色固體(87mg,63%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：492.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.04(s,3H),2.72(s,3H),3.37(s,3H),6.68(m,1H),7.18(m,1H),7.44(m,3H),7.52(t,J=7.4Hz，1H)7.60(t,J=7.5Hz,2H)，7.67(d,J=2.0Hz,1H),8.18(d,J=5.7Hz,1H),8.60(d,J=9.1Hz,1H),10.55(s,1H),11.16(s,1H)。

實施例14 N-(4-(3-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(125mg,0.28mmol)和Et₃N(0.12mL,0.84mmol)懸浮在THF(4.0mL)中，然後向反應液中加入氯甲酸苯酯(0.10mL,0.84mmol)，室溫攪拌反應22小時後，加入NH₄Cl的水溶液(20mL)和DCM(20mL)，分液，水相用DCM(20mL x 3)萃取，合併的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=20/1)純化後，再用甲醇(4mL)洗，得到標題化合物為米黃色固體(60mg,38%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：563.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)2.80(s,3H),3.35(s,3H),3.50(t,J=4.8Hz,4H),3.73(t,J=4.8Hz,4H),6.50(m,1H),7.02(m,1H),7.14(d,J=2.7Hz,1H),7.29(s,1H),7.39(d,J=7.2Hz,2H),7.46(m,1H),7.55(m,2H),7.65(s,1H),8.02(d,J=5.9Hz,1H),8.60(d,J=9.0Hz,1H),11.03(s,1H)。

實施例15 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氘苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(200mg,0.44mmol)和三乙胺(0.10mL,0.66mmol)懸浮在甲醇(8.0mL)中，然後向反應液中加入Pd/C(40mg,20%)，混合物在氘氣環境下於62℃攪拌反應12小時後，冷卻至室溫，抽濾，將濾液減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(MeOH/DCM(v/v)=1/30)純化後，再經TLC(MeOH/DCM(v/v)=1/20)純化得到標題化合物為淡黃色固體(40mg,21%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：417.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)2.80(s,3H),3.36(s,3H),4.75(s,2H),5.93(d,J=1.8Hz,1H),6.31(m,1H),7.04(d,J=8.8Hz,2H),7.37(d,J=7.4Hz,2H),7.47(m,1H),7.56(m,2H),7.68(d,J=8.8Hz,2H),10.73(s,1H)。

實施例16 N-(5-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)4-((6-氨基吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺

將6-氨基吡啶-3-醇(220mg,2mmol)和t-BuOK(225mg,2.16mmol)溶於二甲基甲醯胺(2.5mL)，然後加入4-氯吡啶甲醯胺(315mg,2mmol)。反應液在80℃下加熱5小時後，冷卻至室溫，用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。有機相真空濃縮，所得殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=30/1)得到標題化合物為褐色固體(230mg,50%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：231.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)6.09(s,2H),6.53-6.56(d,J=8.88Hz,1H),7.12-7.14(dd,J=2.64Hz,5.6Hz,1H),7.31-7.34(dd,J=2.92Hz,8.88 Hz,1H),7.35-7.36(d,J=2.48Hz,1H),7.70(s,1H),7.83-7.84(d,J=2.8Hz,1H),8.11(s,1H),8.46-8.49(d,J=5.6Hz,1H)。

步驟2)4-((6-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺

將4-((6-氨基吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺(230mg,1mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(237mg,1.02mmol)懸浮於二氯甲烷(5mL)，然後加入EDCI(230mg,1.2mmol)和HOAT(27mg,0.2mmol)。反應液在45℃攪拌28小時，冷卻至室溫後，用水(10mL)和二氯甲烷(20mL)稀釋。有機相真空濃縮，所得殘留物通過矽膠柱層析純化(DCM/CH₃OH(v/v)=40/1)得到標題化合物為淺灰色固體(111mg,25%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：445.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.72(s,3H),3.33(s,3H),7.20-7.22(dd,J=2.64Hz,5.64Hz,1H),7.43-7.46(m,3H),7.52-7.54(m,1H),7.58-7.62(m,2H),7.72(s,3H),7.75-7.78(dd,J=2.88Hz,8.96Hz,1H),8.13(s,1H),8.27-8.28(d,J=2.68Hz,1H),8.34-8.36(d,J=9.08Hz,1H),8.52-8.54(d,J=5.6Hz,1H)。

步驟3)N-(5-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-((6-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺(111mg,0.25mmol)溶於乙酸乙酯(2mL)、乙腈(2mL)和水(1mL)的混合溶液中，然後加入二乙酸碘苯(97mg,0.3mmol)。反應液在0℃攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌12小時。反應混合物真空濃縮，所得殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=40/1)純化得到標題化合物為淺米色固體(85mg,81.7%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：417.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.38(s,3H),5.83(s,1H),5.98(s,2H),6.17(s,1H),7.08-7.10(m,2H),7.42-7.81(m,6H),7.80-7.81(d,J=5.8Hz,1H),8.17(s,1H),8.29-8.31(d,J=8.56Hz,1H),11.19(s,1H)。

實施例17 N-(5-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代 -2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(5-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(300mg,0.72mmol)溶解在乙酸酐(4mL)中，然後向反應液中加入Et₃N(400mg,4mmol)，30℃攪拌反應12小時後，減壓濃縮，殘留物經矽膠逐層析(DCM/CH₃OH(v/v)=40/1)純化得到標題化合物為淺黃色固體(197mg,60.1%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：459.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.23(s,1H),10.57(s,1H),8.34-8.31(d,J=9.1Hz,1H),8.22-8.21(d,J=2.8Hz,1H),8.20-8.19(d,J=5.7Hz,1H),7.72-7.69(dd,J=9.0Hz,2.8Hz,1H),7.67-7.67(d,J=1.6Hz,1H),7.62-7.59(m,2H),7.54-7.51(m,1H),7.46(s,1H),7.44(s,1H),3.37(s,3H),2.72(s,3H),2.05(s,3H)。

實施例18 N-(4-((6-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(5-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(171mg,0.41mmol)和Et₃N(0.17mL,1.23mmol)懸浮在THF(8.0mL)中，然後向反應液中加入氯甲酸苯酯(0.15mL,1.23mmol)，室溫攪拌2小時後，加入嗎啉(0.21mL,2.46mmol)，室溫攪拌反應24小時後，加入NH₄Cl水溶液(40mL)和DCM(40mL)，分液，水相用DCM(40mL x 3)萃取，合併的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(MeOH/EtOAc(v/v)=1/50)純化後，再用TLC(MeOH/EtOAc(v/v)=1/30)純化得到標題化合物為淡黃色固體(40mg,18%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：530.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)2.79(s,3H),3.36(s,3H),3.50(t,J=4.8Hz,4H),3.72(t,J=4.8Hz,4H),6.49-6.51(m,1H),7.36-7.38(m,3H),7.42-7.46(m,2H),7.52-7.56(m,2H),7.66(s,1H),8.03(d,J=5.6Hz,1H),8.14(d,J=2.7Hz,1H),8.34(d,J=9.0Hz,1H),11.19(s,1H)。

實施例19 N-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)N-(5-羥基吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將6-氨基吡啶-3-醇(330mg,3mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(710mg,306mmol)懸浮於二甲基甲醯胺(10mL)中，然後加入EDCI(690mg,3.6mmol)和HOAT(80mg,0.6mmol)。反應液在60℃攪拌4小時，冷卻至室溫，並用水(100mL)和乙酸乙酯(2mL)稀釋。反應混合物冷卻至0℃並攪拌過夜。過濾，收集固體，得到標題化合物為淺褐色固體(680mg,70%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：325.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.50(s,3H),3.33(s,3H),7.18-7.20(dd,J=2.3Hz,8.8Hz,1H),7.40-7.42(d,J=7.5Hz,2H),7.48-7.52(m,1H),7.56-7.60(m,2H),7.81-7.82(d,J=2.2Hz,1H),7.95(s,1H),8.04-8.06(d,J=8.8Hz,1H),9.61(s,1H),10.85(s,1H)。

步驟2)3-氯-4-((6-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺

將6-氨基吡啶-3-醇(324mg,1mmol)和t-BuOK(135mg,1.2mmol)溶於二甲基甲醯胺(2mL)，然後加入3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺(191mg,1mmol)。反應液在80℃加熱15小時，冷卻至室溫後，用乙酸乙酯(1mL)和 水(20mL)稀釋。反應混合物攪拌過夜，過濾，收集固體，得到標題化合物為褐色固體(290mg,60.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：479.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)2.72(s,3H),3.35(s,3H),6.91-6.92(d,J=5.5Hz,1H),6.09(s,2H),7.43-7.45(m,2H),7.50-7.54(m,1H),7.58-7.62(m,2H),7.73-7.76(m,2H),8.03(s,1H),8.26-8.27(d,J=2.7Hz,1H),8.33-8.36(m,2H),11.26(s,1H)。

步驟3)N-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將3-氯-4-((6-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)吡啶-3-基)氧基)吡啶醯胺(290mg,0.6mmol)溶於乙酸乙酯(4mL)、乙腈(4mL)和水(2mL)混合溶液中，然後加入二乙酸碘苯(234mg,0.72mmol)。反應液在0℃下攪拌30分鐘後，升至室溫，繼續攪拌12小時。反應混合物通過矽藻土過濾，濾餅用二氯甲烷(30mL)洗滌。濾液用水(20mL)洗滌後，真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淺米色固體(120mg,44.7%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：451.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.71(s,3H),3.36(s,3H),5.99-6.01(d,J=5.6Hz,1H),6.42(s,2H),7.42-7.44(m,2H),7.51-7.53(m,1H),7.57-7.61(m,2H),7.63-7.66(dd,J=2.9Hz,9.0Hz,1H),7.76-7.77(d,J=5.6Hz,1H),8.18-8.19(d,J=2.8Hz,1H),8.28-8.30(d,J=9.1Hz,1H),11.21(s,1H)。

實施例20 N-(5-((2-乙醯氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將N-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(60mg,0.13mmol)和三乙胺(26.3mg,0.26mmol)溶於甲醇(1mL)和四氫呋喃(2mL)的混合溶劑中，然後加入 乙醯氯(20.3mg,0.26mmol)。反應液在室溫下攪拌3小時後，真空濃縮。殘留物用碳酸鈉溶液處理後，室溫攪拌5分鐘，並真空濃縮。所得殘留物通過矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淺米色固體(15mg,22.7%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：493.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.08(s,3H),2.71(s,3H),3.35(s,3H),6.72-6.74(d,J=5.6Hz,1H),7.43-7.45(m,2H),7.50-7.54(m,1H),7.58-7.62(m,2H),7.63-7.66(dd,J=2.9Hz,9.0Hz,1H),8.19-8.20(d,J=5.6Hz,1H),8.26-8.27(d,J=2.8Hz,1H),8.33-8.35(d,J=9.1Hz,1H),10.24(s,1H),11.25(s,1H)。

實施例21 N-(4-((2-乙醯氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺(124mg,0.28mmol)溶於乙酸酐(8.0mL)，然後加入三乙胺(0.4mL)。反應液在40℃下攪拌反應26小時後，將反應混合物用碳酸鈉的飽和溶液(60mL x 3)洗滌，之後用二氯甲烷(60mL x 3)萃取。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮。殘留物通過矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=40/1)純化得到標題化合物為淺粉色固體(80mg,59%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：492.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)2.07(s,3H),2.70(s,3H),3.37(s,3H),6.64(d,J=5.6Hz,1H),7.20(d,J=9.0Hz,2H),7.44(d,J=7.2Hz,2H),7.51(m,1H),7.59(m,2H),7.72(d,J=9.0Hz,2H),8.18(d,J=5.6Hz,1H),10.21(s,1H),10.83(s,1H)。

實施例22 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)N-(3-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-氨基-2-氟苯酚(2.54g,20mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(4.74g,20.4mmol)懸浮於DCM(60mL)中，並向其中加入EDCI(4.6g,24mmol)和HOAT(0.54g,4mmol)。反應液在45℃攪拌12小時後，冷卻至室溫，並加水(10mL)淬滅。混合物繼續攪拌4小時，過濾，收集固體，所得固體用DCM(20mL x 3)洗，並於60℃真空乾燥12小時，得到標題化合物為土黃色固體(6.37g,93.4%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：342.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.59(s,1H),9.58(s,1H),7.64(dd,J=2.4Hz,13.5Hz,1H),7.60(m,2H),7.50(m,1H),7.42(m,2H),6.97(m,1H),6.88(dd,J=9.6Hz,8.8Hz,1H),3.34(s,3H),2.70(s,3H)。

步驟2)4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺

將N-(3-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(2.2g,6.4mmol)和4-氯吡啶甲醯胺(1g,6.39mmol)溶於DMSO(12mL)中，並向其中加入NaH(615mg,12.3mmol,50%分散於礦物油中)，反應液在160℃攪拌20小時後，冷卻至室溫，加水(70mL)淬滅。將混合物用EtOAc(100mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(100mL)洗，無水Na₂SO₄乾燥，並減壓濃縮。所得殘留物經矽膠柱層析(PE/EtOAc(v/v)=1/4)純化，得到標題化合物為白色固體(0.85g,29%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：462.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.87(s,1H),8.40-8.41(d,J=5.6Hz,1H),7.88-7.92(dd,J=2.4Hz,12.6Hz,1H),7.82-7.83(d,J=3.9Hz,1H),7.71-7.71(d,J=2.5Hz,1H),7.54-7.58(m,2H),7.46-7.49(m,1H),7.35-7.37(d,J=8.6Hz,2H),7.07-7.11(m,1H),6.96-6.98(dd,J=2.5Hz,5.6Hz,1H), 5.56(s,1H),3.37(s,3H),2.79(s,3H)。

步驟3)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺(0.4g,0.86mmol)和PhI(OAc)₂(419mg,1.5mmol)溶解在EtOAc(8mL)，MeCN(8mL)和H₂O(4mL)的混合液中，冷卻至0℃，攪拌30分鐘。將反應液恢復至室溫，繼續攪拌8小時。混合物用NaHCO₃水溶液(60mL)稀釋，並用EtOAc(100mL x 3)萃取。合併的有機相用食鹽水(100mL)洗，無水Na₂SO₄乾燥，並減壓濃縮，所得殘留物經矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=10/1)純化，得到標題化合物為白色固體(0.21g,56%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：434.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.83(s,1H),7.91-7.92(d,J=5.9Hz,1H),7.83-7.86(dd,J=2.4Hz,10.1Hz,1H),7.56-7.58(m,2H),7.46-7.52(d,J=5.9Hz,2H),7.35-7.37(d,J=8.6Hz,2H),7.04-7.09(m,1H),6.29-6.31(m,1H),5.92-5.93(d,J=2.1Hz,1H),4.45(s,2H),3.37(s,3H),2.79(s,3H)。

實施例23 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(90mg,0.21mmol)溶解在乙酸酐(6mL)中，向其中加入Et₃N(0.3mL)。反應液室溫攪拌8小時後，減壓濃縮。所得殘留物經矽膠柱層析(DCM/MeOH(v/v)=10/1)純化，得到標題化合物為白色固體(53mg,49%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：476.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.83(s,1H),8.15(s,1H),8.05-8.07(d,J=5.8Hz,1H),7.84-7.89(m,2H),7.54-7.58(m,2H),7.47-7.49(d,J=7.3Hz, 1H),7.35-7.37(d,J=7.4Hz,2H),7.25(s,1H),7.06-7.11(m,1H),6.53-6.54(dd,J=2.2Hz,5.7Hz,1H),3.36(s,3H),2.79(s,3H),2.16(s,3H)。

實施例24 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯-5-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)1-氯-4,5-二氟-2-硝基苯

向反應瓶中加入4-氯-1,2-二氟苯(8.97g,60.4mmol)，冷卻至0℃，然後再依次加入98%的濃H₂SO₄(16.1mL,302mmol)和65%的濃HNO₃(5.0mL,66.4mmol)，在室溫攪拌反應5小時後，傾倒入冰水中，得到的混合物用EtOAc(200mL x 2)萃取，合併的有機相依次用飽和的NaHCO₃水溶液(200mL x 2)和食鹽水(200mL)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，減壓濃縮得到標題化合物為黃色液體(11.31g,96.7%)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)7.41-7.45(m,1H),7.86-7.90(m,1H)。

步驟2)5-氯-2-氟-4-硝基苯酚鉀

化合物1-氯-4,5-二氟-2-硝基苯(5.12g,26.5mmol)和15%的KOH(19.9g,0.35mol)水溶液的混合物攪拌回流3小時後，冷卻至室溫，抽濾，得到標題化合物為黃色固體(5.67g,93.3%)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ(ppm)6.20(d,J=13.2Hz,1H),7.70(d,J=8.6Hz,1H)。

步驟3)4-氨基-5-氯-2-氟苯酚

將化合物5-氯-2-氟-4-硝基苯酚鉀(1.0g,4.35mmol)溶解在EtOH(22mL,95%)和H₂O(8mL)的混合溶劑中，然後向反應液中加入鐵粉(0.97g,17.4mmol)和NH₄Cl(1.86g,34.8mmol)，室溫攪拌反應10小時後，加入甲醇(25mL)和乙酸乙酯(25mL)稀釋反應液，抽濾，將濾液減壓濃縮，殘留物用乙酸乙酯(40mL)稀釋，用食鹽水(25mL)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，減壓濃縮得到標題化合物為灰白色固體(0.6g,85.3%)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ(ppm)4.90(s,2H),6.60(d,J=12.9Hz,1H),6.79(d,J=8.8Hz,1H),9.11(s,1H)。

步驟4)N-(2-氯-5-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-氨基-5-氯-2-氟苯酚(0.97g,6mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(1.42g,6.12mmol)懸浮在DMF(20mL)中，然後向反應液中加入EDCI(0.38mg,7.2mmol)和HOAT(0.16g,1.2mmol)，加熱至80℃，攪拌反應24小時後，冷卻至0℃，然後加入H₂O(200mL)和EtOAc(2mL)稀釋反應液，抽濾，真空乾燥，得到標題化合物為淺棕色固體(1.2g,53.2%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：376.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ(ppm)2.68(s,3H),3.34(s,3H),7.03(d,J=8.8Hz,1H),7.41-7.43(m,2H),7.48-7.52(m,1H),7.56-7.60(m,2H),8.31(d,J=13.8Hz,1H),10.08(s,1H),10.95(s,1H)。

步驟5)4-(5-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺

將化合物N-(2-氯-5-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(751.6mg,2mmol)和t-BuOK(224.4mg,2mmol)懸浮在DMF(4mL)中，然後向反應液中4-氯吡啶甲醯胺(313.2mg,2mmol)，加熱至120℃並攪拌反應15小時，然後冷卻至室溫，加入H₂O(40mL)，得到的混合物室溫攪拌過夜，抽濾，濾餅經矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為淺黃色固體(290mg,60.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：496.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.37(s,1H),8.69-8.66(d,J=13.4Hz,1H),8.55-8.54(d,J=5.6Hz,1H),8.15(s,1H),7.78-7.75(m,2H),7.62-7.58(m,2H),7.55-7.51(m,1H),7.46-7.43(m,3H),7.26-7.24(dd,J=5.6Hz,2.6Hz,1H),3.38(s,3H),2.72(s,3H)。

步驟6)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯-5-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-(5-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶醯胺(297.6mg,0.6mmol)懸浮在EtOAc(4mL)，CH₃CN(4mL)和H₂O(2mL)的混合溶劑中，冷卻至0℃，加入PhI(OAc)₂(97mg,0.3mmol)，於0℃攪拌反應半小時後，升至室溫並攪拌反應12小時，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠逐層析(DCM/CH₃OH(v/v)=20/1)純化得到標題化合物淺米色固體(220mg,78.3%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：468.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.32(s,1H),8.63-8.60(d,J=13.4Hz,1H),7.82-7.81(d,J=5.9Hz,1H),7.64-7.62(m,3H),7.55-7.54(m,1H),7.46-7.44(m,2H),6.22-6.20(dd,J=5.8Hz,2.2Hz,1H),6.05(s,2H),5.85-5.84(d,J=2.0Hz,1H),3.33(s,3H),2.71(s,3H)。

實施例25 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯-5-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯-5-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(200mg,0.43mmol)溶解在乙酸酐(4mL)中，然後向反應液中加入Et₃N(400mg,2.6mmol)，在30℃攪拌反應12小時後，減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=40/1)純化得到標題化合物為淺黃色固體(110mg,50.5%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：510.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)12.15(s,1H),11.38(s,1H),9.45-9.42(d,J=13.4Hz,1H),9.00-8.98(d,J=5.7Hz,1H),8.50-8.48(m,2H),8.42-8.38(m,2H),8.34-8.31(m,1H),8.26-8.24(m,2H),7.52-7.50(dd,J=5.7Hz,1.3Hz,1H),4.14(s,3H),3.51(s,3H),2.84(s,3H)。

實施例26 N-(4-(5-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-2-氟苯氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氯-5-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(234mg,0.5mmol)和Et₃N(0.1mg,1mmol)懸浮在THF(5mL)，然後向反應液中加入氯甲酸苯酯(0.16mg,1mmol)，室溫攪拌反應2小時後，加入嗎啉(0.44mL,5mmol)，室溫繼續攪拌反應24小時後，加入NH₄Cl(30mL)和DCM(30mL)，分液，有機相用DCM(30mL x 3)萃取，合併的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為白色固體(145mg,49.9%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：581.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)11.35(s,1H),9.30(s,1H),8.65-8.61(d,J=13.4Hz,1H),8.14-8.13(d,J=5.7Hz,1H),7.69-7.67(d,J=8.1Hz,1H),7.62-7.58(m,2H),7.54-7.51(m,1H),7.45-7.40(m,3H),6.65-6.63(dd,J=5.7Hz,2.2Hz,1H),3.55-3.53(m,4H),3.43-3.36(m,7H),2.71(s,3H)。

實施例27 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)N-(3-氯-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-氨基-2-氯苯酚(4.0g,28.00mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(7.4g,30.11mmol)懸浮在DCM(70mL)中，然後向反應液中加入EDCI(6.65g,30.11mmol)和HOAT(0.76g,5.68mmol)，加熱至45℃並攪拌反應20小時，然後冷卻至室溫，抽濾，濾餅用DCM(20mL x 3)洗，在真空乾燥箱於50℃乾燥過夜，得到標題化合物為灰色固體(7.1g,72.1%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：358.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.56(s,1H),9.92(s,1H),7.59(m,2H),7.50(m,1H),7.42(m,2H),7.83(dd,J=2.6Hz,8.7Hz,1H),6.90(d,J=8.7Hz,1H),6.88(dd,J=9.6Hz,8.8Hz,1H),3.33(s,3H),2.68(s,3H)。

步驟2)4-(2-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺

將化合物N-(3-氯-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(1.074g,3.0mmol)懸浮在DMF(12mL)中，然後向反應液中加入t-BuOK(539mg,4.8mmol)，室溫攪拌30分鐘後，加入4-氯吡啶醯胺(517mg,3.3mmol)，升溫至120℃並攪拌反應36小時，然後冷卻至室溫，加入水(50mL)淬滅反應，混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(50mL x 3)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=3/1)純化得到標題化合物為白色固體(580mg,40.4%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：478.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.95(s,1H),8.53(d,J=5.6Hz,1H),8.16(d,J=2.4Hz,1H),8.13(br s,1H),7.72(br s,1H),7.60(m,2H),7.51(m,2H),7.44(d,J=7.3Hz,2H),7.38(d,J=8.8Hz,1H),7.32(d,J=2.6Hz,1H),7.17(dd,J=2.6Hz,5.6Hz,1H),3.16(d,J=5.2Hz,3H),2.70(s,3H)。

步驟3)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-(2-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶醯胺(540mg,1.13mmol)懸浮在EtOAc(6mL),CH₃CN(6mL)和H₂O(3mL)的混合溶劑中，冷卻至0℃，然後向反應液中加入PhI(OAc)₂(438mg,1.36mmol)，在0℃攪拌30分鐘後，升至室溫並攪拌反應4.5小時，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=6/1)純化得到標題化合物為米黃色固體(265mg,52.2%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：450.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.89(s,1H),8.10(d,J=2.4Hz,1H), 7.79(d,J=5.8Hz,1H),7.59(m,2H),7.52(m,1H),7.43(d,J=5.7Hz,3H),7.25(d,J=8.8Hz,1H),6.13(dd,J=2.3Hz,5.8Hz,1H),5.93(s,2H),5.72(d,J=2.2Hz,1H),3.36(s,3H),2.70(s,3H)。

實施例28 N-(4-((2-乙醯氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(120mg,0.27mmol)溶解在乙酸酐(5mL)中，然後向反應液中加入Et₃N(0.4mL,1.12mmol)，室溫攪拌反應8小時後，減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(DCM/CH₃OH(v/v)=40/1)純化得到標題化合物為白色固體(65mg,49%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：492.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)：δ(ppm)10.92(s,1H),10.53(s,1H),8.16-8.17(d,J=5.7Hz,1H),8.12-8.13(d,J=2.4Hz,1H),7.49-7.61(m,4H),7.42-7.47(m,3H),7.29-7.32(d,J=8.7Hz,1H),6.60-6.62(dd,J=2.4Hz,5.7Hz,1H),3.36(s,3H),2.70(s,3H),2.03(s,3H)。

實施例29 N-(4-(2-氯-4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)苯氧基)吡啶-2-基)嗎啉-4-甲醯胺

將化合物N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-3-氯苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(135mg,0.3mmol)懸浮在THF(3mL)中，然後向反應液中先加入Et₃N(0.080mL,0.6mmol)，接下來逐滴加入氯甲酸苯酯(0.075mL,0.6mmol)，室溫攪拌2小時後，再加入嗎啉(0.250mL,3.0mmol)，室溫攪拌反應22小時後，加入飽和NH₄Cl水溶液(20mL)和 CH₂Cl₂(20mL)，攪拌10分鐘後，混合物用CH₂Cl₂(20mL x 3)萃取，合併的有機相用食鹽水(20mL x 3)洗，用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(EtOAc/PE(v/v)=6/1)純化得到標題化合物為米黃色固體(43mg,25.4%)。

MS(ESI,pos.ion)m/z：563.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )：δ(ppm)10.92(s,1H),9.25(s,1H),8.12(s,1H),8.11(d,J=3.9Hz,1H),7.59(m,2H),7.52(m,1H),7.44(m,3H),7.31(m,2H),6.56(dd,J=2.3Hz,5.7Hz,1H),3.54(t,J=4.4Hz,5.0Hz,4H),3.37(br s,7H),2.70(s,3H)。

實施例30 N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)4-氨基-3-氟苯酚

化合物3-氟-4-硝基苯酚(2.0g,12.73mmol),10% Pd/C(0.4g)，HCOOK(8.75g,101.85mmol)和THF/H₂O(70mL/20mL)的懸浮液在50℃攪拌反應5小時後，冷卻至室溫，用矽藻土抽濾，濾液用水(30mL)稀釋，混合物用THF(50mL)萃取，得到的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到的殘留物用水(50mL)稀釋，混合物用DCM(50mL)萃取，得到的有機相用無水Na₂SO₄乾燥，然後減壓濃縮，得到標題化合物為棕色固體(1.17g,72.3%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：128.1[M+H]⁺。

步驟2)N-(2-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-氨基-3-氟苯酚(1.0g,7.87mmol)和1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-羧酸(2.19g,9.44mmol)懸浮在CH₂Cl₂(20mL)中，然後向反應液中加入EDCI(3.02g,15.7mmol)和HOAT(0.21g,1.57mmol)，加熱至回流並攪拌反應20小時，然後冷卻至室溫，加入水(10mL)， 並將得到的混合物在室溫條件攪拌過夜，抽濾，濾餅用水(5mL)洗，然後再經矽膠柱層析(CH₂Cl₂/MeOH(v/v)=70/1)純化得到標題化合物為米白色固體(1.25g,46.6%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：342.1[M+H]⁺。

步驟3)4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-3-氟苯氧基)吡啶醯胺

向化合物N-(2-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(300mg,0.879mmol)和t-BuOK(118mg,1.05mmol)的混合物中加入DMF(2.5mL)，室溫攪拌30分鐘後，加入4-氯吡啶甲醯胺(165mg,1.05mmol)，加熱至120℃並攪拌反應5小時，然後冷卻至室溫，加入H₂O(50mL)和EtOAc(2mL)，得到的混合物室溫攪拌過夜，抽濾，濾餅用水(5mL)洗，真空乾燥，得到標題化合物為深棕色固體(370mg,91.2%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：462.2[M+H]⁺,Rt=3.012min。

步驟4)N-(4-((2-氨基吡啶-4-基)氧基)-2-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-3-氟苯氧基)吡啶醯胺(370mg,0.746mmol)溶解在EtOAc(4.5mL)，CH₃CN(4.5mL)和H₂O(2.5mL)混合溶劑中，冷卻至0℃，攪拌30分鐘後，加入PhI(OAc)₂(288mg,0.895mmol)，在0℃繼續攪拌30分鐘後，升至室溫並繼續攪拌反應7小時，抽濾，濾餅用EtOAc(5mL)洗，將濾液減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(CH₂Cl₂/MeOH(v/v)=250/9)純化後，再次用矽膠柱層析(CH₂Cl₂/MeOH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為米白色固體(46mg,17.3%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：434.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.90(s,1H),8.46(t,J=8.7Hz,1H),7.91(d,J=5.9Hz,1H),7.54(t,J=7.6Hz,2H),7.45(t,J=7.4Hz,1H),7.36(d,J=7.3Hz,2H),6.86(d,J=9.0Hz,2H),6.30(dd,J=5.9Hz,2.1Hz,1H),5.96(d,J=2.0Hz,1H),4.58(s,2H),3.36(s,3H),2.79(s,3H)。

實施例31 N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-2-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

步驟1)3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-3-氟苯氧基)吡啶醯胺

將化合物N-(2-氟-4-羥基苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺(300mg,0.879mmol)，t-BuOK(118mg,1.05mmol)和DMF(3mL)的混合物室溫攪拌30分鐘後，加入3,4-二氯-2-吡啶甲醯胺(201mg,1.05mmol)，加熱至120℃並攪拌反應12小時，然後加入EtOAc(1mL)和H₂O(20mL)，得到的混合物室溫攪拌過夜，抽濾，得到標題化合物為棕色固體(379mg,87.0%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：496.0[M+H]⁺。

步驟2)N-(4-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)氧基)-2-氟苯基)-1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺

將化合物3-氯-4-(4-(1,5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-甲醯胺基)-3-氟苯氧基)吡啶醯胺(379mg,0.764mmol)懸浮在EtOAc(4.5mL)，CH₃CN(4.5mL)和H₂O(2.5mL)的混合溶劑中，冷卻至0℃，攪拌30分鐘後，加入PhI(OAc)₂(295mg,0.917mmol)，在0℃攪拌反應30分鐘後，升至室溫並攪拌反應10小時，抽濾，濾餅用EtOAc(5mL)洗，將濾液減壓濃縮，得到的殘留物經矽膠柱層析(CH₂Cl₂/MeOH(v/v)=50/1)純化得到標題化合物為黃色固體(150mg,47.0%)。

MS(ESI,pos,ion)m/z：468.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.97(s,1H),8.53(t,J=9.0Hz,1H),7.81(d,J=5.9Hz,1H),7.56(t,J=7.6Hz,2H),7.48(t,J=7.4Hz,1H),7.39(d,J=7.4Hz,2H),6.95-6.90(m,1H),6.90-6.86(m,1H),6.17(d,J=5.9Hz,1H),5.21(s,2H),3.38(s,3H),2.81(s,3H)。

生物試驗 生物分析方法

分析用的LC/MS/MS系統包括Agilent 1200系列真空脫氣爐，二元注射泵，孔板自動採樣器，柱恒溫箱，帶電噴霧電離(ESI)源的Agilent G6430三級四級杆質譜儀。定量分析在MRM模式下進行，MRM轉換的參數如表A所示：

分析使用Agilent XDB-C18，2.1 x 30mm，3.5μM柱，注入5μL樣品。分析條件：流動相為0.1%的甲酸水溶液(A)和0.1%的甲酸甲醇溶液(B)。流速為0.4mL/min。流動相梯度如表B所示：

此外，用於分析的還有Agilent 6330系列LC/MS/MS光譜儀，配備有G1312A二元注射泵，G1367A自動採樣器和G1314C UV檢測器；LC/MS/MS光譜儀採用ESI放射源。使用標準液對每一個分析物進行合適的陽離子模型 處理和MRM轉換進行最佳的分析。在分析期間使用Capcell MP-C18柱，規格為：100 x 4.6mm I.D.，5μM(Phenomenex,Torrance,California,USA)。流動相是5mM醋酸銨，0.1%甲醇水溶液(A)：5mM醋酸銨，0.1%甲醇乙腈溶液(B)(70：30，v/v)；流速為0.6mL/min；柱溫保持在室溫；注入20μL樣品。

實施例A 人和大鼠肝微粒體中的穩定性

將人或大鼠肝微粒體置於聚丙烯試管中孵育，並引導其複製。典型的孵育混合液包括人或大鼠肝微粒體(0.5mg蛋白質/mL)，目標化合物(5μM)和總體積為200μL的NADPH(1.0mM)磷酸鉀緩衝液(PBS，100mM，pH值為7.4)，將化合物溶解在DMSO中，並使用PBS將其稀釋，使其最終的DMSO溶液的濃度為0.05%。並在37℃下與空氣相通的水浴中進行孵育，預孵育3分鐘後向混合液中加入蛋白並開始反應。在不同的時間點(0，5，10，15，30和60min)，加入同體積冰冷乙腈終止反應。樣品於-80℃下保存直到進行LC/MS/MS分析。

化合物在人或大鼠肝微粒體孵育混合物中的濃度是通過LC/MS/MS的方法來測定的。濃度範圍的線性範圍是通過每一個受試化合物來確定的。

平行孵育試驗使用變性的微粒體作為陰性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0,15和60分鐘)終止。

右美沙芬(70μM)作為陽性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0，5，10，15，30和60分鐘)終止。每一種測定方法中都包括陽性和陰性對照樣品，以保證微粒體孵化體系的完整性。此外，本發明所述化合物在人或大鼠肝微粒體中的穩定性資料也可由以下試驗得到。將人或大鼠肝微粒體置於聚丙烯試管中孵育，並引導其複製。典型的孵育混合物包括人或大鼠肝微粒體(最終濃度：0.5mg蛋白/mL)，化合物(最終濃度：1.5μM)和總體積為30μL的K-緩衝溶液(含1.0mM EDTA,100mM,pH 7.4)。將化合物溶解在DMSO中，並用K-緩衝溶液稀釋，使DMSO的最終濃度為0.2%。預孵育10分鐘後，加入15μL NADPH(最終濃度：2mM)進行酶促反應，整個試驗在37℃的孵育管中進行。在不同的時間點(0，15，30和60分鐘)，加入135μL乙腈(含IS)終止反應。以4000rpm離心10分鐘，除去蛋白， 收集上層清液，用LC-MS/MS分析。

在上述試驗中，酮色林(1μM)被選作陽性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0，15，30和60分鐘)終止。每一種測定方法中都包括陽性對照樣品，以保證微粒體孵化體系的完整性。

資料分析

對於每一個反應，將化合物在人或大鼠肝微粒體孵育中的濃度(以百分比表示)按相對零時間點的百分比作圖，以此來推斷體內肝固有清除率CL_int(ref.：Naritomi Y,Terashita S,Kimura S,Suzuki A,Kagayama A,Sugiyama Y.Prediction of human hepatic clearance from in vivo animal experiments and in vitro metabolic studies with liver microsomes from animals and humans.Drug Metabolism and Disposition 2001,29：1316-1324.)

將化合物孵育在人和大鼠肝微粒體中時，本發明所述化合物表現出良好的半衰期(T_1/2)。

實施例B 小鼠、大鼠、犬和猴子口服定量本發明化合物後的藥代動力學評價

本發明對本發明化合物在小鼠、大鼠、犬或猴子體內的藥代動力學研究進行了評估。本發明化合物以水溶液或2% HPMC+1%吐溫-80的水溶液，5% DMSO+5%的鹽水溶液，4% MC或膠囊形式進行給藥。對於靜脈注射給藥，動物給予1或2mg/kg的劑量。對於口服劑量(p.o.)，大鼠和小鼠是5或10mg/kg，犬和猴子是10mg/kg。在時間點為0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12和24小時取血(0.3mL)，並在3,000或4,000rpm 下離心10分鐘。收集血漿溶液，並於-20℃或-70℃下保存直到進行上述的LC/MS/MS分析。

將化合物靜注或口服給藥時，本發明所述化合物表現出良好的藥代動力學性質，包括理想的清除率(Cl)，半衰期(T_1/2)和好的口服生物利用度。

本發明化合物抑制酪氨酸激酶受體活性，特別是抑制c-Met，VEGFR，Ron和Axl活性和作為抗腫瘤藥物的功效是通過下述動物異種移植模型試驗來進行評價的。研究結果表明本發明化合物可以有效地抑制c-Met, VEGF-R2，Ron和Axl的磷酸化作用，並且劑量依賴性的抑制裸鼠移植瘤的增殖。

激酶試驗

激酶試驗通過檢測摻入γ-³³P-ATP的髓磷脂堿基蛋白(MBP)來完成的。製備20μg/mL的MBP(Sigma #M-1891)三羥甲基氨基甲烷緩衝鹽溶液(TBS；50mM Tris pH 8.0,138mM NaCl,2.7mM KCl)，包被高結合性的白384孔板(Greiner)，每孔60μL。4℃，孵育24小時。之後用100μL TBS洗板3次。激酶反應在總體積為34μL的激酶緩衝液(5mM Hepes pH 7.6,15mM NaCl,0.01%牛血清白蛋白(Sigma #I-5506),10mM MgCl₂,1mM DTT,0.02% TritonX-100)中進行。將化合物溶解在DMSO中，加入各孔中，DMSO的最終濃度為1%。每個資料測定兩遍，每個化合物的測定至少進行兩次試驗。比如，酶的最終濃度為10nM或20nM。加入沒有標記的ATP(10μM)和γ-³³P標記的ATP(每孔2×10⁶cpm，3000Ci/mmole)開始反應。反映在室溫下震盪進行1個小時。384孔板用7x的PBS清洗，然後加入每孔50μL的閃爍液。用Wallac Trilux計數器檢測結果。對於所屬領域的技術人員來說，這僅是眾多檢測方法中的一種，其他的方法亦可。

上述試驗方法可以得到抑制的IC₅₀和/或抑制常數K_i。IC₅₀定義為在試驗條件下，抑制50%酶活性時的化合物濃度。利用½ log的稀釋倍數做出包含10個濃度點的曲線，估算IC₅₀值(例如，通過以下化合物濃度做出一條典型的曲線：100μM,30μM,10μM,3μM,1μM,0.3μM,0.1μM,0.03μM,0.01μM,0μM)。

c-Met(h)激酶測定

人c-Met在8mM pH值為7.0的MOPS，0.2mM EDTA，250μM KKKSPGEYVNIEFG，10mM醋酸鎂和[γ-³³P-ATP](比活性約500cpm/pmol，濃度根據需求確定)存在的條件下進行孵育。加入MgATP混合物後開始反應。室溫下孵育40分鐘之後，向其中加入3%磷酸溶液來終止反應。將10μL的反應液呈斑點狀分佈於P30篩檢程式上，並用75mM磷酸在5分鐘內清洗3次，並在乾燥和閃爍計數之前立刻放入甲醇溶液中保存。

KDR(h)(VEGF-R2(h))激酶測定

人KDR在8mM pH值為7.0的MOPS，0.2mM EDTA，0.33mg/mL髓磷脂堿蛋白，10mM醋酸鎂和[γ-³³P-ATP](比活性約500cpm/pmol，濃度根據需求確定)存在的條件下進行孵育。加入MgATP混合物後開始反應。室溫下孵育40分鐘之後，向其中加入3%磷酸溶液終止反應。將10μL反應液呈斑點狀分佈於P30篩檢程式上，並用75mM磷酸在5分鐘內清洗3次，並在乾燥和閃爍計數之前立刻放入甲醇溶液中保存。

Axl(h)激酶測定

人Axl在8mM pH值為7.0的MOPS，0.2mM EDTA，0.33mg/mL髓磷脂堿蛋白，10mM醋酸鎂和[γ-³³P-ATP](比活性約500cpm/pmol，濃度根據需求確定)存在的條件下進行孵育。加入MgATP混合物後開始反應。室溫下孵育40分鐘之後，加入3%磷酸溶液來終止反應。將10μL反應液呈斑點狀分佈於P30篩檢程式上，並用75mM磷酸在5分鐘內清洗3次，並在乾燥和閃爍計數之前立刻放入甲醇溶液中保存。

本發明中的激酶試驗是由英國Millipore公司來完成的(Millipore UK Ltd,Dundee Technology Park,Dundee DD2 1SW,UK)。

本發明化合物的激酶抑制活性也可以通過KINOMEscan ^TM測試，它主要是基於定量測定樣品和固定的、有活性位元點導向的配體與激酶競爭性結合能力的試驗。這個試驗的完成需要結合以下三要素：DNA-標記的激酶、固定的配體和待測樣品。待測樣品與固定配體的競爭性結合激酶的能力可以通過測定DNA標記中的PCR的量來確定。

對於大多數試驗來說，激酶-標記的T7噬菌體菌株是由來源於BL21菌株的大腸桿菌宿主製備得到的。即先將大腸桿菌培養到對數生長期，然後用T7噬菌體將其感染，並將其在連續震盪下於32℃孵化直到裂解，將裂解液離心、抽濾，除去細胞碎片。剩餘的在HEK-293細胞內產生的激酶緊接著用DNA來標記，用於qPCR的檢測。包被有鏈黴親和素的磁珠與生物素化的小分子配體在室溫下反應30分鐘後，生成用於激酶試驗的親和樹脂。配位好的磁珠被過量的生物素堵塞，用封閉緩衝溶液(SEABLOCK^TM (Pierce),1% BSA,0.05%吐溫-20,1mM DTT)洗滌除去游離的配體，以減少非特異性結合。結合反應都是通過激酶、配位好的親和性的磁珠和待測樣品在1x結合緩衝液(20% SEABLOCK^TM,0.17x PBS,0.05%吐溫-20,6mM DTT)中完成的。所有反應均在終體積為0.135mL的聚苯乙烯的96孔板中進行。試驗的孔板均在連續震盪下於室溫條件孵化1小時，親和性的磁珠均用洗滌緩衝液(1x PBS,0.05%吐溫-20)洗滌，然後重懸浮於洗脫緩衝液(1x PBS,0.05%吐溫-20,0.5μM非生物素化親和性配體)中，並在連續震盪下於室溫條件孵化30分鐘。洗脫液中的激酶濃度通過qPCR測定。

本發明中的激酶試驗是由DiscoveRx公司的KINOMEscan ^TM分析服務來完成的(42501 Albrae St.Fremont,CA 94538,USA)，本發明實施例的測試結果列於表3中。

Kd-結合常數(Binding Constants) 細胞磷酸化試驗

通常，細胞與待測化合物預孵育，使其達到充分的靶標結合。利用夾心酶聯免疫分析(Sandwich-ELISA)技術檢測自磷酸化水準。利用½ log的稀釋倍數做出包含8個濃度點的曲線，估算IC₅₀值(每個濃度測定2次)。本發明中細胞磷酸化試驗可以通過ProQinase GmbH公司(ProQinase GmbH,Breisacher Straße 117 D-79106,Freiburg,Germany)來完成的。

c-Met磷酸化試驗

眾所周知，人胃腺癌細胞株MKN45過表達c-Met。c-Met過表達導致組成型，配體非依賴的激酶自磷酸化。加入SU11274，磷酸化Met水準顯著降低，因此可以確定本發明化合物的抑制能力。通過夾心酶聯免疫分析(Sandwich-ELISA)技術可以對磷酸化Met信號進行定量。試驗設已知Met抑制劑組，以驗證試驗方法的可靠性。

VEGF-R2磷酸化試驗

已知永生化人臍靜脈內皮細胞(HUE)過表達VEGF-R2。用生理學的配體VEGF-A刺激這些細胞，可導致明顯的受體自磷酸化。細胞與待測化合物預孵育，達到充分的靶標結合。優化刺激條件，達到劑量依賴性的抑制磷酸化VEGF-R2信號，並通過夾心酶聯免疫分析(Sandwich-ELISA)技術對磷酸化信號進行定量。試驗設已知VEGF-R2抑制劑組，以驗證試驗方法的可靠性。

Axl磷酸化試驗

通常利用小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)進行細胞Axl磷酸化試驗。細 胞通過轉染表達全長的Axl蛋白。之後通過克隆選擇獲得一個高度Axl自磷酸化的轉染細胞。然後加入星狀孢子素，磷酸化Axl水準顯著降低，因此可以確定化合物的抑制能力。並通過夾心酶聯免疫分析(Sandwich-ELISA)技術對磷酸化Axl水準進行定量。

異種移植腫瘤模型

本發明化合物的藥效是通過移植腫瘤的標準鼠類模型來進行評價的。人腫瘤細胞(U87MG膠質瘤細胞，ATCC)培養、收集後，於後腹側皮下接種於6-7周齡的雌性裸小鼠體內(BALB/cA nu/nu，上海SLAC動物實驗室)(對於溶劑組和每一個劑量組：n=6-10))。當腫瘤體積達到100-250mm³時，動物隨機地分為溶劑對照組(5% DMSO+70% Captisol^®(30%),7% HCl(pH1),18% Captisol^®(30%)；或者7% DMSO,7% HCl(pH1),70% Captisol^®(30%),16% Captisol^®(30%))和化合物組。後續採用化合物對動物進行灌胃給藥，從腫瘤細胞接種後的0到15天中的任何地方開始，並且通常在試驗中每天進行一次。

腫瘤生長抑制(TGI)分析

腫瘤的演化生長是通過腫瘤體積與時間的關係來進行評價的。皮下腫瘤的長軸(L)和短軸(W)通過測徑器每週測定兩次，腫瘤的體積(TV)通過公式(L×W²)/2)進行計算。TGI由溶劑組小鼠腫瘤體積的中值和藥物組小鼠腫瘤體積中值的差值來進行計算，以溶劑對照組腫瘤體積中值的百分比來表示，通過下述公式進行計算： 原始統計分析是通過重複方差測定分析(RMANOVA)來完成的。接下來通過Scheffe psot hoc試驗方法進行多重比較。單獨溶劑(5% DMSO+70% Captisol^®(30%),7% HCl(pH1),18% Captisol^®(30%)；或者7% DMSO,7% HCl(pH1),70% Captisol^®(30%),16% Captisol^®(30%))為陰性對照。

表4本發明實施例的異種移植腫瘤模型研究資料

最後需要注意的是，還有其它方式可以實施本發明。相應地，本發明的實施例是將作為例證進行說明，但並不限於本發明所描述的內容，還可能是在本發明範圍內所作的修改或在申請專利範圍中所添加的等同內容。本發明所引用的所有出版物或專利都將作為本發明的參考文獻。

Claims (30)

1. 一種如式(I)所示的化合物： 或其藥學上可接受的鹽，其中：Q為-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；W為CR⁷或N；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基，C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F，Cl，Br，CN，N₃，OR^a，C_1-6烷基，C_1-6鹵代烷基，C_2-6烯基或C_2-6炔基；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基， C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-6脂肪族，C_1-6鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為H，C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基或C_6-10芳基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基和C_6-10芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-6烷基，C_2-6烯基，C_2-6炔基，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代。
2. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，苯基-C_1-2亞烷基或(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，苯基-C_1-2亞烷基，(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子 的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-2亞烷基，苯基和包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-4烯基，C_2-4炔基，OR^a，NR^aR^b，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。
3. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和R⁷獨立地為H，D，F或Cl。
4. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基或包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，當R^a和R^b與同一個氮原子相連時，R^a，R^b，和與他們相連的氮原子一起，可以任選地形成取代的或非取代的3-8個原子組成的雜環，其中，所述C_1-4烷基，C_1-4鹵代烷基，C_3-6環烷基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基和3-8個原子組成的雜環可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-3鹵代烷基，C_1-3烷氧基或C_1-3烷基氨基的取代基所取代。
5. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^d為H，C_1-4烷基或C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基和C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，CN，OR^a，NR^aR^b，C_1-3烷基，C_2-4烯基，C_2-4炔基，R^aO-C_1-2亞烷基或R^aR^bN-C_1-2亞烷基的取代基所取代。
6. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q為-N(R^c)C(=O)R^d。
7. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各X，Y和Z獨立地為H，D，CH₃，CH₂CH₃，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。
8. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 Q為：
9. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，具有式(II)所示結構： 其中：Q為-N(R^c)C(=O)R^d或-N(R^c)C(=O)OR^a；各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-6烷基，C_3-8環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基，或(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-8環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_3-8環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-7雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F，Cl，Br，CN，C_2-6烯基， C_2-6炔基，OR^a，NR^aR^b，R^aO-C_1-4亞烷基或R^aR^bN-C_1-4亞烷基的取代基所取代；各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-6烷基，C_3-6環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基或(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基，其中，所述C_1-6烷基，C_3-6環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，C_6-10芳基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基，C_3-6環烷基-C_1-4亞烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-4亞烷基，C_6-10芳基-C_1-4亞烷基和(包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的5-10個原子組成的雜芳基)-C_1-4亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代；和R^d為C_1-6烷基，其中，所述C_1-6烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，OH，NH₂，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。
10. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q為-N(R^c)C(=O)R^d。
11. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各X，Y和Z獨立地為H，D，C_1-4烷基或苯基，其中，所述C_1-4烷基和苯基可以任選地被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代。
12. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各R^a，R^b和R^c獨立地為H，C_1-4烷基，C_3-6環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基或包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基，其中，所述C_1-4烷基，C_3-6環烷基，包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基，C_3-6環烷基-C_1-2亞烷基和包含1，2或3個獨立選自O，S和N的雜原子的C_3-6雜環基-C_1-2亞烷基可以任選地被1，2，3或4個獨立 選自D，F，Cl，CN，N₃，OH，NH₂，C_1-6鹵代烷基，C_1-6烷氧基或C_1-6烷基氨基的取代基所取代。
13. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^d為Me，Et，n-Pr，i-Pr，n-Bu，i-Bu或t-Bu。
14. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q為-N(R^c)C(=O)R^d。
15. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，各X，Y和Z獨立地為H，D，Me，CH₂D，CHD₂，CD₃，乙基，丙基，異丙基，苯基或被1，2，3，4或5個獨立選自D，F或Cl的取代基所取代的苯基基團。
16. 如申請專利範圍第9項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Q為：
17. 如申請專利範圍第1項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，具有以下其中之一的結構：
18. 一種藥物組合物，其包含如申請專利範圍第1項至第17項任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物，或它們的組合。
19. 如申請專利範圍第18項所述的藥物組合物，其中更進一步地包含附加治療劑，這些附加治療劑選自化學治療藥物，抗增殖劑，用於治療動脈粥樣硬化的藥物，用於治療肺纖維化的藥物，或它們的組合。
20. 如申請專利範圍第19項所述的藥物組合物，其中所述的附加治療劑是阿黴素(Adriamycin)，雷怕黴素(Rapamycin)，Temsirolimus，依維莫司(Everolimus)，Ixabepilone，吉西他濱(Gemcitabin)，環磷醯胺(cyclophosphamide)，地塞米松(dexamethasone)，依託泊苷(etoposide)，氟尿嘧啶(fluorouracil)，阿法替尼(afatinib)，alisertib，amuvatinib，阿西替尼(axitinib)，波舒替尼(bosutinib)，brivanib，cabozantinib，西地尼布(cediranib)，crenolanib，克卓替尼(crizotinib)，dabrafenib，dacomitinib，達沙替尼(dasatinib)，danusertib，dovitinib，厄洛替尼(erlotinib)，foretinib，ganetespib，吉非替尼(gefitinib)，ibrutinib，伊馬替尼(imatinib)，iniparib，拉帕替尼(lapatinib)，lenvatinib，linifanib，linsitinib，馬賽替尼(masitinib)，momelotinib，莫替沙尼(motesanib)，來那替尼(neratinib)，niraparib，尼洛替尼(nilotinib)，oprozomib，olaparib，帕唑帕尼(pazopanib)，pictilisib，ponatinib，quizartinib，regorafenib，rigosertib，rucaparib，ruxolitinib，塞卡替尼(saracatinib)，saridegib，索拉非尼(sorafenib)，舒尼替尼(sunitinib)，tasocitinib，telatinib，tivantinib，tivozanib，tofacitinib，trametinib，凡德他尼(vandetanib)，veliparib，vemurafenib，vismodegib，volasertib，干擾素(an interferon)，卡鉑(carboplatin)，托泊替康(topotecan)，紫杉醇(taxol)，長春堿(vinblastine)，長春新堿(vincristine)，替莫唑胺(temozolomide)，托西莫單抗(tositumomab)，trabedectin，belimumab，貝伐單抗(bevacizumab)，brentuximab，cetuximab，gemtuzumab，ipilimumab，ofatumumab，panitumumab，ranibizumab，rituximab，tositumomab，曲妥單抗(trastuzumab)或它們的組合。
21. 一種使用如申請專利範圍第1項至第17項任一項所述化合物來製 備用於防護、處理、治療或減輕患者增殖性疾病的藥品的用途。
22. 如申請專利範圍第21項所述的用途，其中所述的增殖性疾病是轉移癌、結腸癌，胃腺癌，膀胱癌，乳腺癌，腎癌，肝癌，肺癌，皮膚癌，甲狀腺癌，腦瘤，頸癌，前列腺癌，胰腺癌，CNS(中樞神經系統)的癌症，惡性膠質瘤，骨髓增生病，動脈粥樣硬化或肺纖維化。
23. 一種使用如申請專利範圍第1項至第17項任一項所述的化合物來製備用於在生物標本內抑制或調節蛋白激酶活性的藥品的用途，所述用途包含使用所述化合物與所述的生物標本接觸。
24. 如申請專利範圍第23項所述的用途，其中所述蛋白激酶為受體酪氨酸激酶。
25. 如申請專利範圍第24項所述的用途，其中受體酪氨酸激酶為VEGFR，c-Met，Ron，Axl或它們的組合。
26. 一種使用如申請專利範圍18項至第20項任一項所述的藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者增殖性疾病的藥品的用途。
27. 如申請專利範圍第26項所述的用途，其中所述的增殖性疾病是轉移癌、結腸癌，胃腺癌，膀胱癌，乳腺癌，腎癌，肝癌，肺癌，皮膚癌，甲狀腺癌，腦瘤，頸癌，前列腺癌，胰腺癌，CNS(中樞神經系統)的癌症，惡性膠質瘤，骨髓增生病，動脈粥樣硬化或肺纖維化。
28. 一種使用如申請專利範圍第18項至第20項任一項所述的藥物組合物來製備用於在生物標本內抑制或調節蛋白激酶活性的藥品的用途，所述用途包含使用所述的藥物組合物與所述的生物標本接觸。
29. 如申請專利範圍第28項所述的用途，其中所述蛋白激酶為受體酪氨酸激酶。
30. 如申請專利範圍第29項所述的用途，其中受體酪氨酸激酶為VEGFR，c-Met，Ron，Axl或它們的組合。