TWI504412B

TWI504412B - ｆ正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法

Info

Publication number: TWI504412B
Application number: TW102141015A
Authority: TW
Inventors: Chyng Yann Shiue; Cheng Yi Cheng; Ta Kai Chou
Original assignee: Nat Defense Medical Ct
Priority date: 2013-11-12
Filing date: 2013-11-12
Publication date: 2015-10-21
Also published as: TW201517922A

Description

18 F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法

本發明係有關於一種¹⁸ F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法，特別是一種利用單一反應器即可完成¹⁸ F離子取代以及NO₂ 胺化反應之¹⁸ F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法。

隨著醫學的進步，人類的壽命已經比以前大幅增加，隨之而來的神經退化性疾病(neurodegenerative diseases)、神經精神障礙(neuropsychiatric disorders)、癌症以及藥物濫用(substance abuse)已經成為全世界主要的社會經濟問題。非侵入式造影方法，例如：正子斷層掃描(Positron Emission Tomography,PET)與適當的放射性配體(radioligands)偶合可能提供一個診斷及監測這些病變的治療反應的客觀的方法。

神經傳導物(neurotransmitters)的異常，特別是在多巴胺(dopamine)系統，已經被證實在不同的精神疾病與神經疾病中扮演重要的角色。在其他的神經傳導物中，血清素運轉器(serotonin transporters,SERT)已知與帕金森氏症(Parkinson's disease)、重度憂鬱症(major depression)、精神分裂症(schizophrenia)、藥物成癮(drug addiction)、焦慮(anxiety)以及強迫症(obsessive compulsive disorders)有關，但卻少有深入研究，原因之一可能是因為缺乏其專一的造影劑。

在過去，以同位素碳-11標定的[¹¹ C]-(+)McN5652被認為是最有希望成為研究血清素運轉器(SERT)的正子造影劑(PET agent)。然而，該藥劑具有高度非專一性結合，且在人體正子斷層掃描研究上，只有中等的訊號對比(signal contrast)。此外，[¹¹ C]-(+)McN5652的藥物動力學並不理想，因為其腦內攝取(brain uptake)速度慢，且同位素碳-11(¹¹ C)的半衰期短，而將該化合物以同位素氟-18(¹⁸ F)標記並無法增加它的造影性質。

後來，一類名為N,N-dimethyl-2-(arylthio)benzylamines的新穎血清素再吸收抑制劑(serotonin reuptake inhibitors)已被報導對血清素運轉器(SERT)具有高度選擇性及親和性，其類似物也已被研發出來，例如：以同位素碘-123標定的[¹²³ I]IDAM(5-iodo-2-[[2-2-[(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]benzyl alcohol)、[¹²³ I]ADAM(2-[[2-[[dimethylamino]methyl]phenyl]thio]-5-iodophenylamine)以及以同位素碳-11(¹¹ C)標定的IDAM、ADAM、MADAM(2-[2-dimethylaminomethyl-phenylsulphanyl]-5-methyl-phenylamine)、AFM(2-[2-(dimethylaminomethylphenylthio)]-5-fluoromethylphenylamine)、AFA(2-[2-[[(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-5-fluorophenylamine)、AFE(2-[2-[[(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-5-(2-fluoroethyl)phenylamine)、DAPA(5-bromo-2-[2-(dimethylaminomethylphenylsulfanyl)]phenylamine)以及DASB(3-amino-4-[2-(dimethylaminomethylphenylthio)]benzonitrile)作為血清素運轉器(SERT)單光子放射電腦斷層攝影(single photon emission computed tomography,SPECT)以及正子斷層掃描(PET)的造影劑。

初步的人體研究顯示，[¹²³ I]ADAM有潛力可成為中樞性血清素系統(the central serotonin system)體內(in vivo)研究的放射性配體。然而，該配體仍有如下限制：(1)¹²³ I標定的放射性配體需要在擁有高能量粒子迴旋加速器(high-energy cyclotron)之單位才能使用，這種不確定性或多或少都會對研究進展造成不方便；(2)在中腦(mid-brain)外的腦內攝取量(brain uptake)並無法顯示出足夠的對比訊號，這會造成在前額葉(prefrontal lobe)、額葉(frontal lobe)以及顳葉(temporal lobe)這些區域的單光子電腦斷層掃描半定量分析困難，而這些區域對於評估神經精神障礙來說是非常重要的；(3)該配體需花費長時間(4小時)才能達到平衡狀態，這可能會增加動物試驗的風險以及長時間佔用掃描儀器。

同樣地，研究顯示¹¹ C標定的ADAM、MADAM、AFM、AFA、AFE以及DASB也有潛力可成為血清素體內研究的放射性配體，尤其是放射藥物[¹¹ C]DASB已被發現很適合搭配正子斷層掃描(PET)，以探測人體中血清素再吸收位置(serotonin reuptake sites)以及血清素再吸收抑制劑的藥物佔有率(drug occupancy)。然而，¹⁸ F比¹¹ C具有較多的優點，包括：(1)¹⁸ F比¹¹ C具有較低的正子能量(¹⁸ F：0.635MeV，¹¹ C：0.96MeV)，因此空間解析模糊(spatial resolution smearing)的情況較少；(2)由於¹⁸ F的半衰期較長，如果需要的話，正子斷層掃描的研究可以多進行2個小時，而¹¹ C則只有20分鐘的半衰期，可使用的時間極短；因此，使用¹⁸ F可以建立一個較佳的掃描試驗流程；(3)由於¹⁸ F的半衰期較長，使用¹⁸ F進行放射物化學合成(radiosynthesis)比使用¹¹ C方便；(4)當一正子斷層掃描檢驗場所無法使用粒子迴旋加速器(cyclotron)來產生正子造影劑時，可以由其他單位支援，將¹⁸ F標誌之正子造影劑由外界送到該檢驗場所，使正子斷層掃描可以如期進行。

據此，本案發明人先於2003年已發展出一種新的以¹⁸ F標定的血清素放射性配體，N,N-dimethyl-2-(2-amino-4-¹⁸ F-fluorophenylthio)benzylamine(4-[¹⁸ F]-ADAM)，以及以人工操作合成該配體的方法。如第一圖所示，該配體4-[¹⁸ F]-ADAM(5a)係以potassium[¹⁸ F]fluoride/Kryptofix_2.2.2 (2)將溴-前驅物N,N-dimethyl-2-(2-nitro-4-bromophenylthio)benzylamine(1a)或硝酸-前驅物N,N-dimethyl-2-(2,4-dinitrophenylthio)benzylamine(1b)進行親核取代反應(nucleophilic substitution)，形成N,N-dimethyl-2-(2-nitro-4-¹⁸ F-fluorophenylthio)benzylamine(3a)之後，再與NaBH₄ /Cu(OAc)₂ (4)進行還原反應，並以HPLC純化。

以人工操作合成4-[¹⁸ F]-ADAM的放射化學產量為5-10%(decay corrected)，自EOB(End of Bombardment)合成時間為150分鐘，HPLC分析顯示放射化學純度>98%，比活度(specific activity)為0.6Ci/μmol。初步以大鼠研究顯示，4-[¹⁸ F]-ADAM對血清素具有親和性及高度專一性；而以狒狒進行研究也顯示4-[¹⁸ F]-ADAM在中腦的攝取量約於注射後一小時達到高峰，之後緩慢的減少，在注射後2小時及3小時，中腦內的放射線對小腦內的放射線比例分別為3.2及4.2，由這些發現可推測，4-[¹⁸ F]-ADAM適合搭配正子斷層掃描(PET)以研究在活體大腦中的血清素。

此外，Huang等人也於2005年發表4-[¹⁸ F]-ADAM的類似物4-[¹⁸ F]-AFM(2-[[2-Amino-4-([¹⁸ F]fluoromethyl)phenyl]thio]-N,N-dimethylbenzene-methana mine)(5c)、4-[¹⁸ F]-AFE(2-[[2-Amino-4-(2-[¹⁸ F]fluoroethyl)phenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine)(5d)、4-[¹⁸ F]-AFP(2-[[2-Amino-4-(3-[¹⁸ F]fluoropropyl)phenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine)(5e)等血清素運轉器造影劑的製備方法，其合成程式與4-[¹⁸ F]-ADAM(5a)相同，皆經過：(1)[¹⁸ F]離子的分離；(2)以K[¹⁸ F]/K_2.2.2 對相關前驅物進行親核取代反應；(3)以NaBH₄ /Cu(OAc)₂ 進行還原反應；(4)以HPLC純化產物；(5)配方化反應(Formulation)。

請再參閱第一圖，4-[¹⁸ F]-AFM(5c)、4-[¹⁸ F]-AFE(5d)、4-[¹⁸ F]-AFP(5e)等血清素運轉器造影劑的製備步驟如第一圖所示，首先，分別將各相關前驅物2-[[4-(chloromethyl)-2-nitrophenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine(1c)、4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzeneethanol4-methylbenezenesulfonate(1d)、4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzenepropanol 4-methylbenezenesulfonate(1e)以potassium[¹⁸ F]fluoride/Kryptofix_2.2.2 (2)進行親核取代反應，各形成中間產物2-[[2-nitro-4-([¹⁸ F]fluoromethyl)phenyl]thio]-N,N-dimethylbenzene-methanamine(3c)、2-[[2-nitro-4-(2-[¹⁸ F]fluoroethyl)phenyl]thio]-N,N-dimethyl benzenemethanamine(3d)、2-[[2-nitro-4-(3-[¹⁸ F]fluoropropyl)phenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine(3e)之後，再與NaBH₄ /Cu(OAc)₂ (4)進行還原反應，分別得到4-[¹⁸ F]-AFM(5c)、4-[¹⁸ F]-AFE(5d)、4-[¹⁸ F]-AFP(5e)，之後再以HPLC純化。

由於4-[¹⁸ F]-ADAM、4-[¹⁸ F]-AFM、4-[¹⁸ F]-AFE、4-[¹⁸ F]-AFP等血清素運轉器造影劑的製備步驟繁瑣，且¹⁸ F為輻射物，若以人工操作進行製備，不但操作麻煩，一次可製備的份量少，無法大量製造，且操作人員需長期暴露在輻射下，對其健康將造成不利的影響。因此，本案發明人後續於2007年在中華民國專利發明第I329021號中揭示一種以¹⁸ F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的自動合成製造方法及其自動合成之裝置。其中，請參考第二圖所顯示的即為習知血清素運轉器造影劑之自動合成系統100的基本架構，其至少包含第一第一試劑存取裝置20、第一分離裝置11、水溶液儲存槽21、第一反應器12、第二試劑存取裝置22、第二分離裝置13、廢液儲存槽30、第二反應器14、第三試劑存取裝置23、第三分離裝置15、第一收集器16、第四試劑存取裝置24、第四分離裝置17以及第二收集器18。接著，搭配上述自動合成裝置之自動合成步驟簡述如下：首先，將[¹⁸ F]離子水溶液通過第一分離裝置11，以吸附[¹⁸ F]離子，再將K₂ CO₃ /Kryptofix_2.2.2 溶液通過第一分離裝置11，以帶出[¹⁸ F]離子至第一反應器12內，並於一適當溫度及時間通鈍氣進行乾燥。然後，將前驅物溶液加到第一反應器12內，並於一適當溫度下進行親核取代反應一段時間後，冷卻至室溫。加入水後，將第一反應器12內的溶液通過第二分離裝置13，以吸附溶液中的中間產物，再將二氯甲烷(CH₂ Cl₂ )溶液通過第二分離裝置13，以帶出中間產物至第二反應器14內，並於一適當溫度及時間通鈍氣進行乾燥。後續，再將將乙醇、Cu(OAc)₂ -H₂ O飽和溶液以及NaBH₄ 溶液依序加到第二反應器14內，並於一適當溫度下進行還原反應一段時間後，將混合物注入第三分離裝置15分離純化。然後，將含有產物的溶液收集到一含有水的第一收集器16中，再將將收集器內的溶液通過第四分離裝置17，以吸附溶液中的產物，並以清洗液清洗第四分離裝置17，以去除管柱內殘餘的乙腈(acetonitrile)。最後，將乙醇通過第四分離裝置17，以帶出產物至一含有生理食鹽水的第二收集器18內備用。上述裝置與方法的目的即在於提供一種¹⁸ F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法及裝置以自動化合成方法與自動化合成系統來簡化製造過程，並減少操作人員暴露在輻射下的機會。

然而，上述方法的準備步驟繁複、合成時間長以及無法直接應用於商業化購買之自動化合成模組。由此可見，上述習用方法仍有諸多缺失，亟待加以改良。

有鑑於此，本發明提供一種利用單一反應器即可完成¹⁸ F離子取代以及NO₂ 胺化反應之¹⁸ F正子放射性同位素標誌之血清素運轉器造影劑的製造方法。其中本發明所提供之方法係配合一自動化合成系統來實施，此自動化合成系統至少包含一第一分離裝置、一反應器、一第二分離裝置、一第一收集器、一第三分離裝置與一第二收集器。上述製造方法包括下列步驟：(a)使[¹⁸ F]離子水溶液通過第一分離裝置，以吸附[¹⁸ F]離子；(b)使K₂ CO₃ /Kryptofix_2.2.2 溶液通過第一分離裝置，將[¹⁸ F]離子帶出至該反應器內，並於一適當溫度及時間反應後，通鈍氣進行乾燥；(c)加入一前驅物溶液至反應器內，並於一適當溫度時間反應後，冷卻至室溫；(d)依序加入溶於乙醇中之醋酸銅飽和溶液以及硼氫化鈉溶液至反應器內以形成一混合物，並於一適當溫度及時間反應後，將混合物注入第二分離裝置以進行分離與純化，其中該第二分離裝置包含一沖提液，而該沖提液包含乙腈；(e)收集含有產物之一溶液至第一收集器中；(f)使第一收集器內之溶液通過第三分離裝置，以吸附產物並以水通過第三分離裝置以洗淨殘留之乙腈；以及(g)使乙醇通過第三分離裝置，以帶出產物至第二收集器內。

在本發明之一實施例中，其中上述自動化合成系統為一GE TRACERlab FX_FN 模組。

在本發明之一實施例中，其中上述步驟(b)所述之適當溫度與時間分別為120℃~130℃與8~12分鐘。

在本發明之一實施例中，其中上述步驟(c)所述之適當溫度與時間分別為115℃~125℃與8~12分鐘。

在本發明之一實施例中，其中上述步驟(d)所述之適當溫度與時間分別為75℃~85℃℃與15~20分鐘。

在本發明之一實施例中，其中上述第二分離裝置係為一高效能液相層析管柱。較佳地，上述高效能液相層析管柱係為一NUCLEOSIL 100-5 C₁₈ 管柱。

在本發明之一實施例中，其中於上述步驟(d)中將混合物注入第二分離裝置以進行分離與純化的步驟之前更包含下列步驟：過濾移除混合物中之雜質。較佳地，前述過濾移除混合物中之雜質的步驟係藉由一微孔濾膜係來完成。較佳地，上述微孔濾膜係為聚四氟乙烯濾膜，且孔徑為0.22μ m。

在本發明之一實施例中，其中上述前驅物溶液係將N,N-dimethyl-2-(2-nitro-4-bromophenylthio)benzylamine或N,N-dimethyl-2-(2,4-dinitrophenylthio)benzylamine溶於二甲基亞碸中製備而得，且其濃度為4-20mg/mL。

在本發明之一實施例中，其中上述前驅物溶液係將2-[[4-(chloromethyl)-2-nitrophenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine、4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzeneethanol 4-methylbenezenesulfonate或4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzenepropanol 4-methylbenezenesulfonate溶於乙腈，且其濃度為1-20mg/mL。

在本發明之一實施例中，其中上述硼氫化鈉溶液係將硼氫化鈉溶於乙醇中製備而得，且其濃度為8-14mg/mL。

在本發明之一實施例中，其中上述醋酸銅飽和溶液係將醋酸銅水合物溶於乙醇中製備而得，且其濃度為10-16.6mg/mL。

在本發明之一實施例中，其中上述第一收集器含有水，上述第二收集器含有生理食鹽水。

由下文的說明，可更進一步瞭解本發明的特徵及其優點，閱讀時請參考第三圖至第六圖。

100、200‧‧‧自動化合成系統

11‧‧‧第一分離裝置

12‧‧‧第一反應器

13‧‧‧第二分離裝置

14‧‧‧第二反應器

15‧‧‧第三分離裝置

16‧‧‧第一收集器

17‧‧‧第四分離裝置

18‧‧‧第二收集器

20‧‧‧第一試劑存取裝置

21‧‧‧水溶液儲存槽

22‧‧‧第二試劑存取裝置

23‧‧‧第三試劑存取裝置

24‧‧‧第四試劑存取裝置

30‧‧‧廢液儲存槽

41‧‧‧第一分離裝置

42‧‧‧反應器

43‧‧‧第二分離裝置

44‧‧‧第一收集器

45‧‧‧第三分離裝置

46‧‧‧第二收集器

第一圖顯示習知血清素運轉器造影劑4-[¹⁸ F]-ADAM反應示意圖；第二圖顯示習知製造血清素運轉器造影劑之自動合成系統的架構示意圖；第三圖顯示本發明之製造血清素運轉器造影劑之自動合成系統的架構示意圖；第四A圖與第四B圖分別顯示經由習知技術與本發明所提供之製造方法所得產物之半製備高效能液相層析儀的結果；第五A圖與第五B圖分別顯示攝入經由習知技術與本發明所提供之製造方法所得產物之老鼠大腦的正子放射斷層攝影影像；以及第六圖顯示老鼠大腦對於經由習知技術與本發明所提供之製造方法所得產物的標準攝入比例。

承上，本發明旨在提供一種可利用單一反應器來合成¹⁸ F正子放射性同位素標誌的血清素運轉器藥物的製造方法。本發明所提供之製造方法係配合一自動化合成系統來實施，較佳地，此自動化合成系統可為一GE TRACERlab FX_FN 模組。

首先，請參考第三圖，第三圖顯示本發明之製造血清素運轉器造影劑之自動合成系統200的架構示意圖。其中，該系統200至少包含一第一分離裝置41、一反應器42、一第二分離裝置43、一第一收集器44、一第三分離裝置45與一第二收集器46。另外，如同第一圖所繪示之架構，本發明所配合之系統200亦可包含有第一試劑存取裝置20、水溶液儲存槽21、第二試劑存取裝置22、廢液儲存槽30、第三試劑存取裝置23與第四試劑存取裝置24。亦即，本發明與習知技術的不同即在於本發明僅需單一反應器42，可省去習知技術之合成方法中仍需流經第二反應器與第二分離裝置時所耗費的時間。

在一較佳實施例中，如下式，本發明之製造方法係用以將溶於二甲基亞碸中的N,N-dimethyl-2-(2,4-dinitrophenylthio)benzylamine 1於單一反應器42中藉由K[¹⁸ F]/K_2.2.2 對其之親核取代反應以及後續於乙醇中之硼氫化鈉/醋酸銅(NaBH₄ /Cu(OAc)₂ )之還原反應而得到N,N-Dimethyl-2-(2-amino-4-[¹⁸ F]fluorophenylthio)benzylamine(4-[¹⁸ F]-ADAM，2)。

然而，本發明所提供之方法亦可應用於製備其他¹⁸ F標誌的造影劑，本發明並不欲以任一實施例為限。

接著，進一步配合此系統200詳述本發明所提供之製造方法如下：首先，在步驟(a)中，先使[¹⁸ F]離子水溶液通過第一分離裝置41，以吸附[¹⁸ F]離子。較佳地，第一分離裝置41係為一陰離子交換樹脂，且在較佳實施例中，第一分離裝置41為QMA管柱。再者，[¹⁸ F]離子水溶液較佳地係由粒子迴旋加速器以¹⁸ O(p,n)¹⁸ F核反應所製得。

接著，在步驟(b)中，使K₂ CO₃ /Kryptofix_2.2.2 溶液通過第一分離裝置41，以將[¹⁸ F]離子帶出至反應器42內，並於一適當溫度及時間反應後，通鈍氣進行乾燥。在較佳實施例中，此步驟中所提之適當溫度與時間分別為120℃與10分鐘。另外，上述K₂ CO₃ 溶液較佳地係溶於水中，且濃度為20-50mg/mL，而上述Kryptofix_2.2.2 溶液較佳地係溶於乙腈溶液中，且濃度為20-60mg/mL。

具體地來說，雖未圖示，但第一試劑存取裝置20可包含[¹⁸ F]離子水溶液以及水溶液儲存槽21包含K₂ CO₃ /Kryptofix_2.2.2 溶液。第一分離裝置41與第一試劑存取裝置20連接，並且第一分離裝置41再利用三向開關與反應器42以及水溶液儲存槽21連接。此時，只要將水溶液儲存槽21經一開關與一抽真空裝置連接，即可以抽真空方式使試劑存取器內的[¹⁸ F]離子水溶液流經第一分離裝置41以吸附[¹⁸ F]離子，並將不要的水溶液排至廢液儲存槽30。反應器42亦可經由一開關與抽真空裝置連接，即可以抽真空方式使試劑存取器內的K₂ CO₃ /Kryptofix_2.2.2 溶液流經第一分離裝置41，以將[¹⁸ F]離子帶出至反應器42中。然而，前述之系統架構與細部零件僅為實施例說明，本發明並不欲以此為限。

隨後，在步驟(c)中將存放在第二試劑存取裝置22中包含有前驅物之溶液加入至反應器42內，並於一適當溫度時間反應後，冷卻至室溫，此即為利用K[¹⁸ F]/K_2.2.2 對前驅物進行之親核取代反應。在較佳實施例中，上述步驟(c)中之適當的溫度與時間分別為120℃與10分鐘。且較佳地，上述前驅物溶液可為將N,N-dimethyl-2-(2-nitro-4-bromophenylthio)benzylamine或N,N-dimethyl-2-(2,4-dinitrophenylthio)benzylamine溶於二甲基亞碸中製備而得，且其濃度為4-20mg/mL，也可以為經由將2-[[4-(chloromethyl)-2-nitrophenyl]thio]-N,N-dimethylbenzenemethanamine、4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzeneethanol 4-methylbenezenesulfonate或4-[[2-(dimethylamino)methyl]phenyl]thio]-3-nitrobenzenepropanol 4-methylbenezenesulfonate溶於乙腈製備而得，且其濃度為1-20mg/mL。

再於步驟(d)中依序加入乙醇、醋酸銅(Cu(OAc)₂ .H₂ O)飽和溶液以及硼氫化鈉(NaBH₄ )溶液至反應器42內以形成一混合物，並於一適當溫度及時間反應後(此即為NaBH₄ /Cu(OAc)₂ 之還原反應)，將混合物注入第二分離裝置43以進行分離與純化。在較佳實施例中，步驟(d)中所提之適當的溫度與時間係分別為80℃與20分鐘。此外，上述硼氫化鈉溶液較佳地係將硼氫化鈉溶於乙醇中製備而得，且其濃度為8-14mg/mL，而醋酸銅飽和溶液較佳地係將醋酸銅水合物溶於乙醇中製備而得，且其濃度為10-16.6mg/mL。

具體實施方式可舉例如下：第三試劑存取裝置23亦可包含有複數個試劑存取器，而乙醇、醋酸銅(Cu(OAc)₂ .H₂ O)飽和溶液以及硼氫化鈉(NaBH₄ )溶液係分別存放於不同的試劑存取器中。該些試劑存取器之流出口係分別設有一開關以控制各溶液之流出與否，但此僅為實施例說明，本發明並不欲以此為限。

另外，在上述步驟(d)中將混合物注入第二分離裝置43以進行分離與純化的步驟之前更包含：過濾移除該混合物中之雜質。在較佳實施例中，上述過濾步驟係藉由一微孔濾膜係來完成，而此微孔濾膜較佳地係連接於第二分離裝置43之注入口。再者，微孔濾膜較佳地係孔徑為0.22μ m的聚四氟乙烯濾膜，但本發明並不以此為限。

再者，必須說明的是，第二分離裝置43為一高效能液相層析管柱，且較佳地為一半製備高效能液相層析(semi-preparative high performance liquid chromatography,HPLC)管柱。另外，第二分離裝置43的輸出端可進一步接有一輻射偵測器以及一紫外線偵測器，用以偵測流洗液片段之輻射與紫外線吸收光譜。於一較佳實施例中，第二分離裝置43更佳地為10 x 250mm的NUCLEOSIL 100-5 C₁₈ Nautilus管柱。

具體地來說，雖未圖示，當流洗液經由進入第二分離裝置43(流洗液為CH₃ CN：0.1M HCO₂ NH₄ (30：70)含有0.3%(v/v)醋酸；流洗速度為10ml/min)，經過第二分離裝置43純化，以及前述設置於第二分離裝置43輸出端之輻射偵測器及紫外線偵測器偵測後，將不要的流洗液將排至廢液儲存槽30，而含有產物的溶液則會流至該含有水(H₂ O)的第一收集器44，即為步驟(e)。

接著，在步驟(f)中使第一收集器44內之溶液通過第三分離裝置45，以吸附產物。在較佳實施例中，第三分離裝置45係為一具有C18鍵結矽分子之樹脂，且第三分離裝置45較佳地為tC18 Sep-Pak管柱。

具體地來說，水跟乙醇係分別存放在第四試劑存取裝置24之不同試劑存取器中，且該些試劑存取器之流出口係分別設有一開關以控制各溶液之流出與否。接著，可經由例如填充氦氣的方式，迫使該第一收集器44內包含有產物的溶液通過第三分離裝置45以抓取溶液中的產物，並將不要的溶液排至廢液儲存槽30。另外，經由控制，存放在第四試劑存取裝置24之該些試劑存取器之一中的水便會流經第三分離裝置45到廢液儲存槽30中，以清洗去除第三分離裝置45內殘餘的乙腈。然後，同樣存放在第四試劑存取裝置24之該些試劑存取器之一中的乙醇會經由第三分離裝置45流到裝有生理食鹽水的第二收集器46內，此時留在第三分離裝置45中的產物(亦即4-[¹⁸ F]-ADAM便會隨乙醇一起流洗到第二收集器46內。

接著，請參考第四A圖與第四B圖，第四A圖與第四B圖顯示經由習知技術所提供之製造方法所得產物之半製備高效能液相層析儀的結果，而第四B圖顯示經由本發明所提供之製造方法所得產物之半製備高效能液相層析儀的結果。由兩圖可知，經由本發明所提供之製造方法所製備而得之產物(即4-[¹⁸ F]-ADAM)與習知技術所得者的層析結果大致相同，且副產物均為2-[¹⁸ F]-ADAM。

再者，請參考第五A圖、第五B圖與第六圖，第五A圖與第五B圖分別顯示攝入經由習知技術與本發明所提供之製造方法所得產物之老鼠大腦的正子放射斷層攝影影像，而第六圖顯示老鼠大腦對於經由習知技術與本發明所提供之製造方法所得產物的標準攝入比例。由圖可知，經由本發明所提供之製造方法所製備而得之產物(即4-[¹⁸ F]-ADAM)與習知技術所得者當以相同劑量應用於老鼠大腦中進行正子放射斷層攝影時，其分佈影像及標準攝取比例皆大致相同。

然而，藉由本發明與習知技術所製備之4-[¹⁸ F]-ADAM的放射化學產率(radiochemical yield,EOS)則分別約為2.3%(N=12)與2%(N=80)，而合成時間則分別約為102分鐘與125分鐘。由此可知，經由本發明所提供之製造方法所製得之4-[¹⁸ F]-ADAM，其品質與習知技術並無明顯差異，但其產率與合成時間均較習知技術優異。

綜上所述，為了改進先前研發成果之缺失，本發明在此提供一種以單一反應器42來合成¹⁸ F正子放射性同位素標誌的血清素運轉器藥物的方法。其中，[¹⁸ F]離子的分離、K[¹⁸ F]/_K2.2.2 對相關前驅物進行親核取代反應及以NaBH₄ /Cu(OAc)₂ 進行還原之反應皆在同一反應器42進行。隨後，這些藥物再以HPLC進行純化及配方。本發明所提供之方法可節省合成時間，簡化製備流程，增加產率並容易於商業化自動合成模組上執行，有效地擴大此類藥物於生醫產業之應用。

上列詳細說明係針對本發明之一可行實施例之具體說明，惟該實施例並非用以限制本發明之專利範圍，凡未脫離本發明技藝精神所為之等效實施或變更，均應包含於本發明之專利範圍中。

200‧‧‧自動化合成系統