TWI490189B - Ｏ－去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物及其製備方法 - Google Patents

Description

O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物及其製備方法

本發明涉及O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物、其製備方法，以及含有治療有效量的該水合物的藥物組合物，及其在製備抗抑鬱藥物中的用途。

抑鬱症又稱憂鬱症，是以情緒低落為主要特徵的一類心理疾病。抑鬱症包括單相性抑鬱症(即重性憂鬱症和精神憂鬱症)、適應性障礙、輕微抑鬱症、季節情感性精神障礙(SAD)、經前期焦慮症(PMDD)、產後抑鬱症、非典型抑鬱症及雙相性精神障礙、躁鬱症等多種類型。抑鬱症的發病機制尚未完全明確，目前研究認為引發抑鬱症的因素包括：遺傳因素、體質因素、中樞神經介質的功能及代謝異常、精神因素等。抑鬱症其臨床表現：病情較輕的病人外表如常，內心有痛苦體驗；病情稍重的病人可表現為情緒低落、愁眉苦臉、唉聲歎氣、自卑等。有些患者常常伴有神經官能症症狀，如：注意力不集中、記憶力減退、反應遲緩和失眠多夢等症狀。重型抑鬱症患者會出現悲觀厭世、絕望、自責自罪、幻覺妄想、食欲不振、體重銳減、功能減退、並伴有嚴重的自殺企圖，甚至有自殺行為。

抑鬱症是世界範圍內最常見、嚴重的精神障礙，目前全球約有12100萬人受到抑鬱症的困擾。在中國，目前抑鬱症的患病率約為3%至5%，抑鬱症患者估計有3600萬人，與高發病率形成鮮明反差的是，目前全國地市級以上醫院對抑鬱症的識別率不到20%，而在現有抑鬱症患者中，只有不到10%的人接受了相關藥物治療，但是絕大多數患者殘留未解決的抑鬱症狀。曾患過抑鬱症的病人，有50%到60%的復發機率。抑鬱症在我國造成的直接經濟負擔約為141億，間接經濟損失約481億，總經濟負擔達到622億。抑鬱症已經越來越廣泛地影響著人們的生活，世界衛生組織指出，抑鬱症目前已成為世界第四大疾患，到2020年，抑鬱症將可能成為僅次於心臟病的第二大疾病。因此，開發出療效更高、不良反應更少的新型抗抑鬱藥已成為藥物生產商家共同追求的目標。

O-去甲基文拉法辛是文拉法辛的主要代謝物，為5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取抑制劑，用於治療各種抑鬱症，其化學名稱為4-[2-二甲基胺基-1-(1-羥基環己基)乙基]苯酚。美國專利第4,535,186號列舉了其富馬酸鹽；美國專利第2004044241號公開了其琥珀酸鹽；美國專利第2003236309號公開了其甲酸鹽。

適宜的鹽可以在不改變基本化學結構的基礎上藉由改變藥物的理化性質進而影響其作為藥物的適當性。鹽的形成提供了改變藥物理化性質及生物學特性而不改變其化學結構的手段。鹽形式可以對藥物的性質產生劇烈的影響。適宜的鹽的選擇部分由結晶結構的收率、速率和產量的決定。此外，鹽形式的吸水性、穩定性、溶解性和加工特性是重要的方面。具有多方面性質的適宜組合的鹽形式的鑒定可能是困難的。

溶解性是鹽形式的一個重要特性，其可能影響其作為藥物的適當性。當水溶性低，即小於10 mg/ml時，體內給藥時的分解速度可能限制吸收過程的速度，導致生物可利用度差。吸水性也是一個重要的特性。吸水性低的化合物比較穩定並易於加工。

每種藥物化合物均具有最佳治療血液濃度和致死濃度。化合物的生物可利用度決定了藥物製劑中要獲得理想血液水準所需的劑量強度。如果藥物可結晶成兩種或多種具有不同生物相容性的晶體形式，則最佳劑量將取決於製劑中存在的晶體形式。一些藥物的治療濃度和致死濃度之間具有很小的差距。例如，氯黴素-3-棕桐酸鹽(CAPP)是一種廣譜抗生素，其已知可結晶成至少三種多晶型形式和一種無定形形式。最穩定的形式A已經上市。該多晶型與另一形式B之間的生物可利用度差異為8的係數，因而，在由於加工和/或貯存過程中的變化而不經意地作為形式B施用時，可能會導致化合物的致命性過量。因此，管理機構如美國食品藥品管理局已經開始嚴格控制固體劑型中的活性成分的多晶型含量。一般而言，對於以多晶型形式存在的藥物，如果純化的、熱力學上較佳的多晶型之外的藥物上市，則該管理機構可能要求逐批監測。因此，生產和銷售呈熱力學最穩定的多晶型、而基本不含其他動力學上有利的多晶型的純化藥物從醫學和經濟角度來說都變得非常重要。

藥劑的新固體形式可以促進治療疾病的製劑的開發。例如，在製藥領域已知化合物的鹽的固體形式可影響例如該化合物的溶解度、溶解速率、生物可利用度、化學和物理穩定性、流動性、可分餾性以及可壓縮性，以及基於該化合物的藥物產品的安全性和效力(參見，例如Byrn,S. R.,Pfeiffer,R. R.和Stowell,J. G.(1999) Solid-State Chemistry of Drugs，第二版，SSCI,Inc.:West Lafayettc，IN)。

因此，鑒定包含化合物的鹽和游離鹼的具有最佳物理和化學屬性的固體形式將促進該化合物作為藥物的開發。有用的物理和化學屬性包括：可重複製備、非吸水性、水溶性、可見光和紫外光穩定性、在溫度和濕度的加速穩定性條件下的低降解速率、在異構形式之間的低異構化速率以及長期向人施用的安全性。結晶性通常是需要的，儘管在部分情況下可藉由製備無定形形式來獲得提高的溶解性。

本發明的目的在於提供一種O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物，其以外消旋形式存在，其中，該水合物為一水合物、二水合物或三水合物；該一水合物為晶型結構；該晶型X射線粉末衍射圖的特徵峰以2θ(±0.2° 2θ)表示位於10.780，14.860，16.200，17.380，18.260，21.200，24.420和27.160。

本發明的又一目的在於提供製備O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物的方法，該方法包括下列步驟：

(1)使化學計量的鹽酸與去甲基文拉法辛游離鹼接觸；

(2)用有機溶劑洗滌所得產物。

其中，該接觸在乙醇、丙酮或水中進行；該有機溶劑為甲基叔丁基醚。

本發明的又一目的在於提供含有治療有效量的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物作為有效成分以及藥學上可接受的載體的醫藥組成物。

進一步，本發明提供O-去甲基-文拉法辛鹽酸鹽的水合物或其藥物組合物在製備抗抑鬱藥物的用途。

本發明提供的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽水合物具有特別適於作為藥物的適宜性質，包括不易吸水以方便製備、良好的溶解性、穩定性、滲透性和生物利用度。

下面將結合具體的實施例來進一步說明發明的內容，但本發明並不限定於此。

實施例一

步驟1、中間體2：2-(4-(苄氧基)苯基)-2-(1-羥基環己基)-N,N-二甲基乙醯胺的製備

方法A：在反應釜中，加入四氫呋喃(200mL)，攪拌條件下加入鎂絲(5.2g)和異丙基溴(4mL)，加熱，待回流後停止加熱。加入碘(0.1g)引發反應，緩慢加入異丙基溴(20mL)，滴加完後保持微回流攪拌反應40至60分鐘，加入原料A[2-(4-(苄氧基)苯基)-N,N-二甲基乙醯胺，9.72g]的四氫呋喃(100mL)溶液，加熱回流攪拌反應4至5小時。向反應液中滴加原料B(環己酮，7.4ml)，攪拌反應0.5至1小時，TLC檢測原料A至反應完全。將反應液冷卻到35℃以下，加入2N鹽酸(220mL)，攪拌0.5至1小時。用乙酸乙酯(200mL×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水(100mL)洗滌，加無水硫酸鈉(10.000g)乾燥0.5至1小時，過濾，乙酸乙酯(50mL)洗滌，合併濾液，減壓濃縮至乾，加入乙酸乙酯(60mL)，加熱回流0.5至1小時，溶清。加入正己烷(200mL)，加熱回流0.5至1小時，冷卻，10至30℃攪拌析晶2至3小時。過濾，濾餅真空乾燥6至8小時，得中間體2(11.275g，類白色固體)。品質收率：116.0%。

方法B：與方法A的區別僅在於將其中的異丙基溴(4mL)替換為正丁基鋰(4mL)，加入正丁基鋰是在-70℃條件下完成，其他反應條件及所加試劑用量與方法A相同。得中間體2(11.135g，類白色固體)。品質收率：115.0%。

TLC條件：正己烷-乙酸乙酯(2:1)，GF254矽膠板，碘燻顯色，Rf原料A=0.1，Rf中間體2=0.5

步驟2、中間體3：1-(1-(4-(苄氧基)苯基)-2-(二甲胺基)乙基)環己醇的製備

方法A：在反應釜中，加入2N氫化鋁鋰的乙醚溶液(58mL)，冷卻到-15℃以下，攪拌條件下緩慢加入濃硫酸(3.2ml)的四氫呋喃(100mL)溶液，滴加過程中溫度不超過0℃。混合物於-15至0℃反應1至2小時。快速滴加中間體2(11.275g)的四氫呋喃(100mL)溶液，在-15至0℃反應0.5至1小時，TLC檢測至中間體2反應完全。緩慢加入10%的氫氧化鈉溶液(200mL)，攪拌0.5至1小時。過濾，濾液用乙酸乙酯(200 mL×2)提取，合併有機相，加入無水硫酸鈉(10.000g)乾燥0.5至1小時，過濾，用乙酸乙酯(30mL)洗滌，合併濾液，減壓濃縮至乾，得到中間體3(10.241g，白色固體)。品質收率：99.9%。

方法B：將方法A中的還原劑由氫化鋁鋰換為紅鋁，其餘條件及所加試劑種類與用量與方法A相同，最後得到中間體3(9.761g，白色固體)。品質收率：97.3%。

TLC條件：三氯甲烷-甲醇(5:1)，GF254矽膠板，碘燻顯色，Rf中間體2=0.8，Rf中間體3=0.7

步驟3、化合物1：1-(2-(二甲胺基)-1-苯乙基)環己醇的製備

在反應釜中，加入中間體3(10.241g)，乙醇(100mL)，10%的鈀碳(4.8g)和甲酸銨(3g)。加熱，70至80℃攪拌反應0.5至1小時，TLC檢測中間體3至反應完全。過濾，濾餅用50至60℃的熱乙醇(40mL)洗滌，合併濾液，減壓濃縮至乾，得到的殘餘物溶於水(100mL)，加入碳酸鉀(3g)，攪拌0.5至1小時，析出大量固體，過濾，濾餅用水(40mL)洗滌，濾乾，得化合物1粗品(類白色固體)。

在反應釜中，攪拌條件下，加入乙酸乙酯(200mL)和化合物1粗品。加熱，回流2至3小時，溶液冷卻，10至30℃攪拌析晶10至12小時。過濾，濾餅真空乾燥6至8小時，得化合物1(3.784g，白色固體)。品質收率：40.7%。

TLC條件：三氯甲烷-甲醇(5:1)，GF254矽膠板，碘燻顯色，Rf中間體3=0.7，Rf化合物1=0.3

步驟4、成品：1-(2-(二甲胺基)-1-苯乙基)環己醇鹽酸鹽一水合物的製備

將化合物1(3.784g，白色固體)、無水乙醇(10mL)加入反應瓶中，攪拌，加入7N的鹽酸(2mL)，10至30℃攪拌0.5至1小時，過濾，攪拌條件下將濾液滴加到甲基叔丁基醚(160mL)中，10至30℃攪拌18至20小時，過濾，濾餅用甲基叔丁基醚(10mL)洗滌，濾餅40至45℃真空乾燥22至24小時，得到鹽酸去甲文拉法辛(4.367g，白色固體)，品質收率：127.1%。

MS-ESI：264.3(100)[M-HCl-H₂ O+H]⁺

經圖1確證，該產物為晶型結構。

實施例二

按照實施例一的方法步驟(其中步驟1、步驟2中均選用方法A)，重複製備三批樣品(批次依次編為20100208、20100315、20100422)，其中各步驟物料的投料量及產率如下表所示：

實驗例一

析晶條件及晶型對比實驗

為了摸索該發明晶型的製備方法，發明人藉由大量實驗，對相關試劑以及反應條件進行了篩選。

首先，發明人對各種溶劑體系的析晶情況做了相關實驗，按照實施例一的方法製備樣品，其中步驟四依次在下表所列的溶劑體系中析晶，具體實驗結果可以參見下列統計表：

發明人選用上一實驗步驟中製備的固體1、固體2、固體3、固體4和固體5做X-射線衍射實驗，五種固體的X-射線衍射資料統計如下表所示：

對比五種固體XRD譜圖，衍射峰的d值和2θ角度相符，五種固體為同一種晶型。

實驗例二

重現性及穩定性實驗

1.重現性實驗

以實施例二中所製備的對應批號為20100208、20100315和20100422的樣品來做重現性研究，分別對三批樣品做X-射線粉末衍射，具體資料結果可參見下表：

結論：實驗結果表明，對比上述XRD譜圖資料，衍射峰的d值和2θ角度相符，三批穩定性樣品晶型一致，可重現性好。

2.穩定性實驗

對於樣品(20100208，20100315，20100422)在加速(溫度40℃，濕度75%)條件下放置六個月後分別作X-射線衍射，同時與起始資料進行了比較。資料比較分別見表5，表6，表7：

結論：對比上述XRD譜圖資料，衍射峰的d值和2θ角度相符。三批樣品在加速(溫度40℃，濕度75%)條件下放置六個月後，晶型未發生改變。

實驗例三

研磨及壓片後的晶型研究實驗

取批號為20100315的樣品，分別進行如下實驗：

(1)直接研磨5分鐘；(批號：20100315-1)

(2)原料直接造粒，壓片。(批號：20100315-2)

將上述兩種樣品分別進行X-射線衍射試驗，並將資料與起始資料進行了對比。

資料對比見下表：

結論：樣品在直接研磨和壓片條件下，晶型未改變。

實驗例四

比格犬生物可利用度實驗

1.　試驗藥物

固體1，批號20100909-2，規格100 mg/粒(鹼)；固體2，批號20100909-3，規格100 mg/粒(鹼)；固體3，批號20100910-1，規格100 mg/粒(鹼)；固體4，批號20100910-2，規格100 mg/粒(鹼)；固體5，批號20100911-2，規格100 mg/粒(鹼)；均由江蘇豪森藥業股份有限公司研製並提供。

2.　試驗動物和給藥方案

比格犬4隻，雄性，體重約9至11 kg，購於上海交大農學院教學實驗實習場，生產許可證號SCXK(滬)2007至0004，使用許可證號SYXK(滬)2008至0049。試驗安排如下表：

參照臨床給藥途徑和劑量，選擇口服給藥，給藥劑量為100 mg/只(按鹼計)，以膠囊形式給藥，給藥時以30 ml水沖服。

兩週期試驗給藥間隔不少於3天。試驗前禁食12h，早上空腹給藥，給藥後2h後提供食物，整個試驗過程不禁水。

3.　樣品採集與處理

給藥前(0小時)及給藥後0.25，0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12和24h經一側前肢靜脈血0.5 ml，置肝素化試管中，11000rpm離心5 min，分離血漿，於-20℃冰箱中保存至分析測定。

4.　血漿濃度測定

採用LC/MS/MS法測定血漿中去甲文拉法辛的藥物濃度，分析方法的線性範圍為0.500至1500ng/mL。在1.00，50.0和1200 ng/mL的品質管制濃度下，每一濃度水準的QC樣品日內精密度(RSD)均小於8.7%，日間精密度(RSD)均小於6.3%，準確度(RE)在-3.7%至1.1%之間。分析方法符合生物樣品測定的有關規定。

5.　資料處理

採用WinNonlin 5.3軟體非房室方法計算比格犬給藥後去甲文拉法辛的主要藥動學參數：

達峰時間T_max 和達峰濃度C_max 採用實測值；藥物濃度-時間曲線下面積AUC_0-t 採用梯形法計算值；AUC_0-∞ 按下列公式計算：AUC_0-∞ =AUC_0-t +C_t /k_e ，C_t 為最後一個可測定時間點的濃度，k_e 為消除速率常數；血漿消除半衰期t_1/2 =0.693/k_e 。

採用單因素方差分析，比較去甲文拉法辛藥動學參數的在不同晶型給藥組的差異，T_max 採用非參數檢驗，其他參數經對數轉換後進行統計分析。

6.　試驗結果

比格犬分別給予100 mg(鹼計)五個固體鹽酸去甲文拉法辛原料藥後，平均血藥濃度-時間曲線見圖14。

比格犬給予五個固體鹽酸去甲文拉法辛原料藥後，五個固體鹽酸去甲文拉法辛的藥動學參數總結見下表(n=4)：

7.　結論

比格犬口服五個固體的鹽酸去甲文拉法辛原料藥後，去甲文拉法辛的血漿濃度達峰時間約為0.8 h。經單因素方差分析，去甲文拉法辛的藥動學參數(C_max 、AUC_0-t 、AUC_0-∞ 、MRT和t_1/2 )在五個固體給藥組間無統計學差異(P >0.05)。

第1圖是固體1(批號20100909-2)X-射線粉末衍射圖；

第2圖是固體2(批號20100909-3)X-射線粉末衍射圖；

第3圖是固體3(批號20100910-1)X-射線粉末衍射圖；

第4圖是固體4(批號20100910-2)X-射線粉末衍射圖；

第5圖是固體5(批號20100911-2)X-射線粉末衍射圖；

第6圖是樣品(批號20100208)X-射線粉末衍射圖；

第7圖是樣品(批號20100315)X-射線粉末衍射圖；

第8圖是樣品(批號20100422)X-射線粉末衍射圖；

第9圖是樣品(批號20100208)加速六個月X-射線粉末衍射圖；

第10圖是樣品(批號20100315)加速六個月X-射線粉末衍射圖；

第11圖是樣品(批號20100422)加速六個月X-射線粉末衍射圖；

第12圖是樣品(批號20100315)直接研磨5分鐘X-射線粉末衍射圖；

第13圖是樣品(批號20100315)原料壓片X-射線粉末衍射圖；

第14圖是比格犬口服100 mg鹽酸去甲文拉法辛原料藥不同晶型後的平均血漿濃度-時間曲線。

由於本案的圖為試驗化合物的結果數據，並非本案的代表圖。故本案無指定代表圖。

Claims (6)

1. 一種O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物，其以外消旋形式存在，其中該水合物為一水合物、二水合物或三水合物，且該一水合物為晶型結構，且該晶型X射線粉末衍射圖的特徵峰以2 θ±0.2° 2 θ表示位於10.780，14.860，16.200，17.380，18.260，21.200，24.420和27.160。
2. 如申請專利範圍第1項所述的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物，其中該一水合物的晶型X射線粉末衍射圖的特徵峰如第1圖所示。
3. 一種製備申請專利範圍第1項或第2項所述的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物的方法，該方法包括下列步驟：1)使化學計量的鹽酸與去甲基文拉法辛游離鹼接觸；2)用甲基叔丁基醚洗滌所得產物，其中該接觸在乙醇、丙酮或水中進行。
4. 一種醫藥組成物，其含有治療有效量的申請專利範圍第1項或第2項所述的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物作為有效成分以及藥學上可接受的載體。
5. 一種申請專利範圍第1項或第2項所述的O-去甲基文拉法辛鹽酸鹽的水合物的用途，其是用在製備抗抑鬱藥物。
6. 一種申請專利範圍第4項所述的醫藥組成物的用途，其 是用在製備抗抑鬱藥物。