TWI465454B - ４Ｈ－苯并［ｄ］吡咯［１，２－ａ］噻唑類及吲哚嗪［６，７－ｂ］吲哚衍生物之合成及其作為抗腫瘤醫療藥劑之用途 - Google Patents

４Ｈ－苯并［ｄ］吡咯［１，２－ａ］噻唑類及吲哚嗪［６，７－ｂ］吲哚衍生物之合成及其作為抗腫瘤醫療藥劑之用途 Download PDF

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Description

4H-苯并[d]吡咯[1,2-a]噻唑類及吲哚嗪[6,7-b]吲哚衍生物之合成及其作為抗腫瘤醫療藥劑之用途 相關申請案
本申請案主張美國臨時專利申請案第61/508,145號(申請日：2011年7月15日)的優先權，茲將上述申請案的全部內容作為參考資料併入本文。
本發明係關於新穎之2,3-雙(羥甲基)-4H-苯并[d ]吡咯-[1,2-a]噻唑類及1,2-雙(羥甲基)吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物及其雙(烷基胺甲酸酯)衍生物。該等衍生物係被設計為雙功能性之DNA交聯劑，且於抑制各種不同癌症上具有顯著的抗增生活性，諸如人類淋巴性白血病、各種不同之固態腫瘤細胞生長、人類乳癌及肺癌。
DNA雙功能性烷化劑，像是硫咪唑類(如：羧甲基噻唑，1，圖1)1 、雙(羥甲基)吡咯啶衍生物(如：2 2 及3 3 )及2,3-二羥基-6,7-雙(羥甲基)吡咯啶[如：4 (IPP)]4 ，皆是從吡咯生物鹼(5 )所開發出來的。該等藥劑可藉由一近似絲裂黴素C衍生物(6 ，MMCs)所誘發的機制，以誘發DNA股間或股內之交聯3 。與MMCs不同的是，由吡咯啶所誘發之DNA交聯不需還原酶之還原性再活化作用。由雙(胺甲醯氧甲基)吡咯類或吡咯啶類所誘發之DNA股間或股內交聯之較可能的機制，可能是透過SN 1親電子反應3 進行。因此，該等藥劑(羥基或胺甲醯基於烷氧斷裂機制中為離去基)之潛在的親電子活性應可藉由影響參與其中之吡咯的電子擾動程度來調節。結構與活性關係(SAR，structure-activity relationship)研究證明了於附在雜環氮原子上之碳原子上的取代基之親油性、平面性、大小及電子特性，亦可影響該等藥劑之抗腫瘤活性5 。於雙(羥甲基)吡咯 啶相似物中，化合物10 被發現具有顯著的抗腫瘤活性，可對抗各種不同實驗性人類腫瘤異種移植物6 。苯基吡咯啶類亦可能影響該等藥劑之抗腫瘤活性5 。Anderson等人進一步合成吡咯[2,1-a ]異喹啉之雙(胺甲醯氧甲基)衍生物(13 及14 ，圖2)，其具有角狀三環結構，用以限制自苯及吡咯環之共面性(co-planarity)偏差5 。結果顯示該等藥劑具有廣泛的抗腫瘤活性，可對抗廣範圍之腫瘤。
於吾人之雙功能性烷化劑作為潛在的抗腫瘤藥劑之研究中，吾人已合成一系列的雙(羥甲基)-8H -3a-氮雜環戊-[a ]茚-1-基及其雙(胺基甲酸甲酯)衍生物，其可被認為是吡咯啶類(4 )的「苯同系物」衍生物7 。吾人報告過該等藥劑可於活體外(in vitro)抑制人類淋巴性白血病及各種不同的人類腫瘤細胞生長，且具有顯著的細胞毒性，以及於腫瘤異種移植模式中具有潛在的療效。在該等藥劑中，以雙(羥甲基)衍生物BO-1090(7 ，圖2)及BO-1099(8 )治療帶有人類乳癌MX-1異種移植之裸鼠，可觀察到完整的腫瘤緩解(CR)。再者，當以雙(胺基甲酸甲酯)衍生物BO-1012(9 )及BO-1124(10 )治療帶有人類前列腺腺癌PC3異種移植物之小鼠時，可達到超過95%之腫瘤抑制率。顯著地，吾人發現於一異種移植模式中，將BO-1012(9 )及三氧化二砷(ATO(arsenic trioxide)，DNA修復抑制劑)合併治療帶有人類大細胞肺癌H460異種移植物之裸鼠時，可達到超過82%之腫瘤抑制率，而治療帶有順鉑抗性之NTUB1/P人類膀胱癌異種移植物之裸鼠時，可達到超過92%之腫瘤抑制率8 。近日，吾人已合成一系列線性的5,10-二氫吡咯并[1,2-b ]異喹啉類及其雙(烷基胺甲酸酯)類。於該等衍生物中，BO-1107(11 )顯示具有有效的抗腫瘤活性，可對抗人類乳癌MX-1及卵巢癌SK-OV-3異種移植物9 。
早期於硫咪唑類(如1 ，圖1)或二氫吡咯并[2,1-b ]噻唑(12 ，圖2)10 之機制的研究報告中，顯示硫原子參與將羥基或胺基甲酸酯排出，導致DNA之親核性攻擊11 。利用已知之 苯并[d ]吡咯[1,2-a ]噻唑二酯類12、13 ，可用以製備2,3-雙(羥甲基)-4H -苯并[d ]吡咯[1,2-a ]噻唑類及其雙(烷基胺甲酸酯)衍生物(13 )，其被認為是化合物12 的「苯同系物」，供抗腫瘤評估。由化合物13 所誘發之DNA交聯之較可能的機制係呈現於圖解1中，如圖3所示。
此外，曾報告過自然存在之β-卡林生物鹼及合成的吲哚生物鹼，具有一常見之三環9H -吡啶并[3,4-b ]吲哚環狀系統，亦具有有效的抗腫瘤活性14、15 。此可推測β-卡林生物鹼可插入DNA之雙股中。因此，吾人欲將此三環9H -吡啶并[3,4-b ]吲哚環狀系統應用於構築新穎的雙功能性DNA烷化劑，稱作1,2-雙(羥甲基)吲哚嗪[6,7-b]吲哚衍生物(14 ，圖2)。
本發明提供新穎衍生物，其可藉由與5,10-二氫吡咯并[1,2-b ]異喹啉(11 )相同的機制，以誘發DNA交聯，且具有有效的抗腫瘤活性。基於吾人之假設，吾人合成一系列之2,3-雙(羥甲基)-4H -苯并[d ]吡咯-[1,2-a ]噻唑類(13 )及1,2-雙(羥甲基)吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物(14 )以及其之雙(烷基胺甲酸酯)類，以供抗腫瘤評估。吾人研究顯示該等藥劑(13 及14 )於活體外及異種移植模式中，對於各種不同之人類腫瘤具有有效的抗腫瘤活性。因此，本發明提供新穎的合成化合物，及其可作為潛在的抗腫瘤藥劑之應用，且更特定而言，可用於治療人類淋巴性白血病及各種不同之固態腫瘤細胞生長、人類乳癌及肺癌。
本發明合成一系列帶有雙(羥甲基)的4H-苯并[d]吡咯-[1,2-a ]噻唑類及吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物(分別為式I及III)，以及與其對應的雙(胺基甲酸酯)(分別為式II及IV)。
本文所揭露之示例性化合物係表示於下文中，式I化合物(表1)、式II化合物(表2)、式III化合物(表3)、及式IV化合物(表4)。
表1. 苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(5a-j)(式I)
該等藥劑會被用於抗腫瘤研究中。結果顯示該等化合物於活體外，對於抑制各種不同人類腫瘤細胞生長具有顯著的細胞毒性，且對於帶有人類腫瘤異種移植物(如人類乳癌MX-1及肺癌HCT-116)之動物具有有效療效。結果證明該等化合物具有有效抗腫瘤之療效，且具有進行臨床應用之潛力。
在一方面，本發明揭露式之I化合物：
其中：R為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的；「芳基」乙詞是指未經取代或經取代的芳香烴基及雜芳基。芳香烴基的示例包含經取代的或未經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、及菲基。雜芳基的示例包含呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基。芳基或苯甲基的取代基，例如，可從C1 -C6 烷基、ORa ；鹵基、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、或伸甲二氧基、或伸乙二氧基中選擇；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。取代基的數目不受限，且可為1至5。
式I化合物之例子可選自： (1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇； (1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇，及(1-環丙苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇。
在另一方面，本發明揭露式II之化合物：
其中：R1 及R2 可相同或不同，且可為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的；「芳基」乙詞是指未經取代或經取代的芳香烴基及雜芳基。芳香烴基的示例包含經取代的或未經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、及菲基。雜芳基的示例包含呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基。芳基或苯甲基的取代基，例如，可從C1 -C6 烷基、ORa ；鹵素、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、或伸甲二氧基、或伸乙二氧基中選擇；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。取代基的數目不受限，且可為1至5。
式II之化合物之例子可選自： (1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-環丙苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞 甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)及(1-環丙苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)。
在另一方面，本發明揭露式III之化合物：
其中：R1 為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的；「芳基」乙詞是指未經取代或經取代的芳香烴基及雜芳基。芳香烴基的示例包含經取代的或未經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、及菲基。雜芳基的示例包含呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基。芳基或苯甲基的取代基，例如，可從C1 -C6 烷基、ORa ；鹵素、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、或伸甲二氧基、或伸乙二氧基中選擇；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。取代基的數目不受限，且可為1至5。
R2 為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、苯甲基，其可為未經取代的或經取代的、醯基(Ra CO)、甲磺醯基(Me2 SO2 )、或 甲苯磺醯基(MeC6 H4 SO2 )；其中Ra 為C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的。
式III化合物之例子可選自： (3-(苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；(3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；(3-(3,4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；[6-甲基-3-苯基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；[3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)及[3-(4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)。
在另一方面，本發明揭露式IV之化合物：
其中：R1 及R2 可相同或不同，且可為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的；「芳基」乙詞是指未經取代或經取代的芳香烴基及雜芳基。芳香烴基的示例包含經取代的或未經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、及菲基。雜芳基的示例包含呋喃基、吡咯基、噻 吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基。芳基或苯甲基的取代基，例如，可從C1 -C6 烷基、ORa ；鹵素、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、或伸甲二氧基、或伸乙二氧基中選擇；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。取代基的數目不受限，且可為1至5。
R3 為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、苯甲基，其可為未經取代的或經取代的、醯基(Ra CO)、甲磺醯基(Me2 SO2 )、或甲苯磺醯基(MeC6 H4 SO2 )；其中Ra 為C1 -C5 直鏈、分支鏈或環烷基、芳基或苯甲基，其可為未經取代的或經取代的。
式IV化合物之例子可選自： [6-甲基-3-苯基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；[3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)；[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)及[3-(3,4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)。
前述式I至IV化合物之合成方法，包含從式V、VI、VII、VIII、IX、或X化合物開始合成：
本發明具有種種不同具新穎性之特徵，係具體地描述於所附之申請專利範圍中，且亦屬本發明所揭露之一部份。為了能更佳明瞭本發明、其操作優勢、及藉由其之用途所達到的特定目標，請參閱本發明所提供之圖示及較佳具體實施例中所描述者。
本文所揭露之化合物可使用習知技術合成。例如，該等化合物可從市售可得之起始物質，藉由習知之標準有機化學合成方法合成，該等方法亦包含於本文中，將於此藉由圖解及示例闡述。
一般步驟
一示例性之2,3-雙-(羥甲基)-4H -苯并[d ]吡咯[1,2-a ]噻唑類(式I)及其雙(胺基甲酸酯)衍生物(式II)的合成方式係呈現於圖解2中，其中R1 、R2 、R3 、R4 、R5 及R6 已於前述定義過。一示例性之(1-羥甲基-5,10-二氫-吡咯[1,2-b ]異喹啉-2-基) 甲醇(式III)及其雙(胺基甲酸酯)衍生物(式IV)的合成方式係呈現於圖解3中。
式I及式II化合物可被合成如圖解2所示。根據文獻步驟16 ，化合物16 可從市售可得之苯并噻唑15 合成。藉由先前研究所述方法17 繼續進行，以四氟硼酸於醚中處理，接著再以N,N -乙炔二羧酸二甲酯(N,N -dimethyl acetylenedicarboxylate，DMAD)處理，化合物16 可被轉化為二酯17 。藉由與LiAlH4 於醚/CH2 Cl2 之混合物中，於冰浴中反應，二酯17 可被還原成對應的雙乙醇衍生物18 (式I)。將18 以不同的烷基、苯基、或異氰酸苄酯處理，於鹼基存在時(如三乙胺或吡啶)可產生所欲的雙(烷基胺甲酸酯)衍生物19 及20 (式II)。
式III及IV化合物可被合成如圖解3所示。將色氨酸甲酯鹽酸鹽(21 )與甲醛反應，藉由Pictet Spengler環化反應(Pictet Spengler cyclization)18、19 ，可得到22 。於鹼基存在時(如三乙胺或吡啶)、於適當的溶劑中(如CHCl3 、THF、或DMF)，22 與不同的氯酸或酸酐之N -醯化作用(N -Acylation)可得到化合物23 ，其接著可與各種不同之烷基或經取代的苯甲基鹵化物(像是碘甲烷、碘乙烷、或溴化苯)進行反應以生成產物24 。藉由先前研究20 所述之習知步驟，將24 於醋酸酐60-75℃中，以DMAD處理可得到二酯25 。藉由LiAlH4 於醚/CH2 Cl2 還原25 ，可得到所欲的雙(羥甲基)衍生物26 (式III)。相似的，將26 與不同的烷基、苯基、或異氰酸苄酯反應，於鹼基存在時(如三乙胺或吡啶)可產生所欲的雙(烷基胺甲酸酯)衍生物27 (式IV)。
或是，於吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物的C3位置上具有Me的化合物，可被製備如圖解4所示。市售可得的L-色氨酸(29 )可藉由前述方法被轉化為化合物30 。將30 以DMAD於醋酸酐中處理，並加熱可得到二酯31 ，其可接著以不同烷基鹵化物(像是MeI、EtI)、或苯基鹵化物(像是溴甲苯)進行反應以得到32 。相似的，化合物32可藉由前述方式被轉化為所欲的雙(羥甲基)(式III)及雙(烷基胺甲酸酯)衍生物(式IV)。
以下之特定示例僅作為闡述，而非用以侷限本發明。
2,3-雙(羥甲基)-4H -苯并[d ]吡咯-[1,2-a ]噻唑類(式I)及其雙(烷基胺甲酸酯)類衍生物(式II)
實施例1
合成(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1595)、(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)-雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1653)、及(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1652)
1)3-乙醯基-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈
於氬氣環境下，將乙醯氯(Acetylchloride)(4.00 g，51.0 mmol)逐滴加入攪拌中之含有苯并噻唑(benzothiazole)(6.75 g，50.0 mmol)之二氯甲烷(dichloromethane)(40 mL)溶液中。將一催化量之AlCl3 及氰化三甲基矽(trimethylsilylcyanide)(5.1 g，52.0 mmol)接著加入該反應混合物中。經過於室溫攪拌17小時後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥狀態，並將殘留物以醚研磨，以得到3-乙醯基-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈，8.2 g(80%)；mp 92-93℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.39(3H,s,Me),7.05 (1H,s,ArH),7.16-7.26(2H,m,2×ArH),7.49-7.51(1H,m,ArH),7.65(1H,brs,C2-H).模擬計算值(C10 H8 N2 OS)：C,58.80；H,3.95；N,13.72；S,15.70.實驗值：C,58.85；H,3.95；N,13.78；S,15.76。
2)1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯
於含3-乙醯基-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈(5 g，24.5 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液中逐滴加入7 mL的四氟硼酸(HBF4 )。於室溫攪拌該溶液3小時。以過濾收集出現之褐色沈澱物，並將該濾餅以醚沖洗。將固化之鹽類加入含有乙炔二羧酸二甲酯(dimethyl acetylenedicarboxylate)(10.4 g，73.0 mmol)的DMF(30 mL)溶液中，並接著以35℃加熱13小時。將該反應混合物抽真空濃縮，並將殘留物自甲醇中重新結晶，以得到1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯，1.7 g(23%)；mp 143-144℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.85(3H,s,Me),3.83(3H,s,COOMe),3.85(3H,s,COOMe),7.50(1H,t,J =7.6 Hz,ArH),7.58(1H,t,J =7.6 Hz,ArH),8.07(1H,d,J =8.0 Hz,ArH),8.12(1H,d,J =8.0 Hz,ArH).模擬計算值(C15 H13 NO4 S)：C,59.39；H,4.32；N,4.62；S,10.57.實驗值：C,59.02；H,4.23；N,4.87；S,10.42。
3)(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1595)
將含有1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯(2.0 g，6.6 mmol)的無水二氯甲烷(30 mL)溶液，於-5℃至0℃，逐滴加入一含有氫化鋰鋁(0.6 g，16.0 mmol)的無水醚(20 mL)攪拌混合物中。該反應混合物接著於該溫度進行攪拌20分鐘。過多的氫化物可藉由添加水(1 mL)，接著添加NH4 OH(1 mL)及水(1 mL)，於-5℃至0℃分解之。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗數次。將結合的濾出物及洗滌物連續地 以水及鹽水溶液沖洗。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並在真空中濃縮至乾燥。將殘留物以醚研磨以得到白色粉末之(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1595)，1.3 g(82%)；mp 138-139℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.63(3H,s,Me),4.39(2H,d,J =5.2 Hz,CH2 ),4.56(2H,d,J =5.2 Hz,CH2 ),4.60(1H,t,J =5.6 Hz，可交換的，OH),4.97(1H,t,J =5.6 Hz，可交換的，OH),7.21-7.25(1H,m,ArH),7.34-7.38(1H,m,ArH),7.76-7.78(1H,m,ArH),7.83-7.85(1H,m,ArH).模擬計算值(C13 H13 NO2 S)：C,63.13；H,5.30；N,5.66；S,12.97.實驗值：C,62.94；H,5.24；N,5.83；S,12.90。
4)(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1653)
將含有(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1595)(0.24 g，1.0 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.5 mL)處理，之後再以過多的異氰酸乙酯(0.28 g，4.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到BO-1653，0.30 g(85%)；mp 158-159℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 0.98(6H,t,J =7.0 Hz,2×Me),2.67(3H,s,Me),2.98(4H,q,J =7.0 Hz,CH2 ),5.01(2H,s,CH2 ),5.03(2H,s,CH2 ),7.02-7.05(2H,brs，可交換的，NH),7.29(1H,t,J =8.0 Hz,ArH),7.41(1H,t,J =8.0 Hz,ArH),7.84(1H,d,J =8.0 Hz,ArH),7.91(1H,d,J =8.0 Hz,ArH).模擬計算值(C19 H23 N3 O4 S)：C,58.59；H,5.95；N,10.79；S,8.23.實驗值：C,58.26；H,5.62；N,10.46；S,8.60。
5)(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1652)
將含有(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇 (BO-1595)(0.24 g，1.0 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.5 mL)處理，之後再以過多的異氰酸異丙酯(0.34 g，4.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待整夜攪拌後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-甲基苯并[d]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1652)，0.33 g(79%)；mp 172-173℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.03(12H,d,J =6.4 Hz,4×Me),2.67(3H,s,Me),3.59(2H,m,CH),5.02(2H,s,CH2 ),5.04(2H,s,CH2 ),6.97-6.99(2H,brs，可交換的，NH),7.29(1H,t,J =8.0 Hz,ArH),7.41(1H,t,J =8.0 Hz,ArH),7.84(1H,d,J =8.0 Hz,ArH),7.91(1H,d,J =8.0 Hz,ArH).模擬計算值(C21 H27 N3 O4 S)：C,60.41；H,6.52；N,10.06；S,7.68.實驗值：C,60.08；H,6.24；N,9.76；S,7.97。
實施例2
合成(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1592)、(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1593)及(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1597)
1)3-(4-氟苯甲醯基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈
於氬氣環境下，將4-氟苯甲醯氯(6.5 g，41.0 mmol)逐滴加入攪拌中之含有苯并噻唑(5.4 g，40.0 mmol)之二氯甲烷(40 mL)溶液中。將一催化量之AlCl3 及氰化三甲基矽(4.1 g，42.0 mmol)接著加入該反應混合物中。經過於室溫攪拌15小時後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥，並將殘留物以醚研磨，以得到3-(4-氟苯甲醯基)-2,3-二氫苯并[d ]噻唑-2-腈，9.3 g(82%)；mp 150-151℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 6.71(1H,brs,C2-H),6.85(1H,s,ArH),7.04-7.07(1H,m,ArH),7.12-7.16(1H,m, ArH),7.38-7.40(2H,m,2×ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH),7.64-7.67(2H,m,2×ArH).模擬計算值(C15 H9 FN2 OS)：C,63.37；H,3.19；N,9.85；S,11.28.實驗值：C,63.02；H,3.27；N,9.81；S,11.31。
2)1-(4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯
於含有3-(4-氟苯甲醯基)-2,3-二氫苯并[d ]噻唑-2-腈(8.1g，28.0 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液中逐滴加入8 mL的四氟硼酸(HBF4 )。於室溫攪拌該溶液3小時。以過濾收集出現之褐色沈澱物，並將該濾餅以醚沖洗。將固化之鹽類加入含有乙炔二羧酸二甲酯(12.2 g，84.0 mmol)的DMF(40 mL)溶液中，並接著以35℃增溫14小時。將該反應混合物於真空中濃縮，並將殘留物自甲醇中結晶，以得到1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯，2.5 g(23%)；mp 186-187℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.63(3H,s,COOMe),3.83(3H,s,COOMe),6.78-6.80(1H,m,ArH),7.28-7.30(1H,m,ArH),7.30-7.44(3H,m,3×ArH),7.62-7.66(2H,m,2×ArH),8.03-8.05(1H,m,ArH).模擬計算值(C20 H14 FNO4 S)：C,62.65；H,3.68；N,3.65；S,8.36.實驗值：C,62.68；H,3.46；N,3.62；S,8.76。
3)(1-(4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1592)
將含有1-(4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯(2.4 g，6.6 mmol)的無水二氯甲烷(30 mL)溶液，於-5℃至0℃，逐滴加入一含有氫化鋰鋁(0.6 g，16.0 mmol)的無水醚(20 mL)攪拌混合物中。該反應混合物接著於該溫度進行攪拌20分鐘。過多的氫化物可藉由添加水(1 mL)，接著添加NH4 OH(1 mL)及水(1 mL)，於-5℃至0℃分解。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗數次。將結合的濾出物及洗滌物連續地以水及鹽水溶液沖洗。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並在真空中濃縮至乾 燥。將殘留物與醚研磨以得到(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1592)，1.5 g(76%)；mp 155-156℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 4.22(2H,d,J =5.1 Hz,CH2 ),4.66(2H,d,J =5.1 Hz,CH2 ),4.73(1H,t,J =5.1 Hz，可交換的，OH),5.13(1H,t,J =5.1 Hz，可交換的，OH),6.83-6.85(1H,m,ArH),7.15-7.19(2H,m,2×ArH),7.37-7.41(2H,m,2×ArH),7.53-7.57(2H,m,2×ArH),7.79-7.81(1H,m,ArH).模擬計算值(C18 H14 FNO2 S)：C,66.04；H,4.31；N,4.28；S,9.79.實驗值：C,65.25；H,4.22；N,4.14；S,9.76。
4)(1-(4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1593)
將含有(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1592)(0.33 g，1.0 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.5 mL)處理，之後再以過多的異氰酸乙酯(0.28 g，4.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待整夜攪拌後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1593)，0.36 g(79%)；mp 172-173℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 0.98(6H,t,J =7.0 Hz,2×Me),2.98(4H,q,J =7.0 Hz,CH2 ),4.81(2H,s,CH2 ),5.12(2H,s,CH2 ),6.79-6.81(1H,m,ArH),7.05-7.11(2H,brs，可交換的，NH),7.19-7.26(2H,m,2×ArH),7.38-7.43(2H,m,2×ArH),7.56-7.59(2H,m,2×ArH),7.86-7.88(1H,m,ArH)。模擬計算值(C24 H24 FN3 O4 S)：C,61.39；H,5.15；N,8.95；S,6.83.實驗值：C,61.36；H,5.26；N,8.94；S,7.14。
5)(1-(4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1597)
將含有(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二 甲醇(BO-1592)(0.33 g，1.0 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.5 mL)處理，之後再以過多的異氰酸異丙酯(0.34 g，4.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待整夜攪拌後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1597)，0.47 g(95%)；mp 174-175℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ1.04(12H,d,J =6.6 Hz,4×Me),3.59(2H,m,CH),4.81(2H,s,CH2 ),5.12(2H,s,CH2 ),6.79-6.81(1H,m,ArH),6.99-7.05(2H,brs，可交換的，NH),7.18-7.26(2H,m,2×ArH),7.38-7.42(2H,m,2×ArH),7.55-7.58(2H,m,2×ArH),7.86-7.88(1H,m,ArH).模擬計算值(C26 H28 FN3 O4 S)：C,62.76；H,5.67；N,8.44；S,6.44.實驗值：C,62.46；H,5.61；N,8.30；S,6.48。
實施例3
合成(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1582)、(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1596)、及(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1600)
1)3-(4-氯苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈
於氬氣環境下，將4-氯苯甲醯氯(7.2 g，41.0 mmol)逐滴加入攪拌中之含有苯并噻唑(5.4 g，40.0 mmol)之二氯甲烷(40 mL)溶液中。將一催化量之AlCl3 及氰化三甲基矽(4.1 g，42.0 mmol)接著加入該反應混合物中。經過於室溫攪拌15小時後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥，並將殘留物以醚研磨，以得到3-(4-氯苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d ]噻唑-2-腈，10.1g(84%)；mp 115-117℃(lit.21 mp 115-118℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 6.75(1H,brs,C2-H),6.85(1H,s,ArH),7.05-7.09(1H,m,ArH),7.13-7.17(1H,m,ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH),7.58-7.61(4H, m,4×ArH)。
2)1-(4-氯苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯
於含有3-(4-氯苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d ]噻唑-2-腈(9.12 g，30.0 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液中逐滴加入9 mL的四氟硼酸(HBF4 )。於室溫攪拌該溶液3小時。以過濾收集出現之褐色沈澱物，並將該濾餅以醚沖洗。將固化之鹽類加入含有乙炔二羧酸二甲酯(12.7 g，90.0 mmol)的DMF(40 mL)溶液中，並接著以35℃增溫14小時。將該反應混合物於真空中濃縮，並將殘留物自甲醇中結晶，以得到1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯，2.5 g(21%)；mp 172-173℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.64(3H,s,COOMe),3.83(3H,s,COOMe),6.85-6.87(1H,m,ArH),7.30-7.42(2H,m,ArH),7.60-7.66(4H,m,4×ArH),8.04-8.06(1H,m,ArH).模擬計算值(C20 H14 ClNO4 S． 0.5H2 O)：C,58.75；H,3.70；N,3.43；S,7.84.實驗值：C,58.76；H,3.45；N,3.59；S,7.73。
3)(1-(4-氯苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1582)
將含有1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯(2.1 g，5.0 mmol)的無水二氯甲烷(30 mL)溶液，於-5℃至0℃，逐滴加入一含有氫化鋰鋁(0.45 g，12.5 mmol)的無水醚(20 mL)之經攪拌混合物中。該反應混合物接著於該溫度進行攪拌20分鐘。過多的氫化物可藉由添加水(1 mL)，接著添加NH4 OH(1 mL)及水(1 mL)，於-5℃至0℃分解。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗數次。將結合的濾出物及洗滌物連續地以水及鹽水溶液沖洗。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並於真空中濃縮至乾燥。將殘留物以醚研磨以得到(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1582)，1.5 g(88%)；mp 151-152℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 4.22(2H,d,J =4.4 Hz, CH2 ),4.66(2H,d,J =4.4 Hz,CH2 ),4.76(1H,t,J =5.2 Hz，可交換的，OH),5.14(1H,t,J =5.2 Hz，可交換的，OH),6.91-6.93(1H,m,ArH),7.16-7.22(2H,m,2×ArH)，7.53(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.61(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.79-7.82(1H,m,ArH).模擬計算值(C18 H14 ClNO2 S)：C,62.88；H,4.10；N,4.07；S,9.33.實驗值：C,62.73；H,4.09；N,4.06；S,9.19。
4)(1-(4-氯苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1596)
將含有(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1582)(0.25 g，0.7 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.4 mL)處理，之後再以過多的異氰酸乙酯(0.23 g，3.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待整夜攪拌後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1596)，0.28 g(78%)；mp 190-191℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.00(6H,t,J =7.2 Hz,2×Me),2.99(4H,q,J =7.2 Hz,CH2 ),4.83(2H,s,CH2 ),5.13(2H,s,CH2 ),6.87-6.89(1H,m,ArH),7.07-7.14(2H,brs，可交換的，NH),7.21-7.29(2H,m,2×ArH),7.55(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.63(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.88-7.90(1H,m,ArH).模擬計算值(C24 H24 ClN3 O4 S)：C,59.31；H,4.98；N,8.65；S,6.60.實驗值：C,59.44；H,4.95；N,8.52；S,6.72。
5)(1-(4-氯苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1600)
將含有(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1582)(0.17 g，0.5 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.3 mL)處理，之後再以過多的異氰酸異丙酯(0.17 g，2.0 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進 行攪拌。待整夜攪拌後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1600)，0.2 g(78%)；mp 171-172℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.04(12H,d,J =6.4 Hz,4×Me),3.59(2H,m,CH),4.82(2H,s,CH2 ),5.12(2H,s,CH2 ),6.87-6.89(1H,m,ArH),6.97-7.05(2H,brs，可交換的，NH),7.20-7.28(2H,m,2×ArH),7.54(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.63(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.87-7.89(1H,m,ArH).模擬計算值(C26 H28 ClN3 O4 S．0.5H2 O)：C,59.70；H,5.59；N,8.03；S,6.13.實驗值：C,59.38；H,5.32；N,7.87；S,6.50。
實施例4
合成(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1646)、(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1647)、及(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1648)
1)3-(4-甲氧苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈
於氬氣環境下，將4-甲氧苯甲醯氯(7.0 g，41.0 mmol)逐滴加入攪拌中之含有苯并噻唑(5.4 g，40.0 mmol)之二氯甲烷(40 mL)溶液中。將一催化量之AlCl3 及氰化三甲基矽(4.1 g，42.0 mmol)接著加入該反應混合物中。經過於室溫攪拌14小時後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥，並將殘留物以醚研磨，以得到3-(4-甲氧苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d]噻唑-2-腈，8.2g(70%)；mp 122-123℃(Lit.21 122-123℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.82(3H,s,MeO),6.72(1H,brs,C2-H),6.84(1H,s,ArH),7.01-7.14(4H,m,4×ArH),7.52-7.55(3H,m,3×ArH)。
2)1-(4-甲氧苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯
於含有3-(4-甲氧苯甲醯)-2,3-二氫苯并[d ]噻唑-2-腈(5.3 g，17.9 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液中逐滴加入5 mL的四氟硼酸(HBF4 )。於室溫攪拌該溶液3小時。以過濾收集出現之褐色沈澱物，並將該濾餅以醚沖洗。將固化之鹽類加入含有乙炔二羧酸二甲酯(7.6 g，54.0 mmol)的DMF(40 mL)溶液中，並接著以35℃升溫14小時。將該反應混合物於真空中濃縮，並將殘留物自甲醇中結晶，以得到1-(4-甲氧苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二羧酸二甲酯1.7 g(24%)；mp 167-168℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.63(3H,s,COOMe),3.82(3H,s,COOMe),3.86(3H,s,Me),6.84-6.86(1H,m,ArH),7.12(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.28-7.32(1H,m,ArH),7.37-7.40(1H,m,ArH),7.48(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),8.03-8.05(1H,m,ArH).模擬計算值(C21 H17 NO5 S)：C,63.79；H,4.33；N,3.54；S,8.11.實驗值：C,63.81；H,4.33；N,3.55；S,8.10。
3)(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1646)
將含有1-(4-甲氧苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二羧酸酯(1.7 g，4.3 mmol)的無水二氯甲烷(30 mL)溶液，於-5℃至0℃，逐滴加入一含有氫化鋰鋁(0.4 g，10.0 mmol)的無水醚(20 mL)之經攪拌混合物中。該反應混合物接著於該溫度進行攪拌20分鐘。過多的氫化物可藉由添加水(1 mL)，接著添加NH4 OH(1 mL)及水(1 mL)，於-5℃至0℃分解。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗數次。將結合的濾出物及洗滌物連續地以水及鹽水溶液沖洗。將有機層乾燥(Na2 SO4 )並在真空中濃縮至乾燥。將殘留物自乙醇結晶以得到(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)-二甲醇(BO-1646)，1.3 g(91%)；mp 156-157℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.85(3H,s,MeO),4.22(2H, d,J =4.8 Hz,CH2 ),4.66(3H,m,CH2 及可交換的OH),5.09(1H,t,J =4.8 Hz，可交換的，OH),6.85-6.87(1H,m,ArH),7.08-7.19(4H,m,4×ArH),7.39-7.42(2H,m,2×ArH),7.76-7.79(1H,m,ArH).模擬計算值(C19 H17 NO3 S)：C,67.24；H,5.05；N,4.13；S,9.45.實驗值：C,67.54；H,5.00；N,4.00；S,9.30。
4)(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1647)
將含有(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1646)(0.2 g，0.6 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.3 mL)處理，之後再以過多的異氰酸乙酯(0.17 g，2.4 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌。待反應完成後，將該反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1647)，0.24 g(85%)；mp 146-147℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.00(6H,t,J =7.2 Hz,2×Me),2.99(4H,q,J =7.2 Hz,CH2 ),3.87(3H,s,OMe),4.80(2H,s,CH2 ),5.11(2H,s,CH2 ),6.83-6.85(1H,m,ArH),7.04-7.10(2H,brs，可交換的，NH),7.11-7.13(2H,m,2×ArH),7.18-7.26(2H,m,2×ArH),7.41-7.43(2H,m,2×ArH),7.84-7.86(1H,m,ArH).模擬計算值(C25 H27 N3 O5 S)：C,62.35；H,5.65；N,8.73；S,6.66.實驗值：C,62.19；H,5.55；N,7.03；S,8.75。
5)(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1648)
將含有(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇(BO-1646)(0.25 g，0.7 mmol)之無水THF溶液，以過多的三乙胺(0.4 mL)處理，之後再以過多的異氰酸異丙酯(0.24 g，2.8 mmol)處理。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物 進行攪拌。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1648)，0.32 g(86%)；mp 141-142℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.04(12H,d,J =6.6 Hz,4×Me),3.59(2H,m,CH),3.87(3H,s,MeO),4.81(2H,s,CH2 ),5.11(2H,s,CH2 ),6.83-6.85(1H,m,ArH),6.97-7.04(2H,brs，可交換的，NH),7.12(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.17-7.25(2H,m,2×ArH),7.42(2H,d,J =8.4 Hz,2×ArH),7.84-7.86(1H,m,ArH).模擬計算值(C27 H31 N3 O5 S)：C,63.63；H,6.13；N,8.25；S,6.29.實驗值：C,63.38；H,6.06；N,8.05；S,6.61。
按照前述相同之合成方式，以合成如表1及2中之式I及式II的化合物。
合成1,2-雙(羥甲基)吲哚嗪[6,7-b ]吲哚類(式III)及其雙(烷基胺甲酸酯)類衍生物(式IV)
實施例5
合成[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1922)、[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)-雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1923)、及[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]-吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1924)
1)1,2,3,4-四氫-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸
將L-色胺酸(50 g，245 mmol)分批添加入0.1 N H2 SO4 (150 mL)及37%甲醛(80 mL)之混合物中，且過程中伴隨著攪拌。經過於室溫攪拌4小時後，藉由過濾收集分離出的白色固體。該固體餅以水沖洗，並乾燥以得到1,2,3,4-四氫-吡啶并[3,4-b ]吲 哚-3-羧酸，41 g，(78%)；mp 275-276℃(lit.18 mp 280-282℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.84(1H,m,CH2 ),3.16(1H,m,CH2 ),3.66(1H,m,CH2 ),4.23(1H,m,CH2 ),4.38(1H,m,CH),6.98-7.02(1H,m,ArH),7.13-7.16(1H,m,ArH),7.32-7.34(1H,m,ArH),7.45-7.48(1H,m,ArH),11.03(1H,brs，可交換的，NH)。
2)3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯
將乙炔二羧酸二甲酯(8.4 g,59.5 mmol)加入一含有1,2,3,4-四氫-吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸(10 g，39.6 mmol)的醋酸酐(70 mL)混合物中。將該反應混合物以70℃加熱並攪拌2小時，接著於真空中揮發至乾燥。將殘留物自MeOH中重新結晶以得到3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯，11.5 g(86%)；mp 252-253℃(lit.20 mp 255-260℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.43(3H,s,Me),3.73(3H,s,COOMe),3.75(3H,s,COOMe),4.16(2H,s,CH2 ),5.21(2H,s,CH2 ),7.02-7.06(1H,m,ArH),7.11-7.14(1H,m,ArH),7.39(1H,d,J =8.0 Hz,ArH),7.52(1H,d,J =7.8 Hz,ArH),11.12(1H,s，可交換的，NH)。
3)3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯
於0℃至5℃，將3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯(6 g，17.7 mmol)分批加入含有NaH(0.63 g，26.5 mmol)之乾燥DMF(150 ml)懸浮液中。經攪拌15分鐘後，將碘甲烷(2.5 g，17.7 mmol)加入該反應混合物中，並於冰浴中再攪拌1小時。經過於室溫攪拌9小時後，將甲醇加入該反應混合物中，接著於真空中揮發至乾燥。將殘留物自MeOH中重新結晶以得到3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯，5.8 g(94%)；mp 240-241℃。1 H NMR (DMSO-d 6 )δ 2.45(3H,s,Me),3.73(6H,s,COOMe及Me),3.74(3H,s,COOMe),4.16(2H,t,J =3.4 Hz,CH2 ),5.27(2H,t,J =3.4 Hz,CH2 ),7.05-7.09(1H,m,ArH),7.17-7.21(1H,m,ArH),7.48(1H,d,J =8.2 Hz,ArH),7.53(1H,d,J =7.8 Hz,ArH).模擬計算值(C20 H20 N2 O4 )：C,68.17；H,5.72；N,7.95.實驗值：C,67.79；H,5.73；N,7.84。
4)[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1922)
將含有3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯(3.5 g，10.0 mmol)的無水二氯甲烷(35 mL)溶液，於0℃至-5℃，逐滴加入一含有LiAlH4 (0.9 g，25.0 mmol)的無水乙醚(20 mL)之經攪拌懸浮物中。待添加完成後，再攪拌該反應混合物15分鐘。過多的氫化物可藉由連續添加水(1 mL)、15%水狀NaOH(1 mL)及水(1 mL)，於0℃分解。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗該固體殘留物。將結合的濾出物及洗滌物於真空中揮發至乾燥。將殘留物以醚研磨，以得到[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1922)，2.3 g(79%)；mp 200-201℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.29(3H,s,Me),3.73(3H,s,Me),3.99(2H,s,CH2 ),4.38(4H,brs,CH2 及可交換的，OH),4.44(2H,s,CH2 ),5.13(2H,s,CH2 ),7.05(1H,t,J =7.4 Hz,ArH),7.16(1H,t,J =7.4 Hz,ArH),7.46(1H,d,J =7.8 Hz,ArH),7.53(1H,d,J =7.8 Hz,ArH).模擬計算值(C18 H20 N2 O2 ．0.5H2 O)：C,70.80；H,6.93；N,9.17.實驗值：C,70.85；H,6.65；N,9.02。
5)[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1923)
將異氰酸乙酯(0.28 g，4 mmol)加入含有[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1922)(0.29 g，1 mmol)及三乙胺(0.3 mL)之無水DMF溶液。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌12小時。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1923)，0.3 g(69%)；mp 165-166℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 0.98(6H,t,J =6.9 Hz,2×Me),2.32(3H,s,Me),2.98(4H,q,J =6.9 Hz,CH2 ),3.73(3H,s,NMe),4.04(2H,s,CH2 ),4.94(2H,s,CH2 ),4.98(2H,s,CH2 ),5.17(2H,s,CH2 ),6.88-6.91(2H,brs，可交換的，NH),7.04-7.08(1H,m,ArH),7.15-7.19(1H,m,ArH),7.46-7.48(1H,m,ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH).模擬計算值(C24 H30 N4 O4 )：C,65.73；H,6.90；N,12.78.實驗值：C,65.53；H,6.75；N,12.44。
6)[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1924)
將異氰酸異丙酯(0.34 g，4 mmol)加入含有[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1922)(0.29 g，1 mmol)及三乙胺(0.3 mL)之無水DMF溶液。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌12小時。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到[3,6-二甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1924)，0.32 g(68%)；mp 190-191℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.02(12H,d,J =6.4 Hz,4×Me),2.31(3H,s,Me),3.56(2H,m,CH),3.73(3H,s,NMe),4.03(2H,s,CH2 ),4.94(2H,s,CH2 ),4.98(2H,s,CH2 ),5.16(2H,s,CH2 ),6.81-6.83(2H,brs，可交換的，NH),7.04-7.07(1H,m,ArH),7.15-7.18(1H,m,ArH),7.45-7.47(1H,m,ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH).模擬計算值(C26 H34 N4 O4 )：C,66.93；H,7.35；N,12.01.實驗值：C,66.79；H,7.15；N,11.73。
實施例6
按照與合成BO-1922、BO-1923、及BO-1924之相同合成方式，以製備以下之化合物。
[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1972)、[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1973)、及[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1974)
1)6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯
此化合物係從3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯(5.1 g，15 mmol)、NaH(0.54 g，22.5 mmol)及碘乙烷(2.3 g，15 mmol)製備。產率5.1 g(92%)；mp 202-203℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.29(3H,t,J =6.9 Hz,Me),2.46(3H,s,Me),3.73(3H,s,COOMe),3.74(3H,s,COOMe),4.17(2H,s,CH2 ),4.20(2H,q,J =6.9 Hz,CH2 ),5.29(2H,s,CH2 ),7.05-7.09(1H,m,ArH),7.16-7.20(1H,m,ArH),7.49-7.51(1H,m,ArH),7.53-7.55(1H,m,ArH).模擬計算值(C21 H22 N2 O4 )：C,68.84；H,6.05；N,7.65.實驗值：C,68.46；H,6.06；N,7.59。
2)[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]二甲醇(BO-1972)
化合物BO-1972係從6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯(3.6 g，10 mmol)及LiAlH4 (0.92 g，25 mmol)製備。產率2.5 g(80%)；mp 216-217℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.29(3H,t,J =7.1 Hz,Me),2.30(3H,s,Me),4.00(2H,s,CH2 ),4.21(2H,q,J =7.1 Hz,CH2 ),4.38(3H,br s,CH2 及可交換的，OH),4.44(3H,br s,CH2 及可交換的，OH),5.13 (2H,s,CH2 ),7.04-7.07(1H,m,ArH),7.14-7.18(1H,m,ArH),7.47-7.49(1H,m,ArH),7.53-7.55(1H,m,ArH).模擬計算值(C19 H22 N2 O2 )：C,73.52；H,7.14；N,9.03.實驗值：C,73.68；H,6.93；N,8.66。
3)[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1973)
化合物BO-1973係從[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(0.62 g，2 mmol)、Et3 N(0.6 mL)、及異氰酸乙酯(0.56 g，8 mmol)製備。產率，0.52 g(57%)；mp 178-179℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 0.98(6H,t,J =7.1 Hz,2×Me),1.29(3H,t,J =7 Hz,Me),2.33(3H,s,Me),2.97(4H,q,J =7.1 Hz,CH2 ),4.04(2H,s,CH2 ),4.21(2H,q,J =7 Hz,CH2 ),4.94(2H,s,CH2 ),4.99(2H,s,CH2 ),5.17(2H,s,CH2 ),6.89(2H,br s，可交換的，NH),7.04-7.08(1H,m,ArH),7.15-7.18(1H,m,ArH),7.47-7.49(1H,m,ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH).模擬計算值(C25 H32 N4 O4 ．0.5H2 O)：C,65.06；H,7.21；N,12.14.實驗值：C,64.71；H,7.09；N,12.03。
4)[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1974)
化合物BO-1974係從[6-乙基-3-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]二甲醇(0.62 g，2 mmol)、Et3 N(0.6 mL)、及異氰酸異丙酯(0.68 g，8 mmol)製備。產率，0.61 g(63%)；mp 219-220℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.01(12H,d,J =6.4 Hz,4×Me),1.29(3H,t,J =7 Hz,Me),2.33(3H,s,Me),3.57(2H,m,CH),4.04(2H,s,CH2 ),4.21(2H,q,J =7 Hz,CH2 ),4.94(2H,s,CH2 ),4.99(2H,s,CH2 ),5.17(2H,s,CH2 ),6.82(2H,br s，可交換的，NH),7.04-7.08(1H,m,ArH),7.15-7.18(1H,m,ArH),7.45-7.49(1H,m,ArH),7.52-7.54(1H,m,ArH).模擬計算值 (C27 H36 N4 O4 )：C,67.48；H,7.55；N,11.66.實驗值：C,67.26；H,7.59；N,11.54。
實施例7
合成(3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇(BO-1934)、[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]-吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1935)、及[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1936)
1)1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯
將含有L-色胺酸甲基酯(25.4 g，100 mmol)及37%甲醛溶液(12.5 mL)之液狀甲醇(170 mL；H2 O：MeOH，v/v 10：1)混合物，於室溫攪拌5小時。將該反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物以重碳酸鈉進行鹼化以得到1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸甲酯，14.4 g(63%)；mp 161-162℃(lit.19 mp 164-165℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 2.78(1H,m,CH2 ),2.98(1H,m,CH2 ),3.66(3H,s,COOMe),3.85(1H,m,CH),4.02(2H,q,J =15.8 Hz,NCH2 ),6.92-6.96(1H,m,ArH),7.00-7.04(1H,m,ArH),7.27-7.29(1H,m,ArH),7.37-7.39(1H,m,ArH),10.78(1H,s，可交換的NH)。
2)2-(4-氯苯甲醯)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯
將含有1,2,3,4-四氫-9H -吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸甲酯(6.9 g，30 mmol)、氯化芐基(4.2 g，30 mmol)及三乙胺(4.8 mL)之無水THF(150 mL)混合物進行回流9小時。將其濃縮後以水稀釋。以過濾收集沈澱的固體，並以水及己烷連續地沖洗該固體餅，並進行乾燥以得到2-(4-氯苯甲醯)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯，9.0 g(82%)；mp 243-244℃(lit.19 mp 245-246℃)。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.10(1H,m,CH2 ),3.35(1H,m,CH2 ),3.55及3.65(3H,s,COOMe),4.41及5.18(1H,d,J =17.4 Hz,NCH2 ),4.51及4.64(1H,d,J =16.4 Hz,NCH2 ),4.88及5.82(1H,d,J =5.4 Hz,CH),6.96-6.99(1H,m,ArH),7.03-7.08(1H,m,ArH),7.25-7.32(1H,m,ArH),7.42-7.60(5H,m,5×ArH),10.65及10.95(1H,s，可交換的NH)。
3)2-(4-氯苯甲醯)-9-甲基-1,2,3,4-四氫-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸
於0℃至5℃，將2-(4-氯苯甲醯)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸甲酯(7.3 g，20.0 mmol)分批加入含有NaH(0.96 g，40.0 mmol)之乾燥DMF(150 ml)懸浮液中。經過攪拌15分鐘後，將碘甲烷(2.8 g，20.0 mmol)加入，並於冰浴中再攪拌該反應混合物1小時。再將該混合物於室溫攪拌9小時。將過多的氫化物以甲醇分解，再將該反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物從MeOH中重新結晶以得到2-(4-氯苯甲醯)-9-甲基-1,2,3,4-四氫-吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸，5.4 g(74%)；mp 262-263℃。1 H NMR(醋酸-d 4 )δ 3.18(1H,m,CH2 ),3.56(1H,m,CH2 ),3.45及3.68(3H,s,NMe),4.64及5.40(1H,d,J =15.8 Hz,NCH2 ),4.70及4.93(1H,d,J =17.1 Hz,NCH2 ),5.02及6.12(1H,d,J =5.4 Hz,CH),7.04-7.07(1H,m,ArH),7.15-7.18(1H,m,ArH),7.31-7.33(1H,m,ArH),7.45-7.47(1H,m,ArH),7.50-7.55(3H,m,3×ArH),7.59-7.61(1H,m,ArH).模擬計算值(C20 H17 ClN2 O3 )：C,65.13；H,4.65；N,7.60.實驗值：C,64.77；H,4.79；N,7.68。
4)3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯
將含有2-(4-氯苯甲醯)-9-甲基-1,2,3,4-四氫吡啶并[3,4-b ]吲哚-3-羧酸(4 g，10.8 mmol)、及DMAD(2.3 g，16.3 mmol)之 AC2 O(30 mL)混合物以80℃進行加熱2小時。將該反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物從MeOH中重新結晶以得到3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯，3.5 g，(72%)；mp 264-265℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.60(6H,s,2×COOMe),3.78(3H,s,NMe),4.30(2H,s,CH2 ),5.18(2H,s,CH2 ),7.06-7.10(1H,m,ArH),7.17-7.20(1H,m,ArH),7.45-7.47(1H,m,ArH),7.54-7.59(5H,m,5×ArH).模擬計算值(C25 H21 ClN2 O4 )：C,66.89；H,4.72；N,6.24.實驗值：C,66.82；H,4.63；N,6.24。
5)(3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基)二甲醇(BO-1934)
於0℃至-5℃，將含有3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二羧酸二甲酯(3.2 g，7 mmol)之無水二氯甲烷(35 mL)溶液逐滴加入一攪拌中之含有LiAlH4 (0.6g，17.8 mmol)的無水乙醚(20 mL)懸浮液中。待添加完成後，將反應混合物再攪拌15分鐘。過多的氫化物可藉由於0℃連續添加水(1 mL)、15%水狀NaOH(1 mL)及水(1 mL)分解。將混合物以矽藻土過濾，並以二氯甲烷沖洗該固體。將結合的濾出物及洗滌物於真空中揮發至乾燥。將殘留物與醚研磨以得到(3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇(BO-1934)，2.2 g(77%)；mp 238-239℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 3.62(3H,s,Me),4.10(2H,s,CH2 ),4.29(2H,m,CH2 ),4.55(2H,s,CH2 )4.59(2H,brs，可交換的，2×OH),5.16(2H,s,CH2 ),7.04-7.08(1H,m,ArH),7.14-7.18(1H,m,ArH),7.43-7.45(1H,m,ArH)，7.53-7.59(5H,m,5×ArH).模擬計算值(C23 H21 ClN2 O2 ．0.5H2 O)：C,68.74；H,5.52；N,6.97.實驗值：C,68.72；H,5.16；N,6.94。
6)[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚 -1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1935)
將異氰酸乙酯(0.28 g，4 mmol)加入含有(3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)-二甲醇(BO-1934)(0.4 g，1 mmol)及三乙胺(0.4 mL)之無水DMF溶液。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌12小時。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)(BO-1935)，0.31 g(58%)；mp 176-177℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 0.98(6H,t,J =6.4 Hz,2×Me),2.98(4H,q,J =6.4 Hz,CH2 ),3.60(3H,s,NMe),4.13(2H,s,CH2 ),4.80(2H,s,CH2 ),5.07(2H,s,CH2 ),5.15(2H,s,CH2 ),6.96-6.98(2H,brs，可交換的，NH),7.04-7.08(1H,m,ArH),7.14-7.18(1H,m,ArH),7.43-7.45(1H,m,ArH),7.54-7.60(5H,m,5×ArH).模擬計算值(C29 H31 ClN4 O4 ．0.5H2 O)：C,64.02；H,5.93；N,10.30.實驗值：C,63.97；H,6.01；N,10.29。
7)[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1936)
將異氰酸異丙酯(0.34 g，4 mmol)加入含有(3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)-二甲醇(BO-1934)(0.4 g，1 mmol)及三乙胺(0.4 mL)之無水DMF溶液。於氬氣環境、環境溫度下將該反應混合物進行攪拌12小時。待反應完成後，將反應混合物於真空中揮發至乾燥。將殘留物自乙醇中重新結晶以得到[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H-吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)(BO-1936)，0.34 g(60%)；mp 195-196℃。1 H NMR(DMSO-d 6 )δ 1.02(12H,d,J =6.4 Hz,4×Me),3.57(2H,m,CH),3.61(3H,s,NMe),4.14(2H,s,CH2 ),4.81(2H,s,CH2 ),5.08(2H,s,CH2 ),5.16(2H,s,CH2 ),6.87-6.90(2H,brs，可交換的，NH),7.05-7.09 (1H,m,ArH),7.15-7.19(1H,m,ArH),7.44-7.46(1H,m,ArH),7.54-7.58(5H,m,5×ArH).模擬計算值(C31 H35 ClN4 O4 ．0.5H2 O)：C,65.08；H,6.34；N,9.79.實驗值：C,64.94；H,6.21；N,9.73。
按照如前述之相同合成方式，以合成如表3及4之式III及式IV之化合物。
生物性結果
活體外細胞毒性對抗人類淋巴性白血病及固態腫瘤
表5顯示本文所揭露之化合物的細胞毒性，可於細胞培養中抑制腫瘤細胞生長。該IC50 係指用以抑制腫瘤細胞生長50%的所需濃度。如表5所示，結果證實該等藥劑具有有效的細胞毒性，可用以對抗人類淋巴性白血病(CCRF/CEM)及其具抗藥性之亞細胞群(對於長春鹼及紫杉醇具有抗性，分別為CCRF-CEM/VBL及CCRF-CEM/紫杉醇)。本文所揭露之化合物，於活體外之細胞培養時，以亞微莫耳濃度或微莫耳濃度的IC50 值(表6)觀察，可抑制人類固態腫瘤生長(如：乳癌MX-1、結腸癌HCT-116、攝護腺癌PC3、肺癌H1299、神經膠瘤U87、及口腔癌OECM1)。表7顯示2,3-雙(羥甲基)-5H -吲哚嗪[6,7-b ]-吲哚及其雙(烷基胺甲酸酯)衍生物的抗增生活性，可於活體外對抗人類淋巴性白血病之細胞生長(CCRF-CEM)及固態腫瘤(如：MX-1、HCT-116、PC3、H1299、U87、及OECM1腫瘤細胞株)。結果顯示新發明的化合物具有顯著抗增生性，可於活體外對抗各種不同腫瘤細胞生長，且該等腫瘤對於紫杉醇或長春鹼具有低抗藥性、或不具有交叉耐藥性(cross-resistance)。因此，可推測於此揭露的類似物可有效對抗對於多種藥物具抗藥性之腫瘤。
表5：新合成的2,3-雙(羥甲基)苯并[d ]-吡咯[2,1-b ]噻唑及其雙(烷基胺甲酸酯)衍生物之細胞毒性，可對抗人類淋巴性白血
a 相較於親代細胞株之IC50 而言，CCRF-CEM/紫杉醇及CCRF-CEM/VBL為CCRF-CEM亞細胞群，分別對於紫杉醇具有330倍之抗藥性，對於長春鹼具有680倍抗藥性。
b 相較於親代細胞株之IC50 而言，括號內之數字為交叉抗藥性之倍數。
活體內研究
本文所揭露之新發明的化合物，其代表性化合物係用以評估於帶有人類腫瘤異種移植物之裸鼠的療效。苯并[d]吡咯[2,1-b ]-噻唑衍生物於活體內之療效，如圖4之化合物19b (BO-1593)及19c (BO-1596)，以及圖5之化合物20b (BO-1597)及20c (BO-1600)，可於裸鼠中對抗人類乳癌MX-1異種移植物。結果顯示當以BO-1593 (10 mg/kg，Q2D×4)或BO-1596 (30 mg/kg，Q2D×4)藉由靜脈注射(iv.Inj.)治療時，可達到高於99%之腫瘤抑制率(圖4A)。顯著地，當小鼠以BO-1597 (20 mg/kg，Q2D×3及接著25 mg/kg，Q2D×4，靜脈注射)治療時，2/3之小鼠於D26及28時可發現完整的腫瘤緩解(CR)。於另一試驗中，當小鼠以BO-1600 (20 mg/kg，Q2D×3及接著25 mg/kg，Q2D×5)治療時，於D24、26、及26時(圖5A)，全部三隻受治療小鼠皆可發現完整的腫瘤緩解。
本研究亦評估吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物之療效。如圖6所示，當帶有MX-1人類乳腺異種移植物之裸鼠以28c (BO-1919)及33b (BO-1972)治療時，可達到CR。此外，本研究亦評估相較於紫杉醇，33a (BO-1922)及33b (BO-1972)對於帶有人類肺癌A549異種移植物之裸鼠的抗腫瘤活性。
DNA交聯研究
本發明藉由鹼性瓊脂膠體位移試驗研究不同濃度(1、10及20μ M)之苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑衍生物的雙(羥甲基)衍生物 [18g (BO-1646)及18c (BO-1582)](式I)，及其對應的雙(烷基胺甲酸酯)衍生物[19g (BO-1647)、20g (BO-1648)、19c (BO-1596)及20c (BO-1600)](式II)於DNA交聯之能力(將pBR322 DNA線性化的能力)。美法侖(Melphalan)被當作陽性對照組。如圖8所示，所有測試化合物可與DNA共價結合(股間交聯)，即可推知DNA交聯可能為該等藥劑之主要作用機制。
生物性方法
腫瘤及細胞株
人類結腸癌HCT-116細胞及人類攝護腺癌PC-3細胞皆取自美國菌種保存中心(ATCC,Rockville,MD)。人類乳癌(MX-1)腫瘤細胞取自MSKCC細胞庫。CCRF-CEM人類淋巴性白血病細胞及其對長春鹼有抗藥性之亞細胞群(CCRF-CEM/VBL，活體外具680倍抗藥性)取自芝加哥，伊利諾大學的Dr.William Beck，以及CCRF-CEM/紫杉醇(活體外具330倍抗藥性)。具抗藥性細胞CCRF-CEM/紫杉醇是藉由將親代細胞暴露在漸增濃度(低於致死濃度，IC50 -IC90 )之太平洋紫杉醇(paclitaxel)長達6個月以製得。
攝護腺癌PC3、非小細胞肺癌細胞H1299、及人類神經膠瘤細胞U87皆購自美國菌種保存中心(Rockville,MD)。OECM-1(人類牙齦鱗狀細胞癌細胞)取自Dr C.-L.Meng(國防醫學院，台灣)22 。
細胞毒性試驗
於進行活體外之細胞毒性試驗前之準備，需將細胞以每毫升2-5×104 個細胞的起始密度進行培養。將該等細胞置於5%潮濕CO2 環境、37℃中，以含有青黴素(100 units/mL)、鏈黴素(100μg/mL，GIBCO/BRL)、及5%熱不活化的FBS之RPMI培養基1640(GIBCO/BRL)持續培養。將懸浮培養細胞(如CCRF-CEM及其亞細胞群)藉由使用XTT微培養方法23 ，於96 孔微升盤中進行細胞毒性測量。
新合成的化合物之細胞毒性，係以T細胞急性淋巴性白血病(CCRF-CEM)及其具抗藥性亞細胞群(CCRF-CEM/紫杉醇及CCRF-CEM/VBL)以XTT方法24 ，以及以人類固態腫瘤細胞(如乳癌MX-1及結腸癌HCT-116)以SRB方法25 ，經72小時培養，使用先前所述25 之分光光度計評估。待加入吩嗪硫酸甲酯-XTT溶液後，置於37℃培養6小時，並以微量盤式光譜儀(EL 340)於吸光值450及630 nm進行測量。抗非小細胞肺癌H1299、攝護腺癌PC3、口腔癌OECM-1、及神經膠瘤U87之新合成化合物的細胞毒性，係以Alamar blue試驗26 ，經72小時培養，使用先前所述之分光光度計評估。待加入alamar blue溶液後，置於37℃培養6小時。以微量盤式光譜儀於吸光值570及600 nm進行測量。藉由使用Chou及Martin27 所開發出之基於中效理論及作圖28、29 之CompuSyn軟體，分析每個藥物於6或7個濃度時，其劑量與效用之間的關係，藉此以決定IC50 值。對於順鉑之濃度範圍係以平均值±SE(n=4)表示。
動物
帶有nu/nu基因的無胸腺的裸鼠係取自NCI,Frederick,MD，係用於所有人類腫瘤異種移植。使用6週齡或更老、重量20-24g或更重之公裸鼠。化合物之投予係如先前所述之方法26 經由尾巴靜脈進行靜脈注射或輸注。用於化療研究之典型配方，係將每個藥物溶於DMSO中，以製成25 mg/ml現配溶液，將0.4 ml該溶液與0.3 ml Tween 80混合，再加入1.3 ml Tween 80以配製成2 ml之5 mg/ml溶液。每隻老鼠一次性注射的體積為0.1-0.2 ml。使用卡尺測量長×寬×高(或寬)以評估腫瘤體積。該等帶有腫瘤之裸鼠於試驗期間，體重係指總重量減去腫瘤重量。所有動物研究皆按照國家衛生健康機構所制訂之對於動物使用及管理的原則所進行，且試驗計畫為實驗動物管理與使用委員會所同意。
鹼性瓊脂膠體位移試驗
本研究藉由鹼性瓊脂膠體電泳試驗以分析DNA交聯的形成。簡言之，將純化的pEGFP-N1質體DNA(1500 ng)與各種不同濃度(1-20μ M)之待測化合物混合於40 μL之結合緩衝液中(3 mM氯化鈉/1mM磷酸鈉、pH 7.4、及1 mM EDTA)。將反應混合物置於37℃培養2小時。於反應結束時，以BamHI將質體DNA進行酶切以線性化，接著以乙醇沈澱。將DNA pellets溶解及變性於鹼性緩衝液中(0.5 N NaOH-10mM EDTA)。將等分的20 μL DNA溶液(1000 ng)與4 μL之6X鹼性染劑混合，並接著以鹼性瓊脂膠體、及NaOH-EDTA緩衝液，於4℃進行電泳。電泳係以18 V進行22小時。將膠體以溴化乙菲錠溶液進行染色後，即可以UV光觀察DNA。
本發明不受限於前述具體實施例，其僅用作為示例，並可以各種不同方式修改，而該等修改皆屬於所附申請專利範圍之保護範疇內。
圖式中：圖1顯示源自吡咯啶生物鹼(5 )所開發之各種不同之DNA雙功能烴化劑。
圖2顯示各種不同化合物之化學結構，包含吡咯[2,1-a ]異喹啉的雙(胺甲醯氧甲基)衍生物、雙(羥甲基)衍生物、二氫吡咯[2,1-b ]噻唑、及1,2-雙(羥甲基)吲哚嗪[6,7-b]吲哚衍生物。
圖3顯示藉由2,3-雙(羥甲基)-4H -苯并[d ]吡咯[1,2-a ]噻唑及其雙(烷基胺甲酸酯)所導致的DNA交聯之可能的機制。
圖4顯示於帶有MX-1人類乳腺異種移植物之裸鼠中，苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑衍生物：19b (BO-1593)及19c (BO-1596)之療效(靜脈注射，n=3)。A：平均腫瘤大小改變。B：平均 體重改變。
圖5顯示於帶有MX-1人類乳腺異種移植物之裸鼠中，苯并[d]吡咯[2,1-b]噻唑衍生物：20b (BO-1597)及20c (BO-1600)之療效(靜脈注射，n=3)。A：平均腫瘤大小改變。B：平均體重改變。
圖6顯示於帶有MX-1人類乳腺異種移植物之裸鼠中，吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物：28c (BO-1919)及33b (BO-1972)之療效(靜脈注射，n=4)。A：平均腫瘤大小改變。B：平均體重改變。
圖7顯示於帶有人類肺癌A549異種移植物之裸鼠中，吲哚嗪[6,7-b ]吲哚衍生物：33a (BO-1922)及33b (BO-1972)之療效(靜脈注射，n=4)。A：平均腫瘤大小改變。B：平均體重改變。
圖8為苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑衍生物的雙(羥甲基)衍生物[18g (BO-1646)及18c (BO-1582)]及其對應的雙(烷基胺甲酸酯)衍生物[19g (BO-1647)、20g (BO-1648)、19c (BO-1596)及20c (BO-1600)]，於不同濃度時之代表性的DNA交聯膠體移位分析(gel shift assay)。美法侖(Melphalan)(1、10及20 μM)作為陽性對照組。
 【參考文獻】
1. Elliot, W. L.; Fry, D. W.; Anderson, W. K.; Nelson, J. M.; Hook, K. E.; Hawkins, P. A.; Leopold, W. R. In vivo and in vitro evaluation of the alkylating agent carmethizole.Cancer Res. 1991 ,51 , 4581-4587.
2. Weidner, M. F.; Sigurdsson, S. T.; Hopkins, P. B. Sequence preferences of DNA interstrand cross-linking agents: dG-to-dG cross-linking at 5'-CG by structurally simplified analogs of mitomycin C.Biochemistry ,1990 ,29 , 9225-9233.
3. Woo, J.; Sigurdsson, S. T.; Hopkins, P. B. DNA interstrand cross-linking reactions of pyrrole-derived, bifunctional electrophiles: evidence for a common target site in DNA.J. Am. Chem. Soc. 1993 ,115 , 3407-3415.
4. Andeson, W. K.; New, J. S.; Corey, P. F. Tumor inhibitory agents. Bis(N -alkylcarbamate) derivatives of 2,3-dihydro-5-(3’,4’-dichlorophenyl)-6,7-bis(hydroxymethyl)-1H -pyrrolizine.Arzneim. Forsch. 1980 ,30 , 765-768.
5. Anderson, W. K.; McPherson, H. L.; New, J. S.; Rick, A. C. Synthesis and murine antineoplastic activity of bis[carbamoyloxymethyl] derivatives of pyrrolo[2,1-a]isoquinoline.J. Med. Chem. 1984 ,27 , 1321-1325.
6. Anderson, W. K. Activity of bis-carbamoyloxymethyl derivatives of pyrroles and pyrrolizines against human tumor xenografts in nude mice.Cancer Res. 1982 ,42 , 2168-2170.
7. Kakadiya R.; Dong, H.; Lee P. -C.; Kapuriya, N.; Zhang, X.; Chou, T. -C.; Lee, T. -C.; Kapuriya, K.; Shah, A.; Su, T. -L. Potent antitumor bifunctional DNA alkylating agents, synthesis and biological activities of 3a-aza-cyclopenta[a ]indenes.Bioorg. Med. Chem. 2009 ,17 , 5614-5626.
8. Lee P. -C.; Kakadiya R.; Su, T. -L.; Lee, T. -C. Combination of bifunctional alkylating agent and arsenic trioxide synergistically suppresses the growth of drug-resistant tumor cells.Neoplasia. 2010 ,12 , 376-387.
9. Chaniyara, R.; Kapuriya, N.; Dong, H.; Lee, P. -C.; Suman, S.; Marvania, B.; Chou, T. -C.; Lee, T. -C.; Kakadiya, R.; Shah, A.; Su, T. -L. Novel bifunctional alkylating agents, 5,10-dihydropyrrolo[1,2-b ]isoquinoline derivatives, synthesis and biological activity.Boorg. Med. Chem. 2010 ,19 , 1987-1998.
10. Lalezari, I.; Schwartz, E. L.synthesis and antineoplastic activity of 5-aryl-2,3-dihydropyrrolo[2,1-b ]thiazole-6,7-dimethanol 6,7-bis(isopropylcarbamates).J. Med. Chem. 1988 ,31 , 1427-1429.
11. Anderson, W. K. Activity of bis-carbamoyloxymethyl derivatives of pyrroles and pyrrolizines against human tumor xenografts in nude mice.Cancer Res. 1982 ,42 , 2168-2170.
12. Pandya, A; Gibson, H. W.; Synthesis and stereochemistry of reissert compounds from benzothiazole.J. Org. Chem. 1993 ,58 , 2851-2855.
13. McEwen, W. E.; Mineo, I. C.; Shen, Y. H. 1,3-Dipolar addition reactions of reinsert compoundsJ. Am. Chem. Soc. 1971 ,93 , 4479-4484.
14. Deveau, A. M.; Labroli, M. A., Dieckhaus, C. M.; Barthen, M. T.; Smith, K. S.; Macdonald, T. L. The Synthesis of amino-acid functionalized β-carbolines as topoisomerase II inhibitors.Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001 ,11 , 1251-1255.
15. Cao, R.; Peng, W.; Wang, Z.; Xu, A. β-Carboline alkaloids: Biochemical and pharmacological functions. Curr. Med. Chem. 2007 ,14 , 479-500.
16. Pandya, A.; Gibson, H. W. Synthesis and stereochemistry of reissert compounds from benzothiazole.J. Org. Chem. 1993 ,58 , 2851-2855.
17. Berrabah, M.; Schmitt, G.; Dinh, N.; Laude, B.; Condensation of 2-cyano-3-paranitrobenzoyl-2,3-dihydrobenzothiazole hydrofluroborate with alkynes and alkenesBull. Soc. Chim. Belg. 1991 ,100 , 613-616.
18. Lin, N.; Zhao, M.; Wang, C.; Peng, S. Synthesis and antithrombotic activity of carbolinecarboxyl RGD sequence.Bioorg. Med. Chem. ,2002 ,12 , 585-587.
19. Saxena, A. K.; Pandey, S. K.; Tripathi R. C.; Raghubir, R. Synthesis, Molecular Modeling and QSAR Studies in Chiral 2,3-disubstituted-1,2,3,4-tetrahydro-9H -pyrido(3,4-b )indoles as Potential Modulators of Opioid Antinociceptiony.Bioorg. Med. Chem. 2001 ,9 , 1559-1570.
20. Hershenson, F. M., Synthesis of ring-fused pyrrole. I. 1,3-dipolar cycloaddition reactions of munchnone derivatives obtained from tetrahydro-β-carboline-3-and-1-carboxylic acids.J. Org. Chem., 1972 ,37 , 3111-3113.
21. Uff, B. C.; Ho, Y. -P.; Brown, D. S.; Fisher, I.; Popp, F. D.; Kant, J. Reissert compound formation with fused five-membered ring heterocycles.J. Chem. Res. Miniprint, 1989 ,11 , 2652-2681.
22. Lai, K. -C.; Chang, K. -W.; Liu, C. -J.; Kao, S. -Y.; Lee, T. -C. IFN-induced protein with tetratricopeptide repeats 2 inhibits migration activity and increases survival of oral squamous cell carcinoma.Mol. Cancer Res. 2008 ,6 , 1431-1439.
23. Scudiero, D. A.; Shoemaker, R. H.; Paull, K. D.; Monks, A.; Tierney, S.; Nofziger, T. H.; Currens, M. J.; Seniff, D.; Boyd, M. R. Evaluation of soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines.Cancer Res. 1988 ,48 , 4827-4833.
24. Skehan, P.; Storeng, R.; Scudiero, D.; Monks, A.; McMahon, J.; Vistica, D.; Warren, J. T.; Bokesch, H.; Kenny, S.; Boyd, M. R. New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug screening.J. Natl. Cancer Inst. 1990 ,82 , 1107-1112.
25. Chou, T. -C.; O’Connor, O. A.; Tong, W. P.; Guan, Y.; Zhang, Z. -G.; Stachel, S. J.; Lee, C.; Danishefsky, S. J. The Synthesis, discovery and development of a highly promising class of microtubule stabilization agents: Curative effects of desoxyepothilones B and F against human tumor xenografts in nude mice.Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2001 ,98 , 8113-8118.
26. Al-Nasiry, S.; Hanssens, M.; Luyten, C.; Pijnenborn, R. The use of alamarblue assay for quantitative analysis of viability, migration and invasion of choriocarcinoma cells.Hum Reprod. 2007 ,22 , 1304-1309.
27. Chou, T. -C.; Martin, N. CompuSyn for drug combinations: PC Software and user’s guide: A computer program for quantitation of synergism and antagonism in drug combinations, and the determination of IC50 and ED50 and LD50 Values. ComboSyn, Inc., Paramus, NJ,2005.
28. Chou, T. -C.; Talalay, P. Quantitative analysis of dose-effect relationships: The combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors.Adv. Enzyme Regul. 1984 ,22 , 27-55.
29. Chou, T. -C. Theoretical basis, experimental design and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies.Pharmacol. Rev. 2006, 58 , 621-681.

Claims (12)

  1. 一種式I之化合物： 其中：R為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、或未經取代的或經取代的苯甲基，其中該芳基或苯甲基之取代基係選自由C1 -C6 烷基、ORa ；鹵基、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、或伸甲二氧基、或伸乙二氧基所組成之群組；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該未經取代的或經取代的芳基係選自由未經取代的或經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、菲基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基所組成之群組。
  3. 如申請專利範圍第1項之化合物，係選自由(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲 醇；及(1-環丙基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)二甲醇所組成之群組。
  4. 一種式II之化合物： 其中：R1 及R2 可相同或不同，且可為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、或未經取代的或經取代的苯甲基，其中該芳基或苯甲基之取代基係選自由C1 -C6 烷基、ORa ；鹵基、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、伸甲二氧基及伸乙二氧基所組成之群組；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。
  5. 如申請專利範圍第4項之化合物，其中該未經取代的或經取代的芳基係選自由未經取代的或經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、菲基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基所組成之群組。
  6. 如申請專利範圍第4項之化合物，係選自由(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)； (1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-環丙基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；(1-甲基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二氟苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二氯苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3-氯-4-氟苯基)苯并[d]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(4-甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4-二甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙 (亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；及(1-環丙基苯并[d ]吡咯[2,1-b ]噻唑-2,3-二基)雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)所組成之群組。
  7. 一種式III之化合物： 其中：R1 係選自由氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、或未經取代的或經取代的苯甲基所組成之群組；以及R2 係選自由氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的苯甲基、醯基(Ra CO)、甲磺醯基(MeSO2 )、或甲苯磺醯基(MeC6 H4 SO2 )所組成之群組；其中Ra 為C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、以及未經取代的或經取代的苯甲基，其中該芳基或苯甲基之取代基係選自由C1 -C6 烷基、ORa ；鹵基、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、伸甲二氧基及伸乙二氧基所組成之群組；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。
  8. 如申請專利範圍第7項之化合物，其中該未經取代的或經取代的芳基係選自由未經取代的或經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、菲基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基所組成之群組。
  9. 如申請專利範圍第7項之化合物，係選自由(3-(苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇； (3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇；及(3-(3,4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基)二甲醇所組成之群組。
  10. 一種式IV之化合物： 其中：R1 及R2 可相同或不同，且可為氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、或未經取代的或經取代的苯甲基；以及R3 係選自由氫、C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的苯甲基、醯基(Ra CO)、甲磺醯基(MeSO2 )、及甲苯磺醯基(MeC6 H4 SO2 )所組成之群組；其中Ra 為C1 -C5 直鏈、分支鏈烷基或C3 -C6 環烷基、未經取代的或經取代的芳基、以及未經取代的或經取代的苯甲基，其中該芳基或苯甲基之取代基係選自由C1 -C6 烷基、ORa ；鹵基、氰基、硝基、NH2 、NHRb 、N(Rb )2 、C3 -C6 環烷胺基、伸甲二氧基及伸乙二氧基所組成之群組；其中Ra 為氫或C1 -C10 烷基，以及Rb 為氫或C1 -C10 烷基。
  11. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中該未經取代的或經取代的芳基係選自由未經取代的或經取代的苯基、萘基、芘基、蒽基、菲基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基及吲哚基所組成之群組。
  12. 如申請專利範圍第10項之化合物，係選自由[6-甲基-3-苯基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(異丙基胺基甲酸酯)；[3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)；[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)；[3-(3,4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)(異丙基胺基甲酸酯)；[6-甲基-3-苯基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；[3-(4-氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；[3-(4-氯苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)；及[3-(4-二氟苯基)-6-甲基-6,11-二氫-5H -吲哚嗪[6,7-b ]吲哚-1,2-二基]雙(亞甲基)雙(胺基甲酸乙酯)所組成之群組。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201825092A (zh) * 2016-09-22 2018-07-16 中央研究院 使用包含吲哚嗪并[6, 7-b]吲哚衍生物的醫藥組合物或組合治療小細胞肺癌的方法
CN106866706A (zh) * 2017-04-12 2017-06-20 扬州大学 一种苯并[d]吡咯并[2,1‑b]噻唑的合成方法
WO2019078246A1 (ja) * 2017-10-19 2019-04-25 一般社団法人ファルマバレープロジェクト支援機構 Ｉｄｏ／ｔｄｏ阻害剤

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6838456B2 (en) * 2000-10-02 2005-01-04 Lilly Icos Llc Condensed pyridoindole derivatives

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6838456B2 (en) * 2000-10-02 2005-01-04 Lilly Icos Llc Condensed pyridoindole derivatives

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