TW202424189A - 用於抑制FAM13A表現的RNAi構建體和方法 - Google Patents
用於抑制FAM13A表現的RNAi構建體和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202424189A TW202424189A TW112127730A TW112127730A TW202424189A TW 202424189 A TW202424189 A TW 202424189A TW 112127730 A TW112127730 A TW 112127730A TW 112127730 A TW112127730 A TW 112127730A TW 202424189 A TW202424189 A TW 202424189A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- rnai construct
- nucleotides
- seq
- nos
- antisense strand
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 130
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 100
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 title claims description 354
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title description 4
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 claims abstract description 358
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 47
- 101001062760 Homo sapiens Protein FAM13A Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 31
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 26
- 102100030557 Protein FAM13A Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims abstract description 15
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims abstract description 14
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 657
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 496
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 365
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 265
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 claims description 203
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 claims description 162
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 122
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 111
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 96
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 95
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 59
- -1 bicyclic nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 46
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 43
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 30
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 claims description 29
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 claims description 29
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 27
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 claims description 26
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 claims description 25
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 23
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims description 21
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 20
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 20
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 19
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 16
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 15
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 15
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 13
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 claims description 12
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 claims description 12
- 235000021357 Behenic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940116226 behenic acid Drugs 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 11
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 10
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 10
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 10
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 208000004611 Abdominal Obesity Diseases 0.000 claims description 9
- 206010065941 Central obesity Diseases 0.000 claims description 9
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 9
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 9
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 8
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- KFEVDPWXEVUUMW-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCC1=CC=C(O)C=C1 KFEVDPWXEVUUMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 claims description 7
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 claims description 7
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 5
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 claims description 4
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 claims description 4
- 229940014144 folate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims description 3
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical group C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 3
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 claims description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 2
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims 1
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 38
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 31
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 abstract description 28
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 abstract description 27
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 abstract description 16
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 abstract description 5
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 283
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 162
- 241001655883 Adeno-associated virus - 1 Species 0.000 description 110
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 98
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 78
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 69
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 60
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 58
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 57
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 description 52
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 description 39
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 30
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 30
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 28
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 28
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 27
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 27
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 27
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 22
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 22
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 21
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 20
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 20
- 230000008859 change Effects 0.000 description 20
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 20
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 19
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 19
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 19
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 17
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 16
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 16
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 15
- 210000000746 body region Anatomy 0.000 description 15
- 102000047508 human FAM13A Human genes 0.000 description 15
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 15
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 14
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 14
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 101150090653 FAM13A gene Proteins 0.000 description 13
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 13
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 13
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 13
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 13
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 13
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 13
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 12
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 12
- 208000026594 alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 11
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 11
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 11
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 11
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 11
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 10
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 10
- 101100445935 Mus musculus Fam13a gene Proteins 0.000 description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 10
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 10
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 10
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 9
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 9
- 210000000579 abdominal fat Anatomy 0.000 description 9
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 9
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 9
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 8
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 8
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 8
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 8
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 8
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 8
- 230000000021 endosomolytic effect Effects 0.000 description 8
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 8
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 8
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000007082 Alcoholic Fatty Liver Diseases 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 7
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000000593 adipose tissue white Anatomy 0.000 description 7
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 7
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 7
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 7
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 7
- JBIJLHTVPXGSAM-UHFFFAOYSA-N 2-naphthylamine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(N)=CC=C21 JBIJLHTVPXGSAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 6
- 102100026292 Asialoglycoprotein receptor 1 Human genes 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000785944 Homo sapiens Asialoglycoprotein receptor 1 Proteins 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N Tomudex Chemical compound C=1C=C2NC(C)=NC(=O)C2=CC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)S1 IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 6
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 6
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 6
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 6
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 6
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 6
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 6
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 6
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 5
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 5
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 5
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 5
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 5
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- DXDIHODZARUBLA-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibenzoyloxybutanedioic acid;hydrate Chemical compound O.C=1C=CC=CC=1C(=O)OC(C(O)=O)C(C(=O)O)OC(=O)C1=CC=CC=C1 DXDIHODZARUBLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CKAAWCHIBBNLOJ-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminobutanoic acid;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NCCC(N)C(O)=O CKAAWCHIBBNLOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000005427 Asialoglycoprotein Receptor Human genes 0.000 description 4
- 102100026293 Asialoglycoprotein receptor 2 Human genes 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 101000785948 Homo sapiens Asialoglycoprotein receptor 2 Proteins 0.000 description 4
- 101100445934 Homo sapiens FAM13A gene Proteins 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 4
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 108010006523 asialoglycoprotein receptor Proteins 0.000 description 4
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 4
- 238000003633 gene expression assay Methods 0.000 description 4
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 4
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 4
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 4
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 3
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 206010014486 Elevated triglycerides Diseases 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 3
- 101150003028 Hprt1 gene Proteins 0.000 description 3
- 239000012098 Lipofectamine RNAiMAX Substances 0.000 description 3
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 3
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 3
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 3
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 description 3
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000000574 RNA-Induced Silencing Complex Human genes 0.000 description 3
- 108010016790 RNA-Induced Silencing Complex Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 241000289690 Xenarthra Species 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 238000011331 genomic analysis Methods 0.000 description 3
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000013116 obese mouse model Methods 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 150000002942 palmitic acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 101150105899 ppiB gene Proteins 0.000 description 3
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 3
- 231100000272 reduced body weight Toxicity 0.000 description 3
- 102210035360 rs9991328 Human genes 0.000 description 3
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 3
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 3
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- YRASDMUWFUDPGT-UOGQDSSISA-N (2s,3s,4r)-4-butan-2-yl-3-(carboxymethyl)pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CCC(C)[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)[C@H]1CC(O)=O YRASDMUWFUDPGT-UOGQDSSISA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 description 2
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 2
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 2
- SKWCZPYWFRTSDD-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(azaniumyl)propanoate;chloride Chemical compound Cl.NCC(N)C(O)=O SKWCZPYWFRTSDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-methyl-1,7-dihydro-6H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC(O)=C2N(C)C=NC2=N1 FZWGECJQACGGTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 4-sulfanylidene-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound SC=1C=CNC(=O)N=1 OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 5-(hydroxymethyl)cytosine Chemical compound NC=1NC(=O)N=CC=1CO RYVNIFSIEDRLSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 7-deaza-adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1C=CN2 PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 7-methyladenine Chemical compound C1=NC(N)=C2N(C)C=NC2=N1 HCGHYQLFMPXSDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000014156 AMP-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010011376 AMP-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical group N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 206010019837 Hepatocellular injury Diseases 0.000 description 2
- 101000611202 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- 102100040283 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Human genes 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 125000004450 alkenylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004419 alkynylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 206010002906 aortic stenosis Diseases 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- XJHCXCQVJFPJIK-UHFFFAOYSA-M caesium fluoride Chemical compound [F-].[Cs+] XJHCXCQVJFPJIK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 238000006642 detritylation reaction Methods 0.000 description 2
- JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N dichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)Cl JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 description 2
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 2
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 150000002972 pentoses Chemical group 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M potassium fluoride Chemical compound [F-].[K+] NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000229 preadipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 125000004219 purine nucleobase group Chemical group 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 2
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 2
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- CHZVREGLAPRBDI-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) cyclohexanecarboxylate Chemical compound C1CCCCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O CHZVREGLAPRBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 2-o-methyl 4-hydroxypyrrolidine-1,2-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1CC(O)CN1C(=O)OC(C)(C)C MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- PNXSUXRNBHUCSF-HSYVXBRLSA-N 107658-43-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)OC(=O)CC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)OC(=O)[C@H](CCC(=O)OC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)N)C1C=NC=N1 PNXSUXRNBHUCSF-HSYVXBRLSA-N 0.000 description 1
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 1H-pyrrole Natural products C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine Chemical compound NC1=NC=CC2=C1N=CN2 UHUHBFMZVCOEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVVJCLFLKMGEIY-UHFFFAOYSA-N 2,3-dioctadecoxypropyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OCCCCCCCCCCCCCCCCCC HVVJCLFLKMGEIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)acetic acid Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(CC(=O)O)C3 AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIINGYXNCHTJTF-UHFFFAOYSA-N 2-(2-azaniumylethylamino)acetate Chemical compound NCCNCC(O)=O PIINGYXNCHTJTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 2-amino-2-deoxy-D-mannopyranose Chemical compound N[C@@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 0.000 description 1
- 125000001731 2-cyanoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])C#N 0.000 description 1
- FTBBGQKRYUTLMP-UHFFFAOYSA-N 2-nitro-1h-pyrrole Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=CN1 FTBBGQKRYUTLMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 3 Isobutyl 1 methylxanthine Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(CC(C)C)C2=C1N=CN2 APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOJNBPNACKZWAI-UHFFFAOYSA-N 3-nitro-1h-pyrrole Chemical compound [O-][N+](=O)C=1C=CNC=1 LOJNBPNACKZWAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LAVZKLJDKGRZJG-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-1h-indole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC2=C1C=CN2 LAVZKLJDKGRZJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIUOBAHGBPSRKY-UHFFFAOYSA-N 5-(4-nitrophenyl)-2h-tetrazole Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1C1=NNN=N1 MIUOBAHGBPSRKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HHDRWGJJZGJSGZ-UHFFFAOYSA-N 5-benzyl-2h-tetrazole Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC=1N=NNN=1 HHDRWGJJZGJSGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GONFBOIJNUKKST-UHFFFAOYSA-N 5-ethylsulfanyl-2h-tetrazole Chemical compound CCSC=1N=NNN=1 GONFBOIJNUKKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-sulfanylidene-1h-pyrimidin-4-one Chemical compound CC1=CNC(=S)NC1=O ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZFPSOBLQZPIAV-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-1h-indole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2NC=CC2=C1 OZFPSOBLQZPIAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UJBCLAXPPIDQEE-UHFFFAOYSA-N 5-prop-1-ynyl-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound CC#CC1=CNC(=O)NC1=O UJBCLAXPPIDQEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1,5-dihydroimidazo[4,5-c]pyridin-4-one Chemical compound O=C1NC(N)=CC2=C1N=CN2 KXBCLNRMQPRVTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1h-pyrimidine-2-thione Chemical compound NC1=CC=NC(S)=N1 DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKOMXBHMKXXTNW-UHFFFAOYSA-N 6-methyladenine Chemical compound CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 CKOMXBHMKXXTNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSWCIARYGITEOY-UHFFFAOYSA-N 6-nitro-1h-indole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2C=CNC2=C1 PSWCIARYGITEOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 7-deazaguanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1CC=N2 LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCVSBWVETWJDTK-UHFFFAOYSA-N 8-amino-3,6-dioxooctanoic acid Chemical compound NCCC(=O)CCC(=O)CC(O)=O SCVSBWVETWJDTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 8-azaadenine Chemical compound NC1=NC=NC2=NNN=C12 HRYKDUPGBWLLHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 8-azaguanine Chemical compound NC1=NC(O)=C2NN=NC2=N1 LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005508 8-azaguanine Drugs 0.000 description 1
- FJNCXZZQNBKEJT-UHFFFAOYSA-N 8beta-hydroxymarrubiin Natural products O1C(=O)C2(C)CCCC3(C)C2C1CC(C)(O)C3(O)CCC=1C=COC=1 FJNCXZZQNBKEJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241001504639 Alcedo atthis Species 0.000 description 1
- 108090000531 Amidohydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004092 Amidohydrolases Human genes 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000031104 Arterial Occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 125000006374 C2-C10 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005865 C2-C10alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- QXXZWZDCTBAGLI-NVHJTNISSA-N CO[C@@]1([C@H](N(C=CC(N2)=O)C2=O)O[C@H](COP(N)O)[C@H]1O)O Chemical compound CO[C@@]1([C@H](N(C=CC(N2)=O)C2=O)O[C@H](COP(N)O)[C@H]1O)O QXXZWZDCTBAGLI-NVHJTNISSA-N 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 108010004942 Chylomicron Remnants Proteins 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 102000001493 Cyclophilins Human genes 0.000 description 1
- 108010068682 Cyclophilins Proteins 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010087294 GALA peptide Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000000563 Hyperlipoproteinemia Type II Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046315 IDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 108010033266 Lipoprotein(a) Proteins 0.000 description 1
- 102000057248 Lipoprotein(a) Human genes 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 229910003849 O-Si Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 229910003872 O—Si Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102220567853 Protein FAM13A_V769I_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 108010057163 Ribonuclease III Proteins 0.000 description 1
- 102000003661 Ribonuclease III Human genes 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000003919 adipocyte function Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000005600 alkyl phosphonate group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 208000021328 arterial occlusion Diseases 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000923 atherogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013500 data storage Methods 0.000 description 1
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001064 degrader Substances 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229960005215 dichloroacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- MCWXGJITAZMZEV-UHFFFAOYSA-N dimethoate Chemical compound CNC(=O)CSP(=S)(OC)OC MCWXGJITAZMZEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N dimethylpyridine Natural products CC1=CC=CN=C1C HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011304 droplet digital PCR Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000003028 elevating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005745 ethoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 201000001386 familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 125000003929 folic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- IXZISFNWUWKBOM-ARQDHWQXSA-N fructosamine Chemical compound NC[C@@]1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O IXZISFNWUWKBOM-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000037440 gene silencing effect Effects 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 150000002386 heptoses Chemical class 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000005597 hydrazone group Chemical group 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002952 image-based readout Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910001506 inorganic fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 229940028435 intralipid Drugs 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000002608 intravascular ultrasound Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 235000014413 iron hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- NCNCGGDMXMBVIA-UHFFFAOYSA-L iron(ii) hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Fe+2] NCNCGGDMXMBVIA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000231 kidney cortex Anatomy 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N lactose group Chemical group OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)CO)[C@H](O1)CO GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000008604 lipoprotein metabolism Effects 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 231100000849 liver cell damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018191 liver inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 238000006396 nitration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012434 nucleophilic reagent Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 229940064696 nutrilipid Drugs 0.000 description 1
- 230000009437 off-target effect Effects 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M phosphinate Chemical compound [O-][PH2]=O ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000011698 potassium fluoride Substances 0.000 description 1
- 235000003270 potassium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000011809 primate model Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002265 redox agent Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 102220399515 rs57400569 Human genes 0.000 description 1
- COFLCBMDHTVQRA-UHFFFAOYSA-N sapphyrin Chemical compound N1C(C=2NC(C=C3N=C(C=C4NC(=C5)C=C4)C=C3)=CC=2)=CC=C1C=C1C=CC5=N1 COFLCBMDHTVQRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000002437 synoviocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035924 thermogenesis Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 125000005309 thioalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000005691 triesters Chemical class 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
Abstract
本申請關於用於調節具有序列相似性的家族13成員A(FAM13A)蛋白表現的組成物和方法。特別地,本申請關於用於經由RNA干擾減少
FAM13A基因表現的基於核酸的治療劑和使用這樣的基於核酸的治療劑減少腹部脂肪過多、減輕體重、減少脂肪量、改善代謝參數包括胰島素抗性和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、以及降低心肌梗塞風險的方法。
Description
本申請關於用於調節具有序列相似性的家族13成員A(FAM13A)蛋白表現的組成物和方法。特別地,本申請關於用於經由RNA干擾減少
FAM13A基因表現的基於核酸的治療劑和使用這樣的基於核酸的治療劑的方法。
肥胖或過度脂肪過多被認為是一種疾病,並被確立為心血管疾病(CVD)的主要風險因素。脂肪過多最常見的測量指標係身體質量指數(BMI),其導致心肌梗塞(MI)的風險幾率升高。然而,在對腰臀比(WHR)進行調整後,這種關聯性大幅降低,WHR係反映內臟體脂分佈模式(也稱為中心性肥胖或腹部肥胖)的測量指標。已證明WHR與MI風險更強烈相關,WHR最高五分位數人群的比值比有2.52倍的增加(p < 0.001),這一發現即使在對BMI進行調整後仍然存在。Yusuf等人,
Lancet[柳葉刀] 366:1640-1649 (2005);Cao等人,
Medicine (Baltimore)[醫學(巴爾的摩)] 97, e11639 (2018);de Koning
等人,
Eur. Heart J.[歐洲心臟學雜誌], 28, 850-856 (2007)。該等數據表明,WHR係比BMI更好的MI風險預測因子,並且該指標克服了BMI的一些關鍵限制(例如,高肌肉質量)。
FAM13A(也稱為FAM13A1、KIAA0914或ARHGAP48)係胞質蛋白,已證明其調節AMP活化蛋白激酶(AMPK)的活性,並且其與肝葡萄糖、脂質代謝、體脂分佈和脂肪細胞功能的調節有關。Lin等人,
iScience[i科學] 23, 100928 (2020);Fathzadeh等人,
Nature Communications[自然通訊] 11, 1465 (2020)。例如,人類遺傳證據表明,FAM13A與HDL膽固醇、身體質量指數(BMI)調整的空腹胰島素水平和針對BMI調整的WHR有關。在體外,人間葉幹細胞中的
FAM13A敲低增加了脂肪細胞的分化和產熱,而過表現導致前脂肪細胞的凋亡並抑制脂肪生成。Lundback等人,
Diabetologia[糖尿病學], 2018;Tang等人,
Int. J. Obesity[國際肥胖雜誌], 2019;Fathzadeh等人,
Nat. Comm.[自然通訊], 2020。另外,
FAM13AKO小鼠抵禦飲食誘導的肥胖(DIO),具有改善的肝胰島素敏感性和增加的肝細胞耗氧率。Lin等人,
iScience[i科學], 2020。
本申請部分關於靶向
FAM13A基因並降低其表現的RNAi構建體的設計和產生。序列特異性抑制
FAM13A基因表現可用於減少腹部脂肪過多、減輕體重、減少脂肪量、改善代謝參數(包括胰島素抗性和非酒精性脂肪性肝炎(NASH))、以及降低心肌梗塞的風險。因此,在一個實施方式中,本申請提供一種包含有義股和反義股的RNAi構建體,其中該反義股包含含有與
FAM13AmRNA序列基本上互補的序列的區域。在一些實施方式中,RNAi構建體僅靶向肝臟。在一些實施方式中,反義股包含與人
FAM13AmRNA序列(SEQ ID NO: 1)的區域的至少15個連續核苷酸的序列基本上互補(有不超過1、2或3個誤配)的序列。在一些實施方式中,反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的
FAM13AmRNA序列的特定區域內(如SEQ ID NO: 1的核苷酸1300-1375或4900-5300內)的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。在某些實施方式中,反義股包含區域,該區域包含來自
表 1或
表 2中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸。
在一些實施方式中,本文所述之RNAi構建體的有義股包含與反義股的序列充分互補以形成長度為約15至約30個鹼基對、長度為約17至約24個鹼基對、或長度為約19至約21個鹼基對的雙股體區的序列。在一些實施方式中,有義股和反義股各自獨立地為約19至約30個核苷酸的長度、或約19至約23個核苷酸的長度。在一些實施方式中,RNAi構建體包含一或兩個平端。在其他實施方式中,RNAi構建體包含一或兩個核苷酸突出端。這樣的核苷酸突出端可包含1至6個未配對核苷酸,且可位於有義股3'端、反義股3'端、或有義股和反義股兩者的3'端。在某些實施方式中,RNAi構建體在有義股3'端和反義股3'端包含具有兩個未配對核苷酸的突出端。在其他實施方式中,RNAi構建體在反義股3'端包含具有兩個未配對核苷酸的突出端,且在有義股3'端/反義股5'端包含平端。
揭露的RNAi構建體可包含一或多種經修飾的核苷酸,包括具有對核糖環、核鹼基或磷酸二酯骨架的修飾的核苷酸。在一些實施方式中,RNAi構建體包含一或多種2'-修飾的核苷酸。這樣的2'-修飾的核苷酸可包括2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、雙環核酸(BNA)、去氧核糖核苷酸、或其組合。在一個特定實施方式中,RNAi構建體包含一或多個2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、或其組合。在一些實施方式中,RNAi構建體的有義股和反義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。無鹼基核苷酸可摻入所揭露的RNAi構建體中,例如,作為有義股的3'端、5'端、或3'端和5'端兩者的末端核苷酸。在這樣的實施方式中,無鹼基核苷酸可為反向的,例如藉由3'-3'核苷酸間鍵或5'-5'核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸。
在一些實施方式中,RNAi構建體包含至少一個骨架修飾,例如經修飾的核苷酸間或核苷間鍵。在某些實施方式中,本文所述之RNAi構建體包含至少一個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在特定實施方式中,硫代磷酸酯核苷酸間鍵可位於有義股和/或反義股的3'或5'端。例如,在一些實施方式中,反義股在3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在一些這樣的實施方式中,有義股在其3'端的末端核苷酸之間包含一或兩個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
在一些實施方式中,本申請的RNAi構建體可靶向SEQ ID NO: 1所示的人
FAM13AmRNA轉錄物的特定區域。在一些實施方式中,反義股的序列可與人
FAM13A轉錄物(SEQ ID NO: 1)的特定區域的至少15個連續核苷酸的序列完全互補。在一些實施方式中,反義股的序列可與人
FAM13A轉錄物(SEQ ID NO: 1)的特定區域的至少15個連續核苷酸的序列基本上互補,在反義股的序列與人
FAM13A轉錄物的特定區域的序列之間有不超過1、2或3個誤配。在某些實施方式中,RNAi構建體的反義股和/或有義股可包含來自
表 1中列出的反義和有義序列的序列或由其組成。在一些實施方式中,有義股和反義股分別包含SEQ ID NO: 15和559、SEQ ID NO: 24和568、SEQ ID NO: 125和669、SEQ ID NO: 127和671、SEQ ID NO: 222和766、SEQ ID NO: 406和950、SEQ ID NO: 448和992、SEQ ID NO: 498和1042、SEQ ID NO: 502和1046、SEQ ID NO: 503和1047、SEQ ID NO: 504和1048、SEQ ID NO: 513和1057、SEQ ID NO: 526和1070、SEQ ID NO: 527和1071、SEQ ID NO: 533和1077、或SEQ ID NO: 534和1078,或由其組成。
在一些實施方式中,RNAi構建體包含具有特定修飾模式的特定序列,該等序列在本文中被稱為雙股體。在某些實施方式中,RNAi構建體的具有特定修飾模式的反義股和/或有義股可包含表2中列出的反義和有義序列作為特定雙股體或由其組成。在一些實施方式中,RNAi構建體係被稱為以下的雙股體:D-1557、D-1597、D-1612、D-1614、D-1623、D-1650、D-1667、D-1680、D-1682、D-1685、D-1686、D-1690、D-1697、D-1698、D-1699、D-1702、D-1704、D-1705、D-1709、D-1768、D-1846、D-1849、D-1853、D-1856、D-1858、D-1861、D-1862、D-1863、D-1864、D-1865、D-1866、D-1868、D-1869、D-1870、D-1871、D-1873、D-1875、D-1876、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1883、D-1884、D-1885、D-1886、D-1887、D-1888、D-1899、D-1896、D-1955、D-1970、D-1972、D-1975、D-1976、D-1977、D-1979、D-1980、D-1981、D-1982、D-1983、D-1984、D-1985、D-1987、D-1988、D-1989、D-1990、D-1991、D-1992、D-1993、D-1994、D-1995、D-1996、D-1997、D-1998、D-2000、D-2001、D-2002、D-2003、D-2004、D-2005、D-2012、D-2013、D-2014、D-2017、D-2021、D-2022、D-2023、D-2040、D-2044、D-2045、D-2047、D-2049、D-2051、D-2052、D-2053、D-2054、D-2058、D-2061、D-2075、D-2077、D-2079、D-2080、D-2081、D-2083、D-2090、D-2091或D-2093。在一些實施方式中,RNAi構建體係經觀察將FAM13A表現敲低大於80%的雙股體。
所揭露的RNAi構建體可包含配體,以促進該等RNAi構建體向特定組織或細胞(如肝臟或脂肪細胞)的遞送或攝取。在某些實施方式中,配體靶向該RNAi構建體向肝細胞的遞送。在該等和其他實施方式中,配體可以包含半乳糖、半乳胺糖、或N-乙醯基-半乳胺糖(GalNAc)。在某些實施方式中,配體包含多價半乳糖或多價GalNAc部分,如三價或四價半乳糖或GalNAc部分。配體可以視需要地藉由連接子共價附接於RNAi構建體有義股的5'或3'端。在一些實施方式中,RNAi構建體包含含有根據本文所述之式I至IX中任一個的結構的配體和連接子。在某些實施方式中,RNAi構建體包含含有根據式VII的結構的配體和連接子。在其他實施方式中,RNAi構建體包含含有根據式IV的結構的配體和連接子。在一些實施方式中,配體包含長鏈脂肪酸,如月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、棕櫚酸(C16)、硬脂酸(C18)、二十碳五烯酸(C20)或二十二酸(C22)。在一些實施方式中,配體藉由磷酸二酯或硫代磷酸酯鍵附接。
本申請還提供了包含任何本文所述之RNAi構建體和藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組成物。這樣的藥物組成物對於降低
FAM13A基因在有需要的患者的細胞(例如肝臟或脂肪細胞)中的表現特別有用。可以投與所揭露的藥物組成物的患者包括被診斷患有肥胖或有肥胖風險的患者,包括表現出高WHR的患者和被診斷患有腹部肥胖的患者。可以投與所揭露的藥物組成物的患者還可以包括被診斷患有代謝病症或有代謝病症風險的患者,該等代謝病症如脂肪性肝病(例如,NAFLD、NASH、酒精性脂肪性肝病、或酒精性脂肪性肝炎)、胰島素抗性和2型糖尿病(T2D)、高三酸甘油脂血症或高膽固醇血症。本申請還提供了治療需要降低其細胞中
FAM13A基因表現的患者的方法,該等患者包括被診斷患有肥胖、腹部肥胖、脂肪性肝病(例如,NAFLD、NASH、酒精性脂肪性肝病、或酒精性脂肪性肝炎)、胰島素抗性和2型糖尿病(T2D)、高三酸甘油脂血症、或高膽固醇血症,或有該等疾病風險的患者。該等方法包括投與本文所述之RNAi構建體或藥物組成物。在一些實施方式中,將RNAi構建體與配體一起投與,該配體使該RNAi構建體靶向肝臟或肝細胞。
特別考慮了靶向
FAM13A的RNAi構建體在本文所述之任何方法中之用途或用於製備根據本文所述之方法投與的藥物之用途。例如,本申請包括用於在有需要的患者中治療、預防肥胖、腹部肥胖、脂肪性肝病(例如,NAFLD、NASH、酒精性脂肪性肝病、或酒精性脂肪性肝炎)、胰島素抗性和2型糖尿病(T2D)、高三酸甘油脂血症或高膽固醇血症,或降低患該等疾病的風險的靶向
FAM13A的RNAi構建體。
本申請關於用於調節細胞或哺乳動物中
FAM13A基因的表現的組成物和方法。在一些實施方式中,組成物包含RNAi構建體,該等構建體靶向從
FAM13A基因(特別是人
FAM13A基因)轉錄的mRNA,並降低細胞或哺乳動物中FAM13A蛋白的表現。這樣的RNAi構建體可用於在有需要的患者中治療、預防肥胖、肝脂肪變性、胰島素抗性和2型糖尿病(T2D)、高三酸甘油脂血症、或高膽固醇血症,或降低患該等疾病的風險。
RNAi 構建體
如本文所用,術語「RNAi構建體」係指包含RNA分子的藥劑,該藥劑在被引入細胞中時能夠經由RNA干擾機制下調靶基因(例如
FAM13A基因)的表現。RNA干擾係核酸分子以序列特異性方式(例如藉由RNA誘導緘默化複合物(RISC)途徑)誘導靶RNA分子(例如,傳訊者RNA或mRNA分子)切割和降解的過程。在一些實施方式中,RNAi構建體包含雙股RNA分子,其包含連續核苷酸的兩條反平行股,其彼此充分互補以雜交形成雙股體區。「雜交(hybridize或hybridization)」係指互補多核苷酸的配對,典型地是經由在兩個多核苷酸中的互補鹼基之間的氫鍵合(例如瓦生克立克(Watson-Crick)氫鍵合、Hoogsteen氫鍵合、或反向Hoogsteen氫鍵合)而配對。包含含有與靶序列(例如靶mRNA)基本上互補的序列的區域的股被稱為「反義股」或「指導股」。「有義股」或「過客股(passenger strand)」係指包括與反義股的區域基本上互補的區域的股。在一些實施方式中,有義股可以包含具有與靶序列基本上相同的序列的區域。
雙股RNA分子可以包括對核糖核苷酸的化學修飾,包括對核糖核苷酸的核糖、鹼基或骨架組分的修飾,諸如本文所述或本領域已知的那些。出於本揭露之目的,術語「雙股RNA」涵蓋如在雙股RNA分子(例如siRNA、shRNA等)中所採用的任何這樣的修飾。下文RNAi構建體的修飾和製備部分提供了本文所述之RNAi構建體的潛在修飾的細節。
如本文所用,如果包含第一序列的多核苷酸可以在某些條件(如生理條件)下與包含第二序列的多核苷酸雜交形成雙股體區,則第一序列與第二序列為「互補」。其他這些條件可包括熟悉該項技術者已知的中等或嚴格雜交條件。若在一或兩個核苷酸序列的整個長度上包含第一序列的多核苷酸與包含第二序列的多核苷酸鹼基配對而無任何誤配,則該第一序列與該第二序列完全互補(100%互補)。若序列與靶序列至少約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%互補,則該序列與該靶序列「基本上互補」或與該靶序列具有「基本同一性」。互補百分比可以藉由將第一序列中與第二或靶序列中相應位置處的鹼基互補的鹼基數除以第一序列的總長度來計算。當使兩個序列雜交時,如果在30個鹼基對雙股體區上存在不超過5個、4個、3個或2個誤配,則一個序列也可以說與另一序列基本上互補。通常,若存在如本文所定義的任何核苷酸突出端,則在確定兩個序列之間的互補程度時不考慮這些突出端的序列。舉例來說,雜交而形成在各股的3'端具有2個核苷酸突出端的19個鹼基對雙股體區的、長度為21個核苷酸的有義股與長度為21個核苷酸的反義股將會如本文所用術語那樣完全互補。
在一些實施方式中,反義股的區域包含與靶RNA序列(例如
FAM13AmRNA序列)的區域基本上或完全互補的序列。在這樣的實施方式中,有義股可以包含與反義股的序列完全互補的序列。在其他這樣的實施方式中,有義股可以包含與反義股的序列基本上互補的序列,例如在由有義股和反義股形成的雙股體區中有1、2、3、4或5個誤配。在某些實施方式中,較佳的是任何誤配發生在末端區內(例如在股的5'和/或3'端的6、5、4、3、或2個核苷酸內)。在一個實施方式中,在由有義股和反義股形成的雙股體區中之任何誤配發生在反義股的5'端的6、5、4、3、或2個核苷酸內。
在某些實施方式中,雙股RNA的有義股和反義股可以是兩個單獨的分子,這兩個分子雜交而形成雙股體區,否則係未連接的。由兩條單獨股形成的這類雙股RNA分子被稱為「小干擾RNA」或「短干擾RNA」(siRNA)。因此,在一些實施方式中,RNAi構建體包含siRNA。
在其他實施方式中,雜交形成雙股體區的有義股和反義股可為單個RNA分子的一部分,即有義股和反義股為單個RNA分子的自身互補區的一部分。在這樣的情況下,單個RNA分子包含雙股體區(還稱為莖區)和環區。有義股的3'端藉由未配對核苷酸的連續序列而連接至反義股的5'端,這將形成環區。環區典型地具有足夠的長度以允許RNA分子自身向後折疊,使得反義股可以與有義股鹼基配對以形成雙股體或莖區。環區可以包含從約3至約25、從約5至約15、或從約8至約12個未配對核苷酸。具有至少部分地自身互補區的這樣的RNA分子被稱為「短髮夾RNA」(shRNA)。在某些實施方式中,RNAi構建體包含shRNA。單個的至少部分地自身互補的RNA分子的長度可為約40個核苷酸至約100個核苷酸、約45個核苷酸至約85個核苷酸、或約50個核苷酸至約60個核苷酸,並且包含雙股體區和環區,各區具有本文所列舉的長度。
在一些實施方式中,RNAi構建體包含有義股和反義股,其中該反義股包含具有與
FAM13A傳訊者RNA(mRNA)序列基本上或完全互補的序列的區域。如本文所用,「
FAM13AmRNA序列」係指任何傳訊者RNA序列,包括編碼FAM13A蛋白的對偶基因變體和剪接變體,包括來自任何物種(例如非人靈長類動物、人)的FAM13A蛋白變體或同種型。
FAM13AmRNA序列還包括表現為其互補DNA(cDNA)序列的轉錄物序列。cDNA序列係指表現為DNA鹼基(例如,鳥嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶)而非RNA鹼基(例如,鳥嘌呤、腺嘌呤、尿嘧啶和胞嘧啶)的mRNA轉錄物的序列。因此,RNAi構建體的反義股可包含具有與靶
FAM13AmRNA序列或
FAM13AcDNA序列基本上或完全互補的序列的區域。
FAM13AmRNA或cDNA序列可包括但不限於Ensembl基因組或美國國家生物技術資訊中心(NCBI)數據庫中之任何
FAM13AmRNA或cDNA序列,包括如Ensembl轉錄物編號ENST00000264344.9(SEQ ID NO: 1)和NCBI參考序列NM_022746.4等人序列。
FAM13AmRNA或cDNA序列還可以包括石蟹獼猴序列、恒河猴序列、黑猩猩序列、大鼠序列和小鼠序列。在某些實施方式中,
FAM13AmRNA序列係如下所示的人轉錄物(SEQ ID NO: 1)。
CCTTCCAGCCATGTGGGTTCAGCGGAAAGAGAAGCAAAACCACTCTTCCTAAAATGTTAGAAGCTGCTCTTCGCTTACCTTGGGGCCTTTGCATTGGGAGCTGTTTTTCACATCAAAGAATATGTGCTGAATGGAATTTTAGTATTTTGCTGTCGTTTTAATATTTTCGTCTGGTCTTCCTCAGTTCTTCCAGACGCTTTCTGAGAGAATGGGGGCAGGAGCTCTAGCCATCTGTCAAAGTAAAGCAGCGGTTCGGCTGAAAGAAGACATGAAAAAGATAGTGGCAGTGCCATTAAATGAACAGAAGGATTTTACCTATCAGAAGTTATTTGGAGTCAGTCTCCAAGAACTTGAACGGCAGGGGCTCACCGAGAATGGCATTCCAGCAGTAGTGTGGAATATAGTGGAATATTTGACGCAGCATGGACTTACCCAAGAAGGTCTTTTTAGGGTGAATGGTAACGTGAAGGTGGTGGAACAACTTCGACTGAAGTTCGAGAGTGGAGTGCCCGTGGAGCTCGGGAAGGACGGTGATGTCTGCTCAGCAGCCAGTCTGTTGAAGCTGTTTCTGAGGGAGCTGCCTGACAGTCTGATCACCTCAGCGTTGCAGCCTCGATTCATTCAACTCTTTCAGGATGGCAGAAATGATGTTCAGGAGAGTAGCTTAAGAGACTTAATAAAAGAGCTGCCAGACACCCACTACTGCCTCCTCAAGTACCTTTGCCAGTTCTTGACAAAAGTAGCCAAGCATCATGTGCAGAATCGCATGAATGTTCACAATCTCGCCACTGTATTTGGGCCAAATTGCTTTCATGTGCCACCTGGGCTTGAAGGCATGAAGGAACAGGACCTGTGCAACAAGATAATGGCTAAAATTCTAGAAAATTACAATACCCTGTTTGAAGTAGAGTATACAGAAAATGATCATCTGAGATGTGAAAACCTGGCTAGGCTTATCATAGTAAAAGAGGTCTATTATAAGAACTCCCTGCCCATCCTTTTAACAAGAGGCTTAGAAAGAGACATGCCAAAACCACCTCCAAAAACCAAGATCCCAAAATCCAGGAGTGAGGGATCTATTCAGGCCCACAGAGTACTGCAACCAGAGCTATCTGATGGCATTCCTCAGCTCAGCTTGCGGCTAAGTTATAGAAAAGCCTGCTTGGAAGACATGAATTCAGCAGAGGGTGCTATTAGTGCCAAGTTGGTACCCAGTTCACAGGAAGATGAAAGACCTCTGTCACCTTTCTATTTGAGTGCTCATGTACCCCAAGTCAGCAATGTGTCTGCAACCGGAGAACTCTTAGAAAGAACCATCCGATCAGCTGTAGAACAACATCTTTTTGATGTTAATAACTCTGGAGGTCAAAGTTCAGAGGACTCAGAATCTGGAACACTATCAGCATCTTCTGCCACATCTGCCAGACAGCGCCGCCGCCAGTCCAAGGAGCAGGATGAAGTTCGACATGGGAGAGACAAGGGACTTATCAACAAAGAAAATACTCCTTCTGGGTTCAACCACCTTGATGATTGTATTTTGAATACTCAGGAAGTCGAAAAGGTACACAAAAATACTTTTGGTTGTGCTGGAGAAAGGAGCAAGCCTAAACGTCAGAAATCCAGTACTAAACTTTCTGAGCTTCATGACAATCAGGACGGTCTTGTGAATATGGAAAGTCTCAATTCCACACGATCTCATGAGAGAACTGGACCTGATGATTTTGAATGGATGTCTGATGAAAGGAAAGGAAATGAAAAAGATGGTGGACACACTCAGCATTTTGAGAGCCCCACAATGAAGATCCAGGAGCATCCCAGCCTATCTGACACCAAACAGCAGAGAAATCAAGATGCCGGTGACCAGGAGGAGAGCTTTGTCTCCGAAGTGCCCCAGTCGGACCTGACTGCATTGTGTGATGAAAAGAACTGGGAAGAGCCTATCCCTGCTTTCTCCTCCTGGCAGCGGGAGAACAGTGACTCTGATGAAGCCCACCTCTCGCCGCAGGCTGGGCGCCTGATCCGTCAGCTGCTGGACGAAGACAGCGACCCCATGCTCTCTCCTCGGTTCTACGCTTATGGGCAGAGCAGGCAATACCTGGATGACACAGAAGTGCCTCCTTCCCCACCAAACTCCCATTCTTTCATGAGGCGGCGAAGCTCCTCTCTGGGGTCCTATGATGATGAGCAAGAGGACCTGACACCTGCCCAGCTCACACGAAGGATTCAGAGCCTTAAAAAGAAGATCCGGAAGTTTGAAGATAGATTCGAAGAAGAGAAGAAGTACAGACCTTCCCACAGTGACAAAGCAGCCAATCCGGAGGTTCTGAAATGGACAAATGACCTTGCCAAATTCCGGAGACAACTTAAAGAATCAAAACTAAAGATATCTGAAGAGGACCTAACTCCCAGGATGCGGCAGCGAAGCAACACACTCCCCAAGAGTTTTGGTTCCCAACTTGAGAAAGAAGATGAGAAGAAGCAAGAGCTGGTGGATAAAGCAATAAAGCCCAGTGTTGAAGCCACATTGGAATCTATTCAGAGGAAGCTCCAGGAGAAGCGAGCGGAAAGCAGCCGCCCTGAGGACATTAAGGATATGACCAAAGACCAGATTGCTAATGAGAAAGTGGCTCTGCAGAAAGCTCTGTTATATTATGAAAGCATTCATGGACGGCCGGTAACAAAGAACGAACGGCAGGTGATGAAGCCACTATACGACAGGTACCGGCTGGTCAAACAGATCCTCTCCCGAGCTAACACCATACCCATCATTGGTTCCCCCTCCAGCAAGCGGAGAAGCCCTTTGCTGCAGCCAATTATCGAGGGCGAAACTGCTTCCTTCTTCAAGGAGATAAAGGAAGAAGAGGAGGGGTCAGAAGACGATAGCAATGTGAAGCCAGACTTCATGGTCACTCTGAAAACCGATTTCAGTGCACGATGCTTTCTGGACCAATTCGAAGATGACGCTGATGGATTTATTTCCCCAATGGATGATAAAATACCATCAAAATGCAGCCAGGACACAGGGCTTTCAAATCTCCATGCTGCCTCAATACCTGAACTCCTGGAACACCTCCAGGAAATGAGAGAAGAAAAGAAAAGGATTCGAAAGAAACTTCGGGATTTTGAAGACAACTTTTTCAGACAGAATGGAAGAAATGTCCAGAAGGAAGACCGCACTCCTATGGCTGAAGAATACAGTGAATATAAGCACATAAAGGCGAAACTGAGGCTCCTGGAGGTGCTCATCAGCAAGAGAGACACTGATTCCAAGTCCATGTGAGGGGCATGGCCAAGCACAGGGGGCTGGCAGCTGCGGTGAGAGTTTACTGTCCCCAGAGAAAGTGCAGCTCTGGAAGGCAGCCTTGGGGCTGGCCCTGCAAAGCATGCAGCCCTTCTGCCTCTAGACCATTTGGCATCGGCTCCTGTTTCCATTGCCTGCCTTAGAAACTGGCTGGAAGAAGACAATGTGACCTGACTTAGGCATTTTGTAATTGGAAAGTCAAGACTGCAGTATGTGCACATGCGCACGCGCATGCACGCACACACACACACAGTAGTGGAGCTTTCCTAACACTAGCAGAGATTAATCACTACATTAGACAACACTCATCTACAGAGAATATACACTGTTCTTCCCTGGATAACTGAGAAACAAGAGACCATTCTCTGTCTAACTGTGATAAAAACAAGCTCAGGACTTTATTCTATAGAGCAAACTTGCTGTGGAGGGCCATGCTCTCCTTGGACCCAGTTAACTGCAAACGTGCATTGGAGCCCTATTTGCTGCCGCTGCCATTCTAGTGACCTTTCCACAGAGCTGCGCCTTCCTCACGTGTGTGAAAGGTTTTCCCCTTCAGCCCTCAGGTAGATGGAAGCTGCATCTGCCCACGATGGCAGTGCAGTCATCATCTTCAGGATGTTTCTTCAGGACTTCCTCAGCTGACAAGGAATTTTGGTCCCTGCCTAGGACCGGGTCATCTGCAGAGGACAGAGAGATGGTAAGCAGCTGTATGAATGCTGATTTTAAAACCAGGTCATGGGAGAAGAGCCTGGAGATTCTTTCCTGAACACTGACTGCACTTACCAGTCTGATTTTATCGTCAAACACCAAGCCAGGCTAGCATGCTCATGGCAATCTGTTTGGGGCTGTTTTGTTGTGGCACTAGCCAAACATAAAGGGGCTTAAGTCAGCCTGCATACAGAGGATCGGGGAGAGAAGGGGCCTGTGTTCTCAGCCTCCTGAGTACTTACCAGAGTTTAATTTTTTTAAAAAAAATCTGCACTAAAATCCCCAAACTGACAGGTAAATGTAGCCCTCAGAGCTCAGCCCAAGGCAGAATCTAAATCACACTATTTTCGAGATCATGTATAAAAAGAAAAAAAAGAAGTCATGCTGTGTGGCCAATTATAATTTTTTTCAAAGACTTTGTCACAAAACTGTCTATATTAGACATTTTGGAGGGACCAGGAAATGTAAGACACCAAATCCTCCATCTCTTCAGTGTGCCTGATGTCACCTCATGATTTGCTGTTACTTTTTTAACTCCTGCGCCAAGGACAGTGGGTTCTGTGTCCACCTTTGTGCTTTGCGAGGCCGAGCCCAGGCATCTGCTCGCCTGCCACGGCTGACCAGAGAAGGTGCTTCAGGAGCTCTGCCTTAGACGACGTGTTACAGTATGAACACACAGCAGAGGCACCCTCGTATGTTTTGAAAGTTGCCTTCTGAAAGGGCACAGTTTTAAGGAAAAGAAAAAGAATGTAAAACTATACTGACCCGTTTTCAGTTTTAAAGGGTCGTGAGAAACTGGCTGGTCCAATGGGATTTACAGCAACATTTTCCATTGCTGAAGTGAGGTAGCAGCTCTCTTCTGTCAGCTGAATGTTAAGGATGGGGAAAAAGAATGCCTTTAAGTTTGCTCTTAATCGTATGGAAGCTTGAGCTATGTGTTGGAAGTGCCCTGGTTTTAATCCATACACAAAGACGGTACATAATCCTACAGGTTTAAATGTACATAAAAATATAGTTTGGAATTCTTTGCTCTACTGTTTACATTGCAGATTGCTATAATTTCAAGGAGTGAGATTATAAATAAAATGATGCACTTTAGGATGTTTCCTATTTTTGAAATCTGAACATGAATCATTCACATGACCAAAAATTGTGTTTTTTTAAAAATACATGTCTAGTCTGTCCTTTAATAGCTCTCTTAAATAAGCTATGATATTAATCAGATCATTACCAGTTAGCTTTTAAAGCACATTTGTTTAAGACTATGTTTTTGGAAAAATACGCTACAGAATTTTTTTTTAAGCTACAAATAAATGAGATGCTACTAATTGTTTTGGAATCTGTTGTTTCTGCCAAAGGTAAATTAACTAAAGATTTATTCAGGAATCCCCATTTGAATTTGTATGATTCAATAAAAGAAAACACCAAGTAAGTTATATAAAATAAATTGTGTATGAGATGTTGTGTTTTCCTTTGTAATTTCCACTAACTAACTAACTAACTTATATTCTTCATGGAATGGAGCCCAGAAGAAATGAGAGGAAGCCCTTTTCACACTAGATCTTATTTGAAGAAATGTTTGTTAGTCAGTCAGTCAGTGGTTTCTGGCTCTGCCGAGGGAGATGTGTTCCCCAGCAACCATTTCTGCAGCCCAGAATCTCAAGGCACTAGAGGCGGTGTCTTAATTAATTGGCTTCACAAAGACAAAATGCTCTGGACTGGGATTTTTCCTTTGCTGTGTTGGGAATATGTGTTTATTAATTAGCACATGCCAACAAAATAAATGTCAAGAGTTATTTCATAAGTGTAAGTAAACTTAAGAATTAAAGAGTGCAGACTTATAATTTTC
反義股的區域可以與
FAM13AmRNA序列的至少15個連續核苷酸基本上互補或完全互補。在某些實施方式中,反義股的區域包含與
FAM13AmRNA序列(例如人
FAM13AmRNA序列(SEQ ID NO: 1))的區域的至少15、至少16、至少17、至少18或至少19個連續核苷酸的序列基本上互補(有不超過1、2或3個誤配)的序列。在相關實施方式中,反義股包含具有與
FAM13AmRNA序列的區域的至少15、至少16、至少17、至少18、或至少19個連續核苷酸的序列基本上互補(有不超過1個誤配)的序列的區域。在一些實施方式中,反義股包含與之互補區域的
FAM13AmRNA序列的靶區域的範圍可以為約15至約30個連續核苷酸、約16至約28個連續核苷酸、約18至約26個連續核苷酸、約17至約24個連續核苷酸、約19至約30個連續核苷酸、約19至約25個連續核苷酸、約19至約23個連續核苷酸或約19至約21個連續核苷酸。在某些實施方式中,包含與
FAM13AmRNA序列基本上或完全互補的序列的反義股的區域可以包含來自
表 1或
表 2 中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸。在其他實施方式中,反義股的序列包含來自
表 1或
表 2中列出的反義序列的至少16、至少17、至少18或至少19個連續核苷酸。
在一些實施方式中,包含與
FAM13AmRNA序列基本上或完全互補的序列的反義股的區域可以包含來自特別易於被RNAi構建體靶向的區域的至少15個連續核苷酸。因此,在一些實施方式中,包含與
FAM13AmRNA序列基本上或完全互補的序列的反義股的區域可以包含來自SEQ ID NO: 1所示的人
FAM13AmRNA序列的核苷酸1300-1375、1625-1700、2075-2175或4900-5300內的至少15個連續核苷酸。在一些實施方式中,包含與
FAM13AmRNA序列基本上或完全互補的序列的反義股的區域可以包含來自該等區域的亞部分的至少15個連續核苷酸。因此,在一些實施方式中,序列可包含來自核苷酸1300-1350、4900-5275、4900-5250、4900-5225、4900-5200、4900-5175、4900-5150、4900-5125、4900-5100、4900-5075、4925-5300、4925-5275、4925-5250、4925-5225、4925-5200、4925-5175、4925-5150、4925-5125、4925-5100、4925-5075、4950-5300、4950-5275、4950-5250、4950-5225、4950-5200、4950-5175、4950-5150、4950-5125、4950-5100、4950-5075、4975-5300、4975-5275、4975-5250、4975-5225、4975-5200、4975-5175、4975-5150、4975-5125、4975-5100、4975-5075、5175-3000、5100-5300、5125-5300、5150-5300、5175-5300、5200-5300或5225-5300的至少15個連續核苷酸。
RNAi構建體的有義股典型地包含與反義股的序列充分互補,使得兩條股在生理條件下雜交以形成雙股體區的序列。「雙股體區」係指在兩個互補或基本上互補的多核苷酸中的區域,這些多核苷酸藉由瓦生克立克鹼基配對或其他氫鍵合相互作用而相互形成鹼基對,從而在兩個多核苷酸之間形成雙股體。RNAi構建體的雙股體區應具有足夠的長度以允許RNAi構建體進入RNA干擾途徑,例如藉由接合Dicer酶和/或RISC複合物。例如,在一些實施方式中,雙股體區的長度為約15至約30個鹼基對。在該範圍內的雙股體區的其他長度也是合適的,諸如約15至約28個鹼基對、約15至約26個鹼基對、約15至約24個鹼基對、約15至約22個鹼基對、約17至約28個鹼基對、約17至約26個鹼基對、約17至約24個鹼基對、約17至約23個鹼基對、約17至約21個鹼基對、約19至約25個鹼基對、約19至約23個鹼基對、或約19至約21個鹼基對。在某些實施方式中,雙股體區的長度為約17至約24個鹼基對。在其他實施方式中,雙股體區的長度為約19至約21個鹼基對。在一個實施方式中,雙股體區的長度為約19個鹼基對。在另一個實施方式中,雙股體區的長度為約21個鹼基對。
對於其中有義股和反義股為兩個單獨分子的實施方式(例如RNAi構建體包含siRNA),有義股和反義股的長度不需要與雙股體區的長度相同。例如,一條或兩條股可能比雙股體區更長,並且具有在雙股體區側翼的一或多個未配對核苷酸或誤配。因此,在一些實施方式中,RNAi構建體包含至少一個核苷酸突出端。如本文所用,「核苷酸突出端」係指延伸超過在股末端的雙股體區的未配對的一個或多個核苷酸。當一條股的3'端延伸超過另一條股的5'端時或者當一條股的5'端延伸超過另一條股的3'端時,典型地形成核苷酸突出端。核苷酸突出端的長度通常是在1與6個核苷酸之間、1與5個核苷酸之間、1與4個核苷酸之間、1與3個核苷酸之間、2與6個核苷酸之間、2與5個核苷酸之間、或2與4個核苷酸之間。在一些實施方式中,核苷酸突出端包含1、2、3、4、5或6個核苷酸。在一些實施方式中,核苷酸突出端包含1至4個核苷酸。在某些實施方式中,核苷酸突出端包含2個核苷酸。在某些其他實施方式中,核苷酸突出端包含單個核苷酸。
突出端中的核苷酸可為如本文所述之核糖核苷酸或經修飾的核苷酸。在一些實施方式中,突出端中的核苷酸係2'-修飾的核苷酸(例如2'-氟修飾的核苷酸,2'-O-甲基修飾的核苷酸)、去氧核糖核苷酸、無鹼基核苷酸、反向核苷酸(例如反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸)、或其組合。例如,在一個實施方式中,突出端中的核苷酸係去氧核糖核苷酸,例如去氧胸苷。在另一個實施方式中,突出端中的核苷酸係2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-氟修飾的核苷酸、2'-甲氧基乙基修飾的核苷酸、或其組合。在其他實施方式中,突出端包含5'-尿苷-尿苷-3'(5'-UU-3')二核苷酸。在這樣的實施方式中,UU二核苷酸可以包含核糖核苷酸或經修飾的核苷酸,例如2'-修飾的核苷酸。在其他實施方式中,突出端包含5'-去氧胸苷-去氧胸苷-3'(5'-dTdT-3')二核苷酸。當核苷酸突出端存在於反義股中時,突出端中的核苷酸可以與靶基因序列互補,形成與靶基因序列的誤配或包含一些其他序列(例如聚嘧啶或聚嘌呤序列,如UU、TT、AA、GG等)。
核苷酸突出端可以在一條或兩條股的5'端或3'端。例如,在一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的5'端和3'端包含核苷酸突出端。在另一個實施方式中,RNAi構建體在有義股的5'端和3'端包含核苷酸突出端。在一些實施方式中,RNAi構建體在有義股的5'端和反義股的5'端包含核苷酸突出端。在其他實施方式中,RNAi構建體在有義股的3'端和反義股的3'端包含核苷酸突出端。
RNAi構建體可以在雙股RNA分子的一端包含單個核苷酸突出端且在另一端包含平端。「平端」意味著有義股與反義股在分子末端完全地鹼基配對,並且不存在延伸超出雙股體區的未配對核苷酸。在一些實施方式中,RNAi構建體在有義股的3'端包含核苷酸突出端,在有義股的5'端和反義股的3'端包含平端。在其他實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端包含核苷酸突出端,在反義股的5'端和有義股的3'端包含平端。在某些實施方式中,RNAi構建體在雙股RNA分子兩端均包含平端。在這樣的實施方式中,有義股和反義股具有相同長度,且雙股體區的長度與有義股和反義股相同(即,分子在其整個長度上為雙股)。
RNAi構建體中的有義股和反義股可以各自獨立地為約15至約30個核苷酸的長度、約19至約30個核苷酸的長度、約18至約28個核苷酸的長度、約19至約27個核苷酸的長度、約19至約25個核苷酸的長度、約19至約23個核苷酸的長度、約19至約21個核苷酸的長度、約21至約25個核苷酸的長度、或約21至約23個核苷酸的長度。在某些實施方式中,有義股和反義股的長度各自獨立地為約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、或約25個核苷酸。在一些實施方式中,有義股和反義股具有相同的長度,但形成短於這些股使得RNAi構建體具有兩個核苷酸突出端的雙股體區。例如,在一個實施方式中,RNAi構建體包含 (i) 長度各自為21個核苷酸的有義股和反義股、(ii) 長度為19個鹼基對的雙股體區、和 (iii) 在有義股的3'端和反義股的3'端兩者處具有2個未配對核苷酸的核苷酸突出端。在另一個實施方式中,RNAi構建體包含 (i) 長度各自為23個核苷酸的有義股和反義股、(ii) 長度為21個鹼基對的雙股體區、和 (iii) 在有義股的3'端和反義股的3'端兩者處具有2個未配對核苷酸的核苷酸突出端。在其他實施方式中,有義股和反義股具有相同長度且在其整個長度上形成雙股體區,使得在雙股分子的任一端上不存在核苷酸突出端。在一個這樣的實施方式中,RNAi構建體為平端的(例如具有兩個平端)且包含 (i) 長度各自為21個核苷酸的有義股和反義股和 (ii) 長度為21個鹼基對的雙股體區。在另一個這樣的實施方式中,RNAi構建體為平端的(例如具有兩個平端)且包含 (i) 長度各自為23個核苷酸的有義股和反義股和 (ii) 長度為23個鹼基對的雙股體區。在仍另一個這樣的實施方式中,RNAi構建體為平端的(例如具有兩個平端)且包含 (i) 長度各自為19個核苷酸的有義股和反義股和 (ii) 長度為19個鹼基對的雙股體區。
在其他實施方式中,有義股或反義股長於另一條股,且兩條股形成長度等於較短股長度使得RNAi構建體包含至少一個核苷酸突出端的雙股體區。例如,在一個實施方式中,RNAi構建體包含 (i) 長度為19個核苷酸的有義股、(ii) 長度為21個核苷酸的反義股、(iii) 長度為19個鹼基對的雙股體區、和 (iv) 在反義股的3'端的具有2個未配對核苷酸的核苷酸突出端。在另一個實施方式中,RNAi構建體包含 (i) 長度為21個核苷酸的有義股、(ii) 長度為23個核苷酸的反義股、(iii) 長度為21個鹼基對的雙股體區、和 (iv) 在反義股的3'端的具有2個未配對核苷酸的核苷酸突出端。
RNAi構建體的反義股可包含
表 1或
表 2中列出的反義序列中之任一個的序列、該等反義序列中任一個中的核苷酸1-19的序列、或該等反義序列中任一個中的核苷酸2-19的序列或由其組成。因此,在一些實施方式中,反義股包含選自SEQ ID NO: 546-1089或1938-2785的序列或由其組成。在其他實施方式中,反義股包含SEQ ID NO: 546-1089或1938-2785中任一個的核苷酸1-19的序列或由其組成。在仍其他實施方式中,反義股包含SEQ ID NO: 546-1089或1938-2785中任一個的核苷酸2-19的序列或由其組成。
在該等和其他實施方式中,RNAi構建體的有義股可包含
表 1或
表 2中列出的有義序列中任一個的序列、該等有義序列中任一個中的核苷酸1-19的序列、或該等有義序列中任一個中的核苷酸2-19的序列或由其組成。因此,在一些實施方式中,有義股包含選自SEQ ID NO: 2-545或1090-1937的序列或由其組成。在其他實施方式中,有義股包含SEQ ID NO: 2-545或1090-1937中任一個的核苷酸1-19的序列或由其組成。在仍其他實施方式中,有義股包含SEQ ID NO: 2-545或1090-1937中任一個的核苷酸2-19的序列或由其組成。
在某些實施方式中,RNAi構建體包含 (i) 包含選自SEQ ID NO: 2-545或1090-1937的序列或由其組成的有義股和 (ii) 包含選自SEQ ID NO: 546-1089或1938-2785的序列或由其組成的反義股。在一些實施方式中,RNAi構建體可為
表 1或
表 2中列出的任何雙股體化合物(包括該等化合物的未經修飾的核苷酸序列和/或經修飾的核苷酸序列)。在某些實施方式中,RNAi構建體係D-1539、D-1544、D-1545、D-1549、D-1557、D-1559、D-1573、D-1579、D-1586、D-1597、D-1607、D-1611、D-1612、D-1614、D-1623、D-1631、D-1636、D-1639、D-1640、D-1643、D-1644、D-1645、D-1646、D-1648、D-1652、D-1661、D-1667、D-1672或D-1694。
RNAi 構建體的修飾和製備
本文揭露的RNAi構建體可包含一或多種經修飾的核苷酸。「經修飾的核苷酸」係指具有針對核苷、核鹼基、戊糖環、或磷酸酯基團的一或多個化學修飾的核苷酸。如本文所用,經修飾的核苷酸不涵蓋含有腺苷單磷酸酯、鳥苷單磷酸酯、尿苷單磷酸酯、和胞苷單磷酸酯的核糖核苷酸。然而,RNAi構建體可包含經修飾的核苷酸和核糖核苷酸的組合。將經修飾的核苷酸摻入雙股RNA分子的一條或兩條股中可以例如藉由降低分子對核酸酶和其他降解過程的敏感性來改善RNA分子的體內穩定性。還可藉由摻入經修飾的核苷酸來增強RNAi構建體降低靶基因表現的效力。
在某些實施方式中,經修飾的核苷酸具有核糖的修飾。該等糖修飾可以包括在戊糖環的2'和/或5'位置的修飾、以及雙環糖修飾。2'-修飾的核苷酸係指具有戊糖環的核苷酸,該戊糖環在2'位置具有除OH以外的取代基。這樣的2'-修飾包括但不限於2'-H(例如去氧核糖核苷酸)、2'-O-烷基(例如-O-C
1-C
10或-O-C
1-C
10取代的烷基)、2'-O-烯丙基(-O-CH
2CH=CH
2)、2'-C-烯丙基、2'-去氧-2'-氟(也稱為2'-F或2'-氟)、2'-O-甲基(-OCH
3)、2'-O-甲氧基乙基(-O-(CH
2)
2OCH
3)、2ʹ-OCF
3、2'-O(CH
2)
2SCH
3、2'-O-胺基烷基、2'-胺基(例如-NH
2)、2'-O-乙胺和2'-疊氮基。在戊糖環的5'位置的修飾包括但不限於5'-甲基(R或S組態)、5'-乙烯基、和5'-甲氧基。
「雙環糖修飾」係指戊糖環的修飾,其中橋將環的兩個原子連接而形成第二環從而得到雙環糖結構。在一些實施方式中,雙環糖修飾包含在戊糖環的4'和2'碳之間的橋。包含具有雙環糖修飾的糖部分的核苷酸在本文中稱為雙環核酸或BNA。示例性雙環糖修飾包括但不限於α-L-亞甲基氧基(4'-CH
2—O-2')雙環核酸(BNA);β-D-亞甲基氧基(4'-CH
2—O-2')BNA(也稱為鎖核酸或LNA);伸乙基氧基(4'-(CH
2)
2—O-2')BNA;胺基氧基(4'-CH
2—O—N(R)-2',其中R係H、C
1-C
12烷基或保護基團)BNA;氧基胺基(4'-CH
2—N(R)—O-2',其中R係H、C
1-C
12烷基或保護基團)BNA;甲基(亞甲基氧基)(4'-CH(CH
3)—O-2')BNA(也稱為受限乙基或cEt);亞甲基-硫基(4'-CH
2—S-2')BNA;亞甲基-胺基(4'-CH2-N(R)-2',其中R係H、C
1-C
12烷基或保護基團)BNA;甲基碳環(4'-CH
2—CH(CH
3)-2')BNA;丙烯碳環(4'-(CH
2)
3-2')BNA;和甲氧基(伸乙基氧基)(4'-CH(CH
2OMe)-O-2')BNA(也稱為受限MOE或cMOE)。可以摻入RNAi構建體中的該等和其他經糖修飾的核苷酸描述於美國專利案號9,181,551、美國專利公開案號2016/0122761以及Deleavey和Damha, Chemistry and Biology [化學和生物學], 第19卷: 937-954, 2012中,所有該等文獻均藉由引用以其全文特此併入。
在一些實施方式中,RNAi構建體包含一或多個2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、雙環核酸(BNA)、去氧核糖核苷酸、或其組合。在某些實施方式中,RNAi構建體包含一或多個2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、或其組合。在一些實施方式中,RNAi構建體包含一或多個2ʹ-氟修飾的核苷酸、2ʹ-O-甲基修飾的核苷酸、或其組合。
RNAi構建體的有義股和反義股均可包含一個或多個經修飾的核苷酸。例如,在一些實施方式中,有義股包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個經修飾的核苷酸。在某些實施方式中,有義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。在一些實施方式中,反義股包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個經修飾的核苷酸。在其他實施方式中,反義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。在某些其他實施方式中,有義股中的所有核苷酸和反義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。在該等和其他實施方式中,經修飾的核苷酸可為2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、或其組合。
在某些實施方式中,摻入RNAi構建體的一條或兩條股中的經修飾的核苷酸具有核鹼基(在本文中也稱為「鹼基」)的修飾。「經修飾的核鹼基」或「經修飾的鹼基」係指除天然存在的嘌呤鹼基腺嘌呤(A)和鳥嘌呤(G)和嘧啶鹼基胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和尿嘧啶(U)以外的鹼基。經修飾的核鹼基可為合成的或天然存在的修飾,並且包括但不限於通用鹼基、5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥甲基胞嘧啶、黃嘌呤(X)、次黃嘌呤(I)、2-胺基腺嘌呤、6-甲基腺嘌呤、6-甲基鳥嘌呤,以及腺嘌呤和鳥嘌呤的其他烷基衍生物,腺嘌呤和鳥嘌呤的2-丙基衍生物和其他烷基衍生物,2-硫尿嘧啶、2-硫胸腺嘧啶和2-硫胞嘧啶,5-鹵尿嘧啶和胞嘧啶,5-丙炔基尿嘧啶和胞嘧啶,6-偶氮尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶,5-尿嘧啶(假尿嘧啶),4-硫尿嘧啶,8-鹵代、8-胺基、8-硫醇、8-硫代烷基、8-羥基和其他8-取代的腺嘌呤和鳥嘌呤,5-鹵代(特別是5-溴)、5-三氟甲基和其他5-取代的尿嘧啶和胞嘧啶,7-甲基鳥嘌呤和7-甲基腺嘌呤,8-氮雜鳥嘌呤和8-氮雜腺嘌呤,7-脫氮鳥嘌呤和7-脫氮腺嘌呤,以及3-脫氮鳥嘌呤和3-脫氮腺嘌呤。
在一些實施方式中,經修飾的鹼基為通用鹼基。「通用鹼基」係指鹼基類似物,其與RNA和DNA中的所有天然鹼基不加差異地形成鹼基對,而不改變所得雙股體區的雙螺旋結構。通用鹼基對於熟悉該項技術者而言係已知的,包括但不限於:肌苷、C-苯基、C-萘基和其他芳香族衍生物、唑醯胺類、和硝基唑衍生物(如3-硝基吡咯、4-硝基吲哚、5-硝基吲哚和6-硝基吲哚)。
可以摻入RNAi構建體中的其他合適的經修飾鹼基包括在Herdewijn, Antisense Nucleic Acid Drug Dev. [反義核酸藥物開發], 第10卷: 297-310, 2000和Peacock等人, J. Org. Chem. [有機化學雜誌], 第76卷: 7295-7300, 2011中描述的那些,這兩份文獻藉由引用以其全文特此併入。熟悉該項技術者瞭解鳥嘌呤、胞嘧啶、腺嘌呤、胸腺嘧啶和尿嘧啶可被其他核鹼基(如上述經修飾的核鹼基)替代,而基本上不改變包含攜帶這樣的替代核鹼基的核苷酸的多核苷酸的鹼基配對特性。
在一些實施方式中,RNAi構建體的有義股和反義股可以包含一或多個無鹼基核苷酸。「無鹼基核苷酸」或「無鹼基核苷」係在核糖的1'位置處缺少核鹼基的核苷酸或核苷。在某些實施方式中,將無鹼基核苷酸摻入RNAi構建體的有義股和/或反義股的末端。在一個實施方式中,有義股在其3'端、其5'端、或其3'和5'端兩者處包含作為末端核苷酸的無鹼基核苷酸。在另一個實施方式中,反義股在其3'端、其5'端、或其3'和5'端兩者處包含作為末端核苷酸的無鹼基核苷酸。在其中無鹼基核苷酸係末端核苷酸的這樣的實施方式中,其可為反向核苷酸——即藉由3'-3'核苷酸間鍵(當在股的3'端時)或藉由5'-5'核苷酸間鍵(當在股的5'端時)而不是天然的3'-5'核苷酸間鍵與相鄰核苷酸連接。無鹼基核苷酸也可以包含糖修飾,如上述的任何糖修飾。在某些實施方式中,無鹼基核苷酸包含2'-修飾,如2'-氟修飾、2'-O-甲基修飾、或2'-H(去氧)修飾。在一個實施方式中,無鹼基核苷酸包含2'-O-甲基修飾。在另一個實施方式中,無鹼基核苷酸包含2'-H修飾(即去氧無鹼基核苷酸)。
在某些實施方式中,RNAi構建體可包含根據特定模式(如WIPO公開案號WO 2020/123410中描述的模式)的摻入有義股和反義股中的經修飾的核苷酸,該文獻藉由引用以其全文特此併入。已經證明具有這樣的化學修飾模式的RNAi構建體具有改善的體內基因緘默化活性。在一個實施方式中,RNAi構建體包含含有彼此充分互補以形成至少15個鹼基對的雙股體區的序列的有義股和反義股,其中:
在反義股(從5'端開始計數)的位置2、7、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸;
在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置8至11和13配對的位置處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸;並且
有義股或反義股均不具有超過7個的總的2'-氟修飾的核苷酸。
在其他實施方式中,RNAi構建體包含含有彼此充分互補以形成至少19個鹼基對的雙股體區的序列的有義股和反義股,其中:
在反義股(從5'端開始計數)的位置2、7、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸,位置4、6、10、和12(從5'端開始計數)處的核苷酸視需要地是2'-氟修飾的核苷酸,並且反義股中所有其他的核苷酸係除2'-氟修飾的核苷酸之外的經修飾的核苷酸;並且
在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置8至11和13配對的位置處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸,在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置3和5配對的位置處的核苷酸視需要地是2'-氟修飾的核苷酸;並且有義股中的所有其他核苷酸係除2'-氟修飾的核苷酸之外的經修飾的核苷酸。
在這樣的實施方式中,除2'-氟修飾的核苷酸之外的經修飾的核苷酸可以選自2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA、和去氧核糖核苷酸。在該等和其他實施方式中,有義股的3'端、5'端、或3'端和5'端兩者處的末端核苷酸可為無鹼基核苷酸或去氧核糖核苷酸。在這樣的實施方式中,無鹼基核苷酸或去氧核糖核苷酸可為反向的——即藉由3'-3'核苷酸間鍵(當在股的3'端時)或藉由5'-5'核苷酸間鍵(當在股的5'端時)而不是天然的3'-5'核苷酸間鍵與相鄰核苷酸連接。
在上述任何實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、7、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在其他實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、4、7、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在又其他實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、4、6、7、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在仍其他實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、4、6、7、10、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在可替代實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、7、10、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在某些其他實施方式中,在反義股(從5'端開始計數)的位置2、4、7、10、12、和14處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。
在上述任何實施方式中,在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置3、8至11和13配對的位置處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在一些實施方式中,在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置5、8至11和13配對的位置處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。在其他實施方式中,在有義股的與反義股(從5'端開始計數)中的位置3、5、8至11和13配對的位置處的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸。
在一些實施方式中,RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構:
5′-(N
A)
xN
LN
LN
LN
LN
LN
LN
FN
LN
FN
FN
FN
FN
LN
LN
MN
LN
MN
LN
T(n)
y-3′
3′-(N
B)
zN
LN
LN
LN
LN
LN
FN
LN
MN
LN
MN
LN
LN
FN
MN
LN
MN
LN
FN
L-5′
(A)
在式 (A) 中,按5'至3'方向列出的上股係有義股並且按3'至5'方向列出的下股係反義股;每個N
F代表2'-氟修飾的核苷酸;每個N
M獨立地代表選自以下的經修飾的核苷酸:2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸;每個N
L獨立地代表選自以下的經修飾的核苷酸:2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸;並且N
T代表選自以下的經修飾的核苷酸:無鹼基核苷酸、反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。X可為0至4的整數,條件係當x係1、2、3、或4時,該等N
A核苷酸中之一或多個係獨立地選自以下的經修飾的核苷酸:無鹼基核苷酸、反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。該等N
A核苷酸中之一或多個可以與反義股中的核苷酸互補。Y可為0至4的整數,條件係當y係1、2、3、或4時,一或多個n核苷酸係不與反義股中的核苷酸發生鹼基配對的經修飾的或未經修飾的突出端核苷酸。Z可為0至4的整數,條件係當z係1、2、3、或4時,該等N
B核苷酸中之一或多個係獨立地選自以下的經修飾的核苷酸:2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。該等N
B核苷酸中之一或多個可以與N
A核苷酸互補(當N
A核苷酸存在於有義股中時),或者可為不與該有義股中的核苷酸發生鹼基配對的突出端核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的一些實施方式中,在有義股的3'端處有核苷酸突出端——即y係1、2、3、或4。在一個這樣的實施方式中,y係2。在其中在有義股的3'端處有2個核苷酸的突出端(即y係2)的實施方式中,x係0並且z係2,或x係1並且z係2。在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的其他實施方式中,RNAi構建體包含在有義股的3'端和反義股的5'端的平端(即y係0)。在其中有義股的3'端處無核苷酸突出端(即y係0)的這樣的實施方式中:(i) x係2並且z係4,(ii) x係3並且z係4,(iii) x係0並且z係2,(iv) x係1並且z係2,或者 (v) x係2並且z係2。在其中x大於0的任何實施方式中,N
A核苷酸(有義股的5'端的末端核苷酸)可為反向核苷酸,如反向無鹼基核苷酸或反向去氧核糖核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的某些實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4和12處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在其他實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、和12處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在又其他實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、10、和12處的N
M各自為2’-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的可替代實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置10和12處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在相關的實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、10、和12處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的其他可替代實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、和10處的N
M係2'-O-甲基修飾的核苷酸,並且在從5'端開始計數的反義股中的位置12處的N
M係2'-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的一些實施方式中,有義股中之每個N
M係2'-O-甲基修飾的核苷酸。在其他實施方式中,有義股中之每個N
M係2ʹ-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的仍其他實施方式中,在有義股和反義股兩者中之每個N
M均是2'-O-甲基修飾的核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (A) 表示的結構的上述任何實施方式中,在有義股和反義股兩者中之每個N
L均可為2'-O-甲基修飾的核苷酸。在該等實施方式和以上所述之任何實施方式中,式 (A) 中的N
T可為反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、或2'-O-甲基修飾的核苷酸。
在其他實施方式中,RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構:
5′-(N
A)
xN
LN
LN
LN
LN
MN
LN
FN
FN
FN
FN
LN
LN
LN
LN
LN
LN
LN
LN
T(n)
y-3′
3′-(N
B)
zN
LN
LN
LN
MN
LN
FN
LN
MN
LN
LN
MN
MN
MN
MN
LN
MN
LN
FN
L-5′
(B)
在式 (B) 中,按5ʹ至3ʹ方向列出的上股係有義股並且按3ʹ至5ʹ方向列出的下股係反義股;每個N
F代表2'-氟修飾的核苷酸;每個N
M獨立地代表選自以下的經修飾的核苷酸:2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸;每個N
L獨立地代表選自以下的經修飾的核苷酸:2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸;並且N
T代表選自以下的經修飾的核苷酸:無鹼基核苷酸、反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。X可為0至4的整數,條件係當x係1、2、3、或4時,該等N
A核苷酸中之一或多個係獨立地選自以下的經修飾的核苷酸:無鹼基核苷酸、反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。該等N
A核苷酸中之一或多個可以與反義股中的核苷酸互補。Y可為0至4的整數,條件係當y係1、2、3、或4時,一或多個n核苷酸係不與反義股中的核苷酸發生鹼基配對的經修飾的或未經修飾的突出端核苷酸。Z可為0至4的整數,條件係當z係1、2、3、或4時,該等N
B核苷酸中之一或多個係獨立地選自以下的經修飾的核苷酸:2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、BNA和去氧核糖核苷酸。該等N
B核苷酸中之一或多個可以與N
A核苷酸互補(當N
A核苷酸存在於有義股中時),或者可為不與該有義股中的核苷酸發生鹼基配對的突出端核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的一些實施方式中,在有義股的3'端處有核苷酸突出端——即y係1、2、3、或4。在一個這樣的實施方式中,y係2。在其中在有義股的3'端處有2個核苷酸的突出端(即y係2)的實施方式中,x係0並且z係2,或x係1並且z係2。在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的其他實施方式中,RNAi構建體包含在有義股的3'端和反義股的5'端的平端(即y係0)。在其中有義股的3'端處無核苷酸突出端(即y係0)的這樣的實施方式中:(i) x係2並且z係4,(ii) x係3並且z係4,(iii) x係0並且z係2,(iv) x係1並且z係2,或者 (v) x係2並且z係2。在其中x大於0的任何實施方式中,N
A核苷酸(有義股的5'端的末端核苷酸)可為反向核苷酸,如反向無鹼基核苷酸或反向去氧核糖核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的某些實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、8、9和16處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸並且在從5'端開始計數的反義股中的位置7和12處的N
M各自為2'-O-甲基修飾的核苷酸。在其他實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4和6處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸並且在從5'端開始計數的反義股中的位置7至9處的N
M各自為2'-O-甲基修飾的核苷酸。在仍其他實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、8、9和16處的N
M各自為2'-O-甲基修飾的核苷酸並且在從5'端開始計數的反義股中的位置7和12處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的可替代實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、8、9和12處的N
M各自為2'-O-甲基修飾的核苷酸並且在從5'端開始計數的反義股中的位置7和16處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的某些其他實施方式中,在從5'端開始計數的反義股中的位置7、8、9和12處的N
M各自為2'-O-甲基修飾的核苷酸並且在從5'端開始計數的反義股中的位置4、6、和16處的N
M各自為2'-氟修飾的核苷酸。在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的該等和其他實施方式中,有義股中的N
M係2ʹ-氟修飾的核苷酸。在可替代實施方式中,有義股中的N
M係2'-O-甲基修飾的核苷酸。
在其中RNAi構建體包含由式 (B) 表示的結構的上述任何實施方式中,在有義股和反義股兩者中之每個N
L均可為2'-O-甲基修飾的核苷酸。在該等實施方式和以上所述之任何實施方式中,式 (B) 中的N
T可為反向無鹼基核苷酸、反向去氧核糖核苷酸、或2'-O-甲基修飾的核苷酸。
RNAi構建體還可以包含一或多個經修飾的核苷酸間鍵。如本文所用,術語「經修飾的核苷酸間鍵」係指除天然3'至5'磷酸二酯鍵以外的核苷酸間鍵。在一些實施方式中,經修飾的核苷酸間鍵係含磷的核苷酸間鍵,如磷酸三酯、胺基烷基磷酸三酯、烷基膦酸酯(例如甲基膦酸酯、3'-伸烷基膦酸酯)、次膦酸酯、胺基磷酸酯(例如3'-胺基胺基磷酸酯和胺基烷基胺基磷酸酯)、硫代磷酸酯、手性硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、琉羰基磷醯胺酯、琉羰基烷基膦酸酯、琉羰基烷基磷酸三酯、和硼烷磷酸酯。在一個實施方式中,經修飾的核苷酸間鍵係2'至5'磷酸二酯鍵。在其他實施方式中,經修飾的核苷酸間鍵為不含磷核苷酸間鍵,且因此可稱為經修飾的核苷間鍵。這樣的不含磷的鍵包括但不限於𠰌啉鍵(部分由核苷的糖部分形成);矽氧烷鍵(—O—Si(H)
2—O—);硫化物、亞碸和碸鍵;甲醯基和硫代甲醯基鍵;含烯的骨架;胺基磺酸鹽骨架;亞甲基甲基亞胺基(—CH
2—N(CH
3)—O—CH
2—)和亞甲基肼鍵;磺酸鹽和磺醯胺鍵;醯胺鍵;以及具有混合的N、O、S和CH
2組成部分的其他鍵。在一個實施方式中,經修飾的核苷間鍵為產生肽核酸或PNA的基於肽的鍵(例如胺基乙基甘胺酸),如美國專利案號5,539,082、5,714,331、和5,719,262中所述之那些。可以在RNAi構建體中使用的其他合適的經修飾的核苷酸間和核苷間鍵描述於美國專利案號6,693,187、美國專利案號9,181,551、美國專利公開案號2016/0122761以及Deleavey和Damha, Chemistry and Biology [化學和生物學], 第19卷: 937-954, 2012中,所有該等文獻均藉由引用以其全文特此併入。
在某些實施方式中,RNAi構建體包含一個或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。硫代磷酸酯核苷酸間鍵可以存在於RNAi構建體的有義股、反義股或兩條股中。例如,在一些實施方式中,有義股包含1、2、3、4、5、6、7、8或更多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在其他實施方式中,反義股包含1、2、3、4、5、6、7、8或更多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在仍其他實施方式中,兩條股包含1、2、3、4、5、6、7、8或更多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。RNAi構建體可以在有義股、反義股、或兩條股的3'-端、5'-端、或者3'-和5'-端兩者處包含一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。例如,在某些實施方式中,RNAi構建體在有義股、反義股、或兩條股的3'端處包含約1至約6或更多個(例如,約1、2、3、4、5、6或更多個)連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在其他實施方式中,RNAi構建體在有義股、反義股或兩條股的5'-端處包含約1至約6或更多個(例如,約1、2、3、4、5、6或更多個)連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在一些實施方式中,反義股包含至少1個但不超過6個硫代磷酸酯核苷酸間鍵,並且有義股包含至少1個但不超過4個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在其他實施方式中,反義股包含至少1個但不超過4個硫代磷酸酯核苷酸間鍵,並且有義股包含至少1個但不超過2個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
在一些實施方式中,RNAi構建體在有義股的3'端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在其他實施方式中,RNAi構建體在有義股的3'端的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在一個實施方式中,RNAi構建體在有義股的3'端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵並在反義股的3'端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端的末端核苷酸之間包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵(即,在反義股的3'端的第一和第二核苷酸間鍵處的硫代磷酸酯核苷酸間鍵)。在另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在又另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並且在有義股的5'端包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在仍另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並且在有義股的3'端的末端核苷酸之間包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並且在有義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵(即,在反義股的5'端和3'端兩者的第一和第二核苷酸間鍵處的硫代磷酸酯核苷酸間鍵和在有義股的5'端和3'端兩者的第一和第二核苷酸間鍵處的硫代磷酸酯核苷酸間鍵)。在又另一個實施方式中,RNAi構建體在反義股的3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間均包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並且在有義股的3'端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。在其中一條或兩條股包含一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵的任何實施方式中,股內的其餘核苷酸間鍵可為天然的3'至5'磷酸二酯鍵。例如,在一些實施方式中,有義股和反義股的各核苷酸間鍵選自磷酸二酯和硫代磷酸酯,其中至少一個核苷酸間鍵為硫代磷酸酯。
在RNAi構建體包含核苷酸突出端的實施方式中,突出端中的兩個或更多個未配對核苷酸可藉由硫代磷酸酯核苷酸間鍵來連接。在某些實施方式中,在反義股和/或有義股的3'端處的核苷酸突出端中的所有未配對核苷酸係藉由硫代磷酸酯核苷酸間鍵連接的。在其他實施方式中,在反義股和/或有義股的5'端處的核苷酸突出端中的所有未配對核苷酸係藉由硫代磷酸酯核苷酸間鍵連接的。在仍其他實施方式中,任何核苷酸突出端中的所有未配對核苷酸藉由硫代磷酸酯核苷酸間鍵來連接。
硫代磷酸酯核苷酸間鍵的摻入在寡核苷酸的磷原子處引入了另外的手性中心,且因此在每個硫代磷酸酯核苷酸間鍵處產生非鏡像物對(Rp和Sp)。非鏡像物或非鏡像異構物係化合物的具有相同分子式和鍵合原子序列但其原子在空間中的三維方向不同的不同組態。與鏡像異構物不同,非鏡像物不是彼此的鏡像圖像。每個手性磷酸鹽原子可以處於「R」組態(Rp)或「S」組態(Sp)。在某些實施方式中,RNAi構建體可包含一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵,其中手性磷酸鹽選擇為主要處於Rp或Sp組態。例如,在其中RNAi構建體具有一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵的一些實施方式中,至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、或至少約95%的手性磷酸鹽處於Sp組態。在其中RNAi構建體具有一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵的其他實施方式中,至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、或至少約95%的手性磷酸鹽處於Rp組態。RNAi構建體中的所有手性磷酸鹽可以處於Sp組態或Rp組態(即RNAi構建體為立體純)。在一些實施方式中,RNAi構建體中的所有手性磷酸鹽處於Sp組態。在一些實施方式中,RNAi構建體中的所有手性磷酸鹽處於Rp組態。
在某些實施方式中,RNAi構建體中的手性磷酸鹽在有義股或反義股中的不同位置處可具有不同組態。在其中RNAi構建體在反義股的5'端包含一或兩個硫代磷酸酯核苷酸間鍵的一個這樣的實施方式中,反義股的5'端處的手性磷酸鹽可以處於Rp組態。在其中RNAi構建體在反義股的3'端包含一或兩個硫代磷酸酯核苷酸間鍵的另一個這樣的實施方式中,反義股的3'端處的手性磷酸鹽可以處於Sp組態。在某些實施方式中,RNAi構建體在反義股3'和5'端兩者的末端核苷酸之間包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並在有義股3'端的末端核苷酸之間包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵,其中在反義股5'端處的手性磷酸鹽處於Rp組態,在反義股3'端處的手性磷酸鹽處於Sp組態,並且在有義股3'端處的手性磷酸鹽可處於Rp或Sp組態。在某些其他實施方式中,RNAi構建體在反義股3'和5'端兩者的末端核苷酸之間包含兩個連續硫代磷酸酯核苷酸間鍵並在有義股3'端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵,其中在反義股5'端處的手性磷酸鹽處於Rp組態,在反義股3'端處的手性磷酸鹽處於Sp組態,並且在有義股3'端處的手性磷酸鹽可處於Rp或Sp組態。在寡核苷酸合成期間控制硫代磷酸酯鍵的立體化學的方法係熟悉該項技術者已知的且可以包括以下中描述的方法:Nawrot和Rebowska, Curr. Protoc. Nucleic Acid Chem. [核酸化學當前方案] 2009, 第4章: doi:10.1002/0471142700.nc0434s362009;Jahns等人, Nat. Commun. [自然通訊], 第6卷: 6317, 2015;Knouse等人, Science [科學], 第361卷: 1234-1238, 2018;和Sakamuri等人, ChemBioChem [化學生物學和生物化學], 第21卷(9): 1304-1308, 2020。
在RNAi構建體的一些實施方式中,有義股、反義股、或反義股和有義股兩者的5'端包含磷酸酯部分。如本文所用,術語「磷酸酯部分」係指包括未經修飾的磷酸酯(—O—P=O)(OH)OH)以及經修飾的磷酸酯的末端磷酸酯基團。經修飾的磷酸酯包括如下的磷酸酯,其中O和OH基團中之一或多個被H、O、S、N(R)或烷基(例如C
1至C
12)所替代,其中R係H、胺基保護基團或者未經取代或經取代的烷基(例如C
1至C
12)。示例性磷酸酯部分包括但不限於:5'-單磷酸酯;5'-二磷酸酯;5'-三磷酸酯;5'-鳥苷帽(7-甲基化的或非甲基化的);5'-腺苷帽或任何其他經修飾的或未經修飾的核苷酸帽結構;5'-單硫代磷酸酯(硫代磷酸酯);5'-單二硫代磷酸酯(二硫代磷酸酯);5'-α-硫代三磷酸酯;5'-γ-硫代三磷酸酯、5'-胺基磷酸酯;5'-乙烯基磷酸酯;5'-烷基膦酸酯(例如,烷基 = 甲基、乙基、異丙基、丙基等);和5'-烷基醚膦酸酯(例如,烷基醚 = 甲氧基甲基、乙氧基甲基等)。
可摻入RNAi構建體中的經修飾的核苷酸可具有多於一種本文所述之化學修飾。例如,經修飾的核苷酸可以具有對核糖的修飾以及對核鹼基的修飾。舉例來說,經修飾的核苷酸可以包含2'糖修飾(例如2ʹ-氟或2ʹ-O-甲基)並且包含經修飾的鹼基(例如5-甲基胞嘧啶或假尿嘧啶)。在其他實施方式中,經修飾的核苷酸可以包含糖修飾與對5ʹ磷酸酯的修飾的組合,當將經修飾的核苷酸摻入多核苷酸中時這將會形成經修飾的核苷酸間鍵或核苷間鍵。例如,在一些實施方式中,經修飾的核苷酸可以包含糖修飾,如2ʹ-氟修飾、2ʹ-O-甲基修飾或雙環糖修飾、以及5ʹ硫代磷酸酯基。因此,在一些實施方式中,RNAi構建體的一條或兩條股包含2ʹ修飾的核苷酸或BNA與硫代磷酸酯核苷酸間鍵的組合。在某些實施方式中,RNAi構建體的有義股和反義股兩者均包含2ʹ-氟修飾的核苷酸、2ʹ-O-甲基修飾的核苷酸和硫代磷酸酯核苷酸間鍵的組合。包含經修飾的核苷酸和核苷酸間鍵的示例性RNAi構建體顯示在
表 2中。
RNAi構建體的示例性修飾模式顯示在
圖 7A-7R中。該等模式可用於本文揭露的RNAi雙股體的背景,或用於一般RNAi構建體的背景。
圖 7A-7R各自顯示了雜交的有義(上)和反義(下)股,其中每一個核苷酸都經修飾。
圖 7A-7R中的實心圓對應於2ʹ-O-甲基核糖核苷酸,而空心圓對應於2ʹ-去氧-2ʹ-氟(「2ʹ-氟」)核糖核苷酸。陰影圓對應於反向無鹼基去氧核苷酸。粗線指示在核苷酸之間使用硫代磷酸酯鍵代替標準磷酸二酯鍵的位置。最後,箭頭表示配體(例如GalNAc或脂肪酸(如C22))可以附接至RNAi構建體的位置。如以下實例所表明,該等修飾模式在FAM13A序列中之一系列不同觸發物序列上係有效的,從而表明它們通常適用於RNAi構建體。
利用本領域中已知的技術(例如,利用常規的核酸固相合成),可以容易地製備RNAi構建體。RNAi構建體的多核苷酸可使用標準核苷酸或核苷先質(例如亞磷醯胺)在合適的核酸合成儀上組裝。自動核酸合成儀係由若干供應商商業銷售,包括來自應用生物系統公司(Applied Biosystems)(福斯特城,加利福尼亞州(Foster City, CA))的DNA/RNA合成儀、來自生物自動化公司(BioAutomation)(歐文市,德克薩斯州(Irving, TX))的MerMade合成儀、和來自GE保健生命科學公司(GE Healthcare Life Sciences)(匹茲堡市,賓夕凡尼亞州(Pittsburgh, PA))的OligoPilot合成儀。實例3中描述了合成RNAi構建體的示例性方法。
2'甲矽烷基保護基團可以在核糖核苷的5'位置與酸不穩定的二甲氧基三苯甲基(DMT)結合使用,從而利用亞磷醯胺化學來合成寡核苷酸。已知最終去保護條件不會顯著降解RNA產物。所有合成均可在任何自動或手動合成儀中以大、中、小規模進行。合成還可以在多個孔板、柱或載玻片中進行。
可以經由暴露於氟離子來去除2ʹ-O-甲矽烷基基團,該等氟離子可以包括任何氟離子源,例如含有與無機反離子配對的氟離子的那些鹽(例如氟化銫和氟化鉀)、或者含有與有機反離子配對的氟離子的那些鹽(例如四烷基氟化銨)。冠醚催化劑可以與無機氟化物組合用於去保護反應中。示例性氟離子源為四丁基氟化銨或胺基氫氟化物(例如,將水性HF與三乙胺組合在偶極非質子溶劑例如二甲基甲醯胺中)。
選擇用於亞磷酸三酯和磷酸三酯上的保護基團可以改變三酯對氟化物的穩定性。磷酸三酯或亞磷酸三酯的甲基保護可以穩定與氟離子的鍵聯且改善過程產率。
因為核糖核苷具有反應性2ʹ羥基取代基,所以可能理想的是用與5ʹ-O-二甲氧基三苯甲基保護基團垂直的保護基團(例如一個對使用酸的處理為穩定的保護基團)來保護RNA中的反應性2ʹ位置。甲矽烷基保護基團符合該標準,且可以在最終的氟化物去保護步驟中容易地除去,這可以導致最少RNA降解。
四唑催化劑可用於標準亞磷醯胺偶合反應。示例性催化劑包括例如四唑、S-乙基-四唑、苄基巰基四唑、對硝基苯基四唑。
如熟悉該項技術者可以理解的,合成本文所述之RNAi構建體的其他方法對於普通熟悉該項技術者而言為顯而易見的。另外地,各種合成步驟可以交替順序或順序進行,以得到所需化合物。其他合成化學轉化、保護基團(例如,對於鹼基上存在的羥基、胺基等)和可用於合成本文所述之RNAi構建體的保護基團方法(保護和去保護)為本領域已知的且包括例如以下中描述的那些:R. Larock, Comprehensive Organic Transformations [全面有機轉換], VCH Publishers [VCH出版社] (1989);T. W. Greene和P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis [有機合成中的保護基團], 第2版,John Wiley and Sons [約翰威立父子公司], (1991);L. Fieser和M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis [費塞爾和用於有機合成的費塞爾試劑], John Wiley and Sons [約翰威立父子公司] (1994);以及L. Paquette編輯, Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis [有機合成試劑百科全書], John Wiley and Sons [約翰威立父子公司] (1995),及其後續版本。RNAi構建體的定製合成還可自若干商業供應商處獲得,該等供應商包括Dharmacon公司(Dharmacon, Inc.)(拉法葉,科羅拉多州(Lafayette, CO))、Axo實驗室股份有限公司(AxoLabs GmbH)(庫母巴赫,德國(Kulmbach, Germany))和Ambion公司(Ambion, Inc.)(福斯特城,加利福尼亞州(Foster City, CA))。
RNAi構建體可包含配體。如本文所用,「配體」係指能夠與另一種化合物或分子直接地或間接地相互作用的任何化合物或分子。配體與另一種化合物或分子的相互作用可引發生物反應(例如,活化訊息傳遞級聯、誘導受體介導的內吞作用)或者可僅為物理締合。配體可以修改所附接的雙股RNA分子的一種或多種特性,例如RNA分子的藥效學、藥動學、結合、吸收、細胞分佈、細胞攝取、電荷和/或清除特性。
配體可包含血清蛋白(例如,人血清白蛋白、低密度脂蛋白、球蛋白)、膽固醇部分、維生素(生物素、維生素E、維生素B
12)、葉酸部分、類固醇、膽汁酸(例如膽酸)、脂肪酸(例如,棕櫚酸、肉豆蔻酸)、碳水化合物(例如,聚葡萄醣、聚三葡萄糖、幾丁質、殼聚糖、菊粉、環糊精或透明質酸)、糖苷、磷脂、或者抗體或其結合片段(例如,使RNAi構建體靶向特定細胞類型(如肝臟)的抗體或結合片段)。配體的其他實例包括染料、嵌入劑(例如吖啶)、交聯劑(例如補骨脂素、絲裂黴素C)、卟啉(TPPC4、Texaphyrin、Sapphyrin)、多環芳烴(例如啡𠯤、二氫啡𠯤)、人工核酸內切酶(例如EDTA)、親脂性分子(例如金剛烷乙酸、1-芘丁酸、二氫睪酮、1,3-雙-O(十六烷基)甘油、香葉氧基己基基團、十六烷基甘油、冰片、薄荷醇、1,3-丙二醇、十七烷基基團、O3-(油醯基)石膽酸、O3-(油醯基)膽烯酸、二甲氧基三苯甲基或吩㗁𠯤)、肽(例如觸角肽、Tat肽、RGD肽)、烷化劑、聚合物(如聚乙二醇(PEG)(例如PEG-40K))、聚胺基酸和多胺(例如精胺、亞精胺)。
在某些實施方式中,配體具有內體溶解特性。內體溶解配體促進內體的裂解和/或RNAi構建體或其組分從內體轉運到細胞的細胞質。內體溶解配體可為聚陽離子肽或肽類比物,其顯示出pH依賴性膜活性和融合性。在一個實施方式中,內體溶解配體在內體pH下呈現其活性構形。「活性」構像係其中內體溶解配體促進內體裂解和/或RNAi構建體或其組分從內體轉運到細胞的細胞質的構形。示例性內體溶解配體包括GALA肽(Subbarao等人, Biochemistry [生物化學], 第26卷: 2964-2972, 1987),EALA肽(Vogel等人, J. Am. Chem. Soc. [美國化學會誌], 第118卷: 1581-1586, 1996)、及其衍生物(Turk等人, Biochem. Biophys. Acta [生物化學與生物物理學報], 第1559卷: 56-68, 2002)。在一個實施方式中,內體溶解組分可含有化學基團(例如胺基酸),其響應於pH的變化將經歷電荷或質子化的變化。內體溶解組分可為直鏈或支鏈的。
在一些實施方式中,配體包含脂質或其他疏水分子。在一個實施方式中,配體包含膽固醇部分或其他類固醇。據報告,膽固醇綴合的寡核苷酸比其未綴合的寡核苷酸更具活性(Manoharan, Antisense Nucleic Acid Drug Development [反義核酸藥物開發], 第12卷: 103-228, 2002)。包含用於與核酸分子綴合的膽固醇部分和其他脂質的配體也已經描述於美國專利案號7,851,615、7,745,608、和7,833,992,所有該等均藉由引用以其全文特此併入。在另一個實施方式中,配體包含葉酸部分。與葉酸部分綴合的多核苷酸可以經由經受體介導的胞吞作用途徑被細胞攝取。這樣的葉酸-多核苷酸綴合物描述於美國專利案號8,188,247中,該專利藉由引用以其全文特此併入。
在某些實施方式中,希望將RNAi構建體特異性地遞送至肝細胞以降低FAM13A蛋白在肝臟中的特異性表現。因此,在某些實施方式中,使用如下文更詳細描述的各種方法使配體靶向RNAi構建體至肝臟細胞(例如肝細胞)的特異性遞送。在某些實施方式中,使RNAi構建體靶向至具有配體的肝臟細胞,該配體結合表面表現的去唾液酸糖蛋白受體(ASGR)或其組分(例如ASGR1、ASGR2)。
在一些實施方式中,RNAi構建體可以藉由使用與肝臟細胞表面上表現的蛋白質結合或相互作用的配體而特異性靶向肝臟。例如,在某些實施方式中,配體可以包含與在肝細胞上表現的受體(如去唾液酸糖蛋白受體和LDL受體)特異性結合的抗原結合蛋白(例如抗體或其結合片段(例如Fab、scFv))。在一些實施方式中,配體包含特異性結合ASGR1和/或ASGR2的抗體或其結合片段。在另一個實施方式中,配體包含特異性結合ASGR1和/或ASGR2的抗體的Fab片段。「Fab片段」由一條免疫球蛋白輕鏈(即輕鏈可變區(VL)和恒定區(CL))以及一條免疫球蛋白重鏈的CH1區和可變區(VH)構成。在另一個實施方式中,配體包含特異性結合ASGR1和/或ASGR2的抗體的單鏈可變抗體片段(scFv片段)。「scFv片段」包含抗體的VH和VL區,其中該等區存在於單條多肽鏈中,並且視需要地在VH和VL區之間包含肽連接子,該肽連接子使Fv能形成希望的抗原結合結構。特異性結合ASGR1的可以用作用於使RNAi構建體靶向肝臟的配體的示例性抗體及其結合片段描述於WIPO公開案號WO 2017/058944中,該文獻藉由引用以其全文特此併入。特異性結合ASGR1、LDL受體、或其他肝臟表面表現的蛋白質的適用於用作RNAi構建體中的配體的其他抗體或其結合片段係可商購的。
在某些實施方式中,希望將RNAi構建體特異性地遞送至脂肪組織或脂肪細胞以降低FAM13A蛋白在脂肪細胞中的特異性表現。因此,在某些實施方式中,使用如下文更詳細描述的各種方法使配體靶向RNAi構建體至脂肪細胞(例如,皮下白色脂肪組織(scWAT)或附睪白色脂肪組織(eWAT))的特異性遞送。在某些實施方式中,RNAi構建體藉由與長鏈脂肪酸綴合而靶向脂肪組織或細胞,該等長鏈脂肪酸係含有12至24個碳原子的飽和或不飽和脂肪酸。在一些實施方式中,長鏈脂肪酸係月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、棕櫚酸(C16)、硬脂酸(C18)、二十碳五烯酸(C20)、二十二酸(C22)或二十四碳六烯酸(C24)。
在某些實施方式中,希望全身性遞送RNAi構建體以降低FAM13A蛋白在多種或所有細胞類型中的表現。因此,在某些實施方式中,使用本領域已知的促進siRNA的細胞遞送的方法使配體靶向RNAi構建體的遞送(參見例如,美國專利案號10,633,653、WO 2022/016043,該等專利各自藉由引用以其全文併入)。在一些實施方式中,RNAi構建體藉由與膽固醇、α-生育酚或脂肪酸綴合而靶向細胞。在一些實施方式中,RNAi構建體藉由與ω脂肪酸綴合而靶向細胞。在某些實施方式中,RNAi構建體藉由與長鏈脂肪酸綴合而靶向細胞,該等長鏈脂肪酸如月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、棕櫚酸(C16)、硬脂酸(C18)、二十碳五烯酸(C20)、二十二酸(C22)或二十四碳六烯酸(C24)。
在某些實施方式中,配體包含碳水化合物。「碳水化合物」係指由一或多個具有至少6個碳原子(可為直鏈、支鏈或環狀)和與各碳原子鍵合的氧、氮或硫原子的單糖單元構成的化合物。碳水化合物包括但不限於糖(例如,單糖、二糖、三糖、四糖和含有約4、5、6、7、8或9個單糖單元的寡糖)和多糖(如澱粉、糖原、纖維素和多糖膠)。在一些實施方式中,摻入配體中的碳水化合物為選自戊糖、己糖或庚糖的單糖和包括這樣的單糖單元的二糖和三糖。在其他實施方式中,摻入配體中的碳水化合物為胺基糖,例如半乳胺糖、葡糖胺、N-乙醯基-半乳胺糖和N-乙醯葡糖胺。
在一些實施方式中,配體包含己糖或己糖胺。己糖可選自葡萄糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖或果糖。己糖胺可選自果糖胺、半乳胺糖、葡糖胺或甘露糖胺。在某些實施方式中,配體包含葡萄糖、半乳糖、半乳胺糖或葡糖胺。在一個實施方式中,配體包含葡萄糖、葡糖胺或N-乙醯葡糖胺。在另一個實施方式中,配體包含半乳糖、半乳胺糖或N-乙醯基-半乳胺糖。在特定實施方式中,配體包含N-乙醯基-半乳胺糖。包括葡萄糖、半乳糖、和N-乙醯基-半乳胺糖(GalNAc)的配體在使化合物靶向肝臟細胞方面特別有效,因為這樣的配體與在肝細胞表面表現的ASGR結合。參見例如,D'Souza和Devarajan, J. Control Release [控制釋放雜誌], 第203卷: 126-139, 2015。可以摻入RNAi構建體中的含GalNAc或半乳糖的配體的實例描述於美國專利案號7,491,805;8,106,022;和8,877,917;美國專利公開案號20030130186;和WIPO公開案號WO 2013166155中,所有這些文獻均藉由引用以其全文特此併入。
在某些實施方式中,配體包含多價碳水化合物部分。如本文所用,「多價碳水化合物部分」係指包含能夠獨立地與其他分子結合或相互作用的兩個或更多個碳水化合物單元的部分。例如,多價碳水化合物部分包含兩個或更多個由碳水化合物組成的結合結構域,其可以結合兩個或更多個不同分子或同一分子上的兩個或更多個不同位點。碳水化合物部分的化合價表示該碳水化合物部分內的單個結合結構域的數目。例如,關於碳水化合物部分的術語「一價」、「二價」、「三價」和「四價」分別係指具有一個、兩個、三個和四個結合結構域的碳水化合物部分。多價碳水化合物部分可以包含多價乳糖部分、多價半乳糖部分、多價葡萄糖部分、多價N-乙醯基-半乳胺糖部分、多價N-乙醯基-葡糖胺部分、多價甘露糖部分、或多價岩藻糖部分。在一些實施方式中,配體包含多價半乳糖部分。在其他實施方式中,配體包含多價N-乙醯基-半乳胺糖部分。在該等和其他實施方式中,多價碳水化合物部分可為二價、三價或四價的。在這樣的實施方式中,多價碳水化合物部分可為雙觸角或三觸角的。在一些實施方式中,多價N-乙醯基-半乳胺糖部分為三價或四價的。在一些實施方式中,多價半乳糖部分為三價或四價的。用於摻入RNAi構建體中的示例性含三價和四價GalNAc的配體在下文詳細描述。
配體可以直接或間接地附接或綴合到RNAi構建體至RNA分子上。例如,在一些實施方式中,配體直接共價附接至RNAi構建體的有義股或反義股。在其他實施方式中,配體經由連接子共價附接至RNAi構建體的有義股或反義股。配體可以附接至RNAi構建體的多核苷酸(例如有義股或反義股)的核鹼基、糖部分或核苷酸間鍵。與嘌呤核鹼基或其衍生物的綴合或附接可發生在包括環內和環外原子在內的任何位置。在某些實施方式中,嘌呤核鹼基的2位置、6位置、7位置或8位置附接至配體。與嘧啶核鹼基或其衍生物的綴合或附接還可發生在任何位置處。在一些實施方式中,嘧啶核鹼基的2位置、5位置和6位置可以附接至配體。與核苷酸的糖部分的綴合或附接可以發生在任何碳原子處。可以附接至配體的糖部分的示例性碳原子包括2'、3'、和5'碳原子。1'位置也可以附接至配體,如在無鹼基核苷酸中。核苷酸間鍵還可以支持配體附接。對於含磷鍵(例如,磷酸二酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、胺基磷酸酯等),配體可直接附接至磷原子或與磷原子鍵合的O、N或S原子上。對於含胺或醯胺的核苷間鍵(例如PNA),配體可附接至胺或醯胺的氮原子或附接至相鄰碳原子。
在一些實施方式中,配體可以附接至有義股或反義股的3'或5'端。在某些實施方式中,配體共價附接至有義股的5'端。在這樣的實施方式中,配體附接至有義股的5'-末端核苷酸。在該等和其他實施方式中,配體附接在有義股的5'-末端核苷酸的5'-位置處。在其中反向無鹼基核苷酸係有義股的5'-末端核苷酸並且經由5'-5'核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸的實施方式中,配體可以附接在反向無鹼基核苷酸的3'-位置處。在其他實施方式中,配體共價附接至有義股的3'端。例如,在一些實施方式中,配體附接至有義股的3'-末端核苷酸。在某些這樣的實施方式中,配體附接在有義股的3'-末端核苷酸的3'-位置處。在其中反向無鹼基核苷酸係有義股的3'-末端核苷酸並且經由3'-3'核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸的實施方式中,配體可以附接在反向無鹼基核苷酸的5'-位置處。在可替代實施方式中,配體附接在有義股的3'端附近,但在一或多個末端核苷酸之前(即在1、2、3或4個末端核苷酸之前)。在一些實施方式中,配體附接在有義股的3'-末端核苷酸的糖的2'-位置處。在其他實施方式中,配體附接在有義股的5'-末端核苷酸的糖的2'-位置處。
在某些實施方式中,配體經由連接子附接至有義股或反義股。「連接子」係使配體共價連接至RNAi構建體的多核苷酸組分的原子或基團。連接子可為約1至約30個原子的長度、約2至約28個原子的長度、約3至約26個原子的長度、約4至約24個原子的長度、約6至約20個原子的長度、約7至約20個原子的長度、約8至約20個原子的長度、約8至約18個原子的長度、約10至約18個原子的長度、以及約12至約18個原子的長度。在一些實施方式中,連接子可以包含雙官能連接部分,其通常包含具有兩個官能基的烷基部分。選擇官能基中之一個以結合目的化合物(例如RNAi構建體的有義股或反義股),且選擇另一個以基本上結合任何選定基團,如本文所述之配體。在某些實施方式中,連接子包含重複單元,諸如乙二醇或胺基酸單元的鏈結構或寡聚物。典型地用於雙官能連接部分的官能基的實例包括但不限於用於與親核基團反應的親電子試劑和用於與親電子基團反應的親核試劑。在一些實施方式中,雙官能連接部分包括胺基、羥基、羧酸、硫醇、不飽和度(例如雙鍵或三鍵)等。
可用於將配體附接至RNAi構建體中的有義股或反義股的連接子包括但不限於吡咯啶、8-胺基-3,6-二氧雜辛酸、4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸琥珀醯亞胺酯、6-胺基己酸、經取代的C
1-C
10烷基、經取代的或未經取代的C
2-C
10烯基、或者經取代的或未經取代的C
2-C
10炔基。這樣的連接子的合適的取代基基團包括但不限於羥基、胺基、烷氧基、羧基、苄基、苯基、硝基、硫醇、硫代烷氧基、鹵素、烷基、芳基、烯基和炔基。
在某些實施方式中,連接子為可切割的。可切割連接子為在細胞外足夠穩定,但是在進入靶細胞後經切割以釋放連接子保持在一起的兩個部分的連接子。在一些實施方式中,可切割連接子在靶細胞中或在第一參考條件(其可以例如經選擇以模擬或代表細胞內條件)下比在受試者血液中或在第二參考條件(其可以例如經選擇以模擬或代表在血液或血清中發現的條件)下切割快至少10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或更多倍、或至少100倍。
可切割連接子易受切割劑(例如pH、氧化還原電位或降解性分子的存在)影響。通常,切割劑在細胞內比在血清或血液中更普遍或以更高水平或活性被發現。這樣的降解劑的實例包括:經選擇用於特定底物或不具有底物特異性的氧化還原劑,包括例如存在於細胞中的氧化或還原酶或還原劑(如硫醇),其可藉由還原來使氧化還原可切割連接子降解;酯酶;可形成酸性環境的內體或藥劑,例如產生pH為五或更低的那些;藉由充當一般酸來使酸可切割連接子水解或降解的酶、肽酶(可為底物特異性的)、和磷酸酶。
可切割的連接子可包含對pH敏感的部分。人血清的pH為7.4,而平均細胞內pH略低,範圍為從約7.1-7.3。內體具有更高酸性pH,在5.5-6.0範圍內,且溶酶體具有約5.0的甚至更高酸性pH。一些連接子將具有可切割基團,其在較佳的pH下切割,從而將RNA分子自配體釋放到細胞內,或進入細胞的所需區室。
連接子可包括可由特定酶切割的可切割基團。摻入連接子中的可切割基團的類型可取決於待靶向的細胞。例如,肝靶向配體可以藉由包括酯基的連接子連接至RNA分子。肝臟細胞富含酯酶,且因此連接子在肝臟細胞中將比在不富含酯酶的細胞類型中更有效地切割。富含酯酶的其他類型的細胞包括肺、腎皮質和睪丸的細胞。當靶向富含肽酶的細胞(例如肝臟細胞和滑膜細胞)時,可以使用含有肽鍵的連接子。
通常,可以藉由測試降解劑(或條件)切割候選連接子的能力來評估候選可切割連接子的適用性。還期望還測試候選可切割連接子在血液中或當與其他非靶組織接觸時抵抗切割的能力。因此,可以確定第一條件與第二條件之間對切割的相對易感性,其中第一條件經選擇為指示靶細胞中的切割,而第二條件經選擇為指示其他組織或生物流體(例如血液或血清)中的切割。評估可以在無細胞系統、細胞、細胞培養物、器官或組織培養物或整個動物中進行。在無細胞或培養條件下進行初步評估且藉由對整個動物進行進一步評估來確認可能是有用的。在一些實施方式中,有用候選連接子在細胞中(或者在被選擇用於模擬細胞內條件的體外條件下)的切割,與在血液或血清中(或者在模擬細胞外條件的體外條件下)相比,至少快2、4、10、20、50、70或100倍。
在其他實施方式中,使用氧化還原可切割連接子。氧化還原可切割連接子在還原或氧化時切割。還原性可切割基團的實例係二硫連接基團(-S-S-)。為了確定候選可切割連接子是否是合適的「還原性可切割連接子」或者例如是否適合與特定RNAi構建體和特定配體一起使用,可以採用本文所述之一或多種方法。例如,可以藉由與二硫蘇糖醇(DTT)或本領域已知的其他還原劑一起孵育來評價候選連接子,其模擬將在細胞(例如靶細胞)中觀察到的切割速率。候選連接子也可以在經選擇以模擬血液或血清條件的條件下進行評價。在特定實施方式中,候選連接子在血液中切割至多10%。在其他實施方式中,與在血液中(或者在經選擇以模擬細胞外條件的條件下)相比,有用的候選連接子在細胞中(或者在經選擇以模擬細胞內條件的體外條件下)的降解至少快2、4、10、20、50、70、或100倍。
在又其他實施方式中,採用被降解或水解磷酸酯基團的藥劑切割的基於磷酸酯的可切割連接子來使配體共價附接至RNAi構建體的有義股或反義股。水解細胞中的磷酸酯基團的試劑的實例為酶,例如細胞中的磷酸酶。基於磷酸酯的可切割基團的實例係-O-P(O)(ORk)-O-、-O-P(S)(ORk)-O-、-O-P(S)(SRk)-O-、-S-P(O)(ORk)-O-、-O-P(O)(ORk)-S-、-S-P(O)(ORk)-S-、-O-P(S)(ORk)-S-、-S-P(S)(ORk)-O-、-O-P(O)(Rk)-O-、-O-P(S)(Rk)-O-、-S-P(O)(Rk)-O-、-S-P(S)(Rk)-O-、-S-P(O)(Rk)-S-和-O-P(S)(Rk)-S-,其中Rk可為氫或C
1-C
10烷基。特定實施方式包括-O-P(O)(OH)-O-、-O-P(S)(OH)-O-、-O-P(S)(SH)-O-、-S-P(O)(OH)-O-、-O-P(O)(OH)-S-、-S-P(O)(OH)-S-、-O-P(S)(OH)-S-、-S-P(S)(OH)-O-、-O-P(O)(H)-O-、-O-P(S)(H)-O-、-S-P(O)(H)-O-、-S-P(S)(H)-O-、-S-P(O)(H)-S-和-O-P(S)(H)-S-。另一特定實施方式為-O-P(O)(OH)-O-。這些候選連接子可以使用與上述那些類似的方法評估。
在其他實施方式中,連接子可包含酸可切割基團,該等基團為在酸性條件下切割的基團。在一些實施方式中,酸可切割基團在pH為約6.5或更低(例如,約6.0、5.5、5.0或更低)的酸性環境中被切割,或藉由試劑如可充當一般酸的酶來切割。在細胞中,特定的低pH細胞器,例如內體和溶酶體,可以為酸可切割基團提供切割環境。酸可切割連接基團的實例包括但不限於腙、酯和胺基酸酯。酸可切割基團可具有通式-C=NN-、C(O)O或-OC(O)。當附接至酯的氧(烷氧基基團)的碳係芳基基團時,特定實施方式係經取代的烷基基團或三級烷基基團(如二甲基、戊基或三級丁基)。這些候選物可以使用與上述那些類似的方法評估。
在其他實施方式中,連接子可包含基於酯的可切割基團,該等基團藉由細胞中的酶,例如酯酶和醯胺酶來切割。基於酯的可切割基團的實例包括但不限於伸烷基、亞烯基和亞炔基的酯。酯可切割基團具有通式-C(O)O-或-OC(O) -。這些候選連接子可以使用與上述那些類似的方法評估。
在其他實施方式中,連接子可以包含基於肽的可切割基團,該等基團藉由細胞中的酶,例如肽酶和蛋白酶來切割。基於肽的可切割基團為在胺基酸之間形成的肽鍵,以產生寡肽(例如,二肽、三肽)和多肽。基於肽的可切割基團包括醯胺基(-C(O)NH-)。醯胺基可以在任何伸烷基、亞烯基或亞炔基之間形成。肽鍵為在胺基酸之間形成的特殊類型的醯胺鍵,以產生肽和蛋白質。基於肽的切割基團通常限於在產生肽和蛋白質的胺基酸之間所形成的肽鍵(即,醯胺鍵)。基於肽的可切割連接基團具有通式-NHCHR
AC(O)NHCHR
BC(O)-,其中R
A和R
B係兩個相鄰胺基酸的側鏈。這些候選物可以使用與上述那些類似的方法評估。
適合於將配體附接到RNAi構建體中的有義股或反義股的其他類型的連接子為本領域已知的,且可以包括以下中描述的連接子:美國專利案號7,723,509;8,017,762;8,828,956;8,877,917;和9,181,551,所有這些均藉由引用以其全文特此併入。
在某些實施方式中,共價附接至RNAi構建體的有義股或反義股的配體包含GalNAc部分,例如多價GalNAc部分。在一些實施方式中,多價GalNAc部分係三價GalNAc部分,並且與有義股的3'端附接。在其他實施方式中,多價GalNAc部分係三價GalNAc部分,並且與有義股的5'端附接。在又其他實施方式中,多價GalNAc部分係四價GalNAc部分,並且與有義股的3'端附接。在仍其他實施方式中,多價GalNAc部分係四價GalNAc部分,並且與有義股的5'端附接。
在某些實施方式中,RNAi構建體包含具有以下結構([結構1])的配體:
在較佳的實施方式中,將具有此結構的配體經由連接子(如本文所述之連接子)共價附接至有義股的5'端(例如附接至有義股的5'末端核苷酸)。在一個實施方式中,連接子係胺基己基連接子。
以下結構式I-IX中提供了可以附接至RNAi構建體中的雙股RNA分子的示例性三價和四價GalNAc部分和連接子。本文列出的式中的「Ac」代表乙醯基基團。
在一個實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式I的結構的配體和連接子,其中每個n獨立地是1至3,k係1至3,m係1或2,j係1或2,並且配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的3'端:
式I
在另一個實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式II的結構的配體和連接子,其中每個n獨立地是1至3,k係1至3,m係1或2,j係1或2,並且配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的3'端:
式II
在又另一個實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式III的結構的配體和連接子,其中配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的3'端:
式III
在仍另一個實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式IV的結構的配體和連接子,其中配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的3'端:
式IV
在某些實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式V的結構的配體和連接子,其中每個n獨立地是1至3,k係1至3,並且配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的5'端:
式V
在其他實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式VI的結構的配體和連接子,其中每個n獨立地是1至3,k係1至3,並且配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的5'端:
式VI
在一些實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式VII的結構的配體和連接子,其中X = O或S,並且其中配體附接至雙股RNA分子(由彎曲線表示)的有義股的5'端:
式VII
在一些實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式VIII的結構的配體和連接子,其中每個n獨立地是1至3,並且配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的5'端:
式VIII
在某些實施方式中,RNAi構建體包含具有以下式IX的結構的配體和連接子,其中配體附接至雙股RNA分子(由實的波浪線表示)的有義股的5'端:
式IX
硫代磷酸酯鍵可以由式I-IX中任一個所示的磷酸二酯鍵取代,以將配體和連接子共價附接至核酸股。
藥物組成物
本申請還包括藥物組成物和配製物,其包含本文所述之RNAi構建體和藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。這樣的組成物和配製物可用於在有需要的患者中降低
FAM13A基因和FAM13A蛋白的表現。當考慮臨床應用時,將以適合於預期應用的形式製備藥物組成物和配製物。通常,這將需要製備基本上不含熱原以及可能對人或動物有害的其他雜質的組成物。
短語「藥學上可接受的」或「藥理學上可接受的」係指在投與於動物或人類時不產生不良反應、過敏反應或其他不利反應的分子實體和組成物。如本文所用,「藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑」包括可接受的用於配製藥物(如適合於向人投與的藥物)的溶劑、緩衝液、溶液、分散介質、包衣、抗細菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。這些介質和試劑用於藥學上活性物質的用途為本領域熟知的。除非任何常規介質或藥劑與揭露的RNAi構建體不相容,否則考慮將其用於治療組成物中。補充的活性成分也可以摻入組成物中,只要它們不使組成物的RNAi構建體失活。
用於配製藥物組成物的組成物和方法取決於許多標準,包括但不限於投與途徑、待治療的疾病或障礙的類型和程度、或投與劑量。在一些實施方式中,基於預期遞送途徑配製藥物組成物。例如,在某些實施方式中,配製藥物組成物以用於腸胃外遞送。腸胃外遞送形式包括靜脈內、動脈內、皮下、鞘內、腹膜內或肌內注射或輸注。在一個實施方式中,配製藥物組成物以用於靜脈內遞送。在此實施方式中,藥物組成物可包括基於脂質的遞送媒介物。在另一個實施方式中,配製藥物組成物以用於皮下遞送。在這樣的實施方式中,藥物組成物可包括靶向配體(例如本文所述之含有GalNAc、含有脂肪酸或含有抗體的配體)。
在一些實施方式中,藥物組成物包含有效量的本文所述RNAi構建體。「有效量」係足以產生有益或期望的臨床結果的量。在一些實施方式中,有效量係足以降低患者的特定組織或細胞類型(例如肝臟或肝細胞或脂肪組織)中
FAM13A基因表現的量。RNAi構建體的有效量可為約0.01 mg/kg體重至約100 mg/kg體重,且可每日、每週、每月投與或以更長的時間間隔投與。準確確定有效量和投與頻率可以基於若干因素,包括患者大小、年齡和一般狀況、待治療的障礙類型(例如脂肪性肝病、肝纖維化或心血管疾病)、使用的RNAi構建體和投與途徑。
投與所揭露的藥物組成物可以經由任何常規途徑,只要靶組織可經由該途徑獲得。這樣的途徑包括但不限於腸胃外(例如皮下、肌內、腹膜內或靜脈內)、口服、經鼻、經頰、皮內、透皮和舌下途徑、或者藉由直接注射入組織(例如,肝臟或脂肪)或藉由肝門靜脈遞送。在一些實施方式中,腸胃外投與藥物組成物。例如,在某些實施方式中,靜脈內投與藥物組成物。在其他實施方式中,皮下投與藥物組成物。
膠體分散系統(如大分子複合物、奈米膠囊、微球、珠粒)和基於脂質的系統(包括水包油乳劑、膠束、混合膠束和脂質體)可用作RNAi構建體的遞送媒介物。適於遞送核酸的可商購脂肪乳劑包括:Intralipid
®(百特國際有限公司(Baxter International Inc.))、Liposyn
®(雅培製藥公司(Abbott Pharmaceuticals))、Liposyn
®II(赫升瑞公司(Hospira))、Liposyn
®III(赫升瑞公司)、Nutrilipid(貝朗醫療公司(B. Braun Medical Inc.))、和其他類似的脂質乳劑。用作體內遞送媒介物的示例性膠體系統係脂質體(即,人工膜囊)。RNAi構建體可被封裝於脂質體內或者可與其形成複合體,特別是陽離子脂質體。可替代地,RNAi構建體可以與脂質複合,特別是與陽離子脂質複合。合適的脂質和脂質體包括中性(例如二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOPE)、二肉豆蔻醯基磷脂醯膽鹼(DMPC)和二棕櫚醯磷脂醯膽鹼(DPPC))、二硬脂醯磷脂醯膽鹼)、陰性(例如二肉豆蔻醯磷脂醯甘油(DMPG))、和陽離子型(例如二油醯基四甲基胺基丙基(DOTAP)和二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOTMA))。這樣的膠體分散系統的製備和使用在本領域中係熟知的。示例性的配製物還揭露於美國專利案號5,981,505;美國專利案號6,217,900;美國專利案號6,383,512;美國專利案號5,783,565;美國專利案號7,202,227;美國專利案號6,379,965;美國專利案號6,127,170;美國專利案號5,837,533;美國專利案號6,747,014;和WIPO公開案號WO 03/093449中。
在一些實施方式中,RNAi構建體被完全地封裝於脂質配製物中,例如以形成SNALP或其他核酸-脂質顆粒。如本文所用,術語「SNALP」係指穩定的核酸-脂質顆粒。SNALP典型地含有陽離子脂質、非陽離子脂質、和防止顆粒聚集的脂質(例如PEG-脂質綴合物)。SNALP對於全身應用特別有用,因為它們在靜脈內注射後展現出循環壽命延長,並且在遠端部位(例如與投與部位物理分離的部位)積累。核酸-脂質顆粒典型地具有約50 nm至約150 nm、約60 nm至約130 nm、約70 nm至約110 nm、或約70 nm至約90 nm的平均直徑,且基本上無毒。另外,核酸當存在於核酸-脂質顆粒中時在水溶液中對用核酸酶的降解具有抗性。核酸-脂質顆粒及其製備方法揭露於例如美國專利案號5,976,567;5,981,501;6,534,484;6,586,410;6,815,432;和WIPO公開案號WO 96/40964中。
適於可注射使用的藥物組成物包括例如無菌水溶液或分散液和用於臨時製備無菌可注射溶液或分散液的無菌粉末。通常,這些製劑為無菌的且流動到易於注射的程度。製劑在製造和儲存條件下應保持穩定,且應防止微生物諸如細菌和真菌的污染作用。合適的溶劑或分散介質可以含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、和液體聚乙二醇等)、其合適的混合物和植物油。可以例如藉由使用包衣(如卵磷脂)、藉由維持所需的粒度(在分散液的情況下)和/或藉由使用界面活性劑來維持適當的流動性。對微生物作用的預防可以藉由各種抗細菌劑和抗真菌劑(例如對羥苯甲酸酯、氯丁醇、酚、山梨酸、硫柳汞等)來實現。在許多情況下,較佳的是包括等滲劑,例如糖或氯化鈉。可注射組成物的延長吸收可以藉由在組成物中使用吸收延遲劑(例如,單硬脂酸鋁和明膠)來實現。
無菌可注射溶液可以藉由將活性化合物按需要以適當量與任何其他成分(例如以上列舉的)一起併入溶劑中,然後過濾滅菌來製備。通常,藉由將各種滅菌的活性成分摻入無菌媒介物中來製備分散液,該無菌媒介物含有基礎分散介質和希望的其他成分,例如如上所列舉的。在用於製備無菌注射溶液的無菌粉末情況下,較佳的製備方法包括真空乾燥和冷凍乾燥技術,該等技術產生一或多種活性成分加來自其先前無菌過濾溶液的任何另外的希望的成分的粉末。
本申請的組成物通常可以配製成中性或鹽形式。藥學上可接受的鹽包括例如衍生自無機酸(例如鹽酸或磷酸)或衍生自有機酸(例如乙酸、草酸、酒石酸、苦杏仁酸等)的酸加成鹽(由游離胺基基團形成)。用游離羧基基團形成的鹽還可衍生自無機鹼(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵)或有機鹼(例如異丙胺、三甲胺、組胺酸、普魯卡因等)。藥學上可接受的鹽詳細描述於Berge等人, J. Pharmaceutical Sciences [藥物科學雜誌], 第66卷: 1-19, 1977中。
例如對於在水溶液中的腸胃外投與,通常將溶液適當地緩衝,且首先例如用足夠的鹽水或葡萄糖使液體稀釋劑等滲。這樣的水溶液可用於例如靜脈內、肌內、皮下和腹膜內投與。較佳的是,如熟悉該項技術者已知的,特別是根據本揭露,使用無菌含水介質。舉例說明,可將單劑量溶解於1 mL等滲NaCl溶液中,並添加到1000 mL皮下注射液中或在所建議輸注部位注射(參見例如「Remington’s Pharmaceutical Sciences [雷明頓製藥科學]」 第15版, 第1035-1038頁和第1570-1580頁)。對於人投與,製劑應符合FDA標準所要求的無菌、產熱原性、一般安全性和純度標準。在某些實施方式中,藥物組成物包含無菌鹽水溶液和本文所述之RNAi構建體或由其組成。在其他實施方式中,藥物組成物包含本文所述之RNAi構建體和無菌水(例如注射用水,WFI),或由其組成。在仍其他實施方式中,藥物組成物包含本文所述之RNAi構建體和磷酸鹽緩衝液(PBS),或由其組成。
在一些實施方式中,藥物組成物與用於投與的裝置一起包裝或儲存於該裝置內。用於可注射配製物的裝置包括但不限於注射口、預充式注射器、自動注射器、注射泵、隨身注射器和注射筆。用於霧化或粉末配製物的裝置包括但不限於吸入器、吹入器、吸氣器等。因此,一些實施方式包含投與裝置,該等投與裝置包含所揭露的用於治療或預防一或多種本文所述之疾病或障礙的藥物組成物。
所揭露的 RNAi 構建體之用途和使用該等構建體之方法
本申請提供了藉由使細胞與本文所述之任何一種RNAi構建體接觸來減少或抑制該細胞(例如肝臟細胞或脂肪細胞)中
FAM13A基因的表現以及從而減少或抑制FAM13A蛋白的產生的方法。該細胞可以是體外或體內的。任何能夠測量
FAM13AmRNA或FAM13A蛋白的方法可用於評估RNAi構建體的功效。如本文所用,術語「FAM13A表現」和「FAM13A的表現」係指
FAM13A基因轉錄的水平、存在的
FAM13AmRNA的量、FAM13A翻譯的水平和存在的FAM13A蛋白的量。因此,可以藉由測量
FAM13AmRNA、FAM13A蛋白或與FAM13A表現相關的另一生物標誌物的量或水平(如三酸甘油酯、膽固醇或胰島素的血清或血漿水平)來評估FAM13A的表現。如本文所用,短語「FAM13A表現的降低」係指
FAM13A基因轉錄的水平、存在的
FAM13AmRNA的量、FAM13A翻譯的水平和存在的FAM13A蛋白的量中之一或多個的降低。
可以相對於未用RNAi構建體處理或用對照RNAi構建體處理的細胞或動物中的FAM13A表現來確定用RNAi構建體處理的細胞或動物中的FAM13A表現的降低。例如,在一些實施方式中,藉由如下方式對FAM13A表現的降低進行評估:(a) 測量在用RNAi構建體處理的細胞(例如,肝臟或脂肪細胞)中
FAM13AmRNA的量或水平;(b) 測量用對照RNAi構建體(例如,針對細胞中未表現的RNA分子的RNAi構建體、或者具有無義序列或加擾序列的RNAi構建體)處理或者不用構建體處理的細胞(例如,肝臟或脂肪細胞)中
FAM13AmRNA的量或水平;和 (c) 比較來自 (a) 中經處理細胞的經測量
FAM13AmRNA水平與來自 (b) 中對照細胞的經測量
FAM13AmRNA水平。在比較之前,可以將經處理細胞和對照細胞中的
FAM13AmRNA水平相對於對照基因(例如18S核糖體RNA或管家基因)的RNA水平歸一化。可以藉由多種方法來測量
FAM13AmRNA水平,該等方法包括北方墨點轉漬法分析、核酸酶保護測定、螢光原位雜交(FISH)、反轉錄酶(RT)-PCR、即時RT-PCR、定量PCR、微滴式數位PCR等。
在其他實施方式中,藉由如下方式對FAM13A表現的降低進行評估:(a) 測量在用RNAi構建體處理的細胞(例如,肝臟或脂肪細胞)中FAM13A蛋白的量或水平;(b) 測量用對照RNAi構建體(例如,針對細胞中未表現的RNA分子的RNAi構建體、或者具有無義序列或加擾序列的RNAi構建體)處理或者不用構建體處理的細胞(例如,肝臟或脂肪細胞)中FAM13A蛋白的量或水平;和 (c) 比較來自 (a) 中經處理細胞的經測量FAM13A蛋白水平與來自 (b) 中對照細胞的經測量FAM13A蛋白水平。測量FAM13A蛋白水平的方法為熟悉該項技術者已知,並且包括西方墨點法、免疫測定(例如ELISA)和流動式細胞分析術。
在一些實施方式中,評估FAM13A表現水平的方法在體外在天然表現FAM13A的細胞(例如肝臟或脂肪細胞)或者已被工程化以表現FAM13A的細胞中進行。在某些實施方式中,該等方法在體外在肝臟細胞或脂肪細胞中進行。合適的肝臟細胞包括但不限於原代肝細胞(例如人或非人靈長類動物的肝細胞)、HepAD38細胞、HuH-6細胞、HuH-7細胞、HuH-5-2細胞、BNLCL2細胞、Hep3B細胞或HepG2細胞。在一個實施方式中,肝臟細胞為HuH-7細胞。在另一個實施方式中,肝臟細胞為人原代肝細胞。在又另一個實施方式中,肝臟細胞為Hep3B細胞。合適的脂肪細胞包括來自皮下白色脂肪組織(scWAT)的細胞、來自附睪白色脂肪組織(eWAT)的細胞或3T3-L1細胞。
在其他實施方式中,評估FAM13A表現水平的方法在體內進行。RNAi構建體和任何對照RNAi構建體可以投與至動物且在治療後,在自動物收穫的肝臟或脂肪組織中評估
FAM13AmRNA或FAM13A蛋白水平。可替代地或另外地,可以在經處理的動物中對與FAM13A表現相關的生物標誌物或功能表現型進行評估。例如,具有
FAM13A表現降低的FAM13A變體的人也具有降低的血清三酸甘油酯和升高的HDL膽固醇,並且具有
FAM13A表現升高的FAM13A變體的人也具有升高的三酸甘油酯和降低的HDL膽固醇(
圖 1)。另外,FAM13A的表現與空腹胰島素水平顯著相關。Fathzadeh等人, Nature Communications [自然通訊] 11, 1465 (2020)。因此,在一些實施方式中,FAM13A敲低的目標和結果係降低三酸甘油酯、膽固醇或胰島素的血清或血漿水平,並且可以在用RNAi構建體處理的動物中測量這樣的降低以評估降低FAM13A表現的功能性功效。
在某些實施方式中,RNAi構建體將
FAM13AmRNA或蛋白質在肝臟或脂肪細胞中的表現降低至少40%、至少45%、或至少50%。在一些實施方式中,RNAi構建體將
FAM13AmRNA或蛋白質在肝臟或脂肪細胞中的表現降低至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、或至少85%。在其他實施方式中,RNAi構建體將
FAM13AmRNA或蛋白質在肝臟或脂肪細胞中的表現降低約90%或更多,例如91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、或更多。FAM13A表現的降低百分比可藉由本文所述之任何方法以及本領域已知的其他方法測量。
本申請提供用於在有需要的患者中降低或抑制
FAM13A基因的表現並由此降低FAM13A蛋白的產生的方法,以及治療或預防與FAM13A表現或活性相關的病症、疾病或障礙的方法。「與FAM13A表現相關的病症、疾病或障礙」係指其中FAM13A表現水平被改變或者其中FAM13A表現水平的升高與患上病症、疾病或障礙的風險增加相關的病症、疾病或障礙。與FAM13A表現相關的病症、疾病或障礙也可包括由脂蛋白代謝異常變化導致的病症、疾病或障礙,如導致膽固醇、脂質、三酸甘油酯等水平異常或升高或該等分子的清除削弱的變化。在某些實施方式中,RNAi構建體對於治療或預防腹部脂肪過多、脂肪性肝病(例如NAFLD和NASH)和心血管疾病(例如冠狀動脈疾病和心肌梗塞)以及降低肝纖維化和血清膽固醇水平特別有用。
根據該等方法可治療或預防的與FAM13A表現相關的病症、疾病和障礙包括但不限於脂肪性肝病,如酒精性脂肪性肝病、腹部脂肪過多、酒精性脂肪性肝炎、NAFLD和NASH;慢性肝病;肝硬化;心血管疾病,如心肌梗塞、心臟衰竭、中風(缺血性和出血性)、動脈粥樣硬化、冠狀動脈疾病、外周血管疾病(例如外周動脈疾病)、腦血管疾病、易損斑塊和主動脈瓣狹窄;家族性高膽固醇血症;靜脈血栓形成;高膽固醇血症;高脂血症;和血脂異常(表現為例如,總膽固醇升高、低密度脂蛋白(LDL)升高、極低密度脂蛋白(VLDL)升高、三酸甘油酯升高、和/或高密度脂蛋白(HDL)的低水平)。
在某些實施方式中,本申請提供用於在有需要的患者中降低FAM13A蛋白的表現的方法,該方法包括向該患者投與本文所述之任何RNAi構建體。如本文所用,術語「患者」係指哺乳動物,包括人,且可與術語「受試者」互換使用。較佳的是,與未接受RNAi構建體的患者中的FAM13A表現水平或與投與RNAi構建體之前患者中的FAM13A表現水平相比,在投與RNAi構建體後,患者肝細胞中的FAM13A表現水平降低。在一些實施方式中,在投與RNAi構建體之後,患者中的FAM13A表現降低至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少為55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、或至少90%,例如91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%。FAM13A表現的降低百分比可藉由本文所述之任何方法以及本領域已知的其他方法測量。
在一些實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係有患心肌梗塞的風險的患者。有患心肌梗塞的風險的患者可能是有心肌梗塞病史的患者(例如,以前患過心肌梗塞)。有患心肌梗塞的風險的患者也可能是有心肌梗塞家族史或有一或多個心肌梗塞風險因素的患者。這樣的風險因素包括但不限於高血壓、非HDL膽固醇水平升高、三酸甘油酯水平升高、糖尿病、肥胖、或自體免疫性疾病(例如類風濕性關節炎、狼瘡)史。在一個實施方式中,有患心肌梗塞的風險的患者係患有或被診斷患有冠狀動脈疾病的患者。藉由向患者投與本文所述之任何RNAi構建體,可以降低該等和其他患者的心肌梗塞的風險。因此,用於降低有需要的患者中的心肌梗塞的風險的方法包括向該患者投與本文所述之RNAi構建體。在一些實施方式中,本文所述之任何RNAi構建體可用於製備用於在有需要的患者中降低心肌梗塞的風險的藥物。一些實施方式包含用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中降低心肌梗塞的風險。
在某些實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係被診斷患有心血管疾病或有患心血管疾病的風險的患者。因此,用於在有需要的患者中治療或預防心血管疾病的方法包括投與任何RNAi構建體。在一些實施方式中,本文所述之任何RNAi構建體可用於製備用於在有需要的患者中治療或預防心血管疾病的藥物。一些實施方式包含可用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中治療或預防心血管疾病。心血管疾病包括但不限於心肌梗塞、心臟衰竭、中風(缺血性和出血性)、動脈粥樣硬化、冠狀動脈疾病、外周血管疾病(例如外周動脈疾病)、腦血管疾病、易損斑塊和主動脈瓣狹窄。在一些實施方式中,根據所揭露的方法治療或預防的心血管疾病係冠狀動脈疾病。在其他實施方式中,根據所揭露的方法治療或預防的心血管疾病係心肌梗塞。在又其他實施方式中,根據所揭露的方法治療或預防的心血管疾病係中風。在仍其他實施方式中,根據所揭露的方法治療或預防的心血管疾病係外周動脈疾病。在某些實施方式中,投與本文所述之RNAi構建體降低了心臟病患者發生非致命性心肌梗塞、致命性和非致命性中風、某些類型的心臟手術(例如血管成形術、搭橋術)、心臟衰竭住院、胸痛的風險,和/或已確定心臟病患者的心血管事件(例如,既往心肌梗塞、既往心臟手術和/或有動脈阻塞的跡象的胸痛)。在一些實施方式中,投與本文所述之RNAi構建體可用於降低復發性心血管事件的風險。
在一些實施方式中,根據所揭露的方法治療的患者係具有易損斑塊(也稱為不穩定斑塊)的患者。易損斑塊係巨噬細胞和主要含有膽固醇的脂質的堆積,其位於動脈壁內皮襯裡下方。該等易損斑塊可能會破裂,導致形成血塊,從而可能潛在地阻礙動脈血液流動,並導致心肌梗塞或中風。易損斑塊可藉由本領域已知的方法鑒定,該等方法包括但不限於血管內超音波和電腦斷層掃描(參見Sahara等人, European Heart Journal [歐洲心臟雜誌], 第25卷: 2026-2033, 2004;Budhoff, J. Am. Coll.Cardiol. [美國心臟病學會雜誌], 第48卷: 319-321, 2006;Hausleiter等人, J. Am. Coll.Cardiol. [美國心臟病學會雜誌], 第48卷: 312-318, 2006)。
在其他實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係血液膽固醇水平(例如總膽固醇、非HDL膽固醇或LDL膽固醇)升高的患者。因此,在一些實施方式中,用於在有需要的患者中降低血液膽固醇水平(例如,血清或血漿)的方法包括向該患者投與本文所述之任何RNAi構建體。在一些實施方式中,本文所述之任何RNAi構建體可用於製備用於在有需要的患者中降低血液膽固醇水平(例如,血清或血漿)的藥物。一些實施方式包括用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中降低血液膽固醇水平(例如血清或血漿)。在某些實施方式中,根據所揭露的方法降低的膽固醇為LDL膽固醇。在其他實施方式中,根據所揭露的方法降低的膽固醇為非HDL膽固醇。非HDL膽固醇係所有含膽固醇的促動脈粥樣硬化脂蛋白的量度,該等脂蛋白包括LDL膽固醇、極低密度脂蛋白、中密度脂蛋白、脂蛋白(a)、乳糜微粒和乳糜微粒殘餘物。據報告,非HDL膽固醇係心血管風險的良好預測因子(Rana等人, Curr.Atheroscler.Rep. [當前動脈粥樣硬化報告], 第14卷:130-134, 2012)。非HDL膽固醇水平可以藉由從總膽固醇水平中減去HDL膽固醇水平來計算。
在一些實施方式中,待治療的患者係具有升高的非HDL膽固醇水平(例如,升高的血清或血漿非HDL膽固醇水平)的患者。理想情況下,任何給定患者的非HDL膽固醇水平應比LDL膽固醇水平的目標高出約30 mg/dL。在特定實施方式中,如果患者具有約130 mg/dL或更大的非HDL膽固醇水平,則向該患者投與RNAi構建體。在一個實施方式中,如果患者具有約160 mg/dL或更大的非HDL膽固醇水平,則向該患者投與RNAi構建體。在另一個實施方式中,如果患者具有約190 mg/dL或更大的非HDL膽固醇水平,則向該患者投與RNAi構建體。在仍另一個實施方式中,如果患者具有約220 mg/dL或更大的非HDL膽固醇水平,則向該患者投與RNAi構建體。在某些實施方式中,根據2013 ACC/AHA心血管風險評估指南,如果患者有患心血管疾病的高或極高風險(Goff等人, ACC/AHA guideline on the assessment of cardiovascular risk: a report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines [ACC/AHA心血管風險評估指南:美國心臟病學會/美國心臟協會實踐指南特別小組的報告]. J Am Coll Cardiol [美國心臟病學會雜誌], 第63卷:2935-2959, 2014),並且具有約100 mg/dL或更高的非HDL膽固醇水平,則向該患者投與RNAi構建體。
在某些實施方式中,根據2013 ACC/AHA心血管風險評估指南(本文稱為「2013指南」),如果患者有患心血管疾病的中等風險或更高風險,則向其投與本文所述之RNAi構建體。在某些實施方式中,如果患者的LDL膽固醇水平大於約160 mg/dL,則向該患者投與RNAi構建體。在其他實施方式中,如果患者的LDL膽固醇水平大於約130 mg/dL且根據2013指南,該患者有患心血管疾病的中等風險,則向該患者投與RNAi構建體。在仍其他實施方式中,如果患者的LDL膽固醇水平大於100 mg/dL且根據2013指南,該患者有患心血管疾病的高風險或極高風險,則向該患者投與RNAi構建體。
在其他實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係被診斷患有脂肪性肝病或有患脂肪性肝病的風險的患者。因此,用於在有需要的患者中治療、預防脂肪性肝病或降低患脂肪性肝病風險的方法包括向該患者投與所揭露的任何RNAi構建體。在一些實施方式中,本文所述之任何RNAi構建體可用於製備藥物,該藥物用於在有需要的患者中治療、預防脂肪性肝病或降低患脂肪性肝病的風險。其他實施方式包含用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中治療、預防脂肪性肝病或降低患脂肪性肝病的風險。脂肪性肝病係脂肪在肝臟中積累的病症。有兩種主要類型的脂肪性肝病:第一類與大量飲酒有關(酒精性脂肪性肝炎),第二類與飲酒無關(非酒精性脂肪性肝病(NAFLD))。NAFLD的典型特徵在於肝臟中存在脂肪積累,但很少或沒有炎症或肝臟細胞損傷。NAFLD可以進展到非酒精性脂肪性肝炎(NASH),其特徵在於肝臟炎症和細胞損傷,兩者又可以導致肝纖維化以及最終的肝硬化或肝癌。在某些實施方式中,待治療、預防或降低患病風險的脂肪性肝病係NAFLD。在其他實施方式中,待治療、預防或降低患病風險的脂肪性肝病係NASH。在仍其他實施方式中,待治療、預防或降低患病風險的脂肪性肝病係酒精性脂肪性肝炎。在一些實施方式中,需要治療或預防脂肪性肝病的患者或有患上脂肪性肝病的風險的患者已被診斷患有2型糖尿病、代謝障礙或肥胖(例如身體質量指數≥ 30.0)。在其他實施方式中,需要治療或預防脂肪性肝病的患者或有患上脂肪性肝病的風險的患者具有升高的非HDL膽固醇或三酸甘油酯水平。取決於患者和患者可能具有的其他風險因素,升高的非HDL膽固醇水平可能為約130 mg/dL或更高、約160 mg/dL或更高、約190 mg/dL或更高、或約220 mg/dL或更高。升高的三酸甘油酯水平可為約150 mg/dL或更大、約175 mg/dL或更大、約200 mg/dL或更大、或約250 mg/dL或更大。
在某些實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係被診斷患有肝纖維化或肝硬化或者有患肝纖維化或肝硬化的風險的患者。因此,一些實施方式包含用於在有需要的患者中治療、預防或減少肝纖維化的方法,該方法包括向該患者投與所揭露的任何RNAi構建體。一些實施方式包含本文所述之任何RNAi構建體在製備用於在有需要的患者中治療、預防或減少肝纖維化的藥物中之用途。一些實施方式包含可用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中治療、預防或減少肝纖維化。在一些實施方式中,有患肝纖維化或肝硬化的風險的患者被診斷患有NAFLD。在其他實施方式中,有患肝纖維化或肝硬化的風險的患者被診斷患有NASH。在又其他實施方式中,有患肝纖維化或肝硬化的風險的患者被診斷患有酒精性脂肪性肝炎。在仍其他實施方式中,有患肝纖維化或肝硬化的風險的患者被診斷患有肝炎。在某些實施方式中,投與所揭露的RNAi構建體預防或延遲患者患上肝硬化。
在其他實施方式中,需要降低FAM13A表現的患者係已被診斷患有腹部脂肪過多或腰臀比(WHR)高的患者。在一些實施方式中,需要降低的患者具有超過0.95、超過1.0、超過10.5或超過1.1的腰臀比。因此,在一些實施方式中,用於在有需要的患者中減少腹部脂肪過多或WHR的方法包括向該患者投與本文所述之任何RNAi構建體。在一些實施方式中,本文所述之任何RNAi構建體可用於製備用於在有需要的患者中減少腹部脂肪過多或WHR的藥物。一些實施方式包含用於在以下方法中使用的靶向
FAM13A的RNAi構建體,該方法用於在有需要的患者中減少腹部脂肪過多或WHR。
在一些實施方式中,使用特異性靶向肝臟的RNAi構建體來治療需要降低FAM13A表現的患者。在一些實施方式中,RNAi構建體藉由與包含N-乙醯基-半乳胺糖(GalNAc)的配體綴合而靶向。因此,在一些實施方式中,用於在有需要的患者中降低FAM13A水平的方法包括向該患者投與已與GalNAc綴合的本文所述之任何RNAi構建體。
一般術語和表現的定義
為了可更容易地理解本揭露,首先定義某些術語。除非另有定義,否則本文使用的所有技術和科學術語具有如本揭露所屬領域的普通技術者通常理解的相同含義。如本申請中所用,除非本文另外明確提供,否則以下術語中之每一個均應具有下文闡述的含義。另外的定義在整個申請中闡述。
單位、前標和符號均以它們的國際單位系統(SI)接受形式表示。
如在本揭露和申請專利範圍中所用,單數形式「一個/種(a、an)」以及「該(the)」包括複數形式,除非上下文另外清楚地指示。除非特別說明或從上下文中顯而易見,否則如本文所用,術語「或」應理解為具有包容性。如本文在短語如「A和/或B」中所用,術語「和/或」旨在包括「A和B」、「A或B」、「A」和「B」。同樣,如在短語如「A、B和/或C」中所用,術語「和/或」旨在涵蓋以下各實施方式:A、B和C;A、B或C;A或C;A或B;B或C;A和C;A和B;B和C;A(單獨);B(單獨);以及C(單獨)。
應理解,本文中用語言「包含」描述實施方式的任何地方,還提供了以「由……組成」和/或「基本上由……組成」的形式描述的類似實施方式。在本揭露中,「包含(comprises、comprising)」、「含有」和「具有」等可具有美國專利法賦予它們的含義,並且也可意指「包括(includes、including)」等;「基本上由……組成(consisting essentially of或consists essentially)」同樣具有美國專利法規定的含義,並且該術語係開放式的,允許存在比所敘述內容更多的內容,只要所敘述內容的基本或新穎特徵不因所敘述內容之外的內容的存在而改變,但不包括先前技術的實施方式。
術語「約」或「基本上由……構成(comprising essentially of)」係指由熟悉該項技術者確定的在特定值或組成的可接受誤差範圍內的值或組成,這將部分取決於如何測量或確定該值或組成,即測量系統的限制。例如,根據本領域的實踐,「約」或「基本上由……構成」可以意指在1或多於1的標準差內。可替代地,「約」或「基本上由……構成」可以意指高達20%的範圍。此外,特別是關於生物系統或過程,該等術語可意指高達一個數量級或高達值的5倍。當在本申請和申請專利範圍中提供特定的值或組成時,除非另有說明,否則「約」或「基本上由……構成」的含義應假定為在該特定值或組成的可接受的誤差範圍內。
本文提供的任何組成物或方法可以與本文提供的任何其他組成物和方法中之一或多種組合。
以下實例,包括進行的實驗和實現的結果,僅提供解釋說明目的,並且不應被解釋為限制所附申請專利範圍的範圍。
實例
實例 1 : FAM13A 的基因組及表現分析
進行基因組分析以考察三種常見的
FAM13A變體的關聯性,該分析考察該等變體與對BMI調整的WHR(WHRadjBMI)、三酸甘油酯水平、HDL膽固醇水平、收縮壓和皮下脂肪組織eQTL數據中FAM13A表現的關聯性。該分析的結果呈現在
圖 1中,並且顯示出三種
FAM13A變體獨立地與對BMI調整的WHR相關聯。
首先,訊息A變體rs
57400569-A係具有疾病保護性的內含子SNP,並且與HDL膽固醇升高以及WHR、三酸甘油酯和收縮壓降低相關。rs57400569-A與deCODE脂肪組織eQTL數據中FAM13A表現降低相關。rs57400569-A與FAM13A表現一致,與疾病狀態相關。該分析還證實了所報告的與血壓的關聯性,同時發現了先前未報告的與WHR、三酸甘油酯和HDL的關聯性。rs57400569-A亦為脂肪中的靠前順式eQTL變體。
接下來,訊息B變體rs
7657817-T係蛋白質編碼誤義變體,其與WHR和三酸甘油酯降低以及HDL膽固醇增加相關。rs7657817-T也具有疾病保護性,並且該分析證實了先前報告的文獻關聯性。
最後,訊息C變體rs
9991328-T係促進疾病的內含子SNP,並且與HDL膽固醇降低以及WHR、三酸甘油酯和deCODE脂肪組織eQTL數據中FAM13A表現增加相關。值得注意的是,在多項研究(5-10)中,
rs9991328與WHR具有強的、可重複的全基因組關聯研究(GWAS)關聯性,其中英國生物庫(UK Biobank)數據中報告了高度顯著的關聯性(p = 1 x 10
-51)(5)。另外,
rs9991328WHR升高對偶基因與空腹胰島素水平升高顯著相關(胰島素抗性的量度;p = 5.9 x 10
-21)。rs9991328-T促進疾病,並且該分析證實了先前報告的文獻關聯性。
腰臀比升高對偶基因與三酸甘油酯升高、HDL膽固醇降低、收縮壓升高和皮下脂肪組織中FAM13A表現增加相關。
實例 2 : siRNA 介導的鼠體內 Fam13a 敲低
為了測試Fam13a表現降低與WHR和CVD風險因素減少相關的假設,進行了一系列小鼠
Fam13asiRNA實驗。將
Fam13asiRNA綴合至棕櫚酸酯脂質(C16)或GalNAc(如下文實例3中所述進行附接),並測試該等分子在培養細胞中或在體內(即脂肪組織或肝臟)降低Fam13a表現的能力。用可商購的小鼠
Fam13asiRNA觸發物進行該等實驗。觸發物可從Ambion公司(s81721)或Dharmacon公司(J-041073-09)獲得,並製備為經修飾的siRNA雙股體。鼠siRNA雙股體序列為:
D-0001有義(SEQ ID NO: 2786) | GAAAGAUUCCAGGACGAU |
D-0001反義(SEQ ID NO: 2787) | UAUCGUCCUGGAAUCUUUCUG |
D-0002有義(SEQ ID NO: 2788) | GAAUCAAGAUGGUGAAGA |
D-0002反義(SEQ ID NO: 2789) | AUCUUCACCAUCUUGAUUCCUC |
D-0003有義(SEQ ID NO: 2790) | AGGAAUCAAGAUGGUGAAGA |
D-0003反義(SEQ ID NO: 2791) | AUCUUCACCAUCUUGAUUCCUCU |
將該等序列製備為經修飾的雙股體,如下所示。該等經修飾的雙股體的核苷酸序列適用以下符號:a、u、g、和c = 對應的2ʹ-O-甲基核糖核苷酸;Af、Uf、Gf、和Cf = 對應的2ʹ-去氧-2ʹ-氟(「2ʹ-氟」)核糖核苷酸;和invAb = 反向無鹼基去氧核苷酸(即當在股的3'端時,經由其3'位置處的取代基連接至相鄰核苷酸(3'-3'鍵)或者當在股的5'端時,經由其5'位置處的取代基連接至相鄰核苷酸(5'-5'核苷酸間鍵)的無鹼基去氧核苷酸)。在序列中「s」的插入指示兩個相鄰的核苷酸藉由硫代磷酸二酯基團(例如硫代磷酸酯核苷酸間鍵)連接。除非另有指示,否則所有其他核苷酸都藉由3'-5'磷酸二酯基團連接。使用下文實例3中提供的方法使
Fam13asiRNA綴合至棕櫚酸酯脂質(C16)或GalNAc。
D-0004有義(SEQ ID NO: 2792) | gaaagaUfuCfCfAfGfgacgasus{invAb} |
D-0004反義(SEQ ID NO: 2793) | usAfsucguCfcuggAfaUfcuuucsusg |
D-0005有義(SEQ ID NO: 2794) | gaaucaAfgAfUfGfGfugaagsas{invAb} |
D-0005反義(SEQ ID NO: 2795) | asUfscuucAfccauCfuUfgauucscsu |
D-0006有義(SEQ ID NO: 2796) | {DCA-C6}saggaaucaAfgAfUfGfGfugaagas{invAb} |
D-0006反義(SEQ ID NO: 2797) | asUfscuucAfccauCfuUfgauuccuscsu |
體外
Fam13a
siRNA
處理
在鼠腎臟來源的(Renca細胞系;ATCC CRL-2947)和脂肪來源的(原代脂肪細胞)培養細胞中分析
Fam13asiRNA對
Fam13aRNA表現水平的影響。
圖 2A 和 2B顯示了
Fam13asiRNA在Renca細胞和原代脂肪細胞中的作用的這種體外劑量-響應研究結果。
對於在Renca細胞中的實驗,使用Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑(賽默飛世爾科技公司(Thermo Fisher Scientific))將siRNA轉染到細胞中。在100 µL基礎培養基(RPMI-1640、10% FBS、1%非必需胺基酸、1%丙酮酸鈉、2% L-麩醯胺和1%青黴素-鏈黴素)中以12,500個細胞/孔將細胞鋪在96孔板中,並孵育過夜。對於轉染,將150 µL的RNAiMAX與OptiMEM混合(最終稀釋為0.3 µL RNAiMAX/孔),然後將1 mM的siRNA在OptiMEM/RNAiMAx中稀釋至60 µM,然後進一步稀釋至6 nM的起始濃度。將siRNA從6 nM、0.6 nM、0.06 nM和0.006 nM以1 : 10連續稀釋。向100 µL鋪板培養基中添加20 µL OptiMEM/RNAiMAX + siRNA,使每種siRNA的最終濃度為1 nM、0.1 nM、0.01 nM、0.001 nM和0 nM。將細胞在37°C和5% CO
2下孵育72小時,然後去除培養基並用150 µL緩衝液RLT(凱傑公司(Qiagen))裂解。按照製造商的說明(凱傑公司)使用RNeasy 96 RNA分離方案分離RNA。按照製造商的說明(賽默飛世爾公司(ThermoFisher)),使用TaqMan® RNA-to-Ct™ 1步套組(Kit)進行即時PCR,對於
Fam13a(Mm00467910)和
Hprt(Mm03024075),使用4.25 µL RNA和TaqMan®基因表現測定(賽默飛世爾公司)。
對於在原代小鼠脂肪細胞中的實驗,使用最初由Viswanadha和Londos描述的方法(Viswanadha, S.和Londos, C. Optimized conditions for measuring lipolysis in murine primary adipocytes [用於測量鼠原代脂肪細胞脂肪溶解的優化條件].J. Lipid Res [脂質研究雜誌]. 47, 1859-1864 (2006)),從雄性DIO小鼠中分離並解剖皮下WAT,稱重,並立即浸入pH 7.4的Krebs-Ringer碳酸氫鹽(KRB)緩衝液中,該緩衝液具有4%牛血清白蛋白(BSA)、500 nM腺苷和5 mM葡萄糖,並且將基質血管部分(SVF)和原代脂肪細胞藉由膠原酶消化(1 mg/mL KRB)進行分離,並在37°C下以220 rpm振盪孵育1 h。消化後,藉由250 µm紗網將混合物過濾到15 mL錐形聚丙烯管中,並使用長針和注射器小心地去除含有膠原酶溶液和SVF的下層液。如Hausman等人先前所述培養SVF(Hausman, D. B., Park, H. J.和Hausman, G. J. Isolation and culture of preadipocytes from rodent white adipose tissue [來自齧齒動物白色脂肪組織的前脂肪細胞的分離與培養].Methods Mol. Biol. [分子生物學方法] 456, 201-219 (2008)),其中將含SVF的溶液以200×g離心10 min以使SVF細胞沈澱,將其重懸於10 mL鋪板培養基(DMEM/F12 + 10% FBS)中,然後藉由無菌的20 μm篩網過濾器過濾到無菌的50 mL塑膠離心管中。將SVF細胞以250,000個細胞/孔鋪板在24孔板中,並在37°C和5% CO
2下孵育過夜,然後去除鋪板培養基和非黏附細胞,用DMEM/F12培養基 + 5% FBS替換,並且每兩天替換培養基,直到細胞達到匯合(鋪板後5-6天)。藉由添加分化培養基誘導分化48 h(DMEM/F12 + 5% FBS + 17 nM胰島素,0.1 μM迪皮質醇,250 μM 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)和60 μM吲哚美洒辛)。48 h後,用維持培養基(DMEM/F12 + 10%FBS + 17 nM胰島素)替換分化培養基共10天,其中每2-3天替換維持培養基。在分化的第10天,將C16綴合的siRNA在維持培養基中稀釋至10 µM,然後將10 µM siRNA從10 µM、1 µM、100 nM、10 nM、1 nM、0.1 nM和0.01 nM以1 : 10連續稀釋。從細胞中去除維持培養基,並用含有1.5 mL siRNA的培養基替換,並將細胞在37°C和5% CO
2下孵育72小時。72小時後,去除培養基,並將細胞收集在每孔1 mL Qiazol(凱傑公司)中。按照製造商的說明(凱傑公司)使用RNeasy 96通用組織套組RNA分離方案分離RNA。按照製造商的說明(賽默飛世爾公司),使用TaqMan® RNA-to-Ct™ 1步套組進行即時PCR,對於
Fam13a(Mm00467910)和
Ppib(Mm00478295),使用4.25 µL RNA和TaqMan®基因表現測定(賽默飛世爾公司)。
如
圖 2A 和 2B中所示,每種測試的
Fam13asiRNA構建體以劑量依賴性方式降低Fam13a的表現。在最高濃度下,在Renca細胞中觀察到
Fam13amRNA表現水平58%、68%或81%的降低。類似地,在最高濃度下,在原代脂肪細胞中觀察到
Fam13amRNA水平49%、75%和78%的降低。
飲食誘導的肥胖小鼠中的
5
天體內
Fam13a
siRNA
處理
在5天內在飲食誘導的肥胖(DIO)和胰島素抗性的高脂肪飲食(HFD)鼠模型中分析了
Fam13asiRNA對
Fam13aRNA表現水平的影響。對小鼠執行HFD持續12週(18週齡;n = 6隻/組)。然後向小鼠皮下投與含有30 mg/kg劑量的C16綴合的鼠
Fam13asiRNA、靶向m
Hprt的對照C16 siRNA(C16-
Hprt-siRNA)或媒介物對照的單次注射液。注射後五天,處死小鼠並進行屍體剖檢,獲取皮下WAT、附睪WAT和肝臟組織。按照製造商的說明(凱傑公司)使用RNeasy 96通用組織套組RNA分離方案確定
Fam13aRNA的表現水平。按照製造商的說明(賽默飛世爾公司),使用TaqMan® RNA-to-Ct™ 1步套組進行即時PCR,對於
Fam13a(Mm00467910)和
Ppib(Mm00478295),使用4.25 µL RNA和TaqMan®基因表現測定(賽默飛世爾公司)。如
圖 3A-3D中所示,
Fam13asiRNA構建體降低了
Fam13aRNA在肝臟和脂肪組織兩者中的表現。
飲食誘導的肥胖小鼠中的
30
天體內
Fam13a
siRNA
處理
在30天的過程內重複注射siRNA後,在飲食誘導的肥胖和胰島素抗性的高脂肪飲食(HFD)鼠模型中分析了
Fam13asiRNA的生理作用。對小鼠執行HFD持續12週(19週齡;n = 7或8隻/組)。然後每10天一次向小鼠投與30 mg/kg劑量的C16綴合的鼠
Fam13asiRNA(D-0002或D-0003)、靶向m
Hprt的對照C16 siRNA(C16-
HprtsiRNA)或媒介物對照(SC),總共三劑(參見
圖 4A)。在治療開始時和此後每10天測量每隻小鼠的體重,直到注射後三十天處死小鼠進行屍體剖檢。在第一次siRNA投與前4天和處理28天後測量每隻小鼠的脂肪量。
圖 4B 和 4C係顯示
Fam13asiRNA對小鼠體重和脂肪量的結果的圖。處理30天後,與對照相比,兩種測試的
Fam13asiRNA均顯著減輕了體重(減輕11%)並減少了脂肪量(減少20%)。該等數據表明當與C16綴合時,C16綴合的siRNA觸發物在體內脂肪組織中顯著降低了Fam13a表現。
另外,肝臟重量減少了-25%,肝臟三酸甘油酯減少了-31%,血漿胰島素減少了-40%,並且血漿LDL減少了-17%。該等與肝臟相關的作用表明C16綴合的siRNA觸發物在肝臟組織中亦為有效的。
飲食誘導的肥胖小鼠中的
60
天體內
Fam13a
siRNA
處理
進行實驗以直接比較使用GalNAc綴合的
Fam13asiRNA(其使siRNA特異性靶向肝臟)的結果與使用C16綴合的
Fam13asiRNA(其使siRNA靶向脂肪組織和肝臟兩者)的結果。每10天用以下分子處理肥胖小鼠,持續60天:(1) 鹽水,(2) C16綴合的非靶向(NT)siRNA對照(30 mg/kg),(3) C16-
Fam13asiRNA(D-0002;30 mg/kg),(4) C16-
Fam13asiRNA(D-0002;5 mg/kg),(5) GalNAc綴合的NT siRNA對照(5 mg/kg),或 (6) GalNAc-
Fam13asiRNA(D-0002;5 mg/kg)。
處理60天後,與各自的NT siRNA對照相比,C16和GalNAc siRNA處理均顯著降低了體重、脂肪量、肝臟重量、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇和ALT(
圖 5)。在肥胖小鼠中,每10天以5 mg/kg對小鼠給藥
Fam13ax GalNAc siRNA,持續60天,將體重、脂肪量、肝臟重量、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇和ALT分別顯著降低了-15%、-22%、-49%、-66%、-37%、-37%和-60%。具有治療重要性的是,GalNAc-
Fam13asiRNA(5 mg/kg)處理足以將所有代謝終點顯著降低,程度至少與C16-
Fam13asiRNA(30 mg/kg)處理大致相同,這表明肝靶向對於
Fam13asiRNA在肥胖小鼠中的功效係足夠的。另外,GalNAc-
Fam13asiRNA顯著降低總膽固醇,程度比C16-
Fam13asiRNA更大,這表明肝特異性靶向可以提供超過脂質綴合物的廣泛靶向的增強的治療益處,並且劑量低6倍。
實例 3 :經修飾的 FAM13A siRNA 分子的選擇、設計和合成
利用對人
FAM13A轉錄物的生物資訊學分析,鑒定了用於設計靶向人
FAM13A基因的治療性siRNA分子的候選序列,該轉錄物在本文中作為SEQ ID NO: 1提供(Ensembl轉錄物編號ENST00000264344.9)。生物資訊學分析包括對SEQ ID NO: 1進行資訊學分析,包括藉由長度為21個核苷酸的觸發物來平鋪SEQ ID NO: 1。為了最小化脫靶效應的風險,所有與人微小RNA互補且與任何已鑒定的人基因的鹼基對誤配少於三個的觸發物都不製備用於功能性測試。另外,針對序列與人和石蟹獼猴
FAM13AmRNA交叉反應的能力來選擇序列。基於生物資訊學分析的結果,選擇了序列用於初始合成和體外測試。
下
表 1列出了生物資訊學分析中優先考慮的雙股體分子的未經修飾的有義和反義序列。
表 1中還顯示了人
FAM13A轉錄物(SEQ ID NO: 1)內每個序列家族中由siRNA分子靶向的核苷酸範圍的第一個核苷酸。
[
表 1]
:針對 FAM13A 的 siRNA 序列
雙股體編號 | SEQ ID NO: 1 中的靶起始 | 有義序列( 5'-3' ) | SEQ ID NO: | 反義序列( 5'-3' ) | SEQ ID NO: |
D-1001 | 1282 | CAUGUACCCCAAGUCAGCAAU | 2 | AUUGCUGACUUGGGGUACAUG | 546 |
D-1002 | 1284 | UGUACCCCAAGUCAGCAAUGU | 3 | ACAUUGCUGACUUGGGGUACA | 547 |
D-1003 | 1285 | GUACCCCAAGUCAGCAAUGUG | 4 | CACAUUGCUGACUUGGGGUAC | 548 |
D-1004 | 1298 | GCAAUGUGUCUGCAACCGGAG | 5 | CUCCGGUUGCAGACACAUUGC | 549 |
D-1005 | 1299 | CAAUGUGUCUGCAACCGGAGA | 6 | UCUCCGGUUGCAGACACAUUG | 550 |
D-1006 | 1300 | AAUGUGUCUGCAACCGGAGAA | 7 | UUCUCCGGUUGCAGACACAUU | 551 |
D-1007 | 1302 | UGUGUCUGCAACCGGAGAACU | 8 | AGUUCUCCGGUUGCAGACACA | 552 |
D-1008 | 1303 | GUGUCUGCAACCGGAGAACUC | 9 | GAGUUCUCCGGUUGCAGACAC | 553 |
D-1009 | 1304 | UGUCUGCAACCGGAGAACUCU | 10 | AGAGUUCUCCGGUUGCAGACA | 554 |
D-1010 D-1794 | 1305 | GUCUGCAACCGGAGAACUCUU | 11 | AAGAGUUCUCCGGUUGCAGAC | 555 |
D-1011 D-1795 | 1306 | UCUGCAACCGGAGAACUCUUA | 12 | UAAGAGUUCUCCGGUUGCAGA | 556 |
D-1012 | 1307 | CUGCAACCGGAGAACUCUUAG | 13 | CUAAGAGUUCUCCGGUUGCAG | 557 |
D-1013 D-1796 | 1308 | UGCAACCGGAGAACUCUUAGA | 14 | UCUAAGAGUUCUCCGGUUGCA | 558 |
D-1014 D-1545 D-1635 D-1639 D-1640 D-1646 D-1652 D-1657 D-1662 D-1667 D-1670 D-1676 D-1681 D-1686 D-1691 D-1847 D-1849 D-1859 D-2009 D-2018 | 1309 | GCAACCGGAGAACUCUUAGAA | 15 | UUCUAAGAGUUCUCCGGUUGC | 559 |
D-1015 D-1570 | 1311 | AACCGGAGAACUCUUAGAAAG | 16 | CUUUCUAAGAGUUCUCCGGUU | 560 |
D-1016 | 1322 | UCUUAGAAAGAACCAUCCGAU | 17 | AUCGGAUGGUUCUUUCUAAGA | 561 |
D-1017 | 1323 | CUUAGAAAGAACCAUCCGAUC | 18 | GAUCGGAUGGUUCUUUCUAAG | 562 |
D-1018 | 1324 | UUAGAAAGAACCAUCCGAUCA | 19 | UGAUCGGAUGGUUCUUUCUAA | 563 |
D-1019 D-1817 | 1326 | AGAAAGAACCAUCCGAUCAGC | 20 | GCUGAUCGGAUGGUUCUUUCU | 564 |
D-1020 D-1599 | 1328 | AAAGAACCAUCCGAUCAGCUG | 21 | CAGCUGAUCGGAUGGUUCUUU | 565 |
D-1021 | 1329 | AAGAACCAUCCGAUCAGCUGU | 22 | ACAGCUGAUCGGAUGGUUCUU | 566 |
D-1022 D-1818 | 1331 | GAACCAUCCGAUCAGCUGUAG | 23 | CUACAGCUGAUCGGAUGGUUC | 567 |
D-1023 D-1597 D-1694 D-1700 D-1707 D-1714 D-1721 D-1728 D-1735 D-1853 D-1873 D-2006 D-2015 | 1333 | ACCAUCCGAUCAGCUGUAGAA | 24 | UUCUACAGCUGAUCGGAUGGU | 568 |
D-1024 D-1569 | 1338 | CCGAUCAGCUGUAGAACAACA | 25 | UGUUGUUCUACAGCUGAUCGG | 569 |
D-1025 D-1543 | 1366 | GAUGUUAAUAACUCUGGAGGU | 26 | ACCUCCAGAGUUAUUAACAUC | 570 |
D-1026 | 1371 | UAAUAACUCUGGAGGUCAAAG | 27 | CUUUGACCUCCAGAGUUAUUA | 571 |
D-1027 | 1373 | AUAACUCUGGAGGUCAAAGUU | 28 | AACUUUGACCUCCAGAGUUAU | 572 |
D-1028 D-1819 | 1407 | AUCUGGAACACUAUCAGCAUC | 29 | GAUGCUGAUAGUGUUCCAGAU | 573 |
D-1029 D-1797 | 1472 | AGGAUGAAGUUCGACAUGGGA | 30 | UCCCAUGUCGAACUUCAUCCU | 574 |
D-1030 | 1480 | GUUCGACAUGGGAGAGACAAG | 31 | CUUGUCUCUCCCAUGUCGAAC | 575 |
D-1031 | 1483 | CGACAUGGGAGAGACAAGGGA | 32 | UCCCUUGUCUCUCCCAUGUCG | 576 |
D-1032 | 1485 | ACAUGGGAGAGACAAGGGACU | 33 | AGUCCCUUGUCUCUCCCAUGU | 577 |
D-1033 | 1487 | AUGGGAGAGACAAGGGACUUA | 34 | UAAGUCCCUUGUCUCUCCCAU | 578 |
D-1034 D-1542 | 1489 | GGGAGAGACAAGGGACUUAUC | 35 | GAUAAGUCCCUUGUCUCUCCC | 579 |
D-1035 | 1490 | GGAGAGACAAGGGACUUAUCA | 36 | UGAUAAGUCCCUUGUCUCUCC | 580 |
D-1036 | 1491 | GAGAGACAAGGGACUUAUCAA | 37 | UUGAUAAGUCCCUUGUCUCUC | 581 |
D-1037 D-1553 | 1495 | GACAAGGGACUUAUCAACAAA | 38 | UUUGUUGAUAAGUCCCUUGUC | 582 |
D-1038 D-1589 | 1496 | ACAAGGGACUUAUCAACAAAG | 39 | CUUUGUUGAUAAGUCCCUUGU | 583 |
D-1039 D-1798 | 1500 | GGGACUUAUCAACAAAGAAAA | 40 | UUUUCUUUGUUGAUAAGUCCC | 584 |
D-1040 D-1820 D-1933 D-1939 D-1945 D-1951 D-1957 D-1963 D-1969 | 1514 | AAGAAAAUACUCCUUCUGGGU | 41 | ACCCAGAAGGAGUAUUUUCUU | 585 |
D-1041 D-1799 | 1520 | AUACUCCUUCUGGGUUCAACC | 42 | GGUUGAACCCAGAAGGAGUAU | 586 |
D-1042 D-1576 | 1533 | GUUCAACCACCUUGAUGAUUG | 43 | CAAUCAUCAAGGUGGUUGAAC | 587 |
D-1043 D-1616 | 1534 | UUCAACCACCUUGAUGAUUGU | 44 | ACAAUCAUCAAGGUGGUUGAA | 588 |
D-1044 D-1575 | 1558 | UUGAAUACUCAGGAAGUCGAA | 45 | UUCGACUUCCUGAGUAUUCAA | 589 |
D-1045 D-1821 | 1564 | ACUCAGGAAGUCGAAAAGGUA | 46 | UACCUUUUCGACUUCCUGAGU | 590 |
D-1046 | 1565 | CUCAGGAAGUCGAAAAGGUAC | 47 | GUACCUUUUCGACUUCCUGAG | 591 |
D-1047 | 1566 | UCAGGAAGUCGAAAAGGUACA | 48 | UGUACCUUUUCGACUUCCUGA | 592 |
D-1048 | 1568 | AGGAAGUCGAAAAGGUACACA | 49 | UGUGUACCUUUUCGACUUCCU | 593 |
D-1049 | 1574 | UCGAAAAGGUACACAAAAAUA | 50 | UAUUUUUGUGUACCUUUUCGA | 594 |
D-1050 | 1575 | CGAAAAGGUACACAAAAAUAC | 51 | GUAUUUUUGUGUACCUUUUCG | 595 |
D-1051 | 1610 | GAGAAAGGAGCAAGCCUAAAC | 52 | GUUUAGGCUUGCUCCUUUCUC | 596 |
D-1052 D-1822 | 1611 | AGAAAGGAGCAAGCCUAAACG | 53 | CGUUUAGGCUUGCUCCUUUCU | 597 |
D-1053 | 1612 | GAAAGGAGCAAGCCUAAACGU | 54 | ACGUUUAGGCUUGCUCCUUUC | 598 |
D-1054 D-1823 | 1615 | AGGAGCAAGCCUAAACGUCAG | 55 | CUGACGUUUAGGCUUGCUCCU | 599 |
D-1055 D-1824 | 1616 | GGAGCAAGCCUAAACGUCAGA | 56 | UCUGACGUUUAGGCUUGCUCC | 600 |
D-1056 | 1617 | GAGCAAGCCUAAACGUCAGAA | 57 | UUCUGACGUUUAGGCUUGCUC | 601 |
D-1057 D-1825 | 1618 | AGCAAGCCUAAACGUCAGAAA | 58 | UUUCUGACGUUUAGGCUUGCU | 602 |
D-1058 D-1574 | 1619 | GCAAGCCUAAACGUCAGAAAU | 59 | AUUUCUGACGUUUAGGCUUGC | 603 |
D-1059 D-1800 | 1620 | CAAGCCUAAACGUCAGAAAUC | 60 | GAUUUCUGACGUUUAGGCUUG | 604 |
D-1060 D-1801 | 1621 | AAGCCUAAACGUCAGAAAUCC | 61 | GGAUUUCUGACGUUUAGGCUU | 605 |
D-1061 D-1610 | 1631 | GUCAGAAAUCCAGUACUAAAC | 62 | GUUUAGUACUGGAUUUCUGAC | 606 |
D-1062 D-1554 | 1632 | UCAGAAAUCCAGUACUAAACU | 63 | AGUUUAGUACUGGAUUUCUGA | 607 |
D-1063 | 1652 | UUUCUGAGCUUCAUGACAAUC | 64 | GAUUGUCAUGAAGCUCAGAAA | 608 |
D-1064 | 1658 | AGCUUCAUGACAAUCAGGACG | 65 | CGUCCUGAUUGUCAUGAAGCU | 609 |
D-1065 | 1661 | UUCAUGACAAUCAGGACGGUC | 66 | GACCGUCCUGAUUGUCAUGAA | 610 |
D-1066 | 1662 | UCAUGACAAUCAGGACGGUCU | 67 | AGACCGUCCUGAUUGUCAUGA | 611 |
D-1067 | 1663 | CAUGACAAUCAGGACGGUCUU | 68 | AAGACCGUCCUGAUUGUCAUG | 612 |
D-1068 | 1664 | AUGACAAUCAGGACGGUCUUG | 69 | CAAGACCGUCCUGAUUGUCAU | 613 |
D-1069 | 1665 | UGACAAUCAGGACGGUCUUGU | 70 | ACAAGACCGUCCUGAUUGUCA | 614 |
D-1070 D-1607 | 1666 | GACAAUCAGGACGGUCUUGUG | 71 | CACAAGACCGUCCUGAUUGUC | 615 |
D-1071 | 1667 | ACAAUCAGGACGGUCUUGUGA | 72 | UCACAAGACCGUCCUGAUUGU | 616 |
D-1072 | 1669 | AAUCAGGACGGUCUUGUGAAU | 73 | AUUCACAAGACCGUCCUGAUU | 617 |
D-1073 | 1670 | AUCAGGACGGUCUUGUGAAUA | 74 | UAUUCACAAGACCGUCCUGAU | 618 |
D-1074 D-1609 | 1671 | UCAGGACGGUCUUGUGAAUAU | 75 | AUAUUCACAAGACCGUCCUGA | 619 |
D-1075 D-1615 D-1695 D-1701 D-1708 D-1715 D-1722 D-1729 D-1736 D-1852 D-1867 D-2007 D-2016 | 1678 | GGUCUUGUGAAUAUGGAAAGU | 76 | ACUUUCCAUAUUCACAAGACC | 620 |
D-1076 D-1826 | 1693 | GAAAGUCUCAAUUCCACACGA | 77 | UCGUGUGGAAUUGAGACUUUC | 621 |
D-1077 | 1694 | AAAGUCUCAAUUCCACACGAU | 78 | AUCGUGUGGAAUUGAGACUUU | 622 |
D-1078 | 1695 | AAGUCUCAAUUCCACACGAUC | 79 | GAUCGUGUGGAAUUGAGACUU | 623 |
D-1079 | 1696 | AGUCUCAAUUCCACACGAUCU | 80 | AGAUCGUGUGGAAUUGAGACU | 624 |
D-1080 D-1827 | 1697 | GUCUCAAUUCCACACGAUCUC | 81 | GAGAUCGUGUGGAAUUGAGAC | 625 |
D-1081 D-1605 | 1698 | UCUCAAUUCCACACGAUCUCA | 82 | UGAGAUCGUGUGGAAUUGAGA | 626 |
D-1082 | 1699 | CUCAAUUCCACACGAUCUCAU | 83 | AUGAGAUCGUGUGGAAUUGAG | 627 |
D-1083 D-1828 | 1700 | UCAAUUCCACACGAUCUCAUG | 84 | CAUGAGAUCGUGUGGAAUUGA | 628 |
D-1084 D-1829 | 1701 | CAAUUCCACACGAUCUCAUGA | 85 | UCAUGAGAUCGUGUGGAAUUG | 629 |
D-1085 D-1830 | 1703 | AUUCCACACGAUCUCAUGAGA | 86 | UCUCAUGAGAUCGUGUGGAAU | 630 |
D-1086 D-1831 | 1704 | UUCCACACGAUCUCAUGAGAG | 87 | CUCUCAUGAGAUCGUGUGGAA | 631 |
D-1087 D-1606 | 1705 | UCCACACGAUCUCAUGAGAGA | 88 | UCUCUCAUGAGAUCGUGUGGA | 632 |
D-1088 | 1709 | CACGAUCUCAUGAGAGAACUG | 89 | CAGUUCUCUCAUGAGAUCGUG | 633 |
D-1089 | 1714 | UCUCAUGAGAGAACUGGACCU | 90 | AGGUCCAGUUCUCUCAUGAGA | 634 |
D-1090 D-1832 | 1716 | UCAUGAGAGAACUGGACCUGA | 91 | UCAGGUCCAGUUCUCUCAUGA | 635 |
D-1091 D-1833 | 1717 | CAUGAGAGAACUGGACCUGAU | 92 | AUCAGGUCCAGUUCUCUCAUG | 636 |
D-1092 | 1742 | UUGAAUGGAUGUCUGAUGAAA | 93 | UUUCAUCAGACAUCCAUUCAA | 637 |
D-1093 D-1802 | 1783 | GGUGGACACACUCAGCAUUUU | 94 | AAAAUGCUGAGUGUGUCCACC | 638 |
D-1094 D-1587 | 1801 | UUUGAGAGCCCCACAAUGAAG | 95 | CUUCAUUGUGGGGCUCUCAAA | 639 |
D-1095 D-1834 | 1832 | AUCCCAGCCUAUCUGACACCA | 96 | UGGUGUCAGAUAGGCUGGGAU | 640 |
D-1096 D-1835 | 1833 | UCCCAGCCUAUCUGACACCAA | 97 | UUGGUGUCAGAUAGGCUGGGA | 641 |
D-1097 D-1836 | 1834 | CCCAGCCUAUCUGACACCAAA | 98 | UUUGGUGUCAGAUAGGCUGGG | 642 |
D-1098 | 1835 | CCAGCCUAUCUGACACCAAAC | 99 | GUUUGGUGUCAGAUAGGCUGG | 643 |
D-1099 | 1836 | CAGCCUAUCUGACACCAAACA | 100 | UGUUUGGUGUCAGAUAGGCUG | 644 |
D-1100 D-1837 | 1856 | AGCAGAGAAAUCAAGAUGCCG | 101 | CGGCAUCUUGAUUUCUCUGCU | 645 |
D-1101 D-1803 | 1890 | GAGCUUUGUCUCCGAAGUGCC | 102 | GGCACUUCGGAGACAAAGCUC | 646 |
D-1102 D-1563 D-1804 | 1896 | UGUCUCCGAAGUGCCCCAGUC | 103 | GACUGGGGCACUUCGGAGACA | 647 |
D-1103 | 1899 | CUCCGAAGUGCCCCAGUCGGA | 104 | UCCGACUGGGGCACUUCGGAG | 648 |
D-1104 D-1838 | 1900 | UCCGAAGUGCCCCAGUCGGAC | 105 | GUCCGACUGGGGCACUUCGGA | 649 |
D-1105 | 1943 | AGAACUGGGAAGAGCCUAUCC | 106 | GGAUAGGCUCUUCCCAGUUCU | 650 |
D-1106 | 1944 | GAACUGGGAAGAGCCUAUCCC | 107 | GGGAUAGGCUCUUCCCAGUUC | 651 |
D-1107 D-1608 | 1952 | AAGAGCCUAUCCCUGCUUUCU | 108 | AGAAAGCAGGGAUAGGCUCUU | 652 |
D-1108 | 2024 | AGGCUGGGCGCCUGAUCCGUC | 109 | GACGGAUCAGGCGCCCAGCCU | 653 |
D-1109 | 2025 | GGCUGGGCGCCUGAUCCGUCA | 110 | UGACGGAUCAGGCGCCCAGCC | 654 |
D-1110 | 2026 | GCUGGGCGCCUGAUCCGUCAG | 111 | CUGACGGAUCAGGCGCCCAGC | 655 |
D-1111 | 2027 | CUGGGCGCCUGAUCCGUCAGC | 112 | GCUGACGGAUCAGGCGCCCAG | 656 |
D-1112 | 2028 | UGGGCGCCUGAUCCGUCAGCU | 113 | AGCUGACGGAUCAGGCGCCCA | 657 |
D-1113 | 2050 | CUGGACGAAGACAGCGACCCC | 114 | GGGGUCGCUGUCUUCGUCCAG | 658 |
D-2094 | 2055 | CGAAGACAGCGACCCCAUGCU | 2807 | AGCAUGGGGUCGCUGUCUUCG | 2808 |
D-1114 D-1568 | 2066 | ACCCCAUGCUCUCUCCUCGGU | 115 | ACCGAGGAGAGAGCAUGGGGU | 659 |
D-1115 D-1567 | 2070 | CAUGCUCUCUCCUCGGUUCUA | 116 | UAGAACCGAGGAGAGAGCAUG | 660 |
D-1116 D-1805 | 2071 | AUGCUCUCUCCUCGGUUCUAC | 117 | GUAGAACCGAGGAGAGAGCAU | 661 |
D-1117 | 2073 | GCUCUCUCCUCGGUUCUACGC | 118 | GCGUAGAACCGAGGAGAGAGC | 662 |
D-1118 | 2074 | CUCUCUCCUCGGUUCUACGCU | 119 | AGCGUAGAACCGAGGAGAGAG | 663 |
D-1119 D-1601 | 2075 | UCUCUCCUCGGUUCUACGCUU | 120 | AAGCGUAGAACCGAGGAGAGA | 664 |
D-1120 | 2076 | CUCUCCUCGGUUCUACGCUUA | 121 | UAAGCGUAGAACCGAGGAGAG | 665 |
D-1121 | 2077 | UCUCCUCGGUUCUACGCUUAU | 122 | AUAAGCGUAGAACCGAGGAGA | 666 |
D-1122 D-1550 | 2078 | CUCCUCGGUUCUACGCUUAUG | 123 | CAUAAGCGUAGAACCGAGGAG | 667 |
D-1123 | 2079 | UCCUCGGUUCUACGCUUAUGG | 124 | CCAUAAGCGUAGAACCGAGGA | 668 |
D-1124 D-1549 D-1643 D-1647 D-1651 D-1656 D-1661 D-1666 D-1671 D-1675 D-1680 D-1685 D-1690 D-1848 D-1860 | 2080 | CCUCGGUUCUACGCUUAUGGG | 125 | CCCAUAAGCGUAGAACCGAGG | 669 |
D-1125 | 2081 | CUCGGUUCUACGCUUAUGGGC | 126 | GCCCAUAAGCGUAGAACCGAG | 670 |
D-1126 D-1544 D-1636 D-1648 D-1653 D-1658 D-1663 D-1668 D-1672 D-1677 D-1682 D-1687 D-1692 D-1851 D-1858 D-2010 D-2019 | 2144 | CACCAAACUCCCAUUCUUUCA | 127 | UGAAAGAAUGGGAGUUUGGUG | 671 |
D-1127 D-1565 D-1641 | 2146 | CCAAACUCCCAUUCUUUCAUG | 128 | CAUGAAAGAAUGGGAGUUUGG | 672 |
D-1128 D-1539 | 2151 | CUCCCAUUCUUUCAUGAGGCG | 129 | CGCCUCAUGAAAGAAUGGGAG | 673 |
D-1129 | 2155 | CAUUCUUUCAUGAGGCGGCGA | 130 | UCGCCGCCUCAUGAAAGAAUG | 674 |
D-1130 | 2156 | AUUCUUUCAUGAGGCGGCGAA | 131 | UUCGCCGCCUCAUGAAAGAAU | 675 |
D-1131 | 2157 | UUCUUUCAUGAGGCGGCGAAG | 132 | CUUCGCCGCCUCAUGAAAGAA | 676 |
D-1132 | 2158 | UCUUUCAUGAGGCGGCGAAGC | 133 | GCUUCGCCGCCUCAUGAAAGA | 677 |
D-1133 | 2159 | CUUUCAUGAGGCGGCGAAGCU | 134 | AGCUUCGCCGCCUCAUGAAAG | 678 |
D-1134 | 2160 | UUUCAUGAGGCGGCGAAGCUC | 135 | GAGCUUCGCCGCCUCAUGAAA | 679 |
D-1135 | 2182 | UCUCUGGGGUCCUAUGAUGAU | 136 | AUCAUCAUAGGACCCCAGAGA | 680 |
D-1136 | 2218 | ACACCUGCCCAGCUCACACGA | 137 | UCGUGUGAGCUGGGCAGGUGU | 681 |
D-1137 | 2219 | CACCUGCCCAGCUCACACGAA | 138 | UUCGUGUGAGCUGGGCAGGUG | 682 |
D-1138 | 2221 | CCUGCCCAGCUCACACGAAGG | 139 | CCUUCGUGUGAGCUGGGCAGG | 683 |
D-1139 | 2226 | CCAGCUCACACGAAGGAUUCA | 140 | UGAAUCCUUCGUGUGAGCUGG | 684 |
D-1140 D-1806 | 2228 | AGCUCACACGAAGGAUUCAGA | 141 | UCUGAAUCCUUCGUGUGAGCU | 685 |
D-1141 D-1573 D-1638 D-1644 D-1645 D-2024 D-2025 D-2026 D-2027 D-2028 D-2029 D-2030 D-2031 D-2032 D-2033 D-2034 | 2263 | AUCCGGAAGUUUGAAGAUAGA | 142 | UCUAUCUUCAAACUUCCGGAU | 686 |
D-1142 D-1547 | 2266 | CGGAAGUUUGAAGAUAGAUUC | 143 | GAAUCUAUCUUCAAACUUCCG | 687 |
D-1143 D-1602 | 2270 | AGUUUGAAGAUAGAUUCGAAG | 144 | CUUCGAAUCUAUCUUCAAACU | 688 |
D-1144 | 2271 | GUUUGAAGAUAGAUUCGAAGA | 145 | UCUUCGAAUCUAUCUUCAAAC | 689 |
D-1145 D-1839 | 2275 | GAAGAUAGAUUCGAAGAAGAG | 146 | CUCUUCUUCGAAUCUAUCUUC | 690 |
D-1146 D-1807 | 2294 | AGAAGAAGUACAGACCUUCCC | 147 | GGGAAGGUCUGUACUUCUUCU | 691 |
D-1147 D-1808 | 2295 | GAAGAAGUACAGACCUUCCCA | 148 | UGGGAAGGUCUGUACUUCUUC | 692 |
D-1148 D-1809 | 2296 | AAGAAGUACAGACCUUCCCAC | 149 | GUGGGAAGGUCUGUACUUCUU | 693 |
D-1149 D-1810 D-1938 D-1944 D-1950 D-1956 D-1962 D-1968 D-1974 D-2035 D-2055 D-2056 | 2343 | UCUGAAAUGGACAAAUGACCU | 150 | AGGUCAUUUGUCCAUUUCAGA | 694 |
D-1150 D-1613 | 2344 | CUGAAAUGGACAAAUGACCUU | 151 | AAGGUCAUUUGUCCAUUUCAG | 695 |
D-1151 D-1598 | 2353 | ACAAAUGACCUUGCCAAAUUC | 152 | GAAUUUGGCAAGGUCAUUUGU | 696 |
D-1152 D-1811 | 2355 | AAAUGACCUUGCCAAAUUCCG | 153 | CGGAAUUUGGCAAGGUCAUUU | 697 |
D-1153 D-1556 | 2356 | AAUGACCUUGCCAAAUUCCGG | 154 | CCGGAAUUUGGCAAGGUCAUU | 698 |
D-1154 D-1595 | 2358 | UGACCUUGCCAAAUUCCGGAG | 155 | CUCCGGAAUUUGGCAAGGUCA | 699 |
D-1155 | 2359 | GACCUUGCCAAAUUCCGGAGA | 156 | UCUCCGGAAUUUGGCAAGGUC | 700 |
D-1156 D-1578 | 2360 | ACCUUGCCAAAUUCCGGAGAC | 157 | GUCUCCGGAAUUUGGCAAGGU | 701 |
D-1157 | 2361 | CCUUGCCAAAUUCCGGAGACA | 158 | UGUCUCCGGAAUUUGGCAAGG | 702 |
D-1158 | 2373 | CCGGAGACAACUUAAAGAAUC | 159 | GAUUCUUUAAGUUGUCUCCGG | 703 |
D-1159 | 2374 | CGGAGACAACUUAAAGAAUCA | 160 | UGAUUCUUUAAGUUGUCUCCG | 704 |
D-1160 | 2402 | AGAUAUCUGAAGAGGACCUAA | 161 | UUAGGUCCUCUUCAGAUAUCU | 705 |
D-1161 | 2413 | GAGGACCUAACUCCCAGGAUG | 162 | CAUCCUGGGAGUUAGGUCCUC | 706 |
D-1162 | 2416 | GACCUAACUCCCAGGAUGCGG | 163 | CCGCAUCCUGGGAGUUAGGUC | 707 |
D-1163 D-1812 D-1935 D-1941 D-1947 D-1953 D-1959 D-1965 D-1971 | 2417 | ACCUAACUCCCAGGAUGCGGC | 164 | GCCGCAUCCUGGGAGUUAGGU | 708 |
D-1164 D-1813 | 2432 | UGCGGCAGCGAAGCAACACAC | 165 | GUGUGUUGCUUCGCUGCCGCA | 709 |
D-1165 | 2433 | GCGGCAGCGAAGCAACACACU | 166 | AGUGUGUUGCUUCGCUGCCGC | 710 |
D-1166 D-1840 | 2437 | CAGCGAAGCAACACACUCCCC | 167 | GGGGAGUGUGUUGCUUCGCUG | 711 |
D-1167 D-1841 | 2439 | GCGAAGCAACACACUCCCCAA | 168 | UUGGGGAGUGUGUUGCUUCGC | 712 |
D-1168 | 2444 | GCAACACACUCCCCAAGAGUU | 169 | AACUCUUGGGGAGUGUGUUGC | 713 |
D-1169 | 2457 | CAAGAGUUUUGGUUCCCAACU | 170 | AGUUGGGAACCAAAACUCUUG | 714 |
D-1170 | 2460 | GAGUUUUGGUUCCCAACUUGA | 171 | UCAAGUUGGGAACCAAAACUC | 715 |
D-1171 D-1592 | 2462 | GUUUUGGUUCCCAACUUGAGA | 172 | UCUCAAGUUGGGAACCAAAAC | 716 |
D-1172 D-1842 | 2534 | UUGAAGCCACAUUGGAAUCUA | 173 | UAGAUUCCAAUGUGGCUUCAA | 717 |
D-1173 | 2568 | CCAGGAGAAGCGAGCGGAAAG | 174 | CUUUCCGCUCGCUUCUCCUGG | 718 |
D-1174 D-1581 | 2623 | GACCAGAUUGCUAAUGAGAAA | 175 | UUUCUCAUUAGCAAUCUGGUC | 719 |
D-1175 D-1621 | 2632 | GCUAAUGAGAAAGUGGCUCUG | 176 | CAGAGCCACUUUCUCAUUAGC | 720 |
D-1176 | 2677 | AGCAUUCAUGGACGGCCGGUA | 177 | UACCGGCCGUCCAUGAAUGCU | 721 |
D-1177 | 2678 | GCAUUCAUGGACGGCCGGUAA | 178 | UUACCGGCCGUCCAUGAAUGC | 722 |
D-1178 | 2679 | CAUUCAUGGACGGCCGGUAAC | 179 | GUUACCGGCCGUCCAUGAAUG | 723 |
D-1179 | 2680 | AUUCAUGGACGGCCGGUAACA | 180 | UGUUACCGGCCGUCCAUGAAU | 724 |
D-1180 | 2681 | UUCAUGGACGGCCGGUAACAA | 181 | UUGUUACCGGCCGUCCAUGAA | 725 |
D-1181 | 2682 | UCAUGGACGGCCGGUAACAAA | 182 | UUUGUUACCGGCCGUCCAUGA | 726 |
D-2095 | 2683 | CAUGGACGGCCGGUAACAAAG | 2809 | CUUUGUUACCGGCCGUCCAUG | 2810 |
D-1182 | 2684 | AUGGACGGCCGGUAACAAAGA | 183 | UCUUUGUUACCGGCCGUCCAU | 727 |
D-1183 | 2685 | UGGACGGCCGGUAACAAAGAA | 184 | UUCUUUGUUACCGGCCGUCCA | 728 |
D-1184 | 2686 | GGACGGCCGGUAACAAAGAAC | 185 | GUUCUUUGUUACCGGCCGUCC | 729 |
D-1185 D-1814 | 2688 | ACGGCCGGUAACAAAGAACGA | 186 | UCGUUCUUUGUUACCGGCCGU | 730 |
D-1186 | 2689 | CGGCCGGUAACAAAGAACGAA | 187 | UUCGUUCUUUGUUACCGGCCG | 731 |
D-1187 D-1815 | 2690 | GGCCGGUAACAAAGAACGAAC | 188 | GUUCGUUCUUUGUUACCGGCC | 732 |
D-1188 | 2691 | GCCGGUAACAAAGAACGAACG | 189 | CGUUCGUUCUUUGUUACCGGC | 733 |
D-1189 | 2692 | CCGGUAACAAAGAACGAACGG | 190 | CCGUUCGUUCUUUGUUACCGG | 734 |
D-1190 D-1843 | 2693 | CGGUAACAAAGAACGAACGGC | 191 | GCCGUUCGUUCUUUGUUACCG | 735 |
D-1191 | 2694 | GGUAACAAAGAACGAACGGCA | 192 | UGCCGUUCGUUCUUUGUUACC | 736 |
D-1192 | 2700 | AAAGAACGAACGGCAGGUGAU | 193 | AUCACCUGCCGUUCGUUCUUU | 737 |
D-1193 D-1844 | 2719 | AUGAAGCCACUAUACGACAGG | 194 | CCUGUCGUAUAGUGGCUUCAU | 738 |
D-1194 | 2721 | GAAGCCACUAUACGACAGGUA | 195 | UACCUGUCGUAUAGUGGCUUC | 739 |
D-1195 | 2722 | AAGCCACUAUACGACAGGUAC | 196 | GUACCUGUCGUAUAGUGGCUU | 740 |
D-1196 | 2723 | AGCCACUAUACGACAGGUACC | 197 | GGUACCUGUCGUAUAGUGGCU | 741 |
D-1197 | 2724 | GCCACUAUACGACAGGUACCG | 198 | CGGUACCUGUCGUAUAGUGGC | 742 |
D-1198 | 2725 | CCACUAUACGACAGGUACCGG | 199 | CCGGUACCUGUCGUAUAGUGG | 743 |
D-1199 D-1845 | 2726 | CACUAUACGACAGGUACCGGC | 200 | GCCGGUACCUGUCGUAUAGUG | 744 |
D-1200 | 2727 | ACUAUACGACAGGUACCGGCU | 201 | AGCCGGUACCUGUCGUAUAGU | 745 |
D-1201 | 2753 | AACAGAUCCUCUCCCGAGCUA | 202 | UAGCUCGGGAGAGGAUCUGUU | 746 |
D-1202 | 2754 | ACAGAUCCUCUCCCGAGCUAA | 203 | UUAGCUCGGGAGAGGAUCUGU | 747 |
D-1203 | 2756 | AGAUCCUCUCCCGAGCUAACA | 204 | UGUUAGCUCGGGAGAGGAUCU | 748 |
D-1204 | 2759 | UCCUCUCCCGAGCUAACACCA | 205 | UGGUGUUAGCUCGGGAGAGGA | 749 |
D-1205 | 2760 | CCUCUCCCGAGCUAACACCAU | 206 | AUGGUGUUAGCUCGGGAGAGG | 750 |
D-1206 | 2761 | CUCUCCCGAGCUAACACCAUA | 207 | UAUGGUGUUAGCUCGGGAGAG | 751 |
D-1207 | 2764 | UCCCGAGCUAACACCAUACCC | 208 | GGGUAUGGUGUUAGCUCGGGA | 752 |
D-1208 | 2765 | CCCGAGCUAACACCAUACCCA | 209 | UGGGUAUGGUGUUAGCUCGGG | 753 |
D-1209 D-1816 | 2886 | GGGGUCAGAAGACGAUAGCAA | 210 | UUGCUAUCGUCUUCUGACCCC | 754 |
D-1210 D-1561 | 2887 | GGGUCAGAAGACGAUAGCAAU | 211 | AUUGCUAUCGUCUUCUGACCC | 755 |
D-1211 D-1620 | 2889 | GUCAGAAGACGAUAGCAAUGU | 212 | ACAUUGCUAUCGUCUUCUGAC | 756 |
D-1212 D-1560 | 2890 | UCAGAAGACGAUAGCAAUGUG | 213 | CACAUUGCUAUCGUCUUCUGA | 757 |
D-1213 D-1559 | 2893 | GAAGACGAUAGCAAUGUGAAG | 214 | CUUCACAUUGCUAUCGUCUUC | 758 |
D-1214 D-1558 | 2895 | AGACGAUAGCAAUGUGAAGCC | 215 | GGCUUCACAUUGCUAUCGUCU | 759 |
D-1215 D-1604 | 2923 | AUGGUCACUCUGAAAACCGAU | 216 | AUCGGUUUUCAGAGUGACCAU | 760 |
D-1216 | 2924 | UGGUCACUCUGAAAACCGAUU | 217 | AAUCGGUUUUCAGAGUGACCA | 761 |
D-1217 | 2925 | GGUCACUCUGAAAACCGAUUU | 218 | AAAUCGGUUUUCAGAGUGACC | 762 |
D-1218 D-1541 | 2934 | GAAAACCGAUUUCAGUGCACG | 219 | CGUGCACUGAAAUCGGUUUUC | 763 |
D-1219 D-1588 | 2937 | AACCGAUUUCAGUGCACGAUG | 220 | CAUCGUGCACUGAAAUCGGUU | 764 |
D-1220 D-1619 | 2994 | UAUUUCCCCAAUGGAUGAUAA | 221 | UUAUCAUCCAUUGGGGAAAUA | 765 |
D-1221 D-1557 D-1642 D-1650 D-1655 D-1660 D-1665 D-1674 D-1679 D-1684 D-1689 D-1850 D-1861 | 3000 | CCCAAUGGAUGAUAAAAUACC | 222 | GGUAUUUUAUCAUCCAUUGGG | 766 |
D-1222 D-1579 | 3002 | CAAUGGAUGAUAAAAUACCAU | 223 | AUGGUAUUUUAUCAUCCAUUG | 767 |
D-1223 | 3005 | UGGAUGAUAAAAUACCAUCAA | 224 | UUGAUGGUAUUUUAUCAUCCA | 768 |
D-1224 D-1555 | 3014 | AAAUACCAUCAAAAUGCAGCC | 225 | GGCUGCAUUUUGAUGGUAUUU | 769 |
D-1225 | 3043 | GGGCUUUCAAAUCUCCAUGCU | 226 | AGCAUGGAGAUUUGAAAGCCC | 770 |
D-1226 | 3044 | GGCUUUCAAAUCUCCAUGCUG | 227 | CAGCAUGGAGAUUUGAAAGCC | 771 |
D-1227 | 3052 | AAUCUCCAUGCUGCCUCAAUA | 228 | UAUUGAGGCAGCAUGGAGAUU | 772 |
D-1228 | 3053 | AUCUCCAUGCUGCCUCAAUAC | 229 | GUAUUGAGGCAGCAUGGAGAU | 773 |
D-1229 | 3054 | UCUCCAUGCUGCCUCAAUACC | 230 | GGUAUUGAGGCAGCAUGGAGA | 774 |
D-1230 | 3062 | CUGCCUCAAUACCUGAACUCC | 231 | GGAGUUCAGGUAUUGAGGCAG | 775 |
D-1231 | 3082 | CUGGAACACCUCCAGGAAAUG | 232 | CAUUUCCUGGAGGUGUUCCAG | 776 |
D-1232 D-1586 D-1637 D-1649 D-1654 D-1659 D-1664 D-1669 D-1673 D-1678 D-1683 D-1688 D-1693 | 3133 | CUUCGGGAUUUUGAAGACAAC | 233 | GUUGUCUUCAAAAUCCCGAAG | 777 |
D-1233 | 3180 | CCAGAAGGAAGACCGCACUCC | 234 | GGAGUGCGGUCUUCCUUCUGG | 778 |
D-1234 | 3183 | GAAGGAAGACCGCACUCCUAU | 235 | AUAGGAGUGCGGUCUUCCUUC | 779 |
D-1235 D-1540 | 3184 | AAGGAAGACCGCACUCCUAUG | 236 | CAUAGGAGUGCGGUCUUCCUU | 780 |
D-1236 | 3185 | AGGAAGACCGCACUCCUAUGG | 237 | CCAUAGGAGUGCGGUCUUCCU | 781 |
D-1237 | 3186 | GGAAGACCGCACUCCUAUGGC | 238 | GCCAUAGGAGUGCGGUCUUCC | 782 |
D-1238 D-1552 | 3187 | GAAGACCGCACUCCUAUGGCU | 239 | AGCCAUAGGAGUGCGGUCUUC | 783 |
D-1239 D-1618 | 3189 | AGACCGCACUCCUAUGGCUGA | 240 | UCAGCCAUAGGAGUGCGGUCU | 784 |
D-1240 D-1585 | 3192 | CCGCACUCCUAUGGCUGAAGA | 241 | UCUUCAGCCAUAGGAGUGCGG | 785 |
D-1241 | 3225 | UAAGCACAUAAAGGCGAAACU | 242 | AGUUUCGCCUUUAUGUGCUUA | 786 |
D-1242 | 3226 | AAGCACAUAAAGGCGAAACUG | 243 | CAGUUUCGCCUUUAUGUGCUU | 787 |
D-1243 | 3228 | GCACAUAAAGGCGAAACUGAG | 244 | CUCAGUUUCGCCUUUAUGUGC | 788 |
D-1244 D-1584 | 3283 | GAUUCCAAGUCCAUGUGAGGG | 245 | CCCUCACAUGGACUUGGAAUC | 789 |
D-1245 | 3284 | AUUCCAAGUCCAUGUGAGGGG | 246 | CCCCUCACAUGGACUUGGAAU | 790 |
D-1246 | 3287 | CCAAGUCCAUGUGAGGGGCAU | 247 | AUGCCCCUCACAUGGACUUGG | 791 |
D-1247 | 3288 | CAAGUCCAUGUGAGGGGCAUG | 248 | CAUGCCCCUCACAUGGACUUG | 792 |
D-1248 | 3291 | GUCCAUGUGAGGGGCAUGGCC | 249 | GGCCAUGCCCCUCACAUGGAC | 793 |
D-1249 | 3327 | GCAGCUGCGGUGAGAGUUUAC | 250 | GUAAACUCUCACCGCAGCUGC | 794 |
D-1250 | 3329 | AGCUGCGGUGAGAGUUUACUG | 251 | CAGUAAACUCUCACCGCAGCU | 795 |
D-1251 | 3352 | CCCAGAGAAAGUGCAGCUCUG | 252 | CAGAGCUGCACUUUCUCUGGG | 796 |
D-1252 | 3398 | CAAAGCAUGCAGCCCUUCUGC | 253 | GCAGAAGGGCUGCAUGCUUUG | 797 |
D-1253 | 3411 | CCUUCUGCCUCUAGACCAUUU | 254 | AAAUGGUCUAGAGGCAGAAGG | 798 |
D-1254 | 3414 | UCUGCCUCUAGACCAUUUGGC | 255 | GCCAAAUGGUCUAGAGGCAGA | 799 |
D-1255 | 3420 | UCUAGACCAUUUGGCAUCGGC | 256 | GCCGAUGCCAAAUGGUCUAGA | 800 |
D-1256 | 3421 | CUAGACCAUUUGGCAUCGGCU | 257 | AGCCGAUGCCAAAUGGUCUAG | 801 |
D-1257 | 3422 | UAGACCAUUUGGCAUCGGCUC | 258 | GAGCCGAUGCCAAAUGGUCUA | 802 |
D-1258 | 3423 | AGACCAUUUGGCAUCGGCUCC | 259 | GGAGCCGAUGCCAAAUGGUCU | 803 |
D-1259 D-1632 | 3429 | UUUGGCAUCGGCUCCUGUUUC | 260 | GAAACAGGAGCCGAUGCCAAA | 804 |
D-1260 | 3432 | GGCAUCGGCUCCUGUUUCCAU | 261 | AUGGAAACAGGAGCCGAUGCC | 805 |
D-1261 | 3436 | UCGGCUCCUGUUUCCAUUGCC | 262 | GGCAAUGGAAACAGGAGCCGA | 806 |
D-1262 D-1580 | 3438 | GGCUCCUGUUUCCAUUGCCUG | 263 | CAGGCAAUGGAAACAGGAGCC | 807 |
D-1263 D-1583 | 3498 | UAGGCAUUUUGUAAUUGGAAA | 264 | UUUCCAAUUACAAAAUGCCUA | 808 |
D-1264 D-1582 | 3499 | AGGCAUUUUGUAAUUGGAAAG | 265 | CUUUCCAAUUACAAAAUGCCU | 809 |
D-1265 | 3503 | AUUUUGUAAUUGGAAAGUCAA | 266 | UUGACUUUCCAAUUACAAAAU | 810 |
D-1266 | 3505 | UUUGUAAUUGGAAAGUCAAGA | 267 | UCUUGACUUUCCAAUUACAAA | 811 |
D-1267 | 3510 | AAUUGGAAAGUCAAGACUGCA | 268 | UGCAGUCUUGACUUUCCAAUU | 812 |
D-1268 | 3514 | GGAAAGUCAAGACUGCAGUAU | 269 | AUACUGCAGUCUUGACUUUCC | 813 |
D-1269 | 3519 | GUCAAGACUGCAGUAUGUGCA | 270 | UGCACAUACUGCAGUCUUGAC | 814 |
D-1270 | 3520 | UCAAGACUGCAGUAUGUGCAC | 271 | GUGCACAUACUGCAGUCUUGA | 815 |
D-2096 | 3536 | UGCACAUGCGCACGCGCAUGC | 2811 | GCAUGCGCGUGCGCAUGUGCA | 2812 |
D-2097 | 3537 | GCACAUGCGCACGCGCAUGCA | 2813 | UGCAUGCGCGUGCGCAUGUGC | 2814 |
D-2098 | 3538 | CACAUGCGCACGCGCAUGCAC | 2815 | GUGCAUGCGCGUGCGCAUGUG | 2816 |
D-2099 | 3539 | ACAUGCGCACGCGCAUGCACG | 2817 | CGUGCAUGCGCGUGCGCAUGU | 2818 |
D-1271 | 3565 | ACACACACAGUAGUGGAGCUU | 272 | AAGCUCCACUACUGUGUGUGU | 816 |
D-1272 | 3568 | CACACAGUAGUGGAGCUUUCC | 273 | GGAAAGCUCCACUACUGUGUG | 817 |
D-1273 D-1571 | 3569 | ACACAGUAGUGGAGCUUUCCU | 274 | AGGAAAGCUCCACUACUGUGU | 818 |
D-1273B | 3571 | ACAGUAGUGGAGCUUUCCUAA | 275 | UUAGGAAAGCUCCACUACUGU | 819 |
D-1274 | 3582 | GCUUUCCUAACACUAGCAGAG | 276 | CUCUGCUAGUGUUAGGAAAGC | 820 |
D-1275 | 3589 | UAACACUAGCAGAGAUUAAUC | 277 | GAUUAAUCUCUGCUAGUGUUA | 821 |
D-1276 | 3590 | AACACUAGCAGAGAUUAAUCA | 278 | UGAUUAAUCUCUGCUAGUGUU | 822 |
D-1277 | 3591 | ACACUAGCAGAGAUUAAUCAC | 279 | GUGAUUAAUCUCUGCUAGUGU | 823 |
D-1278 | 3594 | CUAGCAGAGAUUAAUCACUAC | 280 | GUAGUGAUUAAUCUCUGCUAG | 824 |
D-1279 | 3599 | AGAGAUUAAUCACUACAUUAG | 281 | CUAAUGUAGUGAUUAAUCUCU | 825 |
D-1280 | 3611 | CUACAUUAGACAACACUCAUC | 282 | GAUGAGUGUUGUCUAAUGUAG | 826 |
D-1281 | 3612 | UACAUUAGACAACACUCAUCU | 283 | AGAUGAGUGUUGUCUAAUGUA | 827 |
D-1282 | 3614 | CAUUAGACAACACUCAUCUAC | 284 | GUAGAUGAGUGUUGUCUAAUG | 828 |
D-1283 | 3659 | GGAUAACUGAGAAACAAGAGA | 285 | UCUCUUGUUUCUCAGUUAUCC | 829 |
D-1284 | 3676 | GAGACCAUUCUCUGUCUAACU | 286 | AGUUAGACAGAGAAUGGUCUC | 830 |
D-1284B | 3687 | CUGUCUAACUGUGAUAAAAAC | 287 | GUUUUUAUCACAGUUAGACAG | 831 |
D-1285 | 3712 | UCAGGACUUUAUUCUAUAGAG | 288 | CUCUAUAGAAUAAAGUCCUGA | 832 |
D-1286 D-1617 | 3717 | ACUUUAUUCUAUAGAGCAAAC | 289 | GUUUGCUCUAUAGAAUAAAGU | 833 |
D-1287 D-1626 | 3720 | UUAUUCUAUAGAGCAAACUUG | 290 | CAAGUUUGCUCUAUAGAAUAA | 834 |
D-1288 | 3721 | UAUUCUAUAGAGCAAACUUGC | 291 | GCAAGUUUGCUCUAUAGAAUA | 835 |
D-1289 | 3723 | UUCUAUAGAGCAAACUUGCUG | 292 | CAGCAAGUUUGCUCUAUAGAA | 836 |
D-1290 | 3741 | CUGUGGAGGGCCAUGCUCUCC | 293 | GGAGAGCAUGGCCCUCCACAG | 837 |
D-1291 | 3755 | GCUCUCCUUGGACCCAGUUAA | 294 | UUAACUGGGUCCAAGGAGAGC | 838 |
D-1292 | 3757 | UCUCCUUGGACCCAGUUAACU | 295 | AGUUAACUGGGUCCAAGGAGA | 839 |
D-1293 | 3758 | CUCCUUGGACCCAGUUAACUG | 296 | CAGUUAACUGGGUCCAAGGAG | 840 |
D-1294 | 3760 | CCUUGGACCCAGUUAACUGCA | 297 | UGCAGUUAACUGGGUCCAAGG | 841 |
D-1295 | 3761 | CUUGGACCCAGUUAACUGCAA | 298 | UUGCAGUUAACUGGGUCCAAG | 842 |
D-1296 | 3764 | GGACCCAGUUAACUGCAAACG | 299 | CGUUUGCAGUUAACUGGGUCC | 843 |
D-1297 | 3765 | GACCCAGUUAACUGCAAACGU | 300 | ACGUUUGCAGUUAACUGGGUC | 844 |
D-1298 | 3766 | ACCCAGUUAACUGCAAACGUG | 301 | CACGUUUGCAGUUAACUGGGU | 845 |
D-1299 | 3767 | CCCAGUUAACUGCAAACGUGC | 302 | GCACGUUUGCAGUUAACUGGG | 846 |
D-1300 | 3768 | CCAGUUAACUGCAAACGUGCA | 303 | UGCACGUUUGCAGUUAACUGG | 847 |
D-1301 | 3769 | CAGUUAACUGCAAACGUGCAU | 304 | AUGCACGUUUGCAGUUAACUG | 848 |
D-1302 | 3772 | UUAACUGCAAACGUGCAUUGG | 305 | CCAAUGCACGUUUGCAGUUAA | 849 |
D-1303 | 3776 | CUGCAAACGUGCAUUGGAGCC | 306 | GGCUCCAAUGCACGUUUGCAG | 850 |
D-1304 D-1551 | 3777 | UGCAAACGUGCAUUGGAGCCC | 307 | GGGCUCCAAUGCACGUUUGCA | 851 |
D-1305 | 3781 | AACGUGCAUUGGAGCCCUAUU | 308 | AAUAGGGCUCCAAUGCACGUU | 852 |
D-1306 | 3782 | ACGUGCAUUGGAGCCCUAUUU | 309 | AAAUAGGGCUCCAAUGCACGU | 853 |
D-1307 | 3784 | GUGCAUUGGAGCCCUAUUUGC | 310 | GCAAAUAGGGCUCCAAUGCAC | 854 |
D-1308 | 3785 | UGCAUUGGAGCCCUAUUUGCU | 311 | AGCAAAUAGGGCUCCAAUGCA | 855 |
D-1309 | 3790 | UGGAGCCCUAUUUGCUGCCGC | 312 | GCGGCAGCAAAUAGGGCUCCA | 856 |
D-1310 | 3791 | GGAGCCCUAUUUGCUGCCGCU | 313 | AGCGGCAGCAAAUAGGGCUCC | 857 |
D-1311 | 3792 | GAGCCCUAUUUGCUGCCGCUG | 314 | CAGCGGCAGCAAAUAGGGCUC | 858 |
D-1312 | 3793 | AGCCCUAUUUGCUGCCGCUGC | 315 | GCAGCGGCAGCAAAUAGGGCU | 859 |
D-1313 | 3807 | CCGCUGCCAUUCUAGUGACCU | 316 | AGGUCACUAGAAUGGCAGCGG | 860 |
D-1314 | 3811 | UGCCAUUCUAGUGACCUUUCC | 317 | GGAAAGGUCACUAGAAUGGCA | 861 |
D-1315 | 3812 | GCCAUUCUAGUGACCUUUCCA | 318 | UGGAAAGGUCACUAGAAUGGC | 862 |
D-1316 | 3818 | CUAGUGACCUUUCCACAGAGC | 319 | GCUCUGUGGAAAGGUCACUAG | 863 |
D-1317 | 3834 | AGAGCUGCGCCUUCCUCACGU | 320 | ACGUGAGGAAGGCGCAGCUCU | 864 |
D-1318 | 3840 | GCGCCUUCCUCACGUGUGUGA | 321 | UCACACACGUGAGGAAGGCGC | 865 |
D-1319 | 3847 | CCUCACGUGUGUGAAAGGUUU | 322 | AAACCUUUCACACACGUGAGG | 866 |
D-1320 | 3848 | CUCACGUGUGUGAAAGGUUUU | 323 | AAAACCUUUCACACACGUGAG | 867 |
D-1321 | 3873 | UUCAGCCCUCAGGUAGAUGGA | 324 | UCCAUCUACCUGAGGGCUGAA | 868 |
D-1322 | 3874 | UCAGCCCUCAGGUAGAUGGAA | 325 | UUCCAUCUACCUGAGGGCUGA | 869 |
D-1323 | 3876 | AGCCCUCAGGUAGAUGGAAGC | 326 | GCUUCCAUCUACCUGAGGGCU | 870 |
D-1323B | 3907 | CACGAUGGCAGUGCAGUCAUC | 327 | GAUGACUGCACUGCCAUCGUG | 871 |
D-1324 | 3932 | UCAGGAUGUUUCUUCAGGACU | 328 | AGUCCUGAAGAAACAUCCUGA | 872 |
D-1325 | 3952 | UUCCUCAGCUGACAAGGAAUU | 329 | AAUUCCUUGUCAGCUGAGGAA | 873 |
D-1326 | 3958 | AGCUGACAAGGAAUUUUGGUC | 330 | GACCAAAAUUCCUUGUCAGCU | 874 |
D-1327 | 3968 | GAAUUUUGGUCCCUGCCUAGG | 331 | CCUAGGCAGGGACCAAAAUUC | 875 |
D-1328 | 3969 | AAUUUUGGUCCCUGCCUAGGA | 332 | UCCUAGGCAGGGACCAAAAUU | 876 |
D-1328 | 3971 | UUUUGGUCCCUGCCUAGGACC | 333 | GGUCCUAGGCAGGGACCAAAA | 877 |
D-1329 | 3972 | UUUGGUCCCUGCCUAGGACCG | 334 | CGGUCCUAGGCAGGGACCAAA | 878 |
D-1330 | 3980 | CUGCCUAGGACCGGGUCAUCU | 335 | AGAUGACCCGGUCCUAGGCAG | 879 |
D-1331 D-1548 | 4008 | ACAGAGAGAUGGUAAGCAGCU | 336 | AGCUGCUUACCAUCUCUCUGU | 880 |
D-1332 | 4011 | GAGAGAUGGUAAGCAGCUGUA | 337 | UACAGCUGCUUACCAUCUCUC | 881 |
D-1333 | 4012 | AGAGAUGGUAAGCAGCUGUAU | 338 | AUACAGCUGCUUACCAUCUCU | 882 |
D-1334 | 4013 | GAGAUGGUAAGCAGCUGUAUG | 339 | CAUACAGCUGCUUACCAUCUC | 883 |
D-1335 | 4019 | GUAAGCAGCUGUAUGAAUGCU | 340 | AGCAUUCAUACAGCUGCUUAC | 884 |
D-1336 | 4022 | AGCAGCUGUAUGAAUGCUGAU | 341 | AUCAGCAUUCAUACAGCUGCU | 885 |
D-1337 | 4040 | GAUUUUAAAACCAGGUCAUGG | 342 | CCAUGACCUGGUUUUAAAAUC | 886 |
D-1338 | 4042 | UUUUAAAACCAGGUCAUGGGA | 343 | UCCCAUGACCUGGUUUUAAAA | 887 |
D-1339 | 4084 | CUGAACACUGACUGCACUUAC | 344 | GUAAGUGCAGUCAGUGUUCAG | 888 |
D-1340 | 4085 | UGAACACUGACUGCACUUACC | 345 | GGUAAGUGCAGUCAGUGUUCA | 889 |
D-1341 | 4098 | CACUUACCAGUCUGAUUUUAU | 346 | AUAAAAUCAGACUGGUAAGUG | 890 |
D-1342 | 4103 | ACCAGUCUGAUUUUAUCGUCA | 347 | UGACGAUAAAAUCAGACUGGU | 891 |
D-1343 | 4104 | CCAGUCUGAUUUUAUCGUCAA | 348 | UUGACGAUAAAAUCAGACUGG | 892 |
D-1344 | 4108 | UCUGAUUUUAUCGUCAAACAC | 349 | GUGUUUGACGAUAAAAUCAGA | 893 |
D-1345 D-1600 | 4109 | CUGAUUUUAUCGUCAAACACC | 350 | GGUGUUUGACGAUAAAAUCAG | 894 |
D-1346 | 4110 | UGAUUUUAUCGUCAAACACCA | 351 | UGGUGUUUGACGAUAAAAUCA | 895 |
D-1347 | 4111 | GAUUUUAUCGUCAAACACCAA | 352 | UUGGUGUUUGACGAUAAAAUC | 896 |
D-1348 | 4112 | AUUUUAUCGUCAAACACCAAG | 353 | CUUGGUGUUUGACGAUAAAAU | 897 |
D-1349 | 4115 | UUAUCGUCAAACACCAAGCCA | 354 | UGGCUUGGUGUUUGACGAUAA | 898 |
D-1350 | 4116 | UAUCGUCAAACACCAAGCCAG | 355 | CUGGCUUGGUGUUUGACGAUA | 899 |
D-1351 | 4142 | CAUGCUCAUGGCAAUCUGUUU | 356 | AAACAGAUUGCCAUGAGCAUG | 900 |
D-1352 | 4147 | UCAUGGCAAUCUGUUUGGGGC | 357 | GCCCCAAACAGAUUGCCAUGA | 901 |
D-1353 | 4169 | GUUUUGUUGUGGCACUAGCCA | 358 | UGGCUAGUGCCACAACAAAAC | 902 |
D-1354 | 4170 | UUUUGUUGUGGCACUAGCCAA | 359 | UUGGCUAGUGCCACAACAAAA | 903 |
D-1355 | 4171 | UUUGUUGUGGCACUAGCCAAA | 360 | UUUGGCUAGUGCCACAACAAA | 904 |
D-1356 | 4172 | UUGUUGUGGCACUAGCCAAAC | 361 | GUUUGGCUAGUGCCACAACAA | 905 |
D-1357 | 4174 | GUUGUGGCACUAGCCAAACAU | 362 | AUGUUUGGCUAGUGCCACAAC | 906 |
D-1358 | 4175 | UUGUGGCACUAGCCAAACAUA | 363 | UAUGUUUGGCUAGUGCCACAA | 907 |
D-1359 | 4176 | UGUGGCACUAGCCAAACAUAA | 364 | UUAUGUUUGGCUAGUGCCACA | 908 |
D-1360 | 4177 | GUGGCACUAGCCAAACAUAAA | 365 | UUUAUGUUUGGCUAGUGCCAC | 909 |
D-1361 | 4178 | UGGCACUAGCCAAACAUAAAG | 366 | CUUUAUGUUUGGCUAGUGCCA | 910 |
D-1362 | 4179 | GGCACUAGCCAAACAUAAAGG | 367 | CCUUUAUGUUUGGCUAGUGCC | 911 |
D-1363 | 4180 | GCACUAGCCAAACAUAAAGGG | 368 | CCCUUUAUGUUUGGCUAGUGC | 912 |
D-1364 | 4185 | AGCCAAACAUAAAGGGGCUUA | 369 | UAAGCCCCUUUAUGUUUGGCU | 913 |
D-1365 | 4186 | GCCAAACAUAAAGGGGCUUAA | 370 | UUAAGCCCCUUUAUGUUUGGC | 914 |
D-1366 | 4187 | CCAAACAUAAAGGGGCUUAAG | 371 | CUUAAGCCCCUUUAUGUUUGG | 915 |
D-1367 | 4188 | CAAACAUAAAGGGGCUUAAGU | 372 | ACUUAAGCCCCUUUAUGUUUG | 916 |
D-1368 | 4189 | AAACAUAAAGGGGCUUAAGUC | 373 | GACUUAAGCCCCUUUAUGUUU | 917 |
D-1369 | 4190 | AACAUAAAGGGGCUUAAGUCA | 374 | UGACUUAAGCCCCUUUAUGUU | 918 |
D-1370 | 4191 | ACAUAAAGGGGCUUAAGUCAG | 375 | CUGACUUAAGCCCCUUUAUGU | 919 |
D-1371 | 4193 | AUAAAGGGGCUUAAGUCAGCC | 376 | GGCUGACUUAAGCCCCUUUAU | 920 |
D-1372 | 4194 | UAAAGGGGCUUAAGUCAGCCU | 377 | AGGCUGACUUAAGCCCCUUUA | 921 |
D-1373 | 4197 | AGGGGCUUAAGUCAGCCUGCA | 378 | UGCAGGCUGACUUAAGCCCCU | 922 |
D-1374 | 4205 | AAGUCAGCCUGCAUACAGAGG | 379 | CCUCUGUAUGCAGGCUGACUU | 923 |
D-1375 | 4206 | AGUCAGCCUGCAUACAGAGGA | 380 | UCCUCUGUAUGCAGGCUGACU | 924 |
D-1376 | 4210 | AGCCUGCAUACAGAGGAUCGG | 381 | CCGAUCCUCUGUAUGCAGGCU | 925 |
D-1377 | 4211 | GCCUGCAUACAGAGGAUCGGG | 382 | CCCGAUCCUCUGUAUGCAGGC | 926 |
D-1378 | 4212 | CCUGCAUACAGAGGAUCGGGG | 383 | CCCCGAUCCUCUGUAUGCAGG | 927 |
D-1379 | 4219 | ACAGAGGAUCGGGGAGAGAAG | 384 | CUUCUCUCCCCGAUCCUCUGU | 928 |
D-1380 | 4262 | GAGUACUUACCAGAGUUUAAU | 385 | AUUAAACUCUGGUAAGUACUC | 929 |
D-2100 | 4297 | UCUGCACUAAAAUCCCCAAAC | 2819 | GUUUGGGGAUUUUAGUGCAGA | 2820 |
D-1381 | 4298 | CUGCACUAAAAUCCCCAAACU | 386 | AGUUUGGGGAUUUUAGUGCAG | 930 |
D-1382 | 4299 | UGCACUAAAAUCCCCAAACUG | 387 | CAGUUUGGGGAUUUUAGUGCA | 931 |
D-1383 | 4301 | CACUAAAAUCCCCAAACUGAC | 388 | GUCAGUUUGGGGAUUUUAGUG | 932 |
D-1384 | 4307 | AAUCCCCAAACUGACAGGUAA | 389 | UUACCUGUCAGUUUGGGGAUU | 933 |
D-1385 | 4312 | CCAAACUGACAGGUAAAUGUA | 390 | UACAUUUACCUGUCAGUUUGG | 934 |
D-1386 | 4313 | CAAACUGACAGGUAAAUGUAG | 391 | CUACAUUUACCUGUCAGUUUG | 935 |
D-1387 | 4314 | AAACUGACAGGUAAAUGUAGC | 392 | GCUACAUUUACCUGUCAGUUU | 936 |
D-1388 | 4316 | ACUGACAGGUAAAUGUAGCCC | 393 | GGGCUACAUUUACCUGUCAGU | 937 |
D-1389 | 4359 | AUCUAAAUCACACUAUUUUCG | 394 | CGAAAAUAGUGUGAUUUAGAU | 938 |
D-1390 | 4361 | CUAAAUCACACUAUUUUCGAG | 395 | CUCGAAAAUAGUGUGAUUUAG | 939 |
D-1391 | 4362 | UAAAUCACACUAUUUUCGAGA | 396 | UCUCGAAAAUAGUGUGAUUUA | 940 |
D-1392 | 4364 | AAUCACACUAUUUUCGAGAUC | 397 | GAUCUCGAAAAUAGUGUGAUU | 941 |
D-1393 | 4366 | UCACACUAUUUUCGAGAUCAU | 398 | AUGAUCUCGAAAAUAGUGUGA | 942 |
D-1394 | 4367 | CACACUAUUUUCGAGAUCAUG | 399 | CAUGAUCUCGAAAAUAGUGUG | 943 |
D-1395 | 4368 | ACACUAUUUUCGAGAUCAUGU | 400 | ACAUGAUCUCGAAAAUAGUGU | 944 |
D-1396 | 4370 | ACUAUUUUCGAGAUCAUGUAU | 401 | AUACAUGAUCUCGAAAAUAGU | 945 |
D-1397 | 4371 | CUAUUUUCGAGAUCAUGUAUA | 402 | UAUACAUGAUCUCGAAAAUAG | 946 |
D-1398 | 4373 | AUUUUCGAGAUCAUGUAUAAA | 403 | UUUAUACAUGAUCUCGAAAAU | 947 |
D-1399 | 4376 | UUCGAGAUCAUGUAUAAAAAG | 404 | CUUUUUAUACAUGAUCUCGAA | 948 |
D-1400 | 4399 | AAAAAAGAAGUCAUGCUGUGU | 405 | ACACAGCAUGACUUCUUUUUU | 949 |
D-1401 D-1777 D-1937 D-1943 D-1949 D-1955 D-1961 D-1967 D-1973 D-2041 D-2045 D-2050 D-2057 D-2058 D-2059 D-2060 D-2061 D-2085 D-2091 | 4412 | UGCUGUGUGGCCAAUUAUAAU | 406 | AUUAUAAUUGGCCACACAGCA | 950 |
D-1402 | 4476 | UUGGAGGGACCAGGAAAUGUA | 407 | UACAUUUCCUGGUCCCUCCAA | 951 |
D-1403 D-1742 | 4484 | ACCAGGAAAUGUAAGACACCA | 408 | UGGUGUCUUACAUUUCCUGGU | 952 |
D-1404 D-1743 | 4485 | CCAGGAAAUGUAAGACACCAA | 409 | UUGGUGUCUUACAUUUCCUGG | 953 |
D-1405 | 4522 | GUGUGCCUGAUGUCACCUCAU | 410 | AUGAGGUGACAUCAGGCACAC | 954 |
D-1406 | 4523 | UGUGCCUGAUGUCACCUCAUG | 411 | CAUGAGGUGACAUCAGGCACA | 955 |
D-1407 | 4524 | GUGCCUGAUGUCACCUCAUGA | 412 | UCAUGAGGUGACAUCAGGCAC | 956 |
D-1408 | 4526 | GCCUGAUGUCACCUCAUGAUU | 413 | AAUCAUGAGGUGACAUCAGGC | 957 |
D-1409 | 4556 | UUUUUUAACUCCUGCGCCAAG | 414 | CUUGGCGCAGGAGUUAAAAAA | 958 |
D-1410 | 4560 | UUAACUCCUGCGCCAAGGACA | 415 | UGUCCUUGGCGCAGGAGUUAA | 959 |
D-1411 | 4562 | AACUCCUGCGCCAAGGACAGU | 416 | ACUGUCCUUGGCGCAGGAGUU | 960 |
D-1412 | 4563 | ACUCCUGCGCCAAGGACAGUG | 417 | CACUGUCCUUGGCGCAGGAGU | 961 |
D-1413 | 4591 | UGUCCACCUUUGUGCUUUGCG | 418 | CGCAAAGCACAAAGGUGGACA | 962 |
D-1414 | 4593 | UCCACCUUUGUGCUUUGCGAG | 419 | CUCGCAAAGCACAAAGGUGGA | 963 |
D-1415 | 4595 | CACCUUUGUGCUUUGCGAGGC | 420 | GCCUCGCAAAGCACAAAGGUG | 964 |
D-1416 | 4597 | CCUUUGUGCUUUGCGAGGCCG | 421 | CGGCCUCGCAAAGCACAAAGG | 965 |
D-1417 | 4617 | GAGCCCAGGCAUCUGCUCGCC | 422 | GGCGAGCAGAUGCCUGGGCUC | 966 |
D-1418 | 4620 | CCCAGGCAUCUGCUCGCCUGC | 423 | GCAGGCGAGCAGAUGCCUGGG | 967 |
D-1419 | 4622 | CAGGCAUCUGCUCGCCUGCCA | 424 | UGGCAGGCGAGCAGAUGCCUG | 968 |
D-1420 | 4625 | GCAUCUGCUCGCCUGCCACGG | 425 | CCGUGGCAGGCGAGCAGAUGC | 969 |
D-1421 | 4638 | UGCCACGGCUGACCAGAGAAG | 426 | CUUCUCUGGUCAGCCGUGGCA | 970 |
D-1422 | 4668 | GAGCUCUGCCUUAGACGACGU | 427 | ACGUCGUCUAAGGCAGAGCUC | 971 |
D-1423 | 4669 | AGCUCUGCCUUAGACGACGUG | 428 | CACGUCGUCUAAGGCAGAGCU | 972 |
D-1424 | 4670 | GCUCUGCCUUAGACGACGUGU | 429 | ACACGUCGUCUAAGGCAGAGC | 973 |
D-1425 | 4671 | CUCUGCCUUAGACGACGUGUU | 430 | AACACGUCGUCUAAGGCAGAG | 974 |
D-1426 | 4672 | UCUGCCUUAGACGACGUGUUA | 431 | UAACACGUCGUCUAAGGCAGA | 975 |
D-1427 | 4673 | CUGCCUUAGACGACGUGUUAC | 432 | GUAACACGUCGUCUAAGGCAG | 976 |
D-1428 | 4675 | GCCUUAGACGACGUGUUACAG | 433 | CUGUAACACGUCGUCUAAGGC | 977 |
D-1429 | 4676 | CCUUAGACGACGUGUUACAGU | 434 | ACUGUAACACGUCGUCUAAGG | 978 |
D-1430 | 4677 | CUUAGACGACGUGUUACAGUA | 435 | UACUGUAACACGUCGUCUAAG | 979 |
D-1431 | 4679 | UAGACGACGUGUUACAGUAUG | 436 | CAUACUGUAACACGUCGUCUA | 980 |
D-1432 | 4682 | ACGACGUGUUACAGUAUGAAC | 437 | GUUCAUACUGUAACACGUCGU | 981 |
D-1433 | 4703 | ACACAGCAGAGGCACCCUCGU | 438 | ACGAGGGUGCCUCUGCUGUGU | 982 |
D-1434 | 4704 | CACAGCAGAGGCACCCUCGUA | 439 | UACGAGGGUGCCUCUGCUGUG | 983 |
D-1435 | 4705 | ACAGCAGAGGCACCCUCGUAU | 440 | AUACGAGGGUGCCUCUGCUGU | 984 |
D-1436 | 4706 | CAGCAGAGGCACCCUCGUAUG | 441 | CAUACGAGGGUGCCUCUGCUG | 985 |
D-1437 | 4707 | AGCAGAGGCACCCUCGUAUGU | 442 | ACAUACGAGGGUGCCUCUGCU | 986 |
D-1438 | 4708 | GCAGAGGCACCCUCGUAUGUU | 443 | AACAUACGAGGGUGCCUCUGC | 987 |
D-1439 | 4709 | CAGAGGCACCCUCGUAUGUUU | 444 | AAACAUACGAGGGUGCCUCUG | 988 |
D-1440 | 4710 | AGAGGCACCCUCGUAUGUUUU | 445 | AAAACAUACGAGGGUGCCUCU | 989 |
D-1441 | 4711 | GAGGCACCCUCGUAUGUUUUG | 446 | CAAAACAUACGAGGGUGCCUC | 990 |
D-1442 | 4713 | GGCACCCUCGUAUGUUUUGAA | 447 | UUCAAAACAUACGAGGGUGCC | 991 |
D-1443 D-1744 D-1896 D-1902 D-1908 D-1914 D-1920 D-1926 D-1932 D-2062 D-2063 D-2089 | 4717 | CCCUCGUAUGUUUUGAAAGUU | 448 | AACUUUCAAAACAUACGAGGG | 992 |
D-1444 D-1778 | 4777 | AUGUAAAACUAUACUGACCCG | 449 | CGGGUCAGUAUAGUUUUACAU | 993 |
D-1445 | 4778 | UGUAAAACUAUACUGACCCGU | 450 | ACGGGUCAGUAUAGUUUUACA | 994 |
D-1446 D-1590 | 4779 | GUAAAACUAUACUGACCCGUU | 451 | AACGGGUCAGUAUAGUUUUAC | 995 |
D-1447 D-1779 | 4780 | UAAAACUAUACUGACCCGUUU | 452 | AAACGGGUCAGUAUAGUUUUA | 996 |
D-1448 | 4784 | ACUAUACUGACCCGUUUUCAG | 453 | CUGAAAACGGGUCAGUAUAGU | 997 |
D-1449 | 4787 | AUACUGACCCGUUUUCAGUUU | 454 | AAACUGAAAACGGGUCAGUAU | 998 |
D-1450 D-1745 | 4799 | UUUCAGUUUUAAAGGGUCGUG | 455 | CACGACCCUUUAAAACUGAAA | 999 |
D-1451 | 4800 | UUCAGUUUUAAAGGGUCGUGA | 456 | UCACGACCCUUUAAAACUGAA | 1000 |
D-1452 D-1746 | 4801 | UCAGUUUUAAAGGGUCGUGAG | 457 | CUCACGACCCUUUAAAACUGA | 1001 |
D-1453 D-1747 | 4802 | CAGUUUUAAAGGGUCGUGAGA | 458 | UCUCACGACCCUUUAAAACUG | 1002 |
D-1454 D-1630 | 4804 | GUUUUAAAGGGUCGUGAGAAA | 459 | UUUCUCACGACCCUUUAAAAC | 1003 |
D-1454 | 4805 | UUUUAAAGGGUCGUGAGAAAC | 460 | GUUUCUCACGACCCUUUAAAA | 1004 |
D-1455 D-1748 | 4806 | UUUAAAGGGUCGUGAGAAACU | 461 | AGUUUCUCACGACCCUUUAAA | 1005 |
D-1456 | 4808 | UAAAGGGUCGUGAGAAACUGG | 462 | CCAGUUUCUCACGACCCUUUA | 1006 |
D-1457 | 4809 | AAAGGGUCGUGAGAAACUGGC | 463 | GCCAGUUUCUCACGACCCUUU | 1007 |
D-1458 D-1780 | 4819 | GAGAAACUGGCUGGUCCAAUG | 464 | CAUUGGACCAGCCAGUUUCUC | 1008 |
D-1459 | 4830 | UGGUCCAAUGGGAUUUACAGC | 465 | GCUGUAAAUCCCAUUGGACCA | 1009 |
D-1460 D-1781 D-1894 D-1900 D-1906 D-1912 D-1918 D-1924 D-1930 D-2064 D-2065 D-2066 D-2067 D-2068 D-2092 | 4834 | CCAAUGGGAUUUACAGCAACA | 466 | UGUUGCUGUAAAUCCCAUUGG | 1010 |
D-1461 D-1596 | 4927 | UUUAAGUUUGCUCUUAAUCGU | 467 | ACGAUUAAGAGCAAACUUAAA | 1011 |
D-1462 D-1594 | 4928 | UUAAGUUUGCUCUUAAUCGUA | 468 | UACGAUUAAGAGCAAACUUAA | 1012 |
D-1463 D-1782 | 4931 | AGUUUGCUCUUAAUCGUAUGG | 469 | CCAUACGAUUAAGAGCAAACU | 1013 |
D-1464 D-1783 D-1895 D-1901 D-1907 D-1913 D-1919 D-1925 D-1931 D-2069 D-2070 D-2071 D-2072 D-2073 D-2074 D-2088 | 4932 | GUUUGCUCUUAAUCGUAUGGA | 470 | UCCAUACGAUUAAGAGCAAAC | 1014 |
D-1465 D-1784 | 4933 | UUUGCUCUUAAUCGUAUGGAA | 471 | UUCCAUACGAUUAAGAGCAAA | 1015 |
D-1466 D-1785 | 4935 | UGCUCUUAAUCGUAUGGAAGC | 472 | GCUUCCAUACGAUUAAGAGCA | 1016 |
D-1467 D-1786 | 4939 | CUUAAUCGUAUGGAAGCUUGA | 473 | UCAAGCUUCCAUACGAUUAAG | 1017 |
D-1468 D-1787 | 4940 | UUAAUCGUAUGGAAGCUUGAG | 474 | CUCAAGCUUCCAUACGAUUAA | 1018 |
D-1469 D-1749 | 4950 | GGAAGCUUGAGCUAUGUGUUG | 475 | CAACACAUAGCUCAAGCUUCC | 1019 |
D-1470 D-1750 | 4951 | GAAGCUUGAGCUAUGUGUUGG | 476 | CCAACACAUAGCUCAAGCUUC | 1020 |
D-1471 D-1751 | 4953 | AGCUUGAGCUAUGUGUUGGAA | 477 | UUCCAACACAUAGCUCAAGCU | 1021 |
D-1472 D-1752 | 4954 | GCUUGAGCUAUGUGUUGGAAG | 478 | CUUCCAACACAUAGCUCAAGC | 1022 |
D-1473 D-1753 | 4955 | CUUGAGCUAUGUGUUGGAAGU | 479 | ACUUCCAACACAUAGCUCAAG | 1023 |
D-1474 D-1593 | 4956 | UUGAGCUAUGUGUUGGAAGUG | 480 | CACUUCCAACACAUAGCUCAA | 1024 |
D-1475 D-1631 D-1696 D-1703 D-1710 D-1717 D-1724 D-1731 D-1738 D-1857 D-2011 D-2020 | 4957 | UGAGCUAUGUGUUGGAAGUGC | 481 | GCACUUCCAACACAUAGCUCA | 1025 |
D-1476 D-1754 | 4958 | GAGCUAUGUGUUGGAAGUGCC | 482 | GGCACUUCCAACACAUAGCUC | 1026 |
D-1477 D-1755 | 4965 | GUGUUGGAAGUGCCCUGGUUU | 483 | AAACCAGGGCACUUCCAACAC | 1027 |
D-1478 D-1756 | 4970 | GGAAGUGCCCUGGUUUUAAUC | 484 | GAUUAAAACCAGGGCACUUCC | 1028 |
D-1479 | 4979 | CUGGUUUUAAUCCAUACACAA | 485 | UUGUGUAUGGAUUAAAACCAG | 1029 |
D-1480 | 4985 | UUAAUCCAUACACAAAGACGG | 486 | CCGUCUUUGUGUAUGGAUUAA | 1030 |
D-1481 | 4986 | UAAUCCAUACACAAAGACGGU | 487 | ACCGUCUUUGUGUAUGGAUUA | 1031 |
D-1482 | 4987 | AAUCCAUACACAAAGACGGUA | 488 | UACCGUCUUUGUGUAUGGAUU | 1032 |
D-1483 | 4988 | AUCCAUACACAAAGACGGUAC | 489 | GUACCGUCUUUGUGUAUGGAU | 1033 |
D-1484 D-1788 | 4989 | UCCAUACACAAAGACGGUACA | 490 | UGUACCGUCUUUGUGUAUGGA | 1034 |
D-1485 D-1789 | 4991 | CAUACACAAAGACGGUACAUA | 491 | UAUGUACCGUCUUUGUGUAUG | 1035 |
D-1486 D-1634 | 4993 | UACACAAAGACGGUACAUAAU | 492 | AUUAUGUACCGUCUUUGUGUA | 1036 |
D-1487 | 4994 | ACACAAAGACGGUACAUAAUC | 493 | GAUUAUGUACCGUCUUUGUGU | 1037 |
D-1488 D-1546 D-2036 | 4995 | CACAAAGACGGUACAUAAUCC | 494 | GGAUUAUGUACCGUCUUUGUG | 1038 |
D-1489 D-1757 D-2037 | 4996 | ACAAAGACGGUACAUAAUCCU | 495 | AGGAUUAUGUACCGUCUUUGU | 1039 |
D-1490 D-1758 D-2038 | 4997 | CAAAGACGGUACAUAAUCCUA | 496 | UAGGAUUAUGUACCGUCUUUG | 1040 |
D-1491 D-1562 D-2039 | 4998 | AAAGACGGUACAUAAUCCUAC | 497 | GUAGGAUUAUGUACCGUCUUU | 1041 |
D-1492 D-1614 D-1697 D-1702 D-1709 D-1716 D-1723 D-1730 D-1737 D-1856 D-1863 D-1865 D-1866 D-1869 D-1872 D-1877 D-1878 D-1879 D-1880 D-1881 D-1884 D-1887 D-1978 D-1987 D-1992 D-1997 D-2002 D-2008 D-2017 D-2049 D-2054 D-2090 | 4999 | AAGACGGUACAUAAUCCUACA | 498 | UGUAGGAUUAUGUACCGUCUU | 1042 |
D-1493 D-1566 | 5005 | GUACAUAAUCCUACAGGUUUA | 499 | UAAACCUGUAGGAUUAUGUAC | 1043 |
D-1494 D-1759 | 5008 | CAUAAUCCUACAGGUUUAAAU | 500 | AUUUAAACCUGUAGGAUUAUG | 1044 |
D-1495 D-1633 | 5012 | AUCCUACAGGUUUAAAUGUAC | 501 | GUACAUUUAAACCUGUAGGAU | 1045 |
D-1496 D-1564 D-2040 | 5042 | UAGUUUGGAAUUCUUUGCUCU | 502 | AGAGCAAAGAAUUCCAAACUA | 1046 |
D-1497 D-1611 D-1698 D-1705 D-1712 D-1719 D-1726 D-1733 D-1740 D-1855 D-1864 D-1870 D-1875 D-1883 D-1886 D-1980 D-1984 D-1989 D-1994 D-1999 D-2004 D-2013 D-2022 D-2044 D-2048 D-2053 | 5043 | AGUUUGGAAUUCUUUGCUCUA | 503 | UAGAGCAAAGAAUUCCAAACU | 1047 |
D-1498 D-1612 D-1699 D-1704 D-1711 D-1718 D-1725 D-1732 D-1739 D-1854 D-1868 D-1871 D-1876 D-1882 D-1885 D-1888 D-1979 D-1983 D-1988 D-1993 D-1998 D-2003 D-2012 D-2021 D-2043 D-2047 D-2052 | 5045 | UUUGGAAUUCUUUGCUCUACU | 504 | AGUAGAGCAAAGAAUUCCAAA | 1048 |
D-1499 D-1760 | 5056 | UUGCUCUACUGUUUACAUUGC | 505 | GCAAUGUAAACAGUAGAGCAA | 1049 |
D-1500 D-1591 D-1624 | 5060 | UCUACUGUUUACAUUGCAGAU | 506 | AUCUGCAAUGUAAACAGUAGA | 1050 |
D-1501 D-1577 | 5062 | UACUGUUUACAUUGCAGAUUG | 507 | CAAUCUGCAAUGUAAACAGUA | 1051 |
D-1502 | 5063 | ACUGUUUACAUUGCAGAUUGC | 508 | GCAAUCUGCAAUGUAAACAGU | 1052 |
D-1503 D-1603 | 5067 | UUUACAUUGCAGAUUGCUAUA | 509 | UAUAGCAAUCUGCAAUGUAAA | 1053 |
D-1504 D-1629 | 5068 | UUACAUUGCAGAUUGCUAUAA | 510 | UUAUAGCAAUCUGCAAUGUAA | 1054 |
D-1505 D-1628 | 5069 | UACAUUGCAGAUUGCUAUAAU | 511 | AUUAUAGCAAUCUGCAAUGUA | 1055 |
D-1506 | 5079 | AUUGCUAUAAUUUCAAGGAGU | 512 | ACUCCUUGAAAUUAUAGCAAU | 1056 |
D-1507 D-1623 D-1846 D-1706 D-1713 D-1720 D-1727 D-1734 D-1741 D-1761 D-1846 D-1862 D-1874 D-1981 D-1985 D-1990 D-1995 D-2000 D-2005 D-2014 D-2023 | 5080 | UUGCUAUAAUUUCAAGGAGUG | 513 | CACUCCUUGAAAUUAUAGCAA | 1057 |
D-1508 D-1762 | 5114 | AAUGAUGCACUUUAGGAUGUU | 514 | AACAUCCUAAAGUGCAUCAUU | 1058 |
D-1509 D-1627 D-1763 | 5115 | AUGAUGCACUUUAGGAUGUUU | 515 | AAACAUCCUAAAGUGCAUCAU | 1059 |
D-1510 D-1764 | 5154 | ACAUGAAUCAUUCACAUGACC | 516 | GGUCAUGUGAAUGAUUCAUGU | 1060 |
D-1511 D-1765 | 5155 | CAUGAAUCAUUCACAUGACCA | 517 | UGGUCAUGUGAAUGAUUCAUG | 1061 |
D-1512 D-1572 | 5194 | AAAUACAUGUCUAGUCUGUCC | 518 | GGACAGACUAGACAUGUAUUU | 1062 |
D-1512B D-1766 | 5195 | AAUACAUGUCUAGUCUGUCCU | 519 | AGGACAGACUAGACAUGUAUU | 1063 |
D-1513 D-1767 | 5200 | AUGUCUAGUCUGUCCUUUAAU | 520 | AUUAAAGGACAGACUAGACAU | 1064 |
D-1514 D-1790 | 5201 | UGUCUAGUCUGUCCUUUAAUA | 521 | UAUUAAAGGACAGACUAGACA | 1065 |
D-1515 D-1791 | 5203 | UCUAGUCUGUCCUUUAAUAGC | 522 | GCUAUUAAAGGACAGACUAGA | 1066 |
D-1516 D-1792 D-1892 D-1898 D-1904 D-1910 D-1916 D-1922 D-1928 | 5204 | CUAGUCUGUCCUUUAAUAGCU | 523 | AGCUAUUAAAGGACAGACUAG | 1067 |
D-1517 | 5205 | UAGUCUGUCCUUUAAUAGCUC | 524 | GAGCUAUUAAAGGACAGACUA | 1068 |
D-1518 D-1793 | 5207 | GUCUGUCCUUUAAUAGCUCUC | 525 | GAGAGCUAUUAAAGGACAGAC | 1069 |
D-1519 D-1768 D-1891 D-1897 D-1903 D-1909 D-1915 D-1921 D-1927 D-2075 D-2077 | 5247 | AAUCAGAUCAUUACCAGUUAG | 526 | CUAACUGGUAAUGAUCUGAUU | 1070 |
D-1520 D-1769 D-1934 D-1940 D-1946 D-1952 D-1958 D-1964 D-1970 D-2076 D-2078 | 5249 | UCAGAUCAUUACCAGUUAGCU | 527 | AGCUAACUGGUAAUGAUCUGA | 1071 |
D-1521 | 5250 | CAGAUCAUUACCAGUUAGCUU | 528 | AAGCUAACUGGUAAUGAUCUG | 1072 |
D-1522 D-1770 | 5251 | AGAUCAUUACCAGUUAGCUUU | 529 | AAAGCUAACUGGUAAUGAUCU | 1073 |
D-1523 D-1771 | 5254 | UCAUUACCAGUUAGCUUUUAA | 530 | UUAAAAGCUAACUGGUAAUGA | 1074 |
D-1524 D-1622 | 5255 | CAUUACCAGUUAGCUUUUAAA | 531 | UUUAAAAGCUAACUGGUAAUG | 1075 |
D-1525 D-1772 | 5259 | ACCAGUUAGCUUUUAAAGCAC | 532 | GUGCUUUAAAAGCUAACUGGU | 1076 |
D-1526 D-1773 D-1936 D-1942 D-1948 D-1954 D-1960 D-1966 D-1972 D-2042 D-2046 D-2051 D-2079 D-2080 D-2081 D-2082 D-2083 D-2093 | 5274 | AAGCACAUUUGUUUAAGACUA | 533 | UAGUCUUAAACAAAUGUGCUU | 1077 |
D-1527 D-1774 D-1893 D-1899 D-1905 D-1911 D-1917 D-1923 D-1929 D-1975 D-1976 D-1977 D-1982 D-1986 D-1991 D-1996 D-2001 D-2084 | 5276 | GCACAUUUGUUUAAGACUAUG | 534 | CAUAGUCUUAAACAAAUGUGC | 1078 |
D-1528 | 5292 | CUAUGUUUUUGGAAAAAUACG | 535 | CGUAUUUUUCCAAAAACAUAG | 1079 |
D-1529 | 5296 | GUUUUUGGAAAAAUACGCUAC | 536 | GUAGCGUAUUUUUCCAAAAAC | 1080 |
D-1530 | 5300 | UUGGAAAAAUACGCUACAGAA | 537 | UUCUGUAGCGUAUUUUUCCAA | 1081 |
D-1531 D-1625 | 5338 | AAUAAAUGAGAUGCUACUAAU | 538 | AUUAGUAGCAUCUCAUUUAUU | 1082 |
D-1532 D-1775 | 5344 | UGAGAUGCUACUAAUUGUUUU | 539 | AAAACAAUUAGUAGCAUCUCA | 1083 |
D-1533 | 5362 | UUUGGAAUCUGUUGUUUCUGC | 540 | GCAGAAACAACAGAUUCCAAA | 1084 |
D-1534 | 5377 | UUCUGCCAAAGGUAAAUUAAC | 541 | GUUAAUUUACCUUUGGCAGAA | 1085 |
D-1535 | 5378 | UCUGCCAAAGGUAAAUUAACU | 542 | AGUUAAUUUACCUUUGGCAGA | 1086 |
D-1536 D-1776 | 5402 | GAUUUAUUCAGGAAUCCCCAU | 543 | AUGGGGAUUCCUGAAUAAAUC | 1087 |
D-1537 | 5407 | AUUCAGGAAUCCCCAUUUGAA | 544 | UUCAAAUGGGGAUUCCUGAAU | 1088 |
D-1538 | 5412 | GGAAUCCCCAUUUGAAUUUGU | 545 | ACAAAUUCAAAUGGGGAUUCC | 1089 |
下
表 2提供了在本文揭露的實驗中使用的具有對雙股體的化學修飾的示例性有義股和反義股的序列。在
表 2中,根據以下符號列出了核苷酸序列:a、u、g、和c = 對應的2ʹ-O-甲基核糖核苷酸;Af、Uf、Gf、和Cf = 對應的2ʹ-去氧-2ʹ-氟(「2ʹ-氟」)核糖核苷酸;和invAb = 反向無鹼基去氧核苷酸(即當在股的3'端時,經由其3'位置處的取代基連接至相鄰核苷酸(3'-3'鍵)或者當在股的5'端時,經由其5'位置處的取代基連接至相鄰核苷酸(5'-5'核苷酸間鍵)的無鹼基去氧核苷酸)。在序列中「s」的插入指示兩個相鄰的核苷酸藉由硫代磷酸二酯基團(例如硫代磷酸酯核苷酸間鍵)連接。除非另有指示,否則所有其他核苷酸都藉由3'-5'磷酸二酯基團連接。[DCA-C6]表示綴合的二十二酸(C22)。[GalNAc3]表示式VII中所示的GalNAc部分。當「s」跟隨[GalNAc3]或[DCA-C6]符號時,[DCA-C6]和[GalNAc]配體經由磷酸二酯鍵或硫代磷酸酯鍵共價附接至有義股的5'端的5'末端核苷酸。當invAb核苷酸係有義股的5'端的5ʹ末端核苷酸時,它經由5'-5'鍵連接至相鄰核苷酸,且該GalNAc或C22部分共價附接至invAb核苷酸的3'碳。在其他方面,該部分共價附接至有義股的5'末端核苷酸的5'碳。
[
表 2]
:經修飾的 FAM13A siRNA 序列
雙股體編號 | 有義序列( 5'-3' ) | SEQ ID NO: | 反義序列( 5'-3' ) | SEQ ID NO: |
D-1001 | csasuguaCfcCfCfAfAfgucagcaas{invAb} | 1090 | asUfsugcuGfacuuggGfgUfacaugsusu | 1938 |
D-1002 | usgsuaccCfcAfAfGfUfcagcaaugs{invAb} | 1091 | asCfsauugCfugacuuGfgGfguacasusu | 1939 |
D-1003 | gsusacccCfaAfGfUfCfagcaaugus{invAb} | 1092 | asAfscauuGfcugacuUfgGfgguacsusu | 1940 |
D-1004 | gscsaaugUfgUfCfUfGfcaaccggas{invAb} | 1093 | asUfsccggUfugcagaCfaCfauugcsusu | 1941 |
D-1005 | csasauguGfuCfUfGfCfaaccggags{invAb} | 1094 | usCfsuccgGfuugcagAfcAfcauugsusu | 1942 |
D-1006 | asasugugUfcUfGfCfAfaccggagas{invAb} | 1095 | usUfscuccGfguugcaGfaCfacauususu | 1943 |
D-1007 | usgsugucUfgCfAfAfCfcggagaacs{invAb} | 1096 | asGfsuucuCfcgguugCfaGfacacasusu | 1944 |
D-1008 | gsusgucuGfcAfAfCfCfggagaacus{invAb} | 1097 | asAfsguucUfccgguuGfcAfgacacsusu | 1945 |
D-1009 | usgsucugCfaAfCfCfGfgagaacucs{invAb} | 1098 | asGfsaguuCfuccgguUfgCfagacasusu | 1946 |
D-1010 | gsuscugcAfaCfCfGfGfagaacucus{invAb} | 1099 | asAfsgaguUfcuccggUfuGfcagacsusu | 1947 |
D-1011 | uscsugcaAfcCfGfGfAfgaacucuus{invAb} | 1100 | usAfsagagUfucuccgGfuUfgcagasusu | 1948 |
D-1012 | csusgcaaCfcGfGfAfGfaacucuuas{invAb} | 1101 | asUfsaagaGfuucuccGfgUfugcagsusu | 1949 |
D-1013 | usgscaacCfgGfAfGfAfacucuuags{invAb} | 1102 | usCfsuaagAfguucucCfgGfuugcasusu | 1950 |
D-1014 | gscsaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1103 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguugcsusu | 1951 |
D-1015 | asasccggAfgAfAfCfUfcuuagaaas{invAb} | 1104 | asUfsuucuAfagaguuCfuCfcgguususu | 1952 |
D-1016 | uscsuuagAfaAfGfAfAfccauccgas{invAb} | 1105 | asUfscggaUfgguucuUfuCfuaagasusu | 1953 |
D-1017 | csusuagaAfaGfAfAfCfcauccgaus{invAb} | 1106 | asAfsucggAfugguucUfuUfcuaagsusu | 1954 |
D-1018 | ususagaaAfgAfAfCfCfauccgaucs{invAb} | 1107 | usGfsaucgGfaugguuCfuUfucuaasusu | 1955 |
D-1019 | asgsaaagAfaCfCfAfUfccgaucags{invAb} | 1108 | asCfsugauCfggauggUfuCfuuucususu | 1956 |
D-1020 | asasagaaCfcAfUfCfCfgaucagcus{invAb} | 1109 | asAfsgcugAfucggauGfgUfucuuususu | 1957 |
D-1021 | asasgaacCfaUfCfCfGfaucagcugs{invAb} | 1110 | asCfsagcuGfaucggaUfgGfuucuususu | 1958 |
D-1022 | gsasaccaUfcCfGfAfUfcagcuguas{invAb} | 1111 | asUfsacagCfugaucgGfaUfgguucsusu | 1959 |
D-1023 | ascscaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1112 | usUfscuacAfgcugauCfgGfauggususu | 1960 |
D-1024 | cscsgaucAfgCfUfGfUfagaacaacs{invAb} | 1113 | usGfsuuguUfcuacagCfuGfaucggsusu | 1961 |
D-1025 | gsasuguuAfaUfAfAfCfucuggaggs{invAb} | 1114 | asCfscuccAfgaguuaUfuAfacaucsusu | 1962 |
D-1026 | usasauaaCfuCfUfGfGfaggucaaas{invAb} | 1115 | asUfsuugaCfcuccagAfgUfuauuasusu | 1963 |
D-1027 | asusaacuCfuGfGfAfGfgucaaagus{invAb} | 1116 | asAfscuuuGfaccuccAfgAfguuaususu | 1964 |
D-1028 | asuscuggAfaCfAfCfUfaucagcaus{invAb} | 1117 | asAfsugcuGfauagugUfuCfcagaususu | 1965 |
D-1029 | asgsgaugAfaGfUfUfCfgacaugggs{invAb} | 1118 | usCfsccauGfucgaacUfuCfauccususu | 1966 |
D-1030 | gsusucgaCfaUfGfGfGfagagacaas{invAb} | 1119 | asUfsugucUfcucccaUfgUfcgaacsusu | 1967 |
D-1031 | csgsacauGfgGfAfGfAfgacaagggs{invAb} | 1120 | usCfsccuuGfucucucCfcAfugucgsusu | 1968 |
D-1032 | ascsauggGfaGfAfGfAfcaagggacs{invAb} | 1121 | asGfsucccUfugucucUfcCfcaugususu | 1969 |
D-1033 | asusgggaGfaGfAfCfAfagggacuus{invAb} | 1122 | usAfsagucCfcuugucUfcUfcccaususu | 1970 |
D-1034 | gsgsgagaGfaCfAfAfGfggacuuaus{invAb} | 1123 | asAfsuaagUfcccuugUfcUfcucccsusu | 1971 |
D-1035 | gsgsagagAfcAfAfGfGfgacuuaucs{invAb} | 1124 | usGfsauaaGfucccuuGfuCfucuccsusu | 1972 |
D-1036 | gsasgagaCfaAfGfGfGfacuuaucas{invAb} | 1125 | usUfsgauaAfgucccuUfgUfcucucsusu | 1973 |
D-1037 | gsascaagGfgAfCfUfUfaucaacaas{invAb} | 1126 | usUfsuguuGfauaaguCfcCfuugucsusu | 1974 |
D-1038 | ascsaaggGfaCfUfUfAfucaacaaas{invAb} | 1127 | asUfsuuguUfgauaagUfcCfcuugususu | 1975 |
D-1039 | gsgsgacuUfaUfCfAfAfcaaagaaas{invAb} | 1128 | usUfsuucuUfuguugaUfaAfgucccsusu | 1976 |
D-1040 | asasgaaaAfuAfCfUfCfcuucugggs{invAb} | 1129 | asCfsccagAfaggaguAfuUfuucuususu | 1977 |
D-1041 | asusacucCfuUfCfUfGfgguucaacs{invAb} | 1130 | asGfsuugaAfcccagaAfgGfaguaususu | 1978 |
D-1042 | gsusucaaCfcAfCfCfUfugaugauus{invAb} | 1131 | asAfsaucaUfcaagguGfgUfugaacsusu | 1979 |
D-1043 | ususcaacCfaCfCfUfUfgaugauugs{invAb} | 1132 | asCfsaaucAfucaaggUfgGfuugaasusu | 1980 |
D-1044 | ususgaauAfcUfCfAfGfgaagucgas{invAb} | 1133 | usUfscgacUfuccugaGfuAfuucaasusu | 1981 |
D-1045 | ascsucagGfaAfGfUfCfgaaaaggus{invAb} | 1134 | usAfsccuuUfucgacuUfcCfugagususu | 1982 |
D-1046 | csuscaggAfaGfUfCfGfaaaagguas{invAb} | 1135 | asUfsaccuUfuucgacUfuCfcugagsusu | 1983 |
D-1047 | uscsaggaAfgUfCfGfAfaaagguacs{invAb} | 1136 | usGfsuaccUfuuucgaCfuUfccugasusu | 1984 |
D-1048 | asgsgaagUfcGfAfAfAfagguacacs{invAb} | 1137 | usGfsuguaCfcuuuucGfaCfuuccususu | 1985 |
D-1049 | uscsgaaaAfgGfUfAfCfacaaaaaus{invAb} | 1138 | usAfsuuuuUfguguacCfuUfuucgasusu | 1986 |
D-1050 | csgsaaaaGfgUfAfCfAfcaaaaauas{invAb} | 1139 | asUfsauuuUfuguguaCfcUfuuucgsusu | 1987 |
D-1051 | gsasgaaaGfgAfGfCfAfagccuaaas{invAb} | 1140 | asUfsuuagGfcuugcuCfcUfuucucsusu | 1988 |
D-1052 | asgsaaagGfaGfCfAfAfgccuaaacs{invAb} | 1141 | asGfsuuuaGfgcuugcUfcCfuuucususu | 1989 |
D-1053 | gsasaaggAfgCfAfAfGfccuaaacgs{invAb} | 1142 | asCfsguuuAfggcuugCfuCfcuuucsusu | 1990 |
D-1054 | asgsgagcAfaGfCfCfUfaaacgucas{invAb} | 1143 | asUfsgacgUfuuaggcUfuGfcuccususu | 1991 |
D-1055 | gsgsagcaAfgCfCfUfAfaacgucags{invAb} | 1144 | usCfsugacGfuuuaggCfuUfgcuccsusu | 1992 |
D-1056 | gsasgcaaGfcCfUfAfAfacgucagas{invAb} | 1145 | usUfscugaCfguuuagGfcUfugcucsusu | 1993 |
D-1057 | asgscaagCfcUfAfAfAfcgucagaas{invAb} | 1146 | usUfsucugAfcguuuaGfgCfuugcususu | 1994 |
D-1058 | gscsaagcCfuAfAfAfCfgucagaaas{invAb} | 1147 | asUfsuucuGfacguuuAfgGfcuugcsusu | 1995 |
D-1059 | csasagccUfaAfAfCfGfucagaaaus{invAb} | 1148 | asAfsuuucUfgacguuUfaGfgcuugsusu | 1996 |
D-1060 | asasgccuAfaAfCfGfUfcagaaaucs{invAb} | 1149 | asGfsauuuCfugacguUfuAfggcuususu | 1997 |
D-1061 | gsuscagaAfaUfCfCfAfguacuaaas{invAb} | 1150 | asUfsuuagUfacuggaUfuUfcugacsusu | 1998 |
D-1062 | uscsagaaAfuCfCfAfGfuacuaaacs{invAb} | 1151 | asGfsuuuaGfuacuggAfuUfucugasusu | 1999 |
D-1063 | ususucugAfgCfUfUfCfaugacaaus{invAb} | 1152 | asAfsuuguCfaugaagCfuCfagaaasusu | 2000 |
D-1064 | asgscuucAfuGfAfCfAfaucaggacs{invAb} | 1153 | asGfsuccuGfauugucAfuGfaagcususu | 2001 |
D-1065 | ususcaugAfcAfAfUfCfaggacggus{invAb} | 1154 | asAfsccguCfcugauuGfuCfaugaasusu | 2002 |
D-1066 | uscsaugaCfaAfUfCfAfggacggucs{invAb} | 1155 | asGfsaccgUfccugauUfgUfcaugasusu | 2003 |
D-1067 | csasugacAfaUfCfAfGfgacggucus{invAb} | 1156 | asAfsgaccGfuccugaUfuGfucaugsusu | 2004 |
D-1068 | asusgacaAfuCfAfGfGfacggucuus{invAb} | 1157 | asAfsagacCfguccugAfuUfgucaususu | 2005 |
D-1069 | usgsacaaUfcAfGfGfAfcggucuugs{invAb} | 1158 | asCfsaagaCfcguccuGfaUfugucasusu | 2006 |
D-1070 | gsascaauCfaGfGfAfCfggucuugus{invAb} | 1159 | asAfscaagAfccguccUfgAfuugucsusu | 2007 |
D-1071 | ascsaaucAfgGfAfCfGfgucuugugs{invAb} | 1160 | usCfsacaaGfaccgucCfuGfauugususu | 2008 |
D-1072 | asasucagGfaCfGfGfUfcuugugaas{invAb} | 1161 | asUfsucacAfagaccgUfcCfugauususu | 2009 |
D-1073 | asuscaggAfcGfGfUfCfuugugaaus{invAb} | 1162 | usAfsuucaCfaagaccGfuCfcugaususu | 2010 |
D-1074 | uscsaggaCfgGfUfCfUfugugaauas{invAb} | 1163 | asUfsauucAfcaagacCfgUfccugasusu | 2011 |
D-1075 | gsgsucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1164 | asCfsuuucCfauauucAfcAfagaccsusu | 2012 |
D-1076 | gsasaaguCfuCfAfAfUfuccacacgs{invAb} | 1165 | usCfsguguGfgaauugAfgAfcuuucsusu | 2013 |
D-1077 | asasagucUfcAfAfUfUfccacacgas{invAb} | 1166 | asUfscgugUfggaauuGfaGfacuuususu | 2014 |
D-1078 | asasgucuCfaAfUfUfCfcacacgaus{invAb} | 1167 | asAfsucguGfuggaauUfgAfgacuususu | 2015 |
D-1079 | asgsucucAfaUfUfCfCfacacgaucs{invAb} | 1168 | asGfsaucgUfguggaaUfuGfagacususu | 2016 |
D-1080 | gsuscucaAfuUfCfCfAfcacgaucus{invAb} | 1169 | asAfsgaucGfuguggaAfuUfgagacsusu | 2017 |
D-1081 | uscsucaaUfuCfCfAfCfacgaucucs{invAb} | 1170 | usGfsagauCfguguggAfaUfugagasusu | 2018 |
D-1082 | csuscaauUfcCfAfCfAfcgaucucas{invAb} | 1171 | asUfsgagaUfcgugugGfaAfuugagsusu | 2019 |
D-1083 | uscsaauuCfcAfCfAfCfgaucucaus{invAb} | 1172 | asAfsugagAfucguguGfgAfauugasusu | 2020 |
D-1084 | csasauucCfaCfAfCfGfaucucaugs{invAb} | 1173 | usCfsaugaGfaucgugUfgGfaauugsusu | 2021 |
D-1085 | asusuccaCfaCfGfAfUfcucaugags{invAb} | 1174 | usCfsucauGfagaucgUfgUfggaaususu | 2022 |
D-1086 | ususccacAfcGfAfUfCfucaugagas{invAb} | 1175 | asUfscucaUfgagaucGfuGfuggaasusu | 2023 |
D-1087 | uscscacaCfgAfUfCfUfcaugagags{invAb} | 1176 | usCfsucucAfugagauCfgUfguggasusu | 2024 |
D-1088 | csascgauCfuCfAfUfGfagagaacus{invAb} | 1177 | asAfsguucUfcucaugAfgAfucgugsusu | 2025 |
D-1089 | uscsucauGfaGfAfGfAfacuggaccs{invAb} | 1178 | asGfsguccAfguucucUfcAfugagasusu | 2026 |
D-1090 | uscsaugaGfaGfAfAfCfuggaccugs{invAb} | 1179 | usCfsagguCfcaguucUfcUfcaugasusu | 2027 |
D-1091 | csasugagAfgAfAfCfUfggaccugas{invAb} | 1180 | asUfscaggUfccaguuCfuCfucaugsusu | 2028 |
D-1092 | ususgaauGfgAfUfGfUfcugaugaas{invAb} | 1181 | usUfsucauCfagacauCfcAfuucaasusu | 2029 |
D-1093 | gsgsuggaCfaCfAfCfUfcagcauuus{invAb} | 1182 | asAfsaaugCfugagugUfgUfccaccsusu | 2030 |
D-1094 | ususugagAfgCfCfCfCfacaaugaas{invAb} | 1183 | asUfsucauUfguggggCfuCfucaaasusu | 2031 |
D-1095 | asuscccaGfcCfUfAfUfcugacaccs{invAb} | 1184 | usGfsguguCfagauagGfcUfgggaususu | 2032 |
D-1096 | uscsccagCfcUfAfUfCfugacaccas{invAb} | 1185 | usUfsggugUfcagauaGfgCfugggasusu | 2033 |
D-1097 | cscscagcCfuAfUfCfUfgacaccaas{invAb} | 1186 | usUfsugguGfucagauAfgGfcugggsusu | 2034 |
D-1098 | cscsagccUfaUfCfUfGfacaccaaas{invAb} | 1187 | asUfsuuggUfgucagaUfaGfgcuggsusu | 2035 |
D-1099 | csasgccuAfuCfUfGfAfcaccaaacs{invAb} | 1188 | usGfsuuugGfugucagAfuAfggcugsusu | 2036 |
D-1100 | asgscagaGfaAfAfUfCfaagaugccs{invAb} | 1189 | asGfsgcauCfuugauuUfcUfcugcususu | 2037 |
D-1101 | gsasgcuuUfgUfCfUfCfcgaagugcs{invAb} | 1190 | asGfscacuUfcggagaCfaAfagcucsusu | 2038 |
D-1102 | usgsucucCfgAfAfGfUfgccccagus{invAb} | 1191 | asAfscuggGfgcacuuCfgGfagacasusu | 2039 |
D-1103 | csusccgaAfgUfGfCfCfccagucggs{invAb} | 1192 | usCfscgacUfggggcaCfuUfcggagsusu | 2040 |
D-1104 | uscscgaaGfuGfCfCfCfcagucggas{invAb} | 1193 | asUfsccgaCfuggggcAfcUfucggasusu | 2041 |
D-1105 | asgsaacuGfgGfAfAfGfagccuaucs{invAb} | 1194 | asGfsauagGfcucuucCfcAfguucususu | 2042 |
D-1106 | gsasacugGfgAfAfGfAfgccuauccs{invAb} | 1195 | asGfsgauaGfgcucuuCfcCfaguucsusu | 2043 |
D-1107 | asasgagcCfuAfUfCfCfcugcuuucs{invAb} | 1196 | asGfsaaagCfagggauAfgGfcucuususu | 2044 |
D-1108 | asgsgcugGfgCfGfCfCfugauccgus{invAb} | 1197 | asAfscggaUfcaggcgCfcCfagccususu | 2045 |
D-1109 | gsgscuggGfcGfCfCfUfgauccgucs{invAb} | 1198 | usGfsacggAfucaggcGfcCfcagccsusu | 2046 |
D-1110 | gscsugggCfgCfCfUfGfauccgucas{invAb} | 1199 | asUfsgacgGfaucaggCfgCfccagcsusu | 2047 |
D-1111 | csusgggcGfcCfUfGfAfuccgucags{invAb} | 1200 | asCfsugacGfgaucagGfcGfcccagsusu | 2048 |
D-1112 | usgsggcgCfcUfGfAfUfccgucagcs{invAb} | 1201 | asGfscugaCfggaucaGfgCfgcccasusu | 2049 |
D-1113 | csusggacGfaAfGfAfCfagcgacccs{invAb} | 1202 | asGfsggucGfcugucuUfcGfuccagsusu | 2050 |
D-1114 | ascscccaUfgCfUfCfUfcuccucggs{invAb} | 1203 | asCfscgagGfagagagCfaUfggggususu | 2051 |
D-1115 | csasugcuCfuCfUfCfCfucgguucus{invAb} | 1204 | usAfsgaacCfgaggagAfgAfgcaugsusu | 2052 |
D-1116 | asusgcucUfcUfCfCfUfcgguucuas{invAb} | 1205 | asUfsagaaCfcgaggaGfaGfagcaususu | 2053 |
D-1117 | gscsucucUfcCfUfCfGfguucuacgs{invAb} | 1206 | asCfsguagAfaccgagGfaGfagagcsusu | 2054 |
D-1118 | csuscucuCfcUfCfGfGfuucuacgcs{invAb} | 1207 | asGfscguaGfaaccgaGfgAfgagagsusu | 2055 |
D-1119 | uscsucucCfuCfGfGfUfucuacgcus{invAb} | 1208 | asAfsgcguAfgaaccgAfgGfagagasusu | 2056 |
D-1120 | csuscuccUfcGfGfUfUfcuacgcuus{invAb} | 1209 | usAfsagcgUfagaaccGfaGfgagagsusu | 2057 |
D-1121 | uscsuccuCfgGfUfUfCfuacgcuuas{invAb} | 1210 | asUfsaagcGfuagaacCfgAfggagasusu | 2058 |
D-1122 | csusccucGfgUfUfCfUfacgcuuaus{invAb} | 1211 | asAfsuaagCfguagaaCfcGfaggagsusu | 2059 |
D-1123 | uscscucgGfuUfCfUfAfcgcuuaugs{invAb} | 1212 | asCfsauaaGfcguagaAfcCfgaggasusu | 2060 |
D-1124 | cscsucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1213 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 2061 |
D-1125 | csuscgguUfcUfAfCfGfcuuaugggs{invAb} | 1214 | asCfsccauAfagcguaGfaAfccgagsusu | 2062 |
D-1126 | csasccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1215 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggugsusu | 2063 |
D-1127 | cscsaaacUfcCfCfAfUfucuuucaus{invAb} | 1216 | asAfsugaaAfgaauggGfaGfuuuggsusu | 2064 |
D-1128 | csuscccaUfuCfUfUfUfcaugaggcs{invAb} | 1217 | asGfsccucAfugaaagAfaUfgggagsusu | 2065 |
D-1129 | csasuucuUfuCfAfUfGfaggcggcgs{invAb} | 1218 | usCfsgccgCfcucaugAfaAfgaaugsusu | 2066 |
D-1130 | asusucuuUfcAfUfGfAfggcggcgas{invAb} | 1219 | usUfscgccGfccucauGfaAfagaaususu | 2067 |
D-1131 | ususcuuuCfaUfGfAfGfgcggcgaas{invAb} | 1220 | asUfsucgcCfgccucaUfgAfaagaasusu | 2068 |
D-1132 | uscsuuucAfuGfAfGfGfcggcgaags{invAb} | 1221 | asCfsuucgCfcgccucAfuGfaaagasusu | 2069 |
D-1133 | csusuucaUfgAfGfGfCfggcgaagcs{invAb} | 1222 | asGfscuucGfccgccuCfaUfgaaagsusu | 2070 |
D-1134 | ususucauGfaGfGfCfGfgcgaagcus{invAb} | 1223 | asAfsgcuuCfgccgccUfcAfugaaasusu | 2071 |
D-1135 | uscsucugGfgGfUfCfCfuaugaugas{invAb} | 1224 | asUfscaucAfuaggacCfcCfagagasusu | 2072 |
D-1136 | ascsaccuGfcCfCfAfGfcucacacgs{invAb} | 1225 | usCfsguguGfagcuggGfcAfggugususu | 2073 |
D-1137 | csasccugCfcCfAfGfCfucacacgas{invAb} | 1226 | usUfscgugUfgagcugGfgCfaggugsusu | 2074 |
D-1138 | cscsugccCfaGfCfUfCfacacgaags{invAb} | 1227 | asCfsuucgUfgugagcUfgGfgcaggsusu | 2075 |
D-1139 | cscsagcuCfaCfAfCfGfaaggauucs{invAb} | 1228 | usGfsaaucCfuucgugUfgAfgcuggsusu | 2076 |
D-1140 | asgscucaCfaCfGfAfAfggauucags{invAb} | 1229 | usCfsugaaUfccuucgUfgUfgagcususu | 2077 |
D-1141 | asusccggAfaGfUfUfUfgaagauags{invAb} | 1230 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggaususu | 2078 |
D-1142 | csgsgaagUfuUfGfAfAfgauagauus{invAb} | 1231 | asAfsaucuAfucuucaAfaCfuuccgsusu | 2079 |
D-1143 | asgsuuugAfaGfAfUfAfgauucgaas{invAb} | 1232 | asUfsucgaAfucuaucUfuCfaaacususu | 2080 |
D-1144 | gsusuugaAfgAfUfAfGfauucgaags{invAb} | 1233 | usCfsuucgAfaucuauCfuUfcaaacsusu | 2081 |
D-1145 | gsasagauAfgAfUfUfCfgaagaagas{invAb} | 1234 | asUfscuucUfucgaauCfuAfucuucsusu | 2082 |
D-1146 | asgsaagaAfgUfAfCfAfgaccuuccs{invAb} | 1235 | asGfsgaagGfucuguaCfuUfcuucususu | 2083 |
D-1147 | gsasagaaGfuAfCfAfGfaccuucccs{invAb} | 1236 | usGfsggaaGfgucuguAfcUfucuucsusu | 2084 |
D-1148 | asasgaagUfaCfAfGfAfccuucccas{invAb} | 1237 | asUfsgggaAfggucugUfaCfuucuususu | 2085 |
D-1149 | uscsugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccs{invAb} | 1238 | asGfsgucaUfuuguccAfuUfucagasusu | 2086 |
D-1150 | csusgaaaUfgGfAfCfAfaaugaccus{invAb} | 1239 | asAfsggucAfuuugucCfaUfuucagsusu | 2087 |
D-1151 | ascsaaauGfaCfCfUfUfgccaaauus{invAb} | 1240 | asAfsauuuGfgcaaggUfcAfuuugususu | 2088 |
D-1152 | asasaugaCfcUfUfGfCfcaaauuccs{invAb} | 1241 | asGfsgaauUfuggcaaGfgUfcauuususu | 2089 |
D-1153 | asasugacCfuUfGfCfCfaaauuccgs{invAb} | 1242 | asCfsggaaUfuuggcaAfgGfucauususu | 2090 |
D-1154 | usgsaccuUfgCfCfAfAfauuccggas{invAb} | 1243 | asUfsccggAfauuuggCfaAfggucasusu | 2091 |
D-1155 | gsasccuuGfcCfAfAfAfuuccggags{invAb} | 1244 | usCfsuccgGfaauuugGfcAfaggucsusu | 2092 |
D-1156 | ascscuugCfcAfAfAfUfuccggagas{invAb} | 1245 | asUfscuccGfgaauuuGfgCfaaggususu | 2093 |
D-1157 | cscsuugcCfaAfAfUfUfccggagacs{invAb} | 1246 | usGfsucucCfggaauuUfgGfcaaggsusu | 2094 |
D-1158 | cscsggagAfcAfAfCfUfuaaagaaus{invAb} | 1247 | asAfsuucuUfuaaguuGfuCfuccggsusu | 2095 |
D-1159 | csgsgagaCfaAfCfUfUfaaagaaucs{invAb} | 1248 | usGfsauucUfuuaaguUfgUfcuccgsusu | 2096 |
D-1160 | asgsauauCfuGfAfAfGfaggaccuas{invAb} | 1249 | usUfsagguCfcucuucAfgAfuaucususu | 2097 |
D-1161 | gsasggacCfuAfAfCfUfcccaggaus{invAb} | 1250 | asAfsuccuGfggaguuAfgGfuccucsusu | 2098 |
D-1162 | gsasccuaAfcUfCfCfCfaggaugcgs{invAb} | 1251 | asCfsgcauCfcugggaGfuUfaggucsusu | 2099 |
D-1163 | ascscuaaCfuCfCfCfAfggaugcggs{invAb} | 1252 | asCfscgcaUfccugggAfgUfuaggususu | 2100 |
D-1164 | usgscggcAfgCfGfAfAfgcaacacas{invAb} | 1253 | asUfsguguUfgcuucgCfuGfccgcasusu | 2101 |
D-1165 | gscsggcaGfcGfAfAfGfcaacacacs{invAb} | 1254 | asGfsugugUfugcuucGfcUfgccgcsusu | 2102 |
D-1166 | csasgcgaAfgCfAfAfCfacacucccs{invAb} | 1255 | asGfsggagUfguguugCfuUfcgcugsusu | 2103 |
D-1167 | gscsgaagCfaAfCfAfCfacuccccas{invAb} | 1256 | usUfsggggAfguguguUfgCfuucgcsusu | 2104 |
D-1168 | gscsaacaCfaCfUfCfCfccaagagus{invAb} | 1257 | asAfscucuUfggggagUfgUfguugcsusu | 2105 |
D-1169 | csasagagUfuUfUfGfGfuucccaacs{invAb} | 1258 | asGfsuuggGfaaccaaAfaCfucuugsusu | 2106 |
D-1170 | gsasguuuUfgGfUfUfCfccaacuugs{invAb} | 1259 | usCfsaaguUfgggaacCfaAfaacucsusu | 2107 |
D-1171 | gsusuuugGfuUfCfCfCfaacuugags{invAb} | 1260 | usCfsucaaGfuugggaAfcCfaaaacsusu | 2108 |
D-1172 | ususgaagCfcAfCfAfUfuggaaucus{invAb} | 1261 | usAfsgauuCfcaauguGfgCfuucaasusu | 2109 |
D-1173 | cscsaggaGfaAfGfCfGfagcggaaas{invAb} | 1262 | asUfsuuccGfcucgcuUfcUfccuggsusu | 2110 |
D-1174 | gsasccagAfuUfGfCfUfaaugagaas{invAb} | 1263 | usUfsucucAfuuagcaAfuCfuggucsusu | 2111 |
D-1175 | gscsuaauGfaGfAfAfAfguggcucus{invAb} | 1264 | asAfsgagcCfacuuucUfcAfuuagcsusu | 2112 |
D-1176 | asgscauuCfaUfGfGfAfcggccggus{invAb} | 1265 | usAfsccggCfcguccaUfgAfaugcususu | 2113 |
D-1177 | gscsauucAfuGfGfAfCfggccgguas{invAb} | 1266 | usUfsaccgGfccguccAfuGfaaugcsusu | 2114 |
D-1178 | csasuucaUfgGfAfCfGfgccgguaas{invAb} | 1267 | asUfsuaccGfgccgucCfaUfgaaugsusu | 2115 |
D-1179 | asusucauGfgAfCfGfGfccgguaacs{invAb} | 1268 | usGfsuuacCfggccguCfcAfugaaususu | 2116 |
D-1180 | ususcaugGfaCfGfGfCfcgguaacas{invAb} | 1269 | usUfsguuaCfcggccgUfcCfaugaasusu | 2117 |
D-1181 | uscsauggAfcGfGfCfCfgguaacaas{invAb} | 1270 | usUfsuguuAfccggccGfuCfcaugasusu | 2118 |
D-1182 | asusggacGfgCfCfGfGfuaacaaags{invAb} | 1271 | usCfsuuugUfuaccggCfcGfuccaususu | 2119 |
D-1183 | usgsgacgGfcCfGfGfUfaacaaagas{invAb} | 1272 | usUfscuuuGfuuaccgGfcCfguccasusu | 2120 |
D-1184 | gsgsacggCfcGfGfUfAfacaaagaas{invAb} | 1273 | asUfsucuuUfguuaccGfgCfcguccsusu | 2121 |
D-1185 | ascsggccGfgUfAfAfCfaaagaacgs{invAb} | 1274 | usCfsguucUfuuguuaCfcGfgccgususu | 2122 |
D-1186 | csgsgccgGfuAfAfCfAfaagaacgas{invAb} | 1275 | usUfscguuCfuuuguuAfcCfggccgsusu | 2123 |
D-1187 | gsgsccggUfaAfCfAfAfagaacgaas{invAb} | 1276 | asUfsucguUfcuuuguUfaCfcggccsusu | 2124 |
D-1188 | gscscgguAfaCfAfAfAfgaacgaacs{invAb} | 1277 | asGfsuucgUfucuuugUfuAfccggcsusu | 2125 |
D-1189 | cscsgguaAfcAfAfAfGfaacgaacgs{invAb} | 1278 | asCfsguucGfuucuuuGfuUfaccggsusu | 2126 |
D-1190 | csgsguaaCfaAfAfGfAfacgaacggs{invAb} | 1279 | asCfscguuCfguucuuUfgUfuaccgsusu | 2127 |
D-1191 | gsgsuaacAfaAfGfAfAfcgaacggcs{invAb} | 1280 | usGfsccguUfcguucuUfuGfuuaccsusu | 2128 |
D-1192 | asasagaaCfgAfAfCfGfgcaggugas{invAb} | 1281 | asUfscaccUfgccguuCfgUfucuuususu | 2129 |
D-1193 | asusgaagCfcAfCfUfAfuacgacags{invAb} | 1282 | asCfsugucGfuauaguGfgCfuucaususu | 2130 |
D-1194 | gsasagccAfcUfAfUfAfcgacaggus{invAb} | 1283 | usAfsccugUfcguauaGfuGfgcuucsusu | 2131 |
D-1195 | asasgccaCfuAfUfAfCfgacagguas{invAb} | 1284 | asUfsaccuGfucguauAfgUfggcuususu | 2132 |
D-1196 | asgsccacUfaUfAfCfGfacagguacs{invAb} | 1285 | asGfsuaccUfgucguaUfaGfuggcususu | 2133 |
D-1197 | gscscacuAfuAfCfGfAfcagguaccs{invAb} | 1286 | asGfsguacCfugucguAfuAfguggcsusu | 2134 |
D-1198 | cscsacuaUfaCfGfAfCfagguaccgs{invAb} | 1287 | asCfsgguaCfcugucgUfaUfaguggsusu | 2135 |
D-1199 | csascuauAfcGfAfCfAfgguaccggs{invAb} | 1288 | asCfscgguAfccugucGfuAfuagugsusu | 2136 |
D-1200 | ascsuauaCfgAfCfAfGfguaccggcs{invAb} | 1289 | asGfsccggUfaccuguCfgUfauagususu | 2137 |
D-1201 | asascagaUfcCfUfCfUfcccgagcus{invAb} | 1290 | usAfsgcucGfggagagGfaUfcuguususu | 2138 |
D-1202 | ascsagauCfcUfCfUfCfccgagcuas{invAb} | 1291 | usUfsagcuCfgggagaGfgAfucugususu | 2139 |
D-1203 | asgsauccUfcUfCfCfCfgagcuaacs{invAb} | 1292 | usGfsuuagCfucgggaGfaGfgaucususu | 2140 |
D-1204 | uscscucuCfcCfGfAfGfcuaacaccs{invAb} | 1293 | usGfsguguUfagcucgGfgAfgaggasusu | 2141 |
D-1205 | cscsucucCfcGfAfGfCfuaacaccas{invAb} | 1294 | asUfsggugUfuagcucGfgGfagaggsusu | 2142 |
D-1206 | csuscuccCfgAfGfCfUfaacaccaus{invAb} | 1295 | usAfsugguGfuuagcuCfgGfgagagsusu | 2143 |
D-1207 | uscsccgaGfcUfAfAfCfaccauaccs{invAb} | 1296 | asGfsguauGfguguuaGfcUfcgggasusu | 2144 |
D-1208 | cscscgagCfuAfAfCfAfccauacccs{invAb} | 1297 | usGfsgguaUfgguguuAfgCfucgggsusu | 2145 |
D-1209 | gsgsggucAfgAfAfGfAfcgauagcas{invAb} | 1298 | usUfsgcuaUfcgucuuCfuGfaccccsusu | 2146 |
D-1210 | gsgsgucaGfaAfGfAfCfgauagcaas{invAb} | 1299 | asUfsugcuAfucgucuUfcUfgacccsusu | 2147 |
D-1211 | gsuscagaAfgAfCfGfAfuagcaaugs{invAb} | 1300 | asCfsauugCfuaucguCfuUfcugacsusu | 2148 |
D-1212 | uscsagaaGfaCfGfAfUfagcaaugus{invAb} | 1301 | asAfscauuGfcuaucgUfcUfucugasusu | 2149 |
D-1213 | gsasagacGfaUfAfGfCfaaugugaas{invAb} | 1302 | asUfsucacAfuugcuaUfcGfucuucsusu | 2150 |
D-1214 | asgsacgaUfaGfCfAfAfugugaagcs{invAb} | 1303 | asGfscuucAfcauugcUfaUfcgucususu | 2151 |
D-1215 | asusggucAfcUfCfUfGfaaaaccgas{invAb} | 1304 | asUfscgguUfuucagaGfuGfaccaususu | 2152 |
D-1216 | usgsgucaCfuCfUfGfAfaaaccgaus{invAb} | 1305 | asAfsucggUfuuucagAfgUfgaccasusu | 2153 |
D-1217 | gsgsucacUfcUfGfAfAfaaccgauus{invAb} | 1306 | asAfsaucgGfuuuucaGfaGfugaccsusu | 2154 |
D-1218 | gsasaaacCfgAfUfUfUfcagugcacs{invAb} | 1307 | asGfsugcaCfugaaauCfgGfuuuucsusu | 2155 |
D-1219 | asasccgaUfuUfCfAfGfugcacgaus{invAb} | 1308 | asAfsucguGfcacugaAfaUfcgguususu | 2156 |
D-1220 | usasuuucCfcCfAfAfUfggaugauas{invAb} | 1309 | usUfsaucaUfccauugGfgGfaaauasusu | 2157 |
D-1221 | cscscaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1310 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugggsusu | 2158 |
D-1222 | csasauggAfuGfAfUfAfaaauaccas{invAb} | 1311 | asUfsgguaUfuuuaucAfuCfcauugsusu | 2159 |
D-1223 | usgsgaugAfuAfAfAfAfuaccaucas{invAb} | 1312 | usUfsgaugGfuauuuuAfuCfauccasusu | 2160 |
D-1224 | asasauacCfaUfCfAfAfaaugcagcs{invAb} | 1313 | asGfscugcAfuuuugaUfgGfuauuususu | 2161 |
D-1225 | gsgsgcuuUfcAfAfAfUfcuccaugcs{invAb} | 1314 | asGfscaugGfagauuuGfaAfagcccsusu | 2162 |
D-1226 | gsgscuuuCfaAfAfUfCfuccaugcus{invAb} | 1315 | asAfsgcauGfgagauuUfgAfaagccsusu | 2163 |
D-1227 | asasucucCfaUfGfCfUfgccucaaus{invAb} | 1316 | usAfsuugaGfgcagcaUfgGfagauususu | 2164 |
D-1228 | asuscuccAfuGfCfUfGfccucaauas{invAb} | 1317 | asUfsauugAfggcagcAfuGfgagaususu | 2165 |
D-1229 | uscsuccaUfgCfUfGfCfcucaauacs{invAb} | 1318 | asGfsuauuGfaggcagCfaUfggagasusu | 2166 |
D-1230 | csusgccuCfaAfUfAfCfcugaacucs{invAb} | 1319 | asGfsaguuCfagguauUfgAfggcagsusu | 2167 |
D-1231 | csusggaaCfaCfCfUfCfcaggaaaus{invAb} | 1320 | asAfsuuucCfuggaggUfgUfuccagsusu | 2168 |
D-1232 | csusucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1321 | asUfsugucUfucaaaaUfcCfcgaagsusu | 2169 |
D-1233 | cscsagaaGfgAfAfGfAfccgcacucs{invAb} | 1322 | asGfsagugCfggucuuCfcUfucuggsusu | 2170 |
D-1234 | gsasaggaAfgAfCfCfGfcacuccuas{invAb} | 1323 | asUfsaggaGfugcgguCfuUfccuucsusu | 2171 |
D-1235 | asasggaaGfaCfCfGfCfacuccuaus{invAb} | 1324 | asAfsuaggAfgugcggUfcUfuccuususu | 2172 |
D-1236 | asgsgaagAfcCfGfCfAfcuccuaugs{invAb} | 1325 | asCfsauagGfagugcgGfuCfuuccususu | 2173 |
D-1237 | gsgsaagaCfcGfCfAfCfuccuauggs{invAb} | 1326 | asCfscauaGfgagugcGfgUfcuuccsusu | 2174 |
D-1238 | gsasagacCfgCfAfCfUfccuauggcs{invAb} | 1327 | asGfsccauAfggagugCfgGfucuucsusu | 2175 |
D-1239 | asgsaccgCfaCfUfCfCfuauggcugs{invAb} | 1328 | usCfsagccAfuaggagUfgCfggucususu | 2176 |
D-1240 | cscsgcacUfcCfUfAfUfggcugaags{invAb} | 1329 | usCfsuucaGfccauagGfaGfugcggsusu | 2177 |
D-1241 | usasagcaCfaUfAfAfAfggcgaaacs{invAb} | 1330 | asGfsuuucGfccuuuaUfgUfgcuuasusu | 2178 |
D-1242 | asasgcacAfuAfAfAfGfgcgaaacus{invAb} | 1331 | asAfsguuuCfgccuuuAfuGfugcuususu | 2179 |
D-1243 | gscsacauAfaAfGfGfCfgaaacugas{invAb} | 1332 | asUfscaguUfucgccuUfuAfugugcsusu | 2180 |
D-1244 | gsasuuccAfaGfUfCfCfaugugaggs{invAb} | 1333 | asCfscucaCfauggacUfuGfgaaucsusu | 2181 |
D-1245 | asusuccaAfgUfCfCfAfugugagggs{invAb} | 1334 | asCfsccucAfcauggaCfuUfggaaususu | 2182 |
D-1246 | cscsaaguCfcAfUfGfUfgaggggcas{invAb} | 1335 | asUfsgcccCfucacauGfgAfcuuggsusu | 2183 |
D-1247 | csasagucCfaUfGfUfGfaggggcaus{invAb} | 1336 | asAfsugccCfcucacaUfgGfacuugsusu | 2184 |
D-1248 | gsusccauGfuGfAfGfGfggcauggcs{invAb} | 1337 | asGfsccauGfccccucAfcAfuggacsusu | 2185 |
D-1249 | gscsagcuGfcGfGfUfGfagaguuuas{invAb} | 1338 | asUfsaaacUfcucaccGfcAfgcugcsusu | 2186 |
D-1250 | asgscugcGfgUfGfAfGfaguuuacus{invAb} | 1339 | asAfsguaaAfcucucaCfcGfcagcususu | 2187 |
D-1251 | cscscagaGfaAfAfGfUfgcagcucus{invAb} | 1340 | asAfsgagcUfgcacuuUfcUfcugggsusu | 2188 |
D-1252 | csasaagcAfuGfCfAfGfcccuucugs{invAb} | 1341 | asCfsagaaGfggcugcAfuGfcuuugsusu | 2189 |
D-1253 | cscsuucuGfcCfUfCfUfagaccauus{invAb} | 1342 | asAfsauggUfcuagagGfcAfgaaggsusu | 2190 |
D-1254 | uscsugccUfcUfAfGfAfccauuuggs{invAb} | 1343 | asCfscaaaUfggucuaGfaGfgcagasusu | 2191 |
D-1255 | uscsuagaCfcAfUfUfUfggcaucggs{invAb} | 1344 | asCfscgauGfccaaauGfgUfcuagasusu | 2192 |
D-1256 | csusagacCfaUfUfUfGfgcaucggcs{invAb} | 1345 | asGfsccgaUfgccaaaUfgGfucuagsusu | 2193 |
D-1257 | usasgaccAfuUfUfGfGfcaucggcus{invAb} | 1346 | asAfsgccgAfugccaaAfuGfgucuasusu | 2194 |
D-1258 | asgsaccaUfuUfGfGfCfaucggcucs{invAb} | 1347 | asGfsagccGfaugccaAfaUfggucususu | 2195 |
D-1259 | ususuggcAfuCfGfGfCfuccuguuus{invAb} | 1348 | asAfsaacaGfgagccgAfuGfccaaasusu | 2196 |
D-1260 | gsgscaucGfgCfUfCfCfuguuuccas{invAb} | 1349 | asUfsggaaAfcaggagCfcGfaugccsusu | 2197 |
D-1261 | uscsggcuCfcUfGfUfUfuccauugcs{invAb} | 1350 | asGfscaauGfgaaacaGfgAfgccgasusu | 2198 |
D-1262 | gsgscuccUfgUfUfUfCfcauugccus{invAb} | 1351 | asAfsggcaAfuggaaaCfaGfgagccsusu | 2199 |
D-1263 | usasggcaUfuUfUfGfUfaauuggaas{invAb} | 1352 | usUfsuccaAfuuacaaAfaUfgccuasusu | 2200 |
D-1264 | asgsgcauUfuUfGfUfAfauuggaaas{invAb} | 1353 | asUfsuuccAfauuacaAfaAfugccususu | 2201 |
D-1265 | asusuuugUfaAfUfUfGfgaaagucas{invAb} | 1354 | usUfsgacuUfuccaauUfaCfaaaaususu | 2202 |
D-1266 | ususuguaAfuUfGfGfAfaagucaags{invAb} | 1355 | usCfsuugaCfuuuccaAfuUfacaaasusu | 2203 |
D-1267 | asasuuggAfaAfGfUfCfaagacugcs{invAb} | 1356 | usGfscaguCfuugacuUfuCfcaauususu | 2204 |
D-1268 | gsgsaaagUfcAfAfGfAfcugcaguas{invAb} | 1357 | asUfsacugCfagucuuGfaCfuuuccsusu | 2205 |
D-1269 | gsuscaagAfcUfGfCfAfguaugugcs{invAb} | 1358 | usGfscacaUfacugcaGfuCfuugacsusu | 2206 |
D-1270 | uscsaagaCfuGfCfAfGfuaugugcas{invAb} | 1359 | asUfsgcacAfuacugcAfgUfcuugasusu | 2207 |
D-1271 | ascsacacAfcAfGfUfAfguggagcus{invAb} | 1360 | asAfsgcucCfacuacuGfuGfugugususu | 2208 |
D-1272 | csascacaGfuAfGfUfGfgagcuuucs{invAb} | 1361 | asGfsaaagCfuccacuAfcUfgugugsusu | 2209 |
D-1273 | ascsacagUfaGfUfGfGfagcuuuccs{invAb} | 1362 | asGfsgaaaGfcuccacUfaCfugugususu | 2210 |
D-1273B | ascsaguaGfuGfGfAfGfcuuuccuas{invAb} | 2821 | usUfsaggaAfagcuccAfcUfacugususu | 2822 |
D-1274 | gscsuuucCfuAfAfCfAfcuagcagas{invAb} | 1363 | asUfscugcUfaguguuAfgGfaaagcsusu | 2211 |
D-1275 | usasacacUfaGfCfAfGfagauuaaus{invAb} | 1364 | asAfsuuaaUfcucugcUfaGfuguuasusu | 2212 |
D-1276 | asascacuAfgCfAfGfAfgauuaaucs{invAb} | 1365 | usGfsauuaAfucucugCfuAfguguususu | 2213 |
D-1277 | ascsacuaGfcAfGfAfGfauuaaucas{invAb} | 1366 | asUfsgauuAfaucucuGfcUfagugususu | 2214 |
D-1278 | csusagcaGfaGfAfUfUfaaucacuas{invAb} | 1367 | asUfsagugAfuuaaucUfcUfgcuagsusu | 2215 |
D-1279 | asgsagauUfaAfUfCfAfcuacauuas{invAb} | 1368 | asUfsaaugUfagugauUfaAfucucususu | 2216 |
D-1280 | csusacauUfaGfAfCfAfacacucaus{invAb} | 1369 | asAfsugagUfguugucUfaAfuguagsusu | 2217 |
D-1281 | usascauuAfgAfCfAfAfcacucaucs{invAb} | 1370 | asGfsaugaGfuguuguCfuAfauguasusu | 2218 |
D-1282 | csasuuagAfcAfAfCfAfcucaucuas{invAb} | 1371 | asUfsagauGfaguguuGfuCfuaaugsusu | 2219 |
D-1283 | gsgsauaaCfuGfAfGfAfaacaagags{invAb} | 1372 | usCfsucuuGfuuucucAfgUfuauccsusu | 2220 |
D-1284 | gsasgaccAfuUfCfUfCfugucuaacs{invAb} | 1373 | asGfsuuagAfcagagaAfuGfgucucsusu | 2221 |
D-1284B | csusgucuAfaCfUfGfUfgauaaaaas{invAb} | 1374 | asUfsuuuuAfucacagUfuAfgacagsusu | 2222 |
D-1285 | uscsaggaCfuUfUfAfUfucuauagas{invAb} | 1375 | asUfscuauAfgaauaaAfgUfccugasusu | 2223 |
D-1286 | ascsuuuaUfuCfUfAfUfagagcaaas{invAb} | 1376 | asUfsuugcUfcuauagAfaUfaaagususu | 2224 |
D-1287 | ususauucUfaUfAfGfAfgcaaacuus{invAb} | 1377 | asAfsaguuUfgcucuaUfaGfaauaasusu | 2225 |
D-1288 | usasuucuAfuAfGfAfGfcaaacuugs{invAb} | 1378 | asCfsaaguUfugcucuAfuAfgaauasusu | 2226 |
D-1289 | ususcuauAfgAfGfCfAfaacuugcus{invAb} | 1379 | asAfsgcaaGfuuugcuCfuAfuagaasusu | 2227 |
D-1290 | csusguggAfgGfGfCfCfaugcucucs{invAb} | 1380 | asGfsagagCfauggccCfuCfcacagsusu | 2228 |
D-1291 | gscsucucCfuUfGfGfAfcccaguuas{invAb} | 1381 | usUfsaacuGfgguccaAfgGfagagcsusu | 2229 |
D-1292 | uscsuccuUfgGfAfCfCfcaguuaacs{invAb} | 1382 | asGfsuuaaCfugggucCfaAfggagasusu | 2230 |
D-1293 | csusccuuGfgAfCfCfCfaguuaacus{invAb} | 1383 | asAfsguuaAfcuggguCfcAfaggagsusu | 2231 |
D-1294 | cscsuuggAfcCfCfAfGfuuaacugcs{invAb} | 1384 | usGfscaguUfaacuggGfuCfcaaggsusu | 2232 |
D-1295 | csusuggaCfcCfAfGfUfuaacugcas{invAb} | 1385 | usUfsgcagUfuaacugGfgUfccaagsusu | 2233 |
D-1296 | gsgsacccAfgUfUfAfAfcugcaaacs{invAb} | 1386 | asGfsuuugCfaguuaaCfuGfgguccsusu | 2234 |
D-1297 | gsascccaGfuUfAfAfCfugcaaacgs{invAb} | 1387 | asCfsguuuGfcaguuaAfcUfgggucsusu | 2235 |
D-1298 | ascsccagUfuAfAfCfUfgcaaacgus{invAb} | 1388 | asAfscguuUfgcaguuAfaCfugggususu | 2236 |
D-1299 | cscscaguUfaAfCfUfGfcaaacgugs{invAb} | 1389 | asCfsacguUfugcaguUfaAfcugggsusu | 2237 |
D-1300 | cscsaguuAfaCfUfGfCfaaacgugcs{invAb} | 1390 | usGfscacgUfuugcagUfuAfacuggsusu | 2238 |
D-1301 | csasguuaAfcUfGfCfAfaacgugcas{invAb} | 1391 | asUfsgcacGfuuugcaGfuUfaacugsusu | 2239 |
D-1302 | ususaacuGfcAfAfAfCfgugcauugs{invAb} | 1392 | asCfsaaugCfacguuuGfcAfguuaasusu | 2240 |
D-1303 | csusgcaaAfcGfUfGfCfauuggagcs{invAb} | 1393 | asGfscuccAfaugcacGfuUfugcagsusu | 2241 |
D-1304 | usgscaaaCfgUfGfCfAfuuggagccs{invAb} | 1394 | asGfsgcucCfaaugcaCfgUfuugcasusu | 2242 |
D-1305 | asascgugCfaUfUfGfGfagcccuaus{invAb} | 1395 | asAfsuaggGfcuccaaUfgCfacguususu | 2243 |
D-1306 | ascsgugcAfuUfGfGfAfgcccuauus{invAb} | 1396 | asAfsauagGfgcuccaAfuGfcacgususu | 2244 |
D-1307 | gsusgcauUfgGfAfGfCfccuauuugs{invAb} | 1397 | asCfsaaauAfgggcucCfaAfugcacsusu | 2245 |
D-1308 | usgscauuGfgAfGfCfCfcuauuugcs{invAb} | 1398 | asGfscaaaUfagggcuCfcAfaugcasusu | 2246 |
D-1309 | usgsgagcCfcUfAfUfUfugcugccgs{invAb} | 1399 | asCfsggcaGfcaaauaGfgGfcuccasusu | 2247 |
D-1310 | gsgsagccCfuAfUfUfUfgcugccgcs{invAb} | 1400 | asGfscggcAfgcaaauAfgGfgcuccsusu | 2248 |
D-1311 | gsasgcccUfaUfUfUfGfcugccgcus{invAb} | 1401 | asAfsgcggCfagcaaaUfaGfggcucsusu | 2249 |
D-1312 | asgscccuAfuUfUfGfCfugccgcugs{invAb} | 1402 | asCfsagcgGfcagcaaAfuAfgggcususu | 2250 |
D-1313 | cscsgcugCfcAfUfUfCfuagugaccs{invAb} | 1403 | asGfsgucaCfuagaauGfgCfagcggsusu | 2251 |
D-1314 | usgsccauUfcUfAfGfUfgaccuuucs{invAb} | 1404 | asGfsaaagGfucacuaGfaAfuggcasusu | 2252 |
D-1315 | gscscauuCfuAfGfUfGfaccuuuccs{invAb} | 1405 | usGfsgaaaGfgucacuAfgAfauggcsusu | 2253 |
D-1316 | csusagugAfcCfUfUfUfccacagags{invAb} | 1406 | asCfsucugUfggaaagGfuCfacuagsusu | 2254 |
D-1317 | asgsagcuGfcGfCfCfUfuccucacgs{invAb} | 1407 | asCfsgugaGfgaaggcGfcAfgcucususu | 2255 |
D-1318 | gscsgccuUfcCfUfCfAfcgugugugs{invAb} | 1408 | usCfsacacAfcgugagGfaAfggcgcsusu | 2256 |
D-1319 | cscsucacGfuGfUfGfUfgaaagguus{invAb} | 1409 | asAfsaccuUfucacacAfcGfugaggsusu | 2257 |
D-1320 | csuscacgUfgUfGfUfGfaaagguuus{invAb} | 1410 | asAfsaaccUfuucacaCfaCfgugagsusu | 2258 |
D-1321 | ususcagcCfcUfCfAfGfguagauggs{invAb} | 1411 | usCfscaucUfaccugaGfgGfcugaasusu | 2259 |
D-1322 | uscsagccCfuCfAfGfGfuagauggas{invAb} | 1412 | usUfsccauCfuaccugAfgGfgcugasusu | 2260 |
D-1323 | asgscccuCfaGfGfUfAfgauggaags{invAb} | 1413 | asCfsuuccAfucuaccUfgAfgggcususu | 2261 |
D-1323B | csascgauGfgCfAfGfUfgcagucaus{invAb} | 2823 | asAfsugacUfgcacugCfcAfucgugsusu | 2824 |
D-1324 | uscsaggaUfgUfUfUfCfuucaggacs{invAb} | 1414 | asGfsuccuGfaagaaaCfaUfccugasusu | 2262 |
D-1325 | ususccucAfgCfUfGfAfcaaggaaus{invAb} | 1415 | asAfsuuccUfugucagCfuGfaggaasusu | 2263 |
D-1326 | asgscugaCfaAfGfGfAfauuuuggus{invAb} | 1416 | asAfsccaaAfauuccuUfgUfcagcususu | 2264 |
D-1327 | gsasauuuUfgGfUfCfCfcugccuags{invAb} | 1417 | asCfsuaggCfagggacCfaAfaauucsusu | 2265 |
D-1328 | asasuuuuGfgUfCfCfCfugccuaggs{invAb} | 1418 | usCfscuagGfcagggaCfcAfaaauususu | 2266 |
D-1328B | ususuuggUfcCfCfUfGfccuaggacs{invAb} | 2825 | asGfsuccuAfggcaggGfaCfcaaaasusu | 2826 |
D-1329 | ususugguCfcCfUfGfCfcuaggaccs{invAb} | 1419 | asGfsguccUfaggcagGfgAfccaaasusu | 2267 |
D-1330 | csusgccuAfgGfAfCfCfgggucaucs{invAb} | 1420 | asGfsaugaCfccggucCfuAfggcagsusu | 2268 |
D-1331 | ascsagagAfgAfUfGfGfuaagcagcs{invAb} | 1421 | asGfscugcUfuaccauCfuCfucugususu | 2269 |
D-1332 | gsasgagaUfgGfUfAfAfgcagcugus{invAb} | 1422 | usAfscagcUfgcuuacCfaUfcucucsusu | 2270 |
D-1333 | asgsagauGfgUfAfAfGfcagcuguas{invAb} | 1423 | asUfsacagCfugcuuaCfcAfucucususu | 2271 |
D-1334 | gsasgaugGfuAfAfGfCfagcuguaus{invAb} | 1424 | asAfsuacaGfcugcuuAfcCfaucucsusu | 2272 |
D-1335 | gsusaagcAfgCfUfGfUfaugaaugcs{invAb} | 1425 | asGfscauuCfauacagCfuGfcuuacsusu | 2273 |
D-1336 | asgscagcUfgUfAfUfGfaaugcugas{invAb} | 1426 | asUfscagcAfuucauaCfaGfcugcususu | 2274 |
D-1337 | gsasuuuuAfaAfAfCfCfaggucaugs{invAb} | 1427 | asCfsaugaCfcugguuUfuAfaaaucsusu | 2275 |
D-1338 | ususuuaaAfaCfCfAfGfgucaugggs{invAb} | 1428 | usCfsccauGfaccuggUfuUfuaaaasusu | 2276 |
D-1339 | csusgaacAfcUfGfAfCfugcacuuas{invAb} | 1429 | asUfsaaguGfcagucaGfuGfuucagsusu | 2277 |
D-1340 | usgsaacaCfuGfAfCfUfgcacuuacs{invAb} | 1430 | asGfsuaagUfgcagucAfgUfguucasusu | 2278 |
D-1341 | csascuuaCfcAfGfUfCfugauuuuas{invAb} | 1431 | asUfsaaaaUfcagacuGfgUfaagugsusu | 2279 |
D-1342 | ascscaguCfuGfAfUfUfuuaucgucs{invAb} | 1432 | usGfsacgaUfaaaaucAfgAfcuggususu | 2280 |
D-1343 | cscsagucUfgAfUfUfUfuaucgucas{invAb} | 1433 | usUfsgacgAfuaaaauCfaGfacuggsusu | 2281 |
D-1344 | uscsugauUfuUfAfUfCfgucaaacas{invAb} | 1434 | asUfsguuuGfacgauaAfaAfucagasusu | 2282 |
D-1345 | csusgauuUfuAfUfCfGfucaaacacs{invAb} | 1435 | asGfsuguuUfgacgauAfaAfaucagsusu | 2283 |
D-1346 | usgsauuuUfaUfCfGfUfcaaacaccs{invAb} | 1436 | usGfsguguUfugacgaUfaAfaaucasusu | 2284 |
D-1347 | gsasuuuuAfuCfGfUfCfaaacaccas{invAb} | 1437 | usUfsggugUfuugacgAfuAfaaaucsusu | 2285 |
D-1348 | asusuuuaUfcGfUfCfAfaacaccaas{invAb} | 1438 | asUfsugguGfuuugacGfaUfaaaaususu | 2286 |
D-1349 | ususaucgUfcAfAfAfCfaccaagccs{invAb} | 1439 | usGfsgcuuGfguguuuGfaCfgauaasusu | 2287 |
D-1350 | usasucguCfaAfAfCfAfccaagccas{invAb} | 1440 | asUfsggcuUfgguguuUfgAfcgauasusu | 2288 |
D-1351 | csasugcuCfaUfGfGfCfaaucuguus{invAb} | 1441 | asAfsacagAfuugccaUfgAfgcaugsusu | 2289 |
D-1352 | uscsauggCfaAfUfCfUfguuuggggs{invAb} | 1442 | asCfscccaAfacagauUfgCfcaugasusu | 2290 |
D-1353 | gsusuuugUfuGfUfGfGfcacuagccs{invAb} | 1443 | usGfsgcuaGfugccacAfaCfaaaacsusu | 2291 |
D-1354 | ususuuguUfgUfGfGfCfacuagccas{invAb} | 1444 | usUfsggcuAfgugccaCfaAfcaaaasusu | 2292 |
D-1355 | ususuguuGfuGfGfCfAfcuagccaas{invAb} | 1445 | usUfsuggcUfagugccAfcAfacaaasusu | 2293 |
D-1356 | ususguugUfgGfCfAfCfuagccaaas{invAb} | 1446 | asUfsuuggCfuagugcCfaCfaacaasusu | 2294 |
D-1357 | gsusugugGfcAfCfUfAfgccaaacas{invAb} | 1447 | asUfsguuuGfgcuaguGfcCfacaacsusu | 2295 |
D-1358 | ususguggCfaCfUfAfGfccaaacaus{invAb} | 1448 | usAfsuguuUfggcuagUfgCfcacaasusu | 2296 |
D-1359 | usgsuggcAfcUfAfGfCfcaaacauas{invAb} | 1449 | usUfsauguUfuggcuaGfuGfccacasusu | 2297 |
D-1360 | gsusggcaCfuAfGfCfCfaaacauaas{invAb} | 1450 | usUfsuaugUfuuggcuAfgUfgccacsusu | 2298 |
D-1361 | usgsgcacUfaGfCfCfAfaacauaaas{invAb} | 1451 | asUfsuuauGfuuuggcUfaGfugccasusu | 2299 |
D-1362 | gsgscacuAfgCfCfAfAfacauaaags{invAb} | 1452 | asCfsuuuaUfguuuggCfuAfgugccsusu | 2300 |
D-1363 | gscsacuaGfcCfAfAfAfcauaaaggs{invAb} | 1453 | asCfscuuuAfuguuugGfcUfagugcsusu | 2301 |
D-1364 | asgsccaaAfcAfUfAfAfaggggcuus{invAb} | 1454 | usAfsagccCfcuuuauGfuUfuggcususu | 2302 |
D-1365 | gscscaaaCfaUfAfAfAfggggcuuas{invAb} | 1455 | usUfsaagcCfccuuuaUfgUfuuggcsusu | 2303 |
D-1366 | cscsaaacAfuAfAfAfGfgggcuuaas{invAb} | 1456 | asUfsuaagCfcccuuuAfuGfuuuggsusu | 2304 |
D-1367 | csasaacaUfaAfAfGfGfggcuuaags{invAb} | 1457 | asCfsuuaaGfccccuuUfaUfguuugsusu | 2305 |
D-1368 | asasacauAfaAfGfGfGfgcuuaagus{invAb} | 1458 | asAfscuuaAfgccccuUfuAfuguuususu | 2306 |
D-1369 | asascauaAfaGfGfGfGfcuuaagucs{invAb} | 1459 | usGfsacuuAfagccccUfuUfauguususu | 2307 |
D-1370 | ascsauaaAfgGfGfGfCfuuaagucas{invAb} | 1460 | asUfsgacuUfaagcccCfuUfuaugususu | 2308 |
D-1371 | asusaaagGfgGfCfUfUfaagucagcs{invAb} | 1461 | asGfscugaCfuuaagcCfcCfuuuaususu | 2309 |
D-1372 | usasaaggGfgCfUfUfAfagucagccs{invAb} | 1462 | asGfsgcugAfcuuaagCfcCfcuuuasusu | 2310 |
D-1373 | asgsgggcUfuAfAfGfUfcagccugcs{invAb} | 1463 | usGfscaggCfugacuuAfaGfccccususu | 2311 |
D-1374 | asasgucaGfcCfUfGfCfauacagags{invAb} | 1464 | asCfsucugUfaugcagGfcUfgacuususu | 2312 |
D-1375 | asgsucagCfcUfGfCfAfuacagaggs{invAb} | 1465 | usCfscucuGfuaugcaGfgCfugacususu | 2313 |
D-1376 | asgsccugCfaUfAfCfAfgaggaucgs{invAb} | 1466 | asCfsgaucCfucuguaUfgCfaggcususu | 2314 |
D-1377 | gscscugcAfuAfCfAfGfaggaucggs{invAb} | 1467 | asCfscgauCfcucuguAfuGfcaggcsusu | 2315 |
D-1378 | cscsugcaUfaCfAfGfAfggaucgggs{invAb} | 1468 | asCfsccgaUfccucugUfaUfgcaggsusu | 2316 |
D-1379 | ascsagagGfaUfCfGfGfggagagaas{invAb} | 1469 | asUfsucucUfccccgaUfcCfucugususu | 2317 |
D-1380 | gsasguacUfuAfCfCfAfgaguuuaas{invAb} | 1470 | asUfsuaaaCfucugguAfaGfuacucsusu | 2318 |
D-1381 | csusgcacUfaAfAfAfUfccccaaacs{invAb} | 1471 | asGfsuuugGfggauuuUfaGfugcagsusu | 2319 |
D-1382 | usgscacuAfaAfAfUfCfcccaaacus{invAb} | 1472 | asAfsguuuGfgggauuUfuAfgugcasusu | 2320 |
D-1383 | csascuaaAfaUfCfCfCfcaaacugas{invAb} | 1473 | asUfscaguUfuggggaUfuUfuagugsusu | 2321 |
D-1384 | asasucccCfaAfAfCfUfgacagguas{invAb} | 1474 | usUfsaccuGfucaguuUfgGfggauususu | 2322 |
D-1385 | cscsaaacUfgAfCfAfGfguaaaugus{invAb} | 1475 | usAfscauuUfaccuguCfaGfuuuggsusu | 2323 |
D-1386 | csasaacuGfaCfAfGfGfuaaauguas{invAb} | 1476 | asUfsacauUfuaccugUfcAfguuugsusu | 2324 |
D-1387 | asasacugAfcAfGfGfUfaaauguags{invAb} | 1477 | asCfsuacaUfuuaccuGfuCfaguuususu | 2325 |
D-1388 | ascsugacAfgGfUfAfAfauguagccs{invAb} | 1478 | asGfsgcuaCfauuuacCfuGfucagususu | 2326 |
D-1389 | asuscuaaAfuCfAfCfAfcuauuuucs{invAb} | 1479 | asGfsaaaaUfagugugAfuUfuagaususu | 2327 |
D-1390 | csusaaauCfaCfAfCfUfauuuucgas{invAb} | 1480 | asUfscgaaAfauagugUfgAfuuuagsusu | 2328 |
D-1391 | usasaaucAfcAfCfUfAfuuuucgags{invAb} | 1481 | usCfsucgaAfaauaguGfuGfauuuasusu | 2329 |
D-1392 | asasucacAfcUfAfUfUfuucgagaus{invAb} | 1482 | asAfsucucGfaaaauaGfuGfugauususu | 2330 |
D-1393 | uscsacacUfaUfUfUfUfcgagaucas{invAb} | 1483 | asUfsgaucUfcgaaaaUfaGfugugasusu | 2331 |
D-1394 | csascacuAfuUfUfUfCfgagaucaus{invAb} | 1484 | asAfsugauCfucgaaaAfuAfgugugsusu | 2332 |
D-1395 | ascsacuaUfuUfUfCfGfagaucaugs{invAb} | 1485 | asCfsaugaUfcucgaaAfaUfagugususu | 2333 |
D-1396 | ascsuauuUfuCfGfAfGfaucauguas{invAb} | 1486 | asUfsacauGfaucucgAfaAfauagususu | 2334 |
D-1397 | csusauuuUfcGfAfGfAfucauguaus{invAb} | 1487 | usAfsuacaUfgaucucGfaAfaauagsusu | 2335 |
D-1398 | asusuuucGfaGfAfUfCfauguauaas{invAb} | 1488 | usUfsuauaCfaugaucUfcGfaaaaususu | 2336 |
D-1399 | ususcgagAfuCfAfUfGfuauaaaaas{invAb} | 1489 | asUfsuuuuAfuacaugAfuCfucgaasusu | 2337 |
D-1400 | asasaaaaGfaAfGfUfCfaugcugugs{invAb} | 1490 | asCfsacagCfaugacuUfcUfuuuuususu | 2338 |
D-1401 | usgscuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 1491 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagcasusu | 2339 |
D-1402 | ususggagGfgAfCfCfAfggaaaugus{invAb} | 1492 | usAfscauuUfccugguCfcCfuccaasusu | 2340 |
D-1403 | ascscaggAfaAfUfGfUfaagacaccs{invAb} | 1493 | usGfsguguCfuuacauUfuCfcuggususu | 2341 |
D-1404 | cscsaggaAfaUfGfUfAfagacaccas{invAb} | 1494 | usUfsggugUfcuuacaUfuUfccuggsusu | 2342 |
D-1405 | gsusgugcCfuGfAfUfGfucaccucas{invAb} | 1495 | asUfsgaggUfgacaucAfgGfcacacsusu | 2343 |
D-1406 | usgsugccUfgAfUfGfUfcaccucaus{invAb} | 1496 | asAfsugagGfugacauCfaGfgcacasusu | 2344 |
D-1407 | gsusgccuGfaUfGfUfCfaccucaugs{invAb} | 1497 | usCfsaugaGfgugacaUfcAfggcacsusu | 2345 |
D-1408 | gscscugaUfgUfCfAfCfcucaugaus{invAb} | 1498 | asAfsucauGfaggugaCfaUfcaggcsusu | 2346 |
D-1409 | ususuuuuAfaCfUfCfCfugcgccaas{invAb} | 1499 | asUfsuggcGfcaggagUfuAfaaaaasusu | 2347 |
D-1410 | ususaacuCfcUfGfCfGfccaaggacs{invAb} | 1500 | usGfsuccuUfggcgcaGfgAfguuaasusu | 2348 |
D-1411 | asascuccUfgCfGfCfCfaaggacags{invAb} | 1501 | asCfsugucCfuuggcgCfaGfgaguususu | 2349 |
D-1412 | ascsuccuGfcGfCfCfAfaggacagus{invAb} | 1502 | asAfscuguCfcuuggcGfcAfggagususu | 2350 |
D-1413 | usgsuccaCfcUfUfUfGfugcuuugcs{invAb} | 1503 | asGfscaaaGfcacaaaGfgUfggacasusu | 2351 |
D-1414 | uscscaccUfuUfGfUfGfcuuugcgas{invAb} | 1504 | asUfscgcaAfagcacaAfaGfguggasusu | 2352 |
D-1415 | csasccuuUfgUfGfCfUfuugcgaggs{invAb} | 1505 | asCfscucgCfaaagcaCfaAfaggugsusu | 2353 |
D-1416 | cscsuuugUfgCfUfUfUfgcgaggccs{invAb} | 1506 | asGfsgccuCfgcaaagCfaCfaaaggsusu | 2354 |
D-1416 | cscsuuugUfgCfUfUfUfgcgaggccs{invAb} | 1507 | asGfsgccuCfgcaaagCfaCfaaaggsusu | 2355 |
D-1417 | gsasgcccAfgGfCfAfUfcugcucgcs{invAb} | 1508 | asGfscgagCfagaugcCfuGfggcucsusu | 2356 |
D-1418 | cscscaggCfaUfCfUfGfcucgccugs{invAb} | 1509 | asCfsaggcGfagcagaUfgCfcugggsusu | 2357 |
D-1419 | csasggcaUfcUfGfCfUfcgccugccs{invAb} | 1510 | usGfsgcagGfcgagcaGfaUfgccugsusu | 2358 |
D-1420 | gscsaucuGfcUfCfGfCfcugccacgs{invAb} | 1511 | asCfsguggCfaggcgaGfcAfgaugcsusu | 2359 |
D-1421 | usgsccacGfgCfUfGfAfccagagaas{invAb} | 1512 | asUfsucucUfggucagCfcGfuggcasusu | 2360 |
D-1422 | gsasgcucUfgCfCfUfUfagacgacgs{invAb} | 1513 | asCfsgucgUfcuaaggCfaGfagcucsusu | 2361 |
D-1423 | asgscucuGfcCfUfUfAfgacgacgus{invAb} | 1514 | asAfscgucGfucuaagGfcAfgagcususu | 2362 |
D-1424 | gscsucugCfcUfUfAfGfacgacgugs{invAb} | 1515 | asCfsacguCfgucuaaGfgCfagagcsusu | 2363 |
D-1425 | csuscugcCfuUfAfGfAfcgacgugus{invAb} | 1516 | asAfscacgUfcgucuaAfgGfcagagsusu | 2364 |
D-1426 | uscsugccUfuAfGfAfCfgacguguus{invAb} | 1517 | usAfsacacGfucgucuAfaGfgcagasusu | 2365 |
D-1427 | csusgccuUfaGfAfCfGfacguguuas{invAb} | 1518 | asUfsaacaCfgucgucUfaAfggcagsusu | 2366 |
D-1428 | gscscuuaGfaCfGfAfCfguguuacas{invAb} | 1519 | asUfsguaaCfacgucgUfcUfaaggcsusu | 2367 |
D-1429 | cscsuuagAfcGfAfCfGfuguuacags{invAb} | 1520 | asCfsuguaAfcacgucGfuCfuaaggsusu | 2368 |
D-1430 | csusuagaCfgAfCfGfUfguuacagus{invAb} | 1521 | usAfscuguAfacacguCfgUfcuaagsusu | 2369 |
D-1431 | usasgacgAfcGfUfGfUfuacaguaus{invAb} | 1522 | asAfsuacuGfuaacacGfuCfgucuasusu | 2370 |
D-1432 | ascsgacgUfgUfUfAfCfaguaugaas{invAb} | 1523 | asUfsucauAfcuguaaCfaCfgucgususu | 2371 |
D-1433 | ascsacagCfaGfAfGfGfcacccucgs{invAb} | 1524 | asCfsgaggGfugccucUfgCfugugususu | 2372 |
D-1434 | csascagcAfgAfGfGfCfacccucgus{invAb} | 1525 | usAfscgagGfgugccuCfuGfcugugsusu | 2373 |
D-1435 | ascsagcaGfaGfGfCfAfcccucguas{invAb} | 1526 | asUfsacgaGfggugccUfcUfgcugususu | 2374 |
D-1436 | csasgcagAfgGfCfAfCfccucguaus{invAb} | 1527 | asAfsuacgAfgggugcCfuCfugcugsusu | 2375 |
D-1437 | asgscagaGfgCfAfCfCfcucguaugs{invAb} | 1528 | asCfsauacGfagggugCfcUfcugcususu | 2376 |
D-1438 | gscsagagGfcAfCfCfCfucguaugus{invAb} | 1529 | asAfscauaCfgaggguGfcCfucugcsusu | 2377 |
D-1439 | csasgaggCfaCfCfCfUfcguauguus{invAb} | 1530 | asAfsacauAfcgagggUfgCfcucugsusu | 2378 |
D-1440 | asgsaggcAfcCfCfUfCfguauguuus{invAb} | 1531 | asAfsaacaUfacgaggGfuGfccucususu | 2379 |
D-1441 | gsasggcaCfcCfUfCfGfuauguuuus{invAb} | 1532 | asAfsaaacAfuacgagGfgUfgccucsusu | 2380 |
D-1442 | gsgscaccCfuCfGfUfAfuguuuugas{invAb} | 1533 | usUfscaaaAfcauacgAfgGfgugccsusu | 2381 |
D-1443 | cscscucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 1534 | asAfscuuuCfaaaacaUfaCfgagggsusu | 2382 |
D-1444 | asusguaaAfaCfUfAfUfacugacccs{invAb} | 1535 | asGfsggucAfguauagUfuUfuacaususu | 2383 |
D-1445 | usgsuaaaAfcUfAfUfAfcugacccgs{invAb} | 1536 | asCfsggguCfaguauaGfuUfuuacasusu | 2384 |
D-1446 | gsusaaaaCfuAfUfAfCfugacccgus{invAb} | 1537 | asAfscgggUfcaguauAfgUfuuuacsusu | 2385 |
D-1447 | usasaaacUfaUfAfCfUfgacccguus{invAb} | 1538 | asAfsacggGfucaguaUfaGfuuuuasusu | 2386 |
D-1448 | ascsuauaCfuGfAfCfCfcguuuucas{invAb} | 1539 | asUfsgaaaAfcgggucAfgUfauagususu | 2387 |
D-1449 | asusacugAfcCfCfGfUfuuucaguus{invAb} | 1540 | asAfsacugAfaaacggGfuCfaguaususu | 2388 |
D-1450 | ususucagUfuUfUfAfAfagggucgus{invAb} | 1541 | asAfscgacCfcuuuaaAfaCfugaaasusu | 2389 |
D-1451 | ususcaguUfuUfAfAfAfgggucgugs{invAb} | 1542 | usCfsacgaCfccuuuaAfaAfcugaasusu | 2390 |
D-1452 | uscsaguuUfuAfAfAfGfggucgugas{invAb} | 1543 | asUfscacgAfcccuuuAfaAfacugasusu | 2391 |
D-1453 | csasguuuUfaAfAfGfGfgucgugags{invAb} | 1544 | usCfsucacGfacccuuUfaAfaacugsusu | 2392 |
D-1454 | gsusuuuaAfaGfGfGfUfcgugagaas{invAb} | 1545 | usUfsucucAfcgacccUfuUfaaaacsusu | 2393 |
D-1454B | ususuuaaAfgGfGfUfCfgugagaaas{invAb} | 2827 | asUfsuucuCfacgaccCfuUfuaaaasusu | 2828 |
D-1455 | ususuaaaGfgGfUfCfGfugagaaacs{invAb} | 1546 | asGfsuuucUfcacgacCfcUfuuaaasusu | 2394 |
D-1456 | usasaaggGfuCfGfUfGfagaaacugs{invAb} | 1547 | asCfsaguuUfcucacgAfcCfcuuuasusu | 2395 |
D-1457 | asasagggUfcGfUfGfAfgaaacuggs{invAb} | 1548 | asCfscaguUfucucacGfaCfccuuususu | 2396 |
D-1458 | gsasgaaaCfuGfGfCfUfgguccaaus{invAb} | 1549 | asAfsuuggAfccagccAfgUfuucucsusu | 2397 |
D-1459 | usgsguccAfaUfGfGfGfauuuacags{invAb} | 1550 | asCfsuguaAfaucccaUfuGfgaccasusu | 2398 |
D-1460 | cscsaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 1551 | usGfsuugcUfguaaauCfcCfauuggsusu | 2399 |
D-1461 | ususuaagUfuUfGfCfUfcuuaaucgs{invAb} | 1552 | asCfsgauuAfagagcaAfaCfuuaaasusu | 2400 |
D-1462 | ususaaguUfuGfCfUfCfuuaaucgus{invAb} | 1553 | usAfscgauUfaagagcAfaAfcuuaasusu | 2401 |
D-1463 | asgsuuugCfuCfUfUfAfaucguaugs{invAb} | 1554 | asCfsauacGfauuaagAfgCfaaacususu | 2402 |
D-1464 | gsusuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 1555 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaaacsusu | 2403 |
D-1465 | ususugcuCfuUfAfAfUfcguauggas{invAb} | 1556 | usUfsccauAfcgauuaAfgAfgcaaasusu | 2404 |
D-1466 | usgscucuUfaAfUfCfGfuauggaags{invAb} | 1557 | asCfsuuccAfuacgauUfaAfgagcasusu | 2405 |
D-1467 | csusuaauCfgUfAfUfGfgaagcuugs{invAb} | 1558 | usCfsaagcUfuccauaCfgAfuuaagsusu | 2406 |
D-1468 | ususaaucGfuAfUfGfGfaagcuugas{invAb} | 1559 | asUfscaagCfuuccauAfcGfauuaasusu | 2407 |
D-1469 | gsgsaagcUfuGfAfGfCfuauguguus{invAb} | 1560 | asAfsacacAfuagcucAfaGfcuuccsusu | 2408 |
D-1470 | gsasagcuUfgAfGfCfUfauguguugs{invAb} | 1561 | asCfsaacaCfauagcuCfaAfgcuucsusu | 2409 |
D-1471 | asgscuugAfgCfUfAfUfguguuggas{invAb} | 1562 | usUfsccaaCfacauagCfuCfaagcususu | 2410 |
D-1472 | gscsuugaGfcUfAfUfGfuguuggaas{invAb} | 1563 | asUfsuccaAfcacauaGfcUfcaagcsusu | 2411 |
D-1473 | csusugagCfuAfUfGfUfguuggaags{invAb} | 1564 | asCfsuuccAfacacauAfgCfucaagsusu | 2412 |
D-1474 | ususgagcUfaUfGfUfGfuuggaagus{invAb} | 1565 | asAfscuucCfaacacaUfaGfcucaasusu | 2413 |
D-1475 | usgsagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1566 | asCfsacuuCfcaacacAfuAfgcucasusu | 2414 |
D-1476 | gsasgcuaUfgUfGfUfUfggaagugcs{invAb} | 1567 | asGfscacuUfccaacaCfaUfagcucsusu | 2415 |
D-1477 | gsusguugGfaAfGfUfGfcccugguus{invAb} | 1568 | asAfsaccaGfggcacuUfcCfaacacsusu | 2416 |
D-1478 | gsgsaaguGfcCfCfUfGfguuuuaaus{invAb} | 1569 | asAfsuuaaAfaccaggGfcAfcuuccsusu | 2417 |
D-1479 | csusgguuUfuAfAfUfCfcauacacas{invAb} | 1570 | usUfsguguAfuggauuAfaAfaccagsusu | 2418 |
D-1480 | ususaaucCfaUfAfCfAfcaaagacgs{invAb} | 1571 | asCfsgucuUfuguguaUfgGfauuaasusu | 2419 |
D-1481 | usasauccAfuAfCfAfCfaaagacggs{invAb} | 1572 | asCfscgucUfuuguguAfuGfgauuasusu | 2420 |
D-1482 | asasuccaUfaCfAfCfAfaagacggus{invAb} | 1573 | usAfsccguCfuuugugUfaUfggauususu | 2421 |
D-1483 | asusccauAfcAfCfAfAfagacgguas{invAb} | 1574 | asUfsaccgUfcuuuguGfuAfuggaususu | 2422 |
D-1484 | uscscauaCfaCfAfAfAfgacgguacs{invAb} | 1575 | usGfsuaccGfucuuugUfgUfauggasusu | 2423 |
D-1485 | csasuacaCfaAfAfGfAfcgguacaus{invAb} | 1576 | usAfsuguaCfcgucuuUfgUfguaugsusu | 2424 |
D-1486 | usascacaAfaGfAfCfGfguacauaas{invAb} | 1577 | asUfsuaugUfaccgucUfuUfguguasusu | 2425 |
D-1487 | ascsacaaAfgAfCfGfGfuacauaaus{invAb} | 1578 | asAfsuuauGfuaccguCfuUfugugususu | 2426 |
D-1488 | csascaaaGfaCfGfGfUfacauaaucs{invAb} | 1579 | asGfsauuaUfguaccgUfcUfuugugsusu | 2427 |
D-1489 | ascsaaagAfcGfGfUfAfcauaauccs{invAb} | 1580 | asGfsgauuAfuguaccGfuCfuuugususu | 2428 |
D-1490 | csasaagaCfgGfUfAfCfauaauccus{invAb} | 1581 | usAfsggauUfauguacCfgUfcuuugsusu | 2429 |
D-1491 | asasagacGfgUfAfCfAfuaauccuas{invAb} | 1582 | asUfsaggaUfuauguaCfcGfucuuususu | 2430 |
D-1492 | asasgacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1583 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucuususu | 2431 |
D-1493 | gsusacauAfaUfCfCfUfacagguuus{invAb} | 1584 | usAfsaaccUfguaggaUfuAfuguacsusu | 2432 |
D-1494 | csasuaauCfcUfAfCfAfgguuuaaas{invAb} | 1585 | asUfsuuaaAfccuguaGfgAfuuaugsusu | 2433 |
D-1495 | asusccuaCfaGfGfUfUfuaaauguas{invAb} | 1586 | asUfsacauUfuaaaccUfgUfaggaususu | 2434 |
D-1496 | usasguuuGfgAfAfUfUfcuuugcucs{invAb} | 1587 | asGfsagcaAfagaauuCfcAfaacuasusu | 2435 |
D-1497 | asgsuuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1588 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaacususu | 2436 |
D-1498 | ususuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1589 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 2437 |
D-1499 | ususgcucUfaCfUfGfUfuuacauugs{invAb} | 1590 | asCfsaaugUfaaacagUfaGfagcaasusu | 2438 |
D-1500 | uscsuacuGfuUfUfAfCfauugcagas{invAb} | 1591 | asUfscugcAfauguaaAfcAfguagasusu | 2439 |
D-1501 | usascuguUfuAfCfAfUfugcagauus{invAb} | 1592 | asAfsaucuGfcaauguAfaAfcaguasusu | 2440 |
D-1502 | ascsuguuUfaCfAfUfUfgcagauugs{invAb} | 1593 | asCfsaaucUfgcaaugUfaAfacagususu | 2441 |
D-1503 | ususuacaUfuGfCfAfGfauugcuaus{invAb} | 1594 | usAfsuagcAfaucugcAfaUfguaaasusu | 2442 |
D-1504 | ususacauUfgCfAfGfAfuugcuauas{invAb} | 1595 | usUfsauagCfaaucugCfaAfuguaasusu | 2443 |
D-1505 | usascauuGfcAfGfAfUfugcuauaas{invAb} | 1596 | asUfsuauaGfcaaucuGfcAfauguasusu | 2444 |
D-1506 | asusugcuAfuAfAfUfUfucaaggags{invAb} | 1597 | asCfsuccuUfgaaauuAfuAfgcaaususu | 2445 |
D-1507 | ususgcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1598 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 2446 |
D-1508 | asasugauGfcAfCfUfUfuaggaugus{invAb} | 1599 | asAfscaucCfuaaaguGfcAfucauususu | 2447 |
D-1509 | asusgaugCfaCfUfUfUfaggauguus{invAb} | 1600 | asAfsacauCfcuaaagUfgCfaucaususu | 2448 |
D-1510 | ascsaugaAfuCfAfUfUfcacaugacs{invAb} | 1601 | asGfsucauGfugaaugAfuUfcaugususu | 2449 |
D-1511 | csasugaaUfcAfUfUfCfacaugaccs{invAb} | 1602 | usGfsgucaUfgugaauGfaUfucaugsusu | 2450 |
D-1512 | asasauacAfuGfUfCfUfagucugucs{invAb} | 1603 | asGfsacagAfcuagacAfuGfuauuususu | 2451 |
D-1512B | asasuacaUfgUfCfUfAfgucuguccs{invAb} | 2829 | asGfsgacaGfacuagaCfaUfguauususu | 2830 |
D-1513 | asusgucuAfgUfCfUfGfuccuuuaas{invAb} | 1604 | asUfsuaaaGfgacagaCfuAfgacaususu | 2452 |
D-1514 | usgsucuaGfuCfUfGfUfccuuuaaus{invAb} | 1605 | usAfsuuaaAfggacagAfcUfagacasusu | 2453 |
D-1515 | uscsuaguCfuGfUfCfCfuuuaauags{invAb} | 1606 | asCfsuauuAfaaggacAfgAfcuagasusu | 2454 |
D-1516 | csusagucUfgUfCfCfUfuuaauagcs{invAb} | 1607 | asGfscuauUfaaaggaCfaGfacuagsusu | 2455 |
D-1517 | usasgucuGfuCfCfUfUfuaauagcus{invAb} | 1608 | asAfsgcuaUfuaaaggAfcAfgacuasusu | 2456 |
D-1518 | gsuscuguCfcUfUfUfAfauagcucus{invAb} | 1609 | asAfsgagcUfauuaaaGfgAfcagacsusu | 2457 |
D-1519 | asasucagAfuCfAfUfUfaccaguuas{invAb} | 1610 | asUfsaacuGfguaaugAfuCfugauususu | 2458 |
D-1520 | uscsagauCfaUfUfAfCfcaguuagcs{invAb} | 1611 | asGfscuaaCfugguaaUfgAfucugasusu | 2459 |
D-1521 | csasgaucAfuUfAfCfCfaguuagcus{invAb} | 1612 | asAfsgcuaAfcugguaAfuGfaucugsusu | 2460 |
D-1522 | asgsaucaUfuAfCfCfAfguuagcuus{invAb} | 1613 | asAfsagcuAfacugguAfaUfgaucususu | 2461 |
D-1523 | uscsauuaCfcAfGfUfUfagcuuuuas{invAb} | 1614 | usUfsaaaaGfcuaacuGfgUfaaugasusu | 2462 |
D-1524 | csasuuacCfaGfUfUfAfgcuuuuaas{invAb} | 1615 | usUfsuaaaAfgcuaacUfgGfuaaugsusu | 2463 |
D-1525 | ascscaguUfaGfCfUfUfuuaaagcas{invAb} | 1616 | asUfsgcuuUfaaaagcUfaAfcuggususu | 2464 |
D-1526 | asasgcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 1617 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcuususu | 2465 |
D-1527 | gscsacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 1618 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 2466 |
D-1528 | csusauguUfuUfUfGfGfaaaaauacs{invAb} | 1619 | asGfsuauuUfuuccaaAfaAfcauagsusu | 2467 |
D-1529 | gsusuuuuGfgAfAfAfAfauacgcuas{invAb} | 1620 | asUfsagcgUfauuuuuCfcAfaaaacsusu | 2468 |
D-1530 | ususggaaAfaAfUfAfCfgcuacagas{invAb} | 1621 | usUfscuguAfgcguauUfuUfuccaasusu | 2469 |
D-1531 | asasuaaaUfgAfGfAfUfgcuacuaas{invAb} | 1622 | asUfsuaguAfgcaucuCfaUfuuauususu | 2470 |
D-1532 | usgsagauGfcUfAfCfUfaauuguuus{invAb} | 1623 | asAfsaacaAfuuaguaGfcAfucucasusu | 2471 |
D-1533 | ususuggaAfuCfUfGfUfuguuucugs{invAb} | 1624 | asCfsagaaAfcaacagAfuUfccaaasusu | 2472 |
D-1534 | ususcugcCfaAfAfGfGfuaaauuaas{invAb} | 1625 | asUfsuaauUfuaccuuUfgGfcagaasusu | 2473 |
D-1535 | uscsugccAfaAfGfGfUfaaauuaacs{invAb} | 1626 | asGfsuuaaUfuuaccuUfuGfgcagasusu | 2474 |
D-1536 | gsasuuuaUfuCfAfGfGfaauccccas{invAb} | 1627 | asUfsggggAfuuccugAfaUfaaaucsusu | 2475 |
D-1537 | asusucagGfaAfUfCfCfccauuugas{invAb} | 1628 | usUfscaaaUfggggauUfcCfugaaususu | 2476 |
D-1538 | gsgsaaucCfcCfAfUfUfugaauuugs{invAb} | 1629 | asCfsaaauUfcaaaugGfgGfauuccsusu | 2477 |
D-1539 | [GalNAc3]scucccaUfuCfUfUfUfcaugaggcs{invAb} | 1630 | asGfsccucAfugaaagAfaUfgggagsusu | 2478 |
D-1540 | [GalNAc3]saaggaaGfaCfCfGfCfacuccuaus{invAb} | 1631 | asAfsuaggAfgugcggUfcUfuccuususu | 2479 |
D-1541 | [GalNAc3]sgaaaacCfgAfUfUfUfcagugcacs{invAb} | 1632 | asGfsugcaCfugaaauCfgGfuuuucsusu | 2480 |
D-1542 | [GalNAc3]sgggagaGfaCfAfAfGfggacuuaus{invAb} | 1633 | asAfsuaagUfcccuugUfcUfcucccsusu | 2481 |
D-1543 | [GalNAc3]sgauguuAfaUfAfAfCfucuggaggs{invAb} | 1634 | asCfscuccAfgaguuaUfuAfacaucsusu | 2482 |
D-1544 | [GalNAc3]scaccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1635 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggugsusu | 2483 |
D-1545 | [GalNAc3]sgcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1636 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguugcsusu | 2484 |
D-1546 | [GalNAc3]scacaaaGfaCfGfGfUfacauaaucs{invAb} | 1637 | asGfsauuaUfguaccgUfcUfuugugsusu | 2485 |
D-1547 | [GalNAc3]scggaagUfuUfGfAfAfgauagauus{invAb} | 1638 | asAfsaucuAfucuucaAfaCfuuccgsusu | 2486 |
D-1548 | [GalNAc3]sacagagAfgAfUfGfGfuaagcagcs{invAb} | 1639 | asGfscugcUfuaccauCfuCfucugususu | 2487 |
D-1549 | [GalNAc3]sccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1640 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 2488 |
D-1550 | [GalNAc3]scuccucGfgUfUfCfUfacgcuuaus{invAb} | 1641 | asAfsuaagCfguagaaCfcGfaggagsusu | 2489 |
D-1551 | [GalNAc3]sugcaaaCfgUfGfCfAfuuggagccs{invAb} | 1642 | asGfsgcucCfaaugcaCfgUfuugcasusu | 2490 |
D-1552 | [GalNAc3]sgaagacCfgCfAfCfUfccuauggcs{invAb} | 1643 | asGfsccauAfggagugCfgGfucuucsusu | 2491 |
D-1553 | [GalNAc3]sgacaagGfgAfCfUfUfaucaacaas{invAb} | 1644 | usUfsuguuGfauaaguCfcCfuugucsusu | 2492 |
D-1554 | [GalNAc3]sucagaaAfuCfCfAfGfuacuaaacs{invAb} | 1645 | asGfsuuuaGfuacuggAfuUfucugasusu | 2493 |
D-1555 | [GalNAc3]saaauacCfaUfCfAfAfaaugcagcs{invAb} | 1646 | asGfscugcAfuuuugaUfgGfuauuususu | 2494 |
D-1556 | [GalNAc3]saaugacCfuUfGfCfCfaaauuccgs{invAb} | 1647 | asCfsggaaUfuuggcaAfgGfucauususu | 2495 |
D-1557 | [GalNAc3]scccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1648 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugggsusu | 2496 |
D-1558 | [GalNAc3]sagacgaUfaGfCfAfAfugugaagcs{invAb} | 1649 | asGfscuucAfcauugcUfaUfcgucususu | 2497 |
D-1559 | [GalNAc3]sgaagacGfaUfAfGfCfaaugugaas{invAb} | 1650 | asUfsucacAfuugcuaUfcGfucuucsusu | 2498 |
D-1560 | [GalNAc3]sucagaaGfaCfGfAfUfagcaaugus{invAb} | 1651 | asAfscauuGfcuaucgUfcUfucugasusu | 2499 |
D-1561 | [GalNAc3]sgggucaGfaAfGfAfCfgauagcaas{invAb} | 1652 | asUfsugcuAfucgucuUfcUfgacccsusu | 2500 |
D-1562 | [GalNAc3]saaagacGfgUfAfCfAfuaauccuas{invAb} | 1653 | asUfsaggaUfuauguaCfcGfucuuususu | 2501 |
D-1563 | [GalNAc3]sugucucCfgAfAfGfUfgccccagus{invAb} | 1654 | asAfscuggGfgcacuuCfgGfagacasusu | 2502 |
D-1564 | [GalNAc3]suaguuuGfgAfAfUfUfcuuugcucs{invAb} | 1655 | asGfsagcaAfagaauuCfcAfaacuasusu | 2503 |
D-1565 | [GalNAc3]sccaaacUfcCfCfAfUfucuuucaus{invAb} | 1656 | asAfsugaaAfgaauggGfaGfuuuggsusu | 2504 |
D-1566 | [GalNAc3]sguacauAfaUfCfCfUfacagguuus{invAb} | 1657 | usAfsaaccUfguaggaUfuAfuguacsusu | 2505 |
D-1567 | [GalNAc3]scaugcuCfuCfUfCfCfucgguucus{invAb} | 1658 | usAfsgaacCfgaggagAfgAfgcaugsusu | 2506 |
D-1568 | [GalNAc3]saccccaUfgCfUfCfUfcuccucggs{invAb} | 1659 | asCfscgagGfagagagCfaUfggggususu | 2507 |
D-1569 | [GalNAc3]sccgaucAfgCfUfGfUfagaacaacs{invAb} | 1660 | usGfsuuguUfcuacagCfuGfaucggsusu | 2508 |
D-1570 | [GalNAc3]saaccggAfgAfAfCfUfcuuagaaas{invAb} | 1661 | asUfsuucuAfagaguuCfuCfcgguususu | 2509 |
D-1571 | [GalNAc3]sacacagUfaGfUfGfGfagcuuuccs{invAb} | 1662 | asGfsgaaaGfcuccacUfaCfugugususu | 2510 |
D-1572 | [GalNAc3]saaauacAfuGfUfCfUfagucugucs{invAb} | 1663 | asGfsacagAfcuagacAfuGfuauuususu | 2511 |
D-1573 | [GalNAc3]sauccggAfaGfUfUfUfgaagauags{invAb} | 1664 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggaususu | 2512 |
D-1574 | [GalNAc3]sgcaagcCfuAfAfAfCfgucagaaas{invAb} | 1665 | asUfsuucuGfacguuuAfgGfcuugcsusu | 2513 |
D-1575 | [GalNAc3]suugaauAfcUfCfAfGfgaagucgas{invAb} | 1666 | usUfscgacUfuccugaGfuAfuucaasusu | 2514 |
D-1576 | [GalNAc3]sguucaaCfcAfCfCfUfugaugauus{invAb} | 1667 | asAfsaucaUfcaagguGfgUfugaacsusu | 2515 |
D-1577 | [GalNAc3]suacuguUfuAfCfAfUfugcagauus{invAb} | 1668 | asAfsaucuGfcaauguAfaAfcaguasusu | 2516 |
D-1578 | [GalNAc3]saccuugCfcAfAfAfUfuccggagas{invAb} | 1669 | asUfscuccGfgaauuuGfgCfaaggususu | 2517 |
D-1579 | [GalNAc3]scaauggAfuGfAfUfAfaaauaccas{invAb} | 1670 | asUfsgguaUfuuuaucAfuCfcauugsusu | 2518 |
D-1580 | [GalNAc3]sggcuccUfgUfUfUfCfcauugccus{invAb} | 1671 | asAfsggcaAfuggaaaCfaGfgagccsusu | 2519 |
D-1581 | [GalNAc3]sgaccagAfuUfGfCfUfaaugagaas{invAb} | 1672 | usUfsucucAfuuagcaAfuCfuggucsusu | 2520 |
D-1582 | [GalNAc3]saggcauUfuUfGfUfAfauuggaaas{invAb} | 1673 | asUfsuuccAfauuacaAfaAfugccususu | 2521 |
D-1583 | [GalNAc3]suaggcaUfuUfUfGfUfaauuggaas{invAb} | 1674 | usUfsuccaAfuuacaaAfaUfgccuasusu | 2522 |
D-1584 | [GalNAc3]sgauuccAfaGfUfCfCfaugugaggs{invAb} | 1675 | asCfscucaCfauggacUfuGfgaaucsusu | 2523 |
D-1585 | [GalNAc3]sccgcacUfcCfUfAfUfggcugaags{invAb} | 1676 | usCfsuucaGfccauagGfaGfugcggsusu | 2524 |
D-1586 | [GalNAc3]scuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1677 | asUfsugucUfucaaaaUfcCfcgaagsusu | 2525 |
D-1587 | [GalNAc3]suuugagAfgCfCfCfCfacaaugaas{invAb} | 1678 | asUfsucauUfguggggCfuCfucaaasusu | 2526 |
D-1588 | [GalNAc3]saaccgaUfuUfCfAfGfugcacgaus{invAb} | 1679 | asAfsucguGfcacugaAfaUfcgguususu | 2527 |
D-1589 | [GalNAc3]sacaaggGfaCfUfUfAfucaacaaas{invAb} | 1680 | asUfsuuguUfgauaagUfcCfcuugususu | 2528 |
D-1590 | [GalNAc3]sguaaaaCfuAfUfAfCfugacccgus{invAb} | 1681 | asAfscgggUfcaguauAfgUfuuuacsusu | 2529 |
D-1591 | [GalNAc3]sucuacuGfuUfUfAfCfauugcagas{invAb} | 1682 | asUfscugcAfauguaaAfcAfguagasusu | 2530 |
D-1592 | [GalNAc3]sguuuugGfuUfCfCfCfaacuugags{invAb} | 1683 | usCfsucaaGfuugggaAfcCfaaaacsusu | 2531 |
D-1593 | [GalNAc3]suugagcUfaUfGfUfGfuuggaagus{invAb} | 1684 | asAfscuucCfaacacaUfaGfcucaasusu | 2532 |
D-1594 | [GalNAc3]suuaaguUfuGfCfUfCfuuaaucgus{invAb} | 1685 | usAfscgauUfaagagcAfaAfcuuaasusu | 2533 |
D-1595 | [GalNAc3]sugaccuUfgCfCfAfAfauuccggas{invAb} | 1686 | asUfsccggAfauuuggCfaAfggucasusu | 2534 |
D-1596 | [GalNAc3]suuuaagUfuUfGfCfUfcuuaaucgs{invAb} | 1687 | asCfsgauuAfagagcaAfaCfuuaaasusu | 2535 |
D-1597 | [GalNAc3]saccaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1688 | usUfscuacAfgcugauCfgGfauggususu | 2536 |
D-1598 | [GalNAc3]sacaaauGfaCfCfUfUfgccaaauus{invAb} | 1689 | asAfsauuuGfgcaaggUfcAfuuugususu | 2537 |
D-1599 | [GalNAc3]saaagaaCfcAfUfCfCfgaucagcus{invAb} | 1690 | asAfsgcugAfucggauGfgUfucuuususu | 2538 |
D-1600 | [GalNAc3]scugauuUfuAfUfCfGfucaaacacs{invAb} | 1691 | asGfsuguuUfgacgauAfaAfaucagsusu | 2539 |
D-1601 | [GalNAc3]sucucucCfuCfGfGfUfucuacgcus{invAb} | 1692 | asAfsgcguAfgaaccgAfgGfagagasusu | 2540 |
D-1602 | [GalNAc3]saguuugAfaGfAfUfAfgauucgaas{invAb} | 1693 | asUfsucgaAfucuaucUfuCfaaacususu | 2541 |
D-1603 | [GalNAc3]suuuacaUfuGfCfAfGfauugcuaus{invAb} | 1694 | usAfsuagcAfaucugcAfaUfguaaasusu | 2542 |
D-1604 | [GalNAc3]sauggucAfcUfCfUfGfaaaaccgas{invAb} | 1695 | asUfscgguUfuucagaGfuGfaccaususu | 2543 |
D-1605 | [GalNAc3]sucucaaUfuCfCfAfCfacgaucucs{invAb} | 1696 | usGfsagauCfguguggAfaUfugagasusu | 2544 |
D-1606 | [GalNAc3]succacaCfgAfUfCfUfcaugagags{invAb} | 1697 | usCfsucucAfugagauCfgUfguggasusu | 2545 |
D-1607 | [GalNAc3]sgacaauCfaGfGfAfCfggucuugus{invAb} | 1698 | asAfscaagAfccguccUfgAfuugucsusu | 2546 |
D-1608 | [GalNAc3]saagagcCfuAfUfCfCfcugcuuucs{invAb} | 1699 | asGfsaaagCfagggauAfgGfcucuususu | 2547 |
D-1609 | [GalNAc3]sucaggaCfgGfUfCfUfugugaauas{invAb} | 1700 | asUfsauucAfcaagacCfgUfccugasusu | 2548 |
D-1610 | [GalNAc3]sgucagaAfaUfCfCfAfguacuaaas{invAb} | 1701 | asUfsuuagUfacuggaUfuUfcugacsusu | 2549 |
D-1611 | [GalNAc3]saguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1702 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaacususu | 2550 |
D-1612 | [GalNAc3]suuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1703 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 2551 |
D-1613 | [GalNAc3]scugaaaUfgGfAfCfAfaaugaccus{invAb} | 1704 | asAfsggucAfuuugucCfaUfuucagsusu | 2552 |
D-1614 | [GalNAc3]saagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1705 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucuususu | 2553 |
D-1615 | [GalNAc3]sggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1706 | asCfsuuucCfauauucAfcAfagaccsusu | 2554 |
D-1616 | [GalNAc3]suucaacCfaCfCfUfUfgaugauugs{invAb} | 1707 | asCfsaaucAfucaaggUfgGfuugaasusu | 2555 |
D-1617 | [GalNAc3]sacuuuaUfuCfUfAfUfagagcaaas{invAb} | 1708 | asUfsuugcUfcuauagAfaUfaaagususu | 2556 |
D-1618 | [GalNAc3]sagaccgCfaCfUfCfCfuauggcugs{invAb} | 1709 | usCfsagccAfuaggagUfgCfggucususu | 2557 |
D-1619 | [GalNAc3]suauuucCfcCfAfAfUfggaugauas{invAb} | 1710 | usUfsaucaUfccauugGfgGfaaauasusu | 2558 |
D-1620 | [GalNAc3]sgucagaAfgAfCfGfAfuagcaaugs{invAb} | 1711 | asCfsauugCfuaucguCfuUfcugacsusu | 2559 |
D-1621 | [GalNAc3]sgcuaauGfaGfAfAfAfguggcucus{invAb} | 1712 | asAfsgagcCfacuuucUfcAfuuagcsusu | 2560 |
D-1622 | [GalNAc3]scauuacCfaGfUfUfAfgcuuuuaas{invAb} | 1713 | usUfsuaaaAfgcuaacUfgGfuaaugsusu | 2561 |
D-1623 | [GalNAc3]suugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1714 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 2562 |
D-1624 | [GalNAc3]sucuacuGfuUfUfAfCfauugcagas{invAb} | 1715 | asUfscugcAfauguaaAfcAfguagasusu | 2563 |
D-1625 | [GalNAc3]saauaaaUfgAfGfAfUfgcuacuaas{invAb} | 1716 | asUfsuaguAfgcaucuCfaUfuuauususu | 2564 |
D-1626 | [GalNAc3]suuauucUfaUfAfGfAfgcaaacuus{invAb} | 1717 | asAfsaguuUfgcucuaUfaGfaauaasusu | 2565 |
D-1627 | [GalNAc3]saugaugCfaCfUfUfUfaggauguus{invAb} | 1718 | asAfsacauCfcuaaagUfgCfaucaususu | 2566 |
D-1628 | [GalNAc3]suacauuGfcAfGfAfUfugcuauaas{invAb} | 1719 | asUfsuauaGfcaaucuGfcAfauguasusu | 2567 |
D-1629 | [GalNAc3]suuacauUfgCfAfGfAfuugcuauas{invAb} | 1720 | usUfsauagCfaaucugCfaAfuguaasusu | 2568 |
D-1630 | [GalNAc3]sguuuuaAfaGfGfGfUfcgugagaas{invAb} | 1721 | usUfsucucAfcgacccUfuUfaaaacsusu | 2569 |
D-1631 | [GalNAc3]sugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1722 | asCfsacuuCfcaacacAfuAfgcucasusu | 2570 |
D-1632 | [GalNAc3]suuuggcAfuCfGfGfCfuccuguuus{invAb} | 1723 | asAfsaacaGfgagccgAfuGfccaaasusu | 2571 |
D-1633 | [GalNAc3]sauccuaCfaGfGfUfUfuaaauguas{invAb} | 1724 | asUfsacauUfuaaaccUfgUfaggaususu | 2572 |
D-1634 | [GalNAc3]suacacaAfaGfAfCfGfguacauaas{invAb} | 1725 | asUfsuaugUfaccgucUfuUfguguasusu | 2573 |
D-1635 | [DCA-C6]gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1726 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguugcsusu | 2574 |
D-1636 | [DCA-C6]caccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1727 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggugsusu | 2575 |
D-1637 | [DCA-C6]cuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1728 | asUfsugucUfucaaaaUfcCfcgaagsusu | 2576 |
D-1638 | [DCA-C6]auccggAfaGfUfUfUfgaagauags{invAb} | 1729 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggaususu | 2577 |
D-1639 | [DCA-C6]aaccGfgAfGfAfAfcucuuagaasus{invAb} | 1730 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguususu | 2578 |
D-1640 | [GalNAc3]saaccGfgAfGfAfAfcucuuagaasus{invAb} | 1731 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguususu | 2579 |
D-1641 | [DCA-C6]ccaaacUfcCfCfAfUfucuuucaus{invAb} | 1732 | asAfsugaaAfgaauggGfaGfuuuggsusu | 2580 |
D-1642 | [DCA-C6]cccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1733 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugggsusu | 2581 |
D-1643 | [DCA-C6]ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1734 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 2582 |
D-1644 | [DCA-C6]ccggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 1735 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggsusu | 2583 |
D-1645 | [GalNAc3]sccggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 1736 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggsusu | 2584 |
D-1646 | [GalNAc3]saaccggAfgAfAfCfUfcuuagaaus{invAb} | 1737 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguususu | 2585 |
D-1647 | [GalNAc3]sucggUfuCfUfAfCfgcuuauggusus{invAb} | 1738 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgasusu | 2586 |
D-1648 | [GalNAc3]sccaaAfcUfCfCfCfauucuuucasus{invAb} | 1739 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggsusu | 2587 |
D-1649 | [GalNAc3]sucggGfaUfUfUfUfgaagacaausus{invAb} | 1740 | asUfsugucUfucaaaaUfcCfcgasusu | 2588 |
D-1650 | [GalNAc3]scaauGfgAfUfGfAfuaaaauacusus{invAb} | 1741 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugsusu | 2589 |
D-1651 | [GalNAc3]sucggUfuCfUfAfCfgcuuauggusus{invAb} | 1742 | asCfscauaAfgcguAfgAfaCfcgasusu | 2590 |
D-1652 | [GalNAc3]saaccGfgAfGfAfAfcucuuagaasus{invAb} | 1743 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguususu | 2591 |
D-1653 | [GalNAc3]sccaaAfcUfCfCfCfauucuuucasus{invAb} | 1744 | usGfsaaagAfauggGfaGfuUfuggsusu | 2592 |
D-1654 | [GalNAc3]sucggGfaUfUfUfUfgaagacaausus{invAb} | 1745 | asUfsugucUfucaaAfaUfcCfcgasusu | 2593 |
D-1655 | [GalNAc3]scaauGfgAfUfGfAfuaaaauacusus{invAb} | 1746 | asGfsuauuUfuaucAfuCfcAfuugsusu | 2594 |
D-1656 | [GalNAc3]sccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1747 | asCfscauAfAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 2595 |
D-1657 | [GalNAc3]sgcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1748 | usUfscuaAfGfaguucuCfcGfguugcsusu | 2596 |
D-1658 | [GalNAc3]scaccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1749 | usGfsaaaGfAfaugggaGfuUfuggugsusu | 2597 |
D-1659 | [GalNAc3]scuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1750 | asUfsuguCfUfucaaaaUfcCfcgaagsusu | 2598 |
D-1660 | [GalNAc3]scccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1751 | asGfsuauUfUfuaucauCfcAfuugggsusu | 2599 |
D-1661 | [GalNAc3]sccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1752 | asCfscauaAfgcguAfgAfaCfcgaggsusu | 2600 |
D-1662 | [GalNAc3]sgcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1753 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguugcsusu | 2601 |
D-1663 | [GalNAc3]scaccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1754 | usGfsaaagAfauggGfaGfuUfuggugsusu | 2602 |
D-1664 | [GalNAc3]scuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1755 | asUfsugucUfucaaAfaUfcCfcgaagsusu | 2603 |
D-1665 | [GalNAc3]scccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1756 | asGfsuauuUfuaucAfuCfcAfuugggsusu | 2604 |
D-1666 | [GalNAc3]sccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1757 | asCfscauaagcguAfgAfaCfcgaggsusu | 2605 |
D-1667 | [GalNAc3]sgcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1758 | usUfscuaagaguuCfuCfcGfguugcsusu | 2606 |
D-1668 | [GalNAc3]scaccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1759 | usGfsaaagaauggGfaGfuUfuggugsusu | 2607 |
D-1669 | [GalNAc3]scuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1760 | asUfsugucuucaaAfaUfcCfcgaagsusu | 2608 |
D-1670 | [DCA-C6]aaccggAfgAfAfCfUfcuuagaaus{invAb} | 1761 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguususu | 2609 |
D-1671 | [DCA-C6]ucggUfuCfUfAfCfgcuuauggusus{invAb} | 1762 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgasusu | 2610 |
D-1672 | [DCA-C6]ccaaAfcUfCfCfCfauucuuucasus{invAb} | 1763 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggsusu | 2611 |
D-1673 | [DCA-C6]ucggGfaUfUfUfUfgaagacaausus{invAb} | 1764 | asUfsugucUfucaaaaUfcCfcgasusu | 2612 |
D-1674 | [DCA-C6]caauGfgAfUfGfAfuaaaauacusus{invAb} | 1765 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugsusu | 2613 |
D-1675 | [DCA-C6]ucggUfuCfUfAfCfgcuuauggusus{invAb} | 1766 | asCfscauaAfgcguAfgAfaCfcgasusu | 2614 |
D-1676 | [DCA-C6]aaccGfgAfGfAfAfcucuuagaasus{invAb} | 1767 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguususu | 2615 |
D-1677 | [DCA-C6]ccaaAfcUfCfCfCfauucuuucasus{invAb} | 1768 | usGfsaaagAfauggGfaGfuUfuggsusu | 2616 |
D-1678 | [DCA-C6]ucggGfaUfUfUfUfgaagacaausus{invAb} | 1769 | asUfsugucUfucaaAfaUfcCfcgasusu | 2617 |
D-1679 | [DCA-C6]caauGfgAfUfGfAfuaaaauacusus{invAb} | 1770 | asGfsuauuUfuaucAfuCfcAfuugsusu | 2618 |
D-1680 | [DCA-C6]ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1771 | asCfscauAfAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 2619 |
D-1681 | [DCA-C6]gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1772 | usUfscuaAfGfaguucuCfcGfguugcsusu | 2620 |
D-1682 | [DCA-C6]caccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1773 | usGfsaaaGfAfaugggaGfuUfuggugsusu | 2621 |
D-1683 | [DCA-C6]cuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1774 | asUfsuguCfUfucaaaaUfcCfcgaagsusu | 2622 |
D-1684 | [DCA-C6]cccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1775 | asGfsuauUfUfuaucauCfcAfuugggsusu | 2623 |
D-1685 | [DCA-C6]ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1776 | asCfscauaAfgcguAfgAfaCfcgaggsusu | 2624 |
D-1686 | [DCA-C6]gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1777 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguugcsusu | 2625 |
D-1687 | [DCA-C6]caccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1778 | usGfsaaagAfauggGfaGfuUfuggugsusu | 2626 |
D-1688 | [DCA-C6]cuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1779 | asUfsugucUfucaaAfaUfcCfcgaagsusu | 2627 |
D-1689 | [DCA-C6]cccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 1780 | asGfsuauuUfuaucAfuCfcAfuugggsusu | 2628 |
D-1690 | [DCA-C6]ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 1781 | asCfscauaagcguAfgAfaCfcgaggsusu | 2629 |
D-1691 | [DCA-C6]gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 1782 | usUfscuaagaguuCfuCfcGfguugcsusu | 2630 |
D-1692 | [DCA-C6]caccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 1783 | usGfsaaagaauggGfaGfuUfuggugsusu | 2631 |
D-1693 | [DCA-C6]cuucggGfaUfUfUfUfgaagacaas{invAb} | 1784 | asUfsugucuucaaAfaUfcCfcgaagsusu | 2632 |
D-1694 | [DCA-C6]accaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1785 | usUfscuacAfgcugauCfgGfauggususu | 2633 |
D-1695 | [DCA-C6]ggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1786 | asCfsuuucCfauauucAfcAfagaccsusu | 2634 |
D-1696 | [DCA-C6]ugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1787 | asCfsacuuCfcaacacAfuAfgcucasusu | 2635 |
D-1697 | [DCA-C6]aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1788 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucuususu | 2636 |
D-1698 | [DCA-C6]aguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1789 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaacususu | 2637 |
D-1699 | [DCA-C6]uuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1790 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 2638 |
D-1700 | [GalNAc3]scauccgAfuCfAfGfCfuguagaasus{invAb} | 1791 | usUfscuacAfgcugAfuCfgGfaugsusu | 2639 |
D-1701 | [GalNAc3]sucuuguGfaAfUfAfUfggaaagusus{invAb} | 1792 | asCfsuuucCfauauUfcAfcAfagasusu | 2640 |
D-1702 | [GalNAc3]sgacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 1793 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 2641 |
D-1703 | [GalNAc3]sagcuauGfuGfUfUfGfgaagugusus{invAb} | 1794 | asCfsacuuCfcaacAfcAfuAfgcususu | 2642 |
D-1704 | [GalNAc3]suggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 1795 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 2643 |
D-1705 | [GalNAc3]suuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 1796 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 2644 |
D-1706 | [GalNAc3]sgcuauaAfuUfUfCfAfaggaguusus{invAb} | 1797 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 2645 |
D-1707 | [GalNAc3]scaucCfgAfUfCfAfgcuguagaasus{invAb} | 1798 | usUfscuacAfgcugauCfgGfaugsusu | 2646 |
D-1708 | [GalNAc3]sucuuGfuGfAfAfUfauggaaagusus{invAb} | 1799 | asCfsuuucCfauauucAfcAfagasusu | 2647 |
D-1709 | [GalNAc3]sgacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 1800 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucsusu | 2648 |
D-1710 | [GalNAc3]sagcuAfuGfUfGfUfuggaagugusus{invAb} | 1801 | asCfsacuuCfcaacacAfuAfgcususu | 2649 |
D-1711 | [GalNAc3]suggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 1802 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccasusu | 2650 |
D-1712 | [GalNAc3]suuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 1803 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaasusu | 2651 |
D-1713 | [GalNAc3]sgcuaUfaAfUfUfUfcaaggaguusus{invAb} | 1804 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcsusu | 2652 |
D-1714 | [GalNAc3]scaucCfgAfUfCfAfgcuguagaasus{invAb} | 1805 | usUfscuacAfgcugAfuCfgGfaugsusu | 2653 |
D-1715 | [GalNAc3]sucuuGfuGfAfAfUfauggaaagusus{invAb} | 1806 | asCfsuuucCfauauUfcAfcAfagasusu | 2654 |
D-1716 | [GalNAc3]sgacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 1807 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 2655 |
D-1717 | [GalNAc3]sagcuAfuGfUfGfUfuggaagugusus{invAb} | 1808 | asCfsacuuCfcaacAfcAfuAfgcususu | 2656 |
D-1718 | [GalNAc3]suggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 1809 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 2657 |
D-1719 | [GalNAc3]suuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 1810 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 2658 |
D-1720 | [GalNAc3]sgcuaUfaAfUfUfUfcaaggaguusus{invAb} | 1811 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 2659 |
D-1721 | [GalNAc3]saccaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1812 | usUfscuaCfAfgcugauCfgGfauggususu | 2660 |
D-1722 | [GalNAc3]sggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1813 | asCfsuuuCfCfauauucAfcAfagaccsusu | 2661 |
D-1723 | [GalNAc3]saagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1814 | usGfsuagGfAfuuauguAfcCfgucuususu | 2662 |
D-1724 | [GalNAc3]sugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1815 | asCfsacuUfCfcaacacAfuAfgcucasusu | 2663 |
D-1725 | [GalNAc3]suuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1816 | asGfsuagAfGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 2664 |
D-1726 | [GalNAc3]saguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1817 | usAfsgagCfAfaagaauUfcCfaaacususu | 2665 |
D-1727 | [GalNAc3]suugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1818 | asAfscucCfUfugaaauUfaUfagcaasusu | 2666 |
D-1728 | [GalNAc3]saccaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1819 | usUfscuacAfgcugAfuCfgGfauggususu | 2667 |
D-1729 | [GalNAc3]sggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1820 | asCfsuuucCfauauUfcAfcAfagaccsusu | 2668 |
D-1730 | [GalNAc3]saagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1821 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucuususu | 2669 |
D-1731 | [GalNAc3]sugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1822 | asCfsacuuCfcaacAfcAfuAfgcucasusu | 2670 |
D-1732 | [GalNAc3]suuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1823 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccaaasusu | 2671 |
D-1733 | [GalNAc3]saguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1824 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaacususu | 2672 |
D-1734 | [GalNAc3]suugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1825 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcaasusu | 2673 |
D-1735 | [GalNAc3]saccaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 1826 | usUfscuacagcugAfuCfgGfauggususu | 2674 |
D-1736 | [GalNAc3]sggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 1827 | asCfsuuuccauauUfcAfcAfagaccsusu | 2675 |
D-1737 | [GalNAc3]saagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 1828 | usGfsuaggauuauGfuAfcCfgucuususu | 2676 |
D-1738 | [GalNAc3]sugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 1829 | asCfsacuuccaacAfcAfuAfgcucasusu | 2677 |
D-1739 | [GalNAc3]suuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 1830 | asGfsuagagcaaaGfaAfuUfccaaasusu | 2678 |
D-1740 | [GalNAc3]saguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 1831 | usAfsgagcaaagaAfuUfcCfaaacususu | 2679 |
D-1741 | [GalNAc3]suugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1832 | asAfscuccuugaaAfuUfaUfagcaasusu | 2680 |
D-1742 | [GalNAc3]saccaggAfaAfUfGfUfaagacaccs{invAb} | 1833 | usGfsguguCfuuacauUfuCfcuggususu | 2681 |
D-1743 | [GalNAc3]sccaggaAfaUfGfUfAfagacaccas{invAb} | 1834 | usUfsggugUfcuuacaUfuUfccuggsusu | 2682 |
D-1744 | [GalNAc3]scccucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 1835 | asAfscuuuCfaaaacaUfaCfgagggsusu | 2683 |
D-1745 | [GalNAc3]suuucagUfuUfUfAfAfagggucgus{invAb} | 1836 | asAfscgacCfcuuuaaAfaCfugaaasusu | 2684 |
D-1746 | [GalNAc3]sucaguuUfuAfAfAfGfggucgugas{invAb} | 1837 | asUfscacgAfcccuuuAfaAfacugasusu | 2685 |
D-1747 | [GalNAc3]scaguuuUfaAfAfGfGfgucgugags{invAb} | 1838 | usCfsucacGfacccuuUfaAfaacugsusu | 2686 |
D-1748 | [GalNAc3]suuuaaaGfgGfUfCfGfugagaaacs{invAb} | 1839 | asGfsuuucUfcacgacCfcUfuuaaasusu | 2687 |
D-1749 | [GalNAc3]sggaagcUfuGfAfGfCfuauguguus{invAb} | 1840 | asAfsacacAfuagcucAfaGfcuuccsusu | 2688 |
D-1750 | [GalNAc3]sgaagcuUfgAfGfCfUfauguguugs{invAb} | 1841 | asCfsaacaCfauagcuCfaAfgcuucsusu | 2689 |
D-1751 | [GalNAc3]sagcuugAfgCfUfAfUfguguuggas{invAb} | 1842 | usUfsccaaCfacauagCfuCfaagcususu | 2690 |
D-1752 | [GalNAc3]sgcuugaGfcUfAfUfGfuguuggaas{invAb} | 1843 | asUfsuccaAfcacauaGfcUfcaagcsusu | 2691 |
D-1753 | [GalNAc3]scuugagCfuAfUfGfUfguuggaags{invAb} | 1844 | asCfsuuccAfacacauAfgCfucaagsusu | 2692 |
D-1754 | [GalNAc3]sgagcuaUfgUfGfUfUfggaagugcs{invAb} | 1845 | asGfscacuUfccaacaCfaUfagcucsusu | 2693 |
D-1755 | [GalNAc3]sguguugGfaAfGfUfGfcccugguus{invAb} | 1846 | asAfsaccaGfggcacuUfcCfaacacsusu | 2694 |
D-1756 | [GalNAc3]sggaaguGfcCfCfUfGfguuuuaaus{invAb} | 1847 | asAfsuuaaAfaccaggGfcAfcuuccsusu | 2695 |
D-1757 | [GalNAc3]sacaaagAfcGfGfUfAfcauaauccs{invAb} | 1848 | asGfsgauuAfuguaccGfuCfuuugususu | 2696 |
D-1758 | [GalNAc3]scaaagaCfgGfUfAfCfauaauccus{invAb} | 1849 | usAfsggauUfauguacCfgUfcuuugsusu | 2697 |
D-1759 | [GalNAc3]scauaauCfcUfAfCfAfgguuuaaas{invAb} | 1850 | asUfsuuaaAfccuguaGfgAfuuaugsusu | 2698 |
D-1760 | [GalNAc3]suugcucUfaCfUfGfUfuuacauugs{invAb} | 1851 | asCfsaaugUfaaacagUfaGfagcaasusu | 2699 |
D-1761 | [GalNAc3]suugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1852 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 2700 |
D-1762 | [GalNAc3]saaugauGfcAfCfUfUfuaggaugus{invAb} | 1853 | asAfscaucCfuaaaguGfcAfucauususu | 2701 |
D-1763 | [GalNAc3]saugaugCfaCfUfUfUfaggauguus{invAb} | 1854 | asAfsacauCfcuaaagUfgCfaucaususu | 2702 |
D-1764 | [GalNAc3]sacaugaAfuCfAfUfUfcacaugacs{invAb} | 1855 | asGfsucauGfugaaugAfuUfcaugususu | 2703 |
D-1765 | [GalNAc3]scaugaaUfcAfUfUfCfacaugaccs{invAb} | 1856 | usGfsgucaUfgugaauGfaUfucaugsusu | 2704 |
D-1766 | [GalNAc3]saauacaUfgUfCfUfAfgucuguccs{invAb} | 1857 | asGfsgacaGfacuagaCfaUfguauususu | 2705 |
D-1767 | [GalNAc3]saugucuAfgUfCfUfGfuccuuuaas{invAb} | 1858 | asUfsuaaaGfgacagaCfuAfgacaususu | 2706 |
D-1768 | [GalNAc3]saaucagAfuCfAfUfUfaccaguuas{invAb} | 1859 | asUfsaacuGfguaaugAfuCfugauususu | 2707 |
D-1769 | [GalNAc3]sucagauCfaUfUfAfCfcaguuagcs{invAb} | 1860 | asGfscuaaCfugguaaUfgAfucugasusu | 2708 |
D-1770 | [GalNAc3]sagaucaUfuAfCfCfAfguuagcuus{invAb} | 1861 | asAfsagcuAfacugguAfaUfgaucususu | 2709 |
D-1771 | [GalNAc3]sucauuaCfcAfGfUfUfagcuuuuas{invAb} | 1862 | usUfsaaaaGfcuaacuGfgUfaaugasusu | 2710 |
D-1772 | [GalNAc3]saccaguUfaGfCfUfUfuuaaagcas{invAb} | 1863 | asUfsgcuuUfaaaagcUfaAfcuggususu | 2711 |
D-1773 | [GalNAc3]saagcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 1864 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcuususu | 2712 |
D-1774 | [GalNAc3]sgcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 1865 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 2713 |
D-1775 | [GalNAc3]sugagauGfcUfAfCfUfaauuguuus{invAb} | 1866 | asAfsaacaAfuuaguaGfcAfucucasusu | 2714 |
D-1776 | [GalNAc3]sgauuuaUfuCfAfGfGfaauccccas{invAb} | 1867 | asUfsggggAfuuccugAfaUfaaaucsusu | 2715 |
D-1777 | [GalNAc3]sugcuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 1868 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagcasusu | 2716 |
D-1778 | [GalNAc3]sauguaaAfaCfUfAfUfacugacccs{invAb} | 1869 | asGfsggucAfguauagUfuUfuacaususu | 2717 |
D-1779 | [GalNAc3]suaaaacUfaUfAfCfUfgacccguus{invAb} | 1870 | asAfsacggGfucaguaUfaGfuuuuasusu | 2718 |
D-1780 | [GalNAc3]sgagaaaCfuGfGfCfUfgguccaaus{invAb} | 1871 | asAfsuuggAfccagccAfgUfuucucsusu | 2719 |
D-1781 | [GalNAc3]sccaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 1872 | usGfsuugcUfguaaauCfcCfauuggsusu | 2720 |
D-1782 | [GalNAc3]saguuugCfuCfUfUfAfaucguaugs{invAb} | 1873 | asCfsauacGfauuaagAfgCfaaacususu | 2721 |
D-1783 | [GalNAc3]sguuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 1874 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaaacsusu | 2722 |
D-1784 | [GalNAc3]suuugcuCfuUfAfAfUfcguauggas{invAb} | 1875 | usUfsccauAfcgauuaAfgAfgcaaasusu | 2723 |
D-1785 | [GalNAc3]sugcucuUfaAfUfCfGfuauggaags{invAb} | 1876 | asCfsuuccAfuacgauUfaAfgagcasusu | 2724 |
D-1786 | [GalNAc3]scuuaauCfgUfAfUfGfgaagcuugs{invAb} | 1877 | usCfsaagcUfuccauaCfgAfuuaagsusu | 2725 |
D-1787 | [GalNAc3]suuaaucGfuAfUfGfGfaagcuugas{invAb} | 1878 | asUfscaagCfuuccauAfcGfauuaasusu | 2726 |
D-1788 | [GalNAc3]succauaCfaCfAfAfAfgacgguacs{invAb} | 1879 | usGfsuaccGfucuuugUfgUfauggasusu | 2727 |
D-1789 | [GalNAc3]scauacaCfaAfAfGfAfcgguacaus{invAb} | 1880 | usAfsuguaCfcgucuuUfgUfguaugsusu | 2728 |
D-1790 | [GalNAc3]sugucuaGfuCfUfGfUfccuuuaaus{invAb} | 1881 | usAfsuuaaAfggacagAfcUfagacasusu | 2729 |
D-1791 | [GalNAc3]sucuaguCfuGfUfCfCfuuuaauags{invAb} | 1882 | asCfsuauuAfaaggacAfgAfcuagasusu | 2730 |
D-1792 | [GalNAc3]scuagucUfgUfCfCfUfuuaauagcs{invAb} | 1883 | asGfscuauUfaaaggaCfaGfacuagsusu | 2731 |
D-1793 | [GalNAc3]sgucuguCfcUfUfUfAfauagcucus{invAb} | 1884 | asAfsgagcUfauuaaaGfgAfcagacsusu | 2732 |
D-1794 | [GalNAc3]sgucugcAfaCfCfGfGfagaacucus{invAb} | 1885 | asAfsgaguUfcuccggUfuGfcagacsusu | 2733 |
D-1795 | [GalNAc3]sucugcaAfcCfGfGfAfgaacucuus{invAb} | 1886 | usAfsagagUfucuccgGfuUfgcagasusu | 2734 |
D-1796 | [GalNAc3]sugcaacCfgGfAfGfAfacucuuags{invAb} | 1887 | usCfsuaagAfguucucCfgGfuugcasusu | 2735 |
D-1797 | [GalNAc3]saggaugAfaGfUfUfCfgacaugggs{invAb} | 1888 | usCfsccauGfucgaacUfuCfauccususu | 2736 |
D-1798 | [GalNAc3]sgggacuUfaUfCfAfAfcaaagaaas{invAb} | 1889 | usUfsuucuUfuguugaUfaAfgucccsusu | 2737 |
D-1799 | [GalNAc3]sauacucCfuUfCfUfGfgguucaacs{invAb} | 1890 | asGfsuugaAfcccagaAfgGfaguaususu | 2738 |
D-1800 | [GalNAc3]scaagccUfaAfAfCfGfucagaaaus{invAb} | 1891 | asAfsuuucUfgacguuUfaGfgcuugsusu | 2739 |
D-1801 | [GalNAc3]saagccuAfaAfCfGfUfcagaaaucs{invAb} | 1892 | asGfsauuuCfugacguUfuAfggcuususu | 2740 |
D-1802 | [GalNAc3]sgguggaCfaCfAfCfUfcagcauuus{invAb} | 1893 | asAfsaaugCfugagugUfgUfccaccsusu | 2741 |
D-1803 | [GalNAc3]sgagcuuUfgUfCfUfCfcgaagugcs{invAb} | 1894 | asGfscacuUfcggagaCfaAfagcucsusu | 2742 |
D-1804 | [GalNAc3]sugucucCfgAfAfGfUfgccccagus{invAb} | 1895 | asAfscuggGfgcacuuCfgGfagacasusu | 2743 |
D-1805 | [GalNAc3]saugcucUfcUfCfCfUfcgguucuas{invAb} | 1896 | asUfsagaaCfcgaggaGfaGfagcaususu | 2744 |
D-1806 | [GalNAc3]sagcucaCfaCfGfAfAfggauucags{invAb} | 1897 | usCfsugaaUfccuucgUfgUfgagcususu | 2745 |
D-1807 | [GalNAc3]sagaagaAfgUfAfCfAfgaccuuccs{invAb} | 1898 | asGfsgaagGfucuguaCfuUfcuucususu | 2746 |
D-1808 | [GalNAc3]sgaagaaGfuAfCfAfGfaccuucccs{invAb} | 1899 | usGfsggaaGfgucuguAfcUfucuucsusu | 2747 |
D-1809 | [GalNAc3]saagaagUfaCfAfGfAfccuucccas{invAb} | 1900 | asUfsgggaAfggucugUfaCfuucuususu | 2748 |
D-1810 | [GalNAc3]sucugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccs{invAb} | 1901 | asGfsgucaUfuuguccAfuUfucagasusu | 2749 |
D-1811 | [GalNAc3]saaaugaCfcUfUfGfCfcaaauuccs{invAb} | 1902 | asGfsgaauUfuggcaaGfgUfcauuususu | 2750 |
D-1812 | [GalNAc3]saccuaaCfuCfCfCfAfggaugcggs{invAb} | 1903 | asCfscgcaUfccugggAfgUfuaggususu | 2751 |
D-1813 | [GalNAc3]sugcggcAfgCfGfAfAfgcaacacas{invAb} | 1904 | asUfsguguUfgcuucgCfuGfccgcasusu | 2752 |
D-1814 | [GalNAc3]sacggccGfgUfAfAfCfaaagaacgs{invAb} | 1905 | usCfsguucUfuuguuaCfcGfgccgususu | 2753 |
D-1815 | [GalNAc3]sggccggUfaAfCfAfAfagaacgaas{invAb} | 1906 | asUfsucguUfcuuuguUfaCfcggccsusu | 2754 |
D-1816 | [GalNAc3]sggggucAfgAfAfGfAfcgauagcas{invAb} | 1907 | usUfsgcuaUfcgucuuCfuGfaccccsusu | 2755 |
D-1817 | [GalNAc3]sagaaagAfaCfCfAfUfccgaucags{invAb} | 1908 | asCfsugauCfggauggUfuCfuuucususu | 2756 |
D-1818 | [GalNAc3]sgaaccaUfcCfGfAfUfcagcuguas{invAb} | 1909 | asUfsacagCfugaucgGfaUfgguucsusu | 2757 |
D-1819 | [GalNAc3]saucuggAfaCfAfCfUfaucagcaus{invAb} | 1910 | asAfsugcuGfauagugUfuCfcagaususu | 2758 |
D-1820 | [GalNAc3]saagaaaAfuAfCfUfCfcuucugggs{invAb} | 1911 | asCfsccagAfaggaguAfuUfuucuususu | 2759 |
D-1821 | [GalNAc3]sacucagGfaAfGfUfCfgaaaaggus{invAb} | 1912 | usAfsccuuUfucgacuUfcCfugagususu | 2760 |
D-1822 | [GalNAc3]sagaaagGfaGfCfAfAfgccuaaacs{invAb} | 1913 | asGfsuuuaGfgcuugcUfcCfuuucususu | 2761 |
D-1823 | [GalNAc3]saggagcAfaGfCfCfUfaaacgucas{invAb} | 1914 | asUfsgacgUfuuaggcUfuGfcuccususu | 2762 |
D-1824 | [GalNAc3]sggagcaAfgCfCfUfAfaacgucags{invAb} | 1915 | usCfsugacGfuuuaggCfuUfgcuccsusu | 2763 |
D-1825 | [GalNAc3]sagcaagCfcUfAfAfAfcgucagaas{invAb} | 1916 | usUfsucugAfcguuuaGfgCfuugcususu | 2764 |
D-1826 | [GalNAc3]sgaaaguCfuCfAfAfUfuccacacgs{invAb} | 1917 | usCfsguguGfgaauugAfgAfcuuucsusu | 2765 |
D-1827 | [GalNAc3]sgucucaAfuUfCfCfAfcacgaucus{invAb} | 1918 | asAfsgaucGfuguggaAfuUfgagacsusu | 2766 |
D-1828 | [GalNAc3]sucaauuCfcAfCfAfCfgaucucaus{invAb} | 1919 | asAfsugagAfucguguGfgAfauugasusu | 2767 |
D-1829 | [GalNAc3]scaauucCfaCfAfCfGfaucucaugs{invAb} | 1920 | usCfsaugaGfaucgugUfgGfaauugsusu | 2768 |
D-1830 | [GalNAc3]sauuccaCfaCfGfAfUfcucaugags{invAb} | 1921 | usCfsucauGfagaucgUfgUfggaaususu | 2769 |
D-1831 | [GalNAc3]suuccacAfcGfAfUfCfucaugagas{invAb} | 1922 | asUfscucaUfgagaucGfuGfuggaasusu | 2770 |
D-1832 | [GalNAc3]sucaugaGfaGfAfAfCfuggaccugs{invAb} | 1923 | usCfsagguCfcaguucUfcUfcaugasusu | 2771 |
D-1833 | [GalNAc3]scaugagAfgAfAfCfUfggaccugas{invAb} | 1924 | asUfscaggUfccaguuCfuCfucaugsusu | 2772 |
D-1834 | [GalNAc3]saucccaGfcCfUfAfUfcugacaccs{invAb} | 1925 | usGfsguguCfagauagGfcUfgggaususu | 2773 |
D-1835 | [GalNAc3]succcagCfcUfAfUfCfugacaccas{invAb} | 1926 | usUfsggugUfcagauaGfgCfugggasusu | 2774 |
D-1836 | [GalNAc3]scccagcCfuAfUfCfUfgacaccaas{invAb} | 1927 | usUfsugguGfucagauAfgGfcugggsusu | 2775 |
D-1837 | [GalNAc3]sagcagaGfaAfAfUfCfaagaugccs{invAb} | 1928 | asGfsgcauCfuugauuUfcUfcugcususu | 2776 |
D-1838 | [GalNAc3]succgaaGfuGfCfCfCfcagucggas{invAb} | 1929 | asUfsccgaCfuggggcAfcUfucggasusu | 2777 |
D-1839 | [GalNAc3]sgaagauAfgAfUfUfCfgaagaagas{invAb} | 1930 | asUfscuucUfucgaauCfuAfucuucsusu | 2778 |
D-1840 | [GalNAc3]scagcgaAfgCfAfAfCfacacucccs{invAb} | 1931 | asGfsggagUfguguugCfuUfcgcugsusu | 2779 |
D-1841 | [GalNAc3]sgcgaagCfaAfCfAfCfacuccccas{invAb} | 1932 | usUfsggggAfguguguUfgCfuucgcsusu | 2780 |
D-1842 | [GalNAc3]suugaagCfcAfCfAfUfuggaaucus{invAb} | 1933 | usAfsgauuCfcaauguGfgCfuucaasusu | 2781 |
D-1843 | [GalNAc3]scgguaaCfaAfAfGfAfacgaacggs{invAb} | 1934 | asCfscguuCfguucuuUfgUfuaccgsusu | 2782 |
D-1844 | [GalNAc3]saugaagCfcAfCfUfAfuacgacags{invAb} | 1935 | asCfsugucGfuauaguGfgCfuucaususu | 2783 |
D-1845 | [GalNAc3]scacuauAfcGfAfCfAfgguaccggs{invAb} | 1936 | asCfscgguAfccugucGfuAfuagugsusu | 2784 |
D-1846 | [DCA-C6]uugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 1937 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 2785 |
D-1847 | {DCA-sC6}gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 2831 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcGfguugcsusu | 3085 |
D-1848 | {DCA-sC6}ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 2832 | asCfscauaAfgcguAfgAfaCfcgaggsusu | 3086 |
D-1849 | {DCA-sC6}gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 2833 | usUfscuaagaguuCfuCfcGfguugcsusu | 3087 |
D-1850 | {DCA-sC6}caauGfgAfUfGfAfuaaaauacusus{invAb} | 2834 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugsusu | 3088 |
D-1851 | {DCA-sC6}ccaaAfcUfCfCfCfauucuuucasus{invAb} | 2835 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggsusu | 3089 |
D-1852 | {DCA-sC6}ggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 2836 | asCfsuuucCfauauucAfcAfagaccsusu | 3090 |
D-1853 | {DCA-sC6}accaucCfgAfUfCfAfgcuguagas{invAb} | 2837 | usUfscuacAfgcugauCfgGfauggususu | 3091 |
D-1854 | {DCA-sC6}uuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 2838 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 3092 |
D-1855 | {DCA-sC6}aguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 2839 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaacususu | 3093 |
D-1856 | {DCA-sC6}aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2840 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucuususu | 3094 |
D-1857 | {DCA-sC6}ugagcuAfuGfUfGfUfuggaagugs{invAb} | 2841 | asCfsacuuCfcaacacAfuAfgcucasusu | 3095 |
D-1858 | {DCA-sC6}caccaaAfcUfCfCfCfauucuuucs{invAb} | 2842 | usGfsaaagAfaugggaGfuUfuggugsusu | 3096 |
D-1859 | {DCA-sC6}gcaaccGfgAfGfAfAfcucuuagas{invAb} | 2843 | usUfscuaaGfaguucuCfcGfguugcsusu | 3097 |
D-1860 | {DCA-sC6}ccucggUfuCfUfAfCfgcuuauggs{invAb} | 2844 | asCfscauaAfgcguagAfaCfcgaggsusu | 3098 |
D-1861 | {DCA-sC6}cccaauGfgAfUfGfAfuaaaauacs{invAb} | 2845 | asGfsuauuUfuaucauCfcAfuugggsusu | 3099 |
D-1862 | {DCA-sC6}uugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 2846 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 3100 |
D-1863 | {DCA-C6}aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2847 | usGfsuagGfAfuuauguAfcCfgucuususu | 3101 |
D-1864 | {DCA-C6}aguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 2848 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaacususu | 3102 |
D-1865 | {DCA-C6}aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2849 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucuususu | 3103 |
D-1866 | {DCA-C6}aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2850 | usGfsuaggauuauGfuAfcCfgucuususu | 3104 |
D-1867 | {DCA-C6}ggucuuGfuGfAfAfUfauggaaags{invAb} | 2851 | asCfsuuuccauauUfcAfcAfagaccsusu | 3105 |
D-1868 | {DCA-C6}uggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2852 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccasusu | 3106 |
D-1869 | {DCA-C6}gacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2853 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucsusu | 3107 |
D-1870 | {DCA-C6}uuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 2854 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3108 |
D-1871 | {DCA-C6}uggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2855 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3109 |
D-1872 | {DCA-C6}gacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2856 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3110 |
D-1873 | {DCA-C6}caucCfgAfUfCfAfgcuguagaasus{invAb} | 2857 | usUfscuacAfgcugAfuCfgGfaugsusu | 3111 |
D-1874 | {DCA-C6}gcuauaAfuUfUfCfAfaggaguusus{invAb} | 2858 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 3112 |
D-1875 | {DCA-C6}uuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 2859 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3113 |
D-1876 | {DCA-C6}uggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 2860 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3114 |
D-1877 | {DCA-C6}gacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 2861 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3115 |
D-1878 | {DCA-C6}gsacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2862 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3116 |
D-1879 | [GalNAc3]sgsacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2863 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3117 |
D-1880 | {DCA-sC6}gacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2864 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3118 |
D-1881 | {DCA-sC6}aagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2865 | usGfsuaggauuauGfuAfcCfgucuususu | 3119 |
D-1882 | {DCA-sC6}uggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2866 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3120 |
D-1883 | {DCA-sC6}uuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 2867 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3121 |
D-1884 | {DCA-sC6}gacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 2868 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3122 |
D-1885 | {DCA-sC6}uggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 2869 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3123 |
D-1886 | {DCA-sC6}uuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 2870 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3124 |
D-1887 | {DCA-sC6}gacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2871 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucsusu | 3125 |
D-1888 | {DCA-sC6}uggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2872 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccasusu | 3126 |
D-1889 | 2873 | 3127 | ||
D-1890 | 2874 | 3128 | ||
D-1891 | [GalNAc3]saaucagAfuCfAfUfUfaccaguuas{invAb} | 2875 | asUfsaacUfGfguaaugAfuCfugauususu | 3129 |
D-1892 | [GalNAc3]scuagucUfgUfCfCfUfuuaauagcs{invAb} | 2876 | asGfscuaUfUfaaaggaCfaGfacuagsusu | 3130 |
D-1893 | [GalNAc3]sgcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2877 | asAfsuagUfCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 3131 |
D-1894 | [GalNAc3]sccaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 2878 | usGfsuugCfUfguaaauCfcCfauuggsusu | 3132 |
D-1895 | [GalNAc3]sguuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 2879 | usCfscauAfCfgauuaaGfaGfcaaacsusu | 3133 |
D-1896 | [GalNAc3]scccucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 2880 | asAfscuuUfCfaaaacaUfaCfgagggsusu | 3134 |
D-1897 | [GalNAc3]saaucagAfuCfAfUfUfaccaguuas{invAb} | 2881 | asUfsaacuGfguaaUfgAfuCfugauususu | 3135 |
D-1898 | [GalNAc3]scuagucUfgUfCfCfUfuuaauagcs{invAb} | 2882 | asGfscuauUfaaagGfaCfaGfacuagsusu | 3136 |
D-1899 | [GalNAc3]sgcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2883 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugugcsusu | 3137 |
D-1900 | [GalNAc3]sccaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 2884 | usGfsuugcUfguaaAfuCfcCfauuggsusu | 3138 |
D-1901 | [GalNAc3]sguuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 2885 | usCfscauaCfgauuAfaGfaGfcaaacsusu | 3139 |
D-1902 | [GalNAc3]scccucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 2886 | asAfscuuuCfaaaaCfaUfaCfgagggsusu | 3140 |
D-1903 | [GalNAc3]saaucagAfuCfAfUfUfaccaguuas{invAb} | 2887 | asUfsaacugguaaUfgAfuCfugauususu | 3141 |
D-1904 | [GalNAc3]scuagucUfgUfCfCfUfuuaauagcs{invAb} | 2888 | asGfscuauuaaagGfaCfaGfacuagsusu | 3142 |
D-1905 | [GalNAc3]sgcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2889 | asAfsuagucuuaaAfcAfaAfugugcsusu | 3143 |
D-1906 | [GalNAc3]sccaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 2890 | usGfsuugcuguaaAfuCfcCfauuggsusu | 3144 |
D-1907 | [GalNAc3]sguuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 2891 | usCfscauacgauuAfaGfaGfcaaacsusu | 3145 |
D-1908 | [GalNAc3]scccucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 2892 | asAfscuuucaaaaCfaUfaCfgagggsusu | 3146 |
D-1909 | [GalNAc3]sucagAfuCfAfUfUfaccaguuausus{invAb} | 2893 | asUfsaacuGfguaaugAfuCfugasusu | 3147 |
D-1910 | [GalNAc3]sagucUfgUfCfCfUfuuaauagcusus{invAb} | 2894 | asGfscuauUfaaaggaCfaGfacususu | 3148 |
D-1911 | [GalNAc3]sacauUfuGfUfUfUfaagacuauusus{invAb} | 2895 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugususu | 3149 |
D-1912 | [GalNAc3]saaugGfgAfUfUfUfacagcaacasus{invAb} | 2896 | usGfsuugcUfguaaauCfcCfauususu | 3150 |
D-1913 | [GalNAc3]suugcUfcUfUfAfAfucguauggasus{invAb} | 2897 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaasusu | 3151 |
D-1914 | [GalNAc3]scucgUfaUfGfUfUfuugaaaguusus{invAb} | 2898 | asAfscuuuCfaaaacaUfaCfgagsusu | 3152 |
D-1915 | [GalNAc3]sucagAfuCfAfUfUfaccaguuausus{invAb} | 2899 | asUfsaacuGfguaaUfgAfuCfugasusu | 3153 |
D-1916 | [GalNAc3]sagucUfgUfCfCfUfuuaauagcusus{invAb} | 2900 | asGfscuauUfaaagGfaCfaGfacususu | 3154 |
D-1917 | [GalNAc3]sacauUfuGfUfUfUfaagacuauusus{invAb} | 2901 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugususu | 3155 |
D-1918 | [GalNAc3]saaugGfgAfUfUfUfacagcaacasus{invAb} | 2902 | usGfsuugcUfguaaAfuCfcCfauususu | 3156 |
D-1919 | [GalNAc3]suugcUfcUfUfAfAfucguauggasus{invAb} | 2903 | usCfscauaCfgauuAfaGfaGfcaasusu | 3157 |
D-1920 | [GalNAc3]scucgUfaUfGfUfUfuugaaaguusus{invAb} | 2904 | asAfscuuuCfaaaaCfaUfaCfgagsusu | 3158 |
D-1921 | [GalNAc3]sucagauCfaUfUfAfCfcaguuausus{invAb} | 2905 | asUfsaacuGfguaaUfgAfuCfugasusu | 3159 |
D-1922 | [GalNAc3]sagucugUfcCfUfUfUfaauagcusus{invAb} | 2906 | asGfscuauUfaaagGfaCfaGfacususu | 3160 |
D-1923 | [GalNAc3]sacauuuGfuUfUfAfAfgacuauusus{invAb} | 2907 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugususu | 3161 |
D-1924 | [GalNAc3]saaugggAfuUfUfAfCfagcaacasus{invAb} | 2908 | usGfsuugcUfguaaAfuCfcCfauususu | 3162 |
D-1925 | [GalNAc3]suugcucUfuAfAfUfCfguauggasus{invAb} | 2909 | usCfscauaCfgauuAfaGfaGfcaasusu | 3163 |
D-1926 | [GalNAc3]scucguaUfgUfUfUfUfgaaaguusus{invAb} | 2910 | asAfscuuuCfaaaaCfaUfaCfgagsusu | 3164 |
D-1927 | [GalNAc3]sasasucagAfuCfAfUfUfaccaguusas{invAb} | 2911 | asUfsaacuGfgUfaaugAfuCfugauususu | 3165 |
D-1928 | [GalNAc3]scsusagucUfgUfCfCfUfuuaauagscs{invAb} | 2912 | asGfscuauUfaAfaggaCfaGfacuagsusu | 3166 |
D-1929 | [GalNAc3]sgscsacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 2913 | asAfsuaguCfuUfaaacAfaAfugugcsusu | 3167 |
D-1930 | [GalNAc3]scscsaaugGfgAfUfUfUfacagcaascs{invAb} | 2914 | usGfsuugcUfgUfaaauCfcCfauuggsusu | 3168 |
D-1931 | [GalNAc3]sgsusuugcUfcUfUfAfAfucguaugsgs{invAb} | 2915 | usCfscauaCfgAfuuaaGfaGfcaaacsusu | 3169 |
D-1932 | [GalNAc3]scscscucgUfaUfGfUfUfuugaaagsus{invAb} | 2916 | asAfscuuuCfaAfaacaUfaCfgagggsusu | 3170 |
D-1933 | [GalNAc3]saagaaaAfuAfCfUfCfcuucugggs{invAb} | 2917 | asCfsccaGfAfaggaguAfuUfuucuususu | 3171 |
D-1934 | [GalNAc3]sucagauCfaUfUfAfCfcaguuagcs{invAb} | 2918 | asGfscuaAfCfugguaaUfgAfucugasusu | 3172 |
D-1935 | [GalNAc3]saccuaaCfuCfCfCfAfggaugcggs{invAb} | 2919 | asCfscgcAfUfccugggAfgUfuaggususu | 3173 |
D-1936 | [GalNAc3]saagcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 2920 | usAfsgucUfUfaaacaaAfuGfugcuususu | 3174 |
D-1937 | [GalNAc3]sugcuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 2921 | asUfsuauAfAfuuggccAfcAfcagcasusu | 3175 |
D-1938 | [GalNAc3]sucugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccs{invAb} | 2922 | asGfsgucAfUfuuguccAfuUfucagasusu | 3176 |
D-1939 | [GalNAc3]saagaaaAfuAfCfUfCfcuucugggs{invAb} | 2923 | asCfsccagAfaggaGfuAfuUfuucuususu | 3177 |
D-1940 | [GalNAc3]sucagauCfaUfUfAfCfcaguuagcs{invAb} | 2924 | asGfscuaaCfugguAfaUfgAfucugasusu | 3178 |
D-1941 | [GalNAc3]saccuaaCfuCfCfCfAfggaugcggs{invAb} | 2925 | asCfscgcaUfccugGfgAfgUfuaggususu | 3179 |
D-1942 | [GalNAc3]saagcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 2926 | usAfsgucuUfaaacAfaAfuGfugcuususu | 3180 |
D-1943 | [GalNAc3]sugcuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 2927 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcAfcagcasusu | 3181 |
D-1944 | [GalNAc3]sucugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccs{invAb} | 2928 | asGfsgucaUfuuguCfcAfuUfucagasusu | 3182 |
D-1945 | [GalNAc3]saagaaaAfuAfCfUfCfcuucugggs{invAb} | 2929 | asCfsccagaaggaGfuAfuUfuucuususu | 3183 |
D-1946 | [GalNAc3]sucagauCfaUfUfAfCfcaguuagcs{invAb} | 2930 | asGfscuaacugguAfaUfgAfucugasusu | 3184 |
D-1947 | [GalNAc3]saccuaaCfuCfCfCfAfggaugcggs{invAb} | 2931 | asCfscgcauccugGfgAfgUfuaggususu | 3185 |
D-1948 | [GalNAc3]saagcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 2932 | usAfsgucuuaaacAfaAfuGfugcuususu | 3186 |
D-1949 | [GalNAc3]sugcuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 2933 | asUfsuauaauuggCfcAfcAfcagcasusu | 3187 |
D-1950 | [GalNAc3]sucugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccs{invAb} | 2934 | asGfsgucauuuguCfcAfuUfucagasusu | 3188 |
D-1951 | [GalNAc3]sgaaaAfuAfCfUfCfcuucugggusus{invAb} | 2935 | asCfsccagAfaggaguAfuUfuucsusu | 3189 |
D-1952 | [GalNAc3]sagauCfaUfUfAfCfcaguuagcusus{invAb} | 2936 | asGfscuaaCfugguaaUfgAfucususu | 3190 |
D-1953 | [GalNAc3]scuaaCfuCfCfCfAfggaugcggusus{invAb} | 2937 | asCfscgcaUfccugggAfgUfuagsusu | 3191 |
D-1954 | [GalNAc3]sgcacAfuUfUfGfUfuuaagacuasus{invAb} | 2938 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcsusu | 3192 |
D-1955 | [GalNAc3]scuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 2939 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagsusu | 3193 |
D-1956 | [GalNAc3]sugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccusus{invAb} | 2940 | asGfsgucaUfuuguccAfuUfucasusu | 3194 |
D-1957 | [GalNAc3]sgaaaAfuAfCfUfCfcuucugggusus{invAb} | 2941 | asCfsccagAfaggaGfuAfuUfuucsusu | 3195 |
D-1958 | [GalNAc3]sagauCfaUfUfAfCfcaguuagcusus{invAb} | 2942 | asGfscuaaCfugguAfaUfgAfucususu | 3196 |
D-1959 | [GalNAc3]scuaaCfuCfCfCfAfggaugcggusus{invAb} | 2943 | asCfscgcaUfccugGfgAfgUfuagsusu | 3197 |
D-1960 | [GalNAc3]sgcacAfuUfUfGfUfuuaagacuasus{invAb} | 2944 | usAfsgucuUfaaacAfaAfuGfugcsusu | 3198 |
D-1961 | [GalNAc3]scuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 2945 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcAfcagsusu | 3199 |
D-1962 | [GalNAc3]sugaaAfuGfGfAfCfaaaugaccusus{invAb} | 2946 | asGfsgucaUfuuguCfcAfuUfucasusu | 3200 |
D-1963 | [GalNAc3]sgaaaauAfcUfCfCfUfucugggusus{invAb} | 2947 | asCfsccagAfaggaGfuAfuUfuucsusu | 3201 |
D-1964 | [GalNAc3]sagaucaUfuAfCfCfAfguuagcusus{invAb} | 2948 | asGfscuaaCfugguAfaUfgAfucususu | 3202 |
D-1965 | [GalNAc3]scuaacuCfcCfAfGfGfaugcggusus{invAb} | 2949 | asCfscgcaUfccugGfgAfgUfuagsusu | 3203 |
D-1966 | [GalNAc3]sgcacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 2950 | usAfsgucuUfaaacAfaAfuGfugcsusu | 3204 |
D-1967 | [GalNAc3]scuguguGfgCfCfAfAfuuauaausus{invAb} | 2951 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcAfcagsusu | 3205 |
D-1968 | [GalNAc3]sugaaauGfgAfCfAfAfaugaccusus{invAb} | 2952 | asGfsgucaUfuuguCfcAfuUfucasusu | 3206 |
D-1969 | [GalNAc3]sasasgaaaAfuAfCfUfCfcuucuggsgs{invAb} | 2953 | asCfsccagAfaGfgaguAfuUfuucuususu | 3207 |
D-1970 | [GalNAc3]suscsagauCfaUfUfAfCfcaguuagscs{invAb} | 2954 | asGfscuaaCfuGfguaaUfgAfucugasusu | 3208 |
D-1971 | [GalNAc3]sascscuaaCfuCfCfCfAfggaugcgsgs{invAb} | 2955 | asCfscgcaUfcCfugggAfgUfuaggususu | 3209 |
D-1972 | [GalNAc3]sasasgcacAfuUfUfGfUfuuaagacsus{invAb} | 2956 | usAfsgucuUfaAfacaaAfuGfugcuususu | 3210 |
D-1973 | [GalNAc3]susgscuguGfuGfGfCfCfaauuauasas{invAb} | 2957 | asUfsuauaAfuUfggccAfcAfcagcasusu | 3211 |
D-1974 | [GalNAc3]suscsugaaAfuGfGfAfCfaaaugacscs{invAb} | 2958 | asGfsgucaUfuUfguccAfuUfucagasusu | 3212 |
D-1975 | {DCA-C6}gcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2959 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 3213 |
D-1976 | {DCA-sC6}gcacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2960 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 3214 |
D-1977 | [GalNAc3]sgscacauUfuGfUfUfUfaagacuaus{invAb} | 2961 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugugcsusu | 3215 |
D-1978 | [GalNAc3]sasagacgGfuAfCfAfUfaauccuacs{invAb} | 2962 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucuususu | 3216 |
D-1979 | [GalNAc3]susuuggaAfuUfCfUfUfugcucuacs{invAb} | 2963 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccaaasusu | 3217 |
D-1980 | [GalNAc3]sasguuugGfaAfUfUfCfuuugcucus{invAb} | 2964 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaacususu | 3218 |
D-1981 | [GalNAc3]susugcuaUfaAfUfUfUfcaaggagus{invAb} | 2965 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcaasusu | 3219 |
D-1982 | [GalNAc3]sascauUfuGfUfUfUfaagacuauusus{invAb} | 2966 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugususu | 3220 |
D-1983 | [GalNAc3]susggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2967 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3221 |
D-1984 | [GalNAc3]susuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 2968 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3222 |
D-1985 | [GalNAc3]sgscuaUfaAfUfUfUfcaaggaguusus{invAb} | 2969 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 3223 |
D-1986 | [GalNAc3]sascauuuGfuUfUfAfAfgacuauusus{invAb} | 2970 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugususu | 3224 |
D-1987 | [GalNAc3]sgsacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 2971 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3225 |
D-1988 | [GalNAc3]susggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 2972 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3226 |
D-1989 | [GalNAc3]susuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 2973 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3227 |
D-1990 | [GalNAc3]sgscuauaAfuUfUfCfAfaggaguusus{invAb} | 2974 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 3228 |
D-1991 | [GalNAc3]sascauUfuGfUfUfUfaagacuauusus{invAb} | 2975 | asAfsuaguCfuuaaacAfaAfugususu | 3229 |
D-1992 | [GalNAc3]sgsacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2976 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucsusu | 3230 |
D-1993 | [GalNAc3]susggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2977 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccasusu | 3231 |
D-1994 | [GalNAc3]susuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 2978 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaasusu | 3232 |
D-1995 | [GalNAc3]sgscuaUfaAfUfUfUfcaaggaguusus{invAb} | 2979 | asAfscuccUfugaaauUfaUfagcsusu | 3233 |
D-1996 | [GalNAc3]sascauuuGfuUfUfAfAfgacuauusus{invAb} | 2980 | asAfsuaguCfuuAfaAfcAfaaugususu | 3234 |
D-1997 | [GalNAc3]sgsacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 2981 | usGfsuaggAfuuAfuGfuAfccgucsusu | 3235 |
D-1998 | [GalNAc3]susggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 2982 | asGfsuagaGfcaAfaGfaAfuuccasusu | 3236 |
D-1999 | [GalNAc3]susuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 2983 | usAfsgagcAfaaGfaAfuUfccaaasusu | 3237 |
D-2000 | [GalNAc3]sgscuauaAfuUfUfCfAfaggaguusus{invAb} | 2984 | asAfscuccUfugAfaAfuUfauagcsusu | 3238 |
D-2001 | {DCA-sC6}ascauUfuGfUfUfUfaagacuauusus{invAb} | 2985 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaAfugususu | 3239 |
D-2002 | {DCA-sC6}gsacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 2986 | usGfsuaggAfuuauGfuAfcCfgucsusu | 3240 |
D-2003 | {DCA-sC6}usggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 2987 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuUfccasusu | 3241 |
D-2004 | {DCA-sC6}usuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 2988 | usAfsgagcAfaagaAfuUfcCfaaasusu | 3242 |
D-2005 | {DCA-sC6}gscuaUfaAfUfUfUfcaaggaguusus{invAb} | 2989 | asAfscuccUfugaaAfuUfaUfagcsusu | 3243 |
D-2006 | [GalNAc3]sascscaucCfgAfUfCfAfgcuguagsas{invAb} | 2990 | usUfscuacAfgCfugauCfgGfauggususu | 3244 |
D-2007 | [GalNAc3]sgsgsucuuGfuGfAfAfUfauggaaasgs{invAb} | 2991 | asCfsuuucCfaUfauucAfcAfagaccsusu | 3245 |
D-2008 | [GalNAc3]sasasgacgGfuAfCfAfUfaauccuascs{invAb} | 2992 | usGfsuaggAfuUfauguAfcCfgucuususu | 3246 |
D-2009 | [GalNAc3]sgscsaaccGfgAfGfAfAfcucuuagsas{invAb} | 2993 | usUfscuaaGfaGfuucuCfcGfguugcsusu | 3247 |
D-2010 | [GalNAc3]scsasccaaAfcUfCfCfCfauucuuuscs{invAb} | 2994 | usGfsaaagAfaUfgggaGfuUfuggugsusu | 3248 |
D-2011 | [GalNAc3]susgsagcuAfuGfUfGfUfuggaagusgs{invAb} | 2995 | asCfsacuuCfcAfacacAfuAfgcucasusu | 3249 |
D-2012 | [GalNAc3]sususuggaAfuUfCfUfUfugcucuascs{invAb} | 2996 | asGfsuagaGfcAfaagaAfuUfccaaasusu | 3250 |
D-2013 | [GalNAc3]sasgsuuugGfaAfUfUfCfuuugcucsus{invAb} | 2997 | usAfsgagcAfaAfgaauUfcCfaaacususu | 3251 |
D-2014 | [GalNAc3]sususgcuaUfaAfUfUfUfcaaggagsus{invAb} | 2998 | asAfscuccUfuGfaaauUfaUfagcaasusu | 3252 |
D-2015 | [GalNAc3]sasccauccgAfuCfAfGfCfuguagas{invAb} | 2999 | usUfscuacAfgcugAfuCfggauggususu | 3253 |
D-2016 | [GalNAc3]sgsgucuuguGfaAfUfAfUfggaaags{invAb} | 3000 | asCfsuuucCfauauUfcAfcaagaccsusu | 3254 |
D-2017 | [GalNAc3]sasagacgguAfcAfUfAfAfuccuacs{invAb} | 3001 | usGfsuaggAfuuauGfuAfccgucuususu | 3255 |
D-2018 | [GalNAc3]sgscaaccggAfgAfAfCfUfcuuagas{invAb} | 3002 | usUfscuaaGfaguuCfuCfcgguugcsusu | 3256 |
D-2019 | [GalNAc3]scsaccaaacUfcCfCfAfUfucuuucs{invAb} | 3003 | usGfsaaagAfauggGfaGfuuuggugsusu | 3257 |
D-2020 | [GalNAc3]susgagcuauGfuGfUfUfGfgaagugs{invAb} | 3004 | asCfsacuuCfcaacAfcAfuagcucasusu | 3258 |
D-2021 | [GalNAc3]susuuggaauUfcUfUfUfGfcucuacs{invAb} | 3005 | asGfsuagaGfcaaaGfaAfuuccaaasusu | 3259 |
D-2022 | [GalNAc3]sasguuuggaAfuUfCfUfUfugcucus{invAb} | 3006 | usAfsgagcAfaagaAfuUfccaaacususu | 3260 |
D-2023 | [GalNAc3]susugcuauaAfuUfUfCfAfaggagus{invAb} | 3007 | asAfscuccUfugaaAfuUfauagcaasusu | 3261 |
D-2024 | [GalNAc3]sauccggAfaGfUfUfUfgaagauags{invAb} | 3008 | usCfsuaucuucaaAfcUfuCfcggaususu | 3262 |
D-2025 | [GalNAc3]sccggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 3009 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggsusu | 3263 |
D-2026 | [GalNAc3]sccggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 3010 | usCfsuaucUfucaaAfcUfuCfcggsusu | 3264 |
D-2027 | [GalNAc3]sccggaaGfuUfUfGfAfagauagasus{invAb} | 3011 | usCfsuaucUfucaaAfcUfuCfcggsusu | 3265 |
D-2028 | [GalNAc3]scscggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 3012 | usCfsuaucUfucaaAfcUfuCfcggsusu | 3266 |
D-2029 | [GalNAc3]sasusccggAfaGfUfUfUfgaagauasgs{invAb} | 3013 | usCfsuaucUfuCfaaacUfuCfcggaususu | 3267 |
D-2030 | [GalNAc3]sasuccggAfaGfUfUfUfgaagauags{invAb} | 3014 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggaususu | 3268 |
D-2031 | [GalNAc3]scscggaaGfuUfUfGfAfagauagasus{invAb} | 3015 | usCfsuaucUfucaaAfcUfuCfcggsusu | 3269 |
D-2032 | [GalNAc3]scscggAfaGfUfUfUfgaagauagasus{invAb} | 3016 | usCfsuaucUfucaaacUfuCfcggsusu | 3270 |
D-2033 | [GalNAc3]scscggaaGfuUfUfGfAfagauagasus{invAb} | 3017 | usCfsuaucUfucAfaAfcUfuccggsusu | 3271 |
D-2034 | [GalNAc3]sasuccggaaGfuUfUfGfAfagauags{invAb} | 3018 | usCfsuaucUfucaaAfcUfuccggaususu | 3272 |
D-2035 | {DCA-sC6}uscsugaaAfuGfGfAfCfaaaugacscs{invAb} | 3019 | asGfsgucaUfuUfguccAfuUfucagasusu | 3273 |
D-2036 | [GalNAc3]scsacaaagaCfgGfUfAfCfauaaucs{invAb} | 3020 | asGfsauuaUfguacCfgUfcuuugugsusu | 3274 |
D-2037 | [GalNAc3]sascaaagacGfgUfAfCfAfuaauccs{invAb} | 3021 | asGfsgauuAfuguaCfcGfucuuugususu | 3275 |
D-2038 | [GalNAc3]scsaaagacgGfuAfCfAfUfaauccus{invAb} | 3022 | usAfsggauUfauguAfcCfgucuuugsusu | 3276 |
D-2039 | [GalNAc3]sasaagacggUfaCfAfUfAfauccuas{invAb} | 3023 | asUfsaggaUfuaugUfaCfcgucuuususu | 3277 |
D-2040 | [GalNAc3]susaguuuggAfaUfUfCfUfuugcucs{invAb} | 3024 | asGfsagcaAfagaaUfuCfcaaacuasusu | 3278 |
D-2041 | [GalNAc3]scsuguguGfgCfCfAfAfuuauaausus{invAb} | 3025 | asUfsuauaAfuuGfgccAfcAfcagsusu | 3279 |
D-2042 | [GalNAc3]sgscacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 3026 | usAfsgucuUfaaAfcaaAfuGfugcsusu | 3280 |
D-2043 | [GalNAc3]susggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 3027 | asGfsuagaGfcaAfagaAfuUfccasusu | 3281 |
D-2044 | [GalNAc3]susuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 3028 | usAfsgagcAfaaGfaauUfcCfaaasusu | 3282 |
D-2045 | [GalNAc3]scsuguguGfgCfCfAfAfuuauaausus{invAb} | 3029 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagsusu | 3283 |
D-2046 | [GalNAc3]sgscacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 3030 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcsusu | 3284 |
D-2047 | [GalNAc3]susggaauUfcUfUfUfGfcucuacusus{invAb} | 3031 | asGfsuagaGfcaaagaAfuUfccasusu | 3285 |
D-2048 | [GalNAc3]susuuggaAfuUfCfUfUfugcucuasus{invAb} | 3032 | usAfsgagcAfaagaauUfcCfaaasusu | 3286 |
D-2049 | [GalNAc3]sgsacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 3033 | usGfsuaggAfuuauguAfcCfgucsusu | 3287 |
D-2050 | [GalNAc3]scsuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 3034 | asUfsuauaAfuUfggccAfcAfcagsusu | 3288 |
D-2051 | [GalNAc3]sgscacAfuUfUfGfUfuuaagacuasus{invAb} | 3035 | usAfsgucuUfaAfacaaAfuGfugcsusu | 3289 |
D-2052 | [GalNAc3]susggaAfuUfCfUfUfugcucuacusus{invAb} | 3036 | asGfsuagaGfcAfaagaAfuUfccasusu | 3290 |
D-2053 | [GalNAc3]susuugGfaAfUfUfCfuuugcucuasus{invAb} | 3037 | usAfsgagcAfaAfgaauUfcCfaaasusu | 3291 |
D-2054 | [GalNAc3]sgsacgGfuAfCfAfUfaauccuacasus{invAb} | 3038 | usGfsuaggAfuUfauguAfcCfgucsusu | 3292 |
D-2055 | [GalNAc3]suscugaaauGfgAfCfAfAfaugaccs{invAb} | 3039 | asGfsgucaUfuuguCfcAfuuucagasusu | 3293 |
D-2056 | [GalNAc3]susgaaAfuGfGfAfCfaaaugaccusus{invAb} | 3040 | asGfsgucaUfuuguCfcAfuUfucasusu | 3294 |
D-2057 | [GalNAc3]susgcuguguGfgCfCfAfAfuuauaas{invAb} | 3041 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcacagcasusu | 3295 |
D-2058 | [GalNAc3]scsuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 3042 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcAfcagsusu | 3296 |
D-2059 | [GalNAc3]susgcuguGfuGfGfCfCfaauuauaas{invAb} | 3043 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagcasusu | 3297 |
D-2060 | [GalNAc3]scsuguguGfgCfCfAfAfuuauaausus{invAb} | 3044 | asUfsuauaAfuuggCfcAfcAfcagsusu | 3298 |
D-2061 | [GalNAc3]scsuguguGfgCfCfAfAfuuauaausus{invAb} | 3045 | asUfsuauaAfuuGfgCfcAfcacagsusu | 3299 |
D-2062 | [GalNAc3]scsccucguaUfgUfUfUfUfgaaagus{invAb} | 3046 | asAfscuuuCfaaaaCfaUfacgagggsusu | 3300 |
D-2063 | [GalNAc3]scsucgUfaUfGfUfUfuugaaaguusus{invAb} | 3047 | asAfscuuuCfaaaaCfaUfaCfgagsusu | 3301 |
D-2064 | [GalNAc3]scscaaugggAfuUfUfAfCfagcaacs{invAb} | 3048 | usGfsuugcUfguaaAfuCfccauuggsusu | 3302 |
D-2065 | [GalNAc3]sasaugGfgAfUfUfUfacagcaacasus{invAb} | 3049 | usGfsuugcUfguaaAfuCfcCfauususu | 3303 |
D-2066 | [GalNAc3]scscaaugGfgAfUfUfUfacagcaacs{invAb} | 3050 | usGfsuugcUfguaaauCfcCfauuggsusu | 3304 |
D-2067 | [GalNAc3]sasaugggAfuUfUfAfCfagcaacasus{invAb} | 3051 | usGfsuugcUfguaaAfuCfcCfauususu | 3305 |
D-2068 | [GalNAc3]sasaugggAfuUfUfAfCfagcaacasus{invAb} | 3052 | usGfsuugcUfguAfaAfuCfccauususu | 3306 |
D-2069 | [GalNAc3]sgsuuugcucUfuAfAfUfCfguauggs{invAb} | 3053 | usCfscauaCfgauuAfaGfagcaaacsusu | 3307 |
D-2070 | [GalNAc3]susugcUfcUfUfAfAfucguauggasus{invAb} | 3054 | usCfscauaCfgauuAfaGfaGfcaasusu | 3308 |
D-2071 | [GalNAc3]sgsuuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 3055 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaaacsusu | 3309 |
D-2072 | [GalNAc3]susugcucUfuAfAfUfCfguauggasus{invAb} | 3056 | usCfscauaCfgauuAfaGfaGfcaasusu | 3310 |
D-2073 | [GalNAc3]susugcUfcUfUfAfAfucguauggasus{invAb} | 3057 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaasusu | 3311 |
D-2074 | [GalNAc3]susugcucUfuAfAfUfCfguauggasus{invAb} | 3058 | usCfscauaCfgaUfuAfaGfagcaasusu | 3312 |
D-2075 | [GalNAc3]sasaucagauCfaUfUfAfCfcaguuas{invAb} | 3059 | asUfsaacuGfguaaUfgAfucugauususu | 3313 |
D-2076 | [GalNAc3]suscagaucaUfuAfCfCfAfguuagcs{invAb} | 3060 | asGfscuaaCfugguAfaUfgaucugasusu | 3314 |
D-2077 | [GalNAc3]suscagAfuCfAfUfUfaccaguuausus{invAb} | 3061 | asUfsaacuGfguaaUfgAfuCfugasusu | 3315 |
D-2078 | [GalNAc3]sasgauCfaUfUfAfCfcaguuagcusus{invAb} | 3062 | asGfscuaaCfugguAfaUfgAfucususu | 3316 |
D-2079 | [GalNAc3]sgscacAfuUfUfGfUfuuaagacuasus{invAb} | 3063 | usAfsgucuUfaaacAfaAfuGfugcsusu | 3317 |
D-2080 | [GalNAc3]sasagcacAfuUfUfGfUfuuaagacus{invAb} | 3064 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcuususu | 3318 |
D-2081 | [GalNAc3]sgscacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 3065 | usAfsgucuUfaaacAfaAfuGfugcsusu | 3319 |
D-2082 | [GalNAc3]sgscacAfuUfUfGfUfuuaagacuasus{invAb} | 3066 | usAfsgucuUfaaacaaAfuGfugcsusu | 3320 |
D-2083 | [GalNAc3]sgscacauUfuGfUfUfUfaagacuasus{invAb} | 3067 | usAfsgucuUfaaAfcAfaAfugugcsusu | 3321 |
D-2084 | [GalNAc3]sgscacauuuGfuUfUfAfAfgacuaus{invAb} | 3068 | asAfsuaguCfuuaaAfcAfaaugugcsusu | 3322 |
D-2085 | {DCA-sC6}cuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 3069 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagsusu | 3323 |
D-2086 | [GalNAc3]sgaaucaAfgAfUfGfGfugaagsas{invAb} | 3070 | asUfscuucAfccauCfuUfgauucscsu | 3324 |
D-2087 | {DCA-sC6}gaaucaAfgAfUfGfGfugaagsas{invAb} | 3071 | asUfscuucAfccauCfuUfgauucscsu | 3325 |
D-2088 | {DCA-sC6}guuugcUfcUfUfAfAfucguauggs{invAb} | 3072 | usCfscauaCfgauuaaGfaGfcaaacsusu | 3326 |
D-2089 | {DCA-sC6}cccucgUfaUfGfUfUfuugaaagus{invAb} | 3073 | asAfscuuUfCfaaaacaUfaCfgagggsusu | 3327 |
D-2090 | [GalNAc3]sgsacgguAfcAfUfAfAfuccuacasus{invAb} | 3074 | usGfsuaggAfuuAfuguAfcCfgucsusu | 3328 |
D-2091 | [GalNAc3]scsuguGfuGfGfCfCfaauuauaausus{invAb} | 3075 | asUfsuauaAfuuggccAfcAfcagsusu | 3329 |
D-2092 | [GalNAc3]sasaugGfgAfUfUfUfacagcaacasus{invAb} | 3076 | usGfsuugcUfguaaauCfcCfauususu | 3330 |
D-2093 | [GalNAc3]sasagcacauUfuGfUfUfUfaagacus{invAb} | 3077 | usAfsgucuUfaaacAfaAfugugcuususu | 3331 |
D-2094 | csgsaagaCfaGfCfGfAfccccaugcs{invAb} | 3078 | asGfscaugGfggucgcUfgUfcuucgsusu | 3332 |
D-2095 | csasuggaCfgGfCfCfGfguaacaaas{invAb} | 3079 | asUfsuuguUfaccggcCfgUfccaugsusu | 3333 |
D-2096 | usgscacaUfgCfGfCfAfcgcgcaugs{invAb} | 3080 | asCfsaugcGfcgugcgCfaUfgugcasusu | 3334 |
D-2097 | gscsacauGfcGfCfAfCfgcgcaugcs{invAb} | 3081 | usGfscaugCfgcgugcGfcAfugugcsusu | 3335 |
D-2098 | csascaugCfgCfAfCfGfcgcaugcas{invAb} | 3082 | asUfsgcauGfcgcgugCfgCfaugugsusu | 3336 |
D-2099 | ascsaugcGfcAfCfGfCfgcaugcacs{invAb} | 3083 | asGfsugcaUfgcgcguGfcGfcaugususu | 3337 |
D-2100 | uscsugcaCfuAfAfAfAfuccccaaas{invAb} | 3084 | asUfsuuggGfgauuuuAfgUfgcagasusu | 3338 |
應用以下方法合成和純化
表 1和
表 2中鑒定的RNAi構建體。
合成
使用固相亞磷醯胺化學合成RNAi構建體。合成在MerMade合成儀(生物自動化公司)上進行。將各種化學修飾(包括2’-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、反向無鹼基核苷酸和硫代磷酸酯核苷酸間鍵)摻入分子中。當在無突出端的情況下(雙平端物)或在反義股和/或有義股的3'端具有2個核苷酸的一或兩個突出端的情況下退火時,RNAi構建體通常被格式化為具有19-21個鹼基對的雙股體。對於體內研究,如下進一步所述,將RNAi構建體的有義股與三價N-乙醯基-半乳胺糖(GalNAc)部分或疏水性部分(例如,棕櫚酸或二十二酸)綴合。
用於合成RNAi構建體的材料包括:
• 乙腈(DNA合成分級,AXO152-2505,EMD)
• 封端試劑A(80 : 10 : 10(v/v/v)四氫呋喃/二甲基吡啶/乙酸酐,BIO221/4000,EMD)
• 封端試劑B(16% 1-甲基咪唑/四氫呋喃,BIO345/4000,EMD)
• 活化劑溶液(乙腈中的0.25 M的5-(乙硫基)-1H-四唑(ETT),BIO152/0960,EMD)
• 脫三苯甲基試劑(二氯甲烷中的3%的二氯乙酸,BIO830/4000,EMD)
• 氧化試劑(70 : 20 : 10(v/v/v)四氫呋喃/吡啶/水中的0.02 M的碘,BIO420/4000,EMD)
• 二乙胺溶液(乙腈中的20%的DEA,NC0017-0505,EMD)
• 巰基化試劑(在吡啶中的0.05 M的5-N-[(二甲基胺基)亞甲基]胺基-3H-1,2,4-二噻唑-3-硫酮(BIOSULII/160K))
• 5'-胺基己基連接子亞磷醯胺以及腺苷、鳥苷和胞嘧啶的2'-甲氧基和2'-氟亞磷醯胺(賽默飛世爾科技公司),經Molecular Trap Packs(0.5 g/30 mL,生物自動化公司)的乙腈中的0.10 M
• 2'-甲氧基-尿苷亞磷醯胺(賽默飛世爾科技公司),經Molecular Trap Packs(0.5 g/30 mL,生物自動化公司)的90 : 10(v/v)乙腈/DMF中的0.10 M
• 2'-去氧-反向無鹼基亞磷醯胺(化學基因公司(ChemGenes)),經Molecular Trap Packs(0.5 g/30 mL,生物自動化公司)的乙腈中的0.10 M
• CPG支持物(Hi-Load通用支持物,500A(BH5-3500-G1),79.6 μmol/g,0.126 g(10 μmol))或1 μmol通用合成柱,500A,Pipette Style Body(MM5-3500-1,生物自動化公司)
• 氫氧化銨(濃縮的,吉提貝可公司(J. T. Baker))
將試劑溶液、亞磷醯胺溶液和溶劑連接到MerMade儀器上。將含有固體支持物(生物自動化公司,通用支持物,500Å)的柱固定到儀器上,並用乙腈洗滌。使用Poseidon軟體開啟合成。沖洗亞磷醯胺和試劑溶液管線。藉由重複去保護/偶合/封端/氧化/封端合成循環來完成合成。向固體支持物中添加脫三苯甲基試劑以去除5’-二甲氧基三苯甲基(DMT)保護基團。用乙腈洗滌固體支持物。向支持物中添加亞磷醯胺(4當量)和活化劑溶液(20當量)以使進入的核苷酸與游離的5’-羥基基團偶合。將偶合反應(6 min)重複兩次。用乙腈洗滌支持物,然後添加封端試劑A和B以終止任何未反應的寡核苷酸鏈。用乙腈洗滌支持物。向支持物中添加氧化或巰基化試劑,以將亞磷酸三酯轉化為磷酸三酯或硫代磷酸酯。將氧化反應從3 min增加到5 min。向支持物中添加封端試劑A和B,以使該支持物脫水並終止任何未反應的寡核苷酸鏈。用乙腈洗滌固體支持物。在最終的反應循環後,首先用二乙胺溶液處理樹脂以從磷酸酯骨架去除2-氰基乙基保護基團。用乙腈洗滌支持物,並從反義股中去除DMT基團。讓有義股的5’末端保持5′-單甲氧基三苯甲基(MMT)受保護。
粗合成的RNAi構建體的分析
藉由在水中進行20倍稀釋(最終體積為100 µL),製備用於離子配對(IP)-LCMS的粗樣本。藉由在安捷倫公司(Agilent)的1290分析型HPLC上進行離子配對(IP)-LCMS來分析樣本。使用在15.7 mM DIEA/50 mM HFIP中的乙腈的線性梯度以400 µL/min的流速在3.5 min內從沃特世公司(Waters)的Xbridge BEH OST C18柱(1.7 μm,2.1 x 50 mm)洗脫樣本。
綴合
為了促進樹脂上的醯化或與GalNAc的綴合,藉由添加由二氯甲烷(DCM)中的三氟乙酸和三異丙基矽烷(各2%,v/v)組成的去保護溶液來去除MMT基團。輕輕攪拌混合物並讓其靜置大約2-5 min。最初先對混合物進行重力過濾,直到溶液不再排出,然後在真空下過濾。將該過程重複5-10次,直到濾液不再有顏色。用DCM洗滌樹脂,用在DCM中的5% DIEA中和(2 x 2 min),並再次用DCM洗滌。
當希望與二十二酸(C22)綴合時,將二十二酸(相對於樹脂為10莫耳當量)溶解於DCM(70 mM,34.1 mg,100 µmol,TCI公司)中,並添加TATU(500 mM DMSO)(32.2 mg,100 µmol,化學製備公司(ChemPep))(10當量),隨後添加DIEA(500 mM DCM)(25.24 mg,200 µmol,奧德里奇公司(Aldrich))(20當量)。將溶液混合並讓其靜置以預活化5-10 min。將活化的酯添加到寡聚物-樹脂中並密封反應容器。將反應容器在室溫下放置在700 RPM的渦旋混合器上14 h。排乾溶液並且用DMF和DCM洗滌樹脂。
當希望與棕櫚醯基基團綴合時,將棕櫚酸(相對於樹脂為10莫耳當量)溶解於DCM(300 mM,25.64 mg,100 µmol,奧德里奇公司)中,轉移到聚丙烯管中(相對於樹脂為10莫耳當量)並添加TATU(500 mM DMSO)(32.2 mg,100 µmol,化學製備公司)(10當量),隨後添加DIEA(500 mM DCM)(25.24 mg,200 µmol,奧德里奇公司)(20當量)。將溶液混合並讓其靜置以預活化5-10 min。將活化的酯添加到寡聚物-樹脂中並密封反應容器。將反應容器在室溫下放置在700 RPM的渦旋混合器上14 h。排乾溶液並且用DMF和DCM洗滌樹脂。
當希望與GalNAc綴合時,在單獨的小瓶中製備GalNAc3-Lys2-Ahx(67 mg,40 µmol)在DMF(0.5 mL)中的溶液。用1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(TATU,12.83 mg,40 µmol)和二異丙基乙胺(DIEA,13.9 μL,80 µmol)製備具有如下式VII所示結構的GalNAc3-Lys2-Ahx。將活化的偶合溶液添加至樹脂並且將柱加蓋並在室溫下孵育過夜。將樹脂用DMF、DCM洗滌,並在真空下乾燥。
式 VII
在式VII中,X = O或S。彎曲線代表與RNAi構建體的有義股的5'末端核苷酸的附接點。GalNAc部分附接至有義股的5'末端核苷酸的5'碳,但反向無鹼基(invAb)去氧核苷酸為5'末端核苷酸並經由5'-5'核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸的情況除外,在這種情況下,該GalNAc部分附接至反向無鹼基去氧核苷酸的3'碳。
從樹脂切割
將柱置於切割卡盤中,並向該等柱中添加1.2 mL含20%乙醇的濃氫氧化銨溶液(1 : 4 v/v)。使溶劑藉由固體支持物重力排出,並將濾液收集到24孔板中。將切割過程重複3次,並合併濾液。將板密封在去保護卡盤中,並將其置於55°C的培養箱中,並以200 RPM混合20 h。將卡盤/板冷卻至室溫,並採集樣本用於LCMS。將板置於Genevac HT4X中,並將樣本濃縮2小時,留下大約2 mL的濃縮物
脂質-綴合的寡聚物的RP-HPLC純化
使用飛諾美公司(Phenomenex)的Oligo-RP C18柱(5 um,10 x 250 mm)以6 mL/min的流速藉由RP-HPLC純化粗寡聚物。流動相由0.02 M碳酸氫銨與5%乙腈(緩衝液-A)和75%乙腈(緩衝溶液-B)組成。如下所述,將級分合併用於脫鹽。
寡聚物的陰離子交換純化
藉由陰離子交換(AEX)層析法純化反義股和GalNAc綴合的有義股。使用1 M溴化鈉在20 mM磷酸鈉、15%乙腈(pH 8.5)中的線性梯度以8 mL/min的流速從兩個串聯的Tosoh TSK Gel SuperQ-5PW柱(21 x 150 mm,13 um)洗脫寡聚物。如下所述對樣本進行脫鹽和UV定量。
脫鹽
使用GE Hi-Prep 26/10柱和19.9% EtOH流動相,在GE Akta Pure上藉由粒徑篩析層析法將合併的級分脫鹽。將脫鹽樣本藉由IP-LCMS進行分析,藉由UV(Nanodrop)定量,並在Genevac S3-HT12中凍乾。
最終QC
藉由在安捷倫公司(Agilent)的1290分析型HPLC上進行離子配對(IP)-LCMS來分析樣本。使用在15.7 mM DIEA/50 mM HFIP中的乙腈的線性梯度以400 µL/min的流速在6.5 min內從沃特世公司的Xbridge BEH OST C18柱(1.7 μm,2.1 x 50 mm)洗脫樣本。
退火
將單條股在2 mM的PBS中重構,並藉由UV進行定量。將單條股在PBS中稀釋至1 mM,並等體積組合以使對應的雙股體退火。將雙股體在90°C下退火5 min,並使其冷卻至室溫。藉由分析型AEX監測雙股體的形成,並根據需要對單條股進行滴定。
實例 4 :在基於細胞的測定中對 FAM13A siRNA 分子的體外評價
製備了來自實例3的一組完全化學修飾的siRNA,並在體外測試了FAM13A mRNA敲低的效力和選擇性。各siRNA雙股體由兩條股組成,即有義股或「過客」股和反義股或「指導」股。
進行了RNA FISH(螢光原位雜交)測定,以藉由測試siRNA來測量FAM13A mRNA敲低。將HUH-7細胞(積水Xenotech公司(Sekisui Xenotech)JCRB0403)在補充10%胎牛血清(FBS,西格瑪公司(Sigma))和1%青黴素-鏈黴素(P-S,康寧公司(Corning))的伊格爾氏最低必需培養基(EMEM)(ATCC® 30-2003™)中培養。使用Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑(賽默飛世爾科技公司)藉由反向轉染將siRNA轉染到細胞中。藉由Bravo自動化液體處理平臺(安捷倫公司)將1 µL的測試siRNA(10個數據點,用於從500 nM最終濃度開始以1 : 3稀釋的劑量)或磷酸鹽緩衝液(PBS)媒介物和4 µL不含補充物的普通EMEM添加到PDL包被的CellCarrier-384 Ultra測定板(珀金埃爾默公司(PerkinElmer))中。然後,藉由Multidrop Combi試劑分配器(賽默飛世爾科技公司),將在不含補充物的普通EMEM中預稀釋(在5 µL EMEM中0.06 µL的RNAiMAX)的5 µL的Lipofectamine RNAiMAX(賽默飛世爾科技公司)分配入測定板中。在室溫(RT)下孵育siRNA/RNAiMAX混合物20分鐘後,使用Multidrop Combi試劑分配器,將補充有10% FBS和1% P-S的EMEM中的30 µL HepG2細胞(每孔2000個細胞)添加至轉染複合物中。將測定板在RT下孵育20 min,然後置於培養箱中。將細胞在37°C和5% CO
2下孵育72小時。
RNA FISH測定在siRNA轉染後72小時在內部組裝的自動化FISH測定平臺上使用製造商的測定試劑和方案(來自賽默飛世爾科技公司的QuantiGene® ViewRNA HC篩選測定)進行。易言之,將細胞在4%甲醛(賽默飛世爾科技公司)中在RT下固定15 min,在RT下用洗滌劑透化3 min,且然後在RT下用蛋白酶溶液處理10 min。將靶標特異性探針(賽默飛世爾公司VA6-3175340-VC)或媒介物(不含靶探針的靶探針稀釋劑,作為陰性對照)孵育3小時,而前置放大器、放大器和標記探針各自孵育1小時。所有雜交步驟均在40°C下在Cytomat 2 C-LIN自動培養箱(賽默飛世爾科技公司)中進行。
在雜交反應後,將細胞用Hoechst和CellMask Blue(賽默飛世爾科技公司)染色30 min,且然後在Opera Phenix高含量篩選系統(珀金埃爾默公司)上成像。使用Columbus圖像數據存儲和分析系統(珀金埃爾默公司)對圖像進行分析,以獲得每個細胞的平均斑點計數。使用高(具有靶探針的PBS)和低(沒有靶探針的PBS)對照孔對每個細胞的平均斑點計數進行歸一化。高和低對照分別具有100和0的歸一化值。使用基因數據公司(Genedata)的Screener數據分析軟體(基因數據公司,瑞士巴塞爾(Basel, Switzerland))將相對於測試siRNA濃度的歸一化值擬合到4參數S形模型以獲得IC50值和最大活性。
為了驗證和比較結果,使用上述測定對一些siRNA雙股體進行了超過一次的分析。
將測定的結果顯示在
表 3中。
FAM13A敲低提供與對照樣本相比的敲低百分比。在測試siRNA雙股體超過一次的情況下,每個測試在
表 3中顯示為單獨的行,作為測定的不同「運行」。負值指示
FAM13AmRNA水平降低。未定義意指基因數據公司的Screener軟體無法擬合曲線。
[
表 3]
:在 Hep3B 細胞中人 FAM13A mRNA 的體外抑制
實例 5 : siRNA 分子在 AAV 人 FAM13A 小鼠模型中的體內功效
雙股體編號 | 運行編號 | IC50 ( nM ) | 最大 FAM13A 敲低( % ) |
1001 | 5.74 | -49.1 | |
1002 | 5.95 | -46.1 | |
1003 | > 500 | -40.0 | |
1004 | 3.49 | -38.7 | |
1005 | 運行1 | 未定義 | -33.0 |
1005 | 運行2 | 6.51 | -43.9 |
1005 | 運行3 | 1.97 | -50.6 |
1006 | > 500 | -1.6 | |
1007 | 2.4 | -53.3 | |
1008 | 1.36 | -52.7 | |
1009 | > 500 | -15.3 | |
1010 | 16.5 | -65.7 | |
1011 | 5.85 | -65.5 | |
1012 | 13 | -51.9 | |
1013 | 運行1 | 5.44 | -67.8 |
1013 | 運行2 | 4.93 | -63.9 |
1014 | 4.4 | -72.9 | |
1015 | 3.99 | -74.7 | |
1016 | 2.33 | -67.0 | |
1017 | 3.34 | -75.8 | |
1018 | 6.84 | -31.9 | |
1019 | 2.59 | -78.9 | |
1020 | 5.91 | -81.0 | |
1021 | 4.43 | -52.3 | |
1022 | 5.48 | -70.1 | |
1023 | 4.08 | -80.3 | |
1024 | 2.47 | -77.4 | |
1025 | 6.26 | -81.4 | |
1026 | 未定義 | -38.7 | |
1027 | > 500 | -2.1 | |
1028 | 3.77 | -81.2 | |
1029 | 3.51 | -70.5 | |
1030 | 16 | -50.6 | |
1031 | 2.67 | -43.7 | |
1032 | > 500 | -25.7 | |
1033 | 未定義 | -37.0 | |
1034 | 3.92 | -74.3 | |
1035 | 運行1 | 1.95 | -41.4 |
1035 | 運行2 | 9.61 | -31.8 |
1036 | 未定義 | -39.3 | |
1037 | 1.23 | -77.7 | |
1038 | 運行1 | 4.72 | -80.8 |
1038 | 運行2 | 6.55 | -76.5 |
1038 | 運行3 | 4.56 | -71.9 |
1039 | 14.1 | -69.2 | |
1040 | 2.55 | -82.9 | |
1041 | 3.91 | -71.3 | |
1042 | 8.71 | -72.6 | |
1043 | 2.46 | -78.6 | |
1044 | 4.49 | -77.6 | |
1045 | 1.47 | -79.6 | |
1046 | 5.89 | -65.6 | |
1047 | 6.16 | -73.2 | |
1048 | 4.7 | -69.8 | |
1049 | 6.59 | -76.0 | |
1050 | 5.19 | -86.4 | |
1051 | 6.74 | -68.7 | |
1052 | 3.77 | -69.5 | |
1053 | 18.9 | -62.2 | |
1054 | 5.86 | -72.6 | |
1055 | 未定義 | -60.1 | |
1056 | 5.25 | -55.4 | |
1057 | 4.01 | -76.3 | |
1058 | 4.31 | -74.9 | |
1059 | 10.5 | -71.2 | |
1060 | 4.44 | -65.1 | |
1061 | 11.2 | -82.2 | |
1062 | 5.75 | -95.0 | |
1063 | 16.5 | -68.1 | |
1064 | 11.3 | -56.1 | |
1065 | 7.73 | -55.6 | |
1066 | > 500 | -18.5 | |
1067 | 4.9 | -68.4 | |
1068 | 未定義 | -36.8 | |
1069 | 20.2 | -72.1 | |
1070 | 3.7 | -84.3 | |
1071 | 2.78 | -52.0 | |
1072 | 2.72 | -75.8 | |
1073 | > 500 | -9.7 | |
1074 | 4.12 | -76.3 | |
1075 | 1.62 | -81.9 | |
1076 | 5.71 | -78.7 | |
1077 | 2.92 | -60.1 | |
1078 | 3.14 | -71.9 | |
1079 | 4.53 | -49.4 | |
1080 | 8.67 | -79.1 | |
1081 | 3.97 | -82.1 | |
1082 | 2.73 | -75.3 | |
1083 | 2.48 | -72.7 | |
1084 | 2.45 | -60.5 | |
1085 | 2.93 | -63.7 | |
1086 | 11.8 | -81.7 | |
1087 | 8.19 | -77.0 | |
1088 | 未定義 | -28.5 | |
1089 | > 500 | 4.8 | |
1090 | 3.22 | -75.1 | |
1091 | 3.5 | -82.7 | |
1092 | 2.81 | -70.1 | |
1093 | 7.01 | -66.3 | |
1094 | 運行1 | 27.7 | -70.5 |
1094 | 運行2 | 28 | -80.9 |
1094 | 運行3 | 6.51 | -72.5 |
1095 | 14.2 | -76.8 | |
1096 | 2.98 | -81.7 | |
1097 | 3.39 | -79.6 | |
1098 | 6.78 | -56.7 | |
1099 | > 500 | -10.8 | |
1100 | 2.42 | -74.3 | |
1101 | 3.49 | -64.2 | |
1102 | 運行1 | 19.9 | -54.2 |
1102 | 運行2 | 18.8 | -73.3 |
1102 | 運行3 | 26.2 | -70.0 |
1103 | 8.52 | -59.5 | |
1104 | 5.59 | -79.1 | |
1105 | 6.73 | -38.8 | |
1106 | 3.44 | -44.4 | |
1107 | 6.25 | -88.4 | |
1108 | 17.6 | -42.5 | |
1109 | 2.7 | -44.7 | |
1110 | > 500 | -23.1 | |
1111 | > 500 | 28.7 | |
1112 | 4.27 | -49.4 | |
1113 | 4.03 | -54.1 | |
1114 | 5.59 | -79.4 | |
1115 | 15.8 | -76.0 | |
1116 | 6.72 | -70.9 | |
1117 | 52.3 | -48.3 | |
1118 | 運行1 | 7.89 | -58.9 |
1118 | 運行2 | 1.42 | -46.1 |
1119 | 5.51 | -78.9 | |
1120 | 4.28 | -39.5 | |
1121 | > 500 | 0.0 | |
1122 | 3.2 | -74.3 | |
1123 | > 18.5 | -24.6 | |
1124 | 2.95 | -80.7 | |
1125 | 8.53 | -37.6 | |
1126 | 1.86 | -85.5 | |
1127 | 3.94 | -82.0 | |
1128 | 2.92 | -83.9 | |
1129 | > 500 | -20.2 | |
1130 | > 500 | 7.8 | |
1131 | > 500 | -22.7 | |
1132 | > 500 | -0.8 | |
1133 | 1.36 | -38.9 | |
1134 | 28.9 | -55.7 | |
1135 | 未定義 | -57.6 | |
1136 | > 500 | -18.4 | |
1137 | > 167 | -19.0 | |
1138 | 9.39 | -51.8 | |
1139 | > 500 | -21.7 | |
1140 | 2.61 | -70.0 | |
1141 | 1.48 | -75.0 | |
1142 | 3.9 | -93.1 | |
1143 | 3.55 | -85.1 | |
1144 | 6.44 | -54.5 | |
1145 | 3.35 | -89.3 | |
1146 | 27.9 | -65.8 | |
1147 | 1.83 | -64.6 | |
1148 | 4.16 | -63.8 | |
1149 | 3.07 | -61.7 | |
1150 | 3.65 | -79.0 | |
1151 | 12.3 | -80.2 | |
1152 | 7.56 | -69.6 | |
1153 | 6.31 | -87.0 | |
1154 | 4.23 | -80.4 | |
1155 | 24.9 | -50.3 | |
1156 | 6.43 | -72.3 | |
1157 | > 500 | 3.9 | |
1158 | 4.07 | -76.2 | |
1159 | 2.42 | -78.5 | |
1160 | 3.8 | -31.4 | |
1161 | 46.6 | -43.0 | |
1162 | 未定義 | -39.5 | |
1163 | 6.17 | -70.2 | |
1164 | 20.5 | -65.9 | |
1165 | 19 | -56.7 | |
1166 | 運行1 | 3.29 | -72.1 |
1166 | 運行2 | 3.27 | -75.1 |
1167 | 3.88 | -79.2 | |
1168 | 18.2 | -58.5 | |
1169 | > 500 | -15.2 | |
1170 | 8.32 | -58.4 | |
1171 | 1.71 | -84.5 | |
1172 | 5.3 | -90.7 | |
1173 | 未定義 | -31.5 | |
1174 | 3.51 | -73.5 | |
1175 | 12.8 | -85.8 | |
1176 | > 500 | 8.5 | |
1177 | > 500 | 6.5 | |
1178 | > 500 | 11.2 | |
1179 | 運行1 | > 500 | 11.6 |
1179 | 運行2 | 未定義 | -34.1 |
1180 | 未定義 | -52.7 | |
1181 | 10.2 | -46.4 | |
1182 | 26.2 | -42.9 | |
1183 | 5.71 | -50.8 | |
1184 | > 500 | 21.2 | |
1185 | 5.34 | -65.0 | |
1186 | 6.12 | -47.3 | |
1187 | 12.1 | -64.8 | |
1188 | 4.44 | -45.4 | |
1189 | 6.12 | -42.4 | |
1190 | 3.52 | -74.4 | |
1191 | 3.77 | -67.5 | |
1192 | > 500 | 7.5 | |
1193 | 16.6 | -73.9 | |
1194 | 33.4 | -40.3 | |
1195 | 9.77 | -42.8 | |
1196 | > 500 | -3.6 | |
1197 | 9.38 | -39.0 | |
1198 | 9.41 | -55.6 | |
1199 | 6.51 | -64.1 | |
1200 | > 500 | -37.7 | |
1201 | > 500 | -19.0 | |
1202 | > 167 | -24.0 | |
1203 | 11.6 | -58.5 | |
1204 | 0.593 | -44.6 | |
1205 | 6.19 | -41.3 | |
1206 | 3.99 | -65.8 | |
1207 | 7.26 | -49.6 | |
1208 | 3.91 | -50.1 | |
1209 | 2.55 | -65.0 | |
1210 | 3.24 | -84.2 | |
1211 | 7.45 | -77.8 | |
1212 | 2.09 | -82.1 | |
1213 | 5.31 | -83.7 | |
1214 | 3.75 | -84.4 | |
1215 | 7.38 | -84.0 | |
1216 | 2.48 | -74.3 | |
1217 | 3.61 | -56.6 | |
1218 | 1.22 | -79.7 | |
1219 | 運行1 | 5.07 | -93.2 |
1219 | 運行2 | 1.84 | -88.2 |
1219 | 運行3 | 11.1 | -87.5 |
1220 | 3.89 | -88.0 | |
1221 | 1.97 | -89.0 | |
1222 | 12.9 | -80.1 | |
1223 | 57.4 | -31.0 | |
1224 | 2.42 | -94.2 | |
1225 | 3.62 | -85.0 | |
1226 | 3.12 | -87.7 | |
1227 | 1.62 | -71.5 | |
1228 | > 500 | -29.3 | |
1229 | > 500 | -10.4 | |
1230 | 5.23 | -37.0 | |
1231 | > 500 | 8.4 | |
1232 | 1.35 | -78.4 | |
1233 | 未定義 | -29.0 | |
1234 | 4.38 | -42.8 | |
1235 | 3.42 | -80.9 | |
1236 | 7.33 | -59.6 | |
1237 | 8.96 | -51.5 | |
1238 | 2.27 | -82.2 | |
1239 | 2.74 | -83.0 | |
1240 | 2.33 | -77.5 | |
1241 | 2.77 | -76.6 | |
1242 | 6.71 | -63.5 | |
1243 | 2.29 | -86.4 | |
1244 | 46.8 | -72.2 | |
1245 | 18 | -57.2 | |
1246 | > 500 | 20.7 | |
1247 | > 500 | -0.9 | |
1248 | > 500 | -20.0 | |
1249 | 2.99 | -57.3 | |
1250 | 4.38 | -72.3 | |
1251 | 4.87 | -53.2 | |
1252 | 2.3 | -44.6 | |
1253 | 3.27 | -66.6 | |
1254 | 未定義 | -53.4 | |
1255 | 3.68 | -51.2 | |
1256 | 3.2 | -57.2 | |
1257 | 21.6 | -57.7 | |
1258 | > 500 | -15.1 | |
1259 | 9.5 | -76.0 | |
1260 | 2.47 | -67.7 | |
1261 | 2.41 | -63.4 | |
1262 | 12.3 | -78.3 | |
1263 | 11.7 | -83.0 | |
1264 | 2.02 | -77.8 | |
1265 | 6.7 | -62.0 | |
1266 | 3.99 | -70.0 | |
1267 | 5.48 | -69.7 | |
1268 | 4.6 | -55.0 | |
1269 | 未定義 | -31.8 | |
1270 | 5.58 | -64.8 | |
1271 | 6.02 | -59.9 | |
1272 | 2.32 | -57.8 | |
1273 | 運行1 | 5.34 | -78.2 |
1273 | 運行2 | 4.11 | -72.8 |
1274 | 1.88 | -62.2 | |
1275 | 2.35 | -72.0 | |
1276 | 1.57 | -72.1 | |
1277 | 3.79 | -79.0 | |
1278 | 1.81 | -73.0 | |
1279 | 1.81 | -71.1 | |
1280 | 1.44 | -64.8 | |
1281 | 1.95 | -67.7 | |
1282 | 4.44 | -71.4 | |
1283 | 2.71 | -77.3 | |
1284 | 運行1 | 3.55 | -67.3 |
1284 | 運行2 | 3.28 | -72.0 |
1285 | 8.75 | -66.3 | |
1286 | 4.65 | -78.9 | |
1287 | 10.3 | -76.5 | |
1288 | 4.76 | -74.0 | |
1289 | 5.13 | -68.5 | |
1290 | > 500 | -22.5 | |
1291 | 15.6 | -52.2 | |
1292 | 2.3 | -37.6 | |
1293 | 5.38 | -63.6 | |
1294 | > 500 | -25.6 | |
1295 | 6.02 | -60.4 | |
1296 | 5.31 | -83.4 | |
1297 | 1.62 | -73.4 | |
1298 | 未定義 | -30.6 | |
1299 | 2.32 | -63.6 | |
1300 | 1.19 | -54.6 | |
1301 | 1.78 | -64.7 | |
1302 | 4.79 | -55.9 | |
1303 | 1.83 | -57.3 | |
1304 | 9.89 | -75.5 | |
1305 | 4.19 | -69.5 | |
1306 | 3.65 | -74.3 | |
1307 | 12.6 | -55.7 | |
1308 | 12.6 | -61.5 | |
1309 | 2.83 | -50.6 | |
1310 | 4.94 | -55.4 | |
1311 | 1.74 | -50.9 | |
1312 | 4.25 | -58.2 | |
1313 | 5.44 | -71.6 | |
1314 | 2.28 | -78.4 | |
1315 | 3.42 | -73.2 | |
1316 | 8.48 | -43.1 | |
1317 | 未定義 | -39.4 | |
1318 | 9.04 | -51.5 | |
1319 | 4.55 | -58.6 | |
1320 | 5.69 | -63.2 | |
1321 | 未定義 | -37.6 | |
1322 | 4.82 | -56.4 | |
1323 | 運行1 | 未定義 | -49.9 |
1323 | 運行2 | > 500 | -8.8 |
1324 | 9.43 | -50.7 | |
1325 | 16.3 | -51.9 | |
1326 | 15.8 | -42.6 | |
1327 | 7.09 | -54.5 | |
1328 | 運行1 | 22.5 | -63.9 |
1328 | 運行2 | 34.1 | -47.5 |
1329 | > 500 | 27.5 | |
1330 | 4.47 | -39.0 | |
1331 | 11.6 | -83.7 | |
1332 | 5.14 | -56.8 | |
1333 | 3.43 | -44.6 | |
1334 | 2.79 | -65.6 | |
1335 | 運行1 | 5.17 | -55.2 |
1335 | 運行2 | 5.78 | -58.2 |
1336 | 運行1 | 5.63 | -54.8 |
1336 | 運行2 | 未定義 | -50.7 |
1337 | 13.9 | -68.8 | |
1338 | 13 | -61.6 | |
1339 | 12.7 | -66.6 | |
1340 | 2.85 | -68.3 | |
1341 | 運行1 | 3.41 | -68.1 |
1341 | 運行2 | 1.97 | -64.3 |
1342 | 運行1 | 0.113 | -76.1 |
1342 | 運行2 | 3.75 | -81.6 |
1343 | 3.08 | -78.4 | |
1344 | 14.1 | -87.2 | |
1345 | 2.92 | -84.4 | |
1346 | 9.04 | -84.3 | |
1347 | 6.71 | -75.3 | |
1348 | 11.4 | -75.0 | |
1349 | 8.35 | -57.0 | |
1350 | 運行1 | 9.86 | -79.2 |
1350 | 運行2 | 6.72 | -74.6 |
1351 | 6.46 | -72.8 | |
1352 | 運行1 | 未定義 | -31.0 |
1352 | 運行2 | 23.5 | -36.5 |
1353 | 8.35 | -57.1 | |
1354 | 未定義 | -32.8 | |
1355 | > 500 | -1.4 | |
1356 | > 500 | -19.1 | |
1357 | 未定義 | -53.8 | |
1358 | 10.9 | -63.6 | |
1359 | 7.91 | -57.3 | |
1360 | 10.5 | -63.8 | |
1361 | 3.53 | -37.2 | |
1362 | > 500 | -3.7 | |
1363 | > 500 | -19.6 | |
1364 | 運行1 | 未定義 | -36.2 |
1364 | 運行2 | 40.9 | -40.0 |
1365 | 26.2 | -50.3 | |
1366 | 運行1 | 4.25 | -50.8 |
1366 | 運行2 | 1.76 | -52.4 |
1367 | > 500 | 23.8 | |
1368 | 未定義 | -39.2 | |
1369 | > 500 | -32.2 | |
1370 | 16.3 | -49.5 | |
1371 | 未定義 | -51.8 | |
1372 | 43.5 | -73.6 | |
1373 | 4.18 | -60.3 | |
1374 | 11.9 | -62.0 | |
1375 | 9.86 | -61.2 | |
1376 | 7.68 | -61.3 | |
1377 | 4.8 | -50.1 | |
1378 | 運行1 | 2.32 | -61.0 |
1378 | 運行2 | 1.91 | -65.2 |
1379 | 7.06 | -59.1 | |
1380 | 14.4 | -64.5 | |
1381 | 運行1 | 未定義 | -31.4 |
1381 | 運行2 | > 500 | -3.3 |
1382 | 6.69 | -36.3 | |
1383 | > 500 | -14.2 | |
1384 | 24.7 | -72.1 | |
1385 | 7.57 | -65.4 | |
1386 | 5.78 | -80.7 | |
1387 | 13 | -60.6 | |
1388 | 18.1 | -71.0 | |
1389 | 6.48 | -72.6 | |
1390 | 1.79 | -68.7 | |
1391 | 3.7 | -77.4 | |
1392 | 7.54 | -74.5 | |
1393 | 2.25 | -66.4 | |
1394 | 4.24 | -69.7 | |
1395 | 2.06 | -64.5 | |
1396 | 運行1 | 1.01 | -69.3 |
1396 | 運行2 | 0.597 | -71.2 |
1397 | 2.63 | -70.2 | |
1398 | 5.5 | -74.8 | |
1399 | 1.93 | -70.0 | |
1400 | 3.14 | -74.4 | |
1401 | 9.12 | -70.5 | |
1402 | 未定義 | -43.8 | |
1403 | 8.46 | -70.3 | |
1404 | 9.15 | -75.0 | |
1405 | 14.5 | -63.9 | |
1406 | 4.89 | -60.6 | |
1407 | 5.41 | -52.0 | |
1408 | 運行1 | 2.46 | -42.3 |
1408 | 運行2 | 1.75 | -67.0 |
1409 | 19.5 | -64.5 | |
1410 | > 500 | -28.7 | |
1411 | > 500 | -14.2 | |
1412 | > 500 | -3.4 | |
1413 | 4.59 | -58.6 | |
1414 | 未定義 | -43.9 | |
1415 | 未定義 | -54.5 | |
1416 | 運行1 | > 500 | 22.8 |
1416 | 運行2 | > 500 | 13.1 |
1417 | > 500 | 0.5 | |
1418 | > 500 | 43.6 | |
1419 | 77.3 | -64.7 | |
1420 | 運行1 | > 500 | 9.3 |
1420 | 運行2 | > 500 | -4.3 |
1421 | 運行1 | 7.54 | -47.1 |
1421 | 運行2 | 26.3 | -43.0 |
1422 | 4.9 | -53.3 | |
1423 | 2.06 | -54.0 | |
1424 | 未定義 | -49.9 | |
1425 | 3.79 | -55.6 | |
1426 | 未定義 | -45.5 | |
1427 | 0.569 | -46.2 | |
1428 | 7.11 | -72.7 | |
1429 | 0.653 | -63.3 | |
1430 | 1.07 | -66.8 | |
1431 | 4.47 | -70.9 | |
1432 | 7.62 | -63.1 | |
1433 | 15.8 | -66.5 | |
1434 | 4.22 | -64.0 | |
1435 | 5.61 | -57.6 | |
1436 | 未定義 | -45.5 | |
1437 | 未定義 | -39.1 | |
1438 | 32.2 | -69.4 | |
1439 | 4.03 | -48.3 | |
1440 | 未定義 | -40.6 | |
1441 | 運行1 | 13.7 | -45.1 |
1441 | 運行2 | 未定義 | -61.3 |
1442 | 1.48 | -57.2 | |
1443 | 4.08 | -70.3 | |
1444 | 6.59 | -68.0 | |
1445 | 5.2 | -44.5 | |
1446 | 運行1 | 16.2 | -77.6 |
1446 | 運行2 | 18 | -82.3 |
1447 | 3.61 | -64.6 | |
1448 | 8.4 | -44.0 | |
1449 | > 500 | -21.8 | |
1450 | 28.4 | -67.6 | |
1451 | 8.59 | -57.0 | |
1452 | 7.12 | -62.2 | |
1453 | 3.53 | -62.4 | |
1454 | 運行1 | 16.5 | -76.5 |
1454 | 運行2 | 6.29 | -51.7 |
1455 | 3.26 | -61.8 | |
1456 | 2.62 | -58.2 | |
1457 | 9.92 | -55.2 | |
1458 | 6.52 | -80.4 | |
1459 | 運行1 | 1.57 | -64.4 |
1459 | 運行2 | 4.65 | -63.4 |
1460 | 3.82 | -61.8 | |
1461 | 4.83 | -80.9 | |
1462 | 3.11 | -82.0 | |
1463 | 3.2 | -78.5 | |
1464 | 3.85 | -72.9 | |
1465 | 2.94 | -79.1 | |
1466 | 2.73 | -70.7 | |
1467 | 2.78 | -67.1 | |
1468 | 3.24 | -64.2 | |
1469 | 8.53 | -71.2 | |
1470 | 7.92 | -73.5 | |
1471 | 4.63 | -67.0 | |
1472 | 7.7 | -66.0 | |
1473 | 5.15 | -67.9 | |
1474 | 7.04 | -76.4 | |
1475 | 3.17 | -74.5 | |
1476 | 1.86 | -72.8 | |
1477 | 6.87 | -62.9 | |
1478 | 19.1 | -61.4 | |
1479 | 3.31 | -79.0 | |
1480 | 5.12 | -74.9 | |
1481 | 2.39 | -74.5 | |
1482 | 7.5 | -69.0 | |
1483 | 3.6 | -70.0 | |
1484 | 1.97 | -72.2 | |
1485 | 5.47 | -79.8 | |
1486 | 6.5 | -73.7 | |
1487 | 5.19 | -59.7 | |
1488 | 1.78 | -81.0 | |
1489 | 1.99 | -61.5 | |
1490 | 0.976 | -60.4 | |
1491 | 2.58 | -73.5 | |
1492 | 0.878 | -81.6 | |
1493 | 3.86 | -81.7 | |
1494 | 2.53 | -64.3 | |
1495 | 3.27 | -75.3 | |
1496 | 1.24 | -90.2 | |
1497 | 1.26 | -81.8 | |
1498 | 1.44 | -86.2 | |
1499 | 1.14 | -69.0 | |
1500 | 運行1 | 1.85 | -75.9 |
1500 | 運行2 | 1.07 | -71.1 |
1500 | 運行3 | 1.73 | -80.0 |
1501 | 1.31 | -81.6 | |
1502 | 1.91 | -71.2 | |
1503 | 4.05 | -77.5 | |
1504 | 3.64 | -75.5 | |
1505 | 1.22 | -76.0 | |
1506 | 0.925 | -57.1 | |
1507 | 運行1 | 2.22 | -74.5 |
1507 | 運行2 | 2.84 | -72.6 |
1507 | 運行3 | 3.58 | -64.9 |
1508 | 3.57 | -73.6 | |
1509 | 運行1 | 2.55 | -76.4 |
1509 | 運行2 | 3.9 | -72.5 |
1510 | 運行1 | 0.449 | -73.0 |
1510 | 運行2 | 0.715 | -65.6 |
1511 | 3.23 | -74.2 | |
1512 | 運行1 | 2.08 | -77.9 |
1512 | 運行2 | 2.54 | -62.8 |
1513 | 4.14 | -68.2 | |
1514 | 運行1 | 5.72 | -67.8 |
1514 | 運行2 | 5.64 | -77.0 |
1515 | 2.7 | -75.4 | |
1516 | 2.5 | -66.4 | |
1517 | 2.83 | -66.8 | |
1518 | 運行1 | 1.91 | -66.6 |
1518 | 運行2 | 5.63 | -70.0 |
1518 | 運行3 | 3.13 | -76.4 |
1519 | 3.52 | -63.2 | |
1520 | 1.05 | -70.7 | |
1521 | 1.41 | -56.4 | |
1522 | 2.37 | -68.2 | |
1523 | 0.935 | -68.4 | |
1524 | 運行1 | 4.41 | -75.7 |
1524 | 運行2 | 0.914 | -70.3 |
1525 | 3.18 | -62.3 | |
1526 | 4.5 | -66.1 | |
1527 | 1.93 | -73.6 | |
1528 | 1.35 | -79.4 | |
1529 | 1.8 | -72.2 | |
1530 | 運行1 | 0.598 | -58.8 |
1530 | 運行2 | 1.12 | -69.6 |
1531 | 1.59 | -76.4 | |
1532 | 2.1 | -67.7 | |
1533 | 2.56 | -41.1 | |
1534 | 5.96 | -57.4 | |
1535 | 運行1 | 1.75 | -61.3 |
1535 | 運行2 | 0.449 | -58.7 |
1536 | 14.7 | -66.5 | |
1537 | 0.47 | -44.4 | |
1538 | 2.27 | -45.6 |
為了評估
FAM13AsiRNA分子的功效,在C57BL/6小鼠模型中評價來自實例4中所述之體外活性測定的表現最佳的
FAM13AsiRNA分子的體內功效和耐久性。大體上,向表現人
FAM13A基因的一部分的小鼠投與
FAM13AsiRNA分子。對於該等實驗,使用實例3中描述的方法,使每個測試的siRNA分子中的有義股與式VII中所示的三價GalNAc部分或與二十二酸(C22)綴合。在一些實驗中,用改變的化學修飾模式來評價
FAM13AsiRNA分子的體內功效和耐久性。
所使用的小鼠模型係AAV人FAM13A小鼠模型。在siRNA注射之前,對10-12週齡的C57BL/6小鼠(傑克遜實驗室(The Jackson Laboratory))飼餵標準飼料(Harlan,2020× Teklad global無大豆蛋白膨化齧齒動物飼料)。向10-14週齡的雌性C57Bl6小鼠靜脈內(i.v.)注射腺相關病毒(AAV),該病毒經工程化以共表現eGFP和部分人
FAM13A基因轉錄物兩者。使用的構建體為:AAV-hFAM13A-1(編碼SEQ ID NO: 1的核苷酸1200-2900;「AAV1」)、AAV-hFAM13A-2(編碼SEQ ID NO: 1的核苷酸2800-4500;「AAV2」)、AAV-hFAM13A-3(編碼SEQ ID NO: 1的核苷酸4400-6100;「AAV3」)、AAV-hFAM13A-9span(編碼SEQ ID NO: 1的選定部分,該等部分含有由連接子連接的SEQ ID NO: 15、24、125、127、222、233、481、498、503、504和513;「AAV-9span」)、或AAV-FAM13A-22span(編碼SEQ ID NO: 1的選定部分,該等部分含有由連接子連接的SEQ ID NO: 15、24、41、125、127、150、164、222、233、406、448、466、470、481、498、503、504、513、523、526、527、533和534;「AAV-22span」)。
每隻小鼠注射單AAV,劑量為每隻動物1 × 10
12個基因組拷貝(GC)。注射AAV後兩週,小鼠接受單次皮下(s.c.)注射緩衝液(PBS)或
FAM13AsiRNA分子,劑量為PBS中0.5 mg/kg、1 mg/kg、3 mg/kg、5 mg/kg、15 mg/kg或20 mg/kg體重(n = 3或4隻小鼠/組,如下所指示)。
在siRNA投與後2或4週收集肝臟和皮下白色脂肪組織(ScWAT)並進行分析。將來自收穫的動物組織的RNA進行加工以進行qPCR分析。根據製造商的說明(凱傑公司)使用RNeasy 96通用組織套組RNA分離方案,或根據製造商的說明(賽默飛世爾公司)使用KingFisher Apex系統和MagMAX mirVana總RNA分離套組從50-100 mg組織中分離RNA。根據製造商的說明(賽默飛世爾公司),使用TaqMan® RNA-to-Ct™ 1步套組,使用50 ng RNA/反應和以下引物探針組進行即時PCR:(1) eGFP1正向引物:CTATGTGCAGGAGAGAACCATC(有義;SEQ ID NO: 2798);反向引物:GCCCTTCAGCTCGATTCTATT(反義;SEQ ID NO: 2799);探針:5’-6FAM-TACAAGACCCGCGCTGAAGTCAAG TAMRA-3’(有義;SEQ ID NO: 2800);(2) eGFP2正向引物:TCATCTGCACCACTGGAAAG(有義;SEQ ID NO: 2801);反向引物:CTGCTTCATATGGTCTGGGTATC(反義;SEQ ID NO: 2802);探針:5’-6FAM CCAACACTGGTCACTACCCTCACC TAMRA-3’(有義;SEQ ID NO: 2803);(3) BGH正向引物:5’-GCCAGCCATCTGTTGT-3’(SEQ ID NO: 2804);反向引物:5’-GGAGTGGCACCTTCCA-3’(SEQ ID NO: 2805);探針:5’-6FAM-TCCCCCGTGCCTTCCTTGACC TAMRA-3’(有義;SEQ ID NO: 2806);和 (4) m
PpibTaqMan®基因表現測定(Mm00478295,賽默飛世爾公司)。使用靶向構建體5’端中的eGFP序列的引物組(即,eGFP引物組編號1或eGFP引物組編號2)或靶向構建體3’端處的存在於病毒mRNA中的牛生長激素多腺苷酸化訊息的引物組(BGHpA引物組)對mRNA的敲低水平進行定量。在QuantStudio 7 Flex即時熱循環儀上使用半定量即時聚合酶鏈反應確定siRNA觸發物的敲低效率。使用ΔΔCt方法計算基因表現,同時利用親環素(PPIB)作為參考基因。相對於對照動物的肝臟或ScWAT中人
FAM13AmRNA的水平,計算每隻動物的肝臟或ScWAT中人
FAM13AmRNA的變化百分比。用於計算變化百分比的對照動物表現相同的人
FAM13AmRNA,但接受僅緩衝液注射來代替siRNA注射。
使用不同
FAM13AsiRNA分子在AAV-FAM13A小鼠模型中進行的研究的結果顯示在下
表 4-17中。數據表示為每個處理組(如所指示的,n = 3或4隻動物/組)在每個研究的第4或6週(即,如所指示的,在siRNA注射後2或4週)與對照相比的平均變化百分比。觸發物家族係指給定的siRNA分子靶向的SEQ ID NO: 1的核苷酸範圍中第一個核苷酸。如果
FAM13AsiRNA分子與另一
FAM13AsiRNA分子具有相同的觸發物家族名稱但雙股體編號不同,則這兩個分子具有相同的核心序列(即,siRNA分子靶向
FAM13A轉錄物的相同區域),但化學修飾模式不同,如
表 2中詳述。
圖 8A-8D中還顯示了該數據的子集的圖表。
[
表 4]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 5]
- siRNA 注射後 2 週 siRNA 在肝臟中的劑量 - 響應
[
表 6]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 7]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效 *
* 表7僅含有用AAV1病毒構建體感染的小鼠的數據
[
表 8]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效
[
表 9]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效
[
表 10]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 11]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效
[
表 12]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效
[
表 13]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 14]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟和脂肪組織中的功效
[
表 15]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 16]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
[
表 17]
- siRNA 注射後 4 週 siRNA 在肝臟中的功效
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1545 | 1309 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -42.71±5.394 | -42.27±6.616 | -43.14±7.444 |
D-1570 | 1311 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -19.4±22.73 | -20.06±23.37 | -11.63±22.15 |
D-1569 | 1338 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -11.79±13.66 | -9.43±15.27 | -2.923±19.6 |
D-1543 | 1366 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 6.133±27.89 | -6.135±26.59 | -0.283±29.62 |
D-1542 | 1489 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 35.76±43.79 | -9.96±10.4 | -3.553±24.72 |
D-1553 | 1495 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 23.78±27.21 | -19.31±9.899 | -22.28±11.59 |
D-1576 | 1533 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 24.96±21.55 | 23.82±31.71 | -10.03±7.092 |
D-1575 | 1558 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 33.74±49.25 | 13.87±59.23 | -6.078±39.15 |
D-1574 | 1619 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 40.25±54.93 | -34.08±31.01 | -36.47±25.89 |
D-1554 | 1632 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -6.793±44.9 | -31.49±35.05 | -35.24±28.19 |
D-1563 | 1896 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 29.29±45.3 | -8.05±32.28 | -13.19±25.73 |
D-1568 | 2066 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 21.07±48.89 | -13.38±36.29 | -18.64±22.78 |
D-1567 | 2070 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -23.67±22.87 | -21.89±19.75 | -29.35±12.26 |
D-1550 | 2078 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -25.78±25.17 | -15.87±29.37 | -19.85±24.99 |
D-1549 | 2080 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -44.66±24.88 | -37.31±28.36 | -33.42±23.16 |
D-1544 | 2144 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -28.04±10.28 | -23.07±13.65 | -36.02±7.789 |
D-1565 | 2146 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -1.398±16.51 | 3.045±16.82 | -17.82±16.44 |
D-1539 | 2151 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -32.85±3.319 | -27.82±3.752 | -35.23±5.315 |
D-1573 | 2263 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -39.7±15.67 | -37.2±17.08 | -60.35±10.09 |
D-1547 | 2266 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 26.08±32.18 | 5.21±30.99 | -37.34±10.9 |
D-1556 | 2356 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 62.47±17.62 | 38.02±19.36 | -6.388±11.61 |
D-1578 | 2360 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 13.18±30.52 | -6.565±26.66 | -36.01±14.96 |
D-1581 | 2623 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -1.75±5.865 | -22.66±7.519 | -57.66±5.097 |
D-1561 | 2887 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 16.06±19.7 | -2.823±18.4 | -40.04±5.249 |
D-1561 | 2887 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | -23.87±27.24 | -20.19±29.58 | -36.03±9.772 |
D-1620 | 2889 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | 40.81±24.72 | 15.21±24.44 | -39.23±10.53 |
D-1620 | 2889 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | 52.21±70.23 | 47.44±78.78 | -39.71±28.42 |
D-1560 | 2890 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | -17.63±29.61 | -12.89±40.28 | -19.9±24.63 |
D-1559 | 2893 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | -27.2±15.47 | -25.82±14.26 | -38.13±14.9 |
D-1558 | 2895 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -4.058±33.95 | -1.795±34.36 | -18.15±26.74 |
D-1604 | 2923 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -18.23±34.59 | -14.74±36.79 | -27.4±32.69 |
D-1541 | 2934 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -24.22±24.87 | -17.93±26.09 | -32.21±24.58 |
D-1588 | 2937 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -6.588±17.49 | -2.385±20.55 | -20.34±14.32 |
D-1619 | 2994 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -4.965±29.63 | -0.955±31.88 | -16.1±23.98 |
D-1557 | 3000 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -38.01±36.01 | -38.72±32.87 | -45.02±26.58 |
D-1579 | 3002 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -29.78±13.38 | -23.06±12.39 | -29.02±11.54 |
D-1555 | 3014 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -33.3±38.16 | -33.52±35.11 | -27.61±45.38 |
D-1586 | 3133 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | -14.15±24.03 | -14.48±32.6 | -32.73±22.7 |
D-1540 | 3184 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 49.01±85.72 | 47.35±84.39 | -15.39±48 |
D-1552 | 3187 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -23.01±40.18 | -23.16±41.09 | -57.91±23.56 |
D-1618 | 3189 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -15.8±32.14 | -11.32±38.42 | -55.8±15.9 |
D-1585 | 3192 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -23.44±22.34 | -25.44±24.5 | -32.71±15.77 |
D-1584 | 3283 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 51.7±81.84 | 48.43±75.58 | -28.35±32.39 |
D-1580 | 3438 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | 37.73±23.51 | 37.64±14.87 | -41.3±12.94 |
D-1583 | 3498 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 61.43±51.09 | 70.94±52.52 | -40.57±15.94 |
D-1582 | 3499 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 3.543±40.05 | 5.378±33.08 | -50.74±20.44 |
D-1571 | 3569 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 87.02±48.83 | 105.1±53.36 | -23.29±23.41 |
D-1551 | 3777 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 32.18±41.17 | 38.02±52.05 | -37.14±25.23 |
D-1548 | 4008 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 55.32±23.06 | 52.73±30.99 | -42±8.405 |
D-1600 | 4109 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -0.87±54.04 | 4.31±64.12 | -53.28±23.72 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1545 | 1309 | 0.5 | 4 | AAV1 | GalNAc | 32.32±41.77 | 27.47±45.03 | 60.59±56.66 |
D-1545 | 1309 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -43.11±49.6 | -43.36±48.77 | -21.68±72.64 |
D-1545 | 1309 | 3 | 3 | AAV1 | GalNAc | -38.58±8.37 | -38.32±8.48 | -4.04±17.42 |
D-1635 | 1309 | 5 | 4 | AAV1 | C22 | -33.1±36.41 | -38.7±34.27 | -36.57±31.56 |
D-1635 | 1309 | 15 | 4 | AAV1 | C22 | -9.79±18.62 | -11.38±16.78 | -6.75±28.58 |
D-1639 | 1309 | 5 | 4 | AAV1 | C22 | 40.4±22.62 | 31.4±25.97 | 19.65±19.04 |
D-1639 | 1309 | 15 | 4 | AAV1 | C22 | -3.26±22.12 | -8.76±21.44 | -8.45±16.66 |
D-1640 | 1309 | 0.5 | 4 | AAV1 | GalNAc | -28.7±46.06 | -32.11±44.06 | -2.33±58.61 |
D-1640 | 1309 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -46.12±29.63 | -47.19±29.99 | -19.78±50.46 |
D-1640 | 1309 | 3 | 3 | AAV1 | GalNAc | -45.55±4.81 | -46.32±6.37 | -19.31±10.39 |
D-1549 | 2080 | 0.5 | 3 | AAV1 | GalNAc | -8.73±17.94 | -11.9±18.81 | -10.33±22.34 |
D-1549 | 2080 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -60.51±24.19 | -53.49±11.13 | -52.03±14.74 |
D-1549 | 2080 | 3 | 3 | AAV1 | GalNAc | -47.02±17.61 | -47.06±20.21 | -47.44±14.68 |
D-1643 | 2080 | 5 | 3 | AAV1 | C22 | 9.49±25.88 | -0.76±26.26 | -11.85±13.08 |
D-1643 | 2080 | 15 | 3 | AAV1 | C22 | 6.1±41.35 | 2.91±39.69 | -6.65±37.28 |
D-1544 | 2144 | 0.5 | 4 | AAV1 | GalNAc | -34.12±38.75 | -39.14±36.58 | -10.02±46.03 |
D-1544 | 2144 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -5.52±24.49 | -3.87±28.72 | 23.6±37.54 |
D-1544 | 2144 | 3 | 3 | AAV1 | GalNAc | -52.79±51.1 | -54.53±49.23 | -28.81±78.9 |
D-1636 | 2144 | 5 | 4 | AAV1 | C22 | -15.47±42.39 | -23.31±36.14 | -16.14±34.22 |
D-1636 | 2144 | 15 | 4 | AAV1 | C22 | -43.75±19.47 | -44.85±17.58 | -39.17±18.75 |
D-1539 | 2151 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 13.36±33.44 | 4.59±30.4 | -0.61±23.31 |
D-1539 | 2151 | 3 | 4 | AAV1 | GalNAc | -15.59±26.47 | -16.46±26.89 | -15.8±20.8 |
D-1573 | 2263 | 0.5 | 3 | AAV1 | GalNAc | -2.52±64.76 | -5.55±66.02 | 3.78±43.72 |
D-1573 | 2263 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -36.45±14.44 | -36.88±13.96 | -35.55±7.81 |
D-1573 | 2263 | 3 | 4 | AAV1 | GalNAc | -16.91±14.29 | -16.85±11.81 | -19.48±14.82 |
D-1638 | 2263 | 5 | 3 | AAV1 | C22 | 6.18±39.91 | 1.64±38.82 | 0.64±24.22 |
D-1638 | 2263 | 15 | 4 | AAV1 | C22 | -14.48±14.06 | -15.34±16.81 | -32.49±23.85 |
D-1644 | 2263 | 5 | 3 | AAV1 | C22 | -4.49±28.46 | -8.13±28.85 | -9.74±20.2 |
D-1644 | 2263 | 15 | 3 | AAV1 | C22 | -40.62±32.29 | -41.72±34.15 | -45.04±28.65 |
D-1645 | 2263 | 0.5 | 3 | AAV1 | GalNAc | 17.05±15.72 | 13.25±12.64 | 5.3±8.75 |
D-1645 | 2263 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | 11.58±11.59 | 12±9.78 | 19.45±15.6 |
D-1645 | 2263 | 3 | 4 | AAV1 | GalNAc | -30.31±8.48 | -31.96±5.84 | -34.08±16.03 |
D-1557 | 3000 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | 3.82±37.62 | -4.13±31.55 | 5.9±34.59 |
D-1557 | 3000 | 3 | 3 | AAV2 | GalNAc | 9.8±49.78 | 6.24±48.34 | 27.57±48.71 |
D-1642 | 3000 | 15 | 3 | AAV2 | C22 | -60.07±23.8 | -58.2±24.84 | -52.11±26.5 |
D-1586 | 3133 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -9.95±20.45 | -7.39±16.97 | -6.25±21.94 |
D-1586 | 3133 | 3 | 3 | AAV2 | GalNAc | -46.14±14.71 | -42.98±17.58 | -39.14±15.32 |
D-1637 | 3133 | 15 | 3 | AAV2 | C22 | -17.3±10.47 | -17.27±10.65 | -16.31±9.96 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1599 | 1328 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -45.95±34.12 | -51.22±29.38 | -43.47±38.85 |
D-1597 | 1333 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -62.57±20.24 | -64.15±18.92 | -62.8±14.32 |
D-1589 | 1496 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 14.3±63.6 | 10.78±62.99 | -4.3±34.03 |
D-1616 | 1534 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -11.65±14.21 | -16.95±16.59 | -11.05±10.43 |
D-1610 | 1631 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -48.26±55.95 | -52.2±51.51 | -53.22±49.44 |
D-1607 | 1666 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -49.8±32.9 | -51.01±30.93 | -54.32±27.54 |
D-1609 | 1671 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -4.39±32.6 | -17.13±26.03 | -19.54±26.39 |
D-1615 | 1678 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -41.13±53.81 | -49.28±45.76 | -45.21±48.78 |
D-1605 | 1698 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -33.95±19.59 | -36.11±16.39 | -36.42±16.43 |
D-1606 | 1705 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -17.39±28.54 | -19.93±31.05 | -25.46±25.93 |
D-1587 | 1801 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 45.99±35.41 | 32.63±29.48 | 14.33±25.53 |
D-1608 | 1952 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 21.23±45.64 | 18.69±46.27 | 12.11±38.75 |
D-1601 | 2075 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 3.48±52.45 | 11.81±55.2 | -28.69±27.8 |
D-1602 | 2270 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -31.34±30.1 | -29.49±32.27 | -29.03±29.76 |
D-1613 | 2344 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -16.52±26.48 | -5.98±37.64 | -16.72±16.64 |
D-1598 | 2353 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -6.46±79.75 | 2.57±87.09 | -11.44±74.95 |
D-1595 | 2358 | 1 | 3 | AAV1 | GalNAc | -17.2±28.13 | -8.88±30.22 | -8.88±30.22 |
D-1592 | 2462 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -19.82±24.34 | -16.13±26.34 | 98.03±8.2 |
D-1621 | 2632 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | -13.73±45.73 | -9.86±49.02 | 64.93±59.16 |
D-1620 | 2889 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -37.46±43.63 | -40.78±35.94 | -45.42±32.5 |
D-1604 | 2923 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 39.14±72.97 | 25.32±61.13 | 15.5±48.93 |
D-1588 | 2937 | 1 | 3 | AAV2 | GalNAc | 6.07±22.94 | 5.99±30.89 | -5.12±13.34 |
D-1619 | 2994 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 39.67±48.64 | 44.18±65.89 | 18.49±38.81 |
D-1618 | 3189 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 10.19±27.42 | 3.71±24.64 | 0.48±24.64 |
D-1632 | 3429 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 45.62±34.77 | 41.55±34.47 | 23.62±31.38 |
D-1617 | 3717 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 38.84±47.24 | 37.53±45.21 | 19±42.75 |
D-1626 | 3720 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | -6.37±40.83 | -11.26±36.19 | -17.84±31.67 |
D-1600 | 4109 | 1 | 4 | AAV2 | GalNAc | 27.89±36.42 | 22.01±32.66 | 12.46±28.14 |
D-1590 | 4779 | 1 | 3 | AAV3 | GalNAc | -33.73±13 | -38.93±12.77 | 6±19.5 |
D-1630 | 4804 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -14.77±6.49 | -12.14±2.53 | -30.29±35.81 |
D-1596 | 4927 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -42.19±18.45 | -41.27±17.05 | -42.41±18.48 |
D-1594 | 4928 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -2.76±27.16 | -1.57±31.74 | -39.67±30.85 |
D-1593 | 4956 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | 8.35±10.98 | 14.89±12.4 | 36.47±110.18 |
D-1631 | 4957 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -57.28±10.53 | -54.33±14.16 | -61.59±11.91 |
D-1634 | 4993 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -34.13±23.86 | -29.69±22.95 | -42.05±16.41 |
D-1614 | 4999 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -72.8±18.55 | -70.72±19.27 | -75.89±15.31 |
D-1633 | 5012 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -44.29±14.87 | -41.01±14.68 | -47.43±12.41 |
D-1611 | 5043 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -67.5±14.12 | -64.75±15.77 | -70.05±12.45 |
D-1612 | 5045 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -57.91±11.94 | -56.76±12.24 | -72.15±19.53 |
D-1591 | 5060 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -37.88±21.07 | -36.57±20.16 | -43.71±19.3 |
D-1603 | 5067 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -27.08±12.11 | -21.28±12.91 | -29.76±9.66 |
D-1629 | 5068 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -25.94±28.07 | -22.16±29.33 | -27.4±24.84 |
D-1628 | 5069 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -36.64±25.96 | -33.81±25.97 | -37.94±22.7 |
D-1623 | 5080 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -34.14±2.45 | -29.15±4.19 | -40.61±6.41 |
D-1627 | 5115 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -9.14±24.05 | -4.67±24.43 | -12.81±27.17 |
D-1622 | 5255 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -36.04±17.88 | -33.61±19.59 | -34.26±15.69 |
D-1625 | 5338 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | -26.25±35.36 | -24.19±36.13 | -29.8±29.64 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | 載體 | 組織 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -56.3±21.55 | -55.72±21.86 | -51.8±24.69 |
D-1545 | 1309 | 3 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -38.49±7.6 | -38.32±10.46 | -35.9±12.63 |
D-1640 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -27.46±16.52 | -30.18±15.06 | -26.35±9.34 |
D-1646 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -33.27±15.52 | -35.26±16.91 | -36.1±11.18 |
D-1652 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -37.03±10.19 | -37.27±11.97 | -40.53±10.69 |
D-1657 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -42.36±27.93 | -44.67±25.92 | -47.49±20.08 |
D-1662 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -49.31±3.2 | -49.12±3.99 | -36.17±6.86 |
D-1667 | 1309 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -64.41±14.9 | -64.39±13.81 | -53.08±18.99 |
D-1549 | 2080 | 3 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -42.27±1.69 | -37.74±6.96 | -36.56±12.45 |
D-1647 | 2080 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -9.81±14.47 | -14.38±34.58 | -15±35.29 |
D-1651 | 2080 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -14.14±38.82 | -15.22±33.33 | -7.23±42.67 |
D-1656 | 2080 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -26.48±28.43 | -45.17±17.46 | -46.61±18.99 |
D-1661 | 2080 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -57.19±35.09 | -57.87±34.18 | -46.61±38.09 |
D-1666 | 2080 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -10.47±28.04 | -23.11±34.64 | -21.77±37.38 |
D-1544 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -43.5±14.87 | -40.65±14.86 | -27.59±20.88 |
D-1648 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -53.99±29.24 | -53.2±28.75 | -46.51±30.91 |
D-1653 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -36.13±14.87 | -34.76±16.33 | -25.79±18.55 |
D-1658 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -39.78±25.74 | -34.7±27.83 | -32.37±17.93 |
D-1663 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -27.73±16.32 | -24.24±16.47 | -23.95±12.37 |
D-1668 | 2144 | 3 | 4 | GalNAc | 肝臟 | -29.31±14.33 | -30.61±11.87 | -19.7±18.95 |
D-1635 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 肝臟 | -31.24±27.79 | -31.05±29.03 | -23.73±19.73 |
D-1639 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 肝臟 | -43.19±40.95 | -36.31±47.36 | -40.72±42.52 |
D-1670 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 肝臟 | -18.18±16.92 | -8.04±17.92 | -16.58±9.32 |
D-1676 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 肝臟 | -22.36±34.59 | -17.1±39.02 | -11.76±38.63 |
D-1681 | 1309 | 20 | 3 | C22 | 肝臟 | -47.73±7.7 | -52.39±10.5 | -55.07±10.11 |
D-1686 | 1309 | 20 | 3 | C22 | 肝臟 | -46.26±7.27 | -46.39±8.07 | -44.22±16.43 |
D-1691 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 肝臟 | -32.27±13.41 | -24.45±15.05 | -28.15±14.13 |
D-1635 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 脂肪 | 7.94±65.35 | 9.18±74.04 | -9.4±78.81 |
D-1639 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 脂肪 | -61.2±32.62 | -61.1±33.16 | -61.15±36.91 |
D-1670 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 脂肪 | -56.88±23.59 | -51.24±33.29 | -59.98±24.89 |
D-1676 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 脂肪 | 63.2±100.25 | 42.97±75.56 | 24.61±57.61 |
D-1681 | 1309 | 20 | 3 | C22 | 脂肪 | 29.33±103.09 | 19.17±93.9 | -9.62±76.91 |
D-1686 | 1309 | 20 | 3 | C22 | 脂肪 | -79.73±13.34 | -80.1±13.72 | -80.3±11.86 |
D-1691 | 1309 | 20 | 4 | C22 | 脂肪 | -18.98±17.2 | -20.98±11.52 | -26.98±11.76 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 組織 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | |||||||
D-1597 | 1333 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 肝臟 | -37.5±14.1 | -30.9±13.3 | -47.3±6.1 |
D-1615 | 1678 | 1 | 4 | AAV1 | GalNAc | 肝臟 | -37.9±18 | -34.7±19.1 | -38.8±17.8 |
D-1631 | 4957 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -32.1±10.7 | -26.1±17.3 | -38.3±15.5 |
D-1614 | 4999 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -53.2±12.8 | -49.7±17 | -56.2±9 |
D-1611 | 5043 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -34.3±33.8 | -33.3±32 | -44.5±21.2 |
D-1612 | 5045 | 1 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -31.1±27.1 | -30.1±27.3 | -34.5±18.5 |
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | AAV1 | GalNAc | 肝臟 | -72.3±10.6 | -69.5±12.8 | -72.2±7.4 |
D-1615 | 1678 | 3 | 4 | AAV1 | GalNAc | 肝臟 | -65.5±6.1 | -63.2±7 | -63.9±4.7 |
D-1631 | 4957 | 3 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -68±6.9 | -65.3±7.7 | -65.5±7.2 |
D-1614 | 4999 | 3 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -67.3±2.4 | -64.9±2.6 | -65.2±0.6 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -66.8±17.1 | -65.2±17.7 | -66.4±14.9 |
D-1612 | 5045 | 3 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -83±13 | -82.2±14 | -82.6±14.2 |
D-1694 | 1333 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -73.3±9.4 | -71.3±10.4 | -72.2±3.7 |
D-1695 | 1678 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -51.9±33.7 | -51±33.5 | -56.8±29.8 |
D-1696 | 4957 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 肝臟 | -34.7±29.7 | -34.3±31.1 | -43.6±21.4 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 肝臟 | -3.3±53.7 | 1.1±55.4 | -18.9±43.9 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 肝臟 | -32.6±15.1 | -31±15.9 | -43.7±10.3 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 肝臟 | -18.6±16.2 | -18.7±13.7 | -28.2±11.7 |
D-1694 | 1333 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -66.4±8 | -67.6±9.6 | -75.2±7 |
D-1695 | 1678 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -19±55.4 | -17.5±59.3 | -43.7±43 |
D-1696 | 4957 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 脂肪 | -75.6±34.8 | -75.3±34.7 | -78.1±27.5 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 脂肪 | -79.7±5.8 | -78.5±6.4 | -73.2±9.1 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 脂肪 | -69±21.9 | -67.5±25.3 | -68.4±19.7 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 脂肪 | -72.2±15.9 | -69.1±19.5 | -54.4±17.1 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 組織 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | |||||||
D-1557 | 3000 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -52.1±15.3 | -51.3±15.8 | -46.9±19.4 |
D-1650 | 3000 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -54.1±10 | -53.1±10.5 | -52.4±15.2 |
D-1655 | 3000 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -44.6±9.6 | -42.8±10 | -42.3±7.1 |
D-1660 | 3000 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -39.3±8.9 | -42.9±3.7 | -43.4±8.3 |
D-1665 | 3000 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -20.5±22 | -19.6±21.1 | -22.1±17.8 |
D-1586 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -38.6±9.4 | -36.8±8.5 | -40±2.3 |
D-1649 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -43.4±5.6 | -37.6±6.5 | -42.5±12.4 |
D-1654 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -27.4±46.7 | -22±49.3 | -20.8±46.1 |
D-1659 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -41.5±2.9 | -36.8±5.7 | -42.1±6.3 |
D-1664 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -43.7±14.8 | -41.6±15.9 | -45.5±12.1 |
D-1669 | 3133 | 3 | 4 | AAV2 | GalNAc | 肝臟 | -45.7±27.1 | -40.7±29.6 | -46.4±28.6 |
D-1623 | 5080 | 3 | 4 | AAV3 | GalNAc | 肝臟 | -27.1±25.9 | -22.4±30.4 | -27.1±24.9 |
D-1643 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -14.9±19.5 | -14.6±21.1 | -11.6±17.1 |
D-1671 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -20.1±23.6 | -20.5±23.4 | -17±25.9 |
D-1675 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -32.6±11.2 | -31.9±14 | -19.5±15.8 |
D-1680 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -52.1±13.6 | -50±12.9 | -42.1±11.9 |
D-1685 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -54±25.8 | -53.5±26.2 | -46.7±29 |
D-1690 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -40±10.9 | -36.2±8.7 | -33.9±13.3 |
D-1636 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -48.8±30 | -44.2±33.6 | -40.9±33.7 |
D-1672 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -11±16.5 | -7.5±16.9 | -20±6.3 |
D-1677 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -23.6±9.1 | -20.2±7.2 | -17.5±9.3 |
D-1682 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -14.4±9.8 | -13±9.2 | -29.9±5.7 |
D-1687 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -59.5±33.4 | -61±32.4 | -74.3±18.5 |
D-1692 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 肝臟 | -60.5±21.6 | -60.1±23.3 | -73±6.7 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 肝臟 | -76.6±36 | -79.6±29.9 | -83.5±27.2 |
D-1643 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -53.4±23.5 | -55.1±23.9 | -65.8±16.6 |
D-1671 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -74.9±7.5 | -79.2±5 | -76.1±10.3 |
D-1675 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -64.9±14.4 | -67.8±14.9 | -71±13.7 |
D-1680 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -69.6±26.1 | -66.3±29 | -83.1±11.1 |
D-1685 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -70.2±32 | -67.3±35.7 | -80.4±20 |
D-1690 | 2080 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -81.5±11.6 | -82.6±10.5 | -82.1±16.7 |
D-1636 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -65.7±40.7 | -60±47.4 | -78.5±26.6 |
D-1672 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -63.3±21.1 | -65.6±19.9 | -59.1±27.6 |
D-1677 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -44.2±19.2 | -35.8±26 | -56.6±18.2 |
D-1682 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -85.5±7.7 | -81.1±8.9 | -78.3±14 |
D-1687 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -52.1±15.3 | -51.3±15.8 | -46.9±19.4 |
D-1692 | 2144 | 20 | 4 | AAV1 | C22 | 脂肪 | -54.1±10 | -53.1±10.5 | -52.4±15.2 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | AAV3 | C22 | 脂肪 | -44.6±9.6 | -42.8±10 | -42.3±7.1 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -57.5±17.2 | -54.9±17.5 | -55.1±15.5 |
D-1721 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -35.5±4 | -31.5±8.3 | -34±3.1 |
D-1728 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -32.5±18.5 | -28.1±18.5 | -36.8±13.8 |
D-1735 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -36.3±11.7 | -35±7.2 | -36.3±8.6 |
D-1707 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -37.8±10.4 | -39.3±9.7 | -34.5±4.1 |
D-1714 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -50.6±18.8 | -49.1±19.4 | -45.8±18 |
D-1700 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -44.5±15.2 | -40.9±17.9 | -45.8±18.5 |
D-1615 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -53.7±19.8 | -52±20.9 | -47.8±14.9 |
D-1722 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -45.8±22 | -40.4±24.7 | -46.9±14.7 |
D-1729 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -31.8±15.6 | -27.5±16.4 | -43.2±4.9 |
D-1736 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -51.7±8.2 | -50.6±7.3 | -43.2±5.4 |
D-1708 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -36.1±9.7 | -32.3±11.1 | -35.2±9.7 |
D-1715 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -28.1±28.8 | -22.6±30.8 | -32.9±21 |
D-1701 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -27.8±20.9 | -25.6±18.1 | -17±18.8 |
D-1631 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -55.3±18.1 | -56.1±19.4 | -52.7±18.3 |
D-1724 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -62.3±8.1 | -62.5±7 | -59.1±7.3 |
D-1731 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -64±11.9 | -59.9±14.4 | -58.9±15.6 |
D-1738 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -42.1±9.4 | -40.2±11.3 | -46.7±9 |
D-1710 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -57.9±6.3 | -57.3±6.3 | -49.7±4.3 |
D-1717 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.4±24.8 | -58.5±28.6 | -59.3±23.8 |
D-1703 | 4957 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.2±10 | -62.1±9 | -54.3±12.5 |
D-1614 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -71±21.5 | -70.7±21.7 | -73.5±16.8 |
D-1723 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -70.8±3.4 | -70±2.2 | -60.8±1.5 |
D-1730 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.4±15 | -72.5±16.2 | -67.2±11.7 |
D-1737 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -71.5±3.9 | -74.5±5 | -65.1±1.5 |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -73±5 | -71.6±5.3 | -67.5±6.2 |
D-1716 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -76±4 | -75.5±4.2 | -69.4±4.1 |
D-1702 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.7±4.9 | -72.1±4.7 | -67.9±2.1 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -71.6±11.4 | -69.4±12 | -65.2±10.6 |
D-1726 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.8±17.1 | -57.3±18.3 | -58.8±13.7 |
D-1733 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -70.8±8.1 | -68.3±9.2 | -64.3±8.7 |
D-1740 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.6±10.8 | -57.9±12.3 | -56.6±6.9 |
D-1712 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -67.8±9 | -64.7±10.4 | -69.6±6.3 |
D-1719 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69.4±6.2 | -68.9±5.6 | -68.1±3.3 |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -81.4±4.9 | -77.9±8.8 | -79.7±8.6 |
D-1612 | 5045 | 3 | 3 | 3 | GalNAc | -67.5±15.5 | -69.6±14.1 | -75.3±7.4 |
D-1725 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -64.8±5.2 | -66.7±5.4 | -67.1±3.8 |
D-1732 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -66±9.9 | -64.2±10.6 | -69.5±5.7 |
D-1739 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -66.8±12.9 | -65.5±14.7 | -67.6±11 |
D-1711 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -75.7±6.7 | -75.8±5.1 | -71.5±5.1 |
D-1718 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -76.6±4.1 | -75.7±4.4 | -75.6±2.8 |
D-1704 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -80.1±12.2 | -80.1±12.1 | -79.9±12.4 |
D-1623 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.9±7.6 | -72.6±7.1 | -75.9±7.1 |
D-1727 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59±3.6 | -53.4±12.7 | -49.3±20.9 |
D-1734 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.6±7.4 | -60.3±7 | -61.2±6.2 |
D-1741 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.9±4.8 | -59.4±4.1 | -61±5.8 |
D-1713 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -67.9±11.1 | -67.5±8.7 | -69±4.9 |
D-1720 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -55.3±6.4 | -57±6.5 | -60.7±5.6 |
D-1706 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -66.2±9 | -67.7±7.8 | -69.1±6.7 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 組織 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | |||||||
D-1714 | 1333 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 肝臟 | -50.6±13.9 | -49.2±14.5 | -46.6±17.4 |
D-1615 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 肝臟 | -52.5±11.4 | -53.1±10.4 | -57.9±6.1 |
D-1736 | 1678 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 肝臟 | -44.9±8.9 | -43.1±9.7 | -50±7.7 |
D-1648 | 2144 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 肝臟 | -39.4±13 | -37.3±13.2 | -38.5±10.9 |
D-1557 | 3000 | 3 | 4 | 2 | GalNAc | 肝臟 | -45.8±11 | -44.6±12.7 | -46.8±13.2 |
D-1650 | 3000 | 3 | 4 | 2 | GalNAc | 肝臟 | -32.2±30.3 | -27.5±32.7 | -35.5±20.2 |
D-1664 | 3133 | 3 | 4 | 2 | GalNAc | 肝臟 | -38.4±23.9 | -31.8±26.2 | -46.1±11.7 |
D-1614 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -66.3±13 | -59.8±14.3 | -58.7±13.9 |
D-1723 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -65.3±16.8 | -58.7±19 | -58.5±14.9 |
D-1737 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -57.2±22.1 | -51.3±21 | -47.9±15.1 |
D-1730 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -61±24.9 | -56.6±25.7 | -48.8±24 |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -73±6.3 | -67.4±8 | -68.1±16.8 |
D-1716 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -64.8±14.9 | -57.1±19.5 | -56.6±10.9 |
D-1702 | 4999 | 3 | 3 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -55.6±13.3 | -45.7±15.6 | -50.4±7.6 |
D-1879 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -70.1±10.9 | -62.6±13.7 | -55.6±15.7 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -77.2±9.6 | -78.2±9.1 | -69.5±13.8 |
D-1733 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -75.3±9.1 | -75.7±9.3 | -69.2±10.8 |
D-1719 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -70.9±14 | -71.2±12.7 | -70.9±9.4 |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -75.7±10.3 | -76.7±9.8 | -74.4±7.9 |
D-1612 | 5045 | 3 | 3 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -72.1±6 | -71.2±5.3 | -65.2±7.2 |
D-1711 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -73±3.8 | -72.4±3.4 | -70.4±4.4 |
D-1718 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -75.4±14.3 | -75.4±14.5 | -70.1±16.3 |
D-1704 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -76.4±5.3 | -73.9±6.2 | -71.6±5.6 |
D-1876 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -31±19.2 | -34±17.4 | -38±14.6 |
D-1623 | 5080 | 3 | 3 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -71.4±3.3 | -65.6±4.9 | -65.9±2.3 |
D-1706 | 5080 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -64.9±12.7 | -63.6±16.6 | -64.9±8.5 |
D-1873 | 1333 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -37.5±21.5 | -33±24.6 | -53.8±12.3 |
D-1695 | 1678 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -22±15.4 | -22.4±13.1 | -31.6±12.9 |
D-1867 | 1678 | 20 | 3 | 1 | C22 | 肝臟 | -48.2±10.4 | -49.7±6.3 | -51.4±5.3 |
D-1672 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -48±17.3 | -47.1±17.8 | -49.6±15.8 |
D-1642 | 3000 | 20 | 4 | 2 | C22 | 肝臟 | -38±15.5 | -35.7±16.1 | -36.2±9.4 |
D-1674 | 3000 | 20 | 3 | 2 | C22 | 肝臟 | -44.8±11.5 | -45.9±9 | -45.3±15.1 |
D-1688 | 3133 | 20 | 4 | 2 | C22 | 肝臟 | -41±28.5 | -32.2±32.9 | -47.4±21.9 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -22.4±23 | -14±27.2 | -15.4±25.6 |
D-1865 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -16.8±47.2 | -4.9±53.2 | -14.1±33.6 |
D-1863 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -0.6±33.2 | 16.7±46.2 | 1.2±32.6 |
D-1866 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -11.7±61.1 | -2.2±65.8 | -7.8±45.2 |
D-1869 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -78±7.7 | -73.1±9.9 | -66.4±9.2 |
D-1872 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -65.6±11.2 | -56.5±14.2 | -54.4±12.2 |
D-1877 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -68.4±7.9 | -60.1±12.1 | -58±11.8 |
D-1878 | 4999 | 20 | 3 | 3 | C22 | 肝臟 | -58.2±9.1 | -49.9±8.6 | -52.2±7.5 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -72.2±15 | -72.8±15.1 | -70.5±18.3 |
D-1864 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -35.4±11.3 | -39.2±8.5 | -41.2±12.7 |
D-1870 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -30.4±11.4 | -25.1±9.3 | -32.1±8.7 |
D-1875 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -61.5±19.5 | -61.1±20.5 | -60.9±18.2 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -40.1±10.8 | -42.4±10.7 | -38.2±9.6 |
D-1868 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -52.7±11.7 | -45.4±11.3 | -48.7±8.4 |
D-1871 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -65.4±5.2 | -65.3±4 | -66.8±5.2 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -25.8±17.6 | -12.7±20.8 | -22.9±17.3 |
D-1874 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -41.6±10.4 | -36.9±11.9 | -40.6±7.5 |
D-1873 | 1333 | 20 | 4 | 1 | C22 | 脂肪 | 37.4±68 | 31.4±63.8 | 6.3±35.5 |
D-1695 | 1678 | 20 | 4 | 1 | C22 | 脂肪 | -19.2±12.7 | -28±12.9 | -25.3±7.2 |
D-1867 | 1678 | 20 | 3 | 1 | C22 | 脂肪 | -67.3±35.7 | -69.4±35.3 | -71.5±24.1 |
D-1672 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 脂肪 | -43±26.1 | -43.1±31.7 | -32.6±37.7 |
D-1642 | 3000 | 20 | 4 | 2 | C22 | 脂肪 | -37.2±40.5 | -30.3±45.9 | -15.8±61.1 |
D-1674 | 3000 | 20 | 3 | 2 | C22 | 脂肪 | -70.7±19.9 | -68.6±21.7 | -71.4±19.9 |
D-1688 | 3133 | 20 | 4 | 2 | C22 | 脂肪 | -39.6±18.4 | -39.7±21.7 | -28.9±44.3 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -85.9±7.3 | -89.5±5.6 | -81.5±8.1 |
D-1865 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -78.6±25.5 | -78.2±29.5 | -81.7±21 |
D-1863 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -84.6±8.1 | -87.1±6.9 | -72.9±15.4 |
D-1866 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -88.5±10.9 | -91.6±6.7 | -86.6±13.3 |
D-1869 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -90±8.2 | -92.4±6.7 | -85.3±10.6 |
D-1872 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -66.2±15.1 | -75.9±9.4 | -72.9±11.9 |
D-1877 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -73.7±6.7 | -79.6±5 | -62.8±14.3 |
D-1878 | 4999 | 20 | 3 | 3 | C22 | 脂肪 | -85.2±12 | -88.8±9.3 | -84.7±10.5 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -93±9 | -91.5±11.3 | -91.4±10.7 |
D-1864 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -87.6±7.4 | -86.7±7.2 | -84.6±9.5 |
D-1870 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -81.6±15.5 | -81±16.7 | -80.5±14 |
D-1875 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -85.6±9.1 | -86.9±8.2 | -81.3±12.9 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -78.8±9.5 | -78.7±10.6 | -79.8±7.7 |
D-1868 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -82±9 | -79.4±11.7 | -79.6±9.2 |
D-1871 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -90±15.1 | -91.9±12 | -90.9±12.9 |
D-1876 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -76±24.4 | -76.9±22.6 | -75.2±25.4 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -82.9±8.8 | -87.2±7.7 | -75.9±14.9 |
D-1874 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -71.2±9.7 | -72.8±8.8 | -74.2±5.7 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 組織 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | |||||||
D-1686 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -39.9±38.8 | -39.9±40.6 | -51±29.2 |
D-1691 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -40.1±18.4 | -40±16.9 | -49.8±10.6 |
D-1635 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -38.4±30.6 | -38.8±29.3 | -45.9±19.5 |
D-1694 | 1333 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -25±20.4 | -26±21.8 | -43.4±13.7 |
D-1695 | 1678 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -11.9±10.8 | -14±11.7 | -19.5±17.5 |
D-1643 | 2080 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -44.2±17.3 | -44.1±17.4 | -46.2±11.4 |
D-1672 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -58.5±9.6 | -55.6±9.9 | -52±10.2 |
D-1636 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -65.3±31.3 | -66.3±30.2 | -63.4±32.9 |
D-1847 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -43±14.5 | -39.9±17.1 | -49.9±12.1 |
D-1849 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -23.5±13.9 | -19.6±14.1 | -14.8±11.6 |
D-1859 | 1309 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -33.1±15.6 | -33.3±13.8 | -36.9±15.7 |
D-1853 | 1333 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -42.2±22.9 | -41±19.8 | -44.1±20.7 |
D-1852 | 1678 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -51.2±21.2 | -44.9±23.4 | -38±21.7 |
D-1860 | 2080 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -14.1±23.1 | -11.5±21.8 | -5.5±34.2 |
D-1851 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -61.6±15.8 | -55.8±17.8 | -52.5±16.3 |
D-1858 | 2144 | 20 | 4 | 1 | C22 | 肝臟 | -47.6±10.8 | -44.7±10.2 | -46.2±1.9 |
D-1666 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -35±11.7 | -35.7±11.2 | -38.6±11.7 |
D-1872 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -78.4±5.1 | -76.2±6.1 | -71.3±4.3 |
D-1877 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -84.6±1.7 | -82.1±1.9 | -79.9±2.4 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -40.9±9.3 | -37.5±10.5 | -38.9±8.3 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -43.3±6.8 | -43.8±6.3 | -40±4.5 |
D-1881 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -80.2±2.7 | -77.3±3.3 | -71±2.8 |
D-1887 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -83.2±3.3 | -80.2±3.8 | -75.6±4.5 |
D-1880 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -83.6±2.7 | -82.1±2.8 | -81.5±2.9 |
D-1884 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -88±2.9 | -85.5±3.2 | -86±2.3 |
D-1856 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -82.3±4.5 | -79.7±5 | -74.3±5.8 |
D-1862 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -72.3±3.5 | -69.3±4.1 | -65±3.8 |
D-1869 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -78.8±2.7 | -73.6±2.9 | -68.7±1 |
D-1869 | 4999 | 10 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -72±3.1 | -69.4±2.9 | -67.1±3.3 |
D-1869 | 4999 | 5 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -63.3±6.4 | -60.9±6.8 | -57.3±7 |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -81.1±4 | -77.1±4.7 | -75.4±5.2 |
D-1709 | 4999 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -42.9±7 | -39±7.6 | -43.8±7.5 |
D-1709 | 4999 | 0.5 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -60.9±6 | -58.1±5.9 | -57.8±5.8 |
D-1774 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -66.1±4.5 | -59.6±5.6 | -57.6±4.7 |
D-1975 | 5276 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -73.5±3.6 | -70.7±3.5 | -65.4±3.3 |
D-1976 | 5276 | 20 | 3 | 3 | C22 | 肝臟 | -80.2±0.4 | -76.7±0.3 | -69.3±0.7 |
D-1870 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -49±11.5 | -47.6±11.6 | -49.4±11 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -10.2±15.9 | -13.2±16 | -27.4±9.6 |
D-1875 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -41.9±9 | -40.1±10.4 | -44.8±6.9 |
D-1868 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -33±10.8 | -32.2±11.1 | -35.7±9.5 |
D-1871 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -26±7.2 | -27.4±7.4 | -27.7±6.2 |
D-1876 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -32±3.2 | -25.4±2.7 | -29.9±3.8 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -22.6±16.4 | -20.2±16.8 | -21.4±15.4 |
D-1883 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -64.8±6.2 | -63.2±6.4 | -64.8±6 |
D-1886 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -73.5±5.6 | -70.4±6.6 | -70.9±6.2 |
D-1855 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -61±5.4 | -57.8±6.1 | -53.2±2.9 |
D-1888 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -68.3±3.5 | -65.1±2.8 | -67.2±2.4 |
D-1882 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -69.1±3.3 | -64.7±5 | -63.7±4.1 |
D-1885 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 肝臟 | -66±1.9 | -62.4±2.1 | -59±2 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -70.5±6.1 | -71.5±6.1 | -70.3±5.7 |
D-1611 | 5043 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -17.9±13.6 | -21.3±15.3 | -28.7±8.1 |
D-1611 | 5043 | 0.5 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | 5.7±5.4 | -3.3±4.3 | -5.7±6.5 |
D-1718 | 5045 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -63.1±1.5 | -56.3±1.9 | -62.1±1.1 |
D-1718 | 5045 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -37.8±21.9 | -30.9±26.4 | -33.7±19.9 |
D-1718 | 5045 | 0.5 | 4 | 3 | GalNAc | 肝臟 | -21±13.3 | -16.5±16.5 | -21.2±16.9 |
D-1866 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -94.3±1.3 | -93.9±1.3 | -90.9±1.4 |
D-1873 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -94.3±1.7 | -93.7±1.8 | -89.8±3.3 |
D-1877 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -95±1.7 | -94.7±1.8 | -94.9±1.7 |
D-1697 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -96.9±1.2 | -96.6±1.4 | -96.1±1.5 |
D-1846 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -92.2±2.4 | -90.8±3 | -90.9±2.6 |
D-1881 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -97.3±0.7 | -97.2±0.7 | -96.6±0.9 |
D-1887 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -93.9±4 | -93.2±4.7 | -95.8±2.3 |
D-1880 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -96.1±1.8 | -95.6±2 | -96.3±1.4 |
D-1884 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -98.6±0.5 | -98.5±0.6 | -98.4±0.5 |
D-1856 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -98.3±0.6 | -98.1±0.7 | -97.5±0.9 |
D-1862 | 5080 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -96.1±1.2 | -95.7±1.5 | -95.4±1.2 |
D-1869 | 4999 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -93.9±1.6 | -92.5±2.2 | -92.8±0.5 |
D-1869 | 4999 | 10 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -95.5±1.3 | -94.8±1.6 | -95.6±1.3 |
D-1869 | 4999 | 5 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -87.7±4.9 | -86.2±5.1 | -88.6±4.1 |
D-1975 | 5276 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -95.9±1.4 | -95.2±1.4 | -95.9±1.3 |
D-1976 | 5276 | 20 | 3 | 3 | C22 | 脂肪 | -94.1±2.4 | -93.1±2.6 | -92.2±2.7 |
D-1870 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -84.4±6.6 | -85.6±6.3 | -83.9±6.8 |
D-1698 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -70.8±5.6 | -71.8±5.3 | -63.4±7.9 |
D-1875 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -87.5±4 | -88.9±3.5 | -83.6±6.1 |
D-1868 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -72.1±13.2 | -73.5±13.3 | -68.2±10.6 |
D-1871 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -61.6±12.1 | -64±11.3 | -62.7±6.2 |
D-1876 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -82.3±5.1 | -82.5±5.1 | -71.8±6.4 |
D-1699 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -81.5±4.5 | -82.6±4.6 | -65.5±10.1 |
D-1883 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -90±5.9 | -90.7±5.7 | -85.9±8.2 |
D-1886 | 5043 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -84.9±7.6 | -84±7.9 | -81.7±9.8 |
D-1855 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -76.9±8.7 | -77.7±8.4 | -68.8±5.7 |
D-1888 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -82.1±3 | -83.1±3 | -70.2±5 |
D-1882 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -74.7±6.7 | -74.7±6.7 | -59.7±9.4 |
D-1885 | 5045 | 20 | 4 | 3 | C22 | 脂肪 | -86.1±1.6 | -86.8±1.6 | -78.6±3 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1933 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 3.7±14.8 | 12.5±17 | 2.9±18.1 |
D-1939 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 18.7±10.1 | 23.6±11.5 | 21.7±15.2 |
D-1945 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -33.5±16.6 | -26.5±18.2 | -25.2±9.8 |
D-1951 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 7.5±65.3 | 15.5±67.9 | 4.3±46.6 |
D-1957 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | 12.1±38.9 | 17.4±37.8 | 5.6±35.6 |
D-1963 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -7.4±45.8 | 4.7±55.1 | -11.4±41.8 |
D-1969 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -12.6±14.6 | -6.2±11.6 | -7.7±12 |
D-1820 | 1514 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -24.8±19 | -14.5±27.1 | -17.8±21.1 |
D-1938 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -37.7±14.9 | -32.9±17.1 | -13.3±22.1 |
D-1944 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -35±3.2 | -26±7.1 | -21±16.2 |
D-1950 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -18.4±11 | -9.8±10.8 | -9.8±7.6 |
D-1956 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -48.5±43 | -42.3±51.4 | -40.4±49.1 |
D-1962 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -10.4±19.6 | 2.8±27.4 | -10.1±19.3 |
D-1968 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -44.2±16.5 | -36.9±20 | -27±21.7 |
D-1974 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -52.5±5.8 | -46.5±4.2 | -33.5±6.4 |
D-1810 | 2343 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -42.8±41.3 | -38.5±44.2 | -30±47.6 |
D-1935 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -20.7±16.2 | -13.1±23.6 | -34.4±16.2 |
D-1941 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -27.7±27.6 | -24.9±29.4 | -28.4±29.4 |
D-1947 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -24±41.1 | -18.9±46.2 | -28.4±32.2 |
D-1953 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -48.3±21.8 | -40.7±25.3 | -54.8±16.5 |
D-1959 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -31.3±10.2 | -27.3±8.9 | -42.4±9.6 |
D-1965 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -30.7±13.8 | -25.7±13.8 | -33.8±12 |
D-1971 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -25±22 | -10.9±28.5 | -25.4±33 |
D-1812 | 2417 | 3 | 4 | 1 | GalNAc | -29.2±17.7 | -27±17.8 | -39±14 |
D-1937 | 4412 | 3 | 3 | 3 | GalNAc | -74±6.9 | -70.8±6.4 | -66.4±6.8 |
D-1943 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -68±12.7 | -64.2±15 | -66.3±11 |
D-1949 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -54.8±7.8 | -52.2±6.7 | -55.5±5.7 |
D-1955 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -84.5±1.6 | -82.6±2.2 | -76.7±3.5 |
D-1961 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -78±12 | -75.7±13.3 | -73±13.1 |
D-1967 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.2±24 | -70±25.1 | -64.3±22.4 |
D-1973 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -62.5±7.3 | -56.8±7.3 | -58.2±3 |
D-1777 | 4412 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -74±17.9 | -72.8±20 | -72±20.7 |
D-1934 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -10.6±25.9 | -4.4±25.7 | -21.6±24.3 |
D-1940 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -41.4±11.5 | -39.9±9.3 | -46.1±10.9 |
D-1946 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -45.9±12.7 | -43.7±13.7 | -50±7.2 |
D-1952 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.6±10.9 | -72.3±11.8 | -74.3±12.6 |
D-1958 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -45.9±26.4 | -44.7±27.7 | -56.1±17.1 |
D-1964 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -56.3±19.1 | -56.1±17.1 | -60.4±12.1 |
D-1970 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -79.4±15 | -79.3±14.9 | -80.1±14 |
D-1769 | 5249 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -67.2±3.2 | -64.9±4.7 | -72.2±3.8 |
D-1936 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.7±13 | -60.9±13.1 | -67.3±10.4 |
D-1942 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -51.7±36.3 | -50.8±37.5 | -63.6±19.5 |
D-1948 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -70.5±8.4 | -67.8±11 | -71.7±6.5 |
D-1954 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -71.9±8.4 | -70.6±9.6 | -74±6.1 |
D-1960 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69.7±15.5 | -67.5±16.3 | -77.9±5.6 |
D-1966 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -76.8±12.6 | -74.1±14 | -76.2±11.3 |
D-1972 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -79.7±8.6 | -77.4±10 | -77±10.5 |
D-1773 | 5274 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69.5±13.7 | -66.8±14.1 | -73.9±11.7 |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -86.7±8.9 | -85.2±9.8 | -84±10.7 |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -78.5±2.3 | -77.1±2.2 | -75.3±2.7 |
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | 9-span | GalNAc | -81.3±6.9 | -81.6±7.7 | -81.6±6.7 |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 9-span | GalNAc | -93.4±2.5 | -93.7±2 | -94.5±1.9 |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 9-span | GalNAc | -94.4±0.4 | -94.2±0.5 | -94.7±0.4 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 組織 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | |||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||||
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -80.8±12 | -81.6±9.7 | -85.7±8.9 | |
D-1887 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -85.6±2.1 | -85.9±2.7 | -88.9±1.7 | |
D-1702 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -83.6±8.3 | -84.3±7.4 | -88.3±5.2 | |
D-1884 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -79.5±2.9 | -80.2±3.4 | -85.1±2.2 | |
D-1978 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -85.9±3.8 | -86.4±3.4 | -89.8±3 | |
D-1879 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -81.3±3 | -82.6±2.1 | -87.1±0.7 | |
D-2002 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -88.5±5.5 | -88.5±5.4 | -92.1±3.2 | |
D-1987 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -85.9±5.6 | -86.4±5.2 | -91.6±2.2 | |
D-1992 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -82.7±11.3 | -84±9.9 | -88.1±5.8 | |
D-1997 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -84.7±7.1 | -84.8±6.2 | -88.1±6.2 | |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -82.3±8.1 | -82.4±8.1 | -84.2±7 | |
D-1886 | 5043 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -86.2±11.9 | -87.3±10.7 | -87.9±8.7 | |
D-1980 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -76.9±20.9 | -77.6±19 | -80.4±15.2 | |
D-1984 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -77.3±8 | -78.5±7.6 | -82.3±6.2 | |
D-2004 | 5043 | 20 | 3 | 22-span | 肝臟 | C22 | -65.8±11.7 | -69.4±10 | -73.7±7.7 | |
D-1989 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -82.8±9.6 | -83.4±8 | -84.3±7.3 | |
D-1994 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -79.1±3.3 | -79.5±2.2 | -83±2.2 | |
D-1999 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -66.2±27.4 | -67.7±25.4 | -69.6±23.7 | |
D-1704 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -83±10.2 | -83.9±10.1 | -88.6±5.4 | |
D-1885 | 5045 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -89.1±5.5 | -90.3±4.9 | -90.1±7 | |
D-1979 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -92.3±3.3 | -93±3 | -93.7±2.4 | |
D-1983 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -71.8±8.3 | -74.6±7.4 | -83.6±4.8 | |
D-2003 | 5045 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -86.7±6.2 | -88.5±5.2 | -90.2±4.8 | |
D-1988 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -84.4±16.7 | -85±15.7 | -89.6±9.9 | |
D-1993 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -85±7.4 | -86.1±6.7 | -89.9±4 | |
D-1998 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -95.3±1.8 | -95.6±1.4 | -96±1.5 | |
D-1623 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -77.5±13.5 | -78.8±14.7 | -82.5±10.1 | |
D-1862 | 5080 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -79±16 | -81.1±14.7 | -83±11.3 | |
D-1981 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -82.2±14.2 | -83.2±13.7 | -86.4±10.4 | |
D-1985 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -90.3±5.4 | -91.3±4.7 | -91.5±4.2 | |
D-2005 | 5080 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -88.9±8 | -89.4±7.3 | -90.3±5.3 | |
D-1990 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -81.7±8.7 | -84.1±7.3 | -86.1±5.4 | |
D-1995 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -80.9±8.8 | -84±7.1 | -82.8±7.6 | |
D-2000 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -78.3±6.4 | -81.5±6.2 | -81.9±4.5 | |
D-1955 | 4412 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -74.8±8.4 | -76.7±7.7 | -78.3±9.3 | |
D-1970 | 5249 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -66.9±24 | -71.3±21.6 | -74.5±14.7 | |
D-1972 | 5274 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -77±10.9 | -78.1±9.6 | -80.5±9.2 | |
D-1774 | 5276 | 3 | 3 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -73.8±10 | -74.7±9.7 | -77.9±10.6 | |
D-1976 | 5276 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -83.6±6.4 | -83.9±6.9 | -87.9±5.6 | |
D-1977 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -89.5±1.5 | -89.2±1.4 | -90.7±1.1 | |
D-1982 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -75.7±6.9 | -74.6±7.8 | -80.5±5.3 | |
D-2001 | 5276 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -83.7±4.4 | -83.5±4.9 | -86.7±3 | |
D-1986 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -69.6±9.2 | -71.4±7.8 | -77.6±7.3 | |
D-1991 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -83.7±5.2 | -83±5.4 | -86.6±4.1 | |
D-1996 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -83.3±11.2 | -84.3±11.2 | -85.9±8.9 | |
D-2017 | 1333 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -93.1±2 | -92.7±2 | -94.7±1.8 | |
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -87±4.2 | -87.6±3.7 | -89.1±3.5 | |
D-1853 | 1333 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -87.2±3.1 | -86.5±3.1 | -89.4±2.6 | |
D-1667 | 1309 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -84.2±10.2 | -84.3±9.6 | -86.5±10.6 | |
D-1849 | 1309 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -91.1±8.5 | -91±7.9 | -92.3±6.2 | |
D-1636 | 2144 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -78.2±5.2 | -77.8±5.3 | -77.7±4.4 | |
D-1858 | 2144 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -85.5±6.7 | -85.4±6.1 | -90.7±2.5 | |
D-1650 | 3000 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -87.5±6 | -87±5.9 | -89.6±4.4 | |
D-2035 | 3000 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -50.4±29.9 | -48.7±30.8 | -46.6±30.8 | |
D-1557 | 3000 | 3 | 4 | 22-span | 肝臟 | GalNAc | -85.3±14.9 | -85.2±14.5 | -88.3±10.7 | |
D-1861 | 3000 | 20 | 4 | 22-span | 肝臟 | C22 | -92.8±3.2 | -92.2±3.4 | -94.3±2.2 | |
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 54.7±86.1 | 53.3±88.7 | 59.4±77 | |
D-1887 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -85.4±10.7 | -85.3±10 | -88.2±7.5 | |
D-1702 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -38.1±72.9 | -45±62.5 | -34.8±83 | |
D-1884 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -90.2±1.9 | -90.2±1.6 | -92.3±1.9 | |
D-1978 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 11.8±77.3 | 6.2±70.4 | 7.8±84.9 | |
D-1879 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -14.4±28.1 | -19±28 | -6.3±26.8 | |
D-2002 | 4999 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -92.9±5.2 | -93.1±5.4 | -95.3±3 | |
D-1987 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 73.5±135.8 | 79±140.5 | 68.6±125.8 | |
D-1992 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -21.1±86.3 | -17.9±86.4 | -20.7±86 | |
D-1997 | 4999 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -5.5±40.6 | -7.8±43.4 | -7.4±46.8 | |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 6.6±93.3 | 2.5±81 | -2.2±89.2 | |
D-1886 | 5043 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -91.4±5.8 | -90.7±6 | -90.8±7.3 | |
D-1980 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -1.1±45.8 | -12.7±40.1 | 1.1±48 | |
D-1984 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -30.8±60.8 | -28.8±60.2 | -34.7±51.4 | |
D-2004 | 5043 | 20 | 3 | 22-span | 脂肪 | C22 | -90.9±7.3 | -91±6 | -92.8±5.6 | |
D-1989 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -29.2±64 | -36±54.6 | -18.9±74.2 | |
D-1994 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 160.7± 277.8 | 170.5±276.8 | 144.6± 227.8 | |
D-1999 | 5043 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 43.8± 119.1 | 49.5±123.3 | 50.5± 127.9 | |
D-1704 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -45.7±33.2 | -45.7±35.2 | -46±29.9 | |
D-1885 | 5045 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -97±2.2 | -97±1.9 | -96.7±3 | |
D-1979 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -60.8±31.4 | -58.4±37 | -65.6±25.6 | |
D-1983 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -31.4±68.4 | -24.2±78.3 | -34.1±65.3 | |
D-2003 | 5045 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -92.5±5.1 | -92.8±4.5 | -94.6±3.6 | |
D-1988 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 125± 249.1 | 108.8±235.9 | 162.6± 294.1 | |
D-1993 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -27±97 | -31.1±85.3 | -24.5± 101.3 | |
D-1998 | 5045 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 17.7±133.4 | 6.3±116.3 | 14.3±134.1 | |
D-1623 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -25.3±71.6 | -29.6±65.9 | -23.2±76.9 | |
D-1862 | 5080 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -92.1±4.3 | -91.8±4.8 | -94.6±3.7 | |
D-1981 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -1.8±67.6 | -8.1±63.5 | 0.5±72.2 | |
D-1985 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -21.9±83 | -25.4±79 | -24.5±86.3 | |
D-2005 | 5080 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -85.9±9.7 | -86.8±8.5 | -92.3±5.5 | |
D-1990 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -4.1±104 | -5.1±100.6 | -2±107.4 | |
D-1995 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -23.7±41.3 | -29.9±39.2 | -28.1±41.4 | |
D-2000 | 5080 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -71.9±15.2 | -73.3±14.4 | -69.7±18.6 | |
D-1955 | 4412 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -36.7±62.3 | -36.3±61.6 | -34.6±68.6 | |
D-1970 | 5249 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -51.1±48.8 | -48.6±52.8 | -54.4±47.3 | |
D-1972 | 5274 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -37±22.6 | -28.7±27.9 | -37.3±21 | |
D-1774 | 5276 | 3 | 3 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 171±226.8 | 165.7±214.9 | 168.2±242.3 | |
D-1976 | 5276 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -82.7±15.8 | -82.9±15 | -87.8±11.5 | |
D-1977 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -21.3±82.3 | -14.2±87.6 | -23.4±78.2 | |
D-1982 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 164.9±233.4 | 167.4±228.3 | 157.3±227.8 | |
D-2001 | 5276 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -92.3±2.3 | -91.7±2.6 | -95.2±1.4 | |
D-1986 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 80.1±94 | 67.7±71.1 | 77.4±85.6 | |
D-1991 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -47.7±10.6 | -47.9±11.6 | -47.2±11.1 | |
D-1996 | 5276 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 251.3± 448.9 | 228.4±404.2 | 294.1± 491.1 | |
D-2017 | 1333 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -51.1±20.6 | -49.3±23 | -48.6±24.1 | |
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 58.2± 158.7 | 46.4±139.6 | 44.4± 138.8 | |
D-1853 | 1333 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -50.4±2.9 | -51.3±2 | -65.9±7.5 | |
D-1667 | 1309 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 154.6± 218.9 | 143.5±199.5 | 163± 206.2 | |
D-1849 | 1309 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -71.6±27.5 | -70±30 | -79.5±23.8 | |
D-1636 | 2144 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | -69.5±25.7 | -69.3±23.4 | -77.5±19.5 | |
D-1858 | 2144 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -66.2±18.2 | -63.6±22.3 | -81.7±10.5 | |
D-1650 | 3000 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 121± 235.1 | 104.5±202.1 | 179.8± 319.6 | |
D-2035 | 3000 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -65±28.1 | -62.1±29.7 | -66.4±31.9 | |
D-1557 | 3000 | 3 | 4 | 22-span | 脂肪 | GalNAc | 67.1±166.8 | 93.7±184 | 74.4±166.2 | |
D-1861 | 3000 | 20 | 4 | 22-span | 脂肪 | C22 | -96±5.4 | -95.3±6.4 | -97±3.6 | |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1614 | 4999 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -40.7±17.9 | -39.6±15.7 | -41.1±19.3 |
D-1611 | 5043 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -31.7±28 | -32.7±26 | -48.1±20.5 |
D-1742 | 4484 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -3.9±22.4 | -0.9±17.6 | -23.5±16.7 |
D-1743 | 4485 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -35.7±39.2 | -33.8±43.6 | -45.2±26.3 |
D-1744 | 4717 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -44.9±30.1 | -49.8±23.9 | -45.9±12.8 |
D-1745 | 4799 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -15±25.8 | -21.9±24 | -4.6±31 |
D-1746 | 4801 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -29.3±49.2 | -32.5±46.5 | -31.7±38.3 |
D-1747 | 4802 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 14.7±53.5 | 16±55.1 | 14.9±46 |
D-1748 | 4806 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 33.3±51.8 | 21.9±46.2 | -11.2±21.5 |
D-1749 | 4950 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -26.3±7.9 | -22.5±7.1 | -32.4±10.3 |
D-1750 | 4951 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -15.7±33.3 | -9.4±36.4 | -33.6±22.4 |
D-1751 | 4953 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 7.4±34.9 | 12.5±35.5 | -15.3±33.1 |
D-1752 | 4954 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -5.1±35.9 | -2.1±35.1 | -25.5±23.3 |
D-1753 | 4955 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 6.2±38.7 | 13.5±38.1 | 14.8±55.2 |
D-1754 | 4958 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -21±18.5 | -19.8±13.2 | -35.3±4.6 |
D-1755 | 4965 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 12.9±31.8 | 7.1±27.4 | 7.3±24.2 |
D-1756 | 4970 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 23.6±25.4 | 25.9±26 | 17.3±23.6 |
D-1757 | 4996 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -15.5±17.8 | -10.8±22 | -27.5±9.6 |
D-1758 | 4997 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 6.9±13.4 | 8.3±13.3 | -24.1±13.7 |
D-1759 | 5008 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 70.4±77 | 79.3±88.9 | 14.4±36.1 |
D-1760 | 5056 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -5.1±19.6 | -2±18.9 | -42.6±7 |
D-1761 | 5080 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 9.2±33.4 | 15.1±33 | -37.6±4.3 |
D-1762 | 5114 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -27.6±26.5 | -21.7±27 | -47.8±13.6 |
D-1763 | 5115 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 24.8±64.5 | 25.4±60.1 | -2.1±28.1 |
D-1764 | 5154 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 8.7±50.5 | 15.7±57.8 | -4.1±32.8 |
D-1765 | 5155 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 28.9±64.5 | 40.4±72.9 | 3.6±35.5 |
D-1766 | 5195 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 28.3±40.2 | 28.8±32.9 | 52.2±56.6 |
D-1767 | 5200 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 77.3±52.2 | 82.7±68.3 | 46.4±48.2 |
D-1614 | 4999 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -83.8±2.8 | -82.2±2.6 | -73.4±3.8 |
D-1611 | 5043 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -50.5±5.6 | -50±9 | -50±3.7 |
D-1768 | 5247 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -55.7±3.3 | -53.3±4.1 | -49.9±4.3 |
D-1769 | 5249 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -56.7±10 | -53.6±9.5 | -52.2±2.4 |
D-1770 | 5251 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -33.4±10 | -31.6±10.2 | -38.9±8.5 |
D-1771 | 5254 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -32.5±16.7 | -28.3±20.6 | -30.7±8.4 |
D-1772 | 5259 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -42.9±22.8 | -39.9±23.9 | -44.1±18.5 |
D-1773 | 5274 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -52.4±16.3 | -46.6±21.8 | -62.1±8.1 |
D-1774 | 5276 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -51.9±23.5 | -50.2±23.8 | -44±37.8 |
D-1775 | 5344 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 1.8±46.5 | 8.3±63.6 | 8.3±38.4 |
D-1776 | 5402 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -33.2±37 | -21.4±44.9 | -26.9±44.4 |
D-1777 | 4412 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -51.3±10.8 | -46.8±9.3 | -51±7.5 |
D-1778 | 4777 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -28.5±43.7 | -17.5±55.4 | -33.7±35.1 |
D-1779 | 4780 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -19±26.9 | -4.3±26.2 | -16±21.4 |
D-1780 | 4819 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -18.8±39.4 | -4.3±46.1 | -1.9±45.2 |
D-1781 | 4834 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -63.4±8.6 | -58.4±12.7 | -60±12.2 |
D-1782 | 4931 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -41.3±12.2 | -34.9±12.7 | -23.6±10.1 |
D-1783 | 4932 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -59.1±10.8 | -57.2±11.4 | -52.7±8.6 |
D-1784 | 4933 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -33.6±7.4 | -31.2±9.6 | -17.7±9.5 |
D-1785 | 4935 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -27±31.3 | -14.9±37.2 | -22.9±27.1 |
D-1786 | 4939 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -34.6±17.4 | -34.6±17.1 | -32.2±23.8 |
D-1787 | 4940 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | 0.6±31.7 | -12±20.3 | -5.1±13.9 |
D-1788 | 4989 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -42.4±25.6 | -38.8±23.8 | -30.5±18.8 |
D-1789 | 4991 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -37.1±8.7 | -30.7±8.1 | -17.2±6.8 |
D-1790 | 5201 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -22.6±50.6 | -17.1±54.8 | -11.9±52.9 |
D-1791 | 5203 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -19±34.6 | -17.9±35.4 | -2.2±51.2 |
D-1792 | 5204 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -55.4±6.5 | -49.7±6.7 | -31±12.8 |
D-1793 | 5207 | 1 | 4 | 3 | GalNAc | -46±13.6 | -42.6±18.7 | -26.8±22.9 |
D-1597 | 1333 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -7.1±14.9 | -3.7±15.6 | -10.5±13.8 |
D-1544 | 2144 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -26.1±20.1 | -22.6±14 | -32.8±16.4 |
D-1794 | 1305 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -9.6±21.6 | -2.6±18.8 | -19.9±17.5 |
D-1795 | 1306 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 2.7±27.1 | 7.9±32.2 | 4.2±26.5 |
D-1796 | 1308 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -8.8±26.4 | -5.8±23.5 | -20.8±18.6 |
D-1797 | 1472 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 0.6±49.8 | 0.3±54.3 | -20.3±38.7 |
D-1798 | 1500 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -4.6±8.9 | -3.9±9.5 | -19.3±18 |
D-1809 | 2296 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 12.4±65.3 | 15±64.7 | 21.4±78.9 |
D-1810 | 2343 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -30±20.2 | -28.8±20.4 | -38.3±13.1 |
D-1811 | 2355 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -20.1±39.6 | -20.6±32.7 | -18.9±30.3 |
D-1812 | 2417 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -42.3±12.1 | -38.8±12.2 | -45.6±4.9 |
D-1813 | 2432 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -28.6±22.1 | -22.1±27.3 | -36.7±14.5 |
D-1814 | 2688 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 21.5±13 | 23.6±14.6 | -6.8±10.2 |
D-1815 | 2690 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -21.3±19.1 | -18.3±17.1 | -34.5±9.8 |
D-1816 | 2886 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -23.6±42.2 | -18.2±45.8 | -49.4±24.2 |
D-1817 | 1326 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -14.2±21 | -13.1±16 | -36.1±9.9 |
D-1818 | 1331 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 11.5±72 | 12.7±62.6 | -21.3±35.1 |
D-1819 | 1407 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -20.5±12.3 | -17.4±20.2 | -35.4±5.6 |
D-1597 | 1333 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -29.9±43.6 | -36.7±36 | -40.4±31.5 |
D-1544 | 2144 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 16.9±24.5 | 10.7±23.7 | 1.5±30 |
D-1820 | 1514 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -26±41.7 | -23.6±41.8 | -26.4±37.4 |
D-1821 | 1564 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 16.7±67 | 12.9±68.8 | 105.3±51.2 |
D-1822 | 1611 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 58.7±72 | 57.7±80 | 45.4±67.1 |
D-1823 | 1615 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 27.2±21.2 | 38.5±23.9 | 24.7±30.4 |
D-1824 | 1616 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -17.8±56.8 | -13.7±59.5 | -12.9±59.4 |
D-1825 | 1618 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -20.6±35.1 | -21.3±35 | -31.1±22 |
D-1826 | 1693 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -28.1±32.7 | -13.8±32.7 | -34.2±30.4 |
D-1827 | 1697 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 0.8±18.9 | -1.8±19.2 | 4.9±41.3 |
D-1828 | 1700 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 32.6±24.6 | 33±14 | 15.6±19.4 |
D-1829 | 1701 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 17.8±50.2 | 11.2±46.5 | 2.7±40.7 |
D-1830 | 1703 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 51.5±39 | 44.7±43.9 | 32.3±35.8 |
D-1831 | 1704 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 9.4±36.6 | 9.7±36.7 | -5.9±23.2 |
D-1832 | 1716 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 21.8±29.4 | 29.7±25.6 | 25.8±28.6 |
D-1833 | 1717 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 24.7±45.7 | 33.3±42.4 | 27.2±34.9 |
D-1834 | 1832 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 91.8±94.3 | 125.8±122.3 | 80.5±91.5 |
D-1835 | 1833 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 72.7±75.1 | 98.8±91.9 | 72.8±71.2 |
D-1836 | 1834 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 4±25.5 | 3.4±27.5 | 7.3±26.1 |
D-1837 | 1856 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | -8.2±8.8 | -10.2±9.3 | -16.2±15.9 |
D-1838 | 1900 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 35.2±35.2 | 42.4±32.3 | 13.6±28.3 |
D-1839 | 2275 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 54.8±62.1 | 57.1±67.4 | 9.3±30.7 |
D-1840 | 2437 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 80±18.3 | 79.2±26.8 | 79.4±22.8 |
D-1841 | 2439 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 49.2±23.8 | 43.4±12.9 | 42.3±19.9 |
D-1842 | 2534 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 24.1±22.7 | 12.5±17.4 | 16.7±10.3 |
D-1843 | 2693 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 87.7±40.7 | 83.7±39.7 | 62.3±32.7 |
D-1844 | 2719 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 24.4±44.4 | 26.8±38.5 | 19.9±22.8 |
D-1845 | 2726 | 1 | 4 | 1 | GalNAc | 26.8±46.2 | 29.3±49.8 | 25.5±43.9 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1744 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -62.6±19.9 | -61.8±21.1 | -63±14 |
D-1896 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -81.8±6.7 | -81.3±7.2 | -75.2±9.1 |
D-1902 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.6±14.4 | -59.4±15.3 | -62.5±8.5 |
D-1908 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -67.3±9.2 | -65.2±11.5 | -60.4±15 |
D-1781 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -64.9±8.5 | -65±6.9 | -60.9±3.9 |
D-1894 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -66.9±10.7 | -65.6±10.5 | -61±8 |
D-1900 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -54.2±25.6 | -56.4±26 | -57±13.9 |
D-1906 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -64.2±10.8 | -62.9±11 | -64.9±7.8 |
D-1783 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -79.1±8.3 | -79.3±7.9 | -74.5±4.7 |
D-1895 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -75.3±17.4 | -74.1±17.5 | -64.9±13.2 |
D-1901 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -50.8±7.8 | -47.6±9.7 | -57.1±6.7 |
D-1907 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -74.6±11.3 | -73.9±12.4 | -70.6±15 |
D-1614 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -72.2±10.1 | -71.9±10.2 | -63.3±10.6 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -66.7±24.4 | -67.8±22.8 | -70.6±17.9 |
D-1792 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -55.6±9.1 | -52.9±7.6 | -62.9±6.5 |
D-1892 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -54.2±12.8 | -53.1±14.4 | -56.1±11.1 |
D-1898 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69.1±3.8 | -68.5±3.2 | -66.8±2.3 |
D-1904 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -39.5±13 | -39.3±14.2 | -49.1±11 |
D-1768 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -67.2±7.6 | -69.4±7 | -69.4±8.7 |
D-1891 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -37.2±16 | -39.3±15.8 | -57.1±11.9 |
D-1897 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.7±9.1 | -60.4±9.6 | -67.2±6.4 |
D-1903 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -39.3±28.3 | -38.4±30.2 | -56.1±16.5 |
D-1774 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -70±20.2 | -70.5±18.8 | -68.2±21.8 |
D-1893 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.4±11.7 | -56.8±12.6 | -61.5±7.3 |
D-1899 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -73.8±6.3 | -72.9±7.9 | -72.4±5.3 |
D-1905 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.7±8.2 | -59.1±8.2 | -61.8±3.6 |
D-1914 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -55.9±5.1 | -51±6 | -64.9±12.9 |
D-1920 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.8±10.6 | -58.2±13 | -59.2±7.6 |
D-1926 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -40.6±25 | -39.3±19.9 | -52.3±11.1 |
D-1932 | 4717 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69.5±8.3 | -68.7±6.7 | -67.6±7.4 |
D-1912 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -25.9±30.2 | -7.6±46.6 | -43.6±20.4 |
D-1918 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -71.9±40.5 | -71.3±41 | -69.3±41.3 |
D-1924 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -27.1±27 | -29.6±21.3 | -36.2±18.8 |
D-1930 | 4834 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -62.5±17.3 | -64.9±17.4 | -64.3±15.7 |
D-1913 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -55.9±12.3 | -47.5±11.4 | -53.1±12.5 |
D-1919 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -38±37.3 | -34.7±44.3 | -55.1±22.1 |
D-1925 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -56.9±9.8 | -51.5±11.8 | -58.3±8.8 |
D-1931 | 4932 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -62.1±14.1 | -63.2±10.2 | -58.1±14.8 |
D-1614 | 4999 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -76.1±7 | -78.2±5.6 | -73.3±9.8 |
D-1611 | 5043 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -46.6±8 | -47.3±7.3 | -52.1±11.5 |
D-1910 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -30.7±40.6 | -33.5±39.2 | -41.1±35.3 |
D-1916 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59.5±8.3 | -59.6±10.9 | -59.3±4.4 |
D-1922 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -16.2±25.6 | -20±22.8 | -24.5±22.7 |
D-1928 | 5204 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -61.8±6.1 | -58.5±8 | -56.4±15.8 |
D-1909 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -59±20.7 | -60.6±16.4 | -65.7±12.5 |
D-1915 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -52.8±20.8 | -37.6±29.6 | -66±11.9 |
D-1921 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -54.4±13.4 | -48.2±19.7 | -66±12.1 |
D-1927 | 5247 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -47.4±21.1 | -35.6±31.6 | -57.9±17.4 |
D-1911 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -49.6±22.2 | -47.1±24.8 | -60.6±18.2 |
D-1917 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -79.6±17.6 | -77.6±19.8 | -76.4±17.7 |
D-1923 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -63.8±17.3 | -61.4±19.7 | -59.5±21.4 |
D-1929 | 5276 | 3 | 4 | 3 | GalNAc | -69±10.5 | -68.8±10 | -59±11.2 |
siRNA 雙股體 | 觸發物 家族 | 劑量( mg/kg ) | N | AAV 編號 | 載體 | 平均 mRNA 變化 % ± STD | ||
eGFP-1 | eGFP-2 | BGHpA | ||||||
D-1709 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.2±8.6 | -82.9±9.3 | -83.7±7.5 |
D-2008 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -62.7±8.7 | -65.6±11.3 | -76.2±7.4 |
D-2017 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -66.4±15.5 | -66.4±16.1 | -72.6±11.5 |
D-2049 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -78.6±11.1 | -79.7±10.1 | -85.5±5.7 |
D-2054 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -82.6±6.2 | -82.4±5.9 | -87.3±3.8 |
D-1704 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -81.1±8.4 | -81.8±6.9 | -83.3±6 |
D-2012 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -91.6±1.1 | -91.3±0.8 | -90.4±1.2 |
D-2021 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -84.5±6.7 | -85.3±5.2 | -84.8±6.3 |
D-2043 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -74±12.9 | -74.7±11.1 | -79.2±8.6 |
D-2047 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -80.1±13.4 | -81±11.1 | -81.6±11.4 |
D-2052 | 5045 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -84.2±5.9 | -84.1±6.5 | -83.3±4.9 |
D-1623 | 5080 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -59.6±11.3 | -62.9±11.1 | -62.9±11 |
D-2014 | 5080 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -89.1±10.6 | -88.8±9.1 | -88.5±9.8 |
D-2023 | 5080 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -89.1±6.5 | -88.2±6.2 | -87.6±5.3 |
D-2036 | 4995 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -59.3±40.7 | -60.4±39.2 | -66±29.9 |
D-2037 | 4996 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -42.8±23.2 | -48.5±16.9 | -42.5±20.2 |
D-2038 | 4997 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | 76.6±62.9 | 105.4±74.5 | 88.1±60.4 |
D-2039 | 4998 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -43.5±27.1 | -43.6±30.2 | -56.6±19 |
D-2040 | 5042 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.5±10.5 | -83.8±9.5 | -84.3±7.2 |
D-1705 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -86.5±5.5 | -86.9±5.4 | -90.5±4.1 |
D-2013 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -77.8±15.6 | -78.8±15.2 | -85.1±10.8 |
D-2022 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -79.2±5.7 | -80.3±5 | -87.6±3.7 |
D-2044 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -72.4±32.6 | -70.3±37.2 | -82±21.7 |
D-2048 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -64.1±18.9 | -66.2±18.5 | -76.3±10.2 |
D-2053 | 5043 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.7±5 | -84.9±4.9 | -89.8±3.2 |
D-2042 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -58.7±23.5 | -62.9±21.2 | -74.4±14.3 |
D-2046 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -51.9±37.4 | -55.9±32.1 | -70.4±18.9 |
D-2051 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -71.2±14.4 | -72.6±13 | -82.1±8.2 |
D-2079 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.4±6.6 | -84.7±5.8 | -89.1±5.1 |
D-2080 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -84.7±4.6 | -85.2±4.4 | -90.1±2.6 |
D-2081 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.1±11 | -83.7±10.8 | -88.5±8.3 |
D-2082 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -60.4±18.6 | -61.8±18 | -75±9.5 |
D-2083 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -72.3±21.8 | -73.2±20.8 | -82.2±11.4 |
D-2059 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -53.8±19 | -52.8±26 | -68.3±10.9 |
D-2058 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -76.9±18.2 | -76.6±20.2 | -83.9±11.5 |
D-2060 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -62.4±17.8 | -60.8±18.1 | -74.6±11.4 |
D-1774 | 5276 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -59.9±14.9 | -59.8±15.9 | -74±6.8 |
D-2084 | 5276 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -46.3±25.2 | -47.5±23.2 | -65.6±13.1 |
D-1955 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -88.2±5.2 | -87.8±5.5 | -88.1±4.7 |
D-2091 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -89.2±2.4 | -89.4±2.9 | -90.6±1 |
D-2061 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -93.3±3 | -93.5±2.9 | -93.6±3.1 |
D-2041 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -60.5±18.9 | -60.7±18.9 | -69±13.4 |
D-2045 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -80±12 | -80.2±10 | -82.6±10.5 |
D-2050 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -56.1±55.5 | -58.3±50.9 | -62.3±44.7 |
D-2057 | 4412 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -76.7±14.4 | -78.8±11.8 | -76.9±12.4 |
D-1970 | 5249 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -82.4±13 | -83.5±11.9 | -82.9±13 |
D-2076 | 5249 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -60.6±11.6 | -65±9.7 | -66.8±10.1 |
D-2078 | 5249 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -72.6±17.4 | -74±16.1 | -70.8±20.2 |
D-1768 | 5247 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.6±10.3 | -83.8±10 | -83.3±9.6 |
D-2075 | 5247 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -88.6±10 | -89.2±9.1 | -87.8±11 |
D-2077 | 5247 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -93±2.2 | -92.7±2.6 | -94.5±1 |
D-1597 | 1333 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -83.4±9.3 | -83.3±9.2 | -86.8±7.4 |
D-2006 | 1333 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -79.3±9.7 | -79.2±9.6 | -79.7±9.9 |
D-2015 | 1333 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -65.3±12.8 | -66±12.1 | -72±8.2 |
D-2090 | 4999 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -94.5±1.8 | -94±2.1 | -94.6±1.6 |
D-2093 | 5274 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -81.6±13 | -79.6±15.1 | -86.9±7.1 |
D-1899 | 5276 | 3 | 4 | 22span | GalNAc | -78.5±10.1 | -78.2±9.9 | -83.4±5.9 |
在AAV人FAM13A小鼠模型內對針對
FAM13A的siRNA分子的測試表明,可以靶向
FAM13AmRNA內的多個不同區域以有效降低
FAM13A的表現。如圖6中所示,有效的siRNA觸發物靶向整個
FAM13AmRNA轉錄物(SEQ ID NO: 1)的區域。在以上表格中,siRNA靶向的區域由觸發物家族指定,觸發物家族係指SEQ ID NO: 1的核苷酸範圍中由給定的siRNA分子靶向的第一個核苷酸。
相對於媒介物對照實現40%-60%的最大敲低的觸發物家族(對於伴隨至少一個雙股體的至少一個探針組)係T-1328、T-1631、T-1666、T-2343、T-2417、T-2623、T-2886、T-2887、T-2889、T-3133、T-3187、T-3189、T-3498、T-3499、T-4008、T-4109、T-4485、T-4927、T-4989、T-4993、T-4996、T-4998、T-5060和T-5114。
相對於媒介物對照實現60%-80%的最大敲低的觸發物家族(對於伴隨至少一個雙股體的至少一個探針組)係T-1678、T-2263、T-4834、T-4932、T-4957、T-4995和T-5204。該等家族內被證明將
FAM13A表現有效降低60%-80%的示例性雙股體包括來自觸發物家族T-1678的D-1615、D-1695和D-1867;來自觸發物家族T-2263的D-1573;來自觸發物家族T-4834的D-1781、D-1894、D-1906、D-1918和D-1930;來自觸發物家族T-4932的D-1783、D-1895、D-1907和D-1931;來自觸發物家族T-4957的D-1631、D-1696、D-1703、D-1717、D-1724和D-1731;來自T-4995的D-2036;以及來自觸發物家族T-5204的D-1792、D-1898和D-1928。
相對於媒介物對照實現大於80%的敲低的觸發物家族(對於伴隨至少一個雙股體的至少一個探針組)係T-1309、T-1333、T-2080、T-2144、T-3000、T-4412、T-4717、T-4999、T-5042、T-5043、T-5045、T-5080、T-5247、T-5249、T-5274、和T-5276。該等家族內被證明將
FAM13A表現有效降低大於80%的示例性雙股體包括來自觸發物家族T-1309的D-1667、D-1686和D-1849;來自觸發物家族T-1333的D-1597、D-1853和D-2017;來自觸發物家族T-2080的D-1680、D-1685和D-1690;來自觸發物家族T-2144的D-1682和D-1858;來自觸發物家族T-3000的D-1557、D-1650和D-1861;來自觸發物家族T-4412的D-1955;來自觸發物家族T-4717的D-1896;來自觸發物家族T-4999的D-1614、D-1697、D-1702、D-1709、D-1856、D-1863、D-1865、D-1866、D-1869、D-1873、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1884、D-1887、D-1987、D-1992、D-1997和D-2002;來自觸發物家族T-5042的D-2040;來自觸發物家族T-5043的D-1698、D-1705、D-1864、D-1870、D-1875、D-1883、D-1886、D-1980、D-1984、D-1989、D-1994和D-2004;來自觸發物家族T-5045的D-1699、D-1612、D-1704、D-1868、D-1871、D-1876、D-1885、D-1888、D-1979、D-1983、D-1988、D-1993、D-1998和D-2003;來自觸發物家族T-5080的D-1623、D-1846、D-1862、D-1981、D-1985、D-1990、D-1995、D-2000和D-2005;來自觸發物家族T-5247的D-1768、D-2075和D-2077;來自觸發物家族T-5249的D-1970;來自觸發物家族T-5274的D-1972;以及來自觸發物家族T-5276的D-1975、D-1991、D-1976、D-1977、D-1982、D-1996和D-2001。
在測試一些觸發物家族的一系列不同修飾模式時,發現一些觸發物一致地促進
FAM13A敲低的高水平敲低。例如,在上文基於AAV的實驗中,使用T-4999觸發物家族序列測試了31種不同的修飾模式(D-1614、D-1697、D-1702、D-1709、D-1716、D-1723、D-1730、D-1737、D-1856、D-1863、D-1865、D-1866、D-1869、D-1872、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1884、D-1887、D-1978、D-1987、D-1992、D-1997、D-2002、D-2008、D-2017、D-2049、D-2054和D-2090;關於該等雙股體中的有義和反義序列以及使用的修飾模式,參見
表 2)。在相同的有義和反義序列(SEQ ID NO: 498和1042)的背景下,該等雙股體中之每一個使用不同的修飾模式。在該等雙股體中,觀察到25種修飾模式在至少一個測定中促進大於80%的
FAM13AmRNA敲低,並且觀察到剩餘6種修飾模式在至少一個測定中促進60%至80%的敲低。該等數據表明T-4999觸發物家族係降低
FAM13A表現的特別有效且可靠的觸發物。
另一有效且可靠的觸發物家族係T-5043觸發物家族。對於該家族,在上文基於AAV的實驗中測試了25種不同的修飾模式(D-1611、D-1698、D-1705、D-1712、D-1719、D-1726、D-1733、D-1740、D-1855、D-1864、D-1870、D-1875、D-1883、D-1886、D-1980、D-1984、D-1989、D-1994、D-1999、D-2004、D-2013、D-2022、D-2044、D-2048和D-2053;關於該等雙股體中的有義和反義序列以及使用的修飾模式,參見
表 2)。在相同的有義和反義序列(SEQ ID NO: 503和1047)的背景下,該等雙股體中之每一個使用不同的修飾模式。在該等雙股體中,觀察到16種修飾模式在至少一個測定中促進大於80%的
FAM13AmRNA敲低,觀察到8種修飾模式在至少一個測定中促進60%至80%的敲低,並且觀察到1種修飾模式在至少一個測定中促進40%至60%的
FAM13AmRNA敲低。
第三個特別有效的觸發物家族係T-5045觸發物家族(其靶序列與T-5043觸發物家族大部分重疊)。對於該家族,在上文基於AAV的實驗中測試了25種不同的修飾模式(D-1612、D-1699、D-1704、D-1711、D-1718、D-1725、D-1732、D-1739、D-1868、D-1871、D-1876、D-1882、D-1885、D-1888、D-1979、D-1983、D-1988、D-1993、D-1998、D-2003、D-2012、D-2021、D-2043、D-2047和D-2052;關於該等雙股體中的有義和反義序列以及使用的修飾模式,參見
表 2)。在相同的有義和反義序列(SEQ ID NO: 504和1048)的背景下,該等雙股體中之每一個使用不同的修飾模式。在該等雙股體中,觀察到18種修飾模式在至少一個測定中促進大於80%的
FAM13AmRNA敲低,並且觀察到7種修飾模式在至少一個測定中促進60%至80%的敲低。
能夠顯示出有效敲低的具有多種修飾模式的其他觸發物家族包括T-1309、T-1333、T-2144、T-3000、T-5080和T-5226觸發物家族。
從廣泛的角度來看,測試整個
FAM13A轉錄物的範圍廣泛的觸發物揭示了轉錄物的哪些區域易受RNAi介導的敲低的影響。
圖 6係彙編了不同的有效觸發物家族靶向
FAM13AmRNA轉錄物(如SEQ ID NO: 1所提供)的位置,以及對那些觸發物家族在上文基於AAV的測定中能夠敲低FAM13A表現的最大程度進行分類的圖。根據觀察到的該觸發物的最大敲低是否落在40%-60%敲低、60%-80%敲低或大於80%敲低的範圍內來劃分觸發物。
如
圖 6中所示,特別易受基於RNAi的敲低影響的人
FAM13AmRNA轉錄物的一個區域係
FAM13AmRNA轉錄物的核苷酸4900至5300的部分。在該小區域內,鑒定了24個促進FAM13A的敲低的不同觸發物家族,其中大多數使用具有不同修飾模式的多種不同雙股體驗證。該等家族包括12個促進大於80%敲低的觸發物家族、5個促進60%至80%敲低的家族、和7個促進40%至60%敲低的家族。該出乎意料的成功靶標的集中表明,在核苷酸4900與5300之間的靶向係敲低FAM13A表現的特別有用的策略。
在多個靶位置處也易受影響的其他區域包括核苷酸1300-1375、核苷酸1625-1700和核苷酸2075-2175。因此,該等數據還表明靶向該等區域中之任一個都是敲低FAM13A表現的有用策略。
該等基於AAV的實驗還測試了將不同的配體綴合到siRNA雙股體在不同組織中促進敲低的有效性。
圖 8A-8D和
表 14顯示了當雙股體已與GalNAc(式VII)或脂肪酸C22綴合時,測試來自T-4999和T-5043家族的
FAM13AsiRNA的結果。在該等圖中,「*」表示與C22綴合的那些雙股體,而沒有星號的那些則與GalNAc綴合。在全身性投與後,收集肝臟和脂肪組織兩者的敲低數據。GalNAc綴合的雙股體以3 mg/kg投與,而C22綴合的觸發物以20 mg/kg投與。所有測試的T-4999和T-5043雙股體都能夠降低FAM13A在肝臟中的表現。在脂肪組織中,GalNAc綴合的觸發物在降低FAM13A表現方面的有效性下降,其中一些沒有可檢測的作用。相比之下,C22綴合的觸發物一致地促進脂肪組織中FAM13A表現的降低,程度與它們在肝臟中的促進程度類似。該等數據與體重、脂肪量和代謝特徵的研究(參見實例2、6和7)組合的檢驗表明,GalNAc靶向令人驚訝地能夠實現與C22靶向類似的結果,儘管對生物學上重要的脂肪組織中FAM13A表現的作用較小。
上述數據還允許比較用於將C22附接至siRNA雙股體的鍵。兩種測試的鍵係藉由磷酸二酯鍵(PO)和硫代磷酸酯鍵(PS)。出乎意料的是,用PS連接C22促使了比用PO連接顯著更好的敲低。這係藉由比較只在綴合方法上不同的雙股體對觀察到的。例如,當從PO切換到PS鍵時,一個T-4999觸發物家族對顯示出敲低的43%的增加(比較D-1697(PO;37% KD)和D-1856(PS;80% KD))。當從PO切換到PS鍵時,另一個T-4999觸發物家族對顯示出敲低的6%的較少增加(比較D-1869(PO;74% KD)和D-1887(PS;80% KD))。當從PO切換到PS鍵時,一個T-5080觸發物家族對顯示出敲低的25%的增加(比較D-1846(PO;44% KD)和D-1862(PS;69% KD))。當從PO切換到PS鍵時,一個T-5043觸發物家族對顯示出敲低的45%的增加(比較D-1698(PO;13% KD)和D-1855(PS;58% KD))。當從PO切換到PS鍵時,另一個T-5043觸發物家族對顯示出敲低的30%的增加(比較D-1875(PO;40% KD)和D-1886(PS;70% KD))。並且當從PO切換到PS鍵時,一個T-5045觸發物家族對顯示出敲低的38%的增加(比較D-1871(PO;27% KD)和D-1882(PS;65% KD))。以上表4-17中的該等和其他數據表明與用PO將C22連接到siRNA雙股體相比,用PS連接到相同的siRNA雙股體出乎意料且一致地導致顯著更好的敲低。
實例 6 :肥胖模型中內源性鼠 Fam13a 的體內敲低
為了確定哪些人siRNA雙股體(參見實例4和5)適合於用內源性鼠Fam13a敲低實驗進行測試,審查了有效的觸發物家族(參見上文的實例4和5)與鼠
Fam13amRNA的交叉反應性。該審查發現T-4999觸發物家族除了其序列的一個鹼基外,全部與鼠
Fam13a序列對齊。假設這可能足以仍然顯示出敲低活性,進行了實驗以評估T-4999
FAM13AsiRNA分子在C57BL/6小鼠的飲食誘導的肥胖(DIO)模型中對內源性鼠
Fam13amRNA的功效。
選擇來自T-4999觸發物家族的三種雙股體用於該測定:D-1709(經由PS綴合GalNAc)、D-1869(經由PO綴合C22)和D-1887(經由PS綴合C22)。使用靶向人FAM13A但預測不結合小鼠FAM13A的雙股體D-2086(經由PS綴合GalNAc)和D-2087(經由PS綴合C22)作為陰性對照。還測試了D-2086(經由PS綴合GalNAc)和D-2087(經由PS綴合C22)這兩種完全匹配鼠
Fam13amRNA序列的雙股體。
從5週齡開始向雄性C57BL6小鼠飼餵含有高脂肪含量的飲食(研究飲食D12492,60% kcal源自脂肪)。當小鼠達到19週齡(處於高脂肪飲食14週)時,小鼠接受皮下注射緩衝液(PBS)或FAM13A siRNA分子,劑量為PBS中3 mg/kg身體質量或20 mg/kg身體質量(n = 8隻小鼠/組)。在整個研究中持續測量身體質量。在基線處(注射前2天)和注射後第25天藉由NMR(EchoMRI 3n1身體組成分析儀)測量身體組成。在siRNA投與後4週收集肝臟和皮下白色脂肪組織(ScWAT)並進行分析。
將來自收穫的動物組織的RNA進行加工以進行qPCR分析。按照製造商的說明(凱傑公司)使用RNeasy 96通用組織套組RNA分離方案從50-100 mg組織中分離RNA。根據製造商的說明(賽默飛世爾公司),使用TaqMan® RNA-to-Ct™ 1步套組,使用50 ng RNA/反應以及與鼠
Fam13amRNA互補的引物探針組進行即時PCR。相對於投與PBS緩衝液對照的動物的肝臟或ScWAT中鼠
Fam13amRNA的水平,計算每隻動物的肝臟或ScWAT中鼠
Fam13amRNA的變化百分比。
該等研究的結果顯示在
圖 9A-9C和
圖 10A-10B中。該等圖顯示了每隻小鼠的肝臟、腹股溝WAT和附睪WAT中實現的敲低水平。每個非靶向性對照siRNA雙股體展示出與僅緩衝液對照小鼠相同的表現水平(在所有三種組織中)。
在肝臟中,所有針對
Fam13a的雙股體都有效地降低了鼠Fam13a的表現(
圖 9A)。GalNAc連接的雙股體D-2086和D-1709同等地降低了肝臟中Fam13a的表現(分別降低了62%和63%)。這表明T-4999雙股體(D-1709)係有效的,儘管其與靶序列有一個誤配。每個C22連接的雙股體也促進肝臟中的Fam13a敲低,其中D-2087實現76%的敲低,D-1869實現55%的敲低,並且D-1887實現69%的敲低。
在腹股溝WAT中,C22連接的雙股體比GalNAc連接的雙股體更有效地降低鼠Fam13a的表現。GalNAc連接的雙股體D-2086和D-1709分別將肝臟中的表現降低了8%和19%。相比之下,C22連接的雙股體實現了與在肝臟中實現的類似水平的Fam13a敲低:D-2087實現66%的敲低,D-1869實現60%的敲低,並且D-1887實現62%的敲低。
在附睪WAT中,觀察到比在其他兩種組織類型中更少的敲低。GalNAc連接的雙股體均未實現鼠Fam13a的顯著敲低。相比之下,C22連接的雙股體實現一些Fam13a敲低:D-2087實現22%的敲低,D-1869實現26%的敲低,並且D-1887實現26%的敲低。
圖10A顯示了siRNA處理對DIO小鼠體重的影響。在實驗過程中,未處理和對照處理的小鼠具有5%-8%的體重增加。用Fam13a雙股體中之任一種處理都減少或預防了該增重。GalNAc連接的雙股體D-2086和D-1709分別將增重限制至2%和4%。C22連接的雙股體也限制了增重,其中D-2087實際上導致小鼠的體重減輕1%,D-1869將增重限制至2%,並且D-1887將增重限制至3%。
圖10B顯示了siRNA處理對DIO小鼠脂肪量的影響。在實驗過程中,未處理和對照處理的小鼠具有8%-9%的脂肪量增加。用Fam13a雙股體中之任一種處理都減少或預防了該增重。GalNAc連接的雙股體D-2086和D-1709分別將增重限制至6%和4%。C22連接的雙股體也限制了增重,其中D-2087實際上導致小鼠的體重減輕2%,D-1869將增重限制至3%,並且D-1887將增重限制至3%。
該等數據為
FAM13AsiRNA(並且特別是T-4999觸發物家族)用於多種目的提供了進一步支持,該等目的如減少腹部脂肪過多、減輕體重、減少脂肪量、改善代謝參數(包括胰島素抗性和非酒精性脂肪性肝炎(NASH))、以及降低心肌梗塞的風險。
實例 7 :非人靈長類動物中的 FAM13A siRNA
為了評估
FAM13AsiRNA分子在非人靈長類動物模型中的功效,使用石蟹獼猴評價了來自實例4和5中所述之體外和體內活性測定的表現最佳的
FAM13AsiRNA分子的體內功效。特別地,選擇了來自T-4999和T-5043家族的觸發物。因為所選擇的觸發物靶向人和石蟹獼猴
FAM13AmRNA兩者中存在的序列,所以預期它們也會有效敲低內源性石蟹獼猴FAM13A。
對於該等實驗,使用實例3中描述的方法,使每個測試的siRNA分子中的有義股與式VII中所示的三價GalNAc部分或與二十二酸(C22)綴合。因此,實驗使用了T-4999雙股體T-1709(經由PS綴合GalNAc)和D-1887(經由PS綴合C22),以及T-5043雙股體D-1705(經由PS綴合GalNAc)和D-1886(經由PS綴合C22)。
研究設計提供在下
表 18中。易言之,每個處理組有N = 3隻動物(初治的和非初治的,雌性,瘦石蟹獼猴,柬埔寨來源,3歲)。向每隻動物的肩胛中區投與單次皮下劑量。在第-14天或第-11天給藥前以及在第14天、第30天和第45天給藥後(相對於第0天的給藥)採集肝臟組織活組織檢查。在第-14天或第-11天給藥前(網膜脂肪)以及在第14天(鐮狀脂肪)、第30天(網膜脂肪)和第45天(網膜和鐮狀脂肪)給藥後採集脂肪組織活組織檢查。在第-14天(活組織檢查前)、第-7天、第7天、第14天(活組織檢查前)、第20天、第25天、第30天(活組織檢查前)、第35天和第45天(屍體剖檢前)經由股靜脈採集血液進行臨床化學分析。由於組織活組織檢查採集程序,動物在第-14天、第14天和第30天禁食。
[
表 18]
- NHP 研究設計
組 | 動物 | siRNA雙股體 | 觸發物家族 | 載體 | 劑量途徑 | 劑量水平(mg/kg) | 劑量濃度(mg/mL) |
1 | 3 | D-1709 | 4999 | GalNAc | SC | 3 | 0.6 |
2 | 3 | D-1887 | 4999 | C22 | SC | 20 | 4 |
3 | 3 | D-1705 | 5043 | GalNAc | SC | 3 | 0.6 |
4 | 3 | D-1886 | 5043 | C22 | SC | 20 | 4 |
為了分析肝臟和脂肪組織中的FAM13A敲低水平,對於來自每個時間點的每個組織樣本,從10-20 mg組織中分離總RNA。然後從每個總RNA樣本製備cDNA樣本,並1 : 10稀釋用於ddPCR分析。在分析中使用石蟹獼猴
FAM13A引物/探針組和石蟹獼猴PPIB引物/探針組。對於每隻單獨的動物,相對於給藥前
FAM13A表現水平計算mRNA敲低百分比,然後在全部時間點進行平均。
肝臟中
FAM13AmRNA水平的敲低數據顯示在
圖 11A中。肝臟中最有效的雙股體係D-1709,其為來自T-4999觸發物家族的GalNAc綴合的siRNA。在肝臟中,單劑量的D-1709到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低81%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(77%)和第45天(80%)維持敲低。除了與C22綴合之外,雙股體D-1887與D-1709相同,其幾乎與D-1709一樣有效(儘管劑量更高)。單劑量的D-1887到第14天時將FAM13A mRNA的水平平均降低68%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(71%)和第45天(75%)增加了敲低。
圖 11A還顯示了藉由來自T-5043觸發物家族的兩個雙股體實現的肝臟敲低。單劑量的D-1705(GalNAc)到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低58%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(52%)和第45天(48%)維持了敲低。然而,其中兩隻動物的敲低高得多,因為三隻處理的動物中有一隻係可能的表現出最低敲低的異常動物。T-5043家族中的另一個雙股體D-1886(C22)到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低了45%,但到第30天(35%)和第45天(8.4%)時敲低水平降低。
圖 11B顯示了脂肪組織中
FAM13AmRNA敲低的數據。在脂肪組織中最有效的雙股體係D-1887(T-4999;C22)和D-1886(T-5043;C22)。單劑量的D-1887到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低83%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(80%)和第45天(75%)維持了敲低。類似地,單劑量的D-1886到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低79%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(64%)和第45天(83%)維持了敲低。兩種GalNAc綴合的雙股體表現出緘默化活性的滯後時間,但也有效敲低FAM13A。單劑量的D-1709到第14天時將
FAM13AmRNA的水平平均降低11%,並且在沒有任何後續處理的情況下在第30天(45%)和第45天(56%)增加了敲低。單劑量的D-1705在第14天(下降19%)和第30天(增加15%)對
FAM13AmRNA水平的影響最小,但在第45天觀察到55%的平均敲低。
圖 11C-11E顯示了對來自處理的動物的血清樣本進行的臨床化學分析的結果。對於所有測試的雙股體,在siRNA處理後20至30天,血清膽固醇(
圖 11C)、血清LDL(
圖 11D)和血清HDL(
圖 11E)有一致大約20%或更大的降低。該等降低與靶向FAM13A的siRNA對小鼠血液化學的影響一致(參見
實例 2和
圖 5)。因此,該等數據為FAM13A siRNA(並且特別是T-4999和T-5043觸發物家族)用於多種目的提供了另外的支持,該等目的如減少腹部脂肪過多、減輕體重、減少脂肪量、改善代謝參數(包括胰島素抗性和非酒精性脂肪性肝炎(NASH))、以及降低心肌梗塞的風險。
將藉由使用肥胖石蟹獼猴來收集FAM13A siRNA治療這樣的病症的功效的進一步證據。在投與T-4999雙股體T-1709(經由PS綴合GalNAc)和D-1887(經由PS綴合C22)以及T-5043雙股體D-1705(經由PS綴合GalNAc)和D-1886(經由PS綴合C22)後,將監測該等動物。將監測體重、脂肪量、血液化學和其他代謝參數,並使其與肝臟和脂肪組織兩者中FAM13A表現的敲低相關。
無
[
圖 1]顯示了為考察三種常見的
FAM13A變體的關聯性而進行的基因組分析的結果,該分析考察該等變體與對BMI調整的WHR(WHRadjBMI)、三酸甘油酯水平、HDL膽固醇水平、收縮壓和皮下脂肪組織eQTL數據中FAM13A表現的關聯性。
[
圖 2A 和 2B]顯示了
Fam13asiRNA在Renca細胞和原代脂肪細胞中的作用的體外劑量-響應研究結果。
[
圖 3A-3D]顯示了
Fam13asiRNA在小鼠肝臟和白色脂肪組織中敲低鼠
Fam13amRNA表現水平的能力的體內研究結果。
[
圖 4A-4C]顯示了
Fam13asiRNA對小鼠體重和脂肪量的影響的體內研究結果。
[
圖 5]係顯示C16和GalNAc連接的
Fam13asiRNA在經歷60天處理的肥胖小鼠中的作用的表。
Fam13asiRNA對體重、脂肪量、累計食物攝入、肝臟重量、胰島素水平、總膽固醇、LDL膽固醇和ALT水平具有顯著作用。
[
圖 6]係一系列人
FAM13AsiRNA觸發物靶向人
FAM13AmRNA轉錄物的位置彙編圖。所描述的觸發物全部都有效降低
FAM13AmRNA水平,並且在該圖中根據觀察到的該觸發物的最大敲低是否落在40%-60%敲低、60%-80%敲低或大於80%敲低的範圍內來劃分。
[
圖 7A-7R]描繪了可應用於siRNA觸發物序列的不同修飾模式,其中每個圖顯示了雜交的有義(上)和反義(下)股。在該等圖中,實心圓對應於2ʹ-O-甲基核糖核苷酸,空心圓對應於2ʹ-去氧-2ʹ-氟(「2ʹ-氟」)核糖核苷酸,並且陰影圓對應於反向無鹼基去氧核苷酸。粗線指示在核苷酸之間使用硫代磷酸酯鍵代替標準磷酸二酯鍵的位置。最後,箭頭表示配體(例如GalNAc或脂肪酸)可以附接至多核苷酸的位置。
[
圖 8A-8D]顯示了在AAV人FAM13A小鼠模型中測試
FAM13AsiRNA的結果。圖8A和8B顯示T-4999和T-5043觸發物家族的一系列不同成員分別降低了肝臟中
FAM13AmRNA的表現。圖8C和8D顯示C22綴合的T-4999和T-5043觸發物家族成員以及在較小程度上GalNAc綴合的T-4999和T-5043觸發物家族成員能夠降低脂肪組織中
FAM13AmRNA的表現。在圖8A-8D中之每一個中,「*」表示與C22綴合的那些雙股體,而沒有星號的那些則與GalNAc綴合。
[
圖 9A-9C]顯示了測試人-小鼠交叉反應性
FAM13AsiRNA雙股體的結果,其中在肝臟、腹股溝白色脂肪組織和附睪白色脂肪組織中觀察到敲低。
[
圖 10A 和 10B]顯示了用人-小鼠交叉反應性
FAM13AsiRNA雙股體處理飲食誘導的肥胖(DIO)小鼠防止了與DIO模型相關的體重和脂肪量的增加。
[
圖 11A-11E]顯示了用單劑量的人-石蟹獼猴交叉反應性
FAM13AsiRNA處理石蟹獼猴的結果。圖11A和11B顯示在肝臟和脂肪組織兩者中都實現了敲低。圖11C-11E顯示
FAM13AsiRNA處理分別導致血清膽固醇、LDL和HDL降低。
無
TW202424189A_112127730_SEQL.xml
Claims (97)
- 一種RNAi構建體,其包含有義股和反義股,其中該有義股包含與該反義股的序列充分互補以形成雙股體區的序列,並且 其中該反義股包含: (a) 與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸1300-1375或4900-5300內的至少15個連續核苷酸具有基本同一性的區域,使得在該反義股的具有基本同一性的區域與該等連續核苷酸之間有不超過2個誤配;或者 (b) 與來自表1或表2中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸具有基本同一性的區域,使得在該反義股的具有基本同一性的區域與該等連續核苷酸之間有不超過2個誤配。
- 如請求項1之RNAi構建體,其中該反義股包含 (a) 由SEQ ID NO: 1所示的FAM13A mRNA序列的核苷酸1300-1375或4900-5300內的至少15個連續核苷酸組成的區域,或 (b) 由來自表1或表2中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸組成的區域。
- 如請求項1之RNAi構建體,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸4950-5100內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項3之RNAi構建體,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸4975-5075內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項1之RNAi構建體,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸5225-5300內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項1至5中任一項之RNAi構建體,其中該有義股和反義股形成長度為約15至約30個鹼基對的雙股體區。
- 如請求項6之RNAi構建體,其中該雙股體區的長度為約17至約24個鹼基對。
- 如請求項6之RNAi構建體,其中該雙股體區的長度為約19至約21個鹼基對。
- 如請求項1至8中任一項之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股的長度各自獨立地為約19至約30個核苷酸。
- 如請求項9之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股的長度各自獨立地為約19至約23個核苷酸。
- 如請求項1至10中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體包含一或兩個平端。
- 如請求項1至10中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體包含具有1至4個未配對核苷酸的一或兩個核苷酸突出端。
- 如請求項12之RNAi構建體,其中該核苷酸突出端具有2個未配對的核苷酸。
- 如請求項12或13之RNAi構建體,其中該RNAi構建體在該有義股的3ʹ端、該反義股的3ʹ端、或者該有義股和該反義股兩者的3ʹ端包含核苷酸突出端。
- 如請求項1至14中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體包含一或多種經修飾的核苷酸。
- 如請求項15之RNAi構建體,其中該一或多種經修飾的核苷酸係2ʹ-修飾的核苷酸。
- 如請求項15之RNAi構建體,其中該一或多種經修飾的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、雙環核酸(BNA)、去氧核糖核苷酸、或其組合。
- 如請求項15至17中任一項之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。
- 如請求項18之RNAi構建體,其中該等經修飾的核苷酸係2ʹ-O-甲基修飾的核苷酸、2ʹ-氟修飾的核苷酸、或其組合。
- 如請求項1至19中任一項之RNAi構建體,其中該有義股在其3ʹ端、其5ʹ端、或其3ʹ和5ʹ端兩者處包含作為末端核苷酸的無鹼基核苷酸。
- 如請求項20之RNAi構建體,其中該無鹼基核苷酸藉由3ʹ-3ʹ核苷酸間鍵或5ʹ-5ʹ核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸。
- 如請求項1至21中任一項之RNAi構建體,其中該有義股、該反義股、或該有義股和該反義股兩者包含一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項22之RNAi構建體,其中該反義股在3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項22或23之RNAi構建體,其中該有義股在3ʹ端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項22或23之RNAi構建體,其中該有義股在3ʹ端的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項1至25中任一項之RNAi構建體,其中該反義股包含選自表1或表2中列出的反義序列的序列或由其組成。
- 如請求項1至26中任一項之RNAi構建體,其中該有義股包含選自表1或表2中列出的有義序列的序列或由其組成。
- 如請求項1至27中任一項之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 15和559、SEQ ID NO: 24和568、SEQ ID NO: 125和669、SEQ ID NO: 127和671、SEQ ID NO: 222和766、SEQ ID NO: 406和950、SEQ ID NO: 448和992、SEQ ID NO: 498和1042、SEQ ID NO: 502和1046、SEQ ID NO: 503和1047、SEQ ID NO: 504和1048、SEQ ID NO: 513和1057、SEQ ID NO: 526和1070、SEQ ID NO: 527和1071、SEQ ID NO: 533和1077、或SEQ ID NO: 534和1078,或由其組成。
- 如請求項28之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 24和568、SEQ ID NO: 406和950、SEQ ID NO: 498和1042、SEQ ID NO: 503和1047、SEQ ID NO: 504和1048、SEQ ID NO: 513和1057、SEQ ID NO: 527和1071、或SEQ ID NO: 534和1078,或由其組成。
- 如請求項28之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 498和1042,或由其組成。
- 如請求項1至27中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體係D-1557、D-1597、D-1612、D-1614、D-1623、D-1650、D-1667、D-1680、D-1682、D-1685、D-1686、D-1690、D-1697、D-1698、D-1699、D-1702、D-1704、D-1705、D-1709、D-1768、D-1846、D-1849、D-1853、D-1856、D-1858、D-1861、D-1862、D-1863、D-1864、D-1865、D-1866、D-1868、D-1869、D-1870、D-1871、D-1873、D-1875、D-1876、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1883、D-1884、D-1885、D-1886、D-1887、D-1888、D-1899、D-1896、D-1955、D-1970、D-1972、D-1975、D-1976、D-1977、D-1979、D-1980、D-1981、D-1982、D-1983、D-1984、D-1985、D-1987、D-1988、D-1989、D-1990、D-1991、D-1992、D-1993、D-1994、D-1995、D-1996、D-1997、D-1998、D-2000、D-2001、D-2002、D-2003、D-2004、D-2005、D-2012、D-2013、D-2014、D-2017、D-2021、D-2022、D-2023、D-2040、D-2044、D-2045、D-2047、D-2049、D-2051、D-2052、D-2053、D-2054、D-2058、D-2061、D-2075、D-2077、D-2079、D-2080、D-2081、D-2083、D-2090、D-2091或D-2093。
- 如請求項1至27中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體係D-1492、D-1614、D-1697、D-1702、D-1709、D-1716、D-1723、D-1730、D-1737、D-1856、D-1863、D-1865、D-1866、D-1869、D-1872、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1884、D-1887、D-1978、D-1987、D-1992、D-1997、D-2002、D-2008、D-2017、D-2049、D-2054或D-2090。
- 如請求項1至27中任一項之RNAi構建體,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 1800和2648(D-1709)、或SEQ ID NO: 2861和3115(D-1887),或由其組成。
- 如請求項1至33中任一項之RNAi構建體,其中該RNAi構建體進一步包含配體。
- 如請求項34之RNAi構建體,其中該配體包含膽固醇部分、維生素、類固醇、膽汁酸、葉酸部分、脂肪酸、碳水化合物、糖苷、或者抗體或其抗原結合片段。
- 如請求項34之RNAi構建體,其中該配體包含半乳糖、半乳胺糖、或N-乙醯基-半乳胺糖。
- 如請求項36之RNAi構建體,其中該配體包含多價半乳糖部分或多價N-乙醯基-半乳胺糖部分。
- 如請求項37之RNAi構建體,其中該多價半乳糖部分或多價N-乙醯基-半乳胺糖部分係三價或四價的。
- 如請求項35之RNAi構建體,其中該配體係長鏈脂肪酸。
- 如請求項39之RNAi構建體,其中該長鏈脂肪酸係月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、棕櫚酸(C16)、硬脂酸(C18)、二十碳五烯酸(C20)、二十二酸(C22)或二十二碳六烯酸(C24)。
- 如請求項40之RNAi構建體,其中該長鏈脂肪酸係二十二酸(C22)。
- 如請求項34至41中任一項之RNAi構建體,其中該配體視需要地藉由連接子共價附接至該有義股。
- 如請求項42之RNAi構建體,其中該配體共價附接至該有義股的5ʹ端。
- 如請求項34至43中任一項之RNAi構建體,其中該配體藉由磷酸二酯或硫代磷酸酯鍵附接。
- 一種藥物組成物,其包含如請求項1至44中任一項之RNAi構建體和藥學上可接受的載體或賦形劑。
- 一種用於在有需要的患者中減少FAM13A蛋白表現的方法,該方法包括向該患者投與如請求項1至44中任一項之RNAi構建體或如請求項45之藥物組成物。
- 如請求項46之方法,其中與未接受該RNAi構建體或藥物組成物的患者中的FAM13A表現水平相比,在投與該RNAi構建體或藥物組成物之後該患者中肝細胞中的FAM13A表現水平降低。
- 如請求項46或請求項47之方法,其中與未接受該RNAi構建體或藥物組成物的患者中的FAM13A表現水平相比,在投與該RNAi構建體或藥物組成物之後該患者中脂肪細胞中的FAM13A表現水平降低。
- 如請求項46至48中任一項之方法,其中該患者被診斷患有肥胖、腹部肥胖、NASH、肝脂肪變性、胰島素抗性、2型糖尿病、高三酸甘油脂血症、或高膽固醇血症,或有患該等疾病的風險。
- 一種用於減輕患者體重或減少脂肪量的方法,該方法包括向該患者投與如請求項1至44中任一項之RNAi構建體或如請求項45之藥物組成物。
- 如請求項46至50中任一項之方法,其中該患者具有高腰臀比。
- 如請求項50之方法,其中該腰臀比大於1.0。
- 如請求項50或51之方法,其中該患者被診斷患有腹部肥胖。
- 如請求項46至53中任一項之方法,其中該RNAi構建體或藥物組成物經由腸胃外投與途徑投與至該患者。
- 如請求項54之方法,其中該腸胃外投與途徑係靜脈內或皮下。
- 如請求項1至44中任一項之RNAi構建體,用於在有需要的患者中治療、預防肥胖、腹部肥胖、NASH、肝脂肪變性、胰島素抗性、2型糖尿病、高三酸甘油脂血症、或高膽固醇血症,或降低患該等疾病的風險。
- 一種如請求項1至44中任一項之RNAi構建體在製備藥物中之用途,該藥物用於在有需要的患者中治療、預防肥胖、腹部肥胖、NASH、肝脂肪變性、胰島素抗性、2型糖尿病、高三酸甘油脂血症、或高膽固醇血症,或降低患該等疾病的風險。
- 一種藉由投與RNAi構建體減輕體重或減少脂肪量的方法,該RNAi構建體包含有義股、反義股、和靶向向肝細胞的遞送的配體,其中該反義股具有與FAM13 mRNA序列互補的序列。
- 如請求項58之方法,其中該FAM13A mRNA序列係人mRNA序列。
- 如請求項58之方法,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸1300-1375或4900-5300內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項58之方法,其中該反義股包含含有與 FAM13AmRNA序列基本上互補的序列的區域,並且其中所述區域包含來自表1或表2中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸。
- 如請求項60之方法,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸4950-5100內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項62之方法,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸4975-5075內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項60之方法,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸5225-5300內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項58至64中任一項之方法,其中該有義股包含與該反義股的序列充分互補以形成長度為約15至約30個鹼基對的雙股體區的序列。
- 如請求項65之方法,其中該雙股體區的長度為約17至約24個鹼基對。
- 如請求項66之方法,其中該雙股體區的長度為約19至約21個鹼基對。
- 如請求項58至67中任一項之方法,其中該有義股和該反義股的長度各自獨立地為約19至約30個核苷酸。
- 如請求項68之方法,其中該有義股和該反義股的長度各自獨立地為約19至約23個核苷酸。
- 如請求項58至69中任一項之方法,其中該RNAi構建體包含一或兩個平端。
- 如請求項58至69中任一項之方法,其中該RNAi構建體包含具有1至4個未配對核苷酸的一或兩個核苷酸突出端。
- 如請求項71之方法,其中該核苷酸突出端具有2個未配對的核苷酸。
- 如請求項71或72之方法,其中該RNAi構建體在該有義股的3ʹ端、該反義股的3ʹ端、或者該有義股和該反義股兩者的3ʹ端包含核苷酸突出端。
- 如請求項58至73中任一項之方法,其中該RNAi構建體包含一或多種經修飾的核苷酸。
- 如請求項74之方法,其中該一或多種經修飾的核苷酸係2ʹ-修飾的核苷酸。
- 如請求項74之方法,其中該一或多種經修飾的核苷酸係2'-氟修飾的核苷酸、2'-O-甲基修飾的核苷酸、2'-O-甲氧基乙基修飾的核苷酸、2'-O-烷基修飾的核苷酸、2'-O-烯丙基修飾的核苷酸、雙環核酸(BNA)、去氧核糖核苷酸、或其組合。
- 如請求項74至76中任一項之方法,其中該有義股和該反義股中的所有核苷酸均為經修飾的核苷酸。
- 如請求項77之方法,其中該等經修飾的核苷酸係2ʹ-O-甲基修飾的核苷酸、2ʹ-氟修飾的核苷酸、或其組合。
- 如請求項58至78中任一項之方法,其中該有義股在其3ʹ端、其5ʹ端、或其3ʹ和5ʹ端兩者處包含作為末端核苷酸的無鹼基核苷酸。
- 如請求項79之方法,其中該無鹼基核苷酸藉由3ʹ-3ʹ核苷酸間鍵或ʹ-5ʹ核苷酸間鍵連接至相鄰核苷酸。
- 如請求項58至80中任一項之方法,其中該有義股、該反義股、或該有義股和該反義股兩者包含一或多個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項81之方法,其中該反義股在3'端和5'端兩者的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項81或82之方法,其中該有義股在3ʹ端的末端核苷酸之間包含單個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項81或82之方法,其中該有義股在3ʹ端的末端核苷酸之間包含兩個連續的硫代磷酸酯核苷酸間鍵。
- 如請求項58至84中任一項之方法,其中該反義股包含選自表1或表2中列出的反義序列的序列或由其組成。
- 如請求項58至85中任一項之方法,其中該有義股包含選自表1或表2中列出的有義序列的序列或由其組成。
- 如請求項58至86中任一項之方法,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 15和559、SEQ ID NO: 24和568、SEQ ID NO: 125和669、SEQ ID NO: 127和671、SEQ ID NO: 222和766、SEQ ID NO: 406和950、SEQ ID NO: 448和992、SEQ ID NO: 498和1042、SEQ ID NO: 502和1046、SEQ ID NO: 503和1047、SEQ ID NO: 504和1048、SEQ ID NO: 513和1057、SEQ ID NO: 526和1070、SEQ ID NO: 527和1071、SEQ ID NO: 533和1077、或SEQ ID NO: 534和1078,或由其組成。
- 如請求項87之方法,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 24和568、SEQ ID NO: 406和950、SEQ ID NO: 498和1042、SEQ ID NO: 503和1047、SEQ ID NO: 504和1048、SEQ ID NO: 513和1057、SEQ ID NO: 527和1071、或SEQ ID NO: 534和1078,或由其組成。
- 如請求項87之方法,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 498和1042,或由其組成。
- 如請求項58至86中任一項之方法,其中該RNAi構建體係D-1557、D-1597、D-1612、D-1614、D-1623、D-1650、D-1667、D-1680、D-1682、D-1685、D-1686、D-1690、D-1697、D-1698、D-1699、D-1702、D-1704、D-1705、D-1709、D-1768、D-1846、D-1849、D-1853、D-1856、D-1858、D-1861、D-1862、D-1863、D-1864、D-1865、D-1866、D-1868、D-1869、D-1870、D-1871、D-1873、D-1875、D-1876、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1883、D-1884、D-1885、D-1886、D-1887、D-1888、D-1899、D-1896、D-1955、D-1970、D-1972、D-1975、D-1976、D-1977、D-1979、D-1980、D-1981、D-1982、D-1983、D-1984、D-1985、D-1987、D-1988、D-1989、D-1990、D-1991、D-1992、D-1993、D-1994、D-1995、D-1996、D-1997、D-1998、D-2000、D-2001、D-2002、D-2003、D-2004、D-2005、D-2012、D-2013、D-2014、D-2017、D-2021、D-2022、D-2023、D-2040、D-2044、D-2045、D-2047、D-2049、D-2051、D-2052、D-2053、D-2054、D-2058、D-2061、D-2075、D-2077、D-2079、D-2080、D-2081、D-2083、D-2090、D-2091或D-2093。
- 如請求項58至86中任一項之方法,其中該RNAi構建體係D-1492、D-1614、D-1697、D-1702、D-1709、D-1716、D-1723、D-1730、D-1737、D-1856、D-1863、D-1865、D-1866、D-1869、D-1872、D-1877、D-1878、D-1879、D-1880、D-1881、D-1884、D-1887、D-1978、D-1987、D-1992、D-1997、D-2002、D-2008、D-2017、D-2049、D-2054或D-2090。
- 如請求項58至86中任一項之方法,其中該有義股和該反義股分別包含SEQ ID NO: 1800和2648(D-1709)、或SEQ ID NO: 2861和3115(D-1887),或由其組成。
- 一種RNAi構建體,其包含有義股和反義股,其中該反義股包含含有與靶多核苷酸內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列的區域,其中該RNAi構建體與脂肪酸分子綴合,並且其中該脂肪酸藉由硫代磷酸酯鍵附接。
- 如請求項93之RNAi構建體,其中該脂肪酸係C22。
- 如請求項93或請求項94之RNAi構建體,其中該反義股包含區域,該區域包含與SEQ ID NO: 1所示的 FAM13AmRNA序列的核苷酸1300-1375或4900-5300內的至少15個連續核苷酸基本上互補的序列。
- 如請求項93或94之RNAi構建體,其中該反義股包含含有與 FAM13AmRNA序列基本上互補的序列的區域,並且其中所述區域包含來自表1或表2中列出的反義序列的至少15個連續核苷酸。
- 一種用於減輕個體體重或減少個體脂肪量的非治療性或美容性方法,該方法包括向該個體應用或投與如請求項1至44中任一項之RNAi構建體。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US63/391,860 | 2022-07-25 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202424189A true TW202424189A (zh) | 2024-06-16 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101857707B1 (ko) | 아포지질단백질 c-iii 발현을 조절하는 조성물 및 방법 | |
JP7472180B2 (ja) | ASGR1発現を阻害するためのRNAiコンストラクトおよびその使用方法 | |
US20230078200A1 (en) | RNAi CONSTRUCTS AND METHODS FOR INHIBITING LPA EXPRESSION | |
JP2022511866A (ja) | 化学修飾されたRNAiコンストラクト及びその使用 | |
US20220047621A1 (en) | RNAi CONSTRUCTS AND METHODS FOR INHIBITING MARC1 EXPRESSION | |
CA3184345A1 (en) | Rnai constructs for inhibiting hsd17b13 expression and methods of use thereof | |
TW202039843A (zh) | 用於抑制pnpla3表現之rnai構建體及其使用方法 | |
CA3141902A1 (en) | Rnai constructs for inhibiting scap expression and methods of use thereof | |
JP2023546103A (ja) | Angptl3を阻害するための新規のrna組成物および方法 | |
JP2023545502A (ja) | リポタンパク質(a)を阻害するためのrna組成物および方法 | |
JP2022513111A (ja) | Angptl8を阻害するための新規のrna組成物および方法 | |
TW202424189A (zh) | 用於抑制FAM13A表現的RNAi構建體和方法 | |
US20240084301A1 (en) | Rnai constructs and methods for inhibiting fam13a expression | |
TW202345869A (zh) | 用於抑制pnpla3表現的rnai 構建體及其使用方法 | |
WO2024130142A2 (en) | Rnai constructs for inhibiting ttr expression and methods of use thereof | |
TW202413642A (zh) | 用於抑制scap表現的rnai構建體及其使用方法 | |
AU2022359289A1 (en) | Compositions and methods for enhancing gene silencing activity of oligonucleotide compounds | |
KR20240090496A (ko) | Gpam 발현을 억제하기 위한 rnai 작제물 및 이의 사용 방법 |