TW202412840A - 一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物 - Google Patents
一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202412840A TW202412840A TW112135244A TW112135244A TW202412840A TW 202412840 A TW202412840 A TW 202412840A TW 112135244 A TW112135244 A TW 112135244A TW 112135244 A TW112135244 A TW 112135244A TW 202412840 A TW202412840 A TW 202412840A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- drug composition
- aqueous drug
- concentration
- polysorbate
- fusion protein
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 65
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 384
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 39
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 352
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 350
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 183
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 183
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 183
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims description 183
- KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)C(N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 181
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 claims description 180
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 180
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 178
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 178
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 111
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 111
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 110
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 97
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 91
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 91
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 91
- 108010081667 aflibercept Proteins 0.000 claims description 44
- 229960002833 aflibercept Drugs 0.000 claims description 42
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 25
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 20
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims description 20
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 14
- 208000022873 Ocular disease Diseases 0.000 claims description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 208000004644 retinal vein occlusion Diseases 0.000 claims description 11
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 10
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 9
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 9
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 9
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 9
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 208000001344 Macular Edema Diseases 0.000 claims description 5
- 206010025415 Macular oedema Diseases 0.000 claims description 5
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims description 5
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 claims description 5
- 201000010230 macular retinal edema Diseases 0.000 claims description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 4
- 206010012688 Diabetic retinal oedema Diseases 0.000 claims description 4
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 claims description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 claims description 4
- 208000007135 Retinal Neovascularization Diseases 0.000 claims description 4
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 claims description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 4
- 201000011190 diabetic macular edema Diseases 0.000 claims description 4
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 4
- 101000851018 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000851007 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 2 Proteins 0.000 claims description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000002158 Proliferative Vitreoretinopathy Diseases 0.000 claims description 3
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 claims description 3
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 201000005667 central retinal vein occlusion Diseases 0.000 claims description 3
- 208000021971 neovascular inflammatory vitreoretinopathy Diseases 0.000 claims description 3
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 3
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 claims description 3
- 230000006785 proliferative vitreoretinopathy Effects 0.000 claims description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 3
- 208000005590 Choroidal Neovascularization Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060823 Choroidal neovascularisation Diseases 0.000 claims description 2
- 206010055665 Corneal neovascularisation Diseases 0.000 claims description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010065630 Iris neovascularisation Diseases 0.000 claims description 2
- 108700036276 KH902 fusion Proteins 0.000 claims description 2
- 241001111421 Pannus Species 0.000 claims description 2
- 201000002154 Pterygium Diseases 0.000 claims description 2
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000208 Wet Macular Degeneration Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007917 background diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 229950005748 conbercept Drugs 0.000 claims description 2
- 201000000159 corneal neovascularization Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims description 2
- 201000003142 neovascular glaucoma Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims description 2
- 201000007914 proliferative diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 claims description 2
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 claims 6
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 claims 6
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 claims 6
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 claims 6
- 102000016844 Immunoglobulin-like domains Human genes 0.000 claims 2
- 108050006430 Immunoglobulin-like domains Proteins 0.000 claims 2
- 201000006165 Kuhnt-Junius degeneration Diseases 0.000 claims 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 15
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 abstract 1
- 239000013628 high molecular weight specie Substances 0.000 description 106
- 239000013627 low molecular weight specie Substances 0.000 description 104
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 56
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 43
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 41
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 39
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 39
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 29
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 230000008859 change Effects 0.000 description 14
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 13
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 13
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 8
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000019624 protein content Nutrition 0.000 description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 4
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229940023490 ophthalmic product Drugs 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 2
- 239000003732 agents acting on the eye Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000000533 capillary isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 2
- 229960005337 lysine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101150048336 Flt1 gene Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101000827703 Homo sapiens Polyphosphoinositide phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 101150088608 Kdr gene Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102100023591 Polyphosphoinositide phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101100233916 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) KAR5 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000016549 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Human genes 0.000 description 1
- 239000012615 aggregate Substances 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 229960000106 biosimilars Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229940051306 eylea Drugs 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940093181 glucose injection Drugs 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 1
- 201000005111 ocular hyperemia Diseases 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000013060 ultrafiltration and diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 210000004127 vitreous body Anatomy 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本發明涉及一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物，包含VEGF結合分子、穩定劑和表面活性劑等，組合物的pH為5.0-7.0。藥物組合物沒有額外添加緩衝劑，具有很高的穩定性，方便儲存，應用前景廣闊。
Description
本發明要求於2022年09月16日提交中國專利局、申請號為CN202211134160.6、發明名稱「一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物」的中國專利申請，2022年09月20日提交中國專利局、申請號為CN202211141413.2、發明名稱「一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物」的中國專利申請，2023年09月07日提交中國專利局、申請號為CN202311153498.0、發明名稱「一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物」的中國專利申請的優先權，其全部內容經由引用結合在本發明中。
本發明涉及藥物組合物技術領域，具體涉及一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物。
血管內皮生長因子(VEGF)是血管生成和新生血管形成的已知調節劑，並且已被證明是與腫瘤和眼部疾病或障礙形成的關鍵因子。包括VEGF受體融合蛋白或VEGF抗體在內的許多VEGF結合分子已被批准用於人類和其他哺乳動物中的治療性用途。例如，EYLEA
®(Regeneron Pharmaceuticals，Inc.)，其是一種抗VEGF藥物，經由與VEGF緊密結合，降低血管通透性，進一步抑制新生血管的生成。美國食品藥品監督管理局(Food and drug administration，FDA)和歐洲藥物管理局(European medicines agency，EMA)從2014年8月以來相繼批准了其經由玻璃體注射治療視網膜靜脈阻塞繼發黃斑水腫、濕性年齡相關性黃斑變性和糖尿病性黃斑水腫等適應症。
但是，現有技術還存在著許多不足和需要改進的地方。例如，藥物配製品中治療性抗體的濃度根據施用途徑等方式的不同存在廣泛地變化。當受注射體積限制時，通常需要開發高濃度的抗體配製品。例如，對於玻璃體內注射或皮下給藥經常需要開發高濃度的配製品。同時，蛋白質藥物的配製本身就可能給製藥科學家帶來許多挑戰。因此，必須找到一種穩定蛋白質藥物並使其對由蛋白水解，變性等導致的降解、聚集、錯誤折疊等具有抗性的製劑。特別是對於在實質性方面與已知蛋白質不同的工程化蛋白質，找到合適的穩定性條件可能具有挑戰性。還令人希望的是具有對患者方便的形式的蛋白質藥物。所希望的特性包括環境溫度和冷藏溫度下的穩定性、長期儲存的適用性、合適的給藥時間和給藥劑量，以及最小化給予後的不適。
雖然現有技術中已經發現了適合於玻璃體內施用的製劑，但是目前仍需要穩定的適合眼科給藥的高濃度VEGF受體融合蛋白的液體製劑。含有高濃度VEGF受體融合蛋白的製劑可以減少給藥體積，縮短眼部注射時間，增加給藥劑量，延長給藥間隔，降低給藥頻率，並提高製造和儲存效率。同時，研究還發現很多常用的用於配製藥物蛋白的緩衝劑，尤其對於眼科用藥，具有一定的限制和風險，有可能影響藥物的安全性。
緩衝劑，例如：乙酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、組胺酸（咪唑）、磷酸鹽和Tris，其已經被發現在用於配製藥物蛋白時具有不希望的限制和缺點，具體而言，製劑中額外的組分，其使配製過程變得複雜，增加了有害組分、影響藥物整體穩定性、貯存期限，同時增加最終用戶可接受性的風險。本領域普遍知曉現有技術中雖存在無緩衝鹽的體系，但針對具體藥物獲得有效的無緩衝鹽體系的藥物組合物是一項挑戰性的工作，結果往往是難以預料，高濃度自緩衝體系的技術難度則更高，同時，在工業上，藥物組合物穩定性的提高是很有挑戰的，從製劑角度上，高蛋白濃度導致更高的蛋白聚集率，因為不同的組成成分更近距離的接觸會導致分子間的吸引和自我聚集事件的發生。由於體積排阻和道南平衡效應，獲得符合UF/DF步驟要求的pH和輔料濃度也是一項挑戰，更高的蛋白濃度加劇了這種挑戰，因此，有必要繼續優化緩衝體系，開發穩定的適合眼科給藥的高濃度VEGF受體融合蛋白的液體製劑。
本發明的目的之一是提供改善的具有高濃度的、無需額外的緩衝劑的VEGF結合分子高濃度藥物組合物，即，本發明提供了一種無緩衝鹽的體系，高濃度的蛋白自緩衝藥物組合物，發明人經由多年的探索和試驗，最終製備獲得了一種VEGF結合分子的高濃度自緩衝水性藥物組合物。此外，本發明還令人驚訝的發現高濃度自緩衝體系藥物組合物還具有很高的穩定性，應用前景廣闊。
本發明公開了一種自緩衝高濃度的VEGF結合分子水性藥物組合物。高濃度體系本身容易發生聚集事件使得製劑不穩定，而自緩衝高濃度體系更是如此，一般而言，自緩衝高濃度體系在室溫條件下難於儲存，聚集事件更是極易發生。本發明公開的阿柏西普藥物組合物是穩定的，且具有對於生產、儲存和分配藥物而言足夠的貯存期限。例如，本發明公開的自緩衝高濃度阿柏西普藥物組合物在室溫貯存條件（例如，25℃）下具有至少1個月、3個月或6個月的儲存期限。
在一些實施方案中，本發明公開了一種藥物組合物，當在加速條件（例如，25℃±2℃）下儲存包裝的樣品時，1個月後在組合物中SEC-HPLC純度有≥95％起始量的阿柏西普保留不變。在其它實施方案中，當在高溫條件（40℃±2℃）下儲存包裝的樣品時，本發明公開的自緩衝高濃度阿柏西普藥物組合物相對於有緩衝體系的高濃度阿柏西普藥物組合物均表現出了更好的效果。
在一些實施方案中，本發明公開了一種藥物組合物，對不同粒徑的不溶性微粒進行檢測（≥2μm、≥5μm、≥10μm和/或≥25μm），本發明公開的自緩衝高濃度阿柏西普藥物組合物相對於有緩衝體系的高濃度阿柏西普藥物組合物均表現出了更好的效果。
在一些實施方案中，本發明公開了一種自緩衝高濃度的VEGF結合分子水性或凍乾藥物組合物，其包含：①VEGF結合分子，所述VEGF結合分子選自VEGF受體融合蛋白或抗VEGF抗體或其抗原結合片段，所述VEGF結合分子的濃度為至少約100mg/mL；②穩定劑，所述穩定劑選自蔗糖、海藻糖、脯胺酸、脯胺酸的藥學上可接受的鹽、賴胺酸、賴胺酸的藥學上可接受的鹽或山梨醇中的至少一種；③表面活性劑，所述表面活性劑選自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20或泊洛沙姆中的至少一種；其中，水性藥物組合物不包含緩衝劑且具有約5.0-7.0的pH。
在一些實施方案中，水性藥物組合物不包含緩衝劑，所述緩衝劑指的是組胺酸緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑、檸檬酸緩衝劑、乙酸緩衝劑、碳酸緩衝劑、丁二酸緩衝劑、酒石酸緩衝劑和/或順丁烯二酸緩衝劑。
在一些實施方案中，自緩衝高濃度的VEGF結合分子水性或凍乾藥物組合物還包含：④L-精胺酸、L-精胺酸的藥學上可接受的鹽或氯化鈉中的至少一種。
在一些實施方案中，所述L-精胺酸或所述L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為約0-100mM，或所述氯化鈉的含量為約0-40mM。在優選的實施方案中，L-精胺酸或L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為約20-100mM，或氯化鈉的含量為約40mM。在更優選的實施方案中，L-精胺酸或L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為約20mM、約40mM、約50mM、約60mM、約70mM、約80mM或約100mM。
在一些實施方案中，水性藥物組合物中VEGF結合分子的濃度至少為約100mg/mL、至少為約114.3mg/mL、至少為約125mg/mL或至少為約180mg/mL。
在一些實施方案中，水性藥物組合物包含約100-180mg/mL的VEGF結合分子。在優選的實施方案中，水性藥物組合物包含約100-125mg/mL的VEGF結合分子。
在一些實施方案中，水性藥物組合物中穩定劑的濃度為約5w/v%-10w/v%。在一些實施方案中，穩定劑選自約5w/v%-9w/v%的蔗糖或者約5.5w/v%-10w/v%的海藻糖，在優選的實施方案中，蔗糖的濃度為約5w/v%、約6w/v%、約7w/%、約8w/v%或約9w/v%，或海藻糖的濃度為約5.5w/v%、約6.6w/v%、約7.7w/v%、約8.0w/v%或約10w/v%。
在一些實施方案中，表面活性劑選自約0.01w/v%-0.05w/v%的聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80或泊洛沙姆中的至少一種。在優選的實施方案中，表面活性劑為聚山梨醇酯20，所述聚山梨醇酯20的含量為約0.01w/v%、約0.03w/v%、約0.05w/v%、0.07w/v%、約0.1w/v%或約0.2w/v%。
在一些實施方案中，水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；優選的，所述pH為約5.5、約5.8、約6.0、約6.1、約6.2或約6.4。
在一些實施方案中，水性藥物組合物包含濃度為約100-180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%-9w/v%的蔗糖或約5.5w/v%-10w/v%的海藻糖、約0.01w/v%-0.2w/v%的聚山梨酯20、約0-100mM的L-鹽酸精胺酸或約0-40mM的氯化鈉；其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.0-7.0。
在一些實施方案中，水性藥物組合物包含濃度為約100-180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%-7w/v%的蔗糖或約5.5w/v%-7.7w/v%的海藻糖、約0.01w/v%-0.2w/v%的聚山梨酯20、約20-100mM的L-鹽酸精胺酸或約0-40mM的氯化鈉；其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4。
在一些實施方案中，水性藥物組合物選自如下任一種：
水性藥物組合物A包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物B包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物C包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物D包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物E包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物F包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物G包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物H包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物I包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物J包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物K包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物L包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物M包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物N包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物O包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物P包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物Q包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物R包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物S包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物T包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物U包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物V包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物W包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物X包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物Y包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.01w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物Z包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.05w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZA包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZB包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZC包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZD包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZE包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZF包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZG包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZH包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZI包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZJ包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZK包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZL包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZM包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZN包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZO包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZP包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZQ包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZR包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZS包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZT包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZU包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZV包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZW包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZX包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZY包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.01w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物ZZ包含：濃度為約125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.05w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AA包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AB包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AC包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AD包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AE包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AF包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AG包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AH包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AI包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AJ包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AK包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AL包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AM包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AN包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AO包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AP包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AQ包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AR包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AS包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AT包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AU包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7w/v%的蔗糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AV包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5.5w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AW包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約6.6w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AX包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約7.7w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AY包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.01w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物AZ包含：濃度為約180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約5w/v%的蔗糖、約0.05w/v%的聚山梨酯20和約50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
水性藥物組合物BA包含：濃度為約114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、約8w/v%的海藻糖、約0.03w/v%的聚山梨酯20和約20mM的L-鹽酸精胺酸，其中，所述水性藥物組合物的pH為約5.5-6.4；
優選地，所述VEGF受體融合蛋白為阿柏西普。
在一些實施方案中，VEGF結合分子包含兩條多肽，每條多肽包含VEGFR1的免疫球蛋白樣(Ig)結構域2和VEGFR2的免疫球蛋白樣(Ig)結構域3。在優選的實施方案中，VEGF結合分子選自貝伐單抗、雷珠單抗、阿柏西普或康柏西普。在更優選的實施方案中，VEGF結合分子為阿柏西普。
在一些實施方案中，所述藥物組合物在2-8℃下是穩定的，穩定持續至少6個月、12個月或24個月；或所述藥物組合物在25℃±2℃下是穩定的，穩定持續至少1個月、3個月或6個月。
在一些實施方案中，本發明提供了一種凍乾製劑，其由根據本發明的水性藥物組合物經凍乾獲得，或者所述凍乾製劑經複溶以後獲得本發明的水性藥物組合物。
在一些實施方案中，本發明提供了一種遞送裝置，其包含本發明中的水性藥物組合物或複溶後的凍乾製劑。在一個優選實施方案中，遞送裝置為預填充的注射器。
在一些實施方案中，本發明提供了一種治療由VEGF介導的眼部疾病或障礙的方法，所述方法包括向受試者施用本發明公開的水性藥物組合物或遞送裝置。在一個優選實施方案中，所述施用的部位是玻璃體內。
在一些實施方案中，本發明提供了本發明的水性藥物組合物或遞送裝置在製備治療由VEGF介導的眼部疾病或障礙的藥物組合物中的用途，所述治療包括向受試者施用本發明的水性藥物組合物或遞送裝置。在一個優選實施方案中，所述施用的部位是玻璃體內。
在一些實施方案中，眼部疾病或障礙包括眼部新生血管性疾病或血管原性眼病。
在一些實施例中，眼部疾病或障礙包括新血管性(濕性)老年性黃斑變性(AMD)年齡相關性黃斑變性(濕性)、黃斑水腫、視網膜靜脈阻塞後的黃斑水腫、視網膜靜脈阻塞(RVO)、視網膜中央靜脈阻塞(CRVO)、視網膜分支靜脈阻塞(BRVO)、糖尿病性黃斑水腫(DME)、脈絡膜新生血管(CNV)、虹膜新生血管、新生血管性青光眼、青光眼的手術後纖維化、增生性玻璃體視網膜病變(PVR)、視盤新血管形成、角膜新生血管形成、視網膜新生血管形成、玻璃體新生血管形成、角膜翳、翼狀胬肉、血管性視網膜病、糖尿病性視網膜病變（DR）、非增殖性糖尿病性視網膜病和/或增殖性糖尿病性視網膜病。
在一些實施方案中，公開了一種向受試者遞送VEGF結合分子的方法，包括向所述受試者施用本發明的水性藥物組合物或遞送裝置的步驟。在一個優選實施方案中，所述施用的部位是玻璃體內。
本發明提供的藥物組合物不需要額外添加緩衝劑，具有很高的穩定性，方便儲存，應用前景廣闊。
術語「約」包括並描述了值或參數本身。例如，「約x」包括並描述了「x」本身。如本發明所使用的，當與測量值結合使用或用於修飾值、單位、常數或一系列值時，術語「約」除了包括該值或參數本身外，還指±1%-10%的變化。在一些實施例中，當與測量值結合使用或用於修飾值、單位、常數或一系列值時，術語「約」指±1%、±2%、±3%、±4%、±5%、±6%、±7%、±8%、±9%或±10%的變化。
術語「水性」藥物組合物是指包括水的藥物組合物。
術語「自緩衝」是指，排除傳統上用於在製劑中引入緩衝能力的組分，例如排除緩衝劑包括但不限於：組胺酸緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑、檸檬酸緩衝劑、乙酸緩衝劑、碳酸緩衝劑、丁二酸緩衝劑、酒石酸緩衝劑、順丁烯二酸緩衝劑或其混合物等等。除了存在於不含緩衝劑組分的製劑中的任何緩衝能力之外，已知蛋白質可為製劑提供緩衝能力。 因此，這些術語並不意味著配方不能具有任何緩衝能力。
術語「高濃度」製劑包含濃度為至少100mg/mL、101mg/mL、102mg/mL、103mg/mL、104mg/mL、105mg/mL、106mg/mL、107mg/mL、108mg/mL、109mg/mL、110mg/mL、111mg/mL、112mg/mL、113mg/mL、 114mg/mL、114.1mg/mL、114.2mg/mL、114.3mg/mL、114.4mg/mL、114.5mg/mL、114.6mg/mL，114.7mg/mL，114.8mg/mL、114.9mg/mL、115mg/mL、116mg/mL、117mg/mL、118mg/mL、119mg/mL、120mg/mL、121mg/mL、122mg/mL、123mg/mL、124mg/mL、125mg/mL、126mg/mL、127mg/mL、128mg/mL、129mg/mL、130mg/mL、131mg/mL、132mg/mL、133mg/mL、134mg/mL、135mg/mL、136mg/mL、137mg/mL、138mg/mL、139mg/mL、140mg/mL、141mg/mL、142mg/mL、143mg/mL、144mg/mL、145mg/mL、146mg/mL、147mg/mL、148mg/mL、149mg/mL、150mg/mL、151mg/mL、152mg/mL、153mg/mL、154mg/mL、155mg/mL、156mg/mL、157mg/mL、158mg/mL、159mg/mL、160mg/mL、161mg/mL、162mg/mL、163mg/mL、164mg/mL、165mg/mL、166mg/mL、167mg/mL、168mg/mL、169mg/mL、170mg/mL、171mg/mL、172mg/mL、173mg/mL、174mg/mL、175mg/mL、176mg/mL、177mg/mL、178mg/mL、179mg/mL、180mg/mL的VEGF受體融合蛋白濃度。
術語「VEGF結合分子」是指VEGF受體融合蛋白、抗VEGF抗體或抗原結合片段或VEGF特異性結合的抗體或片段。例示性的VEGF受體融合蛋白包括阿柏西普(Regeneron Pharmaceuticals，Inc.)，參見國際專利申請公開WO2005/121176或WO2007/112675。
術語「VEGF受體融合蛋白」是指包含與另一個多肽融合的一個或多個VEGF受體或其結構域的分子，其干擾VEGF和天然VEGF受體之間的相互作用，例如，其中兩個這樣的融合多肽結合，從而形成同型二聚體或其他多聚體。這樣的VEGF受體融合蛋白可以被稱為「VEGF-Trap」或「VEGF Trap」。在本發明內容範圍內的落入該定義的VEGF受體融合蛋白包括嵌合多肽，其包含VEGF受體的兩個或更多個免疫球蛋白(Ig)樣結構域，例如VEGFR1(也稱為Flt1)和/或VEGFR2(也稱為Flk1或KDR)，並且也可包含多聚結構域(例如Fc結構域)。
術語「阿柏西普」包括其生物相似形式，阿柏西普的生物相似形式通常是指包含相同胺基酸序列的產品。示例中阿柏西普的胺基酸序列和核酸序列已在文獻中有所記載，參見WO2000075319A1中所示。
術語「治療」在本發明中使用時表示本發明所描述的治療手段。所述「治療」的方法採用向需要此類治療的受試者(例如，患有VEGF介導的眼部障礙的受試者或最終可能獲得此類障礙的受試者)施用本發明的抗體，以預防、治癒、延遲障礙或復發的障礙，減輕障礙或復發的障礙的嚴重性，或改善障礙或復發的障礙的一種或多種症狀，或者為了延長受試者的存活使其超過在沒有這樣的治療下所預期的存活期。
術語「受試者」或「患者」是指人和非人哺乳動物，包括但不限於靈長類動物、兔、豬、馬、狗、貓、綿羊和牛。
蛋白質含量測定：採用Lunatic微量光譜分析儀對蛋白質含量進行測定。以純化水進行空白扣除，以330nm的光散射校正280nm的紫外光吸收，依照公式1計算蛋白質濃度，其中消光係數ε為1.5(L/g·cm
-1)。
分子排阻層析（SEC）：使用分子大小排阻層析來量化聚合體、單體和片段。這種測定利用TSKgel G3000 SWXL 7.8x300mm 5μm 250Å柱，並在Waters e2695-2489 HPLC系統上運行。流動相為磷酸鉀鹽緩衝劑。用流動相稀釋樣品到1mg/mL，注射體積為25μL。以0.5mL/min的流速將蛋白質等度洗脫30min，於215nm檢測洗脫物的吸光度。利用Empower 3軟體進行積分處理。
還原毛細管電泳（rCE-SDS）：經由還原毛細管電泳（rCE-SDS）測定%（主峰1+主峰2）純度，將這一測定在SCIEX PA800 plus毛細管電泳系統上以50μm I.D.非塗層石英毛細管進行，毛細管有效分離長度20cm，全長30.2cm分離，PDA220nm 帶寬10nm檢測，利用32Karat軟體進行積分處理。
非還原SDS-PAGE（nrSDS-PAGE）：經由非還原SDS-PAGE電泳法測定%主峰純度，這種測定使用聚丙烯醯胺凝膠電泳進行，分離膠濃度為8%，濃縮膠濃度為4.5%，以恒流10mA/塊膠條件下進行電泳檢測，考馬斯亮藍R250染色、脫色液脫色後採用凝膠成像系統進行掃描成像，並分析其目標帶純度。
成像毛細管等電聚焦電泳（iCIEF）：經由成像毛細管等電聚焦電泳（iCIEF）法測定電荷異質性及鑒別實驗，這種測定在成像毛細管電泳儀Maurice C系統上進行，毛細管有效分離長度5cm，聚焦時間6min，聚焦程序1.5kV-1min，3kV-5min檢測，利用Empower 3軟體進行積分處理。
MFI微流成像顆粒分析：經由MFI微流成像顆粒分析系統測定微粒數，將這一測定在MFI顆粒分析系統MFI 5200中進行，待測樣品體積為1mL，總有效體積為0.7mL，分析體積0.51mL，利用MVSS分析軟體進行分析。
m-VROC型黏度計測定黏度：經由Rheosense的VROC
®技術構建的e-VROC™是同時測量拉伸黏度和剪切黏度的出色工具。黏度計使用MEMS壓力傳感器測量收縮上游和下游的壓力，並記錄流量變化。流體經由收縮/膨脹經歷幾乎恒定的拉伸，從而能夠計算表觀拉伸黏度。
冰點下降法測定滲透壓莫耳濃度：採用測量溶液的冰點下降來間接測定其滲透壓莫耳濃度。在理想的稀溶液中，冰點下降符合ΔTf=Kf·m的關係，式中，ΔTf為冰點下降，Kf為冰點下降常數(當水為溶劑時為1.86)，m為重量莫耳濃度。而滲透壓符合Po=ko・m的關係，式中，Po為滲透壓，ko滲透壓常數，m為溶液的重量莫耳濃度。由於兩式中的濃度等同，故可以用冰點下降法測定溶液的滲透壓莫耳濃度。
ELISA測定結合活性：經由ELISA方法測定重組人血管內皮生長因子受體-抗體融合蛋白注射液與VEGF165的結合活性。首先將人VEGF165蛋白包被在96孔板上，然後加入梯度稀釋的本品，再依次加入二抗、顯色液、終止液，讀取吸光值，計算本品與人VEGF165抗原的結合能力。試驗數據採用Soft Max Pro或其他同類軟體進行四參數擬合分析，並按下式自動分析結果：參考品（自製）濃度的對數值為X軸，吸光值為Y軸，軟體將給出供試品和參考品的半數有效濃度（EC
50），並繪製「S」型曲線。
| 結合活性（%） | = | 參考品EC 50（μg/mL） | ×100% |
| 供試品EC 50（μg/mL） |
本發明所述的VEGF結合分子的濃度、穩定劑的濃度、表面活性劑的濃度、L-精胺酸的濃度、L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的濃度、氯化鈉的濃度分別是指VEGF結合分子、穩定劑、表面活性劑、L-精胺酸的濃度、L-精胺酸的藥學上可接受的鹽、氯化鈉在水性藥物組合物中的濃度。
下述實施例中的實驗條件分別為：室溫（25±2℃）振盪一週（25℃ 1W）、凍融循環3次（-40℃凍16h、25℃ 融8h為一次循環）、2-8℃放置1個月（2-8℃ 1M）、2-8℃放置6個月（2-8℃ 6M）、25℃±2℃放置1個月（25℃ 1M）、40℃±2℃放置一週（40℃ 1W）、40℃±2℃放置二週（40℃ 2W）或40℃±2℃放置1個月（40℃ 1M）。
實施例1：自緩衝體系製劑樣品製備
測試了具有約40mg/mL、約114.3mg/mL和約180mg/mL VEGF受體融合蛋白(阿柏西普，又稱阿帕西普，aflibercept)的四種不同製劑的長期效力、物理穩定性和電荷異質體的形成。四種製劑的組分含量如表1.1所示。為配製製劑溶液，使用預期的輔料溶液進行緩衝劑交換，並經由超濾濃縮至所需抗體濃度。完成超濾濃縮後，將要添加的輔料以母液形式添加至抗體溶液中，將所有配製劑經由0.22μm低蛋白質結合濾器無菌過濾，並在無菌條件下灌裝至無菌2mL管制瓶中，使用覆膜膠塞和鋁塑組合蓋密封。經由SEC-HPLC、nr-SDS-PAGE、rCE-SDS，以確定高分子量種類(HMWS、LMWS)和主要峰(Monomer/MAIN)的存在(%)，評估每種製劑在不同條件的儲存過程中阿柏西普的穩定性。
以下是不同的製劑及其穩定性結果：
表1.1含有阿柏西普的製劑組成
注：「-」表示未添加。
表1.2製劑A1的穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表1.3製劑A2的穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表1.4製劑A3的穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表1.5製劑A4穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表1.6製劑A2-A4黏度和滲透壓數據
| 試驗例 | 阿柏西普（mg/mL） | 組胺酸（mM） | 磷酸鈉（mM） | 蔗糖 （w/v%） | 聚山梨酯20（w/v%） | 氯化鈉（mM） | L-鹽酸精胺酸（mM） | pH |
| A1 | 40 | - | 10 | 5 | 0.03 | 40 | - | 6.2 |
| A2 | 114.3 | 10 | - | 5 | 0.03 | - | 50 | 5.8 |
| A3 | 114.3 | - | - | 6 | 0.03 | - | 50 | 5.8 |
| A4 | 180 | - | - | 6 | 0.03 | - | 50 | 5.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 0.89 | 99.1 | / | 1.9 | 96.9 | 1.2 | / | 97.9 | 2.1 |
| 振盪1W | 1 | 99 | / | 1.3 | 96.8 | 1.8 | / | 97.7 | 2.3 |
| 凍融3次 | 1.1 | 98.9 | / | 1.4 | 96.8 | 1.7 | / | 97.8 | 2.2 |
| 2-8℃ 1M | 1.2 | 98.8 | / | 2.9 | 95.6 | 1.2 | 0.09 | 97.9 | 2.1 |
| 2-8℃ 6M | 1.1 | 98.9 | / | 2.4 | 95.5 | 2.1 | / | 97.7 | 2.3 |
| 25℃ 1M | 1.5 | 98.5 | / | 3.4 | 93.9 | 2.6 | 0.09 | 97.3 | 2.6 |
| 40℃ 1W | 4.8 | 95.1 | 0.13 | 1.8 | 95.0 | 3.1 | / | 96.7 | 3.3 |
| 40℃ 2W | 7 | 92.9 | 0.1 | 2.6 | 93.1 | 4.2 | 0.26 | 95.8 | 3.9 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.89 | 99.1 | / | 1.8 | 96.9 | 1.2 | / | 98.2 | 1.8 |
| 振盪1W | 1.1 | 98.9 | / | 1.7 | 96.4 | 1.8 | / | 97.8 | 2.3 |
| 凍融3次 | 1.1 | 98.9 | / | 1.2 | 96.9 | 1.9 | / | 97.7 | 2.4 |
| 2-8℃ 1M | 1.2 | 98.8 | / | 2.8 | 95.6 | 1.4 | 0.05 | 97.9 | 2.1 |
| 2-8℃ 6M | 1.1 | 98.9 | / | 2.2 | 95.4 | 2.3 | / | 97.6 | 2.4 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 3.3 | 93.5 | 3.0 | 0.08 | 97.3 | 2.6 |
| 40℃ 1W | 16.5 | 83.4 | 0.15 | 1.9 | 93.8 | 4.2 | / | 96.2 | 3.8 |
| 40℃ 2W | 22.8 | 77.1 | 0.11 | 3.2 | 90.9 | 6.0 | 0.24 | 95.6 | 4.2 |
| 40℃ 1M | 41 | 58.8 | 0.25 | 8.9 | 79.4 | 11.6 | 0.12 | 93.3 | 6.6 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 2.0 | 96.7 | 1.2 | / | 98.2 | 1.8 |
| 振盪1W | 1.4 | 98.6 | / | 2.0 | 96.1 | 1.8 | / | 97.7 | 2.4 |
| 凍融3次 | 1.3 | 98.7 | / | 1.5 | 96.5 | 2.0 | / | 97.7 | 2.3 |
| 2-8℃ 1M | 1.5 | 98.5 | / | 3.2 | 95.3 | 1.3 | 0.10 | 97.8 | 2.1 |
| 2-8℃ 6M | 1.3 | 98.7 | / | 2.7 | 95.0 | 2.3 | / | 97.8 | 2.2 |
| 25℃ 1M | 2 | 98 | / | 4.1 | 93.4 | 2.5 | 0.09 | 97.4 | 2.5 |
| 40℃ 1W | 13.5 | 86.4 | 0.13 | 2.3 | 94.4 | 3.3 | / | 96.7 | 3.3 |
| 40℃ 2W | 18.3 | 81.6 | 0.18 | 3.5 | 92.2 | 4.2 | 0.14 | 96.0 | 3.9 |
| 40℃ 1M | 35.1 | 64.7 | 0.25 | 9.6 | 80.8 | 9.7 | 0.14 | 93.9 | 5.9 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.2 | 98.8 | / | 2.3 | 96.5 | 1.2 | / | 98.1 | 1.9 |
| 凍融3次 | 1.5 | 98.5 | / | 1.9 | 96.4 | 1.5 | / | 97.7 | 2.3 |
| 2-8℃ 1M | 1.8 | 98.2 | / | 3.5 | 95.2 | 1.2 | 0.10 | 97.7 | 2.2 |
| 2-8℃ 6M | 1.6 | 98.4 | / | 3.1 | 94.6 | 2.3 | / | 97.4 | 2.6 |
| 25℃ 1M | 2.7 | 97.3 | / | 5.1 | 91.8 | 3.1 | 0.09 | 97.3 | 2.6 |
| 40℃ 1W | 23.9 | 75.9 | 0.11 | 2.7 | 93.3 | 3.9 | / | 96.5 | 3.6 |
| 40℃ 2W | 32.5 | 67.4 | 0.09 | 4.8 | 90.0 | 5.2 | 0.19 | 95.6 | 4.2 |
| 理化參數 | A2 | A3 | A4 |
| 黏度（cP），25℃ | 7.0 | 5.7 | 29.7 |
| 滲透壓（mOsmol/kg） | 353 | 346 | 410 |
試驗例A1和試驗例A2為具有緩衝劑體系的方案、試驗例A3和試驗例A4為自緩衝體系方案。實驗結果發現：在室溫（25±2℃）振盪一週、凍融循環3次、2-8℃放置6個月的條件下，試驗例A1、試驗例A2、試驗例A3樣品較穩定，SEC-HPLC純度等無明顯變化。在25℃放置1個月的條件下，試驗例A1、試驗例A2、試驗例A3、試驗例A4，除nr-SDS-PAGE純度明顯下降外，其他各個純度均無明顯變化。
在40℃±2℃放置1個月的條件下，試驗結果如表1.2-1.4所示，40℃±2℃下製劑A2、A3的SEC主峰純度變換趨勢圖如圖1所示，不同放置條件下製劑A2、A3的SEC聚體純度變換趨勢圖如圖2所示。從上述結果可知，試驗例A3的SEC-HPLC純度較試驗例A2獲得了較大的提升。具體而言，試驗例A3與試驗例A2相比，SEC-HPLC主峰純度提高了5.9%，聚集體降低5.9%。在工業上，蛋白質穩定性的提高很困難，1-2%純度的提高具有有很高的意義，5.9%的純度提高是一個非常顯著的突破。另外在製備工藝過程中自緩衝體系的高濃度製劑製備更加節約輔料的成本。綜上，試驗例A1-A4的試驗結果表明，本發明的不含組胺酸和磷酸鹽緩衝劑的自緩衝製劑在整個研究過程中均顯示出極好的穩定性。
表1.7不溶性微粒—MFI結果
表1.8不溶性微粒—MFI結果（形態學分析）
| 樣品名稱 | MFI | ||||
| ≥2μm(顆/mL) | ≥5μm(顆/mL) | ≥10μm(顆/mL) | ≥25μm(顆/mL) | ≥50μm(顆/mL) | |
| A1 | 1798 | 347 | 67 | 5 | 0 |
| A2 | 1216 | 260 | 78 | 5 | 0 |
| A3 | 826 | 117 | 14 | 0 | 0 |
| 樣品名稱 | MFI形態學分析≥5μm(顆/mL) | ||||
| 矽油 | 氣泡 | 緻密聚集體 | 蛋白 | 包材 | |
| A1 | 7 | 10 | 0 | 331 | 0 |
| A2 | 5 | 7 | 0 | 241 | 7 |
| A3 | 5 | 0 | 0 | 113 | 0 |
表1.7、表1.8顯示了不溶性微粒的MFI檢測結果。對於眼科玻璃體內注射的產品來說，聚集體的降低，有望降低患者的免疫原性等一系列不良反應。試驗例A3相比於A1和A2，nr-SDS-PAGE、rCE-SDS純度有所改善。同時，試驗例A3與A1和A2相比，不溶性微粒有所改善，在對於≥2μm、≥5μm、≥10μm和≥25μm不溶性微粒的分析中，A3製劑均具有濃度更低的不溶性微粒。這是一個令人驚訝的結果，對於眼科給藥來說，不溶性微粒的改善可以降低由於注射導致的患者不良反應率，因此，本試驗結果表明本發明的自緩衝製劑在眼科給藥中具有優異的前景。
實施例2：含有不同L-鹽酸精胺酸濃度的自緩衝體系製劑的穩定性比較
試驗例B1-B7為含有不同L-鹽酸精胺酸濃度的自緩衝製劑，各個組分含量如表2.1所示，其中B1-B7中阿柏西普的濃度為約114.3mg/mL。實施例2檢測了分別添加20mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、100mM的L-鹽酸精胺酸對藥物組合物穩定性的影響。
表2.1含有不同L-鹽酸精胺酸濃度的製劑
表2.2製劑B1穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.3製劑B2穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.4製劑B3穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.5製劑B4穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.6製劑B5穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.7製劑B6穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表2.8製劑B7穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
| 試驗例 | 組成 | 黏度（25℃） | 滲透壓（mOsmol/kg） |
| B1 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，20mM L-鹽酸精胺酸 | 8.0 cP | 313 |
| B2 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，40mM L-鹽酸精胺酸 | 8.5 cP | 365 |
| B3 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，50mM L-鹽酸精胺酸 | 8.5 cP | 379 |
| B4 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，60mM L-鹽酸精胺酸 | 8.6 cP | 394 |
| B5 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，70mM L-鹽酸精胺酸 | 8.6 cP | 418 |
| B6 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，80mM L-鹽酸精胺酸 | 8.0 cP | 433 |
| B7 | 阿柏西普，6w/v%蔗糖，0.03w/v%聚山梨酯20，pH5.8，100mM L-鹽酸精胺酸 | 7.8 cP | 472 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 2.0 | 97.2 | 0.73 | / | 98.0 | 2.0 |
| 37℃ 2W | 4.1 | 95.9 | / | 4.6 | 92.4 | 3.0 | / | 97.0 | 3.0 |
| 37℃ 1M | 8.4 | 91.4 | 0.25 | / | / | / | / | / | / |
| 25℃ 1M | 1.9 | 98.1 | / | / | / | / | / | / | / |
| 2-8℃ 3M | 1.5 | 98.5 | / | 2.1 | 96.8 | 1.0 | / | 98.1 | 2.0 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.4 | 98.6 | / | 2.5 | 96.1 | 1.3 | / | 97.6 | 2.4 |
| 37℃ 2W | 5.1 | 94.7 | 0.18 | 3.2 | 93.0 | 3.8 | / | 96.8 | 3.2 |
| 37℃ 1M | 9.3 | 90.3 | 0.36 | 3.4 | 91.4 | 5.2 | / | 95.7 | 4.3 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 2.6 | 95.3 | 2.1 | / | 97.5 | 2.5 |
| 2-8℃ 3M | 1.3 | 98.7 | / | 3.1 | 95.6 | 1.3 | / | 97.9 | 2.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS（%） | Monomer（%） | LMWS（%） | HMWS（%） | MAIN（%） | LMWS（%） | HMWS（%） | MAIN（%） | LMWS（%） | |
| 0時 | 1.4 | 98.6 | / | 2.6 | 96.1 | 1.2 | / | 97.8 | 2.3 |
| 37℃ 2W | 5.3 | 94.6 | 0.18 | 3.1 | 92.9 | 4.0 | / | 96.9 | 3.1 |
| 37℃ 1M | 9.8 | 89.9 | 0.38 | 3.5 | 91.4 | 5.1 | / | 95.7 | 4.3 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.5 | / | 2.4 | 95.8 | 1.8 | / | 97.4 | 2.6 |
| 2-8℃ 3M | 1.2 | 98.8 | / | 3.2 | 95.5 | 1.3 | / | 97.8 | 2.2 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 2.6 | 96.1 | 1.2 | / | 97.8 | 2.2 |
| 37℃ 2W | 5.5 | 94.3 | 0.2 | 3.3 | 92.6 | 4.1 | / | 96.9 | 3.1 |
| 37℃ 1M | 10.0 | 89.7 | 0.37 | 3.6 | 91.2 | 5.1 | / | 95.8 | 4.3 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 2.6 | 95.3 | 2.0 | / | 97.5 | 2.5 |
| 2-8℃ 3M | 1.3 | 98.7 | / | 3.1 | 95.7 | 1.2 | / | 97.9 | 2.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS(%) | Monomer (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 2.5 | 96.4 | 1.2 | / | 97.8 | 2.2 |
| 37℃ 2W | 5.6 | 94.2 | 0.19 | 3.5 | 92.8 | 3.7 | / | 96.9 | 3.1 |
| 37℃ 1M | 10.6 | 89.1 | 0.36 | 3.2 | 91.6 | 5.2 | / | 95.6 | 4.4 |
| 25℃ 1M | 1.5 | 98.5 | / | 2.9 | 95.1 | 2.0 | / | 97.4 | 2.6 |
| 2-8℃ 3M | 1.2 | 98.8 | / | 3.1 | 95.7 | 1.1 | / | 97.9 | 2.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN(%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 2.4 | 96.4 | 1.2 | / | 97.8 | 2.2 |
| 37℃ 2W | 5.9 | 94 | 0.18 | 3.5 | 92.5 | 3.9 | / | 96.9 | 3.1 |
| 37℃ 1M | 11.0 | 88.6 | 0.37 | 3.3 | 91.4 | 5.2 | / | 95.6 | 4.4 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 2.8 | 95.1 | 2.0 | / | 97.4 | 2.6 |
| 2-8℃ 3M | 1.3 | 98.7 | / | 3.6 | 95.8 | 0.51 | / | 97.8 | 2.2 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | HMWS(%) | MAIN (%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.0 | 99.0 | / | 2.0 | 97.4 | 0.61 | / | 98.0 | 2.0 |
| 37℃ 2W | 5.5 | 94.5 | / | 4.2 | 92.7 | 3.1 | / | 97.0 | 3.0 |
| 37℃ 1M | 11.6 | 88.1 | 0.27 | / | / | / | / | / | / |
| 25℃ 1M | 1.8 | 98.2 | / | / | / | / | / | / | / |
| 2-8℃ 3M | 1.4 | 98.6 | / | 2.2 | 96.8 | 1.0 | / | 98.0 | 2.0 |
經由SEC-HPLC、nr-SDS-PAGE、rCE-SDS評估了不同濃度的L-鹽酸精胺酸的自緩衝製劑在2-8℃、25℃±2℃、37℃±2℃條件下的物理穩定性，實驗結果如表2.2-2.8以及圖3-4所示，其中圖3是不同放置條件下製劑B1、B2、B3、B4、B5的SEC主峰純度變換趨勢圖，圖4是製劑B1、B2、B3、B4、B5所對應的黏度曲線圖。
上述試驗結果表明：在2-8℃ 3M和25℃1M的條件下，含有20mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、100mM的L-鹽酸精胺酸的藥物組合物穩定性均非常優異，其各項純度與初期（0時）相比，均無明顯變化，同時不同濃度的L-鹽酸精胺酸對製劑黏度無明顯影響。
實施例3：含有不同穩定劑種類和濃度的自緩衝體系製劑的穩定性比較
試驗例C1-C10為含有不同種類和濃度穩定劑的自緩衝製劑，其中阿柏西普的含量均為約114.3mg/mL，各個組分含量如表3.1所示。實施例3檢測了不同穩定劑種類和濃度對藥物組合物穩定性的影響。
表3.1含有阿柏西普的製劑
注：「-」表示未添加。
表3.2製劑C1穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.3製劑C2穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.4製劑C3穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.5製劑C4穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.6製劑C5穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.7製劑C6穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.8製劑C7穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.9製劑C8穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.10製劑C9穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表3.11製劑C10穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
| 試驗例 | 阿柏西普（mg/mL） | 聚山梨酯20（w/v%） | L-鹽酸精胺酸（mM） | 蔗糖 （w/v%） | 海藻糖（w/v%） | 脯胺酸（w/v%） | 鹽酸賴胺酸（mM） | 山梨醇（w/v%） | 氯化鈉（mM） | pH |
| C1 | 114.3 | 0.03 | 50 | 5 | - | - | - | - | - | 5.8 |
| C2 | 114.3 | 0.03 | 50 | 6 | - | - | - | - | - | 5.8 |
| C3 | 114.3 | 0.03 | 50 | 7 | - | - | - | - | - | 5.8 |
| C4 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | 5.5 | - | - | - | - | 5.8 |
| C5 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | 6.6 | - | - | - | - | 5.8 |
| C6 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | 7.7 | - | - | - | - | 5.8 |
| C7 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | - | 2.5 | - | - | - | 5.8 |
| C8 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | - | - | 100 | - | - | 5.8 |
| C9 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | - | - | - | 4 | - | 5.8 |
| C10 | 114.3 | 0.03 | - | 6.84 | - | - | - | - | 40 | 5.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 3.4 | 94.4 | 2.2 | / | 97.9 | 2.2 |
| 37℃ 2W | 6.6 | 93.1 | 0.37 | 3.7 | 92.1 | 4.2 | / | 96.4 | 3.6 |
| 37℃ 1M | 13.3 | 86.1 | 0.59 | 5.6 | 87.6 | 6.8 | / | 94.7 | 5.3 |
| 2-8℃ 1M | 0.93 | 99.1 | / | 3.6 | 94.5 | 1.9 | / | 97.8 | 2.3 |
| 25℃ 1M | 1.4 | 98.2 | 0.42 | 3.8 | 93.6 | 2.5 | / | 97.0 | 3.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 3.0 | 93.2 | 3.8 | / | 97.7 | 2.3 |
| 37℃ 2W | 5.6 | 94.0 | 0.36 | 3.7 | 92.2 | 4.1 | / | 96.5 | 3.5 |
| 37℃ 1M | 11.3 | 88.1 | 0.56 | 5.1 | 88.0 | 6.9 | / | 94.6 | 5.4 |
| 2-8℃ 1M | 0.93 | 99.1 | / | 3.6 | 94.3 | 2.0 | / | 97.7 | 2.3 |
| 25℃ 1M | 1.4 | 98.2 | 0.42 | 4.5 | 93.1 | 2.3 | / | 96.9 | 3.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 3.3 | 94.2 | 2.5 | / | 97.8 | 2.2 |
| 37℃ 2W | 5.2 | 94.4 | 0.38 | 3.5 | 92.2 | 4.3 | / | 96.5 | 3.5 |
| 37℃ 1M | 10.6 | 88.8 | 0.57 | 5.2 | 87.9 | 7.0 | / | 94.3 | 5.7 |
| 2-8℃ 1M | 0.95 | 99 | / | 3.7 | 94.3 | 2.0 | / | 97.7 | 2.3 |
| 25℃ 1M | 1.3 | 98.2 | 0.41 | 3.5 | 93.9 | 2.5 | / | 96.9 | 3.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.3 | 98.7 | / | 2.8 | 94.1 | 3.0 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 2W | 5.5 | 94.2 | 0.32 | 2.4 | 92.9 | 4.7 | / | 96.7 | 3.3 |
| 37℃ 1M | 10.8 | 88.7 | 0.46 | 4.0 | 88.0 | 7.9 | / | 94.9 | 5.2 |
| 2-8℃ 1M | 0.92 | 99.1 | / | 3.2 | 95.1 | 1.6 | / | 98.1 | 1.9 |
| 25℃ 1M | 1.4 | 98.3 | 0.35 | 3.1 | 93.9 | 2.9 | / | 97.1 | 2.9 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.2 | 98.8 | / | 3.2 | 94.9 | 1.8 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 2W | 4.8 | 94.9 | 0.28 | 2.3 | 93.0 | 4.7 | / | 96.7 | 3.3 |
| 37℃ 1M | 9.7 | 89.9 | 0.44 | 4.6 | 88.0 | 7.4 | / | 94.7 | 5.3 |
| 2-8℃ 1M | 0.94 | 99.1 | / | 2.9 | 95.7 | 1.3 | / | 98.1 | 1.9 |
| 25℃ 1M | 1.3 | 98.4 | 0.33 | 3.3 | 93.8 | 2.8 | / | 97.0 | 3.1 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.2 | 98.8 | / | 2.9 | 96.1 | 0.86 | / | 98.1 | 1.9 |
| 37℃ 2W | 4.3 | 95.4 | 0.30 | 2.5 | 93.8 | 3.7 | / | 96.6 | 3.4 |
| 37℃ 1M | 8.6 | 91 | 0.44 | 3.5 | 89.2 | 7.3 | / | 94.8 | 5.2 |
| 2-8℃ 1M | 0.88 | 99.1 | / | 2.9 | 95.8 | 1.3 | / | 98.0 | 2.0 |
| 25℃ 1M | 1.3 | 98.4 | 0.34 | 3.2 | 93.7 | 3.0 | / | 97.2 | 2.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 3.1 | 95.3 | 1.5 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 2W | 9.9 | 89.8 | 0.30 | 2.1 | 92.6 | 5.3 | / | 95.7 | 4.3 |
| 37℃ 1M | 21.1 | 78.4 | 0.47 | 3.3 | 85.4 | 11.3 | / | 92.8 | 7.2 |
| 2-8℃ 1M | 0.61 | 99.4 | / | 2.7 | 95.6 | 1.6 | / | 97.9 | 2.1 |
| 25℃ 1M | 1.4 | 98.1 | 0.45 | 3.2 | 92.6 | 4.1 | / | 96.5 | 3.5 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 1.8 | 97.5 | 0.62 | / | 98.1 | 1.9 |
| 37℃ 2W | 6.4 | 93.6 | / | 3.1 | 91.8 | 5.1 | / | 96.6 | 3.4 |
| 37℃ 1M | 32.4 | 67.3 | 0.35 | 4.0 | 79.4 | 16.6 | / | 89.7 | 10.3 |
| 2-8℃ 1M | 1.0 | 99.0 | / | 2.1 | 96.8 | 1.0 | / | 98.0 | 2.0 |
| 25℃ 1M | 2.2 | 97.8 | / | 2.2 | 91.6 | 6.1 | / | 95.6 | 4.4 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 1.5 | 97.7 | 0.71 | / | 98.0 | 2.0 |
| 37℃ 2W | 15.4 | 84.6 | / | 2.9 | 89.8 | 7.3 | / | 94.1 | 5.9 |
| 37℃ 1M | 14.4 | 85.1 | 0.43 | 4.2 | 88.6 | 7.2 | / | 95.0 | 5.0 |
| 2-8℃ 1M | 1.1 | 98.9 | / | 2.3 | 96.9 | 0.81 | / | 98.2 | 1.8 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 2.6 | 95.2 | 2.1 | / | 97.5 | 2.5 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.1 | 98.9 | / | 1.7 | 97.7 | 0.54 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 2W | 5.0 | 95.0 | / | 3.2 | 92.3 | 4.5 | / | 96.1 | 3.9 |
| 37℃ 1M | 12.1 | 87.6 | 0.36 | 5.6 | 85.0 | 9.4 | / | 93.8 | 6.2 |
| 2-8℃ 1M | 1.1 | 98.9 | / | 2.1 | 96.9 | 0.92 | / | 98.2 | 1.8 |
| 25℃ 1M | 1.6 | 98.4 | / | 2.9 | 94.3 | 2.7 | / | 97.0 | 3.0 |
表3.2-3.11顯示了C1-C10製劑在0h、37℃±2℃、2-8℃及25℃±2℃條件下的SEC-HPLC、rCE-SDS、nr-SDS-PAGE的Monomer/ MAIN（主峰）、HMWS（聚體）、片段（LMWS）百分比結果，圖5是顯示了37℃±2℃下製劑C1-C10的SEC主峰純度變換趨勢。從上述結果可以看出：經由添加蔗糖、海藻糖、山梨醇、脯胺酸、鹽酸賴胺酸等輔料製備了C1-C10十種純度較高的自緩衝高濃度製劑，且0h SEC-HPLC主峰純度均在98.7%以上；37℃ 1M結果顯示，C1-C3製劑SEC-HPLC主峰純度在86.1%-88.8%之間；C4-C6製劑SEC-HPLC主峰純度在88.7%-91.0%之間；C7、C8、C9製劑SEC-HPLC主峰純度分別為78.4%、67.3%和85.1%；rCE-SDS、nr-SDS-PAGE各製劑純度變化未見明顯差異。
以上試驗結果表明，蔗糖和海藻糖對阿柏西普有著明顯的保護作用，進一步探索蔗糖與海藻糖的含量範圍，發現蔗糖濃度在5w/v%-7w/v%，海藻糖濃度在5.5w/v%-7.7w/v%的範圍內時，藥物組合物均具有優異的穩定性。
實施例4：不同自緩衝體系製劑的穩定性比較
調節不同自緩衝體系製劑中pH值、蛋白質含量和聚山梨酯20含量，各個組分如表4.1所示。測試了條件如下的阿柏西普製劑的穩定性：6w/v%蔗糖，50mM L-鹽酸精胺酸，pH值分別為5.5、5.8、6.1，蛋白質含量分別為約100mg/mL、約114.3mg/mL、約125mg/mL，聚山梨酯20分別為0.01w/v%、0.03w/v%、0.05w/v%。
表4.1含有阿柏西普的製劑
表4.2製劑D1穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.3 製劑D2穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.4製劑D3穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.5製劑D4穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.6 製劑D5穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.7製劑D6穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.8 製劑D7穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.9 製劑D8穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.10製劑D9穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.11製劑D10穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表4.12製劑D1-D10黏度及滲透壓數據
| 試驗例 | pH | 蛋白質含量（mg/mL） | 聚山梨酯20（w/v%） | 蔗糖（w/v%） | L-鹽酸精胺酸（mM） |
| D1 | 6.1 | 125 | 0.01 | 6 | 50 |
| D2 | 5.5 | 100 | 0.05 | 6 | 50 |
| D3 | 5.8 | 100 | 0.01 | 6 | 50 |
| D4 | 5.8 | 114.3 | 0.03 | 6 | 50 |
| D5 | 5.8 | 114.3 | 0.03 | 6 | 50 |
| D6 | 5.5 | 125 | 0.05 | 6 | 50 |
| D7 | 6.1 | 100 | 0.05 | 6 | 50 |
| D8 | 5.5 | 125 | 0.01 | 6 | 50 |
| D9 | 5.5 | 100 | 0.01 | 6 | 50 |
| D10 | 6.1 | 125 | 0.05 | 6 | 50 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.83 | 99.2 | / | 2.9 | 96.5 | 0.54 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 1W | 3.3 | 96.7 | / | 2.6 | 95.5 | 1.8 | / | 97.7 | 2.3 |
| 37℃ 1M | 13 | 86.6 | 0.36 | 5.1 | 86.7 | 8.1 | / | 95.1 | 4.9 |
| 2-8℃ 1M | 1.5 | 98.5 | / | 3.0 | 96.2 | 0.82 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 2.3 | 97.7 | / | 3.2 | 94.5 | 2.3 | / | 97.5 | 2.5 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.77 | 99.2 | / | 2.4 | 97.1 | 0.45 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 1W | 3.5 | 96.5 | / | 2.1 | 96.0 | 1.9 | / | 97.6 | 2.4 |
| 37℃ 1M | 14.5 | 85 | 0.48 | 3.9 | 87.4 | 8.7 | / | 95.0 | 5.0 |
| 2-8℃ 1M | 1.1 | 98.9 | / | 2.2 | 96.7 | 1.1 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 1.8 | 98.2 | / | 2.1 | 95.5 | 2.3 | / | 97.5 | 2.5 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.89 | 99.1 | / | 2.9 | 96.6 | 0.51 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 1W | 2.8 | 97.2 | / | 2.4 | 95.8 | 1.8 | / | 97.4 | 2.6 |
| 37℃ 1M | 10 | 89.6 | 0.38 | 4.9 | 86.5 | 8.6 | / | 95.2 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.4 | 98.6 | / | 2.8 | 96.2 | 0.97 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 2 | 98 | / | 2.6 | 95.3 | 2.1 | / | 97.5 | 2.5 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.84 | 99.2 | / | 2.4 | 96.4 | 1.1 | / | 98.1 | 1.9 |
| 37℃ 1W | 3.5 | 96.5 | / | 2.4 | 95.5 | 2.0 | / | 97.7 | 2.3 |
| 37℃ 1M | 14.2 | 85.4 | 0.4 | 5.0 | 86.9 | 8.1 | / | 95.2 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.3 | 98.7 | / | 2.6 | 96.4 | 0.97 | / | 98.2 | 1.8 |
| 25℃ 1M | 2 | 98 | / | 2.4 | 95.6 | 2.0 | / | 97.4 | 2.6 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.86 | 99.1 | / | 2.2 | 96.9 | 0.86 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 1W | 3.5 | 96.5 | / | 2.5 | 95.8 | 1.6 | / | 97.7 | 2.3 |
| 37℃ 1M | 13.9 | 85.7 | 0.45 | 4.9 | 87.1 | 8.0 | / | 95.3 | 4.7 |
| 2-8℃ 1M | 1.4 | 98.6 | / | 2.6 | 96.6 | 0.80 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 1.9 | 98.1 | / | 2.6 | 95.4 | 2.0 | / | 97.4 | 2.6 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer(%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.83 | 99.2 | / | 2.2 | 96.7 | 1.0 | / | 98.3 | 1.7 |
| 37℃ 1W | 4.7 | 95.3 | / | 2.0 | 95.9 | 2.1 | / | 97.5 | 2.6 |
| 37℃ 1M | 19.7 | 79.8 | 0.46 | 4.0 | 86.8 | 9.1 | / | 94.9 | 5.1 |
| 2-8℃ 1M | 1.3 | 98.7 | / | 2.4 | 96.4 | 1.1 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 2.1 | 97.9 | / | 2.7 | 94.9 | 2.3 | / | 97.4 | 2.7 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.95 | 99.0 | / | 2.6 | 96.4 | 1.0 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 1W | 3.0 | 97.0 | / | 2.1 | 95.5 | 2.4 | / | 97.4 | 2.6 |
| 37℃ 1M | 10.9 | 88.7 | 0.37 | 5.1 | 86.3 | 8.5 | / | 95.3 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.5 | 98.5 | / | 2.9 | 96.2 | 0.89 | / | 98.0 | 2.0 |
| 25℃ 1M | 1.9 | 98.1 | / | 3.3 | 94.7 | 1.9 | / | 97.2 | 2.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.87 | 99.1 | / | 2.3 | 96.7 | 0.97 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 1W | 4.3 | 95.7 | / | 2.0 | 95.8 | 2.1 | / | 97.4 | 2.6 |
| 37℃ 1M | 19.3 | 80.3 | 0.44 | 4.3 | 86.2 | 9.4 | / | 95.2 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.4 | 98.6 | / | 2.1 | 96.5 | 1.3 | / | 98.3 | 1.7 |
| 25℃ 1M | 2.2 | 97.8 | / | 2.6 | 95.1 | 2.3 | / | 97.3 | 2.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 0.83 | 99.2 | / | 2.0 | 97.2 | 0.67 | / | 98.1 | 1.9 |
| 37℃ 1W | 3.3 | 96.7 | / | 1.8 | 96.0 | 2.1 | / | 97.5 | 2.5 |
| 37℃ 1M | 14.2 | 85.3 | 0.44 | 4.0 | 86.3 | 9.7 | / | 95.2 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.3 | 98.7 | / | 2.3 | 96.5 | 1.1 | / | 98.2 | 1.8 |
| 25℃ 1M | 1.7 | 98.3 | / | 2.3 | 95.4 | 2.2 | / | 97.3 | 2.7 |
| 條件 | SEC-HPLC | nr-SDS-PAGE | rCE-SDS | ||||||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | HMWS (%) | MAIN (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.0 | 99.0 | / | 2.7 | 96.7 | 0.63 | / | 98.2 | 1.8 |
| 37℃ 1W | 3.3 | 96.7 | / | 2.6 | 95.5 | 1.9 | / | 97.5 | 2.5 |
| 37℃ 1M | 12.7 | 87 | 0.32 | 5.5 | 86.0 | 8.4 | / | 95.2 | 4.8 |
| 2-8℃ 1M | 1.8 | 98.2 | / | 3.1 | 96.1 | 0.72 | / | 98.2 | 1.8 |
| 25℃ 1M | 2.2 | 97.8 | / | 3.2 | 94.7 | 2.0 | / | 97.4 | 2.7 |
| 製劑 | D1 | D2 | D3 | D4 | D5 | D6 | D7 | D8 | D9 | D10 |
| 黏度（cP，25℃） | 10.0 | 5.8 | 6.5 | 8.1 | 8.1 | 9.3 | 6.0 | 10.1 | 5.6 | 8.6 |
| 滲透壓（mOsmol/kg） | 387 | 342 | 376 | 361 | 363 | 349 | 376 | 348 | 348 | 377 |
試驗結果如表4.2-4.12所示，從上述結果可以看出：製劑D1-D10 0h SEC-HPLC主峰純度均在99.0%以上；2-8℃ 1M和25℃ 1M的結果顯示，D1-D10製劑SEC-HPLC主峰純度在97.7%-98.9%之間；製劑黏度在5.6-10.1cP，滲透壓結果為342-387mOsmol/kg。上述結果表明，在蛋白質含量100-125mg/mL、pH 5.5-6.1、聚山梨酯20含量0.01-0.05w/v%範圍內，高濃度自緩衝製劑穩定性均保持在良好的水平上。
實施例5：製劑稀釋試驗
為模擬稀釋後的阿柏西普在玻璃體內的穩定性，測試了具有2mg/mL和0.1mg/mL的阿柏西普的製劑的穩定性。表5.1顯示了兩種製劑的組分信息。為配製製劑溶液，使用預期的輔料溶液進行稀釋，將要添加的輔料以母液形式添加至抗體溶液中，將所有配製劑經由0.22μm低蛋白質結合濾器無菌過濾，並在無菌條件下灌裝至無菌2mL管制瓶中，使用覆膜膠塞和鋁塑組合蓋密封。經由SEC-HPLC，以確定高分子量種類(HMWS、LMWS)和主要峰(Monomer/MAIN)的存在(%)，評估兩種製劑在37℃儲存過程中阿柏西普的穩定性，以表徵藥品在玻璃體內的穩定性。
表5.1含有阿柏西普的製劑
表5.2製劑E1穩定性數據
表5.3製劑E2穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
| 製劑 | pH | 蛋白質含量（mg/mL） | 葡萄糖注射液（mg/mL） | 稀釋液 | 滲透壓（mOsmol/kg） |
| E1 | 7.39 | 0.1 | 0.4 | 1×PBS溶液 | 273 |
| E2 | 7.41 | 2 | 0.4 | 1×PBS溶液 | 274 |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 0.69 | 98.7 | 0.58 |
| 37℃ 1M | 0.55 | 98.8 | 0.62 |
| 37℃ 2M | 0.67 | 98.8 | 0.55 |
| 37℃ 3M | 0.69 | 98.3 | 1.0 |
| 37℃ 4M | 1.2 | 96.5 | 2.3 |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 0.97 | 99 | / |
| 37℃ 1M | 1.1 | 98.6 | 0.27 |
| 37℃ 2M | 2.1 | 97.5 | 0.42 |
| 37℃ 3M | 3.2 | 96.2 | 0.68 |
| 37℃ 4M | 4.9 | 93.7 | 1.4 |
試驗結果如表5.2-5.3所示，經由以上結果可以發現：經過37℃ 3M的穩定性考察，製劑1與製劑2 SEC-HPLC主峰純度未有明顯變化，說明模擬的稀釋後的阿柏西普在玻璃體內具有良好的穩定性。
實施例6：製劑凍乾和pH試驗
為了進一步確認pH值範圍以及考察凍乾製劑穩定性，分別在pH 5.8、6.0、6.2、6.4條件下，考察製劑的穩定性，同時製備凍乾製劑樣品。將所有配製劑經由0.22μm低蛋白質結合濾器無菌過濾，並在無菌條件下灌裝至無菌2mL管制瓶中，使用覆膜膠塞和鋁塑組合蓋密封。將這些製劑溶液放置在如下條件：37℃ 1M和2-8℃ 3M，考察樣品的穩定性。表6.1是不同的製劑信息，其中阿柏西普的含量為約114.3mg/mL，表6.2-6.7是不同的製劑的穩定性結果。
表6.1含有阿柏西普的製劑
注：「-」表示未添加。
表6.2製劑F1穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表6.3製劑F2穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表6.4製劑F3穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表6.5製劑F4穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表6.6製劑F5凍乾粉穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
表6.7製劑F6凍乾粉穩定性數據
注：「/」表示未檢測出。
| 試驗例 | 劑型 | 阿柏西普（mg/mL） | 聚山梨酯20（w/v%） | L-鹽酸精胺酸（mM） | 蔗糖（w/v%） | 海藻糖（w/v%） | pH |
| F1 | 注射液 | 114.3 | 0.03 | - | - | 9 | 5.8 |
| F2 | 注射液 | 114.3 | 0.03 | - | - | 9 | 6.0 |
| F3 | 注射液 | 114.3 | 0.03 | - | - | 9 | 6.2 |
| F4 | 注射液 | 114.3 | 0.03 | - | - | 9 | 6.4 |
| F5 | 凍乾粉 | 114.3 | 0.03 | 50 | 6 | - | 5.8 |
| F6 | 凍乾粉 | 114.3 | 0.03 | 50 | - | 6.6 | 5.8 |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.4 | 98.6 | / |
| 2-8℃ 3M | 1.7 | 98.4 | / |
| 37℃ 1M | 5.4 | 94.6 | / |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.5 | 98.5 | / |
| 2-8℃ 3M | 1.8 | 98.2 | / |
| 37℃ 1M | 5.6 | 94.4 | / |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.6 | 98.4 | / |
| 2-8℃ 3M | 1.9 | 98.1 | / |
| 37℃ 1M | 6.5 | 93.5 | / |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS (%) | Monomer (%) | LMWS (%) | |
| 0時 | 1.7 | 98.3 | / |
| 2-8℃ 3M | 2.0 | 98.0 | / |
| 37℃ 1M | 6.6 | 93.4 | / |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.2 | 98.8 | / |
| 2-8℃ 3M | 1.5 | 98.5 | / |
| 37℃ 1M | 2.6 | 97.4 | / |
| 條件 | SEC-HPLC | ||
| HMWS(%) | Monomer(%) | LMWS(%) | |
| 0時 | 1.2 | 98.8 | / |
| 2-8℃ 3M | 1.6 | 98.4 | / |
| 37℃ 1M | 2.9 | 97.1 | / |
試驗結果如表6.2-6.7和圖6所示，其中圖6是2-8℃和37℃±2℃下製劑F5和F6的SEC純度變換趨勢圖。經由結果可以發現：經過2-8℃ 3M及37℃ 1M的穩定性考察，製劑F1-F4 SEC-HPLC主峰純度無明顯差異，表明製劑在pH為5.8-6.4的範圍內穩定性良好；在37℃ 1M下，F5和F6 SEC-HPLC主峰純度無明顯差異，表明本發明的凍乾製劑具有很好的穩定性和可行性。
上文所述的本發明的實施方案僅為示例性的，任何本領域技術人員都可以認識到或者可以確定無數的特定化合物、材料和操作的等價物，而不需要進行超出常規的試驗。所有這些等價物都是在本發明範圍之內的，並且被發明申請專利範圍所包含。
附圖更進一步說明了本發明所公開的新特性。參照這些附圖將能更好地理解本發明中所公開的特性和優點，但應當理解，這些附圖僅用於說明本發明所公開原理的具體的實施方案，而非意欲對所附權利要求的範圍加以限制。
圖1是40℃±2℃下製劑A2、A3的SEC主峰純度變換趨勢圖。
圖2是不同放置條件下製劑A2、A3的SEC聚體純度變換趨勢圖。
圖3是不同放置條件下製劑B1、B2、B3、B4、B5的SEC主峰純度變換趨勢圖。
圖4是製劑B1、B2、B3、B4、B5所對應的黏度曲線圖。
圖5是37℃±2℃下製劑C1-C10的SEC主峰純度變換趨勢圖。
圖6是2-8℃和37℃±2℃下製劑F5和F6的SEC純度變換趨勢圖。
Claims (24)
- 一種水性藥物組合物，其包含： VEGF結合分子，該VEGF結合分子選自VEGF受體融合蛋白或抗VEGF抗體或其抗原結合片段，該VEGF結合分子的濃度至少為100mg/mL； 穩定劑，該穩定劑選自蔗糖、海藻糖、脯胺酸、脯胺酸的藥學上可接受的鹽、賴胺酸、賴胺酸的藥學上可接受的鹽或山梨醇中的至少一種； 表面活性劑，該表面活性劑選自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20或泊洛沙姆中的至少一種； 其中，該水性藥物組合物不包含緩衝劑且pH為5.0-7.0。
- 如請求項1所述的水性藥物組合物，其中，該水性藥物組合物還包含：L-精胺酸、L-精胺酸的藥學上可接受的鹽或氯化鈉中的至少一種； 優選地，該L-精胺酸或該L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為0-100mM，或該氯化鈉的含量為0-40mM。
- 如請求項2所述的水性藥物組合物，其中，該L-精胺酸或該L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為20-100mM，或該氯化鈉的含量為40mM； 優選地，該L-精胺酸或該L-精胺酸的藥學上可接受的鹽的含量為20mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM或100mM。
- 如請求項1-3中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該水性藥物組合物中VEGF結合分子的濃度至少為100mg/mL、至少為114.3mg/mL、至少為125mg/mL或至少為180mg/mL； 優選地，該水性藥物組合物中VEGF結合分子的濃度為100-180mg/mL，優選為100-125mg/mL。
- 如請求項1-4中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該穩定劑的濃度為5w/v%-10w/v%；優選地，該穩定劑選自蔗糖或海藻糖，該蔗糖的濃度為5w/v%-9w/v%，該海藻糖的濃度為5.5w/v%-10w/v%。
- 如請求項5所述的水性藥物組合物，其中，該蔗糖的濃度為5w/v%、6w/v%、7w/v%、8w/v%或9w/v%； 或該海藻糖的濃度為5.5w/v%、6.6w/v%、7.7w/v%、8.0w/v%或10w/v%。
- 如請求項1-6中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該表面活性劑的濃度為0.01w/v%-0.2w/v%。
- 如請求項7所述的水性藥物組合物，其中，該表面活性劑選自聚山梨醇酯20，該的聚山梨醇酯20的濃度為0.01w/v%、0.03w/v%、0.05w/v%、0.07w/v%、0.1w/v%或0.2 w/v%。
- 如請求項1-8中任一項所述的水性藥物組合物，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4；優選地，該pH為5.5、5.8、6.0、6.1、6.2或6.4。
- 如請求項1-9中任一項所述的水性藥物組合物，其包含濃度為100-180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%-9w/v%的蔗糖或5.5w/v%-10w/v%的海藻糖、0.01w/v%-0.2w/v%的聚山梨酯20、0-100mM的L-鹽酸精胺酸或0-40mM的氯化鈉，該水性藥物組合物的pH為5.0-7.0。
- 如請求項1-9中任一項所述的水性藥物組合物，其包含濃度為100-180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%-7w/v%的蔗糖或5.5w/v%-7.7w/v%的海藻糖、0.01w/v%-0.2w/v%的聚山梨酯20、40-80mM的L-鹽酸精胺酸或0-40mM的氯化鈉，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4。
- 一種水性藥物組合物，選自： 水性藥物組合物A包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物B包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物C包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物D包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物E包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物F包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物G包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物H包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物I包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物J包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物K包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物L包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物M包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物N包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物O包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物P包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物Q包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物R包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物S包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物T包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物U包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物V包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物W包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物X包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物Y包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.01w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物Z包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.05w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZA包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZB包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZC包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZD包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZE包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZF包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZG包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZH包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZI包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZJ包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZK包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZL包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZM包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZN包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZO包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZP包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZQ包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZR包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZS包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZT包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZU包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZV包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZW包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZX包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZY包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.01w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物ZZ包含：濃度為125mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.05w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AA包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AB包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AC包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AD包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AE包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AF包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AG包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AH包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AI包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AJ包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AK包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AL包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和60mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AM包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AN包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AO包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AP包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AQ包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AR包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和70mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AS包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AT包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AU包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7w/v%的蔗糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AV包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5.5w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AW包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、6.6w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AX包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、7.7w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和80mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AY包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.01w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物AZ包含：濃度為180mg/mL的VEGF受體融合蛋白、5w/v%的蔗糖、0.05w/v%的聚山梨酯20和50mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 水性藥物組合物BA包含：濃度為114.3mg/mL的VEGF受體融合蛋白、8w/v%的海藻糖、0.03w/v%的聚山梨酯20和20mM的L-鹽酸精胺酸，其中，該水性藥物組合物的pH為5.5-6.4； 優選地，該VEGF受體融合蛋白為阿柏西普。
- 如請求項1-9中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該VEGF結合分子包含兩條多肽，每條多肽包含VEGFR1的免疫球蛋白樣結構域2和VEGFR2的免疫球蛋白樣結構域3。
- 如請求項1-9中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該VEGF結合分子選自貝伐單抗、雷珠單抗、阿柏西普或康柏西普。
- 如請求項14所述的水性藥物組合物，其中，該VEGF結合分子為阿柏西普。
- 如請求項1-15中任一項所述的水性藥物組合物，其中，該水性藥物組合物在2-8℃下穩定持續至少6個月、12個月或24個月；或該水性藥物組合物在25℃±2℃下穩定持續至少1個月、3個月或6個月。
- 一種凍乾製劑，其由請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物經凍乾獲得，或者該凍乾製劑經複溶後獲得請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物。
- 一種遞送裝置，其包含請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物或複溶後的請求項17所述的凍乾製劑。
- 如請求項18所述的遞送裝置，該遞送裝置為預填充的注射器。
- 一種治療由VEGF介導的眼部疾病或障礙的方法，該方法包括向受試者施用請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物或請求項18或19所述的遞送裝置；優選地，該施用的部位是玻璃體內。
- 如請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物或請求項18或19所述的遞送裝置在製備治療由VEGF介導的眼部疾病或障礙的藥物組合物中的用途。
- 如請求項20所述的方法或請求項21所述的用途，其中，該眼部疾病或障礙包括眼部新生血管性疾病或血管原性眼病。
- 如請求項22所述的方法或用途，其中，該眼部疾病或障礙包括新血管性老年性黃斑變性年齡相關性黃斑變性、黃斑水腫、視網膜靜脈阻塞後的黃斑水腫、視網膜靜脈阻塞、視網膜中央靜脈阻塞、視網膜分支靜脈阻塞、糖尿病性黃斑水腫、脈絡膜新生血管、虹膜新生血管、新生血管性青光眼、青光眼的手術後纖維化、增生性玻璃體視網膜病變、視盤新血管形成、角膜新生血管形成、視網膜新生血管形成、玻璃體新生血管形成、角膜翳、翼狀胬肉、血管性視網膜病、糖尿病性視網膜病變、非增殖性糖尿病性視網膜病和/或增殖性糖尿病性視網膜病。
- 一種向受試者遞送VEGF結合分子的方法，包括向該受試者施用請求項1-16中任一項所述的水性藥物組合物或請求項18或19所述的遞送裝置的步驟；優選地，該施用的部位是玻璃體內。
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211134160 | 2022-09-16 | ||
| CN2022111341606 | 2022-09-16 | ||
| CN2022111414132 | 2022-09-20 | ||
| CN202211141413 | 2022-09-20 | ||
| CN2023111534980 | 2023-09-07 | ||
| CN202311153498 | 2023-09-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202412840A true TW202412840A (zh) | 2024-04-01 |
Family
ID=90274288
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW112135244A TW202412840A (zh) | 2022-09-16 | 2023-09-15 | 一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TW202412840A (zh) |
| WO (1) | WO2024056058A1 (zh) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103816115B (zh) * | 2010-08-31 | 2017-06-27 | 成都康弘生物科技有限公司 | 一种含有抑制血管增生的融合蛋白的药物组合物及用途 |
| TWI705827B (zh) * | 2014-11-07 | 2020-10-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療眼部疾病之方法 |
| WO2018094316A1 (en) * | 2016-11-21 | 2018-05-24 | Just Biotherapeutics, Inc. | Aflibercept formulations and uses thereof |
| JOP20200275A1 (ar) * | 2018-05-10 | 2020-11-02 | Regeneron Pharma | صيغ تحتوي على بروتين اندماج لمستقبلvegf مرتفعة التركيز |
| CN114129723A (zh) * | 2020-09-03 | 2022-03-04 | 齐鲁制药有限公司 | 一种高浓度抗her2的抗体制剂及其用途 |
-
2023
- 2023-09-15 TW TW112135244A patent/TW202412840A/zh unknown
- 2023-09-15 WO PCT/CN2023/119034 patent/WO2024056058A1/zh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2024056058A1 (zh) | 2024-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2020202408B2 (en) | Liquid protein formulations containing ionic liquids | |
| TW202412840A (zh) | 一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物 | |
| JP2024510480A (ja) | 融合タンパク質の新規製剤 | |
| NZ756401B2 (en) | Liquid protein formulations containing ionic liquids | |
| BR112016005309B1 (pt) | Formulação farmacêutica líquida compreendendo cimetidina ou seu sal farmaceuticamente aceitável e uso da mesma |