TW202409015A - 一種prmt5抑制劑、其製備方法及應用 - Google Patents

一種prmt5抑制劑、其製備方法及應用 Download PDF

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王家坡
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大陸商上海艾力斯醫藥科技股份有限公司
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Abstract

本發明公開了一種PRMT5抑制劑、其製備方法及應用。具體公開了如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，及其在製備治療和/或預防癌症藥物中的應用。所述癌症可為MTAP相關/介導的癌症。

Description

一種PRMT5抑制劑、其製備方法及應用
本申請要求申請日為2022年8月2日的中國專利申請2022109224322、申請日為2022年10月25日的中國專利申請2022113131424、申請日為2022年12月19日的中國專利申請2022116357441、申請日為2023年3月10日的中國專利申請202310233629X和申請日為2023年7月24日的中國專利申請202310918224X的優先權。本申請引用上述中國專利申請的全文。
本發明涉及一種PRMT5抑制劑、其製備方法及應用。
蛋白質精胺酸N-甲基轉移酶(PRMTs)負責精胺酸的胍基的甲基化。精胺酸的胍基帶有兩個可發生單甲基化或二甲基化的末端氮原子。PRMTs可以將S腺苷甲硫胺酸(SAM)上的甲基基團轉移到蛋白質精胺酸側鏈的胍基氮原子上，生成甲基化精胺酸。PRMTs以三種不同的形式調控精胺酸甲基化：單甲基精胺酸(MMA)、不對稱二甲基精胺酸(ADMA)和對稱二甲基精胺酸(SDMA)甲基化。PRMTs主要包括9種亞型，根據二甲基化的類型，酶進一步分為I型或II型。I型PRMTs催化單甲基化作用或不對稱二甲基化作用，而II型酶催化對稱二甲基化作用。
蛋白質精胺酸N-甲基轉移酶5(PRMT5)是一種II型精胺酸甲基轉移酶，負責對組蛋白和非組蛋白上的精胺酸殘基進行對稱二甲基化，進而調控哺乳動物細胞中的許多生命過程。PRMT5在許多類型的癌症中過度表現，包括淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌、卵巢癌等，並且與多數的癌症進展和預後不良相關。PRMT5也可以抑制一些抑癌基因的轉錄，包括致瘤性抑制因子7、非轉移性基因23、視網膜母細胞瘤家族和程序性細胞死亡4等。因此，PRMT5是一個治療癌症的潛在標的。
甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)是一個抑癌基因，MTAP基因在許多人類腫瘤中高頻率缺失，包括53%的膠質母細胞瘤和26%的胰腺癌，是癌症中最常發生突變的基因。另外，MTAP常與體內常見的抑癌基因CDKN2A發生共缺失現象，這種共缺失現象在腫瘤中的比例可達9%~15%。
合成致死是指兩個基因同時發生突變導致細胞死亡的現象，其中單個基因發生突變都不會造成細胞死亡。研究表明，PRMT5與MTAP構成一對合成致死組合，抑制PRMT5可導致MTAP缺失腫瘤細胞的合成致死效應。MTAP參與甲硫腺苷(MTA)的代謝，MTAP基因缺失的癌細胞中由於MTA的積聚，會與PRMT5結合生成PRMT5·MTA複合物。因此PRMT5抑制劑可能成為MTAP缺失或低表現患者的高選擇性治療方法。
Mirati Therapeutics公司開發的MRTX1719是一種新型的PRMT5抑制劑，它選擇性地抑制與MTA結合的PRMT5，其結構如下：
雖然上述新型PRMT5抑制劑已經進入臨床實驗階段，在該領域取代了一定進展，但還沒有批准治療，因此仍需要繼續開發標靶PRMT5-MTA複合物的新型PRMT5抑制劑，這種新型PRMT5特異性小分子抑制劑或許會為癌症帶來新的化學療法。
本發明所要解決的技術問題是為了克服現有技術中PRMT5抑制劑結構單一，而提供了一種新穎的PRMT5抑制劑、其製備方法和用途。本發明提供的PRMT5抑制劑具有較好的人結腸癌穩定剔除MTAP蛋白細胞(HCT-116-MTAP-KO-1A2)抑制活性或選擇性，能夠抑制腫瘤細胞的增殖。
本發明提供了一種如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， 其中，X 1和X 2各自獨立地為CR 5或N； 各R 5獨立地為氘、氫、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基； R 1為3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、-N(R 6) 2、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述4~10元雜環基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、-NH 2或-OH；所述4~10元雜環基和鹵素取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； 當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氫、氰基、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、C 1- 6烷基、C 1- 6烷氧基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基、4~10元雜環基或5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基和5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氘、氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b、-C(=O)-O-C 6- 10芳基、-C(=O)-C 1- 6烷基或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氘、氫或C 1-20烷基； 各R 3c獨立地為氘、氫、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、3~8元環烷基、4~10元雜環基或C 6-10芳基；所述4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 4a為氘、H或3~8元環烷基； m為0~10的整數； Y、Z 1a、Z 1b、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； L、U 1a和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
本發明中，所述“氘代”、“鹵代”和“鹵素取代的”是指一個或多個氫原子被具體取代基所取代。例如，所述“氘代”是指一個或多個氫原子被氘所取代。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽中的某些基團如下定義，未提及的基團同本申請任一方案所述(簡稱“在本發明的某些優選實施方案中”)， ， 其中，X 1和X 2各自獨立地為CR 5或N； 各R 5獨立地為氘、氫、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基； R 1為3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、-N(R 6) 2、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述4~10元雜環基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-； 當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氫、氰基、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、C 1- 6烷基、C 1- 6烷氧基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基、4~10元雜環基或5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基和5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氘、氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b、-C(=O)-O-C 6- 10芳基、-C(=O)-C 1- 6烷基或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氘、氫或C 1-20烷基； 各R 3c獨立地為氘、氫、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、3~8元環烷基、4~10元雜環基或C 6-10芳基；所述4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 4a為氘、H或3~8元環烷基； m為0~10的整數； Y、Z 1a、Z 1b、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； L、U 1a和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽中的某些基團如下定義，未提及的基團同本申請任一方案所述(簡稱“在本發明的某些優選實施方案中”)， ， 其中，X 1和X 2各自獨立地為CR 5或N； 各R 5獨立地為氘、氫、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基； R 1為3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、-N(R 6) 2、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述4~10元雜環基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； 當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氫、氰基、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、C 1- 6烷基、C 1- 6烷氧基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基、4~10元雜環基或5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基和5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氘、氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b、-C(=O)-O-C 6- 10芳基、-C(=O)-C 1- 6烷基或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氘、氫或C 1-20烷基； 各R 3c獨立地為氘、氫、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、3~8元環烷基、4~10元雜環基或C 6-10芳基；所述4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 4a為氘、H或3~8元環烷基； m為0~10的整數； Y、Z 1a、Z 1b、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； L、U 1a和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽中的某些基團如下定義，未提及的基團同本申請任一方案所述(簡稱“在本發明的某些優選實施方案中”)， ， 其中，X 1和X 2各自獨立地為CR 5或N； 各R 5獨立地為氘、氫、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基； R 1為3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、-N(R 6) 2、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基；所述C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述4~10元雜環基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； 當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氫、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、C 1- 6烷基、C 1- 6烷氧基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基、4~10元雜環基或5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基和5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氘、氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b、-C(=O)-O-C 6- 10芳基、-C(=O)-C 1- 6烷基或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氘、氫或C 1-20烷基； 各R 3c獨立地為氘、氫、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、3~8元環烷基、4~10元雜環基或C 6-10芳基；所述4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 4a為氘、H或3~8元環烷基； m為0~10的整數； Y、Z 1a、Z 1b、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； L、U 1a和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些實施方案中，所述的如式I所示的化合物不為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些實施方案中，所述的如式I所示的化合物不為： 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為氫； 或者，所述的如式I所示的化合物為 。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為氫； 或者，所述的如式I所示的化合物為 。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氰基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、-NH 2或-OH； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、或被一個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為-Z 1d-11~20元雜芳基，所述-Z 1d-11~20元雜芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-； Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為-Z 1d-11~20元雜芳基，所述-Z 1d-11~20元雜芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、和被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基獨立地為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2b中，所述的3~8元環烷基各自獨立地為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2j中，所述的3~8元環烷基各自獨立地為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 4a中，所述的3~8元環烷基為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2a、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n和R 3c中，所述的3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、和-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基獨立地為環丙基、環丁基、環戊基，例如環丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2、R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n和R 3c中，所述的4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、和被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基獨立地為4~6元雜環基，例如哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基。
本發明中“ ”是指，相應的基團通過該“ ”與化合物中的其它片段、基團進行連接。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的4~10元雜環基為4~6元雜環基，例如氧雜環丁烷基、哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基，又例如氧雜環丁烷基( )。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述4~10元雜環基和鹵素取代的4~10元雜環基中的4~10元雜環基為4~6元雜環基，例如氧雜環丁烷基、氮雜環丁烷基、哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基，又例如氧雜環丁烷基( )、氮雜環丁烷基( )或吡咯烷基( )。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基獨立地為苯基或萘基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 2、R 3、R 4和R 3c中，所述的C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、和被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基獨立地為苯基或萘基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑基或咪唑基，例如 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑基、咪唑基或三氮唑基，例如 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基可以獨立地具有2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的5~10元雜芳基、被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的5~10元雜芳基、被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基可以獨立地具有2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2a中，所述的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2a中，所述的5~10元雜芳基可以獨立地具有2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2i中，所述的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2i中，所述的5~10元雜芳基可以獨立地具有2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n中，所述的5~10元雜芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n中，所述的5~10元雜芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基可以獨立地具有2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基。所述的8~10元稠雜芳基獨立地為 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地具有1、2或3個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N和O。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地為11~16元雜芳基，例如12元雜芳基、13元雜芳基或15元雜芳基，又例如 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地為11~16元雜芳基，例如12元雜芳基、13元雜芳基、14元雜芳基或15元雜芳基，又例如 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地為11~16元雜芳基，例如12元雜芳基、13元雜芳基、14元雜芳基或15元雜芳基，又例如 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地具有2、3或4個雜原子。所述的雜原子可獨立地選自N和O。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的鹵素取代的4~10元雜環基裡的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘，例如氟。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2c中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2g中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2k中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2a、R 2b、R 2d、R 2e、R 2f、R 2h、R 2i、R 2j、R 2l、R 2m、R 2n和R 5中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘，例如氟或氯。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1d和R 1-a中，所述的C 1- 6羥烷基獨立地為C 1- 4羥烷基，例如-CH 2OH、-CH 2CH 2OH、-CH(CH 3)OH或-CH(CH 3)CH 2OH。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1-a、R 2、R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、、R 2n和R 5中，所述的C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、鹵代C 1- 6烷氧基裡的C 1- 6烷氧基和氘代C 1- 6烷氧基裡的C 1- 6烷氧基獨立地為甲氧基、-OCH 2CH 3、-O(CH 2) 2CH 3、-OCH(CH 3) 2、-O(CH 2) 3CH 3、-OCH 2CH(CH 3) 2、-OCHCH 3CH 2CH 3或-OC(CH 3) 3，例如甲氧基、乙氧基或-OCH 2CH(CH 3) 2。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的C 2-6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2-6烯基裡的C 2-6烯基、和被一個或多個R 2i取代的C 2-6烯基裡的C 2-6烯基獨立地為C 2-4烯基，例如乙烯基、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 3c中，所述的C 2-6烯基獨立地為C 2-4烯基，例如乙烯基、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基裡的C 2- 6炔基、和被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基裡的C 2- 6炔基獨立地為C 2- 4炔基，例如乙炔基、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1d和R 3c中，所述的C 2- 6炔基獨立地為C 2- 4炔基，例如乙炔基、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1d中，所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的C 1- 6烷基、和被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基裡的C 1-6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基、乙基或異丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2b中，所述的C 1- 6烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2j中，所述的C 1- 6烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1a、R 1b、R 1c、R 1-a、R 2a、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 3c、R 5和R 6中，所述的C 1- 6烷基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-C(=O)-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-SO 2-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基和(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基、乙基或異丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，例如甲基、乙基或異丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a和R 3c中，所述的鹵代C 1-6烷基和-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基裡的鹵代C 1- 6烷基獨立地為鹵代C 1- 4烷基，例如-CF 3、-CHF 2或-CH 2CF 3。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1-a中，所述的-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基裡的鹵代C 1- 6烷基獨立地為鹵代C 1- 4烷基，例如-CF 3、-CHF 2、-CH 2CHF 2或-CH 2CF 3。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的鹵代C 1- 6烷氧基優選為鹵代C 1- 4烷氧基，例如-OCF 3、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2中，所述的氘代C 1- 6烷氧基優選為氘代C 1- 4烷氧基，例如-OCD 3或-OCD 2CD 3。
在本發明的某些優選實施方案中，R 3a和R 3b中，所述的C 1-20烷基獨立地為C 1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，又例如甲基、乙基或異丙基。
在本發明的某些優選實施方案中，L中，所述的C 1- 3亞烷基優選為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-，例如亞甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，U 1a中，所述的C 1- 3亞烷基優選為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-，例如亞甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，U 1b中，所述的C 1- 3亞烷基優選為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-，例如亞甲基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、或-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-或4~10元雜環基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為氫、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為氫。
在本發明的某些優選實施方案中，R 2a、R 2b、R 2c、R 2f、R 2g、R 2i、R 2j、R 2k、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基。
在本發明的某些優選實施方案中，R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2。
在本發明的某些優選實施方案中，R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 3c獨立地為氫。
在本發明的某些優選實施方案中，R 4a為H或3~8元環烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，m為1、2或3。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 5獨立地為氫、鹵素或-N(R 6) 2。
在本發明的某些優選實施方案中，Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-或-S-。
在本發明的某些優選實施方案中，Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H。
在本發明的某些優選實施方案中，Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-S-，R 6為H。
在本發明的某些優選實施方案中，Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-、-S-或-C(=O)-，R 6為H。
在本發明的某些優選實施方案中，L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 6獨立地為氫。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia、如式Ib或如式Ic所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ， 其中，R 1、R 2、R 3、R 4、R 4a、Y和L的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia’、如式Ib’或如式Ic’所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ， 其中，R 1d’為-Z 1a-C 1- 6烷基，其中所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基任選地被一個或多個R 1-a取代； 環B為 、 或 ； (1)式Ia’中，當R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； (2)式Ia’中，R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； (3)式Ib’和式Ic’中，R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基時，或者Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵，R 2為氫時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； Z 1a、Z 1c和Z 1d各自獨立地為化學鍵； R 1-a、R 2a、R 2b、R 2c、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 4a、Y和L的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia’、如式Ib’或如式Ic’所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ， 其中，R 1d’為-Z 1a-C 1- 6烷基，其中所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基任選地被一個或多個R 1-a取代； 環B為 、 或 ； (1)式Ia’中，當R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； (2)式Ia’中，R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ； (3)式Ib’和式Ic’中，R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基時，或者Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵，R 2為氫時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； Z 1a、Z 1c和Z 1d各自獨立地為化學鍵； R 1-a、R 2a、R 2b、R 2c、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 4a、Y和L的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia’、如式Ib’或如式Ic’所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ， 其中，R 1d’為-Z 1a-C 1- 6烷基，其中所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基任選地被一個或多個R 1-a取代； 環B為 、 或 ； (1)式Ia’中，當R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； (2)式Ia’中，R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ； (3)式Ib’和式Ic’中，R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基時，或者Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵，R 2為氫時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； Z 1a、Z 1c和Z 1d各自獨立地為化學鍵； R 1-a、R 2a、R 2b、R 2c、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 4a、Y和L的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式II-a、如式II-b或如式II-c所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 、 或 ； 其中，Y、L、R 1d和R 2的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式II-a、如式II-b、如式II-c、如式II-d、如式II-e或如式II-f所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 、 、 、 、 或 ； 其中，Y、L、R 1d和R 2的定義如前所述。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為5~10元雜芳基、被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基； R 2a、R 2b、R 2c和R 2f各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為H或3~8元環烷基； 各R 6獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵或-O-； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b、R 2c和R 2f各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為H或3~8元環烷基； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b、R 2c和R 2f各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為H或3~8元環烷基； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b、R 2c和R 2f各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為H或3~8元環烷基； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為5~10元雜芳基、被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為氫、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基； R 2g、R 2i、R 2j、R 2k和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H、鹵素或-N(R 6) 2； 各R 6獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵或-O-； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g、R 2i、R 2j、R 2k和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H、鹵素或-N(R 6) 2； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g、R 2i、R 2j、R 2k和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H、鹵素或-N(R 6) 2； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g、R 2i、R 2j、R 2k和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H、鹵素或-N(R 6) 2； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基或-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b和R 2c各自獨立地為鹵素、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； 各R 3c獨立地為氫； m為1； R 4a為H； Y、Z 1a、Z 1c和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基或-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b和R 2c各自獨立地為鹵素、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； 各R 3c獨立地為氫； m為1； R 4a為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基或-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b和R 2c各自獨立地為鹵素、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； 各R 3c獨立地為氫； m為1； R 4a為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基或被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基； R 2g、R 2j、和R 2k各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基或-N(R 6) 2； R 3和R 4各自獨立地為氫或-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b； R 3a和R 3b各自獨立地為C 1- 6烷基； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基或被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基； R 2g、R 2j、和R 2k各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基或-N(R 6) 2； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d 、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基或被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基； R 2g、R 2j、和R 2k各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基或-N(R 6) 2； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d 、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或C 1-6烷基； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為H； Y和Z 1a各自獨立地為化學鍵或-NR 6-； R 6為H； L為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 或被1個或多個R 1-a取代的 ； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基或-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為H； Y、Z 1a和Z 1e各自獨立地為化學鍵或-NR 6-； R 6為H； L為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當R 2為H時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或C 1-6烷基； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為H； Y和Z 1a各自獨立地為化學鍵； L為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基或3~8元環烷基；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g獨立地為氘或鹵素； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為氫； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； R 6為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-或4~10元雜環基； R 2為氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基或3~8元環烷基；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g獨立地為氘或鹵素； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； R 4a為氫； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； R 6為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g獨立地為氘； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為氫； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； R 6為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1d獨立地為被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1d獨立地為被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 1d獨立地為被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-a所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， , 其中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為鹵代C 1- 6烷氧基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為2、3、4或5； 例如，各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為鹵代C 1- 6烷氧基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為4。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-b所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， 其中，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基；R 2為H；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；L為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-c所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， , 其中，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； 例如，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，其中R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-d所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 其中，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基，或被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，R 1d為被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1f為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-d所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 其中，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-或4~10元雜環基；R 2為C 1-6烷基，或被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-或4~10元雜環基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 又例如，R 1d為被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基或C 1- 6烷基-OC(=O)-；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-c所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， , 其中，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； 例如，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，其中R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-d所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 其中，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基或-OH；R 2為C 1-6烷基，或被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-、4~10元雜環基或-OH；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 又例如，R 1d為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、C 1- 6烷基-OC(=O)-或C 1- 6烷基-SO 2-；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物為如式III-e-1或式III-e-2所示的化合物， 或 ， 其中，各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、4~10元雜環基或鹵素取代的4~10元雜環基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為4。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物為如式III-f-1或式III-f-2所示的化合物， 或 ， 其中， 表示單鍵或雙鍵； 當 表示雙鍵時，W為CR 1-a；當 表示單鍵時，W為C=O、CH 2或NR 1-a； 各R 1-a獨立地為C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基或-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和L獨立地為化學鍵。
在本發明的某些優選實施方案中，X 1和X 2各自獨立地為CH或N。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1為 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、-OCD 3或 。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為H、F、Cl、-CF 3、-CH 2CF 3、 、 、 、 、 、 、-CD 3、 、 、 、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為F、Cl、-CF 3、-CH 2CF 3、 、 、 、 、 、 、-CD 3、 、三氮唑基(例如 )、吡唑基(例如 )、 、 、-CH 3、氰基、 、 、-CH 2CHF 2、-CH 2CD 3、-CD 2CD 3或-CD 2CH 3； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H。
在本發明的某些優選實施方案中，R 3為H、 或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 4為H或 。
在本發明的某些優選實施方案中，R 4a為H或 。
在本發明的某些優選實施方案中，Y為化學鍵或-O-。
在本發明的某些優選實施方案中，Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，其中R 6為H。
在本發明的某些優選實施方案中，L為化學鍵或C 1- 3亞烷基。
在本發明的某些優選實施方案中，各R 5獨立地為H。
在本發明的某些優選實施方案中，所述的如式I所示的化合物選自如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
本發明還提供了一種藥物組合物，其包括如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，以及至少一種藥用輔料。
所述的藥用輔料的選擇因施用途徑和作用特點而異，通常可為本領域常規的填充劑、稀釋劑、黏合劑、濕潤劑、崩解劑、潤滑劑、乳化劑、助懸劑等。
本發明還提供了一種如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物在製備PRMT5抑制劑中的應用，例如在製備PRMT5·MTA抑制劑中的應用。在所述的應用中，所述的PRMT5抑制劑可用於哺乳動物生物體內；也可用於生物體外，主要作為實驗用途，例如：作為標準樣或對照樣提供比對，或按照本領域常規方法製成試劑盒，為抑制PRMT5的效果提供快速檢測。
本發明中，PRMT5·MTA是指MTAP(甲硫腺苷磷酸化酶)基因缺失的癌細胞中，MTA(甲硫腺苷)與PRMT5(蛋白質精胺酸N-甲基轉移酶5)結合生成的複合物。
本發明還提供了一種如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物在製備藥物中的應用，例如在製備治療和/或預防癌症藥物中的應用。所述的癌症可為MTAP相關/介導的癌症，優選地，所述的MTAP相關/介導的癌症為頭頸部癌症(例如甲狀腺癌、腦膜癌、顱內轉移瘤或膠質母細胞瘤)、呼吸系統癌症(例如肺癌或鼻咽癌)、消化系統癌症(食道癌、胃癌、肝癌、膽管癌、胰腺癌、結直腸癌、直腸癌或結腸癌)、泌尿系統癌症(例如腎癌、膀胱癌、前列腺癌或睾丸癌)、骨癌、婦科癌症(例如乳腺癌、子宮內膜癌、子宮頸癌或卵巢癌)、血液系統癌症(例如白血病、淋巴瘤或骨髓瘤)或其它類型癌症(例如黑色素瘤或皮膚癌)，更優選為淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、結腸癌、直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌或卵巢癌。
本發明還提供了一種如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物在製備藥物中的應用，例如在製備治療和/或預防MTAP相關/介導的疾病的藥物中的應用。所述疾病可為癌症。所述的癌症可為頭頸部癌症(例如甲狀腺癌、腦膜癌、顱內轉移瘤或膠質母細胞瘤)、呼吸系統癌症(例如肺癌或鼻咽癌)、消化系統癌症(食道癌、胃癌、肝癌、膽管癌、胰腺癌、結直腸癌、直腸癌或結腸癌)、泌尿系統癌症(例如腎癌、膀胱癌、前列腺癌或睾丸癌)、骨癌、婦科癌症(例如乳腺癌、子宮內膜癌、子宮頸癌或卵巢癌)、血液系統癌症(例如白血病、淋巴瘤或骨髓瘤)或其它類型癌症(例如黑色素瘤或皮膚癌)，優選為淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、結腸癌、直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌或卵巢癌。
本申請提供了一種治療和/或預防癌症的方法，該方法包括向需要其的受試者施用治療有效量的物質X；所述物質X為如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物。所述的癌症可為頭頸部癌症(例如甲狀腺癌、腦膜癌、顱內轉移瘤或膠質母細胞瘤)、呼吸系統癌症(例如肺癌或鼻咽癌)、消化系統癌症(食道癌、胃癌、肝癌、膽管癌、胰腺癌、結直腸癌、直腸癌或結腸癌)、泌尿系統癌症(例如腎癌、膀胱癌、前列腺癌或睾丸癌)、骨癌、婦科癌症(例如乳腺癌、子宮內膜癌、子宮頸癌或卵巢癌)、血液系統癌症(例如白血病、淋巴瘤或骨髓瘤)或其它類型癌症(例如黑色素瘤或皮膚癌)，優選為淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、結腸癌、直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌或卵巢癌。
本申請提供了一種治療和/或預防MTAP相關/介導的疾病的方法，該方法包括向需要其的受試者施用治療有效量的物質Y；所述物質Y為如上所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物。所述疾病可為癌症。所述的癌症可為頭頸部癌症(例如甲狀腺癌、腦膜癌、顱內轉移瘤或膠質母細胞瘤)、呼吸系統癌症(例如肺癌或鼻咽癌)、消化系統癌症(食道癌、胃癌、肝癌、膽管癌、胰腺癌、結直腸癌、直腸癌或結腸癌)、泌尿系統癌症(例如腎癌、膀胱癌、前列腺癌或睾丸癌)、骨癌、婦科癌症(例如乳腺癌、子宮內膜癌、子宮頸癌或卵巢癌)、血液系統癌症(例如白血病、淋巴瘤或骨髓瘤)或其它類型癌症(例如黑色素瘤或皮膚癌)，優選為淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、結腸癌、直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌或卵巢癌。
所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物可以為治療有效量。
所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如上所述的藥物組合物可以任何合適的途徑給予受試者，較佳地為口服或注射(靜脈、肌肉、皮下和冠狀動脈)。
本發明還提供了一種如上所述的如式I所示的化合物的製備方法，所述製備方法包括如下方案一、方案二或方案三： 方案一，當所述的如式I所示的化合物為所述的如式II-a所示的化合物時，從原料1a出發，經過取代反應得到中間體1b；中間體1b經過溴代、關環得到中間體1d；1d再與N,N-二甲基甲醯胺二甲基縮醛反應得到中間體1e；1e在水合肼的條件下生成中間體1f；1f再經過氯代、鄰苯二甲醯亞胺取代得到中間體1h；中間體1h與相應的硼酸酯化合物經Suzuki偶聯反應得到中間體1i；或者中間體1h轉化成硼酸酯中間體1j，再與相應的碘代物反應生成中間體1i；中間體1i經過肼解得到化合物II-a； ； 方案二，當所述的如式I所示的化合物為所述的如式II-a所示的化合物時，由原料2a(根據專利US20210078994A1中描述的方法製備)出發，經過桑德邁爾反應得到碘代物中間體2b，中間體2b再經酯還原成醇、氯化、鄰苯二甲醯胺取代得到中間體2e；中間體2e經過肼解之後再用碳酸第三丁酯保護得到中間體2g；中間體2g經過兩步偶聯反應和脫除第三丁氧羰基保護基後得到化合物II-a； ； 方案三，當所述的如式I所示的化合物為所述的如式II-b所示的化合物時，原料3a經強鹼二異丙基胺基鋰拔氫、鹵素轉移後再用二氧化碳處理得到羧酸中間體3b，3b再經酯化得到中間體3c；3c通過Stille偶聯反應得到中間體3e；3e與N-溴代丁二醯亞胺反應得到中間體3f；3f經乙酸鉀或二甲胺取代得到中間體3g-1或3g-2；3g-1或3g-2與水合肼並關環得到中間體3i-1或3i-2；3i-1或3i-2與相應的硼酸酯化合物經Suzuki偶聯反應得到中間體3j-1或3j-2；3j-1或3j-2再經過氯代、鄰苯二甲醯亞胺取代、肼解得到化合物II-b； ； 其中，W為Cl或Br；Y、L、R 1d和R 2的定義如前所述。
本發明還提供了一種如下所示的化合物， 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
術語定義
除前述以外，當用於本申請的說明書及申請專利範圍中時，除非另外特別指明，否則以下術語具有如下所示的含義。
如本文中所使用的，本發明式I所示的化合物可以含有一個或多個手性中心，並以不同的光學活性形式存在。當化合物含有一個手性中心時，化合物包含對映異構體。本發明包括這兩種異構體和這兩種異構體的混合物，如外消旋混合物。對映異構體可以通過本專業已知的方法拆分，例如結晶以及手性色譜等方法。當式I所示的化合物含有多於一個手性中心時，可以存在非對映異構體。本發明包括拆分過的光學純的特定異構體以及非對映異構體的混合物。非對映異構體可由本專業已知方法拆分，比如結晶以及手性色譜。
術語“立體異構體”包括構象異構體和構型異構體，其中構型異構體主要包括順反異構體和旋光異構體。本發明所述化合物可以以立體異構體的形式存在，並因此涵蓋所有可能的立體異構體形式，包括但不限於順反異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體等，本發明所述化合物也可以以前述的立體異構體的任何組合或任何混合物等形式存在，例如內消旋體、外消旋體、阻轉異構體的等量混合物，又例如單一對映異構體，單一非對映異構體或以上的混合物，或單一阻轉異構體或其混合物。
術語“互變異構體”是指因分子中某一原子在兩個位置迅速移動而產生的官能團異構體。
當本發明所述的化合物含有烯烴雙鍵時，除非特別說明，否則其包括順式異構體和反式異構體，以及其任何組合。
如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽意圖涵蓋如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽的任何同位素標記的(或“放射性標記的”)變體。這種變體可以是如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽中一個或多個原子被原子質量或質量數不同於通常在自然界中所發現的原子質量或質量數的原子置換而得到。所使用的放射性核素將取決於該放射性標記的變體的具體應用。舉例來說，對於體外受體標記和競爭測定， 3H或 14C常常是有用的。對於放射成像應用， 11C或 18F常常是有用的。
本發明化合物的特定同位素變體，特別是其中已經結合一種或多種放射性同位素的同位素變體，可有益於例如考察作用機制或在體內的活性組分分布；由於相對容易的可製備性和可檢測性，標記有 3H或 14C同位素的化合物特別適用於此目的。另外，納入同位素如氘，由於該化合物具有更好的代謝穩定性，例如延長體內的半衰期或降低所需的有效劑量，可產生特別的治療益處；因此本發明化合物的這種修飾還可在一些情況下構成本發明的優選實施方案。本發明化合物的同位素變體可通過本領域技術人員已知的方法，例如通過以下描述的方法及操作實施例中描述的方法，通過使用相應的同位素修飾的特定試劑和/或起始化合物來製備。
在本申請中，“藥物組合物”是指包含本發明化合物與本領域通常接受的用於將生物活性化合物輸送至哺乳動物(例如人)的介質的製劑。該介質包括藥學上可接受的載體。藥物組合物的目的是促進生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
在本申請中，“藥學上可接受的”是指不影響本發明化合物的生物活性或性質的物質(如藥用輔料)，並且相對無毒，即該物質可施用於個體而不造成不良的生物反應或以不良方式與組合物中包含的任意組分相互作用。
術語“藥用輔料”或“藥學上可接受的載體”是指生產藥品和調配處方時使用的賦形劑和附加劑，是除活性成分以外，包含在藥物製劑中的所有物質。可參見中華人民共和國藥典(2015年版)四部、或、Handbook of Pharmaceutical Excipients (Raymond C Rowe, 2009 Sixth Edition)。輔料主要用於提供一個安全、穩定和功能性的藥物組合物，還可以提供方法，使受試者接受給藥後活性成分以所期望速率溶出，或促進受試者接受組合物給藥後活性成分得到有效吸收。所述的藥用輔料可以是惰性填充劑，或者提供某種功能，例如穩定該組合物的整體pH值或防止組合物活性成分的降解。所述的藥用輔料可以包括下列輔料中的一種或多種：黏合劑、助懸劑、乳化劑、稀釋劑、填充劑、成粒劑、膠黏劑、崩解劑、潤滑劑、抗黏著劑、助流劑、潤濕劑、膠凝劑、吸收延遲劑、溶解抑制劑、增強劑、吸附劑、緩衝劑、螯合劑、防腐劑、著色劑、矯味劑和甜味劑。
本發明的藥物組合物可根據公開的內容使用本領域技術人員已知的任何方法來製備。例如，常規混合、溶解、造粒、乳化、磨細、包封、包埋或凍乾工藝。
當用作藥物時，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽可以以藥物組合物的任何形式給藥。這些組合物可以各種途徑施用，視需要局部或系統性治療和要治療的區域而定。給藥可以是局部(包括表皮和透皮，眼部和黏膜，包括鼻內，陰道和直腸遞送)，肺(例如，通過粉末或氣溶膠吸入或吹入，包括通過噴霧器；氣管內或鼻內)，口服(固體和液體製劑)或胃腸外給予形式。固體口服製劑的實例包括但不限於粉末、膠囊、囊片、軟膠囊劑和片劑。口服或黏膜給藥的液體製劑實例包括但不限於懸浮液、乳液、酏劑和溶液。局部用製劑的實例包括但不限於乳劑、凝膠劑、軟膏劑、乳膏劑、貼劑、糊劑、泡沫劑、洗劑、滴劑或血清製劑。胃腸外給藥的製劑實例包括但不限於注射用溶液、可以溶解或懸浮在藥學上可接受載體中的乾製劑、注射用懸浮液和注射用乳劑。外用給藥的藥物組合物和製劑可包括透皮貼片、油膏劑、乳液、軟膏劑、凝膠、滴劑、栓劑、噴劑、液體和粉末。所述的藥物組合物的其它合適製劑的實例包括但不限於滴眼液和其他眼科製劑；氣霧劑：如鼻腔噴霧劑或吸入劑。口服給藥可以包括配製為每日一次或每日兩次(BID)給藥的劑型。胃腸外給藥包括靜脈內、動脈內、皮下、腹膜內肌肉內或注射或輸液；或顱內如鞘內或心室內給藥。胃腸外給藥可以單次推注劑量形式，或可以是通過連續灌注幫浦。常規藥學載體、水、粉末或油狀基底、增稠劑等可能是必須或需要的。包括本發明的藥物組合物還可以是控釋或延遲釋放劑型(例如脂質體或微球)。
術語“治療”指治療性療法或緩解性措施。涉及具體病症時，治療指：(1)緩解疾病或者病症的一種或多種生物學表現，(2)干擾(a)導致或引起病症的生物級聯中的一個或多個點或(b)病症的一種或多種生物學表現，(3)改善與病症相關的一種或多種症狀、影響或副作用，或者與病症或其治療相關的一種或多種症狀、影響或副作用，或(4)減緩病症或者病症的一種或多種生物學表現發展。“治療”也可以指與不接受治療的期望存活相比延長生存期。
術語“預防”是指獲得或發生疾病或障礙的風險降低。
術語“治療有效量”是指在給予患者時足以有效治療本文所述的疾病或病症的化合物的量。“治療有效量”將根據化合物、病症及其嚴重度、以及欲治療患者的年齡而變化，但可由本領域技術人員根據需要進行調整。
術語“患者”是指根據本發明的實施例，即將或已經接受了該化合物或組合物給藥的任何動物，哺乳動物為優，人類最優。術語“哺乳動物”包括任何哺乳動物。哺乳動物的實例包括但不限於牛、馬、羊、豬、貓、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、猴、人等，以人類為最優。
除非另外說明，應當應用本文所使用的下列定義。出於本發明的目的，化學元素與元素週期表CAS版，和《化學和物理手冊》，第75版，1994一致。此外，有機化學一般原理可參考"Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito:1999和"March's Advanced Organic Chemistry”by Michael B. Smith and Jerry March, John Wiley & Sons, New York: 2007中的描述，其全部內容通過引用併入本文。
術語“藥學上可接受的鹽”是指化合物與藥學上可接受的(相對無毒、安全、適合於患者使用)酸或鹼反應得到的鹽。當化合物中含有相對酸性的官能團時，可以通過在合適的惰性溶劑中用足量的藥學上可接受的鹼與化合物的游離形式接觸的方式獲得鹼加成鹽。藥學上可接受的鹼加成鹽包括但不限於鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、鎂鹽、鉍鹽、銨鹽等。當化合物中含有相對鹼性的官能團時，可以通過在合適的惰性溶劑中用足量的藥學上可接受的酸與化合物的游離形式接觸的方式獲得酸加成鹽。所述藥學上可接受的酸包括無機酸和有機酸。具體可參見Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)或Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (P. Heinrich Stahl and Camille G. Wermuth, ed., Wiley-VCH, 2002)。
在本說明書中，可由本領域技術人員選擇基團及其取代基以提供穩定的結構部分和化合物。當通過從左向右書寫的常規化學式描述取代基時，該取代基也同樣包括從右向左書寫結構式時所得到的在化學上等同的取代基。
在本文中定義的某些化學基團前面通過簡化符號來表示該基團中存在的碳原子總數。例如，C 1-C 4烷基或C 1-4烷基是指具有總共1、2、3或4個碳原子的如下文所定義的烷基。簡化符號中的碳原子總數不包括可能存在於所述基團的取代基中的碳。
在本文中，取代基中定義的數值範圍如0至10、1-6、1-3等表明該範圍內的整數，如1-6為1、2、3、4、5、6。
術語“任選地被一個或多個R 1-a取代”表示未被R 1-a取代和被一個或多個R 1-a取代兩種情形。例如，“所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基任選地被一個或多個R 1-a取代”表示-Z 1a-C 1- 6烷基和-Z 1a-(被一個或多個R 1-a取代的)C 1- 6烷基。
術語“包括”為開放式表達，即包括本發明所指明的內容，但並不排除其他方面的內容。
術語“被……取代的”或“被……取代”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。
一般而言，術語“取代的”或“取代”表示所給結構中的一個或多個氫原子被具體取代基所取代。進一步地，當該基團被1個以上所述取代基取代時，所述取代基之間是相互獨立的，即，所述的1個以上的取代基可以是互不相同的，也可以是相同的。除非其他方面表明，一個取代基團可以在被取代基團的各個可取代的位置進行取代。當所給出的結構式中不只一個位置能被選自具體基團中的一個或多個取代基所取代，那麼取代基可以相同或不同地在各個位置取代。
在本說明書的各部分，本發明公開化合物的取代基按照基團種類或範圍公開。特別指出，本發明包括這些基團種類和範圍的各個成員的每一個獨立的次級組合。術語“C x-C y烷基"或“C x-y烷基"是指含有x至y個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴。例如，術語“C 1-C 6烷基”或“C 1-6烷基”特別指獨立公開的甲基、乙基、C 3烷基、C 4烷基、C 5烷基和C 6烷基；“C 1-4烷基”特指獨立公開的甲基、乙基、C 3烷基(即丙基，包括正丙基和異丙基)、C 4烷基(即丁基，包括正丁基、異丁基、第二丁基和第三丁基)。
本文所用術語“部分”、“結構部分”、“化學部分”、“基團”、“化學基團”是指分子中的特定片段或官能團。化學部分通常被認為是嵌入或附加到分子上的化學實體。
當所列舉的取代基中沒有指明其通過哪一個原子連接到化學結構通式(包括但未具體提及的化合物)中時，這種取代基可以通過其任何原子相鍵合。取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
當任意變數(例如R 1-a)在化合物的定義中多次出現時，該變數每一位置出現的定義與其餘位置出現的定義無關，它們的含義互相獨立、互不影響。因此，若某基團被1個、2個或3個R 1-a基團取代，也就是說，該基團可能會被最多3個R 1-a取代，其中某一位置R 1-a的定義與其餘位置R 1-a的定義是互相獨立的。另外，取代基和/或變數的組合只有在該組合產生穩定的化合物時才被允許。
當所列舉的基團中沒有明確指明其具有取代基時，這種基團僅指未被取代。例如當“C 1-6烷基”沒有“取代或未取代的”的限定時，僅指“C 1-6烷基”本身或“未取代的C 1-6烷基”。
在本發明的各部分，描述了連接取代基。當該結構清楚地需要連接基團時，針對該基團所列舉的馬庫西變數應理解為連接基團。例如，如果該結構需要連接基團並且針對該變數的馬庫西基團定義列舉了“烷基”，則應該理解，該“烷基”代表連接的亞烷基基團。
在一些具體的結構中，當烷基基團清楚地表示為連接基團時，則該烷基基團代表連接的亞烷基基團，例如，基團“鹵代-C 1-6烷基-”中的C 1-6烷基應當理解為C 1-6亞烷基。
術語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘，尤其指F、Cl或Br。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分(例如用在鹵代烷基、氘代烷基等基團中)，術語“烷基”是指包括具有指定碳原子數目的支鏈和直鏈的飽和脂族烴基，僅由碳原子和氫原子組成、具有例如1至12個(優選1至8個，更優選1至6個，最優選1至4個)碳原子，且通過單鍵與分子的其餘部分連接，其中，丙基為C 3烷基(包括同分異構體，例如正丙基或異丙基)；丁基為C 4烷基(包括同分異構體，例如正丁基、第二丁基、異丁基或第三丁基)；戊基為C 5烷基(包括同分異構體，例如正戊基、1-甲基-丁基、1-乙基-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、異戊基、第三戊基或新戊基)；己基為C 6烷基(包括同分異構體，例如正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基)。例如包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、正辛基、壬基和癸基等其類似烷基。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“亞烷基”表示從飽和的直鏈或支鏈烴中去掉兩個氫原子所得到的飽和的二價烴基基團；即烷基中的一個氫被取代，烷基的定義如上所述。亞烷基基團的實例包括亞甲基(-CH 2-)，亞乙基{包括-CH 2CH 2-或-CH(CH 3)-}，亞異丙基{包括-CH(CH 3)CH 2-、-CH 2CH(CH 3)-或-C(CH 3) 2-}等等。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“烷氧基”是指-O-烷基，烷基的定義如上所述。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“羥烷基”是指HO-烷基-，烷基的定義如上所述。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“烯基”是指具有至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的烴基，僅由碳原子和氫原子組成、具有例如2至12個(優選2至8個，更優選2至6個，最優選2至4個)碳原子，且通過單鍵與分子的其餘部分連接，例如包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、正烯丙基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、戊-1-烯基或戊-1,4-二烯基等。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“炔基”是指具有至少一個三鍵的直鏈或支鏈的烴基，僅由碳原子和氫原子組成、具有例如2至12個(優選2至8個，更優選2至6個，最優選2至4個)碳原子，且通過單鍵與分子的其餘部分連接，例如包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、正炔丙基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、戊-1-炔基或戊-1,4-二炔基等。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“環烷基”意指飽和的單環或多環(例如雙環、三環或更多環的橋環、并環(稠環)或螺環體系)的碳環取代基，且其可經由任何適宜的碳原子通過單鍵與分子的其餘部分連接；如具有3至15個碳原子的3~15元環烷基，優選具有3至12個碳原子3~12元環烷基，更優選具有3至8個碳原子的3~8元環烷基，最優選具有3至6個碳原子的3~6元環烷基。環烷基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、金剛烷基等。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“雜環基”是指由碳原子和1、2、3、4、5或6個選自N、O和S的雜原子組成的穩定的飽和或部分不飽和的單環或多環(例如雙環、三環或更多環的橋環、并環(稠環)或螺環體系)的非芳香性環狀基團；優選包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的3-12元雜環基，更優選包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的3-10元雜環基，最優選包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的3-8元雜環基。當其為雙環、三環或更多環的并環(稠環)的雜環基時，其還可包括與如本文中所定義的環烴基、芳基、雜芳基形成并環(稠環)，條件是雜環基經由飽和或部分不飽和的雜環中任何適宜的原子通過單鍵與分子的其餘部分連接。當其為雙環、三環或更多環的螺環的雜環基時，其還可包括與如本文中所定義的環烴基形成螺環，條件是雜環基經由飽和或部分不飽和的雜環中任何適宜的原子通過單鍵與分子的其餘部分連接。在本發明的某一方案中，雜環基包括“雜環烷基”、“雜環烯基”，雜環烷基是指由碳原子和1、2、3、4、5或6個選自N、O和S的雜原子組成的穩定的飽和的單環或多環(例如雙環、三環或更多環的橋環、并環(稠環)或螺環體系)的環狀基團，雜環烯基是指由碳原子和1、2、3、4、5或6個選自N、O和S的雜原子組成的穩定的具有至少一個雙鍵的部分不飽和的單環或多環(例如雙環、三環或更多環的橋環、并環(稠環)或螺環體系)的非芳香性環狀基團。例如所述的3-10元雜環基包括3-10元雜環烷基或3-10元雜環烯基。在一些實施例中，“雜環烷基”是3至7元單環的雜環烷基、4至8元并環連接的雜環烷基、4至8元橋環連接的雜環烷基或5至10元螺環連接的雜環烷基。示例性3元雜環烷基基團包括但不限於，氮雜環丙基、環氧乙烷基以及硫雜環丙烷基，或者其立體異構體；示例性4元雜環烷基基團包括但不限於，氮雜環丁烷基(例如 )，環氧丙烷基，氧雜環丁烷基(例如 )，硫雜環丁烷基，或者其同分異構體和立體異構體；示例性5元雜環烷基基團包括但不限於，四氫呋喃基，四氫噻吩基，吡咯烷基 (例如 )，或者其同分異構體和立體異構體。示例性6元雜環烷基基團包括但不限於，哌啶基，四氫吡喃基，硫化環戊烷基，嗎啉基，硫代嗎啉基，二噻烷基，二噁烷基，哌嗪基，三嗪烷基，或者其同分異構體和立體異構體。示例性7元雜環烷基基團包括但不限於， 、 、 或 ，或者其同分異構體和立體異構體。示例性8元雜環烷基基團包括但不限於， 、 、 、 或 ，或者其同分異構體和立體異構體。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“芳基”是指由碳原子組成的滿足4n+2規則的共軛烴環體系的芳香基團，每個環均具有芳香性。在某一方案中，“芳基”是指具有6至18個(優選6至10個)碳原子的芳香基團。芳基的實例包括但不限於苯基或萘基等。
在本申請中，作為基團或是其它基團的一部分，術語“雜芳基”意指環內具有碳原子和1至5個選自氮、氧和硫的雜原子的共軛環系基團。除非本說明書中另外特別指明，否則雜芳基可為單環、雙環、三環或更多環的環體系，當其為雙環、三環或更多環的并環(稠環)時，其還可以包括與如本文中所定義的環烴基或雜環基稠合，條件是雜芳基經由芳香環上的原子通過單鍵與分子的其餘部分連接。優選包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的5-10元雜芳基，或者包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的11-20元雜芳基，更優選包含1個、2個、3個或4個選自N、O和S的雜原子的5-6元雜芳基、8-10元雜芳基、12元雜芳基、13元雜芳基、14元雜芳基或15元雜芳基。雜芳基的實例包括但不限於噻吩基、咪唑基、吡唑基(例如 、 或 )、噻唑基、噁唑基、二唑基、噁二唑基、異噁唑基、吡啶基 、嘧啶基 、吡嗪基、噠嗪基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、吲哚基 、呋喃基、吡咯基、三唑基(例如 或 )、四唑基、三嗪基、吲嗪基、異唑基、噻二唑基、異吲哚基、吲唑基、異吲唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、二氮萘基、萘啶基、喹噁啉基、蝶啶基、咔唑基、咔啉基、菲啶基、菲咯啉基、吖啶基、吩嗪基、異噻唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并噻吩基、噁三唑基、噌啉基、喹唑啉基、中氮茚基、鄰二氮雜菲基、異噁唑基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、苯并噁唑基或苯并異唑基。雜芳基的實例包括但不限於 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
基團末端或兩端的“-”是指該基團通過該位點與分子中的其他片段連接。
應該理解，在本發明中使用的單數形式，如“一種”，包括複數指代，除非另有規定。
術語“一種(個)或多種(個)”或“一種(個)或兩種(個)以上”是指即1、2、3、4、5、6、7、8、9或更多。
除非另有說明，本發明採用質譜、元素分析的傳統方法，各步驟和條件可參照本領域常規的操作步驟和條件。
除非另有指明，本發明採用分析化學、有機合成化學和光學的標準命名及標準實驗室步驟和技術。在某些情況下，標準技術被用於化學合成、化學分析。
另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本發明中所採用的描述方式“…獨立地為”應做廣義理解，是指所描述的各個個體之間是相互獨立的，可以獨立地為相同或不同的具體基團。更詳細地，描述方式“…獨立地為”既可以是指在不同基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響；也可以表示在相同的基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響。
本領域技術人員可以理解，根據本領域中使用的慣例，本申請描述基團的結構式中所使用的“ ”是指，相應的基團通過該“ ”與化合物中的其它片段、基團進行連接。
除非另有規定，本文使用的所有技術術語和科學術語具有要求保護主題所屬領域的標準含義。倘若對於某術語存在多個定義，則以本文定義為準。
在符合本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。
本發明所用試劑和原料均市售可得。
本發明的積極進步效果在於：本發明提供了一類PRMT5抑制劑，具有較好的人結腸癌穩定剔除MTAP蛋白細胞(HCT-116-MTAP-KO-1A2)抑制活性或選擇性，能夠抑制腫瘤細胞的增殖。
下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但並不因此將本發明限制在所述的實施例範圍之中。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商品說明書選擇。
以下實施例對本發明進行更詳細的說明，但對本發明不具有任何限定作用。
本發明的化合物結構是通過核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。核磁共振化學位移(δ)以百萬分之一(ppm)的單位給出。核磁共振的測定是用布魯克(Bruker)AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d 6)或氘代氯仿(CDCl 3)，內標為四甲基矽烷(TMS)。質譜的測定是用安捷倫(Agilent)1260-6125B單四極杆液質聯用儀，採用的是電噴霧離子源(ESI)。
對向矽膠柱層析，使用的是拜泰齊(Biotage)Selekt快速製備色譜儀以及適當規格的拜泰齊生產的BK-SIL矽膠預填充柱或艾傑爾(Agela)生產的Claricep Flash矽膠預填充柱。
薄層層析色譜矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，採用的規格是0.15mm～0.20mm，製備薄層層析色譜採用的規格是0.4mm～0.5mm。
製備高效液相色譜(製備HPLC)使用的是沃特世(Waters)公司生產的配備ACQUITY QDa質譜檢測器的AutoPurification LC製備系統。製備色譜柱用的是SunFire C18 5μm 19x250mm OBD製備柱。流動相使用不同梯度的水(含0.1%甲酸)-乙腈來洗脫化合物。
中英文縮寫如下所示： Boc：第三丁氧羰基；SEM：(三甲矽烷基)乙氧甲基；THP：四氫吡喃基；TIPS：三異丙基矽基；CDCl 3：氘代氯仿；DMSO：二甲基亞碸；-Bpin： 。
實施例 1 2-(4-(4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -8-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 1)
步驟1：4-溴-2-甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯甲酸甲酯 將4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(247 mg，1.0 mmol)，三氟乙醇(200 mg，2.0 mmol)溶向二甲基亞碸(5 mL)，加入碳酸銫(652 mg，2.0 mmol)，80℃攪拌反應18小時。冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(236 mg，收率72.1%)。 ESI-MS m/z：326.9 [M+1] +。
步驟2：4-溴-2-(溴甲基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯甲酸甲酯 將4-溴-2-甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯甲酸甲酯(2610 mg，8.0 mmol)溶向四氯化碳(30 mL)，加入過氧化苯甲醯(258 mg，0.8 mmol，75%)， N-溴代丁二醯亞胺(1570 mg，8.8 mmol)，80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(3060 mg，收率94.7%)。 ESI-MS m/z：404.9 [M+1] +。
步驟3：5-溴-7-(2,2,2-三氟乙氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將4-溴-2-(溴甲基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯甲酸甲酯(3060 mg，7.57 mmol)溶向1,4-二氧六環(30 mL)和水(10 mL)的混合溶液中，100℃攪拌反應8小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(1600 mg，收率68.2%)。 ESI-MS m/z：310.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.35 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.33-5.19 (m, 2H), 4.74-4.57 (m, 2H).
步驟4：5-溴-3-((二甲基胺基)亞甲基)-7-(2,2,2-三氟乙氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將5-溴-7-(2,2,2-三氟乙氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(1240 mg，4.0 mmol)溶向 N, N-二甲基甲醯胺二甲基縮醛(3065 mg，25.76 mmol)，加入第三丁醇鉀(45 mg，0.4 mmol，75%)，110℃攪拌反應12小時。冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(930 mg，收率63.7%)。 ESI-MS m/z：365.9 [M+1] +。
步驟5：6-溴-4-((二甲基胺基)甲基)-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將5-溴-3-((二甲基胺基)亞甲基)-7-(2,2,2-三氟乙氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(930 mg，2.54 mmol)溶向乙醇(10 mL)，加入水合肼(318 mg，5.08 mmol，85%)，70℃攪拌反應12小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(630 mg，收率65.4%)。 ESI-MS m/z：380.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.39 (s, 1H), 7.98 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4.91 (q, J= 8.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.17 (s, 6H).
步驟6：6-溴-4-(氯甲基)-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將6-溴-4-((二甲基胺基)甲基)-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(630 mg，1.66 mmol)溶向四氫呋喃(50 mL)，冷卻至0℃，氬氣氛圍下滴加氯甲酸異丁酯(272 mg，2.0 mmol)，自然恢復至25℃攪拌反應6小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(500 mg，收率81.4%)。 ESI-MS m/z：370.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.64 (s, 1H), 7.89 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.95 (q, J= 8.8 Hz, 2H).
步驟7：2-((7-溴-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚啉-1,3-二酮 將鄰苯二甲醯亞胺化鉀鹽(412 mg，2.23 mmol)溶向 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)，緩慢滴加入6-溴-4-(氯甲基)-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(550 mg，1.48 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液中，15℃攪拌反應0.5小時。加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(420 mg，收率59.1%)。 ESI-MS m/z：482.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.32 (s, 1H), 8.01 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.97-7.92 (m, 2H), 7.92-7.87 (m, 2H), 7.74 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.94 (q, J= 8.8 Hz, 2H).
步驟8：(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)硼酸 將2-((7-溴-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚啉-1,3-二酮(73 mg，0.15 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(77 mg，0.3 mmol)，乙酸鉀(45 mg，0.45 mmol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(11 mg，0.015 mmol)，二氧六環(5 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，100℃攪拌反應13小時。冷卻至室溫，通過矽藻土過濾，減壓濃縮，殘留物直接用向下一步，黃色油狀物(67 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：448 [M+1] +。
步驟9：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)硼酸(67 mg，0.15 mmol)，2-(4-溴-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(72 mg，0.195 mmol，根據專利US20210078994A1中的方法製備)，1,1'-雙(二-第三丁基膦)二茂鐵二氯合鈀(10 mg，0.015 mmol)，碳酸氫鈉(38 mg，0.45 mmol)，二氧六環(4 mL)和水(1 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，棕色固體(40 mg，收率38.8%)。 ESI-MS m/z：693.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.22 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.99-7.93 (m, 2H), 7.93-7.87 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.95 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.69 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.19-4.12 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 0.97-0.76 (m, 4H).
步驟10：2-(4-(4-(胺甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(40 mg，0.06 mmol)溶向乙醇(4 mL)，加入水合肼(19.5 mg，0.33 mmol，85%)，25℃攪拌反應20小時。冷卻至室溫，減壓濃縮後製備高效液相色譜純化，得到產物，白色固體(7 mg，收率21.2%)。 ESI-MS m/z：563.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.35 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J= 0.9 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.83-4.66 (m, 2H), 4.24-4.16 (m, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 0.95-0.76 (m, 4H).
實施例 2 2-(4-(4-( 胺甲基 )-8-((1- 氟環丙基 ) 甲氧基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 2)
步驟1：4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈 氬氣保護下，將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(11 g，26.4 mmol，該中間體的合成參考文獻Journal of Medicinal Chemistry, 2022, vol. 65, (3) p. 1749 – 1766)和2-異丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(7.9 g，42.2 mmol)溶向四氫呋喃(100 mL)中，降溫至0℃，滴加入異丙基氯化鎂(31.7 mL，1 M)，0℃下攪拌反應3小時，加飽和氯化銨(20 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(100 mL×2)萃取，水洗滌，乾燥柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=4：1)得到產物黃色液體(8.4 g，收率76%)。 ESI-MS m/z：418.1, 420.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.92 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.60 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 1.15 (d, J = 2.1 Hz, 12H), 0.92 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 0.79 (t, J = 1.5 Hz, 2H).
步驟2：4-溴-2-((1-氟環丙基)甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將氫化鈉(1.07 g，26.72 mmol，60%純度)溶向N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)，在氬氣氛圍、0℃下加入(1-氟環丙基)甲醇(1.2 g，13.36 mmol)，在15℃下攪拌30分鐘，加入4-溴-2-羥基-6-甲基苯甲酸甲酯(2.2 g，8.91 mmol)，在15℃下攪拌2小時。在0℃下慢慢加入冰水(10 mL)淬滅反應，然後將反應液倒入冰水(200 mL)中，用乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到透明油狀物(1.7 g，收率60%)。 ESI-MS m/z：317.0, 319.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.01 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 6.94 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.21 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.20 – 1.09 (m, 2H), 0.83 – 0.75 (m, 2H).
步驟3：4-溴-2-(溴甲基)-6-((1-氟環丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯 將4-溴-2-((1-氟環丙基)甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯(1.5 g，4.73 mmol)溶向四氯化碳(20 mL)，加入過氧化二苯甲醯(200 mg，0.83 mmol)和N-溴代琥珀醯亞胺(1.5 g，8.43 mmol)，反應在80℃攪拌6小時。反應液冷卻至室溫，過濾濾液減壓濃縮得到粗品黃色固體(2.1 g)，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：418.9 [M+1] +。
步驟4：5-溴-7-((1-氟環丙基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將4-溴-2-(溴甲基)-6-((1-氟環丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(2.1 g，5.33 mmol)溶向1,4-二氧六環(21 mL)，加入水(7 mL)，反應在100℃攪拌16小時。向反應液中加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合併有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到淡黃色固體(540 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：300.9, 302.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.22 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.19 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.48 (d, J= 19.4 Hz, 2H), 1.27 – 1.17 (m, 2H), 0.96 – 0.89 (m, 2H).
步驟5：5-溴-3-((二甲胺基)亞甲基)-7-((1-氟環丙基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將5-溴-7-((1-氟環丙基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(540 mg，1.8 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺二甲基縮醛(10 mL)，在120℃下攪拌4小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色油狀物(620 mg，收率97%)。 ESI-MS m/z：356.0, 358.0 [M+1] +。
步驟6：6-溴-4-((二甲胺基)甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將5-溴-3-((二甲胺基)亞甲基)-7-((1-氟環丙基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(140 mg，0.393 mmol)溶向乙醇(5 mL)，加入水合肼(50 mg，0.786 mmol，85%純度)，在80℃下攪拌12小時。反應液直接減壓濃縮得粗品，粗品用乙酸乙酯(10 mL)打漿，得到白色固體(75 mg，收率52%)。 ESI-MS m/z：370.0, 372.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.72 (s, 1H), 7.90 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 18.3 Hz, 2H), 3.58 (s, 2H), 2.31 (s, 6H), 1.27 – 1.17 (m, 2H), 1.02 – 0.94 (m, 2H).
步驟7：6-溴-4-(氯甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將6-溴-4-((二甲胺基)甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(400 mg，1.08 mmol)溶向四氫呋喃(10 mL)，在0~5℃、氬氣氛圍下加入氯甲酸異丁酯(176 mg，1.28 mmol)在15℃下攪拌16小時。反應液直接減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1)分離，得到黃色固體(368 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：363.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.54 (s, 1H), 7.77 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.52 (d, J= 20.9 Hz, 2H), 1.17 – 1.09 (m, 2H), 0.95 – 0.90 (m, 2H).
步驟8：2-((7-溴-5-((1-氟環丙基)甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮 將鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(345 mg，1.86 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)，慢慢加入6-溴-4-(氯甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(368 mg，1.02 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液，在15℃下攪拌20分鐘。反應液倒入冰水(200 mL)中，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合併有機相用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到淡黃色固體(450 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：472.0, 474.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.53 (s, 1H), 7.91 (dd, J= 5.4, 3.0 Hz, 2H), 7.77 (dd, J= 5.5, 3.0 Hz, 2H), 7.65 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.46 (d, J= 18.1 Hz, 2H), 1.22 – 1.15 (m, 2H), 0.98 – 0.94 (m, 2H).
步驟9：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將2-((7-溴-5-((1-氟環丙基)甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮(80 mg，0.17 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(102 mg，0.17 mmol，70%純度)溶向1,4-二氧六環(5 mL)，加入碳酸鉀(70 mg，0.51 mmol)、水(1 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(13 mg，0.02 mmol)，反應在80℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1)分離，得到黃色固體(130 mg)。 ESI-MS m/z：683.1 [M+1] +。
步驟10：2-(4-(4-(胺甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-8-((1-氟環丙基)甲氧基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(130 mg，0.19 mmol)溶向乙醇(5 mL)，水合肼(34 mg，0.57 mmol，85%純度)，反應在50℃攪拌16小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到白色固體(5 mg)。 ESI-MS m/z：553.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.13 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.30 (d, J= 20.8 Hz, 2H), 4.18 (tq, J= 7.5, 4.6, 3.7 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 1.10 – 1.04 (m, 2H), 0.86 (td, J= 7.8, 5.3 Hz, 4H), 0.83 – 0.78 (m, 2H).
實施例 3 2-(4-(8-((1 H-1,2,4- 三唑 -3- 基 ) 甲氧基 )-4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 3)
步驟1：5-溴-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將5-溴-7-羥基異苯并呋喃-1(3 H)-酮(840 mg，3.65 mmol)溶向二氯甲烷(20 mL)，加入N,N-二異丙基乙胺(1.41 g，10.93 mmol)，之後加入2-(三甲矽烷基)乙氧甲基氯(915 mg，5.48 mmol)，在15℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(1.3 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：381.0, 383.0 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.41 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 1.3 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 5.21 (s, 2H), 3.85 – 3.79 (m, 2H), 0.99 – 0.92 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
步驟2：5-溴-3-((二甲胺基)亞甲基)-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮 將5-溴-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(1.4 g，3.89 mmol)溶向第三丁氧基二(二甲基胺基)甲烷(5 mL)，在氬氣氛圍、120℃下攪拌1小時。將反應液減壓濃縮得到粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到黃色固體(1.6 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：414.0, 416.0 [M+1] +。
步驟3：6-溴-4-((二甲胺基)甲基)-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將5-溴-3-((二甲胺基)亞甲基)-7-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3 H)-酮(1.6 g，3.87 mmol)溶向乙醇(20 mL)，加入水合肼(455 mg，7.73 mmol)，在氬氣氛圍、80℃攪拌12小時。反應液減壓濃縮得到粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(850 mg，收率51%)。 ESI-MS m/z：428.1, 430.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.83 (s, 1H), 7.89 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 3.88 – 3.82 (m, 2H), 3.61 (s, 2H), 2.33 (s, 6H), 1.01 – 0.93 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
步驟4：6-溴-4-(氯甲基)-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮 將6-溴-4-((二甲胺基)甲基)-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(650 mg，1.52 mmol)溶向四氫呋喃(10 mL)，加入碳酸鉀(313 mg，2.27 mmol)，在-70℃~-60℃下加入氯甲酸異丁酯(311 mg，2.27 mmol)，在15℃下攪拌3小時。反應液直接過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到黃色固體(230 mg，收率36%)。 ESI-MS m/z：442.9 [M+Na] +。
步驟5：2-((7-溴-4-氧代-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮 將鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(218 mg，1.18 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，慢慢加入6-溴-4-(氯甲基)-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-1(2 H)-酮(330 mg，0.78 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)溶液，在15℃下攪拌30分鐘。反應液倒入水(100 mL)中，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合併有機相用飽和食鹽水(20mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(450 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：552.0, 554.0 [M+1] +。
步驟6：6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯 將2-((7-溴-4-氧代-5-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮(300 mg，0.57 mmol)溶向四氫呋喃(10 mL)，加入二碳酸二第三丁酯(185 mg，0.85 mmol)和二甲胺基吡啶(7 mg，0.06 mmol)，在15℃下攪拌1小時。反應液直接減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(330 mg，收率93%)。 ESI-MS m/z：472.0, 474.0 [M-158] +。
步驟7：6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-8-羥基-1-氧代酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯 將6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯(200 mg，0.32 mmol)溶向甲醇(10 mL)，加入對甲苯磺酸一水合物(120 mg，0.63 mmol)，在15℃下攪拌1小時。用飽和碳酸氫鈉溶液將pH調節至7~8，再用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合併有機相用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到白色固體(140 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：521.9, 524.0 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 12.13 (s, 1H), 7.92 (tt, J= 5.2, 2.5 Hz, 2H), 7.78 (dd, J= 5.5, 3.0 Hz, 2H), 7.44 – 7.38 (m, 2H), 5.09 (s, 2H), 1.25 (s, 9H).
步驟8：6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯 將6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-8-羥基-1-氧代酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯(140 mg，0.28 mmol)和3-(氯甲基)-1-(四氫- 2H-吡喃-2-基)-1 H-1,2,4-三唑(140 mg，0.42 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入碳酸銫(137 mg，0.42 mmol)，在80℃下攪拌7小時。反應液冷卻至室溫，反應液倒入冰水(100 mL)中，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合併有機相用飽和食鹽水(20mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1)分離，得到淡黃色固體(120 mg，收率65%)。 ESI-MS m/z：665.1, 667.1 [M+1] +。
步驟9：6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯 將6-溴-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯(120 mg，0.18 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(129 mg，0.22 mmol，70%純度)溶向1,4-二氧六環(10 mL)，加入碳酸鉀(75 mg，0.54 mmol)、水(2 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(13 mg，0.02 mmol)，反應在80℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(乙酸乙酯100%)分離，得到黃色固體(140 mg，收率89%)。 ESI-MS m/z：867.2 [M+1] +。
步驟10：4-(胺甲基)-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-氧代-8-((1-(四氫- 2H-吡喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1H)-羧酸第三丁酯 將6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-((1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1 H)-羧酸第三丁酯(140 mg，0.16 mmol)溶向乙醇(10 mL)，加入水合肼(28 mg，0.48 mmol，85%純度)，反應在15℃攪拌12小時。反應液減壓濃縮得粗品黃色固體(150 mg)。粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：646.2 [M-100] +。
步驟11：2-(4-(8-((1 H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-(胺甲基)-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-氧代-8-((1-(四氫- 2H-吡喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)酞嗪-2(1H)-羧酸第三丁酯(150 mg，0.2 mmol)溶向二氯甲烷(10 mL)，加入三氟乙酸(2 mL)，反應在20℃攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，經製備液相分離得到白色固體(25 mg，收率22%)。 ESI-MS m/z：562.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.51 (s, 1H), 8.38 (s, 1H),8.36 (s, 1H), 7.96 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.37 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.22 (d, J= 2.9 Hz, 2H), 4.15 (tt, J= 6.2, 3.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 0.95 – 0.76 (m, 4H).
實施例 4 2-(4-(4-( 胺甲基 )-8-( 二氟甲氧基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 4)
步驟1：4-溴-2-羥基-6-甲基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯(5.27 g，20.3 mmol)溶向二氯甲烷(100 mL)，氬氣氛圍下冷卻至0℃，滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(30.5 mL，30.5 mmol，1.0 M)，0℃下攪拌0.5小時，反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，白色固體(3.8 g，收率76.3%)。 ESI-MS m/z：244.9 [M+1] +。
步驟2：4-溴-2-(二氟甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-羥基-6-甲基苯甲酸甲酯(6.28 mg，25.6 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(120 mL)，加入碳酸鉀(7.07 g，51.3 mmol)，溴二氟乙酸乙酯(7.8 g，38.4 mmol)，80℃攪拌反應18小時後，冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=100：1，體積比)，得到產物，白色固體(1.5 g，收率19.8%)。 ESI-MS m/z：294.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.27 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.46 (t, J = 73.5 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.33 (s, 3H).
步驟3：4-溴-2-(溴甲基)-6-(二氟甲氧基)苯甲酸甲酯 將4-溴-2-(二氟甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯(1.5 g，5.08 mmol)溶向四氯化碳(20 mL)，加入過氧化苯甲醯(164 mg，0.51 mmol，75%)，N-溴代丁二醯亞胺(905 mg，5.08 mmol)，80℃攪拌反應4小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(1.8 g，收率94.7%)。 ESI-MS m/z：372.9 [M+1] +。
步驟4：5-溴-7-(二氟甲氧基)異苯并呋喃-1( 3H)-酮 將4-溴-2-(溴甲基)-6-(二氟甲氧基)苯甲酸甲酯(1.8 g，4.81 mmol)溶向1,4-二氧六環(30 mL)和水(10 mL)的混合溶液中，100℃攪拌反應24小時後，冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(900 mg，收率67.2%)。 ESI-MS m/z：278.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.90 (t, J = 72.9 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H).
步驟5：5-溴-7-(二氟甲氧基)-3-((二甲胺基)亞甲基)異苯并呋喃-1( 3H)-酮 將5-溴-7-(二氟甲氧基)異苯并呋喃-1( 3H)-酮(900 mg，3.23 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺二甲基縮醛(15 mL)，加入第三丁醇鉀(36.2 mg，0.32 mmol)，110℃攪拌反應3.0小時後，冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1，體積比)，得到產物，黃色固體(670 mg，收率62.2%)。 ESI-MS m/z：334.0 [M+1] +。
步驟6：6-溴-8-(二氟甲氧基)-4-((二甲胺基)甲基)酞嗪-1( 2H)-酮 將5-溴-7-(二氟甲氧基)-3-((二甲胺基)亞甲基)異苯并呋喃-1( 3H)-酮(670 mg，2.00 mmol)溶向乙醇(30 mL)，加入水合肼(235 mg，4.00 mmol，85%)，回流攪拌反應24小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1，體積比)，得到產物，黃色固體(420 mg，收率60.2%)。 ESI-MS m/z：348.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.62 (s, 1H), 8.26 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 74.5 Hz, 1H), 3.60 (s, 2H), 2.19 (s, 6H).
步驟7：6-溴-4-(氯甲基)-8-(二氟甲氧基)酞嗪-1( 2H)-酮 將6-溴-8-(二氟甲氧基)-4-((二甲胺基)甲基)酞嗪-1( 2H)-酮(420 mg，1.21 mmol)溶向四氫呋喃(30 mL)，冷卻至0℃，氬氣氛圍下滴加氯甲酸異丁酯(198 mg，1.45 mmol)，自然恢復至室溫攪拌反應18小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(240 mg，收率58.6%)。 ESI-MS m/z：338.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, 1H), 8.20 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 74.3 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H).
步驟8：2-((7-溴-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚啉-1,3-二酮 將鄰苯二甲醯亞胺化鉀(81.5 mg，0.44 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，滴加溶向N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)的6-溴-4-(氯甲基)-8-(二氟甲氧基)酞嗪-1( 2H)-酮(100 mg，0.29 mmol)溶液，室溫攪拌反應0.5小時。加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(87 mg，收率65.6%)。 ESI-MS m/z：450.0 [M+1] +。
步驟9：(8-(二氟甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)硼酸 將2-((7-溴-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚啉-1,3-二酮(93 mg，0.21 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(104.9 mg，0.41 mmol)，醋酸鉀(60.7 mg，0.62 mmol)溶向二氧六環(5 mL)，氬氣氛圍下加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(15.1 mg，0.021 mmol)，100℃攪拌反應17小時。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，得到粗品，棕色油狀物。 ESI-MS m/z：416.1 [M+1] +。
步驟10：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(8-(二氟甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將(8-(二氟甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)硼酸(85.8 mg，0.21 mmol)，2-(4-溴-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(76.2 mg，0.21 mmol)，碳酸氫鈉(53 mg，0.62 mmol)溶向二氧六環(5 mL)和水(1 mL)的混合溶液中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(13.7 mg，0.021 mmol)，80℃攪拌反應2.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1，體積比)，得到產物，棕色油狀物(136 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：661.1 [M+1] +。
步驟11：2-(4-(4-(胺甲基)-8-(二氟甲氧基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(8-(二氟甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(136 mg，0.21 mmol)溶向乙醇(5 mL)，加入水合肼(37 mg，0.63 mmol，85%)，50℃攪拌反應4小時。冷卻至室溫，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(9 mg，收率8.2%)。 ESI-MS m/z：531.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.04 (d, J = 6.0 Hz, 1H),7.87 (s, 1H), 7.19 (t, J = 74.3 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.20 (m, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 0.92 (m, 2H), 0.87 – 0.73 (m, 2H).
實施例 5 2-(4-(8-((1- 胺基環丙基 ) 甲氧基 )-4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 - 1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 5a) 2-(4-(8-((1- 胺基環丙基 ) 甲氧基 )-4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 - 1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 5b)
步驟1：4-溴-2-((1-((第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(1.0 g，4.05 mmol)，第三丁基(1-(羥甲基)環丙基)胺基甲酸酯(1.14 g，6.07 mmol)溶向四氫呋喃(10 mL)，氬氣氛圍下冷卻至0℃，加入氫化鈉(648 mg，16.19 mmol，60%)，0℃下攪拌1.0小時，加入飽和氯化銨溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(1.43 g，收率85.1%)。 ESI-MS m/z：436.1, 438.1 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.98 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 0.85 (dt, J = 7.3, 2.2 Hz, 4H).
步驟2：2-((1-((二第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-4-溴-6-甲基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-((1-((第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-甲基苯甲酸甲酯(200 mg，0.48 mmol)溶向四氫呋喃(4 mL)，加入4-二甲胺基吡啶(88.5 mg，0.72 mmol)，二碳酸二第三丁酯(158.0 mg，0.72 mmol)，回流攪拌反應1小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(204 mg，收率82.2%)。 ESI-MS m/z：536.1, 538.1 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.97 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.50 (s, 18H), 1.06 – 0.87 (m, 4H).
步驟3：2-((1-((二第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-4-溴-6-(溴甲基)苯甲酸甲酯 將2-((1-((二第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-4-溴-6-甲基苯甲酸甲酯(193 mg，0.38 mmol)溶向四氯化碳(4 mL)，加入過氧化苯甲醯(12 mg，0.038 mmol，75%)，N-溴代丁二醯亞胺(100 mg，0.56 mmol)，80℃攪拌反應4小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(167 mg，收率75.0%)。 ESI-MS m/z：391.9, 393.9, 395.9 [M-2Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.17 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.20 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 1.50 (s, 18H), 1.06 – 0.94 (m, 4H)
步驟4：7-((1-胺基環丙基)甲氧基)-5-溴代異苯并呋喃-1( 3H)-酮 將2-((1-((二第三丁氧羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-4-溴-6-(溴甲基)苯甲酸甲酯(158 mg，0.27 mmol)溶向1,4-二氧六環(1.5 mL)和水(0.5 mL)的混合溶液中，100℃攪拌反應24小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮得到粗品(80 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：298.0, 300 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-((6-溴-3氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 將7-((1-胺基環丙基)甲氧基)-5-溴代異苯并呋喃-1( 3H)-酮(80 mg，0.27 mmol)溶向四氫呋喃(4 mL)中，加入三乙胺(80.8 mg，0.80 mmol)，4-二甲胺基吡啶(97.6 mg，0.80 mmol)，二碳酸二第三丁酯(174.0 mg，0.80 mmol)，回流攪拌反應2小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，黃色油狀物(40 mg，收率29.7%)。 ESI-MS m/z：520.1, 522.0 [M+Na] +。
步驟6：第三丁基(1-((6-溴-1-((二甲胺基)亞甲基)-3-氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 將第三丁基(1-((6-溴-3氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(250 mg，0.50 mmol)溶向第三丁氧基雙(二甲胺基)甲烷(5 mL)，120℃攪拌反應1.0小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，黃色固體(160 mg，收率57.8%)。 ESI-MS m/z：575.1, 577.1 [M+1] +。
步驟7：第三丁基(1-((7-溴-1-((二甲胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 將第三丁基(1-((6-溴-1-((二甲胺基)亞甲基)-3-氧代-1,3-二氫異苯并呋喃-4-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(170 mg，0.31 mmol)溶向乙醇(3 mL)，加入水合肼(36 mg，0.62 mmol，85%)，回流攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(160 mg，收率91.0%)。 ESI-MS m/z：567.2, 569.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.26 (s, 1H), 7.84 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 2.16 (s, 6H), 1.41 (s, 18H), 0.96 – 0.76 (m, 4H).
步驟8：第三丁基(1-((7-溴-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 將第三丁基(1-((7-溴-1-((二甲胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(160 mg，0.28 mmol)溶向四氫呋喃(6 mL)，冷卻至0℃，氬氣氛圍下滴加氯甲酸異丁酯(46.2 mg，0.34 mmol)，自然恢復至室溫攪拌反應6小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(95 mg，收率60.7%)。 ESI-MS m/z：358.0, 360.0 [M-2Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.51 (s, 1H), 7.74 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 1.41 (s, 18H), 0.96 – 0.76 (m, 4H).
步驟9：第三丁基(1-((7-溴-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 將鄰苯二甲醯亞胺化鉀(47.2 mg，0.25 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)，滴加溶向N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)的第三丁基(1-((7-溴-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(95 mg，0.17 mmol)溶液，室溫攪拌反應0.5小時。加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(110 mg，收率96.6%)。 ESI-MS m/z：669.1, 671.1 [M+1] +。
步驟10：第三丁基(第三丁氧羰基)(1-((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基- 1H-吡唑-4-基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)環丙基)胺基甲酸酯 將第三丁基(1-((7-溴-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(110 mg，0.16 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)- 1H-吡唑-5-基)苯甲腈(124.9 mg，0.21 mmol)，碳酸鉀(86.6 mg，0.63 mmol)溶向二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(15.3 mg，0.021 mmol)，80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，棕色固體(110 mg，收率78.1%)。 ESI-MS m/z：780.2, 782.2 [M-Boc+1] +。
步驟11：2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將第三丁基(第三丁氧羰基)(1-((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基- 1H-吡唑-4-基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-5-基)氧基)環丙基)胺基甲酸酯(110 mg，0.12 mmol)溶向二氯甲烷(5 mL)，滴加三氟乙酸(1 mL)，室溫攪拌0.5小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，棕色固體(75 mg，收率91.9%)。 ESI-MS m/z：680.2, 682.2 [M+1] +。
步驟12：2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(5a)和2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(5b) 將2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(75 mg，0.11 mmol)溶向乙醇(4 mL)，加入水合肼(19.5 mg，0.33 mmol，85%)，30℃攪拌反應20小時。冷卻至室溫，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到 產物2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(化合物5a)，白色固體(4 mg，收率6.6%)。 ESI-MS m/z：550.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.33 (s, 1H), 8.03 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.19 (td, J = 6.0, 3.1 Hz, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 2H), 0.95 – 0.88 (m, 2H), 0.86 – 0.76 (m, 2H), 0.53 (m, 2H), 0.51 (m, 2H). 脫氯產物2-(4-(8-((1-胺基環丙基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(化合物5b)，白色固體(2 mg，收率3.5%)。 ESI-MS m/z：516.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.32 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.17 – 4.09 (m, 1H), 3.75 (d, J = 3.7 Hz, 5H), 3.71 (s, 2H), 0.94 – 0.74 (m, 4H), 0.57 – 0.45 (m, 4H).
實施例 6 2-(4-(8-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲氧基 )-4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 6)
步驟1：4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(10.0 g，40.5 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(80 mL)，加入甲醇鈉的甲醇溶液(14.6 g，81.0 mmol，30%)，70℃攪拌2小時，反應液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，得到產物，淡黃色油狀物(10.0 g，收率94.8%)。 ESI-MS m/z：258.9 [M+1] +。
步驟2：4-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基苯甲酸甲酯 將4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯(8.95 g，34.5 mmol)溶向四氯化碳(180 mL)，加入過氧化苯甲醯(1.12 g，3.45 mmol，75%)，N-溴代丁二醯亞胺(6.76 g，38.0 mmol)，80℃攪拌反應6小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，白色固體(10.8 g，收率92.6%)。 ESI-MS m/z：336.8 [M+1] +。
步驟3：5-溴-7-甲氧基異苯并呋喃-1(3H)-酮 將4-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基苯甲酸甲酯(10.8 g，32.0 mmol)溶向1,4-二氧六環(150 mL)和水(50 mL)的混合溶液中，100℃攪拌反應14小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(6.0 g，收率77.3%)。 ESI-MS m/z：242.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.43 (q, J = 1.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 3.93 (s, 3H).
步驟4：5-溴-7-羥基異苯并呋喃-1(3H)-酮 將5-溴-7-甲氧基異苯并呋喃-1(3H)-酮(6.0 g，24.7 mmol)溶向二氯甲烷(100 mL)，氬氣氛圍下冷卻至0℃，滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(74.1 mL，74.1 mmol，1.0 M)，0℃下攪拌0.5小時，反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，淡黃色固體(5.4 g，收率95.5%)。 ESI-MS m/z：228.9 [M+1]+。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.24 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 5.24 (s, 2H).
步驟5：5-溴-7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3H)-酮 將5-溴-7-羥基異苯并呋喃-1(3H)-酮(1.0 g，4.4 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入碳酸鉀(1.8 g，13.1 mmol)，70℃攪拌反應15分鐘，加入碘化鈉(327 mg，2.2 mmol)，滴加溶向N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)的3-(氯甲基)-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑(876 mg，4.4 mmol)溶液，70℃攪拌反應1小時後，冷卻至室溫，加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，無色油狀物(1.2 g，收率70.0%)。 ESI-MS m/z：393.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.89 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.40 (dd, J = 9.9, 2.4 Hz, 1H), 5.27 (s, 2H), 5.24 (s, 2H), 3.99 – 3.84 (m, 1H), 3.65 – 3.58 (m, 1H), 2.00 – 1.41 (m, 6H).
步驟6：5-溴-3-(二甲胺基)亞甲基)-7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3H)-酮 將5-溴-7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(1.2 g，3.05 mmol)溶向第三丁氧基雙(二甲胺基)甲烷(15 mL)，120℃攪拌反應1.0小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(910 mg，收率66.5%)。 ESI-MS m/z：448.0, 450.0 [M+1] +。
步驟7：6-溴-4-(二甲胺基)甲基)-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)酞嗪-1(2H)-酮 將5-溴-3-(二甲胺基)亞甲基)-7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)異苯并呋喃-1(3H)-酮(200 mg，0.45 mmol)溶向乙醇(5 mL)，加入水合肼(52.5 mg，0.90 mmol，85%)，回流攪拌反應17小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，淡黃色固體(150 mg，收率72.7%)。 ESI-MS m/z：462.1, 464.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.30 (s, 1H), 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.39 (dd, J = 9.9, 2.4 Hz, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.95 – 3.86 (m, 1H), 3.61 (ddd, J = 13.8, 7.2, 5.0 Hz, 1H), 3.53 (s, 2H), 2.16 (s, 6H), 2.00 – 1.47 (m, 6H).
步驟8：6-溴-4-(氯甲基)-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)酞嗪-1(2H)-酮 將6-溴-4-(二甲胺基)甲基)-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)酞嗪-1(2H)-酮(150 mg，0.32 mmol)溶向四氫呋喃(5 mL)，冷卻至0℃，氬氣氛圍下滴加氯甲酸異丁酯(53.2 mg，0.39 mmol)，自然恢復至室溫攪拌反應6小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1，體積比)，得到產物，白色固體(85 mg，收率57.7%)。 ESI-MS m/z：453.0, 455.0 [M+1] +。
步驟9：2-(7-溴-4-氧代-5-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮 將鄰苯二甲醯亞胺化鉀(49.0 mg，0.26 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)，滴加溶向N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)的6-溴-4-(氯甲基)-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)酞嗪-1(2H)-酮(80 mg，0.18 mmol)溶液，室溫攪拌反應0.5小時。加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=20：1，體積比)，得到產物，白色固體(90 mg，收率90.4%)。 ESI-MS m/z：564.0, 566.0 [M+1] +。
步驟10：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-(1,3-二氧異辛醇-2-基)甲基)-1-氧代-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將2-(7-溴-4-氧代-5-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮(100 mg，0.18 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(92.6 mg，0.18 mmol)，碳酸鉀(73.4 mg，0.53 mmol)溶向二氧六環(5 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(13.0 mg，0.018 mmol)，80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(30 mg，收率21.8%)。 ESI-MS m/z：775.2。
步驟11：2-(4-(胺甲基)-1-氧代-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-(1,3-二氧異辛醇-2-基)甲基)-1-氧代-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(30 mg，0.039 mmol)溶向乙醇(4 mL)，加入水合肼(6.8 mg，0.12 mmol，85%)，25℃攪拌反應18小時。冷卻至室溫，減壓濃縮後得到粗品，黃色油狀物(25 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：645.2 [M+1] +。
步驟12：2-(4-(8-(1H-吡唑-3-基)甲氧基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將2-(4-(胺甲基)-1-氧代-8-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)甲氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(25 mg，0.039 mmol)溶向二氯甲烷(5 mL)，滴加三氟乙酸(1 mL)，室溫攪拌1.0小時。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(4 mg，收率18.4%)。 ESI-MS m/z：561.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.77 (s, 1H), 12.49 (s, 1H), 8.37 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.21 (s, 2H), 4.17 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 0.99 – 0.67 (m, 4H).
實施例 7 2-(4-(4-( 胺甲基 )-8-( 環丙基乙炔基 )-1 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 7)
步驟1：7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-甲酸甲酯 將5-胺基-7-溴-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-甲酸甲酯(600 mg，2.0 mmol)(根據專利US20210078994A1中描述的方法製備)，乙腈(20 mL)，甲苯磺酸(1.38 g，8 mmol)加入反應瓶中，冷卻至0℃，加入亞硝酸鈉(345 mg，5 mmol)的水溶液，攪拌十分鐘後，緩慢加入碘化鉀(996 mg，6.0 mmol)的水溶液，然後升溫至20℃攪拌反應1.0小時。硫代硫酸鈉溶液淬滅反應，去除乙腈，過濾，水洗，乙醇洗滌，得到產物，白色固體(636 mg，收率77.9%)。 ESI-MS m/z：408.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.24 (s, 1H), 8.73 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.60 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H).
步驟2：6-溴-4-(羥甲基)-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮 將7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-甲酸甲酯(64 mg，0.15 mmol)，乙醇(10 mL)加入反應瓶中，冷卻至0℃，加入硼氫化鈉(11.4 mg，0.3 mmol)，氯化鈣(20 mg，0.18 mmol)，20℃攪拌反應1小時。氯化銨水溶液淬滅反應，去除乙醇，過濾，水洗，乙醇洗滌，得到產物，白色固體(35 mg，收率61.4%)。 ESI-MS m/z：380.8 [M+1] +。
步驟3：6-溴-4-(氯甲基)-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮 將6-溴-4-(羥甲基)-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮(210 mg，0.55  mmol)，二氯亞碸(5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應3小時。減壓濃縮，得到產物，黃色固體(218 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：398.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.88 (s, 1H), 8.60 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.27 (d, J= 1.8 Hz, 2H), 5.01 (s, 2H).
步驟4：4-(胺甲基)-6-溴-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮 將6-溴-4-(氯甲基)-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮(120 mg，0.3 mmol)，7.0 M氨的甲醇溶液(15 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應2小時後，減壓濃縮得到粗品(110 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：379.8 [M+1] +。
步驟5：第三丁基((7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將4-(胺甲基)-6-溴-8-碘酞嗪-1(2 H)-酮(110 mg，0.3 mmol)，二氯甲烷(5 mL)，三乙胺(90 mg，0.9 mmol)，二碳酸二第三丁酯(131 mg，0.6 mmol)，20℃攪拌反應2小時。減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(41 mg，收率28.6%)。 ESI-MS m/z：479.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.66 (s, 1H), 11.34 (s, 1H), 8.56 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 4.35 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 1.36 (s, 9H).
步驟6：第三丁基((7-溴-5-(環丙基乙炔基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(40 mg，0.085 mmol)，環丙乙炔(33 mg，0.51 mmol)，三乙胺(0.3 mL)，碘化亞銅(1.7 mg，0.0085 mmol)、雙三苯基膦氯化鈀(6.1 mg，0.0085 mmol)，四氫呋喃(5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應1小時。反應液直接減壓濃縮，矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10：1)，得到產物，黃色固體(35 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：418.1 [M+1] +。
步驟7：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-(環丙基乙炔基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-(環丙基乙炔基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(42 mg，0.1 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(48 mg，0.1 mmol)，碳酸鉀(42 mg，0.3 mmol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(7.3 mg，0.01 mmol)，二氧六環(4 mL)和水(1 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，直接下一步反應(62 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：629.2 [M+1] +。
步驟8：2-(4-(4-(胺甲基)-8-(環丙基乙炔基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將第三丁基((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-(環丙基乙炔基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(62 mg，0.1 mmol)，二氯甲烷(2.5 mL)，三氟乙酸(2.5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應1小時。反應物直接減壓濃縮，製備高效液相色譜純化，得到產物，白色固體(25 mg，收率48.1%)。 ESI-MS m/z：529.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.66 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.03 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.55-4.38 (m, 2H), 4.24-4.16 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.04-1.94 (m, 1H), 1.05-0.76 (m, 8H).
實施例 8 ( E)-2-(4-(8-(2-(1 H- 吡唑 -3- 基 ) 乙烯基 )-4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 8)
步驟1：第三丁基-( E)-((7-溴-4-氧代-5-(2-(1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-吡唑-3-基)乙烯基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(24 mg，0.05 mmol)，( E)-1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)乙烯基)-1 H-吡唑(15 mg，0.05 mmol)，碳酸鉀(21 mg，0.15 mmol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(3.7 mg，0.005 mmol)，二氧六環(2 mL)和水(0.5 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，直接下一步反應(26 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：530.1 [M+1] +。
步驟2：第三丁基-( E)-((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-(2-(1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-吡唑-3-基)乙烯基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基-( E)-((7-溴-4-氧代-5-(2-(1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-吡唑-3-基)乙烯基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(26 mg，0.05 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(24 mg，0.05 mmol)，碳酸鉀(21 mg，0.15 mmol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(3.7 mg，0.005 mmol)，二氧六環(4 mL)和水(1 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，85℃攪拌反應3小時。反應液直接減壓濃縮，矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=10：1)，得到產物，黃色固體(16 mg，收率43.2%)。 ESI-MS m/z：741.3 [M+1] +。
步驟3：( E)-2-(4-(8-(2-(1 H-吡唑-3-基)乙烯基)-4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將第三丁基-( E)-((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-(2-(1-(四氫-2 H-吡喃-2-基)-1 H-吡唑-3-基)乙烯基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(16 mg，0.02 mmol)，二氯甲烷(2.5 mL)，三氟乙酸(2.5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應1小時。反應物直接減壓濃縮，製備高效液相色譜純化，得到產物，白色固體(5 mg，收率45.5%)。 ESI-MS m/z：557.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.80 (s, 1H), 8.55-8.43 (m, 1H), 8.07 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.81-7.70 (m, 1H), 7.52-7.45 (m, 1H), 7.39-7.34 (m, 1H), 7.24-7.12 (m, 2H), 6.48-6.42 (m, 1H), 6.42-6.34 (m, 1H), 4.45-4.32 (m, 3H), 3.83 (s, 3H), 0.96-0.77 (m, 4H).
實施例 9 2-(4-(4-( 胺甲基 )-8- 乙炔基 -1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 9 、 9a 和 9b)
步驟1：((7-溴-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基)乙炔基)-3,4-二氫酞-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯 向(((7-溴-5-碘-4-氧代-3,4-二氫酞-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(55 mg，0.1146 mmol)、醋酸鈀(1.29 mg，0.0057mmol)、三苯基膦(3.01 mg，0.01146 mmol)和碘化亞銅(1 mg，0.0053 mmol)的四氫呋喃(5 mL)和二異丙基乙胺(5 mL)溶液中，加入乙炔基三異丙基矽烷(22.98 mg，0.126 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液，反應體系在氬氣保護和室溫條件下攪拌1小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(乙酸乙酯/石油醚=0~11%，體積比)得到黃色油狀產物(49 mg，80%)。 ESI-MS m/z：534.1 [M+H] +。
步驟2：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基))乙炔基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 在氬氣保護下，向((7-溴-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基)乙炔基)-3,4-二氫酞-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(48 mg，0.0898 mmol)、4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(45 mg, 0.108 mmol)和碳酸鉀(24.82 mg，0.180 mmol)的二氧六環(10 mL)和水(1 mL)溶液中，加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(32.85 mg，0.045 mmol)，反應液在90℃攪拌2小時，反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~30%，體積比)得到紅色油狀產物(25 mg，收率37.35%)。
步驟3：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-乙炔基-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 在0℃條件下，向第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基))乙炔基)-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(25 mg，0.03359 mmol)的四氫呋喃(4 mL)溶液中，加入四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(67 µL，0.0672 mmol，1 M)，反應液繼續攪拌15分鐘。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，反應液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相用飽和氯化鈉洗滌(60 mL×2)，有機相減壓濃縮得到黃色油狀產物(25 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：589.1 [M+H] +。
步驟4：2-(4-(4-(胺甲基)-8-乙炔基-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈
在0℃條件下，向第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-乙炔基-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(25 mg，0.0424 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在室溫攪拌0.5小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，殘留物經高效液相色譜製備得到化合物9a(3 mg，收率14.46%)和化合物9b(8 mg，收率38.55%)，9a和9b為阻旋異構體。 化合物9a和化合物9b的表徵數據如下： ESI-MS m/z：489.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.84 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.06 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 4.34 – 4.16 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.95 – 0.72 (m, 4H). ESI-MS m/z：489.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.31 (s, 1H), 8.01 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.50 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 4.53 – 4.33 (m, 2H), 4.19 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.92 (m, 2H), 0.87 – 0.78 (m, 2H).
實施例 10 2-(4-(1-( 胺甲基 )-4- 氧代 -5-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 10)
步驟1：6-溴-2-氟-3-碘吡啶 2-溴-6-氟吡啶(4.2 g，23.8 mmol)溶向四氫呋喃(42 mL)中，氬氣保護，-78℃下滴加二異丙基胺基鋰(13.1 mL，26.2 mmol，2 N溶向正庚烷)，攪拌反應1.0小時；-78℃下向體系內滴加碘(6.0 g，23.8 mmol)的四氫呋喃溶液，攪拌反應1.5小時。-78℃下向體系內加入飽和亞硫酸鈉溶液，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=100：1)，得到產物，白色固體(5.98 g，收率83%)。 ESI-MS m/z：301.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.98 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.18 (dd, J= 7.9, 1.3 Hz, 1H).
步驟2：6-溴-2-氟-4-碘煙酸 6-溴-2-氟-3-碘吡啶(5.98 g, 19.8 mmol)溶向四氫呋喃(60 mL)中，氬氣保護，-78℃下滴加二異丙基胺基鋰(10.9 mL，21.8 mmol，2 N溶向正庚烷)，攪拌反應1.0小時；-78℃下向反應液內通入乾燥的二氧化碳氣體，攪拌反應1.5小時，反應液自然恢復至室溫，加入濃鹽酸(3.6 mL)，加入水(6.0 mL)，加入二氯甲烷，分出有機相，水相再用二氯甲烷萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2：1)，得到產物，白色固體(3.42 g，收率49%)。 ESI-MS m/z：345.8 [M+1] +。
步驟3：6-溴-2-氟-4-碘煙酸甲酯 6-溴-2-氟-4-碘煙酸(3.42 g，9.9 mmol)、碘甲烷(2.1 g，7.3 mmol)和碳酸鉀(2.05 g，14.8 mmol)溶向N,N-二甲基乙醯胺(35 mL)中，氬氣保護，室溫攪拌反應16小時。反應物中加入水，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=15：1)，得到產物，白色固體(2.5 g，收率70%)。 ESI-MS m/z：359.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.94 (s, 1H), 3.99 (s, 3H).
步驟4：6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯 6-溴-2-氟-4-碘煙酸甲酯(6.1 g，17.0 mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯)錫(6.1 g，17.0 mmol)、四(三苯基膦)鈀(1.96 g，1.70 mmol)、雙三苯基膦二氯化鈀(1.2 g，1.70 mmol)溶向二氧六環(100 mL)，氬氣保護，105℃攪拌反應24小時。反應物冷卻至室溫，加入氟化鉀，室溫攪拌0.5小時，通過矽藻土過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10：1)，得到產物，黃色油狀物(3.51 g，收率68%)。 ESI-MS m/z：303.9 [M+1] +。
步驟5：6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯 6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(1.5 g，4.95 mmol)、三氟乙醇(544 mg，5.44 mmol)和第三丁醇鉀(5.4 mL，5.44 mmol，1 N溶向四氫呋喃)溶向四氫呋喃(20 mL)中，0℃攪拌反應1小時。反應物加入水稀釋，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=10：1)，得到產物，無色油狀物(1.85 g，收率97%)。 ESI-MS m/z：384.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.30 (s, 1H), 4.75 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4.64 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 3.4 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 1.34 (t, J= 7.0 Hz, 3H).
步驟6：6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯 6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯(1.0 g，2.61 mmol)、N-溴代丁二醯亞胺(464 mg，2.61 mmol)和水(5 mL)溶向四氫呋喃(10 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=8：1)得到白色固體(960 mg，收率85%)。 ESI-MS m/z：433.8 [M+1] +。
步驟7：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯 6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯(1.6 g，3.69 mmol)、乙酸(332 mg，5.54 mmol)和乙酸鉀(1.08 g，11.07 mmol)溶向乙腈(16 mL)中，室溫攪拌反應2小時。反應物加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到產物(粗品)。 ESI-MS m/z：413.9 [M+1] +。
步驟8：2-(6-溴-3-(肼羰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-4-基)-2-氧乙基乙酸酯 4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙酸甲酯(粗品)、水合肼(184 mg，3.69 mmol，85%)溶向三氟乙醇(30 mL)中，室溫下反應2小時。反應物加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物(1.06 g，兩步收率70%)。 ESI-MS m/z：413.9 [M+1] +。
步驟9：6-溴-4-(2-羥基乙醯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙醯胺 2-(6-溴-3-(肼羰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-4-基)-2-氧乙基乙酸酯(1.06 g，2.56 mmol)、一水合氫氧化鋰(161 mg，3.84 mmol)和水(1 mL)溶向四氫呋喃(10 mL)中，室溫下攪拌反應1.5小時。反應物加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物(896 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：371.9 [M+1] +。
步驟10：7-溴-1-(羥甲基)-5-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮 6-溴-4-(2-羥基乙醯基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)煙醯胺(896 mg，2.41 mmol)溶向三氟乙醇(10 mL)中，80℃下攪拌反應16小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物(296 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：353.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.80 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 5.57 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 5.13 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.61 (d, J= 5.9 Hz, 2H).
步驟11：4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(4-(1-(羥甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈 7-溴-1-(羥甲基)-5-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶[3,4- d]噠嗪-4(3H)-酮(60 mg，0.17 mmol)、4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(106 mg，0.25 mmol)、碳酸鉀(70 mg，0.51 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(12 mg，0.017 mmol)和水(0.5 mL)溶向二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，80℃下攪拌反應4小時。反應物冷卻至室溫，加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠層析柱純化(二氯甲烷/甲醇=30：1)，得到產物(22.1 mg，收率23%)。 ESI-MS m/z：565.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ12.58 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.97 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 5.50 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 4.64 (d, J= 4.7 Hz, 2H), 4.36 – 4.25 (m, 2H), 4.19 – 4.11 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 0.97 – 0.90 (m, 2H), 0.86 – 0.77 (m, 2H).
步驟12：4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(4-(1-(羥甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(15 mg，0.026 mmol)溶向二氯亞碸(2 mL)中，室溫攪拌反應1.5小時。反應物濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1：1)，得到產物(13.2 mg，收率85%)。 ESI-MS m/z：583.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ12.83 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.98 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.02 (d, J= 1.2 Hz, 2H), 4.39 – 4.28 (m, 2H), 4.18 – 4.11 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 0.96 – 0.91 (m, 2H), 0.85 – 0.76 (m, 2H).
步驟13：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(1-(1,3-二氧異吲哚-2-基)甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(13.2 mg，0.022 mmol)溶向N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中，氬氣保護，0℃下加入鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(6.3 mg，0.034 mmol)，室溫攪拌反應0.5小時。反應物加入乙酸乙酯稀釋，加入水，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=1：1)，得到產物(12.8 mg，收率84%)。 ESI-MS m/z：694.1 [M+1] +。
步驟14：2-(4-(1-(胺甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(1-(1,3-二氧異吲哚-2-基)甲基)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(12.8 mg，0.0184 mmol)和水合肼(9.2 mg，0.184 mmol)溶向三氟乙醇(3 mL)中，室溫攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘留物通過製備高效液相色譜純化得到產物(5.8 mg，收率55%)。 ESI-MS m/z：564.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ8.64 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.97 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 4.27 – 4.20 (m, 2H), 4.17 – 4.11 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 0.96 – 0.90 (m, 2H), 0.85 – 0.76 (m, 2H).
實施例 11 2-(4-(5-((1- 胺基環丙基 ) 甲氧基 )-1-( 胺甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 11)
步驟1：6-氯-2-氟-3-碘吡啶 在氬氣保護和-70℃條件下，向2-氯-6-氟吡啶(10 g，76.04 mmol)的四氫呋喃(100 mL)溶液中，加入二異丙基胺基鋰(41.82 mL，83.65 mmol)，反應液在繼續攪拌2小時，再向反應液中加入碘(21.23 g，83.65 mmol)的四氫呋喃(100 mL)溶液，反應液在-70℃攪拌1小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和亞硫酸鈉(100 mL)淬滅反應，混合液用乙酸乙酯(200 mL×3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚=100%，體積比)得到白色固體產物(16 g，收率81.76%)。 ESI-MS m/z：257.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.09 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 7.9, 1.2 Hz, 1H).
步驟2：6-氯-2-氟-4-碘煙酸 在氬氣保護和-70℃~-60℃條件下，向6-氯-2-氟-3-碘吡啶(14 g，54.74 mmol)的四氫呋喃(20 mL)溶液中加入二異丙基胺基鋰(29.96 mL，59.94 mmol)，反應液攪拌2小時，反應體系用二氧化碳氣球置換，繼續攪拌5小時。反應完畢後，向反應液中加入水(100 mL)，反應體系用乙酸乙酯(50 mL)萃取。取水相用稀鹽酸(2 M)調節pH值6~7，再用乙酸乙酯(100 mL×3)萃取，有機相濃縮得到紅色固體產物(16 g，粗品)。 ESI-MS m/z：301.9 [M+1] +。
步驟3：6-氯-2-氟-4-碘煙酸甲酯 在0℃條件下，向6-氯-2-氟-4-碘煙酸(1.4 g，4.64 mmol)和碳酸鉀(0.963 g，6.97 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(15 mL)溶液中，加入碘甲烷(433 µL，6.97 mmol)，反應液繼續攪拌3小時。反應完畢，向反應液中加入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~2%，體積比)得到黃色固體產物(1.12 g，收率76.45%)。 ESI-MS m/z：315.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.77 (s, 1H), 3.99 (s, 3H).
步驟4：6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯 在氬氣保護下，6-氯-2-氟-4-碘煙酸甲酯(5 g，15.873 mmol)、四(三苯基膦)鈀(917 mg，0.7936 mmol)、雙(三苯基膦)氯化鈀(557.02 mg，0.7936 mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯)錫(5.732 g，15.873 mmol)反應液在110℃攪拌24 h。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~3%，體積比)得到無色油狀產物(3.4 g，收率82.62%)。 ESI-MS m/z：260.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.35 (s, 1H), 4.68 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 4.47 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.86 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.35 (t, J= 7.0 Hz, 3H).
步驟5：2-((1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 在0℃條件下，向(1-(羥甲基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(867.5 mg，4.633 mmol)和氫化鈉(463 mg，11.58 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(15 mL)溶液中，加入6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(1 g，3.861 mmol)，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入水(20 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(30 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~11%，體積比)得到無色油狀產物(1.55 g，收率94.28%)。 ESI-MS m/z： 449.1 [M+Na] +
步驟6：4-(2-溴乙醯)-2-((1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-氯煙酸甲酯 在0℃條件下，向2-((1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(1 g，2.343 mmol)的四氫呋喃(30 mL)和水(10 mL)溶液中，加入N-溴代琥珀醯亞胺(0.417 g，2.343 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~17%，體積比)得到白色固體產物(1.1 g，收率98.3%)。 ESI-MS m/z： 499.0 [M+Na] +
步驟7：(1-(((6-氯-4-(二甲基甘胺醯)-3-(甲醯肼)吡啶-2-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯 在0℃條件下，向4-(2-溴乙醯)-2-((1-((第三丁氧基羰基)胺基)環丙基)甲氧基)-6-氯煙酸甲酯(500 mg，1.0482 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中，加入二甲胺四氫呋喃溶液(1.048 mL，2.096 mmol)，反應液繼續攪拌0.5小時，再加入水合肼溶液(60 µL，1.0482 mmol)。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉(20 mL)，用二氯甲烷(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~4%，體積比)得到淺紅色固體產物(246 mg，收率53.19%)。 ESI-MS m/z：442.1 [M+Na] +。
步驟8：第三丁基(1-(((7-氯-1-((二甲基胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯 (1-(((6-氯-4-(二甲基甘胺醯)-3-(甲醯肼)吡啶-2-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸第三丁酯(246 mg，0.5567 mmol)的甲苯(10 mL)溶液在70℃攪拌12小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到淺紅色固體產物(180 mg，收率76.16%)。 ESI-MS m/z：424.1 [M+H] +。
步驟9：第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-((二甲基胺基))甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯 在氬氣保護下，向第三丁基(1-(((7-氯-1-((二甲基胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯(240 mg，0.566 mmol)、4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(473.3 mg，1.132 mmol)和碳酸鉀(156.5 mg，1.132 mmol)的二氧六環(10 mL)和水(1 mL)溶液中，加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(207.13 mg，0.283 mmol)，反應液在90℃攪拌12小時，反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到黃色固體產物(220 mg，收率57.2%)。 ESI-MS m/z：679.2 [M+H] +。
步驟10：第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基))-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯 在0℃和氬氣保護條件下，向第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-((二甲基胺基))甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯(100 mg，0.1472 mmol)的四氫呋喃溶液(10 mL)中，緩慢加入氯甲酸異丁酯(24.13 mg，0.1767 mmol),反應體系繼續攪拌2小時。反應完畢後，向反應液中加入水(10 mL)淬滅反應，混合液用二氯甲烷(10 mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水洗滌(10 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到產物，黃色油狀產物(63 mg，收率63.83%)。 ESI-MS m/z：692.1 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.34 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.68 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.79 – 4.62 (m, 2H), 4.28 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.65 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 0.93 (m, 4H), 0.84 – 0.80 (m, 4H).
步驟11：第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯 在0℃條件下，向鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(19.14 mg，0.1033 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)溶液中，加入第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基))-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯(63 mg，0.094 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液，反應體系繼續攪拌0.5小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用二氯甲烷(20 mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水洗滌(20 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到產物，黃色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：781.2[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.38 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 5.5, 3.1 Hz, 2H), 7.93 – 7.89 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.28 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.64 – 3.45 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 0.99 – 0.79 (m, 4H), 0.68 (m, 4H).
步驟12：2-(4-(5-((1-胺基環丙基)甲氧基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 在室溫條件下，向第三丁基(1-(((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)氧基)甲基)環丙基)胺基甲酸酯(100 mg，粗品)的二氯甲烷(3 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在室溫攪拌0.5小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，反應液加入飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)，混合液用二氯甲烷(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮得到黃色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：681.1 [M+H] +。
步驟13：2-(4-(5-((1-胺基環丙基)甲氧基)-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 向2-(4-(5-((1-胺基環丙基)甲氧基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(50 mg，0.0735 mmol)的乙醇(5 mL)溶液中，加入水合肼(28.5 µL，0.5882 mmol)，反應液在室溫條件下攪拌12小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，殘留物經製備高效液相色譜純化得到白色固體產物(10 mg，收率24.72%)。 ESI-MS m/z：551.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.48 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.99 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.04 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.38 (s, 2H), 0.94 (m, 2H), 0.88 – 0.78 (m, 2H), 0.53 (m, 2H), 0.39 (m, 2H).
實施例 12 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 12)
步驟1：6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯 將2-氟-2-甲基-1-丙醇(221 mg，2.4 mmol)， N, N-二甲基甲醯胺(3 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下冷卻至0℃，加入氫化鈉(160 mg，4.0 mmol，60%)，0℃下攪拌反應1.0小時，加入6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(520 g，2.0 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液，0℃下繼續攪拌反應1.0小時。加入飽和氯化銨溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(556 mg，收率83.7%)。 ESI-MS m/z：332.1 [M+1] +。
步驟2：4-(2-溴乙醯基)-6-氯-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯 將6-氯-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯(390 mg，1.17 mmol)，四氫呋喃(6 mL)和水(2 mL)加入反應瓶中，冷卻至0℃，加入 N-溴代丁二醯亞胺(209 mg，1.17 mmol)，0℃攪拌反應0.5小時。加水，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(400 mg，收率89.6%)。 ESI-MS m/z：382.0 [M+1] +。
步驟3：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-氯-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯 將乙酸鉀(85 mg，0.87 mmol)，乙酸(26 mg，0.42 mmol)，乙腈(10 mL)加入反應瓶中，緩慢滴加4-(2-溴乙醯基)-6-氯-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯(110 mg，0.28 mmol)的乙腈(5 mL)溶液，20℃攪拌反應4小時。加水，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品(100 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：362.0 [M+1] +。
步驟4：(7-氯-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)乙酸甲酯 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-氯-2-(2-氟-2-甲基丙氧基)煙酸甲酯(100 mg，0.28 mmol)溶向乙醇(4 mL)，加入水合肼(16 mg，0.28 mmol，85%)，25℃攪拌反應48小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(61 mg，收率64.2%)。 ESI-MS m/z：343.1 [M+1] +。
步驟5：7-氯-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1-(羥甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮 將(7-氯-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)乙酸甲酯(224 mg，0.65 mmol)溶向四氫呋喃(20 mL)、水(2.5 mL)的混合溶劑中，加入氫氧化鋰一水化合物(55 mg，1.3 mmol)，20℃攪拌反應3小時。加水，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(195 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：302.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.69 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.54 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 4.60 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 4.47 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.48 (s, 3H).
步驟6：4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(4-(5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈 將7-氯-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1-(羥甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(91 mg，0.3 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(197 mg，0.33 mmol)，碳酸鉀(125 mg，0.9 mmol)，1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(22 mg，0.03 mmol)，二氧六環(6 mL)和水(1.5 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(110 mg，收率65.9%)。 ESI-MS m/z：557.1 [M+1] +。
步驟7：4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(4-(5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(110 mg，0.2 mmol)，二氯亞碸(5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應3小時。減壓濃縮，得到產物，黃色固體(115 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：575.1 [M+1] +。
步驟8：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將鄰苯二甲醯亞胺化鉀鹽(83 mg，0.45 mmol)溶向 N, N-二甲基甲醯胺(2 mL)，緩慢滴加入4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(172 mg，0.3 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液中，15℃攪拌反應0.5小時。加入水，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(120 mg，收率58.3%)。 ESI-MS m/z：686.1 [M+1] +。
步驟9：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(2-氟-2-甲基丙基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(69 mg，0.1 mmol)溶向乙醇(4 mL)，加入水合肼(12 mg，0.2 mmol，85%)，25℃攪拌反應20小時。冷卻至室溫，減壓濃縮後製備高效液相色譜純化，得到產物，白色固體(22 mg，收率39.5%)。 ESI-MS m/z：556.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.45 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.94 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 4.15-4.07 (m, 3H), 4.01 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.50-1.30 (m, 6H), 0.95-0.75 (m, 4H).
實施例 13 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲氧基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 13)
步驟1：6-溴-4-碘-2-((4-甲氧基苄基)氧基)煙酸甲酯 在0℃條件下，向4-甲氧基苄醇(84.456 mg，0.6112 mmol)和氫化鈉(44.45 mg，1.111 mmol，純度60%)的四氫呋喃(4 mL)溶液中，加入6-溴-2-氟-4-碘煙酸甲酯(200 mg，0.5557 mmol)的四氫呋喃(4 mL)溶液，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入水(20 mL)淬滅反應，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~7%，體積比)得到黃色油狀產物(300 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：499.8 [M+Na] +。
步驟2：6-溴-2-羥基-4-碘煙酸甲酯 向6-溴-4-碘-2-((4-甲氧基苄基)氧基)煙酸甲酯(300 mg，0.6275 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(2 mL)，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，向殘留物中加入水(5 mL)，用飽和碳酸氫鈉溶液調節混合液pH=6~7，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)得到白色固體產物(170 mg，收率75.69%)。 ESI-MS m/z：357.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (s, 1H), 4.00 (s, 3H).
步驟3：6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-碘煙酸甲酯 在氬氣保護和0℃條件下，向6-溴-2-羥基-4-碘煙酸甲酯(500 mg，1.397 mmol)和無水硫酸鈉(19.8 mg，0.1397 mmol)的乙腈(20 mL)溶液中加入氟磺醯基二氟乙酸(522.43 mg，2.9335 mmol)的乙腈(4 mL)溶液，反應液攪拌24小時。反應完畢後，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~4%，體積比)得到白色固體產物(260 mg，收率45.63%)。 ESI-MS m/z：407.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.80 (s, 1H), 7.58 – 7.17 (m, 1H), 3.98 (s, 3H).
步驟4：6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 在氬氣保護下，向6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-碘煙酸甲酯(200 mg，0.490 mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯)錫(194.77 mg，0.5393 mmol)的二氧六環溶液中，加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(35.85 mg，0.0490 mol)，反應液在90℃攪拌24 h。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~4%，體積比)得到黃色油狀產物(110 mg，收率63.72%)。 ESI-MS m/z：352.0 [M+H] +。
步驟5：6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(二氟甲氧基)煙酸甲酯 在0℃條件下，向6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(780 mg，2.215 mmol)的四氫呋喃(15 mL)和水(5 mL)溶液中，加入N-溴代琥珀醯亞胺(394.24 mg，2.215 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉(20 mL)，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~5%，體積比)得到白色固體產物(500 mg，收率62.42%)。 ESI-MS m/z： 403.8 [M+H] +。
步驟6：6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-(二甲基甘胺醯)煙醯肼 在0℃條件下，向6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(二氟甲氧基)煙酸甲酯(200 mg，0.4964 mmol)的四氫呋喃(20 mL)溶液中，加入二甲胺四氫呋喃溶液(248 µL，0.4964 mmol)，反應液繼續攪拌0.5小時，再加入水合肼溶液(49.696 mg，0.9927 mmol),反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉(20 mL)，混合液用二氯甲烷(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到黃色油狀產物(80 mg，收率43.96%)。 ESI-MS m/z：367.0 [M+H] +。
步驟7：7-溴-5-(二氟甲氧基)-1-((二甲胺基)甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮 6-溴-2-(二氟甲氧基)-4-(二甲基甘胺醯)煙醯肼(38 mg，0.1035 mmol)的甲苯(10 mL)溶液在70℃攪拌12小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到白色固體產物(26 mg，收率71.94%)。 ESI-MS m/z：349.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.91 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.78 (t, J= 71.3 Hz, 1H), 3.58 (s, 2H), 2.19 (s, 6H).
步驟8：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-((二甲基胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基))-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 在氬氣保護下，向7-溴-5-(二氟甲氧基)-1-((二甲胺基)甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(26 mg，0.0745 mmol)、4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(37.32 mg，0.0894 mmol)和碳酸鉀(20.585 mg，0.1489 mmol)的二氧六環(5 mL)和水(0.5 mL)溶液中，加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(27.2 mg，0.0372 mmol)，反應液在85℃攪拌2小時，反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到黃色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：560.1 [M+H] +。
步驟9：4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 在0℃和氬氣保護條件下，向4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-((二甲基胺基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基))-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(50 mg，0.0893 mmol)的四氫呋喃溶液(10 mL)中，緩慢加入氯甲酸異丁酯(14.635 mg，0.1071 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液，反應體系繼續攪拌4小時。反應完畢後，向反應液中加入水(10 mL)淬滅反應，混合液用二氯甲烷(10 mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水洗滌(10 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到產物，黃色油狀產物(25 mg，收率50.78%)。 ESI-MS m/z：551.0 [M+H] +。
步驟10：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 在0℃條件下，向鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(9.24 mg，0.0499 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液中，加入4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(25 mg，0.0453 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)溶液，反應體系繼續攪拌0.5小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用二氯甲烷(20 mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水洗滌(20 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到產物，黃色油狀產物(40 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：662.1 [M+H] +。
步驟11：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 向4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-((1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(40 mg, 0.060 mmol)的乙醇(10 mL)溶液中，加入水合肼(24.199 mg，0.4834 mmol)，反應液在室溫條件下攪拌12小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，殘留物經高效液相色譜製備得到白色固體產物(3 mg，收率9.33%)。 ESI-MS m/z：532.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.64 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.00 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.66 (t, J = 72.6 Hz, 1H), 4.18 (m, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 0.86 – 0.66 (m, 4H).
實施例 14 (4-( 胺甲基 )-6-(5-(3- 氯 -6- 氰基 -5- 環丙氧基 -2- 氟苯基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 )-1- 氧代 -8-(2,2,2- 三氟乙氧基 ) 酞嗪 -2(1 H)- 基 ) 磷酸甲酯 ( 化合物 14)
步驟1：((6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-2(1H)-基)甲基)二第三丁基磷酸酯 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(700 mg，1.01 mmol；來自實施例1步驟9)和二第三丁基氯甲基磷酸酯(523 mg，2.02 mmol)溶向四氫呋喃(10 mL)中，加入碳酸銫(987 mg，3.03 mmol)，在80℃攪拌3小時。反應液冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(257 mg，收率28%)。 ESI-MS m/z：803.1 [M-112] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.97 (s, 1H), 7.92 – 7.86 (m, 2H), 7.78 – 7.72 (m, 2H), 7.63 – 7.56 (m, 2H), 6.98 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 5.75 – 5.67 (m, 2H), 5.01 (dd, J= 6.9, 2.4 Hz, 1H), 4.42 (ddt, J= 13.0, 8.7, 4.3 Hz, 2H), 3.91 – 3.81 (m, 5H), 1.45 – 1.35 (m, 18H), 0.94 – 0.91 (m, 4H).
步驟2：(4-(胺甲基)-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-2(1H)-基)甲基二第三丁基磷酸酯 將((6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-((1,3-二氧代異吲哚-2-基)甲基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-2(1H)-基)甲基二第三丁基磷酸酯(250 mg，0.27 mmol)溶向乙醇(5 mL)，加入水合肼(145 mg，2.46 mmol，85%純度)，反應在20℃攪拌12小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1)分離，得到白色固體(120 mg)。 ESI-MS m/z：729.1 [M-56] +。
步驟3：(4-(胺甲基)-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-2(1 H)-基)甲基磷酸酯 將(4-(胺甲基)-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-氧代-8-(2,2,2-三氟乙氧基)酞嗪-2(1H)-基)甲基二第三丁基磷酸酯(50 mg，0.06 mmol)溶向丙酮(3 mL)，加入水(3 mL)，滴入一滴2 M稀鹽酸，在50℃下攪拌2小時。反應液用三乙胺將pH調節至7~8，減壓濃縮得粗品，粗品經製備高效液相色譜純化，得到白色固體(14 mg)。 ESI-MS m/z：673.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.40 (s, 1H), 8.01 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.66 (d, J= 12.1 Hz, 2H), 4.67 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.23 – 4.09 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 0.93 – 0.76 (m, 4H).
實施例 15 2-(4-(8-( 胺甲基 )-4- 環丙基 -5- 氧代 -5,6- 二氫吡啶 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 15)
步驟1：2,6-二氯-4-環丙基煙酸甲酯 向化合物2,6-二氯-4-碘酸甲酯(10 g，30.2 mmol)和環丙基硼酸(10.38 g，120.8 mmol)的1,4-二氧六環(100 mL)和水(20 mL)溶液中依次加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(2.19 g，3 mmol)和碳酸鉀(12.5 g，90.5 mmol)，氬氣置換3次後，在95℃攪拌20小時後過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0-3%體積比)得到無色油狀產物(5.6 g，收率75.3%)。 ESI-MS m/z：246, 248 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3CDCl 3) δ6.74 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.21 – 1.13 (m, 2H), 0.89 – 0.83 (m, 2H).
步驟2：6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基-2-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 向化合物2,6-二氯-4-環丙基煙酸甲酯(5.6 g，22.76 mmol)和胺基甲酸第三丁酯(5.334 g，45.53 mmol)的甲苯(70 mL)溶液中依次加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(1 g，3 mmol)、4,5-雙(二苯基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽(1.316 g，2.28 mmol)和碳酸銫(26.3 g，80.7 mmol)，氬氣置換3次後，在100℃攪拌9小時後過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0-3%體積比)得到淡綠色固體產物(5.1 g，收率68.5%)。 ESI-MS m/z：271 [M-56] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3CDCl3) δ 7.40 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 1.92-1.85 (m, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.14 – 1.05 (m, 2H), 0.92 – 0.87 (m, 2H).
步驟3：6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基-2-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 向化合物6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基-2-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(5.1 g，15.6 mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯)錫(11.268 g，31.21 mmol)的1,4-二氧六環(100 mL)溶液中加入二(三第三丁基膦)鈀(0.797 g，1.56 mmol)，氬氣置換3次後，在100℃攪拌6小時後過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0-6%體積比)得到無色油狀產物(4.78 g，收率84.5%)。 ESI-MS m/z：363.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.65 (s , 1H), 7.47 (s, 1H), 5.43 (s , 1H), 4.92 (s, 1H), 4.41 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.97 – 1.92 (m, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.39 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.14– 1.09 (m, 2H), 0.94-0.85 (m, 2H).
步驟4：2-(2-溴乙醯基)-6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基煙酸甲酯 向化合物6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基-2-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(4.78 g，13.19 mmol)的四氫呋喃(45 mL)和水(15 mL)溶液中加入 N-溴代丁二醯亞胺(2.465 g，13.8 mmol)，氬氣置換3次後，在室溫下攪拌1.5小時後，向反應中加水(60 mL)，用乙酸乙酯180 mL(60 mL×3)，有機相用硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0-35%體積比)得到白色固體產物(4.3 g，收率78.9%)。 ESI-MS m/z：413, 415 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.70 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.01-1.94 (m , 1H), 1.54 (s, 9H), 1.15 – 1.09 (m, 2H), 0.91 (m, J= 7.1, 2H).
步驟5：2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基煙酸甲酯 向化合物2-(2-溴乙醯基)-6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基煙酸甲酯(4.3 g，10.4 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(40 mL)溶液中加入乙酸鈉(0.896 g，10.9 mmol)，氬氣置換3次後，在室溫下攪拌12時後，向反應中加乙酸乙酯(200 mL)，用水240 mL (80 mL×3)，有機相用硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=5-50%體積比)得到白色固體產物(3.2 g，收率78.4%)。 ESI-MS m/z：393.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.70 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.44 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.00-1.95 (m, 1H), 1.54 (s, 9H), 1.17 – 1.07 (m, 2H), 0.96-0.89(m, 2H).
步驟6：2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-胺基-4-環丙基煙酸甲酯 向化合物2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-(第三丁氧羰基)胺基)-4-環丙基煙酸甲(3.2 g，8.1 mmol)的二氯甲烷(45 mL)溶液中加入三氟乙酸(9 mL)，氬氣置換3次後，在室溫下攪拌16時後，用飽和的碳酸氫鈉調節pH到7左右，用二氯甲烷(200 mL)萃取，有機相用硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=20-85%體積比)得到白色固體產物(1.97 g，收率80.1%)。 ESI-MS m/z：293.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ6.18 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.98-1.90 (m, 1H), 1.10 – 1.02 (m, 2H), 0.79-0.71 (m, 2H).
步驟7：2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-氯-4-環丙基煙酸甲酯 在0-5℃和氬氣保護下，向化合物亞硝酸第三丁酯(2.114 g，20.5 mmol)的二氯甲烷(20 mL)加入三甲基氯矽烷的(904 mg，10.25 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液後，再加入2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-胺基-4-環丙基煙酸甲酯(600 mg，2.05 mmol)的二氯甲烷(10 mL)，在0-5℃下攪拌5小時後，再向反應液中加入飽和的碳酸氫鈉調節pH到7左右，用二氯甲烷(600 mL)萃取，有機相用硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0-50%體積比)得到白色固體產物(420 mg，收率65.6%)。 ESI-MS m/z：312 [M+1] +。
步驟8：(2-氯-4-環丙基-5-氧代-5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-8-基)乙酸甲酯 向化合物2-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-氯-4-環丙基煙酸甲酯(370 mg，1.19 mmol)的乙醇(20 mL)溶液中加入水合肼(77 mg，1.54 mmol)，在室溫下攪拌16小時後，有固體析出，過濾，收集濾餅得到白色固體產物(70 mg，收率20%)。 ESI-MS m/z：294 [M+1] +。
步驟9：2-氯-4-環丙基-8-(羥甲基)吡啶[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮 向化合物(2-氯-4-環丙基-5-氧代-5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-8-基)乙酸甲酯(70 mg，0.24 mmol)的四氫呋喃(15 mL)和水(1 mL)的混合溶液中加入一水合氫氧化鋰(20 mg，0.48 mmol)，在室溫下攪拌1.5小時後，加上(20 mL)，用乙酸乙酯90 mL(30 mL×3)，有機相用硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品白色固體產物(78 mg)。 ESI-MS m/z：252 [M+1] +。
步驟10：2-氯-8-(氯甲基)-4-環丙基吡啶[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮 向化合物2-氯-4-環丙基-8-(羥甲基)吡啶[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(78 mg)的加入二氯亞碸(20 mL)在70℃下攪拌16時後，冷卻至室溫，濃縮反應液得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0-3%體積比)得到白色固體產物(56 mg)。 ESI-MS m/z：270, 272 [M+1] +。
步驟11：2-((2-氯-4-環丙基-5氧代5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-8-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮 向化合物2-氯-8-(氯甲基)-4-環丙基吡啶[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(56 mg，0.207 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液中加入鄰苯二甲醯亞胺鉀(58 mg，0.311 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(8 mL)，在室溫下攪拌1小時後，加入乙酸乙酯(50 mL)稀釋，有機相用水45 mL (15 mL×3)洗，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得粗品粗品化合物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0-5%體積比)得到白色固體產物(80 mg)。 ESI-MS m/z：381.1 [M+1] +。
步驟12：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-環丙基-8-((1,3-二氧異吲哚-2-基)甲基)-5-氧代-5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 向化合物2-((2-氯-4-環丙基-5氧代5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-8-基)甲基)異吲哚-1,3-二酮(80 mg，0.21 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(150 mg，0.36 mmol)的1,4-二氧六環(20 mL)和水(2.5 mL)溶液中依次加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(20 mg，0.027 mmol)和碳酸鉀(87 mg，0.63 mmol)，氬氣置換3次後，在80℃攪拌4小時後過濾，濾液濃縮得粗品，粗品化合物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=10-70%體積比)得到白色固體產物(67 mg)。 ESI-MS m/z：637 [M+1] +。
步驟13：2-(4-(8-(胺甲基)-4-環丙基-5-氧代-5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 向化合物4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(4-環丙基-8-((1,3-二氧異吲哚-2-基)甲基)-5-氧代-5,6-二氫吡啶[2,3-d]噠嗪-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(67 mg，0.105 mmol)的乙醇溶液中加入水合肼(60 mg，1.2 mmol)，在室溫下攪拌16小時後，有機相濃縮得到粗品，粗品經液相純化得到白色固體產物(7 mg)。 ESI-MS m/z：506.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ12.64 (s, 2H), 8.64 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.25-4.19 (m, 1H), 3.93-3.85 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.30(s, 2H), 1.24 – 1.16 (m, 2H), 1.11-1.05 (m, 2H), 0.98 – 0.91 (m, 2H), 0.88 – 0.75 (m, 2H).
實施例 16 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5- 乙炔基 -4 氧代 3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 16)
步驟1：2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將2,6-二氯-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(5.5 g，20 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(11.7 g，28 mmol)溶於1,4-二氧六環(48 mL)，加入碳酸鉀(8.3 mg，60 mmol)、水(10 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(1.46 g，2 mmol)，反應在氬氣氛圍、80℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(200 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(4.0 g，收率52%)。 ESI-MS m/z：531 [M+H] +。
步驟2：4-(2-溴乙醯)-2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)煙酸甲酯 將2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(4.0 g，7.7 mmol)溶於四氫呋喃(50 mL)，加入水(15 mL)，在0℃下加入N-溴代琥珀醯亞胺(1370 mg，7.7 mmol)，攪拌30分鐘。反應液加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(300 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1)分離，得到白色固體(3 g，收率69%)。 ESI-MS m/z：581 [M+H] +。
步驟3：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)煙酸甲酯 將醋酸鉀(1520 mg，15.4 mmol)和醋酸(466 mg，7.7 mmol)溶於乙腈(25 mL)，加入4-(2-溴乙醯)-2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)煙酸甲酯(3.0 g，5.2 mmol)溶於乙腈(25 mL)的溶液，在25℃下攪拌30分鐘。反應液加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(100 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(50 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.76 g，收率60%)。 ESI-MS m/z：561 [M+H] +。
步驟4：2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-(2-羥基乙醯基)煙肼 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)煙酸甲酯(1.76 g，3.14 mmol)溶於乙醇(20 mL)，加入水合肼(924 mg，5.0 mmol)，在25℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.1 g，收率70%)。 ESI-MS m/z：519 [M+H] +。
步驟5：4-氯-2-(4-(5-氯-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯腈 將2-氯-6-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-(2-羥基乙醯基)煙肼(1.2 g，2.3 mmol)溶於乙腈(20 mL)，在100℃下攪拌20小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.2 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：501 [M+H] +。
步驟6：4-氯-2-(4-(5-氯-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-2-(4-(5-氯-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯腈(1.2 g，2.3 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入氯化亞碸(1 mL)和N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，在25℃攪拌1小時。反應液加入水(100 mL)，用二氯甲烷(50 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(50 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.2 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：519 [M+H] +。
步驟7：2-(4-(1-(胺基甲基)-5-氯-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將氨的甲醇溶液(10 mL，7 M)加入到4-氯-2-(4-(5-氯-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(1.2 mg，2.3 mmol)中，在25℃攪拌5分鐘。減壓濃縮得粗品(1.2 g)。50 mg粗品經製備液相分離得到白色固體(7 mg，收率15%) ESI-MS m/z：501 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.64 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.99 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.23 (tt, J= 6.0, 2.9 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 0.99 – 0.87 (m, 2H), 0.86 – 0.72 (m, 2H).
步驟8：((5-氯-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯 將2-(4-(1-(胺甲基)-5-氯-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 (800 mg，1.6 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)，加入三乙胺(485 mg，4.8 mmol)和二碳酸二第三丁酯(523 mg，2.4 mmol)，在25℃下攪拌3小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(630 mg，收率65%)。 ESI-MS m/z：600.0 [M+H] +。
步驟9：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基))乙炔基)-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 於第三丁基((5-氯-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(40 mg，0.0666 mmol)、乙炔基三異丙基矽烷(36.4498 mg，0.1998 mmol)、4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽(3.85 mg，0.00666 mmol)、三乙胺(26.91 mg，0.2664 mmol)和碘化亞銅(6.342 mg，0.0333 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(7 mL)溶液中，加入甲烷磺酸(4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽)(2'-甲胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(6.41 mg，0.00666 mmol)，反應體系在氬氣保護和室溫條件下攪拌1小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析分離(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到黃色油狀產物(48 mg，96.54%)。 ESI-MS m/z：746.2 [M+H] +。
步驟10：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-乙炔基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 在0℃條件下，於第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-((三異丙基甲矽烷基))乙炔基)-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(48 mg，0.0643 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中，加入四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(77 µL，0.0772 mmol，1 M)，反應液繼續攪拌15分鐘。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，反應液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相用飽和氯化鈉洗滌(60 mL×2)，有機相減壓濃縮得到黃色油狀產物(52 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：590.1 [M+H] +。
步驟11：2-(4-(1-(胺基甲基)-5-乙炔基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 在0℃條件下，於第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-乙炔基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(52 mg，0.08813 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在室溫攪拌2小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，殘留物經高效液相色譜製備得到淺黃色固體產物(8 mg，收率18.53%)。 ESI-MS m/z：490.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.60 (s, 1H), 7.98 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 7.89 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.10 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.24 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 0.94 (m, 2H), 0.82 (m, 2H).
實施例 17 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5- 甲基 -4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 17)
步驟1：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲基-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((5-氯-7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(40 mg，0.06 mmol)，三甲基環三硼氧烷(30 mg，0.24 mmol)，碳酸銫(58 mg，0.18 mmol)，四(三苯基膦)鈀(6.9 mg，0.006 mmol)，二氧六環(3 mL)加入反應瓶中，氬氣氛圍下，110℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，直接下一步反應(40 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：580.2 [M+1] +。
步驟2：2-(4-(1-(胺甲基)-5-甲基-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將第三丁基((7-(5-(3-氯-6-甲氰-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲基-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(40 mg，0.06 mmol)，二氯甲烷(2.5 mL)，三氟乙酸(2.5 mL)加入反應瓶中，20℃攪拌反應1小時。反應物直接減壓濃縮，製備高效液相色譜純化，得到產物，白色固體(10 mg，收率31.1%)。 ESI-MS m/z：480.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ12.95 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.37 (s, 2H), 8.00 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.29-4.20 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.58(s，3H)，0.75-0.90(m，4H)。
實施例 18 2-(4-(1-( 胺甲基 )-4- 氧代 -5- 乙烯基 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4- d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 18)
步驟1：((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-乙烯基-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯 將((5-氯-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯(80 mg，0.13 mmol)溶於1,4-二氧六環(2 mL)，接著加入水(0.5 mL)，乙烯基硼酸頻那醇酯(20 mg，0.13 mmol)，四(三苯基膦)鈀(20 mg, 0.13 mmol)，碳酸鉀(55 mg，0.4 mmol)，反應液在氬氣氛圍、100℃下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫，經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：592.1 [M+H] +。
步驟2：2-(4-(1-(胺甲基)-4-氧代-5-乙烯基-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-乙烯基-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯(80 mg，0.13 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，在25℃攪拌30分鐘。反應液減壓濃縮得到粗品，經製備液相分離，得到白色固體(1 mg，收率1%)。 ESI-MS m/z：492.1 [M+H] +。
實施例 19 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4- d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 19)
步驟1：((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯 將((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-5-乙烯基-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯(70 mg，0.12 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)中，接著加入水(5 mL)，2,6-二甲基吡啶(28 mg，0.26 mmol)和鋨酸鉀二水合物(6 mg，0.01 mmol)，之後加入高碘酸鈉(120 mg，0.56 mmol)，反應液在25℃攪拌1小時。加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(60 mg，收率85%)。 ESI-MS m/z：594.1 [M+H] +。
步驟2：1-((雙(第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-氧吡啶[3,4- d]噠嗪-3(4 H)-羧酸第三丁酯 將((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯(60 mg，0.1 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入二碳酸二第三丁酯(110 mg，0.1 mmol)和4-二甲胺基吡啶(12 mg，0.1 mmol)，反應液在15℃攪拌1小時。減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色油狀物(50 mg，收率63%)。 ESI-MS m/z：793.8 [M+H] +。
步驟3：(第三丁氧羰基)((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯 將1-((雙(第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-氧吡啶[3,4- d]噠嗪-3(4 H)-羧酸第三丁酯(50 mg，0.06 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，在0℃、氬氣氛圍下加入二乙胺基三氟化硫(25 mg，0.16 mmol)，在25℃攪拌12小時。慢慢用飽和碳酸氫鈉溶液將反應液pH調節至7~8，加入水(20 mL)，用二氯甲烷(30 mL)萃取，有機相並用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(50 mg)。 ESI-MS m/z：715.8 [M+H] +。
步驟4：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(第三丁氧羰基)((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-1-基)甲基)胺基羧酸第三丁酯(50 mg，0.07 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入三氟乙酸(1 mL)，在25℃攪拌1小時。減壓濃縮得粗品，粗品經製備分離得到(1 mg，收率3%)。 ESI-MS m/z：516.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.67 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.95 – 7.88 (m, 1H), 5.32 (t, J= 4.9 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.18 (tt, J= 6.0, 2.8 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 0.97 – 0.75 (m, 4H).
實施例 20 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲氧基 -d 3)-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 20)
步驟1：第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(甲氧基-d 3)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 在0℃條件下，於氘代甲醇(18.02 mg，0.4996 mmol)和氫化鈉(53.295 mg，1.332 mmol，純度60%)的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液中，加入第三丁基((5-氯-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(100 mg，0.1665 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)溶液，反應液繼續攪拌1.5小時。反應完畢，向反應液中加入水(20 mL)淬滅反應，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)得到白色固體產物(24 mg，24.06%)。 ESI-MS m/z：599.1 [M+H] +。
步驟2：2-(4-(1-(胺基甲基)-5-(甲氧基-d 3)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 在0℃條件下，於第三丁基((7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(甲氧基-d 3)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(24 mg，0.0401 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在室溫攪拌1小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，殘留物經高效液相色譜製備得到淺黃色固體產物(10 mg，收率50.03%)。 ESI-MS m/z：499.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.79 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.96 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.20 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 0.94 (m, 2H), 0.79 (m, 2H).
實施例 21 2-(4-(1-( 胺甲基 )- 5- 環丙氧基 -4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4- d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 21)
步驟1：6-溴-2-環丙氧基-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(1 g，3.29 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入環丙醇(382 mg，6.58 mmol)，碳酸銫(3.2 g，9.82 mmol)，在氬氣氛圍、25℃下攪拌1小時。反應液倒入冰水(100 mL)中，用乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.2 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：342.0, 344.0 [M+H] +。
步驟2：6-溴-4-(2-溴乙醯)-2-環丙氧基煙酸甲酯 將6-溴-2-環丙氧基-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(1.2 g，3.5 mmol)溶於四氫呋喃(15 mL)，加入水(5 mL)，在0℃下加入N-溴代琥珀醯亞胺(623 mg，3.5 mmol)，攪拌30分鐘。反應液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1)分離，得到白色固體(1.1 g，收率80%)。 ESI-MS m/z：393.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.29 (s, 1H), 4.45 (tt, J= 6.4, 3.2 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 0.88 – 0.82 (m, 4H).
步驟3：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-環丙氧基煙酸甲酯 於醋酸鉀(823 mg，8.4 mmol)和醋酸(252 mg，4.2 mmol)溶於乙腈(10 mL)的溶液中，加入6-溴-4-(2-溴乙醯)-2-環丙氧基煙酸甲酯(1.1 g，2.8 mmol)的乙腈(10 mL)溶液，在25℃下攪拌30分鐘。反應液加入水(30 mL)，用乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1 g，收率96%)。 ESI-MS m/z：372.0, 374.0 [M+H] +。
步驟4：6-溴-2-環丙氧基-4-(2-羥基乙醯基)煙醯胺 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-環丙氧基煙酸甲酯(1 g，2.68 mmol)溶於乙醇(10 mL)，再加入水合肼(315 mg，5.36 mmol)，反應液在25℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：330.0, 332.0 [M+H] +。
步驟5：7-溴-5-環丙氧基-1-(羥甲基)吡啶并[3,4- d]噠嗪-4(3H)-酮 將6-溴-2-環丙氧基-4-(2-羥基乙醯基)煙醯胺(1 g，3.03 mmol)溶於乙腈(10 mL)，在100℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到白色固體(340 mg，收率36%)。 ESI-MS m/z：312.0, 313.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.69 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.53 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 4.58 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 4.40 (tt, J= 6.3, 3.1 Hz, 1H), 0.89 – 0.73 (m, 4H).
步驟6：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-環丙氧基-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將7-溴-5-環丙氧基-1-(羥甲基)吡啶并[3,4- d]噠嗪-4(3H)-酮(200 mg，0.64 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(321 mg，0.77 mmol)溶於1,4-二氧六環(8 mL)，接著加入碳酸鉀(265 mg，1.92 mmol)、水(2 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(47 mg，0.06 mmol)，反應在氬氣氛圍、80℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品用乙酸乙酯(10 mL)打漿，過濾，收集濾餅得到淡黃色固體(270 mg，收率80%)。 ESI-MS m/z：523.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.45 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.94 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.46 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 4.62 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 4.15 (dq, J= 5.9, 2.9 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.36 (dq, J= 6.5, 3.2 Hz, 1H), 0.63 – 0.55 (m, 2H), 0.47 – 0.39 (m, 2H).
步驟7：4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-環丙氧基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-環丙氧基-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3-氟苄腈(50 mg，0.1 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入氯化亞碸(1 mL)和(2 mL)和N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，在25℃攪拌1小時。反應液加入水(50 mL)，用二氯甲烷(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(50 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：541.0 [M+H] +。
步驟8：2-(4-(1-(胺甲基)-5-環丙氧基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將氨的甲醇溶液(3 mL，7 M)加入到4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-環丙氧基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(50 mg，0.09 mmol)溶液中，在25℃攪拌5分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離得到白色固體(7 mg，收率15%) ESI-MS m/z：522.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.60 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.93 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 4.16 (tt, J= 6.1, 2.9 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.30 (tt, J= 6.3, 3.1 Hz, 1H), 1.00 – 0.87 (m, 2H), 0.86 – 0.65 (m, 2H), 0.61 – 0.54 (m, 2H), 0.45 – 0.35 (m, 2H).
實施例 22 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5- 環丁氧基 -4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 22)
步驟1：6-溴-2-環丁氧基-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(1.5 g，4.95 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)，加入碳酸銫(4.84 g，14.85 mmol)，環丁醇(714 mg，9.90 mmol)，25℃攪拌2.5小時，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(1.57 g，收率89.0%)。 ESI-MS m/z：356.0 [M+1] +。
步驟2：6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-環丁氧基煙酸甲酯 於6-溴-2-環丁氧基-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(1.65 g，4.63 mmol)的四氫呋喃(24 mL)溶液中，加入水(8 mL)，N-溴代丁二醯亞胺(824 mg，4.63 mmol)，25℃攪拌反應0.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，白色固體(1.53 g，收率81.1%)。 ESI-MS m/z：405.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.16 (s, 1H), 5.29 – 5.19 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 2.48 (dddd, J = 12.4, 10.6, 6.3, 2.6 Hz, 2H), 2.24 – 2.11 (m, 2H), 1.91 – 1.79 (m, 1H), 1.75 – 1.62 (m, 1H).
步驟3：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-環丁氧基煙酸甲酯 於乙酸鉀(722 mg，7.4 mmol)的乙腈(20 mL)溶液中，滴加溶於乙腈(20 mL)的6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-環丁氧基煙酸甲酯(1.0 g，2.5 mmol)溶液，25℃攪拌反應0.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色油狀物(940 mg，收率99.1%)。 ESI-MS m/z：386.0 [M+1] +。
步驟4：6-溴-2-環丁氧基-4-(2-羥基乙醯基)煙醯胺 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-環丁氧基煙酸甲酯(1.0 g，2.6 mmol)溶於乙醇(20 mL)中，滴加水合肼(305 mg，5.2 mmol，85%)，25℃下攪拌16小時，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(895 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：344.0 [M+1] +。
步驟5：7-溴-5-環丁氧基-1-(羥甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮 將6-溴-2-環丁氧基-4-(2-羥基乙醯基)煙醯胺(895 mg，2.6 mmol)溶於甲苯(50 mL)，回流攪拌反應4小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，白色固體(310 mg，收率36.6%)。 ESI-MS m/z：326.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.69 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 5.52 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.20 (p, J = 7.5 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.44 (ddd, J = 12.2, 6.8, 2.4 Hz, 2H), 2.21 – 2.09 (m, 2H), 1.88 – 1.62 (m, 2H).
步驟6：4-氯-2-(4-(5-環丁氧基-1-(羥甲基)-4-氧基-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將7-溴-5-環丁氧基-1-(羥甲基)吡啶[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(40 mg，0.12 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(61.4 mg，0.15 mmol)，碳酸鉀(33.8 mg，0.24 mmol)溶於二氧六環(2 mL)和水(0.2 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(9.0 mg，0.012 mmol)，80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(54 mg，收率82.0%)。 ESI-MS m/z：537.1。
步驟7：4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-環丁氧基-4-氧基-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 於4-氯-2-(4-(5-環丁氧基-1-(羥甲基)-4-氧基-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(50 mg，0.093 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，再加入氯化亞碸(0.5 mL)，25℃攪拌反應15分鐘。反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(50 mg，收率96.7%)。 ESI-MS m/z：555.0 [M+1] +。
步驟8：2-(4-(1-(胺甲基)-5-環丁氧基-4-氧基-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將溶於甲醇(5 mL)的4-氯-2-(4-(1-(氯甲基)-5-環丁氧基-4-氧基-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(50 mg，0.090 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(21 mg，收率43.5%)。 ESI-MS m/z：536.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.68 – 8.54 (m, 1H), 8.12 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.28 – 4.02 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 2.50 (m, 2H), 2.09 – 1.83 (m, 3H), 1.81 – 1.65 (m, 1H), 1.42 (q, J = 9.4 Hz, 1H), 1.06 – 0.67 (m, 3H).
實施例 23 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲氧基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1-( 二氟甲基 )-1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 23)
步驟1：4-氯-6-環丙氧基-2-(1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯腈 將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-碘苯甲腈(1000 mg，2.96 mmol)，1-二氟甲基-4-硝基吡唑(965 mg，5.92 mmol)，碳酸鉀(1430 mg，10.36 mmol)和碘化亞銅(169 mg，0.888 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(15 mL)中，氬氣氛圍下加入醋酸鈀(66.5 mg，0.296 mmol)和正丁基二(1-金剛烷基)膦(212 mg，0.592 mmol)，反應液在135℃微波反應1小時。冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=20：80，體積比)，得到淡黃色固體產物(420 mg，收率38%)。 ESI-MS m/z：372.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.64 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.22 (t, J= 58.0 Hz, 1H), 3.91 (td, J= 5.4, 2.7 Hz, 1H), 0.99-0.93 (m, 4H).
步驟2：2-(4-胺基-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯腈 將4-氯-6-環丙氧基-2-(1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯腈(500 mg，1.34 mmol)、鐵粉(751 mg，13.4 mmol)和氯化銨(358mg，6.7 mmol)的乙醇(40 mL)和水(8 mL)的混合溶液升溫到80℃攪拌1小時後過濾，濃縮濾液，殘留物矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=35：65，體積比)，得到淡黃色固體產物(350 mg，收率76%)。 ESI-MS m/z：342.9 [M+1] +。
步驟3：4-氯-6-環丙氧基-2-(1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯腈 在氬氣的保護下，向2-(4-胺基-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯腈(350 mg，1.02 mmol)和聯硼酸頻那醇酯(2594 mg，10.2 mmol)的乙腈(25 mL)溶液中加入亞硝酸第三丁酯(158 mg，1.53 mmol)後，升溫至80℃攪拌5小時減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1：9，體積比)，得到淡黃色油狀物產物(150 mg)。 ESI-MS m/z：453.9 [M+1] +。
步驟4：4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈 將(7-溴-5-(二氟甲氧基)-1-(羥甲基)吡啶并[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(70 mg，0.217 mmol)，4-氯-6-環丙氧基-2-(1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯腈(108.5 mg，0.239 mmol)，碳酸鉀(90 mg，0.651 mmol)溶於二氧六環(15 mL)和水(1.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(14 mg，0.022 mmol)，80℃攪拌3小時。冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(甲醇/二氯甲烷=3：97，體積比)得到淡黃色固體產物(40 mg)。 ESI-MS m/z：568.7 [M+1] +。
步驟5：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(二氟甲氧基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 於4-氯-6-環丙氧基-2-(4-(5-(二氟甲氧基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(30 mg，0.053 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中加入N,N-二甲基甲醯胺(0.025 mL)和氯化亞碸(35.3 mg，0.295 mmol)，之後反應液於25℃攪拌反應60分鐘。減壓濃縮，得到粗品。將粗品溶於乙腈(5 mL)滴加至氨的甲醇溶液中(3 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮後經高效液相色譜製備得到白色固體產物(2 mg)。 ESI-MS m/z：567.8 [M+1] +。
實施例 24 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(2,2- 二氟乙基 ) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 24)
步驟1：6-溴-2-(2,2-二氟乙基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(3.0 g，9.9 mmol)溶於四氫呋喃(30 mL)，再加入三乙胺(10 mL)，2,2-二氟乙胺(8.0 g，99.0 mmol)，80℃封管攪拌5小時，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(3.3 g，收率91.7%)。 ESI-MS m/z：364.9 [M+1] +。
步驟2：6-溴-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-2-(2,2-二氟乙基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(4.4 g，12.0 mmol)溶於四氫呋喃(80 mL)，加入三乙胺(16 mL)，4-二甲胺基吡啶(2.9 g，24.1 mmol)，二碳酸二第三丁酯(15.8 g，72.3 mmol)，室溫攪拌2小時，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(5.36 g，收率95.7%)。 ESI-MS m/z：486.8 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.29 (s, 1H), 6.14 (t, J = 56.3 Hz, 1H), 4.25 (td, J = 13.3, 4.5 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.72 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.54 (s, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.24 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
步驟3：6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)煙酸甲酯 將6-溴-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(3.9 g，8.38 mmol)溶於四氫呋喃(117 mL)，再加入水(39 mL)，N-溴代丁二醯亞胺(1.49 g，8.38 mmol)，25℃攪拌反應1.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(3.85 g，收率88.9%)。 ESI-MS m/z：536.6 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.32 (s, 1H), 6.13 (t, J = 56.3 Hz, 1H), 4.31 (s, 4H), 3.83 (s, 3H), 1.25 (s, 9H).
步驟4：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)煙酸甲酯 於乙酸鉀(2.20 g，22.4 mmol)，乙酸(671 mg，11.2 mmol)的乙腈(60 mL)溶液中，滴加溶於乙腈(60 mL)的6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)煙酸甲酯(3.85 g，7.50 mmol)溶液，25℃攪拌反應10分鐘後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色油狀物(3.69 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：517.0 [M+Na] +。
步驟5：(6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-(第三丁氧羰基)(2,2-二氟乙基)胺基)煙酸甲酯(3.69 g，7.50 mmol)溶於乙醇(60 mL)中，滴加水合肼(882.4 mg，15.0 mmol，85%)，25℃下攪拌16小時，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(3.38 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：474.9 [M+Na] +。
步驟6：(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯 將6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯(3.38 mg，7.50 mmol)的甲苯(190 mL)溶液回流攪拌反應21小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(2.1 g，收率64.6%)。 ESI-MS m/z：456.9 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.90 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 6.25 (t, J = 56.2 Hz, 1H), 5.60 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 15.0 Hz, 2H), 1.23 (s, 9H).
步驟7：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯 將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(230 mg，0.55 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯(200 mg，0.46 mmol)，碳酸鉀(126.8 mg，0.92 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀(33.6 mg，0.046 mmol)，80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(296.9 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：667.8 [M+Na] +。
步驟8：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯 於第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯(150 mg，0.232 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，再加入氯化亞碸(138 mg，1.16 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(154 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：685.7 [M+Na] +。
步驟9：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(20 mL)的第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯(154 mg，0.232 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(20 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(150 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：644.8 [M+1] +。
步驟10：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(2,2-二氟乙基)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯(150 mg，0.232 mmol)溶於二氯甲烷(25 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(55 mg，收率43.5%)。 ESI-MS m/z：544.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.17 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.91 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.84 (tt, J = 56.1, 4.1 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 4.14 (tt, J = 6.1, 2.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.15 (ddd, J = 15.5, 6.2, 4.1 Hz, 2H), 0.99 – 0.87 (m, 2H), 0.79 (qt, J = 10.6, 2.6 Hz, 2H).
實施例 25 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(2,2- 二氟乙基 ) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1-( 二氟甲基 )-1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 25)
步驟1：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯 將4-氯-6-環丙氧基-2-(1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氟苯甲腈(104 mg，0.23 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.23 mmol)，碳酸鉀(63.4 mg，0.46 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(15.0 mg，0.023 mmol)，80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(130 mg，收率83.0%)。 ESI-MS m/z：704.1 [M+Na] +。
步驟2：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯 於第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯(130 mg，0.19 mmol)的二氯甲烷(25 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，再加入氯化亞碸(113 mg，0.95 mmol)，25℃攪拌反應15分鐘。反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(133.5 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：721.7 [M+Na] +。
步驟3：(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯 將溶於甲醇(5 mL)的第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸酯(133.5 mg，0.19 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(25 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(129.8 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：681.1 [M+1] +。
步驟4：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(2,2-二氟乙基)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(2,2-二氟乙基)胺基甲酸第三丁酯(129.8 mg，0.19 mmol)溶於二氯甲烷(30 mL)中，加入三氟乙酸(6 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(45 mg，收率40.7%)。 ESI-MS m/z：581.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.25 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.97 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 56.6 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.88 (tt, J = 55.9, 4.0 Hz, 1H), 4.17 (dq, J = 6.0, 3.0 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.24 – 3.12 (m, 2H), 0.97 – 0.88 (m, 2H), 0.84 – 0.74 (m, 2H).
實施例 26 2-(4-(5- 胺基 -1-( 胺甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4- d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 26)
步驟1：2-胺基-6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(2 g，6.58 mmol)溶於氨的甲醇溶液(20 mL)，在封管中80℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到透明油狀物(2 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：300.8, 302.8 [M+H] +。
步驟2：2-胺基-6-溴-4-(2-溴乙醯)煙酸甲酯 將2-胺基-6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(2 g，6.64 mmol)溶於四氫呋喃(30 mL)，加入水(10 mL)，在0℃下加入N-溴代琥珀醯亞胺(1.18 g，6.64 mmol)，攪拌30分鐘。反應液加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(50 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1)分離，得到白色固體(1.5 g，收率64%)。 ESI-MS m/z：352.7 [M+H] +。
步驟3：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-2-胺基-6-溴代乙酸甲酯 將醋酸鉀(1.25 g，12.82 mmol)和醋酸(385 mg，6.41 mmol)溶於乙腈(20 mL)，加入2-胺基-6-溴-4-(2-溴乙醯)煙酸甲酯(1.5 g，4.27 mmol)的乙腈(20 mL)的溶液，反應液在90℃下攪拌1小時。反應液加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(80 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(50 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(1.25 g，收率89%)。 ESI-MS m/z：330.8, 332.8 [M+H] +。
步驟4：5-胺基-7-溴-1-(羥甲基)吡啶并[3,4- d]噠嗪-4(3H)-酮 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-2-胺基-6-溴代乙酸甲酯(800 mg，2.42 mmol)溶於乙醇(30 mL)，加入水合肼(710 mg，12.07 mmol)，反應液在25℃下攪拌12小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到白色固體(140 mg，收率21%)。 ESI-MS m/z：270.8, 272.8 [M+H] +。
步驟5：(7-溴-1-(((第三丁氧羰基)氧基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-5-基)胺基羧酸第三丁酯 將5-胺基-7-溴-1-(羥甲基)吡啶并[3,4- d]噠嗪-4(3H)-酮(140 mg，0.519 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，反應液中加入三乙胺(157 mg，1.56 mmol)和二碳酸二第三丁酯(283 mg，1.3 mmol)在70℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)分離，得到黃色固體(170 mg，收率88%)。 ESI-MS m/z：370.8, 372.8 [M+H] +。
步驟6：(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-5-基)胺基羧酸第三丁酯 將(7-溴-1-(((第三丁氧羰基)氧基)甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-5-基)胺基羧酸第三丁酯(170 mg，0.36 mmol)和4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)苯甲腈(180 mg，0.43 mmol)溶於1,4-二氧六環(8 mL)，之後加入碳酸鉀(149 mg，1.08 mmol)、水(2 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(26 mg，0.04 mmol)，反應液在氬氣氛圍、80℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到淡黃色固體(150 mg，收率71%)。 ESI-MS m/z：581.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.30 (s, 1H), 7.92 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.18 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 4.03 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 0.94 – 0.90 (m, 2H), 0.86 – 0.81 (m, 2H).
步驟7：2-(4-(5-胺基-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4- d]噠嗪-5-基)胺基羧酸第三丁酯(60 mg，0.1 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入氯化亞碸(82 mg，0.69 mmol)在40℃攪拌1小時。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(60 mg)。 ESI-MS m/z：500.2 [M+H] +。
步驟8：2-(4-(5-胺基-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)加入到2-(4-(5-胺基-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4- d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈(60 mg，0.12 mmol)中，在25℃攪拌5分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離得到白色固體(1 mg，收率1%)。 ESI-MS m/z：480.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.38 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.92 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 4.18 (td, J= 6.4, 3.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 0.96 – 0.78 (m, 4H).
實施例 27 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 27)
步驟1：6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(甲胺基)煙酸甲酯 於6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(1.2 g，3.96 mmol)的四氫呋喃(20 mL)溶液中加入三乙胺(4 mL)，鹽酸甲胺(2.67 g，39.6 mmol)，80℃密封管攪拌1小時15分鐘，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(1.14 g，收率91.3%)。 ESI-MS m/z：314.9 [M+1] +。
步驟2：6-溴-2-(第三丁氧羰基)(甲基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 於6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-(甲胺基)煙酸甲酯(1.14 g，3.6 mmol)的四氫呋喃(25 mL)溶液中加入三乙胺(5 mL)，4-二甲胺基吡啶(883.8 mg，7.2 mmol)，二碳酸二第三丁酯(9.5 g，43.4 mmol)，氮氣氛圍下回流攪拌1.5小時，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(1.41 g，收率94%)。 ESI-MS m/z：436.8 [M+Na] +。
步驟3：6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(第三丁氧羰基)(甲基)胺基)煙酸甲酯 於6-溴-2-(第三丁氧羰基)(甲基)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(1.41 g，3.40 mmol)的四氫呋喃(45 mL)溶液中，加入水(15 mL)，N-溴代丁二醯亞胺(604.4 mg，3.40 mmol)，25℃攪拌反應1.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(1.45 g，收率91.8%)。 ESI-MS m/z：486.7 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.28 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.41 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).
步驟4：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-((第三丁氧羰基)(甲基)胺基)煙酸甲酯 於乙酸鉀(195.5 mg，2.00 mmol)，乙酸(59.9 mg，1.00 mmol)的乙腈(5 mL)溶液中，滴加溶於乙腈(5 mL)的6-溴-4-(2-溴乙醯基)-2-(第三丁氧羰基)(甲基)胺基)煙酸甲酯(310 mg，0.67 mmol)溶液，25℃攪拌反應1.0小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色油狀物(296 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：466.8 [M+Na] +。
步驟5：(6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-((第三丁氧羰基)(甲基)胺基)煙酸甲酯(296 mg，0.67 mmol)溶於乙醇(5 mL)中，滴加水合肼(78.2 mg，1.33 mmol，85%)，25℃下攪拌6小時，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(268 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：424.8 [M+Na] +。
步驟6：(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯 將(6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(268 mg，0.67 mmol)溶於甲苯(15 mL)，回流攪拌反應12小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(160 mg，收率66.4%)。 ESI-MS m/z：406.8 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.86 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 5.61 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
步驟7：(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯 將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(108.2 mg，0.26 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(100 mg，0.26 mmol)，碳酸鉀(71.6 mg，0.52 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入[1,1'-雙(二苯基磷基)二茂鐵]二氯化鈀(19.0 mg，0.026 mmol)，80℃攪拌反應2.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：5，體積比)，得到產物，黃色固體(155 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：617.8 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.61 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 5.53 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.18 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.16 (s, 9H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 0.87 – 0.67 (m, 2H).
步驟8：(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(120 mg，0.20 mmol)於二氯甲烷(20 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，加入氯化亞碸(120 mg，1.0 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(124 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：635.8 [M+Na] +。
步驟9：(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯 將溶於甲醇(20 mL)的(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(124.0 mg，0.20 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(20 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(120 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：616.8 [M+Na] +。
步驟10：2-(4-(1-(胺甲基)-5-(甲胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(120 mg，0.20 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)中，加入三氟乙酸(4 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(42 mg，收率41.4%)。 ESI-MS m/z：494.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.83 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.24 (s, 2H), 7.92 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.20 – 4.15 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.27 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 0.96 – 0.88 (m, 2H), 0.87 – 0.65 (m, 2H). 13C NMR (101 MHz, DMSO- d 6) δ 160.85, 158.11, 157.57, 154.27, 141.34, 139.22, 136.64, 130.72, 127.19, 127.00, 124.75, 122.41, 116.89, 113.40, 103.58, 102.33, 99.60, 53.67, 40.02, 37.16, 26.56, 6.36, 6.31.
實施例 28 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 28) 和 (M/P)-2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 氯 -6- 環丙氧基 -3- 氟苯甲腈 ( 化合物 28-P1/28-P2) 、 、
步驟1：6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-((甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯 於6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟煙酸甲酯(5.0 g，16.5 mmol)的四氫呋喃(50 mL)溶液中，加入三乙胺(10 mL)，氘代甲胺鹽酸鹽(5.82 g，82.5 mmol)，在80℃封管攪拌1小時15分鐘，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物，淡黃色油狀物(5.2 g，收率99.0%)。 ESI-MS m/z：317.9, 319.9 [M+1] +。
步驟2：6-溴-2-(第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯 將6-溴-4-(1-乙氧基乙烯基)-2-((甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯(5.2 g，16.3 mmol)溶於四氫呋喃(50 mL)，加入三乙胺(10 mL)，4-二甲胺基吡啶(4.0 g，32.6 mmol)，二碳酸二第三丁酯(42.8 g，196.1 mmol)，氮氣氛圍下回流攪拌1.5小時，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色油狀物(5.74 g，收率83.9%)。 ESI-MS m/z：317.9, 319.9 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.43 (s, 1H), 4.50 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.81 (m, 5H), 1.41 (s, 9H), 1.32 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
步驟3：6-溴-4-(2-溴乙醯)-2-(第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯 將6-溴-2-(第三丁氧羰基)(甲基-d3)胺基)-4-(1-乙氧基乙烯基)煙酸甲酯(5.74 g，13.7 mmol)溶於四氫呋喃(75 mL)，加入水(25 mL)，N-溴代丁二醯亞胺(2.44 g，13.7 mmol)，25℃攪拌反應1.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色油狀物(6.2 g，收率96.3%)。 ESI-MS m/z：367.7, 369.7, 371.7 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.27 (s, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.44 (s, 9H).
步驟4：4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯 於乙酸鉀(3.9 g，39.6 mmol)，乙酸(1.19 mg，19.8 mmol)的乙腈(50 mL)溶液中，滴加溶於乙腈(50 mL)的6-溴-4-(2-溴乙醯)-2-(第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯(6.2 g，13.2 mmol)溶液，25℃攪拌反應1.5小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色油狀物(5.92 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：347.8, 349.8 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.33 (s, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).
步驟5：第三丁基(6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將4-(2-乙醯氧基乙醯基)-6-溴-2-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)煙酸甲酯(5.92 g，13.2 mmol)溶於乙醇(80 mL)中，滴加水合肼(1.55 g，26.4 mmol，85%)，25℃下攪拌6小時，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(5.37 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：305.8, 307.8 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.93 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 4.81 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 1.34 (s, 9H).
步驟6：第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(6-溴-3-(肼羰基)-4-(2-羥基乙醯基)吡啶-2-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(5.37 g，13.2 mmol)於甲苯(125 mL)，回流攪拌反應12小時後，冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(4.3 g，收率83.8%)。 ESI-MS m/z：287.9, 289.8 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.85 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 5.61 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.27 (s, 9H).
步驟7：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將4-氯-6-環丙氧基-3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯腈(537 mg，1.29 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(500 mg，1.29 mmol)，碳酸鉀(355.5 mg，2.58 mmol)溶於二氧六環(30 mL)和水(3 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(83.9 mg，0.129 mmol)，90℃攪拌反應12小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(370 mg，收率48.0%)。 ESI-MS m/z：498.9 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.61 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.98 – 7.94 (m, 2H), 5.53 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 4.18 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 1.15 (s, 9H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 0.89 – 0.66 (m, 2H).
步驟8：第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 於第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(500 mg，0.835 mmol)的二氯甲烷(100 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(2.5 mL)，再加入氯化亞碸(496.5 mg，4.17 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。反應液倒入冰水中，二氯甲烷萃取三次，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(515 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：516.8 [M-Boc+1] +。
步驟9：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(20 mL)的第三丁基(7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(515 mg，0.835 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(100 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到產物，棕色油狀物(500 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：497.9 [M-Boc+1] +。
步驟10：2-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將(第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(3-氯-6-氰基-5-環丙氧基-2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(600 mg，1.00 mmol)溶於二氯甲烷(60 mL)中，加入三氟乙酸(18 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(204.6 mg，收率41.0%)。 ESI-MS m/z：497.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.81 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.93 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.18 (tt, J = 6.1, 2.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 0.92 (dd, J = 10.3, 5.3 Hz, 2H), 0.76 (ddt, J = 60.3, 8.8, 2.6 Hz, 2H). 13C NMR (101 MHz, DMSO- d 6) δ 160.85, 158.13, 157.57, 154.35, 140.51, 139.26, 136.54, 130.76, 127.21, 127.01, 124.95, 124.75, 122.39, 116.91, 113.42, 103.49, 102.32, 99.52, 53.68, 40.02, 37.18, 6.38, 6.33.
步驟11：(M/P)-2-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈 將2-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-氯-6-環丙氧基-3-氟苯甲腈進一步高效液相色譜製備(Chiralpak IG 300×50mm I.D製備柱，流動相：A：CO 2，B：(含0.1%氨水)-乙醇，等梯度50%；洗脫時間：35分鐘)，得到兩個產物。化合物28-P1(保留時間為11.5分鐘)，化合物28-P2(保留時間為15.2分鐘)。 化合物28-P1： ESI-MS m/z：497.9 [M+1] +；黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.83 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.91 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.18 (tt, J  = 6.1, 2.9 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 0.91 (dd, J = 10.2, 5.0 Hz, 2H), 0.87 – 0.65 (m, 2H). 化合物28-P2： ESI-MS m/z：497.9 [M+1] +；黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.83 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.92 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.18 (tt, J = 6.1, 2.9 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 0.91 (dd, J = 10.1, 5.0 Hz, 2H), 0.87 – 0.66 (m, 2H).
實施例 29 2-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-3- 氟 -1- 萘腈 ( 化合物 29)
步驟1：3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1-萘甲腈 將3-氟-2-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-萘甲腈(根據專利WO2021050915 A1製得)(319 mg，0.846 mmol)，頻那醇硼烷(1.083 mg，8.46 mmol)，三乙胺(427 mg，4.23 mmol)溶於二氧六環(30 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(77.4 mg，0.085 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(80.7 mg，0.269 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(1050 mg)。 ESI-MS m/z：378.0 [M+1] +。
步驟2：第三丁基(7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(90 mg，0.23 mmol)，3-氟-2-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1-萘甲腈(465 mg)，碳酸鉀(96.5 mg，0.3 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(20 mg，0.03 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=30：100，體積比)，得到產物，淡黃色固體(43 mg)。 ESI-MS m/z：558.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.05 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 8.05 – 7.98 (m, 1H), 7.93 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.81 – 7.73 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 4.84 (s, 2H), 3.87 (s, 3H),2.07 (s, 1H), 1.32 – 1.24 (m, 9H).
步驟3：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(40 mg，0.072 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.025 mL)，再加入氯化亞碸(35.3 mg，0.295 mmol)，25℃攪拌反應60分鐘。減壓濃縮，得到黃色油狀粗品(62 mg)。 ESI-MS m/z：576.9 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(5 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(62 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(3 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黃色油狀粗品(75 mg)。 ESI-MS m/z：558.0 [M+1] +。
步驟5：2-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟-1-萘甲腈 將第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(1-氰基-3-氟萘-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(75 mg)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色色固體(15 mg)。 ESI-MS m/z：457.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 12.06(s, 1H), 8.89 – 7.97 (m, 3H), 7.85 (d, J= 29.8 Hz, 2H), 7.63 (s, 2H), 6.56 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.69 (s, 3H).
實施例 30 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -2,2- 二甲基 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈 ( 化合物 30)
步驟1：5-氟-2-((4-甲氧基苄基)氧基)苯甲腈 將對甲氧基苄醇(15.8 g，115.0 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(240 mL)中，氮氣保護，冷卻至0℃，加入氫化鈉(6.4 g，161.0 mmol，60%)攪拌反應1.0小時後，滴加溶於N,N-二甲基甲醯胺(80 mL)的2,5-二氟苯腈(16.0 g，115.0 mmol)溶液，0℃下攪拌0.5小時，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中生成沉澱，過濾，濾餅用乙腈帶水後得到產物，白色固體(29.6 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：279.9 [M+Na] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.75 (dd, J = 8.2, 3.2 Hz, 1H), 7.56 (ddd, J = 9.4, 8.3, 3.2 Hz, 1H), 7.43 – 7.35 (m, 3H), 6.99 – 6.94 (m, 2H), 5.18 (s, 2H), 3.76 (s, 3H).
步驟2：3-氟-2-碘-6-((4-甲氧基苄基)氧基)苯甲腈 將5-氟-2-((4-甲氧基苄基)氧基)苯甲腈(7.0 g，27.2 mmol)溶於四氫呋喃(175 mL)，氮氣保護，冷卻至-60℃，滴加二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(15 mL，30.0 mmol，2 M)，-60℃攪拌反應0.5小時後，滴加溶於四氫呋喃(70 mL)的碘(7.6 g，30.0 mmol)溶液，-60℃攪拌反應15分鐘後，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(10.5 g，收率100%)。 ESI-MS m/z：405.7 [M+Na] +。
步驟3：3-氟-6-羥基-2-碘苯甲腈 將3-氟-2-碘-6-((4-甲氧基苄基)氧基)苯甲腈(11.0 g，2.87 mmol)溶於二氯甲烷(110 mL)，加入三氟乙酸(11 mL)，25℃攪拌反應1.0小時後，減壓濃縮，殘留物倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(7.5 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：263.8 [M+1] +。
步驟4：3-氟-6-羥基-2-碘-5-硝基苯甲腈 將濃硫酸(10 mL)冷卻至0℃，加入硝酸鉀(461.3 mg，4.6 mmol)，滴加溶於乙腈(5 mL)的3-氟-6-羥基-2-碘苯甲腈(1.0 g，3.8 mmol)溶液，0℃攪拌反應0.5小時後，反應液倒入冰水中，恢復至室溫，過濾，濾餅用乙腈帶水後得到產物，黃色固體(1.05 g，收率89.7%)。 ESI-MS m/z：308.7 [M+1] +。
步驟5：3-氟-6-羥基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-硝基苯甲腈 將3-氟-6-羥基-2-碘-5-硝基苯甲腈(9.6 g，31.1 mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(19.4 g，93.4 mmol)，碳酸鉀(12.9 g，93.4 mmol)溶於二氧六環(100 mL)和水(10 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(2.03 g，3.11 mmol)，100℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(5.1 g，收率62.4%)。 ESI-MS m/z：262.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.95 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H).
步驟6：3-胺基-5-氟-2-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲腈 在3-氟-6-羥基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-硝基苯甲腈(500 mg，1.91 mmol)的乙醇(50 mL)和水(20 mL)溶液中，加入連二亞硫酸鈉(1.66 g，9.53 mmol)室溫攪拌反應3.5小時後，矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，棕色固體(150 mg，收率33.9%)。 ESI-MS m/z：233.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.51 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.80 (s, 2H), 3.64 (s, 3H).
步驟7：6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 於3-胺基-5-氟-2-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(120 mg，0.5167 mmol)和2-溴-2-甲基丙酸甲酯(374.19 mg，2.067 mmol)的乙腈(15 mL)溶液中，加入碳酸鉀(143 mg，1.0335 mmol)，反應溶液在80℃攪拌5小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(89.83 mg，收率57.89%)。 ESI-MS m/z：300.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.30 (s, 1H), 7.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 6.52 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 1.52 (s, 6H).
步驟8：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,2-二甲基-3-氧-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 於6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(82 mg，0.273 mmol)的醋酸(8 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(73.73 mg，0.3277 mmol)，氬氣氛圍下80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，黃色油狀物(185.9 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：426.7 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.37 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.17 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.54 (s, 6H).
步驟9：6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,2-二甲基-3-氧-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(185.9 mg，0.4362 mmol)，頻那醇硼烷(558.32 mg，4.362 mmol)，三乙胺(220.28 mg，2.181 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(19.96 mg，0.02181 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(20.81 mg，0.04362 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(180 mg，收率96.83%)。 ESI-MS m/z：427.0 [M+1] +。
步驟10：第三丁基8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-羧酸鹽 於6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(122 mg，0.2862 mmol)和二碳酸二第三丁酯(124 mg，0.572 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，加入4-二甲胺基吡啶(3.496 mg，0.0286 mmol)，反應液在室溫下攪拌0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%，體積比)，得到產物，白色固體產物(100 mg，收率66.38%)。 ESI-MS m/z：526.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.76 (s, 1H), 7.52 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 1.59 (s, 6H), 1.50 (s, 9H), 1.16 (d, J= 7.8 Hz, 12H).
步驟11：第三丁基7-(4-(5-((第三丁氧羰基)(甲基)胺基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-羧酸酯 將第三丁基8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-羧酸酯(48 mg，0.0912 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(35.14 mg，0.0912 mmol)，碳酸鉀(25.21 mg，0.1824 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(7.39 mg，0.00912 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(50 mg，收率77.78%)。 ESI-MS m/z：704.9 [M+1] +。
步驟12：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基7-(4-(5-((第三丁氧羰基)(甲基)胺基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-羧酸酯(50 mg，0.0827 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(62 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：622.9 [M+1] +。
步驟13：第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(50 mg，0.08025 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：603.9 [M+1] +。
步驟14：7-(4-(1-(胺基甲基)-5-(甲胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-2,2-二甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2,2-二甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(50 mg，0.0828 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(9 mg，收率21.58%)。 ESI-MS m/z：503.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.98 (s, 1H), 11.34 (s, 1H), 8.82 (q, J= 4.8 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.38 (s, 2H), 7.23 – 7.11 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.36 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 1.52 (d, J= 19.3 Hz, 6H).
實施例 31( M)-(S)-7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -2- 甲基 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈和 (P)-(S)-7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -2- 甲基 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈
步驟1：(R)-2-溴丙醯氯 將(R)-2-溴丙基酸(459 mg，3 mmol)溶於四氫呋喃(15 mL)中，氬氣氛圍下加入N,N-二甲基甲醯胺(0.05 mL)，滴加草醯氯(0.254 mL，3 mmol)，室溫攪拌1小時待用。
步驟2：(S)-6-氟-2-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-碳腈 於3-胺基-5-氟-2-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(300 mg，1.293 mmol)的四氫呋喃(20 mL)溶液中，氮氣氛圍下加入三乙胺(3 mL)，滴加步驟1製備的(R)-2-溴丙醯氯的四氫呋喃溶液(8.4 mL，1.68 mmol)，25℃攪拌4 h後過濾，有機相減壓濃縮，得到白色固體產物(370 mg)。 ESI-MS m/z：286.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.30 (s, 1H), 7.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.03 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 3.71 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 1.52 (d, J= 6.8 Hz, 3H).
步驟3：(S)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 於(S)-6-氟-2-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(300 mg，1.05 mmol)的醋酸(15 mL)溶液中，加入N-碘代丁二醯亞胺(283 mg，1.26 mmol)，氬氣氛圍下80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色油狀物(740 mg)。 ESI-MS m/z：412.9 [M+1] +。
步驟4：(S)-6-氟-2-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將(S)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(740 mg，1.8 mmol)，頻那醇硼烷(2300 mg，18 mmol)，三乙胺(906 mg，9 mmol)溶於二氧六環(30 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(165 mg，0.18 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(172 mg，0.36 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(2830 mg)。 ESI-MS m/z：413.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 11.26 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 9.7, 6.8 Hz, 1H), 4.99 (qd, J= 6.8, 3.1 Hz, 1H), 3.67 (d, J= 2.3 Hz, 3H), 1.46 (dd, J= 13.0, 6.9 Hz, 3H), 1.13 (m, 12H).
步驟5：第三丁基(S)-(7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(115 mg，0.30 mmol)，(S)-6-氟-2-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(720 mg)，碳酸鉀(124mg，0.9 mmol)溶於二氧六環(15 mL)和水(1.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(25 mg，0.03 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=30：100，體積比)，得到白色固體產物(110 mg，收率62.4%)。 ESI-MS m/z：590.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.62 (s, 1H), 11.37 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 8.45 (d, J= 3.3 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 19.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 5.60 – 5.48 (m, 1H), 5.12 – 4.90 (m, 1H), 4.68-4.57(m, 2H), 3.76 (d, J= 3.9 Hz, 3H), 2.88 (d, J= 20.4 Hz, 3H), 1.52 (dd, J= 13.7, 6.8 Hz, 3H), 1.28 – 1.09 (m, 9H).
步驟6：第三丁基(S)-(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 於第三丁基(S)-(7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(35 mg，0.059 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.025 mL)，氯化亞碸(35.3 mg，0.295 mmol)，25℃攪拌反應60分鐘。減壓濃縮，得到粗品(60 mg)。 ESI-MS m/z：608.8 [M+1] +。
步驟7：第三丁基(S)-(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(5 mL)的第三丁基(S)-(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(60 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(3 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到粗品(70 mg)。 ESI-MS m/z：589.9 [M+1] +。
步驟8：(S)-7-(4-(1-(胺基甲基)-5-(甲胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-2-甲基-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將第三丁基(S)-(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(70 mg)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後高效液相色譜製備(SunFire C18 5μm 19×250mm OBD製備柱，流動相：A：CO 2，B：(含0.1%甲酸)-乙腈，乙腈的體積含量為13-18%；洗脫時間：15分鐘)，得到兩個產物。化合物31a(保留時間為5.93分鐘)：白色固體(5 mg，收率16.0%)，化合物31b(保留時間為6.45分鐘)：白色固體(5 mg，收率16.0%)。 化合物31a： ESI-MS m/z：489.9 [M+1] +； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ12.98 (s, 1H), 11.34 (s, 1H), 8.82 (q, J= 4.8 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.33 (br, s, 2H), 7.19 – 7.13 (m, 2H), 5.05 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.35 (d, J= 3.2 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.35 (d, J= 4.9 Hz, 3H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 3H). 化合物31b： ESI-MS m/z：489.9 [M+1] +； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.98 (s, 1H), 11.35 (s, 1H), 8.83 (q, J= 4.9 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.33 (br,s, 2H), 7.16 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.96 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 2.7 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.40 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 1.54 (d, J= 6.8 Hz, 3H).
實施例 32 (M)-(R)-7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -2- 甲基 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈 ( 異構體 1 和異構體 2) 和 (P)-(R)-7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -2- 甲基 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈 用(S)-2-溴丙基酸代替(R)-2-溴丙基酸作為起始原料，參考實施例31的製備方法製備，最後經過高效液相色譜製備(SunFire C18 5μm 19x250mm OBD製備柱，流動相使用水(含0.1%甲酸)-乙腈，乙腈體積含量13-18%；洗脫時間：15分鐘)得到兩個異構體即化合物32a和化合物32b。 化合物32a(保留時間為7.93分鐘)：白色固體。 ESI-MS m/z：489.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.82 (q, J= 4.8 Hz, 1H), 8.64 (br, s, 2H)，8.49 (s, 1H), 7.22 – 7.12 (m, 2H), 5.04 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J= 2.5 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.35 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 3H). 化合物32b(保留時間為8.73分鐘)：白色固體。 ESI-MS m/z：489.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.80 (s, 1H), 8.83 (q, J= 4.9 Hz, 1H), 8.48 (br, s, 1H), 8.64 (s, 1H) 7.16 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.95 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.40 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 1.54 (d, J= 6.8 Hz, 3H).
實施例 33 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 甲胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-2,2,6- 三氟 -3- 氧代 -3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -8- 甲腈 ( 化合物 33)
步驟1：2-溴-2,2-二氟乙醯氯 將二氟溴乙酸(1.0 g，5.7 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)中，氬氣氛圍下加入N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)，滴加草醯氯(0.49 mL，5.7 mmol)，室溫攪拌0.5小時待用。
步驟2：2-溴-N-(3-氰基-5-氟-2-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯基)-2,2-二氟乙醯胺 於3-胺基-5-氟-2-羥基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲腈(20 mg，0.086 mmol)的四氫呋喃(4 mL)溶液中，氮氣氛圍下加入三乙胺(0.2 mL)，滴加步驟1製備的2-溴-2,2-二氟乙醯氯的四氫呋喃溶液(0.18 mL，0.095 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。反應液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(33.5 g，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：388.7, 390.8 [M+1] +。
步驟3：2,2,6-三氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將2-溴-N-(3-氰基-5-氟-2-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯基)-2,2-二氟乙醯胺(33.5 mg，0.086 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺中(2 mL)中，加入碳酸鉀(23.8 mg，0.172 mmol)，80℃攪拌1.0小時。冷卻至室溫，加入乙酸(0.5 mL)使溶液呈酸性，攪拌15分鐘，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(12 mg，收率75.8%)。 ESI-MS m/z：308.9 [M+1] +。
步驟4：2,2,6-三氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將2,2,6-三氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(60 mg，0.195 mmol)溶於醋酸(6 mL)中，再加入N-碘代丁二醯亞胺(52.5 mg，0.233 mmol)，氬氣氛圍下80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(84.5 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：434.7 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.69 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.41 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H).
步驟5：2,2,6-三氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將2,2,6-三氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(60 mg，0.138 mmol)，頻那醇硼烷(176.9 mg，1.38 mmol)，三乙胺(69.8 mg，0.69 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(12.6 mg，0.014 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(13.2 mg，0.028 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(60 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：434.9 [M+1] +。
步驟6：第三丁基(7-(5-(8-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將2,2,6-三氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈(70.0 mg，0.16 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(62.1 mg，0.16 mmol)，碳酸鉀(66.3 mg，0.48 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(13.0 mg，0.016 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，加入醋酸(1 mL)，攪拌15分鐘，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：10，體積比)，得到產物，黃色固體(95 mg，收率96.2%)。 ESI-MS m/z：612.8 [M+1] +。
步驟7：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 於第三丁基(7-(5-(8-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(60 mg，0.098 mmol)的二氯甲烷(6 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，再加入氯化亞碸(58.3 mg，0.49 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到粗品(62 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：630.8 [M+1] +。
步驟8：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(62 mg，0.098 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到粗品(60 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：611.8 [M+1] +。
步驟9：7-(4-(1-(胺基甲基)-5-(甲胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-2,2,6-三氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基)胺基甲酸酯(60 mg，0.098 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(8 mg，收率16.0%)。 ESI-MS m/z：511.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.99 (s, 1H), 8.83 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.41 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.28 (d, J = 4.8 Hz, 3H).
實施例 34 5-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-2- 環丙氧基 -6- 氟 -1- 氧代異吲哚啉 -4- 甲腈 ( 化合物 34)
步驟1：4-胺基-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯 在氮氣保護下，於1-溴-5-氟-2-甲基-4-硝基苯(5 g，21.366 mmol)、醋酸鈀(478.6 mg，0.214 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵(1.164 g，2.137 mmol)和三乙胺(6.47 g，64.097 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(60 mL)和甲醇(20 mL)溶液中，加入八羰基二鈷(10.96 g，32.094 mmol)，反應溶液在90℃攪拌3小時。反應完畢，反應液用矽藻土過濾，向濾液中加入飽和氯化鈉(50 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(50 mL×3)，有機相用飽和氯化鈉洗滌(100 mL×3)後濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~7%，體積比)，得到產物，白色固體(2.9 g，收率74.09%)。 ESI-MS m/z：184.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.47 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 6.59 (dd, J= 9.0, 0.8 Hz, 1H), 5.94 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.40 (s, 3H).
步驟2：4-胺基-3-溴-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯 於4-胺基-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯(2.9 g，15.83 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(30 mL)溶液中，加入N-溴代琥珀醯亞胺(3.381 g，18.998 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(30 mL)溶液，反應液在室溫下攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉(50 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(50 mL×3)，有機相用飽和氯化鈉洗滌(100 mL×3)後濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~5%，體積比)，得到產物，淺黃色固體(3.6 g，收率86.77%)。 ESI-MS m/z：261.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.54 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.57 (s, 3H).
步驟3：3-溴-5-氟-4-碘-2-甲基苯甲酸甲酯 在氮氣保護和65℃條件下，於碘化亞銅(1.603 g，8.416 mmol)的乙腈(20 mL)溶液中，緩慢加入亞硝酸第三丁酯(1.063 g，10.31 mmol)的乙腈(5 mL)溶液，繼續攪拌10分鐘，再緩慢加入4-胺基-3-溴-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯(1.8 g，6.87 mmol)的乙腈(30 mL)，反應液在65℃下攪拌2小時。反應完畢，過濾，再向濾液中加入飽和氯化鈉(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL)，混合液過濾，濾液用乙酸乙酯萃取(50 mL×3)，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~8%，體積比)，得到產物，白色固體(1.73 g，收率67.54%)。 ESI-MS m/z：372.7 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.60 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.61 (s, 3H).
步驟4：3-溴-2-(溴甲基)-5-氟-4-碘苯甲酸甲酯 在氮氣保護條件下，於3-溴-5-氟-4-碘-2-甲基苯甲酸甲酯(1.7 g，4.558 mmol)和N-溴代琥珀醯亞胺(1.6225 g，9.116 mmol)的乙腈(30 mL)溶液中，加入偶氮二異丁腈(299.4 mg，1.823 mmol)，反應液在90℃攪拌3小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~5%，體積比)，得到產物，白色固體(1.7 g，收率82.54%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.74 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.90 (s, 3H).
步驟5：4-溴-2-環丙基-6-氟-5-碘異吲哚-1-酮 於3-溴-2-(溴甲基)-5-氟-4-碘苯甲酸甲酯(1.7 g，3.78 mmol)和碳酸鉀(1.56 g，11.35 mmol)的乙醇(30 mL)溶液中，加入環丙胺(475 mg，8.32 mmol)的乙醇(10 mL)溶液，反應液在40℃攪拌3小時。反應完畢，反應液過濾，濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%，體積比)，得到產物，白色固體(1.2 g，收率80.55%)。 ESI-MS m/z：395.7 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.53 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 1.5 Hz, 2H), 2.93 (tt, J= 7.3, 3.9 Hz, 1H), 0.93 -0.87 (m, 2H), 0.84 – 0.78 (m, 2H).
步驟6：4-溴-2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)異吲哚-1-酮 在氮氣保護下，於4-溴-2-環丙基-6-氟-5-碘異吲哚-1-酮(200 mg，0.505 mmol)、1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(157.57 mg，0.758 mmol)和碳酸鉀(139.6 mg，1.01 mmol)的二氧六環(10 mL)和水(1 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(41.2 mg，0.051 mmol)，反應液在120℃微波照射反應2小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%，體積比)，得到產物，黃色固體(85 mg，收率48.06%)。 ESI-MS m/z：349.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.72 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.44 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 4.41 (d, J= 1.5 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 2.97 (tt, J= 7.4, 3.9 Hz, 1H), 0.96 – 0.89 (m, 2H), 0.88 – 0.80 (m, 2H).
步驟7：2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈 在氮氣保護下，於4-溴-2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)異吲哚-1-酮(220 mg，0.6282 mmol)和氰化鋅(88.2 mg，0.754 mmol)的N,N-二甲基乙醯胺(10 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(51.3 mg，0.0628 mmol)，反應液在120℃微波照射反應1小時，反應完畢，反應液加入飽和氯化鈉(30 mL)和乙酸乙酯(30 mL)，混合液過濾，有機相用飽和氯化鈉洗滌(30 mL×3)，並減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~60%，體積比)，得到產物，黃色固體(102 mg，收率54.79%)。 ESI-MS m/z：297.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.08 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.67 (d, J= 1.4 Hz, 2H), 3.73 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 3.01 (tt, J= 7.5, 4.0 Hz, 1H), 0.95 – 0.91 (m, 2H), 0.83–0.89 (m, 2H).
步驟8：2-環丙基-6-氟-5-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈 於2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈(100 mg，0.3375 mmol)和硝酸銀(172.12 mg，1.0125 mmol)的乙醇(15 mL)溶液中，加入碘(128.58 mg，0.5062 mmol)，反應液在80℃攪拌反應2小時。反應完畢，反應液過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(90 mg，收率63.16%)。 ESI-MS m/z：422.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.81 – 4.60 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.00 (tt, J= 7.4, 4.0 Hz, 1H), 0.94 (q, J= 4.2, 3.8 Hz, 2H), 0.85 (dq, J= 7.1, 4.1 Hz, 2H).
步驟9：2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈 將2-環丙基-6-氟-5-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈(90 mg，0.213 mmol)，頻那醇硼烷(272.85 mg，2.132 mmol)，三乙胺(107.65 mg，1.066 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(9.75 mg，0.0107 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(10.168 mg，0.0213 mmol)，100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(80 mg，收率90.01%)。 ESI-MS m/z：423.0 [M+1] +。
步驟10：(7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將2-環丙基-6-氟-5-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1-氧代異吲哚-4-甲腈(80 mg，0.189 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(73.55 mg，0.189 mmol)，碳酸鉀(52.37 mg，0.3789 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(15.47 mg，0.0189 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，褐色固體(100 mg，收率87.44%)。 ESI-MS m/z：603.9 [M+1] +。
步驟11：(1-(氯甲基)-7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.1657 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(98.55 mg，0.8283 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：621.9 [M+1] +。
步驟12：(1-(胺基甲基)-7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將溶於甲醇(15 mL)的(1-(氯甲基)-7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.1607 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(10 mL，7.0 mol/L)，室溫攪拌30分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：602.9 [M+1] +。
步驟13：5-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-4-甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(4-氰基-2-環丙基-6-氟-1-氧代異吲哚-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基](甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.1659 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(30 mg，收率35.98%)。 ESI-MS m/z：502.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.75 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.12 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.95 (br, 2H), 7.18 (s, 1H), 4.78 – 4.62 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.04 (tt, J= 7.4, 4.0 Hz, 1H), 0.98 – 0.82 (m, 4H).
實施例 35 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -3- 氧代 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙氧基 -8- 甲腈 ( 化合物 35)
步驟1：1-(2-溴-4-氟-6-硝基苯氧基)環丙烷-1-羧酸甲酯 將1-溴-2,5-二氟-3-硝基苯(4.0 g，16.8 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(40 mL)中，加入1-羥基環丙烷-1-羧酸甲酯(2.4 g，20.2 mmol)和碳酸銫(6.6 g，20.2 mmol), 80℃下攪拌4小時，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色液體(4.6 g，收率84%)。 ESI-MS m/z：334 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.56 (dd, J = 7.2, 3.1 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 7.0, 3.1 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 1.56 – 1.49 (m, 2H), 1.42 – 1.34 (m, 2H).
步驟2：8-溴-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮 將1-(2-溴-4-氟-6-硝基苯氧基)環丙烷-1-羧酸甲酯(4.6 g，13.8 mmol)溶於醋酸(50 mL)中，加入鐵粉(7 g，125 mmol)，60℃攪拌反應1小時後，過濾，旋乾醋酸，倒入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8：1，體積比)，得到產物，黃色固體(3.1 g，收率84%)。 ESI-MS m/z：272 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.06 (s, 1H), 6.95 (dd, J = 8.0, 2.8 Hz, 1H), 6.58 (dd, J = 8.3, 2.8 Hz, 1H), 1.56 – 1.46 (m, 2H), 1.44 – 1.32 (m, 2H).
步驟3：8-溴-6-氟-7-碘螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮 將8-溴-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮(3.3g，12 mmol)溶於乙醇(60 mL)，加入硝酸銀(2.7g，15.8 mmol)和碘(4.0g，15.8 mmol)，75℃攪拌反應12小時後，減壓濃縮，殘留物倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8：1，體積比)，得到產物，黃色固體(3.3 g，收率68%)。 ESI-MS m/z：398 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.66 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 1.56 – 1.48 (m, 2H), 1.41 – 1.31 (m, 2H).
步驟4：8-溴-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮 將8-溴-6-氟-7-碘螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮(2.0 g，5.0 mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(3.1 g，15.0 mmol)，碳酸鉀(2.1 g，15.0 mmol)溶於二氧六環(50 mL)和水(5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(0.4 g，0.5 mmol)，100℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色液體(0.6 g，收率34%)。 ESI-MS m/z：352 [M+1] +。
步驟5：6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 將8-溴-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮(600 mg，1.7 mmol)，氰化鋅(600 mg，5.1 mmol)，溶於N,N-二甲基乙醯胺(20 mL)，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(277 mg，0.34 mmol)，微波160℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色液體(170 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：299 [M+1] +。
步驟6：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 於6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(170 mg，0.56 mmol)的醋酸(8 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(146 mg，0.65 mmol)，氬氣氛圍下80℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，黃色油狀物(120 mg，收率50%)。 ESI-MS m/z：426 [M+1] +。
步驟7：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(100 mg，0.23 mmol)，頻那醇硼烷(300 mg，2.3 mmol)，三乙胺(120 mg，0.69 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(19.96 mg，0.02181 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(20.81 mg，0.04362 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(120 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：426 [M+1] +。
步驟8：(7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(100 mg，0.23 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(90 mg，0.23 mmol)，碳酸鉀(70 mg，0.5 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(21 mg，0.023 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(110 mg，收率73%)。 ESI-MS m/z：606 [M+1] +。
步驟9：(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(40 mg，0.066 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(42 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：624 [M+1] +。
步驟10：(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將溶於甲醇(15 mL)的(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(42 mg，0.067 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(40 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：605 [M+1] +。
步驟11：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(40 mg，0.066 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(12 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：505 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.98 (s, 2H), 8.80 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 7.19 (dd, J = 9.5, 1.3 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.34 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.51 – 1.26 (m, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO- d 6 ) δ -73.42 (t, J = 3.5 Hz), -116.91.
實施例 36 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 甲基 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 36)
步驟1：8-溴-6-氟-4-甲基螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-3(4 H)-酮 將8-溴-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-3(4 H)-酮(2.32 g，8.56 mmol)和碘甲烷(1.46 g，10.27 mmol)溶於乙腈(50 mL)，加入碳酸鉀(8.3 mg，9.42 mmol)，80℃攪拌反應8小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1)分離，得到白色固體(2.47 g，收率99%)。 ESI-MS m/z：286.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.28 (dd, J= 8.2, 2.8 Hz, 1H), 7.19 (dd, J= 10.1, 2.9 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 1.34 – 1.19 (m, 4H).
步驟2：8-溴-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基] 將8-溴-6-氟-4-甲基螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-3(4 H)-酮(2.5 g，8.77 mmol)溶於四氫呋喃(50 mL)，在0℃下加入2.0 M硼烷二甲硫醚(17.5 mL，35 mmol)，50℃攪拌反應2小時。反應液0℃下加入甲醇(20 mL)淬滅反應，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1)分離，得到白色固體(2.37 g，收率99%)。 ESI-MS m/z：272.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 6.63 (dd, J= 8.2, 2.9 Hz, 1H), 6.59 (dd, J= 11.4, 2.9 Hz, 1H), 3.30 (s, 2H), 2.88 (s, 3H), 0.95 – 0.73 (m, 4H).
步驟3：8-溴-6-氟-7-碘-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基] 將8-溴-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基](2.1 g，7.75 mmol)溶於四氫呋喃(50 mL)，氮氣保護，冷卻至-70℃，滴加二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(4.65 mL，9.29 mmol，2 M)，-70℃攪拌反應2小時後，滴加溶於四氫呋喃(20 mL)的碘(2.36 g，9.3 mmol)溶液，-70℃攪拌反應2小時後，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，黃色固體(2.5 g，收率81.1%)。 ESI-MS m/z：398.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 6.76 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.32 (s, 2H), 2.89 (s, 3H), 0.98 – 0.74 (m, 4H).
步驟4：8-溴-6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基] 將8-溴-6-氟-7-碘-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基](0.8 g，2.0 mmol)和1-甲基-1 H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(1.26 g，6.0 mmol)溶於1,4-二氧六環(12.5 mL)，加入碳酸鉀(552 mg，4.0 mmol)、水(2.5 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(147 mg，0.2 mmol)，反應在氬氣氛圍、微波100℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(564 mg，收率52%)。 ESI-MS m/z：352.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.47 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.75 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 6.24 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.34 (s, 2H), 2.95 (s, 3H), 0.99 – 0.78 (m, 4H).
步驟5：6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將8-溴-6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基](0.48 g，1.36 mmol)、氰化鋅(0.48 g，4.1 mmol)溶於 N-甲基吡咯烷酮(6 mL)，加入[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(198 mg，0.27 mmol)，反應在氬氣氛圍、微波200℃攪拌1小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到白色固體(224 mg，收率55.4%)。 ESI-MS m/z：299.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.59 (d, J= 11.5 Hz, 1H), 6.40 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.35 (s, 2H), 2.99 (s, 3H), 1.29-1.18 (m, 4H).
步驟6：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(204 mg，0.685 mmol)溶於醋酸(6 mL)中，再加入N-碘代丁二醯亞胺(185 mg，0.821 mmol)，氬氣氛圍下60℃攪拌反應4小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(140 mg，收率48.3%)。 ESI-MS m/z：425.0 [M+1] +。
步驟7：6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(140 mg，0.33 mmol)，頻那醇硼烷(423 mg，3.3 mmol)，三乙胺(101 mg，1.0 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(31 mg，0.033 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(32 mg，0.066 mmol)，90℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(144 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：425.2 [M+1] +。
步驟8：第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(120.0 mg，0.3 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(114 mg，0.3 mmol)，碳酸鉀(84 mg，0.6 mmol)溶於二氧六環(7.5 mL)和水(1.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(24.5 mg，0.03 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(45 mg，收率24.8%)。 ESI-MS m/z：606.3 [M+1] +。
步驟9：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.074 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(62 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：623.2 [M+1] +。
步驟10：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(62 mg，0.074 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：605.3 [M+1] +。
步驟11：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(50 mg，0.074 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(10 mg，收率26.8%)。 ESI-MS m/z：505.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.90 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.09 – 7.01 (m, 2H), 4.29 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.51-3.46 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 0.98 – 0.82 (m, 4H).
實施例 37 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-8- 氟 -1- 甲基螺 [ 苯并 [b][1,2,4] 三唑 [4,3-d][1,4] 噁嗪 -4,1 '- 環丙基 -6- 甲腈 ( 化合物 37)
步驟1：8-溴-6-氟-7-碘螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-硫酮 將8-溴-6-氟-7-碘螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-酮 (200 mg，0.503 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入勞森試劑(102 mg，0.251 mmol)在80℃下攪拌3小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到淺黃色固體(180 mg，收率86%)。 ESI-MS m/z：413.7, 415.6 [M+H] +。
步驟2：8-溴-6-氟-3-肼亞基-7-碘-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷 將8-溴-6-氟-7-碘螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-3(4H)-硫酮(180 mg，0.435 mmol)溶於四氫呋喃(5 mL)，加入水合肼(128 mg，2.176 mmol，85%純度)，在25℃下攪拌30分鐘。反應液減壓濃縮得粗品黃色油狀物(180 mg)，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：411.7, 413.7 [M+H] +。
步驟3：6-溴-8-氟-7-碘-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷] 將8-溴-6-氟-3-肼亞基-7-碘-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷(180 mg，0.437 mmol)溶於原乙酸三乙酯(5 mL)，在100℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮得到粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(150 mg，收率79%)。 ESI-MS m/z：435.7, 437.7 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.80 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 1.53 – 1.46 (m, 2H), 1.41 – 1.36 (m, 2H).
步驟4：6-溴-8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷] 將6-溴-8-氟-7-碘-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷](550 mg，1.26 mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(394 mg，1.89 mmol)，碳酸鉀(522 mg，3.78 mmol)溶於二氧六環(20 mL)和水(2 mL)中，氬氣氛圍下加入[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(103 mg，0.126 mmol)，在100℃攪拌反應12小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1)分離，得到黃色固體粗品(500 mg)。 ESI-MS m/z：389.8, 391.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.90 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.79 (s, 3H), 1.53 – 1.45 (m, 2H), 1.43 – 1.31 (m, 2H).
步驟5：8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-腈 將6-溴-8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷](500 mg，1.28 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(5 mL)，加入氰化鋅(375 mg，3.21 mmol)，鋅粉(10 mg，0.154 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(105 mg，0.128 mmol)，在氬氣氛圍、160℃、微波下攪拌2小時。反應液倒入水(100 mL)中，用乙酸乙酯(80 mL×2)萃取，合併有機相，並用飽和食鹽水(80 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到黃色油狀物粗品(450 mg)。 ESI-MS m/z：336.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.17 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.80 (s, 3H), 1.67 – 1.60 (m, 2H), 1.50 – 1.43 (m, 2H).
步驟6：8-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-腈 將8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-腈(450 mg，1.34 mmol)溶於乙酸(10 mL)，加入N-碘代丁二醯亞胺(362 mg，1.61 mmol),反應在氬氣氛圍、80℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到黃色固體(180 mg，收率29%)。 ESI-MS m/z：462.7 [M+H] +。
步驟7：8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-甲腈 將8-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-甲腈(180 mg，0.39 mmol)溶於二氧六環(10 mL)，加入三乙胺(197 mg，1.95 mmol)，三二亞苄基丙酮二鈀(37 mg，0.04 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(38 mg，0.08 mmol)，最後加入頻那醇硼烷(499 mg，3.9 mmol)，在氬氣氛圍、100℃攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到黃色油狀物粗品(280 mg)。 ESI-MS m/z：462.6 [M+H] +。
步驟8：(7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-腈(140 mg，0.303 mmol)和(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(118 mg，0.303 mmol)，碳酸鉀(84 mg，0.606 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-二第三丁基膦基二茂鐵二氯化鈀(20 mg，0.03 mmol)，在90℃攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到黃色油狀物(80 mg，收率41%)。 ESI-MS m/z：544.3 [M-100] +。
步驟9：1-(氯甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(80 mg，0.124 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入氯化亞碸(74 mg，0.621 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1 mg，0.012 mmol)，在20℃攪拌10分鐘。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(80 mg)。 ESI-MS m/z：561.8 [M-100] +。
步驟10：(1-(胺基甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將1-(氯甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(80 mg，0.12 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：542.9 [M-100] +。
步驟11：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙基-6-甲腈 將(1-(胺基甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(80 mg，0.12 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)，在20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到黃色固體(3 mg，收率4%)。 ESI-MS m/z：542.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.99 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.39 – 8.24 (m, 2H), 8.20 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.34 (d, J= 2.4 Hz, 2H), 3.75 (s, 3H), 2.81 (s, 3H), 1.72 – 1.56 (m, 2H), 1.53 – 1.38 (m, 2H).
實施例 38 7-(5-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-2- 甲基 -1H- 咪唑 -1- 基 )-8- 氟 -1- 甲基螺 [ 苯并 [b][1,2,4] 三唑 [4,3-d] [1,4] 噁嗪 -4,1 '- 環丙基 -6- 甲腈 ( 化合物 38)
步驟1：第三丁基((7-溴-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯 於4-(胺甲基)-6-溴酞嗪-1(2H)-酮(400 mg，1.581 mmol)和二碳酸二第三丁酯(1.208 g，5.534 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，加入4-二甲胺基吡啶(17.73 mg，0.1581 mmol),反應液在室溫下攪拌36小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，白色固體(200 mg，收27.74%)。 ESI-MS m/z：453.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.35 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 8.13 (dd, J= 8.5, 1.8 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 1.39 (s, 18H).
步驟2：第三丁基(第三丁氧羰基)((7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-甲腈(91.58 mg，0.1981 mmol)，第三丁基((7-溴-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)(第三丁氧羰基)胺基甲酸酯(90 mg，0.1981 mmol)，碳酸鉀(54.76 mg，0.3962 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(16.18 mg，0.01981 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~3%，體積比)，得到產物，紅色油狀(90 mg，收64.01%)。 ESI-MS m/z：709.9 [M+1] +。
步驟3：7-(4-(4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫苯并噻唑-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-6-甲腈 於第三丁基(第三丁氧羰基)((7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基螺[苯并[b][1,2,4]三唑[4,3-d][1,4]噁嗪-4,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫酞嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(90 mg，0.1268 mmol)的二氯甲烷(8 mL)溶液中，加入三氟乙酸(2 mL)，反應液在室溫下攪拌0.5小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(18 mg，收率27.86%)。 ESI-MS m/z：509.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.34 (s, 1H), 8.25 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 8.16 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.83 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.66 (dd, J= 8.4, 1.6 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 1.69 – 1.55 (m, 2H), 1.53 – 1.42 (m, 2H).
實施例 39 6-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-7- 氟 -2- 氧代 -1,2- 二氫喹啉 -5- 甲腈 ( 化合物 39)
步驟1：7-氟-6-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈 將7-氟-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈(45 mg，0.1142 mmol，見實施列27，步驟5)，頻那醇硼烷(146.14 mg，1.142 mmol)，三乙胺(57.65 mg，0.571 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(5.22 mg，0.0057 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(5.466 mg，0.0114 mmol)，100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~2%，體積比)，得到產物，黃色固體(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：395.0 [M+1] +。
步驟2：第三丁基(7-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將7-氟-6-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈(50 mg，0.1268 mmol)，(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(49.24 mg，0.1268 mmol)，碳酸鉀(35.06 mg，0.2537 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(10.36 mg，0.01268 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~6%，體積比)，得到產物，黃色固體(35 mg，收率47.94%)。 ESI-MS m/z：575.9 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯(30 mg，0.05212 mmol)於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(31 mg，0.261 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(35 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：593.9 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(2 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(35 mg，0.05892 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，室溫攪拌30分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(35 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：574.9 [M+1] +。
步驟5：6-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈 將第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(5-氰基-7-氟-2-氧代-1,2-二氫喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(35 mg，0.061 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(9 mg，收率31.14%)。 ESI-MS m/z：475.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.73 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.03 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.79 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.73 (s, 3H).
實施例 40 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-8- 氟 -1- 甲基 -[1,2,4] 三唑 [4,3-a] 喹啉 [1,4]-6- 甲腈 ( 化合物 40)
步驟1：2-溴-5-氟-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-硝基苯甲腈 將3-氟-6-羥基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-硝基苯甲腈(1.0 g，3.8 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中，加入三溴化磷(2.0 g，7.4 mmol)，110℃下攪拌1小時，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色液體(0.5 g，收率40%)。 ESI-MS m/z：325 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.94 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
步驟2：(E)-3-(2-氰基-4-氟-3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-硝基苯基)丙烯酸丁酯 將2-溴-5-氟-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-硝基苯甲腈(900 mg，2.8 mmol)，丙烯酸丁酯(1.8 g，13.8 mmol)，碳酸鉀(1.15 g，8.34 mmol)溶於二氧六環(30 mL)中，氬氣氛圍下加入2-雙環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(292 mg，0.61 mmol)和醋酸鈀(125 mg，0.56 mmol)，100℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色液體(300 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：373 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.15 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.00 – 7.88 (m, 1H), 7.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.28 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.91 – 3.80 (m, 3H), 1.45 (qd, J = 9.0, 8.3, 6.5 Hz, 2H), 1.31 – 1.27 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
步驟3：(E)-3-(2-氰基-4-氟-3-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-硝基苯基)丙烯酸丁酯 將(E)-3-(2-氰基-4-氟-3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-硝基苯基)丙烯酸丁酯(300 mg，0.81 mmol)溶於醋酸(20 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(300 mg，1.3 mmol)，60℃攪拌反應4小時後，旋乾醋酸，倒入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1，體積比)，得到產物，黃色固體(300 mg，收率74%)。 ESI-MS m/z：498 [M+H] +。
步驟4：(E)-3-(6-胺基-2-氰基-4-氟-3-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯基)丙烯酸丁酯 將(E)-3-(2-氰基-4-氟-3-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-硝基苯基)丙烯酸丁酯(300 mg，0.60 mmol)，鐵粉(84 mg，1.8 mmol)溶於醋酸(30 mL)中，60℃攪拌反應2小時。旋乾醋酸，倒入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1，體積比)，得到產物，黃色固體(230 mg，收率81%)。 ESI-MS m/z：469 [M+H] +。
步驟5：7-氟-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈 將(E)-3-(6-胺基-2-氰基-4-氟-3-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯基)丙烯酸丁酯(160 mg，0.34 mmol)，甲醇鈉(0.1 mL，5 M)溶於甲醇(15 mL)中，60℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(120 mg，收率88%)。 ESI-MS m/z：395 [M+1] +。
步驟6：7-氟-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-硫代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈 將7-氟-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-氧代-1,2-二氫喹啉-5-甲腈(100 mg，0.25 mmol)，勞森試劑(50 mg，0.13 mmol)，溶於四氫呋喃(15 mL)，80℃攪拌反應4小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(90 mg，收率86%)。 ESI-MS m/z：411 [M+1] +。
步驟7：(E)-7-氟-2-腙-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1,2-二氫喹啉-5-腈 將7-氟-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-硫代-1,2-二氫喹啉-5-腈(100 mg，0.24 mmol)，水合肼(0.5 mL)加入四氫呋喃(15 mL)中，40℃攪拌反應2小時。減壓濃縮，得到黃色油狀物(80 mg，收率80%)。 ESI-MS m/z：409 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.91 (dd, J = 13.5, 4.8 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.57 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 8.8, 3.3 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 3.0 Hz, 3H).
步驟8：8-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-6-甲腈 將(E)-7-氟-2-腙-6-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1,2-二氫喹啉-5-甲腈(80 mg，0.2 mmol)和原乙酸三乙酯(10 mL)在100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇的二氯甲烷溶液3%，體積比)，得到產物，黃色油狀(80 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：433 [M+1] +。
步驟9：8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼-2-基)-1H-吡唑-5-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-6-甲腈 將8-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-6-甲腈(80 mg，0.2 mmol)，頻那醇硼烷(300 mg，2.3 mmol)，三乙胺(120 mg，0.69 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(19.96 mg，0.02181 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(20.81 mg，0.04362 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(50 mg，收率62%)。 ESI-MS m/z：433 [M+1] +。
步驟10：第三丁基(7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將8-氟-1-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼-2-基)-1H-吡唑-5-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-6-甲腈(50 mg，0.11 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.11 mmol)，碳酸鉀(35 mg，0.25 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(11 mg，0.011 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(20 mg，收率28%)。 ESI-MS m/z：614 [M+1] +。
步驟11：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(20 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：632 [M+1] +。
步驟12：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(20 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：614 [M+1] +。
步驟13：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑[4,3-a]喹啉[1,4]-6-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(1.2 mg，收率10%)。 ESI-MS m/z：513 [M+1] +。
實施例 41 7-(4-(4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 甲基 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 41)
步驟1：第三丁基(第三丁氧基羰基)(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(100 mg，0.23 mmol)，第三丁基((7-溴-4-氧代-3,4-二氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯(106 mg，0.23 mmol)，碳酸鉀(70 mg，0.5 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(21 mg，0.023 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(40 mg，收率25%)。 ESI-MS m/z：672 [M+1] +。
步驟2：7-(4-(4-(胺甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(第三丁氧基羰基)(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基-3,4-二氫螺 [苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(40 mg，0.025 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(112 mg，收率34%)。 ESI-MS m/z：572 [M+1] +。
實施例 42 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -3- 氧代 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙氧基 -8 甲腈 ( 化合物 42)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(5.1 g，12 mmol)(來自實施例35步驟6)溶於四氫呋喃(80 mL)，加入硼烷二甲硫醚絡合物(12.3 mL，24.6 mmol，2 M)，在氬氣氛圍、50℃下攪拌2小時。反應液冷卻至室溫，用2 M稀鹽酸將pH調節至1~2，攪拌2小時，用乙酸乙酯(100 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和碳酸氫鈉溶液(50 mL)洗滌一次，用飽和食鹽水(50 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，用二氯甲烷(50 mL)打漿，過濾，收集濾餅得到白色固體(4.68 g，收率95%)。 ESI-MS m/z：411.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.50 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 4.11 – 4.00 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 1.14 – 0.96 (m, 4H).
步驟2：8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(50 mg，0.122 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，加入二碳酸二第三丁酯(40 mg，0.183 mmol)和4-二甲胺基吡啶(1 mg，0.008 mmol)，在20℃下攪拌30分鐘。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到粗品白色固體(117 mg)。 ESI-MS m/z：410.8 [M-100] +。
步驟3：8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(110 mg，0.215 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL)，加入三乙胺(108 mg，1.075 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(20 mg，0.022 mmol)，2-雙環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(20 mg，0.044 mmol)，在氬氣氛圍下加入頻那醇硼烷(275 mg，2.15 mmol)，在100℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到透明油狀物(90 mg，收率81%)。 ESI-MS m/z：511.0 [M+H] +。
步驟4：7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(90 mg，0.176 mmol)和(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(171 mg，0.44 mmol)，碳酸鉀(73 mg，0.528 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(14 mg，0.018 mmol)，在微波、120℃下攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到黃色油狀物(80 mg，收率65%)。 ESI-MS m/z：692.3 [M+H] +。
步驟5：7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(80 mg，0.116 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入氯化亞碸(69 mg，0.578 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1 mg，0.012 mmol)，在20℃攪拌30分鐘。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(80 mg)。 ESI-MS m/z：609.9 [M-100] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺基甲基)-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(80 mg，0.131 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：490.9 [M-200] +。
步驟7：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將7-(4-(1-(胺甲基)-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(80 mg，0.116 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)中，加入三氟乙酸(3 mL)，在20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到淡黃色固體(2 mg，收率4%)。 ESI-MS m/z：490.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.93 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.10 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.83 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.50 – 3.45 (m, 2H), 0.94 – 0.80 (m, 4H).
實施例 437- (4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 乙基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 43)
步驟1：4-乙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺 [苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(40 mg，0.097 mmol)(來自實施例42步驟1)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入碳酸銫(48 mg, 0.147 mmol)和碘乙烷(23mg，0.147 mmol)，在60℃下攪拌2小時。反應液過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到淺黃色固體(30 mg，收率70%)。 ESI-MS m/z：438.8 [M+H] +。
步驟2：4-乙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-乙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺 [苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(30 mg，0.068 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL)，加入三乙胺(34 mg，0.34 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(6 mg，0.007 mmol)，2-雙環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(6 mg，0.014 mmol)，在氬氣氛圍下加入頻那醇硼烷(87 mg，0.68 mmol)，在100℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到透明油狀物(22 mg，收率73%)。 ESI-MS m/z：439.2 [M+H] +。
步驟3：(7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將4-乙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(22 mg，0.05 mmol)和(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(39 mg，0.1 mmol)，碳酸鉀(21 mg，0.15 mmol)溶於二氧六環(2 mL)和水(0.2 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(4 mg，0.005 mmol)，在微波、120℃下攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到粗品黃色油狀物(40 mg)。 ESI-MS m/z：620.3 [M+H] +。
步驟4：(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(40 mg，0.065 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入氯化亞碸(38 mg，0.323 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mg，0.007 mmol)，在20℃攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(40 mg)。 ESI-MS m/z：638.2 [M+H] +。
步驟5：(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(40 mg，0.06 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：619.0 [M+H] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-4-乙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(40 mg，0.065 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)中，加入三氟乙酸(3 mL)，在20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到淡黃色固體(3 mg，收率9%)。 ESI-MS m/z：519.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.78 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.09 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.52 – 3.48 (m, 2H), 3.44 – 3.39 (m, 2H), 1.10 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 0.97 – 0.82 (m, 4H).
實施例 44 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 - 1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-(2,2,2- 三氟乙基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1 '- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 44)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(45 mg，0.1mmol)(來自實施例42步驟1)和一水三氟乙醛(165 mg，1.0 mmol)溶於三氟乙酸(3 mL)，20℃攪拌反應2小時，加入醋酸硼氫化鈉(63.6 mg，0.3 mmol)，20℃攪拌反應6小時。反應液經減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1)分離，得到白色固體(32 mg，收率64.9%)。 ESI-MS m/z：493.1 [M+1] +。
步驟2：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(32 mg，0.064 mmol)，頻那醇硼烷(128 mg，1.0 mmol)，三乙胺(30 mg，0.3 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(9 mg，0.01 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(9 mg，0.01 mmol)，氬氣氛圍下100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(78 mg粗品，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：493.2 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(78 mg，0.16 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(114 mg，0.3 mmol)，碳酸鉀(66 mg，0.6 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(13 mg，0.016 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(32 mg，收率30%)。 ESI-MS m/z：674.2 [M+1] +
步驟4：第三丁基 (1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(32 mg，0.05 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(52 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：692.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(52 mg，0.05 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：673.3 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(2,2,2-三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(2,2,2-三氟乙基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(50 mg，0.05 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(6 mg，收率21.4%)。 ESI-MS m/z：573.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.60 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.41(s, 1H), 7.25(d, J= 11.6 Hz, 1H),7.04 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.49 (d, J= 12.3 Hz, 2H), 3.25 (s, 2H), 0.97 – 0.80 (m, 4H).
實施例 45 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 異丙基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1' - 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 45)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(180 mg，0.43 mmol)(來自實施例42步驟1)和丙酮(509 mg，8.78 mmol)溶於三氟乙酸(10 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時；室溫下向體系內加入三乙醯基硼氫化鈉(930 mg，4.39 mmol)，攪拌反應0.5小時。反應物中加入飽和碳酸鈉溶液，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，無色油狀物(60 mg，收率30%)。 ESI-MS m/z：452.8 [M+1] +。
步驟2：6-氟-4-異丙基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(60 mg，0.13 mmol)、頻那醇硼烷(169 mg，1.32 mmol)、三(二亞苄基丙酮)鈀(12 mg，0.013 mmol)、2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(12.5 mg，0.026 mmol)、三乙胺(66 mg，0.66 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，100℃下攪拌反應2.0小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，黃色固體(42 mg，收率70%)。 ESI-MS m/z：453.0 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 6-氟-4-異丙基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(42 mg，0.09 mmol)、第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(90 mg，0.23 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(7.5 mg，0.009 mmol)、碳酸鉀(32 mg，0.23 mmol)和水(0.5 mL)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，微波條件下，120℃反應1小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物，黃色固體(45 mg，收率77%)。 ESI-MS m/z：634.1 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.07 mmol)、二氯亞碸(33 mg，0.28 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1滴)溶於二氯甲烷(5 mL)中，氬氣保護，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮得到粗產物，黃色固體(45 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：652.1 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.07 mmol)溶於甲醇(4 mL)，0℃下滴加到氨的甲醇溶液(5 mL，7 N溶於甲醇)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，得到粗產物，無色油狀物(44 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：633.1 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-異丙基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(44 mg，0.07 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，殘留物通過製備液相得到產物，黃色固體(12.5 mg，收率33%)。 ESI-MS m/z：533.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.85 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.74 (s, 2H), 7.18 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.25 – 4.18 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.43 – 3.28 (m, 3H), 1.18 (d, J= 6.5 Hz, 3H), 1.11 (d, J= 6.4 Hz, 3H), 1.08 – 1.02 (m, 1H), 0.96 – 0.82 (m, 3H).
實施例 46 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 - 1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 環丙基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1' - 環丙基 ]-8 甲腈 ( 化合物 46)
步驟1：4-環丙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(66 mg，0.16 mmol)(來自實施列42步驟1)和環丙基硼酸(138 mg，1.6 mmol)溶於1,2-二氯乙烷(10 mL)，加入醋酸銅(35.2 mg，0.176 mmol)，聯吡啶(27.5 mg，0.176 mmol)，碳酸鈉(42.4 mg，0.4 mmol)，70℃攪拌反應32小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1)分離，得到白色固體(30 mg，收率41.6%)。 ESI-MS m/z：451.1 [M+1] +。
步驟2：4-環丙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將4-環丙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(42 mg，0.1 mmol)，頻那醇硼烷(128 mg，1 mmol)，三乙胺(30 mg，0.3 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(9 mg，0.01 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(9.5 mg，0.02 mmol)，氬氣氛圍下100℃攪拌反應1.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(42 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：451.2 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3) 胺基甲酸酯 將4-環丙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(42 mg，0.1 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(78 mg，0.2 mmol)，碳酸鉀(42 mg，0.3 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(8.1 mg，0.01 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應1小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(52 mg，收率82.2%)。 ESI-MS m/z：632.2 [M+1] +
步驟4：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(52 mg，0.082 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(62 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：650.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(62 mg，0.082 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(52 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：631.3 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(52 mg，0.082 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(10 mg，收率22.9%)。 ESI-MS m/z：531.3 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.84 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.40 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.36 (dd, J= 16.8, 9.2 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.52 (d, J= 12.7 Hz, 2H), 1.35 – 0.81 (m, 8H).
實施例 47 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 甲磺醯基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 47)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(60 mg，0.146 mmol)(來自實施例42步驟1)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入吡啶(35 mg，0.438 mmol)和甲磺酸酐(51mg，0.294 mmol)，在20℃下攪拌2小時。反應液過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(71 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：438.8 [M+H] +。
步驟2：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(70 mg，0.143 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL)，加入三乙胺(72 mg，0.715 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(14 mg，0.015 mmol)，2-雙環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(14 mg，0.03 mmol)，在氬氣氛圍下加入頻那醇硼烷(183 mg，1.43 mmol)，在100℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到白色固體(70 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：488.9 [M+H] +。
步驟3：(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺 [苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(70 mg，0.143 mmol)和(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(139 mg，0.359 mmol)，碳酸鉀(59 mg，0.429 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(12 mg，0.014 mmol)，在微波、120℃下攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到粗品黃色油狀物(100 mg)。 ESI-MS m/z：669.8 [M+H] +。
步驟4：(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.149 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入氯化亞碸(89 mg，0.746 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1 mg，0.015 mmol)，在15℃攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(100 mg)。 ESI-MS m/z：687.8 [M+H] +。
步驟5：(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將((1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.145 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：569.2 [M-100] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.15 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)，在15℃攪拌1小時。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到淡黃色固體(45 mg，收率53%)。 ESI-MS m/z：569.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.97 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.31 (s, 2H), 7.94 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.34 (d, J= 1.7 Hz, 2H), 4.06 – 3.88 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 1.20 – 1.00 (m, 4H).
實施例 48 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 48)
步驟1：7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺 [苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(260 mg，0.544 mmol，來自實施例54步驟3)和7-氯-5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)吡啶并[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(140 mg，0.534 mmol)，碳酸鉀(150 mg，1.09 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(0.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(44 mg，0.05 mmol)，在微波、120℃下攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到粗品黃色油狀物(140 mg，收率45%)。 ESI-MS m/z：578.2 [M+H] +。
步驟2：(7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(140 mg，0.243 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入氯化亞碸(150 mg，1.261 mmol)，在15℃攪拌3小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(140 mg)。 ESI-MS m/z：596.2 [M+H] +。
步驟3：7-(4-(1-(胺甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(140 mg，0.235 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到白色固體(45 mg,收率33%)。 ESI-MS m/z：577.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.65 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.81 (t, J= 54.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 10.7 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.90 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 1.17 – 0.96 (m, 4H).
實施例 49 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-8- 氰基 -6- 氟螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-4(3H)- 羧酸乙酯 ( 化合物 49)
步驟1：8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(50 mg，0.12 mmol)(來自實施例42步驟1)和三乙胺(123 mg，1.21 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，0℃下加入三光氣(178 mg，0.60 mmol),室溫下攪拌反應3小時；向體系內加入無水乙醇(4 mL)，室溫攪拌反應3小時。反應物中加入飽和碳酸鈉溶液，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，無色油狀物(49 mg，收率84%)。 ESI-MS m/z：482.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.35 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 4.27 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 4.03 – 4.00 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 1.30 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.17 – 1.12 (m, 1H), 1.03 – 0.92 (m, 3H).
步驟2：8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(49 mg，0.10 mmol)、頻那醇硼烷(130 mg，1.01 mmol)、三(二亞苄基丙酮)鈀(9.2 mg，0.01 mmol)、2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(9.6 mg，0.02 mmol)、三乙胺(51 mg，0.5 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，100℃下攪拌反應2.0小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，黃色固體(42 mg，收率85%)。 ESI-MS m/z：483.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.33 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 4.27 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 4.07 – 3.96 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 1.30 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.20 – 1.13 (m, 13H), 1.05 – 0.94 (m, 3H).
步驟3：8-氰基-7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(200 mg，0.414 mmol)和7-氯-5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)吡啶并[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(100 mg，0.382 mmol)，碳酸鉀(114 mg，0.826 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.3 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(34 mg，0.041 mmol)，在微波、120℃下攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)分離，得到粗品黃色油狀物(78 mg，收率35%)。 ESI-MS m/z：582.1 [M+H] +。
步驟4：7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將8-氰基-7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(78 mg，0.134 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入氯化亞碸(80 mg，0.672 mmol)，在15℃攪拌3小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步(78 mg)。 ESI-MS m/z：600.2 [M+H] +。
步驟5：7-(4-(1-(胺基甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將(7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(78 mg，0.13 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL，7 M)中，在25℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到白色固體(27 mg，收率36%)。 ESI-MS m/z：581.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.64 (s, 1H), 8.32 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.81 (t, J= 54.3 Hz, 1H), 7.47 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.28 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.06 (d, J= 13.7 Hz, 1H), 3.93 (d, J= 13.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 1.30 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.13 – 0.94 (m, 4H).
實施例 50 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-8- 氰基 -6- 氟螺苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-4(3H)- 羧酸乙酯 ( 化合物 50)
步驟1：第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(42 mg，0.08 mmol)、第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(84 mg，0.21 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(7 mg，0.008 mmol)、碳酸鉀(29 mg，0.21 mmol)和水(0.5 mL)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，微波條件下，120℃反應1小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物，黃色固體(45 mg，收率78%)。 ESI-MS m/z：664.1 [M+1] +。
步驟2：7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.06 mmol)、二氯亞碸(28 mg，0.24 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1滴)溶於二氯甲烷(5 mL)中，氬氣保護，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮得到粗產物，黃色固體(45 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：682.1 [M+1] +。
步驟3：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將7-(4-(5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(45 mg，0.06 mmol)溶於甲醇(3 mL)，0℃下滴加到氨的甲醇溶液(5 mL，7 N溶於甲醇)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，得到粗產物，無色油狀物(44 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：663.1 [M+1] +。
步驟4：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯 將7-(4-(1-(胺甲基)-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-8-氰基-6-氟螺苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸乙酯(44 mg，0.06 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，殘留物通過製備液相得到產物，黃色固體(6.9 mg，收率18%)。 ESI-MS m/z：563.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.89 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.28 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 7.85 (s, 2H), 7.14 (s, 1H), 4.31 – 4.23 (m, 4H), 4.05 – 3.92 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.30 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.19 – 1.10 (m, 1H), 1.05 – 0.93 (m, 3H).
實施例 51 4- 乙醯基 -7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 51)
步驟1：4-乙醯基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(60 mg，0.146 mmol)(來自實施例42步驟1)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)，加入4-二甲胺基吡啶(9.0 mg，0.073 mmol)，吡啶(1 mL)，乙酸酐(0.5 mL)，氮氣保護，升溫至110℃，攪拌反應12小時後，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色油狀物(64 mg，收率96.8%)。 ESI-MS m/z：452.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.49 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.36 (s, 2H),2.33 (s, 3H), 1.13 – 0.96 (m, 4H).
步驟2：4-乙醯基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-乙醯基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(64 mg，0.14 mmol)，頻那醇硼烷(181 mg，1.4 mmol)，三乙胺(71.5 mg，0.71 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(12.9 mg，0.014 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(13.5 mg，0.028 mmol)，100℃攪拌反應1.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(60 mg，收率93.8%)。 ESI-MS m/z：453.0 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將4-乙醯基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(60 mg，0.133 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(103 mg，0.265 mmol)，碳酸鉀(54.9 mg，0.398 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(0.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(10.8 mg，0.0133 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：5，體積比)，得到產物，黃色固體(55 mg，收率65.4%)。 ESI-MS m/z：533.9 [M-Boc+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.58 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.08 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.11 – 0.98 (m, 4H).
步驟4：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(22 mg，0.035 mmol)於二氯甲烷(3 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(20.7 mg，0.174 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到粗品，棕色油狀物。 ESI-MS m/z：551.9 [M-Boc+1] +。
步驟5：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(5 mL)的第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(22.6 mg，0.035 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘，減壓濃縮，得到粗品，棕色油狀物。 ESI-MS m/z：532.9 [M-Boc+1] +。
步驟6：4-乙醯基-7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(22 mg，0.035 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(5 mg，收率27.0%)。 ESI-MS m/z：532.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.96 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.08 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.18 – 0.96 (m, 4H).
實施例 52 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4- 環丙基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 52)
步驟1：4-環丙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(200 mg，0.48 mmol)(來自實施例42步驟1)溶於1,2-二氯乙烷(10 mL)，加入環丙基硼酸(418 mg，4.87 mmol)，醋酸銅(107 mg，0.54 mmol)，聯吡啶(84 mg，0.54 mmol)，碳酸鈉(129 mg，1.22 mmol)，氮氣保護，升溫至70℃，攪拌反應12小時後，反應液冷卻，矽藻土過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=100：2，體積比)，得到產物，無色油狀物(160 mg，收率73%)。 ESI-MS m/z：451.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.63 (s, 1H), 7.17 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.48 – 3.28 (m, 2H), 2.51–2.48 (m, 1H), 1.27 – 1.19 (m, 2H), 1.0–0.94 (m, 2H), 0.77 – 0.68 (m, 4H).
步驟2：4-環丙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-環丙基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(160 mg，0.35 mmol)，頻那醇硼烷(137 mg，1.06 mmol)，三乙胺(108 mg，1.06 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(35 mg，0.03 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(8 mg，0.06 mmol)，100℃攪拌反應1.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=100：3，體積比)，得到產物，無色油狀物(160 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：451.0 [M+1] +。
步驟3：4-環丙基-7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-環丙基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(160 mg，0.35 mmol)，7-氯-5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)吡啶并[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(93 mg，0.35 mmol)，碳酸鉀(150 mg，1.05 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(30 mg，0.03 mmol)，120℃微波照射反應1小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=100：3，體積比)，得到產物，黃色固體(100 mg，收率51.3 %)。 ESI-MS m/z：549.9 [M +1] +。
步驟4：7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-環丙基-7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(100 mg，0.02 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(60 mg，0.06 mmol)，25℃攪拌反應4小時。減壓濃縮，得到粗品，棕黃色油狀物(100 mg，收率97.1%)。 ESI-MS m/z：568.1 [M+1] +。
步驟5：7-(4-(1-(胺甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將溶於甲醇(5 mL)的7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-環丙基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(100 mg，0.035 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，殘留物通過製備液相純化得到產物。淡黃色固體(40 mg，40 %)。 ESI-MS m/z：549.2[M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ8.55 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.84 (t, J = 54.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.52 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 3.37 – 3.31 (m, 2H), 1.10–1.00 (m, 2H), 0.98 – 0.75 (m, 4H), 0.75–0.6 (m, 2H).
實施例 53 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 環丁基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 53)
步驟1：4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(80 mg，0.19 mmol)(來自實施例42步驟1)和環丁酮(273 mg，3.90 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時；室溫下向體系內加入三乙醯基硼氫化鈉(413 mg，1.95 mmol)，攪拌反應0.5小時。反應物中加入飽和碳酸鈉溶液，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，無色油狀物(66 mg，收率73%)。 ESI-MS m/z：464.8 [M+1] +。
步驟2：4-環丁基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(66 mg，0.14 mmol)、頻那醇硼烷(182 mg，1.42 mmol)、三(二亞苄基丙酮)鈀(13 mg，0.014 mmol)、2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(13.5 mg，0.028 mmol)、三乙胺(71 mg，0.71 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，100℃下攪拌反應2.0小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，黃色固體(55 mg，收率83%)。 ESI-MS m/z：465.0 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 4-環丁基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(55 mg，0.11 mmol)、第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(115 mg，0.29 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(9.6 mg，0.011 mmol)、碳酸鉀(40 mg，0.29 mmol)和水(0.5 mL)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，微波條件下，120℃反應1小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物，黃色固體(71 mg，收率93%)。 ESI-MS m/z：646.1 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(71 mg，0.11 mmol)、二氯亞碸(52 mg，0.44 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1滴)溶於二氯甲烷(5 mL)中，氬氣保護，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮得到粗產物，黃色固體(72 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：664.1 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(72 mg，0.11 mmol)溶於甲醇(4 mL)，0℃下滴加到氨的甲醇溶液(5 mL，7 N溶於甲醇)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，得到粗產物，白色固體(70 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：645.1 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(70 mg，0.11 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，殘留物通過製備液相得到產物，黃色固體(10.6 mg，收率19%)。 ESI-MS m/z：545.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.93 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.02 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.48 – 3.40 (m, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.28 – 2.20 (m, 2H), 2.18 – 2.05 (m, 2H), 1.73 – 1.65 (m, 2H), 1.07 – 0.92 (m, 2H), 0.91 – 0.85 (m, 2H).
實施例 54 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1 '- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 54) 和 (M/P)7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1 '- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 54-P1/54-P2) 、 、
步驟1：8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代酸甲酯 在-78℃~-60℃和氬氣保護下，於6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(1.5 g，3.658 mmol)(來自實施例42步驟1)的四氫呋喃(30 mL)溶液中，加入雙(三甲基矽基)胺基鋰(5.488 mL，5.488 mmol，1 mol/L)四氫呋喃溶液，攪拌15分鐘，再加入二硫化碳(306 mg，4.024 mmol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，繼續攪拌30分鐘，最後加入碘甲烷(778.9 mg，5.488 mol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，反應繼續攪拌30分鐘。反應完畢，反應液冷卻到室溫，加入飽和氯化銨溶液(10 mL)和飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(30 mL×3)，有機相無水硫酸鈉乾燥、濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%)得到黃色固體產物(1.7 g，收率92.9%)。 ESI-MS m/z：500.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.52 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 4.96 – 4.63 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 1.21 – 1.06 (m, 4H).
步驟2：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 在-78℃~-60℃條件下，於8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代酸甲酯(1.5 g，3 mmol)的二氯甲烷(30 mL)溶液中，加入氫氟酸吡啶溶液(4.248 g，30 mmol)，再加入N-溴代琥珀醯亞胺(2.136 g，12 mmol)，反應液攪拌1小時，升溫至室溫繼續攪拌1小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%)得到無色油狀產物(1 g，收率69.7%)。 ESI-MS m/z：478.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.74 (s, 1H), 7.62 – 7.57 (m, 1H), 3.96 – 3.81 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 1.22 – 1.13 (m, 2H), 1.07 – 0.96 (m, 2H).
步驟3：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(1 g，2.092 mmol)，頻那醇硼烷(2.6778 g，20.92 mmol)，三乙胺(634 mg，6.276 mmol)溶於二氧六環(30 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(574 mg，0.6276 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(599 mg，1.255 mmol)，100℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，淺綠色油狀(1.8 g，粗品)。 ESI-MS m/z：479.1 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(125 mg，0.26 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(151 mg，0.39 mmol)，碳酸鉀(108 mg，0.78 mmol)溶於二氧六環(4.0 mL)和水(0.4 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(21.2 mg，0.026 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應1小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(145 mg，收率84.8%)。 ESI-MS m/z：660.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(145 mg，0.22 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(162 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：678.2 [M+1] +。
步驟6：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(162 mg，0.22 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(250 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：659.3 [M+1] +。
步驟7：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(250 mg，0.22 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(40 mg，收率32.8%)。 ESI-MS m/z：559.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.90 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.32 (br, s, 2H), 7.60 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.95 – 3.75 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.17-1.01 (m, 4H).
步驟8：(M/P)7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈 將7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈進一步高效液相色譜製備(ChiralPak IE, 250 × 40mm I.D製備柱，流動相：A：正己烷，B：(含0.01%二乙胺)-乙醇，B在流動相中的體積比為0~60%；洗脫時間：40分鐘)，得到兩個產物。化合物54-P1(保留時間為7.977分鐘)，化合物54-P2(保留時間為14.444分鐘)。 化合物54-P1，黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.53 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 10.6, 1.7 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 3.87 (m, 3H), 3.76 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 1.20 – 0.93 (m, 4H). 化合物54-P2，黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.52 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 10.6, 1.7 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 3.87 (m, 3H), 3.76 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 1.20 – 0.93 (m, 4H).
實施例 55 7-(4-(4-( 胺甲基 )-1- 氧代 -1,2- 二氫酞嗪 -6- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 55)
步驟1：第三丁基(第三丁氧基羰基)(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-4-氧代-3,4-二氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯(170.59 mg，0.3766 mmol)，6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(150 mg，0.3138 mmol)，碳酸鉀(86.74 mg，0.6276 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(25.626 mg，0.0314 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，白色固體(170 mg，收率62.38%)。 ESI-MS m/z：725.8 [M+1] +。
步驟2：7-(4-(4-(胺基甲基)-1-氧代-1,2-二氫酞嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於第三丁基(第三丁氧基羰基)(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫鄰苯二甲嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(170 mg，0.234 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，加入三氟乙酸(1 mL)，反應液在室溫下攪拌1小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(40 mg，收率32.5%)。 ESI-MS m/z：525.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.91 (s, 1H), 8.40 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 8.17 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J= 10.8, 1.7 Hz, 1H), 7.46 (dd, J= 8.3, 1.6 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.88 (q, J= 13.3 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.15 – 0.91 (m, 4H).
實施例 56 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 56)
步驟1：第三丁基(7-溴-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 於第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(400 mg，1.0303 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液中，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(612.87 mg，5.151 mmol)，反應液25℃攪拌30分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到紅色油狀產物(420 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：429.8 [M+23] +。
步驟2：第三丁基(1-(胺基甲基)-7-溴-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將氨的甲醇溶液(8 mL，7.0 mol/L)加入到第三丁基(7-溴-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(360 mg，0.4422 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(10 mL)溶液，室溫攪拌10分鐘。反應完畢，反應液加入飽和食鹽水(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(20 mL×3)，合併有機相並用飽和食鹽水洗滌(30 mL×3)，有機相減壓濃縮，得到褐色油狀產物(190 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：286.9 [M-100+1] +。
步驟3：第三丁基((7-溴-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯 於第三丁基(1-(胺基甲基)-7-溴-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(150 mg，0.521 mmol)和二碳酸二第三丁酯(567.7 mg，2.60 mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液中，加入4-二甲胺基吡啶(116.84 mg，1.042 mmol)，反應液在40℃下攪拌6小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，無色油狀(50 mg，收率21.97%)。 ESI-MS m/z：586.9 [M+1] +。
步驟4：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(60 mg，0.14598 mmol)和氧雜環丁烷-3-酮(210 mg，2.9197 mmol)的三氟乙酸(0.5 mL)和二氯甲烷(4 mL)在室溫下攪拌0.5小時。再加入醋酸硼氫化鈉(185.64 mg，0.759 mmol)反應液在室溫繼續攪拌0.5小時。反應完畢，反應液濃縮，加入飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)，混合液用二氯甲烷萃取(20 mL×3)，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，無色油狀(50 mg，收率73.3%)。 ESI-MS m/z：466.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.63 (s, 1H), 6.40 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 5.02 – 4.92 (m, 2H), 4.90 – 4.77 (m, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.53 – 3.40 (m, 2H), 1.37 – 1.27 (m, 4H).
步驟5：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(50 mg，0.1071 mmol)，頻那醇硼烷(137.05 mg，1.071 mmol)，三乙胺(54.07 mg，0.5353 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(4.89 mg，0.00535 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(5.12 mg，0.0107 mmol)，100℃攪拌反應2小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~50%，體積比)，得到產物，無色油狀(37 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：467.0 [M+1] +。
步驟6：第三丁基(第三丁氧羰基)((5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯(46.6 mg，0.0793 mmol)，6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(37 mg，0.0793 mmol)，碳酸鉀(21.9 mg，0.1585 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(6.47 mg，0.00793 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，紅色油狀(45 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：847.4 [M+1] +。
步驟7：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-三氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於第三丁基(第三丁氧羰基)((5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(氧雜環丁烷-3-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(45 mg，0.0532 mmol)的二氯甲烷(8 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在室溫下攪拌1小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(5 mg，收率17.2%)。 ESI-MS m/z：547.3 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.94 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 6.89 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 5.01 (p, J= 6.9 Hz, 1H), 4.89 – 4.64 (m, 4H), 4.33 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.62 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.50 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 1.14 – 0.90 (m, 4H).
實施例 57 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 甲基 -d 3)-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 57)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(甲基-d3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 向化合物6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(70 mg，0.171 mmol)和碳酸銫(111 mg，0.341 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中加入氘代碘甲烷(124 mg，0.855 mmol)，反應在60℃攪拌3小時後加水(30 mL)稀釋，乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，有機相用飽和氯化鈉(30 mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(80 mg)。 ESI-MS m/z：428 [M+1] +。
步驟2：6-氟-4-(甲基-d 3)-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(80 mg，0.187 mmol)，頻那醇硼烷(239 mg，1.87 mmol)，三乙胺(94 mg，0.93 mmol)溶於二氧六環(15 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(17.3 mg，0.019 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(17.4mg，0.037 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，無色油狀體(110 mg)。 ESI-MS m/z：428 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(80 mg，0.206 mmol)，6-氟-4-(甲基-d 3)-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg)，碳酸鉀(85.3mg，0.618 mmol)溶於二氧六環(6 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(18 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應30分鐘。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=2：98，體積比)，得到產物，淡無色膠狀體(60 mg)。 ESI-MS m/z：609 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(60 mg，0.099 mmol)於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.005 mL)，加入氯化亞碸(70.6 mg，0.59 mmol)，25℃攪拌反應1小時。減壓濃縮，得到黃色固體粗品(73 mg)。 ESI-MS m/z：628 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(5 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(73 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(4 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黃色油狀粗品(77 mg)。 ESI-MS m/z：608 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(甲基-d 3)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(77 mg)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(8 mg)。 ESI-MS m/z：508 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.10 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 6.65 (d, J= 12.7 Hz, 2H), 3.95 (d, J= 31.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.36 (d, J= 43.7 Hz, 2H), 1.29-1.09 (m, 2H), 0.92-0.75(m, 2H).
實施例 58 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-5- 氯 -4- 環丁基 -6- 氟 -3,4- 氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 58)
步驟1：4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(120 mg，0.2927 mmol)和環丁酮(410mg, 5.854mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液攪拌0.5小時，再加入三乙醯基硼氫化鈉(270.66 mg，1.219 mmol)，反應液繼續攪拌10分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~35%)得到無色油狀產物(135 mg，收率99.4%)。 ESI-MS m/z：465.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.67 (s, 1H), 7.05 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 4.33 – 4.24 (m, 1H) , 3.71 (s, 3H), 3.55 – 3.42 (m, 2H), 2.29 – 2.09 (m, 4H), 1.69 (td, J= 10.7, 10.2, 4.2 Hz, 2H), 1.05 – 0.82 (m, 4H).
步驟2：5-氯-4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(135 mg，0.291 mmol)的醋酸(6 mL)溶液中，加入N-氯代丁二醯亞胺(174.7 mg，1.33085 mmol)，反應液在室溫條件攪拌1小時。反應完畢，反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，混合液依次用飽和亞硫酸鈉溶液(20 mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)和飽和食鹽水(20 mL)萃取，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%)得無色油狀產物(130 mg，89.65%)。 ESI-MS m/z：498.8[M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.72 (s, 1H), 4.41 (p, J= 8.6 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.65 – 3.51 (m, 2H), 2.24 – 2.12 (m, 4H), 1.52 (dq, J= 27.2, 9.2, 8.6 Hz, 2H), 1.11 – 0.94 (m, 4H).
步驟3：5-氯-4-環丁基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將5-氯-4-環丁基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(130 mg，0.261 mmol)，頻那醇硼烷(334.1 mg，2.61 mmol)，三乙胺(131.83 mg，1.305 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(23.88 mg，0.0261 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(24.9 mg，0.0522 mmol)，100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，無色油狀(135 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：498.9 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯(171.24 mg，0.4411 mmol)，5-氯-4-環丁基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg，0.2205 mmol)，碳酸鉀(60.96 mg，0.4411 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(18 mg，0.0221 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~3%，體積比)，得到產物，黃色油狀(100 mg，收率66.67%)。 ESI-MS m/z：679.9 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.147 mmol)於二氯甲烷(10 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(87.48 mg，0.735 mmol)，25℃攪拌反應1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：597.8 [M-100+1] +。
步驟6：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(2 mL)的第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.1431 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，室溫攪拌10分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：579.2 [M-100+1] +。
步驟7：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-環丁基-6-氟-3,4-氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-氰基-4-環丁基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.1472 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，淺黃色固體(20 mg，收率23.46%)。 ESI-MS m/z：579.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.82 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.30 (p, J= 8.5 Hz, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.64 – 3.43 (m, 2H), 2.15 (tt, J= 9.4, 6.5, 5.7 Hz, 4H), 1.63 – 1.43 (m, 2H), 1.12 – 0.95 (m, 4H).
實施例 59 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4- 環戊基 -6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 59)
步驟1：4-環戊基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(80 mg，0.19 mmol)和環戊酮(327 mg，3.90 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時；室溫下向體系內加入三乙醯基硼氫化鈉(413 mg，1.95 mmol)，攪拌反應0.5小時。反應物中加入飽和碳酸鈉溶液，加入乙酸乙酯，分出有機相，水相再用乙酸乙酯萃取，合併有機相，再依次用水、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，無色油狀物(65 mg，收率69%)。 ESI-MS m/z：478.8 [M+1] +。
步驟2：4-環戊基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 4-環戊基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(60 mg，0.12 mmol)、頻那醇硼烷(160 mg，1.25 mmol)、三(二亞苄基丙酮)鈀(12 mg，0.012 mmol)、2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(11.9 mg，0.025 mmol)、三乙胺(63 mg，0.62 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，100℃下攪拌反應2.0小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1)，得到產物，黃色固體(54 mg，收率90%)。 ESI-MS m/z：479.0 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 4-環戊基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(54 mg，0.11 mmol)、第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(109 mg，0.28 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(9.2 mg，0.011 mmol)、碳酸鉀(38 mg，0.28 mmol)和水(0.5 mL)溶於二氧六環(5 mL)中，氬氣保護，微波條件下，120℃反應1小時。反應物冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇=20：1)，得到產物，黃色固體(36 mg，收率48%)。 ESI-MS m/z：660.1 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(36 mg，0.05 mmol)、二氯亞碸(23 mg，0.20 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1滴)溶於二氯甲烷(3 mL)中，氬氣保護，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮得到粗產物，黃色固體(35 mg，收率94%)。 ESI-MS m/z：678.1 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺基甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(35 mg，0.05 mmol)溶於甲醇(4 mL)，0℃下滴加到氨的甲醇溶液(5 mL，7 N溶於甲醇)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，得到粗產物，白色固體(33 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：659.1 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-4-環戊基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(33 mg，0.05 mmol)溶於三氟乙酸(5 mL)中，室溫攪拌反應0.5小時。反應物減壓濃縮，殘留物通過製備液相得到產物，黃色固體(3.1 mg，收率11%)。 ESI-MS m/z：559.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.98 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.05 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 4.37 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 4.25 – 4.19 (m, 1H), 3.51 – 3.43 (m, 2H), 1.95 – 1.91 (m, 2H), 1.47 – 1.43 (m, 4H), 1.26 – 1.19 (m, 2H), 1.09 – 0.95 (m, 2H), 0.95 – 0.87 (m, 2H).
實施例 60 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-5- 氯 -4-( 環丙烷羰基 )-6- 氟 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 60)
步驟1：5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(300 mg，0.732 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加N-氯代丁二醯亞胺(195.4 mg，1.463 mmol)，反應液在50℃攪拌3小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(30 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(30 mL×3)，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌(50 mL×3)，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~30%)得到白色固體產物(350 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：444.7 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.66 – 3.50 (m, 2H), 1.33 – 1.20 (m, 2H), 0.96 – 0.81 (m, 2H).
步驟2：5-氯-4-(環丙烷羰基)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(130 mg，0.292 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺(6 mL)，加氫化鈉(35.06 mg，0.876 mmol)，反應液在室溫攪拌1小時，然後加入環丙甲醯氯(61.07 mg，0.584 mmol)，反應液繼續攪拌30分鐘。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(20 mL×3)，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌(30 mL×3)，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~15%)得到白色油狀產物(110 mg，收率73.38%)。 ESI-MS m/z：512.7 [M+1] +。
步驟3：5-氯-4-(環丙烷羰基)-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將5-氯-4-(環丙烷羰基)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg，0.2148 mmol)，頻那醇硼烷(275 mg，2.148 mmol)，三乙胺(108.5 mg，1.0742 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(19.65 mg，0.02148 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(20.4 mg，0.04297 mmol)，100℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~15%，體積比)，得到產物，無色油狀(90 mg，收率81.82%)。 ESI-MS m/z：512.9 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基((7-溴-5-((第三丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)(第三丁氧基羰基)胺基甲酸酯(102.27 mg，0.263 mmol)，5-氯-4-(環丙烷羰基)-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(90 mg，0.1755 mmol)，碳酸鉀(48.52 mg，0.351 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(14.33 mg，0.01755 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~2%，體積比)，得到產物，紅色油狀(100 mg，收率73.87%)。 ESI-MS m/z：693.8 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.144 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(85.69 mg，0.7203 mmol)，25℃攪拌反應1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：611.8 [M-100+1] +。
步驟6：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(2 mL)的第三丁基(7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.1403 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，室溫攪拌10分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：692.9 [M+1] +。
步驟7：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-氰基-4-(環丙烷羰基)-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基-(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.1442 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(0.5 mL)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(30 mg，收率23.46%)。 ESI-MS m/z：592.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.44 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.25 (m, 4H), 3.74 (s, 3H), 1.71 (m, 1H), 1.36 – 0.73 (m, 8H).
實施例 61 4- 乙醯基 -7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-5- 氯 -6- 氟 -3,4- 氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 61)
步驟1：4-乙醯基-5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈 將5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(90 mg，0.2 mmol)(來自實施例59步驟1)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中，降溫至5攝氏度左右，加入氫化鈉(490 mg，1 mmol)。5℃攪拌1小時，加入乙醯氯2滴，繼續攪拌1小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1，體積比)，得到產物，黃色固體(65 mg，收率66%)。 ESI-MS m/z：487 [M+1] +。
步驟2：4-乙醯基-5-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-乙醯基-5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(65 mg，0.13 mmol)，頻那醇硼烷(171 mg，1.3 mmol)，三乙胺(40 mg，0.39 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(12 mg，0.013 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(12 mg，0.026 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=5%，體積比)，得到產物，白色油狀(70 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：487 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 4-乙醯基-5-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(30 mg，0.06 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(38 mg，0.09 mmol)，碳酸鉀(16 mg，0.12 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(5 mg，0.006 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(20 mg，收率31%)。 ESI-MS m/z：668 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(20 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：686 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(20 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：667 [M+1] +。
步驟6：4-乙醯基-7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-6-氟-3,4-氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-5-氯-8-氰基-6-氟-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺甲基)-4-氧代-3,4-三氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(20 mg，0.03mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(1.5 mg，收率10%)。 ESI-MS m/z：567 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.99 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 8.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 7.17 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.25 – 0.75 (m, 4H). 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -73.43.
實施例 62 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-5- 氯 -6- 氟 -4-( 甲磺醯基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1 '- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 62)
步驟1：5-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將5-氯-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(286 mg，0.55 mmol)，頻那醇硼烷(701 mg，5.5 mmol)(來自實施例47步驟1)，三乙胺(167 mg，1.65 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(50 mg，0.055 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(52 mg，0.11 mmol)，氬氣氛圍下100℃攪拌反應2.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(287 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：523.1 [M+1] +。
步驟2：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將5-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(287 mg，0.55 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(320 mg，0.825 mmol)，碳酸鉀(228 mg，1.65 mmol)溶於二氧六環(10.0 mL)和水(1.0 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(45 mg，0.055 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應1小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(300 mg，收率77.7%)。 ESI-MS m/z：704.2 [M+1] +
步驟3：第三丁基(7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(94 mg，0.13 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：722.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.13 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：703.2 [M+1] +。
步驟6：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-5-氯-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.13 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(20 mg，收率25.6%)。 ESI-MS m/z：603.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.75 (s,1H), 8.84 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 1.20-1.08 (m, 4H).
實施例 63 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 - d 3 ) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -5- 甲基 -4-( 甲磺醯基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1 '- 環丙基 -8- 甲腈 ( 化合物 63)
步驟1：第三丁基 (7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(5-氯-8-甲腈-6-氟-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(152 mg，0.22 mmol)，甲基硼酸(132 mg，2.2 mmol)，碳酸鉀(92 mg，0.66 mmol)溶於二氧六環(10.0 mL)中，加入1,1'-雙(二第三丁基膦)二茂鐵]二氯化鈀(139 mg，0.022 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(65 mg，收率43.3%)。 ESI-MS m/z：684.2 [M+1] +
步驟2：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(65 mg，0.1 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(82 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：702.2 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(82 mg，0.1 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(85 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：683.2 [M+1] +。
步驟4：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基- d 3 )胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1 '-環丙基-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-6-氟-5-甲基-4-(甲磺醯基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(85 mg，0.1 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(18 mg，收率30.8%)。 ESI-MS m/z：583.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.92 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.10-3.75 (m, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.37-0.95 (m, 4H).
實施例 64 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-( 二氟甲基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -5- 甲基 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 64)
步驟1：6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氧代-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(2.2 g，7.36 mmol)，硼烷二甲硫醚溶液(1.47 mL，10 M)溶於四氫呋喃(40 mL)中，50℃下反應2小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(1.2 g，收率66%)。 ESI-MS m/z：285 [M+1] +。
步驟2：5-溴-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(1.2 g，3.86 mmol)、N-溴代琥珀醯亞胺(0.687 g，3.86 mmol)，溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中，0℃下反應2小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(500 mg，收率33%)。 ESI-MS m/z：363 [M+1] +。
步驟3：6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將5-溴-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(750 mg，2.1 mmol)，甲基頻那醇硼烷(622 mg，10.4 mmol)，碳酸鉀(714 mg，5.18 mmol)溶於二氧六環(30 mL)和水(4 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(170 mg，0.21 mmol)，100℃攪拌反應8小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(390 mg，收率63%)。 ESI-MS m/z：487 [M+1] +。
步驟4：8-氰基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代酸甲酯 在-78℃~-60℃和氬氣保護下，於6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(255 mg，0.855 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，加入雙(三甲基矽基)胺基鋰(1.28 mL，1.28 mmol，1 mol/L)四氫呋喃溶液，攪拌15分鐘，再加入二硫化碳(71.6 mg，0.941 mmol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，繼續攪拌30分鐘，最後加入碘甲烷(182 mg，1.28 mol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，反應繼續攪拌30分鐘。反應完畢，反應液冷卻到室溫，加入飽和氯化銨溶液(10 mL)和飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(30 mL×3)，有機相無水硫酸鈉乾燥、濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%)得到黃色固體產物(315 mg)。 ESI-MS m/z：389 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.62 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.58 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 5.55-4.13 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.70 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.18 – 1.06 (m, 4H).
步驟5：6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在-78℃~-60℃條件下，於8-氰基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代酸甲酯(315 mg，0.81 mmol)的二氯甲烷(30 mL)溶液中，加入氫氟酸吡啶溶液(1.5 g，70%)，再加入N-溴代琥珀醯亞胺(576.7 mg，3.24 mmol)，反應液1小時，升溫至-10℃繼續攪拌1小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%)得到無色油狀產物(190 mg)。 ESI-MS m/z：367 [M+1] +。
步驟6：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(190 mg，0.519 mmol)於醋酸(15 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(128.4 mg，0.571 mmol)，氬氣氛圍下25℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(210 mg)。 ESI-MS m/z：493 [M+1] +。
步驟7：6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(210 mg，0.426 mmol)，頻那醇硼烷(546 mg，4.26 mmol)和三乙胺(215.2 mg，2.13 mmol)溶於二氧六環(15 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(58.5 mg，0.064 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(61mg，0.128 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，無色油狀物(310 mg)。 ESI-MS m/z：493 [M+1] +。
步驟8：7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-34-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(75 mg，0.15 mmol)，7-溴-5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)吡啶并[3,4-d]噠嗪-4(3H)-酮(45 mg，0.15 mmol)，碳酸鉀(40 mg，0.3 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(12 mg，0.015 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色油狀物(60 mg，收率72%)。 ESI-MS m/z：592 [M+1] +。
步驟9：7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將7-(4-(5-(二氟甲基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(60 mg，0.1 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(60 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：610 [M+1] +。
步驟10：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(6-氰基-8-氟-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹啉-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的7-(4-(1-(氯甲基)-5-(二氟甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(60 mg，0.1 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(10mg，收率20%)。 ESI-MS m/z：591 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.85 (s, 2H), 8.66 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.80 (d, J = 4.6 Hz, 3H), 3.69 (s, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.14 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 0.99 (s, 2H). 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -56.65, -120.03.
實施例 65 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -5- 甲基 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 65)
步驟1：第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(150 mg，0.3867 mmol)(來自實施例28步驟6)，6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(310 mg)(來自實施例64步驟7)，碳酸鉀(160.2 mg，1.161 mmol)溶於二氧六環(15 mL)和水(5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(31.6 mg，0.039 mmol)，120℃微波照射反應30分鐘。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=2：98，體積比)，得到產物，淡黃色固體(220 mg)。 ESI-MS m/z：674 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.58 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 5.52 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.89 – 3.68 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.23-0.95 (s, 13H).
步驟2：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(220 mg，0.327mmol)於二氯甲烷(5 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.01 mL)，加入氯化亞碸(389mg，3.27 mmol)，25℃攪拌反應1小時。減壓濃縮，得到黃色固體粗品(253 mg)。 ESI-MS m/z：692 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(10 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(253 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(10 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黃色固體粗品(266mg)。 ESI-MS m/z：673 [M+1] +。
步驟4：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-5-甲基-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(266mg)溶於二氯甲烷(20 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，淡黃色固體(80 mg)。 ESI-MS m/z：573 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.88 – 3.66 (m, 5H), 2.32 (s, 3H), 1.16 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 1.01 (dd, J= 11.3, 6.3 Hz, 2H).
實施例 66 4- 乙醯基 -7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -5- 甲基 -3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 66)
步驟1：4-乙醯基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(150 mg，0.503 mmol)和米氏酸(217 mg，1.51 mmol)的甲苯(10 mL)溶液在115℃攪拌16小時後，濃縮有機相，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(170 mg)。 ESI-MS m/z：341 [M+1] +。
步驟2：4-乙醯基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-乙醯基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(170 mg，0.5 mmol)於醋酸(15 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(123.8 mg，0.55 mmol)，氬氣氛圍下25℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(230 mg)。 ESI-MS m/z：467 [M+1] +。
步驟3：4-乙醯基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，將4-乙醯基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(230 mg，0.494 mmol)，頻那醇硼烷(631.7 mg，4.935 mmol)和三乙胺(249.2 mg，2.468 mmol)溶於二氧六環(15 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(67.7 mg，0.074 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(70.6 mg，0.074 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(210 mg)。 ESI-MS m/z：467 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(227.5 mg，0.586 mmol)，4-乙醯基-6-氟-5-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(210 mg)，碳酸鉀(186.7 mg，1.353 mmol)溶於二氧六環(15 mL)和水(5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(36.8 mg，0.045 mmol)，120℃微波照射反應30分鐘。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=2：98，體積比)，得到產物，淡黃色固體(200 mg)。 ESI-MS m/z：648 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(200 mg，0.309 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中加入N,N-二甲基甲醯胺(0.005 mL)，加入氯化亞碸(183.7 mg，1.545 mmol)，25℃攪拌反應1小時。減壓濃縮，得到黃色固體粗品(245 mg)。 ESI-MS m/z：666 [M+1] +。
步驟6：第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺基甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(10 mL)的第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(245 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(10 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黃色固體粗品(257mg)。 ESI-MS m/z：647 [M+1] +。
步驟7：4-乙醯基-7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基(7-(5-(4-乙醯基-8-氰基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(胺基甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(257 mg)溶於二氯甲烷(20 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(110 mg)。 ESI-MS m/z：547 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.93 (s, 1H), 8.77 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.22 (s, 2H), 7.13 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 4.37 – 3.96 (m, 4H), 3.71 (s, 3H), 2.33 (d, J= 4.3 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.18 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 1.04 – 0.82 (m, 2H).
實施例 67 8'-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-7'- 氟 -3' H- 螺 [ 環丙基 -1,2'-[1,4] 噁嗪 [2,3,4-hi] 吲哚 ]-9'- 甲腈 ( 化合物 67)
步驟1：4-(2,2-二乙氧基乙基)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(213 mg，0.5 mmol)和溴代乙醛縮二乙醇(197 mg，1.0 mmol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(5 mL)，冷卻至0℃，加入氫化鈉(40 mg，1.0 mmol)，80℃攪拌反應5小時。反應液加入水(20 mL)淬滅，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到無色油狀物(170 mg，收率64.6%)。 ESI-MS m/z：527.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.60 (s, 1H), 6.72 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.70 (t, J= 5.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.80 – 3.72 (m, 2H), 3.64 – 3.47 (m, 4H), 3.44 (d, J= 5.1 Hz, 2H), 1.25-0.97 (m, 10H).
步驟2：7'-氟-8'-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將4-(2,2-二乙氧基乙基)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙基]-8-甲腈(140 mg，0.27 mmol)溶於三氟乙酸(6 mL)，60℃攪拌反應12小時。反應液經減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1)分離，得到黃色固體(75 mg，收率64.1%)。 ESI-MS m/z：435.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 (s, 1H), 7.32 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 6.72 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 4.40 – 4.23 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.48-1.20 (m, 4H).
步驟3：7'-氟-8'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將7'-氟-8'-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈(75 mg，0.172mmol)，頻那醇硼烷(221 mg，1.72 mmol)，三乙胺(60 mg，0.6 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(15.5 mg，0.017 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(16.2 mg，0.034 mmol)，氬氣氛圍下100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(80 mg粗品，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：435.2 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將7'-氟-8'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈(70.0 mg，0.15 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(114 mg，0.3 mmol)，碳酸鉀(62 mg，0.45 mmol)溶於二氧六環(3.0 mL)和水(0.3 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(12.3 mg，0.015 mmol)，120℃微波照射反應1小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(72 mg，收率78.3%)。 ESI-MS m/z：616.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(72 mg，0.117 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(80 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：634.2 [M+1] +。
步驟6：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(80 mg，0.117 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(80 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：615.3 [M+1] +。
步驟7：8'-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(80 mg，0.117 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(25 mg，收率41.6%)。 ESI-MS m/z：515.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.90 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.79 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.72 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.35(s,2H), 1.15 – 0.97 (m, 4H).
實施例 68 8'-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6'- 氯 -7'- 氟 -3' H- 螺 [ 環丙基 -1,2'-[1,4] 噁嗪 [2,3,4-hi] 吲哚 ]-9'- 甲腈 ( 化合物 68)
步驟1：6'-氯-7'-氟-8'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將7'-氟-8'-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈(70 mg，0.16 mmol)溶於乙腈(5 mL)，加入 N-氯代丁二醯亞胺(22 mg，0.168 mmol)，20℃攪拌反應2小時。反應液經減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1)分離，得到白色固體(67.9 mg，收率90.6%)。 ESI-MS m/z：469.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.04 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 4.59 – 4.39 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 1.36 – 0.97 (m, 4H).
步驟2：6'-氯-7'-氟-8'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將6'-氯-7'-氟-8'-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈(61 mg，0.13 mmol)，頻那醇硼烷(166 mg，1.3 mmol)，三乙胺(40 mg，0.4 mmol)溶於二氧六環(5 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(11.8 mg，0.013 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(12.4 mg，0.026 mmol)，氬氣氛圍下100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(62 mg，收率100.0%)。 ESI-MS m/z：469.2 [M+1] +。
步驟3：第三丁基(7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將6'-氯-7'-氟-8'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈(62 mg，0.13 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(78 mg，0.195 mmol)，碳酸鉀(56 mg，0.4 mmol)溶於二氧六環(4.0 mL)和水(0.4 mL)中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(10.6 mg，0.013 mmol)，氬氣氛圍下120℃微波照射反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(42 mg，收率49.7%)。 ESI-MS m/z：650.2 [M+1] +。
步驟4：第三丁基(7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(42 mg，0.065 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(45 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：668.2 [M+1] +。
步驟5：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基 (7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(45 mg，0.065 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：649.2 [M+1] +。
步驟6：8'-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6'-氯 -7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-9'-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(6'-氯-9'-甲腈-7'-氟-3' H-螺[環丙基-1,2'-[1,4]噁嗪[2,3,4-hi]吲哚]-8'-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(50 mg，0.065 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(20 mg，收率56.2%)。 ESI-MS m/z：549.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.61 – 4.30 (m, 4H), 3.70 (s, 3H), 1.16 – 1.00 (m, 4H).
實施例 69 (M)-1-((((7-(5-(3- 氯 -6- 氰基 -5- 環丙氧基 -2- 氟苯基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -1- 基 ) 甲基 ) 胺基甲醯基 ) 氧基 ) 異丁酸乙酯和 (P)-1-((((7-(5-(3- 氯 -6- 氰基 -5- 環丙氧基 -2- 氟苯基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -1- 基 ) 甲基 ) 胺基甲醯基 ) 氧基 ) 異丁酸乙酯 ( 化合物 69-P1 和化合物 69-P2) 將化合物28-P1(100 mg，0.2 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入三乙胺(101 mg，1.0 mmol)，加入1-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)異丁酸乙酯(59.6 mg，0.2 mmol)，升溫至60℃，攪拌反應2小時後，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物化合物69-P1，黃色固體(41 mg，收率31.1%)。 ESI-MS m/z：656.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.66 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.36 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.05 (td, J = 6.0, 3.4 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.71 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 4.43 – 4.36 (m, 2H), 4.18 (tt, J = 6.1, 2.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.42 (qd, J = 7.0, 2.7 Hz, 1H), 1.39 (d, J = 5.4 Hz, 3H), 1.00 (dd, J = 9.6, 7.0 Hz, 6H), 0.97 – 0.64 (m, 4H). 13C NMR (101 MHz, DMSO- d 6 ) δ 174.57, 160.83, 158.27, 157.53, 154.30, 154.00, 150.89, 148.49, 142.48, 138.83, 137.00, 130.63, 127.10, 124.85, 122.47, 122.44, 116.85, 113.37, 103.86, 102.37, 99.68, 89.15, 53.65, 42.01, 37.15, 33.23, 19.78, 18.64, 18.57, 6.33. 以化合物28-P2(100 mg，0.2 mmol)為原料參照化合物69-P1的製備來合成化合物69-P2(35 mg，收率26.7%)。 ESI-MS m/z：656.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.67 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.37 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.06 (q, J = 2.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.71 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 6.1, 3.1 Hz, 2H), 4.18 (dt, J = 5.9, 3.1 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.44 (td, J = 7.0, 2.8 Hz, 1H), 1.40 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.07 – 0.98 (m, 6H), 0.97 – 0.89 (m, 2H), 0.86 (ddd, J = 9.2, 4.8, 2.6 Hz, 1H), 0.75 – 0.65 (m, 1H).
實施例 70 1-(((7-(5-(8- 氰基 -6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 雙氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -1- 基 ) 甲基 ) 胺基甲醯基 ) 氧基 ) 異丁酸乙酯 ( 化合物 70)
步驟1：1-(((7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d3)胺基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲醯基)氧基)異丁酸乙酯 將7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-三氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg，0.196 mmol)溶於乙腈(10 mL)，加入三乙胺(99.4 mg，0.984 mmol)，加入1-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)異丁酸乙酯(58.4 mg，0.196 mmol)，升溫至60℃，攪拌反應2小時後，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(23 mg，收率16.3%)。 ESI-MS m/z：716.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.64 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.33 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.04 (td, J = 6.0, 3.3 Hz, 1H), 7.63 – 7.55 (m, 1H), 7.18 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.71 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 4.41 – 4.35 (m, 2H), 3.92 – 3.73 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.43 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 1.39 (d, J = 5.4 Hz, 3H), 1.20 – 0.91 (m, 10H). 13C NMR (101 MHz, DMSO- d 6 ) δ 174.57, 160.84, 158.22, 154.33, 146.43, 142.46, 138.79, 136.96, 131.12, 127.40, 125.71, 123.02, 122.37, 120.44, 118.14, 117.95, 113.30, 112.80, 112.51, 103.72, 99.57, 89.14, 60.47, 46.20, 42.00, 37.06, 33.22, 19.77, 18.64, 18.58, 11.22, 10.53.
實施例 71 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4-( 三氟甲基 )-3,4- 二氫螺 [ 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 -5- 氘 ( 化合物 71)
步驟1：5-溴-8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯 將5-溴-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈(500 mg，1.38 mmol)，二碳酸二第三丁酯(450 mg，2.08 mmol)，4-二甲胺基吡啶(168 mg，1.38 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)中，室溫下反應6小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，白色固體(540 mg，收率86%)。 ESI-MS m/z：463 [M+1] +。
步驟2：第三丁基8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸-5-氘 將5-溴-8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸第三丁酯(500 mg，1.08 mmol)溶於四氫呋喃(25 mL)中，降溫至零下65℃左右，加入正丁基鋰溶液(0.67 mL，1.6 M)。保溫攪拌半小時，加入氘水2滴，繼續攪拌半小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(350 mg，收率70%)。 ESI-MS m/z：386 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.82 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.58 (s, 9H), 0.94 – 0.81 (m, 4H).
步驟3：6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘 將第三丁基8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-羧酸-5-氘(350 mg，0.91 mmol)，三氟乙酸(3 ml)溶於二氯甲烷(12 mL)中，室溫攪拌反應1.0小時。減壓濃縮，殘留物倒入碳酸氫鈉水溶液中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到產物，黃色固體(280 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：286[M+1] +。
步驟4：甲基8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代-5-氘 將6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-腈-5-氘(280 mg，1 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)中，氬氣氛圍下冷卻至零下60℃，加入雙-(三甲基矽基)胺鋰(1.5 mL，1 M)，保溫反應15分鐘。加入二硫化碳(85 mg，1 mmol)，保溫反應30分鐘。再加入碘甲烷(220 mg，1 mmol)，保溫反應30分鐘。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(300 mg，收率81%)。 ESI-MS m/z：376 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 3.87 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 2.76 (s, 3H), 1.36 – 1.00 (m, 4H).
步驟5：6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘 將甲基8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-4(3H)-碳二硫代-5-氘(260 mg，0.69 mmol)，氟化氫吡啶(0.82 mL，6.90 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)中，降溫至零下60℃，加入N-碘代丁二醯亞胺(621 mg，2.76 mmol)攪拌反應30分鐘。再升至室溫攪拌反應1小時，反應完畢。直接矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(120 mg，收率46%)。 ESI-MS m/z：354 [M+1] +。
步驟6：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘 將6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘(120 mg，0.33 mmol)，N-碘代丁二醯亞胺(80 mg，0.37 mmol)溶於醋酸溶液中(15 mL)，50℃攪拌1小時。減壓濃縮，矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，黃色固體(90 mg，收率58%)。 ESI-MS m/z：480 [M+1] +。
步驟7：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘(90 mg，0.19 mmol)，頻那醇硼烷(241 mg，1.9mmol)，三乙胺(60 mg，0.56 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(18 mg，0.02 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(19 mg，0.04 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=5%，體積比)，得到產物，黃色油狀(90 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：480 [M+1] +。
步驟8：第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘(90 mg，0.19 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(110 mg，0.28 mmol)，碳酸鉀(51 mg，0.37 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(16 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色油狀物(70 mg，收率58%)。 ESI-MS m/z：661 [M+1] +。
步驟9：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(70 mg，0.1 mmol)於二氯甲烷(6 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應10分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(70 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：679 [M+1] +。
步驟10：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-雙氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於甲醇(15 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(70 mg，0.1 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(70 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：660 [M+1] +。
步驟11：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-8-甲腈-5-氘 向溶於二氯甲烷(10 mL)的第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-(三氟甲基)-3,4-二氫螺[苯并[b][1,4]噁嗪-2,1'-環丙烷]-7-基-5d)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(70 mg，0.1 mmol)的溶液中滴加三氟乙酸(5 mL)，室溫攪拌30分鐘。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(35mg，收率55%)。 ESI-MS m/z：560 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.95 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.15 (s, 2H), 7.15 (s, 1H), 4.32 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 3.92 – 3.75 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.29 – 0.95 (m, 4H).
實施例 72 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-4,4,6- 三氟螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙基 ]-8- 甲腈 ( 化合物 72)
步驟1：乙基-2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙酸酯 將2-溴-4-氟苯酚(0.81 g，4.2 mmol)和2-環丙基亞甲基乙酸乙酯(0.38 g，3.0 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)，加入活化的4A分子篩(2.0 g)，130℃攪拌反應16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到黃色油狀物(0.7 g，收率73.8%)。 ESI-MS m/z：317.0, 319.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.54 (dd, J = 8.1, 3.0 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 9.2, 5.0 Hz, 1H), 7.23 (td, J = 9.1, 8.6, 3.0 Hz, 1H), 4.04 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.75 (s, 2H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.04 – 0.95 (m, 4H).
步驟2：2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙酸 將乙基-2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙酸酯(700 mg，2.0 mmol)溶於甲醇(16 mL)和水(4 mL)的混合溶劑中，加入氫氧化鈉(240 mg，6.0 mmol)，20℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，加醋酸調節pH至7，減壓濃縮至一定體積，加水，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到黃色油狀產物(780 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：289.0, 291.0 [M+1] +。
步驟3：2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙醯氯 將2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙酸(576 mg，2.0 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL)中，加入氯化亞碸(240 mg，6.0 mmol)，20℃攪拌反應18小時。反應液減壓濃縮，得到黃色油狀產物(720 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：306.9, 308.9 [M+1] +。
步驟4：8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-酮 將2-(1-(2-溴-4-氟苯氧基)環丙烷)乙醯氯(612 mg，2.0 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，冷卻至0℃，加入三氯化鋁(320 mg，2.4 mmol)，0℃攪拌反應30分鐘。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到白色固體(0.47 g，收率87.0%)。 ESI-MS m/z：271.0, 273.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.60 (dd, J = 7.9, 3.0 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 7.4, 3.1 Hz, 1H), 2.83 (s, 2H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 0.79 – 0.71 (m, 2H).
步驟5：8'-溴-6'-氟二螺[環丙烷-1,2'-色烷-4',2''-[1,3]二硫雜環戊烷] 將8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-酮(135 mg，0.5 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入乙二硫醇(94 mg，1.0 mmol)和46.8%三氟化硼乙醚溶液(76 mg，0.25 mmol)，20℃攪拌反應16小時。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到白色固體(0.13 g，收率75.1%)。 ESI-MS m/z：347.0, 349.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.50 (dd, J = 9.5, 3.1 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 7.4, 3.0 Hz, 1H), 3.63 – 3.54 (m, 2H), 3.49 – 3.39 (m, 2H), 2.65 (s, 2H), 1.12 – 1.05 (m, 2H), 0.97 – 0.91 (m, 2H).
步驟6：8-溴-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷] 將二溴海因(3570 mg，12.48 mmol)溶於二氯甲烷(50 mL)中，冷卻至-70℃，加入65-80%氫氟酸吡啶(10 mL)，然後加入8'-溴-6'-氟二螺[環丙烷-1,2'-色烷-4',2''-[1,3]二硫雜環戊烷](1080 mg，3.12 mmol)的二氯甲烷溶液，-70℃攪拌反應0.5小時。加水淬滅反應，二氯甲烷萃取，乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1)分離，得到白色固體(0.74 g，收率81.2%)。 ESI-MS m/z：293.0, 295.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz,CDCl 3) δ 7.34 (ddd, J = 13.7, 7.8, 3.0 Hz, 2H), 2.51 (t, J = 12.6 Hz, 2H), 1.17 – 1.09 (m, 2H), 0.84 – 0.77 (m, 2H).
步驟7：4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將8-溴-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷] (0.59 g，2.0 mmol)、氰化鋅(0.70 g，6.0 mmol)溶於 N,N-二甲基乙醯胺(5 mL)，加入 [1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(326 mg，0.4 mmol)，反應在氬氣氛圍、微波160℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到白色固體(480 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：240.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.58 (ddt, J = 7.8, 3.1, 1.0 Hz, 1H), 7.35 (ddt, J = 7.4, 3.1, 1.0 Hz, 1H), 2.53 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 1.22 – 1.16 (m, 2H), 0.88 – 0.81 (m, 2H).
步驟8：4,4,6-三氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(0.36 g，1.5 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，氮氣保護，冷卻至-70℃，滴加二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(0.9 mL，1.8 mmol，2 M)，-70℃攪拌反應1小時後，滴加溶於四氫呋喃(10 mL)的碘(0.46 g，1.8 mmol)溶液，-70℃攪拌反應1小時後，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(384 mg，收率70.2%)。 ESI-MS m/z：366.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.56 (dt, J= 7.0, 1.0 Hz, 1H), 2.56 (t, J= 12.4 Hz, 2H), 1.27 – 1.19 (m, 2H), 0.92 – 0.83 (m, 2H).
步驟9：4,4,6-三氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4,4,6-三氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(347 mg，0.95 mmol)和1-甲基-1 H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(0.3 g，1.42 mmol)溶於1,4-二氧六環(15 mL)，加入碳酸鉀(263 mg，1.9 mmol)、水(3 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷複合物(78 mg，0.095 mmol)，反應在氬氣氛圍100℃攪拌2小時，然後補加1-甲基-1 H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(0.3 g，1.42 mmol)，100℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(274 mg，收率90.4%)。 ESI-MS m/z：320.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.72 (dt, J = 8.6, 1.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.61 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 1.32 – 1.21 (m, 2H), 0.97 – 0.87 (m, 2H).
步驟10：4,4,6-三氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4,4,6-三氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(272 mg，0.85 mmol)溶於醋酸(6 mL)中，再加入N-碘代丁二醯亞胺(225 mg，1.0 mmol)，氬氣氛圍下80℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(367 mg，收率97.1%)。 ESI-MS m/z：445.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.76 (dt, J= 8.1, 1.0 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 3.86 (d, J= 0.6 Hz, 3H), 2.75 – 2.52 (m, 2H), 1.32 – 1.24 (m, 4H).
步驟11：4,4,6-三氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4,4,6-三氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(357 mg，0.8 mmol)，頻那醇硼烷(1024 mg，8.0 mmol)，三乙胺(242 mg，2.4 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(73.2 mg，0.08 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(76.3 mg，0.16 mmol)，100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(342 mg，收率95.8%)。 ESI-MS m/z：446 [M+1] +。
步驟12：第三丁基(7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將4,4,6-三氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(178 mg，0.4 mmol)，第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(232 mg，0.6 mmol)，碳酸鉀(166 mg，1.2 mmol)溶於二氧六環(4 mL)和水(0.4 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(33 mg，0.04 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(95 mg，收率38%)。 ESI-MS m/z：627.2 [M+1] +。
步驟13：第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將第三丁基(7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(95 mg，0.15 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)，加入 N, N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)，加入氯化亞碸(49.19 mg，0.4135 mmol)，25℃攪拌反應30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(96 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：645.2 [M+1] +。
步驟14：第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將溶於二氯甲烷(3 mL)的第三丁基(1-(氯甲基)-7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(96 mg，0.15 mmol)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(2 mL，7.0 mol/L)，20℃攪拌30分鐘。減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：626.2 [M+1] +。
步驟15：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將第三丁基(1-(胺甲基)-7-(5-(8-甲腈-4,4,6-三氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(100 mg，0.15 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(15 mg，收率19.5%)。 ESI-MS m/z：526.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.63 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.19 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.02 – 2.84 (m, 1H), 2.78-2.62 (m, 1H), 1.25 – 0.88 (m, 4H).
實施例 73 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 羰基 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4,4- 二甲基螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 73)
步驟1：8-溴-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷] 在氬氣保護和-40℃~-30℃條件下，於四氯化鈦二氯甲烷溶液(0.884 mL，0.884 mmol，1 M)的二氯甲烷(4 mL)溶液中，緩慢加入二甲基鋅的正己烷溶液(0.884 mL，0.884 mmol，1 M)，反應液在-30℃攪拌20分鐘，緩慢加入8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-酮(110 mg，0.406 mmol)的二氯甲烷溶液(2 mL)，反應液室溫條件下攪拌12小時。反應完畢，向反應液中加入水(20 mL)，混合液濃縮，再加入飽和碳酸鈉溶液(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚=100%)得無色油狀產物(58 mg，收率50.13%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.11 (dd, J = 7.6, 3.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 9.5, 3.0 Hz, 1H), 1.92 (s, 2H), 1.40 (s, 6H), 1.11 – 1.05 (m, 2H), 0.72 – 0.65 (m, 2H).
步驟2：6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氮氣保護下，於8-溴-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷](100 mg，0.351 mmol)和氰化鋅(123.76 mg，1.053 mmol)的N,N-二甲基乙醯胺(6 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(57.26 mg，0.071 mmol)，反應液在160℃微波照射反應2小時，反應完畢，反應液加入飽和氯化鈉(30 mL)和乙酸乙酯(30 mL)，混合液過濾，有機相用飽和氯化鈉洗滌(30 mL×3)，並減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~2%，體積比)，得到產物，無色油狀(70 mg，收率86.3%)。 ESI-MS m/z：232.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.23 (dd, J= 9.3, 3.1 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 7.4, 3.1 Hz, 1H), 1.94 (s, 2H), 1.41 (s, 6H), 1.17 – 1.12 (m, 2H), 0.74 – 0.68 (m, 2H).
步驟3：6-氟-7-碘-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護和-70℃~-60℃條件下，於6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(70 mg，0.3027 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中，加入二異丙基胺基鋰(182 µL，0.363 mmol，2 M)，反應液在-70℃~-60℃攪拌1小時，再加入碘(92.26 mg，0.363 mmol)的四氫呋喃(1 mL)溶液，反應液繼續攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和亞硫酸鈉溶液(10 mL)和飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(20 mL×3)，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~5%)得無色油狀產物(100 mg，92.5%)。 ESI-MS m/z：357.8[M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.19 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 1.91 (s, 2H), 1.38 (s, 6H), 1.16 – 1.11 (m, 2H), 0.72 – 0.68 (m, 2H).
步驟4：6-氟-4,4-二甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氮氣保護下，於6-氟-7-碘-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(100 mg，0.280 mmol)、1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(116.5 mg，0.560 mmol)和碳酸鉀(115.97 mg，0.840 mmol)的二氧六環(10 mL)和水(1 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(22.86 mg，0.028 mmol)，反應液在100℃攪拌12小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，無色油狀(69 mg，收率79.16%)。 ESI-MS m/z：312.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.70 (s, 1H), 7.37 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 1.99 (s, 2H), 1.47 (s, 6H), 1.23 – 1.15 (m, 2H), 0.79 – 0.73 (m, 2H).
步驟5：6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 於6-氟-4,4-二甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(69 mg，0.2216 mmol)的醋酸(7 mL)溶液中，加入N-碘代丁二醯亞胺(59.83 mg，0.2659 mmol)，反應液在80℃攪拌2小時。反應完畢，反應液濃縮，加入乙酸乙酯(20 mL)，混合液依次用飽和亞硫酸鈉溶液(20 mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)和飽和食鹽水(20 mL)洗滌，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~16%)得無色油狀產物(70 mg，72.2%)。 ESI-MS m/z：437.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 (s, 1H), 7.38 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.07 – 1.94 (m, 2H), 1.48 (d, J= 3.7 Hz, 6H), 1.24 – 1.17 (m, 2H), 0.79 – 0.74 (m, 2H).
步驟6：6-氟-4,4-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(70 mg，0.1598 mmol)，頻那醇硼烷(204.6 mg，1.598 mmol)，三乙胺(80.71 mg，0.7991 mmol)溶於二氧六環(10 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(14.62 mg，0.01598 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(15.25 mg，0.03196 mmol)，100℃攪拌反應3小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，無色油狀(90 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：438.0 [M+1] +。
步驟7：7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將6-氟-4,4-二甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(90 mg，0.2059 mmol)，(7-溴-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基胺基甲酸第三丁酯(79.96 mg，0.2059 mmol)，碳酸鉀(56.93 mg，0.412 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(16.82 mg，0.02059 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，淺黃色固體(75 mg，收率58.9%)。 ESI-MS m/z：619.0 [M+1] +。
步驟8：(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(75 mg，0.121 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)和氯化亞碸(72.19 mg，0.607 mmol)，25℃攪拌反應5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：636.9 [M+1] +。
步驟9：(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將溶於二氯甲烷(2 mL)的(1-(氯甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，粗品)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(5 mL，7.0 mol/L)，室溫攪拌10分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，得到黑色油狀產物(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：518.0 [M-100+1] +。
步驟10：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-羰基-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4,4-二甲基螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.162 mmol)溶於二氯甲烷(6 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，淺黃色固體(20 mg，收率23.87%)。 ESI-MS m/z：518.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.78 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.88 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.13 (d, J= 14.1 Hz, 1H), 1.86 (d, J= 14.1 Hz, 1H), 1.41 (d, J= 21.0 Hz, 6H), 1.07 – 0.94 (m, 2H), 0.81 (d, J= 5.5 Hz, 2H).
實施例 74 7-(4-(1- 胺甲基 )-5-( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 74) 和 (M/P)-7-(4-(1- 胺甲基 )-5-( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 74-P1/74-P2) 、 、
步驟1：8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-醇 向8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-酮(2 g，7.38 mmol)的乙醇(30 mL)溶液中加入硼氫化鈉(0.837 g，22.13 mmol)，在室溫下拌反應1小時後加入水(60 mL)稀釋，乙酸乙酯(50 mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=4：1，體積比)，得到產物，白色固體(1.78 g)。 ESI-MS m/z：255.0, 256.9 [M-17] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.24-7.16 (m, 2H), 4.99 – 4.86 (m, 1H), 2.26 (ddd, J= 13.8, 5.3, 0.8 Hz, 1H), 2.11 (ddd, J= 13.8, 6.5, 0.9 Hz, 1H),1.78(s, 1H), 1.17 – 1.01 (m, 2H), 0.88 – 0.80 (m, 1H), 0.65 – 0.57 (m, 1H).
步驟2：8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷] 向8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-醇(616 mg，2.26mmol)和三氟乙酸(10 mL)中加三乙基矽烷(1.049 g，9.02 mmol)，在室溫下拌反應3小時後加入水(30 mL)稀釋，乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=15：1，體積比)，得到產物，無色固體(540 mg)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.11 (ddt, J= 7.9, 3.0, 0.8 Hz, 1H), 6.81 (ddt, J= 8.5, 3.0, 1.0 Hz, 1H), 2.94 (td, J= 6.6, 1.0 Hz, 2H), 1.95 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 1.12 – 1.05 (m, 2H), 0.68 – 0.61 (m, 2H).
步驟3：6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 向8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷](540 mg，2.1 mmol)和氰化鋅(704.5 mg，6.3 mmol)的N,N-二甲基乙醯胺(10 mL)溶液中加1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(181 mg，0.21 mmol)，在150℃下拌反應8小時後加入水(30 mL)稀釋，乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(420 mg)。 ESI-MS m/z：204 [M+1] +。
步驟4：6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在-70℃和氬氣保護下，向6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(400 mg，1.97 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中滴加二異丙基胺基鋰(1.18 mL，2 mmol/mL)，在此溫度下拌反應1小時後滴加碘(600 mg，2.36 mmol)的四氫呋喃(10 mL)攪拌0.5小時候加飽和氯化銨(30 mL)淬滅，乙酸乙酯(30 mL×2)萃取，有機相用飽和的亞硫酸鈉(30 mL)洗，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=15：1，體積比)，得到產物，白色固體(600 mg)。 ESI-MS m/z：330 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.06 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 2.91 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 1.99 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 1.18 – 1.11 (m, 2H), 0.70 – 0.64 (m, 2H).
步驟5：6-氟-7-(1-甲基吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(600 mg，1.823 mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(948 mg，4.56mmol)，碳酸鉀(756 mg，5.478 mmol)溶於二氧六環(20 mL)和水(4 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(157.5 mg，0.182 mmol)，100℃攪拌8小時後補加1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(179 mg，1.823 mmol)和1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(78.8mg，0.091 mmol)繼續攪拌4小時後，冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=3：7，體積比)，得到產物，白色固體(330 mg)。 ESI-MS m/z：284 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.19 (dt, J = 9.3, 1.1 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.82 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 3.01 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.04 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.21 – 1.16 (m, 2H), 0.76 – 0.67 (m, 2H).
步驟6：6-氟-7-(4-碘-1-甲基吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-7-(1-甲基吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(330 mg，1.17 mmol)溶於醋酸(15 mL)中，加入N-碘代丁二醯亞胺(315 mg，1.4 mmol)，氬氣氛圍下25℃攪拌反應16小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1，體積比)，得到產物，白色固體(470 mg)。 ESI-MS m/z：410 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 (s, 1H), 7.23 (dt, J= 8.8, 1.1 Hz, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.08 – 3.01 (m, 2H), 2.10 – 1.99 (m, 2H), 1.24 – 1.14 (m, 2H), 0.76 – 0.67 (m, 2H).
步驟7：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，將6-氟-7-(4-碘-1-甲基吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(142 mg，0.347 mmol)，頻那醇硼烷(444 mg，3.47 mmol)，三乙胺(175 mg，1.735 mmol)溶於二氧六環(15 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(47.6 mg，0.052 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(49.7 mg，0.104 mmol)，100℃攪拌反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物黃色固體(140 mg)。 ESI-MS m/z：410 [M+1] +。
步驟8：第三丁基7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-羥甲基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯 將第三丁基(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(140 mg，0.361 mmol)，6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(140 mg，0.342 mmol)，碳酸鉀(149mg，1.083 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(2 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(31 mg，0.036 mmol)，120℃微波照射反應25分鐘。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=2：98，體積比)，得到產物，黃色固體(120 mg)。 ESI-MS m/z：591 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.97 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.25-7.18 (m, 1H), 4.86 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.05 (s, 2H), 2.77 (s, 1H), 2.12 – 1.98 (m, 2H), 1.26 (s, 9H), 1.14-1.08 (m, 2H), 0.72 (s, 2H).
步驟9：第三丁基1-氯甲基-7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯 將第三丁基7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-羥甲基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯(120 mg，0.203 mmol)於二氯甲烷(15 mL)，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.005 mL)，加入氯化亞碸(120.8 mg，1.015 mmol)，25℃攪拌反應1小時。減壓濃縮，得到粗品黃色固體(135 mg)。 ESI-MS m/z：609 [M+1] +。
步驟10：第三丁基1-胺甲基-7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯 將溶於甲醇(10 mL)的第三丁基1-氯甲基-7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯(135 mg)溶液滴加至氨的甲醇溶液中(15 mL，7.0 mol/L)，0℃攪拌5分鐘。減壓濃縮，得到黃色油狀粗品(140 mg)。 ESI-MS m/z：590 [M+1] +。
步驟11：7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將第三丁基1-胺甲基-7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(d 3)胺基甲酸甲酯(140 mg)溶於二氯甲烷(15 mL)中，加入三氟乙酸(5 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(65 mg)。 ESI-MS m/z：490 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.92 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.91 (s, 2H), 7.65 (d, J= 9.4 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.28 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.99 (q, J= 5.7 Hz, 2H), 2.06 (dt, J= 13.2, 6.4 Hz, 1H), 1.91 (dt, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H), 1.07 – 0.88 (m, 2H), 0.82-0.73 (m, 2H).
步驟12：(M/P)-7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈進一步經過手性製備分離(ChiralPak IE, 150×4.6mm I.D柱，流動相：A：CO 2，B：(含0.1%氨水)-乙醇，B在流動相中的體積比為0~60%，洗脫時間：35分鐘)，得到兩個產物。化合物74-P1(保留時間為13.097分鐘)，化合物74-P2(保留時間為20.782分鐘)。 化合物74-P1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.92 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.91 (s, 2H), 7.65 (d, J= 9.4 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.28 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.99 (q, J= 5.7 Hz, 2H), 2.06 (dt, J= 13.2, 6.4 Hz, 1H), 1.91 (dt, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H), 1.07 – 0.88 (m, 2H), 0.82-0.73 (m, 2H). 化合物74-P2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.95 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.37 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 7.65 (d, J= 9.5 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.33 (dt, J= 8.8, 4.4 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.03 – 2.95 (m, 2H), 2.06 (dt, J= 13.3, 6.4 Hz, 1H), 1.91 (dt, J= 13.2, 6.2 Hz, 1H), 1.26 – 0.94 (m, 2H), 0.97 – 0.78 (m, 2H).
實施例 75 4- 胺基 -7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 75)
步驟1：N-(8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-亞甲基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺 將8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-酮(1 g, 3.7 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，加入鈦酸乙酯(1.69 g，7.41 mmol)和第三丁基磺醯胺(670 mg，5.54 mmol)，在75℃下攪拌12小時。反應液減壓濃縮，加入乙酸乙酯(50 mL)和水(20 mL)攪拌，經矽藻土過濾，濾液用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，乾燥旋乾得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=5：1)分離，得到黃色油狀物(820 mg，收率59%)。 ESI-MS m/z：374.0, 376.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (dd, J= 8.8, 3.1 Hz, 1H), 7.39 (dd, J= 7.3, 3.1 Hz, 1H), 3.59 (d, J= 17.4 Hz, 1H), 3.24 (d, J= 17.4 Hz, 1H), 1.33 (s, 9H), 1.18 – 1.03 (m, 2H), 0.80 – 0.69 (m, 2H).
步驟2：N-(8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺 將N-(8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-亞甲基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(550 mg，1.47 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，在氬氣氛圍下加入硼烷二甲硫醚絡合物(1.5 mL，0.15 mmol，1 M)，在15℃下攪拌30分鐘。加入2 M稀鹽酸(5 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，有機相用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到淺黃色固體(450 mg，收率81%)。 ESI-MS m/z：375.9, 377.9 [M+H] +。
步驟3：N-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺 將N-(8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(370 mg，0.987 mmol)溶於N,N-二甲基乙醯胺(5 mL)，加入氰化鋅(289 mg，2.47 mmol)，鋅粉(6 mg，0.092 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(81 mg，0.014 mmol)，在微波120℃下攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(350 mg)。 ESI-MS m/z：323.1 [M+H] +。
步驟4：N-(8-氰基-6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺 將N-(8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(300 mg，0.93 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)，在氬氣氛圍、-78℃下加入二異丙基胺基鋰(1.08 mL，2.16 mmol，2 M)，攪拌1小時，在-78℃下加入碘(258 mg，2.03 mmol)的四氫呋喃溶液(2 mL)，攪拌1小時。加入飽和食鹽水(20 mL)和飽和亞硫酸鈉溶液(20 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，乾燥濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)分離，得到黃色固體(300 mg，收率72%)。 ESI-MS m/z：449.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.72 (dd, J= 8.0, 1.0 Hz, 1H), 4.71 – 4.60 (m, 1H), 3.61 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 2.27 – 2.09 (m, 2H), 1.25 (d, J= 1.2 Hz, 9H), 1.23 – 1.07 (m, 2H), 0.86 – 0.60 (m, 2H).
步驟5：(N-(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺 將N-(8-氰基-6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(250 mg，0.558 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL)，加入1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(350 mg，1.68 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(40 mg，0.049 mmol)，碳酸鉀(155 mg，1.12 mmol)和水(1 mL)，在氬氣氛圍、100℃攪拌3小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)分離，得到黃色固體(200 mg，收率89%)。 ESI-MS m/z：403.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.88 (dd, J= 9.5, 1.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.74 (q, J= 7.3 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.64 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 2.31 – 2.14 (m, 2H), 1.28 (s, 9H), 1.25 – 1.11 (m, 2H), 0.90 – 0.64 (m, 2H).
步驟6：4-胺基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(N-(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺(170 mg，0.42 mmol)溶於乙腈(5 mL)，加入N-碘代丁二醯亞胺(20 mg,0.089 mmol)，在15℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：299.1 [M+H] +。
步驟7：(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯 將4-胺基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(170 mg，0.57 mmol)溶於乙醇(10 mL)，加入二碳酸二第三丁酯(2 mL)，在15℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)分離，得到黃色固體(100 mg，收率44%)。 ESI-MS m/z：399.1 [M+H] +。
步驟8：8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯 將(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.251 mmol)溶於醋酸(5 mL)，加入N-碘代丁二醯亞胺(68 mg，0.308 mmol)，在50℃攪拌3小時。減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)分離，得到透明油狀物(100 mg，收率76%)。 ESI-MS m/z：525.0 [M+H] +。
步驟9：(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯 將8-氰基-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.191 mmol)溶於1,4-二氧六環(5 mL)，加入三乙胺(96 mg，0.954 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(17 mg，0.019 mmol)，2-雙環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(18 mg，0.038 mmol)，在氬氣氛圍下加入頻那醇硼烷(244 mg，1.91 mmol)，在100℃下攪拌2小時。反應液減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到透明油狀物(100 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：525.2 [M+H] +。
步驟10：(7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將(8-氰基-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-4-基)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.190 mmol)和(7-溴-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(74 mg，0.190 mmol)，碳酸鉀(52 mg，0.380 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(16 mg，0.019 mmol)，在100℃下攪拌反應6小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(乙酸乙酯：二氯甲烷=3：2)分離，得到黃色油狀物(50 mg，收率37%)。 ESI-MS m/z：606.0 [M-100] +。
步驟11：(7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將((7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(羥甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(50 mg，0.071 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)，加入氯化亞碸(13 mg, 0.106 mmol)，在50℃攪拌30分鐘。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：624.2 [M-100] +。
步驟12：(1-(胺甲基)-7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯 將7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(氯甲基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(50 mg，0.069 mmol)溶於氨的甲醇溶液(5 mL,7M)中，在15℃攪拌10分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：605.3 [M-100] +。
步驟13：4-胺基-7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈 將(1-(胺甲基)-7-(5-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸第三丁酯(50 mg，0.071 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)，在15℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到淡黃色固體(8 mg，收率22%)。 ESI-MS m/z：505.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.98 (s, 1H), 8.82 (d, J= 21.2 Hz, 1H), 8.76 (s, 2H), 8.52 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 8.37 (s, 2H), 7.95 (dd, J= 16.3, 9.7 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 4.88 – 4.77 (m, 1H), 4.42 – 4.27 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.41 – 2.19 (m, 2H), 1.15 – 0.99 (m, 2H), 0.96 – 0.73 (m, 2H).
實施例 76 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 羥基螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙基 ]-8- 甲腈 ( 化合物 76)
步驟1：((8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-4-基)氧)(第三丁基)二甲基矽烷 將8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-4-醇(0.38 g，1.4 mmol)和咪唑(0.14 g，2.1 mmol)溶於 N, N-二甲基甲醯胺(5 mL)，冷卻至0℃，加入第三丁基二甲基氯矽烷(0.23 g，1.54 mmol)，20℃攪拌反應16小時。反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=20：1)分離，得到無色油狀物(0.45 g，收率83.3%)。 ESI-MS m/z：387.1, 389.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.14 (ddd, J= 7.6, 3.1, 0.7 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J= 8.8, 3.1, 1.0 Hz, 1H), 4.99 – 4.91 (m, 1H), 2.24 (ddd, J= 13.4, 8.6, 1.6 Hz, 1H), 1.86 (dd, J= 13.4, 5.6 Hz, 1H), 1.16 (dt, J= 11.2, 6.5 Hz, 1H), 1.00 (tdd, J= 7.0, 5.4, 2.7 Hz, 1H), 0.94 (s, 9H), 0.81 (ddd, J= 10.3, 6.9, 5.9 Hz, 1H), 0.49 (ddd, J= 10.4, 7.1, 5.5 Hz, 1H), 0.17 (d, J= 23.3 Hz, 6H).
步驟2：4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將((8-溴-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-4-基)氧)(第三丁基)二甲基矽烷(0.38 g，1.0 mmol)、氰化鋅(0.35 g，3.0 mmol)溶於 N,N-二甲基乙醯胺(3 mL)，加入[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(163 mg，0.2 mmol)，反應在氬氣氛圍、微波160℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(10 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1)分離，得到白色固體(334 mg，收率99%)。 ESI-MS m/z：334.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.29 (ddd, J= 8.7, 3.2, 1.0 Hz, 1H), 7.12 (ddd, J= 7.5, 3.1, 0.7 Hz, 1H), 4.98 – 4.88 (m, 1H), 2.28 (ddd, J= 13.5, 9.1, 1.6 Hz, 1H), 1.84 (dd, J= 13.4, 5.5 Hz, 1H), 1.29 – 1.17 (m, 1H), 1.11 – 1.00 (m, 1H), 0.94 (s, 9H), 0.90 – 0.77 (m, 1H), 0.50 (ddd, J= 10.4, 7.2, 5.6 Hz, 1H), 0.17 (d, J= 22.5 Hz, 6H).
步驟3：4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈(1.08 g，3.24 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，氮氣保護，冷卻至-70℃，滴加二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(2.25 mL，4.5 mmol，2 M)，-70℃攪拌反應1小時後，滴加溶於四氫呋喃(10 mL)的碘(1.14 g，4.5 mmol)溶液，-70℃攪拌反應1小時後，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(1260 mg，收率84.7%)。 ESI-MS m/z：460.1 [M+1] +。
步驟4：4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-碘螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 (826 mg，1.8 mmol)和1-甲基-1 H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(0.56 g，2.7 mmol)溶於1,4-二氧六環(15 mL)，加入碳酸鉀(497 mg，3.6 mmol)、水(3 mL)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷複合物(147 mg，0.18 mmol)，反應在氬氣氛圍100℃攪拌2小時，然後補加1-甲基-1 H-吡唑-5-硼酸頻那醇酯(0.56 g，2.7 mmol)，100℃攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1)分離，得到黃色固體(660 mg，收率88.8%)。 ESI-MS m/z：414.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.62 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.43 (dd, J= 9.5, 1.1 Hz, 1H), 6.49 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J= 9.4, 5.6 Hz, 1H), 3.83 (d, J= 1.4 Hz, 3H), 2.38 (ddd, J= 13.5, 9.3, 1.6 Hz, 1H), 1.89 (dd, J= 13.5, 5.6 Hz, 1H), 1.30 (dt, J= 11.8, 7.0 Hz, 1H), 1.12 (dddd, J= 11.3, 7.1, 5.6, 1.6 Hz, 1H), 0.99 (s, 9H), 0.90 (dt, J= 10.5, 6.6 Hz, 1H), 0.56 (ddd, J= 10.5, 7.2, 5.7 Hz, 1H), 0.22 (d, J= 23.3 Hz, 6H).
步驟5：4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈(660mg，1.6 mmol)溶於醋酸(3 mL)中，再加入N-碘代丁二醯亞胺(540 mg，2.4 mmol)，氬氣氛圍下20℃攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，黃色固體(840 mg，收率97.2%)。 ESI-MS m/z：540.1 [M+1] +。
步驟6：4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(4-碘-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈(108 mg，0.2 mmol)，頻那醇硼烷(256 mg，2.0 mmol)，三乙胺(60 mg，0.6 mmol)溶於二氧六環(3 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(18.3 mg，0.02 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(19.0 mg，0.04 mmol)，100℃攪拌反應2小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(105 mg，收率97.2%)。 ESI-MS m/z：540.3 [M+1] +。
步驟7：第三丁基((7-(5-(4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1 H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈(105 mg，0.2 mmol)，第三丁基((7-溴-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(77 mg，0.2 mmol)，碳酸鉀(55 mg，0.4 mmol)溶於二氧六環(4 mL)和水(0.4 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(16 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=10：1，體積比)，得到產物，黃色固體(69 mg，收率42%)。 ESI-MS m/z：820.1 [M+1] +。
步驟8：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-羥基螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈 將第三丁基((7-(5-(4-((第三丁基二甲基矽烷)氧)-8-氰基-6-氟螺[色烷-2,1'-環丙基]-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(69 mg，0.08 mmol)溶於二氯甲烷(2 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌1小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(6 mg，收率15.1%)。 ESI-MS m/z：506.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.63 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.76 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.80-4.65 (m, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.52 – 2.26 (m, 1H), 1.98-1.89 (m, 1H), 1.25 – 0.88 (m, 4H).
實施例 77 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 羥基 -4- 甲基螺 [ 鉻酸鹽 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 腈 ( 化合物 77)
步驟1：8-溴-6-氟-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-4-醇 將8-溴-6-氟螺[色胺-2,1'-環丙烷]-4-酮(1000 mg，3.69 mmol)溶於四氫呋喃(30 mL)中，置換氬氣，冷卻至0度下，向溶液中滴加甲基溴化鎂試劑(5.5 mL，1 M)，攪拌反應6小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=8：1，體積比)，得到產物，黃色油狀(800 mg，收率74%)。 ESI-MS m/z：287 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.26 (dd, J = 8.9, 3.0 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 7.5, 3.0 Hz, 1H), 2.20 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 1.65 (s, 3H), 1.18 – 1.05 (m, 2H), 0.86 – 0.67 (m, 2H).
步驟2：6-氟-4-羥基-4-甲基螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈 將8-溴-6-氟-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-4-醇(700 mg，2.44 mmol)，氰化鋅(440 mg，3.66 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(200 mg，0.24 mmol)，150℃微波照射反應2小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色油狀(500 mg，收率86%)。 ESI-MS m/z：234 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.53 (dd, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.3, 3.1 Hz, 1H), 2.10 (s, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.29 – 1.15 (m, 2H), 0.87 – 0.70 (m, 2H).
步驟3：6-氟-4-羥基-7-碘-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-4-羥基-4-甲基螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈(500 mg，2.14 mmol)溶於四氫呋喃(20 mL)中，置換氬氣，冷卻至零下78度，向溶液中滴加二異丙基胺基鋰試劑(2.4 mL，2 M)，攪拌反應1小時。再向溶液中滴加碘單質的四氫呋喃稀釋液(600 mg，2.14 mmol)，攪拌反應1小時。反應完畢，加入飽和氯化銨溶液淬滅，反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色油狀(550 mg，收率72%)。 ESI-MS m/z：360 [M+1] +。
步驟4：6-氟-4-羥基-4-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-4-羥基-7-碘-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-8-腈(550 mg，1.53 mmol)，1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(953 mg，4.58 mmol)，碳酸鉀(632 mg，4.58 mmol)溶於二氧六環(20 mL)和水(4 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(200 mg，0.24 mmol)，100℃加熱反應6小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色油狀(400 mg，收率83%)。 ESI-MS m/z：314 [M+1] +。
步驟5：6-氟-4-羥基-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-4-羥基-4-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈(400 mg，1.27 mmol)，N-碘代丁二醯亞胺(350 mg，1.56 mmol)溶於醋酸溶液中(15 mL)，50℃攪拌2小時。減壓濃縮，矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=3：1，體積比)，得到產物，黃色固體(150 mg，收率27%)。 ESI-MS m/z：440 [M+1] +。
步驟6：6-氟-4-羥基-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色滿-2,1'-環丙烷]-8-腈 將6-氟-4-羥基-7-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈(150 mg，0.34 mmol)，頻那醇硼烷(435 mg，3.4 mmol)，三乙胺(102 mg，1.02 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(31 mg，0.034 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(32 mg，0.068 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/甲醇=5%，體積比)，得到產物，黃色油狀(150 mg，收率100%)。 ESI-MS m/z：440 [M+1] +。
步驟8：5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-羥基-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯 將6-氟-4-羥基-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色滿-2,1'-環丙烷]-8-腈(100 mg，0.22 mmol)，7-溴-5-((第三丁氧羰基)(甲基-d3)胺基)-1-(((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯(100 mg，0.22 mmol)，碳酸鉀(51 mg，0.37 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(16 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色油狀物(140mg，收率58%)。 ESI-MS m/z：661 [M+1] +。
步驟9：7-(4-(1-(胺基甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-羥基-4-甲基螺[鉻酸鹽-2,1'-環丙烷]-8-腈 向溶於二氯甲烷(10 mL)的5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-羥基-4-甲基螺[色胺-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯(80 mg，0.12 mmol)的溶液中滴加三氟乙酸(5 mL)，室溫攪拌30分鐘。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(11mg，收率17%)。 ESI-MS m/z：520 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.92 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.03 (s, 2H), 7.80 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.31 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 2.30 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 1.61 (s, 3H), 1.00 (dq, J = 27.5, 5.4 Hz, 2H), 0.91 – 0.73 (m, 2H). 19F NMR (377 MHz, DMSO- d 6 ) δ -73.42.
實施例 78 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧 -3,4- 二氫吡啶 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1 H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 氧螺 [ 色烷 -2,1'- 環丙基 ]-8- 甲腈 ( 化合物 78) 和 (M/P)-7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 氧代螺 [ 鉻烷 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 腈 ( 化合物 78-P1/78-P2) 、 、
步驟1：5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-氧代螺[鉻烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯 將5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-羥基螺[鉻烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯(140 mg，0.17 mmol)溶於二氯甲烷中(20 mL)中，加入戴斯-馬丁氧化劑(88.4 mg，0.21 mmol)，25℃攪拌30分鐘。加入飽和碳酸氫鈉溶液，萃取，有機相用水洗滌三次，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=100：30，體積比)，得到產物，黃色固體(110 mg，收率78.8%)。 ESI-MS m/z：804.1 [M+1] +。
步驟2：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-氧代螺[鉻烷-2,1'-環丙烷]-8-腈 將5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8-氰基-6-氟-4-氧代螺[鉻烷-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯(110 mg，0.137 mmol)溶於二氯甲烷(5 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)。25℃攪拌0.5小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(25 mg，收率36.3%)。 ESI-MS m/z：504.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.99 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.41 (s, 2H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.24 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.96 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 1.23 – 1.11 (m, 1H), 1.02 – 0.84 (m, 3H). 13C NMR (101 MHz, DMSO- d 6 ) δ 189.05, 160.81, 159.71, 158.09, 154.38, 152.55, 139.27, 139.10, 136.41, 130.90, 130.14, 129.93, 123.34, 122.70, 118.61, 118.37, 112.88, 105.13, 103.44, 99.33, 62.99, 42.22, 37.28, 11.07, 10.84.
步驟3：(M/P)-7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-氧代螺[鉻烷-2,1'-環丙烷]-8-腈 將7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧-3,4-二氫吡啶[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1 H-吡唑-5-基)-6-氟-4-氧螺[色烷-2,1'-環丙基]-8-甲腈進一步高效液相色譜製備(ChiralPak IE, 250 × 40mm I.D製備柱，流動相：A：正己烷，B：(含0.1%氨水)-乙醇，B在流動相中的體積比為0~90%；洗脫時間：25分鐘)，得到兩個產物。化合物78-P1(保留時間為9.785分鐘)，化合物78-P2(保留時間為16.087分鐘)。 化合物78-P1，黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.55 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.23 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 1.27 – 0.83 (m, 4H). 化合物78-P2，黃色固體。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.57 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.23 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 1.27 – 0.81 (m, 4H).
實施例 79 7-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟螺 [ 色烯 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 79)
步驟1：6-氟-4-羥基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 (200 mg，0.37 mmol)溶於四氫呋喃(10 mL)，加入四丁基氟化銨(370 uL，1 M)，在0℃下攪拌30分鐘。反應液加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，用飽和食鹽水(20 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得粗品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1)分離，得到透明油狀物(120 mg，收率76%)。 ESI-MS m/z：426.1 [M+H] +。
步驟2：4-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將6-氟-4-羥基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg，0.259 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)，加入三乙胺(131 mg，1.295 mmol)，氯化亞碸(92 mg，0.776 mmol)，在20℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品直接投下一步。 ESI-MS m/z：444.1 [M+H] +。
步驟3：6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將4-氯-6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(110 mg，0.248 mmol)溶於1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(1 mL)，在50℃下攪拌反應30分鐘。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)分離，得到淡黃色油狀物(40 mg，收率36%)。 ESI-MS m/z：408.1 [M+H] +。
步驟4：(7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烯-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯 將6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(40 mg，0.098 mmol)，7-溴-5-((甲基-d3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基胺基甲酸第三丁酯(42 mg，0.108 mmol)和碳酸鉀(27 mg，0.196 mmol)溶於二氧六環(5 mL)和水(0.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀二氯甲烷絡合物(8 mg，0.01 mmol)，在100℃下攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮得粗品，粗品經柱層析(乙酸乙酯：二氯甲烷=1：1)分離，得到淡黃色油狀物(30 mg，收率52%)。 ESI-MS m/z：588.4 [M+H] +。
步驟5：7-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟螺[色烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(7-(5-(8-氰基-6-氟螺[色烯-2,1'-環丙烷]-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(30 mg，0.051 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，加入三氟乙酸(2 mL)，在15℃攪拌30分鐘。減壓濃縮得粗品，粗品經製備液相分離，得到淡黃色固體(18 mg，收率75%)。 ESI-MS m/z：488.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.97 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 7.52 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.62 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 5.94 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.29 – 1.16 (m, 2H), 1.06 – 0.94 (m, 2H).
實施例 80 7'-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 羰基 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6'- 甲基 -4'-( 三氟甲基 )-3',4'- 二氫螺 [ 環丙烷 -1,2'- 吡啶并 [3,2-b][1,4] 噁嗪 ]-8'- 甲腈 ( 化合物 80)
步驟1：2-溴-3-氟-6-甲基異尼古丁醛 在氬氣保護和-78℃~-60℃條件下，於2-溴-3-氟-6-甲基吡啶(5 g，26.316 mmol)的四氫呋喃(50 mL)溶液中加入二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(15.79 mL，31.58 mmol)，反應液在此溫度攪拌0.5小時，再加入 N, N-二甲基甲醯胺(2.31 g，31.58 mmol)，反應液升溫至室溫攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(30 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(30 mL×3)，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌(50 mL×3)，有機相無水硫酸鈉乾燥、過濾，然後減壓濃縮得到紅色油狀產物(6.1 g，粗品)。 ESI-MS m/z：236.0 [M+H 2O+1] +。
步驟2：2-溴-3-氟-6-甲基異尼古丁腈 於2-溴-3-氟-6-甲基異尼古丁醛(12.6 g，57.8 mmol)的四氫呋喃溶液(126 mL)中，加入氨水(126 mL，含量25%~28%)，再加入碘(17.56 g，69.13 mmol)，反應液在室溫攪拌5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(100 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(100 mL×3)，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌(30 mL×3)，再用飽和亞硫酸鈉洗滌(100 mL)，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~3%)得到白色油狀產物(6.3 g，收率50.8%)。 ESI-MS m/z：214.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.93 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H).
步驟3：甲基-1-((2-溴-4-氰基-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯 於2-溴-3-氟-6-甲基異尼古丁腈(3.3g，15.35 mmol)和甲基-1-羥基環丙烷-1-羧酸酯(1.78 g，15.35 mmol)的四氫呋喃(40 mL)溶液中，加入碳酸銫(7.5 g，30.7 mmol)，反應液在70℃攪拌反應2小時。反應完畢反應液過濾，濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~15%，體積比)，得到產物，白色固體(4.15 g，收率86.9%)。 ESI-MS m/z：311.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.30 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.85 – 1.79 (m, 2H), 1.59 – 1.52 (m, 2H).
步驟4：甲基-1-((4-氰基-2-((二苯亞甲基)胺基)-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯 在氬氣保護下，於甲基-1-((2-溴-4-氰基-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯(800 mg，2.572 mmol)，二苯甲酮亞胺(2.33 g，12.862 mmol)，碳酸銫(1.677 g，5.14 mmol)的二氧六環(20 mL)中，加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(117.77 mg，0.1286 mmol)，4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽(148.8 mg，0.2572 mmol)，反應液在100℃攪拌12小時。反應完畢，反應液過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，黃色固體(1.2 g，粗品)。 ESI-MS m/z：412.1 [M+1] +。
步驟5：甲基-1-((2-胺基-4-氰基-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯 在室溫條件下，於甲基-1-((4-氰基-2-((二苯亞甲基)胺基)-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯(1.2 g，粗品)的二氧六環(10 mL)和鹽酸二氧六環溶液(10 mL，2 M)的溶液中，加入水(2 mL)，室溫下攪拌反應0.5小時。反應完畢，反應液加入飽和碳酸鈉溶液(50 mL)(溶液pH=8~9)，混合液用乙酸乙酯萃取(50 mL×3)，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/二氯甲烷=0~20%，體積比)，得到產物，白色固體(470 mg，收率73.9%)。 ESI-MS m/z：248.1 [M+1] +。
步驟6：6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於甲基1-((2-胺基-4-氰基-6-甲基吡啶-3-基)氧代)環丙烷-1-羧酸酯(470 mg，1.901 mmol)的四氫呋喃(20 mL)溶液中，加入碳酸銫(1.239 g，3.8 mmol)，反應液在70℃攪拌1小時。反應完畢，反應液過濾，用甲醇淋洗，濾液減壓濃縮，得到白色固體產物(1 g，粗品)。 ESI-MS m/z：216.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.72 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.41 – 1.30 (m, 4H).
步驟7：7'-溴-6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(900 mg，粗品)的 N, N-二甲基甲醯胺(15 mL)中，加入N-溴代丁二醯亞胺(1.116 g，6.273 mmol)，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢，向反應液中加入飽和食鹽水(50 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(50 mL×3)，再用飽和亞硫酸鈉溶液(50 mL)洗滌，有機相減壓濃縮殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/二氯甲烷=0~20%，體積比)，得到產物，黃色固體(1 g，粗品)。 ESI-MS m/z：293.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.87 (s, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.41 – 1.36 (m, 4H).
步驟8：6'-甲基-7'-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 在氮氣保護下，於7'-溴-6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(1 g，3.4 mmol)、1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.122 g，10.2 mmol)和碳酸鉀(1.41 g，10.2 mmol)的二氧六環(20 mL)和水(2 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(138.77 mg，0.17 mmol)，反應液在100℃攪拌12小時。反應完畢，反應液用矽藻土過濾，濾液加入飽和氯化鈉溶液(50 mL)，用鹽酸(2 M)調節混合液pH~7，用二氯甲烷和甲醇(10：1，體積比)萃取(55 mL×3)，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~20%，體積比)，得到產物，黃色油狀(1 g，粗品)。 ESI-MS m/z：296.1 [M+1] +。
步驟9：7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於6'-甲基-7'-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(210 mg，0.712 mmol)的醋酸(8 mL)溶液中，加入N-碘代丁二醯亞胺(240 mg，1.068 mmol)，反應液在80℃攪拌1小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，加入乙酸乙酯(30 mL)，混合液依次用飽和亞硫酸鈉溶液(30 mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(30 mL)和飽和食鹽水(20 mL)洗滌，有機相濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/二氯甲烷=0~15%)得白色固體產物(250 mg，83.5%)。 ESI-MS m/z：421.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.45 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.68 – 1.63 (m, 2H), 1.54 – 1.50 (m, 2H).
步驟10：7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 在氬氣保護下，於7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3'-羰基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(280 mg，0.665 mmol)的四氫呋喃(15 mL)溶液中，加入硼烷二甲硫醚(1.33 mL，2.66 mmol)溶液，反應液在50℃攪拌6.5小時。反應完畢，加入鹽酸(8 mL，2 M)，混合液攪拌1小時，向混合液中加入飽和碳酸鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取，有機相減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/二氯甲烷=0~20%)得白色固體產物(150 mg，55.4%)。 ESI-MS m/z：407.8 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.69 – 3.57 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.34 – 1.25 (m, 2H), 0.92 – 0.83 (m, 2H).
步驟11：甲基-8'-氰基-7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-4'(3'H)-甲二硫酸酯 在-78℃~-60℃和氬氣保護下，於7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(91 mg，0.223 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，加入雙(三甲基矽基)胺基鋰(894 µL，0.8939 mmol，1 mol/L)的四氫呋喃溶液，攪拌15分鐘，再加入二硫化碳(18.72 mg，0.2458 mmol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，繼續攪拌30分鐘，最後加入碘甲烷(189.9 mg，1.338 mol)的四氫呋喃(1.5 mL)溶液，反應室溫繼續攪拌12小時。反應完畢，反應液冷卻到室溫，加入飽和氯化鈉溶液(20 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(20 mL×3)，有機相無水硫酸鈉乾燥、濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%)得到黃色固體產物(86 mg，收率77.4%)。 ESI-MS m/z：497.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.69 (s, 1H), 4.95 (dd, J = 4.7, 0.8 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.35 – 1.25 (m, 2H), 1.10– 1.04 (m, 2H).
步驟12：7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 在-78℃~-60℃條件下，於甲基-8'-氰基-7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-4'(3'H)-甲二硫酸酯(88 mg，0.177 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入氫氟酸吡啶溶液(175.36 mg，1.77 mmol)，再加入N-溴代琥珀醯亞胺(126 mg，0.71 mmol)，反應液繼續攪拌1小時，升溫至室溫繼續攪拌1小時。反應完畢，反應液濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~25%)得到無色油狀產物(40 mg，收率47.56%)。 ESI-MS m/z：475.9 [M+1] +。
步驟13：6'-甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 將7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(40 mg，0.0842 mmol)，頻那醇硼烷(107.75 mg，0.842 mmol)，三乙胺(42.51 mg，0.421 mmol)溶於二氧六環(8 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(7.7 mg，0.00842 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(8.03 mg，0.0168 mmol)，100℃攪拌反應3小時。反應完畢，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，白色固體(100 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：476.1 [M+1] +。
步驟14：第三丁基((7-(5-(8'-氰基-6'-甲基-4'-(三氟甲基)-3'-，4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將(7-溴-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(24.44 mg，0.0632 mmol)，6'-甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(100 mg，粗品)，碳酸鉀(26 mg，0.1895 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(10.31 mg，0.0126 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(50 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：656.3 [M+1] +。
步驟15：7'-(4-(1-(胺基甲基)-5-((甲基-d3)胺基)-4-羰基-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於第三丁基((7-(5-(8'-氰基-6'-甲基-4'-(三氟甲基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(50 mg，粗品)的二氯甲烷(6 mL)溶液中，加入三氟乙酸(1 mL)，反應液在室溫下攪拌1小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(9 mg，收率25.6%)。 ESI-MS m/z：556.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.95 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 7.15 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.01 – 3.87 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.27 – 1.18 (m, 2H), 1.11 – 1.00 (m, 2H).
實施例 81 7'-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 羰基 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6'- 甲基 -3',4'- 二氫螺 [ 環丙烷 -1,2'- 吡啶并 [3,2-b][1,4] 噁嗪 ]-8'- 甲腈 ( 化合物 81)
步驟1：6'-甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 將7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(100 mg，0.246 mmol)，頻那醇硼烷(314.3 mg，2.46 mmol)，三乙胺(124 mg，1.228 mmol)溶於二氧六環(8 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(44.9 mg，0.049 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(46.85 mg，0.098 mmol)，100℃攪拌反應2小時。反應完畢，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，淺綠色固體(150 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：408.2 [M+1] +。
步驟2：第三丁基(1-(((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8'-氰基-6'-甲基-3'-，4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯 將7-溴-5-((第三丁氧羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-4-氧代吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸第三丁酯(86.5 mg，0.147 mmol)，6'-甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(150 mg，0.147 mmol)，碳酸鉀(61 mg，0.442 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(24 mg，0.0295 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，紅色油狀(120 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：688.2 [M-100+1] +。
步驟3：7'-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-羰基-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於第三丁基(1-(((第三丁氧羰基)胺基)甲基)-7-(5-(8'-氰基-6'-甲基-3'-，4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-5-基)(甲基-d 3)胺基甲酸酯(120 mg，粗品)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(1 mL)，反應液在室溫下攪拌1小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，白色固體(20 mg，收率26.93%)。 ESI-MS m/z：488.1[M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.92 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 7.81 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.34 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.60 – 3.38 (m, 2H), 1.96 (s, 3H), 1.13 – 1.05 (m, 2H), 0.97 – 0.81 (m, 2H).
實施例 82 7'-(4-(1-( 胺甲基 )-5-(( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 羰基 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-4',6'- 二甲基 -3',4'- 二氫螺 [ 環丙烷 -1,2'- 吡啶并 [3,2-b][1,4] 噁嗪 ]-8'- 甲腈 ( 化合物 82)
步驟1：7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4',6'-二甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6'-甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(145 mg，0.36 mmol)和碳酸鉀(81.45 mg，0.59 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中，加入反應物碘甲烷(0.043 mL，0.53 mmol)，反應液在60℃攪拌反應1小時。反應液冷卻至室溫，加入水(20 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3×20 mL)萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(3×30 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。殘留物用矽膠柱層析純化(乙酸乙酯-石油醚=0-40%梯度洗脫)，得到產物黃色油狀(103 mg，0.24 mmol，68.67%)。 ESI-MS m/z：422.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.63 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.62 – 3.47 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.29 – 1.20 (m, 2H), 0.91 – 0.79 (m, 2H).
步驟2：4',6'-二甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 將7'-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4',6'-二甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(103 mg，0.24 mmol)，頻那醇硼烷(310.46 mg，2.45 mmol)，三乙胺(0.17 mL，1.22 mmol)溶於二氧六環(8 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(22.39 mg，0.02 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(23.31 mg，0.05 mmol)，100℃攪拌反應3小時。反應完畢，反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~40%，體積比)，得到產物，白色固體(98 mg，粗品)。 ESI-MS m/z：422.2 [M+1] +。
步驟3：第三丁基((7-(5-(8'-氰基-4'-，6'-二甲基-3'-，4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯 將第三-丁基 7-溴-5-((第三-丁氧基羰基)(甲基-d 3)胺基)-1-(((第三-丁氧基羰基)胺基)甲基)-4-羰基吡啶并[3,4-d]噠嗪-3(4H)-羧酸酯(136.65 mg，0.23 mmol)，4',6'-二甲基-7'-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈(98 mg，0.23 mmol)，碳酸鉀(96.44 mg，0.70 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(19.04 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應40分鐘。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(115 mg，收率61.65%)。 ESI-MS m/z：702.2 [M+1] +。
步驟4：7'-(4-(1-(胺甲基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-羰基-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4',6'-二甲基-3',4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-8'-甲腈 於第三丁基((7-(5-(8'-氰基-4'-，6'-二甲基-3'-，4'-二氫螺[環丙烷-1,2'-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪]-7'-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-((甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸酯(115 mg，0.16 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中，加入三氟乙酸(1 mL)，反應液在室溫下攪拌1小時，反應完畢，反應液減壓濃縮後經製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(45 mg，收率54%)。 ESI-MS m/z：502.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.92 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.68 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.48 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 3.13 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.15 – 1.07 (m, 1H), 1.00 – 0.88 (m, 3H).
實施例 83 7-(4-(1- 胺甲基 )-5-( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 甲基螺 [ 二苯乙烯 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 83) 和 (M/P)-7-(4-(1- 胺甲基 )-5-( 甲基 -d 3) 胺基 )-4- 氧代 -3,4- 二氫吡啶并 [3,4-d] 噠嗪 -7- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-6- 氟 -4- 甲基螺 [ 二苯乙烯 -2,1'- 環丙烷 ]-8- 甲腈 ( 化合物 83-P1/ 化合物 83-P2)
步驟1：6-氟-7-(4-碘-1-甲基吡唑-5-基)-4-甲基螺[二氫吡喃-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 向6-氟-4-羥基-7-(4-碘-2-甲基吡唑-3-基)-4-甲基-3,4-二氫螺[二氫螺-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(250 mg，0.57 mmol)和三乙胺(0.475 mL，3.42 mmol)的二氯甲烷(15 mL)溶液中加入氯化亞碸(203.13 mg，1.71 mmol)在室溫下攪拌20分鐘後濃縮有機相至乾後加1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(10 mL)在50℃攪拌2小時後，加乙酸乙酯(50 mL)，有機相用水(30 mL)洗3次後，飽和食鹽水(30 mL)洗，有機相減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2：1，體積比)，得到產物黃色固體(130 mg)。 ESI-MS m/z：422.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz,CDCl 3) δ 7.66 (s, 1H), 7.13 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 5.79 – 5.03 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.42 – 1.36 (m, 1H), 1.31 – 1.25 (m, 1H), 0.90 – 0.81 (m, 2H).
步驟2：6-氟-4-甲基-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[二苯乙烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 在氬氣保護下，向6-氟-7-(4-碘-1-甲基吡唑-5-基)-4-甲基螺[二氫吡喃-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(47 mg，111.58 μmol)，三乙胺(0.047 mL，334.75 μmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(15.33 mg，16.74 μmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(15.96 mg，33.47 μmol)的二氧六環(3 mL)溶液中加入頻那醇硼烷(142.80 mg，1115.83 μmol)，在100℃攪拌2 h。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(二氯甲烷/乙酸乙酯=20：1，體積比)，得到產物黃色固體(75 mg)。 ESI-MS m/z：422.2 [M+1] +。
步驟3：(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基螺)-1-甲基吡唑-4-基)-5-(甲基-d 3)胺基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯 將(7-溴-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基胺基甲酸第三丁酯(45 mg，0.12 mmol)，6-氟-7-(1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)螺[色烷-2,1'-環丙烷]-8-甲腈(75 mg，0.18 mmol)，碳酸鉀(48 mg，0.35 mmol)溶於二氧六環(3 mL)和水(0.5 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(9.5 mg，0.001 mmol)，120℃微波照射反應30分鐘。冷卻至室溫，過濾，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=2：98，體積比)，得到產物，黃色固體(40 mg)。 ESI-MS m/z：602.1 [M+1] +。
步驟4：7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-甲基螺[二苯乙烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將(7-(5-(8-氰基-6-氟-4-甲基螺)-1-甲基吡唑-4-基)-5-(甲基-d 3)胺基-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-1-基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(40 mg)溶於二氯甲烷(3 mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)。25℃攪拌0.5小時，減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，黃色固體(13mg)。 ESI-MS m/z：502.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.63 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.54 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 5.75 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.03 (d, J= 1.5 Hz, 3H), 1.24 – 1.20 (m, 1H), 1.17 – 1.12 (m, 1H), 0.96 – 0.90 (m, 2H).
步驟5：(M/P)-7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-甲基螺[二苯乙烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈 將7-(4-(1-胺甲基)-5-(甲基-d 3)胺基)-4-氧代-3,4-二氫吡啶并[3,4-d]噠嗪-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-氟-4-甲基螺[二苯乙烯-2,1'-環丙烷]-8-甲腈進一步經過手性製備分離(Daicel ChiralCel OD, 250×40mm I.D., 10µm柱，流動相A：CO 2，流動相B：MeOH(0.1%NH 3 .H 2O)；梯度：B在流動相中的體積比為40%，洗脫時間：25分鐘)，得到兩個產物。化合物83-P1(保留時間為9.57分鐘)，化合物83-P2(保留時間為12.52分鐘)。 化合物83-P1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.54 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.54 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.03 (d, J= 1.4 Hz, 3H), 1.26-1.19 (m, 2H), 0.94-0.90 (m, 2H). 化合物83-P2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.55 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.54 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.03 (d, J= 1.5 Hz, 3H), 1.26-1.16(m, , 2H), 0.94-0.89 (m, 2H).
實施例 84 2-{4-[1-( 胺基甲基 )-4- 羰基 -5-[( 三氘甲基 ) 胺基 ]-3H- 吡啶并 [4,3-d][1,2] 二嗪 -7- 基 ]-2- 甲基吡唑 -3- 基 }-4- 氯 -3- 氟 -6-( 四氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 苯 -1- 甲腈 ( 化合物 84) 和 (M/P)-2-{4-[1-( 胺基甲基 )-4- 羰基 -5-[( 三氘甲基 ) 胺基 ]-3H- 吡啶并 [4,3-d][1,2] 二嗪 -7- 基 ]-2- 甲基吡唑 -3- 基 }-4- 氯 -3- 氟 -6-( 四氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 苯 -1- 甲腈 ( 化合物 84-P1/ 化合物 84-P2)
步驟1：4-氯-5-氟-2-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 於4-氯-2,5-二氟苯-1-甲腈(2 g，11.52 mmol)和碳酸鉀(3.98 g，28.81 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)溶液中，加入四氫吡咯(1.446 mL，17.29 mmol)，反應液在75℃攪拌2小時。反應完全，反應液冷卻至室溫，加入水(50 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3×30 mL)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。殘留物用矽膠柱層析純化(Flash Silica 20 g，乙酸乙酯-石油醚，0-10%梯度洗脫)，得到產物淺綠色固體(2.5 g，收率96.56%) ESI-MS m/z：225.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.23 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.69 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 3.62 – 3.54 (m, 4H), 2.09 – 2.00 (m, 4H).
步驟2：4-氯-3-氟-2-碘-6-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 在氬氣保護和-78℃~-60℃條件下，於4-氯-5-氟-2-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈(1 g，4.45 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，加入二異丙基胺基鋰的四氫呋喃溶液(2.671 mL，5.34 mmol)，反應液在此溫度攪拌0.5小時，再加入碘(1.36 g，5.34 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液，反應液升溫至室溫攪拌0.5小時。反應完畢，向反應液中加入飽和氯化鈉溶液(30 mL)，混合液用乙酸乙酯萃取(30 mL×3)，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌(50 mL×3)，有機相無水硫酸鈉乾燥、過濾，然後減壓濃縮殘留物用矽膠柱層析純化(Flash Silica 20 g，乙酸乙酯-石油醚，0-10%梯度洗脫)，得到產物淺綠色固體(1.5 g，收率96.13%)。 ESI-MS m/z：350.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.75 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 3.65 – 3.51 (m, 4H), 2.08 – 1.96 (m, 4H).
步驟3：4-氯-3-氟-2-(2-甲基吡唑-3-基)-6-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 在氮氣保護下，於4-氯-3-氟-2-碘-6-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈(1.5 g，4.28 mmol)、1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.78 g，8.56 mmol)和碳酸鉀(1.77 g，12.84 mmol)的二氧六環(20 mL)和水(2 mL)溶液中，加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(0.35 g，0.43 mmol)，反應液在100℃攪拌12小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~20%，體積比)，得到產物，黃色固體(1.7 g，粗品)。 ESI-MS m/z：305.0 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.83 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 3.64 – 3.60 (m, 4H), 2.08 – 2.03 (m, 4H).
步驟4：4-氯-3-氟-2-(4-碘-2-甲基吡唑-3-基)-6-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 於4-氯-3-氟-2-(2-甲基吡唑-3-基)-6-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈(470 mg，1.54 mmol)和硝酸銀(130.99 mg，0.77 mmol)的乙醇(15 mL)溶液中，加入碘(587.16 mg，2.31 mmol)，反應液在70℃攪拌反應2小時。反應完畢，反應液過濾，濾液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚=0~14%，體積比)，得到產物，黃色固體(200 mg，收率30.11%)。 ESI-MS m/z：430.9 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.68 (s, 1H), 6.88 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.70 – 3.55 (m, 4H), 2.12 – 2.02 (m, 4H).
步驟5：4-氯-3-氟-2-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)吡唑-3-基]-6-(四氫-1 H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 採用前述實施例83步驟2相同的方法得到硼酸酯化合物。 ESI-MS m/z：431.1 [M+1] +。
步驟6：2-甲基丙-2-基({[7-(5-{5-氯-2-氰基-3-[(甲基)胺基乙基]-6-氟苯基}-1-甲基吡唑-4-基)-4-氧代-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-1-基]甲基}胺基)甲酸酯 採用前述實施例83步驟3相同的方法得到偶聯產物。 ESI-MS m/z：611.2 [M+1] +。
步驟7：2-{4-[1-(胺基甲基)-4-羰基-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-7-基]-2-甲基吡唑-3-基}-4-氯-3-氟-6-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈 採用前述實施例83步驟4相同的方法脫掉保護基得到產物。 ESI-MS m/z：511.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.96 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.33 (s, 2H), 7.14 (d, J= 5.0 Hz, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.58 – 3.48 (m, 4H), 1.99 – 1.89 (m, 4H).
步驟8：(M/P)-2-{4-[1-(胺基甲基)-4-羰基-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-7-基]-2-甲基吡唑-3-基}-4-氯-3-氟-6-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈(化合物84-P1和84-P2) 將2-{4-[1-(胺基甲基)-4-羰基-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-7-基]-2-甲基吡唑-3-基}-4-氯-3-氟-6-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-甲腈進一步經過手性製備分離(ChiraChiralCel OD, 250×30mm I.D., 10µm柱，流動相A：CO 2，流動相B：含0.1%氨水的甲醇；梯度：B在流動相中的體積比為35%，洗脫時間：8分鐘)，得到兩個產物，化合物84-P1和化合物84-P2。 化合物84-P1：SFC分析方法，色譜柱ChiralCel OD, 150×4.6mm I.D., 3µm；流動相：A：CO 2，流動相B：含0.05%二乙醇的甲醇；梯度：B在流動相中體積占比為40%；保留時間：2.366分鐘。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.53 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.13 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.58 – 3.48 (m, 4H), 1.99 – 1.88 (m, 4H). 化合物84-P2：SFC分析方法，色譜柱ChiralCel OD, 150×4.6mm I.D., 3µm；流動相：A：CO 2，流動相B：含0.05%二乙醇的甲醇；梯度：B在流動相中體積占比為40%；保留時間：3.00分鐘。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.54 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.13 (d, J= 6.7 Hz, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.57 – 3.47 (m, 4H), 1.98 – 1.88 (m, 4H).
實施例 85 2-{4-[1-( 胺基甲基 )-4- 羰基 -5-[( 三氘基甲基 ) 胺基 ]-3 H- 吡啶并 [4,3- d][1,2] 二嗪 -7- 基 ]-2- 甲基吡唑 -3- 基 }-4- 氯 -6-(3,3- 二氟氮雜環丁 -1- 基 )-3- 氟苯 -1- 甲腈 採用3,3-二氟氮雜環丁烷取代四氫吡咯，運用和實施例84類似的方法，得到目標產物。 ESI-MS m/z：533.1 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ12.67 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.22 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.59 (s, 2H), 4.67-4.58 (m, 4H), 4.09-4.14 (m, 2H), 3.74 (s, 3H).
實施例 86 2-{4-[1-( 胺基甲基 )-4- 羰基 -5-[( 三氘基甲基 ) 胺基 ]-3H- 吡啶并 [4,3-d][1,2] 二嗪 -7- 基 ]-2- 甲基吡唑 -3- 基 }-4-(3- 胺基丙 -1- 炔基 )-6-( 環丙基氧基 )-3- 氟苯 -1- 甲腈
步驟1：6-(環丙氧基)-3-氟-2-(4-碘-2-甲基吡唑-3-基)-4-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-腈 將4-氯-6-(環丙基氧基)-3-氟-2-(4-碘-2-甲基吡唑-3-基)苯-1-甲腈(200 mg，0.48 mmol)，四氫吡咯(0.080 mL，0.96 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(309.50 mg，2.39 mmol)，N-甲基吡咯烷酮(4 mL)加入封管中，升溫至130度，攪拌反應過夜。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10：1，體積比)，得到產物，白色固體(200 mg，90.91%)。 ESI-MS m/z：453 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.63 (s, 1H), 6.58 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.59 (dq, J = 6.8, 3.4 Hz, 4H), 2.07 – 2.04 (m, 4H), 1.01 – 0.78 (m, 4H).
步驟2：6-(環丙氧基)-3-氟-2-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二惡硼烷-2-基)吡唑-3-基]-4-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-腈 將6-(環丙氧基)-3-氟-2-(4-碘-2-甲基吡唑-3-基)-4-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-腈(200 mg，0.44 mmol)，頻那醇硼烷(563.11 mg，4.40 mmol)，三乙胺(0.184 mL，1.33 mmol)溶於二氧六環(12 mL)中，氬氣氛圍下加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(40.49 mg，0.04 mmol)，2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯(42.16 mg，0.09 mmol)，100℃攪拌反應1.0小時。冷卻至室溫，減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1：1，體積比)，得到產物，白色固體(170 mg，收率85.0%)。 ESI-MS m/z：453.1 [M+1] +。
步驟3：2-甲基丙-2-基{[(7-{5-[6-氰基-5-(環丙氧基)-2-氟-3-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯基]-1-甲基吡唑-4-基}-4-氧代-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-1-基)甲基]胺基}甲酸酯 將6-(環丙氧基)-3-氟-2-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二惡硼烷-2-基)吡唑-3-基]-4-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯-1-腈(100 mg，0.22 mmol)，2-甲基丙-2-基[({7-溴-4-氧代-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-1-基}甲基)胺基]甲酸甲酯(85.61 mg，0.22 mmol)，碳酸鉀(61.10 mg，0.44 mmol)溶於二氧六環(10 mL)和水(1 mL)中，氬氣氛圍下加入1,1’-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物(18.10 mg，0.02 mmol)，120℃微波照射反應0.5小時。反應完畢，反應液減壓濃縮，殘留物矽膠柱層析(甲醇/二氯甲烷=0~5%，體積比)，得到產物，黃色固體(90 mg，收率64%)。 ESI-MS m/z：633.3 [M+1] +。
步驟4：2-{4-[1-(胺基甲基)-4-羰基-5-[(三氘基甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-7-基]-2-甲基吡唑-3-基}-4-(3-胺基丙-1-炔基)-6-(環丙氧基)-3-氟苯-1-甲腈 將2-甲基丙-2-基{[(7-{5-[6-氰基-5-(環丙氧基)-2-氟-3-(四氫-1H-吡咯-1-基)苯基]-1-甲基吡唑-4-基}-4-氧代-5-[(三氘甲基)胺基]-3H-吡啶并[4,3-d][1,2]二嗪-1-基)甲基]胺基}甲酸酯(90 mg，0.14 mmol)溶於二氯甲烷(4 mL)中，滴加三氟乙酸(1 mL)，25℃攪拌30分鐘。減壓濃縮後製備高效液相色譜，得到產物，淡黃色固體(70 mg，收率87.3%)。 ESI-MS m/z：533.2 [M+1] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.93 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.36 (s, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.67 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.04 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.56 – 3.45 (m, 4H), 2.04 – 1.80 (m, 4H), 0.88 (dd, J = 6.2, 1.7 Hz, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO- d 6) δ -73.52.
生物測試實施例
測試實施例1：對人結腸癌細胞HCT-116、人結腸癌穩定剔除MTAP蛋白細胞HCT-116-MTAP-KO-1A2的增殖抑制活性
通過PrestoBlue法測定化合物在體外對人結腸癌細胞HCT-116、人結腸癌細胞HCT-116穩定剔除MTAP蛋白的HCT-116-MTAP-KO-1A2的增殖抑制活性。
細胞來源：HCT-116細胞購自中科院細胞所；HCT-116-MTAP-KO-1A2細胞購自康源博創生物科技(北京)有限公司。
HCT-116、HCT-116-MTAP-KO-1A2細胞培養於含10%胎牛血清的RPMI1640完全培養基中。取處於對數生長期HCT-116、HCT-116-MTAP-KO-1A2細胞，按500細胞/135 μL完全培養基/孔的細胞密度，接種在96孔盤中，置於37℃含有5% CO 2的恆溫培養箱中培養24小時。將各化合物事先溶解在二甲基亞碸(DMSO)中配製成10 mM的儲存液，再依次用DMSO、完全培養基稀釋化合物。取出接種細胞的96孔盤，取其中一塊單獨作為無生長對照組(0小時細胞無生長的培養基對照組)；其他96孔盤則每孔加入15 µL的不同濃度各化合物，使其終濃度為10000、2500、625、156.3、39.1、9.8、2.4、0.6、0.15、0.04 nM，每個化合物濃度設置三個複孔，並設陰性對照組(含細胞、未加化合物的培養基對照組)，每個孔中DMSO的濃度均為0.5%。留出的無生長對照組即刻加入PrestoBlue HS細胞活力檢測試劑並進行後續檢測，其他的96孔盤繼續於37℃含有5% CO 2的恆溫培養箱中培養6天再加入PrestoBlue HS細胞活力檢測試劑並進行後續檢測。
加入PrestoBlue HS細胞活力檢測試劑及後續檢測步驟如下：從CO 2恆溫培養箱中取出96孔細胞培養盤，每孔加入PrestoBlue HS細胞活力檢測試劑(貨號：P50201)15 μL，繼續於37℃含有5% CO 2的恆溫培養箱中培育3小時。取出96孔細胞培養盤，在酶素標示讀取儀560 nm激發波長、590 nm發射波長處測相對螢光強度(RFU)。按以下公式計算各濃度化合物的細胞抑制率。
使用GraphPad Prism 8.3軟體分析數據，利用非線性S曲線回歸來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC 50值，結果見表1。
表1
化合物 HCT-116 IC 50(nM) HCT-116-MTAP-KO-1A2 IC 50(nM) 選擇性
MRTX1719 D B ＞20
化合物1 D A ＞20
化合物4 C A ＞20
化合物15 D B ＞20
化合物17 D B ＞20
化合物19 C A ＞20
化合物21 D B ＞20
化合物26 C A ＞20
化合物27 C A ＞20
化合物28 C A ＞20
化合物28-P1 C A ＞20
化合物28-P2 D B ＞20
化合物29 C A ＞20
化合物34 D B ＞20
化合物35 D B ＞20
化合物36 C A ＞20
化合物41 D B ＞20
化合物42 D B ＞20
化合物43 C A ＞20
化合物44 D B ＞20
化合物45 D A ＞20
化合物46 C A ＞20
化合物47 D B ＞20
化合物48 D B ＞20
化合物50 D A ＞20
化合物52 D B ＞20
化合物53 C A ＞20
化合物54 D A ＞20
化合物54-P1 D B ＞20
化合物54-P2 C A ＞20
化合物55 D B ＞20
化合物56 D B ＞20
化合物57 D B ＞20
化合物58 D B ＞20
化合物59 D B ＞20
化合物60 D A ＞20
化合物61 D B ＞20
化合物62 D A ＞20
化合物63 D B ＞20
化合物65 D B ＞20
化合物66 D B ＞20
化合物67 C A ＞20
化合物68 C A ＞20
化合物71 D A ＞20
化合物72 C A ＞20
化合物73 D B ＞20
化合物74 C A ＞20
化合物74-P1 D A ＞20
化合物74-P2 D A ＞20
化合物76 D B ＞20
化合物77 D B ＞20
化合物78 C A ＞20
化合物78-P2 C A ＞20
化合物79 C A ＞20
化合物80 D A ＞20
化合物81 D B ＞20
化合物82 D A ＞20
化合物83 D A ＞20
化合物83-P1 C A ＞20
化合物83-P2 C A ＞20
化合物84 D A ＞20
化合物84-P1 D B ＞20
化合物84-P2 C A ＞20
化合物85 D A ＞20
化合物86 C A ＞20
其中MRTX1719為陽性對照化合物(參考文獻J. Med. Chem. 2022, 65, 1749–1766中的方法製備)，A表示＜25 nM，B表示25~200 nM，C表示201 nM~1 µM，D表示＞1 µM，選擇性數值為HCT-116細胞IC 50值與HCT-116-MTAP-KO-1A2細胞IC 50值的比值。
結果表明，本發明的化合物對人結腸癌穩定剔除MTAP蛋白細胞HCT-116-MTAP-KO-1A2表現出良好的增殖抑制活性和選擇性。

Claims (23)

  1. 一種如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， 其中，X 1和X 2各自獨立地為CR 5或N； 各R 5獨立地為氘、氫、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基； R 1為3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、-N(R 6) 2、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、C 2- 6炔基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、4~10元雜環基、-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述4~10元雜環基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、-NH 2或-OH；所述4~10元雜環基和鹵素取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； 當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氫、氰基、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、羥基、鹵素、氰基、C 1- 6烷基、C 1- 6烷氧基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基、4~10元雜環基或5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基和5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氘、氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b、-C(=O)-O-C 6- 10芳基、-C(=O)-C 1- 6烷基或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氘、氫或C 1-20烷基； 各R 3c獨立地為氘、氫、C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、3~8元環烷基、4~10元雜環基或C 6-10芳基；所述4~10元雜環基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 4a為氘、H或3~8元環烷基； m為0~10的整數； Y、Z 1a、Z 1b、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； L、U 1a和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
  2. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的任一個， (1)所述的如式I所示的化合物不為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； (2)當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為氫； 或者，所述的如式I所示的化合物為 。
  3. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的任一個： (1)當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、-NH 2或-OH； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基； (2)當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、或被一個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基； (3)R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為-Z 1d-11~20元雜芳基，所述-Z 1d-11~20元雜芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-或(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-； Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
  4. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)當X 1為CR 5且X 2為N、X 1為N且X 2為CR 5、X 1為N且X 2為N、或X 1和X 2各自獨立地為CR 5且R 5為氘、鹵素、-N(R 6) 2、C 1- 6烷基或C 1- 6烷氧基時，R 2為氰基； (2)當X 1和X 2各自獨立地為CH，且R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； Z 1a、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基； (3)R 1a、R 1b、R 1c和R 1d各自獨立地為-Z 1d-11~20元雜芳基，所述-Z 1d-11~20元雜芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1- 6烷基、C 1- 6羥烷基、C 1- 6烷氧基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-、-S-、-NR 6-、-NR 6C(=O)-、-SO-、-SO 2-、-CH(OH)-或-C(=O)-； U 1b獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 各R 6獨立地為氫或C 1- 6烷基。
  5. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)R 1-a中，所述的-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基為環丙基、環丁基、環戊基； (2)R 2中，所述的3~8元環烷基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、和被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基獨立地為環丙基、環丁基、環戊基； (3)R 2b中，所述的3~8元環烷基各自獨立地為環丙基、環丁基、環戊基； (4)R 2j中，所述的3~8元環烷基各自獨立地為環丙基、環丁基、環戊基； (5)R 4a中，所述的3~8元環烷基為環丙基、環丁基、環戊基； (6)R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2a、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n和R 3c中，所述的3~8元環烷基、被一個或多個R 1a取代的3~8元環烷基裡的3~8元環烷基、和-Z 1b-U 1a-3~8元環烷基裡的3~8元環烷基獨立地為環丙基、環丁基、環戊基； (7)R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2、R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n和R 3c中，所述的4~10元雜環基、被一個或多個R 1b取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、被一個或多個R 2d取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基、和被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基裡的4~10元雜環基獨立地為4~6元雜環基，例如哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基； (8)R 1d中，所述的-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基獨立地為苯基或萘基； (9)R 1、R 1a、R 1b、R 1c、R 2、R 3、R 4和R 3c中，所述的C 6- 10芳基、被一個或多個R 1c取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、和被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基獨立地為苯基或萘基； (10)R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基；所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 ； (11)R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地具有2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N； (12)R 2中，所述的5~10元雜芳基、被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基；所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 ； (13)R 2中，所述的5~10元雜芳基、被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地具有2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N； (14)R 2a中，所述的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基；所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 ； (15)R 2a中，所述的5~10元雜芳基獨立地具有2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N； (16)R 2i中，所述的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基；所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 ； (17)R 2i中，所述的5~10元雜芳基獨立地具有2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N； (18)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n中，所述的5~10元雜芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基或8~10元稠雜芳基；所述的5~6元單雜芳基可獨立地為吡唑或三氮唑，例如 、 、 、 或 ； (19)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m和R 2n中，所述的5~10元雜芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地具有2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N； (20)R 1-a中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘； (21)R 2中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘； (22)R 2c中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘； (23)R 2g中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘； (24)R 2k中，所述的鹵素為氟、氯、溴或碘； (25)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 2a、R 2b、R 2d、R 2e、R 2f、R 2h、R 2i、R 2j、R 2l、R 2m、R 2n和R 5中，所述的鹵素獨立地為氟、氯、溴或碘； (26)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d和R 1-a中，所述的C 1- 6羥烷基獨立地為C 1- 4羥烷基，例如-CH 2OH、-CH 2CH 2OH、-CH(CH 3)OH或-CH(CH 3)CH 2OH； (27)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d、R 1-a、R 2、R 2a、R 2b、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、、R 2n和R 5中，所述的C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、鹵代C 1- 6烷氧基裡的C 1- 6烷氧基和氘代C 1- 6烷氧基裡的C 1- 6烷氧基獨立地為甲氧基、-OCH 2CH 3、-O(CH 2) 2CH 3、-OCH(CH 3) 2、-O(CH 2) 3CH 3、-OCH 2CH(CH 3) 2、-OCHCH 3CH 2CH 3或-OC(CH 3) 3； (28)R 2中，所述的C 2-6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2-6烯基裡的C 2-6烯基、和被一個或多個R 2i取代的C 2-6烯基裡的C 2-6烯基獨立地為C 2-4烯基，例如乙烯基、 、 、 、 、 或 ； (29)R 3c中，所述的C 2-6烯基獨立地為C 2-4烯基，例如乙烯基、 、 、 、 、 或 ； (30)R 2中，所述的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基裡的C 2- 6炔基、和被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基裡的C 2- 6炔基獨立地為C 2- 4炔基，例如乙炔基、 、 或 ； (31)R 1a、R 1b、R 1c、R 1d和R 3c中，所述的C 2- 6炔基獨立地為C 2- 4炔基，例如乙炔基、 、 或 ； (32)R 1d中，所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (33)R 2中，所述的C 1- 6烷基、和被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基裡的C 1-6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (34)R 2b中，所述的C 1- 6烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (35)R 2j中，所述的C 1- 6烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (36)R 1a、R 1b、R 1c、R 1-a、R 2a、R 2c、R 2d、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 3c、R 5和R 6中，所述的C 1- 6烷基、-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-C(=O)-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (37)R 1-a和R 3c中，所述的鹵代C 1-6烷基和-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基裡的鹵代C 1- 6烷基獨立地為鹵代C 1- 4烷基，例如-CF 3、-CHF 2或-CH 2CF 3； (38)R 2中，所述的鹵代C 1- 6烷氧基為鹵代C 1- 4烷氧基，例如-OCF 3、 、 或 ； (39)R 2中，所述的氘代C 1- 6烷氧基為氘代C 1- 4烷氧基，例如-OCD 3或-OCD 2CD 3； (40)R 3a和R 3b中，所述的C 1-20烷基獨立地為C 1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基； (41)L中，所述的C 1- 3亞烷基為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-； (42)U 1a中，所述的C 1- 3亞烷基為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-； (43)U 1b中，所述的C 1- 3亞烷基為亞甲基、-CH 2CH 2-、-CH(CH 3)-或-CH(CH 3)CH 2-。
  6. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基； (2)各R 1d獨立為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； (3)各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； (4)當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基； (5)當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為氫、鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基； (6)R 2a、R 2b、R 2c、R 2f、R 2g、R 2i、R 2j、R 2k、R 2m和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基； (7)R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； (8)R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； (9)各R 3c獨立地為氫； (10)R 4a為H或3~8元環烷基； (11)m為1、2或3； (12)各R 5獨立地為氫、鹵素或-N(R 6) 2； (13)Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-O-或-S-； (14)L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； (15)各R 6獨立地為氫。
  7. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)R 1中，所述的5~10元雜芳基、和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地為5~6元單雜芳基時，所述的5~6元單雜芳基獨立地為吡唑基或咪唑基，例如 、 、 、 、 、 或 ； (2)R 1d中，所述的-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基為8~10元稠雜芳基時，所述的8~10元稠雜芳基獨立地為 、 或 ； (3)R 1d中，所述的-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基獨立地具有1、2或3個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N和O； (4)R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地為11~16元雜芳基，例如12元雜芳基、13元雜芳基或15元雜芳基，又例如 、 或 ； (5)R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地具有2、3或4個雜原子；所述的雜原子可獨立地選自N和O； (6)各R 1d獨立為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基、或-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；例如各R 1d獨立地為被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； (7)各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； (8)當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為鹵素、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為氫； (9)Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H。
  8. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)R 1-a中，所述的4~10元雜環基和鹵素取代的4~10元雜環基中的4~10元雜環基為4~6元雜環基，例如氧雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基； (2)R 1d中，所述的-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基獨立地為11~16元雜芳基，例如12元雜芳基、13元雜芳基、14元雜芳基或15元雜芳基，又例如 、 、 、 、 、 、 、 或 ； (3)R 1-a中，所述的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-SO 2-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、鹵代C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基-O-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-O-裡的C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、(C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、氘代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、鹵代C 1- 6烷基-NH-C(=O)-裡的C 1- 6烷基、(氘代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基和(鹵代C 1- 6烷基) 2N-C(=O)-裡的C 1- 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基。
  9. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個： (1)各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH，優選地，各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基(=O)、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； (2)Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-、-S-或-C(=O)-，R 6為H； (3)各R 1d獨立地為被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 。
  10. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia、如式Ib或如式Ic所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ； 優選地，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式II-a、如式II-b或如式II-c所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 、 或 ； 其中，R 1、R 2、R 3、R 4、R 4a、R 1d、Y和L的定義如請求項1至3中任一項所述。
  11. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式Ia’、如式Ib’或如式Ic’所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， ， ， ， 其中，R 1d’為-Z 1a-C 1- 6烷基，其中所述的-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基任選地被一個或多個R 1-a取代； 環B為 、 或 ； (1)式Ia’中，當R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、被一個或多個R 2e取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； (2)式Ia’中，R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； (3)式Ib’和式Ic’中，R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、被一個或多個R 2h取代的C 1-6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、4~10元雜環基、被一個或多個R 2l取代的4~10元雜環基、C 6- 10芳基、被一個或多個R 2m取代的C 6- 10芳基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基時，或者Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵，R 2為氫時， R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基；所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； Z 1a、Z 1c和Z 1d各自獨立地為化學鍵； R 1-a、R 2a、R 2b、R 2c、R 2e、R 2f、R 2g、R 2h、R 2i、R 2j、R 2k、R 2l、R 2m、R 2n、R 3、R 4、R 4a、Y和L的定義如請求項1或2所述。
  12. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的任一個， (1)X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-5~10元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-或4~10元雜環基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、氘代C 1- 6烷氧基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2f取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H、C 1- 6烷基或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被一個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b、R 2c和R 2f各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為H或3~8元環烷基； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基； (2)X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為5~10元雜芳基、或被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基(=O)、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-C(=O)-O-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、被一個或多個R 2i取代的C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基、被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基、5~10元雜芳基、或被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基和被一個或多個R 2n取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g、R 2i、R 2j、R 2k和R 2n各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； m為1、2或3； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H、鹵素或-N(R 6) 2； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e、Z 1d和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (3)X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基或-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基和-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基； R 2為鹵代C 1- 6烷氧基、被一個或多個R 2a取代的C 2- 6烯基、被一個或多個R 2b取代的C 2- 6炔基、被一個或多個R 2c取代的3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 或者，當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ； R 2a、R 2b和R 2c各自獨立地為鹵素、-N(R 6) 2、3~8元環烷基或5~10元雜芳基；所述5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S； R 3和R 4各自獨立地為氫或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； 各R 3c獨立地為氫； m為1； R 4a為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b為化學鍵或C 1- 3亞烷基； (4)X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、C 1- 6烷基-NH-C(=O)-、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為鹵素、氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基、被一個或多個R 2j取代的C 2- 6炔基、3~8元環烷基或被一個或多個R 2k取代的3~8元環烷基； R 2g、R 2j、和R 2k各自獨立地為氘、鹵素、C 1- 6烷基或-N(R 6) 2； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； R 4a為氫或3~8元環烷基； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d 、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； 各R 6獨立地為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵或C 1- 3亞烷基； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (5)X 1和X 2各自獨立地為CH； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 當R 2為H或氘代C 1- 6烷基時，R 1為至少被兩個R 1d取代的5~10元雜芳基，其中至少一個R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基，至少一個R 1d獨立地為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 或被1個或多個R 1-a取代的 ； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、C 1-6烷基或-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為H； Y、Z 1a和Z 1e各自獨立地為化學鍵或-NR 6-； R 6為H； L為化學鍵； (6)X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基、-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-或4~10元雜環基； R 2為氰基、C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基、C 2- 6烯基、C 2- 6炔基或3~8元環烷基；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g獨立地為氘或鹵素； R 3和R 4各自獨立地為氫、-C(=O)-O-CH(R 3a)-O-C(O)-R 3b或-(CH 2)m-OP(=O)(OR 3c) 2； R 3a和R 3b各自獨立地為氫或C 1- 6烷基； 各R 3c獨立地為氫； R 4a為氫； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-、-O-或-C(=O)-； R 6為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (7)X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5； R 1為被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基；所述被一個或多個R 1d取代的5~10元雜芳基裡的5~10元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2或3個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1d獨立地為-Z 1a-C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基或-Z 1d-11~20元雜芳基，其中所述-Z 1a-C 1- 6烷基裡的C 1- 6烷基、-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基和-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基各自任選地被一個或多個R 1-a取代；所述-Z 1d-11~20元雜芳基裡的11~20元雜芳基中的雜原子個數獨立地為1、2、3或4個，雜原子各自獨立地選自N、O和S；當取代基為多個時，相同或不同； 各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、氧代基、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基、-NH 2或-OH； R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；當取代基為多個時，相同或不同； R 2g獨立地為氘； R 3和R 4各自獨立地為氫； R 4a為氫； 各R 5獨立地為H； Y、Z 1a、Z 1c、Z 1d、Z 1e和Z 1f各自獨立地為化學鍵、-NR 6-或-O-； R 6為H； L和U 1b各自獨立地為化學鍵。
  13. 如請求項1或2所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-a、如式III-b、如式III-c或如式III-d所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 、 、 或 ， (1)式III-a中，各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為鹵代C 1- 6烷氧基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為2、3、4或5； 例如，各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為鹵代C 1- 6烷氧基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為4； (2)式III-b中，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為H、C 1-6烷基或氘代C 1-6烷基；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基；R 2為H；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵；L為化學鍵； (3)式III-c中，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； 例如，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氰基、鹵素或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，其中R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (4)式III-d中，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、或被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，R 1d為被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1f為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵。
  14. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的任一個， (1)所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-c所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， , 其中，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氘、氰基、鹵素、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； 例如，R 1d為-Z 1c-C 6- 10芳基，其中所述-Z 1c-C 6- 10芳基裡的C 6- 10芳基任選地被一個或多個R 1-a取代；各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、4~10元雜環基、鹵素取代的4~10元雜環基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為C 1-6烷基、被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基或3~8元環烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵、-NR 6-或-O-，R 6為H；Z 1c為化學鍵；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 或者，Y為-NR 6-，其中R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (2)所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽為如式III-d所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽， 其中，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-O-C(=O)-、4~10元雜環基或-OH；R 2為C 1-6烷基、或被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，R 1d為 、被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被一個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、被1個或多個R 1-a取代的 、 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、氘代C 1- 6烷基、C 1- 6烷基-C(=O)-、C 1- 6烷基-SO 2-、C 1- 6烷基-OC(=O)-、4~10元雜環基或-OH；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘或鹵素；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為化學鍵或-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； 又例如，R 1d為被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、被1個或多個R 1-a取代的 、或被1個或多個R 1-a取代的 ；各R 1-a獨立地為氘、氰基、氧代基、鹵素、C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、C 1- 6烷基-OC(=O)-或C 1- 6烷基-SO 2-；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵或-C(=O)-；L和U 1b獨立地為化學鍵； (3)所述的如式I所示的化合物為如式III-e-1或式III-e-2所示的化合物， 或 , 其中，各R 1-a獨立地為氰基、鹵素、-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基、4~10元雜環基或鹵素取代的4~10元雜環基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1f為-O-；L和U 1b獨立地為化學鍵；n為4； (4)所述的如式I所示的化合物為如式III-f-1或式III-f-2所示的化合物， 或 ， 其中， 表示單鍵或雙鍵； 當 表示雙鍵時，W為CR 1-a；當 表示單鍵時，W為C=O、CH 2或NR 1-a； 各R 1-a獨立地為C 1-6烷基、-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基或-Z 1f-U 1b-3~8元環烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H或3~8元環烷基；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和Z 1f獨立地為化學鍵；L和U 1b獨立地為化學鍵； 例如，各R 1-a獨立地為C 1-6烷基或-Z 1e-鹵代C 1- 6烷基；R 2為被一個或多個R 2g取代的C 1-6烷基；各R 2g獨立地為氘；R 3和R 4各自獨立地為氫；R 4a為H；Y為-NR 6-，其中R 6為H；Z 1e和L獨立地為化學鍵。
  15. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個， (1)X 1和X 2各自獨立地為CH或N； (2)R 1為 、 、 、 或 ； (3)當X 1和X 2各自獨立地為CH時，R 2為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、-OCD 3或 ； (4)當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為H、F、Cl、-CF 3、-CH 2CF 3、 、 、 、 、 、 、-CD 3、 、 、 、 或 ； (5)R 3為H、 或 ； (6)R 4為H或 ； (7)R 4a為H或 ； (8)Y為化學鍵或-O-； (9)L為化學鍵或C 1- 3亞烷基； (10)各R 5獨立地為H。
  16. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽滿足下述條件中的一個或多個， (1)R 1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； (2)當X 1為CR 5且X 2為N、或X 1為N且X 2為CR 5時，R 2為三氮唑基、吡唑基、-CH 3、氰基、 、 、-CH 2CHF 2、-CH 2CD 3、-CD 2CD 3或-CD 2CH 3； 或者，Y為-NR 6-，R 6為H，L為化學鍵時，R 2為H； (3)Y為-NR 6-，其中R 6為H。
  17. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，R 1為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  18. 如請求項1所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，其中，所述的如式I所示的化合物選自如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  19. 一種藥物組合物，其包括如請求項1至18中任一項所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽，以及至少一種藥用輔料。
  20. 一種如請求項1至18中任一項所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如請求項19所述的藥物組合物在製備PRMT5抑制劑中的應用，例如在製備PRMT5·MTA抑制劑中的應用。
  21. 一種如請求項1至18中任一項所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或如請求項19所述的藥物組合物在製備藥物中的應用，例如在製備治療和/或預防癌症藥物中的應用。
  22. 如請求項21所述的應用，其中，所述的應用滿足下述條件中的一個或多個： (1)所述的癌症為MTAP相關/介導的癌症，優選地，所述的MTAP相關/介導的癌症為頭頸部癌症、呼吸系統癌症、消化系統癌症、泌尿系統癌症、骨癌、婦科癌症、血液系統癌症、黑色素瘤或皮膚癌，更優選為淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、結直腸癌、結腸癌、直腸癌、白血病、膠質母細胞瘤、前列腺癌或卵巢癌； (2)所述的如式I所示的化合物、其立體異構體、其互變異構體或其藥學上可接受的鹽、或所述的藥物組合物為治療有效量。
  23. 一種如下所示的化合物， 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
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