TW202337460A - 多醯胺類化合物、其製備方法及其醫藥用途 - Google Patents

多醯胺類化合物、其製備方法及其醫藥用途 Download PDF

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Abstract

本發明涉及醫藥領域，具體涉及式IA、IB和IC所示的合成多醯胺類化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構物和包含其的組合物，其製備方法，以及在醫藥領域的應用。

Description

多醯胺類化合物、其製備方法及其醫藥用途
本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種合成多醯胺類化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構物和包含其的組合物，以及在醫藥領域的應用。
阿片受體是一類重要的G蛋白偶聯受體，是內源性阿片肽及阿片類藥物結合的靶點，阿片受體啟動後對神經系統免疫及內分泌系統具有調節作用，阿片類藥物是目前最強且常用的中樞鎮痛藥。中樞神經系統中存在的阿片受體包括μ、δ、κ受體等。
κ阿片樣物質受體(κ-opioid receptor，KOR)由380個胺基酸組成，在感覺神經元、背根神經節細胞和初級傳入神經元末梢中均有表達，參與痛覺、神經內分泌、情感行為和認知等重要的生理活動。
KOR激動劑作為藥物在醫藥行業具有良好的應用前景。例如，CN108290926A公開了一類可作為KOR激動劑的苯基丙醯胺類衍生物，CN 101627049A也公開了一類可作為KOR激動劑的合成肽醯胺，其中化合物D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-[ω(4-胺基哌啶-4-羧酸)]-OH(研發代號CR845)已進入臨床研究。
雖然現有技術中已經存在一些KOR激動劑，但是仍然需要具有改善的活性和/或成藥性的新型KOR激動劑。
本發明提供一種新κ阿片樣物質受體(KOR受體)激動劑化合物，其令人驚奇地表現出優異的效果和作用。具體地，這類新型含有醯胺鍵的化合物不僅具有優異的KOR受體激動效能(對κ阿片樣物質受體的高親和力)，還具有非常良好的親水能力和由此更小的穿透血腦屏障以及更低的進入腦部的能力。在一些實施方式中，本發明的化合物還具有與μ和δ阿片樣物質受體相比，對於κ阿片樣物質受體更高的選擇性。在一些實施方式中，本發明的化合物還具有更低的成癮性、更好的物理化學性質(例如溶解度、物理和/或化學穩定性)、改善的藥物代謝動力學性質(例如對細胞色素P 450同工酶較低的抑制、改善的生物利用度、合適的半衰期和作用持續時間)、改善的安全性(較低的毒性和/或較少的副作用(如對中樞神經系統的副作用、呼吸抑制、鎮靜、致幻、抗利尿、噁心、便秘、依賴等))、良好的患者順應性，和/或較不易產生耐受性等更優異的成藥性質。在一些實施方式中，本發明的化合物具有改善的安全性，即具有較低的急性毒性和心臟毒性。在一些實施方式中，本發明的化合物具有改善的安全窗(例如具有較大的安全給藥劑量範圍，或者在相同劑量下出現副作用的可能性更小)。在一些實施方式中，本發明的化合物具有改善的藥物代謝動力學性質(例如改善的生物利用度和更長的半衰期等)。
本發明的一方面提供一種式IA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， R 1A為H或-COOH，較佳為H，R 2A為-NR aAC(=O)OR bA或-NR aAS(=O) 2OR bA，較佳為-NR aAC(=O)OR bA，其中R aA為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基取代的C 1-6烷基，R bA選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R bA基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eA和R fA各自獨立地為-(CH 2) n1A-和-(CH 2) n1A’-，n1A和n1A’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1A和n1A’不同時為0，W A選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 5A-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 5A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3； 或者R 1A和R 2A連同其連接的碳原子形成任選取代的9-10員雙環部分，較佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 ， 當Q 1A-Q 4A中的任意一個為N時，其餘為C，或Q 1A-Q 4A均為C； W 1A和W 2A各自獨立地為-C(=O)-NH-、-NH-C(=O)-、-S(=O) 2-NH-、-NH-S(=O) 2-、-S-、-O-、-NR 6A-、-NR 6A-CH 2-、被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-、或不存在，其中R 6A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-；較佳W 1A和W 2A不能同時不存在， W 3A為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-， n2A選自0、1、2和3， 更佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： ，更佳為選自 ，再更佳為選自 ； R 3A選自H或-(CH 2) mANR cAR dA； R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基； R 4A選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基； mA和nA各自獨立地為0、1、2、3、4或5。
本發明的又一方面提供一種製備本發明化合物的方法，其選自以下方法： 方法一： 方法一包括以下步驟： ， 方法二： 方法二包括以下步驟： ， 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’ 為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如前所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
本發明還提供一種如下通式所示的化合物、其立體異構物或其鹽， 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如前所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
本發明的一方面提供一種式IB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， R 1B選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，較佳為選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)，更佳為選自C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 2B和R 3B各自獨立地選自H、C 1-6烷基(例如甲基、異丙基)、脒基、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)； R 4B選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基； mB和nB各自獨立地為0、1、2、3、4或5，例如mB為3，和/或nB為0。
本發明的又一方面提供一種製備本發明化合物的方法，包括以下步驟： 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如前所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基或乙氧羰基。
本發明的又一方面提供一種式iB-1的化合物、其立體異構物或其鹽， 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如前所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基或乙氧羰基。
本發明的一方面提供一種式IC所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， 環A為C 3-8環烷基 、C 6-14芳基或5-14員雜芳基，較佳為苯基； Y選自CH或N； G選自-S-、-O-、-CR 4CR 5C-、-NR 6C-、-S(=O) 2-、-S(=O)(=NR 6C’)-、 ，較佳為-O-、-CR 4CR 5C-、-NR 6C-、-S(=O) 2-、-S(=O)(=NR 6C’)-、 ； R 1C選自H或-(CH 2) tNR aCR bC； R 2C選自H、胺基、羥基、C 1-6烷基、C 1-6烷基胺基、C 1-6胺基烷基，其中的烷基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 3C在Y為CH時，選自H、羥基、C 1-6烷基、3-8員雜環基、C 1-6烷氧基，且在Y為N時，選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基-(CH 2) mC-、3-8員雜環基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、-(CH 2) mCNR 10R 11，其中的烷基、環烷基、雜環基、烷氧基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基胺基的基團取代； R 4C和R 5C各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基-O-、羥基、-C(O)OR 7、-NR 8R 9、-NR cCC(O)NR 8R 9、C 1-6烷基胺基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、鹵素、腈基、-NR cCS(=O) 2NR 8R 9、-NR cCC(O)OR dC、-NR cCS(=O) 2OR dC、-NR cCC(O)R 7’、-NH(CH 2) mCNR 8R 9，其中所述的烷基、雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； 或者CR 4CR 5C形成3-8員雜環或9-10員雙環部分，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 、 ， 當Q 1C-Q 4C中的任意一個為N時，其餘為C，或Q 1C-Q 4C均為C； W 1C和W 2C各自獨立地為-C(=O)-NH-，-NH-C(=O)-，-S(=O) 2-NH-，-NH-S(=O) 2-，-S-，-O-，-NR 12-，-NR 12-CH 2-，被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-；較佳W 1C和W 2C不能同時不存在， W 3C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在；較佳為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-， W 4C和W 5C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在， n2C選自0、1、2和3， 更佳地，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： ，更佳為選自 ； R aC和R bC各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基； R cC為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基取代的C 1-6烷基， R dC選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R dC基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eC和R fC各自獨立地為-(CH 2) n1C-和-(CH 2) n1C’-，n1C和n1C’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1C和n1C’不同時為0；W C選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 12-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-，n3C選自1、2和3； R 6C和R 6C’獨立地選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基、C 1-6烷基-S(=O) 2-、C 1-6烷氧基羰基、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 7和R 7’各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基、C 6-14芳基和5-14員雜芳基，其中所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 8和R 9各自獨立地為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基， R 10和R 11各自獨立地為H或C 1-6烷基，或者R 10和R 11連同其連接的氮原子形成3-8員雜環基，其中的烷基和雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； p和t各自獨立地選自0、1、2、3、4或5； mC在每次出現時獨立地選自1、2、3、4； R 0選自H、鹵素、NO 2、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基。
本發明的又一方面提供一種製備本發明化合物的方法，其選自以下方法： 方法一： 方法一包括以下步驟： 方法二： 方法二包括以下步驟： 較佳地，式iiC-2化合物由選自以下的方法製備： 方法三： 方法三包括以下步驟：式iiC-4-a所示的化合物與式iiC-5-a所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法四： 方法四包括以下步驟：式iiC-4-b所示的化合物與式iiC-5-b所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法五： 方法五包括以下步驟：式iiC-4-c所示的化合物與式iiC-5-c所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法六： 方法六包括以下步驟：式iiC-4-d所示的化合物與式iiC-5-d所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 較佳地，所述式iC-2為 ； 較佳地，所述iiC-2選自： 、 、 、 、 、 ， 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’和R 1C’’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’和R 2C’’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’和R 3C’’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，Rw為羧基保護基，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如前所定義，Rs、Rt和Ru各自獨立地選自H和胺基保護基； 較佳地，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基；所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
本發明的又一方面提供一種如下通式所示的化合物、其立體異構物或其鹽， 較佳地，式iiC-2-X選自： 、 、 、 、 、 ， 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如前所定義，Rs、Rt各自獨立地選自H和胺基保護基，Rv選自H和羧基保護基； 較佳地，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基；所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
本發明的另一方面提供藥物組合物，其包含預防或治療有效量的本發明的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽、和藥學可接受的載體或賦形劑、以及任選的其它治療劑。
本發明的另一方面提供本發明的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽或藥物組合物在製備用於激動κ阿片樣物質受體的藥物中的用途。
本發明的另一方面提供用於預防和/或治療由κ阿片樣物質受體介導的相關疾病的方法，包括施用有效量的本發明的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽或藥物組合物。
本發明的另一方面提供本發明的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽或藥物組合物在製備藥物中的用途，特別地所述藥物用於預防和/或治療由κ阿片樣物質受體介導的相關疾病。
本發明中由κ阿片樣物質受體介導的相關疾病選自疼痛、炎症、瘙癢、水腫、低鈉血症、低鉀血症、腸梗阻、咳嗽和青光眼，較佳疼痛。本發明中的疼痛選自神經性疼痛、軀幹痛、內臟痛、皮膚痛、關節炎疼痛、腎結石疼痛、子宮痙攣、痛經、子宮內膜異位症、消化不良、外科手術後疼痛、醫療處理後疼痛、眼部疼痛、耳炎疼痛、爆發性癌症疼痛和GI紊亂相關的疼痛。
術語
除非另外定義，所有本文使用的科技術語都具有與要求保護的主題所屬技術領域中具有通常知識者一般理解相同的含義。
除非另有說明，本發明採用本領域技術範圍內的質譜、NMR、HPLC、蛋白質化學、生物化學、重組DNA技術和藥理學等常規方法。除非提供具體的定義，否則與本文描述的分析化學、合成有機化學、以及醫學和藥物化學等化學上相關的命名和實驗室操作和技術，是所屬技術領域中具有通常知識者已知的。一般而言，前述技術和步驟可以通過本領域眾所周知的和在各種一般文獻和更具體文獻中描述的常規方法來實施，這些文獻在本說明書中被引用和討論。
術語「烷基」是指脂肪族烴基團，可以是支鏈或直鏈的烷基。根據結構，烷基可以是單價基團或雙價基團(即亞烷基)。在本發明中，烷基較佳是具有1-8個碳原子的烷基，更佳具有1-6個碳原子的「低級烷基」，甚至更佳具有1-4個碳原子的烷基。典型的烷基包括但不限於甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基等。應理解，本文提到的「烷基」包括可能存在的所有構型和構象的該烷基，例如本文提到的「丙基」包括正丙基和異丙基，「丁基」包括正丁基、異丁基和叔丁基，「戊基」包括正戊基、異丙基、新戊基、叔戊基、和戊-3-基等。在一些實施方式中，烷基任選地被1或多個(諸如1至3個)適合的取代基取代。
術語「芳基」具有共軛π電子系統的全碳單環或多環芳族基團。例如，本文所使用的術語「C 6-14芳基」是指含有6-14個碳原子的芳族基團。在一些實施方式中，C 6-14芳基較佳為C 6-10芳基。芳基基團的實例可以包括苯基、萘基、蒽等等。在一些實施方式中，芳基任選地被1或多個(諸如1至3個)適合的取代基取代。
術語「雜芳基」指含有一個或多個相同或不同雜原子的單環或多環芳族基團，所述雜原子例如是氧、氮或硫。例如，本文所使用的術語「5-14員雜芳基」是指具有5-14個環原子的雜芳基。進一步地，所述雜芳基是指單環、雙環或三環芳族基團，其具有5、6、8、9、10、11、12、13或14個環原子，特別是1或2或3或4或5或6或9或10個碳原子，且其包含至少一個可以相同或不同的雜原子，所述雜原子例如是氧、氮或硫；並且，所述雜芳基可為苯並稠合的基團。特別地，所述雜芳基選自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等，以及它們的苯並衍生物；或吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它們的苯並衍生物。在一些實施方式中，雜芳基任選地被1或多個(諸如1至3個)適合的取代基取代。
術語「環烷基」指飽和或不飽和的非芳族單環或多環(諸如雙環)烴環基(例如單環，諸如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、環壬基，或雙環，包括螺環、稠合或橋連系統，諸如雙環[1.1.1]戊基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[3.2.1]辛基或雙環[5.2.0]壬基、十氫化萘基等)。環烷基的非限制性實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基等。在一些實施方式中，所述環烷基任選地被1或多個(諸如1至3個)適合的取代基取代。
術語「雜環基」指飽和或不飽和的單環或多環基團，其在環中具有例如3-12個環原子或3-8個環原子，環原子包括碳原子及一個或多個(例如一個、兩個、三個或四個)選自氮、氧、硫的雜原子；所述雜環基可以通過所述碳原子中的任一個或氮原子(如果存在的話)與分子的其餘部分連接。所述雜環基中的碳原子可以任選地被側氧基(＝O)取代。環的硫原子可以任選地被氧化成S-氧化物，例如SO、SO 2。環的氮原子可以任選地被氧化成N-氧化合物。例如，3-8員雜環基為具有3-8個包括碳原子及雜原子的環原子的基團，包括但不限於環氧乙烷基、氮丙啶基、氮雜環丁基、氧雜環丁基、硫雜環丁基、四氫呋喃基、二氧雜環戊烯基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基、四氫吡喃基、哌啶基、嗎啉基、硫嗎啉基、哌嗪基、嘧啶二酮基、2-側氧基吡咯烷基、3,5-二側氧基哌啶基、環丁碸基、1,1-二側氧基硫代嗎啉基、1,1-二側氧基四氫噻喃基。在一些實施方式中，所述雜環基任選地被1或多個(諸如1至3個)適合的取代基取代。在一些實施方式中，3-8員雜環基為含有一個選自氧、氮和硫的雜原子的3-8員雜環基；在一些實施方式中，3-8員雜環基為 或 ，其中W A、R eA、R fA、W C、R eC、R fC如本說明書所定義。
術語「烷氧基」是指烷基-O-，其中烷基如本文中定義。典型的烷氧基包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。
術語「芳氧基」是指芳基-O-，其中芳基如本文中定義。
術語「雜芳氧基」是指雜芳基-O-，其中雜芳基如本文中定義。
術語「環烷氧基」是指環烷基-O-，其中環烷基如本文中定義。
術語「雜環氧基」是指雜環基-O-，其中雜環基如本文中定義。
術語「羰基」是指由碳和氧兩種原子通過雙鍵連接而成的有機官能團-C(=O)-。術語「烷氧基羰基」是指烷氧基-C(=O)-，即該基團通過羰基與化合物其它部分連接。術語「烷基羰基」是指烷基-C(=O)-，即該基團通過羰基與化合物其它部分連接。類似地，術語「芳基羰基」是指芳基-C(=O)-，即該基團通過羰基與化合物其它部分連接；術語「芳氧基羰基」是指芳氧基-C(=O)-，即該基團通過羰基與化合物其它部分連接；依此類推。
術語「腈基」，是指碳原子和氮原子通過三鍵相連接的基團-CN。
術語「脒基」是指 。
術語「鹵」或「鹵素」是指氟、氯、溴和碘。
術語「鹵代烷基」是指其中至少一個氫被鹵原子替換的烷基。在某些實施方式中，如果兩個或更多氫原子被鹵原子替換，所述鹵原子彼此相同或不同。鹵代烷基的實例包括但不限於一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基等。
術語「胺基烷基」是指被胺基取代的烷基。
術語「烷基胺基」是指被烷基取代的胺基。
表述「C 1-C 6」或「C 1-6」涵蓋1-6個碳原子的範圍，並應理解為還涵蓋其中的任意亞範圍，以及每個點值，包括例如C 1-C 6、C 2-C 6、C 3-C 6、C 4-C 6、C 5-C 6、C 1-C 5、C 2-C 5、C 3-C 5、C 4-C 5、C 1-C 4、C 2-C 4、C 3-C 4、C 1-C 3、C 2-C 3、C 1-C 2等，以及C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6等。類似地，表述「C 3-C 8」或「C 3-8」涵蓋3-8個碳原子的範圍，並應理解為還涵蓋其中的任意亞範圍，以及每個點值，包括例如C 3-C 6等，以及C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8等。表述「3-8員」應理解為涵蓋其中的任意亞範圍以及每個點值，例如3-7員、3-6員、3-5員、4-8員，以及3、4、5、6、7、8員等。類似地，表述「5-14員」應理解為涵蓋其中的任意亞範圍以及每個點值，例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14員等。本文中其他類似的表述也應當以類似的方式理解。
術語「任選取代」或「任選被……取代」是指所提及的基團可以被取代或不被取代。
術語「任選取代」或「取代」是指所提及的基團可以被一個或多個額外的基團取代，所述額外的基團各自並且獨立地選自例如烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、烷氧基、烷硫基、鹵素、巰基、羥基、硝基、胺基、腈基、羧基、側氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、NH 2C(=O)-、烷基胺基等。
表述「被一個或多個選自……的基團取代」或「任選被一個或多個選自……的基團取代」中的「一個或多個」是指1至5個，或1至4個，或1至3個，或1至2個基團取代，前提條件是滿足化合價的要求。
另外，應理解，術語「C 6-14芳基羰基」、「C 6-14芳氧基羰基」是指其中的芳基為C 6-14芳基，術語「C 3-8環烷基羰基」、「C 3-8環烷氧基羰基」是指其中的環烷基為C 3-8環烷基，術語「5-14員雜芳基羰基」、「5-14員雜芳氧基羰基」是指其中的雜芳基為5-14員雜芳基，術語「3-8員雜環基羰基」、「3-8員雜環氧基羰基」是指其中的雜環基為3-8員雜環基，術語「C 1-6烷氧基羰基」是指其中的烷基為C 1-6烷基。類似地，「C 1-6胺基烷基」是指其中的烷基為C 1-6烷基。
術語「藥學上可接受的載體」是指對有機體無明顯刺激作用，而且不會損害該活性化合物的生物活性及性能的那些物質。「藥學上可接受的載體」包括但不限於助流劑、增甜劑、稀釋劑、防腐劑、染料著色劑、矯味劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、崩解劑、穩定劑、溶劑或乳化劑。
本發明的化合物的名稱「化合物*-0」和「化合物*-100」(其中*為化合物編號)分別為「化合物*」的立體異構物。例如，化合物3為消旋物，化合物3-0和化合物3-100分別為其立體異構物。
本發明「*」表示連接點。例如，當本發明的G為 時，表明 為 。
另外，應理解，表述「G選自-CR 4CR 5C-」是指C原子為環原子，即 為 ；類似地，「G選自-S(=O)(=NR 6C’)-」是指S原子為環原子，即 為 。
還應理解，本發明中提到的結構 或 是指芳香環，例如，在Q 1A/Q 1C-Q 4A/Q 4C中的任意一個為N，其餘為C時，該結構為吡啶環，而在Q 1A/Q 1C-Q 4A/Q 4C均為C時，該結構為苯環。還應理解，上述表述中「其餘為C」是指環原子為Ｃ，根據價鍵理論，實際上是指「其餘為CH」。
本發明的化合物或其鹽可以含有一個或多個立體中心，並且每個立體中心獨立地以R或S構型存在，並且因此可以產生鏡像異構物、非鏡像異構物和其它立體異構形式，這些形式在絕對立體化學方面可以被定義為(R)-或(S)-，或者胺基酸的(D)-或(L)-。本發明意在包括所有這些可能的異構物或其混合物的形式，例如基本上純的鏡像異構物、非鏡像異構物、外消旋物或其混合物。在某些實施方案中，較佳化合物為那些顯示更優生物活性的異構物化合物。本發明化合物已純化的或部分純化的異構物和立體異構物、或者外消旋混合物或非鏡像異構物混合物也均包括於本發明範圍內。此類物質的純化和分離可通過本領域已知的標準技術實現。
在一些實施方式中，本發明的化合物是外消旋的。在一些實施方式中，本發明的化合物是單一鏡像異構物。在一些實施方式中，本發明的化合物基本上不含其他異構物。在一些實施方式中，本發明的化合物是基本上不含其他異構物的單一異構物。在一些實施方式中，本發明的化合物包含25%或更少的其他異構物，或包含20%或更少的其他異構物，或包含15%或更少的其他異構物，或包含10%或更少的其他異構物，或包含5%或更少的其他異構物，或包含1%或更少的其他異構物。
在一些實施方式中，本發明的化合物具有至少75%的立體化學純度，或具有至少80%的立體化學純度，或具有至少85%的立體化學純度，或具有至少90%的立體化學純度，或具有至少95%的立體化學純度，或具有至少96%的立體化學純度，或具有至少97%的立體化學純度，或具有至少98%的立體化學純度，或具有至少99%的立體化學純度。
在一些實施方式中，本發明的化合物中的不對稱碳原子都可以以外消旋或鏡像物富集的形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-構型形式存在。在某些實施方式中，本發明的化合物中呈(S)-或(R)-構型的不對稱碳原子具有至少50%鏡像物過量、至少60%鏡像物過量、至少70%鏡像物過量、至少80%鏡像物過量、至少90%鏡像物過量、至少95%鏡像物過量或至少99%鏡像物過量。
如本文所用，「基本上純」或「基本上不含其他異構物」是指相對於較佳異構物，產物含有的其他異構物的量按重量計少於10%、較佳少於5%、較佳少於4%、較佳少於3%、較佳少於2%、較佳少於1%。應理解，本發明提到或標明某化合物構型為絕對構型時是指其為基本上純的該絕對構型形式；類似地，本發明提到或標明某化合物是單一鏡像異構物是指其為基本上純的該鏡像異構物形式。
以下詳述旨在舉例說明非限制性實施方式，使所屬技術領域中具有通常知識者更充分地理解本發明的技術方案、其原理及其實際應用。
化合物
本發明提供式IA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
在一些實施方式中，R 1A為H或-COOH，較佳為H，R 2A為-NR aAC(=O)OR bA或-NR aAS(=O) 2OR bA，較佳為-NR aAC(=O)OR bA，其中R aA為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或C 1-6胺基烷基，R bA選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基(較佳為 )，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R bA基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eA和R fA各自獨立地為-(CH 2) n1A-和-(CH 2) n1A’-，且在一些實施方式中分別為-(CH 2) n1A-和-(CH 2) n1A’-，其中n1A和n1A’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1A和n1A’不同時為0，W A選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 5A-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 5A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3。在一些實施方式中，R aA為H。在一些實施方式中，R aA為被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，例如為甲氧基乙基、甲基胺基乙基、胺基丙基或胺基乙基等。在一些實施方式中，R aA為H或C 1-6胺基烷基。在一些實施方式中，R bA為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，例如為甲基、乙基或丙基，較佳為甲基。在一些實施方式中，R bA為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的 ，W A選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 5A-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 5A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3。
在一些實施方式中，R 1A和R 2A連同其連接的碳原子形成任選取代的9-10員雙環部分(具體為9-10員稠環)。較佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 ， 當Q 1A-Q 4A中的任意一個為N時，其餘為CH，或Q 1A-Q 4A均為CH； W 1A和W 2A各自獨立地為-C(=O)-NH-，-NH-C(=O)-，-S(=O) 2-NH-，-NH-S(=O) 2-，-S-，-O-，-NR 6A-，-NR 6A-CH 2-，被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-，或不存在，R 6A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3，較佳為1；較佳W 1A和W 2A不能同時不存在， W 3A為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-，n2A選自0、1、2和3。
更佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 、 ，更佳選自 、 、 、 、 、 ，再更佳為選自 、 。
在一些實施方式中，R 3A選自H或-(CH 2) mANR cAR dA，其中R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷基(例如甲基、異丙基等)、脒基、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基等)，mA選自0、1、2、3、4或5。
在一些實施方式中，R 3A為H。在一些實施方式中，R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基等)。在一些實施方式中，R cA和R dA各自為H。在一些實施方式中，R cA為H，R dA為C 1-6烷氧基羰基，較佳為甲氧基羰基。在一些實施方式中， mA選自0、1、2或3，較佳為3。
在一些實施方式中，R 4A選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基，較佳為選自F、Cl、NO 2、CH 3、CF 3、腈基、NH 2C(=O)-。
在一些實施方式中，nA為0、1、2、3、4或5，較佳為0、1、2或3，更佳為0。
在一些實施方式中，式IA如式IIA所示，較佳為如式IIIA所示，再更佳為如式IVA所示，再更佳為如式VA所示： 。
較佳地，式IA、式IIA、式IIIA、式IVA或式VA中的R bA選自C 1-6烷基、 ，較佳為 ，其中W A選自-O-、-S(=O) 2-。
在一些實施方式中，式IA如式VIA所示： 。
較佳地，式VIA中的R aA為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或C 1-6胺基烷基。
在一些實施方式中，本發明的化合物為式IIIA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其中R aA為H，R bA選自C 1-6烷基、 ，R eA和R fA分別為-(CH 2) n1A-和-(CH 2) n1A’-，n1A和n1A’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1A和n1A’不同時為0，W A選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 5A-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，R 5A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3，R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基。
在一些實施方式中，本發明的化合物為式IIIA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其中R aA為H，R bA選自C 1-6烷基、 ，W A選自-O-、-S(=O) 2-，R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基。
在一些實施方式中，本發明的化合物為式IVA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其中R aA為H，R bA選自C 1-6烷基、 ，W A選自-O-、-S(=O) 2-。
在一些實施方式中，本發明的化合物選自如下所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
本發明還提供以下通式的化合物、其立體異構物或其鹽，其為製備本發明上述化合物的中間體， 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如前所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基(Boc)、9-芴甲氧羰基(Fmoc)、烯丙氧羰基(Alloc)、三氯乙氧羰基(Troc)、三甲基矽乙氧羰基(Teoc)、苄氧羰基(CBz)、對甲基苯磺醯基(Tosyl)、對硝基苯磺醯基(Nosyl)、叔丁基(t-Bu)、三氟乙醯基(Tfa)、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
製備方法
在一些實施方式中，本發明所示化合物可以通過選自以下的方法製備： 方法一： 方法一包括以下步驟： 方法二： 方法二包括以下步驟： 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如前所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
化合物
本發明提供式IB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： R 1B選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，較佳為選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)，更佳為選自C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 2B和R 3B各自獨立地選自H、C 1-6烷基(例如甲基、異丙基)、脒基、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)； R 4B選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基，較佳為選自F、Cl、NO 2、CH 3、CF 3、腈基、NH 2C(=O)-； mB和nB各自獨立地為0、1、2、3、4或5，例如mB為3，且/或nB為0。
在一些實施方式中，R 1B選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基、C 1-6烷氧基羰基、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，較佳為選自C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基，較佳為選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基、C 1-6烷氧基羰基，更佳選自C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代。在一些實施方式中，R 1B為H。在一些實施方式中，R 1B為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的甲基、乙基、丙基或丁基，更佳為甲基。在一些實施方式中，R 1B為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基羰基，較佳為任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的甲基羰基、乙基羰基、丙基羰基、丁基羰基，更佳為甲基羰基。
在一些實施方式中，R 2B和R 3B各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基。在一些實施方式中，R 2B和R 3B各自獨立地選自H、C 1-6烷氧基羰基。在一些實施方式中，R 2B和R 3B均為H。在一些實施方式中，R 2B為H，R 3B為C 1-6烷氧基羰基，較佳為甲氧基羰基。
在一些實施方式中，R 4B選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基，較佳為選自F、Cl、NO 2、CH 3、CF 3、腈基、NH 2C(=O)-。
在一些實施方式中，mB和nB各自獨立地為0、1、2、3、4或5。在一些實施方式中，mB為0、1、2、3、4或5，較佳為3。在一些實施方式中，nB為0、1、2或3，較佳為0。
在一些實施方式中，式IB較佳如式IIB所示， 進一步較佳如式IIIB所示， 再進一步較佳如式IVB所示， 。
在一些實施方式中，在上述通式中，R 1B選自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基，較佳為C 1-6烷基或C 1-6烷基羰基，更佳為甲基或甲基羰基。
在一些實施方式中，本發明的化合物選自如下所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
本發明還提供式iB-1的化合物、其立體異構物或其鹽，其為製備本發明化合物的中間體， 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如前所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基(Boc)、9-芴甲氧羰基(Fmoc)、烯丙氧羰基(Alloc)、三氯乙氧羰基(Troc)、三甲基矽乙氧羰基(Teoc)、苄氧羰基(CBz)、對甲基苯磺醯基(Tosyl)、對硝基苯磺醯基(Nosyl)、叔丁基(t-Bu)、三氟乙醯基(Tfa)、甲氧羰基或乙氧羰基。
類似地，本發明還提供式iB-4的化合物、其立體異構物或其鹽， ， 其中，R 1B、R 2B、R 3B、R 4B、mB、nB和R xB如前所定義。
製備方法
在一些實施方式中，本發明所示化合物可以通過以下方法製備，該方法包括以下步驟： 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如前所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基或乙氧羰基。
化合物
本發明提供式IC所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
在一些實施方式中，環A為C 3-8環烷基、C 6-14芳基(較佳為單環芳基)或5-14員雜芳基(較佳為單環雜芳基)，例如為環丙基、環戊基、苯基、吡啶基和嘧啶基。在一些實施方式中，環A為苯基。
在一些實施方式中，Y選自CH或N。在一些實施方式中，Y為N。
在一些實施方式中，G選自-S-、-O-、-CR 4CR 5C-、-NR 6C-、-S(=O) 2-、-S(=O)(=NR 6C’)-、 。在一些實施方式中，G選自-O-、-CR 4CR 5C-、-NR 6C-、-S(=O) 2-、-S(=O)(=NR 6C’)-、 。在一些實施方式中，G為-O-。在一些實施方式中，G為-S(=O) 2-。
在一些實施方式中，G為-S(=O)(=NR 6C’)-，其中R 6C’選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基)、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，較佳為選自H、C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)、C 1-6烷氧基羰(例如甲氧基羰基)，更佳為選自C 1-6烷基(例如甲基)、C 1-6烷基羰基(例如甲基羰基)，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代。
在一些實施方式中，G為-CR 4CR 5C-，其中R 4C和R 5C各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基-O-、羥基、-C(O)OR 7、-NR 8R 9、-NR cCC(O)NR 8R 9、C 1-6烷基胺基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、鹵素、腈基、-NR cCS(=O) 2NR 8R 9、-NR cCC(O)OR dC、-NR cCS(=O) 2OR dC、-NR cCC(O)R 7’、-NH(CH 2) mCNR 8R 9，其中所述的烷基、雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代；R 7和R 7’各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基、C 6-14芳基和5-14員雜芳基，其中所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代；R 8和R 9各自獨立地為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基；R cC為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基取代的C 1-6烷基；R dC選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R dC基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eC和R fC各自獨立地為-(CH 2) n1C-和-(CH 2) n1C’-，且在一些實施方式中分別為-(CH 2) n1C-和-(CH 2) n1C’-，其中n1C和n1C’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1C和n1C’不同時為0；W C選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 12-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-，n3C選自1、2和3；mC選自1、2、3、4； 或者CR 4CR 5C形成3-8員雜環或9-10員雙環部分(具體為9-10員稠環)，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 、 ， 當Q 1C-Q 4C中的任意一個為N時，其餘為CH，或Q 1C-Q 4C均為CH； W 1C和W 2C各自獨立地為-C(=O)-NH-，-NH-C(=O)-，-S(=O) 2-NH-，-NH-S(=O) 2-，-S-，-O-，-NR 12-，-NR 12-CH 2-，被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-；較佳W 1C和W 2C不能同時不存在， W 3C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在；較佳為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-， W 4C和W 5C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在， n2C選自0、1、2和3， 更佳地，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 、 、 、 ，更佳為選自 、 、 、 、 、 、 、 。
在一些實施方式中，G為-CR 4CR 5C-，其中R 4C為H，R 5C為-NR cCC(O)OR dC，其中R cC和R dC如上所定義。
在一些實施方式中，G為-CR 4CR 5C-，其中R 4C為-NR 8R 9，R 5C為-C(O)OR 7，其中R 7、R 8和R 9如上所定義。在一些實施方式中，R 7為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，例如為H或C 1-6烷基，例如為H或甲基。在一些實施方式中，R 8和R 9均為H。
在一些實施方式中，G為-S(=O)(=NR 6C’)-，其中R 6C’如上所定義。
在一些實施方式中，R 1C選自H或-(CH 2) tNR aCR bC，其中R aC和R bC各自獨立地選自H、C 1-6烷基(例如甲基、異丙基等)、脒基、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基等)，t選自0、1、2、3、4或5。在一些實施方式中，R 1C為H。在一些實施方式中，R aC和R bC各自獨立地選自H、C 1-6烷氧基羰基(例如甲氧基羰基等)。在一些實施方式中，R aC和R bC各自為H。在一些實施方式中，t選自0、1、2或3，較佳為3。
在一些實施方式中，R 2C選自H、胺基、羥基、C 1-6烷基、C 1-6烷基胺基、C 1-6胺基烷基，其中的烷基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代。
在一些實施方式中，在Y為CH時，R 3C選自H、羥基、C 1-6烷基、3-8員雜環基、C 1-6烷氧基，且在Y為N時，R 3C選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基-(CH 2) mC-、3-8員雜環基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、-(CH 2) mCNR 10R 11，其中的烷基、環烷基、雜環基、烷氧基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基胺基的基團取代；R 10和R 11各自獨立地為H或C 1-6烷基，或者R 10和R 11連同其連接的氮原子形成3-8員雜環基(例如為 、 )，其中的烷基和雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代；mC在每次出現時獨立地選自1、2、3、4。
在一些實施方式中，R 0選自H、鹵素、NO 2、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為選自H、F、Cl、NO 2、CH 3、CF 3、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6胺基烷基。在一些實施方式中，R 4C為H。
在一些實施方式中，p為0、1、2、3、4或5，較佳為0、1、2或3，更佳為0。
在一些實施方式中，式IC如式IIC-1或IIC-2所示： 。
在一些實施方式中，在IIC-1中，R 2C為C 1-6胺基烷基或胺基，R 3C為H或C 1-6烷基；在一些實施方式中，，R 2C為胺基，R 3C為H。
在一些實施方式中，在式IIC-2中，R 2C為C 1-6胺基烷基或胺基，R 3C為H或C 1-6烷基，或者R 2C為H或C 1-6烷基，R 3C為C 1-6胺基烷基或3-8員含氮雜環基。
在一些實施方式中，式IC為如式IIIC或式IVC所示： 。
在一些實施方式中，在上述通式中，滿足以下一項或者多項： (1)R 1C為-(CH 2) tNR aCR bC，較佳為-(CH 2) 3NH 2； (2)環A為苯基； (3)p為0。
在一些實施方式中，在上述通式中，G選自以下之一： (1)G為-S(=O)(=NR 6C’)-； (2)G為-CR 4CR 5C-，R 4C為H，R 5C為-NR cCC(O)OR dC； (3)G為-CR 4CR 5C-，R 4C為-NR 8R 9，R 5C為-C(O)OR 7，R 7選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基、C 6-14芳基和5-14員雜芳基，其中所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代；且R 7較佳為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基。
在一些實施方式中，式IC如式IVC-1、IVC-2或IVC-3所示： 。
在一些實施方式中，本發明的化合物選自如下所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
本發明還提供以下通式的化合物、其立體異構物或其鹽，其為製備本發明上述化合物的中間體： 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如前所定義，Rv選自H和羧基保護基。
在一些實施方式中，式iiC-2-X選自： 、 、 、 、 、 ， 其中Rs、Rt各自獨立地選自H和胺基保護基。
在一些實施方式中，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基。
在一些實施方式中，所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
製備方法
在一些實施方式中，本發明所示化合物可以通過選自以下的方法製備：
方法一：
方法一包括以下步驟：式iC-2所示的化合物與式iC-3-a或iC-3-b或iC-3-c所示的化合物經縮合反應生成式iC-1所示的化合物，然後經過保護基脫除反應生成式IC所示的化合物 ， 方法二： 方法二包括以下步驟：式iiC-2所示的化合物與式iiC-3所示的化合物經縮合反應生成式iiC-1所示的化合物，然後經過保護基脫除反應生成式IC所示的化合物， ， 較佳地，式iiC-2化合物由選自以下的方法製備： 方法三： 方法三包括以下步驟：式iiC-4-a所示的化合物與式iiC-5-a所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法四： 方法四包括以下步驟：式iiC-4-b所示的化合物與式iiC-5-b所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法五： 方法五包括以下步驟：式iiC-4-c所示的化合物與式iiC-5-c所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法六： 方法六包括以下步驟：式iiC-4-d所示的化合物與式iiC-5-d所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 較佳地，所述式iC-2為 ； 較佳地，所述iiC-2選自： 、 、 、 、 、 ， 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’和R 1C’’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’和R 2C’’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’和R 3C’’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，Rw為羧基保護基，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如前所定義，Rs、Rt和Ru各自獨立地選自H和胺基保護基； 較佳地，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基；所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
在上述方法三、方法四、方法五和方法六中，所述縮合反應是指iiC-4(具體指iiC-4-a、iiC-4-b、iiC-4-c、iiC-4-d)分別與iiC-5(具體指iiC-5-a、iiC-5-b、iiC-5-c、iiC-5-d)進行縮合反應形成縮合產物；水解反應意在脫除縮合產物中的羧基保護基Rw，但是根據水解條件的不同，在脫除縮合產物中的羧基保護基Rw的同時，縮合產物中的胺基保護基(如果存在)也可能部分或全部脫除，水解反應之後的產物被稱為水解產物。在一些實施方式中，該水解產物即為iiC-2所示的化合物。在一些實施方式中，該水解產物再經胺基保護反應而得到式iiC-2所示的化合物。在一些實施方式中，該水解產物再經胺基保護基脫除反應和胺基保護反應而得到式iiC-2所示的化合物。
實施例
下面詳細描述本發明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用於解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。除非另外指明，本文所指的比例、百分比等均以重量計。
本申請所用試劑或儀器未註明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。具體地，中間體2(結構如下所示)購自杭州肽佳生物科技有限公司。
另外，關於終產物純化，在各實施例中分別提及為「通過反相快速管柱層析法純化」、「通過製備HPLC純化」、「反相柱層析純化」、「經過高效液相管柱層析純化」、「反相柱純化」，其中在一些實施例中明確標明了純化所用流動相條件為「溶劑ACN和溶劑H 2O(FA，0.1%)」，但應該理解，在其它實施例中也使用的相同或類似的流動相條件。在這種管柱層析條件下，某些實施例化合物形成為甲酸鹽。但所屬技術領域中具有通常知識者理解，通過本領域常規的中和反應條件即可形成游離態化合物。 縮寫： ACN：乙腈 BTC：(三氯甲基)碳酸酯 CDI：N,N-碳醯二咪唑 DCM：二氯甲烷 DIEA：二乙胺 DIPEA：N,N-二異丙基乙胺 DMAP：4-二甲胺基吡啶 DMF：二甲基甲醯胺 HATU：2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 HOBT：1-羥基苯並三唑 TBTU：O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯 TEA：三乙胺 TFA：三氟乙酸 TFE：2,2,2-三氟乙醇 THF：四氫呋喃
實施例1  化合物1的合成
1.1 化合物1-1的合成
在室溫下，將4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯鹽酸鹽(3.7 g，12.552 mmol，1.00 equiv)溶於DMF(37 ml)，分別加入DIEA(4.87 g，37.656 mmol，3 equiv)，(2R)-2-{[(苄氧基)羰基]胺基}-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己酸(5.73 g，15.062 mmol，1.2 equiv)和HATU(5.73 g，15.062 mmol，1.2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用二氯甲烷(2×200 mL)萃取。合併的有機層用鹽水(2×300 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用二氯甲烷、甲醇(20:1)洗脫，得到1-[(2R)-2-{[(苄氧基)羰基]胺基}-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(8.97 g，94.63%，純度：82.0%)，為灰白色固體。
LC-MS-1-1(ES, m/z):[M+1]=621
1.2 化合物1-3的合成
將(2R)-2-胺基-4-甲基戊酸叔丁酯鹽酸鹽(5 g，22.347 mmol，1.00 equiv)和DIEA(8.66 g，67.041 mmol，3 equiv)溶於DMF(50.00 mL，646.052 mmol，28.91 equiv)，加入(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙酸(10.39 g，26.816 mmol，1.2 equiv)和HATU(10.20 g，26.816 mmol，1.2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用乙酸乙酯(1 × 500 mL)萃取。合併的有機層用鹽水(5x300 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脫，得到(2R)-2-[(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊酸叔丁酯(13.94 g，97.60%，純度：87.0%)，為白色固體。
LC-MS-1-3(ES, m/z):[M+1]=557
1.3 化合物1-2的合成
將1-[(2R)-2-{[(苄氧基)羰基]胺基}-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(8.97 g，14.450 mmol，1.00 equiv)溶於甲醇(162.35毫升)，加入Pd/C(922.69 mg，w/t，10%)。將所得混合物在氫氣氛下於室溫攪拌過夜。過濾所得混合物，濾餅用甲醇(3×20 mL)洗滌。減壓濃縮濾液。殘餘物通過反向快速管柱層析法純化，得到1-[(2R)-2-胺基-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(5.65 g，76.53%，純度：95.0%)。
LC-MS-1-2(ES, m/z):[M+1]=487
1.4 化合物1-4的合成
將(2R)-2-[(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊酸叔丁酯(13.94 g，25.040 mmol)溶於DCM(100 mL，1573.005 mmol，62.82 equiv.)，加入TFA(1.00 mL，1346.304 mmol，53.77 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮所得混合物。粗產物從二氯甲烷/1M鹽酸的水中重結晶，並用1x400 mL水洗滌，過濾，收集固體得到(2R)-2-[(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊酸(9.43 g，74.48%，純度：98.8%)。
LC-MS-1-4(ES, m/z):[M+1]=501
1.5 化合物1-5的合成
將(2R)-2-[(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊酸(4.78 g，9.539 mmol，1.1equiv)和DIEA(3.36 g，26.016 mmol，3 equiv)溶解於DMF(40 mL，516.870 mmol，59.60 equiv)，加入1-[(2R)-2-胺基-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(4.22 g，8.672 mmol，1.00 equiv)和HATU(3.96 g，10.406 mmol，1.2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。所得混合物用乙酸乙酯(1x400 mL)萃取。合併的有機層用鹽水(3x200 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘留物經矽膠柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(1:2)洗脫，餾分旋乾得到4-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-[(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(8.39 g，98.12%，純度：98.3%)。
LC-MS-1-5(ES, m/z):[M+1]=969
1.6 化合物1-6的合成
將4-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-[(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2]-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(8.93 g，9.214 mmol，1.00 equiv)溶於DCM(80 mL)，分批加入哌啶(8.90 mL，104.487 mmol，11.34 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮所得混合物。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，得到1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(5.74 g，80.98%，純度： 97.0%)。
LC-MS-1-6(ES, m/z):[M+1]=747
1.7 化合物1-7的合成
將羰基咪唑(47.76 mg，0.295 mmol，1.1 equiv)溶於N,N-二甲基甲醯胺(1.60 mL)，攪拌條件下加入1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(200 mg，0.268 mmol，1.00 equiv)，N-甲基苄胺(32.45 mg，0.268 mmol，1 equiv)和三乙胺(54.19 mg，0.536 mmol，2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮，殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(136 mg，55.67%，純度：66.7%)。
LC-MS-1-7(ES, m/z):[M+1]=894
1.8 化合物1-8的合成
將1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(136 mg，0.152 mmol，1.00 equiv)溶於二氧六環(10.00 mL)，在室溫下分批加入4 M HCl(氣體)的1,4-二氧六環溶液(15.0 mL)。所得混合物在室溫下攪拌4小時。減壓濃縮反應液得4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(115 mg，粗品)。
LC-MS-1-8(ES, m/z):[M+1]=694
1.9 化合物1的合成
將4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(115 mg，0.166 mmol，1.00 equiv)溶於混合溶劑THF(10 mL)/水(2 mL)，加入LiOH.H 2O(13.933 mg，0.332 mmol，2.00 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌1小時。用1M HCl(水溶液)將混合物酸化至pH= 7。所得混合物通過反相快速管柱層析法純化，得到4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸(60.0 mg，49.23%，純度：95.2%)。
LC-MS-1(ES, m/z):  [M+1]=680
1H NMR-1(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 1H), 7.36 – 7.22(m, 6H), 7.18(dd, J= 7.6, 2.0 Hz, 2H), 7.03 – 6.95(m, 2H), 4.76 – 4.72(m, 1H), 4.50(ddd, J= 9.0, 5.7, 3.0 Hz, 1H), 4.43(d, J= 16.5 Hz, 1H), 4.38 – 4.25(m, 2H), 3.88 – 3.47(m, 4H), 3.11(dd, J= 13.9, 5.8 Hz, 1H), 2.97 – 2.85(m, 3H), 2.77(d, J= 2.9 Hz, 3H), 2.27 – 2.06(m, 2H), 1.93 – 1.42(m, 9H), 1.42 – 1.23(m, 2H), 0.92 – 0.77(m, 6H).
實施例2 化合物2的合成
LC-MS-2-0(ES, m/z):[M+1]=710
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.30(s, 1H), 7.51 – 7.20(m, 8H), 7.18 – 6.96(m, 2H), 5.52(ddd, J= 19.0, 10.7, 4.7 Hz, 1H), 4.45(dt, J= 8.9, 6.2 Hz, 1H), 4.30(p, J= 4.7 Hz, 1H), 3.75(dp, J= 18.4, 6.9 Hz, 2H), 3.68 – 3.38(m, 4H), 3.10(ddd, J= 14.6, 9.2, 6.3 Hz, 1H), 2.97(dt, J= 13.9, 10.1 Hz, 1H), 2.87(q, J= 7.8 Hz, 2H), 2.53(d, J= 5.4 Hz, 3H), 2.30 – 2.05(m, 2H), 1.96 – 1.43(m, 9H), 1.32(d, J= 20.6 Hz, 2H), 0.85(dd, J= 16.8, 5.6 Hz, 6H).
LC-MS-2-100(ES, m/z):[M+1]=710
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.35(s, 2H), 7.50 – 7.10(m, 8H), 7.03 – 6.72(m, 2H), 5.53(dd, J= 11.1, 4.2 Hz, 1H), 4.86 – 4.74(m, 1H), 4.72 – 4.59(m, 1H), 4.35(dt, J= 9.3, 5.2 Hz, 1H), 4.06 – 3.66(m, 3H), 3.68 – 3.37(m, 3H), 3.34 – 3.14(m, 1H), 3.07 – 2.73(m, 3H), 2.43(d, J= 6.2 Hz, 3H), 2.31 – 2.01(m, 2H), 1.97 – 1.21(m, 11H), 0.85(dd, J= 16.8, 5.6 Hz, 6H).
實施例3 化合物3的合成
LC-MS-3(ES, m/z):[M+1]=681
1H NMR-3(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.34 – 7.19(m, 6H), 7.11(dt, J= 7.3, 2.2 Hz, 2H), 7.09 – 7.01(m, 2H), 4.53(td, J= 6.9, 6.1, 3.1 Hz, 1H), 4.33(ddd, J= 7.0, 4.9, 1.9 Hz, 1H), 4.30 – 4.21(m, 1H), 3.88 – 3.46(m, 4H), 3.01 – 2.82(m, 5H), 2.75(ddd, J= 14.1, 7.1, 4.5 Hz, 1H), 2.28 – 2.04(m, 2H), 1.95 – 1.55(m, 6H), 1.57 – 1.26(m, 5H), 0.82(dd, J= 19.0, 5.2 Hz, 6H).
實施例4  化合物4的合成
4.1 化合物4-1的合成
將1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧基羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(120 mg，0.161 mmol，1.00 equiv)溶於DMF(7 ml)，加入3-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙酸(51.15 mg，0.193 mmol，1.2 equiv)、HATU(73.30 mg，0.193 mmol，1.2 equiv)和DIEA(62.29 mg，0.483 mmol，3 equiv)。將所得混合物攪拌過夜，然後用水(30 mL)稀釋，並用EA(3×20 mL)萃取。合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到4-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-[(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{3-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(256 mg，粗品)。
LC-MS-4-1(ES, m/z):[M+1]=994
4.2 化合物4-2的合成
將4-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-[(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{3-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(265 mg，0.267 mmol，1.00 equiv)溶於二氧六環(5.3 mL)，在室溫下加入4M HCl(氣體)的1,4-二氧六環溶液(8 mL)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。減壓濃縮。得到4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-(3-胺基-3-苯基丙醯胺基)-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(101 mg，粗品)。
LC-MS-4-2(ES, m/z):[M+1]=694
4.3 化合物4-0/100的合成
將4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-(3-胺基-3-苯基丙醯胺基)-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(80 mg，0.115 mmol，1.00 equiv)溶於THF(3 mL)，加入H 2O(0.8 mL，44.4075.15 mmol)，LiOH(5.52 mg，0.230 mmol，2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌4小時。用HCl(1 N)將混合物酸化至pH 7。所得混合物用水(100 ml)稀釋。所得混合物用乙酸乙酯(3×100 ml)萃取。合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化。餾分旋乾得到4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-((3R)-3-胺基-3-苯基丙醯胺基)-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸(11 mg，13.43%，純度：95.3%)和4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(3S)-3-胺基-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸(11 mg，13.74%，純度：97.5%)。
LC-MS-4-0(ES, m/z):[M+1]=680
化合物 4-0: 1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.22(t, J= 41.9 Hz, 10H), 4.27(d, J= 80.8 Hz, 4H), 3.64(d, J= 47.2 Hz, 4H), 2.89(s, 6H), 2.13(s, 2H), 1.90 – 1.48(m, 6H), 1.37(s, 5H), 0.76(d, J= 20.6 Hz, 6H).
LC-MS-4-100(ES, m/z):[M+1]=680
化合物 4-100: 1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.50 – 6.77(m, 10H), 4.59 – 4.16(m, 4H), 3.67(d, J= 40.1 Hz, 4H), 3.05 – 2.62(m, 6H), 2.12(d, J= 27.4 Hz, 2H), 1.96 – 1.52(m, 6H), 1.54 – 1.16(m, 5H), 0.93 – 0.66(m, 6H).
實施例5  化合物5的合成
LC-MS-5-0(ES, m/z):[M+1]=680
化合物 5-0: 1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.37 – 7.08(m, 10H), 4.90(t, J= 7.1 Hz, 1H), 4.48 – 4.39(m, 2H), 4.20(t, J= 7.3 Hz, 1H), 3.86 – 3.45(m, 4H), 3.06 – 2.78(m, 4H), 2.78 – 2.50(m, 2H), 2.26 – 2.02(m, 2H), 1.93 – 1.53(m, 6H), 1.51 – 1.19(m, 5H), 0.80(dd, J= 17.5, 5.1 Hz, 6H).
LC-MS-5-100(ES, m/z):[M+1]=680
化合物 5-100: 1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 7.39 – 7.01(m, 10H), 4.94(t, J= 7.1 Hz, 1H), 4.44(t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.24(d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.66(d, J= 58.6 Hz, 4H), 2.99 – 2.56(m, 6H), 2.14(d, J= 20.9 Hz, 2H), 1.92 – 1.55(m, 6H), 1.40(d, J= 33.6 Hz, 5H), 0.81(dd, J= 15.7, 4.9 Hz, 6H).
實施例6  化合物6的合成
LC-MS-6-0(ES, m/z):[M+1]=734
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.48 – 6.81(m, 10H), 4.66 – 4.48(m, 1H), 4.06(q, J= 6.6, 5.5 Hz, 1H), 3.91 – 3.44(m, 6H), 3.25(dd, J= 13.1, 4.9 Hz, 1H), 3.16 – 2.48(m, 9H), 2.35 – 1.97(m, 2H), 1.98 – 1.18(m, 15H), 0.91(dd, J= 18.5, 5.3 Hz, 6H).
LC-MS-6-100(ES, m/z):[M+1]=734
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 3H), 7.45 – 6.86(m, 10H), 4.68 – 4.57(m, 1H), 4.10(d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.96 – 3.42(m, 5H), 3.42 – 3.17(m, 1H), 3.02(dt, J= 12.5, 5.7 Hz, 1H), 2.97 – 2.77(m, 4H), 2.71 – 2.48(m, 1H), 2.14(dd, J= 27.5, 13.5 Hz, 2H), 2.02 – 1.49(m, 13H), 1.39 – 1.23(m, 2H), 1.08 – 0.79(m, 6H).
實施例7  化合物7的合成
LC-MS-7(ES, m/z):[M+1]=695
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.35(s, 2H), 7.53 – 6.99(m, 9H), 4.39(ddd, J= 8.8, 5.6, 3.0 Hz, 1H), 4.32 – 3.97(m, 5H), 3.94 – 3.63(m, 2H), 3.58 – 3.29(m, 2H), 3.04(dt, J= 13.9, 5.1 Hz, 1H), 2.93 – 2.63(m, 3H), 2.39 – 1.92(m, 2H), 1.97 – 1.18(m, 11H), 0.79(dd, J= 19.1, 5.4 Hz, 6H).
實施例8  化合物8的合成
8.1 化合物8-1的合成
將(2R)-2-胺基-3-苯基丙酸叔丁酯(480 mg，2.169 mmol，1.00 equiv)和三乙胺(1.85 g，18.282 mmol，8.43 equiv)溶於乙腈(19 mL，361.469 mmol，166.65 equiv)，氮氣氣氛下在0°C攪拌30分鐘。向上述混合物中加入N,N'-羰基二咪唑(1.2 g，7.401 mmol，3.41 equiv)和2,2,2-三氟-N-[2-(甲基胺基)-2-苯乙基]乙醯胺(12.80 g，51.991 mmol，23.97 equiv)。將所得混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜，減壓下濃縮。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙酸叔丁酯(855 mg，79.87%，純度：100%)。
LC-MS-8-1(ES, m/z):[M+1]=494
8.2 化合物8-2的合成
將(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙酸叔丁酯(67 mg，0.136 mmol，1 equiv)溶於二氯甲烷(7.70 mL)，滴加三氟乙酸(7.70 mL，78.592 mmol，45.09 equiv)。所得混合物在空氣中攪拌3 h。減壓濃縮所得混合物，得到(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙酸(600 mg，粗品)。粗產物混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。
LC-MS-8-2(ES, m/z):[M+1]=438
8.3 化合物8-3的合成
在室溫下，將{4-[(4-甲基苯基)甲氧基]苯基}甲基(2R)-2-[(2R)-2-胺基-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]己酸酯(1445.79 mg，2.538 mmol，3 equiv)，(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙酸(2600 mg，5.944 mmol，9.15 equiv)和HOBT(222 mg，1.643 mmol，2.53 equiv)溶於DMF(50 mL，64.609 mmol，99.49 equiv)，加入TBTU(528 mg，1.644 mmol)。所得混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜，得到{4-[(4-甲基苯基)甲氧基]苯基}甲基(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-4-甲基-2-[(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙醯胺基]戊醯胺基]己酸酯(2.6g，粗品)。
8.4 化合物8-4的合成
在室溫下將{4-[(4-甲基苯基)甲氧基]苯基}甲基(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-4-甲基-2-[(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙醯胺基]戊醯胺基]己酸酯(2.8g，3.150 mmol，1 equiv)溶於DCM(20 mL)，加入三氟乙酸(10 mL)。將所得混合物在空氣氣氛下於室溫攪拌2小時，得到(2R)-6-胺基-2-[(2R)-4-甲基-2-[(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙醯胺基]戊醯胺基]己酸(470 mg，粗品)。
LC-MS-8-4(ES, m/z):[M+1]=679
8.5 化合物8-5的合成
在室溫下向50 mL圓底燒瓶中加入(2R)-6-胺基-2-[(2R)-4-甲基-2-[(2R)-2-({甲基[1-苯基-2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基]胺基甲醯基}胺基)-3-苯基丙醯胺基]戊醯胺基]己酸(470 mg，0.692 mmol，1 equiv)、H 2O(10 mL)和氫氧化鋰(33.17 mg，1.384 mmol，2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌3小時。將所得混合物減壓下濃縮得到(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基-1-苯乙基)(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己酸(500 mg，粗品)。
LC-MS-8-5(ES, m/z):[M+1]=583
8.6 化合物8-6的合成
將(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基-1-苯乙基)(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己酸(350 mg，0.601 mmol，1 equiv)和TEA(182.33 mg，1.803 mmol，3 equiv)溶於THF(10 mL)，加入二碳酸二叔丁酯(262.1202 mg，1 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。將所得混合物減壓濃縮，並通過反相快速管柱層析法純化，得到(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]]-1-苯基乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己酸(260 mg，55.29%，純度：100%)。
LC-MS-8-6(ES, m/z):[M+1]=783
8.7 化合物8-7的合成
在室溫和氮氣下，將(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯基乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己酸(60 mg，0.077 mmol，1 equiv)，3-甲基-1-(哌啶-4-基)脲(24.10 mg)，TEA(23.26 mg，0.231 mmol，3equiv)溶於在DMF(5 mL，64.609 mmol，843.12 equiv)中,加入HATU(43.71 mg，0.115 mmol，3 equiv)。將所得混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜。所得混合物通過反相快速管柱層析法純化，得到N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯乙基)}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲基胺基甲醯基)胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(62 mg，87.74%，純度：100%)。
LC-MS-8-7(ES, m/z):[M+1]=922
8.8 化合物8的合成
將N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯基乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲基胺基甲醯基)胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(62 mg，0.067 mmol，1 equiv)溶於二氧六環(10 mL)，加入HCl(氣體)的1,4-二氧六環溶液(5 mL)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮，通過反相快速管柱層析法純化，得到(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基-1-苯基乙基)(甲基)胺基甲醯基)胺基}-3-苯基丙醯胺基]-N-[(2R)-6-胺基-1-{4-[(甲基胺基甲醯基)胺基]哌啶-1-基}-1-側氧基己基-2-基]-4-甲基戊醯胺(13.6 mg，26.73%，純度：95.0%)。
LC-MS-8(ES, m/z):[M+1]=722
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.33(s, 2H), 7.50 – 7.15(m, 8H), 7.10(d, J= 7.2 Hz, 2H), 5.49(dd, J= 10.8, 5.2 Hz, 1H), 4.42(dd, J= 9.1, 6.2 Hz, 1H), 4.37 – 4.25(m, 1H), 4.24 – 4.00(m, 1H), 3.95 – 3.40(m, 7H), 3.26 – 3.02(m, 2H), 2.99 – 2.69(m, 4H), 2.70 – 2.42(m, 6H), 2.02 – 1.75(m, 6H), 1.73 – 1.43(m, 4H), 1.42 – 1.13(m, 7H), 0.80(ddd, J= 15.3, 6.0, 2.9 Hz, 6H).
實施例9  化合物9的合成
LC-MS-9(ES, m/z):[M+1]=671.20
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.43 – 6.81(m, 10H), 4.49(s, 2H), 4.46 – 3.55(m, 6H), 3.60 – 2.94(m, 5H), 3.03 – 2.52(m, 6H), 1.83 – 1.10(m, 9H), 0.78(dd, J= 14.0, 5.0 Hz, 6H).
實施例10 化合物10的合成
LC-MS-10(ES, m/z):[M+1]=699.20
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 7.42 – 6.89(m, 10H), 5.51(dd, J= 10.6, 4.8 Hz, 1H), 4.43(dd, J= 9.0, 6.3 Hz, 1H), 4.34 – 4.12(m, 2H), 4.10 – 3.71(m, 2H), 3.65 – 3.44(m, 3H), 3.32(d, J= 19.3 Hz, 2H), 3.18(d, J= 17.1 Hz, 2H), 3.09(dd, J= 13.8, 6.1 Hz, 1H), 3.00 – 2.93(m, 1H), 2.85(t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.57(d, J= 31.2 Hz, 4H), 1.82 – 1.43(m, 7H), 1.42 – 1.16(m, 2H), 0.82(dd, J= 12.3, 5.0 Hz, 6H).
實施例11  化合物11的合成
LC-MS-11(ES, m/z):[M+1]=695
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.39(s, 1H), 7.40 – 7.19(m, 6H), 7.08(ddt, J= 27.2, 5.4, 1.7 Hz, 4H), 4.59 – 4.47(m, 1H), 4.30(ddd, J= 28.1, 8.0, 5.5 Hz, 2H), 4.14(dd, J= 47.0, 13.4 Hz, 1H), 3.88(dd, J= 36.1, 13.4 Hz, 1H), 3.70 – 3.50(m, 4H), 3.24(q, J= 13.9, 12.7 Hz, 1H), 2.99 – 2.70(m, 7H), 2.01 – 1.80(m, 2H), 1.76 – 1.55(m, 4H), 1.48(q, J= 9.6, 8.5 Hz, 3H), 1.41 – 1.17(m, 4H), 0.83(ddd, J= 16.8, 5.1, 2.1 Hz, 6H).
實施例12  化合物12的合成
12.1 化合物12-1的合成
將4-胺基哌啶-1-羧酸叔丁酯(500 mg，2.496 mmol，1 equiv)溶解在DCM中，加入TEA(505.25 mg，4.992 mmol，2 equiv)，在0°C和氮氣氛下分批加入氯甲酸甲酯(353.84 mg，3.744 mmol，1.5 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。在室溫下用水淬滅反應。減壓濃縮，殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(5:1)洗脫，餾分旋乾得到4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(522 mg，80.94%，純度：100%)。
LC-MS-12-1(ES, m/z):[M+1]=259.32
12.2 化合物12-2的合成
在室溫下，將4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(552 mg，2.137 mmol，1equiv)加入4M HCl(氣體)的1,4-二氧六環(5 mL)溶液中。所得混合物在室溫下攪拌2小時。在室溫下用水淬滅反應。在減壓下濃縮得N-(哌啶-4-基)胺基甲酸甲酯(455 mg，粗品)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。
LC-MS-12-2(ES, m/z):[M+1]=159.20
12.3 化合物12-3的合成
將(2R)-6-[(叔丁氧基羰基)胺基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯基乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己酸(70 mg，0.089 mmol，1 equiv)、TEA(27.14 mg，0.267 mmol，3 equiv)和N-(哌啶-4-基)胺基甲酸甲酯(21.22 mg，0.134 mmol，1.5 equiv)加入DMF(1 ml)中，在室溫和氮氣氛下分批加入HATU(50.99 mg，0.134 mmol，1.5 equiv)。所得混合物在室溫下再攪拌2小時。在室溫下用水淬滅反應。LCMS可以檢測到所需的產品。反應液通過反相快速管柱層析法純化，得到N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(70 mg，83.00%，純度：100%)。
LC-MS-12-3(ES, m/z):[M+1]= 924.1
12.4 化合物12的合成
在室溫和氮氣氛下，將N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[({2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-1-苯乙基}(甲基)胺基甲醯基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(70 mg，0.076 mmol，1 equiv)，加入到DCM(4 mL)中，滴加TFA(1 mL)。所得混合物在室溫下再攪拌3小時。減壓濃縮所得混合物。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到N-{1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基-1-苯乙基)(甲基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-基}胺基甲酸甲酯(42.1 mg，72.07%，純度：93.9%)。
LC-MS-12(ES, m/z):[M+1]=723.15
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.58 – 6.75(m, 10H), 5.52(s, 1H), 4.79 – 4.73(m, 1H), 4.50 – 3.99(m, 3H), 3.87(d, J= 32.6 Hz, 1H), 3.57(s, 6 H), 3.35 – 3.03(m, 2H), 3.02 – 2.68(m, 4H), 2.48(dd, J= 39.8, 5.2 Hz, 3H), 1.90(s, 2H), 1.74 – 1.07(m, 11H), 1.01 – 0.61(m, 6H).
實施例13  化合物13的合成
13.1 化合物13-1的合成
在室溫和氮氣氛下，向N-[2-(苄基胺基)乙基]胺基甲酸叔丁酯(100 mg，0.399 mmol，2.98 equiv)、TEA(40.64 mg，0.402 mmol，3 equiv)和N,N'-羰基二咪唑(23.88 mg，0.147 mmol)的ACN(3 mL)/DMF(3 mL)溶液中，加入1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(100 mg，0.134 mmol，1.00 equiv)。將所得混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜。所得混合物通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基({2-[(叔丁氧羰基)胺基]乙基})胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(120 mg，87.59%，純度：100%)。
LC-MS-13-1(ES, m/z):[M+1]=1024.28
13.2 化合物13-2的合成
將1-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[苄基({2-[(叔丁氧羰基)胺基]乙基})胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-[(叔丁氧羰基)胺基]己醯基]-4-[(叔丁氧羰基)胺基]哌啶-4-羧酸甲酯(120 mg，0.117 mmol，1 equiv)溶解在DCM(1 mL，5.612 mmol)中，加入TFA(1 mL)。將溶液在室溫和氮氣氛下攪拌2小時。減壓濃縮所得混合物。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，得到4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基乙基)(苄基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(75 mg，88.47%，純度：100%)。
LC-MS-13-2(ES, m/z):[M+1]=723.93
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 7.46 – 7.09(m, 6H), 6.97(dt, J= 14.3, 5.4 Hz, 4H), 4.52 – 4.36(m, 2H), 4.31(d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.19(p, J= 4.9, 4.1 Hz, 1H), 4.07(d, J= 14.1 Hz, 1H), 3.92(d, J= 14.4 Hz, 1H), 3.73(dt, J= 12.4, 2.2 Hz, 3H), 3.64(s, 1H), 3.60 – 3.31(m, 3H), 3.30 – 3.16(m, 1H), 3.10 – 2.89(m,3H), 2.87 – 2.57(m, 3H), 2.36 – 2.06(m, 2H), 1.93–1.47(m, 6H), 1.48 – 1.18(m, 5H), 0.92 – 0.40(m, 6H).
13.3 化合物13的合成
將4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(2-胺基乙基)(苄基)胺基甲醯基]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸甲酯(75 mg，0.104 mmol，1 equiv)溶解在THF(1 mL)和H 2O(1 mL)中，加入氫氧化鋰(5 mg，0.209 mmol，2.01 equiv)。將所得混合物在室溫和氮氣氛下攪拌2小時。減壓濃縮得殘餘物。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到4-胺基-1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(胺基乙基)(苄基)胺基甲醯基]]胺基}-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-羧酸(25.5 mg，29.28%，純度：84.5%)。
LC-MS-13(ES, m/z):[M+1]=709.25
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.33(s, 2H), 7.33 – 7.15(m, 6H), 7.00(ddt, J= 12.9, 5.2, 2.6 Hz, 4H), 4.46 – 4.21(m, 4H), 3.76 – 3.36(m, 6H), 3.13 – 2.51(m, 6H), 2.25 – 1.88(m, 2H), 1.96 – 1.49(m, 6H), 1.50 – 1.10(m, 5H), 0.78(dd, J= 14.4, 5.4 Hz, 6H).
實施例14  化合物14的合成
LC-MS-14(ES, m/z):[M+1]=723.25
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.33(s, 3H), 7.45 – 6.79(m, 10H), 5.62 – 5.41(m, 1H), 4.49 – 4.19(m, 2H), 4.05 – 3.35(m, 8H), 3.35 – 2.59(m, 5H), 2.45(dd, J= 30.9, 2.3 Hz, 3H), 2.20(t, J= 16.0 Hz, 2H), 2.00 – 1.10(m, 11H), 0.81(dt, J= 11.9, 5.9 Hz, 6H).
實施例15 化合物15的合成
LC-MS-15(ES, m/z):[M+1]=751
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.32(s, 2H), 7.52 – 6.72(m, 10H), 5.70 – 5.31(m, 2H), 4.48 – 4.09(m, 3H), 4.11 – 3.34(m, 7H), 3.29 – 3.14(m, 1H), 3.14 – 2.68(m, 5H), 2.49(d, J= 5.1 Hz, 2H), 2.44 – 2.28(m, 1H), 2.17(d, J= 18.8 Hz, 2H), 1.93 – 1.34(m, 10H), 1.20(dd, J= 9.0, 6.3 Hz, 8H), 1.00 – 0.59(m, 6H).
實施例16  化合物16的合成
16.1 化合物16-1的合成
將化合物1-3(500 mg，0.898 mmol，1 equiv)溶於DCM(5 mL)中，隨後把哌啶(0.5 mL)滴加到上述體系中，室溫攪拌3小時。然後把反應液旋乾得到黃色粗品，所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(FA，0.1%)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器，餾分旋乾得到化合物16-1(250 mg，83.22%，純度：99%)。
LC-MS-16-1(ES, m/z):[M+1]=335
16.2 化合物16-3的合成
在氮氣保護、0°C，向化合物16-1(1482 mg，4.438 mmol，1 equiv)和化合物16-2(711 mg，4.438 mmol，1.00 equiv)的ACN(2 mL)/DMF(0.4 mL)溶液中，分批加入CDI(791.55 mg，4.882 mmol，1.1 equiv)，室溫攪拌過夜。然後把反應液旋乾得到黃色油狀粗品，所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(FA，0.1%)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物16-3(950 mg，35.05%，純度：99%)。
LC-MS-16-3(ES, m/z):[M+1]=611
16.3 化合物16-4的合成
將化合物16-3(760 mg，1.244 mmol，1 equiv)溶於DCM(5 mL)中，隨後把TFA(5 mL)滴加到上述體系中，室溫攪拌2小時。然後把反應液旋乾得到化合物16-4(800 mg，粗品)。
LC-MS-16-4(ES, m/z):[M+1]=455
16.4 化合物16-5的合成
室溫下，將化合物16-4(600 mg，1.320 mmol，1 equiv)溶於THF(20 mL)中，隨後把TEA(267.13 mg，2.640 mmol，2 equiv)，Boc 2O(432.11 mg，1.980 mmol，1.5 equiv)滴加到上述體系中，室溫攪拌2小時。然後把反應液旋乾得到化合物粗品，所得粗品用矽膠柱層析純化，PE/EA(1/1)，餾分旋乾得化合物16-5(600 mg，81.95%，純度：99%)。
LC-MS-16-5(ES, m/z):[M+1]=555
16.5 化合物16-7的合成
室溫下，向100 mL單口瓶內加入化合物16-5(600 mg，1.320 mmol，1 equiv)，化合物16-6(1975.52 mg，4.328 mmol，4 equiv)，HOBt(292.33 mg，2.164 mmol，2 equiv)，DMF(50 mL)，DIPEA(279.33 mg，2.164 mmol，2 equiv)和TBTU(694.64 mg，2.164 mmol，2 equiv)，氮氣氛下室溫攪拌過夜。將反應液過濾，濾渣分別用甲醇、乙醚洗滌，濾渣旋乾得化合物16-7(2.6 g，粗品)。
16.6 化合物16-8的合成
室溫下，向100 mL單口瓶內加入化合物16-7(2.6 g，2.618 mmol，1 equiv)、DCM(25 mL，393.265 mmol，150.24 equiv)和TFA(25 mL，336.577 mmol，128.58 equiv)，氮氣氛下室溫攪拌過夜。將反應液過濾，濾渣用TFA/DCM(v/v, 1/1)洗滌，濾液旋乾得化合物16-8(1 g，粗品)。
LC-MS-16-8(ES, m/z):[M+1]=583
16.7 化合物16-9的合成
室溫下，將化合物16-8(1 g，1.716 mmol，1 equiv)溶於THF(20 mL)中，隨後把TEA(0.35 g，3.432 mmol，2 equiv)和Boc 2O(0.75 g，3.432 mmol，2 equiv)滴加到上述體系中，室溫攪拌2小時。然後把反應液旋乾得到化合物10粗品，所得粗品用矽膠柱層析純化，PE/EA(1/1)洗脫，餾分旋乾得化合物16-9(700 mg，52.10%，純度：99%)。
LC-MS-16-9(ES, m/z):[M+1]=783
16.8 化合物16-11的合成
室溫下，向50 mL單口瓶內加入化合物16-9(60 mg，0.076 mmol，1 equiv)、化合物16-10(18.18 mg，0.115 mmol，1.5 equiv)、TEA(15.51 mg，0.154 mmol，2 equiv)、DMF(2 mL)和HATU(43.71 mg，0.115 mmol，1.5 equiv)，氮氣氛下室溫攪拌過夜。反應液用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得化合物16-11(50 mg，70.68%，純度：99%)。
LC-MS-16-11(ES, m/z):[M+1]=923
16.9 化合物16的合成
室溫下，向50 mL單口瓶內加入化合物16-11(60 mg，0.065 mmol，1 equiv)、DCM(4 mL)和TFA(4 mL)，室溫攪拌2小時。將反應液旋乾，粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得化合物16(25 mg，53.21%，純度：99.8%)。
LC-MS-16(ES, m/z):[M+1]=723
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.49 – 7.17(m, 6H), 7.06(q, J= 14.0, 8.1 Hz, 4H), 4.58 – 4.33(m, 3H), 4.33 – 3.99(m, 2H), 3.87(dd, J= 36.1, 13.2 Hz, 1H), 3.74 – 3.37(m, 6H), 3.21(t, J= 13.4 Hz, 1H), 3.13 – 2.68(m, 7H), 2.02 – 1.77(m, 2H), 1.80 – 1.16(m, 11H), 0.82(dd, J= 18.2, 5.7 Hz, 6H).
實施例17  化合物17的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-17(ES, m/z):[M+1]=721
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.32(d, J= 7.3 Hz, 2H), 7.30 – 7.19(m, 4H), 7.11(d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.05(dd, J= 10.4, 6.5 Hz, 4H), 4.49(d, J= 16.9 Hz, 2H), 4.45 – 4.35(m, 1H), 4.27(s, 1H), 3.83(t, J= 13.7 Hz, 1H), 3.58 – 3.41(m, 2H), 3.26 – 3.13(m, 1H), 3.02(did, J= 19.7, 11.6, 4.7 Hz, 3H), 2.96 – 2.87(m, 3H), 2.87 – 2.75(m, 2H), 2.62 – 2.56(m, 2H), 2.54(s, 1H), 1.87(dd, J= 19.6, 8.9 Hz, 2H), 1.70 – 1.56(m, 4H), 1.50 – 1.43(m, 2H), 1.40 – 1.28(m, 3H), 0.89 – 0.72(m, 6H).
實施例18  化合物18的合成
LC-MS-18(ES, m/z):[M+1]=709
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.32(s, 1H), 8.29(s, 1H), 8.08(d, J= 4.9 Hz, 1H), 7.46 – 7.35(m, 1H), 7.29(dd, J= 8.1, 5.1 Hz, 1H), 7.10(dd, J= 4.4, 2.2 Hz, 3H), 6.96(t, J= 4.3 Hz, 2H), 4.48(s, 1H), 4.46 – 4.32(m, 2H), 4.22(t, J= 7.0 Hz, 1H), 3.85 – 3.22(m, 7H), 3.05 – 2.87(m, 3H), 2.83(t, J= 7.7 Hz, 2H), 2.73(ddd, J= 14.7, 9.6, 5.7 Hz, 1H), 2.27 – 1.94(m, 2H), 1.88 – 1.09(m, 11H), 0.86 – 0.64(m, 6H).
實施例19 化合物19的合成
LC-MS-19(ES, m/z):[M+1]=710
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.95(d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.37(s, 2H), 8.35(s, 1H), 7.09(dq, J= 45.5, 3.8, 3.3 Hz, 5H), 4.61(d, J= 18.1 Hz, 2H), 4.52 – 4.40(m, 2H), 4.31(t, J= 6.7 Hz, 1H), 3.94 – 3.24(m, 6H), 3.05(dt, J= 22.4, 6.0 Hz, 3H), 2.91(t, J= 7.7 Hz, 2H), 2.78(ddd, J= 14.1, 10.2, 7.5 Hz, 1H), 2.14(ddd, J= 35.9, 12.0, 5.5 Hz, 2H), 1.94 – 1.21(m, 11H), 0.97 – 0.69(m, 6H).
實施例20  化合物20的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-20(ES, m/z):[M+1]=713
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.33(s, 1H), 7.33 – 7.23(m, 2H), 7.27 – 7.21(m, 2H), 7.10 – 7.00(m, 5H), 4.74(s, 1H), 4.54 – 4.44(m, 2H), 4.39(d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.28(s, 1H), 4.20(d, J= 15.1 Hz, 1H), 4.05(s, 1H), 3.98 – 3.76(m, 1H), 3.72(d, J= 14.2 Hz, 1H), 3.63 – 3.55(m, 1H), 3.48(dd, J= 13.9, 7.6 Hz, 2H), 3.36(s, 2H), 3.32 – 3.21(m, 1H), 3.02(dq, J= 20.9, 5.7 Hz, 6H), 2.98 – 2.80(m, 1H), 2.73 – 2.64(m, 2H), 1.68(d, J= 6.1 Hz, 1H), 1.62(s, 5H), 1.47(s, 4H), 1.35(d, J= 12.0 Hz, 1H), 0.85 – 0.80(d, J= 5.5 Hz, 6H).
實施例21  化合物21的合成
21.1 化合物21-2的合成
氮氣保護，室溫下向中間體3(50 mg，0.064 mmol，1 equiv)的DMF(10 mL)溶液中加入化合物21-1(34.53 mg，0.256 mmol，4 equiv)，攪拌反應2小時後，室溫下滴加HATU(36.42 mg，0.096 mmol，1.5 equiv)和DIPEA(16.51 mg，0.128 mmol，2 equiv)。所得混合物用EA(3x100 mL)萃取，有機層用鹽水(3x10 mL)洗滌，用Na 2SO 4乾燥。所得濾液減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1% FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV200奈米檢測器)得到化合物21-2(58 mg，粗品)。
LC-MS-21-2(ES, m/z):[M+1]=900
21.2 化合物21的合成
氮氣保護，室溫下，化合物21-2(40 mg，0.044 mmol，1 equiv)在TFA(1 mL)/DCM(4 mL)的混合溶液攪拌反應2h。所得混合物濾液減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化，(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1% FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV200奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物21(18.6 mg，57.47%，純度：96.0%)。
LC-MS-21(ES, m/z):[M+1]=700
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.31(d, J= 7.3 Hz, 3H), 7.24(q, J= 3.6, 3.1 Hz, 3H), 7.05(dd, J= 12.4, 5.8 Hz, 4H), 4.74(s, 2H), 4.49(dt, J= 13.3, 4.4 Hz, 2H), 4.39(d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.28(s, 3H), 4.19(d, J= 14.8 Hz, 1H), 3.88(q, J= 15.4, 14.7 Hz, 1H), 3.70(d, J= 15.5 Hz, 1H), 3.67 – 3.51(m, 1H), 3.48(s, 1H), 3.28(d, J= 16.0 Hz, 1H), 3.19(s, 2H), 3.09 – 2.96(m, 3H), 2.87(dt, J= 27.6, 8.3 Hz, 3H), 1.69(t, J= 7.4 Hz, 2H), 1.62(q, J= 7.5 Hz, 2H), 1.47(s, 4H), 1.35(dt, J= 16.9, 8.0 Hz, 2H), 0.83(dt, J= 19.1, 3.9 Hz, 6H).
實施例22  化合物22的合成
LC-MS-22(ES, m/z):[M+1]=784
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 8.11(s, 1H), 7.61(t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.40(d, J= 3.4 Hz, 1H), 7.31 – 7.19(m, 5H), 7.18 – 6.99(m, 5H), 4.53 – 4.38(m, 2H), 4.36(s, 3H), 4.28(t, J= 7.6 Hz, 1H), 4.00(d, J= 13.8 Hz, 1H), 3.89(s, 1H), 3.61(d, J= 13.3 Hz, 1H), 3.55(s, 1H), 3.47(ddd, J= 21.8, 14.8, 6.7 Hz, 3H), 3.18 – 2.99(m, 3H), 2.95 – 2.82(m, 5H), 2.17(s, 3H), 1.99(d, J= 17.9 Hz, 3H), 1.92(s, 2H), 1.62(p, J= 6.8 Hz, 2H), 1.47(d, J= 7.3 Hz, 1H), 1.37(s, 4H), 1.20(t, J= 7.3 Hz, 1H), 0.82(dt, J= 16.5, 6.7 Hz, 6H), 0.67(d, J= 6.2 Hz, 1H).
實施例23  化合物23的合成
LC-MS-23(ES, m/z):[M+1]=840.46
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.29(s, 2H), 7.31 – 7.08(m, 6H), 7.00(dd, J= 35.0, 7.4 Hz, 4H), 4.80(s, 1H), 4.48 – 3.95(m, 6H), 3.54 – 3.35(m, 3H), 3.28 – 2.66(m, 12H), 2.15(s, 4H), 1.79(s, 3H), 1.65 – 1.15(m, 11H), 0.83 – 0.55(m, 6H).
實施例24  化合物24的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-24(ES, m/z):[M+1]=793
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.31(d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.30 – 7.21(m, 3H), 7.12(d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.04(t, J= 9.5 Hz, 4H), 4.48(d, J= 17.6 Hz, 3H), 4.39(d, J= 17.8 Hz, 1H), 4.27(s, 1H), 4.20(d, J= 12.5 Hz, 1H), 4.07(d, J= 13.1 Hz, 2H), 3.55(s, 5H), 3.20(d, J= 13.5 Hz, 1H), 2.96(s, 6H), 2.89(s, 1H), 1.86(s, 4H), 1.60(s, 6H), 1.46(d, J= 6.9 Hz, 1H), 1.35(s, 6H), 0.81-0.66(dd, J= 17.8, 5.7 Hz, 6H).
實施例25  化合物25的合成
LC-MS-25(ES, m/z):[M+1]=853
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 2H), 7.32(d, J= 7.3 Hz, 3H), 7.32 – 7.20(m, 3H), 7.05(d, J= 17.7 Hz, 1H), 7.05(s, 3H), 4.27(d, J= 7.3 Hz, 1H), 3.53(s, 4H), 3.41(s, 1H), 3.31(s, 1H), 3.03(dd, J= 15.0, 8.3 Hz, 3H), 2.89(q, J= 12.2, 9.9 Hz, 3H), 2.49(t, J= 12.5 Hz, 2H), 2.19 – 2.09(m, 2H), 1.82(s, 2H), 1.63(s, 8H), 1.51 – 1.43(m, 4H), 0.82(dd, J= 18.6, 5.9 Hz, 6H).
實施例26  化合物26的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-26(ES, m/z):[M+1]=758
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.39(s, 2H), 7.40 – 7.18(m, 6H), 7.16 – 7.00(m, 4H), 4.56 – 4.47(m, 2H), 4.47 – 4.35(m, 2H), 4.30(dq, J= 10.1, 5.2, 4.5 Hz, 1H), 4.20(d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.10(td, J= 13.3, 11.5, 6.9 Hz, 1H), 3.58(dd, J= 15.1, 6.5 Hz, 1H), 3.54 – 3.43(m, 1H), 3.37(dp, J= 11.2, 5.1 Hz, 1H), 3.28 – 3.14(m, 1H), 3.10 – 2.94(m, 3H), 2.92(dd, J= 7.8, 4.0 Hz, 1H), 2.90 – 2.77(m, 2H), 2.56(dd, J= 11.6, 4.2 Hz, 3H), 2.00(s, 1H), 1.94(d, J= 8.6 Hz, 1H), 1.75 – 1.55(m, 4H), 1.55 – 1.40(m, 4H), 1.40 – 1.27(m, 3H), 0.82(ddd, J= 17.6, 6.3, 2.6 Hz, 4H), 0.74(dd, J= 6.8, 3.3 Hz, 1H), 0.67(t, J= 5.4 Hz, 1H).
實施例27  化合物27的合成
LC-MS-27(ES, m/z):[M+1]=736
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.33(s, 1H), 7.52 – 7.10(m, 6H), 6.98(q, J= 4.8, 3.9 Hz, 4H), 4.57 – 4.26(m, 4H), 4.21(dd, J= 9.8, 4.8 Hz, 1H), 3.71(tt, J= 13.0, 5.6 Hz, 3H), 3.63 – 3.31(m, 3H), 3.25(td, J= 12.2, 8.6 Hz, 1H), 3.17 – 2.90(m, 3H), 2.91 – 2.58(m, 3H), 2.39 – 1.98(m, 3H), 1.94 – 1.15(m, 12H), 0.96 – 0.44(m, 6H).
實施例28  化合物28的合成
LC-MS-28(ES, m/z):[M+1]=722
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 2H), 7.41 – 7.18(m, 6H), 7.14 – 6.91(m, 4H), 4.58 – 4.22(m, 5H), 3.95 – 3.35(m, 7H), 3.16 – 2.78(m, 7H), 2.61(s, 3H), 2.33 – 2.01(m, 3H), 1.94 – 1.25(m, 12H), 0.84(dd, J= 18.5, 5.4 Hz, 6H).
實施例29  化合物29的合成
LC-MS-29(ES, m/z):[M+1]=734
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.32(d, J= 7.5 Hz, 3H), 7.23(dt, J= 7.7, 4.0 Hz, 3H), 7.04(d, J= 7.1 Hz, 4H), 4.51(s, 1H), 4.42(dd, J= 22.2, 16.8 Hz, 1H), 4.31 – 4.20(m, 3H), 4.09 – 3.97(m, 2H), 3.94(d, J= 10.0 Hz, 2H), 3.57(s, 1H), 3.49(dd, J= 9.9, 5.5 Hz, 1H), 3.33(dd, J= 28.5, 14.0 Hz, 1H), 3.06(d, J= 7.0 Hz, 1H), 3.01(s, 3H), 2.95 – 2.80(m, 3H), 1.88(d, J= 9.0 Hz, 2H), 1.83 – 1.72(m, 1H), 1.72 – 1.60(m, 4H), 1.48(s, 3H), 1.34(s, 3H), 0.83(dd, J= 19.5, 5.7 Hz, 6H).
實施例30  化合物30的合成
LC-MS-30-0(ES, m/z):[M+1]=749
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.68 – 6.76(m, 10H), 5.47(d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.61 – 4.18(m, 2H), 3.78 – 3.24(m, 6H), 3.21 – 2.76(m, 3H), 2.70 – 2.33(m, 5H), 2.11(dd, J= 14.2, 7.6 Hz, 2H), 1.95 – 1.15(m, 14H), 1.15 – 0.39(m, 6H).
LC-MS-30-100(ES, m/z):[M+1]=749
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.57 – 6.76(m, 10H), 5.51(d, J= 11.1 Hz, 1H), 4.35(d, J= 6.8 Hz, 1H), 3.75 – 3.12(m, 6H), 3.06 – 2.67(m, 3H), 2.46(d, J= 17.8 Hz, 5H), 2.12(dd, J= 13.7, 7.4 Hz, 2H), 2.00 – 1.18(m, 12H), 0.85(dd, J= 17.1, 5.1 Hz, 6H).
實施例31  化合物31的合成
LC-MS-31(ES, m/z):[M+1]=709
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.76 – 6.68(m, 10H), 5.15 – 4.80(m, 2H), 4.56 – 3.67(m, 6H), 3.61(d, J= 16.4 Hz, 4H), 3.30 – 2.97(m, 4H), 3.11 – 2.70(m, 4H), 2.19 – 1.79(m, 2H), 1.76 – 1.06(m, 11H), 0.95 – 0.39(m, 6H).
實施例32  化合物32的合成
按照實施例8的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-32(ES, m/z):[M+1]=782
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.51(s, 1H), 8.36(s, 1H), 7.93(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.35(d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.31 – 7.26(m, 4H), 7.22(d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.13(d, J= 7.4 Hz, 1H), 6.89(d, J= 6.8 Hz, 1H), 5.57 – 5.49(m, 1H), 4.49 – 4.41(m, 1H), 4.33(s, 2H), 4.24 – 4.16(m, 1H), 3.94(s, 1H), 3.69 – 3.50(m, 1H), 3.49(s,  3H), 3.24(dd, J= 13.7, 5.2 Hz, 1H), 3.07(s, 1H), 3.00 – 2.78(m, 2H), 2.53(d, J= 8.6 Hz, 3H), 2.43(d, J= 2.8 Hz, 3H), 1.87(s, 2H), 1.68 – 1.58(m, 2H), 1.57(s,  6H), 1.52(s, 1H), 1.35(s, 3H), 0.90 – 0.78(m, 2H), 0.83(s, 5H).
實施例33  化合物33的合成
按照實施例8的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-33(ES, m/z):[M+1]=793
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.59 – 7.10(m, 9H), 6.89(d, J= 6.7 Hz, 1H), 5.54(dd, J= 11.4, 4.5 Hz, 1H), 4.56 – 4.25(m, 2H), 4.25 – 4.03(m, 1H), 3.96 – 3.78(m, 3H), 3.72 – 3.42(m, 5H), 3.34 – 3.05(m, 2H), 3.05 – 2.73(m, 4H), 2.49(d, J= 39.1 Hz, 3H), 1.87(s, 4H), 1.57(d, J= 31.1 Hz, 9H), 1.34(dd, J= 24.6, 11.5 Hz, 4H), 0.85(dt, J= 13.0, 7.0 Hz, 6H).
實施例34  化合物34的合成
LC-MS-34(ES, m/z):[M+1]=712
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.26(s, 1H), 7.28 – 7.18(m, 3H), 7.15(td, J= 4.4, 1.9 Hz, 3H), 7.01 – 6.90(m, 4H), 4.67(s, 1H), 4.47 – 4.31(m, 3H), 4.31 – 4.18(m, 2H), 3.81(s, 1H), 3.51(dt, J= 15.1, 5.8 Hz, 1H), 3.35(ddd, J= 28.0, 13.3, 7.3 Hz, 2H), 3.02 – 2.87(m, 4H), 2.80(dddd, J= 23.1, 13.9, 9.1, 4.7 Hz, 4H), 2.03 – 1.77(m, 4H), 1.56(ddt, J= 20.7, 8.8, 4.7 Hz, 4H), 1.44 – 1.20(m, 5H), 0.74(ddd, J= 15.8, 5.2, 2.4 Hz, 6H).
實施例35  化合物35的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-35(ES, m/z):[M+1]=675
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.29(s, 2H), 7.18(dtd, J= 29.2, 8.0, 7.1, 2.7 Hz, 6H), 7.08 – 6.88(m, 4H), 4.49 – 4.11(m, 4H), 3.62 – 3.23(m, 5H), 3.16 – 2.71(m, 8H), 1.88 – 1.14(m, 14H), 0.78 – 0.53(m, 6H).
實施例36  化合物36的合成
按照實施例8的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-36(ES, m/z):[M+1]=700
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.43 – 7.17(m, 8H), 7.13(d, J= 7.4 Hz, 1H), 6.91 – 6.85(m, 1H), 5.56 – 5.49(m, 1H), 4.45(dd, J= 9.0, 6.2 Hz, 1H), 4.29(d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.17(d, J= 15.9 Hz, 1H), 3.94 – 3.84(m, 1H), 3.67(dd, J= 25.3, 12.6 Hz, 1H), 3.61 – 3.45(m, 2H), 3.35(t, J= 11.9 Hz, 1H), 3.28(s, 1H), 3.20(s, 5H), 3.18 – 3.06(m, 1H), 3.01 – 2.72(m, 3H), 2.54(s, 2H), 2.43(s, 1H), 1.63(s, 1H), 1.61 – 1.49(m, 4H), 1.34(t, J= 7.9 Hz, 1H), 0.85(ddd, J= 15.5, 9.9, 5.4 Hz, 6H).
實施例37  化合物37的合成
按照實施例8的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-37(ES, m/z):[M+1]=652
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.54 – 6.66(m, 10H), 5.52(dd, J= 11.4, 5.7 Hz, 1H), 4.64 – 4.13(m, 2H), 3.91 – 3.30(m, 10H), 3.35 – 2.73(m, 4H), 2.48(d, J= 40.5 Hz, 3H), 1.95 – 1.22(m, 9H), 0.84(dt, J= 15.4, 7.6 Hz, 6H).
實施例38  化合物38的合成
LC-MS-38(ES, m/z):[M+1]=651
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 1H), 7.57 – 6.68(m, 10H), 5.52(dd, J= 11.0, 4.5 Hz, 1H), 4.70 – 4.10(m, 2H), 4.13 – 3.32(m, 6H), 3.27 – 2.73(m, 8H), 2.73 – 2.30(m, 3H), 1.90 – 1.41(m, 9H), 1.44 – 1.01(m, 3H), 1.01 – 0.42(m, 6H).
實施例39  化合物39的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-39(ES, m/z):[M+1]=652
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 7.68 – 6.57(m, 10H), 4.50 – 3.83(m, 4H), 3.77 – 3.21(m, 10H), 3.16 – 2.57(m, 6H), 1.76 – 1.03(m, 9H), 0.98 – 0.23(m, 6H).
實施例40  化合物40的合成
LC-MS-40(ES, m/z):[M+1]=651
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 1H), 7.53 – 7.15(m, 6H), 7.08 – 6.79(m, 4H), 4.58 – 4.15(m, 5H), 3.96 – 3.34(m, 6H), 3.34 – 2.77(m, 10H), 1.77-21.22(m, 9H), 0.80(dd, J= 19.9, 5.3 Hz, 6H).
實施例41  化合物41的合成
LC-MS-41(ES, m/z):[M+1]=723
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.32(q, J= 7.1 Hz, 3H), 7.26 – 7.20(m, 3H), 7.06(t, J= 4.7 Hz, 4H), 4.54 – 4.46(m, 2H), 4.40(d, J= 17.4 Hz, 2H), 4.28(d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.01(s, 2H), 3.67 – 3.54(m, 4H), 3.48(dt, J= 15.2, 6.8 Hz, 1H), 3.28 – 3.11(m, 3H), 2.95(dqd, J= 44.1, 15.2, 14.4, 6.9 Hz, 6H), 2.67(t, J= 13.1 Hz, 1H), 1.87 – 1.59(m, 6H), 1.48(t, J= 7.5 Hz, 3H), 1.26(dt, J= 13.0, 6.8 Hz, 3H), 0.83(dq, J= 18.4, 3.4 Hz, 6H).
實施例42  化合物42的合成
LC-MS-42(ES, m/z):[M+1]=666
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 1H), 7.32(q, J= 7.0 Hz, 3H), 7.23(q, J= 3.8 Hz, 3H), 7.05(t, J= 5.2 Hz, 4H), 4.53 – 4.45(m, 2H), 4.40(d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.28(t, J= 6.9 Hz, 1H), 4.21 – 4.09(m, 1H), 3.84(d, J= 16.9 Hz, 1H), 3.57(t, J= 8.5 Hz, 5H), 3.45(dq, J= 15.4, 5.4, 5.0 Hz, 1H), 3.23(d, J= 13.5 Hz, 1H), 3.03(dd, J= 13.0, 6.4 Hz, 1H), 2.97(d, J= 6.6 Hz, 2H), 2.91 – 2.79(m, 1H), 2.86(s, 1H), 1.93(d, J= 12.6 Hz, 1H), 1.86(d, J= 15.1 Hz, 1H), 1.48(s, 2H), 1.49 – 1.44(m, 2H), 1.24(q, J= 7.0 Hz, 4H), 0.88 – 0.77(m, 6H).
實施例43  化合物43的合成
LC-MS-43(ES, m/z):[M+1]=723
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.35(s, 2H), 7.35(dd, J= 12.2, 5.2 Hz, 3H), 7.30 – 6.81(m, 7H), 5.70 – 5.42(m, 1H), 4.46 – 4.28(m, 2H), 4.12 – 3.83(m, 2H), 3.61(d, J= 11.6 Hz, 3H), 3.50(q, J= 11.8, 9.2 Hz, 2H), 3.30 – 3.02(m, 4H), 2.91(h, J= 10.1, 9.2 Hz, 3H), 2.70 – 2.50(m, 3H), 2.43(d, J= 4.9 Hz, 1H), 2.00 – 1.63(m, 5H), 1.60 – 1.44(m, 3H), 1.37 – 0.98(m, 3H), 0.95 – 0.50(m, 6H).
實施例44  化合物44的合成
LC-MS-44(ES, m/z):[M+1]=706
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.28(s, 2H), 7.28 – 7.09(m, 6H), 7.07 – 6.90(m, 4H), 4.49 – 4.10(m, 5H), 4.04 – 3.79(m, 2H), 3.59 – 3.28(m, 2H), 3.13(ddt, J= 36.4, 14.4, 7.9 Hz, 3H), 2.99 – 2.67(m, 6H), 2.68 – 2.52(m, 2H), 2.13 – 1.94(m, 3H), 1.86 – 1.02(m, 12H), 0.84 – 0.51(m, 6H).
實施例45  化合物45的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-45(ES, m/z):[M+1]=708
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.29(s, 1H), 7.29 – 7.07(m, 6H), 7.07 – 6.91(m, 4H), 4.46 – 4.25(m, 3H), 4.25 – 3.93(m, 2H), 3.90 – 3.58(m, 2H), 3.58 – 3.29(m, 2H), 3.13(t, J= 13.6 Hz, 1H), 3.02 – 2.64(m, 7H), 1.79(dd, J= 19.2, 5.9 Hz, 5H), 1.64 – 1.08(m, 11H), 0.79 – 0.54(m, 6H).
實施例46  化合物46的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-46(ES, m/z):[M+1]=709
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(d, J= 2.0 Hz, 2H), 7.33 – 7.17(m, 6H), 7.01(dq, J= 13.1, 5.3, 4.5 Hz, 4H), 4.52 – 4.41(m, 2H), 4.35(dd, J= 17.6, 4.9 Hz, 1H), 4.25(dd, J= 8.8, 5.9 Hz, 1H), 3.61(d, J= 3.0 Hz, 6H), 3.50(t, J= 6.6 Hz, 3H), 3.38(s, 1H), 3.01(dt, J= 14.3, 4.5 Hz, 1H), 2.96 – 2.76(m, 5H), 1.68 – 1.52(m, 4H), 1.43(q, J= 10.1, 8.0 Hz, 3H), 1.35 – 1.25(m, 2H), 0.84 – 0.74(m, 6H).
實施例47  化合物47的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-47(ES, m/z):[M+1]=693
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.33(s, 2H), 7.31 – 7.14(m, 6H), 7.00(dd, J= 11.1, 5.8 Hz, 4H), 4.47(dd, J= 13.2, 7.5 Hz, 2H), 4.38 – 4.22(m, 2H), 3.68 – 3.51(m, 5H), 3.38(tdt, J= 24.0, 18.3, 9.2 Hz, 5H), 3.05 – 2.79(m, 6H), 2.03(t, J= 6.9 Hz, 3H), 1.70 – 1.53(m, 4H), 1.43(hept, J= 6.6, 5.9 Hz, 3H), 1.36 – 1.22(m, 2H), 0.79(dd, J= 18.2, 5.9 Hz, 6H).
實施例48  化合物48的合成
LC-MS-48(ES, m/z):[M+1]=673.43
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 7.28 – 7.14(m, 5H), 4.70(s, 1H), 4.65(s, 2H), 4.43(dd, J= 9.5, 5.7 Hz, 1H), 4.28 – 4.21(m, 1H), 3.56(s, 2H), 3.35(dt, J= 14.1, 7.2 Hz, 2H), 3.13 – 2.89(m, 2H), 2.87(s, 2H), 2.86(d, J= 7.6 Hz, 2H), 2.85 – 2.75(m, 2H), 1.98(dd, J= 13.5, 6.8 Hz, 1H), 1.87(d, J= 9.5 Hz, 1H), 1.55(dq, J= 15.0, 7.6 Hz, 6H), 1.45(s, 5H), 0.77(dd, J= 17.0, 5.1 Hz, 7H), 0.66 – 0.59(m, 1H), 0.33(d, J= 7.8 Hz, 2H).
實施例49  化合物49的合成
LC-MS-49(ES, m/z):[M+1]=700
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 7.31(t, J= 7.3 Hz, 2H), 7.23(dd, J= 17.4, 7.3 Hz, 3H), 4.76(d, J= 6.2 Hz, 1H), 4.69(s, 1H), 4.49(dd, J= 9.7, 5.4 Hz, 1H), 4.30(d, J= 8.6 Hz, 1H), 3.74(s, 2H), 3.56(ddd, J= 29.1, 13.5, 7.1 Hz,2H), 3.34(ddt, J= 16.1, 10.9, 5.8 Hz, 1H), 3.14(dd, J= 14.4, 6.6 Hz, 2H), 2.93(dq, J= 14.1, 6.5 Hz, 6H), 2.22 – 2.11(m, 1H), 2.09(s, 1H), 1.72(s, 5H), 1.62(t, J= 7.7 Hz, 2H), 1.47(s, 10H), 1.37(s, 1H), 0.94(s, 1H), 0.84(dd, J= 17.7, 5.3 Hz, 7H).
實施例50  化合物50的合成
LC-MS-50(ES, m/z):[M+1]=726
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.29(s, 2H), 7.18 – 7.12(m, 3H), 6.98(d, J= 5.5 Hz, 2H), 6.91(td, J= 8.0, 6.9, 3.2 Hz, 4H), 4.45 – 4.34(m, 2H), 4.31 – 4.17(m, 2H), 3.75 – 3.57(m, 3H), 3.51(dq, J= 13.0, 6.3, 5.7 Hz, 2H), 3.35(dtt, J= 21.5, 10.9, 6.0 Hz, 1H), 2.97(dt, J= 14.0, 4.6 Hz, 1H), 2.90(q, J= 5.4 Hz, 2H), 2.83(t, J= 7.7 Hz, 2H), 2.75(ddd, J= 13.5, 9.2, 3.4 Hz, 1H), 2.15 – 2.06(m, 1H), 2.01(dd, J= 13.5, 7.7 Hz, 1H), 1.75(dt, J= 13.3, 5.6 Hz, 1H), 1.68 – 1.59(m, 2H), 1.56(s, 1H), 1.53(d, J= 7.5 Hz, 1H), 1.40(q, J= 9.4, 8.3 Hz, 3H), 1.35 – 1.22(m, 2H), 0.74(dd, J= 18.9, 5.1 Hz, 6H).
實施例51  化合物51的合成
按照實施例16的類似步驟製備目標化合物，其中將反應原料化合物 替換為 ，具體如下所示：
LC-MS-51(ES, m/z):[M+1]=829
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.34 – 7.22(m, 3H), 7.21(dt, J= 6.3, 2.6 Hz, 3H), 7.07 – 6.97(m, 4H), 4.52 – 4.42(m, 2H), 4.36(d, J= 17.5 Hz, 1H), 4.25(dd, J= 8.8, 5.7 Hz, 1H), 3.74(d, J= 13.5 Hz, 2H), 3.63 – 3.37(m, 4H), 3.28(ddd, J= 17.5, 11.7, 4.4 Hz, 2H), 3.16(td, J= 8.7, 8.2, 4.1 Hz, 1H), 3.04(ddt, J= 20.9, 12.1, 5.0 Hz, 2H), 2.99 – 2.77(m, 7H), 1.71 – 1.63(m, 1H), 1.60(ddd, J= 14.5, 9.7, 5.6 Hz, 3H), 1.44(s, 3H), 1.35(ddd, J= 30.9, 14.8, 7.2 Hz, 1H), 0.79(dd, J= 18.9, 5.7 Hz, 6H).
實施例1A  化合物1A的合成
1.1 化合物1A-1的合成
將4-胺基哌啶-1-羧酸苄酯(100 mg，0.427 mmol，1.00 equiv)和TEA(0.2毫升，2.693 mmol，6.31 equiv)溶於DCM(15 mL),分批次加入氯甲酸甲酯(60.49 mg，0.640 mmol，1.5 equiv)。混合物在室溫下攪拌2小時。隨後加入飽和氯化銨溶液淬滅反應。DCM(15 mL*3)萃取，有機相合併乾燥、旋乾，得到粗品，通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-羧酸苄酯。
LC-MS-1A-1(ES, m/z):[M+1]=293
1.2 化合物1A-2的合成
向攪拌的4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-羧酸苄酯(180 mg，0.616 mmol，1.00 equiv)THF(12 mL)溶液中加入Pd/C(18 mg，w/t, 10%)。將混合物在氫氣氣氛下攪拌13小時。所得混合物用MeOH(7×50 mL)洗滌。濾液減壓濃縮得到N-(哌啶-4-基)胺基甲酸甲酯(100 mg，粗品)。
LC-MS-1A-2(ES, m/z):[M+1]=159
1.3 化合物1A-3的合成
向攪拌的N-(哌啶-4-基)胺基甲酸甲酯(19.51 mg，0.123 mmol，3.00 equiv)的 DMF(10 mL)溶液中加入DIPEA(1.48 mg，0.123 mmol，3 equiv)、中間體2(31 mg，0.041 mmol，1.00 equiv)和HATU(23.45 mg，0.061 mmol，1.5 equiv)。反應液在室溫氮氣氣氛下進行3小時。加水(12 mL)淬滅反應，乙酸乙酯(3x10 mL)萃取。有機相合併乾燥旋乾，得到粗品，通過反相管柱層析純化，用CH 3CN/H 2O(0.1%FA)(6:1)洗脫，餾分旋乾得到N-[(5R)-5-[(2R))-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲氧基羰基))胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯。
LC-MS-1A-3(ES, m/z):[M+1]=894
1.4 化合物1A的合成
將N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{4-[(甲氧基羰基)胺基]哌啶-1-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(350 mg，0.391 mmol，1 equiv)溶於4 M HCl(氣體)/1,4-二氧六環(5 mL)，在室溫下反應4小時。減壓濃縮所得混合物。殘留物通過製備型HPLC純化，餾分旋乾得到N-{1-[(2R)-6-胺基-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3]-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]己醯基]哌啶-4-基}胺基甲酸甲酯(169.1 mg，62.01%，純度：99.2%)。
LC-MS-1A(ES, m/z):[M+1]=693
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 7.45 – 6.86(m, 10H), 4.63 – 4.47(m, 2H), 4.27 – 4.06(m, 3H), 3.85(dd, J= 37.5, 14.1 Hz, 1H), 3.55(d, J= 3.6 Hz, 4H), 3.32 – 2.69(m, 8H), 2.14 – 1.71(m, 2H), 1.73 – 1.13(m, 11H), 0.82(dq, J= 20.0, 2.6 Hz, 6H).
實施例2A  化合物2A的合成
2.1 化合物 2A-1的合成
在0攝氏度及氮氣氛圍下，向攪拌的茚(1.16 g，9.986 mmol，1.00 equiv)的THF(12.00毫升，148.116 mmol，14.83 equiv)溶液中滴加雙(三甲基矽基)胺基鋰(19.97 mL，119.348 mmol，11.95 equiv)。將所得混合物在氮氣氛下在0℃攪拌1小時。在0℃下向上述混合物中滴加N,N-雙(2-氯乙基)胺基甲酸叔丁酯(2.42 g，9.994 mmol，1.00 equiv)。將所得混合物在0℃下再攪拌1小時。減壓濃縮得粗品。粗品通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(9:1)洗脫，餾分旋乾得到螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.22 g，77.90%，純度：99%)。
LC-MS-2A-1(ES, m/z):[M+1]=286
2.2  化合物2A-2的合成
在0攝氏度氮氣氛下向攪拌的螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.22 g，7.779 mmol，1.00 equiv)的THF(22毫升)溶液中加入硼烷二甲硫醚絡合物2M(THF)(19.45 mL，38.895 mmol，5 equiv)。將所得混合物在氮氣氛下在0℃攪拌4小時。在0℃下向上述混合物中滴加氫氧化鈉(2M)(23.34 mL，46.674 mmol，6 equiv)和雙氧水(6.66 mL，285.878 mmol，36.75 equiv)。所得混合物在0℃下再攪拌30分鐘。隨後用乙酸乙酯(1x150 mL)萃取，合併的有機相，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘留物通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脫，餾分旋乾得到2-羥基-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(959 mg，40.63%，純度：99%)。
LC-MS-2A-2(ES, m/z):[M+1]=304
2.3  化合物2A-3的合成
室溫條件下分批次向2-羥基-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(780 mg，2.571 mmol，1.00 equiv)的二氯甲烷(16 mL)溶液中加入戴斯-馬丁試劑(2180.81 mg，5.142 mmol，2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌12小時。過濾所得混合物，濾餅用二氯甲烷(1x20 mL)洗滌。合併的有機層用碳酸氫鈉水溶液(1x15 mL)和鹽水(1x15 mL)洗滌，乙酸乙酯萃取，合併有機相經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脫，餾分旋乾得到2-側氧基-3H-螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(550 mg , 70.98%，純度：99%)。
LC-MS-2A-3(ES, m/z):[M+1]=302
2.4  化合物2A-4的合成
在室溫下分批次向攪拌的2-側氧基-3H-螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(1.72 g，5.707 mmol，1.00 equiv)和鈦酸乙酯(4 mL)混合物中加入叔丁烷亞磺醯胺(2.08 g，17.121 mmol，3 equiv)。將所得混合物在85℃下攪拌2小時。在室溫下用水淬滅反應。過濾所得混合物，濾餅用乙酸乙酯(3x10 mL)洗滌。減壓濃縮濾液。所得混合物用乙酸乙酯(2x50 mL)萃取。合併的有機相(1x40 mL)，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脫，餾分旋乾得到(2E)-2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)亞胺基]-3H-螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(450 mg，19.49%，純度：99%)。
LC-MS-2A-4(ES, m/z):[M+1]=405
2.5 化合物2A-5的合成
在0℃下及氮氣氣氛下向攪拌的(2E)-2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)亞胺基]-3H-螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(350 mg，0.865 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中分批加入BH 3.THF(1.73 mL，1.730 mmol，2 equiv)。將所得混合物在氮氣氛下在0℃下攪拌2小時。在室溫下用甲醇淬滅反應。將所得混合物減壓濃縮得到2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(380 mg，粗品)。
LC-MS-2A-5(ES, m/z):[M+1]=407
2.6 化合物2A-6的合成
室溫下向攪拌的2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100 mg，0.246 mmol)二氯甲烷(1.7 mL)溶液中加入TFA(0.3 mL)。所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。真空濃縮所得混合物，得到N-{2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-2-基}-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(100 mg，粗品)。
LC-MS-2A-6(ES, m/z):[M+1]=307
2.7 化合物2A-7的合成
室溫下分批向N-{2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-2-基}-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(100.00 mg，0.327 mmol，1.1 equiv)的二甲基甲醯胺(2 mL)溶液加入二異丙基乙胺(115.01 mg，0.891 mmol，3 equiv)、中間體2(223.64 mg，0.297 mmol，1.00 equiv)和HATU(135.34 mg，0.3156 mmol，1.2 equiv)。所得混合物在室溫下攪拌反應過夜。所得溶液通過反相快速管柱層析法純化，餾分旋乾得到N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(70 mg，22.64%，純度：99%)。
LC-MS-2A-7(ES, m/z):[M+1]=1042
2.8 化合物2A的合成
室溫下向攪拌的N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{2-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(70 mg，0.067 mmol，1.00 equiv)的二氧六環(2 mL)溶液分批加入4 M HCl(氣體)/1,4-二氧六環(2 mL)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮所得混合物。粗產物(50 mg)通過製備HPLC純化得到(2R)-N-[(2R)-6-胺基-1-{2-胺基-2,3-二氫螺[茚-1,4'-哌啶]-1'-yl}-1-側氧基己基-2-yl]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺(24.7 mg，41.65%，純度為83.3%)。
LC-MS-2A(ES, m/z):[M+1]=738
1H NMR-2(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.26(s, 3H), 7.48 – 6.89(m, 14H), 4.52(ddt, J= 25.9, 13.0, 7.1 Hz, 2H), 4.14(dq, J= 17.7, 5.4, 4.2 Hz, 2H), 3.99(q, J= 8.3, 7.1 Hz, 2H), 3.86 – 3.23(m, 3H), 3.16 – 2.65(m, 7H), 2.25 – 1.18(m, 13H), 0.97 – 0.56(m, 6H).
實施例3A  化合物3A的合成
3.1 化合物3A-1的合成
在0°C下，向溶有(3-溴吡啶-2-基)甲醇(1 g，5.318 mmol，1.00 equiv)的DCM攪拌溶液中分批加入亞硫醯氯(1.27 g，10.636 mmol，2.0 equiv)。將所得混合物在0℃攪拌4小時。混合物用飽和NaHCO 3(aq.)中和至pH 7。粗品通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(5:1)洗脫，餾分旋乾得到3-溴-2-(氯甲基)吡啶(700 mg，64.4%，純度：99%)。
LC-MS-3A-1(ES, m/z):[M+1]=205
3.2 化合物3A-2的合成
在-30℃和氮氣保護下，向溶有1-叔丁基4-甲基哌啶-1,4-二羧酸酯(2.65 g，10.897 mmol，1.5 equiv)的THF(50 mL)滴加LDA(10 mL，73.747 mmol，10.15 equiv)，30分鐘後向上述溶液中滴加 3-溴-2-(氯甲基)吡啶(1.5 g，7.265 mmol，1 equiv)的THF溶液，室溫攪拌過夜。在室溫下，用飽和NH 4Cl(水溶液)淬滅反應。乙酸乙酯萃取，合併有機相並旋乾，粗品通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到1-叔丁基4-甲基4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]哌啶-1,4-二羧酸酯(3.7 g，82.4%，純度：99%)。
LC-MS-3A-2(ES, m/z):[M+1]=413
3.3 化合物3A-3的合成
在70℃下，向溶有1-叔丁基4-甲基4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]哌啶-1,4-二羧酸酯(1.2 g，2.903 mmol，1.00 equiv)的甲醇中加入LiOH(0.37 g，8.709 mmol，3 equiv)。混合物在70℃下攪拌6小時。反應液冷卻，隨後用HCl(aq.)將混合物的pH調節至6。乙酸乙酯萃取，合併有機相並乾燥旋乾，粗品經矽膠柱層析純化，PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(630 mg，54.34%，純度：99%)。
LC-MS-3A-3(ES, m/z):[M+1]=399
3.4 化合物3A-4的合成
在室溫和氮氣保護下，向溶有N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(200 mg，2.029 mmol，1 equiv)和4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(1604.22 mg，4.058 mmol，2 equiv)的DMF攪拌溶液中加入DIPEA(786.87 mg，6.087 mmol，3 equiv)和HATU(1543.30 mg，4.058 mmol，2 equiv)。將混合物在氮氣保護和0℃條件下攪拌3小時。反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取，合併有機相並乾燥旋乾，粗品通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]-4-(甲氧基(甲基)胺基甲醯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(120 mg，13.52%，純度：99%)。
LC-MS-3A-4(ES, m/z):[M+1]=442
3.5 化合物3A-5的合成
在-78℃和氮氣保護下，向溶有4-[(3-溴吡啶-2-基)甲基]-4-[甲氧基(甲基)胺基甲醯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2 g，2.713 mmol，1 equiv)的THF混合物中加入丁基鋰(1.74 mL，27.130 mmol，10 equiv)。將混合物在-78℃、氮氣保護下攪拌3小時。在室溫下加入飽和NH 4Cl(aq.)(2 mL)溶液淬滅反應。乙酸乙酯萃取，合併有機相並乾燥旋乾，粗品通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到5-側氧基-7H-螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(590 mg，71.93%，純度：99%)。
LC-MS-3A-5(ES, m/z):[M+1]=303
3.6 化合物3A-6的合成
在空氣條件下，向5-側氧基-7H-螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(25 mg，0.083 mmol，1 equiv)的攪拌液中滴加叔丁烷亞磺醯胺(30.06 mg，0.249 mmol，3 equiv)。將混合物在氮氣保護和110℃條件下攪拌4小時。反應液冷卻至室溫，隨後加水淬滅反應。乙酸乙酯萃取，合併有機相並乾燥旋乾，粗品通過矽膠管柱層析純化，用PE/EA(1:1)洗脫，餾分旋乾得到(5Z)-5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)亞胺基]-7H-螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(10 mg，29.82%，純度：99%)。
LC-MS-3A-6(ES, m/z):[M+1]=413
3.7 化合物3A-7的合成
在0℃和氮氣保護下，將溶有(5Z)-5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)亞胺基]-7H-螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(20 mg ,0.049 mmol，1 equiv)和BH 3-THF(0.2 mL，2.327 mmol，47.19 equiv)/THF攪拌3小時。在室溫下加入MeOH(2 mL)來淬滅反應。反應液通過反相快速管柱層析法純化，條件如下：柱，矽膠柱；流動相，MeCN/水溶液，10分鐘內梯度10%至100%；檢測器，UV 220 nm。餾分旋乾得到5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-5,7-二氫螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(10 mg，49.75 %，純度：99%)。
LC-MS-3A-7(ES, m/z):[M+1]=408
3.8 化合物3A-8的合成
在室溫和空氣條件下，將5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-5,7-二氫螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(180 mg，0.4421 mmol，1 equiv)和TFA(1 mL，13.463 mmol，30.48 equiv)溶於DCM中攪拌3小時。減壓濃縮所得混合物。得N-{5,7-二氫螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基}-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(66 mg，粗品)，無需進一步純化直接用於下一步。
LC-MS-3A-8(ES, m/z):[M+1]=308
3.9 化合物3A-9的合成
在室溫和空氣條件下，將溶有N-{5,7-二氫螺[環戊二烯[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基}-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(66 mg，0.107 mmol，1 equiv)和中間體2(126.70 mg，0.086 mmol，0.8 equiv)的DMF溶液攪拌1分鐘。在室溫下向上述混合物中加入DIPEA(41.62 mg，0.323 mmol，1.5 equiv)和HATU(163.24 mg，0.430 mmol，2 equiv)。在室溫和氮保護下攪拌混合物3小時。反應液通過反相快速管柱層析法純化，條件如下：柱，矽膠；流動相，MeCN水溶液，10分鐘內梯度10%至50%；檢測器，UV 220 nm。餾分旋乾得N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-5,7-二氫螺[環戊二烯[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(30 mg，13.39%，純度：99%)。
LC-MS-3A-9(ES, m/z):[M+1]=1043
3.10 化合物3A的合成
向N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧羰基)胺基]-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-{5-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-5,7-二氫螺[環戊二烯[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基}-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(110 mg，0.105 mmol，1equiv)逐滴加入4 M的 HCl(氣體)/1,4-二氧六環(5 mL)，在室溫和氮氣保護下攪拌3小時。減壓濃縮得粗品。粗產物(100 mg)通過製備型HPLC在以下條件下純化(柱，C18矽膠；流動相，乙腈/水溶液，10分鐘內10%至50%梯度；檢測器，UV 220 nm)，餾分旋乾得到(2R)-N-[(2R)-6-胺基-1-{5-胺基-5,7-二氫螺[環戊二烯[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基}-1-側氧基己烷-2-基]-2-[(2R)-2-胺基-3-苯丙醯胺基]-3-苯丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺(20.1 mg，18.2%，純度為70.3%)。
LC-MS-3A(ES, m/z):[M+1]=739
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.40(s, 1H), 8.27(s, 3H), 7.81(dd, J= 8.2, 4.4 Hz, 1H), 7.41 – 6.90(m, 11H), 4.58 – 4.38(m, 2H), 4.36 – 4.16(m, 2H), 4.10(s, 2H), 3.98 – 3.71(m, 1H), 3.39(d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.23 – 2.72(m, 9H), 1.81 – 1.20(m, 13H), 0.79(dt, J= 20.4, 5.1 Hz, 6H).
實施例4A  化合物4A的合成
4.1 化合物4A-1的合成
氮氣氛圍下，在0℃下向攪拌的6-氯吡啶-2-胺(500 mg，3.889 mmol，1.00 equiv)四氫呋喃(10 mL)溶液中加入二(三甲基矽基)胺基鈉(1426.37 mg，7.778 mmol)。向上述混合物中滴加二叔丁基二碳酸酯(933.69 mg，4.278 mmol，1.1 equiv)。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。在0℃下用水/冰淬滅反應。所得混合物用乙酸乙酯(3×10 mL)萃取。合併的有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，濾液減壓濃縮，矽膠柱層析純化，石油醚/乙酸乙酯(10:1)洗脫，餾分旋乾得N-(6-氯吡啶-2-基)胺基甲酸叔丁酯(800 mg，89.95%，純度：99%)。
LC-MS-4A-1(ES, m/z):[M+1]=229
4.2 化合物4A-2的合成
在兩頸圓底燒瓶中，將四甲基乙二胺(3353.91 mg，28.862 mmol，2.2 equiv)溶解在四氫呋喃(78.43 mL)。在-78℃下向上述混合物中逐滴加入正丁基鋰(1848.71 mg，28.862 mmol，2.2 equiv)。在-20℃下將混合物再攪拌30分鐘。在-78℃下向上述混合物中逐滴加入4-側氧基哌啶-1-羧酸苄酯(4590.26 mg，19.678 mmol，1.5 equiv)。將混合物在-78℃下再攪拌1小時。在-50℃下向上述混合物中逐滴加入N-(6-氯吡啶-2-基)胺基甲酸叔丁酯(3000 mg，13.119 mmol，1.00 equiv)。所得混合物在40℃下攪拌過夜。將所得混合物濃縮減壓得到殘餘物，殘餘物通過矽膠管柱層析純化，用石油醚/乙酸乙酯(2:1)洗脫，得7'-氯-2'-側氧基-1'H-螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-1-羧酸苄酯(3000 mg，58.97%，純度：99%)。
LC-MS-4A-2(ES, m/z):[M+1]=388
4.3 化合物4A-3的合成
將7'-氯-2'-側氧基-1'H-螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-1-羧酸苄酯(230 mg，0.612 mmol，1.00 equiv)溶解在甲醇(20 mL)中，加入Pd/C(12.62 mg，w/t，10%)，置換氫氣3次。將所得混合物在氫氣氛圍下於室溫攪拌過夜。過濾所得混合物，濾餅用甲醇(3x10 mL)洗滌。減壓濃縮濾液，得到螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-2'(1'H)-酮(110 mg，粗品)。
LC-MS-4A-3(ES, m/z):[M+1]=220
4.4 化合物4A-4的合成
將螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-2'(1'H)-酮(44 mg，0.138 mmol,1.00 equiv)和中間體2(100 mg，0.067 mmol，0.5 equiv)溶於DMF(2 mL)中，分批加入二異丙基乙胺(34 mg，0.4 mmol，3.00 equiv)和HATU(76 mg，0.207 mmol，1.50 equiv)。將混合物在室溫和氮氣氛圍下攪拌過夜。加水(10 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(3x10 mL)萃取。合併有機相，乾燥、真空濃縮。得到((10R,13R,16R,19R)-16-苄基-13-異丁基-2,2-二甲基4,12,15,18-四側氧基-10-(2'-側氧基-1',2'二氫螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-1-羰基)-20-苯基-3-氧雜-5,11,14,17-四氮雜二十烷-19-基)胺基甲酸叔丁酯(120 mg，粗品)。
LC-MS-4A-4(ES, m/z):[M+1]=955
4.5 化合物4A的合成
向50 mL圓底燒瓶中加入((10R,13R,16R,19R)-16-苄基-13-異丁基-2,2-二甲基4,12,15,18-四側氧基-10-(2'-側氧基-1',2'二氫螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-1-羰基)-20-苯基-3-氧雜-5,11,14,17-四氮雜二十烷-19-基)胺基甲酸叔丁酯(120 mg，0.126 mmol，1.00 equiv)和4 M HCl(氣體)的1,4-二氧六環(4 mL)溶液。將所得混合物在室溫和下攪拌1小時。減壓下濃縮所得混合物，通過反向快速管柱層析純化，餾分旋乾得到(2R)-N-[(2R)-6-胺基-1-側氧基-1-{2'-側氧基-1'H-螺[哌啶-4,4'-吡啶並[2,3-d][1,3]惡嗪]-1-基}己-2-基]-2-[(2R)-2-[(2R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺(7 mg，7.31%，純度：99.2%)。
LC-MS-4A(ES, m/z):[M+1]=755
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 2H), 8.10(dd, J= 10.1, 5.0 Hz, 1H), 7.58(dd, J= 15.2, 7.7 Hz, 1H), 7.24(h, J= 7.1 Hz, 6H), 7.12(q, J= 7.7 Hz, 5H), 4.67(s, 1H), 4.55(q, J= 7.5 Hz, 1H), 4.33(d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.25 – 4.16(m, 1H), 4.07 – 3.82(m, 2H), 3.66 – 3.43(m, 1H), 3.09(q, J= 13.2 Hz, 1H), 3.04 – 2.82(m, 6H), 2.15(d, J= 27.4 Hz, 2H), 2.05 – 1.82(m, 2H), 1.78 – 1.55(m, 4H), 1.57 – 1.23(m, 5H), 0.84(dt, J= 20.5, 5.2 Hz, 6H).
實施例5A  化合物5A的合成
LC-MS-5A(ES, m/z):[M+1]=753
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.55 – 8.39(m, 1H), 8.35(s, 2H), 7.97 – 7.74(m, 1H), 7.56(d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.37 – 7.00(m, 10H), 4.85-4.70(m, 2H), 4.58 – 4.46(m, 1H), 4.33 – 4.13(m, 2H), 4.05 – 3.79(m, 2H), 3.71 – 3.54(m, 2H), 3.50 – 3.26(m, 1H), 3.02 – 2.82(m, 6H), 1.95 – 1.17(m, 13H), 0.83(dd, J= 14.9, 6.7 Hz, 6H).
實施例6A  化合物6A的合成
LC-MS-6A(ES, m/z):[M+1]=753
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H), 8.23 – 7.98(m, 1H), 7.77(dd, J= 27.3, 7.8 Hz, 1H), 7.47 – 6.96(m, 11H), 4.85 – 4.77(m, 1H), 4.58(t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.34 – 4.01(m, 3H), 3.86(dd, J= 53.3, 14.0 Hz, 1H), 3.46(q, J= 12.7, 12.2 Hz, 1H), 3.25 – 2.68(m, 9H), 2.10 – 1.58(m,8H), 1.47(d, J= 6.9 Hz, 5H), 1.13 – 0.44(m, 6H).
實施例7A  化合物7A的合成
LC-MS-7A(ES, m/z):[M+1]=753
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.38(s, 2H), 7.88 – 7.37(m, 2H), 7.42 – 7.00(m, 10H), 6.90 – 6.47(m, 1H), 4.57(t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.37 – 3.97(m, 3H), 3.86(dd, J= 44.1, 13.8 Hz, 1H), 3.63 – 3.34(m, 3H), 3.20 – 2.66(m, 9H), 2.28 – 1.11(m, 15H), 0.84(dd, J= 20.1, 5.4 Hz, 6H).
實施例8A  化合物8A的合成
8.1 化合物8A-1的合成
將4-胺基哌啶-1-羧酸苄酯(500 mg，2.134 mmol，1 equiv)溶於甲苯(5 mL)中，加入雙光氣(260uL，1.314 mmol，0.62 equiv)，90°C攪拌3 h，然後滴加四氫吡喃-4-醇(205 uL, 2.007 mmol，0.94 equiv)。將所得混合物在90°C和氮氣保護條件下攪拌過夜。反應液冷卻至室溫，隨後倒入冰水中，所得混合物用EtOAc(3x10 mL)萃取。合併的有機層用乙酸乙酯(3x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。
8.2 化合物8A-2的合成
將化合物8A-1(433 mg，1.195 mmol，1 equiv)和Pd/C(100 mg，w/t，10%)加到甲醇(10 mL，246.988 mmol，206.73 equiv)中，室溫氫氣氣氛攪拌過夜。過濾所得混合物，濾餅用MeOH(3x10 mL)洗滌。減壓濃縮濾液，濾液旋乾得到氧雜環己烷-4-基N-(哌啶-4-基)胺基甲酸酯(448 mg，粗品)。
8.3 化合物8A-3的合成
室溫氮氣保護下，將氧雜環己烷-4-基N-(哌啶-4-基)胺基甲酸酯(113 mg，0.495 mmol，1.5 equiv)溶於DMF(10 mL)中，加入中間體2(248.79 mg，0.330 mmol，1 equiv)攪拌，再加入DIPEA(85.30 mg，0.660 mmol，2 equiv)和HATU(188.21 mg，0.495 mmol，1.5 equiv)，加畢，攪拌過夜。加水淬滅，所得混合物用EtOAc(3×20 mL)萃取。合併的有機層用乙醚(3x20 mL)洗滌，用無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，減壓濃縮濾液。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，條件如下：柱，矽膠；流動相，MeCN水溶液，10分鐘內梯度10%至50%；檢測器，UV 254 nm。餾分旋乾得到化合物8A-3(104 mg，32.69%，純度：99%)。
8.4 化合物8A的合成
室溫氮氣保護下，將化合物8A-3(104 mg，0.108 mmol，1 equiv)和TFA(4 mL)加到DCM(16 mL)中，攪拌3h。所得混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過反相快速管柱層析法純化，條件如下：柱，矽膠；流動相，MeCN水溶液，10分鐘內梯度10%至50%；檢測器，UV 254 nm。餾分旋乾得到化合物8A(19.7 mg，22.73%，純度：95.0%)。
LC-MS-8A(ES, m/z):[M+1]=764
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.36(s, 1H), 7.26(h, J= 6.6 Hz, 6H), 7.13(t, J= 7.1 Hz, 4H), 4.55(dt, J= 8.0, 4.0 Hz, 2H), 4.30 – 3.99(m, 2H), 3.98 – 3.72(m, 4H), 3.56(d, J= 10.5 Hz, 3H), 3.22(q, J= 13.9 Hz, 1H), 2.96(t, J= 6.7 Hz, 3H), 2.90(td, J= 7.6, 2.7 Hz, 3H), 1.85(s, 4H), 1.74 – 1.52(m, 6H), 1.52 – 1.17(m, 7H), 0.93 – 0.75(m, 6H).
實施例9A  化合物9A的合成
LC-MS-9A(ES, m/z):[M+1]=812.25
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.41(s, 2H), 7.38 – 7.16(m, 10H), 4.92(s, 1H), 4.60(s, 2H), 4.26(s, 2H), 4.02(d, J= 38.6 Hz, 2H), 3.67(s, 1H), 3.41 – 2.90(m, 12H), 2.28(s, 4H), 1.93(d, J= 21.3 Hz, 2H), 1.71 – 1.28(m, 11H), 0.95 – 0.83(m, 6H).
實施例10A  化合物10A的合成
10.1 化合物10A-3的合成
向100 mL的圓底燒瓶中加入化合物10A-2(1 g)，室溫下在DCM(40 mL)中攪拌溶脹30分鐘。過濾，DCM洗滌固體，乾燥。將固體溶於DMF(40 ml)中，隨後加入化合物10A-1(2 g，8.761 mmol，1.00 equiv)，DCC(5.42 g，26.283 mmol，3 equiv)和HOBT(2.37 g，17.522 mmol，2 equiv)，在室溫下攪拌3h，最後加入DMAP(0.54 g，4.380 mmol，0.5 equiv)，室溫攪拌過夜。將所得混合物過濾，MeOH洗滌，收集固體，得到白色固體的化合物10A-3(3 g，粗品)，所得混合物未進一步純化，直接投下步。
10.2 化合物10A-4的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-3(2.9 g，5.560 mmol，1 equiv)在DMF(40 mL)和哌啶(10 mL)溶液攪拌反應6h。將所得混合物過濾，MeOH洗滌，收集固體並旋乾，所得白色粗品(2 g)直接投入下一步。
10.3 化合物10A-6的合成
氮氣保護，室溫下向化合物10A-4(2 g，6.681 mmol，1 equiv)的DMF(10 mL)溶液中加入化合物10A-5(3.54 g，10.021 mmol，1.5 equiv)，室溫下加入DIEA(1.30 g，10.021 mmol，1.5 equiv)、HOBT(1.35 g，10.021 mmol，1.5 equiv)和TBTU(3.22 g，10.021 mmol，1.5 equiv)，室溫攪拌2小時後，將所得混合物過濾，MeOH洗滌，收集固體，減壓濃縮得化合物10A-6(2.9 g，粗品)。
10.4 化合物10A-7的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-6(2 g，3.151 mmol，1 equiv)在TFA(10 mL，134.631 mmol，42.73 equiv)和DCM(40 mL，629.224 mmol，199.71 equiv)的混合溶液攪拌反應4h。所得混合物濾液減壓濃縮，旋乾得到化合物10A-7(1.6 g，粗品)。
LC-MS-10A-7(ES, m/z):[M+1]=424
10.5 化合物10A-9的合成
氮氣保護，室溫下向化合物10A-7(206 mg，0.485 mmol，1 equiv)的DMF(10 mL)溶液中加入化合物10A-8(229.60 mg，0.728 mmol，1.5 equiv)，室溫下加入HATU(276.78 mg，0.728 mmol，1.5 equiv)和DIPEA(125.44 mg，0.970 mmol，2 equiv)。攪拌反應4小時後，加水淬滅反應，所得混合物用EA(3x100 mL)萃取，有機層用EA(3x10 mL)洗滌，用Na 2SO 4乾燥。過濾，所得液體減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化，(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1 %FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物10A-9(165 mg，47.10%)。
LC-MS-10A-9(ES, m/z):[M+1]=721
10.6 化合物10A-10的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-9(165 mg，0.229 mmol，1 equiv)在哌啶(1 mL)和DCM(10 mL)溶液攪拌反應3h。所得液體減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化，條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器，餾分旋乾得到化合物10A-10(100 mg，87.5%)。
LC-MS-10A-10(ES, m/z):[M+1]=499
10.7 化合物10A-13的合成
氮氣保護，室溫下向化合物10A-11(1 g，3.880 mmol，1 equiv)的DMF(10 mL)溶液中加入化合物10A-12(1.93 g，4.981 mmol，1.28 equiv)，室溫下滴加HATU(2.1 g，8.712 mmol，2.25 equiv)和DIPEA(1.8 g，13.927 mmol，3.59 equiv)，攪拌反應過夜。所得混合物加水淬滅，用EA(3x100 mL)萃取，合併有機相並乾燥旋乾，過濾，所得液體減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物10A-13(1.86 g，81.16%，純度：99%)。
LC-MS-10A-13(ES, m/z):[M+1]=590
10.8 化合物10A-14的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-13(1.86 g，3.149 mmol，1 equiv)在TFA(6 mL，61.209 mmol，19.44 equiv)/DCM(24 mL，377.534 mmol，119.90 equiv)的混合溶液攪拌反應3h。所得混合液減壓濃縮，得化合物10A-14(2.7 g，粗品)。
LC-MS-10A-14(ES, m/z):[M+1]=535
10.9 化合物10A-15的合成
氮氣保護，室溫下向化合物10A-10(70 mg，0.140 mmol，1equiv)的DMF(10 mL)溶液中加入化合物10A-14(74.90 mg，0.140 mmol，1equiv)，室溫下加入HATU(53.27 mg，0.140 mmol，1.5 equiv)和DIPEA(24.14 mg，0.187 mmol,1.25 equiv)，攪拌反應4小時。反應液加水淬滅，EA(3x100 mL)萃取，合併有機相並乾燥旋乾。所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物10A-15(118 mg，83.1%，純度：99%)。
LC-MS-10A-15(ES, m/z):[M+1]=1017
10.10 化合物10A-16的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-15(118 mg，0.116 mmol，1 equiv)在哌啶(1 mL)和DCM(10 mL)溶液攪拌反應2h。所得液體減壓濃縮得化合物10A-16(94 mg，粗品)，所得粗品直接投入下一步。
LC-MS-10A-16(ES, m/z):[M+1]=916
10.11 化合物10A的合成
氮氣保護，室溫下，化合物10A-16(94 mg，0.118 mmol，1 equiv)在TFA(1 mL)/DCM(5 mL)的混合溶液攪拌反應2h。所得混合物濾液減壓濃縮，所得粗品用反相柱層析純化(條件如下：C18層析柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%FA)，10%到50%梯度10分鐘，UV254奈米檢測器)，餾分旋乾得到化合物10A(0.0233 g，28.22%，純度：99.0%)。
LC-MS-10A(ES, m/z):[M+1]=694
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.30(s, 3H), 7.30 – 7.19(m, 4H), 7.14(dd, J= 6.8, 4.0 Hz, 3H), 4.61(t, J= 6.7 Hz, 1H), 4.53(t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.37(d, J= 13.1 Hz, 1H), 4.22(t, J= 7.9 Hz, 1H), 4.00(t, J= 13.1 Hz, 2H), 3.91(d, J= 5.7 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.21(s, 2H), 3.13(d, J= 13.5 Hz, 1H), 2.94(ddd, J= 15.8, 9.8, 4.5 Hz, 6H), 2.66(s, 1H), 1.81(q, J= 7.3 Hz, 3H), 1.74(d, J= 14.4 Hz, 2H), 1.46(d, J= 8.1 Hz, 4H), 1.26(dd, J= 14.7, 7.1 Hz, 3H), 0.85(dt, J= 20.3, 5.0 Hz, 6H).
實施例11A  化合物11A的合成
LC-MS-11A(ES, m/z):[M+1]=680
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.35(s, 1H), 7.24(ddd, J= 11.2, 7.7, 5.5 Hz, 6H), 7.10(t, J= 9.0 Hz, 4H), 4.69(s, 2H), 4.58(t, J= 7.1 Hz, 1H), 4.48(t, J= 7.4 Hz, 1H), 4.36(s, 1H), 4.20(t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.08(s, 1H), 4.00(d, J= 13.6 Hz, 1H), 3.68(d, J= 6.7 Hz, 1H), 3.64(s, 1H), 3.47 – 3.39(m, 2H), 3.14(t, J= 13.3 Hz, 1H), 3.06 – 2.98(m, 2H), 2.90(s, 2H), 2.85(dd, J= 17.8, 6.6 Hz, 2H), 2.65(s, 1H), 1.75(s, 2H), 1.51(s, 3H), 1.43(s, 3H), 1.24(dd, J= 12.7, 7.0 Hz, 3H), 0.82(dt, J= 20.9, 5.0 Hz, 6H).
實施例12A  化合物12A的合成
LC-MS-12A(ES, m/z):[M+1]=637
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.32 – 7.17(m, 6H), 7.12(dd, J= 7.2, 3.8 Hz, 4H), 4.68(s, 1H), 4.61 – 4.46(m, 1H), 3.88(t, J= 6.9 Hz, 2H), 3.61(s, 2H), 3.56(s, 4H), 3.21(q, J= 13.1 Hz, 3H), 2.98 – 2.88(m, 4H), 1.93(s, 1H), 1.84(d, J= 13.1 Hz, 1H), 1.43(s, 2H), 1.30(s, 2H), 1.23(t, J= 7.0 Hz, 4H), 0.85 – 0.80(d, J= 4.9 Hz, 6H).
實施例1B 化合物1B的合成
1.1 化合物1B-2的合成
在室溫和氮氣保護條件下，將中間體2(750 mg，0.995 mmol，1.00 equiv)和DIEA(192.85 mg，1.492 mmol，1.5 equiv)溶於DMF(30 mL)，分批加入HATU(567.37 mg，1.492 mmol，1.5 equiv)和化合物1B-1(200 mg，1.492 mmol，1.5 equiv)，將所得混合物在室溫和氮氣條件下攪拌過夜。所得粗品用反相柱純化，條件如下：C18柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%甲酸)，10%到50%梯度10分鐘，UV200奈米檢測器，所得餾分旋乾後得到N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧羰基)胺基]-3]-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-(1-亞胺基-1-側氧基-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(600 mg，69.32%，純度：99%)，呈淺黃色固體。
LC-MS-1B-2(ES, m/z):[M+1]=870
1.2 化合物1B的合成
向25 mL圓底燒瓶中加入N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-[(叔丁氧羰基)胺基]-3]-苯基丙醯胺基]-3-苯基丙醯胺基]-4-甲基戊醯胺基]-6-(1-亞胺基-1-側氧基-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-6-側氧基己基]胺基甲酸叔丁酯(80 mg，0.092 mmol，1.00 equiv)和4 M HCl的1,4-二氧六環(8 mL)溶液。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。將所得混合物減壓濃縮，所得粗品用反相柱純化，條件如下：C18柱，流動相，溶劑ACN和溶劑H 2O(0.1%甲酸)，10%到50%梯度10分鐘，檢測器為UV200奈米，得到(R)-N-((R)-6-胺基-1-(1-亞胺基-1-側氧基-1λ6-硫代嗎啉)-1-側氧基己-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-胺基-3-苯基丙醯胺基)-3-苯基丙醯胺基)-4-甲基戊醯胺(10.2 mg，15.90%，純度：95.9%)。
LC-MS-1B(ES, m/z):[M+1]=670
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 2H)(HCOOH), 7.63 – 7.01(m, 10H), 4.56(t, J= 7.5 Hz, 1H), 4.37 – 3.87(m, 5H), 3.85 – 3.67(m, 1H), 3.52(t, J= 12.4 Hz, 1H), 3.40 – 3.07(m, 4H), 3.11 – 2.81(m, 6H), 1.64(tt, J= 15.1, 7.8 Hz, 4H), 1.52 – 1.17(m, 5H), 0.85(dd, J= 21.2, 5.0 Hz, 6H).
實施例2B 化合物2B的合成
按照實施例1B的類似步驟製備目標化合物，不同之處在於將反應原料 替換為 。
LC-MS-2B(ES, m/z):[M+1]=684.20
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.30(d, J= 6.9 Hz, 1H), 7.51 – 7.05(m, 10H), 4.62(dt, J= 15.2, 7.6 Hz, 2H), 4.33 – 4.12(m, 3H), 4.12 – 3.90(m, 1H), 3.87 – 3.66(m, 1H), 3.62 – 3.36(m, 4H), 3.36 – 3.04(m, 3H), 2.98(dq, J= 24.6, 7.8 Hz, 4H), 2.73(s, 3H), 1.92 – 1.60(m, 4H), 1.57 – 1.21(m, 5H), 0.87(dd, J= 20.8, 5.0 Hz, 6H).
實施例3B  化合物3B的合成
按照實施例1B的類似步驟製備目標化合物，不同之處在於將反應原料 替換為 。
LC-MS-3B(ES, m/z):[M+1]=712.20
1H NMR(400 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.37(s, 1H), 7.43 – 7.01(m, 10H), 4.63 – 4.50(m, 1H), 4.43(s, 1H), 4.33 – 3.98(m, 4H), 3.98 – 3.26(m, 6H), 3.12 – 2.70(m, 6H), 2.18 – 1.91(m, 3H), 1.74 – 1.27(m, 9H), 0.98 – 0.72(m, 6H).
實施例4B  化合物4B的合成
按照實施例1B的類似步驟製備目標化合物，不同之處在於將反應原料 替換為 。
LC-MS-4B(ES, m/z):[M+1]=728.10
1H NMR(300 MHz, Deuterium Oxide)δ 8.34(s, 2H), 7.38 – 7.07(m, 10H), 4.63 – 4.04(m, 5H), 3.96(q, J= 6.5 Hz, 1H), 3.86 – 3.30(m, 8H), 3.22(s, 1H), 3.12 – 2.59(m, 6H), 1.90 – 1.09(m, 9H), 0.89(dd, J= 13.9, 5.0 Hz, 6H).
本說明書示例性地示出上述化合物的製備，所屬技術領域中具有通常知識者能夠理解本發明其它未例示的化合物也可以參照上述通用方法和具體實施例製備。
比較例1B
該化合物參照CN108290926A實施例5的方法進行製備。
生物學測試評價
以下結合測試例進一步描述解釋本發明，但這些實施例並非意味著限制本發明的範圍。
本發明下述CR845如下所示，參照CN 101627049 A實施例2的方法進行製備， 。
測試例1. 體外受體結合實驗
1.1 實驗目的
利用體外同位素標記的方式，檢測化合物對μ、Kappa、delta受體親和力。
1.2 實驗材料
細胞系：CHO-K1-μ、CHO-K1-Kappa、CHO-K1-delta穩轉細胞株(南京金斯瑞生物科技有限公司)
表1-標記配體相關資訊及配製
標記配體名稱 來源 貨號 批號 適用受體 保存條件
編號 名稱
1 3H-DAMGO PE NET902250 2139100 Mu OR -20℃
2 3H-U69593 PE NET952250 2126416 Kappa -20℃
3 3H-DADLE PE NET648250 2060549 Delta -20℃
註：PE：PerkinElmer公司；
表2-非標化合物相關資訊
非標化合物名稱 分子量 來源 貨號 批號 適用受體 保存條件
DAMGO 513.59 Abcam Ab120674 Apn113800-1-1 Mu OR 2-8℃
U69593 356.50 Sigma U103-25MG 0000102364 Kappa 2-8℃
DADLE 569.66 Abcam Ab120673 APN11299-1-3 Delta 2-8℃
註：5-HT：5-hydroxytryptamine。
表3-試劑及耗材訊息
名稱 貨號 / 批號 生產廠家
無水乙醇 20150422 永華科技
Tris T1378-1KG/BCBQ2051V SIGMA
EDTA T20110308 國藥集團(滬試)
氯化鎂 E010094/GF290086 薩恩化學技術有限公司
MICROSCINT PS閃爍液 6013631/94-19221 Perkin Elmer
PEI 306185-100G/07518TE SIGMA
UniFilter-96 GF/C 板 6005174 Perkin Elmer
註：Tris：三羥甲基胺基甲烷；EDTA：乙二胺四乙酸；PEI：聚醚醯亞胺。
表4-儀器資訊
名稱 型號 生產廠家
PH計 PHS-3C 上海雷磁
精密電子天平 MS105DU METTLER TOLEDO
液閃儀 Microbeta 2450 Perkin Elmer公司
高速離心機 J26xpi Beckman Coulter
高速分散機 IKA-T10 IKA
1.3 實驗方法
1.3.1 Buffer 製備
A：(用於製備μ、Kappa、delta受體膜)：稱取11.7 mg EDTA，380.84 mg MgCl 2，加入50 mM Tris-HCl緩衝液總體積為400 mL，調整pH=7.4。使其終濃度分別為EDTA 0.1 mM、MgCl 210 mM。
B：化合物配製：按設計濃度和所需體積計算理論稱樣量。以5.0×10 -3M為初始配製劑量，用DMSO溶解，然後用DMSO依次稀釋為5.0×10 - 4M~5.0×10 -9M，將稀釋好的DMSO溶液用Buffer稀釋至工作濃度，5.0×10 -5M~5.0×10 -11M，工作液DMSO終濃度為1%(反應體系DMSO終濃度為0.2%)。供試品配製後置於4℃保存，試驗結束後廢棄。
1.3.2 受體膜的製備
CHO-μ、Kappa、delta 等細胞由-80℃冰箱取出後自然解凍，在1000 g，4℃下離心10分鐘。取沉澱，棄上清液。沉澱加Buffer，勻漿20-30秒，然後50000 g，4℃離心15 min。小心的棄去上層液，再次加入Buffer，混勻，50000 g，4℃離心15 min離心。重複三次。-80℃儲存。
1.3.3 受體競爭結合試驗
3.3.1 μ受體親和試驗
第一步：總結合管(TB)加入50 μL溶劑(1%DMSO)，非特異性結合管(NB)加入 50 μL DAMGO(終濃度1.0×10 -5M)，各受試化合物管(CB)加入50 μL受試化合物。
第二步：各反應管分別加入緩衝液(勻漿液A)100 μL。
第三步：先將製備好的膜用勻漿液A製成10 mg/mL膜的混懸液備用。
第四步：各反應管分別加入放射性配體[ 3H] DAMGO 50 μL，終濃度2 nM。
第五步：各反應管分別加入50 μL膜溶液。
第六步：將各反應管25℃溫孵90 min，反應完畢，結合的配基通過減壓快速過濾，UniFilter GF/C板提前1 h使用0.5%PEI溶液飽和，用冰冷的Tris緩衝液充分洗滌，抽濾後放入恆溫乾燥箱內乾燥30min。將濾板取出加入MICROSCINT PS閃爍液，40 μL/孔。
第七步：將閃爍杯放入液閃計數儀計數。
3.3.2  Kappa受體競爭結合試驗
第一步： 總結合管(TB)加入50 μL 溶劑(1%DMSO)，非特異性結合管(NB)加入U69593 50 μL(終濃度1.0×10 -5M)，各受試化合物管(CB)加入50 μL受試化合物。
第二步：各反應管分別加入緩衝液(勻漿液A)100 μL。
第三步：先將製備好的膜用勻漿液A製成15 mg/mL膜的混懸液備用。
第四步：各反應管分別加入放射性配體 3H-U69593 50 μL，終濃度為2 nM。
第五步：各反應管分別加入50 μL膜溶液。
第六步：將各反應管25℃溫孵90 min，反應完畢，結合的配基通過減壓快速過濾，UniFilter GF/C板提前1 h使用0.5%PEI溶液飽和，用冰冷的Tris緩衝液充分洗滌，抽濾後放入恆溫乾燥箱內乾燥30min。將濾板取出加入MICROSCINT PS閃爍液，40 μL/孔。
第七步：將濾板放入液閃計數儀計數。
3.3.3  Delta受體競爭結合試驗
第一步：總結合管(TB)加入50 μL 溶劑(1%DMSO)，非特異性結合管(NB)加入DADLE 50 μL(終濃度1.0×10 -5M)，各受試化合物管(CB)加入50 μL受試化合物。
第二步：各反應管分別加入緩衝液(勻漿液A)100 μL。
第三步：先將製備好的膜用勻漿液A製成10 mg/mL膜的混懸液備用。
第四步：各反應管分別加入放射性配體 3H-DADLE 50 μL，終濃度為4nM。
第五步：各反應管分別加入50 μL膜溶液。
第六步：將各反應管25℃溫孵90 min，反應完畢，結合的配基通過減壓快速過濾，UniFilter GF/C板提前1 h使用0.5%PEI溶液飽和，用冰冷的Tris緩衝液充分洗滌，抽濾後放入恆溫乾燥箱內乾燥30min。將濾板取出加入MICROSCINT PS閃爍液，40 μL/孔。
第七步：將濾板放入液閃計數儀計數。
1.4 資料分析
根據化合物樣品不同濃度測試點的效應值，利用GraphPad Prism軟體擬合化合物樣品對受體作用曲線，並計算Ki值。結果如表5所示。
表5-受體結合Ki值
化合物 κ受體Ki(nM) μ受體Ki(nM) δ受體Ki(nM)
2-0 1.15 ＞1000 ＞1000
2-100 32.51 ＞1000 ＞1000
3 3.31 ＞1000 ＞1000
4-0 2.80 ＞1000 ＞1000
4-100 59.93 ＞1000 ＞1000
8 0.09 ＞1000 ＞1000
9 11.15 ＞1000 ＞1000
10 0.86 ＞1000 ＞1000
11 0.94 ＞1000 ＞1000
12 0.53 ＞1000 ＞1000
13 0.13 ＞1000 ＞1000
13-2 0.13 ＞1000 ＞1000
14 1.10 ＞1000 ＞1000
15 0.83 ＞1000 ＞1000
16 0.26 ＞1000 ＞1000
17 0.44 ＞1000 ＞1000
18 0.21 ＞1000 ＞1000
19 0.90 ＞1000 ＞1000
20 0.58 ＞1000 ＞1000
21 0.33 ＞1000 ＞1000
22 0.35 ＞1000 ＞1000
23 0.36 ＞1000 ＞1000
24 0.36 ＞1000 ＞1000
25 0.45 ＞1000 ＞1000
26 0.31 ＞1000 ＞1000
27 0.88 ＞1000 ＞1000
28 3.31 ＞1000 ＞1000
29 0.63 ＞1000 ＞1000
30 1.61 ＞1000 ＞1000
31 3.49 ＞1000 ＞1000
32 0.58 ＞1000 ＞1000
33 0.56 ＞1000 ＞1000
34 0.60 ＞1000 ＞1000
35 0.18 ＞1000 ＞1000
36 0.98 ＞1000 ＞1000
37 0.41 ＞1000 ＞1000
38 0.17 ＞1000 ＞1000
39 0.27 ＞1000 ＞1000
40 0.58 ＞1000 ＞1000
41 0.57 ＞1000 ＞1000
42 0.47 ＞1000 ＞1000
43 2.00 ＞1000 ＞1000
44 0.55 ＞1000 ＞1000
45 0.52 ＞1000 ＞1000
46 0.29 ＞1000 ＞1000
47 0.49 ＞1000 ＞1000
48 3.79 ＞1000 ＞1000
49 0.93 ＞1000 ＞1000
50 0.27 ＞1000 ＞1000
51 0.35 ＞1000 ＞1000
55 10.63 ＞1000 ＞1000
69 14.37 ＞1000 ＞1000
1A 0.40 ＞1000 ＞1000
2A 0.34 ＞1000 ＞1000
3A 0.26 ＞1000 ＞1000
4A 0.30 ＞1000 ＞1000
5A 0.34 ＞1000 ＞1000
6A 0.43 ＞1000 ＞1000
7A 0.60 ＞1000 ＞1000
8A 0.31 ＞1000 ＞1000
9A 0.37 ＞1000 ＞1000
10A 0.48 ＞1000 ＞1000
11A 0.48 ＞1000 ＞1000
12A 0.34 ＞1000 ＞1000
1B 0.42 ＞1000 ＞1000
2B 0.91 ＞1000 ＞1000
3B 1.05 ＞1000 ＞1000
4B 1.88 ＞1000 ＞1000
由此可見，本發明化合物對κ阿片樣物質受體具有優異的選擇性，對κ阿片樣物質受體具有很高的親和力。
測試例2. 體外功能試驗
2.1 實驗目的
利用Cisbio HTRF cAMP-Gi試劑盒，通過酶標儀檢測κ阿片類受體(Kappa)訊號通路的cAMP濃度變化，計算化合物的EC 50值，來評價化合物對κ阿片類受體的激動作用。
2.2 實驗材料
細胞系：CHO-K1-OPRK1穩轉細胞株(南京金斯瑞生物科技有限公司)
細胞培養條件：F12、10% FBS、200 μg/mL Zeocin、100 μg/mL Hygromycin B
試劑及耗材： F12(meilunbio，MA0229) FBS(BOVOGEN，SFBS) Zeocin(invitrogen，R25001) Hygromycin B(invitrogen，10687010) PBS(meilunbio，MA0015) 胰酶(Gibco，25200-072) 96細胞板(cisbio，66PL96025) cAMP-Gi kit(cisbio，62AM9PEB) CO2培養箱(Thermo，311) 離心機(上海安亭，TGL-16C) 細胞計數儀(Countstar，IC1000) 酶標儀(PerkinElmer，EnVision)
2.3 實驗方法
(1)配製實驗所需的反應緩衝液(1xStimulation buffer)：將Cisbio cAMP-Gi試劑盒中的5xStimulation buffer與ddH 2O按1:4比例稀釋，備用。
(2)化合物準備：用DMSO將化合物稀釋成5 mM的儲存液，隨後3.16倍稀釋成10個梯度，然後用Stimulation buffer將配好的化合物稀釋成相應濃度(2.5 x)，備用。
(3)細胞準備：胰酶消化培養皿上的CHO-K1-OPRK1細胞，用培養基洗脫細胞並收集至5 mL離心管。1000 rpm離心5分種，棄上清。加入3 mL PBS，用移液槍輕輕吹打混勻。1000 rpm再次離心5分種，棄上清。用1xStimulation buffer重懸細胞，使用Countstar 細胞計數儀計數，調整細胞密度至6x10 5個/mL，備用。
(4)細胞加入：將細胞懸液加至實驗板中，5 μL/孔(即約3000個細胞/孔)。
(5)化合物加入：將用Stimulation buffer稀釋好的化合物加入到上述實驗板中，4 μL/孔。
(6)反應孵育：緩慢震盪後，將實驗板放置37℃孵育20分鐘。
(7)激動劑Forskolin的加入：加入10x腺苷酸環化酶激動劑(終濃度1 μM Forskolin)溶液，1 μL/孔。
(8)反應孵育：緩慢震盪後，將實驗板放置37℃孵育45分鐘。
(9)加檢測試劑：用Cisbio cAMP-Gi檢測試劑盒中的Lysis & detection buffer分別將cAMP-cryptate及Anti-cAMP-d2按1:20倍稀釋，向實驗板分別加入上述稀釋的cAMP-cryptate及Anti-cAMP-d2，各5 μL/孔。震盪後，將實驗板室溫靜置60分鐘。
(10)實驗讀數：在Envision上讀板，檢測665 nm和615 nm通道的讀數，計算665 nm/615 nm讀數的比值。
2.4. 資料分析
根據化合物樣品不同濃度測試點的激動作用效應值，利用GraphPad Prism軟體擬合化合物樣品對κ阿片類受體激動作用曲線，並計算EC 50。實驗結果如表6所示。
表6-對κ阿片類受體的體外激動作用
化合物 EC 50(nM)
4-0 3.62
8 0.90
10 1.1
11 5.1
12 0.17
13 0.52
13-2 0.13
14 8.20
15 0.63
16 0.079
17 0.30
18 0.18
19 0.87
20 0.52
21 0.68
22 0.36
23 0.34
24 0.27
25 0.46
26 0.25
27 0.87
29 0.058
31 1.23
32 0.65
33 0.81
34 0.71
35 0.17
36 0.35
37 0.39
38 0.54
39 0.35
40 0.13
41 0.57
42 0.46
43 6.13
44 0.09
45 0.16
46 0.22
47 0.24
48 12.01
49 3.06
50 0.43
1A 0.05
2A 0.36
3A 0.40
4A 0.20
5A 0.30
6A 0.95
7A ＜0.1
8A 0.075
9A ＜0.1
10A 0.59
11A 0.21
12A 0.07
1B 0.52
2B 0.30
3B 1.00
4B 0.65
由此可見，本發明化合物對κ阿片樣物質受體具有較強的激動作用。
測試例3. 鎮靜安全窗實驗
3.1 小鼠醋酸扭體試驗
3.1.1 試驗目的
通過小鼠醋酸扭體試驗，考察化合物單次給藥後的鎮痛效果，並求算其ED 50。
3.1.2 試驗系統
3.1.2.1 實驗動物資訊種屬和品系：ICR小鼠 等級：普通級 數量和性別：雄性，100隻(根據具體情況而定) 年齡範圍：6-8周齡 體重範圍：23-32 g 供應單位：斯貝福(北京)生物科技有限公司 動物使用許可證：SYXK(蘇)2019-053 剩餘動物處理：剩餘動物則移交實驗系統部處理。
3.1.2.2 儀器和試劑
表7- 主要儀器和試劑
名稱 型號 生產廠家
精密電子天平 BS224s 賽多利斯科學儀器(北京)公司
電子天平 YP6001N 上海精密科學儀器有限公司
冷熱板儀 35100 義大利UGO公司
乙酸 20160408 上海淩峰化學
3.1.3 試驗方法
小鼠醋酸扭體試驗是經典的內臟痛試驗模型，小鼠腹腔注射0.6%醋酸水溶液會刺激腹膜引起持久的疼痛反應，進而導致小鼠出現扭體反應，鎮痛藥物可以抑制小鼠的扭體反應。小鼠尾靜脈注射給予藥物後先適應15 min，然後腹腔注射0.6%醋酸溶液(0.1 mL/10 g)，設置溶劑對照組(0.9%氯化鈉注射液)，觀察記錄注射完醋酸15 min內小鼠扭體次數，計算受試化合物扭體抑制率，以初步評價單次給藥的鎮痛作用。
扭體抑制率%=(溶劑組次數-給藥組次數)*100%/溶劑組次數。
3.1.4 資料處理
實驗資料均數±標準差(Mean±SD)表示，採用GraphPad Prism 8統計軟體進行單因素方差分析，兩兩比較採用Dunnett t檢驗，非線性擬合的方法計算ED 50，以 P＜0.05為差異有統計學意義。
3.2 小鼠自主活動試驗
3.2.1 試驗目的
測定化合物單次給藥後對小鼠自主活動的影響，並求算其ED 50。
3.2.2 試驗系統
3.2.2.1實驗動物資訊 種屬和品系：ICR小鼠 等級：普通級 數量和性別：雄性，200隻(根據具體情況而定) 年齡範圍：6-8周齡 體重範圍：23-35g 供應單位：斯貝福(北京)生物科技有限公司 動物使用許可證：SYXK(蘇)2019-053 剩餘動物處理：剩餘動物則移交實驗系統部處理。
3.2.2.2 儀器和試劑
表8-主要儀器和試劑
名稱 型號 生產廠家
精密電子天平 BS224s 賽多利斯科學儀器(北京)公司
電子天平 YP6001N 上海精密科學儀器有限公司
大華L系列硬碟監控錄影機 DH/DVR1604LE-L 浙江大華技術股份有限公司
TopScan Version 3.00(動物視頻分析系統) Version 3.00 Clever Sys, Inc.
3.2.3 、試驗方法
小鼠自主活動試驗是經典的用於評價化合物對中樞抑制情況的試驗模型。小鼠尾靜脈注射給予相應濃度的供試品溶液(現用現配)，空白組給予溶劑(0.9%氯化鈉注射液)，給藥結束後立即將小鼠置於自主活動箱(規格為29 cm×29 cm×30 cm的黑色聚乙烯箱)進行錄影，錄影時間為30 min，錄影結束進行影片分析，評價小鼠用藥後自主活動情況。
3.2.4 資料處理
實驗資料均數±標準差(Mean±SD)表示，採用GraphPad Prism 8統計軟體進行單因素方差分析，兩兩比較採用Dunnett t檢驗，非線性擬合的方法計算ED 50，以 P＜0.05為差異有統計學意義。
3.3 安全窗
鎮靜是外周Kappa受體激動劑最顯著的副作用，將鎮靜副作用ED 50(自主活動試驗)/藥效ED 50(醋酸扭體試驗)便可得出其鎮靜安全窗，安全窗越大預示著安全性更高，相同劑量下臨床出現鎮靜副作用的可能性越小。實驗結果如表9所示。
表9-安全窗
化合物 小鼠醋酸扭體 ED 50(mg/kg) 小鼠自主活動 ED 50(mg/kg) 安全窗
4-0 1.14 7.34 6.44
11 1.82 9.60 5.27
13 0.23 2.83 12.30
13-2 0.17 2.75 16.18
16 0.27 1.37 5.13
21 0.50 1.42 2.82
27 0.88 4.59 5.22
29 0.41 1.35 3.28
1A 0.38 1.08 2.84
3A 0.45 1.41 3.15
4A 0.41 1.25 3.05
8A 0.16 5.93 37.06
10A 1.61 5.52 3.43
1B 0.20 0.50 2.50
2B 0.31 3.33 10.74
3B 0.42 3.25 7.74
比較例1B 0.25 0.59 2.36
由此可見，本發明的化合物具有很大的安全窗，即，具有較大的安全給藥劑量範圍，或者在相同劑量下出現副作用的可能性更小。
測試例 4. 小鼠 PK 和透腦
4.1 試驗目的
考察本發明化合物在小鼠體內的藥代動力學特徵和血腦屏障通透性。
4.2 試驗設備
表10-設備資訊
名稱 型號 生產廠家
AB三重四級杆液質聯用儀 5500+ Sciex公司
梅特勒-托利多分析天平 XSE105 梅特勒-托利多集團
臺式高速冷凍離心機 TL-18M 上海市離心機械研究所
Eppendorf微量移液器 20/200/1000 μL 德國Eppendorf公司
數顯恆溫振盪器 SHA-B(A) 金壇市醫療儀器廠
臺式超音波清洗機 CPX8800H 美國艾默生電氣集團
渦旋振盪器 Vortex genie 2 美國Scientific Industries公司
乙腈 管柱層析純 美國天地公司
甲醇 管柱層析純 美國天地公司
屈臣氏純淨水 600 mL 屈臣氏集團
甲酸 095324 美國MREDA公司
4.3 試驗方法和資料處理
將健康雄性ICR小鼠隨機分組，每組6隻動物，每個受試化合物分別3組動物，第一組動物用於給藥後5分鐘採血取腦，第二、三組動物用於後續時間點交叉採血；受試化合物分別靜脈給予(1 mg/kg)相應組別小鼠，於不同時間點小鼠頜下靜脈採血，LC-MS/MS法測得不同時刻血漿和腦組織中藥物含量，運用EXCEL軟體求得腦血比B/P，運用DAS3.0軟體計算其藥動學參數。實驗結果參見表11。
表11-藥動參數
化合物 Cmax(ng/mL) AUC(0-∞) (μg/L*h) Clearance (L/h/kg) Vd (L/kg) t1/2(h) B/P
10 3224.52 4010.04 0.25 0.29 0.82 0.007
12 2264.57 3681.68 0.28 0.54 1.42 0.008
13 2538.43 1351.65 0.74 0.38 0.35 0.015
13-2 2929.28 1685.68 0.60 0.63 0.72 BQL**
16 4729.52 2503.55 0.40 0.51 0.87 0.010
21 3461.88 2667.60 0.38 0.63 1.15 0.010
27 2316.41 1163.46 0.88 0.63 0.50 0.010
29 4707.93 3343.19 0.31 0.32 0.74 0.010
CR845 1621.13 652.67 1.62 0.60 0.26 0.015
**：低於定量下限，表示腦組織中未檢出待測物。
由此可見，本發明的化合物具有優異的藥物代謝動力學性質，具體地，與CR845相比，本發明的化合物腦血比B/P與之相當或更低，可選擇性作用於外周Kappa受體，而且本發明的化合物具有顯著改善的藥動學特徵和明顯更長的半衰期。
測試例5.  小鼠單次給藥毒性試驗
5.1 試驗目的
通過研究本發明化合物小鼠單次靜脈給藥後毒性反應，補充安全性資料。
5.2 試驗系統種屬和品系：ICR小鼠 等級：SPF級 性別：雄性 體重範圍：24-28 g 供應單位：斯貝福(北京)生物技術有限公司 動物生產許可證：SCXK(京)2019-0010 動物使用許可證：SYXK(蘇)2019-0053 剩餘動物處理：剩餘動物移交試驗系統部處理。
5.3 儀器試劑
表12-主要儀器和試劑
名稱 型號 生產廠家
精密電子天平 BS224s 賽多利斯科學儀器(北京)公司
電子天平 YP6001N 上海精密科學儀器有限公司
氯化鈉注射液 2204141334 山東辰欣藥業股份有限公司
5.4 試驗方法
取ICR小鼠，隨機分組，每組10隻，按10 mL/kg尾靜脈給藥，觀察記錄動物狀態及死亡情況，根據AOT425軟體推薦劑量依次給藥，直至確定LD 50值。
5.5 資料處理
採用AOT425軟體計算LD 50。結果參見表13。
表13-急性毒性
實施例編號 LD 50(mg/kg)
8A 175
2B 151.6
3B 150
由此可見，本發明的化合物具有較低的單次給藥毒性，因而具有改善的安全性。
測試例 6 化合物對 hERG 鉀離子通道作用的研究
6.1 試驗目的
本實驗通過運用手動膜片鉗技術檢測化合物對hERG通道的抑制作用。
6.2 試驗系統
非心臟類藥物有可能通過抑制hERG(IKr)通道引起心肌動作電位時程的延長，增加威脅生命的尖端扭轉性(TdP)室性心律失常發生的可能性。本實驗採用無內源性IKr電流的HEK293細胞系為宿主細胞，該細胞系被廣泛應用於 hERG的檢測。
將穩定表達hERG通道的HEK293細胞培養於35 mm培養皿中，在37 °C/5% CO 2培養箱中放置至少24小時後用於實驗。hERG細胞系常規培養，傳代在含有10%胎牛血清和250 μg/ml G418的DMEM中。
6.3 液體配製
全細胞膜片鉗實驗所用細胞外液的成分為(mM)：NaCl 145; MgCl 21; KCl 4; Glucose 10;HEPES 10; CaCl 22，用 NaOH 將pH值調至7.4，用sucrose將滲透壓值調至300 mOsm。
細胞內液成分為(mM)：KCl 140; MgCl 21; EGTA 5; HEPES 10 and Na 2ATP 4，用 KOH 將 pH 值調至 7.2，用 sucrose 將滲透壓值調至290 mOsm。
表14-主要試劑濃度
試劑 細胞外液(mM) 細胞內液(mM)
CaCl 2 2 -
MgCl 2 1 1
KCl 4 140
NaCl 145 -
Glucose 10 -
HEPES 10 10
EGTA - 5
Na2ATP - 4
pH 7.4 7.2
6.4 試驗方法
電生理記錄：每次實驗取出一個培養皿，用細胞外液清洗兩次，放置於倒置顯微鏡載物臺上。全細胞膜片鉗實驗在室溫下進行，所用硼矽玻璃微電極尖端電阻為3 ~ 5 MΩ。
電壓刺激方案和電流記錄：全細胞記錄模式後，將膜電位控制在-80 mV，每隔30 s給予細胞+50 mV去極化電壓刺激，持續2 s後複極化至-50 mV，持續3 s，即可引出hERG尾電流。去極化電壓刺激前，先給予細胞50ms，-50 mV複極化電壓，該電壓下記錄的電流作為計算hERG尾電流的基線。只有達到記錄標準的細胞才會被應用於待測化合物的檢測。加入化合物前，hERG尾電流在細胞外液中至少穩定記錄3分鐘。灌流給藥後當hERG尾電流幅值變化小於＜5%時，被認為藥物作用達到穩態。如果電流在6分鐘內未達到穩態，則亦結束該濃度化合物檢測。
6.5 資料處理
原始資料使用Clampex 10.2記錄，資料獲取和分析使用pCLAMP 10.1軟體程式。選取加入化合物前電流處於穩態的4~5個sweep，計算峰值平均值，作為對照電流幅值。選取加入化合物後電流處於穩態的4~5個sweep，計算峰值平均值，作為電流被抑制後的剩餘幅值。待測化合物對hERG電流的抑制率依據以下方程進行計算：
%抑制率={1-(電流剩餘幅值)/(對照電流幅值)}×100
依據上述計算方法得到待測化合物在10 μM濃度下對hERG電流的抑制率。結果參見表15。
表15-心臟毒性
實施例編號 % 抑制率
4 0.54% ± 1.72%
12 2.13% ± 2.96%
13 0.80% ± 0.77%
1A -0.94% ± 0.76%
2A 1.00% ± 1.86%
4A 0.90% ± 3.50%
5A 4.15% ± 0.07%
6A 1.04% ± 0.53%
1B 1.20% ± 0.39%
3B 1.13% ± 0.00%
由此可見，本發明的化合物具有較低的心臟毒性，因而具有改善的安全性。
以上實施例僅示例性地示出本發明的某些代表性化合物的活性資料，本發明提供的其它化合物通過同樣的方法進行測試也具有類似的效果。
無

Claims (18)

  1. 一種式IA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， R 1A為H或-COOH，較佳為H； R 2A為-NR aAC(=O)OR bA或-NR aAS(=O) 2OR bA，較佳為-NR aAC(=O)OR bA，其中 R aA為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基取代的C 1-6烷基，R bA選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R bA基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eA和R fA各自獨立地為-(CH 2) n1A-和-(CH 2) n1A’-，n1A和n1A’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1A和n1A’不同時為0，W A選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 5A-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 5A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-，n3A選自1、2和3； 或者R 1A和R 2A連同其連接的碳原子形成任選取代的9-10員雙環部分；較佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 ， 當Q 1A-Q 4A中的任意一個為N時，其餘為C，或Q 1A-Q 4A均為C； W 1A和W 2A各自獨立地為-C(=O)-NH-、-NH-C(=O)- 、-S(=O) 2-NH-、-NH-S(=O) 2-、-S-、-O-、-NR 6A-、-NR 6A-CH 2-、被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-、或不存在，其中，R 6A選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3A-；較佳W 1A和W 2A不能同時不存在， W 3A為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2A-， n2A選自0、1、2和3， 更佳地，所述雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： ，更佳為選自 ， 再更佳選自 ； R 3A選自H或-(CH 2) mANR cAR dA； R cA和R dA各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基； R 4A選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基； mA和nA各自獨立地為0、1、2、3、4或5， 較佳其為式IIA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ， 其中R 1A、R 2A、R cA和R dA如請求項1中所定義； 較佳為式IIIA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中R bA、R aA、R cA和R dA如請求項1中所定義； 更佳為式IVA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中R bA和R aA如請求項1中所定義； 更佳為式VA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中R bA如請求項1中所定義。
  2. 如請求項1所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其中，R bA選自C 1-6烷基或3-8員雜環基；較佳選自C 1-6烷基或 ；更佳C 1-6烷基或 ；進一步較佳為 ，W A選自-O-或-S(=O) 2-，其中R eA和R fA如請求項1所定義；以及R aA、R cA和R dA如請求項1中所定義。
  3. 如請求項1所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其為式VIA所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ， 其中，R aA為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或C 1-6胺基烷基；R bA如請求項1所定義。
  4. 如請求項1所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其選自以下化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽：
  5. 一種製備如請求項1至4中任一項所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽的方法，其選自以下方法： 方法一： 方法一包括以下步驟： 方法二： 方法二包括以下步驟： 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’ 為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如請求項1至4中任一項所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
  6. 一種如下通式所示的化合物、其立體異構物或其鹽， 其中，R 1A’為R 1A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1A，R 2A’ 為R 2A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2A，R 3A’為R 3A或其中NH 2受胺基保護基保護的R 3A，R 1A、R 2A、R 3A、R 4A和nA如請求項1至4中任一項所定義，且R xA為胺基保護基， 所述胺基保護基較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基或乙氧羰基。
  7. 一種式IB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， R 1B選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基、C 1-6烷氧基羰基、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 2B和R 3B各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基； R 4B選自鹵素、NO 2、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基； mB和nB各自獨立地為0、1、2、3、4或5， 較佳其為式IIB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ， 較佳為式IIIB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ， 較佳為式IVB所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ， 較佳其中R 1B選自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基，較佳為C 1-6烷基或C 1-6烷基羰基，更佳為甲基或甲基羰基。
  8. 如請求項7所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其選自以下化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
  9. 一種製備如請求項7或8所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽的方法，包括以下步驟： 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如請求項7或8所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基或乙氧羰基。
  10. 一種式iB-1的化合物、其立體異構物或其鹽， 其中，R 1B、R 4B、mB和nB如請求項7或8所定義，且R xB和R yB為胺基保護基，較佳為各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基或乙氧羰基。
  11. 一種式IC所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 其中， 環A為C 3-8環烷基 、C 6-14芳基或5-14員雜芳基，較佳為苯基； Y選自CH或N； G選自-S-、-O-、-CR 4CR 5C‑、-NR 6C‑、-S(=O) 2‑、-S(=O)(=NR 6C’)-、 ，較佳為-O-、-CR 4CR 5C‑ ­、-NR 6C‑、-S(=O) 2‑、-S(=O)(=NR 6C’)-、 ； R 1C選自H或-(CH 2) tNR aCR bC； R 2C選自H、胺基、羥基、C 1-6烷基、C 1-6烷基胺基、C 1-6胺基烷基，其中的烷基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 3C在Y為CH時，選自H、羥基、C 1-6烷基、3-8員雜環基、C 1-6烷氧基，且在Y為N時，選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基-(CH 2) m-、3-8員雜環基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、-(CH 2) mCNR 10R 11，其中的烷基、環烷基、雜環基、烷氧基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基胺基的基團取代； R 4C和R 5C各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基-O-、羥基、-C(O)OR 7、-NR 8R 9、-NR cCC(O)NR 8R 9、C 1-6烷基胺基、3-8員雜環基-(CH 2) mC-、鹵素、腈基、-NR cCS(=O) 2NR 8R 9、-NR cCC(O)OR dC、-NR cCS(=O) 2OR dC、-NR cCC(O)R 7’、-NH(CH 2) mCNR 8R 9，其中所述的烷基、雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； 或者CR 4CR 5C形成3-8員雜環或9-10員雙環部分，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： 、 、 ， 當Q 1C-Q 4C中的任意一個為N時，其餘為C，或Q 1C-Q 4C均為C； W 1C和W 2C各自獨立地為-C(=O)-NH-，-NH-C(=O)-，-S(=O) 2-NH-，-NH-S(=O) 2-，-S-，-O-，-NR 12-，-NR 12-CH 2-，被一個或多個選自-NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-；較佳W 1C和W 2C不能同時不存在， W 3C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在；較佳為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-， W 4C和W 5C為被一個或多個選自NH 2、-OH、鹵素、硝基、腈基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團任選取代的-(CH 2) n2C-，或不存在， n2C選自0、1、2和3， 更佳地，所述3-8員雜環或9-10員雙環部分連同其所連接的哌啶環形成選自以下的結構： ， 更佳為選自 ； R aC和R bC各自獨立地選自H、C 1-6烷基、脒基、C 1-6烷氧基羰基； R cC為H或被一個或多個選自胺基、C 1-6烷基胺基、C 1-6烷氧基、鹵素、羥基、硝基、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基，較佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基或C 1-6烷氧基取代的C 1-6烷基，更佳為H或被胺基、C 1-6烷基胺基取代的C 1-6烷基， R dC選自C 1-6烷基、C 6-14芳基、5-14員雜芳基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基，較佳為選自C 1-6烷基、3-8員雜環基，更佳為選自C 1-6烷基、 ，更佳為選自C 1-6烷基、 ，上述R dC基團任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代，R eC和R fC各自獨立地為-(CH 2) n1C-和-(CH 2) n1C’-，n1C和n1C’各自獨立地選自0、1、2和3，較佳為2，且n1C和n1C’不同時為0；W C選自-NH-C(=O)-、-NH-S(=O) 2-、-NR 12-、-O-、-S-、-S(=O) 2-，較佳為選自-O-、-S(=O) 2-，R 12選自H、C 1-6烷基、脒基、HOOC-(CH 2) n3C-， n3C選自1、2和3； R 6C和R 6C’獨立地選自H、C 1-6烷基、C 1-6烷基羰基、C 1-6烷基-S(=O) 2-、C 1-6烷氧基羰基、C 6-14芳基、C 6-14芳基羰基、C 6-14芳氧基羰基、C 3-8環烷基、C 3-8環烷基羰基、C 3-8環烷氧基羰基、5-14員雜芳基、5-14員雜芳基羰基、5-14員雜芳氧基羰基、3-8員雜環基、3-8員雜環基羰基、3-8員雜環氧基羰基，上述取代基各自任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 7和R 7’各自獨立地選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基、C 6-14芳基和5-14員雜芳基，其中所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； R 8和R 9各自獨立地為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基， R 10和R 11各自獨立地為H或C 1-6烷基，或者R 10和R 11連同其連接的氮原子形成3-8員雜環基，其中的烷基和雜環基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代； p和t各自獨立地選自0、1、2、3、4或5； mC在每次出現時獨立地選自1、2、3、4； R 0選自H、鹵素、NO 2、腈基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基、任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基， 較佳滿足以下一項或者多項： (1)R 1C為-(CH 2) tNR aCR bC，較佳為-(CH 2) 3NH 2； (2)環A為苯基； (3)p為0。
  12. 如請求項11所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其為式IIC-1或IIC-2所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 較佳地，在IIC-1中，R 2C為C 1-6胺基烷基或胺基，R 3C為H或C 1-6烷基；更佳地，R 2C為胺基，R 3C為H； ， 較佳地，在IIC-2中，R 2C為C 1-6胺基烷基或胺基，R 3C為H或C 1-6烷基，或者R 2C為H或C 1-6烷基，R 3C為C 1-6胺基烷基或3-8員含氮雜環基； 更佳地，式IIC-2為式IIIC或式IVC： ， 較佳滿足以下一項或者多項： (1)R 1C為-(CH 2) tNR aCR bC，較佳為-(CH 2) 3NH 2； (2)環A為苯基； (3)p為0。
  13. 如請求項11或12所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其中，G選自以下之一： (1)G為-S(=O)(=NR 6C’)-； (2)G為-CR 4CR 5C-，R 4C為H，R 5C為-NR cCC(O)OR dC； (3)G為-CR 4CR 5C-，R 4C為-NR 8R 9，R 5C為-C(O)OR 7，R 7選自H、C 1-6烷基、C 3-8環烷基、3-8員雜環基、C 6-14芳基和5-14員雜芳基，其中所述的烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代；且R 7較佳為H或任選被一個或多個選自鹵素、羥基、胺基、硝基、腈基、C 1-6烷基、C 1-6鹵代烷基、NH 2C(=O)-、C 1-6烷氧基的基團取代的C 1-6烷基， 較佳 其為以下通式所示的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： ，更佳為 ，更佳為 。
  14. 如請求項11所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽，其選自以下化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽： 。
  15. 一種製備如請求項11至14中任一項所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽的方法，其選自以下方法： 方法一： 方法一包括以下步驟： 方法二： 方法二包括以下步驟： ， 較佳地，式iiC-2化合物由選自以下的方法製備： 方法三： 方法三包括以下步驟：式iiC-4-a所示的化合物與式iiC-5-a所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法四： 方法四包括以下步驟：式iiC-4-b所示的化合物與式iiC-5-b所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法五： 方法五包括以下步驟：式iiC-4-c所示的化合物與式iiC-5-c所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 方法六： 方法六包括以下步驟：式iiC-4-d所示的化合物與式iiC-5-d所示的化合物經縮合反應、水解反應和任選的胺基保護基脫除反應、胺基保護反應得到式iiC-2所示的化合物， ， 較佳地，所述式iC-2為 ； 較佳地，所述iiC-2選自： ， 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’和R 1C’’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’和R 2C’’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’和R 3C’’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，Rw為羧基保護基，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如請求項11至14中任一項所定義，Rs、Rt和Ru各自獨立地選自H和胺基保護基； 較佳地，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基；所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
  16. 一種如下通式所示的化合物、其立體異構物或其鹽， 較佳地，式iiC-2-X選自： ， 其中，R 0’為R 0或其中NH 2受胺基保護基保護的R 0，R 1C’為R 1C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 1C，R 2C’為R 2C或其中NH 2受胺基保護基保護的R 2C，R 3C’為R 3C或其中NH 2或環亞胺基受胺基保護基保護的R 3C，G’為G或其中NH 2和/或環亞胺基受胺基保護基保護且/或羧基受羧基保護基保護的G，環A、Y、R 0、R 1C、R 2C、R 3C、G和p如請求項11至14中任一項所定義，Rs、Rt各自獨立地選自H和胺基保護基，Rv選自H和羧基保護基； 較佳地，所述胺基保護基各自獨立地選自叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基矽乙氧羰基、苄氧羰基、對甲基苯磺醯基、對硝基苯磺醯基、叔丁基、三氟乙醯基、甲氧羰基、叔丁基亞磺醯基、1-苯基乙基或乙氧羰基；所述羧基保護基各自獨立地選自C 1-6烷基、烯丙基、苄基、2,4-二甲氧基苄基、對甲氧基苄基、甲氧基乙氧基甲基、五氟代苯基、4-對甲基苄氧基苄基。
  17. 一種藥物組合物，其包括如請求項1至4、7至8、11至14中任一項所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽、和藥學可接受的載體或賦形劑、以及任選的其它治療劑。
  18. 一種如請求項1至4、7至8、11至14中任一項所述的化合物、其立體異構物或其藥學上可接受的鹽或如請求項17所述的藥物組合物在製備藥物中的用途，特別地所述藥物用於激動κ阿片樣物質受體；或者 特別地所述藥物用於預防和/或治療由κ阿片樣物質受體介導的相關疾病；較佳地所述疾病症選自：疼痛、炎症、瘙癢、水腫、低鈉血症、低鉀血症、腸梗阻、咳嗽和青光眼，較佳疼痛；較佳地，所述疼痛選自：神經性疼痛、軀幹痛、內臟痛、皮膚痛、關節炎疼痛、腎結石疼痛、子宮痙攣、痛經、子宮內膜異位症、消化不良、外科手術後疼痛、醫療處理後疼痛、眼部疼痛、耳炎疼痛、爆發性癌症疼痛和GI紊亂相關的疼痛。
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