TW202237187A

TW202237187A - 組合療法

Info

Publication number: TW202237187A
Application number: TW111101427A
Authority: TW
Inventors: 莎拉可倫貝提; 蘇菲亞佛洛斯特
Original assignee: 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
Priority date: 2021-01-13
Filing date: 2022-01-13
Publication date: 2022-10-01
Also published as: JP2024503654A; CA3204291A1; AU2022207624A1; MX2023008083A; US20240173442A1; KR20230131205A; IL304223A; WO2022152701A1; EP4277668A1

Abstract

本發明係關於包括使用預靶向放射免疫療法(pre-targeted radioimmunotherapy；PRIT)之組合療法。

Description

組合療法

本發明係關於用於治療癌症之組合療法。

已研發出使藥物靶向癌細胞之單株抗體。藉由將毒性劑與結合至腫瘤相關抗原之抗體接合可能提供在對周圍組織之損傷較小之情況下更特定之腫瘤殺滅。

在預靶向放射免疫療法(PRIT)中，利用一方面對腫瘤相關抗原具有親和力且另一方面對放射性標記化合物具有親和力之抗體構築體。在第一步驟中，將抗體投與且定位至腫瘤。隨後，投與放射性標記化合物。因為放射性標記化合物小，故可將其迅速遞送至腫瘤且其清除快速，此情況減少腫瘤外之輻射暴露(Goldenberg等人Theranostics 2012, 2(5), 523-540)。類似程序亦可用於成像。預靶向可利用使用抗生物素蛋白-生物素之雙特異性抗體或系統，但後者具有抗生物素蛋白/鏈黴抗生物素蛋白具免疫原性之缺點。

本發明係關於包括使用PRIT之組合療法。

本發明係關於一種組合療法，其涉及使用：i)多特異性抗體或分裂多特異性抗體，該多特異性抗體或分裂多特異性抗體具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點；ii) CD40促效劑及iii)免疫檢查點抑制劑。

在一個態樣中，本發明係關於一種醫藥產品，其包含A)作為第一組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之多特異性抗體或分裂多特異性抗體，其具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點；B)作為第二組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之CD40促效劑；及C)作為第三組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之免疫檢查點抑制劑、較佳PD-L1抑制劑，用於組合、同時或依序治療增生性疾病、較佳癌症。在一些實施例中，醫藥產品可進一步包含放射性標記化合物。

在另一態樣中，本發明提供一種套組，其包含如本文所揭示之醫藥產品以及使用說明書。

在另一態樣中，本發明係關於一種具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體，其用於治療諸如癌症之增生性疾病的方法中，其中治療包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體，且其中治療進一步包含投與i)放射性標記化合物，ii) CD40促效劑及iii)免疫檢查點抑制劑。

在另一態樣中，本發明係關於一種用於治療諸如癌症之增生性疾病之方法中的CD40促效劑，其中治療進一步包含投與i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)放射性標記化合物，及iii)免疫檢查點抑制劑。

在另一態樣中，本發明係關於一種用於治療諸如癌症之增生性疾病之方法中的免疫檢查點抑制劑，其中該治療進一步包含投與i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)放射性標記化合物及iii) CD40促效劑。

在另一態樣中，本發明係關於i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)放射性標記化合物；iii) CD40促效劑及iv)免疫檢查點抑制劑，其在治療諸如癌症之增生性疾病之方法中組合使用。

在另一態樣中，本發明係關於一種治療諸如癌症之增生性疾病的方法，其包含向患者投與i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)放射性標記化合物；iii) CD40促效劑；及iv)免疫檢查點抑制劑。

在另一態樣中，本發明係關於一種治療個體之增生性疾病(諸如癌症)之方法，其包含： i)放射免疫療法治療，其包含向該個體投與多特異性抗體或分裂多特異性抗體，該多特異性抗體或分裂多特異性抗體具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點，且進一步包含向該個體投與該放射性標記化合物；及 ii)免疫療法治療，其包含向該個體投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑。

在多特異性抗體或分裂多特異性抗體之後，向該患者投與該放射性標記化合物。該多特異性抗體或分裂多特異性抗體結合至目標抗原。放射性標記化合物接著結合至多特異性抗體或分裂多特異性抗體，且因此定位至目標細胞。

抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑可以同時或按任一次序依序投與。其可在投與多特異性抗體/分裂多特異性抗體及放射性標記化合物之前或之後投與。較佳地，其在多特異性抗體/分裂多特異性抗體及放射性標記化合物之後投與。

在一個實施例中，治療之週期包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中該抗CD40抗體及該免疫檢查點抑制劑同時或按任一次序依序投與。

治療可包含一個週期，或可包含多個週期，例如2、3、4、5或6個週期。

在一些實施例中，並非所有治療週期均相同。在一些實施例中：該第一週期包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與該放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中該抗CD40抗體及該免疫檢查點抑制劑同時或按任一次序依序投與；及一或多個後續週期，其包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與該放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與免疫檢查點抑制劑。

舉例而言，可存在1、2、3、4或5個如上文所描述之後續週期。

多特異性抗體或分裂多特異性抗體可為雙特異性抗體或分裂雙特異性抗體。

在一個實施例中，多特異性抗體(例如雙特異性抗體)可為包含至少一個用於目標抗原之結合位點及至少一個用於放射性標記化合物(例如Pb-DOTAM螯合物)之結合位點的抗體。例示性抗體描述於WO2019/201959中。

分裂多特異性抗體由兩個不同部分組成，在本文中稱為半抗體。各半抗體包含能夠結合至目標抗原之抗原結合部分。用於放射性標記化合物之抗原結合位點在兩個半抗體之間分裂，使得僅在兩個半抗體締合時形成功能抗原結合位點。因此，分裂抗體包含： i)第一半抗體，其結合至目標抗原(亦即包含能夠結合至目標抗原之抗原結合部分)，且其進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點的VH域，但不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域；及 ii)第二半抗體，其結合至目標抗原(亦即包含能夠結合至目標抗原之抗原結合部分)，且其進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域，但不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點的VH域，其中該第一半抗體之該VH域及該第二半抗體之該VL域能夠一起形成用於該放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

第一半抗體及第二半抗體均不獨自包含用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點。第一半抗體僅具有來自用於放射性標記化合物之功能結合位點之VH域，且不具有VL域。第二半抗體僅具有VL域，且不具有VH域。

當第一及第二半抗體之VH及VL域締合時，形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點。此種情況可例如在第一抗體及第二抗體結合至同一個別目標細胞或結合至鄰接細胞時發生。

術語「半抗體」、「部分抗體」、分裂(SPLIT)及「單域分裂抗體」可互換使用。例示性半抗體/部分抗體描述於共同待決申請案PCT/EP2020/069561中。

當治療利用包含至少一個用於目標抗原之結合位點及至少一個用於放射性標記化合物之結合位點的單抗體分子(亦即不利用分裂抗體)時，治療亦可包含投與清除劑。清除劑在多特異性抗體之後及放射性標記化合物之前投與。清除劑結合至用於放射性標記化合物之抗原結合位點。清除劑阻斷用於放射性標記化合物之抗原結合位點，防止循環抗體結合於螯合型放射核種。或者或另外，清除劑可增加抗體自體內清除之速率。或者「清除劑」可稱作「阻斷劑」：在以下論述中此等術語可彼此取代。清除劑可結合於如本文中進一步論述之清除劑部分。

當治療利用半抗體時，不需要治療包含清除步驟。亦即，在一些實施例中，該方法不包含在投與第一半抗體及第二半抗體與投與放射性標記化合物之間(亦即，在投與半抗體之後、但在投與放射性標記化合物之前)投與清除劑或阻斷劑之步驟。在另一實施例中，在投與第一半抗體及第二半抗體與投與放射性標記化合物之間不投與除視情況選用之放射增敏劑及/或化學治療劑以外之藥劑。在另一實施例中，在投與第一半抗體及第二半抗體與投與放射性標記化合物之間不投與藥劑。

在一些實施例中，組合療法與單獨用預靶向放射免疫療法及/或單獨用免疫療法進行治療相比產生一或多個優點。單獨利用預靶向放射免疫療法之參考治療涉及投與與組合療法中相同之預靶向放射免疫療法治療(亦即，同一化合物、劑量、投與次數、週期數)但無免疫療法(亦即，不投與CD40促效劑或免疫檢查點抑制劑)。單獨利用免疫療法之參考治療涉及投與與組合療法中相同之免疫療法治療(亦即，同一CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑化合物、劑量、投與次數、週期數)但無預靶向放射免疫療法(亦即，不投與多特異性/分裂多特異性抗體、放射性標記化合物及清除劑(在適當時))。在一些實施例中，組合療法使得腫瘤生長速率比單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法更慢。在一些實施例中，組合療法使得患者/個體存活之可能性比用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療提高。在一些實施例中，與用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療相比，組合療法使得經活化腫瘤內CD8 T細胞之出現率提高(例如，如藉由上調41BB表現所量測)及/或腫瘤、脾及引流淋巴結(DLN)中經活化漿細胞樣DC (pDC)及經典DC (cDC)之出現率提高(例如，如藉由上調CD86表現所量測)，及/或總免疫細胞中T細胞之出現率提高。在一些實施例中，與用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療相比，組合療法引起增強的免疫記憶反應或減少的腫瘤復發可能性。

在一些實施例中，癌症難以用免疫檢查點抑制劑治療。

在一些實施例中，目標抗原為CEA可為較佳的。

在一些實施例中，放射性標記化合物為Pb-DOTAM可為較佳的。

I.定義出於本文之目的，「接受體人類構架」為包含來源於如下文所定義之人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之輕鏈可變域(VL)構架或重鏈可變域(VH)構架之胺基酸序列的構架。「來源於」人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之接受體人類構架可包含人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之相同胺基酸序列，或其可含有胺基酸序列變化。在一些態樣中，胺基酸變化之數目為10或更少、9或更少、8或更少、7或更少、6或更少、5或更少、4或更少、3或更少或2或更少。在一些態樣中，VL接受體人類構架與VL人類免疫球蛋白構架序列或人類共同構架序列具有序列一致性。

「親和力」係指分子(例如抗體)之單一結合位點與其結合搭配物(例如抗原)之間的非共價相互作用之總和之強度。除非另外指示，否則如本文所用，「結合親和力」係指反映結合對(例如，抗體與抗原)成員之間1:1相互作用之固有結合親和力。分子X對其搭配物Y之親和力通常可由解離常數(K _D)表示。可藉由此項技術中已知之常用方法(包括本文所描述之彼等方法)來量測親和力。用於量測結合親和力之特定說明性及例示性方法描述於以下中。

「親和力成熟」抗體係指相較於親本抗體而言在一或多個互補決定區(CDR)中具有一或多個更改之抗體，該親本抗體不具有該等更改，該等更改引起抗體對抗原之親和力改善。

術語「用於目標細胞表面上表現之抗原之結合位點」或「用於目標抗原之結合位點」係指能夠以足以使得抗體在靶向該抗原中可用作診斷劑及/或治療劑之親和力結合該抗原之結合位點。包含用於目標抗原之結合位點的抗體可包含以足夠親和力結合於目標抗原之任何結合部分。在一些實施例中，抗原結合部分可為抗體片段(諸如Fv、Fab、交叉Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；雙功能抗體；線性抗體；單鏈抗體分子(例如scFv或scFab)；或單域抗體(dAb)，諸如VHH)。在其他實施例中，其可為蛋白質結合骨架，諸如DARPin(經設計錨蛋白重複蛋白質)；親和抗體；Sso7d；單功能抗體或抗運載蛋白。

在一個態樣中，如例如藉由表面電漿子共振(SPR)所量測，抗體與不相關非抗原蛋白之結合程度小於抗體與抗原之結合之約10%。在某些態樣中，結合至於目標細胞表面上表現之抗原之抗體之解離常數(K _D)為≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)。據稱當抗體之K _D為1 μM或更小時，抗體「特異性結合」至於目標細胞表面上表現之抗原。在某些態樣中，抗體結合至該抗原之抗原決定基，該抗原決定基在來自不同物種之該抗原當中為保守的。

術語「用於放射性標記化合物之抗原結合位點」或「用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點」係指能夠以足以使得抗體可用作診斷劑及/或治療劑之親和力結合至放射性標記化合物以締合放射性標記化合物與抗體之抗原結合位點。用於放射性標記化合物之抗原結合位點較佳包含VH及VL域。在一個態樣中，如例如藉由表面電漿子共振(SPR)所量測，抗原結合位點與不相關非抗原化合物之結合程度小於抗體與放射性標記化合物之結合之約10%。在某些態樣中，結合至放射性標記化合物之抗原結合位點之解離常數(K _D)為≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)。可較佳地，其K _D為100 pM、50 pM、20 pM、10 pM、5 pM、1 pM或更小，例如0.9 pM或更小、0.8 pM或更小、0.7 pM或更小、0.6 pM或更小或0.5 pM或更小。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合放射性標記化合物。據稱當抗原結合位點之K _D為1 μM或更小時，抗原結合位點「特異性結合」至放射性標記化合物。

術語「抗體」在本文中係以最廣泛意義使用且涵蓋各種抗體結構，包括(但不限於)單株抗體、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)及抗體片段，只要其展現所需抗原結合活性即可。

「抗體片段」係指除完整抗體之外的分子，其包含完整抗體之一部分，結合完整抗體所結合之抗原。抗體片段之實例包括(但不限於) Fv、Fab、交叉Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab') ₂；雙功能抗體；線性抗體；單鏈抗體分子(例如scFv及scFab)；單域抗體(dAb)；及由抗體片段形成之多特異性抗體。對於某些抗體片段之綜述，參見Holliger及Hudson, Nature Biotechnology 23:1126-1136 (2005)。術語「Fab片段」係指由免疫球蛋白之重鏈之VH及CH1域以及輕鏈之VL及CL域組成的蛋白質。「Fab'片段」與Fab片段之不同之處在於，在包括一或多個來自抗體鉸鏈區之半胱胺酸之CH1域之羧基端處添加有殘基。對於包含救助接受體結合抗原決定基殘基且具有延長之活體內半衰期之Fab及F(ab') ₂片段的論述，參見美國專利第5,869,046號。

如本文所使用，提及「Fab片段」意欲包括交叉Fab片段或scFab以及習知Fab片段(亦即，包含有包含VL域及CL域之輕鏈及包含VH域及CH1域之重鏈片段的Fab片段)。

術語「交叉Fab片段」或「xFab片段」或「互換型Fab片段」係指其中重鏈及輕鏈之可變區或恆定區互換之Fab片段。交叉Fab片段包含由輕鏈可變區(VL)及重鏈恆定區1 (CH1)構成的多肽鏈以及由重鏈可變區(VH)及輕鏈恆定區(CL)構成的多肽鏈。為了清楚起見，在其中Fab輕鏈與Fab重鏈之可變區互換的互換型Fab分子中，包含重鏈恆定區之肽鏈在本文中稱為互換型Fab分子之「重鏈」。反之，在其中Fab輕鏈與Fab重鏈之恆定區互換的互換型Fab分子中，包含重鏈可變區之肽鏈在本文中稱為互換型Fab分子之「重鏈」。

如本文所用，術語「單鏈」係指包含胺基酸單體經肽鍵線性連接而成的分子。單鏈Fab分子為其中Fab輕鏈與Fab重鏈經肽連接子連接以形成單一肽鏈之Fab分子。在一特定的此類實施例中，在單鏈Fab分子中，Fab輕鏈之C端連接至Fab重鏈之N端。

不對稱Fab臂亦可藉由將帶電或不帶電胺基酸突變引入域界面中以導引正確Fab配對來進行工程改造。參見例如WO 2016/172485。

「單鏈可變片段」或「scFv」為藉由肽連接子連接之抗體重鏈(VH)及輕鏈(VL)可變域之融合蛋白。特定言之，連接子為具有10至25個胺基酸之短多肽，且通常富含甘胺酸以獲得可撓性以及富含絲胺酸或蘇胺酸以獲得溶解度，且可連接VH之N端與VL之C端，反之亦然。儘管移除恆定區且引入連接子，但此蛋白質保留原始抗體之特異性。關於scFv片段之綜述，參見例如Plückthun, The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, 第113卷, Rosenburg及Moore編, (Springer-Verlag, New York), 第269-315頁(1994)；亦參見WO 93/16185；及美國專利第5,571,894號及第5,587,458號。

分裂抗體係指其中抗原之結合位點在兩個部分(諸如兩個個別抗體分子)之間分裂的抗體。兩個部分可被稱為「半抗體」或「部分抗體」。當兩個部分相關時，形成抗原之功能結合位點。在本發明中，各半抗體包含用於目標細胞表面上之抗原的抗原結合部分，以及用於放射性標記化合物之抗原結合位點的VH或VL。當兩個半抗體結合至相同或鄰近目標細胞時，VH與VL之間可形成穩定締合，因此形成放射性標記化合物之功能結合位點。「靶向CEA之SPLIT PRIT」係指靶向CEA之分裂抗體。術語「SPLIT PRIT」亦可與術語「TA-分裂-DOTAM-VH/VL」互換使用。術語「靶向CEA之SPLIT PRIT」可與術語「CEA-分裂-DOTAM-VH/VL」互換使用。

術語「清除劑」係指增加抗體自個體循環之清除速率及/或阻斷效應分子、尤其放射性標記化合物結合至彼效應分子之功能結合位點的藥劑。一般而言，清除劑結合至抗體，例如特異性結合至抗體。其可結合至效應分子之功能結合位點，例如特異性結合至該功能結合位點。

如本文所用之術語「清除步驟」或「清除階段」涵蓋使用增加抗體自個體之循環之清除速率及/或阻斷效應分子之結合的藥劑。一些藥劑可在清除及阻斷兩方面起作用。

術語「抗原決定基」指示抗體所結合之蛋白質或非蛋白質抗原上之位點。抗原決定基可由連續胺基酸伸長段(線性抗原決定基)或包含例如由於抗原摺疊，亦即因蛋白抗原之三級摺疊而在空間上鄰近之非連續胺基酸(構形抗原決定基)來形成。線性抗原決定基通常在蛋白質抗原暴露於變性劑之後仍與抗體結合，而構形抗原決定基通常在用變性劑處理之後經破壞。抗原決定基在獨特空間構形中包含至少3個、至少4個、至少5個、至少6個、至少7個或8-10個胺基酸。

針對結合於特定抗原決定基之抗體(亦即結合於相同抗原決定基之抗體)之篩選可使用此項技術中之常規方法來進行，該等方法諸如例如(但不限於)丙胺酸掃描、肽墨點法(參見Meth. Mol. Biol. 248 (2004) 443-463)、肽裂解分析、抗原決定基切除、抗原決定基萃取、抗原化學改質(參見Prot. Sci. 9 (2000) 487-496)以及交叉阻斷(參見「Antibodies」, Harlow及Lane (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harb., NY)。

基於抗原結構之抗體剖析(ASAP)亦稱為修飾輔助剖析(MAP)，允許基於來自特異性結合至抗原之多個單株抗體之抗體中之各者與經化學修飾或經酶修飾之抗原表面的結合概況來對多個單株抗體進行分組(參見例如US 2004/0101920)。每一組中之抗體與相同抗原決定基結合，該抗原決定基可為與由另一組所表示之抗原決定基完全不同或部分重疊的獨特抗原決定基。

此外，競爭性結合可用於容易地判定抗體是否結合至與參考抗體相同之抗原決定基，或是否與參考抗體競爭結合。舉例而言，與參考抗體「結合於相同抗原決定基之抗體」係指以下抗體，其在競爭分析中阻斷參考抗體與其抗原之結合達50%或更高，且反之，參考抗體在競爭分析法中阻斷該抗體與其抗原之結合達50%或更高。此外，舉例而言，為判定抗體是否結合至與參考抗體相同之抗原決定基，使參考抗體在飽和條件下結合至抗原。在移除過量參考抗體之後，評估所討論之抗體結合至抗原之能力。若所討論之抗體能夠在參考抗體飽和結合之後結合至抗原，則可得出結論：所討論之抗體結合至與參考抗體不同之抗原決定基。但，若所討論之抗體不能在參考抗體飽和結合之後結合至抗原，則所討論之抗體可能結合至與參考抗體所結合之抗原決定基相同之抗原決定基。為了確認所討論之抗體是與相同抗原決定基結合抑或僅由於空間原因而結合受阻，可使用常規實驗(例如使用ELISA之肽突變及結合分析、RIA、表面電漿子共振、流式細胞量測術或在此項技術中可獲得之任何其他定量或定性抗體結合分析)。此檢驗應在兩個設置下進行，亦即，在兩種抗體均為飽和抗體的情況下進行。若在兩個設置下，僅第一(飽和)抗體能夠結合至抗原，則可得出結論：所討論之抗體及參考抗體競爭結合至抗原。

在一些態樣中，若如在競爭結合分析中所量測，1倍、5倍、10倍、20倍或100倍過量之一個抗體抑制另一抗體之結合達至少50%、至少75%、至少90%或甚至99%或更高，則兩個抗體視為結合至相同或重疊抗原決定基(參見例如Junghans等人, Cancer Res. 50 (1990) 1495-1502)。

在一些態樣中，若抗原中減弱或消除一個抗體之結合之基本上所有胺基酸突變亦減弱或消除另一抗體之結合，則兩個抗體視為結合至相同抗原決定基。若減弱或消除一種抗體之結合的胺基酸突變的僅一個子集減弱或消除另一種抗體之結合，則認為兩種抗體具有「重疊抗原決定基」。

術語「嵌合」抗體係指重鏈及/或輕鏈之一部分來源於特定來源或物種，而重鏈及/或輕鏈之其餘部分來源於不同來源或物種之抗體。

抗體之「類別」係指其重鏈所具有之恆定域或恆定區的類型。存在五個主要抗體類別：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，且此等類別中之若干個類別可進一步分成子類(同型)，例如IgG ₁、IgG ₂、IgG ₃、IgG ₄、IgA ₁及IgA ₂。在某些態樣中，抗體係IgG ₁同型。在某些態樣中，抗體係具有用於減弱Fc區效應子功能之P329G、L234A及L235A突變之IgG ₁同型。在其他態樣中，抗體係IgG ₂同型。在某些態樣中，抗體係具有用於改善IgG ₄抗體穩定性之鉸鏈區中S228P突變之IgG ₄同型。對應於不同類別免疫球蛋白之重鏈恆定域分別稱作α、δ、ε、γ及μ。抗體輕鏈可基於其恆定域之胺基酸序列而歸為兩種類型之一，稱為kappa (κ)及lambda (λ)。

「效應子功能」係指可歸因於抗體之Fc區之生物活性，其因抗體同型而異。抗體效應子功能之實例包括：C1q結合及補體依賴性細胞毒性(CDC)；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細胞表面受體(例如B細胞受體)之下調；及B細胞活化。

藥劑(例如醫藥組合物)之「有效量」係指在劑量上及對於所需時段有效以達成所需治療性或預防性結果的量。

術語「串聯Fab」係指包含經由肽連接子/繫鏈連接之兩個Fab片段之抗體。在一些實施例中，串聯Fab可包含藉由肽連接子/繫鏈連接之一個Fab片段及一個交叉Fab片段。

在本文中，術語「Fc區」用以定義含有至少一部分恆定區之免疫球蛋白重鏈之C端區。術語「Fc域」在本文中用於定義含有兩個重鏈之恆定區、不包括第一恆定區之免疫球蛋白之C端區。因此，Fc係指IgA、IgD及IgG之最後兩個恆定區免疫球蛋白域，及IgE及IgM之最後三個恆定區免疫球蛋白域。該術語包括原生序列Fc區及變異Fc區。在一個態樣中，人類IgG重鏈Fc區自Cys226或自Pro230延伸至重鏈之羧基端。然而，宿主細胞所產生的抗體可能在重鏈C端經歷一或多個(特定言之，一或兩個)胺基酸之轉譯後裂解。因此，宿主細胞藉由表現編碼全長重鏈之特定核酸分子產生的抗體可包括全長重鏈，或其可包括全長重鏈之裂解變體。此情況可為重鏈之最末兩個C端胺基酸為甘胺酸(G446)及離胺酸(K447，根據EU索引編號)之情況。因此，Fc區之C端離胺酸(Lys447)或C端甘胺酸(Gly446)及離胺酸(K447)可存在或可不存在。在一個態樣中，包括如本文所規定、包含於本發明之抗體中之Fc區之重鏈包含另一C端甘胺酸-離胺酸二肽(G446及K447，根據EU索引編號)。在一個態樣中，包括如本文所規定、包含於本發明之抗體中之Fc區之重鏈包含另一C端甘胺酸殘基(G446，根據EU索引編號)。除非本文另外說明，否則Fc區或恆定區中之胺基酸殘基之編號係根據EU編號系統，亦稱為EU索引，如Kabat等人, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991中所述。如本文所使用之Fc域之「次單元」係指形成二聚Fc域之兩個多肽中之一者，亦即能夠與形成二聚Fc域之兩個多肽中之另一者穩定締合的包含免疫球蛋白重鏈之C端恆定區之多肽。舉例而言，IgG Fc域之亞單元包含IgG CH2及IgG CH3恆定域。

「構架」或「FR」係指除互補決定區(CDR)以外之可變域殘基。可變域之FR一般由四個FR域組成：FR1、FR2、FR3及FR4。因此，在VH (或VL)中，CDR及FR序列一般以以下序列出現：FR1-CDR-H1(CDR-L1)-FR2- CDR-H2(CDR-L2)-FR3- CDR-H3(CDR-L3)-FR4。

術語「全長抗體」、「完整抗體」及「全抗體」在本文中可互換使用，係指一種抗體，該抗體具有基本上類似於天然抗體結構之結構或具有含有如本文所定義之Fc區之重鏈。如本文所使用之術語「全長抗體」指示由兩個「全長抗體重鏈」及兩個「全長抗體輕鏈」組成之抗體。「全長抗體重鏈」可為在N端至C端方向上由抗體重鏈可變域(VH)、抗體恆定重鏈域1 (CH1)、抗體鉸鏈區(HR)、抗體重鏈恆定域2 (CH2)及抗體重鏈恆定域3 (CH3) (縮寫為VH-CH1-HR-CH2-CH3)以及在子類別IgE之抗體的情況下視情況選用的抗體重鏈恆定域4 (CH4)組成的多肽。較佳地，「全長抗體重鏈」為在N端至C端方向上由VH、CH1、HR、CH2及CH3組成之多肽。並不意欲提及「全長」排除交叉Mab形成之可能性，因此，重鏈可具有交換成VL域之VH域，或交換成CL域之CH1域。「全長抗體輕鏈」可為在N端至C端方向上由抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域(CL) (縮寫為VL-CL)組成之多肽。可替代地，在交叉Mab之情況下，VL域可調換為VH域，或CL域可調換為CH1域。抗體輕鏈恆定域(CL)可為kappa (κ)或lambda (γ)。兩個全長抗體鏈係經由CL域與CH1域之間及全長抗體重鏈之鉸鏈區之間的多肽間雙硫鍵連接在一起。典型全長抗體之實例為天然抗體，如IgG (例如IgG1及IgG2)、IgM、IgA、IgD及IgE。全長抗體可來自單一物種，例如人類，或其可為嵌合或人類化抗體。本文所描述之全長抗體包含各自藉由一對VH及VL形成之兩個抗原結合位點，在一些實施例中該兩個抗原結合位點均可特異性結合至相同抗原或可結合至不同抗原。該全長抗體之重鏈或輕鏈之C端指示該重鏈或輕鏈之C端處的最末胺基酸。

「融合」意指組分係藉由肽鍵直接連接或經由一或多個肽連接子連接。

術語「宿主細胞」、「宿主細胞株」及「宿主細胞培養物」可互換使用且係指已引入外源核酸之細胞，包括此類細胞之後代。宿主細胞包括「轉型體」及「經轉型細胞」，其包括原代經轉型細胞及由其衍生之後代，不考慮繼代數目。後代之核酸含量與母細胞可能不完全相同，但可能含有突變。本文包括針對原始轉型細胞篩選或選擇具有相同功能或生物活性之突變型子代。

「人類抗體」為胺基酸序列對應於由人類或人類細胞產生或來源於利用人類抗體譜系或其他人類抗體編碼序列之非人類來源之抗體的胺基酸序列之抗體。人類抗體之此定義特定排除包含非人類抗原結合殘基之人類化抗體。

「人類共同構架」為表示所選人類免疫球蛋白VL或VH構架序列中最常出現之胺基酸殘基的構架。一般而言，人類免疫球蛋白VL或VH序列係選自可變域序列之子組。通常，序列子組為如Kabat等人, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第五版, NIH公開案91-3242, Bethesda MD (1991), 第1-3卷中之子組。在一個態樣中，對於VL，該子組為如Kabat等人，同前文獻中之子組κ I。在一個態樣中，對於VH，該子組為如Kabat等人，同前文獻中之子組III。

「人類化」抗體係指包含來自非人類CDR之胺基酸殘基及來自人類FR之胺基酸殘基之嵌合抗體。在某些態樣中，人類化抗體將包含實質上全部至少一個且通常兩個可變域，其中全部或實質上全部CDR對應於非人類抗體之CDR，且全部或實質上全部FR對應於人類抗體之FR。人類化抗體視情況可包含來源於人類抗體之抗體恆定區之至少一部分。抗體(例如，非人類抗體)之「人類化形式」係指已經歷人類化之抗體。

如本文所用之術語「高變區」或「HVR」係指抗體可變域中之序列高變且決定抗原結合特異性之區(例如「互補決定區」(「CDR」))中之每一者。

一般而言，抗體包含六個CDR：VH中之三個CDR (CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)及VL中之三個CDR (CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3)。本文中之例示性CDR包括： (a)出現在胺基酸殘基26-32 (L1)、50-52 (L2)、91-96 (L3)、26-32 (H1)、53-55 (H2)及96-101 (H3)處之高變環(Chothia及Lesk, J. Mol. Biol.196:901-917(1987))； (b)出現在胺基酸殘基24-34 (L1)、50-56 (L2)、89-97 (L3)、31-35b (H1)、50-65 (H2)及95-102 (H3)處之CDR (Kabat等人, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版. 美國公共衛生署(Public Health Service), 美國國家衛生研究院(National Institutes of Health), Bethesda, MD (1991))；及 (c)出現在胺基酸殘基27c-36 (L1)、46-55 (L2)、89-96 (L3)、30-35b (H1)、47-58 (H2)及93-101 (H3)處之抗原觸點(MacCallum等人 J. Mol. Biol.262: 732-745 (1996))。

除非另外指示，否則CDR係根據Kabat等人(同上)確定。熟習此項技術者應理解，CDR名稱亦可根據以下來確定：Chothia，同前文獻；McCallum，同前文獻；或任何其他科學上所接受之命名法系統。代替上文，如本文所描述之CDR-H1之序列可自Kabat26延伸至Kabat35，例如對於Pb-DOTAM結合可變域而言。

在一個態樣中，CDR殘基包含在序列表中或本說明書中其他地方識別之CDR殘基。

除非另外指示，否則可變域中之HVR/CDR殘基及其他殘基(例如FR殘基)係在本文中根據Kabat等人，同前文獻來進行編號。

「免疫結合物」為結合於一或多個異源分子(包括(但不限於)細胞毒性劑)之抗體。

「個體(individual)」或「個體(subject)」為哺乳動物。哺乳動物包括(但不限於)家養動物(例如牛、羊、貓、狗及馬)、靈長類動物(例如人類及非人類靈長類動物，諸如猴)、兔及嚙齒動物(例如小鼠及大鼠)。在某些態樣中，個體(individual/subject)為人類。

如本文所描述之分子可為「經分離」的。「經分離」之抗體為已與其天然環境之組分分離之抗體。在一些態樣中，如藉由例如電泳(例如SDS-PAGE、等電聚焦(IEF)、毛細管電泳)或層析(例如離子交換或逆相HPLC)方法所測定，抗體經純化至大於95%或99%純度。關於評估抗體純度之方法的綜述，參見例如Flatman等人, J. Chromatogr. B848:79-87 (2007)。

術語「核酸分子」或「多核苷酸」包括包含核苷酸聚合物之任何化合物及/或物質。各核苷酸由鹼基、特別嘌呤或嘧啶鹼基(亦即胞嘧啶(C)、鳥嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)或尿嘧啶(U))、糖(亦即去氧核糖或核糖)及磷酸酯基構成。核酸分子通常用鹼基序列描述，因此該等鹼基代表核酸分子之一級結構(線性結構)。鹼基序列通常自5'至3'表示。在本文中，術語核酸分子涵蓋去氧核糖核酸(DNA)，包括例如互補DNA (cDNA)及基因體DNA；核糖核酸(RNA)，尤其信使RNA (mRNA)；DNA或RNA之合成形式；及包含兩個或兩個以上此等分子之混合聚合物。核酸分子可呈線性或環狀圓形。另外，術語核酸分子包括有義股與反義股，以及單股與雙股形式。另外，本文描述之核酸分子可含有天然存在或非天然存在之核苷酸。非天然存在之核苷酸之實例包括具有衍生化糖或磷酸酯主鏈鍵聯或經化學修飾之殘基的經修飾核苷酸鹼基。核酸分子亦涵蓋適用作載體以在活體外及/或活體內，例如在宿主或患者中直接表現本發明抗體的DNA及RNA分子。此類DNA (例如cDNA)或RNA (例如mRNA)載體可以不修飾或經修飾。舉例而言，mRNA可經化學修飾以增強RNA載體之穩定性及/或經編碼分子之表現，以使得可將mRNA注射至個體中以活體內生成抗體(參見例如Stadler等人, Nature Medicine 2017, 2017年6月12日線上發佈, doi:10.1038/nm.4356或EP 2 101 823 B1)。

「分離」之核酸係指已與其天然環境之組分分離之核酸分子。分離核酸包括通常含有核酸分子之細胞中所含的核酸分子，但該核酸分子存在於染色體外或存在於不同於其天然染色體位置之染色體位置。

「編碼抗體之經分離核酸」係指編碼抗體重鏈及輕鏈(或其片段)之一或多種核酸分子，包括單一載體或單獨載體中之此等核酸分子及存在於宿主細胞中之一或多個位置處之此等核酸分子。

如本文所用，術語「單株抗體」係指自實質上均質抗體之群體獲得之抗體，亦即除可能變異抗體(例如含有天然產生之突變或在製造單株抗體製劑期間出現之變異抗體，此類變異體通常以較小量存在)以外，構成該群體之個別抗體相同及/或結合相同抗原決定基。相比於典型地包括針對不同決定子(抗原決定基)之不同抗體的多株抗體製劑，單株抗體製劑之各單株抗體係針對抗原上之單一決定子。因此，修飾語「單株」指示抗體之特徵為自基本上同質之抗體群體獲得，且不應解釋為需要藉由任何特定方法產生該抗體。舉例而言，根據本發明之單株抗體可藉由多種技術製造，該等技術包括但不限於融合瘤方法、重組DNA方法、噬菌體呈現方法及利用含有全部或部分人類免疫球蛋白基因座之基因轉殖動物之方法、本文所描述之用於製造單株抗體之該等方法及其他例示性方法。

「裸抗體」係指未與異質部分(例如細胞毒性部分)或放射性標記結合之抗體。裸抗體可存在於醫藥組合物中。

「原生抗體」係指具有不同結構之天然產生之免疫球蛋白分子。舉例而言，天然IgG抗體為約150,000道爾頓(dalton)之雜四聚體醣蛋白，其由二硫化物鍵結之兩條相同輕鏈及兩條相同重鏈構成。各重鏈自N端至C端具有可變域(VH)，該VH亦稱為可變重域或重鏈可變區，接著為三個恆定重域(CH1、CH2及CH3)。類似地，各輕鏈自N端至C端具有可變域(VL)，該VL亦稱為可變輕域或輕鏈可變區，接著為恆定輕(CL)域。

術語「藥品說明書」用以指通常包括於治療性產品之商業包裝中的說明書，其含有關於與使用此類治療性產品有關之適應症、用法、劑量、投與、組合療法、禁忌症及/或警告的資訊。

關於參考多肽序列之「胺基酸序列一致性百分比(%)」定義為在比對序列且必要時引入間隙以達成最大序列一致性百分比且出於比對之目的不將任何保守取代視為序列一致性之一部分之後，候選序列中與參考多肽序列中之胺基酸殘基具有一致性之胺基酸殘基的百分比。出於測定胺基酸序列一致性百分比之目的之比對可以此項技術中之技能範圍內的各種方式達成，例如使用公開可獲得的電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、Clustal W、Megalign (DNASTAR)軟體或FASTA程式包。熟習此項技術者可確定適用於比對序列之參數，包括在所比較序列之全長內達成最大比對所需的任何算法。或者，可使用序列比較電腦程式ALIGN-2生成一致性百分比值。ALIGN-2序列比較電腦程式係由Genentech, Inc.所著，且源碼已與華盛頓哥倫比亞特區美國版權局(U.S. Copyright Office, Washington D.C.), 20559中之使用者資料一起提交，其中其以美國版權登記號TXU510087註冊，且描述於WO 2001/007611中。

出於本文之目的，除非另外指示，否則胺基酸序列一致性百分比值係使用FASTA套裝36.3.8c版或更新版之ggsearch程式，用BLOSUM50比較矩陣生成。FASTA程式包的作者為W. R. Pearson及D. J. Lipman (1988)，「Improved Tools for Biological Sequence Analysis」，PNAS 85:2444-2448；W. R. Pearson (1996)「Effective protein sequence comparison」 Meth. Enzymol. 266:227-258；及Pearson等人(1997) Genomics 46:24-36，且公開獲自www.fasta.bioch.virginia.edu/fasta_www2/ fasta_down.shtml或www.ebi.ac.uk/Tools/sss/fasta。或者，可使用在fasta.bioch.virginia.edu/fasta_www2/index.cgi可獲取的公共伺服器來比較序列，使用ggsearch (全域蛋白質：蛋白質)程式及預設選項(BLOSUM50；開端：-10；ext：-2；Ktup = 2)以確保進行全域比對而非局域比對。胺基酸一致性百分比係在輸出比對標題中給出。

術語「醫藥組合物」或「醫藥調配物」係指呈便於准許其中所含活性成分之生物活性有效之形式且不含有對投與有醫藥組合物之個體具有不可接受毒性之額外組分的製劑。

「醫藥學上可接受之載劑」係指醫藥組合物或調配物中除活性成分以外之對個體無毒的成分。醫藥學上可接受之載劑包括(但不限於)緩衝液、賦形劑、穩定劑或防腐劑。

除非另外指示，否則所提及之如本文所使用之目標抗原係指來自任何脊椎動物來源之任何原生目標抗原，該任何脊椎動物來源包括諸如靈長類動物(例如人類)及嚙齒動物(例如小鼠及大鼠)之哺乳動物。該術語涵蓋「全長」、未經加工之目標抗原以及由細胞中之加工產生之目標抗原之任何形式。該術語亦涵蓋目標抗原之天然存在之變異體，例如剪接變異體或對偶基因變異體。舉例而言，目標抗原CEA可具有人類CEA，尤其癌胚抗原相關細胞黏附分子5 (CEACAM5)之胺基酸序列，其示於UniProt (www.uniprot.org)寄存編號P06731 (型號119)或NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov/) RefSeq NP_004354.2中。

如本文所用，「治療(treatment)」(及其文法變化形式，諸如「治療(treat)」或「治療(treating)」)係指試圖改變所治療個體之疾病之自然過程的臨床介入且可出於預防或在臨床病理學過程中進行。所需治療作用包括(但不限於)預防疾病發生或復發、緩解症狀、減輕疾病之任何直接或間接病理性後果、預防轉移、降低疾病進展速率、改善或緩和疾病病況及緩解或改善預後。在一些態樣中，本發明抗體用於延緩疾病發展或用於減慢疾病惡化。

術語「可變區」或「可變域」係指涉及抗體結合至抗原的抗體重鏈或輕鏈域。原生抗體之重鏈及輕鏈之可變域(分別為VH及VL)一般具有類似結構，其中各域包含四個保守構架區(FR)及三個互補決定區(CDR)。(參見例如Kindt等人. Kuby Immunology, 第6版, W.H. Freeman and Co., 第91頁(2007)。)單一VH或VL域可足以賦予抗原結合特異性。此外，結合特定抗原之抗體可使用來自結合抗原之抗體的VH域或VL域分別篩選互補VL域或VH域之庫來分離。參見例如Portolano等人, J. Immunol.150:880-887 (1993)；Clarkson等人, Nature352:624-628 (1991)。

如本文所用之術語「載體」係指能夠傳播至其所連接之另一核酸的核酸分子。該術語包括呈自我複製核酸結構之載體以及併入其已引入之宿主細胞之基因體中的載體。某些載體能夠導引可操作地連接其之核酸的表現。此等載體在本文中稱為「表現載體」。

如本文所使用之術語「Pb」或「鉛」包括例如Pb(II)之其離子。所提及之其他金屬亦包括其離子。因此，熟習此項技術之讀者瞭解例如術語鉛、Pb、 ²¹²Pb或 ²⁰³Pb意欲涵蓋該元素之離子形式，尤其Pb(II)。

II.組合物及方法 A.放射性標記化合物根據本發明，多特異性抗體或分裂多特異性抗體包含用於效應分子之結合位點。(在由第一及第二半抗體形成之分裂多特異性抗體中，第一半抗體包含用於效應分子之抗原結合位點之VH域且第二半抗體包含用於效應分子之抗原結合位點之VL域，且在兩個半抗體締合時形成功能結合位點)。

根據本發明之效應分子為包含放射性同位素之放射性標記化合物，例如為放射性標記半抗原。

在一些實施例中，效應分子可包含經螯合放射性同位素。

在一些實施例中，用於效應分子之功能結合位點可結合至包含螯合物及放射性同位素之螯合物。在其他實施例中，抗體可結合至與經螯合放射性同位素接合之部分，例如組織胺-丁二醯基-甘胺酸(HSG)、地穀新配質(digoxigenin)、生物素或咖啡鹼。

舉例而言，螯合物可為諸如胺基多羧酸或胺基多硫羧酸或其鹽或功能變異體之多齒分子。舉例而言，螯合物可為雙齒或三齒或四齒的。合適金屬螯合物之實例包括包含以下之分子：EDTA (乙二胺四乙酸或諸如CaNa ₂EDTA之鹽形式)、DTPA (二伸乙三胺五乙酸)、DOTA (1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸)、NOTA (2,2',2''-(1,4,7-三氮雜壬烷-1,4,7-三基)三乙酸)、IDA (亞胺二乙酸)、MIDA ((甲基亞胺基)二乙酸)、TTHA (3,6,9,12-肆(羧甲基)-3,6,9,12-四氮雜十四烷二酸)、TETA (2,2',2'',2'''-(1,4,8,11-四氮雜環十四烷-1,4,8,11-四基)四乙酸)、DOTAM (1,4,7,10-肆(胺甲醯基甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷)、HEHA (1,4,7,10,13,16-六氮雜環十六烷-1,4,7,10,13,16-六乙酸，可獲自Macrocyclics公司, Plano, Texas)、NTA (氮基三乙酸)、EDDHA (乙二胺-N,N'-雙(2-羥基苯乙酸)、BAL (2,3,-二巰基丙醇)、DMSA (2,3-二巰基丁二酸)、DMPS (2,3-二巰基-1-丙磺酸)、D-青黴胺(B-二甲基半胱胺酸)、MAG ₃(巰基乙醯基三甘胺酸)、肼基菸醯胺(Hynic) (6-肼基吡啶-3-甲酸)、對異硫氰基苄基-去鐵胺(例如經鋯標記以進行成像)及其能夠螯合金屬之鹽或功能變異體/衍生物。在一些實施例中，可較佳地，螯合物為DOTA或DOTAM或其能夠螯合金屬之鹽或功能變異體/衍生物。因此，螯合物可為或可包含具有與其螯合之放射性同位素之DOTA或DOTAM。

放射性標記化合物可包含以下或由以下組成：上文螯合物之功能變異體或衍生物以及放射核種。合適變異體/衍生物具有在某種有限程度上有所不同之結構且保持充當螯合物之能力(亦即，保持足以用於本文所描述之目的中之一或多個之活性)。功能變異體/衍生物亦可包括接合至一或多個額外部分或取代基之如上文所描述之螯合物，包括小分子、多肽或碳水化合物。此連接可例如在螯合物之主鏈部分中經由構成碳中之一者發生。舉例而言，適合的取代基可為烴基，諸如烷基、烯基、芳基或炔基；羥基；醇基；鹵素原子；硝基；氰基；磺醯基；硫醇基；胺基；側氧基；羧基；硫羧基；羰基；醯胺基；酯基；或雜環基，包括雜芳基。舉例而言，取代基可為下文針對基團「R ¹」所定義之取代基中之一者。舉例而言，小分子可為染料(諸如Alexa 647或Alexa 488)、生物素或生物素部分或苯基或苯甲基部分。舉例而言，多肽可為例如具有兩個或三個胺基酸之寡肽之寡肽。例示性碳水化合物包括聚葡萄糖、直鏈或分支鏈聚合物或共聚物(例如聚伸烷基、聚(乙烯-離胺酸)、聚甲基丙烯酸酯、聚胺基酸、多醣或寡醣、樹枝狀聚合物)。衍生物亦可包括其中如上文所闡述之化合物經由連接子部分連接之螯合物化合物之多聚體。衍生物亦可包括保持螯合金屬離子之能力之上文化合物之功能片段。

衍生物之特定實例包括苯甲基-EDTA及羥乙基-硫脲基-苯甲基EDTA、DOTA-苯(例如(S-2-(4-胺基苯甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷四乙酸)、DOTA-生物素及DOTA-TyrLys-DOTA。

在本發明之一些實施例中，放射性配位體之功能結合位點結合於包含DOTAM及金屬，例如鉛(Pb)之金屬螯合物。如上文所提及，「DOTAM」具有化學名稱： 1,4,7,10-肆(胺甲醯基甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷，其為下式化合物：

在某些態樣及實施例中，本發明亦可利用併有金屬離子之DOTAM之功能變異體或衍生物。適合的DOTAM之變異體/衍生物具有在某種有限程度上與DOTAM之結構有所不同的結構，且保持起作用之能力(亦即，保持足以用於本文所描述之一或多個目的之活性)。在該等態樣及實施例中，DOTAM或DOTAM之功能變異體/衍生物可為WO 2010/099536中所揭示之活性變異體中之一者。適合的功能變異體/衍生物可為下式之化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽；其中 R ^N為H、C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基及C _1-7雜芳基-C _1-4烷基；其中C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基及C _2-6炔基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^w基團取代；且其中該C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基及C _1-7雜芳基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^x基團取代； L ¹獨立地為C _1-6伸烷基、C _1-6伸烯基或C _1-6伸炔基，其中之每一者視情況經1、2或3個獨立地選自R ¹基團之基團取代； L ²為C _2-4直鏈伸烷基，其視情況由經獨立選擇之R ¹基團取代；且其視情況經1、2、3或4個獨立地選自C _1-4烷基及/或C _1-4鹵烷基之基團取代； R ¹獨立地選自D ¹-D ²-D ³、鹵素、氰基、硝基、羥基、C _1-6烷氧基、C _1-6鹵烷氧基、C _1-6烷硫基、C _1-6烷基亞磺醯基、C _1-6烷基磺醯基、胺基、C _1-6烷胺基、二C _1-6烷胺基、C _1-4烷基羰基、羧基、C _1-6烷氧基羰基、C _1-6烷基羰基胺基、二C _1-6烷基羰基胺基、C _1-6烷氧基羰基胺基、C _1-6烷氧基羰基-(C _1-6烷基)胺基、胺甲醯基、C _1-6烷基胺甲醯基及二C _1-6烷基胺甲醯基；各D ¹獨立地選自C _6-10芳基-C _1-4烷基、C _1-9雜芳基-C _1-4烷基、C _3-10環烷基-C _1-4烷基、C _2-9雜環烷基-C _1-4烷基、C _1-8伸烷基、C _1-8伸烯基及C _1-8伸炔基；其中該C _1-8伸烷基、C _1-8伸烯基及C _1-8伸炔基視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ⁴基團取代；且其中該C _6-10芳基-C _1-4烷基、C _1-9雜芳基-C _1-4烷基、C _3-10環烷基-C _1-4烷基、C _2-9雜環烷基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ⁵基團取代；各D ²獨立地不存在或為C _1-20直鏈伸烷基，其中該C _1-20直鏈伸烷基之1至6個非鄰接亞甲基各自視情況由經獨立選擇之-D ⁴-部分置換，其限制條件為該C _1-20直鏈伸烷基中之至少一個亞甲基單元不視情況經-D ⁴-部分置換；其中該C _1-20直鏈伸烷基視情況經一或多個獨立地選自以下之基團取代：鹵素、氰基、硝基、羥基、C _1-4烷基、C _1-4鹵烷基、C _1-4烷氧基、C _1-4鹵烷氧基、胺基、C _1-4烷胺基、二C _1-4烷胺基、C _1-4烷基羰基、羧基、C _1-4烷氧基羰基、C _1-4烷基羰基胺基、二C _1-4烷基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基-(C _1-4烷基)胺基、胺甲醯基、C _1-4烷基胺甲醯基及二C _1-4烷基胺甲醯基；各D ³獨立地選自H、鹵素、氰基、硝基、羥基、C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-14環烷基、C _3-14環烷基-C _1-4烷基、C _2-14雜環烷基、C _2-14雜環烷基-C _1-4烷基、C _6-14芳基、C _6-14芳基-C _1-4烷基、C _1-13雜芳基、C _1-13雜芳基-C _1-4烷基；其中該C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ⁶基團取代；且其中該C _3-14環烷基、C _3-14環烷基-C _1-4烷基、C _2-14雜環烷基、C _2-14雜環烷基-C _1-4烷基、C _6-14芳基、C _6-14芳基-C _1-4烷基、C _1-13雜芳基、C _1-13雜芳基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ⁷基團取代；各D ⁴獨立地選自-O-、-S-、-NR ^aC(=O)-、-NR ^aC(=S)-、-NR ^bC(=O)NR ^c-、-NR ^bC(=S)NR ^c-、-S(=O)-、-S(=O) ₂-、-S(=O)NR ^a-、-C(=O)-、-C(=S)-、-C(=O)O-、-OC(=O)NR ^a-、-OC(=S)NR ^a-、-NR ^a-、-NR ^bS(=O)NR ^c-及NR ^bS(=O) ₂NR ^O-；各R ⁴及R ⁶獨立地選自鹵素、氰基、硝基、羥基、C _1-4烷氧基、C _1-4鹵烷氧基、C _1-4烷硫基、C _1-4烷基亞磺醯基、C _1-4烷基磺醯基、胺基、C _1-4烷胺基、二C _1-4烷胺基、C _1-4烷基羰基、羧基、C _1-4烷氧基羰基、C _1-4烷基羰基胺基、二C _1-4烷基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基-(C _1-4烷基)胺基、胺甲醯基、C _1-4烷基胺甲醯基及二C _1-4烷基胺甲醯基；各R ⁵獨立地選自鹵素、氰基、氰酸根、異硫氰酸根、硝基、羥基、C _1-4烷基、C _2-4烯基、C _2-4炔基、C _1-4烷氧基、C _1-4鹵烷氧基、C _1-4烷硫基、C _1-4烷基亞磺醯基、C _1-4烷基磺醯基、胺基、C _1-4烷胺基、二C _1-4烷胺基、C _1-4烷基羰基、羧基、C _1-4烷氧基羰基、C _1-4烷基羰基胺基、二C _1-4烷基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基胺基、C _1-4烷氧基羰基-(C _1-4烷基)胺基、胺甲醯基、C _1-4烷基胺甲醯基及二C _1-4烷基胺甲醯基；各R ⁷獨立地選自鹵素、氰基、硝基、羥基、C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基、-OR ^O、-SR ^O、-S(=O)R ^P、-S(=O) ₂R ^P、-S(=O)NR ^sR ^t、-C(=O)R ^P、-C(=O)OR ^P、-C(=O)NR ^sR ^t、-OC(=O)R ^P、-OC(=O)NR ^sR ^t、-NR ^sR ^t、-NR ^qC(=O)R ^r、-NR ^qC(=O)OR ^r、-NR ^qC(=O)NR ^r、-NR ^qS(=O) ₂R ^r及-NR ^PS(=O) ₂NR ^sR ^t；其中該C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R'基團取代；且其中該C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R''基團取代；各R ^a、R ^b及R ^c獨立地選自H、C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基；其中該C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基及C _2-6炔基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^w基團取代；且其中該C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^x基團取代；各R ^o、R ^p、R ^q、R ^r、R ^s及R ^t獨立地選自H、C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基；其中該C _1-6烷基、C _1-6鹵烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^y基團取代；且其中該C _3-7環烷基、C _3-7環烷基-C _1-4烷基、C _2-7雜環烷基、C _2-7雜環烷基-C _1-4烷基、苯基、苯基-C _1-4烷基、C _1-7雜芳基、C _1-7雜芳基-C _1-4烷基各自視情況經1、2、3或4個經獨立選擇之R ^z基團取代；各R'、R ^w及R ^y獨立地選自羥基、氰基、硝基、C _1-4烷氧基、C _1-4鹵烷氧基、胺基、C _1-4烷胺基及二C _1-4烷胺基；及各R''、R ^x及R ^z獨立地選自羥基、鹵素、氰基、硝基、C _1-4烷基、C _1-4鹵烷基、C _1-4烷氧基、C _1-4鹵烷氧基、胺基、C _1-4烷胺基及二C _1-4烷胺基；其限制條件為不超出視情況經取代之部分中各原子之價數。

適當地，上式功能變異體/衍生物對本發明抗體之親和力與DOTAM對本發明抗體之親和力相當或超過DOTAM對本發明抗體之親和力，且對Pb之結合強度與DOTAM對Pb之結合強度相當或超過DOTAM對Pb之結合強度(「親和力」係如上文所描述藉由解離常數來量測)。舉例而言，功能/變異衍生物與本發明抗體或/Pb之解離常數可為DOTAM與同一抗體/Pb之解離常數的1.1倍或更小、1.2倍或更小、1.3倍或更小、1.4倍或更小、1.5倍或更小或2倍或更小。

各R ^N可為H、C _1-6烷基或C _1-6鹵烷基；較佳H、C _1-4烷基或C _1-4鹵烷基。最佳地，各R ^N為H。

對於DOTAM變異體，較佳地，1、2、3個或最佳各個L ²為C ₂伸烷基。有利地，DOTAM之C ₂伸烷基變異體可對Pb具有特別地高之親和力。L ²之視情況選用之取代基可為R ¹、C _1-4烷基或C _1-4鹵烷基。適當地，L ²之視情況選用之取代基可為C _1-4烷基或C _1-4鹵烷基。

視情況，各L ²可為未經取代之C ₂伸烷基-CH ₂CH ₂-。

各L ¹較佳為C _1-4伸烷基，更佳為C ₁伸烷基，諸如-CH ₂-。

DOTAM之功能變異體/衍生物可為下式化合物：

其中各Z獨立地為如上文所定義之R ¹；p、q、r及s為0、1或2；且p+q+r+s為1或更大。較佳地，p、q、r及s為0或1及/或p+q+r+s為1。舉例而言，該化合物可具有p+q+r+s = 1，其中Z為對SCN-苯甲基部分-此類化合物可商購自Macrocyclics公司(Plano, Texas)。

可用於本發明中之放射核種可包括諸如鉛(Pb)、鎦(Lu)或釔(Y)之金屬之放射性同位素。

特別可用於治療應用中之放射核種為作為α或β發射體之放射核種。舉例而言，其可選自 ²¹²Pb、 ²¹²Bi、 ²¹³Bi、 ⁹⁰Y、 ¹⁷⁷Lu、 ²²⁵Ac、 ²¹¹At、 ²²⁷Th、 ²²³Ra。

在一些實施例中，可較佳地，DOTAM (或其鹽或功能變異體)與諸如上文所列之Pb或Bi放射性同位素中之一者之Pb或Bi螯合。在其他實施例中，可較佳地，DOTA (或其鹽或功能變異體)與諸如上文所列之Lu或Y放射性同位素中之一者之Lu或Y螯合。

在一些實施例中，多價抗體或多價分裂抗體可結合於Pb-DOTAM螯合物。

在一些實施例中，多價抗體或多價分裂抗體可特異性結合於放射性標記化合物。在一些實施例中，其可結合至諸如Pb-DOTAM螯合物之放射性標記化合物，其中與Pb-DOTAM及/或目標之解離常數(K _D)為≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-7M或更小，例如10 ^-7至10 ^-13；10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10-13 M、例如10 ^-9M至10 ^-13M)。在一些實施例中，可較佳地，其以100 pM、50 pM、20 pM、10 pM、5 pM、1 pM或更小，例如0.9 pM或更小、0.8 pM或更小、0.7 pM或更小、0.6 pM或更小或0.5 pM或更小之結合親和力K _D值結合。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合金屬螯合物。

B.用於DOTA之例示性抗原結合位點在本發明之一個特定實施例中，抗體包含用於DOTA(或其功能衍生物或變異體)之功能結合位點，或第一及第二半抗體締合以形成用於DOTA(或其功能衍生物或變異體)之功能結合位點，例如DOTA與Lu或Y(例如 ¹⁷⁷Lu或 ⁹⁰Y)螯合。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合放射性標記化合物。

C825為已知之對與諸如 ¹⁷⁷Lu及 ⁹⁰Y之放射性金屬複合之DOTA-Bn (S-2-(4-胺基苯甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷四乙酸)具有高親和力的scFv (參見例如以引用之方式併入本文中之Cheal等人2018, Theranostics 2018及WO2010099536)。本文提供C825之CDR序列以及VL及VH序列。在一個實施例中，形成用於放射性標記化合物之抗原結合位點之一部分的重鏈可變區可包含至少一個、兩個或全部三個選自以下之CDR：(a)包含35之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含36之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含37之胺基酸序列的CDR-H3。在一替代性實施例中，CDR-H1可具有序列GFSLTDYGVH。形成用於放射性標記化合物之結合位點之一部分的輕鏈可變區可包含至少一個、兩個或全部三個選自以下之CDR：(d)包含38之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含39之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含40之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點之一部分的重鏈可變域(例如在分裂抗體之情況下在第一半抗體上)包含SEQ ID NO: 41之胺基酸序列或包含與SEQ ID NO: 41至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致之胺基酸序列的其變異體。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之結合位點保持較佳以如本文所描述之親和力結合至與Lu或Y複合之DOTA的能力。在某些實施例中，總計1至10個胺基酸已在SEQ ID NO:41中經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在CDR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，抗體或第一半抗體包含SEQ ID NO:41中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列或序列GFSLTDYGVH的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列的CDR-H2；及(c)包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列的CDR-H3。

視情況，形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點之一部分的輕鏈可變域(例如在分裂抗體之情況下在第二半抗體上)包含SEQ ID NO: 42之胺基酸序列或包含與SEQ ID NO: 42至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致之胺基酸序列的其變異體。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之結合位點保持較佳以如本文所描述之親和力結合至與Lu或Y複合之DOTA的能力。在某些實施例中，總計1至10個胺基酸已在SEQ ID NO: 42中經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在CDR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，抗體或第二半抗體包含SEQ ID NO:42中之VL序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列的CDR-L2；及(c)包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列的CDR-L3。

明確地考慮關於重鏈可變區及輕鏈可變區之實施例組合。因此，功能抗原結合位點可由如上文所定義之重鏈可變區及如上文所定義之輕鏈可變區形成。在分裂抗體之情況下，此等可分別在第一及第二半抗體上。

在上文實施例中之任一個中，形成用於DOTA複合物之結合位點之輕鏈可變區及重鏈可變區可為人類化的。在一個實施例中，輕鏈可變區及重鏈可變區包含如同上文實施例中之任一個一般之CDR，且進一步包含例如人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之接受體人類構架。

在一些實施例中，如下文進一步論述，重鏈可變域可藉由諸如一或多個C端丙胺酸殘基之一或多個C端殘基或來自CH1域N端之一或多個殘基延伸。

C.用於DOTAM之例示性抗原結合位點在本發明之另一特定實施例中，抗體包含Pb-DOTAM螯合物(Pb-DOTAM)之功能結合位點，或第一及第二半抗體締合以形成Pb-DOTAM螯合物(Pb-DOTAM)之功能抗原結合位點。

例示性抗原結合位點描述於WO2019/201959中，該案以全文引用之方式併入本文中。

在某些實施例中，結合至Pb-DOTAM之功能抗原結合位點可具有以下特性中之一或多者： •特異性結合至Pb-DOTAM且特異性結合至Bi-DOTAM； •與諸如Cu-DOTAM之其他經螯合金屬相比，對Pb-DOTAM (及視情況選用之Bi-DOTAM)具選擇性； •以極高親和力結合至Pb-DOTAM； •與WO2019/201959中所描述之抗體(例如PRIT-0213或PRIT-0214)結合於Pb-DOTAM上之相同抗原決定基及/或與該等抗體具有相同接觸殘基。

Pb之放射性同位素可用於療法方法中。可用於本發明中之鉛之特定放射性同位素包括 ²¹²Pb。

因為短路徑長度及高線性能量傳遞之組合，故作為α-粒子發射體之放射核種能夠比β-發射體在對周圍組織損傷更小之情況下更特異性地殺滅腫瘤細胞。 ²¹²Bi為α-粒子發射體，但其較短的半衰期妨礙其直接使用。 ²¹²Pb為 ²¹²Bi之母放射性核種且可充當 ²¹²Bi之活體內生成劑，由此有效地克服 ²¹²Bi之短半衰期(Yong及Brechbiel, Dalton Trans. 2001年6月21日; 40(23)6068-6076)。

一般而言，放射性金屬係以經螯合形式使用。在本發明之某些態樣中，DOTAM用作螯合物。DOTAM為Pb(II)之穩定螯合物(Yong及Brechbiel, Dalton Trans.2001年6月21日; 40(23)6068-6076；Chappell等人Nuclear Medicine and Biology, 第27卷, 第93-100頁, 2000)。因此，DOTAM特別適於與如上文所論述之鉛同位素，諸如 ²¹²Pb結合使用。

在一些實施例中，可能較佳的是，抗體以100 pM、50 pM、20 pM、10 pM、5 pM、1 pM或更小，例如0.9 pM或更小、0.8 pM或更小、0.7 pM或更小、0.6 pM或更小或0.5 pM或更小之結合親和力之K _D值結合Pb-DOTAM。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合放射性標記化合物。

在某個實施例中，抗體另外結合至經DOTAM螯合之Bi。在一些實施例中，可能較佳的是，抗體以1 nM、500 pM、200 pM、100 pM、50 pM、10 pM或更小，例如9 pM、8 pM、7 pM、6 pM、5 pM或更小之結合親和力之K _D值結合Bi-DOTAM (亦即，包含與鉍複合之DOTAM的螯合物，在本文中亦稱為「Bi-DOTAM螯合物」)。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合金屬螯合物。

在一些實施例中，抗體可以類似親和力結合至Bi-DOTAM且結合至Pb-DOTAM。舉例而言，較佳地，對Bi-DOTAM/Pb-DOTAM之親和力之比率，例如K _D值之比率，在0.1-10，例如1-10之範圍內。

在一個實施例中，形成用於Pb-DOTAM之抗原結合位點之一部分的重鏈可變區(例如在分裂抗體之情況下在第一半抗體上)可包含至少一個、兩個或全部三個選自以下之CDR：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列GFSLSTYSMS (SEQ ID NO:1)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列FIGSRGDTYYASWAKG (SEQ ID NO:2)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列ERDPYGGGAYPPHL (SEQ ID NO:3)。形成用於Pb-DOTAM之結合位點之一部分的輕鏈可變區(例如在分裂抗體之情況下在第二半抗體上)可包含至少一個、兩個或全部三個選自以下之CDR：(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列QSSHSVYSDNDLA (SEQ ID NO:4)；(e) CDR-L2，其包含胺基酸序列QASKLAS (SEQ ID NO:5)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列LGGYDDESDTYG (SEQ ID NO:6)。

在一些實施例中，抗體可包含與分別SEQ ID NO: 1-6之胺基酸序列相比具有取代，例如1、2或3個取代之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3中之一或多個、或CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3中之一或多個。

在一些實施例中，抗體可共用與本文所描述之接觸殘基相同之接觸殘基：例如此等殘基可為不變異的。此等殘基可包括以下： a)重鏈CDR2中：Phe50、Asp56及/或Tyr58，以及此外視情況存在之Gly52及/或Arg 54； b)重鏈CDR3中：Glu95、Arg96、Asp97、Pro98、Tyr99、Ala100C及/或Tyr100D，以及此外視情況存在之Pro100E； c)輕鏈CDR1中：Tyr28及/或Asp32； d)輕鏈CDR3中：Gly91、Tyr92、Asp93、Thr95c及/或Tyr96； e)輕鏈CDR2中：視情況存在之Gln50；全部係根據Kabat編號。

舉例而言，在一些實施例中，CDR-H2可包含胺基酸序列FIGSRGDTYYASWAKG (SEQ ID NO:2)或在SEQ ID NO: 2中具有至多1、2或3個取代之其變異體，其中此等取代不包括Phe50、Asp56及/或Tyr58，且視情況亦不包括Gly52及/或Arg 54，全部係根據Kabat編號。

在一些實施例中，CDR-H2可在如下文所示之一或多個位置處經取代。此處及在隨後取代表中，取代係基於生殖系殘基(加下劃線)或藉由理論上空間上配合且亦在經結晶組庫中在位點處存在之胺基酸進行。在一些實施例中，如上文所提及之殘基可固定且其他殘基可根據下表經取代：在其他實施例中，任何殘基之取代可根據下表進行。

WolfGuy	Kabat	AA	取代
251	50	F	Y、 H
252	51	I
253	52	G
254	53	S	A、 G、 T、I、N
288	54	R	A、 D、 G、 N、 S、T、F、Y
289	55	G	D、 S、Y、T、A、N、R、V
290	56	D
291	57	T	K、 I、A、P、S
292	58	Y	F、W、H
293	59	Y	N、F、H、L、S
294	60	A	G、 N、 S、 T
295	61	S	A、 G、 N、 Q、 T
296	62	W	K、 P、 S、A、T、D、N、R、Q
297	63	A	F、 L、 V、M、I
298	64	K	N、 Q、R、E
299	65	G	S、 T、D、N、A

視情況，CDR-H3可包含胺基酸序列ERDPYGGGAYPPHL (SEQ ID NO:3)或在SEQ ID NO: 3中具有至多1、2或3個取代之其變異體，其中此等取代不包括Glu95、Arg96、Asp97、Pro98，且視情況亦不包括Ala100C、Tyr100D及/或Pro100E，且/或視情況亦不包括Tyr99。舉例而言，在一些實施例中，取代不包括Glu95、Arg96、Asp97、Pro98、Tyr99、Ala100C及Tyr100D。

在某些實施例中，CDR-H3可在如下文所示之一或多個位置處經取代。在一些實施例中，如上文所提及之殘基可固定且其他殘基可根據下表經取代：在其他實施例中，任何殘基之取代可根據下表進行。

WolfGuy	Kabat	AA	取代
351	95	E
352	96	R	K、E
353	97	D
354	98	P
355	99	Y	F、G、S、T、D
356	100	G
392	100A	G
393	100B	G
394	100C	A	S、T
395	100D	Y	F
396	100E	P
397	100F	P
398	101	H	A、T、V、D
399	102	L	Y、V、I、H、F

視情況，CDR-L1可包含胺基酸序列QSSHSVYSDNDLA (SEQ ID NO:4)或在SEQ ID NO: 4中具有至多1、2或3個取代之其變異體，其中此等取代不包括Tyr28及/或Asp32 (Kabat編號)。

在某些實施例中，CDR-L1可在如下文所示之一或多個位置處經取代。此外，在一些實施例中，如上文所提及之殘基可固定且其他殘基可根據下表經取代：在其他實施例中，任何殘基之取代可根據下表進行。

WolfGuy	Kabat	AA	取代
551	24	Q	R、 K
552	25	S	A、 G
554	26	S	T
555	27	H	Q、 S、R、K
556	27A	S	Q
557	27B	V	I、 D、 N
561	28	Y	F
562	29	S	T、 V
571	30	D	R、 S、 N、 G
572	31	N	K
597	32	D
598	33	L	I、 V、 M
599	34	A	S

視情況，CDR-L3可包含胺基酸序列LGGYDDESDTYG (SEQ ID NO:6)或在SEQ ID NO: 6中具有至多1、2或3個取代之其變異體，其中此等取代不包括Gly91、Tyr92、Asp93、Thr95c及/或Tyr96 (Kabat)。

在某些實施例中，CDR-L3可在如下文所示之以下位置處經取代。(因為大部分殘基為溶劑暴露的且無抗原接點，故許多取代為可設想的)。此外，在一些實施例中，如上文所提及之殘基可固定且其他殘基可根據下表經取代：在其他實施例中，任何殘基之取代可根據下表進行。

WolfGuy	Kabat	AA	取代
751	89	L	A、V、Q
752	90	G	A
753	91	G
754	92	Y	A、D、E、F、G、H、I、K、L、N、Q、R、S、T、V
755	93	D	A、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、Y
756	94	D	A、E、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、Y
794	95	E	A、D、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、S、T、V、W、Y
795	95A	S	A、F、G、H、I、K、L、M、N、Q、R、T、V、W、Y
796	95B	D	A、E、F、G、H、I、L、M、N、Q、S、T、V、W、Y
797	95C	T	S
798	96	Y	F、H、R
799	97	G	A、E、I、K、L、M、N、Q、S、T、V

抗體可進一步包含視情況分別具有SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 5之序列或相對於其而言具有至少1、2或3個取代，視情況保守取代之其變異體的CDR-H1或CDR-L2。

因此，形成用於Pb-DOTAM之抗原結合位點之一部分之重鏈可變域可至少包含： a)包含胺基酸序列FIGSRGDTYYASWAKG (SEQ ID NO:2)或在SEQ ID NO: 2中具有至多1、2或3個取代之其變異體之重鏈CDR2，其中此等取代不包括Phe50、Asp56及/或Tyr58，且視情況亦不包括Gly52及/或Arg54； b)包含胺基酸序列ERDPYGGGAYPPHL (SEQ ID NO:3)或在SEQ ID NO: 3中具有至多1、2或3個取代之其變異體之重鏈CDR3，其中此等取代不包括Glu95、Arg96、Asp97、Pro98，且視情況亦不包括Ala100C、Tyr100D及/或Pro100E，且/或視情況亦不包括Tyr99。

在一些實施例中，重鏈可變域另外包括視情況為以下之重鏈CDR1： c)包含胺基酸序列GFSLSTYSMS (SEQ ID NO:1)或在SEQ ID NO: 1中具有至多1、2或3個取代之其變異體之重鏈CDR1。

在一些實施例中，重鏈可變域另外包括C端丙胺酸(例如根據Kabat編號系統之Ala114)以避免辨識游離VH區之預存在抗體之結合。如Holland MC等人J.Clin Immunol (2013)中所報告，游離C端似乎對HAVH (人類抗VH域)自體抗體與VH域抗體之結合至關重要，此係因為HAVH自體抗體不結合至含有相同VH構架序列之完整IgG或IgG片段(fAb或經修飾VH分子)或不結合至VK域抗體。Cordy JC等人Clinical and Experimental Immunology (2015)指出VH dAb之C端抗原決定基處隱藏抗原決定基之存在，該隱藏抗原決定基非可天然地接近全IgG分子中之HAVH抗體。

因此，在抗體包含游離VH區(不融合至其C端處之任何其他域)之情況下，序列可藉由一或多個C端殘基延伸。延伸可防止辨識游離VH區之抗體之結合。舉例而言，延伸可藉由1-10個殘基，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基進行。在一個實施例中，VH序列可藉由一或多個C端丙胺酸殘基延伸。VH序列亦可藉由CH1域之N端部分，例如藉由來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端之1-10個殘基延伸。(人類IgG1 CH1域之前十個殘基為ASTKGPSVFP (SEQ ID NO.: 149)，且因此在一個實施例中，1-10個殘基可取自此序列之N端)。舉例而言，在一個實施例中，將肽序列AST (對應於IgG1 CH1域之前3個殘基)添加至VH區之C端中。

在另一實施例中，形成用於Pb-DOTAM之抗原結合位點之一部分之輕鏈可變域至少包含： d)包含胺基酸序列QSSHSVYSDNDLA (SEQ ID NO:4)或在SEQ ID NO: 4中具有至多1、2或3個取代之其變異體之輕鏈CDR1，其中此等取代不包括Tyr28及Asp32； e)包含胺基酸序列LGGYDDESDTYG (SEQ ID NO:6)或在SEQ ID NO: 6中具有至多1、2或3個取代之其變異體之輕鏈CDR3，其中此等取代不包括Gly91、Tyr92、Asp93、Thr95c及Tyr96。

在一些實施例中，輕鏈可變域另外包括視情況為以下之輕鏈CDR2： f)包含胺基酸序列QASKLAS (SEQ ID NO: 5)或在SEQ ID NO: 5中具有至少1、2或3個取代之其變異體之輕鏈CDR2，該等取代視情況不包括Gln50。

在包括包含如上文所闡述之CDR (例如具有可變域)之序列變異體之本發明任何實施例中，蛋白質可在如上文所闡述之CDR殘基中之一或多個中為不變異的。

視情況，形成用於Pb-DOTAM之功能抗原結合位點之一部分的重鏈可變域(例如在分裂抗體之情況下在第一半抗體上)包含選自由SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO 9組成之群的胺基酸序列或包含與SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 9具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之胺基酸序列的其變異體。(此等參考序列中之N端胺基酸(展示於圓括號中)可存在或不存在，且在一些實施例中，可保留於任何變異序列中)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含該序列之結合位點保持較佳以如本文所描述之親和力結合於Pb-DOTAM的能力。VH序列可保留如上文所闡述之不變異殘基。在某些實施例中，SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO 9中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在CDR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，抗體包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO: 9中之VH序列(具有或不具有圓括號中所示之N端殘基)，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:1之胺基酸序列之CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:2之胺基酸序列之CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:3之胺基酸序列之CDR-H3。

在一些實施例中，如上文所提及，在一些變異體中，SEQ ID NO: 7或9可藉由一或多個額外C端殘基，例如藉由一或多個丙胺酸殘基，視情況藉由單個丙胺酸殘基延伸。因此，舉例而言，在一個特異性變異體中，SEQ ID NO: 7之序列可延伸為：

在其他實施例中，延伸可藉由如上文所描述之CH1域之N端部分，例如藉由來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端之1-10個殘基進行。舉例而言，延伸可藉由肽序列AST進行。

視情況，形成用於Pb-DOTAM之功能抗原結合位點之一部分的輕鏈可變域(例如在分裂抗體之情況下在第二半抗體上)包含SEQ ID NO: 8之胺基酸序列或包含與SEQ ID NO: 8具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之胺基酸序列的其變異體。(此參考序列中之N端胺基酸(展示於圓括號中)可存在或不存在，且在一些實施例中，可保留於任何變異體中)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗Pb-DOTAM結合位點保持較佳以如本文所描述之親和力結合至Pb-DOTAM的能力。VL序列可保留如上文所闡述之不變異殘基。在某些實施例中，SEQ ID NO:8中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在CDR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，抗Pb-DOTAM抗體包含SEQ ID NO:8中之VL序列(具有或不具有圓括號中所示之N端殘基)，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:4之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:5之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:6之胺基酸序列的CDR-L3。

明確地考慮關於重鏈可變區及輕鏈可變區之實施例組合。因此，用於Pb-DOTAM之功能抗原結合位點可由如上文所定義之重鏈可變區及如上文所定義之輕鏈可變區形成。在分裂抗體之情況下，此等可分別在第一及第二半抗體上。

視情況，用於Pb-DOTAM螯合物具有特異性之抗原結合位點可由包含選自由SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 9 (具有或不具有圓括號中所示之N端殘基)組成之群的胺基酸序列或如上文所定義之其變異體(包括具有如上文所論述之C端延伸的變異體)的重鏈可變域及包含SEQ ID NO: 8 (具有或不具有圓括號中所示之N端殘基)之胺基酸序列或如上文所定義之其變異體的輕鏈可變域形成。舉例而言，對Pb-DOTAM螯合物具有特異性之抗原結合位點可包含有包含SEQ ID NO: 7之胺基酸序列或其變異體之重鏈可變域及包含SEQ ID NO: 8之胺基酸序列或其變異體之輕鏈可變域，該等胺基酸序列或其變異體包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，其可包含有包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列或其變異體(包括具有如上文所論述之C端延伸部分之變異體)的重鏈可變域及包含SEQ ID NO: 8之胺基酸序列或其變異體之輕鏈可變域，該等胺基酸序列或其變異體包括彼等序列之轉譯後修飾。

在上文實施例中之任一個中，形成抗Pb-DOTAM結合位點之輕鏈可變區及重鏈可變區可為人類化的。在一個實施例中，輕鏈可變區及重鏈可變區包含如同上文實施例中之任一個一般之CDR，且進一步包含例如人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之接受體人類構架。在另一實施例中，輕鏈可變區及/或重鏈可變區包含如同上文實施例中之任一個一般之CDR，且進一步包含來源於vk 1 39及/或vh 2 26之構架區。在一些實施例中，對於vk 1 39，可不存在回復突變。對於vh 2 26，生殖系Ala49殘基可經回復突變成Gly49。

D.目標抗原組合療法中使用之多特異性抗體(或分裂多特異性抗體)結合於目標抗原。此為在目標細胞表面上表現之抗原。其亦可稱為「目標細胞抗原」。

治療較佳屬於腫瘤或癌症。

目標抗原可為例如腫瘤相關抗原。

如本文所使用之術語「腫瘤相關抗原」或「腫瘤特異性抗原」係指僅僅或主要由腫瘤細胞及/或癌細胞或由諸如癌症相關纖維母細胞之其他腫瘤基質細胞表現或過度表現以使得抗原與一或多種腫瘤及/或一或多種癌症相關聯的任何分子(例如蛋白質、肽、脂質、碳水化合物等)。腫瘤相關抗原可另外由正常、非腫瘤或非癌細胞表現。然而，在該等情況下，由正常、非腫瘤或非癌細胞進行之腫瘤相關抗原表現不如由腫瘤細胞或癌細胞進行之表現穩健。在此方面，與由正常、非腫瘤或非癌細胞進行之抗原表現相比，腫瘤細胞或癌細胞可能會過度表現抗原或以顯著較高位準表現抗原。此外，腫瘤相關抗原可另外由發育或成熟之不同狀態之細胞表現。舉例而言，腫瘤相關抗原可另外由胚胎或胎階段之細胞表現，該等細胞通常在成年宿主中找不到。可替代地，腫瘤相關抗原可另外由幹細胞或前驅細胞表現，該等細胞通常在成年宿主中找不到。

腫瘤相關抗原可為由任何癌症或腫瘤，包括本文所描述之癌症及腫瘤之任何細胞表現之抗原。腫瘤相關抗原可為僅一種類型之癌症或腫瘤之腫瘤相關抗原以使得腫瘤相關抗原與僅一種類型之癌症或腫瘤相關聯或為僅一種類型之癌症或腫瘤之特徵。可替代地，腫瘤相關抗原可為超過一種類型之癌症或腫瘤之腫瘤相關抗原(例如可為特徵性的)。舉例而言，腫瘤相關抗原可由乳癌細胞及前列腺癌細胞表現，且完全不由正常、非腫瘤或非癌細胞表現。

本發明之抗體可結合之例示性腫瘤相關抗原包括(但不限於)：黑色素瘤相關硫酸軟骨素蛋白多醣(MCSP)、黏蛋白1 (MUCl；腫瘤相關上皮黏蛋白)、優先表現之黑色素瘤抗原(PRAME)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特異性膜抗原(PSMA)、PSCA、EpCAM、Trop2 (滋胚層-2，亦稱為EGP-1)、顆粒球-巨噬細胞群落刺激因子受體(GM-CSFR)、CD56、人類表皮生長因子受體2 (HER2/neu)(亦稱為erbB-2)、CDS、CD7、酪胺酸酶相關蛋白(TRP) I及TRP2。在另一實施例中，腫瘤抗原可選自由以下組成之群：分化簇(CD) 19、CD20、CD21、CD22、CD25、CD30、CD33 (唾液酸結合Ig樣凝集素3，骨髓細胞表面抗原)、CD79b、CD123 (介白素3受體α)、運鐵蛋白受體、EGF受體、間皮素、鈣黏蛋白、路易斯Y (Lewis Y)、磷脂醯肌醇蛋白聚糖-3、FAP (纖維母細胞活化蛋白α)、GPRC5D (G蛋白偶合受體C類第5群成員D)、PSMA (前列腺特異性膜抗原)、CA9 = CAIX (碳酸酐酶IX)、Ll CAM (神經細胞黏附分子L 1)、內皮唾酸蛋白、HER3 (表皮生長因子受體家族成員3之經活化構形)、Alkl/BMP9複合物(未分化淋巴瘤激酶1/骨成形性蛋白9)、TPBG = 5T4 (滋胚層醣蛋白)、ROR1 (受體酪胺酸激酶樣表面抗原)、HER1 (表皮生長因子受體之經活化構形)及CLL1 (C型凝集素域家族12成員A)。間皮素在例如卵巢癌、間皮瘤、非小細胞肺癌、肺腺癌、輸卵管癌、頭頸癌、子宮頸癌及胰臟癌中表現。CD22表現於例如毛細胞白血病、慢性淋巴球性白血病(CLL)、前淋巴球白血病(PLL)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、小淋巴球淋巴瘤(SLL)及急性淋巴白血病(ALL)中。CD25表現於例如白血病及淋巴瘤，包括毛細胞白血病及霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)中。路易斯Y抗原在例如膀胱癌、乳癌、卵巢癌、大腸直腸癌、食道癌、胃癌、肺癌及胰臟癌中表現。CD33在例如急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓單核球性白血病(CML)及骨髓增生病中表現。

特異性結合至腫瘤相關抗原之例示性抗體包括但不限於抗運鐵蛋白受體抗體(例如HB21及其變異體)、抗CD22抗體(例如RFB4及其變異體)、抗CD25抗體(例如Tac抗體及其變異體)、抗間皮素抗體(例如SS 1、MORAb-009、SS、HN1、HN2、MN、MB及其變異體)及抗路易斯Y抗原抗體(例如B3及其變異體)。在此方面，靶向部分(細胞結合劑)可為選自由B3、RFB4、SS、SS1、MN、MB、HN1、HN2、HB21及MORAb-009組成之群的抗體及其抗原結合部分。適用於本發明嵌合分子中之另外例示性靶向部分揭示於例如以下中：美國專利5,242,824 (抗運鐵蛋白受體)；美國專利5,846,535 (抗CD25)；美國專利5,889,157 (抗路易斯Y)；美國專利5,981,726 (抗路易斯Y)；美國專利5,990,296 (抗路易斯Y)；美國專利7,081,518 (抗間皮素)；美國專利7,355,012 (抗CD22及抗CD25)；美國專利7,368,110 (抗間皮素)；美國專利7,470,775 (抗CD30)；美國專利7,521,054 (抗CD25)；及美國專利7,541,034 (抗CD22)；美國專利申請公開案2007/0189962 (抗CD22)；Frankel等人, Clin. Cancer Res., 6: 326-334 (2000)；以及Kreitman等人, AAPS Journal, 8(3): E532-E551 (2006)，該等案及文獻中之各者以引用之方式併入本文中。

已培養靶向特異性腫瘤相關抗原之其他抗體，該等抗原包括以下抗原：畸胎瘤衍化生長因子(Cripto)、CD30、CD19、CD33、醣蛋白NMB、CanAg、Her2 (ErbB2/Neu)、CD56 (NCAM)、CD22 (Siglec2)、CD33 (Siglec3)、CD79、CD138、PSCA、PSMA (前列腺特異性膜抗原)、BCMA、CD20、CD70、E-選擇素、EphB2、黑色素運鐵蛋白、Muc16及TMEFF2。以上抗體中之任一者或其抗原結合片段可適用於本發明中，亦即可併入本文所描述之抗體中。

在本發明之一些實施例中，可較佳地，腫瘤相關抗原為癌胚抗原(CEA)。

CEA在本發明之上下文中係有利的，此係因為其內化相對緩慢，且因此在初始處理之後高百分比之抗體將保持在細胞表面上可用，以結合至放射核種。其他低內化目標/腫瘤相關抗原亦可為較佳的。腫瘤相關抗原之其他實例包括CD20或HER2。在再另一實施例中，目標可為EGP-1 (上皮醣蛋白-1，亦稱為滋胚層-2)、大腸特異性抗原-p (CSAp)或胰臟黏蛋白MUC1。參見例如以引用之方式併入本文中之Goldenberg等人2012 (Theranostics 2(5))。此參考文獻亦描述抗體，諸如結合於CSAp之Mu-9 (亦參見Sharkey等人Cancer Res. 2003; 63: 354-63)、結合於MUC1之hPAM4 (亦參見Gold等人Cancer Res. 2008: 68: 4819-26)、結合於CD20之維妥珠單抗(valtuzumab) (亦參見Sharkey等人 Cancer Res. 2008; 68: 5282-90)及結合於EGP-1之hRS7 (亦參見Cubas等人Biochim Biophys Acta 2009; 1796: 309-14)。以上抗體中之任一者或其抗原結合部分可適用於本發明中，亦即可併入本文所描述之抗體中。已培養之抗CEA抗體之一個實例為T84.66 (如NCBI寄存編號：CAA36980 (重鏈)及CAA36979 (輕鏈)中所示，或如WO2016/075278之SEQ ID NO 317及318中所示)以及其人類化及嵌合型式，諸如WO2016/075278 A1及/或WO2017/055389中所描述之T84.66-LCHA。另一實例為作為如WO2012/117002及WO2014/131712中所描述之抗CEA抗體之CH1A1a；及CEA hMN-14 (亦參見US 6 676 924及US 5 874 540)。另一抗CEA抗體為如M.J. Banfield等人, Proteins 1997, 29(2), 161-171中所描述之A5B7。衍生自鼠類抗體A5B7之人類化抗體已揭示於WO 92/01059及WO 2007/071422中。亦參見共同待決之申請案PCT/EP2020/067582。A5B7之人類化型式之實例為A5H1EL1(G54A)。另一例示性抗CEA抗體為US7626011及/或共同待決申請案PCT/EP2020/067582中所描述之MFE23及其人類化型式。抗CEA抗體之另一實例為28A9。以上抗體中之任一者或其抗原結合片段可用於形成本發明中之CEA結合部分。

在一些實施例中，本發明抗體可特異性結合至目標抗原(例如本文所論述之目標抗原中之任一者)。在一些實施例中，其可以≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-7M或更小，例如10 ^-7M至10 ^-13M；10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10 ^-13M、例如10 ^-9M至10 ^-13M)之解離常數(K _D)結合。

E.用於CEA之例示性抗原結合位點在可與上文所論述之實施例組合的本發明之一特定實施例中，例如放射性標記化合物及DOTA/DOTAM之例示性結合位點、由多特異性抗體結合或由分裂多特異性抗體之第一及/或第二半抗體結合的目標抗原可為CEA(癌胚抗原)。已培養之抗CEA抗體包括T84.66以及其人類化及嵌合型式，諸如如WO2016/075278 A1及/或WO2017/055389中所描述之T84.66-LCHA、CH1A1a、如WO2012/117002及WO2014/131712中所描述之抗CEA抗體以及CEA hMN-14或拉貝珠單抗(labetuzumab) (例如如US 6 676 924及US 5 874 540中所描述)。另一例示性抗CEA抗體為A5B7 (例如如M.J. Banfield等人, Proteins 1997, 29(2), 161-171中所描述)，或如WO 92/01059及WO 2007/071422中所描述之衍生自鼠類A5B7之人類化抗體。亦參見共同待決之申請案PCT/EP2020/067582。A5B7之人類化型式之實例為A5H1EL1(G54A)。另一例示性抗CEA抗體為US 7 626 011及/或共同待決之申請案PCT/EP2020/067582中所描述之MFE23及其人類化型式。抗CEA抗體之另一其他實例為28A9。此等抗體或其抗原結合片段中之任一者可用於形成本發明中之CEA結合部分。

視情況，針對單價結合，結合於CEA之抗原結合部分可以1 nM或更小、500 pM或更小、200 pM或更小或100 pM或更小之K _D值結合。

在一些實施例中，多特異性抗體或分裂多特異性抗體之第一及/或第二半抗體可結合於CEA之CH1A1a抗原決定基、A5B7抗原決定基、MFE23抗原決定基、T84.66抗原決定基或28A9抗原決定基。

在一些實施例中，多特異性抗體或分裂多特異性抗體之第一及/或第二半抗體與不存在於可溶CEA (sCEA)上之CEA抗原決定基結合。可溶CEA為藉由GPI磷脂酶裂解且釋放至血液中之CEA分子之一部分。在可溶CEA上找不到之抗原決定基之實例為CH1A1A抗原決定基。視情況，在分裂抗體之情況下，第一半抗體及/或第二半抗體中之一者結合至不存在於可溶CEA上之抗原決定基，且另一者結合至存在於可溶CEA上之抗原決定基。

用於CH1A1a及其親本鼠抗體PR1A3之抗原決定基描述於WO2012/117002A1及Durbin H.等人, Proc. Natl. Scad. Sci. USA, 91:4313-4317, 1994中。結合於CH1A1a抗原決定基之抗體結合於CEA分子之B3域及GPI錨內之構形抗原決定基。在一個態樣中，該抗體結合至與具有本文中之具有SEQ ID NO: 25之VH及具有SEQ ID NO 26之VL之CH1A1a抗體相同的抗原決定基。A5B7抗原決定基描述於共同待決之申請案PCT/EP2020/067582中。結合於A5B7抗原決定基之抗體結合於CEA之A2域，亦即，結合於包含SEQ ID NO: 141之胺基酸的域：

在一個態樣中，抗體結合至與具有本文中之具有SEQ ID NO: 49之VH及具有SEQ ID NO: 50之VL之A5B7抗體相同的抗原決定基。

在一個態樣中，抗體結合至與WO2016/075278中所描述之T84.66相同之抗原決定基。抗體可結合至與具有本文中之具有SEQ ID NO: 17之VH及具有SEQ ID NO:18之VL之抗體相同的抗原決定基。

MFE23抗原決定基描述於共同待決之申請案PCT/EP2020/067582中。結合於MFE23抗原決定基之抗體結合於CEA之A1域，亦即，結合於包含SEQ ID NO: 142之胺基酸之域：

在一個態樣中，抗體可結合於與具有本文中之SEQ ID NO: 127之VH域及SEQ ID NO: 128之VL域之抗體相同的抗原決定基。

在分裂多特異性抗體之一些實施例中，第一及第二半抗體彼此結合CEA之相同抗原決定基。因此，舉例而言，第一半抗體及第二半抗體均可結合於CH1A1a抗原決定基、A5B7抗原決定基、MFE23抗原決定基、T84.66抗原決定基或28A9抗原決定基。

在一些實施例中，第一半抗體及第二半抗體均可具有來自CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR及/或VH/VL域)；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自A5B7或其人類化型式之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自T84.66或其人類化型式之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自MFE23或其人類化型式之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自28A9或其人類化型式之CEA結合序列。例示性序列揭示於本文中。

在其他實施例中，第一半抗體及第二半抗體結合至CEA之不同抗原決定基。因此，舉例而言，i)一個半抗體可結合CH1A1A抗原決定基且另一半抗體可結合A5B7抗原決定基、T84.66抗原決定基、MFE23抗原決定基或28A9抗原決定基；ii)一個半抗體可結合A5B7抗原決定基且另一半抗體可結合CH1A1A抗原決定基、T84.66抗原決定基、MFE23抗原決定基或28A9抗原決定基；iii)一個半抗體可結合MFE23抗原決定基且另一半抗體可結合CH1A1A抗原決定基、A5B7抗原決定基、T84.66抗原決定基或28A9抗原決定基；iv)一個半抗體可結合T84.66抗原決定基且另一半抗體可結合CH1A1A抗原決定基、A5B7抗原決定基、MFE23抗原決定基或28A9抗原決定基；或v)一個半抗體可結合28A9抗原決定基且另一半抗體可結合CH1A1a抗原決定基、A5B7抗原決定基、MFE23抗原決定基或T84.66抗原決定基。

在一些實施例中，i)一個半抗體可具有來自CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)且另一半抗體可具有來自A5B7或其人類化型式、來自T84.66或其人類化型式、來自MFE23或其人類化型式或來自28A9或其人類化型式之CEA結合序列；ii)一個半抗體可具有來自A5B7或其人類化型式之CEA結合序列且另一半抗體可具有來自CH1A1A、來自T84.66或其人類化型式、來自MFE23或其人類化型式或來自28A9或其人類化型式之CEA結合序列；iii)一個半抗體可具有來自MFE23或其人類化型式之CEA結合序列且另一半抗體可具有來自CH1A1A、來自A5B7或其人類化型式、來自T84.66或其人類化型式或來自28A9或其人類化型式之CEA結合序列；iv)一個半抗體可具有來自T84.66或其人類化型式之CEA結合序列且另一半抗體可具有來自CH1A1A、來自A5B7或其人類化型式、來自MFE23或其人類化型式或來自28A9或人類化型式之CEA結合序列；v)一個半抗體可具有來自28A9或其人類化型式之CEA結合序列且另一半抗體可具有來自CH1A1A、來自A5B7或其人類化型式、來自T84.66或其人類化型式或來自MFE23或其人類化型式之CEA結合序列。

在一個特定實施例中，一個半抗體可結合CH1A1A抗原決定基且另一半抗體可結合A5B7抗原決定基。第一半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列且第二半抗體可具有來自A5B7 (包括其人類化型式)之CEA結合序列；或第一半抗體可具有來自抗體A5B7 (包括其人類化型式)之CEA結合序列且第二半抗體可具有來自CH1A1A之CEA結合序列。

在另一個特定實施例中，一個半抗體可結合CH1A1A抗原決定基且另一半抗體可結合T84.66抗原決定基。第一半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列且第二半抗體可具有來自T84.66 (包括其人類化型式)之CEA結合序列；或第一半抗體可具有來自抗體T84.66 (包括其人類化型式)之CEA結合序列且第二半抗體可具有來自CH1A1A之CEA結合序列。在一些實施例中，第一半抗體可結合T84.66抗原決定基且/或具有如下文(i)中所描述之抗原結合位點，且第二半抗體可結合CH1A1A抗原決定基且/或具有如下文(ii)中所描述之抗原結合位點。

例示性CEA結合序列i)-v)揭示於下文中。此等例示性CEA結合序列提供來自i) T84.66、ii) CH1A1A、iii) A5B7、iv) 28A9及v) MFE23 (或來自其人類化型式)之CEA結合序列之實例。

i).在一個實施例中，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合至CEA之抗原結合位點可包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列之CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列之CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列之CDR-H3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含至少一個、至少兩個或所有三個選自以下之VL CDR序列：(a)包含SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含：(a)包含至少一個、至少兩個或所有三個選自以下之VH CDR序列之VH域：(i)包含SEQ ID NO: 11之胺基酸序列之CDR-H1、(ii)包含SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之CDR-H2及(iii)包含選自SEQ ID NO: 13之胺基酸序列的CDR-H3；及(b)包含至少一個、至少兩個或所有三個選自以下之VL CDR序列之VL域：(i)包含SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之CDR-L1、(ii)包含SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之CDR-L2及(c)包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之CDR-L3。

在另一態樣中，結合於CEA之抗原結合位點包含：(a)包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列的CDR-L3。

在上文實施例中之任一個中，多特異性抗體可為人類化的。在一個實施例中，抗CEA抗原結合位點包含如同上文實施例中之任一個一般之CDR，且進一步包含例如人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之接受體人類構架。

在另一實施例中，結合至CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:17之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之重鏈可變域(VH)序列。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點保持較佳以如上文所闡述之親和力結合至CEA之能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:17中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，結合至CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:17中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:11之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:12之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:13之胺基酸序列的CDR-H3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:18之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的輕鏈可變域(VL)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點仍保持較佳以如上文所闡述之親和力結合於CEA的能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:18中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，用於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:18中之VL序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:14之胺基酸序列之CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:15之胺基酸序列之CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:16之胺基酸序列之CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含如以上提供之任一實施例中之VH及如以上提供之任一實施例中之VL。在一個實施例中，抗體分別包含SEQ ID NO:17及SEQ ID NO:18中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。

ii).在另一特定實施例中，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列之CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列之CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列之CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列之CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列之CDR-L2；及(f)包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列的CDR-H3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含至少一個、至少兩個或所有三個選自以下之VL CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列之CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列之CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列之CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含以下：(a)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列的VH域：(i)包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列的CDR-H1，(ii)包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列的CDR-H2，及(iii)包含選自SEQ ID NO:21之胺基酸序列的CDR-H3；以及(b)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VL CDR序列的VL域：(i)包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列的CDR-L1，(ii)包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列的CDR-L2，及(c)包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一態樣中，結合於CEA之抗原結合位點包含：(a)包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:25之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的重鏈可變域(VH)序列。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點保持較佳以如上文所闡述之親和力結合至CEA之能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:25中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:25中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列的CDR-H3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:26之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的輕鏈可變域(VL)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點仍保持較佳以如上文所闡述之親和力結合於CEA的能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:26中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，用於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:26中之VL序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含如以上提供之任一實施例中之VH及如以上提供之任一實施例中之VL。在一個實施例中，抗體分別包含SEQ ID NO:25及SEQ ID NO:26中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。

iii)在另一特定實施例中，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列的CDR-L2；及(f)包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列的CDR-L3。在一些實施例中，CDR-H1可具有序列GFTFTDYYMN (SEQ ID NO.: 151)。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，CDR-H1可具有序列GFTFTDYYMN (SEQ ID NO.: 151)。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VL CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含以下：(a)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列的VH域：(i)包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列的CDR-H1，(ii)包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列的CDR-H2，及(iii)包含選自SEQ ID NO:45之胺基酸序列的CDR-H3；以及(b)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VL CDR序列的VL域：(i)包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列的CDR-L1，(ii)包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列的CDR-L2，及(c)包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列的CDR-L3。在一些實施例中，CDR-H1可具有序列GFTFTDYYMN (SEQ ID NO.: 151)。

在另一態樣中，結合於CEA之抗原結合位點包含：(a)包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列的CDR-L3。在一些實施例中，CDR-H1可具有序列GFTFTDYYMN (SEQ ID NO.: 151)。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:49之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的重鏈可變域(VH)序列。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點保持較佳以如上文所闡述之親和力結合至CEA之能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:49中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:49中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列或序列GFTFTDYYMN (SEQ ID NO.: 151)的CDR-H1，(b)包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列的CDR-H2，以及(c)包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列的CDR-H3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:50之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的輕鏈可變域(VL)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點仍保持較佳以如上文所闡述之親和力結合於CEA的能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:50中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，用於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:50中之VL序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含如以上提供之任一實施例中之VH及如以上提供之任一實施例中之VL。在一個實施例中，抗體分別包含SEQ ID NO:49及SEQ ID NO:50中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。

iv)在另一特定實施例中，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:59之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:60之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:61之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:62之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:63之胺基酸序列的CDR-L2；及(f)包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:59之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:60之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:61之胺基酸序列的CDR-H3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VL CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:62之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:63之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含以下：(a)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VH CDR序列的VH域：(i)包含SEQ ID NO:59之胺基酸序列的CDR-H1，(ii)包含SEQ ID NO:60之胺基酸序列的CDR-H2，及(iii)包含選自SEQ ID NO:61之胺基酸序列的CDR-H3；以及(b)包含至少一個、至少兩個或全部三個選自以下之VL CDR序列的VL域：(i)包含SEQ ID NO:62之胺基酸序列的CDR-L1，(ii)包含SEQ ID NO:63之胺基酸序列的CDR-L2，及(c)包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一態樣中，結合於CEA之抗原結合位點包含：(a)包含SEQ ID NO:59之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:60之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:61之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:62之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:63之胺基酸序列的CDR-L2；以及(f)包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:65之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的重鏈可變域(VH)序列。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點保持較佳以如上文所闡述之親和力結合至CEA之能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:65中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，結合於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:65中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:59之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:60之胺基酸序列的CDR-H2；以及(c)包含SEQ ID NO:61之胺基酸序列的CDR-H3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含與SEQ ID NO:66之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的輕鏈可變域(VL)。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點仍保持較佳以如上文所闡述之親和力結合於CEA的能力。在某些實施例中，SEQ ID NO:66中總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。視情況，用於CEA之抗原結合位點包含SEQ ID NO:66中之VL序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含一個、兩個或三個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:62之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:63之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列的CDR-L3。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含如以上提供之任一實施例中之VH及如以上提供之任一實施例中之VL。在一個實施例中，抗體分別包含SEQ ID NO:65及SEQ ID NO:66中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。

v).在再其他特定實施例中，結合於CEA之抗原結合位點可包含至少一個、兩個、三個、四個、五個或六個選自以下之CDR：(a)包含SEQ ID NO:116之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:117或118之胺基酸序列的CDR-H2；(c)包含SEQ ID NO:119之胺基酸序列的CDR-H3；(d)包含SEQ ID NO:120、121或122之胺基酸序列的CDR-L1；(e)包含SEQ ID NO:123、124或125之胺基酸序列的CDR-L2；及(f)包含SEQ ID NO:126之胺基酸序列的CDR-L3。

視情況，結合於CEA之抗原結合位點可包含： VH CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:116之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含SEQ ID NO:117或118之胺基酸序列的CDR-H2；及(c)包含SEQ ID NO:119之胺基酸序列的CDR-H3；及/或 VL CDR序列：(a)包含SEQ ID NO:120、121或122之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含SEQ ID NO:123、124或125之胺基酸序列的CDR-L2；以及(c)包含SEQ ID NO:126之胺基酸序列的CDR-L3。

在一個實施例中，用於CEA之抗原結合位點包含：包含SEQ ID NO: 127或(更佳)選自SEQ ID NO: 129、130、131、132、133或134之胺基酸序列的重鏈可變區(VH)，以及其包含SEQ ID NO: 128或(更佳)選自SEQ ID NO: 135、136、137、138、139或140之胺基酸序列的輕鏈可變區(VL)。

在一特定態樣中，能夠結合於CEA之抗原結合域包含： (a)包含SEQ ID NO:129之胺基酸序列的VH域及包含SEQ ID NO:139之胺基酸序列的VL域，或 (b)包含SEQ ID NO:133之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:139之胺基酸序列之VL域，或 (c)包含SEQ ID NO:130之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:139之胺基酸序列之VL域，或 (d)包含SEQ ID NO:134之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:138之胺基酸序列之VL域，或 (e)包含SEQ ID NO:133之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:138之胺基酸序列之VL域，或 (f)包含SEQ ID NO:131之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:138之胺基酸序列之VL域，或 (g)包含SEQ ID NO:129之胺基酸序列之VH域及包含SEQ ID NO:138之胺基酸序列之VL域。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含重鏈可變域(VH)序列，其與如上文a)至g)中所提及之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性之VH序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點保持較佳以如上文所闡述之親和力結合至CEA之能力。在某些實施例中，總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含輕鏈可變域(VL)，其與如上文a)至g)中所提及之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性。在某些實施例中，相對於參考序列而言，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致性的VL序列含有取代(例如保守取代)、插入或缺失，但包含彼序列之抗原結合位點仍保持較佳以如上文所闡述之親和力結合於CEA的能力。在某些實施例中，總共有1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中(亦即在FR中)。

在另一實施例中，結合於CEA之抗原結合位點包含如以上提供之任一實施例中之VH及如以上提供之任一實施例中之VL。

F.例示性多特異性抗體對於本發明中所用之多特異性抗體，多種格式為可能的。例示性格式描述於以引用的方式併入本文中之WO2019/201959中，且可應用其中所描述之格式中之任一者。特定例示性抗體亦描述於WO2019/201959中，且此等特異性抗體中之任一者亦可經選擇以用於本發明中。

在一些實施例中，多特異性抗體可包含Fc域。在放射免疫療法及放射成像之情況下Fc區之存在具有益處，例如延長蛋白質之循環半衰期及/或使腫瘤吸收比在較小片段下觀測到之腫瘤吸收高。Fc域可經工程改造以減弱或消除Fc效應子功能。

一種例示性格式包括包含第一及第二抗體重鏈及第一及第二抗體輕鏈之全長抗體(例如IgG)，其中該第一重鏈與該第一輕鏈裝配形成用於放射性標記化合物之抗原結合位點，且其中該第二重鏈與該第二輕鏈裝配形成用於目標抗原之抗原結合位點。

可例如藉由使用杵臼突變及/或如以下進一步論述之其他修飾幫助雜二聚體重鏈正確裝配。

可藉由使用交叉mab技術幫助輕鏈與其相應重鏈正確裝配。在此方法中，第一重鏈及第一輕鏈，或第二重鏈及第二輕鏈，可裝配形成交叉Fab片段(而其他裝配形成習知Fab)。因此，在一個實施例中，第一重鏈可包含VL域代替VH域(例如VL-CH1-鉸鏈-CH2-CH3)，且第一輕鏈可包含交換VL域之VH域(例如VH -CL)，或第一重鏈可包含CL域代替HC1域(例如VH-CL-鉸鏈-CH2-CH3)且第一輕鏈可包含CH1域代替CL域(例如VL-CH1)。在此實施例中，第二重鏈及第二輕鏈具有習知域結構(分別例如VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3及VL-CL)。在一替代實施例中，第二重鏈可包含VL域代替VH域(例如VL-CH1-鉸鏈-CH2-CH3)且第二輕鏈可包含交換VL域之VH域(例如VH-CL)，或第二重鏈可包含CL域代替HC1域(例如VH-CL-鉸鏈-CH2-CH3)且第二輕鏈可包含CH1域代替CL域(例如VL-CH1)。在此實施例中，第一重鏈及第一輕鏈具有習知域結構。

在一些實施例中，另外或可替代地，輕鏈與其各別重鏈之正確裝配可藉由使用如下文進一步論述之電荷修飾來輔助。

在以上格式之一些實施例中，格式可為二價。在另一可能實施例中，其他抗原結合部分可與例如第一及/或第二重鏈融合以提高一個或兩個抗原之價數。舉例而言，目標抗原之另一抗原結合部分可與重鏈分子中之一者或兩者之N端融合。在一些實施例中，抗體對於腫瘤相關抗原可為多價的，例如為二價的，且對於放射性標記化合物為單價的。

其他抗原結合部分可例如為例如包含第一抗原(例如腫瘤相關抗原)之抗原結合位點之scFab。在另一實施例中，其他抗原結合部分為Fab或交叉Fab。舉例而言，重鏈中之一者之N端或C端可經由多肽連接子連接於由VH域及CH1域組成之第一多肽，第一多肽與由VL及CL域組成之第二多肽締合形成Fab。在另一實施例中，重鏈中之一者之N端或C端可經由多肽連接子連接於由VL域及CH1域組成之第一多肽，第一多肽與由VH及CL域組成之第二多肽締合。在另一實施例中，重鏈中之一者之N端或C端可經由多肽連接子連接於由VH域及CL域組成之第一多肽，第一多肽與由VL及CH1域組成之第二多肽締合。

在此格式中，較佳地，具有相同抗原特異性之結合臂藉由與相同輕鏈締合而形成。因此，目標抗原之抗原結合部分/臂可為交叉Fab，且放射性標記化合物之抗原結合部分/臂可為習知Fab。或者，目標抗原之抗原結合部分/臂可為習知Fab，且放射性標記化合物之抗原結合部分/臂可為交叉Fab。

格式亦可併入電荷修飾，如以下進一步論述。

另一例示性格式包括包含用於目標抗原之抗原結合位點(例如針對目標抗原可為二價)連接於用於放射性標記化合物之抗原結合部分的全長抗體，諸如IgG。

舉例而言，用於放射性標記化合物之抗原結合部分可為包含用於放射性標記化合物(例如Pb-DOTAM螯合物)之抗原結合位點的scFab。在一些實施例中，scFab可與全長抗體之兩條重鏈中之一條的C端融合，例如在CH3域之C端。可例如藉由使用臼包杵突變及/或如以下進一步論述之其他修飾幫助雜二聚體重鏈正確裝配。

另一例示性格式包括包含用於目標抗原之抗原結合位點(例如針對目標抗原可為二價)的全長抗體，其中重鏈中之一條的N端或C端經由多肽連接子連接於第一多肽且其中第一多肽與第二多肽締合形成包含用於放射性標記化合物之結合位點的Fab或交叉Fab。舉例而言，此格式可包含： i)由VH域及CH1域組成之第一多肽，其與由VL及CL域組成之第二多肽締合；或 ii)由VL域及CH1域組成之第一多肽，其與由VH及CL域組成之第二多肽締合；或 iii)由VH域及CL域組成之第一多肽，其與由VL及CH1域組成之第二多肽締合；使得該第一及第二多肽一起形成用於放射性標記化合物之抗原結合位點。

可例如藉由使用臼包杵突變及/或如以下進一步論述之其他修飾，包括電荷修飾來幫助雜二聚體重鏈正確裝配。舉例而言，全長抗體之Fab域可包括電荷修飾。

在另一例示性格式中，抗體可為雙特異性抗體，其包含： a)全長抗體，其特異性結合於目標抗原且由兩條抗體重鏈及兩條抗體輕鏈組成； b)由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域(CH1)；或 iii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體輕鏈恆定域(CL)；其中該多肽經由肽連接子以該VH域之N端與該全長抗體之兩條重鏈中之一條的C端融合； c)多肽，其由以下組成： i)抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域(CL)；或 iii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體重鏈恆定域(CH1)；其中該多肽經由肽連接子以VL域之N端與該全長抗體之兩條重鏈中之另一條的C端融合；且其中(b)下之肽之抗體重鏈可變域(VL)與(c)下之肽之抗體輕鏈可變域一起形成用於放射性標記化合物之抗原結合位點。

在此格式中，若第一多肽如b(i)中闡述，則第二多肽如c(i)中闡述；若第一多肽如b(ii)中闡述，則第二多肽如c(ii)中闡述；且若第一多肽如b(iii)中闡述，則第二多肽如c(iii)中闡述。例如在全長抗體之Fab中亦可使用電荷修飾之取代。

視情況，可使結構穩定，藉此(b)下之多肽之抗體重鏈可變區(VH)與(c)下之多肽之抗體輕鏈可變域(VL)經由鏈間二硫橋鍵連接且穩定，例如藉由在以下位置之間引入二硫鍵(始終根據Kabat之EU索引編號)： i)重鏈可變域位置44至輕鏈可變域位置100， ii)重鏈可變域位置105至輕鏈可變域位置43，或 iii)重鏈可變域位置101至輕鏈可變域位置100。

上文格式之實例，其中(b)之抗體由VH域組成且(c)之抗體由VL域組成，為如WO2019/201959中所描述之PRIT213 (亦稱為PRIT-0213)及PRIT214 (亦稱為PRIT-0214)。因此，在一特定實施例中，用於本發明之多特異性抗體可包含： i)具有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之第一重鏈； ii)具有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之第二重鏈；以及 iii)具有SEQ ID NO: 21之胺基酸序列之兩條抗體輕鏈，其中序列編號為WO2019/201959之序列編號。

在另一實施例中，用於本發明之多特異性抗體可包含 i)具有SEQ ID NO: 19之胺基酸序列之第一重鏈； ii)具有SEQ ID NO: 20之胺基酸序列之第二重鏈；以及 iii)具有SEQ ID NO: 21之胺基酸序列之兩條抗體輕鏈，其中序列編號為WO2019/201959之序列編號。

G.分裂多特異性抗體之例示性格式在其他實施例中，用於組合療法中之抗體可為分裂多特異性抗體。分裂多特異性抗體可包含： i)第一半抗體，其結合至目標細胞表面上表現之抗原，且進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域，但不包含用於該放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域；及 ii)第二半抗體，其結合至目標細胞表面上表現之抗原，且進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域，但不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域，其中該第一半抗體之該VH域及該第二半抗體之該VL域能夠一起形成用於該放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

第一及第二半抗體可在相同或不同抗原決定基處結合至相同目標抗原。

在一些實施例中，第一及第二半抗體可各自包含Fc域。Fc域可經工程改造以減弱或消除Fc效應子功能。

在一些實施例中，如上文所論述，在用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域在其C端處游離(例如不經由其C端融合至另一域)之情況下，則其可藉由一或多個殘基延伸以避免HAVH自體抗體結合。舉例而言，延伸可藉由1-10個殘基，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基進行。在一個實施例中，其可藉由一或多個丙胺酸殘基，視情況藉由一個丙胺酸殘基延伸。VH序列亦可藉由CH1域之N端部分，例如藉由來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端之1-10個殘基延伸。(人類IgG1 CH1域之前十個殘基為ASTKGPSVFP，且因此在一個實施例中，1-10個殘基可取自此序列之N端)。舉例而言，在一個實施例中，將肽序列AST (對應於IgG1 CH1域之前3個殘基)添加至VH區之C端中。在一些實施例中，對於目標抗原(例如腫瘤相關抗原)而言，第一及/或第二半抗體可各自為多價的，例如二價的。此抗體具有漸增親合力之優勢。

在一些實施例中，可較佳地，當第一半抗體及第二半抗體締合時，其形成對於放射性標記化合物而言為單價之抗體複合物。因此，第一半抗體可包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之僅一個VH域，且第二半抗體可包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之僅一個VL域，以使得其一起形成用於放射性標記化合物之僅一個完整功能結合位點。

半抗體可各自包含i)至少一個能夠結合於目標抗原之抗原結合部分(例如抗體片段)，ii)放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域或VH域，及iii)視情況選用之Fc區。抗體片段可為例如包含對目標抗原具有特異性之抗原結合位點之至少一個Fv、scFv、Fab或交叉Fab片段。抗原結合部分(例如抗體片段)可融合至a)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域或b)若抗體包含與用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域融合之Fc區，則融合至Fc區。在一些實施例中，Fc區之C端融合至VL域或VH域之N端。

融合可為直接或間接的。在一些實施例中，融合可經由連接子進行。舉例而言，Fc區可經由鉸鏈區或另一合適連接子融合至抗體片段。類似地，用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL或VH域與抗體結構之其餘部分的連接可經由連接子進行。在一個特定實施例中，第一半抗體可包含以下或由以下組成： a) scFv片段，其中scFv片段結合目標抗原；及 b)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域，其中VH域之C端融合至恆定域之N端；其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至scFv片段之C端。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： c)結合目標抗原之第二scFv；以及 d)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域，其中VL域之C端融合至恆定域之N端；其中該多肽係藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至scFv片段之C端。

第一半抗體之抗體重鏈可變域(VH)及第二半抗體之抗體輕鏈可變域(VL)在締合兩個半抗體時一起形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

視情況，部分b(i)之多肽可另外包含VH域之C端處之一或多個殘基，視情況一或多個丙胺酸殘基，視情況單個丙胺酸殘基。視情況，額外殘基可為如上文所描述之CH1域之N端部分，例如來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端的1-10個殘基。舉例而言，額外殘基可為AST。

scFv之重鏈及輕鏈之辨識目標抗原之可變域可藉由肽繫鏈連接。此類肽繫鏈可包含1至25個胺基酸、較佳12至20個胺基酸、較佳12至16個或15至20個胺基酸。上文所描述之繫鏈可包含一或多個(G ₃S)及/或(G ₄S)模體，詳言之1、2、3、4、5或6個(G ₃S)及/或(G ₄S)模體、較佳3或4個(G ₃S)及/或(G ₄S)模體、更佳3或4個(G ₄S)模體。

視情況，第一半抗體可基本上由上文所列之組分(a)及(b)組成或由上文所列之組分(a)及(b)組成，且第二半抗體可由上文所列之組分(c)及(d)組成或基本上由上文所列之組分(c)及(d)組成。在任何情況下，第一半抗體不包含與第一半抗體之組分(b)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體輕鏈可變域(VL)；且第二半抗體不包含與第二半抗體之組分(d)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體重鏈可變(VH)域。

在另一個特定實施例中，第一半抗體可包含以下或由以下組成： a)結合目標抗原之Fab片段，以及 b)包含以下或由以下組成之多肽： i)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體重鏈可變域(VH)，或 ii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域，其中VH域之C端融合至該恆定域之N端；其中多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fab片段之CL域或CH1域之C端。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： c)結合目標抗原之Fab片段，以及 d)包含以下或由以下組成之多肽： iii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體輕鏈可變域(VL)，或 iv)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域，其中該VL域之C端融合至該恆定域之N端；其中多肽係藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fab片段之CL域或CH1域之C端。

(b)之多肽之抗體重鏈可變域(VH)及(d)之多肽之抗體輕鏈可變域(VL)一起形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點(亦即在締合兩個半抗體時)。

視情況，部分b(i)之多肽可另外包含如上文所描述之VH域之C端處之一或多個殘基，視情況一或多個丙胺酸殘基，視情況單個丙胺酸殘基。視情況，額外殘基可為如上文所描述之CH1域之N端部分，例如來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端的1-10個殘基。舉例而言，額外殘基可為AST。

融合至多肽之Fab片段之鏈可獨立地經選擇以用於第一半抗體及第二半抗體。因此，在一個實施例中，(b)之多肽融合至第一半抗體之Fab片段之CH1域的C端，且(d)之多肽融合至第二半抗體之Fab片段之CH1域的C端。在另一實施例中，(b)之多肽融合至第一半抗體之Fab片段之CL域的C端，且(d)之多肽融合至第二半抗體之Fab片段之CL域的C端。在另一實施例中，(b)之多肽融合至第一半抗體之Fab片段之CH1域的C端，且(d)之多肽融合至第二半抗體之Fab片段之CL域的C端。在另一實施例中，(b)之多肽融合至第一半抗體之Fab片段之CL域的C端，且(d)之多肽融合至第二半抗體之Fab片段之CH1域的C端。

如上文所指出，在一些實施例中，對於目標抗原(例如腫瘤相關抗原)而言，第一及/或第二半抗體可各自為多價的，例如二價的。此抗體具有漸增親合力之優勢。半抗體可為多價的，例如二價的，且可各自對特定抗原決定基(其可為用於第一半抗體及第二半抗體之相同抗原決定基，或可為用於第一半抗體及第二半抗體之不同抗原決定基)具有單特異性。因此，在一些實施例中，第一半抗體可包含i)兩個或更多個能夠結合目標抗原之相同抗原決定基的抗原結合部分(例如抗體片段)，ii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域(但非兩者)及iii)視情況選用之Fc區。第二半抗體可包含i)兩個或更多個能夠結合目標抗原之相同抗原決定基的抗原結合部分(例如抗體片段)，ii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域(但非兩者)及iii)視情況選用之Fc區。如上文所陳述，抗原決定基可對於第一半抗體及第二半抗體而言為相同的，或可對於第一半抗體及第二半抗體而言為不同的。

舉例而言，第一半抗體及第二半抗體中之各者可包含經由肽連接子連接之串聯Fab (Fab-連接子-Fab)，亦即兩個Fab片段，其中第一Fab經由其C端連接至第二Fab之N端。

在一個實施例中，第一半抗體包含 a)包含兩個Fab片段之串聯Fab，其中第一Fab片段及第二Fab片段結合相同目標抗原(「目標抗原A」)且第一Fab片段所結合之抗原決定基與第二Fab片段所結合之抗原決定基相同，且其中第一Fab片段及第二Fab片段經由肽連接子連接，其中第一Fab經由其C端連接至第二Fab之N端；以及 b)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至該CH1域之N端；其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至第二Fab片段之CL域或CH1域之C端；且該第二半抗體包含 c)包含兩個Fab片段之串聯Fab，其中第一Fab片段及第二Fab片段結合目標抗原A且第一Fab片段所結合之抗原決定基與第二Fab片段所結合之抗原決定基相同，且其中第一Fab片段及第二Fab片段經由肽連接子連接，其中第一Fab經由其C端連接至第二Fab之N端；以及 d)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域(CL)，其中VH域之C端融合至該恆定域之N端；其中該多肽係藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至第二Fab片段之CL域或CH1域之C端。

(第一半抗體中)部分b之抗體重鏈可變域(VH)及(第二半抗體中)部分(d)之抗體輕鏈可變域(VL)一起形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點，亦即在締合兩個半抗體時進行。

融合至多肽之串聯Fab之鏈(亦即不論多肽是否融合至第二Fab片段之CL域或CH1域)可獨立地經選擇以用於第一半抗體及第二半抗體。

如上文所描述，串聯Fab之第一Fab片段連接至第二Fab片段之N端。在一個實施例中，第一Fab片段之重鏈片段之C端連接至第二Fab片段之重鏈片段或輕鏈片段之N端。在另一實施例中，第一Fab片段之輕鏈片段之C端連接至第二Fab片段之重鏈片段或輕鏈片段之N端。因此，在一些實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體之串聯Fab可包含如下三個鏈： 1)第一Fab片段之輕鏈片段((VLCL)1)、經由肽連接子連接至第二Fab片段之重鏈片段的第一Fab片段之重鏈片段((VHCH1)1-連接子-(VHCH1)2)以及第二Fab片段之輕鏈片段((VLCL)2)；或 2)第一Fab片段之輕鏈片段((VLCL)1)、經由肽連接子連接至第二Fab片段之輕鏈片段的第一Fab片段之重鏈片段((VHCH1)1-連接子-(VLCL)2)以及第二Fab片段之重鏈片段((VH-CH1)2)；或 3)第一Fab片段之重鏈片段(VHCH1)、經由肽連接子連接至第二Fab片段之輕鏈片段的第一Fab片段之輕鏈片段((VLCL)1-連接子-(VLCL)2)以及第二Fab片段之重鏈片段；或 4)第一Fab片段之重鏈片段(VHCH1)、經由肽連接子連接至第二Fab片段之重鏈片段的第一Fab片段之輕鏈片段((VLCL)1-連接子-(VHCH1)2)以及第二Fab片段之輕鏈片段((VLCL)2)。

在另一實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體可各自結合目標抗原之超過一個，視情況兩個不同抗原決定基。因此，對於目標抗原而言，半抗體中之一者或兩者可為雙互補位的。在一些實施例中，第一半抗體及第二半抗體可各自包含i)能夠結合目標抗原之第一抗原決定基的抗原結合部分(例如抗體片段)；ii)能夠結合目標抗原之第二抗原決定基的抗原結合部分(例如抗體片段)，iii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域(但非兩者)；以及iv)視情況選用之Fc區。

在此類實施例中，輕鏈與其各別重鏈之正確裝配可藉由使用交叉mab技術來輔助。舉例而言，在一個實施例中，各半抗體可包含有包含一個Fab及一個交叉Fab之串聯Fab，其中選自Fab及交叉Fab之一個片段對第一抗原決定基具有特異性且另一片段對第二抗原決定基具有特異性。

在一個特定實例中，第一半抗體可包含： a)包含第一片段及第二片段之串聯Fab，其中第一片段係經由肽連接子藉由其C端連接至第二片段之N端，其中第一片段結合目標抗原之第一抗原決定基且第二片段結合目標抗原之第二抗原決定基，且其中選自第一片段及第二片段之片段中之一者為Fab且另一者為交叉Fab， b)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至CH1域之N端；其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至第二片段之鏈中之一者的C端。

第二半抗體可包含 c)包含第一片段及第二片段之串聯Fab，其中第一片段係藉由其C端連接至第二片段之N端，其中第一片段結合目標抗原之第一抗原決定基且第二片段結合目標抗原之第二抗原決定基，且其中選自第一片段及第二片段之片段中之一者為Fab且另一者為交叉Fab；以及 d)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域(CL)，其中VL域之C端融合至該輕鏈恆定域之N端其中該多肽係藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至第二片段之鏈中之一者的C端。

第一半抗體之抗體重鏈可變域(VH)與第二半抗體之抗體輕鏈可變域(VL)一起形成放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

第一片段或第二片段可為交叉Fab，只要串聯Fab包含一個習知Fab及一個交叉Fab即可。

在上文所描述之串聯Fab實施例(包括涉及交叉Fab之串聯Fab實施例)中之任一個中，視情況，第一半抗體可基本上由組分(a)及(b)組成或由組分(a)及(b)組成且第二半抗體可由組分(c)及(d)組成或基本上由組分(c)及(d)組成。在任何情況下，第一半抗體不包含與第一半抗體之組分(b)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體輕鏈可變域(VL)；且第二半抗體不包含與第二半抗體之組分(d)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體重鏈可變(VH)域。

如上文所指出，在一些實施例中，第一半抗體及第二半抗體可各自包含視情況經工程改造以減弱或消除效應子功能之Fc域。

在一個實施例中，第一半抗體及第二半抗體中之各者可包含i) Fc域，ii)至少一個能夠結合於目標抗原之抗原結合部分(例如抗體片段，諸如scFv、Fv、Fab或交叉Fab片段)以及iii)用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域(但非兩者)。

視情況，就結合至目標抗原而言，包含Fc域之半抗體可為單價的。在其他實施例中，其可為多價的，例如二價的。第一半抗體及第二半抗體可各自為多價的且對目標抗原之相同抗原決定基具有單特異性。在再其他實施例中，第一半抗體及第二半抗體可各自具有用於目標抗原之不同抗原決定基之結合位點-例如其可為雙互補位的。

抗體片段可為scFv。因此，在一個實施例中，第一半抗體可包含以下或由以下組成： a) scFv片段，其中scFv片段結合目標抗原； b)Fc域；以及 c)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至恆定域之N端；其中(a)之scFv融合至Fc域之N端，且其中c)之多肽藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fc域之C端。

視情況，部分c(i)之多肽可另外包含VH域之C端處之一或多個殘基，視情況一或多個丙胺酸殘基，視情況單個丙胺酸殘基。視情況，額外殘基可為如上文所描述之CH1域之N端部分，例如來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端的1-10個殘基。舉例而言，額外殘基可為AST。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： d)結合目標抗原之第二scFv； e)Fc域；以及 f)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)抗體輕鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域(CL)，其中VL域之C端融合至恆定域之N端；其中(d)之scFv融合至Fc域之N端，且其中(f)之多肽藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fc域之C端。

在另一實施例中，第一半抗體及第二半抗體可各自為包含用於目標抗原之Fab (例如用於目標抗原之單一Fab)及Fc域之單臂IgG。因此，第一半抗體可包含以下或由以下組成： i)完整輕鏈片段； ii)完整重鏈； iii)另一缺乏Fd之Fc鏈；以及 iv)包含用於該放射性標記化合物之該抗原結合位點之該VH域或由其組成之多肽；其中(i)之輕鏈及(ii)之重鏈一起提供用於目標抗原之抗原結合位點；且其中包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域或由其組成之多肽藉由其N端，較佳經由連接子融合至(ii)或(iii)的C端。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： v)完整輕鏈片段； vi)完整重鏈； vii)另一缺乏Fd之Fc鏈；以及 viii)包含用於該放射性標記化合物之該抗原結合位點之該VL域或由其組成之多肽；其中(v)之輕鏈及(vi)之重鏈一起提供用於目標抗原之抗原結合位點；且其中包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或由其組成之多肽藉由其N端，較佳經由連接子融合至(vi)或(vii)的C端。

包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域或由其組成之多肽可為包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)，在此情況下多肽可另外包含VH域之C端處之一或多個殘基，視情況一或多個丙胺酸殘基，視情況單一個丙胺酸殘基；或視情況選用之如上文所描述之CH1域之N端部分；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至CH1域之N端。

包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或由其組成之多肽可為包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VL)；或 ii)抗體重鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域，其中VL域之C端融合至恆定域之N端。

當例如就單臂IgG而論，第一半抗體及第二半抗體為雜二聚體時，其可藉由使用如下文進一步描述之杵-臼(knob-into-hole)技術來輔助裝配。

在另一實施例中，半抗體可各自包含如上文所描述之串聯Fab (例如包含兩個Fab片段，其中第一Fab片段及第二Fab片段均結合目標抗原A之相同抗原決定基；或包含Fab及交叉Fab，其中，其中之一者結合目標抗原A之第一抗原決定基且另一者結合目標抗原A之第二抗原決定基)，其中串聯Fab (例如經由其C端)融合至Fc域之N端，且其中包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域或VL域或由其組成之肽融合(例如經由其N端)至Fc域之C端。

因此，第一半抗體可包含以下或由以下組成： a)選自以下之串聯Fab： i)包含兩個Fab片段之串聯Fab，其中第一Fab片段及第二Fab片段結合目標抗原A且第一Fab片段所結合之抗原決定基與第二Fab片段所結合之抗原決定基相同，且其中第一Fab片段及第二Fab片段經由肽繫鏈連接，其中第一Fab經由其C端連接至第二Fab之N端；以及 ii)包含第一片段及第二片段之串聯Fab，其中第一片段係經由肽繫鏈藉由其C端連接至第二片段之N端，其中第一片段結合目標抗原A之第一抗原決定基且第二片段結合目標抗原A之第二抗原決定基，且其中選自第一片段及第二片段之片段中之一者為Fab且另一者為交叉Fab； b)Fc域；以及 c)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)抗體重鏈可變域(VH)及抗體重鏈恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至CH1域之N端，其中串聯Fab融合至Fc域之鏈中之一者的N端，且c)之多肽藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fc域之鏈中之一者的C端。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： d)選自以下之串聯Fab： i)包含兩個Fab片段之串聯Fab，其中第一Fab片段及第二Fab片段結合目標抗原A且第一Fab片段所結合之抗原決定基與第二Fab片段所結合之抗原決定基相同，且其中第一Fab片段及第二Fab片段經由肽繫鏈連接，其中第一Fab經由其C端連接至第二Fab之N端；以及 ii)包含第一片段及第二片段之串聯Fab，其中第一片段係經由肽繫鏈藉由其C端連接至第二片段之N端，其中第一片段結合目標抗原A之第一抗原決定基且第二片段結合目標抗原A之第二抗原決定基，且其中選自第一片段及第二片段之片段中之一者為Fab且另一者為交叉Fab； e)Fc域；以及 f)包含以下或由以下組成之多肽： i)抗體重鏈可變域(VL)；或 ii)抗體重鏈可變域(VL)及抗體輕鏈恆定域，其中VL域之C端融合至輕鏈恆定域之N端，其中(d)之串聯Fab融合至Fc域之鏈中之一者的N端，且(f)之多肽藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至Fc域之鏈中之一者的C端。

第一半抗體之VH域及第二半抗體之VL域一起形成用於放射性標記化合物之抗原結合位點，亦即在締合兩個抗體時進行。

若第一半抗體包含根據(a)(i)之串聯Fab，則一般為以下情況：第二半抗體將包含根據d(i)之串聯Fab；若第一半抗體包含根據(a)(ii)之串聯Fab，則一般將為以下情況：第二半抗體將包含根據d(ii)之串聯Fab。

串聯Fab可一般如上文所描述。舉例而言，串聯Fab可由上文所闡述之鏈組中之任一個構成。一般而言，第二Fab (其可為交叉Fab)之重鏈片段可連接至Fc域。

在另一實施例中，第一及第二半抗體中之各者可包含a)包含第一及第二子單元之Fc域，b)至少一個能夠結合目標抗原之抗原結合部分(例如抗體片段，諸如scFv、Fv、Fab或交叉Fab片段，包含目標抗原之抗原結合位點)及c)包含放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域或VH域(但並非兩者)的多肽，其中(b)之抗原結合部分(例如抗體片段)之C端融合至Fc域之第一子單元的N端，且(c)之多肽之C端融合至Fc域之第二子單元的N端。(b)之抗體片段之融合較佳經由鉸鏈區進行。(c)之多肽之融合可經由位於多肽C端與Fc區N端之間的連接子及/或經由上鉸鏈區中之一些或全部(例如根據EU編號索引，Asp221及其C端殘基)進行。在一個實施例中，(b)之抗體片段可為Fab片段。在一個實施例中，在第一半抗體中，(c)之多肽由用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域組成；且在第二半抗體中，(c)之多肽由用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域組成。

因此，在一個實施例中，第一半抗體可包含以下或由以下組成： i)完整輕鏈； ii)完整重鏈； iii)另一Fc鏈；以及 iv)包含用於該放射性標記化合物之該抗原結合位點之該VH域或由其組成之多肽；其中(i)之輕鏈及(ii)之重鏈一起提供用於目標抗原之抗原結合位點；且其中包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域或由其組成之多肽藉由其C端，較佳經由連接子融合至(iii)的N端。

第二半抗體可包含以下或由以下組成： v)完整輕鏈； vi)完整重鏈； vii)另一Fc鏈；以及 viii)包含用於該放射性標記化合物之該抗原結合位點之該VL域或由其組成之多肽；其中(v)之輕鏈及(vi)之重鏈一起提供用於目標抗原之抗原結合位點；且其中包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或由其組成之多肽藉由其C端，較佳經由連接子融合至(vii)的N端。

連接子可包含如熟習此項技術者已知或如本文所描述之任何可撓性連接子，例如連接子GGGGSGGGGSGGGGSGGSGG (SEQ ID NO.: 152)。連接子可進一步包括全部上鉸鏈區之一部分，例如可自Asp221延伸至(例如Cys226處之) Fc鏈開始處。

在再另一實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體各自包含具有用於目標抗原之抗原結合位點之全長抗體，且進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域或VH域。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含： a)由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第一全長抗體，其中全長抗體之至少一個臂結合至目標抗原；以及 b)包含以下或由以下組成之多肽： i)另一抗體重鏈可變域(VH)；或 ii)另一抗體重鏈可變域(VH)及另一抗體恆定域(CH1)，其中VH域之C端融合至CH1域之N端，其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第一全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端。

第二半抗體可包含 c)由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第二全長抗體，其中全長抗體之至少一個臂結合至目標抗原；以及 d)包含以下或由以下組成之多肽： i)另一抗體輕鏈可變域(VL)；或 ii)另一抗體輕鏈可變域(VL)及另一抗體輕鏈恆定域(CL)，其中VL域之C端融合至CL域之N端，其中該多肽係藉由VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第二全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端。

第一半抗體之抗體重鏈可變域(VH)及第二半抗體之抗體輕鏈可變域(VL)一起形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點，亦即在締合兩個抗體時。

視情況，第一半抗體可基本上由上文所列之組分(a)及(b)組成或由上文所列之組分(a)及(b)組成，且第二半抗體可基本上由上文所列之組分(c)及(d)組成或由上文所列之組分(c)及(d)組成。在任何情況下，第一半抗體不包含與第一半抗體之組分(b)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體輕鏈可變域(VL)；且第二半抗體不包含與第二半抗體之組分(b)締合之能夠形成用於放射性標記化合物之功能抗原結合位點的抗體重鏈可變(VH)域。

可較佳地，全長抗體之兩個臂均對相同目標抗原具有結合特異性。在對於目標抗原而言抗體為二價抗體之情況下，全長抗體之兩個臂均可結合至相同目標抗原之相同抗原決定基。

在另一實施例中，對於目標抗原而言，抗體可為雙互補位的；例如全長抗體之一個臂可結合至目標抗原之第一抗原決定基且一個臂可結合至目標抗原之第二抗原決定基。在此類實施例中，抗體之一個臂可包含Fab且一個臂可包含交叉Fab以輔助輕鏈與其各別重鏈之正確裝配。因此，在一個實施例中，全長抗體之第一重鏈可包含代替VH域之VL域(例如VL-CH1-鉸鏈-CH2-CH3)且第一輕鏈可包含更換為VL域之VH域(例如VH-CL)，或第一重鏈可包含代替HC1域之CL域(例如VH-CL-鉸鏈-CH2-CH3)且第一輕鏈可包含代替CL域之CH1域(例如VL-CH1)。在此實施例中，第二重鏈及第二輕鏈具有習知域結構(分別例如VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3及VL-CL)。在一替代性實施例中，全長抗體之第二重鏈可包含代替VH域之VL域(例如VL-CH1-鉸鏈-CH2-CH3)且第二輕鏈可包含更換為VL域之VH域(例如VH-CL)，或第二重鏈可包含代替HC1域之CL域(例如VH-CL-鉸鏈-CH2-CH3)且第二輕鏈可包含代替CL域之CH1域(例如VL-CH1)。在此實施例中，第一重鏈及第一輕鏈具有習知域結構。

在半抗體之又一可能格式中， i)第一半抗體包含： a)能夠結合表現於目標細胞表面上之抗原的抗原結合部分(例如抗體片段，例如Fab片段)； b)多肽，其包含放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體重鏈可變域(VH)或由其組成；及 c)包含兩個子單元之Fc域，其中(b)之多肽藉由其N端融合至(a)之抗原結合部分之C端(例如融合至(a)之Fab片段之鏈中之一者的C端)且藉由其C端融合至(c)之Fc域之子單元中之一者的N端；且其中第一半抗體不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域；及 ii)第二半抗體包含： d)能夠結合表現於目標細胞表面上之抗原的抗原結合部分(例如抗體片段，例如Fab)； e)多肽，其包含該放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體輕鏈可變域(VL)或由其組成；及 f)包含兩個子單元之Fc域，其中(e)之多肽藉由其N端融合至(d)之抗原結合部分之C端(例如融合至(d)之Fab片段之鏈中之一者的C端)且藉由其C端融合至(f)之Fc域之子單元中之一者的N端；且其中第二半抗體不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域；其中該第一半抗體之該VH域及該第二半抗體之該VL域能夠一起形成用於該放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

融合可為直接或間接的，例如經由肽連接子。

在一些實施例中，第一及/或第二半抗體進一步包含結合於目標抗原之另一抗原結合部分(例如另一抗體片段)，例如結合於目標抗原之另一Fab片段。因此，在一些實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體(通常兩者)各自包含能夠結合於目標抗原之兩個抗原結合部分。半抗體之兩個抗原結合部分較佳能夠在相同或不同抗原決定基處彼此結合於相同目標抗原。視情況，第一抗體及第二抗體各自包含不超過兩個能夠結合於目標抗原之抗原結合部分。在其他實施例中，其可包含超過兩個能夠結合於目標抗原之抗原結合部分。

在一個實施例中，此另一抗體結合部分(例如抗體片段，例如Fab片段)藉由C端(例如其鏈中之一者，例如重鏈)融合至Fc域之另一子單元之N端。因此，在一個實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體可為雙臂半抗體，其中各臂攜有用於目標抗原之結合部分。

因此，在一個實施例中，分裂抗體包含： i)第一半抗體，其包含： a)第一抗原結合部分(例如Fab片段)，其中該抗原結合部分(例如Fab片段)結合至表現於目標細胞表面上之抗原； b)多肽，其包含放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體重鏈可變域(VH)或由其組成；及 c)包含第一及第二子單元之Fc域，其中(b)之多肽藉由其N端融合至(a)之抗原結合部分之C端(例如融合至(a)之Fab片段之鏈中之一者的C端)且藉由其C端融合至(c)之Fc域之第一子單元的N端；且進一步包含結合至目標細胞表面上所表現之抗原的第二抗原結合部分(例如第二Fab片段)，其中該第二抗原結合部分(例如Fab)藉由其C端(例如藉由其鏈中之一者之C端)融合至(c)之Fc域之第二子單元的N端；其中第一半抗體不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域；及 ii)第二半抗體，其包含： d)第一抗原結合部分(例如Fab片段)，其中該抗原結合部分(例如Fab片段)結合至表現於目標細胞表面上之抗原； e)多肽，其包含放射性標記化合物之抗原結合位點之抗體輕鏈可變域(VL)或由其組成；及 f)包含第一及第二子單元之Fc域，其中(e)之多肽藉由其N端融合至(d)之抗原結合部分之C端(例如融合至(d)之Fab片段之鏈中之一者的C端)且藉由其C端融合至(f)之Fc域之第一子單元的N端；且進一步包含結合至目標細胞表面上所表現之抗原的第二抗原結合部分(例如第二Fab片段)，其中第二抗原結合部分(例如Fab)藉由C端(例如藉由其鏈中之一者之C端)融合至(f)之Fc域之第二子單元的N端；其中第二半抗體不包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域；及其中該第一半抗體之該VH域及該第二半抗體之該VL域能夠一起形成用於該放射性標記化合物之功能抗原結合位點。

在可在一些情況下為較佳的其他實施例中，第一及/或第二半抗體各自具有能夠特異性結合於目標抗原之單一抗原結合部分。因此，第一半抗體及/或第二半抗體可對目標抗原為單特異性及單價的。較佳地，第一半抗體及第二半抗體在相同或不同抗原決定基處彼此結合於相同目標抗原。

在一個實施例中，第一半抗體及/或第二半抗體為單臂抗體。在此類實施例中，未融合至(b)中之多肽的第一半抗體之Fc子單元亦不融合至任何其他抗原結合域/部分；及/或未融合至(e)中之多肽的第二半抗體之Fc子單元亦不融合至任何其他抗原結合域/部分。因此，Fc域可包含不含Fd之子單元。在一些實施例中，構成半抗體之多肽中之一者可由Fc子單元組成或基本上由其組成。

因此，在一些實施例中，第一半抗體可包含以下多肽： i)自N端至C端包含以下之多肽：Fab重鏈(例如VH-CH1)；視情況選用之連接子；放射性標記化合物之抗原結合位點的VH域；視情況選用之連接子；及Fc子單元(例如CH2-CH3)； ii) Fab輕鏈多肽(例如VL-CL)；及 iii) Fc子單元多肽(例如CH2-CH3)；其中(i)中之Fab重鏈及(ii)中之Fab輕鏈形成能夠結合於目標抗原之Fab片段。

第二半抗體可包含以下多肽： iv)自N端至C端包含以下之多肽：Fab重鏈(例如VH-CH1)；視情況選用之連接子；放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域；視情況選用之連接子；及Fc子單元(例如CH2-CH3)； v) Fab輕鏈多肽(例如VL-CL)，及 vi)Fc子單元多肽(例如CH2-CH3)；其中(iv)中之Fab重鏈及(v)中之Fab輕鏈形成能夠結合於目標抗原之Fab片段。

在此等單臂半抗體之一些實施例中，(i)及(iv)中之Fab重鏈可具有彼此相同的序列；且ii)及(v)中之Fab輕鏈多肽可具有彼此相同的序列。

在以上格式中之任一者之一些實施例中，其中存在具有不同特異性之Fab，可藉由使用電荷修飾輔助輕鏈與其對應重鏈之正確裝配，如下文進一步論述。

雜二聚體重鏈之正確裝配可藉由杵-臼技術來輔助，如以下進一步論述。

H.例示性分裂多特異性分裂抗體在一些實施例中，可組合關於目標結合(例如CEA-結合)之態樣及實施例及關於DOTA結合之態樣及實施例。在一個實施例中，多特異性抗體可包含具有以上闡述之序列中之任一者的用於CEA之結合位點，及具有以上闡述之序列中之任一者的用於DOTA螯合物之結合位點。在另一個實施例中，第一及第二半抗體各自包含例如包含如上文所描述之序列中之任一者的用於CEA之結合位點，且締合以形成具有如上文所描述之序列中之任一者的用於DOTA螯合物之結合位點。亦經明確地考慮，關於CEA結合及/或DOTA結合之態樣及實施例可與如上文所描述抗體之較佳格式組合-亦即在較佳格式中之任一個中，結合目標抗原之部分可為包含如上文所描述之CDR或可變區序列的CEA結合子，且/或結合放射核種標記化合物之部分可為具有如上文所描述之CDR及/或可變區序列的DOTA結合子。

在分裂抗體之一個特定實施例中，第一半抗體可包含： a)特異性結合至CEA且由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第一全長抗體；以及 b)包含抗體重鏈可變域(VH)或由其組成之多肽，其中該重鏈可變域包含SEQ ID NO 35-37之重鏈CDR(或其中CDR-H1具有序列GFSLTDYGVH)，及/或其中該重鏈可變域與SEQ ID NO 41具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性；其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第一全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端。

第一半抗體不包含與(b)之多肽締合以形成用於放射性標記化合物之功能結合域之輕鏈域。

可較佳地，(b)之多肽進一步包含VH域之C端處之一或多個殘基，例如1-10個殘基。視情況，該等殘基可為一或多個丙胺酸殘基，視情況單個丙胺酸殘基。在另一實施例中，額外殘基可為如上文所描述之CH1域之N端部分，例如來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端的1-10個殘基。舉例而言，額外殘基可為AST。

在一些實施例中，部分(a)中之兩個抗體重鏈具有一致可變域，視情況一致可變CH1及/或CH2域。其不同之處可視情況僅在於其CH3域，例如藉由杵-臼突變及意欲促進雜二聚體之正確締合之其他突變之產生而不同。

第二半抗體可包含： c)特異性結合CEA且由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第二全長抗體；以及 d)包含抗體輕鏈可變域(VL)或由其組成之多肽，其中輕鏈可變域包含具有SEQ ID NO: 38-40之CDR且/或其中輕鏈可變域與SEQ ID NO 42具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性；其中該多肽係利用VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第二全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端，且其中第二半抗體不包含與(d)之多肽締合以形成用於放射性標記化合物之功能結合域之重鏈域。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈具有彼此一致之可變域，視情況一致之可變CH1及/或CH2域。其不同之處可視情況僅在於其CH3域，例如藉由杵-臼突變及意欲促進雜二聚體之正確締合之其他突變之產生而不同。

CEA結合位點/序列可為上文所描述之CEA結合位點/序列中之任一者。

在一個特定實施例中，第一半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(a)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 22-24之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 26具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO 103具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性。在一些實施例中，可較佳地，(a)中之兩個輕鏈彼此一致。

部分(a)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 19-21之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 25具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(a)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 100之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 102之序列。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 100之第一重鏈及具有SEQ ID NO: 101 (其中C端AST為視情況選用的且可不存在或經如本文所描述之另一C端延伸取代)之第二重鏈以及具有SEQ ID NO: 103之輕鏈。

第二半抗體亦可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(c)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 22-24之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 26具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 103具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈彼此一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈具有與第一半抗體之(a)中之輕鏈相同之序列，例如部分(a)及(c)中之全部該等輕鏈具有相同序列。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈包含具有SEQ ID NO: 19-21之CDR且/或部分(c)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 25具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(c)之一個重鏈具有SEQ ID NO: 97之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 99之序列。

在一個特定實施例中，第二半抗體可包含SEQ ID NO: 97之第一重鏈及SEQ ID NO: 98之第二重鏈及SEQ ID NO: 103之輕鏈。

類似地，關於目標結合(例如CEA結合)之態樣及實施例以及關於Pb-DOTAM結合之態樣及實施例可在一些實施例中組合。在一個實施例中，多特異性抗體可包含具有以上闡述之序列中之任一者的用於CEA之結合位點，及具有以上闡述之序列中之任一者的用於pb-DOTAM螯合物之結合位點。在另一個實施例中，第一及第二半抗體可各自包含例如包含如上文所描述之序列中之任一者的用於CEA之結合位點，且締合以形成具有如上文所描述之序列中之任一者的用於Pb-DOTAM螯合物之結合位點。亦經明確地考慮，關於CEA結合及/或Pb-DOTAM結合之態樣及實施例可與如上文所描述抗體之較佳格式組合-亦即在較佳格式中之任一個中，結合目標抗原之部分可為包含如上文所描述之CDR或可變區序列的CEA結合子，且/或結合放射核種標記化合物之部分可為具有如上文所描述之CDR及/或可變區序列的Pb-DOTAM結合子。

在分裂抗體之一個特定實施例中，第一半抗體可包含： a)特異性結合至CEA且由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第一全長抗體；以及 b)多肽，其包含抗體重鏈可變域(VH)或由其組成，其中該重鏈可變域包含SEQ ID NO 1-3之重鏈CDR，及/或其中該重鏈可變域與SEQ ID NO 7具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性；其中該多肽係藉由VH域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第一全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端。

可較佳地，(b)之多肽進一步包含VH域之C端處之一或多個殘基，視情況一或多個丙胺酸殘基，視情況單個丙胺酸殘基。舉例而言，(b)之多肽可包含以下或由以下組成：具有C端丙胺酸延伸部分之SEQ ID NO: 7，例如序列

在另一實施例中，額外殘基可為如上文所描述之CH1域之N端部分，例如來自例如人類IgG1 CH1域之CH1域之N端的1-10個殘基。舉例而言，額外殘基可為AST。

第二半抗體可包含： c)特異性結合CEA且由兩個抗體重鏈及兩個抗體輕鏈組成之第二全長抗體；以及 d)包含抗體輕鏈可變域(VL)或由其組成之多肽，其中輕鏈可變域包含具有SEQ ID NO: 4-6之CDR且/或其中輕鏈可變域與SEQ ID NO 8具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性；其中該多肽係利用VL域之N端，較佳經由肽連接子融合至該第二全長抗體之兩個重鏈中之一者的C端，且其中第二半抗體不包含與(d)之多肽締合以形成用於放射性標記化合物之功能結合域之重鏈域。

在特定實施例中，第一半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(a)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 22-24之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 26具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO 34至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(a)中之兩個輕鏈彼此一致。

部分(a)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 19-21之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 25具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(a)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 27之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 28之序列。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 28之第一重鏈及具有SEQ ID NO: 32 (或包含額外C端丙胺酸或諸如具有AST之延伸部分之如本文所描述之其他C端延伸部分的其變異體)之第二重鏈以及具有SEQ ID NO: 34之輕鏈。具有C端丙胺酸延伸部分之SEQ ID NO: 32之變異體顯示於下：

在另一特定實施例中，第一半抗體可具有來自抗體A5B7 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(a)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 46-48之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 50具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 54至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(a)中之兩個輕鏈彼此一致。

在一些實施例中，部分(a)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 43-45之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 49具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(a)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 51之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 53之序列。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 51之第一重鏈及具有SEQ ID NO: 52 (或具有C端丙胺酸延伸部分或諸如具有AST之延伸部分之如本文所描述之其他C端延伸部分的其變異體)之第二重鏈以及具有SEQ ID NO: 54之輕鏈。

在另一特定實施例中，第一半抗體可具有來自抗體T84.66 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(a)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 14-16之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 18具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 89具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性。在一些實施例中，可較佳地，(a)中之兩個輕鏈彼此一致。

在一些實施例中，部分(a)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 11-13之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 17具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(a)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 86之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 88之序列。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 86之第一重鏈及具有SEQ ID NO: 87 (或其中C端「AST」不存在或經如本文所揭示之另一C端延伸部分取代的其變異體)之第二重鏈以及具有SEQ ID NO: 89之輕鏈。

在另一特定實施例中，第一半抗體可具有來自抗體28A9 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(a)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 62-64之CDR且/或可包含與SEQ ID NO: 66具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 96至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(a)中之兩個輕鏈彼此一致。

在一些實施例中，部分(a)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 59-61之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 65具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(a)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 93之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 95之序列。

在一個特定實施例中，第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 93之第一重鏈及具有SEQ ID NO: 94 (或不具有C端「AST」或具有如本文所描述之不同C端延伸部分的其變異體)之第二重鏈以及具有SEQ ID NO: 96之輕鏈。

在一些實施例中，第二半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(c)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 22-24之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 26具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO 34至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈彼此一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈具有與第一半抗體之(a)中之輕鏈相同之序列，例如部分(a)及(c)中之全部該等輕鏈具有相同序列。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈包含具有SEQ ID NO: 19-21之CDR且/或部分(c)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 25具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(c)之一個重鏈具有SEQ ID NO: 29之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 30之序列。

在一個特定實施例中，第二半抗體可包含SEQ ID NO: 30之第一重鏈及SEQ ID NO: 33之第二重鏈及SEQ ID NO: 34之輕鏈。

在另一特定實施例中，第二半抗體可具有來自A5B7 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(c)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 46-48之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 50具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO 58至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈彼此一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈具有與第一半抗體之(a)中之輕鏈相同之序列，例如部分(a)及(c)中之全部該等輕鏈具有相同序列。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈包含具有SEQ ID NO: 43-45之CDR且/或部分(c)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 49具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(c)之一個重鏈具有SEQ ID NO: 55之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 57之序列。

在一個特定實施例中，第二半抗體可包含SEQ ID NO: 55之第一重鏈及SEQ ID NO: 56之第二重鏈及SEQ ID NO: 58之輕鏈。

在另一特定實施例中，第二半抗體可具有來自抗體T84.66 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(c)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 14-16之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 18具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 89具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈彼此一致。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 11-13之CDR且/或部分(c)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 17具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(c)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 83之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 85之序列。

在一個特定實施例中，第二半抗體可包含SEQ ID NO: 83之第一重鏈及SEQ ID NO: 84之第二重鏈及SEQ ID NO: 89之輕鏈。

在另一特定實施例中，第二半抗體可具有來自抗體28A9 (包括其人類化型式)之CEA結合序列(亦即CDR或VH/VL域)。

舉例而言，(c)中之兩個輕鏈可包含具有SEQ ID No 62-64之CDR且/或可包含與SEQ ID NO 66具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之輕鏈可變域。在一些實施例中，其可與SEQ ID NO: 96至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致。在一些實施例中，可較佳地，(c)中之兩個輕鏈彼此一致。

在一些實施例中，部分(c)中之兩個抗體重鏈可包含具有SEQ ID NO: 59-61之CDR且/或部分(a)中之兩個抗體重鏈包含與SEQ ID NO 65具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%一致性之可變域。在一個實施例中，部分(c)中之一個重鏈具有SEQ ID NO: 90之序列且另一重鏈具有SEQ ID NO: 92之序列。

在一個特定實施例中，第二半抗體可包含SEQ ID NO: 90之第一重鏈及SEQ ID NO: 91之第二重鏈及SEQ ID NO: 96之輕鏈。

在一些實施例中，第一及第二半抗體結合相同的CEA抗原決定基。因此，舉例而言，第一半抗體及第二半抗體均可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自A5B7 (包括其人類化型式)之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自T84.66 (包括其人類化型式)之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自28A9 (包括其人類化型式)之CEA結合序列；或第一半抗體及第二半抗體均可具有來自MFE23 (包括其人類化型式)之CEA結合序列。

因此，舉例而言： i)第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 28之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 32 (視情況具有例如AST之如本文所描述之C端延伸部分)之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 34之輕鏈；且第二半抗體可包含具有SEQ ID NO: 30之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 33之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 34之輕鏈； ii)第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 51之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 52 (視情況具有例如AST之如本文所描述之C端延伸部分)之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 54之輕鏈；且第二半抗體可包含具有SEQ ID NO: 55之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 56之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 58之輕鏈； iii)第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 86之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 87 (其中C端AST殘基為視情況選用的且可不存在或經替代性C端延伸部分取代)之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 89之輕鏈；且第二半抗體可包含具有SEQ ID NO: 83之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 84之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 89之輕鏈；或 iv)第一半抗體可包含具有SEQ ID NO: 93之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 94 (其中C端AST殘基為視情況選用的且可不存在或經替代性C端延伸部分取代)之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 96之輕鏈；且第二半抗體可包含具有SEQ ID NO: 90之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 91之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 96之輕鏈。

在其他實施例中，第一半抗體及第二半抗體結合至如上文所論述之CEA之不同抗原決定基。因此，舉例而言，第一半抗體可具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列，且第二半抗體可具有來自A5B7之CEA結合序列；或第一半抗體可具有來自抗體A5B7之CEA結合序列，且第二半抗體可具有來自CH1A1A之CEA結合序列。雙互補位(CH1A1A及A5B7)對之使用實例描述於實例6c中。

在再另一特定實施例中，目標可為例如具有來自抗體CH1A1A之CEA結合序列之CEA，且格式可如圖25C中所示。視情況，第一半抗體及第二半抗體締合以形成用於Pb-DOTAM螯合物(Pb-DOTAM)之功能抗原結合位點。

I多肽連接子在用於組合療法之多特異性或分裂多特異性抗體中，組分或域(例如Fc域、抗體結合部分、VH、VL)可經由肽連接子間接融合至其他組分或域。

連接子(例如Fab片段與針對放射性標記化合物之VH/VL之間及/或針對放射性標記化合物之VH/VL與Fc域之間的連接子)可為具有至少5個胺基酸或至少10個胺基酸，較佳5至100個，例如5至70個、5至60個或5至50個或10至100個、10至70個、10至60個或10至50個胺基酸的肽。在一些實施例中，可能較佳的是，連接子之長度為15-30個胺基酸，例如長度為15-25個，例如16、17、18、19、20、21、22、23或24個胺基酸。連接子可為剛性連接子或可撓性連接子。在一些實施例中，其為包含以下或由以下組成之可撓性連接子：Thr、Ser、Gly及/或Ala殘基。舉例而言，其可包含以下或由以下組成：Gly及Ser殘基。在一些實施例中，其可具有諸如(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)n之重複模體，其中n為例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。適合的非免疫原性肽連接子包括例如(G ₄S) _n、(SG ₄) _n、(G ₄S) _n或G ₄(SG ₄) _n肽連接子，其中「n」一般為1與10之間，通常為2與4之間的數字。在另一實施例中，該肽連接子為(GxS)n或(GxS)nGm，其中G =甘胺酸，S =絲胺酸，且(x = 3，n= 3、4、5或6，且m= 0、1、2或3)或(x = 4，n= 2、3、4或5，且m= 0、1、2或3)，例如x = 4且n= 2或3，例如其中x = 4，n= 2。在一些實施例中，連接子可為或可包含序列GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO.: 31)。在另一實施例中，連接子可為或包含GGGGSGGGGSGGGGSGGSGG或GGGGSGGGGSGGGGSGGSGGS或GGGGSGGGGSGGGGSGGSGGG。另一例示性肽連接子為EPKSC(D)-(G ₄S) ₂。另外，在抗原結合部分融合至Fc域子單元之N端之情況下，其可在存在或不存在另一肽連接子之情況下經由免疫球蛋白鉸鏈區或其部分融合。

本發明人已測定在由y個胺基酸組成之肽連接子中，y位置中之Ser (亦即，作為連接子之最末/C端胺基酸之Ser)可視y+2胺基酸(亦即，在C端方向上距離連接子中之最末胺基酸2個殘基處定位之胺基酸)之性質而定，誘導此y+2胺基酸之醣基化。因此，可較佳地，將連接子之最末絲胺酸殘基置於y-2或y-3位置中(亦即，連接子之最末絲胺酸殘基處於在N端方向上距離連接子中之最末胺基酸2或3個胺基酸之位置處)。在一些實施例中，連接子可由y個選自由Gly及Ser組成之群之連續胺基酸殘基組成，例如其中y = 5或更大；例如y = 5至100、5至70、5至60、5至50；或10至100、10至70、10至60或10至50；例如15至31或15至30，例如15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25，且其中最末絲胺酸處於y-2或y-3位置中。(因此，在y-2位置中可存在絲胺酸且在y-1及y位置中可存在甘胺酸；或在y-3位置中可存在絲胺酸且在y-2、y-1及y位置中可存在甘胺酸)。在一些實施例中，可較佳地，y = 20或21。在一些實施例中，可較佳地，連接子為(GxS)n(GGSGG)或(GxS)n(GGSGGG)，其中G =甘胺酸，S =絲胺酸，x = 4且n = 1至20或2至20或1至10或2至10，例如n = 2、3、4、5、6、7、8或9，例如n = 2至5或2至4。舉例而言，連接子可為GGGGSGGGGSGGGGSGGSGG或GGGGSGGGGSGGGGSGGSGGG。

J. CD40促效劑本發明之組合療法包含CD40促效劑。

人類CD40抗原為50 kDa細胞表面糖蛋白，其屬於腫瘤壞死因子受體(TNF-R)家族(Stamenkovic等人, EMBO J. 8:1403-10 (1989))。其亦稱為「腫瘤壞死因子受體超家族成員5」。替代名稱包括B細胞表面抗原40、Bp50、CD40L受體、CDw40、CDW40、MGC9013、p50或TNFRSF5。其例如以UniProt登錄號P25942登記。在一個實施例中，人類CD40抗原具有以下顯示之序列(參見表1)。表1：人類CD40抗原之蛋白質序列

人類CD40抗原之蛋白質序列

MVRLPLQCVLWGCLLTAVHPEPPTACREKQYLINSQCCSLCQPGQKLVSDCTEFTETECLPCGESEFLDTWNRETHCHQHKYCDPNLGLRVQQKGTSETDTICTCEEGWHCTSEACESCVLHRSCSPGFGVKQIATGVSDTICEPCPVGFFSNVSSAFEKCHPWTSCETKDLVVQQAGTNKTDVVCGPQDRLRALVVIPIIFGILFAILLVLVFIKKVAKKPTNKAPHPKQEPQEINFPDDLPGSNTAAPVQETLHGCQPVTQEDGKESR ISVQERQ

CD40由抗原呈遞細胞(APC)表現且其天然配體在T細胞上之接合活化APC，包括樹突狀細胞及B細胞。

如本文所使用之「CD40促效劑」包括促效CD40/CD40L相互作用之任何部分。典型地，此等部分將為促效CD40抗體或促效CD40L多肽。「促效劑」與細胞上之受體組合且引發與藉由該受體之天然配位體引發類似或相同之反應或活性。在一個態樣中，「CD40促效劑」誘導以下反應中之任一者或所有(但不限於)：B細胞增殖及/或分化；經由如ICAM-1、E-選擇素、VC AM及其類似物之此類分子上調細胞間黏著力；分泌促炎性細胞介素，諸如IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF及其類似物；如下實現經由CD40受體之信號轉導：藉由如TRAF (例如TRAF2及/或TRAF3)之此類途徑、MAP激酶，諸如NIK (NF-kB誘發激酶)、I-κB激酶(IKK/.β.)、轉錄因子NF-kB、Ras及MEK/ERK路徑、PI3K AKT路徑、P38 MAPK路徑及其類似物；藉由如XIAP、mcl-1、bcl-x及其類似物之此類分子實現抗凋亡信號之轉導；B及/或T細胞記憶產生；B細胞抗體產生；B細胞同型切換、MHC II類及CD80/86之細胞表面表現上調及類似物。

例示性促效劑包括CD40配位體CD40L，包括其功能變異體，或表現CD40L或其功能變異體之核酸，諸如重組人類CD40L，或表現CD40L之腺病毒載體。

在其他實施例中，促效劑可為抗CD40抗體，例如單株抗體。舉例而言，抗體可為人類或人類化抗體或嵌合抗體。抗體可為IgG，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。

在一些實施例中，抗體可以≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-8M或更低，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)之解離常數(K _D)結合CD40。在另一實施例中，抗體可以4×10 ^-10M或更小的K _D結合至人類CD40。

例示性抗CD40促效劑抗體在此項技術中已知。可在本發明之實施例中採用此等或其功能變異體中之任一者。

CP-870,893 (Pfizer) (亦稱為塞立路單抗(Selicrelumab))為完全人類CD40促效劑IgG2 mAb，其展現免疫介導及非免疫介導之對腫瘤細胞死亡的影響(Vonderheide RH, Flaherty KT, Khalil M, Stumacher MS, Bajor DL, Hutnick NA等人. Clinical activity and immune modulation in cancer patients treated with CP-870,893, a novel CD40 agonist monoclonal antibody. J Clin Oncol. 2007;25:876-83)。

達西珠單抗(dacetuzumab) (Seattle Genetics)為針對CD40之人類化mAb IgG1 (Khubchandani S, Czuczman MS, Hernandez-Ilizaliturri FJ. Dacetuzumab, a humanized mAb against CD40 for the treatment of hematological malignancies. Curr Opin Investig Drugs. 2009;10:579-87.)。

Chi Lob 7/4 (南安普敦大學(University of Southampton))為嵌合IgG1 (Johnson PW, Steven NM, Chowdhury F, Dobbyn J, Hall E, Ashton-Key M等人. A Cancer Research UK phase I study evaluating safety, tolerability, and biological effects of chimeric anti-CD40 monoclonal antibody (MAb), Chi Lob 7/4. J Clin Oncol. 2010;28:2507)。

APX005M為人類化兔IgG1 (Bjorck P, Filbert E, Zhang Y, Yang X, Trifan O. The CD40 agonistic monoclonal antibody APX005M has potent immune stimulatory capabilities. J Immunother Cancer. 2015;3:P198. doi: 10.1186/2051-1426-3-S2-P198)。

ADC-1013為完全人類IgG1 (Mangsbo SM, Broos S, Fletcher E, Veitonmäki N, Furebring C, Dahlén E, Norlén P, Lindstedt M, Tötterman TH, Ellmark P. The human agonistic CD40 antibody ADC-1013 eradicates bladder tumors and generates T-cell-dependent tumor immunity. Clin Cancer Res. 2015;21:1115-1126. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-14-0913)。

CDX-1140為完全人類IgG2 (Vitale LA, Thomas LJ, He LZ, O'Neill T, Widger J, Crocker A, Sundarapandiyan K, Storey JR, Forsberg EM, Weidlick J等人. Development of CDX-1140, an agonist CD40 antibody for cancer immunotherapy. Cancer Immunol Immunother. 2019;68:233-245. doi: 10.1007/s00262-018-2267-0)。

K.免疫檢查點抑制劑本發明之組合療法包含免疫檢查點抑制劑。

例示性免疫檢查點抑制劑包括CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-1 5049、CHK1、CHK2、A2aR、B-7之抑制劑或其組合。

在一些實施例中，檢查點抑制劑可為PD1、PDL1或CTLA4之抑制劑。

人類PD-L1(或PDL1)抗原又稱為「計劃性細胞死亡1配位體1」或CD274分子。替代名稱包含B7-H、B7H1、B7-H1、B7同源物1、MGC142294、MGC142296、PDCD1L1、PDCD1LG1、PDCD1配位體1、PDL1、PD-L1、計劃性死亡配位體1。在一個實施例中，人類PD-L1抗原具有下文所示之序列(表2)，如例如以UniProt登記號Q9NZQ7登記。表2：

人類PD-L1抗原之蛋白質序列

MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET

在一些實施例中，抑制劑可為小分子或肽，例如能夠結合至PD-1或PD-L1且阻斷PD1與PD-L1之間的締合。

在一些實施例中，抑制劑為針對檢查點抑制劑之抗體，例如抗PD1抗體、抗PDL1抗體或抗CTLA4抗體。抗體可為單株抗體。在一些實施例中，抗體可為人類或人類化抗體或嵌合抗體。抗體可為IgG，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。

在一些實施例中，抗體可以≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM(例如10 ^-8M或更低，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)之解離常數(K _D)結合檢查點抑制劑，例如PD1、PDL1或CTLA4。抗體可結合至人類PD1、PDL1或CTLA4。

例示性抗體為此項技術中已知的。可在本發明之實施例中採用此等或其功能變異體中之任一者。實例包括：

納武單抗(Nivolumab) (抗PD-1 mAb，BMS-936558/ONO-4538，Bristol-Myers Squibb，先前為MDX-1 106)；帕博利珠單抗(Pembrolizumab) (抗PD1 mAb，MK-3475，拉立珠單抗(lambrolizumab)，Keytruda®，Merck)；西米普利單抗(Cemiplimab) (抗PD-1，Regeneron)；阿特珠單抗(Atezolizumab) (抗PD-L1 mAb，Tecentriq®，MPDL3280A/RG7446) Roche/Genentech)；阿維魯單抗(Avelumab) (Bavencio)，亦即由Merck Serono及Pfizer研發之完全人類IgG1抗PD-L1抗體；度伐魯單抗(Durvalumab) (Imfinzi)，亦即由AstraZeneca研發之完全人類IgG1抗PD-L1抗體。

例示性PD-1抑制劑亦可選自：由Jounce Therapeutics研發之JTX-4014；斯巴達珠單抗(Spartalizumab) (PDR001)；卡瑞利珠單抗(Camrelizumab) (SHR1210)；斯迪利單抗(Sintilimab) (IBI308)；替雷利珠單抗(Tislelizumab) (BGB-A317)；特瑞普利單抗(Toripalimab) (JS 001)；多斯利單抗(Dostarlimab) (TSR-042，WBP-285)；INCMGA00012 (MGA012)，亦即由Incyte及MacroGenics研發之人類化IgG4單株抗體；由AstraZeneca/MedImmune及GlaxoSmithKline研發之AMP-224；及由AstraZeneca研發之AMP-514 (MEDI0680)。

例示性PD-L1抑制劑亦可選自KN035；由Checkpoint Therapeutics研發之CK-301；AUNP12；CA-170；或BMS-986189。

CTLA-4 (細胞毒性T淋巴球相關蛋白4)，亦稱為CD152，為CD28受體家族之另一抑制劑成員，且表現於T細胞上。

結合及抑制CTLA-4之抗體為此項技術中已知的。

在一個實例中，抗體為伊匹單抗(ipilimumab) (商品名Yervoy®，Bristol-Myers Squibb)，亦即人類IgG抗體。在另一實例中，抗CTLA-4抗體為曲美單抗(tremelimumab) (先前為替西單抗(ticilimumab)，CP-675,206)，亦即人類IgG2抗體。

L.清除劑如上文所論述，清除劑可用於本發明之一些實施例中。

例示性藥劑結合至抗體且增強其自身體清除之速率。其包括抗個體基因型抗體。

其他例示性藥劑為結合至用於放射性標記化合物之抗原結合位點、但本身未經放射性標記之藥劑。舉例而言，在放射性標記化合物包含負載有特定化學元素(例如金屬)之放射性同位素之螯合物情況下，藥劑可包含負載有相同元素(例如金屬)之非放射性同位素之相同螯合物，或可包含非負載螯合物或負載有不同非放射性部分(例如不同元素之非放射性同位素)之螯合物，其限制條件為其仍可與抗原結合位點結合。

在一些情況下，清除劑/阻斷劑可另外包含增大分子之尺寸及/或流體動力學半徑之部分。清除劑/阻斷劑在循環中阻礙分子接近腫瘤之能力，而不干擾分子結合至抗體之能力。例示性部分包括親水性聚合物。部分可為例如聚葡萄糖、糊精、PEG、聚唾液酸(PSA)、玻尿酸、羥乙基澱粉(HES)或聚(2-乙基2-㗁唑啉) (PEOZ)之聚合物或共聚物。在其他實施例中，部分可為非結構化肽或蛋白質，諸如XTEN多肽(非結構化親水性蛋白質聚合物)、高胺基酸聚合物(HAP)、脯胺酸-丙胺酸-絲胺酸聚合物(PAS)、彈性蛋白樣肽(ELP)或明膠樣蛋白(GLK)。另外例示性部分包括諸如白蛋白(例如牛血清白蛋白)或IgG之蛋白質。適用於部分/聚合物之分子量可介於例如至少50 kDa，例如50 kDa與2000 kDa之間的範圍內。舉例而言，分子量可為200-800 kDa，視情況大於300、350、400或450 kDa，且視情況小於700、650、600或550 kDa，視情況約500 kDa。

例示性清除劑描述於WO2019/202399中，其以引用之方式併入本文中。此描述包含聚葡萄糖或其衍生物(諸如胺基聚葡萄糖)之結合於M-DOTAM (其中M-DOTAM為併有金屬離子之DOTAM或其功能變異體)之聚葡萄糖類清除劑，其中該複合物由用於Pb-DOTAM之抗原結合位點識別。清除劑中存在之金屬可為鉛之穩定(非放射性)同位素，或另一金屬離子之穩定或基本上穩定同位素，其限制條件為抗體以高親和力識別金屬離子-DOTAM複合物。

「穩定同位素」意謂不進行放射性衰變之同位素。「基本上穩定同位素」意謂進行放射性衰變，但半衰期非常長，使得使用安全之同位素。較佳地，該金屬離子係選自Pb、Ca及Bi之離子。舉例而言，清除劑可包含Pb之穩定同位素與DOTAM或其功能變異體複合、Ca與DOTAM或其功能變異體複合或 ²⁰⁹Bi (半衰期為1.9×10 ¹⁹年之基本上穩定同位素)與DOTAM或其功能變異體複合。Pb可為天然存在之鉛，其為穩定(非放射性)同位素 ²⁰⁴Pb、 ²⁰⁶Pb、 ²⁰⁷Pb及 ²⁰⁸Pb之混合物。

M.治療方法及組合物在某些態樣中，本發明提供本文所描述之組合療法，其作為個體中之增生性疾病或病症(例如腫瘤或癌症)之治療。根據以上態樣中之任一者的「個體(individual/subject)」較佳為哺乳動物，更佳地人類。

如本文中所使用之術語「癌症」包括實體癌及血液癌，諸如淋巴瘤、淋巴球性白血病、肺癌、非小細胞肺(NSCL)癌、細支氣管肺泡細胞肺癌、骨癌、胰臟癌(包括胰管腺癌(PDAC))、皮膚癌、頭或頸部之癌症、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、肛門區癌、胃部癌、胃癌、大腸直腸癌(其可為大腸癌及/或直腸癌)、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金氏病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、間皮瘤、肝細胞癌、膽癌、中樞神經系統(CNS)贅瘤、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、神經鞘瘤、室管膜瘤、神經管胚細胞瘤、脊膜瘤、鱗狀細胞癌、垂體腺瘤及尤文氏肉瘤(Ewings sarcoma)，包括以上癌症中之任一者之難治性型式、以上癌症中之任一者之經受檢查點-抑制劑型式或以上癌症中之一或多者之組合。在一個實施例中，此類「癌症」為選自以下之實體腫瘤：乳癌、肺癌、大腸癌、卵巢癌、黑色素瘤癌、膀胱癌、腎癌、腎癌、肝癌、頭頸癌、大腸直腸癌、胰臟癌、胃癌瘤、食道癌、間皮瘤或前列腺癌。在另一實施例中，此類「癌症」為血液腫瘤，諸如(例如)白血病(諸如AML、CLL)、淋巴瘤、骨髓瘤。在再另一實施例中，「癌症」為乳癌、肺癌、大腸癌、大腸直腸癌、胰臟癌、胃癌或前列腺癌。

在一些實施例中，癌症可能難以用免疫檢查點抑制劑作為單一療法治療。實例可包括人類黑色素瘤、腎細胞癌(RCC)、NSCLC、胃腸道癌、乳癌、胰臟癌、前列腺癌、肉瘤癌及大腸直腸癌，例如胰管腺癌。

一種治療增生性病症或癌症之方法可包含向患者投與i)多特異性抗體或分裂多特異性抗體，該多特異性抗體或分裂多特異性抗體具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點；ii)放射性標記化合物；iii) CD40促效劑；及iv)免疫檢查點抑制劑。

在一個實施例中，治療包含治療週期，該治療週期包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中該抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑同時或按任一次序依序投與。

在一些實施例中，第二步驟(免疫療法)可包含重複投與抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑中之一者或兩者。舉例而言，第二步驟可包含投與抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑(同時或按任一次序依序)，接著一或多次單獨投與免疫檢查點抑制劑。重複投與可以如熟習此項技術者可確定之適合的時間間隔進行。

治療可包含一個週期，或較佳實施例可包含多個週期，例如2、3、4、5或6個週期。

在一些實施例中，並非所有治療週期均相同。在一些實施例中：第一治療週期，其包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑同時或按任一次序依序投與；以及一或多個後續週期，其包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與該放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與免疫檢查點抑制劑。

舉例而言，可存在1、2、3、4或5個後續週期。放射性標記化合物經對細胞具細胞毒性之放射性同位素標記。合適放射性同位素包括如上文所論述之α及β發射體。

在一些實施例中，一旦已給予多特異性抗體或分裂多特異性抗體合適時間段以定位至目標細胞，則可向個體投與放射性標記化合物。舉例而言，在一些實施例中，在多特異性抗體或分裂多特異性抗體之後立即或在多特異性抗體及分裂多特異性抗體之後至少4小時、8小時、1天或2天可向個體投與放射性標記化合物。視情況，其可在多特異性抗體或分裂多特異性抗體之後不超過3天、5天或7天投與。在一個特定實施例中，在多特異性抗體或分裂多特異性抗體之後2至7天可向個體投與放射性標記化合物。

在一些實施例中，免疫療法可在放射性標記化合物之後投與。

例示性治療週期持續時間為14天，其中多特異性抗體或分裂多特異性抗體在週期第1天投與；放射性標記化合物在該週期之後續7天期間投與，例如在此實例中在最近的第8天，且在投與放射性標記化合物之後至少1天(例如在第9天)給與免疫療法(例如包含CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑同時或按任一次序依序投與，或包含不具有抗CD40之免疫檢查點抑制劑)。在一個實施例中，在第一治療週期，CD40促效劑僅投與一次。包含抗CD40及抗PD-L1抗體之組合療法中所涉及的治療時程例如揭示於WO2016/023875中。

在利用雙特異性抗體(亦即非本發明之「分裂」抗體)之預靶向放射免疫療法方法中，慣例為在投與抗體與投與放射性標記化合物之間投與清除劑或阻斷劑。

在本發明之一些態樣中，清除劑在多特異性抗體之後及放射性標記化合物之前投與。

在一些實施例中，清除劑可在用多特異性抗體治療之後約數小時或數天投與。在一些實施例中，可較佳地，清除劑在多特異性抗體之後至少2、4、6、8、10、12、16、18、22或24小時，或至少1、2、3、4、5、6或7天投與。在一些實施例中，可較佳地，清除劑在抗體之後不超過14天，例如不超過10、9、8、7、6、5、4、3或2天投與。

視情況，清除劑在多特異性抗體之後4與10天、4與7天、2與7天或2至4天之間的時間段內投與。

在一些實施例中，放射核種在清除劑之後約數分鐘、數小時或數天投與。在一些實施例中，可較佳地，放射核種在清除劑之後至少30分鐘，且視情況在投與清除劑的48小時、24小時、8小時或4小時內投與。在一些實施例中，放射核種可在清除劑投與之後當日投與。因此，舉例而言，若放射性標記化合物在週期之第8天投與，則清除劑可在第7天投與。

根據本發明之其他態樣，例如涉及分裂多特異性抗體之態樣，不存在向個體投與清除劑或阻斷劑之步驟。在某些態樣中，在投與分裂抗體與投與放射性標記化合物之間，不存在投與結合至第一或第二半抗體或由第一及第二半抗體形成之分裂抗體之任何藥劑的步驟。在某些態樣中，不存在於投與分裂抗體與放射性標記化合物之間投與任何藥劑之步驟，選自化學治療劑及放射增敏劑之視情況選用之化合物除外。在一些實施例中，在投與抗體與投與放射性標記化合物之間不投與藥劑。在一些實施例中，在投與抗體與投與放射性標記化合物之間可不向個體注射或輸注任何其他藥劑。

在一些實施例中，另外或可替代地，本文所描述之抗體可與放射增敏劑組合投與。放射增敏劑及抗體可同時或按任一次序依序投與。

多特異性抗體或分裂多特異性抗體、放射性標記化合物、抗CD40抗體及免疫檢查點抑制劑可藉由任何適合手段投與，包括非經腸、肺內及鼻內投與，且必要時用於局部治療，病灶內投與。非經腸輸注或注射包括肌肉內、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下投與。在一些實施例中，投與可藉由靜脈內或皮下注射進行。在一些實施例中，多特異性抗體或分裂多特異性抗體及/或抗CD40抗體及/或免疫檢查點抑制劑可藉由IV輸注投與。在一些實施例中，放射性標記化合物可藉由IV注射投與，且抗CD40抗體及/或免疫檢查點抑制劑可皮下(s.c.)投與。

在一些實施例中，可在如上文所描述之一或多個治療週期之前使用一或多個劑量測定法週期。劑量測定法週期可包含以下步驟：i)投與多特異性抗體或分裂多特異性抗體，及ii)隨後投與適用於成像之經γ發射體放射性標記的化合物(其中該放射性標記化合物結合至用於放射性標記化合物之功能結合位點)。該化合物可與後續治療週期中所使用之化合物相同，不同之處在於其經γ發射體而非α或β發射體標記。舉例而言，在一個實施例中，劑量測定術週期中所使用之放射性標記化合物可為 ²⁰³Pb-DOTAM，且治療週期中所使用之放射性標記化合物可為 ²¹²Pb-DOTAM。患者可經受成像以測定腫瘤對化合物之吸收且/或以估計化合物之吸收劑量。此資訊可用於估計後續治療步驟中之預期輻射暴露且用於將治療步驟中所使用之放射性標記化合物之劑量調節至安全位準。

N.醫藥調配物具有如本文所描述之抗體的醫藥調配物可藉由混合具有所需純度之此抗體與一或多種視情況存在之醫藥學上可接受之載劑，以凍乾調配物或水溶液之形式來製備(Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A.編(1980))。醫藥學上可接受之載劑在所採用之劑量及濃度下一般對接受者無毒性，且包括但不限於：緩衝液，諸如組胺酸、磷酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如十八烷基二甲基苯甲基氯化銨；氯化六羥季銨；苯紮氯銨；苄索氯銨；苯酚、丁醇或苯甲醇；對羥苯甲酸烷基酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(小於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣，及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合物，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬複合物(例如Zn-蛋白質複合物))；及/或非離子界面活性劑，諸如聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)及聚山梨醇酯(例如PS20、PS80、高級PS80，亦即具有＞98%油酸之PS80)。根據本發明使用之用於一些癌症免疫療法組分之醫藥組合物例如揭示於WO2003/040170(對於抗CD40抗體)及WO2010/77634(對於PD-L1抗體)中或可以商業醫藥產品形式獲得。

本文中之例示性醫藥學上可接受之載劑進一步包括間質藥物分散劑，諸如可溶中性活性玻尿酸酶醣蛋白(sHASEGP)，例如人類可溶PH-20玻尿酸酶醣蛋白，諸如rHuPH20 (HYLENEX®, Halozyme公司)。某些例示性sHASEGP及使用方法，包括rHuPH20，描述於美國專利公開案第2005/0260186號及第2006/0104968號中。在一個態樣中，sHASEGP與一或多種其他醣胺聚醣酶(諸如軟骨素酶)組合。

例示性凍乾抗體組合物描述於美國專利第6,267,958號中。水性抗體組合物包括美國專利第6,171,586號及WO 2006/044908中所描述之水性抗體組合物，後者組合物包括組胺酸-乙酸鹽緩衝液。

在抗體為分裂抗體之情況下，第一及第二半抗體可在單一醫藥組合物中或在單獨醫藥組合物中調配。

本文之調配物亦可含有一種以上為所治療之特定適應症所必需之活性成分，較佳為具有不會對彼此產生不利影響之互補活性的彼等活性成分。舉例而言，可能需要進一步提供如上文所論述之化學治療劑及/或放射增敏劑。此類活性成分宜以有效達成預期目的之量組合存在。

活性成分可包覆於微膠囊中，例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合所製備之微膠囊，例如分別為羥基甲基纖維素或明膠微膠囊及聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊；包覆於膠態藥物傳遞系統(例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊)中或巨乳液中。該等技術揭示於Remington's Pharmaceutical Sciences第16版, Osol, A.編(1980)中。

可製備持續釋放製劑。持續釋放製劑之適合實例包括含有抗體之固體疏水性聚合物之半滲透基質，該等基質呈成形物品形式，例如膜或微膠囊。

用於活體內投與之調配物通常為無菌的。無菌性可容易地藉由例如經由無菌過濾膜過濾來實現。

O.抗體變異體在某些實施例中，考慮本文所提供之抗體中之任一者的胺基酸序列變異體。舉例而言，可能需要改進抗體之結合親和力及/或其他生物特性。抗體之胺基酸序列變異體可藉由將適當修飾引入編碼該抗體之核苷酸序列中或藉由肽合成來製備。此類修飾包括例如在抗體之胺基酸序列內的殘基之缺失及/或插入及/或取代。可進行缺失、插入及取代之任何組合以獲得最終構築體，其限制條件為最終構築體具有所需特徵，例如抗原結合。

取代、插入及缺失變異體在某些實施例中，提供具有一或多個胺基酸取代之抗體變異體。所關注之取代型突變誘發位點包括HVR (CDR)及FR。保守取代顯示於表3中之「較佳取代」標題下。更多實質性變化提供於表3中標題「示例性取代」下，且如下文參考胺基酸側鏈類別進一步描述。可將胺基酸取代引入所關注之抗體中，且篩檢產物之例如所保持/經改善之抗原結合、經降低之免疫原性或經減弱或消除之ADCC或CDC的所需活性。表 3

原始殘基	例示性取代	較佳取代
Ala (A)	Val；Leu；Ile	Val
Arg (R)	Lys；Gln；Asn	Lys
Asn (N)	Gln；His；Asp、Lys；Arg	Gln
Asp (D)	Glu；Asn	Glu
Cys (C)	Ser；Ala	Ser
Gln (Q)	Asn；Glu	Asn
Glu (E)	Asp；Gln	Asp
Gly (G)	Ala	Ala
His (H)	Asn；Gln；Lys；Arg	Arg
Ile (I)	Leu；Val；Met；Ala；Phe；正白胺酸	Leu
Leu (L)	正白胺酸；Ile；Val；Met；Ala；Phe	Ile
Lys (K)	Arg；Gln；Asn	Arg
Met (M)	Leu；Phe；Ile	Leu
Phe (F)	Trp；Leu；Val；Ile；Ala；Tyr	Tyr
Pro (P)	Ala	Ala
Ser (S)	Thr	Thr
Thr (T)	Val；Ser	Ser
Trp (W)	Tyr；Phe	Tyr
Tyr (Y)	Trp；Phe；Thr；Ser	Phe
Val (V)	Ile；Leu；Met；Phe；Ala；正白胺酸	Leu

胺基酸可根據共有側鏈特性來進行分組： (1)疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile； (2)中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln； (3)酸性：Asp、Glu； (4)鹼性：His、Lys、Arg； (5)影響鏈取向之殘基：Gly、Pro； (6)芳族：Trp、Tyr、Phe。

非保守取代將引起此等類別中之一者之成員換成另一個類別。

一種類型之取代型變異體涉及取代親本抗體(例如人類化或人類抗體)之一或多個高變區殘基。一般而言，選用於進一步研究之所得變異體相對於親本抗體將在某些生物特性方面具有修飾(例如改善)(例如親和力提高、免疫原性降低)及/或將實質上保留親本抗體之某些生物特性。一種例示性取代型變異體為親和力成熟抗體，其可例如使用基於噬菌體呈現之親和力成熟技術(諸如本文所描述之技術)便利地產生。簡言之，使一或多個CDR殘基突變且在噬菌體上呈現變異抗體且針對特定生物活性(例如結合親和力)篩選。

改變(例如取代)可於CDR中進行以例如改善抗體親和力。可以在CDR「熱點」，亦即由在體細胞成熟過程期間經受高頻突變之密碼子編碼的殘基(參見例如Chowdhury, Methods Mol. Biol.207:179-196 (2008))及/或接觸抗原之殘基中進行此等更改，其中測試所得變異型VH或VL之結合親和力。藉由構築二級庫及自二級庫再選擇來達成親和力成熟已描述於例如Hoogenboom等人之 Methods in Molecular Biology178:1-37 (O'Brien等人編, Human Press, Totowa, NJ, (2001))。在親和力成熟之一些態樣中，藉由各種方法(例如易錯PCR、鏈改組或寡核苷酸導引之突變誘發)中之任一種將多樣性引入經選擇以用於成熟之可變基因中。隨後產生二級庫。隨後篩選該庫以鑑別具有所需親和力之任何抗體變異體。引入多樣性之另一方法涉及CDR導引途徑，其中將若干CDR殘基(例如一次4-6個殘基)隨機分組。可例如使用丙胺酸掃描突變誘發或模型化特異性地識別參與抗原結合之CDR殘基。常常尤其以CDR-H3及CDR-L3為目標。

在某些態樣中，取代、插入或缺失可發生在一或多個CDR內，只要該等更改不實質上降低抗體結合抗原之能力即可。舉例而言，不實質上降低結合親和力之保守性改變(例如，如本文所提供之保守性取代)可以在CDR中進行。此等改變可在例如CDR中接觸抗原之殘基外部進行。在上文所提供之某些變異VH及VL序列中，各CDR未經更改或含有不超過一個、兩個或三個胺基酸取代。

一種適用於可針對突變誘發進行靶向之抗體殘基或區域的方法稱為「丙胺酸掃描突變誘發」，如由Cunningham及Wells (1989) Science, 244:1081-1085所描述。在此方法中，殘基或目標殘基之群(例如，帶電殘基，諸如arg、asp、his、lys及glu)經鑑別出，且經中性或帶負電胺基酸(例如丙胺酸或聚丙胺酸)置換以判定抗體與抗原之相互作用是否受影響。可在對初始取代展現功能敏感性之胺基酸位置處引入其他取代。可替代地或另外，抗原-抗體複合物之晶體結構可用於識別抗體與抗原之間的接觸點。該等接觸殘基及相鄰殘基可作為用於取代之候選物進行靶向或消除。可篩選變異體以確定其是否含有所需特性。

胺基酸序列插入包括長度在一個殘基至含有一百個或超過一百個殘基之多肽範圍內的胺基末端及/或羧基末端融合，以及單一或多個胺基酸殘基之序列內插入。末端插入之實例包括具有N端甲硫胺醯基殘基之抗體。抗體分子之其他插入變異體包括與抗體之N端或C端至延長抗體血清半衰期之酶(例如針對ADEPT (抗體導引之酶前藥療法))或多肽的融合。

糖基化變異體在某些態樣中，本文所提供之抗體經更改以提高或降低抗體醣基化之程度。向抗體中添加糖基化位點或使抗體缺失糖基化位點可藉由改變胺基酸序列以便產生或移除一或多個糖基化位點來便利地實現。

在抗體包含Fc區之情況下，可更改與其連接之寡醣。由哺乳動物細胞產生之原生抗體通常包含分支鏈雙觸角寡醣，其通常藉由N鍵連接至Fc區之CH2域的Asn297。參見例如Wright等人. TIBTECH15:26-32 (1997)。寡醣可包括各種碳水化合物，例如甘露糖、N-乙醯基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖及唾液酸，以及連接至雙觸角寡醣結構之「主幹」中之GlcNAc的岩藻糖。在一些態樣中，可對本發明抗體中之寡醣進行修飾以便產生具有某些經改善特性之抗體變異體。

在一個態樣中，提供具有非岩藻糖基化寡醣，亦即缺乏(直接地或間接地)連接至Fc區之岩藻糖之寡醣結構的抗體變異體。特定言之，此等非岩藻糖基化寡醣(亦稱為「去岩藻糖基化」寡醣)為缺少連接至雙觸角寡醣結構之主幹中之第一GlcNAc的岩藻糖殘基之N連接寡醣。在一個態樣中，提供相較於原生或親本抗體而言具有經增加比例之Fc區中非岩藻糖基化寡醣之抗體變異體。舉例而言，非岩藻糖基化寡醣之比例可為至少約20%、至少約40%、至少約60%、至少約80%或甚至約100% (亦即不存在岩藻糖基化寡醣)。非岩藻糖基化寡醣之百分比為如例如WO 2006/082515中所描述，如藉由MALDI-TOF質譜分析所量測，相對於附接於Asn 297上之所有寡醣(例如複合、雜交及高甘露糖結構)的總和，不含岩藻醣殘基之寡醣的(平均)量。Asn297係指位於Fc區中約位置297 (Fc區殘基之EU編號)處的天冬醯胺殘基；然而，歸因於抗體之較小序列變化，Asn297亦可位於位置297上游或下游約±3個胺基酸處，亦即位置294與300之間。Fc區中之非岩藻糖基化寡醣之比例增加的此類抗體可具有FcγRIIIa受體結合改善及/或效應子功能改善，尤其ADCC功能改善。參見例如，US 2003/0157108；US 2004/0093621。

能夠產生具有經減少之岩藻糖基化之抗體之細胞株之實例包括缺乏蛋白質岩藻糖基化之Lec13 CHO細胞(Ripka等人 Arch. Biochem. Biophys.249:533-545 (1986)；US 2003/0157108；以及WO 2004/056312，尤其在實例11處)；及基因剔除細胞株，諸如α-1,6-岩藻糖基轉移酶基因、 FUT8、基因剔除CHO細胞(參見例如Yamane-Ohnuki等人 Biotech. Bioeng.87:614-622 (2004)；Kanda, Y.等人, Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006)；以及WO 2003/085107)；或具有經減弱或消除之GDP-岩藻糖合成或轉運蛋白活性之細胞(參見例如US2004259150、US2005031613、US2004132140、US2004110282)。

在另一態樣中，提供具有對分寡糖之抗體變異體，例如其中連接至抗體之Fc區之雙觸角寡醣經GlcNAc對分。此等抗體變異體可具有降低之岩藻糖基化及/或改善之ADCC功能，如上文所描述。該等抗體變異體之實例描述於例如以下中：Umana等人, Nat Biotechnol 17, 176-180 (1999)；Ferrara等人, Biotechn Bioeng 93, 851-861 (2006)；WO 99/54342；WO 2004/065540；WO 2003/011878。

亦提供寡醣中之至少一個半乳糖殘基與Fc區附接之抗體變異體。此類抗體變異體可具有經改善之CDC功能。該等抗體變異體描述於例如WO 1997/30087；WO 1998/58964；及WO 1999/22764中。

可較佳地，抗體經修飾以降低醣基化程度。在一些實施例中，抗體可為無醣基化或去醣基化的。抗體可包括例如N297D/A之N297處之取代。

Fc 區變異體在某些實施例中，可將一或多個胺基酸修飾引入本文所提供之抗體的Fc區中，從而產生Fc區變異體。Fc區變異體可包含在一或多個胺基酸位置處包含胺基酸修飾(例如取代)之人類Fc區序列(例如，人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc區)。

在某些實施例中，本發明考慮具有經減弱之效應子功能，例如經減弱或消除之CDC、ADCC及/或FcγR結合之抗體變異體。在某些態樣中，本發明涵蓋擁有一些但並非所有效應子功能之抗體變異體，該等效應子功能使其成為抗體在活體內之半衰期至關重要且某些效應子功能(諸如補體依賴性細胞毒性(CDC)及抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(ADCC))不必要或有害之應用的所需候選。

可進行活體外及/或活體內細胞毒性分析以確認CDC及/或ADCC活性之降低/消耗。舉例而言，可進行Fc受體(FcR)結合分析以確保抗體不具有FcγR結合能力(因此可能不具有ADCC活性)，但保留FcRn結合能力。用於介導ADCC之原代細胞NK細胞僅表現FcγRIII，而單核球表現FcγRI、FcγRII及FcγRIII。FcR在造血細胞上之表現概述於Ravetch及Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)之第464頁之表3中。評估相關分子之ADCC活性之活體外分析的非限制性實例描述於以下中：美國專利第5,500,362號(參見例如Hellstrom, I.等人. Proc. Nat ' l Acad. Sci. USA83:7059-7063 (1986))及Hellstrom, I等人., Proc. Nat ' l Acad. Sci. USA82:1499-1502 (1985)；5,821,337 (參見Bruggemann, M.等人., J. Exp. Med.166:1351-1361 (1987))。或者，可採用非放射性分析方法(參見例如用於流動式細胞量測術之ACTI™非放射性細胞毒性分析(CellTechnology, Inc. Mountain View, CA)；及CytoTox 96 ^®非放射性細胞毒性分析(Promega, Madison, WI))。適用於此類分析之效應細胞包括周邊血液單核細胞(PBMC)及自然殺手(NK)細胞。或者或另外，可例如在動物模型中，諸如Clynes等人 Proc. Nat ' l Acad. Sci. USA95:652-656 (1998)中所揭示之動物模型中活體內評估所關注分子之ADCC活性。亦可進行C1q結合分析以證實抗體不能結合C1q且因此缺乏CDC活性。參見例如WO 2006/029879及WO 2005/100402中之C1q及C3c結合ELISA。為了評估補體活化，可進行CDC分析(參見例如Gazzano-Santoro等人, J. Immunol. Methods202:163 (1996)；Cragg, M.S.等人, Blood101:1045-1052 (2003)；及Cragg, M.S.及M.J. Glennie, Blood103:2738-2743 (2004))。亦可使用此項技術中已知之方法執行FcRn結合及活體內清除率/半衰期測定(參見例如Petkova, S.B.等人, Int ' l. Immunol.18(12):1759-1769 (2006)；WO 2013/120929 Al)。

效應子功能減小之抗體包括具有Fc區殘基238、265、269、270、297、327及329中之一或多者之取代(美國專利第6,737,056號) (例如P329G)的抗體。此類Fc突變體包括具有胺基酸位置265、269、270、297及327中之兩者或兩者以上之取代的Fc突變體，包括殘基265及297取代為丙胺酸的所謂「DANA」Fc突變體(美國專利第7,332,581號)。

在某些態樣中，抗體變異體包含具有降低FcγR結合之一或多個胺基酸取代的Fc區，該等取代例如在Fc區之位置234及235(殘基之EU編號)處之取代。在一個態樣中，取代為L234A及L235A (LALA)。在某些態樣中，抗體變異體進一步在來源於人類IgG1 Fc區之Fc區中包含D265A及/或P329G。在一個態樣中，取代為來源於人類IgG1 Fc區之Fc區中之L234A、L235A及P329G (LALA-PG)。(參見例如WO 2012/130831)。在另一態樣中，取代為來源於人類IgG1 Fc區之Fc區中的L234A、L235A及D265A (LALA-DA)。替代性取代包括L234F及/或L235E以及視情況選用之D265A及/或P329G及/或P331S。

在其他實施例中，或許有可能使用諸如IgG4或IgG2之具有經減弱之效應子功能之IgG亞型。

描述具有提高或降低之與FcR之結合的某些抗體變異體。(參見例如美國專利第6,737,056號；WO 2004/056312及Shields等人. , J. Biol. Chem.9(2): 6591-6604 (2001)。)

在一些實施例中，在Fc區中進行改變(亦即，提高或減少，較佳減少)C1q結合及/或補體依賴性細胞毒性(CDC)的改變，例如如以下中所述：美國專利第6,194,551號，WO 99/51642及Idusogie等人. J. Immunol.164: 4178-4184 (2000)。

在某些態樣中，抗體變異體包含具有一或多個減少FcRn結合之胺基酸取代，例如在Fc區之位置253及/或310及/或435處之取代的Fc區(殘基進行EU編號)。在某些態樣中，抗體變異體包含具有位置253、310及435處之胺基酸取代的Fc區。在一個態樣中，取代為來源於人類IgG1 Fc區之Fc區中的I253A、H310A及H435A。參見例如Grevys, A.等人, J. Immunol. 194 (2015) 5497-5508。

在某些態樣中，抗體變異體包含Fc區，該Fc區具有降低FcRn結合之一或多個胺基酸取代，例如在Fc區之位置310及/或433及/或436 (殘基之EU編號)處之取代。在某些態樣中，抗體變異體包含在位置310、433及436處具有胺基酸取代之Fc區。在一個態樣中，取代為來源於人類IgG1 Fc區之Fc區中之H310A、H433A及Y436A。(參見例如WO 2014/177460 Al)舉例而言，在一些實施例中，可使用正常FcRn結合。

關於Fc區變異體之其他實例，亦參見Duncan及Winter, Nature322:738-40 (1988)；美國專利第5,648,260號；美國專利第5,624,821號；及WO 94/29351。

如本文所報告之全長抗體之重鏈之C端可為以胺基酸殘基PGK終止之完整C端。重鏈之C端可為縮短C端，其中已移除一或兩個C端胺基酸殘基。重鏈之C端可為以PG終止之經縮短之C端。在如本文所報告之全部態樣中之一個態樣中，如本文所規定，包含包括C端CH3域之重鏈之抗體包含C端甘胺酸殘基(G446，胺基酸位置之EU索引編號)。如本文所使用之術語「全長抗體」或「全長重鏈」仍明確地涵蓋C端甘胺酸殘基。

改善裝配/穩定性之變異體已知用於製備多特異性抗體之技術可用於製備本文所述之任一種多特異性抗體或分裂多特異性抗體。此等技術包括(但不限於)具有不同特異性之兩個免疫球蛋白重鏈-輕鏈對之重組共同表現(參見Milstein及Cuello, Nature 305: 537 (1983))及「杵-臼」工程改造(參見例如美國專利第5,731,168號及Atwell等人, J. Mol. Biol. 270:26 (1997))。其他方法包括工程改造用於製備抗體Fc-雜二聚體分子之靜電轉向效應(參見例如WO 2009/089004)；交聯兩個或更多個抗體或片段(參見例如美國專利第4,676,980號及Brennan等人, Science, 229: 81 (1985))；使用白胺酸拉鏈(參見例如Kostelny等人, J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992)及WO 2011/034605)；以及使用常用於規避輕鏈錯配問題之輕鏈技術(參見例如WO 98/50431)。

在上文所述之多特異性或分裂多特異性抗體中之任一者中，重鏈雜二聚體之正確裝配可藉由各種修飾輔助。

Fc區之CH3域可藉由「杵-臼」技術進行更改，該技術以若干實例詳細描述於例如WO 96/027011、Ridgway, J.B.,等人, Protein Eng 9 (1996) 617-621以及Merchant, A.M.,等人, Nat Biotechnol 16 (1998) 677-681中。在此方法中，改變兩個CH3域之相互作用表面以增加含有此兩個CH3域之兩條重鏈的雜二聚作用。(兩條重鏈之)兩個CH3域中之各者可為「杵」，而另一者為「臼」。舉例來說，根據EU索引編號，一個包含所謂的「杵突變」(例如T366W及視情況S354C或Y349C之一，較佳S354C)，且另一個包含所謂的「臼突變」(例如T366S、L368A及Y407V及視情況Y349C或S354C，較佳Y349C)(參見例如Carter, P.等人, Immunotechnol. 2 (1996) 73)。

因此，在一些實施例中，抗體或半抗體之特徵進一步在於：Fc域之一個子單元之CH3域及Fc域之另一子單元之CH3域各自在包含抗體CH3域之間的原始介面之介面處接合(meet)；其中該介面經更改以促進抗體形成，其中更改之特徵在於： a)一個Fc子單元之CH3域經更改以使得在接合其他Fc子單元之CH3域原始介面之一個子單元之CH3域原始介面內，胺基酸殘基經具有較大側鏈體積之胺基酸殘基置換，由此在可位於另一Fc子單元之CH3域介面內之空腔中的一個Fc子單元之CH3域介面內生成隆凸及 b)另一Fc子單元之CH3域經更改以使得在接合抗體內第一CH3域原始介面之第二CH3域原始介面內，胺基酸殘基經具有較小側鏈體積之胺基酸殘基置換，由此在第二CH3域介面內生成空腔，第一CH3域介面內之隆凸可定位於該空腔內。

該具有較大側鏈體積之胺基酸殘基可視情況選自由以下組成之群：精胺酸(R)、苯丙胺酸(F)、酪胺酸(Y)、色胺酸(W)。該具有較小側鏈體積之胺基酸殘基可視情況選自由以下組成之群：丙胺酸(A)、絲胺酸(S)、蘇胺酸(T)、纈胺酸(V)。

或者或另外，二硫橋鍵之引入可用於穩定化雜二聚體(Merchant, A.M.等人, Nature Biotech 16 (1998) 677-681；Atwell, S.等人, J. Mol. Biol. 270 (1997) 26-35)及增加產率。因此，視情況，在一些實施例中，兩個CH3域係藉由引入半胱胺酸(C)作為各CH3域之對應位置中之胺基酸以使得可在兩個CH3域之間形成雙硫橋鍵來進行進一步更改。實例包括在以下位置之間引入二硫鍵： i)重鏈可變域位置44至輕鏈可變域位置100， ii)重鏈可變域位置105至輕鏈可變域位置43，或 iii)重鏈可變域位置101至輕鏈可變域位置100 (始終根據Kabat EU索引編號)。

或者或另外，抗體可包含其中所包含之Fab分子(包括交叉Fab分子)中之胺基酸取代(Bence-Jones型副產物)，該等胺基酸取代特別有效地減少輕鏈與非匹配重鏈之錯配，該等Bence-Jones型副產物可存在於基於Fab之雙特異性/多特異性抗原結合分子生產中，其中其結合臂中之一個(或在包含超過兩個抗原結合Fab分子之分子之情況下多個)中具有VH/VL互換(亦參見PCT公開案第WO 2015/150447號，特定言之，其中之實例，該案以全文引用之方式併入本文中)。所需多特異性抗體與不希望之副產物、尤其在結合臂之一中存在的Bence Jones型副產物相比的比率可藉由在Fab分子之CH1及CL域中的特定胺基酸位置處引入具有相反電荷之帶電胺基酸(有時在本文中稱作「電荷修飾」)來改良。

因此，在一些實施例中，包含Fab分子之抗體包含至少一個Fab，該Fab具有包含如本文中所描述之電荷修飾的重鏈恆定域CH1域以及包含如本文中所描述之電荷修飾的輕鏈恆定CL域。

電荷修飾可在包含於抗體中之習知Fab分子中或在包含於抗體中之互換型Fab分子中(但一般不在兩者中)進行。在特定實施例中，電荷修飾係在抗體中所包含之一或多個習知Fab分子中進行。

在一些實施例中，在包含有包含電荷修飾之輕鏈恆定域CL及包含電荷修飾之重鏈恆定域CH1之Fab或交叉Fab中，輕鏈恆定域CL中之電荷修飾係在位置124處且視情況在位置123處(根據Kabat編號)，且重鏈恆定域CH1中之電荷修飾係在位置147及/或213處(根據Kabat EU索引編號)。在一些實施例中，在輕鏈恆定域CL中，位置124處之胺基酸獨立地經離胺酸(K)、精胺酸(R)或組胺酸(H)取代(根據Kabat編號) (在一個較佳實施例中，獨立地經離胺酸(K)取代)，且在重鏈恆定域CH1中，位置147處之胺基酸及/或位置213處之胺基酸獨立地經麩胺酸(E)或天冬胺酸(D)取代(根據Kabat EU索引編號)。

抗體衍生物在某些態樣中，可對本文所提供之任何抗體進行進一步修飾以含有此項技術中已知且可易於獲得之額外非蛋白質部分。適用於抗體之衍生作用之部分包括(但不限於)水溶性聚合物。水可溶聚合物之非限制性實例包括(但不限於)聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、聚葡萄糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯啶酮、聚-1,3-二氧雜環戊烷、聚-1,3,6-三㗁烷、乙烯/順丁烯二酸酐共聚物、聚胺基酸(均聚物或無規共聚物)及聚葡萄糖或聚(n-乙烯吡咯啶酮)聚乙二醇、聚丙二醇均聚物、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙烯多元醇(例如，甘油)、聚乙烯醇及其混合物。聚乙二醇丙醛因其於水中之穩定性而可在製造中具有優勢。聚合物可具有任何分子量，且可為分支鏈或非分支鏈的。附接於抗體上之聚合物的數目可變化，且若附接超過一個聚合物，則其可為相同或不同分子。一般而言，用於衍生作用之聚合物之數目及/或類型可基於包括(但不限於)待改善抗體之特殊特性或功能，抗體衍生物是否將用於指定病症下之療法等考慮因素來確定。

P.分析可藉由此項技術中已知之各種分析，針對其物理/化學特性及/或生物活性鑑別、篩選或表徵本文所提供之抗體。

在一個態樣中，(例如)藉由諸如ELISA、西方墨點法等之已知方法來測試本發明之抗體的抗原結合活性。

抗體親和力在某些實施例中，本文所提供之抗體針對目標抗原之解離常數(K _D)為≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)或如本文在其他方面所陳述。

在某些實施例中，用於放射性標記化合物之抗原結合位點針對放射性標記化合物之解離常數(K _D)為≤ 1 μM、≤ 100 nM、≤ 10 nM、≤ 1 nM、≤ 0.1 nM、≤ 0.01 nM或≤ 0.001 nM (例如10 ^-8M或更小，例如10 ^-8M至10 ^-13M，例如10 ^-9M至10 ^-13M)。在一些實施例中，K _D為1 nM或更小、500 pM或更小、200 pM或更小、100 pM或更小、50 pM或更小、20 pM或更小、10 pM或更小、5 pM或更小或1 pM或更小或如本文在其他方面所陳述。舉例而言，功能結合位點可以約1 pM-1 nM，例如約1-10 pM、1-100 pM、5-50 pM、100-500 pM或500 pM-1 nM之K _D結合放射性標記化合物/金屬螯合物。

在一個實施例中，K _D係藉由放射性標記抗原結合分析(RIA)來量測。在一個實施例中，用相關抗體之Fab型式及其抗原進行RIA。舉例而言，Fab對抗原之溶液結合親和力係藉由以下來量測：在存在未標記抗原之滴定系列之情況下用最低濃度之( ¹²⁵I)標記抗原平衡Fab，隨後用經抗Fab抗體塗佈之盤捕獲結合抗原(參見例如Chen等人, J. Mol. Biol.293:865-881(1999))。為確定分析條件，將MICROTITER®多孔盤(Thermo Scientific)用50 mM碳酸鈉(pH 9.6)中之5 µg/ml捕捉抗Fab抗體(Cappel Labs)塗佈隔夜，且隨後在室溫(約23℃)下用PBS中之2% (w/v)牛血清白蛋白阻斷二至五小時。在無吸附劑培養盤(Nunc #269620)中，將100 pM或26 pM [ ¹²⁵I]抗原與相關Fab之連續稀釋液混合(例如與Presta等人, Cancer Res.57:4593-4599 (1997)中對抗VEGF抗體Fab-12之評估一致)。隨後將相關Fab培育隔夜；然而，培育可持續較長時間段(例如，約65小時)以確保達至平衡。此後，在室溫下將混合物轉移至捕捉培養盤中以用於培育(例如持續一小時)。接著移除溶液且用含於PBS中之0.1%聚山梨醇酯20 (TWEEN-20 ^®)洗滌盤八次。當盤已經乾燥時，添加150微升/孔之閃爍體(MICROSCINT-20 ^TM；Packard)，且在TOPCOUNT ^TMγ計數器(Packard)上對盤計數十分鐘。選擇提供小於或等於20%最大結合之各Fab的濃度以用於競爭性結合分析法。

根據另一實施例，使用BIACORE®表面電漿子共振分析法量測K _D。舉例而言，使用BIACORE ^®-2000或BIACORE ^®-3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ)之分析係在25℃下用固定抗原CM5晶片以約10反應單位(RU)進行。在一個實施例中，根據供應商之說明書，用 N-乙基- N'-(3-二甲胺基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)及 N-羥基丁二醯亞胺(NHS)來活化羧基甲基化聚葡萄糖生物感測器晶片(CM5, BIACORE, Inc.)。用10 mM乙酸鈉(pH 4.8)將抗原稀釋至5 μg/ml (約0.2 μM)，隨後以5微升/分鐘之流動速率注射以獲得大約10個反應單位(RU)之偶合蛋白質。在注入抗原後，注入1 M乙醇胺以阻斷未反應之基團。關於動力學量測，在25℃下以大約25 µl/min之流動速率注射Fab於含0.05 %聚山梨醇酯20 (TWEEN-20 ^TM)界面活性劑之PBS (PBST)中之兩倍連續稀釋液(0.78 nM至500 nM)。使用簡單的一比一朗格繆爾結合模型(one-to-one Langmuir binding model) (BIACORE ^®評估軟體3.2版)、藉由同時擬合締合及解離感測圖譜來計算締合速率(k _on)及解離速率(k _off)。平衡解離常數(K _D)按比率k _off/k _on來計算。參見例如Chen等人， J. Mol. Biol.293:865-881 (1999)。若根據上文表面電漿子共振分析，締合速率(on-rate)超過10 ⁶M ^-1s ^-1，則可藉由使用螢光淬滅技術測定締合速率，該螢光淬火技術在存在如於諸如具有攪拌式光析槽之停流裝備型分光光度計(Aviv Instruments)或8000-系列SLM-AMINCO ^TM分光光度計(ThermoSpectronic))之光譜儀中所量測之漸增濃度之抗原情況下，在25℃下量測含20 nM抗抗原抗體(Fab形式)之PBS (pH 7.2)之螢光發射強度(激發= 295 nm；發射= 340 nm，16 nm帶通)的增加或降低。

在另一實施例中，K _D使用SET(溶液平衡滴定)分析來量測。根據此分析，測試抗體通常以恆定濃度施用且與測試抗原之連續稀釋液混合。在進行培育以建立平衡之後，在經抗原塗佈表面上捕獲游離抗體之部分且一般使用電化學發光用經標記/加標籤之抗物種抗體對其進行偵測(例如如Haenel等人Analytical Biochemistry 339 (2005) 182-184中所描述)。

舉例而言，在一個實施例中，將384孔鏈黴抗生物素蛋白盤(Nunc，Microcoat #11974998001)與25微升/孔抗原-生物素-異構體混合物在濃度為20 ng/ml之PBS-緩衝液中在4℃下培育隔夜。對於用游離抗原進行之抗體樣品平衡：在以2500 nM、500 nM或100 nM抗原之濃度起始之1:3、1:2或1:1.7稀釋步驟中用相關抗原滴定0.01 nM-1 nM抗體。將樣品在經密封REMP儲存聚丙烯微量盤(Brooks)中在4℃下培育隔夜。在隔夜培育之後，將鏈黴抗生物素蛋白盤用每孔90 μl PBST洗滌3次。將15 µl來自平衡盤的各樣品轉移至分析盤且在室溫下培育15分鐘，接著用PBST緩衝液進行3次90 µl洗滌步驟。藉由添加25 µl山羊抗人類IgG抗體-POD接合物(Jackson，109-036-088，在OSEP中1:4000)，接著用PBST緩衝液進行6次90 µl洗滌步驟來進行偵測。將25 μl TMB受質(Roche Diagnostics GmbH，目錄號：11835033001)添加至各孔中。在Safire2讀取器(Tecan)上在370/492 nm處進行量測。

在另一實施例中，K _D係使用KinExA (動力學排除)分析來量測。根據此分析，通常將抗原滴定至恆定濃度之抗體結合位點中，使樣品平衡，且隨後快速抽吸通過流槽，在該流槽中在經抗原塗佈珠粒上捕獲游離抗體結合位點，同時將抗原飽和抗體複合物洗掉。隨後，用標記抗物種抗體，例如螢光標記抗物種抗體偵測珠粒捕獲抗體(Bee等人PloS One, 2012; 7(4): e36261)。舉例而言，在一個實施例中，在室溫(RT)下使用PBS (pH 7.4)作為運行緩衝液執行KinExA實驗。在補充有1 mg/ml BSA之運行緩衝液(「樣品緩衝液」)中製備樣品。使用0.25 ml/min之流動速率。藉由以100 pM起始之兩倍連續稀釋(濃度範圍0.049 pM-100 pM)用抗原滴定恆定量之具有5 pM結合位點濃度之抗體。不具有抗原之抗體之一種樣品充當100%信號(亦即無抑制)。將抗原-抗體複合物在室溫下培育至少24小時以允許達到平衡。隨後，以5 ml之體積將經平衡混合物抽吸通過KinExA系統中之抗原偶合珠粒管柱，准許在不擾亂溶液平衡狀態之情況下由珠粒捕獲未結合抗體。使用含250 ng/ml Dylight 650©結合抗人類Fc片段特異性二級抗體的樣品緩衝液偵測所捕獲抗體。對於全部平衡實驗，各樣品一式兩份量測。使用KinExA軟體(4.0.11版)內所含之單位點均質結合模型，使用「標準分析」法，由資料之非線性回歸分析獲得KD。

生物活性在一些實施例中，組合療法使得個體中的腫瘤生長速率與單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法相比慢。在一些實施例中，組合療法使得個體存活之可能性與用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療相比提高。在一些實施例中，與用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療相比，組合療法使得個體中之經活化腫瘤內CD8 T細胞之出現率提高(例如，如藉由上調41BB表現所量測)及/或個體之腫瘤、脾及引流淋巴結(DLN)中經活化漿細胞樣DC (pDC)及經典DC (cDC)之出現率提高(例如，如藉由上調CD86表現所量測)，及/或個體之總免疫細胞中T細胞之出現率提高。在一些實施例中，個體可為患者，例如人類患者。在其他實施例中，評定活性之個體可為模型動物，諸如小鼠模型。

在一些實施例中，與用單獨的預靶向放射免疫療法及/或單獨的免疫療法治療相比，組合療法在個體中引起增強的免疫記憶反應或減少的腫瘤復發可能性。增強之免疫記憶反應可藉由在小鼠模型中對腫瘤再攻擊之較大抗性評估。

小鼠模型之實例可為接種有表現抗體/分裂抗體之目標抗原之腫瘤細胞株的小鼠。實例為經工程改造以表現抗體/分裂抗體之目標抗原(例如huCEA)的Panc02腫瘤細胞株或MC38腫瘤細胞株。腫瘤細胞株亦可經工程改造以表現諸如螢光素酶之報導子。接種可以為皮下或原位(例如胰腺內)。經接種之小鼠亦可為目標抗原亦即huCEA之轉殖基因。作為免疫療法模型之針對人類CEA轉基因的小鼠之實例論述於Clarke等人Cancer Research 58, 1469-1477, 1998年4月1日。

III.序列

SEQ ID NO	描述	序列
1	重鏈CDR1，＜Pb-Dotam＞	GFSLSTYSMS
2	重鏈CDR2 ＜Pb-Dotam＞	FIGSRGDTYYASWAKG
3	重鏈CDR3 ＜Pb-Dotam＞	ERDPYGGGAYPPHL
4	輕鏈CDR1，＜Pb-Dotam＞	QSSHSVYSDNDLA
5	輕鏈CDR2 ＜Pb-Dotam＞	QASKLAS
6	輕鏈CDR3 ＜Pb-Dotam＞	LGGYDDESDTYG
7	重鏈可變域＜Pb-Dotam＞ PRIT-0213	(Q)VTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLST YSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLT MTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVS S
8	輕鏈可變域＜Pb-Dotam＞ PRIT-0213	(A)IQMTQSPSSLSASVGDRVTI TCQSSHSVYS DNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQ PEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
9	重鏈可變域＜Pb-Dotam＞ PRIT-0214	(Q)VQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGFSLST YSMSWIRQPPGKGLEWIGFIGSRGDTYYASWAKGRVTISRDTSKNQVSLK LSSVTAADTAVYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSS
10	輕鏈可變域＜Pb-Dotam＞ PRIT-0214	(A)IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYS DNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQ PEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
11	重鏈CDR1 ＜CEA＞ T84.66	GFNIKDTYMH
12	重鏈CDR2 ＜CEA＞ T84.66	RIDPANGNSKYVPKFQG
13	重鏈CDR3 ＜CEA＞ T84.66	FGYYVSDYAMAY
14	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ T84.66	RAGESVDIFGVGFLH
15	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ T84.66	RASNRAT
16	輕鏈CDR3 ＜CEA＞ T84.66	QQTNEDPYT
17	重鏈可變域＜CEA＞ T84.66	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSS
18	輕鏈可變域＜CEA＞ T84.66	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRAGESVDIFGVGFLHWYQQKPGQAPRLLIYRASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQTNEDPYTFGQGTKLEIK
19	重鏈CDR1 ＜CEA＞ CH1A1A	GYTFTEFGMN
20	重鏈CDR2 ＜CEA＞ CH1A1A	WINTKTGEATYVEEFKG
21	重鏈CDR3 ＜CEA＞ CH1A1A	WDFAYYVEAMDY
22	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ CH1A1A	KASAAVGTYVA
23	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ CH1A1A	SASYRKR
24	輕鏈CDR3 ＜CEA＞ CH1A1A	HQYYTYPLFT
25	重鏈可變域＜CEA＞ CH1A1A	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSS
26	輕鏈可變域＜CEA＞ CH1A1A	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASAAVGTYVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRKRGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQYYTYPLFTFGQGTKLEIK
27	不具有連接子及＜DOTAM-VH＞之P1AD8749之重鏈＜CEA＞ à作為SeqID32之樣品質體，缺乏連接子及＜DOTAM＞	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGW INTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWD FAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV KDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQ TYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPK PKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQY NSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREP QVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
28	P1AD8749重鏈臼＜CEA＞ CH1A1A	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
29	不具有連接子及＜DOTAM-VL＞之P1AD8592之重鏈＜CEA＞ à作為SeqID33之樣品質體，缺乏連接子及＜DOTAM＞	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGW INTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWD FAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV KDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQ TYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPK PKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQY NSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREP QVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP VLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
30	P1AD8592重鏈杵＜CEA＞CH1A1A	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
31	連接子	GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS
32	P1AD8749重鏈杵＜CEA＞CH1A1A＜Dotam-VH＞	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS VTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSS
33	P1AD8592重鏈臼＜CEA＞CH1A1A＜Dotam-VL＞	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
34	P1AD8749及P1AD8592 輕鏈＜CEA＞ CH1A1A	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASAAVGTYVAWYQQKPGKAPKLLIYS ASYRKRGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQYYTYPLFTFG QGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWK VDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQ GLSSPVTKSFNRGEC
35	重鏈CDR1，＜C825＞	DYGVH
36	重鏈CDR2，＜C825＞	VIWSGGGTAYNTALIS
37	重鏈CDR3，＜C825＞	RGSYPYNYFDA
38	輕鏈CDR1，＜C825＞	GSSTGAVTASNYAN
39	輕鏈CDR2，＜C825＞	GHNNRPP
40	輕鏈CDR3，＜C825＞	ALWYSDHWV
41	重鏈可變域＜C825＞	HVKLQESGPGLVQPSQSLSLTCTVSGFSLTDYGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWSGGGTAYNTALISRLNIYRDNSKNQVFLEMNSLQAEDTAMYYCARRGSYPYNYFDAWGQGTTVTVSS
42	輕鏈可變域，＜C825＞	QAVVIQESALTTPPGETVTLTCGSSTGAVTASNYANWVQEKPDHLFTGLIGGHNNRPPGVPARFSGSLIGDKAALTIAGTQTEDEAIYFCALWYSDHWVIGGGTKLTVL
43	重鏈CDR1 ＜CEA＞ A5B7	DYYMN
44	重鏈CDR2 ＜CEA＞ A5B7	FIGNKANAYTTEYSASVKG
45	重鏈CDR3 ＜CEA＞ A5B7	DRGLRFYFDY
46	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ A5B7	RASSSVTYIH
47	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ A5B7	ATSNLAS
48	輕鏈CDR3 ＜CEA＞ A5B7	QHWSSKPPT
49	重鏈可變域＜CEA＞ A5B7	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSS
50	輕鏈可變域＜CEA＞ A5B7	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVTYIHWYQQKPGQAPRSWIYATSNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHWSSKPPTFGQGTKLEIK
51	P1AE4956重鏈臼＜CEA＞ A5B7	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
52	P1AE4956重鏈杵＜CEA＞ A5B7 ＜Dotam-VH＞	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP GGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS VTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSS
53	不具有連接子及DOTAM-VH＞之P1AE4956之重鏈＜CEA＞à 作為SeqID 52之樣品質體，缺乏連接子及＜DOTAM＞	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP
54	P1AE4956輕鏈＜CEA＞ A5B7	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVTYIHWYQQKPGQAPRSWIYATSNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHWSSKPPTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
55	P1AE4957重鏈杵＜CEA＞ A5B7	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
56	P1AE4957重鏈臼＜CEA＞ A5B7 ＜Dotam-VL＞	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP GGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
57	不具有連接子及DOTAM-VL＞之P1AE4957之重鏈＜CEA＞à作為SeqID 56之樣品質體，缺乏連接子及＜DOTAM＞	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYYMNWVRQAPGKGLEWLGFIGNKANAYTTEYSASVKGRFTISRDKSKNTLYLQMNSLRAEDTATYYCTRDRGLRFYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP
58	P1AE4957輕鏈＜CEA＞ A5B7	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVTYIHWYQQKPGQAPRSWIYATSNLASGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHWSSKPPTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
59	重鏈CDR1 ＜CEA＞ 28A9	GGTFSYYAIS
60	重鏈CDR2 ＜CEA＞ 28A9	GILPAFGAANYAQKFQG
61	重鏈CDR3 ＜CEA＞ 28A9	LPPLPGAGLDY
62	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ 28A9	RASQSISSWLA
63	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ 28A9	DASSLES
64	輕鏈CDR3 ＜CEA＞ 28A9	QQNTQYPMT
65	重鏈可變域＜CEA＞ 28A9	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSS
66	輕鏈可變域＜CEA＞ 28A9	DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITC RASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIY DASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYC QQNTQYPMTFGQGTKVEIK
67	重鏈CDR1 ＜GPRC5D＞	GFTFSKYAMA
68	重鏈CDR2 ＜GPRC5D＞	SISTGGVNTYYADSVKG
69	重鏈CDR3 ＜GPRC5D＞	HTGDYFDY
70	輕鏈CDR1 ＜GPRC5D＞	RASQSVSISGINLMN
71	輕鏈CDR2 ＜GPRC5D＞	HASILAS
72	輕鏈CDR3 ＜GPRC5D＞	QQTRESPLT
73	重鏈可變域＜GPRC5D＞	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSKYAMAWVRQAPGKGLEWVASISTGGVNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATHTGDYFDYWGQGTMVTVSS
74	輕鏈可變域＜GPRC5D＞	EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSISGINLMNWYQQKPGQQPKLLIYHASILASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQTRESPLTFGQGTRLEIK
75	重鏈CDR1 ＜FAP＞ 4B9	GFTFSSYAMS
76	重鏈CDR2 ＜FAP＞ 4B9	AIIGSGASTYYADSVKG
77	重鏈CDR3 ＜FAP＞ 4B9	GWFGGFNY
78	輕鏈CDR1 ＜FAP＞ 4B9	RASQSVTSSYLA
79	輕鏈CDR2 ＜FAP＞ 4B9	VGSRRAT
80	輕鏈CDR3 ＜FAP＞ 4B9	QQGIMLPPT
81	重鏈可變域＜FAP＞ 4B9	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIIGSGASTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSS
82	輕鏈可變域＜FAP＞ 4B9	EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPGQAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQGIMLPPTFGQGTKVEIK
83	P1AF0709 HC杵＜CEA＞ T84.66 (D1AE4688)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
84	P1AF0709 HC臼＜CEA＞ T84.66 Dotam-VL (D1AA4920)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
85	P1AF0709 HC臼＜CEA＞ T84.66不具有連接子及DOTAM	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
86	PIAF0298 HC臼＜CEA＞ T84.66 (D1AE4687)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
87	PIAF0298 HC杵＜CEA＞ T84.66 Dotam-VH-AST (D1AE3668)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSVTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSSAST
88	PIAF0298 HC杵＜CEA＞ T84.66不具有連接子及DOTAM	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDTYMHWVRQAPGQGLEWMGRIDPANGNSKYVPKFQGRVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAPFGYYVSDYAMAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
89	P1AF0709及 PIAF0298輕鏈(D1AA4120)	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRAGESVDIFGVGFLHWYQQKPGQAPRLLIYRASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQTNEDPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
90	P1AF0710 HC杵＜CEA＞ 28A9 (D1AE4690)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
91	P1AF0710 HC臼＜CEA＞ 28A9 Dotam-VL (D1AC3172)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
92	P1AF0710 HC臼＜CEA＞ 28A9不具有連接子或DOTAM	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
93	P1AF0711 HC臼＜CEA＞ 28A9 (D1AE4689)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
94	P1AF0711 HC杵＜CEA＞ 28A9 Dotam-VH-AST (D1AE3671)	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSVTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSSAST
95	P1AF0711 HC杵＜CEA＞ 28A9不具有連接子及DOTAM	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSYYAISWVRQAPGQGLEWMGGILPAFGAANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLPPLPGAGLDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
96	P1AF0710及P1AF0711輕鏈(D1AA2299)	DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQNTQYPMTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
97	P1AF0712 HC杵＜CEA＞ CH1A1A (D1AC4023)	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
98	P1AF0712 HC臼＜CEA＞ CH1A1A DOTA-VL (D1AE4684)	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQAVVIQESALTTPPGETVTLTCGSSTGAVTASNYANWVQEKPDHLFTGLIGGHNNRPPGVPARFSGSLIGDKAALTIAGTQTEDEAIYFCALWYSDHWVIGGGTKLTVL
99	P1AF0712 HC臼＜CEA＞不具有連接子或DOTA	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
100	P1AF0713 HC臼＜CEA＞ CH1A1A (D1AC4022)	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
101	P1AF0713 HC杵＜CEA＞ CH1A1A DOTA-VH-AST (D1AE3670)	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSHVKLQESGPGLVQPSQSLSLTCTVSGFSLTDYGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWSGGGTAYNTALISRLNIYRDNSKNQVFLEMNSLQAEDTAMYYCARRGSYPYNYFDAWGQGTTVTVSSAST
102	P1AF0713 HC杵＜CEA＞ CH1A1A不具有連接子及DOTA	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
103	P1AF0712及P1AF0713輕鏈(D1AA3384)	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASAAVGTYVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRKRGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQYYTYPLFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
104	P1AF8284及P1AF8285 HC杵＜GPRC5D＞ (D1AF6517)	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSKYAMAWVRQAPGKGLEWVASISTGGVNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATHTGDYFDYWGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
105	P1AF8284 HC臼Dotam-VL (D1AG3592)	DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
106	P1AF8285 H臼Dotam-VHA (D1AG3591)	DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSVTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSSA
107	P1AF8284及P1AF8285輕鏈 (D1AF6469)	EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSISGINLMNWYQQKPGQQPKLLIYHASILASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQTRESPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
108	P1AF8286及P1AF8287 HC杵＜FAP＞ 4B9 (D1AF6515)	EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIIGSGASTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
109	P1AF8286 HC臼Dotam-VL (D1AG3592)	DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSSIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIK
110	P1AF8287 HC臼Dotam-VHA (D1AG3591)	DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSVTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSSA
111	P1AF8286及P1AF8287輕鏈(D1AB9974)	EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPGQAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQGIMLPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
112	P1AF7782及P1AF7784 HC杵＜CEA＞ CH1A1A (D1AD3419)	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTEFGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTKTGEATYVEEFKGRVTFTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARWDFAYYVEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
113	P1AF7782 HC臼Dotam-VL (D1AG2237)	SIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSHSVYSDNDLAWYQQKPGKAPKLLIYQASKLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLGGYDDESDTYGFGGGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGSGGDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
114	P1AF7784 HC臼Dotam-VH (D1AG2236)	GVTLKESGPVLVKPTETLTLTCTVSGFSLSTYSMSWIRQPPGKALEWLGFIGSRGDTYYASWAKGRLTISKDTSKSQVVLTMTNMDPVDTATYYCARERDPYGGGAYPPHLWGRGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGSGGDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
115	P1AF7782及P1AF7784輕鏈(D1AD3421)	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASAAVGTYVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRKRGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQYYTYPLFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
116	重鏈CDR1 ＜CEA＞ MFE23	DSYMH
117	重鏈CDR2 ＜CEA＞ MFE23	WIDPENGDTEYAPKFQG
118	重鏈CDR2 ＜CEA＞ MFE23-H26	WIDPENGGTNYAQKFQG
119	重鏈CDR3 ＜CEA＞ MFE23	GTPTGPYYFDY
120	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ MFE23	SASSSVSYMH
121	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ MFE23-L24，L25	RASSSVSYMH
122	輕鏈CDR1 ＜CEA＞ MFE23-L26	RASQSISSYM
123	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ MFE23	STSNLAS
124	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ MFE23-L26	YTSNLAS
125	輕鏈CDR2 ＜CEA＞ MFE23-L29	STSSLQS
126	輕鏈CDR3 ＜CEA＞ MFE23	QQRSSYPLT
127	重鏈可變域＜CEA＞ MFE23	QVKLQQSGAELVRSGTSVKLSCTASGFNIKDSYMHWLRQGPEQGLEWIGWIDPENGDTEYAPKFQGKATFTTDTSSNTAYLQLSSLTSEDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTTVTVSS
128	輕鏈可變域＜CEA＞ MFE23	ENVLTQSPAIMSASPGEKVTITCSASSSVSYMHWFQQKPGTSPKLWIYSTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQRSSYPLTFGAGTKLELK
129	MFE-H24	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFNIKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPKFQGRVTMTTDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
130	MFE-H25	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPKFQGRVTMTTDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
131	MFE-H26	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFNIKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGGTNYAQKFQGRVTMTTDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
132	MFE-H27	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFNIKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPKFQGRVTMTTDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
133	MFE-H28	QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFNIKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
134	MFE-H29	QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGFNIKDSYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPKFQGRVTITTDESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCNEGTPTGPYYFDYWGQGTLVTVSS
135	MFE-L24	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVSYMHWYQQKPGKAPKLLIYSTSNLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
136	MFE-L25	EIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVSYMHWYQQKPGKAPKLLIYSTSNLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
137	MFE-L26	EIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYMHWYQQKPGKAPKLLIYSTSNLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
138	MFE-L27	EIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVPYMHWYQQKPGKAPKLLIYSTSNLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSVQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
139	MFE-L28	EIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVPYMHWLQQKPGKAPKLLIYSTSNLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSVQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
140	MFE-L29	EIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVPYMHWLQQKPGKAPKLLIYSTSSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSVQPEDFATYYCQQRSSYPLTFGGGTKLEIK
141	CEA之A2域	PKPFITSNNSNPVEDEDAVALTCEPEIQNTTYLWWVNNQSLPVSPRLQLSNDNRTLTLLSVTRNDVGP YECGIQNKLSVDHSDPVILN
142	CEA之A1域	PKPSISSNNSKPVEDKDAVAFTCEPETQDATYLWWVNNQSLPVSPRLQLSNGNRTLTLFNVTRNDTAS YKCETQNPVSARRSDSVILN

IV.實例以下為本發明之方法及組合物的實例。應瞭解，考慮到上文提供之一般描述，可實施各種其他實施例。

縮寫詞彙表 ADA 抗藥物抗體 AST 丙胺酸、絲胺酸、蘇胺酸 BLI 生物發光成像 BsAb 雙特異性抗體 BW 體重 CA 清除劑 cDC 經典樹突狀細胞 CEA 癌胚抗原 CIT 癌症免疫療法 DC 樹突狀細胞 DLN 引流淋巴結 DOTAM 1,4,7,10-肆(胺甲醯基甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷 ID 注射劑量 ELISA 酶聯免疫吸附分析法 FACS 螢光激活細胞分選 FAP 纖維母細胞活化蛋白 GPRC5D G蛋白偶合受體家族C第5組成員D huCEA 人類癌胚抗原 ID 注射劑量 IFN 干擾素 IL 介白素 IP 腹膜內 IV 靜脈內 Luc 螢光素酶 MCH 主要組織相容複合物 MFI 平均螢光強度 MW 分子量 NBF 中性緩衝福馬林 PBS 磷酸鹽緩衝生理食鹽水 PD 藥效動力學 pDC 漿細胞樣樹突狀細胞 p.i. 注射後 PMA 佛波醇12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸鹽 PK 藥物動力學 PRIT 預靶向放射免疫療法 RIT 放射免疫療法 RCF 相對離心力(重力) ROI 關注區 RT 室溫 SC 皮下 SCID 嚴重聯合免疫缺陷 SD 標準差 SEM 平均值之標準誤差 SOPF 不含特異性及機會性病原體 SPLIT 分離v域連接技術 TA 目標抗原 TGI 腫瘤生長抑制 TR 腫瘤消退 Treg 調節T細胞

實例1：產生CEA-分裂-DOTAM VH/VL抗體使用具有用於目標抗原之結合位點及用於放射性標記化合物之結合位點之雙特異性抗體之PRIT (預靶向放射免疫療法)方法通常在投與抗體與放射性配位體之間使用清除劑(CA)，以確保有效靶向及高腫瘤與正常組織吸收劑量比(參見圖3)。在一種該方法之實例中，允許所注射BsAb足夠時間，一般4-10天滲透至腫瘤中，其後使用Pb-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA中和循環BsAb。CA在不滲透至腫瘤中之情況下阻斷 ²¹²Pb-DOTAM結合於未經靶向之BsAb，此舉將阻斷預靶向位點。此預靶向方案允許隨後投與之放射性標記螯合物 ²¹²Pb-DOTAM之有效腫瘤積聚。

然而，在涉及清除劑之方法中，CA之使用將另一步驟引入方法中，該方法低效。此外，謹慎選擇CA投與之時機及劑量可為重要的，其為複雜因素。

為解決清除劑使用相關問題，本發明人提出分裂DOTAM VL域及VH域以使得在獨立抗體上找到其之策略。

下文進一步論述例示性分裂DOTAM VH/VL抗體之生成。

生成用於抗體重鏈或輕鏈之重組表現之質體藉由短暫轉染人類胚腎細胞(HEK 293)表現所需蛋白質。為表現所需基因/蛋白質(例如全長抗體重鏈、全長抗體輕鏈或含有其他域(例如在C端含有免疫球蛋白重鏈或輕鏈可變域)之全長抗體重鏈，使用包含以下功能元件之轉錄單元： -包括內含子A之人類巨細胞病毒(P-CMV)之即刻早期強化子及啟動子， -人類重鏈免疫球蛋白5'未轉譯區(5'UTR)， -鼠類免疫球蛋白重鏈信號序列(SS)， -待表現之基因/蛋白質，以及 -牛生長激素聚腺苷酸化序列(BGH pA)。

除包括待表現之所需基因之表現單元/卡匣之外，基礎/標準哺乳動物表現質體亦含有 -允許在大腸桿菌中複製此質體之來自載體pUC18之複製起點，及 -在大腸桿菌中賦予安比西林抗性之β-內醯胺酶基因。

a) 用於抗體重鏈之表現質體藉由將編碼各自由G4Sx4連接子分離之各別序列元件(V-重鏈或V-輕鏈)的DNA片段與人類IgG分子之CH3域之C端融合，來裝配抗體重鏈編碼基因，該等基因包括包含完整及功能性抗體重鏈之C端融合基因、接著為其他抗體V-重鏈或V-輕鏈域(VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3-連接子-VH或VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3-連接子-VL)。使用杵-臼技術表現在兩個CH3域之C端分別負載一個VH及一個VL域的重組抗體分子。

除具有C端VH或VL域表現卡匣之抗體重鏈片段之外，用於在HEK293細胞中短暫表現具有C端VH或VL域之抗體重鏈之表現質體亦包含：來自載體pUC18之複製起點，其允許在大腸桿菌中複製此質體；及β-內醯胺酶基因，其賦予大腸桿菌安比西林抗性。具有C端VH域或VL域融合基因之抗體重鏈片段之轉錄單元包含以下功能元件： -包括內含子A之人類巨細胞病毒(P-CMV)之即刻早期強化子及啟動子， -人類重鏈免疫球蛋白5'未轉譯區(5'UTR)， -鼠類免疫球蛋白重鏈信號序列， -抗體重鏈(VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3-連接子-VH或VH-CH1-鉸鏈-CH2-CH3-連接子-VL)編碼核酸，以及 -牛生長激素聚腺苷酸化序列(BGH pA)。

b) 用於抗體輕鏈之表現質體

藉由融合編碼各別序列元素之DNA片段來裝配包含完整且功能抗體輕鏈之抗體輕鏈編碼基因。

除抗體輕鏈片段之外，用於短暫表現抗體輕鏈之表現質體亦包含：來自載體pUC18之複製起點，其允許在大腸桿菌中複製此質體；及β-內醯胺酶基因，其賦予大腸桿菌安比西林(ampicillin)抗性。抗體輕鏈片段之轉錄單元包含以下功能元件： -包括內含子A之人類巨細胞病毒(P-CMV)之即刻早期強化子及啟動子， -人類重鏈免疫球蛋白5'未轉譯區(5'UTR)， -鼠類免疫球蛋白重鏈信號序列， -抗體輕鏈(VL-CL)編碼核酸，以及 -牛生長激素聚腺苷酸化序列(BGH pA)。

抗體分子之短暫表現在於F17培養基(Invitrogen公司)中培養之經短暫轉染之HEK293細胞(人類胚腎細胞株293源性)中生成抗體分子。對於轉染係使用「293-Free」轉染劑(Novagen)。如上文所描述之各別抗體重鏈及輕鏈分子係由個別表現質體表現。如製造商說明中所規定執行轉染。在轉染之後三至七(3-7)天，收穫含有免疫球蛋白之細胞培養上清液。將上清液儲存於低溫(例如-80℃)下直至純化為止。

關於人類免疫球蛋白在例如HEK293細胞中之重組表現之總體資訊提供於Meissner, P.等人, Biotechnol. Bioeng. 75 (2001) 197-203中。

藉由MabSelect Sure (親和力層析法)且接著為Superdex 200 (粒徑排阻層析法)來純化PRIT半抗體(Hemibody) (分裂抗體)。

例示性抗體之序列概述如下。

抗體名稱	第一重鏈	第二重鏈	輕鏈
P1AD8592	SEQ ID NO: 30	SEQ ID NO: 33	SEQ ID NO: 34
P1AD8749	SEQ ID NO: 28	SEQ ID NO: 32	SEQ ID NO: 34
P1AE4956	SEQ ID NO: 51	SEQ ID NO: 52	SEQ ID NO: 54
P1AE4957	SEQ ID NO 55	SEQ ID NO 56	SEQ ID NO: 58

對於具有DOTAM-VL-P1AD8592之PRIT分裂抗體，基於分析性SEC及CE-SDS產生5 mg濃度為1.372 mg/mL且純度為＞ 96%之該PRIT分裂抗體。對於具有DOTAM-VH-P1AD8749之PRIT分裂抗體，基於分析性SEC及CE-SDS產生14 mg濃度為2.03 mg/mL且純度為＞91%之該PRIT分裂抗體。

亦生成抗體P1AE4956及P1AE4957。對於具有DOTAM-VL-P1AE4957之PRIT分裂抗體，基於分析性SEC及CE-SDS產生19 mg濃度為2.6 mg/mL且純度＞ 81.6%之該PRIT分裂抗體。對於具有DOTAM-VH-P1AE4956之PRIT分裂抗體，基於分析性SEC及CE-SDS產生6.9 mg濃度為1.5 mg/mL且純度＞90%之該PRIT分裂抗體。使用ESI-MS以確認PRIT半抗體之一致性。

實例2：分裂抗體功能之FACS分析

為評估分裂抗體或半抗體之功能，在37℃下使用阿庫酶(accutase)自培養容器剝離MKN-45細胞10分鐘。隨後，將細胞在PBS中洗滌兩次，且接種至96孔v形底盤中以達到4×10 ⁶個細胞/孔之最終密度。

將半抗體P1AD8749及P1AD8592以及人類ISO對照1:1混合，以如圖5中所指示之濃度添加至細胞中。隨後，將細胞在冰上培育1 h且在PBS中洗滌兩次。使細胞集結粒再懸浮且添加40 µl/孔之偵測試劑，亦即含＜人類IgG(H+L)＞FITC (10 µg/ml)或Pb_Dotam_FITC 1:100 =＞ (10 µg/ml)之PBS / 5% FCS。在於冰上培育60 min之後，將細胞在PBS中洗滌兩次且再懸浮於200 µl PBS / 5% FCS中以使用FACS canto量測FITC螢光。

為評估半抗體與CEA在MKN-45細胞上之結合能力，使用抗體，使用人類IgG特異性二級抗體對該等半抗體進行偵測(圖5)。如所期望，未在此等細胞上觀測到大量人類ISO對照結合。當調節至相同IgG濃度時，兩個半抗體以及兩者組合顯示與MKN-45細胞之劑量依賴性結合，其中如所期望在極高濃度下具有明顯鉤狀效應(hook effect)。此實驗證實，CEA結合在半抗體中起作用。

為評估半抗體與DOTAM之結合能力，在存在人類ISO對照或其各別分裂抗體搭配物之情況下以1:1比將該等半抗體結合至細胞。在其結合至MKN-45細胞之後，洗滌細胞以移除未經結合抗體。隨後，添加Pb-DOTAM-FITC (螢光標記之Pb-DOTAM)以偵測DOTAM結合勝任細胞結合之抗體(圖6)。如所期望，當分裂抗體搭配物中之一者與人類ISO對照組合時未在此等細胞上觀測到大量FITC。僅呈1:1比之兩個半抗體之組合顯示劑量依賴性FITC信號。此實驗顯示，當兩個半抗體在一個細胞上合於一起時，DOTAM結合位點可以發揮作用。

實例3：活體內研究實例3a：材料及方法-概要全部實驗方案均由地方當局(Comité Régional d'Ethique de l'Expérimentation Animale du Limousin [CREEAL], Laboratoire Départemental d'Analyses et de Recherches de la Haute-Vienne)審查及批准。根據倫理準則，將雌性嚴重合併性免疫缺失病(SCID)小鼠(Charles River)維持在具有每日光/暗(12 h/12 h)週期之不含特異性及機會性病原體(SOPF)條件下。在到達之後前5天期間不執行操縱以使動物習慣新環境。每日控制動物之臨床症狀且偵測不良事件。

藉由皮下(SC)注射在與Corning® Matrigel®基底膜基質(生長因子減少；目錄號354230) 1:1混合之細胞培養基中之表現CEA之腫瘤細胞來建立實體異種移植物。腫瘤體積係經由每週3次手動測徑規量測來估計，根據下式來計算：體積 = 0.5× 長度 × 寬度 ² 。視腫瘤生長速率而定需要時進行額外腫瘤量測。

若小鼠由於腫瘤負荷、注射副作用或其他原因而顯示難以消除之痛苦或疼痛徵象，則在預定終點之前對其進行安樂死。疼痛、痛苦或不適之指示包括但不限於急性體重(BW)損失、毛皮不整潔(scruffy fur)、下痢、駝背姿勢及嗜睡。每週3次量測經處理動物之BW，其中視健康狀況而定需要時進行額外量測。在放射性注射之後當天開始向全部小鼠提供濕食，持續7天或直至全部個體自任何急性BW損失中充分恢復為止。對BW損失超過其初始BW 20%或腫瘤體積達到3000 mm ³之小鼠立即施以安樂死。出於倫理原因考慮施以安樂死之其他因素為腫瘤狀態(例如壞死區域、血液/液體滲出、自殘徵象)及動物一般外觀(例如毛皮、姿勢、動作)。

為將放射性尿液/糞便之再攝取減至最少，在投與 ²¹²Pb-DOTAM之後將全部功效研究小鼠置於具有格子地板之籠中4小時，之後轉移至具有標準墊料之新籠。隨後，在注射(p.i.)後24小時更換全部籠。在放射性注射之後24小時內不對出於生物分佈目的而處死之小鼠執行此程序。

如由方案所指定，在進行安樂死時，對經麻醉小鼠使用眼眶後採血自靜脈竇收集血液，之後經由頸椎脫位術終止，接著進行額外組織收穫以進行放射性量測及/或組織學分析。記載意外或異常狀況。將經收集以用於福馬林固定之組織立即置於10%中性緩衝福馬林(4℃)中，且隨後在5天之後轉移至磷酸鹽緩衝鹽水(PBS；4℃)。將出於生物分佈之目的而收集之器官及組織稱重且使用2470 WIZARD ²自動γ計數器(PerkinElmer)量測放射性，且隨後計算每公克組織之注射劑量百分比(ID/g %)，包括針對衰變及背景進行之校正。

使用GraphPad Prism 7 (GraphPad Software公司)及JMP 12 (SAS Institute公司)執行統計分析。基於平均腫瘤體積使用下式執行腫瘤生長抑制(TGI)曲線分析：

其中 d指示研究日且 0指示基線值。媒劑選為參考組。腫瘤消退(TR)係根據以下計算：

其中正值指示腫瘤消退，且低於-1之值指示超出雙倍基線值之生長。

測試化合物用於所描述研究中之化合物分別針對雙特異性抗體、清除劑及放射性標記螯合物呈現於下表中。

CEA-DOTAM (RO7198427，PRIT-0213)為靶向CEA之T84.66抗原決定基之完全人類化BsAb (亦參見WO2019/201959)。PRIT-0213由以下構成： i)如下文所示之第一重鏈； ii)如下文所示之第二重鏈；及 iii)如下文所示之兩個抗體輕鏈。

	描述	序列
PRIT-00213之輕鏈	1 eivltqspat lslspgerat lscragesvd ifgvgflhwy qqkpgqaprl 51 liyrasnrat giparfsgsg sgtdftltis slepedfavy ycqqtnedpy 101 tfgqgtklei krtvaapsvf ifppsdeqlk sgtasvvcll nnfypreakv 151 qwkvdnalqs gnsqesvteq dskdstysls stltlskady ekhkvyacev 201 thqglsspvt ksfnrgec
重鏈1 PRIT-0213	1 qvqlvqsgae vkkpgssvkv sckasgfnik dtymhwvrqa pgqglewmgr 51 idpangnsky vpkfqgrvti tadtststay melsslrsed tavyycapfg 101 yyvsdyamay wgqgtlvtvs sastkgpsvf plapssksts ggtaalgclv 151 kdyfpepvtv swnsgaltsg vhtfpavlqs sglyslssvv tvpssslgtq 201 tyicnvnhkp sntkvdkkve pkscdkthtc ppcpapeaag gpsvflfppk 251 pkdtlmisrt pevtcvvvdv shedpevkfn wyvdgvevhn aktkpreeqy 301 nstyrvvsvl tvlhqdwlng keykckvsnk algapiekti skakgqprep 351 qvytlppcrd eltknqvslw clvkgfypsd iavewesngq pennykttpp 401 vldsdgsffl yskltvdksr wqqgnvfscs vmhealhnhy tqkslslspg 451 ggggsggggs ggggsggggs vtlkesgpvl vkptetltlt ctvsgfslst 501 ysmswirqpp gkalewlgfi gsrgdtyyas wakgrltisk dtsksqvvlt 551 mtnmdpvdta tyycarerdp ygggaypphl wgrgtlvtvs s
PRIT-0213之重鏈2	1 qvqlvqsgae vkkpgssvkv sckasgfnik dtymhwvrqa pgqglewmgr 51 idpangnsky vpkfqgrvti tadtststay melsslrsed tavyycapfg 101 yyvsdyamay wgqgtlvtvs sastkgpsvf plapssksts ggtaalgclv 151 kdyfpepvtv swnsgaltsg vhtfpavlqs sglyslssvv tvpssslgtq 201 tyicnvnhkp sntkvdkkve pkscdkthtc ppcpapeaag gpsvflfppk 251 pkdtlmisrt pevtcvvvdv shedpevkfn wyvdgvevhn aktkpreeqy 301 nstyrvvsvl tvlhqdwlng keykckvsnk algapiekti skakgqprep 351 qvctlppsrd eltknqvsls cavkgfypsd iavewesngq pennykttpp 401 vldsdgsffl vskltvdksr wqqgnvfscs vmhealhnhy tqkslslspg 451 ggggsggggs ggggsggggs iqmtqspssl sasvgdrvti tcqsshsvys 501 dndlawyqqk pgkapklliy qasklasgvp srfsgsgsgt dftltisslq 551 pedfatyycl ggyddesdty gfgggtkvei k

DIG-DOTAM (RO7204012)為未結合CEA之BsAb，其用作陰性對照物。

P1AD8749、P1AD8592、P1AE4956及P1AE4957為靶向CEA之CH1A1A或A5B7抗原決定基之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體。其序列描述如上。將全部抗體構築體儲存於-80℃下直至注射之日為止，在注射之日將其解凍且在標準媒劑緩衝液(20 mM組胺酸、140 mM NaCl；pH 6.0)或0.9% NaCl中稀釋至其最終各別濃度以用於靜脈內(IV)或腹膜內(IP)投與。

將Pb-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (RO7201869)儲存於-20℃下直至注射之日為止，在注射之日將其解凍且在PBS中稀釋以用於IV或IP投與。

用於放射性標記之DOTAM螯合物係由Macrocyclics提供且在藉由Orano Med (Razès, France)執行放射性標記之前維持在-20℃下。 ²¹²Pb-DOTAM (RO7205834)係藉由用DOTAM溶離由釷生成劑生成，且隨後在標記之後用Ca淬滅。將 ²¹²Pb-DOTAM溶液用0.9% NaCl稀釋以獲得IV注射所需之 ²¹²Pb活性濃度。

媒劑對照組中之小鼠接受多次代替BsAb、CA及 ²¹²Pb-DOTAM之媒劑緩衝液注射。 雙特異性抗體

化合物	目標	方案
CEA-DOTAM (RO7198427，PRIT-0213)	T84.66	144、158、160
DIG-DOTAM (RO7204012)	地高辛	160
CEA-分裂-DOTAM-VH P1AD8749	CH1A1A	144、158
CEA-分裂-DOTAM-VH-AST P1AF0171	CH1A1A	175、185、189
CEA-分裂-DOTAM-VL P1AD8592	CH1A1A	144、158、175、185、189
CEA-分裂-DOTAM-VH P1AE4956	A5B7	158
CEA-分裂-DOTAM-VL P1AE4957	A5B7	158
CEA-分裂-DOTAM-VH-AST P1AF0298	T84.66	185、189
CEA-分裂-DOTAM-VL P1AF0709	T84.66	185、189

清除劑

化合物	方案
Ca-DOTAM-聚葡萄糖-500 (RO7201869)	144、158、160

放射性標記螯合物

化合物	淬滅	方案
²¹²Pb-DOTAM (RO7205834)	Ca	144、158、160、175、185、189
²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM	Ca	160

腫瘤模型用於小鼠接種之所用腫瘤細胞株及注射量描述於下表中。BxPC3為天然表現CEA之人類原代胰臟腺癌細胞株。在富含10%胎牛血清(GE Healthcare Hyclone SH30088.03)之RPMI 1640培養基、GlutaMAX™補充劑、HEPES (Gibco，參考編號72400-021)中培養細胞。在研究第0天，在各SCID小鼠中藉由皮下注射將在與Corning® Matrigel®基底膜基質(生長因子減少；目錄號354230) 1:1混合之RPMI培養基中之細胞注射至右側腹中來確立實體異種移植物。 腫瘤細胞株

細胞株	細胞 / 小鼠	注射體積	方案	供應商
BxPC3	5×10 ⁶	100 µL	144、158、160、175、185、189	ECACC*

*歐洲認證細胞培養物保藏中心(European Collection of Authenticated Cell Cultures) (Salisbury, UK)

實例3b：方案144 方案144之目標為在使用CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb進行2步驟PRIT之後提供攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中之預靶向 ²¹²Pb-DOTAM之PK及活體內分佈資料。

藉由分開或一起注射CEA-分裂-DOTAM-VH及CEA-分裂-DOTAM-VL (P1AD8749及P1AD8592)，7天後接著注射 ²¹²Pb-DOTAM來進行二步驟PRIT。在放射性注射之後6小時處死小鼠，且收穫血液及器官以進行放射性量測。將2步驟流程與3步驟PRIT作比較，該3步驟PRIT係使用標準CEA-DOTAM雙特異性抗體，7天後接著使用Ca-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA且在CA之後24小時使用 ²¹²Pb-DOTAM。

藉由在抗體注射之後1小時至7天重複血液取樣來收集CEA-分裂-DOTAM-VH/VL清除之PK資料，且隨後藉由ELISA進行分析。

研究概述示於圖7中。圖7a顯示2步驟PRIT方案之概述，該方案包括在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中CEA-分裂-DOTAM-VH/VL PK之血液取樣。圖7b顯示3步驟PRIT方案之概述，該方案係在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中執行(h =小時，d =天)。

研究設計方案144之時程及設計示於下表中。方案 144 之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2018-05-02	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	2018-05-02	SC注射BxPC3細胞
14	2018-05-16	IV注射CEA-DOTAM BsAb (D組)
15	2018-05-17	IV注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb (Aa、Ab、Ba、Bb、Ca、Cb組)
15	2018-05-17	眼眶後採血(1及4 h p.i.；分別為Aa、Ba、Ca及Ab、Bb、Cb組)
16	2018-05-18	眼眶後採血(24 h p.i.；Aa、Ba、Ca組)
18	2018-05-20	眼眶後採血(72 h p.i.；Ab、Bb、Cb組)
21	2018-05-23	IV注射CA (D組)
21	2018-05-23	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
22	2018-05-24	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM (Aa、Ba、Ca、D組)
22	2018-05-24	眼眶後採血(168 h p.i.)且安樂死(Ab、Bb、Cb組)
22	2018-05-24	安樂死且收集組織，包括眼眶後採血(6 h p.i.) + γ計數(Aa、Ba、Ca、D組)

方案 144 中之研究組

組	P1AD8749 (VH) CH1A1A(µg)	P1AD8592 (VL) CH1A1A(µg)	CEA-DOTAM BsAb(µg)	PK(h p.i.)	CA(µg)	²¹²Pb (µCi)	BD(h p.i.)	n(小鼠)
Aa	100	0	0	1，24，168	0	10	6	4
Ab	100	0	0	4，72，168	0	0	—	4
Ba	0	100	0	1，24，168	0	10	6	4
Bb	0	100	0	4，72，168	0	0	—	4
Ca	100	100	0	1，24，168	0	10	6	4
Cb	100	100	0	4，72，168	0	0	—	4
D	0	0	100	—	25	10	6	4

在研究第0天在各SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第26代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來建立實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後十四天，以116 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第22天注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第21天平均腫瘤體積為140 mm ³。

在CEA-分裂-DOTAM-VH/VL注射之後1 h (右眼)、24 h (左眼)及168 h (右眼，終止時)經由麻醉眼眶後採血來收集來自Aa、Ba及Ca組中之小鼠之血液。類似地，在CEA-分裂-DOTAM-VH/VL注射之後4 h (右眼)、72 h (左眼)及168 h (右眼，終止時)自Ab、Bb及Cb組中之小鼠採集樣品。

在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時，將Aa、Ba、Ca及D組中之小鼠處死且進行屍體剖檢，且收穫以下器官及組織以量測放射性含量：血液、皮膚、膀胱、胃、小腸、大腸、脾、胰臟、腎、肝、肺、心臟、骰骨、肌肉、腦、尾部、耳及腫瘤。

結果注射之後6小時全部所收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率展現於圖8中。僅用CEA-分裂-DOTAM-VH或CEA-分裂-DOTAM-VL預靶向不引起腫瘤中之放射性積聚。與標準3步驟PRIT方案之87 ± 15% ID/g相比，組合之兩個互補抗體引起65 ± 12% ID/g之2步驟PRIT後之腫瘤吸收。利用杜凱氏多重比較檢定(Tukey's multiple comparisons test)之雙因子變異數分析(ANOVA)顯示，兩次PRIT處理之間的腫瘤吸收差異顯著，與膀胱中之差異一致(對於2步驟及3步驟PRIT，分別為1 ± 2% ID/g及38 ± 17% ID/g)；使用此檢定之組織積聚在統計學上不存在顯著之其他差異(p=0.05)。

如藉由酶聯免疫吸附分析(ELISA)所分析之IV注射之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL構築體的清除率示於圖9中。

不良事件及毒性不存在與此研究相關之不良事件或毒性。

結論研究結果證實使用互補CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之CA非依賴性2步驟預靶向之概念驗證。使用2步驟PRIT及標準3步驟PRIT達成 ²¹²Pb-DOTAM之較高及特異性腫瘤吸收，且在使用互補CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之正常組織中具有極少放射性積聚。

實例3c：方案158 方案158之目標為評估由用於清除劑非依賴性2步驟CEA-PRIT之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之雙互補位(CH1A1A及A5B7)對預靶向的小鼠中 ²¹²Pb-DOTAM與皮下BxPC3腫瘤的締合。將腫瘤吸收與標準3步驟CEA-PRIT之腫瘤吸收作比較。

使攜有皮下BxPC3腫瘤之小鼠注射 ●CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體，7天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM (2步驟PRIT)，或 ●CEA-DOTAM BsAb，7天後接著為CA，且最後在24小時後為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM (3步驟PRIT)。

在放射性注射之後6小時評估 ²¹²Pb-DOTAM之活體內分佈。研究概述示於圖10中。

研究設計方案158之時程及設計示於下表中。方案 158 之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2018-11-26	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	2018-11-26	SC注射BxPC3細胞
15	2018-12-11	IV注射CEA-DOTAM BsAb (C組)
16	2018-12-12	IV注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb (A、B組)
22	2018-12-18	IV注射CA (C組)
22	2018-12-18	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
23	2018-12-19	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM (所有組)
23	2018-12-19	安樂死且收集組織，包括眼眶後採血(6 h p.i.) + γ計數(所有組)

方案 158 中之研究組

組	P1AD8749 (VH) CH1A1A(µg)	P1AD8592 (VL) CH1A1A(µg)	P1AE4956 (VH) A5B7(µg)	P1AE4957 (VL) A5B7(µg)	CEA-DOTAM BsAb(µg)	CA(µg)	²¹²Pb (µCi)	n(小鼠)
A	154*	0	0	100	0	0	10	4
B	0	100	167**	0	0	0	10	4
C	0	0	0	0	100	25	10	4

*P1AD8749劑量調節至154 µg以補償35%臼/臼雜質；**P1AD8592劑量調節至167 µg以補償40%臼/臼雜質。

在研究第0天，在各SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第27代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來確立實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後十四天，以177 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第20天注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第21天平均腫瘤體積為243 mm ³。

在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時，將全部組中之小鼠處死且進行屍體剖檢，且收穫以下器官及組織以量測放射性含量：血液、皮膚、膀胱、胃、小腸、大腸、脾、胰臟、腎、肝、肺、心臟、骰骨、肌肉、腦、尾部及腫瘤。

結果注射之後6小時全部所收集組織中之平均 ²¹²Pb分佈示於圖11中。利用杜凱氏多重比較檢定之雙因子ANOVA顯示，三種處理之間正常組織中無顯著 ²¹²Pb吸收差異，膀胱除外，其中兩個雙互補位CEA-分裂-DOTAM-VH/VL對產生低於標準3步驟PRIT之積聚。對於全部三種處理，腎吸收為3-4% ID/g。與對於3步驟PRIT之67% ID/g相比，雙互補位組合引起約56% ID/g之腫瘤積聚；2步驟與3步驟PRIT之間的差異為統計學上顯著的(p ＜ 0.0001)。

不良事件及毒性不存在與此研究相關之不良事件或毒性。

結論此研究評估與標準3步驟PRIT相比由用於CA非依賴性2步驟CEA-PRIT之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之雙互補位對預靶向的小鼠中 ²¹²Pb-DOTAM與SC BxPC3腫瘤的締合。對於2步驟及3步驟PRIT，注射之後6小時之 ²¹²Pb分佈為相當的，其中腫瘤中之積聚高且健康組織中之放射性極少。此種情況證實使用CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之2步驟CEA-PRIT之表現CEA之腫瘤的雙互補位預靶向概念驗證。

實例3d：方案160 方案160之目標為比較攜有SC BxPC3腫瘤之小鼠中使用互補CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之CA非依賴性2步驟CEA-PRIT之3個週期之後的治療功效與標準3步驟CEA-PRIT的治療功效。亦與使用在注射之前與 ²¹²Pb-DOTAM一起預培育之BsAb之1步驟CEA-RIT進行比較。

使攜有SC BxPC3腫瘤之小鼠注射 ●CEA-DOTAM BsAb，7天後接著為CA，且最後在24小時後為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM (3步驟PRIT)， ●CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體，7天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM (2步驟PRIT)，或 ● ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM BsAb (經預培育；1步驟RIT)。

在20 µCi ²¹²Pb-DOTAM之3個重複週期中投與療法，該等週期亦包括與非CEA結合對照抗體(DIG-DOTAM)及無處理(媒劑)進行比較。出於生物分佈目的處死專用小鼠以確認各治療週期時之 ²¹²Pb-DOTAM靶向及清除。就TGI及TR而言評估治療功效，且謹慎地監測小鼠達用於評估治療耐受性之研究持續時間。研究概述示於圖12中。

方案160之時程及設計示於下表中。方案 160 之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2019-01-29	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	2019-01-29	SC注射BxPC3細胞
15	2019-02-13	IP注射BsAb或組胺酸緩衝液(A、B、C、F、G、H、I組)
16	2019-02-14	IP注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL或組胺酸緩衝液(D、J、K、L組)
22	2019-02-20	IP注射CA或PBS (A、B、C、F、G、H、I組)
23	2019-02-21	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
23	2019-02-21	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM或組胺酸緩衝液(E、M組)
23	2019-02-21	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM或0.9% NaCl (B、C、D、F、G、H、I、J、K、L組)
24	2019-02-22	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數(F、G、J、M組)
29	2019-02-27	IP注射PRIT BsAb或PBS (A、B、C、H、I組)
30	2019-02-28	IP注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL或組胺酸緩衝液(D、K、L組)
36	2019-03-06	IP注射CA或PBS (A、B、C、H、I組)
37	2019-03-07	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
37	2019-03-07	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM或0.9% NaCl (B、C、D、H、I、K、L組)
38	2019-03-08	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數(H、K組)
43	2019-03-13	IP注射PRIT BsAb或PBS (A、B、C、I組)
44	2019-03-14	IP注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL或組胺酸緩衝液(D、L組)
50	2019-03-20	IP注射CA或PBS (A、B、C、I組)
51	2019-03-21	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
51	2019-03-21	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM或0.9% NaCl (B、C、D、I、L組)
52	2019-03-22	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數(I、L組)

方案 160 中之研究組

組	BsAb	BsAb/ 週期(µg)	CA/ 週期(µg)	²¹² Pb-DOTAM/ 週期(µCi)	週期(#)	n(小鼠)
A	—	0	0	0	3	10
B	DIG-DOTAM	100	25	20	3	10
C	CEA-DOTAM	100	25	20	3	10
D	CEA-分裂-DOTAM	154* + 100**	0	20	3	10
E	²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM	100	0	20	1***	10
F	DIG-DOTAM	100	25	20	1	3
G	CEA-DOTAM	100	25	20	1	3
H	CEA-DOTAM	100	25	20	2	3
I	CEA-DOTAM	100	25	20	3	3
J	CEA-分裂-DOTAM	154* + 100**	0	20	1	3
K	CEA-分裂-DOTAM	154* + 100**	0	20	2	3
L	CEA-分裂-DOTAM	154* + 100**	0	20	3	3
M	²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM	100	0	20	1	3

*P1AD8749：調節至154 μg以補償儲備溶液中之35%臼/臼雜質之劑量；**P1AD8592；***由於第一治療週期時之急劇輻射誘發毒性而將3個週期調節為1個週期。

在研究第0天在SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第24代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來建立實體異種移植物。在腫瘤細胞注射之後十五天，以122 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第23天注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第22天平均腫瘤體積為155 mm ³。

根據上表(方案160中之研究組)，將CEA-DOTAM及DIG-DOTAM抗體在媒劑緩衝液中稀釋至100 μg/200 μL之最終濃度以用於IP投與。將CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體一起混合至一種單一注射溶液中以用於IP投與，每200 µL含有100 µg各構築體。對於P1AD8749，將劑量調節至154 µg以補償儲備溶液中之35%臼/臼雜質(不攜有VH/VL之分子側)。根據圖12中之實驗時程，在注射BsAb之後7天IP投與CA-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (25 μg/200 μL PBS)，24小時後接著為 ²¹²Pb-DOTAM (RO7205834)。使經PRIT處理之小鼠(2步驟及3步驟) IV注射100 µL經Ca淬滅之 ²¹²Pb-DOTAM溶液(於100 µL 0.9% NaCl中之20 µCi)。

經1步驟RIT處理之小鼠僅接受一種注射：預結合 ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM (於100 µL 0.9% NaCl中20 µCi/20 µg BsAb以用於IV注射)。藉由在37℃下將 ²¹²Pb-DOTAM與CEA-DOTAM BsAb一起培育10分鐘來製備經直接標記抗體。

在安樂死時自A-E組中之小鼠收穫以下器官及組織：血清、肝、脾、腎、胰臟及腫瘤。在安樂死之前，對活小鼠進行麻醉以收集眼眶後血液。在5分鐘期間以10 000 rcf離心所收集血液樣品，且將所得血清溶離份分離、冷凍且儲存於-20℃下。緊接著將所切離組織置於10%中性緩衝福馬林(4℃)中且隨後在24小時之後轉移至1× PBS (4℃)。將經福馬林固定樣品運送至Roche Pharma Research and Early Development，Roche Innovation Center Basel以供進一步處理及分析。

在F、G、J及M組中之小鼠在第一次且唯一一次注射 ²¹²Pb-DOTAM或 ²¹²Pb-DOTAM-BsAb之後24小時被處死且進行屍體剖檢；在H及K組中之小鼠在第二次注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時被處死且進行屍體剖檢；在I及L組中之小鼠在第三次注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時被處死且進行屍體剖檢。在安樂死時在經麻醉小鼠上使用眼眶後採血來自靜脈竇收集血液，之後經由頸椎脫位術終止。出於生物分佈目的亦收穫以下器官及組織：膀胱、脾、腎、肝、肺、肌肉、尾部、皮膚及腫瘤。

結果注射之後24小時全部所收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率係針對各療法及治療週期示於圖13中。陰性對照在腫瘤中不引起吸收(0.4% ID/g)。利用杜凱氏多重比較檢定之雙因子變異數分析(ANOVA)顯示，對於2步驟及3步驟PRIT，任何週期時之分佈非顯著地不同；然而，與陰性對照及1步驟RIT相比，全部週期時之差異為統計學上顯著的(p ＜ 0.05)。腫瘤吸收對於3步驟PRIT為25-45% ID/g且對於2步驟PRIT為25-30% ID/g，其中任一處理或週期之間無任何統計學上顯著之差異。對於1步驟RIT，一次且唯一一次治療週期時之腫瘤吸收為99%。對於兩個PRIT方案，正常組織中之吸收極低，但在1步驟RIT之後在全部器官及組織中顯著地較高，此係由於與小放射性標記DOTAM螯合物相比經預培育抗體之循環時間長得多。

平均腫瘤發展及個別腫瘤生長曲線分別示於圖14及圖15中。未經處理之媒劑組及DIG-DOTAM組中之腫瘤穩定地生長，但在第三次處理之後，後者中之倍增速率略微地較低。相比之下，在第一治療週期之後PRIT及RIT組中之腫瘤尺寸減小，且維持腫瘤對照直至接種之後約10週為止，在接種之後約10週時腫瘤尺寸開始增大。2步驟及3步驟PRIT處理產生幾乎一致之腫瘤對照。無腫瘤完全消退。

在研究第83天，亦即可基於平均值分析全部處理組之最後一天，與媒劑對照相比，對於使用CEA-DOTAM之PRIT(3步驟)及使用CEA-分裂-DOTAM-VH/VL之PRIT(2步驟)，TGI分別為91.7%及88.4%。對於1步驟RIT，對應數值為72.6%，而對於非特異性DIG-DOTAM對照，TGI為-59.7%。在同一天，基於平均值之TR對於3步驟CEA-DOTAM PRIT為-1.9，對於2步驟CEA-分裂-DOTAM-VH/VL PRIT為-2.9，對於1步驟RIT為-4.7，對於DIG-DOTAM PRIT為-28.8，且對於媒劑對照為-39.3。

由於下文所描述之不良事件，故存活分析視為統計學上非相關的。

不良事件及毒性圖16中顯示全部療法組中之BW發展。利用20 µCi ²¹²Pb-DOTAM之2步驟及3步驟PRIT之多個週期具有良好耐受性，但急劇BW損失出現在接受1步驟RIT之小鼠中，其中在第一RIT週期之後(在 ²¹²Pb照射之後6-11天)由於20%或更多之BW下降而對E組中之8/10小鼠進行安樂死。不給予剩餘2隻RIT小鼠任何另外 ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM注射，但連續地追蹤以用於腫瘤生長評估。

此外，出於倫理原因，由於腫瘤狀態惡化(亦即腫瘤破裂或滲漏)而處死多隻小鼠。在DIG-DOTAM組中，出於此原因，9/10小鼠在達到3000 mm ³之腫瘤體積之前進行安樂死；對於未經處理之媒劑對照，對應數目為5/10。在PRIT組及RIT組中問題不太明顯，其中出於此原因而分別在3步驟PRIT組、2步驟PRIT組及1步驟RIT組中對1/10、2/10及2/10小鼠進行安樂死。此種情況反映於圖15中之個別腫瘤生長曲線中。

最後，由於肛門下創傷劣化，故對C組中之1隻小鼠進行安樂死。

全部不良事件均列於下表中。方案 160 中之不良事件

組	經處死小鼠(n/組)	研究日	終止原因
A：媒劑	5(10)	53、71、71、73、75	腫瘤狀態惡化
B：DIG-DOTAM	9(10)	55、55、55、55、61、73、73、73、74	腫瘤狀態惡化
C：CEA -DOTAM	1(10)	83	肛門下創傷
C：CEA -DOTAM	1(10)	85	腫瘤狀態惡化
D：CEA-分裂-DOTAM	2(10)	83、83	腫瘤狀態惡化
E： ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM	8(10)	29、29、30、31、31、32、32、34	BW損失≥ 20%
E： ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM	2(10)	83、83	腫瘤狀態惡化

在研究第23天(第1週期)、第37天(第2週期)及第51天(第3週期)執行 ²¹²Pb照射。

結論在使用3步驟流程(CEA-DOTAM BsAb、CA及 ²¹²Pb-DOTAM)與2步驟流程(CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體及 ²¹²Pb-DOTAM)之CEA-PRIT之間未看見差異；對於兩種處理，TGI為相當大的且幾乎一致的，且20 µCi之3個週期可在兩種情況下安全地投與。相比之下，大部分經處理之小鼠對20 μCi在注射之前預結合於CEA-DOTAM之 ²¹²Pb-DOTAM (1步驟RIT)不耐受。

因此，研究證實使用所研發之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL構築體之CA非依賴性2步驟PRIT之耐受性及治療功效。

實例4：方案175 方案175之目標為評估經增加之預靶向抗體注射量對後續腫瘤及健康組織中之 ²¹²Pb積聚的影響。比較兩個不同劑量之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體：標準量(100 µg)及2.5倍高之劑量(250 µg)。此外，對CEA-分裂-DOTAM-VH構築體進行修飾以延伸其VH來避免抗藥物抗體(ADA)形成(此係與先前所測試之CEA-分裂-DOTAM-VL構築體一起使用)。VH經延伸以包含來自抗體CH1域之前三個胺基酸：丙胺酸、絲胺酸及蘇胺酸(AST)，且此後構築體稱為CEA-分裂-DOTAM-VH-AST。

抗體P1AD8592已描述於上文實例1中。P1AF0171與P1AD8749相同，不同之處在於融合HC係藉由殘基AST延伸-因此，抗體P1AD0171由如上文所描述之輕鏈D1AA3384 (SEQ ID NO: 34)、如上文所描述之第一重鏈D1AC4022 (SEQ ID NO: 28)及如下文所示之第二重鏈D1AE3669組成： D1AE3669 (HC杵＜CEA＞ CH1A1A Dotam-VH-AST)

使攜有SC BxPC3腫瘤之小鼠注射 ●1×標準劑量之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb，7天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM，或 ●2.5×標準劑量之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb，7天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM。

在放射性注射之後24小時評估 ²¹²Pb-DOTAM之活體內分佈。研究概述示於圖17中。

研究設計方案175之時程及設計顯示如下。方案175之時程

研究日	實驗程序
0	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	SC注射BxPC3細胞
22	IP*注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb
29	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
29	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
30	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數

*由於低化合物濃度(200 μL/構築體=總計400 μL)而所需之IP注射方案175中之研究組

組	P1AF0171 (VH-AST)(µg)	P1AD8592 (VL)(µg)	²¹² Pb(µCi)	BD(h p.i.)	n(小鼠)
A	143*	100	10	24	4
B	357*	250	10	24	4

*P1AF0171劑量調節至143及357 µg以補償約30%臼/臼雜質。

在研究第0天在各SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第24代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來建立實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後二十一天，以310 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第29天注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第30天平均腫瘤體積為462 mm ³。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後24小時處死全部小鼠且進行屍體剖檢，且收穫以下器官及組織以量測放射性含量：血液、皮膚、脾、胰臟、腎、肝、肌肉、尾部及腫瘤。

結果圖18中展示在注射之後24小時全部所收集之組織中之平均 ²¹²Pb分佈。在腫瘤或正常組織中不存在介於兩個劑量水準之間的顯著 ²¹²Pb吸收差異。對於兩個處理組，腫瘤積聚為30%-31% ID/g，且此時腎吸收為＜2% ID/g。一隻小鼠由於 ²¹²Pb-DOTAM注射問題而在尾部中具有約1 %ID/g，但其他所收集健康組織不顯示任何可觀的 ²¹²Pb積聚。

不良事件及毒性不存在與此研究相關之不良事件或毒性。

結論在此活體內模型中將預靶向CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之劑量增加2.5倍並不改善隨後投與之 ²¹²Pb-DOTAM之腫瘤積聚。然而，其亦並不增加正常組織中之放射性積聚，突出顯示使用此2步驟預靶向方案達成之強特異性。最後，結果驗證經延伸-VH CEA-分裂-DOTAM-VH-AST構築體之功能。

實例5：方案185 方案185之目標為評估靶向T84.66抗原決定基之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL。本文提供P1AF0709及P1AF0298之序列。P1AF0709具有D1AE4688 (SEQ ID NO: 83)之第一重鏈及D1AA4920 (SEQ ID NO: 84)之第二重鏈。P1AF0298具有D1AE4687 (SEQ ID NO: 86)之第一重鏈及D1AE3668 (SEQ ID NO: 87)之第二重鏈。兩者均具有D1AA4120 (SEQ ID NO: 89)之輕鏈。

使攜有SC BxPC3腫瘤之小鼠注射標準劑量之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb (100 µg/抗體)，6天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM。在放射性注射之後6小時評估 ²¹²Pb-DOTAM之活體內分佈。研究概述示於圖19中。

研究設計方案185之時程及設計顯示如下。方案185之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2020-03-04	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	2020-03-04	SC注射BxPC3細胞
22	2020-03-26	IV注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb
27	2020-03-31	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
28	2020-04-01	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
28	2020-04-01	安樂死及組織收穫(6 h p.i.) + γ計數

方案185中之研究組

組	P1AF0298 T84.66 (VH-AST)(µg)	P1AF0709 T84.66 (VL)(µg)	P1AF0171 CH1A1A (VH-AST)(µg)	P1AD8592 CH1A1A (VL)(µg)	²¹² Pb(µCi)	BD(h p.i.)	n(小鼠)
A	100	100	0	0	10	6	5
B	0	0	143*	100	10	6	5

*P1AF0171劑量調節至143 µg以補償約30%臼/臼雜質。

在研究第0天，在各SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第27代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來確立實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後二十二天，以224 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第28天注射 ²¹²Pb-DOTAM，此時平均腫瘤體積達到385 mm ³。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後6小時處死全部小鼠且進行屍體剖檢，且收穫以下器官及組織以量測放射性含量：血液、皮膚、脾、胰臟、腎、肝、肌肉、尾部及腫瘤。將所收集腫瘤分成兩塊：一塊針對放射性含量加以量測，且另一塊置於含有Tissue-Tek®最佳切割溫度(OCT)嵌式培養基之冰凍模具中，且置於乾冰上以快速凝固。將OCT中之冷凍樣品維持在-80℃下，之後進行冷凍切片、免疫螢光染色，且使用Zeiss Axio Scope.A1模組顯微鏡進行分析。

結果圖20中展示在注射之後6小時全部所收集之組織中之平均 ²¹²Pb分佈。腫瘤積聚為40% ID/g (CH1A1A)或44% ID/g (T84.66)。在腎中發現唯一其他可觀放射性積聚：對於兩個組，在6 h p.i.下為3%-5% ID/g。

靶向T84.66 (A組)或CH1A1A (B組)之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL對之瘤內分佈之實例示於圖21中。圖A及C顯示BxPC3腫瘤中之CEA表現高且均質，且圖B及D展示注射之後7天之抗體分佈為類似分佈。然而，與來自B組之腫瘤樣品相比，來自A組之樣品展現總體更強信號，提供T84.66為強於CH1A1A之結合子之證明。

不良事件及毒性不存在與此研究相關之不良事件或毒性。

結論結果驗證靶向CEA之T84.66抗原決定基之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL構築體之功能。預靶向表現CEA之腫瘤中之所得212Pb積聚為高且特異性的，且靶向CH1A1A或T84.66抗原決定基之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL對均質地分佈於表現CEA之腫瘤內部。

實例6：方案189 方案189之目標為與靶向CH1A1A VH-AST/VL之陽性對照對相比評估靶向T84.66 VH-AST/CH1A1A VL及T84.66 VL/CH1A1 VH-AST之雙互補位CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體對。此雙互補位組合排除可溶CEA上全Pb-DOTAM結合子之形成，該可溶CEA僅表現兩個抗原決定基中之一者(例如T84.66)，由此減少其潛在副作用，諸如經提高循環放射性及相關輻射誘發毒性以及經降低之與腫瘤外目標競爭方面之功效。

使攜有SC BxPC3腫瘤之小鼠注射標準劑量之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb (100 µg/抗體)，7天後接著為放射性標記 ²¹²Pb-DOTAM。在放射性注射之後6小時評估 ²¹²Pb-DOTAM之活體內分佈。研究概述示於圖22中。

研究設計方案189之時程及設計顯示如下。方案189之時程

研究日	實驗程序
0	製備BxPC3細胞及填充注射器
0	SC注射BxPC3細胞
15	IV注射CEA-分裂-DOTAM-VH/VL BsAb
21	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
22	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
22	安樂死及組織收穫(6 h p.i.) + γ計數

方案189中之研究組

組	P1AF0298 T84.66 (VH-AST)(µg)	P1AF0709 T84.66 (VL)(µg)	P1AF0171 CH1A1A (VH-AST)(µg)	P1AD8592 CH1A1A (VL)(µg)	²¹² Pb(µCi)	BD(h p.i.)	n(小鼠)
A	100	0	0	100	10	6	5
B	0	100	143*	0	10	6	5
C	0	0	143*	100	10	6	3

*P1AF0171劑量調節至143 µg以補償約30%臼/臼雜質。

在研究第0天在各SCID小鼠中藉由將含5×10 ⁶個細胞(第31代)之RPMI/基質膠SC注射至右側腹中來建立實體異種移植物。在腫瘤細胞注射之後十四天，以343 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第22天注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第21天平均腫瘤體積達到557 mm ³。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後6小時處死全部小鼠且進行屍體剖檢，且收穫以下器官及組織以量測放射性含量：血液、皮膚、脾、胰臟、腎、肝、肌肉、尾部及腫瘤。

結果圖23中展示在注射之後6小時全部所收集之組織中之平均 ²¹²Pb分佈。對於T84.66 VH-AST + CH1A1A VL及T84.66 VL + CH1A1A VH-AST，雙互補位變體之腫瘤積聚分別為71% ID/g及46% ID/g。陽性CH1A1A對照引起37% ID/g。利用杜凱氏多重比較檢定之雙因子ANOVA顯示，就腫瘤吸收而言，全部三個組彼此顯著地不同(相對於兩個其他組，對於T84.66 VH-AST + CH1A1A VL為p＜0.0001；僅相對於CH1A1A，對於T84.66 VL + CH1A1A VH-AST為p = 0.0020)。其他器官不顯示各組間統計學上顯著之差異，但血液中略微高之滯留指示與兩個其他組相比之T84.66 VH-AST + CH1A1A VL組合：與＜1% ID/g相比之2% ID/g。腎吸收類似地略微高，但並非統計學上顯著地如此：與對於另兩個之3% ID/g相比，對於T84.66 VH-AST + CH1A1A為4.5% ID/g。

不良事件及毒性不存在與此研究相關之不良事件或毒性。然而，在此研究中與標準生長速率相比，BxPC3腫瘤生長顯著地較快且伴以較大變化性。在屍體剖檢時，得出結論：大腫瘤(大部分)填充有液體，當在放射性量測之前將腫瘤切成兩半時將其清空；此液體有可能導致生長速率加速，但並不任何大程度地影響IA/g %，此係因為腫瘤係在切開之後稱重且量測。

結論結果使用所測試CEA-分裂-DOTAM-VH/VL構築體驗證CEA之T84.66及CH1A1A抗原決定基之雙互補位靶向之功能，且展現與陽性CH1A1A對照相比，此組合之意外高的功效。在T84.66 VH-AST + CH1A1A VL對之特定優勢之指示下， ²¹²Pb在表現預靶向CEA之腫瘤中之所得積聚較高且具有特異性。

實例7 此等實例研究藉由如本文所述之分裂抗體將Pb-DOTA募集至細胞。

P1AF0712具有SEQ ID NO:97之第一重鏈、SEQ ID NO: 98之第二重鏈及SEQ ID NO: 103之輕鏈。P1AF0713具有SEQ ID NO: 100之第一重鏈、SEQ ID NO: 101之第二重鏈及SEQ ID NO: 103之輕鏈。

使用胰蛋白酶自培養瓶分離MKN-45細胞且使用Casy細胞計數器計數。在4℃下粒化之後，使300 g細胞再懸浮於FACS緩衝液(含2.5% FCS之PBS)中，調節至2.0E+06個細胞/毫升，分配至96孔V形底PP盤(25微升/孔= 5.0E+04Zellen/孔)。

使用DOTA-FITC進行FACS染色將CEA特異性分裂抗體(分別為P1AF0712或P1AF0713)調節至40 μg/mL於FACS緩衝液中，使得最終濃度為10 μg/mL。將兩種抗體添加至細胞中，組合或分離，且隨後添加至緩衝液中，且在4℃下培育1小時。隨後，將經FITC標記之Pb-DOTA以與抗體呈等莫耳比添加至細胞中，且在4℃下培育1小時。隨後將細胞在FACS緩衝液中洗滌兩次且再懸浮於70 µl/孔FACS緩衝液中以使用FACS Canto (BD, Pharmingen)進行量測。其展示(圖24) SPLIT兩半均不產生螢光信號，表明缺乏Pb-DOTA結合能力。僅SPLIT兩半之組合能夠將Pb-DOTAM-FITC募集至目標細胞(圖24)。

使用＜huIgG(H+L)A488＞進行FACS染色將CEA特異性分裂抗體(分別為P1AF0712或P1AF0713)調節至40 μg/mL於FACS緩衝液中，使得最終濃度為10 μg/mL。以分離形式將兩種抗體添加至細胞中，接著添加緩衝液，或以合併形式添加，且在4℃下培育1小時。隨後在FACS緩衝液中洗滌細胞兩次。在洗滌之後，使細胞再懸浮於50 µL含有二級抗體(＜huIgG(H+L)＞-Alexa488，c=10 µg/mL)之FACS-緩衝液中，且在4℃下培育1小時。隨後將細胞在FACS緩衝液中洗滌兩次且再懸浮於70 µl/孔FACS緩衝液中以使用FACS Canto (BD, Pharmingen)進行量測。兩種分裂抗體之EC50相當，指示兩種分裂抗體之CEA特異性細胞結合。由於抗體在混合物中之量更高，在此等情形下獲得較低EC50，如下表中所示。

分裂抗體 之 EC50 測定

		EC50 µg/ml絕對值
＜hu＞A488	P1AF0712+ PBS	2.7
P1AF0713+ PBS	2.3
P1AF0712+ P1AF0713	0.9
hu ISO + PBS
DOTA-FITC	P1AF0712+ PBS	na
P1AF0713+ PBS	na
P1AF0712+ P1AF0713	2.4
hu ISO + PBS

使用基於二級抗體之偵測 (＜hu＞488 ，上圖 ) 或 Pb-DOTA-FITC (DOTA-FITC ，下圖 ) 測定 分裂抗體 之 EC50

實例8：Biacore結合實驗此實例測試與參考抗體CEA-DOTAM (RO7198427，PRIT-0213)相比，單獨TA-分裂-DOTAM-VH及TA-分裂-DOTAM-VL與DOTAM之結合。其進一步測試與參考抗體相比，DOTAM與TA-分裂-DOTAM-VH/VL對之結合。

此等實例中所使用之編碼與本申請案中其他地方所使用之蛋白質編號之間的對應性顯示如下。亦提供序列。在此實例中，參考抗體編碼為「PRIT_RS」。

目標結合子	SPR 碼( 前藥A+B)	SPR 碼	DOTAM	蛋白質	LC (SEQ ID NO)	HC (SEQ ID NO)	融合 HC (SEQ ID NO)
＜CEA＞ CH1A1A	P1_AB	P1_A	VL	P1AD8592	34	30	33
P1_B	VH	P1AD8749	34	28	32
＜CEA＞ CH1A1A	P2_AB	P2_A	VL	P1AD8592	34	30	33
P2_B	VH	P1AF0171	34	28	147
＜CEA＞ T84.66	P3_AB	P3_A	VL	P1AF0709	89	83	84
P3_B	VH	P1AF0298	89	86	89
＜CEA＞ 28A9	P4_AB	P4_A	VL	P1AF0710	96	90	91
P4_B	VH	P1AF0711	96	93	94
＜CEA＞ A5H1EL1(G54A)	P5_AB	P5_A	VL	P1AE4957	58	55	56
P5_B	VH	P1AE4956	54	51	52
＜CEA＞ CH1A1A	P6_AB	P6_A	VL	P1AF0712	103	97	98
P6_B	VH	P1AF0713	103	100	101
＜GPRC5D＞	P7_AB	P7_A	VL	P1AF8284	107	104	105
P7_B	VH	P1AF8285	107	104	106

對於此等實驗，藉由MabSelect Sure (親和力層析法)之第一步驟及離子交換層析法(例如POROS XS)之第二步驟純化PRIT分裂抗體，且隨後藉由Superdex 200 (尺寸排阻層析法)對其進行拋光。

在25℃量測溫度下用Biacore T200執行實驗。全部Biacore T200實驗均在HBS-P+ (GE Healthcare, Br-1008-27) pH 7.4操作緩衝液中進行。使用不同DOTAM溶離份對各測試抗體/抗體對執行兩項實驗。

1.在第一實驗中，相對於參考抗體而言，評估個別TA-分裂-DOTAM-VH及TA-分裂-DOTAM-VL抗體與在晶片上捕獲之經生物素標記DOTAM之結合。

在CAP晶片表面上以高密度捕獲DOTAM (120 nM於HBS-P+中之溶液) (10微升/分鐘，60秒)。隨後，在DOTAM表面上注射600 nM前藥_A或前藥_B於HBS-P+中之溶液(10微升/分鐘，90秒)。在10微升/分鐘之流動速率下監測解離240秒。使用T200評估軟體評估相對最大反應測定。

結果示於圖26中。個別抗體中無一者顯示結合至所捕獲DOTAM。

2. 在第二實驗中，首先在晶片中使用固定抗hFab捕獲個別TA-分裂-DOTAM-VH及TA-分裂-DOTAM-VL抗體，且隨後評估DOTAM-單抗生蛋白鏈菌素複合物之結合(DOTAM +單抗生蛋白鏈菌素偶合600 nM，1:1 mol，在RT下1 h)。

在抗hFab (GE Healthcare, BR-1008-27) CM5晶片表面上注射600 nM前藥_A或前藥B於HBS-P+中之溶液(10微升/分鐘，120秒)。在高密度捕獲前藥A或B溶液之後，注射DOTAM-單抗生蛋白鏈菌素複合物(20微升/分鐘，90秒)。在20微升/分鐘之流動速率下監測解離180秒。對於新週期，藉由使用Glycin 2.1及75秒再生時間以10微升/分鐘再生表面。使用T200評估軟體評估相對最大反應測定。

結果顯示於圖27中。咸信低百分比的最大反應(如在圖中標記有*)為「痕量」或與DOTAM-SA之非特異性相互作用，且反映使分析最佳化之需要。

3.在第三實驗中，與參考抗體相比，評估TA-分裂-DOTAM-VH/VL對與DOTAM之結合。首先在晶片中使用固定抗hFab捕獲抗體，且隨後評估DOTAM-單鏈黴抗生物素蛋白複合物之結合(DOTAM +單鏈黴抗生物素蛋白偶合600 nM，1:1 mol，在RT下1 h)。

在抗hFab (GE Healthcare, BR-1008-27) CM5晶片表面上注射300 nM前藥_A及前藥B於HBS-P+中之溶液(10微升/分鐘，120秒)。在高密度捕獲前藥A及B溶液之後，注射DOTAM-單鏈黴抗生物素蛋白複合物(20微升/分鐘，90秒)。在20微升/分鐘之流動速率下監測解離180秒。對於新週期，藉由使用Glycin 2.1及75秒再生時間以10微升/分鐘再生表面。使用T200評估軟體評估相對最大反應測定。

結果示於圖28中。全部TA-分裂-DOTAM-VH/VL對均顯示大量針對DOTAM之結合，作為DOTA結合子之P6_AB (P1AF0712/P1AF0713)對除外。

FAP-結合子P1AF8286及P1AF8287亦獲得類似結果，該等結果顯示TA-分裂-DOTAM-VH/VL對而非該對之個別成員的大量DOTAM結合。P1AF8286由具有SEQ ID NO: 108之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 109之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 111之輕鏈構成，且P1AF8287由具有SEQ ID NO: 108之第一重鏈、具有SEQ ID NO: 110之第二重鏈及具有SEQ ID NO: 111之輕鏈構成。然而，此分析仍需要經最佳化。

實例9：組合療法實例9a：材料及方法，概要健康監測及終止準則全部實驗方案均由地方當局(Comité Régional d'Ethique de l'Expérimentation Animale du Limousin [CREEAL], Laboratoire Départemental d'Analyses et de Recherches de la Haute-Vienne)審查及批准。根據倫理準則，將來自Charles River之雌性轉基因C57BL/6J-TgN(CEAGe)18FJP [Clarke P, Mann J, Simpson JF, Rickard-Dickson K, Primus FJ. Mice transgenic for human carcinoembryonic antigen as a model for immunotherapy. Cancer Res. 1998; 58(7):1469-77] (「B6-huCEA」)及C57BL/6J-Tg(CEACAM5)2682Wzm [Eades-Perner AM, van der Putten H, Hirth A, Thompson J, Neumaier M, von Kleist S, Zimmermann W. Mice transgenic for the human carcinoembryonic antigen gene maintain its spatiotemporal expression pattern. Cancer Res. 1994; 54(15):4169-76] (「huCEACAM5」)小鼠維持在具有每日光/暗(12 h/12 h)週期之不含特異性及機會性病原體(SOPF)條件下。在到達之後前5天期間不執行操縱以使動物習慣新環境。

在研究第0天在各B6-huCEA或huCEACAM5小鼠中經由皮下(SC)或胰臟內注射表現癌胚抗原(CEA)之腫瘤細胞建立原代實體異種移植物。針對臨床症狀及不良事件之偵測每天控制動物，且若該等動物由於腫瘤負荷、注射或手術之副作用或其他原因而顯示難以消除之痛苦或疼痛徵象，則在預定終點之前對其進行安樂死。疼痛、痛苦或不適之指示包括但不限於急性體重(BW)損失、毛皮不整潔、下痢、駝背姿勢、表皮蒼白及不願移動。不良SC腫瘤狀態(例如潰瘍、齒痕或開放性傷口)亦可促使其進行安樂死；在原位模型中，腹部腫脹指示腫瘤負荷增加，此可促使安樂死。

SC腫瘤體積係經由每週3次手動測徑規量測來估計，根據下式來計算：體積 = 0.5× 長度 × 寬度 ² 。視腫瘤生長速率而定需要時進行額外腫瘤量測。在原位模型中，經由生物發光成像(BLI)定期評估腫瘤進展。每週至少3次量測動物之BW，其中視健康狀況而定需要時進行額外量測。BW損失超過其初始BW之20%或腫瘤體積達到3000 mm ³(方案119、136、150)或2000 mm ³(方案195)之小鼠立即經安樂死。

為將放射性尿液/糞便之再攝取減至最少，在投與 ²¹²Pb-1,4,7,10-肆(胺甲醯基甲基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷(DOTAM)之後，將小鼠置放於具有格子地板之籠中4小時，之後轉移至具有標準墊料之新籠。隨後，在注射(p.i.)後24小時更換全部籠。自放射性注射之後當天向全部小鼠提供濕食，持續7天或直至全部個體自任何急性BW損失中充分恢復為止。

生物發光成像使用Bruker In-Vivo FX PRO系統經由重複BLI評估腫瘤進展。為了限制對信號之干擾，在成像之前使用電剃刀儘可能地移除注射區域上及周圍之毛皮。為進行成像，使小鼠在背部上SC注射100 µL螢光素(D-螢光素；Thermo Scientific，參考號88294)。將溶液在磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中稀釋至15 mg/mL，通過0.2-µm過濾器，且在-20℃下儲存直至使用。在成像期間，將小鼠並排置放，其中注射部位面向下。獲取裝置之光學照片，隨後進行1分鐘BLI採集。為最大化信號，採集在螢光素注射之後10分鐘開始。接著覆疊影像以用於視覺評估。繪製所關注之矩形區(ROI)，且比較各小鼠之ROI內之背景校正信號以評估腫瘤進展。

組織收穫在免疫療法投與之後自小鼠取樣血液以藉由量測抗體之相應血清濃度驗證抗體注射。將樣品在5分鐘期間在10 000 RCF下離心，且將所得血清溶離份分離、冷凍且儲存在-20℃下以供後續分析，該分析由Discovery Pharmacology (Roche Innovation Center Zurich)藉由酶聯免疫吸附分析(ELISA)進行。

亦在安樂死時在經麻醉小鼠上使用眼眶後採血來自靜脈竇收集血液，之後經由頸椎脫位術終止。如由方案所指定，在此之後，進行額外組織收穫以用於放射性量測及/或組織學分析。記載意外或異常狀況。將經收集以用於福馬林固定之組織立即置於10%中性緩衝福馬林(NBF；4℃)中，且隨後在24 h之後轉移至PBS (4℃)。將出於生物分佈之目的而收集之器官及組織稱重且使用2470 WIZARD ²自動γ計數器(PerkinElmer)量測放射性，且隨後計算每公克組織之注射劑量百分比(ID/g %)，包括針對衰變及背景進行之校正。

統計分析使用GraphPad Prism 7 (GraphPad Software公司)、JMP 12 (SAS Institute公司)及DOPsa (內部應用)進行統計分析。基於平均腫瘤體積使用下式執行腫瘤生長抑制(TGI)曲線分析：

其中 d指示研究日且 0指示基線值。「媒劑」選為參考組。

1.1測試化合物 CEA-DOTAM (mu) (P1AD8758)為靶向CEA之CH1A1A抗原決定基的鼠類化BsAb。其由以下多肽鏈構成：

如在方案195中使用之CEA-分裂-DOTAM-VL為P1AD8592，描述於本申請案中其他處(參見例如實例1)。如方案195中使用之CEA-分裂-DOTAM-VH-AST為P1AF0171，描述於本申請案中其他處(參見例如實例4)。

DIG-DOTAM (RO7204012)為非CEA-結合BsAb(目標=地高辛)，用作陰性對照。

抗CD40抗體為muIgG1 CD40 FGK4.5 B6 CHO W(9)。其具有如WO2018/189220中所教示之使用彼文獻之序列編號的SEQ ID NO: 61之重鏈及SEQ ID NO: 62之輕鏈。方案119中所用之抗PD-L1為6E11 muIgG1 GNE w(1) (亦稱為「鼠類IgGl，純系6E11，Genentech」)。參見例如WO2018/055145。方案136及195中所使用之抗PD-L1為6E11.mIgG2a.LALAPG。

將全部抗體構築體儲存於-80℃下直至注射之日為止，在注射之日將其解凍且在標準媒劑緩衝液(20 mM組胺酸、140 mM NaCl；pH 6.0)或0.9% NaCl中稀釋至其最終各別濃度以用於靜脈內(IV)或腹膜內(IP)投與。同樣，將抗CD40及抗PD-L1抗體儲存在-80℃下且在IP注射當天，在組胺酸緩衝液中稀釋至200 µg/200 µL。

將Pb-DOTAM-聚葡萄糖-500及Ca-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (RO7201869)儲存於-20℃下直至注射之日，在注射之日將其解凍且在PBS中稀釋以用於IV或IP投與。

用於放射性標記之DOTAM螯合物係由Macrocyclics提供且在藉由Orano Med (Razès, France)執行放射性標記之前維持在-20℃下。 ²¹²Pb-DOTAM (RO7205834)係藉由用DOTAM溶離由釷生成劑生成，且隨後在標記之後用Cu或Ca淬滅。將 ²¹²Pb-DOTAM溶液用PBS或0.9% NaCl稀釋以獲得IV注射所需之 ²¹²Pb活性濃度。

媒劑對照組中之小鼠接受多次代替BsAb、CA及 ²¹²Pb-DOTAM之媒劑緩衝液注射。

腫瘤模型用於接種小鼠之腫瘤細胞株為Panc02-huCEA-luc或MC38-huCEA。

Panc02為衍生自小鼠胰管腺癌細胞之細胞株，其獲自The University of Texas MD Anderson Cancer Center (Houston, TX)且經Roche工程改造以表現人類CEA (huCEA)及螢光素酶(luc)，從而產生Panc02-huCEA-luc。將細胞在富含1% GlutaMAX (Gibco，目錄號72400-021)、10%胎牛血清(GE Healthcare，目錄號SH30088.03)、4 µg/mL嘌呤黴素(VWR，目錄號J593)及50 µg/mL潮黴素(Cayman Chemicals，目錄號14291)之RPMI-1640培養基中培養。

MC38-huCEA為經工程改造以表現huCEA之鼠類大腸腺癌細胞株，其獲自City of Hope, CA, USA。將細胞在富含GlutaMAX (Gibco，目錄號61965-026)、10%胎牛血清(GE Healthcare，目錄號SH30088.03)及500 µg/mL遺傳黴素(Gibco，目錄號10131-027)之DMEM培養基中培養。

在研究第0天，在各小鼠中藉由SC注射將在與Corning® Matrigel®基底膜基質(生長因子減少；目錄號354230) 1:1混合之培養基中之細胞注射至右側腹中來確立SC異種移植物。在原位模型中，經由將細胞直接注射至胰臟中，在各小鼠中建立原代實體胰臟內異種移植物。

實例9b：方案119 方案119之目標為評估單獨及與癌症免疫療法(CIT)組合之CEA-預靶向放射免疫療法(PRIT)的三個週期之後在胰臟腺癌之同基因型原位鼠類模型中進行處理的功效。

使免疫活性轉殖基因B6-huCEA小鼠在胰臟中注射Panc02-huCEA-luc腫瘤細胞(0.2×10 ⁶個細胞，10 µL)，且利用BLI跟蹤腫瘤發展。CEA-PRIT方案包含IV注射CEA-DOTAM (mu) BsAb(100 µL中之100 µg)，之後4天後藉由IV投與Pb-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (100 µL中之25 µg)，之後依次為Cu淬滅 ²¹²Pb-DOTAM效應分子(100 µL中之20 µCi)，其在CA之後IV注射2小時。在放射性注射之後24小時IP投與CIT治療，其由一次投與抗CD40抗體及多次注射抗PD-L1抗體組成(各抗體為200 µL中之200 µg)。對偵察小鼠進行生物分佈評估以證實第一治療週期期間 ²¹²Pb-DOTAM靶向及清除。在TGI (基於BLI)及存活率方面評估治療功效。

研究概述示於圖29中。

方案119之時程及設計示於下表中。方案119之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2017-06-08	製備Panc02-huCEA-luc細胞及填充注射器
0	2017-06-08	SC注射Panc02-huCEA-luc細胞
6	2017-06-14	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
7	2017-06-15	IV注射BsAb
11	2017-06-19	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
11	2017-06-19	IV注射CA
11	2017-06-19	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
11	2017-06-19	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
12	2017-06-20	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數
12	2017-06-20	IP注射抗CD40及抗PD-L1
13	2017-06-21	眼眶後採血
14	2017-06-22	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
18	2017-06-26	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
21	2017-06-29	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
22	2017-06-30	IV注射BsAb
25	2017-07-03	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
26	2017-07-04	IV注射CA
26	2017-07-04	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
26	2017-07-04	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
27	2017-07-05	IP注射抗PD-L1
28	2017-07-06	眼眶後採血
28	2017-07-06	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
32	2017-07-10	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
35	2017-07-13	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
36	2017-07-14	IV注射BsAb
39	2017-07-17	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
40	2017-07-18	IV注射CA
40	2017-07-18	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
40	2017-07-18	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
41	2017-07-19	IP注射抗PD-L1
42	2017-07-20	眼眶後採血
43	2017-07-21	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
46	2017-07-24	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
49	2017-07-27	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
53	2017-07-31	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
53	2017-08-03	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
60	2017-08-07	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
63	2017-08-10	SC注射D-螢光素+成像(BLI)

方案119中之研究組

組	BsAb	BsAb(µg)	CA(µg)	²¹² Pb(µCi)	抗 CD40*(µg)	抗 PD-L1(µg)	週期	n(小鼠)
A	—	0	0	0	0	0	3	8
B	—	0	0	0	200	200	3	8
C	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	3	8
D	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	200	200	3	8
E	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	1	3
F	DIG-DOTAM	100	25	20	0	0	1	3

*在第一治療週期，僅投與一次抗CD40

在研究第0天在各B6-huCEA小鼠(10週齡)中經由將RPMI-1640培養基(10 µL中之0.2×10 ⁶個細胞)中之Panc02-huCEA-luc細胞(第19代)直接注射至胰臟中來建立原代實體異種移植物。在第6天、第11天、第14天、第18天、第21天且隨後每週兩次，直至接種後第63天，經由BLI藉由量測在所有小鼠中評估腫瘤進展。

追蹤A-D組中之小鼠以評估治療功效直至研究結束或直至達到一個或若干個終止準則。在投與免疫療法之後24小時自B及D組中之小鼠取樣血液，以藉由經由ELISA分析血清溶離份驗證抗CD40及抗PD-L1注射。亦在安樂死之前經由眼眶後血液收集分離血清，且隨後冷凍且儲存在-20℃下。收集以下組織用於組織學處理及分析且立即置於10% NBF中24小時，隨後轉移至1×PBS溶液：血清、肝、脾、腎及胰臟以及腫瘤。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後24小時處死E及F組中之小鼠且進行屍體解剖，以證實腫瘤自正常組織之吸收及清除。因此收集以下器官及組織且量測放射性：血液、膀胱、脾、胰臟(無腫瘤)、腎、肝、肌肉、皮膚、尾部及腫瘤。

結果生物分佈及ELISA 圖30中展示在第一次注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時所有收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率。相比於使用DIG-DOTAM之0.6% ID/g，腫瘤吸收具有特異性，在用CEA-DOTAM (mu)預靶向之後在腫瘤中為16.5% ID/g。在無腫瘤之胰臟組織中， ²¹²Pb積聚為1.9% ID/g。

在免疫療法投與之後24小時，抗CD40及抗PD-L1抗體之血清濃度展示於圖31中。

腫瘤進展及存活率 CEA-PRIT及對照處理後平均減去背景之BLI信號展示於圖32中，表示為光子/秒/mm ²。相應個別曲線展示於圖33中。在未經處理之對照小鼠中平均信號以指數方式加強，而在用單一療法(免疫療法或CEA-PRIT)處理之小鼠中增加更慢且具有更大的個體差異。在CEA-PRIT/免疫療法組合組中，BLI信號相較於其他組以較慢速率增加或降低至背景水準。在第88天，亦即成像最後一天，3/8 CEA-PRIT/免疫療法處理之小鼠中無信號可自背景雜訊區分。

存活率曲線展示於圖34中。研究在細胞注射之後第103天終止，此時CEA-PRIT/免疫療法組合組中之2/8隻小鼠存活且無腫瘤。其他組不具有無腫瘤或存活小鼠。個別處理組之事件發生時間統計(事件=安樂死/死亡)顯示於下表中，展示中值存活時間與上部及下部95%置信度界限以及四分位數存活時間(25%及75%)。事件發生時間*統計之分位數(天)

組	中值時間	下部 95%	上部 95%	25% 死亡率	75% 死亡率
媒劑	27.5	11	33	23.5	33
抗CD40+抗PD-L1	36.5	11	46	27.5	46
CEA-PRIT	46.5	14	60	30	56
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	73	50	—	59	—

*事件=安樂死/因腫瘤負荷所致死亡。

進行成對檢驗以說明在存活率方面哪些組顯著不同：對數秩檢驗(對後續存活事件施加更多權重)及威爾卡森檢驗(Wilcoxon test) (對早期存活時間施加更多權重)，兩者均針對多個檢驗使用邦弗朗尼校正(Bonferroni correction)。結果展示於下表中。CEA-PRIT/免疫療法組合相較於單一療法及媒劑組顯著提高存活率。成對對數秩檢驗(多個測試水準= 0.00833)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0341	0.0131	＜0.0001*
抗CD40+抗PD-L1	0.0341	1.0000	0.7100	0.0004*
CEA-PRIT	0.0131	0.7100	1.0000	0.0029*
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	＜0.0001*	0.0004*	0.0029*	1.0000

成對威爾卡森檢驗(多個測試水準= 0.00833)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0864	0.0396	0.0002*
抗CD40+抗PD-L1	0.0864	1.0000	0.5250	0.0007*
CEA-PRIT	0.0396	0.5250	1.0000	0.0065*
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	0.0002*	0.0007*	0.0065*	1.0000

不良事件及毒性圖35中展示全部療法組中之平均BW發展。投與抗CD40觸發所注射之小鼠的預期急性體重減輕，其在注射之後約1週內消退。注射 ²¹²Pb-DOTAM引起經照射之小鼠的短暫體重減輕，其嚴重程度低於注射抗CD40後的體重減輕。無小鼠由於急性注射後BW損失而安樂死。

在CEA-PRIT單一療法組中，歸因於 ²¹²Pb-DOTAM注射失敗，在第三治療週期期間自方案中排除1隻小鼠；同一組中之1隻小鼠在BLI採集期間在麻醉下時死亡。在CEA-PRIT/免疫療法組合組中，由於尾部壞死而使1隻小鼠安樂死。方案119中之不良事件

組	經處死小鼠(n/組)	研究日	終止原因
C：CEA-PRIT	1(8)	42	²¹²Pb-DOTAM注射失敗
C：CEA-PRIT	1(8)	56	小鼠在麻醉/BLI採集期間死亡
D：CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	1(8)	53	壞死尾部

在研究第11天、第26天及第40天進行 ²¹²Pb照射(20 µCi)。在研究第12天(抗CD-40 +抗PD-L1)、第27天(抗PD-L1)及第41天(抗PD-L1)投與免疫療法。

組織病理學檢查在所有小鼠中檢測以下組織：腎、肝、肺、脾及原發性腫瘤(胰臟內)。組織切片用蘇木精及伊紅(H&E)或過碘酸-希夫(Schiff) (PAS，僅腎)染色且藉由光學顯微鏡法在Leica Diaplan顯微鏡上檢測。使用最小(1級)、輕微(2級)、中度(3級)、明顯(4級)或重度(5級)之五點系統，組織病理學發現以嚴重程度分級。

腫瘤 A、B及C組中之所有小鼠(8/8)在胰臟內存在植入腫瘤，而D組之對應數目為5/8。記錄B、C及D組之1/8小鼠的肝中及B組之1隻小鼠的脾中的轉移性植入。各組之間的尺寸、壞死及出血總體上類似(下表)。有絲分裂數之數目如下：A組＞B組＞C組＞D組，而當與C及D組相比時，A及B組中之凋亡數更低。植入胰臟腫瘤中之出血、有絲分裂數及凋亡數之大小及平均分數*

組檢測之 n	A ：媒劑 8	B ：抗 CD40 + 抗 PD-L1 8	C ： CEA-PRIT 8	D ： CEA-PRIT + 抗 CD40+ 抗 PD-L1 5
以cm計之平均尺寸± SD	11.13 ± 1.89	14.13 ± 5.69	10.63 ± 4.14	14.00 ± 3.39
壞死	2.5	2.5	2.1	2.6
出血	1.9	0.9	1.3	1.2
有絲分裂數	4	2.9	2.5	0.8
凋亡數	1.5	1.4	2.5	2.4

*平均分數=Σ動物數目×嚴重程度/組中之腫瘤數目

器官主要處理相關之影響存在於來自C及D組之小鼠的腎中，且由退化/再生及細胞核大小不等(anisokaryosis)組成，主要涉及外髓質之外條內之近端小管(S3區段)。退化/再生及細胞核大小不等，C及D組之腎中之近端小管

組檢測之 n	C ： CEA-PRIT 8	D ： CEA-PRIT + 抗 CD40+ 抗 PD-L1 5
	退化 / 再生，近端小管
最小	4	5
略微	0	1
中度	0	2
平均分數*	0.5	1.6
	細胞核大小不等，近端小管
最小	3	0
略微	3	5
中度	1	2
明顯	0	1
平均分數*	1.5	2.5

*平均分數=Σ動物數目×嚴重程度/組中之腫瘤數目

結論 CEA-PRIT與CIT (抗CD40 +抗PD-L1)之組合與媒劑及任一單一療法相比顯著增加存活率，且最初已建立原位腫瘤之2/8 CEA-PRIT/免疫療法處理之小鼠在研究結束時係無腫瘤的。BLI確認使用組合治療改善之腫瘤控制。

任一組中之小鼠均未由於BW損失而經安樂死，表明處理之耐受性良好。然而，許多動物在重複成像階段期間遭受異氟醚介導之麻醉，需要長時間喚醒/恢復及似乎更快老化(皮毛發灰)。一隻小鼠未自麻醉喚醒，且在影像採集之後死亡。

用CEA-PRIT治療誘導腎(近端小管)內管狀退化/再生及細胞核大小不等，腎發現之嚴重程度在與免疫療法組合之後略微較高。對腫瘤之主要作用為藉由CEA-PRIT/免疫療法組合治療減少發生率、藉由CEA-PRIT及/或免疫療法治療減少有絲分裂數及藉由CEA-PRIT增加凋亡數。

實例9c：方案136 方案136之目標為評估單獨的及與CIT組合在三個週期之CEA-PRIT之後在免疫活性轉殖基因小鼠中處理SC Panc02-huCEA-luc腫瘤的功效。

在3個重複週期內投與PRIT方案，包含IP注射CEA-DOTAM (mu) BsAb (200 µL中之100 µg)，之後7天後IP投與Pb-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (200 µL中之25 µg)，之後依次24小時後為效應分子 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。

在放射性注射之後24小時IP投與免疫療法治療，其由一次投與抗CD40抗體及多次注射抗PD-L1抗體組成(各抗體為200 µL中之200 µg)。獲取偵查小鼠用於生物分佈評估以證實第一治療週期期間 ²¹²Pb-DOTAM靶向及清除，以及處死小鼠用於在第二週期之後進行免疫藥效動力學(免疫PD)效應之流動細胞量測分析。在CEA-PRIT/免疫療法組合、單獨CEA-PRIT、單獨免疫療法及無處理之間進行比較。在TGI、存活率及免疫記憶方面評估治療功效。除測徑規量測之外，經由BLI追蹤腫瘤生長。

研究概述示於圖36中。

方案136之時程及設計示於下表中。方案136之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2018-01-12	製備Panc02-huCEA-luc細胞及填充注射器
0	2018-01-12	SC注射Panc02-huCEA-luc細胞
10	2018-01-22	IP注射BsAb
11	2018-01-23	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
14	2018-01-26	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
17	2018-01-29	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
17	2018-01-29	IP注射CA
18	2018-01-30	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
18	2018-01-30	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
19	2018-01-31	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數
19	2018-01-31	IP注射抗CD40及抗PD-L1
20	2018-02-01	眼眶後採血
20	2018-02-01	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
24	2018-02-05	IP注射BsAb
24	2018-02-05	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
27	2018-02-08	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
31	2018-02-12	IP注射CA
31	2018-02-12	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
31	2018-02-12	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
32	2018-02-13	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
33	2018-02-14	IP注射抗PD-L1
34	2018-02-15	眼眶後採血
34	2018-02-15	免疫PD之安樂死及組織收穫(FACS)
35	2018-02-16	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
38	2018-02-19	IP注射BsAb
38	2018-02-19	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
41	2018-02-22	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
45	2018-02-26	IP注射CA
45	2018-02-26	SC注射D-螢光素+成像(BLI)
46	2018-02-27	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
46	2018-02-27	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
47	2018-02-28	IP注射抗PD-L1
48	2018-03-01	眼眶後採血

方案136中之研究組

組	BsAb	BsAb(µg)	CA(µg)	²¹² Pb(µCi)	抗 CD40*(µg)	抗 PD-L1(µg)	週期	n(小鼠)
A	—	0	0	0	0	0	3	9
B	—	0	0	0	200	200	3	9
C	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	3	9
D	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	200	200	3	9
E	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	1	3
F	DIG-DOTAM	100	25	20	0	0	1	3
G	—	0	0	0	0	0	2	4
H	—	0	0	0	200	200	2	4
I	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	2	4
J	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	200	200	2	4

*在第一治療週期，僅投與一次抗CD40

在研究第0天在各B6-huCEA小鼠(11-12週齡)中藉由SC注射將在RPMI/基質膠中之0.5×10 ⁵個細胞(第18代)注射至右側腹中來建立原發性實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後十天，以114 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。在接種之後第17天注射CA，此時平均腫瘤體積為233 mm ³。在第19天，亦即在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後的當天，平均腫瘤體積為326 mm ³。

追蹤A-D組中之小鼠以評估治療功效直至研究結束或直至達到一個或若干個終止準則。在投與免疫療法之後24小時自B及D組中之小鼠取樣血液，以藉由經由ELISA分析血清溶離份驗證抗CD40及抗PD-L1注射。亦在安樂死之前經由眼眶後血液收集自所有小鼠分離血清，且隨後冷凍且儲存在-20℃下。收集以下組織用於組織學處理及分析且立即置於10% NBF中24小時，隨後轉移至1×PBS溶液：血清、肝、脾、腎、胰臟及腫瘤。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後24小時處死E及F組中之小鼠且進行屍體解剖，以證實腫瘤自正常組織之吸收及清除。因此收集以下器官及組織且量測放射性：血液、膀胱、脾、腎、肝、肺、肌肉、尾部、皮膚及腫瘤。

G-J組包含在第二次抗PD-L1注射之後24小時在眼眶後採血後經處死且屍體解剖之免疫PD偵查小鼠，以藉由對來自不同區室之T細胞及DC進行功能及表型表徵來評估抗腫瘤T細胞及樹突狀細胞(DC)反應之產生。自所有免疫PD小鼠收集：腫瘤、脾及引流淋巴結(DLN；來自腫瘤側)。

對脾樣品進行離體PMA/離子黴素(Thermo Fisher，目錄號00-4970-03, 00-4980-03)再刺激分析以評估T細胞效應子及記憶產生。另外，使用MACSQuant分析儀10 (Miltenyi Biotec)進行流式細胞測量術(螢光活化細胞分選[FACS])且使用FlowJo 10.5.3軟體進行結果分析。染色小組設計展示於下表中。方案136之FACS小組設計

T 細胞	DC	五聚體	Treg	PMA/ 離子黴素
標記	標記	標記	標記	標記
存活/死	存活/死	存活/死	存活/死	存活/死
CD45	CD45	五聚體p15E	CD45	CD45
CD3	負向選擇(CD19，Gr1，F4/80)	CD45	CD3	CD3
CD4	CD11c	CD3	CD4	CD4
CD8a	MHC II類	CD8	CD8	CD8
41BB	CD86	CD4	CD25	CD44
Lag3	CD11b	CD11b	CD11b	IFNγ
PD-1	CD317	B220	FoxP3	IL-2

IFNγ =干擾素γ；IL-2 =介白素-2；MCH =主要組織相容複合物；PMA =佛波醇12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸鹽；Treg =調節T細胞

結果生物分佈及ELISA 圖37中展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM (第1週期)之後24小時所有收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率。相比於針對所有收集之正常組織的＜2.5 %ID/g，腫瘤吸收具有特異性，在用CEA-DOTAM (mu)預靶向之後在腫瘤中為14.7 %ID/g。使用DIG-DOTAM，所得腫瘤積聚為1.9 %ID/g。

在免疫療法投與之後24小時，抗CD40及抗PD-L1抗體之血清濃度展示於圖38中。

腫瘤進展及存活率 CEA-PRIT及對照處理後之平均Panc02-huCEA-luc腫瘤進展展示於圖39中，其中所有處理組之個別腫瘤生長曲線展示於圖40中。用單一療法(CIT或CEA-PRIT)處理之小鼠中的腫瘤不斷生長，儘管與媒劑對照相比有延遲；CEA-PRIT比免疫療法作用更強。在CEA-PRIT/免疫療法組合組中，8/9小鼠在降低腫瘤體積方面對處理展現初始反應；在反應之強度/持續時間與療法開始時之腫瘤尺寸之間未發現相關性。

在第47天，亦即可基於平均值分析所有處理組之最後一天，相較於媒劑對照，對於免疫療法、CEA-PRIT及CEA-PRIT與免疫療法之組合，TGI分別為34.0%、81.4%及89.7%。在細胞注射之後第140天終止初步驟研究，此時在CEA-PRIT/免疫療法組合組中4/9小鼠存活且無腫瘤。在PRIT單一療法組中，1/9小鼠具有完全消退之腫瘤，但該小鼠在第117天由於BW損失而被安樂死。

CEA-PRIT及對照處理後平均減去背景之BLI信號展示於圖41中，表示為光子/秒/mm ²。相應個別曲線展示於圖42中。相比於對應原位腫瘤模型(方案119)，結果更可變；具有及不具有免疫療法之CEA-PRIT在個別小鼠中展示BLI信號之強力降低，而免疫療法小鼠具有較低初始信號，使得難以區分任何降低。

基於腫瘤體積≥3000 mm ³之終止準則，總存活率展示於圖43中。個別處理組之事件發生時間(腫瘤體積超過3000 mm ³)統計展示於下表中，展示中值存活時間與上部及下部95%置信度界限以及四分位數存活時間(25%及75%)。事件發生時間*統計之分位數(天)

組	中值時間	下部 95%	上部 95%	25% 死亡率	75% 死亡率
媒劑	38	33	48	38	45
抗CD40+抗PD-L1	54	47	70	48	60
CEA-PRIT	73	70	91	70	91
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	103	59	—	80	—

*事件=腫瘤體積≥ 3000 mm ³。

進行成對檢驗以說明在存活率方面哪些組顯著不同：對數秩檢驗(對後續存活事件施加更多權重)及威爾卡森檢驗(對早期存活時間施加更多權重)，兩者均針對多個檢驗使用邦弗朗尼校正。結果展示於下表中。與媒劑組相比，所有處理顯著增加存活率。成對對數秩檢驗(多個測試水準= 0.00833)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0023*	0.0002*	0.0001*
抗CD40+抗PD-L1	0.0023*	1.0000	0.0006*	0.0001*
CEA-PRIT	0.0002*	0.0006*	1.0000	0.1242
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	0.0001*	0.0001*	0.1242	1.0000

成對威爾卡森檢驗(多個測試水準= 0.00833)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0018*	0.0005*	0.0003*
抗CD40+抗PD-L1	0.0018*	1.0000	0.0011*	0.0004*
CEA-PRIT	0.0005*	0.0011*	1.0000	0.1085
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	0.0003*	0.0004*	0.1085	1.0000

免疫-藥效動力學使用調節T細胞(Treg)或五聚體染色未實現顯著結果。CEA-PRIT + CIT組合與經活化腫瘤內CD8 T細胞之出現率顯著提高(如藉由上調41BB表現所量測)、腫瘤、脾及引流淋巴結(DLN)中經活化漿細胞樣DC (pDC)及經典DC (cDC)之出現率顯著提高(如藉由上調CD86表現所量測)及總免疫細胞中T細胞之出現率提高相關。關鍵結果展示於圖44、圖45及圖46中。

再攻擊為了評估對原發腫瘤之抗腫瘤免疫記憶反應的產生，使處理之後的無腫瘤小鼠在與初始注射相對的側腹中被Panc02-huCEA-luc細胞再攻擊。兩個未處理之對照組經接種：一組用11週齡之B6-huCEA小鼠，且另一組用年齡與再攻擊之小鼠匹配之B6-huCEA小鼠(33週)。在首次腫瘤細胞注射之後的第140天執行再攻擊。

為再攻擊5隻經處理(無腫瘤)小鼠(31-32週齡)及5隻對照小鼠(11週齡)，藉由SC注射0.5×10 ⁵個細胞(第18代)至左側腹建立腫瘤移植物。在稍後時間點，將5隻年齡匹配(33週齡)未處理之對照小鼠SC注射0.5×10 ⁵個細胞(第22代)至左側腹。研究組及再攻擊/對照之時程展示於下表中。方案136中之研究組(再攻擊)

組	接受之處理	年齡(週數)	細胞株	細胞 / 小鼠	n(小鼠)
D*	CEA-PRIT × 3 + 抗CD40 × 1 +抗PD-L1 × 3	31-32	Panc02-huCEA-luc	0.5×10 ⁶	4+1**
K	未處理之對照	11	Panc02-huCEA-luc	0.5×10 ⁶	5
L	未處理之年齡匹配對照	33	Panc02-huCEA-luc	0.5×10 ⁶	5

*來自方案136之保留組名稱；**如D組中之小鼠處理之額外小鼠，但不包括於主要功效研究中。方案136之時程(再攻擊)

研究日	日期	實驗程序
140	2018-06-01	製備Panc02-huCEA-luc細胞及填充注射器
140	2018-06-01	SC注射Panc02-huCEA-luc細胞(D*及K組)
172	2018-07-03	安樂死及組織取樣(D*及K組)
—	2018-12-04	製備Panc02-huCEA-luc細胞及填充注射器
—	2018-12-04	SC注射Panc02-huCEA-luc細胞(L組)
—	2019-01-03	安樂死(L組)

自D組及K組收集血液、脾及DLN以在終止時用於流式細胞測量術分析。對血液、脾及DLN執行T細胞之表徵，且對脾執行離體PMA/離子黴素再刺激分析。

結果再攻擊

經再攻擊及未治療(naïve)小鼠中之腫瘤生長展示於圖47中。所有未經處理之小鼠(5/5 + 5/5)產生腫瘤，但生長動力學在年齡匹配之對照小鼠中更慢。在再攻擊小鼠中，4/5保持無腫瘤直至實驗終止，亦即在第二次接種之後32天(初始接種之後172天)；1/5具有在再攻擊之後28天開始生長的腫瘤。在第二次接種之後第24天(初始接種之後164天)，歸因於BW突然下降，使一隻無腫瘤的經再攻擊之小鼠安樂死。

對來自再攻擊及未治療(年齡不匹配)小鼠之樣品進行的FACS分析揭示，相比於對照，再攻擊組中之血液及脾中的CD4+及CD8+ T細胞群增加。其他發現包括脾中增加之CD4+效應記憶細胞群(CD44+)、在離體PMA/離子黴素刺激時產生介白素-2 (IL-2)及在離體PMA/離子黴素刺激時產生IL-2及干擾素γ (IFNγ)之DLN中增加之CD4+效應記憶細胞群(CD44+)。關鍵結果展示於圖48中。

不良事件及毒性圖49中展示全部療法組中之平均BW發展。投與抗CD40觸發所注射之小鼠的預期急性體重減輕，其在注射之後一週內消退。注射 ²¹²Pb-DOTAM引起經照射之小鼠的短暫體重減輕，其嚴重程度低於因抗CD40引起的體重減輕。無小鼠由於急性注射後BW損失而被安樂死；1隻無腫瘤CEA-PRIT小鼠在總狀態突然下降之後第117天被安樂死。

自所有組，歸因於腫瘤狀態惡化(具有劣化風險之切開腫瘤)，總共2隻小鼠被安樂死；歸因於腫瘤劣化以及總狀態惡化，1隻額外小鼠被安樂死。研究之主要及再攻擊部分中的所有不良事件描述於下表中。方案136及136b中之不良事件

組	經處死小鼠(n/組)	研究日	終止原因
A：媒劑	1(9)	48	惡化腫瘤/總體狀態
C：CEA-PRIT	2(9)	44、46	腫瘤狀態惡化
C：CEA-PRIT	1(9)	117	BW損失≥ 20%
D*：CEA-PRIT + 抗CD40 +抗PD-L1	1(5)	164	BW損失≥ 20%

在研究第18天、第32天及第46天進行 ²¹²Pb照射(20 µCi)。在研究第19天(抗CD-40 +抗PD-L1)、第33天(抗PD-L1)及第47天(抗PD-L1)投與免疫療法。 *在第140天再攻擊。

結論與對照組小鼠及用單獨免疫療法處理之小鼠相比，CEA-PRIT與CIT (抗CD40 +抗PD-L1)之組合導致存活率顯著提高。組合治療產生若干無腫瘤小鼠，及免疫記憶之強力指征，其由免疫PD及再攻擊之小鼠中之腫瘤發展減弱證實。實例9d：方案150 方案150之目標為評估單獨的及與CIT組合在三個週期之CEA-PRIT之後在免疫活性轉殖基因小鼠中處理SC MC38-huCEA腫瘤的功效。

在3個重複週期內投與PRIT方案，包含IP注射CEA-DOTAM (mu) BsAb (200 µL中之100 µg)，之後7天後IP投與Ca-DOTAM-聚葡萄糖-500 CA (200 µL中之25 µg)，之後依次24小時後為效應分子 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。

在放射性注射之後24小時IP投與免疫療法治療，其由一次投與抗CD40抗體或一次投與抗CD40抗體之後多次注射抗PD-L1抗體組成(各抗體為200 µL中之200 µg)。獲取偵查小鼠用於生物分佈評估以證實第一治療週期期間 ²¹²Pb-DOTAM靶向及清除，以及處死小鼠用於在第二週期之後進行免疫PD效應之流動細胞量測分析。在CEA-PRIT/免疫療法組合、單獨CEA-PRIT、單獨免疫療法及無處理之間進行比較。在TGI、存活率及免疫記憶方面評估治療功效。

研究概述示於圖50中。

方案150之時程及設計示於下表中。方案150之時程

研究日	日期	實驗程序
0	2018-09-05	製備MC38-huCEA細胞及填充注射器
0	2018-09-05	SC注射MC38-huCEA細胞
13	2018-09-18	IP注射BsAb
20	2018-09-25	IP注射CA
21	2018-09-26	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
21	2018-09-26	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
22	2018-09-27	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數
22	2018-09-27	IP注射抗CD40及抗PD-L1
23	2018-09-28	舌下採血
27	2018-10-02	IP注射BsAb
33	2018-10-08	IP注射CA
33	2018-10-08	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
34	2018-10-09	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
35	2018-10-10	IP注射抗PD-L1
36	2018-10-11	舌下採血
36	2018-10-11	免疫PD之安樂死及組織收穫(FACS)
41	2018-10-16	IP注射BsAb
48	2018-10-23	IP注射CA
48	2018-10-23	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
49	2018-10-24	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
50	2018-10-25	IP注射抗PD-L1
51	2018-10-26	眼眶後採血

方案150中之研究組

組	BsAb	BsAb(µg)	CA(µg)	²¹² Pb(µCi)	抗 CD40*(µg)	抗 PD-L1(µg)	週期	n(小鼠)
A	—	0	0	0	0	0	3	9
B	—	0	0	0	200	0	3	9
C	—	0	0	0	200	200	3	9
D	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	3	9
E	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	200	200	3	9
F	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	1	4
G	DIG-DOTAM	100	25	20	0	0	1	4
H	—	0	0	0	0	0	2	4
I	—	0	0	0	200	0	2	4
J	—	0	0	0	200	200	2	4
K	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	0	0	2	4
L	CEA-DOTAM (mu)	100	25	20	200	200	2	4

*在第一治療週期，僅投與一次抗CD40

在研究第0天在各B6-huCEA小鼠(10-12週齡)中藉由SC注射將在DMEM/基質膠中之0.5×10 ⁶個細胞(第17代)注射至右側腹中來建立原發性實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後十二天，以103 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。一週後注射CA；在第19天平均腫瘤體積在功效組(A-E)中為284 mm ³，在生物分佈偵查組(F、G)中為303 mm ³，及在免疫PD偵查組(H-L)中為262 mm ³。

A-E組中之小鼠為追蹤以評估治療功效直至研究結束或直至達到一個或若干個終止準則的小鼠。在投與免疫療法之後24小時自B、C及E組中之小鼠取樣血液，以藉由經由ELISA分析血清溶離份驗證抗CD40及抗PD-L1注射。亦在安樂死之前經由眼眶後血液收集自所有小鼠分離血清，且隨後冷凍且儲存在-20℃下。收集以下組織用於組織學處理及分析且立即置於10% NBF中24小時，隨後轉移至1×PBS溶液：血清、肝、脾、腎、胰臟及腫瘤。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後24小時處死F及G組中之小鼠且進行屍體解剖，以證實腫瘤自正常組織之吸收及清除。收集以下器官及組織且量測放射性：血液、皮膚、膀胱、脾、胰臟、腎、肝、肌肉、尾部及腫瘤。

H-L組包含在第二次抗PD-L1注射之後24小時在眼眶後採血後經處死且屍體解剖之免疫PD偵查小鼠，以藉由對來自不同區室之T細胞及DC進行功能及表型表徵來評估抗腫瘤T細胞及DC反應之產生。自所有免疫PD小鼠收集：腫瘤、脾及DLN(來自腫瘤側)。

對脾樣品進行離體PMA/離子黴素(Thermo Fisher，目錄號00-4970-03, 00-4980-03)再刺激分析以評估T細胞記憶。另外，使用MACSQuant分析儀10 (Miltenyi Biotec)進行FACS且使用FlowJo 10.5.3軟體進行結果分析。染色小組設計展示於下表中。方案150之FACS小組設計

T 細胞	DC	Treg	PMA/ 離子黴素	分化
標記	標記	標記	標記	標記
存活/死	存活/死	存活/死	存活/死	存活/死
CD45	CD45	CD45	CD45	CD45
CD3	負向選擇(CD19，Gr1，F4/80)	CD3	CD3	CD3
CD4	CD11c	CD4	CD4	CD4
CD8a	MHC II類	CD8	CD8	CD8a
41BB	CD86	CD25	CD44	CD62L
Lag3	CD11b	CD11b	IFNγ	CD127
PD-1	CD317	FoxP3	IL-2	CD44

結果生物分佈及ELISA 圖51中展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM (第1週期)之後24小時所有收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率。相比於針對所有收集之正常組織的＜2.0 %ID/g，腫瘤吸收具有特異性，在用CEA-DOTAM (mu)預靶向之後在腫瘤中為16.9 %ID/g。使用DIG-DOTAM，所得腫瘤積聚為1.8 %ID/g。

在免疫療法投與之後24小時，抗CD40及抗PD-L1抗體之血清濃度展示於圖52中。

腫瘤進展及存活率 CEA-PRIT及對照處理後之平均MC38-huCEA腫瘤進展展示於圖53中，其中所有處理組之個別腫瘤生長曲線展示於圖54中。在第42天，亦即可基於平均值分析所有處理組之最後一天，相較於媒劑對照，對於抗CD40、抗CD40 +抗PD-L1、CEA-PRIT及CEA-PRIT與抗CD40 +抗PD-L1之組合，TGI分別為57.8%、54.5%、82.8%及99.6%。在細胞注射之後第103天終止主要研究，此時在抗CD40組中2/9小鼠存活且無腫瘤(或具有極小腫瘤)；抗CD40 +抗PD-L1及CEA-PRIT組中之對應數目分別為2/9及1/9。CEA-PRIT與抗CD40 +抗PD-L1之組合產生對應數目之7/9小鼠。

基於腫瘤體積≥3000 mm ³之終止準則，總存活率展示於圖55中。個別處理組之事件發生時間(腫瘤體積超過3000 mm ³)統計展示於下表中，展示中值存活時間與上部及下部95%置信度界限以及四分位數存活時間(25%及75%)。事件發生時間*統計之分位數(天)

組	中值時間	下部 95%	上部 5%	25% 死亡率	75% 死亡率
媒劑	39	33	41	35	41
抗CD40	43	36	—	39	70
抗CD40+PD-L1	51	37	—	43	—
CEA-PRIT	83	44	—	77	—
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	—	61	—	—	—

*事件=腫瘤體積≥ 3000 mm ³。

進行成對檢驗以說明在存活率方面哪些組顯著不同：對數秩檢驗(對後續存活事件施加更多權重)及威爾卡森檢驗(對早期存活時間施加更多權重)，兩者均針對多個檢驗使用邦弗朗尼校正。結果展示於下表中。觀察後續存活時間，除單獨抗CD40處理之外，所有處理與媒劑組相比顯著增加存活率。成對對數秩檢驗(多個測試水準= 0.005)

組	媒劑	抗 CD40	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0210	0.0008*	＜0.0001*	＜0.0001*
抗CD40	0.0210	1.0000	0.6349	0.1300	0.0075
抗CD40+抗PD-L1	0.0008*	0.6349	1.0000	0.2792	0.0167
CEA-PRIT	＜0.0001*	0.1300	0.2792	1.0000	0.0992
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	＜0.0001*	0.0075	0.0167	0.0992	1.0000

成對威爾卡森檢驗(多個測試水準= 0.005)

組	媒劑	抗 CD40	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0470	0.0019*	＜0.0001*	＜0.0001*
抗CD40	0.0470	1.0000	0.4428	0.0297	0.0063
抗CD40+抗PD-L1	0.0019*	0.4428	1.0000	0.1052	0.0129
CEA-PRIT	＜0.0001*	0.0297	0.1052	1.0000	0.1550
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	＜0.0001*	0.0063	0.0129	0.1550	1.0000

免疫藥效動力學 CEA-PRIT/免疫療法組合與淋巴結中pDC、活化pDC及cDC之增加(如藉由CD86表面表現之增加所量測)相關，與來自方案136 (Panc02-huCEA-luc)之發現一致。此示於圖56中。

再攻擊為了評估對原發腫瘤之抗腫瘤免疫記憶反應的產生，使處理之後的無腫瘤小鼠在與初始注射相對的側腹中被MC38-huCEA細胞再攻擊。作為對照，同時向未處理之年齡匹配之B6-huCEA小鼠注射。

在初始開始方案150之後的第98天，再攻擊總共12隻經處理(無腫瘤)小鼠：2隻用抗CD40處理，2隻用抗CD40 +抗PD-L1處理，1隻用單獨的CEA-PRIT處理，且7隻用CEA-PRIT/免疫療法組合處理。異種移植物藉由將0.5×10 ⁵個細胞(第17代) SC注射至左側腹中來建立。研究組及再攻擊/對照之時程展示於下表中。方案150中之研究組(再攻擊)

組	接受之處理	年齡(週數)	細胞株	細胞 / 小鼠	n(小鼠)
B*	抗CD40 × 1	24-26	MC38-huCEA	0.5×10 ⁶	2
C*	抗CD40 × 1 +抗PD-L1 × 3	24-26	MC38-huCEA	0.5×10 ⁶	2
D*	CEA-PRIT × 3	24-26	MC38-huCEA	0.5×10 ⁶	1
E*	CEA-PRIT × 3 + 抗CD40 × 1 +抗PD-L1 × 3	24-26	MC38-huCEA	0.5×10 ⁶	7
M	未處理之年齡匹配對照	24-26	MC38-huCEA	0.5×10 ⁶	5

*來自方案150之保留組名稱方案150之時程(再攻擊)

研究日	日期	實驗程序
98	2018-12-12	製備MC38-huCEA細胞及填充注射器
98	2018-12-12	SC注射MC38-huCEA細胞(B、C、D、E及M組)
125	2019-01-08	免疫PD之安樂死及組織收穫(FACS) (B、C及M組)
127	2019-01-10	免疫PD之安樂死及組織收穫(FACS) (D及E組)

自所有小鼠收集血液、脾及DLN以在終止時用於流式細胞測量術分析。對血液及DLN進行T細胞之表徵，且對脾及DLN進行離體PMA/離子黴素再刺激分析。

結果再攻擊經再攻擊及未治療小鼠中之腫瘤生長展示於圖57中。在未治療對照小鼠中，僅3/5產生腫瘤(此活體內模型中已知變化)。在經再攻擊之小鼠中，CEA-PRIT組中僅1隻小鼠具有當實驗在第二次接種之後28天終止時體積超過100 mm ³的腫瘤；所有其他經再攻擊之小鼠基本上保持無腫瘤。

對來自經再攻擊及未治療小鼠之樣品的FACS分析揭示經CEA-PRIT/免疫療法組合處理之小鼠之DLN中CD44+/IL-2及CD44+/IFNγ CD4+細胞之增加，指示產生效應記憶T細胞反應，與來自方案136 (Panc02-huCEA-luc)之發現一致，展示於圖58中。

不良事件及毒性圖59中展示全部療法組中之平均BW發展。投與抗CD40觸發所注射之小鼠的預期急性體重減輕，其在注射之後一週內消退。注射 ²¹²Pb-DOTAM引起經照射之小鼠的短暫體重減輕，其嚴重程度低於因抗CD40引起的體重減輕。無小鼠由於急性注射後BW損失而安樂死。

所有接受第三週期的單獨抗PD-L1或在CEA-PRIT之後的抗PD-L1之動物(14/14)在注射之後的數分鐘內展現強反應，先前在Panc02-huCEA-luc模型(方案119及136)中未發現。反應包括1/14小鼠中之遲緩行為、嗜睡及死亡。在抗PD-L1注射之後大約15-40分鐘後恢復；單個死亡在注射之後20-30分鐘發生。

自所有組，PRIT組中之1隻小鼠由於腫瘤狀態惡化(具有劣化風險之切開腫瘤)而被安樂死；PRIT組中之另一隻小鼠由於尾部問題妨礙進一步IV注射而自研究中排除。全部不良事件描述於下表中。方案150中之不良事件

組	受影響之小鼠(n/組)	研究日	觀測結果
C：抗CD40 +抗PD-L1	5(5)	50	在第3次抗PD-L1注射之後，嗜眠、嗜睡、死亡(1隻小鼠)
D：CEA-PRIT	1(9)	44	腫瘤狀態惡化à安樂死
D：CEA-PRIT	1(9)	49	尾部受傷à安樂死
E：CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1	9(9)	50	在第3次抗PD-L1注射之後，嗜眠、嗜睡

在研究第21天、第34天及第49天進行 ²¹²Pb照射(20 µCi)。在研究第22天(抗CD-40 +抗PD-L1)、第35天(抗PD-L1)及第50天(抗PD-L1)投與免疫療法。

結論相比於Panc02-huCEA-luc，單獨免疫療法在MC38-huCEA模型中更有效。單一療法(免疫療法或CEA-PRIT)產生多個無腫瘤小鼠，但在腫瘤控制方面，自組合抗CD40與抗PD-L1與輻射處理存在明顯益處。

再攻擊實驗之結果與Panc02-huCEA-luc等效物相比更難以解釋，此歸因於MC38-huCEA之更可變腫瘤吸收。另外，單一療法處理之組的樣品數量少，使得後續與CEA-PRIT/免疫治療組合組的比較難以解釋。

實例9e：方案195 方案195之目標為評估在單獨使用SeParated v域LInkage Technology (SPLIT)預靶向抗體之CA(清除劑)非依賴性PRIT (「SPLIT PRIT」)及與CIT組合用於處理免疫活性轉殖基因小鼠中之SC Panc02-huCEA-Fluc腫瘤之後的功效。

PRIT處理包含IP注射互補SPLIT BsAb (100 µg，各在總共200 µL中)，之後7天後IV投與效應分子 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。

在放射性注射之後24小時IP投與免疫療法治療，其由一次投與抗CD40抗體及多次注射抗PD-L1抗體組成(各抗體為200 µL中之200 µg)。獲取偵查小鼠用於生物分佈評估以證實PRIT處理之後的 ²¹²Pb-DOTAM靶向。在SPLIT PRIT/免疫療法組合、單獨SPLIT PRIT、單獨免疫療法及無處理之間進行比較。在TGI、存活率及免疫記憶(再攻擊)方面評估治療功效。

研究概述示於圖60中。

方案195之時程及設計示於下表中。方案195之時程

研究日	實驗程序
0	製備Panc02-huCEA-Fluc細胞及填充注射器
0	SC注射Panc02-huCEA-Fluc細胞
14	IP注射分裂抗體
21	溶離 ²¹²Pb-DOTAM及填充注射器
21	IV注射 ²¹²Pb-DOTAM
22	安樂死及組織收穫(24 h p.i.) + γ計數
22	IP注射抗CD40及抗PD-L1
23	頜下採血用於ELISA
36	IP注射抗PD-L1
37	頜下採血用於ELISA
50	IP注射抗PD-L1
51	頜下採血用於ELISA

方案195中之研究組

組	P1AD8592 (VL)(µg)	P1AF0171 (VH-AST)(µg)	²¹² Pb(µCi)	PRIT 週期	抗 CD40*(µg)	抗 PD-L1(µg)	CIT 週期	n(小鼠)
A	0	0	0	0	0	0	0	10
B	0	0	0	0	200	200	3	10
C	100	143	20	1	0	0	0	10
D	100	143	20	1	200	200	3	10
E	100	143	20	1	0	0	0	3

*在第一CIT週期，僅投與一次抗CD40

在研究第0天在各huCEACAM5小鼠(9-12週齡)中藉由SC注射將在RPMI/基質膠中之0.5×10 ⁶個細胞(第28代)注射至右側腹中來建立原發性實體異種移植物。在注射腫瘤細胞之後十四天，以102 mm ³之平均腫瘤體積將小鼠分選至實驗組中。七天後注射 ²¹²Pb-DOTAM；在第20天之平均腫瘤體積在功效組(A-D)中為196 mm ³且在生物分佈偵查組(E)中為187 mm ³。

A-D組中之小鼠為經追蹤以評估治療功效直至研究結束或直至達到一個或若干個終止準則的小鼠。在投與免疫療法之後24小時自B及D組中之小鼠取樣血液，以藉由經由ELISA分析血清溶離份驗證抗CD40及抗PD-L1注射。

在 ²¹²Pb-DOTAM注射之後24小時處死E組中之小鼠且進行屍體解剖，以證實腫瘤自正常組織之吸收及清除。收集以下器官及組織且量測放射性：血液、脾、胃、小腸、大腸、胰臟、腎、肝、肺、肌肉、尾部及腫瘤。

結果生物分佈

圖61中展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時所有收集組織中之平均 ²¹²Pb積聚及清除率。相比於針對所有收集之正常組織的＜1.4 %ID/g，腫瘤吸收具有特異性，在使用SPLIT PRIT之後在腫瘤中為5.4 %ID/g。

腫瘤進展及存活率所有處理組之平均Panc02-huCEA-Fluc腫瘤發展示於圖62中，其中個別腫瘤生長曲線顯示於圖63中。在第48天，亦即可基於平均值分析所有處理組之最後一天，相比於媒劑對照，對於抗CD40 +抗PD-L1、SPLIT CEA-PRIT及SPLIT CEA-PRIT與抗CD40 +抗PD-L1之組合，TGI分別為78.9%、58.6%及100%。在細胞注射之後第94天終止主要研究，此時在抗CD40 +抗PD-L1及SPLIT CEA-PRIT+抗CD40 +抗PD-L1組中分別有1/10及6/10小鼠存活且無腫瘤(或具有極小腫瘤)。媒劑及SPLIT CEA-PRIT組不具有無腫瘤小鼠。

基於腫瘤體積≥2000 mm ³之終止準則，總存活率展示於圖64中。

個別處理組之事件發生時間(腫瘤體積超過2000 mm ³)統計展示於下表中，展示中值存活時間與上部及下部95%置信度界限以及四分位數存活時間(25%及75%)。事件發生時間*統計(天)

組	n	事件	中值時間	下部 5%	上部 95%
媒劑	10	10	45.5	43	—
抗CD40+PD-L1	10	7	62	61	—
SPLIT CEA-PRIT	10	9	54.5	46	—
SPLIT CEA-PRIT +抗CD40+抗PD-L1	10	4	—	71	—

*事件=腫瘤體積≥ 2000 mm ³。

進行成對檢驗以說明在存活率方面哪些組顯著不同：對數秩檢驗(對後續存活事件施加更多權重)及威爾卡森檢驗(對早期存活時間施加更多權重)，兩者均針對多個檢驗使用邦弗朗尼校正。結果展示於以下兩個表中。觀察後續存活時間，除單獨抗CD40處理之外，所有處理與媒劑組相比顯著增加存活率。成對對數秩檢驗(多個測試水準= 0.005)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0003*	0.001*	0*
抗CD40+抗PD-L1	0.0003*	1.0000	0.0453	0.0291
CEA-PRIT	0.001*	0.0453	1.0000	0.0004*
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	0*	0.0291	0.0004*	1.0000

成對威爾卡森檢驗(多個測試水準= 0.005)

組	媒劑	抗 CD40 + 抗 PD-L1	CEA-PRIT	CEA-PRIT + 抗 CD40 + 抗 PD-L1
媒劑	1.0000	0.0019*	0.0035*	0.0001*
抗CD40+抗PD-L1	0.0019*	1.0000	0.0469	0.0301
CEA-PRIT	0.0035*	0.0469	1.0000	0.0011*
CEA-PRIT + 抗CD40+抗PD-L1	0.0001*	0.0301	0.0011*	1.0000

再攻擊為了評估對原發腫瘤之抗腫瘤免疫記憶反應的產生，使處理之後的無腫瘤小鼠在與初始注射相對的側腹中被Panc02-huCEA-Fluc細胞再攻擊。作為對照，同時向未處理之年齡匹配之huCEACAM5小鼠注射。

在初始開始方案195之後的第94天，再攻擊總共6隻經處理(無腫瘤)小鼠：所有均用SPLIT PRIT/免疫療法組合處理。異種移植物藉由將0.5×10 ⁵個細胞(第30代) SC注射至左側腹中來建立。研究組及再攻擊/對照之時程展示於以下的兩個表中。在再攻擊之後三十天，使每組3隻小鼠安樂死且獲取樣品用於免疫PD分析(資料未示出)。因此，每組僅追蹤3隻小鼠直至研究結束。方案195中之研究組(再攻擊)

組	接受之處理	年齡(週數)	細胞株	細胞 / 小鼠	n(小鼠)
D*	SPLIT CEA-PRIT × 1 + 抗CD40 × 1 +抗PD-L1 × 3	22-25	Panc02-huCEA-Fluc	0.5×10 ⁶	6
F	未處理之年齡匹配對照	26-27	Panc02-huCEA-Fluc	0.5×10 ⁶	6

*來自先前在方案195中之保留的組名稱方案195之時程(再攻擊)

研究日	實驗程序
94	製備Panc02-huCEA-Fluc細胞及填充注射器
94	SC注射Panc02-huCEA-Fluc細胞(與初始注射相對的側腹)
107	對每組3隻小鼠進行安樂死及組織收穫以用於免疫PD分析(資料未示出)
157	研究終止

結果再攻擊經再攻擊及未治療小鼠中之腫瘤生長示於圖65及圖66中。在未治療對照小鼠中，6/6產生腫瘤。在經再攻擊之小鼠中，6/6小鼠基本上保持無腫瘤。

不良事件及毒性圖67中展示全部療法組中之平均BW發展。投與抗CD40觸發所注射之小鼠的預期急性體重減輕，其在注射之後一週內消退。注射 ²¹²Pb-DOTAM本身不引起任何顯著重量損失。無小鼠由於急性注射後BW損失而安樂死。

接受單獨或在CEA-PRIT之後多次投與抗PD-L1之小鼠在注射之後約10分鐘內呈現反應：在第二次及第三次投與之後分別為約40%及80%；在第一次抗PD-L1注射之後未發現特異性反應。反應包括皮膚刺激、發紅、活動減少、痙攣、翹毛(ruffled fur)、弓背。所有小鼠在抗PD-L1注射之後1-2小時恢復。

自所有組，2隻小鼠由於腫瘤狀態惡化(具有劣化風險之切開腫瘤)而被安樂死。另外，出於未知原因，在第三次抗PD-L1注射之後1天發現抗CD40 +抗PD-L1組中之1隻小鼠死亡。全部不良事件描述於下表中。方案195中之不良事件

組	受影響之小鼠(n/組)	研究日	觀測結果
B：抗CD40 +抗PD-L1	1(10)	47	腫瘤狀態惡化
B：抗CD40 +抗PD-L1	~40-80%	36、51	在重複抗PD-L1注射之後的反應
B：抗CD40 +抗PD-L1	1(10)	51	發現小鼠死亡；無明顯原因
B：抗CD40 +抗PD-L1		36、50
C：SPLIT CEA-PRIT	1(10)	62	腫瘤狀態惡化
D：SPLIT CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1	~40-80%	36、51	在重複抗PD-L1注射之後的反應

在研究第21天進行 ²¹²Pb照射(20 µCi)。在研究第22天(抗CD-40 +抗PD-L1)、第36天(抗PD-L1)及第50天(抗PD-L1)投與免疫療法。

結論二步驟SPLIT CEA-PRIT之一個週期與免疫療法之三個週期的組合在SC Panc02-huCEA-luc模型(參見方案136)中與三步驟CEA-PRIT之三個完整週期與免疫療法組合一樣有效，且產生60% (6/10)治癒小鼠。免疫記憶之存在由再攻擊實驗強烈指示，其中與100%未經治療之對照小鼠相比，未經預處理之經再攻擊之小鼠均未產生腫瘤。

雖然出於清楚理解之目的，已藉助於說明及實例相當詳細地描述前述本發明，但描述及實例不應解釋為限制本發明之範疇。本文所引用的所有專利及科學文獻之揭示內容以全文引用的方式明確併入本文中。

圖1展示目標抗原(TA)-DOTAM雙特異性抗體(TA-DOTAM BsAb)及例示性TA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體之示意性結構。圖2為展示腫瘤細胞上之分裂-VH/VL DOTAM結合子之裝配體的示意圖。除非結合於靶向細胞上之腫瘤抗原(TA)(其中DOTAM結合子之兩個域得以裝配)，TA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體不會大量結合 ²¹²Pb-DOTAM。圖3展示涉及清除劑使用之三步驟TA-PRIT概念實例之示意綜述。圖4展示其中不使用清除劑之二步驟TA-PRIT概念實例之示意綜述。圖5展示用於展現CEA結合能力之分裂抗體與MKN45細胞之結合。使用人類IgG特異性二級抗體進行抗體偵測。圖6展示用於展現DOTAM結合能力之分裂抗體與MKN45細胞之結合。使用Pb-DOTAM-FITC進行抗體偵測。圖7A展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中進行之利用CEA-分裂-DOTAM-VH/VL之二步驟PRIT之例示性方案(h =小時，d =天，w =週)。圖7B展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中進行之三步驟PRIT對照之例示性方案(h =小時，d =天，w =週)。圖8展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM後6小時，在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中之預靶向 ²¹²Pb-DOTAM之生物分佈，該等小鼠藉由單獨CEA-分裂-DOTAM-VH、單獨CEA-分裂-DOTAM-VL或組合之兩個互補抗體預靶向或使用標準三步驟PRIT預靶向(%ID/g ± SD，n = 4)。圖9展示在SCID小鼠中IV注射之後之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL藥物動力學。圖10展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中在2步驟(頂部)或3步驟(底部)中包含CEA-PRIT之方案158之實驗設計。*CEA分裂DOTAM BsAb劑量經調節以補償2/4構築體中之臼/臼雜質。圖11展示預靶向 ²¹²Pb-DOTAM在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中之生物分佈(6 h p.i.)。分佈為在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時，在攜有腫瘤之SCID小鼠中之 ²¹²Pb之分佈，該等小鼠經CEA-DOTAM BsAb或CEA-分裂-DOTAM抗體之雙互補位組合預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 4)。圖12展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中包含3步驟CEA-PRIT (頂部)、2步驟CEA-PRIT (中間)或1步驟CEA-RIT之一個週期之方案160的實驗排程。在放射性注射之後24小時對生物分佈(BD)偵察小鼠進行安樂死，而謹慎地維持且監測功效組中之小鼠直至達到終止準則為止。圖13展示預靶向 ²¹²Pb-DOTAM及 ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中之生物分佈(24 h p.i.)。分佈係在注射CEA-DOTAM預靶向之 ²¹²Pb-DOTAM或經預培育之 ²¹²Pb-DOTAM-CEA-DOTAM之後24小時，在攜有腫瘤之SCID小鼠中之 ²¹²Pb之分佈。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 3)。圖14展示BxPC3模型(n=10)中之PRIT處理組及對照組(A-E組)之腫瘤生長平均值+標準誤差。曲線在n＜5處截斷。豎點線指示根據研究設計之一些組或所有組之 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖15展示BxPC3模型(n=10)中PRIT處理組及對照(A-E組)之個別腫瘤生長曲線。豎點線指示 ²¹²Pb標記化合物投與(20 µCi)。圖16展示BxPC3模型(A-E組，n=10)中之經CEA-PRIT及CEA-RIT處理之小鼠之平均體重損失。曲線在n＜5處截斷。豎點線指示根據研究設計之一些組或所有組之 ²¹²Pb標記化合物投與。圖17展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中包含二步驟CEA-PRIT之方案175之實驗設計，其中在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時進行處死及屍體剖檢。CEA-分裂-DOTAM-VH-AST劑量經調節以補償臼/臼雜質。圖18展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時，在攜有腫瘤之SCID小鼠中之 ²¹²Pb之分佈，該等小鼠經CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體預靶向(方案175)。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 4)。圖19展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中包含二步驟CEA-PRIT之方案185之實驗設計，其中在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時進行處死及屍體剖檢。CEA-分裂-DOTAM-VH-AST (CH1A1A)劑量經調節以補償臼/臼雜質。圖20展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時，在攜有腫瘤之SCID小鼠中之 ²¹²Pb之分佈，該等小鼠經CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體預靶向(方案185)。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 5)。圖21展示在注射之後7天CEA-分裂-DOTAM-VH/VL對(合併VH及VL抗體)在兩個所選SC BxPC3腫瘤中之分佈。A及B展示來自注射有靶向T84.66之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL之小鼠A3之腫瘤切片，其中A展示CEA表現且B展示對應CEA-分裂-DOTAM-VH/VL分佈。C及D展示來自注射有靶向CH1A1A之CEA-分裂-DOTAM-VH/VL之小鼠C5之腫瘤切片：C展示CEA表現且D展示對應CEA-分裂-DOTAM-VH/VL分佈。圖22展示在攜有SC BxPC3腫瘤之SCID小鼠中包含二步驟CEA-PRIT之方案189之實驗設計，其中在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時進行處死及屍體剖檢。CEA-分裂-DOTAM-VH-AST (CH1A1A)劑量經調節以補償臼/臼雜質。圖23展示與陽性對照(僅CH1A1A)相比，在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後6小時在攜有腫瘤之SCID小鼠中之 ²¹²Pb之分佈，該等小鼠經CEA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體(T84.66及CH1A1A)之雙互補位對預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD。圖24展示如藉由FACS所測定之分裂抗體之平均螢光強度(MFI)。藉由FACS測定之Pb-DOTA-FITC之結合可僅針對兩個分裂抗體與Pb-DOTA-FITC之共培育而展示。單分裂抗體不產生有效信號。圖25A-C展示分裂抗體之其他例示性型式。圖26展示來自實例8實驗1之結果，其評估個別TA-分裂-DOTAM-VH及TA-分裂-DOTAM-VL抗體與於晶片上捕獲之經生物素標記之DOTAM的結合。圖27展示來自實例8實驗2之結果，其評估DOTAM與於晶片上捕獲之個別TA-分裂-DOTAM-VH及TA-分裂-DOTAM-VL抗體的結合。圖28展示來自實例8實驗3之結果，其評估DOTAM與於晶片上捕獲之TA-分裂-DOTAM-VH/VL抗體(抗體對)之結合。圖29展示方案119之研究概述，評估B6-huCEA小鼠中原位Panc02-huCEA-luc腫瘤之CEA-PRIT (IPANC =胰腺內，d =天，h =小時)。圖30展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時攜有腫瘤之B6-huCEA小鼠中之 ²¹²Pb分佈，該等小鼠藉由CEA-DOTAM (mu)(第1週期)預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ±標凖偏差(SD；n=3)。圖31展示如藉由ELISA所測定，在向方案119之組B及D中之小鼠進行IP投與(200 µg/抗體/小鼠)之後24小時的抗CD40及抗PD-L1抗體之血清濃度。圖展示各治療週期之平均值±SD之個別值。圖32展示組A-D在原位Panc02-huCEA-luc模型中之平均減去背景的BLI信號，其表示為光子(P)/秒/mm ²±平均值之標準誤差(SEM；n=8)。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖33展示組A-D中之個別小鼠在原位Panc02-huCEA-luc模型中之減去背景的BLI信號，表示為光子(P)/秒/mm ²(n=8)。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。箭頭指示第88天，亦即成像之最後一天，截至此時，D組中之3隻小鼠仍存活且無信號。圖34展示原位Panc02-huCEA-luc模型(n=8)中A-D組中之存活率的卡普蘭-邁耶曲線(Kaplan-Meier curve)。根據研究設計，豎點線及豎虛線分別指示一些或所有組的 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)及免疫療法投與。圖35展示在各種處理之後BW之平均變化，表示為初始BW±SEM之百分比。點線及虛線分別指示 ²¹²Pb-DOTAM及免疫療法投與，視治療方案而定。圖36展示方案136之研究概述，評估B6-huCEA小鼠中SC Panc02-huCEA-luc腫瘤之CEA-PRIT (d =天，h =小時)。圖37展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時攜有腫瘤之B6-huCEA小鼠中之 ²¹²Pb分佈，該等小鼠藉由CEA-DOTAM (mu)(第1週期)預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 3)。圖38展示如藉由ELISA所測定，在向組B及D中之小鼠進行IP投與(200 µg/抗體/小鼠)之後24小時的抗CD40及抗PD-L1之血清濃度。圖展示各治療週期之個別值及平均值±SD。右圖中之星號(*)指示由離群值所致之偏斜平均值(圖中未展示；週期1之1個資料點及週期3之3個資料點)。圖39展示SC Panc02-huCEA-luc模型(n=9)中之A-D組之腫瘤生長平均值及標準誤差。曲線在n＜5處截斷。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖40展示SC Panc02-huCEA-luc模型(n=9)中之組A-D之個別腫瘤生長曲線。豎虛線及豎點線分別指示投與免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。圖41展示SC Panc02-huCEA-luc模型中之組A-D的平均減去背景之BLI信號，表示為光子(P)/秒/mm ²± SEM (n=9)。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖42展示組A-D中之個別小鼠在SC Panc02-huCEA-luc模型中之減去背景的BLI信號，表示為光子(P)/秒/mm ²(n=9)。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖43展示基於腫瘤體積≥3000 mm ³之終止準則，SC Panc02-huCEA-luc模型中A-D組中之存活率的卡普蘭-邁耶曲線(n = 9)。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖44展示對用2週期之免疫療法、CEA-PRIT、CEA-PRIT +免疫療法處理或無處理之小鼠的DLN、脾及腫瘤樣品之FACS分析，展示T細胞活化。對應於 ²¹²Pb-DOTAM照射之後48小時，在免疫療法注射之後24小時獲取樣品。星號指示顯著水準(單因子ANOVA，p＜0.05，n=4)。圖45展示對用2週期之免疫療法、CEA-PRIT、CEA-PRIT +免疫療法處理或無處理之小鼠的DLN、脾及腫瘤樣品之FACS分析，展示cDC及pDC之活化。pDC亞群之標記：MHCII+ CD11c ^初始CD317+；CD11b-cDC亞群(交叉呈遞DC)之標記：MHCII+ CD11c ^高CD11b-；CD11b+cDC亞群之標記：MHCII+ CD11c ^高CD11b+。對應於 ²¹²Pb-DOTAM照射之後48小時，在免疫療法注射之後24小時獲取樣品。星號指示顯著水準(單因子ANOVA，p＜0.05，n=4)。圖46展示對用2週期之免疫療法、CEA-PRIT、CEA-PRIT +免疫療法處理或無處理之小鼠的DLN、脾及腫瘤樣品之FACS分析，展示總T細胞出現率。對應於 ²¹²Pb-DOTAM照射之後48小時，在免疫療法注射之後24小時獲取樣品。星號指示顯著水準(單因子ANOVA，p＜0.05，n=4)。圖47展示SC Panc02-huCEA-luc模型(n=5)中之經再攻擊及未經處理之B6-huCEA小鼠的腫瘤生長曲線。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在3個週期CEA-PRIT +CIT (抗CD40 +抗PD-L1)之後顯現無腫瘤。圖48展示對來自SC Panc02-huCEA-luc模型(n=5)中之經再攻擊及未經處理之小鼠之血液、脾及淋巴結(LN)樣品的FACS分析。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在3個週期CEA-PRIT +CIT (抗CD40 +抗PD-L1)之後顯現無腫瘤。星號指示顯著水準(不成對t檢驗，p＜0.05)；dp =雙陽性；iono =離子黴素。圖49展示在各種處理之後BW之平均變化，表示為初始BW±SEM之百分比。點線及虛線分別指示 ²¹²Pb-DOTAM及免疫療法投與，視治療方案而定。圖50展示方案150之研究概述，評估B6-huCEA小鼠中SC MC38-huCEA腫瘤之CEA-PRIT (d =天，h =小時)。圖51展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時攜有MC38-huCEA腫瘤之B6-huCEA小鼠中之 ²¹²Pb分佈，該等小鼠藉由CEA-DOTAM (mu)(第1週期)預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 4)。圖52展示如藉由ELISA所測定，在向B、C及E組中之小鼠進行IP投與(200 µg/抗體/小鼠)之後24小時的抗CD40及抗PD-L1血清濃度。圖展示各治療週期之平均值±SD之個別值。圖53展示SC MC38-huCEA模型(n=9)中之A-E組之腫瘤生長平均值及標準誤差。曲線在n＜5處截斷。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。箭頭指示免疫PD分析。圖54展示SC MC38-huCEA模型(n=9)中之A-E組之個別腫瘤生長曲線。豎虛線及豎點線分別指示投與免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。圖55展示基於腫瘤體積≥3000 mm ³之終止準則，SC MC38-huCEA模型中A-E組中之存活率的卡普蘭-邁耶曲線(n = 9)。符號表示經刪失之小鼠，其出於除腫瘤體積外之原因被安樂死。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖56展示對來自用2個週期之免疫療法、CEA-PRIT、CEA-PRIT +免疫療法處理或無處理之小鼠的淋巴結樣品之FACS分析。對應於 ²¹²Pb-DOTAM照射之後48小時，在免疫療法注射之後24小時獲取樣品。星號指示顯著水準(利用多重比較進行校正的單因子ANOVA [Tukey]，p＜0.05，n=4)。MFI=平均螢光強度。圖57展示SC MC38-huCEA模型中之經再攻擊及未經處理(年齡匹配)之B6-huCEA小鼠的腫瘤生長曲線。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在用抗CD40、抗CD40 +抗PD-L1、CEA-PRIT或CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1處理後顯現無腫瘤。圖58展示對SC MC38-huCEA模型中經再攻擊及未經處理之小鼠之FACS分析。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在用抗CD40、抗CD40 +抗PD-L1、CEA-PRIT或CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1處理後顯現無腫瘤。星號指示顯著水準(利用多重比較進行校正的單因子ANOVA [Tukey]，p＜0.05，n=4)；dp =雙陽性。圖59展示在各種處理之後BW之平均變化，表示為初始BW±SEM之百分比。點線及虛線分別指示 ²¹²Pb-DOTAM及免疫療法投與，視治療方案而定。圖60展示方案195之研究概述，評估huCEACAM5小鼠中SC Panc02-huCEA-Fluc腫瘤之SPLIT PRIT及/或CIT (d =天數，h =小時)。圖61展示在注射 ²¹²Pb-DOTAM之後24小時攜有Panc02-huCEA-Fluc腫瘤之huCEACAM5小鼠中之 ²¹²Pb分佈，該等小鼠藉由SPLIT CEA-PRIT預靶向。器官及組織中之放射性含量表示為平均ID/g % ± SD (n = 3)。圖62展示SC Panc02-huCEA-Fluc模型(n=10) (方案195)中之A-D組之腫瘤生長平均值及標準誤差。曲線在n＜5處截斷。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖63展示SC Panc02-huCEA-Fluc模型(n=10) (方案195)中之A-D組之個別腫瘤生長曲線。豎虛線及豎點線分別指示投與免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM (20 µCi)。圖64展示基於腫瘤體積≥2000 mm ³之終止準則，SC Panc02-huCEA-Fluc模型(方案195)中A-D組中之存活率的卡普蘭-邁耶曲線(n = 10)。符號表示經刪失之小鼠，其出於除腫瘤體積外之原因被安樂死。根據研究設計，豎虛線及豎點線分別指示一些或所有組的免疫療法及 ²¹²Pb-DOTAM投與(20 µCi)。圖65展示SC Panc02-huCEA-Fluc模型中之經再攻擊之小鼠及未經處理(年齡匹配)之huCEACAM5小鼠之腫瘤生長平均值及標準誤差。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在用SPLIT CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1處理後顯現無腫瘤。在再攻擊之後第13天，使每組3隻小鼠安樂死用於免疫PD分析(資料未示出)。圖66展示SC Panc02-huCEA-Fluc模型中之經再攻擊及未經處理(年齡匹配)之huCEACAM5小鼠的腫瘤生長曲線。經再攻擊之小鼠最初為腫瘤載體，在用SPLIT CEA-PRIT +抗CD40 +抗PD-L1處理後顯現無腫瘤。在再攻擊之後第13天，使每組3隻小鼠安樂死用於免疫PD分析(資料未示出)。圖67展示在各種處理之後BW之平均變化，表示為初始BW±SEM之百分比。點線及虛線分別指示 ²¹²Pb-DOTAM及免疫療法投與，視治療方案而定。


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              50                  55                  60                  
          Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Val Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala 
                          85                  90                  95      
          Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro Pro His Leu Trp 
                      100                 105                 110         
          Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120         
          <![CDATA[<210>  8]]>
          <![CDATA[<211>  112]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  8]]>
          Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His Ser Val Tyr Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 
                  35                  40                  45              
          Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp 
                          85                  90                  95      
          Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                      100                 105                 110         
          <![CDATA[<210>  9]]>
          <![CDATA[<211>  122]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  9]]>
          Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys 
              50                  55                  60                  
          Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 
                          85                  90                  95      
          Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro Pro His Leu Trp 
                      100                 105                 110         
          Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120         
          <![CDATA[<210>  10]]>
          <![CDATA[<211>  112]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  10]]>
          Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His Ser Val Tyr Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 
                  35                  40                  45              
          Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp 
                          85                  90                  95      
          Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                      100                 105                 110         
          <![CDATA[<210>  11]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  11]]>
          Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr Tyr Met His 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  12]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  12]]>
          Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe Gln 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  13]]>
          <![CDATA[<211>  12]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  13]]>
          Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr 
          1               5                   10          
          <![CDATA[<210>  14]]>
          <![CDATA[<211>  15]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  14]]>
          Arg Ala Gly Glu Ser Val Asp Ile Phe Gly Val Gly Phe Leu His 
          1               5                   10                  15  
          <![CDATA[<210>  15]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  15]]>
          Arg Ala Ser Asn Arg Ala Thr 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  16]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  16]]>
          Gln Gln Thr Asn Glu Asp Pro Tyr Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  17]]>
          <![CDATA[<211>  121]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  17]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120     
          <![CDATA[<210>  18]]>
          <![CDATA[<211>  111]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  18]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Gly Glu Ser Val Asp Ile Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 
                  35                  40                  45              
          Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 
              50                  55                  60                  
          Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 
                          85                  90                  95      
          Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105                 110     
          <![CDATA[<210>  19]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  19]]>
          Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe Gly Met Asn 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  20]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  20]]>
          Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe Lys 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  21]]>
          <![CDATA[<211>  12]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  21]]>
          Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr 
          1               5                   10          
          <![CDATA[<210>  22]]>
          <![CDATA[<211>  11]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  22]]>
          Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr Val Ala 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210>  23]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  23]]>
          Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  24]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  24]]>
          His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu Phe Thr 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  25]]>
          <![CDATA[<211>  121]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  25]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120     
          <![CDATA[<210>  26]]>
          <![CDATA[<211>  108]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  26]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105             
          <![CDATA[<210>  27]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  27]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  28]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  28]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  29]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  29]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
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          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
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          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
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          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
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          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
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              450 
          <![CDATA[<210>  30]]>
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          <![CDATA[<400>  30]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
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          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
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          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
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                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
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          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
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                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
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          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
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          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
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                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
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          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
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          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
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          <![CDATA[<400>  31]]>
          Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Gly Gly Ser 
                      20  
          <![CDATA[<210>  32]]>
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          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  32]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                      580                 585                 590     
          <![CDATA[<210>  33]]>
          <![CDATA[<211>  581]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  33]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His 
                          485                 490                 495     
          Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 
                      500                 505                 510         
          Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly 
                  515                 520                 525             
          Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 
              530                 535                 540                 
          Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu 
          545                 550                 555                 560 
          Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr 
                          565                 570                 575     
          Lys Val Glu Ile Lys 
                      580     
          <![CDATA[<210>  34]]>
          <![CDATA[<211>  215]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  34]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 
                      100                 105                 110         
          Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 
                  115                 120                 125             
          Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 
              130                 135                 140                 
          Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 
                          165                 170                 175     
          Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 
                      180                 185                 190         
          Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 
                  195                 200                 205             
          Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215 
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  35]]>
          Asp Tyr Gly Val His 
          1               5   
          <![CDATA[<210>  36]]>
          <![CDATA[<211>  16]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  36]]>
          Val Ile Trp Ser Gly Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Thr Ala Leu Ile Ser 
          1               5                   10                  15      
          <![CDATA[<210>  37]]>
          <![CDATA[<211>  11]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  37]]>
          Arg Gly Ser Tyr Pro Tyr Asn Tyr Phe Asp Ala 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210>  38]]>
          <![CDATA[<211>  14]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  38]]>
          Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ala Ser Asn Tyr Ala Asn 
          1               5                   10                  
          <![CDATA[<210>  39]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  39]]>
          Gly His Asn Asn Arg Pro Pro 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  40]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  40]]>
          Ala Leu Trp Tyr Ser Asp His Trp Val 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  41]]>
          <![CDATA[<211>  119]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  41]]>
          His Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Thr Ala Leu Ile 
              50                  55                  60                  
          Ser Arg Leu Asn Ile Tyr Arg Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Phe Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Met Asn Ser Leu Gln Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala 
                          85                  90                  95      
          Arg Arg Gly Ser Tyr Pro Tyr Asn Tyr Phe Asp Ala Trp Gly Gln Gly 
                      100                 105                 110         
          Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 
          <![CDATA[<210>  42]]>
          <![CDATA[<211>  109]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  42]]>
          Gln Ala Val Val Ile Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Pro Pro Gly Glu 
          1               5                   10                  15      
          Thr Val Thr Leu Thr Cys Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ala Ser 
                      20                  25                  30          
          Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly 
                  35                  40                  45              
          Leu Ile Gly Gly His Asn Asn Arg Pro Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Ala Gly Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asp 
                          85                  90                  95      
          His Trp Val Ile Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 
                      100                 105                 
          <![CDATA[<210>  43]]>
          <![CDATA[<211>  5]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  43]]>
          Asp Tyr Tyr Met Asn 
          1               5   
          <![CDATA[<210>  44]]>
          <![CDATA[<211>  19]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  44]]>
          Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala Ser 
          1               5                   10                  15      
          Val Lys Gly 
          <![CDATA[<210>  45]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  45]]>
          Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  46]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  46]]>
          Arg Ala Ser Ser Ser Val Thr Tyr Ile His 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  47]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  47]]>
          Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  48]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  48]]>
          Gln His Trp Ser Ser Lys Pro Pro Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  49]]>
          <![CDATA[<211>  121]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  49]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120     
          <![CDATA[<210>  50]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  50]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Thr Tyr Ile 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Ser Trp Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Ser Lys Pro Pro Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  51]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  51]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  52]]>
          <![CDATA[<211>  591]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  52]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                      580                 585                 590     
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          <![CDATA[<211>  449]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  53]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro 
          <![CDATA[<210>  54]]>
          <![CDATA[<211>  213]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  54]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Thr Tyr Ile 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Ser Trp Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Ser Lys Pro Pro Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 
                      100                 105                 110         
          Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 
                  115                 120                 125             
          Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 
              130                 135                 140                 
          Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 
                      180                 185                 190         
          Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 
                  195                 200                 205             
          Asn Arg Gly Glu Cys 
              210             
          <![CDATA[<210>  55]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<400>  55]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  56]]>
          <![CDATA[<211>  581]]>
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          <![CDATA[<400>  56]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His 
                          485                 490                 495     
          Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 
                      500                 505                 510         
          Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly 
                  515                 520                 525             
          Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 
              530                 535                 540                 
          Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu 
          545                 550                 555                 560 
          Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr 
                          565                 570                 575     
          Lys Val Glu Ile Lys 
                      580     
          <![CDATA[<210>  57]]>
          <![CDATA[<211>  449]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  57]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Asn Lys Ala Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Tyr Ser Ala 
              50                  55                  60                  
          Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Cys Thr Arg Asp Arg Gly Leu Arg Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro 
          <![CDATA[<210>  58]]>
          <![CDATA[<211>  213]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  58]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Thr Tyr Ile 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Ser Trp Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Ser Lys Pro Pro Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 
                      100                 105                 110         
          Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 
                  115                 120                 125             
          Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 
              130                 135                 140                 
          Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 
                      180                 185                 190         
          Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 
                  195                 200                 205             
          Asn Arg Gly Glu Cys 
              210             
          <![CDATA[<210>  59]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  59]]>
          Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr Ala Ile Ser 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  60]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  60]]>
          Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  61]]>
          <![CDATA[<211>  11]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  61]]>
          Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210>  62]]>
          <![CDATA[<211>  11]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  62]]>
          Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210>  63]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  63]]>
          Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  64]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  64]]>
          Gln Gln Asn Thr Gln Tyr Pro Met Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  65]]>
          <![CDATA[<211>  120]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  65]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
          <![CDATA[<210>  66]]>
          <![CDATA[<211>  107]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  66]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp 
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Thr Gln Tyr Pro Met 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                      100                 105         
          <![CDATA[<210>  67]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  67]]>
          Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr Ala Met Ala 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  68]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  68]]>
          Ser Ile Ser Thr Gly Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  69]]>
          <![CDATA[<211>  8]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  69]]>
          His Thr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr 
          1               5               
          <![CDATA[<210>  70]]>
          <![CDATA[<211>  15]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  70]]>
          Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ile Ser Gly Ile Asn Leu Met Asn 
          1               5                   10                  15  
          <![CDATA[<210>  71]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  71]]>
          His Ala Ser Ile Leu Ala Ser 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  72]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  72]]>
          Gln Gln Thr Arg Glu Ser Pro Leu Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  73]]>
          <![CDATA[<211>  117]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  73]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 
                  35                  40                  45              
          Ala Ser Ile Ser Thr Gly Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Thr His Thr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met 
                      100                 105                 110         
          Val Thr Val Ser Ser 
                  115         
          <![CDATA[<210>  74]]>
          <![CDATA[<211>  111]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  74]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ile Ser 
                      20                  25                  30          
          Gly Ile Asn Leu Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Gln Pro 
                  35                  40                  45              
          Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Ile Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp 
              50                  55                  60                  
          Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Arg 
                          85                  90                  95      
          Glu Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105                 110     
          <![CDATA[<210>  75]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  75]]>
          Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  76]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  76]]>
          Ala Ile Ile Gly Ser Gly Ala Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  77]]>
          <![CDATA[<211>  8]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  77]]>
          Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr 
          1               5               
          <![CDATA[<210>  78]]>
          <![CDATA[<211>  12]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  78]]>
          Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Ser Tyr Leu Ala 
          1               5                   10          
          <![CDATA[<210>  79]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  79]]>
          Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  80]]>
          <![CDATA[<211>  9]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  80]]>
          Gln Gln Gly Ile Met Leu Pro Pro Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210>  81]]>
          <![CDATA[<211>  117]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  81]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 
                  35                  40                  45              
          Ser Ala Ile Ile Gly Ser Gly Ala Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 
                      100                 105                 110         
          Val Thr Val Ser Ser 
                  115         
          <![CDATA[<210>  82]]>
          <![CDATA[<211>  108]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400>  82]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 
                  35                  40                  45              
          Ile Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ile Met Leu Pro 
                          85                  90                  95      
          Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                      100                 105             
          <![CDATA[<210>  83]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  83]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  84]]>
          <![CDATA[<211>  581]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<400>  84]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His 
                          485                 490                 495     
          Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 
                      500                 505                 510         
          Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly 
                  515                 520                 525             
          Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 
              530                 535                 540                 
          Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu 
          545                 550                 555                 560 
          Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr 
                          565                 570                 575     
          Lys Val Glu Ile Lys 
                      580     
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  85]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  86]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  86]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  87]]>
          <![CDATA[<211>  594]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  87]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala 
                      580                 585                 590         
          Ser Thr 
          <![CDATA[<210>  88]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  88]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  89]]>
          <![CDATA[<211>  218]]>
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  89]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Gly Glu Ser Val Asp Ile Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 
                  35                  40                  45              
          Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 
              50                  55                  60                  
          Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 
                          85                  90                  95      
          Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 
                  115                 120                 125             
          Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 
              130                 135                 140                 
          Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 
                          165                 170                 175     
          Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 
                      180                 185                 190         
          His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 
                  195                 200                 205             
          Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215             
          <![CDATA[<210>  90]]>
          <![CDATA[<211>  449]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  90]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly 
          <![CDATA[<210>  91]]>
          <![CDATA[<211>  580]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  91]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 
          465                 470                 475                 480 
          Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His Ser 
                          485                 490                 495     
          Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val 
                  515                 520                 525             
          Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 
              530                 535                 540                 
          Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly 
          545                 550                 555                 560 
          Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys 
                          565                 570                 575     
          Val Glu Ile Lys 
                      580 
          <![CDATA[<210>  92]]>
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          <![CDATA[<400>  92]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly 
          <![CDATA[<210>  93]]>
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          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly 
          <![CDATA[<210>  94]]>
          <![CDATA[<211>  593]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  94]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val 
          465                 470                 475                 480 
          Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser 
                          485                 490                 495     
          Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala 
                      500                 505                 510         
          Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala 
                  515                 520                 525             
          Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser 
              530                 535                 540                 
          Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr 
          545                 550                 555                 560 
          Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro 
                          565                 570                 575     
          Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 
                      580                 585                 590         
          Thr 
          <![CDATA[<210>  95]]>
          <![CDATA[<211>  449]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  95]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Gly Ile Leu Pro Ala Phe Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Leu Pro Pro Leu Pro Gly Ala Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 
                  115                 120                 125             
          Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 
              130                 135                 140                 
          Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 
                          165                 170                 175     
          Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 
                  195                 200                 205             
          Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 
              210                 215                 220                 
          Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu 
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 
                  355                 360                 365             
          Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 
                  435                 440                 445             
          Gly 
          <![CDATA[<210>  96]]>
          <![CDATA[<211>  214]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  96]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp 
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Thr Gln Tyr Pro Met 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 
          <![CDATA[<210>  97]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  97]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  98]]>
          <![CDATA[<211>  579]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  98]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ala Val Val Ile Gln Glu Ser Ala Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Thr Thr Pro Pro Gly Glu Thr Val Thr Leu Thr Cys Gly Ser Ser Thr 
                          485                 490                 495     
          Gly Ala Val Thr Ala Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro 
                      500                 505                 510         
          Asp His Leu Phe Thr Gly Leu Ile Gly Gly His Asn Asn Arg Pro Pro 
                  515                 520                 525             
          Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala 
              530                 535                 540                 
          Leu Thr Ile Ala Gly Thr Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys 
          545                 550                 555                 560 
          Ala Leu Trp Tyr Ser Asp His Trp Val Ile Gly Gly Gly Thr Lys Leu 
                          565                 570                 575     
          Thr Val Leu 
          <![CDATA[<210>  99]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  99]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  100]]>
          <![CDATA[<211>  450]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  100]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
          <![CDATA[<210>  101]]>
          <![CDATA[<211>  592]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  101]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser His Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly 
          465                 470                 475                 480 
          Leu Val Gln Pro Ser Gln Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly 
                          485                 490                 495     
          Phe Ser Leu Thr Asp Tyr Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly 
                      500                 505                 510         
          Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Gly Thr Ala 
                  515                 520                 525             
          Tyr Asn Thr Ala Leu Ile Ser Arg Leu Asn Ile Tyr Arg Asp Asn Ser 
              530                 535                 540                 
          Lys Asn Gln Val Phe Leu Glu Met Asn Ser Leu Gln Ala Glu Asp Thr 
          545                 550                 555                 560 
          Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Pro Tyr Asn Tyr Phe 
                          565                 570                 575     
          Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 
                      580                 585                 590         
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  102]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly 
              450 
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          <![CDATA[<400>  103]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 
                      100                 105                 110         
          Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 
                  115                 120                 125             
          Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 
              130                 135                 140                 
          Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 
                          165                 170                 175     
          Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 
                      180                 185                 190         
          Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 
                  195                 200                 205             
          Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215 
          <![CDATA[<210>  104]]>
          <![CDATA[<211>  447]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  104]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 
                  35                  40                  45              
          Ala Ser Ile Ser Thr Gly Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Thr His Thr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met 
                      100                 105                 110         
          Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 
                  115                 120                 125             
          Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 
              130                 135                 140                 
          Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 
                      180                 185                 190         
          Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 
                  195                 200                 205             
          Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 
              210                 215                 220                 
          Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val 
          225                 230                 235                 240 
          Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 
                          245                 250                 255     
          Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 
                      260                 265                 270         
          Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 
                  275                 280                 285             
          Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 
              290                 295                 300                 
          Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 
                          325                 330                 335     
          Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 
                      340                 345                 350         
          Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 
                  355                 360                 365             
          Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 
              370                 375                 380                 
          Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 
          385                 390                 395                 400 
          Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 
                          405                 410                 415     
          Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 
                      420                 425                 430         
          His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445         
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  105]]>
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                      20                  25                  30          
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                  35                  40                  45              
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
              50                  55                  60                  
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
                          85                  90                  95      
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                      100                 105                 110         
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                  115                 120                 125             
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
              130                 135                 140                 
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                  195                 200                 205             
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
              210                 215                 220                 
          Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser 
                          245                 250                 255     
          Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser 
                      260                 265                 270         
          Ser His Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 
                  275                 280                 285             
          Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala 
              290                 295                 300                 
          Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 
          305                 310                 315                 320 
          Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr 
                          325                 330                 335     
          Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly 
                      340                 345                 350         
          Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                  355                 
          <![CDATA[<210>  106]]>
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  106]]>
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                      20                  25                  30          
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                  35                  40                  45              
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
              50                  55                  60                  
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
                          85                  90                  95      
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                      100                 105                 110         
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                  115                 120                 125             
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
              130                 135                 140                 
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                  195                 200                 205             
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
              210                 215                 220                 
          Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val 
                          245                 250                 255     
          Leu Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly 
                      260                 265                 270         
          Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly 
                  275                 280                 285             
          Lys Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr 
                          325                 330                 335     
          Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala 
                      340                 345                 350         
          Tyr Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  355                 360                 365             
          Ala 
          <![CDATA[<210>  107]]>
          <![CDATA[<211>  218]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  107]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ile Ser 
                      20                  25                  30          
          Gly Ile Asn Leu Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Gln Pro 
                  35                  40                  45              
          Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Ile Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp 
              50                  55                  60                  
          Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Arg 
                          85                  90                  95      
          Glu Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 
                  115                 120                 125             
          Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 
              130                 135                 140                 
          Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 
                          165                 170                 175     
          Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 
                      180                 185                 190         
          His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 
                  195                 200                 205             
          Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215             
          <![CDATA[<210>  108]]>
          <![CDATA[<211>  447]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  108]]>
          Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 
                  35                  40                  45              
          Ser Ala Ile Ile Gly Ser Gly Ala Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 
                      100                 105                 110         
          Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 
                  115                 120                 125             
          Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 
              130                 135                 140                 
          Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 
                      180                 185                 190         
          Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 
                  195                 200                 205             
          Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 
              210                 215                 220                 
          Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val 
          225                 230                 235                 240 
          Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 
                          245                 250                 255     
          Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 
                      260                 265                 270         
          Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 
                  275                 280                 285             
          Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 
              290                 295                 300                 
          Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 
          305                 310                 315                 320 
          Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 
                          325                 330                 335     
          Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 
                      340                 345                 350         
          Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu 
                  355                 360                 365             
          Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 
              370                 375                 380                 
          Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 
          385                 390                 395                 400 
          Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 
                          405                 410                 415     
          Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 
                      420                 425                 430         
          His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445         
          <![CDATA[<210>  109]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400>  109]]>
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                      20                  25                  30          
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                  35                  40                  45              
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
              50                  55                  60                  
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
                          85                  90                  95      
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                      100                 105                 110         
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                  115                 120                 125             
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
              130                 135                 140                 
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                  195                 200                 205             
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
              210                 215                 220                 
          Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser 
                          245                 250                 255     
          Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser 
                      260                 265                 270         
          Ser His Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 
                  275                 280                 285             
          Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala 
              290                 295                 300                 
          Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 
          305                 310                 315                 320 
          Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr 
                          325                 330                 335     
          Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly 
                      340                 345                 350         
          Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                  355                 
          <![CDATA[<210>  110]]>
          <![CDATA[<211>  369]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  110]]>
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                      20                  25                  30          
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                  35                  40                  45              
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
              50                  55                  60                  
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
                          85                  90                  95      
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                      100                 105                 110         
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                  115                 120                 125             
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
              130                 135                 140                 
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                  195                 200                 205             
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
              210                 215                 220                 
          Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val 
                          245                 250                 255     
          Leu Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly 
                      260                 265                 270         
          Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly 
                  275                 280                 285             
          Lys Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr 
                          325                 330                 335     
          Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala 
                      340                 345                 350         
          Tyr Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  355                 360                 365             
          Ala 
          <![CDATA[<210>  111]]>
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          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  111]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 
                  35                  40                  45              
          Ile Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ile Met Leu Pro 
                          85                  90                  95      
          Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 
                      100                 105                 110         
          Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 
                  115                 120                 125             
          Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 
              130                 135                 140                 
          Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 
                          165                 170                 175     
          Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 
                      180                 185                 190         
          Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 
                  195                 200                 205             
          Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215 
          <![CDATA[<210>  112]]>
          <![CDATA[<211>  451]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  112]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Lys 
              450     
          <![CDATA[<210>  113]]>
          <![CDATA[<211>  359]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  113]]>
          Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His Ser Val Tyr Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 
                  35                  40                  45              
          Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp 
                          85                  90                  95      
          Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 
                      100                 105                 110         
          Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Gly Ser Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 
              130                 135                 140                 
          Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 
          145                 150                 155                 160 
          Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 
                          165                 170                 175     
          Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 
                      180                 185                 190         
          Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 
                  195                 200                 205             
          Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 
              210                 215                 220                 
          Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 
                          245                 250                 255     
          Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 
                      260                 265                 270         
          Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 
                  275                 280                 285             
          Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 
              290                 295                 300                 
          Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 
                          325                 330                 335     
          Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 
                      340                 345                 350         
          Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  355                 
          <![CDATA[<210>  114]]>
          <![CDATA[<211>  369]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  114]]>
          Gly Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys 
              50                  55                  60                  
          Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Val Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala 
                          85                  90                  95      
          Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro Pro His Leu Trp 
                      100                 105                 110         
          Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Asp Lys 
              130                 135                 140                 
          Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 
                          165                 170                 175     
          Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 
                      180                 185                 190         
          Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 
                  195                 200                 205             
          Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 
              210                 215                 220                 
          Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 
          225                 230                 235                 240 
          Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile Glu Lys 
                          245                 250                 255     
          Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr 
                      260                 265                 270         
          Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser 
                  275                 280                 285             
          Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 
              290                 295                 300                 
          Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 
                          325                 330                 335     
          Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 
                      340                 345                 350         
          Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
                  355                 360                 365             
          Lys 
          <![CDATA[<210>  115]]>
          <![CDATA[<211>  215]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  115]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 
                      100                 105                 110         
          Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 
                  115                 120                 125             
          Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 
              130                 135                 140                 
          Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 
                          165                 170                 175     
          Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 
                      180                 185                 190         
          Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 
                  195                 200                 205             
          Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215 
          <![CDATA[<210>  116]]>
          <![CDATA[<211>  5]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  116]]>
          Asp Ser Tyr Met His 
          1               5   
          <![CDATA[<210>  117]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  117]]>
          Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe Gln 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  118]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  118]]>
          Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 
          1               5                   10                  15      
          Gly 
          <![CDATA[<210>  119]]>
          <![CDATA[<211>  11]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  119]]>
          Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210>  120]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  120]]>
          Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  121]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  121]]>
          Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  122]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  122]]>
          Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Met 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  123]]>
          <![CDATA[<211>  7]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  123]]>
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser 
          1               5           
          <![CDATA[<210>  124]]>
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          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400>  124]]>
          Tyr Thr Ser Asn Leu Ala Ser 
          1               5           
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          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
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          Ser Thr Ser Ser Leu Gln Ser 
          1               5           
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          <![CDATA[<400>  126]]>
          Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
          1               5                   
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  127]]>
          Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Ser Gly Thr 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Leu Arg Gln Gly Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Lys Ala Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
          <![CDATA[<210>  128]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400>  128]]>
          Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  129]]>
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          <![CDATA[<400>  129]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  130]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  131]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  132]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
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                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
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          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 
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          Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
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          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
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          <![CDATA[<400>  134]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Ser 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu Tyr Ala Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Thr Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Asn Glu Gly Thr Pro Thr Gly Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 
                      100                 105                 110         
          Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                  115                 120 
          <![CDATA[<210>  135]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  135]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  136]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  136]]>
          Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  137]]>
          <![CDATA[<211>  107]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  137]]>
          Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 
                      20                  25                  30          
          Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105         
          <![CDATA[<210>  138]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  138]]>
          Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Pro Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  139]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  139]]>
          Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Pro Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  140]]>
          <![CDATA[<211>  106]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  140]]>
          Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Pro Tyr Met 
                      20                  25                  30          
          His Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 
                  35                  40                  45              
          Ser Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 
              50                  55                  60                  
          Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105     
          <![CDATA[<210>  141]]>
          <![CDATA[<211>  88]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  141]]>
          Pro Lys Pro Phe Ile Thr Ser Asn Asn Ser Asn Pro Val Glu Asp Glu 
          1               5                   10                  15      
          Asp Ala Val Ala Leu Thr Cys Glu Pro Glu Ile Gln Asn Thr Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Leu Trp Trp Val Asn Asn Gln Ser Leu Pro Val Ser Pro Arg Leu Gln 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Asn Asp Asn Arg Thr Leu Thr Leu Leu Ser Val Thr Arg Asn 
              50                  55                  60                  
          Asp Val Gly Pro Tyr Glu Cys Gly Ile Gln Asn Lys Leu Ser Val Asp 
          65                  70                  75                  80  
          His Ser Asp Pro Val Ile Leu Asn 
                          85              
          <![CDATA[<210>  142]]>
          <![CDATA[<211>  88]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  142]]>
          Pro Lys Pro Ser Ile Ser Ser Asn Asn Ser Lys Pro Val Glu Asp Lys 
          1               5                   10                  15      
          Asp Ala Val Ala Phe Thr Cys Glu Pro Glu Thr Gln Asp Ala Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Leu Trp Trp Val Asn Asn Gln Ser Leu Pro Val Ser Pro Arg Leu Gln 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Asn Gly Asn Arg Thr Leu Thr Leu Phe Asn Val Thr Arg Asn 
              50                  55                  60                  
          Asp Thr Ala Ser Tyr Lys Cys Glu Thr Gln Asn Pro Val Ser Ala Arg 
          65                  70                  75                  80  
          Arg Ser Asp Ser Val Ile Leu Asn 
                          85              
          <![CDATA[<210>  143]]>
          <![CDATA[<211>  122]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  143]]>
          Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu Thr 
          1               5                   10                  15      
          Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Ser 
                      20                  25                  30          
          Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Gly 
                  35                  40                  45              
          Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 
              50                  55                  60                  
          Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Val Leu Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro Pro His Leu Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala 
                  115                 120         
          <![CDATA[<210>  144]]>
          <![CDATA[<211>  592]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  144]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala 
                      580                 585                 590         
          <![CDATA[<210>  145]]>
          <![CDATA[<211>  21]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  145]]>
          Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Ser Gly Gly Ser 
                      20      
          <![CDATA[<210>  146]]>
          <![CDATA[<211>  21]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  146]]>
          Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Ser Gly Gly Gly 
                      20      
          <![CDATA[<210>  147]]>
          <![CDATA[<211>  277]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  147]]>
          Met Val Arg Leu Pro Leu Gln Cys Val Leu Trp Gly Cys Leu Leu Thr 
          1               5                   10                  15      
          Ala Val His Pro Glu Pro Pro Thr Ala Cys Arg Glu Lys Gln Tyr Leu 
                      20                  25                  30          
          Ile Asn Ser Gln Cys Cys Ser Leu Cys Gln Pro Gly Gln Lys Leu Val 
                  35                  40                  45              
          Ser Asp Cys Thr Glu Phe Thr Glu Thr Glu Cys Leu Pro Cys Gly Glu 
              50                  55                  60                  
          Ser Glu Phe Leu Asp Thr Trp Asn Arg Glu Thr His Cys His Gln His 
          65                  70                  75                  80  
          Lys Tyr Cys Asp Pro Asn Leu Gly Leu Arg Val Gln Gln Lys Gly Thr 
                          85                  90                  95      
          Ser Glu Thr Asp Thr Ile Cys Thr Cys Glu Glu Gly Trp His Cys Thr 
                      100                 105                 110         
          Ser Glu Ala Cys Glu Ser Cys Val Leu His Arg Ser Cys Ser Pro Gly 
                  115                 120                 125             
          Phe Gly Val Lys Gln Ile Ala Thr Gly Val Ser Asp Thr Ile Cys Glu 
              130                 135                 140                 
          Pro Cys Pro Val Gly Phe Phe Ser Asn Val Ser Ser Ala Phe Glu Lys 
          145                 150                 155                 160 
          Cys His Pro Trp Thr Ser Cys Glu Thr Lys Asp Leu Val Val Gln Gln 
                          165                 170                 175     
          Ala Gly Thr Asn Lys Thr Asp Val Val Cys Gly Pro Gln Asp Arg Leu 
                      180                 185                 190         
          Arg Ala Leu Val Val Ile Pro Ile Ile Phe Gly Ile Leu Phe Ala Ile 
                  195                 200                 205             
          Leu Leu Val Leu Val Phe Ile Lys Lys Val Ala Lys Lys Pro Thr Asn 
              210                 215                 220                 
          Lys Ala Pro His Pro Lys Gln Glu Pro Gln Glu Ile Asn Phe Pro Asp 
          225                 230                 235                 240 
          Asp Leu Pro Gly Ser Asn Thr Ala Ala Pro Val Gln Glu Thr Leu His 
                          245                 250                 255     
          Gly Cys Gln Pro Val Thr Gln Glu Asp Gly Lys Glu Ser Arg Ile Ser 
                      260                 265                 270         
          Val Gln Glu Arg Gln 
                  275         
          <![CDATA[<210>  148]]>
          <![CDATA[<211>  290]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  148]]>
          Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu 
          1               5                   10                  15      
          Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu 
                  35                  40                  45              
          Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile 
              50                  55                  60                  
          Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn 
                          85                  90                  95      
          Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr 
                      100                 105                 110         
          Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val 
                  115                 120                 125             
          Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val 
              130                 135                 140                 
          Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr 
          145                 150                 155                 160 
          Pro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn 
                      180                 185                 190         
          Val Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr 
                  195                 200                 205             
          Cys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu 
              210                 215                 220                 
          Val Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr His 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu Leu Cys Leu Gly Val Ala Leu Thr 
                          245                 250                 255     
          Phe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly Arg Met Met Asp Val Lys Lys Cys 
                      260                 265                 270         
          Gly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys Lys Gln Ser Asp Thr His Leu Glu 
                  275                 280                 285             
          Glu Thr 
              290 
          <![CDATA[<210>  149]]>
          <![CDATA[<211>  218]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  149]]>
          Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Gly Glu Ser Val Asp Ile Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 
                  35                  40                  45              
          Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 
              50                  55                  60                  
          Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn 
                          85                  90                  95      
          Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 
                  115                 120                 125             
          Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 
              130                 135                 140                 
          Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 
                          165                 170                 175     
          Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 
                      180                 185                 190         
          His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 
                  195                 200                 205             
          Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 215             
          <![CDATA[<210>  150]]>
          <![CDATA[<211>  591]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  150]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                      580                 585                 590     
          <![CDATA[<210>  151]]>
          <![CDATA[<211>  10]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  151]]>
          Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met Asn 
          1               5                   10  
          <![CDATA[<210>  152]]>
          <![CDATA[<211>  20]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  152]]>
          Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gly Ser Gly Gly 
                      20  
          <![CDATA[<210>  153]]>
          <![CDATA[<211>  594]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  153]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe 
                          485                 490                 495     
          Ser Leu Ser Thr Tyr Ser Met Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 
                      500                 505                 510         
          Ala Leu Glu Trp Leu Gly Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr 
                  515                 520                 525             
          Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 
              530                 535                 540                 
          Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 
          545                 550                 555                 560 
          Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr 
                          565                 570                 575     
          Pro Pro His Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala 
                      580                 585                 590         
          Ser Thr 
          <![CDATA[<210>  154]]>
          <![CDATA[<211>  215]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  154]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Ala Ala Val Gly Thr Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Lys Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Tyr Thr Tyr Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala 
                      100                 105                 110         
          Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser 
                  115                 120                 125             
          Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp 
              130                 135                 140                 
          Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val 
          145                 150                 155                 160 
          Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met 
                          165                 170                 175     
          Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser 
                      180                 185                 190         
          Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys 
                  195                 200                 205             
          Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 
              210                 215 
          <![CDATA[<210>  155]]>
          <![CDATA[<211>  583]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  155]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val 
              130                 135                 140                 
          Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro 
                  195                 200                 205             
          Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly 
              210                 215                 220                 
          Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile 
          225                 230                 235                 240 
          Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys 
                          245                 250                 255     
          Val Thr Cys Val Val Val Ala Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln 
                      260                 265                 270         
          Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln 
                  275                 280                 285             
          Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu 
              290                 295                 300                 
          Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg 
          305                 310                 315                 320 
          Val Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 
                          325                 330                 335     
          Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr 
                  355                 360                 365             
          Asn Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln 
              370                 375                 380                 
          Pro Ala Glu Asn Tyr Asp Asn Thr Gln Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly 
          385                 390                 395                 400 
          Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Asp Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu 
                          405                 410                 415     
          Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn 
                      420                 425                 430         
          His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly 
                  435                 440                 445             
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 
              450                 455                 460                 
          Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 
          465                 470                 475                 480 
          Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Ser 
                          485                 490                 495     
          Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 
                      500                 505                 510         
          Phe Ile Gly Ser Arg Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 
                  515                 520                 525             
          Arg Phe Thr Val Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 
              530                 535                 540                 
          Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Arg 
          545                 550                 555                 560 
          Asp Pro Tyr Gly Gly Gly Ala Tyr Pro Pro His Leu Trp Gly Pro Gly 
                          565                 570                 575     
          Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 
                      580             
          <![CDATA[<210>  156]]>
          <![CDATA[<211>  575]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
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          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<400>  156]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Phe 
                      20                  25                  30          
          Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Trp Ile Asn Thr Lys Thr Gly Glu Ala Thr Tyr Val Glu Glu Phe 
              50                  55                  60                  
          Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Arg Trp Asp Phe Ala Tyr Tyr Val Glu Ala Met Asp Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val 
              130                 135                 140                 
          Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro 
                  195                 200                 205             
          Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly 
              210                 215                 220                 
          Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile 
          225                 230                 235                 240 
          Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys 
                          245                 250                 255     
          Val Thr Cys Val Val Val Ala Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln 
                      260                 265                 270         
          Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln 
                  275                 280                 285             
          Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu 
              290                 295                 300                 
          Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg 
          305                 310                 315                 320 
          Val Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 
                          325                 330                 335     
          Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Lys Lys Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr 
                  355                 360                 365             
          Asn Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln 
              370                 375                 380                 
          Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Lys Thr Asp Gly 
          385                 390                 395                 400 
          Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu 
                          405                 410                 415     
          Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn 
                      420                 425                 430         
          His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly 
                  435                 440                 445             
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 
              450                 455                 460                 
          Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Pro Ala Val Gly Gly 
          465                 470                 475                 480 
          Thr Val Thr Ile Ser Cys Gln Ser Ser His Ser Val Tyr Ser Asp Asn 
                          485                 490                 495     
          Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Leu Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu 
                      500                 505                 510         
          Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Ser 
                  515                 520                 525             
          Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln 
              530                 535                 540                 
          Ser Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Tyr Asp Asp Glu 
          545                 550                 555                 560 
          Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys 
                          565                 570                 575 
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          <![CDATA[<400>  157]]>
          Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 
          1               5                   10                  15      
          Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 
                      20                  25                  30          
          Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 
                  35                  40                  45              
          Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Ser Lys Tyr Val Pro Lys Phe 
              50                  55                  60                  
          Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 
          65                  70                  75                  80  
          Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Ala Pro Phe Gly Tyr Tyr Val Ser Asp Tyr Ala Met Ala Tyr Trp Gly 
                      100                 105                 110         
          Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 
                  115                 120                 125             
          Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 
              130                 135                 140                 
          Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 
                          165                 170                 175     
          Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 
                      180                 185                 190         
          Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 
                  195                 200                 205             
          Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 
              210                 215                 220                 
          Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 
                          245                 250                 255     
          Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 
                      260                 265                 270         
          Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 
                  275                 280                 285             
          His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 
              290                 295                 300                 
          Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Gly Ala Pro Ile 
                          325                 330                 335     
          Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 
                      340                 345                 350         
          Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 
                  355                 360                 365             
          Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 
              370                 375                 380                 
          Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val 
                          405                 410                 415     
          Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 
                      420                 425                 430         
          His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 
                  435                 440                 445             
          Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 
              450                 455                 460                 
          Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser His 
                          485                 490                 495     
          Ser Val Tyr Ser Asp Asn Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 
                      500                 505                 510         
          Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gln Ala Ser Lys Leu Ala Ser Gly 
                  515                 520                 525             
          Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu 
              530                 535                 540                 
          Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu 
          545                 550                 555                 560 
          Gly Gly Tyr Asp Asp Glu Ser Asp Thr Tyr Gly Phe Gly Gly Gly Thr 
                          565                 570                 575     
          Lys Val Glu Ile Lys 
                      580

Claims

一種治療個體中增生性病症之方法，其包含用以下治療該個體： i)預靶向放射免疫療法，該放射免疫療法包含向該個體投與多特異性抗體或分裂多特異性抗體，該抗體或分裂抗體具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點，且進一步包含向該個體投與該放射性標記化合物；及 ii)免疫療法，該免疫療法包含向該個體投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑。
如請求項1之方法，其中該方法包含治療週期，該治療週期包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與該放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中該抗CD40抗體及該免疫檢查點抑制劑係同時投與或以任一次序依序投與。
如請求項2之方法，其中該方法包含一或多個額外治療週期，其中各額外週期包含預靶向放射免疫療法之第一步驟，該第一步驟包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體且接著投與該放射性標記化合物，及免疫療法之第二步驟，該第二步驟包含投與免疫檢查點抑制劑。
如請求項3之方法，其中該方法包含2、3、4或5個額外週期。
如請求項1至5中任一項之方法，其中該放射性標記化合物係與 ²¹²Pb、 ²¹²Bi或 ²¹³Bi螯合之DOTAM。
如請求項1至5中任一項之方法，其中該目標抗原為CEA。
如前述請求項中任一項之方法，其中該多特異性抗體包含Fc域。
如請求項7之方法，其中該Fc域經修飾以減弱或消除效應子功能。
如請求項1至6中任一項之方法，其中該方法包含投與分裂多特異性抗體，其中該分裂抗體包含 i)第一半抗體，其結合至目標抗原，且進一步包含用於放射性標記化合物之抗原結合位點之VH域，但不包含用於該放射性標記化合物之抗原結合位點之VL域；及 ii)第二半抗體，其結合至目標抗原，且進一步包含用於該放射性標記化合物之抗原結合位點的VL域，但不包含用於該放射性標記化合物之該抗原結合位點的VH域，其中該第一半抗體之該VH域及該第二半抗體之該VL域能夠一起形成用於該放射性標記化合物之功能抗原結合位點。
如請求項9之方法，其中該第一半抗體及該第二半抗體各自包含Fc域。
如請求項10之方法，其中該Fc域經修飾以減弱或消除效應子功能。
如前述請求項中任一項之方法，其中該CD40促效劑為促效性抗CD40抗體。
如前述請求項中任一項之方法，其中該免疫檢查點抑制劑係選自PD1、PDL1或CTLA4之抑制劑。
如請求項13之方法，其中該免疫檢查點抑制劑為選自以下之抗體：針對PD1之抗體、針對PDL1之抗體及針對CTLA4之抗體。
如請求項14之方法，其中該免疫檢查點抑制劑為針對PDL1之抗體。
如前述請求項中任一項之方法，其中該增生性病症為癌症。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體為人類。
如前述請求項中任一項之方法，其中該方法使得腫瘤生長速率比單獨用該預靶向放射免疫療法及/或該免疫療法治療更慢。
如前述請求項中任一項之方法，其中該方法使得個體存活之可能性比單獨用該預靶向放射免疫療法及/或該免疫療法治療提高。
如前述請求項中任一項之方法，其中與單獨用該預靶向放射免疫療法及/或該免疫療法治療相比，該方法使得經活化腫瘤內CD8 T細胞之頻率提高及/或腫瘤、脾及引流淋巴結(draining lymph node；DLN)中經活化漿細胞樣DC (plasmacytoid DC；pDC)及經典DC (classical DC；cDC)之頻率提高。
如前述請求項中任一項之方法，其中與單獨用該預靶向放射免疫療法及/或該免疫療法治療相比，該方法引起增強之免疫記憶反應。
一種多特異性抗體或分裂多特異性抗體，該多特異性抗體或分裂多特異性抗體具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點，其用於治療增生性病症之方法中，其中該治療包含投與該多特異性抗體或分裂多特異性抗體，且其中該治療進一步包含投與i)該放射性標記化合物，ii) CD40促效劑及iii)免疫檢查點抑制劑。
如請求項22之供使用之多特異性抗體或分裂多特異性抗體，其中該方法為如請求項1至21中任一項之方法。
一種用於治療增生性病症之方法中的CD40促效劑，其中該治療進一步包含投與i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)該放射性標記化合物，及iii)免疫檢查點抑制劑。
如請求項24之供使用之CD40促效劑，其中該方法為如請求項1至21中任一項之方法。
一種用於治療增生性病症之方法中之免疫檢查點抑制劑，其中該治療進一步包含投與i)具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體；ii)該放射性標記化合物及iii) CD40促效劑。
如請求項26之免疫檢查點抑制劑，其中該方法為如請求項1至21中任一項之方法。
一種具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體、放射性標記化合物、CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其以組合形式用於治療增生性病症之方法中。
如請求項28之供使用之具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點的多特異性抗體或分裂多特異性抗體、放射性標記化合物、CD40促效劑及免疫檢查點抑制劑，其中該方法為如請求項1至21中任一項之方法。
一種醫藥產品，其包含A)作為第一組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之多特異性抗體或分裂多特異性抗體，其具有用於放射性標記化合物之結合位點及用於目標抗原之結合位點；B)作為第二組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之CD40促效劑；及C)作為第三組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之免疫檢查點抑制劑、較佳PD-L1抑制劑，用於組合、同時或依序治療增生性疾病。
如請求項30之醫藥產品，其中該增生性疾病為癌症。
如請求項30或請求項31之醫藥產品，其進一步包含D)作為第四組分之組合物，該組合物包含作為活性成分之該放射性標記化合物。