TW202235108A

TW202235108A - Ｃｅａｃａｍ５抗體－藥物接合物配製物

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Publication number: TW202235108A
Application number: TW110141643A
Authority: TW
Inventors: 珍雷內奧特林; 費蒂本賽德; 奧黛麗龐斯特比; 西爾梵休勒; 瑪麗萊曼; 阿爾貝里奇露西馬納什
Original assignee: 法商賽諾菲公司
Priority date: 2020-11-10
Filing date: 2021-11-09
Publication date: 2022-09-16
Also published as: MX2023005345A; IL302731A; CA3200955A1; JP2023547707A; US20220202946A1; WO2022101165A1; CO2023005889A2; CN116635077A; AU2021379882A1; EP4243875A1; KR20230107250A

Abstract

本發明提供人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)-標靶抗體-藥物接合物huMAb2-3-SPDB-DM4的穩定配製物，及其製備和使用方法。

Description

CEACAM5抗體-藥物接合物配製物

序列表

本申請案含有序列表，該份序列表已按ASCII格式以電子方式提交，並在此以全文引入的方式併入。該份ASCII副本創建於2020年7月31日，命名為707628_SA9-297-1_ST25.txt，且大小為9,175個位元組。

本發明是有關治療性治療癌症(諸如表現CEACAM5的非鱗狀非小細胞肺癌)的領域。本發明的某些態樣是有關CEACAM5拮抗劑(諸如抗CEACAM5免疫接合物)治療癌症的配製物和用途。

癌胚抗原(CEA)是一種涉及細胞黏附的醣蛋白。CEA於1965年首次被發現(Gold and Freedman, J Exp Med, 121, 439, 1965)是一種通常在妊娠前六個月期間由胎兒腸道所表現的蛋白質，並在胰臟癌、肝癌和結腸癌中被發現到。CEA是屬於免疫球蛋白超家族的一個家族的一部分。CEA家族由18個基因組成，細分為兩個蛋白質子群：癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)子群和懷孕特異性醣蛋白子群(Kammerer & Zimmermann, BMC Biology2010, 8:12)。

大量研究已證明，CEACAM5是CEACAM子群之一，與最初發現到的CEA相同，在結腸直腸、胃、肺臟、乳房、前列腺、卵巢、子宮頸和膀胱腫瘤細胞表面上高度表現，但在少數正常上皮組織(諸如結腸中的柱狀上皮和杯狀細胞、胃中的黏液頸細胞，以及食道與子宮頸中的鱗狀上皮細胞)的表現較稀少(Hammarstrom et al., 2002的「Tumor Markers, Physiology, Pathobiology, Technology and Clinical Applications」Eds. Diamandis E.P. et al., AACC Press, Washington pp 375 ff)。因此，CEACAM5被看作是一種適用於腫瘤特異性靶向方法(諸如免疫接合物)的治療目標。

huMAb2-3-SPDB-DM4是一種免疫接合物(抗體-藥物接合物，ADC)，包含連接至類美登素衍生物4(DM4)的人類化抗CEACAM5抗體，DM4是一種抑制微管組裝的強效抗有絲分裂劑。DM4透過經優化的連接子SPDB [N-琥珀醯亞胺基-4-(2-吡啶基二硫基)丁酸]共價結合至抗體，這個連接子在血漿中穩定並且可在細胞內裂解。在靶向癌細胞中結合與內化後，huMAb2-3-SPDB-DM4被降解，釋放出細胞毒性DM4代謝物。

目前huMAb2-3-SPDB-DM4正在進行多項臨床試驗，並預期可用於治療各種類型的CEACAM5表現癌症中的任一者。例如，最近的一項臨床研究已證明，huMAb2-3-SPDB-DM4有效治療非鱗狀非小細胞肺癌(NSQ NSCLC)，該亞型約佔肺癌的60% (參見WO 2020/161214)。然而，就長期穩定性和儲存期限來說，諸如huMAb2-3-SPDB-DM4的ADC難以配製。因此，huMAb2-3-SPDB-DM4的新配製物引起了極大的興趣。

本發明尤其提供了huMAb2-3-SPDB-DM4的經改良配製物，該抗體-藥物接合物(ADC)由特異地結合至人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)的單株抗體組成，其連接至與N2'-乙醯基-N-2'(4-甲基-4-巰基-1-側氧基戊基)-美登素(DM4)。本文揭示的配製物不同於迄今為止在臨床試驗中使用的huMAb2-3-SPDB-DM4配製物，並且相對於這些配製物更為優化。

本發明的一個態樣是一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑，以及 iv) 表面活性劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物是凍乾配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物是液體配製物。

本發明的一個態樣是一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑， iv) 表面活性劑，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物是凍乾配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物是液體配製物。

在某些具體例中，緩衝劑是選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組。在一些具體例中，緩衝劑是乙酸鹽，例如乙酸鈉。

在某些具體例中，張力劑是多元醇。在某些具體例中，多元醇是選自由赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合構成之群組。在某些具體例中，張力劑是山梨糖醇。

在某些具體例中，表面活性劑是選自由聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯80、泊洛沙姆(poloxamer) 188、及其任何組合構成之群組。

在某些具體例中，表面活性劑是聚山梨糖醇酯80。

在某些具體例中，螯合劑是選自由二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二醇-雙(β-胺基乙基醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、氮基三乙酸、及其任何組合構成之群組。在某些具體例中，螯合劑是EDTA。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇，例如山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些態樣中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯80，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 乙二胺四乙酸(EDTA)，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些態樣中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 多元醇， iv) 表面活性劑，選自由聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯20、泊洛沙姆188、及其任何組合構成之群組，及 v) EDTA，在約4.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 多元醇， iv) 表面活性劑，選自由聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯20、泊洛沙姆188、及其任何組合構成之群組，及 v) EDTA，在約4.5至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 多元醇， iv) 表面活性劑，選自由聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯20、泊洛沙姆188、及其任何組合構成之群組，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇，及其任何組合、濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

本發明的一個態樣是一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1-50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 10 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

本發明的一個態樣是一種治療癌症的方法，該方法包含向有需要的個體投予有效量之前述醫藥配製物中的任一者。

在某些具體例中，癌症是高癌胚抗原相關細胞黏附分子癌。

在某些具體例中，癌症是選自由結腸直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、及膀胱癌構成之群組。

在某些具體例中，癌症是選自由肺癌、乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌，及膀胱癌構成之群組。

在某些具體例中，癌症是肺癌。

在某些具體例中，肺癌是非鱗狀非小細胞肺癌。

在某些具體例中，個體是人類。

本發明揭示了特異地結合人類和食蟹獼猴CEACAM5蛋白的抗體-藥物接合物(ADC)的醫藥配製物。這個被稱為huMAb2-3-SPDB-DM4的ADC及其在本文中揭示的配製物可用於治療任何表現CEACAM5的癌症類型，包括非鱗狀非小細胞肺癌。出乎意料的是，根據本發明，已發現在huMAb2-3-SPDB-DM4配製物中納入適量乙二胺四乙酸(EDTA)會明顯增加ADC及其配製物的穩定性。

在人類中，CEACAM子群由7個成員組成：CEACAM1、CEACAM3、CEACAM4、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7，和CEACAM8。大量研究已證明，CEACAM5與最初發現的CEA相同，在結腸直腸、胃、肺臟、乳房、前列腺、卵巢、子宮頸和膀胱腫瘤細胞表面上高度表現，但在少數正常上皮組織(諸如結腸中的柱狀上皮和杯狀細胞、胃中的黏液頸細胞，以及食道與子宮頸中的鱗狀上皮細胞)的表現較稀少(Hammarstrom et al., 2002的「Tumor Markers, Physiology, Pathobiology, Technology and Clinical Applications」Eds. Diamandis E.P. et al., AACC Press, Washington pp 375)。因此，CEACAM5被當作是一個適用於腫瘤特異性靶向方法(諸如免疫接合物)的治療目標。

如本文所用，「CEACAM5」表示「癌胚抗原相關細胞黏附分子5」，也稱為CD66e(分化簇66e)或CEA。CEACAM5是一種涉及細胞黏附的醣蛋白。CEACAM5特別是在結腸直腸、胃、肺臟和子宮腫瘤細胞的表面上高度表現。

如本文所用，「高CEACAM5癌症」是指多種癌症類型中的任一種，包括結腸直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、及膀胱癌。在某些具體例中，「高CEACAM5癌症」是指數種癌症類型中的任一種，包括結腸癌、肺癌、胃癌、子宮頸癌、及胰臟癌。

在一些具體例中，肺癌是非鱗狀非小細胞肺癌。在某些具體例中，高CEACAM5表現者在至少50%的表現型腫瘤細胞群中具有大於或等於2+的強度。在某些具體例中，高CEACAM5表現者在至少50%的表現型腫瘤細胞群中具有大於2+的強度。高CEACAM5表現者佔肺癌的約20%。免疫接合物

ADC huMAb2-3-SPDB-DM4是一種免疫接合物，結合了huMAb2-3 (抗CEACAM5)抗體和類美登素衍生物4 (DM4)，DM4是一種抑制微管組裝的強效抗有絲分裂劑。DM4透過經優化的連接子SPDB [N-4-(2-吡啶基二硫基)-丁酸琥珀醯亞胺酯]共價結合至huMAb2-3，這個連接子在血漿中穩定並可在細胞內裂解。在靶向癌細胞中結合並內化後，huMAb2-3-SPDB-DM4被降解，釋放出細胞毒性DM4代謝物。

huMAb2-3-SPDB-DM4的抗體部分是人類IgG1 κ抗體，具有一對重鏈(HC)，各自包含一個可變重(VH)域；和一對輕鏈(LC)，各自包含一個可變輕(VL)域。每個VH域包含三個互補決定區(CDR)：HCDR1、HCDR2和HCDR3。每個VL域包含三個互補決定區(CDR)：LCDR1、LCDR2和LCDR3。這些多肽的胺基酸序列如下： HCDR1 SEQ ID NO: 1 GFVFSSYD HCDR2 SEQ ID NO: 2 ISSGGGIT HCDR3 SEQ ID NO: 3 AAHYFGSSGPFAY LCDR1 SEQ ID NO: 4 ENIFSY LCDR2 NTR LCDR3 SEQ ID NO: 5 QHHYGTPFT VH SEQ ID NO: 6 EVQLQESGPGLVKPGGSLSLSCAASGFVFSSYDMSWVRQTPERGLEWVAYISSGGGITYAPSTVKGRFTVSRDNAKNTLYLQMNSLTSEDTAVYYCAAHYFGSSGPFAYWGQGTLVTVSS VL SEQ ID NO: 7 DIQMTQSPASLSASVGDRVTITCRASENIFSYLAWYQQKPGKSPKLLVYNTRTLAEGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPFTFGSGTKLEIK HC SEQ ID NO: 8 EVQLQESGPGLVKPGGSLSLSCAASGFVFSSYDMSWVRQTPERGLEWVAYISSGGGITYAPSTVKGRFTVSRDNAKNTLYLQMNSLTSEDTAVYYCAAHYFGSSGPFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG LC SEQ ID NO: 9 DIQMTQSPASLSASVGDRVTITCRASENIFSYLAWYQQKPGKSPKLLVYNTRTLAEGVPSRFSGSGSGTDFSLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPFTFGSGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

如本文所用，「類美登素」表示類美登素和類美登素類似物。類美登素是抑制微管形成的藥物，對哺乳動物細胞具有高度毒性。

合適類美登素的實例包括美登醇和美登醇類似物。

本發明的細胞毒性接合物利用含有硫醇的類美登素DM4作為細胞毒性劑，DM4正式稱作 N ²-去乙醯基 -N- ^2’(4-甲基-4-巰基-1-側氧基戊基)-美登素。DM4由以下結構式(I)表示：

(I)

在一些具體例中，本發明的抗體直接或經由可裂解或不可裂解連接子共價附接到至少一種生長抑制劑。

如本文所用，「連接子」表示一個化學部分，其包含將多肽共價附接至藥物部分的共價鍵或原子鏈。

接合物可以藉由活體外方法製備。為了將藥物或前藥連接至抗體，使用了連接基團。合適的連接基團是本領域中習知的，並包括二硫化物基團、硫醚基團、酸不穩定基團、光不穩定基團、肽酶不穩定基團、和酯酶不穩定基團。本發明的抗體與細胞毒性劑或生長抑制劑的接合可以使用各種雙功能性蛋白偶聯劑進行，包括但不限於N-琥珀醯亞胺基-4-(2-吡啶基二硫基)丁酸(SPDB)、丁酸4-[(5-硝基-2-吡啶基)二硫基]-2,5-二側氧基-1-吡喀啶基酯(硝基-SPDB)、4-(吡啶-2-基二氫硫基)-2-磺基-丁酸(磺基-SPDB)、N-(2-吡啶基二硫基)丙酸琥珀醯亞胺酯(SPDP)、(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸琥珀醯亞胺酯(SMCC)、亞胺基硫烷(IT)、醯亞胺酯的雙功能性衍生物(諸如己二酸二甲酯HCL)、活性酯(諸如辛二酸二琥珀醯亞胺酯)、醛類(諸如戊二醛)、雙疊氮基化合物(諸如雙(對疊氮基苯甲醯基)-己二胺)、雙重氮衍生物(諸如雙-(對-重氮苯甲醯基)-乙二胺)、二異氰酸酯(諸如2,6-二異氰酸甲苯酯)、和雙活性氟化合物(諸如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。

連接子可以是促進細胞毒性劑或生長抑制劑在細胞中釋放的「可裂解連接子」。例如，可以使用酸不穩定連接子、肽酶敏感連接子、酯酶不穩定連接子、光不穩定連接子、或含二硫化物的連接子(參見例如美國專利第5,208,020號)。連接子也可以是「不可裂解的連接子」(例如SMCC連接子)，在某些情況下可能會有更好的耐受性。

根據一個具體例，在本發明的接合物中，生長抑制劑是類美登素DM4。

在該接合物中，抗體藉由連接基團接合至該至少一個生長抑制劑。在一個具體例中，該連接基團是可裂解或不可裂解的連接子，諸如N-琥珀醯亞胺基-4-(2-吡啶基二硫基)丁酸(SPDB)、4-(吡啶-2-基二氫硫基)-2-磺基-丁酸(磺基-SPDB)、或(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸琥珀醯亞胺酯(SMCC)。

在一個具體例中，連接基團為SPDB，而該接合物由式(II)的抗體-SPDB-DM4接合物組成

(II)；其中n為大於或等於1的整數。n的平均值通常為約3.8。亦參見圖1。

大體上，接合物可以藉由包含以下步驟的方法獲得： (i) 使細胞結合劑(例如，根據本發明的抗體)的視情況經緩衝的水溶液與連接子和細胞毒性化合物的溶液接觸； (ii) 然後視情況將在(i)中形成的接合物與未反應的細胞結合劑分離。

細胞結合劑的水溶液可以用緩衝劑進行緩衝，緩衝劑為諸如例如磷酸鉀、乙酸鹽、檸檬酸鹽、或N-2-羥基乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸(HEPES緩衝劑)。緩衝劑取決於細胞結合劑的性質。細胞毒性化合物是在有機極性溶劑中的溶液，有機極性溶劑為例如二甲亞碸(DMSO)或二甲基乙醯胺(DMA)。

反應溫度通常介於20和40℃之間。反應時間可以從1小時到24小時不等。細胞結合劑和細胞毒性劑之間的反應可以透過具有折射及/或UV偵測器的尺寸排阻層析(SEC)進行監測。如果接合物產率過低，可以延長反應時間。

習知技術者可以使用多種不同的層析方法來進行步驟(ii)的分離：可以例如透過SEC、吸附層析(諸如離子交換層析，IEC)、疏水交互作用層析(HIC)、親和力層析、混合撐體層析(諸如羥基磷灰石層析)、或高效液相層析(HPLC)來純化接合物。也可以使用藉由透析或透濾進行的純化。

根據一個具體例，根據本發明的接合物的特徵在於「藥物-抗體比率」(或「DAR」)範圍為1到10，例如2到5，特別是3到4。這通常是包括類美登素分子的接合物的情況。

這個DAR數可隨所用抗體和藥物(即生長抑制劑)的性質以及用於接合的實驗條件(像是生長抑制劑/抗體的比率、反應時間、溶劑和共溶劑(如果有的話)的性質)而改變。因此，抗體和生長抑制劑之間的接觸導致包含數種接合物的混合物，這些接合物的藥物與抗體比率彼此不同；視情況是裸抗體；視情況是聚集體。因此所測得的DAR是一個平均值。

可用於測定DAR的方法在於藉由分光光度法測量基本上純的接合物溶液在λ _D和280 nm下的吸光度比率。280 nm通常是用於測量蛋白質濃度(諸如抗體濃度)的波長。選定波長λ _D以允許區分藥物與抗體，即習知技術者容易已知的，λ _D是藥物在其下具有高吸光度的波長，而λ _D與280 nm遠到足夠避免藥物和抗體的吸光度峰值大幅重疊。在類美登素分子的情況下，λ _D可選定為252 nm。DAR計算方法可得自Antony S. Dimitrov (ed), LLC, 2009, Therapeutic Antibodies and Protocols, vol 525, 445, Springer Science。

接合物在λ _D(A _λD)和280 nm (A ₂₈₀)下的吸光度是對尺寸排阻層析(SEC)分析的單體峰(允許計算「DAR (SEC)」參數)，或使用典型分光光度計設備(允許計算「DAR (UV)」參數)來進行測量。吸光度可以表示如下： A _λD= (C _Dx ɛ _DλD) + (C _Ax ɛ _AλD) A ₂₈₀= (C _Dx ɛ _D280) + (C _Ax ɛ _A280) 其中： C _D和C _A分別是藥物和抗體溶液中的濃度； ɛ _DλD和ɛ _D280分別是藥物在λ _D和280 nm下的莫耳消光係數；及 ɛ _AλD和ɛ _A280分別是抗體在λ _D和280 nm下的莫耳消光係數。

用兩個未知數對這兩個方程式進行求解，得到以下等式： c _D= [(ɛ _A280x A _λD) - (ɛ _AλDx A ₂₈₀)] / [(ɛ _DλDx ɛ _A280) - (ɛ _AλDx ɛ _D280)] c _A= [A ₂₈₀- (c _Dx ɛ _D280)] / ɛ _A280

然後根據藥物濃度與抗體濃度的比率來計算平均DAR：DAR＝c _D/c _A。

huMAb2-3-SPDB-DM4目前完成第1期/第2期的首次人體研究，以評估huMAb2-3-SPDB-DM4在晚期實體腫瘤患者中的安全性、藥物動力學和抗腫瘤活性(NCT02187848)。

huMAb2-3-SPDB-DM4目前正在進行一項與多西他賽(docetaxel)比較的隨機、開放標籤第3期研究，該研究在先前治療過的具有CEACAM5陽性腫瘤的轉移性非鱗狀非小細胞肺癌患者中進行(NCT04154956)。

如本文所用，「個體」是指哺乳動物，包括小鼠、大鼠、倉鼠、天竺鼠、兔、貓、狗、綿羊、山羊、豬、牛、馬、非人類靈長類動物，及人類。在某些具體例中，個體是人類。

配製物根據本發明，現已發現到，huMAb2-3-SPDB-DM4的配製物有利地包括ADC、緩衝劑、張力劑、表面活性劑、及視情況選用的螯合劑。此外，根據本發明，已經發現huMAb2-3-SPDB-DM4的配製物有利地包括ADC、乙酸鹽、山梨糖醇、和聚山梨糖醇酯80 (PS80)。根據本發明，目前已進一步發現，huMAb2-3-SPDB-DM4的配製物有利地包括ADC、乙酸鹽、山梨糖醇、聚山梨糖醇酯80 (PS80)、和EDTA。此配製物適用於液體形式和凍乾形式。

應當理解，本文揭示的醫藥組合物可以是按指定的量和濃度含有各種所列舉組分的水溶液。

在由水溶液製備的凍乾物的情況下，所列舉成分的量和濃度與還原時配製物中的量和濃度有關。用於還原的液體通常是注射用無菌水，其量適合於實現指定組分的所列舉量和濃度。

在某些具體例中，醫藥配製物是凍乾配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物是液體配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑，例如多元醇， iv) 表面活性劑，例如聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物是凍乾配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物是液體配製物。

在某些態樣中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇，例如山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物是凍乾配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物是液體配製物。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

適用於配製物的緩衝劑包括但不限於有機酸鹽，諸如檸檬酸、抗壞血酸、葡萄糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸或鄰苯二甲酸的鹽類；Tris、三木甲胺(叄(羥基甲基)-胺基甲烷)鹽酸鹽、或磷酸鹽緩衝劑。此外，胺基酸組分也可用作為緩衝劑。這種胺基酸組分包括但不限於精胺酸、甘胺酸、甘胺醯基甘胺酸、和組胺酸。精胺酸緩衝劑包括精胺酸乙酸鹽、精胺酸氯化物、精胺酸磷酸鹽、精胺酸硫酸鹽、精胺酸琥珀酸鹽等。在一個具體例中，精胺酸緩衝劑是精胺酸乙酸鹽。組胺酸緩衝劑的實例包括組胺酸氯化物-精胺酸氯化物、組胺酸乙酸鹽-精胺酸乙酸鹽、組胺酸磷酸鹽-精胺酸磷酸鹽、組胺酸硫酸鹽-精胺酸硫酸鹽、組胺酸琥珀酸鹽-精胺酸琥珀酸鹽等。這些可從許多商業供應商獲得。

在一些具體例中，緩衝劑可以是乙酸、精胺酸、組胺酸、檸檬酸的鹽類，諸如其鹼金屬鹽。乙酸的鹽可以是乙酸鈉。

適用於配製物的張力劑包括但不限於多元醇，包括糖類(還原糖和非還原糖)、糖醇和糖酸。「還原糖」是一種含有半縮醛基團的糖，其可以還原金屬離子或與蛋白質中的離胺酸和其他胺基基團共價反應，而「非還原糖」是一種不具有這些還原糖性質的糖。還原糖的例子是果糖、甘露糖、麥芽糖、乳糖、阿拉伯糖、木糖、核糖、鼠李糖、半乳糖、和葡萄糖。非還原糖包括蔗糖、海藻糖、山梨糖、蜜三糖、和棉子糖。糖醇選自甘露糖醇、木糖醇、赤藻糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇、赤藻糖醇、蘇糖醇、山梨糖醇和甘油。糖酸包括L-葡萄糖酸及其金屬鹽。這些可從許多商業供應商獲得。

在一些具體例中，多元醇可以是山梨糖醇。

適用於配製物的表面活性劑包括但不限於聚山梨糖醇酯和泊洛沙姆。泊洛沙姆包括例如泊洛沙姆188。這些可從許多商業供應商獲得。

適用於配製物的聚山梨糖醇酯包括，但不限於聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯65、聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯81、和聚山梨糖醇酯85。這些可從許多商業供應商獲得。

在一些具體例中，聚山梨糖醇酯可以是聚山梨糖醇酯80。

適用於配製物的螯合劑包括，但不限於二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、氮基三乙酸、乙二醇-雙(β-胺基乙基醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)及其鹽，例如EDTA二鈉、EDTA鈣二鈉、EDTA四鈉。這些可從許多商業供應商獲得。

在一些具體例中，螯合劑可以是乙二胺四乙酸(EDTA)或其鹽，例如EDTA二鈉、EDTA鈣二鈉、EDTA四鈉。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 乙二胺四乙酸(EDTA) 在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 多元醇， iv) 表面活性劑，選自由聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯20、泊洛沙姆188，及其任何組合構成之群組，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種某些具體例中，pH可以是約5.0至約6.0。在各種某些具體例中，pH可以是約5.0至約5.5。在各種某些具體例中，pH可以是約5.6至約6.5。在各種某些具體例中，pH可以是約5.6至約6.0。在各種某些具體例中，pH可以是約6.1至約6.5。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種某些具體例中，pH可以是5.0至6.0。在各種某些具體例中，pH可以是5.0至5.5。在各種某些具體例中，pH可以是5.6至6.5。在各種某些具體例中，pH可以是5.6至6.0。在各種某些具體例中，pH可以是6.1至6.5。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種某些具體例中，pH可以是約5.0、約5.1、約5.2、約5.3、約5.4、約5.5、約5.6、約5.7、約5.8、約5.9、約6.0、約6.1、約6.2、約6.3、約6.4、或約6.5。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種某些具體例中，pH可以是5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、或6.5。

根據前述態樣和具體例中的每一個，緩衝劑可選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM。在各種具體例中，緩衝劑以約10 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約20 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約30 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約40 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約50 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約60 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約70 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約80 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約90 mM至約100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約90 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約80 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約70 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約60 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約50 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約40 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約30 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約20 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM至約10 mM的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，緩衝劑可選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合，濃度為5 mM至100 mM。在各種具體例中，緩衝劑以10 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以20 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以30 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以40 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以50 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以60 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以70 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以80 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以90 mM至100 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至90 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至80 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至70 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至60 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至50 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至40 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至30 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至20 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以5 mM至10 mM的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種具體例中，緩衝劑以約5 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約10 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約15 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約20 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約25 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約30 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約40 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約50 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約60 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約70 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約80 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約90 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以約100 mM的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在各種具體例中，緩衝劑以5 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以10 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以15 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以20 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以25 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以30 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以40 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以50 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以60 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以70 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以80 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以90 mM的濃度存在。在各種具體例中，緩衝劑以100 mM的濃度存在。

在一些具體例中，緩衝劑可以是乙酸的鹽類，諸如乙酸的鹼金屬鹽，例如乙酸鈉，以範圍約2 mM至約25 mM、或5 mM至約20 mM、或約8 mM至約15 mM、或約10 mM的量存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，張力劑選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)。在某些具體例中，張力劑以約5% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約10% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約15% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約20% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約25% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約30% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約40% (w/v)至約50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約40% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約30% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約25% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約20% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約15% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約1% (w/v)至約5% (w/v)的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，張力劑選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為1%(w/v)至50% (w/v)。在某些具體例中，張力劑以5% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以10% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以15% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以20% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以25% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以30% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以40% (w/v)至50% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至40% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至30% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至25% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至20% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至15% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以1% (w/v)至5% (w/v)的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，張力劑選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)。在某些具體例中，張力劑以約2% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約3% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約4% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約15% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約20% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約25% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約30% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約40% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以約50% (w/v)的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，張力劑選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為1% (w/v)。在某些具體例中，張力劑以2% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以3% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以4% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以15% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以20% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以25% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以30% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以40% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，張力劑以50% (w/v)的濃度存在。

在一些具體例中，多元醇可以是山梨糖醇，以約1至約10% (w/v)、或約2至約8% (w/v)、或約4至約6% (w/v)，或約5% (w/v)的量存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，表面活性劑可以選自聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯65、聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯81和聚山梨糖醇酯85、泊洛沙姆、及其任何組合，濃度為約0.0001% (w/v)至約10% (w/v)。在某些具體例中，表面活性劑以約0.0001% (w/v)至約10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.0005% (w/v)至約5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.001% (w/v)至約3% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.005% (w/v)至約2% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.01% (w/v)至約1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.02% (w/v)至約0.5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.03% (w/v)至約0.1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.04% (w/v)至約0.08% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.04% (w/v)至約0.06% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.04% (w/v)的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，表面活性劑選自聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯65、聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯81和聚山梨糖醇酯85、泊洛沙姆，及其任何組合，濃度為0.0001% (w/v)至10% (w/v)。在某些具體例中，表面活性劑以0.0005% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.005% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.01% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.02% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.03% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.04% (w/v)至10% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至3% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至2% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至0.5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至0.1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以0.001% (w/v)至0.08% (w/v)的濃度存在。

根據前述態樣和具體例中的每一者，在某些具體例中，表面活性劑選自聚山梨糖醇酯，諸如聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯65、聚山梨糖醇酯80、聚山梨糖醇酯81和聚山梨糖醇酯85、泊洛沙姆，及其任何組合，濃度為約0.0001% (w/v)。在某些具體例中，表面活性劑以約0.0005% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.001% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.005% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.01% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.02% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.03% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.04% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.06% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.08% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約0.5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約1% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約2% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約5% (w/v)的濃度存在。在某些具體例中，表面活性劑以約10% (w/v)的濃度存在。

在一些具體例中，表面活性劑可以是聚山梨糖醇酯，諸如聚山梨糖醇酯80，以範圍約0.005至約5% (w/v)、或約0.01至約2% (w/v)、或約0.02至約1% (w/v)，或約0.03至約0.08% (w/v)，或約0.04% (w/v)之量存在。

在某些具體例中，醫藥配製物包含約1至約50 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含約2至約40 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含約3至約30 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含約4至約20 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含約5至約10 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含約5 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。

在某些具體例中，醫藥配製物包含1-50 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含2-40 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含3-30 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含4-20 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含5-10 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含5 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。在某些具體例中，醫藥配製物包含10 mg/mL huMAb2-3-SPDB-DM4。

在一些具體例中，螯合劑可選自二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、氮基三乙酸、乙二醇-雙(β-胺基乙基醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、及其鹽，例如EDTA二鈉、EDTA鈣二鈉、EDTA四鈉，以約1至約50 μM、或約1至約40 μM、或約1至約30 μM、或1至約20 μM、或約1至約10 μM之量存在。在一些具體例中，螯合劑可以約10至約50 μM、或約10至約40 μM、或約10至約20 μM EDTA二鈉之量存在。在一些具體例中，螯合劑以約10 μM、或約20 μM、或約30 μM、或約40 μM、或約50 μM存在。

在某些具體例中，醫藥組合物包含約1至約50 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約1至約40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約1至約30 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約1至約20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約1至約10 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約10至約50 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約10至約40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約10至約20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約10 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約30 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含約50 μM EDTA二鈉。

在某些具體例中，醫藥組合物包含1至50 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含1至40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含1至30 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含1至20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含1至10 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含10至50 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含10至40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含10至20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含10 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含20 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含30 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含40 μM EDTA二鈉。在某些具體例中，醫藥組合物包含50 μM EDTA二鈉。

在一些具體例中，螯合劑可以是EDTA或其鹽，其以範圍約1至約30 μM、或約2至約25 μM、或約5至約20 μM、或約8至約15 μM，或約10 μM之量存在。

本文揭示的配製物通常適用於透過注射或輸注，例如透過靜脈內注射或輸注向個體投予。本文揭示的配製物通常適用於透過注射或輸注，例如透過靜脈內注射或輸注向人類個體投予。

方法本發明的一個態樣是治療癌症的方法，該方法包含向有需要的個體投予有效量的前述醫藥配製物中任一者。

根據此方法，在某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑，例如多元醇， iv) 表面活性劑，例如聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇，例如山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯，例如聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，例如選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組，或例如為乙酸鹽， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 視情況選用的螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 多元醇， iv) 聚山梨糖醇酯，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合， iii) 張力劑， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) 乙二胺四乙酸(EDTA) 在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1-50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 10 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在根據此方法的某些具體例中，醫藥配製物包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。

在某些具體例中，癌症是高癌胚抗原相關細胞黏附分子癌。

在某些具體例中，癌症是選自由肺癌、乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、及膀胱癌構成之群組。

在某些具體例中，癌症是肺癌。

在某些具體例中，肺癌是非鱗狀非小細胞肺癌。

在某些具體例中，個體是人類。

在某些具體例中，癌症是肺癌。

在某些具體例中，肺癌是非鱗狀非小細胞肺癌。

非小細胞肺癌(NSCLC)是最常見的肺癌類型。它通常比不太常見的小細胞肺癌生長和擴散更慢。非小細胞肺癌主要分為三種亞型，包括鱗狀細胞癌(占肺癌的25%)、腺癌(占肺癌的40%)和大細胞癌(占肺癌的10%)。因此，非鱗狀非小細胞肺癌包括腺癌(占肺癌的40%)和大細胞癌(占肺癌的10%)。

在某些具體例中，個體是人類。實例實例1. huMAb2-3-SPDB-DM4的初始配製物

huMAb2-3-SPDB-DM4 (參見圖1)最初被開發為輸注溶液用的濃縮物。劑型是5 mg/mL的溶液，一次性使用，儲存在5℃的玻璃小瓶中。原料藥是在-20℃下在聚碳酸酯瓶中開發的散裝冷凍溶液，聚碳酸酯瓶是其他容器的代表。這項初步研究的目的是確定一組pH緩衝系統和穩定賦形劑。在40℃、25℃和5℃下的熱壓力以及冷凍/解凍壓力和機械壓力(搖動)下，測試總共8個具有組合賦形劑的配製物。

原型如表1中所呈現。表1. 在約pH 6.0進行huMAb2-3-SPDB-DM4評估的賦形劑組合

N°	緩衝系統	賦形劑	pH
A	乙酸鹽10 mM	蔗糖2.5 % 甘露糖醇3.75 % PS80 0.005%	5.5
B	乙酸鹽10 mM	蔗糖2.5 % 甘露糖醇3.75 % PS80 0.1%	5.5
C	組胺酸10 mM	蔗糖5.0 % 甘胺酸130 mM PS80 0.1 %	5.5
D	組胺酸10 mM	蔗糖10 % PS80 0.1 %	6.5
E	檸檬酸鹽 10 mM	蔗糖10 % PS80 0.1 %	6.0
F	乙酸鹽10 mM	蔗糖10 % PS80 0.1 %	6.0
G	乙酸鹽10 mM	蔗糖10 % PS80 0.1 %	5.5
H	乙酸鹽10 mM	蔗糖10 % PS20 0.1 %	5.5

方法 UF/DF程序起始材料提供於組胺酸緩衝液中。為了製造基於乙酸鹽的原型(原型A、B、F、G、H)，在Cogent µScale系統上使用Pellicon 3®匣對乙酸鹽10 mM pH 5.5(3個88 cm ²的膜，68.7 g蛋白質/m ²膜)進行透濾來處理起始材料。為了製造基於檸檬酸鹽的原型(原型E)，在Cogent µScale系統上使用Pellicon 3®匣對檸檬酸鹽10 mM pH 6.0 (1個88 cm ²的膜，51.4 g蛋白質/m ²膜)進行透濾處理來處理起始材料。

在這兩種情況下，在通過10倍體積的透濾緩衝液後停止透濾。透濾後，藉由添加適當的2X濃縮溶液，濃度訂為5 mg/mL，如表3中所述。表3. 賦形劑濃縮溶液2X配方

N°	緩衝系統	賦形劑	目標 pH
A	乙酸鹽10 mM	蔗糖5 % 甘露糖醇7.5 % PS80 0.01%	5.5
B	乙酸鹽10 mM	蔗糖5 % 甘露糖醇7.5 % PS80 0.2%	5.5
C	組胺酸 10 mM	蔗糖10 % 甘胺酸260 mM PS80 0.2 %	5.5
D	組胺酸 10 mM	蔗糖20 % PS80 0.2 %	6.5
E	檸檬酸鹽 10 mM	蔗糖20 % PS80 0.2 %	6.0
F	乙酸鹽10 mM	蔗糖20 % PS80 0.2 %	6.0
G	乙酸鹽10 mM	蔗糖20 % PS80 0.2 %	5.5
H	乙酸鹽10 mM	蔗糖20 % PS20 0.2 %	5.5

過濾0.2 μm 在與2X濃縮溶液配製後，所有配製物在0.2 μm過濾器上過濾，並在填充之前收集在Nalgene® (HDPE)瓶上。

壓力條件

熱壓力配製物分析A至H在40℃下儲存2週；分析前在5℃、25℃和40℃下放置4週。

冷凍/解凍循環配製物分析A至H在-20℃或-80℃下冷凍並在室溫下解凍。進行3個循環的冷凍/解凍程序，然後分析配製物。

搖動壓力在15小時期間，經由以350 rpm的速度進行軌道搖動，將配製物分析A至H在小瓶中搖動。

分析方法在研究期間進行了以下分析方法：

外觀的目視檢查(透明度、顏色和顆粒)：在白色表面上檢查小瓶5秒，然後在目視檢查台的黑色表面上進行檢查。

依據UV測量的蛋白質濃度和DAR：使用以下吸收係數在280 nm和254 nm下測得的OD。檢查用溶液的稀釋係數：F=10。在254 nm下檢查用溶液的吸光度：A254D 在280 nm下檢查用溶液的吸光度：A280D 裸抗體h4D4的分子量 = 144522 g/mol DM4的分子量 = 780 g/mol DM4在280 nm下的莫耳消光係數 = 4927 L*mol ^-1*cm ^-1裸抗體h4D4在280 nm下的莫耳消光係數 = 201400 L*mol ^-1*cm ^-1h4D4的A254/A280 = 0.43 DM4的A254/A280 = 4.83 [藥物] (M)= [A254 – (0.43xA280)] / [(4.83x4927)– (0.43x4927)] [藥物] (mg/mL)= [藥物] (M) x 780 x F [蛋白質] (M)= [A280 – 4927x[藥物] (M)] / 201400 [蛋白質] (mg/mL)= [蛋白質] (M) x 144522 x F

關於乳光特徵鑑定的濁度(350 nm下的OD)：針對0.8 mL非稀釋溶液，在350 nm下測量溶液的吸光度。

依據SEC-UPLC的蛋白質純度：於T0、在40℃下2週和4週後以及在5℃下4週後對樣品A、B、G和H進行尺寸排阻超高效液相層析SEC-UPLC)。

SEC-UPLC條件：管柱：BEH 200，1.7 μm，300 mm*4.6 mm 流速：0.30 mL/min 偵測：230 nm 管柱溫度：30℃±2℃ 注射器溫度：5℃±0.3℃ 注射體積：4 μL 分析時間：17分鐘相流動D-PBS (2X)：用D-PBS (10X) (杜貝可氏磷酸鹽緩衝鹽水(D-PBS)) (10X)製備，參考品Invitrogen：14200083：用注射用水(WFI)將此溶液以1/5稀釋並在0.22 μm上過濾。DS批次用作每個順序中的參考品(以5 g/L注射5 μL)。

依據SDS-PAGE的蛋白質純度：僅在T0和在40℃下2週後測量。樣品在還原和非還原條件下(藉由添加nem)製備，並在4-12% Bis-Tris凝膠上遷移。遷移緩衝液是藉由在sqf 1000 mL純水中稀釋50mL Nu-Page MOPS SDS緩衝液20X所製得的。在90分鐘期間的遷移參數為135V。凝膠用Bleu rotiphorese溶液上色。

依據iCIEF的電荷異質性：僅在pH 5.5下對乙酸鹽配製物進行4週分析。

IcIEF是使用經FC塗覆cIEF Cartbridge與Convergent Biosciences iCE280成像毛細管電泳系統進行。樣品稀釋在含有Pharmalyte 3-10、Pharmalyte 8-10.5、4M尿素、0.35%甲基纖維素1%和pI標記的Master混合液中。

每個樣品都利用自動進樣器注射至毛細管中。聚焦後由CCD相機進行偵測，其直接測量280 nm UV吸光度。iCE280軟體計算每一個分離峰的表觀pI，Empower允許透過按面積進行標準化來量化同型。

游離類美登素：僅在pH 5.5下對配製物進行4週分析。

游離類美登素是藉由具有兩個管柱的RP-HPLC進行測量：第一個管柱用於將蛋白質與游離類美登素分離，第二個管柱用於分離游離類美登素物質並在PDA偵測器上偵測它們。流動相A是在純水中的0.1%三氟乙酸溶液。流動相B是乙腈中的0.08%三氟乙酸溶液。DM4溶液用作為參考品。

僅在T0下進行熱穩定性的DSC (差示掃描量熱法)。

膠體聚集狀態的DLS (動態光散射)：顆粒的大小平均值和分佈。僅在pH 5.5下對配製物進行4週分析。

亞可見聚集狀態的FCM (流動式細胞測量術)：顆粒的形態分析和計數。僅在pH 5.5下對配製物進行4週分析。

結果與討論

在組胺酸緩衝液中和在乙酸鹽與檸檬酸鹽緩衝液中TFF後DS的觀察和SEC分析

在接收時，過濾0.2 μm後組胺酸緩衝液中的一批DS略微呈乳白色，帶有顆粒。在乙酸鹽和檸檬酸鹽緩衝液中，UFDF後的結果提供於表4中。表4. UFDF結果

批次	TFF 的產率 (%)	加工時間及體積	UFDF 後的濃度 (mg/mL)	單體純度 (%)	HMW (%)	LMW (%)
TFF後，在乙酸鹽緩衝液中 pH 5.5	92.0	46分 160 mL	11.3	94.2	3.0	2.75
TFF後，在檸檬酸鹽緩衝液中 pH 6.0	81.5	68分 40 mL	12.7	94.4	3.1	2.5

乙酸鹽緩衝液在乳光和產率方面似乎更好。

壓力研究

在T0的分析

原型在T0時的目視檢查、FCM、DLS、SEC-UPLC (圖2)和icIEF分析是相同的： - 關於目視檢查，所有配製物都非常輕微的乳白色且不含可見顆粒。 - 關於DLS，所有配製物都是多分散的，PDI高於30%。

在T0可以觀察到原型之間的一些差異： - 關於DSC的結果，乙酸鹽緩衝液(pH 5.5或6)的Tm更高。 - 關於游離類美登素，在乙酸鹽或檸檬酸鹽緩衝液中的總含量較低，而在組胺酸緩衝液中的總含量較高(乙酸鹽和檸檬酸鹽緩衝液＜0.1%，組胺酸緩衝液約0.6%)。參見圖3。 - 關於SDS PAGE的結果，除了具有不同概況的配製物G和H外，配製物是相似的。於非還原條件下，配製物H在127 kDa處呈現一條額外條帶，而在還原條件下，配製物G在89 kDa處呈現一條額外條帶(圖4A和4B)。

熱壓力

在5℃和25℃下4週後，所有原型的分析參數(目視檢查、SEC-HPLC、FCM、DLS、游離類美登素、icIEF)都相似，除了4W25℃後疑似污染的原型C (與pH、濃度、DLS、FCM相關)。參見圖5濁度結果。

在40℃下2週和4週後，原型在蛋白質濃度、SDS-PAGE、目視檢查分析方面是相同的： - 在40℃下2週後，在SDS PAGE還原條件下，所有配製物偵測到在145 kDa處有一條新條帶。 - 在40℃下2週後，就目視檢查來說，所有配製物都有非常輕微的乳白色。然而，在40℃壓力之後，與T0相比沒有觀察到實際演變。

在2W和4W 40℃後可以觀察到原型之間的一些差異： - 在40℃下4週後，配製物D (pH 6.5的組胺酸緩衝液)的DAR降低最多，pH 6.5或組胺酸的配製物的DAR降低為高(圖6)。 - 在40℃下2週後，觀察到檸檬酸鹽pH 6.0 (原型E)的HMW增加最高，而高於pH 5.5的2種其他配製物(D和F)為高。關於乙酸鹽緩衝液(A、B、G、H)中在pH 5.5下的原型，在4W40℃後觀察到聚集體(圖7)和碎片(圖8)的增加，配製物G和H更高。(未在4W40℃下分析原型C、D、E、F)。 - 在40℃下2週後，關於游離類美登素分析，配製物D、E和F呈現出較高含量的游離類美登素。在40℃下4週後，僅分析pH 5.5的配製物(原型A、B、C、G和H)，原型A呈現出較低含量的游離類美登素(圖9)。緩衝劑類型(乙酸鹽相對於組胺酸)影響類美登素偵測到的雜質(圖10)。 - 在40℃下4週後，原型D (組胺酸，pH 6.5)在350 nm下觀察到OD增加最高，而在高pH或組胺酸中的配製物為高。 - 關於iCIEF的電荷同型結果，在4W40℃後觀察到配製物D (pH 6.5)的酸性物質增加最高(圖12)。其他測試原型(原型A、B、G和H)在2W40℃和4W40℃後表現相似。(圖11)。

搖動壓力

搖動壓力後，原型在pH、濃度&DAR、DLS、濁度、SEC-UPLC、游離類美登素方面相似。

在搖動壓力後，觀察到原型之間的一些差異： - 關於目視檢查，原型A和B沒有呈現出顆粒，而原型D、G和H包含許多可見顆粒。 - 關於FCM，原型H觀察到≧10和25 μm的顆粒略有增加，這可能表明從PS20開始聚集(表5)。 - 關於icIEF結果，原型C (組胺酸，pH 5.5)呈現出最高的電荷變體生成(+5%酸，-3%鹼，PI偏移，圖13)。其他原型描繪了在搖動壓力後並沒有電荷變體演變。表5. 搖動後的FCM結果：顆粒數/mL

	T0	搖動
配製物	≧2 μm	≧10 μm	≧25 μm	≧2 μm	≧10 μm	≧25 μm
A	138	13	6	263	35	15
B	72	6	1	165	29	9
C	128	11	7	178	34	10
D	194	23	5	653	18	4
E	236	17	7	229	18	2
F	100	5	2	390	18	6
G	83	2	1	268	32	6
H	133	10	1	413	149	50

冷凍與解凍/(F/T)壓力

F/T壓力後，原型在目視檢查、pH、濃度&DAR、濁度、SEC-UPLC、游離類美登素、FCM和DLS方面相似。關於icIEF，原型C對F/T壓力最為敏感(-20℃的酸為+6%而-80℃為+5%，2個溫度的鹼為-6%，表6，表7)。表6. F/T -20℃/RT後的iCIEF結果

配製物	主要pI	主要峰%	Σ酸%	Σ鹼%	觀察到的同型數
A	7.62	20.5	34.1	45.4	11
B	7.61	20.6	33.2	46.3	11
C	7.62	20.2	40.1	39.1	11
D	7.60	20.2	35.8	44.1	11
E	7.56	20.3	34.6	45.1	11
F	7.58	20.6	34.5	44.9	11
G	7.57*	20.0	34.8	45.3	11
H	7.58	20.4	34.3	45.4	11

*第二個主要同型，但條件之間維持一致性百分率表7. F/T -80℃/RT後的iCIEF結果

配製物	主要pI	主要峰%	Σ酸%	Σ鹼%	觀察到的同型數
A	7.63	20.8	33.8	45.4	11
B	7.62	20.5	34.6	44.6	11
C	7.62	20.6	38.8	40.6	11
D	7.62	19.6	35.6	44.8	11
E	7.56	20.1	35.2	44.7	11
F	7.57	21.2	34.3	44.5	11
G	7.56	20.3	34.7	45.0	11
H	7.56*	20.3	35.2	44.6	11

*第二個主要同型，但條件之間維持一致性百分率

結論 UF/DF濃縮至多達約12 mg/mL後，乙酸鹽緩衝液的產率更好(~92%)，且處理時間比在檸檬酸鹽緩衝液中更短。檸檬酸鹽10 mM pH 6.0緩衝液中的huMAb2-3-SPDB-DM4在UF/DF後略微呈乳白色。

關於在壓力之後的配製物行為：

藉由目視檢查，所有配製物都觀察到非常輕微的乳光，但沒有進一步演變。就OD 350 nm來說，在40℃壓力後所有配製物的濁度增加，但主要是組胺酸pH 6.5(配製物D)。

就所有配製物來說，在搖動壓力後僅觀察到一些可見顆粒，但配製物A和B (乙酸鹽pH 5.5，具有蔗糖和甘露糖醇)觀察到較少。

在4週40℃後，組胺酸pH 6.5的DAR不穩定程度更大。

在2週40℃後，乙酸鹽pH 5.5的HMW更為穩定(依據SEC-UPLC)。

在4週40℃後，所有乙酸鹽pH 5.5配製物的LMW增加達3(依據SEC-UPLC) (未對其他配製物進行分析)。

就游離類美登素和iCIEF來說，pH 5.5和乙酸鹽緩衝液在壓力(主要是熱壓力)後更穩定。

依據FCM，沒有觀察到PS80有亞可見顆粒聚集。

在乙酸鹽緩衝液(pH 5.5和6.0)中獲得了更高的Tm (依據DSC)。

總之，乙酸鹽pH 5.5似乎是最好的穩定緩衝劑(主要針對DAR、HMW、游離類美登素、電荷變體)且PS80的存在允許顆粒減少。

實例2. 選定山梨糖醇做為賦形劑

方法

本實例中描述的配製物開發研究是基於實例1的結果所設計，理由如下： • 因為改善多種物理化學品質屬性(主要是DAR、HMW%、游離類美登素和電荷變體)，選擇pH 5.5的10 mM乙酸鈉緩衝液； • 將實例1中測試的甘露糖醇保留用於一種配製物，並測試其他多元醇作為替代物：蔗糖和山梨糖醇，濃度與等滲性相容；和 • 因為改善聚集傾向(主要是搖動壓力後依據FCM的亞可見顆粒)，從實例1中選擇PS80。PS80濃度在0.01% w/v和0.04% w/v之間不等。

此研究選出的6個原型的組成提供於表8中。表8. 原型配製物

配製物 ID	緩衝系統	目標 pH	賦形劑	濃度 (mg/mL)
A	乙酸鹽10 mM	5.5	蔗糖2.5% + 甘露糖醇3.75% + PS80 0.01%	5.0
B	乙酸鹽10 mM	5.5	蔗糖10% + PS 80 0.01%	5.0
C	乙酸鹽10 mM	5.5	蔗糖10% + PS 80 0.02%	5.0
D	乙酸鹽10 mM	5.5	蔗糖10% + PS 80 0.04%	5.0
E	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% + PS 80 0.01%	5.0
F	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% + PS 80 0.04%	5.0

6種原型配製物儲存在40℃下至多1個月，在-20℃、5℃和25℃下儲存至多3個月。還在壓力條件下藉由搖動壓力，接著為使用中模擬對它們進行了評估。表9描述了配製物研究的時間點、壓力條件和分析方法。表9. 時間點和分析方法

時間點	目的	分析方法
T0	初始時間點	DSC、目視觀察、濁度、pH、DAR與蛋白質濃度、icIEF、游離類美登素、SEC-UPLC (單體%、HMW%、LMW%)、DLS、FCM、依據ELISA的結合、在還原與非還原條件下的SDS-PAGE
搖動壓力(SS)	軌道搖動，15小時350 rpm	目視觀察、LO (HIAC)與FCM
使用中的模擬(在SS後執行)	樣品以0.8 mg/mL的濃度稀釋於NaCl 0.9%聚烯烴袋中(P0分析)。經稀釋的袋子在室溫下保持24小時(P1分析)。經稀釋的袋子接著經由Hospira輸注組(聚乙烯管和聚醚碸0.2μm過濾器)與泵以1mL/mi進行灌注。分析收集的樣品(約10mL) (P2分析)。	目視觀察、LO (HIAC)、DAR與蛋白質濃度、SEC-UPLC (單體%、HMW%、LMW%)

本實例中使用的原料藥來自單個批次，其特徵為在乙酸鹽10 mM、pH 5.5、12.4 g/L中的配製物。樣品稀釋於乙酸鹽緩衝液中並補充賦形劑以獲得表8中所示的6種配製物。

在目視檢查台上進行外觀(透明度和顆粒)的目視檢查。在白色表面然後在黑色表面上檢查小瓶5秒，並評估可見顆粒的存在。額外使用來自MOTIC的光纖MLC-150C (色溫：2000-3500K)檢查小瓶，評分詳述於表10和表11中。表10. 乳光評估的目視檢查評分

	乳光
L	清澈的
SO	略為乳白色
O	乳白色

表11. 顆粒評估的目視檢查評分

顆粒偵測		顆粒數
0	用冷光(光纖)偵測不到	+	可數(1≦n≦5)
1	僅用冷光(光纖)偵測到	++	數個(n＞5)
2	目視檢查台上的可見顆粒	+++	很多

蛋白質濃度及DAR (UV)

蛋白質濃度和DAR測量是藉由UV測量進行，使用以下方法：將樣品稀釋10倍，然後測量280 nm和254 nm下的OD。下面的公式用於計算DAR和蛋白質濃度。 [藥物] (M)= A254 – (0.43xA280) / (4.83x4927)– (0.43x4927) [藥物] mg/mL = [藥物] (M) x 780 x F [蛋白質] (M)= A280 – 4927 x [藥物] (M) / 201400 [蛋白質] mg/mL = [蛋白質] (M) x 144522 x F DAR = [藥物] (M) / [蛋白質] (M)

濁度藉由在Cary UV 100分光光度計上對0.8 mL未稀釋溶液測量溶液在350 nm下的吸光度來評估濁度。

光遮蔽亞可見顆粒計數是藉由使用高精度液體顆粒計數器(HIAC)的光遮蔽技術來進行。每個結果是0.9 mL樣品的4次測量平均值。進行分析需要約4 mL樣品。

依據SDS-PAGE的蛋白質純度根據以下程序進行依據SDS-PAGE的蛋白質純度。樣品製備如表12中所述。表12. SDS PAGE的樣品製備

	還原條件	非還原條件
樣品(5 mg/mL的溶液或參考品)	5 µL	5 µL
Nu page LDS緩衝液(x4)	12.5 µL	+ nem 12.5 µL
還原劑(x10)	5 µL	-
調配緩衝液	20 µL	20 µL
水	7.5 µL	12.5 µL
加熱	90℃下10分鐘	70℃下10分鐘
沉積	20 µL	10 µL

將樣品稀釋至1 g/L的濃度。參考品與樣品一起進行。1X遷移緩衝液是藉由將50 mL緩衝液Nu-Page MOPS SDS Buffer 20X (Invitrogen NP0001)稀釋於足量的1L純水製得的。凝膠是4-12% Bis-Tris。電泳遷移參數為135瓦，持續90分鐘。然後用「Blue Rotiphorese」溶液對凝膠進行上色。數據處理是用Quantity one進行。

結果熱壓力研究(1個月5℃、25℃、40℃和3個月5℃、25℃、-20℃)。

DSC T0的DSC結果呈現於表13中。表13. T0的DSC結果

配製物	Td (℃)
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	86.4
B – Suc 10% PS80 0.01%	86.7
C – Suc 10% PS80 0.02%	86.7
D – Suc 10% PS80 0.04%	86.7
E – Sorb 5% PS80 0.01%	86.4
F – Sorb 5% PS80 0.04%	86.4

在T0時，6種配製物的熱穩定性相等。

目視檢查目視檢查的結果提供於表14 (顆粒)和表15(澄清度)中。表14. 目視觀察結果(顆粒)

目視觀察	5℃	25℃	40℃
配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	2+	0	0	0	2+	0
B – Suc 10% PS80 0.01%	2+	0	0	1+	2+	0
C – Suc 10% PS80 0.02%	2+	0	0	0	0	0
D – Suc 10% PS80 0.04%	0	0	0	0	0	0
E – Sorb 5% PS80 0.01%	2+	0	0	1+	0	0
F – Sorb 5% PS80 0.04%	2+	0	0	0	0	0

表15. 目視觀察結果(澄清度)

目視觀察	5℃	25℃	40℃
配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	L	SO	L	SO	L	SO
B – Suc 10% PS80 0.01%	L	SO	L	SO	L	SO
C – Suc 10% PS80 0.02%	L	SO	L	SO	L	SO
D – Suc 10% PS80 0.04%	L	SO	L	SO	L	SO
E – Sorb 5% PS80 0.01%	L	SO	L	SO	L	SO
F – Sorb 5% PS80 0.04%	L*	SO	L	SO	L	SO

整體而言，在所有配製物和所有時間點觀察到的顆粒非常少。所有配製物都是透明的或略呈乳白色，其他時間沒有顯著演變。

濁度(在350 nm下的OD) 表16呈現在熱壓力後的濁度(350 nm下的OD)結果。表16. 濁度

濁度	5℃	25℃	40℃	-20℃
配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	0.0145	0.0153	0.0157	0.0185	0.0294	0.0631	0.0150
B – Suc 10% PS80 0.01%	0.0169	0.0177	0.0159	0.0260	0.0318	0.0698	0.0149
C – Suc 10% PS80 0.02%	0.0152	0.0163	0.0155	0.0214	0.0337	0.0692	0.0157
D – Suc 10% PS80 0.04%	0.0164	0.0167	0.0167	0.0221	0.0332	0.0681	0.0163
E – Sorb 5% PS80 0.01%	0.0140	0.0152	0.0138	0.0193	0.0277	0.0618	0.0138
F – Sorb 5% PS80 0.04%	0.0146	0.0152	0.0143	0.0199	0.0289	0.0599	0.0157

就所有配製物而言，在T1M40℃後觀察到顯著演變。在T1M40℃和T3M25℃時，注意到E和F山梨糖醇類配製物與其他配製物之間略有差異，而山梨糖醇類原型的擴散略少。

pH pH的結果回報於表17中。表17. pH結果

pH	5℃	25℃	40℃	-20℃
配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	5.49	5.49	5.49	5.48	5.46	5.48	5.50
B – Suc 10% PS80 0.01%	5.50	5.48	5.49	5.49	5.49	5.48	5.49
C – Suc 10% PS80 0.02%	5.50	5.49	5.48	5.48	5.48	5.48	5.50
D – Suc 10% PS80 0.04%	5.51	5.48	5.50	5.49	5.48	5.49	5.49
E – Sorb 5% PS80 0.01%	5.48	5.49	5.49	5.49	5.50	5.49	5.50
F – Sorb 5% PS80 0.04%	5.48	5.49	5.50	5.49	5.52	5.49	5.50

所有配製物在壓力期間均沒有觀察到pH值的演變。

DAR及濃度蛋白質濃度和DAR的結果回報於表18中。表18. 濃度及DAR結果

		5℃	25℃	40℃	-20℃
配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
濃度
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	5.2	5.2	5.1	5.1	5.2	5.3	5.2
B – Suc 10% PS80 0.01%	5.1	5.1	5.1	5.1	5.2	5.2	5.1
C – Suc 10% PS80 0.02%	5.1	5.1	5.2	5.1	5.2	5.3	5.2
D – Suc 10% PS80 0.04%	5.1	5.1	5.2	5.1	5.2	5.3	5.2
E – Sorb 5% PS80 0.01%	5.1	5.1	5.1	5.1	5.2	5.2	5.2
F – Sorb 5% PS80 0.04%	5.2	5.2	5.2	5.2	5.2	5.3	5.2
DAR
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	3.5	3.5	3.4	3.8	3.1	2.5	3.4
B – Suc 10% PS80 0.01%	3.5	3.4	3.4	3.3	3.1	2.4	3.5
C – Suc 10% PS80 0.02%	3.5	3.4	3.5	3.3	3.2	2.5	3.5
D – Suc 10% PS80 0.04%	3.5	3.5	3.6	3.4	3.2	2.4	3.6
E – Sorb 5% PS80 0.01%	3.4	3.4	3.3	3.3	3.0	2.5	3.3
F – Sorb 5% PS80 0.04%	3.5	3.5	3.5	3.4	3.2	2.5	3.5

所有配製物在壓力期間均沒有觀察到濃度的演變。關於DAR，在T1M40℃ (約-1個單位)和T3M25℃ (約-0.5個單位)熱壓力之後觀察到降低，但原型之間沒有突顯出差異(圖14)。

icIEF 主要同型%、酸性形式%和鹼性形式%的結果提供於表19中。依據icIEF，主要同型含量的結果描繪在圖15中。表19. icIEF結果

			5 ℃	25 ℃	40 ℃	-20 ℃
	配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
主要同型 %	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	20	21	20	21	20	15	20
	B – Suc 10% PS80 0.01%	20	21	20	21	19	14	19
	C – Suc 10% PS80 0.02%	20	21	19	21	19	14	19
	D – Suc 10% PS80 0.04%	20	21	20	20	19	14	19
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	20	21	20	20	19	15	19
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	20	21	20	19	20	15	20
酸性同型 %	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	53	51	54	52	53	67	53
	B – Suc 10% PS80 0.01%	53	50	53	53	54	68	54
	C – Suc 10% PS80 0.02%	53	50	54	53	54	69	54
	D – Suc 10% PS80 0.04%	53	52	53	54	56	69	56
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	54	51	54	54	54	67	54
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	54	52	54	53	54	67	54
鹼性同型 %	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	27	28	27	27	27	18	27
	B – Suc 10% PS80 0.01%	27	29	27	27	27	18	27
	C – Suc 10% PS80 0.02%	27	29	27	26	27	18	27
	D – Suc 10% PS80 0.04%	27	28	28	26	24	17	24
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	26	28	27	26	27	18	27
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	26	27	27	27	26	18	26

對於所有配製物和T1M40℃以外的所有壓力條件，未觀察到主要同型%、酸性同型%和鹼性同型%有顯著差異。T1M40℃後，主要同型%和鹼性同型%顯著下降，伴隨著酸性同型%增加。原型之間沒有看到有顯著差異。

游離類美登素熱壓力期間總游離類美登素含量的結果呈現在圖16和表20中。表20. 游離類美登素結果

			5 ℃	25 ℃	40 ℃	-20 ℃
	配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
游離總和 %	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	0.3	0.4	0.6	0.8	2.7	4.5	0.4
	B – Suc 10% PS80 0.01%	0.4	0.5	0.5	0.9	2.8	4.8	0.4
	C – Suc 10% PS80 0.02%	0.4	0.5	0.5	1.0	2.8	4.7	0.4
	D – Suc 10% PS80 0.04%	0.4	0.5	0.6	1.1	2.8	5.2	0.5
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	0.3	0.4	0.5	1.0	2.5	4.3	0.4
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	0.4	0.5	0.6	1.2	2.6	4.4	0.5
DM4-TBA (%)	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	0.2	0.4	0.5	0.7	2.2	2.5	0.3
	B – Suc 10% PS80 0.01%	0.3	0.4	0.4	0.8	2.1	2.5	0.3
	C – Suc 10% PS80 0.02%	0.3	0.4	0.4	0.9	2.2	2.6	0.3
	D – Suc 10% PS80 0.04%	0.3	0.4	0.5	1.0	2.1	2.9	0.4
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	0.2	0.3	0.4	0.8	2.0	2.4	0.3
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	0.3	0.4	0.5	1.0	2.1	2.7	0.4
DM4 – (%)	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	-	-	-	0.1
	B – Suc 10% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	-	-	-	0.1
	C – Suc 10% PS80 0.02%	0.1	0.1	0.1	-	-	-	0.1
	D – Suc 10% PS80 0.04%	0.1	0.1	0.1	0.1	-	-	0.1
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	0.1	-	-	0.1
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	0.1	0.1	0.1	0.1	-	-	0.1

在T1M25℃ (略微)、T3m25℃和T1M40℃後，所有配製物的游離類美登素含量增加。在各個條件下，所有原型都觀察到相同的含量。在T3M25℃和T1M40℃之後，配製物E和F呈現出略低含量的游離類美登素。在T1M40℃後，配製物D的游離類美登素含量略高。

整體而言，如在T1M40℃和T3M25℃時所見，含山梨糖醇的原型(配製物E和F)在總游離類美登素含量方面更好。

SEC-UPLC SEC-UPLC的結果描繪於表21中。表21. 依據SEC-UPLC，在熱壓力下的單體%、HMW%和LMW%

			5 ℃	25 ℃	40 ℃	-20 ℃
	配製物	T0	T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
單體 %	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.3	93.7	98.3
	B – Suc 10% PS80 0.01%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.2	93.7	98.4
	C – Suc 10% PS80 0.02%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.2	93.5	98.4
	D – Suc 10% PS80 0.04%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.1	93.5	98.3
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.5	94.0	98.3
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	98.3	98.3	98.2	98.1	96.4	93.9	98.3
HMW%	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.1	3.2	1.7
	B – Suc 10% PS80 0.01%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.0	3.1	1.6
	C – Suc 10% PS80 0.02%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.0	3.1	1.6
	D – Suc 10% PS80 0.04%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.0	3.1	1.6
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.0	3.3	1.7
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	1.7	1.7	1.7	1.8	2.0	3.2	1.7
LMW%	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	0.1	1.7	3.1	＜0.1
	B – Suc 10% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	0.1	1.8	3.3	＜0.1
	C – Suc 10% PS80 0.02%	0.1	0.1	0.1	0.1	1.8	3.4	＜0.1
	D – Suc 10% PS80 0.04%	0.1	0.1	0.1	0.1	1.8	3.4	＜0.1
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	0.1	0.1	0.1	0.1	1.4	2.8	＜0.1
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	0.1	0.1	＜0.1	0.1	1.5	2.8	＜0.1

就所有配製物和所有熱壓力條件來說，單體%和HMW%以類似的方式演變。

關於LMW%，就所有配製物來說，在T0、T1M和T3M 5℃、T3M - 20℃和T1M25℃觀察到含量相似的碎片。在T3M25℃和T1M40℃之後，配製物E和F似乎具有比其他配製物更低的LMW% (與其他配製物相比，T1M40℃之後-0.3%至-0.6%)，如圖17中所描繪。

SDS-PAGE

在非還原條件下的觀察結果如下：在T3M5℃和T3M25℃之後，與T0的模式相同，且配製物之間沒有觀察到有差異。在T1m40℃之後，所有配製物在46kDa處出現一條額外條帶。其相對量為0.1%至0.6%。

在還原條件下的觀察結果如下：在T3m5℃和T3m25℃之後，配製物之間觀察到模式相同且沒有顯著差異。在T1m40℃之後，根據配製物的不同，在33、42、44、83、87、90、130、150和160 kDa處出現了多達9條額外的條帶。配製物之間沒有觀察到顯著差異。

整體而言，就所有測試的熱壓力條件來說，依據SDS-PAGE，可以突顯出配製物之間並沒有差異。

FCM FCM結果呈現在表22中。表22. 熱壓力期間的FCM結果

顆粒 /mL	配製物	T0	5℃	25 ℃	40 ℃	-20 ℃
			T1M	T3M	T1M	T3M	T1M	T3M
≧ 2µm	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	436	192	710	129	362	384	336
	B – Suc 10% PS80 0.01%	446	126	642	192	525	321	131
	C – Suc 10% PS80 0.02%	211	371	491	144	495	1806	374
	D – Suc 10% PS80 0.04%	105	208	287	168	1098	162	137
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	158	284	422	194	326	210	168
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	161	180	511	698	346	508	108
≧ 10µm	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	40	15	15	10	10	20	13
	B – Suc 10% PS80 0.01%	35	10	28	9	12	23	12
	C – Suc 10% PS80 0.02%	15	16	13	10	13	54	33
	D – Suc 10% PS80 0.04%	6	16	11	15	16	11	11
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	7	21	11	13	14	10	13
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	8	14	11	63	15	16	13
≧ 25µm	A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	4	3	1	1	1	3	2
	B – Suc 10% PS80 0.01%	1	1	5	1	2	4	1
	C – Suc 10% PS80 0.02%	2	1	2	2	2	5	2
	D – Suc 10% PS80 0.04%	1	1	1	4	1	1	1
	E – Sorb 5% PS80 0.01%	1	1	1	2	4	2	1
	F – Sorb 5% PS80 0.04%	1	3	0	4	6	0	1

就所有原型和所有熱壓力條件而言，依據FCM，亞可見顆粒沒有顯著的演變。

依據ELISA，與CEACAM5的結合依據ELISA結果，與CEACAM5的結合呈現於表23中。在T3M -20℃、T3M5℃和T3M25℃之後，相對於T0樣品測試配製物(相對效力EC ₅₀T0/EC ₅₀T3m)。表23. T3M5℃、T3M25℃和T3M -20℃後，依據ELISA的結合

配製物	T3M5℃	T3M25℃	T3M-20℃
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	96	98	104
B – Suc 10% PS80 0.01%	101	93	102
C – Suc 10% PS80 0.02%	99	98	98
D – Suc 10% PS80 0.04%	100	95	97
E – Sorb 5% PS80 0.01%	102	94	94
F – Sorb 5% PS80 0.04%	99	100	92

依據ELISA，在T3M -20℃、T3M5℃和T3M25℃之後，與CEACAM5結合的相對效力是穩定的。在這些實驗條件下，配製物原型之間沒有注意到差異。

搖動壓力表24呈現了搖動壓力後目視觀察的結果。表24. 搖動壓力後的目視觀察(顆粒)

配製物	T0	搖動壓力
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	2+	2+
B – Suc 10% PS80 0.01%	2+	2+
C – Suc 10% PS80 0.02%	2+	2+
D – Suc 10% PS80 0.04%	0	2++
E – Sorb 5% PS80 0.01%	2+	2+
F – Sorb 5% PS80 0.04%	2+	2++

在搖動壓力之後，所有配製物都觀察到很少的顆粒。顆粒最常被發現是外源性纖維。

LO (HIAC)及FCM 表25和表26顯示了搖動壓力後，依據HIAC和FCM的亞可見顆粒結果。表25. 搖動壓力後的HIAC結果

顆粒 /mL	T0	搖動壓力後
配製物	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	352	22	5	485	11	1
B – Suc 10% PS80 0.01%	114	10	4	222	13	2
C – Suc 10% PS80 0.02%	208	17	1	257	12	2
D – Suc 10% PS80 0.04%	198	24	5	155	13	1
E – Sorb 5% PS80 0.01%	277	19	3	105	7	1
F – Sorb 5% PS80 0.04%	241	34	2	124	6	2

表26. 搖動後的FCM結果

顆粒 /mL	T0	搖動壓力後
原型	≧ 2 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 2 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	436	40	4	1337	59	5
B – Suc 10% PS80 0.01%	446	35	1	1165	59	5
C – Suc 10% PS80 0.02%	211	15	2	759	102	12
D – Suc 10% PS80 0.04%	105	6	1	412	25	3
E – Sorb 5% PS80 0.01%	158	7	1	225	12	1
F – Sorb 5% PS80 0.04%	161	8	1	798	33	3

依據FCM，看到配製物C的≧10 µM顆粒略有增加，但依據HIAC則無。整體而言，所有配製物在搖動壓力後有關亞可見顆粒的穩定性是令人滿意的。

使用中模擬

目視觀察評估三個採樣點： • P0：在0.9% NaCl中以0.8 g/L稀釋後的T0 • P1：在0.9% NaCl中以0.8 g/L稀釋後在室溫下T24h，沒有透過輸注管線和過濾器進行輸注 • P2：在0.9% NaCl中以0.8 g/L稀釋後在室溫下T24h，透過輸注管線和過濾器進行輸注後。

在0.9% NaCl中稀釋後，所有配製物均呈現可見顆粒：在P0採樣點，提出了以下排名：F＜(優於)D＜C＜B＜E＜A，其中a是最差的情況，而f明顯優於其他配製物。在P1採樣點，提出以下排名：F＜D＜C＜E＜B＜A (樣本之間的差異小於P0) 在P2採樣點，除原型E外，所有配製物中的顆粒都少得多。原型E呈現出大量顆粒；其他原型類似，只有少許顆粒。

總結，在0.9% NaCl中稀釋增加了所有配製物中的可見顆粒含量。輸注後(P2樣品)，顆粒含量恢復到與T0含量相當的程度，除了具有100ppm ps80的配製物E以外。

亞可見顆粒表27和表28分別描繪在使用中模擬後，依據HIAC的亞可見顆粒結果，分別以顆粒/mL和顆粒/容器表示。表27. 使用中模擬後的HIAC結果

顆粒 /mL	T0	P0	P1	P2
配製物	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 1.5 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	352	22	5	5836	245	5	4782	207	11	160	19	3
B – Suc 10% PS80 0.01%	114	10	4	4072	86	2	1735	52	2	120	8	0
C – Suc 10% PS80 0.02%	208	17	1	2733	37	2	1445	25	1	59	6	1
D – Suc 10% PS80 0.04%	198	24	5	1992	18	1	889	45	3	37	7	1
E – Sorb 5% PS80 0.01%	277	19	3	2676	110	4	935	43	1	260	37	3
F – Sorb 5% PS80 0.04%	241	34	2	881	8	0	1430	32	2	62	4	1

表28. 使用中模擬後的HIAC結果，以顆粒/容器(50mL袋)表示

顆粒 / 容器		T0	P0	P1	P2
配製物	規格	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm	≧ 10 µm	≧ 25 µm
A – Suc 2.5% Man 3.75% PS80 0.01%	輸注前，僅供參考。輸注後：顆粒數 ≧10µm ≦6000/接受者顆粒數≧25µm ≦600/接受者	1100	250	12250	250	10350	550	950	150
B – Suc 10% PS80 0.01%	500	200	4300	100	2600	100	400	0
C – Suc 10% PS80 0.02%	850	50	1850	100	1250	50	300	50
D – Suc 10% PS80 0.04%	1200	250	900	50	2250	150	350	50
E – Sorb 5% PS80 0.01%	950	150	5500	200	2150	50	1850	150
F – Sorb 5% PS80 0.04%		1700	100	400	0	1600	100	200	50

如圖18中有關P0和P1採樣點所示，藉由在鹽水溶液(NaCl 0.9%)中稀釋，滲透壓力在所有配製物中產生≧1.5 µm亞可見顆粒。配製物A的≧1.5 µm顆粒數明顯更高。配製物A和E在P0採樣點具有明顯更高數量的≧10 µm顆粒。A和E配製物都具有100 ppm的較低PS80測試濃度。

在透過輸注管線和0.2 µm過濾器輸注後(P2採樣點)，所有配製物的亞可見顆粒都減少了。所有配製物均通過藥典標準，適用於50mL輸液袋。就超過100mL的體積來說，配製物E將未能通過藥典標準(低於25個顆粒/mL≧10μm和低於3個顆粒/mL≧25μm)。就100 ppm PS80濃度來說，突顯出不順從性的風險較高。

濃度及DAR 圖19和圖20描繪了使用中模擬後蛋白質濃度和DAR的結果。對於所有配製物來說，在利用常規輸注套組(包括0.2μM pes在線過濾器)使用中模擬約10ml後，觀察到濃度(-15至-20%)和DAR (-10至-15%)降低。原型之間沒有突顯任何差異。

SEC-UPLC 圖21和圖22呈現出使用中模擬後HMW%和LMW%的結果。在使用中模擬期間，依據SEC未觀察到所有原型在稀釋並在室溫下袋中儲存24小時後發生顯著演變。

結論

基於熱壓力，山梨糖醇類配製物(E & F)在游離類美登素(T1M40℃)、碎裂(T3M25℃和T1M40℃)和濁度(T1M40℃)方面較佳。關於其他測試參數，所有配製物都是相等的。

此外，使用中模擬接續其後的搖動壓力證明：所有配製物在搖動壓力下都顯示出令人滿意的結果，並且沒有突顯出原型之間有顯著差異。

在0.9% NaCl中以0.8 mg/mL稀釋會導致亞可見顆粒形成，特別是含有100 ppm PS80的配製物。依據LO (HIAC)，配製物E (山梨糖醇5%，PS80 100ppm)未通過最嚴格的藥典標準。

透過PE管線+PES過濾器，輸注呈0.8mg/mL的經稀釋huMAb2-3-SPDB-DM4會導致第一毫升中的蛋白質濃度和DAR顯著降低。

基於這些結果，選出初始 huMAb2-3-SPDB-DM4 配製物：乙酸鈉10 mM pH 5.5、山梨糖醇5% (w/v)、PS80 400ppm (0.04%)。

實例3. 添加EDTA對huMAb2-3-SPDB-DM4配製物的影響

在微量金屬存在的情況下，可以觀察到聚山梨糖醇酯的加速降解。眾所周知，鐵以及其他金屬(諸如銅)涉入山梨糖醇酯80 (PS80)的降解，即使以極低濃度(ppb)存在亦然。Kranz et al., J Pharm Sci2019 108(6):2022-2032。探究螯合劑EDTA二鈉的添加以評估其限制PS80氧化的能力。

研究設計

本研究目的是要評估EDTA在三種不同濃度(1、10和50 μM)下對含有金屬殘留物(代表可達到的含量)的huMAb2-3-SPDB-DM4材料的保護作用。填充平台用於模擬實驗室規模的藥品(DP)填充步驟。

在5℃、25℃和40℃下評估樣品的穩定性，至多達1個月。配製物鎖定後，對選定的EDTA濃度和不含EDTA的比較樣品進行至多達6個月的額外分析。表29. 測試配製物

名稱	緩衝劑	目標 pH	賦形劑	EDTA 含量	目標濃度 (g/L)
w/o EDTA	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% PS80 0.04%	0	5.0
EDTA 1 µM	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% PS80 0.04%	1 µM	5.0
EDTA 10 µM	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% PS80 0.04%	10 µM	5.0
EDTA 50 µM	乙酸鹽10 mM	5.5	山梨糖醇5% PS80 0.04%	50 µM	5.0

四種測試配製物在配製物鎖定前儲存於5℃、25℃和40℃下至多達1個月。在25℃下對數量有限的原型和分析方法進行了至多達6個月的補充分析(T6M25℃)。表30描述了配製物研究的時間點、壓力條件和分析方法。表30. 時間點和分析方法

時間點	目的	分析方法
配製物鎖定
T0	初始時間點	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、EDTA含量、CGE、iCIEF、游離藥物、PS80、PTM
T1M5℃	DP儲存條件	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、CGE、iCIEF、游離藥物、PS80
T1M25℃	DP加速條件	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、CGE、iCIEF、游離藥物、PS80
T2W40℃	DP壓力條件	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、CGE、iCIEF、游離藥物、PS80、PTM
T1M40℃	DP壓力條件	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、CGE、iCIEF、游離藥物、PS80、PTM
補充分析
T3M5℃	專注於選定的配製物和不含EDTA的比較樣品	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、PS80
T3M25℃	專注於選定的配製物和不含EDTA的比較樣品	目視檢查、pH、滲透壓、蛋白質濃度、DAR、SEC、DLS、MFI、PS80
T6M25℃	專注於選定的配製物和不含EDTA的比較樣品	PS80

用於本研究的原料藥(DS)含有24 ng/mL的鐵和7 ng/mL的Ni。如此提供的DS配製在乙酸鹽10 mM、山梨糖醇5%、PS80 0.04%、pH 5.5、5g/L中，並儲存在-20℃下。

方法

製備主要包裝材料

玻璃小瓶經注射用水(WFI)手動清洗，並於填充前在烘箱中去熱原。塞子藉由高壓滅菌予以消毒。

配製物製備

三種EDTA原液(50 μM、500 μM和2500 μM)是藉由將EDTA二鈉溶解在有刻度玻璃燒瓶的WFI中所製備。使用0.22 μm滅菌注射器過濾器來過濾得到的溶液。

將ADC DS解凍，彙集在10L聚碳酸酯(PC)瓶中，並透過手動倒置瓶子予以均質。然後用蠕動泵以1.5 L (1.527 kg)填充將ADC DS分到六個2L PC瓶中。

然後將EDTA原液添加到ADC DS中，並透過手動倒置瓶予以均質。表31收集了要添加到ADC DS中的EDTA原液的計算體積，以獲得以下目標濃度：無EDTA、1 μM、10 μM和50 μM。表31. EDTA摻加體積

目標 EDTA 濃度	EDTA 50 μM	EDTA 500 μM	EDTA 2500 μM
0 μM	0	0	0
1 μM	30.6 mL	0	0
10 μM	0	30.6 mL	0
50 μM	0	0	30.6 mL

製備好之後，將溶液儲存在5℃下，直到開始DP填充。摻加EDTA後，初始配製物的稀釋係數估計為約2%。

小瓶填充配製後，產品在10L中間袋中過濾，然後在模擬工業藥品(DP)製程的專用填充平台上被填充到10R小瓶中。然後手動塞住填充好的小瓶並捲邊(crimped)。

分析方法

目視檢查在藥典室(pharmacopeia chamber)和來自MOTIC的光纖MLC-150C下目視檢查樣品以分析可見顆粒的存在(表32中詳述的評分)。表32. 目視檢查的排名

顆粒偵測		顆粒數
0	用冷光(光纖)偵測不到	+	可數(1≦n≦5)
1	僅用冷光(光纖)偵測到	++	數個(n＞5)
2	目視檢查台上的可見顆粒 (歐洲藥典條件)	+++	很多

微流成像(MicroFlow Imaging, MFI) 關於MFI分析，需要1 mL樣品，無需任何稀釋。使用的方法如下：樣品以0.1 mL/min的速度流入小室(cell)中，在0.2 mL吹掃後開始記錄。在室溫下進行測量。在每次測量之前和之後進行Hellmanex 3%和經MilliQ過濾水沖洗。

動態光散射使用以下參數在Nanosizer (Zetasizer nano-S, Malvern)上分析80 μL溶液：3次測量，運行11次，每次10秒，入射角為173°。無需稀釋。結果呈現為三次測量的平均值。

pH 藉由將pH探針丟入2mL樣品中，在室溫下進行測量。

滲透壓使用冰點滲壓計進行滲透壓測量。測量重複3次，結果以平均值呈現。每次測量需要20 μL的體積。

PS80含量藉由氣相層析(GC)測量PS80含量。

結果與討論

下面討論的結果僅限於壓力條件40℃和25℃，因為在5℃儲存條件下觀察到樣品之間沒有差異和演變。在T1M結果後進行配製物鎖定，並決定在較晚時間點只分析所選的10 μM配製物以及無EDTA比較樣品。

目視觀察

目視觀察結果呈現於表33中。

根據歐洲藥典方法，除T2W40℃外，所有配製物都被認為在所有壓力點基本上無可見顆粒。在T1M40℃下未確認可見顆粒的存在，因此歸因於非GMP環境製備。

當使用光纖方法(比歐洲藥典方法更為靈敏)時，在所有配製物和所有時間點都觀察到一些顆粒，但沒有趨勢。

在EDTA存在或不存在的情況下，沒有觀察到顯著差異和演變。

pH和滲透壓

pH和滲透壓值呈現於表34中。

就pH來說，突顯出沒有演變。數值保持不變並符合驗收標準(5.2-5.8)。無論EDTA濃度如何，所有樣品的滲透壓值均未證實隨著時間而演變。

蛋白質濃度及DAR (UV)

蛋白質濃度和DAR結果呈現於表35中。

無論EDTA濃度如何，所有樣品的蛋白質濃度值均未證實隨時間有明顯演變。

在T2M40℃和T1M40℃之後，所有樣品的DAR值都隨時間而下降(圖23)。

就不含EDTA的樣品來說，隨著時間觀察到了下降更多(T1M40℃下無EDTA為-1.2，而T1M40℃下三種EDTA濃度為-0.9)。這個趨勢在3M25℃時間點得到證實，與10 μM EDTA樣品相比，無EDTA樣品降低更多。表33. 目視觀察

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
目視觀察	1++	1++	1++	1++	1+	2+++	2++	2++	1+	1+++	1++	1++	1++	1++	1+++	1+++	1++	1+

表34. pH及滲透壓

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
pH	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5
Osm.	267	264	282	272	270	265	282	276	269	264	282	273	264	263	283	270	267	282

表35. 蛋白質濃度及DAR

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
濃度 mg/mL	4.4	4.3	4.7	4.5	4.5	4.4	4.8	4.6	4.5	4.4	4.8	4.6	4.5	4.4	4.7	4.5	4.6	4.8
DAR	3.8	3.9	3.9	3.9	3.1	3.4	3.5	3.4	2.6	3.0	3.0	3.0	3.8	3.8	3.9	3.8	3.3	3.6

表36. Z平均值及PDI%

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
Zav (nm)	11.2	11.2	11.2	11.3	11.3	11.2	11.3	11.4	11.3	11.2	11.2	11.2	11.1	11.0	11.2	11.0	11.4	11.2
PDI%	21.7	21.3	20.5	23.9	26.5	36.4	23.2	26.1	24.9	25.5	20.2	23.5	27.5	19.4	18.9	22.0	30.0	21.6

表37. MFI結果

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
≧2 μm	329	367	406	292	229	719	1104	310	376	237	906	171	902	714	846	751	1381	1166
≧10 μm	0	8	0	10	5	30	32	4	0	0	8	9	0	6	53	21	39	15
≧25 μm	0	2	0	2	0	5	5	0	0	0	2	3	0	2	10	8	6	6

表38. 單體及HMW

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25 ° C
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
單體 %	96.6	96.6	96.6	96.6	95.4	96.5	96.2	96.2	93.2	95.3	94.8	95.0	97.2	97.5	97.3	97.4	96.1	96.7
HMW%	1.1	1.1	1.2	1.1	2.1	1.8	2.0	1.9	3.1	2.1	2.5	2.3	1.3	1.2	1.3	1.3	1.7	1.5

表39. 還原cGE結果

	T0	T2W40℃	T1M40 ℃	T1M25 ℃
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50
輕鏈和重鏈的總和 (經校正面積%)	98.2	97.8	98.1	98.3	97.8	98.0	97.8	97.9	95.6	97.5	98.2	97.3	98.2	98.1	98.1	97.9

表40. 非還原cGE結果

	T0	T2W40 ℃	T1M40 ℃	T1M25 ℃
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50
純度 (H2L2，經校正面積%)	87.1	87.1	87.3	87.2	85.2	86.9	86.9	86.6	84.8	87.2	86.7	87.0	85.0	86.1	86.2	86.0
主要碎片 (RMT 0.96，經校正面積%)	9.3	9.3	9.1	9.3	10.0	9.6	9.6	9.7	8.3	7.7	8.0	8.0	10.5	10.4	10.3	10.4
其他碎片的總和 (經校正面積%)	3.5	3.5	3.6	3.5	4.8	3.5	3.5	3.5	6.9	5.1	5.2	5.0	4.5	3.5	3.6	3.5

表41. PS80含量

	T0	T2W40℃	T1M40℃	T1M25℃	T3M25℃
EDTA μM	0	1	10	50		1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	50
PS80 ppm	310	323	332	317	282	298	329	315	241	311	333	319	300	309	331	331	233	390

(續)

	T6M25 ℃
EDTA μM	0	1	10	50
PS80 ppm	103	317	333	317

表42. 依據IiCIEF的低PI及主要同型

	T0	T2W40 ℃	T1M40℃	T1M25 ℃
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50
高pI同型的總和(面積%)	9	9	9	9	7	8	8	8	4	6	5	7	9	9	9	9
主要同型的總和(面積%)	83	83	82	82	77	81	81	81	66	74	73	72	82	82	82	83
低pI同型的總和(面積%)	8	8	9	8	15	11	11	10	30	20	22	21	9	9	9	9

表43. 總游離類美登素

	T0	T2W40 ℃	T1M40 ℃	T1M25 ℃
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50
總游離	0.1	0.1	0.1	0.1	1.5	1.4	1.5	1.4	2.9	2.7	2.7	2.6	0.5	0.6	0.6	0.6
氧化物質	-	-	-	-	-	-	-	-	+	-	-	-	-	-	-	-
雜質A	ND	ND	ND	ND	0.25	0.07	0.10	0.09	0.69	0.41	0.43	0.41	ND	ND	ND	ND
≧LOQ的其他類美登素雜質的數量	0	0	0	0	1	1	0	0	8	5	4	4	0	0	0	0

表44. Met255及Met431氧化

	T0	T2W40 ℃	T1M40 ℃
EDTA μM	0	1	10	50	0	1	10	50	0	1	10	50
Met255 氧化 (%)	5	4	5	4	8	5	6	5	23	10	12	11
Met431 氧化 (%)	2	2	1	1	3	2	2	2	10	4	4	4

亞微米顆粒(DLS)

在表36中呈現PdI%和Z平均值隨時間變化的數值。

就Zav來說，所有時間點和所有EDTA濃度並沒有觀察到趨勢。關於PDI%，在25℃和40℃時間點觀察到大多數樣品略有增加。然而，在EDTA含量方面突顯出沒有明確的趨勢。

亞可見顆粒(MFI)

表37中呈現亞可見顆粒結果。

在所有時間點都看不到原型之間的差異。在T3M25℃時間點觀察到亞可見顆粒非常少量增加；對於無EDTA和10 μM EDTA樣品來說，這種增加是相似的。

依據尺寸排阻層析(SEC)的純度及HMW%

表38呈現SEC的結果(單體%和HMW%)。

所有樣品的單體%在T1M40℃後下降，在EDTA不存在的情況下速率更快(在T1M40℃下，無EDTA樣品為-3.4%，含EDTA樣品為-1.3/-1.8%，參見圖24)。

這個結果是透過HMW%增加而得到證實，無EDTA樣品則更高(在T1M40℃下，無EDTA樣品為+2.0%，含EDTA樣品為+1.0/+1.3%，參見圖25)。

三種測試的EDTA濃度就單體%和HMW%來說並沒有顯著差異。

依據CGE的純度及破碎

表39和表40呈現在還原條件(輕鏈和重鏈%的總和)和非還原條件(純度%、主要碎片%和其他碎片的總和%)下的CGE結果。

在非還原cGE中(表40、圖26和圖27)，在EDTA不存在的情況下，1M40℃後純度顯著降低，這是透過碎片(所有碎片的總和)增加而獲得證實。對於三種EDTA濃度來說，在T2W40℃、T1M25℃和T1M40℃下觀察到沒有顯著的演變。

在還原cGE中(參見表39和圖28)，在EDTA不存在的情況下，1M40℃後，輕鏈和重鏈的總和顯著下降。對於三種EDTA濃度來說，在T2W40℃、T1M25℃和T1M40℃下觀察到沒有顯著的演變。

依據氣相層析(GC)的PS80含量

表41呈現PS80含量的結果。

對於所有EDTA濃度來說，高達T6M25℃都記錄到PS80含量沒有顯著下降。在EDTA不存在的情況下，T1M40℃和T6M25℃之後觀察到PS80明顯降低(也參見圖29)。

依據成像毛細管等電聚焦(iCIEF)的電荷變體分析

表42收集了iCIEF結果(主要同型%的總和、高pI同型%的總和和低PI同型%的總和)。

在40℃壓力條件下，含EDTA的樣品在電荷同型方面具有更為改善的穩定性。在無EDTA的情況下，低pI同型的總和增加但主要同型減少更為明顯(低pI：在T1M40℃無EDTA時為+22%，有EDTA為+12-13%。主要同型：無EDTA為-17%，有EDTA為-9/-10%，也參見圖30與31)。在EDTA濃度方面突顯出沒有顯著差異。

游離類美登素含量

表43呈現游離藥物分析的結果。

就所有樣品(有和沒有EDTA)的游離藥物總量來說，突顯出沒有顯著差異。然而，可以看到雜質A的百分率有差異：在40℃下2週和1個月後，與EDTA樣品相比，在EDTA不存在的情況下雜質A的百分率更高。無法區分三種EDTA濃度。此外，在EDTA不存在的情況下，在1M40℃後會出現氧化物質，而在EDTA存在的情況下偵測到無氧化物質。

轉譯後修飾

本節僅探討Met255和Met431氧化，因為其他PTM的配製物之間沒有注意到差異。

PTM分析證明，與無EDTA的樣品相比，存在EDTA時，M255和M431位置的氧化程度較低。看到三種EDTA濃度之間沒有顯著差異(參見表44)。

結論

就所有測試條件來說，三種EDTA濃度提供了PS80含量和可能受氧化過程影響的其他品質屬性(特別是PTM、游離類美登素、cGE、iCIEF和SEC)的穩定作用。

圖1是huMAb2-3-SPDB-DM4(左)和化學部分之結構(右)的通用代表圖。圖2是描繪原型配製物A-H的SEC-UPLC T0分析層析圖的圖。顯示原型A-H在T0的SEC-HPLC圖的疊加。參見實例3。圖3是描繪游離類美登素的原型A(乙酸鹽)、C(組胺酸)、和E(檸檬酸鹽)的t0分析層析圖的圖。顯示原型A(中灰色)、C(淺灰色)、和E (深灰色)在T0的游離類美登素。X軸，分；Y軸，AU。圖4A是原型配製物A-H在t0時，非還原條件下的SDS-PAGE影像。圖4B是原型配製物A-H在t0時，還原條件下的SDS-PAGE影像。圖5是描繪在指定壓力後，OD 350 nm的演變。Y軸，OD350 nm。針對每個壓力條件，原型以A到H呈現。圖6是描繪在指定熱壓力後，藥物與抗體比率(DAR)演變的圖。X 軸，原型配製物。圖7是描繪在指定熱壓力期間，聚集體演變的圖。對於每個原型，壓力條件按以下順序呈現：T0、T2w40℃、T4W40℃、T1M5℃。X軸，原型配製物。圖8是描繪在指定熱壓力期間，碎片演變的圖。對於每個原型，壓力條件按以下順序呈現：T0、T2w40℃、T4W40℃、T1M5℃。X軸，原型配製物。圖9是描繪在指定熱壓力後，游離類美登素總和的圖。除原型D外，T0含量不可見。所有原型均可見T2W40℃。T4W時間點僅分析原型A、B、C、G、H。X軸，原型配製物；Y軸：游離類美登素含量。圖10是描繪配製物A (乙酸鹽，下方輪廓)和C (組胺酸，上方輪廓)在40℃下4週後疊加的游離類美登素曲線圖的圖。圖11是描繪在指定熱壓力後，酸性同型演變的圖。對於每個原型，時間點按以下順序呈現：T0、T2W40℃、T4W40℃、T4W5℃、T4W25℃。原型E和F未針對T4W時間點進行分析。X軸，原型配製物；Y軸，酸性同型%。圖12是描繪原型配製物A(乙酸鹽)在t0(上圖)和40℃下4週後(下圖)的成像毛細管等電聚焦(iCIEF)層析圖的圖。X軸，時間(分)。圖13是描述配製物A(乙酸鹽)、C(組胺酸)、和E(檸檬酸鹽)在搖動壓力後的疊加iCIEF層析圖的圖。圖14是描繪熱壓力期間DAR演變的圖(初始配製物開發；實例2)。對於每個時間點，原型以A到F呈現。Y軸，DAR UV。圖15是描繪熱壓力期間icIEF主要電荷同型演變的圖。對於每個時間點，原型以A到F呈現。圖16是描繪熱壓力期間總游離類美登素演變的圖。對於每個時間點，原型以A到F呈現。圖17是描繪熱壓力期間LMW演變的圖。對於每個時間點，原型以A到F呈現。圖18是描述使用中模擬後高精度液體顆粒計數器(HIAC)結果的圖表，顆粒≧1.5 µm。對於每個原型，壓力按以下順序呈現：無施加壓力(T0)、搖動壓力後、P0 (以0.9g/L在NaCl 0.9% IV袋中稀釋後)、P1(以0.9g/L在NaCl 0.9% IV袋中稀釋後24小時)和P2(以0.9g/L在NaCl 0.9% IV袋中稀釋並通過帶有在線過濾器的IV輸注組灌注後24小時)。圖19A是描繪使用中模擬後濃度變化%的圖。圖19B是描繪使用中模擬後濃度變化的圖。圖20A是描繪使用中模擬後DAR變化(%)的圖。圖20B是描繪使用中模擬後DAR變化(%)的圖。圖21是描繪使用中模擬期間HMW演變的圖。對於這兩個時間點，原型以A到F呈現。圖22是描繪使用中模擬期間LMW演變的圖。對於每個時間點，原型以A到F呈現。圖23是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品在填充小瓶中的DAR演變的圖。T0，時間零；T2W40℃，40℃下兩週；T1M T2W40℃，40℃下一個月；T3M25℃，25℃下3個月(實例3)。無EDTA和10µM EDTA樣品僅分析T3M25℃時間點。圖24是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品在填充小瓶中的單體%變化的圖。無EDTA和10µM EDTA樣品僅分析T3M25℃時間點。圖25是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品在填充小瓶中的高分子量物質(HMW)%變化的圖。無EDTA和10µM EDTA樣品僅分析T3M25℃時間點。圖26是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品的其他碎片演變的總和的圖。圖27是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品的H2L2%變化的圖(非還原性毛細管凝膠電泳)。圖28是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品的輕鏈和重鏈%總和的圖(還原性毛細管凝膠電泳)。圖29是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品的PS80含量的圖。未對1 µM和50 µM EDTA樣品進行T3M25℃時間點分析。圖30是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品在填充小瓶中的主要同型總和的圖。圖31是描繪在指定熱壓力後，具有指定濃度EDTA的樣品在填充小瓶中的低pI%的總和的圖。

圖1

Claims

一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑，以及 iv) 表面活性劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項1之醫藥配製物，其中該醫藥配製物是凍乾配製物。
如請求項1之醫藥配製物，其中該醫藥配製物是液體配製物。
一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑， iii) 張力劑， iv) 表面活性劑，及 v) 螯合劑，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項4之醫藥配製物，其中該醫藥配製物是液體配製物。
如請求項4之醫藥配製物，其中該醫藥配製物是凍乾配製物。
如請求項1至6中任一項之醫藥配製物，其中緩衝劑是選自由乙酸鹽、精胺酸、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合構成之群組。
如請求項7之醫藥配製物，其中張力劑是多元醇。
如請求項8之醫藥配製物，其中多元醇是選自由赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合構成之群組。
如請求項1至9中任一項之醫藥配製物，其中表面活性劑是選自由聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯80、泊洛沙姆(poloxamer) 188、及其任何組合構成之群組。
如請求項10之醫藥配製物，其中表面活性劑是聚山梨糖醇酯80。
如請求項2至11中任一項之醫藥配製物，其中螯合劑是選自由二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二醇-雙(β-胺基乙基醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、氮基三乙酸、及其任何組合構成之群組。
如請求項12之醫藥配製物，其中螯合劑是EDTA。
如請求項4之醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項4之醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽，及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項4之醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項4之醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 緩衝劑，選自乙酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽、及其任何組合，濃度為約5 mM至約100 mM， iii) 張力劑，選自赤藻糖醇、甘油、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、蔗糖、蘇糖醇、木糖醇、及其任何組合，濃度為約1% (w/v)至約50% (w/v)， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA，在約5.0至約6.5的pH下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
一種醫藥配製物，其包含 i) 抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉， iii) 山梨糖醇， iv) 聚山梨糖醇酯80，及 v) EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項18之醫藥配製物，其包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1-50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項19之醫藥組合物，其包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 1 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
如請求項19之醫藥組合物，其包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 10 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
一種醫藥組合物，其包含 i) 5 mg/mL抗人類癌胚抗原相關細胞黏附分子5(hCEACAM5)抗體-藥物接合物(ADC)， ii) 乙酸鈉10 mM， iii) 山梨糖醇5% (w/v)， iv) 0.04% (w/v)聚山梨糖醇酯80，及 v) 50 μM EDTA二鈉，在pH 5.5下，其中ADC由huMAb2-3-SPDB-DM4組成。
一種治療癌症的方法，包含向有需要的個體投予有效量之如請求項1至22中任一項的醫藥配製物。
一種治療癌症的方法，包含向有需要的個體投予有效量之如請求項20的醫藥配製物。
如請求項23或24之方法，其中癌症是高癌胚抗原相關細胞黏附分子癌。
如請求項23至25中任一項之方法，其中癌症是選自由結腸直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌，及膀胱癌構成之群組。
如請求項23至25中任一項之方法，其中癌症是選自
如請求項23至25中任一項之方法，其中癌症是肺癌。
如請求項28之方法，其中肺癌是非鱗狀非小細胞肺癌。
如請求項23至29中任一項之方法，其中個體是人類。