TW202226956A - 蛋白質方法和組成物 - Google Patents
蛋白質方法和組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202226956A TW202226956A TW110134226A TW110134226A TW202226956A TW 202226956 A TW202226956 A TW 202226956A TW 110134226 A TW110134226 A TW 110134226A TW 110134226 A TW110134226 A TW 110134226A TW 202226956 A TW202226956 A TW 202226956A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- cells
- protein
- protein composition
- aqueous suspension
- proteins
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 361
- 238000001814 protein method Methods 0.000 title 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 775
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 775
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 325
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims abstract description 59
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 759
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 454
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 200
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 163
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 159
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 146
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims description 122
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 claims description 99
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 81
- 239000012465 retentate Substances 0.000 claims description 75
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 53
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 53
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 52
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 50
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 49
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 48
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 38
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 37
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 36
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 32
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 31
- -1 dodecaldehyde Chemical compound 0.000 claims description 30
- YVBAUDVGOFCUSG-UHFFFAOYSA-N 2-Pentylfuran Natural products CCCCCC1=CC=CO1 YVBAUDVGOFCUSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 22
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 19
- 102000001696 Mannosidases Human genes 0.000 claims description 17
- 108010054377 Mannosidases Proteins 0.000 claims description 17
- KWOLFJPFCHCOCG-UHFFFAOYSA-N Acetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC=C1 KWOLFJPFCHCOCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 16
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 16
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 16
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical compound CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical compound CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N phenylacetaldehyde Chemical compound O=CCC1=CC=CC=C1 DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- NWZIYQNUCXUJJJ-UHFFFAOYSA-N 2-butylfuran Chemical compound CCCCC1=CC=CO1 NWZIYQNUCXUJJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- ZAJNGDIORYACQU-UHFFFAOYSA-N decan-2-one Chemical compound CCCCCCCCC(C)=O ZAJNGDIORYACQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 claims description 14
- HLPIHRDZBHXTFJ-UHFFFAOYSA-N 2-ethylfuran Chemical compound CCC1=CC=CO1 HLPIHRDZBHXTFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- ZPVFWPFBNIEHGJ-UHFFFAOYSA-N 2-octanone Chemical compound CCCCCCC(C)=O ZPVFWPFBNIEHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- RHLVCLIPMVJYKS-UHFFFAOYSA-N 3-octanone Chemical compound CCCCCC(=O)CC RHLVCLIPMVJYKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- YEJRWHAVMIAJKC-UHFFFAOYSA-N 4-Butyrolactone Chemical compound O=C1CCCO1 YEJRWHAVMIAJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 claims description 14
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 14
- MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N decan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCO MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- CATSNJVOTSVZJV-UHFFFAOYSA-N heptan-2-one Chemical compound CCCCCC(C)=O CATSNJVOTSVZJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- ZWRUINPWMLAQRD-UHFFFAOYSA-N nonan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCO ZWRUINPWMLAQRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- VKCYHJWLYTUGCC-UHFFFAOYSA-N nonan-2-one Chemical compound CCCCCCCC(C)=O VKCYHJWLYTUGCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N nonanal Chemical compound CCCCCCCCC=O GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N octanal Chemical compound CCCCCCCC=O NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 14
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- LCZUOKDVTBMCMX-UHFFFAOYSA-N 2,5-Dimethylpyrazine Chemical compound CC1=CN=C(C)C=N1 LCZUOKDVTBMCMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 10
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 claims description 8
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 claims description 8
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 claims description 8
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 claims description 8
- 229940100595 phenylacetaldehyde Drugs 0.000 claims description 8
- 239000005968 1-Decanol Substances 0.000 claims description 7
- ACWQBUSCFPJUPN-UHFFFAOYSA-N Tiglaldehyde Natural products CC=C(C)C=O ACWQBUSCFPJUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229930188620 butyrolactone Natural products 0.000 claims description 7
- HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N pentanal Chemical compound CCCCC=O HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- IDEYZABHVQLHAF-GQCTYLIASA-N (e)-2-methylpent-2-enal Chemical compound CC\C=C(/C)C=O IDEYZABHVQLHAF-GQCTYLIASA-N 0.000 claims description 6
- 239000001934 2,5-dimethylpyrazine Substances 0.000 claims description 6
- IDEYZABHVQLHAF-UHFFFAOYSA-N 2-Methyl-2-pentenal Natural products CCC=C(C)C=O IDEYZABHVQLHAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 6
- FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N heptanal Chemical compound CCCCCCC=O FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 6
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 claims description 3
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 abstract description 41
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 abstract description 18
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 57
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 55
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 54
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 52
- 239000000047 product Substances 0.000 description 41
- 239000002585 base Substances 0.000 description 34
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 34
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 32
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 29
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 26
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 25
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 24
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 23
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 23
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 21
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 18
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 18
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 17
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 17
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 17
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 16
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 16
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 16
- 239000008394 flocculating agent Substances 0.000 description 16
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 16
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 15
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 15
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 15
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 14
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 14
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 14
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 14
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 14
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 13
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 13
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 13
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 13
- YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutanal Chemical compound CC(C)CC=O YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 12
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 12
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 12
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 12
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 12
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 11
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 11
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 10
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 10
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 10
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 10
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 9
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- 241000894007 species Species 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 8
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 8
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 8
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 7
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 7
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 7
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 7
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 7
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 7
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000019568 aromas Nutrition 0.000 description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 6
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 6
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 241000203069 Archaea Species 0.000 description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 5
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 5
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 5
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 5
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 5
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 5
- 240000004922 Vigna radiata Species 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 5
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 5
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 5
- 238000010296 bead milling Methods 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- NPSTUPUZGGHOHT-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde;heptanal Chemical compound CCCCCCC=O.O=CC1=CC=CC=C1 NPSTUPUZGGHOHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 5
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 description 5
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 5
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 5
- ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N elaidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 5
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 5
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 5
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 5
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 5
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 5
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000010523 Cicer arietinum Nutrition 0.000 description 4
- 244000045195 Cicer arietinum Species 0.000 description 4
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 4
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- GRSZFWQUAKGDAV-KQYNXXCUSA-N IMP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 GRSZFWQUAKGDAV-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 4
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 4
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 235000010721 Vigna radiata var radiata Nutrition 0.000 description 4
- 235000011469 Vigna radiata var sublobata Nutrition 0.000 description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 4
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 4
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 4
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 4
- 235000013902 inosinic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 4
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- CAWHJQAVHZEVTJ-UHFFFAOYSA-N methylpyrazine Chemical compound CC1=CN=CC=N1 CAWHJQAVHZEVTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 3
- 235000014653 Carica parviflora Nutrition 0.000 description 3
- 241001529572 Chaceon affinis Species 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 3
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 description 3
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 3
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 3
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 3
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 3
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 3
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 3
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 3
- 239000006057 Non-nutritive feed additive Substances 0.000 description 3
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 3
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 description 3
- 244000115721 Pennisetum typhoides Species 0.000 description 3
- 235000007195 Pennisetum typhoides Nutrition 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000207961 Sesamum Species 0.000 description 3
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 3
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 3
- 244000042314 Vigna unguiculata Species 0.000 description 3
- 241000746966 Zizania Species 0.000 description 3
- 102000019199 alpha-Mannosidase Human genes 0.000 description 3
- 108010012864 alpha-Mannosidase Proteins 0.000 description 3
- 235000021168 barbecue Nutrition 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 3
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol Chemical compound CCC(C)O BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 3
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 3
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 3
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 3
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 235000019264 food flavour enhancer Nutrition 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K iron(III) citrate Chemical compound [Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 3
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 3
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 3
- 235000005974 protein supplement Nutrition 0.000 description 3
- 229940116540 protein supplement Drugs 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 3
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 3
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 description 2
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MMFCJPPRCYDLLZ-CMDGGOBGSA-N (2E)-dec-2-enal Chemical compound CCCCCCC\C=C\C=O MMFCJPPRCYDLLZ-CMDGGOBGSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDFKTBCGKNOHPJ-AATRIKPKSA-N (E)-hept-2-enal Chemical compound CCCC\C=C\C=O NDFKTBCGKNOHPJ-AATRIKPKSA-N 0.000 description 2
- BSAIUMLZVGUGKX-BQYQJAHWSA-N (E)-non-2-enal Chemical compound CCCCCC\C=C\C=O BSAIUMLZVGUGKX-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 2
- LVBXEMGDVWVTGY-VOTSOKGWSA-N (E)-oct-2-enal Chemical compound CCCCC\C=C\C=O LVBXEMGDVWVTGY-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 2
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BBMCTIGTTCKYKF-UHFFFAOYSA-N 1-heptanol Chemical compound CCCCCCCO BBMCTIGTTCKYKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JLIDVCMBCGBIEY-UHFFFAOYSA-N 1-penten-3-one Chemical compound CCC(=O)C=C JLIDVCMBCGBIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OXQOBQJCDNLAPO-UHFFFAOYSA-N 2,3-Dimethylpyrazine Chemical compound CC1=NC=CN=C1C OXQOBQJCDNLAPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MOMFXATYAINJML-UHFFFAOYSA-N 2-Acetylthiazole Chemical compound CC(=O)C1=NC=CS1 MOMFXATYAINJML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BYGQBDHUGHBGMD-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutanal Chemical compound CCC(C)C=O BYGQBDHUGHBGMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JMMZCWZIJXAGKW-UHFFFAOYSA-N 2-methylpent-2-ene Chemical compound CCC=C(C)C JMMZCWZIJXAGKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MFEIKQPHQINPRI-UHFFFAOYSA-N 3-Ethylpyridine Chemical compound CCC1=CC=CN=C1 MFEIKQPHQINPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QENGPZGAWFQWCZ-UHFFFAOYSA-N 3-Methylthiophene Chemical compound CC=1C=CSC=1 QENGPZGAWFQWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SEPQTYODOKLVSB-UHFFFAOYSA-N 3-methylbut-2-enal Chemical compound CC(C)=CC=O SEPQTYODOKLVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLJXXKKOSFGPHI-UHFFFAOYSA-N 3-methylhexane Chemical compound CCCC(C)CC VLJXXKKOSFGPHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DBERHVIZRVGDFO-UHFFFAOYSA-N Acetoxyacetone Chemical compound CC(=O)COC(C)=O DBERHVIZRVGDFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical compound C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108010001949 Algal Proteins Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 2
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 description 2
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N Campesterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 244000132059 Carica parviflora Species 0.000 description 2
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 description 2
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 description 2
- 241001107116 Castanospermum australe Species 0.000 description 2
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 2
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 2
- 102100034976 Cystathionine beta-synthase Human genes 0.000 description 2
- 108010073644 Cystathionine beta-synthase Proteins 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YWHLKYXPLRWGSE-UHFFFAOYSA-N Dimethyl trisulfide Chemical compound CSSSC YWHLKYXPLRWGSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004097 EU approved flavor enhancer Substances 0.000 description 2
- 241000195620 Euglena Species 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 2
- 241000223195 Fusarium graminearum Species 0.000 description 2
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 2
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 2
- BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N Haliclonasterol Natural products CC(C=CC(C)C(C)(C)C)C1CCC2C3=CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N Isopropylaldehyde Chemical compound CC(C)C=O AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 2
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 2
- 235000010649 Lupinus albus Nutrition 0.000 description 2
- 240000000894 Lupinus albus Species 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241001330975 Magnaporthe oryzae Species 0.000 description 2
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 2
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 2
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 2
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 2
- 241000203353 Methanococcus Species 0.000 description 2
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 2
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 2
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 2
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 2
- HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M Potassium gluconate Chemical compound [K+].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M 0.000 description 2
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LOUPRKONTZGTKE-WZBLMQSHSA-N Quinine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@@H]2[C@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-WZBLMQSHSA-N 0.000 description 2
- 235000019774 Rice Bran oil Nutrition 0.000 description 2
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008515 Setaria glauca Nutrition 0.000 description 2
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 2
- 235000004240 Triticum spelta Nutrition 0.000 description 2
- 240000003834 Triticum spelta Species 0.000 description 2
- 235000010716 Vigna mungo Nutrition 0.000 description 2
- 235000011453 Vigna umbellata Nutrition 0.000 description 2
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 2
- 235000019498 Walnut oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 2
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000002636 Zizania aquatica Nutrition 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- 229920000180 alkyd Polymers 0.000 description 2
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 2
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 2
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000001548 androgenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000015241 bacon Nutrition 0.000 description 2
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 2
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013406 biomanufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000021279 black bean Nutrition 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 2
- 235000011116 calcium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N campesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N 0.000 description 2
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 description 2
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 description 2
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000001055 chewing effect Effects 0.000 description 2
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 2
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 2
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 2
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- WQOXQRCZOLPYPM-UHFFFAOYSA-N dimethyl disulfide Chemical compound CSSC WQOXQRCZOLPYPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 244000013123 dwarf bean Species 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- CBOQJANXLMLOSS-UHFFFAOYSA-N ethyl vanillin Chemical compound CCOC1=CC(C=O)=CC=C1O CBOQJANXLMLOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KVFIJIWMDBAGDP-UHFFFAOYSA-N ethylpyrazine Chemical compound CCC1=CN=CC=N1 KVFIJIWMDBAGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000004426 flaxseed Nutrition 0.000 description 2
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 2
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 235000013882 gravy Nutrition 0.000 description 2
- 235000021331 green beans Nutrition 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 235000020993 ground meat Nutrition 0.000 description 2
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 2
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 2
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWVFCEVNXHTDNF-UHFFFAOYSA-N hexane-2,3-dione Chemical compound CCCC(=O)C(C)=O MWVFCEVNXHTDNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 2
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- BJBSKTPEFSQVHL-XRDLMGPZSA-L iron(2+) (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate hydrate Chemical compound O.[Fe++].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O BJBSKTPEFSQVHL-XRDLMGPZSA-L 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010059642 isinglass Proteins 0.000 description 2
- MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N isoamyl acetate Chemical compound CC(C)CCOC(C)=O MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229940033355 lauric acid Drugs 0.000 description 2
- XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N limonene Chemical compound CC(=C)C1CCC(C)=CC1 XMGQYMWWDOXHJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 2
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 2
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000012269 metabolic engineering Methods 0.000 description 2
- VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N methyl anthranilate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1N VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229910052627 muscovite Inorganic materials 0.000 description 2
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N nonanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(O)=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 2
- VSMOENVRRABVKN-UHFFFAOYSA-N oct-1-en-3-ol Chemical compound CCCCCC(O)C=C VSMOENVRRABVKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 2
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 2
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 2
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 2
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 2
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004224 potassium gluconate Substances 0.000 description 2
- 235000013926 potassium gluconate Nutrition 0.000 description 2
- 229960003189 potassium gluconate Drugs 0.000 description 2
- SUVIGLJNEAMWEG-UHFFFAOYSA-N propane-1-thiol Chemical compound CCCS SUVIGLJNEAMWEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 2
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000008165 rice bran oil Substances 0.000 description 2
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 2
- SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N salicylaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC=C1C=O SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 2
- PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N sinapic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 2
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 description 2
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 2
- 229940071440 soy protein isolate Drugs 0.000 description 2
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 2
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 2
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- UHEPJGULSIKKTP-UHFFFAOYSA-N sulcatone Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=O UHEPJGULSIKKTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N tetradecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- IAEGWXHKWJGQAZ-UHFFFAOYSA-N trimethylpyrazine Chemical compound CC1=CN=C(C)C(C)=N1 IAEGWXHKWJGQAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 2
- KYWIYKKSMDLRDC-UHFFFAOYSA-N undecan-2-one Chemical compound CCCCCCCCCC(C)=O KYWIYKKSMDLRDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N undecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC(O)=O ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KJIOQYGWTQBHNH-UHFFFAOYSA-N undecanol Chemical compound CCCCCCCCCCCO KJIOQYGWTQBHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 239000008170 walnut oil Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 2
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 2
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 2
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 2
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 2
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001893 (2R)-2-methylbutanal Substances 0.000 description 1
- FDKWRPBBCBCIGA-REOHCLBHSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-$l^{1}-selanylpropanoate Chemical compound [Se]C[C@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N (2r)-2-hydroxy-n-[(2s,3r,4e,8e)-3-hydroxy-9-methyl-1-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]heptadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)C(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CC\C=C(/C)CCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N 0.000 description 1
- MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N (2r,3r)-2,3-bis[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]butane-1,4-diol;(2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.C1=C(O)C(OC)=CC(C[C@@H](CO)[C@H](CO)CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N 0.000 description 1
- LABTWGUMFABVFG-ONEGZZNKSA-N (3E)-pent-3-en-2-one Chemical compound C\C=C\C(C)=O LABTWGUMFABVFG-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQVLRGLGWNWPSS-BXBUPLCLSA-N (4r,7s,10s,13s,16r)-16-acetamido-13-(1h-imidazol-5-ylmethyl)-10-methyl-6,9,12,15-tetraoxo-7-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14-tetrazacycloheptadecane-4-carboxamide Chemical compound N1C(=O)[C@@H](NC(C)=O)CSSC[C@@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CC1=CN=CN1 FQVLRGLGWNWPSS-BXBUPLCLSA-N 0.000 description 1
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- PANBRUWVURLWGY-MDZDMXLPSA-N (E)-2-undecenal Chemical compound CCCCCCCC\C=C\C=O PANBRUWVURLWGY-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- KJPRLNWUNMBNBZ-QPJJXVBHSA-N (E)-cinnamaldehyde Chemical compound O=C\C=C\C1=CC=CC=C1 KJPRLNWUNMBNBZ-QPJJXVBHSA-N 0.000 description 1
- AYQPVPFZWIQERS-VOTSOKGWSA-N (E)-oct-2-en-1-ol Chemical compound CCCCC\C=C\CO AYQPVPFZWIQERS-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 1
- BATOPAZDIZEVQF-MQQKCMAXSA-N (E,E)-2,4-hexadienal Chemical compound C\C=C\C=C\C=O BATOPAZDIZEVQF-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 1
- PHIQHXFUZVPYII-ZCFIWIBFSA-N (R)-carnitine Chemical compound C[N+](C)(C)C[C@H](O)CC([O-])=O PHIQHXFUZVPYII-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N (e)-4-(6-aminopurin-9-yl)but-2-en-1-ol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2C\C=C\CO DYLIWHYUXAJDOJ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSMOENVRRABVKN-MRVPVSSYSA-N 1-Octen-3-ol Natural products CCCCC[C@H](O)C=C VSMOENVRRABVKN-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQWNKUAZQSLNSR-UHFFFAOYSA-N 12-methyltridecanal Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCC=O OQWNKUAZQSLNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 2,3,9,10-tetramethoxy-6,8,13,13a-tetrahydro-5H-isoquinolino[2,1-b]isoquinoline Chemical compound C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3CC2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBSLLHNATPQFMJ-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dimethylthiazole Chemical compound CC1=CSC(C)=N1 OBSLLHNATPQFMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUYNUXHHUVUINQ-UHFFFAOYSA-N 2-Methyl-3-furanthiol Chemical compound CC=1OC=CC=1S RUYNUXHHUVUINQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCSBILYQLVXLJG-UHFFFAOYSA-N 2-Propenyl hexanoate Chemical compound CCCCCC(=O)OCC=C RCSBILYQLVXLJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOMQUZPKALKDCA-UHFFFAOYSA-K 2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetate;iron(3+) Chemical compound [Fe+3].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UOMQUZPKALKDCA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DQBQWWSFRPLIAX-UHFFFAOYSA-N 2-acetyl-1-pyrroline Chemical compound CC(=O)C1=NCCC1 DQBQWWSFRPLIAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEMMBWWQXVXBEU-UHFFFAOYSA-N 2-acetylfuran Chemical compound CC(=O)C1=CC=CO1 IEMMBWWQXVXBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZWOXDYRBDIHMA-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1,3-thiazole Chemical compound CC1=NC=CS1 VZWOXDYRBDIHMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNOUKPGPAUUCPC-UHFFFAOYSA-N 2-methylsulfanylpropanal Chemical compound CSC(C)C=O DNOUKPGPAUUCPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBNVSWHUJDDZRH-UHFFFAOYSA-N 2-methylthiirane Chemical compound CC1CS1 MBNVSWHUJDDZRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UBVSIAHUTXHQTD-UHFFFAOYSA-N 2-n-(4-bromophenyl)-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical compound NC1=NC=NC(NC=2C=CC(Br)=CC=2)=N1 UBVSIAHUTXHQTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDXQPTHHAPCTPP-UHFFFAOYSA-N 3-Octen-1-ol Natural products CCCCC=CCCO YDXQPTHHAPCTPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FISPASSVCDRERW-BSMVMXCYSA-L 3-[18-(2-carboxylatoethyl)-13-ethenyl-8-[(4e,8e)-1-hydroxy-5,9,13-trimethyltetradeca-4,8,12-trienyl]-3,7,12,17-tetramethylporphyrin-21,24-diid-2-yl]propanoate;hydron;iron(2+) Chemical compound [H+].[H+].[Fe+2].[N-]1C(C=C2C(=C(C)C(C=C3C(C(O)CC/C=C(C)/CC/C=C(C)/CCC=C(C)C)=C(C)C([N-]3)=C3)=N2)C=C)=C(C)C(CCC([O-])=O)=C1C=C1C(CCC([O-])=O)=C(C)C3=N1 FISPASSVCDRERW-BSMVMXCYSA-L 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DICSSFCRHPFHCT-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutanal;3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)CC=O.CC(C)CC(O)=O DICSSFCRHPFHCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QUMSUJWRUHPEEJ-UHFFFAOYSA-N 4-Pentenal Chemical compound C=CCCC=O QUMSUJWRUHPEEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- KTRZMTDCLOUQKB-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-5-methyl-3h-furan-2-one Chemical compound CC1=C(O)CC(=O)O1 KTRZMTDCLOUQKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VAUMDUIUEPIGHM-UHFFFAOYSA-N 5-Methyl-2-thiophenecarboxaldehyde Chemical compound CC1=CC=C(C=O)S1 VAUMDUIUEPIGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 5-hydroxy-L-tryptophan Chemical compound C1=C(O)C=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229940000681 5-hydroxytryptophan Drugs 0.000 description 1
- OZJPLYNZGCXSJM-UHFFFAOYSA-N 5-valerolactone Chemical compound O=C1CCCCO1 OZJPLYNZGCXSJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038222 60 kDa heat shock protein, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710154868 60 kDa heat shock protein, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- LEYQJUBFWATMMS-UHFFFAOYSA-N 9-acetyl-7-methyl-2-morpholin-4-ylpyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one Chemical compound CC(=O)C1=CC(C)=CN(C(C=2)=O)C1=NC=2N1CCOCC1 LEYQJUBFWATMMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 9-cis,11-trans-octadecadienoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 0.000 description 1
- GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthene Chemical compound C1=CC=C2CC3=CC=CC=C3OC2=C1 GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150078509 ADH2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150026777 ADH5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150006240 AOX2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150015935 ATP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000002245 Acer pensylvanicum Species 0.000 description 1
- 235000006760 Acer pensylvanicum Nutrition 0.000 description 1
- 101150021974 Adh1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000889837 Aeropyrum pernix (strain ATCC 700893 / DSM 11879 / JCM 9820 / NBRC 100138 / K1) Protein CysO Proteins 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 102100036826 Aldehyde oxidase Human genes 0.000 description 1
- JDLKFOPOAOFWQN-VIFPVBQESA-N Allicin Natural products C=CCS[S@](=O)CC=C JDLKFOPOAOFWQN-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 235000019489 Almond oil Nutrition 0.000 description 1
- 244000208874 Althaea officinalis Species 0.000 description 1
- 235000006576 Althaea officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000247812 Amorphophallus rivieri Species 0.000 description 1
- 235000001206 Amorphophallus rivieri Nutrition 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 1
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 1
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 241000242757 Anthozoa Species 0.000 description 1
- 241000893512 Aquifex aeolicus Species 0.000 description 1
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 description 1
- 108010045149 Archaeal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241001495180 Arthrospira Species 0.000 description 1
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 description 1
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 description 1
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241000195645 Auxenochlorella protothecoides Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 101100272790 Bacillus subtilis (strain 168) bslB gene Proteins 0.000 description 1
- 101100281452 Bacillus subtilis (strain 168) folD gene Proteins 0.000 description 1
- 101100362510 Bacillus subtilis (strain 168) rpsN1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 235000021533 Beta vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 244000178924 Brassica napobrassica Species 0.000 description 1
- 235000011297 Brassica napobrassica Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N Brassidinsaeure Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- 101100336279 Caenorhabditis elegans icl-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100246536 Caenorhabditis elegans pyc-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100416200 Caenorhabditis elegans rla-0 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100311260 Caenorhabditis elegans sti-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 239000005632 Capric acid (CAS 334-48-5) Substances 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219312 Chenopodium Species 0.000 description 1
- 240000006162 Chenopodium quinoa Species 0.000 description 1
- 241000195585 Chlamydomonas Species 0.000 description 1
- 241000195598 Chlamydomonas moewusii Species 0.000 description 1
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 description 1
- 235000001258 Cinchona calisaya Nutrition 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 101100263205 Coxiella burnetii (strain RSA 493 / Nine Mile phase I) uspA2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 101100138542 Cupriavidus necator (strain ATCC 17699 / DSM 428 / KCTC 22496 / NCIMB 10442 / H16 / Stanier 337) phbH gene Proteins 0.000 description 1
- 235000003392 Curcuma domestica Nutrition 0.000 description 1
- 244000008991 Curcuma longa Species 0.000 description 1
- 229920002558 Curdlan Polymers 0.000 description 1
- 239000001879 Curdlan Substances 0.000 description 1
- 241000192700 Cyanobacteria Species 0.000 description 1
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 1
- 108060006006 Cytochrome-c peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N D-F6P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N D-Selenocysteine Natural products [Se]C[C@@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPYBSIWDXQFNMH-UHFFFAOYSA-N D-fructose 1,6-bisphosphate Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(=O)COP(O)(O)=O XPYBSIWDXQFNMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 101100480530 Danio rerio tal1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N Dialdehyde 11678 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1[C@H](C[C@H](/C(=C/O)C(=O)OC)[C@@H](C=C)C=O)NCC2 ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010777 Disulfide Reduction Effects 0.000 description 1
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101100269269 Drosophila mayaguana Adh gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150015836 ENO1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032055 Elongation of very long chain fatty acids protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 1
- URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N Erucic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 101100010747 Escherichia coli (strain K12) epd gene Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZNVSLGYWMSMKE-OPDGVEILSA-K Ferric gluconate Chemical compound [Fe+3].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O CZNVSLGYWMSMKE-OPDGVEILSA-K 0.000 description 1
- 102000003875 Ferrochelatase Human genes 0.000 description 1
- 108010057394 Ferrochelatase Proteins 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 101710187052 Flavohemoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 101150098454 GAPA2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150036652 GAPB gene Proteins 0.000 description 1
- 102100022887 GTP-binding nuclear protein Ran Human genes 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000001238 Gaultheria procumbens Species 0.000 description 1
- 235000007297 Gaultheria procumbens Nutrition 0.000 description 1
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 description 1
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 1
- 108010063907 Glutathione Reductase Proteins 0.000 description 1
- 102100036442 Glutathione reductase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000219146 Gossypium Species 0.000 description 1
- 235000009438 Gossypium Nutrition 0.000 description 1
- 235000009429 Gossypium barbadense Nutrition 0.000 description 1
- 101150069554 HIS4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100335749 Halobacterium salinarum (strain ATCC 700922 / JCM 11081 / NRC-1) gap gene Proteins 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 102000008015 Hemeproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089792 Hemeproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 1
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 1
- 101000928314 Homo sapiens Aldehyde oxidase Proteins 0.000 description 1
- 101000921370 Homo sapiens Elongation of very long chain fatty acids protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000620756 Homo sapiens GTP-binding nuclear protein Ran Proteins 0.000 description 1
- 101150028525 Hsp83 gene Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000000177 Indigofera tinctoria Nutrition 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 241000588752 Kluyvera Species 0.000 description 1
- 229920002752 Konjac Polymers 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000665629 Linum flavum Species 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 229920000161 Locust bean gum Polymers 0.000 description 1
- 241000219745 Lupinus Species 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 description 1
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 description 1
- 108010070551 Meat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000006679 Mentha X verticillata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002899 Mentha suaveolens Nutrition 0.000 description 1
- 235000001636 Mentha x rotundifolia Nutrition 0.000 description 1
- 101100253802 Methanopyrus kandleri (strain AV19 / DSM 6324 / JCM 9639 / NBRC 100938) rps14 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000672512 Methylacidiphilum infernorum Species 0.000 description 1
- 102000006404 Mitochondrial Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010058682 Mitochondrial Proteins Proteins 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100054943 Mus musculus Adh4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100480538 Mus musculus Tal1 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N N'-hexadecylthiophene-2-carbohydrazide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCNNC(=O)c1cccs1 HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 1
- UXRXEUQDSYGOAH-UHFFFAOYSA-N N1=CC=CC=C1.O1NC=CC=C1 Chemical compound N1=CC=CC=C1.O1NC=CC=C1 UXRXEUQDSYGOAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150001186 NABP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150061735 Nabp1 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100073235 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) adk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100277704 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gdh-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100068676 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gln-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100341115 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) ipp-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100281510 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) met-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100065137 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) prt-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000207746 Nicotiana benthamiana Species 0.000 description 1
- 241000208136 Nicotiana sylvestris Species 0.000 description 1
- 235000013817 Nostoc commune Nutrition 0.000 description 1
- 240000001131 Nostoc commune Species 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 235000010676 Ocimum basilicum Nutrition 0.000 description 1
- 240000007926 Ocimum gratissimum Species 0.000 description 1
- 241000320412 Ogataea angusta Species 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 235000005043 Oryza sativa Japonica Group Nutrition 0.000 description 1
- 101100332768 Oscheius tipulae eft-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100118099 Oscheius tipulae eft-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150040663 PGI1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150004094 PRO2 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000223786 Paramecium caudatum Species 0.000 description 1
- 101100312945 Pasteurella multocida (strain Pm70) talA gene Proteins 0.000 description 1
- 101150003085 Pdcl gene Proteins 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 240000002264 Phyllostachys aurea Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 235000015622 Pisum sativum var macrocarpon Nutrition 0.000 description 1
- 241000223503 Platysma Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003893 Prunus dulcis var amara Nutrition 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000589540 Pseudomonas fluorescens Species 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- JVWLUVNSQYXYBE-UHFFFAOYSA-N Ribitol Natural products OCC(C)C(O)C(O)CO JVWLUVNSQYXYBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 244000178231 Rosmarinus officinalis Species 0.000 description 1
- XOWVFANEOZMPKG-REOHCLBHSA-N S-nitroso-L-cysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CSN=O XOWVFANEOZMPKG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 101150045406 SPSB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150089364 SPTLC1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 235000009367 Sesamum alatum Nutrition 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 101100277741 Staphylococcus aureus folP gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101100007845 Stigmatella aurantiaca (strain DW4/3-1) cspA gene Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 241000192560 Synechococcus sp. Species 0.000 description 1
- 241000192581 Synechocystis sp. Species 0.000 description 1
- 101150032817 TPI1 gene Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000248418 Tetrahymena pyriformis Species 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 235000007303 Thymus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 240000002657 Thymus vulgaris Species 0.000 description 1
- ACWQBUSCFPJUPN-HYXAFXHYSA-N Tiglic aldehyde Chemical compound C\C=C(\C)C=O ACWQBUSCFPJUPN-HYXAFXHYSA-N 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 241000499912 Trichoderma reesei Species 0.000 description 1
- 108050009020 Truncated hemoglobin Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150044377 UBA1 gene Proteins 0.000 description 1
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006668 UniProt protein families Human genes 0.000 description 1
- 108020004729 UniProt protein families Proteins 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009499 Vanilla fragrans Nutrition 0.000 description 1
- 244000263375 Vanilla tahitensis Species 0.000 description 1
- 235000012036 Vanilla tahitensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000010749 Vicia faba Nutrition 0.000 description 1
- 240000006677 Vicia faba Species 0.000 description 1
- 235000002098 Vicia faba var. major Nutrition 0.000 description 1
- 244000042295 Vigna mungo Species 0.000 description 1
- 235000006582 Vigna radiata Nutrition 0.000 description 1
- 235000010726 Vigna sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001417 Vigna umbellata Species 0.000 description 1
- 235000010722 Vigna unguiculata Nutrition 0.000 description 1
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N Vitamin B6 Natural products CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 235000018936 Vitellaria paradoxa Nutrition 0.000 description 1
- 241001135917 Vitellaria paradoxa Species 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UJELMAYUQSGICC-UHFFFAOYSA-N Zymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(C)C=CCC(C)C)CCC21 UJELMAYUQSGICC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222124 [Candida] boidinii Species 0.000 description 1
- ONGZMKPEWCAXFS-UHFFFAOYSA-L [Cl+].[Cl-].[K+].[Cl-] Chemical compound [Cl+].[Cl-].[K+].[Cl-] ONGZMKPEWCAXFS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 1
- JDLKFOPOAOFWQN-UHFFFAOYSA-N allicin Chemical compound C=CCSS(=O)CC=C JDLKFOPOAOFWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010081 allicin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@](O)(COP(O)(O)=O)O[C@@H]1COP(O)(O)=O RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N alpha-cholestanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010210 aluminium Nutrition 0.000 description 1
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- ANBBXQWFNXMHLD-UHFFFAOYSA-N aluminum;sodium;oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[Na+].[Al+3] ANBBXQWFNXMHLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093740 amino acid and derivative Drugs 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037354 amino acid metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 description 1
- 239000010480 babassu oil Substances 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 description 1
- 235000015191 beet juice Nutrition 0.000 description 1
- GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N benzyl(trichloro)silane Chemical compound Cl[Si](Cl)(Cl)CC1=CC=CC=C1 GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N beta-D-fructofuranose 6-phosphate Chemical compound OC[C@@]1(O)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OHDFENKFSKIFBJ-UHFFFAOYSA-N bis(2-methyl-3-furyl)disulfide Chemical compound O1C=CC(SSC2=C(OC=C2)C)=C1C OHDFENKFSKIFBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005774 blackeyed pea Nutrition 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H calcium citrate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000001354 calcium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 description 1
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 description 1
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004203 carnitine Drugs 0.000 description 1
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008618 cell wall macromolecule catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N cerebroside D Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000015228 chicken nuggets Nutrition 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KJPRLNWUNMBNBZ-UHFFFAOYSA-N cinnamic aldehyde Natural products O=CC=CC1=CC=CC=C1 KJPRLNWUNMBNBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117916 cinnamic aldehyde Drugs 0.000 description 1
- AYQPVPFZWIQERS-UHFFFAOYSA-N cis-2-octen-1-ol Natural products CCCCCC=CCO AYQPVPFZWIQERS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 229940108924 conjugated linoleic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- QYIXCDOBOSTCEI-NWKZBHTNSA-N coprostanol Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]2(C)CC1 QYIXCDOBOSTCEI-NWKZBHTNSA-N 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N crotonaldehyde Chemical compound C\C=C\C=O MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N crotonaldehyde Natural products CC=CC=O MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150049887 cspB gene Proteins 0.000 description 1
- 101150058203 cspD gene Proteins 0.000 description 1
- 101150041068 cspJ gene Proteins 0.000 description 1
- 101150010904 cspLB gene Proteins 0.000 description 1
- 235000003373 curcuma longa Nutrition 0.000 description 1
- 235000019316 curdlan Nutrition 0.000 description 1
- 229940078035 curdlan Drugs 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- MMFCJPPRCYDLLZ-UHFFFAOYSA-N dec-2-enal Natural products CCCCCCCC=CC=O MMFCJPPRCYDLLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDPQWHLMBJZURR-UHFFFAOYSA-N decan-5-one Chemical compound CCCCCC(=O)CCCC JDPQWHLMBJZURR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003936 denaturing gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical class [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- WPUMTJGUQUYPIV-JIZZDEOASA-L disodium (S)-malate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](O)CC([O-])=O WPUMTJGUQUYPIV-JIZZDEOASA-L 0.000 description 1
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 1
- 101150081397 dps gene Proteins 0.000 description 1
- 101150015945 dpsA gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 101150104041 eno2 gene Proteins 0.000 description 1
- BTCAEOLDEYPGGE-JVAZTMFWSA-N episterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)CCC(=C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC[C@H]21 BTCAEOLDEYPGGE-JVAZTMFWSA-N 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N erucic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 235000012732 erythrosine Nutrition 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPCRGEVPIBLWAY-QNRZBPGKSA-N ethyl (2E,4Z)-deca-2,4-dienoate Chemical compound CCCCC\C=C/C=C/C(=O)OCC OPCRGEVPIBLWAY-QNRZBPGKSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- FKRCODPIKNYEAC-UHFFFAOYSA-N ethyl propionate Chemical class CCOC(=O)CC FKRCODPIKNYEAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073505 ethyl vanillin Drugs 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 229960002413 ferric citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000013611 frozen food Nutrition 0.000 description 1
- RNBGYGVWRKECFJ-UHFFFAOYSA-N fructose-1,6-phosphate Natural products OC1C(O)C(O)(COP(O)(O)=O)OC1COP(O)(O)=O RNBGYGVWRKECFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N gamma-Linolensaeure Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020664 gamma-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 1
- 229960002733 gamolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 101150048660 gatB gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- 229940045883 glutathione disulfide Drugs 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 239000008169 grapeseed oil Substances 0.000 description 1
- 238000012388 gravitational sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 229940094952 green tea extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020688 green tea extract Nutrition 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015220 hamburgers Nutrition 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- NDFKTBCGKNOHPJ-UHFFFAOYSA-N hex-2-enal Natural products CCCCC=CC=O NDFKTBCGKNOHPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 235000019692 hotdogs Nutrition 0.000 description 1
- 101150059304 hup gene Proteins 0.000 description 1
- 101150023945 hup1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097275 indigo Drugs 0.000 description 1
- COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N indigo powder Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C(=O)C2=CC=CC=C2N1 COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002505 iron Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XBDUTCVQJHJTQZ-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate monohydrate Chemical compound O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O XBDUTCVQJHJTQZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- AJVRSHNXSHMMCH-UHFFFAOYSA-K iron(III) citrate monohydrate Chemical compound O.[Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O AJVRSHNXSHMMCH-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940117955 isoamyl acetate Drugs 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940119170 jojoba wax Drugs 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000252 konjac Substances 0.000 description 1
- 235000010485 konjac Nutrition 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- QDLAGTHXVHQKRE-UHFFFAOYSA-N lichenxanthone Natural products COC1=CC(O)=C2C(=O)C3=C(C)C=C(OC)C=C3OC2=C1 QDLAGTHXVHQKRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229940087305 limonene Drugs 0.000 description 1
- 235000001510 limonene Nutrition 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 1
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000010420 locust bean gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000711 locust bean gum Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013310 margarine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003264 margarine Substances 0.000 description 1
- 235000001035 marshmallow Nutrition 0.000 description 1
- 235000015255 meat loaf Nutrition 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N meldrum's acid Chemical compound CC1(C)OC(=O)CC(=O)O1 GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 229940102398 methyl anthranilate Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- BTCAEOLDEYPGGE-UHFFFAOYSA-N methylene-24 cholesten-7 ol-3 beta Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(=C)C(C)C)CCC33)C)C3=CCC21 BTCAEOLDEYPGGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000020166 milkshake Nutrition 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002969 oleic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N oxitriptan Natural products C1=C(O)C=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003346 palm kernel oil Substances 0.000 description 1
- 235000019865 palm kernel oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940098695 palmitic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229960000292 pectin Drugs 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- 101150079312 pgk1 gene Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003906 phosphoinositides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- PHZLMBHDXVLRIX-UHFFFAOYSA-M potassium lactate Chemical compound [K+].CC(O)C([O-])=O PHZLMBHDXVLRIX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011085 potassium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001521 potassium lactate Substances 0.000 description 1
- 229960001304 potassium lactate Drugs 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 101150045242 ptsH gene Proteins 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000948 quinine Drugs 0.000 description 1
- 239000000985 reactive dye Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 235000020989 red meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N ribitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N 0.000 description 1
- 229940092258 rosemary extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020748 rosemary extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000001233 rosmarinus officinalis l. extract Substances 0.000 description 1
- 101150107339 rpsN gene Proteins 0.000 description 1
- 101150028844 rpsZ gene Proteins 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000004739 secretory vesicle Anatomy 0.000 description 1
- 229940055619 selenocysteine Drugs 0.000 description 1
- ZKZBPNGNEQAJSX-UHFFFAOYSA-N selenocysteine Natural products [SeH]CC(N)C(O)=O ZKZBPNGNEQAJSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000016491 selenocysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 229940057910 shea butter Drugs 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical class O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N sinapinic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005549 size reduction Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 101150062190 sod1 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000019265 sodium DL-malate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 229910001388 sodium aluminate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000176 sodium gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000012207 sodium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005574 sodium gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000001394 sodium malate Substances 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 229940082787 spirulina Drugs 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 229960004274 stearic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013547 stew Nutrition 0.000 description 1
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 1
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 1
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- OHEFFKYYKJVVOX-UHFFFAOYSA-N sulcatol Natural products CC(O)CCC=C(C)C OHEFFKYYKJVVOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229960005349 sulfur Drugs 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 239000001585 thymus vulgaris Substances 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 229960005196 titanium dioxide Drugs 0.000 description 1
- 235000010215 titanium dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 210000002105 tongue Anatomy 0.000 description 1
- LVBXEMGDVWVTGY-UHFFFAOYSA-N trans-2-octenal Natural products CCCCCC=CC=O LVBXEMGDVWVTGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKOVPWSSZFDYPG-WUKNDPDISA-N trans-octadec-2-enoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC\C=C\C(O)=O LKOVPWSSZFDYPG-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000013337 tricalcium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003628 tricarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N triphenylmethane Chemical compound C1=CC=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 101150099542 tuf gene Proteins 0.000 description 1
- 101150010742 tuf2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150061352 tufA gene Proteins 0.000 description 1
- 235000013976 turmeric Nutrition 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019583 umami taste Nutrition 0.000 description 1
- 235000018322 upland cotton Nutrition 0.000 description 1
- 101150004840 uspA gene Proteins 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000010497 wheat germ oil Substances 0.000 description 1
- 210000003032 wing Anatomy 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 101150102112 yhjA gene Proteins 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
- 101150069172 yqiA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- CGSJXLIKVBJVRY-XTGBIJOFSA-N zymosterol Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@H]21 CGSJXLIKVBJVRY-XTGBIJOFSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/195—Proteins from microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C20/00—Cheese substitutes
- A23C20/02—Cheese substitutes containing neither milk components, nor caseinate, nor lactose, as sources of fats, proteins or carbohydrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/008—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/009—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from unicellular algae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/18—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from yeasts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/20—Proteins from microorganisms or unicellular algae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/22—Working-up of proteins for foodstuffs by texturising
- A23J3/225—Texturised simulated foods with high protein content
- A23J3/227—Meat-like textured foods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L13/00—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L15/00—Egg products; Preparation or treatment thereof
- A23L15/35—Egg substitutes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
- C12N1/063—Lysis of microorganisms of yeast
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
- C12N1/066—Lysis of microorganisms by physical methods
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/185—Escherichia
- C12R2001/19—Escherichia coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
- C12R2001/84—Pichia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
- C12R2001/85—Saccharomyces
- C12R2001/865—Saccharomyces cerevisiae
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本發明描述了蛋白質純化方法,且更特定言之,係關於可減少經純化之蛋白質中不良氣味及風味之產生且增加蛋白質產率之蛋白質純化方法。
Description
本發明係關於蛋白質純化方法,且更特定言之,係關於可減少經純化之蛋白質中不良氣味及風味之產生、增強功能性且增加蛋白質產率之蛋白質純化方法。本發明亦係關於包括經純化之蛋白質的食物產品。
模擬動物來源之食物產品(例如乾酪或肉)的食物產品之成功可視產生可操縱且具有低風味從而使蛋白質來源不容易辨認並且不會給食物產品提供不可接受之「異」味的功能性蛋白質而定。常用蛋白質純化方法通常包括使用不符合食品安全及/或產生變性蛋白質之化學品的步驟。擁有一種符合食品安全且在經純化之蛋白質中產生最少不良氣味及風味的蛋白質純化方法將為有用的。
本文檔提供蛋白質組合物,且其亦提供自微生物細胞,包括真核生物、真菌、原核生物及古細菌細胞中純化蛋白質,在整個過程中使用至少約8.5之pH,由此產生蛋白質組合物之方法。本文檔亦提供包括此等蛋白質組合物之食物產品。在一些實施例中,本文中所描述之方法為食品安全的、不貴且可擴大規模,同時減少了經純化之蛋白質中不良氣味及風味之產生並增加了蛋白質產率。在本文中所提供之純化製程期間pH低於8.5 (例如8.0或更低)之蛋白質純化方法之一些實施例中,與一些或所有純化製程期間pH高於8.5 (例如9.0或更高)之其他相應蛋白質純化方法相比,所得蛋白質組合物中可能存在增加之異味及/或異臭且製程產率可能降低。在一些實施例中,本文中所描述之組合物可為食品安全的而且不貴,具有最低程度之不良氣味及風味。總細胞蛋白質,例如自整個細胞分離或由其產生之蛋白質,適用時包括來自細胞質、細胞核及次細胞區室(例如,溶酶體、過氧化物酶體、粒線體、內質網、高爾基體、周質、分泌囊泡、細胞外基質、生物膜、葉綠體及細胞核)之蛋白質,可使用本文中所描述之方法進行純化。在一些實施例中,如本文中所描述之蛋白質組合物可包含總細胞蛋白質,但術語「總」並不指示每種細胞蛋白質皆存在於蛋白質組合物中。在一些實施例中,如本文中所描述之蛋白質組合物可基本上由總細胞蛋白質組成。
此外,蛋白質組合物中之蛋白質可為功能性的。如本文中所描述,功能性蛋白可具有一或多種以下性質:不變性;能夠在加熱後形成凝膠(例如約25至約250 mg/mL (例如約25至約50 mg/mL、約25至約100 mg/mL、約25 至約150 mg/mL、約25至約200 mg/mL、約50至約250 mg/mL、約100至約250 mg/mL、約150至約250 mg/mL或約200至約250 mg/mL)之懸浮液,pH為約7.0)在加熱至約65°C時熱轉變為凝膠);在約50°C與約85°C之間培育期間熱變性,其中在約85°C下,超過約80%蛋白質在約20分鐘之後變性,如藉由微差掃描熱量法(DSC)或微差掃描螢光法(DSF)所量測;在約50 mg/mL (5% w/v)或以上之純化蛋白質溶液或懸浮液中,當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,蛋白質形成獨立凝膠(具有例如100 Pa儲存模數);可在約pH 5.5與約pH 10.0之間變性及膠凝;可在離子強度(I)低於約0.5 M之溶液中變性及膠凝,其中I係基於非蛋白質溶質之濃度計算;在約10 mg/mL蛋白質濃度下,粒度分佈D10、D50及D90分別為小於約0.1 μm、1.0 μm及5 μm;具有酶活性;在約4.0至約8.0之pH範圍內,乳液活性指數(EAI)大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
在一些實施例中,(w/v)懸浮液可能係指每100 mL溶液之乾固體量(以公克計)。
可存在於蛋白質組合物中之功能性蛋白質之非限制性實例包括具有酶活性之蛋白質,諸如但不限於半胱胺酸合成酶(Met17p、ED 2.5.1.47)、胱硫醚β-合成酶(Cys4p、EC 4.2.1.22)、己糖激酶、葡萄糖氧化酶、麩胱甘肽還原酶、催化酶及脂肪酶。
酶活性亦可更一般地描述且實例可包括例如胺基酸代謝(例如,當無L-半胱胺酸(例如L-半胱胺酸本身,或呈異構體混合物形式提供)添加(例如,至5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0)時硫化氫(H
2S)以小於約0.1 ppm存在於頂隙中,且在L-半胱胺酸添加至25 mM最終濃度(例如,至5 mL 2% (w/v)懸浮液之後(例如,在25°C下約24小時之後)H
2S以大於或等於約0.2 ppm (例如大於或等於約 0.3 ppm)存在)、葡萄糖代謝(例如由葡萄糖產生丙酮酸、產生葡萄糖-6-磷酸、產生乳酸、產生D-葡萄糖酸-δ-內酯)、脂質代謝(例如脂質水解)、麩胱甘肽二硫化物還原及過氧化氫分解。舉例而言,可使用單酶反應(例如藉由己糖激酶由葡萄糖產生葡萄糖-6-磷酸),或多酶反應,例如藉由多於一種酶將起始物質轉化為最終產物(例如藉由酶糖解由葡萄糖產生丙酮酸,或藉由細胞麩胱甘肽生物合成途徑由麩胺酸、半胱胺酸及甘胺酸產生麩胱甘肽)。
蛋白質組合物可具有食物活性。如本文中所描述,具有食物活性之蛋白質可具有一種或多種以下性質(以每公克計進行定義):能夠形成凝膠;能夠使油及水乳化(水包油、油包水);能夠使空氣及水乳化(水包空氣)。
在發明描述及附圖中,使用以下縮寫:CS (細胞懸浮液);RN (細胞洗滌);LY (溶解產物,例如藉由珠粒碾磨、均質器、高剪切混合器或微流化器獲得);CN (離心產物,例如離心自旋移除固體之上清液);MF (微濾,例如使用直徑為0.2、0.3或0.45 µm之孔徑);DF (滲濾,例如使用pH 9.3+/-0.3水);UF (超濾,例如使用5、10、30或50 kDa之分子量截止值);PZ (巴氏滅菌,例如在65°C持續60秒);SD (噴霧乾燥,例如利用180°C入口溫度、80°C出口溫度及0.27 LPM饋料)。
術語「約」係關於特定值使用以說明量測該值時之實驗變化。
在一個態樣中,本文檔包括一種自細胞(例如複數個細胞)純化蛋白質之方法,該方法包括使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;過濾該澄清溶解產物,以獲得過濾之溶解產物;濃縮該過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,其中該溶解、澄清及過濾步驟獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於10%之動物產品。在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於5%之動物產品。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於1%之動物產品。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品不含有動物產品。
在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於10%之動物來源之產品。在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於5%之動物來源之產品。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於1%之動物來源之產品。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品不含有動物來源之產品。
在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於10%之動物肉。在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於5%之動物肉。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品含有以重量計少於1%之動物肉。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品不含有動物肉。
在本文中所描述之蛋白質組合物或食物產品之一些實施例中,該蛋白質組合物或食物產品不含或實質上不含乳糖、大腸桿菌、乳清、酪蛋白、動物脂肪、大豆蛋白、堅果蛋白、卵清蛋白、明膠、乳製品、動物產品、動物來源產品、瓊脂、角叉菜膠、豆腐、膽固醇,或其中兩者或更多者。
如本文中所使用,術語「動物產品」係指自動物(例如哺乳動物、鳥、魚、兩棲動物、爬行動物、昆蟲、軟體動物、甲殼動物、珊瑚、節肢動物或鱟)身體獲得或由其產生的材料。實例包括但不限於肉(meat)、脂肪、肉(flesh)、血液、乳液、卵、魚膠、凝乳酶、毛皮、皮膚、毛髮、骨、纖維、軟骨、酪蛋白、明膠及蜜。術語「無動物產品」意謂組合物不含有任何動物產品。
如本文中所使用,術語「動物來源產品」係指來源於動物(例如哺乳動物、鳥、魚、兩棲動物、爬行動物、昆蟲、軟體動物、甲殼動物、珊瑚、節肢動物或鱟)身體的材料或化合物。實例包括但不限於來源於動物肉、脂肪、肉、血液、乳液、卵、魚膠、凝乳酶、毛皮、皮膚、毛髮、骨、纖維、軟骨、酪蛋白、明膠及蜜之材料或化合物。動物來源產品之其他實例包括自動物身體分離之材料,包括但不限於激素、胺基酸、維生素、有機酸、蛋白質、膠原蛋白、染料、脂肪酸、油類、甘油、糖、角蛋白及自動物身體分離之核酸。術語「無動物來源產品」意謂組合物不含有任何動物產品。
如本文中所使用,術語「動物肉」係指自動物(例如哺乳動物、鳥、魚、兩棲動物、爬行動物、昆蟲、軟體動物、甲殼動物、珊瑚、節肢動物或鱟)之肉。實例包括但不限於肌肉及器官。術語「無動物肉」意謂組合物不含有任何動物肉。
如本文中所使用,術語「實質上不含」意謂少於5.0重量% (例如少於5.0重量%、少於4.0重量%、少於3.0重量%、少於2.5重量%、少於2.0重量%、少於1.5重量%、少於1.0重量%、少於0.5重量%、少於0.1重量%或少於0.01重量%)之參考成分存在於組合物中。舉例而言,當如本文中所揭示之乳製品仿製品含有少於5.0重量% (例如少於4.0重量%、少於3.0重量%、少於2.5重量%、少於2.0重量%、少於1.5重量%、少於1.0重量%、少於0.5重量%、少於0.1重量%或少於0.01重量%)之動物產品時,其實質上不含動物產品。
如本文中所使用,術語「不含」意謂參考成分在組合物中皆不可偵測。舉例而言,當本文中所揭示之蛋白質組合物或食物產品不含有可偵測到之動物產品時,其不含動物產品。
如本文中所使用,「細菌來源蛋白質」、「酵母來源蛋白質」、「藻類來源蛋白質」、「真菌來源蛋白質」或「植物來源蛋白質」係指蛋白質之直接生產生物體,且可意謂細菌、酵母、藻類、真菌或植物中產生之任何蛋白質,與該蛋白質是否分別天然表現於細菌、酵母、藻類、真菌或植物中無關。
術語「非天然表現」可係指蛋白質在自然界中不產生該蛋白質之生物體中產生。非天然表現之蛋白質之非限制性實例包括細菌中表現之動物蛋白質、酵母中表現之植物蛋白質及藻類中表現之動物蛋白質。
術語「巴氏滅菌」可意謂應用於食品以便將具有公共衛生意義之最具抗性微生物降至在正常分配及儲存條件下不可能存在公共衛生風險之水準的任何製程、處理或其組合。
如本文中所使用,術語「完整」在其係關於細胞時包括穿孔之細胞,但不包括破裂或溶解之細胞。在具有次細胞區室之細胞中,完整細胞通常保留細胞膜內之次細胞區室。引起細胞溶解之例示性方法包括機械溶解(例如珠粒擊打、珠粒碾磨、研磨或旋轉振盪均質器)、冷凍粉碎、高壓細胞破碎(例如藉由弗氏壓機或微流化器)、音波處理及氮氣減壓。在一些實施例中,當規定完整細胞時,機械溶解(例如珠粒擊打、珠粒碾磨、研磨或旋轉振盪均質器)、冷凍粉碎、高壓細胞破碎(例如藉由弗氏壓機或微流化器)、音波處理及氮氣減壓皆不進行。在一些實施例中,可藉由粒度分佈確定完整細胞。在一些實施例中,與單細胞懸浮液相比,完整細胞(例如已進行處理,諸如本文中所描述之任何處理)之粒度分佈可顯著不變。舉例而言,完整酵母細胞之粒度分佈中值可為約3 µm。在一些實施例中,完整酵母細胞之粒度分佈可能缺乏可指示細胞片段之小於約3 μm之峰。
如本文中所使用,「低風味」在關於蛋白質組合物時意謂該蛋白質組合物具有比該蛋白質組合物之來源(例如,若描述酵母蛋白質組合物,則為酵母)更弱的風味。舉例而言,產生與蛋白質來源相關之獨特風味的一或多種風味化合物較少。在一些實施例中,低風味蛋白質組合物本身可具有極輕風味。在一些情況下,低風味蛋白質組合物之風味弱於已知蛋白質組合物(例如市售大豆蛋白分離物)。具有較弱風味可例如由受過培訓之人類官能檢查員或例如藉由量測一或多種通常理解為賦予風味及/或香氣之揮發性化合物來確定。
如本文中所使用,術語「風味化合物」係指賦予如本文中所描述之蛋白質組合物以例如受過培訓之人類官能檢查員可偵測到之味道及/或香氣的化合物。在一些實施例中,風味化合物可為陽性態樣,例如賦予使用蛋白質組合物時預料之風味,例如肉仿製產品中使人聯想到動物肉風味之風味化合物。在一些實施例中,風味化合物可為陰性態樣,例如賦予使用蛋白質組合物時未預料之風味,例如肉仿製產品中使人聯想到大豆之風味化合物。
術語「芳香」可意謂被普通人類觀察者與特定食物、成分或烹飪過程相關聯之香氣總和。芳香之非限制性實例為禽類芳香、雞肉芳香、牛肉芳香、豬肉芳香、海鮮芳香、野味芳香、肉桂芳香、巧克力芳香、油炸芳香及燒烤芳香。
在一個態樣中,本發明包括一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;過濾該澄清溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
在另一態樣中,本發明包括一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;過濾該細胞溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
此等及其他實施例可視情況包括以下任一者。過濾可包括微濾、超濾、滲濾或其組合。澄清步驟可藉由離心至少於約20%乾固體來進行。複數個細胞可包括微生物細胞。一種方法可進一步包括在步驟a)之前在介於約8.5與約12.0之間的pH下對複數個細胞之水性懸浮液進行洗滌。以乾重計,蛋白質組合物可包括至少約35%大於5 kDa之化合物。蛋白質組合物中之蛋白質有至少約50%可落在約10 kDa與約200 kDa之間。
在另一態樣中,本發明包括藉由一種方法產生的蛋白質組合物,該方法包括:溶解複數個細胞之水性懸浮液以獲得細胞溶解產物;過濾該細胞溶解產物以獲得蛋白質組合物;及視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
此實施例及其他實施例可視情況包括以下任一者。過濾可包括微濾、超濾、滲濾或其組合。一種方法可進一步包括在步驟a)之前在介於約8.5與約12.0之間的pH下對複數個細胞之水性懸浮液進行洗滌。蛋白質組合物中之蛋白質有至少約50%可落在約10 kDa與約200 kDa之間。蛋白質組合物之緩衝容量可小於約2.5 mmol NaOH/公克乾固體。當未向5 mL 2% (w/v)蛋白質組合物懸浮液(pH 7.0)添加L-半胱胺酸時,在25°C下約24小時之後,可偵測到小於約0.1 ppm之量的硫化氫(H
2S)。在25°C下使5 mL 2% (w/v)蛋白質組合物懸浮液達到約25 mM L-半胱胺酸最終濃度之後約24小時,可偵測到至少約0.2 ppm之量的硫化氫。
在一些實施例中,本文中提供自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個細胞純化複數種蛋白質的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及d)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及d)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,自該固體部分提取蛋白質包括對該固體部分進行機械溶解。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)將表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,該可溶性蛋白質為含血基質之蛋白質。在一些實施例中,該方法包括用約5 mM至約500 mM還原當量之包括還原劑處理該複數個細胞。在一些實施例中,用還原劑處理包括用約20 mM至約80 mM還原當量之還原劑處理。在一些實施例中,該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。在一些實施例中,該還原劑為食品安全還原劑。在一些實施例中,該可溶性蛋白質具有熔點,且方法進一步包括在a)之前將該複數個細胞加熱至比該可溶性蛋白質之熔點低約10°C或約5°C之溫度。在一些實施例中,該可溶性蛋白質之熔點為至少約60°C。在一些實施例中,該可溶性蛋白質與該複數個細胞異源。
在一些實施例中,本文中提供處理複數個細胞(例如,複數個具有細胞壁之細胞)的方法。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 μg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
本文中亦提供諸如已如本文中所描述加以處理之彼等細胞之細胞的組合物。在一些實施例中,提供一種組合物,其包括:複數個細胞,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種組合物,其包括:複數個細胞,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
除非另外定義,否則本文中所使用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域之普通技術人員通常所理解之含義相同的含義。儘管與本文中所描述之方法及材料類似或等效之方法及材料可用於實踐本發明,但以下描述適合之方法及材料。本文中所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻均以引用之方式整體併入。在矛盾之情況下,將以本說明書(包括定義)為準。另外,材料、方法及實例僅為說明性的,而不意欲具有限制性。
以下發明描述中闡述本發明之一或多個實施例之細節。本發明之其他特徵、目標及優勢將由發明描述及附圖以及申請專利範圍顯而易知。根據專利法之標準規範,申請專利範圍中之字組「包括」可替換為「基本上由……組成」或「由……組成」。
電子提交之文本檔案之描述
與本文一起電子提交之正文檔案之內容係以引用之方式整體併入本文中:序列表之電腦可讀形式複本檔案名稱:0247WO1SEQ.txt,記錄日期:2020年9月14日,檔案大小≈49千位元組。
蛋白質(例如,在其未變性狀態下)可有助於食品仿製產品,諸如肉及乳製品仿製產品之成功。然而,現有工業蛋白質提取製程會導致此種蛋白質變性。此外,許多可能在食品仿製品中具有功能性之蛋白質具有相關色彩或香氣,由此可能減損或抑制其應用。不希望受任何特定理論束縛,據信在整個純化製程中維持高pH值(例如,約8.5至約12.0)可有助於獲得低風味及/或低色彩蛋白質組合物。
一般而言,此文檔提供蛋白質組合物以及自細胞純化總細胞蛋白質,從而產生可用於例如食品仿製品,例如肉及乳製品仿製產品或替代品之蛋白質組合物的方法及材料。在一些實施例中,本文中所提供之方法產生可用於許多食物產品之低風味蛋白質組合物。在一些實施例中,本文中所提供之方法產生可用於許多食物產品之低色彩蛋白質組合物(例如,具有減弱之黃色從而在肉仿製品中產生更強紅色知覺)。在一些實施例中,本文中所提供之方法產生具有諸如膠凝或乳化穩定之食物活性的蛋白質組合物。
本文中亦提供提高蛋白質純化速度及/或效率之方法。舉例而言,在一些實施例中,藉由對細胞進行穿孔而非使其溶解,可容易地分離次細胞組分、細胞壁組分及/或核酸與胞質蛋白。在一些實施例中,保留之次細胞組分、細胞壁組分及/或核酸亦可為有價值產物之來源,諸如核酸香氣化合物GMP及IMP。作為另一實例,本文中所提供之方法可有助於純化豐富蛋白(例如,重組產生之蛋白質),尤其當該豐富蛋白並非由生產細胞正常分泌時。作為另一實例,一些處理,例如還原、鹼性耗竭及/或預先巴氏殺菌,可增加大部分製程變化方案(包括包括及不包括機械溶解之變化方案)中之蛋白質回收率。
產生蛋白質組合物之方法
在一些實施例中,可使用本文中所描述之任何方法來純化蛋白質組合物。可提取蛋白質之適合之細胞包括但不限於來自真菌、藻類、原核生物及古細菌之細胞。在一些實施例中,適合之細胞可天然存在於單細胞生物體(包括酵母)中或多細胞生物體(包括子囊菌門及擔子菌門)中。在一些實施例中,可自例如酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬、麯黴屬、木黴屬或鐮刀菌屬之一或多個真菌物種純化蛋白質組合物。舉例而言,可自釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母或鑲片鐮刀菌細胞純化蛋白質組合物。在一些實施例中,可自例如芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬或甲烷球菌屬之一或多種古細菌或細菌物種純化蛋白質組合物。舉例而言,可自大腸桿菌、枯草芽孢桿菌(
Bacillus subtilis)、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌(
Corynebacterium glutamicum)、螢光假單胞菌或海沼甲烷球菌純化蛋白質組合物。在一些實施例中,可自例如小球藻屬、藍藻屬、衣藻屬、眼蟲藻屬或螺旋藻屬之一或多個藻類物種純化蛋白質組合物。舉例而言,可自原殼綠球藻、鈍頂節旋藻、眼蟲藻或髮狀念珠藻純化蛋白質組合物。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物中之一或多種蛋白質可具有作為生物催化劑、作為食品加工助劑、酶、作為風味增強劑、治療劑或營養品之功能活性。
在一些實施例中,自微生物純化之蛋白質組合物或蛋白質可包括一或多種異源蛋白質(例如,來自與用於純化蛋白質或蛋白質組合物之生物體不同的物種,舉例而言,諸如來自真核生物、動物、植物、藻類、嗜熱生物、酵母、細菌、原生生物或古細菌之蛋白質)。在一些實施例中,異源蛋白質具有作為生物催化劑、作為食品加工助劑、酶、作為風味增強劑、治療劑、甜味劑、藥物或營養品之功能活性。
在一些實施例中,水溶液可包括緩衝液。緩衝液可為任何食品級緩衝液(例如,包括磷酸鈉、磷酸鉀、磷酸鈣、乙酸鈉、乙酸鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸鈣、碳酸氫鈉、乳酸鈉、乳酸鉀、蘋果酸鈉、蘋果酸鉀、葡糖酸鈉及/或葡糖酸鉀),濃度為約2 mM至約200 mM (例如,約2 mM至約10 mM、約10 mM至約20 mM、約10 mM至約30 mM、約20 mM 至約30 mM、約30 mM至約40 mM、約40 mM至約50 mM、約50 mM至約100 mM或約100 mM至約200 mM),且pH為約8.5至約12.0 (例如,約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)。
在本文中所描述之方法之一些實施例中,可使複數個細胞(例如微生物細胞)懸浮於水溶液中。在一些實施例中,可洗滌該複數個細胞。
可在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下使複數個細胞溶解,以獲得細胞溶解產物。如本文中所描述,在溶解期間維持高pH可有助於改良溶解(例如蛋白質產率)及/或澄清。不具限制性,水性懸浮液或細胞溶解產物可具有約2%至約25%乾固體(亦即,移除所有水之後剩餘之質量)。舉例而言,水性懸浮液或細胞溶解產物可具有約2%至約5%、約5%至約10%、約10%至約15%、約15%至約20%、約20%至約25%、約5%至約25%、約10%至約25%、約15%至約20%、約2%、5%、7.5%、10%、12.5%、15%、17.5%、20%、22.5%或25%乾固體。在一些實施例中,溶解可為生物化學的,諸如酶促細胞壁降解,或溶解可為化學的,例如基於表面活性劑之溶解、基於離液劑之溶解或基於有機溶劑之溶解。另外或替代地,溶解亦可為機械的,例如使用音波處理、珠粒碾磨、滲透溶解、均質化、手工研磨或藉由使細胞經受冷凍-解凍循環。溶解可在介於約4°C與約15°C之間(例如約4°C至約12°C、約5°C至約10°C、約4°C、5°C、6°C、7°C、8°C、9°C、10°C、11°C、12°C、13°C、14°C或15°C)的溫度下進行。
細胞溶解產物之純化可包括一或多個步驟,例如離心、澄清、沉澱、微濾、超濾、滲濾(例如,使用微濾或超濾膜)、巴氏滅菌及/或噴霧乾燥。圖1說明可採用之不同純化方案之一些例示性示意圖。圖2說明四個特定純化方案。在一些實施例中,蛋白質組合物可為澄清溶解產物。在一些實施例中,蛋白質組合物可為過濾(例如,使用一或多個過濾步驟)之溶解產物,無論溶解產物是否已澄清。蛋白質組合物可用於例如食品及食品仿製產品。
可視情況藉由移除大塊固體使細胞溶解產物澄清,從而形成澄清溶解產物。可使用多種技術使細胞溶解產物澄清。舉例而言,可藉由離心、重力沉降或藉由添加矽藻土使細胞溶解產物澄清。在一些實施例中,在澄清期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。可使細胞溶解產物澄清至乾固體含量小於20%,例如小於17%、15%、12%、10%、9%、8%、7%、6%或5%乾固體。
可視情況添加一或多種絮凝劑至約0.1至約10 g/L之最終濃度,以有助於改良澄清步驟期間之固體移除。絮凝劑之非限制性實例包括烷基胺-表氯醇、聚二甲基二烯丙基氯化銨、聚胺(例如,MAGNAFLOC®、SUPERFLOC®或TRAMFLOC®,來自BASF,Florham Park,NJ)、聚-ε-離胺酸、石灰、熟石灰、氯化鐵、硫酸鐵、硫酸亞鐵、硫酸鋁、鋁酸鈉、氯化鋁、鹼式碳酸鎂、碳酸鈣、氫氧化鈣、活性矽酸鹽、瓜爾膠、澱粉、丹寧酸、海藻酸鈉、聚硫酸鋁、聚羥基氯化鋁、BIO-FLOCK®及合成聚電解質(例如,ZETAG®)。在一些實施例中,添加一或多種絮凝劑。在一些實施例中,在未添加一或多種絮凝劑之情況下進行澄清步驟。
在一些實施例中,在固體移除前,可視情況使用例如水或鹽水溶液或緩衝液稀釋細胞溶解產物,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間。舉例而言,可用水1:1稀釋細胞溶解產物。在一些實施例中,向細胞溶解產物添加一或多種絮凝劑並且在澄清之前稀釋細胞溶解產物。在一些實施例中,在澄清之前稀釋細胞溶解產物,且在未添加一或多種絮凝劑之情況下進行澄清步驟。在一些實施例中,向細胞溶解產物添加一或多種絮凝劑並且在澄清之前未稀釋細胞溶解產物。在一些實施例中,在未向細胞溶解產物添加一或多種絮凝劑之情況下且在未稀釋細胞溶解產物之情況下進行澄清步驟。
在一些實施例中,可對細胞溶解產物(例如尚未進行澄清步驟,諸如本文中所描述之澄清步驟的細胞溶解產物)進行過濾,以獲得過濾之溶解產物。過濾步驟可進一步減少顆粒物之量。在一些實施例中,在過濾期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在過濾期間將溫度維持在約12°C以下(例如約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。可使用微濾、超濾及/或滲濾來過濾細胞溶解產物或澄清溶解產物。微濾可使用孔徑為約0.2 µm至約2.0 µm (例如約0.2至約0.3 µm、約0.3至約0.5 µm、約0.5至約0.7 µm、約0.7至約0.9 µm、約0.9至約1.1 µm、約1.0至約1.2 µm、約1.2至約1.4 µm、約1.4至約1.6 µm、約1.6至約1.8 µm或約1.8至約2.0 µm)之膜。超濾可使用分子量截止值為約5 kDa至約70 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa、或約30 kDa至約50 kDa、約20 kDa至約40 kDa、約40至約60 kDa、或約50 kDa至約70 kDa)之膜。
在一些實施例中,可對澄清溶解產物進行過濾,以獲得過濾之溶解產物。在一些實施例中,過濾步驟可減少顆粒物之量。在一些實施例中,在過濾期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在過濾期間將溫度維持在約12°C以下(例如約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。可使用微濾、超濾及/或滲濾來過濾澄清溶解產物。微濾可使用孔徑為約0.2 µm至約2.0 µm (例如約0.2至約0.3 µm、約0.3至約0.5 µm、約0.5至約0.7 µm、約0.7至約0.9 µm、約0.9至約1.1 µm、約1.0至約1.2 µm、約1.2至約1.4 µm、約1.4至約1.6 µm、約1.6至約1.8 µm或約1.8至約2.0 µm)之膜。超濾可使用分子量截止值為約5 kDa至約70 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa、約30 kDa至約50 kDa、約20至約40 kDa、約40 kDa至約60 kDa、或約50至約70 kDa)之膜。
在一些實施例中,可使過濾之溶解產物經受一或多個額外過濾步驟,以獲得另一過濾之溶解產物。可使用微濾、超濾及/或滲濾來過濾經過濾之溶解產物。微濾可使用孔徑為約0.2 µm至約2.0 µm (例如約0.2至約0.3 µm、約0.3至約0.5 µm、約0.5至約0.7 µm、約0.7至約0.9 µm、約0.9至約1.1 µm、約1.0至約1.2 µm、約1.2至約1.4 µm、約1.4至約1.6 µm、約1.6至約1.8 µm或約1.8至約2.0 µm)之膜。超濾可使用分子量截止值為約5 kDa至約70 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa、約30 kDa至約50 kDa、約20 kDa至約40 kDa、約40 kDa至約60 kDa、或約50 kDa至約70 kDa)之膜。舉例而言,可藉由迫使溶液(例如,使用增壓或離心)通過例如分子量截止值為約5 kDa至約50 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa或約30 kDa至約50 kDa)之半透膜對過濾之溶解產物進行進一步過濾。在一些實施例中,可在微濾膜上對過濾之溶解產物進行滲濾。在一些實施例中,可在超濾膜上對過濾之溶解產物進行滲濾。在一些實施例中,可將過濾之溶解產物(例如,藉由微濾及/或超濾過濾之細胞溶解產物或澄清溶解產物)濃縮至至少約10%乾固體(例如,至少約15%或20%乾固體),隨後以恆定體積滲濾至少一倍滲析體積(DV) (例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20倍滲析體積)。在一些實施例中,可將過濾之溶解產物(例如,藉由微濾及/或超濾過濾之細胞溶解產物或澄清溶解產物)稀釋(例如,使用水或鹽水溶液或緩衝液,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間)至約5%乾固體(例如,約6%、7%、8%或9%乾固體),隨後以恆定體積滲濾至少一倍滲析體積(例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20倍滲析體積)。在一些實施例中,可將過濾之溶解產物(例如,藉由微濾及/或超濾過濾之細胞溶解產物或澄清溶解產物)稀釋(例如,使用水或鹽水溶液或緩衝液,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間)至約3%乾固體(例如,約2%或約4%乾固體),隨後滲濾以便將過濾之溶解產物濃縮至約15%乾固體(例如,約13%、14%、16%或17%乾固體)。在一些實施例中,在一或多個額外過濾步驟期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在一或多個額外過濾步驟期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下、或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。
可濃縮細胞溶解產物(例如,藉由如針對移除小於所要蛋白質之組分所描述之過濾方法,諸如超濾,視情況利用滲濾)。在濃縮期間,可將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在濃縮期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。可將細胞溶解產物濃縮至蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL (例如,10 mg/mL至225 mg/mL、15 mg/mL至200 mg/mL、25 mg/mL至約225 mg/mL、50 mg/mL至200 mg/mL或50 mg/mL至150 mg/mL)。濃縮可與過濾步驟同時發生。濃縮可與過濾步驟分開發生。
可濃縮澄清溶解產物(例如,藉由如針對移除小於所要蛋白質之組分所描述之過濾方法,諸如超濾,視情況利用滲濾)。在濃縮期間,可將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在濃縮期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。可將澄清溶解產物濃縮至蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL (例如,10 mg/mL至225 mg/mL、15 mg/mL至200 mg/mL、25 mg/mL至約225 mg/mL、50 mg/mL至200 mg/mL或50 mg/mL至150 mg/mL)。濃縮可與過濾步驟同時發生。濃縮可與過濾步驟分開發生。
可濃縮過濾之溶解產物(例如,藉由如針對移除小於所要蛋白質之組分所描述之過濾方法,諸如超濾,視情況利用滲濾)。在濃縮期間,可將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在濃縮期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。可將過濾之溶解產物濃縮至蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL (例如,10 mg/mL至225 mg/mL、15 mg/mL至200 mg/mL、25 mg/mL至約225 mg/mL、50 mg/mL至200 mg/mL或50 mg/mL至150 mg/mL)。濃縮可與過濾步驟同時發生。濃縮可與過濾步驟分開發生。
在一些實施例中,複數個細胞(例如,洗滌之複數個細胞及/或細胞之水性懸浮液)可經歷一或多種處理,例如在自細胞純化蛋白質之前。處理可包括例如細胞壁穿孔、鹼性耗竭及/或巴氏滅菌。此等處理可以任何組合或以任何順序進行(參見例如圖9A中以穿孔或鹼性耗竭開始之一些例示性處理方案)。
不希望受任何特定理論束縛,據信此等處理(單獨或任何組合)可獲得更有效及/或更短持續時間之純化方案。舉例而言,在一些情況下,此等處理(單獨或任何組合)可釋放目標胞質蛋白(例如,重組產生之蛋白),如同其被分泌且視情況呈未經修飾之形式(例如,無分泌信號)。作為另一實例,本文中所描述之處理通常不要求細胞壁滲透穩定。就速度而言,驚訝地發現,與在30多分鐘內獲得約70%釋放之市售球形質體套組相比,還原劑、鹼性耗竭及巴氏滅菌處理之組合在約15-20分鐘內釋放約100%靶胞質蛋白(LegH)。在一些實施例中,本文中所描述之處理可擴大規模。在一些實施例中,本文中所描述之處理為食品安全的。此等處理之另一潛在益處為選擇性增濃固體及液體部分中之某些物質;舉例而言,在一些實施例中,本文中所描述之處理可在分離液體部分與固體部分(例如,經由離心)之後引起以下一或多項:增濃液體部分中之胞溶質蛋白(以及,在一些實施例中,非膜結合細胞壁蛋白,因為不希望受任何特定理論束縛,此等蛋白質通常經由二硫鍵附著於細胞壁) (及/或耗竭來自固體部分之胞質蛋白);增濃胞質小分子(及/或,在一些實施例中,非膜結合細胞壁小分子) (及/或耗竭來自固體部分之胞質小分子);增濃固體部分中之膜結合細胞壁蛋白及/或次細胞區室蛋白(及/或耗竭液體部分中之膜結合細胞壁蛋白及/或次細胞區室蛋白);增濃固體部分中之非胞質小分子(及/或耗竭液體部分中之非胞質小分子);增濃固體部分中之核酸(例如,風味前驅物IMP及GMP之來源) (及/或耗竭液體部分中之核酸);增濃固體部分中之細胞壁組分(及/或耗竭液體部分中之細胞壁組分);或增濃固體部分中之脂質/脂肪(及/或耗竭液體部分中之脂質/脂肪) (例如,與包括顯著溶解(例如,機械溶解)細胞之方法相比)。
一般而言,當進行了此等處理中之一或多種時,不必溶解細胞(但若進行溶解步驟,則與缺乏該(等)處理之溶解步驟相比,該(等)處理可增加產率)。在一些實施例中,當進行此等處理中之一或多種時,該方法不包括機械溶解(例如,珠粒擊打、珠粒碾磨、研磨或旋轉振盪均質器)、冷凍粉碎、高壓細胞破碎(例如,藉由French壓機或微流化器)、音波處理、氮氣減壓或其組合。再次不希望受任何理論束縛,據信,當細胞保持完整時,蛋白質純化之一些典型污染物,諸如細胞壁物質、次細胞區室及核酸,以比進行溶解時更大之程度保留在細胞中。
複數個細胞(具有細胞壁)之細胞壁穿孔可使用任何適當之方法進行。通常,細胞壁穿孔產生完整細胞而非引起細胞溶解。穿孔方法之非限制性實例包括用還原劑處理、用酶處理、電穿孔或其組合。
在一些實施例中,細胞壁穿孔包括用還原劑處理。不希望受任何特定理論束縛,據信用還原劑處理可促進削弱細胞壁、釋放胞質內含物、驅動絮凝、促進固體移除、防止胞質目標在純化過程中氧化,及/或使氧化還原敏感性蛋白質對熱處理(例如,巴氏滅菌)穩定。在一些實施例中,還原劑可為食品安全還原劑。在一些實施例中,還原劑可選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。在一些實施例中,用還原劑處理包括用約5 mM至約500 mM (例如,約5 mM至約20 mM、約5 mM至約50 mM、約5 mM至約100 mM、約5 mM至約200 mM、約5 mM至約300 mM、約5 mM至約400 mM、約10 mM至約20 mM、約10 mM至約50 mM、約10 mM至約100 mM、約10 mM至約200 mM、約10 mM至約300 mM、約10 mM至約400 mM、約10 mM至約500 mM、約20 mM至約500 mM、約50 mM至約500 mM、約100 mM至約500 mM、約200 mM至約500 mM、約300 mM至約500 mM、約400 mM至約500 mM、約20 mM至約80 mM、約30 mM至約70 mM、約40 mM至約60 mM、約80 mM至約120 mM、約90 mM至約110 mM、約50 mM或約100 mM)還原當量之還原劑處理。如本文中所使用,「還原當量」為還原劑分子上所存在之還原單元數目。舉例而言,半胱胺酸具有單一巰基且表示單一還原當量。作為另一實例,二硫蘇糖醇(DTT)具有兩個巰基且表示兩個還原當量。在大部分情況下,還原當量可指兩個電子轉移,但單一電子還原亦為已知的。在一些實施例中,在細胞壁穿孔期間,將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如,約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在細胞壁穿孔期間,將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。
在一些實施例中,可使複數個細胞經受鹼性耗竭。如本文中所使用,「鹼性耗竭」係指用鹼處理細胞直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,例如持續一段時間(例如,至少約3分鐘、至少約5分鐘、或至少約10分鐘)。不希望受任何特定理論束縛,據信藉由使環境酸化而使細胞(例如,真菌細胞(例如,酵母細胞))響應於鹼性環境;然而,細胞調節環境pH之能力有限,且最終將不可能進一步調節。再次不希望受任何特定理論束縛,據信細胞之鹼性耗竭可減小純化過程之pH下降,且此種pH下降可使蛋白質沉澱及/或不活化。不希望受任何特定理論束縛,鹼性耗竭之另一潛在益處為削弱細胞壁及增加蛋白質釋放效率(例如,利用穿孔或利用溶解步驟)。在一些實施例中,在鹼性耗竭期間將溫度維持在約12°C以下(例如約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。
在一些實施例中,複數個細胞可經巴氏殺菌(例如,在任何過濾步驟之前,本文中亦稱為「預先巴氏滅菌」或「PZ1」)。舉例而言,在一些實施例中,可將複數個細胞加熱至約50°C至約85°C (例如約50°C至約55°C、約50°C至約60°C、約50°C至約65°C、約50°C至約70°C、約50°C至約75°C、約50°C至約80°C、約55°C至約85°C、約60°C至約85°C、約65°C至約85°C、約70°C至約85°C、約75°C至約85°C、約80°C至約85°C)。不希望受任何特定理論束縛,據信巴氏滅菌可具有一或多個益處,諸如增加蛋白質自細胞釋放、對粒度之影響最小、促進固體移除(例如,相對於機械溶解)、殺死生產生物體(例如,為了減少生物負擔),及/或化學減少細胞內蛋白質。在一些實施例中,在巴氏滅菌期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。
此等處理可單獨實行,或以任何順序組合。舉例而言,本文中所描述之一些方法可包括細胞壁穿孔步驟、鹼性耗竭步驟或巴氏滅菌步驟,且可無其中之另兩者。在一些實施例中,本文中所描述之方法可包括細胞壁穿孔步驟,繼之以鹼性耗竭步驟或巴氏滅菌步驟,視情況隨後分別繼之以巴氏滅菌步驟或鹼性耗竭步驟。在一些實施例中,本文中所描述之方法可包括鹼性耗竭步驟,繼之以細胞壁穿孔步驟或巴氏滅菌步驟,視情況隨後分別繼之以巴氏滅菌步驟或細胞壁穿孔步驟。在一些實施例中,本文中所描述之方法可包括巴氏滅菌步驟,繼之以細胞壁穿孔步驟或鹼性耗竭步驟,視情況隨後分別繼之以鹼性耗竭步驟或細胞壁穿孔步驟。
不受任何特定理論束縛,據信使用本文中所提供之一或多種處理至少部分改變了細胞壁,而細胞保持大體上完整。舉例而言,在一些實施例中,當用本文中所提供之任一或多種處理加以處理之複數個細胞之10% (w/v)懸浮液在約50°C及pH 10.5下培育約10分鐘,隨後離心以移除固體並用甘露糖苷酶(例如α甘露糖苷酶)處理上清液時,偵測到少於約50 μg/mL (例如,少於約40 μg/mL、少於約30 μg/mL、少於約20 μg/mL、少於約15 μg/mL或少於約10 μg/mL)之甘露糖。作為另一實例,在一些實施例中,當用本文中所提供之任一或多種處理加以處理之複數個細胞之10% (w/v)懸浮液在約50°C及pH 12.0下培育時,在該複數個細胞之可溶相中偵測到少於約400 μg/mL (例如,少於約300 μg/mL、少於約200 μg/mL、少於約150 μg/mL、少於約100 μg/mL或少於約50 μg/mL)之β葡聚糖。
因此,在一些實施例中,本文中提供藉由使用本文中所提供之任一或多種處理產生之組合物。在一些實施例中,本文中提供一種包含複數個細胞之組合物,其中用甘露糖苷酶(例如,α-甘露糖苷酶)處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約50 μg/mL少於約50 μg/mL (例如,少於約40 μg/mL、少於約30 μg/mL、少於約20 μg/mL、少於約15 μg/mL或少於約10 μg/mL)可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,本文中提供一種包含複數個細胞之組合物,其中可溶相中可偵測到少於約400 μg/mL (例如,少於約300 μg/mL、少於約200 μg/mL、少於約150 μg/mL、少於約100 μg/mL或少於約50 μg/mL) β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,該組合物進一步包含還原劑。在一些實施例中,該還原劑係以約5 mM至約500 mM (例如約5 mM至約20 mM、約5 mM至約50 mM、約5 mM至約100 mM、約5 mM至約200 mM、約5 mM至約300 mM、約5 mM至約400 mM、約10 mM至約20 mM、約10 mM至約50 mM、約10 mM至約100 mM、約10 mM至約200 mM、約10 mM至約300 mM、約10 mM至約400 mM、約10 mM至約500 mM、約20 mM至約500 mM、約50 mM至約500 mM、約100 mM至約500 mM、約200 mM至約500 mM、約300 mM至約500 mM、約400 mM至約500 mM、約20 mM至約80 mM、約30 mM至約70 mM、約40 mM至約60 mM、約80 mM至約120 mM、約90 mM至約110 mM、約50 mM或約100 mM)還原當量之該還原劑之量存在於該組合物中。在一些實施例中,該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。在一些實施例中,該還原劑為食品安全還原劑。在一些實施例中,該複數個細胞中至少約25重量%之細胞為完整的。在一些實施例中,該複數個細胞中至少約50重量%之細胞為完整的。在一些實施例中,該複數個細胞中至少約75重量%之細胞為完整的。在一些實施例中,該複數個細胞之粒度分佈中值為約2 µm至約4 µm (例如約3 µm)。
在一些實施例中,本文中提供處理複數個細胞(例如,複數個具有細胞壁之細胞)的方法。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中用甘露糖苷酶(例如α-甘露糖苷酶)處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
本文中亦提供諸如已如本文中所描述加以處理之彼等細胞之細胞的組合物。在一些實施例中,提供一種組合物,其包括:複數個細胞,其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。在一些實施例中,提供一種組合物,其包括:複數個細胞,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
此等處理可繼之以本文中所描述之任一步驟,包括但不限於溶解、相分離、過濾、濃縮、巴氏滅菌及/或乾燥。在一些實施例中,此等處理未繼之以溶解步驟,因為一或多種處理可引起胞質蛋白釋放。
在以上處理之一之後的後續純化步驟可包括一或多個步驟,例如離心、相分離、沉澱、微濾、超濾、滲濾(例如,使用微濾或超濾膜)、巴氏滅菌及/或噴霧乾燥。圖9B說明可對複數個細胞(例如,用本文中所描述之任一或多種處理加以處理之細胞之水性懸浮液)進行之一些例示性後續純化步驟。蛋白質組合物可用於例如食品及食品仿製產品。
處理之後,複數個細胞之水性懸浮液可經受分離步驟以分離固體部分與液體部分(類似於上文所描述之澄清)。舉例而言,可藉由離心、深度過濾、重力沉降、微濾或其組合來達成相分離。在一些實施例中,離心包括以至少3k×g (例如,至少約5k×g、至少約10k×g、至少約20k×g或至少約40k×g)之力進行離心。在一些實施例中,在分離期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。分離可進行至液體部分中之乾固體含量少於20%,例如少於17%、15%、12%、10%、9%、8%、7%、6%或5%乾固體。在一些實施例中,在分離期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。
可視情況添加一或多種絮凝劑至約0.1至約10 g/L之最終濃度,以有助於改良分離步驟期間之固體移除。在一些實施例中,添加一或多種絮凝劑。在一些實施例中,在未添加一或多種絮凝劑之情況下進行分離步驟。
在一些實施例中,在分離步驟之前,可視情況使用例如水或鹽水溶液或緩衝液稀釋複數個細胞之水性懸浮液,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間。舉例而言,可用水1:1稀釋細胞溶解產物。在一些實施例中,將一或多種絮凝劑添加至複數個細胞之水性懸浮液,並且在分離固體部分與液體部分之前稀釋該複數個細胞之水性懸浮液。在一些實施例中,在分離之前稀釋複數個細胞之水性懸浮液,且分離步驟在未添加一或多種絮凝劑之情況下進行。在一些實施例中,將一或多種絮凝劑添加至複數個細胞之水性懸浮液,並且在分離之前未稀釋該複數個細胞之水性懸浮液。在一些實施例中,在未向該複數個細胞之水性懸浮液添加一或多種絮凝劑且未稀釋該複數個細胞之水性懸浮液的情況下進行分離步驟。
如本文中所指出,在一些實施例中,本文中所描述之方法可將來自不同細胞位置之細胞組分(例如,蛋白質及/或核酸)有效分離至液體部分或固體部分。舉例而言,在一些實施例中,液體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之胞質蛋白。在一些實施例中,液體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之己糖激酶(例如,作為胞質蛋白含量之指標)。在一些實施例中,液體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之非膜結合細胞壁蛋白。在一些實施例中,液體部分中之蛋白質可包括以重量計少於約40% (例如,少於約35%、少於約33%、少於約30%、少於約25%、少於約20%、少於約15%或少於約10%)之膜結合及次細胞區室蛋白。在一些實施例中,液體部分之乾固體(例如,再懸浮於緩衝液或水中)之A
260/A
280比可為小於約1.5,通常在脫鹽之後(例如,在未進行核酸酶處理之情況下藉由標準核酸微量製備套組)。在一些實施例中,固體部分之乾固體(例如,再懸浮於緩衝液或水中)之A260/A280比可為大於約1.5,通常在脫鹽之後(例如,在未進行核酸酶處理之情況下藉由標準核酸微量製備套組)。在一些實施例中,固體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之膜結合及/或次細胞區室蛋白。在一些實施例中,固體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之總組蛋白。在一些實施例中,固體部分可包括該複數個細胞中以重量計至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%)之亞鐵螯合酶蛋白(例如,作為粒線體蛋白含量之指標)。
在一些實施例中,本文中所描述之方法可獲得完整細胞之一大部分(例如,最終將處於固體部分中)。舉例而言,本文中所描述之方法可使該複數個細胞中以重量計至少約20% (例如至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約75%或至少約80%)之細胞保持完整。在一些實施例中,該等完整細胞之粒度分佈中值可為約2 µm至約4 µm (例如約3 µm)。
在分離液體部分與固體部分之步驟後,可過濾液體部分(例如,在產生蛋白質組合物時、在產生富含胞質蛋白之蛋白質組合物時、或在純化可溶性蛋白質時),以形成濾液及滲餘物。可使用微濾、超濾及/或滲濾來過濾液體部分。微濾可使用孔徑為約0.2 µm至約2.0 µm (例如約0.2至約0.3 µm、約0.3至約0.5 µm、約0.5至約0.7 µm、約0.7至約0.9 µm、約0.9至約1.1 µm、約1.0至約1.2 µm、約1.2至約1.4 µm、約1.4至約1.6 µm、約1.6至約1.8 µm或約1.8至約2.0 µm)之膜。超濾可使用分子量截止值為約5 kDa至約70 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa、或約30 kDa至約50 kDa、約20 kDa至約40 kDa、約40至約60 kDa、或約50 kDa至約70 kDa)之膜。超濾可使用分子量截止值為約5 kDa至約70 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa、約30 kDa至約50 kDa、約20 kDa至約40 kDa、約40 kDa至約60 kDa、或約50 kDa至約70 kDa)之膜。在一些實施例中,可藉由迫使溶液(例如,使用增壓或離心)通過例如分子量截止值為約5 kDa至約50 kDa (例如約5 kDa至約10 kDa、約10 kDa至約30 kDa或約30 kDa至約50 kDa)之半透膜對液體部分進行過濾。在一些實施例中,可在微濾膜上對液體部分進行滲濾。在一些實施例中,可在超濾膜上對液體部分進行滲濾。在一些實施例中,可將液體部分濃縮至至少約10%乾固體(例如,至少約15%或20%乾固體),隨後以恆定體積滲濾至少一倍滲析體積(DV) (例如,至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20倍滲析體積)。在一些實施例中,可將液體部分稀釋(例如,使用水或鹽水溶液或緩衝液,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間)至約5%乾固體(例如,約6%、7%、8%或9%乾固體),隨後以恆定體積滲濾至少一倍滲析體積(例如,至少2、3、4、5、6、7 、8、9、10、15或20倍滲析體積)。在一些實施例中,可將液體部分稀釋(例如,使用水或鹽水溶液或緩衝液,同時將pH維持在約pH 8.5與12.0之間)至約3%乾固體(例如,約2%或約4%乾固體),隨後滲濾至約15%乾固體(例如,約13%、14%、16%或17%乾固體)。在一些實施例中,在一或多個過濾步驟期間將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在一或多個過濾步驟期間將溫度維持在約12°C以下(例如約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。
可濃縮滲餘物(例如,藉由如針對移除小於所要蛋白質粒度之組分所描述之過濾方法,諸如超濾,視情況利用滲濾),以形成蛋白質組合物。在濃縮期間,可將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。可將滲餘物濃縮至蛋白質濃縮物中之蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL (例如,10 mg/mL至225 mg/mL、15 mg/mL至200 mg/mL、25 mg/mL至約225 mg/mL、50 mg/mL至200 mg/mL或50 mg/mL至150 mg/mL)。濃縮可與過濾步驟同時發生。濃縮可與過濾步驟分開發生。在一些實施例中,在濃縮期間將溫度維持在約12°C以下(例如,約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如,約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C或約10°C與約12°C之間)。
在一些實施例中,本文中提供自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個細胞純化複數種蛋白質的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:a)將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及d)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及d)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物,及e)視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,自該固體部分提取蛋白質包括對該固體部分進行機械溶解。
在一些實施例中,本文中提供用於自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質的方法。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,b)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)對該複數個細胞之細胞壁進行穿孔,b)用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0,c)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,d)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,e)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,提供一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:a)將表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度,b)分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分,c)過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物,d)濃縮該滲餘物以形成包括該可溶性蛋白質之蛋白質組合物,及e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包括該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。在一些實施例中,該可溶性蛋白質為含血基質之蛋白質。在一些實施例中,該方法包括用約5 mM至約500 mM還原當量之包括還原劑處理該複數個細胞。在一些實施例中,用還原劑處理包括用約20 mM至約80 mM還原當量之還原劑處理。在一些實施例中,該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。在一些實施例中,該還原劑為食品安全還原劑。在一些實施例中,該可溶性蛋白質具有熔點,且方法進一步包括在a)之前將該複數個細胞加熱至比該可溶性蛋白質之熔點低約10°C或約5°C之溫度。在一些實施例中,可溶性蛋白質之熔點為至少約50°C (例如,至少約55°C、至少約60°C、至少約65°C、至少約70°C或至少約75°C)。在一些實施例中,該可溶性蛋白質與該複數個細胞異源。在一些實施例中,可能對固體部分之一或多種組分(例如,膜結合蛋白、次細胞區室蛋白、細胞壁物質、脂質、核酸)感興趣。在一些此種實施例中,可例如藉由使固體部分懸浮在水或水性緩衝液中,隨後機械破碎固體部分而自固體部分提取該等組分。在一些實施例中,此等方法可用於產生富含膜結合及/或次細胞區室(例如,富含粒線體蛋白、富含核蛋白及/或富含內質網蛋白)之蛋白質組合物。在提取期間,可將pH維持在介於約8.5至約12.0之間(例如約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5或12.0)的pH下。在一些實施例中,在提取期間將溫度維持在約12°C以下(例如約10°C以下、約8°C以下或約6°C以下)或約4°C與約12°C之間(例如約4°C與約10°C、約4°C與約8°C、約4°C與約6°C、約6°C與約12°C、約8°C與約12°C、或約10°C與約12°C之間)。在一些實施例中,本文中所描述之任何方法皆可用於純化目標蛋白質。在一些實施例中,目標蛋白質大量表現於複數個細胞中。在一些實施例中,目標蛋白質重組表現於複數個細胞中。在一些實施例中,該目標蛋白質與該複數個細胞異源。在一些實施例中,該目標蛋白質為可溶性蛋白質。在一些實施例中,該目標蛋白質為含血基質之蛋白質(例如,本文中所描述之任何含血基質之蛋白質)。目標蛋白質可組成如本文中所描述之蛋白質組合物之任何適合之部分。舉例而言,在一些實施例中,以乾重計,目標蛋白質可組成該蛋白質組合物中蛋白質之至少約30% (例如至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少90%)。
在一些實施例中,目標蛋白質為胞質蛋白。在一些此種實施例中,本文中所描述之方法可增濃液體部分中之目標蛋白質。舉例而言,驚訝地發現用鹼性耗竭及預先巴氏滅菌處理複數個細胞之水性懸浮液使液體部分中目標蛋白(LegH)之相對豐度為約0.9且固體部分中為約0.53 (參見例如圖12C)。在一些實施例中,本文中所描述之方法包括將複數個細胞加熱至比目標蛋白質之熔點低約10°C至約5°C之溫度。不受任何特定理論束縛,據信此種加熱步驟可使熔點低於目標蛋白質之熔點的蛋白質展開及/或聚集,因而增濃液體部分中之目標蛋白質。在一些實施例中,本文中所描述之方法包括將該複數個細胞加熱至約60°C。
在一些實施例中,目標蛋白質為次細胞區室(例如粒線體、細胞核及/或內質網)蛋白。在一些實施例中,目標蛋白質為膜結合蛋白。在一些此種實施例中,本文中所描述之方法可增濃固體部分中之目標蛋白質。
亦可對蛋白質組合物進行巴氏滅菌。舉例而言,可使用熱處理、高溫短時巴氏滅菌、脈衝電場、高壓巴氏滅菌、UV照射、γ照射或微濾對蛋白質組合物進行巴氏滅菌。在一些實施例中,可在巴氏滅菌期間或之後添加一或多種抗微生物劑(例如聚離胺酸)。
在一些實施例中,蛋白質組合物,無論經巴氏滅菌與否,皆可在溫和條件下乾燥,例如噴霧乾燥或冷凍乾燥或其類似操作,以確保蛋白質不變性。
在一些實施例中,本文中所描述之任何方法中之步驟皆可在8.5至12之pH下獨立地進行。舉例而言,溶解步驟可在約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、約9.0、約9.5、約10.0、約10.5、約11.0、約11.5或約12.0之pH下進行,而澄清及/或過濾步驟可各自獨立地在不同於溶解步驟之pH的pH下進行,只要澄清及/或過濾步驟之不同pH在8.5以上即可。作為另一實例,澄清步驟可在約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、約9.0、約9.5、約10.0、約10.5、約11.0、約11.5或約12.0之pH下進行,而溶解及/或過濾步驟可各自獨立地在不同於澄清步驟之pH的pH下進行,只要溶解及/或過濾步驟之不同pH在8.5以上即可。作為另一實例,過濾步驟可在約8.5至約9.0、約9.0至約10.0、約9.0至約11.0、約10.0至約11.0、約11.0至約12.0、約9.5至約10.5、約9.5至約11.5、約10.5至約11.5、約9.0、約9.5、約10.0、約10.5、約11.0、約11.5或約12.0之pH下進行,而溶解及/或澄清步驟可各自獨立地在不同於過濾步驟之pH的pH下進行,只要溶解及/或澄清步驟之不同pH在8.5以上即可。
不受任何特定理論束縛,在約8.5至約12.0之pH下進行如本文中所揭示之步驟可具有多種益處,例如:穩定(例如熱穩定)一或多種目標蛋白(例如,尤其在蛋白質之等電點在pH 8.5以下時);穩定氧化還原敏感性蛋白;增加過濾期間之膜通量;促進固體分離;在10°C或以下之效力,以及使用食品安全且廣泛使用之試劑。
本文中亦提供一種藉由本文中所描述之任何方法產生之蛋白質組合物。本文中亦提供一種藉由本文中所描述之任何方法產生之蛋白質組合物用於食品、飲料或補充劑之用途。在一些實施例中,食品可為肉仿製品。
在一些態樣中,本文中亦提供蛋白質組合物。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的情況下)可包含以乾重計至少35% (例如至少40%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%)大於500 Da (例如,1 kDa、2 kDa、3 kDa、5 kDa、10 kDa、30 kDa或50 kDa)之分子。普通熟習此項技術者可使用多種已知方法中之任一種,例如液相層析-質譜法(LCMS)決定樣品中大分子(例如,大於500 Da、1 kDa、2 kDa、3 kDa、5 kDa、10 kDa、30 kDa或50 kDa之分子)之總量或特定大分子之量。普通熟習此項技術者可使用多種已知方法中之任一種,例如液相層析-質譜法(LCMS)決定樣品中小分子(例如,小於30 kDa、20 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa、2 kDa、1 kDa或500 Da之分子)之總量或特定小分子之量。在一些實施例中,小分子(例如,小於30 kDa、20 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa、1 kDa或500 Da之分子)減少可與過濾步驟(例如滲濾)同時發生。
應瞭解,過濾器(例如,膜材料、孔徑)及過濾方法(例如,微濾、超濾或滲濾)之選擇可影響乃至決定所要組分在指定過濾步驟之滲餘物或濾液中。舉例而言,在一些實施例中,若大分子為所要組分,則可選擇超濾作為過濾方法,且所要組分可為滲餘物之一部分。在一些實施例中,超濾可與滲濾組合。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的情況下)與其中一或多個相同純化步驟未在約pH 8.5及約12.0下進行之純化蛋白質相比可存在減少量之或不存在一或多種可有助於緩衝容量之小分子。成分緩衝容量可促成pH漂移,由此可促進異味產生,以及可能影響產品組裝及調配。舉例而言,蛋白質組合物之緩衝容量可小於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體(例如,小於約2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.5或0.1 mmol NaOH/公克乾固體)。在一些實施例中,滲濾(例如,在pH 9.3±0.3下)可將緩衝容量(例如,自約3.6 mmol NaOH/公克乾固體)降至低於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體(例如,低於約2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.5或0.1 mmol NaOH/公克乾固體)。緩衝容量可藉由對2% (w/v)懸浮液或溶液進行pH滴定,量測將懸浮液或溶液自pH 3.0調節至pH 12.0所需之NaOH之mmol來測定。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的情況下)與其中一或多個相同純化步驟未在約pH 8.5及約12.0下進行之純化蛋白質相比可形成具有較高儲存模數之凝膠。舉例而言,在一些實施例中,凝膠可在約7.0之pH下由濃度為約25至約250 mg/mL (例如,約25至約50 mg/mL、約25至約100 mg/mL、約25至約150 mg/mL、約25至約200 mg/mL、約50至約250 mg/mL、約100至約250 mg/mL、約150至約250 mg/mL或約200至約250 mg/mL)之蛋白質組合物形成。在一些實施例中,由本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行)之10% (w/v)懸浮液形成之凝膠的儲存模數可大於其中一或多個相同純化步驟未在約pH 8.5及約12.0下進行之類似凝膠。在一些實施例中,由本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行)之10% (w/v)懸浮液形成之凝膠的儲存模數在約95°C下可具有至少約100 Pa之儲存模數。在一些實施例中,由其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行之蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液在約95°C下形成之凝膠的儲存模數可具有比其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)未在約pH 8.5與約12.0之間進行的類似凝膠的儲存模數高出至少約10倍(例如,15倍或20倍)的儲存模數。在一些實施例中,由其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行之蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液在約95°C下形成之巴氏滅菌(例如在65°C下持續30秒)凝膠的儲存模數可具有比其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)未在約pH 8.5與約12.0之間進行的類似凝膠的儲存模數高出至少約2倍(例如,3倍、4倍或5倍)的儲存模數。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的情況下)可為低風味蛋白質組合物。
在一些實施例中,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的蛋白質組合物與其中各步驟在約6.5之pH下進行的類似方法相比可具有較少(例如,較小絕對量或較小濃度) (例如,少至少5倍、少至少10倍、少至少20倍或少至少50倍)酯。
在一些實施例中,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的蛋白質組合物與藉由其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)未在約pH 8.5與約12.0之間進行之純化方法獲得之蛋白質組合物相比可具有較少(例如,較小絕對量或較小濃度)之一或多種可導致異臭或異味之風味化合物(例如,半胱胺酸;1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸)。在一些實施例中,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行的蛋白質組合物與其中一或多個相同純化步驟未在約pH 8.5與12.0之間進行之純化蛋白質相比可具有減少至少約1.05倍(例如至少約2.0倍、至少約2.5倍、至少約3倍、至少約4倍、至少約5倍、或至少約10倍)之一或多種可導致異臭或異味之小分子(例如,半胱胺酸;1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸)。在一些實施例中,減少倍數可藉由將其中一或多個步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)未在約pH 8.5與約12.0之間進行之蛋白質組合物中小分子之量除以其中一或多個相同純化步驟在約pH 8.5與約12.0之間進行的相同小分子之量來計算。普通熟習此項技術者可使用例如GCMS確定樣品中特定小分子之量。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行)包括一或多種導致異臭或異味之小分子(例如,半胱胺酸;1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸),其量在官能檢查員可偵測之水準以下。普通熟習此項技術者可使用例如GCMS確定樣品中特定小分子之量。
在一些實施例中,本文中所提供之蛋白質組合物(例如,其中一或多個純化步驟(例如,兩個或更多個、三個或更多個、或所有純化步驟)在約pH 8.5與約12.0之間進行)不存在可偵測水準之一或多種導致異臭或異味之小分子(例如,半胱胺酸;1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸)。
在一些實施例中,當在以此項技術中常用之方式(例如,考馬斯亮藍G-250、考馬斯亮藍R-250或硝酸銀)偵測之後藉由還原及變性凝膠電泳(例如SDS-PAGE)及密度測定法量測時,蛋白質組合物中至少約50% (例如,至少約60%、70%、80%或90%)之多肽落在約10 kDa與約200 kDa之間。
在一些實施例中,如本文中所描述之蛋白質組合物中之一或多種蛋白質為功能性的(如以上所描述)。通常,如本文中所描述之蛋白質組合物包括複數種功能性蛋白質。蛋白質組合物可具有任何適當之附加性質。在一些實施例中,該蛋白質組合物可使水包油乳液穩定。在一些實施例中,該蛋白質組合物可使油包水乳液穩定。在一些實施例中,該蛋白質組合物可使水包氣乳液(例如泡沫)穩定。
在一些實施例中,蛋白質組合物可用於多種食物產品,包括例如蛋白質補充劑(例如,蛋白質粉)、膳食替代品或烘焙食品,或者替代模擬動物衍生食物產品之食物產品(例如,乾酪仿製品、蛋仿製品或肉仿製品,諸如碎肉仿製品)中之全部或部分動物蛋白質(例如,來自牛、豬、家禽、羔羊或魚)。因此,本文中亦提供包括本文中所描述之任何蛋白質組合物的食品、飲料或補充劑。在一些實施例中,食品可為肉仿製品。
如本文中所描述之蛋白質組合物可具有任何適當之組分。
在一些實施例中,以乾重計,如本文中所描述之蛋白質組合物之蛋白質含量可包括至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、或至少約90%)之胞質蛋白。
在一些實施例中,以乾重計,如本文中所描述之蛋白質組合物之蛋白質含量可包括至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、或至少約90%)之胞質蛋白與非膜結合細胞壁蛋白之組合。
在一些實施例中,如本文中所描述之蛋白質組合物之蛋白質含量可包括目標蛋白質(例如本文中所描述之任何目標蛋白質)。在一些實施例中,以乾重計,蛋白質組合物可包括至少約30% (例如,至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、或至少約90%)之目標蛋白質。
在一些實施例中,複數種功能性蛋白質可包括至少10種(例如,至少20種、至少30種、至少40種、至少50種、至少75種、或至少100種)不同的功能性蛋白質。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括選自由以下組成之群的一或多種蛋白質:AOX1及AOX2。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括一或多種藉由選自由以下組成之群的GI編號標識的蛋白質:254568470、254567507、254570367、254568544、254573764、254566601、254566257、254567798、254570575、254571387、254571425、254568572、254571679、254569858、254573010、254564691、254571699、254572585、254566127、254570667、254572870、254573696、254565205、254569186、254572668、254571899、254569222、254572359、254573464、254572163、254570957、254573014、254570673、254566987、254567581、254564747、254568562、254566731、254565437、254564519、254571763、254566729、254569372、254571423、254565451、254565973、254573008、254574310、254564587、254568946、254569478、254566861、254565513、254572906、254572796、254573092、254567233、254565959、254570383、254570885、254565519、254574530、254573558、254569654、254573466、254571991、254568780、254565859、254568564、254570088、254564995、254573142、254571407、254569976、254570771、254565455、254565551、254574244、254567716、254572952、254568654、254570661、254566481、254565045、254567189、254570098、254566883、254569212、254574528、254565655、254568196、254572782、254570305、254572856、254568894、254564809、254569780、254565263、254567287、254567754、254565279、254567471、254564667、254568442、254571893、254573996、254572005、254572033、254567027、254569734、254566559、254570993、254566611、254566089、254567714、254571057、254573908、254572676、254570100、254567055、254565475、254567834、254567872、254566327、254574366、254568036、254567738、254565307、254570727、254566301、254565783、254567173、254568492、254565493、254571145、254565699、254567029、254573198、254568642、254568302、254574036、254569716、254571157、254571485、254567788、254573482、254566631、254571293、254569576、254572962、254565129、254569094、254570112、254566447、254570515、254568944、254573180、254573098、254570969、254569500、254564507、254569714、254570072、254573324、254568444、254569156、254568334、254568304、254566885、254571359、254574464、254569852、254569144、254573818、254573050、254572992、254571587、254573470、254565991、254566975、254570022、254569102、254574442、254569298、254572501、254569162、254565713、254565211、254572377、254571575、254574030、254572872、254565431、254569400、254572599、254565725、254569842、254570271、254573426、254574502、254569568、254572822、254568950、254572257、254569700、254573726、254574210、254567569、254569896、254571915、254568132、254567191、254566971、254567243、254566843、254568386、254571131、254572628、254567025、254569344、254571043、254572958、254566489、254566607、254569916、254571179、254569898、254567938、254566619、254566141、254572159、254573164、254573328、254570166、254565545、254570535、254564705、254570393、254566769、254565063、254567203、254573714、254571903、254571639、254564825、254569512、254569682、254574296、254574080、254564849、254570719、254568186、254572093、254573284、254571919、254570821、254565769、254573468、254571883、254570633、254570315、254570527、254567583、254573420、254569866、254569290、254569438、254574316、254566267、254570897、254569696、254566847、254572974、254569386、254568682、254565735、254574242、254568876、254566225、254566479、254569106、254566881、254569226、254565085、254569736、254572157、254565157、254573986、254569320、254570679、254572211、254566063、254568616、254564917、254564915、254568842、254573376、254566487、254565875、254568412、254564663、254565961、254569890、254566293、254568216、254572836、254570523、254568506、254572347、254567662、254567720、254574020、254571733、254571747、254569894、254571377、254566013、254569558、254565617、254566191、254571955、254565721、254567996、254566897、254574140、254571035、254570359、254566893、254568298、254566101、254565989、254568566、254571457、254571393、254571161、254564537、254571649、254570979、254566595、254566417、254569072、254570669、254569122、254567253、254573448、254571343、254572333、254566649、254571369、254573496、254572133、254573886、254569410、254570411、254565705、254573462、254568908、254572495、254569552、254566933、254568102、254569702、254569846、254574136、254569390、254567273、254572371、254569354、254572053、254568006、254565653、254570487、254573510、254564923、254568606、254572503、254569166、254572145、254572531、254568464、254570723、254570485、254567349、254565049、254574132、254564979、254564629、254572309、254565163、254573160、254573452、254565165、254573834、254574102、254568996、254573756、254572015、254568992、254572535、254566143、254572321、254568056、254573266、254566351、254571007、254571463、254570629、254573948、254572884、254567375、254567467、254567928、254572307、254567700、254571783、254573676、254567900、254568714、254564921、254564599、254573602、254573662、254570521、254572814、254571619、254566321、254568896、254566743、254572553、254565607、254565035、254565403、254573760、254566097、254564603、254572956、254564565、254572834、254566317、254564665、254573056、254568582、254564717、254572724、254565955、254568718、254573174、254566999、254569742、254573508、254565095、254569494、254573046、254568148、254574028、254569828、254566605、254569010、254568244、254564675、254569952、254574158、254567143、254566779、254574118、254573866、254570090、254569928、254573178、254574370、254569876、254571543、254570799、254569038、254570373、254567774、254571247、254574144、254571313、254570649、254565795、254572920、254568600、254571879、254567231、254567553、254569782、254566517、254566423、254573664、254565207、254566497、254566087、254571791、254568702、254569082、254569470、254565589、254570561及254574100。GI編號可在ncbi.nlm.nih.gov/protein發現之PubMed蛋白質資料庫中搜尋,例如,檢索相應蛋白質之名稱及/或序列。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括選自由以下組成之群的一或多種選自Pfam家族之蛋白質:Pf00044、Pf02800、Pf02826、Pf00009、Pf03143、Pf03144、Pf00113、Pf03952、Pf00107、Pf08240、Pf00012、Pf06723、Pf00162、Pf00183、Pf02518、Pf00009、Pf00679、Pf03144、Pf03764、Pf00205、Pf02775、Pf02776、Pf00006、Pf00306、Pf02874、Pf01249、Pf00240、Pf01020、Pf11976、Pf00240、Pf01599、Pf11976、Pf00006、Pf00306、Pf02874、Pf00153、Pf00189、Pf07650、Pf00012、Pf06723、Pf01929、Pf00400、Pf00012、Pf06723、Pf00297、Pf01015、Pf01116、Pf00224、Pf02887、Pf03328、Pf00005、Pf03193、Pf00300、Pf00416、Pf01287、Pf01294、Pf00121、Pf00012、Pf06723、Pf01251、Pf00022、Pf00318、Pf00327、Pf00238、Pf00411、Pf01090、Pf00687、Pf00573、Pf00177、Pf00828、Pf01459、Pf00270、Pf00271、Pf00298、Pf03946、Pf01201、Pf00572、Pf00276、Pf00428、Pf00466、Pf00827、Pf00923、Pf01781、Pf01248、Pf00118、Pf00043、Pf00647、Pf00900、Pf01479、Pf08071、Pf00333、Pf03719、Pf01450、Pf07991、Pf01280、Pf01780、Pf00181、Pf03947、Pf03501、Pf00312、Pf08069、Pf00338、Pf00380、Pf00132、Pf00483、Pf12804、Pf00366、Pf00347、Pf00410、Pf00334、Pf00160、Pf01248、Pf00237、Pf00393、Pf03446、Pf00213、Pf00347、Pf00080、Pf01248、Pf01198、Pf00838、Pf01200、Pf00122、Pf00690、Pf00702、Pf08282、Pf12710、Pf00252、Pf00163、Pf01479、Pf00833、Pf01092、Pf01667、Pf00107、Pf08240、Pf01092、Pf01775、Pf01159、Pf01667、Pf01849、Pf00125、Pf02969、Pf00675、Pf05193、Pf00153、Pf00244、Pf00208、Pf02812、Pf01158、Pf00330、Pf00694、Pf00125、Pf00808、Pf02284、Pf00281、Pf00673、Pf00438、Pf02772、Pf02773、Pf00670、Pf02826、Pf05221、Pf00428、Pf00578、Pf08534、Pf10417、Pf01247、Pf02953、Pf09598、Pf04969、Pf01246、Pf00202、Pf01212、Pf00349、Pf03727、Pf01776、Pf03332、Pf08282、Pf00253、Pf00155、Pf00012、Pf06723、Pf01717、Pf08267、Pf00166、Pf00085、Pf00056、Pf02866、Pf00076、Pf00658、Pf00285、Pf00406、Pf05191、Pf00456、Pf02779、Pf02780、Pf00861、Pf00349、Pf03727、Pf00025、Pf00071、Pf01926、Pf04670、Pf08477、Pf05873、Pf00342、Pf00831、Pf00203、Pf01282、Pf00515、Pf07719、Pf01215、Pf01159、Pf05405、Pf00180、Pf02297、Pf00108、Pf00109、Pf02803、Pf01488、Pf03435、Pf05368、Pf02953、Pf00076、Pf00012、Pf06723、Pf00828、Pf00070、Pf01262、Pf02852、Pf07992、Pf12831、Pf00793、Pf11022、Pf00389、Pf00670、Pf02826、Pf05221、Pf00085、Pf02114、Pf01063、Pf01209、Pf02353、Pf08241、Pf08242、Pf08498、Pf12847、Pf03297、Pf00719、Pf00254、Pf00226、Pf00684、Pf01556、Pf00164、Pf00125、Pf00627、Pf01849、Pf00736、Pf01283、Pf01157、Pf00009、Pf03143、Pf03144、Pf05680、Pf00180、Pf04911、Pf00180、Pf01926、Pf06071、Pf00270、Pf00271、Pf00310、Pf00733、Pf00266、Pf01243、Pf10590、Pf00231、Pf00025、Pf00071、Pf00503、Pf01926、Pf04670、Pf08477、Pf09439、Pf01588、Pf01253、Pf00675、Pf02136、Pf00036、Pf00006、Pf00306、Pf02874、Pf00410、Pf01655、Pf00085、Pf01546、Pf00270、Pf00271、Pf04851、Pf00025、Pf00071、Pf00503、Pf01926、Pf08477、Pf09439、Pf00254、Pf00006、Pf00306、Pf02874、Pf04568、Pf00956、Pf00180、Pf00133、Pf01406、Pf08264、Pf09334、Pf00004、Pf00910、Pf01078、Pf02359、Pf02933、Pf05496、Pf05673、Pf06068、Pf07724、Pf07728、Pf00676、Pf12718、Pf01808、Pf02142、Pf02167、Pf11578、Pf00091、Pf03953、Pf01873、Pf02020、Pf00702、Pf01030、Pf00226、Pf00083、Pf07690、Pf00587、Pf02403、Pf02779、Pf02780、Pf01798、Pf08060、Pf08156、Pf00365、Pf00106、Pf01073、Pf01370、Pf07993、Pf08659、Pf00034、Pf00155、Pf01041、Pf01053、Pf00549、Pf01071、Pf08442、Pf00501、Pf11930、Pf03114、Pf10455、Pf01199、Pf00106、Pf00109、Pf01648、Pf02801、Pf00291、Pf00571、Pf01118、Pf02774、Pf08718、Pf01154、Pf08540、Pf00070、Pf07992、Pf00081、Pf02777、Pf00152、Pf01336、Pf01798、Pf08060、Pf08156、Pf10642、Pf00289、Pf00364、Pf00682、Pf02436、Pf02785、Pf02786、Pf07478、Pf00180、Pf09229、Pf01704、Pf00076、Pf00887、Pf00698、Pf01575、Pf03060、Pf08354、Pf05047、Pf00155、Pf01347、Pf00549、Pf02629、Pf00076、Pf08662、Pf00018、Pf00241、Pf07653、Pf00070、Pf01946、Pf07992、Pf01269、Pf00133、Pf08264、Pf09334、Pf00117、Pf00958、Pf02540、Pf03054、Pf06508、Pf07722、Pf02550、Pf00479、Pf02781、Pf00005、Pf03193、Pf12848、Pf00155、Pf00266、Pf01041、Pf01053、Pf01212、Pf02347、Pf03841、Pf00009、Pf03144、Pf09173、Pf00118、Pf01907、Pf00155、Pf00464、Pf04718、Pf00733、Pf00764、Pf03054、Pf06508、Pf10791、Pf00926、Pf04669、Pf01459、Pf00294、Pf01192、Pf04281、Pf00638、Pf01873、Pf01399、Pf00587、Pf02824、Pf03129、Pf07973、Pf01920、Pf00743、Pf07992、Pf00255、Pf00578、Pf08534、Pf03134、Pf02271、Pf00120、Pf03951、Pf00310、Pf01380、Pf09280、Pf01634、Pf08029、Pf09084、Pf00682、Pf00501、Pf00176、Pf00270、Pf00271、Pf00437、Pf00625、Pf00910、Pf05729、Pf00198、Pf00364、Pf02817、Pf00171、Pf00705、Pf02144、Pf02747、Pf01652、Pf00241、Pf00171、Pf03198、Pf07983、Pf03198、Pf07983、Pf04627、Pf01042、Pf00152、Pf01336、Pf00682、Pf08502、Pf01912、Pf00578、Pf08534、Pf10417、Pf00226、Pf01556、Pf01399、Pf09440、Pf00262、Pf00118、Pf00750、Pf03485、Pf05746、Pf00111、Pf00384、Pf09326、Pf10588、Pf01248、Pf00085、Pf00462、Pf00676、Pf02779、Pf00009、Pf00071、Pf02421、Pf08477、Pf05091、Pf00133、Pf08264、Pf09334、Pf10458、Pf01472、Pf01509、Pf08068、Pf00118、Pf01111、Pf00160、Pf00152、Pf01336、Pf00899、Pf02134、Pf09358、Pf10585、Pf00682、Pf04111、Pf00175、Pf00970、Pf08030、Pf03435、Pf00575、Pf07541、Pf00332、Pf01257、Pf00742、Pf03447、Pf01262、Pf05222、Pf00832、Pf12710、Pf01266、Pf01411、Pf02272、Pf07973、Pf00013、Pf01991、Pf06505、Pf00587、Pf03129、Pf01398、Pf11976、Pf09796、Pf00025、Pf00071、Pf04670、Pf08477、Pf01176、Pf00043、Pf00749、Pf03950、Pf02374、Pf06244、Pf02939、Pf00160、Pf00515、Pf07719、Pf00793、Pf00709、Pf00235、Pf02115、Pf00881、Pf11885、Pf02823、Pf00291、Pf10276、Pf00004、Pf00158、Pf06414、Pf07724、Pf07726、Pf07728、Pf01433、Pf00155、Pf00076、Pf00118、Pf01194、Pf00317、Pf02867、Pf03477、Pf03483、Pf03484、Pf00076、Pf12353、Pf02453、Pf05262、Pf00578、Pf08534、Pf01238、Pf01564、Pf01218、Pf00227、Pf10584、Pf00240、Pf00627、Pf11976、Pf00153、Pf00009、Pf00025、Pf00071、Pf04670、Pf08477、Pf09439、Pf00350、Pf01031、Pf02212、Pf00535、Pf00890、Pf02910、Pf00583、Pf00403、Pf12223、Pf02854、Pf12152、Pf00152、Pf00587、Pf01409、Pf00004、Pf01057、Pf01078、Pf06068、Pf07724、Pf07726、Pf07728、Pf00155、Pf00464、Pf01381、Pf08523、Pf12844、Pf00156、Pf00735、Pf01926、Pf03193、Pf00004、Pf01057、Pf01078、Pf05673、Pf06068、Pf07726、Pf07728、Pf00290、Pf00291、Pf01208、Pf01466、Pf03931、Pf08327、Pf09229、Pf00107、Pf08240、Pf03223、Pf12757、Pf09731、Pf00557、Pf01753、Pf02936、Pf01793、Pf00155、Pf00202、Pf00155、Pf00687、Pf00091、Pf03953、Pf08597、Pf00118、Pf00586、Pf01071、Pf02222、Pf02655、Pf02769、Pf02843、Pf02844、Pf08442、Pf00118、Pf00343、Pf03130、Pf00332、Pf00270、Pf00271、Pf00004、Pf05496、Pf06068、Pf06414、Pf01145、Pf00579、Pf00266、Pf01212、Pf01965、Pf00815、Pf01502、Pf01503、Pf00149、Pf00542、Pf00156、Pf03098、Pf00400、Pf03604、Pf00248、Pf00365、Pf04145、Pf00400、Pf00329、Pf01086、Pf00004、Pf00158、Pf02861、Pf07724、Pf07728、Pf10431、Pf00205、Pf02775、Pf02776、Pf00043、Pf02798、Pf01546、Pf00227、Pf10584、Pf00156、Pf00310、Pf00118、Pf01012、Pf01145、Pf00481、Pf00248、Pf00206、Pf10397、Pf01602、Pf08752、Pf00227、Pf10584、Pf00491、Pf00300、Pf05739、Pf00004、Pf03796、Pf06068、Pf00107、Pf08240、Pf00298、Pf03946、Pf01399、Pf04135、Pf00637、Pf03463、Pf03464、Pf03465、Pf02330、Pf08662、Pf01512、Pf10531、Pf10589、Pf10785、Pf12853、Pf00735、Pf03193、Pf04548、Pf00635、Pf00650、Pf03765、Pf02656、Pf04758、Pf00731、Pf02222、Pf02655、Pf07478、Pf00118、Pf00275、Pf00465、Pf01202、Pf01487、Pf01488、Pf01761、Pf08501、Pf07957、Pf04280、Pf01399、Pf08375、Pf05383、Pf00076、Pf05383、Pf00636、Pf01641、Pf03678、Pf00125、Pf00364、Pf02817、Pf00462、Pf00227、Pf10584、Pf00291、Pf00585、Pf01263、Pf01399、Pf05470、Pf00459、Pf01576、Pf05911、Pf12128、Pf12757、Pf01398、Pf00009、Pf01926、Pf03029、Pf08597、Pf11987、Pf00390及Pf03949。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括選自由以下組成之群的一或多種蛋白質:Adh1、Adh2、Cit2、Eno1、Eno2、Fba1、Hxk1、Hxk2、Icl1、Pdb1、Pdc1、Pfk1、Pgi1、Pgk1、Pyc1、Tal1、Tdh2、Tdh3、Tpi1、Efb1、Eft1、Eft2、Prt1、Rpa0、Tif1,2、Yef3、Hsc82、Hsp60、Hsp82、Hsp104、Kar2、Ssa1、Ssa2、Ssb1、Ssb2、Ssc1、Sse1、Sti1、Ade1、Ade3、Ade5,7、Arg4、Gdh1、Gln1、His4、Ilv5、Lys9、Met6、Pro2、Ser1、Trp5、Act1、Adk1、Ald6、Atp2、Bmh1、Bmh2、Cdc19、Cdc48、Cdc60、Erg20、Gpp1、Gsp1、Ipp1、Lcb1、Mol1、Pab1、Pma1、Psa1、Rnr4、Sam1、Sam2、Sod1、Uba1、YKL056、YLR109及YMR116。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括選自由以下組成之群的一或多種蛋白質:cspB、cspD、rp1L、rp1U、hag、rpsN、rp1D及yweA。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括一或多種選自由以下組成之群的蛋白質:hup、ptsH、dpsA、tuf、gapB、rp1X、malE及yhjA。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括一或多種選自由以下組成之群的蛋白質:uspA、tufa、yqiA、rp1E、lpp、rp1Y、gatB及rp1L。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括一或多種藉由選自由以下組成之群的SwissProt登錄編號標識的蛋白質:P00575、P06958、P00577、P02996、P04475、P02349、P06139、P09373、P02990、P17547、P22257、P06959、P06977、P11665、P14178、P02997、P00957、P00350、P07813、P23843、P00956、P08324、P08839、P02995、P07650、P03815、P09831、P05055、P00882、P00961、P07118、P09743、P10413、P60422、P02934、P00391、P30148、P04079、P36683、P12283、P06711、P00477、P02351、P0A8N3、P08177、P39184、P02384、P02354、P00968、P06981、P0A6T1、P07395、P08200、P27302、P62593、P03002、P09097、P11604、P16659、P15639、P00824、P02359、P00574、P60438、P00962、P62399、P15254、P07015、P26427、P23721、P00959、P00864、P02352、P03003、P39171、P62707、P39170、P15046、P02392、P17242、P00452、P14926、P00561、P25739、P00490、P02356、P76116、P04805、P00822、P00509、P23304、P07651、P32132、P30136、P17169、P21889、P08398、P61175、P00955、P08202、P08936、P29132、P06996、P04790、P04825、P03948、P02418、P09156、P15288、P32176、P00448、P33136、P08328、P02390、P17963、P22783、P02925、P60723、P02408、P08859、P09169、P13029、P16174、P25716、P04384、P21202、P02999、P30850、P33602、P35340、P05082、P08837、P37797、P02410、P22259、P07459、P10408、P22523、P02358、P09376、P45523、P00353、P06612、P33195、P08312、P24182、P12758、P17579、P00579、P07460、P61889、P25715、P60624、P09625、P23861、P22992、P33633、P07012、P17288、P27430、P60240、P02413、P37689、P32168、P00951、P08330、P18391、P21155、P07016、P13519、P21170、P06998、P02369、P02928、P02361、P11454、P06982、P02420、P77241、P31120、P36546、Q46829、P00954、P39172、P02426、P31216、P45577、P60906、P06138、P19673、P09372、P21513、P10177、P09151、P00891、P60785、P76177、P36938、P61517、P28691、P11457、P02428、P02419、P02416、P46837、P33599、P37747、P00913、P02931、P09546、P06971、P11096、P09157、P00934、P23480、P00960、P77482、P21346、P77349、P02364、P25665、P33138、P02375、P11875、P37095、P39435、P27827、P00479、P27248、P21599、P30867、P02363、P0A8N5、P22106、P04425、P37901、P02411、P02409、P39174、P02432、P39173、P10377、P25532、P31554、P02378、P24249、P30859、P03020、P37191、P37759、P23839、P77645、P33998、P76268、P02930、P24199、P02342、P14177、P07672、P23847、P63020、P08374、P08204、P27298、P02366、P24991、P05380、P17315、P21167、P21165、P23869、P31224、P17114、P76558、P15877、P19935、P07176、P61714、P10378、P24237、P60651、P77395、P17117、P24167、P06715、P37744、P02421、P25553、P24171、P05053、P03026、P08957、P00393、P02430、P27290、P02370、P04287、P23851、P00963、P17577、P39179、P10344、P09832、P07638、P76344、P00946、P38489、P45955、P05838、P75780、P23844、P31979、P00886、P11285、P07912、P25520、P00907、P02422、P18197、P26616、P07671、P52697、P02341、P39311、P33221、P39168、P00837、P22767、P19675、P05793、P62620、P02373、P45390、P00582、P77146、P30958、P24233、P05640、P16921、P07006、P30017、P00496、P31223、P36541、P02372、P76372、P31550、P39182、P11668、P21499、P77718、P10444、P19245、P02371、P08178、P18843、P45578、P21888、P22786、P02367、P23893、P23882、P11648、P51001、P02379、P10121、P05020、P24231、P02427、P60757、P15002、P31663、P19494、P08193、P37051、P02424、P13036、P02429、P00274、P15640、P02414、P36997、P0A6A6、P07004、P02435、P32164、P77310、P27252、P13652、P52643、P02436、P15277、P77804、P31057、P30139、P11028、P80063、P21774、P08622、P04951、P02374、P15716、P03017、P37648、P00923、P04422、P11557、P16456、P07906、P09159、P15048、Q46856、P39377、P14374、P06128、P29464、P60716、P00453、P37192、P76492、P45464、P23887、P00495、P45803、P33363、P30849、P04036、P18274、P28635、P77774、P46853、P25521、P14175、P36658、P39287、P78258、P77348、P30746、P29209、P24186、P26650、P23865、P05459、P15040、P30125、P25528、P30856、P36996、P08186、P02901、P33398、P39831、P18400、P23836、P20752、P29015、P04693、P00859、P02339、P36979、P60560、P0A6T3、P23858、P05825、P09424、P00831、P39330、P15047、P76153、P23853、P04816、P33598、P02998、P27251、P25714、P21892、P37754、P37329、P28909、P37187、P21590、P28302、P09029、P02937、P55741、P25662、P15039、P23863、P27851、P00370、P23932、P02905、P07019、P76002、P75876、P37688、P03025、P78083、P52065、P39406、P77258、P30744、P61316、P77254、P24253、P39811、P07005、P11026、P40874、P36540、P00478、P02437、P75789、P36766、P03844、P37010、P26428、P37190、P24250、P77438、P06984、P27434、P37749、P10384、Q57261、P15770、P00501、P24247、P77734、P12996、P42641、Q47130、P60546、P06129、P24223、P75838、P43675、P28694、P75902、P09375、P76403、P76658、P25529、P25516、P15034、P09200、P10902、P06995、P00547、P29210、P00583、P06613、P0A6W9、P75802、P28904、P31803、P25661、P27511、P30126、P00470、P30177、P17952、P10443、P37665、P36671、P76351、P36950、P09028、P00832、P06999、P23331、P07862、P09170、P40120、P80449、P77486、P14189、P06992、P05054、P75864、P09158、P61949、P62768、P07024、P23929、P75844、P07913、P37666、P00373、P04982、P03842、P76536、P07014、P13035、P36559、P76055、P36539、P09030、P21504、P36767、P39169、P08756、P42617、P32661、P37765、P23827、P04381、P52054、P20082、P09147、P06988、P76367、P46143、P05797、P77150、P06983、P25397、P18133、P75790、P16244、P08956、P37634、P43329、P24229、P06968、P75743、P28242、P18783、P27291、P30138、P45467、P06975、P46885、P39199、P10440、P25745、P40681、P25437、P33648、P37760、P75805、P00894、P77695、P00510、P31222、P09830、P31059、P05826、P76258、P76569、P18198、P46880、P30977、P07001、P45391、P13024、P13009、P33635、P24176、P31142、P17112、P60752、Q93K97、P11458、P08331、P37620、Q46828、P13000、P26615、P33644、P02917、P33918、P25888、P19934、P77338、P13685、P28225、P09997、P40718、P27828、P23830、P08188、P03812、P52647、P37667、Q46918、P00482、P18401、P32052、P03841、P62623、P46889、P27190、P37026、P11666、P39164、P46130、P30860、P37188、P76576、P33921、P31221、P37687、P12281、P76506、P25894、P00893、P03843、P25663、P45571、P77552、P52635、P30137、P76494、P39099、P24201、P20083、P46132、P76034、P39315、P09323、P37163、P07011、P31465、P39321、P05194、P77225、P32691、P37902、P09371、P77484、P23486、P39290、P76008、P32165、P19677、P76270、P45396、P75950、P77247、P75915、P32175、P05828、Q59384、P27306、P05848、P45748、P31133、P39396、P06986、P05796、P10740、P33570、P46473、P28690、P32130、P17993、P39177、P31664、P23911、P43671、P30848、P21338、Q46920、P77392、P61320、P23003、P39202、P45533、P15042、P30010、P02943、P32126、P26282、P46186、P38521、P09053、P00642、P25907、P00562、P17580、P09152、P17994、P76277、P76504、P75947、P37096、P37066、P52049、P02914、Q46933、P22333、P29217、P07020、P15298、P03807、P37631、P33597、P37347、P08367、P07002、P28304、P52061、P39356、P37308、Q46871、P15302、P00363、P75914、Q46948、P22563、P37345、P11056、P05791、P33601、P28633、P08373、P42550、P17113、P77202、P31218、P37175、P32157、P29679、P24178、P29680、P75736、P22188、P45389、P76290、P55139、P21645、P17448、P55253、P37440、P36564、P24245、P76370、P36995、P45799、P33636、P32105、Q46837、P23909、P78067、P21169、P08390、P30748、P16680、P36680、P41407、P76110、P23930、P28692、P16095、P03018、P15977、P21829、P09148、P05021、P23483、P31658、P45847、P39286、P46860、P40191、P37350、O65938、P32680、P12008、P27303、P03817、P46930、P21507、P77499、P76550、P52083、P37346、P33016、P09551、P24251、P25519、P11721、P27292、P00928、P17445、P43672、P33650、P24218、P07604、P39335、P28637、P29745、O69415、P71295、P11603、P76272、P32099、P77455、P45426、P15484、P15028、P08323、P00550、P02918、P30870、P76503、P24183、P36672、P23874、P03818、P02978、P33349、P75783、P33916、Q46863、P27848、P23199、P25533、P36768、P19641、P76423、P18393、P27841、P03019、P45580、P08660、P61887、P39401、P23894、P23884、P33643、P19674、P00811、P08179、P40717、P07085、P18390、P75849、P33031、P37189、P39323、P22938、P10346、P37647、P23089、P76187、P24285、P75823、P37745、P76426、P28861、Q46872、P75958、P02924、P60340、Q47622、P32174、P03033、P32703、P43781、P75949、P15050、P37349、P76316、P25738、P11288、P24203、P10957、P76015、P08203、P37354、P27838、P17109、P34086、P76141、P31220、P27550、P51024、P46131、P28248、P31680、P37606、Q46893、Q46868、P08244、P16528、P20099、P39903、P07003、P77293、P45756、P24213、P21516、P37692、P75745、P32695、P37194、P27829、P76495、P45529、P52124、P75968、P00844、P11027、P52084、P33220、P33362、P77605、P22255、P00926、P26648、P30854、P33129、P32050、P15272、P06149、P32177、P75957、P11349、P77674、P32678、P76036、P30858、P12610、P23870、P36879、P37904、P39347、P18196、P17443、P36929、P31546、P26646、P03004、P31828、P05792、P30178、P33353、P29011、P30855、Q00191、P77561、P76496、P77252、P32721、P08338、P18775、P37330、P33940、P76422、P07676、Q46841、P45535、P30846、P06964、P23282、P39833、P33226、P76017、P52052、P45471、P03021、P23917、P11880、P60472、P36565、P77624、P07762、P28689、P06716、P22256、P45802、Q52280、P75913、P46474、P19635、P09391、P15038、P22997、Q57154、P08577、P75874、P76146、P24181、P22763、P27850、P77239、P37005、Q46814、P37626、P77562、P39835、P76256、P77500、P24205、P06712、P09454、P11257、P75793、P42908、P31475、P76014。SwissProt登錄編號可在uniprot.org發現之UniProt蛋白質資料庫中搜尋,例如,檢索相應蛋白質之名稱及/或序列。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括含血基質之蛋白質。在一些實施例中,蛋白質組合物可包括一或多種選自由以下組成之群的蛋白質:雄性球蛋白、細胞球蛋白、球蛋白E、球蛋白X、球蛋白Y、血紅素、豆血紅素、黃素血紅素、地獄之門球蛋白I、肌球蛋白、擬血紅素、β 血紅素、α血紅素、原球蛋白、氰球蛋白、細胞球蛋白、組織球蛋白、神經球蛋白、血綠蛋白、截短血紅素 (例如HbN或HbO)、截短2/2球蛋白、血紅素3 (例如Glb3)、細胞色素或過氧化物酶。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括碳水化合物聚合物(例如,β-葡聚糖、糖原、黃原膠、木聚糖、結冷膠、凝膠多糖、瓊脂糖、葡聚糖、支鏈澱粉、磷壁酸、肽聚糖(例如,胞壁質)或核酸聚合物(例如,核糖體RNA (rRNA)、轉移RNA (tRNA)、信使RNA (mRNA)或基因組DNA)或其他生物聚合物。
在一些實施例中,蛋白質組合物可包括異源表現之蛋白質。在一些實施例中,異源表現之蛋白質可來自與宿主細胞不同的物種,例如來自真核生物、動物、植物、藻類、嗜熱生物、酵母、細菌、原生生物或古細菌。在一些實施例中,異源表現之蛋白質可為本文中所描述之任何蛋白質。在一些實施例中,異源表現之蛋白質可為含血基質之蛋白質。在一些實施例中,異源蛋白質具有作為生物催化劑、作為食品加工助劑、酶、作為風味增強劑、治療劑、甜味劑、藥物、營養品之功能活性。
如本文中所描述,在純化製程期間將pH維持在8.5與12.0之間可產生具有最低程度異味或異臭之蛋白質組合物,因此蛋白質之來源(例如,自其中純化蛋白質之微生物)為可鑑定的。在一些實施例中,此種蛋白質組合物為其作為一部分或添加其之食物產品提供最低程度之異味或異臭。在一些實施例中,可使用受過培訓之人類官能檢查員評定異味及異臭產生。評估可包括目視、感覺、咀嚼及/或品嘗蛋白質或用蛋白質製成之食物產品,以判斷外觀、色彩、完整性、質地、風味及口感等。可在不同的色光(例如,紅光或白光)下給官能檢查員提供樣品。可給樣品指定隨機三位數字並輪換投票位置以防止偏差。可要求官能檢查員以樣品盲式「四個一組」形式對兩組不同的樣品重複組進行正確配對(例如,A1、A2與B1、B2)。可要求官能檢查員以樣品盲式「六個一組」形式對兩組不同的樣品重複組進行正確配對(例如,A1、A2、A3與B1、B2、B3)。感覺判斷可根據「接受度」或「喜歡程度」或使用特殊術語進行定標。舉例而言,可使用字母標度(A為優良,B為良好,C為不良)或數字標度(1=厭惡,2=中等,3=良好;4=極好;5=優良)。標度可用於對測試產品之總體接受度或品質或諸如肉用牛體型、質地及風味之特定品質屬性進行分級。可使用特定感覺參考物(例如,「烤穀物」相對於市售穀物,或「發酵乳製品」相對於市售酸酪乳)來培訓官能檢查員。可給與官能檢查員機會評論各樣品,並鼓勵其在樣品之間用水漱口。
在一些實施例中,可基於嗅覺計讀數評定本文中所描述之蛋白質組合物或用此種蛋白質製造之食物產品。在各個實施例中,可使用嗅覺計來評定氣味濃度及氣味閾值、與參考氣體相比之氣味閾上、決定欣賞程度之喜好尺度評分或氣味之相對強度。在一些實施例中,嗅覺計允許對專家小組進行培訓及自動評估。
在一些實施例中,蛋白質組合物可用作生物催化劑。舉例而言,可將蛋白質組合物中所存在之酶的受質添加至組合物,並且可在培育之後,分離酶促反應之產物。在一些實施例中,可添加多種受質及輔因子以支持一或多種目標產物之產生。在一些實施例中,反應產物可為藥物、藥物中間物、風味化合物、輔因子、修飾之糖、胺基酸、單體或任何其他目標化合物。
在一些實施例中,蛋白質組合物可用於蛋白質活體外轉錄及轉譯。在一些實施例中,蛋白質組合物可用於蛋白質活體外轉譯。添加模板DNA、能量系統及胺基酸可產生目標蛋白質(參見例如最近之綜述,諸如Mini-review: In vitro Metabolic Engineering for Biomanufacturing of High-value Products Computational and Structural Biotechnology Journal, 2017, 第15卷, 161-167)。在一些實施例中,蛋白質組合物可用於使用活體外轉譯將非天然胺基酸併入蛋白質中。
在一些實施例中,蛋白質組合物(例如,藉由本文中所描述之方法產生)可包含總細胞蛋白。在一些實施例中,蛋白質組合物(例如,藉由本文中所描述之方法產生)可包含複數個蛋白質。舉例而言,蛋白質組合物可包含5種或更多(例如10、15、20、30、40、50、100、200、300、400或500)種不同的蛋白質。在一些實施例中,蛋白質組合物中至少25% (例如至少30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%)之蛋白質為功能性的,如本文中所描述。
食物產品
本文中所描述之任何蛋白質組合物皆可用作或用於一或多種食物產品。如本文中所描述之蛋白質組合物用於多種食物產品,包括例如蛋白質補充劑(例如,蛋白質粉或奶昔)、膳食替代品或烘焙食品,或者替代模擬動物衍生食物產品之食物產品(例如,乳製品仿製品(例如乳仿製品、乾酪仿製品)、蛋仿製品(例如蛋白仿製品、蛋黃仿製品、全蛋仿製品或炒蛋仿製品)或肉仿製品(諸如牛肉仿製品、雞肉仿製品、豬肉仿製品、魚仿製品、羊肉仿製品,其中任一者皆可呈碎肉仿製品形式)、整切仿製品(例如,烤肉仿製品、牛排仿製品、胸肉仿製品、雞翅仿製品、大腿仿製品、魚片仿製品或排骨仿製品)、器官仿製品或香腸仿製品)中之全部或部分動物蛋白質(例如,來自牛、豬、家禽、羔羊或魚)。在一些實施例中,蛋白質組合物可用作肉增量劑。
在一些實施例中,如本文中所描述之蛋白質組合物可具有最低程度異味或異臭,因此蛋白質之來源(亦即,純化蛋白質之微生物)不容易辨別並且給食物產品提供最低程度之異味或異臭。在一些實施例中,可使用受過培訓之人類官能檢查員評定異味及異臭產生。評估可包括目視、感覺、咀嚼及/或品嘗蛋白質或用蛋白質製成之食物產品,以判斷外觀、色彩、完整性、質地、風味及口感等。可在不同的色光(例如,紅光或白光)下給官能檢查員提供樣品。可給樣品指定隨機三位數字並輪換投票位置以防止偏差。感覺判斷可根據「接受度」或「喜歡程度」或使用特殊術語進行定標。舉例而言,可使用字母標度(A為優良,B為良好,C為不良)或數字標度(1=厭惡,2=中等,3=良好;4=極好;5=優良)。標度可用於對測試產品之總體接受度或品質或諸如肉用牛體型、質地及風味之特定品質屬性進行分級。可給與官能檢查員機會評論各樣品,並鼓勵其在樣品之間用水漱口。
在一些實施例中,可基於嗅覺計讀數評定本文中所描述之蛋白質組合物或用此種蛋白質製造之食物產品。在各個實施例中,可使用嗅覺計來評定氣味濃度及氣味閾值、與參考氣體相比之氣味閾上、決定欣賞程度之喜好尺度評分或氣味之相對強度。在一些實施例中,嗅覺計允許對專家小組進行培訓及自動評估。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可包含以乾重計至少約35% (例如至少約40%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%)大於約500 Da (例如,約1 kDa、2 kDa、3 kDa、5 kDa、10 kDa、30 kDa或50 kDa)之分子。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可包含以乾重計至少約35% (例如至少40%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%)介於約500 Da (例如,約1 kDa、2 kDa、3 kDa、5 kDa、10 kDa、30 kDa、或50 kDa)與約200 kDa (例如300 kDa、400 kDa或500 kDa)之間的分子。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物中至少約35% (例如至少40%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%)之多肽(亦稱為蛋白質)可落在約500 Da (例如,約1 kDa、2 kDa、3 kDa、5 kDa、10 kDa、30 kDa、或50 kDa)與約200 kDa (例如300 kDa、400 kDa或500 kDa)之間。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可不包括一或多種導致異臭或異味之小分子(例如,蛋白質組合物可不包含半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮、戊醛、3-甲基丁醛、3-甲基丁酸)。普通熟習此項技術者可使用例如GCMS確定樣品中小分子之總量或特定小分子之量。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可包含導致異臭或異味之分子(例如,半胱胺酸、1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸)。普通熟習此項技術者可使用例如GCMS確定樣品中特定小分子之量。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物之緩衝容量可小於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體(例如,小於約2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.5或0.1 mmol NaOH/公克乾固體)。緩衝容量可藉由對2% (w/v)懸浮液或溶液進行pH滴定,量測將懸浮液或溶液自pH 3.0調節至pH 12.0所需之NaOH之mmol來測定。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可呈溶液形式。在一些實施例中,蛋白質組合物可呈固體(例如經冷凍乾燥或噴霧乾燥之溶液)形式。在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可經巴氏滅菌。舉例而言,可藉由熱處理、高溫短時巴氏滅菌、脈衝電場、高壓巴氏滅菌、UV照射、γ照射或微濾對蛋白質組合物進行巴氏滅菌。在一些實施例中,一或多種抗微生物劑(例如聚離胺酸)可包括在本文中所描述之蛋白質組合物中。
在一些實施例中,本文中所描述之蛋白質組合物可用作生物催化劑。舉例而言,可將本文中所描述之蛋白質組合物中所存在之酶的受質添加至組合物,並且可在培育之後,分離酶促反應之產物。在一些實施例中,可添加多種受質及輔因子以支持一或多種目標產物之產生。在一些實施例中,反應產物可為藥物、藥物中間物、風味化合物、輔因子、修飾之糖、胺基酸、單體或任何其他目標化合物。
在一些實施例中,蛋白質組合物可用於蛋白質活體外轉錄及轉譯。在一些實施例中,蛋白質組合物可用於蛋白質活體外轉譯。添加模板DNA、能量系統及胺基酸產生了目標蛋白質(參見例如最近之綜述,諸如Mini-review:
In vitroMetabolic Engineering for Biomanufacturing of High-value Products Computational and Structural Biotechnology Journal, 2017, 第15卷, 161-167)。在一些實施例中,蛋白質組合物可用於使用活體外轉譯將非天然胺基酸併入蛋白質中。
本文中亦提供包括本文中所描述之任何蛋白質組合物的食物產品(有時亦稱為「食品」)、飲料及/或補充劑。本文中亦提供本文中所提供之任何蛋白質組合物用於食物產品、飲料或補充劑之用途。含有本文中所描述之任何蛋白質組合物之食物產品可用作調配多種其他食物產品,包括肉仿製品、湯料、燉料、點心、肉汁粉、肉汁塊、調味包或冷凍食物產品之基料。肉仿製品(有時亦稱為「肉替代品」)可調配為例如熱狗、漢堡、碎肉、香腸、牛排、魚片、器官(諸如肝臟、心臟、舌頭、腎臟、蜜餞等)、烤肉、胸肉、大腿、翅膀、肉丸、肉卷、培根、肉條、肋條、雞塊、肉餅或肉塊。
例示性食物產品描述於美國專利第10,039,306號、第9,700,067號及第9,011,949號;美國專利申請公開案第US20150305361A1號、第US20170172169A1號、第US20150289541A1號及第US20170188612A1號中,各案係以引用之方式整體併入。
在一些實施例中,食物產品可為蛋白質補充劑。舉例而言,在一些實施例中,如本文中所揭示之蛋白質組合物可為蛋白質粉之一部分,其可用於蛋白質奶昔、奶昔、烘焙及其類似物。
在一些實施例中,食物產品可包括肌肉仿製品。在一些實施例中,食物產品可為肉替代品。在一些實施例中,食物產品可包括脂肪仿製品。在一些實施例中,食物產品可包括肌肉仿製品及脂肪仿製品。在一些實施例中,包括肌肉仿製品及脂肪仿製品之食物產品亦可稱為肉仿製品。
在一些實施例中,食物產品可為乳製品仿製品。在一些實施例中,食物產品可為乾酪仿製品。在一些實施例中,食物產品可為乳仿製品。在一些實施例中,乳仿製品可用於製造乾酪仿製品。
在一些實施例中,食物產品可為蛋仿製品。在一些實施例中,食物產品可為全蛋仿製品(例如,蛋黃仿製品與蛋白仿製品分開)。在一些實施例中,食物產品可為蛋黃仿製品。在一些實施例中,食物產品可為蛋白仿製品。在一些實施例中,食物產品可為炒蛋仿製品(例如,蛋黃仿製品與蛋白仿製品之混合物)。
食物產品可包括一或多種蛋白質(例如,如本文中所描述之蛋白質組合物、市售蛋白質、藉由此項技術中已知的任何方法純化之蛋白質、或其組合)。在一些實施例中,食物產品可包括如本文中所描述之蛋白質組合物中之任一種。在一些實施例中,食物產品可包括如本文中所描述之任何蛋白質組合物以及市售蛋白質(例如,大豆濃縮蛋白、大豆分離蛋白、酪蛋白、乳清、小麥麵筋、蠶豆球蛋白或豌豆球蛋白)。在一些實施例中,食物產品可包括如本文中所描述之任何蛋白質組合物以及藉由此項技術中已知的任何方法純化之一或多種蛋白質。
一或多種蛋白質(例如,如本文中所描述之蛋白質組合物、市售蛋白質、藉由此項技術中已知的任何方法純化之蛋白質或其組合)可以重量計以約0.1%至約100% (例如,約0.1%至約1%、約1%至約5%、約5%至約10%、約1%至約10%、約10%至約20%、約20%至約30%、約30%至約40%、約40%至約50%、約50%至約60%、約60%至約70%、約70%至約80%、約80%至約90%、約90%至約100%、約10%至約30%、約30%至約50%、約50%至約70%、約70%至約90%、約0.1%至約20%、約20%至約40%、約40%至約60%、約60%至約80%、約80%至約100%、約0.1%至約33%、約33%至約66%、約66%至約100%、約0.1%至約50%、或約50%至約100%)之量存在於食物產品(例如,肉仿製品、牛肉樣食物產品、雞肉樣食物產品、豬肉樣食物產品、魚肉樣食物產品、牛肉食物產品、雞肉食物產品、豬肉食物產品或魚肉食物產品)中。
本文中所描述之任何食物產品皆可包括鐵錯合物(例如亞鐵葉綠素(例如,CAS編號69138-22-3)、去鎂葉綠素酸鐵(例如,CAS編號15664-29-6)、鐵鹽(例如硫酸鐵(例如,CAS編號7720-78-7、17375-41-6、7782-63-0或10028-22-5中之任一者)、葡糖酸鐵(例如,CAS編號299-29-6、22830-45-1或699014-53-4中之任一者)、檸檬酸鐵(例如,CAS編號3522-50-7、2338-05-8或207399-12-0中之任一者)、EDTA鐵(例如,CAS編號17099-81-9)或血基質部分,諸如血基質(例如,血基質A (例如,CAS編號18535-39-2)、血基質B (例如,CAS編號14875-96-8)、血基質C (例如,CAS編號26598-29-8)、血基質O (例如,CAS編號137397-56-9)、血基質I、血基質M、血基質D、血基質S)或含血基質之蛋白質)。舉例而言,血基質B之結構示於圖8中。
在一些實施例中,血基質部分係與作為含血基質之蛋白質的蛋白質或多肽非共價或共價結合的血基質。在一些實施例中,該蛋白質或多肽為球蛋白。在一些實施例中,球蛋白係選自由以下組成之群:雄性球蛋白、細胞球蛋白、球蛋白E、球蛋白X、球蛋白Y、血紅素、肌球蛋白、豆血紅素、黃素血紅素、β血紅素、α血紅素、原球蛋白、氰球蛋白、細胞球蛋白、組織球蛋白、神經球蛋白、血綠蛋白、截短血紅素、截短2/μ球蛋白及血紅素3。在一些實施例中,該蛋白質或多肽為非動物蛋白質或多肽。在一些實施例中,該蛋白質或多肽為植物、真菌、海藻、古細菌或細菌蛋白質。在一些實施例中,該蛋白質或多肽並非天然表現於植物、真菌、海藻、古細菌或細菌細胞中。在一些實施例中,該蛋白質或多肽包含與SEQ ID NO. 1-27中所示之多肽具有至少50%序列一致性(例如至少60%、70%、80%、90%或95%序列一致性)的胺基酸序列。
可用於本文中所描述之任何食物產品中之含血基質之蛋白質可來自於哺乳動物(例如農場動物,諸如母牛、山羊、綿羊、豬、公牛或兔)、鳥類、植物、藻類、真菌(例如酵母或絲狀真菌)、纖毛蟲或細菌。舉例而言,含血基質之蛋白質可來自於哺乳動物,諸如農場動物(例如母牛、山羊、綿羊、豬、公牛或兔),或者禽類,諸如火雞或雞。含血基質之蛋白質可來自於植物,諸如普通菸草(
Nicotiana tabacum)或林菸草(
Nicotiana sylvestris) (菸草);玉蜀黍(
Zea mays) (玉米)、擬南芥(
Arabidopsis thaliana);豆科植物,諸如黃豆(
Glycine max) (大豆)、鷹嘴豆(
Cicer arietinum) (回鶻豆或雞兒豆)、荷蘭豆(
Pisum sativum) (豌豆)品種,諸如青豆或糖豌豆;普通豆類之菜豆(
Phaseolus vulgaris)品種,諸如青豆、黑豆、四季豆、北方豆或斑豆、豇豆(
Vigna unguiculata)品種(米豆)、綠豆(
Vigna radiata) (菉豆(Mung beans))、白羽扇豆(
Lupinus albus) (羽扇豆)或紫苜蓿(
Medicago sativa) (紫花苜蓿);蕪菁甘藍(
Brassica napus) (芥菜);小麥屬(
Triticumsps.) (小麥,包括小麥粒及斯卑爾脫小麥(spelt));陸地棉(
Gossypium hirsutum) (棉花);秈稻(
Oryza sativa) (水稻);茭白屬(
Zizaniasps.) (野生稻米);向日葵(
Helianthus annuus) (葵花);根菾菜(
Beta vulgaris)(甜菜);貓尾粟(
Pennisetum glaucum) (珍珠粟);藜屬(
Chenopodiumsp.) (鵝腳藜);胡麻屬(
Sesamumsp.) (芝麻);山西胡麻(
Linum usitatissimum) (亞麻);或栽培大麥(
Hordeum vulgare) (大麥)。含血基質之蛋白質可自真菌分離,該等真菌為諸如釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、稻瘟病菌(
Magnaporthe oryzae)、禾穀鐮刀菌(
Fusarium graminearum)、米麯黴(
Aspergillus oryzae)、里氏木黴(
Trichoderma reesei)、嗜熱毀絲黴(
Myceliopthera thermophile)、乳酸克盧費氏酵母(
Kluyvera lactis)或尖孢鐮刀菌(
Fusarium oxysporum)。含血基質之蛋白質可自細菌分離,該等細菌為諸如大腸桿菌、枯草芽孢桿菌(
Bacillus subtilis)、地衣芽孢桿菌(
Bacillus licheniformis)、巨大芽孢桿菌(
Bacillus megaterium)、集胞藻屬(
Synechocistissp.)、超嗜熱菌(
Aquifex aeolicus)、極端嗜酸甲烷氧化細菌(
Methylacidiphilum infernorum)或嗜熱細菌,諸如嗜熱菌屬(
Thermophilus)。眾多含血基質之蛋白質的序列及結構為已知的。參見例如Reedy等人, Nucleic Acids Research, 2008, 第36卷, 資料庫期刊D307-D313及可在全球資訊網hemeprotein.info/heme.php上獲得之血基質蛋白資料庫。
舉例而言,非共生血紅素可來自於選自由以下組成之群的植物:大豆、萌芽大豆、紫花苜蓿、金色亞麻、黑豆、黑眼豆、北方豆、鷹嘴豆、綠豆、米豆、斑豆、莢豌豆、鵝腳藜、芝麻、向日葵、小麥粒、斯卑爾脫小麥、大麥、野生稻米或水稻。
本文中所描述之可用於生產食物產品之任何含血基質之蛋白質可與含有血基質結合基元之相應野生型含血基質之蛋白質或其片段之胺基酸序列具有至少70% (例如,至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%)序列一致性。舉例而言,含血基質之蛋白質可與包括非共生血紅素之胺基酸序列具有至少70%序列一致性,諸如來自綠豆(SEQ ID NO:1)、栽培大麥(SEQ ID NO:5)、玉蜀黍(SEQ ID NO: 13)、粳稻(
Oryza sativa subsp.japonica) (水稻) (SEQ ID NO:14)或擬南芥(SEQ ID NO:15)之非共生血紅素;地獄之門球蛋白I,諸如來自極端嗜酸甲烷氧化細菌者(SEQ ID NO:2);黃素血紅蛋白,諸如來自超嗜熱菌者(SEQ ID NO:3);豆血紅素,諸如來自黃豆(SEQ ID NO:4)、荷蘭豆(SEQ ID NO:16)或豇豆(SEQ ID NO:17)之豆血紅素;血基質依賴性過氧化物酶,諸如來自稻瘟病菌(SEQ ID NO:6)或尖孢鐮刀菌(SEQ ID NO:7)之血基質依賴性過氧化物酶;來自禾穀鐮刀菌之細胞色素c過氧化物酶(SEQ ID NO:8)、來自莫氏衣藻(
Chlamydomonas moewusii)之截短血紅素(SEQ ID NO:9)、梨形四膜蟲(
Tetrahymena pyriformis) (SEQ ID NO:10,I組截短型)、草履蟲(
Paramecium caudatum) (SEQ ID NO:11,I組截短型)、來自黑麯黴(
Aspergillus niger)之血紅素(SEQ ID NO:12);或哺乳動物肌球蛋白,諸如黃牛(
Bos taurus) (SEQ ID NO:18)肌球蛋白、野豬(
Sus scrofa) (SEQ ID NO:19)肌球蛋白、家馬(
Equus caballus) (SEQ ID NO:20)肌球蛋白;來自本氏菸草(
Nicotiana benthamiana) (SEQ ID NO:21)、枯草芽孢桿菌(SEQ ID NO:22)、麩胺酸棒狀桿菌(SEQ ID NO:23)、集胞藻屬(
Synechocystissp.) PCC6803 (SEQ ID NO:24)、聚球藻屬(
Synechococcussp.) PCC 7335 (SEQ ID NO:25)、念珠藻屬群落(
Nostoc commune) (SEQ ID NO:26)或巨大芽孢桿菌(SEQ ID NO:27)之血基質蛋白。
可如下決定兩個胺基酸序列之間的一致性百分比。首先,使用來自含有BLASTP第2.0.14版之BLASTZ獨立版本之BLAST 2序列(Bl2seq)程式來比對胺基酸序列。可自Fish & Richardson之網站(例如fr.com/blast/)或美國政府之國立生物技術資訊中心網站(ncbi.nlm.nih.gov)獲得此BLASTZ獨立版本。可在BLASTZ之隨附讀我檔案中發現闡明如何使用Bl2seq程式之說明。Bl2seq使用BLASTP算法在兩個胺基酸序列之間進行比較。為了比較兩個胺基酸序列,如下設定Bl2seq之選項:-i設定為含有欲比較之第一胺基酸序列之檔案(例如,C:\seq1.txt);-j設定為含有欲比較之第二胺基酸序列之檔案(例如,C:\seq2.txt);-p設定為blastp;-o設定為任何所要檔案名(例如,C:\output.txt);且所有其他選項皆保留其預設值。舉例而言,可使用以下命令產生含有兩個胺基酸序列之間的比較的輸出檔案:C:\Bl2seq -i c:\seq1.txt -j c:\seq2.txt -p blastp -o c:\output.txt。若兩個比較序列具有同源性,則指定輸出檔案會將彼等同源性區域呈現為對準序列。若兩個比較序列不具有同源性,則指定輸出檔案將不呈現對準序列。對於核酸序列,可遵循類似程序,但使用blastn。
一旦對準後,便藉由計算兩個序列中所存在之一致胺基酸殘基之位置數來決定匹配數。藉由將匹配數除以全長多肽胺基酸序列之長度,繼而將所得值乘以100來決定一致性百分比。應注意,一致性百分比值可四捨五入至最接近之十分位。舉例而言,78.11、78.12、78.13及78.14向下四捨五入至78.1,而78.15、78.16、78.17、78.18及78.19向上四捨五入至78.2。亦應注意,長度值將始終為整數。
應瞭解,許多核酸可編碼具有特定胺基酸序列之多肽。遺傳密碼之簡並在此項技術中為眾所周知的;亦即,對於許多胺基酸,有不超過一個核苷酸三聯體充當該胺基酸之密碼子。舉例而言,可使用特定物種(例如細菌或真菌)之適當密碼子偏移表來修飾指定酶之編碼序列中之密碼子,以便在該物種中獲得最佳表現。
在一些實施例中,含血基質之蛋白質可自生產生物體中提取(例如,自動物組織或植物、真菌、藻類或細菌生物質,或者自分泌蛋白質之培養物上清液提取)或自生產生物體之組合(例如,多個植物物種)提取。豆血紅素容易作為商品豆類作物(例如大豆、紫花苜蓿或豌豆)之無用副產品而獲得。在美國,此等作物根部之豆血紅素之量超過了美國所有食用紅肉之肌球蛋白含量。
在一些實施例中,含血基質之蛋白質之提取物包括來自源材料(例如,其他動物、植物、真菌、藻類或細菌蛋白質)或來自源材料之組合(例如,不同的動物、植物、真菌、藻類或細菌)的一或多種非含血基質之蛋白質。舉例而言,含血基質之蛋白質可為如本文中所描述之蛋白質組合物之一部分。
在一些實施例中,含血基質之蛋白質可呈不作為如本文中所描述之蛋白質組合物之一部分的形式提供於食物產品中。在一些實施例中,含血基質之蛋白質可藉由此項技術中已知的任何方法來純化。
蛋白質可基於其分子量進行分離,例如,藉由粒徑排阻層析法、經膜超濾或密度離心。在一些實施例中,蛋白質可基於其表面電荷進行分離,例如,藉由等電沉澱、陰離子交換層析或陽離子交換層析。蛋白質亦可基於其溶解度進行分離,例如藉由硫酸銨沉澱、等電沉澱、表面活性劑、清潔劑或溶劑萃取。蛋白質亦可藉由其對另一分子之親和力進行分離,例如使用疏水性相互作用層析、活性染料或羥基磷灰石。親和層析亦可包括使用對蛋白質(例如,含血基質之蛋白質)具有特異性結合親和力之抗體、針對His標籤化重組蛋白之鎳NTA、結合糖蛋白上之糖部分的凝集素,或特異性結合該蛋白質之其他分子。
含血基質之蛋白質亦可使用多肽表現技術(例如,使用細菌細胞、昆蟲細胞、真菌細胞(諸如酵母)、植物細胞(諸如菸草、大豆或擬南芥)或哺乳動物細胞之異源表現技術)重組產生。在一些情況下,可使用標準多肽合成技術(例如液相多肽合成技術或固相多肽合成技術)來合成產生含血基質之蛋白質。在一些情況下,可使用活體外轉錄-轉譯技術來產生含血基質之蛋白質。
在一些實施例中,含血基質之蛋白質可為如本文中所描述之總細胞蛋白質組合物之一部分。
含血基質之蛋白質可存在於食物產品中(例如,乳製品仿製品、乾酪仿製品、蛋仿製品、肉仿製品、牛肉樣食物產品、雞肉樣食物產品、豬肉樣食物產品、魚肉樣食物產品、牛肉食物產品、雞肉食物產品、豬肉食物產品或魚肉食物產品),其量為約0.005%至約5% (wt含血基質之蛋白質/wt食物產品) (例如,約0.005%至約0.01%、約0.01%至約0.1%、約0.1%至約0.5%、約0.5%至約1%、約1%至約2%、約2%至約3%、約3%至約4%、約4%至約5%、約1%至約3%、約3%至約5%或約1%至約5% (wt/wt))。在一些實施例中,含血基質之蛋白質可為非動物含血基質之蛋白質。在一些實施例中,含血基質之蛋白質可為藻類、細菌、真菌、植物或古細菌含血基質之蛋白質。
血基質可存在於食物產品中(例如,乳製品仿製品、乾酪仿製品、蛋仿製品、肉仿製品、牛肉樣食物產品、雞肉樣食物產品、豬肉樣食物產品、魚肉樣食物產品、牛肉食物產品、雞肉食物產品、豬肉食物產品或魚肉食物產品),其量為約0.00005%至約2% (wt血基質/wt食物產品) (例如,約0.00005%至約0.0001%、約0.0001%至約0.0005%、約0.0005%至約0.001%、約0.001%至約0.005%、約0.005%至約0.01%、約0.01%至約0.05%、約0.05%至約0.1%、約0.1%至約0.5%、約0.5%至約1%、約0.1%至約0.2%、約0.2%至約0.4%、約0.4%至約0.6%、約0.6%至約0.8%、約0.8%至約1%、約1%至約2%、約1.0%至約1.2%、約1.2%至約1.4%、約1.4%至約1.6%、約1.6%至約1.8%、或約1.8%至約2.0% (wt/wt))。
本文中所描述之食物產品可不含或實質上不含一些類型之動物產品(例如,動物含血基質之蛋白質或所有動物產品)。
在一些實施例中,食物產品可實質上不含大豆、實質上不含小麥、實質上不含酵母、實質上不含MSG、實質上不含蛋白質水解產物、不含大豆、不含小麥、不含酵母、不含MSG及/或不含蛋白質水解產物,且可嘗到肉味、非常可口且無異臭或異味。
在一些實施例中,食物產品可包括一或多種風味前驅物。適合之風味前驅物包括糖、糖醇、糖衍生物、油類(例如植物油)、游離脂肪酸、α醇酸、二羧酸、胺基酸及其衍生物、核苷、核苷酸、維生素、肽、蛋白質水解物、提取物、磷脂、卵磷脂及有機分子。此種風味前驅物之非限制性實例提供於表1中。
表1
風味前驅物分子
糖、糖醇、糖酸及糖衍生物:葡萄糖、果糖、核糖、蔗糖、阿拉伯糖、6-磷酸葡萄糖、6-磷酸果糖、1,6-二磷酸果糖、肌醇、麥芽糖、糖蜜、麥芽糊精、糖原、半乳糖、乳糖、核糖醇、葡糖酸、葡糖醛酸、直鏈澱粉、支鏈澱粉、甘油及/或木糖 |
油類:椰子油、芒果油、葵花油、棉籽油、紅花油、米糠油、可可脂、棕櫚果油、棕櫚油、大豆油、芥花油、玉米油、芝麻油、核桃油、亞麻籽、荷荷芭油、蓖麻、葡萄籽油、花生油、橄欖油、海藻油及/或來自細菌或真菌之油 |
游離脂肪酸:辛酸、羊脂酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、α亞麻酸、γ亞麻酸、花生酸、花生四烯酸、蘿酸及/或芥子酸 |
胺基酸及其衍生物:半胱胺酸、胱胺酸、半胱胺酸亞碸、蒜素、硒代半胱胺酸、甲硫胺酸、麥角組織胺基硫、異白胺酸、白胺酸、離胺酸、苯丙胺酸、蘇胺酸、色胺酸、5-羥基色胺酸、纈胺酸、精胺酸、組胺酸、丙胺酸、天冬醯胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、甘胺酸、脯胺酸、絲胺酸及/或酪胺酸 |
核苷及核苷酸:肌苷、單磷酸肌苷(IMP)、鳥苷、單磷酸鳥苷(GMP)、腺苷及/或單磷酸腺苷(AMP) |
維生素:硫胺、維生素C、維生素D、維生素B6及/或維生素E |
雜項:磷脂、卵磷脂、吡嗪、肌酸、肉鹼及/或焦磷酸鹽酯 |
酸:乙酸;α醇酸,諸如乳酸或乙醇酸;三羧酸,諸如檸檬酸;二羧酸,諸如琥珀酸及/或酒石酸 |
肽及蛋白質水解物:麩胱甘肽、肌肽、甲肌肽、植物蛋白水解物、大豆蛋白水解物、酵母蛋白水解物、藻類蛋白水解物及/或肉蛋白水解物 |
提取物:麥芽提取物、酵母提取物及/或蛋白腖 |
本文中所描述之食物產品可以各種方式包裝,包括密封在個別封包或搖動器中,使得該組合物可在烹飪之前或期間撒或散佈在食物產品頂部。
本文中所描述之食物產品可包括其他成分,包括食品級油,諸如芥花油、玉米油、葵花油、大豆油、橄欖油或椰子油;調味劑,諸如食用鹽(例如氯化鈉或氯化鉀)或草本植物(例如迷迭香、百里香、羅勒、鼠尾草或薄荷);風味劑;蛋白質(例如大豆分離蛋白、小麥明膠、豌豆球蛋白及/或豌豆豆球蛋白)、蛋白質濃縮物(例如大豆濃縮蛋白)、乳化劑(例如卵磷脂)、膠凝劑(例如,k-角叉菜膠或明膠)、纖維(例如,竹纖維或菊粉)或無機物(例如,碘、鋅及/或鈣)。
本文中所描述之食物產品亦可包括天然著色劑,諸如薑黃或甜菜汁,或人工著色劑,諸如偶氮染料、三苯甲烷、氧雜蒽、奎寧、靛藍、二氧化鈦、3號紅、40號紅、1號藍或5號黃。
本文中所描述之食物產品亦可包括肉貨架壽命延長劑,諸如一氧化碳、亞硝酸鹽、焦亞硫酸鈉、Bombal、維生素E、迷迭香提取物、綠茶提取物、兒茶素及其他抗氧化劑。
在一些實施例中,包括血基質、風味前驅物或其組合之食物產品在烹調時可增加一或多種(例如,2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多種)與肉樣香氣相關之揮發性化合物。與肉樣香氣相關之揮發性化合物之非限制性實例提供於所附附錄1中,其中每一者皆與肉香相關,諸如牛肉、雞肉或豬肉之香氣,如所列參考文獻所支持。在一些實施例中,烹調如本文中所描述之任何食物產品可增加選自由以下組成之群的一或多種(例如,2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20或更多種)揮發性化合物的產生:(E)-2-癸烯醛、(E)-2-庚烯醛、(E)-2-壬烯醛、(E)-2-辛烯-1-醇、(E)-2-辛烯醛、(E)-3-戊烯-2-酮、(E,E)-2,4-己二烯醛、1-(2-呋喃基)-乙酮、1-(乙醯氧基)-2-丙酮、1-庚醇、1-己醇、1-辛醇、1-戊烯-3-酮、1-十一醇、2,3-二甲基-吡嗪、2,3-己二酮、2,4-二甲基-噻唑、2,5-二甲基-吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2-乙醯基-1-吡咯啉、2-乙醯基噻唑、2-丁醇、2-丁酮、2-丁烯醛、2-庚酮、2-羥基-苯甲醛、2-甲基-2(E)-丁烯醛、2-甲基-3-呋喃硫醇、2-甲基-丁醛、2-甲基-丙醛、2-甲基-噻唑、2-正丁基呋喃、2-戊基-呋喃、2-丙烯醛、2-十一酮、3-乙基-吡啶、3-甲基-2-丁烯醛、3-甲基-3-丁烯-2-酮、3-甲基-丁醛、3-甲基-己烷、3-甲基-噻吩、4-戊烯醛、5-甲基-2-噻吩甲醛、6-甲基-5-庚烯-2-酮、乙醛、丙酮、苯乙酮、苯甲醛、苯乙醛、雙(2-甲基-3-呋喃基)二硫化物、二甲基二硫化物、二甲基三硫化物、十二醛、E-2-十一烯醛、乙基吡嗪、呋喃、糠醛、庚醛、己醛、甲硫丙醛、甲基硫雜丙環、丙硫醇、吡嗪、吡啶、十四烷、四氫-2H-吡喃-2-酮及三甲基-吡嗪。
本文中所描述之食物產品可包括脂質(亦稱為脂肪)組分。脂質可經分離及/或純化,且可呈三酸甘油酯、單酸甘油酯、二酸甘油酯、游離脂肪酸、神經鞘胺醇、糖脂、磷脂或油,或者此種脂質之組裝體(例如膜、卵磷脂、溶血卵磷脂或大量水相中含有少量脂質之脂肪滴)的形式。在一些實施例中,脂質來源為獲自非動物來源之油(例如,獲自植物、藻類、諸如酵母或絲狀真菌之真菌、海草、細菌或古細菌之油),包括經基因工程改造之細菌、藻類、古細菌或真菌。植物油之非限制性實例包括玉米油、橄欖油、大豆油、花生油、核桃油、杏仁油、芝麻油、棉籽油、菜籽油、芥花油、紅花油、葵花油、亞麻籽油、棕櫚油、棕櫚仁油、椰子油、巴巴蘇油、牛油樹油、芒果油、可可脂、小麥胚芽油或米糠油;或人造黃油。油可為氫化(例如,氫化植物油)或非氫化的。
在一些實施例中,脂質可為三酸甘油酯、單酸甘油酯、二酸甘油酯、游離脂肪酸、神經鞘胺醇、糖脂、卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂(諸如磷脂酸、溶血磷脂酸、磷脂醯膽鹼、磷脂醯肌醇、磷脂醯乙醇胺或磷脂醯絲胺酸);神經鞘脂質,諸如鞘磷脂或神經醯胺;甾醇,諸如豆甾醇、穀甾醇、菜油甾醇、芸苔甾醇、穀甾醇、菜油甾烷醇、麥角甾醇、酵母甾醇、糞甾醇、二甾醇、羊毛甾醇、膽固醇或表甾醇;脂質醯胺,諸如N-棕櫚醯脯胺酸、N-硬脂醯甘胺酸、N-棕櫚醯甘胺酸、N-花生四烯醯甘胺酸、N-棕櫚醯牛磺酸、N-花生四烯醯組胺酸或大麻素;游離脂肪酸,諸如棕櫚油酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸、肉豆蔻油酸、己酸、癸酸、辛酸、壬酸、十一酸、亞油酸(C18:2)、二十酸(C22:0) 、花生四烯酸(C20:4)、二十碳五烯酸(C20:5)、二十二碳五烯酸(C22:5)、二十二碳六烯酸(C22:6)、芥酸(C22:1)、共軛亞油酸、亞麻酸(C18:3)、油酸(C18:1)、反油酸(油酸之反式異構體)、反式十八烯酸(C18:1反式11)或共軛油酸;或者此種脂肪酸之酯,包括此種脂肪酸之單醯基甘油酯、二醯基甘油酯及三醯基甘油酯。
脂質可包含磷脂、脂質醯胺、甾醇或中性脂質。磷脂可包含複數個包含脂肪酸、甘油及極性基團之兩性分子。在一些實施例中,極性基團為例如膽鹼、乙醇胺、絲胺酸、磷酸酯、3-磷酸甘油、肌醇或磷酸肌醇。在一些實施例中,脂質為例如神經鞘脂質、神經醯胺、鞘磷脂、腦苷脂、神經節苷脂、醚脂質、縮醛磷脂或聚乙二醇化脂質。
在一些實施例中,脂肪可以重量計以約0.1%至約95% (例如約0.1%至約1%、約1%至約5%、約5%至約10%、約1%至約10%、約10%至約20%、約20%至約30%、約30%至約40%、約40%至約50%、約50%至約60%、約60%至約70%、約70%至約80%、約80%至約90%、約90%至約95%、約10%至約30%、約30%至約50%、約50%至約70%、約70%至約90%、約0.1%至約20%、約20%至約40%、約40%至約60%、約60%至約80%、約80%至約95%、約0.1%至約33%、約33%至約66%、約66%至約95%、約0.1%至約50%、或約50%至約95%)之量存在於食物產品(例如,肉仿製品、牛肉樣食物產品、雞肉樣食物產品、豬肉樣食物產品、魚肉樣食物產品、牛肉食物產品、雞肉食物產品、豬肉食物產品或魚肉食物產品)中。
在一些實施例中,脂肪可呈脂肪仿製品形式存在於食物產品中。
食物產品可包括黏合劑或基於碳水化合物之凝膠。在一些實施例中,基於碳水化合物之凝膠可包括在黏合劑中。以重量計,黏合劑可為食物產品之約2%至約10%。黏合劑可包括一或多種已經化學或酶促修飾以改良其質地及/或風味性質或者改變其變性及膠凝溫度之蛋白質。基於碳水化合物之凝膠可含有甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、瓜爾膠、刺槐豆膠、黃原膠、瓊脂、果膠、角叉菜膠、蒟蒻、藻酸鹽、化學改質之瓊脂糖或其混合物。黏合劑可包括卵白蛋白或膠原蛋白。
在某些實施例中,本發明提供了決定消耗品擔任食物產品仿製品之適合性的方法,例如,藉由決定動物或人類是否可區分該消耗品與判定食物產品(例如特定的肉)。決定消耗品是否與食物產品(例如肉)相當之一種方法為a)定義肉之性質及b)決定消耗品是否具有類似性質。
可測試或用於比較或描述食物產品之性質包括機械性質,諸如硬度、內聚性、脆性、咀嚼性、膠黏性、黏度、彈性及黏附性。可測試之食物產品性質亦包括幾何性質,諸如粒度及形狀,以及粒子形狀及取向。亦可測試粒子之三維組織。其他性質可包括水分含量及脂肪含量。此等性質可使用諸多術語來描述,諸如用於描述硬度之「柔軟」、「堅實」或「堅硬」;用於描述內聚性之「易碎」、「鬆脆」、「脆」、「耐嚼」、「嫩」、「堅韌」、「短」、「粉狀」、「糊狀」或「黏性」;用於描述黏度之「稀薄」或「黏稠」;用於描述彈性之「塑性」或「彈性」;用於描述黏附性之「黏性」、「膠黏」或「黏糊」;用於描述粒子形狀及大小之「砂礫狀」、「粒狀」或「粗粒狀」;用於描述粒子形狀及取向之「纖維狀」、「多孔狀」或「結晶狀」;用於描述水分含量之「乾」、「潮濕」、「濕」或「水樣」;或用於描述脂肪含量之「油性」或「油膩」。因此,在一些實施例中,可要求一群人根據描述參考食物產品之性質對某一參考食物產品(例如碎牛肉)進行分級。本文中所描述之食物產品可由相同的人分級以決定等價。
亦可評定本發明之食物產品之風味。可根據與參考食品之相似性對風味進行分級,例如,「蛋味」、「魚味」、「黃油味」、「巧克力味」、「水果味」、「胡椒味」、「培根味」、「乳油味」、「乳味」或「牛肉味」。風味可根據七種基味進行分級,亦即,甜、酸、苦、咸、鮮味(原味)、刺激性(或辛辣)及金屬味。風味可根據與由化學物質引起之體驗的相似性來描述,例如,二乙醯(黃油味)、3-羥基-2-丁酮(黃油味)、壬-2E-烯醛(脂肪味)、1-辛烯-3-醇(蘑菇味)、己酸(汗味)、4-羥基-5-甲基呋喃酮(HMF,肉味)、吡嗪(堅果味)、雙(2-甲基-3-呋喃基)二硫化物(烤肉味)、癸酮(黴味/果味)、乙酸異戊酯(香蕉味)、苯甲醛(苦杏仁味)、肉桂醛(肉桂味)、丙酸乙酯(果味)、鄰胺基苯甲酸甲酯(葡萄味)、檸檬烯(橙味)、癸二烯酸乙酯(梨味)、己酸烯丙酯(菠蘿味)、乙基麥芽酚(糖、棉花糖)、乙基香蘭素(香草味)、丁酸(腐臭味)、12-甲基十三烷醛(牛肉味)或水楊酸甲酯(冬青味)。此等分級可用作參考食物產品性質之指示。隨後可將本發明之食物產品與參考食物產品進行比較以決定該食物產品與參考食物產品之相似程度。在一些實施例中,隨後改變本發明之食物產品之性質以使本發明之食物產品與參考食物產品更相似。因此,在一些實施例中,根據人類評估,本發明食物產品之分級與參考食物產品相似。在一些實施例中,人類無法區分本發明之食物產品與參考食物產品。
在一些實施例中,被要求鑑別本發明之食物產品之受試者可將其鑑定為參考食物產品之一種形式,或鑑定為特定參考食物產品,例如,受試者將本發明之食物產品鑑定為肉。舉例而言,在一些實施例中,人類可將本發明之食物產品鑑定為具有與肉等效之性質。在一些實施例中,根據人類之感知,本發明食物產品之一或多種性質與肉之相應性質等效。此種性質包括可測試之性質。在一些實施例中,人類將本發明之食物產品鑑定為比此項技術中所發現之任何肉仿製品更像肉。
實驗可證明本發明之食物產品對消費者為可接受的。可使用專門小組來篩檢本文中所描述之各種消耗品。許多人類官能檢查員可測試多種食物產品樣品,亦即,天然肉對比本文中所描述之食物產品,或肉替代品對比本文中所描述之可消耗組合物。諸如脂肪含量之變數可使用瘦肉與肥肉混合物標準化例如至20%脂肪。脂肪含量可使用Babcock測肉方法測定(S. S. Nielson, Introduction to the Chemical Analysis of Foods (Jones & Bartlett Publishers, Boston, 1994))。可調配根據本文中所描述之程序製備之碎牛肉與本發明食物產品之混合物。
在開放消費者固定樣本中,可在紅光或白光下給官能檢查員提供樣品(例如,在小室中)。可給樣品指定隨機三位數字並輪換投票位置以防止偏差。可要求官能檢查員使用1=極其厭惡至9=極其喜歡之喜好尺度來評估樣品之柔軟性、多汁性、質地、風味及總體可接受性,其中中值5=既不喜歡亦不厭惡。可鼓勵官能檢查員在樣品之間用水漱口,並給與機會評論各樣品。
此實驗之結果可指示傳統肉類與本發明之食物產品之間的顯著差異或相似性。
此等結果可證明本文中所描述之食物產品被判斷為可接受地等效於真肉製品。另外,此等結果可證明與其他市售肉替代品相比,官能檢查員更偏好本文中所描述之食物產品。因而,在一些實施例中,本發明提供與傳統肉類相似且比先前已知的肉替代品更像肉的食物產品。
本發明之食物產品亦可具有與食物產品,例如傳統肉類相似的物理特徵。在一個實施例中,用固定直徑鋼棒刺穿由本發明之食物產品製成之1吋厚結構(例如,肉餅)所需之力與用類似固定直徑鋼棒刺穿1吋厚類似食物產品結構(例如,碎牛肉餅)所需之力無顯著不同。因此,本發明提供具有與肉相似之物理強度特徵的食物產品。在另一實施例中,撕裂橫截面積為100 mm
2之本發明食物產品樣品所需之力與用相同方式量測之撕裂橫截面積為100 mm
2之動物組織樣品(肌肉、脂肪或結締組織)所需之力無顯著不同。可使用例如TA.XT Plus質地分析儀(Textrue Technologies Corp.)來量測力。因此,本發明提供具有與肉相似之物理強度特徵的食物產品。
本文中所描述之食物產品可具有與食物產品(例如肉)相似的烹飪損耗特徵。舉例而言,本發明之食物產品可具有與碎牛肉相似的脂肪及蛋白質含量,且在烹飪時具有與真碎牛肉相同的尺寸減小。對於與各種肉匹配之本文中所描述之食物產品之各種組成,可達成尺寸損耗概況之相似性。本文中所描述之食物產品之烹飪損耗特徵亦可經工程改造而優於食物產品。舉例而言,可產生在烹飪期間損耗較少但達成與烹飪產品相似之味道及質地品質的本文中所描述之食物產品。一種方式,此可藉由基於熔融溫度改變本發明之食物產品中之脂質比例來達成。另一方式,此可藉由以控制蛋白質濃度改變食物產品之蛋白質組成或藉由形成組織仿製品之機制來達成。
在一些實施例中,基於嗅覺計讀數將本發明之食物產品與參考食物產品(例如,基於動物之食物產品(例如,肉))進行比較。在一些實施例中,可使用嗅覺計來評定氣味濃度及氣味閾值、與參考氣體相比之氣味閾上、決定欣賞程度之喜好尺度評分或氣味之相對強度。在一些實施例中,嗅覺計允許對專家小組進行培訓及自動評估。因此,在一些實施例中,本發明之食物產品為引起與參考食物產品相似或相同之嗅覺計讀數的食物產品。在一些實施例中,差異足夠小以至低於人類感知之偵測閾值。
氣相層析-質譜(GCMS)為一種組合氣相-液相層析及質譜之特徵來分離並鑑定測試樣品內之不同物質的方法。在一些實施例中,可使用GCMS評估本發明之食物產品之性質。舉例而言,可自肉周圍之頂部空間分離揮發性化學物質。可使用GCMS鑑定此等化學物質。從而可產生肉周圍之頂部空間中揮發性化學物質之概況。在一些實施例中,可進一步評估GCMS之各峰。舉例而言,人類可對嗅到負責某一峰之化學物質之體驗進行分級。此資訊可用於對概況進行進一步精化。隨後可使用GCMS評估消耗品之性質。可使用GCMS概況對消耗品進行精化。
特徵風味及芳香組分主要由化學反應分子(包括植物以及肉中發現之胺基酸、脂肪及糖)在烹飪過程中產生。因此,在一些實施例中,測試本發明之食物產品在烹飪期間或之後與肉的相似性。在一些實施例中,使用人類分級、人類評估、嗅覺計讀數或GCMS量測或其組合產生參考食物產品(例如烹飪過之肉)的嗅覺圖。類似地,可產生本發明之食物產品(例如肉仿製品)之嗅覺圖。可比較此等圖以評定烹飪過之消耗品與肉的相似程度。在一些實施例中,本發明之食物產品在烹飪期間或之後的嗅覺圖與烹飪過或烹飪中之肉的嗅覺圖相似或無法區分。在一些實施例中,相似性足以超過人類感知之偵測閾值。在一些實施例中,可製造本發明之食物產品,使其特徵與烹飪之後的參考食物產品類似,但未烹飪之本發明之食物產品可具有與烹飪前之參考食物產品不同的性質。
在一些實施例中,食物產品可為乳製品仿製品(亦稱為非乳製品)。
在一個態樣中,本發明提供一種可用作製備非乳製乾酪之起始材料的非乳製乾酪源。術語「非乳製乾酪源」係指包含蛋白質(例如,包括如本文中所描述之蛋白質組合物、市售蛋白質或藉由此項技術中已知的任何方法純化之蛋白質,或其組合)及脂肪之乳液,其中該等蛋白質及脂肪係由非乳製品源製備。
在一些實施例中,非乳製乾酪源可為乳仿製品(亦稱為非乳製乳)。在一些實施例中,可使用乳仿製品製造乾酪仿製品(亦稱為非乳製乾酪)。
在一些實施例中,非乳製乳為包含一或多種蛋白質(例如,如本文中所描述之蛋白質組合物、市售蛋白質、藉由此項技術中已知的任何方法純化之蛋白質,或其組合)及一或多種脂肪的乳液。在一些實施例中,蛋白質包含在蛋白質溶液中。溶液可包含EDTA (0 - 0.1M)、NaCl (0-1M)、KCl (0-1M)、NaSO
4(0 - 0.2M)、磷酸鉀(0-1M)、檸檬酸鈉(0-1M)、碳酸鈉(0-1M)、蔗糖(0-50%)、尿素(0-2M)或其任何組合。溶液可具有3至11之pH。在一些實施例中,一或多種蛋白質佔該蛋白質溶液之蛋白質含量之0.1%、0.2%、0.5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或更多。在一些實施例中,一或多種蛋白質佔該蛋白質溶液之蛋白質含量之0.1-5%、1-10%、5-20%、10-40%、30-60%、40-80%、50-90%、60-95%或70-100%。在一些實施例中,蛋白質溶液之總蛋白質含量為約0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.75%、1%、1.5%、2%、5%、7.5%、10%、12.5%、15%、17.5%、20%或多於20%重量/體積。在一些實施例中,蛋白質溶液之總蛋白質含量為0.1-5%、1-10%、5-20%或多於20%重量/體積。
在一些實施例中,使用此項技術中已知的任何方法來濃縮蛋白質。蛋白質可濃縮2倍、五倍、10倍或高達100倍。蛋白質可濃縮至0.001-1%、0.05-2%、0.1-5%、1-10%、2-15%、4-20%或多於20%之最終濃度。例示性方法包括例如超濾(或切向流過濾)、凍乾、噴霧乾燥或薄膜蒸發。
在一些實施例中,用於製備乳液之脂肪可來自於多種來源。在一些實施例中,該等來源可為非動物來源(例如,獲自植物、藻類、諸如酵母或絲狀真菌之真菌、海草、細菌或古細菌之油),包括經基因工程改造之細菌、藻類、古細菌或真菌。油可為氫化(例如,氫化植物油)或非氫化的。植物油之非限制性實例包括玉米油、橄欖油、大豆油、花生油、核桃油、杏仁油、芝麻油、棉籽油、菜籽油、芥花油、紅花油、葵花油、亞麻籽油、棕櫚油、棕櫚仁油、椰子油、巴巴蘇油、牛油樹油、芒果油、可可脂、小麥胚芽油或米糠油;或人造黃油。
在一些實施例中,脂肪可為三酸甘油酯、單酸甘油酯、二酸甘油酯、神經鞘胺醇、糖脂、卵磷脂、溶血卵磷脂、磷脂(諸如磷脂酸、溶血磷脂酸、磷脂醯膽鹼、磷脂醯肌醇、磷脂醯乙醇胺或磷脂醯絲胺酸);神經鞘脂質,諸如鞘磷脂或神經醯胺;甾醇,諸如豆甾醇、穀甾醇、菜油甾醇、芸苔甾醇、穀甾醇、菜油甾烷醇、麥角甾醇、酵母甾醇、糞甾醇、二甾醇、羊毛甾醇、膽固醇或表甾醇;游離脂肪酸,諸如棕櫚油酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸、肉豆蔻油酸、己酸、癸酸、辛酸、壬酸、十一酸、亞油酸(C18:2)、二十酸(C22:0) 、花生四烯酸(C20:4)、二十碳五烯酸(C20:5)、二十二碳五烯酸(C22:5)、二十二碳六烯酸(C22:6)、芥酸(C22:1)、共軛亞油酸、亞麻酸(C18:3)、油酸(C18:1)、反油酸(油酸之反式異構體)、反式十八烯酸(C18:1反式11)或共軛油酸;或者此種脂肪酸之酯,包括此種脂肪酸之單醯基甘油酯、二醯基甘油酯及三醯基甘油酯。
脂肪可包含磷脂、甾醇或脂質。磷脂可包含複數個包含脂肪酸(例如,參見上文)、甘油及極性基團之兩性分子。在一些實施例中,極性基團為例如膽鹼、乙醇胺、絲胺酸、磷酸酯、3-磷酸甘油、肌醇或磷酸肌醇。在一些實施例中,脂質為例如神經鞘脂質、神經醯胺、鞘磷脂、腦苷脂、神經節苷脂、醚脂質、縮醛磷脂或聚乙二醇化脂質。
在一些實施例中,藉由製備包含一或多種蛋白質之溶液、混合該溶液與一或多種脂肪從而產生該乳液來製備乳液。蛋白質溶液與脂肪之比率可為約1:10、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1或10:1。蛋白質溶液與脂肪之比率可為約10:1至1:2、1:4至2:1、1:1至4:1或2:1至10:1。乳液可用作用於製備非乳製乾酪之非乳製乳。僅作為實例,以重量/重量或重量/體積計,可向蛋白質溶液添加0%-50%脂肪。
風味化合物可由微生物在用於製造本文中所描述之許多不同非乳製品(包括乾酪仿製品)之非動物衍生材料中產生。調味方法通常包括使非乳製乳或蛋白質溶液與一或多種微生物接觸,以及由非乳製乳製備培養非乳製產品。微生物(諸如細菌、酵母或黴菌)可用於製造具有所要風味概況之產品或用作產品中之風味組分,因為細菌可在中性、植物或豆類產品中產生所要風味(例如,黃油味、乳油味、乳製品味或乾酪味)。
例示性非乳製乳描述於本文中。任何非乳製乾酪乳或其組合可與一或多種微生物(例如受控量之細菌)接觸以控制所得培養非乳製品(諸如乾酪仿製品)之風味。在一些實施例中,微生物可選自細菌、酵母或黴菌。在一些實施例中,細菌可包含嗜溫及/或嗜熱細菌。在一些實施例中,細菌可包含來自市售菌酛之細菌。例示性市售菌酛描述於本文中。
仿製品中之風味產生可藉由使用一或多種微生物,例如一或多種細菌、酵母或黴菌來控制,包括但不限於仿製品中之風味產生可藉由使用一或多種微生物,例如一或多種細菌、酵母或黴菌來控制,包括但不限於乳球菌屬(
Lactococcus)物種,諸如乳酸乳球菌(
Lactococcus lactis lactis) (LLL,單獨或作為市售混合物MA11之組分使用)、乳脂乳球菌(
Lactococcus lactis cremoris) (LLC,單獨或作為市售混合物MA11之組分使用使用)或乳酸乳球菌丁二酮變種(
Lactococcus lactis biovar diacetylactis) (LLBD,通常用作市售培養物MD88);乳桿菌屬(
Lactobacillus)物種,諸如德氏乳桿菌乳酸亞種(
Lactobacillus delbrueckii lactis)、保加利亞德氏乳桿菌(
Lactobacillus delbrueckii bulgaricus)、瑞士乳桿菌(
Lactobacillus helveticus)、植物乳桿菌(
Lactobacillus plantarum)、乾酪乳桿菌(
Lactobacillus casei)或鼠李糖乳桿菌(
Lactobacillus rhamnosus);明串珠菌屬(
Leuconostocaceae)物種,諸如腸膜明串珠菌乳脂亞種(
Leuconostoc mesenteroides cremoris) (LM);鏈球菌屬(
Streptococcus)物種,諸如嗜熱鏈球菌(
Streptococcus thermophiles) (ST,通常用作市售培養物TA61);小球菌屬(
Pediococcus)物種,諸如戊糖片球菌(
Pediococcus pentosaceus);梭菌屬(
Clostridium)物種,諸如丁酸梭菌(
Clostridium butyricum);葡萄球菌屬(
Staphylococcus)物種,諸如木糖葡萄球菌(
Staphylococcus xylosus) (SX);短桿菌屬(
Brevibacterium)物種,諸如亞麻短桿菌(
Brevibacterium linens);丙酸桿菌屬(
Propioniibacteria)物種;青黴屬(
Penicillium)物種,諸如白青黴(
Penicillium candidum)、沙門柏青黴(
Penicillium camemberti)或婁地青黴(
Penicillium roqueforti);德巴利酵母屬(
Debaryomyces)物種,諸如漢遜德巴利酵母(
Debaryomyces hansenii);地黴屬(
Geotrichum)物種,諸如白地黴(
Geotrichum candidum);棒狀桿菌屬(
Corynebacteria)物種;輪枝孢菌屬(
Verticillium)物種,例如蠟蚧輪枝菌(
Verticillium lecanii);克盧費氏酵母屬(
Kluyveromyces)物種,諸如乳酸克盧費氏酵母(
Kluyveromyces lactis);酵母菌屬(
Saccharomyces)物種,諸如釀酒酵母(
Saccharomyces cerevisiae);假絲酵母屬(
Candida)物種,諸如傑佛氏假絲酵母(
Candida jefer)或高蛋白假絲酵母(
Candida utilis);紅冬孢酵母屬(
Rhodosporidum)物種,諸如脆紅冬孢酵母(
Rhodosporidum infirmominiatum);微球菌屬(
Micrococcus)物種;嗜鹽單胞菌屬(
Halomonas)物種;嗜冷桿菌屬(
Psychrobacter)物種。在一些實施例中,使用乳酸細菌,諸如乳桿菌屬、明串珠菌屬、小球菌屬、乳球菌屬或鏈球菌屬。在一些實施例中,細菌不包括嗜酸乳桿菌菌株。在一些實施例中,可使用諸如釀酒酵母、乳酸克盧費氏酵母及/或漢遜德巴利酵母之酵母。在一些實施例中,黴菌可為白青黴、沙門柏青黴、婁地青黴、白地黴或其組合。
在一些實施例中,使用以下微生物中之一或多種:戊糖片球菌、丁酸梭菌、德氏乳桿菌乳酸亞種、保加利亞德氏乳桿菌、瑞士乳桿菌、植物乳桿菌、乾酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、木糖葡萄球菌及亞麻短桿菌。
在一些實施例中,非乳製乾酪源可與一或多種微生物(例如,單獨細菌、酵母或黴菌)或者與兩種或更多種微生物(例如,兩種不同的細菌、兩種不同的酵母、兩種不同的黴菌、細菌及酵母、細菌及黴菌,或酵母及黴菌)一起培養。當使用兩種或更多種微生物時,該等微生物可共培養或順序培養,亦即,一種微生物可在添加另一微生物之前培養一段時間。用於仿製品中風味產生之特定良好組合與SX繼之以TA61或MD88或者與MA11共培養之MD88一起預培養。
微生物之生長條件亦可控制仿製品中之風味產生。在4°C至45°C範圍內之微生物生長溫度可控制仿製品中產生之風味化合物之量及類型。藉由振盪(例如0至300 rpm)之通氣量可改變非乳製品培養基中許多不同細菌之風味產生。培養過程中由SX、TA61或MD88導致之更多通氣可產生更多所要乾酪及黃油味化合物。通氣亦可減少一些非所要風味化合物。當SX、MD88或TA61在通氣條件下培養時,諸如2-庚酮之所要乾酪化合物會增加。亦可藉由通氣調節MD88在乾酪仿製品中產生己酸甲酯。在豆乳中培養期間增加SX通氣可增加3-甲基及2-甲基丁酸產生,並且可減少乾酪仿製品中諸如2-乙基呋喃或2-戊基呋喃之不合需要之芳族化合物之量。
培養一或多種微生物之時間之量亦可調節風味化合物之量及類型。在一些實施例中,培養可在1小時至多天之範圍內。在一些實施例中,將一或多種微生物及非乳製乳共同培育1分鐘至60分鐘、0.5至5小時、3至10小時、6至15小時、10至20小時、或超過20小時之持續時間。在一些實施例中,大部分黃油味化合物在前10小時內產生,而其他乾酪化合物可在24至48小時或更長時間內形成。僅在豆乳中培養20小時之後,MD88及MA11方可在非乳製培養基(例如非乳製乾酪源或乳仿製品)中產生丁內酯,其為乳油狀乳白色化合物。
在一些實施例中,亦可以不同的接種量,例如10
2-10
9cfu/mL乃至更大量添加一或多種微生物。細菌培養之生長階段(亦即,穩定期對比指數期)及細胞密度會影響培養基之風味化合物概況。較高接種量之菌酛培養物可保護仿製品免受不需要之微生物污染(例如,細菌污染)。因此,通常使用10
6-10
9cfu/mL之接種量。
一或多種微生物之風味產生亦可藉由引導代謝途徑,例如藉由調節其氮源、碳源、其他可用營養物及生長條件來調節。
在一些實施例中,將一或多種微生物、非乳製乾酪源及一或多種可用於改變風味之可選成分(例如,糖、脂肪、碳水化合物、維生素、有機酸、核苷酸或食物產品)共同培育足夠長之時間段以達到所要pH。pH可在pH 3-5、4-6或4.3-5.7之範圍內。所要pH可為pH 6或更低、pH 5或更低、或者pH 4或更低。在一些情況下,藉由細菌培養該物質使pH降至6.5、6、5.5、5、4.5、4或3.5,而在其他情況下,產生風味而不改變pH。與乳球菌屬、乳桿菌屬、明串珠菌屬、小球菌屬及/或鏈球菌屬一起培養通常使大部分起始物質之pH降低,而與葡萄球菌屬、短桿菌屬及/或梭菌屬一起培養通常對pH影響很小或無影響。
在一些實施例中,一或多種酶可單獨或與所描述之培養方法及添加劑中之任一者組合使用以幫助調節風味、質地及/或熔融概況,包括使非乳製乾酪源與一或多種酶接觸。在一些實施例中,可在固化之前、在固化之後但在排出乳清之前、或在排出乳清之後添加一或多種酶。令人驚訝地,添加痕量一或多種酶(例如,蛋白酶、脂肪酶及/或澱粉酶)可增強所得非乳製乾酪仿製品之質地、風味及/或熔融性,如藉由盲式評味試驗或藉由以例如GCMS偵測揮發性氣味劑所測定。使用此種酶亦可影響微生物培養物之風味產生(例如,當豆乳用澱粉酶預處理時,TA61產生更多丁二酮)。
在一些實施例中,該酶為天冬胺酸蛋白酶。
在特定實施例中,蛋白酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、AO蛋白酶、無花果蛋白酶、凝乳酶、來自灰色鏈黴菌(
Streptomyces griseus)之XXI型蛋白酶、來自地衣芽孢桿菌之蛋白酶、來自米麯黴之蛋白酶、來自解澱粉芽孢桿菌(
Bacillus amyloliquefaciens)之蛋白酶、來自佐氏麯黴(
Aspergillus saitoi)之蛋白酶、來自祿剛嗜熱芽孢桿菌(
Bacillus thermoproteolyticus rokko)之嗜熱菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶A、X型蛋白酶或XIII型真菌蛋白酶。
在一些實施例中,該酶為脂肪酶。
以重量或體積計,所添加之酶可佔非乳製乾酪源之0.00001-0.005%、0.001-0.01%、0.01-0.1%、0.05-1%、0.1-2%或0.5-5%。在一些實施例中,以重量或體積計,所添加之酶可佔非乳製乾酪源之0.00001-0.1%。
在一些實施例中,該蛋白酶為木瓜蛋白酶。在一些實施例中,向非乳製乾酪源添加0.001-0.01%木瓜蛋白酶。在一些實施例中,藉由加熱/冷卻方法使添加蛋白酶之蛋白質溶液固化。在一些實施例中,添加木瓜蛋白酶改良了所得乾酪仿製品之柔軟性及乳油味。
一種方法可包括向非乳製乾酪源添加一或多種脂肪以產生乳液。
僅作為實例,一些非乳製乾酪仿製品可藉由向非乳製乾酪源添加0%-50%脂肪以產生乳液,隨後藉由蛋白質變性(例如藉由加熱)使乳液固化來製備。在一些實施例中,在固化之前或固化之後添加一或多種脂肪。在一些實施例中,在固化之後及排出乳清之後添加一或多種脂肪。僅作為其他實例,一些由蛋白質變性製成之乾酪仿製品在藉由變性固化之後添加0%至50%脂肪,或在排出乳清之後添加0%至50%脂肪。在一些實施例中,在藉由蛋白質變性或交聯形成凝膠之後,可排出乳清以增加乾酪仿製品中之總脂肪,對乾酪進行進一步排出及老化可降低水分含量,從而增加乾酪仿製品之總脂肪。
在一些實施例中,向酶交聯凝膠添加5-20%不飽和脂肪可增加凝膠之堅實性。
在一些實施例中,添加5%至50%飽和脂肪可增加乾酪仿製品之堅實性。
在另一態樣中,本發明提供乾酪仿製品及其製造方法。在一些實施例中,該方法包括使非乳製乾酪源(例如非乳製乳)固化(例如藉由形成凝膠)。在一些實施例中,非乳製乳在該固化之後能夠保持形狀。有許多方式可使非乳製乾酪源固化,包括使用酶、熱變性、形成冷凝膠、形成凝聚層、液體分離、酸、離子強度變化、高壓加工、溶劑、離液劑或如此部分中所描述之二硫鍵還原劑。
酶(或化學物質)可用於使非動物(例如基於植物)蛋白質或非乳製乾酪源在有或無乳化脂肪或油、糖及培養物之情況下交聯。所得交聯乾酪仿製品可添加或未添加細菌培養物,且添加時機可為在交聯步驟前後。在一些實施例中,固化涉及使非乳製乾酪源中之組分(例如,多肽,本文中亦稱為蛋白質)交聯的過程。在一些實施例中,交聯包括使非乳製乾酪源與交聯酶接觸,從而在多肽鏈之間產生交聯。在一些實施例中,交聯酶可為轉麩醯胺酸酶、酪胺酸酶、脂肪氧化酶、蛋白質二硫鍵還原酶、蛋白質二硫鍵異構酶、巰基氧化酶、過氧化物酶、己糖氧化酶、離胺醯氧化酶或胺氧化酶。
在一些實施例中,交聯酶為轉麩醯胺酸酶。轉麩醯胺酸酶為催化遊離胺與麩醯胺酸之γ-羧基之間形成共價鍵,從而將蛋白質連接在一起的酶家族。舉例而言,轉麩醯胺酸酶催化例如蛋白質或肽中之離胺酸與蛋白質或肽麩醯胺酸殘基之γ-羧醯胺基團交聯。由轉麩醯胺酸酶形成之共價鍵可展現對蛋白水解降解之高抵抗力。
許多類型之轉麩醯胺酸酶可用於本發明之各個實施例中。可接受之交聯用轉麩醯胺酸酶包括但不限於茂原鏈黴菌(
Streptoverticillium mobaraense)轉麩醯胺酸酶、與茂原鏈黴菌轉麩醯胺酸酶類似之酶、其他微生物轉麩醯胺酸酶、由基因工程改造之細菌、真菌或藻類產生之轉麩醯胺酸酶、因子XIII (纖維蛋白穩定因子)、角質細胞轉麩醯胺酸酶(TGM1)、組織轉麩醯胺酸酶(TGM2)、表皮轉麩醯胺酸酶(TGM3)、前列腺轉麩醯胺酸酶(TGM4)、TGM X (TGM5)、TGM Y (TGM6)、TGM Z (TGM7)或離胺醯氧化酶。
添加培養物之時機、培養物之類型及培養物之量可改變乳液之pH,且因此改變轉麩醯胺酸酶之活性及乾酪之最終質地。此外,利用添加酸或鹼來改變溶液之pH以及乳液之總體緩衝容量可改變乾酪仿製品之交聯能力及最終質地。
在一些實施例中,本發明提供一種包含非乳製乳及茂原鏈黴菌轉麩醯胺酸酶、與茂原鏈黴菌轉麩醯胺酸酶類似之酶、其他微生物轉麩醯胺酸酶、由基因工程改造之細菌、真菌或藻類產生之轉麩醯胺酸酶、因子XIII (纖維蛋白穩定因子)、角質細胞轉麩醯胺酸酶(TGM1)、組織轉麩醯胺酸酶(TGM2)、表皮轉麩醯胺酸酶(TGM3)、前列腺轉麩醯胺酸酶(TGM4)、TGM X (TGM5)、TGM Y (TGM6)及/或TGM Z (TGM7)之組合物。在一些實施例中,交聯用酶並非因子XIII (纖維蛋白穩定因子)、角質細胞轉麩醯胺酸酶(TGM1)、組織轉麩醯胺酸酶(TGM2)、表皮轉麩醯胺酸酶(TGM3)、前列腺轉麩醯胺酸酶(TGM4)、TGM X (TGM5) 、TGM Y (TGM6)、TGM Z (TGM7)或離胺醯氧化酶。
轉麩醯胺酸酶可藉由以工業量進行茂原鏈黴菌發酵來生產或者自動物組織提取。另外,本發明之轉麩醯胺酸酶(TGM)可自細菌或真菌分離,在細菌或真菌中由合成或選殖之基因表現。在一些特定實施例中,轉麩醯胺酸酶獲自商業來源,例如呈來自Ajinomoto Food Ingredients LLC之Activa™形式。
在一些實施例中,以重量/體積計,以介於0.0000001-0.001%、0.0001-0.1%、0.001-0.05%、0.1-2%、0.5-4%或大於4%之量添加轉麩醯胺酸酶。在一些實施例中,以大於0.1%且至多10%之量添加轉麩醯胺酸酶。
在一些實施例中,藉由轉麩醯胺酸酶交聯可在10-30°C、20-60°C、30-70°C或50-100°C範圍內之溫度下進行。轉麩醯胺酸酶交聯可發生10分鐘至24小時。
在一些實施例中,每1 mL非乳製乳添加介於0.1與20單位(U)之間的轉麩醯胺酸酶。在一些實施例中,每1 mL非乳製乳添加約0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、5、7、10、15或20 U轉麩醯胺酸酶。在一些實施例中,添加轉麩醯胺酸酶之後,加熱培育例如在100℉水浴中發生。加熱培育可在針對酶功能最佳化之溫度下進行。在一些實施例中,溫度為約65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120或125℉。在一些實施例中,酶促交聯不包括使非乳製乾酪源與麩醯胺酸酶及轉麩醯胺酸酶接觸。轉麩醯胺酸酶交聯已在室溫及至多65°C下進行10分鐘至24小時。
在一些實施例中,固化包括誘導蛋白變性。在一些實施例中,藉由加熱混合物,繼而冷卻該混合物來誘導變性。在一些實施例中,藉由將混合物加熱至介於30-35、32-40、37-45、40-50、45-55、50-60、55-65、60-70、65-75、70-80、75-85、80-95、90-100°C或100°C以上之間的溫度來誘導變性。在一些實施例中,藉由將混合物加熱約10-20、15-30、25-40、30-50、40-70秒或約1-3、2-5、3-8或5-20分鐘來誘導變性。在一些實施例中,加熱之後允許混合物冷卻。舉例而言,蛋白質(例如,如本文中所揭示之蛋白質組合物、市售蛋白質、藉由此項技術中已知的任何方法純化之蛋白質、純化或分餾之植物蛋白質,諸如來自豌豆、綠豆、大豆、RuBisCO或其組合),較佳在>1%濃度下,可用濃度為0.1-60%之油(諸如芥花油、葵花油、棕櫚油或來自諸如向日葵之種子的油體)進行均質化。乳液可經受熱-冷循環,其中將其加熱至45-100°C之溫度後持續5-60分鐘,隨後冷卻至低於30°C (例如20-25°C)。所得凝膠可在≤30°C之溫度下培育,較佳2至16小時,隨後經紗布排出。排出之凝乳即時可成形及老化,或藉由加熱或壓製進行進一步處理。
酸、離子強度變化、高壓處理、溶劑、離液劑或二硫鍵還原劑可用於使非乳製乾酪源中之蛋白質變性。在一些實施例中,向非乳製乾酪源添加尿素以形成凝乳。
在一些實施例中,固化導致形成固體凝乳及乳清(形成凝乳之後剩餘之所得液體)。在一些實施例中,分離凝乳與乳清。
在一些實施例中,固化包括兩種或更多種方法之組合。舉例而言,固化可包括使蛋白質交聯及藉由加熱繼而冷卻使其變性。舉例而言,冷固化凝膠可與轉麩醯胺酸酶交聯以產生更堅實之凝膠,或者與其他蛋白質,諸如大豆、豌豆豆球蛋白、豌豆白蛋白、來自雞兒豆及小扁豆之粗蛋白質級分或物質(例如脂肪或豌豆蛋白凝聚層)組合以增加堅實度及/或熔融性。
在另一態樣中,本發明提供對培養之非乳製品,包括酸乳油、鮮乳油、酸酪乳或乾酪仿製品進行調味之方法。在一些實施例中,該方法包括將含一或多種風味添加劑及/或一或多種本文中所描述之個別微生物菌株之測試非乳製品之風味特徵概況與不含該等添加劑及/或個別微生物菌株之對照非乳製品之風味特徵概況相比較。非乳製品(例如乾酪仿製品)之質地及風味概況可藉由此項技術中已知的或本文中所描述的任何方法來確定。確定風味及質地之例示性方法可為藉由評味試驗,例如盲式評味試驗,或使用氣相層析-質譜(GCMS)。
GCMS為一種組合氣相-液相層析及質譜之特徵以鑑定測試樣品內之不同物質的方法。在一些實施例中,GCMS可用於評估乳製乾酪及乾酪仿製品之性質。舉例而言,可自乳製乾酪或乾酪仿製品周圍之頂部空間偵測到揮發性化學物質。可使用GCMS鑑定此等化學物質。從而產生乾酪周圍之頂部空間中揮發性化學物質之概況。在一些實施例中,可進一步評估GCMS之各峰。舉例而言,人類可對嗅到負責某一峰之化學物質之體驗進行分級。此資訊可用於對概況進行進一步精化。隨後可使用GCMS評估乾酪仿製品之性質。可使用GCMS對乾酪仿製品進行精化。在一些實施例中,乾酪仿製品具有與乳制乾酪類似之GCMS概況。在一些實施例中,乾酪仿製品具有與乳制乾酪相同之GCMS概況。
乳製仿製品之風味概況可藉由一或多種風味特徵之存在及/或強度來表徵。例示性風味特徵包括但不限於黃油味、果味、堅果味、乳製品味、乳味、乾酪味、脂肪味、果味、菠蘿味、蠟味、黃油味、香豆味、深色水果味、柑橘味、酸味、香蕉味、甜味、苦味、黴味、花香、山羊香、汗味、木香、泥土香、蘑菇香、麥芽香、香辛味、梨香、青草香、香脂香、刺激性、油香、玫瑰香、脂肪香、乳油糖果香、橙香、松樹香、康乃馨香、甜瓜香、菠蘿香、香草香、大蒜香、草本香、木香、肉桂、芸香、酸乳酪、桃、香草、山楂及草本植物。風味特徵可能與一或多種揮發性化合物之釋放相關。風味概況可藉由一或多種風味特徵不存在或強度降低來表徵。例示性風味特徵包括植物味、豆味、大豆味、青草味、蔬菜味、堅果味、垢味及酸味。
例示性揮發性化合物包括例如γ-壬酸內酯、γ-十一酸內酯、γ-癸內酯、δ-十四酸內酯、S-甲基硫代丙酸酯、δ-十三酸內酯、δ-十四酸內酯、δ-十四酸內酯、丁醯乳酸丁酯、2,3-己二酮、己酸甲酯、丁內酯、丙酸、2-甲基丙酸、甲基異丁基酮、γ辛內酯、δ辛內酯、γ壬內酯、5-羥基-4-辛酮、2-乙基-1-己醇、辛烷、乙醇、2,3-丁二酮、2-庚酮、1-丁醇、乙醯乙醇、丁酸、壬醛、乙酸、1,3-丁二醇、甲基-3-丁烯-1-醇、甲醇、己醇、二甲苯、乙苯、吲哚、檸檬烯、甲苯、苯乙酮、戊-2,3-二酮、2-戊酮、2-庚酮、2-壬酮、丙酮、丁酮、2-甲基丙酸、丁酸、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸、戊酸、4-甲基戊酸、己酸、辛酸、癸酸、十一烷酸、十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、十八烷酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、丙醇、丁醇、戊醇、己醇、庚醇、辛醇、丙-2-醇、丁-2-醇、戊-2-醇、己-2-醇、庚-2-醇、壬-2-醇、十一烷-2-醇、辛-3-醇、辛-1,5-二烯-3-醇、3-甲基-2-環己烯醇、2-甲基丙醇、2-甲基丁醇、3-甲基丁醇、3-甲基戊醇、苯基甲醇、2-苯基乙醇、2-苯基-乙-2-醇、丙-2-酮、丁-2-酮、戊-2-酮、己-2-酮、庚-2-酮、辛-2-酮、壬-2-酮、癸-2-酮、十一碳-2-酮、十二碳-2-酮、十三碳-2-酮、十五碳-2-酮、戊-3-酮、辛-3-酮、3-甲基戊-2-酮、4-甲基戊-2-酮、甲基己-2-酮、羥基丙-2-酮、庚-5-烯-2-酮、4-甲基戊-3-烯-2-酮、辛-3-酮、辛-1,5-二烯-3-酮、壬-2-酮、十一碳-2-酮、甲基呋喃基酮、苯基丙-2-酮、苯丙酮、丁酸甲酯、己酸甲酯、辛酸甲酯、癸酸甲酯、十四酸甲酯、十六酸甲酯、肉桂酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸乙酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、十二酸乙酯、十四酸乙酯、丁酸乙基-3-甲酯、乙酸丙酯、丁酸丙酯、甲酸丁酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、甲酸異戊酯、乙酸異戊酯、丙酸異戊酯、丁酸異戊酯、鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二甲酯、乙酸2-苯基乙酯、丙酸2-苯基乙酯、丁酸2-苯基乙酯、3-甲硫基丙醇、甲硫醇、硫化氫、二甲基二硫化物、二甲基三硫化物、二甲基四硫化物、甲基乙基二硫化物、二乙基二硫化物、2,4-二硫代戊烷、甲硫丙醛、3-甲硫基-2,4-二硫代戊烷、2,4,5-三硫代己烷、1,1-雙-甲基巰基二硫化物、甲硫醇乙酸酯、硫代丙酸甲酯、硫代苯甲酸甲酯、噻吩-2-醛、甲基吲哚、對乙基苯酚、對甲酚、乙醛、丁醛、2-甲基丁醛、3-甲基丁醛、2-甲基丙醛、己醛、庚醛、壬醛、2-甲基丁烯-2-醛、苯甲醛、乙酸3-甲基庚酯、1-丁醇、1-丁醇、3-甲基、1-庚醇、甲酸、1-己醇-2、乙基、1-辛醇、2-丁酮、2-庚烯-1-醇、2-己酮、庚醛、2-辛烯-1-醇、1-辛烯-3-醇、2-戊酮、2,3-丁二酮、3-丁烯-1-醇、5-庚烯-2-酮、辛烷、乙醇、 2,3-丁二酮、2-庚酮、1-丁醇、丁酸、壬醛、乙酸、1,3-丁二醇、甲基-3-丁烯苯乙醇、甲苯、1-戊醇、3-辛烯-1-醇、2-辛烯-1-醇、2-十一酮、1-辛醇、苯甲醛、1-庚醇、2-庚酮、4-甲基-2-壬酮、2-甲基-2-壬醇、1-己醇、2-甲基2-丙醇、乙醇、3-甲基1-丁醇、1-己醇、2-甲基2-壬醇、2-壬酮、2-庚酮、4-甲基、1-庚醇、1-辛醇、2-辛烯-1-醇、3-辛烯-1-醇、1-辛醇、1-庚醇、2-庚酮、4-甲基-2-壬酮、2-十二醇、2-十二酮、3-癸烯1-醇乙酸酯、苯甲醇、苯乙醇、2-甲氧基4-乙烯基苯酚、3-癸烯1-醇乙酸酯、2-十二酮、2-十二醇或2-甲氧基4-乙烯基苯酚。
在一些實施例中,改良之風味係由於揮發性風味化合物之含量降低,該等揮發性風味化合物為諸如1-己醇;2-丁基呋喃;2-甲基-2-戊烯醛;3-辛酮;乙酸乙酯;2-乙基-呋喃;2-戊基-呋喃;吡嗪;1-癸醇;苯乙酮;1-壬醇;2,5-二甲基-吡嗪;十二醛;苯乙醛;壬醛;丁內酯;辛醛;2-癸酮;己醛;2-壬酮;苯甲醛;庚醛;2-辛酮;糠醛;2-庚酮;戊醛;3-甲基丁醛;3-甲基丁酸。
在一些實施例中,該方法進一步包括藉由在仿製品製造過程中之任何時間點向非乳製品源受控添加本文中所描述之限定風味添加劑組合來製備具有受控風味概況之培養非乳製品,諸如乾酪仿製品、酸乳酪、酸乳油或鮮乳油。例示性添加劑及特定組合描述於本文中。
例示性實施例
實施例1為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 過濾該澄清溶解產物,以獲得過濾之溶解產物;
d) 濃縮該過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例2為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 濃縮該澄清溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例3為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 過濾該澄清溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例4為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 使用微濾來過濾該澄清溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
d) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得第二過濾之溶解產物;
e) 使用超濾來過濾該第二過濾之溶解產物,以獲得第三過濾之溶解產物;
f)使用滲濾來過濾該第三過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
g) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)、d)、e)、f)及g)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例5為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 使用微濾來過濾該澄清溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
d) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)、d)及e)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例6為如實施例1至5中任一者之方法,其中過濾包括微濾。
實施例7為如實施例1至6中任一者之方法,其中過濾包括超濾。
實施例8為如實施例1至7中任一者之方法,其中過濾包括滲濾。
實施例9為如實施例8之方法,其中滲濾進行了至少兩倍滲析體積。
實施例10為如實施例1至9中任一者之方法,其中該複數個細胞包括微生物細胞。
實施例11為如實施例1至10中任一者之方法,其中該複數個細胞包括真菌細胞。
實施例12為如實施例11之方法,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬及鐮刀菌屬細胞。
實施例13為如實施例11之方法,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母及鑲片鐮刀菌。
實施例14為如實施例1至13中任一者之方法,其中該複數個細胞包括細菌細胞。
實施例15為如實施例14之方法,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬及甲烷球菌屬。
實施例16為如實施例14之方法,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌、螢光假單胞菌及海沼甲烷球菌。
實施例17為如實施例1至16中任一者之方法,其中該複數個細胞之該水性懸浮液包含約2%至約25%乾固體。
實施例18為如實施例1至17中任一者之方法,其進一步包括在步驟a)之前在介於約8.5與約12.0之間的pH下洗滌該複數個細胞之該水性懸浮液。
實施例19為如實施例1至18中任一者之方法,其中該溶解步驟係在介於約4°C與約15°C之間的溫度下進行。
實施例20為如實施例1至19中任一者之方法,其中該溶解步驟係以生物化學方式進行。
實施例21為如實施例1至20中任一者之方法,其中該溶解步驟係以化學方式進行。
實施例22為如實施例1至21中任一者之方法,其中該溶解步驟係以機械方式進行。
實施例23為如實施例1至22中任一者之方法,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例24為如實施例22之方法,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約10.0之間的pH下進行。
實施例25為如實施例22之方法,其中該溶解步驟係在介於約10.0與約11.0之間的pH下進行。
實施例26為如實施例22之方法,其中該溶解步驟係在介於約11.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例27為如實施例1至26中任一者之方法,其中視情況在一或多種絮凝劑之存在下、在介於約9.0與約12.0之間的pH下進行該澄清步驟。
實施例28為如實施例27之方法,其中該澄清步驟係在介於約9.0與約10.0之間的pH下進行。
實施例29為如實施例27之方法,其中該澄清步驟係在介於約10.0與約11.0之間的pH下進行。
實施例30為如實施例27之方法,其中該澄清步驟係在介於約11.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例31為如實施例1至30中任一者之方法,其中澄清步驟係藉由離心至少於約20%乾固體來進行。
實施例32為如實施例1至31中任一者之方法,其中該澄清步驟係藉由重力沉降至少於約20%乾固體來進行。
實施例33為如實施例1至32中任一者之方法,其中該澄清步驟係藉由矽藻土過濾至少於約20%乾固體來進行。
實施例34為如實施例1至33中任一者之方法,其中在澄清之前用水或鹽水溶液或緩衝液1:1稀釋該溶解產物,其中該pH介於約8.5與約12.0之間。
實施例35為如實施例1至34中任一者之方法,其中在一或多種絮凝劑之存在下使步驟a)之該細胞溶解產物澄清。
實施例36為如實施例35之方法,其中該一或多種絮凝劑包括以下中之一或多種:烷基胺表氯醇、聚二甲基二烯丙基氯化銨、聚胺、石灰、熟石灰、氯化鐵、硫酸鐵、硫酸亞鐵、硫酸鋁、鋁酸鈉、氯化鋁、鹼式碳酸鎂、碳酸鈣、氫氧化鈣、活性矽酸鹽、瓜爾膠、澱粉、丹寧酸、海藻酸鈉、聚硫酸鋁、聚羥基氯化鋁、BIO-FLOCK®及合成聚電解質。
實施例37為如實施例36之方法,其中該一或多種絮凝劑係選自由以下組成之群:烷基胺表氯醇、聚二甲基二烯丙基氯化銨、聚胺、石灰、熟石灰、氯化鐵、硫酸鐵、硫酸亞鐵、硫酸鋁、鋁酸鈉、氯化鋁、鹼式碳酸鎂、碳酸鈣、氫氧化鈣、活性矽酸鹽、瓜爾膠、澱粉、丹寧酸、海藻酸鈉、聚硫酸鋁、聚羥基氯化鋁、BIO-FLOCK®及合成聚電解質。
實施例38為如實施例1至37中任一者之方法,其中該蛋白質組合物之蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL。
實施例39為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的一或多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例40為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例41為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例42為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例43為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例44為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例45為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例46為如實施例1至38中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現以下特徵:
當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性,
當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例47為如實施例1至45中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例48為如實施例1至45中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例49為如實施例1至45中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例50為如實施例1至45中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例51為如實施例1至45中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例52為如實施例47至51中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例53為如實施例47至51中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例54為如實施例47至51中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例55為如實施例47至51中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例56為如實施例1至55中任一者之方法,其進一步包括乾燥該蛋白質組合物。
實施例57為如實施例56之方法,其中該蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例58為如實施例56之方法,其中該蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例59為如實施例1至55中任一者之方法,其進一步包括對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例60為如實施例59之方法,其中該蛋白質組合物係藉由微濾來進行巴氏滅菌。
實施例61為如實施例59之方法,其中該蛋白質組合物係藉由高溫短時巴氏滅菌來進行巴氏滅菌。
實施例62為如實施例59之方法,其中該蛋白質組合物係藉由添加一或多種抗微生物劑來進行巴氏滅菌。
實施例63為如實施例59至62中任一者之方法,其進一步包括乾燥該巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例64為如實施例63之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例65為如實施例63之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例66為如實施例1至65中任一者之方法,其中與該溶解、澄清或過濾步驟中之一或多者未在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行的相應方法相比,一或多種揮發性化合物之量減少了至少約1.05倍,其中該揮發性化合物係選自由以下組成之群:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例67為如實施例1至66中任一者之方法,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、 2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例68為如實施例1至67中任一者之方法,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例69為如實施例1至3中任一者之方法,其中過濾該澄清溶解產物包括使用平均孔徑為0.2至2.0 μm之過濾器對該澄清溶解產物進行微濾及/或對該澄清溶解產物進行滲濾,以產生該過濾之溶解產物。
實施例70為如實施例69之方法,其中該滲濾包括使用超濾膜系統。
實施例71為如實施例1至2中任一者之方法,其中步驟c)之該過濾之溶解產物在濃縮之前經進一步過濾。
實施例72為如實施例71之方法,其中使用具有約10 kDa至約30 kDa分子量截止值之膜對該過濾之溶解產物進行超濾。
實施例73為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 過濾該細胞溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
c) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例74為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 使用微濾來過濾該細胞溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
c) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例75為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 使用微濾來過濾該細胞溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
c) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例76為如實施例73至75中任一者之方法,其中過濾包括微濾。
實施例77為如實施例73至76中任一者之方法,其中過濾包括超濾。
實施例78為如實施例73至77中任一者之方法,其中過濾包括滲濾。
實施例79為如實施例78之方法,其中滲濾進行了至少兩倍滲析體積。
實施例80為如實施例73至79中任一者之方法,其中該複數個細胞包括微生物細胞。
實施例81為如實施例73至80中任一者之方法,其中該複數個細胞包括真菌細胞。
實施例82為如實施例81之方法,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬及鐮刀菌屬細胞。
實施例83為如實施例81之方法,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母及鑲片鐮刀菌。
實施例84為如實施例73至83中任一者之方法,其中該複數個細胞包括細菌細胞。
實施例85為如實施例84之方法,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬及甲烷球菌屬。
實施例86為如實施例84之方法,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌、螢光假單胞菌及海沼甲烷球菌。
實施例87為如實施例73至86中任一者之方法,其中該複數個細胞之該水性懸浮液包含約2%至約25%乾固體。
實施例88為如實施例73至87中任一者之方法,其進一步包括在步驟a)之前在介於約8.5與約12.0之間的pH下洗滌該複數個細胞之該水性懸浮液。
實施例89為如實施例73至88中任一者之方法,其中該溶解步驟係在介於約4°C與約15°C之間的溫度下進行。
實施例90為如實施例73至89中任一者之方法,其中該溶解步驟係以生物化學方式進行。
實施例91為如實施例73至90中任一者之方法,其中該溶解步驟係以化學方式進行。
實施例92為如實施例73至91中任一者之方法,其中該溶解步驟係以機械方式進行。
實施例93為如實施例73至92中任一者之方法,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例94為如實施例93之方法,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約10.0之間的pH下進行。
實施例95為如實施例93之方法,其中該溶解步驟係在介於約10.0與約11.0之間的pH下進行。
實施例96為如實施例93之方法,其中該溶解步驟係在介於約11.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例97為如實施例73至96中任一者之方法,其中在過濾之前用水或鹽水溶液或緩衝液1:1稀釋該溶解產物,其中該pH介於約8.5與約12.0之間。
實施例98為如實施例73至97中任一者之方法,其中該蛋白質組合物之蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL。
實施例99為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的一或多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例100為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例101為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例102為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例103為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例104為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例105為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例106為如實施例73至98中任一者之方法,其中該蛋白質組合物展現以下特徵:
當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性,
當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例107為如實施例73至106中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例108為如實施例73至106中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例109為如實施例73至106中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例110為如實施例73至106中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例111為如實施例73至106中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例112為如實施例107至111中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例113為如實施例107至111中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例114為如實施例107至111中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例115為如實施例107至111中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例116為如實施例73至115中任一者之方法,其進一步包括乾燥該蛋白質組合物。
實施例117為如實施例116之方法,其中該蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例118為如實施例116之方法,其中該蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例119為如實施例73至115中任一者之方法,其進一步包括對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例120為如實施例119之方法,其中該蛋白質組合物係藉由微濾來進行巴氏滅菌。
實施例121為如實施例119之方法,其中該蛋白質組合物係藉由高溫短時巴氏滅菌來進行巴氏滅菌。
實施例122為如實施例119之方法,其中該蛋白質組合物係藉由添加一或多種抗微生物劑來進行巴氏滅菌。
實施例123為如實施例119至122中任一者之方法,其進一步包括乾燥該巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例124為如實施例123之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例125為如實施例123之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例126為如實施例73至125中任一者之方法,其中與該溶解或過濾步驟中之一或多者未在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行的相應方法相比,一或多種揮發性化合物之量減少了至少約1.05倍,其中該揮發性化合物係選自由以下組成之群:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例127為如實施例73至126中任一者之方法,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例128為如實施例73至127中任一者之方法,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例129為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例130為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中該蛋白質組合物之緩衝容量為小於約2.5 mmol NaOH/公克乾固體。
實施例131為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中將該蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液加熱至至少約95°C產生儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
實施例132為如實施例129至131中任一者之蛋白質組合物,其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% ( w/v)懸浮液pH 7.0時,在25°C下約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm。
實施例133為如實施例129至132中任一者之蛋白質組合物,其中在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm。
實施例134為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% ( w/v)懸浮液pH 7.0時,在25°C下約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm。
實施例135為如實施例134之蛋白質組合物,其中在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm。
實施例136為如實施例129至127中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例137為如實施例129至136中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在加熱至65°C後轉變為凝膠。
實施例138為如實施例129至137中任一者之蛋白質組合物,其中在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性。
實施例139為如實施例129至138中任一者之蛋白質組合物,其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
實施例140為如實施例129至139中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間可形成凝膠。
實施例141為如實施例129至140中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中可形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算。
實施例142為如實施例129至141中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D10小於約0.1 μm。
實施例143為如實施例129至142中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D50小於約1.0 μm。
實施例144為如實施例129至143中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D90小於約5 μm。
實施例145為如實施例129至144中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例146為如實施例129或131至145中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之緩衝容量為小於約2.5 mmol NaOH/公克乾固體。
實施例147為如實施例129至146中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在一或多個多步驟代謝途徑中顯示出活性。
實施例148為如實施例129至147中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少10種不同的功能性蛋白質。
實施例149為如實施例129至148中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少20種不同的功能性蛋白質。
實施例150為如實施例129至149中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少50種不同的功能性蛋白質。
實施例151為如實施例129至150中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性微生物蛋白質。
實施例152為如實施例129至151中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性真菌蛋白質。
實施例153為如實施例129至152中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性細菌蛋白質。
實施例154為如實施例129至153中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬、麯黴屬、木黴屬或鐮刀菌屬之功能性蛋白質。
實施例155為如實施例129至154中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母或鑲片鐮刀菌之功能性蛋白質。
實施例156為如實施例129至155中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬或甲烷球菌屬之功能性蛋白質。
實施例157為如實施例129至156中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌、螢光假單胞菌及海沼甲烷球菌之功能性蛋白質。
實施例158為如實施例129至157中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含一或多種異源功能性蛋白質。
實施例159為如實施例129或136至158中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例160為如實施例129或136至158中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例161為如實施例129或136至158中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例162為如實施例129或136至158中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例163為如實施例129或136至158中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約80%大於5 kDa之化合物。
實施例164為如實施例129或136至163中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例165為如實施例129或136至163中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例166為如實施例129或136至163中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例167為如實施例129或136至163中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例168為如實施例129至167中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例169為如實施例129至168中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例170為釀酒酵母蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性釀酒酵母蛋白質,
其中以乾重計,該釀酒酵母蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物,且
其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例171為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例172為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例173為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例174為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例175為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例176為如實施例170之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該釀酒酵母蛋白質組合物展現以下特徵:
當未將L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該釀酒酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
其中該釀酒酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
其中該釀酒酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
其中在約85°C下約20分鐘之後,該釀酒酵母蛋白質組合物至少約80%變性,
其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該釀酒酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
其中該釀酒酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
其中該釀酒酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例177為如實施例170至176中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例178為如實施例170至176中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例179為如實施例170至176中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例180為如實施例170至176中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例181為如實施例170至176中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約80%大於5 kDa之化合物。
實施例182為如實施例170至181中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例183為如實施例170至181中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例184為如實施例170至181中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例185為如實施例170至181中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例186為如實施例170至185中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例187為如實施例170至186中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例188為一種巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性巴斯德畢赤氏酵母蛋白質,
其中以乾重計,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物,且
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例189為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例190為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例191為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例192為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例193為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例194為如實施例188之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物展現以下特徵:
當未將L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
其中在約85°C下約20分鐘之後,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物至少約80%變性,
其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
其中該巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例195為如實施例188至194中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例196為如實施例188至194中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例197為如實施例188至194中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例198為如實施例188至194中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例199為如實施例188至194中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約80%大於5 kDa之化合物。
實施例200為如實施例188至199中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例201為如實施例188至199中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例202為如實施例188至199中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例203為如實施例188至199中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例204為如實施例188至203中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例205為如實施例188至204中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例206為一種大腸桿菌蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性大腸桿菌蛋白質,
其中以乾重計,該大腸桿菌蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物,且
其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例207為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例208為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例209為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例210為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例211為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例212為如實施例206之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該大腸桿菌蛋白質組合物展現以下特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該大腸桿菌蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
其中該大腸桿菌蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
其中該大腸桿菌蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
其中在約85°C下約20分鐘之後,該大腸桿菌蛋白質組合物至少約80%變性,
其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該大腸桿菌蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
其中該大腸桿菌蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
其中該大腸桿菌蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例213為如實施例206至212中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例214為如實施例206至212中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例215為如實施例206至212中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例216為如實施例206至212中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例217為如實施例206至216中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約80%大於5 kDa之化合物。
實施例218為如實施例206至216中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例219為如實施例206至216中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例220為如實施例206至216中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例221為如實施例206至216中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例222為如實施例206至221中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例223為如實施例206至222中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例224為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 過濾該澄清溶解產物,以獲得過濾之溶解產物;
d) 濃縮該過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)、d)及e)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例225為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 濃縮該澄清溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例226為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 過濾該澄清溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例227為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 使用微濾來過濾該澄清溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
d) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得第二過濾之溶解產物;
e) 使用超濾來過濾該第二過濾之溶解產物,以獲得第三過濾之溶解產物;
f)使用滲濾來過濾該第三過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
g) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)、d)、e)、f)及g)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例228為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 視情況在一或多種絮凝劑存在下使該細胞溶解產物澄清,以獲得澄清溶解產物;
c) 使用超濾來過濾該澄清溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
d) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)、d)及e)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例229為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 過濾該細胞溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
c) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例230為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 使用超濾來過濾該細胞溶解產物,以獲得第一過濾之溶解產物;
c) 使用滲濾來過濾該第一過濾之溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
d) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)、c)及d)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例231為一種蛋白質組合物,其係藉由包括以下之方法產生:
a) 使該複數個細胞之水性懸浮液溶解,以獲得細胞溶解產物;
b) 使用超濾來過濾該細胞溶解產物,以獲得蛋白質組合物;及
c) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物,
其中步驟a)、b)及c)獨立地在介於約8.5與約12.0之間的pH下進行。
實施例232為如實施例224至228中任一者之蛋白質組合物,其中視情況在一或多種絮凝劑之存在下、在介於約9.0與約12.0之間的pH下進行該澄清步驟。
實施例233為如實施例232之蛋白質組合物,其中該澄清步驟係在介於約9.0與約10.0之間的pH下進行。
實施例234為如實施例232之蛋白質組合物,其中該澄清步驟係在介於約10.0與約11.0之間的pH下進行。
實施例235為如實施例232之蛋白質組合物,其中該澄清步驟係在介於約11.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例236為如實施例224至228或232至235中任一者之蛋白質組合物,其中澄清步驟係藉由離心至少於約20%乾固體來進行。
實施例237為如實施例224至228或232至236中任一者之蛋白質組合物,其中該澄清步驟係藉由重力沉降至少於約20%乾固體來進行。
實施例238為如實施例224至228或232至237中任一者之蛋白質組合物,其中該澄清步驟係藉由矽藻土過濾至少於約20%乾固體來進行。
實施例239為如實施例224至228或232至238中任一者之蛋白質組合物,其中在澄清之前用水或鹽水溶液或緩衝液1:1稀釋該溶解產物,其中該pH介於約8.5與約12.0之間。
實施例240為如實施例224至228或232至239中任一者之蛋白質組合物,其中在一或多種絮凝劑之存在下使步驟a)之該細胞溶解產物澄清。
實施例241為如實施例240之蛋白質組合物,其中該一或多種絮凝劑包括以下中之一或多種:烷基胺表氯醇、聚二甲基二烯丙基氯化銨、聚胺、石灰、熟石灰、氯化鐵、硫酸鐵、硫酸亞鐵、硫酸鋁、鋁酸鈉、氯化鋁、鹼式碳酸鎂、碳酸鈣、氫氧化鈣、活性矽酸鹽、瓜爾膠、澱粉、丹寧酸、海藻酸鈉、聚硫酸鋁、聚羥基氯化鋁、BIO-FLOCK®及合成聚電解質。
實施例242為如實施例240之蛋白質組合物,其中該一或多種絮凝劑係選自由以下組成之群:烷基胺表氯醇、聚二甲基二烯丙基氯化銨、聚胺、石灰、熟石灰、氯化鐵、硫酸鐵、硫酸亞鐵、硫酸鋁、鋁酸鈉、氯化鋁、鹼式碳酸鎂、碳酸鈣、氫氧化鈣、活性矽酸鹽、瓜爾膠、澱粉、丹寧酸、海藻酸鈉、聚硫酸鋁、聚羥基氯化鋁、BIO-FLOCK®及合成聚電解質。
實施例243為如實施例224至242中任一者之方法,其中過濾包括微濾。
實施例244為如實施例224至243中任一者之方法,其中過濾包括超濾。
實施例245為如實施例224至244中任一者之方法,其中過濾包括滲濾。
實施例246為如實施例245之方法,其中滲濾進行了至少兩倍滲析體積。
實施例247為如實施例224至246中任一者之蛋白質組合物,其中該複數個細胞包括微生物細胞。
實施例248為如實施例224至247中任一者之蛋白質組合物,其中該複數個細胞包括真菌細胞。
實施例249為如實施例248之蛋白質組合物,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬及鐮刀菌屬細胞。
實施例250為如實施例248之蛋白質組合物,其中該真菌細胞係選自由以下組成之群:釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母及鑲片鐮刀菌。
實施例251為如實施例224至250中任一者之蛋白質組合物,其中該複數個細胞包括細菌細胞。
實施例252為如實施例251之蛋白質組合物,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬及甲烷球菌屬。
實施例253為如實施例251之蛋白質組合物,其中該細菌細胞係選自由以下組成之群:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌、螢光假單胞菌及海沼甲烷球菌。
實施例254為如實施例224至253中任一者之蛋白質組合物,其中該複數個細胞之該水性懸浮液包含約2%至約25%乾固體。
實施例255為如實施例224至254中任一者之蛋白質組合物,其進一步包括在步驟a)之前在介於約8.5與約12.0之間的pH下洗滌該複數個細胞之該水性懸浮液。
實施例256為如實施例224至255中任一者之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係在介於約4°C與約15°C之間的溫度下進行。
實施例257為如實施例224至256中任一者之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係以生物化學方式進行。
實施例258為如實施例224至257中任一者之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係以化學方式進行。
實施例259為如實施例224至258中任一者之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係以機械方式進行。
實施例260為如實施例224至259中任一者之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例261為如實施例260之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係在介於約9.0與約10.0之間的pH下進行。
實施例262為如實施例260之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係在介於約10.0與約11.0之間的pH下進行。
實施例263為如實施例260之蛋白質組合物,其中該溶解步驟係在介於約11.0與約12.0之間的pH下進行。
實施例264為如實施例224至263中任一者之蛋白質組合物,其中在過濾之前用水或鹽水溶液或緩衝液1:1稀釋該溶解產物,其中該pH介於約8.5與約12.0之間。
實施例265為如實施例224至264中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL。
實施例266為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的一或多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0間具有大於或等於約50 m
2/g蛋白質之乳液活性指數。
實施例267為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的兩種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例268為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的三種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例269為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的四種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例270為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的五種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例271為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的六種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例272為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現選自由以下組成之群的七種或更多種特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm;該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠;該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm;在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性;當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠;該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠;該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算;且該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例273為如實施例224至265中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物展現以下特徵:當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm,且在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm,
該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠,
該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm,
在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性,
當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠,
其中該蛋白質組合物在約pH 5.5與約pH 10.0之間形成凝膠,
該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算,且
該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例274為如實施例224至273中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例275為如實施例224至273中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例276為如實施例224至273中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例277為如實施例224至273中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例278為如實施例224至273中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例279為如實施例274至278中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例280為如實施例274至278中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例281為如實施例274至278中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例282為如實施例274至278中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例283為如實施例224至282中任一者之蛋白質組合物,其進一步包括乾燥該蛋白質組合物。
實施例284為如實施例283之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例285為如實施例283之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例286為如實施例224至282中任一者之蛋白質組合物,其進一步包括對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例287為如實施例286之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物係藉由微濾來進行巴氏滅菌。
實施例288為如實施例286之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物係藉由高溫短時巴氏滅菌來進行巴氏滅菌。
實施例289為如實施例286之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物係藉由添加一或多種抗微生物劑來進行巴氏滅菌。
實施例290為如實施例286至289中任一者之蛋白質組合物,其進一步包括乾燥該巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例291為如實施例290之蛋白質組合物,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例292為如實施例290之蛋白質組合物,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例293為如實施例224至292中任一者之蛋白質組合物,其中與該溶解、澄清或過濾步驟中之一或多個未在約8.5與約12.0之間的pH下進行的相應方法相比,一或多種揮發性化合物之量減少了至少約1.05倍,其中該揮發性化合物係選自由以下組成之群:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、 2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例294為如實施例224至293中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
實施例295為如實施例224至294中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例296為一種食物產品,其包含:
如實施例129至169中任一者之蛋白質組合物。
實施例297為一種食物產品,其包含:
如實施例170至187中任一者之釀酒酵母蛋白質組合物。
實施例298為一種食物產品,其包含:
如實施例188至205中任一者之巴斯德畢赤氏酵母蛋白質組合物。
實施例299為一種食物產品,其包含:
如實施例206至223中任一者之大腸桿菌蛋白質組合物。
實施例300為如實施例296至290中任一者之食物產品,其中該食物產品為乳製品仿製品。
實施例301為如實施例300之食物產品,其中該食物產品為乳仿製品。
實施例302為如實施例300之食物產品,其中該食物產品為乾酪仿製品。
實施例303為如實施例300至302中任一者之食物產品,其中該食物產品進一步包含一或多種微生物。
實施例304為如實施例303之食物產品,其中該一或多種微生物係選自由以下組成之群:乳球菌屬、乳桿菌屬、明串珠菌屬、鏈球菌屬、小球菌屬、梭菌屬、葡萄球菌屬、短桿菌屬、丙酸桿菌屬、青黴屬、德巴利酵母屬、地黴屬、棒狀桿菌屬、輪枝孢菌屬、克盧費氏酵母屬、酵母菌屬、假絲酵母屬、紅冬孢酵母屬、微球菌屬、嗜鹽單胞菌屬、嗜冷桿菌屬或其組合。
實施例305為如實施例303之食物產品,其中該一或多種微生物係選自由以下組成之群:乳酸乳球菌、乳脂乳球菌、乳酸乳球菌丁二酮變種、德氏乳桿菌乳酸亞種、保加利亞德氏乳桿菌、瑞士乳桿菌、植物乳桿菌、乾酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、腸膜明串珠菌乳脂亞種、嗜熱鏈球菌、戊糖片球菌、丁酸梭菌、木糖葡萄球菌、亞麻短桿菌、白青黴、卡門柏青黴、婁地青黴、漢遜德巴利酵母、白地黴、蠟蚧輪枝菌、乳酸克盧費氏酵母、釀酒酵母、傑佛氏假絲酵母、高蛋白假絲酵母、脆紅冬孢酵母。
實施例306為如實施例296至299中任一者之食物產品,其中該食物產品為肉仿製品。
實施例307為如實施例306之食物產品,其進一步包含血基質。
實施例308為如實施例308之食物產品,其中該血基質係呈含血基質之蛋白質的形式提供。
實施例309為如實施例306至308中任一者之食物產品,其進一步包含一或多種風味前驅物。
實施例310為如實施例309之食物產品,其中該一或多種風味前驅物包含選自由以下組成之群的化合物:糖、糖醇、糖酸、糖衍生物、含硫化合物、胺基酸或其衍生物、核苷酸、核苷、維生素、酸、肽、蛋白質水解產物、提取物及其組合。
實施例311為如實施例309之食物產品,其中該風味前驅物包含糖及含硫化合物。
實施例312為如實施例310至311中任一者之食物產品,其中該含硫化合物係選自由以下組成之群:半胱胺酸、胱胺酸、半胱胺酸亞碸、蒜素、硒代半胱胺酸、甲硫胺酸、硫胺及其組合。
實施例313為如實施例310至312中任一者之食物產品,其中該糖係選自由以下組成之群:葡萄糖、果糖、核糖、蔗糖、阿拉伯糖、6-磷酸葡萄糖、6-磷酸果糖、1,6-二磷酸果糖、肌醇、麥芽糖、糖蜜、麥芽糊精、糖原、半乳糖、乳糖、核糖醇、葡糖酸及葡糖醛酸、直鏈澱粉、支鏈澱粉、木糖及其組合。
實施例314為如實施例306至313中任一者之食物產品,其進一步包含油。
實施例315為如實施例314之食物產品,其中該油係選自由以下組成之群:椰子油、芒果油、葵花油、棉籽油、紅花油、米糠油、可可脂、棕櫚果油、棕櫚油、大豆油、芥花油、玉米油、芝麻油、核桃油、亞麻籽、荷荷芭油、蓖麻、葡萄籽油、花生油、橄欖油、海藻油、來自細菌或真菌之油及其組合。
實施例316為如實施例296至299中任一者之食物產品,其中該食物產品為蛋白質補充劑。
實施例317為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於10% (以該食物產品之重量計)動物產品。
實施例318為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於5% (以該食物產品之重量計)動物產品。
實施例319為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於1% (以該食物產品之重量計)動物產品。
實施例320為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品不含動物產品。
實施例321為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於10% (以該食物產品之重量計)動物衍生產品。
實施例322為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於5% (以該食物產品之重量計)動物衍生產品。
實施例323為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於1% (以該食物產品之重量計)動物衍生產品。
實施例324為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品不含動物衍生產品。
實施例325為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於10% (以該食物產品之重量計)動物肉。
實施例326為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於5% (以該食物產品之重量計)動物肉。
實施例327為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品含有少於1% (以該食物產品之重量計)動物肉。
實施例328為如實施例296至316中任一者之食物產品,其中該食物產品不含動物肉。
實施例329為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例330為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。
實施例331為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及
f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例332為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及
f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例333為一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括:
a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例334為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例335為一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。
實施例336為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物;及
f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例337為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物;及
f)視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例338為一種自複數個細胞製備富含胞質蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成富含胞質蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含胞質蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例339為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物;及
d) 視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例340為一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物;及
d) 視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至b)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。
實施例341為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例342為一種自複數個具有細胞壁之細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例343為一種自複數個細胞製備富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物的方法,該方法包括:
a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 自該固體部分提取蛋白質以形成富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該富含膜結合及/或次細胞區室蛋白之蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例344為如實施例339至343中任一者之方法,其中該自該固體部分提取蛋白質包括該固體部分之機械溶解。
實施例345為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例346為一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:
a) 用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。
實施例347為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:
a) 用鹼處理表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及
f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例348為一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
e) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及
f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例349為一種自複數個細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括:
a) 將表現該可溶性蛋白質之該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分;
c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物;
d) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及
e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,
其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例350為如實施例345至349中任一者之方法,其中該可溶性蛋白質為含血基質之蛋白質。
實施例351為如實施例350之方法,其中該方法包括用約5 mM至約500 mM還原當量之還原劑處理該複數個細胞。
實施例352為如實施例351之方法,其中用該還原劑處理包括用約20 mM至約80 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例353為如實施例351至352中任一者之方法,其中該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。
實施例354為如實施例351至353中任一者之方法,其中該還原劑為食品安全還原劑。
實施例355為如實施例345至354中任一者之方法,其中該可溶性蛋白質具有熔點,且方法進一步包括在a)之前將該複數個細胞加熱至比該可溶性蛋白質之該熔點低約10°C或約5°C之溫度。
實施例356為如實施例355之方法,其中該可溶性蛋白質之熔點為至少約60°C。
實施例357為如實施例345至356中任一者之方法,其中該可溶性蛋白質與該複數個細胞異源。
實施例358為如實施例345至357中任一者之方法,其中以乾重計,該可溶性蛋白質組成該蛋白質組合物中蛋白質之至少約30%。
實施例359為如實施例345至357中任一者之方法,其中以乾重計,該可溶性蛋白質組成該蛋白質組合物中蛋白質之至少約50%。
實施例360為如實施例345至357中任一者之方法,其中以乾重計,該可溶性蛋白質組成該蛋白質組合物中蛋白質之至少約70%。
實施例361為如實施例345至357中任一者之方法,其中以乾重計,該可溶性蛋白質組成該蛋白質組合物中蛋白質之至少約90%。
實施例362為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例363為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例364為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例365為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例366為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例367為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例368為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例369為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例370為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例371為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例372為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例373為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例374為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例375為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例376為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例377為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例378為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例379為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例380為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例381為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例382為如實施例339或實施例340之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例383為如實施例341或實施例342之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例384為如實施例329、330、333、334、335、338、343、345、346或349中任一者之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例385為如實施例331、332、336、337、347或348中任一者之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例386為如實施例333、338、343或349中任一者之方法,其進一步包括在加熱該複數個細胞與分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分之間,用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0。
實施例387為如實施例333、338、343或349中任一者之方法,其中當該複數個細胞具有細胞壁時,該方法進一步包括在加熱該複數個細胞與分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分之間,對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔。
實施例388為如實施例330至332、335至337、340至342或346至348中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0包括用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約3分鐘。
實施例389為如實施例330至332、335至337、340至342或346至348中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間包括用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約5分鐘。
實施例390為如實施例330至332、335至337、340至342或346至348中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間包括其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約10分鐘。
實施例391為如實施例330至332、335至337、340至342或346至348中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例392為如實施例329至332、334至337、339至342或345至348中任一者之方法,其中該方法進一步包括在分離該複數個細胞之該水性懸浮液以形成固體部分及液體部分之前將該複數個細胞加熱至至少約60°C。
實施例393為如實施例329、331、332、334、336、337、339、341、342、345、347或348中任一者之方法,其中該穿孔係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例394為如實施例329、331、332、334、336、337、339、341、342、345、347或348中任一者之方法,其中穿孔包括用還原劑處理、用酶處理、電穿孔或其組合。
實施例395為如實施例394之方法,其中用該還原劑處理包括用約10 mM至約500 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例396為如實施例394之方法,其中用該還原劑處理包括用約20 mM至約80 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例397為如實施例394之方法,其中用該還原劑處理包括用約50 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例398為如實施例394至397中任一者之方法,其中該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。
實施例399為如實施例394至398中任一者之方法,其中該還原劑為食品安全還原劑。
實施例400為如實施例329至399中任一者之方法,其中來自該液體部分之乾固體在脫鹽後之A
260/A
280比為小於約1.5。
實施例401為如實施例329至400中任一者之方法,其中來自該固體部分之乾固體在脫鹽後之A260/A280比為大於約1.5。
實施例402為如實施例329至401中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
實施例403為如實施例329至402中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約60重量%。
實施例404為如實施例329至403中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約70重量%。
實施例405為如實施例329至404中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約80重量%。
實施例406為如實施例329至402中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之己糖激酶之至少約50重量%。
實施例407為如實施例329至406中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之己糖激酶之至少約70重量%。
實施例408為如實施例329至407中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之己糖激酶之至少約90重量%。
實施例409為如實施例329至408中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之非膜結合細胞壁蛋白之至少約50重量%。
實施例410為如實施例329至409中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之非膜結合細胞壁蛋白之至少約70重量%。
實施例411為如實施例329至410中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之非膜結合細胞壁蛋白之至少約90重量%。
實施例412為如實施例329至411中任一者之方法,其中該方法使該液體部分中之蛋白質包含該複數個細胞之膜結合及次細胞區室蛋白之少於40重量%。
實施例413為如實施例329至412中任一者之方法,其中該方法使該液體部分中之蛋白質包含該複數個細胞之膜結合及次細胞區室蛋白之少於35重量%。
實施例414為如實施例329至413中任一者之方法,其中該方法使該液體部分中之蛋白質包含該複數個細胞之膜結合及次細胞區室蛋白之少於33重量%。
實施例415為如實施例329至414中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總組蛋白之少於50重量%。
實施例416為如實施例329至415中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總組蛋白之少於70重量%。
實施例417為如實施例329至416中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總組蛋白之少於90重量%。
實施例418為如實施例329至417中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總亞鐵螯合酶之少於50重量%。
實施例419為如實施例329至418中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總亞鐵螯合酶之少於70重量%。
實施例420為如實施例329至419中任一者之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之總亞鐵螯合酶之少於90重量%。
實施例421為如實施例329至420中任一者之方法,其中該方法使該複數個細胞中至少約25重量%之細胞保持完整。
實施例422為如實施例329至421中任一者之方法,其中該方法使該複數個細胞中至少約50重量%之細胞保持完整。
實施例423為如實施例329至422中任一者之方法,其中該方法使該複數個細胞中至少約75重量%之細胞保持完整。
實施例424為如實施例329至423中任一者之方法,其中在分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分之前,該複數個細胞之粒度分佈中值為約2 μm至約4 μm。
實施例425為如實施例329至343或345至424中任一者之方法,其中該方法不包括對該複數個細胞進行機械溶解。
實施例426為如實施例425之方法,其中與包括機械溶解之類似方法相比,該蛋白質組合物包含較高比例之胞質蛋白。
實施例427為如實施例329至424中任一者之方法,其中該方法進一步包括對該複數個細胞進行機械溶解。
實施例428為如實施例329至427中任一者之方法,其中該分離該複數個細胞之該水性懸浮液以形成固體部分及液體部分係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例429為如實施例329至428中任一者之方法,其中該過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例430為如實施例329至429中任一者之方法,其中該分離包括離心、重力沉降、深度過濾、微濾或其組合。
實施例431為如實施例430之方法,其中該離心包括至少約3,000×g的離心。
實施例432為如實施例329至431中任一者之方法,其中與各步驟皆在約6.5之pH下進行的類似方法相比,該蛋白質組合物包含少至少約10倍之酯。
實施例433為如實施例329至432中任一者之方法,其中該蛋白質組合物為低風味蛋白質組合物。
實施例434為如實施例329至433中任一者之方法,其中該過濾包括微濾、超濾、滲濾或其組合。
實施例435為如實施例329至434中任一者之方法,其中該過濾進行直至該蛋白質組合物之2% (w/v)懸浮液之pH自pH 3調節至pH 12所需之氫氧化鈉之量少於或等於3 mmol。
實施例436為如實施例329至435中任一者之方法,其中該複數個細胞包含微生物細胞。
實施例437為如實施例329至436中任一者之方法,其中該複數個細胞包含真核細胞。
實施例438為如實施例329至437中任一者之方法,其中該複數個細胞包含真菌細胞。
實施例439為如實施例438之方法,其中該等真菌細胞係選自由以下組成之群:酵母細胞、畢赤氏酵母細胞、假絲酵母細胞、漢遜酵母細胞、球擬酵母細胞、克盧費氏酵母細胞、耶氏酵母細胞、鐮刀菌細胞及其組合。
實施例440為如實施例438之方法,其中該等真菌細胞係選自由以下組成之群:釀酒酵母細胞、巴斯德畢赤氏酵母細胞、博伊丁假絲酵母細胞、多形漢遜酵母細胞、乳酸克盧費氏酵母細胞、解脂耶氏酵母細胞、鑲片鐮刀菌細胞及其組合。
實施例441為如實施例329至440中任一者之方法,其中該複數個細胞包含細菌細胞。
實施例442為如實施例441之方法,其中該等細菌細胞係選自由以下組成之群:芽孢桿菌細胞、大腸桿菌細胞、乳桿菌細胞、棒狀桿菌細胞、假單胞菌細胞、甲烷球菌細胞及其組合。
實施例443為如實施例441之方法,其中該等細菌細胞係選自由以下組成之群:大腸桿菌細胞、枯草芽孢桿菌細胞、乳酸乳桿菌細胞、麩胺酸棒狀桿菌細胞、螢光假單胞菌細胞、海沼甲烷球菌細胞及其組合。
實施例444為如實施例329至443中任一者之方法,其中該複數個細胞之該水性懸浮液包含約2%至約25%乾固體。
實施例445為如實施例329至444中任一者之方法,其進一步包括在步驟a)之前在約8.5至約12.0之pH下洗滌該複數個細胞。
實施例446為如實施例329至445中任一者之方法,其中該蛋白質組合物之蛋白質含量為約2 mg/mL至約250 mg/mL。
實施例447為如實施例329至446中任一者之方法,其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm。
實施例448為如實施例329至447中任一者之方法,其中在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm。
實施例449為如實施例329至448中任一者之方法,其中該蛋白質組合物在加熱至65°C後形成凝膠。
實施例450為如實施例329至449中任一者之方法,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D10、D50及D90分別小於0.1 μm、1.0 μm及5 μm。
實施例451為如實施例329至450中任一者之方法,其中在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性。
實施例452為如實施例329至451中任一者之方法,其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
實施例453為如實施例329至452中任一者之方法,其中該蛋白質組合物在約5.5至約pH 10.0之pH下形成凝膠。
實施例454為如實施例329至453中任一者之方法,其中該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算。
實施例455為如實施例329至454中任一者之方法,該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例456為如實施例329至455中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
實施例457為如實施例329至455中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約40%大於5 kDa之化合物。
實施例458為如實施例329至455中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約50%大於5 kDa之化合物。
實施例459為如實施例329至455中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約60%大於5 kDa之化合物。
實施例460為如實施例329至455中任一者之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約70%大於5 kDa之化合物。
實施例461為如實施例456至460中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例462為如實施例456至460中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例463為如實施例456至460中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例464為如實施例456至460中任一者之方法,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例465為如實施例329至464中任一者之方法,其進一步包括乾燥該蛋白質組合物。
實施例466為如實施例465之方法,其中該蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例467為如實施例465之方法,其中該蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例468為如實施例329至464中任一者之方法,其進一步包括對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌,以獲得巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例469為如實施例468之方法,其中該蛋白質組合物係藉由微濾來進行巴氏滅菌。
實施例470為如實施例468之方法,其中該蛋白質組合物係藉由高溫短時巴氏滅菌來進行巴氏滅菌。
實施例471為如實施例468之方法,其中該蛋白質組合物係藉由添加一或多種抗微生物劑來進行巴氏滅菌。
實施例472為如實施例468至471中任一者之方法,其進一步包括乾燥該巴氏滅菌之蛋白質組合物。
實施例473為如實施例472之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經噴霧乾燥。
實施例474為如實施例472之方法,其中該巴氏滅菌之蛋白質組合物經冷凍乾燥。
實施例475為如實施例329至474中任一者之方法,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例476為藉由如實施例329至475中任一者之方法製備之蛋白質組合物。
實施例477為一種藉由如實施例329至475中任一者之方法製備之蛋白質組合物用於食品、飲料或補充劑之用途。
實施例478為一種藉由如實施例329至475中任一者之方法製備之蛋白質組合物用於肉仿製品之用途。
實施例479為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中該蛋白質組合物可使水包油乳液穩定。
實施例480為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中該蛋白質組合物可使水包氣乳液穩定。
實施例481為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中以乾重計,該複數種功能性蛋白質包含至少約50%胞質蛋白。
實施例482為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中來自該蛋白質組合物之乾固體之懸浮液或溶液之A
260/A
280比為小於約1.5。
實施例483為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中該蛋白質組合物為低風味蛋白質組合物。
實施例484為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中以乾重計,至少約35%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例485為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中該蛋白質組合物之緩衝容量為小於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體。
實施例486為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中將該蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液加熱至至少約95°C產生儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
實施例487為如實施例479至100中任一者之蛋白質組合物,其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% ( w/v)懸浮液pH 7.0時,在25°C下約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm。
實施例488為如實施例479至101中任一者之蛋白質組合物,其中在將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0且隨後在25°C下培育約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm。
實施例489為一種蛋白質組合物,其包含:
複數種功能性蛋白質,
其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% ( w/v)懸浮液pH 7.0時,在25°C下約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量小於約0.1 ppm。
實施例490為如實施例103之蛋白質組合物,其中在25°C下且在將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0之後約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H
2S之量為至少約0.2 ppm。
實施例491為如實施例479至481或483至490中任一者之蛋白質組合物,其中來自該蛋白質組合物之乾固體之懸浮液或溶液之A260/A280比為小於約1.5。
實施例492為如實施例479至491中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物為低風味蛋白質組合物。
實施例493為如實施例479至492中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,該複數種功能性蛋白質包含至少約50%胞質蛋白。
實施例494為如實施例480至493中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物可使水包油乳液穩定。
實施例495為如實施例479或481至494中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物可使水包氣乳液穩定。
實施例496為如實施例479至495中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約30%之該蛋白質組合物包含豐富蛋白。
實施例497為如實施例479至495中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約40%之該蛋白質組合物包含豐富蛋白。
實施例498為如實施例479至494中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約50%之該蛋白質組合物包含豐富蛋白。
實施例499為如實施例496至498中任一者之蛋白質組合物,其中該豐富蛋白為含血基質之蛋白質。
實施例500為如實施例479至499中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少一種與該複數種功能性蛋白質之來源生物體異源的蛋白質。
實施例501為如實施例500之蛋白質組合物,其中該至少一種與該複數種功能性蛋白質之來源生物體異源的蛋白質包含含血基質之蛋白質。
實施例502為如實施例500或實施例501之蛋白質組合物,其中該至少一種與該複數種功能性蛋白質之該來源生物體異源的蛋白質不包含分泌信號。
實施例503為如實施例500至502中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約30%之該蛋白質組合物包含至少一種與該複數種功能性蛋白質之該來源生物體異源的蛋白質。
實施例504為如實施例500至502中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約40%之該蛋白質組合物包含至少一種與該複數種功能性蛋白質之該來源生物體異源的蛋白質。
實施例505為如實施例500至502中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約50%之該蛋白質組合物包含至少一種與該複數種功能性蛋白質之該來源生物體異源的蛋白質。
實施例506為如實施例479至505中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約35%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例507為如實施例479至506中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在加熱至65°C後轉變為凝膠。
實施例508為如實施例479至507中任一者之蛋白質組合物,其中在約85°C下約20分鐘之後,該蛋白質組合物至少約80%變性。
實施例509為如實施例479至508中任一者之蛋白質組合物,其中當在約85°C或以上加熱約20分鐘時,該蛋白質組合物形成儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
實施例510為如實施例479至509中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在約pH 5.5至約pH 10.0之pH下可形成凝膠。
實施例511為如實施例479至510中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在離子強度低於約0.5 M之溶液中可形成凝膠,其中該離子強度係基於非蛋白質溶質之濃度計算。
實施例512為如實施例479至511中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D10小於約0.1 µm。
實施例513為如實施例479至512中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D50小於約1.0 µm。
實施例514為如實施例479至513中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之粒度分佈D90小於約5 µm。
實施例515為如實施例479至514中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在約pH 4.0至約pH 8.0範圍內之乳液活性指數大於或等於約50 m
2/g蛋白質。
實施例516為如實施例479至484或486至515中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物之緩衝容量為小於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體。
實施例517為如實施例479至516中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在一或多個多步驟代謝途徑中顯示出活性。
實施例518為如實施例479至517中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少10種不同的功能性蛋白質。
實施例519為如實施例479至518中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少20種不同的功能性蛋白質。
實施例520為如實施例479至519中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含至少50種不同的功能性蛋白質。
實施例521為如實施例479至520中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性微生物蛋白質。
實施例522為如實施例479至521中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性真菌蛋白質。
實施例523為如實施例479至522中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含功能性細菌蛋白質。
實施例524為如實施例479至523中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自酵母菌屬、畢赤氏酵母屬、假絲酵母屬、漢遜酵母屬、球擬酵母屬、克盧費氏酵母屬、耶氏酵母屬、麯黴屬、木黴屬、鐮刀菌屬或其組合之功能性蛋白質。
實施例525為如實施例479至524中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母、博伊丁假絲酵母、多形漢遜酵母、乳酸克盧費氏酵母、解脂耶氏酵母、鑲片鐮刀菌或其組合之功能性蛋白質。
實施例526為如實施例479至525中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自芽孢桿菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、棒狀桿菌屬、假單胞菌屬、甲烷球菌屬或其組合之功能性蛋白質。
實施例527為如實施例479至526中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含來自大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸乳桿菌、麩胺酸棒狀桿菌、螢光假單胞菌、海沼甲烷球菌或其組合之功能性蛋白質。
實施例528為如實施例479至527中任一者之蛋白質組合物,其中該複數種功能性蛋白質包含一或多種異源功能性蛋白質。
實施例529為如實施例479至528中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約40%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例530為如實施例479至529中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約50%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例531為如實施例479至529中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約60%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例532為如實施例479至529中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約70%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例533為如實施例479至529中任一者之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約80%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
實施例534為如實施例484或529至533中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於10 kDa之化合物。
實施例535為如實施例484或529至533中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於15 kDa之化合物。
實施例536為如實施例484或529至533中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於20 kDa之化合物。
實施例537為如實施例484或529至533中任一者之蛋白質組合物,其中該等大於5 kDa之化合物為大於25 kDa之化合物。
實施例538為如實施例479至537中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮、戊醛、3-甲基丁醛及3-甲基丁酸。
實施例539為如實施例479至538中任一者之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物中至少約50%之蛋白質落在約10 kDa與約200 kDa之間。
實施例540為一種食品、飲料或補充劑,其包含如實施例479至539中任一者之蛋白質組合物。
實施例541為一種包含如實施例479至539中任一者之蛋白質組合物的肉替代品。
實施例542為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔,
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例543為一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:
用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例544為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例545為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例546為一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:
將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例547為如實施例542至546中任一者之方法,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例548為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔,
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例549為一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:
用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例550為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例551為一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括:
a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔;
b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0;
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例552為一種處理複數個細胞之方法,該方法包括:
將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度;
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例553為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例554為如實施例546或實施例552之方法,其中該加熱係在約8.5至約12.0之pH下進行。
實施例555為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例556為如實施例546或實施例552之方法,其中該加熱係在約9.0至約12.0之pH下進行。
實施例557為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該處理包括用該鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH約為約9.0至約12.0之pH。
實施例558為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例559為如實施例546或實施例552之方法,其中該加熱係在約9.0至約10.0之pH下進行。
實施例560為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該處理包括用該鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH約為約9.0至約10.0之pH。
實施例561為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例562為如實施例546或實施例552之方法,其中該加熱係在約10.0至約11.0之pH下進行。
實施例563為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該處理包括用該鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH約為約10.0至約11.0之pH。
實施例564為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例565為如實施例546或實施例552之方法,其中該加熱係在約11.0至約12.0之pH下進行。
實施例566為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該處理包括用該鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH約為約11.0至約12.0之pH。
實施例567為如544、545、550或551中任一者之方法,其中a)及b)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例568為如實施例544、545、550或551中任一者之方法,其中a)至c)中之每一者獨立地在低於或等於約10°C之溫度下進行。
實施例569為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該穿孔係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例570為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該處理係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
實施例571為如實施例546或實施例552之方法,其進一步包括在加熱該複數個細胞之後,用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0。
實施例572為如實施例546或實施例552之方法,其中當該複數個細胞具有細胞壁時,該方法進一步包括在加熱該複數個細胞之後,對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔。
實施例573為如543至545或549至551中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0包括用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約3分鐘。
實施例574為如543至545或549至551中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間包括用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約5分鐘。
實施例575為如543至545或549至551中任一者之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間包括其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約10分鐘。
實施例576為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中該方法進一步包括在該穿孔之後將該複數個細胞加熱至至少約60°C。
實施例577為如實施例543至545或549至551中任一者之方法,其中該方法進一步包括在該處理之後將該複數個細胞加熱至至少約60°C。
實施例578為如實施例542、544、545、548、550或551中任一者之方法,其中穿孔包括用還原劑處理、用酶處理、電穿孔或其組合。
實施例579為如實施例578之方法,其中用該還原劑處理包括用約10 mM至約500 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例580為如實施例578之方法,其中用該還原劑處理包括用約20 mM至約80 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例581為如實施例578之方法,其中用該還原劑處理包括用約50 mM還原當量之該還原劑處理。
實施例582為如實施例578至581中任一者之方法,其中該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。
實施例583為如實施例578至582中任一者之方法,其中該還原劑為食品安全還原劑。
實施例584為一種藉由如實施例542至583中任一者之方法製備之組合物。
實施例585為一種組合物,其包含:
複數個細胞,
其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例586為如實施例之組合物,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例587為一種組合物,其包含:
複數個細胞,
其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
實施例588為如實施例585至587中任一者之組合物,其中該組合物進一步包含還原劑。
實施例589為如實施例588之組合物,該還原劑係以約10 mM至約500 mM還原當量之該還原劑之量存在於該組合物中。
實施例590為如實施例588之組合物,該還原劑係以約20 mM至約80 mM還原當量之該還原劑之量存在於該組合物中。
實施例591為如實施例588之組合物,該還原劑係以約50 mM還原當量之該還原劑之量存在於該組合物中。
實施例592為如實施例588至591中任一者之組合物,其中該還原劑係選自由以下組成之群:半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合。
實施例593為如實施例588至592中任一者之組合物,其中該還原劑為食品安全還原劑。
實施例594為如實施例585至593中任一者之組合物,其中該複數個細胞中至少約25重量%之細胞為完整的。
實施例595為如實施例585至593中任一者之組合物,其中該複數個細胞中至少約50重量%之細胞為完整的。
實施例596為如實施例585至593中任一者之組合物,其中該複數個細胞中至少約75重量%之細胞為完整的。
實施例597為如實施例585至593中任一者之組合物,其中該複數個細胞之粒度分佈中值為約2 µm至約4 µm。
以下實例中將進一步描述本發明,該等實例不限制申請專利範圍中所描述之本發明範疇。
實例
實例1
在pH 6.0或9.0下溶解酵母細胞
使用如製造商所提供之酵母碎屑或酵母醪製備釀酒酵母之水性細胞懸浮液(CS),最終乾固體為15-21%。在酵母碎屑之情況下,使用milliQ水製備1:1懸浮液。將CS維持在pH 6.0或pH 9.0下。使用珠粒碾磨使CS中之酵母細胞溶解,同時視情況而定將pH維持在6.0或9.0。藉由使用小規模型試驗規模疊片式離心機以8,000×g離心3分鐘來使溶解之細胞澄清。使用具有0.2 um標稱孔徑之膜對澄清溶解產物進行微濾。
使用pH 9.0對比6.0得到若干合意之結果。在離心期間更有效地移除固體。離心之後,維持在pH 9.0之澄清溶解產物之產率相對於維持在pH 6.0之溶解產物增加了25-50% (例如,在一項實驗中,pH 6.0得到10%乾基(DB)產率,而在pH 9.0下得到15% DB產率)且微濾(0.2 μm膜)過程中之蛋白質損失減少了30%。如藉由混合型流變儀所測定,獲自鹼性製程之蛋白質功能更強(圖10)。在感覺層面上,上清液/離心產物中不良異味之產生顯著減少,因此一組有經驗之嗅析者立即能夠對盲樣進行分選。分析結果支持此等發現且與內部感覺組註解一致。
實例2
在pH 6.0或9.0下溶解酵母細胞
使用由Impossible Foods發酵之肉湯製備表現大豆豆血紅蛋白之巴斯德畢赤氏酵母之水性懸浮液。藉由使用試驗規模疊片式離心機(Alfa Laval BRPX 810 SGV-34CG;饋料速度:10 LPM;初始排放時間:5分鐘;饋料%SS:10-13;離心產物固體%SS:55-60;2-10°C)進行離心來分離全細胞。使用去離子水(2-10°C)使細胞以1:1比率再懸浮。使用5 M HCl或5 M NaOH將細胞懸浮液pH調節至pH 6.0或9.0,直至細胞懸浮液pH穩定30分鐘。使用小規模均質器(Gaulin 30CD;13,000-15,000 psi;3遍)使細胞懸浮液溶解,冷卻至2-10°C並在兩遍之間進行pH調節。藉由使用小規模型試驗規模疊片式離心機以12,000×g離心20分鐘來使溶解之細胞澄清。將澄清溶解產物(「濃縮液」)直接施加至中空纖維超濾膜(Koch Romicon部件編號0721039;30 kDa分子量截止值(MWCO),1.1 mm直徑纖維),濃縮至約10%乾固體(DS)並使用去離子水在pH 6.0或pH 9.0下進行滲濾。在凍乾器中乾燥之後獲得最終產物。乾燥之後,使用各最終產物製備10% (w/v)懸浮液,最終pH為約7.0,並使用混合型流變儀(TA Instruments,DHR系列;4C/min步長)進行分析。
使用pH 9.0對比6.0得到若干合意之結果。離心之後,維持在pH 9.0之澄清溶解產物之蛋白質產率相對於維持在pH 6.0之溶解產物增加了35%。當以10% (w/v) DS加熱至95°C時,使用pH 9.0最終產物之熱固性凝膠比使用由pH 6.0製程之最終產物獲得之彼等凝膠強約10倍(亦即,更高儲存模數)。
實例3
在pH 6.0或9.0下溶解細菌細胞
藉由在37°C下在搖瓶中之溶原性肉湯(LSB培養基)中生長來製備大腸桿菌細胞培養物(DH5α,總計8公升)。藉由使用落地型實驗室離心機以15,000×g離心20分鐘來分離全細胞。
使用MILLI-Q®水(2-10°C)使細胞以1:5比率(公克細胞糰粒:mL水)再懸浮。將細胞懸浮液分成二等份,使用5 M HCl或5 M NaOH將pH調節至pH 6.0或9.0,直至細胞懸浮液pH穩定30分鐘。使用小規模均質器(Gaulin 30CD;13,000-15,000 psi;3遍)使細胞懸浮液溶解,冷卻至2-10°C並在兩遍之間進行pH調節。直接在30 kDa滲析膜(Pierce Slide-a-Lyzer)上對溶解之細胞進行滲析。
使用pH 9.0對比6.0得到若干合意之結果:1)細胞溶解之後釋放之蛋白質增加了30%;2)熱固性凝膠之儲存模數(堅實度)提高了約6倍(製程變化方案C之最終產物,pH 9對比pH 6;在MILLI-Q®水中製備之10% w/v懸浮液達至pH 7.0;如先前所描述藉由流變儀分析);來自多個類別之關鍵氣味活性揮發物減少了30-75% (例如,3-辛酮、乙酸乙酯、吡嗪、壬醛、乙醛)。
實例4
在pH 6.5或9.5下純化蛋白質
在兩個不同的實驗中使用相同的方法及材料自釀酒酵母培養物純化總細胞蛋白,但整個純化中之溶液pH為pH 6.5或pH 9.5。使用如製造商所提供之酵母碎屑或酵母醪製備釀酒酵母之水性細胞懸浮液(CS),最終乾固體為15-21%。在酵母碎屑之情況下,使用milliQ水製備1:1懸浮液。使用珠粒碾磨使酵母細胞溶解,同時視情況而定將pH維持在6.5或9.5,以製造細胞溶解產物。藉由使用小規模型試驗規模疊片式離心機以8,000×g離心3分鐘來使溶解產物澄清。在4°C下將澄清溶解產物(「離心產物」)培育過夜。隨後一組受過培訓之品嘗師及嗅覺師對冷藏之後的所得產物進行測試。藉由在不存在其他可視線索之情況下對異味進行評分,該小組能夠正確地分選pH 6.5與pH 9.5製程樣品。
實例5
在pH 9.5下對蛋白質濃縮或分離物進行過濾、濃縮及/或脫鹽
如先前實例中所指示對酵母細胞進行溶解。該材料可視情況進行微濾以移除過程中微生物計數(例如,使用WaterSep Mini-BioProducer41,HF 0.2 μm微濾器,目錄號WA 920 10MPR41 SG),從而使蛋白質通過率提高了30%。可在有或無微濾之情況下使用超濾對材料進行濃縮、滲濾及耗竭小分子。舉例而言,使用4-10倍滲析體積將該材料施加至WaterSep (目錄號:BC 030 20GRA43 1L)及Koch (目錄號:HF,6043-97-43-PM30),之後最終濃度降至10-16%乾固體。所描述之鹼處理方法產生了一種優越成分,其顯示改良之食品活性:烹飪後產生更堅實凝膠(圖3至圖5、圖10及圖11A至圖11B),異臭及異味較低(參見例如表4)。表2列出了藉由此製程產生之蛋白質的一些例示性說明。表3列出了pH 9.5技術與pH 6.5技術相比之一些例示性益處。表4列出了可藉由pH 9.5技術耗竭之一些例示性化合物。
表2. 材料說明
表3. 使用與過濾組合之鹼性製程技術獲得之製程及組合物益處
實例6
量測蛋白質組合物中之多肽完整性
性質 | 分析法 | 說明 |
蛋白質變性 | 微差掃描螢光測定法 | >80%可偵測疏水性暴露在50°C與85°C之間完成;最大疏水性暴露出現在50°C與75°C之間;pH 5.5 - 10.0;非蛋白質離子強度0-0.5M |
膠化 | 混合型流變儀 | 當加熱至95°C並冷卻回25°C時,10% (w/v)懸浮液膠凝至100 Pa儲存模數 |
粒度分佈 | 雷射繞射(Mastersizer,Malvern) | D10 < 0.1 µm;D50 < 1.0 µm;D90 < 5 µm |
多肽完整性 | 還原型變性SDS-PAGE | 大於50%考馬斯染色多肽落在10 kDa與200 kDa (例如20 kDa與200 kDa)之間,如藉由密度測定法所量測 |
H 2S釋放 | Hach硫化氫測試套組(目錄號25379-00)。在50 mL Falcon管中測試45 mL頂部空間,其中含有5 mL產品、2% (w/v,水溶液),pH 7.0,室溫×24小時。過濾器安裝在蓋子下。未添加泡騰片 | 添加L-半胱胺酸後釋放之H2S增加三倍或更多;及/或 未添加半胱胺酸:H 2S < 0.1 ppm 添加25 mM半胱胺酸:H 2S > 0.2 ppm (例如>0.3 ppm) |
緩衝容量 | 藉由用NaOH或HCl在pH 3與pH 12之間滴定量測緩衝容量 | 小於3.0 mmol (例如小於2.5 mmol) NaOH/公克乾固體 |
揮發性酯含量 | 對pH及體積匹配樣品進行GCMS | 酯含量相對於在pH 6.5下處理之匹配樣品降低>10倍 |
揮發性芳族化合物 | 當在20 mL玻璃小瓶中在50°C下藉由吸附至SPME纖維上來分析2 mL 10% (w/v)懸浮液之頂部空間,繼而進行GCMS時,對pH及體積匹配樣品進行GCMS | 以下揮發性化合物減少>2.5倍:3-辛酮;苯乙酮;1-壬醇;苯乙醛;壬醛 |
乳液活性指數 | 對含芥花油之蛋白質水溶液進行機械均質化;EAI=(2T)/(c*vol_fx_油),其中T = ln(10)*A 600/路徑_長度 | pH 4.0 - 8.0範圍內> 50 m 2/g蛋白質 |
製程或組合物特徵 | 益處(pH 9.5對比pH 6.5) |
蛋白質釋放 | 25-50%增加 |
微濾效能 | 滲透蛋白質增加30% |
固體移除(例如,藉由離心) | 水相體積>20%回收率 |
10% (w/v)凝膠強度 | 在95°C下之儲存模數增加≥10倍 |
分離物/濃縮物之緩衝容量 | 降低約30%。 作為乾成分添加至肉仿製品之後,pH穩定,及/或以2%乾固體(w/v)處於MILLI-Q®水中時,小於或等於2.5 mmol NaOH/公克乾固體之當量需要物質pH自pH 3.0變至pH 12.0 |
巴氏滅菌之後的膠凝容量;在10% (w/v) 乾固體下分析 | 在95°C下之儲存模數增加≥2倍。PZ,65°C×30秒 |
來自使用製程變化方案B或C (圖2)之來自釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母或大腸桿菌之乾燥蛋白質組合物在MILLI-Q®水中達到材料之10% (w/v)最終懸浮液。使用NaOH或HCl將pH調節至9.0,並使用Pierce 660nm蛋白質分析試劑(目錄號22660)遵循製造商之說明書來量測蛋白質濃度。隨後將懸浮液在新近添加0.1 mM DTT (最終)之1×最終濃度SDS-PAGE負載緩衝液(4×Laemmli樣品緩衝液Bio-Rad #1610747)中調節至0.1 mg/mL最終蛋白質濃度。將樣品作為50-500 uL等分試樣在密封容器(1.7 mL Eppendorf管)中在95°C下培育10分鐘以使蛋白質變性。使加熱之樣品在20,000×g、25°C下澄清5分鐘,之後在梯度(例如,4-10%聚丙烯醯胺) SDS-PAGE凝膠(Bio-Rad標準凝膠,目錄號5671091)上根據製造商之說明書進行拆分。視染色方法而定,每個凝膠泳道負載介於100 ng至5 ug之間的蛋白質。在相鄰泳道中,根據製造商之推薦負載涵蓋10-200 kDa範圍之分子量標記物(Bio-Rad Precision Plus標記物,目錄號1610373)。在一個實例中,使用Bio-Rad QC膠體考馬斯染色劑(目錄號1610803)根據製造商之說明書觀察蛋白質譜帶。
對脫色之凝膠進行掃描,之後使用配備有Image Lab (目錄號1708270EDU)之Bio-Rad Gel Doc系統量測譜帶強度。使用自動化譜帶偵測及相對於負載標準物進行分子量校準對譜帶進行偵測、定量及定尺寸。資料輸出至微軟Excel。將個別譜帶強度相加以證明超過50%之個別譜帶強度位於10 kDa與200 kDa之間。
實例7
量測製程變化方案前後的緩衝容量變化
來源於使用釀酒酵母細胞作為起始材料之開始(「溶解產物」)及結束(「最終產品」)製程變化方案C (圖2)之蛋白質組合物之兩個獨立試驗規模製程重複實驗係以冷凍乾燥粉末形式獲得。懸浮液(500 mL)由各重複實驗組成,達至2% (w/v)最終懸浮液,將200 mL轉移至配備有磁性攪拌棒之玻璃燒杯。將懸浮液充分混合(200 rpm-700 rpm)。使用配備有針對標準化緩衝溶液(ThermoFisher目錄號810199)校準之pH探針(ThermoFisher Orion模塊目錄號VSTAR82)的pH計來量測懸浮液pH。
以0.2 mL增量添加5 M NaOH,直至pH=12.0+/-0.1單位。記錄添加之NaOH溶液總體積,隨後丟棄樣品。用200 mL懸浮液之新鮮等分試樣重複該製程,但以0.2 mL增量添加5 M HCl增量,直至pH=3.0+/-0.1單位。記錄添加之HCl溶液總體積,隨後丟棄樣品。
為了計算各懸浮液之緩衝容量,將滴定過程中添加之HCl及NaOH總體積相加並且以毫升(mL)表示。將此數字乘以5以獲得將200 mL 2% (w/v)溶液(4公克乾固體)自起始pH 3.0調節至最終pH 12.0所需之總毫莫耳(mmol) NaOH。使用此方法,蛋白質組合物(最終產品)僅需要2.5 mmol/公克乾固體,而起始材料(溶解產物)需要多出約50%之NaOH方可達成相同的pH變化。
實例8
量測蛋白質組合物之硫化氫釋放容量
將製程變化方案B或C (圖2)之來自釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母或大腸桿菌之冷凍乾燥最終產品懸浮在MILLIQ®水中達至2% (w/v),並使用如以上所描述之用於量測緩衝容量之方法使用HCl調節至最終pH為約7.0。將5 mL體積之pH調節樣品轉移至50 mL Falcon錐形管(Corning目錄號352070)中。利用添加25 mM最終濃度之L-半胱胺酸(Acros目錄號173600250)或添加等體積之水(對照組)來製造一式三份樣品。將來自Hach套組之單一過濾器安裝至各管之蓋中,以用於偵測硫化氫(Hach HS-C目錄號2537900)。封蓋之管留在室溫(25°C)下約24小時以偵測釋放之硫化氫。
如下使用標準曲線來決定硫化氫釋放。所使用之Hach偵測套組提供了一組用於測定硫化氫(以ppm表示)之參考影像。此等影像之比色強度係使用Konica Minolta色度計CR-5 E350量測,其中各參考影像皆在黑色背景下量測。此在介於0與1 ppm硫化氫之間的「b」通道(黃色)中產生了線性標準曲線。為了測定四種未知樣品(大腸桿菌(變化方案C)、畢赤氏酵母(變化方案B)、酵母屬(變化方案C)及酵母屬(變化方案B))中之硫化氫釋放,用相同裝置量測濾色器顏色,並且將「b」(黃色)強度與標準曲線相比較。此分析之結果提供於圖6中,顯示硫化氫釋放之半胱胺酸依賴性增加。對照實驗(圖6及圖7)證明此活性:1)相對於未添加L-半胱胺酸之釀酒酵母之起始溶解產物中之高濃度(>1 ppm)降至製程變化方案B或C之最終產品中之不可偵測;2)受鹽酸吡哆醛抑制,與此為所表徵之硫化氫解酶一致(Yamagata及Takeshima (1976) J. Biochem 80: 777)。在圖7中所示之實驗中,藉由在製程變化方案C期間在均質器溶解之後獲取過程中樣品,對乾固體進行定量,隨後補充水(對照組)或達至50 mM最終鹽酸吡哆醛(pH 7)或50 mM最終半胱胺酸(pH 7)而以約 2% (w/v)最終製備了來自酵母屬細胞之溶解產物。如所描述使用HS-C硫醚偵測過濾器量測硫醚釋放,並且與所提供之套組標準物相比較 (如圖7中所示)。注意,吡哆醛抑制硫醚釋放,而未滲濾之溶解產物產生強硫醚信號,該信號在添加L-半胱胺酸後進一步增強。
實例9
在加熱過程中量測溶解產物、離心產物及最終產品蛋白質組合物之流變學
將製程變化方案B或C之來自釀酒酵母或巴斯德畢赤氏酵母之冷凍乾燥溶解產物、離心產物或最終產品懸浮在MILLI-Q®水中達至10% (w/v),並使用如上文針對量測緩衝容量所描述之方法,使用NaOH或HCl調節至最終pH為約7.0。將1.25 mL體積之經pH調節之樣品轉移至混合型流變儀 (TA instruments,DHR單元)中之鋼(Peltier)板。遵循製造商之推薦量測儲存模數,同時溫度以3°C/分鐘之緩變速率自25°C增至95°C。將所得儲存模數資料以對數標度相對於呈線性標度之相應溫度作圖,以產生圖3、圖4及圖5。
實例10
量測疏水性胺基酸之熱暴露
將製程變化方案B或C之冷凍乾燥溶解產物、離心產物或最終產品製備為不同pH (例如 pH 6、7、8、9)及濃度(例如0.5%、1%、2% w/v)之懸浮液。使用如Lo等人 (2004) Anal. Biochem. 332(1):153所描述之「熱偏移」方法量測熱變性過程中之相對及總螢光信號增加。在Bio-Rad CFX96 (C1000 Touch)裝置上使用工廠校準運作樣品。將來自通道2 (HEX)之資料相對於相對螢光強度(RFI)與溫度作圖。在以1°C/分鐘緩變速率自25°C至100°C期間,每分鐘讀取一次螢光。在減去基線及僅染料之信號之後,將最大螢光指定為最大峰高度以計算疏水性暴露)。最大峰高度被視為樣品『100%變性』。
實例11
量測粒度分佈(PSD)
以10% (w/v)製備釀酒酵母或巴斯德畢赤氏酵母溶解產物或最終產品(製程變化方案B或C) (圖2)之懸浮液。此等分散在配備有Hydro MV單元之Malvern Mastersizer 3000單元中,直至遮蔽度達到約15%。使用以下儀器參數量測分佈。材料性質:折射率1.45;吸光度指數0.001;密度1 g/cm
3;分散劑:水;折射率1.33;非球形顆粒;背景量測時間10秒;樣品量測時間10秒;遮蔽限度0.1%-50%;超聲功率,50%;攪拌器,2000 rpm。使用此等值以及製程變化方案B及C,所觀測之PSD值如表2中所提供:D10<0.1 μm;D50 <1.0 μm;D90 <5 μm。當使用pH 6製程時,特徵PSD值顯著更大,此大概由於靜電介導之聚集。
實例12
微生物蛋白質樣品之頂部空間概況之取樣及表徵
在6.0-6.5之製程pH (對照組)或pH 9.0-9.5 (測試組)下製備之由釀酒酵母、巴斯德畢赤氏酵母及大腸桿菌之微生物提取物(LY、CN、MF滲餘物、MF滲透物、UF滲餘物、UF滲透物、最終產品)製備之過程中樣品全部用MILLI-Q®水製成10%溶液(wt/wt)。用10M NaOH或3M HCl將所有樣品調節至pH 6.5 (或pH 9.5)。量取3 mL各樣品至20 mL GCMS小瓶中。為了評估揮發性化合物之產生,使用與Leco Pegasus HT-C高通量TOFMS偶聯之Agilent 7890A GC連同用於自動取樣之Gerstel多用途取樣器。Gerstel自動取樣器用於對各樣品進行HS-SPME。各樣品在50°C下隨250 rpm攪拌培育15分鐘,之後在50°C下隨250 rpm攪拌使用2 cm 50/30 μm二乙烯基苯/羧基/聚二甲基矽氧烷(DVB/CAR/PDMS)、穩定可撓線、23 Ga、自動取樣器(Supleco,目錄號57299-U) SPME纖維提取20分鐘。
提取之樣品在GCMS上運作,藉由在PTV入口設定為240°C之情況下將SPME纖維解吸至Gerstel無隔墊頭中,持續60秒,且在-50°C下用Gerstel冷卻注射系統(CIS)低溫聚焦。將CIS保持在-50°C下持續0.1分鐘,使溫度以+12°C/秒上升至240°C,並在運作之其餘時間內保持。在60米蠟管柱(Agilent,VF-WAXms 60 m×0.25 mm×0.25 mm,部件編號CP9207)上使用50分鐘GC方法(35°C持續2分鐘,以5°C/min升至255°C,在255°C下保持4分鐘)及1.5 mL/min氦氣流速以不分流模式分離解吸附之樣品。藉由質譜儀分析分離之化合物,且所有資料皆在20-500μ質量範圍內收集,其中擷取速率為10譜圖/秒,偵測器電壓偏移為200。
隨後使用經最佳化以供Pegasus 4D (版本4.71.0.0)與NIST MS Search 2.2聯用之Leco ChromaTOF來分析樣品。在兩步製程中鑑定各樣品中各峰之一致性。首先,使用相似性閾值650將訊噪比大於30之各峰之質譜與NIST庫中之質譜相匹配。另外,將內部開發之校準方法應用於資料集,以確定目標化合物之特性。在第二步中,使用ChromaTOF之統計比較功能來比對一組中所有樣品之指定分析。對準所有樣品之單一峰之標準為匹配評分(所有樣品之峰光譜之間的相似性)為700,最大滯留時間差異為10秒,且峰必須存在於至少兩個樣品中。
表4包括使用此技術分析之化合物。
實例13
其他製程變化方案
進行其他製程變化方案。圖9A顯示用於處理細胞懸浮液(CS)之例示性製程變化方案,以鹼耗竭(AE)或還原(例如,使用 50 mM L-半胱胺酸) (RD)開始。在一些情況下,細胞懸浮液進行預先巴氏滅菌(PZ1),作為第一步(例如,單獨,或者與RD或AE以任何順序組合),或者作為在作為第一步驟之RD或AE之後的步驟。圖9B顯示用於跟蹤「饋料」輸入單元之例示性製程變化方案,諸如來自圖9A之製程;一些製程變化方案使用機械裂解,而一些則依賴於細胞穿孔,諸如由圖9A中之處理產生者。
實例14
微生物細胞之化學及熱處理使得僅藉由使混合物澄清便能夠達成實質性靶增濃
微生物細胞(此處為表現豐富靶蛋白之巴斯德畢赤氏酵母菌株)不影響所有可偵測蛋白之相對豐度(圖12A),但允許藉由離心對胞質靶標進行實質性純化(圖12B、圖12C)。在圖12A中,針對在水(「對照肉湯」)中洗滌並用鹼及熱(「AE_PZ」)處理之畢赤氏酵母細胞,顯示總蛋白質含量之相對豐度(在嚴格機械及化學釋放後藉由鳥槍質譜法量測)。此表明「AE_PZ」處理不會顯著改變總蛋白質含量。在圖12B及圖12C中,針對用鹼及熱處理之畢赤氏酵母細胞顯示了蛋白質相對豐度(藉由鳥槍質譜法),隨後分離成固體部分(「AE_PZ_球粒」)及液體部分(「AE_PZ_上清液」)。圖12B說明一些在液體部分中增濃之富含液體部分的蛋白質,包括豐富目標蛋白質和細胞壁相關蛋白質。然而,機械溶解之細胞在澄清後未顯示相對蛋白質豐度之此種變化(圖12D)。
實例15
化學及熱處理僅藉由細胞穿孔及移除固體便可完全釋放目標細胞質蛋白
在冷水(RN)中洗滌來自巴斯德畢赤氏酵母發酵之微生物細胞。添加氫氧化鈉(NaOH)直至攪拌之懸浮液pH穩定在約pH 9下持續至少10分鐘(鹼耗竭,或「AE」)。將AE懸浮液加熱至60°C(PZ),隨後冷卻至4°C。隨後使材料以12-15 kpsi通過均質器(HG),同時冷卻以測試是否提取了其他蛋白質。在各階段,取出樣品,離心,隨後分析目標蛋白向上清液中釋放情況。圖13顯示半胱胺酸(50 mM,在NaOH之前添加)處理改良了目標胞質蛋白釋放,甚至在無半胱胺酸之情況下,超過75%靶胞質蛋白在未均質化之情況下被釋放。
實例16
可選擇化學及熱處理以控制粒度
藉由如所描述之製程處理來調整細胞絮凝,以促進固體移除及重塑細胞壁表面黏附性。圖14A顯示經洗滌之畢赤氏酵母細胞(「CW」)在未添加還原劑之情況下的粒度分佈;細胞利用在pH 10.5下鹼性耗竭(「AE」)及隨後在60°C下加熱(「AE/PZ」)進行處理。體積分數(垂直軸)相對於以微米計之尺寸(水平軸,對數標度)作圖。圖14B顯示經洗滌之細胞(「CW」)在添加食品安全還原劑(L-半胱胺酸,50 mM)之情況下的粒度分佈;細胞隨後在pH 10.5下鹼性耗竭(「AE」),接著加熱至60°C (「AE/PZ」) (軸如圖 14A中)。圖14C顯示如所指示加以處理之畢赤氏酵母細胞之光顯微術影像,顯示與圖14A及圖14B中所示之粒徑資料一致的凝塊或分散。細胞在冷水中稀釋100倍,隨後在可見光下以100倍加以檢視。
實例17
蛋白質組合物I之性質
在中性水中製備製程變化方案1之產物之10% (w/v)懸浮液(參見圖9B),隨後如表2中所描述進行分析。加熱至375°C後,懸浮液形成了具有高彈性模數之凝膠(圖15)且形成彈性閃亮凝膠。
實例18
蛋白質組合物II之性質
藉由將植物油與製程變化方案1之產品之10% (w/v)懸浮液以1:1體積比組合,隨後在室溫下用手持式均質器混合來形成水包油乳液。在375°C下加熱後,乳液為穩定的。此方式製備之乳液對高達20,000×g之離心及在4°C下儲存若干天為穩定的。
實例19
與未調節之pH相比,鹼性處理使酵母(巴斯德畢赤氏酵母)細胞去味
在一些應用中可能不需要說明pH對化學物質之影響。將微生物組合物調節至pH 4.0及10.5,5,000×g離心10分鐘,傾析上清液,用水使細胞復原至起始體積並充分混合。如表2中所指示藉由氣相層析質譜分析樣品。「AE」去味之一個實例,相對於pH 4.0製程,在AE階段升高pH (10.5)增加了風味化合物之移除(圖16A及圖16B)。如表2中所匯總來分析樣品。
揭示了可供所揭示之方法及組合物使用、可與所揭示之方法及組合物聯合使用、可用於製備所揭示之方法及組合物或為所揭示之方法及組合物之產物的方法及組合物。本文中揭示了此等及其他材料,並且應理解,揭示了此等方法及組合物之組合、子集、相互作用、群組等。亦即,儘管可能未明確揭示對此等組合物及方法之每一種不同的個別及集體組合及排列之特定參考,但本文中明確涵蓋並描述了每一者。舉例而言,若揭示並論述特定物質組合物或特定方法以及論述眾多組合物或方法,則除非明確指出相反,否則明確涵蓋該等組合物及方法之各種及每種組合及排列。同樣,亦明確涵蓋並揭示了此等之任何子集或組合。
應理解,儘管本文中已結合眾多不同的態樣描述了方法及物質組合物,但各個態樣之前述描述意欲說明而非限制該等方法及物質組合物之範疇。其他態樣、優勢及修改在以下申請專利範圍之範疇內。
其他實施例
應理解,儘管已結合本發明之詳細描述對本發明進行了描述,但前述描述意欲說明而非限制本發明之範疇,本發明之範疇係由所附申請專利範圍之範疇來限定。其他態樣、優勢及修改在以下申請專利範圍之範疇內。
無
圖1為用於分離及濃縮蛋白質之例示性製程變化方案的示意圖。
圖2為用於分離及濃縮蛋白質之例示性製程變化方案的示意圖。所有步驟皆可繼之以巴氏滅菌(PZ)及/或噴霧乾燥(SD)。所有製程條件:pH 9.3+/-0.3;溫度<10°C。
圖3為顯示高pH值製程之產物在加熱時會產生較堅硬凝膠之圖。製程變化方案A (參見圖2)係在pH 6.5下或在pH 9.5下進行。使用混合型流變儀量測所得材料之流變性質。垂直軸以對數標度顯示儲存模數(Pa)。水平軸顯示培育溫度。
圖4為顯示自微生物蛋白質分離物及濃縮物移除小分子使凝膠堅實度增加>5倍之圖;該效應與固體移除無關。製程變化方案B及C (參見圖2)係在pH 9.3下進行。自離心產物(「CN」)或溶解產物(「LY」)以及各別製程B (「CN/UFO」)或製程C (「LY/UFO」)之最終產物取出過程中樣品。將各樣品冷凍乾燥,隨後懸浮於MILLI-Q®水中達至10% (w/v)。在pH 7.5下分析懸浮液。使用混合型流變儀量測所得材料之流變性質。垂直軸以對數標度顯示儲存模數(Pa)。水平軸顯示培育溫度。
圖5為顯示用天然小分子復原蛋白質分離物及濃縮物使凝膠堅實度降低>2倍之圖。製程變化方案C (參見圖2)係在pH 9.3下進行。將最終材料冷凍乾燥,隨後再懸浮於MILLI-Q®水中或作為過程中樣品取出之初始UF滲透物中達至10% (w/v)。在pH 7.5下分析懸浮液。使用混合型流變儀量測所得材料之流變性質。垂直軸以對數標度顯示儲存模數(Pa)。水平軸顯示培育溫度。
圖6為顯示頂部空間中不存在可偵測硫化氫(H
2S)以及在25 mM L-半胱胺酸添加至使用製程變化方案C或製程變化方案D製備之微生物蛋白質組合物中之後出現>0.1 ppm硫化氫(H
2S)之圖。用於製備蛋白質組合物之微生物為細菌(大腸桿菌(
Escherichia coli))或真核生物(巴斯德畢赤氏酵母(
Pichia pastoris)或釀酒酵母(
Saccharomyces cerevisiae))之代表。
圖7為製程變化方案C期間藉由在均質器溶解之後取出過程中樣品製備之最終約2% (w/v)酵母菌屬細胞溶解產物之頂部空間中H
2S的分析結果的相片。上半部顯示標準物,下半部顯示未添加半胱胺酸之溶解產物(左)、添加鹽酸吡哆醛之製程變化方案C (中)及添加L-半胱胺酸之製程變化方案C (右)的結果。
圖8為血基質B之結構。
圖9A為用於處理細胞懸浮液之例示性製程變化方案之示意圖,包括作為初始步驟之鹼性耗竭(「AE」)或還原(「RD」)。
圖9B為用於分離及濃縮蛋白質之例示性製程變化方案的示意圖,視情況包括圖9之製程之產物中之任一種作為「饋料」。
圖10為藉由在pH 6.5下或在pH 9.5下進行之製程變化方案3 (參見圖9B)產生之蛋白質組合物之流變性質的圖。使用混合型流變儀量測所得材料之流變性質。垂直軸以對數標度顯示儲存模數(Pa)。水平軸顯示培育溫度。
圖11A為藉由在pH 9.3下進行之製程變化方案3 (參見圖9B)產生之蛋白質組合物之流變性質的圖。過程中樣品取自溶解產物(「LY」)及製程變化方案3之最終產物(「LY/UFO」)。將各樣品冷凍乾燥,隨後懸浮於milliQ水中達至10% (w/v)。在pH 7.5下分析懸浮液。
圖11B為藉由在pH 9.3下進行之製程變化方案2 (參見圖9B)產生之蛋白質組合物之流變性質的圖。過程中樣品取自離心產物(「CN」)及製程變化方案2之最終產物(「CN/UFO」)。將各樣品冷凍乾燥,隨後懸浮於milliQ水中達至10% (w/v)。在pH 7.5下分析懸浮液。
圖12A為藉由槍式質譜(MS)在如實施例中所描述自在水中洗滌之畢赤氏酵母細胞(「對照」,水平軸)或用鹼及熱處理之畢赤氏酵母細胞(「AE_PZ」,垂直軸)提取之總蛋白中鑑定之所有蛋白質的相對豐度相關性的圖。所有軸皆為對數標度。
圖12B為藉由槍式質譜(MS)在來自表現目標蛋白之畢赤氏酵母細胞之固體(水平軸,「AE_PZ_球粒」)對比由此溶解產物製備之澄清離心產物(垂直軸,「AE_PZ_上清液」)中鑑定之所有蛋白質的相對豐度相關性的圖。
圖12C為圖12B之注釋型式,顯示單獨離心使目標蛋白質增濃兩倍,自佔級分中蛋白質之53%增至90%。注意,注釋為細胞壁組分之其他蛋白質釋放/富含在澄清離心產物中,與鹼及熱處理造成細胞壁損傷一致。
圖12D為藉由槍式質譜(MS)在表現目標蛋白之畢赤氏酵母細胞之機械溶解產物(水平軸)對比由此溶解產物製備之澄清離心產物(垂直軸)中鑑定之所有蛋白質的相對豐度相關性的圖。
圖13為若干單元操作中已用或未用半胱胺酸處理之釋放目標蛋白質之相對量的圖。
圖14A為經洗滌之畢赤氏酵母細胞(「CW」)在未添加還原劑之情況下的粒度分佈圖;細胞利用在pH 10.5下鹼性耗竭(「AE」)及隨後在60°C下加熱(「AE/PZ」)進行處理。體積分數(垂直軸)相對於以微米計之尺寸(水平軸,對數標度)作圖。
圖14B為經洗滌之畢赤氏酵母細胞(「CW」)在添加食品安全還原劑(L-半胱胺酸,50 mM)之情況下的粒度分佈圖;細胞隨後在pH 10.5下鹼性耗竭(「AE」),接著加熱至60°C (「AE/PZ」)。軸如圖14A中。
圖14C為如所指示加以處理之畢赤氏酵母細胞之光顯微術影像,顯示與圖14A及圖14B中所示之粒度分佈資料一致的凝塊或分散。細胞在冷水中稀釋100倍,隨後在可見光下以100倍加以檢視。
圖15為製程變化方案1之產物之10% (w/v)懸浮液之彈性模數圖(圖9B)。
圖16A為在pH 4及pH 10.5下在蛋白質組合物中偵測之3-甲基-丁醛之量的圖。
圖16B為在pH 4及pH 10.5下在蛋白質組合物中偵測之3-甲基-丁酸之量的圖。
國內寄存資訊(請依寄存機構、日期、號碼順序註記)
無
國外寄存資訊(請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記)
無
Claims (60)
- 一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔; b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及 e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0; b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及 e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約10重量%。
- 一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0; b) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔; c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; e) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及 f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 一種自複數個具有細胞壁之細胞純化蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔; b) 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0; c) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; d) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; e) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及 f)視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 一種自複數個細胞純化蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度; b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; d) 濃縮該滲餘物以形成蛋白質組合物;及 e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 一種自複數個具有細胞壁之細胞純化可溶性蛋白質之方法,該方法包括以下步驟: a) 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔; b) 分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分; c) 過濾該液體部分以形成濾液及滲餘物; d) 濃縮該滲餘物以形成包含該可溶性蛋白質之蛋白質組合物;及 e) 視情況對該蛋白質組合物進行巴氏滅菌, 其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5及約12.0之pH下進行,及/或其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 如請求項6之方法,其中該可溶性蛋白質為含血基質之蛋白質。
- 如請求項6或7之方法,其中該可溶性蛋白質具有熔點,且方法進一步包括以下步驟:在a)之前將該複數個細胞加熱至比該可溶性蛋白質之該熔點低約10°C或約5°C之溫度。
- 如請求項6至8中任一項之方法,其中以乾重計,該可溶性蛋白質佔該蛋白質組合物中蛋白質之至少約30%。
- 如請求項1、2、5或6中任一項之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
- 如請求項3或4之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約8.5至約12.0之pH下進行。
- 如請求項1、2、5或6中任一項之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
- 如請求項3或4之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在約9.0至約10.0之pH下進行。
- 如請求項1、2、5或6中任一項之方法,其中a)至d)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
- 如請求項3或4之方法,其中a)至e)中之每一者獨立地在低於或等於約12°C之溫度下進行。
- 如請求項5之方法,其進一步包括以下步驟:在加熱該複數個細胞與分離該複數個細胞之水性懸浮液以形成固體部分及液體部分之間,用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0。
- 如請求項2至4中任一項之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間的步驟包括以下步驟:用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約5分鐘。
- 如請求項1、3、4或6中任一項之方法,其中穿孔包括用還原劑處理、用酶處理、電穿孔或其組合。
- 如請求項18之方法,其中用該還原劑處理之步驟包括以下步驟:用約10 mM至約500 mM還原當量之該還原劑處理。
- 如請求項18或19之方法,其中該還原劑係選自由半胱胺酸、麩胱甘肽、亞硫酸氫鹽及其組合組成之群。
- 如請求項18至20中任一項之方法,其中該還原劑為食品安全還原劑。
- 如請求項1至21中任一項之方法,其中該方法使該液體部分包含該複數個細胞之胞質蛋白之至少約50重量%。
- 如請求項1至22中任一項之方法,其中該方法使該複數個細胞中至少約25重量%之細胞保持完整。
- 如請求項1至23中任一項之方法,其中該方法不包括對該複數個細胞進行機械溶解。
- 如請求項24之方法,其中與包括機械溶解之類似方法相比,該蛋白質組合物包含較高比例之胞質蛋白。
- 如請求項1至25中任一項之方法,其中該過濾係進行直至將該蛋白質組合物之2% (w/v)懸浮液之pH自pH 3調節至pH 12所需之氫氧化鈉之量小於或等於3 mmol。
- 如請求項1至26中任一項之方法,其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物時,頂部空間中可偵測到之H 2S之量小於約0.1 ppm。
- 如請求項1至27中任一項之方法,其中在25°C下將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之後約24小時,頂部空間中可偵測到之H 2S之量為至少約0.2 ppm。
- 如請求項1至28中任一項之方法,其中以乾重計,該蛋白質組合物包含至少約35%大於5 kDa之化合物。
- 一種藉由如請求項1至29中任一項之方法製備之蛋白質組合物。
- 一種藉由如請求項1至29中任一項之方法製備之蛋白質組合物在食品、飲料或補充劑中之用途。
- 一種蛋白質組合物,其包含: 複數種功能性蛋白質, 其中該蛋白質組合物之緩衝容量為小於約3.0 mmol NaOH/公克乾固體。
- 一種蛋白質組合物,其包含: 複數種功能性蛋白質, 其中將該蛋白質組合物之10% (w/v)懸浮液加熱至至少約95°C產生儲存模數為至少約100 Pa之凝膠。
- 一種蛋白質組合物,其包含: 複數種功能性蛋白質, 其中當未將L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0時,在25°C下約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H 2S之量小於約0.1 ppm。
- 如請求項34之蛋白質組合物,其中在25°C下且在將約25 mM L-半胱胺酸添加至該蛋白質組合物之5 mL 2% (w/v)懸浮液pH 7.0之後約24小時之後,頂部空間中可偵測到之H 2S之量為至少約0.2 ppm。
- 如請求項32至35中任一項之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物為低風味蛋白質組合物。
- 如請求項32至36中任一項之蛋白質組合物,其中以乾重計,該複數種功能性蛋白質包含至少約50%胞質蛋白。
- 如請求項32至37中任一項之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物可使水包油乳液穩定。
- 如請求項32至38中任一項之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物可使水包氣乳液穩定。
- 如請求項32至39中任一項之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約30%之該蛋白質組合物包含豐富蛋白。
- 如請求項40之蛋白質組合物,其中該豐富蛋白為含血基質之蛋白質。
- 如請求項32或34至41中任一項之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物在加熱至65°C後轉變為凝膠。
- 如請求項32至42中任一項之蛋白質組合物,其中以乾重計,至少約40%之該蛋白質組合物包含大於5 kDa之化合物。
- 如請求項32至43中任一項之蛋白質組合物,其中該蛋白質組合物不包含選自由以下組成之群的一或多種化合物:半胱胺酸、1-己醇、2-丁基呋喃、2-甲基-2-戊烯醛、3-辛酮、乙酸乙酯、2-乙基-呋喃、2-戊基-呋喃、吡嗪、1-癸醇、苯乙酮、1-壬醇、2,5-二甲基-吡嗪、十二醛、苯乙醛、壬醛、丁內酯、辛醛、2-癸酮、己醛、2-壬酮、苯甲醛、庚醛、2-辛酮、糠醛、2-庚酮及戊醛。
- 一種食品、飲料或補充劑,其包含如請求項32至44中任一項之蛋白質組合物。
- 一種處理複數個具有細胞壁之細胞的方法,該方法包括以下步驟: 對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔, 其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
- 一種處理複數個細胞之方法,該方法包括以下步驟: 用鹼處理該複數個細胞之水性懸浮液,直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0; 其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
- 一種處理複數個細胞之方法,該方法包括以下步驟: 將該複數個細胞加熱至約50°C至約85°C之溫度; 其中用甘露糖苷酶處理該複數個細胞之上清液在該上清液中產生少於約30 µg/mL可偵測甘露糖,其中該上清液係在50°C下在pH 10.5下培育10分鐘並離心以移除固體之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
- 如請求項46至48中任一項之方法,其中在可溶相中可偵測少於約200 μg/mL β葡聚糖,其中該可溶相係在50°C下在pH 12.0下培育10分鐘之後使用該複數個細胞之10% (w/v)懸浮液製備。
- 如請求項46之方法,其中該穿孔係在約8.5至約12.0之pH下進行。
- 如請求項48之方法,其中該加熱係在約8.5至約12.0之pH下進行。
- 如請求項46之方法,其中該穿孔係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
- 如請求項47之方法,其中該處理係在低於或等於約12°C之溫度下進行。
- 如請求項48之方法,其進一步包括以下步驟:在加熱該複數個細胞之後,用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0。
- 如請求項48之方法,其中當該複數個細胞具有細胞壁時,該方法進一步包括以下步驟:在加熱該複數個細胞之後,對該複數個細胞之該等細胞壁進行穿孔。
- 如請求項47之方法,其中用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH為約8.5至約12.0之步驟包括以下步驟:用鹼處理該複數個細胞之該水性懸浮液直至該水性懸浮液之pH在約8.5與12.0之間後持續至少約3分鐘。
- 如請求項46之方法,其中該方法進一步包括以下步驟:在該穿孔之後將該複數個細胞加熱至至少約60°C。
- 如請求項46之方法,其中穿孔之步驟包括以下步驟:用還原劑處理、用酶處理、電穿孔或其組合。
- 如請求項58之方法,其中用該還原劑處理之步驟包括以下步驟:用約10 mM至約500 mM還原當量之該還原劑處理。
- 一種藉由如請求項46至59中任一項之方法製備之組合物。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
WOPCT/US20/50774 | 2020-09-14 | ||
PCT/US2020/050774 WO2022055513A1 (en) | 2020-09-14 | 2020-09-14 | Protein purification methods at alkaline ph |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202226956A true TW202226956A (zh) | 2022-07-16 |
Family
ID=72659930
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW110134226A TW202226956A (zh) | 2020-09-14 | 2021-09-14 | 蛋白質方法和組成物 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP4210508A1 (zh) |
CN (1) | CN116367734A (zh) |
AU (1) | AU2020467230A1 (zh) |
BR (1) | BR112023003286A2 (zh) |
CA (1) | CA3191734A1 (zh) |
IL (1) | IL301159A (zh) |
MX (1) | MX2023002675A (zh) |
TW (1) | TW202226956A (zh) |
WO (1) | WO2022055513A1 (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA3191387A1 (en) | 2020-09-30 | 2022-04-07 | Nobell Foods, Inc. | Recombinant milk proteins and food compositions comprising the same |
US10947552B1 (en) | 2020-09-30 | 2021-03-16 | Alpine Roads, Inc. | Recombinant fusion proteins for producing milk proteins in plants |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH532903A (fr) * | 1971-06-25 | 1973-01-31 | Nestle Sa | Procédé d'extraction de protéines à partir de cellules de microorganismes |
US5760189A (en) * | 1995-06-02 | 1998-06-02 | Genetics Institute, Inc. | Protein recovery & purification methods |
WO2010046920A1 (en) * | 2008-10-08 | 2010-04-29 | V.B. Medicare Pvt. Ltd. | Methods and kits for tuning permeabilization of cells by three phase partitioning |
US8575320B2 (en) * | 2010-03-18 | 2013-11-05 | Alltech, Inc. | Compositions and methods for separating, characterizing and administering soluble selenoglycoproteins |
US20140220217A1 (en) | 2011-07-12 | 2014-08-07 | Maraxi, Inc. | Method and compositions for consumables |
WO2013010037A1 (en) | 2011-07-12 | 2013-01-17 | Lyrical Foods, Inc. | Methods and compositions for consumables |
CN103889243A (zh) | 2011-07-12 | 2014-06-25 | 马拉克西公司 | 用于消费品的方法和组合物 |
US10039306B2 (en) | 2012-03-16 | 2018-08-07 | Impossible Foods Inc. | Methods and compositions for consumables |
CA3113417C (en) | 2013-01-11 | 2023-03-07 | Impossible Foods Inc. | Non-dairy cheese replica comprising a coacervate |
EP3107400A4 (en) | 2014-02-21 | 2017-11-08 | Impossible Foods Inc. | Soy-based cheese |
KR102669270B1 (ko) | 2014-03-31 | 2024-05-27 | 임파서블 푸즈 인크. | 재조합 효모 |
EP3670646A1 (en) * | 2018-12-21 | 2020-06-24 | Ohly GmbH | Functional yeast protein concentrate |
-
2020
- 2020-09-14 MX MX2023002675A patent/MX2023002675A/es unknown
- 2020-09-14 CN CN202080106539.9A patent/CN116367734A/zh active Pending
- 2020-09-14 AU AU2020467230A patent/AU2020467230A1/en active Pending
- 2020-09-14 IL IL301159A patent/IL301159A/en unknown
- 2020-09-14 BR BR112023003286A patent/BR112023003286A2/pt unknown
- 2020-09-14 CA CA3191734A patent/CA3191734A1/en active Pending
- 2020-09-14 WO PCT/US2020/050774 patent/WO2022055513A1/en active Application Filing
- 2020-09-14 EP EP20781204.1A patent/EP4210508A1/en active Pending
-
2021
- 2021-09-14 TW TW110134226A patent/TW202226956A/zh unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2020467230A1 (en) | 2023-03-09 |
EP4210508A1 (en) | 2023-07-19 |
IL301159A (en) | 2023-05-01 |
WO2022055513A1 (en) | 2022-03-17 |
CA3191734A1 (en) | 2022-03-17 |
MX2023002675A (es) | 2023-05-19 |
BR112023003286A2 (pt) | 2023-05-02 |
CN116367734A (zh) | 2023-06-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11771111B2 (en) | Purified protein | |
US12011016B2 (en) | Protein methods and compositions | |
JP7425110B2 (ja) | コアセルベートを含む、乳成分非含有チーズ代替品 | |
KR102381965B1 (ko) | 소비재를 위한 방법 및 조성물 | |
TW202226956A (zh) | 蛋白質方法和組成物 | |
EP2384122B1 (en) | Use of phytase in the preparation of a fermented soy based product | |
CN112293715A (zh) | 一种赋予食品奶香风味的组合物、一种酶解增香的乳脂及制品及其制备方法 | |
US11918019B2 (en) | Food components having high protein content | |
Kumar et al. | Probiotics and Prebiotics in Meat Products: An Overview |