TW202216194A - 包含抗ｃｄ１３７抗體之組合療法 - Google Patents

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Abstract

本申請案提供使用抗CD137抗體及誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導該個體之癌細胞上之CD137L表現的劑來治療該個體之癌症之組合物及方法。在一些實施例中，該劑係細胞介素，例如IL-2。在一些實施例中，該劑係組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑。在一些實施例中，該劑係DNA損傷劑。

Description

包含抗CD137抗體之組合療法
本申請案處於癌症治療學之領域，且係關於使用結合至人類CD137之抗體治療癌症之組合物及方法。
CD137 (亦稱為CD137受體、4-1BB、TNFRSF9等)係腫瘤壞死因子受體超家族(TNFRS)之跨膜蛋白。當前對CD137之理解表明，其表現通常具有活化依賴性且存在於免疫細胞之廣泛亞組中，包括活化NK細胞及NKT細胞、調控T細胞、樹突細胞(DC)、經刺激肥大細胞、分化骨髓細胞、單核球、嗜中性球及嗜酸性球(Wang, 2009, Immunological Reviews 229: 192-215)。CD137表現亦已展示於腫瘤血管系統上(Broll, 2001, Amer. J. Clin. Pathol. 115(4):543-549；Seaman, 2007, Cancer Cell 11: 539-554)及發炎或動脈粥樣硬化內皮之位點處(Drenkard, 2007 FASEB J. 21: 456-463；Olofsson, 2008, Circulation 117: 1292-1301)。刺激CD137之配位體(即CD137配位體(CD137L))在活化抗原呈遞細胞(APC)、骨髓祖細胞及造血幹細胞上表現。
鼠類及人類T細胞之多項研究表明，CD137促進增強的細胞增殖、存活及細胞介素產生(Croft, 2009, Nat Rev Immunol 9:271-285)。研究已表明，一些CD137促效劑單株抗體(mAb)會增加共刺激分子表現且顯著增強細胞溶解性T淋巴球反應，從而在多種模型中產生抗腫瘤效能。CD137促效劑mAb已在預防及治療環境中展示效能。另外，CD137單一療法及組合療法腫瘤模型已建立持久的抗腫瘤保護性T細胞記憶反應(Lynch, 2008, Immunol Rev. 22: 277-286)。亦已顯示，在多種公認自體免疫模型中，CD137促效劑會抑制自體免疫反應(Vinay, 2006, J Mol Med 84:726-736)。CD137之此雙重活性提供了提供抗腫瘤活性，同時阻止可與破壞免疫耐受性之免疫療法相關之自體免疫副作用之潛能。
本申請案提供使用抗CD137抗體及誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑來治療個體癌症之方法。
在一個態樣中，本發明提供治療個體(例如人類個體)之癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，免疫細胞係選自由以下組成之群：CD8+ T細胞、調控T (Treg)細胞、自然殺手(NK)細胞及NK-T細胞。在一些實施例中，劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體(例如人類個體)之癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞上之CD137表現之細胞介素。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體(例如人類個體)之癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之IL-2。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體(例如聚乙二醇化IL-2)或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係阿地介白素(aldesleukin)。在一些實施例中，IL-2係聚乙二醇(PEG)修飾之IL-2，例如貝培阿地介白素(bempegaldesleukin)。在一些實施例中，IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2(例如約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2)之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次或三次。在一些實施例中，IL-2之投與不超過每三天一次。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2(例如7.2×10 5IU/kg或約1.4×10 7IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體(例如人類個體)之癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞上之CD137表現之組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他(belinostat)、伏立司他(vorinostat)、羅米地辛(romidepsin)及西達本胺(chidamide)。在一些實施例中，HDAC抑制劑係貝林司他。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體(例如人類個體)之癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞上之CD137表現之DNA損傷劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑，例如絲裂黴素(mitomycin)、博來黴素(bleomycin)或多柔比星(doxorubicin)。在一些實施例中，DNA損傷劑係烷基化劑，例如苯達莫斯汀(bendamustine)。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，劑(包括細胞介素，例如IL-2、HDAC抑制劑及DNA損傷劑)係靜脈內投與。在一些實施例中，劑(包括細胞介素，例如IL-2、HDAC抑制劑及DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之前投與。在一些實施例中，劑(包括細胞介素，例如IL-2、HDAC抑制劑及DNA損傷劑)及抗CD137抗體係同時投與。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，該方法進一步包括投與有效量之抗CD20抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體係利妥昔單抗(rituximab)。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，該方法進一步包括投與有效量之免疫檢查點抑制劑。在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係抗PD-1抗體，例如2E5。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，癌症係液體癌症。在一些實施例中，癌症係非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)。在一些實施例中，癌症係T細胞淋巴瘤。在一些實施例中，癌症係B細胞淋巴瘤。在一些實施例中，癌症係多發性骨髓瘤。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，癌症係實體癌症。在一些實施例中，癌症係選自由以下組成之群：乳癌、卵巢癌、結腸直腸癌、胃癌、黑色素瘤、肝癌、肺癌、甲狀腺癌、腎癌、腦癌、子宮頸癌、膀胱癌及食管癌。在一些實施例中，癌症係肺癌。在一些實施例中，癌症係黑色素瘤。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，癌症處於輔助環境(adjuvant setting)中。在一些實施例中，癌症處於新輔助環境(neoadjuvant setting)中。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過500 mg (例如約125 mg至約500 mg)之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過約10 mg/kg (例如約2.5 mg/kg至約10 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係靜脈內投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係約每三週投與一次。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，癌症係晚期癌症。在一些實施例中，癌症係轉移性癌症。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體與來自至少一種選自由以下組成之群之非人類物種之CD137多肽交叉反應：食蟹猴、小鼠、大鼠及狗。在一些實施例中，抗CD137抗體結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-114。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體包含重鏈可變區(VH)及輕鏈可變區(VL)，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3；且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3。在一些實施例中，VH包含SEQ ID NO: 8之胺基酸序列，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體包含重鏈及輕鏈，且其中重鏈包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，且/或輕鏈包含SEQ ID NO: 11之胺基酸序列。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3；且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3。在一些實施例中，VH包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體包含重鏈及輕鏈，其中重鏈包含SEQ ID NO: 20之胺基酸序列，且/或輕鏈包含SEQ ID NO: 21之胺基酸序列。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3；且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3。在一些實施例中，VH包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體包含重鏈及輕鏈，其中重鏈包含SEQ ID NO: 30之胺基酸序列，且/或輕鏈包含SEQ ID NO: 31之胺基酸序列。
在根據上文所述方法中之任一者之一些實施例中，抗CD137抗體包含人類IgG1 Fc區。在一些實施例中，抗CD137抗體包含人類IgG4 Fc區。在一些實施例中，人類IgG4 Fc區包含S241P突變，其中編號係根據Kabat。
亦提供用於本文所述方法中之任一者之組合物、套組及製品。
應理解，上文及本文所述各個實施例之一種、一些或所有性質可組合形成本揭示案之其他實施例。熟習此項技術者將明了本揭示案之該等及其他態樣。藉由下文詳細描述進一步闡述本揭示案之該等及其他實施例。
相關申請案之交叉引用
本申請案主張於2020年6月23日提出申請之美國臨時申請案第63/043,042號之優先權益，該美國臨時申請案之全文皆以引用方式併入本文中。 ASCII文字檔案上之序列表之提交
ASCII文字檔案上之以下提交內容之全文皆以引用方式併入本文中：序列表之電腦可讀形式(CRF) (檔案名稱：695402000740SEQLIST.txt，記錄日期：2021年6月21日，大小：38 KB)。
本申請案提供使用抗CD137抗體及誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑(例如細胞介素(例如IL-2)或組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑)來治療個體癌症之方法。本文所述之方法至少部分地基於本發明人之以下發現：IL-2誘導CD137在T細胞、NK細胞及NK-T細胞上表現，此可有助於組合療法中之IL-2及抗CD137抗體協同效應來治療癌症。另外，儘管抗CD137抗體與持續高劑量之IL-2之組合在活體內小鼠肺癌模型中產生顯著毒性，但抗CD137抗體與低頻率高劑量或持續低劑量之IL-2之組合顯示協同抗腫瘤效應而不會引起毒性。
因此，在一個態樣中，本申請案提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116，及(b)誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑(例如IL-2)。 I. 定義
除非本文另有定義，否則結合本揭示案使用之科學及技術術語應具有熟習此項技術者通常所理解之含義。另外，除非上下文另有要求，否則單數術語應包括複數形式且複數術語應包括單數形式。通常，結合本文所述之抗體改造、免疫療法、細胞及組織培養、分子生物學、免疫學、微生物學、遺傳學以及蛋白質及核酸化學使用之命名及技術係此項技術中已知且常用之彼等命名及技術。
術語「CD137」及「CD137受體」在本申請案中可互換使用，且包括人類CD137受體以及其變異體、同種型及物種同源物。因此，如本文定義及揭示之結合分子亦可結合除人類以外之物種之CD137。在其他情形下，結合分子可完全特異性針對人類CD137且可不展現物種或其他類型之交叉反應性。
術語「CD137抗體」係指如本文所定義能夠結合至人類CD137受體之抗體。
術語「抗體」在本文中係以最廣泛意義使用且具體涵蓋單株抗體(包括全長單株抗體)、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)及抗體片段(例如單鏈可變片段或scFv)，只要其展現期望生物活性即可。
術語「抗體」係公認術語，且可指具有由兩條相同重(H)鏈及兩條相同輕(L)鏈組成之基本四多肽鏈結構之抗原結合蛋白(即免疫球蛋白)。每一L鏈藉由一個共價二硫鍵連接至H鏈，而兩條H鏈藉由一或多個二硫鍵彼此連接，此端視H鏈同型而定。每一重鏈在N末端具有可變區(在本文中縮寫為VH)，其後為恆定區。重鏈恆定區包含三個結構域CH1、CH2及CH3。每一輕鏈在N末端具有可變區(在本文中縮寫為VL)，其後為處於該輕鏈另一端之恆定區。輕鏈恆定區包含一個結構域CL。VL與VH對準且CL與重鏈之第一恆定結構域(CH1)對準。VH及VL之配對一起形成單一抗原結合位點。IgM抗體係由5個基本異四聚體單元以及稱為J鏈之另一多肽組成，且因此含有10個抗原結合位點，而分泌性IgA抗體可聚合形成包含2-5個基本4鏈單元以及J鏈之多價集合體。
基於結構及序列分析，VH區及VL區可進一步細分成多個超變性區，稱為超變區(HVR)。HVR與更保守之區域(稱為框架區(FW))間雜排列。為進行比較，下文列出Yvonne Chen等人之Kabat CDR定義(Selection and Analysis of an Optimized Anti-VEGF Antibody: Crystal Structure of an Affinity-matured Fab in Complex with Antigen, J. Mol. Biol. (1999) 293, 865-881)。每一VH及VL係由三個HVR及四個FW構成，其自胺基末端至羧基末端以下列順序排列：FW1、HVR1、FW2、HVR2、FW3、HVR3、FW4。在本揭示案通篇中，重鏈之三個HVR稱為HVR_H1、HVR_H2及HVR_H3。類似地，輕鏈之三個HVR稱為HVR_L1、HVR_L2及HVR_L3。
如本文所用之術語「CDR」或「互補決定區」意欲意指在重鏈及輕鏈多肽之可變區內發現之不連續抗原組合位點。該等特定區域已闡述於Kabat等人，J. Biol. Chem. 252:6609-6616 (1977)；Kabat等人，U.S. Dept. of Health and Human Services, 「Sequences of proteins of immunological interest」 (1991)；Chothia等人，J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)；Al-Lazikani B.等人， J. Mol. Biol., 273: 927-948 (1997)；MacCallum等人，J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996)；Abhinandan及Martin, Mol. Immunol.,45: 3832-3839 (2008)；Lefranc M.P.等人， Dev. Comp. Immunol., 27: 55-77 (2003)；以及Honegger及Plückthun, J. Mol. Biol., 309:657-670 (2001)，其中定義包括彼此比較時胺基酸殘基之重疊或亞組。無論如何，應用任一定義來指抗體或其移植抗體或變異體之CDR意欲在如本文所定義及使用之術語之範圍內。涵蓋如由上文所引用參考文獻中之每一者定義之CDR之胺基酸殘基闡釋於下表A中作為比較。CDR預測算法及界面為此項技術中已知，包括例如Abhinandan及Martin, Mol. Immunol.,45: 3832-3839 (2008)；Ehrenmann F.等人， Nucleic Acids Res., 38: D301-D307 (2010)；及Adolf-Bryfogle J.等人， Nucleic Acids Res., 43: D432-D438 (2015)。此段中所引用參考文獻之內容之全文皆以引用方式併入本文中，用於本發明且可能納入本文之一或多項請求項中。 表 A ： CDR 定義
   Kabat 1 Chothia 2 MacCallum 3 IMGT 4 AHo 5
VH CDR1 31-35 26-32 30-35 27-38 25-40
VH CDR2 50-65 53-55 47-58 56-65 58-77
VH CDR3 95-102 96-101 93-101 105-117 109-137
VL CDR1 24-34 26-32 30-36 27-38 25-40
VL CDR2 50-56 50-52 46-55 56-65 58-77
VL CDR3 89-97 91-96 89-96 105-117 109-137
1殘基編號遵循Kabat等人，參見上文之命名 2殘基編號遵循Chothia等人，參見上文之命名 3殘基編號遵循MacCallum等人，參見上文之命名 4殘基編號遵循Lefranc等人，參見上文之命名 5殘基編號遵循Honegger及Plückthun，參見上文之命名
重鏈及輕鏈之可變區含有與抗原相互作用之結合結構域。抗體之恆定區可調介免疫球蛋白與宿主組織或因子(包括免疫系統之多種細胞(例如效應細胞)及經典補體系統之第一組分(Clq))之結合。在輕鏈及重鏈內，可變區及恆定區藉由約12個或更多個胺基酸之「J」區連結，重鏈亦包括約10個或更多個胺基酸之「D」區。通常參見Fundamental Immunology第7章(Paul, W.編輯，第2版，Raven Press, N.Y. (1989))。
來自任一脊椎動物物種之L鏈基於其恆定結構域之胺基酸序列可分配至兩種明顯不同之類型(稱為κ及λ)中之一者。端視抗體重鏈(CH)之恆定結構域之胺基酸序列，該等抗體可分配至不同之類別或同型。存在五類抗體：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，其重鏈分別命名為α (alpha)、δ (delta)、ε (epsilon)、γ (gamma)及μ (mu)。藉由γ重鏈Y1-Y4，IgG類抗體可進一步分成四個子類，分別為IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。
如本文所用之「Fc區」係指包含不包括第一恆定區免疫球蛋白結構域之抗體重鏈恆定區之多肽。對於IgG，Fc區可包含免疫球蛋白結構域CH2及CH3以及CH1與CH2之間之鉸鏈。
術語「抗體衍生物」或抗體之「衍生物」係指能夠結合至抗體所結合之相同抗原(例如CD137)且包含連接至另一分子實體之抗體之胺基酸序列的分子。抗體衍生物中所含之抗體胺基酸序列可為全長重鏈、全長輕鏈、抗體全長重鏈之任一或多個部分、抗體全長輕鏈之任一或多個部分、抗體之任何其他片段或完整抗體。另一分子實體可為化學或生物分子。其他分子實體之實例包括化學基團、胺基酸、肽、蛋白質(例如酶、抗體)及化學化合物。另一分子實體可具有任何效用，例如用作偵測劑、標記、標記物、醫藥劑或治療劑。抗體之胺基酸序列可藉由化學偶聯、遺傳融合、非共價締合或其他方式附接或連接至另一分子實體。術語「抗體衍生物」亦涵蓋嵌合抗體、人類化抗體及衍生自抗體(例如CD137抗體)之胺基酸序列修飾(例如保守胺基酸取代、添加及插入)之分子。
如本文所用之兩條多肽序列之間之「序列一致性」指示序列之間 一致之胺基酸之百分比。多肽之胺基酸序列一致性可按慣例使用已知電腦程式(例如Bestfit、FASTA或BLAST)來確定(參見例如Pearson, Methods Enzymol.183:63-98 (1990)；Pearson, Methods Mol. Biol.132:185-219 (2000)；Altschul等人， J. Mol. Biol.215:403-410 (1990)；Altschul等人， Nucleic Acids Res.25:3389-3402 (1997))。在使用Bestfit或任何其他序列比對程式來確定例如特定序列是否與參考胺基酸序列95%一致時，設定參數，使得在參考胺基酸序列之全長內計算一致性百分比且允許參考序列中高達5%之胺基酸殘基總數之同源性差異。此上文所提及確定多肽之間之一致性百分比之方法適用於本文所揭示之所有蛋白質、其片段或變異體。
術語抗體之「抗原結合片段」或「抗原結合部分」係指抗體之保留與抗體所鍵結之抗原(例如CD137)結合之能力的一或多個部分。抗體之「抗原結合片段」之實例包括(i)Fab片段，其係由VL、VH、CL及CH1結構域組成之單價片段；(ii)F(ab′)2片段，其係包含藉由鉸鏈區處之二硫橋連接之兩個Fab片段之二價片段；(iii)由VH及CH1結構域組成之Fd片段；(iv)由抗體單臂之VL及VH結構域組成之Fv片段，(v)dAb片段(Ward等人， Nature341:544-546 (1989))，其係由VH結構域組成；及(vi)經分離互補決定區(CDR)。
術語「結合分子」涵蓋(1)抗體，(2)抗體之抗原結合片段，及(3)抗體之衍生物，其各自如本文所定義。
術語「結合(binding) CD137」、「結合(binds) CD137」、「結合(binding)至CD137」或「結合(binds)至CD137」係指，在活體外分析(例如Biacore分析)中如本文所定義之結合分子以100 nM或更小之親和力(K D)結合至人類CD137。
提及如本文所定義之結合分子(例如抗體)與其結合伴侶(例如抗原)之相互作用之術語「特異性結合」或「特異性結合至」係指結合分子在給定條件集合下區分來自動物物種之所關注抗原與來自不同動物物種之抗原直向同源物的能力。若CD137結合分子結合至人類CD137之EC50低於如在活體外分析中所測定其結合大鼠或小鼠CD137之EC50的50%，則稱該CD137結合分子特異性結合至人類CD137。抗體之結合特異性可使用此項技術中已知之方法測定。此等方法之實例包括使用PHA刺激之原代細胞之FACS、西方墨點法(Western blot)、ELISA測試、RIA測試、ECL測試、IRMA測試及肽掃描。
術語「競爭性結合」係指兩種抗體結合至結合靶之相互作用。若在第二抗體存在下第一抗體與其同族抗原決定基之結合與第二抗體不存在下第一抗體之結合相比可偵測地減少，則第一抗體與第二抗體競爭性結合。可為但無需為以下替代性情形：在第一抗體存在下第二抗體與其抗原決定基之結合亦可偵測地減少。亦即，第一抗體可抑制第二抗體與其抗原決定基之結合，而第二抗體不抑制第一抗體與其各別抗原決定基之結合。然而，當每一抗體可偵測地抑制另一抗體與其同族抗原決定基之結合時，無論程度相同、較大抑或較小，皆稱抗體彼此「交叉競爭」結合其各別抗原決定基。
術語「抗原決定基」係指抗體(或其抗原結合片段)結合之抗原之一部分。抗原決定基可自連續胺基酸或藉由蛋白質之三級摺疊並置之不連續胺基酸形成。自連續胺基酸形成之抗原決定基通常在暴露於變性溶劑時得以保留，而藉由三級摺疊形成之抗原決定基通常在用變性溶劑處理時丟失。抗原決定基可包括不同數量之呈獨特空間構形之胺基酸。測定抗原決定基之空間構形之方法包括例如x射線結晶學、2維核磁共振、氘及氫交換與質譜之組合、或位點定向誘變、或與抗原及其複合結構與其結合抗體及其變異體之計算建模組合使用之所有方法。參見例如Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology，第66卷，G. E. Morris編輯(1996)。一旦確定抗原之期望抗原決定基，便立即可例如使用本文所述之技術生成針對該抗原決定基之抗體。抗體之生成及表徵亦可闡明關於期望抗原決定基之資訊。根據此資訊，然後可競爭性篩選結合至相同抗原決定基之抗體。達成此目的之方法係實施交叉競爭研究以發現彼此競爭性結合之抗體，即競爭結合至抗原之抗體。基於其交叉競爭對抗體「分倉」之高通量製程闡述於PCT公開案第WO 03/48731號中。
術語「人類抗體」係指其中輕鏈及重鏈之整個胺基酸序列係來自人類免疫球蛋白基因之抗體。人類抗體當在小鼠、小鼠細胞或衍生自小鼠細胞之雜交瘤中產生時可含有鼠類碳水化合物鏈。人類抗體可以此項技術中已知之多種方式製備。
術語「人類化抗體」係指含有衍生自人類抗體序列之胺基酸殘基之嵌合抗體。人類化抗體可含有來自非人類動物或合成抗體之一些或所有CDR或HVR，而抗體之框架區及恆定區含有衍生自人類抗體序列之胺基酸殘基。
術語「嵌合抗體」係指包含衍生自不同動物物種之胺基酸序列之抗體，例如具有衍生自人類抗體之可變區及鼠類免疫球蛋白恆定區之抗體。
術語「經分離抗體」或「經分離結合分子」係指如本文所定義之如下抗體或結合分子：(1)不與在其天然狀態下伴隨其之天然締合組分締合；(2)不含來自同一物種之其他蛋白質；(3)由來自不同物種之細胞表現；或(4)不存在於自然界中。經分離抗體之實例包括已使用CD137親和純化之CD137抗體、由雜交瘤或其他細胞株活體外生成之CD137抗體及衍生自基因轉殖動物之CD137抗體。
術語「經分離核酸」係指與存在於核酸之天然來源中之其他核酸分子分離之基因體、cDNA或合成起源之核酸分子或其組合。舉例而言，關於基因體DNA，術語「經分離」包括自基因體DNA天然締合之染色體分離之核酸分子。較佳地，「經分離」核酸不含天然側接核酸之序列(即位於所關注核酸之5′端及3′端之序列)。
「個體(individual)」或「個體(subject)」係哺乳動物，更佳地人類。哺乳動物亦包括(但不限於)農場動物、運動場動物、寵物(例如貓、狗及馬)、靈長類動物、小鼠及大鼠。
提及哺乳動物之某一疾病病狀之術語「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」係指在患有疾病病狀之哺乳動物中產生期望或有益效應。期望或有益效應可包括減小疾病之一或多種症狀(即腫瘤生長及/或轉移，或由免疫細胞之數量及/或活性介導之其他效應及諸如此類)之頻率或嚴重程度、或阻止或抑制疾病、疾患或病症之進一步發展。在治療哺乳動物之癌症之上下文中，期望或有益效應可包括抑制癌細胞之進一步生長或擴散、癌細胞之死亡、抑制癌症之再發、減輕與癌症相關之疼痛或改良哺乳動物之存活。效應可為主觀或客觀的。舉例而言，若哺乳動物係人類，則人類可注意到改良之精力或活力或減輕的疼痛作為對療法之改良或反應之主觀症狀。替代地，臨床醫師可基於體檢、實驗室參數、腫瘤標記物或放射學發現注意到腫瘤大小或腫瘤負荷之減小。臨床醫師可觀察到治療反應之一些實驗室跡象包括測試之正規化，例如白血球計數、紅血球計數、血小板計數、成熟紅血球沉降速率及各個酶水準。另外，臨床醫師可觀察到可偵測腫瘤標記物之減少。替代地，可使用其他測試來評估客觀改良，例如音波圖、核磁共振測試及正電子發射測試。
提及哺乳動物之某一疾病病狀之術語「預防(prevent)」或「預防(preventing)」係指預防或延遲疾病之發作，或預防其臨床或亞臨床症狀之表現。
如本文所用之「有效量」係指有效地治療個體之疾病或病症之劑或藥物之量。在癌症之情形下，劑之有效量可減少癌細胞之數量；減小腫瘤大小；抑制(即在一定程度上減緩且較佳地停止)癌細胞浸潤至外周器官中；抑制(即在一定程度上減緩且較佳地停止)腫瘤轉移；在一定程度上抑制腫瘤生長；及/或在一定程度上減輕與癌症相關之一或多種症狀。如在臨床上下文中所理解，藥物、化合物或醫藥組合物之有效量可或可不結合另一藥物、化合物或醫藥組合物達成。因此，若結合一或多種其他劑可達成或達成期望結果，則「有效量」可視為在投與一或多種治療劑之上下文中，且單一劑可視為以有效量給予。
「輔助環境」係指其中個體已具有癌症史且通常(但不必)對療法有反應之臨床環境，該療法包括(但不限於)手術(例如手術切除)、放射療法及化學療法。「輔助環境」中之治療或投與係指後續治療模式。
「新輔助環境」係指其中該方法係在主要/確定性療法之前實施之臨床環境。
術語「再發」、「復發」或「復發的」係指在臨床評價疾病消失後返回癌症或疾病。遠端轉移或局部再發之診斷可視為復發。
術語「難治性」或「抗性」係指尚未對治療有反應之癌症或疾病。
如本文所用之「不良事件」或「AE」係指接受市售醫藥產品之個體或正參與臨床試驗之接受研究或非研究性醫藥劑之個體中的任何不利醫療事故。AE與個體之治療不一定具有因果關係。因此，AE可為與使用醫藥產品暫時相關聯之任何不利及意外的跡象、症狀或疾病，無論是否視為與醫藥產品相關。AE包括(但不限於)：預先存在之疾病加重；預先存在之間歇性事件或疾患之頻率或強度增加；投與研究藥物後偵測或診斷之疾患，即使其可能在研究開始之前已存在；及在基線時存在且在研究開始後惡化之持續存在之疾病或症狀。AE通常不包括：醫療或手術程序(例如手術、內視鏡檢查、拔牙或輸液)；然而，導致該程序之疾患係不良事件；在研究開始時存在或偵測到之沒有惡化之預先存在之疾病、疾患或實驗室異常；與不利醫療事故無關之出於擇期目的進行之住院或程序(例如用於美容或擇期手術或社會/便利入院之住院)；所研究之疾病或與疾病相關之跡象/症狀，除非比對個體疾患所預期更嚴重；及過量服用研究藥物而無任何臨床跡象或症狀。
如本文所用之「嚴重不良事件」或(SAE)係指任一劑量下之任何不利醫療事故，包括(但不限於)：a)致死；b)危及生命(定義為事件發生時之直接死亡風險)；c)導致持久或顯著之失能或無能力；d)需要患者住院或延長現有住院(例外：在研究期間沒有惡化之預先存在之疾患之擇期治療的住院不視為不良事件。在住院期間出現之併發症係AE，且若併發症延長住院，則該事件為嚴重的)；e)係接受藥物治療之個體後代之先天性異常/出生缺陷；或f)上述定義中不包括的可危害個體或可需要干預以預防上文所列結果中之一者之疾患，除非與個體之潛在疾病明顯相關。「缺乏效能」(進行性疾病)不視為AE或SAE。若源自缺乏效能之跡象及症狀或臨床後遺症符合AE或SAE定義則應報告。
可基於靶病灶使用以下定義來評估反應：「完全反應」或「CR」係指所有靶病灶消失；「部分反應」或「PR」係指以基線SLD為參考，靶病灶之最長直徑之和(SLD)減小至少30%；「穩定疾病」或「SD」係指以自開始治療之最小SLD为参考，靶病灶既不足够减小至满足PR之资格，亦不足够增加至满足PD之资格；且「進行性疾病」或「PD」係指以自開始治療記錄之最小SLD為參考，靶病灶之SLD增加至少20%或存在一或多個新病灶。
可使用反應評價之以下定義來評估非靶病灶：「完全反應」或「CR」係指所有非靶病灶消失；「穩定疾病」或「SD」係指存在不滿足CR或PD之資格之一或多個非靶病灶；且「進行性疾病」或「PD」係指現有非靶病灶之「明確進展」或出現一或多個新病灶視為進行性疾病(若欲僅基於非靶病灶之進展評價個體之PD之時間點，則需要符合其他準則)。
「無進展存活期」 (PFS)指示癌症不生長之治療期間及之後之時間長度。無進展存活期包括個體已經歷完全反應或部分反應之時間量以及個體已經歷穩定疾病之時間量。
術語「多肽」、「蛋白質」及「肽」在本文中可互換使用且可係指兩個或更多個胺基酸之聚合物。
如本文可互換使用之「多核苷酸」或「核酸」係指任一長度之核苷酸之聚合物，且包括DNA及RNA。核苷酸可為去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、經修飾核苷酸或鹼基及/或其類似物或可藉由DNA或RNA聚合酶或藉由合成反應納入聚合物中之任何受質。多核苷酸可包含經修飾核苷酸，例如甲基化核苷酸及其類似物。若存在，可在聚合物組裝之前或之後賦予核苷酸結構之修飾。核苷酸之序列可雜有非核苷酸組分。多核苷酸可包含在合成後製造之修飾，例如結合至標記。其他類型之修飾包括例如「帽」、用類似物取代一或多種天然核苷酸；核苷酸間修飾，例如具有不帶電連接(例如膦酸甲酯、磷酸三酯、胺基磷酸酯、胺基甲酸酯等)之修飾及具有帶電連接(例如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)之修飾；含有側基部分(例如蛋白質，例如核酸酶、毒素、抗體、信號肽、聚L-離胺酸等)之修飾；具有嵌入劑(例如吖啶、補骨脂素等)之修飾；含有螯合劑(例如金屬、放射性金屬、硼、氧化金屬等)之修飾；含有烷基化劑之修飾；具有經修飾連接(例如α變旋異構核酸等)之修飾以及多核苷酸之未經修飾形式。另外，通常存在於糖中之任一羥基皆可經例如膦酸酯基團、磷酸酯基團替代，經標準保護基團保護，或經活化以製備與額外核苷酸之額外連接，或可結合至固體或半固體支撐物。5’及3’末端OH可經胺或1至20個碳原子之有機封端基團部分磷酸化或取代。其他羥基亦可衍生化成標準保護基團。多核苷酸亦可含有此項技術中通常已知之核糖或去氧核糖之類似形式，包括例如2’-O-甲基核糖、2’-O-烯丙基核糖、2’-氟核糖或2’-疊氮基核糖、碳環糖類似物、α-變旋異構糖、差向異構糖(例如阿拉伯糖、木糖或來蘇糖)、吡喃糖、呋喃糖、景天庚酮糖、非環類似物及鹼性核苷類似物(例如甲基核苷)。一或多個磷酸二酯連接可經替代性連接基團替代。該等替代性連接基團包括(但不限於)以下實施例：其中磷酸酯經P(O)S (「硫代酯」)、P(S)S (「二硫代酯」)、(O)NR 2(「醯胺化物」)、P(O)R、P(O)OR’、CO或CH 2(「甲縮醛(formacetal)」)替代，其中每一R或R’獨立地係H或視情況地含有醚(-O-)連接之經取代或未經取代之烷基(1-20個C)、芳基、烯基、環烷基、環烯基或芳烷基(araldyl)。多核苷酸中之所有連接無需相同。前述描述適用於本文中提及之所有多核苷酸，包括RNA及DNA。
如本文所用之「PEG」或「聚乙二醇」意欲涵蓋任何水溶性聚(環氧乙烷)。除非另有指示，否則「PEG聚合物」或聚乙二醇係其中實質上所有(較佳地所有)的單體次單元係環氧乙烷次單元之聚合物，但該聚合物可含有不同的封端部分或官能基，例如用於結合。用於本發明之PEG聚合物將包含以下兩種結構中之一者：「-(CH 2CH 2O) n-」或「-(CH 2CH 2O) n-1CH 2CH 2-」，此端視例如在合成轉型期間末端氧是否已經置換而定。如上文所述，對於PEG聚合物，變量(n)介於約3至4000範圍內，且整個PEG之端基及架構可發生變化。
除非另有指示，否則本揭示案之方法及技術通常係根據此項技術中所熟知之方法且如本說明書通篇引用及論述之多個一般及更特定參考文獻中所述來實施。此等參考文獻包括例如Sambrook及Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2001)；Ausubel等人， Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002)；以及Harlow及Lane， Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990)。酶反應及純化技術係根據製造商之說明書、如此項技術中通常實現或如本文所述來實施。结合本文所述分析化学、合成有机化学以及医学及药物化学使用之命名及实验室程序及技术為此項技術中所熟知且常用之命名及程序及技术。化学合成、化学分析、医药制备、调配及递送以及患者之治疗使用标準技术。
如本文所用之20種習用胺基酸及其縮寫遵循習用用法。參見 Immunology—A Synthesis(第2版，E. S. Golub及D. R. Gren編輯，Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991))。
應理解，本文所述申請案之實施例包括「包含多個態樣及實施例」、「由其組成」及「基本上由其組成」。
如本文所用之術語「約」係指容易地為熟習此技術領域者已知之各別值之一般誤差範圍。本文提及「約」值或參數包括(且闡述)關於該值或參數 本身之變化形式。舉例而言，提及「約X」之描述包括「X」之描述。
如本文所用之提及「不為」值或參數通常意指且闡述「除值或參數以外」。舉例而言，不使用該方法來治療X型癌症意指使用該方法來治療除X以外之類型之癌症。
本文所用之術語「約X-Y」具有與「約X至約Y」相同之含義。
除非上下文另有明確說明，否則如本文及隨附申請專利範圍中所用之單數形式「一(a)」、「一(an)」及「該(the)」包括複數個指示物。
如本文片語(例如「A及/或B」)中所用之術語「及/或」意欲包括A及B；A或B；A (單獨)；及B (單獨)。同樣，如本文片語(例如「A、B及/或C」)中所用之術語「及/或」意欲涵蓋以下實施例中之每一者：A、B及C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A及C；A及B；B及C；A (單獨)；B (單獨)；及C (單獨)。 II. 治療方法
本申請案提供使用特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體與誘導免疫細胞上之CD137表現及/或誘導癌細胞上之CD137L表現的劑(「CD137誘導劑」)之組合來治療癌症之方法。部分III「抗CD137抗體」中之任一抗CD137抗體可與下文子部分「CD137誘導劑」中之任一CD137誘導劑組合用於本文所述之方法。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞上之CD137表現之細胞介素、誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的細胞介素。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的細胞介素。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的細胞介素。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之IL-2。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2之投與不超過每三天一次。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2(例如約7.2×10 5IU/kg或約1.4×10 7IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2之投與 不超過每三天一次。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2(例如約7.2×10 5IU/kg或約1.4×10 7IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2之投與不超過每三天一次。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2(例如約7.2×10 5IU/kg或約1.4×10 7IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如肺癌或黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之IL-2，其中IL-2之投與不超過每三天一次。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2(例如約7.2×10 5IU/kg或約1.4×10 7IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量 之 誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他、伏立司他、羅米地辛及西達本胺。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的HDAC抑制劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他、伏立司他、羅米地辛及西達本胺。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的HDAC抑制劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他、伏立司他、羅米地辛及西達本胺。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的HDAC抑制劑。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他、伏立司他、羅米地辛及西達本胺。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，HDAC抑制劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如B細胞淋巴瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑或烷基化劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素、博來黴素、多柔比星及苯達莫斯汀。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如B細胞淋巴瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑或烷基化劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素、博來黴素、多柔比星及苯達莫斯汀。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如B細胞淋巴瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑或烷基化劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素、博來黴素、多柔比星及苯達莫斯汀。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如B細胞淋巴瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3；及(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑或烷基化劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素、博來黴素、多柔比星及苯達莫斯汀。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)可與一或多種其他治療劑或療法組合投與。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係與一或多種其他治療劑組合投與，用於單獨、依序或同時投與。術語「其他治療劑」係指除本文所提供之抗CD137抗體或CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)以外之任一治療劑。例示性其他治療劑或療法包括例如化學治療劑、免疫治療劑及激素治療劑。在一些實施例中，一或多種其他治療劑係選自由以下組成之群：病毒基因療法、免疫檢查點抑制劑、靶向療法、放射療法及化學療法。
在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係與抗CD20抗體組合投與。例示性抗CD20抗體包括(但不限於)利妥昔單抗、奧妥珠單抗(obinutuzumab)、B-Lyl、11B8、AT80、HI47、2C6、2F2、2H7及GA101、其生物類似物及其衍生物。在一些實施例中，抗CD20抗體係I型抗CD20抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體係II型抗CD20抗體。在一些實施例中，可使用公認抗CD20抗體。舉例而言，美國專利第7,879,984號、WO2005/044859、WO2004/035607、WO2005/103081、WO2004/056312、WO2007/031875及WO2015/095410中所揭示之抗CD-20抗體可用於本文所揭示之方法中。上文所提及公開案中每一者之教示皆以引用方式併入本文中。在一些實施例中，亦可使用與該等公認抗體中之任一者競爭結合至CD-20之抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體係利妥昔單抗。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如B細胞淋巴瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的DNA損傷劑；及(c)有效量之抗CD20抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體係利妥昔單抗。在一些實施例中，DNA損傷劑係DNA螯合劑或烷基化劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素、博來黴素、多柔比星及苯達莫斯汀。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，DNA損傷劑誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。
在一些實施例中，提供治療個體之B細胞淋巴瘤之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者；(b)有效量之苯達莫斯汀；及(c)有效量之抗CD20抗體。在一些實施例中，抗CD20抗體係利妥昔單抗、其生物類似物或其衍生物。在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，抗CD137抗體包含重鏈及輕鏈，且其中重鏈包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，且/或輕鏈包含SEQ ID NO: 11之胺基酸序列。
在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係與免疫檢查點抑制劑組合投與。免疫檢查點抑制劑係抑制免疫系統之控制機制之活性之化合物。免疫系統檢查點或免疫檢查點係免疫系統中之抑制路徑，其通常用於維持自身耐受性或調節生理免疫反應之持續時間及幅度以最小化側組織損傷。檢查點抑制劑可藉由在路徑中刺激刺激性檢查點分子之活性或抑制抑制性檢查點分子之活性來抑制免疫系統檢查點。免疫系統檢查點分子包括(但不限於)細胞毒性T淋巴球抗原4 (CTLA-4)、程式化細胞死亡1蛋白(PD-1)、程式化細胞死亡1配位體1 (PD-L1)、程式化細胞死亡1配位體2 (PD-L2)、淋巴球活化基因3 (LAG3)、B7-1、B7-H3、B7-H4、T細胞膜蛋白3 (TIM3)、B淋巴球及T淋巴球弱化子(BTLA)、含V結構域免疫球蛋白(Ig)之T細胞活化阻抑劑(VISTA)、殺手細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)及A2A腺苷受體(A2aR)。因此，檢查點抑制劑包括CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG3、B7-1、B7-H3、B7-H4、BTLA、VISTA、KIR、A2aR或TIM3之拮抗劑。舉例而言，結合至CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG3、B7-1、B7-H3、B7-H4、BTLA、VISTA、KIR、A2aR或TIM3且拮抗其功能之抗體係檢查點抑制劑。另外，抑制免疫系統檢查點之抑制功能之任一分子(例如肽、核酸、小分子等)係檢查點抑制劑。
在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係特異性結合至免疫檢查點分子之抗體。在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係選自由以下組成之群：抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體及抗CTLA-4抗體。
在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係抗PD-1抗體。例示性抗PD-1抗體包括(但不限於) 2E5 (Cstone Pharmaceuticals)、替雷利珠單抗(tislelizumab，BGB-A317)、BGB-108、STI-A1110、AM0001、BI 754091、信迪利單抗(sintilimab，IBI308)、西利單抗(cetrelimab，JNJ-63723283)、特瑞普利單抗(toripalimab，JS-001)、卡瑞利珠單抗(camrelizumab，SHR-1210、INCSHR-1210、HR-301210)、MEDI-0680 (AMP-514)、MGA-012 (INCMGA 0012)、尼沃魯單抗(nivolumab，BMS-936558、MDX1106、ONO-4538)、司帕珠單抗(spartalizumab，PDR00l)、派姆單抗(pembrolizumab，MK-3475、SCH 900475)、PF-06801591、西米普利單抗(cemiplimab，REGN-2810、REGEN2810)、多塔利單抗(dostarlimab，TSR-042、ANB011)、匹利珠單抗(pidilizumab，CT-011)、FITC-YT-16 (PD-1結合肽)、APL-501或CBT-501或傑諾單抗(genolimzumab，GB-226)、AB-122、AK105、AMG 404、BCD-100、F520、HLX10、HX008、JTX-4014、LZM009、Sym021、PSB205、AMP-224 (靶向PD-1之融合蛋白)、CX-188 (PD-1 probody)、AGEN-2034、GLS-010、佈格利單抗 (budigalimab，ABBV-181)、AK-103、BAT-1306、CS-1003、AM-0001、TILT-123、BH-2922、BH-2941、BH-2950、ENUM-244C8、ENUM-388D4、HAB-21、H EISCOI 11-003、IKT-202、MCLA-134、MT-17000、PEGMP-7、PRS-332、RXI-762、STI-1110、VXM-10、XmAb-23104、AK-112、HLX-20、SSI-361、AT-16201、SNA-01、AB122、PD1-PIK、PF-06936308、RG-7769、CAB PD-1 Abs、AK-123、MEDI-3387、MEDI-5771、4H1128Z-E27、REMD-288、SG-001、BY-24.3、CB-201、IBI-319、ONCR-177、Max-1、CS-4100、JBI-426、CCC-0701、CCX- 4503、其生物類似物及其衍生物。在一些實施例中，亦可使用與該等公認抗體中之任一者競爭結合至PD-1之抗體。在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係2E5。2E5及相關抗PD-1抗體已闡述於例如CN107840887A中，該專利之全文皆以引用方式併入本文中。在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係特瑞普利單抗。特瑞普利單抗及相關抗PD-1抗體已闡述於例如US10066013B2中，該專利之全文皆以引用方式併入本文中。
在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係抗PD-L1抗體。例示性抗PD-L1抗體包括(但不限於)阿替珠單抗(atezolizumab)、阿維魯單抗(avelumab)、德瓦魯單抗(durvalumab，imfinzi)、BGB-A333、SHR-1316 (HTI-1088)、CK-301、BMS-936559、恩沃利單抗(envafolimab，KN035、ASC22)、CS1001、MDX-1105 (BMS-936559)、LY3300054、STI-A1014、FAZ053、CX-072、INCB086550、GNS-1480、CA-170、CK-301、M-7824、HTI-1088 (HTI-131、SHR-1316)、MSB-2311、AK-106、AVA-004、BBI-801、CA-327、CBA-0710、CBT-502、FPT-155、IKT-201、IKT-703、10-103、JS-003、KD-033、KY-1003、MCLA-145、MT-5050、SNA-02、BCD-135、APL-502 (CBT-402或TQB2450)、IMC-001、KD-045、INBRX-105、KN-046、IMC-2102、IMC-2101、KD-005、IMM-2502、89Zr-CX-072、89Zr-DFO-6E11、KY-1055、MEDI-1109、MT-5594、SL-279252、DSP-106、Gensci-047、REMD-290、N-809、PRS-344、FS-222、GEN-1046、BH-29xx、FS-118、其生物類似物及其衍生物。在一些實施例中，亦可使用與該等公認抗體中之任一者競爭結合至PD-L1之抗體。在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係阿替珠單抗。
在一些實施例中，免疫檢查點抑制劑係抗CTLA-4抗體。例示性抗CTLA-4抗體包括(但不限於)伊匹單抗(ipilimumab，IBI310、BMS-734016、MDX010、MDX-CTLA4、MEDI4736)、曲美木單抗(tremelimumab，CP-675、CP-675,206)、APL-509、AGEN1884及CS1002、AGEN1181、阿巴西普(Abatacept，Orencia、BMS-188667、RG2077)、BCD-145、ONC-392、ADU-1604、REGN4659、ADG116、KN044、KN046、其生物類似物及其衍生物。在一些實施例中，可使用公認抗CTLA-4抗體。舉例而言，以下各項中所揭示之抗CTLA-4抗體：WO2019/149281、美國專利第8,119,129號、WO 01/14424、WO 98/42752；WO 00/37504 (CP675,206，亦稱為曲美木單抗；之前稱為替西莫單抗(ticilimumab))、美國專利第6,207,156號；W02001014424、W02000037504及美國專利第8,017,114號；Hurwitz等人(1998) Proc Natl Acad Sci USA 95(17):10067-10071；Camacho等人(2004) J Clin Oncology 22(145):摘要編號2505 (抗體CP-675206)；及Mokyr等人(1998) Cancer Res 58:5301-5304，可用於本文所揭示之方法中。上文所提及公開案中每一者之教示皆以引用方式併入本文中。在一些實施例中，亦可使用與該等公認抗體中之任一者競爭結合至CTLA-4之抗體。在一些實施例中，抗CTLA-4抗體係ADG116。ADG116 (亦稱為TY21580)及相關抗CTLA-4抗體已闡述於例如WO2019/149281中，該專利之全文皆以引用方式併入本文中。
在一些實施例中，提供治療個體癌症(例如黑色素瘤)之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；(b)有效量之誘導個體之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的細胞介素；及(c)有效量之抗PD-1抗體。在一些實施例中，抗PD-1抗體係2E5。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素誘導個體之免疫細胞上之CD137表現且誘導個體之癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素係IL-2。在一些實施例中，IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2(例如約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2)之劑量投與。
在一些實施例中，提供治療個體之黑色素瘤之方法，其包括向個體投與：(a)有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者；(b)有效量之IL-2；及(c)有效量之抗PD-1抗體。在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3，且其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之VH，且/或VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。在一些實施例中，抗CD137抗體包含重鏈及輕鏈，且其中重鏈包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，且/或輕鏈包含SEQ ID NO: 11之胺基酸序列。
癌症治療可藉由例如腫瘤消退、腫瘤重量或大小皺縮、進展時間、存活持續時間、無進展存活期、總反應率、反應持續時間、生活品質、蛋白質表現及/或活性來評估。可採用測定療法效能之方法，包括例如經由放射性成像來量測反應。
本揭示案所提供之抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)可經由任何適宜腸投與途徑或非經腸投與途徑來投與。術語「腸投與途徑」係指經由胃腸道之任一部分投與。腸途徑之實例包括口服、黏膜、頰及直腸途徑或胃內途徑。「非經腸投與途徑」係指除腸途徑以外之投與途徑。非經腸投與途徑之實例包括靜脈內、肌內、真皮內、腹膜內、腫瘤內、膀胱內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、經氣管、關節內、囊下、蛛網膜下、脊柱內、硬膜外及胸骨內、皮下或局部投與。本揭示案之抗體及組合物可使用任一適宜方法、例如藉由口服、鼻胃管、胃造口管、注射、輸注、可植入輸注幫浦及滲透幫浦來投與。適宜投與途徑及方法可端視多種因素而變化，例如所用具體抗體、期望吸收速率、所用具體調配物或劑量形式、所治療病症之類型或嚴重程度、具體作用位點及患者之疾患，且可容易地由熟習此項技術者選擇。在一些實施例中，抗CD137抗體係靜脈內投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係靜脈內投與。
在一些實施例中，抗CD137抗體係以均一劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過以下中之任一者之劑量投與：500 mg、475 mg、450 mg、425 mg、400 mg、390 mg、380 mg、370 mg、360 mg、350 mg、340 mg、330 mg、320 mg、310 mg、300 mg、275 mg、250 mg、225 mg、200 mg、175 mg、150 mg或125 mg。在一些實施例中，抗CD137抗體之劑量在以下範圍中之任一者內，其中範圍具有以下中之任一者之上限：500 mg、475 mg、450 mg、425 mg、400 mg、390 mg、380 mg、370 mg、360 mg、350 mg、340 mg、330 mg、320 mg、310 mg、300 mg、275 mg、250 mg、225 mg、200 mg、175 mg或150 mg，及以下中之任一者之經獨立選擇之下限：475 mg、450 mg、425 mg、400 mg、390 mg、380 mg、370 mg、360 mg、350 mg、340 mg、330 mg、320 mg、310 mg、300 mg、275 mg、250 mg、225 mg、200 mg、175 mg、150 mg或125 mg，且其中下限小於上限。在一些實施例中，抗CD137抗體係以下列中之任一者之劑量投與：約150 mg至約200 mg、約150 mg至約300 mg、約150 mg至約400 mg、約150 mg至約500 mg、約125 mg至約200 mg、約200 mg至約300 mg、約300 mg至約400 mg、約400 mg至約500 mg、約125 mg至約300 mg、約300 mg至約500 mg、約200 mg至約400 mg、約125 mg至約250 mg、約250 mg至約500 mg、約250 mg至約400 mg、約125 mg至約400 mg、約200 mg至約500 mg、或約125 mg至約500 mg。本文所述之劑量可係指適用於人類之劑量或用於特定物種個體之等效劑量。在一些實施例中，對於人類個體，抗CD137抗體係以等效於不超過500 mg (例如不超過400 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係以約125 mg至約500 mg、例如約125 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、約400 mg、約450 mg或約500 mg中之任一者之劑量投與。
在一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過以下中之任一者之劑量投與：10 mg/kg、9 mg/kg、8 mg/kg、7 mg/kg、6 mg/kg、5 mg/kg、4 mg/kg、3 mg/kg、2 mg/kg、1 mg/kg、0.8 mg/kg、0.6 mg/kg、0.5 mg/kg、0.4 mg/kg、0.3 mg/kg、0.2 mg/kg、0.1 mg/kg、0.08 mg/kg、0.05 mg/kg、0.04 mg/kg或0.03 mg/kg。在一些實施例中，抗CD137抗體之劑量在以下範圍中之任一者內，其中範圍具有以下中之任一者之上限：10 mg/kg、9 mg/kg、8 mg/kg、7 mg/kg、6 mg/kg、5 mg/kg、4 mg/kg、3 mg/kg、2 mg/kg、1 mg/kg、0.8 mg/kg、0.6 mg/kg、0.5 mg/kg、0.4 mg/kg、0.3 mg/kg、0.2 mg/kg、0.1 mg/kg、0.08 mg/kg、0.05 mg/kg或0.04 mg/kg，及以下中之任一者之經獨立選擇之下限：9 mg/kg、8 mg/kg、7 mg/kg、6 mg/kg、5 mg/kg、4 mg/kg、3 mg/kg、2 mg/kg、1 mg/kg、0.8 mg/kg、0.6 mg/kg、0.5 mg/kg、0.4 mg/kg、0.3 mg/kg、0.2 mg/kg、0.1 mg/kg、0.08 mg/kg、0.05 mg/kg、0.04 mg/kg或0.03 mg/kg，且其中下限小於上限。在一些實施例中，抗CD137抗體係以下列中之任一者之劑量投與：約0.03 mg/kg至約10 mg/kg、約0.1 mg/kg至約10 mg/kg、約0.3 mg/kg至約10 mg/kg、約1 mg/kg至約10 mg/kg、約3 mg/kg至約10 mg/kg、約5 mg/kg至約10 mg/kg、約0.03 mg/kg至約0.1 mg/kg、約0.1 mg/kg至約0.3 mg/kg、約0.3 mg/kg至約1 mg/kg、約1 mg/kg至約3 mg/kg、約3 mg/kg至約5 mg/kg、約0.1 mg/kg至約3 mg/kg、或約1 mg/kg至約5 mg/kg。本文所述之劑量可係指適用於人類之劑量或用於特定物種個體之等效劑量。在一些實施例中，對於人類個體，抗CD137抗體係以等效於約0.1 mg/kg至約10 mg/kg (例如約3 mg/kg至約8 mg/kg、或約5 mg/kg至約10 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，對於人類個體，抗CD137抗體係以等效於不超過10 mg/kg (例如不超過8 mg/kg或不超過5 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係以約0.03 mg/kg至約10 mg/kg、例如約0.03 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約1 mg/kg、約3 mg/kg、約5 mg/kg、約8 mg/kg或約10 mg/kg中之任一者之劑量投與。
抗CD137抗體之有效量可以單一劑量或以多個劑量投與。對於包括以多個劑量投與抗CD137抗體之方法，例示性給藥頻率包括(但不限於)每週、每週不中斷、每週三週兩次(weekly for two out of three weeks)、每週四週三次(weekly for three out of four weeks)、每三週一次、每兩週一次、每月、每六個月、每年等。在一些實施例中，約每週、每2週一次或每3週一次投與抗CD137抗體。在一些實施例中，每一投與之間之間隔小於約3年、約2年、約12個月、約11個月、約10個月、約9個月、約8個月、約7個月、約6個月、約5個月、約4個月、約3個月、約2個月、約1個月、約4週、約3週、約2週或約1週中之任一者。在一些實施例中，每一投與之間之間隔大於約1週、約2週、約3週、約4週、約1個月、約2個月、約3個月、約4個月、約5個月、約6個月、約7個月、約8個月、約9個月、約10個月、約11個月、約12個月、約2年或約3年中之任一者。在一些實施例中，給藥時間表無中斷。
在一些實施例中，抗CD137抗體係以低頻率、例如以下頻率中之任一者投與：不超過每週一次、每隔一週一次、每三週一次、每月一次、每2個月一次、每3個月一次、每4個月一次、每5個月一次、每6個月一次、每7個月一次、每8個月一次、每9個月一次、每10個月一次、每11個月一次、每年一次或更不頻繁。在一些實施例中，抗CD137抗體係以單一劑量投與。在一些實施例中，抗CD137抗體係約每三週投與一次。
在一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過500 mg、例如不超過400 mg、350 mg、300 mg、250 mg、200 mg、150 mg或125 mg中之任一者之劑量每三週投與一次。在一些實施例中，抗CD137抗體係以約125 mg至約500 mg、例如約125 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg或約400 mg中之任一者之劑量每三週投與一次。
在一些實施例中，抗CD137抗體係以不超過10 mg/kg、例如不超過8 mg/kg、5 mg/kg、3 mg/kg、2 mg/kg或1 mg/kg中之任一者之劑量每三週投與一次。在一些實施例中，抗CD137抗體係以約0.03 mg/kg至約10 mg/kg、例如約0.03 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.3 mg/kg、約1 mg/kg、約3 mg/kg、約5 mg/kg、約8 mg/kg或約10 mg/kg中之任一者之劑量每三週投與一次。
適用於CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量端視諸如CD137誘導劑之性質、所治療癌症之類型及投與途徑之因素而定。CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之例示性劑量包括(但不限於)約1 mg/m 2、約5 mg/m 2、約10 mg/m 2、約20 mg/m 2、約50 mg/m 2、約100 mg/m 2、約200 mg/m 2、約300 mg/m 2、約400 mg/m 2、約500 mg/m 2、約750 mg/m 2、約1000 mg/m 2或更大中之任一者。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量包括在以下範圍中之任一者中：約1至約5 mg/m 2、約5至約10 mg/m 2、約10至約20 mg/m 2、約20至約50 mg/m 2、約50至約100 mg/m 2、約100 mg/m 2至約200 mg/m 2、約200至約300 mg/m 2、約300至約400 mg/m 2、約400至約500 mg/m 2、約500至約750 mg/m 2、或約750至約1000 mg/m 2。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量為約1 µg/kg、約2 µg/kg、約5 µg/kg、約10 µg/kg、約20 µg/kg、約50 µg/kg、約0.1 mg/kg、約0.2 mg/kg、約0.3 mg/kg、約0.4 mg/kg、約0.5 mg/kg、約1 mg/kg、約2 mg/kg、約5 mg/kg、約10 mg/kg、約20 mg/kg、約50 mg/kg、約100 mg/kg或更大中之任一者。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量為約1 µg/kg至約5 µg/kg、約5 µg/kg至約10 µg/kg、約10 µg/kg至約50 µg/kg、約50 µg/kg至約0.1 mg/kg、約0.1 mg/kg至約0.2 mg/kg、約0.2 mg/kg至約0.3 mg/kg、約0.3 mg/kg至約0.4 mg/kg、約0.4 mg/kg至約0.5 mg/kg、約0.5 mg/kg至約1 mg/kg、約1 mg/kg至約5 mg/kg、約5 mg/kg至約10 mg/kg、約10 mg/kg至約20 mg/kg、約20 mg/kg至約50 mg/kg、約50 mg/kg至約100 mg/kg、或約1 mg/kg至約100 mg/kg中之任一者。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量為約1 μg、約10 μg、約50 μg、約100 μg、約500 μg、約1 mg、約10 mg、約50 mg、約100 mg、約500 mg或約1000 mg中之任一者。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之劑量為約1 μg至約10 μg、約10 μg至約50 10 μg、約50 μg至約100 μg、約100 μg至約500 μg、約500 μg至約1 mg、約1 mg至約5 mg、約5 mg至約10 mg、約10 mg至約25 mg、約25 mg至約50 mg、約50 mg至約100 mg、約100 mg至約500 mg、約500 mg至約1000 mg、約1 μg至約1 mg、約1 mg至約1000 mg或約1 μg至約1000 mg中之任一者。
在一些實施例中，每天投與CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)。在一些實施例中，以至少約每週1×、約每週2×、約每週3×、約每週4×、約每週5×、約每週6×或約每週7× (即每天)中之任一者投與CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)。在一些實施例中，每週投與CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)。在一些實施例中，每週不中斷；每週，三週兩次；每週，四週三次；每兩週一次；每3週一次；每4週一次；每6週一次；每8週一次、每月或每2個月至12個月投與CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)。在一些實施例中，每一投與之間之間隔小於約6個月、約3個月、約1個月、約20天、約15天、約12天、約10天、約9天、約8天、約7天、約6天、約5天、約4天、約3天、約2天或約1天中之任一者。在一些實施例中，每一投與之間之間隔大於約1個月、約2個月、約3個月、約4個月、約5個月、約6個月、約8個月或約12個月中之任一者。在一些實施例中，給藥時間表無中斷。在一些實施例中，每一投與之間之間隔不超過約一週。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係使用與抗CD137抗體相同之給藥時間表投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係使用與抗CD137抗體不同之給藥時間表投與。
在一些實施例中，IL-2係以持續低劑量投與。在一些實施例中，IL-2係至少每天投與。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次。在一些實施例中，IL-2係每天投與三次，即每8小時一次。在一些實施例中，IL-2係至少每天投與達至少7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天或更長時間。在一些實施例中，IL-2係每天投與兩次達約14天至約28天。在一些實施例中，IL-2係以不超過約2.8×10 6、約2.5×10 6、約2×10 6、約1.5×10 6、約1×10 6、約9×10 5、約8×10 5、約7×10 5、約6×10 5、約5×10 5、約4×10 5、約3×10 5、約2×10 5、約1.4×10 5國際單位(IU)/m 2中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約1.4×10 5IU/m 2至5×10 5IU/m 2、約5×10 5IU/m 2至1×10 6IU/m 2、約1×10 6IU/m 2至1.5×10 6IU/m 2、約1×10 6IU/m 2至2×10 6IU/m 2、約1×10 6IU/m 2至2.8×10 6IU/m 2、約1.4×10 6IU/m 2至2.8×10 6IU/m 2、約7×10 5IU/m 2至2.8×10 6IU/m 2、或約1.4×10 5IU/m 2至2.8×10 6IU/m 2中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以不超過約8×10 4IU/kg、約7.2×10 4IU/kg、約6×10 4IU/kg、約5×10 4IU/kg、約4×10 4IU/kg、約3×10 4IU/kg、約2×10 4IU/kg、約1×10 4IU/kg、約9×10 3IU/kg、約8×10 3IU/kg、約7×10 3IU/kg、約6×10 3IU/kg或約5×10 3IU/kg中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約5×10 3IU/kg至1×10 4IU/kg、約1×10 4IU/kg至4×10 4IU/kg、約4×10 4IU/kg至8×10 4IU/kg、約5×10 3IU/kg至8×10 4IU/kg、約5×10 3IU/kg至5×10 4IU/kg、約5×10 3IU/kg至7.2×10 4IU/kg、約1×10 4IU/kg至7.2×10 4IU/kg、或約7.2×10 3IU/kg至7.2×10 4IU/kg中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg之劑量每天投與兩次或三次。在一些實施例中，IL-2係以約2.8×10 6IU/m 2之劑量每天投與兩次或三次。本文所述之劑量可指適用於小鼠之劑量或用於特定物種個體(例如人類)之等效劑量。
在一些實施例中，IL-2係以低頻率投與。在一些實施例中，IL-2係以不超過約每2天一次、約每3天一次、約每4天一次、約每5天一次、約每6天一次、約每7天一次或更長時間一次之頻率投與。在一些實施例中，IL-2係以不超過每三天一次之頻率投與。在一些實施例中，投與IL-2不超過約14個劑量、約13個劑量、約12個劑量、約11個劑量、約10個劑量、約9個劑量、約8個劑量、約7個劑量、約6個劑量、約5個劑量、約4個劑量或約3個劑量中之任一者。在一些實施例中，IL-2係以至少約2.8×10 6、約3×10 6、約4×10 6、約5×10 6、約6×10 6、約7×10 6、約8×10 6、約9×10 6、約1×10 7、約1.2×10 7或約1.4×10 7IU/m 2中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以不超過約1.4×10 7、約1.2×10 7、約1×10 7、約9×10 6、約8×10 6、約7×10 6、約6×10 6、約5×10 6、約4×10 6、約3×10 6或約2.8×10 6IU/m 2中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約2.8×10 6IU/m 2至5×10 6IU/m 2、約5×10 6IU/m 2至1×10 7IU/m 2、約2.8×10 6IU/m 2至7×10 6IU/m 2、約7×10 6IU/m 2 至1.4×10 7IU/m 2、約1×10 7IU/m 2至1.4×10 7IU/m 2、約2.8×10 6IU/m 2至1×10 7IU/m 2、或約2.8×10 6IU/m 2至1.4×10 7IU/m 2中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以至少約7.2×10 4IU/kg、約8×10 4IU/kg、約9×10 4IU/kg、約1×10 5IU/kg、約2×10 5IU/kg、約3×10 5IU/kg、約4×10 5IU/kg、約5×10 5IU/kg、約6×10 5IU/kg或約7.2×10 5IU/kg中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以不超過約7.2×10 5IU/kg、約6×10 5IU/kg、約5×10 5IU/kg、約4×10 5IU/kg、約3×10 5IU/kg、約2×10 5IU/kg、約1×10 5IU/kg、約9×10 4IU/kg、約8×10 4IU/kg或約7.2×10 4IU/kg中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 4IU/kg至1×10 5IU/kg、約1×10 5IU/kg至3×10 5IU/kg、約3×10 5IU/kg至7.2×10 5IU/kg、約7.2×10 4IU/kg至2×10 5IU/kg、約1×10 5IU/kg至7.2×10 5IU/kg、或約7.2×10 4IU/kg至7.2×10 5IU/kg中之任一者之劑量投與。在一些實施例中，IL-2係以約7.2×10 5IU/kg之劑量每三天投與一次。在一些實施例中，IL-2係以約1.4×10 7IU/m 2之劑量每三天投與一次。本文所述之劑量可指適用於小鼠之劑量或用於特定物種個體(例如人類)之等效劑量。
在一些實施例中，DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)係以約12.5 mg/kg之劑量投與。在一些實施例中，DNA損傷劑(例如苯達莫斯汀)係每天投與一次。在一些實施例中，DNA損傷劑係投與至少約3個劑量、約4個劑量、約5個劑量、約6個劑量、約7個劑量或更多個劑量中之任一者。本文所述之劑量可指適用於小鼠之劑量或用於特定物種個體(例如人類)之等效劑量。
在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係依序投與，即抗CD137抗體係在投與CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之前或之後投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之前投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之前不超過約15分鐘、約30分鐘、約1小時、約2小時、約3小時、約4小時、約5小時、約6小時、約12小時或約24小時中之任一者投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之前約數天或數週(例如約1天、約2天、約3天、約4天、約5天、約6天、約1週、約2週、約3週、約4週或更長時間中之任一者)投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之後投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之後不超過約15分鐘、約30分鐘、約1小時、約2小時、約3小時、約4小時、約5小時、約6小時、約12小時或約24小時中之任一者投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體之後約數天或數週(例如約1天、約2天、約3天、約4天、約5天、約6天、約1週、約2週、約3週、約4週或更長時間中之任一者)投與。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係一個接一個地立即投與(例如在兩次投與之間不到5分鐘或更短時間)。舉例而言，在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在即將投與抗CD137抗體前投與。在一些實施例中，CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與抗CD137抗體後立即投與。
在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係同時投與。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係經由單獨組合物同時投與。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係作為單一組合物投與。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)係在投與組合物之前(例如在即將投與組合物前，例如在之前不到約10分鐘、5分鐘或1分鐘內)混合。在一些實施例中，包含抗CD137抗體及CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)之組合物係在投與之前預製造且儲存至少約1小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、12小時、24小時、2天、3天、4天、5天、6天、7天、2週、3週或更長時間。
在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑係投與2個或更多個週期，例如約2個、約3個、約4個、約5個、約6個、約7個、約8個、約9個、約10個、約11個、約12個或更多個週期中之任一者。抗CD137抗體及CD137誘導劑之投與可在延長時間段內延長，例如約一週至約一個月、約一個月至約一年、約一年至約幾年。在一些實施例中，抗CD137抗體及CD137誘導劑係在至少約1週、約2週、約3週、約4週、約5週、約1個月、約2個月、約3個月、約4個月、約5個月、約6個月、約7個月、約8個月、約9個月、約10個月、約11個月、約12個月、約1年、約2年、約3年、約4年或更長時間中之任一者之時段內投與。
本文所述之方法可用於治療多種癌症。在一些實施例中，癌症係實體癌症。在一些實施例中，癌症係液體癌症。涉及CD137之多種癌症，無論惡性抑或良性且無論原發性抑或繼發性，皆可使用本揭示案所提供之方法治療或預防。根據美國癌症聯合委員會(American Joint Committee on Cancer，AJCC)分期小組，該等方法適用於所有時期之液體或實體癌症，包括I期、II期、III期及IV期。在一些實施例中，癌症係：早期癌症、非轉移性癌症、原發性癌症、晚期癌症、局部晚期癌症、轉移性癌症、緩解中之癌症、輔助環境中之癌症或新輔助環境中之癌症。在一些實施例中，癌症係可局部切除的、不可局部切除的或不可切除的。在一些實施例中，癌症為先前療法難治的。
在一些實施例中，癌症係液體癌症。在一些實施例中，癌症係非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)。在一些實施例中，NHL源自B淋巴球。在一些實施例中，癌症係B細胞淋巴瘤。在一些實施例中，癌症係瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)。
在一些實施例中，癌症係T細胞淋巴瘤(TCL)。在一些實施例中，癌症係T淋巴母細胞性淋巴瘤或白血病。在一些實施例中，癌症係外周T細胞淋巴瘤。在一些實施例中，癌症係血管免疫母細胞性T細胞淋巴瘤(AITL)。在一些實施例中，癌症係結節外自然殺手/T細胞淋巴瘤，例如鼻型。在一些實施例中，癌症係腸病變相關之腸T細胞淋巴瘤(EATL)。在一些實施例中，癌症係淋巴結/扁桃體型TCL。在一些實施例中，癌症係退行性大細胞淋巴瘤(ALCL)。在一些實施例中，癌症係外周T細胞淋巴瘤(PTCL)。
在一些實施例中，癌症係多發性骨髓瘤。
在一些實施例中，癌症係實體癌症。在一些實施例中，癌症係選自由以下組成之群：乳癌、卵巢癌、結腸直腸癌、胃癌、黑色素瘤、肝癌、肺癌、甲狀腺癌、腎癌、腦癌、子宮頸癌、膀胱癌及食管癌。在一些實施例中，癌症係肺癌，例如非小細胞肺癌或NSCLC。在一些實施例中，癌症係黑色素瘤。
本文所述之方法可用於癌症治療之各個態樣。在一些實施例中，提供抑制個體之細胞增殖(例如腫瘤生長)之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，抑制至少約10% (包括例如至少約20%、約30%、約40%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%或更大中之任一者)之細胞增殖。
在一些實施例中，提供抑制個體之腫瘤轉移之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，抑制至少約10% (包括例如至少約20%、約30%、約40%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%或更大中之任一者)之轉移。
在一些實施例中，提供減少(例如消滅)個體之預先存在之腫瘤轉移(例如轉移至淋巴結)之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，減少至少約10% (包括例如至少約20%、約30%、約40%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%或更大中之任一者)之轉移。
在一些實施例中，提供減小個體之預先存在之腫瘤轉移(例如轉移至淋巴結)之發生率或負荷的方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。
在一些實施例中，提供減小個體之腫瘤大小之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，該方法使腫瘤大小減小至少約10% (包括例如至少約20%、約30%、約40%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%或更大中之任一者)。
在一些實施例中，提供延長個體之癌症之疾病進展時間之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，該方法使疾病進展時間延長至少1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、16週、20週、24週、28週、32週、36週或更多週中之任一者。
在一些實施例中，提供延長患有癌症之個體之存活期(例如總存活期或無進展存活期)之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，該方法使個體之存活期延長至少1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、18個月或24個月中之任一者。
在一些實施例中，提供緩和患有癌症之個體之一或多種症狀之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。
在一些實施例中，提供改良患有癌症之個體之生活品質之方法，其包括向個體投與有效量之本文所述抗CD137抗體中之任一者及有效量之本文所述CD137誘導劑中之任一者。
亦提供本文所述抗CD137抗體中之任一者及本文所述CD137誘導劑中之任一者的組合物用於本部分所述之方法中，及本文所述抗CD137抗體中之任一者及本文所述CD137誘導劑中之任一者於製造用來治療癌症之藥物之用途。 CD137 誘導劑
本文所述之方法包括投與誘導個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導個體之癌細胞上之CD137L表現的劑(在本文中亦稱為「CD137誘導劑」)。
在一些實施例中，CD137誘導劑誘導免疫細胞上之CD137表現。例示性免疫細胞包括(但不限於)外周血單核細胞(PBMC)、CD8+ T細胞、調控T (Treg)細胞、自然殺手(NK)細胞及NK-T細胞。在一些實施例中，CD137誘導劑誘導至少約5倍、約10倍、約20倍、約50倍、約100倍、約200倍、約500倍、約1000倍或更多倍中之任一者的CD137表現。在一些實施例中，CD137誘導劑使個體樣品(例如血液樣品或腫瘤生檢)中CD137+免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)之百分比增加至少約5倍、約10倍、約20倍、約50倍、約100倍、約200倍、約500倍、約1000倍或更多倍中之任一者。在一些實施例中，在用CD137誘導劑治療後個體中表現CD137之免疫細胞(例如CD8+ T細胞、Treg細胞、NK細胞及/或NK-T細胞)之百分比係至少約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%或更大中之任一者。CD137之表現可在RNA或蛋白質層級上使用此項技術中已知之方法(包括例如定量聚合酶鏈反應(qPCR)、RNA測序、西方墨點法及免疫組織化學染色)來評價。
在一些實施例中，CD137誘導劑誘導癌細胞上之CD137L表現。在一些實施例中，CD137誘導劑誘導至少約5倍、約10倍、約20倍、約50倍、約100倍、約200倍、約500倍、約1000倍或更多倍中之任一者的CD137L表現。在一些實施例中，CD137誘導劑使個體樣品(例如腫瘤生檢)中CD137L+癌細胞之百分比增加至少約5倍、約10倍、約20倍、約50倍、約100倍、約200倍、約500倍、約1000倍或更多倍中之任一者。在一些實施例中，在用CD137誘導劑治療後個體中表現CD137L之癌細胞之百分比係至少約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%或更大中之任一者。CD137L之表現可在RNA或蛋白質層級上使用此項技術中已知之方法(包括例如定量聚合酶鏈反應(qPCR)、RNA測序、西方墨點法及免疫組織化學染色)來評價。
在一些實施例中，CD137誘導劑係細胞介素。例示性細胞介素包括(但不限於) IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。在一些實施例中，細胞介素係野生型細胞介素、天然細胞介素、重組細胞介素、經化學修飾之細胞介素(例如聚乙二醇化細胞介素、去糖基化細胞介素等)或細胞介素類似物。「細胞介素類似物」係指具有一或多個胺基酸殘基之插入、缺失及/或取代、同時保留與野生型細胞介素實質上相同(例如至少約60%、約70%、約80%、約90%、約95%或更大中之任一者)之活性(例如受體結合)之經改造多肽。通常，與野生型細胞介素相比，細胞介素類似物具有增強的藥物動力學性質，例如穩定性及血清半衰期。在一些實施例中，細胞介素類似物具有與野生型細胞介素之胺基酸序列具有至少約80%、約85%、約90%、約91%、約92%、約93%、約94%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%或更大一致性中之任一者之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞介素類似物相對於野生型細胞介素之胺基酸序列具有約10個、約9個、約8個、約7個、約6個、約5個、約4個、約3個、約2個或約1個突變中之任一者(例如取代、插入及/或缺失)。
在一些實施例中，CD137誘導劑係IL-2。在一些實施例中，CD137誘導劑係IL-2受體之促效劑。在一些實施例中，CD137誘導劑係IL-2Rβ選擇性促效劑。在一些實施例中，CD137誘導劑係長效IL-2類似物。在一些實施例中，CD137誘導劑係IL-2與水溶性聚合物(例如PEG)之結合物。長效IL-2Rβ選擇性促效劑之非限制性實例闡述於WO 2012/065086中，該專利之全文皆以引用方式併入本文中。
IL-2或介白素-2係調控淋巴球活性之細胞介素。天然IL-2係約15.5-16 kDa之蛋白質，其藉由結合至IL-2受體起作用。IL-2受體係具有三條鏈之複合物：IL-2α (CD25)、IL-2β (CD122)及IL-2γ (CD132)，IL-2Rα及IL-2Rβ中之每一者對IL-2具有結合親和力，而僅IL-2Rγ不具明顯親和力。參見Theze等人 ，(1994) Immunol. Today 17(10):481-486。IL-2受體(IL-2R) α次單元以低親和力(Kd約為10 -8M)結合IL-2。IL-2及單獨CD25之相互作用不會引起信號轉導，但具有增加IL-2R親和力之能力(在結合至β及γ次單元時)。IL-2R之β及γ次單元之異二聚化為T細胞中之信號傳導所必需。IL-2可經由中間親和力二聚體CD122/CD132 IL-2R (Kd約為10 -9M)或經由高親和力三聚體CD25/CD122/CD132 IL-2R (Kd約為10 -11M)進行信號傳導。二聚體IL-2R係由記憶CD8+ T細胞及NK細胞表現，而調控T細胞及活化T細胞表現高水準之三聚體IL-2R。
高劑量IL-2療法PROLEUKIN ®已經美國食品藥品管理局(U.S. Food and Drug Administration，FDA)批準用於治療患有轉移性黑色素瘤及腎細胞癌(RCC)之患者，且在患者亞組中具有有益結果。然而，與高劑量IL-2相關之血管滲漏症候群、低血壓及肝毒性限制其在癌症免疫療法中之使用。另外，高劑量IL-2可擴增癌症患者中之有效阻抑性CD4+CD25+ Foxp3+ Treg，此可能限制其作為癌症療法之單一療法之效能。
在一些實施例中，IL-2係人類IL-2。人類IL-2 (UniProt ID: P60568)係具有153個胺基酸(包括胺基酸殘基1-20處之信號肽)之糖基化蛋白。在一些實施例中，IL-2係包含SEQ ID NO: 43之胺基酸序列之胺基酸殘基21-153之野生型人類IL-2。在一些實施例中，IL-2係人類IL-2之功能性變異體。 SEQ ID NO: 43人類IL-2胺基酸序列 MYRMQLLSCIALSLALVTNSAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT
在一些實施例中，IL-2係人類IL-2之類似物。在一些實施例中，IL-2包含SEQ ID NO: 44之胺基酸序列。在一些實施例中，IL-2係阿地介白素。阿地介白素(例如PROLEUKIN ®)係人類重組IL-2產品，其係分子量為約15,300道爾頓之經高度純化之蛋白質。化學名稱係去丙胺醯基-1，絲胺酸-125人類介白素-2。PROLEUKIN ®係藉由重組DNA技術使用含有編碼經修飾人類IL-2之人類IL-2基因類似物之經遺傳改造之大腸桿菌( E. coli)菌株來產生。阿地介白素在以下方面不同於天然IL-2：a)阿地介白素因其衍生自大腸桿菌而未經糖基化；b)分子不具N末端丙胺酸；c)分子具有取代胺基酸位置125處之半胱胺酸之絲胺酸；及d)阿地介白素之聚集狀態可能不同於天然IL-2之聚集狀態。 SEQ ID NO: 44阿地介白素胺基酸序列 MAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT
在一些實施例中，IL-2係經化學修飾之人類IL-2，例如去糖基化及/或聚乙二醇修飾之(聚乙二醇化) IL-2。在一些實施例中，IL-2係包含SEQ ID NO: 44之胺基酸序列之聚乙二醇化IL-2。在一些實施例中，IL-2係聚乙二醇化阿地介白素。在一些實施例中，IL-2包含約1個、約2個、約3個、約4個、約5個、約6個或更多個中之任一者之聚乙二醇部分。在一些實施例中，IL-2係貝培阿地介白素。
貝培阿地介白素(亦稱為NKTR-214)係經改造之IL-2R促效劑，其具有平均6個可釋放聚乙二醇(PEG)分子連接至IL-2 (阿地介白素)之IL-2Rα結合區。與CD122/CD132相比，此位點特異性聚乙二醇化優先減少IL-2與CD25之結合。貝培阿地介白素及其他長效IL-2類似物已闡述於例如Sharma M.等人 ，Nature Communications, (2020) 11:661；WO2012/065086A1及WO2015125159A1中，該等文獻之全文皆以引用方式併入本文中。
在一些實施例中，CD137誘導劑係組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑。在一些實施例中，HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他、伏立司他、羅米地辛及西達本胺。在一些實施例中，HDAC抑制劑係貝林司他。
組蛋白及其他蛋白質之乙醯化狀態係藉由組蛋白乙醯基轉移酶(HAT)及組蛋白去乙醯酶(HDAC)來維持。HAT催化乙醯基自乙醯基-CoA轉移至蛋白質中之離胺酸殘基且HDAC將其去除。端視去除乙醯基之機制，HDAC可分成兩個不同的家族。「經典家族」包含Zn 2+依賴性HDAC，HDAC之第二家族之催化依賴於NAD +，且隨後形成O-乙醯基-ADP-核糖及菸鹼醯胺作為乙醯基轉移之結果。在人類中，HDAC包含18個基因之家族且基於其與酵母菌類似物之同源性分成四類：I類(HDAC 1、2、3、8)、IIa類(HDAC 4、5、7、9)、IIb類(HDAC 6、10)及IV類(HDAC11)。
已開發出多種HDAC抑制劑，包括：1)羥肟酸；2)脂族酸；3)苯甲醯胺；及4)環四肽。伏立司他(SAHA)、帕比司他(panobinostat，LBH-589)、貝林司他(PXD-101)及羅米地辛(FK-228)已經US FDA批準用於治療癌症(難治性皮膚/外周T細胞淋巴瘤)。
在一些實施例中，CD137誘導劑係DNA損傷劑。在一些實施例中，DNA損傷劑係烷基化劑。例示性烷基化劑包括(但不限於)苯達莫斯汀(BENDEKA ®)、苯丁酸氮芥(chlorambucil，LEUKERAN ®)、環磷醯胺(mcyclophosphamide，CYTOXAN ®)、異環磷醯胺(ifosfamide，IFEX ®)、鹽酸甲基二氯乙胺(MUSTARGEN ®)、塞替派(thiotepa，THIOPLEX ®)、鏈佐黴素(streptozotocin，ZANOSAR ®)、卡莫司汀(carmustine，BICNU ®、GLIADEL WAFER ®)、洛莫司汀(lomustine，CEENU ®)及達卡巴嗪(dacarbazine，DTIC-DOME ®)。在一些實施例中，CD137誘導劑係苯達莫斯汀。
在一些實施例中，CD137誘導劑係DNA螯合劑。在一些實施例中，CD137誘導劑係生物鹼。例示性生物鹼包括(但不限於)多柔比星(ADRIAMYCIN ®)、泛艾黴素(epirubicin，ELLENCE ®、PHARMORUBICIN ®)、道諾黴素(daunorubicin，CERUBIDINE ®、DAUNOXOME ®)、奈莫柔比星(nemorubicin)、伊達比星(idarubicin，IDAMYCIN ®PFS、ZAVEDOS ®)、米托蒽醌(mitoxantrone，DHAD ®、NOVANTRONE ®)、放線菌素D (dactinomycin，放線菌素D (actinomycin D)、COSMEGEN ®)、普卡黴素(plicamycin，MITHRACIN ®)、絲裂黴素(MUTAMYCIN ®)及博來黴素(BLENOXANE ®)。在一些實施例中，CD137誘導劑係絲裂黴素。在一些實施例中，CD137誘導劑係博來黴素。在一些實施例中，CD37誘導劑係多柔比星。已顯示絲裂黴素、博來黴素及多柔比星誘導人類T淋巴球中CD137之表現。參見例如Kim K.等人， Immunology2002, 107: 472-479。
在一些實施例中，CD137誘導劑係蛋白酶體抑制劑。在一些實施例中，CD137誘導劑係硼替佐米(VELCADE ®)。
在一些實施例中，CD137誘導劑係化學治療劑。術語「化學治療劑」係指可導致癌細胞死亡或干擾癌細胞之生長、分裂、修復及/或功能之化學或生物物質。在一些實施例中，CD137誘導劑係生物鹼或植物長春花生物鹼，例如細胞毒性抗生素，例如多柔比星(ADRIAMYCIN ®)、泛艾黴素(ELLENCE ®、PHARMORUBICIN ®)、道諾黴素(CERUBIDINE ®、DAUNOXOME ®)、奈莫柔比星、伊達比星(IDAMYCIN ®PFS、ZAVEDOS ®)、米托蒽醌(DHAD ®、NOVANTRONE ®)、放線菌素D (放線菌素D (actinomycin D)、COSMEGEN ®)、普卡黴素(MITHRACIN ®)、絲裂黴素(MUTAMYCIN ®)及博來黴素(BLENOXANE ®)、酒石酸長春瑞濱(vinorelbine tartrate，NAVELBINE ®)、長春鹼(vinblastine，VELBAN ®)、長春新鹼(ONCOVIN ®)或長春地辛(vindesine，ELDISINE ®)。在一些實施例中，CD137誘導劑係長春新鹼(ONCOVIN ®)。 III. 抗 CD137 抗體
本文所述之方法包括投與特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體。本文所述之抗CD137抗體包括全長抗CD137抗體、CD137抗體之抗原結合片段及CD137抗體之衍生物。在一些實施例中，抗CD137抗體係本文所述抗體中之任一者，包括提及抗原決定基結合闡述之抗體及提及CDR、可變區(VL、VH)及IgG (例如IgG1或IgG4)輕鏈及重鏈之特定胺基酸序列闡述之抗體。在一些實施例中，抗CD137抗體具有以下功能性質中之至少一者(例如至少一者、至少兩者、至少三者、至少四者、至少五者、至少六者、至少七者、八者或所有九者)：(a)以500 nM或更小之KD結合至人類CD137；(b)對人類CD137具有促效活性；(c)在高達1000 nM之濃度下不與人類OX40、CD40、GITR及/或CD27受體結合；(d)與猴、小鼠、大鼠或狗CD137交叉反應；(e)不會誘導ADCC效應；(f)能夠抑制腫瘤細胞生長；(g)對癌症具有治療效應；h)阻斷CD137與CD137L之間之結合；及(i)阻斷表現CD137之細胞中CD137L刺激之CD137信號傳導(例如CD137L刺激之NF-κB依賴性轉錄)。在一些實施例中，本文所揭示之抗體亦可阻斷(例如完全阻斷) CD137與其配位體CD137L之間之結合。在一些實施例中，抗CD137抗體係與如本文所述之一或多種抗體或抗原結合片段交叉競爭結合至人類CD137之抗體(或其抗原結合片段)。適用於本文所述方法之例示性抗CD137抗體已闡述於例如US20190055314A1、WO2019036855A1及WO2019037711A1中，該等專利之全文皆以引用方式併入本文中。
人類CD137 (亦稱為腫瘤壞死因子受體超家族成員9 (TNFRSF9)、4-1BB且由淋巴球活化(ILA)誘導)係255個胺基酸之蛋白質(例如GenBank登錄號NM _001561；NP _001552；SEQ ID NO.: 1)。蛋白質包含信號序列(胺基酸殘基1-17)，其後為細胞外結構域(169個胺基酸)、跨膜區(27個胺基酸)及細胞內結構域(42個胺基酸) (Cheuk ATC等人 ，2004 Cancer Gene Therapy 11: 215-226)。受體以單體及二聚體形式在細胞表面上表現且可能與CD137配位體三聚化以進行信號傳導。 SEQ ID NO: 1人類CD137胺基酸序列 MGNSCYNIVATLLLVLNFERTRSLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAECDCTPGFHCLGAGCSMCEQDCKQGQELTKKGCKDCCFGTFNDQKRGICRPWTNCSLDGKSVLVNGTKERDVVCGPSPADLSPGASSVTPPAPAREPGHSPQIISFFLALTSTALLFLLFFLTLRFSVVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL
在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基34-108內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基34-93內之一或多個胺基酸殘基。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO:1之胺基酸殘基34-36、53-55及92-93。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基34-36中之一或多者、胺基酸殘基53-55中之一或多者及胺基酸殘基92-93中之一或多者。在一些實施例中，抗CD137抗體不與一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基結合：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基109-112、125、126、135-138、150及151。在一些實施例中，抗CD137抗體不與SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基109-112、125、126、135-138、150及151特異性結合。量測抗體或抗原結合片段結合靶抗原之能力之方法可使用此項技術中已知之任一方法、包括例如藉由表面電漿子共振、ELISA、等溫滴定量熱、過濾器結合分析、EMSA等或基於抗CD137抗體與CD137之晶體結構來實施。
在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-116。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-114。
在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-116。在一些實施例中，抗CD137抗體特異性結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-114。
在一些實施例中，抗CD137抗體以約500 nM或更小(例如約500 nM或更小、約400 nM或更小、約300 nM或更小、約200 nM或更小、約150 nM或更小、約100 nM或更小、約90 nM或更小、約80 nM或更小、約75 nM或更小、約70 nM或更小、約60 nM或更小、約50 nM或更小、約40 nM或更小、約30 nM或更小、約25 nM或更小、約20 nM或更小、約10 nM或更小、約1 nM或更小、約0.1 nM或更小等)之KD特異性結合至人類CD137。在一些實施例中，抗CD137抗體以約100 nM或更小之KD特異性結合至人類CD137。在一些實施例中，抗CD137抗體以約50 nM或更小之KD特異性結合至人類CD137。量測抗體或抗原結合片段之KD之方法可使用此項技術中已知之任一方法、包括例如藉由表面電漿子共振、ELISA、等溫滴定量熱、過濾器結合分析、EMSA等來實施。
抗CD137抗體需要交叉連接以變得具有促效性。舉例而言，交叉連接係經由Fcγ受體活體內達成，而通常將多株抗Fc抗體用於基於細胞之活體外實驗中。在一些實施例中，本文所述之抗CD137抗體對人類CD137具有促效活性。在一些實施例中，當表現人類CD137之細胞(例如人類細胞)與抗CD137抗體接觸時，抗CD137抗體誘導人類CD137之一或多種(例如一或多種、兩種或更多種、三種或更多種等)活性。多種CD137活性為此項技術中已知且可包括(但不限於)誘導NF-κB依賴性轉錄、誘導T細胞增殖、延長T細胞存活、共刺激活化T細胞、誘導細胞介素分泌(例如IL-2)及誘導單核球活化。在一些實施例中，一或多種CD137活性並非CD137與其配位體結合。量測CD137活性(例如誘導NF-κB依賴性轉錄及/或T細胞增殖等)之方法為此項技術中已知。在一些實施例中，抗CD137抗體增加表現人類CD137之細胞(例如人類細胞)中之NF-κB依賴性轉錄。在一些實施例中，在與抗CD137抗體接觸之表現CD137之細胞(例如人類細胞)中，相對於不與抗CD137抗體接觸之相應細胞(例如不與抗體接觸或與同型對照抗體接觸之相應細胞)，NF-κB依賴性轉錄增加約10%或更大、約20%或更大、約30%或更大、約40%或更大、約50%或更大、約60%或更大、約70%或更大、約80%或更大、約90%或更大、或約99%或更大。在一些實施例中，在與抗CD137抗體接觸之表現CD137之細胞(例如人類細胞)中，相對於不與抗CD137抗體接觸之相應細胞(例如不與抗體接觸或與同型對照抗體接觸之相應細胞)，NF-κB依賴性轉錄增加約2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、100倍、1000倍或更大。
在一些實施例中，抗CD137抗體與猴(例如食蟹猴)、小鼠、大鼠及/或狗CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體與猴CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體與小鼠CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體與大鼠CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體與狗CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體與猴及小鼠CD137；猴及大鼠CD137；猴及狗CD137；小鼠及大鼠CD137；小鼠及狗CD137；大鼠及狗CD137；猴、小鼠及大鼠CD137；猴、小鼠及狗CD137；猴、大鼠及狗CD137；小鼠、大鼠及狗CD137；或猴、小鼠、大鼠及狗CD137交叉反應。在一些實施例中，抗CD137抗體在約100 nM下(例如在約1 nM下、在約10 nM下、在約25 nM下、在約50 nM下、在約75 nM下、在約100 nM下)交叉反應。量測抗體交叉反應性之方法為此項技術中已知，包括(但不限於)表面電漿子共振、ELISA、等溫滴定量熱、過濾器結合分析、EMSA等。
在一些實施例中，抗CD137抗體不會誘導ADCC效應。量測ADCC效應之方法(例如，活體內方法)為此項技術中已知。在一些實施例中，抗CD137抗體不會誘導相對於對照大於約10%之ADCC效應(不會誘導大於約10%、大於約5%、大於約1%、大於約0.1%、大於約0.01%之ADCC)。
在一些實施例中，抗CD137抗體能夠抑制腫瘤細胞生長/增殖。在一些實施例中，當與抗CD137抗體接觸時，相對於不與抗CD137抗體接觸之相應腫瘤細胞，抑制至少約5% (例如至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約99%)之腫瘤細胞生長/增殖。在一些實施例中，當向個體投與抗CD137抗體時，抗CD137抗體能夠減小個體之腫瘤體積。在一些實施例中，相對於個體之初始腫瘤體積(例如在投與抗CD137抗體之前)，抗CD137抗體能夠使個體之腫瘤體積減小至少約5% (例如至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約99%)。監測腫瘤細胞生長/增殖、腫瘤體積及/或腫瘤抑制之方法為此項技術中已知。
在一些實施例中，抗CD137抗體對癌症具有治療效應。在一些實施例中，抗CD137抗體減輕癌症之一或多種跡象或症狀。在一些實施例中，當投與抗CD137抗體時，患有癌症之個體進入部分或完全緩解。
在一些實施例中，抗CD137抗體係選自由以下組成之群：AG10058、AG10059及ADG106。在一些實施例中，抗CD137抗體與本申請案之說明性抗體中之任一者(例如AG10058、AG10059及ADG106)競爭或交叉競爭結合至人類CD137。在一些實施例中，抗CD137抗體係與AG10058、AG10059或ADG106競爭或交叉競爭結合至人類CD137上之相同抗原決定基之抗體。抗體與另一抗體競爭或交叉競爭結合之能力可使用此項技術中已知之標準結合分析(例如BIAcore分析、ELISA分析或流式細胞術)來測定。舉例而言，吾人可允許本揭示案之說明性抗體在飽和條件下結合至人類CD137，且然後量測測試抗體結合至CD137之能力。若測試抗體能夠與說明性抗體同時結合至CD137，則測試抗體與說明性抗體結合至不同抗原決定基。然而，若測試抗體無法同時結合至CD137，則測試抗體結合至相同抗原決定基、重疊抗原決定基或非常靠近說明性抗體所結合之抗原決定基之抗原決定基。此實驗可使用多種方法(例如ELISA、RIA、FACS或表面電漿子共振)來實施。
在一些實施例中，抗CD137抗體阻斷CD137與其配位體(例如人類CD137及人類CD137L)之間之結合。在一些實施例中，抗CD137抗體阻斷活體外CD137與其配位體之間之結合。在一些實施例中，抗CD137抗體具有約500 nM或更小(例如約500 nM或更小、約400 nM或更小、約300 nM或更小、約200 nM或更小、約100 nM或更小、約50 nM或更小、約25 nM或更小、約10 nM或更小、約1 nM或更小等)之半最大抑制濃度(IC50)，用於阻斷CD137與其配位體之結合。在一些實施例中，抗CD137抗體具有約100 nM或更小之半最大抑制濃度(IC50)，用於阻斷CD137與其配位體之結合。在一些實施例中，當以約100 nM或更大(例如約100 nM或更大、約500 nM或更大、約1 µM或更大、約10 µM或更大等)之濃度提供時，抗CD137抗體完全阻斷人類CD137與其配位體之結合。如本文所用之術語「完全阻斷(complete blocking)」或「完全阻斷(completely blocks)」係指抗體或抗原結合片段使第一蛋白質與第二蛋白質之間的結合減少至少約80% (例如至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約99%等)之能力。量測抗體或抗原結合片段阻斷第一蛋白質(例如CD137)及第二蛋白質(例如CD137L)之結合之能力的方法為此項技術中已知，包括(但不限於)經由BIAcore分析、ELISA分析及流式細胞術。
在一些實施例中，抗CD137抗體包含重鏈可變區(VH)及輕鏈可變區(VL)，a)其中VH包含HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3，其中HVR-H1包含根據選自由以下組成之群之式的胺基酸序列：式(I)：X1TFX2X3YX4IHWV (SEQ ID NO: 32)，其中X1係F或Y，X2係S或T，X3係G、N或S，且X4係A、G或W；式(II)：YSIX1SGX2X3WX4WI (SEQ ID NO: 33)，其中X1係S或T，X2係H或Y，X3係H或Y，且X4係A、D、G、N、S或T；及式(III)：FSLSTX1GVX2VX3WI (SEQ ID NO: 34)，其中X1係G或S，X2係A或G，且X3係A、G、S或T；其中HVR-H2包含根據選自由以下組成之群之式的胺基酸序列：式(IV)：LALIDWX1X2DKX3YSX4SLKSRL (SEQ ID NO: 35)，其中X1係A、D或Y，X2係D或G，X3係R、S或Y，且X4係P或T；式(V)：IGX1IYHSGX2TYYX3PSLKSRV (SEQ ID NO: 36)，其中X1係D或E，X2係N或S，且X3係N或S；及式(VI)：VSX1ISGX2GX3X4TYYADSVKGRF (SEQ ID NO: 37)，其中X1係A、G、S、V或Y，X2係A、D、S或Y，X3係D、G或S，且X4係S或T；且其中HVR-H3包含根據式(VII)之胺基酸序列：ARX1GX2X3X4VX5GDWFX6Y (SEQ ID NO: 38)，其中X1係E或G，X2係E或S，X3係D或T，X4係A、T或V，X5係A、I、L、T或V，且X6係A、D或G；及/或b)其中VL包含HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其中HVR-L1包含根據式(VIII)之胺基酸序列：X1ASQX2X3X4X5X6X7X8 (SEQ ID NO: 39)，其中X1係Q或R，X2係D、G或S，X3係I或V，X4係G、R、S或T，X5係P、R、S或T，X6係A、D、F、S、V或Y，X7係L或V，且X8係A、G或N；其中HVR-L2包含根據式(IX)之胺基酸序列：X1ASX2X3X4X5GX6 (SEQ ID NO: 40)，其中X1係A或D，X2係N、S或T，X3係L或R，X4係A、E或Q，X5係S或T，且X6係I或V；且其中HVR-L3包含根據選自由以下組成之群之式的胺基酸序列：式(X)：YCQQX1YX2X3X4T (SEQ ID NO: 41)，其中X1係A、G、S或Y，X2係Q、S或Y，X3係I、L、T或Y，且X4係I、S、V或W；及式(XI)：YCX1QX2X3X4X5PX6T (SEQ ID NO: 42)，其中X1係E或Q，X2係P、S或Y，X3係D、L、S、T或Y，X4係D、E、H、S或T，X5係D、L T或W，且X6係L、P、R或V。
在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 34之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 35之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 38之胺基酸序列之HVR-H3；且/或其中VL包含含有SEQ ID NO: 39之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 40之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 41之胺基酸序列之HVR-L3。
下表B顯示例示性抗CD137抗體之序列。 表B. 例示性抗CD137抗體。
抗體 HVR-H1 HVR-H2 HVR-H3 HVR-L1 HVR-L2 HVR-L3
ADG106 FSLSTGGVGVGWI (SEQ ID NO: 2) LALIDWADDKYYSPSLKSRL (SEQ ID NO: 3) ARGGSDTVIGDWFAY (SEQ ID NO: 4) RASQSIGSYLA (SEQ ID NO: 5) DASNLETGV (SEQ ID NO: 6) YCQQGYYLWT (SEQ ID NO: 7)
AG10059 YSITSGHYWAWI (SEQ ID NO: 12) VSSISGYGSTTYYADSVKGRF (SEQ ID NO: 13) ARGGSDAVLGDWFAY (SEQ ID NO: 14) RASQGIGSFLA (SEQ ID NO: 15) DASNLETGV (SEQ ID NO: 16) YCQQGYYLWT (SEQ ID NO: 17)
AG10058 FSLSTSGVGVGWI (SEQ ID NO: 22) LALIDWDDDKYYSPSLKSRL (SEQ ID NO: 23) ARGGSDTVLGDWFAY (SEQ ID NO: 24) RASQSVSPYLA (SEQ ID NO: 25) DASSLESGV (SEQ ID NO: 26) YCQQGYSLWT (SEQ ID NO: 27)
在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3；且/或其中VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3。
在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之重鏈互補決定區(HC-CDR) 1、HC-CDR2及HC-CDR3之VH；及/或含有SEQ ID NO: 9之胺基酸序列之輕鏈互補決定區(LC-CDR) 1、LC-CDR2及LC-CDR3之VL。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 8之胺基酸序列之重鏈可變區，及/或含有SEQ ID NO: 9之胺基酸序列之輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 10之胺基酸序列之重鏈，及/或含有SEQ ID NO: 11之胺基酸序列之輕鏈。 SEQ ID NO: 8 ADG106 VH EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSTGGVGVGWIRQAPGKGLEWLALIDWADDKYYSPSLKSRLTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDTVIGDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 9 ADG106 VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSIGSYLAWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYYLWTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 10 ADG106重鏈 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSTGGVGVGWIRQAPGKGLEWLALIDWADDKYYSPSLKSRLTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDTVIGDWFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 11 ADG106輕鏈 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSIGSYLAWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYYLWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3；且/或其中VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3。
在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之HC-CDR1、HC-CDR2及HC-CDR3之VH；及/或含有SEQ ID NO: 19之胺基酸序列之LC-CDR1、LC-CDR2及LC-CDR3之VL。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之重鏈可變區，及/或含有SEQ ID NO: 19之胺基酸序列之輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 20之胺基酸序列之重鏈，及/或含有SEQ ID NO: 21之胺基酸序列之輕鏈。 SEQ ID NO: 18 ADG10059 VH EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYSITSGHYWAWIRQAPGKGLEWVSSISGYGSTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDAVLGDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 19 ADG10059 VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIGSFLAWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYYLWTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 20 ADG10059重鏈 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYSITSGHYWAWIRQAPGKGLEWVSSISGYGSTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDAVLGDWFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 21 ADG10059輕鏈 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIGSFLAWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYYLWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
在一些實施例中，抗CD137抗體包含VH及VL，其中VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3；且/或其中VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3。
在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之HC-CDR1、HC-CDR2及HC-CDR3之VH；及/或含有SEQ ID NO: 29之胺基酸序列之LC-CDR1、LC-CDR2及LC-CDR3之VL。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 28之胺基酸序列之重鏈可變區，及/或含有SEQ ID NO: 29之胺基酸序列之輕鏈可變區。在某些實施例中，抗CD137抗體包含含有SEQ ID NO: 30之胺基酸序列之重鏈，及/或含有SEQ ID NO: 31之胺基酸序列之輕鏈。 SEQ ID NO: 28 AG10058 VH EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSTSGVGVGWIRQAPGKGLEWLALIDWDDDKYYSPSLKSRLTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDTVLGDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 29 AG10058 VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSPYLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYSLWTFGQGTKVEIKR SEQ ID NO: 30 AG10058重鏈 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSTSGVGVGWIRQAPGKGLEWLALIDWDDDKYYSPSLKSRLTISRDNSKNTLYLQLNSLRAEDTAVYYCARGGSDTVLGDWFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 31 AG10058輕鏈 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSPYLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYSLWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
本文所述之CD137抗體可為任一類別，例如IgG、IgM、IgE、IgA或IgD。CD137抗體較佳地係IgG類別，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4子類。CD137抗體可使用此項技術中已知之方法自一個類別或子類轉化成另一類別或子類。產生期望類別或子類之抗體之例示性方法包括以下步驟：分離編碼CD137抗體重鏈之核酸及編碼CD137抗體輕鏈之核酸，分離編碼VH區之序列，將VH序列聯結至編碼期望類別或子類之重鏈恆定區之序列，在細胞中表現輕鏈基因及重鏈構築物，及收集CD137抗體。在一些實施例中，抗CD137抗體包含人類IgG1 Fc區。在一些實施例中，抗CD137抗體包含人類IgG4 Fc區。在一些實施例中，人類IgG4 Fc區包含S241P突變，其中編號係根據Kabat。在一些實施例中，抗CD137抗體包含含有一或多個促進交叉連接之突變之Fc區。 抗原結合片段及抗體衍生物
在一些實施例中，抗CD137抗體係本文所述抗CD137抗體中之任一者之抗原結合片段。
在一些實施例中，CD137抗體之抗原結合片段包括：(i)Fab片段，其係由V L、V H、C L 及C H1結構域組成之單價片段；(ii)F(ab′) 2片段，其係包含藉由鉸鏈區處之二硫橋連接之兩個Fab片段之二價片段；(iii)由V H及C H1結構域組成之Fd片段；(iv)由抗體單臂之V L及V H結構域組成之Fv片段；(v)dAb片段(Ward等人，(1989) Nature 341:544-546)，其係由V H結構域組成；(vi)經分離CDR，及(vii)單鏈抗體(scFv)，其係包含連接至抗體V H區之抗體V L區之多肽。Bird等人，(1988) Science 242:423-426及Huston等人，(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883。
在一些實施例中，抗CD137抗體係本文所述抗CD137抗體中之任一者之衍生物。
在一些實施例中，抗體衍生物衍生自本揭示案之說明性抗體(「親代抗體」)之胺基酸序列之修飾，同時保留親代抗體胺基酸序列之總體分子結構。親代抗體鏈之任何區域之胺基酸序列可經修飾，例如框架區、CDR區或恆定區。修飾之類型包括親代抗體之一或多個胺基酸之取代、插入、缺失或其組合。
在一些實施例中，抗體衍生物包含VH，其包含與SEQ ID NO: 8之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列；及/或VL，其包含與SEQ ID NO: 9之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 2中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 3中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 4中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H3胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 5中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 6中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 7中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L3胺基酸序列區域。在一些特定實施例中，抗體衍生物相對於如SEQ ID NO: 8、9、10及11中之任一者中所示之胺基酸序列包含1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個保守或非保守取代，及/或1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個添加及/或缺失。
在一些實施例中，抗體衍生物包含VH，其包含與SEQ ID NO: 18之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列；及/或VL，其包含與SEQ ID NO: 19之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 12中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 13中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 14中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H3胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 15中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 16中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 17中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L3胺基酸序列區域。在一些特定實施例中，抗體衍生物相對於如SEQ ID NO: 18、19、20及21中之任一者中所示之胺基酸序列包含1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個保守或非保守取代，及/或1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個添加及/或缺失。
在一些實施例中，抗體衍生物包含VH，其包含與SEQ ID NO: 28之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列；及/或VL，其包含與SEQ ID NO: 29之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 22中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 23中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 24中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-H3胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 25中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L1胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 26中所示之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L2胺基酸序列區域。在一些實施例中，抗體衍生物包含與如SEQ ID NO: 27中所示之胺基酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致之HVR-L3胺基酸序列區域。在一些特定實施例中，抗體衍生物相對於如SEQ ID NO: 28、29、30及31中之任一者中所示之胺基酸序列包含1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個保守或非保守取代，及/或1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個或15個添加及/或缺失。
胺基酸取代涵蓋保守取代及非保守取代。術語「保守胺基酸取代」意指用另一胺基酸替代一個胺基酸，其中兩個胺基酸之某些物理化學性質(例如所涉及殘基之極性、電荷、溶解度、疏水性、親水性及/或兩親性)具有相似性。舉例而言，取代通常可在以下組中之每一者內進行：(a)非極性(疏水性)胺基酸，例如丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、纈胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及甲硫胺酸；(b)極性中性胺基酸，例如甘胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、半胱胺酸、酪胺酸、天冬醯胺及麩醯胺酸；(c)帶正電(鹼性)胺基酸，例如精胺酸、離胺酸及組胺酸；及(d)帶負電(酸性)胺基酸，例如天冬胺酸及麩胺酸。
修飾可在抗體胺基酸序列之任何位置(包括CDR、框架區或恆定區)進行。在一些實施例中，本揭示案提供含有本揭示案之說明性抗體之VH及VL CDR序列、但含有不同於說明性抗體之框架序列之框架序列的抗體衍生物。此等框架序列可自包括生殖系抗體基因序列之公共DNA資料庫或公開參考文獻獲得。舉例而言，人類重鏈及輕鏈可變區基因之生殖系DNA序列可參見Genbank資料庫或「VBase」人類生殖系序列資料庫(Kabat, E. A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，美國衛生與公眾服務部(U.S. Department of Health and Human Services), NIH出版物第91-3242號(1991)；Tomlinson, I. M.等人， J. Mol. Biol.227:776-798 (1992)；及Cox, J. P. L.等人， Eur. J. Immunol.24:827-836 (1994))。可用於構築抗體衍生物之框架序列包括結構類似於本揭示案之說明性抗體所用之框架序列、例如類似於本揭示案之說明性抗體所用之VH 3-23框架序列及/或VL λ3或λ1-13框架序列的框架序列。舉例而言，說明性抗體之HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3序列以及HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3序列可移植至具有與在衍生出框架序列之生殖系免疫球蛋白基因中所發現一致之序列的框架區上，或CDR序列可移植至與生殖系序列相比含有一或多個突變之框架區上。
在一些實施例中，抗體衍生物係包含本揭示案之說明性抗體之胺基酸序列之嵌合抗體。在一個實例中，將一或多種說明性人類抗體之一或多個CDR與非人類動物(例如小鼠或大鼠)之抗體之CDR組合。在另一實例中，嵌合抗體之所有CDR皆衍生自一或多種說明性抗體。在一些特定實施例中，嵌合抗體包含來自說明性抗體之重鏈可變區或輕鏈可變區之一個、兩個或三個CDR。嵌合抗體可使用此項技術中已知之習用方法來生成。
另一類型之修飾係突變VH及/或VL鏈之CDR區內之胺基酸殘基。可實施位點定向誘變或PCR介導之誘變以引入突變，且可在此項技術中已知之活體外或活體內分析中評估對抗體結合或所關注之其他功能性質之效應。通常，引入保守取代。突變可為胺基酸添加及/或缺失。另外，通常改變CDR區內之不超過一個、兩個、三個、四個或五個殘基。在一些實施例中，抗體衍生物在重鏈CDR及/或輕鏈CDR中包含1個、2個、3個或4個胺基酸取代。在一些實施例中，胺基酸取代係將抗體中之一或多個半胱胺酸變成另一殘基，例如(但不限於)丙胺酸或絲胺酸。半胱胺酸可為規範或非規範半胱胺酸。在一些實施例中，相對於說明性抗體之胺基酸序列，抗體衍生物在重鏈CDR區中具有1個、2個、3個或4個保守胺基酸取代。
亦可對VH及/或VL區內之框架殘基進行修飾。通常，製造此等框架變異體以減小抗體之免疫原性。一種方法係將一或多個框架殘基「回復突變」至相應生殖系序列。已經受體細胞突變之抗體可含有不同於衍生出抗體之生殖系序列之框架殘基。此等殘基可藉由比較抗體框架序列與衍生出抗體之生殖系序列來鑑別。為使框架區序列返回其生殖系構形，可藉由例如位點定向誘變或PCR介導之誘變使體細胞突變「回復突變」至生殖系序列。
另外，亦可在說明性抗體之Fc區內進行修飾，通常以改變抗體之一或多種功能性質，例如血清半衰期、補體固定、Fc受體結合及/或抗原依賴性細胞毒性。在一個實例中，CH1之鉸鏈區經修飾，使得改變(例如增加或減少)鉸鏈區中之半胱胺酸殘基數。此方法進一步闡述於美國專利第5,677,425號中。改變CH1鉸鏈區中之半胱胺酸殘基數以例如促進輕鏈及重鏈之組裝或增加或減小抗體之穩定性。在另一情形下，使抗體之Fc鉸鏈區突變以縮短抗體之生物半衰期。
另外，可根據此項技術中已知之常規實驗修飾本揭示案之抗體以改變其潛在糖基化位點或模式。在一些實施例中，抗CD137抗體衍生物在輕鏈或重鏈之可變區中含有至少一個改變可變區之糖基化模式之突變。此一抗體衍生物對結合抗原可具有增加的親和力及/或經改質特異性。突變可添加V區中之新穎糖基化位點，改變一或多個V區糖基化位點之位置，或去除預先存在之V區糖基化位點。在一些實施例中，抗CD137抗體衍生物在重鏈可變區中之天冬醯胺處具有潛在N-連接糖基化位點，其中一個重鏈可變區中之潛在N-連接糖基化位點被去除。在一些實施例中，抗CD137抗體衍生物在重鏈可變區中之天冬醯胺處具有潛在N-連接糖基化位點，其中兩個重鏈可變區中之潛在N-連接糖基化位點被去除。改變抗體之糖基化模式之方法為此項技術中已知，例如美國專利第6,933,368號中所述之方法，該美國專利之揭示內容以引用方式併入本文中。
在一些實施例中，抗體衍生物係CD137抗體多聚體，其係CD137抗體之多聚體形式，例如單體抗體之抗體二聚體、三聚體或更高級多聚體。抗體多聚體內之個別單體可相同或不同。另外，多聚體內之個別抗體可具有相同或不同之結合特異性。抗體之多聚化可經由抗體之天然聚集來實現。舉例而言，一定百分比之經純化抗體製劑(例如經純化之IgG1或IgG4分子)自發形成含有抗體同二聚體及其他更高級抗體多聚體之蛋白質聚集體。替代地，抗體同二聚體可經由此項技術中已知之化學連接技術、例如經由使用交聯劑來形成。適宜交聯劑包括具有藉由適當間隔體分開之兩個不同反應性基團之異雙官能交聯劑(例如間-馬來醯亞胺基苯甲醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯、4-(馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸琥珀醯亞胺酯及S-乙醯基硫基-乙酸N-琥珀醯亞胺酯)或同雙官能交聯劑(例如辛二酸二琥珀醯亞胺酯)。此等連接體可自例如Pierce Chemical Company, Rockford, IL購得。亦可經由此項技術中已知之重組DNA技術使抗體多聚化。
在一些實施例中，抗CD137抗體係多聚抗體(例如雙特異性抗體)。在一些實施例中，抗CD137抗體係IgM抗體，例如包含IgM Fc區(例如人類IgM Fc區)。
本揭示案所提供之其他抗體衍生物之實例包括單鏈抗體、雙價抗體、結構域抗體及單抗體。「單鏈抗體」 (scFv)係由包含連接至VH結構域之VL結構域之單一多肽鏈組成，其中VL結構域及VH結構域配對形成單價分子。單鏈抗體可根據此項技術中已知之方法來製備(參見例如Bird等人(1988) Science 242:423-426及Huston等人(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)。「雙價抗體(diabody)」係由兩條鏈組成，每一鏈包含同一多肽鏈上藉由短肽連接體聯接之聯接至輕鏈可變區之重鏈可變區，其中同一鏈上之兩個區域不彼此配對，而是與另一鏈上之互補結構域配對形成雙特異性分子。製備雙價抗體之方法為此項技術中已知(參見例如Holliger P.等人(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448及Poljak R. J.等人(1994) Structure 2:1121-1123)。結構域抗體(dAb)係抗體之小功能性結合單元，對應於抗體重鏈或輕鏈之可變區。結構域抗體在細菌、酵母菌及哺乳動物細胞系統中良好表現。結構域抗體及其產生方法之其他細節為此項技術中已知(參見例如美國專利第6,291,158號；第6,582,915號；第6,593,081號；第6,172,197號；第6,696,245號；歐洲專利0368684及0616640；WO05/035572、WO04/101790、WO04/081026、WO04/058821、WO04/003019及WO03/002609)。單抗體係由IgG4抗體之一條輕鏈及一條重鏈組成。單抗體可藉由去除IgG4抗體之鉸鏈區來製造。單抗體及其製備方法之其他細節可參見WO2007/059782。 製造方法
本揭示案之抗體可藉由此項技術中已知之技術來產生，該等技術包括習用單株抗體方法，例如標準體細胞細胞雜交技術(參見例如Kohler及Milstein, Nature256:495 (1975)、B淋巴球之病毒或致癌轉型或如下文詳細闡述之重組抗體技術。
雜交瘤產生係極充分建立之程序。常用於製備雜交瘤之動物系統係鼠類系統。用於分離融合用經免疫脾細胞之免疫方案及技術為此項技術中已知。亦已知融合伴侶(例如鼠類骨髓瘤細胞)及融合程序。可用於製造本揭示案所提供之人類CD137抗體之一種熟知方法涉及使用XENOMOUSE™動物系統。XENOMOUSE™小鼠係包含人類免疫球蛋白重鏈及輕鏈基因座大片段且小鼠抗體產生缺陷之經改造小鼠品系。參見例如Green等人，Nature Genetics 7:13-21 (1994)及WO2003/040170。用CD137抗原免疫動物。CD137抗原係經分離及/或純化之CD137，較佳地CD137。其可為CD137之片段，例如CD137之細胞外結構域，具體而言包含SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基34-108或34-93之CD137細胞外結構域片段。動物之免疫可藉由此項技術中已知之任一方法來實施。參見例如Harlow及Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, New York: Cold Spring Harbor Press, 1990。用於免疫非人類動物(例如小鼠、大鼠、綿羊、山羊、豬、牛及馬)之方法為此項技術中所熟知。參見例如Harlow及Lane，參見上文及美國專利第5,994,619號。CD137抗原可與佐劑一起投與來刺激免疫反應。例示性佐劑包括完全或不完全弗氏佐劑(Freund's adjuvant)、RIBI (胞壁醯二肽)或ISCOM (免疫刺激複合物)。用CD137抗原免疫動物後，自經免疫動物分離之細胞製備產生抗體之永生化細胞株。免疫後，將動物殺死且使淋巴結及/或脾B細胞永生化。使細胞永生化之方法包括(但不限於)將其用致癌基因轉移、將其用致癌病毒感染、將其在選擇永生化細胞之條件下培養、使其經歷致癌或突變化合物、將其與永生化細胞(例如骨髓瘤細胞)融合及不活化腫瘤阻抑基因。參見例如Harlow及Lane，參見上文。若使用與骨髓瘤細胞之融合物，則骨髓瘤細胞較佳地不會分泌免疫球蛋白多肽(非分泌性細胞株)。使用CD137、其部分或表現CD137之細胞來篩選永生化細胞。針對期望特徵選擇、選殖且進一步篩選產生CD137抗體之細胞(例如雜交瘤)，包括穩健生長、高抗體產生及期望抗體特徵，如下文進一步論述。可在同基因動物活體內、在缺乏免疫系統之動物(例如裸小鼠)中或在細胞培養物活體外擴增雜交瘤。選擇、選殖及擴增雜交瘤之方法為熟習此項技術者所熟知。
本揭示案之抗體亦可使用噬菌體展示或酵母菌展示方法製備。此項技術中已建立用於分離人類抗體之此等展示方法，例如Achim Knappik等人，「Fully Synthetic Human Combinatorial Antibody Libraries (HuCAL) Based on Modular Consensus Frameworks and CDRs Randomized with Trinucleotides.」J. Mol. Biol. (2000) 296, 57-86；及Michael J. Feldhaus等人，「Flow-cytometric isolation of human antibodies from a non-immune Saccharomyces cerevisiae surface display library」 Nat Biotechnol (2003) 21:163-170。
在一些實施例中，抗CD137抗體係藉由在宿主細胞中表現一或多種編碼抗CD137抗體或其多肽鏈之核酸來製備。在一些實施例中，一或多種核酸係DNA或RNA，且可含或可不含內含子序列。通常，核酸係cDNA分子。
本揭示案之核酸可使用任何適宜分子生物學技術獲得。對於由雜交瘤表現之抗體，可藉由PCR擴增或cDNA選殖技術獲得編碼由雜交瘤製得之抗體之輕鏈及重鏈之cDNA。對於自免疫球蛋白基因文庫獲得之抗體(例如使用噬菌體展示技術)，可自文庫回收編碼抗體之核酸。
編碼VH區之經分離DNA可藉由將編碼VH之DNA可操作連接至編碼重鏈恆定區(CH1、CH2及CH3)之另一DNA分子轉化成全長重鏈基因。人類重鏈恆定區基因之序列為此項技術中已知(參見例如Kabat等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，美國衛生與公眾服務部，NIH出版物第91-3242號)，且涵蓋該等區域之DNA片段可藉由標準PCR擴增獲得。重鏈恆定區可為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恆定區，但最佳地為不具ADCC效應之IgG4或IgG2恆定區。IgG4恆定區序列可為已知出現在不同個體中之多種對偶基因或異型中之任一者。該等異型代表IgG4恆定區中之天然胺基酸取代。對於Fab片段重鏈基因，編碼VH之DNA可操作連接至僅編碼重鏈CH1恆定區之另一DNA分子。
編碼VL區之經分離DNA可藉由將編碼VL之DNA可操作連接至編碼輕鏈恆定區CL之另一DNA分子轉化成全長輕鏈基因(以及Fab輕鏈基因)。人類輕鏈恆定區基因之序列為此項技術中已知(參見例如Kabat等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，美國衛生與公眾服務部，NIH出版物第91-3242號)，且涵蓋該等區域之DNA片段可藉由標準PCR擴增獲得。輕鏈恆定區可為κ或λ恆定區。
為產生scFv基因，將編碼VH及VL之DNA片段可操作連接至編碼撓性連接體(例如編碼胺基酸序列(Gly 4-Ser) 3)之另一片段，使得VH及VL序列可表現為連續單鏈蛋白，且VL區及VH區藉由撓性連接體連結(參見例如Bird等人， Science242:423-426 (1988)；Huston等人， Proc. Natl. Acad. Sci. USA85:5879-5883 (1988)；及McCafferty等人， Nature348:552-554 (1990))。
在一些實施例中，提供載體，其包含一或多種編碼本文所述之抗CD137抗體之核酸分子。在一些實施例中，載體係可用於表現抗CD137抗體之表現載體。在一些實施例中，本文提供載體，其中第一載體包含編碼如本文所述之重鏈可變區之多核苷酸序列，且第二載體包含編碼如本文所述之輕鏈可變區之多核苷酸序列。在一些實施例中，單一載體包含編碼如本文所述之重鏈可變區及如本文所述之輕鏈可變區之多核苷酸。
為表現本文所述之抗CD137抗體，將編碼部分或全長輕鏈及重鏈之DNA插入表現載體中，使得DNA分子可操作連接至轉錄及轉譯控制序列。在此上下文中，術語「可操作連接」意指抗體基因聯結至載體中，使得載體內之轉錄及轉譯控制序列發揮其調控DNA分子之轉錄及轉譯之預期功能。表現載體及表現控制序列經選擇以與所用表現宿主細胞相容。抗體輕鏈基因及抗體重鏈基因可插入單獨載體中，或更通常，將兩種基因插入同一表現載體中。抗體基因係藉由任何適宜方法(例如聯結抗體基因片段及載體上之互補限制位點或基於同源重組之DNA聯結)插入表現載體中。本文所述抗體之輕鏈及重鏈可變區可藉由將其插入已編碼期望同型及子類之重鏈恆定區及輕鏈恆定區之表現載體中，使得VH區段可操作連接至載體內之CH區段且VL區段可操作連接至載體內之CL區段，用於產生任一抗體同型及子類之全長抗體基因。另外或替代地，重組表現載體可編碼促進抗體鏈自宿主細胞分泌之信號肽。可將抗體鏈基因選殖至載體中，使得信號肽框內連接至抗體鏈基因之胺基末端。信號肽可為免疫球蛋白信號肽或異源信號肽(即來自非免疫球蛋白蛋白之信號肽)。
除抗體鏈基因外，本揭示案之表現載體通常攜帶控制抗體鏈基因在宿主細胞中之表現之調控序列。術語「調控序列」意欲包括啟動子、增強子及控制抗體鏈基因之轉錄或轉譯之其他表現控制元件(例如多腺苷酸化信號)。此等調控序列闡述於例如Goeddel (Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990))中。熟習此項技術者應了解，表現載體之設計(包括調控序列之選擇)可端視諸如欲轉型宿主細胞之選擇、期望蛋白質之表現水準等因素而定。用於哺乳動物宿主細胞表現之調控序列之實例包括引導哺乳動物細胞中之高蛋白質表現水準之病毒元件，例如衍生自巨細胞病毒(CMV)、猿猴病毒40 (SV40)、腺病毒(例如腺病毒主要晚期啟動子(AdMLP))及多瘤病毒之啟動子及/或增強子。替代地，可使用非病毒調控序列，例如泛素啟動子或β-球蛋白啟動子。另外，調控元件由不同來源之序列構成，例如SR啟動子系統，其含有來自SV40早期啟動子及1型人類T細胞白血病病毒之長末端重複之序列(Takebe, Y.等人(1988) Mol. Cell. Biol.8:466-472)。
除抗體鏈基因及調控序列外，表現載體可攜帶其他序列，例如調控載體在宿主細胞中之複製之序列(例如複製起點)及可選擇標記基因。可選擇標記基因促進已引入載體之宿主細胞之選擇(參見例如美國專利第4,399,216號、美國專利第4,634,665號及美國專利第5,179,017號，其皆來自Axel等人)。舉例而言，可選擇標記基因通常賦予其中已引入載體之宿主細胞對藥物(例如G418、潮黴素(hygromycin)或胺甲喋呤(methotrexate))之抗性。可選擇標記基因包括二氫葉酸還原酶(DHFR)基因(用於利用胺甲喋呤選擇/擴增之dhfr-宿主細胞中)及neo基因(用於G418選擇)。
對於輕鏈及重鏈之表現，藉由任何適宜技術將編碼重鏈及輕鏈之表現載體轉染至宿主細胞中。術語「轉染」之各種形式意欲涵蓋常用於將外源DNA引入原核或真核宿主細胞中之眾多種技術，例如電穿孔、磷酸鈣沈澱、DEAE-葡聚糖轉染及諸如此類。儘管可在原核或真核宿主細胞中表現本揭示案之抗體，但在真核細胞、且通常哺乳動物宿主細胞中表現抗體係最典型的。
在一些實施例中，提供含有本揭示案所提供之核酸分子之宿主細胞。宿主細胞實質上可為表現載體可用之任何細胞。其可為例如較高等真核宿主細胞(例如哺乳動物細胞)、較低等真核宿主細胞(例如酵母菌細胞)，且可為原核細胞(例如細菌細胞)。將重組核酸構築物引入宿主細胞中可藉由磷酸鈣轉染、DEAE、葡聚糖介導之轉染、電穿孔或噬菌體感染來實現。
適用於轉型之原核宿主包括大腸桿菌、枯草桿菌( Bacillus subtilis)、鼠傷寒沙氏桿菌( Salmonella typhimurium)及假單胞菌屬( Pseudomonas)、鏈黴菌屬( Streptomyces)及葡萄球菌屬( Staphylococcus)內之各個物種。
用於表現本揭示案之結合分子之哺乳動物宿主細胞包括例如中國倉鼠卵巢(CHO)細胞(包括dhfr-CHO細胞，闡述於Urlaub及Chasin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA77:4216-4220 (1980)中，與DHFR可選擇標記物一起使用，例如如Kaufman及Sharp, J. Mol. Biol.159:601-621 (1982)中所述)、NS0骨髓瘤細胞、COS細胞及Sp2細胞。具體而言，為與NS0骨髓瘤或CHO細胞一起使用，另一表現系統係WO 87/04462、WO 89/01036及EP 338,841中所揭示之GS (麩醯胺酸合成酶)基因表現系統。當將編碼抗體基因之表現載體引入哺乳動物宿主細胞中時，抗體係藉由將宿主細胞培養一段時間以足以允許抗體在宿主細胞中表現或抗體分泌至宿主細胞生長之培養基中來產生。抗體可使用任何適宜蛋白質純化方法自培養基回收。 IV. 醫藥組合物、套組及製品
本申請案之一個態樣係提供組合物，其包含本文所述抗CD137抗體中之任一者及/或本文所述CD137誘導劑(例如細胞介素、HDAC抑制劑或DNA損傷劑)中之任一者。亦提供醫藥組合物，其包含本文所述抗CD137抗體中之任一者及/或本文所述CD137誘導劑中之任一者。在一些實施例中，組合物係醫藥組合物，其包含：(a)有效量之抗CD137抗體；(b)有效量之CD137誘導劑；及(c)醫藥學上可接受之載劑。在一些實施例中，組合物進一步包含抗CD20抗體(例如利妥昔單抗)。組合物可藉由此項技術中已知之習用方法來製備。
術語「醫藥學上可接受之載劑」係指適用於調配物中以遞送活性劑(例如抗CD137抗體及/或CD137誘導劑)之任何無活性物質。載劑可為抗黏劑、黏合劑、包衣、崩解劑、填充劑或稀釋劑、防腐劑(例如抗氧化劑、抗細菌劑或抗真菌劑)、甜味劑、吸收延遲劑、潤濕劑、乳化劑、緩衝劑及諸如此類。適宜醫藥學上可接受之載劑之實例包括水、乙醇、多元醇(例如乙二醇、丙二醇、聚乙二醇及諸如此類)、右旋糖、植物油(例如橄欖油)、鹽水、緩衝劑、緩衝鹽水及等滲劑(例如糖、多元醇、山梨醇及氯化鈉)。
組合物可呈任何適宜形式，例如液體、半固體及固體劑量形式。液體劑量形式之實例包括溶液(例如可注射及可輸注溶液)、微乳液、脂質體、分散液或懸浮液。固體劑量形式之實例包括錠劑、丸劑、膠囊、微膠囊及粉末。適用於遞送抗CD137抗體及/或CD137誘導劑之組合物之特定形式係注射或輸注用無菌液體，例如溶液、懸浮液或分散液。無菌溶液可藉由將所需量之抗體納入適當載劑中、然後無菌微過濾來製備。通常，分散液係藉由將抗體納入含有鹼性分散介質及其他載劑之無菌媒劑中來製備。在用於製備無菌液體之無菌粉末之情形下，製備方法包括真空乾燥及冷凍乾燥(凍乾)，以產生活性成分加來自其先前無菌過濾溶液之任何其他期望成分的粉末。組合物之各種劑量形式可藉由此項技術中已知之習用技術來製備。
組合物中所包括之抗CD137抗體及/或CD137誘導劑之相對量將端視多種因素而變化，例如所用之具體抗CD137抗體及/或CD137誘導劑及載劑、劑量形式及期望釋放及藥效學特徵。單一劑量形式中抗CD137抗體及/或CD137誘導劑之量通常將為產生治療效應之量，但亦可為更小量。通常，相對於劑量形式之總重量，此量將介於約0.01%至約99%、約0.1%至約70%、或約1%至約30%範圍內。
在一些實施例中，提供製品，其包含可用於治療癌症之材料。製品可包含容器及位於容器上或與容器相關聯之標記或包裝插頁。適宜容器包括例如瓶、小瓶、注射器等。容器可自多種材料(例如玻璃或塑膠)形成。通常，容器容納本文所述可有效地治療癌症之組合物，且可具有無菌存取埠(例如，容器可為靜脈內溶液袋或具有可由皮下注射針刺穿之塞子的小瓶)。包裝插頁係指通常包括在治療產品之商業包裝中之說明書，其含有關於適應症、用法、劑量、投與、禁忌及/或關於使用此等治療產品之警告的資訊。在一些實施例中，包裝插頁指示組合物用於治療癌症。標記或包裝插頁可進一步包含將組合物投與患者之說明書。
另外，製品可進一步包含第二容器，其包含醫藥學上可接受之緩衝劑，例如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液(Ringer's solution)及右旋糖溶液。其可進一步包括自商業及使用者角度來看期望之其他材料，包括其他緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針及注射器。
亦提供套組，其可用於多個目的，例如用於治療本文所述之癌症，視情況地與製品組合。本申請案之套組包括一或多個容器，其包含本文所述組合物中之任一者(或單位劑量形式及/或製品)。在一些實施例中，套組進一步包含根據本文所述方法中之任一者使用之說明書。套組可進一步包含選擇適於治療之個體之描述。本申請案套組中所供應之說明書通常係標記或包裝插頁上之書面說明(例如包括在套組中之紙片)，但機器可讀說明(例如磁碟或光學存儲碟上之說明)亦係可接受的。
舉例而言，在一些實施例中，提供套組，其包含：(a)包含本文所述抗CD137抗體中之任一者及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物；(b)包含本文所述CD137誘導劑中之任一者及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物；及(c)將醫藥組合物投與患有癌症之個體之說明書。在一些實施例中，套組進一步包含含有抗CD20抗體(例如利妥昔單抗)之醫藥組合物。
本申請案之套組處於適宜包裝中。適宜包裝包括(但不限於)小瓶、瓶、罐、撓性包裝(例如密封Mylar或塑膠袋)及諸如此類。套組可視情況地提供其他組分，例如緩衝劑及解釋性資訊。因此，本申請案亦提供製品，其包括小瓶(例如密封小瓶)、瓶、罐、撓性包裝及諸如此類。
容器可為單位劑量、散裝包裝(例如多劑量包裝)或亞單位劑量。套組亦可包括多個單位劑量之醫藥組合物及使用說明書，且以足以在藥房(例如醫院藥房及複方藥房)中儲存及使用之量包裝。 實例
以下實例意欲僅例示本發明且因此不應視為以任何方式限制本發明。以下實例及詳細描述係以說明方式而非限制方式提供。 實例 1. IL-2 刺激之 PBMC 表面上之 CD137 表現
以下實例闡述用細胞介素IL-2刺激之外周血單核細胞(PBMC)表面上之CD137表現。
藉由密度梯度離心方法使用Ficoll Histopaque自全血分離新鮮的人類PBMC。將經分離細胞在96孔板(2×10 5個細胞/孔)中培養且在活體外用不同濃度之IL-2 (0 IU/mL、100 IU/mL、1000 IU/mL)處理。72小時後，收集PBMC且如下對細胞表面上之CD137染色。
用多組抗體對IL-2刺激之PBMC染色以偵測細胞表面標記物且由此鑑別PBMC中細胞類型之亞組。如表1中所顯示，組1係由抗人類CD45、CD3、CD4、CD8、CD56及CD137抗體組成，且組2係由抗人類CD45、CD3、CD4、CD20、CD25、CD127及CD137抗體組成。藉由螢光活化細胞分選(FACS)來分選PBMC中細胞類型之亞組。偵測PBMC之不同亞組上之CD137表現，且使用FlowJo軟體分析數據。 表 1. PBMC FACS 染色組
FACS 染色組 1 FACS 染色組 2
T-NK 標記物 螢光染料 B-Treg 標記物 螢光染料
1 CD45 BV510 1 CD45 BV510
2 CD3 FITC 2 CD3 APC-Cy7
3 CD4 PerCP-Cy5.5 3 CD4 PerCP-Cy5.5
4 CD8 APC-Cy7 4 CD20 PE-Cy7
5 CD56 APC 5 CD25 FITC
6 CD137 PE-Cy7 6 CD127 BV421
7 CD137 AF647
如圖1A-1B中所顯示，100 IU/mL及1000 IU/mL之IL-2強烈地誘導活體外人類NK、NKT、CD8+及Treg細胞上之CD137表現。 實例 2. 小鼠路易斯肺癌模型中 ADG106 與連續高劑量 IL-2 之組合
以下實例闡述抗CD137抗體ADG106與IL-2之組合在小鼠路易斯肺癌模型中之治療效能。
向C57BL/6小鼠皮下移植5×10 5個路易斯肺癌細胞。腫瘤建立(即達到75 mm 3之體積)後，用僅媒劑、ADG106 (5 mg/kg，每週兩次達4個劑量)、IL-2 (1.4×10 7IU/m 2，每天兩次，連續13天)或ADG106 (5 mg/kg，每週兩次達4個劑量)及IL-2 (1.4×10 7IU/m 2，每天兩次，連續13天)藉由腹膜內注射治療小鼠。每週兩次監測腫瘤生長且報告為隨時間變化的腫瘤體積±SEM。
如圖2A-2D中所顯示，連續高劑量IL-2展現穩健的抗腫瘤活性，但亦引起小鼠中之顯著毒性，導致一隻動物在第19天死亡(1/8)且在第22天所有其他患病動物提前終止(7/8) (圖2C)。ADG106與持續高劑量之IL-2之組合進一步誘導嚴重毒性且在第12天至第19天加速動物死亡(7/8) (圖2D)。 實例 3. 小鼠路易斯肺癌模型中 ADG106 與高劑量低頻率或持續低劑量之 IL-2 之組合
此實例闡述抗CD137抗體ADG106與IL-2之組合之治療效能。在小鼠路易斯肺癌模型中，IL-2係以高劑量低頻率或以持續低劑量投與。
向C57BL/6小鼠皮下移植5×10 5個路易斯肺癌細胞。腫瘤建立(即達到76 mm 3之體積)後，用單獨媒劑、ADG106 (2.5 mg/kg，每週兩次達4個劑量)、低頻率高劑量之IL-2 (1.4×10 7IU/m 2，每天兩次，每3天，達4個劑量)、持續低劑量之IL-2 (2.8×10 6IU/m 2，每天兩次，連續5天)、ADG106及低頻率高劑量之IL-2之組合或ADG106及持續低劑量之IL-2之組合藉由腹膜內注射治療小鼠。每週兩次監測腫瘤生長且報告為隨時間變化的腫瘤體積±SEM。
如圖3A-3F中所顯示，小鼠對低頻率高劑量之IL-2及持續低劑量之IL-2充分耐受，但具有弱抗腫瘤活性(圖3C-3D)。ADG106與任一IL-2劑量方案之組合展現增強的抗腫瘤效能，尤其與持續低劑量IL-2方案之組合(圖3E-3F)。在研究期間未觀察到明顯毒性。 實例 4. 小鼠 A20 B 細胞淋巴瘤模型中 ADG106 與 DNA 損傷劑之組合
向BALB/c小鼠(n=8隻/組，雌性，6-8週齡)皮下移植5 × 10 5個A20 B細胞淋巴瘤細胞。腫瘤建立(即達到100 mm 3之體積)後，用媒劑、ADG106 (5 mg/kg，每週兩次達4個劑量，藉由腹膜內注射)、苯達莫斯汀(12.5 mg/kg，每天一次達4個劑量，藉由腹膜內注射)或ADG106 (5 mg/kg，每週兩次達4個劑量，藉由腹膜內注射)與苯達莫斯汀(12.5 mg/kg，每天一次達4個劑量，藉由腹膜內注射)之組合治療小鼠。每週兩次監測腫瘤生長且報告為隨時間變化的平均腫瘤體積±SEM。
如圖4A-4E中所顯示，小鼠對作為單一療法之ADG106及苯達莫斯汀治療充分耐受。與ADG106及苯達莫斯汀單一療法相比，ADG106與苯達莫斯汀之組合展現增強的抗腫瘤效能。另外，對組合療法未觀察到明顯毒性。 實例 5. 標準護理 (SOC) 藥物治療對 CD137L 蛋白表面表現之劑量依賴性效應
將在6孔板中之含有20%胎牛血清(FBS)之RPMI-1640培養基中培養之HUT78細胞用一定劑量範圍之羅米地辛(0-0.1 µM)、硼替佐米(0-1.0 µM)、貝林司他(0-1.0 µM)、西達本胺(0-3.0 µM)或長春新鹼(0-0.03 µM)處理24小時。將細胞(1×10 5個)在達爾伯克氏磷酸鹽緩衝鹽水(Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline，DPBS)中洗滌兩次，用藻紅素(PE)結合之同型對照(Biolegend目錄編號400112)及抗人類CD137L (Biolegend目錄編號311504)抗體(1 µL抗體於100 µL DPBS中，圖5A-5E)或PE-Cy7結合之同型對照(Thermofisher目錄編號25-4714-80)及抗人類CD137L (Thermofisher目錄編號25-5906-42)抗體(1 µL抗體於100 µL DPBS中，圖5F-5H)在4℃下染色30分鐘，在DPBS中洗滌兩次，且重懸浮於100 µL DPBS中用於流式細胞術分析。
如圖5A-5H中所顯示，在用羅米地辛(圖5A及圖5F)、硼替佐米(圖5B及圖5G)、西達本胺(圖5C及圖5H)及貝林司他(圖5D)處理後，HUT78人類TCL細胞顯示CD137L蛋白表面表現之劑量依賴性上調。另一方面，在長春新鹼(圖5E)處理後，HUT78人類TCL細胞不顯示CD137L蛋白表面表現之上調。 實例 6. SOC 藥物處理對 CD137L 蛋白表面表現之時間依賴性效應
將在6孔板中之含有20% FBS之RPMI-1640培養基中培養之HUT78細胞用0.003 µM羅米地辛或0.01 µM硼替佐米處理2小時、6小時、16小時或24小時。將細胞(1×10 5個)在DPBS中洗滌兩次，用PE結合之同型對照(Biolegend目錄編號400112)及抗人類CD137L (Biolegend目錄編號311504)抗體(1 µL抗體於100 µL DPBS中)在4℃下染色30分鐘，在DPBS中洗滌兩次，且重懸浮於100 µL DPBS中用於流式細胞術分析。
如圖6A及圖6B中所顯示，在用羅米地辛(圖6A)及硼替佐米(圖6B)處理後，HUT78人類TCL細胞顯示CD137L蛋白表面表現之時間依賴性上調。 實例 7. SOC 藥物處理對 CD137L mRNA 表現之劑量依賴性效應
將在96孔板中培養之HUT102、HUT78及SU-DHL1細胞用一定劑量範圍之羅米地辛(0-0.1 µM)、硼替佐米(0-1.0 µM)、貝林司他(0-10.0 µM)或長春新鹼(0-0.03 µM)處理24小時。用溶解緩衝液溶解細胞且將細胞溶解物用於QuantiGene Plex分析(7基因多倍體(CD80、CD86、CD274、CD137、CD137L、HPRT1、GAPDH))。
表2顯示HPRT1、CD86、CD80、CD274 (PD-L1)、GAPDH、TNFSF9 (CD137L/4-1BBL)及TNFRSF9 (CD137/4-1BB)在HUT102、HUT78及SU-DHL1人類TCL細胞中之基礎表現水準。顯示平均螢光強度(MFI)水準，其係基因表現水準之代用值。HUT78及SU-DHL1細胞表現極低或不表現CD86及CD80之mRNA水準。HUT78細胞表現極低或不表現CD274及TNFRSF9 (CD137/4-1BB)之mRNA水準。當MFI水準較低時，MFI值之微小變化可能引起倍數變化之顯著變化；因此，在解釋該等基因之倍數變化時應謹慎( #)。 表 2. HUT102 、 HUT78 及 SU-DHL1 人類 TCL 細胞中 HPRT1 、 CD86 、 CD80 、 CD274 (PD-L1) 、 GAPDH 、 TNFSF9 (CD137L/4-1BBL) 及 TNFRSF9 (CD137/4-1BB) 之平均螢光強度 (MFI) 水準
   HPRT1 CD86 CD80 CD274 (PD-L1) GAPDH TNFSF9 (CD137L/ 4-1BBL) TNFRSF9 (CD137/ 4-1BB)
HUT102 2427 4113 3575 713 27138 135 1661
HUT78 9845 #5 #5 #79 29538 4353 #56
SU-DHL1 5492 #3 #1 3294 29140 577 150
#低基礎表現，在解釋該等基因之倍數變化時應謹慎。
如圖7A-7C中所顯示，羅米地辛處理誘導HUT102 (圖7A)、HUT78 (圖7B)及SU-DHL1 (圖7C)人類TCL細胞中CD137L mRNA表現之劑量依賴性上調。羅米地辛處理亦誘導HUT102細胞(圖7A)中之CD137及CD274 mRNA表現及SU-DHL1細胞(圖7C)中之CD137 mRNA表現。
如圖8A-8C中所顯示，貝林司他處理誘導HUT102 (圖8A)、HUT78 (圖8B)及SU-DHL1 (圖8C)人類TCL細胞中CD137L mRNA表現之劑量依賴性上調。貝林司他處理亦誘導HUT102細胞(圖8A)中之CD137及CD274 mRNA表現及SU-DHL1細胞(圖7C)中之CD137 mRNA表現。
如圖9A-9C中所顯示，硼替佐米處理誘導HUT102 (圖9A)及SU-DHL1 (圖9C)而非HUT78 (圖9B)人類TCL細胞中CD137L mRNA表現之劑量依賴性上調。硼替佐米處理亦誘導HUT102細胞(圖9A)中之CD274 mRNA表現。
如圖10A-10C中所顯示，長春新鹼處理誘導HUT102 (圖10A)而非HUT78 (圖10A B)或SU-DHL1 (圖10A C)人類TCL細胞中CD137L mRNA表現之上調。長春新鹼處理亦誘導HUT102細胞(圖10A)中之CD137 mRNA表現。 實例 8. SOC 藥物處理對 HUT78 細胞之細胞活力之效應
將在96孔板中之含有20%胎牛血清(FBS)之RPMI-1640培養基中培養之HUT78細胞用一定劑量範圍之羅米地辛(0-0.1 µM)、硼替佐米(0-1.0 µM)或西達本胺(0-3.0 µM)處理24小時。使用CellTiter-Glo分析(Promega)根據製造商之說明書來評價細胞活力。
如圖11A-11C中所顯示，羅米地辛(圖11A)及硼替佐米(圖11B)而非西達本胺(圖11C)以劑量依賴性方式抑制HUT78人類TCL細胞之細胞活力。 實例 9. SOC 藥物處理對經純化人類 T 細胞之細胞活力之效應
自人類PBMC純化T細胞(＞95%純度，數據未顯示)，在96孔板中之含有10%胎牛血清(FBS)之RPMI-1640培養基中培養，且用一定劑量範圍之羅米地辛(0-0.1 µM)、硼替佐米(0-1.0 µM)或西達本胺(0-3.0 µM)處理24小時。使用CellTiter-Glo分析(Promega)根據製造商之說明書來評價細胞活力。
如圖12A-12C中所顯示，羅米地辛(圖12A)、硼替佐米(圖12B)及西達本胺(圖12C)對經純化之人類T細胞的活力具有極小效應或無效應。
表3. 顯示TCL細胞株中SOC藥物對CD137L表現之調控之彙總。「蛋白質」行指示CD137L蛋白表面表現之調控，而「mRNA」行指示CD137L mRNA表現之調控。「Y」指示處理會引起上調；「N」指示處理不會引起上調。 表3.
藥物(類型) HUT78 HUT102 SU-DHL1
蛋白質 mRNA mRNA mRNA
羅米地辛(HDACi) Y Y Y Y
貝林司他(HDACi) Y Y Y Y
西達本胺(HDACi) Y 未測試 未測試   
硼替佐米(蛋白酶體抑制劑) Y N Y Y
長春新鹼(化學療法) N N Y N
實例 10. B16F10 小鼠模型中作為單一療法或組合之 ADG106 、 IL-2 、抗 PD-1 抗體
向C57BL/6小鼠(n=8隻/組，雌性，6-8週齡)皮下移植5×10 5個B16F10鼠類黑色素瘤癌細胞。腫瘤建立(即達到80 mm 3之體積)後，用單獨媒劑、ADG106 (小鼠IgG1，10 mg/kg，每週兩次達4個劑量)、抗PD1抗體2E5 (10 mg/kg，每週兩次達4個劑量)、ADG106及抗PD1抗體2E5之組合、持續低劑量IL-2 (2.8×10 6IU/m 2，每天兩次，連續5天)、ADG106及持續低劑量IL-2之組合、抗PD1抗體2E5及持續低劑量IL-2之組合或ADG106、抗PD1抗體2E5及持續低劑量IL-2之組合藉由腹膜內注射治療小鼠。每週兩次監測腫瘤生長且報告為隨時間變化的腫瘤體積±SEM。
如圖13A-13I中所顯示，與ADG106、IL-2及2E5單一療法相比，ADG106、IL-2及2E5之組合療法展現增強的抗腫瘤效能。
圖1A-1B顯示經重組人類IL-2處理之經分選外周血單核細胞(PBMC)表面上之CD137水準。在圖1A及圖1B中之每一者中，x軸指示經分選PBMC之類型及IL-2之濃度(IU/ml)，且y軸指示表現CD137之細胞之百分比。使用兩組標記物將PBMC分選成NK細胞、NKT細胞、CD8+細胞、CD4+細胞及Treg細胞，如表1中所顯示。圖1A顯示使用組1分選之細胞之CD137水準。圖1B顯示使用組2分選之細胞之CD137水準。 圖2A-2D顯示在小鼠路易斯肺癌(Lewis lung cancer)模型中，用抗CD137抗體(ADG106)及/或持續高劑量之IL-2治療對腫瘤體積減小之效應。在圖2A-2D中之每一者中，x軸顯示接種後天數，且y軸顯示腫瘤體積(mm 3)。圖2A顯示用媒劑治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。圖2B顯示用抗CD137抗體ADG106治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每週兩次投與5 mg/kg之ADG106達4個劑量。圖2C顯示用IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天兩次投與1.4×10 7IU/m 2IL-2達27個劑量。圖2D顯示用ADG106及IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每週兩次投與5 mg/kg之ADG106達4個劑量，且每天兩次投與1.4×10 7IU/m 2IL-2達13個劑量。 圖3A-3F顯示在小鼠路易斯肺癌模型中，用抗CD137抗體(ADG106)及/或低頻率高劑量或持續低劑量之IL-2治療對腫瘤體積減小之效應。在圖3A-3F中之每一者中，x軸顯示接種後天數，且y軸顯示腫瘤體積(mm 3)。圖3A顯示用媒劑治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。圖3B顯示用抗CD137抗體ADG106治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每週兩次投與2.5 mg/kg之ADG106達4個劑量。圖3C顯示用高劑量之IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天兩次每3天投與1.4×10 7IU/m 2IL-2達4個劑量。圖3D顯示用低劑量之IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天兩次連續5天投與2.8×10 6IU/m 2之IL-2達總共10個劑量。圖3E顯示用抗CD137抗體ADG106及高劑量之IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天兩次每3天投與1.4×10 7IU/m 2IL-2達4個劑量，且每週兩次投與2.5 mg/kg之ADG106達4個劑量。圖3F顯示用抗CD137抗體ADG106及低劑量之IL-2治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天兩次連續5天投與2.8×10 6IU/m 2之IL-2達總共10個劑量，且每週兩次投與2.5 mg/kg之ADG106達4個劑量。 圖4A-4E顯示在A20 B細胞淋巴瘤模型之小鼠模型中，用抗CD137抗體(ADG106)及/或苯達莫斯汀治療對腫瘤體積減小之效應。x軸顯示接種後天數，且y軸顯示腫瘤體積(mm 3)。圖4A顯示不同治療組之腫瘤生長曲線。數據點表示組平均值，且誤差槓表示平均值之標準誤差(SEM)。圖4B顯示用媒劑治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。圖4C顯示用抗CD137抗體ADG106治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每週兩次投與2.5 mg/kg之ADG106達4個劑量。圖4D顯示用苯達莫斯汀治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每天一次投與12.5 mg/kg之苯達莫斯汀達4個劑量。圖4E顯示用ADG106與苯達莫斯汀之組合治療之個別小鼠之隨時間變化的腫瘤體積。每週兩次投與2.5 mg/kg之ADG106達4個劑量，每天一次投與12.5 mg/kg之苯達莫斯汀達4個劑量。 圖5A-5E顯示用不同劑量之羅米地辛、硼替佐米(bortezomib)、西達本胺、貝林司他及長春新鹼(vincristine)治療對HUT78皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)細胞表面上之CD137L蛋白表現水準的效應。圖5A顯示用羅米地辛治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5B顯示用硼替佐米治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5C顯示用西達本胺治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5D顯示用貝林司他治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5E顯示用長春新鹼治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5F顯示用羅米地辛治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5G顯示用硼替佐米治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖5H顯示用西達本胺治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。用PE結合之同型對照(Biolegend目錄編號400112)或抗人類CD137L (Biolegend目錄編號311504)抗體對圖5A-5E中之細胞染色；用PE-Cy7結合之同型對照(Thermofisher目錄編號25-4714-80)及抗人類CD137L (Thermofisher目錄編號25-5906-42)抗體對圖5F-5H中之細胞染色。 圖6A-6B顯示在不同時間點用羅米地辛及硼替佐米治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖6A顯示在不同時間點用0.003 µM羅米地辛治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。圖6B顯示在不同時間點用0.01 µM硼替佐米治療對HUT78 CTCL細胞表面上之CD137L蛋白表現水準之效應。 圖7A-7C顯示用不同劑量之羅米地辛治療對HUT102、HUT78及SU-DHL1人類T細胞淋巴瘤(TCL)細胞中之mRNA表現的效應。圖7A顯示用羅米地辛治療對HUT102人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖7B顯示用羅米地辛治療對HUT78人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖7C顯示用羅米地辛治療對SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。#指示具有低基礎表現之基因。 圖8A-8C顯示用不同劑量之貝林司他治療對HUT102、HUT78及SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現的效應。圖8A顯示用貝林司他治療對HUT102人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖8B顯示用貝林司他治療對HUT78人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖8C顯示用貝林司他治療對SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。#指示具有低基礎表現之基因。 圖9A-9C顯示用不同劑量之硼替佐米治療對HUT102、HUT78及SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現的效應。圖9A顯示用硼替佐米治療對HUT102人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖9B顯示用硼替佐米治療對HUT78人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖9C顯示用硼替佐米治療對SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。#指示具有低基礎表現之基因。 圖10A-10C顯示用不同劑量之長春新鹼治療對HUT102、HUT78及SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現的效應。圖10A顯示用長春新鹼治療對HUT102人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖10B顯示用長春新鹼治療對HUT78人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。圖10C顯示用長春新鹼治療對SU-DHL1人類TCL細胞中之mRNA表現之效應。#指示具有低基礎表現之基因。 圖11A-11C顯示用不同劑量之羅米地辛、硼替佐米及西達本胺治療對HUT78人類TCL細胞活力之效應。圖11A顯示用不同劑量之羅米地辛治療對HUT78人類TCL細胞活力之效應。圖11B顯示用不同劑量之硼替佐米治療對HUT78人類TCL細胞活力之效應。圖11C顯示用不同劑量之西達本胺治療對HUT78人類TCL細胞活力之效應。 圖12A-12C顯示用不同劑量之羅米地辛、硼替佐米及西達本胺治療對經純化之人類T細胞活力之效應。圖12A顯示用不同劑量之羅米地辛治療對經純化之人類T細胞活力之效應。圖12B顯示用不同劑量之硼替佐米治療對經純化之人類T細胞活力之效應。圖12C顯示用不同劑量之西達本胺治療對經純化之人類T細胞活力之效應。 圖13A-13I顯示用抗CD137抗體ADG106、抗PD1抗體2E5、IL-2、ADG106與IL-2之組合、2E5與IL-2之組合、ADG106與2E5之組合及ADG106與IL-2及2E5二者之組合治療對B16F10小鼠模型之效應。圖13A顯示不同治療組之間隨時間變化之平均腫瘤體積之比較。圖13B顯示ADG106單一療法組中之個體反應。圖13C顯示媒劑(對照)組中之個體反應。圖13D顯示IL-2單一療法組中之個體反應。圖13E顯示ADG106 + IL-2組合療法組中之個體反應。圖13F顯示2E5單一療法組中之個體反應。圖13G顯示ADG106 + 2E5組合療法組中之個體反應。圖13H顯示2E5 + IL-2組合療法組中之個體反應。圖13I顯示ADG106 + IL-2 + 2E5組合療法組中之個體反應。 

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          Pro Pro Asn Ser Phe Ser Ser Ala Gly Gly Gln Arg Thr Cys Asp Ile
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                          85                  90                  95      
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          Thr Lys Lys Gly Cys Lys Asp Cys Cys Phe Gly Thr Phe Asn Asp Gln
                  115                 120                 125             
          Lys Arg Gly Ile Cys Arg Pro Trp Thr Asn Cys Ser Leu Asp Gly Lys
              130                 135                 140                 
          Ser Val Leu Val Asn Gly Thr Lys Glu Arg Asp Val Val Cys Gly Pro
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                          165                 170                 175     
          Pro Ala Arg Glu Pro Gly His Ser Pro Gln Ile Ile Ser Phe Phe Leu
                      180                 185                 190         
          Ala Leu Thr Ser Thr Ala Leu Leu Phe Leu Leu Phe Phe Leu Thr Leu
                  195                 200                 205             
          Arg Phe Ser Val Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe
              210                 215                 220                 
          Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly
          225                 230                 235                 240 
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           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Tyr
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Tyr Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
                      100                 105         
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          <![CDATA[<400> 10]]>
          Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
           1               5                  10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Gly
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
                  35                  40                  45              
          Trp Leu Ala Leu Ile Asp Trp Ala Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser
              50                  55                  60                  
          Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Leu Gln Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                          85                  90                  95      
          Cys Ala Arg Gly Gly Ser Asp Thr Val Ile Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
                      100                 105                 110         
          Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
              130                 135                 140                 
          Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
          145                 150                 155                 160 
          Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
                          165                 170                 175     
          Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
                      180                 185                 190         
          Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
                  195                 200                 205             
          Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
              210                 215                 220                 
          Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
                  355                 360                 365             
          Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
                  435                 440                 445             
          Gly Lys
              450 
          <![CDATA[<210> 11]]>
          <![CDATA[<211> 213]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 11]]>
          Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Tyr
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Tyr Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
                      100                 105                 110         
          Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
                  115                 120                 125             
          Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
              130                 135                 140                 
          Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                          165                 170                 175     
          Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
                      180                 185                 190         
          Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
                  195                 200                 205             
          Asn Arg Gly Glu Cys
              210             
          <![CDATA[<210> 12]]>
          <![CDATA[<211> 12]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 12]]>
          Tyr Ser Ile Thr Ser Gly His Tyr Trp Ala Trp Ile
           1               5                  10          
          <![CDATA[<210> 13]]>
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          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 13]]>
          Val Ser Ser Ile Ser Gly Tyr Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
           1               5                  10                  15      
          Val Lys Gly Arg Phe
                      20      
          <![CDATA[<210> 14]]>
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          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<400> 14]]>
          Ala Arg Gly Gly Ser Asp Ala Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
           1               5                  10                  15  
          <![CDATA[<210> 15]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 15]]>
          Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Phe Leu Ala
           1               5                  10      
          <![CDATA[<210> 16]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<400> 16]]>
          Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val
           1               5                  
          <![CDATA[<210> 17]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<400> 17]]>
          Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Tyr Leu Trp Thr
           1               5                  10  
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          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<400> 18]]>
          Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
           1               5                  10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
                      20                  25                  30          
          His Tyr Trp Ala Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
                  35                  40                  45              
          Val Ser Ser Ile Ser Gly Tyr Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
              50                  55                  60                  
          Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Leu Gln Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                          85                  90                  95      
          Cys Ala Arg Gly Gly Ser Asp Ala Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
                      100                 105                 110         
          Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
                  115                 120             
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          Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Phe
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Tyr Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
                      100                 105         
          <![CDATA[<210> 20]]>
          <![CDATA[<211> 450]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 20]]>
          Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
           1               5                  10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
                      20                  25                  30          
          His Tyr Trp Ala Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
                  35                  40                  45              
          Val Ser Ser Ile Ser Gly Tyr Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
              50                  55                  60                  
          Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Leu Gln Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                          85                  90                  95      
          Cys Ala Arg Gly Gly Ser Asp Ala Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
                      100                 105                 110         
          Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
              130                 135                 140                 
          Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
          145                 150                 155                 160 
          Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
                          165                 170                 175     
          Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
                      180                 185                 190         
          Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
                  195                 200                 205             
          Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
              210                 215                 220                 
          Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
                  355                 360                 365             
          Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
                  435                 440                 445             
          Gly Lys
              450 
          <![CDATA[<210> 21]]>
          <![CDATA[<211> 213]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 21]]>
          Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Phe
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Tyr Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
                      100                 105                 110         
          Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
                  115                 120                 125             
          Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
              130                 135                 140                 
          Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                          165                 170                 175     
          Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
                      180                 185                 190         
          Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
                  195                 200                 205             
          Asn Arg Gly Glu Cys
              210             
          <![CDATA[<210> 22]]>
          <![CDATA[<211> 13]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 22]]>
          Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Val Gly Val Gly Trp Ile
           1               5                  10              
          <![CDATA[<210> 23]]>
          <![CDATA[<211> 20]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 23]]>
          Leu Ala Leu Ile Asp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser Leu
           1               5                  10                  15      
          Lys Ser Arg Leu
                      20  
          <![CDATA[<210> 24]]>
          <![CDATA[<211> 15]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 24]]>
          Ala Arg Gly Gly Ser Asp Thr Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
           1               5                  10                  15  
          <![CDATA[<210> 25]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 25]]>
          Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Pro Tyr Leu Ala
           1               5                  10      
          <![CDATA[<210> 26]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<400> 26]]>
          Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val
           1               5                  
          <![CDATA[<210> 27]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 27]]>
          Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Ser Leu Trp Thr
           1               5                  10  
          <![CDATA[<210> 28]]>
          <![CDATA[<211> 123]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 28]]>
          Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
           1               5                  10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
                  35                  40                  45              
          Trp Leu Ala Leu Ile Asp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser
              50                  55                  60                  
          Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Leu Gln Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                          85                  90                  95      
          Cys Ala Arg Gly Gly Ser Asp Thr Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
                      100                 105                 110         
          Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
                  115                 120             
          <![CDATA[<210> 29]]>
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          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 29]]>
          Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Pro Tyr
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Ser Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
                      100                 105         
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          <![CDATA[<400> 30]]>
          Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
           1               5                  10                  15      
          Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
                      20                  25                  30          
          Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
                  35                  40                  45              
          Trp Leu Ala Leu Ile Asp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser
              50                  55                  60                  
          Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Leu Gln Leu Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                          85                  90                  95      
          Cys Ala Arg Gly Gly Ser Asp Thr Val Leu Gly Asp Trp Phe Ala Tyr
                      100                 105                 110         
          Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
              130                 135                 140                 
          Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
          145                 150                 155                 160 
          Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
                          165                 170                 175     
          Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
                      180                 185                 190         
          Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
                  195                 200                 205             
          Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
              210                 215                 220                 
          Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly
          225                 230                 235                 240 
          Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                          245                 250                 255     
          Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
                      260                 265                 270         
          Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
                  275                 280                 285             
          Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
              290                 295                 300                 
          Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
          305                 310                 315                 320 
          Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
                          325                 330                 335     
          Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
                      340                 345                 350         
          Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
                  355                 360                 365             
          Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
              370                 375                 380                 
          Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
          385                 390                 395                 400 
          Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp
                          405                 410                 415     
          Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
                      420                 425                 430         
          Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
                  435                 440                 445             
          Gly Lys
              450 
          <![CDATA[<210> 31]]>
          <![CDATA[<211> 213]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 31]]>
          Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
           1               5                  10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Pro Tyr
                      20                  25                  30          
          Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
                  35                  40                  45              
          Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Ser Leu Trp Thr
                          85                  90                  95      
          Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
                      100                 105                 110         
          Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
                  115                 120                 125             
          Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
              130                 135                 140                 
          Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
          145                 150                 155                 160 
          Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                          165                 170                 175     
          Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
                      180                 185                 190         
          Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
                  195                 200                 205             
          Asn Arg Gly Glu Cys
              210             
          <![CDATA[<210> 32]]>
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          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 1]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = F或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 4]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 5]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = G、N或S]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、G或W]]>
          <![CDATA[<400> 32]]>
          Xaa Thr Phe Xaa Xaa Tyr Xaa Ile His Trp Val
           1               5                  10      
          <![CDATA[<210> 33]]>
          <![CDATA[<211> 12]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 4]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = H或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = H或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = A、D、G、N、S或T]]>
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          Tyr Ser Ile Xaa Ser Gly Xaa Xaa Trp Xaa Trp Ile
           1               5                  10          
          <![CDATA[<210> 34]]>
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          <![CDATA[<222> 6]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = G或S]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 9]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A或G]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 11]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、G、S或T]]>
          <![CDATA[<400> 34]]>
          Phe Ser Leu Ser Thr Xaa Gly Val Xaa Val Xaa Trp Ile
           1               5                  10              
          <![CDATA[<210> 35]]>
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          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、D或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 8]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = D或G]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 11]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = R、S或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 14]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = P或T]]>
          <![CDATA[<400> 35]]>
          Leu Ala Leu Ile Asp Trp Xaa Xaa Asp Lys Xaa Tyr Ser Xaa Ser Leu
           1               5                  10                  15      
          Lys Ser Arg Leu
                      20  
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          <![CDATA[<223> Xaa = N或S]]>
          <![CDATA[<400> 36]]>
          Ile Gly Xaa Ile Tyr His Ser Gly Xaa Thr Tyr Tyr Xaa Pro Ser Leu
           1               5                  10                  15      
          Lys Ser Arg Val
                      20  
          <![CDATA[<210> 37]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = A、D、S或Y]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = S或T]]>
          <![CDATA[<400> 37]]>
          Val Ser Xaa Ile Ser Gly Xaa Gly Xaa Xaa Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
           1               5                  10                  15      
          Val Lys Gly Arg Phe
                      20      
          <![CDATA[<210> 38]]>
          <![CDATA[<211> 15]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = E或S]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 6]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = D或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、T或V]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 9]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、I、L、T或V]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 14]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、D或G]]>
          <![CDATA[<400> 38]]>
          Ala Arg Xaa Gly Xaa Xaa Xaa Val Xaa Gly Asp Trp Phe Xaa Tyr
           1               5                  10                  15  
          <![CDATA[<210> 39]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 1]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = Q或R]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 6]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = G, R、S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = P, R、S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = A、D、F、S、V或Y]]>
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          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = L或V]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 11]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、G或N]]>
          <![CDATA[<400> 39]]>
          Xaa Ala Ser Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
           1               5                  10      
          <![CDATA[<210> 40]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 1]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A或D]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 4]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = N、S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = L或R]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 9]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = I或V]]>
          <![CDATA[<400> 40]]>
          Xaa Ala Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa
           1               5                  
          <![CDATA[<210> 41]]>
          <![CDATA[<211> 10]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<220> ]]>
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          <![CDATA[<222> 5]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = A、G、S或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = Q、S或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
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          <![CDATA[<223> Xaa = I、L、T或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 9]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = I、S、V或W]]>
          <![CDATA[<400> 41]]>
          Tyr Cys Gln Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa Thr
           1               5                  10  
          <![CDATA[<210> 42]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 3]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = E或Q]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 5]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = P、S或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 6]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = D、L、S、T或Y]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 7]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = D、E、H、S或T]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 8]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = D、L、T或W]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<221> 變異體        ]]>
          <![CDATA[<222> 10]]>
          <![CDATA[<223> Xaa = L、P、R或V]]>
          <![CDATA[<400> 42]]>
          Tyr Cys Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr
           1               5                  10      
          <![CDATA[<210> 43]]>
          <![CDATA[<211> 153]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人(Homo sapiens)]]>
          <![CDATA[<400> 43]]>
          Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu
           1               5                  10                  15      
          Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu
                      20                  25                  30          
          Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile
                  35                  40                  45              
          Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe
              50                  55                  60                  
          Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys
                          85                  90                  95      
          Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile
                      100                 105                 110         
          Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala
                  115                 120                 125             
          Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe
              130                 135                 140                 
          Cys Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr
          145                 150             
          <![CDATA[<210> 44]]>
          <![CDATA[<211> 134]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列(Artificial Sequence)]]>
          <![CDATA[<220> ]]>
          <![CDATA[<223> 合成構築物]]>
          <![CDATA[<400> 44]]>
          Met Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu
           1               5                  10                  15      
          His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr
                      20                  25                  30          
          Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro
                  35                  40                  45              
          Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu
              50                  55                  60                  
          Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His
          65                  70                  75                  80  
          Leu Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu
                          85                  90                  95      
          Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr
                      100                 105                 110         
          Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Ser Thr Leu Thr
              130
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Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
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Figure 12_A0101_SEQ_0009
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Claims (58)

  1. 一種治療個體癌症之方法，其包括向該個體投與：(a)有效量之特異性結合至人類CD137之細胞外結構域之抗CD137抗體，其中該抗體結合至一或多個選自由以下組成之群之胺基酸殘基：SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、53、62-73、83、89、92、95-104及112-116；及(b)有效量之誘導該個體之免疫細胞上之CD137表現及/或誘導該個體之癌細胞上之CD137L表現的劑。
  2. 如請求項1之方法，其中該免疫細胞係選自由以下組成之群：CD8+ T細胞、調控T (Treg)細胞、自然殺手(NK)細胞及NK-T細胞。
  3. 如請求項1或2之方法，其中該劑係細胞介素。
  4. 如請求項3之方法，其中該細胞介素係選自由以下組成之群：IL-2、IL-12、IL-10及INFγ。
  5. 如請求項3之方法，其中該劑係IL-2。
  6. 如請求項5之方法，其中該IL-2係野生型IL-2、經化學修飾之IL-2變異體或IL-2類似物。
  7. 如請求項5之方法，其中該IL-2係阿地介白素(aldesleukin)或貝培阿地介白素(bempegaldesleukin)。
  8. 如請求項5至7中任一項之方法，其中該IL-2係以不超過約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
  9. 如請求項8之方法，其中該IL-2係以約7.2×10 4IU/kg或約2.8×10 6IU/m 2之劑量投與。
  10. 如請求項8或9之方法，其中該IL-2係每天投與兩次或三次。
  11. 如請求項5至7中任一項之方法，其中該IL-2之投與不超過每三天一次。
  12. 如請求項11之方法，其中該IL-2係以不超過約1.4×10 7IU/m 2之劑量投與。
  13. 如請求項1或2之方法，其中該劑係組蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑。
  14. 如請求項13之方法，其中該HDAC抑制劑係選自由以下組成之群：貝林司他(belinostat)、伏立司他(vorinostat)、羅米地辛(romidepsin)及西達本胺(chidamide)。
  15. 如請求項14之方法，其中該HDAC抑制劑係貝林司他。
  16. 如請求項1或2之方法，其中該劑係DNA損傷劑。
  17. 如請求項16之方法，其中該DNA損傷劑係選自由以下組成之群：絲裂黴素(mitomycin)、博來黴素(bleomycin)、多柔比星(doxorubicin)及苯達莫斯汀(bendamustine)。
  18. 如請求項17之方法，其中該DNA損傷劑係苯達莫斯汀。
  19. 如請求項1至18中任一項之方法，其進一步包括投與有效量之抗CD20抗體。
  20. 如請求項19之方法，其中該抗CD20抗體係利妥昔單抗(rituximab)。
  21. 如請求項1至18中任一項之方法，其進一步包括向該個體投與有效量之免疫檢查點抑制劑。
  22. 如請求項21之方法，其中該免疫檢查點抑制劑係抗PD-1抗體。
  23. 如請求項1至22中任一項之方法，其中該劑係靜脈內投與。
  24. 如請求項1至23中任一項之方法，其中該劑係在投與該抗CD137抗體之前投與。
  25. 如請求項1至23中任一項之方法，其中該劑及該抗CD137抗體係同時投與。
  26. 如請求項1至25中任一項之方法，其中該癌症係液體癌症。
  27. 如請求項26之方法，其中該癌症係非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)。
  28. 如請求項26或27之方法，其中該癌症係T細胞淋巴瘤。
  29. 如請求項26或27之方法，其中該癌症係B細胞淋巴瘤。
  30. 如請求項26之方法，其中該癌症係多發性骨髓瘤。
  31. 如請求項1至25中任一項之方法，其中該癌症係實體癌症。
  32. 如請求項31之方法，其中該癌症係選自由以下組成之群：乳癌、卵巢癌、結腸直腸癌、胃癌、黑色素瘤、肝癌、肺癌、甲狀腺癌、腎癌、腦癌、子宮頸癌、膀胱癌及食管癌。
  33. 如請求項32之方法，其中該癌症係肺癌。
  34. 如請求項32之方法，其中該癌症係黑色素瘤。
  35. 如請求項1至34中任一項之方法，其中該癌症處於輔助環境或新輔助環境中。
  36. 如請求項1至35中任一項之方法，其中該抗CD137抗體係以不超過500 mg之劑量投與。
  37. 如請求項36之方法，其中該抗CD137抗體係以約125 mg或更大之劑量投與。
  38. 如請求項1至37中任一項之方法，其中該抗CD137抗體係以不超過約10 mg/kg之劑量投與。
  39. 如請求項38之方法，其中該抗CD137抗體係以約2.5 mg/kg或更大之劑量投與。
  40. 如請求項1至39中任一項之方法，其中該抗CD137抗體係靜脈內投與。
  41. 如請求項1至40中任一項之方法，其中該抗CD137抗體係約每三週投與一次。
  42. 如請求項1至41中任一項之方法，其中該癌症係晚期癌症。
  43. 如請求項1至42中任一項之方法，其中該癌症係轉移性癌症。
  44. 如請求項1至43中任一項之方法，其中該抗CD137抗體與來自至少一種選自由以下組成之群之非人類物種之CD137多肽交叉反應：食蟹猴、小鼠、大鼠及狗。
  45. 如請求項1至44中任一項之方法，其中該 抗CD137抗體結合至SEQ ID NO: 1之胺基酸殘基51、63-67、69-73、83、89、92、98-104及112-114。
  46. 如請求項1至45中任一項之方法，其中該抗CD137抗體包含重鏈可變區(VH)及輕鏈可變區(VL)，其中該VH包含含有SEQ ID NO: 2之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 4之胺基酸序列之HVR-H3；且其中該VL包含含有SEQ ID NO: 5之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 6之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 7之胺基酸序列之HVR-L3。
  47. 如請求項46之方法，其中該VH包含SEQ ID NO: 8之胺基酸序列，且/或該VL包含SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。
  48. 如請求項47之方法，其中該抗體包含重鏈及輕鏈，且其中該重鏈包含SEQ ID NO: 10之胺基酸序列，且/或該輕鏈包含SEQ ID NO: 11之胺基酸序列。
  49. 如請求項1至45中任一項之方法，其中該抗CD137抗體包含VH及VL，其中該VH包含含有SEQ ID NO: 12之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 13之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 14之胺基酸序列之HVR-H3；且其中該VL包含含有SEQ ID NO: 15之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之HVR-L3。
  50. 如請求項49之方法，其中該VH包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列，且/或該VL包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列。
  51. 如請求項50之方法，其中該抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含SEQ ID NO: 20之胺基酸序列，且/或該輕鏈包含SEQ ID NO: 21之胺基酸序列。
  52. 如請求項1至45中任一項之方法，其中該抗CD137抗體包含VH及VL，其中該VH包含含有SEQ ID NO: 22之胺基酸序列之HVR-H1、含有SEQ ID NO: 23之胺基酸序列之HVR-H2及含有SEQ ID NO: 24之胺基酸序列之HVR-H3；且其中該VL包含含有SEQ ID NO: 25之胺基酸序列之HVR-L1、含有SEQ ID NO: 26之胺基酸序列之HVR-L2及含有SEQ ID NO: 27之胺基酸序列之HVR-L3。
  53. 如請求項52之方法，其中該VH包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列，且/或該VL包含SEQ ID NO: 29之胺基酸序列。
  54. 如請求項53之方法，其中該抗體包含重鏈及輕鏈，其中該重鏈包含SEQ ID NO: 30之胺基酸序列，且/或該輕鏈包含SEQ ID NO: 31之胺基酸序列。
  55. 如請求項1至54中任一項之方法，其中該抗CD137抗體包含人類IgG1 Fc區。
  56. 如請求項1至54中任一項之方法，其中該抗CD137抗體包含人類IgG4 Fc區。
  57. 如請求項56之方法，其中該人類IgG4 Fc區包含S241P突變，其中編號係根據Kabat。
  58. 如請求項1至57中任一項之方法，其中該個體係人類個體。
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