TW202120524A

TW202120524A - 治療性肽

Info

Publication number: TW202120524A
Application number: TW109127760A
Authority: TW
Inventors: 肯尼康帝
Original assignee: 美商寇峇有限公司
Priority date: 2019-08-15
Filing date: 2020-08-14
Publication date: 2021-06-01
Also published as: MX2022001927A; CA3149645A1; WO2021030687A8; CN114269367A; WO2021030687A1; JP2022545388A; AU2020328055A1; IL290520A; KR20220045033A; US20220324909A1; EP4013440A1; EP4013440A4

Abstract

本文之揭露內容係關於細胞生物學領域以及控制細胞活力、細胞增殖及代謝過程之細胞機制的調節。更具體言之，本文揭露有效調節細胞機制之肽，該等細胞機制控制細胞活力、細胞增殖及代謝過程，包含與異常細胞增殖及惡性疾病相關之細胞信號傳導。本文亦揭露有效調節控制細胞活力之細胞機制、治療代謝疾病並作為細胞保護劑的肽。本文還揭露有效作為愛帕琳肽受體促效劑之肽。

Description

治療性肽

本揭露係關於細胞生物學領域以及細胞活力及代謝過程的調節。更具體言之，揭露有效調節與異常細胞增殖及惡性疾病相關之細胞信號傳導的肽。亦揭露有效調節細胞活力、治療代謝疾病並作為細胞保護劑之肽。本文還揭露有效作為愛帕琳肽受體促效劑之肽。以引用之方式併入以電子方式提交之材料

作為本揭露之一部分的序列表係作為正文檔案與說明書同時提交，且以引用之方式併入本文中。包含序列表之檔案係「54008_Seqlisting.txt」，創建於2020年8月12日，且大小為21,927字節。

關於細胞行為之控制尚未得到清晰地瞭解。細胞代謝途徑失調可導致能量恆定之失衡，且可能導致多種代謝障礙，包含但不限於肥胖症、糖尿病、高血壓、動脈硬化、高膽固醇、高脂血症、脂肪肝、非酒精性脂肪變性肝炎（NASH）及其他疾病。調控細胞凋亡之確切細胞機制尚不完全明瞭。細胞凋亡之失調牽涉到許多人類疾病。細胞中細胞凋亡之抑制不當可能導致該細胞不受控制之增殖，從而可能促進癌症之發展。相比之下，無法控制凋亡細胞死亡之程度可能導致特定組織及細胞類型之退化，諸如在神經退化、自體免疫性疾病及其他疾病中發生的情形。

需要更有效的療法來調節控制細胞活性，包含例如控制細胞代謝、細胞增殖及細胞活力之細胞機制。更具體言之，仍迫切需要能夠藉由安全地調控代謝途徑來解決多種代謝障礙的更有效治療方法。需要調節細胞機制的更有效療法，該等細胞機制包含誘導或抑制患有以不當細胞增殖或不當細胞死亡為特徵之病症之個體的細胞及/或組織中之細胞凋亡的細胞機制。

粒線體，作為真核細胞中代謝過程之中心，參與許多細胞過程，包含尤其能量產生、ATP合成、活性氧物種（ROS）生成、計劃性細胞死亡、信號傳導、細胞分化、以及細胞週期及細胞生長之控制。迄今為止，已鑑別出少量具有不同結構及廣泛不同之生物特性的粒線體DNA源性信號傳導肽。儘管獲得此成果，但絕大多數理論粒線體DNA源性肽序列之天然存在及功能仍未確定，而且其作為外源肽之潛在生物活性係完全未知的，且無法由其結構預測。本發明人已鑑別出基於粒線體DNA的具有意想不到之特性的治療上有用之經分離肽，且構思出具有改善之特性的新穎類似物及衍生物。

揭露包括式I-II之胺基酸序列的肽，該等肽在調節細胞機制方面展現出活性。亦揭露包括胺基酸序列SEQ ID NO: 1-64之肽、其類似物及衍生物。

此外，本揭露包括含本文所述之肽的醫藥組成物，該等肽包含但不限於本文所述的包括胺基酸序列SEQ ID NO: 1-64之肽、其類似物及衍生物，以及醫藥學上可接受之賦形劑；以及使用本文所述之肽及組成物治療或預防患者之疾病或醫學病況（例如癌症、代謝疾病）的方法。該方法包括向患者投與有效治療適當疾病或醫學病況之量的當前所揭露之肽、衍生物或類似物，該肽、衍生物或類似物視情況調配成醫藥組成物。類似地，揭露本文所述之肽、衍生物、類似物及組成物用於治療或預防上述疾病或醫學病況之用途；以及用於製造供治療或預防上述疾病或醫學病況用之藥物的用途。

本揭露還包含核酸，例如DNA或RNA，其包括編碼本文所述之肽的核苷酸序列；包括或含有此類核酸之載體；及用此類核酸或載體轉型或轉染之宿主細胞；以及其治療方法及用途。

自以下具體實施方式及申請專利範圍，本發明之其他態樣將變得顯而易知。

在一個態樣中，揭露在治療上調節細胞機制之肽。

在一個實施例中，揭露具有SEQ ID NO: 1-64中任一個所示胺基酸序列中之任一個或多個的肽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽 X¹ -R-X² -X³ -X⁴ -X⁵ -X⁶ -Q-X⁷ -L-X⁸ -X⁹ (I) (SEQ ID NO: 1)

其中X¹ 不存在，或若存在，則為具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X² 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X³ 不存在，若存在，則為一至三個胺基酸，各胺基酸獨立地具有極性側鏈或非極性側鏈；X⁴ 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X⁵ 係具有非極性側鏈之胺基酸；X⁶ 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X⁷ 係具有極性側鏈之胺基酸；X⁸ 係具有極性側鏈之胺基酸；以及X⁹ 不存在，若存在，則為一至三個胺基酸，各胺基酸獨立地具有極性側鏈或非極性側鏈；或具有一個、兩個、三個或四個胺基酸之缺失、插入或取代的該肽之類似物；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽，其中X³ 不存在，或若存在，則為-X¹² X¹¹ X¹⁰ -；其中X¹⁰ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；X¹¹ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；以及X¹² 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽，其中X⁹ 不存在，或若存在，則為-X¹³ X¹⁴ X¹⁵ ；其中X¹³ 係具有非極性側鏈之胺基酸；X¹⁴ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；以及X¹⁵ 不存在，或若存在，則為具有極性側鏈之胺基酸；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽，其中X¹ 不存在，或若存在，則選自D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C、(dC)、G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X² 選自D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C、(dC)、G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X³ 不存在，或若存在，則為D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C、(dC)、G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M、(dM)或-X¹² X¹¹ X¹⁰ -；X⁴ 係選自以下之胺基酸：D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C、(dC)、G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM；X⁵ 係選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X⁶ 係選自以下之胺基酸：D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C、(dC)、G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X⁷ 係選自以下之胺基酸：D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C及(dC)；X⁸ 係選自以下之胺基酸：D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C及(dC)；X⁹ 不存在，或若存在，則為獨立地選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)，或-X¹² X¹³ X¹⁴ ；X¹⁰ 不存在，或若存在，則為選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X¹¹ 不存在，或若存在，則為選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X¹² 係選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；X¹³ 係選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；6]X¹⁴ 不存在，或若存在，則為選自以下之胺基酸：G、A、(dA)、V、(dV)、L、(dL)、I、(dI)、F、(dF)、W、(dW)、P (dP)、M及(dM)；以及X¹⁵ 不存在，或若存在，則為選自以下之胺基酸：D、(dD)、E、(dE)、K、(dK)、R、(dR)、H、(dH)、N、(dN)、Q、(dQ)、S、(dS)、T、(dT)、Y、(dY)、C及(dC)；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；156]或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽，其中X¹ 係M、K,或不存在；X² 係R或Aib；X³ 不存在，或若存在，則為M、E、-MMG-、-II(dA)-、-Nle-Nle-G-或-IIG-；X⁴ 係M、E、I或Nle；X⁵ 係V、A或G；X⁶ 係F、Y、A或E；X⁷ 係C、S或E；X⁸ 係C、S或E；以及X⁹ 係-GL、-G(dA)、-G(dA)K、-(dA)L、G或不存在；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I之胺基酸序列的肽，其中X¹ 係(PEG12)-K，及/或其中X⁹ 係-G(dA)-K(PEG12)。

一個實施例包括具有式II之胺基酸序列的肽X¹⁶ -M-M-G-M-X¹⁷ - (II) (SEQ ID NO: 64) 其中X¹⁶ 不存在，或若存在，則為R-或R-R-；以及X¹⁷ 不存在，或若存在，則選自-V、-VF、-VFQ、-VFQS、-VFQSL及-VFQSLCG(dA)；C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式II之胺基酸序列的肽，其中X¹⁶ 係R-或RR-；以及X¹⁷ 選自VF、-VFQ、-VFQS、-VFQSL及-VFQSLCG(dA；C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括選自以下之胺基酸序列：MMGMVF (SEQ ID NO: 45)；RMMGMVFQ (SEQ ID NO: 51)；RMMGMVFQS (SEQ ID NO: 52)；RMMGMVFQSL (SEQ ID NO: 53)；RMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 54)；RRMMGMVF (SEQ ID NO: 57)；乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 61)；RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺(SEQ ID NO: 62)；及乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺(SEQ ID NO: 63)；或其醫藥學上可接受之鹽。

一個實施例包括具有式I-II之胺基酸序列的肽，其進一步包括其溶劑合物及/或共晶體。

一個實施例包括具有以下胺基酸序列之肽：MRRIIGIVFQCLCGL (SEQ ID NO: 2)。在一些實施例中，肽係SEQ ID NO: 2之修飾形式，相對於SEQ ID NO: 2，該修飾形式包括至多5個胺基酸修飾。在一些實施例中，肽係SEQ ID NO: 2之修飾形式，相對於SEQ ID NO: 2，其包括至多5個胺基酸修飾，該（該等）修飾在位置1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15中之一或多個中，其中胺基酸編號對應於SEQ ID NO: 2。在一些實施例中，相對於SEQ ID NO: 2，肽包括至多5個胺基酸修飾，該（該等）修飾在位置1、4、5、6、7、9、11、13、14或15中之一或多個中，其中胺基酸編號對應於SEQ ID NO: 2。

一個實施例包括選自以下之肽：MRRIIGIVFQCLCGL (SEQ ID NO: 2)；MRRMMGMVFQCLCGL (SEQ ID NO: 7)；RRMMGMVFQCLCG(dA) (SEQ ID NO: 8)；RRII(dA)IVFQCLC(dA)L (SEQ ID NO: 9)；RRMMGMVYQCLCG(dA) (SEQ ID NO: 10)；RRMMGMVEQCLCG(dA) (SEQ ID NO: 12)；RRMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 15)；(PEG12)KRRMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 36)；RRMMGMVEQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 38)；RRIIGIVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 43)；或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，肽由表1中所列之肽表示。表 1 序列 SEQ ID NO: MRRIIGIVFQCLCGL 2 RRIIGIVFQCLCGL 3 RRIIGIVFQCLCG 4 RRIIGIVFQCLC 5 RRIIGIVFQCLC(dA)L 6 MRRMMGMVFQCLCGL 7 RRMMGMVFQCLCG(dA) 8 RRII(dA)IVFQCLC(dA)L 9 RRMMGMVYQCLCG(dA) 10 RRMMGMVAQCLCG(dA) 11 RRMMGMVEQCLCG(dA) 12 RRMMGMVFQELCG(dA) 13 RRMMGMVFQCLEG(dA) 14 RRMMGMVFQSLCG(dA) 15 RRMMGMVFQCLSG(dA) 16 RRMMGMVFQSLSG(dA) 17 RR(Nle)(Nle)G(Nle)VFQCLCG(dA) 18 RRMVFQCLCG(dA) 19 (PEG12)KRRMMGMVFQCLCG(dA) 20 RRMMGMVFQCLCG(dA)K(PEG12) 21 RRMVYQCLCG(dA) 22 RRMVFQCLEG(dA) 23 RRMVYQCLEG(dA) 24 RREMVYQCLCG(dA) 25 RREMVYQCLEG(dA) 26 RRMAYQCLEG(dA) 27 RRMGYQCLEG(dA) 28 RRMMGMVYQCLEG(dA) 29 RRMMGMVAQCLEG(dA) 30 RRMEVYQCLCG(dA) 31 RRMEVYQCLEG(dA) 32 RRLLGLVFQSLCG(dA) 33 R(AIB)MMGMVFQSLCG(dA) 34 R(AIB)LLGLVFQSLCG(dA) 35 (PEG12)KRRMMGMVFQSLCG(dA) 36 (PEG12)KRRLLGLVFQSLCG(dA) 37 RRMMGMVEQSLCG(dA) 38 RRMMGMVFQSLEG(dA) 39 RRLLGLVEQSLCG(dA) 40 RRLLGLVFQSLEG(dA) 41 (PEG12)KRRIIGIVFQCLCG(dA) 42 RRIIGIVFQSLCG(dA) 43 MMGMV 44 MMGMVF 45 MMGMVFQ 46 MMGMVFQS 47 MMGMVFQSL 48 MMGMVFQSLCG(dA) 49 RMMGMVF 50 RMMGMVFQ 51 RMMGMVFQS 52 RMMGMVFQSL 53 RMMGMVFQSLCG(dA) 54 RRMMGM 55 RRMMGMV 56 RRMMGMVF 57 RRMMGMVFQ 58 RRMMGMVFQS 59 RRMMGMVFQSL 60 乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA) 61 RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺 62 乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺 63。

在示例性實施例中，肽或肽衍生物係其PEG、乙醯基、生物素或脂肪酸衍生物。在示例性實施例中，肽衍生物包含PEG12。

在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低脂肪細胞，例如人類原代脂肪細胞中之游離脂肪酸含量。在示例性態樣中，游離脂肪酸含量相對於對照降低至少或約5%。在示例性態樣中，游離脂肪酸含量相對於對照降低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、至少或約90%。在示例性態樣中，游離脂肪酸含量相對於對照降低超過90%。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低脂肪細胞，例如人類原代脂肪細胞中之游離脂肪酸含量，其降低程度高於由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO: 2組成之肽）所實現或與之相關的程度。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低脂肪細胞，例如人類原代脂肪細胞中之游離脂肪酸含量，其降低程度比由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO: 2組成之肽）引起或與之相關的降低要低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、至少或約90%。分析脂肪細胞中之游離脂肪酸含量的適合方法係已知的，其中幾種示例性方法此處描述於實例2-5及17中。在示例性態樣中，如藉由實例2-5及17之一中所述之方法所分析，本揭露之肽或肽類似物降低脂肪細胞，例如人類原代脂肪細胞中之游離脂肪酸含量。在示例性態樣中，如藉由實例2-5及17之一中所述之單劑量分析法所分析，本揭露之肽或肽類似物降低脂肪細胞，例如人類原代脂肪細胞中之游離脂肪酸含量。

在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低哺乳動物，例如DIO小鼠、人類之體重、血糖含量及/或脂肪質量。在示例性態樣中，哺乳動物之體重、血糖含量及/或脂肪質量相對於對照降低至少或約5%。在示例性態樣中，哺乳動物之體重、血糖含量及/或脂肪質量相對於對照降低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低哺乳動物，例如DIO小鼠、人類之體重、血糖含量及/或脂肪質量，其降低程度高於由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO: 2組成之肽）所實現或與之相關的程度。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低哺乳動物，例如DIO小鼠、人類之體重、血糖含量及/或脂肪質量，其降低程度比由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO: 2組成之肽）引起或與之相關的降低要低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、至少或約90%。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量。在示例性態樣中，哺乳動物之血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量相對於對照降低至少或約5%。在示例性態樣中，哺乳動物之血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量相對於對照降低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、至少或約90%。在示例態樣中，哺乳動物之血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量相對於對照降低超過90%。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量，其降低程度高於由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO:2組成之肽）所實現或與之相關的程度。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物降低血清甘油三酯含量及/或肝損傷酶標記物（例如AST、ALT）之血清含量，其降低程度比由MOTS-c肽（例如由SEQ ID NO:2組成之肽）引起或與之相關的降低要低至少或約10%、至少或約20%、至少或約30%、至少或約40%、至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、至少或約90%。分析哺乳動物之體重、血糖含量、脂肪質量、血清甘油三酯含量及肝損傷酶標記物之血清含量的適合方法係此項技術中已知的，其中幾種示例性方法此處描述於實例6-9及18-20中。在示例性態樣中，如藉由實例6-9及18-20之一中所描述之方法，例如每天一次或兩次經皮下或腹膜內注射每劑15 mg/kg之劑量10天（實例6）、每天兩次經適當途徑投與每劑15 mg/kg之劑量21天（實例7）、每天一次藉由適當途徑投與每劑5 mg/kg之劑量21天（實例8）、每天兩次藉由適當途徑投與每劑15 mg/kg之劑量21天（實例9）所分析，本揭露之肽或肽類似物降低哺乳動物，例如DIO小鼠、人類之體重、血糖含量及/或脂肪質量。

在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物在37攝氏度下，在小鼠血漿中展現至少10%的穩定性，持續60分鐘。換言之，在37攝氏度下，在小鼠血漿中培育60分鐘後，該肽或肽類似物之起始分析量之至少10%以完整狀態（例如未降解、裂解等）存在。在示例性態樣中，在37攝氏度下，在血漿中，該肽或肽類似物展現至少20%之穩定性、至少或約30%之穩定性、至少或約40%之穩定性、至少或約50%之穩定性、至少或約60%之穩定性、至少或約70%之穩定性、至少或約80%之穩定性、或至少或約90%之穩定性，持續60分鐘。分析肽在血漿（包含小鼠血漿）中之穩定性的適合方法係此項技術中已知的。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物在37℃下，在小鼠血漿中展現至少10%的穩定性，持續60分鐘。在示例性態樣中，如藉由單次肽劑量/濃度分析所分析，本揭露之肽或肽類似物在37攝氏度下於小鼠血漿中展現至少10%的穩定性，持續60分鐘。肽長度

在示例性實施例中，如本文所描述，本揭露之肽或肽類似物係包括經由肽鍵或其他共價鍵連接之至少四個胺基酸的肽或肽類似物。在示例性態樣中，該肽或肽類似物係約4至約50個胺基酸長度。本文中之肽特定地涵蓋4至50個胺基酸之所有整數子範圍。在示例性態樣中，該肽或肽類似物係約5至約35個胺基酸長度、約5至約30個胺基酸長度、約5至約25個胺基酸長度、或約5至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽或肽類似物係約6至約35個胺基酸長度、約7至約30個胺基酸長度、約6至約25個胺基酸長度、或約6至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽或肽類似物係約7至約35個胺基酸長度、約7至約30個胺基酸長度、約7至約25個胺基酸長度、或約7至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽或肽類似物係約8至約35個胺基酸長度、約8至約30個胺基酸長度、約8至約25個胺基酸長度、或約8至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係約8至約17個或18個、或約9至約16個或17個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係約10至約17個、或約12至約16個或17個、或約14至約16個胺基酸長度。在一些實施例中，該肽係5聚體、6聚體、7聚體、8聚體、9聚體、10聚體、11聚體、12聚體、13聚體、14聚體、15聚體、16聚體、17聚體、18聚體、19聚體、或20聚體。肽修飾

本揭露之肽包含以任何方式且出於任何原因修飾之肽，該修飾例如用於：(1)降低蛋白水解之敏感性、(2)改變結合親和力、及(3)賦予或改變其他物理化學或功能特性。舉例而言，可在序列中進行單個或多個胺基酸取代（例如等效物、保守或非保守取代、缺失或添加）。在示例性態樣中，本揭露之肽或肽類似物包括表1中所列之序列、或其經修飾之序列。在本揭露之示例性實施例中，該肽或肽類似物經脂化（例如豆蔻醯化（myritoylated）、棕櫚醯化、連接至C₇ -C₂₀ 脂質部分）、糖基化、醯胺化、羧基化、磷酸化、酯化、醯化、乙醯化、環化、聚乙二醇化（例如連接至5-20 kDa PEG、連接至5 kDa PEG、12 kDa PEG、20 kDa PEG）或轉化成酸加成鹽及/或視情況二聚化或多聚化、或綴合，如本文進一步描述。大小為200-4600分子量（mol wt）之PEG亦可用於修飾本發明之肽。線狀、分支狀及星狀幾何結構之PEG亦可用於修飾本發明之肽。PEG600又稱為PEG12。在本揭露之示例性實施例中，該肽或肽類似物在N末端處乙醯化、在C末端處醯胺化及/或在Tyr殘基上磷酸化。在示例性態樣中，該肽或肽類似物在N末端或內部殘基之側鏈處連接至脂質部分。在示例性態樣中，該肽或肽類似物直接連接至脂質部分。在示例性態樣中，該肽或肽類似物間接連接至脂質部分。舉例而言，脂質部分可經由連接子附接至肽。該連接子可為胺基酸。在示例性態樣中，脂質部分經由Glu殘基附接至肽或肽類似物之Lys殘基，視情況經由ε胺附接。本發明之經修飾肽的實例見於表1中。

在一些實施例中，本文所揭露之肽包括與胺基酸序列SEQ ID NO:1-64中之任一個具有至少66%序列一致性的序列。在某些實施例中，與給定序列之一致性百分比選自例如至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、或至少95%或更高序列一致性。在某些實施例中，一致性百分比在例如約65%至約70%、約70%至約80%、約80%至約85%、約85%至約90%、或約90%至約95%；%；在約70%與約80%之間、在約80%與約90%之間及在約90%與約99%之間序列一致性的範圍內。

在某些實施例中，肽包括與胺基酸序列SEQ ID NO:1-64中之任一個具有至少66%序列一致性的序列。在某些實施例中，與給定序列之一致性百分比選自例如至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、或至少95%或更高序列一致性。在某些實施例中，一致性百分比在例如約65%至約70%、約70%至約80%、約80%至約85%、約85%至約90%、或約90%至約95%；%；在約70%與約80%之間、在約80%與約90%之間及在約90%與約99%之間序列一致性的範圍內，但不包括SEQ ID NO:2中所示之序列。

本揭露之肽包含以任何方式且出於任何原因修飾之肽，該修飾例如用於：(1)降低蛋白水解之敏感性、(2)改變結合親和力、及(3)賦予或改變其他物理化學或功能特性。舉例而言，可在序列中進行單個或多個胺基酸取代（例如等效物、保守或非保守取代、缺失或添加）。

保守胺基酸取代係指肽中之胺基酸經具有類似特性，例如大小、電荷、疏水性、親水性及/或芳香性類似的功能類似之胺基酸取代。表2中呈現以下六組，其各自含有彼此保守取代之胺基酸。表 2 i. 丙胺酸（A）、絲胺酸（S）及蘇胺酸（T） ii. 天冬胺酸（D）及麩胺酸（E） iii. 天冬醯胺（N）及麩醯胺酸（Q） iv. 精胺酸（R）及離胺酸（K） v. 異白胺酸（I）、白胺酸（L）、甲硫胺酸（M）及纈胺酸（V） vi. 苯丙胺酸（F）、酪胺酸（Y）及色胺酸（W）

另外，如本文中所用，在術語「等效胺基酸取代」之含義內，在一個實施例中，在下文指示之胺基酸組中，一個胺基酸可取代成另一個胺基酸： 1. 具有極性側鏈之胺基酸（Asp、Glu、Lys、Arg、His、Asn、Gln、Ser、Thr、Tyr及Cys）， 2. 具有小非極性殘基或微小極性殘基之胺基酸（Ala、Ser、Thr、Pro、Gly）； 3. 具有非極性側鏈之胺基酸（Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Trp、Pro及Met） 4. 具有較大脂族非極性殘基之胺基酸（Met、Leu、Ile、Val、Cys、正白胺酸（Nle）、高半胱胺酸） 5. 具有脂族側鏈之胺基酸（Gly、Ala Val、Leu、Ile） 6. 具有環狀側鏈之胺基酸（Phe、Tyr、Trp、His、Pro） 7. 具有芳族側鏈之胺基酸（Phe、Tyr、Trp） 8. 帶有酸性側鏈之胺基酸（Asp、Glu） 9. 具有鹼性側鏈之胺基酸（Lys、Arg、His） 10. 帶有醯胺側鏈之胺基酸（Asn、Gln） 11. 帶有羥基側鏈之胺基酸（Ser、Thr） 12. 具有含硫側鏈之胺基酸（Cys、Met） 13. 中性、弱疏水性胺基酸（Pro、Ala、Gly、Ser、Thr） 14. 親水性、酸性胺基酸（Gln、Asn、Glu、Asp），以及 15. 疏水性胺基酸（Leu、Ile、Val）。

在一些實施例中，胺基酸取代並非保守胺基酸取代，例如為非保守胺基酸取代。此類別一般包含相應D-胺基酸、高胺基酸、N-烷基胺基酸、β胺基酸及其他非天然胺基酸。非保守胺基酸取代仍在以上關於等效胺基酸取代所標識之描述[例如極性、非極性等]範圍內。非保守胺基酸之實例提供於下。

丙胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：D-丙胺酸[Dala、(dA)、a]、N -乙醯基-3-(3,4-二甲氧基苯基)-D-丙胺酸、N -Me-D-Ala-OH、N -Me-Ala-OH、H-β-Ala-β-萘、L-(-)-2-胺基-3-脲基丙酸、(R )-(+)-α-烯丙基丙胺酸、(S )-(-)-α-烯丙基丙胺酸、D-2-胺基丁酸、L-2-胺基丁酸、DL-2-胺基丁酸、2-胺基異丁酸、α-胺基異丁酸、(S )-(+)-2-胺基-4-苯基丁酸乙酯、α-胺基異丁酸苯甲酯、Abu-OH、Aib-OH、β-(9-蒽基)-Ala-OH、β-(3-苯并噻吩基)-Ala-OH、β-(3-苯并噻吩基)-D-Ala-OH、Cha-OH、Cha-OMe、β-(2-呋喃基)-Ala-OH、β-(2-呋喃基)-D-Ala-OH、β-碘-Ala-OBzl、β-碘-D-Ala-OBzl、3-碘-D-Ala-OMe、β-碘-Ala-OMe、1-Nal-OH、D-1-Nal-OH、2-Nal-OH、D-2-Nal-OH、(R )-3-(2-萘基)-β-Ala-OH、(S )-3-(2-萘基)-β-Ala-OH、β-苯基-Phe-OH、3-(2-吡啶基)-Ala-OH、3-(3-吡啶基)-Ala-OH、3-(3-吡啶基)-D-Ala-OH、(S )-3-(3-吡啶基)-β-Ala-OH、3-(4-吡啶基)-Ala-OH、3-(4-吡啶基)-D-Ala-OH、β-(2-喹啉基)-Ala-OH、3-(2-喹啉基)-DL-Ala-OH、3-(3-喹啉基)-DL-Ala-OH、3-(2-喹喔啉基)-DL-Ala-OH、β-(4-噻唑基)-Ala-OH、β-(2-噻吩基)-Ala-OH、β-(2-噻吩基)-D-Ala-OH、β-(3-噻吩基)-Ala-OH、β-(3-噻吩基)-D-Ala-OH、3-氯-D-丙胺酸甲酯、N -[(4-氯苯基)磺醯基]-β-丙胺酸、3-環己基-D-丙胺酸、3-環戊基-DL-丙胺酸、(-)-3-(3,4-二羥基苯基)-2-甲基-L-丙胺酸、3,3-二苯基-D-丙胺酸、3,3-二苯基-L-丙胺酸、N -[(S )-(+)-1-(乙氧基羰基)-3-苯基丙基]-L-丙胺酸、N -[1-(S )-(+)-乙氧基羰基-3-苯基丙基]-L-丙胺醯基羧基環內酸酐、N-(3-氟苯甲基)丙胺酸、N -(3-吲哚基乙醯基)-L-丙胺酸、(RS )-2-(胺基甲基)-3-苯基丙酸甲酯、3-(2-側氧基-1,2-二氫-4-喹啉基)丙胺酸、3-(1-吡唑基)-L-丙胺酸、3-(2-吡啶基)-D-丙胺酸、3-(2-吡啶基)-L-丙胺酸、3-(3-吡啶基)-L-丙胺酸、3-(4-吡啶基)-D-丙胺酸、3-(4-吡啶基)-L-丙胺酸、3-(2-喹啉基)-DL-丙胺酸、3-(4-喹啉基)-DL-丙胺酸、D-苯乙烯基丙胺酸、L-苯乙烯基丙胺酸、3-(2-噻吩基)-L-丙胺酸、3-(2-噻吩基)-DL-丙胺酸、3-(2-噻吩基)-DL-丙胺酸、3,3,3-三氟-DL-丙胺酸、N -甲基-L-丙胺酸、3-脲基丙酸、Aib-OH、Cha-OH、脫氫-Ala-O Me、脫氫-Ala-OH、D-2-Nal-OH、β-Ala-ONp、β-高丙胺酸-OH、β-D-高丙胺酸-OH、β-丙胺酸、β-丙胺酸乙酯、β-丙胺酸甲酯、(S )-二苯基-β-高丙胺酸-OH、(R )-4-(4-吡啶基)-β-高丙胺酸-OH、(S )-4-(4-吡啶基)-β-高丙胺酸-OH、β-Ala-OH、(S )-二苯基-β-高丙胺酸-OH、L-β-高丙胺酸、(R )-4-(3-吡啶基)-β-高丙胺酸-OH、α-甲基-α-萘基丙胺酸[Manap]、N-甲基-環己基丙胺酸[Nmchexa]、環己基丙胺酸[Chexa]、N-甲基-環戊基丙胺酸[Nmcpen]、環戊基丙胺酸[Cpen]、N-甲基-α-萘基丙胺酸[Nmanap]、α-萘基丙胺酸[Anap]、L-N-甲基丙胺酸[Nmala]、D-N-甲基丙胺酸[Dnmala]、α-甲基-環己基丙胺酸[Mchexa]、α-甲基-環戊基丙胺酸[Mcpen]。每種可能性代表一個獨立實施例。

精胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：高精胺酸（hArg）、N-甲基精胺酸（NMeArg）、瓜胺酸、2-胺基-3-胍基丙酸、N-亞胺基乙基-L-鳥胺酸、Νω-單甲基-L-精胺酸、Νω-硝基-L-精胺酸、D-精胺酸、2-胺基-3-脲基丙酸、Νω,ω-二甲基-L-精胺酸、Νω-硝基-D-精胺酸、L-α-甲基精胺酸[Marg]、D-α-甲基精胺酸[Dmarg]、L-N-甲基精胺酸[Nmarg]、D-N-甲基精胺酸[Dnmarg]、β-高精胺酸-OH、L-高精胺酸、N-(3-胍基丙基)甘胺酸[Narg]及D-精胺酸[Darg、(dR)、r]。每種可能性代表一個獨立實施例。

天冬醯胺非保守胺基酸之非限制性實例係：L-α-甲基天冬醯胺[Masn]、D-α-甲基天冬醯胺[Dmasn]、L-N-甲基天冬醯胺[Nmasn]、D-N-甲基天冬醯胺[Dnmasn]、N-(胺甲醯基甲基)甘胺酸[Nasn]及D-天冬醯胺[Dasn、(dN)、n]。每種可能性代表一個獨立實施例。

天冬胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：L-α-甲基天冬胺酸酯[Masp]、D-α-甲基天冬胺酸酯[Dmasp]、L-N-甲基天冬胺酸[Nmasp]、D-N-甲基天冬胺酸酯[Dnmasp]、N-(羧基甲基)甘胺酸[Nasp]及D-天冬胺酸[Dasp、(dD)、d]。每種可能性代表一個獨立實施例。

半胱胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：L-氧化半胱胺酸、L-半胱胺酸亞磺酸、D-乙硫胺基酪酸、S-(2-噻唑基)-L-半胱胺酸、DL-高半胱胺酸、L-高半胱胺酸、L-高胱胺酸、L-α-甲基半胱胺酸[Mcys]、D-α-甲基半胱胺酸[Dmcys]、L-N-甲基半胱胺酸[Nmcys]、D-N-甲基半胱胺酸[Dnmcys]、N-(硫代甲基)甘胺酸[Ncys]及D-半胱胺酸[Dcys、(dC)、c]。每種可能性代表一個獨立實施例。

麩胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：γ-羧基-DL-麩胺酸、4-氟-DL-麩胺酸、β-麩胺酸、L-β-高麩胺酸、L-α-甲基麩胺酸酯[Mglu]、D-α-甲基麩胺酸[Dmglu]、L-N-甲基麩胺酸[Nmglu]、D-N-甲基麩胺酸酯[Dnmglu]、N-(2-羧基乙基)甘胺酸[Nglu]及D-麩胺酸[Dglu、(dE)、e]。每種可能性代表一個獨立實施例。

麩醯胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：Cit-OH、D-瓜胺酸、硫代-L-瓜胺酸、β-Gln-OH、L-β-高麩醯胺酸、L-α-甲基麩醯胺酸[Mgln]、D-α-甲基麩醯胺酸[Dmgln]、L-N-甲基麩醯胺酸[Nmgln]、D-N-甲基麩醯胺酸[Dnmgln]、N-(2-胺甲醯基乙基)甘胺酸[Ngln]及D-麩醯胺酸[Dgln、(dQ)、q]。每種可能性代表一個獨立實施例。

甘胺酸非保守性胺基酸之非限制性實例係：tBu-Gly-OH、D-烯丙基甘胺酸、N -[雙(甲硫基)亞甲基]甘胺酸甲酯、Chg-OH、D-Chg-OH、D-環丙基甘胺酸、L-環丙基甘胺酸、(R )-4-氟苯基甘胺酸、(S )-4-氟苯基甘胺酸、亞胺基二乙酸、(2-茚烷基)-Gly-OH、(±)-α-膦醯基甘胺酸三甲酯、D-炔丙基甘胺酸、炔丙基-Gly-OH、(R )-2-噻吩基甘胺酸、(S )-2-噻吩基甘胺酸、(R )-3-噻吩基甘胺酸、(S )-3-噻吩基甘胺酸、2-(4-三氟甲基-苯基)-DL-甘胺酸、(2S,3R,4S)-α-(羧基環丙基)甘胺酸、N -(氯乙醯基)甘胺酸乙酯、(S)-(+)-2-氯苯基甘胺酸甲酯、N-(2-氯苯基)-N-(甲基磺醯基)甘胺酸、D-α-環己基甘胺酸、L-α-環丙基甘胺酸、亞胺基二甲酸二第三丁酯、乙醯胺基氰基乙酸乙酯、N-(2-氟苯基)-N-(甲基磺醯基)甘胺酸、N-(4-氟苯基)-N-(甲基磺醯基)甘胺酸、N -(2-呋喃亞甲基乙醯基)甘胺酸甲酯、N -(2-呋喃甲醯基)甘胺酸、N -(2-羥基乙基)亞胺基二乙酸、N -(4-羥基苯基)甘胺酸、亞胺基二乙酸、N -月桂醯基肌胺酸鈉鹽、L-α-新戊基甘胺酸、N -(膦醯基甲基)甘胺酸、D-炔丙基甘胺酸、L-C-炔丙基甘胺酸、肌胺酸、N ,N -二甲基甘胺酸、N ,N -二甲基甘胺酸乙酯、D-Chg-OH、α -膦醯基甘胺酸三甲酯、N-環丁基甘胺酸[Ncbut]、L-α-甲基乙基甘胺酸[Metg]、N-環庚基甘胺酸[Nchep]、L-α-甲基-異丁基甘胺酸[Mtbug]、N-甲基甘胺酸[Nmgly]、L-N-甲基-乙基甘胺酸[Nmetg]、L-乙基甘胺酸[Etg]、L-N-甲基-第三丁基甘胺酸[Nmtbug]、L-第三丁基甘胺酸[Tbug]、N-環己基甘胺酸[Nchex]、N-環癸基甘胺酸[Ncdec]、N-環十二烷基甘胺酸[Ncdod]、N-環辛基甘胺酸[Ncoct]、N-環丙基甘胺酸[Ncpro]、N-環十一烷基甘胺酸[Ncund]、N-(2-胺基乙基)甘胺酸[Naeg]、N-(N-(2,2-二苯基乙基)二苯基乙基)甘胺酸[Nnbhm]、N-(2,2-胺甲醯基甲基-甘胺酸[Nbhm]、N-(N-(3,3-二苯基丙基)二苯基丙基)甘胺酸[Nnbhe]及N-(3,3-胺甲醯基甲基-甘胺酸[Nbhe]。每種可能性代表一個獨立實施例。

組胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：L-α-甲基組胺酸[Mhis]、D-α-甲基組胺酸[Dmhis]、L-N-甲基組胺酸[Nmhis]、D-N-甲基組胺酸[Dnmhis]、N-(咪唑基乙基)甘胺酸[Nhis]及D-組胺酸[Dhis、(dH)、h]。每種可能性代表一個獨立實施例。

異白胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：N -甲基-L-異白胺酸[Nmile]、N -(3-吲哚基乙醯基)-L-異白胺酸、別-Ile-OH、D-別-異白胺酸、L-β-高異白胺酸、L-α-甲基異白胺酸[Mile]、D-α-甲基異白胺酸[Dmile]、D-N-甲基異白胺酸[Dnmile]、N-(1-甲基丙基)甘胺酸[Nile]及D-異白胺酸[Dile、(dD)、i]。每種可能性代表一個獨立實施例。

白胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：D-白胺酸[Dleu、(dL)、l]。環白胺酸、DL-白胺酸、N -甲醯基-Leu-OH、D-第三-白胺酸、L-第三-白胺酸、DL-第三-白胺酸、L-第三-白胺酸甲酯、5,5,5-三氟-DL-白胺酸、D-β-Leu-OH、L-β-白胺酸、DL-β-白胺酸、L-β-高白胺酸、DL-β-高白胺酸、L-N-甲基-白胺酸[Nmleu]、D-N-甲基-白胺酸[Dnmleu]、L-α-甲基-白胺酸[Mleu]、D-α-甲基-白胺酸[Dmleu]、N-(2-甲基丙基)甘胺酸[Nleu]、D-白胺酸[Dleu、l]、D-正白胺酸、L-正白胺酸、DL-正白胺酸、L-N-甲基正白胺酸[Nmnle]及L-正白胺酸[Nle]。每種可能性代表一個獨立實施例。

離胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：DL-5-羥基離胺酸、(5R )-5-羥基-L-離胺酸、β-Lys-OH、L-β-高離胺酸、L-α-甲基-離胺酸[Mlys]、D-α-甲基-離胺酸[Dmlys]、L-N-甲基-離胺酸[Nmlys]、D-N-甲基-離胺酸[Dnmlys]、N-(4-胺基丁基)甘胺酸[Nlys]及D-離胺酸[Dlys、(dK)、k]。每種可能性代表一個獨立實施例。

甲硫胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：L-β-高甲硫胺酸、DL-β-高甲硫胺酸、L-α-甲基甲硫胺酸[Mmet]、D-α-甲基甲硫胺酸[Dmmet]、L-N-甲基甲硫胺酸[Nmmet]、D-N-甲基甲硫胺酸[Dnmmet]、N-(2-甲硫基乙基)甘胺酸[Nmet]及D-甲硫胺酸[Dmet、(dM)、m]。每種可能性代表一個獨立實施例。

苯丙胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：N -乙醯基-2-氟-DL-苯丙胺酸、N -乙醯基-4-氟-DL-苯丙胺酸、4-胺基-L-苯丙胺酸、3-[3,4-雙(三氟甲基)苯基]-L-丙胺酸、Bpa-OH、D-Bpa-OH、4-第三丁基-Phe-OH、4-第三丁基-D-Phe-OH、4-(胺基)-L-苯丙胺酸、外消旋 -β² -高苯丙胺酸、2-甲氧基-L-苯丙胺酸、(S )-4-甲氧基-β-Phe-OH、2-硝基-L-苯丙胺酸、五氟-D-苯丙胺酸、五氟-L-苯丙胺酸、Phe(4-Br)-OH、D-Phe(4-Br)-OH、Phe(2-CF₃ )-OH、D-Phe(2-CF₃ )-OH、Phe(3-CF₃ )-OH、D-Phe(3-CF₃ )-OH、Phe(4-CF₃ )-OH、D-Phe(4-CF₃ )-OH、Phe(2-Cl)-OH、D-Phe(2-Cl)-OH、Phe(2,4-Cl₂ )-OH、D-Phe(2,4-Cl₂ )-OH、D-Phe(3-Cl)-OH、Phe(3,4-Cl₂ )-OH、Phe(4-Cl)-OH、D-Phe(4-Cl)-OH、Phe(2-CN)-OH、D-Phe(2-CN)-OH、D-Phe(3-CN)-OH、Phe(4-CN)-OH、D-Phe(4-CN)-OH、Phe(2-Me)-OH、D-Phe(2-Me)-OH、Phe(3-Me)-OH、D-Phe(3-Me)-OH、Phe(4-Me)-OH、Phe(4-NH₂ )-OH、Phe(4-NO₂ )-OH、Phe(2-F)-OH、D-Phe(2-F)-OH、Phe(3-F)-OH、D-Phe(3-F)-OH、Phe(3,4-F₂ )-OH、D-Phe(3,4-F₂ )-OH、Phe(3,5-F₂ )-OH、Phe(4-F)-OH、D-Phe(4-F)-OH、Phe(4-I)-OH、D-3,4,5-三氟苯丙胺酸、對溴-DL-苯丙胺酸、4-溴-L-苯丙胺酸、β-苯基-D-苯丙胺酸、4-氯-L-苯丙胺酸、DL-2,3-二氟苯丙胺酸、DL-3,5-二氟苯丙胺酸、3,4-二羥基-L-苯丙胺酸、3-(3,4-二甲氧基苯基)-L-丙胺酸、N -[(9H -茀-9-基甲氧基)羰基]-2-甲氧基-L-苯丙胺酸、鄰氟-DL-苯丙胺酸、間氟-L-苯丙胺酸、間氟-DL-苯丙胺酸、對氟-L-苯丙胺酸、對氟-DL-苯丙胺酸、4-氟-D-苯丙胺酸、2-氟-L-苯丙胺酸甲酯、對氟-DL-Phe-OMe、D-3-溴苯丙胺酸、D-4-溴苯丙胺酸、L-β-(6-氯-4-吡啶基)丙胺酸、D-3,5-二氟苯丙胺酸、L-3-氟苯丙胺酸、L-4-氟苯丙胺酸、L-β-(1H -5-吲哚基)丙胺酸、2-硝基-L-苯丙胺酸、五氟-L-苯丙胺酸、phe(3-br)-oh、Phe(4-Br)-OH、Phe(2-CF₃ )-OH、D-Phe(2-CF₃ )-OH、Phe(3-CF₃ )-OH、D-Phe(3-CF₃ )-OH、Phe(4-CF₃ )-OH、D-Phe(4-CF₃ )-OH、Phe(2-Cl)-OH、D-Phe(2-Cl)-OH、Phe(2,4-Cl₂ )-OH、D-Phe(2,4-Cl₂ )-OH、Phe(3,4-Cl₂ )-OH、D-Phe(3,4-Cl₂ )-OH、Phe(4-Cl)-OH、D-Phe(4-Cl)-OH、Phe(2-CN)-OH、D-Phe(2-CN)-OH、D-Phe(3-CN)-OH、Phe(4-CN)-OH、Phe(2-Me)-OH、Phe(3-Me)-OH、D-Phe(3-Me)-OH、Phe(4-NO₂ )-OH、D-Phe(4-NO₂ )-OH、D-Phe(2-F)-OH、Phe(3-F)-OH、D-Phe(3-F)-OH、Phe(3,4-F₂ )-OH、Phe(3,5-F₂ )-OH、D-Phe(4-F)-OH、Phe(4-I)-OH、D-Phe(4-I)-OH、4-(膦醯基甲基)-Phe-OH、L-4-三氟甲基苯丙胺酸、3,4,5-三氟-D-苯丙胺酸、L-3,4,5-三氟苯丙胺酸、6-羥基-DL-DOPA、4-(羥基甲基)-D-苯丙胺酸、N -(3-吲哚基乙醯基)-L-苯丙胺酸、對碘-D-苯丙胺酸、4-碘-L-苯丙胺酸、α-甲基-D-苯丙胺酸、α-甲基-L-苯丙胺酸、α-甲基-DL-苯丙胺酸、α-甲基-DL-苯丙胺酸甲酯、4-硝基-D-苯丙胺酸、4-硝基-L-苯丙胺酸、4-硝基-DL-苯丙胺酸、(S )-(+)-4-硝基苯丙胺酸甲酯、2-(三氟甲基)-D-苯丙胺酸、2-(三氟甲基)-L-苯丙胺酸、3-(三氟甲基)-D-苯丙胺酸、3-(三氟甲基)-L-苯丙胺酸、4-(三氟甲基)-D-苯丙胺酸、3,3',5-三碘-L-甲狀腺胺酸、(R )-4-溴-β-Phe-OH、N-乙醯基-DL-β-苯丙胺酸、(S )-4-溴-β-Phe-OH、(R )-4-氯-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-4-氯-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-4-氯-β-Phe-OH、(S )-4-氯-β-Phe-OH、(S )-2-氰基-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-4-氰基-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-4-氰基-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-3-氰基-β-Phe-OH、(R )-4-氰基-β-Phe-OH、(S )-4-氰基-β-Phe-OH、(R )-3,4-二甲氧基-β-Phe-OH、(S )-3,4-二甲氧基-β-Phe-OH、(R )-4-氟-β-Phe-OH、(S )-4-氟-β-Phe-OH、(S )-4-碘-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-3-氰基-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-3,4-二氟-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-4-氟-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-β2-高苯丙胺酸、(R )-3-甲氧基-β-Phe-OH、(S )-3-甲氧基-β-Phe-OH、(R )-4-甲氧基-β-Phe-OH、(S )-4-甲基-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-2-甲基-β-Phe-OH、(S )-2-甲基-β-Phe-OH、(R )-3-甲基-β-Phe-OH、(S )-3-甲基-β-Phe-OH、(R )-4-甲基-β-Phe-OH、(S )-4-甲基-β-Phe-OH、β-Phe-OH、D-β-Phe-OH、(S )-2-(三氟甲基)-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-2-(三氟甲基)-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-3-(三氟甲基)-β-高苯丙胺酸-OH、(R )-4-(三氟甲基)-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-2-(三氟甲基)-β-Phe-OH、(R )-3-(三氟甲基)-β-Phe-OH、(S )-3-(三氟甲基)-β-Phe-OH、(R )-4-(三氟甲基)-β-Phe-OH、(S )-4-(三氟甲基)-β-Phe-OH、β-高苯丙胺酸-OH、D-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-2-甲基-β-高苯丙胺酸-OH、(S )-3-甲基-β-高苯丙胺酸-OH、β-Phe-OH、β-D-Phe-OH、(S )-3-(三氟甲基)-β-高苯丙胺酸-OH、L-β-高苯丙胺酸、DL-β-高苯丙胺酸、DL-β-苯丙胺酸、DL-高苯丙胺酸甲酯、D-高苯丙胺酸、L-高苯丙胺酸、DL-高苯丙胺酸、D-高苯丙胺酸乙酯、(R )-β² -高苯丙胺酸、L-α-甲基-高苯丙胺酸[Mhphe]、L-α-甲基苯丙胺酸[Mphe]、D-a-甲基苯丙胺酸[Dmphe]、L-N-甲基-高苯丙胺酸[Nm phe]、L-高苯丙胺酸[Hphe]、L-N-甲基苯丙胺酸[Nmphe]、D-N-甲基苯丙胺酸[Dnmphe]、N-苯甲基甘胺酸[Nphe]及D-苯丙胺酸[Dphe、(dF)、f]。每種可能性代表一個獨立實施例。

脯胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：高脯胺酸（hPro）、(4-羥基)Pro（4HyP）、(3-羥基)Pro（3HyP）、γ-苯甲基-脯胺酸、γ-(2-氟-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-氟-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-氟-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-氯-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-氯-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-氯-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-溴-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-溴-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-溴-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-硝基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-硝基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-硝基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(l-萘基甲基)-脯胺酸、γ-(2-萘基甲基)-脯胺酸、γ-(2,4-二氯-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3,4-二氯-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3,4-二氟-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-三氟-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-三氟-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-三氟-甲基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-氰基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-氰基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-氰基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(2-碘-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-碘-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-碘-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-苯基-烯丙基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(3-苯基-丙基-苯甲基)-脯胺酸、γ-(4-第三丁基-苯甲基)-脯胺酸、γ-二苯甲基-脯胺酸、γ-(4-聯苯-甲基)-脯胺酸、γ-(4-噻唑基-甲基)-脯胺酸、γ-(3-苯并噻吩基-甲基)-脯胺酸、γ-(2-噻吩基-甲基)-脯胺酸、γ-(3-噻吩基-甲基)-脯胺酸、γ-(2-呋喃基-甲基)-脯胺酸、γ-(2-吡啶基-甲基)-脯胺酸、γ-(3-吡啶基-甲基)-脯胺酸、γ-(4-吡啶基-甲基)-脯胺酸、γ-烯丙基-脯胺酸、γ-丙炔基-脯胺酸、α-經修飾之脯胺酸殘基、2-哌啶甲酸、氮雜環丁烷-3-甲酸、L-β-高脯胺酸、L-β³ -高脯胺酸、L-β-高羥基脯胺酸、羥基脯胺酸[Hyp]、L-α-甲基脯胺酸[Mpro]、D-α-甲基脯胺酸[Dmpro]、L-N-甲基脯胺酸[Nmpro]、D-N-甲基脯胺酸[Dnmpro]及D-脯胺酸[Dpro、(dP)、p]。每種可能性代表一個獨立實施例。

絲胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：(2R ,3S )-3-苯基異絲胺酸、D-環絲胺酸、L-異絲胺酸、DL-異絲胺酸、DL-3-苯基絲胺酸、L-β-高絲胺酸、D-高絲胺酸、D-高絲胺酸、L-3-高絲胺酸、L-高絲胺酸、L-α-甲基絲胺酸[Mser]、D-α-甲基絲胺酸[Dmser]、L-N-甲基絲胺酸[Nmser]、D-N-甲基絲胺酸[Dnmser]、D-絲胺酸[Dser、(dS)、s]、N-(羥基甲基)甘胺酸[Nser]及磷酸絲胺酸[pSer]。每種可能性代表一個獨立實施例。

蘇胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：L-別 -蘇胺酸、D-甲狀腺素、L-β-高蘇胺酸、L-α-甲基蘇胺酸[Mthr]、D-α-甲基蘇胺酸[Dmthr]、L-N-甲基蘇胺酸[Nmthr]、D-N-甲基蘇胺酸[Dnmthr]、D-蘇胺酸[Dthr、(dT)、t]、N-(1-羥基乙基)甘胺酸[Nthr]及磷酸蘇胺酸[pThr]。每種可能性代表一個獨立實施例。

色胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：5-氟-L-色胺酸、5-氟-DL-色胺酸、5-羥基-L-色胺酸、5-甲氧基-DL-色胺酸、L-相思子鹼、5-甲基-DL-色胺酸、H-Tpi-Ome。β-高色胺酸-OMe、L-β-高色胺酸、L-α-甲基色胺酸[Mtrp]、D-α-甲基色胺酸[Dmtrp]、L-N-甲基色胺酸[Nmtrp]、D-N-甲基色胺酸[Dnmtrp]、N-(3-吲哚基乙基)甘胺酸[Nhtrp]、D-色胺酸[Dtrp、(dW)、w]。每種可能性代表一個獨立實施例。

酪胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：3,5二碘酪胺酸（3,5-dITyr）、3,5二溴酪胺酸（3,5-dBTyr）、高酪胺酸、D-酪胺酸、3-胺基-L-酪胺酸、3-胺基-D-酪胺酸、3-碘-L-酪胺酸、3-碘-D-酪胺酸、3-甲氧基-L-酪胺酸、3-甲氧基-D-酪胺酸、L-甲狀腺素、D-甲狀腺素、L-甲狀腺胺酸、D-甲狀腺胺酸、O-甲基-L-酪胺酸、O-甲基-D-酪胺酸、D-甲狀腺胺酸、O-乙基-L-酪胺酸、O-乙基-D-酪胺酸、3,5,3'-三碘-L-甲狀腺胺酸、3,5,3'-三碘-D-甲狀腺胺酸、3,5-二碘-L-甲狀腺胺酸、3,5-二碘-D-甲狀腺胺酸、D-間酪胺酸、L-間酪胺酸、D-鄰酪胺酸、L-鄰酪胺酸、苯丙胺酸、經取代之苯丙胺酸、N-硝基苯丙胺酸、p-硝基苯丙胺酸、3-氯-Dtyr-oh、Tyr(3,5-diI)、3-氯-L-酪胺酸、Tyr(3-NO₂ )-OH、Tyr(3,5-diI)-OH、N -Me-Tyr-OH、α-甲基-DL-酪胺酸、3-硝基-L-酪胺酸、DL-鄰酪胺酸、β-高酪胺酸-OH、(R )-β-Tyr-OH、(S )-β-Tyr-OH、L-α-甲基酪胺酸[Mtyr]、D-α-甲基酪胺酸[Dmtyr]、L-N-甲基酪胺酸[Nmtyr]、D-N-甲基酪胺酸[Dnmtyr]、D-酪胺酸[Dtyr、(dY)、y]、O-甲基-酪胺酸及磷酸酪胺酸[pTyr]。每種可能性代表一個獨立實施例。

纈胺酸非保守胺基酸之非限制性實例係：3-氟-DL-纈胺酸、4,4,4,4',4',4'-六氟-DL-纈胺酸、D-纈胺酸\[ Dval、(dV)、v]、N -Me-Val-OH[Nmval]、N -Me-Val-OH、L-α-甲基纈胺酸[Mval]、D-α-甲基纈胺酸[Dmval]、(R )-(+)-α-甲基纈胺酸、(S )-(-)-α-甲基纈胺酸及D-N-甲基纈胺酸[Dnmval]。每種可能性代表一個獨立實施例。

可作為非保守置換取代的其他非天然胺基酸包含：鳥胺酸及修飾：D-鳥胺酸[Dorn]、L-鳥胺酸[Orn]、DL-鳥胺酸、L-α-甲基鳥胺酸[Morn]、D-α-甲基鳥胺酸[Dmorn]、L-N-甲基鳥胺酸[Nmorn]、D-N-甲基鳥胺酸[Dnmorn]及N-(3-胺基丙基)甘胺酸[Norn]。每種可能性代表一個獨立實施例。

脂環族胺基酸：L-2,4-二胺基丁酸、L-2,3-二胺基丙酸、N-Me-Aib-OH、(R )-2-(胺基)-5-己炔酸、哌啶-2-甲酸、胺基降冰片烷基-甲酸酯[Norb]、α-胺基丁酸[Abu]、胺基環丙烷-甲酸酯[Cpro]、(順 )-3-胺基雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸、外-順-3-胺基雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-甲酸、1-胺基-1-環丁烷甲酸、順 - 2-胺基環庚烷甲酸、1-胺基環己烷甲酸、順 -2-胺基環己烷甲酸、反 - 2-胺基環己烷甲酸、順 -6-胺基-3-環己烯-1-甲酸、2-(1-胺基環己基)乙酸、順 -2-胺基-1-環辛烷甲酸、順 -2-胺基-3-環辛烯-1-甲酸、(1R ,2S )-(-)-2-胺基-1-環戊烷甲酸、(1S ,2R )-(+)-2-胺基-1-環戊烷甲酸、順 -2-胺基-1-環戊烷甲酸、2-(1-胺基環戊基)乙酸、順 -2-胺基-2-甲基環己烷甲酸、順 -2-胺基-2-甲基環戊烷甲酸、3-胺基-3-(4-硝基苯基)丙酸、3-氮雜環丁烷甲酸、amchc-oh、1-胺基環丁烷甲酸、1-(胺基)環己烷甲酸、順 -2-(胺基)-環己烷甲酸、反 - 2-(胺基)-環己烷甲酸、順 -4-(胺基)環己烷甲酸、反 - 4-(胺基)環己烷甲酸、(±)-順 -2-(胺基)-3-環己烯-1-甲酸、(±)-順 -6-(胺基)-3-環己烯-1-甲酸、2-(1-胺基環己基)乙酸、順 -[4-(胺基)環己基]乙酸、1-(胺基)環戊烷甲酸、(±)-順 -2-(胺基)環戊烷甲酸、(1R,4S)-(+)-4-(胺基)-2-環戊烯-1-甲酸、(±)-順 -2-(胺基)-3-環戊烯-1-甲酸、2-(1-胺基環戊基)乙酸、1-(胺基)環丙烷甲酸、1-胺基環丙烷甲酸乙酯、1,2-反-achec-oh、1-(胺基)環丁烷甲酸、1-(胺基)環己烷甲酸、順 -2-(胺基)-環己烷甲酸、反 - 2-(胺基)環己烷甲酸、順 -4-(胺基)環己烷甲酸、反 - 4-(胺基)環己烷甲酸、順 -[4-(胺基)環己基]乙酸、1-(胺基)環戊烷甲酸、(1R ,4S )-(+)-4-(胺基)-2-環戊烯-1-甲酸、(1S ,4R )-(-)-4-(胺基)-2-環戊烯-1-甲酸、1-(胺基)環丙烷甲酸、反 - 4-(胺基甲基)環己烷甲酸、β-Dab-OH、3-胺基-3-(3-溴苯基)丙酸、3-胺基丁酸、順 -2-胺基-3-環戊烯-1-甲酸、DL-3-胺基異丁酸、(R )-3-胺基-2-苯基丙酸、(±)-3-(胺基)-4-(4-聯苯yl)丁酸、順 -3-(胺基)環己烷甲酸、(1S ,3R )-(+)-3-(胺基)環戊烷甲酸、(2R ,3R )-3-(胺基)-2-羥基-4-苯基丁酸、(2S ,3R )-3-(胺基)-2-羥基-4-苯基丁酸、2-(胺基甲基)苯基乙酸、(R )-3-(胺基)-2-甲基丙酸、(S )-3-(胺基)-2-甲基丙酸、(R )-3-(胺基)-4-(2-萘基)丁酸、(S )-3-(胺基)-4-(2-萘基)丁酸、(R )-3-(胺基)-5-苯基戊酸、(R )-3-(胺基)-2-苯基丙酸、3-(苯甲基胺基)丙酸乙酯、順 -3-(胺基)環己烷甲酸、(S )-3-(胺基)-5-己烯酸、(R )-3-(胺基)-2-甲基丙酸、(S )-3-(胺基)-2-甲基丙酸、(R )-3-(胺基)-4-(2-萘基)丁酸、(S )-3-(胺基)-4-(2-萘基)丁酸、(R )-(-)-吡咯啶-3-甲酸、(S)-(+)-吡咯啶-3-甲酸、N-甲基-γ-胺基丁酸酯[Nmgabu]、γ-胺基丁酸[Gabu]、N-甲基-α-胺基-α-甲基丁酸酯[Nmaabu]、α-胺基-α-甲基丁酸酯[Aabu]、N-甲基-α-胺基異丁酸酯[Nmaib]、α-胺基異丁酸[Aib]、α-甲基-y-胺基丁酸酯[Mgabu]。每種可能性代表一個獨立實施例。

苯基甘胺酸及其修飾：Phg-OH、D-Phg-OH、2-(1-哌嗪基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙酸、2-(1-哌嗪基)-2-(2-氟苯基)乙酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-(3-氟苯基)乙酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-(4-甲氧基苯基)乙酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-(3-吡啶基)乙酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-[4-(三氟甲基)苯基]乙酸、L-(+)-2-氯苯基甘胺酸、(±)-2-氯苯基甘胺酸、(±)-4-氯苯基甘胺酸、(R )-(-)-2-(2,5-二氫苯基)甘胺酸、(R )-(-)-N -(3,5-二硝基苯甲醯基)-α-苯基甘胺酸、(S )-(+)-N -(3,5-二硝基苯甲醯基)-α-苯基甘胺酸、2,2-二苯基甘胺酸、2-氟-DL-α-苯基甘胺酸、4-氟-D-α-苯基甘胺酸、4-羥基-D-苯基甘胺酸、4-羥基-L-苯基甘胺酸、2-苯基甘胺酸、D-(-)-α-苯基甘胺酸、D-(-)-α-苯基甘胺酸、DL-α-苯基甘胺酸、L-(+)-α-苯基甘胺酸、N -苯基甘胺酸、(R )-(-)-2-苯基甘胺酸甲酯、(S )-(+)-2-苯基甘胺酸甲酯、2-苯基胺基乙腈鹽酸鹽、α-苯基胺基乙腈、3-(三氟甲基)-DL-苯基甘胺酸及4-(三氟甲基)-L-苯基甘胺酸。每種可能性代表一個獨立實施例。

青黴胺及其修飾：N-乙醯基-D-青黴胺、D-青黴胺、L-青黴胺[Pen]、DL-青黴胺。α-甲基青黴胺[Mpen]、N-甲基青黴胺[Nmpen]。每種可能性代表一個獨立實施例。

β-高吡咯啶。每種可能性代表一個獨立實施例。

芳族胺基酸：3-乙醯胺基苯甲酸、4-乙醯胺基苯甲酸、4-乙醯胺基-2-甲基苯甲酸、N -乙醯基鄰胺基苯甲酸、3-胺基苯甲酸、3-胺基苯甲酸鹽酸鹽、4-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、2-胺基二苯甲酮-2'-甲酸、2-胺基-4-溴苯甲酸、2-胺基-5-溴苯甲酸、3-胺基-2-溴苯甲酸、3-胺基-4-溴苯甲酸、3-胺基-5-溴苯甲酸、4-胺基-3-溴苯甲酸、5-胺基-2-溴苯甲酸、2-胺基-3-溴-5-甲基苯甲酸、2-胺基-3-氯苯甲酸、2-胺基-4-氯苯甲酸、2-胺基-5-氯苯甲酸、2-胺基-5-氯苯甲酸、2-胺基-6-氯苯甲酸、3-胺基-2-氯苯甲酸、3-胺基-4-氯苯甲酸、4-胺基-2-氯苯甲酸、4-胺基-3-氯苯甲酸、5-胺基-2-氯苯甲酸、5-胺基-2-氯苯甲酸、4-胺基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸、2-胺基-5-氯-3-甲基苯甲酸、3-胺基-2,5-二氯苯甲酸、4-胺基-3,5-二氯苯甲酸、2-胺基-4,5-二甲氧基苯甲酸、4-(2-胺基乙基)苯甲酸鹽酸鹽、2-胺基-4-氟苯甲酸、2-胺基-5-氟苯甲酸、2-胺基-6-氟苯甲酸、4-胺基-2-氟苯甲酸、2-胺基-5-羥基苯甲酸、3-胺基-4-羥基苯甲酸、4-胺基-3-羥基苯甲酸、2-胺基-5-碘苯甲酸、5-胺基間苯二甲酸、2-胺基-3-甲氧基苯甲酸、2-胺基-4-甲氧基苯甲酸、2-胺基-5-甲氧基苯甲酸、3-胺基-2-甲氧基苯甲酸、3-胺基-4-甲氧基苯甲酸、3-胺基-5-甲氧基苯甲酸、4-胺基-2-甲氧基苯甲酸、4-胺基-3-甲氧基苯甲酸、5-胺基-2-甲氧基苯甲酸、2-胺基-3-甲基苯甲酸、2-胺基-5-甲基苯甲酸、2-胺基-6-甲基苯甲酸、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-胺基-2-甲基苯甲酸、3-胺基-4-甲基苯甲酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、4-胺基-2-甲基苯甲酸、4-胺基-3-甲基苯甲酸、5-胺基-2-甲基苯甲酸、3-胺基-2-萘甲酸、6-胺基-2-萘甲酸、2-胺基-3-硝基苯甲酸、2-胺基-5-硝基苯甲酸、2-胺基-5-硝基苯甲酸、4-胺基-3-硝基苯甲酸、5-胺基-2-硝基苯甲酸、3-(4-胺基苯基)丙酸、3-胺基鄰苯二甲酸、4-胺基鄰苯二甲酸、3-胺基水楊酸、4-胺基水楊酸、5-胺基水楊酸、5-胺基水楊酸、2-胺基對苯二甲酸、2-胺基-3,4,5,6-四氟苯甲酸、4-胺基-2,3,5,6-四氟苯甲酸、(R )-2-胺基-1,2,3,4-四氫萘-2-甲酸、(S )-2-胺基-1,2,3,4-四氫-2-萘甲酸、2-胺基-3-(三氟甲基)苯甲酸、2-胺基-3-(三氟甲基)苯甲酸、3-胺基-5-(三氟甲基)苯甲酸、5-胺基-2,4,6-三碘間苯二甲酸、2-胺基-3,4,5-三甲氧基苯甲酸、2-苯胺基苯基乙酸、2-Abz-OH、3-Abz-OH、4-Abz-OH、2-(胺基甲基)苯甲酸、3-(胺基甲基)苯甲酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、2-胺基苯甲酸第三丁酯、3-胺基苯甲酸第三丁酯、4-胺基苯甲酸第三丁酯、4-(丁基胺基)苯甲酸、2,3-二胺基苯甲酸、3,4-二胺基苯甲酸、3,5-二胺基苯甲酸、3,5-二胺基苯甲酸、3,5-二氯鄰胺基苯甲酸、4-(二乙基胺基)苯甲酸、4,5-二氟鄰胺基苯甲酸、4-(二甲基胺基)苯甲酸、4-(二甲基胺基)苯甲酸、3,5-二甲基鄰胺基苯甲酸、5-氟-2-甲氧基苯甲酸、2-Abz-OH、3-Abz-OH、4-Abz-OH、3-(胺基甲基)苯甲酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、4-(2-肼基)苯甲酸、3-羥基鄰胺基苯甲酸、3-羥基鄰胺基苯甲酸、3-胺基苯甲酸甲酯、3-(甲基胺基)苯甲酸、4-(甲基胺基)苯甲酸、2-胺基-4-氯苯甲酸甲酯、2-胺基-4,5-二甲氧基苯甲酸甲酯、4-硝基鄰胺基苯甲酸、N -苯基鄰胺基苯甲酸、N -苯基鄰胺基苯甲酸及4-胺基水楊酸鈉。每種可能性代表一個獨立實施例。

其他胺基酸：(S )-α-胺基-γ-丁內酯、DL-2-胺基辛酸、7-胺基頭孢烷酸、4-胺基肉桂酸、(S )-(+)-α-胺基環己烷丙酸、(R )-胺基-(4-羥基苯基)乙酸甲酯、5-胺基乙醯丙酸、4-胺基-菸鹼酸、3-胺基苯基乙酸、4-胺基苯基乙酸、2-胺基-2-苯基丁酸、4-(4-胺基苯基)丁酸、2-(4-胺基苯硫基)乙酸、DL-α-胺基-2-噻吩乙酸、5-胺基戊酸、8-苯甲基(S)-2-胺基辛二酸酯、4-(胺基)-1-甲基吡咯-2-甲酸、4-(胺基)四氫硫代哌喃-4-甲酸、(1R ,3S ,4S )-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-甲酸、L-氮雜環丁烷-2-甲酸、氮雜環丁烷-3-甲酸、4-(胺基)哌啶-4-甲酸、二胺基乙酸、Inp-OH、(R )-Nip-OH、(S )-4-側氧基哌啶-2-甲酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-(4-氟苯基)乙酸、2-(4-(1-哌嗪基))-2-苯基乙酸、4-哌啶乙醛、4-哌啶基乙酸、(-)-L-硫代脯胺酸、Tle-OH、3-哌啶甲酸、L-(+)-刀豆胺酸、(±)-肉鹼、氮芥苯丁酸、2,6-二胺基庚二酸、內消旋 -2,3-二胺基琥珀酸、4-(二甲基胺基)肉桂酸、4-(二甲基胺基)苯基乙酸、(S )-N -Boc-哌啶-3-甲酸乙酯、1-哌嗪基乙酸乙酯、4-[2-(胺基)乙基]哌嗪-1-基乙酸、(R )-4-(胺基)-5-苯基戊酸、(S )-氮雜環丁烷-2-甲酸、氮雜環丁烷-3-甲酸、丙種檳榔鹼、Inp-OH、(R )-Nip-OH、DL-Nip-OH、4-苯基-哌啶-4-甲酸、1-哌嗪乙酸、4-哌啶乙酸、(R )-哌啶-2-甲酸、(S )-哌啶-2-甲酸、(S )-1,2,3,4-四氫去甲哈爾滿-3-甲酸、Tic-OH、D-Tic-OH、亞胺基二乙酸、吲哚啉-2-甲酸、DL-犬尿胺酸、L-氮丙啶-2-甲酸酯、4-胺基丁酸甲酯、(S )-2-哌嗪甲酸、2-(1-哌嗪基)乙酸、(R )-(–)-3-哌啶甲酸、2-吡咯啶酮-5-甲酸、(R )-(+)-2-吡咯啶酮-5-甲酸、(R )-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉甲酸、(S )-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉甲酸、L-4-噻唑啶甲酸、(4R )-(-)-2-硫酮基-4-噻唑啶甲酸、肼基乙酸及3,3',5-三碘-L-甲狀腺胺酸。每種可能性代表一個獨立實施例。

本揭露提供包括肽模擬化合物之肽，該等肽模擬化合物具有進一步改善之穩定性及細胞滲透性特性。一些實施例包括根據SEQ ID NO:1-64中之任一個的肽，其中該肽內多個肽鍵（-CO-NH-）之一可例如經以下取代：N-甲基化醯胺鍵（-N(CH₃ )-CO-）；酯鍵（-C(=O)-O-）；酮基亞甲基鍵（-CO-CH₂ -）；亞磺醯基亞甲基鍵（-S(=O)-CH₂ -）；α-氮雜鍵（-NH-N(R)-CO-），其中R係任何烷基（例如甲基）；胺鍵（-CH₂ -NH-）；硫醚鍵（-CH₂ -S-）；伸乙基鍵（-CH₂ CH₂ -）；羥基伸乙基鍵（-CH(OH)-CH₂ -）；硫代醯胺鍵（-C-NH-）；烯系雙鍵（-CH=CH-）；經氟化之烯系雙鍵（-CF=CH-）；或逆醯胺鍵（-NH-CO-）；肽衍生物（-N(R^x )-CH₂ -CO-），其中R^x 係天然地存在於碳原子上的「正常」側鏈。此等修飾可出現在沿肽鏈之任一鍵處且甚至同時出現在若干（2-3）個鍵處。

本文所述肽之大小變異體特定地涵蓋在內。示例性肽係由6至50個胺基酸構成。特定地涵蓋6-50個胺基酸之所有整數子範圍（例如7-50個aa、8-50個aa、9-50個aa、6-49個aa、6-48個aa、7-49個aa，諸如此類）作為本發明之屬；且涵蓋所有整數值作為本發明之種。在示例性實施例中，該肽包括經由肽鍵連接的至少七個或八個胺基酸。在示例性態樣中，該肽係至少約9個胺基酸長度、至少約10個胺基酸長度、至少約11個胺基酸長度、至少約12個胺基酸長度、或至少約13個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係至少約14個胺基酸長度、至少約15個胺基酸長度、至少約16個胺基酸長度、或至少約17個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係至少約18個胺基酸長度、至少約19個胺基酸長度、或至少約20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽小於約50個胺基酸長度、小於約40個胺基酸、或小於約30個胺基酸、或小於約25個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係約8至約30個胺基酸長度或約8至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係約10至約10個胺基酸長度、約14至約20個胺基酸長度。在示例性態樣中，該肽係8-9個、10-11個、12-13個、14-15個或16-17個胺基酸長度。在一些實施例中，該肽係8聚體、9聚體、10聚體、11聚體、12聚體、13聚體、14聚體、15聚體、16聚體、17聚體、18聚體、19聚體或20聚體。

一些實施例之肽較佳以線性形式使用，不過，應瞭解，在環化不嚴重干擾肽特徵的情況下，該肽之環狀形式亦可使用且作為實施例涵蓋在內。

根據一些實施例，綴合物包括與用於延長半衰期或增加細胞滲透之部分綴合的本文所述之肽及類似物中的任一種。舉例而言，半衰期延長部分可為肽或蛋白質且該綴合物係融合蛋白或嵌合多肽。或者，該半衰期延長部分可為聚合物，例如聚乙二醇。本揭露另外提供二聚體及多聚體，其包括本文所述之肽及類似物中的任一種。

此項技術中已知用於主動地或被動地促進或增強細胞中肽之滲透性的任何部分均可用於與肽核心綴合。非限制性實例包含：疏水性部分，諸如脂肪酸、類固醇及大體積之芳族或脂族化合物；可具有細胞膜受體或運載體之部分，諸如類固醇、維生素及糖、天然及非天然胺基酸及轉運蛋白肽。根據一個較佳實施例，疏水性部分係脂質部分或胺基酸部分。滲透性增強部分可直接或經由間隔子或連接子連接至肽部分中之任何位置，較佳地連接至肽部分之胺基末端。疏水性部分可較佳地包括脂質部分或胺基酸部分。根據一個具體實施例，疏水性部分係選自由以下組成之群組：磷脂、類固醇、神經鞘胺醇、神經醯胺、辛基甘胺酸、丙胺酸2-環己酯、苯甲醯基苯丙胺酸、丙醯基（C₃ ）；丁醯基（C₄ ）；戊醯基（C₅ ）；己醯基（C₆ ）；庚醯基（C₇ ）；辛醯基（C₈ ）；壬醯基（C₉ ）；癸醯基（C₁₀ ）；十一烷醯基（C₁₁ ）；月桂醯基（C₁₂ ）；十三烷醯基（C₁₃ ）；肉豆蔻醯基（C₁₄ ）；十五烷醯基（C₁₅ ）；棕櫚醯基（C₁₆ ）；植烷醯基（(CH₃ )₄ ）；十七烷醯基（C₁₆ ）；硬脂醯基（C₁₈ ）；十九烷醯基（C₁₉ ）；花生醯基（C₂₀ ）；二十一烷醯基（C₂₁ ）；山崳醯基（C₂₂ ）；二十三烷醯基（C₂₃ ）；及二十四烷醯基（C₂₄ ）；其中該疏水性部分經醯胺鍵、硫氫基、胺、醇、酚基或碳-碳鍵附接至該嵌合多肽。可使用之脂質部分的其他實例包含：Lipofectamine、Transfectace、Transfectam、Cytofectin、DMRIE、DLRIE、GAP-DLRIE、DOTAP、DOPE、DMEAP、DODMP、DOPC、DDAB、DOSPA、EDLPC、EDMPC、DPH、TMADPH、CTAB、離胺醯基-PE、DC-Cho、-丙胺醯基膽固醇；DCGS、DPPES、DCPE、DMAP、DMPE、DOGS、DOHME、DPEPC、Pluronic、Tween、BRIJ、縮醛磷脂（plasmalogen）、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯膽鹼、甘油-3-乙基磷脂醯膽鹼、二甲基銨丙烷、三甲基銨丙烷,二乙基銨丙烷、三乙基銨丙烷、溴化二甲基雙十八烷基銨、鞘脂、鞘磷脂、溶血脂質（lysolipid）、糖脂、腦硫脂、鞘糖脂、膽固醇、膽固醇酯、膽固醇鹽、油、N-琥珀醯基二油醯基磷脂醯乙醇胺、1,2-二油醯基-甘油、1,3-二棕櫚醯基-2-琥珀醯基甘油、1,2-二棕櫚醯基-3-琥珀醯基甘油、l-十六烷基-2-棕櫚醯基甘油磷脂醯乙醇胺、棕櫚醯基高半胱胺酸、Ν,Ν'-雙(十二烷基胺基羰基亞甲基)-N,N'-雙((-N,N,N-三甲基銨甲基-胺基羰基亞甲基)乙二胺四碘化物；N,N"-雙(十六烷基胺基羰基亞甲基)-N,N',N"-參((-N,N,N-三甲基銨-乙基胺基羰基亞甲基二伸乙基三胺六碘化物；Ν,Ν'-雙(十二烷基胺基羰基亞甲基)-N,N"-雙((-N,N,N-三甲基銨乙基胺基羰基亞甲基)伸環己基-l,4-二胺四碘化物；l,7,7-肆((N,N,N,N-四甲基銨甲基胺基-羰基亞甲基)-3-十六烷基胺基羰基-亞甲基-l,3,7-三氮雜庚烷七碘化物；N,N,N',N'-肆((N,N,N-三甲基銨-乙基胺基羰基亞甲基)-N'-(1,2-二油醯基甘油-3-磷酸乙醇胺基-羰基亞甲基)二伸乙基三胺四碘化物；二油醯基磷脂醯乙醇胺、脂肪酸、溶血脂質、磷脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯甘油、磷脂醯肌醇、鞘脂、糖脂、葡萄糖脂、腦硫脂、鞘糖脂、磷脂酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生四烯酸、油酸、帶有聚合物之脂質、帶有磺化醣之脂質、膽固醇、生育酚半琥珀酸酯、具有醚連接之脂肪酸的脂質、具有酯連接之脂肪酸的脂質、聚合脂質、二乙醯基磷酸酯、硬脂胺、心磷脂、具有6-8個碳長度之脂肪酸的磷脂、具有不對稱醯基鏈之磷脂、6-(5-膽固烯-3b-基氧基)-l-硫代-b-D-哌喃半乳糖苷、二半乳糖基甘油二酯、6-(5-膽固烯-3b-基氧基)己基-6-胺基-6-脫氧-l-硫代-b-D-哌喃半乳糖苷、6-(5-膽固烯-3b-基氧基)己基-6-胺基-6-脫氧-l-硫代-a-D-哌喃甘露糖苷、12-(((7'-二乙基胺基-香豆素-3-基)羰基)甲基胺基)-十八烷酸；N-[12-(((7'-二乙基胺基香豆素-3-基)羰基)甲基-胺基)十八烷醯基]-2-胺基棕櫚酸；膽固醇基)4'-三甲基-銨基)丁酸酯；N-琥珀醯基二油醯基-磷脂醯乙醇胺；1,2-二油醯基-甘油；1,2-二棕櫚醯基-3-琥珀醯基-甘油；1,3-二棕櫚醯基-2-琥珀醯基甘油、l-十六烷基-2-棕櫚醯基甘油-磷酸乙醇胺及棕櫚醯基高半胱胺酸。

本文中所揭露之肽可與一或多個部分綴合，由此產生綴合物以發揮前藥作用。舉例而言，美國專利第8969288號及美國公開案20160058881中所述之N-胺基酸相關部分可與本文中所揭露之肽綴合且此類綴合物包含在本揭露中。

根據一些實施例，肽可附接（共價或非共價）至滲透劑。如本文所使用，短語「滲透劑」係指增強任何附接肽跨細胞膜移位之試劑。典型地，基於肽之滲透劑具有含高相對豐度的諸如離胺酸或精胺酸之類帶正電胺基酸的胺基酸組成，或具有含交替模式之極性/帶電胺基酸與非極性疏水性胺基酸的序列。藉助於非限制性實例，可使用細胞穿透肽（CPP）序列以增強細胞內滲透。CPP可包含HIV TAT蛋白質之蛋白質轉導域（PTD）的短形式及長形式，諸如YARAAARQARA（SEQ ID NO:65）、YGRKKRR（SEQ ID NO:66）、YGRKKRRQRRR（SEQ ID NO:67）或RRQRR（SEQ ID NO:68）]。然而，本揭露不限於此，且如本領域中熟習此項技術者所知，任何適合的滲透劑均可使用。增強細胞滲透之另一種方法係經由N-末端肉豆蔻醯化。在此蛋白質修飾中，肉豆蔻醯基（衍生自肉豆蔻酸）係經由醯胺鍵共價附接至肽之N末端胺基酸的α-胺基。

根據一些實施例，該肽經修飾以包含持續時間增強部分。持續時間增強部分可為水溶性聚合物、或長鏈脂族基團。在一些實施例中，複數個持續時間增強部分可附接至肽，在此情況下，連接至每個持續時間增強部分之每個連接子獨立地選自本文所述之連接子。

根據一些實施例，肽之胺基末端經修飾，例如經醯化。根據額外實施例，羧基末端經修飾，例如，其可經醯化、醯胺化、還原或酯化。根據一些實施例，該肽包括醯化胺基酸（例如非編碼之醯化胺基酸（例如包括醯基之胺基酸，該醯基係天然存在之胺基酸非原生的））。根據一個實施例，該肽包括醯基，其經由酯、硫酯或醯胺鍵聯附接至該肽，以達到延長循環半衰期及/或延遲作用起始及/或延長作用持續時間及/或改善對蛋白酶之抗性的目的。醯化可在該肽內之任何位置（例如在C末端處之胺基酸）處進行，條件是保持該活性，若活性未增強的話。在一些實施例中，肽可在連接親水性部分之相同胺基酸位置處或在不同胺基酸位置處醯化。醯基可直接共價連接至該肽之胺基酸，或經由間隔子間接地共價連接至該肽之胺基酸，其中間隔子係定位於該肽之胺基酸與醯基之間。

在特定態樣中，該肽藉由對該肽中胺基酸側鏈之胺、羥基或硫醇直接醯化進行修飾以包括醯基。就這一點而言，醯化肽可包括SEQ ID NO:1-64中任一個之胺基酸序列，或其包括本文所描述之胺基酸修飾中之一或多個的經修飾之胺基酸序列。

在一些實施例中，該肽包括在類似物與醯基之間的間隔子。在一些實施例中，該肽共價結合至間隔子，該間隔子共價結合至醯基。在一些實施例中，間隔子係包括側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸，或包括含側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸的二肽或三肽。間隔子附接之胺基酸可為包括允許鍵聯至間隔子之部分的任何胺基酸（例如單或雙α-取代之胺基酸）。舉例而言，包括側鏈NH₂ 、-OH或-COOH之胺基酸(例如Lys、Orn、Ser、Asp或Glu)係適合的。在一些實施例中，間隔子係包括側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸，或包括含側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸的二肽或三肽。當醯化經由間隔子之胺基發生時，醯化可經由胺基酸之α胺或側鏈胺發生。在α胺經醯化之情況下，間隔子之胺基酸可為任何胺基酸。舉例而言，間隔子之胺基酸可為疏水性胺基酸，例如Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Trp、Met、Phe、Tyr、6-胺基己酸、5-胺基戊酸、7-胺基庚酸及8-胺基辛酸。或者，間隔子之胺基酸可為酸性殘基，例如Asp、Glu、高麩胺酸、高氧化半胱胺酸、氧化半胱胺酸、γ-麩胺酸。在間隔子之胺基酸的側鏈胺經醯化之情況下，間隔子之胺基酸係包括側鏈胺之胺基酸。在此情況下，間隔子之胺基酸的α胺與側鏈胺均可經醯化，由此使肽經二醯化實施例包含此類二醯化之分子。當醯化經由間隔子之羥基發生時，該胺基酸或二肽或三肽之一個胺基酸可為Ser。當醯化經由間隔子之硫醇基發生時，該胺基酸或二肽或三肽之一個胺基酸可為Cys。在一些實施例中，間隔子係親水性雙官能間隔子。在某些實施例中，親水性雙官能間隔子包括兩個或兩個以上反應性基團，例如胺、羥基、硫醇及羧基，或其任何組合。在某些實施例中，親水性雙官能間隔子包括羥基及羧酸酯基。在其他實施例中，親水性雙官能間隔子包括胺基及羧酸酯基。在其他實施例中，親水性雙官能間隔子包括硫醇基及羧酸酯基。

在一個特定實施例中，間隔子包括胺基聚(烷氧基)羧酸酯。就這一點而言，間隔子可包括例如NH₂ (CH₂ CH₂ O)_n (CH₂ )_m COOH，其中m係1至6之任何整數且n係2至12之任何整數，諸如8-胺基-3,6-二氧雜辛酸，其可購自Peptides International, Inc.（肯塔基州路易斯維爾（Louisville, Ky.））。在一些實施例中，間隔子係疏水性雙官能間隔子。疏水性雙官能間隔子係此項技術中已知的。參見例如《生物綴合技術（Bioconjugate Techniques ）》, G.T.Hermanson(Academic Press, 加利福尼亞州聖地亞哥（San Diego, Calif.）, 1996)，其以全文引用的方式併入本文中。在某些實施例中，疏水性雙官能間隔子包括兩個或兩個以上反應性基團，例如胺、羥基、硫醇及羧基，或其任何組合。在某些實施例中，疏水性雙官能間隔子包括羥基及羧酸酯基。在其他實施例中，疏水性雙官能間隔子包括胺基及羧酸酯基。在其他實施例中，疏水性雙官能間隔子包括硫醇基及羧酸酯基。包括羧酸酯基及羥基或硫醇基之適合疏水性雙官能間隔子係此項技術中已知的且包含例如8-羥基辛酸及8-巰基辛酸。在一些實施例中，雙官能間隔子不為在羧酸酯基之間包括1-7個碳原子之未分支亞甲基的二羧酸。在一些實施例中，雙官能間隔子係在羧酸酯基之間包括1-7個碳原子之未分支亞甲基的二羧酸。在特定實施例中，間隔子（例如胺基酸、二肽、三肽、親水性雙官能間隔子或疏水性雙官能間隔子）係3至10個原子（例如6至10個原子（例如6、7、8、9或10個原子）長度。在更具體之實施例中，間隔子係約3至10個原子（例如6至10個原子）長度且醯基係C₁₂ 至C₁₈ 脂肪醯基，例如C₁₄ 脂肪醯基、C₁₆ 脂肪醯基，由此使間隔子及醯基之總長度係14至28個原子，例如約14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28個原子。在一些實施例中，間隔子及醯基之長度係17至28個（例如19至26個、19至21個）原子。根據某些前述實施例，雙官能間隔子可為合成或天然存在之胺基酸（包含但不限於本文所描述之胺基酸中的任一個），其包括3至10個原子長度之胺基酸主鏈（例如6-胺基己酸、5-胺基戊酸、7-胺基庚酸及8-胺基辛酸）。或者，間隔子可為具有長度為3至10個原子（例如6至10個原子）之肽主鏈的二肽或三肽間隔子。該二肽或三肽間隔子之每個胺基酸可與該二肽或三肽之其他胺基酸相同或不同，且可獨立地選自由以下組成之群組：天然存在或編碼及/或非編碼或非天然存在之胺基酸，包含例如天然存在之胺基酸（Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Pro、Arg、Ser、Thr、Val、Trp、Tyr）之D或L異構體中的任一種，或選自由以下組成之群組的非天然存在或非編碼之胺基酸之任何D或L異構體：β-丙胺酸（β-Ala）、N-α-甲基-丙胺酸（Me-Ala）、胺基丁酸（Abu）、γ-胺基丁酸（7-Abu）、胺基己酸（ε-Ahx）、胺基異丁酸（Aib）、胺基甲基吡咯甲酸、胺基哌啶甲酸、胺基絲胺酸（Ams）、胺基四氫哌喃-4-甲酸、精胺酸N-甲氧基-N-甲基醯胺、β-天冬胺酸（β-Asp）、氮雜環丁烷甲酸、3-(2-苯并噻唑基)丙胺酸、α-第三丁基甘胺酸、2-胺基-5-脲基-正戊酸（瓜胺酸、Cit）、β-環己基丙胺酸（Cha）、乙醯胺基甲基-半胱胺酸、二胺基丁酸（Dab）、二胺基丙酸（Dpr）、二羥基苯丙胺酸（DOPA）、二甲基噻唑啶（DMTA）、γ-麩胺酸（γ-Glu）、高絲胺酸（Hse）、羥基脯胺酸（Hyp）、異白胺酸N-甲氧基-N-甲基醯胺、甲基-異白胺酸（MeIle）、異哌啶甲酸（Isn）、甲基-白胺酸（MeLeu）、甲基-離胺酸、二甲基-離胺酸、三甲基-離胺酸、甲橋脯胺酸、甲硫胺酸-亞碸（Met(O)）、甲硫胺酸-碸（Met(O₂ )）、正白胺酸（Nle）、甲基-正白胺酸（Me-Nle）、正纈胺酸（Nva）、鳥胺酸（Orn）、對胺基苯甲酸（PABA）、青黴胺（Pen）、甲基苯丙胺酸（MePhe）、4-氯苯丙胺酸（Phe(4-Cl)）、4-氟苯丙胺酸（Phe(4-F)）、4-硝基苯丙胺酸（Phe(4-NO₂ )）、4-氰基苯丙胺酸（(Phe(4-CN)）、苯基甘胺酸（Phg）、哌啶基丙胺酸、哌啶基甘胺酸、3,4-脫氫脯胺酸、吡咯啶基丙胺酸、肌胺酸（Sar）、硒代半胱胺酸（Sec）、O-苯甲基-磷酸絲胺酸、4-胺基-3-羥基-6-甲基庚酸（Sta）、4-胺基-5-環己基-3-羥基戊酸（ACHPA）、4-胺基-3-羥基-5-苯基戊酸（AHPPA）、1,2,3,4,-四氫-異喹啉-3-甲酸（Tic）、四氫哌喃甘胺酸、噻吩基丙胺酸（Thi）、O-苯甲基-磷酸酪胺酸、O-磷酸酪胺酸、甲氧基酪胺酸、乙氧基酪胺酸、O-(雙-二甲基胺基-膦醯基)-酪胺酸、酪胺酸硫酸酯四丁基胺、甲基-纈胺酸（MeVal）及烷基化3-巰基丙酸。在一些實施例中，間隔子包括總體負電荷，例如包括一或兩個帶負電之胺基酸。在一些實施例中，二肽不為具有通式結構A-B之二肽中的任一種，其中A選自由以下組成之群組：Gly、Gln、Ala、Arg、Asp、Asn、Ile、Leu、Val、Phe及Pro，其中B選自由以下組成之群組：Lys、His、Trp。在一些實施例中，二肽間隔子係選自由以下組成之群組：Ala-Ala、β-Ala-β-Ala、Leu-Leu、Pro-Pro、γ-胺基丁酸-γ-胺基丁酸、Glu-Glu及γ-Glu-γ-Glu。

經由胺、羥基及硫醇進行肽醯化之適合方法係此項技術中已知的。參見例如Miller, 《生物化學與生物物理研究通訊（Biochem Biophys Res Commun ）》218: 377-382(1996)；Shimohigashi及Stammer, 《國際肽與蛋白質研究雜誌（Int J Pept Protein Res ）》19: 54-62(1982)；以及Previero等人, 《生物化學與生物物理學學報（Biochim Biophys Acta ）》263: 7-13(1972)（關於經由羥基醯化之方法）；以及San及Silvius, 《肽研究雜誌（J Pept Res ）》66: 169-180(2005)（關於經由硫醇醯化之方法）；《生物綴合化學（Bioconjugate Chem.）》「蛋白質之化學修飾：歷史及應用（Chemical Modifications of Proteins: History and Applications）」第1、2-12頁(1990)；Hashimoto等人, 《藥學研究（Pharmaceutical Res.）》「胰島素之棕櫚醯基衍生物的合成及其生物活性（Synthesis of Palmitoyl Derivatives of Insulin and their Biological Activity）」, 第6卷, 第2期, 第171-176頁(1989)。醯化胺基酸之醯基可具有任何大小，例如任何長度之碳鏈，且可為直鏈或分支鏈。在一些具體實施例中，醯基係C₄ 至C₃₀ 脂肪酸。舉例而言，醯基可為以下任一種：C₄ 脂肪酸、C₆ 脂肪酸、C₈ 脂肪酸、C₁₀ 脂肪酸、C₁₂ 脂肪酸、C₁₄ 脂肪酸、C₁₆ 脂肪酸、C₁₈ 脂肪酸、C₂₀ 脂肪酸、C₂₂ 脂肪酸、C₂₄ 脂肪酸、C₂₆ 脂肪酸、C₂₈ 脂肪酸或C₃₀ 脂肪酸。在一些實施例中，醯基係C₈ 至C₂₀ 脂肪酸，例如C₁₄ 脂肪酸或C₁₆ 脂肪酸。在一個替代實施例中，醯基係膽汁酸。膽汁酸可為任何適合之膽酸，包含但不限於膽酸（cholic acid）、鵝去氧膽酸、去氧膽酸、石膽酸、牛膽酸、甘膽酸及膽固醇酸。在一些實施例中，肽藉由使肽上之長鏈烷烴醯化而包括醯化胺基酸。在特定態樣中，長鏈烷烴包括胺、羥基或硫醇基（例如十八烷基胺、十四烷醇及十六烷硫醇），其與肽之羧基或其經活化形式反應。該肽之羧基或其經活化形式可為該肽之胺基酸（例如麩胺酸、天冬胺酸）之側鏈的一部分，或可為類似物主鏈之一部分。在某些實施例中，該肽藉由用附接至該肽之間隔子使長鏈烷烴醯化進行修飾以包括醯基。在特定態樣中，長鏈烷烴包括胺、羥基或硫醇基，其與間隔子之羧基或其經活化形式反應。包括羧基或其經活化形式之適合間隔子在本文中有描述且包含例如雙官能間隔子，例如胺基酸、二肽、三肽、親水性雙官能間隔子及疏水性雙官能間隔子。

如本文所使用，術語羧基之「經活化形式」係指具有通式R(C═O)X之羧基，其中X係離去基團且R係肽或間隔子。舉例而言，羧基之經活化形式可包含但不限於醯基氯化物、酸酐及酯。在一些實施例中，經活化羧基係具有N-羥基琥珀醯亞胺酯（NHS）離去基團之酯。

就長鏈烷烴經肽或間隔子醯化之此等態樣而言，長鏈烷烴可具有任何大小且可包括任何長度之碳鏈。長鏈烷烴可為直鏈或分支鏈的。在某些態樣中，長鏈烷烴係C4至C30烷烴。舉例而言，長鏈烷烴可為以下任一種：C₄ 烷烴、C₆ 烷烴、C₈ 烷烴、C₁₀ 烷烴、C₁₂ 烷烴、C₁₄ 烷烴、C₁₆ 烷烴、C₁₈ 烷烴、C₂₀ 烷烴、C₂₂ 烷烴、C₂₄ 烷烴、C₂₆ 烷烴、C₂₈ 烷烴或C₃₀ 烷烴。在一些實施例中，長鏈烷烴包括C₈ 至C₂₀ 烷烴，例如C₁₄ 烷烴、C₁₆ 烷烴或C₁₈ 烷烴。

另外，在一些實施例中，該肽之胺、羥基或硫醇基經膽固醇酸醯化。在一個特定實施例中，該肽經由烷基化脫胺基Cys間隔子，亦即，烷基化3-巰基丙酸間隔子連接至膽固醇酸。烷基化脫胺基Cys間隔子可例如為包括十二甘醇部分之脫胺基-Cys間隔子。

本文所描述之肽可進一步修飾以包括親水性部分。在一些特定實施例中，親水性部分可包括聚乙二醇（PEG）鏈。親水性部分可經由任何適合方式，諸如本文所描述之方法中的任一種併入。就這一點而言，醯化肽可具有SEQ ID NO:1-64中的任一個，包含本文所描述之修飾中的任一個，其中至少一個胺基酸包括醯基且至少一個胺基酸共價鍵結至親水性部分（例如PEG）。在一些實施例中，醯基係經由Cys、Lys、Orn、高半胱胺酸或Ac-Phe之間隔子附接，且親水性部分在Cys殘基處併入。

或者，肽可包括間隔子，其中間隔子經醯化且經修飾以包括親水性部分。適合間隔子之非限制性實例包括含選自由以下組成之群組之一或多個胺基酸的間隔子：Cys、Lys、Orn、高半胱胺酸及Ac-Phe。

根據一些實施例，該肽包括烷基化胺基酸（例如非編碼之烷基化胺基酸（例如包括天然存在之胺基酸非原生之烷基的胺基酸））。烷基化可在肽內任何位置處進行，包含本文中描述為醯化位點之位置中的任一個，包含但不限於胺基酸位置、C末端延伸內之位置處或在C末端處中的任一個，只要保持生物活性即可。烷基可直接共價連接至肽之胺基酸，或經由間隔子間接地共價連接至肽之胺基酸，其中間隔子係定位於肽之胺基酸與烷基之間。該等肽可在連接親水性部分之相同胺基酸位置處或在不同胺基酸位置處烷基化。在特定態樣中，肽可藉由使該等肽中胺基酸之側鏈的胺、羥基或硫醇直接烷基化進行修飾以包括烷基。就這一點而言，烷基化肽可包括至少一個胺基酸經修飾成包括側鏈胺、羥基或硫醇之任何胺基酸的胺基酸序列。在又其他實施例中，包括側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸係雙取代之胺基酸。在一些實施例中，烷基化肽包括在該肽與烷基之間的間隔子。在一些實施例中，該肽共價結合至間隔子，該間隔子共價結合至烷基。在一些示例性實施例中，肽藉由使間隔子之胺、羥基或硫醇烷基化進行修飾以包括烷基，該間隔子附接至胺基酸之側鏈。間隔子附接之胺基酸可為包括允許鍵聯至間隔子之部分的任何胺基酸。舉例而言，包括側鏈NH₂ 、-OH或-COOH之胺基酸(例如Lys、Orn、Ser、Asp或Glu)係適合的。在一些實施例中，間隔子係包括側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸，或包括含側鏈胺、羥基或硫醇之胺基酸的二肽或三肽。當烷基化經由間隔子之胺基發生時，烷基化可經由胺基酸之α胺或側鏈胺發生。在α胺經烷基化之情況下，間隔子之胺基酸可為任何胺基酸。舉例而言，間隔子之胺基酸可為疏水性胺基酸，例如Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Trp、Met、Phe、Tyr、6-胺基己酸、5-胺基戊酸、7-胺基庚酸及8-胺基辛酸。或者，間隔子之胺基酸可為酸性殘基，例如Asp及Glu，只要烷基化在酸性殘基之α胺上發生。在間隔子之胺基酸的側鏈胺經烷基化的情況下，間隔子之胺基酸係包括側鏈胺之胺基酸，例如式I-II之胺基酸（例如Lys或Orn）。在此情況下，間隔子之胺基酸的α胺基側鏈均經烷基化，使得該肽經二烷基化。實施例包含此類二烷基化分子。當烷基化經由間隔子之羥基發生時，胺基酸可為Ser。當烷基化經由間隔子之硫醇基發生時，胺基酸可為Cys。在一些實施例中，間隔子係親水性雙官能間隔子。在某些實施例中，親水性雙官能間隔子包括兩個或兩個以上反應性基團，例如胺、羥基、硫醇及羧基，或其任何組合。在某些實施例中，親水性雙官能間隔子包括羥基及羧酸酯基。在其他實施例中，親水性雙官能間隔子包括胺基及羧酸酯基。在其他實施例中，親水性雙官能間隔子包括硫醇基及羧酸酯基。在一個特定實施例中，間隔子包括胺基聚(烷氧基)羧酸酯。就這一點而言，間隔子可包括例如NH₂ (CH₂ CH₂ O)_n (CH₂ )_m COOH，其中m係1至6之任何整數且n係2至12之任何整數，諸如8-胺基-3,6-二氧雜辛酸，其可購自Peptides International, Inc.（肯塔基州路易斯維爾）。包括羧酸酯基及羥基或硫醇基之適合疏水性雙官能間隔子係此項技術中已知的且包含例如8-羥基辛酸及8-巰基辛酸。在特定實施例中，間隔子（例如胺基酸、二肽、三肽、親水性雙官能間隔子或疏水性雙官能間隔子）係3至10個原子（例如6至10個原子（例如6、7、8、9或10個原子））長度。在更具體之實施例中，間隔子係約3至10個原子（例如6至10個原子）長度且烷基係C₁₂ 至C₁₈ 烷基，例如C₁₄ 烷基、C₁₆ 烷基，由此使間隔子及醯基之總長度係14至28個原子，例如約14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28個原子。在一些實施例中，間隔子及烷基之長度係17至28個(例如19至26個、19至21個)原子。根據某些前述實施例，雙官能間隔子可為合成或非天然存在或非編碼之胺基酸，其包括3至10個原子長度之胺基酸主鏈（例如6-胺基己酸、5-胺基戊酸、7-胺基庚酸及8-胺基辛酸）。或者，間隔子可為具有長度為3至10個原子（例如6至10個原子）之肽主鏈的二肽或三肽間隔子。二肽或三肽間隔子可由天然存在或編碼及/或非編碼或非天然存在之胺基酸構成，包括例如本文中所教示之胺基酸中的任一個。在一些實施例中，間隔子包括總體負電荷，例如包括一或兩個帶負電之胺基酸。在一些實施例中，二肽間隔子係選自由以下組成之群組：Ala-Ala、β-Ala-β-Ala、Leu-Leu、Pro-Pro、γ-胺基丁酸-γ-胺基丁酸及γ-Glu-γ-Glu。經由胺、羥基及硫醇進行肽烷基化之適合方法係此項技術中已知的。舉例而言，可使用威廉森氏醚合成（Williamson ether synthesis）在肽之羥基與烷基之間形成醚鍵聯。此外，肽與烷基鹵化物之親核取代反應可產生醚、硫醚或胺基鍵聯中之任一個。烷基化肽之烷基可具有任何大小，例如任何長度之碳鏈，且可為直鏈或分支鏈。在一些實施例中，烷基係C₄ 至C₃₀ 烷基。舉例而言，烷基可為以下任一個：C₄ 烷基、C₆ 烷基、C₈ 烷基、C₁₀ 烷基、C₁₂ 烷基、C₁₄ 烷基、C₁₆ 烷基、C₁₈ 烷基、C₂₀ 烷基、C₂₂ 烷基、C₂₄ 烷基、C₂₆ 烷基、C₂₈ 烷基或C₃₀ 烷基。在一些實施例中，烷基係C₈ 至C₂₀ 烷基，例如C₁₄ 烷基或C₁₆ 烷基。在本揭露之一些實施例中，肽包括藉由使親核性長鏈烷烴與肽反應產生的烷基化胺基酸，其中該肽包括適用於親核取代之離去基團。在特定態樣中，長鏈烷烴之親核性基團包括胺、羥基或硫醇基（例如十八烷基胺、十四烷醇及十六烷硫醇）。該肽之離去基團可為胺基酸之側鏈的一部分或可為肽主鏈之一部分。適合離去基團包含例如N-羥基琥珀醯亞胺、鹵素及磺酸酯。在某些實施例中，該肽藉由親核性長鏈烷烴與附接至該肽之間隔子反應進行修飾以包括烷基，其中該間隔子包括離去基團。在特定態樣中，該長鏈烷烴包括胺、羥基或硫醇基。在某些實施例中，包括離去基團之間隔子可為本文所論述之任何間隔子，例如胺基酸、二肽、三肽、親水性雙官能間隔子及疏水性雙官能間隔子，其進一步包括適合離去基團。就長鏈烷烴經肽或間隔子烷基化的本揭露之此等態樣而言，長鏈烷烴可具有任何大小且可包括任何長度之碳鏈。長鏈烷烴可為直鏈或分支鏈的。在某些態樣中，長鏈烷烴係C₄ 至C₃₀ 烷烴。舉例而言，長鏈烷烴可為以下任一種：C₄ 烷烴、C₆ 烷烴、C₈ 烷烴、C₁₀ 烷烴、C₁₂ 烷烴、C₁₄ 烷烴、C₁₆ 烷烴、C₁₈ 烷烴、C₂₀ 烷烴、C₂₂ 烷烴、C₂₄ 烷烴、C₂₆ 烷烴、C₂₈ 烷烴或C₃₀ 烷烴。在一些實施例中，長鏈烷烴包括C₈ 至C₂₀ 烷烴，例如C₁₄ 烷烴、C₁₆ 烷烴或C₁₈ 烷烴。此外，在一些實施例中，烷基化可在肽與膽固醇部分之間發生。舉例而言，膽固醇之羥基可置換長鏈烷烴上之離去基團以形成膽固醇-肽產物。本文所描述之烷基化肽可進一步修飾以包括親水性部分。在一些特定實施例中，親水性部分可包括聚乙二醇（PEG）鏈。親水性部分可經由任何適合方式，諸如本文所描述之方法中的任一種併入。或者，烷基化肽可包括間隔子，其中間隔子經烷基化且經修飾以包括親水性部分。適合間隔子之非限制性實例包括含選自由以下組成之群組之一或多個胺基酸的間隔子：Cys、Lys、Orn、高半胱胺酸及Ac-Phe。

在一些實施例中，該肽在1位或2位處、或在1位及2位處包括實現肽對肽酶裂解之抗性的胺基酸。在一些實施例中，該肽在1位包括選自由以下組成之群組的胺基酸：D-組胺酸、脫胺基組胺酸、羥基-組胺酸、乙醯基-組胺酸、高組胺酸、N-甲基組胺酸、α-甲基組胺酸、咪唑乙酸或α,α-二甲基咪唑乙酸（DMIA）。在一些實施例中，該肽在2位處包括選自由以下組成之群組的胺基酸：D-絲胺酸、D-丙胺酸、纈胺酸、甘胺酸、N-甲基絲胺酸、N-甲基丙胺酸或α胺基異丁酸。在一些實施例中，該肽在2位處包括實現肽對肽酶之抗性的胺基酸且實現肽對肽酶之抗性的胺基酸不為D-絲胺酸。在一些實施例中，此共價鍵係除內醯胺橋外的分子內橋。舉例而言，適合共價鍵結方法包含以下任一種或多種：烯烴複分解、基於羊毛硫胺酸之環化、二硫橋鍵或經修飾之含硫橋形成、使用α,ω-二胺基烷烴繫鏈、形成金屬-原子橋及使肽環化之其他方式。

在一些實施例中，肽藉由胺基酸取代及/或添加修飾，該等胺基酸取代及/或添加將帶電胺基酸引入類似物之C末端部分中。在一些實施例中，此類修飾增強穩定性及溶解性。如本文所使用，術語「帶電胺基酸」或「帶電殘基」係指包括在生理pH值下在水溶液中帶負電(亦即，去質子化)或帶正電(亦即，質子化)之側鏈的胺基酸。在一些態樣中，引入帶電胺基酸修飾之此等胺基酸取代及/或添加可在C末端位置處。在一些實施例中，可在C末端位置處引入一個、兩個或三個（及在一些情況下，超過三個）帶電胺基酸。在示例性實施例中，一個、兩個或全部帶電胺基酸可為帶負電的。在一些實施例中，帶負電胺基酸係天冬胺酸、麩胺酸、氧化半胱胺酸、高氧化半胱胺酸或高麩胺酸。在一些態樣中，此等修飾增加溶解性。

根據一些實施例，本文中所揭露之肽可藉由截短C末端一個或兩個胺基酸殘基進行修飾。就這一點而言，肽可包括視情況具有本文所描述之額外修飾中之任一個的序列（SEQ ID NO:1-64）。

在一些實施例中，該肽包括經修飾之SEQ ID NO:1-64，其中C末端胺基酸之羧酸經呈電中性之基團，諸如醯胺或酯置換。因此，在一些實施例中，肽係醯胺化肽，使得C末端殘基包括醯胺替代胺基酸之α羧酸酯。如本文所使用，大體上提及的肽或類似物意圖涵蓋具有經修飾之胺基末端、經修飾之羧基末端或胺基及羧基末端修飾的肽。舉例而言，包含醯胺基替代末端羧酸之胺基酸鏈意欲涵蓋在指定標準胺基酸之胺基酸序列內。

根據一些實施例，本文中所揭露之肽可藉由綴合於至少一個胺基酸殘基上進行修飾。就這一點而言，該等肽可包括視情況具有本文所描述之額外綴合中之任一種的序列（SEQ ID NO:1-64）。

本揭露進一步提供綴合物，其包括與異源部分綴合的一或多種本文所描述之肽。如本文所使用，術語「異源部分」與術語「綴合物部分」同義且係指不同於本文所描述之肽的任何分子（化學或生物化學、天然存在或非編碼之分子）。可連接至本文所描述之類似物中之任一種的示例性綴合物部分包含但不限於異源肽或多肽（包含例如血漿蛋白質）、靶向劑、免疫球蛋白或其部分（例如可變區、CDR或Fc區）、診斷標記，諸如放射性同位素、螢光團或酶標記、包含水溶性聚合物在內之聚合物、或其他治療劑或診斷劑。在一些實施例中，提供包括肽及血漿蛋白質之綴合物，其中血漿蛋白質選自由以下組成之群組：白蛋白、轉鐵蛋白、纖維蛋白原及球蛋白。在一些實施例中，該綴合物之血漿蛋白質部分係白蛋白或轉鐵蛋白。

在一些實施例中，該綴合物包括一或多種本文所描述之肽及以下一或多種：不同肽（其不同於本文所描述之肽）、多肽、核酸分子、抗體或其片段、聚合物、量子點、小分子、毒素、診斷劑、碳水化合物、胺基酸。在一些實施例中，異源部分係聚合物。在一些實施例中，聚合物係選自由以下組成之群組：聚醯胺；聚碳酸酯；聚伸烷基及其衍生物，包含聚伸烷二醇、聚氧化烯、聚對苯二甲酸伸烷基酯；丙烯酸酯及甲基丙烯酸酯之聚合物，包含聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙酯)、聚(丙烯酸異丁酯)及聚(丙烯酸十八烷酯)；聚乙烯聚合物，包含聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯鹵化物、聚(乙酸乙烯酯)及聚乙烯吡咯啶酮；聚乙交酯；聚矽氧烷；聚胺基甲酸酯及其共聚物；纖維素，包含烷基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素醚、纖維素酯、硝基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丁基甲基纖維素、乙酸纖維素、丙酸纖維素、乙酸丁酸纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、羧乙基纖維素、三乙酸纖維素及纖維素硫酸鈉鹽；聚丙烯；聚乙烯，包含聚(乙二醇)、聚(氧化乙烯)及聚(對苯二甲酸乙二酯)；及聚苯乙烯。在一些態樣中，聚合物係可生物降解聚合物，包含合成可生物降解聚合物（例如乳酸及乙醇酸之聚合物、聚酸酐、聚(原酸)酯、聚胺基甲酸酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)及聚(丙交酯-共-己內酯)），及天然可生物降解聚合物（例如海藻酸酯及其他多醣，包含聚葡萄糖及纖維素、膠原蛋白、其化學衍生物（化學基團例如烷基、伸烷基之取代、添加、羥基化、氧化及本領域中熟習此項技術者常規地進行之其他修飾）、白蛋白及其他親水性蛋白質（例如玉米蛋白及其他醇溶蛋白及疏水性蛋白質）），以及其任何共聚物或混合物。一般而言，此等材料藉由酶水解或在活體內暴露於水、藉由表面或整體侵蝕而降解。在一些態樣中，聚合物係生物黏附聚合物，諸如H.Sawhney等人於[《大分子（Macromolecules）》, 1993, 26, 581-587，其傳授內容併入本文中]描述之生物可蝕解水凝膠；聚玻尿酸；酪蛋白；明膠；明膠蛋白；聚酸酐；聚丙烯酸；海藻酸酯；殼聚糖；聚(甲基丙烯酸甲酯)；聚(甲基丙烯酸乙酯)；聚(甲基丙烯酸丁酯)；聚(甲基丙烯酸異丁酯)；聚(甲基丙烯酸己酯)；聚(甲基丙烯酸異癸酯)；聚(甲基丙烯酸十二烷酯)；聚(甲基丙烯酸苯酯)；聚(丙烯酸甲酯)；聚(丙烯酸異丙酯)；聚(丙烯酸異丁酯)；及聚(丙烯酸十八烷酯)。

在一些實施例中，聚合物係水溶性聚合物或親水性聚合物。親水性聚合物在本文中於「親水性部分」下進一步描述。適合水溶性聚合物係此項技術中已知的且包含例如聚乙烯吡咯啶酮、羥丙基纖維素（HPC；Klucel）、羥丙基甲基纖維素（HPMC；Methocel）、硝化纖維素、羥丙基乙基纖維素、羥丙基丁基纖維素、羥丙基戊基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素（Ethocel）、羥乙基纖維素、各種烷基纖維素及羥烷基纖維素、各種纖維素醚、乙酸纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、乙酸乙烯酯/巴豆酸共聚物、聚甲基丙烯酸羥基烷酯、甲基丙烯酸羥基甲酯、甲基丙烯酸共聚物、聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸甲酯、順丁烯二酸酐/甲基乙烯基醚共聚物、聚乙烯醇、聚丙烯酸鈉及聚丙烯酸鈣、聚丙烯酸、酸性羧基聚合物、羧基聚亞甲基、羧基乙烯基聚合物、聚氧化乙烯聚氧化丙烯共聚物、聚甲基乙烯基醚共聚順丁烯二酸酐、羧甲基醯胺、甲基丙烯酸鉀二乙烯苯共聚物、聚氧乙二醇、聚氧化乙烯以及其衍生物、鹽及組合。在特定實施例中，聚合物係聚烷二醇，包含例如聚乙二醇（PEG）。

在一些實施例中，異源部分係碳水化合物。在一些實施例中，碳水化合物係單醣（例如葡萄糖、半乳糖、果糖）、雙醣（例如蔗糖、乳糖、麥芽糖）、寡醣（例如棉子糖、水蘇糖）、多醣（澱粉、澱粉酶、支鏈澱粉、纖維素、幾丁質、胼胝糖、昆布糖、木聚糖、甘露聚糖、褐藻糖膠、半乳甘露聚糖。

在一些實施例中，異源部分係脂質。在一些實施例中，脂質係脂肪酸、類廿烷酸、前列腺素、白三烯、血栓素、N-醯基乙醇胺）、甘油脂質（例如單取代、二取代、三取代的甘油）、甘油磷脂（例如磷脂醯膽鹼、磷脂醯肌醇、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲胺酸）、鞘脂（例如神經鞘胺醇、神經醯胺）、固醇脂質（例如類固醇、膽固醇）、異戊烯醇脂質、醣脂、或聚酮、油、蠟、膽固醇、固醇、脂溶性維生素、甘油單酯、甘油二酯、甘油三酯、磷脂。

在一些實施例中，異源部分經由非共價或共價鍵附接至本揭露之肽。在某些態樣中，異源部分經由連接子附接至本揭露之肽。鍵聯可藉由共價化學鍵、物理力，諸如靜電、氫、離子、凡得瓦爾力（van der Waals）或疏水性或親水性相互作用實現。可使用多種非共價偶合系統，包含生物素-抗生物素蛋白、配體/受體、酶/受質、核酸/核酸結合蛋白、脂質/脂質結合蛋白、細胞黏附分子搭配物；或對彼此具有親和力之任何結合搭配物或其片段。在一些實施例中，肽藉由使類似物之目標胺基酸殘基與有機衍生劑反應，經由直接共價鍵連接至綴合物部分，該有機衍生劑能夠與此等目標胺基酸之選定側鏈或N末端或C末端殘基反應。類似物或綴合物部分上之反應性基團包含例如醛、胺基、酯、硫醇、α-鹵代乙醯基、順丁烯二醯亞胺基或肼基。衍生劑包含例如順丁烯二醯亞胺基苯甲醯基磺基琥珀醯亞胺酯（經由半胱胺酸殘基綴合）、N-羥基琥珀醯亞胺（經由離胺酸殘基綴合）、戊二醛、琥珀酸酐或此項技術中已知之其他試劑。或者，綴合物部分可經由中間物運載體，諸如多醣或多肽運載體間接連接至類似物。多醣運載體之實例包含胺基聚葡萄糖。適合多肽運載體之實例包含聚離胺酸、聚麩胺酸、聚天冬胺酸、其共聚物及此等胺基酸及其他（例如絲胺酸）之混合聚合物，以賦予所得經裝載之運載體所希望的溶解性特性。半胱胺醯基殘基最常與α-鹵代乙酸酯(及相應胺)，諸如氯乙酸、氯乙醯胺反應以產生羧甲基或羧醯胺基甲基衍生物。半胱胺醯基殘基亦可藉由與溴三氟丙酮、α-溴-β-(5-咪唑基)丙酸、氯乙醯基磷酸酯、N-烷基順丁烯二醯亞胺、3-硝基-2-吡啶基二硫化物、甲基2-吡啶基二硫化物、對氯汞基苯甲酸酯、2-氯汞基-4-硝基苯酚或氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑反應而衍生化。組胺醯基殘基藉由在pH 5.5-7.0下與焦碳酸二乙酯反應而衍生化，因為此試劑對組胺醯基側鏈具有相對較高特異性。對溴苯甲醯甲基溴亦為有用的；反應較佳在pH 6.0下於0.1 M二甲胂酸鈉中執行。離胺醯基及胺基末端殘基可與琥珀酸酐或其他羧酸酐反應。用此等試劑衍生化具有逆轉離胺醯基殘基之電荷的作用。用於使含α-胺基之殘基衍生化的其他適合試劑包含醯亞胺酯，諸如吡啶甲醯亞胺酸甲酯、磷酸吡哆醛、吡哆醛、氯硼氫化物、三硝基苯磺酸、O-甲基異脲、2,4-戊二酮及轉胺酶催化的與乙醛酸酯之反應。精胺醯基殘基可藉由與一或數種習知試劑反應來進行修飾，在該等試劑中有苯基乙二醛、2,3-丁二酮、1,2-環己二酮及茚滿三酮。由於胍官能基具有高pKa，故精胺酸殘基之衍生化需要在鹼性條件下執行反應。此外，此等試劑可與離胺酸之基團以及精胺酸ε-胺基反應。可對酪胺醯基殘基進行特異性修飾，其中藉由與芳族重氮化合物或四硝基甲烷反應將光譜標記引入酪胺醯基殘基中特別值得關注。最常見的是，使用N-乙醯基咪唑及四硝基甲烷分別形成O-乙醯基酪胺醯基物種及3-硝基衍生物。羧基側基（天冬胺醯基或麩胺醯基）藉由與碳化二亞胺(R'-N=C=N-R')反應進行選擇性修飾，其中R及R'係不同烷基，諸如1-環己基-3-(2-嗎啉基-4-乙基)碳化二亞胺或1-乙基-3-(4-氮鎓-4,4-二甲基戊基)碳化二亞胺。此外，天冬胺醯基及麩胺醯基殘基可藉由與銨離子反應而轉化為天冬醯胺醯基及麩醯胺醯基殘基。其他修飾包含脯胺酸及離胺酸之羥基化；絲胺醯基或蘇胺醯基殘基之羥基的磷酸化；離胺酸、精胺酸及組胺酸側鏈之α-胺基的甲基化（T.E.Creighton, 《蛋白質：結構及分子特性（Proteins: Structure and Molecular Properties）》, 舊金山（San Francisco）的W.H.Freeman&Co., 第79-86頁(1983)）；天冬醯胺或麩醯胺酸之脫醯胺；N末端胺之乙醯化；及/或C末端羧酸基團之醯胺化或酯化。另一類型之共價修飾涉及以化學方式或酶方式將糖苷偶合至肽。糖可附接至(a)精胺酸及組胺酸；(b)游離羧基；(c)游離硫氫基，諸如半胱胺酸之硫氫基；(d)游離羥基，諸如絲胺酸、蘇胺酸或羥脯胺酸之羥基；(e)芳族殘基，諸如酪胺酸或色胺酸之芳族殘基；或(f)麩醯胺酸之醯胺基。此等方法描述於1987年9月11日公開之WO87/05330，以及Aplin及Wriston, 《CRC生物化學評論（CRC Crit.Rev. Biochem.）》, 第259-306頁 (1981)。在一些實施例中，肽經由該肽之胺基酸的側鏈與異源部分之間的共價鍵綴合至異源部分。在一些態樣中，共價連接至異源部分（例如包括異源部分之胺基酸）之胺基酸係Cys、Lys、Orn、高半胱胺酸或Ac-Phe，且該胺基酸之側鏈共價鍵結至異源部分。在一些實施例中，綴合物包括將肽接合至異源部分之連接子。在一些態樣中，連接子包括1至約60個、或1至30個原子或更長、2至5個原子、2至10個原子、5至10個原子、或10至20個原子長之原子鏈。在一些實施例中，鏈原子可為所有碳原子。在一些實施例中，連接子主鏈中之鏈原子可選自由C、O、N及S組成之群。鏈原子及連接子可根據其預期溶解性(親水性)選擇以便提供溶解性較高之綴合物。在一些實施例中，連接子提供官能基，該官能基經歷酶或其他催化劑或目標組織或器官或細胞中存在之水解條件的裂解。在一些實施例中，連接子之長度足夠長以減小空間位阻之可能性。若連接子係共價鍵或肽鍵且綴合物係多肽，則整個綴合物可為融合蛋白。此類肽基連接子可為任何長度。示例性連接子可為約1至50個胺基酸長度、5至50個、3至5個、5至10個、5至15個、或10至30個胺基酸長度。此類融合蛋白可替代地藉由本領域中一般熟習此項技術者已知之重組基因工程改造方法製造。

如上文所指出，在一些實施例中，肽可與免疫球蛋白或其部分（例如可變區、CDR或Fc區）綴合，例如融合。免疫球蛋白（Ig）之已知類型包含IgG、IgA、IgE、IgD或IgM。Fc區係Ig重鏈之C末端區，其負責與Fc受體結合，由此發揮活性，諸如再循環（其使半衰期延長）、抗體依賴性細胞介導之細胞毒性（ADCC）及補體依賴性細胞毒性（CDC）。舉例而言，根據一些定義，人類IgG重鏈Fc區自重鏈之Cys226伸長至C末端。「鉸鏈區」一般自人類IgG1之Glu216延伸至Pro230（其他IgG同型之鉸鏈區可藉由對準半胱胺酸鍵結中所涉及之半胱胺酸來與IgG1序列對準）。IgG之Fc區包含兩個恆定域：CH2及CH3。人類IgGFc區之CH2域通常自胺基酸231延伸至胺基酸341。人類IgGFc區之CH3域通常自胺基酸342延伸至447。提到的免疫球蛋白或免疫球蛋白片段或區域之胺基酸編號均基於Kabat等人, 1991, 《免疫相關蛋白質之序列（Sequences of Proteins of Immunological Interest）》, U.S. Department of Public Health, 馬里蘭州貝塞斯達（Bethesda, Md）。在相關實施例中，Fc區可包括除CH1外的來自免疫球蛋白重鏈之一或多個原生或經修飾之恆定區，例如IgG及IgA之CH2及CH3區、或IgE之CH3及CH4區。適合綴合物部分包含免疫球蛋白序列中包含FcRn結合位點之部分。FcRn係一種救助受體，負責免疫球蛋白再循環並使其返回至血液循環。已基於X射線結晶學描述IgG之Fc部分中結合至FcRn受體的區域（Burmeister等人1994, 《自然（Nature）》372:379）。Fc與FcRn之主要接觸區域接近CH2與CH3域之接合點。Fc-FcRn接觸點均在單一Ig重鏈內。主要接觸位點包含CH2域之胺基酸殘基248、250-257、272、285、288、290-291、308-311及314，以及CH3域之胺基酸殘基385-387、428及433-436。一些綴合物部分可包含或可不包含FcγR結合位點。FcγR引起ADCC及CDC。Fc區內與FcγR直接接觸之位置的實例有胺基酸234-239（下部鉸鏈區）、胺基酸265-269（B/C環）、胺基酸297-299（C'/E環）及胺基酸327-332（F/G）環（Sondermann等人, 《自然》406:267-273, 2000）。IgE之下部鉸鏈區亦牽涉到FcRI結合（Henry等人, 《生物化學（Biochemistry）》36, 15568-15578, 1997）。參與IgA受體結合之殘基描述於Lewis等人（《免疫學雜誌（J Immunol.）》175:6694-701, 2005）中。參與IgE受體結合之胺基酸殘基描述於Sayers等人（《生物化學雜誌（J Biol Chem.）》279(34):35320-5, 2004）中。可對免疫球蛋白之Fc區進行胺基酸修飾。此類變異體Fc區包括Fc區CH3域中之至少一個胺基酸修飾（殘基342-447）及/或Fc區CH2域中之至少一個胺基酸修飾（殘基231-341）。咸信賦予FcRn增加之親和力的突變包含T256A、T307A、E380A及N434A（Shields等人, 2001, 《生物化學雜誌》276:6591）。其他突變可減少Fc區與FcγRI、FcγRIIA、FcγRIIB及/或FcγRIIIA之結合，同時不會明顯減小對FcRn之親和力。舉例而言，Fc區297位之Asn經Ala或另一胺基酸取代移除高度保守之N-糖基化位點且可引起免疫原性降低且伴隨Fc區半衰期延長，以及與FcγR之結合減少（Routledge等人, 1995, 《移植（Transplantation）》60:847；Friend等人, 1999, 《移植》68:1632；Shields等人, 1995, 《生物化學雜誌》276:6591）。已對IgG1之位置233-236進行胺基酸修飾以減少與FcγR之結合（Ward及Ghetie, 1995, 《治療免疫學（Therapeutic Immunology）》2:77，及Armour等人, 1999, 《歐洲免疫學雜誌（Eur.J. Immunol.）》29:2613）。一些示例性胺基酸取代描述於美國專利第7,355,008號及第7,381,408號中，其各自以全文引用的方式併入本文中。在某些實施例中，本文所描述之肽係插入免疫球蛋白分子內之環區中。在其他實施例中，本文所描述之肽置換免疫球蛋白分子內之環區的一或多個胺基酸。

本文所描述之肽可進一步經修飾以改善在生理pH值下其在水溶液中之溶解性及穩定性，同時保持生物活性。親水性部分，諸如聚乙二醇基團，可在任何適合用於使蛋白質與活化聚合物分子反應之條件下附接至類似物。可使用此項技術中已知之任何方式，包含經由醯化、還原性烷基化、邁克爾加成（Michael addition）、硫醇烷基化或經由PEG部分上之反應性基團(例如醛、胺基、酯、硫醇、α-鹵代乙醯基、順丁烯二醯亞胺基或肼基)與目標化合物上之反應性基團(例如醛、胺基、酯、硫醇、α-鹵代乙醯基、順丁烯二醯亞胺基或肼基)進行的其他化學選擇性綴合/接合方法。可用於將水溶性聚合物連接至一或多種蛋白質之活化基團包含但不限於碸、順丁烯二醯亞胺、硫氫基、硫醇、三氟甲磺酸鹽、三氟乙磺酸鹽、氮雜環丙烷、環氧乙烷、5-吡啶基及α-鹵代醯基（例如α-碘乙酸、α-溴乙酸、α-氯乙酸）。若藉由還原烷基化附接至肽，則所選聚合物應具有單一反應性醛以便控制聚合度。參見例如Kinstler等人，《先進藥物遞送評論（Adv.Drug.Delivery Rev. ）》 54: 477-485 (2002)；Roberts等人, 《先進藥物遞送評論》54:459-476(2002)；及Zalipsky等人, 《先進藥物遞送評論》16:157-182(1995)。在特定態樣中，該肽中具有硫醇之胺基酸殘基經親水性部分，諸如PEG修飾。在一些實施例中，硫醇在邁克爾加成反應中經順丁烯二醯亞胺活化之PEG修飾，產生包括硫醚鍵聯之聚乙二醇化類似物。在一些實施例中，硫醇在親核取代反應中經鹵代乙醯基活化之PEG修飾，產生包括硫醚鍵聯之聚乙二醇化類似物。適合的親水性部分包含聚乙二醇（PEG）、聚丙二醇、聚氧乙基化多元醇（例如POG）、聚氧乙基化山梨糖醇、聚氧乙基化葡萄糖、聚氧乙基化甘油（POG）、聚氧化烯、聚乙二醇丙醛、乙二醇/丙二醇之共聚物、單甲氧基-聚乙二醇、單-(C₁ -C₁₀ )烷氧基-聚乙二醇或芳氧基-聚乙二醇、羧甲基纖維素、聚縮醛、聚乙烯醇（PVA）、聚乙烯吡咯啶酮、聚1,3-二氧雜環戊烷、聚1,3,6-三噁烷、乙烯/順丁烯二酸酐共聚物、聚(β-胺基酸)(均聚物或無規共聚物)、聚(N-乙烯吡咯啶酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物（PPG）及其他聚氧化烯、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、結腸酸（colonic acid）或其他多醣聚合物、Ficoll或聚葡萄糖及其混合物。聚葡萄糖係主要由αl-6鍵連接之葡萄糖次單元的多醣聚合物。可用聚葡萄糖在多個分子量範圍內，例如約1 kD至約100 kD，或約5 kD、10 kD、15 kD或20 kD至約20 kD、30 kD、40 kD、50 kD、60 kD、70 kD、80 kD或90 kD。涵蓋線性或分支聚合物。所得綴合物製劑基本上可為單分散或多分散的，且每一類似物可具有約0.5、0.7、1、1.2、1.5或2個聚合物部分。

在一些實施例中，肽經由在該肽之胺基酸的側鏈與親水性部分之間的共價鍵綴合至親水性部分。在一些實施例中，肽經由胺基酸之側鏈、C末端延伸內之位置、或C末端胺基酸、或此等位置之組合綴合至親水性部分。在一些態樣中，共價連接至親水性部分（例如包括親水性部分之胺基酸）之胺基酸係Cys、Lys、Orn、高半胱胺酸或Ac-Phe，且胺基酸之側鏈共價鍵結至親水性部分（例如PEG）。在一些實施例中，本揭露之綴合物包括與輔助類似物融合之肽，該輔助類似物能夠形成類似於化學PEG（例如重組PEG（rPEG）分子）的延伸之構形，諸如國際專利申請公開案第WO2009/023270號及美國專利申請公開案第US20080286808號中所述者。在一些態樣中，rPEG分子係包括以下一或多個之多肽：甘胺酸、絲胺酸、麩胺酸、天冬胺酸、丙胺酸或脯胺酸。在一些態樣中，rPEG係均聚物，例如聚甘胺酸、聚絲胺酸、聚麩胺酸、聚天冬胺酸、聚丙胺酸或聚脯胺酸。在其他實施例中，rPEG包括兩種類型之胺基酸重複，例如聚(Gly-Ser)、聚(Gly-Glu)、聚(Gly-Ala)、聚(Gly-Asp)、聚(Gly-Pro)、聚(Ser-Glu)等。在一些態樣中，rPEG包括三種不同類型之胺基酸，例如聚(Gly-Ser-Glu)。在特定態樣中，rPEG增加肽之半衰期。在一些態樣中，rPEG包括淨正電荷或淨負電荷。在一些態樣中，rPEG缺乏二級結構。在一些實施例中，rPEG大於或等於10個胺基酸長度且在一些實施例中為約40至約50個胺基酸長度。在一些態樣中，輔助肽經由肽鍵或蛋白酶裂解位點與本揭露之肽的N末端或C末端融合，或插入本揭露之肽的環中。在一些態樣中，rPEG包括親和標籤或連接至超過5 kDa之PEG。在一些實施例中，rPEG賦予本揭露之肽增加之流體動力半徑、血清半衰期、蛋白酶抗性或溶解性且在一些態樣中賦予類似物降低之免疫原性。

包括序列（SEQ ID NO:1-64）之肽以及視情況本文所描述之任何綴合物均涵蓋作為實施例。

本揭露進一步提供本文所揭露之肽的多聚體或二聚體，包含同多聚體或異多聚體、或同二聚體或異二聚體。兩種或兩種以上類似物可使用本領域中熟習此項技術者已知之標準連接劑及程序連接在一起。舉例而言，可經由使用雙官能硫醇交聯劑及雙官能胺交聯劑在兩個肽之間形成二聚體，特別是對於已經半胱胺酸、離胺酸鳥胺酸、高半胱胺酸或乙醯基苯丙胺酸殘基取代之類似物而言。二聚體可為同二聚體，或替代地，可為異二聚體。在某些實施例中，連接兩種（或更多種）類似物之連接子係PEG，例如5 kDa PEG、20 kDa PEG。在一些實施例中，連接子係二硫鍵。舉例而言，二聚體之每個單體可包括Cys殘基（例如定位於末端或內部之Cys）且每個Cys殘基之硫原子參與二硫鍵之形成。在一些態樣中，單體可經由末端胺基酸（例如N末端或C末端）、經由內部胺基酸、或經由至少一個單體之末端胺基酸及至少一個其他單體之內部胺基酸連接。在特定態樣中，單體不經由N末端胺基酸連接。在一些態樣中，多聚體之單體可以「尾至尾」取向附接在一起，其中每個單體之C末端胺基酸可附接在一起。

本文所揭露之肽可以多種方式製備。從頭合成肽之適合方法描述於例如Merrifield, 《美國化學協會雜誌（J.Am.Chem.Soc）》, 85, 2149(1963)；Davis等人, 《國際生物化學（Biochem.Intl.）》, 10, 394-414 (1985)；Larsen等人, 《美國化學協會雜誌》, 115, 6247 (1993)；Smith等人, 《肽與蛋白質研究雜誌（J. Peptide Protein Res.）》, 44, 183 (1994)；O'Donnell等人, 《美國化學協會雜誌》, 118, 6070 (1996)；Stewart及Young, 《固相肽合成（Solid Phase Peptide Synthesis）》, Freeman (1969)；Finn等人, 《蛋白質（The Proteins）》, 第3版, 第2卷, 第105-253頁 (1976)；Erickson等人, 《蛋白質》, 第3版, 第2卷, 第257-527頁 (1976)；及Chan等人, 《Fmo固相肽合成（Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis）》, Oxford University Press, 英國牛津（Oxford, United Kingdom）, 2005。本揭露涵蓋合成肽。製備該等肽之方法本身為本發明之實施例。

或者，肽可使用標準重組方法，藉由將包括編碼肽之核苷酸序列或由該核苷酸序列組成之核酸引入宿主細胞中，以重組方式表現，該等宿主細胞可經培養以表現編碼之肽。參見例如Sambrook等人, 《分子選殖：實驗室手冊（Molecular Cloning: A Laboratory Manual.）》第3版, Cold Spring Harbor Press, 紐約冷泉港（Cold Spring Harbor, N.Y.）, 2001；以及Ausubel等人, 《分子生物學實驗手冊（Current Protocols in Molecular Biology）》, Greene Publishing Associates and John Wiley & Sons, 紐約, 1994。此類肽可自培養基或細胞集結粒純化。

在一些實施例中，本揭露之肽可經分離。在一些實施例中，本揭露之肽可經純化。應認識到，「純度」係一種相對術語，且不必解釋為絕對純度或絕對富集或絕對選擇。在一些態樣中，純度係至少或約50%、至少或約60%、至少或約70%、至少或約80%、或至少或約90%（例如至少或約91%、至少或約92%、至少或約93%、至少或約94%、至少或約95%、至少或約96%、至少或約97%、至少或約98%、至少或約99%或係約100%。

在一些實施例中，本文所描述之肽可在商業上由以下公司合成：諸如Genscript（新澤西州皮斯卡塔威（Piscataway, NJ））、New England Peptide（馬薩諸塞州加特納（Gardner, MA））及CPC Scientific（加利福尼亞州森尼維耳市（Sunnyvale, CA））、Peptide Technologies Corp.（馬里蘭州蓋瑟斯堡（Gaithersburg, Md.））及Multiple Peptide Systems（加利福尼亞州聖地亞哥（San Diego, Calif.））。就此而言，肽可為合成、重組、經分離及/或經純化的。

根據一個實施例，本揭露之肽可提供作為套組之一部分。因此，在一些實施例中，提供用於向有需要之患者投與肽的套組，其中該套組包括如本文所述之肽。

在一個實施例中，該套組具備用於向患者投與組成物之裝置，例如注射器針、筆裝置、噴射式注射器或另一種無針注射器。套組可替代地或另外地包含一或多個容器，例如小瓶、管、瓶子、單室或多室預填充注射器、藥筒、輸液泵（外部或可植入式）、噴射式注射器、預填充筆裝置及類似物，其中視情況含有呈凍乾形式或在水溶液中之肽。在一些實施例中，套組包括使用說明書。根據一個實施例，套組之裝置係氣霧劑分配裝置，其中組成物預先包裝在氣霧劑裝置內。在另一個實施例中，套組包括注射器及針，且在一個實施例中，無菌組成物預先包裝在注射器內。

另一個實施例包含一種治療疾病之方法，該方法包括以下一或多種：對需要治療之個體開處方、銷售或廣告銷售、購買、指導自投與、或投與本文所描述之肽，其中該肽已經管理機構批准用於治療病況。

另一個實施例包含一種供應肽以治療疾病之方法，該方法包括補償醫師、處方藥、患者或保險公司銷售該肽的費用。定義

術語「肽」係指包括藉由肽鍵將兩個或兩個以上胺基酸殘基彼此接合之分子。此等術語涵蓋例如天然及人造蛋白質、蛋白質片段及具有蛋白質序列之多肽類似物（諸如突變蛋白、變異體及融合蛋白）以及轉譯後、或以其他方式共價或非共價修飾之肽。肽可為單體或聚合物。在某些實施例中，「肽」係α碳可經由肽鍵連接之胺基酸鏈。因此，在鏈一端之末端胺基酸（胺基末端）具有游離胺基，而在鏈另一端之末端胺基酸（羧基末端）具有游離羧基。如本文所使用，術語「胺基末端」（縮寫N末端）係指在肽之胺基末端處之胺基酸上的游離α-胺基或在該肽內任何其他位置處之胺基酸的α-胺基（當參與肽鍵時的亞胺基）。類似地，術語「羧基末端」係指在肽之羧基末端上的游離羧基或在肽內任何其他位置處之胺基酸的羧基。肽亦包含基本上任何聚胺基酸，包含但不限於肽模擬物，諸如由醚而不是醯胺鍵接合之胺基酸。

術語「治療性肽」係指具有一或多種治療及/或生物活性之肽或類似物或其片段或變異體。

如本文所使用，術語「類似物」描述包括一或多個胺基酸修飾之肽，該一或多個胺基酸修飾諸如但不限於任何天然或非天然胺基酸、合成胺基酸或肽模擬物之任一個胺基酸殘基之取代及/或一或多個缺失及/或一或多個添加、及/或在任何可用位置處側鏈附接至天然或非天然胺基酸、合成胺基酸或肽模擬物中之任一個。胺基酸殘基之添加或缺失可在肽之N末端處及/或在肽之C末端處進行。

在一些實施例中，類似物具有1、2、3、4或5個此類修飾。在一些實施例中，類似物保持原始肽之生物活性。在一些實施例中，類似物係原始肽之競爭性或非競爭性抑制劑。

肽序列係使用標準單字母或三字母縮寫指示。除非另外指示，否則肽序列在左側具有其胺基末端且在右側具有其羧基末端。肽之特定區段可藉由胺基酸殘基編號諸如胺基酸3至6指定，或藉由在該位點處之實際殘基，諸如Met3至Gly6指定。特定肽序列亦可藉由說明其與參考序列之不同來描述。

當在本文中使用時，術語「天然胺基酸」係選自由以下組成之群組的胺基酸（括號中為常見三字母代碼&單字母代碼）：甘胺酸（Gly & G）、脯胺酸（Pro & P）、丙胺酸（Ala & A）、纈胺酸（Val & V）、白胺酸（Leu & L）、異白胺酸（Ile & I）、甲硫胺酸（Met & M）、半胱胺酸（Cys & C）、苯丙胺酸（Phe & F）、酪胺酸（Tyr & Y）、色胺酸（Trp & W）、組胺酸（His & H）、離胺酸（Lys & K）、精胺酸（Arg & R）、麩醯胺酸（Gin & Q）、天冬醯胺（Asn & N）、麩胺酸（Glu & E）、天冬胺酸（Asp & D）、絲胺酸（Ser & S）及蘇胺酸（Thr & T）。若在本文任何地方，提及肽、類似物或衍生物、或包括或不包括G、P、A、V、L、I、M、C、F、Y、H、K、R、Q、N、E、D、S或T之肽，則在未進一步指明的情況下，意思指胺基酸。若不另外指示，則以大寫字母表示之單字母代碼指示的胺基酸指示L-同功異構物，然而，若胺基酸用小寫字母指示，則此胺基酸以其D-形式使用/應用。先前定義之此類D-形式及其他非保守胺基酸取代係包含在非天然胺基酸之定義中。

若由於鍵入錯誤，存在與常用代碼之偏差，則應用常用代碼。肽中存在之胺基酸較佳為可藉由核酸編碼之胺基酸。如自以上實例顯而易見，胺基酸殘基可藉由其全稱、其單字母代碼及/或其三字母代碼標識。該三種方式係完全等效的。

「非保守胺基酸取代」亦指此等種類之一之成員取代成來自另一種類之成員。在進行該等改變時，根據某些實施例，可考慮胺基酸之親水指數。已基於疏水性及電荷特徵指定各胺基酸之親水指數。其為：異白胺酸（+4.5）；纈胺酸（+4.2）；白胺酸（+3.8）；苯丙胺酸（+2.8）；半胱胺酸/胱胺酸（+2.5）；甲硫胺酸（+1.9）；丙胺酸（+1.8）；甘胺酸（-0.4）；蘇胺酸（-0.7）；絲胺酸（-0.8）；色胺酸（-0.9）；酪胺酸（-1.3）；脯胺酸（-1.6）；組胺酸（-3.2）；麩胺酸（-3.5）；麩醯胺酸（-3.5）；天冬胺酸（-3.5）；天冬醯胺（-3.5）；離胺酸（-3.9）；及精胺酸（-4.5）。此項技術中理解親水胺基酸指數在賦予蛋白質相互作用生物功能方面之重要性（參見例如Kyte等人, 1982, 《分子生物學雜誌》157:105-131）。已知某些胺基酸可取代為具有類似親水指數或分數之其他胺基酸且仍保持類似生物活性。在基於親水指數進行改變時，在某些實施例中，包含親水指數在±2內之胺基酸的取代。在某些實施例中，包含親水指數在±1內之胺基酸的取代，且在某些實施例中，包含親水指數在±0.5內之胺基酸的取代。此項技術中亦應理解，可基於親水性有效地進行類似胺基酸之取代，特別是在由此產生之生物功能蛋白或肽意圖用於如本文中所揭露之免疫實施例中時。在某些實施例中，蛋白質之最大局部平均親水性，如由其相鄰胺基酸之親水性所決定，與其免疫原性及抗原性，亦即與蛋白質之生物特性相關。已對此等胺基酸殘基指定以下親水性值：精胺酸（+3.0）；離胺酸（+3.0）；天冬胺酸（+3.0±.1）；麩胺酸（+3.0±.1）；絲胺酸（+0.3）；天冬醯胺（+0.2）；麩醯胺酸（+0.2）；甘胺酸（0）；蘇胺酸（-0.4）；脯胺酸（-0.5±1）；丙胺酸（-0.5）；組胺酸（-0.5）；半胱胺酸（-1.0）；甲硫胺酸（-1.3）；纈胺酸（-1.5）；白胺酸（-1.8）；異白胺酸（-1.8）；酪胺酸（-2.3）；苯丙胺酸（-2.5）及色胺酸（-3.4）。在基於類似親水性值進行改變時，在某些實施例中，包含親水性值在±2內之胺基酸的取代，在某些實施例中，包含親水性值在±1內之胺基酸的取代，且在某些實施例中，包含親水性值在±0.5內之胺基酸的取代。

其他胺基酸取代陳述於表3中。

表 3 原始殘基 取代 較佳之取代 Ala Val、Leu、Ile Val Arg Lys、Gln、Asn Lys Asn Gln Gln Asp Glu Glu Cys Ser、Ala Ser Gln Asn Asn Glu Asp Asp Gly Pro、Ala Ala His Asn、Gln、Lys、Arg Arg Ile Leu、Val、Met、Ala、Phe、正白胺酸 Leu Leu 正白胺酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe Ile Lys Arg、Gln、Asn、1,4-二胺基-丁酸 Arg Met Leu、Phe、Ile Leu Phe Leu、Val、Ile、Ala、Tyr Leu Pro Ala Gly Ser Thr、Ala、Cys Thr Thr Ser Ser Trp Tyr、Phe Tyr Tyr Trp、Phe、Thr、Ser Phe Val Ile、Met、Leu、Phe、Ala、正白胺酸 Leu

如本文單獨或組合使用之術語「胺基酸」意思指式-R^x -NH-CH(R^y )C(=O)OH之取代基，其中R^x 典型地係氫，但可與N（例如，如在胺基酸脯胺酸情況下）環化，且R^y 選自由以下組成之群組：氫、烷基、雜烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、胺基、醯胺基、環烷基烷基、雜環烷基烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、胺基烷基、醯胺基烷基、羥烷基、硫醇、硫烷基、烷基硫烷基及烷硫基，其中任一個可視情況經取代。術語「胺基酸」包含所有天然存在之胺基酸以及合成類似物。

如本文所使用，術語「帶電胺基酸」或「帶電殘基」係指包括在生理pH值下在水溶液中帶負電(亦即，去質子化)或帶正電(亦即，質子化)之側鏈的胺基酸。舉例而言，帶負電胺基酸包含天冬胺酸、麩胺酸、氧化半胱胺酸、高氧化半胱胺酸及高麩胺酸，而帶正電胺基酸包含精胺酸、離胺酸及組胺酸。帶電胺基酸包含在20種編碼胺基酸中之帶電胺基酸，以及非典型或非天然存在或非編碼之胺基酸。

如本文所使用，術語「酸性胺基酸」係指包括第二酸性部分（除胺基酸之羧酸以外)，包含例如羧酸或磺酸基之胺基酸。

如本文所使用，術語「醯化胺基酸」係指包括天然存在之胺基酸之非原生醯基的胺基酸，不管該胺基酸之製造方式如何（例如在將胺基酸併入肽中之前醯化，或在併入肽中之後醯化）。

如本文所使用，術語「烷基化胺基酸」係指包括天然存在之胺基酸非原生之烷基的胺基酸，不管該胺基酸之製造方式如何。因此，本揭露之醯化胺基酸及烷基化胺基酸係非編碼胺基酸。

熟練技術人員將能夠使用熟知技術確定如本文所闡述之肽的活性變異體或類似物。在某些實施例中，本領域中熟習此項技術者可藉由靶向咸信對活性不重要之區域來鑑別分子中可經改變而在不破壞活性之適合區域。在其他實施例中，熟練技術人員可鑑別分子中在類似肽間保守之殘基及部分。在其他實施例中，甚至對於生物活性或對於結構很重要之區域亦可經歷保守胺基酸取代，而不破壞生物活性或不會不利地影響肽結構。眾所周知，用測試化合物處理之細胞中半胱天冬酶活性之變化可指示潛在治療效用。不管半胱天冬酶是否已確定地牽涉到疾病之病因或病理結果，半胱天冬酶活性降低均與由不當凋亡性細胞死亡引起之若干病況之症狀改善相關聯，該等病況包含糖尿病、心血管疾病、不利的肝細胞凋亡、缺血再灌注損傷、創傷性腦損傷、器官移植及神經退化（Choadhry, 《胸科與心血管外科雜誌（J Thorac Cardiovasc Surg.）》2007年7月;134(1):124-31；McIlwain, 《冷泉港實驗室生物學展望（Cold Spring Harb Perspect Biol）》2013; 5:a008656）。此外，眾所周知，半胱天冬酶活性增加指示用於治療對誘導細胞凋亡起反應之疾病及病症的潛在效用，包含癌症、自體免疫性病症、類風濕性關節炎、感染性疾病、發炎性疾病（Elmore, 《毒性病理學（Toxicol Pathol.）》2007; 35(4): 495-516）。眾所周知，用測試化合物處理之細胞中細胞活力之改變指示潛在治療效用。細胞活力降低指示用於治療對細胞活力/增殖變化起反應之疾病及病症的潛在效用，包含例如癌症（Boyd, 《藥物開發研究（Drug Dev Res）》34:91-109(1995)）。細胞活力增加指示用於治療與細胞活力降低相關之疾病的潛在效用，包含糖尿病、心血管疾病、缺血再灌注損傷、創傷性腦損傷、器官移植、化學療法及神經退化。另外，細胞活力增加指示用於改善培養物中動物細胞之細胞活力的潛在效用。

此外，本領域中熟習此項技術者可回顧鑑別類似肽中對於活性或結構很重要之殘基的結構-功能研究。鑒於此類比較，熟練技術人員可預測肽中對應於對類似肽中活性或結構很重要之胺基酸殘基的胺基酸殘基之重要性。本領域中熟習此項技術者可選擇對該等所預測之重要胺基酸殘基進行之化學上類似之胺基酸取代。

本領域中熟習此項技術者亦可相對於類似肽之結構分析三維結構及胺基酸序列。鑒於此類資訊，本領域中熟習此項技術者可預測肽之胺基酸殘基關於其三維結構之比對。在某些實施例中，本領域中熟習此項技術者可選擇不對預測位於肽表面上之胺基酸殘基進行基團變化，因為此類殘基可涉及與其他分子之重要相互作用。此外，本領域中熟習此項技術者可產生在每個所需胺基酸殘基處含有單一胺基酸取代之測試變異體。接著，可使用本領域中熟習此項技術者已知之活性分析來篩選該等變異體。此等變體可用以收集關於適合變異體之資訊。舉例而言，若發現改變特定胺基酸殘基導致破壞、不合需要地降低或不適合之活性，則可避免具有此類改變之變異體。換言之，基於自該等常規實驗收集之資訊，本領域中熟習此項技術者可容易確定胺基酸，其中應避免單獨或與其他突變組合之其他取代。

如本文單獨或組合使用之術語「醯基」係指附接至烯基、烷基、芳基、環烷基、雜芳基、雜環烷基或任何其他部分之羰基，其中附接至羰基之原子係碳。「乙醯基」係一種類型之醯基，指-C(O)CH₃ 基團。「烷基羰基」或「烷醯基」係指經由羰基附接至母體分子部分之烷基。此類基團之實例包含甲基羰基及乙基羰基。醯基之實例包括甲醯基、烷醯基及芳醯基。

如本文所使用，術語「衍生物」意謂經化學修飾之肽，其中一或多個側鏈已共價附接至肽。術語「側鏈」亦可稱為「取代基」。因此，包括此類側鏈之衍生物將為「衍生化」肽或「衍生化」類似物。該術語亦可指含有一或多個通常不為肽分子之一部分的化學部分之肽，該一或多個化學部分諸如游離羧基之酯及醯胺、游離胺基之醯基及烷基衍生物、磷酸酯及游離羥基之醚。此類修飾可藉由使肽之目標胺基酸殘基與有機衍生劑反應而引入分子中，該有機衍生劑能夠與所選側鏈或末端殘基反應。較佳之化學衍生物包含經磷酸化、C末端醯胺化或N末端乙醯化之肽。該術語亦可指如本文所使用之肽，其可藉由此項技術中已知之方式，由作為側鏈存在於殘基或N末端或C末端基團上之官能基來製備，且包含在本文中，只要其保持醫藥學上可接受，亦即，其不會破壞肽之活性，不會賦予含有其之組成物毒性特性且不會不利地影響其抗原特性即可。此等衍生物可例如包含羧基之脂族酯、藉由與氨或與一級或二級胺反應產生的羧基之醯胺、藉由與醯基部分（例如烷醯基或碳環芳醯基）反應形成的胺基酸殘基之游離胺基的N-醯基衍生物、或藉由與醯基部分反應形成的游離羥基之O-醯基衍生物（例如絲胺醯基或蘇胺醯基殘基之游離羥基）。

經修飾之胺基酸殘基係任何基團或鍵藉由缺失、添加或用不同基團或鍵置換而修飾之胺基酸殘基，只要保留胺基酸殘基之官能基即可，或在官能基改變(例如酪胺酸用經取代苯丙胺酸置換)之情況下，只要該修飾不削弱含有經修飾殘基之肽之活性即可。

如本文所使用，術語「取代基」或「側鏈」意謂鍵結，尤其共價鍵結至胺基酸殘基，尤其胺基酸殘基上之任何可用位置的任何適合之部分。典型地，該適合之部分係化學部分。

術語「脂肪酸」指具有4至28個碳原子之脂族單羧酸，其較佳為未分支的，且其可為飽和或不飽和的。在本揭露中，包括10至16個胺基酸之脂肪酸較佳。

術語「脂肪二酸」係指如上文所定義但在ω位置中具有額外羧酸基團之脂肪酸。因此，脂肪二酸係二羧酸。在本揭露中，包括14至20個胺基酸之脂肪酸較佳。

當揭露值之範圍，且使用表示法「n₁ 至n₂ 」，其中n₁ 及n₂ 係數字時，則除非另外規定，否則此表示法意欲包含數字本身及在其之間的範圍。此範圍可在端值間為整數或連續的，且包含端值在內。舉例而言，範圍「2至6個碳」意欲包含兩個、三個、四個、五個及六個碳，因為碳係以整數單位出現。舉例而言，比較範圍「1至3 µM (微莫耳濃度)」，其意欲包含1 µM、3 µM及其間精確至任何數目之有效數字的任何數值（例如1.255 µM、2.1 µM、2.9999 µM等）。

術語「序列一致性百分比」在本文中可與術語「一致性百分比」互換使用，且係指在使用序列比對程式比對時，兩個或兩個以上肽序列之間的胺基酸序列一致性水準、或兩個或兩個以上核苷酸序列之間的核苷酸序列一致性水準。舉例而言，如本文所使用，80%一致性意謂藉由確定之演算法確定為80%序列一致性之事物，且意味著，給定序列與另一長度之另一序列至少80%一致。

術語「序列同源性百分比」在本文中可與術語「同源性百分比」互換使用，且係指當使用序列比對程式比對時，兩個或兩個以上肽序列之間的胺基酸序列同源性水準、或兩個或兩個以上核苷酸序列之間的核苷酸序列同源性水準。舉例而言，如本文所使用，80%同源性意謂由確定之演算法確定為80%序列同源性之事物，且因此，給定序列之同源物在給定序列之長度內具有大於80%序列同源性。

可用於確定兩個序列之間之一致性或同源性程度的示例性電腦程式包含但不限於在網際網路上之NCBI網站公開可得的BLAST程式套件，例如BLASTN、BLASTX及TBLASTX、BLASTP及TBLASTN。亦參見Altschul等人, 1990, 《分子生物學雜誌》 215: 403-10（特別提及公開之預設設定，亦即，參數w=4，t=17）及Altschul等人, 1997, 《核酸研究（Nucleic Acids Res.）》25: 3389-3402。當相對於GenBank蛋白質序列及其他公共資料庫中之胺基酸序列評價給定胺基酸序列時，典型地使用BLASTP程式進行序列搜索。BLASTX程式較佳用於針對Genbank蛋白質序列及其他公共資料庫中之胺基酸序列搜索所有閱讀框架中轉譯之核酸序列。BLASTP及BLASTX兩者使用11.0之開放空位罰分及1.0之延伸空位罰分的預設參數運行，且利用BLOSUM-62矩陣。（同上文）。除了計算序列同一性百分比外，BLAST算法還對兩個序列之間的相似性進行統計分析（參見例如，Karlin及Altschul, 《美國國家科學院院刊（Proc.Nat'l.Acad. Sci. USA）》, 90:5873-5787 (1993)）。由BLAST演算法提供的一種相似性量測法係最小和概率（P(N)），其指示兩個核苷酸或胺基酸序列之間出現偶然匹配的概率。

「醫藥組成物」係指適於動物或人類之醫藥用途的組成物。醫藥組成物包括藥理學及/或治療有效量之活性劑及醫藥學上可接受之賦形劑或運載體。醫藥組成物及其製備方法對於本領域中熟習此項技術者將為顯而易見的。此類組成物及其製備方法可見於例如《雷氏藥學大全（Remington's Pharmaceutical Sciences）》, 第19版(Mack Publishing Company, 1995)。醫藥組成物一般調配為無菌、大體上等張且完全符合美國食品與藥物管理局（U. S. Food and Drug Administration）之所有GMP法規的形式。該術語亦涵蓋美國藥典(US Pharmacopeia)中列舉的用於包含人類在內之動物的任何試劑。適合醫藥運載體及調配物描述於《雷氏藥學大全》, 第21版, 2005, Mack Publishing Co, 伊斯頓（Easton）中。

「醫藥學上可接受之運載體」或「醫藥學上可接受之賦形劑」係指當投與動物或人類時不會產生不良、過敏性或其他不良反應的組成物。如本文所使用，「醫藥學上可接受之運載體」或「醫藥學上可接受之賦形劑」包含生理學上相容之任何及全部溶劑、分散介質、塗層、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑，及類似物。醫藥學上可接受之賦形劑之一些實例有水、生理食鹽水、磷酸鹽緩衝生理食鹽水、右旋糖、甘油、乙醇及類似物，以及其組合。在多數情況下，賦形劑將在組成物中包含等張劑，例如糖；多元醇，諸如甘露糖醇、山梨糖醇；或氯化鈉。醫藥學上可接受之賦形劑之額外實例有潤濕劑或少量輔助物質，諸如濕潤劑或乳化劑、防腐劑或緩衝劑，由此增加肽之保存期限或有效性。

如本文所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保持母體肽之生物活性且不會在生物學上或在其他方面不合需要的肽之鹽。許多本文所揭露之肽能夠藉助於胺基及/或羧基或其類似之基團的存在形成酸及/或鹼鹽。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可由無機鹼及有機鹼製備。僅舉例而言，衍生自無機鹼之鹽包含鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽及鎂鹽。衍生自有機鹼之鹽包含但不限於一級、二級及三級胺之鹽。

製備、純化及/或處理肽之相應溶劑合物可為便利或合乎需要的。本文所使用之術語「溶劑合物」在習知意義上係指溶質(例如肽、肽之鹽)與溶劑之複合物。若溶劑係水，則溶劑合物可適宜地稱為水合物，例如單水合物、二水合物、三水合物等。除非另外說明，否則提及特定肽亦包含其溶劑合物及水合物形式。

如本文所使用，「共晶體」或「共晶體鹽」意謂由兩種或兩種以上獨特固體在室溫下構成之結晶材料，該等固體各自具有獨特的物理特徵，諸如結構、熔點及熔化熱、吸濕性、溶解性及穩定性。共晶體或共晶體鹽可根據本身已知之共結晶方法製造。術語共晶體(co-crystal/cocrystal)或共晶體鹽亦指存在一或多個主體API（活性醫藥成分）分子，諸如式I-II之肽，及一或多個客體(或共形成物)分子之多組分系統。

如本文所使用，肽之「治療有效量」當根據所揭露及所主張之方法提供給個體時影響生物活性，諸如調節與異常細胞增殖及惡性疾病有關之細胞信號傳導、影響細胞活力及提供神經保護。

術語「治療（treat/treating/treatment）」係指用於獲得有益或所希望之臨床結果的方法。另外，本文中提及的「療法」包含提及治癒性、姑息性及預防性治療。術語「治療」係指抑制、預防或停滯病變（疾病、病症或病況）之發展及/或引起病變之減輕、緩解或消退。本領域中熟習此項技術者應理解，可使用各種方法及分析評估病變之發展，且類似地，可使用各種方法及分析評估病變之減輕、緩解或消退。

如本文所使用，術語「疾病」意欲與術語「病症」及「病況」(如在醫學病況中)大體上同義且可互換地使用，因為其皆反映身體或其部位中之一的損害正常功能之異常狀況，且典型地藉由有區別的病徵及症狀體現。

術語「改善細胞存活」係指與對照，例如在不治療之相同條件下存活之細胞數量相比，在給定條件下存活之細胞數量增加。條件可為活體外、活體內、離體或原位的。改善之細胞存活可以比較值表示，例如若細胞存活改善兩倍，則有多達兩倍的細胞存活。改善之細胞存活可由細胞凋亡減少、細胞壽命增加或細胞功能及條件改善引起。

為清楚起見，術語「指導」除包含其通常所理解之定義外，亦意欲包含關於由監管機構批准之標記之資訊。

在一個實施例中，肽可經由基因治療方法，作為其核苷酸等效物投與。術語「核苷酸等效物」包括含編碼肽之核苷酸序列的任何核酸。舉例而言，本發明包含聚核苷酸，其包括編碼本文所描述之肽的核苷酸序列或由其組成。本發明亦包含載體，包含表現載體，其包括編碼本文所描述之肽的核苷酸序列。表現載體包含一或多個表現控制序列，諸如啟動子，其可操作地連接至編碼序列，使得肽在含有該表現載體之適合宿主細胞中表現。在一個實施例中，肽相關聚核苷酸在質體或載體中編碼，該質體或載體可來源於腺相關病毒（AAV）。AAV可為重組AAV病毒且可包括諸如但不限於以下衣殼血清型，AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV9.47、AAV9(hu14)、AAV10、AAV11、AAV12、AAVrh8、AAVrh10、AAV-DJ及AAV-DJ8。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAV2。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAVrh10。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAV9(hu14)。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAV-DJ。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAV9.47。作為非限制性實例，重組AAV病毒之衣殼係AAV-DJ8。一個實施例包括SEQ ID NO:1-64之肽序列的核苷酸等效物。

本領域中熟習此項技術者可認識到，目標細胞可能需要特定啟動子，包含但不限於物種特異性、誘導性、組織特異性或細胞週期特異性啟動子Parr等人, 《自然·醫學（Nat. Med.）》3:1145-9 (1997)；其內容以全文引用之方式併入本文中）。

如本文所使用，術語「載體」係轉運、轉導或以其他方式充當異源分子，諸如本發明之聚核苷酸之運載體的任何分子或部分。「病毒載體」係包括一或多個聚核苷酸區域之載體，該聚核苷酸區域編碼或包括所關注之有效負載分子，例如轉殖基因、編碼多肽或多個多肽之聚核苷酸。本發明之病毒載體可以重組方式產生且可以基於腺相關病毒（AAV）親本或參考序列。可用於本發明中的血清型包含源自以下之血清型中的任一種：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV9.47、AAV9(hul4)、AAV10、AAV11、AAV 12、AAVrh8、AAVrhlO、AAV-DJ及AAV-DJ8。

在一個實施例中，可用於本發明中之血清型可為AAV-DJ8。AAV-DJ8之胺基酸序列可包括兩個或兩個以上突變以便移除肝素結合域（HBD）。作為非限制性實例，在美國專利案第7,588,772號(其內容以全文引用之方式併入本文中)中描述為SEQ ID NO: 1之AAV-DJ序列可包括兩個突變：(1) R587Q，其中胺基酸587處之精胺酸（R；arg）變為麩醯胺酸（Q；gln）；及(2) R590T，其中胺基酸590處之精胺酸（R；arg）變為蘇胺酸（T；thr）。作為另一個非限制性實例，可包括三個突變：(1) K406R，其中胺基酸406處之離胺酸（K；lys）變為精胺酸（R；arg）；(2) R587Q，其中胺基酸587處之精胺酸（R；）變為麩醯胺酸（Q；gln）；及(3) R590T，其中胺基酸590處之精胺酸（R；arg）變為蘇胺酸（T；thr）。

AAV載體亦可包括自身互補型AAV載體（scAAV）。scAAV載體含有兩個DNA股，該等DNA股黏接在一起形成雙股DNA。藉由跳過第二股合成，scAAV允許在細胞中快速表現。

在一個實施例中，醫藥組成物包括重組腺相關病毒（AAV）載體，其包括AAV衣殼及AAV載體基因組。AAV載體基因組可包括至少一種本文所描述之肽相關聚核苷酸，諸如但不限於SEQ ID NO:1-64，或與其具有至少95%一致性之變異體。醫藥組成物中之重組AAV載體可有至少70%含有AAV載體基因組。

在一個實施例中，醫藥組成物包括重組腺相關病毒（AAV）載體，其包括AAV衣殼及AAV載體基因組。AAV載體基因組可包括至少一種本文所描述之肽相關聚核苷酸，諸如但不限於SEQ ID NO:1-64或與其具有至少95%一致性之變異體，加額外的N末端脯胺酸。醫藥組成物中之重組AAV載體可有至少70%含有AAV載體基因組。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用歐洲專利申請案第EP1857552號中所描述的用於遞送AAV病毒粒子之方法投與或遞送，該申請案之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用歐洲專利申請案第EP2678433號中所描述的使用AAV載體遞送蛋白質之方法投與或遞送，該申請案之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利案第US 5858351號中所描述的使用AAV載體遞送DNA分子之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利案第US 6211163號中所描述的將DNA遞送至血流之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利案第US 6325998號中所描述的遞送AAV病毒粒子之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利案第US 7588757號中所描述的將有效負載遞送至中樞神經系統之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利案第US 8283151號中所描述的遞送有效負載之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用國際專利公開案第WO2001089583號中所描述的使用麩胺酸脫羧酶（GAD）遞送載體遞送有效負載之方法投與或遞送，該專利公開案之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用國際專利公開案第WO2012057363號中所描述的將有效負載遞送至神經細胞之方法投與或遞送，該專利公開案之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用美國專利第9585971號中所描述的將有效負載遞送至細胞之方法投與或遞送，該專利之內容以全文引用之方式併入本文中。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用Deverman等人《自然-生物技術（Nature Biotechnology）》, 34, 204-09(2016)所描述的將有效負載遞送至細胞之方法投與或遞送。

在一個實施例中，包括肽相關聚核苷酸之病毒載體可使用US7198951[腺相關病毒（AAV）血清型9序列、含有其之載體及其用途]、US 9217155[新穎AAV之分離及其用途]、WO2011126808[藥理學上誘導之轉殖基因消融系統]、US6015709[轉錄活化物以及其組成物及相關用途]、US7094604[假型化重組AAV病毒粒子之製造]、WO2016126993[抗τ構築體]、US7094604[重組AAV衣殼蛋白]、US8,292,769[禽類腺相關病毒（aaav）及其用途]、US9102949[靶向CNS之AAV載體及其使用方法]、US20160120960[腺相關病毒介導的中樞神經系統中之基因轉移]、WO2016073693[用於治療帕金森氏病之AADC聚核苷酸]、WO2015168666[用於視網膜及CNS基因療法之AAV載體]、US20090117156[用於A型尼曼-匹克二氏病（Niemann-Pick Disease type A）之基因療法]或WO2005120581[用於神經代謝障礙之基因療法]中所描述之遞送AAV病毒粒子之方法投與或遞送。

本文所描述之病毒載體的醫藥組成物可由生物利用率、治療窗及/或分佈體積中之一或多種表徵。

在一些實施例中，本發明之肽相關核苷酸及/或肽相關核苷酸組成物可組合於裝置中、塗佈於裝置上或包埋於裝置中。裝置可包含但不限於支架、泵及/或其他可植入治療裝置。另外，在個體使用壓縮裝置，諸如但不限於用以減小個體深層靜脈栓塞（DVT）之幾率的壓縮裝置肽時，可將相關核苷酸及/或肽相關核苷酸組成物遞送至個體。本發明提供裝置，該等裝置可併入編碼一或多個肽相關聚核苷酸有效負載分子之病毒載體。此等裝置在穩定調配物含有病毒載體，其可直接遞送給有需要之個體，諸如人類患者。

可採用供投與之裝置，根據本文所教示的單劑量、多劑量或分次劑量方案遞送包括本發明之肽相關核苷酸的病毒載體。

除非上下文另外明確指示，否則如本文中及所附申請專利範圍中所使用，單數形式「一個（種）（a/an）」及「該（the）」包含複數個(種)指示物。應瞭解，本文所述的本揭露之態樣及變化形式包含「由態樣及變化形式組成」及/或「基本上由態樣及變化形式組成」。

如本文所使用，術語「約」意謂比所述值或所述值之範圍大或小10%，但不意圖將任何值或值之範圍指定為僅此較寬定義。前面有術語「約」之各值或值之範圍亦意圖涵蓋所述絕對值或值之範圍的實施例。

如本文所使用，術語「預防」係指防止有患病風險但尚未診斷為患有該疾病之個體發生疾病、病症或病況。

如本文所使用，術語「個體」包含哺乳動物，較佳地為處於任何年齡的罹患該病變之人類。較佳地，此術語涵蓋有發展病變之風險的個體。

醫藥調配物典型地適於非經腸投與。如本文所使用，醫藥組成物之「非經腸投與」包含以物理突破個體之組織並經由組織中之裂口投與醫藥組成物，由此總體上直接投與血流、肌肉或內部器官中的任何投藥途徑。因此，非經腸投藥包含但不限於藉由注射組成物、藉由經手術切口施加組成物、藉由經組織穿透性非手術傷口施加組成物及類似方式來投與醫藥組成物。確切地說，預期非經腸投與包含但不限於皮下注射、腹膜內注射、肌肉內注射、胸骨內注射、靜脈內注射、動脈內注射、鞘內注射、室內注射、尿道內注射、顱內注射、滑膜內注射或輸注；或腎臟透析輸注技術。

在各種實施例中，將肽與醫藥學上可接受之賦形劑混合以形成醫藥組成物，該醫藥組成物可經口或經由以下方式向個體全身投與：靜脈注射、肌肉內注射、皮下注射、腹腔內注射、透皮注射、動脈內注射、胸骨內注射、鞘內注射、室內注射、尿道內注射、顱內注射、滑膜內注射或經由輸注。醫藥組成物較佳含有至少一種在自然界中未發現之組分。

適合於非經腸投與之醫藥組成物的調配物典型地總體上包括活性成分與醫藥學上可接受之賦形劑，諸如無菌水或無菌等張生理食鹽水的組合。此類調配物可以適於以快速注射投與或連續投與之形式製備、包裝或銷售。可注射調配物可以單位劑型製備、包裝或銷售，諸如在安瓿中或含有防腐劑之多劑量容器中。用於非經腸投與之調配物包含但不限於油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液、乳液；糊劑；及類似物。此類調配物可進一步包括一或多種額外成分，包含但不限於懸浮劑、穩定劑或分散劑。在用於非經腸投與之調配物的一個實施例中，活性成分係以乾燥（亦即，粉末或顆粒狀）形式提供，用於在非經腸投與復水之組成物之前用適合媒劑（例如無菌無熱原水）復水。非經腸調配物亦包含水溶液，其可含有運載體，諸如鹽、碳水化合物及緩衝劑（較佳地達到自3至9之pH值），但對於一些應用，其可更適當地調配為無菌非水性溶液或擬與適合媒劑，諸如無菌無熱原質水組合的乾燥形式。示例性非經腸投與形式包含在無菌水溶液，例如丙二醇或右旋糖水溶液中之溶液或懸浮液。必要時，此類劑型可經適當緩衝。其他有用的可非經腸投與之調配物包括含在微晶形式或脂質體製劑中之活性成分的調配物。用於非經腸投與之調配物可調配成速釋型及/或調釋型。調釋型調配物包含延遲釋放型、持續釋放型、脈衝釋放型、受控釋放型、靶向釋放型及程控釋放型。

本揭露包含用於經皮或局部遞送，以在施用點局部起作用，或在進入身體之血液循環後，亦即全身起作用的組成物及方法。在此等系統中，遞送可藉由諸如直接局部施用呈軟膏或類似物形式之物質或藥物的技術來實現，或藉由貼劑與容納藥物（或其他物質）之儲庫或類似物黏著並以控制時間之方式將其釋放至皮膚來實現遞送。對於局部投與，該等組成物可呈乳液、洗劑、凝膠、乳膏、膠凍、溶液、懸浮液、軟膏及經皮貼片形式。一些局部遞送組成物可含有多烯基磷脂醯膽鹼（本文中縮寫為「PPC」）。在一些情況下，PPC可用於增強表皮滲透。如本文所使用，術語「多烯基磷脂醯膽鹼」意思指帶有兩個脂肪酸部分之任何磷脂醯膽鹼，其中該兩個脂肪酸中之至少一個係在其結構中具有至少兩個雙鍵的不飽和脂肪酸，諸如亞麻油酸。此類局部調配物可包括一或多種乳化劑、一或多種界面活性劑、一或多種聚乙二醇、一或多種卵磷脂、一或多種脂肪酸酯或一或多種經皮滲透增強劑。製劑可包含無菌水性或非水性溶液、懸浮液及乳液，在某些實施例中，其可與個體之血液等張。非水性溶劑之實例係聚丙二醇；聚乙二醇；植物油，諸如橄欖油、芝麻油、椰子油、花生油（arachis oil/peanut oil）；礦物油；有機酯，諸如油酸乙酯；或不揮發性油，包含合成甘油單酯或甘油二酯。水性溶劑包含水、醇/水溶液、乳液或懸浮液，包含生理食鹽水及緩衝介質。非經腸媒劑包含氯化鈉溶液、1,3-丁二醇、林格氏右旋糖(Ringer's dextrose)、右旋糖及氯化鈉、乳酸林格氏溶液或不揮發性油。靜脈內媒劑包含流體及營養補充劑、電解質補充劑(諸如基於林格氏右旋糖之電解質補充劑)及類似物。亦可存在防腐劑及其他添加劑，諸如抗微生物劑、抗氧化劑、螯合劑及惰性氣體，及類似物。

舉例而言，在一個態樣中，無菌可注射溶液可藉由將所需量之肽與以上所列舉之成分之一或其組合一起併入適合溶劑中，必要時，隨後過濾滅菌來製備。一般而言，分散液係藉由將活性肽併入含有鹼性分散介質及來自以上所列舉之成分的所需其他成分的無菌媒劑中來製備。在用於製備無菌可注射溶液之無菌散劑之情況下，製備方法，諸如真空乾燥及冷凍乾燥，自其先前經無菌過濾之溶液產生活性成分加上任何其他所需成分之散劑。可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣、在分散液之情況下藉由維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持溶液之適當流動性。可注射組成物之延長吸收可藉由在組成物中包含延遲吸收劑，例如單硬脂酸鹽及明膠來達成。在各種實施例中，可注射組成物將使用市售拋棄式可注射裝置投與。

非經腸調配物可存在於單位劑量或多劑量密封容器，諸如安瓿及小瓶中，且可在經冷凍乾燥（凍乾）條件下儲存，僅需要在即將使用之前添加用於注射之無菌液體賦形劑，例如注射用水。可自此項技術中已知種類之無菌散劑、顆粒劑及錠劑製備即用型注射溶液及懸浮液。可注射調配物係根據本發明。關於可注射組成物之有效藥物賦形劑的要求係一般本領域中一般熟習此項技術者熟知的（參見例如《製藥學及藥劑學實踐（Pharmaceutics and Pharmacy Practice ）》 , J. B. Lippincott Company, 賓夕法尼亞州費城（Philadelphia, Pa.）, Banker及Chalmers編, 第238-250頁(1982)，及《ASHP可注射藥物手冊（ASHP Handbook on Injectable Drugs ）》, Toissel, 第4版, 第622-630頁(1986)）。

另外，本揭露之肽可藉由與各種基質，諸如乳化基質或水溶性基質混合而製成供直腸投與之栓劑。適於經陰道投與之調配物可呈子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧調配物形式，除含有活性成分以外，其亦含有此項技術中已知適當之該等運載體。

本領域中熟習此項技術者應瞭解，除上文所描述之醫藥組成物外，本揭露之肽亦可調配為包合複合物形式，諸如環糊精包合複合物或脂質體。

該肽可經鼻內或藉由吸入投與，典型地呈乾燥粉末（單獨、呈混合物形式、或呈混合組分粒子形式，例如混有適合醫藥學上可接受之運載體）自乾粉吸入器吸入；呈氣霧劑噴霧形式自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器（較佳地使用電流體動力學產生細霧之霧化器）或噴灑器投與，其中存在或不存在使用適合推進劑；或呈鼻滴劑形式。加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或噴灑器一般含有肽之溶液或懸浮液，其包括例如用於將活性劑分散、溶解或延遲釋放之適合試劑、作為溶劑之推進劑。在以乾燥粉末或懸浮液調配物使用之前，藥品一般經微米尺寸化為適合於藉由吸入遞送之大小(典型地小於5微米)。此可藉由任何適當之粉碎方法達成，諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、形成奈米粒子之超臨界流體加工、高壓均質化或噴霧乾燥。用於吸入器或吹入器之膠囊、泡殼及藥筒可經調配成含有肽、適合粉末基質及效能調節劑之粉末混合物。可將適合的調味劑，諸如薄荷醇及左薄荷腦；或甜味劑，諸如糖精或糖精鈉，添加至欲用於吸入/鼻內投與的該等調配物中。用於吸入/鼻內投與之調配物可調配為速釋型及/或調釋型。調釋型調配物包含延遲釋放型、持續釋放型、脈衝釋放型、受控釋放型、靶向釋放型及程控釋放型。在乾粉吸入劑及氣霧劑之情況下，藉助於閥遞送計量之量來確定劑量單位。各單位典型地佈置成投與計量之量或「噴出」之肽。總日劑量將典型地以單次劑量投與，或更通常在全天以分次劑量投與。

根據一個態樣，肽係用於醫學，特別是人類醫學。該等肽有效地調節與異常細胞增殖及惡性疾病相關之細胞信號傳導。另外，本揭露提供有效影響細胞活力及細胞保護之肽。

在一些態樣中，本文提供用於治療病況之方法，對於該病況，凋亡性細胞死亡、炎症、自體免疫性、血管生成、癌轉移係病因決定因素。

在另一態樣中，提供一種肽，其用於預防及/或治療骨或軟骨病症/疾病、癌症、自體免疫性疾病、纖維化疾病、發炎性疾病、肥胖症、I型及II型糖尿病、神經退化性疾病、骨折、骨骼軟骨發育不良、感染性疾病、肺病、不孕症、肌肉病症、衰老、皮膚病及代謝疾病。

在一些態樣中，投與肽以治療與細胞應激反應，諸如但不限於與熱休克蛋白及/或代謝及氧化應激之誘導相關之病況。細胞應激反應可對任何應激因素起反應，該應激因素包含例如熱、免疫、細胞介素、氧化性、代謝、缺氧、內質網、網狀、蛋白質解摺疊、營養、化學、機械、滲透壓及血糖應激。

在一些態樣中，肽係根據本文所提供之方法投與以治療發炎性病況，諸如但不限於糖尿病、心血管疾病、腎病、視網膜病變、肥胖症、代謝疾病、神經退化性疾病、胃腸疾病、自體免疫性疾病、風濕病或感染性疾病。組合療法

根據另一個實施例，將肽與其他已知治療劑共投與或共調配。根據本揭露之另一態樣，本文提供一種組合治療，其包括向需要治療性治療之哺乳動物，諸如人類投與藥理學上有效量的根據本揭露之肽或肽類似物，或其醫藥學上可接受之鹽，視情況以及醫藥學上可接受之稀釋劑或運載體，且同時、依序或獨立地投與選自以下一或多種藥劑：(1)胰島素及胰島素類似物；(2)胰島素促分泌物，包含磺醯基脲（例如格列吡嗪（glipizide））及餐食葡萄糖調節劑（有時稱為「短效促分泌物」），諸如美格替耐（meglitinide）（例如瑞格列奈（repaglinide）及那格列奈（nateglinide））；(3)改善腸促胰島素作用之藥劑，例如二肽基肽酶IV（DPP-4）抑制劑（例如維格列汀（vildagliptin）、沙格列汀（saxagliptin）及西他列汀（sitagliptin））及升糖素樣肽-1（GLP-1）促效劑（例如艾塞那肽（exenatide））；(4)胰島素增敏劑，包含過氧化體增殖物活化受體γ（PPARy）促效劑，諸如噻唑啶二酮（例如吡格列酮（pioglitazone）及羅格列酮（rosiglitazone）），及具有PPARα、γ及δ活性之任何組合的藥劑；(5)調節肝葡萄糖平衡之藥劑，例如雙胍（例如二甲雙胍（metformin））、果糖1,6-二磷酸酶抑制劑、糖原磷酸化酶抑制劑、肝糖合成酶激酶抑制劑及葡糖激酶活化劑；(6)設計成用於減少/減慢腸中葡萄糖吸收之藥劑，諸如α-葡糖苷酶抑制劑（例如米格列醇（miglitol）及阿卡波糖（acarbose））；以及(7)拮抗升糖素之作用或減少升糖素分泌的藥劑，諸如澱粉素類似物（例如普蘭林肽（pramlintide））；(7)防止腎中葡萄糖再吸收之藥劑，諸如鈉依賴性葡萄糖轉運蛋白2（SGLT-2）抑制劑（例如達格列淨（dapagliflozin））；(8)設計成用於治療長期高血糖症之併發症的藥劑，諸如醛醣還原酶抑制劑（例如依帕司他（epalrestat）及雷尼司他（ranirestat））；以及用於治療與微血管病相關之併發症的藥劑；(9)抗血脂異常劑，諸如HMG-CoA還原酶抑制劑（斯他汀類藥物（statins），例如羅素他汀（rosuvastatin）及其他降膽固醇劑；PPARa促效劑（貝特類（fibrates），例如吉非羅齊（gemfibrozil）及非諾貝特（fenofibrate））；膽酸錯隔劑（例如消膽胺（cholestyramine））；(10)膽固醇吸收抑制劑（例如植物固醇（亦即，植物固醇）、合成抑制劑）；膽固醇酯轉運蛋白（CETP）抑制劑；迴腸膽酸轉運系統抑制劑（I BAT抑制劑）；膽酸結合樹脂；菸鹼酸（菸酸）及其類似物；抗氧化劑，諸如普羅布可（probucol）；以及ω-3脂肪酸；(1 1)抗高血壓劑，包含腎上腺素激導性受體拮抗劑，諸如β阻斷劑（例如阿替洛爾（atenolol））、α阻斷劑（例如多沙唑嗪（doxazosin））及混合α/β阻斷劑（例如拉貝洛爾（labetalol））；腎上腺素激導性受體促效劑，包含α-2促效劑（例如可樂定（clonidine））；血管收縮素轉化酶（ACE）抑制劑（例如賴諾普利（lisinopril））、鈣通道阻斷劑，諸如二氫吡啶類（例如硝苯地平（nifedipine））、苯烷胺類（phenylalkylamines）（例如維拉帕米（verapamil））及苯并硫氮呯類（例如地爾硫卓（diltiazem）；血管收縮素II受體拮抗劑（例如坎地沙坦（candesartan））；醛固酮受體拮抗劑（例如依普利酮（eplerenone））；中樞作用之腎上腺素激導性藥物，諸如中樞α促效劑（例如可樂定）；以及利尿劑（例如呋塞米（furosemide））；(12)止血調節劑，包含抗血栓藥，諸如纖維蛋白溶解活化劑；凝血酶拮抗劑；因子VIIa抑制劑；抗凝血劑，諸如維生素K拮抗劑（例如華法林（warfarin））、肝素及其低分子量類似物、因子Xa抑制劑及直接凝血酶抑制劑（例如阿加曲班（argatroban））；抗血小板劑，諸如環加氧酶抑制劑（例如阿司匹林（aspirin））、二磷酸腺苷（ADP）受體抑制劑（例如克羅匹多（clopidogrel））、磷酸二酯酶抑制劑（例如西洛他唑（cilostazol））、糖蛋白I IB/I I A抑制劑（例如替羅非班（tirofiban））及腺苷再吸收抑制劑（例如雙嘧達莫（dipyridamole））；(14)抗肥胖劑，諸如食慾抑制劑（例如麻黃素（ephedrine）），包含去甲腎上腺素劑（例如苯丁胺（phentermine））及血清素激導性劑（例如西布曲明（sibutramine））、胰臟脂肪酶抑制劑（例如奧利司他（orlistat））、微粒體轉運蛋白（MTP）調節劑、二醯基甘油醯基轉移酶（DGAT）抑制劑及大麻素（CB1）受體拮抗劑（例如利莫那班（rimonabant））；(15)進食行為調節劑，諸如食慾素受體調節劑及黑色素濃集激素（MCH）調節劑；(16)升糖素樣肽-1（GLP-1）受體調節劑；(17)神經肽Y（NPY）/NPY受體調節劑；(18)丙酮酸脫氫酶激酶（PDK）調節劑；(19)血清素受體調節劑；(20)瘦素/瘦素受體調節劑；(21)胃內激素（ghrelin）/胃內激素受體調節劑；或(22)單胺傳遞調節劑，諸如選擇性血清素再吸收抑制劑（SSRI）（例如氟西汀（fluoxetine））、去甲腎上腺素再吸收抑制劑（NARI）、去甲腎上腺素-血清素再吸收抑制劑（SNRI）、三重單胺再吸收阻斷劑（例如泰索酚辛（tesofensine））及單胺氧化酶抑制劑（MAOI）（例如托洛沙酮（toloxatone）及阿米夫胺（amiflamine））、或、醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、此類鹽之溶劑合物或前藥，視情況以及醫藥學上可接受之運載體。

根據另一個實施例，將肽與用於治療NASH之其他已知治療劑共投與或共調配。根據本揭露之另一態樣，本文提供一種組合治療，其包括投與藥理學上有效量的根據本揭露之肽或肽類似物，或其醫藥學上可接受之鹽，視情況以及醫藥學上可接受之稀釋劑或運載體，且同時、依序或獨立地投與選自以下藥劑中之一或多種：（miR至103/107拮抗劑、FXR促效劑、半乳糖凝集素-1/3促效劑、ACC抑制劑、CB-1抑制劑、己酮糖激酶抑制劑、PDE4抑制劑、PPARγ促效劑、A3AR促效劑、PDE抑制劑、氟酮內酯（fluoroketolide）、mTOT胰島素敏化劑、半胱天冬酶抑制劑、瘦素類似物、半乳糖凝集素-1/3促效劑、SCD1抑制劑、PPARαδ促效劑、LOXL2抗體、ASK1抑制劑、11β-HSD1抑制劑、PPARαδγ促效劑、THR-β促效劑、醛固酮抑制劑、FGF-19類似物、SBAT抑制劑、CCR2/CCR5抑制劑、GLP-1促效劑及PPARαγ促效劑）。亦涵蓋與以下化合物之組合作為本發明之實施例：Astra ZenecA AZD4076、Enanta EDP-305、半乳糖凝集素治療劑GR-MD-02、吉卡賓（gemcabene）、Gilead GS-0976、Gilead GS-9674、Merck MK-4074、吡格列酮（pioglitazone）、Pfizer PF-06835919、Pfizer CP-945598、Astellas ASP9831、Boehringer Ingelheim BI 1467335、Bristol Myers Squibb BMS-986036、文迪雅（avandia）、二甲雙胍、氯沙坦（losartan）、Can-Fite CF102、己酮可可鹼（pentoxifylline）、索利黴素（solithromycin）、Cirius MSDC-0602K、恩利卡生（emricasan）、Conatus IDN-6556、美曲普汀（metreleptin）、阿雷美羅（aramchol）、Genfit GFT505、辛圖珠單抗（simtuzumab）、Gilead GS-4997、Gilead GS-9450、Roche TRO19622、Roche RO5093151、Immuron IMM-124E、奧貝膽酸（obeticholic acid）、Inventiva IVA337、Madrigal MGL-3196、MN-001、Mitsubishi Tanabe MT-3995、Mochida EPA-E、NGM Biopharma NGM282、Novartis LMB763、Novartis LJN452、Shire SHP626、森尼韋若（cenicriviroc）、利拉魯肽（liraglutide）及沙格列讓（saroglitazar）。與肥胖症相關之共患病 - 單藥療法或組合

舉例而言，除超重或肥胖以外，個體或患者還可患有與超重或肥胖相關之共患病，亦即與超重或肥胖相關、因其加劇或由其促進之疾病及其他不利健康病況。本文中涵蓋單獨投與，與先前經顯示可治療此等超重或肥胖相關病況之至少一種其他藥劑組合投與的本發明所揭露之肽。

舉例而言，II型糖尿病已與肥胖症相關聯。II型糖尿病之某些併發症，例如殘疾及過早死亡，可藉由持續體重減輕預防、改善或消除（Astrup A., 《公共衛生營養（Pub Health Nutr）》(2001) 4:499-5 15）。經投與以治療II型糖尿病之藥劑包含磺醯脲（例如氯磺丙脲（chlorpropamide）、格列吡嗪、格列本脲（Glyburide）、格列美脲（Glimepiride））；美格替耐（例如瑞格列奈及那格列奈）；雙胍（例如二甲雙胍）；噻唑啶二酮（羅格列酮、曲格列酮（Troglitazone）及吡格列酮）；二肽基肽酶-4抑制劑（例如西他列汀、維格列汀及沙格列汀）；升糖素樣肽-1模擬物（例如艾塞那肽及利拉魯肽（Liraglutide））；及α-葡糖苷酶抑制劑（例如阿卡波糖及米格列醇）。

心臟病症及病況，例如高血壓、血脂異常、缺血性心臟病、心肌症、心肌梗塞、中風、靜脈血栓栓塞疾病及肺高血壓，已與超重或肥胖相關聯。舉例而言，高血壓已與肥胖相關聯，因為過量之脂肪組織分泌受到腎臟作用之物質，從而導致高血壓。另外，對於肥胖症，一般存在產生較高量之胰島素（歸因於過量脂肪組織），且此過量之胰島素亦升高血壓。高血壓的一個主要治療選擇係體重減輕。經投與以治療高血壓之藥劑包含氯噻酮（Chlorthalidone）；氫氯噻嗪（Hydrochlorothiazide）；吲達帕胺（Indapamide）、美托拉宗（Metolazone）；環利尿劑（例如布美他尼（Bumetanide）、依他尼酸（Ethacrynic acid）、呋塞米、樂泄（Lasix）、托西邁（Torsemide））；保鉀劑（例如鹽酸氨氯吡脒（Amiloride hydrochloride）、苯紮明（benzamil）、螺內酯（Spironolactone）及胺苯喋啶（Triamterene））；外周藥物（例如蛇根素鹼（Reserpine））；中樞α-促效劑（例如鹽酸可樂定、乙酸胍那苄（Guanabenz acetate）、鹽酸胍法新（Guanfacine hydrochloride）及甲基多巴（Methyldopa））；α-阻斷劑（例如甲磺酸多沙唑嗪（Doxazosin mesylate）、鹽酸哌唑嗪（Prazosin hydrochloride）及鹽酸特拉唑嗪（Terazosin hydrochloride））；β-阻斷劑（例如醋丁洛爾（Acebutolol）、阿替洛爾（Atenolol）、倍他洛爾（Betaxolol）、反丁烯二酸比索洛爾（Bisoprolol fumarate）、鹽酸卡替洛爾（Carteolol hydrochloride）、酒石酸美托洛爾（Metoprolol tartrate）、琥珀酸美托洛爾、納多洛爾（Nadolol）、硫酸噴布洛爾（Penbutolol sulfate）、品多洛爾（Pindolol）、鹽酸普萘洛爾（Propranolol hydrochloride）及順丁烯二酸噻嗎洛爾（Timolol maleate））；組合α及β阻斷劑（例如卡維地洛（Carvedilol）及鹽酸拉貝洛爾（Labetalol hydrochloride））；直接血管擴張劑（例如鹽酸肼酞嗪（Hydralazine hydrochloride）及敏樂定（Minoxidil））；鈣拮抗劑（例如鹽酸地爾硫卓（Diltiazem hydrochloride）及鹽酸維拉帕米（Verapamil hydrochloride））；二氫吡啶（例如苯磺酸胺氯地平（Amlodipine besylate）、非洛地平（Felodipine）、伊拉地平（Isradipine）、尼卡地平（Nicardipine）、硝苯地平（Nifedipine）及尼索地平（Nisoldipine））；ACE抑制劑（鹽酸貝那普利（benazepril hydrochloride）、卡托普利（Captopril）、順丁烯二酸依那普利（Enalapril maleate）、福辛普利鈉（Fosinopril sodium）、賴諾普利（Lisinopril）、莫西普利（Moexipril）、鹽酸喹那普利（Quinapril hydrochloride）、雷米普利（Ramipril）、群多普利（Trandolapril））；血管收縮素II受體阻斷劑（例如氯沙坦鉀（Losartan potassium）、纈沙坦（Valsartan）及依貝沙坦（Irbesartan））；腎素抑制劑（例如阿力克倫（Aliskiren））；及其組合。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。

Carr等人（《臨床內分泌學及代謝期刊（The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism）》 (2004) 第89卷, 第6期2601-2607）論述超重或肥胖與血脂異常之間的關聯。血脂異常典型地用斯他汀類藥物治療。斯他汀類藥物，亦即HMG-CoA還原酶抑制劑，減慢個體體內膽固醇之產生及/或自動脈移除膽固醇積累。斯他汀類藥物包含美伐他汀（mevastatin）、洛伐他汀（lovastatin）、普伐他汀（pravastatin）、辛伐他汀（simvastatin）、韋羅他汀（velostatin）、二氫康百汀（dihydrocompactin）、氟伐他汀（fluvastatin）、阿托伐他汀（atorvastatin）、達伐他汀（dalvastatin）、卡瓦他汀（carvastatin）、克伐他汀（crilvastatin）、柏伐他汀（bevastatin）、西立伐他汀（cefvastatin）、羅素他汀（rosuvastatin）、匹伐他汀（pitavastatin）及格侖伐地汀（glenvastatin）。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。Eckel（《循環（Circulation）》 (1997) 96:3248-3250)論述超重或肥胖與缺血性心臟病之間的關聯。經投與以治療缺血性心臟病之藥劑包含斯他汀類藥物、硝酸酯（例如二硝酸異山梨酯及單硝酸異山梨酯）、β-阻斷劑及鈣離子通道拮抗劑。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。

Wong等人（《自然-心血管醫學臨床實踐（Nature Clinical Practice Cardiovascular Medicine）》(2007) 4:436-443）論述超重或肥胖與心肌病之間的關聯。用於治療心肌病之藥劑包含肌力劑（例如地高辛（Digoxin））、利尿劑（例如呋塞米）、ACE抑制劑、鈣拮抗劑、抗心律不整劑（例如索他洛爾（Sotolol）、胺碘酮（Amiodarone）及丙吡胺（Disopyramide））及β-阻斷劑。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。Yusef等人（《柳葉刀（Lancet）》(2005) 366(9497): 1640-1649）論述超重或肥胖與心肌梗塞之間的關聯。經投與以治療心肌梗塞之藥劑包含ACE抑制劑、血管收縮素II受體阻斷劑、直接血管擴張劑、β阻斷劑、抗心律不整劑及溶栓劑（例如阿替普酶（Alteplase）、瑞替普酶（Retaplase）、替奈普酶（Tenecteplase）、阿尼普酶（Anistreplase）及尿激酶（Urokinase））。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。

Suk等人（《中風（Stroke）》(2003) 34: 1586-1592）論述超重或肥胖與中風之間的關聯。經投與以治療中風之藥劑包含抗血小板劑（例如阿司匹林、氯吡格雷（Clopidogrel）、雙嘧達莫（Dipyridamole）及噻氯匹定（Ticlopidine））、抗凝血劑（例如肝素）及溶栓劑。Stein等人（《美國醫學雜誌（The American Journal of Medicine）》(2005) 18(9):978-980）論述超重或肥胖與靜脈血栓栓塞疾病之間的關聯。經投與以治療靜脈血栓栓塞疾病之藥劑包含抗血小板劑、抗凝血劑及溶栓劑。Sztrymf等人（《臨床肺病評論（Rev Pneumol Clin）》(2002) 58(2): 104-10）論述超重或肥胖與肺高血壓之間的關聯。經投與以治療肺高血壓之藥劑包含肌力劑、抗凝血劑、利尿劑、鉀（例如K-dur）、血管擴張劑（例如硝苯地平及地爾硫卓）、波生坦（Bosentan）、依前列醇（Epoprostenol）及西地那非（Sildenafil）。呼吸病症及病況，諸如肥胖症-換氣不足症候群、哮喘及阻塞性睡眠呼吸暫停與超重或肥胖關聯。Elamin（《胸科（Chest）》(2004) 125: 1972-1974）論述超重或肥胖與哮喘之間的關聯。經投與以治療哮喘之藥劑包含支氣管擴張劑、抗炎劑、白三烯阻斷劑及抗Ige劑。特定哮喘劑包含紮魯司特（Zafirlukast）、氟尼縮松（Flunisolide）、曲安西龍（Triamcinolone）、倍氯米松（Beclomethasone）、特布他林（Terbutaline）、氟替卡松（Fluticasone）、福莫特羅（Formoterol）、倍氯米松、沙美特羅（Salmeterol）、茶鹼（Theophylline）及左旋沙丁胺醇（Xopenex）。

Kessler等人（《歐洲呼吸雜誌（Eur Respir J）》(1996) 9:787-794）論述超重或肥胖與阻塞性睡眠呼吸暫停之間的關聯。經投與以治療睡眠呼吸暫停之藥劑包含莫達非尼（Modafinil）及安非他明（amphetamines）。

肝功能障礙及病況，諸如非酒精性脂肪肝病，已與超重或肥胖關聯。Tolman等人（治療學與臨床風險管理《（Ther Clin Risk Manag）》(2007) 6: 1153-1163）論述超重或肥胖與非酒精性脂肪肝病之間的關聯。經投與以治療非酒精性脂肪肝病之藥劑包含抗氧化劑（例如維生素E及維生素C）、胰島素敏化劑（二甲雙胍、吡格列酮、羅格列酮及甜菜鹼）、保肝藥及降脂劑。

骨骼病症及病況，諸如背痛及關節負重之骨關節炎，與超重或肥胖關聯，van Saase（《風濕病學雜誌（J Rheumatol）》(1988) 15(7): 1152-1158）論述超重或肥胖與關節負重之骨關節炎之間的關聯。經投與以治療關節負重之骨關節炎之藥劑包含乙醯胺苯酚（Acetaminophen）、非類固醇抗發炎劑（例如布洛芬（Ibuprofen）、依託度酸（Etodolac）、奧沙普嗪（Oxaprozin）、萘普生（Naproxen）、雙氯芬酸（Diclofenac）及萘丁美酮（Nabumetone））、COX-2抑制劑（例如塞內昔布（Celecoxib））、類固醇、補充劑（例如葡糖胺及硫酸軟骨素）及人工關節液。

代謝紊亂及病況，例如普拉德-威利二氏症候群（Prader-Willi Syndrome）及多囊性卵巢症候群，與超重或肥胖關聯。Cassidy（《醫學遺傳學雜誌（Journal of Medical Genetics）》(1997) 34:917-923）論述超重或肥胖與普拉德-威利二氏症候群之間的關聯。經投與以治療普拉德-威利二氏症候群之藥劑包含人類生長激素（HGH）、促生長激素及體重減輕劑（例如奧利司他（Orlistat）、西布曲明（Sibutramine）、甲基安非他明（Methamphetamine）、芬特明（Ionamin）、苯丁胺、安非他酮、安非拉酮（Diethylpropion）、芬美曲嗪（Phendimetrazine）、苯非他明（Benzphetermine）及妥泰（Topamax））。

Hoeger（《北美臨床婦產科（Obstetrics and Gynecology Clinics of North America）》(2001) 28(1):85-97）論述超重或肥胖與多囊性卵巢症候群之間的關聯。經投與以治療多囊性卵巢症候群之藥劑包含胰島素敏化劑、合成雌激素及孕酮之組合、螺內酯、依氟鳥胺酸（Eflornithine）及克羅米芬（Clomiphene）。生殖病症及病況，諸如性功能障礙、勃起功能障礙、不孕症、產科併發症及胚胎異常，與超重或肥胖關聯。Larsen等人（《國際肥胖症雜誌（倫敦）（Int J Obes (Lond)）》(2007) 8: 1189-1198）論述超重或肥胖與性功能障礙之間的關聯。Chung等人（《歐洲泌尿學（Eur Urol）》(1999) 36(l):68-70）論述超重或肥胖與勃起功能障礙之間的關聯。經投與以治療勃起功能障礙之藥劑包含磷酸二酯酶抑制劑（例如他達拉非（Tadalafil）、檸檬酸西地那非及伐地那非（Vardenafil））、前列腺素E類似物（例如前列地爾（Alprostadil））、生物鹼（例如育亨賓（Yohimbine））及睪固酮。Pasquali等人（《人類生殖（Hum Reprod）》(1997) 1:82-87）論述超重或肥胖與不孕症之間的關聯。經投與以治療不孕症之藥劑包含克羅米芬、檸檬酸克羅米芬、溴麥角環肽（Bromocriptine）、促性腺激素釋放激素（GnRH）、GnRH促效劑、GnRH拮抗劑、他莫昔芬（Tamoxifen）/諾瓦得士（nolvadex）、促性腺激素、人絨毛膜促性腺激素（HCG）、人絕經促性腺激素（HmG）、孕酮、重組促卵泡激素（FSH）、尿促卵泡素、肝素、促卵泡激素α及促卵泡激素β。

Weiss等人（《美國婦產科雜誌》(2004) 190(4): 1091-1097）論述超重或肥胖與產科併發症之間的關聯。經投與以治療產科併發症之藥劑包含鹽酸布比卡因（Bupivacaine hydrochloride）、地諾前列酮（Dinoprostone）PGE2、嘜啶HC1、鐵-葉酸-500/益補力（iberet）-葉酸-500、嘜啶、順丁烯二酸甲基麥角新鹼、羅比卡因（Ropivacaine）HC1、納布啡（Nalbuphine）HC1、羥嗎啡酮（Oxymorphone）HC1、催產素、地諾前列酮、利托君（Ritodrine）、氫溴酸東茛菪鹼（Scopolamine hydrobromide）、檸檬酸舒芬太尼（Sufentanil citrate）及催產素。

精神病症及病況，例如體重相關抑鬱症及焦慮症，已與超重或肥胖關聯。Dixson等人（《內科學文獻集（Arch Intern Med）》(2003) 163:2058-2065）論述超重或肥胖與抑鬱症之間的關聯。經投與以治療抑鬱之藥劑包含血清素再吸收抑制劑（例如氟西汀（Fluoxetine）、艾司西酞普蘭（Escitalopram）、西它普蘭（Citalopram）、帕羅西汀（Paroxetine）、舍曲林（Sertraline）及文拉法辛（Venlafaxine））；三環抗抑鬱劑（例如阿米曲替林（Amitriptyline）、阿莫沙平（Amoxapine）、氯米帕明（Clomipramine）、地昔帕明（Desipramine）、鹽酸度硫平（hydrochloride Dosulepin）、多塞平（Doxepin）、丙咪嗪（Imipramine）、伊普吲哚（Iprindole）、洛夫帕明（Lofepramine）、去甲替林（Nortriptyline）、奧匹哌醇（Opipramol）、普羅替林（Protriptyline）及曲米帕明（Trimipramine））；單胺氧化酶抑制劑（例如異卡波肼（Isocarboxazid）、嗎氯貝胺（Moclobemide）、苯乙肼（Phenelzine）、反苯環丙胺（Tranylcypromine）、司來吉蘭（Selegiline）、雷沙吉蘭（Rasagiline）、尼阿拉米（Nialamide）、異丙菸肼（Iproniazid）、異丙氯肼（Iproclozide）、托洛沙酮（Toloxatone）、利奈唑胺（Linezolid）、二氧烯醇酯（Dienolide）卡瓦哌喃酮（kavapyrone）去甲氧基羊高寧（desmethoxyyangonin）及右旋安非他明（Dextroamphetamine））；精神興奮劑（例如安非他明（Amphetamine）、甲基安非他明（Methamphetamine）、哌醋甲酯（Methylphenidate）及檳榔鹼（Arecoline））；抗精神病劑（例如丁酸酚酮（Butyrophenones）、吩噻嗪（Phenothiazines）、噻噸（Thioxanthenes）、氯氮平（Clozapine）、奧氮平（Olanzapine）、利培酮（Risperidone）、喹硫平（Quetiapine）、齊拉西酮（Ziprasidone）、胺磺必利（Amisulpride）、帕潘立酮（Paliperidone）、賽必雅（Symbyax）、四苯納嗪（Tetrabenazine）及大麻二酚（Cannabidiol））；及情緒穩定劑（例如碳酸鋰、丙戊酸、雙丙戊酸鈉、丙戊酸鈉、拉莫三嗪（Lamotrigine）、卡馬西平（Carbamazepine）、加巴噴丁（Gabapentin）、奧卡西平（Oxcarbazepine）及托吡酯（Topiramate））。

Simon等人（《普通精神病學文獻集（Archives of General Psychiatry）》(2006) 63(7):824-830）論述超重或肥胖與焦慮症之間的關聯。經投與以治療焦慮症之藥劑包含血清素再吸收抑制劑、情緒穩定劑、苯并二氮呯（例如阿普唑侖（Alprazolam）、氯硝西泮（Clonazepam）、地西泮（Diazepam）及勞拉西泮（Lorazepam））、三環抗抑鬱劑、單胺氧化酶抑制劑及β-阻斷劑。

本發明之另一態樣提供用於促進且維持個體之體重減輕的方法，該等方法涉及向個體投與一定量有效地使個體之體重減輕的所揭露之化合物；及投與治療有效量的不同體重減輕劑，以維持個體之體重減輕。體重減輕劑包含血清素及去甲腎上腺素再吸收抑制劑；去甲腎上腺素再吸收抑制劑；選擇性血清素再吸收抑制劑；及腸道脂肪酶抑制劑。特定體重減輕劑包含利拉魯肽（liraglutide）、奧利司他、西布曲明、甲基安非他明、芬特明、苯丁胺、安非他酮、安非拉酮、芬美曲嗪、苯非他明、溴麥角環肽、氯卡色林、托吡酯，或藉由以下方式起作用以調節食物攝入之藥劑：阻斷胃內激素作用、抑制二醯甘油醯基轉移酶1（DGATl）活性、抑制硬脂醯基CoA去飽和酶1（SCD1）活性、抑制神經肽Y受體1功能、活化神經肽Y受體2或4功能、或抑制鈉-葡萄糖共轉運蛋白1或2之活性。此等化合物係以此項技術中已知之方案及劑量投與。

不受特定理論的束縛，用肽處理脂肪細胞後細胞培養基中的游離脂肪酸（FFA）指示參與脂質或脂肪細胞調節的途徑的調節酸水平。培養基中脂肪酸水平的降低可能由許多過程導致，包括但不限於抑制信號傳導途徑，減少細胞脂肪生成，減少脂解作用或增加脂肪酸氧化。對游離脂肪酸淨濃度有影響之肽具有治療代謝障礙的潛在效用。

脂質營養不良係以來自各種身體區域之脂肪組織（體脂肪）選擇性喪失及/或其他區域中過量脂肪累積為特徵之病症的通用名。一個區域，諸如面部之局部脂肪損失被稱作脂萎縮。脂肪損失之程度可在身體某一部分上之極小區域至幾乎完全不存在於全身之脂肪組織的範圍內。此外，患者可能患有嚴重代謝併發症或僅具有美容問題。與嚴重脂肪損失相關之脂質營養不良可能造成與胰島素抵抗相關之代謝併發症，諸如糖尿病、高含量之血清甘油三酯及脂肪肝（肝脂肪變性）。脂肪營養不良可能是先天性的（例如家族性部分脂肪營養不良或Beradinelli-Seip綜合徵），也可能是後天的（例如與各種疾病或藥物有關）。獲得性脂質營養不良係由藥物、自體免疫機制引起，或可為特發性的。獲得性脂肪營養不良包括HIV感染患者的脂肪營養不良（LD-HIV），可通過高活性抗逆轉錄病毒療法（HAART）誘導獲得性脂肪營養不良，獲得性全身脂肪營養不良（AGL），獲得性部分脂肪營養不良（APL）和局部脂肪營養不良。獲得性脂質營養不良不具有直接遺傳基礎。根據一些實施例，本發明提供一種用於減輕、改善或預防脂質營養不良之方法。

肽可用於治療由葡萄糖、活性氧物種（ROS）及/或游離脂肪酸（FFA）之異常血液含量表現之代謝狀態不平衡相關的病況。有利代謝狀態定義為能量恆定平衡，其特徵在於葡萄糖、ROS及FFA之血液含量等於健康個體之含量（在健康人群之平均含量的範圍內）。因此，如本文所使用，不利代謝狀態係指葡萄糖、ROS及/或FFA之血液含量異常，亦即，與健康對照個體體內各別含量相比顯著改變（例如，如由醫師或熟習此項技術者評價）。在一些實施例中，術語不利代謝狀態係指葡萄糖、ROS及/或FFA之血液含量與健康對照個體體內各別含量相比顯著提高（例如，如由醫師或熟習此項技術者評價）。不利代謝狀態可能由異常代謝引起，其可能涉及葡萄糖（碳水化合物）及/或脂肪酸氧化路徑。當涉及脂肪酸氧化路徑異常時，不利代謝狀態典型地由與健康對照個體相比顯著增加之ROS血液含量，及/或異常FFA血液含量表現。此等異常亦可由氧化低密度脂蛋白（LDL）之血液含量升高表現。當涉及葡萄糖代謝異常時，與健康對照個體相比，葡萄糖血液含量典型地顯著增加。如本文所使用，若如本文所述，血糖含量顯著增加伴有異常血液ROS及/或FFA值，則該血糖含量顯著增加不超過不平衡血糖控制臨限值之患者將被定義為具有不利代謝狀態。如此項技術中所知，該醫師或熟練技術人員亦可藉由考慮能量攝入及各種能量消耗以及利用參數，來評價不平衡代謝狀態。舉例而言但不限於，可評價在細胞層面上之參數，諸如細胞（例如血小板）ATP產生及細胞氧化，以及在全身層面上之參數，諸如呼吸商（RQ），以確定個體之代謝狀態。舉例而言，藉由比較健康與患病患者之間此類參數的相對比率，熟習此項技術者可評價該個體相較於健康對照的代謝狀態。在罹患慢性代謝及/或炎性病症之患者中可發現不利代謝狀態，該慢性代謝及/或炎性病症未經適合治療方案充分治療或平衡。

術語「代謝疾病」或「代謝障礙」係指一組已鑑別之病症，在該等病症中存在代謝錯誤、代謝不平衡或次佳代謝，其可涉及葡萄糖（碳水化合物）、脂肪酸及/或蛋白質氧化路徑。因此，當不平衡時，此等病症典型地由不利代謝狀態表現，不利代謝狀態之特徵在於與健康對照個體體內之各別含量相比，葡萄糖、ROS及/或FFA之血液含量異常，如本文所描述。此類病症包含但不限於糖尿病及與營養或內分泌不平衡相關之病症。

不利代謝狀態亦可作為慢性炎性病症之結果出現，其中非消減、不平衡炎性過程伴有由與健康對照個體之各別含量相比，葡萄糖、ROS及/或FFA之異常血液含量表現的繼發性代謝併發症。此類病症之非限制性實例係敗血症及自體免疫性疾病。

X症候群（或代謝症候群）表示與腹部脂肪累積相關之一組病徵及症狀。此形式之脂肪分佈在中年男性中很常見，且通常呈現為壺形腹或大肚子形式。X症候群以多種病症為特徵，包含痛風、葡萄糖代謝受損（對糖尿病之易感性增加）、血壓升高及血液膽固醇含量升高。X症候群患者患心臟病之風險很高。美國臨床內分泌學家協會（American Association of Clinical Endocrinologists）將X症候群定義為血清或血漿胰島素/葡萄糖含量比率、脂質、尿酸含量、血管生理學及凝血因子不平衡之代謝異常的群集。因此，如本文所使用，術語「X症候群」係指由以下至少兩種之陽性診斷為特徵的病況：非胰島素依賴性糖尿病、血壓超過被認為正常之水準、胰島素含量超過被認為正常之水準、血脂異常及肥胖症。

肽可用於以下代謝疾病 (a)預防及/或治療所有形式之糖尿病，諸如高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量異常、1型糖尿病、非胰島素依賴型糖尿病、MODY（年輕人成年型糖尿病）、妊娠期糖尿病、及/或用於減少HbAlC； (b)延遲或預防糖尿病進展，諸如2型糖尿病之進展；延遲葡萄糖耐量異常（IGT）進展為需要胰島素之2型糖尿病；延遲或預防胰島素抵抗；及/或延遲不需要胰島素之2型糖尿病進展為需要胰島素之2型糖尿病； (c)改善β-細胞功能，諸如減少β-細胞凋亡；增加β-細胞功能及/或β-細胞塊；及/或用於恢復葡萄糖對β-細胞之敏感性； (d)預防及/或治療認知障礙及/或神經退化性病症，諸如阿茲海默氏病（Alzheimer's disease）、帕金森氏病（Parkinson's disease）及/或多發性硬化症； (e)預防及/或治療飲食障礙，諸如肥胖症，例如藉由減少食物攝入、減輕體重、抑制食慾、誘發飽腹感；治療或預防藉由投與抗精神病藥或類固醇誘發之暴食症、神經性貪食症及/或肥胖症；減少胃運動；延遲胃排空；增加軀體移動；及/或預防及/或治療肥胖症之共患病，諸如骨關節炎及/或尿失禁； (f)預防及/或治療糖尿病併發症，諸如血管病；神經病變，包含周邊神經病變；腎病；及/或視網膜病變； (g)改善脂質參數，諸如預防及/或治療血脂異常，降低總血清脂質；增加HDL；降低低密度LDL；降低VLDL；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人體中之脂蛋白a（Lp(a)）之血漿含量；抑制活體外及/或活體內載脂蛋白a（apo(a)）之產生； (h)預防及/或治療心血管疾病，諸如X症候群、動脈粥樣硬化、心肌梗塞、冠心病、再灌注損傷、中風、低氧症、大腦缺血、早期心臟疾病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動脈疾病、高血壓、原發性高血壓、急性高血壓急症、心肌病、心功能不全、運動不耐、急性及/或慢性心臟衰竭、心律不整、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟旁路及/或支架再閉塞、間歇性跛行（閉塞性動脈粥樣硬化）、舒張功能障礙及/或收縮功能障礙；及/或血壓降低，諸如收縮壓降低； (i)預防及/或治療胃腸疾病，諸如發炎性腸病、短腸症候群或克羅恩氏病（Crohn's disease）或結腸炎；消化不良及/或胃潰瘍；及/或炎症，諸如牛皮癬、牛皮癬性關節炎、類風濕性關節炎及/或全身性紅斑狼瘡； (j)預防及/或治療危重病，諸如治療危重病患者、危重病多發性腎病（CIPNP）患者及/或潛在CIPNP患者；預防危重病或CIPNP之發展；預防、治療及/或治癒患者之全身炎症反應症候群（SIRS）；預防或減小患者在住院治療期間罹患菌血症、敗血症及/或敗血性休克之可能性；及/或使患有急性病之重症監護病房患者之血糖、胰島素平衡及視情況存在之代謝穩定化； (k)預防及/或治療多囊性卵巢症候群（PCOS）； (l)預防及/或治療腦部疾病，諸如大腦缺血、大腦出血及/或創傷性腦損傷； (m)預防及/或治療睡眠呼吸暫停； (n)預防及/或治療濫用，諸如酒精濫用及/或藥物濫用； (o)預防或治療脂肪肝病況，包含但不限於脂肪肝病（FLD）、非酒精性脂肪肝病（NAFLD）及非酒精性脂肪變性肝炎（NASH）；及/或 (p)治療細胞內活性氧物種（ROS）之產生。

在其他態樣中，本文提供藉由向需要治療之患者投與有效量之肽來治療糖尿病及/或糖尿病相關併發症的方法。有利地，用於根據本文所提供之方法治療糖尿病及/或相關併發症的肽具有針對胰臟β細胞之抗細胞凋亡活性及/或刺激胰臟β細胞增殖，使得投與肽增加產生胰島素之β細胞的數量及由患者產生之胰島素的含量。

本揭露亦包含治療癌症之方法，該等方法包括向需要治療之個體投與有效量的肽或其類似物或變異體。本文所提供之肽發揮多種抗癌作用，且可用於治療眾多癌症及其他增生性病症。本文所提供之肽可具有多種抗癌活性，諸如但不限於誘導癌細胞之細胞凋亡、抑制腫瘤血管生成、抑制腫瘤轉移、調節細胞週期、抑制癌細胞增殖、促進癌細胞分化、抑制活性氧物種之產生及/或防止活性氧物種影響，及增強應激抗性。「癌症」一般係指以不受控制之異常細胞生長及增殖為特徵的疾病。「腫瘤」或「贅瘤」係由過量、不受控制及進行性細胞分裂引起之異常組織塊。本文所述之方法可用於治療任何類型之癌症及增生性病症，包含但不限於癌瘤、肉瘤、軟組織肉瘤、淋巴瘤、血液癌症、白血病、生殖細胞腫瘤及非實體腫瘤之癌症（例如造血系統癌症）。在各種實施例中，肽可用於治療源自及/或影響任何組織之癌症及/或腫瘤，包含但不限於肺、乳房、上皮、大腸、直腸、睪丸、膀胱、甲狀腺、膽囊、膽管、膽道、前列腺、結腸、胃、食道、胰臟、肝臟、腎臟、子宮、子宮頸、卵巢及腦組織。可用肽治療之特定癌症的非限制性實例包含但不限於急性淋巴母細胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨髓性白血病、腎上腺皮質癌、AIDS相關淋巴瘤、肛門癌、星形細胞瘤、腦基底細胞癌、膽管癌、肝外膀胱癌、膀胱癌、骨癌、骨肉瘤/惡性纖維組織細胞瘤、腦幹神經膠質瘤、腦瘤、腦幹神經膠質瘤、腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤、室管膜瘤、神經管母細胞瘤、幕上原始神經外胚層瘤、視路及下丘腦神經膠質瘤、乳癌、男性支氣管腺瘤/類癌、伯基特氏淋巴瘤（Burkitt's lymphoma）、類癌、胃腸原發灶不明癌中樞神經系統淋巴瘤、子宮頸癌、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性骨髓增生性病症、結腸癌、結腸直腸癌、皮膚T細胞淋巴瘤、蕈樣黴菌病及塞紮萊氏症候群（sezary syndrome）、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、尤文氏家族腫瘤（Ewing's family tumors）、生殖細胞腫瘤、肝外膽管癌、眼癌、眼內黑素瘤、視網膜母細胞瘤、膽囊癌、胃（gastric/stomach）癌症、胃腸類癌、妊娠期卵巢、滋養細胞腫瘤、神經膠質瘤、下丘腦皮膚癌（黑素瘤）、皮膚癌（非黑素瘤）、皮膚癌瘤、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、鱗狀細胞癌、隱匿性原發性鱗狀頸癌、轉移性胃癌、胃癌、t細胞淋巴瘤、睪丸癌、胸腺瘤、胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂移行細胞癌、輸尿管滋養細胞腫瘤、移行細胞癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉瘤、陰道癌、下丘腦神經膠質瘤、外陰癌、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症（Waldenstrom's macroglobulinemia）、威耳姆氏腫瘤（Wilms'tumor）、毛細胞白血病、頭頸癌、肝細胞（肝臟）癌症、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、胰島細胞癌（內分泌胰臟）、卡波西氏肉瘤（Kaposi's sarcoma）、腎（腎臟細胞）癌症、腎癌、喉癌、毛細胞唇及口腔癌、肝癌、肺癌、非小細胞肺癌、小細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、皮膚t細胞、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、瓦爾登斯特倫氏骨惡性纖維組織細胞瘤/骨肉瘤神經管母細胞瘤、眼內（眼睛）梅克爾細胞癌、間皮瘤、惡性間皮瘤、隱匿性原發性轉移性鱗狀頸癌多發性內分泌瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣黴菌病骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生疾病、骨髓性白血病、多發性骨髓增生病、慢性鼻腔及鼻竇癌症、鼻咽癌、胸膜肺母細胞瘤、骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤、嗜鉻細胞瘤、松果體母細胞瘤及幕上原始神經外胚層腫瘤。在一些較佳態樣中，癌症係乳癌。在一些較佳態樣中，癌症係前列腺癌。

在一些實施例中，根據本文所提供之方法投與肽增強確定之癌症療法的功效。在其他態樣中，根據本文所提供之方法投與肽增強另一種癌症療法，諸如放射或化學療法之抗癌活性。在一些態樣中，本文提供用於誘導癌細胞及/或腫瘤細胞之細胞死亡的方法，該等方法包括投與足以誘導癌細胞死亡及/或腫瘤細胞死亡之量的本文所描述之肽。

在一些實施例中，肽具有一或多種細胞保護性（cell protective）或細胞保護（cytoprotective）活性。舉例而言，在一些實施例中，肽能夠防止細胞損傷、改善細胞存活及/或增強對環境脅迫之抗性，諸如但不限於熱休克、血清剝奪、化學療法及/或放射。

在一些實施例中，根據本文所提供之方法投與肽降低確定之癌症療法的不利影響。

本文所揭露之方法包含神經保護，治療由病況、疾病或事件引起的與CNS組織或細胞中之任一種，且尤其是神經元、神經膠質細胞或內皮細胞的完整性及功能相關之病況，或治療其損傷，否則該病況、疾病或事件將導致對該等組織或細胞或對血腦屏障之完整性的損害。此類神經保護作用可用以防止、減少或治療由該病況、疾病或事件引起之損害，否則該損害將出現在該等組織或細胞中。該等方法包含治療創傷性脊髓受傷、創傷性腦損傷、多發性硬化症、周邊神經損傷及缺血性或出血性中風。

確切地說，該等肽可有效保護白血球免受抑制、保護生殖細胞免於經歷由化學治療劑誘導之細胞死亡及抑制由化學治療劑誘導的生育力降低或減退。

舉例而言，在一些態樣中，根據本文所提供之方法投與肽保護非癌細胞免受非特異性癌症療法，諸如放射或化學療法之不利影響。

在一些實施例中，本文所提供之肽針對周邊神經系統中之神經毒性，諸如但不限於與化學治療劑、放射線療法、抗感染劑及/或其他治療劑相關之神經毒性具有神經保護活性。舉例而言，本文所提供之肽可針對與長春花生物鹼、鉑類化合物、蘇拉明（suramin）、紫杉烷（taxanes）及/或其他化學治療劑相關之周邊神經毒性發揮神經保護活性。

在一些實施例中，該等肽針對疾病相關細胞及/或刺激物，諸如但不限於罹患糖尿病、腎病及/或癌症之個體的細胞展現細胞存活促進（例如抗細胞凋亡）活性。舉例而言，在一些態樣中，該等肽針對糖尿病個體及/或腫瘤細胞之胰臟β-細胞具有抗細胞凋亡活性。

有利地，根據本文所提供之方法投與肽針對神經退化性作用，包含例如由肌肉萎縮性側索硬化個體體內之SOD1突變體、突變APP、PS-1、PS-22或阿茲海默氏病個體體內之澱粉樣β（Aβ）肽及/或亨廷頓氏病個體體內之多麩醯胺酸重複突變誘導之細胞死亡提供保護作用。

在一些實施例中，本文所提供之肽針對疾病相關細胞，諸如但不限於糖尿病個體之胰臟β-細胞具有細胞生長刺激活性。

在一些實施例中，本文所提供之肽針對疾病相關細胞具有分化刺激活性。舉例而言，在一些態樣中，該等肽刺激胰島素誘導的糖尿病患者之脂肪細胞分化。

在一些實施例中，肽具有抗癌活性。舉例而言，在一些態樣中，肽針對癌細胞，諸如但不限於前列腺癌細胞及/或乳癌細胞具有促細胞凋亡活性。在其他態樣中，肽針對癌細胞，諸如但不限於前列腺癌細胞及/或乳癌細胞具有抗增殖活性。

更佳之醫學用途包含治療或預防退化性病症，特別是神經退化性病症，諸如阿茲海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、共濟失調（例如脊髓小腦失調）、甘乃迪氏病（Kennedy disease）、肌緊張性營養障礙、路易體性癡呆、多系統萎縮、肌肉萎縮性側索硬化、原發性側索硬化、脊髓性肌萎縮、朊病毒相關疾病（例如庫-賈二氏病（Creutzfeldt-Jacob disease））、多發性硬化症、毛細管擴張、巴藤氏病（Batten disease）、皮質基底核退化症、皮質基底核退化症、脊髓亞急性聯合變性、脊髓癆、泰-薩二氏病（Tay-Sachs disease）、中毒性腦病、嬰兒雷弗素姆氏病（infantile Refsum disease）、雷夫蘇姆氏病、神經性棘紅細胞增多症、尼曼-匹克二氏病（Niemann-Pick disease）、萊姆氏病、馬查多-約瑟夫二氏病（Machado-Joseph disease）、山多夫氏病（Sandhoff disease）、夏伊-德爾格二氏症候群（Shy-Drager syndrome）、刺蝟搖擺症候群（wobbly hedgehog syndrome）、蛋白質構象病、腦β-澱粉樣血管病、青光眼中之視網膜神經節細胞退化、突觸核蛋白病、τ蛋白病、額顳葉變性（FTLD）、癡呆、cadasil症候群、伴隨澱粉樣變性之遺傳性腦出血、亞歷山大氏病（Alexander disease）、Seipin蛋白病、家族性澱粉樣變性神經病變、老年型全身澱粉樣變性病、Seipin蛋白病、AL（輕鏈）澱粉樣變性病（原發性全身澱粉樣變性病）、AH（重鏈）澱粉樣變性病、AA（繼發性）澱粉樣變性病、主動脈內側澱粉樣變性病、ApoAI澱粉樣變性病、ApoAII澱粉樣變性病、ApoAIV澱粉樣變性病、芬蘭型家族性澱粉樣變性病（FAF）、溶菌酶澱粉樣變性病、纖維蛋白原澱粉樣變性病、透析澱粉樣變性病、包涵體肌炎/肌病、白內障、伴隨視紅紫質突變之色素性視網膜炎、甲狀腺髓樣癌、心臟心房澱粉樣變性病、垂體促乳素瘤、遺傳性格子狀角膜變性病、皮膚苔癬狀澱粉樣變性病、麥洛利氏小體（Mallory bodies）、角膜乳鐵傳遞蛋白澱粉樣變性病、肺泡蛋白沈積症、牙源性（平伯氏（Pindborg））澱粉樣腫瘤、囊腫性纖維化、鐮狀細胞病或重症肌病（CIM）。不受特定理論限制，咸信本文所提供之肽具有能夠修復及/或防止神經細胞及/或其他細胞類型之神經退化性損傷的一或多種活性。可根據本文所提供之方法治療的「神經退化性疾病」係例如由神經元細胞死亡（細胞凋亡）導致神經元退化及/或損失之進行性疾病。神經退化性疾病之實例包含但不限於腦退化性疾病（例如阿茲海默氏病（AD）、帕金森氏病、進行性核上麻痹及亨廷頓氏病（HD）），及脊柱退化疾病/運動神經元退化疾病（例如肌肉萎縮性側索硬化（ALS）、（SMA：韋-霍二氏病（Werdnig-Hoffmann disease）或庫-韋二氏症候群（Kugelberg-Welander syndrome））、脊髓小腦失調、延髓肌肉萎縮（BSMA；肯-奧-宋三氏症候群（Kennedy-Alter-Sung syndrome）））。「運動神經元退化疾病」係以控制體內運動之上下運動神經元之進行性逆行障礙為特徵的一種神經退化性疾病。在其他態樣中，肽及其組成物亦有效改善由運動神經元退化疾病引起之病況，諸如肌肉萎縮、肌肉無力、延髓麻痹（面部、咽部及舌之肌肉萎縮或無力，以及由此引起之失語或吞咽困難）、肌肉束化及呼吸道病症。

其他用途包含預防及治療與粒線體功能障礙相關之疾病或病況。粒線體對於代謝過程而言至關重要，涉及能量產生、計劃性細胞死亡及活性氧物種（ROS）產生。傳統上，粒線體被視為「終端功能」細胞器，接收並加工大量細胞信號以調控能量產生及細胞死亡。肽及其醫藥調配物可用於治療具有許多代謝影響之各種年齡相關疾病。其亦具有影響，亦在活體外及活體內以各種方式測試以影響粒線體呼吸、葡萄糖轉運、葡萄糖利用、糖酵解、胰島素調控及細胞增殖/存活。粒線體功能障礙與以下相關聯但不限於以下：代謝障礙、神經退化性疾病、慢性炎性疾病及衰老疾病。一些粒線體疾病係歸因於粒線體基因組中之突變或缺失。粒線體以比其宿主細胞更快之周轉率分裂及增殖，且其複製受核基因組之控制。若細胞中臨限比例之粒線體有缺陷，且若在組織內臨限比例之此類細胞具有有缺陷之粒線體，則可引起組織或器官功能障礙之症狀。實際上任何組織均可受影響，且取決於不同組織所累及之程度，可能存在多種症狀。除涉及遺傳缺陷粒線體之先天性病症之外，獲得性粒線體功能障礙引起疾病，尤其是與衰老相關之神經退化性病症，如帕金森氏病、阿茲海默氏病及亨廷頓氏病。粒線體DNA中體細胞突變之發生率隨年齡以指數方式上升；呼吸鏈減弱普遍出現在老年人中。粒線體功能障礙亦涉及興奮性毒性神經元損傷，諸如與癲癇發作或缺血相關之神經元損傷。與粒線體功能障礙相關之其他病症包含慢性炎性病症及代謝障礙。

細胞保護性肽具有延長細胞在培養物中之活力的潛在效用。肽可用於製造生物產品，包含蛋白質、抗體及類似物。本揭露大體上係關於用於調節細胞培養物之一或多個特性的肽及方法，該細胞培養物包含哺乳動物細胞培養物，諸如CHO細胞培養物或大腸桿菌細胞培養物。在一個實施例中，提供一種增加表現重組蛋白之哺乳動物細胞培養物之比產率的方法，該方法包括在培養基中產生哺乳動物細胞培養物；藉由使該細胞培養物與包括肽之培養基接觸來增加細胞生長活力；以及藉由使該培養物與包括肽之培養基接觸來維持該細胞培養物。

根據另一個實施例，肽係與其他已知之化學治療劑及/或抗炎劑共投與或共調配。

人類愛帕琳肽受體（APJ）及愛帕琳肽被視為針對包含心血管控制、水平衡、下丘腦-垂體-腎上腺（HP A）軸調控及代謝體內平衡在內之多種體內恆定擾動之生理反應的關鍵介體。已在許多病理狀態或疾病過程，諸如心臟病、動脈粥樣硬化、腫瘤血管生成、腦缺血損傷及糖尿病中偵測到愛帕琳肽之含量升高。愛帕琳肽激導性系統牽涉到腫瘤血管新生。愛帕琳肽促效劑可由於血管再生及內皮增殖以及血管直徑調控而在局部缺血恢復中具有治療作用。其亦與敗血症相關損傷腦缺血事件、凝血酶相關聚集及UVB放射恢復相關。參見Tian等人, 《神經病學前沿（Fronteirs in Neurology）》, 11:75(2020)；Sawane等人, AJP, 179(6), 2691-2697(2011)；Luo等人, 《國際分子醫學雜誌（Int.J of Molecular Med.）》 , 42, 1161-1167(2018)；以及Adam等人, 《血液（Blood）》, 127, (7)908-920, 2016年2月。

APJ位於涉及應激反應之關鍵區域的下丘腦pPVN及垂體前葉中。含VP及含CRH之下丘腦核中APJ及愛帕琳肽之存在對於HPA軸針對應激之反應至關重要，表明愛帕琳肽/APJ在神經腺垂體激素釋放中之作用。

愛帕琳肽及APJ係針對多種體內恆定擾動的中樞及周邊反應的調控因子，該多種體內恆定擾動諸如心臟血管控制及功能；血管生成；流體之體內恆定；水平衡；下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸調控；代謝體內恆定；能量代謝；以及腎功能。APJ-愛帕琳肽信號傳導在維持肺血管體內恆定方面起到作用（參見例如Kim，前述）。亦有證據指出愛帕琳肽激導性系統（例如愛帕琳及APJ受體）與諸如敗血症、敗血性休克及腎衰竭之類病況之治療之間的關係（參見例如Coquerel, D.等人, 《重症護理（Critical Care）》2018, 22: 10）。作為另一個實例，合成及由脂肪細胞分泌之愛帕琳肽已描述為有益的脂肪細胞素（adipokine）。因此，式I-II之肽有效作為肺高血壓（例如PAH）；心臟衰竭；II型糖尿病；腎衰竭；敗血症；以及全身性高血壓之治療。

本發明係基於發現愛帕琳肽受體（APJ）之一系列強效促效劑。在其他態樣中，本發明之肽被用於治療愛帕琳肽介導之疾病或病症。在其他態樣中，本發明之肽被用於治療包含心臟衰竭、慢性腎病、高血壓及代謝障礙在內之疾病。

本發明之一態樣係一種預防或治療個體的愛帕琳肽介導之疾病或病症的方法，該方法包括向該個體投與本文所列之肽，因此本文亦提供預防或治療該疾病或病症。

在其他態樣中，該疾病或病症係由CNS依賴性或非CNS依賴性流體體內恆定擾亂、急性或慢性腎衰竭、高血壓、肺高血壓、門靜脈高血壓或收縮期高血壓引起。

在其他態樣中，該疾病或病症係血管疾病或病症、血管滲透性、無功能血管、血管肥大、血管重塑、血管僵硬、動脈粥樣硬化、周邊動脈阻塞性疾病（PAOD）、再狹窄、血栓形成、血管滲透性病症、局部缺血、再灌注損傷、心臟、腎或視網膜缺血或再灌注損傷，或其組合。

在某些態樣中，該疾病或病症係血栓形成或凝血酶介導之血小板凝集。本發明之愛帕琳肽促效劑可用於維持止血及血小板功能之調控。該等促效劑可抑制凝血酶介導及膠原蛋白介導之血小板活化。本發明之肽係抗聚集劑及抗血栓劑。本發明之肽可用於預防血小板凝集及凝血酶介導之事件。

在某些態樣中，該疾病或病症係心血管疾病或病症、冠心病、中風、心臟衰竭、收縮性心臟衰竭、舒張性心臟衰竭、糖尿病性心臟衰竭、射血分數正常型心臟衰竭、心肌症、心肌梗塞、左心室功能障礙、心肌梗塞後之左心室功能障礙、心臟肥大、心肌重塑、梗塞後心肌重塑、或心臟手術後心肌重塑、或心臟瓣膜病。

在其他態樣中，該疾病或病症係代謝疾病或病症、代謝症候群、胰島素抵抗、糖尿病、糖尿病晚期併發症、糖尿病性大血管及微血管病變、糖尿病性腎病變、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性神經病或心臟自主神經病變。

在其他態樣中，本發明包含一種治療及/或預防選自以下之疾病或病症的方法：高血壓、內皮細胞功能不良、心血管組織損傷、心臟衰竭、冠心病、缺血性及/或出血性中風、大血管疾病、微血管疾病、糖尿病性心臟（包含糖尿病性心肌病及心臟衰竭作為糖尿病併發症）冠心病、周邊動脈疾病、周邊動脈阻塞性疾病、子癇前症、頑固性高血壓、難治性高血壓、高血壓危象、血液或胎兒-胎盤循環、水腫病、肺功能障礙、急性肺損傷（ALI）、急性呼吸窘迫症候群（ARDS）、外傷及/或燒傷、及/或呼吸機誘發之肺損傷（VI LI）、肺纖維化、高山病、慢性腎病、急性腎臟損傷、淋巴水腫、淋巴管再生、發炎性腸病、發炎性疾病或與血管功能紊亂相關之眼部病症、局部傷口、偏頭痛、血管生成、軟骨退變、骨關節炎及癌症。

在其他態樣中，APJ促效劑減少血管外肺水累積、毛細管-肺泡滲漏及低血氧症。在其他態樣中，APJ促效劑用作針對多種體內恆定擾動之中樞及周邊反應的關鍵調控劑。在其他態樣中，APJ促效劑調控血管生成、流體之體內恆定或能量代謝。在其他態樣中，APJ促效劑用作FIPA軸針對應激之反應的神經內分泌調節劑。在其他態樣中，APJ促效劑有利於心血管功能。

如本文所使用，術語「愛帕琳肽介導之疾病或病症」包含愛帕琳肽介導的任何疾病或病症。愛帕琳肽介導之疾病或病症的實例包含但不限於心血管疾病或病症，冠心病、中風、心臟衰竭、收縮性心臟衰竭、舒張性心臟衰竭、糖尿病性心臟衰竭、射血分數正常型心臟衰竭、心肌病、心肌梗塞、左心室功能障礙、心肌梗塞後左心室功能障礙、心臟肥大、心肌重塑、梗塞後心肌重塑、心臟手術後心肌重塑、心臟瓣膜病；代謝疾病或病症，代謝症候群、胰島素抵抗、糖尿病、糖尿病晚期併發症、糖尿病性大血管及微血管病變、糖尿病性腎病變、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性神經病或心臟自主神經病變；疾病或病症係由CNS依賴性或非CNS依賴性流體體內平衡擾亂、急性或慢性腎衰竭、高血壓、肺高血壓、門靜脈高血壓、收縮期高血壓引起；血管疾病或病症、血管滲透性、無功能血管、血管肥大、血管重塑、血管僵硬、動脈粥樣硬化、周邊動脈阻塞性疾病（PAOD）、再狹窄、血栓形成、血管滲透性病症、局部缺血、再灌注損傷、心臟、腎或視網膜缺血或再灌注損傷，或其組合。

在一個態樣中，揭露一種治療，其可降低患有致病性感染之個體體內細胞介素風暴之發生率，無論細胞介素係由病原體本身誘導抑或由細胞激活且隨後細菌感染誘導。

本發明之肽可用於治療及/或預防人類或其他動物之細菌感染，該治療及/或預防係藉由向有需要之個體投與治療有效量的式I-II之肽或醫藥學上可接受之鹽或其。本發明之肽及方法特別適用於感染病原體之人類患者，該等病原體包含金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大腸桿菌（Escherichia coli）、肺炎克雷伯氏桿菌（Klebsiella pneumoniae）、鮑氏不動桿菌（Acinetobacter baumannii）及綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa）。

細菌感染之實例可包含但不限於上呼吸道感染、下呼吸道感染、耳部感染、胸膜肺及支氣管感染、複雜性尿道感染、非複雜性尿道感染、腹內感染、心血管感染、血流感染、敗血症、菌血症、CNS感染、皮膚及軟組織感染、GI感染、骨骼及關節感染、生殖器感染、眼部感染或肉芽腫性感染。特定細菌感染的例子包括但不限於簡單的皮膚和皮膚結構感染（uSSSI），複雜的皮膚和皮膚結構感染（cSSSI），導管感染，咽炎，鼻竇炎，外耳道炎，中耳炎，支氣管炎，膿胸，肺炎，社區獲得性細菌性肺炎（CABP），醫院獲得性肺炎（HAP），醫院獲得性細菌性肺炎，呼吸機相關性肺炎（VAP），糖尿病足感染，耐萬古黴素的腸球菌感染，膀胱炎和腎盂腎炎，腎結石，前列腺炎，腹膜炎，複雜的腹腔內感染（cIAI）和其他腹間感染，透析相關的腹膜炎，內臟膿腫，心內膜炎，心肌炎，心包炎，輸血相關敗血症腦膜炎，腦炎，腦膿腫，骨髓炎，關節炎，生殖器潰瘍，尿道炎，陰道炎，宮頸炎，牙齦炎，結膜炎，角膜炎，眼內膜炎，囊性纖維化患者感染或發熱性中性粒細胞減少症患者感染。

在一個態樣中，本文揭露一種治療、預防、抑制有需要個體之敗血症、降低其發生率、改善或緩解敗血症或其任何組合的方法，該方法包括向該個體投與包括早期凋亡細胞群體之組成物的步驟，其中該投與治療、預防、抑制該個體之敗血症、降低其發生率、改善或緩解敗血症。

在一個相關態樣中，該敗血症包括輕度或重度敗血症。在一些實施例中，敗血症之來源包括肺炎、血管內抗甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRS A）感染、敗血症誘發之心肌病或泌尿道感染（UTI）。

在另一個相關態樣中，該方法使該個體之存活期增加。在另一個相關態樣中，經該方法治療之個體的器官衰竭或器官功能障礙、或器官受損或其組合的發生率降低。在另一個相關態樣中，該器官衰竭包括急性多器官衰竭。

本發明係關於使用式I-II之肽作為藥劑以治療及預防放射及/或化學療法相關損傷及/或疾患，諸如骨髓抑制及巨噬細胞活性降低的方法。本發明係關於使用式I-II之肽作為放射防護劑之方法。該等肽亦可用於治療由UVB照射引起之皮膚損傷。

本領域中熟習此項技術者可容易地確定肽是否具有生物活性。舉例而言，可藉由評估由毛喉素、ERK磷酸化及朝向愛帕琳肽受體內化誘導的cAMP產生抑制來確定活化愛帕琳肽/愛帕琳肽受體路徑之能力（例如，如實例中所描述）。愛帕琳肽類似物針對APJ之促效性活性可藉由此項技術中任何熟知之方法確定。舉例而言，由於本發明之肽可促進愛帕琳肽受體之功能，故可在競爭性結合測試及與生物活性相關之測試中藉由使用APJ之天然促效劑愛帕琳肽篩選該促效劑。

因此，熟習此項技術者應瞭解，基於本文提供之揭露內容，根據治療技術中熟知之方法調整劑量及給藥方案。亦即，可容易確定最大耐受劑量，且亦可確定向個體提供可偵測之治療益處的有效量，亦可確定投與各藥劑以向個體提供可偵測之治療益處的時間要求。因此，儘管本文中例示某些劑量及投藥方案，但此等實例決不限制在實踐本揭露時可向個體提供之劑量及投藥方案。

應注意，劑量值可隨待改善之病況的類型及嚴重程度而變化，且可包含單次或多次劑量。應進一步瞭解，對於任何特定個體而言，特定劑量方案應根據個體需要及投與組成物或監督組成物投與之人員的專業判斷而隨時間調整，且本文所闡述之劑量範圍僅為示例性的且不意欲限制所主張之組成物的範圍或實踐。此外，具有本揭露之組成物的劑量方案可基於多種因素，包含疾病類型；個體之年齡、體重、性別、醫學病況；病況之嚴重程度；投與途徑；及所採用之特定肽。因此，劑量方案可變化極大，但可使用標準方法常規地確定。舉例而言，可基於藥物動力學或藥效學參數來調整劑量，該等參數可包含臨床效果，諸如毒性效果及/或實驗室值。因此，本揭露涵蓋熟練技術人員所確定之個體內劑量遞增。確定適當劑量及方案係相關技術中熟知的且一旦提供本文所揭露之教示，熟習此項技術者應理解為涵蓋在內。

本揭露之肽的劑量亦將由可能伴隨投與本揭露之特定肽的任何不良副作用的存在、性質及程度來確定。典型地，主治醫師將考慮多種因素，諸如年齡、體重、一般健康狀況、飲食、性別、待投與的本揭露之肽、投與途徑及所治療病況之嚴重程度，來決定用於治療每一個別患者的本揭露之肽的劑量。舉例而言且不意欲作為限制，本揭露之肽的劑量可為約0.0001至約100毫克/公斤經治療個體之體重/天、約0.001至約10毫克/公斤體重/天，或約0.01毫克至約1毫克/公斤體重/天。肽可分一或多次劑量投與，諸如分1至3次劑量投與。

在一些實施例中，該醫藥組成物包括適於投與患者之純度水準的本文所揭露之類似物中的任一種。在一些實施例中，該類似物具有至少約90%、較佳地高於約95%、更佳地高於約99%的純度水準，及醫藥學上可接受之稀釋劑、運載體或賦形劑。

該等醫藥組成物可經調配以達到生理上相容之pH值。在一些實施例中，取決於調配物及投與途徑，該醫藥組成物之pH值可為至少5、或至少6、或至少7。

在各種實施例中，取決於個體需要且耐受之劑量及頻率，投與醫藥組成物之單次或多次投藥。在任何情況下，該組成物應提供足夠量的至少一種本文所揭露之肽以有效治療個體。劑量可投與一次，但可定期施用，直至達到治療結果或直至副作用需要中止療法。

投與肽醫藥組成物之給藥頻率取決於療法性質及所治療之特定疾病。肽之投與可為每天一次、兩次、三次或四次。用治療有效量之肽治療個體可包含單一治療，或較佳地，可包含一系列治療。在一個較佳實例中，每天、每週一次或每兩週一次用肽治療個體。

已描述肽及其用途，以下實例係藉助於說明提供且並非限制。實例實例 1- 合成

除非另外具體說明，否則肽係藉由與下文所述類似之方法，在適合樹脂上使用t-Boc或Fmoc化學或其他完善的技術，經由固相合成製備（參見例如：Stewart及Young, 《固相肽合成（Solid Phase Peptide Synthesis）》, Pierce Chemical Co., 伊利諾伊州羅克福德（Rockford, III.）, 1984；E.Atherton及R.C.Sheppard, 《固相肽合成實用方法（Solid Phase Peptide Synthesis.A Practical Approach）》, Oxford-IRL Press, 紐約（New York）, 1989；Greene及Wuts, 「有機合成中之保護基（Protective Groups in Organic Synthesis）」, John Wiley & Sons, 1999；Florencio Zaragoza Dorwald, 「固相有機合成（Organic Synthesis on solid Phase）」, Wiley-VCH Verlag GmbH, 2000；及「Fmoc固相肽合成（Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis）」, W.C.Chan及P.D.White編輯, Oxford University Press, 2000）。

固相合成係藉由將N末端保護之胺基酸及其羧基末端附接至帶有可裂解連接子之惰性固體載體起始。該固體載體可為允許偶合初始胺基酸之任何聚合物，例如Pam樹脂、三苯甲基樹脂、氯三苯甲基樹脂、Wang樹脂或Rink樹脂，其中羧基（或對於Rink樹脂而言為羧醯胺）與樹脂之鍵聯對酸敏感（當使用Fmoc策略時）。聚合物載體在肽合成期間用於使α-胺基脫除保護基之條件下穩定。在第一個胺基酸偶合至固體載體之後，移除此胺基酸之α-胺基保護基。接著，使用適當醯胺偶合劑，使其餘經保護之胺基酸按肽序列表示之次序先後偶合，該等偶合劑例如BOP（苯并三唑-l-基-氧基-參-(二甲基胺基)-鏻）、HBTU（2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基-脲鎓）、HATU（O-(7-氮雜苯并三唑-1-基-氧基-參-(二甲基胺基)-鏻）或DIC（Ν,Ν'-二異丙基碳化二亞胺）/HOBt（1-羥基苯并三唑），其中BOP、HBTU及HATU用於三級胺鹼。或者，釋放之N末端可用除胺基酸外之基團，例如羧酸等官能化。通常，胺基酸之反應性側鏈基團用適合封閉基團保護。在組裝好所希望之肽之後，移除此等保護基。保護基移除與在相同條件下所需產物自樹脂之裂解同時進行。保護基及引入保護基之程序可見於《有機合成中之保護基》, 第3版, Greene, T.W.及Wuts, P.G.M., Wiley & Sons(紐約:1999）。在一些情況下，可能希望具有能選擇性移除之側鏈保護基，而其他側鏈保護基保持完整。在此情況下，釋放之官能基可選擇性官能化。舉例而言，離胺酸可用ivDde保護基保護（S.R.Chhabra等人, 《四面體通訊（Tetrahedron Lett.）》39, (1998), 1603），該保護基對親核性極強的鹼，例如含4%肼之DMF（二甲基甲醯胺）不穩定。因此，若N末端胺基及所有側鏈官能基用酸不穩定性保護基保護，則可使用含4%肼之DMF選擇性移除ivDde（[1-(4,4-二甲基-2,6-二側氧基亞環己-1-基)-3-甲基丁基）基團且接著，可例如藉由醯化對相應游離胺基進一步修飾。離胺酸可替代地與經保護之胺基酸偶合且接著，可使此胺基酸之胺基脫除保護基，產生另一個游離胺基，該胺基可經醯化或附接至其他胺基酸。最後，使肽自樹脂裂解。此可藉由使用HF或King混合液實現（D.S. King, C.G.Fields, G.B.Fields, 《國際肽與蛋白質研究雜誌（Int.J.Peptide Protein Res.）》36, 1990, 255-266）。必要時，接著可藉由層析法，例如製備型RP-HPLC純化原材料。

包含非天然胺基酸及/或共價附接之N末端單肽或二肽模擬物之肽、類似物或衍生物可如實驗部分中所描述來製造。或參見例如Hodgson等人: 「含有非天然胺基酸之肽及蛋白質的合成（The synthesis of peptides and proteins containing non-natural amino acids）」, 及《化學會評論（Chemical Society Reviews）》, 第33卷, 第7期 (2004), 第422-430頁。

除非另外具體說明，否則該等肽係根據以下提及之肽合成方法製備且表1中呈現之序列可按與以下提及之合成方法類似的方法製備。

一種肽合成方法係在基於微波之Liberty肽合成器（北卡羅萊納州（North Carolina）之CEM公司）上，藉由Fmoc化學反應進行。樹脂係具有約0.25 mmol/g裝載量的Tentagel S RAM、或具有約0.43 mmol/g裝載量之PAL-ChemMatrix、或具有0.5-0.75 mmol/g裝載量之PAL AM基質。偶合化學試劑係使用0.3 M且6-8倍莫耳過量之胺基酸溶液的含DIC/HOAt或DIC/Oxyma之NMP或DMF。偶合條件係在至多70℃下保持5分鐘。脫除保護基係在至多70℃下用含10%哌啶之NMP進行。使用的經保護胺基酸係標準Fmoc-胺基酸（由例如Anaspec或Novabiochem或Protein Technologies供應）。

另一種肽合成方法係在Prelude肽合成器（亞利桑那州（Arizona）之Protein Technologies）上，藉由Fmoc化學反應進行。樹脂係具有約0.25 mmol/g裝載量的Tentagel S RAM、或具有約0.43 mmol/g裝載量之PAL-ChemMatrix、或具有0.5-0.75 mmol/g裝載量之PAL AM。偶合化學試劑係使用0.3 M且6-8倍莫耳過量之胺基酸溶液的含DIC/HOAt或DIC/Oxyma之NMP或DMF。偶合條件係在室溫下單次偶合或雙重偶合1或2小時。脫除保護基係用含20%哌啶之NMP進行。使用的經保護胺基酸係標準Fmoc-胺基酸（由例如Anaspec或Novabiochem或Protein Technologies供應）。粗肽經歷純化，諸如藉由半製備型HPLC，在裝填5 um或7 um C-18二氧化矽之20 mm × 250 mm管柱上純化。將肽溶液泵送至HPLC管柱上並將沈澱之肽溶解於5 ml 50%乙酸水溶液中且用H₂ O稀釋至20 ml，並將其注射於管柱上，接著在40℃下，用40-60% CH₃ CN/0.1% TFA梯度以10 ml/min溶離50分鐘。收集含有肽之溶離份。在用水稀釋溶離液之後，將經純化之肽凍乾。

除非另外具體說明，否則本文所描述的具有C末端醯胺之所有肽係藉由與下文所描述類似之方法製備。在肽合成期間使用MBHA樹脂（4-甲基苯甲基羥胺聚苯乙烯樹脂。MBHA樹脂，100-180目，1% DVB交聯聚苯乙烯；裝載量0.7-1.0 mmol/g）、經Boc保護及經Fmoc保護之胺基酸可購自Midwest Biotech。在Applied Biosystem 430A肽合成器上，使用經Boc保護之胺基酸執行固相肽合成。使用Applied Biosystems 433型肽合成器執行經Fmoc保護之胺基酸合成。

在Applied Biosystem 430A型肽合成器上執行肽合成。藉由向含有2 mmol經Boc保護之胺基酸的濾筒中依序添加胺基酸來構築合成肽。確切地說，合成係使用Boc DEPBT活化之單次偶合來進行。在偶合步驟結束時，用TFA處理肽基-樹脂以移除N末端Boc保護基。將其用DMF反覆洗滌且重複此重複循環達到所需數目之偶合步驟。組裝之後，藉由20%哌啶處理移除側鏈保護Fmoc且使用DIC進行醯化。在整個合成結束時，藉由使用DCM乾燥肽基-樹脂，且藉由無水HF使肽自樹脂裂解。用無水HF處理肽基-樹脂，且由此典型地得到約350 mg（約50%產率）粗製經脫除保護基之肽。確切地說，將肽基-樹脂（30 mg至200 mg）放入氟化氫（HF）反應容器中進行裂解。將500 μL對甲酚添加至容器中作為碳鎓離子清除劑。將該容器附接至HF系統並浸入甲醇/乾冰混合物中。用真空泵排空容器並將10 ml HF蒸餾至反應容器中。在0℃下，將此肽基-樹脂與HF之反應混合物攪拌一小時，之後建立真空並快速排空HF（10-15分鐘）。小心地移出容器並填充約35 ml乙醚以使肽沈澱且萃取對甲酚及由HF處理得到的小分子有機保護基。利用鐵氟龍（Teflon）過濾器過濾此混合物並重複兩次以移除所有過量的甲酚。將此濾液丟棄。將沈澱之肽溶解於約20 ml之10%乙酸（水溶液）中。收集此含有所需肽之濾液，並凍乾。實例 2- 半胱天冬酶 3/7 活性

可使用半胱天冬酶-3分析法評估肽對細胞死亡/存活之影響。用DMSO溶解肽得到10 mM儲備液。使用星形孢菌素作為半胱天冬酶誘導之高效陽性對照。用DMSO溶解星形孢菌素（Selleckchem）得到1 mM儲備液。半胱天冬酶-Glo 3/7分析試劑係購自Promega（威斯康星州麥迪遜（Madison, WI））。MDA-MB-231人乳癌細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯（Manassas, VA））。使MDA-MB-231細胞在補充有10% FBS之DMEM培養基中生長。將100 µg/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素添加至培養基中。培養物在37℃下維持於含5% CO₂ 及95%空氣之潮濕氛圍中。在37℃下，一式兩份，將MDA-MB-231細胞與10 µM測試肽一起在含5% CO2及95%空氣之潮濕氛圍中培育18小時。將25 µl半胱天冬酶-Glo 3/7分析試劑添加至各孔中並在37℃、5% CO2下培育1小時。藉由Envision 2104多標記讀取器（加利福尼亞州聖克拉拉（Santa Clara, CA）之PerkinElmer）量測盤上各樣品孔之發光。活性係相對於DMSO對照計算。DMSO對照之相對標準差係1%。星形孢菌素（0.05 nM）處理之半胱天冬酶活性係背景校正之DMSO對照值的130%。結果報告於表4中。表 4. MDA-MB-231 細胞中之半胱天冬酶 3/7 活性

SEQ ID NO:	對照活性之百分比
2	62
DMSO對照	100

實例 3- 細胞活力

用DMSO溶解肽及參考化合物星形孢菌素（Selleckchem）得到10 mM儲備液。CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent（MTS分析試劑）係購自Promega（威斯康星州麥迪遜）。MCF-7人乳癌細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使MCF-7細胞在補充有10% FBS及0.01 mg/ml人類重組胰島素之EMEM培養基中生長。將100 µg/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素添加至培養基中。在37℃下，將細胞與10 µM測試肽一起在含5% CO2及95%空氣之潮濕氛圍中培育72小時。將5 µl之CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent（MTS分析試劑）添加至各孔中並在37℃、5% CO2下培育5小時。藉由Envision 2104多標記讀取器記錄在492 nm下之吸光度。單獨DMSO處理用作細胞活力活性對照。DMSO對照之相對標準差係3%。使用星形孢菌素作為降低細胞活力之高效陽性對照。星形孢菌素（10 µM）處理之細胞活力係背景校正之DMSO對照值的＜5%。結果報告於表5中。表 5. MCF-7 細胞中之 MTS 分析

SEQ ID NO:	對照活性之百分比
2	67
DMSO對照	100

實例 4.- 經培養之小鼠脂肪細胞中的游離脂肪酸含量

將小鼠3T3-L1脂肪細胞以每孔3,000個細胞接種於96孔盤中的前脂肪細胞培養基（北卡羅來納州特勒姆（Durham, NC）之Zen-Bio）中並使其在37℃下於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中生長至匯合。在匯合之後兩天，將細胞放入脂肪細胞分化培養基（北卡羅來納州特勒姆之Zen-Bio）中並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再培養三天。接著，將該培養基更換為脂肪細胞維持培養基（Zen-Bio）並在37℃下，將細胞在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再維持9-12天，且每隔一天更換部分培養基。在12-15天分化之後，添加25 µM最終濃度之測試肽並在脂肪細胞維持培養基中培育20-22小時。20-22小時之後，將異丙基腎上腺素（1 nM）添加至除未處理對照外的所有孔中並補充測試肽。在分析緩衝液（Zen-Bio）中再培育細胞3小時。根據製造商說明書，使用盤讀取器（540 nm），使用游離脂肪酸分析套組（Zen-Bio）確定培養基中游離脂肪酸之濃度。針對未處理之背景校正吸光度值，並相對於異丙基腎上腺素處理之細胞表示。單獨異丙基腎上腺素（1 nM）處理用作游離脂肪酸含量刺激對照。異丙基腎上腺素對照之相對標準差＜10%。胰島素用作降低脂肪酸含量之高效陽性對照。胰島素（100 nM）處理之游離脂肪酸含量係異丙基腎上腺素對照值之＜5%。結果報告於表6中。表 6 以異丙基腎上腺素對照百分比表示的3T3-L1脂肪細胞中之游離脂肪酸含量SEQ ID NO: 對照值之百分比 3 89 2 97 4 100 5 115實例 5.- MDA-MB-231 細胞中之細胞活力

用DMSO溶解測試化合物及參考化合物星形孢菌素（Selleckchem）得到10 mM儲備液。CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent（MTS分析試劑）係購自Promega（威斯康星州麥迪遜）。MDA-MB-231人乳癌細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使MDA-MB-231細胞在補充有10% FBS及0.01 mg/ml人類重組胰島素之EMEM培養基中生長。將100 µg/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素添加至培養基中。在37℃下，將細胞與測試化合物一起在含5% CO2及95%空氣之潮濕氛圍中培育72小時。將5 µl之CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent（MTS分析試劑）添加至各孔中並在37℃、5% CO2下培育5小時。藉由Envision 2104多標記讀取器記錄在492 nm下之吸光度。活性係相對於DMSO對照計算。單獨DMSO處理用作細胞活力活性對照。DMSO對照之相對標準差係3%。使用星形孢菌素作為降低細胞活力之高效陽性對照。細胞活力係針對星形孢菌素（10 µM）之DMSO對照值的3%。結果報告於表7中。表 7 MDA-MB-231 細胞中之 MTS 分析 SEQ ID NO: 對照活性之百分比 2 79 DMSO對照 100實例 6 - 對飲食誘發肥胖（ DIO ）之小鼠中代謝參數的影響

DIO小鼠研究係藉由此項技術中熟知之方法進行。使C57BL/6小鼠維持高脂肪飲食6至48週以發展飲食誘發之肥胖症。基於血糖含量及/或體重將動物隨機分入治療組。每天一次或每天兩次藉由腹膜內或皮下注射投與本發明之肽或媒劑對照，持續5至21天。監測體重、血糖含量及食物攝入量。藉由腹膜內投與葡萄糖（1至3 g/kg），隨後量測2小時血糖含量來評估葡萄糖耐量。當與用媒劑對照治療之動物相比較時，投與本發明之肽引起選自以下之一或多種作用：較高的體重減輕、較大程度之血糖降低及改善之葡萄糖耐量。實例 7 - 小鼠異種移植模型

小鼠異種移植模型係藉由此項技術中熟知之方法製備。舉例而言，對SCID小鼠注射人類腫瘤細胞（例如MCF-7、MDA-MB-231、PC-3或類似物）並監測腫瘤生長。當腫瘤達到足夠大小時，將動物隨機分入治療組並每天、每隔一天或每週給與本發明之肽、媒劑對照、陽性對照（例如吉西他濱（gemcitabine）或太平洋紫杉醇（paclitaxel））或本發明之肽+陽性對照之組合。在14至28天內監測腫瘤生長、體重及存活率。當與用媒劑對照治療之動物相比較時，投與單獨本發明之肽及/或其與陽性對照之組合使腫瘤生長減少及/或使存活期延長。實例 8 - 保護細胞免受細胞毒性傷害

藉由此項技術中熟知之方法培養細胞（例如嚙齒動物腦細胞、嚙齒動物或人類神經源性細胞株及類似細胞之初代培養物）。用本發明之肽、媒劑對照或陽性對照處理細胞，並使細胞暴露於細胞毒性條件，例如添加麩胺酸、移除血清、產生活性氧物種、添加β-澱粉樣蛋白、暴露於細胞毒性劑（例如MPTP、星形孢菌素、寡黴素等）、暴露於化學治療劑（例如順鉑（cisplatin）等）及類似條件。藉由此項技術中熟知之方法（例如量測細胞提取物中之乳酸脫氫酶（LDH）活性；量測細胞內ATP、MTT（3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑鎓溴化物）分析；MTS（3(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2(4-磺基苯基)-2H-四唑鎓）分析；錐蟲藍染色；鈣黃綠素染色等）量測細胞存活率。當與用媒劑對照處理之細胞相比較時，在暴露於細胞毒性條件之前及/或期間用本發明之肽處理細胞使得細胞存活率增加。實例 9 - 活性氧物種之含量

可使用針對暴露於適合氧化應激之培養細胞中之ROS的分析來評估肽對由氧化應激誘導之活性氧物種（ROS）之細胞含量的保護或協同作用。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液並在H2O中稀釋至1 mM，且以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）添加。使用第三丁基過氧化氫（TBHP）作為ROS之高效誘導劑。使用的TBHP係100 µM之最終濃度。使用5 mM最終濃度之麩胱甘肽乙酯（GEE）或10 µM最終濃度之蘿蔔硫素作為針對TBHP誘導之ROS產生的保護性對照。C2C12小鼠肌肉肌母細胞之細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使C2C12細胞在補充有10% FBS以及100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之DMEM中生長。在37℃下，將培養物維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中。將C2C12細胞以每孔7,500個細胞接種於96孔盤上。接種後兩天，將細胞與0.1% DMSO中10 µM之測試肽或10 µM之蘿蔔硫素一起培育，且在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中維持18-20小時。培育18-20小時之後，向細胞裝載DCFDA，保持45分鐘。接著，將100 µM之TBHP及5 mM之GEE添加至適當孔中，保持1小時。根據製造商說明書，使用DCFDA細胞ROS偵測分析套組（馬薩諸塞州劍橋（Cambridge, MA）之Abcam）確定ROS活性。使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基（Winooski, VT）之BioTek），在Ex/Em=485/535nm下量測該盤上各樣品孔中的螢光度。活性係相對於TBHP對照計算。投與單獨本發明之肽及/或其與陽性對照之組合使得C2C12細胞中由TBHP誘導之細胞ROS含量相較於媒劑對照處理之細胞增加或減少。實例 10 - 在飲食誘發肥胖（ DIO ）之小鼠中的影響

DIO小鼠研究係藉由此項技術中熟知之方法進行。使C57BL/6小鼠維持高脂肪飲食6至48週以發展飲食誘發之肥胖症。基於血糖含量及/或體重將動物隨機分入治療組。每天一次或每天兩次藉由腹膜內或皮下注射投與本發明之肽或媒劑對照，持續5至21天。監測體重、血糖含量及食物攝入量。藉由腹膜內投與葡萄糖（1至3 g/kg），隨後量測2小時血糖含量來評估葡萄糖耐量。當與用媒劑對照治療之動物相比較時，投與本發明之肽引起選自以下之一或多種作用：較高的體重減輕、較大程度之血糖降低及改善之葡萄糖耐量。實例 11.- 半胱天冬酶 3/7 活性

可使用半胱天冬酶-3/7分析評估肽對培養細胞，諸如小鼠肌母細胞中細胞死亡/存活率之影響。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，在H2O中將其稀釋至1 mM，並以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）使用。使用星形孢菌素作為半胱天冬酶誘導之高效陽性對照。將星形孢菌素（馬薩諸塞州劍橋之Abcam）溶解於DMSO中得到10 mM儲備溶液。半胱天冬酶-Glo 3/7分析試劑係購自Promega（威斯康星州麥迪遜）。C2C12細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使C2C12細胞在補充有20% FBS以及100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之DMEM中生長。在37℃下，將培養物維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中。將C2C12細胞以每孔4,000個細胞接種於96孔盤上。次日，使用0.1% DMSO最終濃度，將細胞與10 µM測試肽或濃度在100 nM與5 nM之間之星形孢菌素一起培育，並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中維持24小時。根據製造商說明書，使用半胱天冬酶-Glo 3/7分析套組確定半胱天冬酶3/7活性。使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測該盤上各樣品孔之發光。活性係相對於0.1% DMSO對照計算。DMSO對照之相對標準差＜10%。星形孢菌素（100 nM）處理之半胱天冬酶3/7活性係背景校正之DMSO對照值的670%。結果報告於表8中。表 8 C2C12 細胞中之半胱天冬酶 3/7 活性 SEQ ID NO: 對照活性之百分比 7 109.4 8 97.6 9 107.9 10 96.6 11 99.1 12 105.1 13 99.0 14 100.1 15 101.6 16 93.1 17 92.0 18 93.8 19 100.1實例 12.- 經培養之小鼠脂肪細胞中的游離脂肪酸含量

可使用針對培養細胞，諸如小鼠脂肪細胞中游離脂肪酸含量之分析來評估肽對脂肪酸代謝之影響。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，在H2O中將其稀釋至1 mM，並以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）使用。使用異丙基腎上腺素作為脂肪酸產生之高效誘導劑。將購自ZenBio之小鼠3T3-L1細胞以每孔3,000個細胞接種於96孔盤中的前脂肪細胞培養基（Zen-Bio）中，並使其在37℃下於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中生長至匯合。在匯合之後兩天，將細胞放入脂肪細胞分化培養基（Zen-Bio）中並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再培養三天。接著，將該培養基更換為脂肪細胞維持培養基（Zen-Bio）並在37℃下，將細胞在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再維持9-12天，且每隔一天更換部分培養基。分化12-15天之後，添加0.1% DMSO中10 µM最終濃度之測試肽並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中於脂肪細胞維持培養基中培育20-22小時。20-22小時之後，將1 nM異丙基腎上腺素添加至除未處理對照外的所有孔中並補充測試肽。將100 nM胰島素添加至對照孔中。在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中，將細胞在分析緩衝液（Zen-Bio）中培育3小時。根據製造商說明書，在540 nm下使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek），使用游離脂肪酸分析套組（Zen-Bio）確定培養基中之游離脂肪酸濃度。針對未處理之背景校正吸光度值，並相對於異丙基腎上腺素處理之細胞表示。單獨異丙基腎上腺素（1 nM）處理用作游離脂肪酸含量刺激對照。異丙基腎上腺素對照之相對標準差＜10%。胰島素用作降低脂肪酸含量之高效陽性對照。胰島素（100 nM）處理之游離脂肪酸含量係異丙基腎上腺素對照值之＜5%。結果報告於表9中。表 9 3T3-L1 小鼠脂肪細胞中之游離脂肪酸含量 SEQ ID NO: 異丙基腎上腺素對照活性之百分比 7 34.6 8 34.7 9 100.3 10 24.9 11 59.2 12 51.3 13 66.0 14 46.5 15 90.8 16 58.8 17 77.9 18 77.3 19 31.0實例 13 - ATP 含量

可使用針對培養細胞，諸如小鼠肌母細胞中ATP含量之分析，評估肽對細胞代謝之影響。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，在H2O中將其稀釋至1 mM，並以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）使用。洛伐他汀（Lovastatin）用作抑制細胞生長/增殖以降低ATP含量之高效對照。將洛伐他汀製備為於70%乙醇中之10 mM儲備液並以含有10 µM最終濃度之0.1% DMSO使用。CellTiter-Glo®分析套組係購自Promega（威斯康星州麥迪遜）。C2C12細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使C2C12細胞在補充有20% FBS以及100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之DMEM培養基中生長。在37℃下，將培養物維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中。將C2C12細胞以每孔800個細胞接種於96孔盤上。在接下來的3天的每一天中，將細胞與0.1% DMSO中10 µM濃度之測試肽或洛伐他汀一起培育，並在37℃下維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中，且以24小時之時間間隔再添加肽/洛伐他汀。根據製造商說明書，使用CellTiter-Glo分析套組確定ATP含量。使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測該盤上各樣品孔之發光。活性係相對於0.1% DMSO處理之對照計算。該0.1% DMSO處理之對照之結果的相對標準差＜5%。洛伐他汀用作降低ATP含量之高效陽性對照。洛伐他汀（10 µM）處理之ATP含量係0.1% DMSO處理之對照值的＜50%。結果報告於表10中。表 10 經培養之 C2C12 細胞中之 ATP 含量 SEQ ID NO: 對照活性之百分比 7 106.6 8 99.5 9 102.0 10 100.9 11 98.0 12 102.6 13 102.8 14 102.1 15 100.4 16 94.7 17 100.0 18 95.5 19 93.6實例 14 - 細胞增殖

可使用DNA染料結合分析評估肽對培養細胞，諸如小鼠肌母細胞中細胞增殖之影響。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，在H2O中將其稀釋至1 mM，並以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）添加。使用10 µM最終濃度之洛伐他汀作為生長停滯對照。C2C12小鼠肌肉肌母細胞之細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使C2C12細胞在補充有20% FBS以及100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之DMEM中生長。在37℃下，將培養物維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中。將C2C12細胞以每孔800個細胞接種於96孔盤上。次日，將細胞與0.1% DMSO中10 µM之測試肽或洛伐他汀一起培育，並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中維持72小時，且以24小時之時間間隔再添加肽/洛伐他汀。根據製造商說明書，使用Cyquant直接核酸染色（馬薩諸塞州沃爾瑟姆（Waltham, MA）之Thermo Fisher Scientific）確定細胞增殖。使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek），在Ex/Em=495/535nm下量測該盤上各樣品孔之螢光度。活性係相對於0.1% DMSO未處理之對照計算。洛伐他汀對照之相對標準差＜27%。洛伐他汀對照之細胞增殖係未處理對照值之＜25%。結果顯示於表11中。表 11 肽對 C2C12 細胞中細胞增殖之影響 SEQ ID NO: 對照之百分比 7 94.0 8 98.1 9 99.7 10 101.5 11 88.1 12 119.3 13 90.0 14 97.2 15 93.5 16 89.6 17 89.1 18 74.9 19 92.3實例 15.- 活性氧物種之含量

可使用針對暴露於適合氧化應激之培養細胞，諸如小鼠肌母細胞中ROS的分析，評估肽對由氧化應激誘導的活性氧物種（ROS）之細胞含量的保護或協同作用。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，在H2O中將其稀釋至1 mM，並以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）添加。使用第三丁基過氧化氫（TBHP）作為ROS之高效誘導劑。使用的TBHP係100 µM之最終濃度。使用10 µM最終濃度之蘿蔔硫素作為針對TBHP誘導之ROS產生之保護性對照。C2C12小鼠肌肉肌母細胞之細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。使C2C12細胞在補充有20% FBS以及100 IU/ml青黴素及100 µg/ml鏈黴素之DMEM中生長。在37℃下，將培養物維持於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中。將C2C12細胞以每孔7,500個細胞接種於96孔盤上。接種後兩天，將細胞與0.1% DMSO中10 µM之測試肽或10 µM之蘿蔔硫素一起培育，且在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中維持18-20小時。培育18-20小時之後，向細胞裝載DCFDA，保持45分鐘。接著，將100 µM TBHP添加至適當孔中，保持1小時。根據製造商說明書，使用DCFDA細胞ROS偵測分析套組（馬薩諸塞州劍橋之Abcam）確定ROS活性。使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek），在Ex/Em=485/535nm下量測該盤上各樣品孔中的螢光度。活性係相對於TBHP對照計算。蘿蔔硫素對照之相對標準差＜20%。在TBHP存在下由蘿蔔硫素對照產生之ROS含量係TBHP對照之52%。結果報告於表12中。表 12 肽對 C2C12 細胞中 TBHP 誘導之細胞 ROS 含量的影響 SEQ ID NO: 對照之百分比 7 98.6 8 102.1 9 105 10 102.3 11 100.6 12 105 13 106.8 14 105.1 15 105.9 16 106.6 17 113.6 18 109.4 19 92實例 16 - 對飲食誘發肥胖（ DIO ）之小鼠中代謝參數的影響

使雄性C57BL/6小鼠維持高脂肪飲食18週以發展飲食誘發之肥胖症。基於血糖含量及體重將動物隨機分入治療組。每天兩次藉由腹膜內注射將每劑5 mg/kg劑量的本發明之肽投與各組雄性DIO小鼠，持續10天（N=8隻動物/治療組）。另一組雄性DIO小鼠（n=8）接受每天兩次藉由腹膜內注射投與的單獨媒劑（水）。監測體重、血糖含量及食物攝入量。在給藥之前及給藥結束時，藉由定量全身NMR確定身體質量分佈（脂肪相對於瘦肉）。當與用單獨媒劑治療之動物相比較時，投與本發明之肽引起自基線值較高的體重減輕、較大程度之血糖降低及較大程度之脂肪質量降低（表13）。表 13 在每天兩次 5 mg/kg 腹膜內治療 10 天之後雄性 DIO 小鼠中之代謝參數自基線之 減小與媒劑對照的平均差異（ N=8 ）

治療 SEQ ID NO:	劑量（mg/kg）	與媒劑對照之差異：體重自基線減輕（%）	與媒劑對照之差異：血糖自基線降低（mg/dL）	與媒劑對照之差異：脂肪質量自基線降低（g）
7	5	-3.19	-20.0	-0.84
8	5	-8.01	-16.9	-3.88
10	5	-5.47	-8.37	-2.16
11	5	-4.05	-4.91	-2.34
12	5	-2.89	-6.75	-1.73

實例 17 經培養之小鼠脂肪細胞中的游離脂肪酸含量及胰島素依賴性

可使用監測由培養細胞，諸如小鼠脂肪細胞產生之游離脂肪酸含量的分析，評估肽對脂肪酸代謝之影響。基於溶解度，最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液並將其在H2O中稀釋至1 mM，或直接在H2O中製備為1 mM儲備液；使用的肽係10 µM最終濃度（0-0.1% DMSO）。使用異丙基腎上腺素作為脂肪酸產生之高效誘導劑。將購自ZenBio（北卡羅來納州三角研究園（Research Triangle Park, NC））之小鼠3T3-L1細胞以每孔3,000個細胞接種於96孔盤中的前脂肪細胞培養基（Zen-Bio）中，並使其在37℃下於含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中生長至匯合。在匯合之後兩天，將細胞放入脂肪細胞分化培養基（Zen-Bio）中並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再培養三天。接著，將該培養基更換為脂肪細胞維持培養基（Zen-Bio）並在37℃下，將細胞在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中再維持9天，且每隔一天更換部分培養基。分化12天之後，將培養基更換為不含胰島素之脂肪細胞維持培養基並在37℃下，將培養物放入含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中。分化第13天，將0-0.1% DMSO中10 µM最終濃度之測試肽直接添加至各孔（無需更換培養基）中，並在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中培育20-22小時。20-22小時之後，移除培養基並更換為含有適當化合物之分析緩衝液（ZenBio）；將0.1 nM異丙基腎上腺素添加至除未處理對照外的所有孔中，在不存在或存在0.25 nM胰島素、作為游離脂肪酸產生之部分抑制劑的0.25 nM胰島素或作為游離脂肪酸產生之高效抑制劑的10 nM胰島素下再施加10 µM測試肽。在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中，將細胞在分析緩衝液（Zen-Bio）中培育3小時。培育3小時之後，將來自各孔之改良性培養基轉移至新鮮96孔盤中。根據製造商說明書，使用游離脂肪酸分析套組（Zen-Bio）確定培養基中之游離脂肪酸濃度；在540 nm下，使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測吸光度。吸光度值對於單獨10 µM肽係相對於0.1 nM異丙基腎上腺素處理之細胞（無胰島素）或在0.25 nM胰島素存在下對於10 µM肽係相對於0.25 nM胰島素處理之細胞（含胰島素）以對照活性百分比表示。單獨異丙基腎上腺素（0.1 nM）處理用作游離脂肪酸含量刺激對照。異丙基腎上腺素對照之相對標準差＜10%。10 nM胰島素用作降低脂肪酸含量之高效陽性對照。胰島素（10 nM）處理之游離脂肪酸含量係異丙基腎上腺素對照值之＜5%。數據呈現為由2-3次獨立實驗得到的平均值，其中每個數據點係一式三份執行。結果報告於表16中。表 16 經培養之 3T3-L1 小鼠脂肪細胞中的游離脂肪酸含量

SEQ ID NO:	異丙基腎上腺素對照活性之百分比	異丙基腎上腺素對照活性之百分比
無胰島素	含胰島素

7 102 71.3 8 106 57.8 9 106 93.1 10 97.9 48.7 11 104 58.5 12 103 54.6 13 105 56.4 14 100 51.0 15 109 89.0 16 110 63.0 17 98.4 87.7 18 110 81.1 19 105 79.0 20 101 90.7 21 109 59.1 22 107 61.9 23 104 57.7 24 108 59.2 25 110 67.4 26 104 52.8 27 108 74.2 28 109 57.8 29 110 52.8 30 102 56.0 31 113 94.6 32 108 62.9 33 98 80 34 104 122 35 101 112 36 102 114 37 103 111 38 101 68 39 97 67 40 101 76 41 97 73 42 103 134 43 103 91 44 103 96 45 105 89 46 98 104 47 101 93 48 92 93 49 101 103 50 103 101 51 99 79 52 102 79 53 101 81 54 102 75 55 100 90 56 99 94 57 96 87 58 110 114 59 111 114 60 110 101 61 112 143 62 112 109 63 112 92實例 18 經培養之 C2C12 細胞中的葡萄糖利用及胰島素依賴性

可使用監測培養細胞，諸如小鼠肌管之葡萄糖利用的分析，評估肽對葡萄糖體內恆定之影響。基於溶解度，最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液並將其在H2O中稀釋至1 mM，或直接在H2O中製備為1 mM儲備液；使用的肽係10 µM最終濃度（0-0.1% DMSO）。C2C12小鼠肌肉細胞株係購自Millipore Sigma（密蘇里州聖路易斯（Saint Louis, MO））。將C2C12細胞以每孔7,500個細胞接種於96孔盤上的標準培養基（DMEM/低葡萄糖（1g/L）+10%胎牛血清+抗生素）中並使其在37℃下於含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中生長至匯合。塗鋪後三天，移除培養基並添加分化培養基（DMEM/低葡萄糖（1g/L）+2%馬血清+抗生素）。在37℃下，將培養物放入含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中，保持5天，且每天更換部分培養基。分化5天之後，自肌管培養物移除培養基且更換為分析培養基（DMEM/低葡萄糖（1g/L）+抗生素）。在37℃下，將培養物放入含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中，保持5小時。培育5小時之後，移除培養基並添加含有以下化合物之新鮮分析培養基：在不存在或存在5-20 nM胰島素情況下之10 µM肽、或作為葡萄糖利用之強效刺激劑之1 mM二甲雙胍。在37℃下，在含5% CO2/95%空氣之潮濕氛圍中，將細胞培育22小時。培育22小時之後，將來自各孔之改良性培養基轉移至新鮮96孔盤中。根據製造商說明書，使用葡萄糖分析套組（Abcam；馬薩諸塞州劍橋）確定培養基中之葡萄糖濃度；在570 nm下，使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測吸光度。吸光度值對於單獨10 µM肽係相對於未處理之細胞（無胰島素）或在5-20 nM胰島素存在下對於10 µM肽係相對於5-20 nM胰島素處理之細胞（含胰島素）以對照活性百分比表示。未處理細胞用作基礎葡萄糖利用之參考。未處理對照的各盤之間的相對標準差＜10%。使用1 mM二甲雙胍作為增加葡萄糖利用之強效對照。二甲雙胍（1 mM）處理之葡萄糖含量係未處理對照值之＜10%。數據呈現為由2-3次獨立實驗得到的平均值，其中每個數據點係一式三份執行。結果報告於表19中。表 19 經培養之 C2C12 細胞中的葡萄糖利用

SEQ ID NO:	對照活性之百分比	對照活性之百分比
無胰島素	含胰島素

7 98.1 100.7 8 90.8 85.5 9 95.8 106.1 10 102.6 76.3 11 107.2 84.5 12 102.3 84.5 13 104.4 97.8 14 102.4 112.3 15 103 106.9 16 99.7 88.4 17 102.6 96.2 18 103.6 122.1 19 100.1 76.5 20 108 91 21 107.5 86 22 100.9 79.8 23 102 86.6 24 98.8 85.8 25 99.9 77.4 26 102.2 98.4 27 101.2 106.2 28 103.3 88.2 29 99.2 92.3 30 97.7 88.3 31 103.7 99.2 32 103.8 85.0實例 19 經培養之 H4-IIE 細胞中的葡萄糖產生及胰島素依賴性

可使用監測培養細胞，諸如大鼠肝細胞之葡萄糖產生的分析來評估肽對葡萄糖體內恆定之影響。基於溶解度，最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液並將其在H2O中稀釋至1 mM，或直接在H2O中製備為1 mM儲備液；使用的肽係10 µM最終濃度（0-0.1% DMSO）。H4-IIE大鼠肝細胞株係購自美國典型培養物保藏中心（弗吉尼亞州馬納薩斯）。將H4-IIE細胞以每孔100,000個細胞接種於96孔盤上的標準培養基（DMEM/高葡萄糖+10%胎牛血清+抗生素）中並使其在37℃下於含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中黏附過夜。接種之後24小時，移除培養基，用不含葡萄糖之DMEM沖洗細胞，並將培養基更換為葡萄糖生產培養基（不含葡萄糖之DMEM+2 mM丙酮酸鈉+10 mM乳酸鈉+抗生素）。在37℃下，將培養物放入含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中過夜。次日上午，移除培養基並添加含有以下化合物之新鮮葡萄糖生產培養基：在不存在或存在800 pM胰島素情況下的10 uM肽。在37℃下，在含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中，將細胞培育24小時。培育24小時之後，將來自各孔之改良性培養基轉移至新鮮96孔盤中。根據製造商說明書，使用葡萄糖分析套組（Abcam；馬薩諸塞州劍橋）確定培養基中之葡萄糖濃度；在570 nm下，使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測吸光度。吸光度值對於單獨10 µM肽係相對於未處理之細胞（無胰島素）或在800 pM胰島素存在下對於10 µM肽係相對於800 pM胰島素處理之細胞（含胰島素）以對照活性百分比表示。未處理細胞用作最大葡萄糖產生之參考。未處理對照的各盤之間的相對標準差＜25%。使用800 pM胰島素作為葡萄糖產生之適當抑制劑。胰島素（800 pM）處理之葡萄糖含量係未處理對照值之＜20-50%。數據呈現為由2-4次獨立實驗得到的平均值，其中每個數據點係一式三份執行。結果顯示於表20中。表 20 經培養之 H4-IIE 細胞中的葡萄糖產生 SEQ ID NO: 對照活性之百分比 對照活性之百分比 無胰島素 含胰島素 7 54.2 64.2 8 78.9 102.8 9 74.9 93.7 10 92.2 38.2 11 96.6 57.5 12 96.4 44.8 13 100.9 68 14 104.4 159.6 15 101.4 63.9 16 99.8 56.8 17 101.7 95.5 18 103.1 140.4 19 100.8 68.9 20 98.4 108.6 21 98.4 72.7 22 109.8 49.1 23 104.3 57.7 24 107.6 61.9 25 108.2 65.2 26 111.5 103.1 27 101.7 98.9 28 107.4 91.4 29 113.9 148.6 30 105.7 65.7 31 95.5 108.3 32 99.5 81.9 33 113.8 34 96.9 35 98.1 36 94.4 37 105.5 38 98.5 39 103.9 40 109.6 41 122.7 42 95.3 43 115.8 44 98.8 45 106.9 46 105.0 47 108.0 48 110.0 49 120.1 50 99.8 51 106.1 52 108.4 53 91.9 54 112.8 55 92.6 56 97.1 57 98.3 58 114.5 59 114.0 60 115.9 61 122.7 62 105.6 63 107.5實例 20 對飲食誘發肥胖（ DIO ）之小鼠中代謝參數的影響

使雄性C57BL/6小鼠維持高脂肪飲食18週以發展飲食誘發之肥胖症。基於血糖含量及體重將動物隨機分入治療組。每天一次或兩次，藉由腹膜內注射將每劑5 mg/kg劑量的本發明之肽投與各組雄性DIO小鼠，持續8至10天（N=8隻動物/治療組）。額外組的雄性DIO小鼠（n=8）接受每天一次或兩次藉由腹膜內注射投與的單獨媒劑（水）。監測體重、血糖含量及食物攝入量。在給藥之前及給藥結束時，藉由定量全身NMR確定身體質量分佈（脂肪相對於瘦肉）。當與用單獨媒劑治療之動物相比較時，投與本發明之肽引起自基線值較高的體重減輕、較大程度之血糖降低及較大程度之脂肪質量降低（表21）。表 21 在以每劑 5 mg/kg 重複腹膜內治療之後雄性 DIO 小鼠中之代謝參數自基線的減少與媒劑對照之平均差異（ N=8 ）

治療	劑量（每劑mg/kg）及頻率	持續時間（天）	與媒劑對照之差異：體重自基線減輕（%）	與媒劑對照之差異：血糖自基線降低（mg/dL）	與媒劑對照之差異：脂肪質量自基線降低（g）
SEQ ID NO: 8	5 BID	8	-5.66	-14.3	-2.15
SEQ ID NO: 15	5 QD	10	-4.97	-3.38	-2.19
SEQ ID NO: 20	5 QD	10	-3.59	-0.75	-1.78
SEQ ID NO: 38	5 QD	10	-3.12	-24.1	ND
SEQ ID NO: 42	5 QD	10	-2.94	-10.7	ND

實例 21 - 食蟹獼猴中之藥物動力學 .

在給藥之前，使雄性食蟹獼猴（2至6 kg）空腹8小時。藉由適合途徑向各組動物注射單次劑量之測試肽（0.1至15 mg/kg）。在24小時內以一定時間間隔抽取血液樣品並加工以獲得血漿。注射後四小時，恢復飲食。藉由適合分析方法（例如LC/MS-MS）確定血漿樣品中肽及/或代謝物之濃度並藉由非房室方法計算藥物動力學參數。實例 22 - 在肥胖症之非人類靈長類動物模型中的影響 .

使自發肥胖之雄性食蟹獼猴適應給藥及處理至少3週。確定基線動物特徵並基於體重及基線代謝參數，諸如甘油三酯含量，將動物隨機分入治療組。隨機分組之後，各組猴接受藉由適合途徑投與的每天一次或每天兩次劑量的本發明之肽，持續4週或更長時間。對照組猴接受每天劑量之媒劑或陽性對照。在研究期間，以一定時間間隔量測食物消耗量及體重。將投與之肽對體重、食物攝入量、BMI及/或代謝參數之影響與用媒劑治療之對照動物相比較。實例 23 在非酒精性脂肪變性肝炎（ NASH ）之 STAM® 小鼠模型中的影響 .

在NASH之STAM模型中，在出生後三天，對C57/BL6小鼠注射單次皮下劑量之鏈球菌毒素（streptotoxin），以破壞胰臟β-細胞。在4週齡時，動物接受高脂肪飲食。此組合處理導致發展脂肪變性、纖維化、肝硬化且最終導致肝細胞癌（HCC）以及高血糖症及中度高脂血症，因此與人類NASH極其相似。自5週齡開始，用每天一次或每天兩次藉由適當途徑投與的本發明之肽治療各組STAM動物（8隻動物/組），直至研究終止。對照組動物接受每天投與的適合陽性對照化合物（例如替米沙坦（telmisartan））。在約10週齡時，確定代謝參數並處死動物。獲得肝臟樣品並固定，包埋於石蠟中，用蘇木精及伊紅或梅森氏三色染色法（Masson's trichrome）染色，並藉由光學顯微鏡檢查。根據此項技術中已知之方法，以組織病理學方式確定脂肪變性之程度及非酒精性脂肪肝病（NAFLD）活動度分數（NAS）。實例 24 在經培養的過度表現愛帕琳肽受體之 CHO-K1 細胞中的 β- 抑制蛋白（ β-Arrestin ）募集

可使用監測來源於中國倉鼠卵巢的過度表現APJ之培養細胞，諸如CHO-K1中β-抑制蛋白之募集的分析，評估肽對愛帕琳肽受體（APJ）之活化的影響。藉由Eurofins-DiscoverX（加利福尼亞州夫利蒙（Fremont, CA）），使用CHO-K1 AGTRL1 β-抑制蛋白細胞株（共表現ProLink標記之人類APJ及酶受體標記之β-抑制蛋白）及PathHunter偵測套組執行β-抑制蛋白募集分析。最初將肽製備為於DMSO中之10 mM儲備液，且以10 µM之最終濃度（0.1% DMSO）使用。將CHO-K1 AGTRL1 β-抑制蛋白細胞接種於384孔盤上的標準培養基中。過夜培養之後，將培養基更換為含有500 nM愛帕琳肽-13（陽性對照）或10 µM肽之緩衝液。在37℃下培育90分鐘之後，使用化學發光互補報導體分析定量回應於各種處理之β-抑制蛋白募集以量測經標記之人類APJ（ProLink標籤）及經標記之β-抑制蛋白（酶受體標籤）之締合。數據呈現為愛帕琳肽-13反應（100%）之百分比且每個數據點表示一式兩份之平均值。結果顯示於表22中。本實例示出各種肽作為APJ促效劑之活性表 22 經培養之 CHO-K1 AGTRL1 β- 抑制蛋白細胞 中之 β - 抑制蛋白募集 SEQ ID NO: 愛帕琳肽 -13 對照活性之百分比 7 91 8 17 9 10 3 11 0 12 -1 13 1 14 0 15 40 16 0 17 10 18 1 19 1 20 1 21 1 22 0 23 0 24 -1 25 -1 26 0 27 -1 28 -1 29 0 30 -1 31 0 32 0 33 9 34 8 35 17 36 63 37 12 38 0 39 0 40 0 41 0 42 8 43 82 44 0 45 0 46 0 47 1 48 1 49 1 50 0 51 0 52 0 53 1 54 1 55 1 56 0 57 0 58 0 59 0 60 0 61 5 62 2 63 9實例 25 經培養的過度表現愛帕琳肽受體之 CHO-K1 細胞中之 cAMP 含量

可使用監測來源於中國倉鼠卵巢的過度表現愛帕琳肽受體（APJ）之培養細胞，諸如CHO-K1中cAMP表現之抑制的分析，評估肽對APJ之活化的影響。最初將肽製備為於DMSO中之30 mM儲備液並在H₂ O中稀釋至3 mM，或直接在H₂ O中製備為3 mM儲備液；以10 µM最終濃度（0-0.1% DMSO）使用。使用毛喉素作為cAMP表現之高效誘導劑。穩定過度表現APJ之CHO-K1 AGTRL1 Gi細胞係購自Eurofins-DiscoverX（加利福尼亞州夫利蒙）。將CHO-K1 AGTRL1 Gi細胞以每孔10,000個細胞接種於384孔盤上的標準培養基（F12K+10%胎牛血清+抗生素）中並使其在37℃下於含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中黏附過夜。過夜培養之後，將培養基更換為含有10 µM毛喉素（用以增加cAMP表現）以及500 nM Pyr-愛帕琳肽-13（抑制cAMP累積）或10 µM肽之緩衝液。在37℃下培育30分鐘之後，根據製造商之方案，使用HitHunter cAMP套組（Eurofins-DiscoverX）定量回應於各種治療之cAMP含量；使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測化學發光信號。數據呈現為Pyr-愛帕琳肽-13反應（100%）之百分比，且每個數據點表示一式三份之平均值。結果顯示於表23中。本實例示出各種肽作為APJ促效劑之活性。表 23 經培養之 CHO-K1 AGTRL1 Gi 細胞中之 cAMP 含量 SEQ ID NO: Pyr- 愛帕琳肽 -13 對照活性之百分比 7 109 8 64 10 70 11 49 12 24 13 49 14 39 15 105 17 26 18 30 19 27 20 37 21 34 22 62 23 -4 24 16 25 3 26 29 27 9 28 3 29 21 30 31 31 2 32 4 33 27 34 61 35 8 36 101 37 53 38 12 39 -13 40 19 41 15 42 33 43 44 44 5 45 10 46 11 47 -6 48 15 49 14 50 8 51 24 52 15 53 6 54 20 55 -7 56 -2 57 -1 58 5 59 -2 60 16 61 1 62 27 63 21實例 26 經培養的過度表現愛帕琳肽受體之 CHO-K1 細胞中之 cAMP 含量

可使用量測過度表現愛帕琳肽受體（APJ）之培養細胞，諸如CHO-K1細胞中毛喉素刺激之cAMP累積之抑制的分析，評估肽對APJ活化之影響。穩定過度表現APJ之CHO-K1 AGTRL1 Gi細胞係購自Eurofins-DiscoverX（加利福尼亞州夫利蒙），以每孔10,000個細胞接種於384孔盤上的標準培養基中並使其在37℃下於含5% CO₂ /95%空氣之潮濕氛圍中黏附過夜。過夜培養後，將培養基更換為含有用以增加cAMP表現之10 µM毛喉素以及Pyr-愛帕琳肽-13（0.025-167 nM）或本發明之肽（0.005-30 μM）的緩衝液。在37℃下培育30分鐘之後，根據製造商之方案，使用HitHunter cAMP套組（Eurofins-DiscoverX）定量回應於各種治療之cAMP含量；使用Cytation 3盤讀取器（佛蒙特州威努斯基之BioTek）量測化學發光信號。將數據繪製為基於2-3個值之平均值的Pyr-愛帕琳肽-13反應（100%）之平均（SD）百分比。藉由GraphPad Prism軟體（加利福尼亞州聖地亞哥之GraphPad Software）確定IC50值。數據係所有數據點之平均值（SD），n=2-3。IC50值顯示於表24中。表 24 SEQ ID NO IC50 （ M ）愛帕琳肽-13 1.763×10-9 15 4.492×10-6 36 1.602 ×10-6 37 2.499×10-6 42 4.382×10-6 43 2.069×10-6 7 1.243×10-6

本文中所揭露及主張之所有製品及方法均可根據本揭露製備及執行，無需過多實驗。雖然已根據較佳實施例描述本揭露之製品及方法，但本領域中熟習此項技術者將顯而易見，在不脫離本揭露之精神及範圍的情況下，可將變化施加於該等製品及方法。本領域中熟習此項技術者顯而易見的所有此類變化及等效物，無論是現有的抑或以後將開發的，均被認為在由所附申請專利範圍界定的本揭露之精神及範圍內。說明書中所提及之所有專利、專利申請案及出版物指示本揭露所涉及之領域中的一般熟習此項技術者之水準。本文示例性揭露之揭露內容適當地可在無本文未具體揭露之任何要素的情況下實踐。因此，例如，在本文之各種情況下，術語「包括」、「基本上由……組成」及「由……組成」中之任一個可由另外兩個術語中之任一個置換。所採用之術語及表述係作為描述而非限制之術語使用，且在使用此類術語及表述中不意欲排除所顯示及描述之特徵的任何等效物或其部分，但應認識到，在本揭露所主張之範圍內，各種修改係可能的。因此，應瞭解，儘管本揭露已由較佳實施例及視情況選用之特徵具體地揭露，但本領域中熟習此項技術者可採取本文所揭露之概念的修改及變化形式，且此類修改及變化形式應視為在所附申請專利範圍所界定的本揭露之範圍內。

本文所引用之所有參考文獻，包含出版物、專利申請案及專利，均以全文引用之方式併入本文中，且引用程度就如同單獨地且特定地指示各參考文獻以引用之方式併入且在本文中闡述全文（在法律允許之最大範圍內）。所有標題及子標題僅為方便起見在本文中使用且不應以任何方式理解為限制性的。除非另外主張，否則使用本文所提供之任何及所有實例或示例性語言(例如「諸如」)僅旨在更佳地闡明本揭露，而不對本揭露之範圍造成限制。本說明書之語言均不應解釋為指示任何非主張之要素對於本揭露之實踐為必不可少的。本文中專利文件之引用及併入僅為方便起見而進行，且不反映此類專利文件之有效性、專利性及/或執行性之任何觀點。

本揭露包含適用法律容許的在此隨附態樣中所敍述之主題的所有修改及等效物。

本申請案包含序列表。若本說明書中序列之資訊/說明與序列表中之資訊之間存在差異，則以本說明書為準。

無

Claims

一種包括式I之胺基酸序列的肽，X¹ - RX² -X³ -X⁴ -X⁵ -X⁶ -Q-X⁷ -L-X⁸ -X⁹ (I) (SEQ ID NO: 1) 其中：X¹ 不存在，或若存在，則為具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X² 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X³ 不存在，或若存在，則為一至三個胺基酸，各胺基酸獨立地具有極性側鏈或非極性側鏈；X⁴ 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X⁵ 係具有非極性側鏈之胺基酸；X⁶ 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；X⁷ 係具有極性側鏈之胺基酸；X⁸ 係具有極性側鏈之胺基酸；以及X⁹ 不存在，或若存在，則為一至三個胺基酸，各胺基酸獨立地具有極性側鏈或非極性側鏈；或具有一個、兩個、三個或四個胺基酸之缺失、插入或取代的該肽之類似物；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1之肽或類似物，其中X³ 不存在，或若存在，則為-X¹² X¹¹ X¹⁰ - ；其中X¹⁰ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；X¹¹ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；以及X¹² 係具有極性側鏈或非極性側鏈之胺基酸；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1之肽或類似物，其中X⁹ 不存在，或若存在，則為-X¹³ X¹⁴ X¹⁵ ；其中X¹³ 係具有非極性側鏈之胺基酸；X¹⁴ 不存在，或若存在，則為具有非極性側鏈之胺基酸；以及X¹⁵ 不存在，或若存在，則為具有極性側鏈之胺基酸；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1之肽或類似物，其中：X¹ 係M、K或不存在；X² 係R或Aib；X³ 不存在，或若存在，則為M、E、-MMG-、-II(dA)-、-Nle-Nle-G-或-IIG-；X⁴ 係M、E、I或Nle；X⁵ 係V、A或G；X⁶ 係F、Y、A或E；X⁷ 係C、S或E；X⁸ 係C、S或E；以及X⁹ 係-GL、-G(dA)、-G(dA)K、-(dA)L、G或不存在；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項4之肽或類似物，其中X¹ 係(PEG12)-K，及/或其中X⁹ 係-G(dA)-K(PEG12)。
如請求項1之肽或類似物，其包括選自表1之肽的胺基酸序列或由選自表1之肽的胺基酸序列組成；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種包括式II之胺基酸序列的肽，X¹⁶ -M-M-G-M-X¹⁷ - (II) (SEQ ID NO: 64) 其中：X¹⁶ 不存在，或若存在，則為R-或R-R-；以及X¹⁷ 不存在，或若存在，則選自-V、-VF、-VFQ、-VFQS、-VFQSL及-VFQSLCG(dA)；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項7之肽，其中X¹⁶ 係R-或RR-；以及X¹⁷ 選自VF、-VFQ、-VFQS、-VFQSL及-VFQSLCG(dA)；或C末端酸或醯胺，或其N-乙醯基衍生物；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種肽或類似物，其包括選自以下之胺基酸序列或由選自以下之胺基酸序列組成：MMGMVF (SEQ ID NO 47)；RMMGMVFQ (SEQ ID NO: 51)；RMMGMVFQS (SEQ ID NO: 52)；RMMGMVFQSL (SEQ ID NO: 53)；RMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 54)；RRMMGMVF (SEQ ID NO: 57)；乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA) (SEQ ID NO: 61)；RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺(SEQ ID NO: 62)；及乙醯基-RRMMGMVFQSLCG(dA)-醯胺(SEQ ID NO: 63)；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1至9中任一項之肽或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1至9中任一項之肽類似物，其中該肽包括用選自以下之至少一個胺基酸進行之取代：(i)具有D構型之胺基酸；以及(ii)非天然存在之胺基酸殘基；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1至11中任一項之肽或類似物，其進一步包括附接至該肽或類似物之持續時間增強部分，且視情況進一步包括將該肽或類似物偶合至該持續時間增強部分的代謝可裂解連接子。
一種組成物，其包括如請求項1至12中任一項之肽或類似物及醫藥學上可接受之賦形劑。
一種醫藥組成物，其包括如請求項1至12中任一項之肽或類似物。
一種如請求項1至14中任一項之肽、肽類似物或組成物在治療性治療代謝性疾病、癌症、肝病或本文所述之任何疾病、病症或醫學病況中的用途。
一種如請求項1至14中任一項之肽、肽類似物或組成物在製造用於治療代謝性疾病、癌症、肝病或本文所述之任何疾病、病症或醫學病況之藥物中的用途。
一種如請求項1至14中任一項之肽、肽類似物或組成物在治療性治療愛帕琳肽介導之疾病或病症中或在製造用於治療性治療愛帕琳肽介導之疾病或病症之藥物中的用途。
如請求項17之用途，其中該疾病與UVB輻射有關。
如請求項17之用途，其中該疾病或病症選自高血壓、內皮功能障礙、心血管組織損傷、心臟衰竭、冠心病、缺血性及/或出血性中風、大血管疾病、微血管疾病、糖尿病性心臟（包含糖尿病性心肌病及心臟衰竭作為糖尿病併發症）冠心病、周邊動脈疾病、周邊動脈阻塞性疾病、子癇前症、頑固性高血壓、難治性高血壓、高血壓危象、血液或胎兒-胎盤循環、水腫病、肺功能障礙、急性肺損傷（ALI）、急性呼吸窘迫症候群（ARDS）、外傷及/或燒傷、及/或呼吸機誘發之肺損傷（VI LI）、肺纖維化、高山病、慢性腎病、急性腎臟損傷、淋巴水腫、淋巴管再生、發炎性腸病、發炎性疾病或與血管功能紊亂相關之眼部病症、局部傷口、偏頭痛、腫瘤、癌轉移、血管生成、軟骨退變、骨關節炎及癌症。
如請求項17之用途，其中該疾病或病症係敗血症或敗血性休克；血栓形成或微血栓形成；凝血酶相關聚集、缺血性休克或器官衰竭或多器官衰竭。