JP2022545388A

JP2022545388A - 治療用ペプチド

Info

Publication number: JP2022545388A
Application number: JP2022509199A
Authority: JP
Inventors: カンディ、ケネス
Original assignee: コーバー、インコーポレイテッド
Priority date: 2019-08-15
Filing date: 2020-08-14
Publication date: 2022-10-27
Also published as: TW202120524A; WO2021030687A1; CN114269367A; US20220324909A1; MX2022001927A; WO2021030687A8; KR20220045033A; EP4013440A1; EP4013440A4; AU2020328055A1; CA3149645A1; IL290520A

Abstract

本明細書の開示は、細胞生物学の分野、ならびに細胞生存率、細胞増殖、および代謝プロセスを制御する細胞メカニズムの調節に関する。異常な細胞増殖および悪性腫瘍に関連する細胞シグナル伝達を含む、細胞生存率、細胞増殖、および代謝プロセスを制御する細胞メカニズムを調節するのに有効なペプチドが、本明細書により具体的に開示される。また、細胞生存率を制御する細胞メカニズムの調節、代謝性疾患の治療、および細胞保護剤として有効なペプチドも本明細書に開示される。アペリン受容体アゴニストとして有効なペプチドも本明細書に開示される。【選択図】なし

Description

本出願は、その全体が両者とも参照により本明細書に組み込まれる、２０２０年６月５日に出願された米国仮出願第６３／０３５，５２１号および２０１９年８月１５日に出願された第６２／８８７，０４９号の優先権を主張する。

本開示は、細胞生物学の分野、ならびに細胞生存率および代謝プロセスの調節に関する。より具体的に開示されるのは、異常な細胞増殖および悪性腫瘍に関連する細胞シグナル伝達を調節するのに有効なペプチドである。また、細胞生存率の調節、代謝性疾患の治療、および細胞保護剤として有効なペプチドも開示される。アペリン受容体アゴニストとして有効なペプチドも本明細書に開示される。

電子的に提出された資料の参照による組み込み
本開示の一部である配列表は、明細書と同時にテキストファイルとして提出され、参照により本明細書に組み込まれる。配列表を含むファイルの名称は、「５４００８Ａ＿Ｓｅｑｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ」であり、これは２０２０年８月１４日に作成され、サイズは２１，９２８バイトである。

細胞性挙動の制御について、明確に理解されていない。細胞代謝経路の調節不全は、エネルギー恒常性の不均衡につながる可能性があり、肥満、糖尿病、高血圧、動脈硬化症、高コレステロール、高脂血症、脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、および他の疾患を含むがこれらに限定されない広範囲の代謝障害をもたらす可能性がある。細胞アポトーシスを調節する正確な細胞メカニズムは完全には知られていない。アポトーシスの調節不全は、多くのヒトの疾患に関係している。細胞内のアポトーシスの不適切な抑制は、その細胞の制御されていない増殖につながる可能性があり、がんの発症を助長する可能性がある。対照的に、アポトーシス細胞死の程度を制御できないと、神経変性、自己免疫障害、およびその他の疾患で生じるような、特定の組織および細胞型の変性につながる可能性がある。

例えば、細胞代謝、細胞増殖、および細胞生存率を含む、細胞の活性を制御する細胞メカニズムを調節するより効果的な療法が必要とされている。より具体的には、代謝経路を安全に調節することによって広範囲の代謝障害に対処できる、より効果的な治療に対する大きな必要性が残っている。不適切な細胞増殖または不適切な細胞死を特徴とする障害に苦しむ個体の細胞および／または組織においてアポトーシスを誘導または抑制するものを含む、細胞メカニズムを調節するより効果的な療法が必要とされている。

真核細胞の代謝プロセスの中心であるミトコンドリアは、とりわけエネルギー産生、ＡＴＰ合成、活性酸素種（ＲＯＳ）の生成、プログラム細胞死、シグナル伝達、細胞分化、細胞周期の制御、および細胞増殖など、多くの細胞プロセスに関与している。これまでに少数のミトコンドリアＤＮＡ由来のシグナル伝達ペプチドが同定されているが、構造は多様で、大きく異なる生物学的特性を有する。この努力にもかかわらず、理論上のミトコンドリアＤＮＡ由来ペプチド配列の大部分の天然型（ｎａｔｕｒａｌｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ）および機能は未定義のままであるが、外因性ペプチドとしての潜在的な生物活性は完全に不明であり、その構造から予測することはできない。本発明者らは、ミトコンドリアＤＮＡに基づいて予想外の特性を有する治療上有用な単離ペプチドを同定し、改善された特性を有する新規の類似体および誘導体を考案した。

細胞メカニズムを調節する活性を示す式Ｉ～ＩＩのアミノ酸配列を含むペプチドが開示される。また、配列番号１～６４のアミノ酸配列を含むペプチド、その類似体および誘導体も開示される。

本開示はさらに、本明細書に記載の配列番号１～６４のアミノ酸配列を含むペプチド、その類似体および誘導体、ならびに薬学的に許容される賦形剤を含むがこれらに限定されない、本明細書に記載のペプチドを含む薬学的組成物、ならびに本明細書に記載のペプチドおよび組成物を使用して、患者の疾患または病状（例えば、がん、代謝性疾患）を治療または予防する方法を含む。方法は、薬学的組成物に任意に製剤化された、ここに開示されるペプチド、誘導体、または類似体を、適切な疾患または病状を治療するのに有効な量で患者に投与することを含む。同様に開示されるのは、前述の疾患または病状を治療または予防するための、本明細書に記載のペプチド、誘導体、類似体、および組成物の使用である。

本開示はさらに、本明細書に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ、かかる核酸を構成するかまたは含むベクター、かかる核酸もしくはベクターで形質転換またはトランスフェクトされた宿主細胞、ならびにその治療法および使用を含む。本発明の他の態様は、詳細な説明およびその後に続く特許請求の範囲から明らかになるであろう。

一態様では、細胞メカニズムを治療的に調節するペプチドが開示される。

一実施形態では、配列番号１～６４のいずれか１つに記載のアミノ酸配列のいずれか１つ以上のペプチドが開示される。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、
Ｘ^１－Ｒ－Ｘ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｑ－Ｘ^７－Ｌ－Ｘ^８－Ｘ^９（Ｉ）（配列番号１）

Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有し、Ｘ^４が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^５が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^６が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^７が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^８が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有する、ペプチド、あるいは１、２、３、もしくは４アミノ酸の欠失、挿入、または置換を有する、該ペプチドの類似体、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、式中、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、式中、Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、式中、Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１３Ｘ^１４Ｘ^１５であり、式中、Ｘ^１３が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、式中、Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、Ｘ^２が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、Ｘ^４が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^５が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^６が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^７が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^８が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は独立して、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１３Ｘ^１４から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１２が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１３が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸である、ペプチド、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、式中、Ｘ^１が、Ｍ、Ｋ、または存在せず、Ｘ^２が、ＲまたはＡｉｂであり、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｍ、Ｅ、－ＭＭＧ－、－ＩＩ（ｄＡ）－、－Ｎｌｅ－Ｎｌｅ－Ｇ－、もしくは－ＩＩＧ－であり、Ｘ^４が、Ｍ、Ｅ、Ｉ、またはＮｌｅであり、Ｘ^５が、Ｖ、Ａ、またはＧであり、Ｘ^６が、Ｆ、Ｙ、Ａ、またはＥであり、Ｘ^７が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、Ｘ^８が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、Ｘ^９が、－ＧＬ、－Ｇ（ｄＡ）、－Ｇ（ｄＡ）Ｋ、－（ｄＡ）Ｌ、Ｇ、または存在しない、ペプチド、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘ^１が、（ＰＥＧ１２）－Ｋであり、かつ／またはＸ^９が、－Ｇ（ｄＡ）－Ｋ（ＰＥＧ１２）である、ペプチドを含む。

一実施形態は、式ＩＩのアミノ酸配列のペプチドであって、
Ｘ^１６－Ｍ－Ｍ－Ｇ－Ｍ－Ｘ^１７（ＩＩ）（配列番号６４）
式中、Ｘ^１６が、存在しない、または存在する場合は、Ｒ－またはＲ－Ｒ－であり、Ｘ^１７が、存在しない、または存在する場合は、－Ｖ、－ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）から選択される、ペプチド、そのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、式ＩＩのアミノ酸配列のペプチドであって、式中、Ｘ^１６が、Ｒ－またはＲＲ－であり、Ｘ^１７が、ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡから選択される、ペプチド、そのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、ＭＭＧＭＶＦ（配列番号４５）、ＲＭＭＧＭＶＦＱ（配列番号５１）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳ（配列番号５２）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬ（配列番号５３）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号５４）、ＲＲＭＭＧＭＶＦ（配列番号５７）、アセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号６１）、ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６２）、およびアセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６３）から選択されるアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含む。

一実施形態は、溶媒和物および／またはその共結晶をさらに含む式Ｉ～ＩＩのアミノ酸配列のペプチドを含む。

一実施形態は、アミノ酸配列ＭＲＲＩＩＧＩＶＦＱＣＬＣＧＬ（配列番号２）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号２に対して最大５アミノ酸修飾を含む配列番号２の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号２に対して最大５アミノ酸修飾を含む配列番号２の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５のうちの１つ以上にあり、アミノ酸番号付けは、配列番号２に対応する。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号２に対して最大５アミノ酸修飾を含み、修飾（複数可）は、位置１、４、５、６、７、９、１１、１３、１４または１５のうちの１つ以上にあり、アミノ酸番号付けは、配列番号２に対応する。

一実施形態は、ＭＲＲＩＩＧＩＶＦＱＣＬＣＧＬ（配列番号２）、ＭＲＲＭＭＧＭＶＦＱＣＬＣＧＬ（配列番号７）、ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＣＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号８）、ＲＲＩＩ（ｄＡ）ＩＶＦＱＣＬＣ（ｄＡ）Ｌ（配列番号９）、ＲＲＭＭＧＭＶＹＱＣＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号１０）、ＲＲＭＭＧＭＶＥＱＣＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号１２）、ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号１５）、（ＰＥＧ１２）ＫＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号３６）、ＲＲＭＭＧＭＶＥＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号３８）、ＲＲＩＩＧＩＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号４３）から選択されるペプチド、またはその薬学的に許容される塩を含む。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、表１に列挙するペプチドによって表される。

例示的な実施形態では、ペプチドまたはペプチド誘導体は、ＰＥＧ、アセチル、ビオチンまたはそれらの脂肪酸誘導体である。例示的な実施形態では、ペプチド誘導体は、ＰＥＧ１２を含む。

例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、脂肪細胞、例えば、ヒト初代脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルを減少させる。例示的な態様では、遊離脂肪酸レベルは、対照と比較して、少なくともまたは約５％減少する。例示的な態様では、遊離脂肪酸レベルは、対照と比較して、少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、少なくともまたは約９０％減少する。例示的な態様では、遊離脂肪酸レベルは、対照と比較して、９０％を超えて減少する。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、脂肪細胞、例えば、ヒト初代脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルを、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって達成されるかまたはそれに関連するレベルと比較してより良好に減少させる。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、脂肪細胞、例えば、ヒト初代脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルを、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって引き起こされるかまたはそれに関連する減少よりも少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、少なくともまたは約９０％程度まで減少させる。脂肪細胞中の遊離脂肪酸レベルをアッセイする好適な方法が周知であり、そのいくつかの例示的な方法が、本明細書の実施例２～５および１７に記載される。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、実施例２～５および１７の１つに記載の方法によってアッセイされるように、脂肪細胞、例えばヒト初代脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルを減少させる。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、実施例２～５および１７の１つに記載の単回用量アッセイによってアッセイされるように、脂肪細胞、例えばヒト初代脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルを減少させる。

例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、哺乳動物、例えば、ＤＩＯマウス、ヒトにおいて、体重、血糖値、および／または脂肪量を減少させる。例示的な態様では、哺乳動物において、体重、血糖値、および／または脂肪量は、対照と比較して、少なくともまたは約５％減少する。例示的な態様では、哺乳動物において、体重、血糖値、および／または脂肪量は、対照と比較して、少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％減少する。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、哺乳動物、例えば、ＤＩＯマウス、ヒトにおいて、体重、血糖値、および／または脂肪量を、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって達成されるかまたはそれに関連するレベルと比較してより良好に減少させる。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、哺乳動物、例えば、ＤＩＯマウス、ヒトにおいて、体重、血糖値、および／または脂肪量を、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって引き起こされるかまたはそれに関連する減少よりも少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、少なくともまたは約９０％程度まで減少させる。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、肝障害の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルを減少させる。例示的な態様では、肝臓損傷の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルは、哺乳動物において、対照と比較して、少なくともまたは約５％減少する。例示的な態様では、肝臓損傷の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルは、哺乳動物において、対照と比較して、少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、少なくともまたは約９０％減少する。例示的な態様では、肝臓損傷の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルは、哺乳動物において、対照と比較して、９０％を超えて減少する。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、肝障害の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルを、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって達成されるかまたはそれに関連するレベルと比較してより良好に減少させる。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、肝臓損傷の酵素マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ）の血清トリグリセリドレベルおよび／または血清レベルを、ＭＯＴＳ－ｃペプチド（例えば、配列番号２からなるペプチド）によって引き起こされるかまたはそれに関連する減少よりも少なくともまたは約１０％、少なくともまたは約２０％、少なくともまたは約３０％、少なくともまたは約４０％、少なくともまたは約５０％、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、少なくともまたは約９０％程度まで減少させる。哺乳動物における体重、血糖値、脂肪量、血清トリグリセリドレベル、および肝臓損傷の酵素マーカーの血清レベルをアッセイする好適な方法が当技術分野で周知であり、そのいくつかの例示的な方法が、本明細書の実施例６～９および１８～２０に記載される。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、哺乳動物、例えば、ＤＩＯマウス、ヒトにおいて、体重、血糖値、および／または脂肪量を、実施例６～９および１８～２０の１つに記載の方法によって、例えば、例えば、１５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で１０日間皮下もしくは腹腔内注入により１日１回または２回（実施例６）、１５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で２１日間適切な経路で１日２回（実施例７）、５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で２１日間適切な経路で１日１回（実施例８）、１５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で２１日間適切な経路で１日２回（実施例９）でアッセイした際に減少させる。

例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、摂氏３７度で６０分間、マウス血漿中で少なくとも１０％の安定性を示す。言い換えれば、ペプチドまたはペプチド類似体の開始アッセイ量の少なくとも１０％は、摂氏３７度で６０分間マウス血漿中でインキュベートされた後、無傷状態（例えば、分解されていない、切断されていないなど）で存在する。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、摂氏３７度で６０分間血漿中で少なくとも２０％の安定性、少なくともまたは約３０％の安定性、少なくともまたは約４０％の安定性、少なくともまたは約５０％の安定性、少なくともまたは約６０％の安定性、少なくともまたは約７０％の安定性、少なくともまたは約８０％の安定性、あるいは少なくともまたは約９０％の安定性を示す。血漿（マウス血漿を含む）中のペプチドの安定性をアッセイする好適な方法が、当技術分野で周知である。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、摂氏３７度で６０分間、マウス血漿中で少なくとも１０％の安定性を示す。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、単一ペプチド用量／濃度アッセイによってアッセイされるように、摂氏３７度で６０分間、マウス血漿中で少なくとも１０％の安定性を示す。

ペプチド長
例示的な実施形態では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、本明細書に記載されるように、ペプチド結合または他の共有結合を介して接続された少なくとも４アミノ酸を含むペプチドまたはペプチド類似体である。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、約４～約５０アミノ酸の長さである。本明細書のペプチドについては、４～５０アミノ酸のすべての整数サブレンジが具体的に企図される。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、約５～約３５アミノ酸の長さ、約５～約３０アミノ酸の長さ、約５～約２５アミノ酸の長さ、または約５～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、約６～約３５アミノ酸の長さ、約７～約３０アミノ酸の長さ、約６～約２５アミノ酸の長さ、または約６～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、約７～約３５アミノ酸の長さ、約７～約３０アミノ酸の長さ、約７～約２５アミノ酸の長さ、または約７～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、約８～約３５アミノ酸の長さ、約８～約３０アミノ酸の長さ、約８～約２５アミノ酸の長さ、または約８～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、約８～約１７もしくは１８、または約９～約１６もしくは１７アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、約１０～約１７、または約１２～約１６もしくは１７、または約１４～約１６アミノ酸の長さである。いくつかの実施形態では、ペプチドは、５－ｍｅｒ、６－ｍｅｒ、７－ｍｅｒ、８－ｍｅｒ、９－ｍｅｒ、－１０－ｍｅｒ、１１－ｍｅｒ、１２－ｍｅｒ、１３－ｍｅｒ、１４－ｍｅｒ、１５－ｍｅｒ、１６－ｍｅｒ、１７－ｍｅｒ、１８－ｍｅｒ、１９－ｍｅｒ、または２０－ｍｅｒである。

ペプチド修飾
本開示のペプチドは、任意の方法および任意の理由で、例えば、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させるため、（２）結合親和性を改変するため、および（３）他の物理化学または機能特性を付与または修飾するために、修飾されているペプチドを含む。例えば、単一または複数のアミノ酸置換（例えば、等価、保存的または非保存的置換、欠失または付加）が配列内で行われ得る。例示的な態様では、本開示のペプチドまたはペプチド類似体は、表１に列挙される配列、またはその修飾された配列を含む。本開示の例示的な実施形態では、ペプチドまたはペプチド類似体は、本明細書でさらに記載されるように、脂質化（例えば、ミリトイル化、パルミトイル化、Ｃ_７－Ｃ_２０脂質部分に連結）、グリコシル化、アミド化、カルボキシル化、リン酸化、エステル化、アシル化、アセチル化、環化、ペグ化（例えば、５～２０ｋＤａＰＥＧに連結、５ｋＤａＰＥＧ、１２ｋＤａＰＥＧ、２０ｋＤａＰＥＧに連結）、もしくは酸付加塩への変換、および／または任意選択で二量体化もしくは重合化、または共役化される。２００～４６００ｍｏｌ重量のサイズのＰＥＧも、本発明のペプチドを修飾するために有用であろう。直鎖、分岐、および星型の形状であるＰＥＧもまた、本発明のペプチドを修飾するために有用であろう。また、ＰＥＧ６００は、ＰＥＧ１２としても知られる。本開示の例示的な実施形態では、ペプチドまたはペプチド類似体は、Ｎ末端でアセチル化され、Ｃ末端でアミド化され、および／またはＴｙｒ残基でリン酸化される。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、内部残基のＮ末端または側鎖で脂質部分に連結される。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、脂質部分に直接的に連結される。例示的な態様では、ペプチドまたはペプチド類似体は、脂質部分に間接的に連結される。例えば、脂質部分は、リンカーを介してペプチドに結合され得る。リンカーはアミノ酸であってもよい。例示的な態様では、脂質部分は、イプシロンアミンを介して任意選択で結合されるＧｌｕ残基を介して、ペプチドまたはペプチド類似体のＬｙｓ残基に結合される。本発明の修飾ペプチドの例を表１に見出す。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるペプチドは、配列番号１～６４のアミノ酸配列のうちのいずれか１つと少なくとも６６％の配列同一性を有する配列を含む。ある特定の実施形態では、同一性％は、例えば、所定の配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、またはそれ以上の配列同一性から選択される。ある特定の実施形態では、同一性％は、例えば、約６５％～約７０％、約７０％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９０％～約９５％、％、約７０％～約８０％、約８０％～約９０％、および約９０％～約９９％の配列同一性の範囲内である。

ある特定の実施形態では、ペプチドは、配列番号１～６４のアミノ酸配列のうちのいずれか１つと少なくとも６６％の配列同一性を有する配列を含む。ある特定の実施形態では、同一性％は、例えば、所定の配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、またはそれ以上の配列同一性から選択される。ある特定の実施形態では、同一性％は、例えば、約６５％～約７０％、約７０％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９０％～約９５％、％、約７０％～約８０％、約８０％～約９０％、および約９０％～約９９％の配列同一性の範囲内であるが、配列番号２に記載される配列は含まない。

本開示のペプチドは、任意の方法および任意の理由で、例えば、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させるため、（２）結合親和性を改変するため、および（３）他の物理化学または機能特性を付与または修飾するために、修飾されているペプチドを含む。例えば、単一または複数のアミノ酸置換（例えば、等価、保存的または非保存的置換、欠失または付加）が配列内で行われ得る。

保存的アミノ酸置換は、類似の性質、例えば、サイズ、電荷、疎水性、親水性、および／または芳香族性を有する機能的に類似のアミノ酸を含むアミノ酸のペプチドでの置換を指す。以下の６つの群は各々、互いに保守的な置換であるアミノ酸を含み、表２に見出される。

さらに、本明細書に適用される「等価のアミノ酸置換」という用語の意味の範囲内で、１アミノ酸を別のものに置換することができ、一実施形態では、本明細書の以下に示されるアミノ酸の群内で置換することができる。
１．極性側鎖を有するアミノ酸（Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、およびＣｙｓ）
２．小さな非極性または微極性残基を有するアミノ酸（Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ）
３．非極性側鎖を有するアミノ酸（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｐｒｏ、およびＭｅｔ）
４．大きな脂肪族非極性残基を有するアミノ酸（Ｍｅｔ、のＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｃｙｓ、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ホモシステイン）
５．脂肪族側鎖を有するアミノ酸（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ）
６．環状側鎖を有するアミノ酸（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｐｒｏ）
７．芳香族側鎖を有するアミノ酸（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）
８．酸性側鎖を有するアミノ酸（Ａｓｐ、Ｇｌｕ）
９．塩基性側鎖を有するアミノ酸（Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）
１０．アミド側鎖を有するアミノ酸（Ａｓｎ、Ｇｌｎ）
１１．ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ）
１２．硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（Ｃｙｓ、Ｍｅｔ）
１３．中性、弱疎水性アミノ酸（Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ）
１４．親水性、酸性アミノ酸（Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ）、および
１５．疎水性アミノ酸（Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ）

いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換ではなく、例えば、非保存的アミノ酸置換である。この分類には、一般に、対応するＤ－アミノ酸、ホモアミノ酸、Ｎ－アルキルアミノ酸、ベータアミノ酸、および他の非天然アミノ酸が含まれる。非保存的アミノ酸置換は、依然として上記の等価のアミノ酸置換について特定される説明の範囲内にある［例えば、極性、非極性など］。非保存的アミノ酸の例は、以下に提供される。

アラニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｄ－アラニン［Ｄａｌａ、（ｄＡ）、ａ］、Ｎ－アセチル－３－（３，４－ジメトキシフェニル）－Ｄ－アラニン、Ｎ－Ｍｅ－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｈ－β－Ａｌａ－β－ナフタレン、Ｌ－（－）－２－アミノ－３－ウレイド酸、（Ｒ）－（＋）－α－アリルアラニン、（Ｓ）－（－）－α－アリルアラニン、Ｄ－２－アミノ酪酸、Ｌ－２－アミノ酪酸、ＤＬ－２－アミノ酪酸、２－アミノイソ酪酸、α－アミノイソ酪酸、（Ｓ）－（＋）－２－アミノ－４－フェニル酪酸エチルエステル、α－アミノイソ酪酸ベンジル、Ａｂｕ－ＯＨ、Ａｉｂ－ＯＨ、β－（９－アントリル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（３－ベンゾチエニル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（３－ベンゾチエニル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｃｈａ－ＯＨ、Ｃｈａ－ＯＭｅ、β－（２－フリル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（２－フリル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、β－ヨード－Ａｌａ－ＯＢｚｌ、β－ヨード－Ｄ－Ａｌａ－ＯＢｚｌ、３－ヨード－Ｄ－Ａｌａ－ＯＭｅ、β－ヨード－Ａｌａ－ＯＭｅ、１－Ｎａｌ－ＯＨ、Ｄ－１－Ｎａｌ－ＯＨ、２－Ｎａｌ－ＯＨ、Ｄ－２－Ｎａｌ－ＯＨ、（Ｒ）－３－（２－ナフチル）－β－Ａｌａ－ＯＨ、（Ｓ）－３－（２－ナフチル）－β－Ａｌａ－ＯＨ、β－フェニル－Ｐｈｅ－ＯＨ、３－（２－ピリジル）－Ａｌａ－ＯＨ、３－（３－ピリジル）－Ａｌａ－ＯＨ、３－（３－ピリジル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、（Ｓ）－３－（３－ピリジル）－β－Ａｌａ－ＯＨ、３－（４－ピリジル）－Ａｌａ－ＯＨ、３－（４－ピリジル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、β－（２－キノリル）－Ａｌａ－ＯＨ、３－（２－キノリル）－ＤＬ－Ａｌａ－ＯＨ、３－（３－キノリル）－ＤＬ－Ａｌａ－ＯＨ、３－（２－キノキサリル）－ＤＬ－Ａｌａ－ＯＨ、β－（４－チアゾリル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（２－チエニル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（２－チエニル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、β－（３－チエニル）－Ａｌａ－ＯＨ、β－（３－チエニル）－Ｄ－Ａｌａ－ＯＨ、３－クロロ－Ｄ－アラニンメチルエステル、Ｎ－［（４－クロロフェニル）スルホニル］－β－アラニン、３－シクロヘキシル－Ｄ－アラニン、３－シクロペンチル－ＤＬ－アラニン、（－）－３－（３，４－ジヒドロキシフェニル）－２－メチル－Ｌ－アラニン、３，３－ジフェニル－Ｄ－アラニン、３，３－ジフェニル－Ｌ－アラニン、Ｎ－［（Ｓ）－（＋）－１－（エトキシカルボニル）－３－フェニルプロピル］－Ｌ－アラニン、Ｎ－［１－（Ｓ）－（＋）－エトキシカルボニル－３－フェニルプロピル］－Ｌ－アラニルカルボキシ無水物、Ｎ－（３－フルオロベンジル）アラニン、Ｎ－（３－インドリルアセチル）－Ｌ－アラニン、メチル（ＲＳ）－２－（アミノメチル）－３－フェニルプロピオネート、３－（２－オキソ－１，２－ジヒドロ－４－キノリニル）アラニン、３－（１－ピラゾリル）－Ｌ－アラニン、３－（２－ピリジル）－Ｄ－アラニン、３－（２－ピリジル）－Ｌ－アラニン、３－（３－ピリジル）－Ｌ－アラニン、３－（４－ピリジル）－Ｄ－アラニン、３－（４－ピリジル）－Ｌ－アラニン、３－（２－キノリル）－ＤＬ－アラニン、３－（４－キノリル）－ＤＬ－アラニン、Ｄ－スチリルアラニン、Ｌ－スチリルアラニン、３－（２－チエニル）－Ｌ－アラニン、３－（２－チエニル）－ＤＬ－アラニン、３－（２－チエニル）－ＤＬ－アラニン、３，３，３－トリフルオロ－ＤＬ－アラニン、Ｎ－メチル－Ｌ－アラニン、３－ウレイドプロピオン酸、Ａｉｂ－ＯＨ、Ｃｈａ－ＯＨ、デヒドロ－Ａｌａ－ＯＭｅ、デヒドロ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｄ－２－Ｎａｌ－ＯＨ、β－Ａｌａ－ＯＮｐ、β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、β－Ｄ－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、β－アラニン、β－アラニンエチルエステル、β－アラニンメチルエステル、（Ｓ）－ジフェニル－β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、（Ｒ）－４－（４－ピリジル）－β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、（Ｓ）－４－（４－ピリジル）－β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、β－Ａｌａ－ＯＨ、（Ｓ）－ジフェニル－β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、Ｌ－β－ホモアラニン、（Ｒ）－４－（３－ピリジル）－β－Ｈｏｍｏａｌａ－ＯＨ、α－メチル－α－ナフチルアラニン［Ｍａｎａｐ］、Ｎ－メチル－シクロヘキシルアラニン［Ｎｍｃｈｅｘａ］、シクロヘキシルアラニン［Ｃｈｅｘａ］、Ｎ－メチル－シクロペンチルアラニン［Ｎｍｃｐｅｎ］、シクロペンチルアラニン［Ｃｐｅｎ］、Ｎ－メチル－α－ナフチルアラニン［Ｎｍａｎａｐ］、α－ナフチルアラニン［Ａｎａｐ］、Ｌ－Ｎ－メチルアラニン［Ｎｍａｌａ］、Ｄ－Ｎ－メチルアラニン［Ｄｎｍａｌａ］、α－メチル－シクロヘキシルアラニン［Ｍｃｈｅｘａ］、α－メチル－シクロペンチルアラニン［Ｍｃｐｅｎ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

アルギニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、ホモアルギニン（ｈＡｒｇ）、Ｎ－メチルアルギニン（ＮＭｅＡｒｇ）、シトルリン、２－アミノ－３－グアニジノプロピオン酸、Ｎ－イミノエチル－Ｌ－オルニチン、Νω－モノメチル－Ｌ－アルギニン、Νω－ニトロ－Ｌ－アルギニン、Ｄ－アルギニン、２－アミノ－３－ウレイドプロピオン酸、Νω，ω－ジメチル－Ｌ－アルギニン、Νω－ニトロ－Ｄ－アルギニン、Ｌ－α－メチルアルギニン［Ｍａｒｇ］、Ｄ－α－メチルアルギニン［Ｄｍａｒｇ］、Ｌ－Ｎ－メチルアルギニン［Ｎｍａｒｇ］、Ｄ－Ｎ－メチルアルギニン［Ｄｎｍａｒｇ］、β－Ｈｏｍｏａｒｇ－ＯＨ、Ｌ－ホモアルギニン、Ｎ－（３－グアニジノプロピル）グリシン［Ｎａｒｇ］、およびＤ－アルギニン［Ｄａｒｇ、（ｄＲ）、ｒ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

アスパラギンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－α－メチルアスパラギン［Ｍａｓｎ］、Ｄ－α－メチルアスパラギン［Ｄｍａｓｎ］、Ｌ－Ｎ－メチルアスパラギン［Ｎｍａｓｎ］、Ｄ－Ｎ－メチルアスパラギン［Ｄｎｍａｓｎ］、Ｎ－（カルバミルメチル）グリシン［Ｎａｓｎ］、およびＤ－アスパラギン［Ｄａｓｎ、（ｄＮ）、ｎ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

アスパラギン酸の非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－α－メチルアスパラギン酸塩［Ｍａｓｐ］、Ｄ－α－メチルアスパラギン酸塩［Ｄｍａｓｐ］、Ｌ－Ｎ－メチルアスパラギン酸［Ｎｍａｓｐ］、Ｄ－Ｎ－メチルアスパラギン酸塩［Ｄｎｍａｓｐ］、Ｎ－（カルボキシメチル）グリシン［Ｎａｓｐ］、およびＤ－アスパラギン酸［Ｄａｓｐ、（ｄＤ）、ｄ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

システインの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－システイン酸、Ｌ－システインスルフィン酸、Ｄ－エチオニン、Ｓ－（２－チアゾリル）－Ｌ－システイン、ＤＬ－ホモシステイン、Ｌ－ホモシステイン、Ｌ－ホモシスチン、Ｌ－α－メチルシステイン［Ｍｃｙｓ］、Ｄ－α－メチルシステイン［Ｄｍｃｙｓ］、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン［Ｎｍｃｙｓ］、Ｄ－Ｎ－メチルシステイン［Ｄｎｍｃｙｓ］、Ｎ－（チオメチル）グリシン［Ｎｃｙｓ］、およびＤ－システイン［Ｄｃｙｓ、（ｄＣ）、ｃ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

グルタミン酸の非保存的アミノ酸の非限定的な例は、γ－カルボキシ－ＤＬ－グルタミン酸、４－フルオロ－ＤＬ－グルタミン酸、β－グルタミン酸、Ｌ－β－ホモグルタミン酸、Ｌ－α－メチルグルタミン酸塩［Ｍｇｌｕ］、Ｄ－α－メチルグルタミン酸［Ｄｍｇｌｕ］、Ｌ－Ｎ－メチルグルタミン酸［Ｎｍｇｌｕ］、Ｄ－Ｎ－メチルグルタミン酸塩［Ｄｎｍｇｌｕ］、Ｎ－（２－カルボキシエチル）グリシン［Ｎｇｌｕ］、およびＤ－グルタミン酸［Ｄｇｌｕ、（ｄＥ）、ｅ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

グルタミンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｃｉｔ－ＯＨ、Ｄ－シトルリン、チオ－Ｌ－シトルリン、β－Ｇｌｎ－ＯＨ、Ｌ－β－ホモグルタミン、Ｌ－α－メチルグルタミン［Ｍｇｌｎ］、Ｄ－α－メチルグルタミン［Ｄｍｇｌｎ］、Ｌ－Ｎ－メチルグルタミン［Ｎｍｇｌｎ］、Ｄ－Ｎ－メチルグルタミン［Ｄｎｍｇｌｎ］、Ｎ－（２－カルバミルエチル）グリシン［Ｎｇｌｎ］、およびＤ－グルタミン［Ｄｇｌｎ、（ｄＱ）、ｑ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

グリシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、ｔＢｕ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｄ－アリルグリシン、Ｎ－［ビス（メチルチオ）メチレン］グリシンメチルエステル、Ｃｈｇ－ＯＨ、Ｄ－Ｃｈｇ－ＯＨ、Ｄ－シクロプロピルグリシン、Ｌ－シクロプロピルグリシン、（Ｒ）－４－フルオロフェニルグリシン、（Ｓ）－４－フルオロフェニルグリシン、イミノ二酢酸、（２－インダニル）－Ｇｌｙ－ＯＨ、（±）－α－ホスホノグリシントリメチルエステル、Ｄ－プロパルギルグリシン、プロパルギル－Ｇｌｙ－ＯＨ、（Ｒ）－２－チエニルグリシン、（Ｓ）－２－チエニルグリシン、（Ｒ）－３－チエニルグリシン、（Ｓ）－３－チエニルグリシン、２－（４－トリフルオロメチル－フェニル）－ＤＬ－グリシン、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－α－（カルボキシシクロプロピル）グリシン、Ｎ－（クロロアセチル）グリシンエチルエステル、（Ｓ）－（＋）－２－クロロフェニルグリシンメチルエステル、Ｎ－（２－クロロフェニル）－Ｎ－（メチルスルホニル）グリシン、Ｄ－α－シクロヘキシルグリシン、Ｌ－α－シクロプロピルグリシン、ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－イミノジカルボキシレート、アセトアミドシアノ酢酸エチル、Ｎ－（２－フルオロフェニル）－Ｎ－（メチルスルホニル）グリシン、Ｎ－（４－フルオロフェニル）－Ｎ－（メチルスルホニル）グリシン、Ｎ－（２－フルフリリデンアセチル）グリシンメチルエステル、Ｎ－（２－フロイル）グリシン、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸、Ｎ－（４－ヒドロキシフェニル）グリシン、イミノ二酢酸、Ｎ－ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Ｌ－α－ネオペンチルグリシン、Ｎ－（ホスホノメチル）グリシン、Ｄ－プロパルギルグリシン、Ｌ－Ｃ－プロパルギルグリシン、サルコシン、Ｎ，Ｎ－ジメチルグリシン、Ｎ，Ｎ－ジメチルグリシンエチルエステル、Ｄ－Ｃｈｇ－ＯＨ、α－ホスホノグリシントリメチルエステル、Ｎ－シクロブチルグリシン［Ｎｃｂｕｔ］、Ｌ－α－メチルエチルグリシン［Ｍｅｔｇ］、Ｎ－シクロヘプチルグリシン［Ｎｃｈｅｐ］、Ｌ－α－メチル－ｉ－ブチルグリシン［Ｍｔｂｕｇ］、Ｎ－メチルグリシン［Ｎｍｇｌｙ］、Ｌ－Ｎ－メチルエチルグリシン［Ｎｍｅｔｇ］、Ｌ－エチルグリシン［Ｅｔｇ］、Ｌ－Ｎ－メチル－ｔ－ブチルグリシン［Ｎｍｔｂｕｇ］、Ｌ－ｔ－ブチルグリシン［Ｔｂｕｇ］、Ｎ－シクロヘキシルグリシン［Ｎｃｈｅｘ］、Ｎ－シクロデシルグリシン［Ｎｃｄｅｃ］、Ｎ－シクロドデシルグリシン［Ｎｃｄｏｄ］、Ｎ－シクロオクチルグリシン［Ｎｃｏｃｔ］、Ｎ－シクロプロピルグリシン［Ｎｃｐｒｏ］、Ｎ－シクロウンデシルグリシン［Ｎｃｕｎｄ］、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン［Ｎａｅｇ］、Ｎ－（Ｎ－（２，２－ジフェニルエチル）ジフェニルエチル）グリシン［Ｎｎｂｈｍ］、Ｎ－（２，２－カルバミルメチルグリシン［Ｎｂｈｍ］、Ｎ－（Ｎ－（３，３－ジフェニルプロピル）ジフェニルプロピル）グリシン［Ｎｎｂｈｅ］、およびＮ－（３，３－カルバミルメチルグリシン［Ｎｂｈｅ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

ヒスチジンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－α－メチルヒスチジン［Ｍｈｉｓ］、Ｄ－α－メチルヒスチジン［Ｄｍｈｉｓ］、Ｌ－Ｎ－メチルヒスチジン［Ｎｍｈｉｓ］、Ｄ－Ｎ－メチルヒスチジン［Ｄｎｍｈｉｓ］、Ｎ－（イミダゾリルエチル）グリシン［Ｎｈｉｓ］、およびＤ－ヒスチジン［Ｄｈｉｓ、（ｄＨ）、ｈ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

イソロイシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｎ－メチル－Ｌ－イソロイシン［Ｎｍｉｌｅ］、Ｎ－（３－インドリルアセチル）－Ｌ－イソロイシン、アロ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｄ－アロ－イソロイシン、Ｌ－β－ホモイソロイシン、Ｌ－α－メチルイソロイシン［Ｍｉｌｅ］、Ｄ－α－メチルイソロイシン［Ｄｍｉｌｅ］、Ｄ－Ｎ－メチルイソロイシン［Ｄｎｍｉｌｅ］、Ｎ－（１－メチルプロピル）グリシン［Ｎｉｌｅ］、およびＤ－イソロイシン［Ｄｉｌｅ、（ｄＤ）、ｉ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

ロイシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｄ－ロイシン［Ｄｌｅｕ、（ｄＬ）、ｌ］である。シクロロイシン、ＤＬ－ロイシン、Ｎ－ホルミル－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｄ－ｔｅｒｔ－ロイシン、Ｌ－ｔｅｒｔ－ロイシン、ＤＬ－ｔｅｒｔ－ロイシン、Ｌ－ｔｅｒｔ－ロイシンメチルエステル、５，５，５－トリフルオロ－ＤＬ－ロイシン、Ｄ－β－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｌ－β－ロイシン、ＤＬ－β－ロイシン、Ｌ－β－ホモロイシン、ＤＬ－β－ホモロイシン、Ｌ－Ｎ－メチル－ロイシン［Ｎｍｌｅｕ］、Ｄ－Ｎ－メチル－ロイシン［Ｄｎｍｌｅｕ］、Ｌ－α－メチル－ロイシン［Ｍｌｅｕ］、Ｄ－α－メチル－ロイシン［Ｄｍｌｅｕ］、Ｎ－（２－メチルプロピル）グリシン［Ｎｌｅｕ］、Ｄ－ロイシン［Ｄｌｅｕ、ｌ］、Ｄ－ノルロイシン、Ｌ－ノルロイシン、ＤＬ－ノルロイシン、Ｌ－Ｎ－メチルノルロイシン［Ｎｍｎｌｅ］、およびＬ－ノルロイシン［Ｎｌｅ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。

リジンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、ＤＬ－５－ヒドロキシリジン、（５Ｒ）－５－ヒドロキシ－Ｌ－リジン、β－Ｌｙｓ－ＯＨ、Ｌ－β－ホモリジン、Ｌ－α－メチル－リジン［Ｍｌｙｓ］、Ｄ－α－メチル－リジン［Ｄｍｌｙｓ］、Ｌ－Ｎ－メチル－リジン［Ｎｍｌｙｓ］、Ｄ－Ｎ－メチル－リジン［Ｄｎｍｌｙｓ］、Ｎ－（４－アミノブチル）グリシン［Ｎｌｙｓ］、およびＤ－リジン［Ｄｌｙｓ、（ｄＫ）、ｋ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

メチオニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－β－ホモメチオニン、ＤＬ－β－ホモメチオニン、Ｌ－α－メチルメチオニン［Ｍｍｅｔ］、Ｄ－α－メチルメチオニン［Ｄｍｍｅｔ］、Ｌ－Ｎ－メチルメチオニン［Ｎｍｍｅｔ］、Ｄ－Ｎ－メチルメチオニン［Ｄｎｍｍｅｔ］、Ｎ－（２－メチルチオエチル）グリシン［Ｎｍｅｔ］、およびＤ－メチオニン［Ｄｍｅｔ、（ｄＭ）、ｍ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

フェニルアラニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｎ－アセチル－２－フルオロ－ＤＬ－フェニルアラニン、Ｎ－アセチル－４－フルオロ－ＤＬ－フェニルアラニン、４－アミノ－Ｌ－フェニルアラニン、３－［３，４－ビス（トリフルオロメチル）フェニル］－Ｌ－アラニン、Ｂｐａ－ＯＨ、Ｄ－Ｂｐａ－ＯＨ、４－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｐｈｅ－ＯＨ、４－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｄ－Ｐｈｅ－ＯＨ、４－（アミノ）－Ｌ－フェニルアラニン、ｒａｃ－β^２－ホモフェニルアラニン、２－メトキシ－Ｌ－フェニルアラニン、（Ｓ）－４－メトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、２－ニトロ－Ｌ－フェニルアラニン、ペンタフルオロ－Ｄ－フェニルアラニン、ペンタフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、Ｐｈｅ（４－Ｂｒ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｂｒ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－ＣＮ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－ＣＮ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－ＣＮ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＣＮ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－ＣＮ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＮＨ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＮＯ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－Ｆ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－Ｆ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４－Ｆ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３，４－Ｆ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，５－Ｆ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｆ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｉ）－ＯＨ、Ｄ－３，４，５－トリフルオロフェニルアラニン、ｐ－ブロモ－ＤＬ－フェニルアラニン、４－ブロモ－Ｌ－フェニルアラニン、β－フェニル－Ｄ－フェニルアラニン、４－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン、ＤＬ－２，３－ジフルオロフェニルアラニン、ＤＬ－３，５－ジフルオロフェニルアラニン、３，４－ジヒドロキシ－Ｌ－フェニルアラニン、３－（３，４－ジメトキシフェニル）－Ｌ－アラニン、Ｎ－［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］－２－メトキシ－Ｌ－フェニルアラニン、ｏ－フルオロ－ＤＬ－フェニルアラニン、ｍ－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、ｍ－フルオロ－ＤＬ－フェニルアラニン、ｐ－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、ｐ－フルオロ－ＤＬ－フェニルアラニン、４－フルオロ－Ｄ－フェニルアラニン、２－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニンメチルエステル、ｐ－フルオロ－ＤＬ－Ｐｈｅ－ＯＭｅ、Ｄ－３－ブロモフェニルアラニン、Ｄ－４－ブロモフェニルアラニン、Ｌ－β－（６－クロロ－４－ピリジニル）アラニン、Ｄ－３，５－ジフルオロフェニルアラニン、Ｌ－３－フルオロフェニルアラニン、Ｌ－４－フルオロフェニルアラニン、Ｌ－β－（１Ｈ－５－インドリル）アラニン、２－ニトロ－Ｌ－フェニルアラニン、ペンタフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、ｐｈｅ（３－ｂｒ）－ｏｈ、Ｐｈｅ（４－Ｂｒ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－ＣＦ_３）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３，４－Ｃｌ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｃｌ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－ＣＮ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－ＣＮ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－ＣＮ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＣＮ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（２－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－Ｍｅ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－ＮＯ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－ＮＯ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（２－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３－Ｆ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（３－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４－Ｆ_２）－ＯＨ、Ｐｈｅ（３，５－Ｆ_２）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｆ）－ＯＨ、Ｐｈｅ（４－Ｉ）－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｅ（４－Ｉ）－ＯＨ、４－（ホスホノメチル）－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｌ－４－トリフルオロメチルフェニルアラニン、３，４，５－トリフルオロ－Ｄ－フェニルアラニン、Ｌ－３，４，５－トリフルオロフェニルアラニン、６－ヒドロキシ－ＤＬ－ＤＯＰＡ、４－（ヒドロキシメチル）－Ｄ－フェニルアラニン、Ｎ－（３－インドリルアセチル）－Ｌ－フェニルアラニン、ｐ－ヨード－Ｄ－フェニルアラニン、４－ヨード－Ｌ－フェニルアラニン、α－メチル－Ｄ－フェニルアラニン、α－メチル－Ｌ－フェニルアラニン、α－メチル－ＤＬ－フェニルアラニン、α－メチル－ＤＬ－フェニルアラニンメチルエステル、４－ニトロ－Ｄ－フェニルアラニン、４－ニトロ－Ｌ－フェニルアラニン、４－ニトロ－ＤＬ－フェニルアラニン、（Ｓ）－（＋）－４－ニトロフェニルアラニンメチルエステル、２－（トリフルオロメチル）－Ｄ－フェニルアラニン、２－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニン、３－（トリフルオロメチル）－Ｄ－フェニルアラニン、３－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニン、４－（トリフルオロメチル）－Ｄ－フェニルアラニン、３，３’，５－トリヨード－Ｌ－チロニン、（Ｒ）－４－ブロモ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｎ－アセチル－ＤＬ－β－フェニルアラニン、（Ｓ）－４－ブロモ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－クロロ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－クロロ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－クロロ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－クロロ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－シアノ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－シアノ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－シアノ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－３－シアノ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－シアノ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－シアノ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－３，４－ジメトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３，４－ジメトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－フルオロ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－フルオロ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－ヨード－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－シアノ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３，４－ジフルオロ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－フルオロ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－β２－ホモフェニルアラニン、（Ｒ）－３－メトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－メトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－メトキシ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－メチル－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－２－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－３－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－メチル－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、β－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｄ－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－（トリフルオロメチル）－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－（トリフルオロメチル）－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－（トリフルオロメチル）－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－（トリフルオロメチル）－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－（トリフルオロメチル）－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－３－（トリフルオロメチル）－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－（トリフルオロメチル）－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｒ）－４－（トリフルオロメチル）－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－４－（トリフルオロメチル）－β－Ｐｈｅ－ＯＨ、β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、Ｄ－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－２－メチル－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－メチル－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、β－Ｐｈｅ－ＯＨ、β－Ｄ－Ｐｈｅ－ＯＨ、（Ｓ）－３－（トリフルオロメチル）－β－Ｈｏｍｏｐｈｅ－ＯＨ、Ｌ－β－ホモフェニルアラニン、ＤＬ－β－ホモフェニルアラニン、ＤＬ－β－フェニルアラニン、ＤＬ－ホモフェニルアラニンメチルエステル、Ｄ－ホモフェニルアラニン、Ｌ－ホモフェニルアラニン、ＤＬ－ホモフェニルアラニン、Ｄ－ホモフェニルアラニンエチルエステル、（Ｒ）－β^２－ホモフェニルアラニン、Ｌ－α－メチル－ホモフェニルアラニン［Ｍｈｐｈｅ］、Ｌ－α－メチルフェニルアラニン［Ｍｐｈｅ］、Ｄ－ａ－メチルフェニルアラニン［Ｄｍｐｈｅ］、Ｌ－Ｎ－メチルホモフェニルアラニン［Ｎｍｐｈｅ］、Ｌ－ホモフェニルアラニン［Ｈｐｈｅ］、Ｌ－Ｎ－メチルフェニルアラニン［Ｎｍｐｈｅ］、Ｄ－Ｎ－メチルフェニルアラニン［Ｄｎｍｐｈｅ］、Ｎ－ベンジルグリシン［Ｎｐｈｅ］、およびＤ－フェニルアラニン［Ｄｐｈｅ、（ｄＦ）、ｆ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

プロリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、ホモプロリン（ｈＰｒｏ）、（４－ヒドロキシ）Ｐｒｏ（４ＨｙＰ）、（３－ヒドロキシ）Ｐｒｏ（３ＨｙＰ）、ガンマ－ベンジル－プロリン、ガンマ－（２－フルオロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－フルオロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－フルオロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－クロロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－クロロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－クロロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－ブロモ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－ブロモ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－ブロモ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－ニトロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－ニトロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－ニトロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（１－ナフタレニルメチル）－プロリン、ガンマ－（２－ナフタレニルメチル）－プロリン、ガンマ－（２，４－ジクロロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３，４－ジクロロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３，４－ジフルオロ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－トリフルオロ－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－トリフルオロ－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－トリフルオロ－メチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－シアノ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－シアノ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－シアノ－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（２－ヨード－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－ヨード－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－ヨード－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－フェニル－アリル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（３－フェニル－プロピル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－（４－ｔｅｒｔ－ブチル－ベンジル）－プロリン、ガンマ－ベンズヒドリル－プロリン、ガンマ－（４－ビフェニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（４－チアゾリル－メチル）－プロリン、ガンマ－（３－ベンゾチエニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（２－チエニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（３－チエニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（２－フラニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（２－ピリジニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（３－ピリジニル－メチル）－プロリン、ガンマ－（４－ピリジニル－メチル）－プロリン、ガンマ－アリル－プロリン、ガンマ－プロピニル－プロリン、アルファ修飾プロリン残基、ピペコリン酸、アゼチジン－３－カルボン酸、Ｌ－β－ホモプロリン、Ｌ－β^３－ホモプロリン、Ｌ－β－ホモヒドロキシプロリン、ヒドロキシプロリン［Ｈｙｐ］、Ｌ－α－メチルプロリン［Ｍｐｒｏ］、Ｄ－α－メチルプロリン［Ｄｍｐｒｏ］、Ｌ－Ｎ－メチルプロリン［Ｎｍｐｒｏ］、Ｄ－Ｎ－メチルプロリン［Ｄｎｍｐｒｏ］、およびＤ－プロリン［Ｄｐｒｏ、（ｄＰ）、ｐ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

セリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、（２Ｒ，３Ｓ）－３－フェニルイソセリン、Ｄ－シクロセリン、Ｌ－イソセリン、ＤＬ－イソセリン、ＤＬ－３－フェニルセリン、Ｌ－β－ホモセリン、Ｄ－ホモセリン、Ｄ－ホモセリン、Ｌ－３－ホモセリン、Ｌ－ホモセリン、Ｌ－α－メチルセリン［Ｍｓｅｒ］、Ｄ－α－メチルセリン［Ｄｍｓｅｒ］、Ｌ－Ｎ－メチルセリン［Ｎｍｓｅｒ］、Ｄ－Ｎ－メチルセリン［Ｄｎｍｓｅｒ］、Ｄ－セリン［Ｄｓｅｒ、（ｄＳ）、ｓ］、Ｎ－（ヒドロキシメチル）グリシン［Ｎｓｅｒ］、およびホスホセリン［ｐＳｅｒ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

トレオニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、Ｌ－アロ－トレオニン、Ｄ－チロキシン、Ｌ－β－ホモトレオニン、Ｌ－α－メチルトレオニン［Ｍｔｈｒ］、Ｄ－α－メチルトレオニン［Ｄｍｔｈｒ］、Ｌ－Ｎ－メチルトレオニン［Ｎｍｔｈｒ］、Ｄ－Ｎ－メチルトレオニン［Ｄｎｍｔｈｒ］、Ｄ－トレオニン［Ｄｔｈｒ、（ｄＴ）、ｔ］、Ｎ－（１－ヒドロキシエチル）グリシン［Ｎｔｈｒ］、およびホスホトレオニン［ｐＴｈｒ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

トリプトファンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：５－フルオロ－Ｌ－トリプトファン、５－フルオロ－ＤＬ－トリプトファン、５－ヒドロキシ－Ｌ－トリプトファン、５－メトキシ－ＤＬ－トリプトファン、Ｌ－アブリン、５－メチル－ＤＬ－トリプトファン、Ｈ－Ｔｐｉ－ＯＭｅ。β－Ｈｏｍｏｔｒｐ－ＯＭｅ、Ｌ－β－ホモトリプトファン、Ｌ－α－メチルトリプトファン［Ｍｔｒｐ］、Ｄ－α－メチルトリプトファン［Ｄｍｔｒｐ］、Ｌ－Ｎ－メチルトリプトファン［Ｎｍｔｒｐ］、Ｄ－Ｎ－メチルトリプトファン［Ｄｎｍｔｒｐ］、Ｎ－（３－インドリルエチル）グリシン［Ｎｈｔｒｐ］、Ｄ－トリプトファン［Ｄｔｒｐ、（ｄＷ）、ｗ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。

チロシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：３，５ジヨードチロシン（３，５－ｄＩＴｙｒ）、３，５－ジブロモチロシン（３，５－ｄＢＴｙｒ）、ホモチロシン、Ｄ－チロシン、３－アミノ－Ｌ－チロシン、３－アミノ－Ｄ－チロシン、３－ヨード－Ｌ－チロシン、３－ヨード－Ｄ－チロシン、３－メトキシ－Ｌ－チロシン、３－メトキシ－Ｄ－チロシン、Ｌ－チロキシン、Ｄ－チロキシン、Ｌ－チロニン、Ｄ－チロニン、Ｏ－メチル－Ｌ－チロシン、Ｏ－メチル－Ｄ－チロシン、Ｄ－チロニン、Ｏ－エチル－Ｌ－チロシン、Ｏ－エチル－Ｄ－チロシン、３，５，３’－トリヨード－Ｌ－チロニン、３，５，３’－トリヨード－Ｄ－チロニン、３，５－ジヨード－Ｌ－チロニン、３，５－ジヨード－Ｄ－チロニン、Ｄ－メタ－チロシン、Ｌ－メタ－チロシン、Ｄ－オルト－チロシン、Ｌ－オルト－チロシン、フェニルアラニン、置換ファエニルアラニン、Ｎ－ニトロフェニルアラニン、ｐ－ニトロフェニルアラニン、３－クロロ－Ｄｔｙｒ－ｏｈ、Ｔｙｒ（３，５－ｄｉＩ）、３－クロロ－Ｌ－チロシン、Ｔｙｒ（３－ＮＯ_２）－ＯＨ、Ｔｙｒ（３，５－ｄｉＩ）－ＯＨ、Ｎ－Ｍｅ－Ｔｙｒ－ＯＨ、α－メチル－ＤＬ－チロシン、３－ニトロ－Ｌ－チロシン、ＤＬ－ｏ－チロシン、β－Ｈｏｍｏｔｙｒ－ＯＨ、（Ｒ）－β－Ｔｙｒ－ＯＨ、（Ｓ）－β－Ｔｙｒ－ＯＨ、Ｌ－α－メチルチロシン［Ｍｔｙｒ］、Ｄ－α－メチルチロシン［Ｄｍｔｙｒ］、Ｌ－Ｎ－メチルチロシン［Ｎｍｔｙｒ］、Ｄ－Ｎ－メチルチロシン［Ｄｎｍｔｙｒ］、Ｄ－チロシン［Ｄｔｙｒ、（ｄＹ）、ｙ］、Ｏ－メチル－チロシン、およびホスホチロシン［ｐＴｙｒ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。

バリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、３－フルオロ－ＤＬ－バリン、４，４，４，４’，４’，４’－ヘキサフルオロ－ＤＬバリン、Ｄ－バリン［Ｄｖａｌ、（ｄＶ）、ｖ］、Ｎ－Ｍｅ－Ｖａｌ－ＯＨ［Ｎｍｖａｌ］、Ｎ－Ｍｅ－Ｖａｌ－ＯＨ、Ｌ－α－メチルバリン［Ｍｖａｌ］、Ｄ－α－メチルバリン［Ｄｍｖａｌ］、（Ｒ）－（＋）－α－メチルバリン、（Ｓ）－（－）－α－メチルバリン、およびＤ－Ｎ－メチルバリン［Ｄｎｍｖａｌ］である。各可能性は、個別の実施形態を表す。

非保存的置換として置換され得る他の非天然アミノ酸には、オルニチンおよびその修飾：Ｄ－オルニチン［Ｄｏｒｎ］、Ｌ－オルニチン［Ｏｒｎ］、ＤＬ－オルニチン、Ｌ－α－メチルオルニチン［Ｍｏｒｎ］、Ｄ－α－メチルオルニチン［Ｄｍｏｒｎ］、Ｌ－Ｎ－メチルオルニチン［Ｎｍｏｒｎ］、Ｄ－Ｎ－メチルオルニチン［Ｄｎｍｏｒｎ］、およびＮ－（３－アミノプロピル）グリシン［Ｎｏｒｎ］が挙げられる。各可能性は、個別の実施形態を表す。

脂環式アミノ酸：Ｌ－２，４－ジアミノ酪酸、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸、Ｎ－Ｍｅ－Ａｉｂ－ＯＨ、（Ｒ）－２－（アミノ）－５－ヘキシン酸、ピペリジン２－カルボン酸、アミノノルボルニル－カルボキシレート［Ｎｏｒｂ］、アルファ－アミノ酪酸［Ａｂｕ］、アミノシクロプロパン－カルボキシレート［Ｃｐｒｏ］、（シス）－３－アミノビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボン酸、エクソ－シス－３－アミノビシクロ［２．２．１］ｈｅｐｔ－５－エン－２－カルボン酸、１－アミノ－１－シクロブタンカルボン酸、シス－２－アミノシクロヘプタンカルボン酸、１－アミノシクロヘキサンカルボン酸、シス－２－アミノシクロヘキサンカルボン酸、トランス－２－アミノシクロヘキサンカルボン酸、シス－６－アミノ－３－シクロヘキセン－１－カルボン酸、２－（１－アミノシクロヘキシル）酢酸、シス－２－アミノ－１－シクロオクタンカルボン酸、シス－２－アミノ－３－シクロオクテン－１－カルボン酸、（１Ｒ，２Ｓ）－（－）－２－アミノ－１－シクロペンタンカルボン酸、（１Ｓ，２Ｒ）－（＋）－２－アミノ－１－シクロペンタンカルボン酸、シス－２－－アミノ－１－シクロペンタンカルボン酸、２－（１－アミノシクロペンチル）酢酸、シス－２－アミノ－２－メチルシクロヘキサンカルボン酸、シス－２－アミノ－２－メチルシクロペンタンカルボン酸、３－アミノ－３－（４－ニトロフェニル）プロピオン酸、３－アゼチジンカルボン酸、ａｍｃｈｃ－ｏｈ、１－アミノシクロブタンカルボン酸、１－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス－２－（アミノ）－シクロヘキサンカルボン酸、トランス－２－（アミノ）－シクロヘキサンカルボン酸、シス－４－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、トランス－４－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（±）－シス－２－（アミノ）－３－シクロヘキセン－１－カルボン酸、（±）－シス－６－（アミノ）－３－シクロヘキセン－１－カルボン酸、２－（１－アミノシクロヘキシル）酢酸、シス－［４－（アミノ）シクロヘキシル］酢酸、１－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（±）－シス－２－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｒ，４Ｓ）－（＋）－４－（アミノ）－２－シクロペンテン－１－カルボン酸、（±）－シス－２－（アミノ）－３－シクロペンテン－１－カルボン酸、２－（１－アミノシクロペンチル）酢酸、１－（アミノ）シクロプロパンカルボン酸、１－アミノシクロプロパンカルボン酸エチル、１，２－トランス－ａｃｈｅｃ－ｏｈ、１－（アミノ）シクロブタンカルボン酸、１－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス－２－（アミノ）－シクロヘキサンカルボン酸、トランス－２－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス－４－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、トランス－４－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス－［４－（アミノ）シクロヘキシル］酢酸、１－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｒ，４Ｓ）－（＋）－４－（アミノ）－２－シクロペンテン－１－カルボン酸、（１Ｓ，４Ｒ）－（－）－４－（アミノ）－２－シクロペンテン－１－カルボン酸、１－（アミノ）シクロプロパンカルボン酸、トランス－４－（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸、β－Ｄａｂ－ＯＨ、３－アミノ－３－（３－ブロモフェニル）プロピオン酸、３－アミノブタン酸、シス－２－アミノ－３－シクロペンテン－１－カルボン酸、ＤＬ－３－アミノイソ酪酸、（Ｒ）－３－アミノ－２－フェニルプロピオン酸、（±）－３－（アミノ）－４－（４－ビフェニリル）酪酸、シス－３－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（１Ｓ，３Ｒ）－（＋）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（２Ｒ，３Ｒ）－３－（アミノ）－２－ヒドロキシ－４－フェニル酪酸、（２Ｓ，３Ｒ）－３－（アミノ）－２－ヒドロキシ－４－フェニル酪酸、２－（アミノメチル）フェニル酢酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－２－メチルプロピオン酸、（Ｓ）－３－（アミノ）－２－メチルプロピオン酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－４－（２－ナフチル）酪酸、（Ｓ）－３－（アミノ）－４－（２－ナフチル）酪酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－５－フェニルペンタン酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－２－フェニルプロピオン酸、３－（ベンジルアミノ）プロピオン酸エチル、シス－３－（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（Ｓ）－３－（アミノ）－５－ヘキセン酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－２－メチルプロピオン酸、（Ｓ）－３－（アミノ）－２－メチルプロピオン酸、（Ｒ）－３－（アミノ）－４－（２－ナフチル）酪酸、（Ｓ）－３－（アミノ）－４－（２－ナフチル）酪酸、（Ｒ）－（－）－ピロリジン－３－カルボン酸、（Ｓ）－（＋）－ピロリジン－３－カルボン酸、Ｎ－メチル－γ－アミノブチレート［Ｎｍｇａｂｕ］、γ－アミノ酪酸［Ｇａｂｕ］、Ｎ－メチル－α－アミノ－α－メチルブチレート［Ｎｍａａｂｕ］、α－アミノ－α－メチルブチレート［Ａａｂｕ］、Ｎ－メチル－α－アミノイソブチレート［Ｎｍａｉｂ］、α－アミノイソ酪酸［Ａｉｂ］、α－メチル－ｙ－アミノブチレート［Ｍｇａｂｕ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。

フェニルグリシンおよびその修飾：Ｐｈｇ－ＯＨ、Ｄ－Ｐｈｇ－ＯＨ、２－（ピペラジノ）－２－（３，４－ジメトキシフェニル）酢酸、２－（ピペラジノ）－２－（２－フルオロフェニル）酢酸、２－（４－ピペラジノ）－２－（３－フルオロフェニル）酢酸、２－（４－ピペラジノ）－２－（４－メトキシフェニル）酢酸、２－（４－ピペラジノ）－２－（３－ピリジル）酢酸、２－（４－ピペラジノ）－２－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］酢酸、Ｌ－（＋）－２－クロロフェニルグリシン、（±）－２－クロロフェニルグリシン、（±）－４－クロロフェニルグリシン、（Ｒ）－（－）－２－（２，５－ジヒドロフェニル）グリシン、（Ｒ）－（－）－Ｎ－（３，５－ジニトロベンゾイル）－α－フェニルグリシン、（Ｓ）－（＋）－Ｎ－（３，５－ジニトロベンゾイル）－α－フェニルグリシン、２，２－ジフェニルグリシン、２－フルオロ－ＤＬ－α－フェニルグリシン、４－フルオロ－Ｄ－α－フェニルグリシン、４－ヒドロキシ－Ｄ－フェニルグリシン、４－ヒドロキシ－Ｌ－フェニルグリシン、２－フェニルグリシン、Ｄ－（－）－α－フェニルグリシン、Ｄ－（－）－α－フェニルグリシン、ＤＬ－α－フェニルグリシン、Ｌ－（＋）－α－フェニルグリシン、Ｎ－フェニルグリシン、（Ｒ）－（－）－２－フェニルグリシンメチルエステル、（Ｓ）－（＋）－２－フェニルグリシンメチルエステル、２－フェニルグリシノニトリル塩酸塩、α－フェニルグリシノニトリル、３－（トリフルオロメチル）－ＤＬ－フェニルグリシン、および４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルグリシン。各可能性は、個別の実施形態を表す。

ペニシラミンおよびその修飾：Ｎ－アセチル－Ｄ－ペニシラミン、Ｄ－ペニシラミン、Ｌ－ペニシラミン［Ｐｅｎ］、ＤＬ－ペニシラミン。α－メチルペニシラミン［Ｍｐｅｎ］、Ｎ－メチルペニシラミン［Ｎｍｐｅｎ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。

β－ホモピロリジン。各可能性は、個別の実施形態を表す。

芳香族アミノ酸：３－アセトアミド安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、４－アセトアミド－２－メチル安息香酸、Ｎ－アセチルアントラニル酸、３－アミノ安息香酸、３－アミノ安息香酸塩酸塩、４－アミノ安息香酸、４－アミノ安息香酸、４－アミノ安息香酸、４－アミノ安息香酸、４－アミノ安息香酸、４－アミノ安息香酸、２－アミノベンゾフェノン－２’－カルボン酸、２－アミノ－４－ブロモ安息香酸、２－アミノ－５－ブロモ安息香酸、３－アミノ－２－ブロモ安息香酸、３－アミノ－４－ブロモ安息香酸、３－アミノ－５－ブロモ安息香酸、４－アミノ－３－ブロモ安息香酸、５－アミノ－２－ブロモ安息香酸、２－アミノ－３－ブロモ－５－メチル安息香酸、２－アミノ－３－クロロ安息香酸、２－アミノ－４－クロロ安息香酸、２－アミノ－５－クロロ安息香酸、２－アミノ－５－クロロ安息香酸、２－アミノ－６－クロロ安息香酸、３－アミノ－２－クロロ安息香酸、３－アミノ－４－クロロ安息香酸、４－アミノ－２－クロロ安息香酸、４－アミノ－３－クロロ安息香酸、５－アミノ－２－クロロ安息香酸、５－アミノ－２－クロロ安息香酸、４－アミノ－５－クロロ－２－メトキシ安息香酸、２－アミノ－５－クロロ－３－メチル安息香酸、３－アミノ－２，５－ジクロロ安息香酸、４－アミノ－３，５－ジクロロ安息香酸、２－アミノ－４，５－ジメトキシ安息香酸、４－（２－アミノエチル）安息香酸塩酸塩、２－アミノ－４－フルオロ安息香酸、２－アミノ－５－フルオロ安息香酸、２－アミノ－６－フルオロ安息香酸、４－アミノ－２－フルオロ安息香酸、２－アミノ－５－ヒドロキシ安息香酸、３－アミノ－４－ヒドロキシ安息香酸、４－アミノ－３－ヒドロキシ安息香酸、２－アミノ－５－ヨード安息香酸、５－アミノイソフタル酸、２－アミノ－３－メトキシ安息香酸、２－アミノ－４－メトキシ安息香酸、２－アミノ－５－メトキシ安息香酸、３－アミノ－２－メトキシ安息香酸、３－アミノ－４－メトキシ安息香酸、３－アミノ－５－メトキシ安息香酸、４－アミノ－２－メトキシ安息香酸、４－アミノ－３－メトキシ安息香酸、５－アミノ－２－メトキシ安息香酸、２－アミノ－３－メチル安息香酸、２－アミノ－５－メチル安息香酸、２－アミノ－６－メチル安息香酸、３－（アミノメチル）安息香酸、３－アミノ－２－メチル安息香酸、３－アミノ－４－メチル安息香酸、４－（アミノメチル）安息香酸、４－アミノ－２－メチル安息香酸、４－アミノ－３－メチル安息香酸、５－アミノ－２－メチル安息香酸、３－アミノ－２－ナフトエ酸、６－アミノ－２－ナフトエ酸、２－アミノ－３－ニトロ安息香酸、２－アミノ－５－ニトロ安息香酸、２－アミノ－５－ニトロ安息香酸、４－アミノ－３－ニトロ安息香酸、５－アミノ－２－ニトロ安息香酸、３－（４－アミノフェニル）プロピオン酸、３－アミノフタル酸、４－アミノフタル酸、３－アミノサリチル酸、４－アミノサリチル酸、５－アミノサリチル酸、５－アミノサリチル酸、２－アミノテレフタル酸、２－アミノ－３，４，５，６－テトラフルオロ安息香酸、４－アミノ－２，３，５，６－テトラフルオロ安息香酸、（Ｒ）－２－アミノ－１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン－２－カルボン酸、（Ｓ）－２－アミノ－１，２，３，４－テトラヒドロ－２－ナフタレンカルボン酸、２－アミノ－３－（トリフルオロメチル）安息香酸、２－アミノ－３－（トリフルオロメチル）安息香酸、３－アミノ－５－（トリフルオロメチル）安息香酸、５－アミノ－２，４，６－トリヨードイソフタル酸、２－アミノ－３，４，５－トリメトキシ安息香酸、２－アニリノフェニル酢酸、２－Ａｂｚ－ＯＨ、３－Ａｂｚ－ＯＨ、４－Ａｂｚ－ＯＨ、２－（アミノメチル）安息香酸、３－（アミノメチル）安息香酸、４－（アミノメチル）安息香酸、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ安息香酸塩、ｔｅｒｔ－ブチル３－アミノ香酸塩、ｔｅｒｔ－ブチル４－アミノ安息香酸塩、４－（ブチルアミノ）安息香酸、２，３－ジアミノ安息香酸、３，４－ジアミノ安息香酸、３，５－ジアミノ安息香酸、３，５－ジアミノ安息香酸、３，５－ジクロロアントラニル酸、４－（ジエチルアミノ）安息香酸、４，５－ジフルオロアントラニル酸、４－（ジメチルアミノ）安息香酸、４－（ジメチルアミノ）安息香酸、３，５－ジメチルアントラニル酸、５－フルオロ－２－メトキシ安息香酸、２－Ａｂｚ－ＯＨ、３－Ａｂｚ－ＯＨ、４－Ａｂｚ－ＯＨ、３－（アミノメチル）安息香酸、４－（アミノメチル）安息香酸、４－（２－ヒドラジノ）安息香酸、３－ヒドロキシアントラニル酸、３－ヒドロキシアントラニル酸、３－アミノ安息香酸メチル、３－（メチルアミノ）安息香酸、４－（メチルアミノ）安息香酸、２－アミノ－４－クロロ安息香酸メチル、２－アミノ－４，５－ジメトキシ安息香酸メチル、４－ニトロアントラニル酸、Ｎ－フェニルアントラニル酸、Ｎ－フェニルアントラニル酸、および４－アミノサリチル酸ナトリウム。各可能性は、個別の実施形態を表す。

他のアミノ酸：（Ｓ）－α－アミノ－γ－ブチロラクトン、ＤＬ－２－アミノカプリル酸、７－アミノセファロスポラン酸、４－アミノケイ酸、（Ｓ）－（＋）－α－アミノシクロヘキサンプロピオン酸、（Ｒ）－アミノ－（４－ヒドロキシフェニル）酢酸メチルエステル、５－アミノレブリン酸、４－アミノ－ニコチン酸、３－アミノフェニル酢酸、４－アミノフェニル酢酸、２－アミノ－２－フェニル酪酸、４－（４－アミノフェニル）酪酸、２－（４－アミノフェニルチオ）酢酸、ＤＬ－α－アミノ－２－チオフェン酢酸、５－アミノ吉草酸、８－ベンジル（Ｓ）－２－アミノオクタンジオエート、４－（アミノ）－１－メチルピロール－２－カルボン酸、４－（アミノ）テトラヒドロチオピラン－４－カルボン酸、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、Ｌ－アゼチジン－２－カルボン酸、アゼチジン－３－カルボン酸、４－（アミノ）ピペリジン－４－カルボン酸、ジアミノ酢酸、Ｉｎｐ－ＯＨ、（Ｒ）－Ｎｉｐ－ＯＨ、（Ｓ）－４－オキソピペリジン－２－カルボン酸、２－（４－ピペラジノ）－２－（４－フルオロフェニル）酢酸、２－（４－ピペラジノ）－２－フェニル酢酸、４－ピペリジンアセトアルデヒド、４－ピペリジル酢酸、（－）－Ｌ－チオプロリン、Ｔｌｅ－ＯＨ、３－ピペリジンカルボン酸、Ｌ－（＋）－カナバニン、（±）－カルニチン、クロラムブシル、２，６－ジアミノピメリン酸、メソ－２，３－ジアミノコハク酸、４－（ジメチルアミノ）桂皮酸、４－（ジメチルアミノ）フェニル酢酸、（Ｓ）－Ｎ－Ｂｏｃ－ピペリジン－３－カルボン酸エチル、ピペラジノ酢酸エチル、４－［２－（アミノ）エチル］ピペラジン－１－イル酢酸、（Ｒ）－４－（アミノ）－５－フェニルペンタン酸、（Ｓ）－アゼチジン－２－カルボン酸、アゼチジン－３－カルボン酸、グバシン、Ｉｎｐ－ＯＨ、（Ｒ）－Ｎｉｐ－ＯＨ、ＤＬ－Ｎｉｐ－ＯＨ、４－フェニル－ピペリジン－４－カルボン酸、１－ピペラジン酢酸、４－ピペリジン酢酸、（Ｒ）－ピペリジン－２－カルボン酸、（Ｓ）－ピペリジン－２－カルボン酸、（Ｓ）－１，２，３，４－テトラヒドロノルハルマン－３－カルボン酸、Ｔｉｃ－ＯＨ、Ｄ－Ｔｉｃ－ＯＨ、イミノ二酢酸、インドリン－２－カルボン酸、ＤＬ－キヌレニン、Ｌ－アジリジン－２－カルボキシレート、４－アミノ酪酸メチル、（Ｓ）－２－ピペラジンカルボン酸、２－（１－ピペラジニル）酢酸、（Ｒ）－（－）－３－ピペリジンカルボン酸、２－ピロリドン－５－カルボン酸、（Ｒ）－（＋）－２－ピロリドン－５－カルボン酸、（Ｒ）－１，２，３，４－テトラヒドロ－３－イソキノリンカルボン酸、（Ｓ）－１，２，３，４－テトラヒドロ－３－イソキノリンカルボン酸、Ｌ－４－チアゾリジンカルボン酸、（４Ｒ）－（－）－２－チオキソ－４－チアゾリジンカルボン酸、ヒドラジノ酢酸、および３，３’，５－トリヨード－Ｌ－チロニン。各可能性は、個別の実施形態を表す。

本開示は、さらに改善された安定性および細胞透過性特性を有するペプチド模倣化合物を含む、ペプチドを提供する。いくつかの実施形態は、配列番号１～６４のうちのいずれかによるペプチドを含み、ペプチド内の１つ以上のペプチド結合（－ＣＯ－ＮＨ－）は、例えば、Ｎ－メチル化アミド結合（－Ｎ（ＣＨ_３）－ＣＯ－）、エステル結合（－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－）、ケトメチレン結合（－ＣＯ－ＣＨ_２－）、スルフィニルメチレン結合（－Ｓ（＝Ｏ）－ＣＨ_２－）、α－アザ結合（－ＮＨ－Ｎ（Ｒ）－ＣＯ－）によって置換されていてもよく、Ｒは、任意のアルキル（例えば、メチル）、アミン結合（－ＣＨ_２－ＮＨ－）、スルフィド結合（－ＣＨ_２－Ｓ－）、エチレン結合（－ＣＨ_２ＣＨ_２－）、ヒドロキシエチレン結合（－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ_２－）、チオアミド結合（－ＣＳ－ＮＨ－）、オレフィン二重結合（－ＣＨ＝ＣＨ－）、フッ素化オレフィン二重結合（－ＣＦ＝ＣＨ－）、またはレトロアミド結合（－ＮＨ－ＣＯ－）、ペプチド誘導体（－Ｎ（Ｒ^ｘ）－ＣＨ_２－ＣＯ－）であり、ここでＲ^ｘは、炭素原子上に天然に存在する「通常の」側鎖である。これらの修飾は、ペプチド鎖に沿った結合のうちのいずれかで生じ得、同時に複数（２～３）の結合でも生じ得る。

本明細書に記載のペプチドのサイズバリアントが、具体的に企図される。例示的なペプチドは、６～５０アミノ酸から構成される。６～５０アミノ酸のすべての整数サブレンジ（例えば、７～５０アミノ酸、８～５０アミノ酸、９～５０アミノ酸、６～４９アミノ酸、６～４８アミノ酸、７～４９アミノ酸など）は、具体的には、本発明の属として企図され、すべての整数値は、本発明の種として企図されている。例示的な実施形態では、ペプチドは、ペプチド結合を介して接続された少なくとも７個または８アミノ酸を含む。例示的な態様では、ペプチドは、少なくとも約９アミノ酸の長さ、少なくとも約１０アミノ酸の長さ、少なくとも約１１アミノ酸の長さ、少なくとも約１２アミノ酸の長さ、または少なくとも約１３アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、少なくとも約１４アミノ酸の長さ、少なくとも約１５アミノ酸の長さ、少なくとも約１６アミノ酸の長さ、または少なくとも約１７アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、少なくとも約１８アミノ酸の長さ、少なくとも約１９アミノ酸の長さ、または少なくとも約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、もしくは３０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、約５０未満アミノ酸の長さ、約４０未満アミノ酸、または約３０未満アミノ酸、または約２５未満アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、約８～約３０アミノ酸の長さ、または約８～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、約１０～約１０アミノ酸の長さ、または約１４～約２０アミノ酸の長さである。例示的な態様では、ペプチドは、８～９、１０～１１、１２～１３、１４～１５、または１６～１７アミノ酸の長さである。いくつかの実施形態では、ペプチドは、８－ｍｅｒ、９－ｍｅｒ、－１０－ｍｅｒ、１１－ｍｅｒ、１２－ｍｅｒ、１３－ｍｅｒ、１４－ｍｅｒ、１５－ｍｅｒ、１６－ｍｅｒ、１７－ｍｅｒ、１８－ｍｅｒ、１９－ｍｅｒ、または２０－ｍｅｒである。

いくつかの実施形態のペプチドは、好ましくは線状形態で利用されるが、環化がペプチド特性を著しく妨害しない場合、ペプチドの環状形態も利用可能であり、実施形態として企図されることが理解されるであろう。

いくつかの実施形態によれば、複合体は、半減期を延長するか、または細胞浸透性を増加させるための部分に複合体化される本明細書に記載のペプチドおよび類似体のいずれかを含む。例えば、半減期延長部分はペプチドまたはタンパク質であり得、複合体は融合タンパク質またはキメラポリペプチドである。あるいは、半減期延長部分は、ポリマー、例えば、ポリエチレングリコールであり得る。本開示は、本明細書に記載のペプチドおよび類似体のいずれかを含む二量体および多量体をさらに提供する。

能動的または受動的に促進するか、または細胞へのペプチドの透過性を高めることが当該技術分野で既知である任意の部分を、ペプチドコアとの複合体化に使用することができる。非限定的な例には、脂肪酸、ステロイド、およびバルキーな芳香族または脂肪族化合物などの疎水性部分；ステロイド、ビタミンおよび糖、天然および非天然のアミノ酸、ならびに輸送ペプチドなどの細胞膜受容体または担体を含み得る部分が挙げられる。好ましい実施形態によれば、疎水性部分は、脂質部分またはアミノ酸部分である。透過性増強部分は、ペプチド部分の任意の位置に、直接またはスペーサもしくはリンカーを介して、好ましくはペプチド部分のアミノ末端に接続されていてもよい。疎水性部分は、好ましくは、脂質部分またはアミノ酸部分を含み得る。特定の実施形態によれば、疎水性部分は、リン脂質、ステロイド、スフィンゴシン、セラミド、オクチル－グリシン、２－シクロヘキシルアラニン、ベンゾリルフェニルアラニン、プロピオノイル（Ｃ_３）；ブタノイル（Ｃ_４）；ペンタノイル（Ｃ_５）；カプロイル（Ｃ_６）；ヘプタノイル（Ｃ_７）；カプリロイル（Ｃ_８）；ノナノイル（Ｃ_９）；カプリル（Ｃ_１０）；ウンデカノイル（Ｃ_１１）；ラウロイル（Ｃ_１２）；トリデカノイル（Ｃ_１３）；ミリストイル（Ｃ_１４）；ペンタデカノイル（Ｃ_１５）；パルミトイル（Ｃ_１６）；フタノイル（（ＣＨ_３）_４）；ヘプタデカノイル（Ｃ_１６）；ステアロイル（Ｃ_１８）；ノナデカノイル（Ｃ_１９）；アラキドイル（Ｃ_２０）；ヘニエコサノイル（Ｃ_２１）；ベヘノイル（Ｃ_２２）；トルシサノイル（Ｃ_２３）；およびリグノセロイル（Ｃ_２４）からなる群から選択され、当該疎水性部分は、アミド結合、スルフヒドリル、アミン、アルコール、フェノール基、または炭素－炭素結合により当該キメラポリペプチドに結合される。使用され得る脂質部分の他の例には、リポフェクタミン、トランスフェクテース（Ｔｒａｎｓｆｅｃｔａｃｅ）、トランスフェクタム、サイトフェクチン、ＤＭＲＩＥ、ＤＬＲＩＥ、ＧＡＰ－ＤＬＲＩＥ、ＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＥ、ＤＭＥＡＰ、ＤＯＤＭＰ、ＤＯＰＣ、ＤＤＡＢ、ＤＯＳＰＡ、ＥＤＬＰＣ、ＥＤＭＰＣ、ＤＰＨ、ＴＭＡＤＰＨ、ＣＴＡＢ、リシル－ＰＥ、ＤＣ－Ｃｈｏ、－アラニルコレステロール；ＤＣＧＳ、ＤＰＰＥＳ、ＤＣＰＥ、ＤＭＡＰ、ＤＭＰＥ、ＤＯＧＳ、ＤＯＨＭＥ、ＤＰＥＰＣ、プルロニック、Ｔｗｅｅｎ、ＢＲＩＪ、プラズマローゲン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、グリセロール－３－エチルホスファチジルコリン、ジメチルアンモニウムプロパン、トリメチルアンモニウムプロパン、ジエチルアンモニウムプロパン、トリエチルアンモニウムプロパン、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド、スフィンゴ脂質、スフィンゴミエリン、リゾ脂質、糖脂質、スルファチド、スフィンゴ糖脂質、コレステロール、コレステロールエステル、コレステロール塩、油、Ｎ－スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－グリセロール、１，３－ジパルミトイル－２－スクシニルグリセロール、１，２－ジパルミトイル－３－スクシニルグリセロール、１－ヘキサデシル－２－パルミトイルグリセロホスファチジルエタノールアミン、パルミトイルホモシスチエン、Ν，Ν’－ビス（ドデシアミノカルボニルメチレン）－Ｎ，Ｎ’－ビス（（－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムエチル－アミノカルボニルメチレン）エチレンジアミン四ヨウ化物；Ｎ，Ｎ”－ビス（ヘキサデシルアミノカルボニルメチレン）－Ｎ，Ｎ’，Ｎ”－トリス（（－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウム－エチルアミノカルボニルメチレンジエチレントリアミンヘキサヨウ化物；Ν，Ν’－ビス（ドデシルアミノカルボニルメチレン）－Ｎ，Ｎ”－ビス（（－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムエチルアミノカルボニルメチレン）シクロヘキシレン－１，４－ジアミン四ヨウ化物；１，７，７－テトラ－（（－Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ－テトラメチルアンモニウムエチルアミノ－カルボニルメチレン）－３－ヘキサデシルアルミノカルボニル－メチレン－１，３，７－トリアアザヘプタンヘプタヨウ化物；Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラ（（－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウム－エチルアミノカルボニルメチレン）－Ｎ’－（１，２－ジオレオイルグリセロ－３－ホスホエタノールアミノカルボニルメチレン）ジエチレントリアミン四ヨウ化物；ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸、リゾ脂質、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴ脂質、糖脂質（ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ）、糖脂質（ｇｌｕｃｏｌｉｐｉｄ）、スルファチド、スフィンゴ糖脂質、ホスファチジン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、オレイン酸、ポリマーを保持する脂質、スルホン化糖を保持する脂質、コレステロール、トコフェロールヘミスクシネート、エーテル結合脂肪酸を含む脂質、エステル結合脂肪酸を含む脂質、重合脂質、リン酸ジアセチル、ステアリルアミン、カルジオリピン、長さ６～８個の炭素の脂肪酸を含むリン脂質、非対称アシル鎖を含むリン脂質、６－（５－コレステン－３ｂ－イルオキシ）－１－チオ－ｂ－Ｄ－ガラクトピラノシド、ジガラクトシルジグリセリド、６－（５－コレステン－３ｂ－イルオキシ）ヘキシル－６－アミノ－６－デオキシ－１－チオ－ｂ－Ｄ－ガラクトピラノシド、６－（５－コレステン－３ｂ－イルオキシ）ヘキシル－６－アミノ－６－デオキシル－１－チオ－ａ－Ｄ－マンノピラノシド、１２－（（（７’－ジエチルアミノクマリン－３－イル）カルボニル）メチルアミノ）－オクタデカノイル；Ｎ－［１２－（（（７’－ジエチルアミノクマリン－３－イル）カルボニル）メチル－アミノ）オクタデカノイル］－２－アミノパルミチン酸；コレステリル）４’－トリメチル－アンモニオ）ブタノエート；Ｎ－スクシニルジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン；１，２－ジオレオイル－グリセロール；１，２－ジパルミトイル－３－スクシニルグリセロール；１，３－ジパルミトイル－２－スクシニルグリセロール、１－ヘキサデシル－２－パルミトイルグリセロ－ホスホエタノールアミン、およびパルミトイルホモシステインが挙げられる。

本明細書に開示されるペプチドは、複合体をプロドラッグとして機能させる１つ以上の部分に複合体化することができる。例えば、米国特許第８９６９２８８号および米国公開第２０１６／００５８８８１号に記載されているＮ－アミノ酸関連部分は、本明細書に開示されるペプチドに複合体化することができ、そのような複合体は、本開示に含まれる。

いくつかの実施形態によれば、ペプチドは、浸透剤に結合（共有結合または非共有結合のいずれかで）され得る。本明細書で使用される場合、「浸透剤」という語句は、細胞膜を通過する結合されたペプチドのうちのいずれかの転位を高める薬剤を指す。典型的には、ペプチドベースの浸透剤は、リジンまたはアルギニンなどの正に荷電したアミノ酸の高い相対存在量を含むアミノ酸組成物、または極性／荷電アミノ酸および非極性の疎水性アミノ酸の交互パターンを含む配列のいずれかを有する。非限定的な例として、細胞内浸透を高めるために細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）配列を使用してもよい。ＣＰＰは、例えば、ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（配列番号６５）、ＹＧＲＫＫＲＲ（配列番号６６）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号６７）、またはＲＲＱＲＲ（配列番号６８）］などのＨＩＶＴＡＴタンパク質のタンパク質形質導入ドメイン（ＰＴＤ）の短いバージョンおよび長いバージョンを含み得る。しかしながら、本開示はそのように限定されず、当業者によって知られているように、任意の好適な浸透剤が使用され得る。細胞浸透を高める別の方法は、Ｎ末端ミリストイル化によるものである。このタンパク質修飾では、ミリストイル基（ミリスチン酸に由来する）が、アミド結合を介してペプチドのＮ末端アミノ酸のアルファ－アミノ基に共有結合される。

いくつかの実施形態によれば、ペプチドは修飾されており、例えば、持続時間増強部分を含む。持続時間増強部分は、水溶性ポリマーまたは長鎖脂肪族基であり得る。いくつかの実施形態では、複数の持続時間増強部分がペプチドに結合され得、その場合、各持続時間増強部分に対する各リンカーは、独立して、本明細書に記載のリンカーから選択される。

いくつかの実施形態によれば、ペプチドのアミノ末端は修飾されており、例えば、アシル化される。さらなる実施形態によれば、カルボキシ末端は修飾されており、例えば、アシル化、アミド化、還元、またはエステル化されていてもよい。いくつかの実施形態によれば、ペプチドは、アシル化アミノ酸（例えば、非コード化アシル化アミノ酸（例えば、天然型アミノ酸に対して非天然のアシル基を含むアミノ酸））を含む。一実施形態によれば、ペプチドは、循環中の半減期を延長および／または発症の遅延および／または作用の持続期間を延長および／またはプロテアーゼへの耐性を改善する目的のために、エステル、チオエステル、またはアミド結合を介してペプチドに結合されているアシル基を含む。アシル化は、ペプチド内の任意の位置（例えば、Ｃ末端のアミノ酸など）で実施することができ、ただし、活性化が強化されない場合に保持されることを条件とする。いくつかの実施形態におけるペプチドは、親水性部分が結合している同じアミノ酸位置、または異なるアミノ酸位置でアシル化され得る。アシル基は、ペプチドのアミノ酸に直接、またはスペーサを介してペプチドのアミノ酸に間接的に共有結合することができ、スペーサは、ペプチドのアミノ酸とアシル基との間に位置する。

特定の態様では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖のアミン、ヒドロキシル、またはチオールの直接アシル化によってアシル基を含むように修飾される。これに関して、アシル化ペプチドは、配列番号１～６４のうちのいずれかのアミノ酸配列、または本明細書に記載のアミノ酸修飾のうちの１つ以上を含むその修飾アミノ酸配列を含むことができる。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、類似体とアシル基との間にスペーサを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、アシル基に共有結合しているスペーサに共有結合している。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。スペーサが結合されているアミノ酸は、スペーサへの結合を可能にする部分を含む任意のアミノ酸（例えば、単一または二重のα－置換アミノ酸）であり得る。例えば、側鎖ＮＨ_２、－ＯＨ、または－ＣＯＯＨ（例えば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＧｌｕ）を含むアミノ酸が好適である。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。アシル化がスペーサのアミン基を介して生じる場合、アシル化は、アミノ酸のアルファアミンまたは側鎖アミンを介して生じ得る。アルファアミンがアシル化されている場合、スペーサのアミノ酸は任意のアミノ酸であり得る。例えば、スペーサのアミノ酸は、疎水性アミノ酸、例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、６－アミノヘキサン酸、５－アミノ吉草酸、７－アミノヘプタン酸、および８－アミノオクタン酸であり得る。あるいは、スペーサのアミノ酸は、酸性残基、例えば、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ホモグルタミン酸、ホモシステイン酸、システイン酸、ガンマ－グルタミン酸であり得る。スペーサのアミノ酸の側鎖アミンがアシル化されている場合、スペーサのアミノ酸は、側鎖アミンを含むアミノ酸である。この場合、ペプチドがジアシル化されるように、スペーサのアミノ酸のアルファアミンおよび側鎖アミンの両方をアシル化することが可能である。実施形態には、そのようなジアシル化分子が含まれる。アシル化がスペーサのヒドロキシル基を介して生じる場合、アミノ酸またはジペプチドもしくはトリペプチドのアミノ酸のうちの１つは、Ｓｅｒであり得る。アシル化がスペーサのチオール基を介して生じる場合、アミノ酸またはジペプチドもしくはトリペプチドのアミノ酸のうちの１つは、Ｃｙｓであり得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、親水性二官能性スペーサである。ある特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、２つ以上の反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシル、チオール、およびカルボキシル基、またはそれらの任意の組み合わせを含む。ある特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、ヒドロキシル基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、アミン基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、チオール基およびカルボキシレートを含む。

特定の実施態様では、スペーサは、アミノ酸、ポリ（アルキルオキシ）カルボキシレートを含む。これに関して、スペーサは、例えば、ＮＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＯＯＨを含むことができ、ｍは、１～６の任意の整数であり、ｎは、２～１２の任意の整数であり、例えば、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸などであり、これは、ＰｅｐｔｉｄｅｓＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，Ｋｙ）から市販されている。いくつかの実施形態では、スペーサは、疎水性二官能性スペーサである。疎水性二官能性スペーサは当該技術分野において既知である。例えば、その全体が参照により組み込まれる、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｇ．Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．，１９９６）を参照されたい。ある特定の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、２つ以上の反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシル、チオール、およびカルボキシル基、またはそれらの任意の組み合わせを含む。ある特定の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、ヒドロキシル基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、アミン基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、チオール基およびカルボキシレートを含む。カルボキシレートおよびヒドロキシル基またはチオール基を含む好適な疎水性二官能性スペーサは、当該技術分野において既知であり、例えば、８－ヒドロキシオクタン酸および８－メルカプトオクタン酸を含む。いくつかの実施形態では、二官能性スペーサは、カルボキシレート基間に１～７個の炭素原子の非分岐メチレンを含むジカルボン酸ではない。いくつかの実施形態では、二官能性スペーサは、カルボキシレート基間に１～７個の炭素原子の非分岐メチレンを含むジカルボン酸である。特定の実施形態におけるスペーサ（例えば、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、または疎水性二官能性スペーサ）は、３～１０個の原子（例えば、６～１０個の原子（例えば、６、７、８、９、または１０個の原子）の長さである。より具体的な実施形態では、スペーサおよびアシル基の全長が１４～２８個の原子、例えば、約１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８個の原子であるように、スペーサは、約３～１０個の原子（例えば、６～１０原子）の長さであり、アシル基は、Ｃ_１２～Ｃ_１８脂肪アシル基、例えば、Ｃ_１４脂肪アシル基、Ｃ_１６脂肪アシル基である。いくつかの実施形態では、スペーサおよびアシル基の長さは、１７～２８（例えば、１９～２６、１９～２１）個の原子である。ある特定の前述の実施形態によれば、二官能性スペーサは、３～１０個の原子の長さであるアミノ酸骨格（例えば、６－アミノヘキサン酸、５－アミノ吉草酸、７－アミノヘプタン酸、および８－アミノオクタン酸）を含む合成または天然型アミノ酸（これらに限定されないが、本明細書に記載のもののうちのいずれかを含む）であり得る。あるいは、スペーサは、３～１０個の原子（例えば、６～１０個の原子）の長さであるペプチド骨格を有するジペプチドまたはトリペプチドスペーサであり得る。ジペプチドまたはトリペプチドスペーサの各アミノ酸は、ジペプチドまたはトリペプチドの他のアミノ酸と同じでも異なっていてもよく、独立して、例えば、天然型アミノ酸（Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ）のＤもしくはＬ異性体のいずれか、またはβ－アラニン（β－Ａｌａ）、Ｎ－α－メチル－アラニン（Ｍｅ－Ａｌａ）、アミノ酪酸（Ａｂｕ）、γ－アミノ酪酸（７－Ａｂｕ）、アミノヘキサン酸（ε－Ａｈｘ）、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、アミノメチルピロールカルボン酸、アミノピペリジンカルボン酸、アミノセリン（Ａｍｓ）、アミノテトラヒドロピラン－４－カルボン酸、アルギニンＮ－メトキシ－Ｎ－メチルアミド、β－アスパラギン酸（β－Ａｓｐ）、アゼチジンカルボン酸、３－（２－ベンゾチアゾリル）アラニン、α－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン、２－アミノ－５－ウレイド－ｎ－吉草酸（シトルリン、Ｃｉｔ）、β－シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、アセトアミドメチル－システイン、ジアミノブタン酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、ジメチルチアゾリジン（ＤＭＴＡ）、γ－グルタミン酸（γ－Ｇｌｕ）、ホモセリン（Ｈｓｅ）、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、イソロイシンＮ－メトキシ－Ｎ－メチルアミド、メチルイソロイシン（ＭｅＩｌｅ）、イソニペコチン酸（Ｉｓｎ）、メチル－ロイシン（ＭｅＬｅｕ）、メチル－リジン、ジメチル－リジン、トリメチル－リジン、メタノプロリン、メチオニン－スルホキシド（Ｍｅｔ（Ｏ））、メチオニン－スルホン（Ｍｅｔ（Ｏ_２））、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチル－ノルロイシン（Ｍｅ－Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、パラ－アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、メチルフェニルアラニン（ＭｅＰｈｅ）、４－クロロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４－Ｃｌ））、４－フルオロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４－Ｆ））、４－ニトロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４－ＮＯ_２））、４－シアノフェニルアラニン（（Ｐｈｅ（４－ＣＮ））、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、ピペリジニルアラニン、ピペリジニルグリシン、３，４－デヒドロプロリン、ピロリジニルアラニン、サルコシン（Ｓａｒ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、Ｏ－ベンジル－ホスホセリン、４－アミノ－３－ヒドロキシ－６－メチルヘプタン酸（Ｓｔａ）、４－アミノ－５－シクロヘキシル－３－ヒドロキシペンタン酸（ＡＣＨＰＡ）、４－アミノ－３－ヒドロキシ－５－フェニルペンタン酸（ＡＨＰＰＡ）、１，２，３，４，－テトラヒドロ－イソキノリン－３－カルボン酸（Ｔｉｃ）、テトラヒドロピラングリシン、チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、Ｏ－ベンジル－ホスホチロシン、Ｏ－ホスホチロシン、メトキシチロシン、エトキシチロシン、Ｏ－（ビス－ジメチルアミノ－ホスホノ）－チロシン、チロシン硫酸テトラブチルアミン、メチル－バリン（ＭｅＶａｌ）、およびアルキル化３－メルカプトプロピオン酸からなる群から選択される非天然型または非コード化アミノ酸の任意のＤまたはＬ異性体を含む、天然型もしくはコード化および／または非コード化もしくは非天然型アミノ酸からなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、全体的に負電荷を含み、例えば、１つまたは２つの負に荷電したアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ジペプチドは、一般構造Ａ～Ｂのジペプチドのうちのいずれでもなく、Ａは、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、およびＰｒｏからなる群から選択され、Ｂは、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ジペプチドスペーサは、Ａｌａ－Ａｌａ、β－Ａｌａ－β－Ａｌａ、Ｌｅｕ－Ｌｅｕ、Ｐｒｏ－Ｐｒｏ、γ－アミノ酪酸－γ－アミノ酪酸、Ｇｌｕ－Ｇｌｕ、およびγ－Ｇｌｕ－γ－Ｇｌｕからなる群から選択される。

アミン、ヒドロキシル、およびチオールを介したペプチドアシル化の好適な方法は、当該技術分野において既知である。例えば、Ｍｉｌｌｅｒ，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ２１８：３７７－３８２（１９９６）、ＳｈｉｍｏｈｉｇａｓｈｉａｎｄＳｔａｍｍｅｒ，ＩｎｔＪＰｅｐｔＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ１９：５４－６２（１９８２）、およびＰｒｅｖｉｅｒｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ２６３：７－１３（１９７２）（ヒドロキシルを介したアシル化の方法について）、ならびにＳａｎａｎｄＳｉｌｖｉｕｓ，ＪＰｅｐｔＲｅｓ６６：１６９－１８０（２００５）（チオールを介したアシル化の方法について）、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．“ＣｈｅｍｉｃａｌＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓ：ＨｉｓｔｏｒｙａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”ｐａｇｅｓ１，２－１２（１９９０）、Ｈａｓｈｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＲｅｓ．“ＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＰａｌｍｉｔｏｙｌＤｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｏｆＩｎｓｕｌｉｎａｎｄｔｈｅｉｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｃｔｉｖｉｔｙ”Ｖｏｌ．６，Ｎｏ：２ｐｐ．１７１－１７６（１９８９）を参照されたい。アシル化アミノ酸のアシル基は、任意のサイズ、例えば、任意の長さの炭素鎖であり得、直鎖状または分岐状であり得る。いくつかの特定の実施形態では、アシル基は、Ｃ_４～Ｃ_３０脂肪酸である。例えば、アシル基は、Ｃ_４脂肪酸、Ｃ_６脂肪酸、Ｃ_８脂肪酸、Ｃ_１０脂肪酸、Ｃ_１２脂肪酸、Ｃ_１４脂肪酸、Ｃ_１６脂肪酸、Ｃ_１８脂肪酸、Ｃ_２０脂肪酸、Ｃ_２２脂肪酸、Ｃ_２４脂肪酸、Ｃ_２６脂肪酸、Ｃ_２８脂肪酸、またはＣ_３０脂肪酸のうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アシル基は、Ｃ_８～Ｃ_２０脂肪酸、例えば、Ｃ_１４脂肪酸またはＣ_１６脂肪酸である。代替的な実施形態では、アシル基は胆汁酸である。胆汁酸は、これらに限定されないが、コール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、タウロコール酸、グリココール酸、およびコレステロール酸を含む、任意の好適な胆汁酸であり得る。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチド上の長鎖アルカンのアシル化によるアシル化アミノ酸を含む。特定の態様では、長鎖アルカンは、ペプチドのカルボキシル基またはその活性化形態と反応するアミン、ヒドロキシル、またはチオール基（例えば、オクタデシルアミン、テトラデカノール、およびヘキサデカンチオール）を含む。ペプチドのカルボキシル基またはその活性化形態は、ペプチドのアミノ酸（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸）の側鎖の一部であるか、または類似体骨格の一部であり得る。ある特定の実施形態では、ペプチドは、ペプチドに結合したスペーサによる長鎖アルカンのアシル化によってアシル基を含むように修飾される。特定の態様では、長鎖アルカンは、スペーサのカルボキシル基またはその活性化形態と反応するアミン、ヒドロキシル、またはチオール基を含む。カルボキシル基またはその活性化形態を含む好適なスペーサは、本明細書に記載されており、例えば、二官能性スペーサ、例えば、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、および疎水性二官能性スペーサを含む。

本明細書で使用される場合、カルボキシル基の「活性化形態」という用語は、一般式Ｒ（Ｃ＝Ｏ）Ｘを有するカルボキシル基を指し、式中、Ｘは、脱離基であり、Ｒは、ペプチドまたはスペーサである。例えば、カルボキシル基の活性化形態は、これらに限定されないが、塩化アシル、無水物、およびエステルを含み得る。いくつかの実施形態では、活性化されたカルボキシル基は、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）脱離基を有するエステルである。

長鎖アルカンがペプチドまたはスペーサによってアシル化されるこれらの態様に関して、長鎖アルカンは、任意のサイズのものであり得、任意の長さの炭素鎖を含み得る。長鎖アルカンは、直鎖状または分岐状であり得る。ある特定の態様では、長鎖アルカンは、Ｃ４～Ｃ３０アルカンである。例えば、長鎖アルカンは、Ｃ_４アルカン、Ｃ_６アルカン、Ｃ_８アルカン、Ｃ_１０アルカン、Ｃ_１２アルカン、Ｃ_１４アルカン、Ｃ_１６アルカン、Ｃ_１８アルカン、Ｃ_２０アルカン、Ｃ_２２アルカン、Ｃ_２４アルカン、Ｃ_２６アルカン、Ｃ_２８アルカン、またはＣ_３０アルカンのうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、長鎖アルカンは、Ｃ_８～Ｃ_２０アルカン、例えば、Ｃ_１４アルカン、Ｃ_１６アルカン、またはＣ_１８アルカンを含む。

また、いくつかの実施形態では、ペプチドのアミン、ヒドロキシル、またはチオール基は、コレステロール酸でアシル化される。特定の実施形態では、ペプチドは、アルキル化デス－アミノＣｙｓスペーサ、すなわち、アルキル化３－メルカプトプロピオン酸スペーサを介してコレステロール酸に結合される。アルキル化デス－アミノＣｙｓスペーサは、例えば、ドデカエチレングリコール部分を含むデス－アミノＣｙｓスペーサであり得る。

本明細書に記載のペプチドは、親水性部分を含むようにさらに修飾され得る。いくつかの特定の実施形態では、親水性部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖を含むことができる。親水性部分の組み込みは、本明細書に記載される方法のうちのいずれかなどの任意の好適な手段によって達成することができる。これに関して、アシル化ペプチドは、本明細書に記載の修飾のうちのいずれかを含む、配列番号１～６４のいずれかであり得、そのうちアミノ酸のうち少なくとも１つは、アシル基を含み、アミノ酸のうちの少なくとも１つは、親水性部分（例えば、ＰＥＧ）に共有結合される。いくつかの実施形態では、アシル基は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ－Ｃｙｓ、またはＡｃ－Ｐｈｅを含むスペーサを介して結合され、親水性部分は、Ｃｙｓ残基に組み込まれる。

あるいは、ペプチドは、スペーサを含むことができ、スペーサは、親水性部分を含むようにアシル化および修飾の両方が施される。好適なスペーサの非限定的な例には、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ－Ｃｙｓ、およびＡｃ－Ｐｈｅからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を含むスペーサが挙げられる。

いくつかの実施形態によれば、ペプチドは、アルキル化アミノ酸（例えば、非コード化アルキル化アミノ酸（例えば、天然型アミノ酸に対して非天然のアルキル基を含むアミノ酸））を含む。アルキル化は、これらに限定されないが、アミノ酸位置のうちのいずれか、Ｃ末端伸長内の位置、またはＣ末端を含む、アシル化の部位として本明細書に記載の位置のうちのいずれかを含むペプチド内の任意の位置で実施することができ、ただし、生物学的活性が保持されることを条件とする。アルキル基は、ペプチドのアミノ酸に直接、またはスペーサを介してペプチドのアミノ酸に間接的に共有結合することができ、スペーサは、ペプチドのアミノ酸とアルキル基との間に位置する。ペプチドは、親水性部分が結合している同じアミノ酸位置、または異なるアミノ酸位置でアルキル化され得る。特定の態様では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖のアミン、ヒドロキシル、またはチオールの直接アルキル化によってアルキル基を含むように修飾され得る。これに関して、アルキル化ペプチドは、側鎖アミン、ヒドロキシル、またはチオールを含む任意のアミノ酸に修飾されたアミノ酸のうちの少なくとも１つを含むアミノ酸配列を含むことができる。さらに他の実施形態では、側鎖アミン、ヒドロキシル、またはチオールを含むアミノ酸は、二置換アミノ酸である。いくつかの実施形態では、アルキル化ペプチドは、ペプチドとアルキル基との間にスペーサを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、アルキル基に共有結合しているスペーサに共有結合している。いくつかの例示的な実施形態では、ペプチドは、アミノ酸の側鎖に結合されているスペーサのアミン、ヒドロキシル、またはチオールのアルキル化によりアルキル基を含むように修飾される。スペーサが結合されているアミノ酸は、スペーサへの結合を可能にする部分を含む任意のアミノ酸であり得る。例えば、側鎖ＮＨ_２、－ＯＨ、または－ＣＯＯＨ（例えば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＧｌｕ）を含むアミノ酸が好適である。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。アルキル化がスペーサのアミン基を介して生じる場合、アルキル化は、アミノ酸のアルファアミンまたは側鎖アミンを介して生じ得る。アルファアミンがアルキル化されている場合、スペーサのアミノ酸は任意のアミノ酸であり得る。例えば、スペーサのアミノ酸は、疎水性アミノ酸、例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、６－アミノヘキサン酸、５－アミノ吉草酸、７－アミノヘプタン酸、および８－アミノオクタン酸であり得る。あるいは、スペーサのアミノ酸は、酸性残基、例えば、ＡｓｐおよびＧｌｕであり得、ただし、アルキル化は酸性残基のアルファアミン上で生じることを条件とする。スペーサのアミノ酸の側鎖アミンがアルキル化されている場合、スペーサのアミノ酸は、側鎖アミン、例えば、式Ｉ～ＩＩのアミノ酸（例えば、ＬｙｓまたはＯｒｎ）を含むアミノ酸である。この場合、ペプチドがジアルキルされるように、スペーサのアミノ酸のアルファアミンおよび側鎖アミンの両方をアルキル化することが可能である。実施形態は、そのようなジアルキル化分子を含む。アルキル化がスペーサのヒドロキシル基を介して生じる場合、アミノ酸はＳｅｒであり得る。アルキル化がスペーサのチオール基を介して生じる場合、アミノ酸はＣｙｓであり得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、親水性二官能性スペーサである。ある特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、２つ以上の反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシル、チオール、およびカルボキシル基、またはそれらの任意の組み合わせを含む。ある特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、ヒドロキシル基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、アミン基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、チオール基およびカルボキシレートを含む。特定の実施態様では、スペーサは、アミノ酸、ポリ（アルキルオキシ）カルボキシレートを含む。これに関して、スペーサは、例えば、ＮＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＯＯＨを含むことができ、ｍは、１～６の任意の整数であり、ｎは、２～１２の任意の整数であり、例えば、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸などであり、これは、ＰｅｐｔｉｄｅｓＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，Ｋｙ）から市販されている。カルボキシレートおよびヒドロキシル基またはチオール基を含む好適な疎水性二官能性スペーサは、当該技術分野において既知であり、例えば、８－ヒドロキシオクタン酸および８－メルカプトオクタン酸を含む。特定の実施形態におけるスペーサ（例えば、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、または疎水性二官能性スペーサ）は、３～１０個の原子（例えば、６～１０個の原子（例えば、６、７、８、９、または１０個の原子））の長さである。より具体的な実施形態では、スペーサおよびアルキル基の全長が１４～２８個の原子、例えば、約１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８個の原子であるように、スペーサは、約３～１０個の原子（例えば、６～１０原子）の長さであり、アルキル基は、Ｃ_１２～Ｃ_１８アルキル基、例えば、Ｃ_１４アルキル基、Ｃ_１６アルキル基である。いくつかの実施形態では、スペーサおよびアルキルの長さは、１７～２８（例えば、１９～２６、１９～２１）個の原子である。ある特定の前述の実施形態によれば、二官能性スペーサは、３～１０個の原子の長さであるアミノ酸骨格（例えば、６－アミノヘキサン酸、５－アミノ吉草酸、７－アミノヘプタン酸、および８－アミノオクタン酸）を含む非天然型または非コード化アミノ酸であり得る。あるいは、スペーサは、３～１０個の原子（例えば、６～１０個の原子）の長さであるペプチド骨格を有するジペプチドまたはトリペプチドスペーサであり得る。ジペプチドまたはトリペプチドスペーサは、例えば、本明細書で教示されるアミノ酸のいずれかを含む、天然型またはコード化および／または非コード化または非天然型アミノ酸から構成され得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、全体的に負電荷を含み、例えば、１つまたは２つの負に荷電したアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ジペプチドスペーサは、Ａｌａ－Ａｌａ、β－Ａｌａ－β－Ａｌａ、Ｌｅｕ－Ｌｅｕ、Ｐｒｏ－Ｐｒｏ、γ－アミノ酪酸－γ－アミノ酪酸、およびγ－Ｇｌｕ－γ－Ｇｌｕからなる群から選択される。アミン、ヒドロキシル、およびチオールを介したペプチドアルキル化の好適な方法は、当該技術分野において既知である。例えば、ウィリアムソンのエーテル合成を使用して、ペプチドのヒドロキシル基とアルキル基との間にエーテル結合を形成することができる。また、ペプチドのハロゲン化アルキルとの求核置換反応は、エーテル、チオエーテル、またはアミノ結合のいずれかをもたらし得る。アルキル化ペプチドのアルキル基は、任意のサイズ、例えば、任意の長さの炭素鎖であり得、直鎖状または分岐状であり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基は、Ｃ_４～Ｃ_３０アルキルである。例えば、アルキル基は、Ｃ_４アルキル、Ｃ_６アルキル、Ｃ_８アルキル、Ｃ_１０アルキル、Ｃ_１２アルキル、Ｃ_１４アルキル、Ｃ_１６アルキル、Ｃ_１８アルキル、Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２２アルキル、Ｃ_２４アルキル、Ｃ_２６アルキル、Ｃ_２８アルキル、またはＣ_３０アルキルのちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基は、Ｃ_８～Ｃ_２０アルキル、例えば、Ｃ_１４アルキルまたはＣ_１６アルキルである。本開示のいくつかの実施形態では、ペプチドは、求核長鎖アルカンをペプチドと反応させることによってアルキル化アミノ酸を含み、ペプチドは、求核置換に好適な脱離基を含む。特定の態様では、長鎖アルカンの求核基は、アミン、ヒドロキシル、またはチオール基（例えば、オクタデシルアミン、テトラデカノール、およびヘキサデカンチオール）を含む。ペプチドの脱離基は、アミノ酸の側鎖の一部であるか、またはペプチド骨格の一部であり得る。好適な脱離基には、例えば、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド、ハロゲン、およびスルホン酸エステルが含まれる。ある特定の実施形態では、ペプチドは、求核長鎖アルカンを、ペプチドに結合されているスペーサと反応させることによってアルキル基を含むように修飾され、スペーサは脱離基を含む。特定の態様では、長鎖アルカンは、アミン、ヒドロキシル、またはチオール基を含む。ある特定の実施形態では、脱離基を含むスペーサは、本明細書で論じられる任意のスペーサ、例えば、好適な脱離基をさらに含むアミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、および疎水性二官能性スペーサであり得る。長鎖アルカンがペプチドまたはスペーサによってアルキル化される本開示のこれらの態様に関して、長鎖アルカンは、任意のサイズのものであり得、任意の長さの炭素鎖を含み得る。長鎖アルカンは、直鎖状または分岐状であり得る。ある特定の態様では、長鎖アルカンは、Ｃ_４～Ｃ_３０アルカンである。例えば、長鎖アルカンは、Ｃ_４アルカン、Ｃ_６アルカン、Ｃ_８アルカン、Ｃ_１０アルカン、Ｃ_１２アルカン、Ｃ_１４アルカン、Ｃ_１６アルカン、Ｃ_１８アルカン、Ｃ_２０アルカン、Ｃ_２２アルカン、Ｃ_２４アルカン、Ｃ_２６アルカン、Ｃ_２８アルカン、またはＣ_３０アルカンのうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、長鎖アルカンは、Ｃ_８～Ｃ_２０アルカン、例えば、Ｃ_１４アルカン、Ｃ_１６アルカン、またはＣ_１８アルカンを含む。また、いくつかの実施形態では、ペプチドとコレステロール部分との間でアルキル化が生じ得る。例えば、コレステロールのヒドロキシル基は、長鎖アルカン上の脱離基を置換して、コレステロール－ペプチド生成物を形成し得る。本明細書に記載のアルキル化ペプチドは、親水性部分を含むようにさらに修飾され得る。いくつかの特定の実施形態では、親水性部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖を含むことができる。親水性部分の組み込みは、本明細書に記載される方法のうちのいずれかなどの任意の好適な手段によって達成することができる。あるいは、アルキル化ペプチドは、スペーサを含むことができ、スペーサは、親水性部分を含むようにアルキル化および修飾の両方である。好適なスペーサの非限定的な例には、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ－Ｃｙｓ、およびＡｃ－Ｐｈｅからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を含むスペーサが挙げられる。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置１もしくは２において、または位置１および２の両方において、ペプチダーゼ切断に対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置１において、Ｄ－ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル－ヒスチジン、アセチル－ヒスチジン、ホモ－ヒスチジン、Ｎメチルヒスチジン、アルファ－メチルヒスチジン、イミダゾール酢酸、またはアルファ、アルファ－ジメチルイミダゾール酢酸（ＤＭＩＡ）からなる群から選択されるアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置２において、Ｄ－セリン、Ｄ－アラニン、バリン、グリシン、Ｎ－メチルセリン、Ｎ－メチルアラニン、またはアルファ、アミノイソ酪酸からなる群から選択されるアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置２において、ペプチダーゼに対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸と、Ｄ－セリンではないペプチダーゼに対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸とを含む。いくつかの実施形態では、この共有結合は、ラクタム架橋以外の分子内架橋である。例えば、好適な共有結合方法には、オレフィンメタセシス、ランチオニンベースの環化、ジスルフィド架橋または修飾硫黄含有架橋形成、α，ω－ジアミノアルカンテザーの使用、金属原子架橋の形成、およびペプチド環化の他の手段のうちのいずれか１つ以上が挙げられる。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、類似体のＣ末端部分に電荷アミノ酸を導入するアミノ酸置換および／または付加によって修飾される。いくつかの実施形態では、そのような修飾は、安定性および溶解性を高める。本明細書で使用する場合、「電荷アミノ酸」または「電荷残基」という用語は、生理学的ｐＨで水溶液中の負電荷（すなわち、脱プロトン化）または正電荷（すなわち、プロトン化）の側鎖を含むアミノ酸を指す。いくつかの態様では、電荷アミノ酸修飾を導入するこれらのアミノ酸置換および／または付加は、Ｃ末端位置にあり得る。いくつかの実施形態では、１つ、２つ、または３つ（いくつかの場合では、４つ以上）の電荷アミノ酸がＣ末端位置で導入され得る。例示的な実施形態において、電荷アミノ酸のうちの１つ、２つ、またはすべてが負電荷であり得る。いくつかの実施形態における負電荷アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、またはホモグルタミン酸である。いくつかの態様では、これらの修飾は溶解性を増加させる。

いくつかの実施形態によれば、本明細書に開示されるペプチドは、１つまたは２つのアミノ酸残基によってＣ末端の切断により修飾され得る。これに関して、ペプチドは、配列（配列番号１～６４）を含むことができ、任意に本明細書に記載の追加の修飾のうちのいずれかとともに含むことができる。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、Ｃ末端アミノ酸のカルボン酸がアミドまたはエステルなどの電荷中性基で置き換えられている、修飾された配列番号１～６４含む。したがって、いくつかの実施形態では、ペプチドは、Ｃ末端残基がアミノ酸のアルファカルボキシレートの代わりにアミドを含むように、アミド化ペプチドである。本明細書で使用される場合、ペプチドまたは類似体への一般的な言及は、修飾アミノ末端、修飾カルボキシ末端、またはアミノ末端とカルボキシ末端の両方の修飾を有するペプチドを包含することを意図している。例えば、末端カルボン酸の代わりにアミド基を構成するアミノ酸鎖は、標準アミノ酸を指定するアミノ酸配列によって包含されることが意図されている。

いくつかの実施形態によれば、本明細書に開示されるペプチドは、少なくとも１つのアミノ酸残基への複合体化によって修飾され得る。これに関して、ペプチドは、配列（配列番号１～６４）を含むことができ、任意に本明細書に記載の追加の複合体のうちのいずれかとともに含むことができる。

本開示は、異種部分に複合体化される本明細書に記載のペプチドのうちの１つ以上を含む複合体をさらに提供する。本明細書で使用される場合、「異種部分」という用語は、「複合体部分」という用語と同義であり、本明細書に記載のペプチドとは異なる任意の分子（化学的または生化学的、天然型または非コード化）を指す。本明細書に記載の類似体のうちのいずれかに結合され得る例示的な複合体部分には、これらに限定されないが、異種ペプチドもしくはポリペプチド（例えば、血漿タンパク質を含む）、標的化剤、免疫グロブリンもしくはその一部（例えば、可変領域、ＣＤＲ、またはＦｃ領域）、放射性同位体、フルオロフォアもしくは酵素標識などの診断ラベル、水溶性ポリマーを含むポリマー、または他の治療薬もしくは診断薬が含まれる。いくつかの実施形態では、ペプチドおよび血漿タンパク質を含む複合体が提供され、血漿タンパク質は、アルブミン、トランスフェリン、フィブリノゲン、およびグロブリンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、複合体の血漿タンパク質部分は、アルブミンまたはトランスフェリンである。

いくつかの実施形態での複合体は、本明細書に記載のペプチドのうちの１つ以上と、異なるペプチド（本明細書に記載のペプチドとは異なる）、ポリペプチド、核酸分子、抗体またはその断片、ポリマー、量子ドット、小分子、毒素、診断薬、炭水化物、アミノ酸のうちの１つ以上とを含む。いくつかの実施形態では、異種部分はポリマーである。いくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレンおよびポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレートを含むその誘導体、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート）、ポリ（ラウリルメタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、およびポリ（オクタデシルアクリレート）を含むアクリルおよびメタクリルエステルのポリマー、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハライド、ポリ（酢酸ビニル）、およびポリビニルピロリドンを含むポリビニルポリマー、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびそのコポリマー、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ－プロピル－メチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースプロピオネート、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートフタレート、カルボキシルエチルセルロース、セルローストリアセテート、およびセルロース硫酸ナトリウム塩を含むセルロース、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、およびポリ（エチレンテレフタレート）を含むポリエチレン、ならびにポリスチレンからなる群から選択される。いくつかの態様では、ポリマーは、合成生分解性ポリマー（例えば、乳酸とグリコール酸のポリマー、ポリ無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリウレタン、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、およびポリ（ラクチド－コカプロラクトン））、および天然の生分解性ポリマー（例えば、アルギン酸塩ならびにデキストランおよびセルロースを含む他の多糖類、コラーゲン、その化学誘導体（置換、化学基の付加、例えば、アルキル、アルキレン、ヒドロキシル化、酸化、および当事者によって日常的に行われる他の修飾）、および当業者によって日常的に行われる他の修飾）、アルブミンおよび他の親水性タンパク質（例えば、ゼインおよび他のプロラミンならびに疎水性タンパク質））、ならびにそれらの任意のコポリマーまたは混合物である。一般に、これらの材料は、酵素加水分解またはインビボでの水への曝露のいずれかによって、表面侵食またはバルク侵食により分解する。いくつかの態様では、ポリマーは、その教示が本明細書に組み込まれるＨ．Ｓａｗｈｎｅｙ，ｅｔａｌ．，［Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，１９９３，２６，５８１－５８７］に記載される生体侵食性ヒドロゲル、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリ無水物、ポリアクリル酸、アルギン酸塩、キトサン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート）、ポリ（ラウリルメタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、およびポリ（オクタデシルアクリレート）などの生体付着性ポリマーである。

いくつかの実施形態では、ポリマーは、水溶性ポリマーまたは親水性ポリマーである。親水性ポリマーは、本明細書において「親水性部分」の下にさらに説明される。好適な水溶性ポリマーは、当該技術分野において既知であり、例えば、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ、Ｋｌｕｃｅｌ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ）、ニトロセルロース、ヒドロキシプロピルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルブチルセルロース、ヒドロキシプロピルペンチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース（Ｅｔｈｏｃｅｌ）、ヒドロキシエチルセルロース、様々なアルキルセルロースおよびヒドロキシアルキルセルロース、様々なセルロースエーテル、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、酢酸ビニル／クロトン酸コポリマー、ポリ－ヒドロキシアルキルメタクリレート、ヒドロキシメチルメタクリレート、メタクリル酸コポリマー、ポリメタクリル酸、ポリメチルメタクリレート、無水マレイン酸／メチルビニルエーテルコポリマー、ポリビニルアルコール、ナトリウムおよびカルシウムポリアクリル酸、ポリアクリル酸、酸性カルボキシポリマー、カルボキシポリメチレン、カルボキシビニルポリマー、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンコポリマー、ポリメチルビニルエーテルコマレイン酸無水物、カルボキシメチルアミド、カリウムメタクリレートジビニルベンゼンコポリマー、ポリオキシエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ならびにそれらの誘導体、塩、および組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、ポリマーは、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含むポリアルキレングリコールである。

いくつかの実施形態では、異種部分は、炭水化物である。いくつかの実施形態では、炭水化物は、単糖（例えば、グルコース、ガラクトース、フルクトース）、二糖（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、オリゴ糖（例えば、ラフィノース、スタキオース）、多糖（デンプン、アミラーゼ、アミロペクチン、セルロース、キチン、カロース、ラミナリン、キシラン、マンナン、フコイダン、ガラクトマンナンである。

いくつかの実施形態では、異種部分は、脂質である。脂質は、いくつかの実施形態では、脂肪酸、エイコサノイド、プロスタグランジン、ロイコトリエン、トロンボキサン、Ｎ－アシルエタノールアミン）、グリセロ脂質（例えば、モノ、ジ、トリ置換グリセロール）、グリセロリン脂質（例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン）、スフィンゴ脂質（例、スフィンゴシン、セラミド）、ステロール脂質（例、ステロイド、コレステロール）、プレノール脂質、糖脂質、またはポリケチド、油、ワックス、コレステロール、ステロール、脂溶性ビタミン、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、リン脂質である。

いくつかの実施形態では、異種部分は、本開示のペプチドと非共有結合または共有結合を介して結合される。ある特定の態様では、異種部分は、リンカーを介して本開示のペプチドに結合される。結合は、共有化学結合、静電気、水素、イオン、ファンデルワールスなどの物理的な力、または疎水性もしくは親水性相互作用によって達成され得る。ビオチン－アビジン、リガンド／受容体、酵素／基質、核酸／核酸結合タンパク質、脂質／脂質結合タンパク質、細胞接着分子パートナー、または互いに親和性を有する任意の結合パートナーもしくはその断片を含む、様々な非共有結合系が使用されてもよい。いくつかの実施形態におけるペプチドは、類似体の標的化されたアミノ酸残基を、選択された側鎖またはこれらの標的化されたアミノ酸のＮまたはＣ末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることによって、直接共有結合を介して複合体部分に結合される。類似体または複合体部分の反応性基には、例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α－ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基が含まれる。誘導体化剤には、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介した複合体化）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を介した）、グルタルアルデヒド、コハク酸無水物、または当該技術分野で既知の他の薬剤が挙げられる。あるいは、複合体部分は、多糖類またはポリペプチド担体などの中間担体を介して間接的に類似体に結合され得る。多糖類担体の例には、アミノデキストランが挙げられる。好適なポリペプチド担体の例には、ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、それらのコポリマー、およびこれらのアミノ酸の混合ポリマー、ならびに他、例えば、得られる担持担体に望ましい溶解特性を付与するためのセリンが挙げられる。システイニル残基は、最も一般的には、クロロ酢酸、クロロアセトアミドなどのα－ハロアセテート（および対応するアミン）と反応して、カルボキシメチルまたはカルボキシアミドメチル誘導体を生じる。システイニル残基はまた、ブロモトリフルオロアセトン、アルファ－ブロモ－β－（５－イミドゾイル）プロピオン酸、クロロアセチルホスファート、Ｎ－アルキルマレイミド、３－ニトロ－２－ピリジルジスルフィド、メチル２－ピリジルジスルフィド、ｐ－クロロ第二水銀安息香酸塩、２－クロロメルクリ－４－ニトロフェノール、またはクロロ－７－ニトロベンゾ－２－オキサ－１、３－ジアゾールとの反応により誘導体化され得る。この薬剤はヒスチジル側鎖に比較的特異的であるため、ヒスチジル残基はｐＨ５．５～７．０でジエチルピロカーボネートとの反応により誘導体化され得る。パラ－ブロモフェナシルブロミドもまた有用であり、反応は、ｐＨ６．０の０．１Ｍカコジル酸ナトリウム中で実行することが好ましい。リジニルおよびアミノ末端残基は、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応し得る。これらの薬剤による誘導体化は、リジニル残基の電荷を逆転させる効果を有する。アルファ－アミノ含有残基を誘導体化するための他の好適な試薬には、ピコリンイミン酸メチル、リン酸ピリドキサール、ピリドキサール、水素化ホウ素、トリニトロベンゼンスルホン酸、Ｏ－メチルイソ尿素、２，４－ペンタンジオン、およびグリオキシレートとのトランスアミナーゼ触媒反応などのイミドエステルが挙げられる。アルギニル残基は、１つまたはいくつかの従来の試薬、その中でもフェニルグリオキサール、２，３－ブタンジオン、１，２－シクロヘキサンジオン、およびニンヒドリンとの反応によって修飾され得る。アルギニン残基の誘導体化は、グアニジン官能基のｐＫａが高いため、反応をアルカリ性条件で実行する必要がある。さらに、これらの試薬は、リジンの基ならびにアルギニンイプシロン－アミノ基と反応し得る。チロシル残基の特定の修飾は、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によるチロシル残基へのスペクトル標識の導入に特に関心をもって行われ得る。最も一般的には、Ｎ－アセチルイミジゾールおよびテトラニトロメタンが、それぞれＯ－アセチルチロシル種および３－ニトロ誘導体を形成するために使用される。カルボキシル側基（アスパルチルまたはグルタミル）は、カルボジイミド（Ｒ－Ｎ＝Ｃ＝Ｎ－Ｒ′）との反応によって選択的に修飾され得、ＲおよびＲ’は、１－シクロヘキシル－３－（２－モルホリニル－４－エチル）カルボジイミドまたは１－エチル－３－（４－アゾニア－４，４－ジメチルペンチル）カルボジイミドなどの異なるアルキル基である。さらに、アスパルチルおよびグルタミル残基は、アンモニウムイオンとの反応によってアスパラギニルおよびグルタミニル残基に変換され得る。他の修飾には、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のアルファ－アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９－８６（１９８３））、アスパラギンもしくはグルタミンの脱アミド化、Ｎ末端アミンのアセチル化、および／またはＣ末端カルボキシル基のアミド化もしくはエステル化が挙げられる。別の種類の共有結合修飾は、グリコシドをペプチドに化学的または酵素的にカップリングすることに関与する。糖は（ａ）アルギニンおよびヒスチジン、（ｂ）遊離カルボキシル基、（ｃ）遊離システインのものなどの遊離スルフヒドリル基、（ｄ）セリン、スレオニン、もしくはヒドロキシプロリンなどの遊離ヒドロキシル基、（ｅ）チロシン、もしくはトリプトファンのものなどの芳香族残基、または（ｆ）グルタミンのアミド基に結合され得る。これらの方法は、１９８７年９月１１日に公開されたＷＯ８７／０５３３０、およびＡｐｌｉｎａｎｄＷｒｉｓｔｏｎ，ＣＲＣＣｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９－３０６（１９８１）に記載されている。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖と異種部分との間の共有結合を介して異種部分に複合体化される。いくつかの態様では、異種部分に共有結合したアミノ酸（例えば、異種部分を含むアミノ酸）は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈｏｍｏ－Ｃｙｓ、またはＡｃ－Ｐｈｅであり、アミノ酸の側鎖は異種部分に共有結合されている。いくつかの実施形態では、複合体は、ペプチドを異種部分に結合するリンカーを含む。いくつかの態様では、リンカーは、１～約６０、または１～３０以上の原子、２～５原子、２～１０原子、５～１０原子、または１０～２０原子長の原子の鎖を含む。いくつかの実施形態では、鎖原子はすべて炭素原子であり得る。いくつかの実施形態では、リンカーの骨格の鎖原子は、Ｃ、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択され得る。鎖原子およびリンカーは、より溶解性の複合体を提供するためにそれらの予期される溶解性（親水性）に従って選択され得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、標的組織または器官または細胞に見られる酵素または他の触媒または加水分解条件による切断を受ける官能基を提供する。いくつかの実施形態では、リンカーの長さは、立体障害の可能性を低減するのに十分な長さである。リンカーが共有結合またはペプチジル結合であり、複合体がポリペプチドである場合、複合体全体が融合タンパク質であり得る。そのようなペプチジルリンカーは、任意の長さであり得る。例示的なリンカーは、約１～５０アミノ酸の長さ、５～５０、３～５、５～１０、５～１５、または１０～３０アミノ酸の長さであり得る。あるいは、そのような融合タンパク質は、当業者に既知の組換え遺伝子操作方法により産生され得る。

上記のように、いくつかの実施形態では、ペプチドは、複合体化され得、例えば、免疫グロブリンまたはその一部（例えば、可変領域、ＣＤＲ、またはＦｃ領域）に融合され得る。既知の種類の免疫グロブリン（Ｉｇ）には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＭが含まれる。Ｆｃ領域は、Ｉｇ重鎖のＣ末端領域であり、それはリサイクル（長い半減期をもたらす）、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）などの活動を行うＦｃ受容体への結合を担う。例えば、いくつかの定義によれば、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から重鎖のＣ末端まで伸びている。「ヒンジ領域」は、一般に、ヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２１６からＰｒｏ２３０まで延在する（他のＩｇＧアイソタイプのヒンジ領域は、システイン結合に関与するシステインを整列させることによりＩｇＧ１配列と整列させることができる）。ＩｇＧのＦｃ領域には、２つの定常ドメイン、ＣＨ２およびＣＨ３が含まれる。ヒトＩｇＧＦｃ領域のＣＨ２ドメインは通常、アミノ酸２３１からアミノ酸３４１まで延在する。ヒトＩｇＧＦｃ領域のＣＨ３ドメインは通常、アミノ酸３４２から４４７まで延在する。免疫グロブリンもしくは免疫グロブリン断片、または領域のアミノ酸番号付けに関する言及はすべて、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．１９９１，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．に基づく。関連する実施形態では、Ｆｃ領域は、ＣＨ１以外、例えば、ＩｇＧおよびＩｇＡのＣＨ２およびＣＨ３領域、またはＩｇＥのＣＨ３およびＣＨ４領域などの、免疫グロブリン重鎖由来の１つ以上の天然または修飾定常領域を含み得る。好適な複合体部分には、ＦｃＲｎ結合部位を含む免疫グロブリン配列の部分が含まれる。サルベージ受容体であるＦｃＲｎは、免疫グロブリンをリサイクルし、血液中の循環にそれらを戻すことを担う。ＦｃＲｎ受容体と結合するＩｇＧのＦｃ部分の領域は、Ｘ線結晶構造解析に基づいて説明されている（Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒｅｔａｌ．１９９４，Ｎａｔｕｒｅ３７２：３７９）。ＦｃのＦｃＲｎとの主要な接触領域は、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインの接合部付近である。Ｆｃ－ＦｃＲｎ接触はすべて単一のＩｇ重鎖内にある。主要な接触部位は、ＣＨ２ドメインのアミノ酸残基２４８、２５０～２５７、２７２、２８５、２８８、２９０～２９１、３０８～３１１、および３１４と、ＣＨ３ドメインのアミノ酸残基３８５～３８７、４２８、および４３３～４３６を含む。いくつかの複合体部分は、ＦｃγＲ結合部位を含んでも含まなくてもよい。ＦｃγＲは、ＡＤＣＣおよびＣＤＣを担う。ＦｃγＲと直接接触するＦｃ領域内の位置の例は、アミノ酸２３４～２３９（下側ヒンジ領域）、アミノ酸２６５～２６９（Ｂ／Ｃループ）、アミノ酸２９７～２９９（Ｃ’／Ｅループ）、およびアミノ酸３２７～３３２（Ｆ／Ｇ）ループである（Ｓｏｎｄｅｒｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ４０６：２６７－２７３，２０００）。ＩｇＥの下側ヒンジ領域もまた、ＦｃＲＩ結合に関与している（Ｈｅｎｒｙ，ｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３６，１５５６８－１５５７８，１９９７）。ＩｇＡ受容体の結合に関与する残基は、Ｌｅｗｉｓｅｔａｌ．，（ＪＩｍｍｕｎｏｌ．１７５：６６９４－７０１，２００５）に記載されている。ＩｇＥ受容体の結合に関与するアミノ酸残基は、Ｓａｙｅｒｓｅｔａｌ．（ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ．２７９（３４）：３５３２０－５，２００４）に記載されている。アミノ酸修飾は、免疫グロブリンのＦｃ領域に行われ得る。そのようなバリアントＦｃ領域は、Ｆｃ領域のＣＨ３ドメインにおける少なくとも１つのアミノ酸修飾（残基３４２～４４７）および／またはＦｃ領域のＣＨ２ドメインにおける少なくとも１つのアミノ酸修飾（残基２３１～３４１）を含む。ＦｃＲｎに対する増加された親和性に影響を与えると考えられる変異には、Ｔ２５６Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａが挙げられる（Ｓｈｉｅｌｄｓｅｔａｌ．２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１）。他の変異は、ＦｃＲｎに対する親和性を著しく低減することなく、Ｆｃ領域のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、および／またはＦｃγＲＩＩＩＡへの結合を低減し得る。例えば、Ｆｃ領域の位置２９７でのＡｓｎの、Ａｌａまたは別のアミノ酸との置換は、高度に保存されたＮ－グリコシル化部位を除去し、Ｆｃ領域の付随する長い半減期を有する低減された免疫原生、ならびにＦｃγＲｓへの低減された結合をもたらし得る（Ｒｏｕｔｌｅｄｇｅｅｔａｌ．１９９５，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ６０：８４７、Ｆｒｉｅｎｄｅｔａｌ．１９９９，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ６８：１６３２、Ｓｈｉｅｌｄｓｅｔａｌ．１９９５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１）。ＦｃγＲへの結合を低減するＩｇＧ１の２３３～２３６位におけるアミノ酸修飾が行われている（ＷａｒｄａｎｄＧｈｅｔｉｅ１９９５，ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ２：７７、およびＡｒｍｏｕｒｅｔａｌ．１９９９，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９：２６１３）。いくつかの例示的なアミノ酸置換は、米国特許第７，３５５，００８号および同第７，３８１，４０８号に記載されており、各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、免疫グロブリン分子内のループ領域に挿入される。他の実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、免疫グロブリン分子内のループ領域の１つ以上のアミノ酸を置き換える。

本明細書に記載のペプチドは、生物学的活性を保持しながら、生理学的ｐＨの水溶液中でのその溶解性および安定性を改善するためにさらに修飾され得る。ＰＥＧ基などの親水性部分は、タンパク質を活性化ポリマー分子と反応させるために使用される任意の好適な条件下で類似体に結合され得る。アシル化、還元的アルキル化、マイケル付加、チオールアルキル化、またはＰＥＧ部分の反応性基（例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α－ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基）から標的化合物の反応性基（例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α－ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基）をとおした他の化学選択的複合体化／ライゲーションを含む、当該技術分野で既知の任意の手段が使用され得る。水溶性ポリマーを１つ以上のタンパク質に結合するために使用され得る活性化基には、限定されないが、スルホン、マレイミド、スルフヒドリル、チオール、トリフレート、トレシレート、アジジリン、オキシラン、５－ピリジル、およびアルファ－ハロゲン化アシル基（例えば、アルファ－ヨード酢酸、アルファ－ブロモ酢酸、アルファ－クロロ酢酸）が挙げられる。還元的アルキル化により類似体に結合される場合、選択されたポリマーは、重合の程度が制御されるように単一の反応性アルデヒドを有するべきである。例えば、Ｋｉｎｓｔｌｅｒｅｔａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．ＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖ．５４：４７７－４８５（２００２）、Ｒｏｂｅｒｔｓｅｔａｌ．，Ａｄｖ．ＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖ．５４：４５９－４７６（２００２）、およびＺａｌｉｐｓｋｙｅｔａｌ．，Ａｄｖ．ＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖ．１６：１５７－１８２（１９９５）を参照されたい。特定の態様では、チオールを有するペプチドのアミノ酸残基は、ＰＥＧなどの親水性部分で修飾されている。いくつかの実施形態では、チオールは、マイケル付加反応においてマレイミド活性化ＰＥＧで修飾されて、チオエーテル結合を含むＰＥＧ化類似体をもたらす。いくつかの実施形態では、チオールは、求核置換反応においてハロアセチル活性化ＰＥＧで修飾されて、チオエーテル結合を含むＰＥＧ化類似体をもたらす。好適な親水性部分には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、ＰＯＧ）、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコース、ポリオキシエチル化グリセロール（ＰＯＧ）、ポリオキシアルキレン、ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒド、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、モノメトキシ－ポリエチレングリコール、モノ－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルコキシ－またはアリールオキシ－ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ポリアセタール、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリ（ベータ－アミノ酸）（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、ポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー（ＰＰＧ）および他のポリアルキレンオキシド、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、結腸酸または他の多糖類ポリマー、フィコールまたはデキストランおよびそれらの混合物が挙げられる。デキストランは、主にα１－６結合により結合したグルコースサブユニットの多糖ポリマーである。デキストランは、多くの分子量範囲、例えば、約１ｋＤ～約１００ｋＤ、または約５、１０、１５、または２０ｋＤ～約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、または９０ｋＤで利用可能である。直鎖状または分岐状ポリマーが企図される。複合体の得られる配合物は、本質的に単分散または多分散であってもよく、類似体あたり約０．５、０．７、１、１．２、１．５、または２個のポリマー部分を有してもよい。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖と親水性部分との間の共有結合を介して親水性部分に複合体化される。いくつかの実施形態では、ペプチドは、アミノ酸、Ｃ末端伸長内の位置、またはＣ末端アミノ酸、またはこれらの位置の組み合わせの側鎖を介して親水性部分に複合体化される。いくつかの態様では、親水性部分に共有結合したアミノ酸（例えば、親水性部分を含むアミノ酸）は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈｏｍｏ－Ｃｙｓ、またはＡｃ－Ｐｈｅであり、アミノ酸の側鎖は親水性部分（例えば、ＰＥＧ）に共有結合されている。いくつかの実施形態では、本開示の複合体は、国際特許出願公開第ＷＯ２００９／０２３２７０号および米国特許出願公開第ＵＳ２００８／０２８６８０８号に記載されているものなど、化学的ＰＥＧ（例えば、組換えＰＥＧ（ｒＰＥＧ）分子）と同様の伸長立体構造を形成することができるアクセサリー類似体に融合したペプチドを含む。いくつかの態様におけるｒＰＥＧ分子は、グリシン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン、またはプロリンのうちの１つ以上を含むポリペプチドである。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、ホモポリマー、例えば、ポリ－グリシン、ポリ－セリン、ポリ－グルタミン酸、ポリ－アスパラギン酸、ポリ－アラニン、またはポリ－プロリンである。他の実施形態では、ｒＰＥＧは、繰り返される２種類のアミノ酸、例えば、ポリ（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）、ポリ（Ｇｌｙ－Ｇｌｕ）、ポリ（Ｇｌｙ－Ａｌａ）、ポリ（Ｇｌｙ－Ａｓｐ）、ポリ（Ｇｌｙ－Ｐｒｏ）、ポリ（Ｓｅｒ－Ｇｌｕ）などを含む。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、３つの異なる種類のアミノ酸、例えば、ポリ（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｕ）を含む。特定の態様では、ｒＰＥＧは、ペプチドの半減期を増加させる。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、正味の正電荷または正味の負電荷を含む。いくつかの態様におけるｒＰＥＧは、二次構造を欠いている。いくつかの実施形態では、ｒＰＥＧは、１０アミノ酸以上の長さであり、いくつかの実施形態では、約４０～約５０アミノ酸の長さである。いくつかの態様におけるアクセサリーペプチドは、ペプチド結合またはプロテイナーゼ切断部位を介して本開示のペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合されるか、または本開示のペプチドのループに挿入される。いくつかの態様におけるｒＰＥＧは、親和性タグを含むか、または５ｋＤａを超えるＰＥＧに結合されている。いくつかの実施形態では、ｒＰＥＧは、本開示のペプチドに増加した流体力学的半径、血清半減期、プロテアーゼ耐性、または溶解度を付与し、いくつかの態様では、類似体に減少した免疫原性を付与する。

配列（配列番号１～６４）を含み、任意に、本明細書に記載の複合体のうちのいずれかを有するペプチドが、実施形態として企図される。

本開示は、ホモもしくはヘテロ多量体またはホモもしくはヘテロ二量体を含む、本明細書に開示されるペプチドの多量体または二量体をさらに提供する。類似体のうちの２つ以上は、当業者に既知の標準結合剤および手順を使用して一緒に結合され得る。例えば、特に、システイン、リジンオルニチン、ホモシステイン、またはアセチルフェニルアラニン残基で置換されている類似体の場合、二官能性チオール架橋剤および二官能性アミン架橋剤を使用して、２つのペプチド間で二量体を形成することができる。二量体は、ホモ二量体、または代替的にはヘテロ二量体であり得る。ある特定の実施形態では、２つ（またはそれ以上の）の類似体を接続するリンカーは、ＰＥＧ、例えば、５ｋＤａＰＥＧ、２０ｋＤａＰＥＧである。いくつかの実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合である。例えば、二量体の各単量体は、Ｃｙｓ残基（例えば、末端または内部に位置するＣｙｓ）を含み得、各Ｃｙｓ残基の硫黄原子は、ジスルフィド結合の形成に関与する。いくつかの態様では、単量体は、末端アミノ酸（例えば、Ｎ末端またはＣ末端）を介して、内部アミノ酸を介して、または少なくとも１つの単量体の末端アミノ酸および少なくとも１つの他の単量体の内部アミノ酸を介して接続され得る。特定の態様では、単量体は、Ｎ末端アミノ酸を介して接続されていない。いくつかの態様では、多量体の単量体は、各単量体のＣ末端アミノ酸が一緒に結合されている「ｔａｉｌ－ｔｏ－ｔａｉｌ」の方向で一緒に結合され得る。

本明細書に開示されるペプチドは、様々な方法で作製され得る。ペプチドを新規に合成する好適な方法は、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，８５，２１４９（１９６３）、Ｄａｖｉｓｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．，１０，３９４－４１４（１９８５）、Ｌａｒｓｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，１１５，６２４７（１９９３）、Ｓｍｉｔｈｅｔａｌ．，Ｊ．ＰｅｐｔｉｄｅＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ．，４４，１８３（１９９４）、Ｏ’Ｄｏｎｎｅｌｌｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，１１８，６０７０（１９９６）、ＳｔｅｗａｒｔａｎｄＹｏｕｎｇ，ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｆｒｅｅｍａｎ（１９６９）、Ｆｉｎｎｅｔａｌ．，ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎｓ，３ｅｄ．，ｖｏｌ．２，ｐｐ．１０５－２５３（１９７６）、Ｅｒｉｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎｓ，３ｒｄｅｄ．，ｖｏｌ．２，ｐｐ．２５７－５２７（１９７６）、およびＣｈａｎｅｔａｌ．，ＦｍｏｃＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，ＵｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍ，２００５に記載されている。本開示は、合成ペプチドを企図している。ペプチドを作製する方法は、それ自体が本発明の実施形態である。

あるいは、ペプチドは、ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むかまたはそれからなる核酸を宿主細胞に導入することによって組換え的に発現され得、標準的な組換え方法を使用してコードされたペプチドを発現するように培養され得る。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ．３ｒｄｅｄ．，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．２００１、およびＡｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＧｒｅｅｎｅＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｅｓａｎｄＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９４を参照されたい。そのようなペプチドは、培養培地または細胞ペレットから精製され得る。

いくつかの実施形態では、本開示のペプチドは、単離され得る。いくつかの実施形態では、本開示のペプチドは、精製され得る。「純度」は相対的な用語であり、必ずしも絶対的な純度または絶対的な濃縮または絶対的な選択として解釈されるものではないことが認識される。いくつかの態様では、純度は、少なくともまたは約５０％であり、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、または少なくともまたは約９０％（例えば、少なくとももしくは約９１％、少なくとももしくは約９２％、少なくとももしくは約９３％、少なくとももしくは約９４％、少なくとももしくは約９５％、少なくとももしくは約９６％、少なくとももしくは約９７％、少なくとももしくは約９８％、少なくとももしくは約９９％、または約１００％である。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）、ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＰｅｐｔｉｄｅ（Ｇａｒｄｎｅｒ、ＭＡ）、およびＣＰＣＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）、ＰｅｐｔｉｄｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＣｏｒｐ．（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）、およびＭｕｌｔｉｐｌｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｓｔｅｍｓ（ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）などの企業によって商業的に合成することができる。これに関して、ペプチドは、合成、組換え、単離、および／または精製されていてもよい。

本開示のペプチドは、一実施形態に従って、キットの一部として提供され得る。したがって、いくつかの実施形態では、ペプチドをそれを必要とする患者に投与するためのキットが提供され、キットは本明細書に記載のペプチドを含む。

一実施形態では、キットは、患者に組成物を投与するためのデバイス、例えば、注射針、ペンデバイス、ジェット式注射器、または他の無針注射器とともに提供される。キットは、代替的または追加的に、１つ以上の容器、例えば、バイアル、チューブ、ボトル、単一または複数チャンバーの事前充填シリンジ、カートリッジ、注入ポンプ（外部または埋め込み可能）、ジェット式注射器、事前充填ペンデバイスなどを含み、任意に、凍結乾燥形態または水溶液でペプチドを含む。いくつかの実施形態におけるキットは、使用のための説明書を含む。一実施形態によれば、キットのデバイスはエアロゾル分配デバイスであり、組成物はエアロゾルデバイス内に予め包装されている。別の実施形態では、キットは、シリンジおよび針を含み、一実施形態において、滅菌組成物はシリンジ内に予め充填されている。

さらなる実施形態は、本明細書に記載のペプチドを処方、販売または販売するための広告、購入、自己投与するように指示、または投与の１つ以上を含む疾患を治療するプロセスを含み、ペプチドは、治療を必要としている対象への状態の治療のために規制機関によって承認されている。

さらなる実施形態は、疾患を治療するためのペプチドを供給する方法を含み、当該方法は、当該ペプチドの販売に関して医師、処方集、患者、または保険会社に償還することを含む。

定義
「ペプチド」という用語は、ペプチド結合によって互いに結合された２個の以上のアミノ酸残基を含む分子を指す。これらの用語は、例えば、タンパク質配列の天然および人工タンパク質、タンパク質断片およびポリペプチド類似体（ムテイン、バリアント、および融合タンパク質など）、ならびに翻訳後に、またはそうでなければ共有結合もしくは非共有結合で修飾されたペプチドを包含する。ペプチドは、単量体でもあってもポリマーであってもよい。ある特定の実施形態では、「ペプチド」は、アルファ炭素がペプチド結合を介して結合し得るアミノ酸の鎖である。したがって、鎖の一方の端部（アミノ末端）の末端アミノ酸は遊離アミノ基を有する一方で、鎖の他方の端部（カルボキシ末端）の末端アミノ酸は遊離カルボキシル基を有する。本明細書で使用される場合、「アミノ末端」（略称Ｎ末端）という用語は、ペプチドのアミノ末端のアミノ酸の遊離α－アミノ基、またはペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸の遊離α－アミノ基（ペプチド結合に関与する場合のイミノ基）を指す。同様に、「カルボキシ末端」という用語は、ペプチドのカルボキシ末端の遊離カルボキシル基、またはペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸のカルボキシル基を指す。ペプチドはまた、これに限定されないが、アミド結合とは対照的にエーテルにより結合されたアミノ酸などのペプチド模倣物を含む任意のポリアミノ酸を本質的に含む。

「治療用ペプチド」という用語は、１つ以上の治療および／または生物学的活性を有する、ペプチドまたはその類似体もしくは断片もしくはバリアントである。

本明細書で使用される「類似体」という用語は、これらに限定されないが、任意の利用可能な位置での、任意の天然または非天然アミノ酸、合成アミノ酸またはペプチド模倣薬のアミノ酸残基のうちのいずれか１つの置換および／または１つ以上の欠失および／または１つ以上の付加などの、１つ以上のアミノ酸修飾および／または天然もしくは非天然アミノ酸、合成アミノ酸またはペプチド模倣薬のうちのいずれか１つへの側鎖の結合を説明する。アミノ酸残基の付加または欠失は、ペプチドのＮ末端および／またはペプチドのＣ末端で起こり得る。

いくつかの実施形態では、類似体は、１、２、３、４、または５つのそのような修飾を有する。いくつかの実施形態では、類似体は、元のペプチドの生物学的活性を保持している。いくつかの実施形態では、類似体は、元のペプチドの競合的または非競合的阻害剤である。

ペプチド配列は、標準的な１文字または３文字の略称を使用して示される。特に明記しない限り、ペプチド配列は、左側にアミノ末端および右側にカルボキシ末端を有する、ペプチドの特定のセクションは、アミノ酸３～６などのアミノ酸残基番号によって、またはＭｅｔ３～Ｇｌｙ６などのその部位の実際の残基によって指定され得る。特定のペプチド配列はまた、参照配列とどのように異なるかを説明することによっても記載され得る。

本明細書で使用される場合、「天然のアミノ酸」という用語は、グリシン（ＧｌｙおよびＧ）、プロリン（ＰｒｏおよびＰ）、アラニン（ＡｌａおよびＡ）、バリン（ＶａｌおよびＶ）、ロイシン（ＬｅｕおよびＬ）、イソロイシン（ＩｌｅおよびＩ）、メチオニン（ＭｅｔおよびＭ）、システイン（ＣｙｓおよびＣ）、フェニルアラニン（ＰｈｅおよびＦ）、チロシン（ＴｙｒおよびＹ）、トリプトファン（ＴｒｐおよびＷ）、ヒスチジン（ＨｉｓおよびＨ）、リジン（ＬｙｓおよびＫ）、アルギニン（ＡｒｇおよびＲ）、グルタミン（ＧｉｎおよびＱ）、アスパラギン（ＡｓｎおよびＮ）、グルタミン酸（ＧｌｕおよびＥ）、アスパラギン酸（ＡｓｐおよびＤ）、セリン（ＳｅｒおよびＳ）、ならびにスレオニン（ＴｈｒおよびＴ）からなる群から選択されるアミノ酸（通常の３文字コードおよび括弧内の１文字コードを有する）である。本明細書のどこかで、さらに特定することなく、Ｇ、Ｐ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｍ、Ｃ、Ｆ、Ｙ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｅ、Ｄ、Ｓ、またはＴを含むか、または含まない、ペプチド、類似体、もしくは誘導体、またはペプチドに言及する場合、アミノ酸を意味する。特に明記しない限り、大文字の１文字コードで示されるアミノ酸は、Ｌ－アイソフォームを示すが、しかしながら、アミノ酸が小文字で示される場合、このアミノ酸はそれがＤ形態であるとして使用／適用される。以前に定義されたそのようなＤ型および他の非保存的アミノ酸置換は、非天然アミノ酸の定義に含まれる。

入力ミスに起因して、一般的に使用されるコードからの偏差がある場合、一般的に使用されるコードを適用する。本発明のペプチドに存在するアミノ酸は、好ましくは、核酸によってコードされ得るアミノ酸である。上記の例から明らかなように、アミノ酸残基は、それらのフルネーム、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって識別されてもよい。これら３つの方法は完全に同等である。

「非保存的アミノ酸置換」はまた、これらの分類のうちの１つのメンバーでの、別の分類からのメンバーの置換を指す。そのような変更を行う際、ある特定の実施形態によれば、アミノ酸のハイドロパシーインデックスが考慮され得る。各アミノ酸に、その疎水性および電荷特性に基づいてハイドロパシーインデックスが割り当てられている。それらは、イソロイシン（＋４．５、バリン（＋４．２）、ロイシン（＋３．８）、フェニルアラニン（＋２．８）、システイン／システイン（＋２．５）、メチオニン（＋１．９）、アラニン（＋１．８）、グリシン（－０．４）、スレオニン（－０．７）、セリン（－０．８）、トリプトファン（－０．９）、チロシン（－１．３）、プロリン（－１．６）、ヒスチジン（－３．２）、グルタメート（－３．５）、グルタミン（－３．５）、アスパルテート（－３．５）、アスパラギン（－３．５）、リジン（－３．９）、およびアルギニン（－４．５）である。タンパク質上の相互作用的な生物学的機能の付与におけるアミノ酸のハイドロパシーインデックスの重要性は、当該技術分野で理解されている（例えば、Ｋｙｔｅｅｔａｌ．，１９８２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５－１３１を参照されたい）。ある特定のアミノ酸が、同様のハイドロパシーインデックスまたはスコアを有する他のアミノ酸に置換され得、依然として同様の生物学的活性を保持することが知られている。ハイドロパシーインデックスに基づいて変更を行う際に、ある特定の実施形態では、ハイドロパシーインデックスが±２以内であるアミノ酸の置換が含まれる。ある特定の実施形態では、±１以内にあるものが含まれ、ある特定の実施形態では、±０．５以内にあるものが含まれる。同様なアミノ酸の置換は、特に、それにより作成された生物学的機能性タンパク質またはペプチドが、本明細書に開示される免疫学的実施形態での使用を意図する場合、親水性に基づいて有効になされ得ることもまた、当該技術分野で理解されている。ある特定の実施形態では、その隣接アミノ酸の親水性によって支配されるタンパク質の最大局所平均親水性は、その免疫原性および抗原性、すなわち、タンパク質の生物学的特性と相関する。これらのアミノ酸残基には、次の親水性値が割り当てられている：アルギニン（＋３．０）、リジン（＋３．０）、アスパラギン酸（＋３．０±１）、グルタミン酸（＋３．０±１）、セリン（＋０．３）、アスパラギン（＋０．２）、グルタミン（＋０．２）、グリシン（０）、スレオニン（－０．４）、プロリン（－０．５±１）、アラニン（－０．５）、ヒスチジン（－０．５）、システイン（－１．０）、メチオニン（－１．３）、バリン（－１．５）、ロイシン（－１．８）、イソロイシン（－１．８）、チロシン（－２．３）、フェニルアラニン（－２．５）、およびトリプトファン（－３．４）。同様の親水性値に基づいて変更を行う際、ある特定の実施形態では、親水性値が＋２以内のアミノ酸の置換が含まれ、ある特定の実施形態では、±１以内にあるものが含まれ、ある特定の実施形態では、±０．５以内にあるものが含まれる。

他のアミノ酸置換は、表３に示される。

本明細書で単独または組み合わせて使用される「アミノ酸」という用語は、－Ｒ^ｘ－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ^ｙ）Ｃ（＝Ｏ）ＯＨの形態の置換基を意味し、式中、Ｒ^ｘが、典型的には水素であるが、Ｎで環化され得（例えば、アミノ酸プロリンの事例のように）、Ｒ^ｙが、水素、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノ、アミド、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシアルキル、チオール、チオアルキル、アルキルチオアルキル、およびアルキルチオからなる群から選択され、これらのいずれも任意に置換され得る。「アミノ酸」という用語は、すべての天然型アミノ酸および合成類似体を含む。

本明細書で使用する場合、「電荷アミノ酸」または「電荷残基」という用語は、生理学的ｐＨで水溶液中の負電荷（すなわち、脱プロトン化）または正電荷（すなわち、プロトン化）の側鎖を含むアミノ酸を指す。例えば、負電荷アミノ酸には、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、およびホモグルタミン酸が含まれるが一方、正電荷アミノ酸には、アルギニン、リジン、およびヒスチジンが含まれる。電荷アミノ酸には、２０個のコードされたアミノ酸の中の電荷アミノ酸、ならびに非定型または非天然型または非コード化アミノ酸が含まれる。

本明細書で使用される場合、「酸性アミノ酸」という用語は、例えば、カルボン酸またはスルホン酸基を含む、（アミノ酸のカルボン酸以外の）第２の酸性部分を含むアミノ酸を指す。

本明細書で使用される場合、「アシル化アミノ酸」という用語は、それが産生される手段（例えば、アミノ酸をペプチドへ組み込む前のアシル化、またはペプチドへの組み込み後のアシル化）にかかわらず、天然型アミノ酸に対して非天然型であるアシル基を含むアミノ酸を指す。

本明細書で使用される場合、「アルキル化アミノ酸」という用語は、それが産生される手段にかかわらず、天然型アミノ酸に対して非天然型であるアルキル基を含むアミノ酸を指す。したがって、本開示のアシル化アミノ酸およびアルキル化アミノ酸は、非コード化アミノ酸である。

当業者は、周知の技術を使用して、本明細書に示されるペプチドの活性バリアントまたは類似体を決定することができるであろう。ある特定の実施形態では、当業者は、活性に重要であると考えられない領域を標的とすることによって、活性を破壊することなく変更され得る分子の好適な領域を特定し得る。他の実施形態では、当業者は、同様のペプチド間で保存されている分子の残基および部分を特定することができる。さらなる実施形態では、生物学的活性または構造に重要であり得る領域でさえ、生物学的活性を破壊することなく、またはペプチド構造に悪影響を与えることなく、保存的アミノ酸置換を受け得る。試験化合物で処理された細胞におけるカスパーゼ活性の変化は、潜在的な治療的有用性の指標であることがよく知られている。カスパーゼが疾患の病因または病理学的結果に明確に関与しているかどうかに関係なく、カスパーゼ活性の低下は、糖尿病、心血管疾患、有害な肝細胞アポトーシス、虚血再灌流障害、外傷性脳損傷、臓器移植、および神経変性を含む不適切なアポトーシス細胞死によって引き起こされるいくつかの状態の症状の改善に関連している（（Ｃｈｏａｄｈｒｙ，ＪＴｈｏｒａｃＣａｒｄｉｏｖａｓｃＳｕｒｇ．２００７Ｊｕｌ；１３４（１）：１２４－３１；ＭｃＩｌｗａｉｎ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂＰｅｒｓｐｅｃｔＢｉｏｌ２０１３；５：ａ００８６５６）。さらに、カスパーゼ活性の増加は、がん、自己免疫障害、関節リウマチ、感染症、炎症性疾患を含むアポトーシスの誘導に反応する疾患および障害を治療するための潜在的な有用性を示すことはよく知られている（Ｅｌｍｏｒｅ，ＴｏｘｉｃｏｌＰａｔｈｏｌ．２００７；３５（４）：４９５－５１６）。試験化合物で処理された細胞における細胞生存率の変化は、潜在的な治療的有用性の指標であることがよく知られている。細胞生存率の低下は、例えばがんを含む、細胞生存率／増殖の変化に応答する疾患および障害を治療するための潜在的な有用性を示している（Ｂｏｙｄ，ＤｒｕｇＤｅｖＲｅｓ３４：９１－１０９（１９９５））。細胞生存率の増加は、糖尿病、心血管疾患、虚血再灌流障害、外傷性脳損傷、臓器移植、化学療法、神経変性を含む細胞生存率の低下に関連する疾患を治療するための潜在的な有用性を示している。さらに、細胞生存率の増加は、培養中の動物細胞の細胞生存率を改善するための潜在的な有用性を示している。

さらに、当業者は、活性または構造に重要な同様のペプチドで残基を特定する構造－機能研究を再検討することができる。そのような比較を考慮して、当業者は、類似のペプチドの活性または構造に重要なアミノ酸残基に対応するペプチドのアミノ酸残基の重要性を予測することができる。当業者は、そのような予測される重要なアミノ酸残基の化学的に同様のアミノ酸置換を選択してもよい。

当業者はまた、類似のペプチドの三次元構造およびその構造に関するアミノ酸配列を分析することができる。そのような情報を考慮して、当業者は、その三次元構造に関してペプチドのアミノ酸残基のアラインメントを予測し得る。ある特定の実施形態では、当業者は、ペプチドの表面上にあると予測されるアミノ酸残基に、ラジカル変化を起こさないことを選択してもよく、これは、そのような残基が他の分子との重要な相互作用に関与し得るためである。さらに、当業者は、所望の各アミノ酸残基において単一のアミノ酸置換を含む試験バリアントを生成し得る。次いで、当業者に既知の代替アッセイを使用して、バリアントをスクリーニングすることができる。そのようなバリアントは、好適なバリアントに関する情報を収集するために使用され得る。例えば、特定のアミノ酸残基への変化が破壊、望ましくない減少、または好適でない活性をもたらしたことを発見した場合、そのような変化を伴うバリアントは避けることができる。言い換えれば、そのような日常的な実験から収集された情報に基づいて、当業者は、単独でまたは他の変異と組み合わせてのいずれかでさらなる置換を回避するべきアミノ酸を容易に決定することができる。

本明細書で単独または組み合わせて使用される「アシル」という用語は、カルボニルに結合した原子が炭素である場合、アルケニル、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、または任意の他の部分に結合したカルボニルを指す。アシルの一種である「アセチル」基は、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３基を指す。「アルキルカルボニル」または「アルカノイル」基は、カルボニル基を介して親分子部分に結合したアルキル基を指す。そのような基の例には、メチルカルボニルおよびエチルカルボニルが含まれる。アシル基の例には、ホルミル、アルカノイルおよびアロイルが含まれる。

本明細書で使用される「誘導体」という用語は、１つ以上の側鎖がペプチドに共有結合されている化学的に修飾されたペプチドを意味する。「側鎖」という用語はまた、「置換基」と称されてもよい。したがって、そのような側鎖を含む誘導体は、「誘導体化」ペプチドまたは「誘導体化」類似体となる。この用語はまた、遊離カルボキシ基のエステルおよびアミド、遊離アミノ基のアシルおよびアルキル誘導体、リン酸エステルおよび遊離ヒドロキシ基のエーテルなど、通常ペプチド分子の一部ではない１つ以上の化学部分を含むペプチドを指してもよい。そのような修飾は、ペプチドの標的化されたアミノ酸残基を、選択された側鎖または末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることによって分子に導入され得る。好ましい化学誘導体には、リン酸化、Ｃ末端アミド化、またはＮ末端アセチル化されているペプチドが含まれる。この用語はまた、当該技術分野で既知の手段によって、残基またはＮもしくはＣ末端基上の側鎖として生じる官能基から調製することができ、かつそれらが薬学的に許容される限り、すなわち、それらがペプチドの活性を破壊せず、それを含む組成物に有毒性を付与せず、その抗原特性に悪影響を与えない限り本明細書に含まれる、本明細書で使用されるペプチドを指し得る。これらの誘導体は、例えば、カルボキシル基の脂肪族エステル、アンモニアまたは一級もしくは二級アミンとの反応により産生されるカルボキシル基のアミド、アシル部分との反応により形成されるアミノ酸残基（例えば、アルカノイルまたは炭素環式アロイル基）の遊離アミノ基のＮ－アシル誘導体、またはアシル部分との反応により形成される遊離ヒドロキシル基（例えば、セリルまたはトレオニル残基のもの）のＯ－アシル誘導体を含む。

修飾されたアミノ酸残基は、アミノ酸残基の官能性が保存されている限り、または官能性が変化した場合（例えば、置換フェニルアラニンによるチロシンの置換）には修飾が修飾された残基を含むペプチドの活性を損なわない限り、任意の基または結合が欠失、付加、または異なる基もしくは結合による置換によって修飾されたアミノ酸残基である。

本明細書で使用される「置換基」または「側鎖」という用語は、特にアミノ酸残基の任意の利用可能な位置に、アミノ酸残基に、結合、特に共有結合された任意の好適な部分を意味する。典型的には、好適な部分は化学部分である。

「脂肪酸」という用語は、４～２８個の炭素原子を有する脂肪族モノカルボン酸を指し、好ましくは非分岐状であり、飽和または不飽和であってもよい。本開示では、１０～１６アミノ酸を含む脂肪酸が好ましい。

「脂肪族二酸」という用語は、上に定義されるが、オメガ位置で追加のカルボン酸基を有する脂肪酸を指す。したがって、脂肪二酸はジカルボン酸である。本開示では、１４～２０アミノ酸を含む脂肪酸が好ましい。

値の範囲が開示され、「ｎ_１～ｎ_２」という表記が使用される場合、ｎ_１およびｎ_２が数値であり、特に指定のない限り、この表記は数値自体とそれらの間の範囲を含むことを意図する。この範囲は、終了値の間で整数または連続値であり得る。例として、「２～６の炭素」の範囲は、炭素が整数単位であるため、２、３、４、５、および６個の炭素を含むことを意図する。例として、１μＭ、３μＭ、およびその間のすべてを含むことを意図した「１～３μＭ（マイクロモル）」の範囲を任意の数の有効数字と比較する（例えば、１．２５５μＭ、２．１μＭ、２．９９９９μＭなど）。

「配列同一性％」という用語は、「同一性％」という用語と交換可能に本明細書で使用され、配列アラインメントプログラムを使用して整列された場合、２つ以上のペプチド配列間のアミノ酸配列同一性のレベル、または２つ以上のヌクレオチド配列間のヌクレオチド配列同一性のレベルを指す。例えば、本明細書で使用される場合、８０％の同一性とは、定義されたアルゴリズムによって決定される８０％の配列同一性と同じことを意味し、所定の配列が別の配列の別の長さと少なくとも８０％同一であることを意味する。

「配列相同性％」という用語は、「相同性％」という用語と交換可能に本明細書で使用され、配列アラインメントプログラムを使用して整列された場合、２つ以上のペプチド配列間のアミノ酸配列相同性のレベル、または２つ以上のヌクレオチド配列間のヌクレオチド配列相同性のレベルを指す。例えば、本明細書で使用される場合、８０％の相同性とは、定義されたアルゴリズムによって決定される８０％の配列相同性と同じことを意味し、したがって、所定の配列の相同体が所定の配列の長さにわたって８０％を超える配列相同性を有することを意味する。

２つの配列間の同一性または相同性の程度を決定するために使用され得る例示的なコンピュータプログラムには、これらに限定されないが、ＢＬＡＳＴプログラム一式、例えば、ＮＣＢＩウェブサイトでインターネット上で公開されている、ＢＬＡＳＴＮ、ＢＬＡＳＴＸ、ＴＢＬＡＳＴＸ、ＢＬＡＳＴＰ、およびＴＢＬＡＳＴＮが挙げられる。また、Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０（デフォルト設定、すなわち、パラメータｗ＝４、ｔ＝１７への特別な参照を伴う）、およびＡｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，１９９７，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．，２５：３３８９－３４０２も参照されたい。ＧｅｎＢａｎｋＰｒｏｔｅｉｎＳｅｑｕｅｎｃｅｓおよびその他の公開データベースのアミノ酸配列に対して、所定のアミノ酸配列を評価する場合、典型的には、配列検索はＢＬＡＳＴＰプログラムを使用して実施される。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、すべてのリーディングフレームで翻訳されている核酸配列を、ＧｅｎＢａｎｋＰｒｏｔｅｉｎＳｅｑｕｅｎｃｅｓおよび他の公開データベースのアミノ酸配列に対して検索するのに好ましい。ＢＬＡＳＴＰおよびＢＬＡＳＴＸの両方は、１１．０のオープンギャップペナルティおよび１．０の伸長ギャップペナルティのデフォルトパラメータを使用して実行され、ＢＬＯＳＵＭ－６２マトリックスを利用する。（同文献）。配列同一性パーセントの計算に加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計分析も実行する（例えば、Ｋａｒｌｉｎ＆Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：５８７３－５７８７（１９９３）を参照されたい）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の尺度の１つは、最小合計確率（Ｐ（Ｎ））であり、これは、２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列間の一致が偶然に生じる確率の表示を提供する。

「薬学的組成物」は、動物またはヒトにおける薬学的使用に好適な組成物を指す。薬学的組成物は、薬理学的有効量および／または治療有効量の活性剤、ならびに薬学的に許容される賦形剤または担体を含む。薬学的組成物およびそれらの調製方法は、当業者には容易に明らかであろう。そのような組成物およびそれらの調製方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈＥｄｉｔｉｏｎ（ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，１９９５）に見出され得る。薬学的組成物は、一般に、減菌で、実質的に等張であり、米国食品医薬品局のすべてのＧＭＰ規制に完全に準拠して製剤化される。この用語はまた、ヒトを含む動物において使用するために、米国薬局方に列挙されている薬剤のうちのいずれかを包含する。好適な薬学的担体および製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２１ｓｔＥｄ．２００５，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ，Ｅａｓｔｏｎに記載されている。

「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」は、動物またはヒトに投与した場合に、有害、アレルギー、または他の不都合な反応を生じない組成物を指す。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」は、生理学的に適合可能な、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。薬学的に許容される賦形剤のいくつかの例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、ならびにそれらの組み合わせである。多くの場合、賦形剤は、等張剤、例えば、糖、マンニトールなどの多価アルコール、ソルビトール、または塩化ナトリウムを組成物中に含む。薬学的に許容される賦形剤の追加の例は、ペプチドの貯蔵寿命または有効性を高める、湿潤剤、または湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤もしくは緩衝剤などの少量の補助物質である。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、生物学的ではないか、あるいは望ましくない、親ペプチドの生物学的活性を保持するペプチドの塩を指す。本明細書に開示されるペプチドの多くは、アミノおよび／もしくはカルボキシル基またはそれらに類似した基の存在により、酸および／または塩基塩を形成することができる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機および有機塩基から調製され得る。無機塩基に由来する塩には、ほんの一例として、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、およびマグネシウムの塩が含まれる。有機塩基に由来する塩には、これらに限定されないが、一級、二級、および三級アミンの塩が含まれる。

ペプチドの対応する溶媒和物を調製、精製、および／または処理することが便利または望ましい場合がある。「溶媒和物」という用語は、本明細書では、従来の意味で、溶質（例えば、ペプチド、ペプチドの塩）および溶媒の複合体を指すために使用される。溶媒が水である場合、溶媒和物は、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物などと都合よく呼ばれ得る。特に明記しない限り、特定のペプチドへの言及は、溶媒和物およびその水和物形態も含む。

本明細書で使用される「共結晶」または「共結晶塩」は、室温で２つ以上の固有の固体から構成される結晶性材料を意味し、各々が構造、融点、および融解熱、吸湿性、溶解性、および安定性などの特有の物理的特性を有する。共結晶または共結晶塩は、それ自体既知の共結晶化法に従って作製することができる。共結晶（または共結晶）または共結晶塩という用語はまた、式Ｉ～ＩＩのペプチド、およびゲスト（またはｃｏ－ｆｏｒｍｅｒ）分子または分子などのホストＡＰＩ（医薬品有効成分）分子または分子が存在する多成分性システムを指す。

本明細書で使用される場合、開示され請求された方法に従って対象に提供される場合の「治療有効量」のペプチドは、異常な細胞増殖および悪性腫瘍に関連する細胞シグナル伝達を調節すること、細胞生存率に影響すること、および神経保護を提供することなどの生物学的活性に影響を与える。

「治療する」、「治療すること」、および「治療」参照という用語は、有益なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチを指す。さらに、「治療」への本明細書における言及には、治癒的、緩和的、および予防的治療への言及が含まれる。「治療する」という用語は、病理（疾患、障害、または状態）の発症を抑制、予防、もしくは停止すること、および／または病理の低減、寛解、または退行を引き起こすことを指す。当業者は、様々な方法論およびアッセイを使用して病理の発症を評価することができ、同様に、様々な方法論およびアッセイを使用して病理の低減、寛解、または退行を評価し得ることを理解するであろう。

本明細書で使用される「疾患」という用語は、一般に同義語であることが意図される、「障害」および「状態」（病状において）という用語と交換可能に使用され、そのすべてが、正常な機能を損なう身体またはその部分の１つの異常な状態を反映しており、通常、兆候および症状を区別することによって現れる。

「細胞生存の改善」という用語は、対照と比較して、所与の条件を生き残る細胞の数、例えば、治療なしで同じ条件を生き残る細胞の数の増加を指す。条件は、インビトロ、インビボ、エクスビボ、またはその場であり得る。細胞生存率の改善は、例えば、細胞生存率が２倍改善された場合、２倍の細胞生存率である、比較値として表すことができる。細胞生存率の改善は、アポトーシスの減少、細胞の寿命の延長、または細胞の機能および状態の改善から生じる可能性がある。

明確にするために、「指示」という用語は、その一般に理解される定義に加えて、規制当局によって承認された標識の情報を含むことを意味する。

一実施形態では、ペプチドは、遺伝子療法の方法を介してそれらのヌクレオチドの等価物として投与され得る。「ヌクレオチド等価物」という用語は、ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む任意の核酸を含む。例えば、本発明は、本明細書に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むか、またはそれからなるポリヌクレオチドを含む。本発明はまた、本明細書に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、発現ベクターを含むベクターを含む。発現ベクターは、ペプチドが発現ベクターを含む適切な宿主細胞で発現されるように、コード配列に作動可能に連結されたプロモーターなどの１つ以上の発現対照配列を含む。一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドは、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来し得るプラスミドまたはベクターにコードされている。ＡＡＶは、組換えＡＡＶウイルスであってもよく、これらに限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、およびＡＡＶ－ＤＪ８などのカプシド血清型を含んでもよい。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ２である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶｒｈ１０である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ９（ｈｕ１４）である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ－ＤＪである。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ９．４７である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ－ＤＪ８である。一実施形態は、配列番号１～６４のペプチド配列のヌクレオチドの等価物を含む。

当業者は、標的細胞が、これらに限定されないが、種特異的、誘導性、組織特異的、または細胞周期特異的であるプロモーターを含む特異的プロモーターを必要とし得ることを認識することができる（Ｐａｒｒｅｔａｌ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：１１４５－９（１９９７）、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。

本明細書で使用される場合、「ベクター」は、輸送、形質導入、またはそうでなければ、本発明のポリヌクレオチドなどの異種分子の担体として作用する任意の分子または部分である。「ウイルスベクター」は、対象のペイロード分子をコードするかまたは含む１つ以上のポリヌクレオチド領域、例えば、導入遺伝子、ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むベクターである。本発明のウイルスベクターは、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいてもよい。本発明において有用であり得る血清型には、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕｌ４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈｌＯ、ＡＡＶ－ＤＪ、およびＡＡＶ－ＤＪ８から生じるもののうちのいずれかが含まれる。

一実施形態では、本発明において有用であり得る血清型は、ＡＡＶ－ＤＪ８であり得る。ＡＡＶ－ＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するために２つ以上の変異を含んでもよい。非限定的な例として、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５８８，７７２号に配列番号１として記載されているＡＡＶ－ＤＪ配列は、２つの変異を含み得る：（１）アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ、ｇｌｎ）に変更されるＲ５８７Ｑ、および（２）アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ、ｔｈｒ）に変更されるＲ５９０Ｔ。別の非限定的な例として、３つの変異を含み得る：（１）アミノ酸４０６におけるリジン（Ｋ、ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）に変更されるＫ４０６Ｒ、（２）アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ、ｇｌｎ）に変更されるＲ５８７Ｑ、および（３）アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がトレオニン（Ｔ、ｔｈｒ）に変更されるＲ５９０Ｔ。

ＡＡＶベクターはまた、自己相補性ＡＡＶベクター（ｓｃＡＡＶｓ）も含み得る。ｓｃＡＡＶベクターは、一緒にアニールして二本鎖ＤＮＡを形成する両方のＤＮＡ鎖を含む。第２の鎖合成をスキップすることにより、ｓｃＡＡＶは細胞内での迅速な発現を可能にする。

一実施形態では、薬学的組成物は、ＡＡＶカプシドおよびＡＡＶベクターゲノムを含む組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む。ＡＡＶベクターゲノムは、これらに限定されないが、配列番号１～６４、またはそれと少なくとも９５％の同一性を有するバリアントなどの、本明細書に記載の少なくとも１つのペプチド関連ポリヌクレオチドを含み得る。薬学的組成物中の組換えＡＡＶベクターは、ＡＡＶベクターゲノムを含む少なくとも７０％を有してもよい。

一実施形態では、薬学的組成物は、ＡＡＶカプシドおよびＡＡＶベクターゲノムを含む組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む。ＡＡＶベクターゲノムは、追加のＮ末端プロリンに加えて、これらに限定されないが、配列番号１～６４、またはそれと少なくとも９５％の同一性を有するバリアントなどの、本明細書に記載の少なくとも１つのペプチド関連ポリヌクレオチドを含み得る。薬学的組成物中の組換えＡＡＶベクターは、ＡＡＶベクターゲノムを含む少なくとも７０％を有してもよい。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、欧州特許出願第ＥＰ１８５７５５２号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のＡＡＶビリオンを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、欧州特許出願第ＥＰ２６７８４３３号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のＡＡＶベクターを使用してタンパク質を送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第ＵＳ５８５８３５１号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のＡＡＶベクターを使用してＤＮＡ分子を送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第ＵＳ６２１１１６３号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の血液流にＤＮＡを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第ＵＳ６３２５９９８号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のＡＡＶビリオンを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第ＵＳ７５８８７５７号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の中枢神経系にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第ＵＳ８２８３１５１号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、国際特許公開第ＷＯ２００１／０８９５８３号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載のグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）送達ベクターを使用してペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、国際特許公開第ＷＯ２０１２／０５７３６３号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の神経細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、米国特許第９５８５９７１号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、Ｄｅｖｅｒｍａｎｅｔａｌ．ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３４，２０４－０９（２０１６）に記載の細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。

一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、ＵＳ７１９８９５１［アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型９の配列、それを含むベクター、およびその使用］、ＵＳ９２１７１５５［新規ＡＡＶの単離およびその使用］、ＷＯ２０１１／１２６８０８［薬理学的に誘導された導入遺伝子除去システム］、ＵＳ６０１５７０９［転写活性化因子、ならびにそれに関連する組成物および使用］、ＵＳ７０９４６０４［偽型組換えＡＡＶビリオンの産生］、ＷＯ２０１６／１２６９９３［抗タウ構築物］、ＵＳ７０９４６０４［組換えＡＡＶカプシドタンパク質］、ＵＳ８，２９２，７６９［鳥類アデノ随伴ウイルス（ａａａｖ）およびその使用］、ＵＳ９１０２９４９［ＣＮＳ標的ａａｖベクターおよびその使用方法］、ＵＳ２０１６／０１２０９６０［中枢神経系へのアデノ随伴ウイルス媒介遺伝子導入］、ＷＯ２０１６／０７３６９３［パーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチド］、ＷＯ２０１５／１６８６６６［網膜およびＣＮＳ遺伝子療法のためのＡＡＶベクター］、ＵＳ２００９／０１１７１５６［ニーマン・ピック病Ａ型の遺伝子療法］、またはＷＯ２００５／１２０５８１［神経代謝障害の遺伝子療法］に記載のＡＡＶビリオンの送達のための方法を用いて投与または送達され得る。

本明細書に記載のウイルスベクターの薬学的組成物は、生物学的利用能、治療域、および／または分布の体積のうちの１つ以上によって特徴付けられ得る。

いくつかの実施形態では、ペプチド関連ヌクレオチドおよび／または本発明のペプチド関連ヌクレオチド組成物は、デバイスと組み合わされ得るか、その上にコーティングされ得るか、またはその内に埋め込まれ得る。デバイスには、これらに限定されないが、ステント、ポンプ、および／または他の埋め込み可能な治療デバイスを備え得る。加えて、ペプチド関連ヌクレオチドおよび／またはペプチド関連ヌクレオチド組成物は、対象が、これらに限定されないが、対象における深部静脈血栓症（ＤＶＴ）の可能性を低減させるための圧縮デバイスなどの圧縮デバイスを使用している間に、対象に送達されてもよい。本発明は、１つ以上のペプチド関連ポリヌクレオチドペイロード分子をコードするウイルスベクターを組み込むことができるデバイスを提供する。これらのデバイスは、安定した製剤に、それを必要とする対象、例えば、ヒト患者に即時に送達することができるウイルスベクターを含む。

投与のためのデバイスは、本明細書に教示される単回、複数回、または分割投与レジメンに従って、本発明のペプチド関連ヌクレオチドを含むウイルスベクターを送達するために用いられ得る。

本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、「ｏｒ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が別段明確に示さない限り、複数の指示対象を含む。本明細書に記載の本開示の態様および変形は、態様および変形「からなる」および／または「から本質的なる」を含むことが理解される。

本明細書で使用される「約」という用語は、１０パーセントで示される値または値の範囲よりも大きいまたは小さいことを意味するが、このより広い定義のみに値または値の範囲を指定することを意図するものではない。「約」という用語が先行する各値または値の範囲はまた、述べられた絶対値または値の範囲の実施形態を包含することを意図する。

本明細書で使用される場合、「予防する」という用語は、疾患の危険にあり得るが、疾患を有しているとはまだ診断されていない対象において、疾患、障害、または状態が発生するのを妨げることを指す。

本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、病理に苦しむ任意の年齢の哺乳動物、好ましくはヒトを含む。好ましくは、この用語は、病理を発症する危険性がある個体を包含する。

薬学的組成物は、典型的には、非経口投与に好適である。本明細書で使用される場合、薬学的組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的破壊および組織の破壊による薬学的組成物の投与によって特徴付けられる投与の任意の経路を含み、したがって一般的に血流、筋肉、または内蔵への直接投与をもたらす。したがって、非経口投与には、これらに限定されないが、組成物の注射による、外科的切開による組成物の適用による、組織貫通非外科的創傷による組成物の適用によるなどの、薬学的組成物の投与が含まれる。特に、非経口投与には、これらに限定されないが、皮下注射、腹腔内注射、筋肉内注射、胸骨内注射、静脈内注射、動脈内注射、髄腔内注射、脳室内注射、尿道内注射、頭蓋内注射、滑液嚢内注射、もしくは点滴、または腎臓透析注入技術を含むことが企図される。

様々な実施形態では、ペプチドは、経口で、または静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、腹腔内注射、経皮注射、動脈内注射、胸骨内注射、髄腔内注射、脳室内注射、尿道内注射、頭蓋内注射、滑液嚢内注射を介して、または点滴を介して対象に全身的に投与することができる薬学的組成物を形成するために、薬学的に許容される賦形剤と混合される。薬学的組成物は、好ましくは、天然には見られない少なくとも１つの構成成分を含む。

非経口投与に好適な薬学的組成物の製剤は、典型的には、一般に、滅菌水または滅菌等張生理食塩水などの薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス投与または連続投与に好適な形態で調製、包装、または販売され得る。注射可能な製剤は、アンプルまたは防腐剤を含む複数回投与容器などの単位剤形で調製、包装、または販売され得る。非経口投与用の製剤には、これらに限定されないが、懸濁液、溶液、油性または水性ビヒクル中の乳濁液、ペーストなどが含まれる。そのような製剤は、これらに限定されないが、懸濁剤、安定化剤、または分散剤を含む１つ以上の追加の成分をさらに含んでもよい。非経口投与用の製剤の一実施形態では、活性成分は、再構成された組成物の非経口投与前に好適なビヒクル（例えば、減菌の発熱性物質を含まない水）で再構成するための乾燥（すなわち、粉末または顆粒）形態で提供される。非経口製剤にはまた、塩、炭水化物、および緩衝剤などの担体を含み得る水溶液が含まれるが（好ましくは３～９のｐＨ）、いくつかの用途では、それらは、滅菌非水溶液として、または減菌の発熱性物質を含まない水などの好適なビヒクルと組み合わせて使用される乾燥形態としてより好適に製剤化され得る。例示的な非経口投与形態には、滅菌水溶液中の溶液または懸濁液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデキストロース溶液が含まれる。そのような剤形は、所望の場合、好適に緩衝化することができる。有用な他の非経口投与可能な製剤には、微結晶形態の、またはリポソーム製剤の活性成分を含むものが含まれる。非経口投与用の製剤は、即時および／または調節放出となるように製剤化され得る。放出調節製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出を含む。

本開示は、適用点で局所的に作用するか、または体の血液循環に入ると全身的に作用する、経皮送達または局所送達のための組成物および方法を含む。これらのシステムでは、軟膏などの形態の物質または薬物の直接局所適用などの技術によって、または薬物（または他の物質）を保持するリザーバーなどとのパッチの接着によって送達を達成することができ、時間制御された様式で皮膚にそれを放出する。局所投与のために、組成物は、乳濁液、ローション、ゲル、クリーム、ゼリー、溶液、懸濁液、軟膏、および経皮パッチの形態であり得る。いくつかの局所送達用組成物は、ポリエニルホスファチジルコリン（本明細書では「ＰＰＣ」と省略される）を含み得る。いくつかの場合では、ＰＰＣを使用して表皮浸透を高めることができる。「ポリエニルホスファチジルコリン」という用語は、本明細書で使用される場合、２つの脂肪酸部分を有する任意のホスファチジルコリンを意味し、２つの脂肪酸のうちの少なくとも１つは、リノール酸などのその構造において少なくとも２つの二重結合を有する不飽和脂肪酸である。そのような局所製剤は、１つ以上の乳化剤、１つ以上の界面活性剤、１つ以上のポリグリコール、１つ以上のレシチン、１つ以上の脂肪酸エステル、または１つ以上の経皮浸透促進剤を含み得る。調製物は、ある特定の実施形態では対象の血液と等張であり得る、減菌の水性または非水性の溶液、懸濁液、および乳濁液を含むことができる。非水性溶媒の例は、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、ゴマ油、ココナッツ油、落花生油、ピーナッツ油、鉱油、オレイン酸エチルなどの有機エステル、または合成モノまたはジ－グリセリドを含む固定油である。水性溶媒には、生理食塩水および緩衝媒体を含む、水、アルコール／水溶液、乳濁液または懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、１，３－ブタンジオール、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液、または固定油が含まれる。静脈内ビヒクルには、液体および栄養補給剤、電解質補給剤（リンゲルデキストロースに基づくものなど）などが含まれる。例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなどの防腐剤および他の添加物もまた存在し得る。

例えば、一態様では、注射可能な減菌溶液は、必要に応じて、上記に列挙した成分のうちの１つまたは組み合わせを含む適切な溶媒中に必要な量でペプチドを組み込み、その後濾過滅菌をすることによって調製することができる。一般に、分散剤は、塩基性分散媒体と、上に列挙したもののうち必要な他の成分とを含む滅菌ビヒクルに活性ペプチドを組み込むことによって調製される。注射可能な滅菌溶液の調製のための滅菌粉末剤の場合、真空乾燥およびフリーズドライなどの調製方法は、その以前に滅菌濾過された溶液からの任意の追加の所望の成分に加えて、活性成分の粉末剤を産生する。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散の場合には必要な粒径の維持によって、かつ界面活性剤の使用によって維持され得る。注射可能な組成物の長期吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物に含むことによりほぼもたらされ得る。様々な実施形態では、注射可能な組成物は、市販の使い捨ての注射可能なデバイスを使用して投与される。

非経口製剤は、アンプルおよびバイアルなどの単位投与または複数回投与用の密封容器内に提供することができ、使用直前に、無菌液体賦形剤、例えば、水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保存することができる。即時注射溶液および懸濁液は、当該技術分野で既知の種類の滅菌粉末剤、顆粒、および錠剤から調製することができる。注射可能な製剤は、本発明によるものである。注射可能な組成物のための有効な薬学的賦形剤の要件は、当業者に周知である（例えば、ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓａｎｄＰｈａｒｍａｃｙＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｊ．Ｂ．ＬｉｐｐｉｎｃｏｔｔＣｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，ＢａｎｋｅｒａｎｄＣｈａｌｍｅｒｓ，ｅｄｓ．，ｐａｇｅｓ２３８－２５０（１９８２）、およびＡＳＨＰＨａｎｄｂｏｏｋｏｎＩｎｊｅｃｔａｂｌｅＤｒｕｇｓ，Ｔｏｉｓｓｅｌ，４ｔｈｅｄ．，ｐａｇｅｓ６２２－６３０（１９８６）を参照されたい）。

さらに、本開示のペプチドは、乳化塩基または水溶性塩基などの様々な塩基と混合することによって、直腸投与用の坐剤にすることができる。膣内投与に好適な製剤は、活性成分に加えて、当該技術分野で適切であることが既知である担体などを含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー製剤として提供することができる。

上述の薬学的組成物に加えて、本開示のペプチドは、シクロデキストリン包接錯体、またはリポソームなどの封入錯体として製剤化することができることが当業者によって理解されるであろう。

ペプチドは、好適な噴射剤の使用ありまたはなしで、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー（好ましくは電気流体力学を使用して細かいミストを産生するアトマイザー）、または噴霧器からのエアゾールスプレーとして、または点鼻剤として、典型的には、乾燥粉末吸入器から乾燥粉末の形態で（例えば、好適な薬学的に許容される担体と混合して、単独で、混合物として、または混合成分粒子としてのいずれか）、鼻腔内にまたは吸入によって投与することができる。加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー、またはネブライザーは一般に、例えば、溶媒としての活性噴射剤の分散、可溶化、または放出の延長に好適な薬剤を含む、ペプチドの溶液または懸濁液を含む。乾燥粉末剤または懸濁液製剤で使用する前に、製剤は一般に、吸入による送達に好適なサイズ（典型的には、５ミクロン未満）に微粉化される。これは、スパイラルジェットミル、流動層ジェットミル、ナノ粒子を形成するための超臨界流体処理、高圧均質化、または噴霧乾燥などの任意の適切な粉砕方法によって達成され得る。吸入器または吹入器で使用するためのカプセル、ブリスター、およびカートリッジは、ペプチド、好適な粉末基剤、および性能調整剤の粉末混合物を含むように製剤化され得る。メントールおよびレボメントールなどの好適な香味料、またはサッカリンまたはサッカリンナトリウムなどの甘味料を、吸入／鼻腔内投与用の製剤に添加してもよい。吸入／鼻腔内投与用の製剤は、即時および／または調節放出となるように製剤化され得る。放出調節製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出を含む。乾燥粉末吸入器およびエアロゾルの場合、投与量単位は、計量された量を送達するバルブによって決定される。ユニットは、典型的には、ペプチドの計量された用量または「パフ」を投与するように配置される。全体の１日用量は、典型的には、単回用量、またはより一般的には、１日を通して分割用量で投与される。

一態様によれば、ペプチドは、医薬品、特にヒト医薬品おける使用のためのものである。ペプチドは、異常な細胞増殖および悪性腫瘍に関連する細胞シグナル伝達を調節するのに有効である。加えて、本開示は、細胞生存率および細胞保護に影響を与えるのに有効なペプチドを提供する。

いくつかの態様では、アポトーシス細胞死、炎症、自己免疫、血管新生、および／または転移が病因学的決定因子である状態を治療するための方法が本明細書に提供される。

別の態様では、骨または軟骨の障害／疾患、がん、自己免疫疾患、線維性疾患、炎症性疾患、肥満、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、神経変性病、骨折、骨格軟骨異形成症、感染症、肺疾患、不妊症、筋肉障害、老化、皮膚病、代謝性疾患の予防および／または治療に使用するためのペプチドが提供される。

いくつかの態様では、ペプチドは、熱ショックタンパク質および／または代謝および酸化ストレスの誘導などであるがこれらに限定されない、細胞ストレス応答に関連する状態を治療するために投与される。細胞ストレス応答は、例えば、熱的、免疫学的、サイトカイン、酸化的、代謝的、無酸素性、小胞体、細網、タンパク質変性、栄養的、化学的、機械的、浸透圧的および血糖的ストレスを含む任意のストレス要因に応答することができる。

いくつかの態様では、ペプチドは、糖尿病、心血管疾患、腎臓病、網膜症、肥満、代謝性疾患、神経変性疾患、胃腸疾患、自己免疫疾患、リウマチ性疾患、または感染症などの炎症状態を治療するために本明細書に提供される方法に従って投与される。

併用療法
別の実施形態によれば、ペプチドは、他の既知の治療剤と同時投与または同時処方される。本開示のさらなる態様によれば、本明細書で提供されるのは、薬理学的に有効な量の本開示によるペプチドまたはペプチド類似体、またはその薬学的に許容される塩、任意選択的に薬学的に許容される希釈剤または担体と一緒に、（１）インスリンおよびインスリン類似体；（２）スルホニル尿素（例えば、グリピジド）および食餌性グルコース制御因子（「短時間作用型分泌促進物質」と呼ばれることもある）を含むインスリン分泌促進物質、例えば、メグリチニド（例えば、レパグリニドおよびナテグリニド）；（３）インクレチン作用を改善する薬剤、例えば、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ－４）阻害剤（例えば、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、シタグリプチン）、およびグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）アゴニスト（例えば、エキセナチド）；（４）ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲｙ）アゴニストを含むインスリン感作物質、例えば、チアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾンおよびロシグリタゾン）、およびＰＰＡＲアルファ、ガンマおよびデルタ活性の任意の組み合わせを伴う薬剤；（５）肝臓性ブドウ糖バランスを調節する薬剤、例えば、ビグアニド（例えば、メトホルミン）、フルクトース１，６－ビスホスファターゼ阻害剤、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、グリコーゲンシンターゼキナーゼ阻害剤、およびグルコキナーゼ活性化因子；（６）腸からのブドウ糖の吸収を低減する／遅延するように設計された薬剤、例えば、α－グルコシダーゼ阻害剤（例えば、ミグリトールおよびアカルボース）；（７）グルカゴンの作用に拮抗する、または分泌を低減させる薬剤、例えば、アミリン類似体（例えば、プラムリンチド）；（７）腎臓によるブドウ糖の再吸収を防ぐ薬剤、例えば、ナトリウム依存性グルコーストランスポーター２（ＳＧＬＴ－２）阻害剤（例えば、ダパグリフロジン）；（８）長期性高血糖の合併症を治療するために設計された薬剤、例えば、アルドースレダクターゼ阻害剤（例えば、エパルレスタットおよびラニレスタット）；微小血管障害に関連する合併症の治療に使用される薬剤；（９）抗脂質異常症剤、例えば、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（スタチン、例えばロスバスタチン）および他のコレステロール低下剤；ＰＰＡＲａアゴニスト（フィブラート、例えばゲムフィブロジルおよびフェノフィブラート）；胆汁酸封鎖剤（例えば、コレスチラミン）；（１０）コレステロール吸収阻害剤（例えば、植物ステロール（すなわちフィトステロール）、合成阻害剤）；コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤；回腸胆汁酸輸送システムの阻害剤（ＩＢＡＴ阻害剤）；胆汁酸結合樹脂；ニコチン酸（ニコチン）およびその類似体；酸化防止剤、例えば、プロブコール；およびオメガ３脂肪酸；（１１）アドレナリン受容体アンタゴニストを含む降圧薬、例えば、ベータ遮断剤（例えば、アテノロール）、アルファ遮断剤（例えば、ドキサゾシン）、および混合アルファ／ベータ遮断剤（例えば、ラベタロール）；アルファ－２アゴニスト（例えば、クロニジン）を含むアドレナリン受容体アゴニスト；アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えば、リシノプリル）、カルシウムチャネル遮断剤、例えば、ジヒドロピリジン（例えば、ニフェジピン）、フェニルアルキルアミン（例えば、ベラパミル）、およびベンゾチアゼピン（例えば、ジルチアゼム）；アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、カンデサルタン）；アルドステロン受容体アンタゴニスト（例えば、エプレレノン）；中枢作用性アドレナリン作動剤、例えば、中枢アルファアゴニスト（例えば、クロニジン）；および利尿剤（例えば、フロセミド）；（１２）抗血栓薬を含む止血修飾剤、例えば、線維素溶解の活性化因子；トロンビンアンタゴニスト；第ＶＩＩａ因子阻害剤；抗凝固剤、例えば、ビタミンＫアンタゴニスト（例えば、ワルファリン）、ヘパリンおよびその低分子量類似体、第Ｘａ因子阻害薬、および直接トロンビン阻害剤（例えば、アルガトロバン）；抗血小板剤、例えば、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えば、アスピリン）、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）受容体阻害剤（例えば、クロピドグレル）、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、シロスタゾール）、糖タンパク質ＩＩＢ／ＩＡ阻害剤（例えば、チロフィバン）、およびアデノシン再取り込み阻害剤（例えば、ジピリダモール）；（１４）抗肥満剤、例えば、ノルアドレナリン作動剤（例えば、フェンテルミン）およびセロトニン作動剤（例えば、シブトラミン）を含む食欲抑制剤（例えば、エフェドリン）、膵臓リパーゼ阻害剤（例えば、オルリスタット）、ミクロソーム転移タンパク質（ＭＴＰ）修飾剤、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ）阻害剤、およびカンナビノイド（ＣＢ１）受容体アンタゴニスト（例えば、リモナバン）；（１５）摂食行動修飾剤、例えば、オレキシン受容体修飾剤およびメラニン凝集ホルモン（ＭＣＨ）修飾剤；（１６）グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）受容体修飾剤；（１７）ニューロペプチドＹ（ＮＰＹ／ＮＰＹ受容体修飾剤；（１８）ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＫ）修飾剤；（１９）セロトニン受容体修飾剤；（２０）レプチン／レプチン受容体修飾剤；（２１）グレリン／グレリン受容体修飾剤；または（２２）モノアミン伝達修飾剤、例えば、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）（例えば、フルオキセチン）、ノルアドレナリン再取り込み阻害剤（ＮＡＲＩ）、ノルアドレナリン－セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＮＲＩ）、トリプルモノアミン再取り込み阻害剤（例えば、テソフェンシン）、およびモノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）（例えば、トロキサトンおよびアミフラミン）、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、そのような塩の溶媒和物またはプロドラッグから選択される１つ以上の薬剤、任意選択的にそのような治療的処置を必要とするヒトなどの哺乳動物に対して薬学的に許容される担体と一緒に同時、連続、または別々に投与することを伴う併用治療である。

別の実施形態によれば、ペプチドは、ＮＡＳＨを治療するための他の既知の治療剤と同時投与または同時処方される。本開示のさらなる態様によれば、本明細書で提供されるのは、薬理学的に有効な量の本開示によるペプチドまたはペプチド類似体、またはその薬学的に許容される塩、任意選択的に薬学的に許容される希釈剤または担体と一緒に、（ｍｉＲ－１０３／１０７アンタゴニスト、ＦＸＲアゴニスト、ガレクチン－１／３アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤、ＣＢ－１阻害剤、ケトヘキサキナーゼ阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ＰＰＡＲγアゴニスト、Ａ３ＡＲアゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、フルオロケトリド、ｍＴＯＴインスリン増感剤、カスパーゼ阻害剤、レプチン類似体、ガレクチン－１／３アゴニスト、ＳＣＤ１阻害剤、ＰＰＡＲαδアゴニスト、ＬＯＸＬ２抗体、ＡＳＫ１阻害剤、１１β－ＨＳＤ１阻害剤、ＰＰＡＲαδγアゴニスト、ＴＨＲ－βアゴニスト、アルドステロン阻害剤、ＦＧＦ－１９アナログ、ＳＢＡＴ阻害剤、ＣＣＲ２／ＣＣＲ５阻害剤、ＧＬＰ－１アゴニスト、およびＰＰＡＲαγアゴニスト）から選択される１つ以上の薬剤を同時、連続、または別々に投与することを伴う併用治療である。以下の化合物との組み合わせもまた、本発明の実施形態として企図される：ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃＡＡＺＤ４０７６、ＥｎａｎｔａＥＤＰ－３０５、ＧａｌｅｃｔｉｎＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓＧＲ－ＭＤ－０２、ジェムカベン（ｇｅｍｃａｂｅｎｅ）、ＧｉｌｅａｄＧＳ－０９７６、ＧｉｌｅａｄＧＳ－９６７４、ＭｅｒｃｋＭＫ－４０７４、ピオグリタゾン、ＰｆｉｚｅｒＰＦ－０６８３５９１９、ＰｆｉｚｅｒＣＰ－９４５５９８、ＡｓｔｅｌｌａｓＡＳＰ９８３１、ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＩｎｇｅｌｈｅｉｍＢＩ１４６７３３５、ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂＢＭＳ－９８６０３６、アバンディア、メトホルミン、ロサルタン、Ｃａｎ－ＦｉｔｅＣＦ１０２、ペントキシフィリン、ソリスロマイシン、ＣｉｒｉｕｓＭＳＤＣ－０６０２Ｋ、エムリカサン、ＣｏｎａｔｕｓＩＤＮ－６５５６、メトレレプチン、アラムコール、ＧｅｎｆｉｔＧＦＴ５０５、シムツズマブ、ＧｉｌｅａｄＧＳ－４９９７、ＧｉｌｅａｄＧＳ－９４５０、ＲｏｃｈｅＴＲＯ１９６２２、ＲｏｃｈｅＲＯ５０９３１５１、ＩｍｍｕｒｏｎＩＭＭ－１２４Ｅ、オベチコール酸、ＩｎｖｅｎｔｉｖａＩＶＡ３３７、ＭａｄｒｉｇａｌＭＧＬ－３１９６、ＭＮ－００１、ＭｉｔｓｕｂｉｓｈｉＴａｎａｂｅＭＴ－３９９５、ＭｏｃｈｉｄａＥＰＡ－Ｅ、ＮＧＭＢｉｏｐｈａｒｍａＮＧＭ２８２、ＮｏｖａｒｔｉｓＬＭＢ７６３、ＮｏｖａｒｔｉｓＬＪＮ４５２、ＳｈｉｒｅＳＨＰ６２６、セニクリビロク、リラグルチド、およびサログリタザール。

肥満に関連する併存疾患－単独療法または併用
例えば、過体重または肥満であることに加えて、対象または患者は、過体重または肥満関連の併存症、すなわち、過体重または肥満であることに関連する、それによって悪化する、または誘発される、疾患および他の有害な健康状態をさらに有し得る。本明細書で企図されるのは、これらの過体重または肥満関連状態を治療することが以前に示されている少なくとも１つの他の薬剤と組み合わせて単独で投与される本発明のペプチドである。

例えば、ＩＩ型糖尿病は肥満に関連付けられている。ＩＩ型糖尿病の特定の合併症、例えば障害および早期死亡は、持続的な体重減少によって予防、改善、または解消することができる（Ａｓｔｒｕｐ，Ａ．ＰｕｂＨｅａｌｔｈＮｕｔｒ（２００１）４：４９９－５１５）。ＩＩ型糖尿病を治療するために投与される薬剤は、スルホニル尿素（例えば、クロルプロパミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド）；メグリチニド（例えば、レパグリニドおよびナテグリニド）；ビグアニド（例えば、メトホルミン）；チアゾリジンジオン（ロシグリタゾン、トログリタゾン、およびピオグリタゾン）；ジペプチジルペプチダーゼ－４阻害剤（例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、およびサクサグリプチン）；グルカゴン様ペプチド－１模倣物（例えば、エキセナチドおよびリラグルチド）；およびα－グルコシダーゼ阻害薬（例えば、アカルボースおよびミグリトールを含む。

心臓の障害および状態、例えば高血圧症、脂質異常症、虚血性心疾患、心筋症、心筋梗塞、脳卒中、静脈血栓塞栓症および肺高血圧は、過体重または肥満に関連している。例えば、過剰な脂肪組織が腎臓から作用を受ける物質を分泌し、高血圧症を引き起こすため、高血圧症は肥満と関連付けられている。さらに、肥満では、一般に産生されるインスリンの量が多くなり（脂肪組織が過剰であるため）、この過剰なインスリンもまた血圧を上昇させる。高血圧症の主な治療選択肢は減量である。高血圧症を治療するために投与される薬剤は、クロルタリドン；ヒドロクロロチアジド；インダパミド、メトラゾン；ループ利尿薬（例えば、ブメタニド、エタクリン酸、フロセミド、ラシックス、トルセミド）；カリウム保持性利尿薬（例えば、塩酸アミロライド、ベンザミル、スピロノラクトン、およびトリアムテレン）；末梢性薬剤（例えば、レセルピン）；中枢性α作動薬（例えば、塩酸クロニジン、酢酸グアナベンズ、塩酸グアンファシン、およびメチルドパ）；α遮断薬（例えば、メシル酸ドキサゾシン、塩酸プラゾシン、および塩酸テラゾシン）；β遮断薬（例えば、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、フマル酸ビソプロロール、塩酸カルテオロール、酒石酸メトプロロール、コハク酸メトプロロール、ナドロール、硫酸ペンブトロール、ピンドロール、塩酸プロプラノロール、およびマレイン酸チモロール）；α遮断薬とβ遮断薬の併用（例えば、カルベジロールと塩酸ラベタロール）；直接血管拡張薬（例えば、塩酸ヒドララジンおよびミノキシジル）；カルシウム拮抗薬（例えば、塩酸ジルチアゼムおよび塩酸ベラパミル）；ジヒドロピリジン類（例えば、ベシル酸アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、およびニソルジピン）；ＡＣＥ阻害剤（塩酸ベナゼプリル、カプトプリル、マレイン酸エナラプリル、ホシノプリルナトリウム、リシノプリル、モエキシプリル、塩酸キナプリル、ラミプリル、トランドラプリル）；アンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬（例えば、ロサルタンカリウム、バルサルタン、およびイルベサルタン）；レニン阻害剤（例えば、アリスキレン）；およびそれらの組み合わせを含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。

Ｃａｒｒｅｔａｌ．（ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ＆Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ（２００４）Ｖｏｌ．８９，Ｎｏ．６２６０１－２６０７）は、過体重または肥満であることと脂質異常症との関連性について論じている。脂質異常症は、通常、スタチンで治療される。ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であるスタチンは、対象におけるコレステロールの生成を遅延させ、かつ／または動脈からコレステロールの蓄積を除去する。スタチンは、メバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、ベロスタチン、ジヒドロコンパクチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、ダルバスタチン、カルバスタチン、クリバスタチン、ベバスタチン、セフバスタチン、ロスバスタチン、ピタバスタチン、およびグレバスタチンを含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。Ｅｃｋｅｌ（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ（１９９７）９６：３２４８－３２５０）は、過体重または肥満であることと虚血性心疾患との関連性について論じている。虚血性心疾患を治療するために投与される薬剤は、スタチン、硝酸塩（例えば、二硝酸イソソルビドおよび一硝酸イソソルビド）、β遮断薬、およびカルシウムチャネル拮抗薬を含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。

Ｗｏｎｇｅｔａｌ．（ＮａｔｕｒｅＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ（２００７）４：４３６－４４３）は、過体重または肥満であることと心筋症との関連性について論じている。心筋症を治療するために投与される薬剤は、変力剤（例えば、ジゴキシン）、利尿薬（例えば、フロセミド）、ＡＣＥ阻害剤、カルシウム拮抗薬、抗不整脈薬（例えば、ソトロール、アミオダロン、ジソピラミド）、およびβ遮断薬を含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。Ｙｕｓｅｆｅｔａｌ．（Ｌａｎｃｅｔ（２００５）３６６（９４９７）：１６４０－１６４９）は、過体重または肥満であることと心筋梗塞との関連性について論じている。心筋梗塞を治療するために投与される薬剤は、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬、直接血管拡張薬、β遮断薬、抗不整脈薬および血栓溶解薬（例えば、アルテプラーゼ、レタプラーゼ、テネクテプラーゼ、アニストレプラーゼ、およびウロキナーゼ）を含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。

Ｓｕｋｅｔａｌ．（Ｓｔｒｏｋｅ（２００３）３４：１５８６－１５９２）は過体重または肥満であることと脳卒中との関連性について論じている。脳卒中を治療するために投与される薬剤は、抗血小板剤（例えば、アスピリン、クロピドグレル、ジピリダモール、およびチクロピジン）、抗凝固剤（例えば、ヘパリン）、および血栓溶解剤を含む。Ｓｔｅｉｎｅｔａｌ．（ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ（２００５）１８（９）：９７８－９８０）は、過体重または肥満であることと静脈血栓塞栓症との関連性について論じている。静脈血栓塞栓症を治療するために投与される薬剤は、抗血小板剤、抗凝固剤、および血栓溶解剤を含む。Ｓｚｔｒｙｍｆｅｔａｌ．（ＲｅｖＰｎｅｕｍｏｌＣｌｉｎ（２００２）５８（２）：１０４－１０）は、過体重または肥満であることと肺高血圧症との関連性について論じている。肺高血圧症を治療するために投与される薬剤は、変力剤、抗凝固剤、利尿薬、カリウム（例えば、Ｋ－ｄｕｒ）、血管拡張剤（例えば、ニフェジピンおよびジルチアゼム）、ボセンタン、エポプロステノール、およびシルデナフィルを含む。肥満低換気症候群、喘息、および閉塞性睡眠時無呼吸等の呼吸器疾患および状態は、過体重または肥満であることと関連付けられている。Ｅｌａｍｉｎ（Ｃｈｅｓｔ（２００４）１２５：１９７２－１９７４）は、過体重または肥満であることと喘息との関連性について論じている。喘息を治療するために投与される薬剤は、気管支拡張剤、抗炎症薬、ロイコトリエン阻害薬、および抗Ｉｇｅ剤を含む。特定の喘息薬は、ザフィルルカスト、フルニソリド、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、テルブタリン、フルチカゾン、ホルモテロール、ベクロメタゾン、サルメテロール、テオフィリン、およびゾペネックスを含む。

Ｋｅｓｓｌｅｒｅｔａｌ．（ＥｕｒＲｅｓｐｉｒＪ（１９９６）９：７８７－７９４）は、過体重または肥満であることと閉塞性睡眠時無呼吸との関連性について論じている。睡眠時無呼吸を治療するために投与される薬剤は、モダフィニルおよびアンフェタミンを含む。

非アルコール性脂肪性肝疾患等の肝臓障害および状態は、過体重または肥満であることと関連付けられている。Ｔｏｌｍａｎｅｔａｌ．（ＴｈｅｒＣｌｉｎＲｉｓｋＭａｎａｇ（２００７）６：１１５３－１１６３）は、過体重または肥満であることと非アルコール性脂肪性肝疾患との関連性について論じている。非アルコール性脂肪性肝疾患を治療するために投与される薬剤は、抗酸化剤（例えば、ビタミンＥおよびＣ）、インスリン抵抗性改善剤（メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、およびベタイン）、肝保護剤、および脂質低下薬を含む。

腰痛および荷重関節の変形性関節症等の骨障害および状態は、過体重または肥満であることと関連付けられており、ｖａｎＳａａｓｅ（ＪＲｈｅｕｍａｔｏｌ（１９８８）１５（７）：１１５２－１１５８）は、過体重または肥満であることと荷重関節の変形性関節症との関連性について論じている。荷重関節の変形性関節症を治療するために投与される薬剤は、アセトアミノフェン、非ステロイド性抗炎症薬（例、イブプロフェン、エトドラク、オキサプロジン、ナプロキセン、ジクロフェナク、およびナブメトン）、ＣＯＸ－２阻害剤（例、セレコキシブ）、ステロイド、サプリメント（例えば、グルコサミンおよびコンドロイチン硫酸）、および人工関節液を含む。

代謝障害および状態、例えばプラダー・ウィリー症候群および多嚢胞性卵巣症候群は、過体重または肥満であることと関連付けられている。Ｃａｓｓｉｄｙ（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ（１９９７）３４：９１７－９２３）は、過体重または肥満であることとプラダー・ウィリー症候群との関連性について論じている。プラダー・ウィリー症候群を治療するために投与される薬剤は、ヒト成長ホルモン（ＨＧＨ）、ソマトロピン、減量剤（例えば、オルリスタット、シブトラミン、メタンフェタミン、イオナミン、フェンテルミン、ブプロピオン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラジン、ベンズフェテルミン、およびトパマックス）を含む。

Ｈｏｅｇｅｒ（ＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙＣｌｉｎｉｃｓｏｆＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａ（２００１）２８（１）：８５－９７）は、過体重または肥満であることと多嚢胞性卵巣症候群との関連性について論じている。多嚢胞性卵巣症候群を治療するために投与される薬剤は、インスリン抵抗性改善薬、合成エストロゲンとプロゲステロンの組み合わせ、スピロノラクトン、エフロルニチン、およびクロミフェンを含む。性機能障害、勃起不全、不妊症、分娩合併症、および胎児異常等の生殖障害および状態は、過体重または肥満であることと関連付けられている。Ｌａｒｓｅｎｅｔａｌ．（ＩｎｔＪＯｂｅｓ（Ｌｏｎｄ）（２００７）８：１１８９－１１９８）は、過体重または肥満であることと性機能障害との関連性について論じている。Ｃｈｕｎｇｅｔａｌ．（ＥｕｒＵｒｏｌ（１９９９）３６（ｌ）：６８－７０）は、過体重または肥満であることと勃起不全との関連性について論じている。勃起不全を治療するために投与される薬剤は、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、タダラフィル、クエン酸シルデナフィル、およびバルデナフィル）、プロスタグランジンＥ類似体（例えば、アルプロスタジル）、アルカロイド（例えば、ヨヒンビン）、およびテストステロンを含む。Ｐａｓｑｕａｌｉｅｔａｌ．（ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ（１９９７）１：８２－８７）は、過体重または肥満であることと不妊症との関連性について論じている。不妊症を治療するために投与される薬剤は、クロミフェン、クエン酸クロミフェン、ブロモクリプチン、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、ＧｎＲＨアゴニスト、ＧｎＲＨアンタゴニスト、タモキシフェン／ノルバデックス、ゴナドトロピン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト閉経期ゴナドトロピン（ＨｍＧ）、プロゲステロン、組換え卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、ウロフォリトロピン、ヘパリン、ホリトロピンアルファ、およびホリトロピンベータを含む。

Ｗｅｉｓｓｅｔａｌ．（ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙ（２００４）１９０（４）：１０９１－１０９７）は、過体重または肥満であることと分娩合併症との関連性について論じている。分娩合併症を治療するために投与される薬剤は、塩酸ブピバカイン、ジノプロストンＰＧＥ２、メペリジンＨＣ１、Ｆｅｒｒｏ－ｆｏｌｉｃ－５００／ｉｂｅｒｅｔ－ｆｏｌｉｃ－５００、メペリジン、マレイン酸メチルエルゴノビン、ロピバカインＨＣ１、ナルブフィンＨＣ１、オキシモルホンＨＣ１、オキシトシン、ジノプロストン、リドコリン、臭化水素酸スコポラミン、クエン酸スフェンタニル、および分娩誘発剤を含む。

精神障害および状態、例えば、体重に関連するうつ病および不安症は、過体重または肥満であることと関連付けられている。Ｄｉｘｓｏｎｅｔａｌ．（ＡｒｃｈＩｎｔｅｒｎＭｅｄ（２００３）１６３：２０５８－２０６５）は、過体重または肥満であることとうつ病との関連性について論じている。うつ病を治療するために投与される薬剤は、セロトニン再取り込み阻害剤（例えば、フルオキセチン、エスシタロプラム、シタロプラム、パロキセチン、セルトラリン、およびベンラファキシン）、三環系抗うつ薬（例：アミトリプチリン、アモキサピン、クロミプラミン、デシプラミン、塩酸ドスレピン、ドキセピン、イミプラミン、イプリンドール、ロフェプラミン、ノルトリプチリン、オピプラモール、プロトリプチリン、およびトリミプラミン）；モノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えば、イソカルボキサジド、モクロベミド、フェネルジン、トラニルシプロミン、セレギリン、ラサギリン、ニアラミド、イプロニアジド、イプロクロジド、トロキサトン、リネゾリド、ジエノリドカバピロンデスメトキシヤンゴニン、およびデキストロアンフェタミン）；精神刺激薬（例えば、アンフェタミン、メタンフェタミン、メチルフェニデート、およびアレコリン）；抗精神病薬（例えば、ブチロフェノン、フェノチアジン、チオキサンテン、クロザピン、オランザピン、リスペリドン、クエチアピン、ジプラシドン、アミスルプリド、パリペリドン、シンビアックス、テトラベナジン、およびカンナビジオール）；および気分安定剤（例えば、炭酸リチウム、バルプロ酸、ジバルプロエクスナトリウム、バルプロ酸ナトリウム、ラモトリギン、カルバマゼピン、ガバペンチン、オクスカルバゼピン、およびトピラマート）を含む。

Ｓｉｍｏｎｅｔａｌ．（ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＧｅｎｅｒａｌＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ（２００６）６３（７）：８２４－８３０））は、過体重または肥満であることと不安症との関連性について論じている。不安症を治療するために投与される薬剤は、セロトニン再取り込み阻害剤、気分安定剤、ベンゾジアゼピン（例えば、アルプラゾラム、クロナゼパム、ジアゼパム、およびロラゼパム）、三環系抗うつ薬、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、およびβ遮断薬を含む。

本発明の別の態様は、対象に体重減少をもたらすのに有効な量の開示される化合物を対象に投与することと、対象において減少した体重を維持するために、治療有効量の異なる減量剤を投与することとを含む、対象における体重減少を促進および維持するための方法を提供する。減量剤は、セロトニンおよびノルアドレナリン再取り込み阻害剤、ノルアドレナリン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ならびに腸リパーゼ阻害剤を含む。特定の減量剤には、リラグルチド、オルリスタット、シブトラミン、メタンフェタミン、イオナミン、フェンテルミン、ブプロピオン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラジン、ベンズフェテルミン、ブロモクリプチン、ロルカセリン、トピラマート、あるいは、グレリン作用を遮断すること、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）の活性を阻害すること、ステアロイルＣｏＡ不飽和化酵素１（ＳＣＤ１）の活性を阻害すること、ニューロペプチドＹ受容体１の機能を阻害すること、ニューロペプチドＹ受容体２もしくは４の機能を活性化すること、またはナトリウム－グルコース共輸送体１もしくは２の活性を阻害することによって食物摂取を調節するように作用する薬剤を含む。これらの化合物は、当該技術分野で既知のレジメンおよび投薬量で投与される。

特定の理論に拘束されるものではないが、脂肪細胞をペプチドで処理した後の細胞培養培地中の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、脂質または脂肪酸レベルの細胞調節に関与する経路の変調を示す。培地中の脂肪酸レベルの低下は、限定されないが、シグナル伝達経路の阻害脂質生合成の低下、脂肪分解の低下、または脂肪酸酸化の増加を含む多くのプロセスから生じ得る。遊離脂肪酸の正味濃度に影響を与えるペプチドは、代謝障害の治療に潜在的に有用である。

脂肪萎縮症は、様々な体の領域からの脂肪組織（体脂肪）の選択的な損失および／または他の領域における過剰な脂肪の蓄積を特徴とする障害の一般名称である。顔等の１つの領域からの局所的な脂肪の減少は、脂肪萎縮と称される。脂肪損失の程度は、身体の一部の非常に小さな領域から、全身の脂肪組織がほぼ完全に存在しない状態まで様々である。さらに、患者は重度の代謝合併症または単なる美容上の問題を抱えている可能性がある。重度の脂肪損失を伴う脂肪萎縮症は、糖尿病、高レベルの血清トリグリセリド、および脂肪肝（肝臓脂肪症）等のインスリン抵抗性に関連する代謝性合併症の原因となり得る。脂肪萎縮症は、先天性（家族性部分性脂肪萎縮症またはベラルディネッリセイプ症候群等）または後天性（例えば、様々な種類の疾病または薬物に関連する）のいずれかであり得る。後天性脂肪萎縮症は、薬物、自己免疫機構によって引き起こされるか、または特発性であり得る。後天性脂肪萎縮症は、非常に活性な抗レトロウイルス療法（ＨＡＡＲＴ）、後天性全身性脂肪萎縮症（ＡＧＬ）、後天性部分型脂肪萎縮症（ＡＰＬ）および限局性脂肪萎縮症によって誘発され得る、ＨＩＶ感染患者（ＬＤ－ＨＩＶ）における脂肪異栄養症を含む。後天性脂肪萎縮症には直接的な遺伝的根拠はない。いくつかの実施形態によれば、本発明は、脂肪萎縮症を軽減、改善または予防するための方法を提供する。

ペプチドは、グルコース、活性酸素種（ＲＯＳ）および／または遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の異常な血中濃度によって明らかになる不均衡な代謝状態に関連する状態の治療に有用である。良好な代謝状態は、健康な対象のものと同等のグルコース、ＲＯＳ、ＦＦＡの血中濃度（健康な集団の平均レベルの範囲内）を特徴とするバランスの取れたエネルギー恒常性として定義される。したがって、本明細書で使用される好ましくない代謝状態は、異常な、すなわち、（例えば、医師または当業者によって評価された場合に）健康な対象におけるそれらのそれぞれのレベルと比較して有意に変化したグルコース、ＲＯＳおよび／またはＦＦＡの血中レベルを指す。好ましくない代謝状態という用語は、いくつかの実施形態では、（例えば、医師または当業者によって評価された場合に）健康な対象に検車におけるそれらのそれぞれのレベルと比較して有意に高いグルコース、ＲＯＳおよび／またはＦＦＡの血中レベルを指す。好ましくない代謝状態は、グルコース（炭水化物）および／または脂肪酸酸化経路が関与し得る異常な代謝から生じる可能性がある。脂肪酸酸化経路の異常が関与している場合、好ましくない代謝状態は通常、健康な対象と比較して有意に高いＲＯＳ血中濃度および／または異常なＦＦＡ血中濃度によって明らかになる。これらの異常はまた、酸化型低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の血中濃度の上昇によっても明らかになる。グルコース代謝の異常が関与している場合、グルコース血中濃度は通常、健康な対象と比較して有意に高い。本明細書で使用される場合、不均衡な血糖コントロールの閾値を超えない有意に高い血糖値を有する患者は、本明細書に記載されるように、当該増加が異常な血中ＲＯＳおよび／またはＦＦＡ値を伴う場合、好ましくない代謝状態を有すると定義される。当該技術分野で知られているように、不均衡な代謝状態は、エネルギー摂取および様々なエネルギー消費および利用パラメータを考慮することによって、当該医師または当業者によって評価され得る。例えば、限定されないが、細胞（例えば、血小板）ＡＴＰ産生および細胞酸化などの細胞レベルでのパラメータ、ならびに呼吸商（ＲＱ）などの全身レベルでのパラメータを評価して、対象の代謝状態を決定してもよい。例えば、健康な患者と病気の患者との間でそのようなパラメータの相対比を比較することにより、当業者は、健康な対象と比較して対象の代謝状態を評価することができる。好ましくない代謝状態は、好適な治療レジメンによって適切に治療されていないまたはバランスが取れていない慢性代謝障害および／または炎症性障害に苦しむ患者に見られる場合がある。

「代謝性疾患」または「代謝性障害」という用語は、グルコース（炭水化物）、脂肪酸および／またはタンパク質の酸化経路が関与し得る、代謝異常、代謝不均衡、または準最適な代謝が生じる、特定された障害の群を指す。したがって、不均衡の場合、本明細書に記載されるように、これらの障害は通常、健康な対象におけるそれらのそれぞれのレベルと比較してグルコース、ＲＯＳおよび／またはＦＦＡの異常な血中レベルを特徴とする好ましくない代謝状態によって明らかになる。そのような障害は、限定されないが、糖尿病、および栄養または内分泌の不均衡に関連する障害を含む。

好ましくない代謝状態は、慢性の炎症性障害の結果としても生じる可能性があり、治療抵抗性の不均衡な炎症プロセスは、健康な対象におけるそれらのそれぞれのレベルと比較してグルコース、ＲＯＳおよび／またはＦＦＡの異常な血中レベルによって明らかになる二次性の代謝合併症を伴う。そのような障害の非限定的な例は、敗血症および自己免疫疾患である。

シンドロームＸ（またはメタボリックシンドローム）は、腹部の脂肪の蓄積に関連する一連の兆候および症状を示す。この形態の脂肪分布は中年男性によく見られ、ぽっこりしたお腹または太鼓腹として目に見えることが多い。シンドロームＸは、痛風、グルコース代謝障害（糖尿病への感受性の増加）、血圧の上昇、および血中コレステロール値を含む、多くの障害を特徴とする。シンドロームＸを有する人々は心臓病のリスクが高い。シンドロームＸは、米国臨床内分泌学者協会（ＡｍｅｒｉｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｉｓｔｓ）によって、血清または血漿のインスリン／グルコースレベル比、脂質、尿酸レベル、血管生理学、および凝固因子の不均衡における一連の代謝異常として定義されている。したがって、本明細書で使用される「シンドロームＸ」という用語は、以下のうち少なくとも２つの陽性診断によって特徴付けられる状態を指す：非インスリン依存性糖尿病、正常とみなされるレベルを超える血圧、正常とみなされるレベルを超えるインスリンレベル、脂質異常症、および肥満。

ペプチドは、以下の代謝性疾患において有用であり得る。
（ａ）高血糖、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、インスリン非依存型糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのあらゆる形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低下、
（ｂ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延もしくは予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）のインスリン使用２型糖尿病への進行の遅延、インスリン抵抗性の遅延もしくは予防、および／またはインスリン非使用２型糖尿病のインスリン使用２型糖尿病への進行の遅延、
（ｃ）β細胞アポトーシスの減少、β細胞機能および／もしくはβ細胞質量の増加などのβ細胞機能の改善、ならびに／またはβ細胞に対するグルコース感受性の回復、
（ｄ）アルツハイマー病、パーキンソン病、および／または多発性硬化症などの認知障害および／または神経変性障害の予防および／または治療、
（ｅ）肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療、例えば、食物摂取量の減少、減量、食欲抑制、満腹感の誘導；抗精神病薬もしくはステロイドの投与により誘発される過食性障害、神経性過食症、および／もしくは肥満の治療もしくは予防；胃の運動性低下；胃内容排出の遅延；身体可動性の増加；ならびに／または変形性関節症および／もしくは尿失禁などの肥満への併存症の予防および／もしくは治療、
（ｆ）血管障害；末梢神経障害を含む神経障害；腎障害；および／または網膜症などの糖尿病合併症の予防および／または治療、
（ｇ）脂質異常症の予防および／または治療、総血清脂質の低下；ＨＤＬの増加；小さく密度の高いＬＤＬの低下；ＶＬＤＬの低下；トリグリセリの低下；コレステロールの低下；ヒトにおけるリポタンパク質ａ（Ｌｐ（ａ））の血漿レベルの低下；インビトロおよび／またはインビボでのアポリポタンパク質ａ（ａｐｏ（ａ））の生成の阻害などの脂質パラメータの改善、
（ｈ）シンドロームＸ、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、冠動脈心疾患、再灌流障害、脳卒中、低酸素症、脳虚血、早期心疾患または早期心血管疾患、左心室肥大、冠動脈疾患、高血圧症、本態性高血圧症、急性高血圧緊急症、心筋症、心不全、運動不耐性、急性および／もしくは慢性心不全、不整脈、心不整脈、失神、狭心症、心臓バイパスおよび／もしくはステント再閉塞、間欠性跛行（閉塞性動脈硬化症）、拡張不全、および／もしくは収縮不全；ならびに／または収縮期血圧の低下などの血圧の低下などの心血管疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉ）炎症性腸疾患、短腸症候群、またはクローン病もしくは大腸炎などの胃腸疾患；消化不良、および／もしくは胃潰瘍；ならびに／または乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、および／もしくは全身性エリテマトーデスなどの炎症の予防および／もしくは治療、
（ｊ）重症患者、重症疾患多発ニューロパチー（ＣＩＰＮＰ）患者、および／もしくは潜在的なＣＩＰＮＰ患者の治療などの重症疾患の予防および／もしくは治療；重症疾患もしくはＣＩＰＮＰの発症の予防；患者における全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）の予防、治療、および／もしくは治癒；入院中に菌血症、敗血症、および／もしくは敗血症性ショックに罹患する患者の可能性の予防もしくは減少；ならびに／または急性疾患の集中治療室患者における血糖、インスリンバランス、および任意に代謝の安定、
（ｋ）多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）の予防および／または治療、
（ｌ）脳虚血、脳出血、および／または外傷性脳損傷などの脳疾患の予防および／または治療、
（ｍ）睡眠時無呼吸の予防および／または治療、
（ｎ）アルコール乱用および／または薬物乱用などの乱用の予防および／または治療、
（ｏ）脂肪性肝疾患（ＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を含むがこれらに限定されない脂肪性肝疾患の予防もしくは治療、ならびに／または
（ｐ）活性酸素種（ＲＯＳ）の細胞内産生の治療。

さらなる態様では、治療を必要とする患者に有効量のペプチドを投与することによって糖尿病および／または糖尿病関連合併症を治療するための方法が本明細書に提供される。有利には、本明細書に提供される方法に従って糖尿病および／または関連合併症を治療するために使用されるペプチドは、膵臓β細胞に対する抗アポトーシス活性を有し、かつ／またはその増殖を刺激し、ペプチドを投与するとインスリン産生β細胞の数および患者によって産生されるインスリンのレベルが増加する。

本開示はまた、治療を必要とする対象に有効量のペプチドまたはその類似体もしくはバリアントを投与することを含む、がんを治療する方法を含む。本明細書で提供されるペプチドは、様々な抗がん効果を発揮し、広範囲のがんおよび他の増殖性障害を治療するために使用することができる。本明細書で提供されるペプチドは、がん細胞におけるアポトーシスの誘導、腫瘍血管新生の阻害、腫瘍転移の阻害、細胞周期の調節、がん細胞増殖の阻害、がん細胞分化の促進、活性酸素種の産生の阻害および／または活性酸素種からの保護、およびストレス耐性の強化などの様々な抗がん活性を有することができる。「がん」は一般に、制御されない異常な細胞成長および増殖を特徴とする疾患を指す。「腫瘍」または「新生物」は、過剰な、制御されない、および進行性の細胞分裂に起因する組織の異常な塊である。本明細書に記載される方法は、がん、肉腫、軟部組織肉腫、リンパ腫、血液がん、白血病、胚細胞腫瘍、および固形腫瘍のないがん（例えば、造血器がん）を含むがこれらに限定されない任意の種類のがんおよび増殖性障害の治療に有用である。様々な態様では、ペプチドは、肺、乳房、上皮、大腸、直腸、睾丸、膀胱、甲状腺、胆嚢、胆管、胆道、前立腺、結腸、胃、食道、膵臓、肝臓、腎臓、子宮、子宮頸部、卵巣、および脳組織を含むがこれらに限定されない任意の組織に由来するおよび／または影響を与えるがんおよび／または腫瘍を治療するために使用され得る。ペプチドで治療可能な特定のがんの非限定的な例には、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、副腎皮質がん、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、肛門がん、星状細胞腫、大脳基底細胞がん、胆管がん、肝外膀胱がん、膀胱がん、骨がん、骨肉腫／悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、脳幹神経膠腫、星状細胞腫／悪性神経膠腫、上衣腫、髄芽腫、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、視覚路および視床下部神経膠腫、乳がん、男性気管支腺腫／カルチノイド、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、原発不明の中枢神経系リンパ腫の消化管がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性疾患、結腸がん、結腸直腸がん、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉症およびとセザリー症候群、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、ユーイング家族腫瘍、胚細胞腫瘍、肝外胆管がん、眼がん、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、胆嚢がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（ｓｔｏｍａｃｈ））がん、消化管カルチノイド腫瘍、卵巣妊絨毛性腫瘍、神経膠腫、視床下部皮膚がん（黒色腫）、皮膚がん（非黒色腫）、皮膚がん、小細胞肺がん、小腸がん、軟部組織肉腫、扁平上皮がん、原発不明の扁平上皮頸部がん、転移性胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、Ｔ細胞リンパ腫、精巣がん、胸腺腫、胸腺がん、甲状腺がん、腎盂の移行上皮がん、尿管絨毛腫瘍、移行細胞がん、尿道がん、子宮がん、子宮肉腫、膣がん、視床下部神経膠腫、外陰がん、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、ウィルムス腫瘍、有毛細胞白血病、頭頸部がん、肝細胞（肝臓）がん、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、膵島細胞がん（内分泌膵臓）、カポジ肉腫、腎臓（腎細胞）がん、腎臓がん、喉頭がん、有毛細胞口唇がんおよび口腔がん、肝臓がん、肺がん、非小細胞肺がん、小細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ウォルデンストレーム骨の悪性線維性組織球腫／骨肉腫、髄芽腫、眼内（眼）メルケル細胞がん、中皮腫、悪性中皮腫、原発不明の転移性扁平上皮頸部がん、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、多発性骨髄増殖性疾患、慢性鼻腔および副鼻腔がん、鼻咽頭がん、胸膜肺芽細胞腫、骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫、褐色細胞腫、松果体芽腫、およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの好ましい態様では、がんは、乳がんである。いくつかの好ましい態様では、がんは、前立腺がんである。

いくつかの態様では、本明細書に提供される方法に従ってペプチドを投与することは、確立されたがん療法の効力を強化する。さらなる態様では、本明細書に提供される方法に従ってペプチドを投与することは、放射線療法または化学療法などの別のがん療法の抗がん活性を強化する。いくつかの態様では、がん細胞および／または腫瘍細胞において細胞死を誘導するための方法が本明細書で提供され、方法は、がん細胞死および／または腫瘍細胞死を誘導するのに十分な量で本明細書に記載のペプチドを投与することを含む。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、１つ以上の細胞保護活性または細胞保護性活性を有する。例えば、いくつかの態様では、ペプチドは、細胞損傷を防止し、細胞生存を改善し、かつ／または限定されないが、熱ショック、血清離脱、化学療法、および／もしくは放射線などの環境ストレスに対する耐性を強化することができる。

いくつかの態様では、本明細書で提供される方法に従ってペプチドを投与することにより、確立されたがん療法の副作用が減少する。

本明細書に開示される方法は、神経保護、ＣＮＳの組織または細胞、特にニューロン、グリア細胞、または内皮細胞のいずれかの完全性または機能に関連する状態を、そのような組織もしくは細胞に、または血液脳関門の完全性にさもなければ損傷を与える状態、疾患、または事象から治療することを含む。そのような神経保護は、そのような状態、疾患、または事象によって引き起こされるそのような組織または細胞にさもなければ発生するであろう損傷を予防、軽減、または治療するのに役立つ。そのような方法には、外傷性脊髄損傷、外傷性脳損傷、多発性硬化症、末梢神経損傷、および虚血性または出血性脳卒中の治療が含まれる。

特に、ペプチドは、白血球を抑制から保護し、生殖細胞を化学療法剤によって誘発される細胞死から保護し、化学療法剤によって誘発される生殖能力の低下または減少を阻害するのに有効であり得る。

例えば、いくつかの態様では、本明細書で提供される方法に従ってペプチドを投与することは、放射線または化学療法などの非特異的がん療法の悪影響から非がん性細胞を保護する。

いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるペプチドは、化学療法剤、放射線療法、抗感染剤、および／または他の治療法に関連する神経毒性などであるがこれらに限定されない、末梢神経系における神経毒性に対する神経保護活性を有する。例えば、本明細書で提供されるペプチドは、ビンカアルカロイド、白金化合物、スラミン、タキサン、および／または他の化学療法剤に関連する末梢神経毒性に対して神経保護活性を発揮し得る。

いくつかの実施形態では、ペプチドは、糖尿病、腎疾患、および／またはがんに罹患している対象の細胞などの、疾患関連細胞および／または刺激に対して細胞生存促進（例えば、抗アポトーシス）活性を示す。例えば、いくつかの態様では、ペプチドは、糖尿病の対象の膵臓β細胞および／または腫瘍細胞に対して抗アポトーシス活性を有する。

有利には、本明細書で提供される方法に従ってペプチドを投与することは、例えば、筋萎縮性側索硬化症対象においてＳＯＤ１変異体、アルツハイマー病の対象において変異体ＡＰＰ、ＰＳ－１、ＰＳ－２２、もしくはアミロイドベータ（Ａβ）ペプチド、および／またはハンチントン病の対象においてポリグルタミン反復変異によって誘導される細胞死を含む神経変性効果に対する保護効果を提供する。

いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるペプチドは、限定されないが糖尿病対象の膵臓β細胞などの疾患関連細胞に対して細胞増殖刺激活性を有する。

いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるペプチドは、疾患関連細胞に対して分化刺激活性を有する。例えば、いくつかの態様では、ペプチドは、脂肪細胞前部糖尿病患者のインスリン誘発性分化を刺激する。

いくつかの実施形態では、ペプチドは抗がん活性を有する。例えば、いくつかの態様では、ペプチドは、限定されないが前立腺がん細胞および／または乳がん細胞などのがん細胞に対してアポトーシス促進活性を有する。さらなる態様では、ペプチドは、限定されないが前立腺がん細胞および／または乳がん細胞などのがん細胞に対して抗増殖活性を有する。

さらに好ましい医学的用途は、変性障害、特にアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、運動失調、例えば、脊髄小脳失調症、ケネディ病、筋緊張性ジストロフィー、レビー小体型認知症、多系統性萎縮、筋萎縮性側索硬化症、原発性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、プリオン関連疾患、例えば、クロイツフェルト・ヤコブ病、多発性硬化症、毛細血管拡張症、バッテン病、大脳皮質基底核変性症、大脳皮質基底核変性症、脊髄の亜急性複合変性、脊髄癆、テイサックス病、中毒性脳症、乳児レフサム病、レフサム病、神経有棘赤血球症、ニーマン・ピック病、ライム病、マチャド・ジョセフ病、サンドホフ病、シャイ・ドレーガー症候群、ハリネズミふらつき症候群、プロテオパチー、脳βアミロイド血管症、緑内障における網膜神経節細胞変性、シヌクレイン病、タウオパチー、前頭側頭葉変性（ＦＴＬＤ）、認知症、カダシル症候群、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、アレクサンダー病、セイピノパシー（ｓｅｉｐｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ）、家族性アミロイド神経障害、老人性全身性アミロイドーシス、セルピノパシー、ＡＬ（軽鎖）アミロイドーシス（原発性全身性アミロイドーシス）、ＡＨ（重鎖）アミロイドーシス、ＡＡ（続発性）アミロイドーシス、大動脈中膜アミロイドーシス、ＡｐｏＡＩアミロイドーシス、ＡｐｏＡＩＩアミロイドーシス、ＡｐｏＡＩＶアミロイドーシス、フィンランド型の家族性アミロイドーシス（ＦＡＦ）、リゾチームアミロイドーシス、フィブリノーゲンアミロイドーシス、透析アミロイドーシス、封入体筋炎／ミオパチー、白内障、ロドプシン変異を伴う網膜色素変性症、甲状腺髄様がん、心房性アミロイドーシス、下垂体プロラクチノーマ、遺伝性格子状角膜ジストロフィー、皮膚苔癬アミロイドーシス、マロリー小体、角膜ラクトフェリンアミロイドーシス、肺胞タンパク症、歯原性（ピンボルグ）腫瘍アミロイド、嚢胞性線維症、鎌状赤血球病、または重症疾患ミオパチー（ＣＩＭ）の治療または予防を含む。特定の理論に限定されるものではないが、本明細書に提供されるペプチドは、神経細胞および／または他の細胞型の神経変性損傷を修復および／または予防することができる１つ以上の活性を有すると考えられる。本明細書に提供される方法に従って治療可能な「神経変性疾患」は、例えば神経細胞死（アポトーシス）に起因するニューロンの変性および／または喪失をもたらす進行性疾患である。神経変性疾患の例には、脳変性疾患（例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病、進行性核上性麻痺、およびハンチントン病（ＨＤ））、および脊髄変性疾患／運動ニューロン変性疾患（例えば、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、（ＳＭＡ：ウェルドニッヒ・ホフマン病またはクーゲルベルク・ヴェランダー症候群）、脊髄小脳失調症、球脊髄性筋萎縮症（ＢＳＭＡ；ケネディ・オルター・スン症候群））が挙げられるが、これらに限定されない。「運動ニューロン変性疾患」は、体の運動を制御する上位および下位運動ニューロンの進行性の逆行性障害を特徴とする神経変性疾患である。さらなる態様では、ペプチドおよびその組成物はまた、筋萎縮、筋力低下、球麻痺（顔面、咽頭および舌の筋萎縮または筋力低下、ならびにそれによって引き起こされる失語症または嚥下障害）、ならびに筋線維性攣縮、および呼吸障害などの運動ニューロン変性疾患に起因する状態を改善するのにも有効である。

さらなる使用は、ミトコンドリア機能障害に関連する疾患または状態の予防および治療を含む。代謝プロセスの中心となるミトコンドリアは、エネルギー産生、プログラム細胞死、および活性酸素種（ＲＯＳ）の生成に関与している。従来、ミトコンドリアは、エネルギー産生および細胞死を調節する膨大な量の細胞シグナルを受け取って処理する、「末端機能」オルガネラであるとみなされてきた。ペプチドおよびその医薬製剤は、多くの代謝的影響を伴う様々な加齢性疾患を治療するために使用することができる。またそれらは、ミトコンドリア呼吸、グルコース輸送、グルコース利用、解糖、インスリン調節、および細胞増殖／生存に影響を与えるように、ｉｎｖｉｔｒｏおよびｉｎｖｉｖｏの様々な方法で試験されてきた。ミトコンドリア機能障害は、限定されないが、代謝障害、神経変性疾患、慢性炎症性疾患、および老化の疾患に関連する。いくつかのミトコンドリア疾患は、ミトコンドリアゲノムの変異または欠失に起因する。ミトコンドリアは、それらの宿主細胞よりも速い代謝回転速度で分裂および増殖し、それらの複製は核ゲノムの制御下にある。細胞内のミトコンドリアの閾値比に欠陥がある場合、および組織内のそのような細胞の閾値比が欠陥のあるミトコンドリアを有する場合、結果として組織または器官の機能障害の症状が生じる可能性がある。実際には、あらゆる組織が影響を受ける可能性があり、異なる組織が関与する程度に応じて、多種多様な症状を呈し得る。遺伝性の欠陥のあるミトコンドリアに関与する先天性障害に加えて、後天性ミトコンドリア機能障害は、疾患、特にパーキンソン病、アルツハイマー病、およびハンチントン病のような加齢に関連する神経変性疾患の原因となる。ミトコンドリアＤＮＡにおける体細胞変異の発生率は、年齢とともに指数関数的に増加し、呼吸鎖活動の低下は、高齢者に広く見られる。ミトコンドリア機能障害は、発作または虚血に関連するものなどの興奮毒性ニューロン損傷にも関係している。ミトコンドリア機能障害に関連する他の障害は、慢性炎症性障害および代謝障害を含む。

細胞保護性のペプチドは、培養中の細胞の生存率を高めるための潜在的な有用性を有する。ペプチドは、タンパク質、抗体などを含む生物学的製品の製造に有用である。本開示は、一般に、ＣＨＯ細胞培養物、またはｅ．ｃｏｌｉ細胞培養物などの哺乳動物細胞培養物を含む、細胞培養物の１つ以上の特性を調節するためのペプチドおよびプロセスに関する。一実施形態では、培養培地中で哺乳動物細胞培養物を確立すること、細胞培養物をペプチドを含む培養培地と接触させること、および培養物をペプチドを含む培養培地と接触させることにより細胞培養物を維持することを含む、組換えタンパク質を発現する哺乳動物細胞培養物における特異的生産性を増加させる方法が提供される。

別の実施形態によれば、ペプチドは、他の既知の化学療法剤および／または抗炎症剤と同時投与または同時処方される。

ヒトアペリン受容体（ＡＰＪ）およびアペリンの両方が心臓血管制御、水分バランス、視床下部－下垂体－副腎（ＨＰＡ）軸制御、および代謝恒常性を含む複数の恒常性摂動に対する生理学的反応の主要なメディエーターとして関与している。アペリンの上昇したレベルは、心臓病、アテローム性動脈硬化症、腫瘍血管新生、脳虚血性損傷、糖尿病などの多くの病的状態または疾患プロセスで検出されている。アペリン作動性システムは、腫瘍の血管新生に関係している。アペリンアゴニストは、血管再生および内皮増殖ならびに血管径調節による虚血回復において治療効果を有し得る。それはまた、敗血症関連損傷、脳虚血事象、スロミビン関連凝集、およびＵＶＢ放射回復にも関連する。Ｔｉａｎｅｔａｌ，ＦｒｏｎｔｅｉｒｓｉｎＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，１１：７５（２０２０）、Ｓａｗａｎｅｅｔａｌ，ＡＪＰ，１７９（６），２６９１－２６９７（２０１１）、Ｌｕｏ，ｅｔａｌ．，Ｉｎｔ．ＪｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｅｄ．，４２，１１６１－１１６７（２０１８）、およびＡｄａｍｅｔａｌ．Ｂｌｏｏｄ，１２７，（７）９０８－９２０，Ｆｅｂ２０１６を参照されたい。

ＡＰＪは、視床下部ｐＰＶＮおよび下垂体前葉、ストレス反応に関与する重要な領域に局在する。ストレスに対するＨＰＡ軸応答に重要なＶＰおよびＣＲＨを含む視床下部核におけるＡＰＪならびにアペリンの存在は、神経腺下垂体ホルモン放出におけるアペリン／ＡＰＪの役割を示唆している。

アペリンおよびＡＰＪは、心臓血管制御および機能、血管新生、流体恒常性、水分バランス、視床下部－下垂体－副腎（ＨＰＡ）軸制御、代謝恒常性、エネルギー代謝、および腎臓機能などの複数の恒常性摂動に対する中枢および末梢反応の制御因子である。ＡＰＪ－アペリンシグナル伝達は、肺血管の恒常性の維持に役割を果たす（例えば、上記のＫｉｍを参照されたい）。証拠はまた、アペリン作動性システム（例えば、アペリンおよびＡＰＪ受容体）と、敗血症、敗血症性ショック、および腎不全などの状態の治療との間の関連を示している（例えば、Ｃｏｑｕｅｒｅｌ，Ｄ．，ｅｔａｌ．，ＣｒｉｔｉｃａｌＣａｒｅ２０１８，２２：１０を参照されたい）。別の例として、脂肪細胞によって合成および分泌されるアペリンは、有益なアディポカインとして記載されている。したがって、式Ｉ～ＩＩのペプチドは、肺高血圧症（例えば、ＰＡＨ）、心不全、ＩＩ型糖尿病、腎不全、敗血症、および全身性高血圧の治療として有効である。

本発明は、アペリン受容体（ＡＰＪ）の一連の強力なアゴニストの発見に基づいている。さらなる態様では、本発明のペプチドは、アペリン媒介性疾患または障害の治療に使用される。さらなる態様では、本発明のペプチドは、心不全、慢性腎臓病、高血圧、および代謝障害を含む疾患の治療に使用される。

本発明の一態様は、対象においてアペリン媒介性疾患もしくは障害を予防または治療する方法であって、本明細書に列挙されるペプチドを対象に投与することを含み、それにより、疾患もしくは障害を予防または治療することも本明細書で提供する、方法である。

さらなる態様では、疾患または障害は、ＣＮＳ依存性またはＣＮＳ非依存性の流体恒常性障害、急性もしくは慢性腎不全、高血圧症、肺高血圧症、門脈圧亢進症、または収縮期高血圧症によって引き起こされる。

他の態様では、疾患または障害は、血管疾患または障害、血管透過性、非機能性血管、血管肥大、血管リモデリング、血管硬化、アテローム性動脈硬化症、末梢動脈閉塞性疾患（ＰＡＯＤ）、再狭窄、血栓症、血管透過性障害、虚血、再灌流傷害、心臓、腎臓、もしくは網膜の虚血または再灌流傷害、またはそれらの組み合わせである。

特定の態様では、疾患または障害は、血栓症またはトロンビン媒介性血小板凝集である。本アペリンアゴニストは、止血および血小板機能の制御を維持するために使用することができる。アゴニストは、トロンビン媒介性およびコラーゲン媒介性血小板活性化を阻害することができる。本発明のペプチドは、抗凝集剤および抗血栓剤である。本発明のペプチドは、血小板凝集およびトロンビン媒介性事象の予防に有用である。

特定の態様では、疾患または障害は、心血管疾患または障害、冠状動脈性心臓病、脳卒中、心不全、収縮期心不全、拡張期心不全、糖尿病性心不全、駆出率が保存された心不全、心筋症、心筋梗塞、左心室機能不全、心筋梗塞後の左心室機能不全、心肥大、心筋リモデリング、梗塞後の心筋リモデリング、心臓手術後の心筋リモデリング、または心臓弁膜症である。

他の態様では、疾患または障害は、代謝性疾患または障害、代謝症候群、インスリン抵抗性、真性糖尿病、糖尿病性後期合併症、糖尿病性大血管障害および微小血管障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害または心臓自律神経障害である。

さらなる態様では、本発明は、高血圧症、内皮機能障害、心血管組織への損傷、心不全、冠状動脈性心臓病、虚血性および／または出血性脳卒中、大血管疾患、微小血管疾患、糖尿病性心臓（糖尿病性心筋症および糖尿病性合併症としての心不全を含む）冠状動脈性心臓病、末梢動脈疾患、末梢動脈閉塞性疾患、子癇前症、抵抗性高血圧、難治性高血圧、高血圧緊急症、血液または胎児－胎盤循環、浮腫性疾患、肺機能障害、急性肺損傷（ＡＬＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、外傷および／または火傷、および／または人工呼吸器誘発肺損傷（ＶＩＬＩ）、肺線維症、高山病、慢性腎臓病、急性腎障害、リンパ浮腫、リンパ管再生、炎症性腸疾患、炎症性疾患、または血管機能障害に関連する眼障害、局所創傷、片頭痛、血管新生、軟骨の変性、変形性関節症、およびがんから選択される疾患もしくは障害を治療および／または予防する方法を含む。

さらなる態様では、ＡＰＪアゴニストは、血管外肺水分蓄積、毛細血管－肺胞漏出、および低酸素血症を減少させる。さらなる態様では、ＡＰＪアゴニストは、複数の恒常性摂動に対する中枢および末梢反応の主要な制御因子として作用する。さらなる態様では、ＡＰＪアゴニストは、血管新生、体液恒常性またはエネルギー代謝を制御する。さらなる態様では、ＡＰＪアゴニストは、ストレスに対するＦＩＰＡ軸応答の神経内分泌修飾因子として作用する。さらなる態様では、ＡＰＪアゴニストは、心血管機能に利益をもたらす。

本明細書で使用される「アペリン媒介性疾患または障害」という用語は、アペリンによって媒介される任意の疾患または障害を含む。アペリン媒介性疾患または障害の例には、心血管疾患または障害、冠状動脈性心臓病、脳卒中、心不全、収縮期心不全、拡張期心不全、糖尿病性心不全、駆出率が保存された心不全、心筋症、心筋梗塞、左心室機能不全、心筋梗塞後の左心室機能不全、心肥大、心筋リモデリング、梗塞後の心筋リモデリング、心臓手術後の心筋リモデリング、心臓弁膜症；代謝性疾患または障害、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、真性糖尿病、糖尿病性後期合併症、糖尿病性大血管障害および微小血管障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性ニューロパチー、心臓自律神経障害；ＣＮＳ依存性またはＣＮＳ非依存性の体液恒常性障害、急性または慢性腎不全、高血圧、肺高血圧症、門脈圧亢進症、収縮期高血圧症によって引き起こされる疾患または障害；血管疾患または血管障害、血管透過性、非機能性血管、血管肥大、血管リモデリング、血管硬化、アテローム性動脈硬化症、末梢動脈閉塞性疾患（ＰＡＯＤ）、再狭窄、血栓症、血管透過性障害、虚血、再灌流傷害、虚血、心臓、腎臓、または網膜の再灌流傷害、またはそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。

一態様では、サイトカインが病原体自体によって誘導されたか、細胞のプライミングおよびその後の細菌感染の結果として誘導されたかにかかわらず、病原性感染を有する対象におけるサイトカインストームの発生率を低減できる治療法が開示される。

本発明のペプチドは、治療有効量の式Ｉ～ＩＩのペプチド、または薬学的に許容される塩、またはそれらを必要とする対象に投与することにより、ヒトまたは他の動物における細菌感染の治療および／または予防に有用である。本発明のペプチドおよび方法は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒｂａｕｍａｎｎｉｉ、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａを含む病原体に感染したヒト患者に特に好適である。

細菌感染症の例には、上気道感染症、下気道感染症、耳の感染症、胸膜肺および気管支の感染症、複雑な尿路感染症、無併発性尿路感染症、腹腔内感染症、心血管感染症、血流感染症、敗血症、細菌血症、ＣＮＳ感染症、皮膚および軟部組織感染症、ＧＩ感染症、骨および関節感染症、生殖器感染症、眼感染症、または肉芽腫性感染症が含まれるが、これらに限定されない。特定の細菌感染症の例には、無併発性皮膚および皮膚構造感染症（ｕＳＳＳＩ）、複雑性皮膚および皮膚構造感染症（ｃＳＳＳＩ）、カテーテル感染症、咽頭炎、副鼻腔炎、外耳炎、中耳炎、気管支炎、蓄膿症、肺炎、市中観戦肺炎（ＣＡＢＰ）、院内感染肺炎（ＨＡＰ）、院内感染細菌性肺炎、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）、糖尿病性足感染症、バンコマイシン耐性腸球菌感染症、膀胱炎および腎盂腎炎、腎結石、前立腺炎、腹膜炎、複雑性腹腔内感染症（ｃＩＡＩ）およびその他の腹腔内感染症、透析関連腹膜炎、内臓膿瘍、心内膜炎、心筋炎、心膜炎、輸血関連敗血症、髄膜炎、脳炎、脳膿瘍、骨髄炎、関節炎、陰部潰瘍、尿道炎、膣炎、子宮頸管炎、歯肉炎、結膜炎、角膜炎、眼内炎、嚢胞性線維症患者の感染症、または発熱性好中球減少症患者の感染症が含まれるが、これらに限定されない。

本明細書に開示される一態様は、敗血症の治療、予防、阻害、発生率の低下、改善、もしくは緩和、またはそれらの任意の組み合わせを必要とする患者においてそれを行う方法であって、初期アポトーシス細胞性集団を含む組成物を該対象に投与するステップを含み、該投与することが、該対象における敗血症を治療、予防、阻害、発生率を低下、改善、または軽減する、方法である。

関連する態様では、敗血症は、軽度または重度の敗血症を含む。いくつかの実施形態では、敗血症の原因は、肺炎、血管内メチシリン耐性黄色Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）感染症、敗血症誘発性心筋症、または尿路感染症（ＵＴＩ）を含む。

別の関連する態様では、方法は、該対象の増加した生存をもたらす。別の関連する態様では、方法によって治療される対象における、臓器不全または臓器機能不全、または臓器損傷、またはそれらの組み合わせの発生率が減少する。さらに関連する態様では、臓器不全は、急性多臓器不全を含む。

本発明は、骨髄抑制およびマクロファージ活性の低減などの放射線および／または化学療法に関連する損傷および／または苦痛の治療および予防のための医薬品として式Ｉ～ＩＩのペプチドを使用する方法に関する。本発明は、式Ｉ～ＩＩのペプチドを放射線防護剤として使用する方法に関する。ペプチドは、ＵＶＢ照射による皮膚損傷の治療にも使用できる。

当業者は、ペプチドが生物学的に活性であるかを容易に決定することができる。例えば、アペリン／アペリン受容体経路を活性化する能力は、フォルスコリン、ＥＲＫリン酸化によって、およびアペリン受容体の内在化に向けて（例えば、実施例に記載されるように）誘導されるｃＡＭＰ産生の阻害を評価することによって決定することができる。ＡＰＪに対するアペリン類似体のアゴニスト活性は、当技術分野で周知の任意の方法によって決定することができる。例えば、本発明のペプチドは、アペリン受容体の機能を促進することができるので、競合結合試験および生物活性に関連する試験において、ＡＰＪの天然アゴニストであるアペリンを使用することによって、アゴニストをスクリーニングすることができる。

したがって、当業者は、本明細書に提供される開示に基づいて、用量および投与レジメンが治療分野で周知の方法に従って調整されることを理解するであろう。すなわち、最大耐量を容易に確立することができ、対象に検出可能な治療効果を提供するための各薬剤を投与するための時間的要件と同様に、対象に検出可能な治療効果を提供する有効量も決定することができる。したがって、ある特定の用量および投与レジメンが本明細書で例示されているが、これらの例は、本開示を実施する際に対象に提供され得る用量および投与レジメンを決して限定しない。

投与量の値は、緩和されるべき状態の種類および重症度に応じて変動してもよく、単回投与または複数回投与を含み得ることに留意されたい。特定の対象については、個々の必要性および組成物の投与を管理または監督する人の専門的判断に従って、特定の投与レジメンを経時的に調整する必要があり、本明細書に記載の投与量範囲は例示であることをさらに理解されたいクレームされた組成物の範囲または実施を制限することを意図したものではない。さらに、本開示の組成物を用いた投与レジメンは、疾患の種類、対象の年齢、体重、性別、病状、状態の重症度、投与経路、および使用される特定のペプチドを含む、様々な要因に基づき得る。したがって、投与レジメンは大きく異なり得るが、標準的な方法を使用して日常的に決定され得る。例えば、用量は、薬物動態学的または薬力学的パラメータに基づいて調整することができ、これには毒性効果および／または検査値などの臨床効果が含まれる場合がある。したがって、本開示は、当業者によって決定される対象内の用量漸増を包含する。適切な投与量およびレジメンの決定は、関連技術分野で周知であり、本明細書に開示される教示が提供されれば、当業者に包含されると理解されるであろう。

本開示のペプチドの用量はまた、本開示の特定のペプチドの投与に伴う可能性がある任意の有害な副作用の存在、性質および程度によって決定され。通常、主治医は、年齢、体重、一般的な健康、食事、性別、投与される本開示のペプチド、投与経路、および治療されている状態の重症度などの様々な要因を考慮して、個々の患者を治療する本開示のペプチドの投与量を決定する。例として、限定的であることを意図するものではないが、本開示のペプチドの用量は、約０．０００１～約１００ｍｇ／治療される対象の体重１ｋｇ／日、約０．００１～約１０ｍｇ／体重１ｋｇ／日、または約０．０１ｍｇ～約１ｍｇ／体重１ｋｇ／日であり得る。ペプチドは、１～３用量などの１回以上の用量で投与することができる。

いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、本明細書に開示される類似体のいずれかを、患者への投与に適した純度レベルで含む。いくつかの実施形態では、類似体は、少なくとも約９０％、好ましくは約９５％を超える、より好ましくは約９９％を超える純度レベル、および薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤を有する。

薬学的組成物は、生理学的に適合するｐＨを達成するように製剤化され得る。いくつかの実施形態では、薬学的組成物のｐＨは、製剤および投与経路に応じて、少なくとも５、または少なくとも６、または少なくとも７であり得る。

様々な実施形態では、単回または複数回投与の薬学的組成物は、対象が必要および忍容性を示す投与量および頻度に応じて投与される。いずれにしても、組成物は、対象を効果的に治療するのに十分な量の本明細書に開示されるペプチドの少なくとも１つを提供する必要がある。投与量は１回投与できるが、治療結果が得られるか、または副作用が療法の中止を保証するかのいずれかまで、定期的に適用され得る。

ペプチド薬学的組成物の投与の投与頻度は、療法および治療される特定の疾患の性質に依存する。投与は、ペプチドの場合、１日１回、２回、３回または４回であってもよい。治療有効量のペプチドによる対象の治療は、単回治療を含むことができ、または好ましくは、一連の治療を含むことができる。好ましい例では、対象は毎日、週に１回または隔週でペプチドにより治療される。

ここで、本開示の実施形態を詳細に参照する。本開示の特定の実施形態が記載されるが、本開示の実施形態をそれらの記載される実施形態に限定することを意図するものではないことが理解される。反対に、本開示の実施形態への言及は、添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の実施形態の精神および範囲内に含まれ得る代替物、修正、および同等物を網羅することを意図する。

実施
以下に列挙される実施形態は、便宜上、および複数の実施形態に戻って参照する際の参照の容易さおよび明確さのために、番号付けした形式で提示される。

１．式Ｉのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘ^１－ＲＸ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｑ－Ｘ^７－Ｌ－Ｘ^８－Ｘ^９（Ｉ）（配列番号１）
Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有し、Ｘ^４が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^５が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^６が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^７が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^８が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有する、ペプチド、あるいは１、２、３、もしくは４アミノ酸の欠失、挿入、または置換を有する、該ペプチドの類似体、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩。

２．式中、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、式中、Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載のペプチドまたは類似体。

３．式中、Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１３Ｘ^１４Ｘ^１５であり、式中、Ｘ^１３が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖を有するアミノ酸であり、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載のペプチドまたは類似体。

４．Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、
Ｘ^２が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、
Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、
Ｘ^４が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^５が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^６が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^７が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^８が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は独立して、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１３Ｘ^１４から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１２が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１３が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載のペプチドまたは類似体。

５．式中、Ｘ^１が、Ｍ、Ｋ、または存在せず、Ｘ^２が、ＲまたはＡｉｂであり、Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｍ、Ｅ、－ＭＭＧ－、－ＩＩ（ｄＡ）－、－Ｎｌｅ－Ｎｌｅ－Ｇ－、もしくは－ＩＩＧ－であり、Ｘ^４が、Ｍ、Ｅ、Ｉ、またはＮｌｅであり、Ｘ^５が、Ｖ、Ａ、またはＧであり、Ｘ^６が、Ｆ、Ｙ、Ａ、またはＥであり、Ｘ^７が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、Ｘ^８が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、Ｘ^９が、－ＧＬ、－Ｇ（ｄＡ）、－Ｇ（ｄＡ）Ｋ、－（ｄＡ）Ｌ、Ｇ、または存在せず、そのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載のペプチドまたは類似体。

６．Ｘ^１が、（ＰＥＧ１２）－Ｋであり、かつ／またはＸ^９が、－Ｇ（ｄＡ）－Ｋ（ＰＥＧ１２）である、実施形態５に記載のペプチドまたは類似体。

７．表１のペプチド配列から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載のペプチドまたは類似体。

８．式ＩＩのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘ^１６－Ｍ－Ｍ－Ｇ－Ｍ－Ｘ^１７－（ＩＩ）（配列番号６４）
式中、Ｘ^１６が、存在しない、または存在する場合は、Ｒ－またはＲ－Ｒ－であり、Ｘ^１７が、存在しない、または存在する場合は、－Ｖ、－ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）から選択される、ペプチド、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩。

９．Ｘ^１６が、Ｒ－またはＲＲ－であり、Ｘ^１７が、ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）から選択され、あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、あるいはその薬学的に許容される塩である、実施形態８に記載のペプチド。

１０．ペプチドまたは類似体であって、ＭＭＧＭＶＦ（配列番号４７）、ＲＭＭＧＭＶＦＱ（配列番号５１）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳ（配列番号５２）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬ（配列番号５３）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号５４）、ＲＲＭＭＧＭＶＦ（配列番号５７）、アセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号６１）、ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６２）、およびアセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６３）から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、ペプチドまたは類似体、あるいはその薬学的に許容される塩。

１１．単離されたもしくは非天然型ペプチド、またはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～１０のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体。

１２．実施形態１～１１のいずれか１つに記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。

１３．ペプチドが、（ｉ）Ｄ配置を有するアミノ酸、および（ｉｉ）非天然型アミノ酸残基から選択される少なくとも１つのアミノ酸による置換を含むか、またはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～１１のいずれか１つに記載のペプチド類似体。

１４．ペプチドまたは類似体に結合した持続時間増強部分をさらに含み、任意に、ペプチドまたは類似体を持続時間増強部分にカップリングする代謝的に切断可能なリンカーをさらに含む、実施形態１～１３のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体。

１５．実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、組成物。

１６．賦形剤が、天然には見られない、実施形態１５に記載の組成物。

１７．実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体を含む、薬学的組成物。

１８．実施形態１～１１のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を投与することを含む、細胞生存率を調節する方法。

１９．がんの治療を必要とする患者においてがんを治療する方法であって、薬学的有効量の実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を患者に投与することを含む、方法。

２０．細胞増殖の治療を必要とする患者において細胞増殖を治療する方法であって、薬学的有効量の実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を患者に投与することを含む、方法。

２１．アポトーシス疾患の治療を必要とする患者においてアポトーシス疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を患者に投与することを含む、方法。

２２．代謝性疾患の治療を必要とする患者において代謝性疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を患者に投与することを含む、方法。

２３．細胞保護の治療を必要とする患者において細胞保護を提供する方法であって、薬学的有効量の実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体、あるいは実施形態１５～１７のいずれか１つに記載の組成物を患者に投与することを含む、方法。

２４．実施形態１～１４のいずれか１つに記載のペプチドまたは類似体をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。

２５．実施形態２４に記載の単離された核酸を含む、ベクターまたは発現ベクター。

２６．実施形態２４に記載の核酸、または実施形態２５に記載のベクターもしくは発現ベクターを含む、宿主細胞。

２７．実施形態２４に記載の核酸、実施形態２５に記載のベクターもしくは発現ベクター、または実施形態２６に記載の宿主細胞、および薬学的に許容される賦形剤を含む、組成物。

２８．代謝性疾患の治療を必要とする対象において代謝性疾患を治療する方法であって、代謝性疾患を治療するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

２９．疾患が、肥満、糖尿病（例えば、２型糖尿病）、認知障害および／または神経変性障害、心血管疾患、脂肪性肝疾患、ならびに胃腸疾患からなる群から選択される、実施形態２８に記載の方法。

３０．がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法であって、がんを治療するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

３１．がんが、肺がん、膵臓がん、乳がん、前立腺がん、卵巣がん、または肝細胞がんである、実施形態３０に記載の方法。

３２．肝疾患の治療を必要とする対象において肝疾患を治療する方法であって、肝疾患を治療するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

３３．肝疾患が、脂肪性肝疾患である、実施形態３２に記載の方法。

３４．脂肪性肝疾患が、ＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨである、実施形態３３に記載の方法。

３５．脂肪酸代謝の調節を必要とする対象において脂肪酸代謝を調節する方法であって、脂肪酸代謝を調節するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

３６．脂肪酸代謝が、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞が対象に投与された後に、対象において増加する、実施形態３５に記載の方法。

３７．減量を必要とする対象において減量を実施する方法であって、対象において減量を実施するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

３８．代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状の治療処置における、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞の使用。

３９．代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状を治療するための医薬品の製造における、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞の使用。

４０．代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状の治療処置において使用するための、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞。

４１．アペリン媒介性疾患または障害の治療を必要とする対象においてアペリン媒介性疾患または障害を治療する方法であって、アペリン媒介性疾患または障害を治療するのに有効な量の、実施形態１～１７および２４～２７のいずれか１つに記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を対象に投与することを含む、方法。

４２．疾患が、ＵＶＢ放射に関連している、実施形態４１に記載の方法。

４３．疾患または障害が、高血圧症、内皮機能障害、心血管組織への損傷、心不全、冠状動脈性心臓病、虚血性および／または出血性脳卒中、大血管疾患、微小血管疾患、糖尿病性心臓（糖尿病性心筋症および糖尿病性合併症としての心不全を含む）冠状動脈性心臓病、末梢動脈疾患、末梢動脈閉塞性疾患、子癇前症、抵抗性高血圧、難治性高血圧、高血圧緊急症、血液または胎児－胎盤循環、浮腫性疾患、肺機能障害、急性肺損傷（ＡＬＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、外傷および／または火傷、および／または人工呼吸器誘発肺損傷（ＶＩＬＩ）、肺線維症、高山病、慢性腎臓病、急性腎障害、リンパ浮腫、リンパ管再生、炎症性腸疾患、炎症性疾患、または血管機能障害に関連する眼障害、局所創傷、片頭痛、腫瘍、転移、血管新生、軟骨の変性、変形性関節症、およびがんから選択される、実施形態４１に記載の方法。

４４．疾患が、敗血症または敗血症性ショックである、実施形態４１に記載の方法。

４５．疾患が、血栓症または微小血栓症である、実施形態４１に記載の方法。

４６．疾患が、トロンビン関連凝集である、実施形態４１に記載の方法。

４７．疾患が、虚血性ショックである、実施形態４１に記載の方法。

４８．疾患が、臓器不全または多臓器不全である、実施形態４１に記載の方法。

本ペプチドとその使用が説明されているが、以下の実施例は例示として提示され、限定するものではない。

実施例１－合成
本ペプチドは、特に明記しない限り、以下に記載のものと同様の方法によって、ｔ－ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学または他の技術（例えば、ＳｔｅｗａｒｔａｎｄＹｏｕｎｇ，ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＩＩ．，１９８４、Ｅ．ＡｔｈｅｒｔｏｎａｎｄＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ．ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ－ＩＲＬＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８９、ＧｒｅｅｎｅａｎｄＷｕｔｓ，“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９９、ＦｌｏｒｅｎｃｉｏＺａｒａｇｏｚａＤｏｒｗａｌｄ，“ＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｎｓｏｌｉｄＰｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨＶｅｒｌａｇＧｍｂＨ，２０００、および“ＦｍｏｃＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，ＥｄｉｔｅｄｂｙＷ．Ｃ．ＣｈａｎａｎｄＰ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ，２０００を参照されたい）を使用して好適な樹脂上での固相合成を介して調製される。

固相合成を、Ｎ末端保護されたアミノ酸をそのカルボキシ末端とともに切断可能なリンカーを運ぶ不活性固体支持体に結合することによって開始する。この固体支持体は、開始アミノ酸、例えば、Ｐａｍ樹脂、トリチル樹脂、クロロトリチル樹脂、Ｗａｎｇ樹脂、またはＲｉｎｋ樹脂のカップリングを可能にする任意のポリマーであり得、ここでカルボキシ基（またはＲｉｎｋ樹脂のカルボキサミド）の樹脂への結合は、酸に対して感受性である（Ｆｍｏｃ戦略を使用する場合）。ポリマー支持体は、ペプチド合成中にα－アミノ基を脱保護するために使用される条件下で安定している。最初のアミノ酸が固体支持体にカップリングされた後、このアミノ酸のα－アミノ保護基を除去する。次いで、残りの保護されたアミノ酸は、適切なアミドカップリング試薬、例えば、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール－１－イル－オキシ－トリス－（ジメチルアミノ）－ホスホニウム）、ＨＢＴＵ（２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチル－ウロニウム）、ＨＡＴＵ（Ｏ－（７－アザベンズトリアゾール－１－イル－オキシ－トリス－（ジメチルアミノ）－ホスホニウム）、またはＤＩＣ（Ν，Ν’－ジイソプロピルカルボジイミド）／ＨＯＢｔ（１－ヒドロキシベンゾトリアゾール）を使用してペプチド配列によって表される順番で次々に結合され、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、およびＨＡＴＵが第三級アミン塩基とともに使用される。あるいは、遊離したＮ末端は、アミノ酸以外の基、例えば、カルボン酸などで官能化することができる。通常、アミノ酸の反応性側鎖基は、好適なブロッキング基で保護されている。これらの保護基を、所望のペプチドが組み立てられた後に除去する。それらを、同じ条件下で樹脂からの所望の生成物の切断に付随して除去する。保護基および保護基を導入するための手順は、ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｄｅｄ．，Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（ＮｅｗＹｏｒｋ：１９９９）に見出され得る。いくつかの場合によっては、選択的に除去され得る側鎖保護基を有することが望ましい場合があるが、他の側鎖保護基はそのままである。この場合、遊離した官能性を選択的に官能化することができる。例えば、リジンは、非常に求核性の塩基、例えば、ＤＭＦ中の４％ヒドラジン（ジメチルホルムアミド）に対して不安定である、ｉｖＤｄｅ保護基（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａｅｔａｌ．，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．３９，（１９９８），１６０３）で保護され得る。したがって、Ｎ末端アミノ基およびすべての側鎖官能基が酸に不安定な保護基で保護されている場合、ｉｖＤｄｅ（［１－（４，４－ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘクス－１－イリデン）－３－メチルブチル）基は、ＤＭＦ中の４％ヒドラジンを使用して選択的に除去することができ、対応する遊離アミノ基は、次いで、例えば、アシル化によりさらに修飾することができる。あるいは、リジンを保護されたアミノ酸にカップリングし、次いで、このアミノ酸のアミノ基を脱保護して、アシル化またはさらなるアミノ酸に結合され得る別の遊離アミノ基を得ることができる。最後に、ペプチドを樹脂から切断する。これは、ＨＦまたはＫｉｎｇのカクテル（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ，Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｉｎｔ．Ｊ．ＰｅｐｔｉｄｅＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ．３６，１９９０，２５５－２６６）を使用することにより達成することができる。次いで、必要に応じて、原料を、クロマトグラフィー、例えば、分取ＲＰ－ＨＰＬＣによって精製することができる。

非天然アミノ酸および／または共有結合したＮ末端モノもしくはジペプチド模倣物を含むこれらのペプチド、類似体、または誘導体は、実験の部分に記載されているように産生され得る。または、例えば、Ｈｏｄｇｓｏｎｅｔａｌ：“Ｔｈｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌａｍｉｎｏａｃｉｄｓ”、およびＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙＲｅｖｉｅｗｓ，ｖｏｌ．３３，ｎｏ．７（２００４），ｐ．４２２－４３０を参照されたい。

ペプチドを、以下に言及されるペプチド合成に従って調製し、表１に示されるような配列は、特に明記しない限り、以下に言及される合成と同様に調製することができる。

ペプチド合成の方法の１つは、マイクロ波に基づくＬｉｂｅｒｔｙペプチド合成装置（ＣＥＭＣｏｒｐ．、ＮｏｒｔｈＣａｒｏｌｉｎａ）でのＦｍｏｃ化学によるものである。樹脂は、約０．２５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＴｅｎｔａｇｅｌＳＲＡＭ、または約０．４３ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ－ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ、または０．５～０．７５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬＡＭマトリックスである。カップリング化学は、０．３Ｍのアミノ酸溶液および６～８倍のモル過剰を使用する、ＮＭＰまたはＤＭＦ中のＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａである。カップリング条件は、最大７０℃で５分である。脱保護は、最大７０℃でＮＭＰ中の１０％ピペリジンを使用する。使用される保護されたアミノ酸は、標準のＦｍｏｃ－アミノ酸（例えば、ＡｎａｓｐｅｃまたはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍまたはＰｒｏｔｅｉｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから供給される）である。

ペプチド合成の別の方法は、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置（ＰｒｏｔｅｉｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｒｉｚｏｎａ）でのＦｍｏｃ化学によるものである。樹脂は、約０．２５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＴｅｎｔａｇｅｌＳＲＡＭ、または約０．４３ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ－ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ、または０．５～０．７５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬＡＭである。カップリング化学は、０．３Ｍのアミノ酸溶液および６～８倍のモル過剰を使用する、ＮＭＰまたはＤＭＦ中のＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａである。カップリング条件は、室温で１または２時間の単一または二重カップリングである。脱保護は、ＮＭＰ中の２０％ピペリジンを使用する。使用される保護されたアミノ酸は、標準のＦｍｏｃ－アミノ酸（例えば、ＡｎａｓｐｅｃまたはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍまたはＰｒｏｔｅｉｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから供給される）である。粗ペプチドを、５ｕｍまたは７ｕｍのいずれかのＣ－１８シリカを充填した２０ｍｍ×２５０ｍｍカラムでのセミ分取ＨＰＬＣなどにより精製する。ペプチド溶液をＨＰＬＣカラムにポンピングし、沈殿したペプチドを、５ｍｌの５０％酢酸Ｈ_２Ｏに溶解し、Ｈ_２Ｏで２０ｍｌに希釈し、次いで、４０℃で５０分間１０ｍｌ／分で、０．１％ＴＦＡ中４０～６０％のＣＨ_３ＣＮの勾配で溶出されるカラム上に注入する。ペプチド含有画分を収集する。精製されたペプチドを、溶出液を水で希釈した後、凍結乾燥する。

Ｃ末端アミドを含むすべてのペプチドを、特に明記されていない限り、以下に記載のものと同様の方法によって調製する。ＭＢＨＡ樹脂（４－メチルベンズヒドリルアミンポリスチレン樹脂を、ペプチド合成時に使用する。ＭＢＨＡ樹脂、１００～１８０メッシュ、１％ＤＶＢ架橋結合ポリスチレン、０．７～１．０ｍｍｏｌ／ｇの負荷）、Ｂｏｃ保護およびＦｍｏｃ保護されたアミノ酸は、ＭｉｄｗｅｓｔＢｉｏｔｅｃｈから購入することができる。Ｂｏｃ保護されたアミノ酸を使用する固相ペプチド合成を、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍ４３０Ａペプチド合成装置で実行する。Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸合成を、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３３ペプチド合成装置を使用して実行する。

ペプチドの合成を、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍモデル４３０Ａペプチド合成装置で実行する。合成ペプチドを、２ｍｍｏｌのＢｏｃ保護されたアミノ酸を含むカートリッジにアミノ酸を連続的に添加することにより構築する。具体的には、ＢｏｃＤＥＰＢＴ－活性化単一カップリングを使用して合成を実施する。カップリングステップの最後に、ペプチジル樹脂をＴＦＡで処理して、Ｎ末端Ｂｏｃ保護基を除去する。ＤＭＦで繰り返し洗浄し、この繰り返しサイクルを所望のカップリングステップ数だけ繰り返す。組み立て後、側鎖保護であるＦｍｏｃを、２０％ピペリジン処理によって除去し、ＤＩＣを使用してアシル化を行った。合成全体の最後のペプチジル樹脂は、ＤＣＭを使用することによって乾燥させ、ペプチドを、無水ＨＦで樹脂から切断する。ペプチジル樹脂を無水ＨＦで処理し、これは、典型的には、約３５０ｍｇ（収率約５０％）の粗脱保護されたペプチドをもたらす。具体的には、ペプチジル樹脂（３０ｍｇ～２００ｍｇ）を切断のためにフッ化水素（ＨＦ）反応容器に入れる。５００μＬのｐ－クレゾールを、カルボニウムイオンスカベンジャーとして容器に添加した。容器をＨＦシステムに取り付けて、メタノール／ドライアイス混合物に浸す。容器を真空ポンプで真空にし、１０ｍｌのＨＦを反応容器に蒸留する。このペプチジル樹脂およびＨＦの反応混合物を、０℃で１時間撹拌し、その後、真空を確立し、ＨＦを迅速に真空にする（１０～１５分）。容器を慎重に取り出し、約３５ｍｌのエーテルで充填し、ペプチドを沈殿させ、ＨＦ処理から生じるｐ－クレゾールおよび小分子有機保護基を抽出する。この混合物を、テフロンフィルターを利用して濾過し、２回繰り返して、すべての過剰なクレゾールを除去する。この濾液を廃棄する。沈殿したペプチドを、約２０ｍｌの１０％酢酸（ａｑ）に溶解する。所望のペプチドを含んだこの濾液を収集し、凍結乾燥する。

実施例２－カスパーゼ３／７活性
細胞死／生存に対するペプチドの効果は、カスパーゼ－３アッセイを使用して評価することができる。ペプチドを１０ｍＭストックのＤＭＳＯで溶解した。スタウロスポリンを、カスパーゼ誘導の非常に強力な陽性対照として使用した。スタウロスポリン（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ）を１ｍＭストックのＤＭＳＯで溶解した。カスパーゼ－Ｇｌｏ３／７アッセイ試薬は、Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）から購入した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１ヒト乳がん細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ培地で培養した。１００μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを培地に加えた。培養物を、５％ＣＯ２および９５％空気の加湿雰囲気中で、３７℃で維持した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を、５％ＣＯ２および９５％空気の加湿雰囲気下で３７°Ｃ、１０μＭで１８時間、試験ペプチドと二重にインキュベートした。２５μｌのＣａｓｐａｓｅ－Ｇｌｏ３／７アッセイ試薬を各ウェルに加え、３７°Ｃ、５％ＣＯ２で１時間インキュベートした。プレート上の各サンプルウェルの発光を、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４ＭｕｌｔｉｌａｂｅｌＲｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，ＳａｎｔａＣｌａｒａ，ＣＡ）によって測定した。活性を、ＤＭＳＯ対照と比較して算出した。ＤＭＳＯ対照の相対標準偏差は、１％であった。スタウロスポリン（０．０５ｎＭ）処理のカスパーゼ活性は、バックグラウンド補正されたＤＭＳＯ対照値の１３０％であった。結果を表４に報告する。

実施例３－細胞生存率
ペプチドおよび参照化合物スタウロスポリン（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ）を１０ｍＭストックのＤＭＳＯで溶解した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓＯｎｅ溶液試薬（ＭＴＳアッセイ試薬）はＰｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）から購入した。ＭＣＦ－７ヒト乳がん細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。ＭＣＦ－７細胞は、１０％ＦＢＳおよび０．０１ｍｇ／ｍｌヒト組換えインスリンを補充したＥＭＥＭ培地で培養した。１００μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを培地に加えた。細胞を、５％ＣＯ２および９５％空気の加湿雰囲気下で３７°Ｃ、１０μＭで７２時間、試験ペプチドとインキュベートした。５μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓＯｎｅ溶液試薬（ＭＴＳアッセイ試薬）を各ウェルに加え、３７°Ｃ、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。４９２ｎｍでの吸光度を、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４ＭｕｌｔｉｌａｂｅｌＲｅａｄｅｒによって記録した。ＤＭＳＯ単独での処理を、細胞生存率活性対照として使用した。ＤＭＳＯ対照の相対標準偏差は、３％であった。スタウロスポリンを、細胞生存率を低下させるための非常に強力な陽性対照として使用した。スタウロスポリン（１０μＭ）処理の細胞生存率は、バックグラウンド補正されたＤＭＳＯ対照値の＜５％であった。結果を表５に報告する。

実施例４．培養マウス脂肪細胞における遊離脂肪酸レベル
マウス３Ｔ３－Ｌ１細胞を、前脂肪細胞培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ）の９６ウェルプレートにウェルあたり３，０００細胞で播種し、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でコンフルエンスまで増殖させた。コンフルエンスの２日後、細胞を脂肪細胞分化培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ）に入れ、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに３日間培養した。次いで、培養培地を脂肪細胞維持培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）と置き換え、細胞を、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに９～１２日間維持し、１日おきに部分的に培地を置き換えた。１２～１５日間の分化後、試験ペプチドを２５μＭの最終濃度で加え、脂肪細胞維持培地中で２０～２２時間インキュベートした。２０～２２時間後、イソプロテレノール（１ｎＭ）を未処理対照を除くすべてのウェルに添加し、試験ペプチドを補充した。細胞をアッセイ緩衝液（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）でさらに３時間インキュベートした。培地中の遊離脂肪酸濃度を、プレートリーダー（５４０ｎｍ）を使用する製造元の指示に従って、遊離脂肪酸アッセイキット（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）を使用して決定した。吸光度の値を、未処理のバックグラウンドに対して補正し、イソプロテレノール処理細胞と比較して表した。イソプロテレノール（１ｎＭ）単独での処理を、遊離脂肪酸レベル刺激対照として使用した。イソプロテレノール対照の相対標準偏差は、＜１０％であった。インスリンを、遊離脂肪酸レベルを低下させるための非常に強力な陽性対照として使用した。インスリン（１００ｎＭ）処理の遊離脂肪酸レベルは、イソプロテレノール対照値の＜５％であった。結果を表６に報告する。

実施例５．－ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞の細胞生存率
試験化合物および参照化合物スタウロスポリン（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ）をすべて、１０ｍＭストックのＤＭＳＯで溶解した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓＯｎｅ溶液試薬（ＭＴＳアッセイ試薬）はＰｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）から購入した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１ヒト乳がん細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、１０％ＦＢＳおよび０．０１ｍｇ／ｍｌヒト組換えインスリンを補充したＥＭＥＭ培地で培養した。１００μｇ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを培地に加えた。細胞を、５％ＣＯ２および９５％空気の加湿雰囲気下、３７°Ｃで７２時間、試験化合物とインキュベートした。５μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓＯｎｅ溶液試薬（ＭＴＳアッセイ試薬）を各ウェルに加え、３７°Ｃ、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。４９２ｎｍでの吸光度を、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４ＭｕｌｔｉｌａｂｅｌＲｅａｄｅｒによって記録した。活性を、ＤＭＳＯ対照と比較して算出した。ＤＭＳＯ単独での処理を、細胞生存率活性対照として使用した。ＤＭＳＯ対照の相対標準偏差は、３％であった。スタウロスポリンを、細胞生存率を低下させるための非常に強力な陽性対照として使用した。細胞生存率は、スタウロスポリン（１０μＭ）についてＤＭＳＯ対照値の３％であった。結果を表７に報告する。

実施例６－食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける代謝パラメータに対する効果
ＤＩＯマウス研究は、当該技術分野において周知の方法によって実施される。Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、高脂肪食で６～４８週間維持され、食餌誘発性肥満を発症する。動物は、血中グルコースレベルおよび／または体重に基づいて処置群にランダム化される。本発明のペプチドまたはビヒクル対照は、５～２１日間の腹腔内または皮下注射によって１日または１日２回投与される。体重、血中グルコースレベル、食物摂取量を監視する。グルコース耐性は、グルコース（１～３ｇ／ｋｇ）の腹腔内投与と、それに続く２時間にわたる血中グルコースレベルの測定によって評価される。本発明のペプチドの投与は、ビヒクル対照で処置された動物と比較した場合、より大きな体重減少、より大きな血中グルコースの減少、および改善されたグルコース耐性から選択される１つ以上の効果をもたらす。

実施例７－マウス異種移植モデル
マウス異種移植モデルは、当該技術分野において周知の方法によって作製される。例えば、ＳＣＩＤマウスにヒト腫瘍細胞（例えば、ＭＣＦ－７、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＣ－３など）を注射し、腫瘍成長を監視する。腫瘍が十分なサイズである場合、動物は処置群にランダム化され、本発明のペプチド、ビヒクル対照、陽性対照（例えば、ゲムシタビンまたはパクリタキセル）またはペプチドの組み合わせ＋陽性対照を毎日、隔日、または毎週投与される。腫瘍成長、体重、および生存を、１４～２８日間にわたって監視する。本発明のペプチドを単独でおよび／または陽性対照と組み合わせて投与すると、ビヒクル対照で処置された動物と比較した場合、腫瘍成長の減少および／または生存の延長がもたらされる。

実施例８－細胞毒性傷害からの細胞の保護
細胞（例えば、げっ歯類の脳細胞、げっ歯類またはヒトの神経由来細胞株などの初代培養物）は、当該技術分野において周知の方法によって培養される。細胞を本発明のペプチド、ビヒクル対照、または陽性対照で処理し、細胞を細胞毒性条件、例えば、グルタミン酸の添加、血清の除去、活性酸素種の生成、ベータアミロイドタンパク質の添加、細胞毒性剤（例えば、ＭＰＴＰ、スタウロスポリン、オリゴマイシンなど）への曝露、化学療法剤（例えば、シスプラチンなど）への曝露などに曝露する。細胞の生存は、当該技術分野において周知の方法によって測定される（例えば、細胞抽出物中の乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）活性の測定；細胞内ＡＴＰ、ＭＴＴ（３－（４，５－ジメチル－２－チアゾリル）－２，５－ジフェニル－２Ｈ－テトラゾリウムブロミド）アッセイの測定；ＭＴＳ（３（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－５－（３－カルボキシメトキシフェニル）－２（４－スルホフェニル）－２Ｈ－テトラゾリウム）アッセイ；トリパンブルー染色；カルセイン染色；など）。細胞毒性状態への曝露前および／または曝露中の本発明のペプチドによる細胞の処理は、ビヒクル対照で処理された細胞と比較した場合、細胞生存の増加をもたらす。

実施例９－活性酸素種のレベル
酸化ストレスによって誘発される活性酸素種（ＲＯＳ）の細胞レベルに対するペプチドの保護または相乗効果は、好適な酸化ストレスに曝露された培養細胞におけるＲＯＳのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯで１０ｍＭのストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で加えた。ｔｅｒｔ－ブチル過酸化水素（ＴＢＨＰ）を、ＲＯＳの非常に強力な誘導物質として使用する。ＴＢＨＰを１００μＭの最終濃度で使用する。５ｍＭの最終濃度のグルタチオンエチルエステル（ＧＥＥ）または１０μＭの最終濃度のスルフォラファンを、ＴＢＨＰ誘導性ＲＯＳ産生に対する保護対照として使用した。Ｃ２Ｃ１２マウス筋肉筋芽細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含む１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭで増殖させる。培養物は、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持される。Ｃ２Ｃ１２細胞を、９６ウェルプレートにウェルあたり７，５００細胞で播種する。播種の２日後、細胞を０．１％ＤＭＳＯ中の１０μＭの試験ペプチドまたは１０μＭのスルフォラファンとインキュベートし、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で１８～２０時間、３７℃で維持する。１８～２０時間のインキュベーション後、細胞にＤＣＦＤＡを４５分間ロードする。次いで、１００μＭのＴＢＨＰおよび５ｍＭのＧＥＥを適切なウェルに１時間加える。ＲＯＳ活性を、製造元の指示に従って、ＤＣＦＤＡＣｅｌｌｕｌａｒＲＯＳ検出アッセイキット（Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用して決定する。プレート上の各サンプルウェルの蛍光を、Ｅｘ／Ｅｍ＝４８５／５３５ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定する。活性を、ＴＢＨＰ対照と比較して算出する。本発明のペプチドを単独でおよび／または陽性対照と組み合わせて投与すると、ビヒクル対照で処理したものよりも、Ｃ２Ｃ１２細胞においてＴＢＨＰによって誘導される細胞性ＲＯＳレベルの増加または減少をもたらす。

実施例１０－食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける効果
ＤＩＯマウス研究は、当該技術分野において周知の方法によって実施される。Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、高脂肪食で６～４８週間維持され、食餌誘発性肥満を発症する。動物は、血中グルコースレベルおよび／または体重に基づいて処置群にランダム化される。本発明のペプチドまたはビヒクル対照は、５～２１日間の腹腔内または皮下注射によって１日または１日２回投与される。体重、血中グルコースレベル、食物摂取量を監視する。グルコース耐性は、グルコース（１～３ｇ／ｋｇ）の腹腔内投与と、それに続く２時間にわたる血中グルコースレベルの測定によって評価される。本発明のペプチドの投与は、ビヒクル対照で処置された動物と比較した場合、より大きな体重減少、より大きな血中グルコースの減少、および改善されたグルコース耐性から選択される１つ以上の効果をもたらす。

実施例１１－カスパーゼ３／７活性
細胞死／生存に対するペプチドの効果は、マウス筋芽細胞などの培養細胞でカスパーゼ－３／７アッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で使用した。スタウロスポリンを、カスパーゼ誘導の非常に強力な陽性対照として使用した。スタウロスポリン（Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を、ストック溶液としてＤＭＳＯに１０ｍＭで溶解した。カスパーゼ－Ｇｌｏ３／７アッセイ試薬は、Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含む２０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭで増殖させた。培養物は、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持された。Ｃ２Ｃ１２細胞を、９６ウェルプレートにウェルあたり４，０００細胞で播種した。翌日、細胞を１０μＭの試験ペプチドまたは１００ｎＭ～５ｎＭの濃度のスタウロスポリンとともに、最終濃度０．１％ＤＭＳＯを使用してインキュベートし、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で２４時間、３７℃で維持した。カスパーゼ３／７活性を、製造元の指示に従って、カスパーゼ－Ｇｌｏ３／７アッセイキットを使用して決定した。プレート上の各サンプルウェルの発光を、Ｃｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定した。活性を、０．１％ＤＭＳＯ対照と比較して算出した。ＤＭＳＯ対照の相対標準偏差は、＜１０％であった。スタウロスポリン（１００ｎＭ）処理のカスパーゼ３／７活性は、バックグラウンド補正されたＤＭＳＯ対照値の６７０％であった。結果を表８に報告する。

実施例１２－培養マウス脂肪細胞における遊離脂肪酸レベル
脂肪酸代謝に対するペプチドの効果は、マウス脂肪細胞などの培養細胞における遊離脂肪酸レベルのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で使用した。イソプロテレノールを、脂肪酸産生の非常に強力な誘導物質として使用した。ＺｅｎＢｉｏから購入したマウス３Ｔ３－Ｌ１細胞を、前脂肪細胞培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）の９６ウェルプレートにウェルあたり３，０００細胞で播種し、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でコンフルエンスまで増殖させた。コンフルエンスの２日後、細胞を脂肪細胞分化培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）に入れ、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに３日間培養した。次いで、培養培地を脂肪細胞維持培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）と置き換え、細胞を、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに９～１２日間維持し、１日おきに部分的に培地を置き換えた。分化の１２～１５日後、試験ペプチドを０．１％ＤＭＳＯ中の最終濃度１０μＭで添加し、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃で、脂肪細胞維持培地で２０～２２時間インキュベートした。２０～２２時間後、１ｎＭイソプロテレノールを未処理対照を除くすべてのウェルに添加し、試験ペプチドを補充した。対照ウェルに１００ｎＭでインスリンを添加した。細胞を、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃で、アッセイ緩衝液（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）で３時間インキュベートした。５４０ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用する製造元の指示に従って、培地中の遊離脂肪酸濃度を、遊離脂肪酸アッセイキット（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）を使用して決定した。吸光度の値を、未処理のバックグラウンドに対して補正し、イソプロテレノール処理細胞と比較して表した。イソプロテレノール（１ｎＭ）単独での処理を、遊離脂肪酸レベル刺激対照として使用した。イソプロテレノール対照の相対標準偏差は、＜１０％であった。インスリンを、遊離脂肪酸レベルを低下させるための非常に強力な陽性対照として使用した。インスリン（１００ｎＭ）処理の遊離脂肪酸レベルは、イソプロテレノール対照値の＜５％であった。結果を表９に報告する。

実施例１３－ＡＴＰレベル
細胞代謝に対するペプチドの効果は、マウス筋芽細胞などの培養細胞におけるＡＴＰレベルのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で使用した。ロバスタチンを、細胞成長／増殖を阻害するための非常に強力な対照として使用し、ＡＴＰレベルの低下をもたらした。ロバスタチンを、７０％エタノール中の１０ｍＭストックとして調製し、０．１％ＤＭＳＯを含む１０μＭの最終濃度で使用した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）アッセイキットは、Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含む２０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ培地で増殖させた。培養物は、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持された。Ｃ２Ｃ１２細胞を、９６ウェルプレートにウェルあたり８００細胞で播種した。次の３日間のそれぞれについて、細胞を、０．１％ＤＭＳＯ中の１０μＭ濃度の試験ペプチドまたはロバスタチンとインキュベートし、２４時間間隔でのペプチド／ロバスタチンの再添加を伴って５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持した。ＡＴＰレベルを、製造元の指示に従って、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏアッセイキットを使用して決定した。プレート上の各サンプルウェルの発光を、Ｃｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定した。活性を、０．１％ＤＭＳＯ処理対照と比較して算出した。０．１％ＤＭＳＯ処理対照の結果の相対標準偏差は、＜５％であった。ロバスタチンを、ＡＴＰレベルを低下させるための非常に強力な陽性対照として使用した。ロバスタチン（１０μＭ）で処理したＡＴＰレベルは、０．１％ＤＭＳＯ処理対照値の＜５０％であった。結果を表１０に報告する。

実施例１４－細胞増殖
細胞増殖に対するペプチドの効果は、マウス筋芽細胞などの培養細胞におけるＤＮＡ色素結合アッセイを使用して評価した。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で加えた。ロバスタチンを、１０μＭの最終濃度で成長停止対照として使用した。Ｃ２Ｃ１２マウス筋肉筋芽細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含む２０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭで増殖させた。培養物は、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持された。Ｃ２Ｃ１２細胞を、９６ウェルプレートにウェルあたり８００細胞で播種した。翌日、細胞を、０．１％ＤＭＳＯ中の１０μＭの試験ペプチドまたはロバスタチンとインキュベートし、２４時間間隔でのペプチド／ロバスタチンの再添加を伴って５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で、３７℃で７２時間維持した。細胞増殖は、ＣｙｑｕａｎｔＤｉｒｅｃｔＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＳｔａｉｎ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を製造元の指示に従って使用して決定した。プレート上の各サンプルウェルの蛍光を、Ｅｘ／Ｅｍ＝４９５／５３５ｎｍ（ＢｉｏＴｅｋ，Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，ＶＴ）でＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダーを使用して測定した。活性を、０．１％ＤＭＳＯ未処理対照と比較して算出した。ロバスタチン対照の相対標準偏差は＜２７％であった。ロバスタチン対照の細胞増殖は、未処理対照の値の＜２５％であった。結果を表１１に示す。

実施例１５－活性酸素種のレベル
酸化ストレスによって誘発される活性酸素種（ＲＯＳ）の細胞レベルに対するペプチドの保護または相乗効果は、好適な酸化ストレスに曝露されたマウス筋芽細胞などの培養細胞におけるＲＯＳのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、Ｈ２Ｏで１ｍＭに希釈し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で加えた。ｔｅｒｔ－ブチル過酸化水素（ＴＢＨＰ）を、ＲＯＳの非常に強力な誘導物質として使用する。ＴＢＨＰを１００μＭの最終濃度で使用した。１０μＭの最終濃度のスルフォラファンを、ＴＢＨＰ誘導性ＲＯＳ産生に対する保護対照として使用した。Ｃ２Ｃ１２マウス筋肉筋芽細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含む２０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭで増殖させた。培養物は、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に維持された。Ｃ２Ｃ１２細胞を、９６ウェルプレートにウェルあたり７，５００細胞で播種した。播種の２日後、細胞を０．１％ＤＭＳＯ中の１０μＭの試験ペプチドまたは１０μＭのスルフォラファンとインキュベートし、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で１８～２０時間、３７℃で維持する。１８～２０時間のインキュベーション後、細胞にＤＣＦＤＡを４５分間ロードする。次いで、１００μＭのＴＢＨＰを適切なウェルに１時間添加する。ＲＯＳ活性を、製造元の指示に従って、ＤＣＦＤＡＣｅｌｌｕｌａｒＲＯＳ検出アッセイキット（Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用して決定した。プレート上の各サンプルウェルの蛍光を、Ｅｘ／Ｅｍ＝４８５／５３５ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定した。活性を、ＴＢＨＰ対照と比較して算出した。スルフォラファン対照の相対標準偏差は、＜２０％であった。ＴＢＨＰの存在下でスルフォラファン対照によって産生されたＲＯＳレベルは、ＴＢＨＰ対照の５２％であった。結果を表１２に報告する。

実施例１６－食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける代謝パラメータに対する効果
雄のＣ５７ＢＬ／６マウスは、高脂肪食を１８週間維持して、食餌誘発性肥満を発症させる。動物は、血中グルコースレベルおよび体重に基づいて処置群にランダム化された。本発明のペプチドを、５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で１０日間腹腔内注射することにより、雄ＤＩＯマウスの群に１日２回投与した（Ｎ＝治療群あたり８匹の動物）。雄ＤＩＯマウスの追加群（ｎ＝８）は、腹腔内注射によって１日２回投与されるビヒクル（水）のみを受けた。体重、血中グルコースレベル、食物摂取量を監視する。体重分布（脂肪対除脂肪）は、投与前および投与終了時に定量的全身ＮＭＲによって決定した。本発明のペプチドの投与は、ビヒクルのみで処置された動物と比較した場合、ベースライン値からのより大きな体重減少、より大きな血糖の低下、および脂肪量のより大きな減少をもたらした（表１３）。

実施例１７
培養マウス脂肪細胞における遊離脂肪酸レベルおよびインスリン依存性
脂肪酸代謝に対するペプチドの効果は、マウス脂肪細胞などの培養細胞によって産生される遊離脂肪酸レベルを監視するためのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、溶解度に基づいて、Ｈ２Ｏ中の１ｍＭストックに希釈するか、またはＨ２Ｏ中の１ｍＭストックとして直接のいずれかで、最終濃度１０μＭ（０～０．１％ＤＭＳＯ）で使用した。イソプロテレノールを、脂肪酸産生の非常に強力な誘導物質として使用した。ＺｅｎＢｉｏ（ＲｅｓｅａｒｃｈＴｒｉａｎｇｌｅＰａｒｋ，ＮＣ）から購入したマウス３Ｔ３－Ｌ１細胞を、前脂肪細胞培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）の９６ウェルプレートにウェルあたり３，０００細胞で播種し、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でコンフルエンスまで増殖させた。コンフルエンスの２日後、細胞を脂肪細胞分化培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）に入れ、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに３日間培養した。次いで、培養培地を脂肪細胞維持培地（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）と置き換え、細胞を、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃でさらに９日間維持し、１日おきに部分的に培地を置き換えた。分化の１２日後、培地をインスリンを含まない脂肪細胞維持培地と交換し、培養物を５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下で３７℃に置いた。分化の１３日目に、試験ペプチドを各ウェルに０～０．１％ＤＭＳＯ中の最終濃度１０μＭで直接添加し（培地の交換を伴わずに）、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で、３７℃で２０～２２時間インキュベートした。２０～２２時間後、培地を除去し、適切な化合物を含むアッセイ緩衝液（ＺｅｎＢｉｏ）と交換し、０．１ｎＭイソプロテレノールを未処理対照を除くすべてのウェルに加え、試験ペプチドを、０．２５ｎＭインスリンの非存在下または存在下、遊離脂肪酸産生の部分的阻害剤としての０．２５ｎＭインスリン、または遊離脂肪酸産生の非常に強力な阻害剤としての１０ｎＭインスリンのいずれか中で１０μＭで再適用した。細胞を、５％ＣＯ２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃で、アッセイ緩衝液（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）で３時間インキュベートした。３時間のインキュベーション後、各ウェルからの条件培地を、新しい９６ウェルプレートに移した。５４０ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用する吸光度測定を製造元の指示に従って、培地中の遊離脂肪酸濃度を、遊離脂肪酸アッセイキット（Ｚｅｎ－Ｂｉｏ）を使用して決定した。吸光度値は、１０μＭペプチド単独の場合は０．１ｎＭイソプロテレノール処理細胞（インスリンなし）、０．２５ｎＭインスリンの存在下での１０μＭペプチドの場合は０．２５ｎＭインスリン処理細胞（インスリンあり）に対する対照活性の割合として表した。イソプロテレノール（０．１ｎＭ）単独での処理を、遊離脂肪酸レベル刺激対照として使用した。イソプロテレノール対照の相対標準偏差は、＜１０％であった。１０ｎＭのインスリンを、遊離脂肪酸レベルを低下させるためのカスパーゼ誘導の非常に強力な陽性対照として使用した。インスリン（１０ｎＭ）処理の遊離脂肪酸レベルは、イソプロテレノール対照値の＜５％であった。データは、各データポイントを３回実行した２～３回の独立した実験からの平均値として表した。結果を表１６に報告する。

実施例１８
培養Ｃ２Ｃ１２細胞におけるグルコース利用およびインスリン依存性
グルコース恒常性に対するペプチドの効果は、マウス筋管などの培養細胞によるグルコース利用を監視するためのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、溶解度に基づいて、Ｈ２Ｏ中の１ｍＭストックに希釈するか、またはＨ２Ｏ中の１ｍＭストックとして直接のいずれかで、最終濃度１０μＭ（０～０．１％ＤＭＳＯ）で使用した。Ｃ２Ｃ１２マウス筋細胞株は、ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＳｉｇｍａ（ＳａｉｎｔＬｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入した。Ｃ２Ｃ１２細胞を標準培地（ＤＭＥＭ／低グルコース（１ｇ／Ｌ）＋１０％ウシ胎児血清＋抗生物質）に７，５００細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下で、３７℃でコンフルエンスになるまで増殖させた。プレーティングの３日後、培地を除去し、分化培地（ＤＭＥＭ／低グルコース（１ｇ／Ｌ）＋２％ウマ血清＋抗生物質）を加えた。培養物を５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下に３７℃で５日間置き、毎日培地を部分的に交換した。分化の５日後、培地を筋管培養物から除去し、アッセイ培地（ＤＭＥＭ／低グルコース（１ｇ／Ｌ）＋抗生物質）と交換した。培養物を、３７℃で５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下に５時間置いた。５時間のインキュベーション後、培地を除去し、化合物を含む新鮮なアッセイ培地に、５～２０ｎＭのインスリンの非存在下または存在下で１０μＭのペプチド、またはグルコース利用の強力な刺激剤としての１ｍＭのメトホルミンを加えた。細胞を５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気中で、３７℃で２２時間インキュベートした。２２時間のインキュベーション後、各ウェルからの条件培地を、新しい９６ウェルプレートに移した。５７０ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用する吸光度測定を製造元の指示に従って、培地中のグルコース濃度を、グルコースアッセイキット（Ａｂｃａｍ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用して決定した。吸光度値は、１０μＭペプチド単独の場合は未処理細胞（インスリンなし）、５～２０ｎＭインスリンの存在下での１０μＭペプチドの場合は５～２０ｎＭインスリン処理細胞（インスリンあり）に対する対照活性の割合として表した。未処理の細胞を、基礎グルコース利用の参照として使用した。未処理対照のプレート間の相対標準偏差は、＜１０％であった。１ｍＭのメトホルミンは、グルコース利用を増加させるための強力な対照として使用した。メトホルミン（１ｍＭ）処理のグルコースレベルは、未処理対照値の＜１０％であった。データは、各データポイントを３回実行した２～３回の独立した実験からの平均値として表した。結果を表１９に報告する。

実施例１９
培養Ｈ４－ＩＩＥ細胞におけるグルコース産生およびインスリン依存性
グルコース恒常性に対するペプチドの効果は、ラット肝細胞などの培養細胞によるグルコース産生を監視するためのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、溶解度に基づいて、Ｈ２Ｏ中の１ｍＭストックに希釈するか、またはＨ２Ｏ中の１ｍＭストックとして直接のいずれかで、最終濃度１０μＭ（０～０．１％ＤＭＳＯ）で使用した。Ｈ４－ＩＩＥラット肝細胞株は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。Ｈ４－ＩＩＥ細胞を標準培地（ＤＭＥＭ／高グルコース＋１０％ウシ胎児血清＋抗生物質）に１００，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下で、３７℃で一晩接着させた。播種の２４時間後、培地を除去し、細胞をグルコースを含まないＤＭＥＭですすぎ、培地をグルコース産生培地（グルコースを含まないＤＭＥＭ＋２ｍＭピルビン酸ナトリウム＋１０ｍＭ乳酸ナトリウム＋抗生物質）と交換した。培養物を、５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気中で３７℃に一晩置いた。翌朝、培地を除去し、化合物を含む新鮮なグルコース産生培地に、８００ｐＭインスリンの非存在下または存在下で１０ｕＭペプチドを加えた。細胞を５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気中で、３７℃で２４時間インキュベートした。２４時間のインキュベーション後、各ウェルからの条件培地を、新しい９６ウェルプレートに移した。５７０ｎｍでＣｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用する吸光度測定を製造元の指示に従って、培地中のグルコース濃度を、グルコースアッセイキット（Ａｂｃａｍ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用して決定した。吸光度値は、１０μＭペプチド単独の場合は未処理細胞（インスリンなし）、８００ｐＭインスリンの存在下での１０μＭペプチドの場合は８００ｐＭインスリン処理細胞（インスリンあり）に対する対照活性の割合として表した。未処理細胞を、最大グルコース産生の基準として使用した。未処理対照のプレート間の相対標準偏差は、＜２５％であった。８００ｐＭのインスリンを、グルコース産生の中程度の阻害剤として使用した。インスリン（８００ｐＭ）処理のグルコースレベルは、未処理対照値の＜２０～５０％であった。データは、各データポイントを３回実行した２～４回の独立した実験からの平均値として表した。結果を表２０に示す。

実施例２０
食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける代謝パラメータに対する効果
雄のＣ５７ＢＬ／６マウスは、高脂肪食を１８週間維持して、食餌誘発性肥満を発症させる。動物は、血中グルコースレベルおよび体重に基づいて処置群にランダム化された。本発明のペプチドを、５ｍｇ／ｋｇ／用量の用量で８～１０日間腹腔内注射することにより、雄ＤＩＯマウスの群に１日１回または２回投与した（Ｎ＝治療群あたり８匹の動物）。雄ＤＩＯマウスの追加群（ｎ＝８）は、腹腔内注射によって１日１回または２回投与されるビヒクル（水）のみを受けた。体重、血中グルコースレベル、食物摂取量を監視する。体重分布（脂肪対除脂肪）は、投与前および投与終了時に定量的全身ＮＭＲによって決定した。本発明のペプチドの投与は、ビヒクルのみで処置された動物と比較した場合、ベースライン値からのより大きな体重減少、より大きな血糖の低下、および脂肪量のより大きな減少をもたらした（表２１）。

実施例２１－カニクイザルにおける薬物動態。
雄のカニクイザル（２～６ｋｇ）を、投与前に８時間絶食させる。動物の群に、好適な経路で試験ペプチドの単回投与（０．１～１５ｍｇ／ｋｇ）を注射する。血液サンプルは２４時間以上の間隔で採取され、血漿用に処理される。食物は注射後４時間で戻される。血漿サンプル中のペプチドおよび／または代謝物の濃度を、好適な分析方法（例えば、ＬＣ／ＭＳ－ＭＳ）によって決定し、薬物動態パラメータは非コンパートメント法によって算出した。

実施例２２－肥満の非ヒト霊長類モデルにおける効果。
自発的に肥満の雄のカニクイザルは、少なくとも３週間は投薬および取り扱いに順化させる。ベースラインの動物の特徴を決定し、動物は体重およびトリグリセリドレベルなどのベースラインの代謝パラメータに基づいて処置群にランダム化した。ランダム化に続いて、サルの群は、好適な経路によって４週間以上本発明のペプチドの１日または１日２回用量の投与を受ける。サルの対照群は、ビヒクルまたは陽性対照の１日用量を受ける。研究中、摂食量および体重を定期的に測定した。投与したペプチドが体重、食物摂取量、ＢＭＩおよび／または代謝パラメータに及ぼす効果を、ビヒクルで処理した対照動物と比較する。

実施例２３
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のＳＴＡＭ（登録商標）マウスモデルにおける効果。
ＮＡＳＨのＳＴＡＭモデルでは、Ｃ５７／ｂｌ６マウスに、膵臓β細胞を破壊するために、生後３日目にストレプトトキシンの単回皮下投与を注射した。４週齢で、動物に高脂肪食を与えた。この併用処置は、脂肪症、線維症、肝硬変、および最終的には高血糖症および中等度の高脂血症を伴う肝細胞がん（ＨＣＣ）の発症をもたらし、したがってヒトＮＡＳＨに非常に類似している。５週齢から始めて、ＳＴＡＭ動物の群（群あたり８匹の動物）を、研究が終了するまで、適切な経路によって毎日または１日２回投与される本発明のペプチドで処理する。動物の対照群は、好適な陽性対照化合物（例えば、テルミサルタン）の毎日の投与を受ける。約１０週齢で、代謝パラメータを決定し、動物を犠牲にした。肝臓サンプルを取得して固定し、パラフィンに包埋し、ヘマトキシリンおよびエオシンまたはマッソントリクロームで染色し、光学顕微鏡で検査する。脂肪症の程度および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）活性スコア（ＮＡＳ）を、当該技術分野において既知の方法に従って組織病理学的に決定した。

実施例２４
培養アペリン受容体過剰発現ＣＨＯ－Ｋ１細胞におけるβ－アレスチン動員
アペリン受容体（ＡＰＪ）の活性化に対するペプチドの効果は、チャイニーズハムスター卵巣に由来するＣＨＯ－Ｋ１などのＡＰＪを過剰発現する培養細胞におけるβ－アレスチン動員を監視するためのアッセイを使用して評価することができる。β－アレスチン動員アッセイは、ＣＨＯ－Ｋ１ＡＧＴＲＬ１ β－アレスチン細胞株（ＰｒｏＬｉｎｋタグ化ヒトＡＰＪおよび酵素アクセプタータグ化β－アレスチンを共発現）およびＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ検出キットを使用するＥｕｒｏｆｉｎｓ－ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）によって実施した。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックとして調製し、１０μＭ（０．１％ＤＭＳＯ）の最終濃度で試験した。ＣＨＯ－Ｋ１ＡＧＴＲＬ１ β－アレスチン細胞を３８４ウェルプレートの標準培地中に播種した。一晩培養した後、培地を５００ｎＭのアペリン－１３（陽性対照）または１０μＭのペプチドを含む緩衝液と交換した。３７°Ｃで９０分間インキュベートした後、タグ化ヒトＡＰＪ（ＰｒｏＬｉｎｋタグ）およびタグ化β－アレスチン（酵素アクセプタータグ）の関連を測定するために、化学発光相補性レポーターアッセイを使用して、様々な処置に応じたβ－アレスチンの動員を定量化した。データは、アペリン－１３応答の割合（１００％）として表し、各データポイントは二重の平均を表す。結果を表２２に示す。本実施例は、ＡＰＪアゴニストとしての様々なペプチドの活性を示す

実施例２５
培養アペリン受容体過剰発現ＣＨＯ－Ｋ１細胞におけるｃＡＭＰレベル
アペリン受容体（ＡＰＪ）の活性化に対するペプチドの効果は、チャイニーズハムスター卵巣に由来するＣＨＯ－Ｋ１などのＡＰＪを過剰発現する培養細胞におけるｃＡＭＰ発現の阻害を監視するためのアッセイを使用して評価することができる。ペプチドを、最初にＤＭＳＯ中の３０ｍＭストックとして調製し、Ｈ_２Ｏ中の３ｍＭストックに希釈するか、またはＨ_２Ｏ中の３ｍＭストックとして直接、最終濃度１０μＭ（０～０．１％ＤＭＳＯ）で使用した。フォルスコリンを、ｃＡＭＰ発現の非常に強力な誘導物質として使用した。ＡＰＪを安定して過剰発現するＣＨＯ－Ｋ１ＡＧＴＲＬ１Ｇｉ細胞は、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ－ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）から購入した。ＣＨＯ－Ｋ１ＡＧＴＲＬ１Ｇｉ細胞を３８４ウェルプレートの標準培地（Ｆ１２Ｋ＋１０％ウシ胎児血清＋抗生物質）に１０，０００細胞／ウェルで播種し、５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下で、３７℃で一晩接着させた。一晩培養した後、培地を１０μＭのフォルスコリン（ｃＡＭＰ発現を増加させるため）および５００ｎＭのＰｙｒ－アペリン－１３（ｃＡＭＰ蓄積を阻害する）または１０μＭペプチドのいずれかを含む緩衝液と交換した。３７℃での３０分間のインキュベーション後に、Ｃｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定する化学発光シグナルを製造元のプロトコル（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ－ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）に従って、ＨｉｔＨｕｎｔｅｒｃＡＭＰキットを使用して、様々な処理に応答するｃＡＭＰレベルを定量化した。データは、Ｐｙｒ－アペリン－１３応答の割合（１００％）として表し、各データポイントは三重の平均を表す。結果を表２３に示す。本実施例は、ＡＰＪアゴニストとしての様々なペプチドの活性を示す。

実施例２６
培養アペリン受容体過剰発現ＣＨＯ－Ｋ１細胞におけるｃＡＭＰレベル
アペリン受容体（ＡＰＪ）の活性化に対するペプチドの効果は、ＣＨＯ－Ｋ１細胞などのＡＰＪを過剰発現する培養細胞におけるフォルスコリン刺激ｃＡＭＰ蓄積の阻害を測定するアッセイを使用して評価することができる。ＡＰＪを安定して過剰発現するＣＨＯ－Ｋ１ＡＧＴＲＬ１Ｇｉ細胞は、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ－ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）から購入し、３８４ウェルプレートの標準培地に１０，０００細胞／ウェルで播種し、５％ＣＯ_２／９５％空気の加湿雰囲気下で、３７℃で一晩接着させた。一晩培養した後、培地を、ｃＡＭＰ発現を増加させるために１０μＭフォルスコリンを含む緩衝液、Ｐｙｒ－アペリン－１３（０．０２５～１６７ｎＭ）、または本発明のペプチド（０．００５～３０μＭ）のいずれかとともに交換した。３７℃での３０分間のインキュベーション後に、Ｃｙｔａｔｉｏｎ３プレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して測定する化学発光シグナルを製造元のプロトコル（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ－ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）に従って、ＨｉｔＨｕｎｔｅｒｃＡＭＰキットを使用して、様々な処理に応答するｃＡＭＰレベルを定量化した。データは、２～３回の値の平均に基づいて、Ｐｙｒ－アペリン－１３応答の平均（ＳＤ）割合（１００％）としてプロットした。ＩＣ５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄＳｏｆｔｗａｒｅ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ）によって決定した。データは、すべてのデータポイントの平均（ＳＤ）ｎ＝２～３である。ＩＣ５０値を表２４に示す。

本明細書に開示され、特許請求される物品および方法はすべて、本開示の観点から過度の実験なしで作製および実行され得る。本開示の物品および方法が好ましい実施形態の観点から記載されているが、本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、物品および方法に変化が適用され得ることが当業者には明らかであろう。現在存在するか、または今後開発されるかにかかわらず、当業者に明らかなそのような変形および等価物はすべて、添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の趣旨および範囲内にあるとみなされる。本明細書で言及されたすべての特許、特許出願、および刊行物は、本開示が属する当業者のレベルを示している。本明細書に例示的に記載される開示は、本明細書に具体的に開示されていない要素の不在下で好適に実施され得る。したがって、例えば、本明細書の各事例において、「を含む」、「から本質的になる」、および「からなる」という用語はいずれも、他の２つの用語のいずれかに置き換えられてもよい。用いられている用語および表現は、用語を説明するものとして使用されており、限定するものではなく、そのような用語および表現の使用において、示され説明される特徴のいずれの等価物またはその一部を除外するようには意図されておらず、特許請求される開示の範囲内で様々な修正が可能であることが認識される。したがって、本開示が好ましい実施形態および任意の特徴によって具体的に開示されているが、本明細書に開示される概念の修正および変形が当業者によってなされてもよく、そのような修正および変形が添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の範囲内にあるとみなされることを理解されたい。

本明細書に引用される刊行物、特許出願および特許を含むすべての参考文献は、各参考文献が参照により個々にかつ具体的に組み込まれるように示され、その全体が本明細書に記載されているのと同程度まで（法律で認められる最大限の範囲で）、参照により本明細書に組み込まれる。すべての見出しおよび小見出しは、本明細書において便宜上使用されているに過ぎず、決して限定的であると解釈されるべきではない。特に要求されない限り、本明細書中に提供されるあらゆる例、または例示的な言語（例えば「など」）の使用は、本開示をより上手く説明することを意図しているに過ぎず、本開示の範囲に制限を課すものではない。本明細書における言語は、本開示の実施に不可欠な任意の非請求要素を示すと解釈されるべきではない。本明細書における特許文書の引用および組み込みは、便宜上行われているに過ぎず、そのような特許文書の有効性、特許性、および／または執行可能性のいかなる見解も反映していない。

本開示は、適用法で許可されるように、本明細書に付属する態様において列挙される主題のすべての変更例および均等物を含む。

本出願は、配列表を含む。明細書内の配列の情報／記載および配列表内の情報の間に差異が存在する範囲で、明細書が制御される。

Claims

式Ｉのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘ^１－ＲＸ^２－Ｘ^３－Ｘ^４－Ｘ^５－Ｘ^６－Ｑ－Ｘ^７－Ｌ－Ｘ^８－Ｘ^９（Ｉ）（配列番号１）
式中、
Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有し、
Ｘ^４が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^５が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^６が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^７が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^８が、極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、１～３アミノ酸であり、各アミノ酸が独立して、極性側鎖または非極性側鎖を有する、ペプチド、
あるいは１、２、３、もしくは４アミノ酸の欠失、挿入、または置換を有する、前記ペプチドの類似体、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩。
Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、式中、
Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^１２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載のペプチドまたは類似体。
Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は、－Ｘ^１３Ｘ^１４Ｘ^１５であり、式中、
Ｘ^１３が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、
Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、極性側鎖を有するアミノ酸であり、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載のペプチドまたは類似体。
Ｘ^１が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、
Ｘ^２が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択され、
Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１１Ｘ^１０－であり、
Ｘ^４が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^５が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^６が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、（ｄＣ）、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^７が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^８が、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^９が、存在しない、または存在する場合は独立して、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）、もしくは－Ｘ^１２Ｘ^１３Ｘ^１４から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１０が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１１が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１２が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１３が、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１４が、存在しない、または存在する場合は、Ｇ、Ａ、（ｄＡ）、Ｖ、（ｄＶ）、Ｌ、（ｄＬ）、Ｉ、（ｄＩ）、Ｆ、（ｄＦ）、Ｗ、（ｄＷ）、Ｐ（ｄＰ）、Ｍ、および（ｄＭ）から選択されるアミノ酸であり、
Ｘ^１５が、存在しない、または存在する場合は、Ｄ、（ｄＤ）、Ｅ、（ｄＥ）、Ｋ、（ｄＫ）、Ｒ、（ｄＲ）、Ｈ、（ｄＨ）、Ｎ、（ｄＮ）、Ｑ、（ｄＱ）、Ｓ、（ｄＳ）、Ｔ、（ｄＴ）、Ｙ、（ｄＹ）、Ｃ、および（ｄＣ）から選択されるアミノ酸であり、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載のペプチドまたは類似体。
Ｘ^１が、Ｍ、Ｋ、または存在せず、
Ｘ^２が、ＲまたはＡｉｂであり、
Ｘ^３が、存在しない、または存在する場合は、Ｍ、Ｅ、－ＭＭＧ－、－ＩＩ（ｄＡ）－、－Ｎｌｅ－Ｎｌｅ－Ｇ－、もしくは－ＩＩＧ－であり、
Ｘ^４が、Ｍ、Ｅ、Ｉ、またはＮｌｅであり、
Ｘ^５が、Ｖ、Ａ、またはＧであり、
Ｘ^６が、Ｆ、Ｙ、Ａ、またはＥであり、
Ｘ^７が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、
Ｘ^８が、Ｃ、Ｓ、またはＥであり、Ｘ^９が、－ＧＬ、－Ｇ（ｄＡ）、－Ｇ（ｄＡ）Ｋ、－（ｄＡ）Ｌ、Ｇ、または存在せず、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載のペプチドまたは類似体。
Ｘ^１が、（ＰＥＧ１２）－Ｋであり、かつ／またはＸ^９が、－Ｇ（ｄＡ）－Ｋ（ＰＥＧ１２）である、請求項５に記載のペプチドまたは類似体。
表１のペプチド配列から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載のペプチドまたは類似体。
式ＩＩのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘ^１６－Ｍ－Ｍ－Ｇ－Ｍ－Ｘ^１７（ＩＩ）（配列番号６４）
式中、Ｘ^１６が、存在しない、または存在する場合は、Ｒ－またはＲ－Ｒ－であり、Ｘ^１７が、存在しない、または存在する場合は、－Ｖ、－ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）から選択される、ペプチド、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩。
Ｘ^１６が、Ｒ－またはＲＲ－であり、Ｘ^１７が、ＶＦ、－ＶＦＱ、－ＶＦＱＳ、－ＶＦＱＳＬ、および－ＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）から選択され、
あるいはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ－アセチル誘導体、
あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項８に記載のペプチド。
ペプチドまたは類似体であって、ＭＭＧＭＶＦ（配列番号４７）、ＲＭＭＧＭＶＦＱ（配列番号５１）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳ（配列番号５２）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬ（配列番号５３）、ＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号５４）、ＲＲＭＭＧＭＶＦ（配列番号５７）、アセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）（配列番号６１）、ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６２）、およびアセチル－ＲＲＭＭＧＭＶＦＱＳＬＣＧ（ｄＡ）－アミド（配列番号６３）から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、ペプチドまたは類似体、あるいはその薬学的に許容される塩。
単離されたもしくは非天然型ペプチド、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１～１０のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体。
請求項１～１１のいずれか一項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
前記ペプチドが、（ｉ）Ｄ配置を有するアミノ酸、および（ｉｉ）非天然型アミノ酸残基から選択される少なくとも１つのアミノ酸による置換を含むか、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１～１１のいずれか一項に記載のペプチド類似体。
前記ペプチドまたは類似体に結合した持続時間増強部分をさらに含み、任意に、前記ペプチドまたは類似体を前記持続時間増強部分にカップリングする代謝的に切断可能なリンカーをさらに含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体。
請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、組成物。
前記賦形剤が、天然には見られない、請求項１５に記載の組成物。
請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体を含む、薬学的組成物。
請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、細胞生存率を調節する方法。
がんの治療を必要とする患者においてがんを治療する方法であって、薬学的有効量の請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を前記患者に投与することを含む、方法。
細胞増殖の治療を必要とする患者において細胞増殖を治療する方法であって、薬学的有効量の請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を前記患者に投与することを含む、方法。
アポトーシス疾患の治療を必要とする患者においてアポトーシス疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を前記患者に投与することを含む、方法。
代謝性疾患の治療を必要とする患者において代謝性疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を前記患者に投与することを含む、方法。
細胞保護の治療を必要とする患者において細胞保護を提供する方法であって、薬学的有効量の請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体、あるいは請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物を前記患者に投与することを含む、方法。
請求項１～１４のいずれか一項に記載のペプチドまたは類似体をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
請求項２４に記載の単離された核酸を含む、ベクターまたは発現ベクター。
請求項２４に記載の核酸、または請求項２５に記載のベクターもしくは発現ベクターを含む、宿主細胞。
請求項２４に記載の核酸、請求項２５に記載のベクターもしくは発現ベクター、または請求項２６に記載の宿主細胞、および薬学的に許容される賦形剤を含む、組成物。
代謝性疾患の治療を必要とする対象において代謝性疾患を治療する方法であって、前記代謝性疾患を治療するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
前記疾患が、肥満、糖尿病（例えば、２型糖尿病）、認知障害および／または神経変性障害、心血管疾患、脂肪性肝疾患、ならびに胃腸疾患からなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法であって、前記がんを治療するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
前記がんが、肺がん、膵臓がん、乳がん、前立腺がん、卵巣がん、または肝細胞がんである、請求項３０に記載の方法。
肝疾患の治療を必要とする対象において肝疾患を治療する方法であって、前記肝疾患を治療するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
前記肝疾患が、脂肪性肝疾患である、請求項３２に記載の方法。
前記脂肪性肝疾患が、ＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨである、請求項３３に記載の方法。
脂肪酸代謝の調節を必要とする対象において脂肪酸代謝を調節する方法であって、脂肪酸代謝を調節するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
脂肪酸代謝が、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞が前記対象に投与された後に、前記対象において増加する、請求項３５に記載の方法。
減量を必要とする対象において減量を実施する方法であって、前記対象において減量を実施するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状の治療処置における、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞の使用。
代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状を治療するための医薬品の製造における、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞の使用。
代謝性疾患、がん、肝疾患、または本明細書に記載の任意の疾患、障害、もしくは病状の治療処置において使用するための、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞。
アペリン媒介性疾患または障害の治療を必要とする対象においてアペリン媒介性疾患または障害を治療する方法であって、前記アペリン媒介性疾患または障害を治療するのに有効な量の、請求項１～１７および２４～２７のいずれか一項に記載のペプチド、ペプチド類似体、組成物、核酸、ベクター、発現ベクター、または宿主細胞を前記対象に投与することを含む、方法。
前記疾患が、ＵＶＢ放射に関連している、請求項４１に記載の方法。
前記疾患または障害が、高血圧症、内皮機能障害、心血管組織への損傷、心不全、冠状動脈性心臓病、虚血性および／または出血性脳卒中、大血管疾患、微小血管疾患、糖尿病性心臓（糖尿病性心筋症および糖尿病性合併症としての心不全を含む）冠状動脈性心臓病、末梢動脈疾患、末梢動脈閉塞性疾患、子癇前症、抵抗性高血圧、難治性高血圧、高血圧緊急症、血液または胎児－胎盤循環、浮腫性疾患、肺機能障害、急性肺損傷（ＡＬＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、外傷および／または火傷、および／または人工呼吸器誘発肺損傷（ＶＩＬＩ）、肺線維症、高山病、慢性腎臓病、急性腎障害、リンパ浮腫、リンパ管再生、炎症性腸疾患、炎症性疾患、または血管機能障害に関連する眼障害、局所創傷、片頭痛、腫瘍、転移、血管新生、軟骨の変性、変形性関節症、およびがんから選択される、請求項４１に記載の方法。
前記疾患が、敗血症または敗血症性ショックである、請求項４１に記載の方法。
前記疾患が、血栓症または微小血栓症である、請求項４１に記載の方法。
前記疾患が、トロンビン関連凝集である、請求項４１に記載の方法。
前記疾患が、虚血性ショックである、請求項４１に記載の方法。
前記疾患が、臓器不全または多臓器不全である、請求項４１に記載の方法。