TW202115091A - 喹啉類似物之結晶型及其鹽類、組合物、及彼等之使用方法 - Google Patents

Abstract

本發明包括2-(4-甲基-[1,4]二氮雜-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜-苯並[c]芴-6-羧酸(5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺(化合物I)的結晶型。此外，本發明提供包含該結晶型的組合物以及該結晶型及其組合物之治療用途。

Description

喹啉類似物之結晶型及其鹽類、　組合物、及彼等之使用方法

本發明一般涉及2-(4-甲基-[1,4]二氮雜-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜-苯並[c]芴-6-羧酸(5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺(化合物I)的結晶型。此外，本發明提供包含該結晶型的組合物以及該結晶型及其組合物之治療用途，例如用於治療癌症。

多種四環喹諾酮化合物已被提出透過與核酸的四鏈體形成區域相互作用並調節核醣體RNA轉錄而具有作用。參見，例如，美國專利第7,928,100號與第8,853,234號。特定而言，四環喹諾酮化合物可穩定癌細胞中的DNA G-四鏈體(G-quadruplexes，G4s)，進而誘導癌細胞的合成致死性。由於以G4穩定劑處理細胞會導致DNA雙鏈斷裂(DNA double strand breaks，DSBs)的形成，因此，由G4穩定配體/試劑(例如四環喹諾酮)處理誘導的DSB形成在遺傳上缺乏，或化學抑制的修復途徑，包括非同源末端連接(non-homologous end joining，NHEJ)以及同源重組修復(homologous recombination repair，HRR)的細胞中會更加明顯。此外，四環喹諾酮化合物選擇性抑制核仁中Pol I合成rRNA，但不抑制RNA聚合酶II (RNA Polymerase II，Pol II)合成mRNA，也不抑制DNA複製或蛋白質合成。推測透過核仁壓力途徑將RNA聚合酶I (Pol I)導向活化p53可能導致腫瘤細胞中p53的選擇性活化。p53蛋白通常透過引起癌細胞自毀而產生腫瘤抑制作用。活化p53殺死癌細胞為一種經過充分驗證的抗癌策略，而且採用許多方法來利用這一途徑。腫瘤細胞中p53的選擇性活化是治療、控制、改善腫瘤細胞而不影響正常健康細胞的一種有吸引力的方法。在美國專利第7,928,100號以及第8,853,234號中公開了上述四環喹諾酮，該公開的內容出於所有預期目的透過引用整體併入本文。

活性醫藥成分的結晶型，包括同質異晶物，可在控制重要的物理化學性質方面提供優勢，例如穩定性、溶解性、生物利用度、粒徑、堆積密度、流動性質、同質異晶物含量，以及其他性質。如美國專利第9,957,282號中所公開的，已經發現2-(4-甲基-[1,4]二氮雜潘-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜苯並[c]芴-6-羧酸(5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺的不同鹽類以及同質異晶物，該專利出於所有預期目的透過引用整體併入本文。然而，同質異晶物的存在特別難以預測，而預測其物理性質甚至更具挑戰性。因此，發現新的同質異晶物需要大量的實驗工作。本發明涉及發現新的同質異晶物，其出乎意料地具有良好的穩定性，適用於醫藥用途。

於一具體實施例中，本發明提供一種化合物I或其醫藥上可接受之鹽類、酯類，及/或溶劑化物的結晶型。於一具體實施例中，該化合物I的結晶型為化合物I的游離鹼。於另一具體實施例中，該化合物I的結晶型為一鹽類。

化合物I

於一具體實施例中，該化合物I的同質異晶物J或同質異晶物K的結晶型。

於某些具體實施例中，本發明之結晶型為分離的。

於某些具體實施例中，該結晶型為化合物I同質異晶物J，其表現出包含在約5.5 ± 0.5以及11.0 ± 0.5度的2θ角處的峰的X射線粉末繞射(X-ray powder diffraction，XRPD)圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現出包含在約7.1 ± 0.5度的2θ角的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現出包含在約17.7 ± 0.5以及26.7 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現出基本上類似於圖1或圖2的XRPD圖。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現出具有在200.0℃ ± 0.5℃至202.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(Differential Scanning Calorimetry，DSC)熱分析圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現出具有在238.0℃ ± 0.5℃至246.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有約90%或更高的同質異晶物純度。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有約95%或更高的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有約95%或更高的化學純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有約98%或更高的化學純度。

於某些具體實施例中，該結晶型為化合物I同質異晶物K，其表現出包含在約5.2 ± 0.5以及25.5 ± 0.5度的2θ角處的峰的X射線粉末繞射(XRPD)圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出包含在約11.4 ± 0.5度的2θ處的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出包含在約14.7 ± 0.5以及23.4 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出基本上類似於圖5的XRPD圖。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出具有在144.0℃ ± 0.5℃至150.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出具有在231.0℃ ± 0.5℃至238.0 ± 0.5℃之間的最大峰值的DSC熱分析圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K表現出具有在242.0℃ ± 0.5℃至250.0 ± 0.5℃之間的最大值峰值的DSC熱分析圖。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有約90%或更高的同質異晶物純度。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有約95%或更高的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有約95%或更高的化學純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有約98%或更高的化學純度。

於一具體實施例中，本發明涉及包含本文所述之任何一種結晶型的組合物。於某些具體實施例中，該組合物包含至少一種醫藥上可接受的載體。於其他具體實施例中，該組合物進一步包含一種或多種額外的治療活性劑。

於一具體實施例中，該治療活性劑係選自一烷化劑、一抗代謝物、一長春花生物鹼、一紫杉烷、一拓撲異構酶抑制劑、一抗腫瘤抗生素、一酪胺酸激酶抑制劑、一免疫抑制大環內酯類藥物、一Akt抑制劑、一HDAC抑制劑、一Hsp90抑制劑、一mTOR抑制劑、一PI3K/mTOR抑制劑、一PI3K抑制劑、一CDK (細胞週期蛋白依賴性激酶)抑制劑、CHK (檢查點激酶)抑制劑，或一PARP (聚(DP-核糖)聚合酶)抑制劑。於一具體實施例中，該PARP抑制劑為奧拉帕尼 (olaparib)。

於一具體實施例中，該治療活性劑係選自破壞程序性死亡1 (Programmed Death-1，PD-1)與程序性死亡配體-1 (Programmed Death Ligand-1，PD-L1)之間相互作用的抗體或其抗原結合部分。於其他具體實施例中，該治療活性劑係選自一抗PD-1抗體、一PD-1拮抗劑、一抗PD-L1抗體、一以PD-1表現為目標的siRNA、一以PD-L1表現為目標的siRNA，以及PD-1或PD-L1的顯性負突變形式或可溶形式的一胜肽、片段。

於本發明之一具體實施例中，提供用於穩定一個體中的G-四鏈體(G4s)之方法，其中該方法包含對該個體施用一治療有效量的本發明之一結晶型或包含一治療有效量的本發明之一結晶型的組合物。於一具體實施例中，該穩定G4s在周邊血單核細胞中。

於本發明之一具體實施例中，提供用於調節一個體中p53活性之方法，其中該方法包含對該個體施用一治療有效量的本發明之結晶型或包含一治療有效量的本發明之一結晶型的組合物。

於本發明之一具體實施例中，提供用於治療或改善一個體的細胞增殖失調之方法，其中該方法包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之結晶型或包含一治療有效量的本發明之結晶型的組合物。

於本文公開的任何一種方法的一些具體實施例中，該細胞增殖失調為癌症。於某些具體實施例中，該癌症係選自血液系統惡性腫瘤、直腸癌、乳癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、子宮頸癌、Ewing氏肉瘤、胰臟癌、淋巴結癌、結腸癌、前列腺癌、腦癌、骨癌、頭頸癌、皮膚癌、腎癌、骨肉瘤、心臟癌、子宮癌、胃腸道惡性腫瘤，以及喉與口腔癌。於一具體實施例中，該癌症為乳癌、卵巢癌或胰臟癌。

於本文公開的任何一種方法之一具體實施例中，該癌症為血液系統惡性腫瘤。於一具體實施例中，該癌症係選自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，以及多發性骨髓瘤。

於本文公開的任何一種方法之一具體實施例中，該細胞增殖失調為一實性瘤。

於本文公開的任何一種方法之一具體實施例中，該癌症為一BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症。於一具體實施例中，該癌症為一BRCA 突變的癌症。於某些具體實施例中，該癌症為一BRCA2 突變的癌症。於一具體實施例中，該BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於一具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於一具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為乳癌。於另一具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為卵巢癌。

於本文公開的任何方法之一具體實施例中，該癌症為BRCA2 缺陷型或BRCA1 缺陷型癌症。於一具體實施例中，該癌症為BRCA2 缺陷型癌症。

於本文公開的任何一種方法之一些具體實施例中，該個體在一DNA修復基因中具有突變。於一具體實施例中，該DNA修復基因為同源重組(homologous recombination，HR)或非同源末端連接(non-homologous end joining，NHEJ)依賴性去氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)雙鏈斷裂(double strand break，DSB)修復途徑中的一基因。

本發明涉及2-(4-甲基-[1,4]二氮雜-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜-苯並[c]芴-6-羧酸 (5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺(化合物I)或其鹽類或溶劑化物的結晶型。化合物I或其鹽類或溶劑化物，包括其結晶型，可穩定G-四鏈體(G4s)及/或抑制Pol I。這些結晶物質可用於治療以細胞增殖為特徵的疾病。

定義

應該理解的是，本文所使用的術語僅出於描述特定具體實施例之目的，其目的並非用於限制。

除非另有定義，否則本文中使用的所有技術及科學術語具有與本申請所屬領域的普通技術人員通常理解的相同含義。儘管與本文描述的那些類似或等同的任何方法及材料都可用於本發明的實踐或測試中，但本文所描述為代表性的方法及材料。

根據長期的專利法慣例，當在包括申請專利範圍的本發明中使用時，「一個」、「一種」以及「該」等詞係指「一個或多個」。因此，例如，提及「一載體」包括一種或多種載體，兩種或多種載體等的混合物。

「本發明之化合物」或「本化合物」等詞係指結晶型的2-(4-甲基-[1,4]二氮雜-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜-苯並[c]芴-6-羧酸(5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺(化合物I)或其異構體、鹽類、N-氧化物、亞碸、碸，或溶劑化物。於整個發明中描述之化合物I的結晶型包括化合物I的任何單一異構體的結晶型，化合物I的任何數目的異構體的混合物。該結晶型包括同質異晶物。

化合物I

多態性可被定義為一化合物在保持相同化學式的同時結晶為不同結晶型的能力。同一化合物(化學式相同)的不同同質異晶物存在於不同的晶相中，這些晶相具有不同的晶格結構及/或構象。如本文所用，同質異晶物包括化合物(包括化合物I)及其鹽類、溶劑化物或水合物的結晶型。多態性會影響一種或多種物理性質，例如穩定性、溶解度、熔點、堆積密度、流動性質、生物利用性等。

如本文所用，一化合物的「雜質」乙詞係指除化合物以外的化學物質，包括該化合物的衍生物或由於不完全純化而留在該化合物中或隨時間而發展的該化合物的降解物，例如，在穩定性測試中，該化合物的配方開發或化合物的儲存。

如本文所用，一化合物的「化學純度」乙詞係指來自其他不同化學實體的化合物的純度。例如，具有90%化學純度的結晶化合物I係指該結晶型包含少於10%的不同於化合物I的分子或化學實體，包括合成副產物、殘留溶劑，或殘留有機或無機物質。

如本文所使用的，化合物的「同質異晶物純度」乙詞係指以一種不同的同質異晶物形式存在的化合物的純度。例如，同質異晶物純度為90%的化合物I同質異晶物J表示該結晶型總共包含少於10%的化合物I的其他同質異晶物形式，例如同質異晶物A、C、E、G，及/或J。同質異晶物A、C、E，以及G，如在美國專利第9,957,282號中所公開，其全部內容透過引用結合於本文。

「異構體」乙詞係指具有相同化學式但可具有不同的立體化學式、結構式，或原子的特殊排列之化合物。異構體的實例包括立體異構體、非對映異構體、對映異構體、構形異構體、旋轉異構體、幾何異構體，以及阻轉異構體。

「N-氧化物」，亦稱為氧化胺或胺-N-氧化物，係指經由本發明化合物的胺基的氧化而衍生自本發明化合物之一化合物。N-氧化物通常包含官能基R₃ N⁺ -O⁻ (有時記載為R₃ N=O或R₃ N→O)。

「酯類」乙詞係指本發明化合物的任何酯類，其中該分子的任何-COOH官能基被-COOR官能基取代，其中該酯類的R部分體為形成一穩定酯類部分體的任何含碳基團，包括但不限於烷基、烯基、炔基、環烷基、環烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基烷基，以及其取代的衍生物。「酯類」乙詞包括但不限於其醫藥上可接受的酯類。醫藥上可接受的酯類包括，但不限於，酸性基團的烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基，以及雜環基酯，該酸性基團包括，但不限於，羧酸、磷酸、次膦酸、磺酸、亞磺酸，以及硼酸。

「亞碸」係指經由硫(S)原子的氧化而衍生自本發明化合物之一化合物。亞碸通常記載為–S(=O)-、-S(O)-，或-(S→O)-。「碸」係指透過進一步氧化硫原子而衍生自本發明化合物之一化合物。碸通常記載為–S(=O)₂ -、-S(O)₂ -，或-(S(→O)₂ )-。

「羧酸」乙詞係指以一個或多個羧基為特徵的有機酸，例如乙酸與草酸。「磺酸」係指通式為R-(S(O)₂ -OH)_n 的有機酸，其中R為一有機部分體，且n為一大於零的整數，例如1、2，以及3。「多羥基酸」乙詞係指含有兩個或更多個羥基的羧酸。多羥基酸的實例包括，但不限於，乳糖酸、葡糖糖酸，以及半乳糖。

「組合物」乙詞表示一物理形式的一種或多種物質，例如固體、液體、氣體，或其混合物。組合物之一實例為一醫藥組合物，亦即與醫學治療有關、製備或用於醫學治療的一組合物。「製劑」乙詞亦用於表示物理形式的一種或多種物質，例如固體、液體、氣體，或其混合物。

「共同-施用」或「共同施用」等詞係指包含以下成分之一製劑或一組合物的施用：(a)本發明之一化合物或由本發明之一化合物製備的一製劑；以及(b)一種或多種其他治療劑及/或放射療法的組合，亦即以協調的方式組合在一起。

如本文所用，「醫藥上可接受的」係指適合與人類及動物的組織接觸而沒有不適當的毒性、刺激性、過敏反應等，並且具有合理的受益/風險比，且在合理的醫學判斷範圍內對其預期用途有效。

「鹽類」包括一活性劑的衍生物，其中該活性劑透過製備其酸或鹼加成鹽類而被改質。較佳地，該鹽類為醫藥上可接受的鹽類。這樣的鹽類包括，但不限於，醫藥上可接受的酸加成鹽類、醫藥上可接受的鹼加成鹽類、醫藥上可接受的金屬鹽類、銨與烷基化銨鹽類。酸加成鹽類包括無機酸及有機酸的鹽類。合適的無機酸的代表性實例包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、磷酸、硫酸、硝酸等。合適的有機酸的代表性實例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、檸檬酸、富馬酸、乙醇酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水楊酸、琥珀酸、甲磺酸、乙磺酸、酒石酸、抗壞血酸、棕櫚酸、雙亞甲基水楊酸、乙二磺酸、葡萄糖酸，焦檸檬酸、天冬胺酸、硬脂酸、棕櫚酸、EDTA、乙醇酸、對胺基苯甲酸、麩胺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、過氯酸鹽、硼酸鹽、乙酸鹽、苯甲酸鹽、羥基萘甲酸、甘油磷酸、酮戊二酸等。鹼加成鹽包括，但不限於，乙二胺、N-甲基葡糖胺、離胺酸、精胺酸、鳥胺酸、膽鹼、N,N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、二乙胺、哌嗪、參(羥甲基)-胺基甲烷、四甲基氫氧化銨、三乙胺、二芐胺、苯乙胺、去氫松香胺、N-乙基哌啶、芐胺、四甲基銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、鹼性胺基酸，例如，離胺酸以及精胺酸二環己胺等。金屬鹽的實例包括鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽等。銨鹽以及烷基化銨鹽的實例包括銨鹽、甲基銨鹽、二甲基銨鹽、三甲基銨、乙基銨、羥乙基銨、二乙基銨、丁基銨、四甲基銨鹽等。有機鹼的實例包括離胺酸、精胺酸、胍、二乙醇胺、膽鹼等。製備醫藥上可接受的鹽類及其製劑的標準方法為本領域所習知的，且公開在各種參考文獻中，包括例如「Remington：The Science and Practice of Pharmacy」， A. Gennaro編輯，第20版，Lippincott，Williams & Wilkins，費城，賓州。

如本文所用，「溶劑化物」係指透過溶劑化形成的一錯合物(溶劑分子與本發明化合物的分子或離子的組合)，或由溶質離子或分子(本發明之化合物)以及一個或多個溶劑分子組成的聚集體。於本發明中，較佳的溶劑化物為水合物。水合物的實例包括，但不限於，半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、六水合物等。本領域普通技術人員應當理解的是，本發明化合物的醫藥上可接受的鹽類也可以溶劑化物形式存在。溶劑化物通常透過水合形成，其為本發明化合物製備的一部分，或者透過本發明之無水化合物自然吸收水分。包括水合物的溶劑化物可以化學計量比組成，例如，每個溶劑化物或每個水合物分子具有兩個、三個、四個鹽類分子。另一種可能性，例如，兩個鹽類分子與三個、五個、七個溶劑或水合物分子化學計量相關。用於結晶的溶劑，例如醇，尤其是甲醇及乙醇；醛；酮，尤其是丙酮；酯，例如乙酸乙酯；可嵌入該結晶光柵中。較佳為醫藥上可接受的溶劑。

如本文所用，關於藥物動力學的生物利用度，「基本上相似」乙詞係指兩種或更多種治療活性劑或藥物在一個體中提供相同的治療效果。

如本文所用，關於例如一XRPD圖、拉曼光譜等的分析光譜，「基本上相似」乙詞係指一光譜在峰值位置及其強度上在很大程度上類似於參考光譜。

如本文所用，「基本上不含」乙詞係指當以建議的劑量施用時不含治療有效量的化合物，但可包括非治療有效量的極微量化合物。

「賦形劑」、「載體」以及「載劑」等詞在整個申請案中可互換使用，表示與本發明一化合物一起施用的一物質。

「治療有效量」係指當施用於一患者以治療一疾病或其他不良醫學症狀的一治療活性劑的量，足以對該疾病或症狀產生有益作用。治療有效量將根據該治療活性劑本身、該疾病或症狀及其嚴重性，以及待治療患者的年齡、體重等而變化。確定該治療活性劑的治療有效量在本領域普通技術範圍內，並且僅需常規實驗即可。

如本文所用，就本文所述之化合物而言，「額外的藥劑」或「額外的治療劑」或「額外的治療活性劑」等詞係指除化合物I以外的一活性劑，或一醫藥上可接受的鹽類、酯類， 其溶劑化物，其被施用以引起治療效果。藥劑可針對與本發明之化合物意圖治療或改善的病症(例如，癌症)有關的治療效果，或者，該藥劑可用於治療或緩解潛在疾病的症狀(例如，腫瘤生長、出血、潰瘍、疼痛、淋巴結腫大、咳嗽、黃疸、腫脹、體重減輕、惡病體質、出汗、貧血、伴腫瘤症候群、血栓形成等)或以進一步降低本發明化合物的副作用的外觀或嚴重性。

如本文所用，詞彙「特徵在於細胞增殖的一病症」或「特徵在於細胞增殖的一症狀」包括，但不限於，癌症、良性及惡性腫瘤。癌症及腫瘤的實例包括，但不限於，大腸、乳腺(包括發炎性乳癌)、肺、肝、胰腺、淋巴結、結腸、直腸、前列腺、腦、頭頸、皮膚、腎臟、骨肉瘤、血液與心臟的癌症或腫瘤生長(例如，白血病、淋巴瘤，以及癌)。

「治療」乙詞係指對於一個體中一病症的至少一種症狀的減輕、減緩、延遲、減少、改善或控制中的一種或多種。「治療」乙詞亦可指以下一種或多種：制止、延遲發作(亦即，該病症臨床表現之前的時期)或降低發生或惡化病症的風險。

如本文所用，「患者」或「個體」等詞包括人類及動物，較佳為哺乳動物。

如本文所用，術語「抑制」或「減少」細胞增殖係指減緩、減少，或，例如，停止細胞增殖，當相較於未經本發明之方法及組合物處理的增殖的細胞時，使用本領域普通技術人員已知的方法測量減少，例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%，或100%。

如本文所用，「細胞凋亡」乙詞係指固有的細胞自毀或自殺程序。對一觸發刺激的反應，細胞經歷一系列事件，包括細胞萎縮、細胞膜起泡、色斑濃縮，以及破碎。這些事件最終導致細胞轉化為膜結合顆粒(凋亡小體)簇，然後被巨噬細胞吞噬。

除非另有說明，否則在本說明書及申請專利範圍中使用的所有表示成分數量、反應條件等的數字均應理解為在所有情況下均被術語「約」修飾。因此，除非有相反的指示，否則本說明書及所附之申請專利範圍中列出的數字參數為近似值，其可根據本申請案尋求獲得的所需特性而變化。化合物 I

化合物I為一合成衍生的小分子，可選擇性地結合並穩定DNA G-四鏈體(G4)結構。化合物I的關鍵特性包括透過G4穩定作用誘導DNA損傷，這取決於完整的BRCA 以及其他同源重組調節的拆分途徑。影響BRCA 的累積突變以及同源重組(HR)缺陷的腫瘤細胞導致加成性致死。

化合物I在許多具有不同遺傳背景(結腸、乳腺，以及卵巢)與特定來源(小鼠及人類)的細胞株中均顯示出對BRCA 缺陷細胞的特異性毒性。當相較於等基因野生型對照細胞時，化合物I在異種移植模型中的BRCA2 敲除腫瘤細胞中顯現出廣泛的活性治療指數。不受任何理論的束縛，迄今為止的數據歸因於化合物I結合及穩定G4 DNA結構的抗腫瘤活性，並阻礙DNA複製錯合物的進程並誘導單鏈DNA缺口或斷裂。BRCA 途徑為修復化合物I誘導的DNA損傷所必需的，而在缺少BRCA 基因的情況下受損的DNA損傷修復將導致致死性。化合物I可在低藥物濃度下殺死BRCA 缺陷細胞，這些化合物不能有效抑制rDNA轉錄，這表示，不受任何理論的束縛，用於治療BRCA 缺陷癌症的劑量低於抑制RNA聚合酶I及破壞核子功能所需之劑量。

此外，化合物I已顯示出對PALB2 突變的癌症有反應。PALB2 基因被稱為BRCA2 基因的伴侶及定位者。它提供了指導說明如何與BRCA2蛋白協同作用以修復受損的DNA並阻止腫瘤生長。遺傳兩個異常的PALB2 基因會導致N型Fanconi氏貧血，其抑制骨髓功能並導致紅血球、白血球，以及血小板的極度缺乏。

化合物I表現出對多種癌細胞株的抗增殖活性。參見實施例6。結晶材料

於一具體實施例中，本發明提供化合物I的一結晶型(游離鹼)。於另一具體實施例中，本發明提供化合物I的鹽類及/或溶劑化物的一結晶型。於一具體實施例中，本發明提供化合物I或其鹽類、酯類，或溶劑化物的一分離的結晶型。

於一具體實施例中，該鹽類為一鹽酸加成鹽類、一硫酸加成鹽類、一磺酸加成鹽類、一羧酸加成鹽類，或一多羥基酸加成鹽類。該結晶鹽類的實例包括，但不限於，鹽酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、蘋果酸鹽、硫酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽、L-(+)-酒石酸鹽、D-葡萄醣醛酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、丙二酸鹽、苯磺酸鹽，以及1-羥基-2-萘甲酸鹽。

於一具體實施例中，該結晶型的特徵在於由一X射線粉末繞射(XRPD)圖確定的晶格內平面間隔。XRPD的光譜通常由將峰的強度與峰的位置作圖的圖表示，即以度為單位的繞射角2θ (2θ)。強度通常提供於括號內，縮寫如下：非常強(very strong) = vst；強(strong) = st；中等(medium) = m；弱(weak) = w； 以及非常弱(very weak) = vw。可根據峰位置及其相對強度選擇給定XRPD的特徵峰，以方便地將該晶體結構與其他晶體結構區分開。相對於最強峰的峰強度百分比可表示為I/Io。

本領域技術人員認識到，對於相同化合物的給定結晶型，XRPD峰位置及/或強度的測量將在誤差範圍內變化。2θ度的值允許適當的誤差範圍。通常，誤差範圍由「±」表示。例如，大約「8.7 ± 0.3」的2θ度數表示從大約8.7 + 0.3 ，亦即，約9.0，至大約8.7-0.3，亦即，約8.4，的範圍。根據樣品製備技術、應用於儀器的校準技術、人為操作的變化等，本領域技術人員認識到，針對XRPD的適當誤差範圍可約為 ± 1.0；± 0.9；± 0.8；± 0.7；± 0.6；± 0.5；± 0.4；± 0.3；± 0.2；± 0.1；± 0.05；或更少。

於實施例部分中描述用於XRPD分析的方法及設備的其他細節。

於一具體實施例中，該結晶型透過示差掃描量熱法(Differential Scanning Calorimetry，DSC)顯示特徵。DSC熱分析圖通常由以瓦特/克(「W/g」)為單位繪製標準化的熱流量以及以攝氏度為單位的測量樣品溫度的圖表來表示。通常對DSC熱分析圖評估外推的起始與終止(起始)溫度、峰值溫度與熔化熱。通常將DSC熱分析圖的峰特徵值作為特徵峰，以區分該晶體結構與其他晶體結構。

本領域技術人員認識到，對於相同化合物的給定結晶型，DSC熱分析圖的測量值將在誤差範圍內變化。以攝氏度表示的單個峰特徵值的值允許適當的誤差範圍。通常，誤差範圍以「±」表示。例如，約「53.09 ± 2.0」的單個峰特徵值表示從約53.09 + 2.0，亦即，約55.09，至約53.09-2.0，亦即，約51.09，的範圍。根據樣品製備技術、應用於儀器的校準技術、人為操作的變化等，本領域技術人員認識到，對於單個峰值特徵值的適當誤差範圍可約為 ± 2.5；± 2.0；± 1.5；± 1.0；± 0.5；或更少。

於實施例部分中描述用於DSC熱分析圖的方法及設備的其他細節。

於一具體實施例中，該結晶型透過拉曼光譜法顯示特徵。拉曼光譜通常由繪製峰的拉曼強度與峰的拉曼位移的圖表示。拉曼光譜的「峰值」也被稱為「吸收帶」。強度通常提供於括號中，縮寫如下：強(strong) = st；中等(medium) = m；以及弱(weak) = w。可根據峰的位置及其相對強度選擇給定拉曼光譜的特徵峰，以方便區分該晶體結構與其他晶體結構。

本領域技術人員認識到，對於相同化合物的給定結晶型，拉曼峰位移及/或強度的測量值將在誤差範圍內變化。以互易波數(cm^-1 )表示的峰移值允許適當的誤差範圍。通常，誤差範圍由「±」表示。例如，大約「1310 ± 10」的拉曼位移表示從大約1310+10，亦即，約1320，至大約1310-10，亦即，約1300，的範圍。本領域技術人員認識到，根據樣品製備技術、應用於儀器的校準技術、人為操作的變化等，拉曼位移的適當誤差範圍可為 ± 12；± 10；± 8；± 5；± 3；± 1；或更少。

於實施例部分中描述用於拉曼光譜分析的方法及設備的其他細節。

於一具體實施例中，本發明之化合物為游離鹼(化合物I游離鹼)。於一具體實施例中，本發明之化合物選自同質異晶物J或同質異晶物K。

於某些具體實施例中，本發明之化合物的化學純度大於約50%、約60%、約70%、約80%、約85%、約95%、約98%，或其之間的任何值(亦即，大於約83%、大於約97%等)。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約80%、約81%、約82%、約83%、約84%、約85%、約86%、約87%、約88%、約89%、約90%、約91%、約92%、約93%、約94%，或約95%的化學純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約90%的化學純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約95%的化學純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約98%的化學純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約99%的化學純度。

於某些具體實施例中，本發明之化合物具有的同質異晶物純度大於大約50%、大約55%、大約60%、大約65%、大約70%、大約75%、大約80%、大約85%、大約90%、大約95%、大約98%，或其之間的任何值。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約80%、約81%、約82%、約83%、約84%、約85%、約86%、約87%、約88%、約89%、約90%、約91%、約92%、約93%、約94%或約95%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約90%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約95%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約98%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，本發明之化合物具有大於約99%的同質異晶物純度。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有大於80%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有大於85%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有大於90%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有大於95%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J具有大於98%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物J為分離的。

於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有大於80%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有大於85%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有大於90%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有大於95%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K具有大於98%的同質異晶物純度。於某些具體實施例中，化合物I同質異晶物K為分離的。

於本發明之一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含化合物I同質異晶物J以及化合物I的一種或多種其他形式的同質異晶物的混合物，包括同質異晶物A、C、E，以及G，如美國專利第9,957,282號中所述，其全部內容透過引用併入本文，或同質異晶物K。於某些具體實施例中，化合物I的結晶型可包含同質異晶物J的基本上純淨的形式。於一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約99.9%、約99.8%、約99.7%、約99.6%、約99.5%、約99.4%、約99.3%、約99.2%、約99.1%，或約99.0%的化合物I同質異晶物J。於另一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約99%、98%、97%、96%、95%、94%、93%、92%、91%或90%的化合物I同質異晶物J。於某些具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%或40%的化合物I同質異晶物J。

於本發明之一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含化合物I同質異晶物K以及化合物I的一種或多種其他形式的同質異晶物的混合物，包括同質異晶物A、C、E，以及G，如美國專利第9,957,282號中所述，其全部內容透過引用併入本文，或同質異晶物J。於某些具體實施例中，化合物I的結晶型可包含同質異晶物K的基本上純的形式。於一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約99.9%、約99.8%、約99.7%、約99.6%、約99.5%、約99.4%、約99.3%、約99.2%、約99.1%，或約99.0%的化合物I同質異晶物K。於另一具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約99%、98%、97%、96%、95%、94%、93%、92%、91%或90%的化合物I同質異晶物K。於某些具體實施例中，化合物I的結晶型可包含超過約90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%或40%的化合物I同質異晶物K。

於某些具體實施例中，本發明之化合物包含與化合物I的其他同質異晶物組合的化合物I同質異晶物J。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及同質異晶物A或同質異晶物E。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及同質異晶物A。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及同質異晶物E。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J、同質異晶物A，以及同質異晶物E。

於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含任何量或任何組合的化合物I同質異晶物J以及同質異晶物A。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8 %、約0.9%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約5.5%、約6%、約6.5%、約7%、約7.5%、約8%、約8.5%、約9%、約9.5%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%、約15 %、約16%、約17%、約18%、約19%或約20%的同質異晶物A。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90% 、約95%，或介於其之間的任何值的同質異晶物A。

於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含任何量或任何組合的化合物I同質異晶物J以及同質異晶物E。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8 %、約0.9%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約5.5%、約6%、約6.5%、約7%、約7.5%、約8%、約8.5%、約9%、約9.5%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%、約15 %、約16%、約17%、約18%、約19%或約20%的同質異晶物E。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物J以及約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%，或介於其之間的任何值的同質異晶物E。

於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含任何量或任何組合的化合物I同質異晶物K以及同質異晶物A。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K以及約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8 %、約0.9%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約5.5%、約6%、約6.5%、約7%、約7.5%、約8%、約8.5%、約9%、約9.5%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%、約15 %、約16%、約17%、約18%、約19%，或約20%的同質異晶物A。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K以及約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90% 、約95%，或介於其之間的任何值的同質異晶物A。

於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含任何量或任何組合的化合物I同質異晶物K以及同質異晶物E。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K以及約0.1%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8 %、約0.9%、約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約5.5%、約6%、約6.5%、約7%、約7.5%、約8%、約8.5%、約9%、約9.5%、約10%、約11%、約12%、約13%、約14%、約15 %、約16%、約17%、約18%、約19%，或約20%的同質異晶物E。於本發明之一具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K以及約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%，或介於其之間的任何值的同質異晶物E。

於某些具體實施例中，本發明之化合物包含與化合物I同質異晶物K與其他同質異晶物的組合。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K與同質異晶物A或同質異晶物E。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K與同質異晶物A。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K與同質異晶物E。於某些具體實施例中，本發明之化合物包含化合物I同質異晶物K、同質異晶物A，以及同質異晶物E。

於某些具體實施例中，本發明之化合物在儲存期間是穩定的。於某些具體實施例中，本發明之化合物在環境溫度下是穩定的。於某些具體實施例中，本發明之化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。於某些具體實施例中，本發明之基本上純的化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。

於某些具體實施例中，本發明之化合物於25℃ /60% RH下是穩定的。於某些具體實施例中，本發明之化合物於25℃ /60% RH下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。於某些具體實施例中，本發明之基本上純的化合物在25℃ /60% RH下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。

於某些具體實施例中，具有至少90%的同質異晶物純度的本發明之化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。於某些具體實施例中，具有至少95%的同質異晶物純度的本發明化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。於某些具體實施例中，具有至少98%的同質異晶物純度的本發明之化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。於某些具體實施例中，本發明之分離的化合物在環境溫度下穩定至少6個月、至少12個月，或至少18個月。

如本文所公開的，同質異晶物A為化合物I的游離鹼的一同質異晶物，其表現包含在約7.7、22.1，以及24.6度的2θ角的峰的XRPD圖，誤差範圍約為± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物A的XRPD進一步包含在約9.4 ± 0.5以及27.7 ± 0.5度的2θ角處的峰。參見美國專利第9,957,282號。

如本文所公開，同質異晶物E為化合物I的游離鹼的一同質異晶物，其表現包含在約5.68度的2θ角的峰的XRPD圖，誤差範圍約為± 0.50；約 ± 0.40；約 ± 0.30；約 ± 0.20；約 ± 0.10；或更少。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物E的XRPD進一步包含在約12.2 ± 0.5、12.6 ± 0.5、25.4 ± 0.5，以及27.6 ± 0.5度的2θ角處的峰。參見美國專利第9,957,282號。

以下與實施例中描述本發明化合物的其他顯示特徵及顯示特徵的方法。同質異晶物 J

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物J (游離鹼) 表現包含在約5.5度以及約11.0度的2θ角的峰的XRPD圖，誤差範圍為約± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物J的XRPD進一步包含在約7.1度的2θ處的峰，誤差範圍為約 ± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。於進一步的具體實施例中，結晶同質異晶物J的XRPD進一步包含在約17.7度以及約26.7度的2θ角處的峰，誤差範圍為約 ± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物J (游離鹼)表現包含在5.5 ± 0.5以及11.0 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現包含在5.5 ± 0.5、7.1 ± 0.5，以及11.0 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現包含在5.5 ± 0.5、7.1 ± 0.5、11.0 ± 0.5、17.7 ± 0.5，以及26.7 ± 0.5度2θ的峰的XRPD圖。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物J (游離鹼)表現包含在5.5 ± 0.5度的2θ處的峰的XRPD圖，該峰為強度最大的峰。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現還包含在7.1 ± 0.5度以及11.0 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖，其中每個峰在5.5 ± 0.5度的2θ角處具有至少30%的峰強度。於其他具體實施例中，化合物I同質異晶物J表現進一步包含在17.7 ± 0.5以及26.7 ± 0.5度的2θ角的峰的XRPD圖，其中每個峰在5.5 ± 0.5度的2θ角處具有至少10%的峰強度。

於又一具體實施例中，結晶化合物I同質異晶物J表現包含下表1中所示的峰的XRPD圖：

表1. 化合物I (游離鹼)的同質異晶物J的XRPD表

2θ	d值	強度(Cps)	強度(%)
5.504	16.042	89	100
6.36	13.885	1.92	2.2
7.064	12.504	36.6	41.1
7.709	11.459	2.9	3.3
9.586	9.219	7.89	8.9
11.003	8.034	40.2	45.2
11.601	7.622	1.05	1.2
12.314	7.182	1.37	1.5
12.779	6.921	2.15	2.4
14.184	6.239	5.51	6.2
15.872	5.579	6.22	7
16.566	5.347	1.47	1.7
17.651	5.021	16.3	18.3
18.352	4.83	4.1	4.6
18.634	4.758	4.7	5.3
19.12	4.638	8.52	9.6
20.038	4.428	2.27	2.5
20.486	4.332	1.98	2.2
21.322	4.164	4.67	5.2
22.21	3.999	2.81	3.2
22.714	3.912	4.35	4.9
23.104	3.847	4.78	5.4
23.913	3.718	0.85	1
24.78	3.59	7.33	8.2
25.76	3.456	1.09	1.2
26.188	3.4	1.61	1.8
26.745	3.331	18.8	21.2
27.346	3.259	0.97	1.1
27.804	3.206	1.51	1.7
28.568	3.122	0.85	1
30.434	2.935	1.05	1.2
30.815	2.899	1.32	1.5
32.099	2.786	1.6	1.8
33.31	2.688	1.33	1.5
34.726	2.581	0.58	0.7
35.731	2.511	1.81	2
36.032	2.491	0.92	1
36.644	2.45	1.18	1.3
37.146	2.418	0.68	0.8
37.588	2.391	0.88	1
38.135	2.358	0.6	0.7
39.296	2.291	0.9	1
39.841	2.261	1.33	1.5

於一特定的具體實施例中，化合物I的結晶同質異晶物J (游離鹼)表現出基本上類似於圖1的XRPD圖。於一特定的具體實施例中，化合物I的結晶同質異晶物J (游離鹼)表現出基本上類似於圖2的XRPD圖。圖1及2代表從不同合成批次獲得的同質異晶物J的XRPD圖。

於一具體實施例中，該結晶化合物I (游離鹼)同質異晶物J表現包含在約200.0℃至約202.0℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖，誤差範圍約為 ± 2.5；約 ± 2.0；約 ± 1.5；約 ± 1.0；約 ± 0.5℃；或更少。於另一具體實施例中，同質異晶物J顯示出包含在200.0℃ ± 0.5℃至約202.0 ± 0.5℃之間的最大吸熱峰的DSC熱分析圖。

於一具體實施例中，同質異晶物J表現包含在約238.0℃至約246.0℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖，誤差範圍約為 ± 2.5；約 ± 2.0；約 ± 1.5；約 ± 1.0；約 ± 0.5℃；或更少。於另一具體實施例中，同質異晶物J表現包含在238.0℃ ± 0.5℃至約246.0 ± 0.5℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖。於另一具體實施例中，同質異晶物J表現包含在238.0℃ ± 0.5℃至約245.0 ± 0.5℃之間的最大吸熱峰的DSC熱分析圖。於另一具體實施例中，同質異晶物J表現包含在238.0℃ ± 0.5℃至約240.0 ± 0.5℃之間的最大吸熱峰的DSC熱分析圖。於另一具體實施例中，同質異晶物J表現包含在238.0℃ ± 0.5℃至約239.0 ± 0.5℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖。於一具體實施例中，同質異晶物J表現出與圖3基本相似的DSC熱分析圖。

於一具體實施例中，同質異晶物J表現出與圖4 (自頂部起的第三行)基本相似的熱重分析(thermogravimetric analysis，TGA)熱分析圖。於一具體實施例中，當從環境溫度至300℃進行TGA分析時，同質異晶物J在約105℃下表現出約0.004%的重量損失(乾燥失重，loss on drying，LOD)。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物J (游離鹼)表現出包含在約1014 ± 5 cm^-1 處的峰的拉曼光譜。於一具體實施例中，同質異晶物J表現出與圖13A基本相似的拉曼光譜。同質異晶物 K

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物K (游離鹼)表現包含在約5.2度以及約25.5度的2θ處的峰的XRPD圖，誤差範圍為約 ± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖進一步包含在約11.4度2-θ處的峰，誤差範圍為約 ± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。在進一步的具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖進一步包含在約14.7度以及約23.4度的2θ角處的峰，誤差範圍為約 ± 0.5；約 ± 0.4；約 ± 0.3；約 ± 0.2；約 ± 0.1；或更少。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物K (游離鹼)表現包含在5.2 ± 0.5度以及25.5 ± 0.5度的2θ角的峰的XRPD圖。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖包含在5.2 ± 0.5、11.4 ± 0.5，以及25.5 ± 0.5度的2θ角處的峰。在進一步的具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖包含在5.2 ± 0.5、11.4 ± 0.5、14.7 ± 0.5、23.4 ± 0.5，以及25.5 ± 0.5度的2θ的峰。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物K (游離鹼)表現包含在5.2 ± 0.5度的2θ處的峰的XRPD圖，該峰是強度最大的峰。於另一具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖進一步包含在25.5 ± 0.5度的2θ角處的峰，其中該峰具有在5.2 ± 0.5度的2θ處的峰的至少4%的強度。於進一步的具體實施例中，結晶同質異晶物K的XRPD圖進一步包含在11.4 ± 0.5、14.7 ± 0.5，以及23.4 ± 0.5度的2θ角的峰，其中該峰具有在5.2 ± 0.5度的2θ處的峰的至少3%的強度。

於又一具體實施例中，結晶化合物I同質異晶物K表現包含下表1中所示的峰的XRPD圖：

表2. 化合物I (游離鹼)的同質異晶物K的XRPD表

2θ	d-值	強度(Cps)	強度(%)
5.185	17.029	258	100
5.74	15.385	9.78	3.8
7.375	11.977	3.92	1.5
8.57	10.309	6.05	2.3
9.596	9.21	5.84	2.3
10.343	8.546	3.3	1.3
10.906	8.106	1.56	0.6
11.401	7.755	11.3	4.4
11.675	7.574	4.53	1.8
12.569	7.037	3.11	1.2
13.299	6.652	0.87	0.3
13.771	6.425	2.52	1
14.163	6.248	3.11	1.2
14.654	6.04	10.5	4.1
15.486	5.717	6.23	2.4
16.217	5.461	5.06	2
17.435	5.082	2.05	0.8
17.846	4.966	2.2	0.9
18.158	4.882	2.12	0.8
18.456	4.803	2.54	1
19.236	4.61	7.86	3
19.9	4.458	1.06	0.4
20.315	4.368	2.45	0.9
20.557	4.317	2.94	1.1
21.371	4.154	3.19	1.2
21.827	4.069	1.34	0.5
22.185	4.004	2.94	1.1
22.85	3.889	3.71	1.4
23.373	3.803	11	4.2
23.87	3.725	5.05	2
24.636	3.611	3.61	1.4
24.859	3.579	2.51	1
25.511	3.489	15.2	5.9
25.968	3.428	3.88	1.5
26.579	3.351	2.2	0.9
27.622	3.227	1.72	0.7
28.47	3.133	5.47	2.1
28.849	3.092	4.15	1.6
29.43	3.033	1.72	0.7
29.659	3.01	1.38	0.5
30.066	2.97	0.91	0.4
30.73	2.907	1.69	0.7
31.074	2.876	1.17	0.5
31.791	2.813	1.42	0.5
32.503	2.753	0.9	0.3
33.065	2.707	1.49	0.6
34.93	2.567	1.13	0.4
35.692	2.514	0.97	0.4
37.128	2.42	1	0.4
38.917	2.312	1.05	0.4
39.818	2.262	1.94	0.7

於一特定的具體實施例中，化合物I的結晶同質異晶物K (游離鹼)表現出基本上類似於圖5 (頂線)的XRPD圖。

於一具體實施例中，結晶化合物I (游離鹼)同質異晶物K表現包含在約144.0℃至約150.0℃之間的最大吸熱峰的DSC熱分析圖，誤差範圍約為 ± 2.5；約 ± 2.0；約 ± 1.5；約 ± 1.0；約 ± 0.5℃；或更少。於另一具體實施例中，同質異晶物K表現包含在144.0℃ ± 0.5℃至約150.0 ± 0.5℃之間的最大吸熱峰的DSC熱分析圖。

於一具體實施例中，同質異晶物K表現包含在約231.0℃至約238.0℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖，誤差範圍約為 ± 2.5；約 ± 2.0；約 ± 1.5；約 ± 1.0；約 ± 0.5℃；或更少。於另一具體實施例中，同質異晶物K表示包含在231.0℃ ± 0.5℃至約238.0 ± 0.5℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖。

於一具體實施例中，同質異晶物K表示包含在約242.0℃至約250.0℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖，誤差範圍約為 ± 2.5；約 ± 2.0；約 ± 1.5；約 ± 1.0；約 ± 0.5℃；或更少。於另一具體實施例中，同質異晶物K表現包含在242.0℃ ± 0.5℃至約250.0 ± 0.5℃之間的吸熱峰最大值的DSC熱分析圖。於一具體實施例中，同質異晶物J表現出與圖6 (底線)基本相似的DSC熱分析圖。

於一具體實施例中，同質異晶物K表現出與圖4 (自頂部起的第四行)基本相似的熱重分析(TGA)熱分析圖。

於一具體實施例中，化合物I的同質異晶物K (游離鹼)表現出包含在約1015 ± 5 cm^-1 處的峰的拉曼光譜。於一具體實施例中，同質異晶物K表現出與圖13B基本相似的拉曼光譜。

藥物配方

於另一具體實施例中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含一治療有效量的本文公開的化合物I的結晶型或其醫藥上可接受的鹽類、酯類及/或溶劑化物作為活性成分，以及與一醫藥上可接受的賦形劑或載體組合。基於多種目的將該賦形劑添加到該製劑中。

於一具體實施例中，本發明內容涉及其中化合物I保持結晶型的固體製劑。於某些具體實施例中，本發明涉及從化合物I的結晶型製備的本文公開的各種類型的製劑。

可將稀釋劑添加至本發明之製劑中。稀釋劑增加固體醫藥組合物的體積，並可使包含該組合物的藥物劑型更易於患者及護理人員使用。用於固體組合物的稀釋劑包括，例如，微晶纖維素(例如，AVICEL)、超細纖維素、乳糖、澱粉、預糊化澱粉、碳酸鈣、硫酸鈣、糖、葡萄糖結合劑、糊精、右旋糖、磷酸氫鈣二水合物、三元磷酸鈣、高嶺土、碳酸鎂、氧化鎂、麥芽糖糊精、甘露醇、聚甲基丙烯酸酯(例如，EUDRAGIT(r))、氯化鉀、粉狀纖維素、氯化鈉、山梨糖醇和滑石粉。用於液體組合物的稀釋劑包括，但不限於，水、糖及/或糖醇的水溶液(例如，葡萄糖溶液、右旋糖溶液、乳糖溶液、麥芽糖溶液、果糖溶液)、鹽溶液，以及其他水性介質。

壓製成劑型的固體醫藥組合物，例如片劑，可包含賦形劑，其功能包括在壓製後幫助將活性成分與其他賦形劑結合於一起。用於固體醫藥組合物的黏合劑包括阿拉伯膠、藻酸、卡波姆(例如，卡波普)、羧甲基纖維素鈉、糊精、乙基纖維素、明膠，關華豆膠，黃蓍膠、氫化植物油、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素(例如，KLUCEL)、羥丙基甲基纖維素(例如，METHOCEL)、液體葡萄糖、矽酸鋁鎂、麥芽糊精、甲基纖維素、聚甲基丙烯酸酯、聚維酮(例如，KOLLIDON、PLSDONE)、預膠化澱粉、海藻酸鈉，以及澱粉。

透過在組合物中添加崩解劑，可提高壓實的固體醫藥組合物在患者胃中的溶解速率。崩解劑包括藻酸、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉(例如，AC-DI-SOL與PRIMELLOSE)、膠體二氧化矽、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯維酮(例如KOLLIDON與POLYPLASDONE)、關華豆膠、矽酸鋁鎂、甲基纖維素、微晶纖維素、聚克立林鉀、纖維素粉、預糊化澱粉、海藻酸鈉、羥乙酸澱粉鈉(例如，EXPLOTAB)、馬鈴薯澱粉，以及澱粉。

可添加助流劑以改善未壓實的固體組合物的流動性並提高劑量的準確性。可作為助流劑的賦形劑包括膠體二氧化矽、三矽酸鎂、粉狀纖維素、澱粉、滑石粉，以及磷酸三鈣。

當透過壓製粉狀組合物製成如片劑之劑型時，該組合物受到來自衝壓機及染料的壓力。一些賦形劑與活性成分傾向於黏附在衝壓機及染料的表面，可能導致產品出現點蝕與其他表面不規則現象。可將潤滑劑添加至組合物中以降低黏附力並簡化產物從染料中的釋放。潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、單硬脂酸甘油酯、棕櫚硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、氫化植物油、礦物油、聚乙二醇、苯甲酸鈉、月桂基硫酸鈉、硬脂富馬酸鈉、硬脂酸、滑石粉，以及硬脂酸鋅。

於某些具體實施例中，化合物I的結晶型透過壓片過程得以維持，包括處於來自衝壓機及染料的壓力下。

調味劑與增味劑增加劑型對患者的適口性。可包括於本發明之組合物中的用於藥物產品的常見調味劑與增味劑包括麥芽酚、香草精、乙基香草精、薄荷醇、檸檬酸、富馬酸、乙基麥芽酚，以及酒石酸。

固體及液體組合物亦可使用任何醫藥上可接受的著色劑染色，以改善其外觀及/或便於患者識別產品及單位劑量程度。

在液體醫藥組合物中，可使用本發明之結晶型與任何其他固體賦形劑製備，其中該組成分溶解或懸浮於一液體載體，例如水、植物油、酒精、聚乙二醇、丙二醇，或甘油中。

液體醫藥組合物可包含乳化劑，以使不溶於液體載體的活性成分或其他賦形劑均勻地分散在整個組合物中。可用於本發明之液體組合物中的乳化劑包括，例如，明膠、蛋黃、酪蛋白、膽固醇、阿拉伯膠、黃蓍膠、鹿角菜、果膠、甲基纖維素、卡波姆、鯨蠟硬脂醇，以及鯨蠟醇。

液體醫藥組合物還可包含增黏劑，以改善產品的口感及/或塗覆胃腸道的內膜。此類試劑包括阿拉伯膠、藻酸膨潤土、卡波姆、羧甲基纖維素鈣或鈉、鯨蠟硬脂醇、甲基纖維素、乙基纖維素、明膠、關華豆膠、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、麥芽糊精、聚乙烯醇、聚維酮、碳酸亞丙酯、海藻酸丙二醇酯、海藻酸鈉、羥乙酸澱粉鈉、黃蓍澱粉，以及黃原膠。

可添加甜味劑，例如阿斯巴甜、乳糖、山梨糖醇、糖精、糖精鈉、蔗糖、阿斯巴甜、果糖、甘露醇，以及轉化糖以改善口感。

可以安全攝取的量添加防腐劑及螯合劑，例如醇、苯甲酸鈉、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基茴香醚，以及乙二胺四乙酸，以提高儲存穩定性。

液體組合物還可包含緩衝劑，例如葡萄糖酸、乳酸、檸檬酸或乙酸、葡萄糖酸鈉、乳酸鈉、檸檬酸鈉或乙酸鈉。配方科學家可根據經驗及對標準程序以及本領域參考工作的考量，容易確定賦形劑的選擇及用量。

液體組合物可用於注射。液體組合物可包含無菌稀釋劑，例如，但不限於，水、葡萄糖溶液、右旋糖溶液、蔗糖溶液，或鹽溶液。

於本發明之液體組合物中，可使用酸化劑及/或鹼化劑調節組合物的pH值。於某些具體實施例中，可用HCl水溶液及/或NaOH水溶液調節組合物的pH值。於某些具體實施例中，組合物的pH值在約4.0至約6.0的範圍內，包括其間的所有值與子範圍。

於某些具體實施例中，液體組合物是在厭氧條件下製備的。於某些具體實施例中，用於製備液體組合物的材料在使用前以氮氣鼓泡。於某些具體實施例中，對液體組合物中通入氮氣直至可溶性氧含量達到小於1.0 ppm。於某些具體實施例中，製備液體組合物，並在氮氣下密封或封蓋。

本發明之固體組合物包括粉末、顆粒、聚集體，以及壓實的組合物。劑量包括適合於口服、頰、直腸、腸胃外(包括皮下、肌內，以及靜脈內)、吸入劑，以及眼科給藥的劑量。儘管在任何給定情況下最合適的給藥方式將取決於所治療疾病的性質及嚴重程度，但本發明最佳的途徑為口服。該劑量可方便地以單位劑型存在，並可透過醫藥領域公知的任何方法製備。

劑型包括固體劑型，例如片劑、散劑、膠囊劑、栓劑、小藥囊、錠劑，以及口含錠，以及液體糖漿劑、混懸劑、氣霧劑，以及酏劑。

本發明之劑型可為包含該組合物的膠囊，較佳為在硬殼或軟殼中包含本發明之粉狀或顆粒狀固體組合物。該殼可由明膠製成，且可選擇地包含一增塑劑，例如甘油與山梨糖醇，以及一遮光劑或著色劑。

可透過濕式製粒來製備用於壓片或膠囊填充的組合物。在濕式製粒中，將一些或全部粉末形式的活性成分與賦形劑混合，然後在液體，通常為水，的存在下進一步混合，該液體通常使粉末結塊成顆粒。將顆粒過篩及/或研磨、乾燥，然後過篩及/或研磨至所需顆粒大小。可將該顆粒壓片，或在壓片之前可添加其他賦形劑，例如一助流劑及/或一潤滑劑。

壓片組合物可常規地透過乾混法製備。例如，可將活性物質與賦形劑的混合組合物壓製為塊狀或片狀，然後粉碎為壓實的顆粒。隨後可將壓實的顆粒壓縮成片劑。

作為乾式製粒的替代方法，可使用直接壓片技術將混合的組合物直接壓製成壓實劑型。直接壓片可製得更均勻的無顆粒片劑。特別適合直接壓片的賦形劑包括微晶纖維素、噴霧乾燥的乳糖、磷酸二鈣二水合物以及膠體二氧化矽。這些與其他賦形劑在直接壓片中的適當使用為本領域具有經驗與技能，特別是在直接壓片的製劑挑戰方面，的技術人員所已知的。

本發明之膠囊填充物可包含參考壓片描述的任何前述摻合物與顆粒；然而，其未經過最後的壓片步驟。

於一具體實施例中，化合物I的結晶型或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物在給藥前於醫藥上可接受的載體或溶劑內被重構。於一具體實施例中，透過靜脈注射施用包含化合物I或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的重構溶液製劑。

可根據本領域已知的方法將活性成分與賦形劑配製為組合物及劑型。

於一具體實施例中，劑型可提供作為一套組，其包含化合物I的結晶型以及醫藥上可接受的賦形劑及載體作為單獨的組成分。於某些具體實施例中，該劑型套組允許醫師及患者在使用前透過將化合物I的結晶型與醫藥上可接受的賦形劑及載體溶解、懸浮，或混合以配製口服溶液或注射溶液。於一具體實施例中，相較於化合物I的預先配製的液體製劑，提供化合物I的結晶型的劑型套組改善化合物I的穩定性。

本發明之劑型可包含本文公開的化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或酯類的結晶型中的至少一種，其量為約5 mg至約500 mg，或介於其之間的任何值。亦即，本發明之劑型可包含化合物I的結晶型或其一醫藥上可接受的鹽類或酯類(例如，同質異晶物J或K)，其量約為5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、35 mg、40 mg、45 mg、50 mg、55 mg、60 mg、65 mg、70 mg、75 mg、80 mg、85 mg、90 mg、95 mg、100 mg、110 mg、120 mg、125 mg、130 mg、140 mg、150 mg、160 mg、170 mg、175 mg、180 mg、190 mg、200 mg、210 mg、220 mg、225 mg、230 mg、240 mg、250 mg、260 mg、270 mg、275 mg、280 mg、290 mg、300 mg、310 mg、320 mg、325 mg、330 mg、340 mg、350 mg、360 mg、370 mg、375 mg、380 mg、390 mg、400 mg、410 mg、420 mg、425 mg、430 mg、440 mg、450 mg、460 mg、470 mg、475 mg、480 mg、490 mg，或500 mg。

如本文所公開的，本發明之劑型可包含化合物I的結晶型或其醫藥上可接受的鹽類或酯類中的至少一種，使得化合物I的總量(可為各種形式)總計約5 mg至約500 mg，或介於其之間的任何值。亦即，本發明之一劑型包含化合物I的一結晶型或其一醫藥上可接受的鹽類或酯類，以及可選擇地化合物I的其他形式，使得化合物I的總量為約：5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、35 mg、40 mg、45 mg、50 mg、55 mg、60 mg、65 mg、70 mg、75 mg、80 mg、85 mg、90 mg、95 mg、100 mg、110 mg、120 mg、125 mg、130 mg、140 mg、150 mg、160 mg、170 mg、175 mg、180 mg、190 mg、200 mg、210 mg、220 mg、225 mg、230 mg、240 mg、250 mg、260 mg、270 mg、275 mg、280 mg、290 mg、300 mg、310 mg、320 mg、325 mg、330 mg、340 mg、350 mg、360 mg、370 mg、375 mg、380 mg、390 mg、400 mg、410 mg、420 mg、425 mg、430 mg、440 mg、450 mg、460 mg、470 mg、475 mg、480 mg、490 mg，或500 mg。

本發明之製劑不必僅包含化合物I的一種結晶型。本發明之結晶型可與化合物I的其他結晶型(例如，同質異晶物J與A)一起作為單一組成分或混合物用於藥物製劑或組合物中。於一具體實施例中，本發明之藥物製劑或組合物在製劑或組合物中包含按重量計25-100%或50-100%的本文所述之化合物I的至少一種結晶型。

於一具體實施例中，本文公開的任何組合物、配方、劑型的製劑可在厭氧條件下製備。

於一具體實施例中，這種劑量以每日劑量的形式給予一患者，不論是每日單一劑量，還是分為多部分每日施用多次，例如每日兩次、三次，或四次。

治療用途

本發明亦提供與細胞增殖有關的疾病之治療。於一方面，提供選擇性活化p53蛋白之方法，該方法包含使患有細胞增殖相關疾病的細胞與本發明化合物接觸。於一具體實施例中，該方法包含使癌細胞及/或腫瘤細胞與化合物I，或其一醫藥上可接受的鹽類、酯類及/或溶劑化物的結晶型接觸，如本文所公開。於另一具體實施例中，使癌細胞及/或腫瘤細胞與化合物I，或其一醫藥上可接受的鹽類、酯類及/或溶劑化物的結晶型接觸，如本文所公開，其可誘導細胞凋亡或減輕或預防疾病的發展。

於一具體實施例中，本發明提供一穩定G-四鏈體(G4)之方法，該方法包含使患有與細胞增殖有關的疾病的細胞與至少一種本發明之化合物接觸。於一具體實施例中，該方法包含使癌細胞及/或腫瘤細胞與至少一種本發明之化合物接觸。於另一具體實施例中，使癌症及/或腫瘤細胞與至少一種本發明之化合物接觸的方法可誘導細胞凋亡或減輕或延遲疾病的發展。

於一具體實施例中，本發明之化合物可以一有效地穩定G4的量施用於癌細胞及/或腫瘤細胞，這可能導致細胞死亡或凋亡。

本發明亦提供於一個體中治療、預防、改善及/或減輕以細胞增殖為特徵的疾病或病症的進展之方法。更具體而言，本發明之方法包括於一個體中施用一有效量的本文所述之喹諾酮化合物的結晶型以治療以細胞增殖為特徵的病症或病狀。可以一有效地選擇性活化癌症及/或腫瘤細胞中的p53蛋白的量來施用該結晶型，這可能導致細胞死亡或凋亡。在整個本申請案中，「個體」以及「患者」等詞可互換使用。

於一具體實施例中，本發明涉及一種治療癌症之方法，其包括對一有此需要的個體施用一有效量的本發明之化合物。於一具體實施例中，透過本文公開之方法治療或改善的癌症可選自急性淋巴細胞白血病、急性髓細胞性白血病、腎上腺皮質癌、愛滋病相關癌症、卡波西肉瘤、淋巴瘤、肛門癌、闌尾癌、星形細胞瘤、兒童非典型畸胎狀/橫紋肌瘤、基底細胞癌、皮膚癌(非黑色素瘤)、兒童期膽管癌、肝外膀胱癌、骨癌、Ewing氏肉瘤家族、骨肉瘤與惡性纖維組織細胞瘤、腦幹膠質瘤、腦腫瘤、胚胎腫瘤、生殖細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、支氣管腫瘤、伯基特淋巴瘤(非霍奇金淋巴瘤)、類癌瘤、未知原發性胃腸道癌、心(心臟)腫瘤、淋巴瘤、原發性、子宮頸癌、兒童癌、脊索瘤、慢性淋巴細胞性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性骨髓增生性腫瘤結腸癌、大腸癌、皮膚T細胞淋巴瘤、原位導管癌、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、黏膜成神經細胞瘤、Ewing氏肉瘤、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、肝外膽管癌、眼癌、眼內黑素瘤、視網膜母細胞瘤、骨的纖維組織細胞瘤、惡性，以及骨肉瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸道類癌、胃腸道間質瘤、性腺外癌、卵巢癌、睾丸癌、妊娠滋養細胞疾病、膠質瘤、腦幹癌、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝細胞(肝臟)癌、組織細胞增生症、朗格漢斯細胞癌、霍奇金淋巴瘤、下嚥癌、眼內黑色素瘤、胰島細胞腫瘤、胰腺神經內分泌腫瘤、卡波西肉瘤、腎癌、腎細胞癌、威爾姆斯腫瘤與其他兒童腎臟腫瘤、朗格漢斯細胞組織細胞增生症、喉癌、白血病、慢性淋巴細胞癌、慢性骨髓性癌、毛細胞癌、嘴唇與口腔癌、肝癌(原發性)、小葉原位癌(Lobular Carcinoma In Situ, LCIS)、肺癌、非小細胞癌、小細胞癌、淋巴瘤、皮膚T細胞(蕈樣真菌病與塞薩里氏症候群)、霍奇金癌症、非霍奇金癌症、巨球蛋白血症、華氏(Waldenström)巨球蛋白血症、男性乳癌、骨與骨肉瘤的惡性纖維組織細胞瘤、黑色素瘤、眼內(眼)癌、默克爾細胞癌、間皮瘤、原發性隱匿性惡性轉移鱗狀上皮癌、涉及NUT基因的中線癌、口腔癌、多發性內分泌腫瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞瘤、蕈樣真菌病、骨髓增生異常症候群、骨髓增生異常/骨髓增生性腫瘤、慢性骨髓性白血病、急性骨髓性白血病、多發性骨髓瘤、慢性骨髓增生性腫瘤、鼻腔與鼻旁竇癌、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小細胞肺癌、口癌、口腔癌、唇與口咽癌、骨肉瘤與骨惡性纖維組織細胞瘤、上皮癌、低惡性腫瘤、胰臟癌、胰腺神經內分泌腫瘤(胰島細胞瘤)、乳頭狀瘤病、副神經節瘤、甲狀旁腺癌、陰莖癌、咽癌、嗜鉻細胞瘤、垂體瘤、漿細胞瘤/多發性骨髓瘤、胸膜肺母細胞瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、直腸癌、腎細胞(腎臟)癌、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、Ewing氏癌、卡波西癌、骨肉瘤(骨癌)、軟組織癌、子宮癌、塞薩里症候群、皮膚癌、兒童黑色素瘤、默克爾細胞癌、非黑色素瘤、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、鱗狀細胞癌、皮膚癌(非黑色素瘤)、兒童鱗狀上皮癌、隱匿性原發性、轉移性癌、胃癌(胃癌)、T細胞淋巴瘤、皮膚癌、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂與輸尿管的移行細胞癌、未知原發性、兒童癌、兒童期異常癌症、尿道癌、子宮癌、子宮內膜癌、子宮肉瘤、陰道癌、外陰癌、華氏巨球蛋白血症、威爾姆斯腫瘤，或女性癌症。

此外，公開用於治療癌症、癌細胞、腫瘤，或腫瘤細胞之方法。可透過本發明之方法治療的癌症的非限制性實例包括以下癌症或癌細胞：大腸、乳房、肺、肝、胰腺、淋巴結、結腸、直腸、前列腺、腦、頭頸、皮膚、卵巢、子宮頸、甲狀腺、膀胱、腎臟、血液及心臟(例如，白血病、淋巴瘤，以及癌症)。可透過本發明之方法治療的腫瘤的非限制性實例包括以下的腫瘤及腫瘤細胞：大腸、乳房、肺、肝、胰腺、淋巴結、結腸、直腸、前列腺、腦、頭、頸、皮膚、腎臟、血液及心臟(例如，白血病、淋巴瘤，以及癌症)、子宮、胃腸道、喉，以及口腔。

於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症可選自由下列所組成之群組：血癌(血液系統惡性腫瘤)、大腸癌、乳癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、子宮頸癌、Ewing氏肉瘤、胰臟癌、淋巴結癌、結腸癌、前列腺癌、腦癌、頭頸癌、皮膚癌、腎癌、心臟癌、子宮癌、胃腸道惡性腫瘤，以及喉與口腔癌。於某些具體實施例中，透過該方法治療或改善的癌症選自由下列所組成之群組：子宮癌、胃腸道惡性腫瘤，以及喉癌及口腔癌。於一具體實施例中，透過該方法治療或改善的癌症為血液系統惡性腫瘤，其選自由下列所組成之群組：白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，以及多發性骨髓瘤。於一具體實施例中，透過本文公開之任何一種方法治療或改善的癌症可選自由下列所組成之群組：血液系統惡性腫瘤、大腸癌、乳癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、子宮頸癌、Ewing氏肉瘤、胰臟癌、淋巴結癌、結腸癌、前列腺癌、腦癌、頭頸癌、皮膚癌、腎癌、骨肉瘤，以及心臟癌。於一具體實施例中，透過該方法治療或改善的癌症為血癌，其選自由下列所組成之群組：白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，以及多發性骨髓瘤。

於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療乳癌。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療卵巢癌。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療實性瘤。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療胰臟癌。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療胰腺腫瘤。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療非小細胞肺癌。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療血液系統惡性腫瘤。於一具體實施例中，本發明之化合物可用於治療血液系統惡性腫瘤。

於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或減輕的癌症可為其中個體在一DNA修復基因中具有一突變。於一特定的具體實施例中，該DNA修復基因為一同源重組基因。於另一具體實施例中，該DNA修復基因為一同源重組(homologous recombination，HR)依賴性去氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)雙鏈斷裂(double strand break，DSB)修復途徑中的基因。於一特定的具體實施例中，該DNA修復基因為一同源重組(HR)或非同源末端連接(non-homologous end joining，NHEJ)基因。於另一具體實施例中，該DNA修復基因為同源重組(HR)或非同源末端連接(NHEJ)依賴性去氧核糖核酸(DNA)雙鏈斷裂(DSB)修復途徑中的基因。於另一方法中，該DNA修復基因係選自由下列所組成之群組中的一個或多個基因：BRCA-1 、BRCA-2 、ATM 、ATR 、CHK1 、CHK2 、Rad51 、RPA ，以及XRCC3 。

於本文公開的任何一種方法之一具體實施例中，該個體在HR途徑、Fanconi貧血途徑、錯配修復途徑、ATM途徑、細胞週期途徑、p53訊息傳遞途徑、聚合酶途徑、 拓撲異構酶途徑中的一種或多種基因中具有一突變。於一具體實施例中，該個體於一種或多種基因中具有一突變，該基因在HR修復、ATM途徑、細胞週期、拓撲異構酶、雙鏈斷裂修復、切除修復、C-Myb轉錄因子網絡、p-53訊息傳遞、 及/或凋亡或基因組穩定性中具有一功能。於一具體實施例中，該個體於選自以下的一種或多種基因中具有一突變：BRCA1 、BRCA2 、PTEN 、ATM 、CHEK1 、TOP2A 、ABL1 、PER1 、RAD51 、ERCC5 、NBN 、TRIM28 、SETMAR 、RAD54L 、EYA1 ，以及TP53 。於一具體實施例中，該個體於選自以下的一種或多種基因中具有一突變：ARID1A 、ATM 、ATR 、BAP1 、BARD1 、BLM 、BRCA1 、BRCA2 、CHEK1 、CHEK2 、ERCC3 、FANCG 、FANCI 、FANCL 、HELQ 、MLH1 、MRE11A 、MSH2 、MSH6 、MUTYH 、PMS1 、POLE 、POLR1B 、PTEN 、RAD17 、RAD51D 、RAD54L 、TOP3A ，及/或WRN 。

於一具體實施例中，該個體在選自BRCA1 、BRCA2 、TP53 ，以及PALB2 的一種或多種基因中具有一突變。於另一具體實施例中，該個體在HR途徑中的BRCA1 及/或BRCA2 基因及/或其他基因中具有一突變。於某些具體實施例中，該突變為體細胞突變。於其他具體實施例中，該突變為一生殖細胞突變。

於一具體實施例中，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類之功效與HR途徑或Fanconi貧血途徑中基因的突變或複製數丟失有關，其中該基因選自：ARID1A 、ATM 、ATR 、BAP1 、BARD1 、BLM 、BRCA1 、BRCA2 、FANCG 、FANCI 、FANCL 、HELQ 、MRE11A 、NBN 、PALB2 、PTEN 、RAD51 、RAD51D 、RAD54L ，及/或WRN 。於一具體實施例中，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類之功效與HR途徑基因BRCA2 及/或PALB2 的突變或複製數丟失有關。

於另一具體實施例中，透過該方法治療或改善的癌症包含在BRCA1 基因(第1型乳癌)、BRCA2 (第2型乳癌)，及/或同源重組途徑的其他成員中具有缺陷的癌細胞。於另一具體實施例中，該癌細胞缺乏BRCA1 及/或BRCA2 。於另一具體實施例中，該癌細胞對於BRCA1 及/或BRCA2 中的突變為同基因型組合的。於另一具體實施例中，該癌細胞對於BRCA1 及/或BRCA2 中的突變為異基因型組合的。於某些具體實施例中，該癌細胞缺乏生殖細胞的BRCA1 及/或BRCA2 。於另一具體實施例中，癌細胞缺乏體細胞的BRCA1 及/或BRCA2 。

於一具體實施例中，透過本文公開之任何一種方法治療或改善的癌症為BRCA2 缺陷的。於另一具體實施例中，相對於BRCA2 充足或BRCA2 野生型細胞，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明之化合物在BRCA2 缺陷或BRCA2 敲除細胞中誘導更多的凋亡細胞死亡。於一具體實施例中，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明之化合物對BRCA2 缺陷型或BRCA2 敲除細胞的選擇性毒性高於對BRCA2 充足或BRCA2 野生型細胞的毒性。於其他具體實施例中，相較於BRCA2 充足或BRCA2 野生型細胞，BRCA2 缺陷或BRCA2 敲除細胞對化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明化合物表現出更高的敏感性。

於某些具體實施例中，透過本文公開之任何一種方法治療或減輕的癌症的特徵在於BRCA1 或BRCA2 基因中的一個或多個突變。BRCA1 與BRCA2 為腫瘤抑制基因，編碼與DNA損傷修復有關的蛋白質。改變BRCA1 或BRCA2 蛋白表現或活性的突變可能導致細胞中遺傳改變的積累，並可能導致一個體罹患癌症。 此類突變於本文中稱為「疾病相關突變」。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA1 與BRCA2 基因中的一個或多個突變。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA1 基因中的一個或多個突變，但是在BRCA2 基因中沒有突變。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA2 基因中的一個或多個突變，但是在BRCA1 基因中沒有突變。

於某些具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症的特徵在於BRCA1 或BRCA2 中的一種或多種與疾病相關的突變。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA1 與BRCA2 中的一種或多種與疾病相關的突變。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA1 中的一種或多種與疾病相關的突變，但在BRCA2 中不具有一與疾病相關的突變。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於BRCA2 中的一種或多種與疾病相關的突變，但是在BRCA1 中沒有疾病相關的突變。

於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症為BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症。於某些具體實施例中，該BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症為BRCA2 突變的癌症。於其他具體實施例中，該BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於一具體實施例中，該BRCA突變或類BRCA突變的癌症為乳癌或前列腺癌。於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症為BRCA 突變的癌症。於某些具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為BRCA2 突變的癌症。於其他具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於其他具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌，或胰臟癌。於一具體實施例中，該BRCA 突變的癌症為乳癌或前列腺癌。於某些具體實施例中，該BRCA2 突變的癌症為乳癌或卵巢癌。於某些具體實施例中，該BRCA2 突變的癌症為乳癌。於某些具體實施例中，該BRCA2 突變的癌症為卵巢癌。

於某些具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症為BRCA 驅動的癌症。於某些具體實施例中，該癌症為BRCA1 驅動的癌症。於某些具體實施例中，該癌症為BRCA2 驅動的癌症。於某些具體實施例中，該癌症為BRCA1 與BRCA2 驅動的癌症。於某些具體實施例中，該癌症既非BRCA1 也非BRCA2 驅動的癌症。

於一具體實施例中，本發明涉及一種用於治療或改善一人類個體中的細胞增殖失調之方法，包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之化合物或一由如本文所公開之本發明的化合物製備的製劑。於某些具體實施例中，該人類個體攜帶一BRCA 突變。 於其他具體實施例中，該人類個體攜帶一BRCA2 突變。於另一具體實施例中，該人類個體對於BRCA2 中的突變為同基因型組合的。

於一具體實施例中，本發明涉及一種用於治療或改善人類個體中的細胞增殖失調之方法，包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之化合物或一由本發明之一化合物製備的製劑。於某些具體實施例中，該人類個體攜帶一BRCA 突變。於其他具體實施例中，該人類個體攜帶一BRCA2 突變。於另一具體實施例中，該人類個體對於BRCA2 中的突變為同基因型組合的。

於一具體實施例中，該BRCA2 突變引起BRCA2 基因喪失其功能。於一具體實施例中，該BRCA2 突變為功能喪失突變。於一具體實施例中，該BRCA2 突變為BRCA2 基因的取代、有害的截短、剪接、插入，或缺失。

於一具體實施例中，BRCA2 突變以以下一種或多種編碼變化或突變形式存在：4088insA、c.68-80insT、c.793+34T＞G、999del5、6503delTT、4486delG、2594delC、5382insC、3829delT、Q563X、3438G＞T、1675delA、999del5、8295T4A、9900insA、5579insA、7647delTG、7253delAA、9303ins31、3034del4bp、5910C3G、6676insTA、6085G＞T、8765delAG、3398delAAAAG、1499insA、7525_7526insT、6174delT、c.289G＞T、c.2950G＞T、c.7963C＞T、c.8878C＞T、IVS6þ1G4A、6503-6504delTT、9132delC、9254del5、c.9254_9258delATCAT、c.3492_3493insT、9475A＞G、c.9026_9030delATCAT、c.3264insT、c.8978_8991del14、c.156_157insAlu、6238ins2del21、10323delCins11、8876delC、8138_8142del5、c.8765_8766delAG、外顯子21–24 del、c.6589delA、4817A＞G、8477delAGA、8984delG、G4X、3783del10、c.5101C＞T、c.5433_5436delGGAA、c.7806−2A＞G、c.5291C＞G、c.3975_3978dupTGCT、IVS16−2A＞G、c.3318C＞A、c.4790C＞A、9326insA and 6174delT、8984delG、1913T＞A、1342C＞A、3199A＞G、1093A＞C、c.3394C＞T、c.7697T＞C、5531delTT、C5507G、6174delT、c.5373_5376 del GTAT、c.373G＞T、S2219X、C1290Y、6633del5、3034delACAA、818delA、外顯子 8-9 del、c.3036_3039delACAA、c.6024_6025_delTA、c.2732_2733insA、c.3870_3873delG、4150G＞T、6027del4、c.5114_5117delTAAA、c.2639_2640delTG、6880 insG、3034 del AAAC、695insT、1528del4、9318del4、S1099X、5802delAATT、8732C＞A、c.2835C＞A、c.7480C＞T、1627A.T、3972delTGAG、7708C.T、7883delTTAA、c.2808_2811delACAA、c.3109C＞T、c.7436_7805del370、c.9097_9098insA、2670delC、3073delT、6696-7delTC、外顯子4–11 dup、4859delA、4265delCT、1342C.A、490 delCT、3337C＞T、5057delTG、g.-1235G＞A、g.-26G＞A、g.681+56C＞T、c.865A＞C、c.1114A＞C、c.1365A＞G、c.2229T＞C、c.2971A＞G、c.3396A＞G、c.3516G＞A、c.3807T＞C、c.4415_4418delAGAA、c.5529A＞C、c.6033_6034insGT、c.7242A＞G、g.7435+53C＞T、g.7806−14T＞C、g.8755−66T＞C、c.4415-4418delAGAA、c.6033insGT、c.5576_5579delTTAA、c.9485−1G＞A、4265delCT、4859delA、6775G＞T、p.Glu2183X、c.2699_2704delTAAATG、4706delAAAG、R2336P、IVS2+1G＞A、8765delAG、999 del 5、1537 del4、5909 insA、c.211dupA、c.3381delT/3609delT、c.7110delA/7338delA、c.7235insG/7463insG、c.2826_2829del、c.6447_6448dup、c.5771_5774del，及/或5999del4。參見Karami, F.等人，BioMed Res. Int’l . 2013年,2013 , 文章編號：928562，出於所有目的，透過引用將其全部內容合併於此。

於一具體實施例中，BRCA2 突變以以下一種或多種編碼變化或突變形式存在：在外顯子20的c.8537_8538del AG、c.8537_8538del AG突變 ，在外顯子7的c.859G＞C、c. 859G＞C突變，在外顯子11的c.4614T＞C、p.Ser1538Ser同義突變、c.5946delT、p.S1982fs、c.6819DelinsGT、c.6592G＞T、c.3847_3848delGT、c.6821G＞T，或c.6821G＞T突變。

於一具體實施例中，本發明之化合物證明，相對於親本細胞株，係對一BRCA2 無效細胞株敏感。於一具體實施例中，該BRCA2 無效細胞株的敏感性比BRCA2 野生型細胞株高至少200倍。於其他實施例中，該靈敏度至少高二十倍。於某些具體實施例中，該靈敏度高至少200倍。於其他具體實施例中，該靈敏度高至少2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、125、150、175、200，或400倍。

於一具體實施例中，本發明涉及用於治療一個體中的癌症之方法，包含對該個體施用一治療有效量的化合物I或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物，其中該個體具有一PALB2 突變及/或一BRCA2 突變。於一具體實施例中，該個體具有一PALB2 突變。於一具體實施例中，該個體具有一BRCA2 突變。於一具體實施例中，該個體具有一PALB2 突變以及一BRCA2 突變。於一具體實施例中，該個體在同源重組途徑中具有一種或多種其他基因突變。

於另一具體實施例中，透過該方法治療或改善的癌症包含在PALB2 基因中具有缺陷的癌細胞。於另一具體實施例中，該癌細胞缺乏PALB2 。於另一具體實施例中，該癌細胞對於PALB2 中的突變為同基因型組合的。於另一具體實施例中，該癌細胞對於PALB2 中的突變為異基因型組合的。

於一具體實施例中，相對於PALB2 充足或PALB2 野生型細胞，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明之化合物在缺乏PALB2 或PALB2 敲除的細胞中誘導更多的凋亡細胞死亡。於一具體實施例中，化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明之化合物對PALB2 缺陷型或PALB2 敲除細胞的選擇性毒性高於PALB2 充足或PALB2 野生型細胞。於其他具體實施例中，相較於PALB2 充足或PALB2 野生型細胞，PALB2 缺陷或PALB2 敲除細胞對化合物I或其醫藥上可接受的鹽類或溶劑化物或本發明化合物表現出更高的敏感性。

於某些具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或減輕的癌症的特徵在於PALB2 基因中的一種或多種突變。改變PALB2蛋白表現或活性的突變可能導致細胞中遺傳改變的積累，並可能導致個體罹患癌症。此類突變於本文中稱為「疾病相關突變」。於某些具體實施例中，該癌症的特徵在於PALB2 基因中的一種或多種突變。

於某些具體實施例中，透過本文公開之任何一種方法治療或改善的癌症的特徵在於PALB2 中的一種或多種與疾病相關的突變。

於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症為PALB2 突變或類PALB2 突變的癌症。於某些具體實施例中，該PALB2 突變或類PALB2 突變的癌症為一PALB2 突變的癌症。於其他具體實施例中，該PALB2 突變或類PALB2 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於一具體實施例中，該PALB2 突變或類PALB2 突變的癌症為乳癌或前列腺癌。於一具體實施例中，透過本文公開的任何一種方法治療或改善的癌症為PALB2 突變的癌症(PALB2 突變型癌症)。於其他具體實施例中，該PALB2 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。於其他具體實施例中，該PALB2 突變的癌症為乳癌、卵巢癌，或胰臟癌。於一具體實施例中，該PALB2 突變的癌症為乳癌或前列腺癌。於一具體實施例中，該PALB2 突變的癌症為乳癌。

於一具體實施例中，該PALB2 突變引起PALB2 基因喪失其功能。於一具體實施例中，該PALB2 突變為一功能喪失突變。於一具體實施例中，該PALB2突變為PALB2 基因的取代、有害的截短、剪接、插入，或缺失。於某些具體實施例中，該PALB2 突變為單等位基因功能喪失突變。於其他具體實施例中，該PALB2 突變為雙等位基因功能喪失突變。

於一具體實施例中，本發明涉及一種用於治療或改善一人類個體中的細胞增殖失調之方法，包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由如本文所公開之本發明的化合物製備的製劑。於某些具體實施例中，該人類個體攜帶一PALB2 突變。於另一具體實施例中，該人類個體對於PALB2 中的突變為同基因型組合的。

於某些具體實施例中，透過本文公開之任何一種方法治療或改善的癌症為PALB2 驅動的癌症。

於一具體實施例中，本發明涉及一種用於治療或改善一人類個體中的細胞增殖失調之方法，包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之一化合物製備的製劑。於某些具體實施例中，該人類個體攜帶一PALB2 突變。於另一具體實施例中，該人類個體對於PALB2 中的突變為同基因型組合的。

於一具體實施例中，PALB2 突變以以下一種或多種編碼變化存在：c.48G＞A、c.72del、c.156del、c.172_175del、c.196C＞T、c.229del、c.451C＞T、c.509_510del、c.757_758del、c.886del、c.956_962del、c.1027C＞T、c.1037_1041del、c.1108C＞T、c.1240C＞T、c.1314del、c.1431del、c.1571C＞G、c.1591_1600del、c.1592del、c.1653T＞A、c.2074C＞T、c.2167_2168del、c.2257C＞T、c.2323C＞T、c.2386G＞T、c.2515−1G＞T、c.2521del、c.2686dup、c.2718G＞A、c.2787_2788del、c.2834+1G＞T、c.2835−1G＞C、c.2888del、c.2919_2920del、c.2982dup、c.3022del、c.3113G＞A、c.3116del、c.3201+1G＞C、c.3323del、c.3423_3426del、c.3426dup、c.3456dup、c.3497_3498del、c.3504_3505del、c.3549C＞A、c.3549C＞G、del5340bp，或c.3362del。參見Antoniou, A. C.等人，N. Engl. J. Med. 2014年,371 , 497-506，其出於所有目的透過引用整體併入本文。

於一具體實施例中，本發明涉及用於治療一個體的癌症之方法，包含 a) 確定該個體是否攜帶BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，且 b) 對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否攜帶一BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，且 b) 如果該個體具有BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否攜帶BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，且 b) 如果該個體具有BRCA2 或PALB2 突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否攜帶BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，且 b) 如果該個體具有BRCA2 突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否攜帶BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 突變，且 b) 如果該個體具有PALB2 突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。

於一具體實施例中，本發明涉及用於治療一個體的癌症之方法，包含 a) 確定該個體是否在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，且 b) 對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，且 b) 如果該個體在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中具有一與疾病相關的突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，且 b) 如果該個體在BRCA2 或PALB2 基因中具有疾病相關的突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，且 b) 如果該個體在BRCA2 基因中具有疾病相關的突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於一具體實施例中，治療一個體的癌症之方法包含 a) 確定該個體是否在BRCA1 、BRCA2 ，或PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，且 b) 如果該個體在PALB2 基因中攜帶一疾病相關突變，則對該個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。於另一具體實施例中，該癌細胞缺乏BRCA1 及/或BRCA2 。於另一具體實施例中，該癌細胞對於BRCA1 及/或BRCA2 中的突變為同基因型組合的。於另一具體實施例中，該癌細胞對於BRCA1 及/或BRCA2 中的突變為異基因型組合的。於某些具體實施例中，該癌細胞缺乏生殖細胞BRCA1 及/或BRCA2 。於另一具體實施例中，癌細胞缺乏體細胞BRCA1 及/或BRCA2 。

此外，本發明涉及用於治療癌症、癌細胞、腫瘤，或腫瘤細胞之方法，該方法包括施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。本發明亦涉及用於治療癌症、癌細胞、腫瘤，或腫瘤細胞之方法，該方法包括對一有此需要的個體施用一治療有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。可透過本發明之方法治療的癌症之非限制性實例包括以下癌症或癌細胞：大腸、乳房、卵巢、子宮頸、肺、肝臟、胰腺、淋巴結、結腸、直腸、前列腺、腦、頭和頸、皮膚、腎臟、骨肉瘤、骨骼(例如，Ewing氏肉瘤)、血液及心臟(例如，白血病、淋巴瘤、癌)、子宮、胃腸道惡性腫瘤，以及喉與口腔癌。可透過本發明之方法治療的腫瘤的非限制性實例包括以下的腫瘤及腫瘤細胞：大腸、乳房、卵巢、子宮頸、肺、肝臟、胰腺、淋巴結、結腸、直腸、前列腺、腦、頭和頸、皮膚、腎臟、骨肉瘤、骨骼(例如，Ewing氏肉瘤)、血液及心臟(例如，白血病、淋巴瘤、癌)、子宮、胃腸道惡性腫瘤，以及喉與口腔癌。

本發明亦提供降低Pol I轉錄之方法，該方法包含將本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑施用於一有此需要的個體。於某些具體實施例中，在周邊血單核細胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)中抑制Pol I轉錄。於其他具體實施例中，可在靜脈注射輸注後一小時在PBMC中觀察到Pol I轉錄的抑制，該劑量包含一有效量的本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑。

於一具體實施例中，在輸注後1小時，PBMC中Pol I轉錄的抑制處於約15%或更高抑制的平均程度。於另一具體實施例中，在輸注後1小時，PBMC中的Pol I轉錄的平均程度為約5%或更高抑制，約10%或更高抑制，約15%或更高抑制，約20%或更高抑制， 約25%或更高抑制，約30%或更高抑制，約35%或更高抑制，約40%或更高抑制，約45%或更高抑制，約50%或更高抑制，約55%或更高抑制，約65 %或更高抑制，或約70%或更高抑制。

於本文公開的本發明方法之一具體實施例中，可在磁活化細胞分選(magnetic-activated cell sorting, MACS)系統中分選的腫瘤細胞中觀察到Pol I轉錄的抑制。

如本文所用，可使用本領域技術人員已知的各種方法中的任何一種來施用或進行。本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑可以例如以下之法施用：皮下、靜脈內、腸胃外、腹膜內、皮內、肌肉內、局部、腸內(例如，口服)、直腸、鼻、頰、舌下、陰道，透過吸入噴霧，透過藥物幫浦，或透過植入的儲庫以含有常規無毒、生理上可接受的載體或載劑的劑型。包含本發明化合物的製劑或組合物可例如皮下、靜脈內、腸胃外、腹膜內、皮內、肌內、局部、腸內(例如，口服)、直腸、鼻、頰、舌下、陰道，透過吸入噴霧劑，透過藥物幫浦，或透過植入的貯存器以含有常規無毒、生理上可接受的載體或載劑的劑型。於一具體實施例中，本發明之組合物於靜脈內施用。

此外，可將本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑施用於需要治療的局部區域。例如，可將由本發明化合物製備的製劑施用於需要治療的局部區域。例如，可透過以下方式局部施用，但不限於，在手術期間局部輸液、局部施用、經皮貼劑、透過注射、透過導管、透過栓劑，或透過植入(植入物可選擇地為多孔、無孔，或凝膠狀材料)包括膜，例如，矽膠膜或纖維。

用於施用於一個體的本發明化合物的製劑(例如，糖漿劑、酏劑、膠囊劑、片劑、泡沫劑、乳劑、凝膠劑等)將部分取決於其給藥途徑。例如，針對黏膜(例如，口腔黏膜、直腸、腸黏膜、支氣管黏膜)給藥，可使用滴鼻劑、氣霧劑、吸入劑、噴霧器、滴眼劑或栓劑。本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑亦可用於包被生物可植入材料，以增強神經突向外生長、神經存活或，或與植入物表面的細胞相互作用。可將本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑與其他生物活性劑例如抗癌劑、鎮痛藥、抗炎劑、麻醉藥，以及其他可控制一種或多種症狀或以細胞增殖為特徵的疾病或病症的病因的藥劑一起施用。

於一具體實施例中，如本文所公開的，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑可與一種或多種治療活性劑組合施用。於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為抗癌劑。於某些具體實施例中，該一種或多種具有治療活性的抗癌劑包括，但不限於，紫杉醇、長春鹼、長春新鹼、依托泊苷、阿黴素、赫塞普汀、拉帕替尼、吉非替尼、厄洛替尼、他莫昔芬、氟維司群、阿那唑、依托洛來唑、依西美坦、法倔唑、環磷醯胺、泰索帝、美法崙、苯丁酸氮芥、甲氯乙胺、苯丁酸氮芥、苯丙胺酸、芥末、環磷醯胺、異環磷醯胺、卡馬斯汀(BCNU)、洛莫斯汀(CCNU)、鏈脲佐菌素、白消安、硫替泰、順鉑、卡鉑、放線菌素(放線菌素D)、阿黴素(adriamycin)、柔紅黴素、伊達比星、米托蒽醌、普拉黴素、絲裂黴素C、博來黴素，或其組合等。於另一具體實施例中，該一種或多種治療活性抗癌劑包括，但不限於，聚(DP-核糖)聚合酶(poly (DP-ribose)polymerase，PARP)抑制劑。合適的PARP抑制劑包括，但不限於，4-(3-(1-(環丙烷羰基)哌嗪-4-羰基)-4-氟芐基)酞嗪-1(2H)-酮 (奧拉帕尼，AZD2281，Ku-0059436)、2-[(2R)-2-甲基吡咯烷-2-基]-1H-苯並咪唑-4-羧醯胺(維利帕尼，ABT-888)、(8S,9R)-5-氟-8-(4-氟苯基)-9-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8,9-二氫-2H-吡啶並[4,3,2-de]酞嗪-3(7H)-酮(他拉唑帕尼，BMN 673)、4-碘-3-硝基苯甲醯胺(因利帕尼，BSI-201)、8-氟-5-(4-((甲基胺基)甲基)苯基)-3,4-二氫-2H-氮雜並[5,4,3-cd]吲哚-1(6H)-酮磷酸(瑞卡帕尼，AG -014699，PF-01367338)、2-[4-[(二甲基胺基)甲基]苯基]-5,6-二氫咪唑並[4,5,1-jk ][1,4]苯並二氮雜-7(4H)-酮(AG14361)、3-胺基苯甲醯胺(ION -1001)、2-(2-氟-4-((S)-吡咯烷-2-基)苯基)-3H-苯並[d]咪唑-4-羧醯胺(A-966492)、N-(5,6-二氫-6-氧代-2-菲啶基)-2-乙醯胺鹽酸鹽(PJ34，PJ34 HCl)、MK-4827、3,4-二氫-4-氧代-3,4-二氫-4-氧代-N-[(1S)-1-苯乙基] -2-喹唑啉丙醯胺(ME0328)、5-(2-氧代-2-苯基乙氧基)-1(2H)-異喹啉酮(UPF-1069)、4-[[4-氟-3-[(4-甲氧基-1-哌啶基)羰基]苯基]甲基]-1(2H)-酞嗪酮(AZD 2461)、5-((3-氯苯基)胺基)苯基[c][2,6]萘啶-8-羧酸等。於另一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為免疫治療劑。於某些具體實施例中，該一種或多種免疫治療劑包括，但不限於，單株抗體、免疫效應細胞、過繼細胞轉移、免疫毒素、疫苗、細胞激素等。

於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑選自一烷化劑、一抗代謝物、一長春花生物鹼、一紫杉烷、一拓撲異構酶抑制劑、一抗腫瘤抗生素、一酪胺酸激酶抑制劑、一免疫抑制大環內酯、一Akt抑制劑、一HDAC抑制劑、一Hsp90抑制劑、一mTOR抑制劑、一PI3K/mTOR抑制劑、一PI3K抑制劑、一細胞週期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)抑制劑、一檢查點激酶(checkpoint kinase，CHK)抑制劑、一聚(DP-核糖)聚合酶(poly (DP-ribose)polymerase，PARP)抑制劑，或其組合。

於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一PI3K抑制劑。於另一具體實施例中，該PI3K抑制劑是依達拉西布(Idelalisib)。

於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一PARP抑制劑。於另一具體實施例中，該PARP抑制劑為奧拉帕里布(Olaparib)。

於其他具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一誘導免疫檢查點阻斷，例如，PD-1阻斷劑以及CTLA-4阻斷劑。

於某些具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一破壞程序性死亡1 (Programmed Death-1，PD-1)以及程序性死亡配體-1 (Programmed Death Ligand-1，PD-L1)之間的相互作用的抗體或其抗原結合部分。於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑選自由以下組成之群組：一抗PD-1抗體、一PD-1拮抗劑、一抗PD-L1抗體、一以PD-1表現為目標的siRNA、一以PD-L1表現為目標的siRNA，以及一PD-1或PD-L1的顯性負突變形式或可溶形式的胜肽、片段。

於一具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一單株抗體。於一具體實施例中，該單株抗體係選自由以下所組成之群組：抗PD-1抗體、納武利尤單抗(nivolumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、阿侖珠單抗(alemtuzumab)、貝伐珠單抗(bevacizumab)、本妥昔單抗(brentuximab, vedotin)，西妥昔單抗(cetuximab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab, ozogamicin)、替伊莫單抗(ibritumomab, tiuxetan)、依匹莫單抗(ipilimumab)、奧法木單抗(ofatumumab)、帕尼單抗(panitumumab)、利妥昔單抗(rituximab)、拖西莫單抗(tositumomab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、抗B7-H4、抗B7-H1、抗LAG3、BTLA、抗Tim3、抗B7-DC、抗CD160、MR拮抗劑抗體、抗4-1BB、抗OX40、 抗CD27，及/或CD40激動劑抗體。於某些具體實施例中，該一種或多種治療活性劑為一抗PD-1抗體。於其他具體實施例中，該抗PD-1抗體為一人源化抗體。於一具體實施例中，該單株抗體選自由納武利尤單抗(nivolumab)以及帕博利珠單抗(pembrolizumab)所組成之群組。於一特定的具體實施例中，該單株抗體為納武利尤單抗(nivolumab)。

於某些具體實施例中，出於所有目的，透過引用整體併入PCT專利申請公開第WO 2017/087235號中公開的一種或多種治療活性劑。

於另一具體實施例中，如本文所公開的，化合物I的結晶型或化合物I的醫藥上可接受的鹽類、酯類，及/或溶劑化物的結晶型可與放射療法組合施用。

此外，施用可包含在合適的期間內對一個體施用多種劑量。在回顧本發明內容後，可根據常規方法確定此類給藥方案。

本發明之結晶型通常以約0.01 mg/kg/劑量至約100 mg/kg/劑量的劑量給藥。或者，該劑量可為約0.1 mg/kg/劑量至約10 mg/kg/劑量；或約1 mg/kg/劑量至10 mg/kg/劑量。可使用延時釋放製劑，或者可按照方便的方式分多次劑量給藥。當使用其他方法(例如，靜脈內給藥)時，以約0.05至約10 mg/kg/小時，或者約0.1至約1 mg/kg/小時的速率向患病組織施用結晶型。當如本文所述靜脈內施用這些結晶型時，容易維持這種速率。通常，局部施用的製劑以約0.5 mg/kg/劑量至約10 mg/kg/劑量範圍的劑量施用。或者，以約1 mg/kg/劑量至約7.5 mg/kg/劑量或甚至約1 mg/kg/劑量至約5 mg/kg/劑量的劑量施用局部製劑。

對於單次劑量，約0.1至約100 mg/kg的範圍為合適的。連續給藥的合適範圍為約0.05至約10 mg/kg。

由於該方法與某些代謝及排泄功能具有良好的相關性，因此也可以每平方米體表面積的毫克數而非體重提供藥物劑量。此外，體表面積可作為成人與兒童以及不同動物物種中藥物劑量的共同標準(Freireich等人，(1966年) Cancer Chemother Rep. 50，219-244)。簡言之，為了將任何給定物種中的mg/kg劑量表示為等效的mg/sq m劑量，請將劑量乘以適當的km係數。於一成人中，100 mg/kg相當於100 mg/kg x 37 kg/sq m = 3700 mg/m² 。

本發明之劑型可以約5 mg至約500 mg的量包含本文公開的化合物I或其醫藥上可接受的鹽類、酯類，及/或溶劑化物。亦即，本發明之劑型可包含約5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、35 mg、40 mg、45 mg、50 mg、55 mg、60 mg、65 mg、70 mg、75 mg、80 mg、85 mg、90 mg、95 mg、100 mg、110 mg、120 mg、125 mg、130 mg、140 mg、150 mg、160 mg、170 mg、175 mg、180 mg、190 mg、200 mg、210 mg、220 mg、225 mg、230 mg、240 mg、250 mg、260 mg、270 mg、275 mg、280 mg、290 mg、300 mg、310 mg、320 mg、325 mg、330 mg、340 mg、350 mg、360 mg、370 mg、375 mg、380 mg、390 mg、400 mg、410 mg、420 mg、425 mg、430 mg、440 mg、450 mg、460 mg、470 mg、475 mg、480 mg、490 mg、500 mg，或介於其之間的任何值。於一具體實施例中，這樣的劑量以每日劑量的形式給予患者，不論該劑量為每日一次或每日多次，例如每日兩次、三次，或四次。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑，通常以約1 mg/m² 至約2000 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑，通常以約10 mg/m² 至約1500 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於另一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑，通常以約200 mg/m² 至約800 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於另一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑，通常以約20 mg/m² 至約300 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於某些具體實施例中，該劑量可根據所施用的化合物I或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的疾病或病症的類型(例如，癌症或實性瘤)而變化。於某些具體實施例中，該劑量可根據患者的健康狀況或患者對化合物I或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的敏感性而變化。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約25 mg/m² 至約2000 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑可以下列劑量：約25 mg/m² 、約 30 mg/m² 、約 35 mg/m² 、約 40 mg/m² 、約 45 mg/m² 、約 50 mg/m² 、約 55 mg/m² 、約 60 mg/m² 、約 65 mg/m² 、約 70 mg/m² 、約 75 mg/m² 、約 80 mg/m² 、約 85 mg/m² 、約 90 mg/m² 、約 95 mg/m² 、約 100 mg/m² 、約 110 mg/m² 、約 120 mg/m² 、約 125 mg/m² 、約 130 mg/m² 、約 140 mg/m² 、約 150 mg/m² 、約 160 mg/m² 、約 170 mg/m² 、約 175 mg/m² 、約 180 mg/m² 、約 190 mg/m² 、約 200 mg/m² 、約 210 mg/m² 、約 220 mg/m² 、約 225 mg/m² 、約 230 mg/m² 、約 240 mg/m² 、約 250 mg/m² 、約 260 mg/m² 、約 270 mg/m² 、約 275 mg/m² 、約 280 mg/m² 、約 290 mg/m² 、約 300 mg/m² 、約 310 mg/m² 、約 320 mg/m² 、約 325 mg/m² 、約 330 mg/m² 、約 340 mg/m² 、約 350 mg/m² 、約 360 mg/m² 、約 370 mg/m² 、約 375 mg/m² 、約 380 mg/m² 、約 390 mg/m² 、約 400 mg/m² 、約 410 mg/m² 、約 420 mg/m² 、約 425 mg/m² 、約 430 mg/m² 、約 440 mg/m² 、約 450 mg/m² 、約 460 mg/m² 、約 470 mg/m² 、約 475 mg/m² 、約 480 mg/m² 、約 490 mg/m² 、約 500 mg/m² 、約 510 mg/m² 、約 520 mg/m² 、約 525 mg/m² 、約 530 mg/m² 、約 540 mg/m² 、約 550 mg/m² 、約 560 mg/m² 、約 570 mg/m² 、約 575 mg/m² 、約 580 mg/m² 、約 590 mg/m² 、約 600 mg/m² 、約 610 mg/m² 、約 620 mg/m² 、約 625 mg/m² 、約 630 mg/m² 、約 640 mg/m² 、約 650 mg/m² 、約 660 mg/m² 、約 670 mg/m² 、約 675 mg/m² 、約 680 mg/m² 、約 690 mg/m² 、約 700 mg/m² 、約 710 mg/m² 、約 720 mg/m² 、約 725 mg/m² 、約 730 mg/m² 、約 740 mg/m² 、約 750 mg/m² 、約 760 mg/m² 、約 770 mg/m² 、約 775 mg/m² 、約 780 mg/m² 、約 790 mg/m² 、約 800 mg/m² 、約 810 mg/m² 、約 820 mg/m² 、約 825 mg/m² 、約 830 mg/m² 、約 840 mg/m² 、約 850 mg/m² 、約 860 mg/m² 、約 870 mg/m² 、約 875 mg/m² 、約 880 mg/m² 、約 890 mg/m² 、約 900 mg/m² 、約 910 mg/m² 、約 920 mg/m² 、約 925 mg/m² 、約 930 mg/m² 、約 940 mg/m² 、約 950 mg/m² 、約 960 mg/m² 、約 970 mg/m² 、約 975 mg/m² 、約 980 mg/m² 、約 990 mg/m² 、約 1000 mg/m² 、約 1010 mg/m² 、約 1020 mg/m² 、約 1025 mg/m² 、約 1030 mg/m² 、約 1040 mg/m² 、約 1050 mg/m² 、約 1060 mg/m² 、約 1070 mg/m² 、約 1075 mg/m² 、約 1080 mg/m² 、約 1090 mg/m² 、約 1100 mg/m² 、約 1110 mg/m² 、約 1120 mg/m² 、約 1125 mg/m² 、約 1130 mg/m² 、約 1140 mg/m² 、約 1150 mg/m² 、約 1160 mg/m² 、約 1170 mg/m² 、約 1175 mg/m² 、約 1180 mg/m² 、約 1190 mg/m² 、約 1200 mg/m² 、約 1210 mg/m² 、約 1220 mg/m² 、約 1225 mg/m² 、約 1230 mg/m² 、約 1240 mg/m² 、約 1250 mg/m² 、約 1260 mg/m² 、約 1270 mg/m² 、約 1275 mg/m² 、約 1280 mg/m² 、約 1290 mg/m² 、約 1300 mg/m² 、約 1310 mg/m² 、約 1320 mg/m² 、約 1325 mg/m² 、約 1330 mg/m² 、約 1340 mg/m² 、約 1350 mg/m² 、約 1360 mg/m² 、約 1370 mg/m² 、約 1375 mg/m² 、約 1380 mg/m² 、約 1390 mg/m² 、約 1400 mg/m² 、約 1410 mg/m² 、約 1420 mg/m² 、約 1425 mg/m² 、約 1430 mg/m² 、約 1440 mg/m² 、約 1450 mg/m² 、約 1460 mg/m² 、約 1470 mg/m² 、約 1475 mg/m² 、約 1480 mg/m² 、約 1490 mg/m² 、約 1500 mg/m² 、約 1510 mg/m² 、約 1520 mg/m² 、約 1525 mg/m² 、約 1530 mg/m² 、約 1540 mg/m² 、約 1550 mg/m² 、約 1560 mg/m² 、約 1570 mg/m² 、約 1575 mg/m² 、約 1580 mg/m² 、約 1590 mg/m² 、約 1500 mg/m² 、約 1610 mg/m² 、約 1620 mg/m² 、約 1625 mg/m² 、約 1630 mg/m² 、約 1640 mg/m² 、約 1650 mg/m² 、約 1660 mg/m² 、約 1670 mg/m² 、約 1675 mg/m² 、約 1680 mg/m² 、約 1690 mg/m² 、約 1700 mg/m² 、約 1710 mg/m² 、約 1720 mg/m² 、約 1725 mg/m² 、約 1730 mg/m² 、約 1740 mg/m² 、約 1750 mg/m² 、約 1760 mg/m² 、約 1770 mg/m² 、約 1775 mg/m² 、約 1780 mg/m² 、約 1790 mg/m² 、約 1800 mg/m² 、約 1810 mg/m² 、約 1820 mg/m² 、約 1825 mg/m² 、約 1830 mg/m² 、約 1840 mg/m² 、約 1850 mg/m² 、約 1860 mg/m² 、約 1870 mg/m² 、約 1875 mg/m² 、約 1880 mg/m² 、約 1890 mg/m² 、約 1900 mg/m² 、約 1910 mg/m² 、約 1920 mg/m² 、約 1925 mg/m² 、約 1930 mg/m² 、約 1940 mg/m² 、約 1950 mg/m² 、約 1960 mg/m² 、約 1970 mg/m² 、約 1975 mg/m² 、約 1980 mg/m² 、約 1990 mg/m² 、約 2000 mg/m² ，或其之間的任何值的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約150 mg/m² 至約700 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約150 mg/m² 至約300 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約150 mg/m² 至約250 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約170 mg/m² 的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約300 mg/m² 至約700 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約400 mg/m² 至約700 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約425 mg/m² 至約675 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約450 mg/m² 至約650 mg/m² 或其之間任何值或子範圍的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以約475 mg/m² 的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑通常以約小於約500 mg/m² 的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。於另一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑通常以約：少於約500 mg/m² 、少於約490 mg/m² 、少於約480 mg/m² 、少於約475 mg/m² 、少於約470 mg/m² 、少於約460 mg/m² 、少於約450 mg/m² 、少於約440 mg/m² 、少於約430 mg/m² 、少於約420 mg/m² 、少於約410 mg/m² 、少於約400 mg/m² 、少於約390 mg/m² 、少於約380 mg/m² 、少於約375 mg/m² 、少於約370 mg/m² 、少於約360 mg/m² 、少於約350 mg/m² 、少於約340 mg/m² 、少於約330 mg/m² 、少於約320 mg/m² 、少於約310 mg/m² 、少於約300 mg/m² 、少於約290 mg/m² 、少於約280 mg/m² 、少於約275 mg/m² 、少於約270 mg/m² 、少於約260 mg/m² 、少於約250 mg/m² 、少於約240 mg/m² 、少於約230 mg/m² 、少於約220 mg/m² 、少於約210 mg/m² 、少於約200 mg/m² 、少於約190 mg/m² 、少於約180 mg/m² ，或少於約170 mg/m² ，或其之間的任何值的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的劑量施用。

於某些具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑可以下列劑量施用於一癌症患者：少於約750 mg/m² 、少於約700 mg/m² 、少於約600 mg/m² 、少於約500 mg/m² 、少於約475 mg/m² 、少於約400 mg/m² 、少於約325 mg/m² 、少於約300 mg/m² 、少於約200 mg/m² 、少於約170 mg/m² ，或其之間的任何值的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物。於其他具體實施例中，本發明化合物或由本發明化合物製備的製劑可以小於約170 mg/m² 的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑合物的劑量施用於一癌症患者 ，每三週一次。於一具體實施例中，該癌症患者為一血癌患者。

於某些具體實施例中，可將本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以下列劑量施用於一癌症患者：約50 mg/m² 至約1550 mg/m² 、約 150 mg/m² 至約1250 mg/m² 、約 250 mg/m² 至約1050 mg/m² 、約 350 mg/m² 至約950 mg/m² 、約 375 mg/m² 至約850 mg/m² 、約 425 mg/m² 至約850 mg/m² 、約 450 mg/m² 至約800 mg/m² ，或約500 mg/m² 至約750 mg/m² ，或其之間的任何值的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物。於某些具體實施例中，本發明化合物或由本發明化合物製備的製劑可以小於約750 mg/m² 的化合物I，或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑合物的劑量施用於一癌症患者。 於其他具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑可以本文所述之施用頻率、施用週期或施用方案中的任一種施用於一癌症患者。於一具體實施例中，該治療係針對實性瘤。

本發明之劑型可每小時、每日、每週，或每月給藥。本發明之劑型可每日兩次或每日一次給藥。本發明之劑型可與食物一起或不與食物一起施用。

於一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑每週一次、每兩週一次、每三週一次、每四周一次，或每月一次給藥。於某些具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以包括每週一次給藥的四週治療週期(QWx4)給藥。於某些具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以四週的治療週期給藥，包括每週一次給藥，持續兩週，然後休息兩週(無治療) (QWx2)。於某些具體實施例中，以四週的治療週期給藥，包括每週一次給藥三週，然後是一週的休息期(無治療)。於某些具體實施例中，以三週的治療週期施用本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑，該治療週期包括每週一次施用，持續兩週，然後休息一週。於另一具體實施例中，本發明之化合物或由本發明之化合物製備的製劑以每三週施用一次。於其他具體實施例中，本發明化合物或由本發明化合物製備的製劑透過靜脈內輸注每三週施用一次。

於某些具體實施例中，本文所公開的以化合物I或其醫藥上可接受的鹽類及/或溶劑化物的治療方案可持續1個週期至20個週期或更長時間。醫師可確定適當的治療時間。

於某些具體實施例中，以本發明化合物的治療產生如PCT專利申請第PCT/US2019/018225號中所公開的PK範圍，出於所有目的，將其公開內容透過引用整體併入本文。

就本文公開的結晶型可採取模擬物或其片段的形式而言，應當理解的是，效力以及因此一有效量的劑量可有變化。然而，本領域技術人員可容易地評估本申請案目前設想的類型的結晶型的效力。

在以細胞增殖為特徵的漸進性疾病或病症的情況下，本申請案的結晶型通常以持續的方式施用。於某些情況下，本文公開的結晶型的施用可在疾病症狀出現之前開始，作為延遲或預防疾病的策略的一部分。於其他情況下，在疾病症狀發作後施用本文公開的結晶型，作為減慢或逆轉疾病過程的策略的一部分及/或改善細胞功能及減輕症狀的策略的一部分。

本領域技術人員理解，劑量範圍將取決於特定的結晶型及其效力。劑量範圍應理解為足以產生所需的作用，其中神經退行性疾​​病或其他病症以及與之相關的症狀得到改善及/或實現細胞存活，但劑量的作用範圍不大到不會引起難以控制的不良副作用。但是，應當理解的是，任何特定患者的具體劑量程度將取決於多種因素，包括所採用的具體結晶型的活性；具體的劑量取決於所使用的具體結晶型的活性；被治療者的年齡、體重、總體健康狀況、性別以及飲食；施用的時間及途徑；排泄率；先前已使用過的其他藥物；如本領域技術人員所熟知的，以及所治療的特定疾病的嚴重性。在發生任何併發症的情況下，劑量也可由個別醫生進行調整。當根據本申請案使用本文公開的結晶型時，預期不會有不可接受的毒理作用。

本文公開的結晶型的一有效量包括足以產生可測量的生物學反應的量。可改變本申請案的治療性結晶型的活性成分的實際劑量程度，以便施用有效地實現對於特定個體及/或應用所需的治療反應的量的活性結晶型。較佳地，施用最小劑量，且在不存在劑量限制性毒性的情況下將劑量逐步增加至最小有效量。治療有效劑量的確定與調節以及何時與如何進行這種調節的評估為本領域普通技術人員已知的。

進一步關於本申請案之方法，較佳的個體為一脊椎動物個體。較佳的脊椎動物為溫血的。較佳的溫血脊椎動物為哺乳動物。儘管應當理解的是，本申請案的原理顯示針對包括在術語「個體」中的所有脊椎動物物種的有效性，但是透過目前公開的方法治療的個體期望為人類。於本文中，脊椎動物應理解為需要治療神經退化性疾病的任何脊椎動物。

如此，本申請案提供對例如人類的哺乳動物以及由於瀕臨滅絕而重要的哺乳動物，例如西伯利亞虎的治療；具有重要經濟意義，例如在農場飼養供人類食用的動物；及/或對人類具有社會重要性的動物，例如寵物、動物園或農場中飼養的動物。這種動物的實例包括但不限於：食肉動物，例如貓及狗；豬，包括豬、肉豬，以及野豬；反芻動物及/或有蹄類動物，例如牛、公牛、綿羊、長頸鹿、鹿、山羊、野牛，以及駱駝；及馬。還提供鳥類的治療，包括那些在動物園中瀕臨滅絕及/或飼養的鳥類及禽類，尤其是家禽，例如禽類，如火雞、雞、鴨、鵝、珠雞等，因為牠們對人類也具有經濟重要性。因此，還提供對牲畜的治療，包括，但不限於，馴養的豬、反芻動物、有蹄類動物、馬(包括賽馬)、家禽等。

以下實施例進一步說明了本發明，但不應解釋為以任何方式限制其範圍。 實施例

分析方法 – 如下所述，將各種分析方法應用於目前的結晶型及其前體，以顯示其理化性質的特徵。

示差掃描量熱法 (DIFFERENTIAL SCANNING CALORIMETRY ， DSC) ：

DSC數據係透過TA儀器MDSC Q200收集的。通常，將質量範圍為1-5 mg的樣品上樣到蓋子上有小孔的T-zero密封鍋中，並在恆定的氮氣流(60 mL/分鐘)下進行分析。加熱過程的程序設置為從30℃開始，然後以10℃/分鐘的斜率在300℃下停止。

熱重分析 (THERMOGRAVIMETRIC ANALYSIS ， TGA):

通常，將樣品放置在貧乾的氧化鋁盤或鋁盤中。通常，使用吹掃流速為約50 mL/分鐘的氮氣在20℃至約300℃之間以10℃/分鐘的速度掃描該盤。

X 射線粉末繞射 (X-RAY POWDER DIFFRACTION ， XRPD):

XRPD圖係在Bruker AXS D8繞射儀上使用CuKα₁ 輻射(40 kV，40 mA)，θ-2θ測角計以及10 mm狹縫的發散，Ge單色儀以及LynxEye檢測器收集的。代表性的XRPD圖是在環境條件下收集的。掃描參數為：5-40°的角度範圍，0.02°的步長，以及0.6秒/步的掃描速度。

實施例1. 化合物I同質異晶物J (游離鹼)之製備

化合物I

醯胺化(粗化合物 I )：將49.00 kg的二氯甲烷(DCM)以及2.100 kg的化合物1加入反應器中，隨後加入2.00 kg的DCM沖洗液。將所得混合物在不超過30℃下攪拌不超過10分鐘。然後在不超過30℃下添加2.690 kg的化合物3，然後將所形成的混合物在不超過30℃下攪拌不超過10分鐘。將混合物轉移到另一個反應器中，然後以4.00 kg DCM沖洗。在不超過30℃下向該反應器中加入1.120 kg的化合物2。然後將所得混合物冷卻至-5℃至5℃。為此，在保持溫度不超過10℃的同時緩慢加入0.710 kg的AlCl₃ 。在完全添加AlCl₃ 之後，將反應混合物調節至0℃至10℃，並在0℃至10℃下攪拌不超過2小時。

反應完成後，將反應混合物轉移至不同的反應器中，隨後進行10.00 kg的DCM沖洗。為此，將24.950 kg的6.4% NaOH (水溶液)透過流量計進料，同時保持溫度不超過10℃。然後將反應混合物調節至20℃至30℃，並於20℃至30℃下攪拌不超過30分鐘。然後，將0.600 kg酸洗矽藻土545加入反應器中，並將反應混合物於20℃至30℃下攪拌不超過10分鐘。將反應混合物透過過濾器轉移至另一個反應器中，並以5.55 kg的DCM沖洗。

攪拌反應混合物，並沉降分離。將下(有機)層轉移至另一容器，並將上(水)層與乳液層留在反應器中。將11.10 kg的DCM加入到包含水層的反應器中。攪拌溶液並沉降用於相分離。將有機層轉移到包含來自第一次分離的有機層的容器中。丟棄水層。

將合併的有機層轉移至反應器中，並裝入12.300 kg的10% NaCl (水溶液)。攪拌溶液並使其沉降，然後分離。將分離的有機層置於真空下，將溫度控制在不超過30℃，直到剩餘11L。向有機層中加入25.00 Kg甲醇，並將所得混合物在不超過30℃的真空下蒸餾，直到剩下17L。將餾出物收集為廢物。蒸餾完成後，將3.00 kg甲醇沖洗到反應器中，並將所得漿液在20℃至30℃下攪拌不超過2小時。

過濾漿液，並以50.00 kg甲醇洗滌該濕潤的過濾餅，即粗製化合物I。

將4.80 kg鹽酸(HCl)與9.85 kg純化處理水(purified process water，PPW)加入反應器中，然後加入3.003 kg粗製化合物I，並於20℃至30℃下攪拌不超過90分鐘。過濾混合物，並加入33.20 kg甲醇，並將所得混合物過濾。將7.00 kg的30% NaOH(水溶液)加入反應混合物中，同時將溫度保持在20℃至30℃直至pH值不小於5。將pH調節的混合物轉移至不同的反應器中，並將0.05 kg的30% NaOH(水溶液)添加至反應混合物，同時將溫度保持在20℃至30℃直到pH值為12-13。一旦將pH值調節至12-13，將混合物加熱至60至65℃並攪拌不超過4小時，然後冷卻至20℃至30℃，隨後攪拌不超過1小時。過濾漿液，並以7.20 kg的MeOH/PPW洗滌濕潤的過濾餅，然後以18.00 kg的PPW洗滌，直到洗滌液的pH值達到約7。以3.60 kg的MeOH/PPW洗滌2.073 kg的濕潤過濾餅(最終的粗化合物I)，並將該濕潤過濾餅在不超過65℃下真空乾燥。

形成 HCl 鹽 ：將25.00 kg的DCM以及1.713 kg最終的粗化合物I裝入反應器。將反應混合物轉移到另一個反應器中，然後以43.00 kg的DCM潤洗。將所得混合物在20℃至30℃攪拌直至完全溶解。在單獨的容器中，裝入0.40 kg鹽酸(最少32%)以及2.7 kg的甲醇，並將混合物緩慢移至含有化合物I的反應器中，反應時間不超過1小時，同時將溫度保持在30℃以下。將所得混合物於20℃至30℃下攪拌不超過2小時。

過濾反應混合物，並以14.00 kg的DCM洗滌。將該濕潤過濾餅，化合物I HCl，在不超過40℃的真空下乾燥，直到其乾燥失重(LOD)達到不超過2.0%。

中和 / 同質異晶物形成 ：將4.10 kg的HCl以及8.00 kg的PPW裝入反應器中，然後加入1.726 kg的化合物I HCl鹽，並於20℃至30℃下攪拌不超過90分鐘。將反應轉移至另一個反應器中，並以29.00 kg甲醇洗滌先前的反應器，將其添加到新的反應器中。將6.05 kg的30% NaOH (水溶液)加入含有化合物I HCl的反應器中，同時將溫度保持在20℃至30℃，直到pH值不小於5。然後將混合物轉移到另一個反應器中，並在將溫度保持在20℃至30℃直至pH值為12-13的同時添加0.07 kg的30% NaOH (水溶液)。在pH 9-10左右析出結晶型。在進行的規模上，花費約4小時將pH值調節至12-13。然後將混合物加熱至60℃至65℃，攪拌不超過4小時，然後冷卻至20℃至30℃，攪拌不超過1小時。過濾所得漿液，並將濕潤過濾餅以5.80 kg的MeOH/PPW (3∶1)洗滌，然後以84.00 kg的PPW洗滌，直到洗滌液的pH值達到約7。最後，將濕潤過濾餅以3.40 kg的MeOH/PPW洗滌，並將濕潤過濾餅在不超過65℃的溫度下真空乾燥，直到水含量不超過0.5%(Karl Fisher分析)，甲醇含量不超過2400 ppm，DCM不超過600 ppm，以提供結晶同質異晶物J (1.4821 kg，產率66%，化學純度≥98%)。所得到的同質異晶物J表現出如圖1所示的XRPD圖，如圖3所示的DSC熱分析圖(頂行)，如圖4所示的TGA熱分析圖(下第二行)以及如圖13A所示的拉曼光譜。相較於同質異晶物A及E (分別為圖13C及13D)，同質異晶物J的拉曼光譜在700至740 cm^-1 以及1300至1340 cm^-1 附近的波數中峰型有明顯不同。

據信同質異晶物J在鹼性條件(約pH 9-10)下形成。此外，如實施例4所述，同質異晶物J在合適的條件下轉化為同質異晶物A。

實施例2. 化合物I同質異晶物K (游離鹼)之製備

在實施例1中討論的程序中，將中和/同質異晶物形成步驟中獲得的濕潤過濾餅在不超過65℃下真空乾燥。然後將乾燥的化合物I (乾燥的濕潤過濾餅)溶於DCM/MeOH (3/1，v/v)，並在矽膠管柱上純化，以DCM/MeOH (3/1，v/v)流洗。收集含有化合物I的級分，並使其通過管線過濾器。然後經由與MeOH (在真空下且夾套溫度不超過30℃)的溶劑交換從DCM/MeOH中沉澱出化合物I。蒸除DCM後，將化合物I的MeOH溶液過濾，並將濕潤過濾餅以甲醇洗滌。將濕潤過濾餅在不超過65℃下真空乾燥。然後將存在於同質異晶物E中的乾燥的化合物I在MeOH/PPW (3:1)中攪拌，並在約60℃至約65℃下加熱4小時。然後將溫度冷卻至20℃至30℃，並在該溫度下攪拌不超過1小時。將內容物過濾並乾燥以獲得同質異晶物K，觀察到其在中性pH值下沉澱。在最後的加熱步驟中，如果將混合物加熱6小時而非4小時，則觀察到同質異晶物A。

同質異晶物K表現出如圖5所示的XRPD圖(頂線)，如圖6所示的DSC熱分析圖(底線)，如圖4所示的TGA熱分析圖(底線)以及如圖13B所示的拉曼光譜。同質異晶物K的拉曼光譜與同質異晶物J的拉曼光譜基本相似(圖13A)。相較於同質異晶物A及E時(分別為圖13C及13D)，在同質異晶物K的拉曼光譜中，在700至740 cm^-1 以及1300至1340 cm^-1 附近的波數中峰模式顯著不同。

據信在中性條件下同質異晶物K由同質異晶物E轉化。此外，在中性條件下長時間加熱後，同質異晶物K轉化為同質異晶物A (熱力學穩定形式)。因此，不受任何理論的束縛，同質異晶物K被認為是同質異晶物E與A之間的亞穩形式。

實施例3：2-(4-甲基-[1,4]二氮雜-1-基)-5-氧代-5H-7-硫雜-1,11b-二氮雜-苯並[c]芴-6-羧酸(5-甲基-吡嗪-2-基甲基)-醯胺(化合物I，游離鹼)的溶解度。

對化合物I同質異晶物A與J進行快速溶解度分析(表3)。將每個樣品懸浮在pH 4.5緩衝溶液(25 mM乙酸鈉，25℃)中10分鐘，然後過濾以進行液相色層分析(liquid chromatography，LC)分析。表3總結了測試樣品的濃度為26 mg/mL – 29 mg/mL。儘管測試樣品溶液中的pH值變為5-6，表示不受任何理論的限制，所選緩衝溶液的濃度可能不適合此溶解度評估，但可認為這些樣品的溶解度可比較 (亦即，同質異晶物A與J具有相似的溶解度)。

表3. 化合物I同質異晶物J、A以及J與A的混合物的溶解度

化合物I形式	溶解度 (mg/mL)
同質異晶物A	29.3
同質異晶物J	28.6

實施例4. 化合物I同質異晶物J的同質異晶物平衡研究及同質異晶物轉變研究

使用化合物I同質異晶物A以及化合物I同質異晶物J進行同質異晶物平衡研究。對裝有3 cm攪拌棒以及N₂ 入口的三頸250 mL燒瓶中，加入1:1的化合物I同質異晶物A (5 g)以及化合物I同質異晶物J (5 g，樣品如圖1所示)，裝入MeOH (112.5 mL，11.25體積)以及純化處理水(PPW，37.5 mL，3.75體積)。將所得混合物在室溫下攪拌10分鐘，然後加熱至65℃，並在2小時、4小時，以及6小時進行採樣，並透過XRPD分析進行分析，如圖7所示。結果顯示，同質異晶物A與J的1:1混合物在65℃加熱2小時後轉變為同質異晶物A，表示同質異晶物A比同質異晶物J更熱力學穩定。

還進行多態轉化研究。對包含2 cm攪拌棒的20 mL小瓶中，加入化合物I同質異晶物J (0.5g，圖1所示的樣品)、MeOH (5.6 mL，11.25體積)，以及PPW (1.9mL，3.75體積)。將所得混合物加熱至65℃達6小時。完成後，將漿料透過布氏漏斗過濾，並收集固體進行XRPD分析，如圖8所示。結果顯示，於65℃下6小時後確實獲得了同質異晶物A。亦即，將同質異晶物J成功轉換為同質異晶物A。

實施例5. 化合物I同質異晶物J的穩定性測試

如實施例1中所述，在最終的pH調節步驟至pH 12-13期間，在pH 9-10附近沉澱出同質異晶物J結晶體。然後將同質異晶物J在MeOH/PPW (3:1)中加熱至60℃至65℃約4小時，並保持其同質異晶物形式。因此，在MeOH/PPW (3:1)中的基本上純的(同質異晶物純度)同質異晶物J在65℃下穩定至少4小時。

另一方面，如圖9所示，當在無溶劑下於205℃加熱30分鐘時，同質異晶物J似乎結晶度較低。

此外，在以下組成的溶液中分析了同質異晶物J的穩定性：

	每毫升數量
化合物I的同質異晶物J	30.0 mg
蔗糖	20.0 mg
HCl	根據需要用於調整pH
NaOH	根據需要用於調整pH
注射用水(Water for Injection, WFI)	q.s.

樣品製備 ：於15至30℃的溫度下，將37.5 kg的WFI加入到混合容器中。透過將氮氣噴射管放在壓力容器的底部，以氮氣強烈噴射WFI不少於30分鐘。繼續在容器中鼓泡，直到溶解氧含量 ≤ 1 ppm。在第二壓力容器中加入不少於15分鐘的20.0 kg氮氣噴射的WFI及蔗糖，並混合直至溶解，同時繼續氮氣噴射。必要時繼續進行氮氣噴射，直到溶解的氧含量 ≤ 蔗糖溶液的1 ppm。對蔗糖溶液中緩慢加入813.8g 2M HCl溶液，並在添加完成後混合不少於10分鐘。將化合物I添加到蔗糖溶液容器中，並沖洗裝有氮氣噴射WFI的化合物I的容器。混合溶液直至溶解(不少於15分鐘)。加入43.5 mL的2M HCl，混合不少於5分鐘。如果溶液沒有目視溶解，則再加入另一份43.5 mL的2M HCl，混合不少於5分鐘。如果有必要，使用2M HCl或1M NaOH溶液將pH調節至4.4-4.6，該溶液使用氮氣噴射的WFI製備。每次添加2M HCl或1M NaOH後混合溶液。必要時以氮氣噴射的WFI調節體積。取10 mL樣品以測量pH值。如有必要，使用2M HCl或1M NaOH溶液(使用氮氣噴射的WFI製備)將pH值重新調節至4.4-4.6。直接進行過濾並填充。材料不儲存過夜。

透過 0.22 μM 膜過濾器滅菌 ：設計標準的無菌過濾操作，以透過容納在聚碳酸酯外殼中的兩個0.22 μM親水性聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride，PVDF)膜進行膜過濾，對複合的本體溶液進行滅菌。如無菌過濾操作中常見的那樣，複合後的物料串聯通過兩個滅菌膜，以提供多餘的滅菌能力。

無菌溶液的無菌灌裝：將化合物I無菌溶液裝入20 cc清潔、去熱原的玻璃小瓶中，並定期檢查重量，以確保維持目標填充量(5.05g/小瓶)，並將小瓶以無菌彈性體塞子半塞住以提供用於穩定性分析的樣品。

將樣品於25℃及60%相對濕度(relative humidity，RH)中存儲18個月。18個月後，透過XRPD與DSC分析樣品(參見圖10及11)。XRPD圖與初始樣品的XRPD圖基本相似(圖2)。DSC熱分析圖顯示，相較於初始樣品，第二個吸熱峰移動了約5℃ (圖3)。VT-XRPD分析顯示，晶格中發生了輕微的重排，進而導致這種微小的偏移(圖12)。透過VT-XRPD於190℃至220℃處觀察到同質異晶物J發生了固體轉變，繞射峰的消失表示樣品在230℃時熔化。在研究結束時，樣品的外觀變為深色，表示樣品已分解。

總之，這項研究顯示，同質異晶物J在25℃/60%RH條件下至少穩定18個月。

實施例6. 細胞活性評估及細胞增殖評估

透過Alamar Blue測定各種癌細胞株中的代謝活性以評估化合物I對細胞活性的影響。表4顯示化合物I在多種癌細胞株中表現出廣泛的抗增殖活性，而在正常細胞中的活性卻明顯較低。

表4. 細胞活性測定中的化合物I的EC₅₀

細胞株	癌症類型	EC50 (nM)	細胞株	癌症類型	EC50 (nM)
EOL-1	白血病	3	SK-MEL-24	黑色素瘤	147
SR	白血病	5	HCT-116	大腸癌	164
MOLT-3	白血病	6	NK92mi	淋巴瘤	165
MV 4;11	白血病	12	MDA-MB-468	乳癌	171
SEM	白血病	18	NCI-H2170	肺癌	194
A7	黑色素瘤	23	U2OS	骨肉瘤	281
NCI-H460	肺癌	38	BT-20	乳癌	335
THP-1	白血病	47	MCF 7	乳癌	347
NCI-H1299	肺癌	55	SUM 190PT	IBC *	583
A375	黑色素瘤	58	BxPC-3	胰臟癌	664
Jurkat	白血病	64	HT-29	大腸癌	741
Ramos	淋巴瘤	66	SUM 149PT	IBC*	751
RPMI-8226	骨髓癌	68	PC-3	前列腺癌	1,100
NCI-H520	肺癌	70	SK-MES-1	肺癌	1,260
MIA PaCa-2	胰臟癌	74	Hs 578.T	乳癌	1,647
SK-OV-3	卵巢癌	78	UACC-812	乳癌	1,830
HL60	白血病	83	MDA-MB-361	乳癌	2,100
MDA-MB-231	乳癌	83	T47D	乳癌	2,337
BT-474	乳癌	86	MDA-MB-175-VII	乳癌	2,780
COLO-205	大腸癌	96	A549	肺癌	4,900
K562	白血病	104	Saos-2	骨肉瘤	5,000
Hs 605.T	乳癌	116	PANC-1	胰臟癌	5,000
ZR-75-1	乳癌	123	LNCaP	前列腺癌	5,500
Raji	淋巴瘤	133	CCD-1058Sk	正常	4,710
SKBr3	乳癌	134	CCD-1094Sk	正常	4,810
MDA-MB-453	乳癌	140	CCD-1068Sk	正常	5,070
Daudi	淋巴瘤	142	BJ-hTERT	正常	5,174
HL60/MX2	白血病	147	CCD-1096Sk	正常	5,260

* IBC =導管浸潤性乳房癌(發炎)

實施例7. 對化合物I反應的預測生物標記物之評估

圖14顯示在具有gBRCA1 、gBRCA2 、體細胞BRCA1 、p53 、PALB2 或其他體細胞同源重組突變的基因突變的患者中，在每個劑量下腫瘤從基線的收縮百分比。突變狀態未知的患者在圖14中標記為「u」，而未標記的患者則未鑑定出基因組突變。圖15所示為評估患者在每種劑量下的治療持續時間。

18名患者被診斷患有轉移性乳癌。在這18例患者中，有10例未曾接受PARP抑制劑治療的具有轉移性乳癌BRCA1/2 生殖細胞以及相關體細胞突變的患者參加了一項正在進行的研究，以評估與乳癌相關的生物標記物的可預測性。進行這項研究以評估對化合物I反應的預測生物標記物，並探索生殖細胞HRD畸變與化合物I治療結果之間的關係。

1名患者(劑量為650 mg/m² )，具有一PALB2 突變以及BRCA2 突變，並顯示出對化合物I治療的部分反應(partial response，PR)。

這項研究顯示，具有BRCA2 突變的患者對化合物I的治療對大於或等於150 mg/m² 的劑量有反應，並觀察到腫瘤縮小。

本文列出的專利及出版物描述了本領域的普通技術人員，因此出於所有目的並以相同的程度透過引用整體併入本文，如同各自具體且單獨地指出透過引用併入。

在引用的參考文獻與本說明書之間有任何衝突的情況下，以本說明書為準。在描述本申請案之實施例時，為了清楚起見採用特定術語。然而，本發明之目的並非在限於所選擇的特定術語。本說明書中的任何內容均不應視為限制本發明之範圍。所提供的所有實施例都是代表性的而非限制性的。如本領域技術人員根據以上教導，可在不脫離本發明之情況下修改或改變上述實施例。因此，應當理解的是，在申請專利範圍及其等同物的範圍內，可以與具體描述不同的方式實踐本發明。

圖1為化合物I (游離鹼)的同質異晶物J的X射線粉末繞射(XRPD)圖。

圖2為化合物I (游離鹼)的同質異晶物J的X射線粉末繞射(XRPD)圖。

圖3為兩個不同的同質異晶物J樣品的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖，對應於圖1及2所示之樣本。

圖4為化合物I (游離鹼)的同質異晶物A、E、J，以及K的熱重分析(thermogravimetric analysis，TGA)熱分析圖的疊加圖。

圖5為化合物I (游離鹼)的同質異晶物A、E、J，以及K的XRPD圖的疊加圖。

圖6為化合物I (游離鹼)的同質異晶物A、E、J，以及K的DSC熱分析圖的疊加圖。

圖7為在T = 0小時、2小時、4小時，以及6小時，於65℃下在MeOH/PPW (3:1)中加熱的同質異晶物A與J，以及同質異晶物A及J的1:1混合物的XRPD圖的疊加圖。

圖8為6小時後，於65℃下在MeOH/PPW (3:1)中加熱的同質異晶物A與J，以及同質異晶物J的XRPD圖的疊加圖。

圖9為同質異晶物A、E，以及J的XRPD圖的疊加，其中同質異晶物J於205℃下加熱30分鐘。

圖10為在25℃ /60%RH下18個月後的同質異晶物J的XRPD圖。

圖11為在25℃ /60%RH下18個月後同質異晶物J的DSC熱分析圖。

圖12為在25℃/60%RH下18個月後同質異晶物J的VT-XRPD圖的疊加圖。

圖13A為同質異晶物J的拉曼光譜。圖13B為同質異晶物K的拉曼光譜。圖13C為同質異晶物A的拉曼光譜。圖13D為同質異晶物E的拉曼光譜。

圖14所示為具有標記的基因突變的可評估患者從基線的最佳腫瘤縮小百分比。

圖15所示為在每個劑量上所有具有標記的基因突變的患者的治療持續時間。

圖16所示為具有一PALB2 突變並顯示出部分反應(partial response，PR)(在28天週期的第1、8、15天以650 mg/m² 的劑量給藥)的患者的CT掃描，A) 以化合物I治療前，以及 B) 以化合物I治療後進行6個月追蹤的CT掃描。

Claims (52)

1. 一種化合物I的結晶型：

   

   I 其中該結晶型為同質異晶物J或同質異晶物K。
2. 如請求項1所述之結晶型，其中該結晶型為分離的。
3. 如請求項1或2所述之結晶型，其中該結晶型為同質異晶物J。
4. 如請求項3所述之結晶型，其表現出包含在約5.5 ± 0.5以及11.0 ± 0.5度的2θ角處的峰的X射線粉末繞射(X-ray powder diffraction，XRPD)圖。
5. 如請求項3或4所述之結晶型，其表現出包含在約7.1 ± 0.5度的2θ角的峰的XRPD圖。
6. 如請求項3至5中任一項所述之結晶型，其表現出包含在約17.7 ± 0.5以及26.7 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。
7. 如請求項3至6中任一項所述之結晶型，其表現出基本上類似於圖1或圖2的XRPD圖。
8. 如請求項3至7中任一項所述之結晶型，其表現出具有在200.0℃ ± 0.5℃至202.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(Differential Scanning Calorimetry，DSC)熱分析圖。
9. 如請求項3至8中任一項所述之結晶型，其表現出具有在238.0℃ ± 0.5℃至246.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。
10. 如請求項3至9中任一項所述之結晶型，其具有約90%或更高的同質異晶物純度。
11. 如請求項3至9中任一項所述之結晶型，其具有約95%或更高的同質異晶物純度。
12. 如請求項3至11中任一項所述之結晶型，其具有約95%或更高的化學純度。
13. 如請求項3至11中任一項所述之結晶型，其具有約98%或更高的化學純度。
14. 如請求項1或2所述之結晶型，其中該結晶型為同質異晶物K。
15. 如請求項14所述之結晶型，其表現出包含在約5.2 ± 0.5以及25.5 ± 0.5度的2θ角處的峰的X射線粉末繞射(XRPD)圖。
16. 如請求項14或15所述之結晶型，其表現出包含在約11.4 ± 0.5度的2θ處的峰的XRPD圖。
17. 如請求項14至16中任一項所述之結晶型，其表現出包含在約14.7 ± 0.5以及23.4 ± 0.5度的2θ角處的峰的XRPD圖。
18. 如請求項14至17中任一項所述之結晶型，其表現出基本上類似於圖5的XRPD圖。
19. 如請求項14至18中任一項所述之結晶型，其表現出具有在144.0℃ ± 0.5℃至150.0 ± 0.5℃之間最大峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。
20. 如請求項14至19中任一項所述之結晶型，其表現出具有在231.0℃ ± 0.5℃至238.0 ± 0.5℃之間的最大峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。
21. 如請求項14至20中任一項所述之結晶型，其表現出具有在242.0℃ ± 0.5℃至250.0 ± 0.5℃之間的最大值峰值的示差掃描量熱法(DSC)熱分析圖。
22. 如請求項14至21中任一項所述之結晶型，其具有約90%或更高的同質異晶物純度。
23. 如請求項14至21中任一項所述之結晶型，其具有約95%或更高的同質異晶物純度。
24. 如請求項14至23中任一項所述之結晶型，其具有約95%或更高的化學純度。
25. 如請求項14至23中任一項所述之結晶型，其具有約98%或更高的化學純度。
26. 一種包含根據請求項1至25中任一項所述之結晶型的組合物。
27. 如請求項26所述之組合物，其中該組合物包含至少一種醫藥上可接受的載體。
28. 如請求項27所述之組合物，其中該組合物進一步包含一種或多種額外的治療活性劑。
29. 如請求項28所述之組合物，其中該額外的治療活性劑係選自一烷化劑、一抗代謝物、一長春花生物鹼、一紫杉烷、一拓撲異構酶抑制劑、一抗腫瘤抗生素、一酪胺酸激酶抑制劑、一免疫抑制大環內酯類藥物、一Akt抑制劑、一HDAC抑制劑、一Hsp90抑制劑、一mTOR抑制劑、一PI3K/mTOR抑制劑、一PI3K抑制劑、一細胞週期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)抑制劑、檢查點激酶(checkpoint kinase，CHK)抑制劑，或一聚(DP-核糖)聚合酶(poly (DP-ribose)polymerase，PARP)抑制劑。
30. 如請求項29所述之組合物，其中，該PARP抑制劑為奧拉帕尼 (olaparib)。
31. 如請求項28所述之組合物，其中該額外的治療活性劑係選自破壞程序性死亡1 (Programmed Death-1，PD-1)與程序性死亡配體-1 (Programmed Death Ligand-1，PD-L1)之間相互作用的抗體或其抗原結合部分。
32. 如請求項28所述之組合物，其中該額外的治療活性劑係選自一抗PD-1抗體、一PD-1拮抗劑、一抗PD-L1抗體、一以PD-1表現為目標的siRNA、一以PD-L1表現為目標的siRNA，以及PD-1或PD-L1的顯性負突變形式或可溶形式的一胜肽、片段。
33. 一種用於穩定一個體中的G-四鏈體(G-quadruplexes，G4s)之方法，該方法包含對該個體施用一治療有效量的根據請求項1至25中任一項所述之結晶型或根據請求項26至32中任一項所述之組合物，其包含一治療有效量的該結晶型。
34. 如請求項33所述之方法，其中該穩定G4s在周邊血單核細胞中。
35. 一種調節一個體中p53活性之方法，該方法包含對該個體施用一治療有效量的根據請求項1至25中任一項所述之結晶型或根據請求項26至32中任一項所述之組合物，其包含一治療有效量的該結晶型。
36. 一種用於治療或改善一個體的細胞增殖失調之方法，該方法包含對一有此需要的個體施用一治療有效量的根據請求項1-25中任一項所述之結晶型或根據請求項26-32中任一項所述之組合物，其包含一治療有效量的該結晶型。
37. 如請求項36所述之方法，其中該細胞增殖失調為癌症。
38. 如請求項37所述之方法，其中該癌症係選自血液系統惡性腫瘤、直腸癌、乳癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、子宮頸癌、Ewing氏肉瘤、胰臟癌、淋巴結癌、結腸癌、前列腺癌、腦癌、骨癌、頭頸癌、皮膚癌、腎癌、骨肉瘤、心臟癌、子宮癌、胃腸道惡性腫瘤，以及喉與口腔癌。
39. 如請求項37所述之方法，其中該該癌症為乳癌、卵巢癌或胰臟癌。
40. 如請求項38所述之方法，其中該血液系統惡性腫瘤係選自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，以及多發性骨髓瘤。
41. 如請求項36所述之方法，其中該細胞增殖失調為一實性瘤。
42. 如請求項36或37所述之方法，其中該個體在一DNA修復基因中具有一突變。
43. 如請求項42所述之方法，其中該DNA修復基因為同源重組(homologous recombination，HR)或非同源末端連接(non-homologous end joining， NHEJ)依賴性去氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)雙鏈斷裂(double strand break，DSB)修復途徑中的一基因。
44. 如請求項37所述之方法，其中該癌症為一BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症。
45. 如請求項37所述之方法，其中該癌症為一BRCA 突變的癌症。
46. 如請求項45所述之方法，其中該癌症為一BRCA2 突變的癌症。
47. 如請求項44所述之方法，其中該BRCA 突變或類BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。
48. 如請求項47所述之方法，其中該BRCA 突變的癌症為乳癌、卵巢癌、胰臟癌，或前列腺癌。
49. 如請求項37所述之方法，其中該癌症為BRCA2 缺陷或BRCA1 缺陷的癌症。
50. 如請求項49所述之方法，其中該癌症為BRCA2 缺陷型癌症。
51. 如請求項37所述之方法，其中該個體患有一PALB2 突變。
52. 如請求項50所述之方法，其中該個體患有一PALB2 突變。

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