TW202110443A - 西達本胺(Chidamide)及希樂葆(Celecoxib)之抗癌組合 - Google Patents
西達本胺(Chidamide)及希樂葆(Celecoxib)之抗癌組合 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202110443A TW202110443A TW108132885A TW108132885A TW202110443A TW 202110443 A TW202110443 A TW 202110443A TW 108132885 A TW108132885 A TW 108132885A TW 108132885 A TW108132885 A TW 108132885A TW 202110443 A TW202110443 A TW 202110443A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- chidamide
- salt
- combination
- cancer
- plus
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本發明係關於組蛋白脫乙醯酶(HDAC)抑制劑,呈酸性鹽形式之西達本胺(chidamide),及非類固醇抗炎藥物(NSAIDs),呈鹼性鹽形式之希樂葆(celecoxib)之組合。本發明亦關於顯著調節腫瘤微環境並因此顯著改善抗癌活性之方法。
Description
本發明係關於癌症療法領域。特別地,本發明提供包含呈鹽形式之西達本胺及希樂葆之組合及其在調節腫瘤微環境及癌症免疫療法中之應用。
癌症免疫療法係一個快速發展的領域,已取得令人印象深刻並有希望之突破。腫瘤相關抗原之存在之發現現已提高使用宿主免疫系統干預腫瘤生長之可能性。目前正在探索利用免疫系統之體液及細胞組之各種機制以進行癌症免疫療法。
已提出破壞免疫耐受之幾種策略,包括免疫效應子之過繼轉移、免疫調節療法及疫苗接種。但是,此等策略仍然不能阻止免疫逃逸。主要的逃逸途徑發生在癌細胞中,包括抗凋亡信號傳導、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)及環狀腺苷單磷酸(cAMP)相關機制。腫瘤微環境係一個重要的研究領域,因為其在腫瘤進展過程中係動態且複雜的。腫瘤藉由稱為免疫編輯之過程進化出逃避免疫控制之機制,該過程在腫瘤微環境中提供選擇性壓力,可導致惡性進展。在稱為「免疫逃逸」之促進腫瘤之階段,免疫系統可藉由選擇更能抵抗宿主免疫能力之癌細胞或藉由改變腫瘤微環境以促進腫瘤突外生長來進一步促進腫瘤進展。腫瘤微環境之獨特性質涉及不同因素,諸如缺氧、酸性pH、血管構造、代謝狀態、許多免疫細胞之免疫抑制功能、及細胞介素或趨化激素。此等因素控制免疫逃逸並降低免疫反應。因此,控制腫瘤微環境係抗癌治療(尤其是免疫療法)之重要策略之一。
免疫系統穩態包括同時存在刺激及抑制機制來控制免疫系統反應之平衡。抑制機制包括細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4,CD28同源物)、及程式化細胞死亡蛋白1(PD-1)或其配體(PD-L1)、TIM-3(T細胞免疫球蛋白3)、BTLA(B及T淋巴細胞衰減蛋白)、VISTA(T細胞活化之V域Ig抑制因子)及LAG-3(淋巴細胞活化基因3)。刺激機制包括分化簇28(CD28)、腫瘤壞死因子受體超家族成員4(TNFRSF4)(亦稱為CD134或稱為OX40)、糖皮質激素誘導TNFR家族相關基因(GITR)、腫瘤壞死因子(TNF)受體家族成員(CD137;4-1BB)、腫瘤壞死因子受體超家族成員(CD27)、皰疹病毒進入介體(HVEM)。目前,許多免疫檢查點抑制劑單株抗體(包括抗CTLA-4、抗PD-1及抗PD-L1抗體)已被美國FDA、EMA、PMDA及NMPA批准用於多種腫瘤學適應症之治療用途。然而,對於此等免疫檢查點抑制劑,約20%至30%之癌症患者提供單藥療法之腫瘤反應。效力仍不令人滿意。將新藥與免疫檢查點抑制劑組合之策略係提高此等免疫檢查點抑制劑之反應率之最新方法。此將提供機會來評估免疫療法對患有各種晚期癌症之患者之益處。另一方面,對免疫檢查點抑制劑之耐藥性導致治療之益處少於所預期的。臨床前研究及臨床試驗中正在進行許多有希望的組合方法。此等有希望的組合方案之努力藉由提高免疫反應率及效力為解決耐藥性問題帶來希望。
US 20180355042及US 20190211103提供包括HDACi及PD-1抑制劑之組合,其可用於治療癌症,包括減少及/或預防癌症轉移。然而,仍然需要開發治療溶液以控制腫瘤微環境並改善免疫療法之抗癌效力。
本發明提供包含西達本胺之鹽及希樂葆之鹽之組合及調節腫瘤微環境之方法,該方法藉由投與西達本胺鹽與其希樂葆鹽之組合來顯著改善免疫反應及抗癌活性。
在一個態樣中,本發明提供一種組合,該組合包含西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽。
在一個實施例中,西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽的量分別在約5% (w/w)至約80% (w/w)及約95% (w/w)至約20% (w/w)的範圍內。在一個實施例中,西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽的量在重量比約8:1、約4:1、約3:1、約2:1、約1:1、約1:2、約1:3、約1:4或約1:8內。
在一個實施例中,西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽係包含於相同劑型中或獨立包含於分開劑型中。在另一個實施例中,劑型係錠劑或膠囊。
在一個實施例中,西達本胺之酸性鹽係鹽酸鹽或硫酸鹽。在另一個實施例中,西達本胺之酸性鹽係呈結晶或非晶形式。
在一個實施例中,西達本胺之鹽酸鹽係呈具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案之結晶形式(形式A),其峰包含在約16.12°、約19.02°、約21.62°、約23.38°及約30.16°之2-θ值。在另一個實施例中,形式A之XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約21.08°、約23.76°、約25.58°、約27.82°及約28.18°之峰。
在又另一個實施例中,西達本胺之鹽酸鹽係呈具有傅立葉(Fourier)變換紅外光譜(FTIR)圖案之峰在約3162 cm-1
、約3059 cm-1
、約3036 cm-1
、約2751 cm-1
、約2588 cm-1
、約2359 cm-1
、約2341 cm-1
、約1667 cm-1
、約1658 cm-1
、約1639 cm-1
、約1620 cm-1
、約1610 cm-1
、約1562 cm-1
、約1517 cm-1
、約1508 cm-1
、約1485 cm-1
、約1468 cm-1
、約1444 cm-1
、約1431 cm-1
、約1307 cm-1
、約1282 cm-1
、約1265 cm-1
、約1243 cm-1
、約1220 cm-1
、約1182 cm-1
、約1145 cm-1
、約1074 cm-1
、約1046 cm-1
之結晶形式(形式A)。
在另一個實施例中,形式A進一步特徵為展示與圖3(B)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(B)所示實質上相同之FTIR圖案。
在一個實施例中,西達本胺之硫酸鹽係呈具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案之結晶形式(形式B),其峰包含在約21.15°、約24.65°、約17.00°、約18.49°及約26.69°之2-θ值。在另一個實施例中,形式B之XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約14.74°、約19.45°、約22.00°、約23.55°及約27.94°之峰。
在一個實施例中,西達本胺之硫酸鹽係呈具有FTIR圖案之峰在約3249 cm-1
、約3067 cm-1
、約2578 cm-1
、約2360 cm-1
、約1689 cm-1
、約1664 cm-1
、約1647 cm-1
、約1614 cm-1
、約1568 cm-1
、約1521 cm-1
、約1510 cm-1
、約1486 cm-1
、約1467 cm-1
、約1434 cm-1
、約1412 cm-1
、約1388 cm-1
、約1354 cm-1
、約1328 cm-1
、約1283 cm-1
、約1266 cm-1
、約1252 cm-1
、約1226 cm-1
、約1184 cm-1
、約1099 cm-1
、約1059 cm-1
、約1034 cm-1
及約1022 cm-1
之結晶形式(形式B)。
在另一個實施例中,形式B進一步特徵為展示與圖3(C)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(C)所示實質上相同之FTIR圖案。
在一個實施例中,希樂葆之鹼性鹽係希樂葆之鈉鹽。在另一個實施例中,希樂葆之鈉鹽係呈非晶形式或結晶形式。在另一個實施例中,希樂葆之鈉鹽之非晶形式具有與圖7(B)所示實質上相同之XRPD圖案。
在一個實施例中,希樂葆之鈉鹽係呈具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案之結晶形式(形式I),其峰包含在約19.85°、約20.51°、約21.51°、約22.55°及約18.25°之2-θ值。在另一個實施例中,形式I之XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約10.95°、約14.05°、約14.60°、約17.2°、約25.80°及約27.30°之峰。在另一個實施例中,形式I進一步特徵為展示與圖7(C)所示實質上相同之XRPD圖案。
在一個實施例中,該組合進一步包含免疫檢查點抑制劑及/或化療劑。在一些實施例中,免疫檢查點抑制劑係抗CTLA-4抗體、抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體。免疫檢查點抑制劑之某些實施例包括帕姆單抗(pembrolizumab)、彼地利株單抗(pidilizumab)、納武單抗(nivolumab)、度伐魯單抗(durvalumab)、阿維單抗(avelumab)、阿特珠單抗(atezolizumab)、特瑞普利單抗(toripalimab)、信迪利單抗(sintilimab)、卡瑞利珠單抗(camrelizumab)及MIHI。
在一個態樣中,本發明提供一種藉由調節微環境並改善免疫反應來治療癌症之方法,該方法包括投與有效量之西達本胺與有效量之希樂葆之組合。在另一個實施例中,西達本胺及希樂葆係同時、分開或連續投與。
在一個態樣中,本發明提供一種在癌症免疫療法中調節腫瘤微環境之方法,該方法包括對個體投與有效量之本文所述的組合。在一個實施例中,西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽係同時、分開或連續投與。
在另一個態樣中,本發明提供一種治療癌症之方法,該方法包括對個體投與有效量之本文所述的組合。在一個實施例中,癌症係藉由調節微環境並改善免疫反應來治療。在一個實施例中,該方法進一步包括投與免疫檢查點抑制劑。在另一個實施例中,本發明及免疫檢查點抑制劑之組合係同時、分開或連續投與。免疫檢查點抑制劑之實例係彼等描述於本文中者。
在一個實施例中,與投與西達本胺游離鹼及希樂葆游離酸相比,投與西達本胺之酸性鹽及希樂葆之鹼性鹽改善藥物動力學形態。
癌症之某些實施例包括神經膠質母細胞瘤、肝癌、結腸直腸上皮癌(colorectal carcinoma)、神經膠質母細胞瘤、胃癌、結腸直腸癌(colorectal cancer)、食道癌、肺癌、胰臟癌、腎細胞癌、良性前列腺增生、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、乳癌、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、梅克爾細胞癌(Merkel cell carcinoma)、非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma)、急性骨髓性白血病(AML)、膽囊癌、膽管癌、膀胱癌及子宮癌。
除非另外定義,否則本文所用的所有技術及科學術語具有與本發明所屬技術之一般技術者通常所瞭解的相同含義。儘管可在實踐或測試本發明中使用類似或等效於彼等本文所述者之任何方法及材料,但現描述較佳之方法及材料。本文提及的所有公開案均以引用的方式併入本文中。
本文中提及「約」值或參數時包括(並描述)針對該值或參數本身之實施例。例如,提及「約X」之描述包括「X」之描述。例如,術語XRPD圖案中2-θ值之「約Xo
」係指2-θ值之+/-0.2度。
術語「一」及「一個」係指冠詞之語法標的中之一者或至多於一者(亦即,至少一者)。舉例來說,「一個元素」意指一個元素或多於一個元素。除非另有明確說明,否則使用「或」意指「及/或」。
術語「多晶型物」係指特定結晶堆積配置中化合物(例如,化合物1)或其水合物或溶劑合物之結晶形式。特定化合物之所有多晶型物具有相同的元素組成。如本文所用,術語「結晶」係指由結構單元之有序配置組成之固體狀態形式。相同化合物或其水合物或溶劑合物之不同結晶形式係由於固體狀態中分子之不同堆積而產生的,此導致不同結晶對稱性及/或單位晶胞參數。不同結晶形式通常具有不同X射線繞射圖案、紅外光譜、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光學及電學性質、穩定性及/或溶解度。
當(例如)提及XRPD圖案時術語「實質上如……中所示」係指不一定與彼等本文所描繪者相同的圖,但當由熟習此項技術者考慮時該圖落在實驗誤差或偏差之限制內。
如本文所用,「個體(subject)」、「個體(individual)」及「患者」可互換使用以指代脊椎動物,較佳係哺乳動物,更佳係人類。哺乳動物包括(但不限於)鼠類、猿猴、人類、農場動物、運動動物及寵物。亦包括體外獲得或體外培養的生物實體之組織、細胞及其子代。
如本文所用,「治療有效量」意指足以治療罹患疾病(例如,神經退化性疾病)的個體或緩解與該疾病有關之症狀或併發症之量。
如本文所用,術語「治療(treat/treating/treatment)」及類似語係指減輕或改善病症、及/或與其有關之症狀。應明瞭,儘管沒有排除,但治療某種病症或病情並不要求完全消除該病症、病情或與其有關之症狀。
如本文所用,術語「免疫療法」係指藉由包括誘導、增強、抑制或以其他方式改變免疫反應之方法來治療罹患疾病或處在感染疾病或發生疾病複發之風險中的個體。
如本文所用,術語「程式化細胞死亡蛋白1 (PD-1)」係指屬於CD28家族之免疫抑制受體。PD-1主要表現於體內先前活化之T細胞上,並結合至兩種配體PD-L1及PD-L2。如本文所用術語「PD-1」包括人類PD-1 (hPD-1)、hPD-1之變體、同功異型物及物種同源物、及具有至少一個與hPD-1共同的抗原決定基之類似物。完整hPD-1序列可以GenBank寄存編號U64863查找。
如本文所用,術語「程式化死亡配體1 (PD-L1)」係PD-1之兩個細胞表面糖蛋白配體之一(另一者係PD-L2),其在結合至PD-1後下調T細胞活化及細胞介素分泌。如本文所用術語「PD-L1」包括人類PD-L1 (hPD-L1)、hPD-L1之變體、同功異型物及物種同源物、及具有至少一個與hPD-L1共同的抗原決定基之類似物。完整hPD-L1序列可以GenBank寄存編號Q9NZQ7查找。
如本文所用,「抗體」及「其抗原結合片段」包括天然生成之免疫球蛋白(例如,IgM、IgG、IgD、IgA、IgE等)以及非天然生成之免疫球蛋白,包括(例如)單鏈抗體、嵌合抗體(例如,人類化鼠類抗體)、異質共軛抗體(例如,雙特異性抗體)、Fab'、F(ab').sub.2、Fab、Fv及rIgG。如本文所用,「抗原結合片段」係全長抗體之保留特異性識別抗原之能力之部分、以及此等部分之各種組合。
如本文所用,術語「癌症」係指一寬泛組之各種疾病,其特徵在於體內異常細胞之不受控制之生長。不受調節之細胞分裂及生長導致形成惡性腫瘤,其侵襲鄰近組織並亦可藉由淋巴系統或血流轉移至身體的遠端部分。如本文所用「癌症」係指原發性、轉移性及復發性癌症。
腫瘤微環境係癌症生物學之重要態樣,其有助於腫瘤發生、腫瘤進展及對療法之反應。腫瘤微環境由異質細胞群組成,該異質細胞群包括惡性細胞及藉由廣泛串擾(crosstalk)來支持腫瘤增殖、侵襲及轉移潛力之細胞。腫瘤細胞通常會誘導免疫抑制微環境,此有利於免疫細胞(諸如骨髓衍生之抑制細胞(MDSC)、腫瘤相關巨噬細胞(TAM)及調節T細胞(Tregs))之免疫抑制群體之發展。因此,已發現在腫瘤微環境中之靶標,其可幫助導引並改善各種癌症療法之作用,特別係藉由增強宿主抗腫瘤免疫反應而起作用之免疫療法。
本發明驚人地發現組蛋白脫乙醯酶(HDAC)抑制劑(諸如西達本胺或其酸性鹽)及非類固醇抗炎藥物(NSAID)(諸如希樂葆或其鹼性鹽)之組合顯著改善免疫反應,調節腫瘤微環境,並因此顯著改善抗癌活性。兩種活性醫藥成分較佳係呈鹽形式或結晶形式或非晶形式。
西達本胺(Epidaza®
)被稱為組蛋白脫乙醯酶(HDAC)抑制劑並抑制I類HDAC1、HDAC2、HDAC3、以及IIb類HDAC10。西達本胺之化學名稱為具有以下結構之4-(((E)-3-(吡啶-3-基)丙烯醯胺基)甲基)-N-(2-胺基-4-氟苯基)苯甲醯胺。
希樂葆(尤其以商標名稱Celebrex®
出售)係一種 COX-2選擇性非類固醇抗炎藥物(NSAID)。希樂葆之化學名稱為具有以下結構之4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺醯胺。
在本發明中,使用西達本胺之酸性鹽(諸如西達本胺-HCl或西達本胺-H2
SO4
鹽)及希樂葆之鹼性形式(諸如希樂葆-Na鹽)。較佳地,西達本胺之鹽形式係呈結晶形式及希樂葆之鹽形式係呈非晶形式。
特定言之,本文描述西達本胺-HCl鹽之結晶形式(結晶形式A)及西達本胺-H2
SO4
鹽(表B)之結晶形式。
本文針對形式A及形式B描繪並描述XRPD圖案及FTIR圖案。如本文所用,「最大峰」係指繞射圖案中強度最高的峰。如本文所用,術語「主要強度峰」包括具有特定X射線粉末繞射圖案中峰之前20%中之強度之任何峰。
結晶形式A具有XRPD圖案,該XRPD圖案具有包括如本文所述的2-θ值之峰。替代地,西達本胺之鹽酸鹽係呈結晶形式(形式A),其具有具有如本文所述的峰之傅立葉變換紅外光譜(FTIR)圖案。此外,形式A進一步特徵為展示與圖3(B)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(B)所示實質上相同之FTIR圖案。
結晶形式B具有XRPD圖案,該XRPD圖案具有包括如本文所述的2-θ值之峰。替代地,西達本胺之硫酸鹽係呈結晶形式(形式B),其具有具有如本文所述的峰之FTIR圖案。此外,形式B進一步特徵為展示與圖3(C)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(C)所示實質上相同之FTIR圖案。
希樂葆之鹼性鹽為希樂葆之鈉鹽,其係呈非晶形式或結晶形式。在一個實施例中,希樂葆之鈉鹽之非晶形式具有與圖7(B)所示實質上相同之XRPD圖案。
呈結晶形式(形式I)之希樂葆之鈉鹽具有具有如本文所述的峰之X射線粉末繞射(XRPD)圖案。在另一個實施例中,形式I進一步特徵為展示與圖7(C)所示實質上相同之XRPD圖案。
西達本胺酸性鹽係在製造製程中藉由強酸性條件(阿瑞尼斯酸(Arrhenius acid),pKa<3)並藉由特定製程生成西達本胺-HCl及西達本胺-H2
SO4
鹽之新穎晶體形式來製備的。此等鹽在與希樂葆-Na鹽及免疫檢查點抑制劑組合時顯著改善水溶解度及藥物動力學性質,大大地增強在免疫療法中之效力。本文實例中說明西達本胺-HCl及西達本胺-H2
SO4
鹽之結晶形式之生成製程。
希樂葆鹼性鹽係在製造製程中藉由金屬氫化物(諸如NaH)並藉由特定製程生成希樂葆-Na鹽之「無水」非晶及晶體形式來製備的。非晶希樂葆-Na鹽具有顯著水溶解度及新穎藥物動力學性質,及當與西達本胺酸性鹽及免疫檢查點抑制劑組合時於增強在免疫療法中之效力上產生影響。希樂葆-Na鹽之晶體形式亦觀察到相似結果。本文實例說明希樂葆-Na鹽之非晶形式及結晶形式之生成製程。
在一些實施例中,西達本胺-HCl或西達本胺-H2
SO4
鹽組合的量在約5% (w/w)至約80% (w/w)、約30%至約80% (w/w)、約40%至約80% (w/w)、約20%至約60% (w/w)、約30%至約60% (w/w)、約40%至約60% (w/w)或約35%至約60% (w/w)之範圍內。
在一些實施例中,希樂葆-Na鹽組合的量在約5%至約80% (w/w)、約30%至約80% (w/w)、約40%至約80% (w/w)、約20%至約60% (w/w)、約30%至約60% (w/w)、約40%至約60% (w/w)或約35%至約60% (w/w)之範圍內。
在一個實施例中,本發明之組合係用不同比例之西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽(可稱為西達本胺鹽)及希樂葆-Na鹽(可稱為希樂葆鹽)產生。與西達本胺-K30 (西達本胺產物之初始調配物Epidaza®
)及希樂葆/膠囊(希樂葆產物之初始調配物Celebrex®
)相比,西達本胺鹽及希樂葆鹽之藥物動力學性質改善。
此外,與西達本胺-K30加希樂葆/膠囊相比,與免疫檢查點抑制劑組合,該組合(西達本胺鹽加希樂葆鹽)顯著改善抗癌活性。與單獨免疫檢查點抑制劑、西達本胺-K30加希樂葆/膠囊、及甚至兩者進一步組合相比,用本發明組合與免疫檢查點抑制劑組合治療顯著增強抑制腫瘤生長之效力。此外,該組合(combo)及免疫檢查點抑制劑之組合顯著根除腫瘤並將存活率提高至約80至100%。
免疫檢查點抑制劑可與本文所述的本發明組合組合使用以刺激抵抗癌細胞之免疫系統並治療癌症。適用於本發明之免疫檢查點抑制劑包括抑制PD-1、PD-L1、CTLA-4、T細胞免疫球蛋白-3 (TIM3)、B及T淋巴細胞衰減因子(BTLA)、T細胞活化之V域Ig抑制因子(VISTA)或淋巴細胞活化基因3 (LAG3)途徑之抑制受體之拮抗劑,諸如抗-PD-1抗體、抗-PD-L1抗體、抗-CTLA-4抗體、抗-TIM-3抗體、抗-BTLA抗體、抗-VISTA抗體及抗-LAG-3抗體。PD-1或PD-L1抑制劑之實例包括(但不限於)阻斷人類PD-1之人類化抗體,諸如帕姆單抗(抗-PD-1 Ab,商標名稱Keytruda®
)、納武單抗(抗-PD-1 Ab,Opdivo®
)或彼地利株單抗(抗-PD-1 Ab,CT-011)、特瑞普利單抗(抗-PD-1 Ab,商標名稱Tuo Yi®
)、信迪利單抗(抗-PD-1 Ab,商標名稱Tyvyt®
)、卡瑞利珠單抗 (抗-PD-1 Ab)、Bavencio®
(抗-PD-L1 Ab,阿維單抗)、Imfinzi®
(抗-PD-L1 Ab,度伐魯單抗)、及Tecentriq®
(抗-PD-L1 Ab,阿特珠單抗)、以及完全人類抗體,諸如納武單抗(抗-PD-1 Ab,商標名稱Opdivo®
)及塞米利單抗(cemiplimab)-rwlc (抗-PD-1 Ab,商標名稱Libtayo®
)。其他PD-1抑制劑可包括可溶性PD-1配體之表現形式,包括(但不限於) PD-L2 Fc融合蛋白(亦稱為B7-DC-Ig或AMP-244)及目前正在研究及/或開發用於療法中之其他PD-1抑制劑。另外,免疫檢查點抑制劑可包括(但不限於)阻斷PD-L1之人類化或完全人類抗體,諸如度伐魯單抗及MIH1及目前正在研究之其他PD-L1抑制劑。在一些實施例中,免疫檢查點抑制劑的量在約0.5% (w/w)至約15% (w/w)、0.5% (w/w)至約10% (w/w)、0.5% (w/w)至約5% (w/w)、1.0% (w/w)至約20% (w/w)、1.0% (w/w)至約15% (w/w)、1.0% (w/w)至約10% (w/w)或1.0% (w/w)至約5% (w/w)之範圍內。
在本發明之一些實施例中,西達本胺-HCl或西達本胺-H2
SO4
鹽、希樂葆-Na鹽及免疫檢查點抑制劑係同時投與。在一些實施例中,西達本胺-HCl或西達本胺-H2
SO4
鹽、希樂葆-Na鹽及免疫檢查點抑制劑係以任一種順序或交替地連續投與。
本發明之醫藥組合可用「載劑」調配。如本文所用,「載劑」包括任何溶劑、分散介質、媒劑、塗料、稀釋劑、抗菌劑及/或抗真菌劑、等滲劑、吸收延遲劑、緩衝劑、載劑溶液、懸浮液、膠體及類似物。此等介質及/或試劑於醫藥活性物質之用途係此項技術中熟知的。例如,醫藥組合可經特別調配以固體或液體形式投與,包括彼等適於以下者:(1)經口投與,例如,浸液(水性或非水性溶液或懸浮液)、含片、糖衣丸、膠囊、丸劑、錠劑(例如,彼等靶向口頰、舌下及全身吸收者)、大丸劑(boluse)、粉劑、顆粒、施用至舌之糊劑;(2)非經腸投與,例如,藉由皮下、肌肉內、靜脈內或硬膜外注射,諸如(例如)無菌溶液或懸浮液、或緩釋調配物;(3)局部施用,諸如(例如)霜劑、乳劑(lotion)、凝膠、軟膏或控釋貼劑或施用至皮膚之噴霧;(4)陰道內或直腸內,諸如(例如)子宮托、霜劑、栓劑或泡沫;(5)舌下;(6)經眼;(7)經皮;(8)透黏膜;或(9)經鼻。
本發明之組合可用於調節腫瘤微環境及癌症免疫療法。癌症之實例包括(但不限於)神經膠質母細胞瘤、肝癌(諸如肝細胞癌)、結腸直腸上皮癌(colorectal carcinoma)、神經膠質母細胞瘤、胃癌、結腸直腸癌(colorectal cancer)、食道癌、肺癌(諸如非小細胞肺癌(NSCLC)及小細胞肺癌)、胰臟癌、腎細胞癌、良性前列腺增生、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、乳癌、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、梅克爾細胞癌、非霍奇金淋巴瘤、急性骨髓性白血病(AML)、膽囊癌、膽管癌、膀胱癌及子宮癌。
本發明之醫藥組合可以單一調配物提供。在其他實施例中,本發明之醫藥組合可以單獨調配物提供。醫藥組合可以適於一或多種較佳投藥途徑之多種及/或複數種形式調配。因此,醫藥組合可藉由一或多種已知途徑投與,包括(例如)口服、非經腸(例如,皮內、經皮、皮下、肌肉內、靜脈內、腹膜內等)、或局部(例如,鼻內、肺內、乳房內、陰道內、子宮內、皮內、經皮、經直腸等)。可將藥物組合或其部分投與至黏膜表面,諸如藉由投與至(例如)鼻或呼吸道黏膜(例如,藉由噴霧或氣霧劑)。藥物組合或其一部分亦可藉由持續釋放或延遲釋放來投與。
本發明之醫藥組合可方便地以單位劑型存在並可藉由藥學技術中熟知的方法來製備。製備與醫藥上可接受之載劑之組合之方法包括使本發明之醫藥組合與構成一或多種輔助成分之載劑結合之步驟。一般而言,本發明之醫藥組合可藉由將活性化合物與液體載劑、細分之固體載劑或兩者均勻及/或緊密地結合,並然後,若需要,將產品成型為所需調配物來製備。
在一些實施例中,該方法可包括投與足夠量之本發明之醫藥組合以提供(例如)約10 mg/kg至約1,000 mg/kg之劑量至個體。
藉由以下實例說明本發明。應明瞭根據如本文所述的本發明範圍及精神廣義上解釋特定實例、材料、量及程式。實例 材料及方法
材料及設備。
西達本胺-API、西達本胺-K30、西達本胺-HCl鹽、西達本胺-H2
SO4
鹽及希樂葆-Na鹽由GNT Biotech & Medicals Co. Ltd (Taiwan)提供。希樂葆-API購自Aarti Drugs Ltd (India)。希樂葆膠囊產品(Celebrex®,200 mg)購自(Pfizer,Taiwan)。以下抗體及試劑用於動物實驗:小鼠抗PD-L1 (B7-H1)單株抗體(10F.9G2;Bio X Cell)、小鼠抗PD-1 (CD279)單株抗體(RMP1-14;Bio X Cell)、小鼠抗CTLA4 (CD152)單株抗體(BE0164;Bio X Cell)及大鼠抗IgG2a同型對照單株抗體(2A3;Bio X Cell)。LC/MS級甲醇、HPLC級乙腈、1-庚磺酸鈉鹽、滑石及乙二胺四乙酸均購自J.T.Baker® (USA)。甲酸、氯化鈉、乳糖、硬脂酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮及磷酸三鈉十二水合物購自Sigma-Aldrich (USA)。月桂基硫酸鈉購自Showa Chemical Co., Ltd (Japan)。蒸餾水係使用Milli-Q蒸餾系統(Merck Millipore®,France)純化。鹽酸S.G. (HCl)購自Fisher chemical,USA。氫化鈉(NaH),THF 99.5%分子篩購自Acros,Belgium。無水乙醚購自ECHO chemical co., LTD,Taiwan。濾紙購自Toyo Roshi Kaisha, LTD,Japan。1
H NMR及13
C NMR記錄於Bruker AVANCE 400MHz PLUS儀器上。FTIR光譜記錄於具有AutoATR系統(Perkin Elmer IR分光光度計)之Perkin Elmer Spotlight 200i Sp2上。粉末X射線繞射測量係在PANalytical EMPYREAN X繞射儀上進行。電噴霧電離質量記錄於Bruker microTOF上。快速原子轟擊質量記錄於JEOL JMS-700上。Gibco RPMI 1640及具有L-麩醯胺酸之DMEM購自Invitrogen Life Technologies。HyClone FBS購自Thermo Scientific。
西達本胺 -HCl 鹽之製備。
將一公克的西達本胺-API(活性醫藥成分)置於燒瓶中且添加3~5 ml 6~8N HCl(aq)並藉由目測檢查攪拌直至完全溶解。然後在沒有攪拌條件下產生固體沉澱。藉由抽濾製程分離固體沉澱,並藉由形成漿液四次以用乙醚除去雜質來進一步純化。濃縮純固體並濃縮至乾燥。然後在50至60℃下在烤箱中乾燥固體產物16小時並研磨成粉末以通過100網目之篩。製備西達本胺-HCl鹽並藉由HPLC、1
H-NMR、13
C-NMR、XRD、飽和溶解度、MS及FTIR等之分析進一步特徵。亦藉由以下製程製備西達本胺-HCl鹽。
將65 mg西達本胺-API懸浮在50~150 ml EtOH、MeOH、DCM、THF或H2O中,然後在攪拌下添加2~6滴37% HCl直至完全溶解。濃縮混合物以除去溶劑直至剩餘1 ml液體,然後將其滴入至50 ml醚中並沉澱出固體鹽。
將500 mg西達本胺-API添加至4~10 ml 4~8N HCl (aq)中並攪拌直至完全溶解。然後添加10~20 ml EtOH並然後添加10~20 ml醚直至形成起霧外觀。結晶製程在4℃下持續12 h。藉由過濾收集鹽並用醚洗滌,並然後在烤箱中在60℃下乾燥5 h。
西達本胺 -H2
SO4 鹽之製備。
將一公克的西達本胺-API置於燒瓶中且添加3~5 ml 3~5M H2
SO4
(aq)並藉由目測檢查攪拌直至完全溶解。將該溶液慢慢滴入至150~200 ml乙醇中並沉澱出固體。藉由抽濾製程分離固體,並用乙醇沖洗三次。固體藉由漿液製程用乙醇純化三次,並該固體進一步用乙醚除去過量的水分。濃縮純固體並濃縮至乾燥。然後在50~60℃下在烤箱中乾燥固體產物16小時並研磨成粉末以通過100網目之篩。製備西達本胺-H2
SO4
鹽並藉由HPLC、1
H-NMR、13
C-NMR、XRD、飽和溶解度、MS及FTIR等之分析進一步表徵。
希樂葆 -Na 鹽之製備。
將五公克希樂葆-API置於圓底燒瓶中並在無空氣條件下在氮氣存在下添加150-200 ml THF。藉由目測檢查,該化合物完全溶解。將450-500 mg NaH(氫化鈉)添加至該溶液中並強力攪拌。固體沉澱在約70-90 min內形成。藉由抽濾製程除去THF並將固體用20 ml THF沖洗三次。然後將固體溶解在300 ml二氯甲烷(DCM)中,並藉由吸濾製程過濾該溶液以除去任何未溶解的。收集濾液並然後藉由旋轉蒸發器利用壓力30-50 mbar及旋轉速度140 rpm濃縮並濃縮至乾燥以產生固體。在60℃下乾燥純固體16小時並研磨粉末以通過100網目之篩。製備無水非晶希樂葆-Na鹽並藉由1
H-NMR、13
C-NMR、XRD、MS、FTIR等之光譜進一步分析。
及生成無水非晶希樂葆-Na鹽之其他製程如下所述。將一公克希樂葆-API置於圓底燒瓶中並在無空氣條件下在氮氣存在下添加6 ml THF。藉由目測檢查,該化合物完全溶解。將75~100 mg NaH (氫化鈉)添加至該溶液中並強力攪拌。固體沉澱在約40~80 min內形成。藉由抽濾製程除去THF並將固體用乙醚沖洗三次。藉由漿液製程用乙醚純化固體三次。然後將固體溶解在150~200 ml二氯甲烷(DCM)中,並藉由吸濾製程過濾該溶液以除去任何未溶解的。收集濾液並然後濃縮並濃縮至乾燥。在縮合製程期間,將初始壓力設定在400~430 mbar,直到沒有餾出物。然後將壓力設定在10~30 mbar直到沉澱出固體鹽。在60℃下乾燥純固體16小時並研磨成粉末以通過100網目之篩。製備非晶希樂葆-Na鹽並藉由HPLC、1
H-NMR、13
C-NMR、XRD、飽和溶解度、MS及FTIR等之分析進一步表徵。
亦在如以上所述製程下製備無水結晶希樂葆-Na鹽,不同之處在於在縮合製程中將壓力設定在10~30 mbar直至沉澱出固體鹽。
測定西達本胺 -HCl 、西達本胺 -H2
SO4 及希樂葆 -Na 鹽之飽和溶解度。
將5 mg西達本胺-HCl、西達本胺-H2
SO4
或希樂葆-Na鹽之樣品添加至含有ddH2O之5 ml容量燒瓶並在培養箱中在25°C下以100 rpm振蕩90分鐘。使所得懸浮液濾過0.22 μm過濾器。分別在256 nm、256 nm及253 nm下分光光度法測定西達本胺-HCl、西達本胺-H2
SO4
及希樂葆-Na鹽之濃度。一式三份測定每個樣品之飽和溶解度並報告平均值及標準偏差。標準曲線之製備如以下所述。在99.99% MeOH中製備西達本胺及希樂葆之儲液。發現λmax
分別在256 nm及253 nm。校準曲線顯示良好線性,其特徵係在0-20 µg/ml之Beer濃度範圍內相關係數(R2
)等於0.9998。
細胞系。
CT26 (CRL-2638;鼠類結腸直腸腺癌)購自ATCC。CT26腫瘤細胞系在補充10% (vol/vol) FBS之McCoy 5A中於37℃、5% CO2
下生長。
動物模型中之抗癌活性。
動物研究係由台北醫學大學機構動物照護及使用委員會(The Taipei Medical University Institutional Animal Care and Use Committee)批准並監督的(TMU IACUC,編號:LAC-2018-0340)。所有動物實驗均使用六-至八週大的雄性BALB/C小鼠(BioLASCO Taiwan)。藉由皮下注射至每隻小鼠的右脇來接種CT26 (5 × 106
)癌細胞。在隨機化及治療之前,允許腫瘤生長10至11 d(腫瘤尺寸約200-300 mm3
)。帶有CT26的小鼠藉由在植入腫瘤後第11天、第14天、第17天、第20天、第23天及第26天腹腔內投藥給予2.5 mg/kg抗IgG (Lot#65481701)、抗PD-1 (Lot#640517M1及Lot#717918D1)、抗PD-L1 (Lot#720619F1)或抗CTLA-4 (Lot#702418A2B)抗體,並將所有抗體在100 μL無菌PBS (pH 7.4) (Invitrogen Life Technologies)中稀釋至適宜濃度。在植入腫瘤後第11天經口投與西達本胺-K30、西達本胺-HCl鹽、西達本胺-H2
SO4
鹽、希樂葆(膠囊/Celebrex®
,200 mg)及希樂葆-Na鹽(非晶或結晶形式)。從第11天至第26天,以每天12.5、25及50 mg/kg之各種劑量經口投與西達本胺-K30、西達本胺-HCl鹽及西達本胺-H2
SO4
鹽來治療帶有腫瘤的小鼠。從第11天至第26天,每天用希樂葆(膠囊/Celebrex®
,200 mg)或希樂葆-Na鹽以12.5、25.0及50 mg/kg之各種劑量進行治療。從治療開始直至腫瘤體積達成3,000 mm3
,測量抗癌活性。腫瘤體積計算為長度×寬度2
×0.5。
動物模型中之存活率。
從第11天至第25天或第26天進行抗體或藥物之投藥。在帶有腫瘤的小鼠中腫瘤繼續生長。每三天或每四天一次(兩次/週)測量小鼠之腫瘤體積。當腫瘤體積達成3,000 mm3
時,帶有腫瘤的小鼠被視為死亡。記錄並分析所有治療組。
克服對第一線 PD-1 檢查點阻斷療法之抗性。
動物研究係由台北醫學大學機構動物照護及使用委員會批准並監督的(TMU IACUC,編號:LAC-2018-0340)。所有動物實驗均使用六-至八週大的雄性BALB/C小鼠(BioLASCO Taiwan)。藉由皮下注射至每隻小鼠的右脇來接種CT26 (5 × 106
)癌細胞。在投與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg)之第一線治療兩次(兩次投藥間隔3天)之前,允許腫瘤生長8 d (平均腫瘤尺寸約120 mm3
)。當腫瘤滿足在第一線療法中第二劑量之抗PD-1抗體後的3天內連續增加三倍(平均腫瘤尺寸360 mm3
)及腫瘤體積<600 mm3
之失敗標準時,重新入選小鼠。將對抗PD-1 Ab具有抗性之此等小鼠進一步隨機分組。藉由七種不同方案處理對抗PD-1 Ab具有抗性之小鼠,包括抗IgG (2.5 mg/kg;Lot#65481701)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg;Lot#640517M1)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)與恩替司他(20 mg/kg)之組合、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)與西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)之組合加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、單獨抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg;Lot#702418A2B)或與西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)之組合加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)。在第14天、第17天、第20天、第23天、第26天及第29天(六種治療,每次治療間隔3天)經腹膜內(i.p.)投與抗體並將所有抗體在100 μL無菌PBS (pH 7.4) (Invitrogen Life Technologies)中稀釋至適宜濃度。從第14天至第29天經口投與希樂葆-Na鹽、西達本胺-HCl鹽及恩替司他。每天給予希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg),然而,每兩天給予恩替司他(20 mg/kg)。從治療開始直至腫瘤體積達成3,000 mm3
,測量抗癌活性。腫瘤體積計算為長度×寬度2
×0.5。設計動物研究並顯示針對抗PD-1抗體之第一線療法在發展出對抗PD-1抗體療法之原發性/繼發性抗性之人類癌症患者中失敗之潛在治療選項。
克服對第一線 PD-L1 檢查點阻斷療法之抗性。
體內動物研究係由台北醫學大學機構動物照護及使用委員會批准並監督的(TMU IACUC,編號:LAC-2018-0340)。所有動物實驗均使用六-至八週大的雄性BALB/C小鼠(BioLASCO Taiwan)。藉由皮下注射至每隻小鼠的右脇來接種CT26 (5 × 106
)癌細胞。在投與抗PD-L1抗體(2.5 mg/kg)之第一線治療兩次(兩次投藥間隔3天)之前,允許腫瘤生長8 d(平均腫瘤尺寸約160 mm3
)。當腫瘤滿足在最後一次投與抗PD-L1 (Lot#720619F1)抗體後的3天內連續增加兩倍(平均腫瘤尺寸320 mm3
)且腫瘤體積為<600 mm3
之失敗標準時,重新入選小鼠。將對抗PD-L1 Ab具有抗性之此等小鼠進一步隨機分組。藉由七種不同方案處理對抗PD-L1 Ab具有抗性之小鼠,包括抗IgG (2.5 mg/kg;Lot#65481701)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg;Lot#717918D1)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)與恩替司他(20 mg/kg)之組合、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)與西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)之組合加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、單獨抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg;Lot#702418A2B)或與西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)之組合加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)。在第14天、第17天、第20天、第23天、第26天及第29天(六種治療,每次治療間隔3天)經腹膜內(i.p.)投與抗體並將所有抗體在100 μL無菌PBS (pH 7.4) (Invitrogen Life Technologies)中稀釋至適宜濃度。從第14天至第29天經口投與希樂葆-Na鹽、西達本胺-HCl鹽及恩替司他。每天給予希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg),然而,每兩天給予恩替司他(20 mg/kg)。從治療開始直至腫瘤體積達成3,000 mm3
,測量抗癌活性。腫瘤體積計算為長度×寬度2
×0.5。設計動物研究並顯示針對抗PD-L1抗體之第一線療法在發展出對抗PD-L1抗體療法之原發性/繼發性抗性之人類癌症患者中失敗之潛在治療選項。
西達本胺 -HCl 鹽及希樂葆 -Na 鹽在 Wistar 大鼠中之 PK 分佈 ( 藥物動力學 ) 之分析。
在7週大的Wistar雄性大鼠中進行西達本胺、希樂葆及其鹽形式(西達本胺-HCl鹽及希樂葆-Na鹽)之藥物動力學研究,藉由以50 mg/kg含在水中之劑量經口投與化合物。Wistar雄性大鼠購自BioLasco (Taiwan)。在藥物動力學研究之前,將動物禁食12 h並自由取得水。在投藥後0.08、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12、24、48及72 h收集血液樣品(n>5/時間點)。在每個時間點,從頸靜脈收集約250 μL血液於具有EDTA之標記Microtainer™管中。在30 min的預定採樣時間內處理該等血液樣品以獲得血漿樣品。所有血漿樣品均儲藏在−80°C以下,直至分析。藉由使用液相層析-質譜(LC-MS/MS,6470 Agilent Tech.,USA)方法,定量極限為14.2 ng/mL (西達本胺)及45.5 ng/mL (希樂葆),用西達本胺-k30、西達本胺-HCl鹽、希樂葆(膠囊/Celebrex®
,200 mg)及非晶形式希樂葆-Na鹽處理,分析血漿樣品。使用梯形法則及經過驗證之Phoenix WinNonlin軟體(版本6.3)之非分隔分析工具計算西達本胺-k30、西達本胺-HCl鹽、希樂葆/celebrex®
及希樂葆-Na鹽之PK參數。藥物動力學研究在台北醫學大學進行並獲得機構動物照護及使用委員會批准(IACUC批准號:LAC-2017-0331)。如下所述製備並分析樣品。將150 μL乙腈(含有10%甲醇)添加至50 μL校準標準品或血漿樣品並渦旋樣品1 min以沉澱蛋白質。在4℃、21,130×g下離心15 min後,將5 μL上清液直接注射至LC-MS/MS中以用於分析。用配備四元泵(1260 Infinity II四元泵LC系統)、脫氣器、自動進樣器、恆溫管柱區室及LC-MS/MS-6470質譜儀(Agilent Tech,USA)之6470系列液相層析(Agilent Tech.,USA)進行分析。如下表所述,在40℃及流動相梯度下,在LiChrospher® 60 RP-選擇性B管柱(5 μm,125×4.6 mm,Merck,Germany)上實現層析分離。流速為0.5 mL/min。總運行時間為10 min。乾燥氣流及霧化氣流設定在6 L/min及1.5 L/min。系統之乾燥氣體溫度及毛細管電壓分別調節至250℃及3000 V。以多重反應監測模式,對於西達本胺在正離子電噴霧電離界面中使用在m/z 391.1及265.1之靶離子,及對於希樂葆在負離子電噴霧電離界面中使用在m/z 380及m/z 316之靶離子,進行LC-MS/MS。
LC/MS之梯度表
時間 (min) | 2.5% 甲酸 | 水 | 乙腈 |
0-3 | 2% | 68% | 30% |
3.01-5 | 2% | 48% | 50% |
5.01-9 | 2% | 38% | 60% |
9.01-12 | 2% | 68% | 30% |
統計。
自至少四個獨立實驗計算所有數據點之平均值及標準誤差。每個實驗條件與IgG對照組之間的腫瘤尺寸之成對比較係使用學生兩樣品t檢驗(Systat Software,San Jose,CA,USA)進行的。進行學生檢驗或ANOVA,以分析動物效力數據。Kaplan–Meier曲線及對數等級檢驗係使用sigma stat 3.5軟體生成的。所有P值<0.05在統計學上視為顯著的。實例 1 西達本胺 -HCl 鹽之新穎晶體形式之表徵
西達本胺已於2014年獲得中國CFDA (NMPA)批准用於復發型或難治性周邊T細胞淋巴瘤(PTCL)。西達本胺(商標名稱,eipdaza®
)可作為包含5 mg西達本胺之口服用錠劑,及推薦劑量為30 mg,每週兩次,間隔時間超過3天。該錠劑含有塗佈在聚乙烯吡咯啶酮k30 (PVP-K30)上之西達本胺-API以改善其水溶解度及口服生物可利用性。在本發明中,吾人開發西達本胺API之調配物以產生呈新穎晶體形式之西達本胺-HCl及西達本胺-H2
SO4
鹽。西達本胺-HCl及西達本胺-H2
SO4
鹽之性質可顯著改善水溶解度及口服生物可利用性。如圖1所示,藉由1
H-NMR及13
C-NMR識別西達本胺鹽之結構。藉由使用溶劑二甲基亞碸(DMSO-d6),使用Bruker AVANCE 400MHz PLUS儀器記錄1
H NMR。在100 MHz下記錄13
C NMR光譜。1
H-NMR數據證實與西達本胺-API相比,在西達本胺-HCl鹽中苯胺中NH2
基之化學位移信號δH
5.20消失,如圖1A及B所示。該結果證實鹽形式係在C21-NH2
之位置生成的。其可描述為C21-NH3 +
Cl-
或西達本胺-HCl鹽。西達本胺-API及西達本胺-HCl鹽之13
C-NMR數據顯示於圖1D及E中。描述西達本胺-API及西達本胺-HCl鹽之化學位移數據之詳細信息,如表1及圖1G所示。此外,使用ESI-MS以確定分子量。使用具有ESI源及離子極性:正/負模式之Bruker microTOF記錄西達本胺-HCl鹽之質譜。確定西達本胺-HCl鹽之正離子模式ESI-MS光譜並顯示於圖2A中。具最大豐度之峰具有m/z 391.158 [M+H]+
。然而,確定西達本胺-HCl鹽之負離子模式ESI-MS光譜並顯示於圖2B中。具最大豐度之峰具有m/z 425.118 [M+Cl]-
。接下來,藉由XRD表徵西達本胺-HCl鹽之晶體形式。分析西達本胺-API與西達本胺-HCl鹽之間的XRD分佈之比較。在PANalytical EMPYREAN X射線衍射儀上進行XRD測量。對於X射線輻射源,使用Cu (λ=45 kV,40 mA)陽極,2θ範圍在3°與40°之間,掃描速率為1/min。XRD數據證實西達本胺-API及西達本胺-HCl鹽具有不同XRD分佈,如圖3A(西達本胺-API)及3B(西達本胺-HCl鹽)所示。如圖3D所示,西達本胺-API與西達本胺-HCl鹽之間的2-θ值不同。該數據指示西達本胺-HCl鹽具有不同於西達本胺-API之晶體形式之新穎晶體形式。在飽和溶解度研究中分析西達本胺-API及西達本胺-HCl鹽之兩種不同晶體形式。如表2所示,西達本胺-HCl鹽之水溶性比西達本胺-API及西達本胺-K30高得多。西達本胺-API不溶於水,及西達本胺-K30(西達本胺錠劑之調配物(epidaza®
))顯示低水溶解度(約26.03 μg/mL)。測試三個獨立批次之西達本胺-HCl鹽並顯示分別約554.83、566.90及536.06 μg/mL之飽和溶解度。此等結果證實與西達本胺-K30相比,西達本胺-HCl鹽顯著改善水溶解度20倍以上,如表2所示。西達本胺-HCl鹽之水溶解度之改善可增加口服生物可利用性,此然後將改善PK分佈及抗癌效力。藉由FTIR分析進一步證實西達本胺-HCl鹽之結構,如圖4所示。在具有AutoATR系統之Perkin Elmer Spotlight 200i Sp2 (Perkin Elmer IR分光光度計)上記錄FTIR光譜。FTIR光譜係在4000-700 cm-1
範圍內之掃描。如圖4B所示,西達本胺-HCl鹽之分佈丟失苯胺之在3275及3309波數(單位為cm-1
)之N-H拉伸信號。圖4D表示西達本胺-API(圖4A)及西達本胺-HCl鹽之FTIR數據之比較。 表 1.
西達本胺-API、西達本胺-HCl鹽及西達本胺-H2
SO4
鹽之1
H-NMR光譜數據(400 MHz,d6
-DMSO)。
表 2.
西達本胺-API、西達本胺-HCl鹽及西達本胺-H2
SO4
鹽之飽和溶解度研究
*BDL:低於偵測極限實例 2 西達本胺 -H2
SO4 鹽之新穎晶體形式之表徵
西達本胺 -API | 西達本胺 -HCl 鹽 | 西達本胺 -H2 SO4 鹽 | ||||
位置 | δH (J ,單位為 Hz) | δH (J ,單位為 Hz) | δH (J ,單位為 Hz) | |||
11 | CH2 | 4.49,d | CH2 | 4.5,d | CH2 | 4.5,d |
21 | NH2 | 5.20,s | ||||
24 | CH | 6.35,td | CH | 6.41,td | CH | 6.57,t |
22 | CH | 6.55,dd | CH | 6.58,dd | CH | 6.72,dd |
25 | CH | 6.82,d | CH | 6.91,d | CH | 6.99,d |
5 | CH | 7.12,dd | CH | 7.13,dd | CH | 7.22,t |
14,16 | CH2 | 7.42,d | CH2 | 7.42,d | CH2 | 7.42,d |
7 | CH | 7.44,dd | CH | 7.59,d | CH | 7.62,d |
6 | CH | 7.52,d | CH | 7.76,dd | CH | 7.90,dd |
13,17 | CH2 | 7.95,d | CH2 | 7.95,d | CH2 | 7.99,d |
4 | CH | 8.01,dt | CH | 8.37,d | CH | 8.54,d |
8 | CH | 8.56,dd | CH | 8.72,dd | CH | 8.79,dd |
2 | CH | 8.74,d | CH | 8.96,d | CH | 9.04,d |
10 | NH | 8.79,t | NH | 8.87,t | NH | 8.97,t |
19 | NH | 9.57,s | NH | 9.62,s | NH | 9.8,s |
物質 | 飽和 & 溶解度 (μg/mL) |
西達本胺-API | BDL |
西達本胺/k30 (1:5) | 26.03±0.24 |
西達本胺-HCl鹽NO.190116 | 554.83±23.90 |
西達本胺-HCl鹽NO.190199 | 566.90±20.60 |
西達本胺-HCl鹽NO.190318 | 536.06±0.94 |
西達本胺-H2 SO4 鹽NO.190119 | 597.39±36.60 |
西達本胺-H2 SO4 鹽NO.190418 | 652.90±14.35 |
西達本胺-H2 SO4 鹽NO.190504 | 561.50±42.60 |
用H2
SO4
製備西達本胺之第二鹽形式。藉由1
H-NMR及13
C-NMR識別西達本胺-H2
SO4
鹽之結構,如圖1C及1F所示。藉由使用溶劑二甲基亞碸(DMSO-d6),使用Bruker AVANCE 400MHz PLUS儀器記錄1
H NMR。在100 MHz下記錄13
C NMR光譜。1
H-NMR數據證實與西達本胺-API相比,在西達本胺-H2
SO4
鹽中苯胺中NH2
基之化學位移信號δH
5.20消失,如圖1C及1A所示。該結果證實鹽形式係在C21-NH2
之位置生成的。其可描述為C21-NH3 +
HSO4 -
或西達本胺-H2
SO4
鹽。表1及圖1G顯示西達本胺-API及西達本胺-H2
SO4
鹽之詳細化學位移數據。此外,使用ESI-MS以確定分子量。使用具有ESI源及離子極性:正/負模式之Bruker microTOF記錄西達本胺-H2
SO4
鹽之質譜。確定西達本胺-H2
SO4
鹽之正離子模式ESI-MS光譜並顯示於圖2C中。具最大豐度之峰具有m/z 391.16 [M+H]+
。然而,確定西達本胺-H2
SO4
鹽之負離子模式ESI-MS光譜並顯示於圖2D中。具最大豐度之峰具有m/z 487.12 [M+ HSO4
]-
。接下來,藉由XRD表徵西達本胺-H2
SO4
鹽之晶體形式。分析西達本胺-API與西達本胺-H2
SO4
鹽之間的XRD分佈之比較。在PANalytical EMPYREAN X射線衍射儀上進行XRD測量。對於X射線輻射源,使用Cu (λ=45 kV,40 mA)陽極,2θ範圍在3°與40°之間,掃描速率為1/min。XRD數據證實西達本胺-API及西達本胺-H2
SO4
鹽具有不同XRD分佈,如圖3A(西達本胺-API)及3C(西達本胺-H2
SO4
鹽)所示。如圖3D所示,西達本胺-API與西達本胺-H2
SO4
鹽之間的2-θ值不同。該數據指示西達本胺-H2
SO4
鹽具有不同於西達本胺-API之晶體形式之新穎晶體形式。在飽和溶解度研究中分析西達本胺-API及西達本胺-H2
SO4
鹽之兩種不同晶體形式。如表2所示,西達本胺-H2
SO4
鹽之水溶性比西達本胺-API及西達本胺-K30高得多。西達本胺-API不溶於水,及西達本胺-K30(西達本胺錠劑之調配物(epidaza®
))顯示低水溶解度(約26.03 μg/mL)。測試三個獨立批次之西達本胺-H2
SO4
鹽並顯示分別約597.39、652.90及561.5 μg/mL之飽和溶解度。此等結果證實與西達本胺-K30相比,西達本胺-H2
SO4
鹽顯著改善水溶解度20倍以上,如表2所示。西達本胺-H2
SO4
鹽之水溶解度之改善可增加口服生物可利用性,此然後將改善PK分佈及抗癌效力。藉由FTIR分析進一步證實西達本胺-H2
SO4
鹽之結構,如圖4C所示。在具有AutoATR系統之Perkin Elmer Spotlight 200i Sp2(Perkin Elmer IR分光光度計)上記錄FTIR光譜。FTIR光譜係在4000-700 cm-1
範圍內之掃描。如圖4C所示,西達本胺-H2
SO4
鹽之分佈丟失苯胺之在3412及3309波數(單位為cm-1
)之N-H拉伸信號。圖4D表示西達本胺-API(圖4A)及西達本胺-H2
SO4
鹽之FTIR數據之比較。實例 3 希樂葆 -Na 鹽之新穎非晶形式之表徵
非晶形式之特徵在於具有短程分子序,而不同於具有分子堆積之長程序列之晶體形式。希樂葆已被分類為BCS(生物醫藥分類系統(biopharmaceutical classification system))之類別II。其具有低溶解度及高滲透性性質。大多數商業化藥物具有適宜滲透性;溶解係針對於此等藥物之吸收之速率限制步驟。另一方面,溶解度係藥物開發中之另一個重要問題;非晶形式之製備為低溶解度問題提供有效解決方案。吾人已設計並測試一種獨特方法來生成希樂葆-Na鹽之非晶形式。在NaH強鹼條件下,發生以Na取代希樂葆-API之磺醯胺基中的氫並藉由多個步驟(包括純化及凝結)生產新穎非晶希樂葆-Na鹽。首先,比較希樂葆-API及希樂葆-Na鹽之1
H-NMR光譜並顯示於圖5A及5B中。其清楚地顯示,如圖5B所示,磺醯胺中的兩個氫信號消失。其表明兩個Na原子取代磺醯胺基中的兩個氫原子產生新穎希樂葆-Na鹽。希樂葆-API之1
H NMR數據(400 MHz,CDCl3
)描述為:δ 2.36(3H, s), 4.86(2H, s), 6.72(1H, s), 7.09(2H, dd), 7.16(2H, d), 7.46(2H, m), 7.89(2H, m)。希樂葆-Na鹽之1
H NMR數據(400 MHz,CDCl3
)描述為:δ 2.09(3H, s), 6.59(1H, s), 6.87(4H, s), 6.94(2H, d), 7.61(2H, d)。1
H-NMR數據證實,與希樂葆-API相比,在希樂葆-Na鹽中磺醯胺之NH2
基中的化學位移信號δH
4.86消失,如圖5B及5A所示。此外,在圖5C、5D及5E中證實13
C-NMR數據。接下來,吾人使用FAB-MS以證實希樂葆-Na鹽之分子量,如圖6所示。藉由使用具有FAB源及離子極性之JEOL JMS-700:正模式記錄希樂葆-Na鹽之質譜。數據證實實測m/z為426.1 [M+H+
]。其建議希樂葆-Na鹽為C17
H12
F3
N3
Na2
O2
S,分子量為425.04。在FAB-MS中C17
H12
F3
N3
Na2
O2
S之計算m/z為425.04,及實測為426.1 (M+H)+
。數據再證實希樂葆-Na鹽包含兩個鈉取代兩個氫。接下來,評估非晶希樂葆-Na鹽之水溶解度。如表3所示,希樂葆-API不溶於水,但希樂葆-膠囊(Celebrex®
)略不溶於水(約1.19 μg/mL)。測試希樂葆-Na鹽之非晶形式之獨立三批,分別具有約54.72、54.45及56.72 μg/mL之飽和溶解度。與希樂葆-API及希樂葆-膠囊相比,希樂葆-Na鹽之水溶解度顯著改善。該結果表明希樂葆-Na之非晶鹽形式之改善水溶解度性質可增加口服生物可利用性,並因此提高治療效力。此外,如圖7所示,XRD數據指示希樂葆-API具有特定晶體圖案(圖7A),但非晶希樂葆-Na鹽具有非晶繞射圖案,如圖7B所示。該結果指示非晶希樂葆-Na鹽具有飽和水溶解度顯著改善之特定形式。許多研究致力於藉由使用不同聚合物作為載劑來製備希樂葆之非晶形式。藉由FTIR之分析再證實非晶希樂葆-Na鹽之結構,如圖8所示。如圖8A & 8B所示,非晶希樂葆-Na鹽丟失磺醯胺之在3234及3341波數(單位為cm-1
)之N-H拉伸。希樂葆-API與非晶希樂葆-Na鹽之間的FTIR數據比較如圖8D所示。表 3.
希樂葆-API、希樂葆-膠囊及希樂葆-Na鹽(非晶形式或結晶形式)之飽和溶解度研究。
*BDL:低於偵測極限
amo:非晶;cry:結晶實例 4 希樂葆 -Na 鹽之結晶形式之表徵
物質 | 飽和 & 溶解度 (μg/mL) |
希樂葆-API | BDL |
希樂葆-膠囊(Celebrex® ) | 1.19±0.05 |
希樂葆-Na鹽NO.1903261 (amo) | 54.72±1.0 |
希樂葆-Na鹽NO.1903262 (amo) | 54.45±1.8 |
希樂葆-Na鹽NO.1903263 (amo) | 56.72±0.8 |
希樂葆-Na鹽NO.190307 (cry) | 111.5±5.7 |
希樂葆-Na鹽NO.1903282 (cry) | 133.63±1.8 |
希樂葆-Na鹽NO.1903283 (cry) | 95.34±5.7 |
製備結晶希樂葆-Na鹽並藉由1
H-NMR、13
C-NMR、XRD、MS、FTIR分析。如表3所示,來自三個不同批次之希樂葆-Na鹽之結晶形式之水溶解度顯示為約111.5、133.63及95.34 μg/mL。如圖7C及7D所示,結晶希樂葆-Na鹽之晶體繞射圖案不同於希樂葆-API之晶體繞射圖案。該結果指示結晶希樂葆-Na鹽具有特定結晶形式,此導致水溶解度顯著改善。藉由FTIR之分析再證實結晶希樂葆-Na鹽之結構,如圖8C所示。如圖8C及8D所示,與希樂葆-API相比,希樂葆-Na鹽丟失磺醯胺之在3234及3341波數(單位為cm-1
)之N-H拉伸。實例 5 在帶有 CT26 的小鼠中在與希樂葆 - 膠囊及抗 PD-1 Ab 組合時,西達本胺 -K30 與西達本胺 -HCl 鹽之間之抗癌活性比較
為研究西達本胺鹽形式是否會增強對於腫瘤抑制之效力,吾人評估西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-膠囊與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg;Lot#640517M1)之組合在帶有CT26的小鼠中之治療效應。如圖9所示,在第11天,帶有CT26腫瘤的小鼠中腫瘤尺寸生長至約200-250 mm3
。然後如所示用6種不同方案治療小鼠。如圖9A所示,與抗PD-1 Ab組相比,西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合在帶有CT26的小鼠中顯著抑制腫瘤生長。12.5、25或50 mg/kg劑量之西達本胺-HCl鹽加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合之結果亦顯示與抗PD-1 Ab組相比在帶有CT26腫瘤的小鼠中腫瘤生長受到顯著抑制。為比較西達本胺鹽形式與西達本胺-K30之間的抗癌活性,由以下等級評估效力。在該研究中,吾人定義完全反應(CR,在帶有腫瘤的小鼠中,在治療結束時,腫瘤生長≦0.5倍);部分反應(PR,腫瘤生長腫瘤尺寸>0.5倍,但在治療結束時,在帶有腫瘤的小鼠中腫瘤生長≦2倍);疾病穩定(SD,在治療結束時,在帶有腫瘤的小鼠中腫瘤生長在2倍與5倍之間);進行性疾病(PD,在治療結束時,在帶有腫瘤的小鼠中腫瘤生長等於或大於5倍)。
如圖9B所示,與西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab組之組合相比,西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab 2.5 mg/kg之組合甚至更有效地抑制帶有CT26腫瘤的小鼠中之腫瘤生長。用西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合治療達成6隻小鼠(60%)具有CR及4隻小鼠PD及中度腫瘤生長,及用西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加希樂葆-HCl鹽50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合治療達成89%之反應率,其中5隻小鼠具有PR及3隻小鼠具有CR,並沒有小鼠具有PD。此等結果表明,由於水溶解度及口服生物可利用性更高,西達本胺-HCl鹽形式比西達本胺-K30更有效,此因此改善治療效力。在圖9A及9B中,亦顯示與抗PD-1 Ab、西達本胺-HCl鹽12.5 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg之組合足以影響腫瘤微環境及反應性細胞毒性T淋巴細胞來殺死腫瘤。如圖9C所示,治療組中無一小鼠損失任何體重。在第26天停止治療後,在IgG對照組中,在帶有CT26腫瘤的小鼠中治療生長更快。然而,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑方案之組合極有效地抑制腫瘤生長並因此顯著增加存活率(圖9D)。如圖9D所示,西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合顯著增加存活率至約77.7%,然而,在帶有CT26的腫瘤小鼠模型中,西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合僅達成60%存活率。值得注意的是,西達本胺-HCl鹽25 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合顯著增加存活率至約66.6%。該結果表明西達本胺-HCl鹽加希樂葆-膠囊比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊更有效地控制並調節腫瘤微環境並增強免疫療法至某種程度。
該研究亦證明,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-膠囊與免疫檢查點抑制劑之組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊更有效地增強抗癌免疫反應。另一方面,當與抗PD-1 Ab比較時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-膠囊與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之間的面對面的直接比較已證實與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之組合方案之抗癌活性優於與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之組合方案之抗癌活性。實例 6 在帶有 CT26 的小鼠中西達本胺 -K30 加希樂葆 - 膠囊與西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 Ab 之組合之間的抗癌效應之比較
為證實腫瘤抑制活性之改善,吾人評估西達本胺-K30加希樂葆-膠囊相對西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg;Lot#640517M1)之組合在帶有CT26的小鼠中之治療效應。如圖10所示,當在第10天在帶有CT26的小鼠中腫瘤尺寸生長至約200至250 mm3
時,對每個研究組進行治療。首先,與抗PD-1 Ab組比較,在帶有CT26的小鼠中,西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab之組合顯著抑制腫瘤生長(圖10A)。與抗PD-1 Ab組相比,在12.5、25及50 mg/kg各種劑量之西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加非晶希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab之組合之結果顯示顯著抑制帶有CT26的小鼠中之腫瘤生長(圖10A)。在圖10B中,證實與西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1 Ab 2.5 mg/kg之組合相比,西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加不同劑量之希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab 2.5 mg/kg之組合甚至更有效地抑制帶有CT26的小鼠中之腫瘤生長。此等結果表明西達本胺-HCl鹽及希樂葆-Na鹽比西達本胺-K30及希樂葆-膠囊更有效,因為此等鹽形式具有更高的水溶解度及口服生物可利用性並因此改善治療效力。
在圖10A及10B中,顯示西達本胺-HCl鹽50 mg/kg與希樂葆-Na鹽12.5 mg/kg之組合足以影響腫瘤微環境及反應性細胞毒性T淋巴細胞來殺死腫瘤。相同劑量(50 mg/kg)之西達本胺-K30加希樂葆-膠囊(達成4隻小鼠具有CR,50%)與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab 2.5 mg/kg之組合之間的抗癌效應之面對面的直接比較顯示與鹽形式方案之後者組合在帶有CT26的小鼠中具有更好的腫瘤生長抑制潛能並達成7隻具有小鼠CR(100%),如圖10B所示。此外,如圖10C所示,在不同治療組中評估無腫瘤動物(CR)之百分比。當與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊比較時,與抗PD-1 Ab組合之所有鹽形式方案更有效地抑制腫瘤生長(具有更高比例之無腫瘤例)。此等結果表明與希樂葆-膠囊與免疫檢查點抑制劑之組合相比,希樂葆-Na鹽更有效地抑制帶有CT26的小鼠模型中之腫瘤生長。與西達本胺-K30相比,西達本胺-HCl亦證實相似結果。該發現亦證實可與免疫檢查點抑制劑組合降低西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之劑量,以有效地再活化腫瘤微環境中之細胞毒性T淋巴細胞,來抑制腫瘤生長,如圖10A及10B所示。如圖10D所示,治療組中無一小鼠損失任何體重。
在第25天停止治療後,在IgG (2.5 mg/kg;Lot#65481701)對照組中,在帶有CT26腫瘤的小鼠中腫瘤生長更快。如圖10E所示,在帶有CT26的腫瘤小鼠模型中,與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊(約75%)相比,與抗PD-1 Ab組合,西達本胺-HCl鹽50 mg/kg加希樂葆-Na鹽50 mg/kg組顯著增加存活率至約100%。抗PD-1組之存活率僅為37.5%。該結果表明西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊更有效地控制並調節腫瘤微環境並增強免疫反應至某種程度。總言之,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑方案之組合極有效地抑制腫瘤生長並因此顯著增加存活率(圖10E)。該研究證明,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑之組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊更有效地增強抗癌免疫反應。另一方面,當與抗PD-1 Ab比較時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之間的面對面的直接比較已證實與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之組合方案之抗癌活性優於與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之組合方案之抗癌活性。實例 7 證實西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 抗體之組合之最佳治療反應劑量並在帶有 CT26 腫瘤的小鼠中評估西達本胺 -H2
SO4 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 抗體之組合
為測試西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體之組合在帶有CT26腫瘤的小鼠中之最佳治療反應劑量,用不同劑量之西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體之組合治療腫瘤尺寸約300 mm3
的小鼠。如圖11A所示,西達本胺-HCl鹽加非晶希樂葆-Na鹽以50 mg/kg之劑量與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg;Lot#717918D1)組合比以25 mg/kg及12.5 mg/kg之劑量更佳。該結果亦顯示當與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊以50 mg/kg之劑量與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg)組合相比時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽以25 mg/kg之劑量與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg)組合具有相似治療反應。已顯示,在帶有CT26腫瘤的小鼠中,在相同劑量下,當與抗PD-1抗體組合時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊具有更有效之抗癌活性。此外,在帶有CT26腫瘤的小鼠中,在相同劑量下,當與西達本胺-HCl鹽加非晶希樂葆-Na鹽相比時,與抗PD-1抗體組合,西達本胺-HCl鹽加結晶希樂葆-Na鹽具有降低的抗癌活性效價,如圖11B所示。另一方面,西達本胺-H2
SO4
鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體組合具有類似於西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗-PD-1抗體組合之強效抗癌活性之強效抗癌活性,如圖11B所示。在該實驗中,由於腫瘤在不同治療之前已達成約300 mm3
之平均體積且抗PD-1抗體蛋白活性相比以往的研究更低,因此在該研究中抗PD-1抗體治療之抗癌治療效應顯示極差。如圖11B所示,在該研究中,最佳劑量之西達本胺-HCl鹽50 mg/kg或西達本胺-H2
SO4
鹽50 mg/kg加希樂葆-Na鹽以50 mg/kg之劑量與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg)組合具有最佳治療反應。此外,在組合方案中,非晶希樂葆-Na鹽比結晶希樂葆-Na鹽獲得更佳反應率。當治療前腫瘤尺寸平均約300 mm3
時,西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1抗體組合僅達成反應率約33%。然而,西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體之組合分別顯著改善反應率高至62.5%及55.5%。此等結果證實在帶有CT26腫瘤的小鼠中西達本胺及希樂葆之鹽形式比西達本胺-K30及希樂葆-膠囊更有效地增強免疫反應率。如圖11C所示,治療組中無一小鼠損失任何體重。
在第26天停止治療後,在IgG對照組中,帶有CT26腫瘤的小鼠中之腫瘤生長更快。然而,西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑方案之組合極有效地抑制腫瘤生長並因此顯著增加存活率(圖11D)。如圖11D所示,在該研究中西達本胺-K30 50 mg/kg加希樂葆-膠囊50 mg/kg與抗PD-1抗體組組合僅增加存活率至約22%,因為抗PD-1抗體抗癌活性相比以往的結果更低。另一方面,在帶有CT26腫瘤的小鼠模型中,西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽50 mg/kg加希樂葆-Na鹽50 mg/kg與抗PD-1抗體組之組合分別顯著增加存活率至約37.5%或44.4%。該結果表明西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1抗體之組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1抗體之組合更有效地控制並調節腫瘤微環境並增強免疫反應至某種程度。該研究亦證明,西達本胺-HCl鹽或西達本胺-H2
SO4
鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑之組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與免疫檢查點抑制劑之組合更有效地增強抗癌免疫反應。另一方面,當與抗PD-1 Ab比較時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之間的面對面的直接比較已證實與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之組合方案之抗癌活性優於與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊之組合方案之抗癌活性。實例 8 藉由在帶有 CT26 的小鼠中用抗 PD-1/ 抗 CTLA-4 Ab 與西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽之組合進行第二線治療克服對第一線抗 PD-1 Ab 治療之抗性
在該研究中,以第二線療法治療小鼠以模仿在人類第一線癌症療法中發生的第一線耐藥性之治療,其中接受第一線抗PD-1抗體療法之很大一部分人類癌症患者將發展出抗性,以評估當第一線抗PD-1抗體療法失敗時西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1/抗CTLA-4抗體之組合之第二線療法之抗癌效價。評價西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽是否可藉由調節腫瘤微環境來改善免疫檢查點抑制劑敏感性。在投與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg;Lot#717918D1)之第一線治療兩次(兩次投藥間隔3天)之前,允許腫瘤生長8 d(平均腫瘤尺寸約120 mm3
)。當腫瘤滿足在第一線療法中第二劑量之第一線抗PD-1抗體療法後的3天內連續增加三倍(平均腫瘤尺寸360 mm3
)及腫瘤體積<600 mm3
之治療失敗標準時,重新入選小鼠。將對抗PD-1 Ab具有抗性之此等小鼠進一步隨機分組。如所示,有十種不同治療方案(n=9至11隻小鼠/組)。將此等小鼠隨機分為不同第二線治療組,包括抗IgG Ab (2.5 mg/kg;Lot#65481701)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg;Lot#717918D1)、作為陽性對照之恩替司他(20 mg/kg)與抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)之組合、西達本胺-K30加希樂葆-膠囊、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、希樂葆-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab之組合、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)與抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)之組合、抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg;Lot#702418A2B)、西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg)之組合、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)與抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg)組之組合。抗體經腹膜內(i.p)處理六次(兩次注射間隔3天)。經口投與恩替司他八次(每2天給予)。西達本胺-K30或西達本胺-HCl鹽及希樂葆-膠囊或希樂葆-Na鹽以口服16次(每天)治療。如圖12A及12B所示,在抗PD-1 Ab組中沒有小鼠達成PR(反應率0%)及8隻小鼠具有PD及快速腫瘤生長。與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊相比,用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療更有效地抑制腫瘤生長。用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療顯示3隻小鼠達成CR及4隻小鼠達成PD及腫瘤快速生長(反應率33.3%)。然而,用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊治療顯示僅1隻小鼠達成PR及8隻小鼠達成PD及腫瘤快速生長(反應率10%)。當西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab組合時,結果證實4隻小鼠達成CR(反應率36.3%)及6隻小鼠達成PD且腫瘤生長慢得多。然而,用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab組合治療顯示僅1隻小鼠達成PR及9隻小鼠達成PD及腫瘤中度生長(反應率10%)。該結果表明抗PD-1 Ab在對抗PD-1 Ab具有抗性之小鼠中沒有抗癌活性。此外,在對抗PD-1 Ab具有抗性之小鼠中,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽方案極有效地控制腫瘤微環境並增加抗PD-1 Ab敏感性。且與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之鹽形式組合相比,用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊治療顯示抗癌活性少得多。如圖12B所示,與抗PD-1 Ab組相比,抗CTLA-4 Ab組適度地抑制腫瘤生長,但沒有小鼠曾經達成CR或PR及有7隻小鼠達成PD及中度腫瘤生長。然而,在西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab組之組合中,結果證實4隻小鼠達成CR,2隻小鼠達成PR(反應率60%)並沒有PD小鼠。及在西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab組之組合中,結果證實2隻小鼠達成CR,1隻小鼠達成PR(反應率25%)及5隻小鼠實現PD及中度腫瘤生長。最後,在陽性對照組中,恩替司他與抗PD-1 Ab組合,1隻小鼠達成PR(反應率9%)及8隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長。總之,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽方案有效地增強對抗PD-1 Ab具有抗性之小鼠之反應率。此外,在對抗PD-1 Ab具有抗性之小鼠中,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽當與抗CTLA-4 Ab組合時比與抗PD-1 Ab組合時可更有效地增強反應率。
在第31天停止治療後,帶有CT26腫瘤的小鼠中之腫瘤在抗PD-1及抗CTLA-4組中生長更快(圖12D)。在第60天評估存活率。用未組合抗PD-1 Ab之西達本胺-K30加希樂葆-膠囊治療比組合PD-1 Ab顯示更佳存活率,分別達成11.1%及0%。及用未組合抗PD-1 Ab之西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療比組合抗PD-1 Ab顯示更佳存活率,分別達成44%及40%。結果指示在治療後停用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊或西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊或西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽意外地顯示更快腫瘤生長。該研究亦證明,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab組合比西達本胺-HCl加希樂葆-Na與抗PD-1 Ab組合更有效地增強抗癌免疫反應。然而,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab組合更有效地抑制腫瘤生長,分別達成存活率77.8%及41.6%(圖12D)。另一方面,當與抗PD-1 Ab組合時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與MS-275之間的面對面的直接比較已證實在抗PD-1抗性條件下,與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之組合方案之抗癌活性優於與MS-275之組合方案之抗癌活性。實例 9 在帶有 CT26 的小鼠中藉由用抗 PD-1/ 抗 CTLA-4 Ab 與西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽組合進行第二線治療克服對第一線抗 PD-L1 Ab 治療之抗性
在該研究中,吾人進一步測試在用抗PD-L1 Ab第一線療法治療後針對於耐藥性之發生進行第二線組合治療,並評估當第一線抗PD-L1抗體療法失敗時用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1/抗CTLA-4抗體組合進行第二線療法之抗癌效價。測試在對第一線抗PD-L1抗體治療之耐藥性後西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽是否可藉由調節腫瘤微環境來改善免疫檢查點抑制劑之敏感性。用抗PD-L1抗體(2.5 mg/kg;Lot#720619F1)之第一線療法治療帶有CT-26腫瘤的小鼠(平均腫瘤尺寸約160 mm3
)兩次(兩次注射間隔3天)。當腫瘤滿足在第一線療法中第二劑量之第一線抗PD-L1抗體療法後的3天內連續增加三倍(平均腫瘤尺寸320 mm3
)及腫瘤體積<600 mm3
之治療失敗標準時,重新入選小鼠。將對抗PD-L1 Ab具有抗性之此等小鼠進一步隨機分組。如所示,有十種不同治療方案(n=9至11隻小鼠/組)。將此等小鼠隨機分為不同第二線治療組,包括抗IgG Ab (2.5 mg/kg;Lot#65481701)、抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg;Lot#717918D1)、作為陽性對照之恩替司他(20 mg/kg)加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)之組合、西達本胺-K30加希樂葆-膠囊、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)、希樂葆-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab之組合、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)與抗PD-1 Ab (2.5 mg/kg)之組合、抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg;Lot#702418A2B)、西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg)之組合、西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)與抗CTLA-4 Ab (2.5 mg/kg)組之組合。腹膜內(i.p)六次(每3天投與)對抗體進行治療。經口投與恩替司他八次(每2天投與)。西達本胺-K30或西達本胺-HCl鹽及希樂葆-膠囊或希樂葆-Na鹽以口服16次(每天)治療。如圖13A及13B所示,在對照組抗IgG組中,2隻小鼠達成PR及3隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率28.6%),此係因為對第一線抗PD-L1療法具有反應性之小鼠由於對第一線治療之反應延遲被誤認為對抗PD-L1 Ab治療具有抗性。然而,在抗PD-1 Ab組中,1隻小鼠達成PR,2隻小鼠達成CR及3隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率33.3%)。與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊相比,用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療更有效地抑制腫瘤生長。用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療顯示6隻小鼠達成CR,1隻小鼠達成PR及無PD小鼠(反應率70%)。然而,用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊治療顯示2隻小鼠達成CR,4隻小鼠達成PR及3隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率54.5 %)。當西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab組合時,結果證實6隻小鼠達成CR(反應率66.6%)及1隻小鼠達成PD及緩慢腫瘤生長。然而,用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab組合治療顯示4隻小鼠達成CR,1隻小鼠達成PR(反應率62.5%)及1隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長。數據表明與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊方案相比,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽方案更有效地控制腫瘤微環境並增加抗PD-L1抗性小鼠中之抗PD-1 Ab敏感性。
在圖13B中,數據顯示抗CTLA-4 Ab第二線治療顯著抑制腫瘤生長,及2隻小鼠達成CR,3隻小鼠達成PR及3隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率55.5%)。然而,在用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab之組合治療的組中,結果證實4隻小鼠達成CR,3隻小鼠達成PR及沒有PD小鼠(反應率77.7%)。及在西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab組組合中,結果證實2隻小鼠達成CR,3隻小鼠達成PR及1隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率55.5%)。最後,在用恩替司他加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab組合作為陽性對照治療的組中,結果顯示2隻小鼠達成CR,1隻小鼠達成PR及3隻小鼠達成PD及快速腫瘤生長(反應率50%)。總之,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽方案有效地增強PD-L1抗性小鼠之反應率。此外,在PD-L1抗性小鼠中,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與免疫檢查點抑制劑之組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與免疫檢查點抑制劑之組合更有效地增強反應率。
在第31天停止治療後,帶有CT26腫瘤的小鼠中之腫瘤在抗PD-1及抗CTLA-4組中生長更快(圖13D)。在第62天評估存活率。用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗PD-1 Ab組合治療比無PD-1 Ab顯示更佳存活率,分別達成62.5%及27.2%。及用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab組合治療比無抗PD-1 Ab顯示更佳存活率,分別達成77%及44%。結果指示在治療後停用西達本胺-K30加希樂葆-膠囊或西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊或西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗PD-1 Ab組合意外地顯示更快腫瘤生長。該研究亦證明西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab組合有效地增強抗癌免疫反應。然而,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與抗CTLA-4 Ab組合比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與抗CTLA-4 Ab組合更有效地抑制腫瘤生長,分別達成存活率66.6%及44.4%(圖13D)。另一方面,當與抗PD-1 Ab組合時,西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與MS-275加希樂葆-膠囊之間的面對面的直接比較已證實在抗PD-L1抗性條件下,與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之組合方案之抗癌活性優於與MS-275加希樂葆-膠囊之組合方案之抗癌活性。實例 10 在 Wistar 雄性大鼠中研究西達本胺 -HCl 鹽與希樂葆 -Na 鹽組合之 PK( 藥物動力學 ) 概況。
單獨西達本胺-HCl鹽加非晶形式希樂葆-Na鹽或與抗PD-1抗體之組合具有極有效之抗癌免疫活性。因此,吾人研究Wistar大鼠中西達本胺-HCl鹽與希樂葆-Na鹽組合相對於西達本胺-K30與希樂葆-膠囊組合之PK特性。如圖14A所示,分析Wistar大鼠中藉由口服西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg)及西達本胺-K30(50 mg/kg)之西達本胺血液濃度-時間分佈。在表4中,結果證實西達本胺之Cmax及Tmax對於鹽形式係顯著改變。在西達本胺-HCl鹽組中,Cmax為2065.2 (ng/mL)及Tmax為0.14 h。然而,在西達本胺-K30組中,Cmax為786.3 ng/mL及Tmax為0.39 h。與西達本胺-K30之吸收率相比,西達本胺-HCl鹽之吸收率極顯著增加。然而,如表4所示,AUC、MRT及T1/2
之值未顯著改變。此等結果表明在Wistar大鼠中與西達本胺-K30相比,西達本胺-HCl鹽具有更快的吸收性質並達成更高的Cmax,但並未增加循環系統中西達本胺之總量。如圖14B所示,分析Wistar大鼠中口服50 mg/kg希樂葆-Na鹽及50 mg/kg希樂葆-膠囊之希樂葆血液濃度-時間分佈。該結果證實在Wistar大鼠中於口服後Tmax、Cmax、AUC、AUMC、MRT及T1/2
之值在希樂葆-Na鹽與希樂葆-膠囊之間無顯著差異,如表5所示。
接下來,分析在Wistar大鼠中藉由口服西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊(劑量為50 mg/kg)之間的西達本胺PK分佈之比較。如圖14C及表4所示,與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊組相比,西達本胺之Cmax值在西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽組中顯著增加,且該等值分別為約2244.5 ng/mL及862.3 ng/mL。如表4所示,與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊組相比,西達本胺之Tmax值在西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽組中顯著減小,且該等值分別為約0.14 h及0.25 h。與西達本胺-K30加希樂葆-膠囊組相比,西達本胺之AUC值在西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽組中略增加,且該等值分別為約5977 ng*h/mL及4201 ng*h/mL。兩種組合之間AUMC值之相似比較結果顯示於表4中。如表4所示,顯示兩組之間的MRT及T1/2
之值沒有差異。如圖14E及表4所示,西達本胺-HCl鹽與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之間的PK分佈比較顯示略有變化。提出在就ADME(吸收、分佈、代謝及排泄)方面,在用西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療中,西達本胺PK分佈未因存在希樂葆-Na鹽而受到顯著影響。然而,如表4所示,對西達本胺之AUC值影響輕微,及西達本胺-HCl及西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽組之AUC值分別為約4113 ng/mL及5977 ng/mL。
另一方面,如圖14D及表5所示,在Wistar大鼠中,藉由口服,當將西達本胺-K30加希樂葆-膠囊與西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽(50 mg/kg)比較時,希樂葆PK分佈沒有顯著改變。然而,如圖14F及表5所示,單獨希樂葆-Na鹽或希樂葆-膠囊比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊或西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽具有顯著更低的Cmax及AUC。此等結果表明西達本胺-K30或西達本胺-HCl鹽的存在顯著改變希樂葆ADME分佈,並因此顯著增加希樂葆之Cmax及AUC值。然而,由於存在希樂葆-Na鹽或希樂葆-膠囊,西達本胺PK分佈未受到顯著影響。總言之,證實西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽具有顯著改變之ADME分佈,此因此當與免疫檢查點抑制劑組合時實現有效腫瘤抑制並增加存活,表明在面對耐藥性之第二線療法之挑戰中鹽形式比西達本胺-K30加希樂葆-膠囊具有更佳抗癌效價。表 4.
在Wistar雄性大鼠中用西達本胺-K30、西達本胺-HCl鹽、西達本胺-k30加希樂葆-膠囊、及西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療之西達本胺藥物動力學參數。
值為平均值±標準偏差(SD)。a
P < 0.05,相對於西達本胺-k30,b
P <0.05,相對於西達本胺-HCl鹽;c
P <0.05,相對於西達本胺-k30加希樂葆-cap。用西達本胺-k30、西達本胺-HCl鹽、西達本胺-k30加希樂葆-cap、及西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療的大鼠之間的差異表示為平均值±SD並藉由單向ANOVA然後Tukey多重比較檢驗分析。
Tmax
:達到Cmax
之時間。
Cmax
:投藥後藥物之峰值血漿濃度。
AUC0→t
:曲線下面積。
MRT:平均滯留時間
T1/2
:藥物濃度達到其原始值的一半所需的時間。表 5.
在Wistar雄性大鼠中用希樂葆-膠囊、希樂葆-Na鹽、希樂葆-膠囊加西達本胺-k30、及希樂葆-Na鹽加西達本胺-HCl鹽治療之希樂葆藥物動力學參數。
值為平均值±標準偏差(SD)。a
P < 0.05,相對於希樂葆/cap,b
P<0.05,相對於希樂葆-Na鹽;c
P<0.05,相對於西達本胺-k30加希樂葆-cap。用西達本胺-k30、西達本胺-HCl鹽、西達本胺-k30加希樂葆-cap、及西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽治療的大鼠之間的差異表示為平均值±SD並藉由單向ANOVA然後Tukey多重比較檢驗分析。
Tmax
:達到Cmax
之時間。
Cmax
:投藥後藥物之峰值血漿濃度。
AUC0→t
:曲線下面積。
MRT:平均滯留時間
T1/2
:藥物濃度達到其原始值的一半所需的時間。
清單 | 西達本胺-k30 N=6 | 西達本胺-HCl 鹽 N=6 | 西達本胺-k30 加 希樂葆-cap N=6 | 西達本胺-HCl鹽 加 希樂葆-Na鹽 N=6 |
Tmax ,(h) | 0.39±0.2 | 0.14±0.1a | 0.25±0.01a,b | 0.14±0.09a,c |
Cmax ,(ng/mL) | 786±243 | 2065±1136a | 862±245a | 2244±841b |
AUC0 → t ,(ng*h/mL) | 4422±1894 | 4113±1773 | 4201±848 | 5977±2161 |
AUMC,(ng*h2 /mL) | 57808±43710 | 46570±25207 | 38478±5671 | 53542±19097 |
MRT (h) | 12.1±5.5 | 11.3±2.8 | 8.9±1.1 | 9.0±2.9 |
T1/2 (h) | 16.9±3.7 | 14.0±4.9 | 20.7±3.1 | 18.8±2.2 |
清單 | 希樂葆-cap N=5 | 希樂葆-Na鹽 N=5 | 西達本胺-k30 加 希樂葆-cap N=6 | 西達本胺-HCl鹽 加 希樂葆-Na鹽 N=6 | ||||
Tmax ,(h) | 4.8±1.0 | 5.2±1 | 4.3±0.8a | 3.3±1.0c | ||||
Cmax ,(ng/mL) | 7104±2962 | 7631±2727 | 15021±1563b | 16576±1181c | ||||
AUC0 → t ,(ng*h/mL) | 105511±34816 | 106723±35778 | 163453±11461b | 168033±14588a,b | ||||
AUMC,(ng*h2 /mL) | 1062627±301118 | 1124599±333210 | 1481893±243790a | 1330378±158873 | ||||
MRT (h) | 9.3±0.4 | 9.4±0.5 | 9.0±1.1 | 7.9±0.6a,b,c | ||||
T1/2 (h) | 6.2±2 | 7.7±3.1 | 3.7±0.2a,b | 3.4±0.1a,b | ||||
圖 1A 至 1G 表示西達本胺 -API 、西達本胺 -HCl 鹽及西達本胺 -H2
SO4 鹽之 1 H-NMR 及 13 C-NMR 光譜。
顯示西達本胺-API (活性醫藥成分) (A)之1
H-NMR光譜、西達本胺-HCl鹽(B)之1
H-NMR光譜及西達本胺-H2
SO4
鹽(C)之光譜1
H-NMR。顯示西達本胺-API (D)之13
C-NMR光譜、西達本胺-HCl鹽(E)之13
C-NMR光譜及西達本胺-H2
SO4
鹽(F)之13
C-NMR光譜。比較西達本胺之不同形式之13
C-NMR光譜數據(G)。
圖 2A 至 2D 表示西達本胺 -HCl 鹽及西達本胺 -H2
SO4 鹽之陽性及陰性離子 ESI-MS 光譜。
顯示陽性離子模式(A)及陰性離子模式(B)之西達本胺-HCl鹽之ESI-MS光譜。顯示陽性離子模式(C)及陰性離子模式(D)之西達本胺-H2
SO4
鹽之ESI-MS光譜。
圖 3A 至 3D 表示西達本胺 -API 、西達本胺 -HCl 鹽及西達本胺 -H2
SO4 鹽之 X 射線粉末繞射 (XRD) 光譜。
比較西達本胺-API (A)之XRD光譜、西達本胺-HCl鹽(B)之XRD光譜、西達本胺-H2
SO4
鹽(C)之XRD光譜並顯示西達本胺-API、西達本胺-HCl鹽及西達本胺-H2
SO4
鹽之2-θ值(D)係不同的(D)。
圖 4A 至 4D 顯示西達本胺 -API 、西達本胺 -HCl 鹽及西達本胺 -H2
SO4 鹽之傅立葉變換紅外光譜 ( FTIR ) 光譜。
分析西達本胺-API (A)、西達本胺-HCl鹽(B)及西達本胺-H2
SO4
鹽(C)之FTIR光譜,以表徵西達本胺-API、西達本胺-HCl鹽及西達本胺-H2
SO4
鹽(D)。
圖 5A 至 5E 顯示希樂葆 -API 及希樂葆 -Na 鹽之 1 H-NMR 及 13 C-NMR 光譜。
希樂葆-API (活性醫藥成分)及希樂葆-Na鹽之1
H-NMR光譜(400MHz,CDCl3
)分別顯示於圖5A及5B中。希樂葆-API及希樂葆-Na鹽之13
C-NMR光譜分別顯示於圖5C及5D中。在圖5E中比較希樂葆-API及希樂葆-Na鹽之13
C-NMR光譜數據(100MHz,DMSO-d6
)。希樂葆-Na鹽可藉由不同製程製備為非晶或結晶形式。非晶希樂葆-Na鹽之1
H-NMR及13
C-NMR光譜具有與結晶鹽形式之1
H-NMR及13
C-NMR光譜相同的圖案。
圖 6 顯示希樂葆 -Na 鹽之快速原子轟擊質譜 (FAB-MS) 光譜。
非晶希樂葆-Na鹽之FAB-MS光譜具有與結晶鹽形式之FAB-MS光譜相同的圖案。
圖 7A 至 7D 顯示希樂葆 -API 及希樂葆 -Na 鹽之非晶及結晶形式之 X 射線粉末繞射 (XRD) 光譜。
希樂葆-API、希樂葆-Na鹽之非晶及結晶形式之XRD光譜分別顯示於圖7A、7B及7C中。非晶形式及結晶形式之間的繞射峰明顯不同。
圖 8A 至 8D 顯示希樂葆 -API 及希樂葆 -Na 鹽之非晶及結晶形式之傅立葉變換紅外光譜 (FTIR) 光譜。
呈晶體及非晶形式之希樂葆-API及希樂葆-Na鹽之FTIR光譜分別顯示於圖8A、8B及8C中。在希樂葆-API與希樂葆-Na鹽間分析FTIR圖案之表徵(圖8D)。
圖 9A 至 9D 顯示西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -cap 與抗 PD-1 抗體之組合在帶有 CT26 腫瘤的小鼠中之治療反應。
如所示,用各種治療方法處理帶有CT26結腸腫瘤的BALB/c小鼠。IgG,抗IgG對照(媒劑,2.5 mg/kg);PD-1,抗PD-1單株抗體(2.5 mg/kg);CD-HCl,西達本胺-HCl鹽12.5、25、50 mg/kg;CD-K30,西達本胺-K30 (塗佈在聚乙烯吡咯啶酮K30上之西達本胺,50 mg/kg);C-cap 50,自膠囊之希樂葆產物(50 mg/kg,Celebrex®
)。記錄總腫瘤體積及腫瘤尺寸之倍數變化(A)、個體腫瘤體積(B)、帶有CT26腫瘤的小鼠體重(C)及動物存活率(D)。在腫瘤植入後,如所示處理帶有CT26腫瘤的小鼠並在腫瘤體積達成3000 mm3
時實施安樂死。顯示平均值及標準偏差。亦指示用於每個實驗組中之動物之數量及P值。*P < 0.05 (相對IgG);#
P < 0.05 (相對PD-1)。使用學生t檢驗計算P值,學生t檢驗將適應症組之腫瘤尺寸與IgG組進行比較。藉由單向ANOVA,然後藉由Tukey多重比較檢驗(Tukey’s multiple comparisons test),分析不同治療組間的存活率差異。
圖 10A 至 10E 顯示西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 抗體之組合在帶有 CT26 腫瘤的小鼠中之治療反應。
如所示,用各種治療方法處理帶有CT26結腸腫瘤的BALB/c小鼠。IgG,抗IgG對照(媒劑,2.5 mg/kg);PD-1,抗PD-1單株抗體(2.5 mg/kg);CD-HCl,西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg);C-Na,非晶希樂葆-Na鹽(12.5、25及50 mg/kg);CD-K30,西達本胺-K30 (塗佈在聚乙烯吡咯啶酮K30上之西達本胺,50 mg/kg);C-膠囊50,自膠囊之希樂葆產物(50 mg/kg,Celebrex®
)。記錄總腫瘤體積及腫瘤尺寸之倍數變化(A)、個體腫瘤體積(B)、無腫瘤小鼠百分比(C)、帶有CT26腫瘤的小鼠體重(D)及動物存活率(E)。在腫瘤植入後,如所示處理帶有CT26腫瘤的小鼠並在腫瘤體積達成3000 mm3
時實施安樂死。顯示平均值及標準偏差。亦指示用於每個實驗組中之動物之數量及P值。*P < 0.05 (相對IgG);#
P < 0.05 (相對PD-1)。使用學生t檢驗計算P值,學生t檢驗將適應症組之腫瘤尺寸與IgG組進行比較。藉由單向ANOVA,然後藉由Tukey多重比較檢驗,分析不同治療組間的存活率差異。
圖 11A 至 11D 證實西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 抗體之組合之最佳治療反應劑量並評估帶有 CT26 腫瘤的小鼠中西達本胺 -H2
SO4 鹽加希樂葆 -Na 鹽與抗 PD-1 抗體之組合之治療反應。
如所示,用各種治療方法處理帶有CT26結腸腫瘤(腫瘤尺寸約300 mm3
)的BALB/c小鼠。IgG,抗IgG對照(媒劑,2.5 mg/kg);PD-1,抗PD-1單株抗體(2.5 mg/kg);CD-HCl,西達本胺-HCl鹽(12.5、25及50 mg/kg);C-Na,非晶希樂葆-Na鹽(12.5、25及50 mg/kg);C-Na結晶,結晶希樂葆-Na鹽(50 mg/kg);CD-H2
SO4
,西達本胺-H2
SO4
鹽(50 mg/kg);CD-K30,西達本胺-K30 (塗佈於聚乙烯吡咯啶酮K30上之西達本胺,50 mg/kg);C-cap,來自膠囊之希樂葆產物(50 mg/kg,Celebrex®)。記錄總腫瘤體積及腫瘤尺寸之倍數變化(A)、個體腫瘤體積(B)、帶有CT26腫瘤的小鼠體重(C)及動物存活率(D)。在腫瘤植入後,如所示處理帶有CT26腫瘤的小鼠並在腫瘤體積達成3000 mm3
時實施安樂死。顯示平均值及標準偏差。亦指示用於每個實驗組中之動物之數量及P值。*P < 0.05 (相對IgG);#
P < 0.05 (相對PD-1)。使用學生t檢驗計算P值,學生t檢驗將適應症組之腫瘤尺寸與IgG組進行比較。藉由單向ANOVA,然後藉由Tukey多重比較檢驗,分析不同治療組間的存活率差異。
圖 12A 至 12D 顯示藉由在帶有 CT26 腫瘤的小鼠中使用抗 PD-1 或抗 CTLA-4 Ab 與西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽之組合克服對 PD-1 檢查點阻斷療法之抗性。
藉由投與抗PD-1抗體(2.5 mg/kg)之第一線療法兩次(每週兩次)來治療帶有CT-26的小鼠(平均腫瘤尺寸約120 mm3
)。當腫瘤符合第一線療法之失敗標準(其定義為當腫瘤尺寸增加三倍至平均約360 mm3
且腫瘤體積<600 mm3
)時,將小鼠重新納入第二線療法研究。如所示,用七種不同方案(n=9至11隻小鼠/組)治療此等抗PD-1抗性小鼠:IgG,抗-IgG對照(媒劑,2.5 mg/kg);PD-1,抗-PD-1單株抗體(2.5 mg/kg);CTLA-4,抗-CTLA-4單株抗體(2.5 mg/kg);CD-HCl,西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg);C-Na,非晶希樂葆-Na鹽(50 mg/kg);MS275,恩替司他(entinostat)(20 mg/kg)。記錄總腫瘤體積及腫瘤尺寸之倍數變化(A)、個體腫瘤體積(B)、帶有CT26腫瘤的小鼠體重(C)及動物存活率(D)。在腫瘤植入後,如所示處理帶有CT26腫瘤的小鼠並在腫瘤體積達成3000 mm3
時實施安樂死。顯示平均值及標準偏差。亦指示用於每個實驗組中之動物之數量及P值。*P < 0.05 (相對IgG);#
P < 0.05 (相對PD-1)。使用學生t檢驗計算P值,學生t檢驗將適應症組之腫瘤尺寸與IgG組進行比較。藉由單向ANOVA,然後藉由Tukey多重比較檢驗,分析不同治療組間的存活率差異。
圖 13A 至 13D 顯示藉由在帶有 CT26 腫瘤的小鼠中使用抗 PD-1 或抗 CTLA-4 Ab 與西達本胺 -HCl 鹽加希樂葆 -Na 鹽之組合克服對 PD-L1 檢查點阻斷療法之抗性。
藉由投與抗PD-L1抗體(2.5 mg/kg)之第一線療法兩次(每週兩次)來治療帶有CT-26的小鼠(平均腫瘤尺寸約160 mm3
)。當腫瘤符合第一線療法之失敗標準(其定義為當腫瘤尺寸增加三倍至平均約320 mm3
且腫瘤體積<600 mm3
)時,將小鼠重新納入第二線療法研究。如所示,用七種不同方案(n=9至11隻小鼠/組)治療此等抗PD-L1抗性小鼠。IgG,抗-IgG對照(媒劑,2.5 mg/kg);PD-1,抗-PD-1單株抗體(2.5 mg/kg);CTLA-4,抗-CTLA-4單株抗體(2.5 mg/kg);CD-HCl,西達本胺-HCl鹽(50 mg/kg);C-Na,非晶希樂葆-Na鹽(50 mg/kg);MS275,恩替司他(20 mg/kg)。記錄總腫瘤體積及腫瘤尺寸之倍數變化(A)、個體腫瘤體積(B)、帶有CT26腫瘤的小鼠體重(C)及動物存活率(D)。在腫瘤植入後,如所示處理帶有CT26腫瘤的小鼠並在腫瘤體積達成3000 mm3
時實施安樂死。顯示平均值及標準偏差。亦指示用於每個實驗組中之動物之數量及P值。*P < 0.05 (相對IgG);#
P < 0.05 (相對PD-1)。使用學生t檢驗計算P值,學生t檢驗將適應症組之腫瘤尺寸與IgG組進行比較。藉由單向ANOVA,然後藉由Tukey多重比較檢驗,分析不同治療組間的存活率差異。
圖 14A 至 14F 顯示 Wistar 雄性大鼠中僅西達本胺 -HCl 鹽及希樂葆 -Na 鹽或組合之 PK 分佈。
該大鼠以50 mg/kg之劑量經口投與西達本胺-K30、西達本胺-HCl鹽、希樂葆-膠囊(celebrex®
,希樂葆/cap)、或非晶希樂葆-Na鹽。分析西達本胺-K30與西達本胺-HCl鹽之間的PK分佈之比較(A)。分析希樂葆/cap與非晶希樂葆-Na鹽之間的PK分佈之比較(B)。西達本胺-K30加希樂葆/cap相對西達本胺-HCl鹽加非晶希樂葆-Na鹽之西達本胺PK分佈之比較顯示於(C)中。西達本胺-K30加希樂葆/cap相對西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之希樂葆PK分佈之比較顯示於(D)中。西達本胺-K30相對西達本胺-HCl鹽相對西達本胺-K30加希樂葆/cap相對西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之西達本胺PK分佈之比較顯示於(E)中。希樂葆/cap相對希樂葆-Na鹽相對西達本胺-K30加希樂葆/cap相對西達本胺-HCl鹽加希樂葆-Na鹽之希樂葆PK分佈之比較顯示於(F)中。
Claims (32)
- 一種組合,其包含西達本胺(chidamide)之酸性鹽及希樂葆(celecoxib)之鹼性鹽。
- 如請求項1之組合,其中該西達本胺之酸性鹽及該希樂葆之鹼性鹽的量分別在約5% (w/w)至約80% (w/w)及約95% (w/w)至約20% (w/w)的範圍內。
- 如請求項1之組合,其中該西達本胺之酸性鹽及該希樂葆之鹼性鹽的量在重量比約8:1、約4:1、約2:1、約1:1、約1:2、約1:4或約1:8內。
- 如請求項1之組合,其中該西達本胺之酸性鹽及該希樂葆之鹼性鹽係包含於相同劑型中或獨立包含於分開劑型中。
- 如請求項4之組合,其中該劑型係錠劑或膠囊。
- 如請求項1之組合,其中該西達本胺之酸性鹽係西達本胺之鹽酸鹽或硫酸鹽。
- 如請求項6之組合,其中該西達本胺之鹽形式係呈結晶形式。
- 如請求項6之組合,其中該西達本胺之鹽酸鹽係呈具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案包含2-θ值在約16.12°、約19.02°、約21.62°、約23.38°及約30.16°之峰之結晶形式(形式A)。
- 如請求項8之組合,其中該形式A之XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約21.08°、約23.76°、約25.58°、約27.82°及約28.18°之峰。
- 如請求項6之組合,其中該西達本胺之鹽酸鹽係呈具有傅立葉(Fourier)變換紅外光譜(FTIR)圖案之峰在約3162 cm-1 、約3059 cm-1 、約3036 cm-1 、約2751 cm-1 、約2588 cm-1 、約2359 cm-1 、約2341 cm-1 、約1667 cm-1 、約1658 cm-1 、約1639 cm-1 、約1620 cm-1 、約1610 cm-1 、約1562 cm-1 、約1517 cm-1 、約1508 cm-1 、約1485 cm-1 、約1468 cm-1 、約1444 cm-1 、約1431 cm-1 、約1307 cm-1 、約1282 cm-1 、約1265 cm-1 、約1243 cm-1 、約1220 cm-1 、約1182 cm-1 、約1145 cm-1 、約1074 cm-1 、約1046 cm-1 之結晶形式(形式A)。
- 如請求項8或10之組合,其中形式A進一步特徵為展示與圖3(B)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(B)所示實質上相同之FTIR圖案。
- 如請求項6之組合,其中該西達本胺之硫酸鹽係呈具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案包含2-θ值在約21.15°、約24.65°、約17.00°、約18.49°及約26.69°之峰之結晶形式(形式B)。
- 如請求項12之組合,其中該形式B之XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約14.74°、約19.45°、約22.00°、約23.55°及約27.94°之峰。
- 如請求項6之組合,其中該西達本胺之硫酸鹽係呈具有FTIR圖案之峰在約3249 cm-1 、約3067 cm-1 、約2578 cm-1 、約2360 cm-1 、約1689 cm-1 、約1664 cm-1 、約1647 cm-1 、約1614 cm-1 、約1568 cm-1 、約1521 cm-1 、約1510 cm-1 、約1486 cm-1 、約1467 cm-1 、約1434 cm-1 、約1412 cm-1 、約1388 cm-1 、約1354 cm-1 、約1328 cm-1 、約1283 cm-1 、約1266 cm-1 、約1252 cm-1 、約1226 cm-1 、約1184 cm-1 、約1099 cm-1 、約1059 cm-1 、約1034 cm-1 及約1022 cm-1 之結晶形式(形式B)。
- 如請求項12或14之組合,其中形式B進一步特徵為展示與圖3(C)所示實質上相同之XRPD圖案或與圖4(C)所示實質上相同之FTIR圖案。
- 如請求項1之組合,其中該希樂葆之鹼性鹽係希樂葆之鈉鹽。
- 如請求項16之組合,其中該希樂葆之鈉鹽係呈非晶形式或結晶形式。
- 如請求項17之組合,其中該非晶形式具有與圖7(B)所示實質上相同之XRPD圖案。
- 如請求項16之組合,其中該結晶形式(形式I)具有X射線粉末繞射(XRPD)圖案包含2-θ值在約19.85°、約20.51°、約21.51°、約22.55°及約18.25°之峰。
- 如請求項19之組合,其中形式I之該XRPD圖案進一步具有包含2-θ值在約10.95°、約14.05°、約14.601°、約17.2°、約25.80°及約27.30°之峰。
- 如請求項19之組合,其中形式I進一步特徵為展示與圖7(C)所示實質上相同之XRPD圖案。
- 如請求項1之組合,其中該組合進一步包含免疫檢查點抑制劑及/或化療劑,在一些實施例中,該免疫檢查點抑制劑係抗CTLA-4抗體、抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體。
- 如請求項22之組合,其中該免疫檢查點抑制劑係帕姆單抗(pembrolizumab)、彼地利株單抗(pidilizumab)、納武單抗(nivolumab)、度伐魯單抗(durvalumab)、阿維單抗(avelumab)、阿特珠單抗(atezolizumab)、特瑞普利單抗(toripalimab)、信迪利單抗(sintilimab)、卡瑞利珠單抗(camrelizumab)或MIHI。
- 一種在癌症免疫療法中調節腫瘤微環境之方法,該方法包括投與有效量之如請求項1至22中任一項之組合。
- 如請求項24之方法,其中該西達本胺之酸性鹽及該希樂葆之鹼性鹽係同時、分開或連續投與。
- 一種治療癌症之方法,其包括對個體投與有效量之如請求項1至22中任一項之組合。
- 如請求項24或26之方法,其中該方法進一步包括投與免疫檢查點抑制劑。
- 如請求項24或26之方法,其中,與西達本胺游離鹼及希樂葆游離鹼之藥物動力學概況(profile)相比,投與該西達本胺之酸性鹽及該希樂葆之鹼性鹽改善藥物動力學概況。
- 如請求項27之方法,其中如請求項1至22中任一項之組合及該免疫檢查點抑制劑係同時、分開或連續投與。
- 如請求項24或26之方法,其中該癌症係神經膠質母細胞瘤、肝癌、結腸直腸上皮癌(colorectal carcinoma)、神經膠質母細胞瘤、胃癌、結腸直腸癌(colorectal cancer)、食道癌、肺癌、胰臟癌、腎細胞癌、良性前列腺增生、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、乳癌、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、梅克爾細胞癌(Merkel cell carcinoma)、非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma)、急性骨髓性白血病(AML)、膽囊癌、膽管癌、膀胱癌或子宮癌。
- 一種經由調節腫瘤微環境並改善免疫反應來治療癌症之方法,該方法包括投與有效量之西達本胺與有效量之希樂葆組合。
- 如請求項31之方法,其中該西達本胺及希樂葆係同時、分開或連續投與。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW108132885A TWI784197B (zh) | 2019-09-11 | 2019-09-11 | 西達本胺(Chidamide)及塞來昔布(Celecoxib)之抗癌組合 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW108132885A TWI784197B (zh) | 2019-09-11 | 2019-09-11 | 西達本胺(Chidamide)及塞來昔布(Celecoxib)之抗癌組合 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202110443A true TW202110443A (zh) | 2021-03-16 |
TWI784197B TWI784197B (zh) | 2022-11-21 |
Family
ID=76035414
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW108132885A TWI784197B (zh) | 2019-09-11 | 2019-09-11 | 西達本胺(Chidamide)及塞來昔布(Celecoxib)之抗癌組合 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
TW (1) | TWI784197B (zh) |
-
2019
- 2019-09-11 TW TW108132885A patent/TWI784197B/zh active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TWI784197B (zh) | 2022-11-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11548897B2 (en) | Crystalline forms of a triazolopyrimidine compound | |
CN111148745B (zh) | Fgfr抑制剂的结晶形式及其制备方法 | |
TWI300351B (en) | Pharmaceutical compositions for the treatment of neoplasms | |
RU2618423C2 (ru) | Усилитель противоопухолевого эффекта, содержащий имидазооксазиновое соединение | |
TWI831780B (zh) | 嘧啶衍生物之醫藥鹽及治療病症之方法 | |
TWI748972B (zh) | 製備經取代5,6-二氫-6-苯基苯并[f]異喹啉-2-胺之方法 | |
US11878009B2 (en) | Anticancer combination of chidamide and celecoxib salts | |
AU2019465985B2 (en) | An anticancer combination of chidamide and celecoxib | |
WO2017202311A1 (zh) | 一种2-氨基嘧啶类化合物的多晶型形式 | |
WO2015085860A1 (zh) | 杂环羟肟酸类化合物及其药用组合物和应用 | |
TWI784197B (zh) | 西達本胺(Chidamide)及塞來昔布(Celecoxib)之抗癌組合 | |
RU2811733C1 (ru) | Противоопухолевая комбинация хидамида и целекоксиба | |
CN118234715A (zh) | 新ras抑制剂 | |
TWI829329B (zh) | 組蛋白去乙醯化酶6和熱休克蛋白90之雙重抑制劑 | |
EP4395775A1 (en) | Cyclopenta[4,5]furo[3,2-c]pyridine derivatives as ras inhibitors for use in the treatment of hyperproliferative diseases or genetic disorders | |
CN114957137A (zh) | N-(1,2,3,6-四氢嘧啶-4-基)-2-苯基乙酰胺类化合物及其制备与应用 |