TW202023558A - 8-胺基異喹啉化合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

闡述式(I)之3-羰基胺基-8-胺基異喹啉化合物：

Description

8-胺基異喹啉化合物及其用途
由腫瘤科醫師用於治療癌症之主要治療方式係手術切除、放射療法及典型化學治療藥物。不幸的是，手術切除並非許多腫瘤或癌症形式之可行選擇。此外，輻射療法及化學治療藥物並非僅靶向患病細胞，且因此，最終會損害健康細胞。正藉由利用抗原之腫瘤特異性表現或腫瘤細胞內特異性蛋白質之不當過表現或活化來研發更特異性靶向腫瘤細胞之治療劑，但腫瘤細胞易於突變且可變得對特異性靶向腫瘤細胞之藥物具有抗性。
已出現新的癌症治療範例，該癌症治療範例利用患者之自身免疫系統以克服由許多癌症所利用之免疫逃避性策略且增強抗腫瘤免疫性。一種此類策略係抑制免疫反應之負調節劑，該等免疫反應通常用於維持外周耐受性，從而允許將腫瘤抗原識別為非自身實體。
造血祖細胞激酶1 (HPK1)係樹突細胞活化以及T及B細胞反應之負調節劑的實例，可被靶向以增強抗腫瘤免疫性。HPK1主要由造血細胞、包括早期祖細胞表現。在T細胞中，據信HPK1藉由以下方式來降低信號傳導微團簇之持久性而負向地調控T細胞活化：磷醯化Ser376處之SLP76 (Di Bartolo等人 (2007)JEM 204:681-691)及Thr254處之Gads，導致招募結合至磷酸化SLP76及Gads之14-3-3蛋白，從而自含有LAT之微團簇釋放SLP76-Gads-14-3-3複合物(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。HPK1亦可因應前列腺素E2被活化，該前列腺素E2通常由腫瘤分泌，從而促使腫瘤細胞自免疫系統逃逸。
揭示作為HPK1抑制劑之3-羰基胺基-8-胺基異喹啉化合物、含有該等化合物之組合物及增強免疫反應及治療HPK1依賴性病症(諸如癌症)之方法。
在一個態樣中，提供如本文詳述之式(I)或其任何變化形式之化合物或其鹽(例如，其醫藥學上可接受之鹽)。亦提供醫藥組合物，該醫藥組合物包含本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
在另一態樣中，提供抑制HPK1之方法，該方法包括使個體之HPK1與有效量之本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。亦提供增強有需要之個體之免疫反應的方法，該方法包括向該個體投與有效量之本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
進一步提供治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包括向有需要之個體投與有效量之本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，個體為人類。在一些實施例中，HPK1依賴性病症為癌症，例如結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰臟癌、血液惡性病及腎細胞癌。在一些實施例中，該方法進一步包括向該個體投與化學治療劑。
亦提供本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽，用於抑制HPK1、增強免疫反應或治療HPK1依賴性病症(諸如癌症)之方法中。
亦提供本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，用於本文詳述之方法(例如，HPK1依賴性病症(諸如癌症)之治療)中。
亦提供本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，用於製造用於本文詳述之方法(例如，HPK1依賴性病症(諸如癌症)之治療)中的藥劑。
亦提供用於治療HPK1依賴性病症之套組，該套組包含含有本文詳述之式(I)或其任何變化形式的化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物；及使用說明書。
在另一態樣中，提供製備式(I)或其任何變化形式之化合物之方法。亦提供可用於合成式(I)或其任何變化形式之化合物之化合物中間體。
相關申請案之交叉參考
本申請案主張於2018年10月3日提出申請之美國臨時申請案第62/740,894號及於2019年7月3日提出申請之美國臨時申請案第62/870,529號之優先權益，該等申請案之內容特此以全文引用之方式併入。
本文揭示式(I)或其變化形式(諸如式(IA)、(IB)及(IC))之化合物及其醫藥組合物，係HPK1 (造血祖細胞激酶1)之抑制劑或調節劑。因此，化合物及組合物可用於治療由HPK1介導之疾病及病症。治療方法之實例係在患有癌症之個體的情形下。該等化合物不僅可用於與癌症戰鬥，且亦可有利地用於增強有需要之個體的免疫反應。
下文將更全面地闡述本發明所揭示標的物。然而，受益於前述說明所提供之教示之益處，熟習本發明所揭示標的物所屬於之技術者將聯想到本文所述之本發明所揭示標的物的許多修改形式及其他實施例。因此，應理解，本發明所揭示標的物並不限於所揭示具體實施例且所附申請專利範圍之範疇內意欲包括修改形式及其他實施例。換言之，本文所述標的物涵蓋所有替代形式、修改形式及等效形式。倘若所納入文獻、專利及類似材料中之一或多者與本申請案(包括但不限於所定義術語、術語使用、所述技術或諸如此類)不同或有衝突，則以本申請案為準。除非另有定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語具有與熟習此項技術者通常所理解之含義相同的含義。本文所提及之所有出版物、專利申請案、專利及其他參考文獻皆以全文引用之方式併入本文中。定義
如本文所用之「烷基」係指具有指定碳原子數(亦即，C1 -10 意指1至10個碳原子)之飽和直鏈(亦即，無支鏈)或具支鏈單價烴鏈或其組合。特定烷基係彼等具有1至20個碳原子(「C1-20 烷基」)、具有1至8個碳原子(「C1-8 烷基」)、具有1至6個碳原子(「C1-6 烷基」)、具有2至6個碳原子(「C2-6 烷基」)或具有1至4個碳原子(「C1-4 烷基」)之基團。烷基之實例包括(但不限於)諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、第二丁基、其同系物及異構物之基團，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基及諸如此類。
如本文所用之「烯基」係指具有至少一個烯烴不飽和位點(亦即，具有至少一個式C=C之部分)且具有指定碳原子數(亦即，C2-10 意指2至10個碳原子)之不飽和直鏈(亦即，無支鏈)或具支鏈單價烴鏈或其組合。烯基可呈「順式」或「反式」組態，或者呈「E」或「Z」組態。特定烯基係彼等具有2至20個碳原子(「C2 -20 烯基」)、具有2至8個碳原子(「C2-8 烯基」)、具有2至6個碳原子(「C2-6 烯基」)或具有2至4個碳原子(「C2-4 烯基」)之基團。烯基之實例包括(但不限於)諸如乙烯基(ethenyl或vinyl)、丙-1-烯基、丙-2-烯基(或烯丙基)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯基、其同系物及異構物及諸如此類之基團。
如本文所用之「炔基」係指具有至少一個炔系不飽和位點(亦即，具有至少一個式C≡C之部分)、具有指定碳原子數(亦即，C2-10 意指2至10個碳原子)之不飽和直鏈(亦即，無支鏈)或具支鏈單價烴鏈或其組合。特定炔基係彼等具有2至20個碳原子(「C2-20 炔基」)、具有2至8個碳原子(「C2-8 炔基」)、具有2至6個碳原子(「C2-6 炔基」)、具有2至4個碳原子(「C2-4 炔基」)之基團。炔基之實例包括(但不限於)諸如乙炔基(ethynyl或acetylenyl)、丙-1-炔基、丙-2-炔基(或炔丙基)、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、其同系物及異構物及諸如此類。
如本文所用之「伸烷基」係指與烷基相同但具有二價之基團。特定伸烷基係彼等具有1至6個碳原子(「C1-6 伸烷基」)、1至5個碳原子(「C1-5 伸烷基」)、具有1至4個碳原子(「C1-4 伸烷基」)或1至3個碳原子(「C1-3 伸烷基」)之基團。伸烷基之實例包括(但不限於)諸如亞甲基(-CH2 -)、伸乙基(-CH2 -CH2 -)、1,3-伸丙基(-CH2 -CH2 -CH2 -)、1,2-伸丙基(-CH(CH3 )-CH2 -)、1,4-伸丁基(-CH2 -CH2 -CH2 -CH2 -)及諸如此類之基團。
如本文所用之「亞烷基」係指與烷基相同、但在連接點具有二價且經由雙鍵連接至母體結構的基團。特定亞烷基係彼等具有1至6個碳原子(「C1-6 亞烷基」)、1至5個碳原子(「C1-5 亞烷基」)、具有1至4個碳原子(「C1-4 亞烷基」)或1至3個碳原子(「C1-3 亞烷基」)之基團。伸烷基之實例包括(但不限於)諸如亞甲基(=CH2 )、亞乙基(=CH-CH3 )、1-亞丙基(=CH-CH2 -CH3 )、2-亞丙基(=C(CH3 )2 )、1-亞丁基(=CH2 -CH2 -CH2 -CH3 )及諸如此類之基團。
如本文所用之「環烷基」係指具有指定碳原子數(亦即，C3-10 意指3至10個碳原子)之非芳香族、飽和或不飽和環狀單價烴結構。環烷基可由一個環組成(例如環己基)或由多個環組成(例如金剛烷基)，但不包括芳基。包含一個以上環之環烷基可為稠合環、螺接環或橋接環或其組合。特定環烷基係彼等具有3至12個環狀碳原子之基團。較佳環烷基係具有3至8個環形碳原子(「C3-8 環烷基」)或具有3至6個碳原子(「C3-6 炔基」)之環狀烴。環烷基之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環己烯基、環庚基、降莰基及諸如此類。
如本文所用之「芳基」係指具有單一環(例如，苯基)或多個稠環(例如，萘基或蒽基)之不飽和芳香族碳環基團，該等稠環可為或可不為芳香族。特定芳基係彼等具有6至14個環狀(亦即，環)碳原子之基團(「C6-14 芳基」)。具有一個以上環(其中至少一個環為非芳香族)之芳基可在芳香族環位置或在非芳香族環位置連接至母體結構。在一種變化形式中，具有一個以上環(其中至少一個環為非芳香族)之芳基在芳香族環位置連接至母體結構。
如本文所用之「雜芳基」係指具有1至14個環狀(亦即，環)碳原子及至少一個環狀雜原子(包括但不限於諸如氮、磷、氧及硫之雜原子)之不飽和芳香族環狀基團。雜芳基可具有單一環(例如，吡啶基、呋喃基)或多個稠環(例如，吲嗪基、苯并噻吩基)，該等稠環可為或可不為芳香族。特定雜芳基係具有1至12個環形(亦即，環)碳原子及1至6個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形(亦即，環)雜原子的5至14員環；具有1至8個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的5至10員環；及具有1至5個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、氧及硫之環形雜原子的5、6或7員環。在一種變化形式中，雜芳基包括具有1至6個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、氧及硫之環形雜原子的單環芳香族5、6或7員環。在另一種變化形式中，雜芳基包括具有1至12個環形碳原子及1至6個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的多環芳香族環。具有一個以上環(其中至少一個環為非芳香族)之雜芳基可在芳香族環位置或在非芳香族環位置連接至母體結構。在一種變化形式中，具有一個以上環(其中至少一個環為非芳香族)之雜芳基在芳香族環位置連接至母體結構。
如本文所用「雜環(Heterocycle、heterocyclic)」或「雜環基」係指具有單一環或多個稠環且具有1至14個環狀(亦即，環)碳原子及1至6個環狀(亦即，環)雜原子(例如氮、磷、硫或氧及諸如此類)之飽和或不飽和非芳香族環狀基團。包含一個以上環之雜環可為稠合環、螺接環或橋接環或其任何組合。在稠合環系統中，一或多者可為稠合環，可為環烷基。特定雜環基係具有1至13個環形碳原子及1至6個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的3至14員環；具有1至11個環形碳原子及1至6個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的3至12員環；具有1至9個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的3至10員環；具有1至7個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的3至8員環；及具有1至5個環形碳原子及1至4個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的3至6員環。在一種變化形式中，雜環基包括具有1至2、1至3、1至4、1至5或1至6個環形碳原子及1至2、1至3或1至4個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環形雜原子的單環3、4、5、6或7員環。在另一變化形式中，雜環基包括具有1至12個環狀碳原子及1至6個獨立地選自氮、磷、氧及硫之環狀雜原子的多環非芳香族環。
「鹵基」或「鹵素」係指氟、氯、溴及/或碘。「鹵代烷基」係指經一或多個可相同或不同之鹵素取代的烷基。若基團經一個以上鹵素取代，則其可稱作藉由使用應於連接之鹵素部分之數目的前綴對，例如，二鹵代芳基、二鹵代烷基、三鹵代芳基等係指經兩個(「二」)或三個(「三」)鹵基取代之芳基及烷基，該等鹵基可為(但不必為)相同鹵基；因此，4-氯-3-氟苯基在二鹵代芳基之範疇內。每一氫經鹵基置換之烷基稱為「全鹵代烷基」。較佳全鹵代烷基係三氟烷基(-CF3 )。類似地，「全鹵代烷氧基」係指鹵素代替構成烷氧基之烷基部分之烴中的每一H的烷氧基。全鹵代烷氧基之實例係三氟甲氧基(-OCF3 )。
「羰基」係指基團C=O。
「側氧基」係指部分=O。
「孿型」係指連接至相同原子之兩個部分之間的關係。舉例而言，在基團-CH2 -CRx Ry -中，Rx 及Ry 係孿型，且Rx 可稱作Ry 之孿型R基團。
「鄰位」係指連接至毗鄰原子之兩個部分之間的關係。舉例而言，在基團-CHRx -CHRy -中，Rx 及Ry 係鄰位，且Rx 可稱為Ry 之鄰位R基團。
「視情況地經取代」除非另外規定，否則意指基團可未經取代或由針對該基團所列舉之取代基中的一或多者(例如1、2、3、4或5者)取代，其中取代基可相同或不同。在一個實施例中，視情況地經取代之基團具有一個取代基。在另一實施例中，視情況地經取代之基團具有兩個取代基。在另一實施例中，視情況地經取代之基團具有三個取代基。在另一實施例中，視情況地經取代之基團具有四個取代基。在一些實施例中，視情況地經取代之基團具有1至2、1至3、1至4或1至5個取代基。
本文中詞語「抑制劑」之使用意指抑制HPK1之活性之分子。本文中之「抑制」意指與在不存在抑制劑下靶酶之活性相比，減少該酶之活性。在一些實施例中，術語「抑制」意指HPK1活性減少至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約95%。在其他實施例中，抑制意指HPK1活性減少約5%至約25%、約25%至約50%、約50%至約75%，或約75%至100%。在一些實施例中，抑制意指HPK1活性減少約95%至100%，例如活性減少95%、96%、97%、98%、99%或100%。該等減少可使用將可由熟習此項技術者認識之各種技術、包括活體外激酶分析來量測。
如本文所用之「HPK1拮抗劑」或「HPK1抑制劑」係降低、抑制或以其他方式減小HPK1之生物活性(例如，絲胺酸/蘇胺酸激酶活性、在TCR活化時招募至TCR複合物、與蛋白結合搭配物、諸如SLP76之相互作用)中之一或多者的分子。使用HPK1拮抗劑之拮抗作用不必指示完全消除HPK1活性。相反，活性可減少顯著統計量，包括例如與適當對照相比，HPK1活性減少至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、95%或100%。在一些實施例中，HPK1拮抗劑降低、抑制或以其他方式消除HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在該等實施例中之一些中，HPK1拮抗劑降低、抑制或以其他方式消除HPK1介導之SLP76及/或Gads磷酸化。本發明所揭示化合物直接結合至HPK1且抑制其激酶活性。
「特異性拮抗劑」欲指與無關靶標相比，以更大程度降低、抑制或其他方式消除界定靶標之活性的劑。舉例而言，HPK1特異性拮抗劑對HPK1之至少一種生物活性的降低的量在統計上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制效應。在一些實施例中，拮抗劑對靶標之IC50 係拮抗劑對非靶標之IC50 的約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、5%、1%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。本發明所揭示化合物可為或可不為特異性HPK1拮抗劑。特異性HPK1拮抗劑對HPK1之生物活性的降低的量在統計上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制效應。在某些實施例中，HPK1拮抗劑特異性抑制HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在該等實施例中之一些中，HPK1拮抗劑對HPK1之IC50 係HPK1拮抗劑對另一絲胺酸/蘇胺酸激酶或其他類型之激酶(例如，酪胺酸激酶)之IC50 的約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。
如本文所用「治療(treatment或treating)」係獲得有益或期望結果(包括臨床結果)之方法。出於本發明之目的，有益或期望結果包括(但不限於)以下中之一或多者：減少由疾病產生之一或多種症狀、減輕疾病之程度、穩定疾病(例如，預防或延遲疾病之惡化)、預防或延遲疾病擴散(例如，轉移)、延遲或減慢疾病之進展、改善疾病狀態、提供疾病之減輕(部分或全部)、減少治療疾病所需之一或多種其他藥劑之劑量、增強另一藥劑之效應、延遲疾病之進展、提高生活品質及/或延長存活期。「治療」亦涵蓋癌症之病理結果的減輕。本發明方法涵蓋該等治療態樣中之任一或多者。
如本文所用之「延遲」癌症發生意指推遲、妨礙、減緩、延緩、穩定及/或延期疾病發生。端視病史及/或所治療之個體而定，此延遲可具有不同時間長度。熟習此項技術者將顯而易見，足夠或顯著延遲實際上可涵蓋預防個體不會發生疾病。「延遲」癌症發生之方法係在與不使用該方法相比時，在給定時間框內降低疾病發生之機率及/或在給定時間框內減小疾病之程度的方法。該等比較通常係基於使用統計上顯著數目之個體之臨床研究。癌症發生可使用標準方法(例如常規體檢、乳房x線攝影術、成像或生檢)來偵測。發生亦可係指可能最初不可偵測之疾病進展且包括出現、復發及發作。
如本文所用，「處於風險下」之個體係處於發生癌症之風險下之個體。「處於風險下」之個體可具有或可不具有可偵測之疾病，且在本文所述治療方法之前可展示或可不展示可偵測之疾病。「處於風險下」表示個體具有一或多個所謂風險因子，該等風險因子係與癌症發生相關之本文所述可量測參數。具有該等風險因子中之一或多者之個體較無該(等)風險因子之個體發生癌症之機率高。
如本文所用之「組合療法」意指包括兩種或更多種不同化合物之療法。因此，在一態樣中，提供包含本文詳述之化合物及另一化合物之組合療法。在一些變化形式中，組合療法視情況地包括一或多種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑、非醫藥活性化合物及/或惰性物質。
如本文所用術語「有效量」欲指與功效及毒性之其參數組合應以給定治療形式有效的本發明化合物之量。如業內所瞭解，有效量可為一或多個劑量，亦即可能需要單一劑量或多個劑量以達成期望治療終點。可在投與一或多種治療劑之背景下考慮有效量，且若結合一或多種其他劑可達成或達成期望或有益之結果，則可認為單一劑係以有效量給予。由於化合物之組合作用(例如加和或協同效應)，可視情況地降低共投與之化合物中之任一者之適宜劑量。在各個實施例中，組合物或療法之有效量可：(i) 減少癌細胞數目；(ii) 減小腫瘤大小；(iii) 抑制、延緩、減緩至一定程度，且較佳停止癌細胞浸潤至周邊器官中；(iv) 抑制(例如減緩至一定程度且較佳停止)腫瘤轉移；(v) 抑制腫瘤生長；(vi) 預防或延遲腫瘤發生及/或復發；及/或(vii) 將與癌症相關之症狀中之一或多種減輕至一定程度。在各個實施例中，該量足以改善、緩解、減輕及/或延長癌症之一或多種症狀。
如業內所瞭解，「有效量」可為一或多個劑量，亦即可能需要單一劑量或多個劑量以達成期望治療終點。可在投與一或多種治療劑之背景下考慮有效量，且若結合一或多種其他劑可達成或達成期望或有益之結果，則可認為化合物或其醫藥學上可接受之鹽係以有效量給予。
「治療有效量」係指化合物或其鹽足以產生期望治療結果(例如，降低癌症之一或多種症狀之嚴重程度或持續時間、穩定癌症之一或多種症狀之嚴重程度或消除癌症之一或多種症狀)的量。對於治療用途而言，有益或期望結果包括例如減少由疾病產生之一或多種症狀(生化、組織學及/或行為症狀)，包括其併發症及在疾病發生期間出現之中間病理學表型；提高彼等患有疾病之患者之生活品質；減少治療疾病所需之其他藥劑之劑量；增強另一藥劑之效應；延長疾病之進展；及/或延長患者之存活期。
「預防有效量」係指化合物或其醫藥學上可接受之鹽在投與易患癌症及/或可發生癌症之個體時預防癌症之一或多種將來症狀或降低該等症狀之嚴重程度的量。對於預防性用途而言，有益或期望結果包括(例如)諸如消除或降低疾病(例如，疾病之生化、組織學及/或行為症狀、其併發症及在疾病將來發生期間出現之中間病理學表型)之風險、減輕將來疾病之嚴重程度或延遲該疾病之發作的結果。
應理解，可在輔助設置中給予個體有效量之化合物或其醫藥學上可接受之鹽(包括預防有效量)，該輔助設置係指其中個體已具有癌症史且通常(但不一定)已對療法有反應的臨床設置，該療法包括(但不限於)手術(例如，手術切除)、放射療法及化學療法。然而，由於其癌症史，該等個體被認為處於發生癌症之風險下。「輔助設置」中之治療或投與係指後續治療模式。
如本文所用「單位劑型」係指適於作為單一劑量之物理離散單位，各單位含有經計算以產生期望治療效應之預定量的活性材料以及所需醫藥載劑或賦形劑。單位劑型可含有單一或組合療法。
如本文所用術語「控制釋放」係指含有藥物之調配物或其部分，其中藥物之釋放不直接，亦即，利用「控制釋放」調配物，投與不會使藥物立即釋放至吸收池中。該術語涵蓋經設計以在延長時間段內逐漸釋放藥物化合物之貯積調配物。控制釋放調配物可包括眾多種藥物遞送系統，通常涉及混合藥物化合物與具有期望釋放特徵(例如，pH依賴性或非pH依賴性溶解性、不同水溶性程度及諸如此類)之載劑、聚合物或其他化合物，及根據期望遞送途徑(例如，包衣膠囊、可植入儲存器、含有生物可降解膠囊之可注射溶液及諸如此類)調配混合物。
如本文所用之「醫藥學上可接受」或「藥理上可接受」係指物質在生物上或在其他方面係期望的，例如，該物質可納入投與患者之醫藥組合物中而不引起任何顯著不期望生物效應或以有害方式與含有其之組合物之其他組分中之任一者相互作用。醫藥學上可接受載劑或賦形劑較佳地符合毒物學及製造測試之所需標準及/或包括在美國食品及藥品管理局(U.S. Food and Drug Administration)編制之非活性成分指南上。
在一些實施例中，本發明化合物之鹽係醫藥學上可接受之鹽。「醫藥學上可接受之鹽」係保留游離(非鹽)化合物之至少一些生物活性且可作為藥物或醫藥劑投與個體之彼等鹽。該等鹽(例如)包括：(1) 與無機酸(例如，鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及諸如此類)形成之酸加成鹽；或與有機酸(例如，乙酸、草酸、丙酸、琥珀酸、馬來酸、酒石酸及諸如此類)形成之酸加成鹽；(2) 當母體化合物中存在之酸性質子由金屬離子(例如，鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子)置換時形成之鹽；或與有機鹼之配合物。可接受之有機鹼包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺及諸如此類。可接受之無機鹼包括氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉及諸如此類。醫藥學上可接受之鹽可在製造過程中原位製備，或藉由使本發明之純化化合物以其游離酸或鹼形式分別與適宜有機或無機鹼或酸單獨反應並在後續純化期間分離由此形成之鹽來製備。
如本文所用術語「賦形劑」意指可用於產生藥物或醫藥劑(例如含有本發明化合物作為活性成分之錠劑)之惰性或無活性物質。術語賦形劑可包涵各種物質，包括但不限於用作黏合劑、崩解劑、包衣、壓縮/囊封助劑、乳霜或洗劑、潤滑劑、非經腸投與用溶液、可咀嚼錠劑用材料、甜味劑或矯味劑、懸浮/膠凝劑或濕式粒化劑之任何物質。黏合劑包括(例如)卡波姆(carbomer)、聚維酮、黃原膠等；包衣包括(例如)乙酸鄰苯二甲酸纖維素、乙基纖維素、結蘭膠、麥芽糊精、腸溶包衣等；壓縮/囊封助劑包括(例如)碳酸鈣、右旋糖、果糖dc (dc- 「直接可壓縮」)、蜂蜜dc、乳糖(無水物或一水合物；視情況地與阿斯巴甜、纖維素或微晶纖維素組合)、澱粉dc、蔗糖等；崩解劑包括(例如)交聯羧甲基纖維素鈉、結蘭膠、羥乙酸澱粉鈉等；乳霜或洗劑包括(例如)麥芽糊精、卡拉膠等；潤滑劑包括(例如)硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂醯基富馬酸鈉等；可咀嚼錠劑用材料包括(例如)右旋糖、果糖dc、乳糖(一水合物，視情況地與阿斯巴甜或纖維素組合)等；懸浮/膠凝劑包括(例如)卡拉膠、羥乙酸澱粉鈉、黃原膠等；甜味劑包括(例如)阿斯巴甜、右旋糖、果糖dc、山梨醇、蔗糖dc等；且濕式粒化劑包括(例如)碳酸鈣、麥芽糊精、微晶纖維素等。在一些情形下，術語「賦形劑」及「載劑」可互換使用。
術語「個體」或「患者」係指動物，諸如哺乳動物，包括(但不限於)靈長類動物(例如，人類)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠及諸如此類。在某些實施例中，個體係人類或人類患者。
術語「異常細胞生長」、「未調控細胞生長」及「過度增殖病症」在本申請案中可互換使用。除非另外指明，否則本文所用術語「異常細胞生長」係指獨立於正常調控機制(例如，接觸抑制損失)之細胞生長。
術語「癌症」係指個體中特徵在於未調控細胞生長之病狀，其中癌性細胞能局部侵襲及/或轉移至非鄰接部位。如本文所用之「癌細胞」、「癌性細胞」或「腫瘤細胞」係指特徵在於此未調控細胞生長及侵襲性質之細胞。術語「癌症」涵蓋所有類型之癌症，包括但不限於所有形式之癌瘤、黑色素瘤、母細胞瘤、肉瘤、淋巴瘤及白血病，包括但不限於膀胱癌、膀胱癌、腦瘤、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、食管癌、子宮內膜癌、肝細胞癌、喉癌、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、腎癌及甲狀腺癌、急性淋巴球性白血病、急性骨髓性白血病、室管膜瘤、尤因氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、神經膠母細胞瘤、髓母細胞瘤、神經胚細胞瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、橫紋肌樣癌及腎母細胞瘤(威爾姆氏腫瘤(Wilm’s tumor))。
「化學治療劑」係可用於治療癌症之化學化合物或生物劑。化學治療劑之實例包括烷基化劑，諸如噻替派(thiotepa)及環磷醯胺(CYTOXAN®)；磺酸烷基酯，諸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)及哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶，諸如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedopa)及烏瑞替派(uredopa)；次乙亞胺及甲基密胺，包括六甲密胺(altretamine)、三乙烯三聚氰胺、三乙烯磷醯胺、三乙烯硫代磷醯胺及三羥甲基密胺；番荔枝內酯(尤其布拉他辛(bullatacin)及布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氫大麻酚(四氫大麻酚(dronabinol)，MARINOL®)；β-拉帕醌(β-lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙鹼(colchicine)；白樺脂酸(betulinic acid)；喜樹鹼(camptothecin)(包括合成類似物托泊替康(topotecan)(HYCAMTIN®)、CPT-11(伊立替康(irinotecan)，CAMPTOSAR®)、乙醯基喜樹鹼(acetylcamptothecin)、莨菪素(scopolectin)及9-胺基喜樹鹼(9-aminocamptothecin))；苔蘚蟲素(bryostatin)；培美曲塞(pemetrexed)；卡利斯他汀(callystatin)；CC-1065 (包括其阿多來新(adozelesin)、卡折來新(carzelesin)及比折來新(bizelesin)合成類似物)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；替尼泊苷(teniposide)；念珠藻素(cryptophycin)(尤其念珠藻素1及念珠藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；多卡米星(duocarmycin)(包括合成類似物：KW-2189及CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉鹼(pancratistatin)；TLK-286；CDP323，一種經口α-4整聯蛋白抑制劑；匍枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海綿抑制素(spongistatin)；氮芥(nitrogen mustard)，諸如氮芥苯丁酸、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷醯胺(cholophosphamide)、雌氮芥(estramustine)、異環磷醯胺(ifosfamide)、甲基二氯乙基胺、甲基二氯乙基胺氧化物鹽酸鹽、美法侖(melphalan)、新氮芥(novembichin)、膽甾醇對苯乙酸氮芥(phenesterine)、潑尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥；亞硝基脲，諸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)及雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，諸如烯二炔抗生素(例如，卡奇黴素(calicheamicin)，尤其卡奇黴素γ1I及卡奇黴素ωI1(例如，參見，Nicolaou等人，Angew. Chem Intl. Ed. Engl ., 33: 183-186 (1994))；達內黴素(dynemicin)，包括達內黴素A；埃斯波黴素(esperamicin)；以及新制癌菌素發色團(neocarzinostatin chromophore)及相關色蛋白烯二炔抗生素發色團)、阿克拉黴素(aclacinomysin)、放線菌素(actinomycin)、安麯黴素(authramycin)、偶氮絲胺酸、博來黴素(bleomycin)、放線菌素C (cactinomycin)、卡拉黴素(carabicin)、洋紅黴素(carminomycin)、嗜癌黴素(carzinophilin)、色黴素(chromomycin)、放線菌素D (dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-側氧基-L-正白胺酸；多柔比星(包括ADRIAMYCIN®、嗎啉基-多柔比星、氰嗎啉基-多柔比星、2-吡咯啉基-多柔比星、多柔比星HCl脂質體注射物(DOXIL®及去氧多柔比星)、泛艾黴素(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊達比星(idarubicin)、麻西羅黴素(marcellomycin)、絲裂黴素(諸如絲裂黴素C)、黴酚酸(mycophenolic acid)、諾拉黴素(nogalamycin)、橄欖黴素(olivomycin)、培洛黴素(peplomycin)、泊非黴素(potfiromycin)、嘌呤黴素(puromycin)、三鐵阿黴素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑黴素(streptonigrin)、鏈脲黴素(streptozocin)、殺結核菌素(tubercidin)、烏苯美司(ubenimex)、淨司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物，諸如胺甲喋呤、吉西他濱(gemcitabine)(GEMZAR®)、替加氟(tegafur)(UFTORAL®)、卡培他濱(capecitabine)(XELODA®)、埃博黴素(epothilone)及5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-FU)；葉酸類似物，諸如二甲葉酸(denopterin)、胺甲喋呤、蝶羅呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類似物，諸如氟達拉濱(fludarabine)、6-巰嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶類似物，諸如安西他濱(ancitabine)、阿紮胞苷(azacitidine)、6-氮雜尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二去氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依諾他濱(enocitabine)及氟尿苷(floxuridine)；抗腎上腺素，諸如胺魯米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；葉酸補充劑，諸如亞葉酸；醋葡醛內酯(aceglatone)；醛磷醯胺醣苷(aldophosphamide glycoside)；胺基乙醯丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；雌二醇-瘤克寧錠複合物(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依達曲沙(edatraxate)；地磷醯胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟鳥胺酸(eflornithine)；依利醋銨(elliptinium acetate)；依託格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥基脲；蘑菇多醣；氯尼達明(lonidainine)；類美登素(maytansinoid)，諸如美登素(maytansine)及安絲菌素類(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達醇(mopidanmol)；硝胺丙吖啶(nitraerine)；噴托他丁(pentostatin)；蛋胺氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基醯肼；丙卡巴肼(procarbazine)；PSK®多醣複合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；雷佐生(razoxane)；利索新(rhizoxin)；西左非蘭(sizofiran)；鍺螺胺(spirogermanium)；替奴佐酸(tenuazonic acid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2’,2’’-三氯三乙胺；單端孢黴烯(trichothecene)(尤其T-2毒素、疣皰菌素A (verracurin A)、桿孢菌素(roridin A)及蛇形菌素(anguidine))；烏拉坦(urethan)；長春地辛(vindesine)(ELDISINE®、FILDESIN®)；達卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；噶薩托辛(gacytosine)；阿糖胞苷(arabinoside)(「Ara-C」)；噻替派；類紫杉醇，諸如太平洋紫杉醇(paclitaxel)(TAXOL®)、太平洋紫杉醇之經白蛋白改造之奈米粒子調配物(ABRAXANETM )及多西他賽(doxetaxel)(TAXOTERE®)；瘤克寧錠；6-硫鳥嘌呤；巰嘌呤；胺甲喋呤；鉑類似物，諸如順鉑(cisplatin)及卡鉑(carboplatin)；長春鹼(VELBAN®)；鉑；依託泊苷(VP-16)；異環磷醯胺；米托蒽醌；長春新鹼(vincristine) (ONCOVIN®)；奧沙利鉑(oxaliplatin)；菊白葉酸(leucovovin)；長春瑞濱(vinorelbine) (NAVELBINE®)；能滅瘤(novantrone)；依達曲沙(edatrexate)；道諾黴素(daunomycin)；胺喋呤(aminopterin)；伊班膦酸鹽(ibandronate)；拓撲異構酶抑制劑RFS 2000；二氟甲基鳥胺酸(DMFO)；類視色素，諸如視黃酸；上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物；以及上述中兩種或更多種之組合，諸如CHOP，即環磷醯胺、多柔比星、長春新鹼及普賴蘇濃(prednisolone)之組合療法的縮寫；及FOLFOX，即奧沙利鉑(ELOXATINTM )與5-FU及菊白葉酸之組合治療方案的縮寫。
化學治療劑之額外實例包括用於調控、降低或抑制可促進癌症生長之激素之效應的抗激素劑，且通常呈全身或整體治療形式。其可為激素自身。實例包括抗雌激素劑及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen) (包括NOLVADEX®他莫昔芬)、雷洛昔芬(raloxifene) (EVISTA®)、屈洛昔芬(droloxifene)、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、可莫昔芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮(onapristone)及托瑞米芬(toremifene) (FARESTON®)；抗助孕酮；雌激素受體下調劑(ERD)；雌激素受體拮抗劑，諸如氟維司群(fulvestrant) (FASLODEX®)；用於抑制或關閉卵巢之劑，例如黃體生成激素釋放激素(LHRH)促效劑，諸如乙酸柳培林(leuprolide acetate) (LUPRON®及ELIGARD®)、乙酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、乙酸布舍瑞林(buserelin acetate)及曲普瑞林(tripterelin)；抗雄激素，諸如氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)及比卡魯胺(bicalutamide)；及抑制芳香酶之芳香酶抑制劑，該芳香酶調控腎上腺中之雌激素產生，諸如4(5)-咪唑、胺魯米特、乙酸甲地孕酮(MEGASE®)、依西美坦(exemestane) (AROMASIN®)、福美坦(formestanie)、法曲唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole) (RIVISOR®)、來曲唑(letrozole) (FEMARA®)及阿那曲唑(anastrozole) (ARIMIDEX®)。另外，化學治療劑之該定義包括雙膦酸鹽，諸如氯膦酸(clodronate)(例如，BONEFOS®或OSTAC®)、依替膦酸鹽(etidronate)(DIDROCAL®)、NE-58095、唑來膦酸(zoledronic acid)/唑來膦酸鹽(ZOMETA®)、阿侖膦酸鹽(alendronate)(FOSAMAX®)、帕米膦酸鹽(pamidronate)(AREDIA®)、替魯膦酸鹽(tiludronate)(SKELID®)或利塞膦酸鹽(risedronate)(ACTONEL®)；以及曲沙他濱(troxacitabine)(一種1,3-二氧戊環核苷胞嘧啶類似物)；反義寡核苷酸，尤其為抑制信號傳導路徑中參與異常細胞增殖之基因表現的彼等反義寡核苷酸，諸如PKC-α、Ralf、H-Ras及表皮生長因子受體(EGF-R)；疫苗，諸如THERATOPE®疫苗及基因療法疫苗，例如，ALLOVECTIN®疫苗、LEUVECTIN®疫苗及VAXID®疫苗；拓撲異構酶1抑制劑(例如，LURTOTECAN®)；抗雌激素劑，諸如氟維司群；EGFR抑制劑，諸如厄洛替尼(erlotinib)或西妥昔單抗(cetuximab)；抗VEGF抑制劑，諸如貝伐珠單抗(bevacizumab)；阿立替康(arinotecan)；rmRH (例如，ABARELIX®)；17AAG (為熱休克蛋白(Hsp) 90毒藥之格爾德黴素衍生物)，及上述中任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物。
「化學治療劑」之定義中亦包括：(i) 用於調控或抑制對腫瘤之激素作用之抗激素劑，諸如抗雌激素劑及擇性雌激素受體調節劑(SERM)，包括(例如)他莫昔芬(包括NOLVADEX®；檸檬酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬、可莫昔芬、LY117018、奧那司酮及FARESTON® (檸檬酸托瑞米芬)；(ii) 抑制芳香酶之芳香酶抑制劑，該芳香酶調控腎上腺中之雌激素產生，諸如4(5)-咪唑、胺魯米特、MEGASE® (乙酸甲地孕酮)、AROMASIN® (依西美坦；Pfizer)、福美坦、法曲唑、RIVISOR® (伏氯唑)、FEMARA® (來曲唑；Novartis)及ARIMIDEX® (阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii) 抗雄激素劑，諸如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、柳培林及戈舍瑞林；以及曲沙他濱(一種1、3-二氧戊環核苷胞嘧啶類似物)；(iv) 蛋白激酶抑制劑；(v) 脂質激酶抑制劑；(vi) 反義寡核苷酸，尤其抑制信號傳導路徑中參與異常細胞增殖之基因表現的彼等反義寡核苷酸，諸如PKC-α、Raf及H-Ras；(vii) 核酶，諸如VEGF表現抑制劑(例如，ANGIOZYME®)及HER2表現抑制劑；(viii) 疫苗，諸如基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN®、LEUVECTIN®及VAXID®；PROLEUKIN® rIL-2；拓撲異構酶1抑制劑，諸如LURTOTECAN®；ABARELIX® rmRH；(ix) 抗血管生成劑，諸如貝伐珠單抗(AVASTIN®，Genentech)；及(x) 上述中任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸及衍生物。
在一些實施例中，化學治療劑係免疫治療劑。如本文所用之「免疫治療劑」係特異性或非特異性增強免疫系統以幫助抵抗癌症之化合物。免疫治療劑包括單株抗體及加強免疫系統之非特異性免疫療法，諸如細胞介素、介白素(例如，IL-2、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21)、干擾素(例如，IFN-α、IFN-β、IFN-γ)、GM-CSF、沙利竇邁(thalidomide) (THALOMID®，Celgene)、雷利竇邁(lenalidomide) (REVLIMID®，Celgene)、泊馬竇邁(pomalidomide) (POMALYST®，Celgene)、咪喹莫特(imiquimod) (ZYCLARA®，Valeant)。可用作化學治療劑之單株抗體的非限制性實例包括曲妥珠單抗(trastuzumab) (HERCEPTIN®，Genentech)、貝伐珠單抗(AVASTIN®，Genentech)、西妥昔單抗(ERBITUX®、Bristol-Myers Squibb)、帕尼單抗(panitumumab) (VECTIBIX®，Amgen)、伊匹單抗(ipilimumab) (YERVOY®，Bristol-Myers Squibb)、利妥昔單抗(rituximab) (RITUXAN®，Genentech)、阿倫單抗(alemtuzumab) (CAMPATH®，Genzyme)、奧法木單抗(ofatumumab) (ARZERRA®，Genmab)、吉妥珠單抗奧唑米星(gemtuzumab ozogamicin) (MYLOTARG®，Wyeth)、貝倫妥單抗維多汀(brentuximab vedotin) (ADCETRIS®，Seattle Genetics)、90 Y標記之替伊莫單抗(tositumomab) (ZEVALIN®，Biogen Idec)、131 I-標記之托西莫單抗(tositumomab)(BEXXAR®，GlaxoSmithKline)、阿多-曲妥珠單抗艾坦辛(ado-trastuzumab emtansine) (KADCYLA®，Genentech)布利莫單抗(blinatumomab) (BLINCYTO®，Amgen)、帕妥珠單抗(pertuzumab) (PERJETA®，Genentech)、奧妥珠單抗(obinutuzumab) (GAZYVA®，Genentech)、尼沃魯單抗(nivolumab) (OPDIVO®，Bristol-Myers Squibb)、派姆單抗(pembrolizumab) (KEYTRUDA®，Merck)、匹利珠單抗(pidilizumab) (CureTech)、MPDL3280A (闡述於以全文引用之方式併入本文中之WO2010/077634中)、MDX-1105 (闡述於以全文引用之方式併入本文中之WO2007/005874中)及MEDI4736 (闡述於WO2011/066389及US2013/034559中，各自以全文引用之方式併入本文中)。另一有用之免疫治療劑係AMP-224 (闡述於WO2010/027827及WO2011/066342中，各自以全文引用之方式併入本文中)。化合物
本文揭示之化合物係式(I)之3-羰基胺基-8-胺基異喹啉化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物。該等化合物係有用的HPK1抑制劑。
在一個態樣中，提供式(I)化合物：
Figure 02_image001
(I) 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中： R15 係-OR16 、-SR16 或-NR17 R18 ； 各R16 獨立地係C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基或3至14員雜環基；其中R16 之C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； R17 係氫或C1-6 烷基； R18 係C1-6 烷基、C3-10 環烷基或3至14員雜環基；其中R18 之C1-6 烷基、C3-10 環烷基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； R3 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、3至14員雜環基或-OR7 ；其中R3 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5至14員雜芳基； R5 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)R6 、-C(O)OR7 、-C(O)NR8a R8b 、-OR7 、-OC(O)R6 、-OC(O)NR8a R8b 、-SR7 、-S(O)R9 、-S(O)2 R9 、-S(O)2 NR8a R8b 、-P(O)R9a R9b 、-NR8a R8b 、-N(R8 )C(O)R6 、-N(R8 )C(O)OR7 、-N(R8 )C(O)NR8a R8b 、-N(R8 )S(O)2 R9 或-N(R8 )S(O)2 NR8a R8b ；其中R5 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R6 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R6 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R7 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R7 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R8 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各R8a 及R8b 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R8a 及R8b 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R8a 及R8b 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R9 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R9 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R9a 及R9b 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基、3至12員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中R9a 及R9b 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R9a 及R9b 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R10 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra 、-C(O)ORb 、-C(O)NRc Rd 、-ORb 、-OC(O)Ra 、-OC(O)NRc Rd 、-SRb 、-S(O)Re 、-S(O)2 Re 、-S(O)(=NH)Re 、-S(O)2 NRc Rd 、-NRc Rd 、-N(Rf )C(O)Ra 、-N(Rf )C(O)ORb 、-N(Rf )C(O)NRc Rd 、-N(Rf )S(O)2 Re 、-N(Rf )S(O)2 NRc Rd 或-P(O)Rg Rh ；其中R10 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Ra 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Ra 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rb 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rb 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rc 及Rd 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rc 及Rd 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 或Rc 及Rd 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的4至12員雜環基； 各Re 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Re 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rf 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg 及Rh 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg 及Rh 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 或Rg 及Rh 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R11 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至8員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra1 、-C(O)ORb1 、-C(O)NRc1 Rd1 、-ORb1 、-OC(O)Ra1 、-OC(O)NRc1 Rd1 、-SRb1 、-S(O)Re1 、-S(O)2 Re1 、-S(O)2 NRc1 Rd1 、-NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )C(O)Ra1 、-N(Rf1 )C(O)ORb1 、-N(Rf1 )C(O)NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )S(O)2 Re1 、-N(Rf1 )S(O)2 NRc1 Rd1 或-P(O)Rg1 Rh1 ；其中R11 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Ra1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Ra1 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rb1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rb1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rc1 及Rd1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rc1 及Rd1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 或Rc1 及Rd1 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的4至8員雜環基； 各Re1 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Re1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rf1 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg1 及Rh1 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至8員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg1 及Rh1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 或Rg1 及Rh1 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的4至8員雜環基； 各R12 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基、3至6員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra2 、-C(O)ORb2 、-C(O)NRc2 Rd2 、-ORb2 、-OC(O)Ra2 、-OC(O)NRc2 Rd2 、-S(O)2 Re2 、-S(O)2 NRc2 Rd2 、-NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )C(O)Ra2 、-N(Rf2 )C(O)ORb2 、-N(Rf2 )C(O)NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )S(O)2 Re2 、-N(Rf2 )S(O)2 NRc2 Rd2 或-P(O)Rg2 Rh2 ；其中R12 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Ra2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Ra2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rb2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至6員雜環基；其中Rb2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rc2 及Rd2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至8員雜環基；其中Rc2 及Rd2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 或Rc2 及Rd2 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的4至6員雜環基； 各Re2 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Re2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rf2 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg2 及Rh2 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、3至8員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg2 及Rh2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 或Rg2 及Rh2 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的4至6員雜環基；且 各R13 獨立地係側氧基、鹵素、羥基、-O(C1-6 烷基)、氰基、C1-6 烷基或C1-6 鹵代烷基。
在一些實施例中，化合物係式(I)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中R15 係-OR16 、-SR16 或-NR17 R18 。
在一些實施例中，R15 係-OR16 或-SR16 ；其中各R16 獨立地係C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基或3至14員雜環基；其中R16 之C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在該等實施例中之一些中，R15 係-OR16 。在該等實施例中之一些中，R15 係-SR16 。
在一個態樣中，提供式(IA)或(IC)之化合物：
Figure 02_image006
(IA)
Figure 02_image008
(IC) 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中： 各R16 獨立地係C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基或3至14員雜環基；其中R16 之C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代；且 R3 、R4 、R5 及R10 係如針對本文詳述之式(I)或變化形式所定義。
在一些實施例中，化合物係式(I)、(IA)或(IC)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中R16 獨立地係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基；視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的7至14員雜芳基；或視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。在一些實施例中，R16 係經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基；視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；或視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。
在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。在該等實施例中之一些中，R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至10員雜環基。在該等實施例中之一些中，R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至7員單環雜環基。在該等實施例中之一些中，R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的6至10員二環雜環基。
在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基。在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-8 環烷基。
在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的7至14員雜芳基。在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合7至14員雜芳基；其中雜芳基含有部分飽和環且連接點係在部分飽和環處。在一種變化形式中，R16 係5H -吡咯并[1、2-a ]咪唑-6-基。
在一些實施例中，R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基。在該等實施例中之一些中，R16 係C1-6 烷基或C1-6 鹵代烷基。在該等實施例中之一些中，R16 係C1-6 烷基(例如，異丙基或新戊基)。在該等實施例中之一些中，R16 係經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基。在一種變化形式中，R16 係C1-6 鹵代烷基(例如，2,2,2-三氟乙基)。
在該等實施例中之一些中，R16 係-(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 係C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 ；其中R19 之C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一種變化形式中，R19 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜芳基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的3至10員雜環基。在一種變化形式中，R19 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的苯基。在另一種變化形式中，R19 係氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 。在另一種變化形式中，R19 係-OCH3 、-NH2 或-S(O)2 CH3 。
在該等實施例中之一些中，R16 係選自由以下組成之群：
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及
Figure 02_image166
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R16 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image168
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、
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Figure 02_image222
、
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、
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、
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、
Figure 02_image230
、
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、
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、
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、
Figure 02_image238
、
Figure 02_image240
、
Figure 02_image242
、
Figure 02_image244
；
Figure 02_image246
、
Figure 02_image248
、
Figure 02_image250
、
Figure 02_image252
、
Figure 02_image254
、
Figure 02_image256
、
Figure 02_image258
、
Figure 02_image260
、
Figure 02_image262
、
Figure 02_image264
、
Figure 02_image266
、
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、
Figure 02_image270
、
Figure 02_image272
、
Figure 02_image274
、
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、
Figure 02_image278
、
Figure 02_image280
、
Figure 02_image282
、
Figure 02_image284
、
Figure 02_image286
及
Figure 02_image288
；其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R15 係-NR17 R18 ，其中R17 係氫或C1-6 烷基；R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基；視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；或視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基；或R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基。
在一個態樣中，提供式(IB)化合物：
Figure 02_image290
(IB) 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中： R17 係氫或C1-6 烷基； R18 係C1-6 烷基、C3-10 環烷基或3至14員雜環基；其中R18 之C1-6 烷基、C3-10 環烷基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基；且 R3 、R4 、R5 及R10 係如針對本文詳述之式(I)或變化形式所定義。
在一些實施例中，化合物係式(I)或(IB)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中R17 係氫或C1-6 烷基。在該等實施例中之一些中，R17 係氫。
在一些實施例中，化合物係式(I)或(IB)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基；視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；或視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C1-6 烷基。
在一些實施例中，R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。在該等實施例中之一些中，R18 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image010
、
Figure 02_image012
、
Figure 02_image014
、
Figure 02_image016
、
Figure 02_image018
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Figure 02_image020
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、
Figure 02_image026
、
Figure 02_image028
、
Figure 02_image030
、
Figure 02_image032
、
Figure 02_image034
、
Figure 02_image036
、
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、
Figure 02_image040
、
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、
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、
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、
Figure 02_image048
、
Figure 02_image050
、
Figure 02_image052
、
Figure 02_image054
、
Figure 02_image056
、
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、
Figure 02_image060
、
Figure 02_image062
、
Figure 02_image064
、
Figure 02_image066
、
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、
Figure 02_image070
、
Figure 02_image072
、
Figure 02_image074
、
Figure 02_image076
、
Figure 02_image078
、
Figure 02_image080
、
Figure 02_image082
、
Figure 02_image084
、
Figure 02_image086
、
Figure 02_image088
、
Figure 02_image090
、
Figure 02_image092
、
Figure 02_image094
及
Figure 02_image096
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R18 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image168
、
Figure 02_image170
、
Figure 02_image172
、
Figure 02_image174
、
Figure 02_image176
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Figure 02_image178
、
Figure 02_image180
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Figure 02_image182
、
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、
Figure 02_image186
、
Figure 02_image188
、
Figure 02_image190
、
Figure 02_image192
、
Figure 02_image194
、
Figure 02_image196
,
Figure 02_image198
、
Figure 02_image200
、
Figure 02_image202
、
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、
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、
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、
Figure 02_image210
、
Figure 02_image212
、
Figure 02_image214
、
Figure 02_image216
、
Figure 02_image218
、
Figure 02_image220
Figure 02_image222
、
Figure 02_image224
、
Figure 02_image226
、
Figure 02_image228
、
Figure 02_image230
、
Figure 02_image232
、
Figure 02_image234
、
Figure 02_image236
、
Figure 02_image238
、
Figure 02_image240
、
Figure 02_image242
、
Figure 02_image244
；
Figure 02_image246
、
Figure 02_image248
及
Figure 02_image250
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基。在該等實施例中之一些中，R18 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image098
、
Figure 02_image100
、
Figure 02_image102
、
Figure 02_image104
、
Figure 02_image106
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Figure 02_image108
、
Figure 02_image110
、
Figure 02_image292
、
Figure 02_image293
、
Figure 02_image116
及
Figure 02_image118
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R18 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image252
、
Figure 02_image254
、
Figure 02_image256
、
Figure 02_image258
、
Figure 02_image260
、
Figure 02_image262
、
Figure 02_image264
、
Figure 02_image266
、
Figure 02_image268
、
Figure 02_image270
、
Figure 02_image272
、
Figure 02_image274
、
Figure 02_image276
、
Figure 02_image278
及
Figure 02_image280
；其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R18 係C1-6 烷基、C1-6 鹵代烷基或-(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 係C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 ；其中R19 之C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在該等實施例中之一些中，R19 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。在該等實施例中之一些中，R19 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基。在一種變化形式中，R19 係視情況地經取代之吡唑基(例如，1-甲基吡唑-4-基)、環丙基或氰基。
在一些實施例中，R18 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image282
、
Figure 02_image284
、
Figure 02_image286
、
Figure 02_image120
、
Figure 02_image122
、
Figure 02_image124
、
Figure 02_image126
、
Figure 02_image128
、
Figure 02_image130
、
Figure 02_image132
、
Figure 02_image134
、
Figure 02_image136
、
Figure 02_image138
、
Figure 02_image140
、
Figure 02_image142
、
Figure 02_image144
、
Figure 02_image146
、
Figure 02_image148
、
Figure 02_image150
、
Figure 02_image294
、
Figure 02_image154
、
Figure 02_image156
、
Figure 02_image158
、
Figure 02_image160
、
Figure 02_image162
、
Figure 02_image164
及
Figure 02_image166
；其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，化合物係式(I)或(IB)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如，水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基。在一種變化形式中，R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜環基。在一種變化形式中，R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成5或6員雜環基(例如，吡咯啶-1-基或六氫吡啶-1-基)。
在一些實施例中，化合物係式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5至14員雜芳基。在一些實施例中，R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5至10員雜芳基。在一些實施例中，R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜芳基。在一些實施例中，R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5員雜芳基。在一些實施例中，R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的6員雜芳基。
在一些實施例中，R4 係
Figure 02_image295
、
Figure 02_image297
或
Figure 02_image299
， 其中波形線表示連接點， R4a 、R4b 及R4c 各自獨立地係氫或R10 ，或兩個鄰位R4(a-c) 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合5或6員雜芳基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合5或6員雜環基。
在一些實施例中，R4 係
Figure 02_image301
， 其中波形線表示連接點，R4a 、R4b 及R4c 各自獨立地係氫或R10 ，或兩個鄰位R4(a-c) 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合5至10員雜環基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合C5-8 環烷基。
在該等實施例中之一些中，R4 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image303
、
Figure 02_image305
及
Figure 02_image307
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，R4 係
Figure 02_image309
，其中波形線表示連接點； R4a 係鹵素、C1-6 烷基或C3-6 環烷基；且R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基。
在該等實施例中之一些中，R4 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image303
、
Figure 02_image305
、
Figure 02_image312
、
Figure 02_image314
、
Figure 02_image316
、
Figure 02_image318
、
Figure 02_image320
、
Figure 02_image322
、
Figure 02_image324
、
Figure 02_image326
、
Figure 02_image328
、
Figure 02_image330
、
Figure 02_image332
、
Figure 02_image334
、
Figure 02_image336
、
Figure 02_image338
、
Figure 02_image340
、
Figure 02_image342
及
Figure 02_image344
； 其中波形線表示連接點。
在該等實施例中之一些中，R4 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image312
、
Figure 02_image314
、
Figure 02_image336
、
Figure 02_image324
及
Figure 02_image318
； 其中波形線表示連接點。
預期且瞭解，針對式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)或(IC)所述之R15 之每一及每個變化形式皆可與針對式(I)、(IA)、(IB)或(IC)所述之R4 之每一及每個變化形式組合，如同每一及每個組合明確且個別地進行闡述一般。舉例而言，在一些實施例中，其中R15 係(a)、(b)或(c)： (a) -OR16 ，其中R16 係(i)、(ii)、(iii)、(iv)或(v)： (i) 具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子及視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至10員雜環基； (ii) 視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基； (iii) C1-6 烷基, (iv) C1-6 鹵代烷基，或 (v) -(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜芳基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的3至10員雜環基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的苯基；氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 ； (b) -NR17 R18 ，其中R17 係氫，且R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基、視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基；C1-6 鹵代烷基或-(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 係視情況地經取代之吡唑基(例如，1-甲基吡唑-4-基)、環丙基或氰基；或 (c)-SR16 ； 且R4 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image312
、
Figure 02_image314
、
Figure 02_image336
、
Figure 02_image324
及
Figure 02_image318
； 其中波形線表示連接點。
在一些實施例中，化合物係式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R3 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、3至14員雜環基或-OR7 ；其中R3 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一些實施例中，R3 係氫、氟、氯、氰基、羥基、C3-4 環烷基、C1-6 烷基、C1-6 鹵代烷基、-O(C1-6 烷基)或-O(C1-6 鹵代烷基)。在一種變化形式中，R3 係氫、氟、氰基或C1-6 烷基(例如，甲基)。在另一種變化形式中，R3 係氫或氟。在另一種變化形式中，R3 係氫。
在一些實施例中，化合物係式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R5 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)R6 、-C(O)OR7 、-C(O)NR8a R8b 、-OR7 、-OC(O)R6 、-OC(O)NR8a R8b 、-SR7 、-S(O)R9 、-S(O)2 R9 、-S(O)2 NR8a R8b 、-P(O)R9a R9b 、-NR8a R8b 、-N(R8 )C(O)R6 、-N(R8 )C(O)OR7 、-N(R8 )C(O)NR8a R8b 、-N(R8 )S(O)2 R9 或-N(R8 )S(O)2 NR8a R8b ；其中R5 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一些實施例中，R5 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、3至14員雜環基、-OR7 、-NR8a R8b 或-N(R8 )C(O)R6 ；其中R5 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一些實施例中，R5 係氫、氟、氯、氰基、羥基、C3-4 環烷基、C1-6 烷基、C1-6 鹵代烷基、-O(C1-6 烷基)或-O(C1-6 鹵代烷基)。在一種變化形式中，R5 係氫、氟、氰基或C1-6 烷基。在另一種變化形式中，R5 係氫、氟或氯。在另一種變化形式中，R5 係氫。在另一種變化形式中，R5 係氟。
預期且瞭解，針對式(I)所述之R15 及R4 之每一及每個變化形式或其組合可與針對式(I)或式(IA)、(IB)或(IC)所述之R3 及R5 之每一及每個變化形式或其組合來組合，如同每一及每個組合明確且個別地進行闡述一般。舉例而言，在一些實施例中，R3 係氫；R5 係氟；其R4 係針對式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)如本文所詳述。在式(I)化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)之一些實施例中，R15 係如上文詳述之(a)、(b)或(c)；R3 係氫；R5 係氟；且R4 係選自由以下組成之群：
Figure 02_image312
、
Figure 02_image314
、
Figure 02_image336
、
Figure 02_image324
及
Figure 02_image318
； 其中波形線表示連接點。
在式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC) (在適用之情形中)之在化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的一些實施例中，各R6 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R6 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一種變化形式中，R6 係C1-6 烷基、C3-8 環烷基或3至12員雜環基；其中R6 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一種變化形式中，R6 係C1-6 烷基(例如，甲基)。在一種變化形式中，R6 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至12員雜環基。
在式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC) (在適用之情形中)之在化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的一些實施例中，各R7 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R7 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一種變化形式中，R7 係氫、視情況地經R10 取代之C1-6 烷基。在一種變化形式中，R7 係C1-6 烷基。在一種變化形式中，R7 係3至12員雜環基。
在式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC) (在適用之情形中)之在化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的一些實施例中，各R8 獨立地係氫或C1-6 烷基；且各R8a 及R8b 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R8a 及R8b 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代；或R8a 及R8b 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基。在一種變化形式中，R8 係氫或C1-6 烷基(例如，甲基)。在一種變化形式中，各R8a 及R8b 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，各R8a 及R8b 係氫。在一種變化形式中，R8a 及R8b 與其連接之氮原子一起形成視情況地經R10 取代之5至7員雜環基。
在式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC) (在適用之情形中)之在化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的一些實施例中，各R9 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R9 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。在一種變化形式中，R9 係視情況地經R10 取代之C1-6 烷基；或視情況地經R10 取代之C6-10 芳基。在一種變化形式中，R9 係C1-6 烷基(例如，甲基)。
在式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC) (在適用之情形中)之在化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的一些實施例中，各R10 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra 、-C(O)ORb 、-C(O)NRc Rd 、-ORb 、-OC(O)Ra 、-OC(O)NRc Rd 、-SRb 、-S(O)Re 、-S(O)2 Re 、-S(O)(=NH)Re 、-S(O)2 NRc Rd 、-NRc Rd 、-N(Rf )C(O)Ra 、-N(Rf )C(O)ORb 、-N(Rf )C(O)NRc Rd 、-N(Rf )S(O)2 Re 或-N(Rf )S(O)2 NRc Rd ；其中R10 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。
在一種變化形式中，R10 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra 、-C(O)NRc Rd 、-ORb 、-S(O)2 Re 、-S(O)2 NRc Rd 、-NRc Rd ；其中R10 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。
在一種變化形式中，R10 獨立地係側氧基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的C1-6 烷基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的5至10員雜芳基；鹵素、-ORb 、-S(O)(=NH)Re 、-NRc Rd 、-N(Rf )C(O)Ra 或-N(Rf )S(O)2 NRc Rd 。
在一種變化形式中，R10 獨立地係側氧基、鹵素、氰基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的C1-6 烷基或-ORb 。
在一種變化形式中，R10 獨立地係-NRc Rd 、-N(Rf )C(O)Ra 、-N(Rf )C(O)ORb 、-N(Rf )C(O)NRc Rd 、-N(Rf )S(O)2 Re 或-N(Rf )S(O)2 NRc Rd 。
在一種變化形式中，R10 獨立地係側氧基、-ORb 、-OC(O)Ra 、-OC(O)NRc Rd 、-SRb 、-S(O)Re 、-S(O)2 Re 、-S(O)(=NH)Re 或-S(O)2 NRc Rd 。
在一種變化形式中，各R10 獨立地係C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra 、-C(O)ORb 、-C(O)NRc Rd ；其中R10 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。
在一種變化形式中，各R10 獨立地係C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基，各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。
在一種變化形式中，R10 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的C1-6 烷基。在一種變化形式中，R10 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的3至12員雜環基。
在一種變化形式中，R10 係鹵素、氰基、-NRc Rd 、-C(O)NRc Rd 、-ORb 、-S(O)2 Re 、C1-6 鹵代烷基、-(C1-6 伸烷基)-OH或-(C1-6 伸烷基)-OH。
在一種變化形式中，R10 係羥基、氰基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、-NH2 、-NH(C1-6 烷基)、-N(C1-6 烷基)2 、-O(C1-6 烷基)、-SO2 (C1-6 烷基)、-S(O)2 NRc Rd 、-C(O)NRc Rd 或-N(Rf )C(O)Ra 。
在一些實施例中，各Ra 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Ra 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。在一種變化形式中，Ra 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Ra 係氫。在一種變化形式中，Ra 係C1-6 烷基(例如，甲基)。
在一些實施例中，各Rb 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rb 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。在一種變化形式中，Rb 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rb 係氫。在一種變化形式中，Rb 係C1-6 烷基(例如，甲基)。
在一些實施例中，各Rc 及Rd 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rc 及Rd 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代；或Rc 及Rd 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的4至12員雜環基。在一種變化形式中，各Rc 及Rd 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rc 及Rd 中之一者係氫且Rc 及Rd 中之另一者係C1-6 烷基。在一種變化形式中，各Rc 及Rd 係氫。在一種變化形式中，各Rc 及Rd 獨立地係C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Re 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Re 之C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代。在一種變化形式中，Re 獨立地係C1-6 烷基(例如，甲基)。
在一些實施例中，各Rf 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rf 係氫。
在一些實施例中，各R11 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至8員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra1 、-C(O)ORb1 、-C(O)NRc1 Rd1 、-ORb1 、-OC(O)Ra1 、-OC(O)NRc1 Rd1 、-SRb1 、-S(O)Re1 、-S(O)2 Re1 、-S(O)2 NRc1 Rd1 、-NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )C(O)Ra1 、-N(Rf1 )C(O)ORb1 、-N(Rf1 )C(O)NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )S(O)2 Re1 或-N(Rf1 )S(O)2 NRc1 Rd1 ；其中R11 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代。
在一種變化形式中，各R11 獨立地係側氧基；視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的C1-6 烷基；或-ORb1 。
在一種變化形式中，各R11 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、3至8員雜環基、鹵素、氰基或-ORb1 ；其中R11 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基,及3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代。
在一種變化形式中，R11 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的C1-6 烷基。在一種變化形式中，R11 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的3至8員雜環基。
在一種變化形式中，R11 係鹵素、氰基、-NRc1 Rd1 、-C(O)NRc1 Rd1 、-ORb1 、-S(O)2 Re1 、C1-6 鹵代烷基、-(C1-6 伸烷基)-OH或-(C1-6 伸烷基)-OH。
在一種變化形式中，R11 係羥基、氰基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、-NH2 、-NH(C1-6 烷基)、-N(C1-6 烷基)2 、-O(C1-6 烷基)、-SO2 (C1-6 烷基)、-S(O)2 NRc1 Rd1 、-C(O)NRc1 Rd1 或-N(Rf1 )C(O)Ra1 。
在一種變化形式中，R11 係鹵素、氰基、-O(C1-6 烷基)、-O(C1-6 伸烷基)-NH2 或-(C1-6 伸烷基)-OH。
在一些實施例中，各Ra1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Ra1 之C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代。在一種變化形式中，Ra1 獨立地係氫或C1-6 烷基(例如，甲基)。
在一些實施例中，各Rb1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rb1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代。在一種變化形式中，Rb1 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rb1 係氫。在一種變化形式中，Rb1 係C1-6 烷基(例如，甲基)。
在一些實施例中，各Rc1 及Rd1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rc1 及Rd1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代；或Rc1 及Rd1 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的4至8員雜環基。在一種變化形式中，各Rc1 及Rd1 獨立地係氫或C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Re1 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Re1 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代。在一種變化形式中，Re1 獨立地係C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Rf1 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rf1 係氫。
在一些實施例中，各R12 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基、3至6員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra2 、-C(O)ORb2 、-C(O)NRc2 Rd2 、-ORb2 、-OC(O)Ra2 、-OC(O)NRc2 Rd2 、-S(O)2 Re2 、-S(O)2 NRc2 Rd2 、-NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )C(O)Ra2 、-N(Rf2 )C(O)ORb2 、-N(Rf2 )C(O)NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )S(O)2 Re2 或-N(Rf2 )S(O)2 NRc2 Rd2 ；其中R12 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代。
在一種變化形式中，各R12 獨立地係側氧基、鹵素、氰基、-ORb2 ；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的C1-6 烷基。在一種變化形式中，各R12 獨立地係側氧基、鹵素、氰基或羥基。
在一種變化形式中，R12 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的C1-6 烷基。
在一種變化形式中，R12 係側氧基、羥基、C1-6 烷基或-O(C1-6 烷基)。
在一些實施例中，各Ra2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Ra2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代。在一種變化形式中，Ra2 獨立地係氫或C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Rb2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至6員雜環基；其中Rb2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代。在一種變化形式中，Rb2 係氫。
在一些實施例中，各Rc2 及Rd2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至8員雜環基；其中Rc2 及Rd2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基及3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代；或Rc2 及Rd2 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的4至6員雜環基。在一種變化形式中，各Rc2 及Rd2 獨立地係氫或C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Re2 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Re2 之C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基及3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代。在一種變化形式中，Re2 獨立地係C1-6 烷基。
在一些實施例中，各Rf2 獨立地係氫或C1-6 烷基。在一種變化形式中，Rf2 係氫。
在一些實施例中，各R13 獨立地係側氧基、鹵素、羥基、-O(C1-6 烷基)、氰基、C1-6 烷基或C1-6 鹵代烷基。
在一種變化形式中，各R13 獨立地係鹵素、羥基、-O(C1-6 烷基)、氰基或C1-6 烷基。
在一種變化形式中，R13 係側氧基、羥基、C1-6 烷基或-O(C1-6 烷基)。
進一步提供式(IA)化合物：
Figure 02_image006
(IA)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R3 、R4 、R5 及R16 係針對式(I)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IA-1)化合物：
Figure 02_image346
(IA-1)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4 及R16 係針對式(IA)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IA-2)化合物：
Figure 02_image348
(IA-2)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4a 係C1-6 烷基；R4b 及R4c 獨立地係氫或R10 ，或R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；且R10 及R16 係針對式(IA)或其適用變化形式如本文所詳述。在一種變化形式中，R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜環基；R4a 係C1-6 烷基(例如，甲基)；且R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代稠合6員雜環基的：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基。
亦提供式(IB)化合物：
Figure 02_image350
(IB)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R3 、R4 、R5 、R17 及R18 係針對式(I)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IB-1)化合物：
Figure 02_image352
(IB-1)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R3 、R4 、R5 及R18 係針對式(IB)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IB-2)化合物：
Figure 02_image354
(IB-2)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4a 係C1-6 烷基；R4b 及R4c 獨立地係氫或R10 ，或R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；且R10 及R18 係針對式(IB)或其適用變化形式如本文所詳述。
亦提供式(IC)化合物：
Figure 02_image356
(IC)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R3 、R4 、R5 及R16 係針對式(I)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IC-1)化合物：
Figure 02_image358
(IC-1)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4 及R16 係針對式(IC)或其適用變化形式如本文所詳述。
在一些實施例中，提供式(IC-2)化合物：
Figure 02_image360
(IC-2)； 或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)，其中R4a 係C1-6 烷基；R4b 及R4c 獨立地係氫或R10 ，或R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；且R10 及R16 係針對式(IC)或其適用變化形式如本文所詳述。在一些實施例中，R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至10員雜環基。在一種變化形式中，R16 係5或6員雜環基(例如，四氫-2H -哌喃-4-基)；R4a 係C1-6 烷基(例如，甲基)；且R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成稠合6員雜環基。
代表性化合物列舉於表1中。應理解，個別鏡像異構物及非鏡像異構物藉由化合物編號及化合物名稱包括於下表中，且可自其容易地確定其相應結構。在一些情況下，鏡像異構物或非鏡像異構物係藉由其各別性質(例如，對掌性HPLC上之滯留時間或其生物活性)來鑑別，且對掌性中心之絕對立體組態為任意分配的。表 1
編號 結構 名稱
401
Figure 02_image362
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
402
Figure 02_image364
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基氮雜環丁-3-基酯
403
Figure 02_image366
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
403a 403b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
404
Figure 02_image368
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-4-基酯
405
Figure 02_image370
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯
405a 405b    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯
406
Figure 02_image372
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸9-甲基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯
407
Figure 02_image374
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-4-基酯
408
Figure 02_image376
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯
408a 408b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯
409
Figure 02_image378
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯
409a 409b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯
410
Figure 02_image380
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
410a 410b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
411
Figure 02_image382
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸甲基吡咯啶-3-基酯
411a 411b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯
412
Figure 02_image384
 (8-胺基-7-氟-6-(4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
412a 412b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H-哌喃-4-基酯
413
Figure 02_image386
 (8-胺基-7-氟-6-(8-羥基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
414
Figure 02_image388
 (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己基酯
414a 414b    (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己基酯； (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己基酯
415
Figure 02_image390
 (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己基酯
415a 415b    (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己基酯； (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己基酯
416
Figure 02_image392
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-3-基酯
416a 416b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-3-基酯
417
Figure 02_image394
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
418
Figure 02_image396
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基吡咯啶-3-基酯
418a 418b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基吡咯啶-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基吡咯啶-3-基酯
419
Figure 02_image398
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基氮雜環丁-3-基酯
420
Figure 02_image400
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2,2-三氟乙基)氮雜環丁-3-基酯
421
Figure 02_image402
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
422
Figure 02_image404
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2,2-三氟乙基)六氫吡啶-4-基酯
423
Figure 02_image406
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
424
Figure 02_image408
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
425
Figure 02_image410
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
426
Figure 02_image412
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基氮雜環丁-3-基酯
427
Figure 02_image414
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
428
Figure 02_image416
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯
429
Figure 02_image418
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基氮雜環丁-3-基酯
430
Figure 02_image420
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
431
Figure 02_image422
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.1]庚-6-基酯
432
Figure 02_image424
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
432a 432b    (1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯； (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
433
Figure 02_image426
 (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基酯
433a 433b    (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基酯
434
Figure 02_image428
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)氮雜環丁-3-基酯
435
Figure 02_image430
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,3,3-三甲基六氫吡啶-4-基酯
436
Figure 02_image432
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸異丙酯
437
Figure 02_image434
 (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯
437a 437b    (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯
438
Figure 02_image436
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
439
Figure 02_image438
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
439a 439b    (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯； (1R ,5S ,9r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
440
Figure 02_image440
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-基酯
440a 440b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-基酯
441
Figure 02_image442
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
441a 441b    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
441c 441d    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
442
Figure 02_image444
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯
442a 442b    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯； N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4S )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯；N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R ,4R )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯
442c 442d    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯
443
Figure 02_image446
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(氧雜環丁-3-基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
444
Figure 02_image448
 (8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
444a 444b    (S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯； (R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
445
Figure 02_image450
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
445a 445b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
445c 445d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
446
Figure 02_image452
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,3-二甲基氮雜環丁-3-基酯
447
Figure 02_image454
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯
447a    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯
447b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯
448
Figure 02_image456
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(吡咯啶-1-基)環丁酯
449
Figure 02_image458
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟氧雜環丁-3-基)甲酯
450
Figure 02_image460
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基氮雜環丁-3-基)甲酯
451
Figure 02_image462
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯
451a 451b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯
452
Figure 02_image464
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯
452a 452b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯
452c 452d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯
453
Figure 02_image466
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸5-(二氟甲基)-1-甲基吡咯啶-3-基酯
454
Figure 02_image468
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(二氟甲基)-1-甲基吡咯啶-3-基酯
455
Figure 02_image470
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
456
Figure 02_image472
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基氮雜環丁-3-基酯
457
Figure 02_image474
 (8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
458
Figure 02_image476
 (8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
459
Figure 02_image478
 (8-胺基-7-氟-6-(7-羥基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
460
Figure 02_image480
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-6,6a,7,7a-四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
461
Figure 02_image482
 (8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
461a 461b    (R )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯； (S )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
462
Figure 02_image484
 (8-胺基-6-(4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
463
Figure 02_image486
 (8-胺基-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
464
Figure 02_image488
 (8-胺基-7-氟-6-(2,2,7-三甲基-2,3-二氫-1H -吡咯并[3,2-b ]吡啶-6-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
465
Figure 02_image490
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基-1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯
466
Figure 02_image492
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-1-基酯
467
Figure 02_image494
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯
467a 467b    (3S ,5S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯； (3R ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯
467c 467d    (3S ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯； (3R ,5S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯
468
Figure 02_image496
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-乙醯基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
469
Figure 02_image498
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(氧雜環丁-3-基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
470
Figure 02_image500
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(N -甲基胺磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
471
Figure 02_image502
 (8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基氮雜環丁-3-基酯
472
Figure 02_image504
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(氧雜環丁-3-基)氮雜環丁-3-基酯
473
Figure 02_image506
 (7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(N -甲基胺磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
474
Figure 02_image508
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基酯
475
Figure 02_image510
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[4.1.0]庚-6-基酯
476
Figure 02_image512
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)乙酯
477
Figure 02_image514
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
477a 477b    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
477c 477d    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
478
Figure 02_image516
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
478a 478b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
479
Figure 02_image518
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
479a 479b    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
480
Figure 02_image520
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
480a 480b    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
481
Figure 02_image522
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
481a 481b    (S)-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯； (R)-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
482
Figure 02_image524
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯
482a 482b    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯 (1R,2S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯； (1S,2R)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯
482c 482d    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯； (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯
483
Figure 02_image526
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
483a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
483b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
484
Figure 02_image528
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
484a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
484b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
485
Figure 02_image530
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
485a    (1s, 3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
485b    (1r, 3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
486
Figure 02_image532
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
486a    (1s, 3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
486b    (1r, 3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
487
Figure 02_image534
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸環丁酯
488
Figure 02_image536
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基氮雜環丁-3-基酯
489
Figure 02_image538
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-氰基-2-甲基丙基)氮雜環丁-3-基酯
490
Figure 02_image540
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-羥基-2-甲基丙基)氮雜環丁-3-基酯
491
Figure 02_image542
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)氮雜環丁-3-基酯
492
Figure 02_image544
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-丙醯基氮雜環丁-3-基酯
493
Figure 02_image546
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
494
Figure 02_image548
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
495
Figure 02_image550
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)氮雜環丁-3-基酯
496
Figure 02_image552
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基磺醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
497
Figure 02_image554
 (8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
498
Figure 02_image556
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
499
Figure 02_image558
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-異丙基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
499a 499b    (1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-異丙基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯； (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-異丙基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
500
Figure 02_image560
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2,2-二氟乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
501
Figure 02_image562
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2,2,2-三氟乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
502
Figure 02_image564
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
502a 502b    (1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯； (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
503
Figure 02_image566
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯
504
Figure 02_image568
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯
504a 504b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a]咪唑-6-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a]咪唑-6-基酯
505
Figure 02_image570
 (8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
506
Figure 02_image572
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-異丙基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
506a 506b    (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-異丙基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯； (1R ,5S ,9r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-異丙基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
507
Figure 02_image574
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(2,2-二氟乙基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
507a 507b    (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(2,2-二氟乙基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯； (1R ,5S ,9r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(2,2-二氟乙基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
508
Figure 02_image576
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(2,2-二氟乙基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
509
Figure 02_image578
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
510
Figure 02_image580
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯
510a 510b 510c 510d    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯 (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯
511
Figure 02_image582
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯
511a 511b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯
512
Figure 02_image584
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯
512a 512b    (1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯 (1r, 3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯
513
Figure 02_image586
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
513a 513b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
514
Figure 02_image588
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯
514a    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯
514b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯
515
Figure 02_image590
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯
515a 515b    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯
515c 515d    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯
516
Figure 02_image592
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯
516a 516b    (反式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯
516c 516d    (順式)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯
517
Figure 02_image594
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁酯
517a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁酯
517b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁酯
518
Figure 02_image596
 (8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
518a 518b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
518c 518d    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
519
Figure 02_image598
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺甲醯基)環丁酯
519a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺甲醯基)環丁酯
519b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺甲醯基)環丁酯
520
Figure 02_image600
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺甲醯基)環丁酯
520a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺甲醯基)環丁酯
520b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺甲醯基)環丁酯
521
Figure 02_image602
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-氟乙基)氮雜環丁-3-基酯
522
Figure 02_image604
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
522a    (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
522b    (1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
523
Figure 02_image606
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯
523a 523b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯
524
Figure 02_image608
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(環丙基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
525
Figure 02_image610
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
525a 525b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
526
Figure 02_image612
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
526a 526b    (1R ,2R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯； (1S ,2S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
526c 526d    (1S ,2R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯； (1R ,2S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
526e 526f 526g 526h    (1R ,2S ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯； (1S ,2R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯 (1S ,2S ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯； (1R ,2R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
527
Figure 02_image614
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
527a 527b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯 (1r,3r)-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
528
Figure 02_image616
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯
528a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯
528b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯
529
Figure 02_image618
 乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯
529a    (1r ,3r )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯
529b    (1s ,3s )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯
530
Figure 02_image620
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯
530a 530b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯；( S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯
531
Figure 02_image622
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
531a 531b    (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(反式 - 2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯； (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
531c 531d    (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(順式 - 2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯； (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
532
Figure 02_image624
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
533
Figure 02_image626
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環戊酯
533a 533b 533c 533d    (1R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環戊酯； (1S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環戊酯； (1R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環戊酯； (1S ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環戊酯
534
Figure 02_image628
 (8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
534a    (1s ,3s )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
534b    (1r ,3r )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
535
Figure 02_image630
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯
535a 535b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯 (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯； (1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯
535c 535d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯； (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯
536
Figure 02_image632
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯
536a 536b    (1r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯； (1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯
537
Figure 02_image634
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯
537a 537b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯
538
Figure 02_image636
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯
538a 538b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯
538c 538d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-4-氰基四氫呋喃-3-基酯 (3S,4S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯
539
Figure 02_image638
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯
539a    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯
539b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯
540
Figure 02_image640
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-環丙基氮雜環丁-3-基酯
541
Figure 02_image642
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯
541a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯
541b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯
542
Figure 02_image644
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯
542a 542b    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯 (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯； (1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯
542c 542d    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯； (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯
543
Figure 02_image646
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯
543a 543b    (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯； (1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯
544
Figure 02_image648
 (8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
544a 544b    反式 - (8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
544c 544d    順式 - (8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
545
Figure 02_image650
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
545a 545b    (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(反式 - 2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯； (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
545c 545d    (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(順式 - 2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯； (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
546
Figure 02_image652
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯
546a 546b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯
546c 546d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯 (3S,4R)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯
547
Figure 02_image654
 (8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
547a 547b    (R )-(8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
548
Figure 02_image656
 (8-胺基-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H-環戊[b]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
548a 548b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
548c 548d    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (S )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
549
Figure 02_image658
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯
549a 549b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯
550
Figure 02_image660
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯
550a    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯
550b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯
551
Figure 02_image662
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-環丙基-3-羥基環丁酯
551a 551b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-環丙基-3-羥基環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-環丙基-3-羥基環丁酯
552
Figure 02_image664
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
553
Figure 02_image666
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
553a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
553b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
554
Figure 02_image668
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-1-甲基環丁酯
554a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-1-甲基環丁酯
554b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-1-甲基環丁酯
555
Figure 02_image670
 (8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
555a 555b    反式 - (8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R,4S)-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
555c 555d    順式 - (8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
556
Figure 02_image672
 (8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
556a 556b    反式 - (8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
556c 556d    順式 - (8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
557
Figure 02_image674
 (8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
557a    (1s ,3s )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
557b    (1r ,3r )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
558
Figure 02_image676
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
558a 558b    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (I3S,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
558c 558d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
559
Figure 02_image678
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯
559a 559b    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯 (1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯； (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯
559c 559d    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯 (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯； (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯
560
Figure 02_image680
 (8-胺基-6-(4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
560a 560b 560c 560d    (1s ,3s )-(8-胺基-6-((S )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1s ,3s )-(8-胺基-6-((R )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-6-((S )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-6-((R )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
561
Figure 02_image682
 (8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
561a 561b    反式 - (8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
561c 561d    順式 - (8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
562
Figure 02_image684
 (8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
562a 562b    (R )-(8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (R )-(8-胺基-6-((R )-4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (R)-(8-胺基-6-((S )-4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
562c 562d    (S )-(8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (S )-(8-胺基-6-((R )-4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-6-((S )-4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
563
Figure 02_image686
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b]呋喃-3-基酯
563a 563b    (3S ,3aR ,6aR) -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯； (3R ,3aS ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯
563c 563d    (3R ,3aR ,6aR) -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯； (3S ,3aS ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯
566
Figure 02_image688
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯
566a 566b    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯
566c 566d    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯
567
Figure 02_image690
 (8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
567a 567b    (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((S)-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
567c 567d    (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4R)-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
567e 567f    (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-((S)-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-((R)-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
567g 567h    (3S,4S)-(8-胺基-7-氟-6-(3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((S)-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
568
Figure 02_image692
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯
568a 568b    (3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯； (3S ,3aS ,6aR) -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯
568c 568d    (3S ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯； (3R ,3aS ,6aR) -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基酯
569
Figure 02_image694
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯
569a 569b 569c 569d    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((S)-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((R )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((S )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((R )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯
570
Figure 02_image696
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(2-甲氧基乙基)六氫吡啶-4-基酯
570a 570b    (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(2-甲氧基乙基)六氫吡啶-4-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(2-甲氧基乙基)六氫吡啶-4-基酯
570c 570d    (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(2-甲氧基乙基)六氫吡啶-4-基酯； (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(2-甲氧基乙基)六氫吡啶-4-基酯
571
Figure 02_image698
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯
571a 571b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯； (1s,3s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯
572
Figure 02_image700
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)環丁酯
572a    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)環丁酯
572b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)環丁酯
573
Figure 02_image702
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1-羥基乙基)環丁酯
573a 573b 573c 573d    (1S ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯； (1S ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯； (1R ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯； (1R ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯
574
Figure 02_image704
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯
574a 574b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯； (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯
575
Figure 02_image706
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
575a 575b    (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯； (1R ,5S ,9r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯
576
Figure 02_image708
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯
576a 576b    (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯； (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯
577
Figure 02_image710
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯
577a 577b    (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯； (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯
578
Figure 02_image712
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基酯
578a 578b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-6-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基酯
579
Figure 02_image714
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,1-二氧離子基四氫-2H -噻喃-4-基酯
580
Figure 02_image716
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
581
Figure 02_image718
 (8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
581a 581b    (R )-(8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
581c 581d    (S )-(8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 (S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯； (S )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
582
Figure 02_image720
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊基酯
582a 582b    順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯 (1S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯； (1R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯
582c 582d    反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯 (1S ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯； (1R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯
583
Figure 02_image722
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯
583a 583b 583c 583d    (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯
584
Figure 02_image724
 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-6,6a,7,7a-四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
584a 584b 584c 584d    (1s ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-((6aR ,7aS )-4-甲基-6,6a,7,7a-四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1s ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-((6aS ,7aR )-4-甲基-6,6a ,7,7a -四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1r ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-((6aR,7aS)-4-甲基-6,6a,7,7a-四氫-5H-環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯； (1r ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-((6aS ,7aR )-4-甲基-6,6a ,7,7a -四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
601
Figure 02_image726
 S -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)硫代胺基甲酸(四氫-2H -哌喃-4-基)酯
701
Figure 02_image728
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-4-基)脲
702
Figure 02_image730
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環丙基脲
703
Figure 02_image732
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲
703a 703b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲
703c    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((順式)-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲
704
Figure 02_image734
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-甲基脲
705
Figure 02_image736
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-甲基脲
706
Figure 02_image738
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環戊基脲
707
Figure 02_image740
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環丁基脲
708
Figure 02_image742
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
709
Figure 02_image744
 1-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲
710
Figure 02_image746
 1-((順式)-1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲
710a 710b    1-((3R ,4S )-1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲； 1-((3S ,4R )-1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲
711
Figure 02_image748
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-3-基)脲
711a 711b    (S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-3-基)脲； (R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-3-基)脲
712
Figure 02_image750
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-氰基環丁基)脲
712a 712b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 2-氰基環丁基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2S )-2-氰基環丁基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2R )-2-氰基環丁基)脲
712c 712d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 2-氰基環丁基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-氰基環丁基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-氰基環丁基)脲
713
Figure 02_image752
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲
713a 713b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,5S ,6s )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲
714
Figure 02_image754
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3,3-二氟環丁基)脲
715
Figure 02_image756
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)脲
716
Figure 02_image758
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(1-甲基氮雜環丁-3-基)脲
717
Figure 02_image760
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
718
Figure 02_image762
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(3,3-二氟環丁基)脲
719
Figure 02_image764
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲
719a 719b    (R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲； (S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲
720
Figure 02_image766
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-乙基脲
721
Figure 02_image768
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(1-(2,2,2-三氟乙基)氮雜環丁-3-基)脲
722
Figure 02_image770
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲
722a 722b    (R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲； (S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲
723
Figure 02_image772
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲
723a 723b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((順式 - 4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S,4S)-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R,4R)-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲
723c 723d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((反式 - 4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S,4R)-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R,4S)-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲
724
Figure 02_image774
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(4-氟四氫呋喃-3-基)脲
724a 724b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 4-氟四氫呋喃-3-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S,4S)-4-氟四氫呋喃-3-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R,4R)-4-氟四氫呋喃-3-基)脲
725
Figure 02_image776
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基)脲
726
Figure 02_image778
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氰基環戊基)脲
726a 726b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 3-氰基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R,3S)-3-氰基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3R )-3-氰基環戊基)脲
726c 726d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 3-氰基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3R )-3-氰基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3S )-3-氰基環戊基)脲
727
Figure 02_image780
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-氟環戊基)脲
727a 727b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 2-氟環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-氟環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-氟環戊基)脲
727c 727d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 2-氟環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2R )-2-氟環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2S )-2-氟環戊基)脲
728
Figure 02_image782
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-羥基環戊基)脲
728a 728b 728c 728d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-羥基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-羥基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2S )-2-羥基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2R )-2-羥基環戊基)脲
729
Figure 02_image784
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-甲氧基環戊基)脲
729a 729b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 2-甲氧基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲氧基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲氧基環戊基)脲
729c 729d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 2-甲氧基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2S )-2-甲氧基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2R )-2-甲氧基環戊基)脲
730
Figure 02_image786
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-甲氧基環戊基)脲
730a 730b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 3-甲氧基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲
730c 730d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 3-甲氧基環戊基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲
731
Figure 02_image788
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氰基環丁基)脲
732
Figure 02_image790
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氟環丁基)脲
732a 732b    1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((1s ,3s )-3-氟環丁基)脲
733
Figure 02_image792
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-甲氧基環丁基)脲
733a 733b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-甲氧基環丁基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1s ,3s )-3-甲氧基環丁基)脲
734
Figure 02_image794
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-氟環丙基)脲
734a 734b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-氟環丙基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-氟環丙基)脲
735
Figure 02_image796
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2,2-二氟環丙基)脲
736
Figure 02_image798
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-甲基環丙基)脲
736a 736b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 2-甲基環丙基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲基環丙基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲基環丙基)脲
736c 736d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 2-甲基環丙基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2S )-2-甲基環丙基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2R )-2-甲基環丙基)脲
737
Figure 02_image800
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
738
Figure 02_image802
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-(2,2-二氟乙基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)脲
739
Figure 02_image804
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
740
Figure 02_image806
 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲
740a 740b    1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((2s ,4s )-6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((2r ,4r )-6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲
741
Figure 02_image808
 1-(6-乙醯基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)脲
742
Figure 02_image810
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1,1-二甲脲
743
Figure 02_image812
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1-甲基-1-(四氫呋喃-3-基)脲
744
Figure 02_image814
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1-甲基-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)脲
745
Figure 02_image816
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)吡咯啶-1-甲醯胺
746
Figure 02_image818
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-異丙基脲
747
Figure 02_image820
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲
747a 747b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲
747c 747d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4R )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4S )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲
748
Figure 02_image822
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-氟環丁基)脲
748a 748b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1s ,3s )-3-氟環丁基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲
749
Figure 02_image824
 1-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)-3-環戊基脲
750
Figure 02_image826
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲
750a 750b    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(順式 - 3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-甲氧基四氫-2H-哌喃-4-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲
750c 750d    1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(反式 - 3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4R )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲； 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4S )-3-甲氧基四氫-2H-哌喃-4-基)脲
751
Figure 02_image828
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-甲基氮雜環丁烷-1-甲醯胺
752
Figure 02_image830
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1-環丁基-1-甲基脲
753
Figure 02_image832
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯胺
754
Figure 02_image834
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-甲醯胺
755
Figure 02_image836
 N-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-氟-3-甲基氮雜環丁烷-1-甲醯胺
756
Figure 02_image838
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)氮雜環丁烷-1-甲醯胺
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號401-584、601及701-756的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號401、402、403、403a、403b、404、405、405a、405b、406、407、408、408a、408b、409、409a、409b、410、410a、410b、411、411a、411b、412、412a、412b、413、414、414a、414b、415、415a、415b、416、416a、416b、417、418、418a、418b、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、432a、432b、433、433a、433b、434、435、436、437、437a、437b、438、439、439a、439b、440、440a、440b、441、441a、441b、441c、441d、442、442a、442b、442c、442d、443、444、444a、444b、445、445a、445b、445c、445d、446、447、447a、447b、448、449、450、451、451a、451b、452、452a、452b、452c、452d、453、454、455、456、457、458、459、460、461、461a、461b、462、463、464、465、466、467、467a、467b、467c、467d、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、477a、477b、477c、477d、478、478a、478b、479、479a、479b、480、480a、480b、481、481a、481b、482、482a、482b、482c、482d、483、483a、483b、484、484a、484b、485、485a、485b、486、486a、486b、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、499a、499b、500、501、502、502a、502b、503、504、504a、504b、505、506、506a、506b、507、507a、507b、508、509、510、510a、510b、510c、510d、511、511a、511b、512、512a、512b、513、513a、513b、514、514a、514b、515、515a、515b、515c、515d、516、516a、516b、516c、516d、517、517a、517b、518、518a、518b、518c、518d、519、519a、519b、520、520a、520b、521、522、522a、522b、523、523a、523b、524、525、525a、525b、526、526a、526b、526c、526d、527、527a、527b、528、528a、528b、529、529a、529b、530、530a、530b、531、531a、531b、531c、531d、532、533、533a、533b、533c、533d、534、534a、534b、535、535a、535b、535c、535d、536、536a、536b、537、537a、537b、538、538a、538b、538c、538d、539、539a、539b、540、541、541a、541b、542、542a、542b、542c、542d、543、543a、543b、544、544a、544b、544c、544d、545、545a、545b、545c、545d、546、546a、546b、546c、546d、547、547a、547b、548、548a、548b、548c、548d、549、549a、549b、550、550a、550b、551、551a、551b、552、553、553a、553b、554、554a、554b、555、555a、555b、555c、555d、556、556a、556b、556c、556d、557、557a、557b、558、558a、558b、558c、558d、559、559a、559b、559c、559d、560、560a、560b、560c、560d、561、561a、561b、561c、561d、562、562a、562b、562c、562d、563、563a、563b、563c、563d、566、566a、566b、566c、566d、567、567a、567b、567c、567d、567e、567f、567g、567h、568、568a、568b、568c、568d、569、569a、569b、569c、569d、570、570a、570b、570c、570d、571、571a、571b、572、572a、572b、573、573a、573b、573c、573d、574、574a、574b、575、575a、575b、576、576a、576b、577、577a、577b、578、578a、578b、579、580、581、581a、581b、581c、581d、582、582a、582b、582c、582d、583、583a、583b、583c、583d、584、584a、584b、584c、584d、601、701、702、703、703a、703b、703c、704、705、706、707、708、709、710、710a、710b、711、711a、711b、712、712a、712b、712c、712d、713、713a、713b、714、715、716、717、718、719、719a、719b、720、721、722、722a、722b、723、723a、723b、723c、723d、724、724a、724b、725、726、726a、726b、726c、726d、727、727a、727b、727c、727d、728、728a、728b、728c、728d、729、729a、729b、729c、729d、730、730a、730b、730c、730d、731、732、732a、732b、733、733a、733b、734、734a、734b、735、736、736a、736b、736c、736d、737、738、739、740、740a、740b、741、742、743、744、745、746、747、747a、747b、747c、747d、748、748a、748b、749、750、750a、750b、750c、750d、751、752、753、754、755及756或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號401-456、458-494及496-509、601、701-720及722-745的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號401、402、403、403a、403b、404、405、405a、405b、406、407、408、408a、408b、409、409a、409b、410、410a、410b、411、411a、411b、412、412a、412b、413、414、414a、414b、415、415a、415b、416、416a、416b、417、418、418a、418b、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、432a、432b、433、433a、433b、434、435、436、437、437a、437b、438、439、439a、439b、440、440a、440b、441、441a、441b、442、442a、442b、442c、442d、443、444、444a、444b、445、445a、445b、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、601、701、702、703、703a、703b、703c、704、705、706、707、708、709、710、710a、710b、711、711a、711b、712、712a、712b、712c、713、713a、713b、714、715、716、717、718、719、720、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744及745或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號457、495、510-563及566-584的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號401-563及566-584的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號401、402、403、403a、403b、404、405、405a、405b、406、407、408、408a、408b、409、409a、409b、410、410a、410b、411、411a、411b、412、412a、412b、413、414、414a、414b、415、415a、415b、416、416a、416b、417、418、418a、418b、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、432a、432b、433、433a、433b、434、435、436、437、437a、437b、438、439、439a、439b、440、440a、440b、441、441a、441b、441c、441d、442、442a、442b、442c、442d、443、444、444a、444b、445、445a、445b、445c、445d、446、447、447a、447b、448、449、450、451、451a、451b、452、452a、452b、452c、452d、453、454、455、456、457、458、459、460、461、461a、461b、462、463、464、465、466、467、467a、467b、467c、467d、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、477a、477b、477c、477d、478、478a、478b、479、479a、479b、480、480a、480b、481、481a、481b、482、482a、482b、482c、482d、483、483a、483b、484、484a、484b、485、485a、485b、486、486a、486b、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、499a、499b、500、501、502、502a、502b、503、504、504a、504b、505、506、506a、506b、507、507a、507b、508、509、510、510a、510b、510c、510d、511、511a、511b、512、512a、512b、513、513a、513b、514、514a、514b、515、515a、515b、515c、515d、516、516a、516b、516c、516d、517、517a、517b、518、518a、518b、518c、518d、519、519a、519b、520、520a、520b、521、522、522a、522b、523、523a、523b、524、525、525a、525b、526、526a、526b、526c、526d、527、527a、527b、528、528a、528b、529、529a、529b、530、530a、530b、531、531a、531b、531c、531d、532、533、533a、533b、533c、533d、534、534a、534b、535、535a、535b、535c、535d、536、536a、536b、537、537a、537b、538、538a、538b、538c、538d、539、539a、539b、540、541、541a、541b、542、542a、542b、542c、542d、543、543a、543b、544、544a、544b、544c、544d、545、545a、545b、545c、545d、546、546a、546b、546c、546d、547、547a、547b、548、548a、548b、548c、548d、549、549a、549b、550、550a、550b、551、551a、551b、552、553、553a、553b、554、554a、554b、555、555a、555b、555c、555d、556、556a、556b、556c、556d、557、557a、557b、558、558a、558b、558c、558d、559、559a、559b、559c、559d、560、560a、560b、560c、560d、561、561a、561b、561c、561d、562、562a、562b、562c、562d、563、563a、563b、563c、563d、566、566a、566b、566c、566d、567、567a、567b、567c、567d、567e、567f、567g、567h、568、568a、568b、568c、568d、569、569a、569b、569c、569d、570、570a、570b、570c、570d、571、571a、571b、572、572a、572b、573、573a、573b、573c、573d、574、574a、574b、575、575a、575b、576、576a、576b、577、577a、577b、578、578a、578b、579、580、581、581a、581b、581c、581d、582、582a、582b、582c、582d、583、583a、583b、583c、583d、584、584a、584b、584c及584d或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號401-456、458-494及496-509的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號401、402、403、403a、403b、404、405、405a、405b、406、407、408、408a、408b、409、409a、409b、410、410a、410b、411、411a、411b、412、412a、412b、413、414、414a、414b、415、415a、415b、416、416a、416b、417、418、418a、418b、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、432a、432b、433、433a、433b、434、435、436、437、437a、437b、438、439、439a、439b、440、440a、440b、441、441a、441b、442、442a、442b、442c、442d、443、444、444a、444b、445、445a、445b、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508及509或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號457、495、510-563及566-584的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號701-756的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號701、702、703、703a、703b、703c、704、705、706、707、708、709、710、710a、710b、711、711a、711b、712、712a、712b、712c、712d、713、713a、713b、714、715、716、717、718、719、719a、719b、720、721、722、722a、722b、723、723a、723b、723c、723d、724、724a、724b、725、726、726a、726b、726c、726d、727、727a、727b、727c、727d、728、728a、728b、728c、728d、729、729a、729b、729c、729d、730、730a、730b、730c、730d、731、732、732a、732b、733、733a、733b、734、734a、734b、735、736、736a、736b、736c、736d、737、738、739、740、740a、740b、741、742、743、744、745、746、747、747a、747b、747c、747d、748、748a、748b、749、750、750a、750b、750c、750d、751、752、753、754、755及756或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號701-720及722-745的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物編號701、702、703、703a、703b、703c、704、705、706、707、708、709、710、710a、710b、711、711a、711b、712、712a、712b、712c、713、713a、713b、714、715、716、717、718、719、720、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744及745或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供選自表1中之化合物編號721及746-756的化合物或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)。
在一些實施例中，提供為表1中之化合物編號601或其鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)的化合物。
本文所述式(I)化合物或其鹽可以立體異構形式存在(例如，其含有一或多個不對稱碳原子)。個別立體異構物(鏡像異構物及非鏡像異構物)及該等立體異構物之混合物包括於本文所揭示標的物之範疇內。同樣，應理解，式(I)化合物或鹽可以不同於該式中所示之互變異構形式的互變異構形式存在，且該等互變異構形式亦包括於本文所揭示標的物之範疇內。應理解，本文所揭示標的物包括本文所述特定組之組合及亞組。本文所揭示標的物之範疇包括立體異構物之混合物以及純化鏡像異構物或富含鏡像異構物/非鏡像異構物之混合物。應理解，本文所揭示標的物包括本文所定義特定組之組合及亞組。
本文所揭示標的物亦包括同位素標記形式之本文所述化合物，但一或多個原子由原子質量或質量數不同於自然界中通常所發現的原子質量或質量數的原子置換。可納入本文所述化合物及其醫藥學上可接受之鹽中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘及氯之同位素，諸如2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、15 N、17 O、18 O、31 P、32 P、35 S、18 F、36 Cl、123 I及125 I。舉例而言，本文揭示之化合物包括其中一或多個氫原子由氘置換或富含氘之形式。
本文所揭示標的物包括式(I)化合物之前藥、代謝物、衍生物及醫藥學上可接受之鹽。式(I)化合物之代謝物包括藉由包括以下之方法產生的化合物：使式(I)化合物與哺乳動物接觸足以產生其代謝產物之時間段。
若式(I)化合物為鹼，則可以藉由業內可用之任何適宜方法製備期望醫藥學上可接受之鹽，例如，用無機酸(諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸及諸如此類)或用有機酸(諸如乙酸、馬來酸、琥珀酸、苦杏仁酸、延胡索酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、哌喃醣苷(諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(諸如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(諸如天冬胺酸或脯胺酸)、芳香族酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(諸如對甲苯磺酸或乙磺酸)或諸如此類)處理游離鹼。
若式(I)化合物為酸，則可藉由任何適宜方法製備期望醫藥學上可接受之鹽，例如，用無機鹼或有機鹼(諸如胺(一級胺、二級胺或三級胺)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物或諸如此類)處理游離酸。適宜鹽之說明性實例包括(但不限於)有機鹽，衍生自胺基酸(諸如甘胺酸及精胺酸)、氨、一級胺、二級胺及三級胺，以及環胺(例如六氫吡啶、嗎啉及六氫吡嗪)；以及衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁及鋰之無機鹽。
式(I)化合物可呈「前藥」形式，該前藥包括具有可在活體內代謝之部分的化合物。通常，前藥在活體內由酯酶或藉由其他機制代謝成活性藥物。前藥之實例及其使用為業內所熟知(參見，例如Berge等人(1977) 「Pharmaceutical Salts」, J. Pharm. Sci. 66:1-19)。前藥可在化合物之最終分離及純化期間原位製備，或藉由使呈游離酸形式之純化化合物或羥基與適宜酯化劑分開反應來製備。羥基可經由用羧酸處理轉化成酯。前藥部分之實例包括經取代及未經取代、具支鏈或無支鏈低碳烷基酯部分(例如，丙酸酯)、低碳烯基酯、二-低碳烷基-胺基低碳烷基酯(例如，二甲基胺基乙基酯)、醯胺基低碳烷基酯(例如，乙醯基氧基甲基酯)、醯氧基低碳烷基酯(例如，特戊醯基氧基甲基酯)、芳基酯(苯基酯)、芳基-低碳烷基酯(例如，苄基酯)、經取代(例如，經甲基、鹵基或甲氧基取代基取代)芳基及芳基-低碳烷基酯、醯胺、低碳烷基醯胺、二-低碳烷基醯胺及羥基醯胺。亦包括在活體內經由其他機制轉化成活性形式之前藥。在態樣中，本發明化合物係本文任一式之前藥。
式(I)化合物可藉由一般合成方法及如本文所述實例中所述之程序以及業內已知之方法來製備。醫藥組合物及調配物
本發明所揭示化合物可與醫藥學上可接受之載劑或賦形劑一起調配成醫藥組合物。
式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物可根據標準醫藥實踐調配為醫藥組合物。根據此態樣，提供包含式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物以及醫藥學上可接受之賦形劑、稀釋劑或載劑的醫藥組合物。
典型調配物係藉由混合式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物與載劑、稀釋劑或賦形劑混合來製備。適宜載劑、稀釋劑及賦形劑為熟習此項技術者所熟知，且包括諸如以下材料：碳水化合物、蠟、水溶性及/或可溶脹聚合物、親水性或疏水性材料、明膠、油、溶劑、水及諸如此類。所用之特定載劑、稀釋劑或賦形劑將取決於式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物所應用之方式及目的。通常基於熟習此項技術者公認為安全(GRAS)而可投與哺乳動物之溶劑來選擇溶劑。一般而言，安全溶劑係無毒水性溶劑，諸如水及其他可溶於水或可與水混溶之無毒溶劑。適宜水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG400、PEG300)等及其混合物。該等調配物亦可包括一或多種緩衝劑、穩定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、滑動劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、加香劑、矯味劑及其他已知添加劑以為藥物(亦即，式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥組合物)提供較佳外觀或有助於製造醫藥產品(亦即，藥劑)。
該等調配物可使用習用溶解及混合程序來製備。舉例而言，在上述賦形劑中之一或多者存在下將體原料藥(亦即，式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物；或式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物的穩定形式(例如，與環糊精衍生物或其他已知複合劑之複合物))溶解於適宜溶劑中。通常將式(I)化合物調配成醫藥劑型以提供藥物之易控制劑量且使患者順應所處方之方案。
用於施加之醫藥組合物(或調配物)可以各種方式包裝，此取決於用於投與藥物之方法。通常，用於配售之物件包括以適當形式存放其中之醫藥調配物之容器。適宜容器為熟習此項技術者所熟知且包括諸如小瓶(塑膠及玻璃)、小藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬圓筒及諸如此類之材料。容器亦可包括防擾裝配以防止不慎接觸包裝之內容物。另外，容器上防止闡述容器之內容物的標記。標記亦可包括適當警告。
可針對各種投與途徑及類型製備醫藥調配物。舉例而言，具有期望純度之式(I)化合物可視情況地與醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑或穩定劑(Remington’s Pharmaceutical Sciences (1980) 第16版, Osol, A.編輯)，以凍乾調配物、研磨粉末或水溶液形式混合。調配可藉由在環境溫度下在適當pH下及在期望純度下與生理上可接受之賦形劑或載劑(亦即，在所用劑量及濃度下對接受者無毒之賦形劑或載劑)混合來執行。調配物之pH主要取決於化合物之特定用途及濃度，但可在約3至約8之範圍內。pH 5之乙酸鹽緩衝液中之調配物係適宜實施例。
式(I)化合物可為無菌的。具體而言，欲用於活體內投與之調配物應為無菌的。該滅菌易於藉由經由無菌過濾膜過濾達成。
化合物通常可儲存為固體組合物、凍乾調配物或水溶液。
包含式(I)化合物之醫藥組合物可以與良好醫藥實踐一致之方式、亦即量、濃度、時間表、過程、媒劑及投與途徑來調配、投用及投與。在此上下文中需考慮之因素包括所治療之特定病症、所治療之特定哺乳動物、個體患者之臨床狀況、病因、劑之遞送位點、投與方法、投與時間安排及從業醫師所知之其他因素。欲投與之化合物之「治療有效量」將由該等考慮因素支配，且係預防、改善或治療凝血因子介導之病症所需的最少量。在一些實施例中，該量低於對主體有毒或使得主體更易出血的量。
可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑及穩定劑在所用劑量及濃度下對接受者無毒性，且包括緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如十八烷基二甲基苄基氯化銨；氯化六甲雙銨；苯紮氯銨、苄索氯銨；苯酚、丁醇或苄醇；對羥基苯甲酸烷基酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、二醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；鹽形成抗衡離子，諸如鈉；金屬錯合物(例如，Zn-蛋白質錯合物)；及/或非離子型表面活性劑，諸如TWEEN™、PLURONICS™或聚乙二醇(PEG)。活性成分亦可裝入分別(例如)膠體藥物遞送系統(例如，脂質體、白蛋白微球體、微滴乳、奈米顆粒及奈米膠囊)或粗滴乳中的藉由凝聚技術或藉由界面聚合製備之微膠囊(例如，羥甲基纖維素或明膠微膠囊及聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊)中。該等技術揭示於Remington’s Pharmaceutical Sciences，第16版，Osol, A.編輯(1980)中。
可製備式(I)化合物之持續釋放製劑。持續釋放製劑之適宜實例包括含有式(I)化合物之固體疏水性聚合物之半透性基質，該等基質呈成型物件之形式，例如膜或微膠囊。持續釋放基質之實例包括聚酯、水凝膠(例如，聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(US 3773919)、L-麩胺酸與γ-乙基-L-麩胺酸鹽之共聚物、不可降解之乙烯-乙酸乙烯酯、可降解之乳酸-乙醇酸共聚物(諸如LUPRON DEPOTTM (由乳酸-乙醇酸共聚物及乙酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)構成之可注射微球體))及聚-D-(-)-3-羥丁酸。
調配物包括彼等適合於本文所詳述之投與路徑者。該等調配物可便利地以單位劑型存在且可藉由製藥技術中熟知之任何方法來製備。技術及調配物通常參見Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA)。該等方法包括使活性成分與構成一或多種附屬成分之賦形劑或載劑締合的步驟。一般而言，調配物係藉由使活性成分與液體賦形劑或載劑或微細固體賦形劑或載劑或二者均勻且充分締合且然後(若必要)使該產物成型來製備。
適於經口投與之式(I)化合物之調配物可製備為諸如丸劑、膠囊、扁囊劑或錠劑之離散單元，各自含有預定量之式(I)化合物。
壓製錠劑可藉由在適宜機器中壓製呈自由流動形式(例如粉末或顆粒)之活性成分來製得，該活性成分視情況地與黏合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑混合。模製錠劑可藉由在適宜機器中模製經惰性液體稀釋劑潤濕之粉末狀活性成分之混合物來製得。錠劑可視情況地經包衣或刻痕且視情況地經調配以便使活性成分自其緩慢或控制釋放。
錠劑、含片、菱形錠劑、水性或油性懸浮液、可分散粉劑或顆粒、乳液、硬質或軟質膠囊(例如，明膠膠囊)、糖漿或酏劑可製備用於經口使用。意欲經口使用之式(I)化合物之調配物可根據用於製造醫藥組合物之業內已知之任何方法來製備，且該等組合物可含有一或多種劑(包括甜味劑、矯味劑、著色劑及防腐劑)以提供適口製劑。含有活性成分與適於製造錠劑之醫藥學上可接受之無毒賦形劑的混合物之錠劑係可接受的。該等賦形劑可為(例如)惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑及崩解劑，諸如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，諸如澱粉、明膠或阿拉伯膠(acacia)；及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。錠劑可無包衣或可藉由包括微囊化之已知技術經包衣以延遲在胃腸道中之崩解及吸收並藉此在較長時期中提供持續作用。舉例而言，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯之延時材料可單獨採用或與蠟一起採用。
對於眼睛或其他外部組織(例如，嘴及皮膚)之治療而言，該等調配物較佳作為含有(例如) 0.075 w/w至20% w/w之量之活性成分的局部軟膏或乳霜施用。在軟膏中調配時，活性成分可與石蠟或水混溶性軟膏基質一起採用。或者，可使用水包油乳霜基質將活性成分調配成乳霜。
若期望，乳霜基質之水相可包括多元醇(亦即，具有兩個或更多個羥基之醇)，諸如丙二醇、丁烷1,3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油及聚乙二醇(包括PEG 400)及其混合物。局部調配物可期望地包括增強活性成分穿過皮膚或其他受影響區域之吸收或滲透之化合物。該等皮膚滲透增強劑之實例二甲亞碸及相關類似物。
乳液之油性相可由已知成分以已知方式構成。儘管該相可僅包含乳化劑，但其亦可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或者與脂肪及油二者之混合物。較佳地，與親脂性乳化劑一起包括之親水性乳化劑可用作穩定劑。該(等)乳化劑在有或沒有穩定劑之情況下一起形成所謂乳化蠟，且該蠟與油及脂肪一起構成所謂乳化軟膏基質，該軟膏基質形成乳霜調配物之油性分散相。適用於調配物之乳化劑及乳液穩定劑包括Tween® 60、Span® 80、十八十六醇、苄醇、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油酯及月桂基硫酸鈉。
式(I)化合物之水性懸浮液含有活性材料與適於製造水性懸浮液之賦形劑的混合物。該等賦形劑包括懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、交聯羧甲纖維素、聚維酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯樹膠；及分散劑或潤濕劑，諸如天然磷脂(例如卵磷脂)、環氧烷與脂肪酸之縮合產物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物(例如，十七伸乙基氧基鯨蠟醇)、環氧乙烷與衍生自脂肪酸與己糖醇酐之部分酯的縮合產物(例如，聚氧乙烯山梨醇單油酸酯)。該等水性懸浮液亦可含有一或多種防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯；一或多種著色劑；一或多種矯味劑；及一或多種甜味劑，諸如蔗糖或糖精。
式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物的醫藥組合物可呈無菌可注射製劑、諸如無菌可注射水性或油性懸浮液形式。此懸浮液可根據習知技術使用已於上文提及之彼等適宜分散劑或潤濕劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑(諸如1,3-丁二醇)中之無菌可注射溶液或懸浮液。無菌可注射製劑亦可製備為凍乾粉末。可採用之可接受之媒劑及溶劑為水、林格氏溶液(Ringer’s solution)及等滲氯化鈉溶液。另外，照慣例可採用無菌不揮發油作為溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和不揮發油，包括合成甘油單酯或甘油二酯。另外，諸如油酸之脂肪酸亦可用於製備可注射物之製劑。
活性成分可與賦形劑或載劑材料組合以產生單一劑型之量將端視所治療主體及特定投與模式而變。舉例而言，意欲用於經口投與人類之長效型調配物可含有約1至1000 mg活性材料，該活性材料與適當且方便量之賦形劑或載劑材料複合，該載劑材料之量可自總組合物之約5%至約95% (重量:重量)變化。可製備醫藥組合物以提供用於投與之易量測量。舉例而言，意欲靜脈內輸注之水溶液可含有約3至500 μg活性成分/毫升溶液，從而使得可以約30 mL/h之速率進行適宜體積之輸注。
適於非經腸投與之調配物包括水性及非水性無菌注射溶液，該等水性及非水性無菌注射溶液可含有抗氧化劑、緩衝液、抑菌劑及可使該調配物與既定接受者之血液等滲之溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，該等水性及非水性無菌懸浮液可包括懸浮劑及增稠劑。
適於局部投與眼睛之調配物亦包括滴眼劑，其中活性成分溶於或懸浮於適宜賦形劑或載劑中，尤其對於活性成分為水性溶劑。活性成分較佳係以約0.5 w/w至20% w/w (例如約0.5 w/w至10% w/w，例如約1.5% w/w)之濃度存於該等調配物中。
適於口腔中局部投與之調配物包括於矯味基質(通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)中包含活性成分之菱形錠劑、於惰性基質(諸如明膠及甘油或蔗糖及阿拉伯膠)中包含活性成分之香錠；及於適宜液體賦形劑或載劑中包含活性成分之漱口劑。
用於直腸投與之調配物可作為具有適宜基質(包含例如可可脂或水楊酸酯)之栓劑存在。
適用於經肺內或經鼻投與之調配物具有(例如) 0.1至500微米範圍內之粒徑(包括以諸如0.5、1、30、35微米等增量微米介於0.1微米與500微米之間的粒徑)，藉由穿過鼻通道快速吸入或藉由經由口腔吸入以便到達肺泡囊來投與。適宜調配物包括活性成分之水性或油性溶液。適於氣溶膠或乾粉投與之調配物可根據習用方法製備且可與其他治療劑(諸如以前用於治療或預防如下文所述病症之化合物)一起遞送。
適於經陰道投與之調配物可以除含有活性成分外亦含有此項技術中已知適宜之賦形劑或載劑的子宮帽、陰道塞(tampon)、乳霜、凝膠、糊劑、發泡體或噴霧調配物形式提供。
該等調配物可包裝於單位劑量或多劑量容器(例如，密封安瓿及小瓶)中，且可儲存於冷凍乾燥(凍乾)條件下，僅需在即將使用前添加無菌液體賦形劑或載劑(例如，注射用水)。臨時注射溶液及懸浮液係自先前所述之種類的無菌粉劑、顆粒及錠劑來製備。較佳單位劑量調配物係如上文所述含有日劑量或單位日子劑量(或其適宜部分)之活性成分的彼等單位劑量調配物。
標的物進一步提供包含至少一種如上文所定義之活性成分以及其獸藥賦形劑或載劑的獸藥組合物。獸藥賦形劑或載劑係可用於投與組合物之目的之材料，且可為固體、液體或氣體材料，該等材料原本為惰性或在獸醫領域可接受且與活性成分相容。該等獸藥組合物可非經腸、經口或藉由任何其他期望途徑投與。
在特定實施例中，包含本發明所揭示化合物之醫藥組合物進一步包括化學治療劑。在該等實施例中之一些中，化學治療劑為免疫治療劑。使用方法
發現本發明所揭示化合物可抑制酶HPK1之活性。HPK1，亦稱為促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶1或MAP4K1，係Ste20有關絲胺酸/蘇胺酸激酶之孿位中心激酶亞家族的成員。HPK1藉由磷醯化及活化MAP3K蛋白(包括MEKK1、MLK3及TAK1)、從而導致MAPK Jnk活化起MAP4K之作用。
在實施例中，本文所揭示標的物係關於抑制HPK1之方法，該方法包括使HPK1與有效量之本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或醫藥組合物接觸。
在實施例中，本文所揭示標的物係關於增強有需要之個體的免疫反應之方法，其中該方法包括向該個體投與有效量之本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或醫藥組合物。在此實施例之某些態樣中，相對於投與化合物或醫藥組合物之前，個體之T細胞具有以下中之至少一者：增強之啟動、增強之活化、增強之遷移、增強之增殖、增強之存活及增強之細胞溶解。在此實施例之某些態樣中，T細胞活化之特徵在於相對於投與化合物或醫藥組合物之前，γ-IFN+ CD8 T細胞之頻率升高、γ-IFN+ CD4 T細胞之頻率升高或由T細胞之IL-2或顆粒酶B產生的水準增強。在此實施例之某些態樣中，相對於投與化合物或醫藥組合物之前，T細胞數目升高。在此實施例之某些態樣中，T細胞係抗原特異性CD8 T細胞。在此實施例之某些態樣中，T細胞係抗原特異性CD4 T細胞。在此實施例之某些態樣中，相對於投與化合物或醫藥組合物之前，個體之抗原呈遞細胞具有增強之成熟及活化。在此實施例之某些態樣中，抗原呈遞細胞係樹突細胞。在此實施例之某些態樣中，抗原呈遞細胞成熟之特徵在於CD83+ 樹突細胞之頻率增加。在此實施例之某些態樣中，抗原呈遞細胞活化之特徵在於樹突細胞上CD80及CD86之表現升高。在一些態樣中，式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥組合物提供對腫瘤或病毒之免疫反應的廣泛啟動(亦即，疫苗)，用於加強/生成抗病毒/腫瘤免疫性。
在本文所述方法中，將式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥組合物投與給患有如本文中別處所述之癌症的個體。
在實施例中，本文所揭示標的物係關於治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包括向有需要之個體投與有效量之本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或醫藥組合物。在此實施例之某些態樣中，HPK1依賴性病症係癌症。在此實施例之某些態樣中，癌症包含至少一種選自由以下組成之群之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰臟癌、血液惡性病及腎細胞癌。在此實施例之某些態樣中，癌症具有升高水準之T細胞浸潤。在此實施例之某些態樣中，相對於投與化合物或組合物之前，個體之癌細胞選擇性地具有MHC I類抗原表現之升高表現。
在本文所述方法中，該方法可進一步包括向該個體投與化學治療劑。在此實施例之某些態樣中，化學治療劑與化合物或組合物同時投與個體。在此實施例之某些態樣中，化學治療劑在投與化合物或組合物之前投與個體。在此實施例之某些態樣中，化學治療劑在投與化合物或該組合物之後投與個體。
HPK1多核苷酸及多肽為業內已知(Hu等人(1996)Genes Dev .10: 2251-2264，以全文引用之方式併入本文中)。某些HPK1多核苷酸及包含人類HPK1多核苷酸之多肽係可及的，且序列係已知的，例如，基因庫登錄號NM_007181.5之核苷酸141-2642及編碼之人類HPK1多肽(登錄號NP_009112.1)；及基因庫登錄號NM_001042600.2之核苷酸141-2606及編碼之人類HPK1多肽(登錄號NP_001036065.1)。
HPK1多肽包含多種保守結構基元。HPK1多肽包含胺基末端Ste20樣激酶結構域，該結構域包括ATP-結合位點。激酶結構域之後係四個富含脯胺酸(PR)之基元，其用作含SH3之蛋白質(諸如CrkL、Grb2、HIP-55、Gads、Nck及Crk)之結合位點。因應TCR或BCR刺激，HPK1被磷酸化及活化。位於PR1與PR2之間之酪胺酸殘基的TCR及BCR誘導之磷酸化介導與T細胞中之SLP-76或B細胞中之BLNK經由SLP-76或BLNK SH2結構域的結合，且需要活化激酶。HPK1之C末端中發現之枸櫞同源性結構域可用作調節結構域且可參與巨分子相互作用。
本發明所揭示化合物直接結合至HPK1且抑制其激酶活性。在一些實施例中，本發明所揭示化合物降低、抑制或以其他方式減少HPK1介導之SLP76及/或Gads磷酸化。
本發明所揭示化合物可為或可不為特異性HPK1拮抗劑。特異性HPK1拮抗劑對HPK1之生物活性的降低的量在統計上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制效應。在某些實施例中，本發明所揭示化合物特異性抑制HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在該等實施例中之一些中，HPK1拮抗劑對HPK1之IC50 係HPK1拮抗劑對另一絲胺酸/蘇胺酸激酶或其他類型之激酶(例如，酪胺酸激酶)之IC50 的約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。
本發明所揭示化合物可用於抑制HPK1之方法中。該等方法包括使HPK1與有效量之本發明所揭示化合物接觸。「接觸」欲指使化合物與分離之HPK1酶或表現HPK1之細胞(例如，T細胞、B細胞、樹突細胞)足夠靠近，使得化合物能夠結合至HPK1且抑制其活性。可經由向個體投與化合物使化合物與HPK1在活體外或活體內接觸。
可使用業內已知可量測HPK1之激酶活性的任何方法來確定HPK1是否被抑制，包括活體外激酶分析、利用對HPK1 (諸如SLP76及Gads)之磷酸化靶標具有特異性之抗體的免疫印跡，或量測HPK1激酶活性之下游生物效應，諸如招募14-3-3蛋白以磷酸化SLP7及Gads、自含有LAT之微團簇釋放SLP76-Gads-14-3-3複合物，或T或B細胞活化。
本發明所揭示化合物可用於治療HPK1依賴性病症。如本文所用之「HPK1依賴性病症」係其中HPK1活性對於病理狀況之發生或維持係必需的病理狀況。在一些實施例中，HPK1依賴性病症係癌症。
亦發現本發明所揭示化合物可用於增強有需要之個體之免疫反應。該等方法包括投與有效量之本發明所揭示化合物(亦即，式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物)。
如本文所用之「增強免疫反應」係指對抗原之任何免疫原性反應的改良。。對抗原之免疫原性反應之改良的非限制性實例包括樹突細胞之成熟或遷移增強、T細胞(例如，CD4 T細胞、CD8 T細胞)活化增強、T細胞(例如，CD4 T細胞、CD8 T細胞)增殖增強、B細胞增殖增強、T細胞及/或B細胞存活期延長、由抗原呈遞細胞(例如，樹突細胞)之抗原呈遞改良、抗原清除率提高、由T細胞(例如，介白素-2)之細胞介素產生增加、對前列腺素E2誘導之免疫抑制之抗性增加及CD8 T細胞之啟動及/或細胞溶解活性增強。
在一些實施例中，相對於在投與式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，個體之CD8 T細胞具有增強之啟動、活化、增殖及/或細胞溶解活性。在一些實施例中，CD8 T細胞啟動之特徵在於CD8 T細胞中CD44表現升高及/或細胞溶解活性增強。在一些實施例中，CD8 T細胞活化之特徵在於γ-IFN+ CD8 T細胞之頻率升高。在一些實施例中，CD8 T細胞係抗原特異性T細胞。
在一些實施例中，相對於在投與式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，個體之CD4 T細胞具有增強之啟動、活化、增殖及/或細胞溶解活性。在一些實施例中，CD4 T細胞啟動之特徵在於CD4 T細胞中CD44表現升高及/或細胞溶解活性增強。在一些實施例中，CD4 T細胞活化之特徵在於γ-IFN+ CD4 T細胞之頻率升高。在一些實施例中，CD4 T細胞係抗原特異性T細胞。
在一些實施例中，相對於在投與式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，個體之抗原呈遞細胞具有增強之成熟及活化。在一些實施例中，抗原呈遞細胞係樹突細胞。在一些實施例中，抗原呈遞細胞成熟之特徵在於CD83+ 樹突細胞之頻率增加。在一些實施例中，抗原呈遞細胞活化之特徵在於樹突細胞上CD80及CD86之表現升高。
在一些實施例中，相對於在投與式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，個體之細胞介素IL-10及/或趨化介素IL-8 (鼠類KC之人類同系物)的血清水準降低。
TCR之接合導致HPK1活化，用作TCR誘導之AP-1反應路徑之負調節劑。據信HPK1藉由以下方式來降低信號傳導微團簇之持久性而負向地調控T細胞活化：磷醯化Ser376處之SLP76 (Di Bartolo等人 (2007)JEM 204:681-691)及Thr254處之Gads，導致招募結合至磷酸化SLP76及Gads之14-3-3蛋白，從而自含有LAT之微團簇釋放SLP76-Gads-14-3-3複合物，導致T細胞功能障礙，包括無反應及耗竭(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。
在免疫功能障礙之背景下，術語「功能障礙」係指對抗原性刺激之免疫反應降低之狀態。該術語包括耗竭及/或無反應二者之常見要素，其中抗原識別可發生，但接著發生的免疫反應不足以控制感染或腫瘤生長。
本文所用之術語「功能障礙」亦包括對抗原識別難治或無反應，具體而言，將抗原識別轉化為T細胞效應功能之能力受損，例如增殖、細胞介素產生(例如，IL-2、γ-IFN)及/或靶細胞殺傷。
術語「無反應」係指由經由T細胞受體遞送之不完全或不足信號產生的對抗原刺激無反應之狀態(例如在不存在ras-活化情況下細胞內Ca+2 增加)。在不存在共刺激情況下用抗原刺激時，T細胞無反應亦可產生，從而導致甚至在共刺激背景下細胞對抗原之隨後活化亦抗拒。無反應狀態通常可由介白素-2之存在而被忽視。無反應T細胞不經歷純系擴增及/或獲得效應子功能。
術語「耗竭」係指由於自持續TCR信號傳導產生之T細胞功能障礙之狀態的T細胞耗竭，該持續TCR信號傳導在許多慢性感染及癌症中發生。其與無反應之區別在於其並非經由不完全或缺乏信號傳導產生，而是由持續信號傳導產生。其係由較差效應子功能、抑制受體之持續表現及區別於功能效應子或記憶T細胞之轉錄狀態來定義。耗竭防止感染及腫瘤之最佳控制。耗竭可由外在負調節路徑(例如，免疫調節性細胞介素)以及細胞固有之負調節(共刺激)路徑(PD-1、B7-H3、B7-H4等)產生。
在一些實施例中，向個體投與式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物導致T細胞功能增強。在一些實施例中，投與本文所述HPK1抑制劑可增強/更新/再活化免疫反應或從頭活化免疫反應。
「增強T細胞功能」意指誘導、引起或刺激T細胞以具有持續或擴大之生物功能，或更新或再活化耗竭或無活性之T細胞。增強T細胞功能之實例包括：細胞介素(例如，γ-干擾素、IL-2、IL-12及TNFα)之分泌增加、增殖增加、抗原反應(例如，病毒、病原體或腫瘤清除率)相對於介入之前之水準增加及CD8 T細胞或CD4 T細胞之效應子顆粒產生增加(諸如顆粒酶B)。在一個實施例中，增強水準為至少50%、或者60%、70%、80%、90%、100%、120%、150%、200%。量測此增強之方式為熟習此項技術者所知。
因此，本發明所揭示式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或其衍生物可用於治療T細胞功能障礙病症。「T細胞功能障礙病症」係特徵在於對抗原刺激之反應減少的T細胞病症或病狀。在具體實施例中，T細胞功能障礙病症係尤其與HPK1之激酶活性增加相關的病症。在另一實施例中，T細胞功能障礙病症係其中T細胞無反應或分泌細胞介素、增殖或執行細胞溶解活性之能力減小的病症。在具體態樣中，減小之反應導致對表現免疫原之病原體或腫瘤之控制無效。特徵在於T細胞功能障礙之T細胞功能障礙病症的實例包括不能消退之急性感染、慢性感染及腫瘤免疫性。
因此，本發明所揭示化合物可用於治療其中期望增強之免疫原性、諸如增加對癌症治療之腫瘤免疫原性的病狀。
「免疫原性」係指特定物質引起免疫反應之能力。腫瘤具有免疫原性且增強腫瘤免疫原性有助於藉由免疫反應清除腫瘤細胞。病毒亦可具有免疫原性且增強/活化免疫原性可有助於藉由免疫反應清除病毒顆粒。
「腫瘤免疫性」係指腫瘤逃避免疫識別及清除之過程。因此，作為一種治療概念，當該逃避減弱時，腫瘤免疫性被「治療」，且腫瘤被免疫系統識別及攻擊。腫瘤識別之實例包括腫瘤結合、腫瘤縮小及腫瘤清除。
在一態樣中，本文提供治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物。在一些實施例中，個體患有黑色素瘤。黑色素瘤可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有結腸直腸癌。結腸直腸癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有非小細胞肺癌。非小細胞肺癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有胰臟癌。胰臟癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有血液惡性病。血液惡性病可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有卵巢癌。卵巢癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，個體患有乳癌。乳癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，癌症患有腎細胞癌。腎細胞癌可處於早期或處於晚期。在一些實施例中，癌症具有升高之T細胞浸潤水準。
在一態樣中，提供治療有需要之個體之病毒感染的方法，該方法包括向該個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物。在一態樣中，提供增強或加強有需要之個體中對疫苗(諸如癌症疫苗或個人化癌症疫苗(PCV))或CAR-T細胞療法之反應的方法，該方法包括向該個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物。
本發明所揭示化合物可以業內已知之任何適宜方式來投與。在一些實施例中，式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物係經靜脈內、肌內、皮下、局部、經口、經皮、腹膜內、眶內、藉由注射、藉由吸入、鞘內、室內、腫瘤內或鼻內來投與。
在一些實施例中，HPK1拮抗劑係連續投與。在其他實施例中，HPK1拮抗劑係間歇投與。此外，用有效量之HPK1拮抗劑治療個體可包括單一治療或可包括一系列治療。
應理解，活性化合物之適當劑量取決於在常見熟練醫師或獸醫師之知識範圍內之多種因素。活性化合物之劑量將(例如)根據個體之年齡、體重、一般健康狀況、性別及飲食、投與時間、投與途徑、排泄速率及任何藥物組合而變。
亦應瞭解，用於治療之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物的有效劑量在特定治療過程中可增加或減少。劑量變化可產生且由診斷分析之結果而變得明瞭。
在一些實施例中，HPK1拮抗劑係以如下劑量投與個體：介於約0.001 µg/kg與約1000 mg/kg之間，包括(但不限於)約0.001 µg/kg、約0.01 µg/kg、約0.05 µg/kg、約0.1 µg/kg、約0.5 µg/kg、約1 µg/kg、約10 µg/kg、約25 µg/kg、約50 µg/kg、約100 µg/kg、約250 µg/kg、約500 µg/kg、約1 mg/kg、約5 mg/kg、約10 mg/kg、約25 mg/kg、約50 mg/kg、約100 mg/kg及約200 mg/kg。
在一些實施例中，提供治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物，進一步包括投與額外療法。額外療法可為放射療法、手術(例如，乳房腫瘤切除術及乳房切除術)、化學療法、基因療法、DNA療法、病毒療法、RNA療法、免疫療法、骨髓移植、奈米療法、單株抗體療法或上述之組合。額外療法可呈輔助或前導性療法形式。在一些實施例中，額外療法係投與抗轉移劑。在一些實施例中，額外療法係投與副作用限制劑(例如，意欲減輕治療副作用之發生及/或嚴重程度的劑，諸如抗噁心劑等)。在一些實施例中，額外療法係放射療法。在一些實施例中，額外療法係手術。在一些實施例中，額外療法係放射療法及手術之組合。在一些實施例中，額外療法係γ輻照。在一些實施例中，額外療法係靶向PI3K/AKT/mTOR路徑、HSP90抑制劑、微管蛋白抑制劑、細胞凋亡抑制劑及/或化學預防劑之療法。
額外療法可為化學治療劑中之一或多者。因此，治療癌症之方法可包括投與本發明所揭示HPK1拮抗劑連同至少一種化學治療劑。
如本文所用之「連同」係指投與一種治療方式以及另一治療方式。因此，「連同」係指在向個體投與一種治療方式之前、期間或之後投與另一治療方式。
舉例而言，HPK1拮抗劑及化學治療劑可依序(在不同時間)或同時(在相同時間)投與。HPK1拮抗劑及化學治療劑可藉由相同投與途徑或藉由不同投與途徑投與。
在某些實施例中，HPK1拮抗劑連同另一免疫療法投與。舉例而言，HPK1拮抗劑可與靶向PD-L1/PD-1路徑之化學治療劑或生物劑組合。已知抑制性檢查點路徑涉及經由PD-1受體之信號傳導。程式化死亡蛋白1 (PD-1)受體及其配位體PD-L1及PD-L2係作為CTLA-4之共調節分子之相同家族的部分。-更多可參見：http://www.onclive.com/web-exclusives/the-role-of-anti-pd-l1-immunotherapy-in-cancer/2#sthash.cGfYa1T1.dpuf。阻斷PD-L1與PD-1及CD80之結合之化學治療劑或生物劑可防止PD-L1介導之T細胞活化之抑制/阻抑。程式化細胞死亡配位體-1 (PD-L1)在抗原呈遞細胞(APC)及其他免疫細胞上廣泛表現。其在來自廣泛範圍之人類癌症之腫瘤細胞上上調，且已參與抗腫瘤T細胞免疫性之抑制。PD-L1係結合至活化T細胞、B細胞及其他骨髓細胞上之受體PD-1及CD80的細胞表面蛋白。已發現結合至活化T細胞上之PD-1的PD-L1干擾T-細胞增殖且抑制免疫反應。癌細胞上PD-L1之過表現可允許該等細胞避免免疫偵測及消除。腫瘤細胞上高水準之PD-L1表現與腫瘤侵犯性增加及預後較差相關。阻斷PD-L1與PD-1結合之化學治療劑或生物劑包括抗PD-L1抗體，尤其諸如德瓦魯單抗(durvalumab)、尼沃魯單抗、匹利珠單抗(pidlizumab)、MPDL3280A、MK-3475及BMS-936559。在一些實施例中，HPK1拮抗劑連同PD-1拮抗劑(諸如抗PD-1抗體)、PD-L1拮抗劑(諸如抗PD-L1抗體)及/或PD-L2拮抗劑(諸如抗PD-L2抗體)投與。抗PD-L1抗體之實例包括(但不限於)阿維魯單抗(avelumab)、阿替珠單抗(atezolizumab) (亦稱為MPDL3280A)、派姆單抗) (亦稱為MK-3475)、LY3300054 (Eli Lilly)、STI-A1014 (Sorrento)、KN035 (Suzhou Alphamab)及BMS-936559 (Bristol Myers Squibb)。抗PD-1抗體之實例包括(但不限於)尼沃魯單抗、匹利珠單抗、PDR001 (Novartis)、REGN2810 (Regeneron)、BGB-108 (BeiGene)、BGB-A317 (BeiGene)、JS-001 (Shanghai Junshi)、STI-A1110 (Sorrento)、INCSHR-1210 (Incyte)、PF-06801591 (Pfizer)、TSR-042 (亦稱為ANB011；Tesaro/AnaptysBio)、AM0001 (ARMO Biosciences)及ENUM 244C8 (Enumeral Biomedical Holdings)。
在另一實例中，HPK1拮抗劑可與靶向OX40及其配位體OX40L (為TNF超家族之成員)之化學治療劑或生物劑組合。OX40在活化CD4(+)及CD8(+) T細胞上以及在多種其他淋巴樣及非淋巴樣細胞上表現。自OX40至習用T細胞之共刺激信號促進分裂及存活，從而擴大效應子及記憶群體在針對抗原產生時之純系擴增。OX40另外抑制T調節細胞之分化及活性，從而進一步放大此過程。OX40及OX40L亦調控自T細胞、抗原呈遞細胞、天然殺傷細胞及天然殺傷T細胞之細胞介素產生，且調節細胞介素受體信號傳導。作為已知控制T細胞之最顯著共刺激分子中之一者，刺激OX40已顯示為癌症之治療免疫策略的靶標。某些OX40促效劑包括GBR 830及以下中所揭示之彼等物質：Linch等人，Frontiers in Oncology，第5卷，第1-10 (2015)頁，其以全文引用之方式併入本文中。
在其他實例中，HPK1拮抗劑可與靶向以下之化學治療劑或生物劑組合：CD28、OX40、GITR、CD137、CD27、CD40、ICOS、HVEM、NKG2D、MICA、2B4、IL-2、IL-12、IFNγ、IFNα、TNFα、IL-1、CDN、HMGB1、TLR、PD-L1軸、CTLA-4、TIM-3、BTLA、VISTA、LAG-3、B7H4、CD96、CD226、前列腺素、VEGF、內皮素B、IDO、精胺酸酶、MICA/MICB、TIM-3、IL-10、IL-4、IL-13、TIGIT或TGFβ。在其他實例中，HPK1拮抗劑可與包含PD-L1軸、CTLA-4、TIM-3、BTLA、VISTA、LAG-3、B7H4、CD96、TIGIT、CD226、前列腺素、VEGF、內皮素B、IDO、精胺酸酶、MICA/MICB、TIM-3、IL-10、IL-4或IL-13拮抗劑之免疫療法組合。在其他實例中，HPK1拮抗劑可與包含CD28、OX40、GITR、CD137、CD27、CD40、ICOS、HVEM、NKG2D、MICA、2B4、IL-2、IL-12、IFNγ、IFNα、TNFα、IL-1、CDN、HMGB1或TLR促效劑之免疫療法組合。
在另一實例中，HPK1拮抗劑可與PCV組合。在另一實例中，HPK1拮抗劑可與過繼性T細胞療法組合。
提供抑制HPK1之方法，該方法包括使個體之HPK1與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或包含式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物接觸。
一種增強有需要之個體之免疫反應的方法，其中該方法包括向該個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或包含式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。
在一些實施例中，個體患有癌症。
亦提供治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包括向有需要之個體投與有效量之式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或包含式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。
在一些實施例中，該HPK1依賴性病症係癌症。
在一些實施例中，其中該癌症包含至少一種選自由以下組成之群之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰臟癌、血液惡性病及腎細胞癌。
在一些實施例中，該方法進一步包括向該個體投與化學治療劑。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物，用於如本文所述抑制HPK1的方法中，用於如本文所述增強有需要之個體之免疫反應的方法中，及/或用於如本文所述治療HPK1依賴性病症的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物，用於如本文所述抑制HPK1的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物，用於如本文所述增強有需要之個體之免疫反應的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物，用於如本文所述治療HPK1依賴性病症的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於製造用於抑制HPK1之藥劑、用於增強有需要之個體之免疫反應的藥劑及/或用於治療HPK1依賴性病症之藥劑。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於製造用於抑制HPK1之藥劑。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於製造用於增強有需要之個體之免疫反應的藥劑。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於製造用於治療HPK1依賴性病症之藥劑。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於如本文所述抑制HPK1的方法中，用於如本文所述增強有需要之個體之免疫反應的方法中，及/或用於如本文所述治療HPK1依賴性病症的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於如本文所述抑制HPK1之方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於如本文所述增強有需要之個體之免疫反應的方法中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述式(I)或其變化形式、諸如式(IA)、(IB)及(IC)之化合物或本文所述醫藥組合物的用途，用於如本文所述治療HPK1依賴性病症的方法中。
在一些實施例中，在停止治療後，治療在個體中導致持續反應。「持續反應」係指停止治療後對減少腫瘤生長之持續效應。舉例而言，與開始投與階段之大小相比，腫瘤大小可保持相同或更小。在一些實施例中，持續反應具有與治療持續時間至少相同、為治療持續時間長度之至少1.5倍、2.0倍、2.5倍或3.0倍的持續時間。
本文揭示之治療方法可導致部分或完全反應。如本文所用之「完全反應」或「CR」係指所有靶病灶皆消失；「部分反應」或「PR」係指靶病灶之最長直徑之和(SLD)減小至少30%，取基線SLD作為參照；且「穩定的疾病」或「SD」係指靶病灶既不足夠縮小以針對PR定性，亦不足夠增加以針對PD定性，取自治療開始之最小SLD作為參照。如本文所用之「總體反應率」(ORR)係指完全反應(CR)率及部分反應(PR)率之和。
本文揭示之治療方法可導致投與HPK1拮抗劑之個體之無進展存活期及總體存活期延長。如本文所用之「無進展存活期」(PFS)係指在所治療疾病(例如，癌症)不惡化期間及在治療後在所治療疾病(例如，癌症)不惡化期間之時間長度。無進展存活期可包括患者經歷完全反應或部分反應之時間量，以及患者經歷穩定的疾病之時間量。
如本文所用之「總體存活率」係指在特定持續時間後可能活著之組中個體的百分比。
在一些實施例中，投與HPK1拮抗劑之個體係哺乳動物，諸如家畜動物(例如，牛、綿羊、貓、狗及馬)、靈長類動物(例如，人類及非人類靈長類動物，諸如猴)、兔及囓齒類動物(例如，小鼠及大鼠)。在一些實施例中，所治療個體為人類。
需要對癌症進行治療之個體可為展現癌症之症狀之人、經診斷患有癌症之人、減輕癌症之個體或具有發生癌症之增加風險(例如，遺傳傾向性、某些飲食或環境暴露)之個體。
在所述方法中之任一者中，在一態樣中，個體為人類，諸如需要該方法之人類。個體可為經診斷患有或懷疑患有HPK1依賴性病症(諸如癌症)之人類。個體可為無可偵測之疾病、但具有一或多個發生癌症之風險因子的人類。
進一步提供實施本文詳述之方法的套組，該等套組包含一或多種本文所述化合物或包含本文所述化合物之醫藥組合物。套組可採用本文揭示之化合物中之任一者。在一種變化形式中，套組採用本文所述化合物或其醫藥學上可接受之鹽。套組可用於本文所述用途中之任一或多者，且因此，可含有治療HPK1依賴性病症(諸如癌症)之使用說明書。在一些實施例中，套組含有治療癌症之使用說明書。
套組通常包含適宜包裝。套組可包含一或多個包含本文所述任何化合物之容器。每一組分(若有一個以上組分)可包裝於單獨容器中或一些組分可組合於一個容器中，只要交叉反應及儲放壽命允許即可。套組之一或多個組分可為無菌的及/或可包含於無菌包裝內。
套組可呈單位劑量、體包裝(例如，多劑量包裝)或亞單位劑量。舉例而言，可提供含有以下之套組：足夠劑量之如本文揭示之化合物(例如治療有效量)及/或可用於HPK1依賴性病症(例如，癌症)以提供個體之有效治療達延長時段(例如1週、2週、3週、4週、6週、8週、3個月、4個月、5個月、7個月、8個月、9個月或更多個月中之任一者)的第二醫藥活性化合物。套組亦可包括化合物之多個單位劑量及使用說明書且以足以儲存於及用於藥房(例如醫院藥房及複合藥房)之量包裝。
套組可視情況地包括一組說明書，通常書面說明書，但關於本發明方法之組分之使用，含有說明書之電子儲存媒體(例如磁碟或光碟)亦可接受。與套組包括在一起之說明書通常包括關於組分及其投與個體之資訊。
以說明方式而非限制方式提供以下實例。 實例縮寫
ACN 乙腈
aq. 水溶液
DCM 二氯甲烷
DIEA 二異丙基乙胺
DMAP 4-二甲基胺基吡啶
DMF N ,N -二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
DMSO-d 6 ： 氘代二甲亞碸
ESI 電噴霧離子化
EtOAc 乙酸乙酯
Et2 O 二乙醚
FA 甲酸
h. 小時
HATU O -(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’ -四甲基脲鎓六氟磷酸鹽
HCl 鹽酸
LCMS 液相層析-質譜法
NaOH 氫氧化鈉
NMR 核磁共振
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
MeOH.NH3 2N甲醇氨
mg 毫克
mmol 毫莫耳
min 分鐘
mL 毫升
RT 室溫
Rt或RT 滯留時間
SFC 超臨界流體層析
TBAF 四丁基氟化銨
TFA 三氟乙酸
TMEDA N,N,N’,N’ -四甲基乙二胺
THF 四氫呋喃
Brettphos Pd G3 [(2-二-環己基膦基-3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三異丙基-1,1′-聯苯)-2-(2′-胺基-1,1′ -聯苯)]鈀(II)甲磺酸酯甲磺酸酯
藉由非對掌性系統預純化所有樣品且在SFC對掌性純化之前檢查純度。LCMS 分析方法
方法 J ： 實驗係在Shimadzu 20AD HPLC上利用Shimadzu LCMS2020質譜儀使用ESI作為離子化源、Shim-Pack XR-ODS C18 2.2 µm、3.0×50管柱及1.2 ml/分鐘流速來實施。溶劑系統係以具有0.05% TFA之95%水(溶劑A)及具有0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)開始、在2.0分鐘內斜升至95%溶劑B的梯度。最終溶劑系統再保持恆定達0.7分鐘。
方法 K ： 實驗係在Shimadzu 20AD HPLC上利用Shimadzu LCMS2020質譜儀使用ESI作為離子化源、Shim-Pack XR-ODS C18 2.2 µm、3.0×50管柱及1.2 ml/分鐘流速來實施。溶劑系統係以具有0.05% TFA之95%水(溶劑A)及具有0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)開始、在2.0分鐘內斜升至95%溶劑B的梯度。最終溶劑系統再保持恆定達0.7分鐘。
方法 L ： 實驗係在Shimadzu 30AD HPLC上利用Shimadzu LCMS2020質譜儀使用ESI作為離子化源、Ascentis Express C18 2.7 µm、2.1×50管柱及1.0 ml/分鐘流速來實施。溶劑系統係以具有0.05% TFA之95%水(溶劑A)及具有0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)開始、在2.0分鐘內斜升至95%溶劑B的梯度。最終溶劑系統再保持恆定達0.7分鐘。
方法 M ： 實驗係在Shimadzu 20AD XR HPLC上利用Shimadzu LCMS2020質譜儀使用ESI作為離子化源、Poroshell HPH-C18 2.7 µm、3.0×50管柱及1.2 ml/分鐘流速來實施。溶劑系統係以具有5 mM碳酸氫銨之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)開始、在2.0分鐘內斜升至95%溶劑B的梯度。最終溶劑系統再保持恆定達0.7分鐘。
方法 N ： 實驗係在與Agilent MSD (6140)質譜儀耦合之Agilent 1290 UHPLC上使用ESI作為離子化源來實施。LC分離使用Phenomenex XB-C18, 1.7mm、50 × 2.1 mm管柱，流速為0.4 ml/分鐘。溶劑A係具有0.1% FA之水且溶劑B係具有0.1% FA之乙腈。梯度由以下組成：在7 min內2 - 98%溶劑B且保持98%B達1.5 min，之後平衡1.5 min。LC管柱溫度係40℃。收集220nm及254nm下之UV吸光度且對所有實驗應用質譜全掃描。合成實例
以下係製備中間體之程序，該等中間體用於製備一般方法及表中所述之化合物。實例 1 中間體1：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image840
步驟1：7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image842
於0℃下向7-溴-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(1 g, 4.37 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS (8.73 mL, 8.73 mmol, 1 mol/L)。將所得溶液於0℃下在氮氣下攪拌0.5 h。接著添加二碳酸二第三丁酯(2.85 g, 13.07 mmol)且將反應物於室溫下攪拌2 h。藉由添加甲醇(50 mL)淬滅反應。在真空下濃縮反應混合物。藉由矽膠急速層析(乙酸乙酯/石油醚，1/4)純化殘餘物，以得到黃色油狀7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(800 mg,2.43 mmol)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 329.2。 步驟2：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image840
將7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(6.2 g, 18.83 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(23.93 g, 94.22 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (2.76 g, 3.77 mmol)及乙酸鉀(5.55 g, 56.62 mmol)於1,4-二噁烷(2 mL)中之混合物於90℃下在氮氣下攪拌2.5 h。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(30%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(5 g, 13.29 mmol)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 376.3。實例 2 中間體2：7-溴-8-氯-6-碘異喹啉-3-胺
Figure 02_image844
步驟1：4-胺基-3-溴-2-氯苯甲腈
Figure 02_image846
向4-胺基-2-氯苯甲腈(1.5 g, 9.83 mmol)於乙腈(30 mL)中之溶液中添加1,3-二溴-5,5-二甲基-2,4-咪唑啶二酮(1.5 g, 5.25 mmol)。將溶液於25℃下攪拌2小時。藉由添加飽和NaHSO3 溶液(30 mL)淬滅反應且用乙酸乙酯(50 mL × 2)萃取。濃縮有機層，接著藉由急速層析(石油醚中之10%乙酸乙酯)純化，以產生黃色固體狀4-胺基-3-溴-2-氯苯甲腈及4-胺基-5-溴-2-氯苯甲腈之混合物(850 mg，5/2比率之位置異構物，26%產率)，直接用於下一步驟。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.67 (s, 1H), 7.38 (d,J = 8.4 Hz, 2.6H), 6.80 (s, 1H), 6.65 (d,J = 8.4 Hz, 2.6H), 4.81(bs, 5H), 4.71 (bs, 2H)。 步驟2：3-溴-2-氯-4-碘苯甲腈
Figure 02_image848
向CuI (51.63 g, 271.74 mmol)於乙腈(300 mL)中之懸浮液中添加亞硝酸第三丁酯( 33.59 g, 326.09 mmol)。將混合物於65℃下攪拌10分鐘。添加4-胺基-3-溴-2-氯苯甲腈及4-胺基-5-溴-2-氯苯甲腈之混合物(3/4比率, 25 g, 108.7 mmol)，接著將反應混合物於65℃下攪拌12小時。在冷卻至室溫時，將混合物用飽和Na2 S2 O4 溶液(30 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且過濾。濃縮濾液且藉由急速管柱層析(石油醚中之5%乙酸乙酯)純化，以產生黃色固體狀3-溴-2-氯-4-碘苯甲腈(5 g, 31%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) 7.91(d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 8.0 Hz, 1H)。 步驟3：(3-溴-2-氯-4-碘苯基)甲胺
Figure 02_image850
向3-溴-2-氯-4-碘苯甲腈(3 g, 8.76 mmol)於THF (30 mL)中之溶液中添加硼烷-THF (30 mL, 1 M，於THF中, 30 mmol)。將混合物於65℃下在N2 下攪拌3 h。在冷卻至室溫時，藉由添加甲醇(10 mL)及HCl (12 N, 10 mL)淬滅混合物。將反應物濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於乙酸乙酯(100 mL)中且用水(50 mL × 2)萃取。棄去有機層且經由添加飽和NaHCO3 水溶液將水層調節至pH 9。將混合物用乙酸乙酯(50 mL × 3)萃取。將合併之有機層用水(10 mL × 2)及鹽水(10 mL)洗滌，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮，以產生黃色油狀(3-溴-2-氯-4-碘苯基)甲胺(3 g, 99%產率)，直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.9。 步驟4：N -(3-溴-2-氯-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒
Figure 02_image852
向(3-溴-2-氯-4-碘苯基)甲胺(2.5 g, 7.22 mmol)於甲醇(20 mL)中之溶液中添加2,2-二乙氧基乙醯亞胺酸甲酯(3.75 g, 23.26 mmol)。將溶液於25℃下攪拌12小時，接著濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於二氯甲烷(20 mL)中，用水及鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮，以產生黃色固體狀N -(3-溴-2-氯-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒(3 g, 87%產率)，直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 474.9。 步驟5：7-溴-8-氯-6-碘異喹啉-3-胺
Figure 02_image844
將硫酸(10 mL)及N -(3-溴-2-氯-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒(3 g, 6.31 mmol)之混合物於60℃下攪拌12小時。將反應混合物冷卻至0℃且接著添加NaOH溶液以將pH調節至9。將所得溶液用二氯甲烷(100 mL × 3)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，以產生黃色固體狀7-溴-8-氯-6-碘異喹啉-3-胺(2.4 g, 99%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 382.8。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.99 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.49 (s, 2H)。實例 3 中間體3：8-氯-7-氟-6-碘異喹啉-3-胺
Figure 02_image855
步驟1：4-胺基-2-氯-3-氟苯甲腈
Figure 02_image857
向壓力反應管中添加氰化銅(I) (1.2 g, 13.37 mmol)、4-溴-3-氯-2-氟苯胺(1 g, 4.46 mmol)及1-甲基-2-吡咯啶酮(8 mL)。將混合物於170℃下在微波反應器中加熱1小時。藉由添加飽和NH4 Cl溶液(20 mL)淬滅反應混合物且過濾。用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取濾液。將合併之有機層用鹽水(3 × 10 mL)洗滌，用Na2 SO4 乾燥，經由矽膠墊過濾，且濃縮至乾燥，以產生黃色固體狀4-胺基-2-氯-3-氟苯甲腈(700 mg, 92%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 171.1。 步驟2：2-氯-3-氟-4-碘苯甲腈
Figure 02_image859
於65℃下在N2 下向CuI (3341 mg, 17.59 mmol)於乙腈(50 mL)中之懸浮液中添加亞硝酸第三丁酯( 1811 mg, 17.59 mmol)。將混合物於65℃下攪拌10分鐘，接著添加4-胺基-2-氯-3-氟苯甲腈(2 g, 11.73 mmol)。將混合物於65℃下攪拌12小時。在冷卻至室溫時，將混合物用飽和Na2 S2 O4 水溶液(30 mL)及NH4 Cl水溶液(30 mL)淬滅且用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水(2 × 10 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且過濾。濃縮濾液以產生粗產物，藉由急速層析(石油醚/乙酸乙酯=5/1)對其進行純化，以產生黃色固體狀2-氯-3-氟-4-碘苯甲腈(1 g, 30%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.80 (dd,J = 5.6, 8.2 Hz, 1H), 7.22 (dd,J = 1.4, 8.2 Hz, 1H)。 步驟3：(2-氯-3-氟-4-碘苯基)甲胺
Figure 02_image861
於0℃下向硼烷-THF (35.53 mL, 1 M，於THF中, 35.53 mmol)於THF (30 mL)中之溶液中添加2-氯-3-氟-4-碘苯甲腈(1 g, 3.55 mmol)。接著將混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。藉由逐滴添加HCl溶液(6 M, 2 mL)淬滅反應溶液，接著用NaHCO3 水溶液中和至pH 8且用二氯甲烷(2 × 200 mL)萃取。將合併之有機層用水(2 × 10 mL)及鹽水(1 × 10 mL)洗滌，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮，以產生(2-氯-3-氟-4-碘苯基)甲胺(400 mg，粗製)，不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 285.9。 步驟4：N -(2-氯-3-氟-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒
Figure 02_image863
向2,2-二乙氧基乙醯亞胺酸甲酯(0.3 g, 1.88 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液中添加(2-氯-3-氟-4-碘苯基)甲胺(250 mg, 0.88 mmol)。將反應混合物於25℃下攪拌12小時，且接著濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於二氯甲烷(20 mL)中，用水(2 × 10 mL)、接著鹽水洗滌，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮，以產生黃色固體狀N -(2-氯-3-氟-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒(360 mg，粗製)，不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 415.0。 步驟5：8-氯-7-氟-6-碘異喹啉-3-胺
Figure 02_image855
將N -(2-氯-3-氟-4-碘苄基)-2,2-二乙氧基乙脒(0.36 g, 0.87 mmol)及濃H2 SO4 (10 mL, 26.05 mmol)之溶液於60℃下攪拌12小時。將混合物冷卻至0℃，用NaOH (10 wt%)調節至pH 9，接著用二氯甲烷(5 × 100 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮，以產生黃色固體狀8-氯-7-氟-6-碘異喹啉-3-胺(0.25 g，粗製)，不經進一步純化即直接使用。LCMS (ESI) [M+H]+ = 322.9。1 H NMR (400MHz, CD3 OD) δ 9.00 (s, 1H), 8.08 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H)。實例 4 7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image865
在氮氣下，將8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(249.0 g, 772.07 mmol)、8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(290.0 g, 770.76 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (57.0 g, 77.98 mmol)及K2 CO3 (320.0 g, 2318.8 mmol)於1,4-二噁烷(3000 mL)及水(300 mL)中之混合物於60℃下攪拌12小時。將反應混合物緩慢冷卻至室溫。添加無水硫酸鈉(500 g)且攪拌0.5小時。過濾出固體。在真空下濃縮濾液。將殘餘物用乙酸乙酯(3 L)洗滌。藉由過濾收集固體且用乙酸乙酯洗滌，在真空下乾燥，以得到240 g產物。在真空下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(0-100%)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到60 g產物。合併兩個批次，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 g, 674.32 mmol, 87.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 445。實例 5 7-(3-胺基-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image867
步驟1：7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image869
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 g, 674.32 mmol)、新鮮乾燥之4Å分子系列(300 g)及鄰苯二甲酸酐(150.0 g, 1012.7 mmol)於甲苯(3000 mL)中之溶液於100℃攪拌3小時。將反應物緩慢冷卻至室溫且接著過濾所得混合物。在真空下濃縮濾液。將殘餘物與乙酸乙酯(2000 mL)一起磨碎。藉由過濾收集固體且在真空下乾燥，以得到200 g產物。在真空下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到100 g產物。合併兩個批次，以得到灰白色固體狀7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 g, 521.75 mmol, 77.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 575。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image871
在氮氣下，將7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 g, 521.75 mmol)、NH2 Boc (916.0 g, 7829.1 mmol)、Brettphos Pd G3 (24.0 g, 26.48 mmol)、新鮮乾燥之4Å分子系列(300 g)及K2 CO3 (227.0 g, 1644.9 mmol)於1,4-二噁烷(3000 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。將反應物緩慢冷卻至室溫且接著過濾混合物。在真空下濃縮濾液且殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 656。 步驟3：7-(3-胺基-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image867
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(來自最後一個步驟之粗產物)及水合肼(228.0 g, 4560 mmol)於甲醇(3000 mL)中之溶液於40℃下攪拌2小時。使產物沈澱，過濾且用MeOH (3x500 mL)洗滌。在真空下乾燥固體，以得到130 g產物。在真空下濃縮濾液。藉由用DCM/MeOH (5 %)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到22 g產物。合併兩個批次，以得到黃色固體狀7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(152 g, 288.97 mmol, 55.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 526。實例 6 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image873
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.0 g, 1.9 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(0.23 g, 1.88 mmol)於吡啶(5 mL)及二氯甲烷(5 mL)中之懸浮液中添加氯甲酸苯酯(0.60 g, 3.82 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用水洗滌且在真空下濃縮有機層。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淡黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.09 g, 1.553 mmol, 81.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =646.2。實例 7 7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image875
步驟1：5-溴-2-碘-4-甲基-吡啶-3-胺
Figure 02_image877
將5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(60.0 g, 320.79 mmol)及n-碘琥珀醯亞胺(72.2 g, 320.92 mmol)於乙酸(1000 mL)中之溶液於25℃下攪拌12小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用PE/EA (1/20)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀5-溴-2-碘-4-甲基-吡啶-3-胺(72 g, 177.16 mmol, 55.2%產率)。 步驟2：N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image879
將5-溴-2-碘-4-甲基-吡啶-3-胺(55 g, 175.76 mmol)及NaHMDS (360.mL, 720 mmol)於四氫呋喃(500 mL)中之溶液於0℃下攪拌30 min。接著添加(Boc)2 O (43 g, 197.25 mmol)且於25℃下攪拌1.5小時。將所得溶液用水稀釋，接著用乙酸乙酯萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/20)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(58 g, 140.42 mmol, 79.9%產率)。 步驟3：3-[5-溴-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-2-吡啶基]丙酸甲酯
Figure 02_image881
在氮氣下，將N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(500.0 mg, 1.21 mmol)、溴-(3-甲氧基-3-側氧基-丙基)鋅(15 mL, 6.89 mmol)及Pd(PPh3 )4 (115.0 mg, 0.10 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之混合物於70℃下攪拌2小時。將反應混合物用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀3-[5-溴-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-2-吡啶基]丙酸甲酯(313 mg, 0.79 mmol, 65.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 373.0。 步驟4：7-溴-8-甲基-3,4-二氫-1H -1,5-萘啶-2-酮
Figure 02_image883
將3-[5-溴-3-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-2-吡啶基]丙酸甲酯(313.0 mg, 0.79 mmol)於三氟乙酸(1 mL)及二氯甲烷(4 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀7-溴-8-甲基-3,4-二氫-1H-1,5-萘啶-2-酮(140 mg, 0.55 mmol, 70%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 241.0 步驟5：7-溴-8-甲基-1,2,3,4-四氫-1,5-萘啶
Figure 02_image885
將7-溴-8-甲基-3,4-二氫-1H -1,5-萘啶-2-酮(120.0 mg, 0.47 mmol)於四氫呋喃(10 mL)及BH3 .THF(1M) (1.4 mL, 1.42 mmol)中之溶液於60℃下攪拌2小時。用甲醇及稀鹽酸淬滅反應。在真空下濃縮混合物。藉由反相層析(乙腈0-70/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化所得殘餘物，以得到白色固體狀7-溴-8-甲基-1,2,3,4-四氫-1,5-萘啶(70 mg, 0.29 mmol, 61.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 227.0。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.74 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 3.26-3.21 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.89-1.81 (m, 2H)。 步驟6：7-溴-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image887
於0℃下向7-溴-8-甲基-1,2,3,4-四氫-1,5-萘啶(60.0 mg, 0.26 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加NaHDMS (0.5 mL, 0.26 mmol, 0.5 mol/L，於THF中)，且接著將混合物於此溫度下攪拌0.5小時。接著添加(Boc)2 O (100.0 mg, 0.46 mmol)且於室溫下攪拌1小時。由甲醇(1 mL)淬滅反應。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀7-溴-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(70 mg, 0.20 mmol, 76.9%)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 327.0。 步驟7：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image889
在氮氣下，將7-溴-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(30.0 g, 91.68 mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼戊環) (117.0 g, 460.63 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (6.7 g, 9.17 mmol)及KOAc (27.0 g, 275.51 mmol)於1,4-二噁烷(500 mL)中之混合物於100℃下攪拌3小時。藉由過濾移出固體。接著在真空下濃縮混合物。藉由反相層析(乙腈5-30/水中之0.1% HCl)純化所得殘餘物，以得到白色固體狀8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(30 g, 80.154 mmol, 87.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 375.0。 步驟8：7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image875
在氮氣下，將8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(30.0 g, 80.15 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(28.5 g, 88.37 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (5.9 g, 8.07 mmol)及K2 CO3 (33.0 g, 239.13 mmol)於1,4-二噁烷(500 mL)及水(50 mL)中之混合物於60℃下攪拌16小時。將反應混合物用乙酸乙酯(1000 mL)稀釋。將所得溶液用水(3×100 mL)洗滌且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(9:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(26 g, 58.703 mmol, 73.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 443。實例 8 步驟1：7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image891
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(26.0 g, 58.7 mmol)及異苯并呋喃-1,3-二酮(17.5 g, 118.24 mmol)於甲苯(300 mL)中之溶液於110℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(18 g, 31.41 mmol, 53.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 573。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image893
在氮氣下，將7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(17.0 g, 29.67 mmol)、NH2 Boc (104.0 g, 888.89 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (6.1 g, 5.89 mmol)、Brettphos (6.4 g, 11.92 mmol)及K2 CO3 (12.3 g, 89.13 mmol)於1,4-二噁烷(300 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。過濾混合物且在真空下濃縮。粗產物不經進一步純化即進入下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 654。 步驟3：7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image895
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(13.0 g, 19.89 mmol)及N2 H4 H2 O (12.5 g, 200 mmol)於乙醇(130 mL)中之溶液於50℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(8 g, 15.279 mmol, 76.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 524。實例 101 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(化合物 401 )
Figure 02_image897
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image899
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(145 mg, 0.33 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加吡啶(1 mL, 12 mmol)。向所得溶液中逐滴添加氯甲酸四氫哌喃-4-基酯(81 mg, 0.50 mmol)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液。接著將反應物攪拌90分鐘。
接著將反應物用20 mL二氯甲烷稀釋且用40 mL飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。分離有機層且將水層進一步用二氯甲烷(2 × 25 mL)萃取。將合併之二氯甲烷層用無水粉末狀硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮，以產生褐色固體。藉由急速管柱層析(庚烷中之0-100%乙酸異丙酯)純化粗物質，以得到白色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(181 mg, 0.3 mmol)。LCMS (ESI,m/z): 575 [M+H]+ 。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image901
將20 mL壓力管中之於1,4-二噁烷(4 mL)中的7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(181 mg, 0.3 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(949.3 mg, 8.1 mmol)、參(二亞苄基丙酮)二鈀-氯仿加成物(83.4 mg, 0.08 mmol)、BrettPhos (94.8 mg, 0.17 mmol)及碳酸銫(624.7 mg, 1.9 mmol)用氮氣吹掃，密封且接著於90℃下加熱3.5 h。接著將反應物冷卻至室溫，用20 mL二氯甲烷稀釋且經由矽藻土過濾。接著濃縮濾液，以產生黃紅色固體且藉由管柱層析(二氯甲烷中之0-50%甲醇)純化，以得到褐色油狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(197 mg, 0.3 mmol)。LCMS (ESI,m/z): 654 [M+H]+ 。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image897
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(197 mg, 0.3 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(8 mL)。接著將反應物於室溫下攪拌45分鐘。接著將反應物濃縮且藉由反相HPLC純化，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(56 mg, 0.12 mmol)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H),5.66 (d,J = 3.0 Hz, 1H), 4.88 (dt,J = 8.8, 4.6 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.88-3.83 (m, 2H), 3.50-3.45 (m, 2H), 3.38-3.36 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 5H), 1.61 (dt,J = 12.9, 4.5 Hz, 2H)。LCMS (ESI,m/z): 454.2 [M+H]+ , Rt = 3.502 min，方法N。實例 102 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基氮雜環丁-3-基酯(化合物 402 )
Figure 02_image903
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image905
於0℃下向1-boc-3-羥基氮雜環丁烷(370 mg, 2.14 mmol)及DIEA (275 mg, 2.13 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加緩慢三光氣(203 mg, 0.68 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。將反應於0℃下攪拌1小時。於0℃下將所得混合物添加至7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.43 mmol)及DIEA (111 mg, 0.86 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中。將反應於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且接著用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.28 mmol, 65.4%產率)。 步驟2：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image907
將7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180.0 mg, 0.28 mmol)、NH2 Boc (981.0 mg, 8.38 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (29.0 mg, 0.03 mmol)、Brettphos (27.0 mg, 0.06 mmol)及Cs2 CO3 (273.0 mg, 0.84 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(10:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.19 mmol, 69.1%產率)。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image909
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140.0 mg, 0.19 mmol)於二氯甲烷(2 mL)及TFA (0.5 mL)中之溶液於25℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(40 mg, 0.09 mmol, 48.8%產率)。 步驟4：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-甲基氮雜環丁-3-基)酯
Figure 02_image911
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(40 mg, 0.09 mmol)及甲醛(40%水溶液，14 mg, 0.19 mmol)於甲醇(2 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (32 mg, 0.28 mmol)且將反應物於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到白色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-甲基氮雜環丁-3-基)酯(9.2 mg, 0.021 mmol, 22.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439, Rt = 1.574 min，方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.95 (p,J = 6.0 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.65 (t,J = 7.4 Hz, 2H), 3.36-3.33 (m, 2H), 3.04 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。 實例 103 (±)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 403 )
Figure 02_image913
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image915
於0℃下向3-羥基四氫呋喃(790 mg, 8.97 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(0.32 mL, 1.86 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(414 mg, 1.40 mmol)。將反應物攪拌30 min。接著添加7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.90 mmol)。將反應物於0℃下攪拌6 h。在真空下濃縮所得混合物且來藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.32 mmol, 35.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 559。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image917
將7-[8-氯-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.29 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(1.0 g, 8.54 mmol)、碳酸銫(290 mg, 0.88 mmol)、2-(二環己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯(62 mg, 0.12 mmol)及參(二亞苄基丙酮)二鈀-氯仿加成物(60 mg, 0.06 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之混合物於100℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用甲烷/二氯甲烷(1/10)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.16 mmol, 54.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H] + = 640。 步驟3：(±)-N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image919
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(45 mg, 0.07 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1 mL)中之溶液於25℃下攪拌30 min。在真空下濃縮所得溶液。用甲醇中之氨(7 mol/L)將殘餘物之pH調節至pH 8。在真空下濃縮所得溶液且藉由製備型HPLC(XBridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內ACN = 19% B至42% B；60 mL/min)純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(17.8 mg, 0.041 mmol, 57.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 440, 2.216 min，方法M。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.31-5.24 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.89-3.69 (m, 4H), 3.39-3.34 (m, 2H), 2.20-2.18 (m, 1H), 1.98-1.96 (m, 1H), 1.92 (s, 3H)。實例 104 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-4-基酯(化合物 407 )及 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-4-基酯(化合物 404 )
Figure 02_image921
步驟1：7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image923
於0℃下向4-羥基六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(2.26 g, 11.23 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(1.95 mL, 11.23 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中逐滴添加二氯甲烷(2 ml)中之三光氣(1 g, 3.43 mmol)。將反應物於0℃下攪拌2小時。接著於0℃下將反應混合物添加至7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.12 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(1.95 mL, 11.23 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中。將混合物於室溫下攪拌16 h。用水淬滅反應且接著用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾，且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.74 mmol, 66%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 672。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1-(第三丁氧基羰基)六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image925
於室溫下向7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.74 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(1.75 g, 14.9 mmol)、參(二亞苄基丙酮)二鈀-氯仿加成物(155 mg, 0.15 mmol)及2-(二環己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯(160 mg, 0.30 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加碳酸銫(730 mg, 2.23 mmol)。將反應物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮所得溶液且來藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.33 mmol, 44.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 753。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image927
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.33 mmol)及三氟乙酸(2 mL)於二氯甲烷(2 mL)中之混合物於室溫下攪拌30分鐘。在真空下濃縮反應溶液。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用三乙胺將pH調節至7。在真空下濃縮混合物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸4-六氫吡啶基酯(70 mg, 0.15 mmol, 45.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453, 1.479 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.98 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.73-4.71 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 3.49 (s, 3H), 2.97-2.94 (m, 2H), 2.58-2.55 (m, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.89-1.85 (m, 2H), 1.53-1.48 (m, 2H)。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image929
於室溫下將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸4-六氫吡啶基酯(70 mg, 0.15 mmol)及甲醛(9 mg, 0.30 mmol)於甲醇(8 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。接著添加氰基硼氫化鈉(18.8 mg, 0.30 mmol)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且接著用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾，且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (XBridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內CH3 CN= 31% B至53% B；60 mL/min)純化粗產物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-甲基-4-六氫吡啶基)酯(24.4 mg, 0.052 mmol, 34.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467, Rt = 1.545 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.99 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.68-4.66 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 3.36-3.33 (m, 2H), 2.64-2.62 (m, 2H), 2.15-2.12 (m, 5H), 1.90-1.87 (m, 5H), 1.65-1.63 (m, 2H)。實例 105 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯 (化合物 405a 及化合物 405b )
Figure 02_image931
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image933
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.56 mmol)、1-boc-3-羥基吡咯啶(105 mg, 0.56 mmol)及DIEA (72 mg, 0.56 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於0℃下在氮氣下攪拌5分鐘。接著於0℃下向反應溶液中添加二氯甲烷(1 mL)中之三光氣(168 mg, 0.59 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時。接著由水淬滅反應且用二氯甲烷(200 mL)萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾，且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230 mg, 0.33 mmol, 59.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 658.0。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image935
將7-[3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230 mg, 0.35 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(1.2 g, 10.26 mmol)、Pd2 (dba)3. CHCl3 (36 mg, 0.03 mmol)、Brettphos (35 mg, 0.070 mmol)及Cs2 CO3 (350 mg, 1.07 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之混合物於90℃下在氮氣下攪拌4小時。過濾反應溶液且在真空下濃縮濾液。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.27 mmol, 76.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 739.0。 步驟3：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image937
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.27 mmol)及三氟乙酸(3 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於28℃下攪拌1小時。接著在真空下濃縮混合物。用三乙胺將殘餘物之pH值調節至pH 9。藉由製備型HPLC( YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內CH3 CN = 50% B至70% B；60 mL/min) 純化粗產物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 405a ) (27.1 mg, 0.062 mmol, 22.8%產率)：滯留時間：2.075 min( ChIRALPAK IC-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA)：在5 min內MeOH = 75:25；1 mL/min) 。 LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.2, Rt=0.935 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.98 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.14-5.11 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.04 (dd,J = 12.4, 5.6 Hz, 1H), 2.92-2.74 (m, 3H), 1.98 (dd,J = 14.3, 7.3 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.78 (q,J = 6.9, 6.1 Hz, 1H)。
鏡像異構物2 (化合物 405b ) (25.9 mg, 0.059 mmol, 21.8%產率)：滯留時間：3.237 min( ChIRALPAK IC-3,0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA)：在5 min內MeOH = 75:25；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.2, Rt=0.935min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.98 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.14-5.11 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.04 (dd,J = 12.4, 5.6 Hz, 1H), 2.92-2.74 (m, 3H), 1.98 (dd,J = 14.3, 7.3 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.78 (q,J = 6.9, 6.1 Hz, 1H)。實例 106 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯 (化合物 408a 及化合物 408b )
Figure 02_image939
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image941
於室溫下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.45 mmol)及3-羥基六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 1.24 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加DIEA (300 mg, 2.33 mmol)。添加三光氣(120 mg, 0.40 mmol)且將反應混合物於0℃下攪拌1小時。將反應物用二氯甲烷稀釋且接著用水洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾，且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.21 mmol, 46.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  672.2。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image943
於室溫下向7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.21 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(1.5 g, 12.82 mmol)於1,4-二噁烷(7 mL)中之溶液中添加Pd2 (dba)3. CHCl3 (50 mg, 0.05 mmol)、Brettphos (50 mg, 0.09 mmol)及Cs2 CO3 (220 mg, 0.67 mmol)。將所得混合物於90℃下攪拌2小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/3)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.20 mmol, 95.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 753.2。 步驟3：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-3-基酯
Figure 02_image945
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.19 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將反應物於25℃下攪拌1 h，之後在真空下濃縮。將殘餘物用三乙胺調節至pH 8且接著藉由製備型HPLC (YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內CH3 CN= 23% - 49%；60 mL/min)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學
鏡像異構物1 (化合物 408a ) (15.9 mg, 0.035 mmol, 18.9 %產率)：滯留時間：1.937 min (CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm, 3 µm；DCM (0.1% DEA)：在3 min內MeOH =50:50；1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 453.2, 1.814 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.59 (dt,J = 8.7, 4.4 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 2.36-3.32 (m, 3H), 3.06-3.04 (m, 1H), 2.76-2.72 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 2H), 1.98-1.92 (m, 4H), 1.68-1.64 (m, 1H), 1.46 (dt,J = 21.7, 10.5 Hz, 2H)。
鏡像異構物2 (化合物 408b ) (12.6 mg, 0.0278 mmol, 15%產率)：滯留時間：1.235 min (CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm, 3 µm；DCM(0.1% DEA): MeOH =50:50；1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 453.2, 1.814 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.59 (dt,J = 8.7, 4.4 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 2.36-3.32 (m, 3H), 3.06-3.04 (m, 1H), 2.76-2.72 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 2H), 1.98-1.92 (m, 4H), 1.68-1.64 (m, 1H), 1.46 (dt,J = 21.7, 10.5 Hz, 2H)。實例 107 N -[8-胺基-7-氟-6-[(4S )-4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯及N -[8-胺基-7-氟-6-[(4R )-4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯 (化合物 412a 及化合物 412b )
Figure 02_image947
步驟4：6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-8-氯-7-氟-異喹啉-3-胺
Figure 02_image949
將8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(311 mg, 0.96 mmol)、[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]硼酸(190 mg, 0.6 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(74.2 mg, 0.09 mmol)及碳酸鉀(294.4 mf, 2.1 mmol)於二噁烷(5 mL)及水(1 mL)中之混合物用氮氣吹掃且於90℃下加熱24 h。接著將反應物冷卻至室溫且用20 mL乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土過濾。接著濃縮濾液且藉由急速管柱層析(庚烷中之0-100%乙酸異丙酯)純化為褐色固體狀6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-8-氯-7-氟-異喹啉-3-胺(204 mg, 0.4 mmol)。LCMS (ESI,m/z): 474 [M+H]+ 。 步驟5：N -[6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-8-氯-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image951
標題化合物係使用類似於實例 101 之步驟1之程序使用6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-8-氯-7-氟-異喹啉-3-胺代替7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(207.8 mg, 0.34 mmol)來製備。LCMS (ESI,m/z): 602 [M+H]+ 。 步驟6：N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image953
標題化合物係使用類似於實例 101 之步驟2之程序使用N -[6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-8-氯-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯代替7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸酯(207.8 mg, 0.34 mmol)來製備。LCMS (ESI,m/z): 602 [M+H]+ 。任意地分配絕對立體化學。 步驟7：N -[8-胺基-7-氟-6-[(4S )-4-羥基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image955
Figure 02_image957
標題化合物係使用類似於實例 101 之步驟3之程序使用N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯代替7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸酯來製備。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 412b )：滯留時間：1.556 min (CHIRALPAK IH, 0.46*5cm, 3 µm；在2.5 min內等度40% MeOH)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.06 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (d,J = 2.8 Hz, 2H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.40 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.40-4.30 (m, 2H), 3.86 (dt,J = 11.7, 4.5 Hz, 2H), 3.48 (ddd,J = 11.8, 9.3, 2.9 Hz, 2H), 2.24 (d,J = 1.4 Hz, 3H), 1.95 (ddd,J = 16.6, 8.0, 3.9 Hz, 4H), 1.65-1.56 (m, 2H)。LCMS (ESI,m/z): 469.2 [M+H]+ , 3.437 min.，方法N。
鏡像異構物2 (化合物 412a )：滯留時間：1.082 min (CHIRALPAK IH, 0.46*5cm, 3 µm；在2.5 min內等度40% MeOH)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.06 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (d,J = 2.8 Hz, 2H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.40 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.40-4.30 (m, 2H), 3.86 (dt,J = 11.7, 4.5 Hz, 2H), 3.48 (ddd,J = 11.8, 9.3, 2.9 Hz, 2H), 2.24 (d,J = 1.4 Hz, 3H), 1.95 (ddd,J = 16.6, 8.0, 3.9 Hz, 4H), 1.65-1.56 (m, 2H)。LCMS (ESI,m/z): 469.2 [M+H]+ , 3.437 min.，方法N。實例 108 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-4-基)脲(化合物 701 )
Figure 02_image959
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image961
於0℃下經10 min向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.67 mmol)及吡啶(0.16 mL, 2.02 mmol)之溶液中添加四氫呋喃(40 mL)中之三光氣(320 mg, 1.08 mmol)。添加四氫-2H -哌喃-4-胺(700 mg, 6.92 mmol)且將反應混合物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/10)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.45 mmol, 67.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 572。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image963
將7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.28 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(1 g, 8.54 mmol)、碳酸銫(284 mg, 0.87 mmol)、2-(二環己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯(61 mg, 0.11 mmol)及參(二亞苄基丙酮)二鈀-氯仿加成物(60 mg, 0.06 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液且藉由用甲醇/二氯甲烷(1/10)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.15 mmol, 54.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 653.0。 步驟3：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-四氫哌喃-4-基-脲
Figure 02_image965
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.15 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及TFA(2 mL)中之溶液於25℃下攪拌1 h。在真空下濃縮所得溶液。用甲醇中之氨(7 mol/L)將殘餘物之pH調節至pH 8。在真空下濃縮所得溶液且藉由製備型HPLC (YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內CH3 CN= 37% B至62% B；60 mL/min)純化，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-四氫哌喃-4-基-脲(59.8 mg, 0.13 mmol, 86.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453, Rt = 0.893 min.，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.84 (s, 1H),7.33 (s, 1H), 7.20 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.88 - 3.75 (m, 3H), 3.42-3.34 (m, 4H), 1.92 (s, 3H), 1.87-1.83 (m, 2H), 1.43-1.39 (m, 2H)。實例 109 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸9-甲基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯(化合物 406 )
Figure 02_image372
步驟1：7-[3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image967
於0℃下攪拌7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.34 mmol)、7-羥基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(410.2 mg, 1.69 mmol)及DIEA (435.8 mg, 3.37 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液。接著於0℃下逐滴添加三光氣(150.1 mg, 0.51 mmol)且接著於25℃下攪拌2小時。用水淬滅反應。將所得溶液用二氯甲烷萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(115 mg, 0.16 mmol, 47.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 714.2。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image969
將7-[3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(105 mg, 0.15 mmol)、NH2 Boc (516.1 mg, 4.41 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (31 mg, 0.030 mmol)、Brettphos (32 mg, 0.06 mmol)及Cs2 CO3 (143.8 mg, 0.44 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(97:3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(85 mg, 0.11 mmol, 72.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 795.5。 步驟3：N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯
Figure 02_image971
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(9-第三丁氧基羰基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg, 0.10 mmol)及TFA (2 ml)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮溶劑。用TEA將殘餘物調節至pH 8。將所得混合物用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮，以得到淺黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯(40 mg, 0.08 mmol, 80.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.3。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸9-甲基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯(化合物 406 )
Figure 02_image372
向N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯(34.5 mg, 0.07 mmol)於甲醇(15 mL)中之溶液中添加甲醛(10.5 mg, 0.14 mmol, 40%)且於25℃下攪拌2小時。接著添加NaBH3 CN (8.8 mg, 0.14 mmol)且於25℃下攪拌2小時。將反應物用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內17% B至31% B；Rt：9.87 min)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸9-甲基-3-氧雜-9-氮雜二環[3.3.1]壬-7-基酯(9.9 mg, 0.02 mmol, 27.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.2, RT = 0.720 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.71 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.05-5.08 (m, 1H), 4.29 (d,J = 4.8 Hz, 2H), 3.80 (dd,J = 11.0, 2.2 Hz, 2H), 3.42-3.36 (m, 4H), 2.70 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 2.43-2.33 (m, 5H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.62 (dd,J = 13.1, 5.8 Hz, 2H)。實例 110 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯(化合物 409a 及化合物 409b )
Figure 02_image973
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image975
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.56 mmol)、5-羥基-1-甲基-六氫吡啶-2-酮(90 mg, 0.70 mmol)及DIEA (292 mg, 2.25 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中添加二氯甲烷(3 mL)中之三光氣(60 mg, 0.20 mmol)。將反應於室溫下攪拌16小時。用水淬滅反應。將所得溶液用二氯甲烷萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(290 mg, 0.495 mmol, 88.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 600。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-6-側氧基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image977
將7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-6-側氧基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.47 mmol)、NH2 Boc (3.28 g, 28.03 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (97 mg, 0.09 mmol)、Brettphos (101 mg, 0.19 mmol)及Cs2 CO3 (304 mg, 0.94 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之溶液於90℃下攪拌3小時。將反應混合物用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(88/12)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-6-側氧基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.264 mmol, 56.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 681。 步驟3：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-6-側氧基六氫吡啶-3-基酯
Figure 02_image979
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-6-側氧基-3-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol)於TFA (3 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。用TEA將殘餘物調節至pH 9。藉由具有以下條件(管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內14% B至37% B；220/254 nm；Rt：6.57 min)之製備型HPLC及對掌性HPLC純化粗產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 409a) (17.9 mg, 0.0373 mmol, 16.9%產率)：滯留時間：2.367 (CHIRALPAK IC-3: 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM =1:1) (0.1%DEA): EtOH =50:50；1.0ml/min；梯度：在5 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2, RT = 1.017 min，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.64 (dd,J = 13.3, 3.9 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.48-2.36 (m, 3H), 2.31-2.20 (m, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 409b) (17.6 mg, 0.0366 mmol, 16.6%產率)：滯留時間：3.097 (CHIRALPAK IC-3: 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM =1:1) (0.1%DEA): EtOH =50:50；1.0ml/min；梯度：在5 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2, RT = 1.017 min，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.64 (dd,J = 13.3, 3.9 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.48-2.36 (m, 3H), 2.31-2.20 (m, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 111 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 410a 及化合物 410b )
Figure 02_image981
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image983
在氮氣下，於0℃下向4-羥基-1-甲基-吡咯啶-2-酮(200 mg, 1.74 mmol)、7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(386 mg, 0.87 mmol)及DIEA (903 mg, 6.95 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中緩慢添加二氯甲烷(5 mL)中之三光氣(155 mg, 0.52 mmol)。將反應於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應。將所得溶液用二氯甲烷稀釋且用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-70/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(307 mg, 0.5239 mmol, 30.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 586。  步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image985
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(307 mg, 0.52 mmol)、NH2 Boc (3.7 g, 31.62 mmol)、Brettphos (112 mg, 0.21 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (108 mg, 0.10 mmol)及Cs2 CO3 (340 mg, 1.05 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)中之混合物於90℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(9/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.39 mmol, 74.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 667。 步驟3：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image987
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol)於TFA (3 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內10% B至30% B；254/220 nm；Rt：9.58 min)及對掌性HPLC純化粗產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 410a ) (37.7 mg, 0.0808 mmol, 35.9%產率)。滯留時間：2.589 min (CHIRALPAK IC-3: 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA): MeOH=75:25；1.0ml/min；梯度：在5min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, 1.659 min.，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.28 (dd,J = 7.1, 5.5 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.42 (dd,J = 11.5, 1.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.75 (m, 2H), 2.76 (s, 4H), 2.30 (d,J = 17.3 Hz, 1H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 410b ) (41.6 mg, 0.0892 mmol, 39.6%產率)。滯留時間：3.581 min (CHIRALPAK IC-3: 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH=75:25；1.0ml/min；梯度：在5min內50 B至50 B), LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, 1.659 min.，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.28 (dd,J = 7.1, 5.5 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.42 (dd,J = 11.5, 1.5 Hz, 1H), 2.84 - 2.75 (m, 2H), 2.76 (s, 4H), 2.30 (d,J = 17.3 Hz, 1H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 112 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯(化合物 411a 及化合物 411b )
Figure 02_image989
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image991
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1200 mg, 2.7 mmol)、1-Boc-3-羥基吡咯啶(660 mg, 3.52 mmol)及DIEA (2000 mg, 15.5 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加(COCl2 )3 (312 mg, 1.05 mmol)。將反應於室溫下攪拌1小時。將反應混合物用水淬滅且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(100/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1600 mg, 2.1881 mmol, 81.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 659.0。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image993
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[(1-甲基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1600 mg, 2.8 mmol)、NH2 Boc (1.40 g, 119.66 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (250 mg, 0.24 mmol)、Brettphos (240 mg, 0.50 mmol)及Cs2 CO3 (2400 mg, 7.36 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1300 mg, 1.793 mmol, 64.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 739.0。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image995
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg, 0.51 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(20 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸吡咯啶-3-基酯(200 mg, 0.4105 mmol, 79.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.0。 步驟4：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image997
將甲醛(20 mg, 0.67 mmol)及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸吡咯啶-3-基酯(300 mg, 0.68 mmol)於甲醇(30 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (127 mg, 2.05 mmol)且將反應物於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮反應混合物。藉由反相層析(乙腈0-70/水中之0.1% NH4 HCO3 )及對掌性HPLC純化殘餘物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 411a ) (25 mg, 0.0553 mmol, 8.1%產率)：滯留時間：7.952 (CHIRALPAK  IG, 2*25cm, 5 µm；移動相A：HEX:DCM=3:1，移動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：在15 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 0.931 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.06 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.14 (dd,J = 8.0, 4.3 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.37(s, 2H),  2.71 (dt,J = 7.6, 3.9 Hz, 1H), 2.65 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 2.32-2.17 (m, 5H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.85-1.73 (m, 1H)。
鏡像異構物2 (化合物 411b ) (22 mg, 0.0485 mmol, 7.1%產率)。滯留時間：12.08 (CHIRALPAK IG, 2*25cm, 5 µm；移動相A：HEX:DCM=3:1，移動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：在15 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 0.931 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.06 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.14 (dd,J = 8.0, 4.3 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.37(s, 2H),  2.71 (dt,J = 7.6, 3.9 Hz, 1H), 2.65 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 2.32-2.17 (m, 5H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.85-1.73 (m, 1H)。實例 113 (8-胺基-7-氟-6-(8-羥基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯(化合物 413 )
Figure 02_image999
步驟1：N -(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N -丁-3-烯基-胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1001
將N -(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(58 g, 140.42 mmol)於四氫呋喃(500 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加4-溴-1-丁烯(50 g, 370.37 mmol)及NaI (55 g, 366.67 mmol)且於95℃下攪拌16小時。接著藉由添加水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N -丁-3-烯基-胺基甲酸第三丁酯(30 g, 64.22 mmol, 45.7%產率)且回收8 g起始材料。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467。 步驟2：7-溴-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1003
將N -(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N-丁-3-烯基-胺基甲酸第三丁酯(30 g, 64.22 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (2.4 g, 3.28 mmol)及TEA (13.1 g, 128.43 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(1500 mL)中之溶液於110℃下在氮氣下攪拌1小時。將所得溶液用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色7-溴-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(13 g, 38.32 mmol, 59.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 339。 步驟3：7-溴-8-甲基-4-側氧基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1005
將7-溴-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(13 g, 38.32 mmol)、RuCl3 (2.4 g, 11.59 mmol)及NaIO4 (20.5 g, 95.79 mmol)於乙腈(350 mL)、四氯化碳(350 mL)及水(350 mL)中之溶液於25℃下攪拌1.5小時。接著藉由添加300 mL硫代硫酸鈉溶液淬滅反應。用碳酸氫鈉將所得溶液調節至pH 6-7且用乙酸乙酯萃取。在真空下濃縮有機相。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-8-甲基-4-側氧基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(7 g, 20.52 mmol, 53.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 341。 步驟4：7-溴-4-羥基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1007
將7-溴-8-甲基-4-側氧基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.47 mmol)及NaBH4 (150 mg, 4.05 mmol)於乙醇(30 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。將反應混合物用水稀釋。將所得混合物用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，以得到黃色固體狀7-溴-4-羥基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 1.049 mmol, 71.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 343。 步驟5：7-溴-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1009
在氮氣下，於25℃下向7-溴-4-羥基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(330 mg, 0.96 mmol)及咪唑(200 mg, 2.94 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TBDMSCl (293 mg, 1.95 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌2 h。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀7-溴-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.874 mmol, 90.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 457。 步驟6：4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1011
在氮氣下，於室溫下向7-溴-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.87 mmol)及雙(頻哪醇)二硼(440 mg, 1.73 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加Pd(dppf)Cl2 (130 mg, 0.18 mmol)及KOAc (260 mg, 2.65 mmol)。將所得溶液於100℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化所得殘餘物，以得到無色油狀4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.634 mmol, 72.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 505。 步驟7：7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1013
在氮氣下，於室溫下向4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.79 mmol)及8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(400 mg, 1.24 mmol)於1,4-二噁烷(12 mL)及水(1.2 mL)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2 (120 mg, 0.16 mmol)及K2 CO3 (330 mg, 2.39 mmol)。將所得混合物於60℃下攪拌2 h。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.523 mmol, 66%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 573。 步驟8：4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1015
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.38 mmol)及氯甲酸四氫-2H-哌喃-4-基酯(350 mg, 2.13 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加DIEA (268 mg, 2.08 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌2 h。將反應物用二氯甲烷稀釋且接著用水洗滌。乾燥有機相且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色固體狀4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.214 mmol, 55.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 701。 步驟9：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1017
在氮氣下，於室溫下向4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.21 mmol)及NH2 -Boc (1.5 g, 12.82 mmol)於1,4-二噁烷(8 mL)中之溶液中添加Pd(dba)3 CHCl3 (45 mg, 0.04 mmol)、Brettphos (45 mg, 0.08 mmol)及Cs2 CO3 (225 mg, 0.69 mmol)。將所得混合物於90℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.179 mmol, 83.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 782。 步驟10：N -[8-胺基-6-[8-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image1019
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.18 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(1 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。用TEA將殘餘物調節至pH 8。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% HCl)純化所得混合物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-6-[8-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(60 mg, 0.103 mol, 57.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 58 步驟11：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-羥基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯
Figure 02_image1021
於25℃下向N -[8-胺基-6-[8-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(60 mg, 0.10 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加四丁基氟化銨(120 mg, 0.46 mmol) 。將所得溶液於25℃下攪拌2 h。濃縮所得混合物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% TFA)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-羥基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(9 mg, 0.019 mmol, 18.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, 1.275 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.87 (dq,J = 8.7, 4.4 Hz, 1H), 4.61 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 3.90-3.81 (m, 2H), 3.53-3.42 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 6H), 1.81 (s, 1H), 1.61 (dtd,J = 12.9, 9.1, 4.0 Hz, 2H)。實例 114 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己基酯及(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己基酯(化合物 414a 及化合物 414b )
Figure 02_image1023
步驟1：(±)-N -((1R,2R)-2-羥基環己基)乙醯胺
Figure 02_image1025
將(±)-(1s ,2s )-2-胺基環己醇(1.0 g, 8.68 mmol)及MeONa (474.0 mg, 8.62 mmol)於甲醇(50 mL)中之溶液於室溫下攪拌15分鐘。接著添加乙酸酐(1.0 g, 9.8 mmol)且於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(9/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到白色固體狀(±)-N-[(反式)-2-羥基環己基]乙醯胺(1 g, 6.361 mmol, 73.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 157.2。 步驟2：(±)-7-(3-(((((1R ,2R )-2-乙醯胺基環己基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1027
於0℃下攪拌N -[(反式)-2-羥基環己基]乙醯胺(133 mg, 0.85 mmol)、7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.56 mmol)及DIEA (363 mg, 2.81 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液。接著添加三光氣(75.0 mg, 0.25 mmol)且將反應物於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(9:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-7-[3-[[(反式)-2-乙醯胺基環己氧基]羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(310 mg, 0.494 mmol, 87.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 628.1。 步驟3：(±)-7-(3-(((((反式)-2-乙醯胺基環己基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1029
將(±)-7-[3-[[(反式)-2-乙醯胺基環己氧基]羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.48 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(2800 mg, 23.9 mmol)、Pd(dba)3 .CHCl3 (99 mg, 0.10 mmol)、Brettphos (103 mg, 0.19 mmol)及Cs2 CO3 (467 mg, 1.43 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物於90℃下在氮氣下攪拌5小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(97:3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-7-[3-[[(反式)-2-乙醯胺基環己氧基]羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.3104 mmol, 65%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 708.8。 步驟4：(1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己酯及 (1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯胺基環己酯
Figure 02_image1031
將(±)- 7-[3-[[(反式)-2-乙醯胺基環己氧基]羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.28 mmol)及TFA (1.0 mL, 0.28 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液於室溫下攪拌1.5小時。將反應物用二氯甲烷稀釋，接著用三乙胺調節至pH 6-7。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱, 30*150mm, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內ACN= 20% - 45%；60 mL/min)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學
鏡像異構物1 (化合物 414a ) (29.6 mg, 0.0582 mmol, 20.6%產率)：滯留時間：1.225 min.( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm；MTBE(0.2%IPAmine)：在5 min內EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.2, RT = 2.029 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.90 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.86 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.61-4.44 (m, 1H), 4.27-4.26 (m, 2H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.34-3.33 (m, 2H), 2.05-2.04 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.91-1.90 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.74-1.61 (m, 2H), 1.45-1.28 (m, 4H)。
鏡像異構物2 (化合物 414b ) (28.3 mg, 0.0556 mmol, 19.7%產率)：滯留時間：2.338 min.( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm；MTBE(0.2%IPAmine)：在5 min內EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.2, RT = 2.029 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.90 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.86 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.61-4.44 (m, 1H), 4.27-4.26 (m, 2H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.34-3.33 (m, 2H), 2.05-2.04 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.91-1.90 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.74-1.61 (m, 2H), 1.45-1.28 (m, 4H)。實例 115 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己酯及(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己酯(化合物 415a 及化合物 415b )
Figure 02_image1033
步驟1：反式-(2-羥基環己基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1035
向反式-2-(甲基胺基)環己醇(200 mg, 1.55 mmol)於1,4-二噁烷中之溶液中添加氫氧化鈉(80.0 mg, 1.86 mmol)於水(30 ml)及Boc2 O (503.0 mg, 2.31 mmol)中之溶液。將混合物於室溫下攪拌16小時。用1N HCl將反應溶液調節至pH 6-7。將所得混合物用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥且在真空下濃縮，以得到白色固體狀反式-(2-羥基環己基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(310 mg, 1.3518 mmol, 87.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 229.3。 步驟2：反式 - 7-(3-((((2-((第三丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1037
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.560 mmol)、反式-(2-羥基環己基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(194.0 mg, 0.850 mmol)及DIEA (362.0 mg, 2.81 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(75.0 mg, 0.250 mmol)。將反應物於室溫下攪拌2小時且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀反式-7-(3-((((2-((第三丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(330 mg, 0.4713 mmol, 83.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 700.2。 步驟3：反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((2-(甲基胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1039
將反式 - 7-(3-((((2-((第三丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320.0 mg, 0.460 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(2698.0 mg, 23.03 mmol)、Pd(dba)3 .CHCl3 (94.0 mg, 0.090 mmol)、Brettphos (98.0 mg, 0.180 mmol)及Cs2 CO3 (447.0 mg, 1.37 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物於90℃下攪拌5小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:2)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀反式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((2-(甲基胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.3202 mmol, 70.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 780.9。 步驟4：(1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己酯及(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(甲基胺基)環己酯
Figure 02_image1041
將反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((2-(甲基胺基)環己基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230.0 mg, 0.290 mmol)及TFA (1.0 mL, 0.290 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液於室溫下攪拌1.5小時。將反應物用二氯甲烷稀釋，接著用三乙胺調節至pH 6-7。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內ACN= 31% - 44%；60 mL/min)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學
鏡像異構物1 (化合物 415a) (22.9 mg, 0.0477 mmol, 16.2%產率)：滯留時間：1.553 min( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1) (0.1%DEA)：在7 min內EtOH= 50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3, Rt = 1.030 min. 方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.92 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.30 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.46-4.40 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.34-3.33 (m, 3H), 2.49-2.42 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.06-1.90 (m, 5H), 1.65-1.63 (m, 2H), 1.39-1.33 (m, 4H)。
鏡像異構物2 (化合物 415b) (24.6 mg, 0.0512 mmol, 17.4%產率)：滯留時間：3.752 min.( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1) (0.1%DEA)：在17 min內EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3, Rt = 1.030 min. 方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.92 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.30 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.46-4.40 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.34-3.33 (m, 3H), 2.49-2.42 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.06-1.90 (m, 5H), 1.65-1.63 (m, 2H), 1.39-1.33 (m, 4H)。實例 116 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基六氫吡啶-3-基酯(化合物 416a 及化合物 416b )
Figure 02_image1043
於室溫下向N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸3-六氫吡啶基酯(100 mg, 0.22 mmol) (來自實例106)於甲醇(10 mL)中之溶液中添加甲醛(20 mg, 0.27 mmol, 40%)。將所得溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加NaBH4 (20 mg, 0.53 mmol)且於25℃下攪拌1小時。藉由添加水淬滅反應，在真空下濃縮且藉由製備型HPLC (管柱：Kinetex EVO C18管柱21.2*150, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內15% B至41% B；254 nm；Rt：9.75 min)及對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 µm；移動相A：Hex:DCM=3:1(10mM NH3 -MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流速：20 mL/min；梯度：在21 min內50% B至50% B)純化，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 416a ) (22.6 mg,0.0484mmol, 21.9%產率)：滯留時間：2.690 min (CHIRALPAK IE-3,0.46*5cm；3 µm, (Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=在5min內50:50；1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 467.3, RT = 1.514 min.，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.72 (dt,J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.33 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.78 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 2.48 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.13-2.01 (d,J = 10.3 Hz, 2H), 1.92-1.87 (s, 4H), 1.75-1.71 (m, 1H), 1.55-1.34 (m, 2H)。
鏡像異構物2 (化合物 416b ) (19.8mg,0.0424 mmol, 19.2%產率)：滯留時間：3.558 min (CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm, 3 µm；(Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH =在5 min內50:50；1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 467.3, RT = 1.514 min.，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.72 (dt,J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.33 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.78 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 2.48 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.13-2.01 (d,J = 10.3 Hz, 2H), 1.92-1.87 (s, 4H), 1.75-1.71 (m, 1H), 1.55-1.34 (m, 2H)。實例 117 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 417 )
Figure 02_image1045
步驟1：7-(3-((((2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1047
在氮氣下，將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.45 mmol)、6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(195 mg, 0.91 mmol)及DIEA (285 mg, 2.21 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液於0℃下攪拌10 min。接著添加三光氣(95 mg, 0.32 mmol)且於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(60/30)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.278 mmol, 61.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 684。 步驟2：7-(3-((((2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1049
將7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.44 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (90 mg, 0.090 mmol)、Brettphos (93 mg, 0.17 mmol)、Cs2 CO3 (420 mg, 1.29 mmol)及NH2 Boc (1250 mg, 10.68 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.248 mmol, 89.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 765。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1051
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.25 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (5 mL, 0.25 mmol)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮有機層且藉由具有CH3 CN/H2 O (10/2)之反相HPLC純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(90 mg, 0.194 mmol, 78%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 465。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1053
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(20 mg, 0.040 mmol)及甲醛(3 mg, 0.10 mmol, 40%)於甲醇(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加NaCNBH3 (8 mg, 0.13 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物且藉由具有ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 ) (45/15)之反向HPLC純化，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)酯(4.6 mg, 0.0096 mmol, 22.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 479.2, RT = 1.584 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.87-6.80 (d,J = 6 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.89-4.81 (m, 1H), 4.29-4.27 (m, 2H), 3.19-3.07 (d,J = 15 Hz, 4H), 2.20-2.14 (m,5H), 1.96-1.89 (m, 3H), 1.24 (s, 4H)。實例 118 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-異丙基氮雜環丁-3-基)酯(化合物 419 )
Figure 02_image1055
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1057
在氮氣下，於室溫下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.5 g, 3.37 mmol)及1-boc-3-羥基氮雜環丁烷(3.0 g, 17.32 mmol)於二氯甲烷(250 mL)中之溶液中添加DIEA (3.5 g, 27.13 mmol)。接著添加三光氣(1.4 g, 4.72 mmol)且將反應物於0℃下攪拌1小時。將反應混合物用水洗滌。乾燥有機相，且在真空下濃縮且藉由用PE/EA (1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.1 g, 1.71 mmol, 50.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 644。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1059
在氮氣下，於室溫下向7-[3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(700 mg, 1.09 mmol)及NH2 -Boc (800 mg, 6.84 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之混合物中添加Pd(dba)3 CHCl3 (250 mg, 0.24 mmol)、Brettphos (250 mg, 0.47 mmol)及Cs2 CO3 (1.1 g, 3.37mmol)。將所得混合物於90℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/4)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.69 mmol, 63.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 725。 步驟3：N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image1061
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.2 g, 1.66 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌2 h。將反應混合物用TEA調節至pH 8。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(250 mg, 0.353 mmol, 21.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 425。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image1063
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(100 mg, 0.24 mmol)、Pd/C (5.0 mg, 0.24 mmol)及丙酮(10 mL)於甲醇(20 mL)中之混合物於室溫下在氫氣氛(1 atm)下攪拌3小時，接著過濾混合物且濃縮。藉由具有以下條件之製備型HPLC純化殘餘物：管柱：Sunfire prep C18管柱30*150, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5% B至18% B；254/220 nm；Rt：5.92/6.67 min，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-異丙基氮雜環丁-3-基)酯(33.6 mg, 0.072 mmol, 30.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =467.2, RT = 1.685 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.39 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.69 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 5.10-5.02 (m, 1H), 4.60-4.25 (m, 3H), 4.09 (d,J = 8.9 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 2.96 (s, 2H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.02 (d,J = 6.2 Hz, 6H)。實例 119 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2,2-三氟乙基)氮雜環丁-3-基酯(化合物 420 )
Figure 02_image1065
於室溫下向N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(40 mg, 0.09 mmol)及三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(28 mg, 0.12 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加DIEA (25 mg, 0.19mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌3 h。藉由添加水淬滅反應且接著藉由製備型HPLC (管柱：Sunfire prep C18管柱30*150, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內13% B至40% B；254/220 nm；Rt：6.90 min)直接純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[1-(2,2,2-三氟乙基)氮雜環丁-3-基]酯(8.1 mg, 0.016 mmol, 17%產率)。LCMS (ESI) [M+H] + = 507.2, RT = 1.842 min，方法J。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.26 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.96 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.18 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 4.50 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.96-3.88 (m, 2H), 3.55 (s, 4H), 3.26 (t,J = 9.6 Hz, 2H), 2.07 (d,J = 1.7 Hz, 3H)。實例 120 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(化合物 421 )
Figure 02_image1067
步驟1：7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1069
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.0 g, 2.25 mmol)、DIEA (1449.0 mg, 11.23 mmol)及1-boc-4-羥基六氫吡啶(903.0 mg, 4.49 mmol)於二氯甲烷(100 mL)中之溶液中添加三光氣(440.0 mg, 1.48 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由水淬滅混合物且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(50/50)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1195mg,1.7779mmol, 79.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 672。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1-(第三丁氧基羰基)六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1071
將7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 0.74 mmol)、NH2 Boc (1740.0 mg, 14.87 mmol)、Brettphos (159.0 mg, 0.30 mmol)、Pd2 (dba)3 (153.0 mg, 0.15 mmol)及Cs2 CO3 (727.0 mg, 2.23 mmol)於1,4-二噁烷(8 mL)中之混合物於90℃下在N2 下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(80/20)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-5,6-二氫異喹啉-6-基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(419 mg,0.55 mmol, 74 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 753。 步驟3. (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image1073
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.53 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。用Et3 N將殘餘物調節至pH 8且藉由用水(10 mmol/LNH4 HCO3 )/ACN (70/30)溶析之反相層析純化，以得到褐色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸4-六氫吡啶基酯(89 mg,0.19 mmol, 37%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image1075
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸4-六氫吡啶基酯(50.0 mg, 0.11 mmol)、氧雜環丁-3-酮(80.0 mg, 1.11 mmol)及四異丙醇鈦(126.0 mg, 0.44 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液於60℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (21.0 mg, 0.33 mmol)。將反應物於25℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由具有以下條件之製備型HPLC純化粗產物：(管柱：YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 )：在9 min內ACN =30% B至40% B；60 mL/min)，以產生白色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[1-(氧雜環丁-3-基)-4-六氫吡啶基]酯(17.9 mg, 0.035 mmol, 32%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509, RT = 1.635 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.03 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.69-4.60 (m, 1H), 4.60-4.50 (m, 2H), 4.40-4.30 (m, 2H), 4.30-4.20 (m, 2H), 3.51-3.30 (m,3H), 2.52-2.40 (m,2H), 2.10-2.05 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 5H), 1.73-1.50 (m, 2H)。實例 121 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2,2-三氟乙基)六氫吡啶-4-基酯(化合物 422)
Figure 02_image1077
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸4-六氫吡啶基酯(50.0 mg, 0.11 mmol)、Et3 N (34.0 mg, 0.34 mmol)及三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(205.0 mg, 0.88 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液於25℃下在N2 下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物。藉由製備型HPLC (管柱：YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 )：在7 min內ACN = 50% B至64% B；60 mL/min)純化粗產物，以產生黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[1-(2,2,2-三氟乙基)-4-六氫吡啶基]酯(21.9 mg,0.041 mmol, 37 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 535, RT = 2.101 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.03 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.23 (s, 2H), 3.19 (q,J = 10.1 Hz, 2H), 2.89-2.84 (m, 2H), 2.55 (d,J = 10.4 Hz, 2H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 5H), 1.63 (d,J = 9.8 Hz, 2H)。實例 122 N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)酯(化合物 423 )
Figure 02_image1079
步驟1：7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1081
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(128 mg, 0.29 mmol)、2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸第三丁酯(204 mg, 0.85 mmol)及DIEA (192 mg, 1.48 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(128 mg, 0.43 mmol)於二氯甲烷(1 ml)中之溶液。將反應於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應溶液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/3)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(164 mg, 0.2309 mmol, 79.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 710。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1083
在氮氣下，將7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(164 mg, 0.23 mmol)、NH2 Boc (0.81 g, 6.92 mmol)、Pd(dba)3 CHCl3 (48 mg, 0.050 mmol)、Brettphos (49 mg, 0.090 mmol)及Cs2 CO3 (150 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/4)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.177 mmol, 76.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 791。 步驟3：N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1085
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.18 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及2,2,2-三氟乙酸(5 mL)中之溶液於30℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(80 mg, 0.1631 mmol, 92.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 491。 步驟4：N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)酯
Figure 02_image1087
將N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(80 mg, 0.16 mmol)及甲醛(35 mg, 0.47 mmol)於甲醇(4 mL)中之混合物於30℃下攪拌1小時。接著添加NaCNBH3 (30 mg, 0.48 mmol)。將反應物於30℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內18% B至39% B；Rt：6.67 min)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)酯(7.7 mg, 0.0153 mmol, 9.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 505.4, Rt = 1.987 min.，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.06 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.43 (t,J = 2.6 Hz, 1H), 4.97 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 3.33-3.30 (m, 3H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.32 - 2.22 (m, 4H), 2.11 (s, 4H), 1.95 - 1.89 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 5H), 1.55 (t,J = 5.4 Hz, 4H)。實例 123 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-乙醯基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 424 )
Figure 02_image1089
在氮氣下，於0℃下向N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(40.0 mg, 0.09 mmol)及Et3 N (26.0mg, 0.26 mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中添加乙醯基酐(13.0mg, 0.1300 mmol)。將混合物於25℃下攪拌2小時。藉由添加MeOH (2 mL)淬滅反應。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於3 ml DMF中。藉由反相急速層析(ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 ))純化粗產物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)酯(11.5 mg, 0.0227 mmol, 42.2%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 507.2, RT = 1.697 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.23 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.94 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.01 (t,J = 7.0 Hz, 1H), 4.41 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.26 (d,J = 14.8 Hz, 2H), 4.02 (d,J = 14.9 Hz, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.73 (ddd,J = 10.2, 6.9, 3.3 Hz, 2H), 2.44 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 2.03 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.87 (d,J = 3.2 Hz, 3H)。實例 124 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 425 )
Figure 02_image410
步驟1：7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1092
於0℃下向6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(289 mg, 1.36 mmol)、7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.45 mmol)及DIEA (294 mg, 2.26 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(202 mg, 0.68 mmol)。將反應於室溫下攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/9)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.2199 mmol, 48.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 682。  步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1094
將7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (46 mg, 0.040 mmol)、Brettphos (47 mg, 0.090 mmol)、NH2 Boc (1.3 g, 11.11 mmol)及Cs2 CO3 (143 mg, 0.44 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。將反應混合物冷卻至室溫，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/4)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(81 mg, 0.106 mmol, 48.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 763。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1096
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(81 mg, 0.106 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及TFA (5 mL)中之溶液於30℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(30 mg, 0.0649 mmol, 62.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 763。  步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image410
將N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(30 mg, 0.0649 mmol)及甲醛(9.7 mg, 0.1298 mmol, 40%)於甲醇(4 mL)中之溶液於30℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (28 mg, 0.44 mmol)。將混合物於30℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC(管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在9 min內50% B至57% B；254/220 nm；Rt：8.87 min)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-甲基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)酯(5.5 mg, 0.0115 mmol, 7.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.2, Rt = 1.670 min.，方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.43 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.83 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 5H), 2.56-2.46 (m, 2H), 2.20-2.10 (m, 5H), 1.92 (s, 2H), 1.86 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 125 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)酯(化合物 426 )
Figure 02_image1098
將7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(50 mg, 0.070 mmol)於二氯甲烷(4 mL)及2,2,2-三氟乙酸(1 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物。向殘餘物中添加二氯甲烷(5 mL)且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：YMC-Actus Triart C18 30*250, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至42% B；254/220 nm；Rt：6.18 min)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)酯(11.8 mg, 0.0249 mmol, 33.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, Rt = 1.751 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.38 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.19-5.15(m, 1H), 4.52-4.40 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.23-4.06 (m, 2H), 3.78 (d,J = 11.2 Hz, 1H), 3.34-3.33 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.77 (s, 3H)。實例 126 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(化合物 427 )
Figure 02_image1100
步驟1：7-(3-((((7-(第三丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1102
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.67 mmol)、2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸第三丁酯(325.5 mg, 1.35 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(435.75 mg, 3.37 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加三光氣(200.1 mg, 0.67 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應。將所得混合物用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.56 mmol, 83.2%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ = 712.4。 步驟2：7-(3-((((7-(第三丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1104
於室溫下向7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.42 mmol)及Pd2 (dba)3• CHCl3 (87.2 mg, 0.08 mmol)、BrettPhos (90.44 mg, 0.17 mmol)及Cs2 CO3 (411.73 mg, 1.26 mmol)於1,4-二噁烷(4 mL)中之混合物中添加碳酸第三丁酯(1.23 g, 10.53 mmol)且於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(99/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.315 mmol, 74.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 793.4 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1106
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(490.0 mg, 0.62 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(2 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。在減壓下濃縮所得溶液。藉由反相層析(乙腈0-90%/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(100 mg, 0.20 mmol, 32.9%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ = 493.4。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1108
向N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(40 mg, 0.08 mmol)於甲醇(3 mL)中之溶液中添加甲醛水溶液(40%, 12.24 mg)。將混合物於室溫下攪拌2小時。接著添加硼氫化鈉(6.2 mg, 0.16 mmol)且於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應。將所得混合物用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內14% B至30% B；254/220 nm；Rt：9.42 min)純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(7-甲基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)酯(16.2 mg, 0.032 mmol, 39.4%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 507.3, RT = 1.420 min.，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.70-5.62 (m, 1H), 4.96 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 4.27 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.34-2.13 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz,3H), 1.78 (dd,J = 12.2, 7.3 Hz, 2H), 1.54 (t,J = 5.4 Hz, 4H)。實例 127 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯(化合物 428 )
Figure 02_image416
步驟1：7-(3-((((6-(第三丁氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1110
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.67 mmol)、DIEA (436.0 mg, 3.38 mmol)及2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸第三丁酯(307.0 mg, 1.35 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(132.0 mg, 0.45 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由水淬滅混合物且用二氯甲烷萃取。在真空下濃縮有機層且藉由用EA/PE (70/30)溶析之矽膠上急速層析純化，以得到白色固體狀7-[3-[(6-第三丁氧基羰基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(430 mg, 0.62 mmol, 91 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 698。 步驟2：7-(3-((((6-(第三丁氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1112
將7-[3-[(6-第三丁氧基羰基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.57 mmol)、NH2 Boc (1343.0 mg, 11.48 mmol)、Pd2 (dba)3 (119.0 mg, 0.11 mmol)、Brettphos (123.0 mg, 0.23 mmol)及Cs2 CO3 (561.0 mg, 1.72 mmol)於1,4-二噁烷(6 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用EA/PE (78/22)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(6-第三丁氧基羰基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(396 mg, 0.51 mmol, 88 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 779。 步驟3. (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯
Figure 02_image1114
於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(6-第三丁氧基羰基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(396.0 mg, 0.51 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (2.5 mL)。將混合物於25℃下攪拌2小時且在真空下濃縮。將殘餘物用Et3 N調節至pH 8且藉由用水(10 mmol/L NH4 HCO3 )/ACN (65/35)溶析之反相層析來純化，以得到褐色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯(73 mg, 0.15 mmol, 30%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 479。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯
Figure 02_image1116
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸6-氮雜螺[3.4]辛-2-基酯(63.0 mg, 0.13 mmol)及甲醛(18.0 mg, 0.60 mmol, 40%)於甲醇(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (23.0 mg, 0.37 mmol)。將反應混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 ) / ACN)純化，以產生黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(6-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基)酯(25 mg, 0.051 mmol, 39 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 493.4, RT = 1.982 min.，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.06 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.92-4.80 (m, 1H), 4.30-4.20 (m, 2H), 3.40-3.30 (m, 2H), 2.49-2.27 (m, 6H), 2.19 (d,J = 9.4 Hz, 3H), 2.14-1.98 (m, 2H), 1.93-1.77 (m, 5H)。實例 128 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基氮雜環丁-3-基酯甲酸(化合物 429 )
Figure 02_image1118
步驟1：7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1120
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.45 mmol)、1-(3-羥基氮雜環丁-1-基)乙酮(80 mg, 0.69 mmol)及DIEA (180 mg, 1.40 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液於0℃下攪拌5 min。接著於0℃下向反應溶液中逐滴添加三光氣(60 mg, 0.20 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。將反應物於室溫下攪拌1小時。將所得溶液用二氯甲烷萃取(200 mL)。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用甲醇/二氯甲烷(7%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.2397 mmol, 53.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 584.0。 步驟2：7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1122
將7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.34 mmol)、NH2 Boc (280 mg, 2.39 mmol)、Brettphos Pd G3 (80 mg, 0.09 mmol)及Cs2 CO3 (280 mg, 0.86 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用甲醇/二氯甲烷(13%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.1625 mmol, 47.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 665.0。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基氮雜環丁-3-基酯甲酸
Figure 02_image1124
將7-[3-[(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.16 mmol)及TFA (3 mL)於DCM (12 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 19*250mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內15% B至36% B；254 nm)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-乙醯基氮雜環丁-3-基)酯甲酸(14 mg, 0.0274 mmol, 16.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 465.2, Rt =1.805 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 10.44 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 5.95 (s, 1H), 5.33-5.12 (m, 1H), 4.48 (dd,J = 9.8, 6.7 Hz, 1H), 4.27-4.04 (m, 2H), 3.81 (dd,J = 10.8, 4.1 Hz, 1H), 2.94 (t,J = 6.3 Hz, 2H), 2.55 (s, 2H), 1.95 (d,J = 1.5 Hz, 5H), 1.80 (s, 3H)。實例 129 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(化合物 430 )
Figure 02_image420
步驟1：7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1127
於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(128 mg, 0.29 mmol)、2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸第三丁酯(204 mg, 0.85 mmol)及DIEA (192 mg, 1.48 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(128 mg, 0.43 mmol)於二氯甲烷(1 ml)中之溶液。將所得溶液於室溫下攪拌16小時。在真空下濃縮反應溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/3)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(164 mg, 0.231 mmol, 79.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 710。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1129
將7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(164 mg, 0.23 mmol)、NH2 Boc (0.81 g, 6.92 mmol)、Pd(dba)3 CHCl3 (48 mg, 0.050 mmol)、Brettphos (49 mg, 0.090 mmol)及Cs2 CO3 (150 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/4)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.177 mmol, 76.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 791。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1131
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.18 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及2,2,2-三氟乙酸(5 mL)中之溶液於30℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(50 mg, 0.1018 mmol, 58.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 491。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1133
將N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(30 mg, 0.060 mmol)、3-丙醇酸丙酯(44 mg, 0.61 mmol)及四異丙醇鈦(69 mg, 0.24 mmol)於甲醇(3 mL)中之溶液於60℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (12 mg, 0.19 mmol)且於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC純化，以得到黃色固體狀(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(4.9 mg, 0.009 mmol, 14.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 547.3, RT = 2.106 min.，方法M。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.02 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.04 (t,J = 4.0 Hz, 1H), 4.67 (t,J = 3.9 Hz, 4H), 3.45 (t,J = 4.0 Hz, 3H), 2.98 (dd,J = 14.2, 3.9 Hz, 2H), 2.45-2.23 (m, 6H), 2.10-1.87 (m, 7H), 1.67-1.65 (m, 4H)。實例 130 (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯(化合物 432a )
Figure 02_image1135
步驟1：7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1137
在氮氣下，將6-羥基-3-氮雜二環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(223.0 mg, 1.12 mmol)、7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.45 mmol)及DIEA (322 mg, 2.5 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於0℃下攪拌30 min。接著添加三光氣(103.0 mg, 0.35 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(5/1)溶析之矽膠上急速層析純化，以得到黃色固體狀7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.328 mmol, 73%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 670。 步驟2：7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1139
在氮氣下，將7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(90.0 mg, 0.13 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (27.0 mg, 0.030 mmol)、Brettphos (29.0 mg, 0.05 mmol)、Cs2 CO3 (135.0 mg, 0.41 mmol)及NH2 Boc (405.0 mg, 3.46 mmol)於1,4-二噁烷(9 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。過濾後，收集溶液且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(32/68)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg,0.1066 mmol, 79.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 751。 步驟3：(1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
Figure 02_image1141
將7-(3-(((((1R ,5S ,6s )-3-(第三丁氧基羰基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(95 mg, 0.13 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1.0 mL, 0.13 mmol)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由具有MeOH/水(65/30)之反相層析純化，以得到黃色固體狀(1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯(45 mg, 0.0999 mmol, 79%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 451。 步驟4：(1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯
Figure 02_image1143
將甲醛(4.5 mg, 0.15 mmol, 40%)及(1R,5S,6s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯(20.0 mg, 0.040 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於0℃下攪拌30 min。接著添加NaCNBH3 (14.0 mg, 0.050 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(25/75)溶析之矽膠上急速層析將殘餘物純化為黃色固體狀(1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯(10 mg, 0.0215 mmol, 35%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 465.2, RT 0.967 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87-6.82 (d,J = 6 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.11 (s, 1H), 3.34(s, 1H), 3.10-3.01 (d,J = 9 Hz, 2H), 2.43-2.34 (s,J = 9 Hz, 1H ), 2.25 (s, 4H), 1.96-1.89 (d,J = 3 Hz, 3H), 1.74 (s, 2H)。實例 131 N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-4-六氫吡啶基]酯(化合物 433 )
Figure 02_image1145
步驟1：7-[3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1147
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 1.35 mmol)、(3S ,4R )-3-氟-4-羥基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(591.5 mg, 2.7 mmol)及DIEA (871.5 mg, 6.74 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(280.2 mg, 0.94 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(800 mg,1.16 mmol, 86%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 690.2。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯.
Figure 02_image1149
在氮氣下，將7-[3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600.0 mg, 0.86 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(509.2 mg, 4.34 mmol)、BrettPhos Pd G3 (157.6 mg, 0.18 mmol)及Cs2 CO3 (567.0 mg, 1.74 mmol)之混合物於90℃下攪拌4小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(410 mg, 0.53 mmol, 62.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771.3。 步驟3：N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-4-六氫吡啶基]酯
Figure 02_image1151
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.52 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(10 mL)。接著將所得溶液於室溫下攪拌0.5小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物用二氯甲烷稀釋，用TEA調節至pH 8且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈1-60%、水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-4-六氫吡啶基]酯(120 mg, 0.256 mmol, 49.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471.2。 步驟4：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-1-甲基-4-六氫吡啶基]酯
Figure 02_image1153
將N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-4-六氫吡啶基]酯(90.0 mg, 0.19 mmol)及甲醛(11.5 mg, 0.38 mmol, 40%)於甲醇(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。接著向混合物中添加NaBH3 CN (48.1 mg, 0.77 mmol)且於室溫下攪拌1小時。用水淬滅反應。將所得混合物用二氯甲烷萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep C18 OBD管柱19×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內32% B至45% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-3-氟-1-甲基-4-六氫吡啶基]酯(9.2 mg, 0.02 mmol, 9.8%產率)。任意地分配絕對立體化學。LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.2, RT = 1.656 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.72-2.89 (m, 2H), 2.38 (s, 1H), 2.20 (s, 4H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.80 (s, 1H)。實例 132 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)氮雜環丁-3-基酯(化合物 434 )
Figure 02_image1155
於室溫下向N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(50 mg, 0.12 mmol)及三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(20 mg, 0.09 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TEA (30 mg, 0.30 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h。藉由添加水淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD 管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內5% B至22% B)純化殘餘物，以產生白色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[1-(2,2-二氟乙基)氮雜環丁-3-基]酯(13.1 mg, 0.0268 mmol, 22.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H] + = 489.2, RT = 1.608 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 6.15-5.80 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.00 (q,J = 5.6 Hz, 1H), 4.29-4.27 (m, 2H), 3.76-3.65 (m, 2H), 3.35-3.33 (m, 2H), 3.22 (dd,J = 8.4, 5.5 Hz, 2H), 2.87 (td,J = 16.1, 4.1 Hz, 2H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 133 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H- 吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1,3,3-三甲基-4-六氫吡啶基)酯(化合物 435 )
Figure 02_image1157
步驟1：7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1159
在氮氣下，向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.67 mmol)、4-羥基-3,3-二甲基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 1.31 mmol)及DIEA (435.0 mg, 3.37 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加三光氣(141.0 mg, 0.48 mmol)且於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(40/60)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到淺黃色固體狀7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(315 mg, 0.45 mmol, 66.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =700.3。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1161
在氮氣下，將7-[3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.43 mmol)、NH2 Boc (1254.0 mg, 10.72 mmol)、Pd2 (dba)3 (90.0 mg, 0.09 mmol)、BrettPhos (93.0 mg, 0.17 mmol)及Cs2 CO3 (420.0 mg, 1.29 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(37/63)溶析之急速層析矽膠管柱純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(60 mg,0.077 mmol, 17.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 781.4。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)酯
Figure 02_image1163
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(55.0 mg, 0.07 mmol)及TFA (1.0 mL, 0.07 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 ) (27/73)溶析之反相層析純化殘餘物，以產生淺黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)酯(33.5 mg, 0.069 mmol, 99%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =481.2。 步驟4：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1,3,3-三甲基-4-六氫吡啶基)酯
Figure 02_image1165
將N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3,3-二甲基-4-六氫吡啶基)酯(25.0 mg, 0.05 mmol)及甲醛(7.8 mg, 0.26 mmol, 40%)於甲醇(2 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (10.0 mg, 0.16 mmol)且於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由具有(管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10MMOL/L NH4 HCO3 )：在7 min內ACN= 20% B至43% B；60 mL/min)之Prep- HPLC純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1,3,3-三甲基-4-六氫吡啶基)酯(10.5 mg, 0.021 mmol, 40.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2, RT 1.696 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.45-4.36 (m,1H), 4.28-4.20 (m, 2H), 3.40-3.31 (m, 2H), 2.36-2.20 (m, 5H), 2.14 (s, 4H), 1.91-1.60 (m, 7H), 1.03 (s, 3H), 0.92 (s, 3H)。實例 134 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯及(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯(化合物 437a 及化合物 437b )
Figure 02_image1167
步驟1：7-[3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1147
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.12 mmol)、(±)-順式 - 3-氟-4-羥基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(492.9 mg, 2.25 mmol)及DIEA (726.3 mg, 5.62 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(233.5 mg, 0.79 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌2小時。由水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(2%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式 - 7-[3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(520 mg, 0.754 mmol, 67%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 690.2 步驟2：(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1149
在氮氣下，將(±)-順式 - 7-[3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.72 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(2546.26 mg, 21.74 mmol)、BrettPhos Pd G3 (131.4 mg, 0.14 mmol)及Cs2 CO3 (472.4 mg, 1.45 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(4%)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(480 mg, 0.4035 mmol, 55.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771.3 步驟3：(±)-順式 -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-氟-4-六氫吡啶基]酯
Figure 02_image1151
於0℃下向(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(480 mg, 0.622 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加TFA (4 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由用H2 O/ACN (44%)溶析之反相急速層析來純化，以得到黃色固體狀(±)-N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-氟-4-六氫吡啶基]酯(110 mg, 0.242 mmol, 40.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471.2。 步驟4：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯及 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image1169
於0℃下向(±)-順式 -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-氟-4-六氫吡啶基]酯(100 mg, 0.21 mmol)及TEA (64.6 mg, 0.64 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加Ac2 O (32.6 mg, 0.32 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌4小時。由水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm,5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內17% B至42% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由具有以下條件之對掌性HPLC分離外消旋產物：管柱：CHIRALPAK IG, 5*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE-HPLC，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在17 min內50 B至50 B。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 437a ) (8.7 mg, 0.0162 mmol, 7.6%產率)； RT 3.793 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*10 cm；3 µm. (MTBE(0.1%DEA):MeOH=50:50；1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 513.2, 1.603 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.94 (dd,J = 50.8, 21.4 Hz, 2H), 4.46-4.12 (m, 3H), 4.09-3.71 (m, 1H), 3.53 (dd,J = 32.6, 14.8 Hz, 1H), 3.26 (s, 2H), 3.21-2.84 (m, 1H), 2.03 (d,J = 11.5 Hz, 3H), 1.94-1.65 (m, 5H)。
鏡像異構物2 (化合物 437b ) (6.5 mg, 0.0125 mmol, 5.9%產率)； RT 3.793 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*10 cm；3 um. MTBE (0.1%DEA):MeOH=50:50；1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 513.2, 1.603 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.94 (dd,J = 50.8, 21.4 Hz, 2H), 4.46-4.12 (m, 3H), 4.09-3.71 (m, 1H), 3.53 (dd,J = 32.6, 14.8 Hz, 1H), 3.26 (s, 2H), 3.21-2.84 (m, 1H), 2.03 (d,J = 11.5 Hz, 3H), 1.94-1.65 (m, 5H)。實例 135 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(化合物 438 )
Figure 02_image1171
步驟1：7-(3-((((7-(第三丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1173
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.67 mmol)、2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸第三丁酯(325.5 mg, 1.35 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(435.8 mg, 3.37 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液於室溫下攪拌30 min。接著添加三光氣(200.1 mg, 0.67 mmol)且於0℃下攪拌。將反應物於室溫下攪拌1小時。接著將反應物用水淬滅且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.562 mmol, 83.2%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ = 712.4。 步驟2：7-(3-((((7-(第三丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1175
在氮氣下，向7-[3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.42 mmol)及Pd2 (dba)3• CHCl3 (87.2 mg, 0.08 mmol)於1,4-二噁烷(4 mL)中之混合物中添加BrettPhos (90.44 mg, 0.17 mmol)、Cs2 CO3 (411.73 mg, 1.26 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(1.23 g, 10.53 mmol)。將反應物於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(99/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.315 mmol, 74.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 793.4. 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1177
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(490.0 mg, 0.62 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將反應物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。藉由反相層析(乙腈0-40、水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(100 mg, 0.20 mmol, 32.9%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ = 493.4。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1179
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(45.0 mg, 0.09 mmol)、氧雜環丁-3-酮(65.83 mg, 0.91 mmol)及四異丙醇鈦(103.8 mg, 0.37 mmol)於甲醇(4 mL)中之溶液於60℃下攪拌1小時。將反應溶液冷卻至室溫。添加NaCNBH3 (17.22 mg, 0.27 mmol)且於室溫下攪拌1小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：MeOH；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內38% B至58% B)純化殘餘物，以產生淺黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[7-(氧雜環丁-3-基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基]酯(15.5 mg, 0.0283 mmol, 30.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 549.4, RT = 1.752 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.98 (t,J = 7.1 Hz, 1H), 4.51 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 4.41 (d,J = 5.9 Hz, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.34-2.20(m, 3H), 2.11(s, 3H), 1.92(d,J = 1.6 Hz,3H), 1.81 (s, 2H), 1.60-1.56 (m, 4H)。實例 136 N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4S )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R ,4R )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯(化合物 442a 及化合物 442b )
Figure 02_image1181
步驟1：(±)-順式 - 7-[3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1183
Figure 02_image1185
在氮氣下，向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.90 mmol)及(±)-順式-3-羥基-4-甲基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(361.0 mg, 1.79 mmol)及DIEA (580.0 mg, 4.5 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(186.0 mg, 0.63 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。接著在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(71/29)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀(±)-順式 - 7-[3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(580 mg, 0.86 mmol, 96%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 672.3。 步驟2：(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1187
Figure 02_image1189
在氮氣下，將(±)-順式 - 7-[3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(227.0 mg, 0.34 mmol)、NH2 Boc (988.0 mg, 8.44 mmol)、Pd2 (dba)3 CHCl3 (70.0 mg, 0.07 mmol)、BrettPhos (72.4 mg, 0.14 mmol)及Cs2 CO3 (330.0 mg, 1.01 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(254 mg,0.34 mmol, 99 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =753.4。 步驟3：(±)-順式 - N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[4-甲基吡咯啶-3-基]酯
Figure 02_image1191
Figure 02_image1193
將(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.33 mmol)及TFA (1 mL)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 )溶析之反相層析純化，以得到淺黃色固體狀(±)-順式 - N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[4-甲基吡咯啶-3-基]酯(80 mg, 0.18 mmol, 53 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =453.2。 步驟4：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4S )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R ,4R )-1,4-二甲基吡咯啶-3-基]酯
Figure 02_image1195
將(±)-順式 -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[4-甲基吡咯啶-3-基]酯(70.0 mg, 0.15 mmol)及甲醛(23.2 mg, 0.31 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。接著添加NaBH4 (11.7 mg, 0.31 mmol)且於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由具有(管柱XBridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 ): ACN = 在10 min內15% B至26% B；60 mL/min)之Prep- HPLC純化殘餘物，以產生產物之外消旋混合物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 442a ) (13.5 mg, 0.029 mmol, 18.7%產率)；RT 3.073 min (CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=50:50；1.0 ml/min)； LCMS(ESI): [M+H]+ =467.2, Rt=1.844 min；方法M。1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.25 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.95 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.34-5.25 (m, 1H), 4.52-4.94 (m, 2H), 3.52-3.48 (m, 2H), 3.22-3.19 (m, 1H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.64-2.34 (m, 5H), 2.03 (s, 3H), 1.12 (d,J = 6.7 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 442b ) (13.7 mg, 0.0294 mmol, 19%產率)；RT 3.911min  (CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1with 0.1%DEA):EtOH=50:50；1.0 ml/min)。LCMS(ESI): [M+H]+ =467.2, Rt=1.844 min；方法M。1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.25 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.95 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.34-5.25 (m, 1H), 4.52-4.94 (m, 2H), 3.52-3.48 (m, 2H), 3.22-3.19 (m, 1H), 2.96-2.85 (m, 1H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.64-2.34 (m, 5H), 2.03 (s, 3H), 1.12 (d,J = 6.7 Hz, 3H)。實例 137 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯(化合物 442c 及化合物 442d )
Figure 02_image1197
步驟1：(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1199
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)及反式-3-羥基-4-甲基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.79 mmol)於二氯甲烷(350 mL)中之溶液中添加DIEA (500 mg, 3.88 mmol)。接著添加三光氣(67 mg, 0.23 mmol)且於0℃下攪拌2小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.212 mmol, 55.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 753。 步驟2：(±)-N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(反式)-4-甲基吡咯啶-3-基]酯
Figure 02_image1201
於室溫下向(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-1-第三丁氧基羰基-4-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.21 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將反應於25℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應溶液且粗產物未經純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453。 步驟3：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1203
於25℃下向(±)-N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(反式)-4-甲基吡咯啶-3-基]酯(160 mg, 0.35 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中添加甲醛(80 mg, 1.07 mmol)。將反應於25℃下攪拌1 h。接著添加NaBH4 (40 mg, 1.05 mmol)且於25℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在12 min內19% B至22% B)純化殘餘物，以產生產物之外消旋混合物。藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IG, 2.0cm I.D*25cm L (5 µm)；移動相A：Hex:DCM=3:1(10mM NH3 -MeOH)，移動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：在28 min內50 B至50 B)分離外消旋物，以產生兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 442c ) (23.1 mg, 0.0495 mmol, 14%產率)； RT 2.590 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1，具有0.1%DEA): EtOH = 50:50；1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 467.3, RT 1.558min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (d,J = 3.1 Hz, 1H), 4.69 (dt,J = 6.0, 2.9 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.41-3.30 (m, 2H), 2.95 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.64 (dd,J = 10.9, 6.3 Hz, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.28-2.17 (m, 1H), 1.95-1.86 (m, 4H), 1.11 (d,J = 7.1 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 442d ) (23.8 mg, 0.0510 mmol, 14.4%產率)。RT 5.364 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. (Hex: DCM=3:1，具有0.1% DEA):EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 467.3, RT 1.885 min.，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (d,J = 3.1 Hz, 1H), 4.69 (dt,J = 6.0, 2.9 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.41-3.30 (m, 2H), 2.95 (t,J = 8.1 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.64 (dd,J = 10.9, 6.3 Hz, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.28-2.17 (m, 1H), 1.95-1.86 (m, 4H), 1.11 (d,J = 7.1 Hz, 3H)。實例 138 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(氧雜環丁-3-基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 443 )
Figure 02_image1204
步驟1：7-(3-((((2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1206
在氮氣下，將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.45 mmol)、6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(195.0 mg, 0.91 mmol)及DIEA (285.0 mg, 2.21 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液於0℃下攪拌10 min。接著添加三光氣(95 mg, 0.32 mmol)。將反應物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(60/40)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg,0.2777 mmol, 61.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 684。 步驟2：7-(3-((((2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1208
將7-[3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190.0 mg, 0.28 mmol)於二氯甲烷(2 mL)及Pd2 (dba)3 CHCl3 (1 mL, 0.060 mmol)中之混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(20/80)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.248 mmol, 89.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 765。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1210
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190.0 mg, 0.25 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由具有CH3 CN/H2 O (15/85)之反相層析來純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(90 mg, 0.194 mmol, 78%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 465。 步驟4：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(氧雜環丁-3-基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1212
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(46.0 mg, 0.10 mmol)、3-丙醇酸丙酯(71.0 mg, 0.99 mmol)及四異丙醇鈦(30.0 mg, 0.11 mmol)於甲醇(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加NaCNBH3 (18.0 mg, 0.29 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由反相急速層析(ACN/水(0.1% FA))純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[2-(氧雜環丁-3-基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基]酯(40 mg, 0.0768 mmol, 77.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =521.2, RT 0.887 min.，方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83-6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.92-4.80 (m, 1H), 4.55-4.46 (t,J = 6 Hz, 2H), 4.34-4.24 (m, 4H), 3.68-3.56 (m, 1H), 3.41-3.46 (m, 2H), 3.25-3.15 (d,J = 12 Hz, 4H), 2.61-2.52 (m, 2H), 2.25-2.13 (m, 2H), 1.82 (s, 3H)。實例 139 (R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 444a 及化合物 444b )
Figure 02_image1214
步驟1：5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺
Figure 02_image1216
向2-胺基-4-乙基吡啶(20 g, 163.71 mmol)及NH4 OAc (1.3 g, 16.88 mmol)於乙腈(500 mL)中之溶液中添加N -溴琥珀醯亞胺(30.6 g, 171.91 mmol)。將混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物且用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(98:2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(22 g, 109.42 mmol, 66.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 200.9。 步驟2：5-溴-4-乙基-3-硝基-吡啶-2-醇
Figure 02_image1218
將5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(17.5 g, 87.04 mmol)於H2 SO4 (200 mL, 87.04 mmol)中之溶液於25℃下攪拌15 min。於0℃下添加HNO3 (9.1 mL, 130.56 mmol)。接著將反應物於25℃下攪拌3 h。將反應混合物用冰/水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(98:2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀5-溴-4-乙基-3-硝基-吡啶-2-醇(10.2 g, 41.29 mmol, 47.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 247.1。 步驟3：3-胺基-5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇
Figure 02_image1220
將5-溴-4-乙基-3-硝基-吡啶-2-醇(10.2 g, 41.29 mmol)、鐵(18.5 g, 330.36 mmol)及NH4 Cl (17.8 g, 329.63 mmol)於乙醇(160 mL)及水(160 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。將反應物冷卻至室溫且接著過濾。在真空下濃縮濾液。將殘餘物用水洗滌，以得到褐色固體狀3-胺基-5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(8.1 g, 37.32 mmol, 90.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 217.1. 步驟4：7-溴-8-乙基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮
Figure 02_image1222
將3-胺基-5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(8.1 g, 37.32 mmol)及K2 CO3 (15.4 g, 111.59 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(120 mL)中之溶液於25℃下攪拌15 min。接著於0℃下添加氯乙醯氯(5.5 g, 48.7 mmol)。將反應物於25℃下攪拌1小時且於90℃下攪拌2小時。藉由過濾去除固體。在真空下濃縮濾液且藉由用二氯甲烷/甲醇(98:2)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到淺黃色固體狀7-溴-8-乙基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(5 g, 19.45 mmol, 52.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 257.2. 步驟5：7-溴-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪
Figure 02_image1224
在氮氣下，於0℃下向7-溴-8-乙基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(1.4 g, 5.45 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液中添加BH3 ·THF (16.5 mL, 16.34 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌1小時。用MeOH淬滅反應且用HCl (1N)調節至pH 2。將反應物於0℃下攪拌0.5小時。接著於0℃下將反應混合物用NH3 .H2 O調節至pH 8。將溶液用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(98:2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-溴-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(1.1 g, 4.525 mmol, 83.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 243.2。 步驟6：7-溴-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1226
在氮氣下，於0℃下向7-溴-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(1.3 g, 5.35 mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加NaHMDS (5.6 mL, 10.93 mmol, 2 mol/L，於THF中)。將所得溶液於0℃下攪拌1小時。接著於0℃下添加(Boc)2 O (1.8 g, 8.26 mmol)。將混合物於25℃下攪拌3小時。藉由MeOH淬滅反應且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀7-溴-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.6 g, 4.66 mmol, 87.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 343.1。 步驟7：8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1228
在氮氣下，將雙(頻哪醇)二硼(2.3 g, 9.06 mmol)、7-溴-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.5 g, 4.37 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (640.0 mg, 0.87 mmol)及KOAc (1.3 g, 13.16 mmol)於1,4-二噁烷(50 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。過濾反應混合物且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(2.6 g, 6.66 mmol)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 391.3。 步驟8：7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1230
在氮氣下，將8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(2.7 g, 6.92 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(1.1 g, 3.41 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (499.1 mg, 0.68 mmol)及K2 CO3 (1.4 g, 10.14 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)及水(2 mL)中之混合物於60℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(97:3)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1 g, 2.18 mmol, 63.9%產率)。LCMS85(ESI) [M+H]+ = 459.3。 步驟9：7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1232
在氮氣下，將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.2g, 2.61mmol)及鄰苯二甲酸酐(0.6 g, 4.05 mmol)於甲苯(20 mL)中之溶液於100℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(888 mg, 1.51 mmol, 57.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 589.3。 步驟10：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-乙基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1234
在氮氣下，將7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(800 mg, 1.36 mmol)、NH2 Boc (4767.3 mg, 40.74 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (281.2 mg, 0.28 mmol)、Brettphos (291.2 mg, 0.54 mmol)及Cs2 CO3 (1328.4 mg, 4.08 mmol)於1,4-二噁烷(52 mL)中之混合物於90℃下攪拌45分鐘。在真空下濃縮反應物以未經純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 670.4。 步驟11：7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1236
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(455.0 mg, 0.68 mmol)於甲醇(30 mL)中之溶液中添加N2 H4 .H2 O (340.2 mg, 6.80 mmol)。將所得溶液於40℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(94:6)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(162 mg, 0.30 mmol, 44.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 540.4。 步驟12：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1238
於0℃下向4-羥基-1-甲基-吡咯啶-2-酮(405.4 mg, 3.52 mmol)及7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg, 0.70 mmol)於二氯甲烷(16 mL)中之溶液中添加DIEA (910.2 mg, 7.04 mmol)及三光氣(313.5 mg, 1.06 mmol)。將反應物於25℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(96:4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230 mg, 0.34 mmol, 48%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 681.4。 步驟13：(R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及 (S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1240
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加TFA (2mL, 0.29 mmol)。將反應於25℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。將殘餘物用TEA調節至pH 8且藉由Prep HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內7% B至30% B；Rt：7.38 min)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC (CHIRALPAK IC, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在15 min內30 B至30 B)分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物(任意地分配絕對立體化學)。
鏡像異構物1 (化合物 444a ) (25.1 mg, 0.0522 mmol, 17.8%產率)。RT 3.593 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH = 80:20；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2, RT 1.972 min.，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.76 (s, 1H), 5.27 (td,J = 5.5, 2.7 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.78 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.41 (dd,J = 11.6, 1.6 Hz, 1H), 3.39-3.33 (m, 2H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.42-2.41 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 2H), 0.91 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。
鏡像異構物1 (化合物 444b ) (26.3 mg, 0.0547 mmol, 18.6%產率)。RT 5.240 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1%DEA):MeOH=80:20；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2, RT 1.926 min.，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.76 (s, 1H), 5.27 (td,J = 5.5, 2.7 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.78 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.41 (dd,J = 11.6, 1.6 Hz, 1H), 3.39-3.33 (m, 2H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.42-2.41 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 2H), 0.91 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。實例 140 (±)-順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(化合物 445cd )
Figure 02_image1242
於室溫下向(±)-順式 - N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-4-六氫吡啶基)酯(70.0 mg, 0.15 mmol) (來自實例137)及3-丙醇酸丙酯(107.2 mg, 1.49 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液中添加四異丙醇鈦(169.2 mg, 0.60 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌1小時，之後冷卻至室溫。添加NaBH3 CN (28 mg, 0.45 mmol)。接著將反應物於室溫下攪拌2小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液且藉由製備型HPLC(管柱：X Bridge Prep C18 OBD管柱19×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內40% B至65% B)純化，以產生黃色固體狀(±)-順式-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(14.2 mg, 0.026 mmol, 17.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 527.3, RT 1.907 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.79-4.96 (m, 2H), 4.59-4.50 (m, 2H), 4.43 (dt,J = 15.7, 6.1 Hz, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.58-3.47 (m, 1H), 3.31 (s, 2H), 2.79 (s, 1H), 2.20-2.47 (s, 2H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.85 (s, 2H), 1.23 (s, 1H)。實例 141 S -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]硫代胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(化合物 601 )
Figure 02_image726
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基硫基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1245
在氮氣下，將四氫哌喃-4-硫醇(17 mg, 0.14 mmol)、7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(60 mg, 0.11 mmol)及DIEA (44 mg, 0.3400mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液於0℃下攪拌5 min。添加(COCl2 )3 (13 mg, 0.04 mmol)。將反應物於室溫下攪拌2小時。將反應混合物用水淬滅且接著用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(70:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基硫基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(20 mg, 0.0284 mmol, 24.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 670.0。 步驟2：S -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]硫代胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯甲酸
Figure 02_image1247
將7-[8-胺基-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基硫基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(20 mg, 0.040 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(1 mL)及二氯甲烷(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內17% B至39% B；254 nm；Rt：6.3 min)純化，以產生黃色固體狀S -N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]硫代胺基甲酸四氫哌喃-4-基酯(5 mg, 0.0095 mmol, 27.1%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ =470.2, RT 2.061 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.90 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 4.36 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.61 (tt,J = 10.7, 4.1 Hz, 1H), 3.48 (dd,J = 11.1, 2.4 Hz, 2H), 3.40 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.14 (d,J = 1.8 Hz, 2H), 1.95 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.90 (d,J = 3.7 Hz, 2H), 1.63 (dtd,J = 14.3, 10.7, 4.2 Hz, 2H)。實例 142 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環丙基脲(化合物 702 )
Figure 02_image730
步驟1：7-(8-氯-3-(3-環丙基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1250
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.45 mmol)及異氰酸基環丙烷(523 mg, 6.29 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌3天。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(94/6)溶析之矽膠上急速層析純化，以得到褐色固體狀7-[8-氯-3-(環丙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(228 mg, 0.43 mmol, 96 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 528。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(3-環丙基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1252
將7-[8-氯-3-(環丙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.47 mmol)、NH2 Boc (1108 mg, 9.47 mmol)、Pd2 (dba)3 (98 mg, 0.09 mmol)、Brettphos (101.0 mg, 0.19 mmol)及Cs2 CO3 (463.0 mg, 1.42 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用甲醇/二氯甲烷(5/95)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環丙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(159 mg, 0.26 mmol, 55 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 609。 步驟3：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環丙基脲
Figure 02_image1254
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環丙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(75.0 mg, 0.12 mmol)及7-[3-(環丙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(75.0 mg, 0.15 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1 mL)之混合物中之混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物。將殘餘物用Et3 N調節至pH 8且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 ): ACN = 在7 min內17% B至37% B)純化，以產生黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-環丙基-脲(13.6 mg,0.033 mmol, 14%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 409. RT 1.577 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.26 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.72 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 3.40-3.31(m, 2H), 2.60-2.48 (m, 1H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 0.70-0.63 (m, 2H), 0.41-0.30 (m, 2H)。實例 143 1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-甲基-脲(化合物 705 )
Figure 02_image1256
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1258
於0℃下向氯甲酸苯酯(275.7 mg, 1.76 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(156 mg, 0.35 mmol)、DMAP (43 mg, 0.35 mmol)及吡啶(3 mL, 0.35 mmol)。接著將反應混合物於0℃下攪拌2小時。接著添加甲胺(4 mL, 8.10 mmol)且於60℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(93:7)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀7-[8-氯-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(135 mg, 0.27 mmol, 76.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 500.3。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1260
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(125 mg, 0.25 mmol)、NH2 Boc (731.3 mg, 6.25 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (51.8 mg, 0.05 mmol)、Brettphos (53.6 mg, 0.10mmol)及Cs2 CO3 (244.5 mg, 0.75 mmol)於1,4-二噁烷(6 mL)中之混合物於90℃下攪拌40分鐘。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(93:7)溶析之矽膠上急速層析純化，以得到黃色油狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(110 mg, 0.19 mmol, 75.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 581.2。 步驟3：1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-甲基-脲
Figure 02_image1262
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(甲基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.17 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(1 mL)。將混合物於25℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。將殘餘物用TEA調節至pH 9且藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內17% B至34% B；254/220 nm；Rt：9.68 min)純化，以產生黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-甲基-脲(23.3 mg, 0.06 mmol, 35.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 381.2, RT 1.648 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.02 (d,J = 4.7 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 3.33-3.28 (m, 2H), 2.85 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.71 (d,J = 4.6 Hz, 3H), 1.95-1.84 (m, 5H)。實例 144 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環戊基脲(化合物 706 )
Figure 02_image1264
步驟1：7-(8-氯-3-(3-環戊基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1266
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(214 mg, 0.48 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加二氯甲烷(1 mL)中之吡啶(190 mg, 2.41 mmol)及三光氣(214 mg, 0.72 mmol)。將反應物於0℃下攪拌30 min，接著添加環戊胺(408 mg, 4.79 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時。將所得混合物用二氯甲烷稀釋且接著用水洗滌。經硫酸鈉乾燥有機相，在真空下濃縮且藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/7)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-氯-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(254 mg, 0.457 mmol, 95.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 556。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(3-環戊基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1268
向7-[8-氯-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.47 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(1666 mg, 14.22 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加Pd2 (dba)3 .CHCl3 (100 mg, 0.10 mmol)、BrettPhos (100 mg, 0.19 mmol)、碳酸銫(464 mg, 1.42 mmol)。將混合物於90℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(60 mg, 0.0942 mmol, 20.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 637。 步驟3：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環戊基脲
Figure 02_image1270
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(60 mg, 0.09 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 ml)。將反應物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，將殘餘物用二氯甲烷(3 ml)稀釋且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮所得溶液。藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至51% B；254/220 nm；Rt：6.5 min)純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-環戊基-脲(14.4 mg, 0.033 mmol, 35%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 437.2, Rt = 1.973 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.28 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.13 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.99 (q,J = 6.6 Hz, 1H), 3.37 (s, 2H), 1.95-1.81 (m, 5H), 1.70-1.53 (m, 4H), 1.40 (dd,J = 12.3, 6.1 Hz, 2H)。實例 145 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(化合物 708 )
Figure 02_image1272
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1274
於0℃下向氯甲酸苯酯(358 mg, 2.29 mmol)於二氯甲烷(7 mL)中之溶液中添加DMAP (69 mg, 0.57 mmol)及7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)於吡啶(4 mL)。將反應於0℃下攪拌2小時。接著添加二氯甲烷(8 mL)中之6-胺基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(608 mg, 2.86 mmol)且於80℃下攪拌12小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.525 mmol, 91.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 764。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
Figure 02_image1276
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.65 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌3 h。在真空下濃縮反應溶液。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(130 mg, 0.28 mmol, 42.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 464。 步驟3：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
Figure 02_image1278
於室溫下向1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(220 mg, 0.47 mmol)及TEA (500 mg, 4.95 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(8 mL)中之溶液中添加三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(330 mg, 1.42 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌15 min。由水淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[2-(2,2,2-三氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基]脲(201 mg, 0.368 mmol, 77.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H] + =546.2, RT 2.67 min.，方法N。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.29 (s, 2H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.03 (q,J = 7.8 Hz, 1H), 3.37-3.29 (m, 4H), 3.13 (q,J = 10.1 Hz, 2H), 2.55-2.44 (m, 4H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.89 (s, 3H)。實例 146 (S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-3-基)脲及(R )-1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[四氫哌喃-3-基]脲(化合物 711a 及化合物 711b )
Figure 02_image1280
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1282
於0℃下向氯甲酸苯酯(527.89 mg, 3.37 mmol)於二氯甲烷(7 mL)中之溶液中添加7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.67 mmol)及DMAP (82.38 mg, 0.67 mmol)於吡啶(7 mL)中之溶液。接著將反應於60℃下攪拌1小時。接著添加四氫-2H-哌喃-3-胺(682.08 mg, 6.74 mmol)且於60℃下攪拌12小時。用水淬滅反應。將所得溶液用二氯甲烷萃取且合併有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(270 mg, 0.472 mmol, 70%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 572.2。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1284
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.35 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(204.8 mg, 1.75 mmol)、Brettphos Pd G3 (63.4 mg, 0.07 mmol)及Cs2 CO3 (228 mg, 0.70 mmol)於1,4-二噁烷(8 mL)中之混合物於90℃下攪拌1小時。接著將混合物冷卻至室溫。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.27 mmol, 78.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 653.3。 步驟3：(S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫-2H -哌喃-3-基)脲及(R )-1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[四氫哌喃-3-基]脲
Figure 02_image1286
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100.0 mg, 0.15 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2.5 mL)。將反應物於室溫下攪拌0.5小時且在真空下濃縮。將殘餘物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺調節至pH 8。接著在真空下濃縮溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內15% B至39% B)純化粗產物，以產生外消旋產物。接著藉由製備型對掌性HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 711a ) (8.0 mg, 0.0002 mmol)。RT 1.699 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5 cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA): EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 1.965 min.；方法K.1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.33 (s, 2H), 6.75 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.52 (s, 1H), 3.27 (dd,J = 10.6, 6.4 Hz, 3H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.88 (s, 1H), 1.71 (s, 1H), 1.54 (d,J = 8.4 Hz, 2H)。
鏡像異構物2：(化合物 711b) (6.6 mg, 0.0001mmol)。RT 2.361 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5 cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA): EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 1.971 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.33 (s, 2H), 6.75 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.52 (s, 1H), 3.27 (dd,J = 10.6, 6.4 Hz, 3H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.88 (s, 1H), 1.71 (s, 1H), 1.54 (d,J = 8.4 Hz, 2H)。實例 147 (±)-反式 - 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-氰基環丁基)脲(化合物 712a )
Figure 02_image1287
步驟1：(±)-反式 - N-(2-胺甲醯基環丁基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1289
將(±)-反式-2-(第三丁氧基羰基胺基)環丁烷羧酸(1.0 g, 4.65 mmol)、NH4 Cl (0.7 g, 12.96 mmol)、HATU (2.6 g, 6.84 mmol)及DIEA (1.2 g, 9.23 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌16小時。由水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮，以得到白色固體狀(±)-反式 -N -(2-胺甲醯基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(628 mg, 2.931 mmol, 63.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 215。 步驟2：(±)-反式 -N -(2-氰基環丁基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1291
將(±)-反式 - N -(2-胺甲醯基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(628 mg, 2.93 mmol)、1-丙烷膦酸環酐(3.7 g, 5.82 mmol)及TEA (593 mg, 5.86 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液於50℃下攪拌2小時。由水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮，以得到白色固體狀(±)-反式 - N-(2-氰基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(480 mg, 2.446 mmol, 83.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 197。 步驟3：(±)-反式 - 2-胺基環丁腈
Figure 02_image1293
將(±)-反式 -N -(2-氰基環丁基)胺基甲酸第三丁酯(480 mg, 2.45 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(2 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物，以得到黃色油狀(±)-反式 - 2-胺基環丁腈(200 mg，粗製)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 97。 步驟4：(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1295
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.34 mmol)及吡啶(5 mL)於二氯甲烷(12 mL)中之溶液中添加三光氣(50 mg, 0.17 mmol)。將反應於0℃下攪拌1小時。接著添加(±)-反式 - 2-胺基環丁腈(197 mg, 2.05 mmol)且於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由反相層析(乙腈0-60/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到黃色固體狀(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg, 0.1235 mmol, 36.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 648。 步驟5：(±)-反式 - 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(2-氰基環丁基)脲(化合物 712a )
Figure 02_image1297
將(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg, 0.06 mmol)於TFA (4 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep Phenyl OBD管柱5 µm, 19*250mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在21 min內40% B至76% B；RT 18 min)純化粗產物，以產生黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S,2S)-2-氰基環丁基]脲(5.2 mg, 0.0116 mmol, 18.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 448.2, RT 1.999 min.，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.30 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.52 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.78 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.45 (q,J = 8.3 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 2.27-2.11 (m, 3H), 2.14-2.12 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 2H), 2.03-1.86 (m, 4H)。實例 148 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲(化合物 713a )
Figure 02_image1298
步驟1：7-(3-(3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1300
於0℃下向氯甲酸苯酯(445.2 mg, 2.85 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.57 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(69.73 mg, 0.57 mmol)於吡啶(2.0 mL)中之溶液。將混合物於室溫下攪拌1小時。接著於0℃下添加(中-1R,5S,6r)-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-內-胺鹽酸鹽(231.26 mg, 1.71 mmol)及三乙胺(231.04 mg, 2.28 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液。將混合物於50℃下再攪拌2 h。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到7-(3-(3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.25 mmol, 43%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 651.3。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲
Figure 02_image1302
向7-(3-(3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.23 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(2.0 mL)。將反應混合物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮所得混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5µm, 19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在15 min內12% B至18% B)純化，以得到淺黃色固體狀1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,5S ,6r )-3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基)脲(31.9 mg,0.071 mmol, 30.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 451.3, RT 1.853 min.，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.20 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.84 (d,J = 8.4 Hz, 2H), 3.62 (d,J = 8.1 Hz, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.46 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.80 (d,J = 2.4 Hz, 2H)。實例 149 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(3,3-二氟環丁基)脲(化合物 714 )
Figure 02_image754
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3,3-二氟環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1305
於0℃下向氯甲酸苯酯(298 mg, 1.9 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液添加DMAP (47 mg, 0.39 mmol)、吡啶(5.mL, 0.38 mmol)及7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)。將反應於0℃下攪拌2小時。接著添加二氯甲烷(14 mL)中之3,3-二氟環丁-1-胺(244 mg, 2.28 mmol)。將反應混合物攪拌16小時於50℃下，用二氯甲烷稀釋且用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3,3-二氟環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.228 mmol, 59.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 659。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(3,3-二氟環丁基)脲
Figure 02_image1307
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3,3-二氟環丁基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.23 mmol)於TFA (4 mL)及二氯甲烷(15 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內22% B至43% B；254/220 nm；RT 6.87 min)純化，以得到褐色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(3,3-二氟環丁基)脲(56.5 mg, 0.123 mmol, 54.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 459.2, RT 1.920 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.31 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.52 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.76 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.07 (s, 1H), 3.34 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 2H), 2.65-2.53 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 150 (R )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H-哌喃-4-基酯及(S )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯(化合物 461a 及化合物 461b )
Figure 02_image1309
步驟1：8-甲基-4-亞甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1311
將7-溴-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(1.0 g, 2.96 mmol) (來自實例113)、B2 Pin2 (3746.0 mg, 14.81mmol)、Pd(dppf)Cl2 (200.0 mg, 0.27 mmol)及KOAc (867.0 mg, 8.85 mmol)於1,4-二噁烷(15.0 mL)中之混合物於100℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/10)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀8-甲基-4-亞甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(1.1 g, 2.85 mmol, 78.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 387。 步驟2：7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-4-亞甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1313
將8-甲基-4-亞甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(1.8 g, 4.66 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(1.5 g, 4.65 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (340.0 mg, 0.47 mmol)及K2 CO3 (2.0 g, 14.49 mmol)於1,4-二噁烷(20.0 mL)及水(2.0 mL)中之混合物於60℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(700 mg, 1.539 mmol, 33%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455。 步驟3：7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-4,8-二甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1315
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-4-亞甲基-2,3-二氫-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(700.0 mg, 1.54 mmol)及Pd/C (500.0 mg, 1.54 mmol)於甲醇(50.0 mL)中之混合物於25℃下在氫氣下攪拌4小時。接著將反應混合物經由矽藻土過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.875 mmol, 56.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 457。 步驟4：7-(8-氯-7-氟-3-((((四氫-2H-哌喃-4-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-4,8-二甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1317
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.66 mmol)、四氫-2h-哌喃-4-醇(342.0 mg, 3.35 mmol)及DIEA (1270 mg, 9.84 mmol)於二氯甲烷(15.0 mL)中之溶液於0℃下攪拌10 min。接著添加三光氣(312.0 mg, 1.05 mmol)。將反應物於0℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.513 mmol, 78.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 585。 步驟5：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((四氫-2H -哌喃-4-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-4,8-二甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1319
將7-[8-氯-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.85 mmol)、NH2 Boc (1000 mg, 8.55 mmol)、Pd2 (dba)3 .CHCl3 (196 mg, 0.19 mmol)、Brettphos (184 mg, 0.34 mmol)及Cs2 CO3 (836 mg, 2.56 mmol)中之混合物於1,4-二噁烷(20 mL)於90℃下在氮氣下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:2)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.751 mmol, 87.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 666。 步驟6：(R )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯及(S )-(8-胺基-6-(4,8-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫-2H -哌喃-4-基酯
Figure 02_image1321
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫哌喃-4-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-4,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.30 mmol)及TFA (2.0 mL, 0.30 mmol)於二氯甲烷(5.0 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在12.5 min內13% B至43% B；RT 10.03 min)及對掌性HPLC純化殘餘物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 461a ) (19.6 mg, 0.0421mmol, 14%產率)。RT 2.933 min( CHIRALPAK IF-3 0.46*5 cm；3 µm. MTBE: EtOH = 90:10, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 466.2, RT 2.106 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.84 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 4.88 (dt,J = 8.9, 4.7 Hz, 1H), 3.85 (dd,J = 10.4, 5.9 Hz, 2H), 3.47-3.31 (t,J = 9.2 Hz, 4H), 2.96 (q,J = 6.5 Hz, 1H), 1.98-1.84 (m, 7H), 1.60 (dtd,J = 13.0, 9.3, 4.2 Hz, 2H), 1.31 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 461b ) (19.5 mg, 0.0419 mmol, 13.9%產率)。RT 3.662 min( CHIRALPAK IF-3 0.46*5 cm；3 µm. MTBE: EtOH = 90:10, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 466.2, RT 2.106 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.84 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 4.88 (dt,J = 8.9, 4.7 Hz, 1H), 3.85 (dd,J = 10.4, 5.9 Hz, 2H), 3.47-3.31 (t,J = 9.2 Hz, 4H), 2.96 (q,J = 6.5 Hz, 1H), 1.98-1.84 (m, 7H), 1.60 (dtd,J = 13.0, 9.3, 4.2 Hz, 2H), 1.31 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。實例 151 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基-1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯(化合物 465 )
Figure 02_image1323
步驟1：6-(((6-(1-(第三丁氧基羰基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1,4-二氮雜環庚烷-1,4-二甲酸二-第三丁酯
Figure 02_image1325
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.57 mmol)、6-羥基-1,4-二氮雜環庚烷-1,4-二甲酸二-第三丁酯(361.0 mg, 1.14 mmol)及DIEA (369.0 mg, 2.86 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(112.0 mg, 0.38 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。將混合物用水淬滅且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(84/16)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀6-[[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-(1-第三丁氧基羰基-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺甲醯基氧基]-1,4-二氮雜環庚烷-1,4-二甲酸二第三丁酯(490 mg,0.56 mmol, 98 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 868。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯
Figure 02_image1327
於25℃下向6-[[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-(1-第三丁氧基羰基-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺甲醯基氧基]-1,4-二氮雜環庚烷-1,4-二甲酸二-第三丁酯(398.0 mg, 0.46 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將混合物於25℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。將殘餘物用Et3 N調節至pH 8且藉由反相層析(用水(NH4 HCO3 )/MeOH (66/34)溶析)純化，以得到褐色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯(52 mg,0.11 mmol, 24 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4-二甲基-1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯
Figure 02_image1329
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸1,4-二氮雜環庚烷-6-基酯(80.0 mg, 0.17 mmol)及甲醛(40%, 51.0 mg, 1.7 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加NaBH3 CN (32.0 mg, 0.51 mmol)且於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 ): ACN= 在10 min內12% B至30% B；60 mL/min)純化，以產生黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1,4-二甲基-1,4-二氮雜環庚烷-6-基)酯(12.8 mg,0.025 mmol, 15 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 496, RT = 0.907 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.03 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.80 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.92-4.86 (m, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 3.32-3.29 (m, 2H), 2.90-2.85 (m, 2H), 2.75-2.61 (m, 2H), 2.60-2.40 (m, 4 H), 2.28 (s, 6H), 1.90 (s, 3H)。實例 152 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 478a 及化合物 478b )
Figure 02_image1331
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-乙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1333
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)及1-乙基-4-羥基-吡咯啶-2-酮(300 mg, 2.32 mmol)於二氯甲烷(60 mL)中之溶液中添加DIEA (500 mg, 3.88 mmol)。接著添加三光氣(200 mg, 0.67 mmol)。將反應物於0℃下攪拌2小時，之後在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-乙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.41 mmol, 72.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 681。 步驟2：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1335
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-乙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.41 mmol)及TFA (2 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌3 h。在真空下濃縮反應物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內7% B至25% B)及對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IC, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE (0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在8.5 min內30 B至30 B；220/254 nm)純化殘餘物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 化合物478a (28.6 mg, 0.0595 mmol, 14.5%產率)：RT 3.418 min( ChIRALPAK IE-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1% FA):EtOH=在8 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3, Rt=1.671min.，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.32-5.25 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.41 (dd,J = 11.7, 1.5 Hz, 2H), 3.32-3.15 (m, 3H), 2.80 (dd,J = 17.6, 7.0 Hz, 1H), 2.30 (dd,J = 17.6, 1.9 Hz, 1H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.03 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。
鏡像異構物2化合物 478b (31.6mg,0.0658mmol, 16%產率)：滯留時間：4.48 min( ChIRALPAK IE-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1% FA):EtOH=在8 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3, Rt=1.671min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.32-5.25 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.41 (dd,J = 11.7, 1.5 Hz, 2H), 3.32-3.15 (m, 3H), 2.80 (dd,J = 17.6, 7.0 Hz, 1H), 2.30 (dd,J = 17.6, 1.9 Hz, 1H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.03 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。實例 153 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸環丁酯( 化合物 487 )
Figure 02_image1337
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1339
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.19 mmol)及環丁醇(70 mg, 0.97 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加DIEA (300 mg, 2.33 mmol)。接著添加三光氣(75 mg, 0.25 mmol)且於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.16 mmol, 84.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 624。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸環丁酯
Figure 02_image1337
於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.19 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌16 h。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內45% B至60% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸環丁酯(17.8 mg, 0.042 mmol, 21.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H] + = 424.2, RT 0.981 min，方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (t,J = 2.8 Hz, 1H), 4.95 (p,J = 7.6 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.41 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.31 (dddt,J = 9.8, 7.6, 5.5, 2.5 Hz, 2H), 2.14-2.00 (m, 2H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.76 -1.60 (dtd,J = 18.6, 10.4, 8.0 Hz, 2H)。實例 154 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-乙基脲(化合物 720 )
Figure 02_image1341
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(3-乙基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1343
在氮氣下，將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.38 mmol)、DMAP (54.0 mg, 0.44 mmol)、吡啶(4 mL, 0.38 mmol)及氯甲酸苯酯(350 mg, 2.24 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液於0℃下攪拌1 h。接著添加乙胺(5 mL, 0.38 mmol)且於60℃下攪拌2小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(63/27)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(乙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.251 mmol, 66.1%產率)黃色固體狀。LCMS (ESI) [M+H]+ = 597。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-乙基脲
Figure 02_image1345
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(乙基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.25 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (2 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮溶液。用三乙胺將殘餘物之pH值調節至鹼性。在真空下濃縮混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L/NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/ min；梯度：在7 min內16% B至35% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-乙基-脲(70 mg, 0.177 mmol, 70.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =397.4, RT 1.696 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.26 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.05 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.72 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.30-4.24 (m, 2H), 3.32-3.29 (m, 2H), 3.20-3.08 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.12-1.02 (t,J = 7.5 Hz, 3H)。實例 155 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯(化合物 511a 及化合物 511b )
Figure 02_image1347
步驟1：7-(3-((((8-(第三丁氧基羰基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1349
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.38 mmol)、3-羥基-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(194.0 mg, 0.76 mmol)及DIEA (246.0 mg, 1.91 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(75.0 mg, 0.25 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(93/7)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(8-第三丁氧基羰基-8-氮雜螺[4.5]癸-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(279 mg, 0.34 mmol, 90 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 807。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯
Figure 02_image1351
於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(8-第三丁氧基羰基-8-氮雜螺[4.5]癸-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.25 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(1 mL)且將混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮溶劑。藉由用水(0.1% NH4 HCO3 )/MeOH (60/40)溶析之反相管柱純化殘餘物，以得到褐色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸8-氮雜螺[4.5]癸-3-基酯(50 mg, 0.098 mmol, 39 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 507. 步驟3：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸8-(氧雜環丁-3-基)-8-氮雜螺[4.5]癸-2-基酯
Figure 02_image1353
將N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸8-氮雜螺[4.5]癸-3-基酯(100.0 mg, 0.20 mmol)、3-丙醇酸丙酯(142.0 mg, 1.97 mmol)及四異丙醇鈦(224.0 mg, 0.79 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液於60℃下攪拌2小時。接著添加NaBH3 CN (38.0 mg, 0.60 mmol)且於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由具有以下條件之製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；水(0.1% FA): ACN= 在10 min內7% B至18% B；25 mL/min)純化，以得到外消旋物。接著藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 µm；MTBE (10mM NH3 -MEOH): EtOH=在17 min內50% B至50% B；17 mL/min)分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 511a ) (11.1 mg,0.019 mmol, 10%產率)。RT 2.666 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 563, RT 1.587 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15-5.08 (m,1H), 4.60-4.28 (m, 6H), 3.40-3.29 (m, 2H), 2.27-1.72 (m, 10H), 1.70-1.40 (m, 8H)。
鏡像異構物2 (化合物 511b ) (10.7 mg, 0.0190 mmol, 9.6%產率)。RT 2.120 min( ChIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE(0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 563, RT 1.589 min.，方法J.1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15-5.08 (m,1H), 4.60-4.28 (m, 6H), 3.40-3.29 (m, 2H), 2.27-1.72 (m,10H), 1.70-1.40 (m, 8H)。實例 156 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯(化合物 485a )
Figure 02_image1354
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-羥基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1356
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)、(1s ,3s )-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)環丁-1-醇(230 mg, 1.14 mmol)及DIEA (368.86 mg, 2.85 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。接著添加三光氣(169.4 mg, 0.57 mmol)。接著將反應混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由反相層析(乙腈0-60/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.23 mmol, 53.7%產率)。LC/MS (ESI): [M+H]+ = 640.3。 步驟2：(1s ,3s )-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸羥基環丁酯
Figure 02_image1358
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-羥基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.23 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(1.6 mL)。將反應物於室溫下攪拌2小時。接著在真空下濃縮混合物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷且接著用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5µm, 19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內7% B至33% B)純化，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-羥基環丁基)酯(19.9 mg, 0.045 mmol, 19.3%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 440.2, RT 1.028 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 5.22 (d,J = 6.5 Hz, 1H), 4.53 (p,J = 7.4 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.84-3.80 (m 1H), 3.38-3.34 (m, 2H), 2.69-2.74 (m, 2H), 2.01-1.86 (m, 5H)。實例 157 1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-氟環丙基]脲(化合物 734a )
Figure 02_image1360
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1362
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(700.0 mg, 1.58 mmol)及吡啶(622.4 mg, 7.86 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加三光氣(700.4 mg, 2.36 mmol)。將反應混合物於0℃下攪拌40 min。接著添加4-甲苯磺酸[[(1R,2S)-2-氟環丙基]胺基]酯(2.32 g, 9.44 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液。將溶液於0℃下攪拌1.5 h。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[[(1R ,2S )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.37 mmol, 46.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 546.3。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1364
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.37 mmol)、NH2 Boc (2571.6 mg, 21.98 mmol)、Brettphos Pd G3 (66.5 mg, 0.07 mmol)及Cs2 CO3 (238.9 mg, 0.73 mmol)於1,4-二噁烷(8 mL)中之混合物於80℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(70 mg, 0.11 mmol, 30.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 627.4。 步驟3：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-氟環丙基]脲
Figure 02_image1366
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-氟環丙基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(64.8 mg, 0.10 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將反應混合物於室溫下攪拌1.5小時且在真空下濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，用TEA調節至pH 8且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內14% B至38% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1R ,2S )-2-氟環丙基]脲(10.04 mg, 0.02mmol, 22.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 427.2, RT 1.890 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.30 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.76 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.89-4.68 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.37-3.35 (m, 2H), 2.70-2.67 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.11-1.09 (m, 1H), 0.83-0.80 (m, 1H)。實例 158 (3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯及(3S ,3aS ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(化合物 568a 及化合物 568b )
Figure 02_image1368
步驟1：4-亞甲基-2,3,3a ,6a -四氫呋喃并[2,3-b ]呋喃
Figure 02_image1370
於110℃下向Bu3 SnH (1700.0 mg, 5.82 mmol)及AIBN (65.0 mg, 0.40 mmol)於甲苯(15 mL)中之溶液中逐滴添加(2R,3S)-3-碘-2-丙-2-炔氧基-四氫呋喃(1000.0 mg, 3.97 mmol)於甲苯(2 mL)中之溶液。將混合物攪拌5小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物吸收於ACN (100 mL)中且用石油醚洗滌。在真空下濃縮ACN層。藉由用石油醚/乙酸乙酯(80/20)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到淺黃色油狀4-亞甲基-2,3,3a,6a-四氫呋喃并[2,3-b ]呋喃(150 mg, 1.189 mmol, 30%產率)。LCMS(ESI): [M+H]+ = 127.1。 步驟2：(3aR ,4S ,6aS )-2,3,3a ,4,5,6a -六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-4-醇
Figure 02_image1372
將2,3,3a,6a-四氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-4-酮(247.0 mg, 1.93 mmol)及NaBH4 (147.0 mg, 3.87 mmol)於乙醇(5 mL)中之混合物於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(92/8)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀(3aR,4S,6aS)-2,3,3a,4,5,6a-六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-4-醇(160 mg, 1.229 mmol, 63.8%產率)。LCMS(ESI) [M+H]+ =131.1 步驟3：(3R ,3aR ,6aS )-4-硝基苯甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯
Figure 02_image1374
向PPh3 (705.0mg, 2.69mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加DIAD (540.0 mg, 2.67 mmol)且將混合物於25℃下攪拌1小時。接著添加4-硝基苯甲酸(465.0 mg, 2.78 mmol)及(3aR ,4S ,6aS )-2,3,3a ,4,5,6a -六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-4-醇(300.0mg, 2.31mmol)於THF中之溶液。將混合物於25℃下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(50/50)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到(3R ,3aR ,6aS )-4-硝基苯甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(360 mg, 1.2892 mmol, 55.9%產率)。 步驟2：(3R ,3aR ,6aS )-六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-醇
Figure 02_image1376
將(3R ,3aR ,6aS )-4-硝基苯甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(360 mg, 1.28 mmol)及K2 CO3 (883 mg, 6.4 mmol)於甲醇(1 mL)中之混合物於25℃下攪拌12小時。在真空下濃縮後，藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(3R ,3aR ,6aS )-六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-醇(120 mg, 0.92 mmol)。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 5.89 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 4.23 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 3.99 (dd,J = 10.3, 3.2 Hz, 1H), 3.94-3.77 (m, 3H), 2.88-2.75 (m, 1H), 2.17 (ddt,J = 13.1, 10.6, 8.4 Hz, 1H), 1.71 (ddt, J = 13.1, 6.6, 4.3 Hz, 1H)。 步驟3：(3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯及7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3S ,3aS ,6aR )-六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1378
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380.0 mg, 0.72 mmol)、2,3,3a ,4,5,6a -六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-4-醇(188.0 mg, 1.44 mmol)及DIEA (466.0 mg, 3.61 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之混合物中添加三光氣(128.0 mg, 0.43 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到外消旋產物(300 mg)。藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK  IC, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE(10 mM於MeOH中之NH3 )，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在12 min內20% B至20% B)分離外消旋物，以得到黃色固體狀(3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(92 mg, 0.135 mmol, 18.7%產率)及7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3S ,3aS ,6aR )-六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(94 mg, 0.1379 mmol, 19.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 682。 步驟4：(3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯及(3S ,3aS ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯
Figure 02_image1380
向(3R ,3aR ,6aS )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(92.0 mg, 0.13 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X select  CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(3R, 3aR,6aS)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(化合物 568a ) (38.1 mg, 0.0791 mmol, 58.6%產率) (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學)：RT 1.229 min (CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 482, RT 1.861 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.77 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.12 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.02 (dd,J = 10.9, 3.6 Hz, 1H), 3.92 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 3.87-3.68 (m, 2H), 3.45-3.35(s, 2H),  2.92 (dt,J = 9.8, 4.1 Hz, 1H), 2.21-2.02 (m, 1H), 1.93-1.89 (m , 4H)。
以類似方式製備黃色固體狀(3S ,3aS ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[2,3-b ]呋喃-3-基酯(化合物 568b ) was (37.2 mg, 0.0773 mmol, 57.3%產率) (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學)：RT 1.600 min  (ChIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE(0.1%DEA):MeOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 482, RT 1.861 min，方法J,1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.77 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.12 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.02 (dd,J = 10.9, 3.6 Hz, 1H), 3.92 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 3.87-3.68 (m, 2H), 3.45-3.35(s, 2H),  2.92 (dt,J = 9.8, 4.1 Hz, 1H), 2.21-2.02 (m, 1H), 1.93-1.89 (m , 4H)。實例 159 1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(3-甲氧基環丁基)脲(化合物 733a )
Figure 02_image1381
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1383
在氮氣下，向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)及DMAP (37.8 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加(1r,3r)-3-甲氧基環丁-1-胺(127.4 mg, 1.26 mmol)且將混合物於60℃下攪拌5小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(91/9)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到白色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(186 mg,  0.28 mmol, 92%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 653.3。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(3-甲氧基環丁基)脲
Figure 02_image1385
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180.0 mg, 0.28 mmol)及TFA (1.0 mL, 0.28 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 ): ACN= 在10 min內19% B至34% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-(3-甲氧基環丁基)脲(82.1 mg,0.18 mmol, 65.8%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 453.3；RT 1.105 min.；方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.49-7.20 (m, 2H), 6.72 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.46-4.20 (m, 3H), 4.10-3.95 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.24-2.07 (m, 4H), 1.90 (s, 3H)。實例 160 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-異丙基脲(化合物 746 )
Figure 02_image818
步驟1：7-[8-氯-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1386
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.12 mmol)及吡啶(2 mL)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(167 mg, 0.56 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。接著添加異丙胺(664 mg, 11.23 mmol)且接著將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(24/76)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230 mg, 0.434 mmol, 38.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 530。 步驟2：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1388
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.42 mmol)、NH2 Boc (2.5 g, 21.37 mmol)、Cs2 CO3 (270 mg, 0.83 mmol)、Brettphos (89 mg, 0.17 mmol)及Pd2 (dba)3 CHCl3 (86 mg, 0.080 mmol)中之混合物於1,4-二噁烷(6 mL)於90℃下攪拌2小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由用甲醇/二氯甲烷(1/9)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色油狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(191 mg, 0.235 mmol, 56.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 611。 步驟3：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-異丙基-脲
Figure 02_image1390
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(異丙基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.31 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(4 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物用TEA調節至pH 9且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內21 B至39 B)純化粗產物，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-異丙基-脲(16.3 mg, 0.0397 mmol, 12.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 411.2, RT 2.153 min，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.98 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 3.82-3.80 (m, 1H), 3.40-3.38 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.13 (d,J = 6.5 Hz, 6H)。實例 161 (R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲及(S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲(化合物 722a 及化合物 722b )
Figure 02_image1392
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1394
在氮氣下，於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.46 mmol)及四氫-3-呋喃胺(200 mg, 2.30 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液添加吡啶(80 mg, 1.01 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌16 h。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.3914 mmol, 84.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 639。 步驟2：(R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲(化合物 722a )及(S )-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲(化合物 722b )
Figure 02_image1396
於室溫下將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.39 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液添加TFA (2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌3 h且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm, 19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：在7 min內5% B至35% B；254/220 nm；RT 6.80 min)及對掌性HPLC (管柱：ChIRALPAK IG, 20*250mm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min)純化粗產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1化合物 722a (32.1 mg, 0.0732 mmol, 18.7%產率)。RT 1.617 min( CHIRALPAK IG-3,46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1%DEA):MeOH=在5 min內60:40；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.1, RT 0.915 min，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.36 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.74 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 3H), 3.87-3.67 (m, 3H), 3.52 (dd,J = 9.0, 3.4 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 2.16 (dq,J = 13.4, 7.5 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.73 (ddt,J = 12.6, 8.2, 4.6 Hz, 1H)。
鏡像異構物2化合物 722b (30.9 mg, 0.0705 mmol, 18%產率)。RT 2.441 min( CHIRALPAK IG-3,46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1%DEA):MeOH=在5 min內60:40；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.1, RT 0.915 min，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.36 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.74 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 3H), 3.87-3.67 (m, 3H), 3.52 (dd,J = 9.0, 3.4 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 2.16 (dq,J = 13.4, 7.5 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.73 (ddt,J = 12.6, 8.2, 4.6 Hz, 1H)。實例 162 (3S ,5S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯、(3R ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯、(3S ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯及(3R ,5S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯(化合物 467a、化合物467b、化合物 467c及化合物 467d )
Figure 02_image1397
Figure 02_image1399
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b] [1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1401
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b] [1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.34 mmol)、3-羥基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷-7-甲酸第三丁酯(162 mg, 0.67 mmol)及DIEA (630 mg, 4.88 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液中添加三光氣(198 mg, 0.67 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌2小時。將反應溶液用二氯甲烷稀釋且將所得溶液用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到紅褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(158 mg, 0.0018 mmol, 50%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 795.3。 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯
Figure 02_image1403
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.19 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(3 mL)及二氯甲烷(12mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷(10 mL)中，用三甲胺調節至pH 8且在真空下濃縮。粗產物未經純化即直接用於下一步驟。 步驟3：(3S ,5S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯、(3R ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯、(3S ,5R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯及(3R ,5S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯
Figure 02_image1405
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸1-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-3-基酯(140 mg, 0.28 mmol)及甲醛(15.0 mg, 0.38 mmol)於甲醇(14 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加硼氫化鈉(27 mg, 0.71 mmol)。將反應物於25℃下攪拌1小時。接著藉由添加水淬滅反應且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈5-50/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到兩對外消旋產物。藉由對掌性HPLC個別地分離該兩種外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物1化合物 467a (11.5 mg, 0.0221 mmol, 7.8%產率)。RT 2.818 min( CHIRALPAK IF-3, 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.2% IPA):MeOH=在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.4, RT 1.584 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.05-3.92 (m, 1H), 3.72 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 2.80-2.55 (m, 3H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.35-2.05 (m, 6H), 1.98-1.78 (m, 6H)。
異構物2化合物 467b (10.3 mg, 0.0197mmol, 7%產率)。RT 2.000 min( CHIRALPAK IF-3, 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE (0.2% IPA):MeOH=在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.4, RT 1.580 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.05-3.92 (m, 1H), 3.72 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 2.80-2.55 (m, 3H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.35-2.05 (m, 6H), 1.98-1.78 (m, 6H)。
異構物3化合物 467c (10.3 mg, 0.0197 mmol, 7%產率)。RT 2.404 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE (0.2% IPA):EtOH=在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  509.4, RT 1.610 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.26-5.17 (m, 1H), 4.27 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 4.02-3.92 (m, 1H), 3.76 (d,J = 10.3, 2.1 Hz, 1H), 2.70-2.58 (m, 2H), 2.48-2.35 (m, 3H), 2.32- 2.13 (m, 5H), 2.1-1.92 (m, 3H), 1.95-1.88 (m, 3H)。
異構物4化合物 467d (19.0 mg, 0.0358 mmol, 12.7%產率)。RT 3.773 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE (0.2% IPA):EtOH=在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  509.4, RT 1.610 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.26-5.17 (m, 1H), 4.27 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 4.02-3.92 (m, 1H), 3.76 (d,J = 10.3, 2.1 Hz, 1H), 2.70-2.58 (m, 2H), 2.48-2.35 (m, 3H), 2.32- 2.13 (m, 5H), 2.1-1.92 (m, 3H), 1.95-1.88 (m, 3H)。實例 163 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 480a 及化合物 480b )
Figure 02_image1407
步驟1：4-溴-2,2-二甲基-3-側氧基丁酸乙酯
Figure 02_image1409
向2,2-二甲基-3-側氧基丁酸乙酯(3.50 g, 22.13 mmol)於乙醇(40.0 mL)中之溶液中添加Br2 (3.85 g, 24.34 mmol)。將反應於室溫下攪拌4小時。在真空下濃縮混合物，以得到標題產物(4.80 g)。粗產物不經純化即直接用於下一步驟。 步驟2：1,3,3-三甲基吡咯啶-2,4-二酮
Figure 02_image1411
向4-溴-2,2-二甲基-3-側氧基-丁酸乙酯(4.80 g, 20.25 mmol)於乙醇(10 0mL)中之溶液中添加甲胺(628.82 mg, 20.25 mmol)。將反應物於室溫下攪拌2小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀1,3,3-三甲基吡咯啶-2,4-二酮(1.70 g, 12.05 mmol, 59.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 142。 步驟3：4-羥基-1,3,3-三甲基-吡咯啶-2-酮
Figure 02_image1413
向1,3,3-三甲基吡咯啶-2,4-二酮(1.50 g, 10.63 mmol)於甲醇(30 mL)中之溶液中添加硼氫化鈉(803.92 mg, 21.25 mmol)且於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，在真空下濃縮且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到白色固體狀4-羥基-1,3,3-三甲基-吡咯啶-2-酮(1.0 g, 6.99 mmol, 66.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 144；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.16 (s, 1H), 3.82 (s, 1H), 3.44 (dd,J = 10.1, 6.2 Hz, 1H), 2.97 (dd,J = 10.0, 4.7 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H)。 步驟4：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1,4,4-三甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1415
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.57 mmol)、DIEA (368.86 mg, 2.85 mmol)及4-羥基-1,3,3-三甲基-吡咯啶-2-酮(163.46 mg, 1.14 mmol)於二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加三光氣(169.39mg, 0.5700mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用DCM/MeOH (10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1,4,4-三甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol, 37.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 695。 步驟5：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,4,4-三甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1417
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1,4,4-三甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(10 mL) . 將反應物於室溫下攪拌30 min且接著在減壓下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5µm,19*150 mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內8% B至32% B；254/220 nm；RT 10.20 min)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：(化合物 480a ) (26.0 mg, 0.053 mmol, 24.3%產率)。RT 2.681 min( ChIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE : EtOH=70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 495.2, RT 2.126min；方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.98 (dd,J = 5.5, 2.3 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.5, 5.5 Hz, 1H), 3.30 (dd,J = 11.4, 2.3 Hz, 3H), 2.75 (s, 3H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.08 (d,J = 6.5 Hz, 6H)。
鏡像異構物2：(化合物 480b ) (21.1 mg, 0.053 mmol, 19.7%產率)。RT 4.892 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE : EtOH=70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 495.2, RT 2.126 min；方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.98 (dd,J = 5.5, 2.3 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.79 (dd,J = 11.5, 5.5 Hz, 1H), 3.30 (dd,J = 11.4, 2.3 Hz, 3H), 2.75 (s, 3H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.08 (d,J = 6.5 Hz, 6H)。實例 164 (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊基酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯(化合物 482b 及化合物 482a )
Figure 02_image1419
步驟1：(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環戊氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1421
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)及(±)-反式-2-羥基環戊腈(300 mg, 2.7 mmol)於二氯甲烷(60 mL)中之溶液中添加DIEA (500 mg, 3.88 mmol)。接著添加三光氣(200 mg, 0.67 mmol)。將反應物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(±)-反式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環戊氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.332 mmol, 58.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 663。  步驟2：(1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯
Figure 02_image1423
於室溫下向(±)-反式- 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-氰基環戊氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.33 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌3 h。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內10% B至37% B，接著於37% B下保持2 min)及對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IG, 20*250mm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在15 min內30 B至30 B)純化，以得到兩種鏡像異構物。
鏡像異構物1：化合物 482a (1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊酯(27.1 mg, 0.062 mmol, 22.8%產率)。RT 1.726 min( CHIRALPAK Ig-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH=在5 min內70:30 ；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.2, RT 0.996 min，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.26-5.18 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (t,J = 4.4 Hz, 2H) 3.17 (dd,J = 7.6, 4.9 Hz, 1H), 2.13 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.84-1.76 (m, 4H)。
鏡像異構物2：化合物 482b (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環戊基酯(25.9 mg, 0.059 mmol, 21.8%產率)。RT 2.428 min( CHIRALPAK Ig-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH=在5 min內70:30；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.2, RT 1.05 min，方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.26-5.18 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (t,J = 4.4 Hz, 2H) 3.17 (dd,J = 7.6, 4.9 Hz, 1H), 2.13 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.84-1.76 (m, 4H)。實例 165 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲基環丙基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲基環丙基)脲(化合物 736a 及化合物 736b )
Figure 02_image1425
步驟1：(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(2-甲基環丙基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1427
在氮氣下，於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.46 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(57 mg, 0.47 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中逐滴添加(±)-順式 - 2-甲基環丙胺鹽酸鹽(108 mg, 1 mmol)及三乙胺(1.0 mL, 7.21 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液。接著將反應物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用二氯甲烷稀釋。用水洗滌有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(2-甲基環丙基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.361 mmol, 77.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 623.2。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲基環丙基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲基環丙基)脲
Figure 02_image1429
將(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(2-甲基環丙基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.40 mmol)於二氯甲烷(20 mL)及2,2,2-三氟乙酸(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。向殘餘物中添加二氯甲烷(5 mL)且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：XBridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內19% B至33% B)純化，以得到黃色固體狀外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1化合物 736a (34.5 mg, 0.0807 mmol, 20.1%產率)。RT 4.285 min( Lux 5µ Cellulose-4, 2.12*25cm, 5 µm. Hex (0.1%DEA): EtOH=在8 min內60:40, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 432.2, RT 2.226 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.25 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.26 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.30-3.26 (m, 2H), 2.26 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 1.90 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.02 (d,J = 6.1 Hz, 3H), 0.91-0.72 (m, 1H), 0.57-0.43 (m, 2H)。
鏡像異構物1化合物 736b (35.6 mg, 0.0819mmol, 20.4%產率)：滯留時間：5.542 min( Lux 5µ Cellulose-4, 2.12*25cm, 5 µm. Hex (0.1%DEA): EtOH=在8 min內60:40, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 432.2, RT 2.226 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.25 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.26 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.30-3.26 (m, 2H), 2.26 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 1.90 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.02 (d,J = 6.1 Hz, 3H), 0.91-0.72 (m, 1H), 0.57-0.43 (m, 2H)。實例 166 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯(化合物 523a 及化合物 523b )
Figure 02_image1431
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1-((第三丁氧基羰基)胺基)丙-2-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1433
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.59 mmol)及N -boc-1-胺基-2-丙醇(300 mg, 1.71 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物中添加DIEA (370 mg, 2.87 mmol)及三光氣(120 mg, 0.40 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用二氯甲烷稀釋且接著用水洗滌。在真空下濃縮有機相。藉由利用反相HPLC (0.1%甲酸)/ACN (45/55)之急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[2-(第三丁氧基羰基胺基)-1-甲基-乙氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(106 mg, 0.149 mmol, 25.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 727。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-胺基丙-2-基酯
Figure 02_image1435
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[2-(第三丁氧基羰基胺基)-1-甲基-乙氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.55 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL, 0.55 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由反相層析(水(0.1%甲酸)/MeOH (80/20))純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-胺基-1-甲基-乙基)酯(106 mg, 0.249 mmol, 45.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 427。 步驟3：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(二甲基胺基)丙-2-基酯
Figure 02_image1437
向N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-胺基-1-甲基-乙基)酯(100 mg, 0.23 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加甲醛溶液(29 mg, 0.97 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時。之後添加氰基硼氫化鈉(56 mg, 0.89 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150 mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內5% B至19% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 523a ) (13.6 mg, 0.0299 mmol, 12.8%產率)。RT 6.077 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1% DEA) : EtOH=60:40, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 1.583 min.；方法K.1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.98 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.3 Hz, 1H), 5.03-4.92 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.41-3.52 (m, 2H), 2.47 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 2.28 (dd,J = 12.7, 5.1 Hz, 1H), 2.19 (s, 6H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.23 (d,J = 6.3 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 523b ) (11.7 mg, 0.0257 mmol, 11%產率)。RT 7.841 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA): EtOH=60:40, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 1.583 min.；方法K.1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.98 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.3 Hz, 1H), 5.03-4.92 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.41-3.52 (m, 2H), 2.47 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 2.28 (dd,J = 12.7, 5.1 Hz, 1H), 2.19 (s, 6H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.23 (d,J = 6.3 Hz, 3H)。實例 167 1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-羥基環戊基]脲(化合物 728a )
Figure 02_image1438
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-羥基環戊基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1440
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)及DMAP (37.9 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於室溫下攪拌15 min。接著添加順式-2-胺基-環戊醇(128.8 mg, 0.93 mmol)及TEA (93.93 mg, 0.93 mol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將混合物於55℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1R ,2S )-2-羥基環戊基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.23 mmol, 74.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 653.3。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-羥基環戊基]脲
Figure 02_image1442
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R )-2-羥基環戊基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140.0 mg, 0.21 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2mL)。將混合物於室溫下攪拌1.5小時且接著在真空下濃縮。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由pre-HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內13% B至35% B)純化，以得到黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-羥基環戊基]脲(53.8 mg, 0.12 mmol, 55.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 1.908 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.22 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.0 Hz, 1H), 4.88 (d,J = 4.1 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.94-3.97 (m, 1H), 3.85 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 3.33-3.31 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H), 1.89-1.38 (m, 6H)。實例 168 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 479a 及化合物 479b )
Figure 02_image1444
步驟1：1-異丙基-3-甲氧基-2H -吡咯-5-酮
Figure 02_image1446
在氮氣下，向(Z)-4-氯-3-甲氧基-丁-2-烯酸甲酯(5.0 g, 30.3 mmol)於乙腈(80 mL)中之溶液中逐滴添加異丙胺(2.3 g, 38.98 mmol)及三乙胺(3.97 g, 39.31 mmol)於乙腈(20 mL)中之溶液。將混合物於回流下攪拌4小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物用水稀釋且接著用二氯甲烷萃取。用1N HCl洗滌有機層。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀1-異丙基-3-甲氧基-2H-吡咯-5-酮(2.26 g, 13.543 mmol, 44.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 156.1。 步驟2：1-異丙基吡咯啶-2,4-二酮
Figure 02_image1448
將1-異丙基-3-甲氧基-2H-吡咯-5-酮(2.26 g, 14.58 mmol)於1N HCl (88 mL)及乙腈(44 mL)中之溶液於65℃下攪拌4小時。在真空下濃縮反應混合物，以得到粗產物(1.6 g)。粗產物未經純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 142.1。 步驟3：4-羥基-1-異丙基-吡咯啶-2-酮
Figure 02_image1450
將1-異丙基吡咯啶-2,4-二酮(1.6 g, 11.35 mmol)及硼氫化鈉(1.29 g, 33.95 mmol)於乙醇(50 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮所得溶液。將殘餘物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(9/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色油狀4-羥基-1-異丙基-吡咯啶-2-酮(700 mg, 4.498 mmol, 39.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 144.1。 步驟4：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-異丙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1452
在氮氣下，將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)、4-羥基-1-異丙基-吡咯啶-2-酮(245 mg, 1.71mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(736 mg, 5.71 mmol)於二氯甲烷(28 mL)中之溶液於0℃下攪拌10 min。接著逐滴添加三光氣(240 mg, 0.81 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用二氯甲烷稀釋且用DCM萃取。用水洗滌有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(19/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-異丙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.246 mmol, 43.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 695.3。 步驟5：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-異丙基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1454
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-異丙基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.26 mmol)於二氯甲烷(20 mL)及TFA (5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X-Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內17% B至36% B)純化，以產生外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 479a (21.6 mg, 0.0433 mmol, 16.7%產率)。RT 2.014 min( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm. MTBE : EtOH =在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2, RT 1.857 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.28 (d,J = 4.3 Hz, 2H), 4.16 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 3.88-3.69 (m, 1H), 3.41-3.38 (m, 2H), 2.89-2.75 (m, 1H), 2.31-2.25 (m,2 H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.06 (t,J = 6.5 Hz, 6H)。
鏡像異構物2：化合物 479b (22.1 mg, 0.044 mmol, 17%產率)。RT 3.049 min( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm；3 µm. MTBE : EtOH =在5 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2, RT 1.857 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.28 (d,J = 4.3 Hz, 2H), 4.16 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 3.88-3.69 (m, 1H), 3.41-3.38 (m, 2H), 2.89-2.75 (m, 1H), 2.31-2.25 (m,2 H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.06 (t,J = 6.5 Hz, 6H)。實例 169 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯(化合物 481a 及化合物 481b )
Figure 02_image1456
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1458
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.76 mmol)、DIEA (493.7 mg, 3.82 mmol)及4-羥基-1-甲基-吡咯啶-2-酮(176.0 mg, 1.53 mmol)於二氯甲烷(14 mL)中之溶液中添加三光氣(226.7 mg, 0.76 mmol)且於0℃下攪拌1.5 h。用水淬滅反應。將所得溶液用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.38 mmol, 49.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =665。 步驟2：(S )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1460
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基-5-側氧基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。接著將混合物於室溫下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內5% B至24% B)純化殘餘物且藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在16 min內30 B至30 B)分離，從而得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：(化合物 481a ) (35.2 mg, 0.069 mmol, 18.3%產率)。RT 2.164 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm, 移動相：MTBE: MeOH =70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 465.3, RT 1.939 min；方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.27 (s, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.33-5.23 (m, 1H), 3.78 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.42 (m, 3H), 2.94-2.74 (m, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.29 (d,J = 17.6 Hz, 1H), 1.92-1.90 (m, 5H)。
鏡像異構物2：(化合物 481b ) (35.2 mg,0.069 mmol, 18.3%產率)。RT 3.101 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm, 移動相：MTBE: MeOH =70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 465.3, RT 1.939 min；方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.27 (s, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.33-5.23 (m, 1H), 3.78 (dd,J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 3.42 (m, 3H), 2.94-2.74 (m, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.29 (d,J = 17.6 Hz, 1H), 1.92-1.90 (m, 5H)。實例 170 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(化合物 483a )
Figure 02_image1462
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1464
在氮氣下，於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.29 mmol)、順式-3-羥基環丁腈(55.6 mg, 0.57 mmol)及DIEA (185.0 mg, 1.43 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(59.5 mg, 0.20 mmol)且將混合物攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用PE/EA(22/78)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(100 mg,0.15 mmol, 54%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 647.3。 步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
Figure 02_image1466
將7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(95.0 mg, 0.15 mmol)及TFA (1.0 mL, 0.15 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：XSelect CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；水(0.1% FA): ACN= 在7 min內5% B至29% B；25 mL/min)純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀(1s,3s)-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(24 mg, 0.054 mmol, 36.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 447.3；RT 1.163 min；方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.47 (s, 1H), 5.00-4.92 (m, 1H), 3.50-3.23(m, 2H), 3.20-3.10 (m, 1H), 2.83-2.70 (m, 4H), 2.42-2.20 (m, 2H), 1.98-1.69 (m, 5H)。實例 171 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲(化合物 723a 及化合物 723b )
Figure 02_image1468
步驟1：(±)-順式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1470
於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)、(±)-順式 - 4-甲氧基四氫呋喃-3-胺鹽酸鹽(143.0 mg, 0.93 mmol)及DMAP (38.0 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加DIEA (200 mg, 1.55 mmol)。將混合物於55℃下攪拌24小時且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(88/12)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(182 mg, 0.27 mmol, 87 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 669。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲
Figure 02_image1472
向(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-甲氧基四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(172.0 mg, 0.26 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(1 mL)。將混合物於25℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。用Et3 N將殘餘物調節至pH 8。藉由具有以下條件之製備型HPLC純化粗產物：(管柱：X Bridge BEH130 Prep C18 OBD管柱19×150mm 5 µm 13nm；水(10 mM NH4 HCO3 ): MeOH= 在7 min內35% B至45% B, 25 mL/min)，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以產生兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 723a ) (29.5 mg, 0.06 mmol, 24 %產率)。RT 1.241 min (CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 469, RT 1.781 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.38-4.22 (m, 3H), 3.97-3.70 (m, 4H), 3.40-3.31 (m, 6H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 723b ) (28.9 mg, 0.062 mmol, 24%產率)。RT 1.805 min (CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 469, RT 1.781 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.38-4.22 (m, 3H), 3.97-3.70 (m, 4H), 3.40-3.31 (m, 6H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 172 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 494 )
Figure 02_image1474
步驟1：7-(3-((((2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1476
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)、6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(164 mg, 0.77 mmol)及DIEA (245 mg, 1.9 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於0℃下攪拌1小時。接著添加三光氣(80 mg, 0.27 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由反相層析(具有ACN/水(20/80)之C18管柱)純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.288 mmol, 75.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 764。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1478
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.26 mmol)於TFA (2 mL)及二氯甲烷(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著在真空下濃縮反應混合物且藉由反相層析(具有ACN/水(18/82)之C18管柱)純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(90 mg, 0.194 mmol, 74.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 465。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1480
將N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(66.0 mg, 0.14 mmol)及Et3 N (72 mg, 0.14 mmol)於四氫呋喃(6.6 mL)中之溶液於室溫下攪拌5 min。接著添加三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(45 mg, 0.21 mmol)且於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由Prep- HPLC (X Select CSH PreC18 OBD管柱, 5 µm, 19 ×150 nm)；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速25 mL/min；梯度：在7min內5% B至25%)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基]酯(15 mg, 0.0284 mmol, 20%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =529.3, RT 6.230 min，方法M。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.51 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85-6.82 (d,J = 6 Hz, 1H), 6.34-6.20 (m, 2H), 5.71 (s, 1H), 4.31-4.13 (m, 6H), 3.84-3.67 (m, 2H), 3.46-3.30 (m, 2H), 2.77 (s, 1H), 2.69 (s, 1H), 2.24-26 (m, 2H), 2.63 (s, 1H), 1.92 (s, 3H)。實例 173 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯(化合物 451a 及化合物 451b )
Figure 02_image1482
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-吡咯啶-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1484
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(370 mg, 0.70 mmol)、3-氟-3-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(680 mg, 3.1 mmol)及DIEA (0.90 g, 6.92 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加三光氣(208 mg, 0.70 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液。將反應於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/7)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-吡咯啶-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.259 mmol, 36.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771。 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟吡咯啶-3-基)甲酯
Figure 02_image1486
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-吡咯啶-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.26 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物，以得到黃色油狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟吡咯啶-3-基)甲酯(120 mg, 0.2551 mmol, 98.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471。 步驟3：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸(3-氟-1-甲基吡咯啶-3-基)甲酯
Figure 02_image1488
將N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟吡咯啶-3-基)甲酯(120 mg, 0.26 mmol)及甲醛(40%, 38 mg, 0.51 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。接著添加NaBH4 (28 mg, 0.76 mmol)且將混合物於25℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內5% B至21% B；254/220 nm；Rt：6 min.)純化，以產生產物之外消旋混合物。藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 451a ) (22.2 mg, 0.0458 mmol, 18%產率)。RT 10.715 min (CHIRALPAK IG, 2.0cm I.D*25cm L (5 µm)；移動相A：Hex: DCM=1:1(10mM NH3-MEOH)，移動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：在18 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 485, RT 2.158 min.，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 4.28 (d,J = 6.0 Hz, 4H), 3.34-3.32 (m, 2H), 2.83-2.42 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 2.16-1.98 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 451ab ) (20.2 mg, 0.0417 mmol, 16.3%產率)。滯留時間：15.235 min (CHIRALPAK IG, 2.0cm I.D*25cm L (5 µm)；移動相A：Hex: DCM=1:1(10mM NH3-MEOH)，移動相B：EtOH--HPLC；流速：20 mL/min；梯度：在18 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 485, RT 2.158 min.，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 4.28 (d,J = 6.0 Hz, 4H), 3.34-3.32 (m, 2H), 2.83-2.42 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 2.16-1.98 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 174 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(化合物 739 )
Figure 02_image1490
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1492
於0℃下向氯甲酸苯酯(358 mg, 2.29 mmol)於二氯甲烷(7 mL)中之溶液中添加吡啶(4 mL)中之DMAP (69 mg, 0.57 mmol)及7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)。將反應於0℃下攪拌2小時。接著添加二氯甲烷(8 mL)中之6-胺基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(608 mg, 2.86 mmol)。將反應於80℃下攪拌16小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.525 mmol, 91.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 762。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
Figure 02_image1494
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.53 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(4 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物，以得到1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(200 mg, 0.4333 mmol, 82.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 462。 步驟3：1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲
Figure 02_image1496
將1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-(2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(200 mg, 0.43 mmol)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(186 mg, 0.87 mmol)及TEA (87.7 mg, 0.87 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由製備型HPLC純化，以得到黃色固體狀1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)脲(40 mg, 0.076 mol, 27.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 526, RT 2.262 min，方法= M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.30 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 6.14-5.72 (tt,J = 4.2 Hz, 54 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.02 (q,J = 7.9 Hz, 1H), 3.88-3.39 (m, 4H), 3.21 (s, 2H), 2.91-2.64 (m, 4H), 2.44 (t,J = 10.0 Hz, 2H), 2.05-1.89 (m, 4H), 1.87 (s, 3H)。實例 175 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲(化合物 732a )
Figure 02_image1498
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1500
於0℃下向氯甲酸苯酯(299 mg, 1.91 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加吡啶(4 mL)中之7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)及DMAP (47 mg, 0.39 mmol)。添加二氯甲烷(12 mL)中之3-氟環丁胺(204 mg, 2.29 mmol)。將混合物於50℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應物且藉由用乙酸乙酯(100%)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.313 mmol, 82%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 639。  步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲
Figure 02_image1502
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.19 mmol)於TFA (4 mL)及二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內10% B至33% B)純化，以得到黃色固體狀1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((1r,3r)-3-氟環丁基)脲(56.2 mg, 0.116 mmol, 61.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.2, RT 1.271 min，方法M。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.30 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.38 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 6.75 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.48 (s, 2H), 4.35 (dq,J = 6.4, 3.1 Hz, 1H), 3.34 (dq,J = 6.5, 3.6 Hz, 4H), 2.86 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.44 (s, 2H), 1.93 (s, 2H), 1.88 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 176 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯(化合物 530a 及化合物 530b )
Figure 02_image1504
步驟1：7-(3-((((1-(苄基氧基)丙-2-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1506
將1-苄基氧基-2-丙醇(126.0 mg, 0.76 mmol)、7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)及DIEA (246 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於0℃下攪拌1小時。接著添加三光氣(80 mg, 0.27 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由具有ACN/水(18/82)之反相層析(C18)純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[3-[(2-苄基氧基-1-甲基-乙氧基)羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(210 mg, 0.293 mmol, 76.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =718.3。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(苄基氧基)丙-2-基酯
Figure 02_image1508
將7-[3-[(2-苄基氧基-1-甲基-乙氧基)羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.28 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由具有ACN/水(20/80)之反相層析(C18)純化，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-苄基氧基-1-甲基-乙基)酯(130 mg, 0.251 mmol, 90.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 517.2 步驟3：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-羥基丙-2-基酯
Figure 02_image1510
在氫氣(1 atm)下，將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(2-苄基氧基-1-甲基-乙基)酯(140.0 mg, 0.27 mmol)及Pd/C (80 mg, 0.27 mmol)於甲醇(2 mL)中之混合物於室溫下攪拌3小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH PreC18 OBD管柱, 5 µm, 19 ×150 nm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速25 ML/min；梯度：在7 min內6% B至36%)純化，以產生產物之外消旋混合物。藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 530a )  (4.4 mg, 0.0103 mmol, 3.8%產率)。RT 1.208 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 428.2, RT 2.081 min，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.94 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84-6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.95-4.78 (m, 2H), 4.32-4.26 (m, 2H), 3.53-3.42 (m, 4H), 1.92 (s, 3H), 1.26-1.18 (d,J = 6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 530b )  (4.5 mg,0.0105 mmol, 3.9%產率)。RT 2.402 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA): EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 428.2, RT 2.081 min，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.94 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84-6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.95-4.78 (m, 2H), 4.32-4.26 (m, 2H), 3.53-3.42 (m, 4H), 1.92 (s, 3H), 1.26-1.18 (d,J = 6 Hz, 3H)。實例 177 (R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲(化合物 719a )
Figure 02_image1512
步驟1：(R )-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1514
於0℃下向氯甲酸苯酯(149.5 mg, 0.95 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加四氫-3-呋喃胺(249.6 mg, 2.87 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(23.3 mg, 0.19 mmol)於吡啶(1 mL)中之溶液。將混合物於室溫下攪拌1小時。接著添加四氫-3-呋喃胺(249.6 mg, 2.87 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液且將混合物於60℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(90 mg, 0.141 mmol, 74%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 637。  步驟2：(R )-1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(四氫呋喃-3-基)脲
Figure 02_image1516
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3S )-四氫呋喃-3-基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(90.0 mg, 0.14 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(3.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物，重新溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。在減壓下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150 mm, 5µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在8 min內18% B至48% B；2)純化，以得到淺黃色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]-3-[(3S )-四氫呋喃-3-基]脲(38 mg, 0.0871 mmol, 61.6%產率)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 437.3, RT 1.876 min.，方法L；1 H NMR1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.35 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.42 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 4.23-4.26 (m, 1H), 3.88-3.65 (m, 3H), 3.52 (dd,J = 8.9, 3.4 Hz, 1H), 3.29 (m, 2H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.14-2.17 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 6H)。實例 178 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲氧基環戊基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲氧基環戊基)脲(化合物 729a 及化合物 729b )
Figure 02_image1518
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(2-甲氧基環戊基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1520
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.23 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(28.5 mg, 0.23 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加2-甲氧基環戊胺(54.0 mg, 0.47 mmol)。將反應混合物於55℃下攪拌5小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(15:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-甲氧基環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.21 mmol, 90.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 667.1。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,2R )-2-甲氧基環戊基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,2S )-2-甲氧基環戊基)脲
Figure 02_image1522
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-甲氧基環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.21 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5.6 mL, 72.69 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內22% B至40% B)純化粗產物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：黃色(化合物 729a ) (19.6 mg, 0.0417 mmol, 19.9%產率)。RT 2.097 min (管柱：CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 µm；移動相：(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH=50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, RT 1.183 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 4.01-3.97 (m, 1H), 3.65-3.62 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 3.28 (s, 3H), 1.92 (s, 3H), 1.92-1.85 (m, 1H), 1.76-1.65 (m, 3H), 1.56-1.42 (m, 2H)。
鏡像異構物2：黃色固體狀(化合物 729b ) (20.2 mg, 0.0431 mmol, 20.5%產率)。RT 2.802 min (管柱：CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 µm；移動相：(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH=50:50, 1ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, RT 1.183min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 4.01-3.97 (m, 1H), 3.65-3.3.62 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 3.28 (s, 3H), 1.92 (s, 3H), 1.92-1.85 (m, 1H), 1.76-1.65 (m, 3H), 1.56-1.42 (m, 2H)。實例 179 1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1R ,2S )-2-氟環戊基]脲及1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-氟環戊基]脲(化合物 727a 及化合物 727b )
Figure 02_image1524
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-氟環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1526
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (56.7 mg, 0.46 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加2-氟環戊胺鹽酸鹽(194.6 mg, 1.39 mmol)於二氯甲烷中之溶液。接著將反應物於55℃下攪拌6小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-氟環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(290 mg, 0.443 mmol, 95.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 655.3。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1R ,2S )-2-氟環戊基]脲及1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(1S ,2R )-2-氟環戊基]脲
Figure 02_image1528
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-氟環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(450.0 mg, 0.69 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(3 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物，用二氯甲烷重新溶解且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱19×150mm 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在11 min內41% B至54% B)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：(化合物 727a ) (71.5 mg, 0.1573 mmol, 22.9%產率)。RT 2.828 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(Hex:DCM =3:1)(0.1% DEA) : EtOH=50:50)。LCMS(ESI) [M+H]+ =  455.2, RT 2.100 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.40 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.04 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 4.27 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 4.01 (s, 1H), 3.31 (s, 2H), 1.75-1.96 (m, 7H), 1.53-1.72 (m, 2H)。
鏡像異構物2：(化合物 727b ) (74.2 mg,0.163 mmol, 23.8%產率)。RT 4.162 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(Hex:DCM =3:1)(0.1% DEA) : EtOH=50:50)。LCMS(ESI): [M+H]+ =  455.2, RT 2.100 min；方法K.1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.40 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.04 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 4.27 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 4.01 (s, 1H), 3.31 (s, 2H), 1.75-1.96 (m, 7H), 1.53-1.72 (m, 2H)。實例 180 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯及(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯(化合物 531a 及化合物 531b )
Figure 02_image1529
於室溫下向N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(100 mg, 0.24 mmol)及(±)-反式-2-氟環丙烷羧酸(35 mg, 0.34 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(5 mL)中之溶液中添加HATU (100 mg, 0.26 mmol)及DIEA (100 mg, 0.78 mmol)。將所得混合物於25℃下攪拌2 h且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：XSelect CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在8 min內5% B至29% B；254/220 nm；Rt：7.83 min)及對掌性HPLC純化殘餘物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 531a ) (21.9 mg, 0.0431 mmol, 18.2%產率)。RT 2.539 min( ChIRALPAK IG-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1% DEA):MeOH=在5 min內70:30；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.3, RT 0.91 min.，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.40 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 5.24 (dd,J = 7.2, 3.4 Hz, 1H), 4.85-4.62 (m, 2H), 4.31-4.18 (m, 2H), 3.84 (td,J = 10.8, 4.0 Hz, 1H), 3.38 (t,J = 6.3 Hz, 2H), 2.84 (t,J = 6.3 Hz, 2H), 2.17 (dt,J = 18.0, 8.8 Hz, 1H), 1.92 (s, 2H), 1.86 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.41 (ddd,J = 12.8, 6.6, 2.7 Hz, 1H), 1.11 (ddd,J = 12.8, 6.6, 2.7 Hz, 1H)。
鏡像異構物2 (化合物 531b ) (20.9 mg, 0.0411 mmol, 17.4%產率)。RT 3.613 min( ChIRALPAK IG-3, 46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH=在5 min內70:30；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.3, RT 0.911 min.，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.40 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 5.24 (dd,J = 7.2, 3.4 Hz, 1H), 4.85-4.62 (m, 2H), 4.31-4.18 (m, 2H), 3.84 (td,J = 10.8, 4.0 Hz, 1H), 3.38 (t,J = 6.3 Hz, 2H), 2.84 (t,J = 6.3 Hz, 2H), 2.17 (dt,J = 18.0, 8.8 Hz, 1H), 1.92 (s, 2H), 1.86 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.41 (ddd,J = 12.8, 6.6, 2.7 Hz, 1H), 1.11 (ddd,J = 12.8, 6.6, 2.7 Hz, 1H)。實例 181 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(化合物 532 )
Figure 02_image624
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1532
在氮氣下，將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)、6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.75 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(490 mg, 3.8 mmol)於二氯甲烷(12 mL)中之溶液於0℃下攪拌。接著逐滴添加三光氣(110 mg, 0.37 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將反應物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用二氯甲烷稀釋且用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層，在真空下濃縮且藉由用二氯甲烷/甲醇(19/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.302 mmol, 79%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  763。  步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺-[3.3]庚-6-基酯
Figure 02_image1534
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(2-第三丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.33 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之2N HCl中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。粗產物未經純化即直接用於下一步驟。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基]酯
Figure 02_image1536
將N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(200 mg, 0.43 mmol)及三乙胺(2.01 mL, 14.46 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液於室溫下攪拌5 min。接著添加三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(90 mg, 0.42 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。接著在真空下濃縮混合物且藉由反相層析(乙腈5-50/水)純化，以得到淺黃色固體狀(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-(2,2-二氟乙基)-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基酯(19.5 mg, 0.0332 mmol, 7.7%產率)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 527.2, RT 0.876 min；方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.09 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 6.08-5.77 (m, 1H), 5.44 (s, 1H), 4.98-4.76 (m, 1H), 3.32-3 .14 (m, 6H), 2.90 (t,J = 10.3, 2H), 2.85-2.65 (m, 2H), 2.61 (s, 2H), 2.25-2.10 (m, 2H), 1.98-1.82 (m, 2H), 1.86 (s, 3H)。實例 182 1-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)-3-環戊基脲(化合物 749 )
Figure 02_image1538
步驟1：N-第三丁氧基羰基-N -[5-[8-氯-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1540
將氯甲酸苯酯(933.8 mg, 5.96 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於0℃下攪拌5 min。接著添加吡啶(20 mL)中之N -[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三丁氧基羰基-胺基甲酸第三丁酯(600.0 mg, 1.19 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(729.4 mg, 5.97 mmol)。將反應物於0℃下於室溫下攪拌1小時。接著向反應混合物中添加環戊胺(1.01 g, 11.93 mmol)。將所得溶液於55℃下於室溫下攪拌12小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(50/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-第三丁氧基羰基-N-[5-[8-氯-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(600 mg, 0.84 mmol, 70.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 614.2。 步驟2：(第三丁氧基羰基)(5-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(3-環戊基脲基)-7-氟異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1542
在氮氣下，於室溫下向N -第三丁氧基羰基-N-[5-[8-氯-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(600.0 mg, 0.98 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(2.30 g, 19.62 mmol)、參(二亞苄基丙酮)二鈀氯仿加成物(204.0 mg, 0.20 mmol)及2-(二環己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯(210.0 mg, 0.39 mmol)於1,4-二噁烷(45 ml)中之混合物中添加碳酸銫(966.0 mg, 2.95 mmol)。將所得混合物於90℃下攪拌2小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀N -第三丁氧基羰基-N -[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(800 mg, 0.81 mmol, 82.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 695.3。 步驟3：1-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)-3-環戊基脲
Figure 02_image1544
向N-第三丁氧基羰基-N-[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(環戊基胺甲醯基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(800.0 mg, 0.81 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(10.0 mL, 129.8 mmol)。將反應物於室溫下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。將殘餘物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺調節至pH 7。接著在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在8 min內26% B至45% B)純化，以產生黃色固體狀1-[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-7-氟-3-異喹啉基]-3-環戊基-脲(100.2 mg, 0.254 mmol, 31.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 395.2, RT 1.943 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.29 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.12 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 6.75 (d,J = 6 Hz ,1H), 6.17 (s, 2H), 5.24 (s, 2H), 4.01-3.96 (m, 1H), 1.91 (s, 3H), 1.91-1.83 (m, 2H), 1.68-1.62 (m, 2H), 1.60-1.55 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 2H)。實例 183 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲(化合物 750b 及化合物 750a )
Figure 02_image1546
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[3-甲氧基四氫哌喃-4-基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1548
在氮氣下，於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)及DMAP (38.1 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(7.5 mL)中之溶液中添加3-甲氧基四氫哌喃-4-胺(81.2 mg, 0.61 mmol)及DIEA (2.0 mL, 0.31 mmol)於二氯甲烷中之溶液。將所得溶液於55℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[3-甲氧基四氫哌喃-4-基]胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.29 mmol, 94.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 683.3。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲 及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基)脲
Figure 02_image1550
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基四氫哌喃-4-基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(5 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物用DCM稀釋，用TEA調節至pH 8且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內17% B至38% B)純化殘餘物，以產生外消旋物產物。藉由對掌性HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。
鏡像異構物1：(化合物 750b ) (29.9 mg, 0.062 mmol, 21.2%產率), RT 2.205 min( 管柱：CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA) : EtOH = 50:50)。LCMS(ESI): [M+H]+ = 483.2, RT 1.790 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.67 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.91-3.95 (m, 2H), 3.76 (d,J = 11.6 Hz, 1H), 3.48-3.32 (m, 7H), 3.29 (s, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.80-1.53 (m, 2H)。
鏡像異構物2：(化合物 750a )  (28.7 mg, 0.0595 mmol, 20.3%產率)。RT 2.782 min( 管柱：CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相 :(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA) : EtOH=50:50)。LCMS(ESI): [M+H]+ = 483.2, RT 1.790 min.，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17 (s, 2H), 5.67 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.91-3.95 (m, 2H), 3.76 (d,J = 11.6 Hz, 1H), 3.48-3.32 (m, 7H), 3.29 (s, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.80-1.53 (m, 2H)。實例 184 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(化合物 484a )
Figure 02_image1552
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1554
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.34 mmol)、(1s ,3s )-3-羥基環丁烷-1-甲腈(40 mg, 0.41 mmol)及DIEA (132 mg, 1.02 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液中添加三光氣(150 mg, 0.51 mmol)。將反應於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應溶液且藉由用MeOH/DCM (7%)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(200 mg, 0.308 mmol, 90.0%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 650.0 步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯化合物 484a
Figure 02_image1556
將(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(81 mg, 0.12 mmol)於2,2,2-三氟乙酸(2 mL)及二氯甲烷(8 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內29% B至50% B)純化，以得到黃色固體狀(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(27 mg, 0.0542 mmol, 44.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 449.2, RT 1.837 min，方法= J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.94 (t,J = 7.4 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.34-3.33 (m, 2H), 3.12 (tt,J = 9.6, 8.0 Hz, 1H), 2.89-2.71 (m, 2H), 2.39 (tdd,J = 9.8, 7.7, 2.6 Hz, 2H), 1.92 (d,J = 1.7 Hz, 3H)。實例 185 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯(化合物 553a )
Figure 02_image666
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1558
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.34 mmol)、(1s,3s)-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)環丁-1-醇(130 mg, 0.64 mmol)及DIEA (132 mg, 1.02 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液中添加三光氣(150 mg, 0.51 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應溶液。藉由用甲醇/二氯甲烷(7%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s,3s)-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.239 mmol, 69.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 752.0。  步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-羥基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1560
向7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.27 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加TBAF (130 mg, 0.50 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時。接著在真空下濃縮混合物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-羥基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.165 mmol, 61.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 638.0. 步驟3：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
Figure 02_image1562
將7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-羥基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(96 mg, 0.15 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及TFA (2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內5% B至21% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯(60 mg, 0.123 mmol, 81.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 438.2, RT 1.645 min，方法= J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.52 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 3.81 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 3.34-3.33 (m, 2H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.75-2.64 (m, 2H), 1.97-1.88 (m, 4H), 1.86 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 186 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯 (化合物 504a 及化合物 504b )
Figure 02_image1564
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1566
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (56.7 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液中添加6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-醇(173.0 mg, 1.39 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液。將所得溶液於90℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(71/29)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(247 mg, 0.36 mmol, 78 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 676.3。 步驟2：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯及(S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基酯
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-a ]咪唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(237.0 mg, 0.35 mmol)及TFA (2.5 mL, 0.35 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌30分鐘。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：X Select CSH Prep C18 OBD管柱, 5 µm,19*150mm；水(0.1% FA) : ACN = 在7 min內5% B至21% B；25 mL/min)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 504a )  (21.9 mg,0.046 mmol, 13 %產率)。RT 1.952 min( CHIRAL Cellulose-SB 0.46*10cm；3 µm；MTBE(0.1% DEA):EtOH=50:50；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2, RT 1.084 min，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.24 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 6.01-5.98 (m, 1H), 5.72-5.69 (m, 1H), 4.30-4.20 (m, 2H), 4.20-3.97 (m, 2H), 3.37-3.33(m, 2H), 3.15-3.00 (m, 1H), 2.60 (s, 1H), 1.93 (s, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 504b )  (10.5 mg, 0.0221 mmol, 6.3%產率) RT 2.419 min( CHIRAL Cellulose-SB 0.46*10cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):EtOH=50:50；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2, RT 1.084 min.，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.24 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 6.01-5.98 (m, 1H), 5.72-5.69 (m, 1H), 4.30-4.20 (m, 2H), 4.20-3.97 (m, 2H), 3.37-3.33(m, 2H), 3.15-3.00 (m, 1H), 2.60 (s, 1H), 1.93 (s, 3H)。實例 187 1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((2s ,4s )-6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-((2r ,4r )-6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲( 化合物 740a) ( 化合物 740b)
Figure 02_image1568
步驟1：7-(3-(3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1570
向氯甲酸苯酯(270 mg, 1.72 mmol)於吡啶(3 mL)中之溶液中添加7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(3 mL)及DMAP (35 mg, 0.29 mmol)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌1小時。接著添加6-氧雜螺[3.4]辛-2-胺(220 mg, 1.73 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.177 mmol, 61.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 677。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)-3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基)脲
Figure 02_image1572
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(6-氧雜螺[3.4]辛-2-基胺甲醯基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(128 mg, 0.19 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA(1 ml)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內25% B至44% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 740a )  (13.5 mg, 0.0289 mmol, 18.7%產率)。RT 2.196 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE (0.1%DEA):EtOH=70:30, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.2, RT 2.108 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.29 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.37 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.42 (s, 1H), 4.09 (q,J = 7.9 Hz, 1H), 3.70-3.60 (m, 4H), 3.25-3.35 (m,2H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.33 (s, 2H), 2.01-1.83 (m, 9H)。
鏡像異構物2 (化合物 740b ) (28.3 mg, 0.0594 mmol, 31.4%產率)。RT 3.188 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE(0.1% DEA):EtOH=70:30, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.2, RT 2.108 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.29 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.37 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.42 (s, 1H), 4.09 (q,J = 7.9 Hz, 1H), 3.70-3.60 (m, 4H), 3.25-3.35(m,2H), 2.84 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.33 (s, 2H), 2.01-1.83 (m, 9H)。實例 188 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-羥基-3-甲基-環丁基)酯(化合物 486 )
Figure 02_image1574
步驟1：3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇
Figure 02_image1576
在氮氣下，於-78℃下向3-(苄基氧基)環丁酮(4.0 g, 22.7 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之溶液中添加甲基鎂(5.03 mL, 68.19 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌2小時。藉由添加MeOH淬滅反應。在真空下濃縮所得溶液且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇(3.7 g, 19.25 mmol, 84.8%產率)。 步驟2：(3-苄基氧基-1-甲基-環丁氧基)-第三丁基-二甲基-矽烷
Figure 02_image1578
於0℃下向3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇(2.4 g, 12.48 mmol)及咪唑(4.26 g, 62.57 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加第三丁基二甲基氯矽烷(5.64 g, 37.42 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌5小時。在真空下濃縮所得溶液且藉由用石油醚/二氯甲烷(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到無色油狀(3-苄基氧基-1-甲基-環丁氧基)-第三丁基-二甲基-矽烷(3 g, 9.79 mmol, 78.4%產率)。 步驟3：7-溴-1H -1,6-萘啶-2-酮
Figure 02_image1580
於室溫下向(3-苄基氧基-1-甲基-環丁氧基)-第三丁基-二甲基-矽烷(800.0 mg, 2.61 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%, 160.0 mg, 0.15 mmol)。將所得溶液於室溫下在氫氣下攪拌16小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁醇(500 mg, 2.31 mmol, 88.5%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.96 (s, 1H), 3.70 (t,J = 7.1 Hz, 1H), 2.25-2.31 (m, 2H), 1.88-1.93 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.84 (s, 9H), 0.05 (s, 6H)。 步驟4：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1582
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(155.3 mg, 0.3 mmol)、3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁醇(127.5 mg, 0.59 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(0.15 mL, 0.88 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(87.0 mg, 0.29 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(130 mg, 0.17 mmol, 57.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 768.4。 步驟5：三氟甲磺酸[7-(第三丁氧基羰基胺基)-1,6-萘啶-2-基]酯
Figure 02_image1584
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(110.0 mg, 0.14 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(3 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮所得溶液，溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。接著在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：Xselect  CSH OBD管柱30*150 mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內7% B至37% B)純化，以得到灰白色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-羥基-3-甲基-環丁基)酯(18 mg, 0.037 mmol, 25.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 1.724  min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.58-4.65 (m,J = 7.3 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.37 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 2.49-2.44 (m, 2H), 2.21-2.07 (m, 2H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.23 (s, 3H)。實例 189 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲、1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲, 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲(化合物 730a 、化合物 730b ；化合物 730c 及化合物 730d )
Figure 02_image1586
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(3-甲氧基環戊基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1588
向6-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-5-甲基-2,3-二氫-1,4-苯并噁嗪-4-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.62 mmol)及DIEA (0.5 ml)於二氯甲烷(16 mL)中之混合物中添加3-甲氧基環戊胺鹽酸鹽(94 mg, 0.62 mmol)及DIEA (0.5 ml)於二氯甲烷(1 ml)中之混合物。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀6-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-5-甲基-2,3-二氫-1,4-苯并噁嗪-4-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.451 mmol, 72.6%產率)。LC/MS (ESI) [M+H]+ = 667。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲(化合物 730a )、1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲(化合物 730b )、1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3S )-3-甲氧基環戊基)脲(化合物 730c )及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3R )-3-甲氧基環戊基)脲(化合物 730d )
向6-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環戊基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-5-甲基-2,3-二氫-1,4-苯并噁嗪-4-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.60 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內22% B至43% B)純化殘餘物，以得到產物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到四種異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 730a ) (41.3 mg, 0.0887 mmol, 14.8%產率)。RT 1.733 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1% DEA): EtOH=60:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 2.093 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.11 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.08 (q,J = 7.2 Hz, 1H), 3.85 (dd,J = 6.1, 3.2 Hz, 1H), 3.32-3.36 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 1.97 (s, 2H), 2.06-1.84 (m, 4H), 1.62-1.51 (m, 2H), 1.38 (dt,J = 11.4, 7.5 Hz, 1H)。
鏡像異構物2 (化合物 730c ) (24.1 mg, 0.0518 mmol, 8.6%產率)。RT 2.900 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE(0.1%DEA): EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 2.125 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.27 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.72 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.06 (q,J = 6.7 Hz, 1H), 3.78 (tt,J = 6.2, 3.5 Hz, 1H), 3.41-3.31(m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.19-2.03 (m, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.79-1.60 (m, 2H), 1.58-1.43 (m, 2H)。
鏡像異構物3 (化合物 730b ) (18.3 mg, 0.0393 mmol, 6.5%產率), RT 2.264 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA): EtOH=60:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 2.093 min.，方法K.1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.27 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.11 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 6.74 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.08 (q,J = 7.2 Hz, 1H), 3.85 (dd,J = 6.1, 3.2 Hz, 1H), 3.32-3.36 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 1.97 (s, 2H), 2.06-1.84 (m, 4H), 1.62-1.51 (m, 2H), 1.38 (dt,J = 11.4, 7.5 Hz, 1H)。
鏡像異構物4 (化合物 730d ) (33.8mg,0.0726mmol, 12.1%產率)。RT 4.378 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE (0.1%DEA): EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455.2, RT 2.125 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.27 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.72 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.06 (q,J = 6.7 Hz, 1H), 3.78 (tt,J = 6.2, 3.5 Hz, 1H), 3.41-3.31(m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.19-2.03 (m, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.79-1.60 (m, 2H), 1.58-1.43 (m, 2H)。實例 190 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯(化合物 493 )
Figure 02_image1590
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1592
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.29 mmol)及1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-醇(220 mg, 1.46 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加DIEA (200 mg, 1.55mmol)。接著添加三光氣(250 mg, 0.84 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時且接著濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.171 mmol, 59.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 701。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image1590
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.17 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應溶液且藉由製備型HPLC純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)酯(38.1 mg, 0.0761 mmol, 44.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =501.2, Rt = 1.941 min，方法M。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 6.12 (s, 1H), 5.21 (tt,J = 6.7, 4.8 Hz, 1H), 4.24 (dd,J = 9.6, 6.7 Hz, 2H), 3.94 (dd,J = 9.7, 4.7 Hz, 2H), 3.38 (s, 2H),  3.08 (s, 3H), 2.98 (t,J = 6.5 Hz, 2H), 1.98 (d,J = 1.4 Hz, 5H)。實例 191 (±)-反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 441ab )
Figure 02_image1595
及
Figure 02_image1597
步驟1：(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1599
及
Figure 02_image1601
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1.19 g, 2.26 mmol)、DIEA (5 mL, 2.26 mmol)及(±)-反式 - 4-甲基四氫呋喃-3-醇(578 mg, 5.66 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加二氯甲烷(10 mL)中之三光氣(537 mg, 1.81 mmol)。將反應於室溫下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(22/78)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(900 mg, 1.377 mmol, 60.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 654。 步驟2：(±)-反式-N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image1603
及
Figure 02_image1597
將(±)-反式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(900 mg, 1.38 mmol)及TFA (2 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應物。藉由反相層析(乙腈0-50/水中之0.1% FA)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式-N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯甲酸鹽(271 mg, 0.543 mmol, 39.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 2.307，方法= M。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 3.97 (q,J = 7.4, 6.8 Hz, 2H), 3.75 (d,J = 10.6 Hz, 2H), 3.36 (s, 2H), 3.33 (dd,J = 8.2, 4.9 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.05 (s, 3H)。
藉由對掌性SFC (Chiralpak IC, 150 × 30 mm × 5 µM；具有0.1% NH4 OH之等度45%甲醇)進一步純化外消旋混合物，以產生兩種單一鏡像異構物：
鏡像異構物1：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 441a ) (86 mg)：RT = 1.204 min( CHIRALPAK IC；具有0.1% NH4 OH之等度50% MeOH，2.5 min運行時間)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT = 3.57 min，方法N。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.13 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.85 (dt, J = 4.6, 2.1 Hz, 1H), 4.34 - 4.26 (m, 2H), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 3.75 (m, 1H), 2.34-2.32 (m,1H), 1.93 (s, 3H), 1.06 (d, J = 7.2 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 441b ) (80 mg)：RT = 1.777 min( CHIRALPAK IC；具有0.1% NH4 OH之等度50% MeOH, 2.5 min運行時間)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT = 3.56 min，方法N。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.12 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.85 (dt, J = 4.6, 2.1 Hz, 1H), 4.34 - 4.26 (m, 2H), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 3.75 (m, 1H), 3.37-3.34 (m, 3H), 2.36-2.31 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.06 (d, J = 7.2 Hz, 3H)。實例 192 1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(順式)-3-氰基環戊基]脲(化合物 726 )
Figure 02_image1605
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(順式)-3-氰基環戊基]胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1607
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)及DMAP (37.8 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加(順式)-3-胺基環戊腈(135.8 mg, 0.93 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將所得溶液於60℃下攪拌4小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(94/6)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(順式)-3-氰基環戊基]胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(175 mg,0.26 mmol, 85 %產率)。LC/MS (ESI) [M+H]+ = 662.3。 步驟2：1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(順式)-3-氰基環戊基]脲
Figure 02_image1609
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(順式)-3-氰基環戊基]胺甲醯基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(170.0 mg, 0.26 mmol)及TFA (1.0mL, 0.26 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm 5 µm；水(10mmol/L NH4 HCO3 ): ACN = 在7 min內17% B至39% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到白色固體狀1-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-3-[(順式)-3-氰基環戊基]脲(65 mg, 0.14 mmol, 55%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.2；RT 1.839 min；方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.35-7.20 (m, 2H), 6.75 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 2H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.50-2.26 (m, 2H), 2.10-1.85 (m, 5H), 1.70-1.50 (m, 2H)。實例 193 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-丙醯基氮雜環丁-3-基酯(化合物 492 )
Figure 02_image1611
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1613
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)及1-boc-3-羥基氮雜環丁烷(500 mg, 2.89 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加DIEA (200 mg, 1.55 mmol)。接著添加三光氣(250 mg, 0.84 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應溶液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.304 mmol, 53.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 723。 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image1615
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.30 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加HCl/二噁烷(2 mL, 3 mol/L)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h且接著在真空下濃縮。粗產物未經純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 423。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-丙醯基氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image1611
於室溫下向N -[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(50 mg, 0.12 mmol)及丙酸酐(20 mg, 0.15 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TEA (20 mg, 0.20 mmol)。將反應於25℃下攪拌1 h且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱19*250mm, 10 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：在10 min內25% B至37% B)純化粗產物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-丙醯基氮雜環丁-3-基)酯(22.6 mg, 0.0472 mmol, 39.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 479.2, RT 1.765 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.36 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.45-5.39 (m, 1H), 5.20 (td,J = 6.8, 3.5 Hz, 1H), 4.52-4.43 (m, 1H), 4.20 (dd,J = 10.7, 6.8 Hz, 1H), 4.11 (dd,J = 9.8, 4.0 Hz, 1H), 3.81 (dd,J = 10.7, 4.0 Hz, 1H), 3.35 (t,J = 6.5 Hz, 2H), 2.85 (t,J = 6.5 Hz, 2H), 2.09 (qd,J = 7.4, 1.6 Hz, 2H), 1.92 (s, 2H), 1.86 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 0.96 (t,J = 7.5 Hz, 3H)。實例 194 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-1-甲基-氮雜環丁-3-基)甲酯(化合物 450 )
Figure 02_image1617
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-氮雜環丁-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1619
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.29 mmol)、3-氟-3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(116 mg, 0.57 mmol)及DIEA (108 mg, 0.84 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(120 mg, 0.40 mmol)。將反應物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用甲醇/二氯甲烷(15%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-氮雜環丁-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(85 mg, 0.101 mmol, 35.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 757.0。 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟氮雜環丁-3-基)甲酯
Figure 02_image1621
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-氮雜環丁-3-基)甲氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b] [1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.19 mmol)於二氯甲烷(16 mL)及TFA (4 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟氮雜環丁-3-基)甲酯(85 mg, 0.149 mmol, 78.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 456.0。 步驟3：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-1-甲基-氮雜環丁-3-基)甲酯
Figure 02_image1617
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟氮雜環丁-3-基)甲酯(85 mg, 0.17 mmol)於甲醇(10 mL)及甲醛(40%, 15 mg, 0.47 mmol)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加NaBH4 (18 mg, 0.46 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，以得到白色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-1-甲基-氮雜環丁-3-基)甲酯(7.8 mg, 0.015 mmol, 8.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471.2, RT 2.204 min，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.24 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.29 (d,J = 4.8 Hz, 2H), 3.51 (dd,J = 12.5, 8.8 Hz, 2H), 3.36 (s, 2H), 3.11 (dd,J = 21.6, 8.4 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 195 (1r , 3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯(化合物 576a )
Figure 02_image1623
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1r ,3r )-3-甲氧基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1625
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氯-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.37 mmol)、N ,N -二異丙基乙胺(0.32 mL, 1.84 mmol)及反式-3-甲氧基環丁醇(76.0 mg, 0.74 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(76.0 mg, 0.26 mmol)。將混合物於0℃下攪拌30 min。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(50/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1r ,3r )-3-甲氧基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.298 mmol, 80.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 652.3。 步驟2：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯
Figure 02_image1627
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.30 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(6 mL)。將混合物於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150m, 5 µm 移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內11% B至32% B)純化殘餘物，以得到白色固體狀(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基環丁酯(23.8 mg,0.053 mmol, 18%產率)。任意地分配立體化學。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 2.031 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 9.22 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.93 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 4.79-4.72 (m, 1H), 4.41 (t,J = 4.4Hz, 2H), 3.71-3.65 (m, 1H), 3.51-3.48 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.87-2.81 (m, 2H), 2.11-2.02 (m, 2H), 2.02 (s, 3H)。實例 196 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯(化合物 577a 及化合物 577b )
Figure 02_image1629
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(二氟甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1631
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg, 0.72 mmol)及3-(二氟甲基)環丁醇(180 mg, 1.47 mmol)於二氯甲烷(20 mL)及DIEA (300 mg, 2.33 mmol)中之溶液中添加三光氣(300 mg, 1.01 mmol)。將反應於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(7%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(二氟甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.297 mmol, 41.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 674.0。  步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二氟甲基)環丁酯
Figure 02_image1633
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(二氟甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.18 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及2,2,2-三氟乙酸(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內20% B至43% B)純化殘餘物。對掌性HPLC拆分得到兩種鏡像異構物。任意地分配立體化學。
鏡像異構物1：(化合物 577a ) (40 mg, 0.0827 mmol, 46.4%產率)。RT 10.917min (CHIRALPAK IA, 2*25cm, 5 µm；移動相A：Hex:DCM=3:1(10mM NH3 -MEOH)，移動相B：EtOH；流速：18 mL/min；梯度：在15 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ =474.2, RT 1.321 min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 3H), 5.67 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 5.05 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.36 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.73 (dtt,J = 11.9, 7.5, 4.0 Hz, 1H), 2.42 (td,J = 7.7, 3.6 Hz, 2H), 2.36-2.25 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：(化合物 577b ) (8.6 mg, 0.0181 mmol, 10.2%產率)。RT 14.166 min (CHIRALPAK IA, 2*25cm, 5 µm；移動相A：Hex:DCM=3:1(10mM NH3-MEOH)，移動相B：EtOH；流速：18 mL/min；梯度：在15 min內50 B至50 B)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 474.2, RT 1.321 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 3H), 5.67 (d,J = 2.8 Hz, 1H), 5.05 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.36 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.73 (dtt,J = 11.9, 7.5, 4.0 Hz, 1H), 2.42 (td,J = 7.7, 3.6 Hz, 2H), 2.36-2.25 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 197 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(6R )-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基]酯及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(6S )-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基]酯(化合物 578a 及化合物 578b)
Figure 02_image1635
Figure 02_image1637
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1639
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(154.8 mg, 0.24 mmol)及DMAP (29.3 mg, 0.24 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液中添加6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-醇(90.0 mg, 0.72 mmol)於1,4-二噁烷(1 mL)中之溶液。將反應物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(92/8)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(123 mg, 0.18 mmol, 76%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 677.3 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(6R )-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基]酯及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(6S )-6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基]酯
Figure 02_image1641
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(6,7-二氫-5H -吡咯并[1,2-b ][1,2,4]三唑-6-基氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120.0 mg, 0.18 mmol)及TFA (2.5 mL)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌30分鐘。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(0.1% FA): ACN= 在7 min內5% B至31% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 578a , 11.2 mg, 0.024 mmol, 13 %產率)。RT 2.251 min( CHIRALPAK ID-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH=50:50；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2, RT 1.873 min，方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.00 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.92 (t,J = 6.3 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.60-4.51 (m, 1H), 4.35-4.20 (m, 3H), 3.44-3.30 (m, 4H), 1.93 (s, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 578b , 10.9 mg, 0.023 mmol, 13%產率)。RT 3.276 min( CHIRALPAK ID-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH=50:50；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2, RT 1.873min，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.00 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.92 (t,J = 6.3 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.60-4.51 (m, 1H), 4.35-4.20 (m, 3H), 3.44-3.30 (m, 4H), 1.93 (s, 3H)。實例 198 (8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,1-二氧離子基四氫-2H -噻喃-4-基酯(化合物 579 )
Figure 02_image1643
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1,1-二氧離子基四氫-2H -噻喃-4-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H )-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1645
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-5-鎓-1-甲酸第三丁酯(100.0 mg, 0.19 mmol)、四氫-2H -噻喃-4-醇1,1-二氧化物(57.26 mg, 0.38 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(122.95 mg, 0.95 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加三光氣(56.57 mg, 0.19 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應。將反應混合物用二氯甲烷萃取。合併有機層，在真空下濃縮且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1,1-二側氧基噻-4-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.143 mmol, 75%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 700.3。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1,1-二氧離子基四氫-2H -噻喃-4-基酯
Figure 02_image1647
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1,1-二側氧基噻-4-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(90.0 mg, 0.13 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(1.0 mL)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮所得溶液。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X select  CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內5% B至17% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1,1-二側氧基噻-4-基)酯(32.1 mg, 0.064 mmol, 50%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 500.2, RT 2.194 min；方法M。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 5.62 (s, 1H), 4.99-5.02 (m, 1H), 3.28-3.16 (m, 6H), 2.89 (t,J = 6.4 Hz, 2H), 2.21 (q,J = 5.5, 4.8 Hz, 4H), 1.98-1.87 (m, 5H)實例 199 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯(化合物 580 )
Figure 02_image1649
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1651
於0℃下向2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸第三丁酯(920 mg, 3.81 mmol)及DIEA (490 mg, 3.8 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加三光氣(300 mg, 1.01mmol)。將反應物於0℃下攪拌30 min。接著添加二氯甲烷(10 mL)中之7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1000 mg, 1.9 mmol)及DIEA (490 mg, 3.8 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。由水淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 0.757 mmol, 39.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =793。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯
Figure 02_image1653
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(7-第三丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 0.76 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加TFA (4 mL)。將反應於25℃下攪拌1 h且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5 B至43 B)純化殘餘物，以得到(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯。將溶解於甲醇(50 mL)中之產物用HCl之1,4-二噁烷溶液(0.04 M)處理，以得到紅色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸7-氮雜螺[3.5]壬-2-基酯鹽酸鹽(270.5 mg, 0.5113 mmol, 67.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =493.3, RT 0.635 min；方法L；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.17 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.87 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 5.80 (bs, 2H), 4.99 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 4.47 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.47 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.94 (s, 2H), 2.43-2.34 (m, 2H), 2.01 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.96-1.86 (m, 2H), 1.81-1.73 (m, 4H)。實例 200 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 581a )
Figure 02_image1655
步驟1：2-(((5-溴-2-碘-4-甲基吡啶-3-基)(第三丁氧基羰基)胺基)甲基)丙烯酸乙酯
Figure 02_image1657
向N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(8.0 g, 19.37 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(80 mL)中之溶液中添加NaH (1.55 g, 38.75 mmol, 60%純度)。將混合物於0℃下攪拌30 min。添加2-(溴甲基)丙烯酸乙酯(6.0 g, 31.08 mmol)且將混合物於0℃下攪拌2小時。將所得溶液用乙酸乙酯稀釋且接著藉由水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由具有水(0.01% NH4 HCO3 )/ACN (50/50)之反相急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀2-[[(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-第三丁氧基羰基-胺基]甲基]丙-2-烯酸乙酯(3.3 g, 6.284 mmol, 32.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 525。 步驟2：7-溴-8-甲基-1,5-萘啶-1,3(2H)-二甲酸1-(第三丁酯)3-乙酯
Figure 02_image1659
向2-[[(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-第三丁氧基羰基-胺基]甲基]丙-2-烯酸乙酯(3.3 g, 6.28 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(100 mL)中之溶液中添加乙酸鈀(2.0 g, 8.93 mmol)、TBAB (2.0 g, 6.21 mmol)及碳酸氫鈉(1.6 g, 19.05 mmol)。將混合物於90℃下攪拌4小時。濃縮後，藉由用石油醚/乙酸乙酯(90/10)溶析之Al2 O3 凝膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀7-溴-8-甲基-1,5-萘啶-1,3(2H)-二甲酸1-(第三丁酯) 3-乙酯(800 mg, 2 mmol, 32%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 397。 步驟3：7-溴-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1661
向7-溴-8-甲基-1,5-萘啶-1,3(2H)-二甲酸1-(第三丁酯) 3-乙酯(800 mg, 2.02 mmol)於乙醇(20 mL)中之溶液中添加NaBH4 (230 mg, 9.58 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(92/8)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-3-(羥基甲基)-8-甲基-四氫萘-1-甲酸第三丁酯(539 mg, 1.517 mmol, 75.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 357。 步驟4：(5-(第三丁氧基羰基)-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)硼酸
Figure 02_image1663
向7-溴-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(530 mg, 1.48 mmol)及B2 Pin2 (1890 mg, 7.47 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之混合物中添加Pd(dppf)Cl2 (220 mg, 0.30 mmol)及乙酸鉀(440 mg, 4.49 mmol)。將混合物於90℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由用水(0.01% NH4 HCO3 )/ACN (80/20)溶析之急速反相層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀(5-(第三丁氧基羰基)-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)硼酸(400 mg, 1.242 mmol, 83.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 323。 步驟5：7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1665
向8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(480.0mg, 1.49mmol)及(5-(第三丁氧基羰基)-7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)硼酸(480 mg, 1.49 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)及水(1.5 mL)中之混合物中添加Pd(dppf)Cl2 (220 mg, 0.30 mmol)、碳酸鉀(615 mg, 4.46 mmol)。將混合物於90℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.848 mmol, 57%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 473。 步驟6：7-(3-胺基-8-氯-7-氟-8-甲基-8l5-異喹啉-6-基)-3-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1667
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(190 mg, 0.40 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(76 mg, 0.50 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之混合物中添加咪唑(114 mg, 1.67 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.255 mmol, 63.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 602。 步驟7：3-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-7-(8-氯-7-氟-3-(((((R)-四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-3,4-二氫-1,5-萘啶-1(2H)-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1669
於0℃下向8-胺基-7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.17 mmol)及3-羥基四氫呋喃(80 mg, 0.91 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之混合物中添加三光氣(40 mg, 0.13 mmol)及DIEA (120 mg, 0.93 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析將殘餘物純化為黃色固體狀8-胺基-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-7-[8-氯-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.142 mmol, 83.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 701。 步驟8：(6-(7-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3,8-二基)二胺基甲酸第三丁酯((R )-四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image1671
向3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-7-[8-氯-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.17 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(599 mg, 5.11 mmol)於1,4-二噁烷(4 mL)中之混合物中添加Pd2 (dba)3 (48 mg, 0.050 mmol)、碳酸銫(168 mg, 0.52 mmol)及BrettPhos (48 mg, 0.090 mmol)。將混合物於70℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(95 mg, 0.1215 mmol, 71%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 682。  步驟9：(7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3,8-二基)二胺基甲酸第三丁酯((R )-四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image1673
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-8-甲基-3,4-二氫-2H -喹啉-1-甲酸第三丁酯(90 mg, 0.12 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液中添加TBAF.3H2 O (108 mg, 0.34 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(四氫呋喃-3-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -喹啉-1-甲酸第三丁酯(50mg, 0.075 mmol, 65.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 568。 步驟10：(R )-(8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1675
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R)-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-(羥基甲基)-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(30 mg, 0.040 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep Phenyl OBD管柱5 µm,19*250mm；移動相A：水(0.1% FA)；移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在12 min內7% B至20% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(R)-(8-胺基-7-氟-6-(7-(羥基甲基)-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(2.7 mg, 0.0053 mmol, 11.7%產率)。非鏡像異構物之混合物。LCMS (ESI) [M+H]+ = 478, RT 1.382 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.13 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.46 (s, 1H), 5.28 (tt,J = 4.4, 2.1 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 3.92- 3.67 (m, 4H), 3.41-3.52 (m, 3H), 2.96 (t,J = 10.4 Hz, 1H), 2.86 (dd,J = 16.7, 5.0 Hz, 1H), 2.66-2.52 (m, 1H), 2.27-2.11 (m, 1H), 2.02 (s, 2H), 1.88 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 201 (1S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯及(1R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯(化合物 582a 及化合物 582b 3)
Figure 02_image1677
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,3R )-3-羥基環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1679
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.23 mmol)及DMAP (28.5 mg, 0.23 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之溶液中添加(±)-順式-環戊烷-1,3-二醇(48.0 mg, 0.47 mmol)於1,4-二噁烷(1 mL)中之溶液。將所得溶液於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-羥基環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg,0.23 mmol, 98 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =654.3 步驟2：(1S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯及(1R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環戊酯
Figure 02_image1681
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S,3R)-3-羥基環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(210.0 mg, 0.32 mmol)及TFA (2.5 mL)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於25℃下攪拌30分鐘。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 ): ACN = 在7 min內14% B至35% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 582a , 13.1 mg, 0.029 mmol, 18%產率)。RT 1.855 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):EtOH=70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ =454.2, RT 1.980 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.13-4.94 (m, 1H), 4.63 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.35-4.25 (m, 2H), 4.14-4.00 (m, 1H), 3.41-3.37 (m, 2H), 2.37-2.21 (m, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.87-1.69 (m, 3H), 1.65-1.47 (m, 2H)。
鏡像異構物2  (化合物 582b , 12.2 mg, 0.027 mmol, 17%產率)：滯留時間：3.647 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):EtOH=70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ =454.2, RT 1.973 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.95 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 5.13-4.94 (m, 1H), 4.63 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.35-4.25 (m, 2H), 4.14-4.00 (m, 1H), 3.41-3.37 (m, 2H), 2.37-2.21 (m, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.87-1.69 (m, 3H), 1.65-1.47 (m, 2H)。實例 202 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1s ,3s )-3-氟環丁基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲( 化合物 748a 及化合物 748b )
Figure 02_image1683
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1685
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg, 0.72 mmol)、DMAP (88 mg, 0.72 mmol)及吡啶(5 mL)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加氯甲酸苯酯(566 mg, 3.61 mmol) 。將所得溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加3-氟環丁胺鹽酸鹽(363 mg, 2.89 mmol)。將混合物於50℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10%)溶析之矽膠上急速層析純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.306 mmol, 42.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 641.0。 步驟2：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1s ,3s )-3-氟環丁基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1r ,3r )-3-氟環丁基)脲
Figure 02_image1687
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁基)胺甲醯基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.47 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及2,2,2-三氟乙酸(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由SFC純化殘餘物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1：黃色固體狀(化合物 748a ) (10 mg, 0.0227 mmol, 4.8%產率)。RT 6.70 min (管柱：Ultimate XB-NH2, 21.2*250mm；5 µm；移動相A：CO2 ，移動相B：MeOH: ACN =2:8 (0.1% NH3 .H2 O)；流速：50 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 441.2, RT 2.370 min.，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.36 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.75 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.94-4.76 (m,1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.78-3.72 (m, 1H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.80-2.72 (m, 2H), 2.13-2.09 (m, 2H), 1.93 (d,J = 1.7 Hz, 3H)。
異構物2：黃色固體狀(化合物 748b ) (27 mg, 0.0613 mmol, 13.1%產率)。RT 7.57 (管柱：Ultimate XB-NH2, 21.2*250mm；5 µm；移動相A：CO2 ，移動相B：MeOH: ACN =2:8 (0.1%NH3 .H2 O)；流速：50 mL/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 441.2, RT 2.370 min.，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.30 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.38 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.76 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.16 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.33-5.18 (m, 1H), 4.30 (t,J = 4.4 Hz, 3H), 3.38 (d,J = 4.4 Hz, 3H), 2.55 (s, 2H), 2.42-2.23 (m, 2H), 1.93 (d,J = 1.7 Hz, 3H)。實例 203 (3S ,4S )-8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯；(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯；(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯；及(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯(化合物 583a 、化合物 583b 、化合物 583c 及化合物 583d )
Figure 02_image1689
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基四氫哌喃-4-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1691
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 0.95 mmol)、DIEA (614.8 mg, 4.76 mmol)及3-甲氧基四氫哌喃-4-醇(251.5 mg, 1.9 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之溶液中添加三光氣(282.4 mg, 0.95 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1.5小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(98/2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基四氫哌喃-4-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg, 0.55 mmol, 58.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =684。 步驟2：(3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯； (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯； (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯； 及(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基四氫-2H -哌喃-4-基酯
Figure 02_image1693
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基四氫哌喃-4-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380.0 mg, 0.56 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮混合物。藉由具有以下條件之HPLC純化殘餘物：(管柱：Xselect CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內7% B至37% B)，以得到產物之異構混合物。藉由對掌性HPLC進一步分離外消旋產物，以得到四種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1：(化合物 583a ) (23.7 mg, 0.05 mmol, 8.8%產率)。RT 1.686 min( 管柱：CHIRALPAK ID-3 0.46*5cm；3 µm, 移動相：MTBE (0.1% DEA):EtOH = 60:40, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 484.2, RT 2.156 min.，方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.12 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 5.14-5.18 (m, 1H), 4.34-4.25 (m, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H), 3.61-3.53 (m, 3H), 3.37 (m, 5H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.83-1.70 (m, 1H)。
異構物2：(化合物 583b ) (2.5mg, 0.005 mmol, 0.9%產率)。RT 2.489 min( 管柱：CHIRALPAK ID-3 0.46*5cm；3 µm, 移動相：MTBE (0.1% DEA):EtOH = 60:40, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 484.2, RT 2.092 min.,；方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.34-4.25 (m, 2H), 3.98 (dd,J = 9.6, 6.1 Hz, 1H), 3.76-3.80 (m, 1H), 3.51-3.34 (m, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.31-3.22 (m, 2H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.60 (m, 1H)。
異構物3：(化合物 583c ) (5.1 mg, 0.01 mmol, 1.9%產率)。RT 2.109 min( 管柱：CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE (0.1%DEA):EtOH = 60:40, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 484.2, RT 2.092 min.，方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.14 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.34-4.25 (m, 2H), 3.98 (dd,J = 9.6, 6.1 Hz, 1H), 3.76-3.80 (m, 1H), 3.51-3.34 (m, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.31-3.22 (m, 2H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.60 (m, 1H)。
異構物4：(化合物 583d ) (47.8 mg, 0.09 mmol, 17.8%產率)。RT 3.113 min( 管柱：CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE (0.1% DEA):EtOH = 60:40, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 484.2, RT 2.156 min.，方法L。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.12 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 5.14-5.18 (m, 1H), 4.34-4.25 (m, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H), 3.61-3.53 (m, 3H), 3.37 (m, 5H), 1.93 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.83-1.70 (m, 1H)。實例 204 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯(化合物 550b )
Figure 02_image1695
步驟1：4-((1s ,3s )-3-(苄基氧基)環丁基)嗎啉
Figure 02_image1697
將3-(苄基氧基)環丁-1-酮(1.0 g, 5.68 mmol)及嗎啉(988.8 mg, 11.35 mmol)於甲醇(18 mL)中之溶液於22℃下攪拌1小時。接著添加NaBH4 (644.06 mg, 17.03 mmol)且將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到無色油狀4-(3-苄基氧基環丁基)嗎啉(920 mg, 3.7197 mmol, 65.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 248.1。 步驟2：(1s,3s)-3-嗎啉基環丁-1-醇
Figure 02_image1699
將4-(3-苄基氧基環丁基)嗎啉(740.0 mg, 2.99 mmol)及Pd/C(10%, 150 mg)於甲醇(15 mL)中之混合物在氫氣(1 atm)下於室溫下攪拌24小時。過濾反應混合物且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀3-嗎啉基環丁醇(100 mg, 0.64 mmol, 21.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 158.1。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.92 (d,J = 6.9 Hz, 1H), 3.76-3.80 (m, 1H), 3.54 (t,J = 4.7 Hz, 4H), 2.30 (qd,J = 7.8, 4.7 Hz, 2H), 2.19 (q,J = 6.3, 5.5 Hz, 4H), 2.18-2.07 (m, 1H), 1.58 (qd,J = 8.7, 2.3 Hz, 2H)。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-嗎啉基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1701
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120.0 mg, 0.23 mmol)、N ,N -二異丙基乙胺(0.12 mL, 0.69 mmol)及3-嗎啉基環丁醇(72.0 mg, 0.4600 mmol)於二氯甲烷(12 mL)中之溶液中添加三光氣(48.0 mg, 0.1600 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。將反應物用水稀釋。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-嗎啉基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg,0.21 mmol, 92.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 709.3。 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯
Figure 02_image1703
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-嗎啉基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.21 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (5 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時且在真空下濃縮。將殘餘物用乙腈(2 mL)稀釋。用NaHCO3 將反應混合物調節至pH 8。過濾後，收集固體，以得到粗產物。藉由製備型HPLC (管柱：Xselect  CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min)純化粗產物，以得到紅色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-嗎啉基環丁基)酯(62.6 mg, 0.1221 mmol, 57.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.3, RT 1.434 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.87 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.96 (d,J = 6.0 Hz ,1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.99-3.80 (m, 4H), 3.49-3.31 (m, 5H), 2.98-2.91 (m, 2H), 2.75-2.72 (m, 2H), 2.60-2.50 (m, 1H), 2.00 (s, 3H)。實例 205 (1s ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-((6aR ,7aS )-4-甲基-6,6a ,7,7a-四氫-5h -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯及(1s ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-((6aS ,7aR )-4-甲基-6,6a ,7,7a -四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯(化合物 584a 及化合物 584b )
Figure 02_image1705
步驟1：N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1707
在氮氣下，於室溫下向N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(5.0 g, 12.11 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼戊環(2.8 g, 18.18 mmol)於1,4-二噁烷(50 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2 (0.85 g, 1.16 mmol)及K2 CO3 (5.0 g, 36.23 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(3.5 g, 11.175 mmol, 92.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 313。 步驟2：N-烯丙基-N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1709
將N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(1000 mg, 3.19 mmol)及NaHMDS (4 mL, 8 mmol, 2 mol/L，於THF中)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液於室溫下在氮氣下攪拌30 min。接著添加NaI (1198 mg, 7.99 mmol)及烯丙基溴(966 mg, 7.98 mmol)。將混合物於室溫下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀N-烯丙基-N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(670 mg, 1.897 mmol, 59.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 353。 步驟3：7-溴-8-甲基-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1711
將N -烯丙基-N-(5-溴-4-甲基-2-乙烯基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(4.0 g, 11.32 mmol)及第2代格拉布觸媒(Grubbs catalyst) (2.0 g, 2.36 mmol)於二氯甲烷(200 mL)中之溶液於40℃下在氮氣下攪拌2小時。將反應溶液用水洗滌。在真空下濃縮有機相。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀7-溴-8-甲基-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(2.68 g, 8.241 mmol, 72.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 325. 步驟4：5-溴-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1713
將三甲基碘化鋶(8.1 g, 36.81 mmol)及t-BuOK (3.3 g, 29.46 mmol)於DMSO (100 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。接著添加7-溴-8-甲基-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(2.4 g, 7.38 mmol)且將混合物於50℃下攪拌16小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用碳酸鈉(水溶液)及鹽水洗滌。乾燥有機相，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀5-溴-4-甲基-1,1a,2,7b-四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1500 mg, 4.422 mmol, 59.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 339。 步驟5：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1715
將5-溴-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1500 mg, 4.42 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(5600 mg, 22.05 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (323 mg, 0.44 mmol)及KOAc (1300 mg, 13.27  mmol)於1,4-二噁烷(60 mL)及水(6 mL)中之溶液於60℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/10)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1500 mg, 3.88 mmol, 87.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 387。 步驟6：5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1717
將4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1.5 g, 3.90 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(1.35 g, 4.2 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (300 mg, 0.30 mmol)及K2 CO3 (1650 mg, 1.20 mmol)於1,4-二噁烷(150 mL)及水(3 mL)中之混合物於60℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1200 mg, 2.637 mmol, 67.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 455。 步驟7：5-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1719
於室溫下向5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-1,1a,2,7b-四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(1.0 g, 2.2 mmol)於甲苯(100 mL)中之溶液中添加鄰苯二甲酸酐(700 mg, 4.73 mmol)。將所得溶液於100℃下攪拌16 h且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/3)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色固體狀5-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a,2,7b-四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(700 mg, 1.197 mmol, 54.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 585。 步驟8：5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b-四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1721
在氮氣下，於室溫下向5-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(640 mg, 1.09 mmol)及NH2 Boc (2.6 g, 22.22 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)中之溶液中添加Brettphos Pd G3 (200 mg, 0.22 mmol)及K2 CO3 (450 mg, 3.26 mmol)。將所得混合物於90℃下攪拌2 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物未經純化即用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 666。 步驟9：5-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1723
在氮氣下，於室溫下向5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(600 mg, 0.90 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中添加N2 H4 .H2 O (600 mg, 9.6 mmol)。將所得溶液於40℃下攪拌2 h。藉由用二氯甲烷/甲醇(92/8)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀5-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a,2,7b-四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.7468 mmol, 82.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 536。 步驟10：5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1725
於室溫下向5-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.56 mmol)及3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁醇(250 mg, 1.24 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加DIEA (730 mg, 5.66 mmol)。接著添加三光氣(140 mg, 0.47 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.288 mmol, 51.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 764。 步驟11：(1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-((6ar ,7as )-4-甲基-6,6a ,7,7a -四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-((6as ,7ar )-4-甲基-6,6a ,7,7a -四氫-5H -環丙[c ][1,5]萘啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
Figure 02_image1727
於室溫下向5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-1,1a ,2,7b -四氫環丙[c ][1,5]萘啶-3-甲酸第三丁酯(220 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加TFA (3 mL)。在真空下濃縮反應物且藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性製備型HPLC (管柱：CHIRALPAK IF, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE (10mM NH3 -MeOH)，移動相B：EtOH；流速：13 mL/min；梯度：在38 min內15 B至15 B)分離混合物，以得到兩種鏡像異構物。關於環丁基之相對立體化學係如所繪示。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 584a ) (27.1 mg, 0.062 mmol, 22.8%產率)。RT 3.018 min( CHIRALPAK IF-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA):EtOH =在8 min內85:15；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 450.2, RT 1.057 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.20 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.53 (p,J = 7.4 Hz, 1H), 3.81 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 3.46-3.36 (m, 1H), 3.25-3.14 (m, 1H), 2.78-2.63 (m, 2H), 2.09 (td,J = 8.5, 4.3 Hz, 1H), 2.01-1.85 (m, 6H), 1.30-1.28 (m, 1H), 0.95 (dt,J = 8.4, 4.2 Hz, 1H)。
鏡像異構物2 (化合物 584b ) (25.9 mg, 0.059 mmol, 21.8%產率)。RT 4.381 min( CHIRALPAK IF-3, 46*5cm, 3 µm；MTBE (0.1% DEA):EtOH =在8 min內85:15；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 450.2, RT 1.057min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.20 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.53 (p,J = 7.4 Hz, 1H), 3.81 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 3.46-3.36 (m, 1H), 3.25-3.14 (m, 1H), 2.78-2.63 (m, 2H), 2.09 (td,J = 8.5, 4.3 Hz, 1H), 2.01-1.85 (m, 6H), 1.30-1.28 (m, 1H), 0.95 (dt,J = 8.4, 4.2 Hz, 1H)。實例 206 (1s ,3s )-(8-胺基-6-((S )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-6-((R )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯(化合物 560a 及化合物 560b )
Figure 02_image1729
步驟1：N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N-(3-溴-2-甲基-丙基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1731
在氮氣下，將N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(4.40 g, 10.65 mmol)、3-溴-2-甲基-1-丙醇(3.20 g, 20.91mmol)及PPh3 (5.60 mg, 21.37 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液於0℃下攪拌。接著逐滴添加DIAD (4.30 g, 21.29 mmol)。將混合物於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N-(3-溴-2-甲基-丙基)胺基甲酸第三丁酯(5.20 g, 9.488 mmol, 89.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  547。 步驟2：7-溴-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1733
將鋅(2.86 g, 43.74 mmol)、氯化鎳(1.9 g, 14.62 mmol)及丙烯酸甲酯(3.77 g, 43.84 mmol)於吡啶(40 mL)中之溶液於室溫下攪拌且接著加熱至55℃並保持20 min。接著逐滴添加N -(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N -(3-溴-2-甲基-丙基)胺基甲酸第三丁酯(4.0 g, 7.3 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(160 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應。過濾後，收集濾液且用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/10)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-溴-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(1 g, 2.784 mmol, 38.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 341。 步驟3：3,8-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1735
將7-溴-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(1.0 g, 2.94 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(7.47 g, 29.42 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(0.48 g, 0.59 mmol)及乙酸鉀(0.86 g, 8.78 mmol)於1,4-二噁烷(50 mL)中之混合物於0℃下攪拌16小時。過濾後，收集濾液且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-50/水中之0.1% NH4 OH)純化所得殘餘物，以得到黑色固體狀3,8-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(0.72 g, 1.762 mmol, 59.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 341。 步驟4：7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1737
將3,8-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(700.0mg, 1.8mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(698 mg, 2.16mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(372 mg, 0.46 mmol)及碳酸鉀(746.0mg, 5.41mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)及水(3 mL)中之混合物於60℃下攪拌12小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋且經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(680 mg, 1.369 mmol, 75.9%產率)。 步驟5：7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1739
將7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(660 mg, 1.44 mmol)及鄰苯二甲酸酐(427 mg, 2.89 mmol)於甲苯(40 mL)中之溶液於100℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油(60:40)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(450 mg, 0.728 mmol, 50.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 587。 步驟6：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1741
將7-[8-氯-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(450 mg, 0.77 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(1.79 g, 15.3 mmol)、Brettphpos Pd G3 (132 mg, 0.15 mmol)及碳酸鉀(198 mg, 1.43 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液，以得到褐色固體狀粗產物。粗產物未經純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668。 步驟7：7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1743
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(400 mg，粗製)及水合肼(299 mg, 5.98 mmol)於甲醇(26 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油(60/40)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H-1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(240 mg, 0.429 mmol, 71.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 538。 步驟8：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]-羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯：
Figure 02_image1745
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(240 mg, 0.45 mmol)、順式 - 3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁醇(180 mg, 0.89 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(575 mg, 4.46 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液於0℃下攪拌。接著逐滴添加三光氣(132 mg, 0.44 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌2小時。將所得混合物用二氯甲烷稀釋且用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(19:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.372 mmol, 83.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 766。 步驟9：(1s ,3s )-(8-胺基-6-((S )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-6-((R )-4,7-二甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯
Figure 02_image1747
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-3,8-二甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.34 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加TFA (20 mL)。將混合物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X-Bridge Prep Phenyl OBD管柱5 µm, 19*250 mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在8 min內5% B至33% B)純化粗產物，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種異構物。關於環丁基之相對立體化學係如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物1 (化合物 560a ) (20.4 mg, 0.044 mmol, 13%產率)。RT 1.984 min( CHIRALPAK IF-3, 2*25cm, 5 µm；(Hex : DCM=3:1)(0.1%DEA) ：EtOH=在6 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.3, RT 2.263 min，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.50 (s, 1H), 5.21 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 4.53 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 3.81 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 2.89 (d,J = 11.5 Hz, 2H), 2.76-2.67 (m, 2H), 2.59-2.52 (m, 2H), 2.00-1.86 (m, 6H), 1.06 (d,J = 6.6 Hz, 3H)。
異構物2 (化合物 560b ) (20.9mg, 0.0457mmol, 13.5%產率)。RT 3.275 min( CHIRALPAK IF-3, 2*25cm, 5 µm；(Hex: DCM=3:1) (0.1% DEA) : EtOH =在6 min內50:50, 1.0 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.3, RT 2.263 min，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.50 (s, 1H), 5.21 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 4.53 (p,J = 7.3 Hz, 1H), 3.81 (p,J = 7.1 Hz, 1H), 2.89 (d,J = 11.5 Hz, 2H), 2.76-2.67 (m, 2H), 2.59-2.52 (m, 2H), 2.00-1.86 (m, 6H), 1.06 (d,J = 6.6 Hz, 3H)。實例 207 (R )-(8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 562a )
Figure 02_image1749
步驟1：3,5-二溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶
Figure 02_image1751
向乙酸鈉(11.6 mL, 215.05 mmol)及2-甲氧基-4-甲基吡啶(8.83 g, 71.69 mmol)於乙酸(70 mL)中之懸浮液中添加溴(34.4 g, 215.06 mmol)。將所得溶液於80℃下加熱12小時。將反應物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。接著將殘餘物用10%氫氧化鈉溶液及飽和亞硫酸鈉溶液處理。將所得混合物用二乙醚萃取。將合併之有機層用無水硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀3,5-二溴-2-甲氧基-4-甲基-吡啶(18.54 g, 65.64 mmol, 91.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 280.0。 步驟2：1-(5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)丙-2-烯-1-醇
Figure 02_image1753
將3,5-二溴-2-甲氧基-4-甲基-吡啶(18.54 g, 65.64 mmol)於二乙醚(250 mL)中之溶液在氮氣下冷卻至-65℃。在攪拌下逐滴添加正丁基鋰(5.06 g, 79.12 mmol)，同時維持溫度於-65℃。將反應物冷卻至-70℃且在氮氣下攪拌1小時。於-65℃下逐滴添加丙烯醛(4.43 g, 79.12 mmol)。接著將反應物升溫至室溫隔夜。用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應且用二氯甲烷萃取。將合併之萃取物用硫酸鎂乾燥且過濾。濃縮濾液，以得到澄清油狀1-(5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-吡啶基)丙-2-烯-1-醇(16.84 g, 65.48 mmol)，不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.0。 步驟3：1-(5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮
Figure 02_image1755
於室溫下向1-(3-溴-6-甲氧基-2-甲基-苯基)丙-2-烯-1-醇(16.84 g, 65.48 mmol)於二氯甲烷(150 mL)中之溶液中添加Dess-Martin過碘烷(41.7 g, 98.21 mmol)。將反應物於室溫下攪拌隔夜，接著藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液淬滅。收集有機層。將水層用二氯甲烷萃取。將合併之有機層用硫酸鎂乾燥，過濾,且濃縮，以得到黃色油，藉由用PE/EtOAc (8/1)溶析之矽膠上急速層析對其進行純化，以得到澄清油狀1-(3-溴-6-甲氧基-2-甲基-苯基)丙-2-烯-1-酮(4.81 g, 18.78 mmol, 以兩步為28.6%產率)。LC/MS (ESI): (M+H)+ = 256.0。 步驟4：6-溴-5-甲基-2,3-二氫-4H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-酮
Figure 02_image1757
向1-(5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-吡啶基)丙-2-烯-1-酮(4.81 g, 18.78 mmol)於乙酸(80 mL)中之溶液中添加氫溴酸(9.5 g, 56.35 mmol)。將反應物加熱至100℃並保持45 min，接著冷卻至室溫且用醚萃取。將合併之有機層用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。收集有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀6-溴-5-甲基-2,3-二氫哌喃[2,3-b ]吡啶-4-酮(1803.9 mg, 7.45 mmol, 39.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 242.1。 步驟5：6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-醇
Figure 02_image1759
向6-溴-5-甲基-2,3-二氫哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-酮(1.81 mg, 7.45 mmol)於甲醇(50 ml)中之溶液中添加硼氫化鈉(657 mg, 17.35 mmol)。將混合物於室溫下攪拌12小時。用水淬滅反應且接著將混合物用乙酸乙酯萃取。接著將合併之有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，且濃縮，以產生白色固體狀6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-醇(1771.4 mg, 7.26 mmol)，不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 244.1。 步驟6：6-溴-4-氯-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶
Figure 02_image1761
將6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-醇(1.77 g, 7.26 mmol)及三乙胺(3.03 ml, 21.77 mmol)於二氯甲烷(50 ml)中之溶液於0℃下攪拌5 min。接著添加甲磺醯氯(0.84 ml, 10.88 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用DCM萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，以產生紅色油狀6-溴-4-氯-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶(2.28 g, 8.71 mmol)，不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 262.1。 步驟7：6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-甲腈
Figure 02_image1763
將6-溴-4-氯-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶(2.29 mg, 8.71 mmol)及四乙基氰化銨(4.08 g, 26.11 mmol)於甲苯(90 ml)中之溶液於70℃下攪拌3小時。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-甲腈(800.0 mg, 3.16 mmol, 以兩步為42.42%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 253.1。 步驟8：5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-甲腈
Figure 02_image1765
在氮氣下，於室溫下向6-溴-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-甲腈(800.0 mg, 3.16 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(1.60 g, 6.32 mmol)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (468.9 mg, 0.63 mmol)於1,4-二噁烷(60 mL)中之溶液中添加乙酸鉀(0.59 mL, 9.48 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌2小時且在減壓下濃縮。反應混合物未經純化即用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 301.2。 步驟9：(R )-(8-氯-7-氟-6-碘異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1767
於0℃下向8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(2.0 g, 6.2 mmol)及(R )-3-羥基四氫呋喃(1.09 g, 12.42 mmol)於二氯甲烷(60 ml)中之溶液中添加N ,N -二異丙基乙胺(5.4 ml, 31.01 mmol)。接著添加溶解於二氯甲烷中之三光氣(1.29 g, 4.34 mmol)。將混合物於0℃下攪拌0.5小時。接著將所得溶液於室溫下攪拌12小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀N-(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R)-四氫呋喃-3-基]酯(1.5 g, 3.4 mmol, 55.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 436.9。 步驟10：(R )-(8-氯-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1769
在氮氣下，於室溫下向5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-4-甲腈(944.0 mg, 3.14 mmol)、N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(1.51 g, 3.46 mmol)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (466.6 mg, 0.63 mmol)於1,4-二噁烷(60 ml)及水(6 ml)中之混合物中添加K2 CO3 (1.30 g, 9.43 mmol)。將所得溶液於70℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀N -[8-氯-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(600.0 mg, 1.24 mmol, 以兩步為39.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 483.1。 步驟11：(6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3,8-二基)二胺基甲酸第三丁酯((R )-四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image1771
在氮氣下，於室溫下向N -[8-氯-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(600.0 mg, 1.24 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(8.73 g, 74.55 mmol)及BrettPhos Pd G3 (225.3 mg, 0.25 mmol)於1,4-二噁烷(60 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (515.2 mg, 3.73 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(250 mg,0.44 mmol, 35.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 564.2。 步驟12：(R )-(8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1773
於室溫下向N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(250.0 mg, 0.4436 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5.0 mL, 64.9 mmol)。將混合物攪拌1h且接著在真空下濃縮。將殘餘物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺將pH調節至7。接著濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內12% B至47% B)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-6-(4-氰基-5-甲基-3,4-二氫-2H -哌喃并[2,3-b ]吡啶-6-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R)-四氫呋喃-3-基]酯(58.4 mg,0.1255 mmol, 28.3%產率) (非鏡像異構物之混合物)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 464.2, RT 1.325 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.14 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 5.29-5.27 (m, 1H), 4.57 (d,J = 14.0 Hz ,2H), 4.30-4.24 (m, 1H), 3.87-3.72 (m, 4H), 2.39 (d,J = 2.0 Hz ,1H), 2.23-2.15 (m, 5H), 2.01-1.97 (m, 1H)。實例 208 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯及(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯(化合物 452a 及化合物 452b )
Figure 02_image1775
步驟1：(3S ,4S )-4-氟吡咯啶-3-醇
Figure 02_image1777
向3-氟-4-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 2.44 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(2.0 mL)。將混合物攪拌2小時且在真空下濃縮。粗產物不經純化即直接用於下一步驟。 步驟2：(±)-反式-4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇
Figure 02_image1779
向4-氟吡咯啶-3-醇(512.0 mg, 4.88 mmol)及乙酸(585.0mg, 9.74mmol)於甲醇(3.0 mL)中之溶液中添加甲醛水溶液(7.2 g, 40%)。將混合物於室溫下攪拌2小時。添加硼氫化鈉(2.21 g, 58.46 mmol)。將反應於室溫下攪拌2小時且接著在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式-4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇(250 mg, 2.10 mmol, 43.0%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 120。 步驟3：(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1781
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.39 mmol)、(±)-反式-4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇(230.7 mg, 1.94 mmol)及DMAP (47.3 mg, 0.39 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液於90℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(110 mg, 0.164 mmol, 42.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 120。 步驟4：(3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯 及(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1783
向(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(110.0 mg, 0.16 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5% B至20% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：(化合物 452a ) (10.5mg, 0.022 mmol, 13.4%產率)。RT 1.274 min( 管柱：CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE: EtOH=50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 471.2, RT 1.524 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.31-5.21 (m, 1H),  5.15 (s, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.10 (s, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.5 (s, 4 H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：(化合物 452b ) (8.5mg, 0.018 mmol, 11%產率)。RT 2.616 min( 管柱：CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE: EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471.2, RT 1.520 min.，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.31-5.21 (m, 1H),  5.15 (s, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.10 (s, 1H),3.01 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.5 (s, 4 H),1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 209 (1S ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯；(1S ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯；(1R ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯；及(1R ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯(化合物 573a 、化合物 573b 、化合物 573c 及化合物 573d )
Figure 02_image1784
步驟1：3-(苄基氧基)-N-甲氧基-N-甲基環丁烷-1-甲醯胺
Figure 02_image1786
將3-苄基氧基-環丁烷羧酸(1000 mg, 4.85 mmol)、N-甲氧基-N-甲基-甲胺鹽酸鹽(815 mg, 7.3 mmol)及DIEA (2505 mg, 19.42 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液於室溫下攪拌5 min。接著添加HATU (2766 mg, 7.27 mmol)。將反應物於室溫下攪拌2小時。藉由甲醇淬滅反應且接著用乙酸乙酯稀釋混合物。將所得溶液用水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮，以得到無色油狀3-苄基氧基-N-甲氧基-N-甲基-環丁烷甲醯胺(1102 mg, 4.42 mmol, 91.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 250。 步驟2：1-(3-(苄基氧基)環丁基)乙-1-酮
Figure 02_image1788
向第三丁基3-(苄基氧基)-N-甲氧基-N-甲基環丁烷-1-甲醯胺(1050 mg, 4.22 mmol)於THF (5 mL)中之溶液中添加甲基溴化鎂(5.6 mL, 5.6 mmol/L, 1 mol/L，於THF中)。將混合物於0℃下攪拌2小時。藉由甲醇淬滅反應。將混合物用乙酸乙酯稀釋且接著將所得溶液用水洗滌。在真空下濃縮有機層。藉由用石油醚/乙酸乙酯(30/70)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀1-(3-(苄基氧基)環丁基)乙-1-酮(1028 mg, 4.42 mmol, 90%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 204。 步驟3：1-(3-(苄基氧基)環丁基)乙-1-醇
Figure 02_image1790
將1-(3-苄基氧基環丁基)乙酮(1028 mg, 5.03 mmol)及NaBH4 (385 mg, 10.13 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。藉由硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應。將殘餘物用水稀釋，接著用碳酸氫鈉調節至pH 6~7。將所得溶液用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，以得到無色油狀1-(3-苄基氧基環丁基)乙醇(816 mg, 3.956 mmol, 78.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 206。 步驟4：(1-(3-(苄基氧基)環丁基)乙氧基)(第三丁基)二甲基矽烷
Figure 02_image1792
在氮氣下，將1-(3-苄基氧基環丁基)乙醇(816 mg, 3.961 mmol)、第三丁基氯二甲基矽烷(1188 mg, 7.952 mmol)及咪唑(108 mg, 15 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。由水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/90)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(1-(3-(苄基氧基)環丁基)乙氧基)(第三丁基)二甲基矽烷(900 mg, 3.956 mmol, 78.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 321。 步驟5：3-(1-((第三丁基二甲基矽基)氧基)乙基)環丁-1-醇
Figure 02_image1794
將1-(3-苄基氧基環丁基)乙氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(600 mg, 1.87 mmol)及Pd/C (10%, 420 mg, 1.87 mmol於甲醇中)之混合物於40℃下在氫氣(1 atm)下攪拌2小時。接著過濾混合物且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(18/82)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]環丁醇(400 mg, 1.736 mmol, 92.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 231。 步驟6：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(((3-(1-((第三丁基二甲基矽基)氧基)乙基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1796
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(460 mg, 0.71 mmol)、3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]環丁醇(328 mg, 1.42 mmol)、DIEA (90 mg, 0.70 mmol)及DMAP (88 mg, 0.72 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液於90℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(38/62)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.639 mmol, 89.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 782。 步驟7：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((3-(1-羥基乙基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1798
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.38 mmol)及TBAF (277 mg, 0.88 mmol)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(1-羥基乙基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.299 mmol, 78.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 782。 步驟8：(1S ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯、(1S ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯、(1R ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((R )-1-羥基乙基)環丁酯及(1R ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-((S )-1-羥基乙基)環丁酯
Figure 02_image1800
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(1-羥基乙基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(180 mg, 0.27 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (2 mL)於室溫下中之溶液攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (X Bridge CSH OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內9 B至41 B)純化殘餘物，以得到異構物產物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到四種異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 573a ) (12.2 mg, 0.021mmol, 9.7%產率)。RT 1.526 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE:EtOH = 80:20, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.845 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.56-4.47 (d, J = 6 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.57-3.44 (m, 2H), 3.50 (q, J = 5.5 Hz, 1H), 3.56-3.44 (m, 2H), 2.32-2.24 (m, 2H), 1.94-1.81 (m, 6H), 1.03-0.92 (m, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 573b ) (2.4 mg, 0.005 mmol, 1.9%產率)。RT 2.059 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE:EtOH = 85:15, 1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.059 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.00-4.71 (m, 1H), 4.59-4.57 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.67-3.58 (m, 1H), 3.36-3.32 (m, 2H), 3.26-2.50 (m, 1H), 2.38-2.35 (m, 4H), 2.34-2.31 (m, 3H), 1.12 (d,J = 6.3 Hz, 3H)。
鏡像異構物3 (化合物 573c ) (3 mg, 0.006 mmol, 2.4%產率)。RT 3.911min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE:EtOH = 85:15, 1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.059 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.00-4.71 (m, 1H), 4.59-4.57 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.67-3.58 (m, 1H), 3.36-3.32 (m, 2H), 3.26-2.50 (m, 1H), 2.38-2.35 (m, 4H), 2.34-2.31 (m, 3H), 1.12 (d,J = 6.3 Hz, 3H)。
鏡像異構物4 (化合物 573b ) (13.6 mg, 0.029mmol, 10.8%產率)。RT 3.911min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE:EtOH = 80:20, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.845 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.56-4.47 (d, J = 6 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.57-3.44 (m, 2H), 3.50 (q, J = 5.5 Hz, 1H), 3.56-3.44 (m, 2H), 2.32-2.24 (m, 2H), 1.94-1.81 (m, 6H), 1.03-0.92 (m, 3H)。實例 210 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯(化合物 574a 及化合物 574b )
Figure 02_image1802
步驟1：3-(苄基氧基)環丁烷-1-甲酸甲酯
Figure 02_image1804
向3-苄基氧基-環丁烷羧酸(1000 mg, 4.85 mmol)、N-甲氧基-N-甲基-甲胺鹽酸鹽(815.0 mg, 7.3 mmol)及DIEA (2505 mg, 19.42 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加HATU (2766 mg, 7.27 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。將反應物用甲醇及乙酸乙酯稀釋。將所得溶液用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，以得到無色油狀3-苄基氧基-N-甲氧基-N-甲基-環丁烷甲醯胺(1102 mg, 4.420 mmol, 91.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 220。 步驟2：2-(3-(苄基氧基)環丁基)丙-2-醇
Figure 02_image1806
在氮氣下，將3-苄基氧基環丁烷羧酸甲酯(1200 mg, 5.45 mmol)及MeMgCl (7 mL, 21 mmol, 3 mol/L)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌2 h。藉由添加甲醇淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色固體狀2-(3-苄基氧基環丁基)丙-2-醇(1000 mg, 4.539 mmol, 83.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 220。 步驟3：3-(2-羥基丙-2-基)環丁-1-醇
Figure 02_image1808
在氫氣(1 atm)下，將2-(3-苄基氧基環丁基)丙-2-醇(1000 mg, 4.54 mmol)及Pd/C (210 mg, 4.54 mmol)於甲醇(2 mL)中之混合物於40℃下攪拌12小時。過濾後，在真空下濃縮濾液，以得到無色油狀3-(1-羥基-1-甲基-乙基)環丁醇(500 mg, 3.84 mmol, 84.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 130。 步驟4：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((3-(2-羥基丙-2-基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1810
在氮氣下，將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)、3-(1-羥基-1-甲基-乙基)環丁醇(120 mg, 0.92 mmol)、DIEA (299 mg, 2.32 mmol)及DMAP (57 mg, 0.47 mmol)於1,4-二噁烷(3 mL)中之溶液於90℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(38/62)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[1-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基乙基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.358 mmol, 77.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 681。 步驟5：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-羥基丙-2-基)環丁酯
Figure 02_image1812
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(1-羥基-1-甲基-乙基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.417 mmol)於TFA (1 mL)及二氯甲烷(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物。藉由Prep- HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內15% B至26% B)純化殘餘物，以得到外消旋混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1 (化合物 574a ) ((27.2 mg, 0.0565 mmol, 77%產率)。RT 7.921 min( CHIRALPAK IC 2*25cm, 5 µm,  移動相A：MTBE；水(0.1% FA)，移動相B：EtOH)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 482.5, RT 2.197min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.99 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.80 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.93 (t,J = 6.6 Hz, 1H), 4.40-4.20 (m, 3H), 3.50-3.30 (m, 2H), 2.50-2.28 (m, 3H), 2.20-2.05 (m, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.03 (s, 6H)。
異構物2 (化合物 574b )  (3.1 mg,0.0064 mmol, 8.8%產率)。RT 10.454min( CHIRALPAK IC 2*25cm, 5 µm,  移動相A：MTBE；水(0.1% FA)，移動相B：EtOH)。LCMS(ESI) [M+H]+ =482.5, RT 1.209 min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.75 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 4.29-4.24 (m, 3H), 3.40-3.20 (m, 2H), 2.30-2.10 (m, 2H), 2.04-1.95 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.88-1.78 (m, 1H), 0.98 (s, 6H)。實例 211 (3S ,3aR ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯及(3R ,3aR ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯(化合物 563a 及化合物 563b )
Figure 02_image1813
步驟1：(±)-反式 - 4-丙-2-炔氧基四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image1815
於0℃下向3,4-環氧四氫呋喃(30.0 g, 348.5 mmol)及炔丙醇(19.8 g, 353.2 mmol)於二氯甲烷(1.8 L)中之溶液中添加三氟化硼合二乙醚(4.42 mL, 34.88 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌16小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/5)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀(±)-反式-4-丙-2-炔氧基四氫呋喃-3-醇(10 g, 70.35 mmol, 20.2%產率)。  步驟2：甲基硫基甲烷硫醇酸O -[(3S ,4S )-4-丙-2-炔氧基四氫呋喃-3-基]酯
Figure 02_image1817
在N2 氣氛下，於0℃下向(±)-反式-4-丙-2-炔氧基四氫呋喃-3-醇(7.0 g, 49.24 mmol)於四氫呋喃(140 mL)中之溶液中添加NaH (3.53 g, 147 mmol, 60%純度)。將混合物於室溫下攪拌30 min。於0℃下添加二硫化碳(4.42 mL, 73.6 mmol)且將混合物於室溫下攪拌30 min。於0℃下添加碘甲烷(10.5 g, 73.97 mmol)且將混合物於室溫下攪拌2小時。將反應混合物用NH4 Cl水溶液淬滅且用乙酸乙酯萃取。乾燥(Na2 SO4 )有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀甲基硫基甲烷硫醇酸O-[(3S,4S)-4-丙-2-炔氧基四氫呋喃-3-基]酯(6.8 g, 29.3 mmol, 59.4%產率)。  步驟3：3-亞甲基-3a,4,6,6a-四氫呋喃并[3,4-b ]呋喃
Figure 02_image1819
在N2 氣氛下，於室溫下向甲基硫基甲烷硫醇酸O-[(1S,2S)-2-丙-2-炔氧基環戊基]酯(6.0 g, 26.04 mmol)於甲苯(420 ml)中之溶液中添加三-正丁基氫化錫(13.86 mL, 51.6 mmol)。將混合物於回流下加熱30 min。於回流下添加催化量之AIBN (216 mg, 1.32 mmol)且將混合物繼續回流4 h。將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀3-亞甲基-3a,4,6,6a-四氫呋喃并[3,4-b ]呋喃(1.8 g, 14.4 mmol, 54.78%產率)。 步驟4：(3R ,3aS ,6aR )-2,3,3a ,4,6,6a -六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇
Figure 02_image1821
於0℃下向3-亞甲基-3a ,4,6,6a-四氫呋喃并[3,4-b ]呋喃(1.26 g, 9.99 mmol)及RuCl3 (620.55 mg, 3 mmol)於四氯化碳(10 mL)、乙腈(10mL)及水(10 mL)中之溶液中添加NaIO4 (5.34 g, 24.95 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌2小時。藉由NaHCO3 水溶液及Na2 S2 O3 水溶液淬滅反應。將所得混合物用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物溶解於乙醇(10 mL)中且於室溫下添加NaBH4 (468.8 mg, 12.34 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌3小時。在減壓下濃縮混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀(3R,3aS,6aR)-2,3,3a,4,6,6a-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇(450 mg, 3.46 mmol, 39.9%產率)。1 H-NMR (300MHz, CDCl3 ) δ 4.60-4.50 (m, 1H), 4.40-4.30 (m, 2H), 4.02-4.07 (m, 1H), 3.90 (d, 1H,), 3.60 (dd,J = 2.1, 8.8 Hz, 1 H), 3.46-3.40 (m, 2H), 2.90-2.75 (m, 1H), 2.20 (bs, 1H)。 步驟5：4-硝基苯甲酸[(3S ,3aR ,6aR )-2,3,3a ,4,6,6a -六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基]酯
Figure 02_image1823
於0℃下向(3R ,3aS ,6aR )-2,3,3a ,4,6,6a -六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇(420.0 mg, 3.23mmol)、4-硝基苯甲酸(808.5 mg, 4.84 mmol)及PPh3 (1.27 g, 4.84 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加DIAD (978.6 mg, 4.84 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌16小時。在真空下濃縮混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀4-硝基苯甲酸[(3S,3aR,6aR)-2,3,3a,4,6,6a-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基]酯(700 mg, 2.5 mmol, 77.7%產率)。 步驟6：(3S ,3aS ,6aR )-2,3,3a,4,6,6a-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇
Figure 02_image1825
將4-硝基苯甲酸[(3S ,3aR ,6aR )-2,3,3a,4,6,6a-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基]酯(700.0 mg, 2.51 mmol)於甲醇(35 mL)及K2 CO3 (1.73 g, 12.53 mmol)中之混合物於室溫下攪拌4小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀(3S,3aS,6aR)-2,3,3a,4,6,6a-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇(200 mg, 1.54 mmol, 57.3%產率)。1 H NMR (300 MHz, 氯仿-d ) δ 4.86 (dd,J = 6.7, 3.7 Hz, 1H), 4.25 (dt,J = 3.1, 1.4 Hz, 1H), 4.03 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 3.92 (dd,J = 9.8, 3.4 Hz, 1H), 3.86 - 3.71 (m, 3H), 3.56 (dd,J = 10.4, 3.8 Hz, 1H), 2.85 (qd,J = 7.0, 6.1, 3.5 Hz, 1H), 1.88 (s, 1H)。 步驟7：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3S ,3aR ,6aR )-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯及7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3R ,3aS ,6aS )-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1827
於0℃下向(3S ,3aS ,6aR )-2,3,3a ,4,6,6a -六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-醇(198.09 mg, 1.52 mmol)、7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.76 mmol)及DIEA (294.54 mg,  2.28 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之溶液中添加三光氣(158.09 mg, 0.53 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌30 min且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/4)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK  IC, 3*25cm, 5 µm；移動相A：己烷:DCM=3:1(0.1%DEA)，移動相B：EtOH；流速：40 mL/min；梯度：在20 min內50% B至50% B)進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 563a 之中間體)：(150 mg, 0.22 mmol, 28.9%產率)。RT 1.621 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5 cm；3 µm；移動相：(Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 682.3。
鏡像異構物2 (化合物 563b 之中間體)：(145 mg, 0.22 mmol, 27.9%產率)。RT 2.772 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5 cm；3 µm；移動相：(Hex:DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 682.3。 步驟8：(3S ,3aR ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯及(3R ,3aR ,6aR )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基酯
Figure 02_image1829
將7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3S ,3aR ,6aR )-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(2 ml)及三氟乙酸(2 ml)中之混合物於室溫下攪拌2小時。接著在真空下濃縮所得溶液。將殘餘物溶解於乙腈中且用NaHCO3 水溶液調節至pH 8。藉由過濾收集固體且用水洗滌，以產生鏡像異構物1( 化合物 563a ) (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。) (49 mg, 0.102 mmol, 46.2%產率)：RT 4.377 min (CHIRALPAK IA-U 3.0*50mm 1.6 µm；移動相A：CO2 ，移動相B：IPA (20 mM NH3 ), 10%-50%, 6.5 min；2 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 482.2, RT 2.137 min.，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 5.23-5.00 (m, 1H), 4.77 (dd,J = 6.7, 3.6 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.96-3.78 (m, 4H), 3.68 (dd,J = 9.5, 8.0 Hz, 1H), 3.46 (dd,J = 10.2, 3.7 Hz, 1H), 3.16-3.20 (m, 2H) 3.04-2.90 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
類似地，使用7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3R ,3aS ,6aS )-六氫呋喃并[3,4-b ]呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯，以得到鏡像異構物2 (化合物 563b )( 相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。) (49.5 mg, 0.102 mmol, 46.5%產率)：RT 4.856 min CHIRALPAK IA-U 3.0*50mm 1.6 µm；移動相A：CO2 ，移動相B：IPA (20 mM NH3 ), 10%-50%, 6.5 min；2 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 482.2, RT 2.137 min.，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 5.23-5.00 (m, 1H), 4.77 (dd,J = 6.7, 3.6 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.96-3.78 (m, 4H), 3.68 (dd,J = 9.5, 8.0 Hz, 1H), 3.46 (dd,J = 10.2, 3.7 Hz, 1H), 3.16-3.20 (m, 2H) 3.04-2.90 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 212 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯及(3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯(化合物 477a 及化合物 477b )
Figure 02_image1831
步驟1：4-氟四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image1833
將3,4-環氧四氫呋喃(2.7 g, 31.40 mmol)及三乙胺三氫氟化物(7.68 mL, 47.1 mmol)之混合物於120℃下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫且接著用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅。將所得溶液用二氯甲烷/2-丙醇(5/1)萃取且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀4-氟四氫呋喃-3-醇(2.02 g, 19.04 mmol, 60.9%產率)。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-氟四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1835
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.38 mmol)、N ,N -二異丙基乙胺(0.33 mL, 1.92 mmol)及4-氟四氫呋喃-3-醇(2.02 g, 19.04 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於0℃下攪拌5 min。接著添加二氯甲烷中之三光氣(80.0 mg, 0.27 mmol)且將反應物於0℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用水淬滅且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(30/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-氟四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190.0 mg, 0.29 mmol, 76.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 658.3。 步驟3：(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯 及(3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1837
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-氟四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(190.0 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(6 mL)。將混合物於室溫下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。將殘餘物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內11% B至34% B)純化，以產生外消旋混合物。藉由對掌性製備型HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：黃色固體狀化合物 477a (12.3 mg, 0.0264 mmol, 9.1%產率)。RT 1.349 min (CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE (0.1%DEA):EtOH = 75:25, 1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ = 458.2, RT 1.843 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.32 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.0 Hz ,1H), 6.22 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.40 (s, 1H), 5.27-5.24 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.99 (d,J = 2.0 Hz ,1H), 3.99-3.87 (m, 1H), 3.83-3.79 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 1.92 (s, 3H)。
鏡像異構物2：黃色固體狀化合物 477b (9 mg, 0.0195 mmol, 6.8%產率)。RT 2.474 min (CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE (0.1% DEA):EtOH = 75:25, 1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ = 458.2, RT 1.843 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.32 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.0 Hz ,1H), 6.22 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.40 (s, 1H), 5.27-5.24 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.99 (d,J = 2.0 Hz ,1H), 3.99-3.87 (m, 1H), 3.83-3.79 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 1.92 (s, 3H)。實例 213 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-4-氟四氫呋喃-3-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-4-氟四氫呋喃-3-基)脲(化合物 724a 及化合物 724b )
Figure 02_image1838
步驟1：(±)-順式 -N ,N -二苄基-4-氟四氫呋喃-3-胺
Figure 02_image1840
於-78℃下向(±)-順式 - 4-(二苄基胺基)四氫呋喃-3-醇(620 mg, 2.19 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加DAST (700 mg, 4.35 mmol)。將混合物於-78℃下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(88/12)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-順式 -N ,N -二苄基-4-氟四氫呋喃-3-胺(300 mg, 1.051 mmol, 48%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 286。  步驟2：(±)-順式 - 4-氟四氫呋喃-3-胺
Figure 02_image1842
將(±)-順式 - N ,N -二苄基-4-氟-四氫呋喃-3-胺(340 mg, 1.19 mmol)及Pd/C (10%, 120 mg, 1.19 mmol)於1,4-二噁烷(1 mL)及甲醇(4 mL)中之混合物於40℃下攪拌3小時。過濾後，在真空下濃縮濾液，以得到黃色固體狀(±)-順式-4-氟四氫呋喃-3-胺(120 mg, 1.142 mmol, 95.8%產率)。GCMS = 106。 步驟3：(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-氟四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1844
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.46 mmol)、DMAP (56 mg, 0.46 mmol)及(±)-順式 - 4-氟四氫呋喃-3-胺(98 mg, 0.93 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(43/57)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-氟四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.426 mmol, 91.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 657。 步驟4：1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S, 4S )-4-氟四氫呋喃-3-基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-4-氟四氫呋喃-3-基)脲
Figure 02_image1846
將(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(3-(4-氟四氫呋喃-3-基)脲基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(130 mg, 0.20 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內15% B至26% B)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 724a ) (54.2 mg, 0.119 mmol, 60%產率)。RT 1.216 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH = 50:50)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 467.2, RT 1.892 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.94 (s,1H), 7.85 (s, 1H), 7.45-7.38 (d,J = 6 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.75-6.73 (s, J = 6 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.28-5.04 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.31-4.23 (m, 3H), 4.08-3.81 (m, 3H), 3.68-3.36 (m, 1H), 3.43-3.32 (m, 2H)。1.93 (s, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 724b )  (52.7 mg, 0.116 mmol, 58.3%產率)。RT 1.861 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(MTBE (0.1%DEA):MeOH = 50:50)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 467.2, RT 1.892 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.28 (s, 1H), 8.94 (s,1H), 7.85 (s, 1H), 7.45-7.38 (d,J = 6 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.75-6.73 (s, J = 6 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.28-5.04 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.31-4.23 (m, 3H), 4.08-3.81 (m, 3H), 3.68-3.36 (m, 1H), 3.43-3.32 (m, 2H)。1.93(s, 3H)。實例 214 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯(化合物 452c 及化合物 452d )
Figure 02_image1848
步驟1：(3S ,4R )-4-氟吡咯啶-3-醇
Figure 02_image1850
將3-氟-4-羥基-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 2.44 mmol)於二氯甲烷(2 mL)及三氟乙酸(2.0 mL)中之溶液中於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。粗產物不經純化即直接用於下一步驟。 步驟2：4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇
Figure 02_image1852
將4-氟吡咯啶-3-醇(510.0 mg, 4.86 mmol)及乙酸(585.0 mg, 9.74 mmol)於甲醇(3.0 mL)及甲醛水溶液(7.2 g, 40%)中之溶液於室溫下攪拌2小時。添加硼氫化鈉(2.21 g, 58.46 mmol)且將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇(310 mg, 2.60 mmol, 53.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 120。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3S ,4S )-4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1854
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(310.0 mg, 0.484 mmol)、4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-醇(286.1 mg, 2.41 mmol)及DMAP (58.7 mg, 0.484 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之溶液於90℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3S ,4S )-4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80 mg,0.119 mmol, 30.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 671.3。 步驟4：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟-1-甲基吡咯啶-3-基酯
Figure 02_image1856
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-氟-1-甲基-吡咯啶-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80.0 mg, 0.119 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮所得溶液。將殘餘物溶解於DCM中且用三乙胺調節至pH 8。在真空下濃縮所得溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5% B至20% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC進一步分離外消旋產物，以獲得兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 452c (5.9 mg, 0.017 mmol, 10.4%產率)。RT 1.203 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE: EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 471.3, RT 1.692 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.23 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.27-5.09 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.79-2.72 (m, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)。
鏡像異構物2：化合物 452d (8.3 mg, 0.0196 mmol, 12%產率)。RT 2.607 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE: EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 471.3, RT 1.692min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.27-5.09 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.79-2.72 (m, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)。實例 215 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯(化合物 571a 及化合物 571b )
Figure 02_image1857
步驟1：(3-(苄基氧基)環丁基)甲醇
Figure 02_image1859
將3-苄基氧基-環丁烷羧酸(3.0 g, 14.55 mmol)及B2 H6 (44 mL, 46.15 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。用甲醇淬滅反應。在真空下濃縮反應物。粗產物將用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 192。 步驟2：((3-(苄基氧基)環丁基)甲氧基)(第三丁基)二甲基矽烷
Figure 02_image1861
將(3-苄基氧基環丁基)甲醇(500 mg, 2.6 mmol)、TBDMSCl (777 mg, 5.18 mmol)及咪唑(704 mg, 10.34 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(77/23)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(3-苄基氧基環丁基)甲氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(770 mg, 2.512 mmol, 96.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 307。 步驟3：3-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)環丁-1-醇
Figure 02_image1863
將(3-苄基氧基環丁基)甲氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(840 mg, 2.74 mmol)及Pd/C (800 mg, 6.78 mmol)於甲醇(30 mL)中之混合物於40℃下在氫氣(1 atm)下攪拌2天。過濾後，在真空下濃縮反應混合物。粗產物(800 mg)用於下一步驟。LCMS (ESI) [M+H]+ = 216。 步驟4：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(((3-(((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1865
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(609 mg, 1.16 mmol)、3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丁醇(587 mg, 2.71 mmol)、三光氣(265 mg, 0.89 mmol)及DIEA (868 mg, 6.73 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於0℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(850mg, 1.1068mmol, 95.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 768。 步驟5：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((3-(羥基甲基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1867
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(889 mg, 1.16 mmol)及TBAF (1460 mg, 4.63 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌4小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(94/6)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(羥基甲基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(416 mg, 0.636 mmol, 55%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 654。 步驟6：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(羥基甲基)環丁酯
Figure 02_image1869
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(羥基甲基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.18 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (2 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150 mm, 5 µm；移動相A：水(10 mM NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內15% B至26% B)純化殘餘物，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種立體異構物。任意地分配立體化學。
異構物1( 化合物 571a ) (26.9 mg, 0.0593 mmol, 32.3%產率)。RT 12.514 min( CHIRALPAK IA 2×25cm；5 µm. 移動相A：(Hex:DCM = 3:1) (10 M NH3 -MeOH)；移動相B：EtOH)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 1.864 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.30(s, 1H), 6.85-6.78 (d,J = 6 Hz, 1H), 6.17(s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.10-4.93 (m, 1H), 4.71-4.63 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.48-3.40 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 3.37-3.31 (m, 2H), 2.38-2.15 (m, 2H), 2.16-2.05 (m, 3H), 1.90 (s, 3H)。
異構物2 (化合物 571b ) (20.7 mg, 0.0456 mmol, 24.9%產率)：滯留時間：13.339 min( CHIRALPAK IA 2*25cm；5 µm. 移動相A：(Hex:DCM = 3:1) ( 10 M NH3 -MeOH)；移動相B：EtOH)。LCMS(ESI) [M+H]+ =454.2, RT 1.771 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.83-6.78(d, J = 6 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.91-4.74 (m, 1H), 4.62-4.52 (m, 1H), 2.28 (s, 2H), 3.40-3.32 (m, 4H), 2.40-2.28 (m, 2H), 2.05-1.98 (m, 1H), 1.98-1.77 (m,5H)。實例 216 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)環丁酯(化合物 572a )
Figure 02_image1871
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(甲基磺醯基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1873
在氮氣下，於室溫下向順式-3-甲基磺醯基環丁醇(150 mg, 1mmol)及7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.23 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中添加TEA (250 mg, 2.48 mmol)。接著添加三光氣(90 mg, 0.30 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/9)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(甲基磺醯基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.143 mmol, 61.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 702。 步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)環丁酯
Figure 02_image1875
於25℃下向7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(甲基磺醯基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.14 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸(2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌2 h。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內9% B至34% B)純化粗產物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-甲基磺醯基環丁基)酯(58.3 mg, 0.106 mmol, 74.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 502.1, RT 1.931 min；方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.67 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 4.99 (p,J = 7.6 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.82-3.69 (m, 1H), 3.33 (s, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.76-2.64 (m, 2H), 2.39 (ddd,J = 12.4, 6.3, 2.4 Hz, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 217 (1r,3r)-N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氰基環丁基)酯(化合物 484b )
Figure 02_image1877
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1879
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (56.7 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液中添加3-羥基環丁腈(135.0 mg, 1.39 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(290 mg, 0.45mmol, 96 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 649.3 步驟2：N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氰基環丁基)酯
Figure 02_image1881
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(290.0 mg, 0.45 mmol)及TFA (3.0 mL, 0.45 mmol)於二氯甲烷(9 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱19*250mm, 10 µm；水(0.1% FA): ACN= 在15 min內14% B至30% B；25 mL/min)純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氰基環丁基)酯(37 mg, 0.08 mmol, 19 %產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 449.2；RT 1.973 min.；方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 5.22-5.10 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 2H), 3.47-3.37 (m, 3H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.61-2.53 (m, 2H), 1.92 (s, 3H)。實例 218 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯(化合物 566a 及化合物 566b )
Figure 02_image1883
步驟1：(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1885
在氮氣下，於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(3000.0 mg, 5.71 mmol)、3-氟-4-羥基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(1880.0 mg, 8.57 mmol)及DIEA (3680.0 mg, 28.53 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加三光氣(1185.0 mg, 3.99 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮有機層。藉由用石油醚/乙酸乙酯(62/38)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到一對白色固體狀鏡像異構物(2400 mg, 3.1136 mmol, 54.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771。
藉由對掌性HPLC分離鏡像異構物，以得到一對鏡像異構物：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1100 mg, 1.4271 mmol, 45.8%產率)及7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3R ,4S )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(800 mg, 1.0379 mmol, 33.3%產率)。( 任意地分配絕對立體化學。) 步驟2：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image1887
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.13 mmol)於HCl (5 mL, 2 mol/L，於MeOH中)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物，以得到紅色固體狀(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟六氫吡啶-4-基酯(50 mg, 0.1063 mmol, 81.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471。 步驟3：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯(化合物 566a )
Figure 02_image1889
將(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟六氫吡啶-4-基酯(70.0 mg, 0.148 mmol)及三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(25 mg)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮溶液。藉由具有水(0.1% FA)/ACN (30/70)之反相層析純化所得殘餘物，以得到(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯(化合物 566a ) (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。) (28 mg, 0.0524 mmol, 8.2%產率)：RT 4.235 min( CHIRALPAK IC, 3.0*100mm, 3 µm；CO2 : MeOH (0.1%DEA)梯度(B%)：在4.0 min內10%至50%，於50%下保持2.0 min。背壓(psi)：1500.000，流速：2 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ =535.3, RT 1.905 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.60 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.18 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.75-6.31 (m,1 H), 5.45-5.24 (m, 2H), 4.76-4.67 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.90-3.75 (m,7H), 3.72-3.65 (m, 1H), 2.52-2.36 (m, 2H), 2.23-2.28 (d,J = 3 Hz, 3H)。
使用相同程序，(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2,2-二氟乙基)-3-氟六氫吡啶-4-基酯(化合物 566b) ( 相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。)係自7-(3-(((((3R ,4S )-1-(第三丁氧基羰基)-3-氟六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯製備：RT 4.771 min( CHIRALPAK IC, 3.0*100mm, 3 µm；CO2 : MeOH(0.1%DEA)梯度(B%)：在4.0 min內10%至50%，於50%下保持2.0 min。背壓(psi)：1500.000，流速：2 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ =535.3, RT 1.905 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.60 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.18 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.75-6.31 (m,1 H), 5.45-5.24 (m, 2H), 4.76-4.67 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.90-3.75 (m,7H), 3.72-3.65 (m, 1H), 2.52-2.36 (m, 2H), 2.23-2.28 (d,J = 3 Hz, 3H)。實例 219 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1R ,3R )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽、N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽、N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,3R )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1R ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽(化合物 533a 、化合物 533b 、化合物 533c 及化合物 533d )
Figure 02_image1891
步驟1：3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環戊酮
Figure 02_image1893
向3-羥基環戊酮(1000.0 mg, 9.99 mmol)於二氯甲烷(40 mL)中之溶液中添加第三丁基二苯基氯矽烷(4110.0 mg, 14.95 mmol)及咪唑(2720.0 mg, 40 mmol)。將混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(92/8)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到澄清油狀3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環戊酮(3350 mg, 9.89 mmol, 99 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =339.2 步驟2：3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基-1-甲基-環戊醇
Figure 02_image1895
在氮氣下，於0℃下向3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環戊酮(3900.0 mg, 11.52 mmol)於四氯乙烯(50 mL)中之溶液中添加甲基氯化鎂(15.4 mL, 46.2 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，以得到澄清油狀3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基-1-甲基-環戊醇(4000 mg,11.28 mmol, 97 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 355.2 步驟3：(1S ,3R )-1-甲基環戊烷-1,3-二醇及(1S,3S)-1-甲基環戊烷-1,3-二醇
Figure 02_image1897
將3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基-1-甲基-環戊醇(4000.0 mg, 11.28 mmol)及TBAF (9000.0 mg, 28.57 mmol)於四氫呋喃(40 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀(1S,3R)-1-甲基環戊烷-1,3-二醇(500 mg, 4.30 mmol, 38 %產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.48 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.12-3.89 (m, 1H), 1.88-1.23 (m, 6H), 1.13 (s, 3H)。及黃色油狀(1S,3S)-1-甲基環戊烷-1,3-二醇(200 mg,1.72 mmol, 15 %產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.38 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 4.29-4.16 (m, 1H), 4.14 (s, 1H), 1.98-1.81 (m, 2H), 1.72-1.34 (m, 4H), 1.24 (s, 3H)。 步驟4：(+/-)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1R ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1899
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (56.7 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液中添加(1S,3R)-1-甲基環戊烷-1,3-二醇(108.0 mg, 0.93 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1R,3S)-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.45 mmol, 96 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =668.3。 (+/-)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1901
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (56.7 mg, 0.46 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之溶液中添加(1S ,3S )-1-甲基環戊烷-1,3-二醇(108.0 mg, 0.93 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.299 mmol, 64 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668.3。 步驟5：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1R ,3R )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽
Figure 02_image1903
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1R ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(295.0 mg, 0.44 mmol)及TFA (3.0 mL)於二氯甲烷(9 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(0.1% FA):CAN = 在7 min內9% B至41% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配立體化學。
鏡像異構物1(化合物 533a ) (22.8 mg, 0.045 mmol, 10 %產率)。RT 2.162 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):EtOH = 70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.019 min.，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.07-4.99 (m, 1H), 4.70-4.20 (m, 6H), 3.50-3.44 (m, 2H), 2.12-1.95 (m, 5H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.81-1.70 (m, 2H), 1.61-1.53 (m, 1H), 1.23 (s, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 533b ) (24.8mg, 0.049 mmol, 11 %產率)。RT 3.594 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):EtOH = 70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.019 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.07-4.99 (m, 1H), 4.70-4.20 (m,6H), 3.50-3.44 (m, 2H), 2.12-1.95 (m, 5H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.81-1.70 (m, 2H), 1.61-1.53 (m, 1H), 1.23 (s, 3H)。N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,3R )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽及N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1R ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊基]酯鹽酸鹽
Figure 02_image1905
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,3S )-3-羥基-3-甲基-環戊氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.30 mmol)及TFA (3.0 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 ):ACN = 在7 min內18% B至35% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK ID-03, 2.0cm I.D*25cm L (5 µm)；MTBE (10 M NH3 -MEOH):IPA= 在20 min內30% B至30% B；流速15 mL/min)分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配立體化學。
鏡像異構物3 (化合物 533c ) (21.5 mg, 0.042 mmol, 14 %產率)。RT 2.380 min (CHIRALPAK ID-3大小：0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):IPA = 70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.077 min；方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.25-5.10 (m, 1H), 4.41-4.38 (m, 2H), 4.20-3.61 (m, 4H), 3.43-3.30 (m, 2H), 2.39-2.14 (m, 2H), 1.97 (s, 3H), 1.78 -1.49 (m, 4H), 1.31 (s, 3H)。
鏡像異構物4 (化合物 533d ) (13.3 mg,0.026 mmol, 9%產率)。RT 3.737 min (CHIRALPAK ID-3大小：0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):IPA = 70:30；1.0 ml/min)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 468.2, RT 2.077 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.00 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.25-5.10 (m, 1H), 4.41-4.38 (m, 2H), 4.20-3.61 (m, 4H), 3.43-3.30 (m, 2H), 2.39-2.14 (m, 2H), 1.97 (s, 3H), 1.78 -1.49 (m, 4H), 1.31 (s, 3H)。實例 220 (1s ,3s )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯(化合物 534a )
Figure 02_image1907
步驟1：N -第三丁氧基羰基-N -[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image1909
向N -[5-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三丁氧基羰基-胺基甲酸第三丁酯(196.5 mg, 0.33mmol)、3-羥基環丁腈(163.5 mg, 1.68 mmol)及DIEA (435.1mg, 3.36 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(99.9 mg, 0.33 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀N -第三丁氧基羰基-N -[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(200 mg, 0.28 mmol, 84.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 707.4。 步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯
Figure 02_image1911
向N-[5-[(Z )-3-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[6-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-4-甲基-3-吡啶基]-2-氟-烯丙基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-(羥基甲基)胺基甲酸第三丁酯；異丁烷(250.0 mg, 0.36 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加TFA (4 mL, 0.36 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時且在真空下濃縮。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select  CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內7% B至35% B)純化，以得到淺黃色固體狀N-[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氰基環丁基)酯(26.1 mg, 0.064 mmol, 18%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 407.1, RT 1.942 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.99 (d,J = 11.3 Hz, 2H), 7.73 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.28 (s, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.95 (m, 1H), 3.12 (m, 1H), 2.90-2.73 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.95 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 221 (1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯鹽酸鹽及(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯鹽酸鹽(化合物 542c 及化合物 542d )
Figure 02_image1913
步驟1：反式 - 2-(苄基氧基)環丁-1-醇
Figure 02_image1915
將苄醇(3850 mg, 35.65 mmol)及鈉(250.0 mg, 10.87 mmol)之混合物於90℃下0.5小時。添加5-氧雜二環[2.1.0]戊烷(250.0 mg, 3.57mmol)且將混合物於90℃下攪拌12小時。藉由乙酸淬滅反應。過濾後且在真空下濃縮，藉由由60%水(0.01% NH4 HCO3 )及40% ACN溶析之反相急速層析純化粗製物，以得到黃色油狀反式-2-苄基氧基環丁醇(280 mg,1.571 mmol, 44%產率)。 步驟2：反式-環丁烷-1,2-二醇
Figure 02_image1917
將反式-2-苄基氧基環丁醇(300.0 mg, 1.68 mmol)及Pd/C (10 wt%, 150 mg)於甲醇(5 mL)中之混合物在氫氣下於40℃下攪拌8小時。接著過濾混合物且濃縮，以得到無色油狀反式-環丁烷-1,2-二醇(234 mg, 2.65 mmol)。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 4.00 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 3.51 (s, 1H), 2.08 (q, J = 6.2 Hz, 3H), 1.56 - 1.19 (m, 1H)。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1S ,2S )-2-羥基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1919
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(234.0 mg, 0.36 mmol)及反式-環丁烷-1,2-二醇(160.0 mg, 1.82 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物中添加DMAP (44.0 mg, 0.36 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2S )-2-羥基環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.2189 mmol, 60.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 640。 步驟4：(1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯鹽酸鹽及(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image1921
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-羥基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160.0 mg, 0.25 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm,19*150mm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內20% B至40% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 542c (25.7 mg, 0.0540 mmol, 21.6%產率)。RT 0.975 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  440.2, RT 1.819 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.15 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.70 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.99 (q,J = 7.9 Hz, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.08-1.94 (m, 5H), 1.38-1.21 (m, 2H)。
鏡像異構物2：化合物 542d (27.2mg, 0.0572mmol, 22.9%產率)。RT 2.281 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA):MeOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 440.2, RT 1.819 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.15 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.70 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.99 (q,J = 7.9 Hz, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.08-1.94 (m, 5H), 1.38-1.21 (m, 2H)。實例 222 (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯(化合物 535a 及化合物 535b )
Figure 02_image1922
步驟1：反式 - 2-羥基環丁烷-1-甲腈
Figure 02_image1924
將二乙基氰化鋁(5.7 mL, 2.85 mmol)及5-氧雜二環[2.1.0]戊烷(200.0 mg, 2.85 mmol)於甲苯(8 mL)中之溶液於25℃下攪拌6小時。將反應混合物用NaHCO3 水溶液淬滅且用乙酸乙酯萃取。在真空下濃縮有機層。藉由用石油醚/乙酸乙酯(0%至100%)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物。產物直接用於下一步驟。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.93 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 4.25-4.09 (m, 1H), 2.99-2.84 (m, 1H), 2.18-2.03 (m, 1H), 2.02-1.84 (m, 1H), 1.87-1.71 (m, 1H), 1.71-1.52 (m, 1H)。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1S ,2R )-2-氰基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1926
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(464.0 mg, 0.88 mmol)、反式 - 2-羥基環丁腈(171.0 mg, 1.76 mmol)及DIEA (569.0 mg, 4.41 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(175 mg, 0.59 mmol)。將混合物於25℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。在真空下濃縮有機層。藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-2-氰基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(366 mg, 0.56 mmol, 64%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 649。 步驟3：(1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-氰基環丁酯
Figure 02_image1928
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(1S ,2R )-2-氰基環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(356.0 mg, 0.44 mmol)於二氯甲烷(2 mL)及TFA (1.5 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。將反應混合物用三乙胺調節至pH 8且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(0.1% FA):ACN = 在10 min內10% B至35% B；60 mL/min)純化粗產物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC分離外消旋產物，以產生兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 535a (8.9 mg, 0.02 mmol, 5%產率)。RT 1.604 min (CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE:EtOH = 70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 449, RT 2.035 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.22-5.13 (m, 1H), 4.35-4.27 (m, 2H), 3.52-3.41 (m, 3H), 2.41-2.10 (m, 3H), 2.02-1.87 (m, 4H)。
鏡像異構物2：化合物 533b (9.1 mg, 0.020 mmol, 5 %產率)。RT 2.656 min (CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE:EtOH = 70:30, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 449, RT 2.035 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.22-5.13 (m, 1H), 4.35-4.27 (m, 2H), 3.52-3.41 (m, 3H), 2.41-2.10 (m, 3H), 2.02-1.87 (m, 4H)。實例 223 (1r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯及(1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯(化合物 536a 及化合物 536b )
Figure 02_image1930
步驟1：3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁烷羧酸乙酯
Figure 02_image1932
於室溫下向3-羥基環丁烷羧酸乙酯(10 g, 69.36 mmol)及咪唑(4.8 g, 70.51 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液添加第三丁基氯二苯基矽烷(21.0 g, 76.64 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌2 h。藉由甲醇淬滅反應且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁烷羧酸乙酯(25 g, 65.348 mmol, 94.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 383。  步驟2：[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲醇
Figure 02_image1934
於0℃下向3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁烷羧酸乙酯(5.0 g, 13.07 mmol)於二苯醚(300 mL)中之溶液中添加LiAlH4 (13 mL, 13.07 mmol, 1 mol/L)。將所得混合物於0℃下攪拌2 h。由水淬滅反應，用乙酸乙酯萃取，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲醇(1.1 g, 3.23 mmol, 24.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 341。 步驟3：甲磺酸[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲酯
Figure 02_image1936
於0℃下向[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲醇(5.0 g, 14.68 mmol)及TEA (5.0 g, 49.5 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液中添加甲磺醯氯(5.0 g, 43.86 mmol)。將反應於0℃下攪拌2 h且接著藉由水淬滅。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色固體狀甲磺酸[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲酯(5.3 g, 12.661 mmol, 86.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 419。 步驟4：2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]乙腈
Figure 02_image1938
於室溫下向甲磺酸[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]甲酯(5.3 g, 12.66 mmol)於DMSO (50 mL)中之溶液中添加KCN (2.65 g, 40.77 mmol)。將所得溶液於110℃下攪拌2 h。由水淬滅反應且接著用乙酸乙酯萃取。乾燥有機層，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]乙腈(4 g, 11.444 mmol, 90.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 350。 步驟5：2-(3-羥基環丁基)乙腈
Figure 02_image1940
將2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]乙腈(2.0 g, 5.72 mmol)於四氫呋喃(5 mL)及TBAF (2.98 g, 11.44 mmol)中之溶液於25℃下攪拌16 h且接著在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀2-(3-羥基環丁基)乙腈(200 mg, 1.799 mmol, 31.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 112。 步驟6：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(氰基甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1942
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)及2-(3-羥基環丁基)乙腈(200 mg, 1.8 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加DIEA (800 mg, 6.2 mmol)。接著添加三光氣(200 mg, 0.67 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(氰基甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.3772 mmol, 66.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 663。 步驟7：(1r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯及(1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氰基甲基)環丁酯
Figure 02_image1944
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(氰基甲基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將所得溶液攪拌1 h且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在9 min內12 B至40 B)純化粗產物，以得到外消旋混合物。藉由對掌性HPLC (管柱(CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm, 3 µm；移動相A：(Hex:DCM = 3:1) ( 0.1%DEA ): EtOH=50:50；流速：1 mL/min)分離外消旋物，以產生兩種鏡像異構物。任意地分配立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 536a ) (23.4 mg, 0.0506 mmol, 13.4%產率)。RT 3.696 min( CHIRALPAK IA-3, 0.46*5cm, 3 µm；Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH =在8 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.2, RT 0.677 min.，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (t,J = 2.7 Hz, 1H), 5.15 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.41 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.75 (d,J = 7.4 Hz, 2H), 2.63 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 2.38-2.16 (m, 4H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 536b ) (60.7 mg, 0.1312 mmol, 34.8%產率)。RT 4.659 min( CHIRALPAK IA-3, 46*5cm, 3 µm；Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH =在8 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.2, RT 0.677 min，方法K；1 H NMR ((400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (t,J = 2.7 Hz, 1H), 5.15 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 4.28 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.41 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.75 (d,J = 7.4 Hz, 2H), 2.63 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 2.38-2.16 (m, 4H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 224 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯(化合物 537a 及化合物 537b )
Figure 02_image1946
步驟1：3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁腈
Figure 02_image1948
將3-羥基環丁腈(800.0 mg, 8.24 mmol)、1H-咪唑(2.80 mg, 41.19 mmol)於二氯甲烷(40 mL)及TBDMSCl (3.72 g, 24.71 mmol)中之溶液於室溫下攪拌4小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(90/10)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色油狀3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁腈(1.6 g, 7.57 mmol, 91.9%產率)。 步驟2：3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-1-甲基-環丁腈
Figure 02_image1950
在氮氣下，向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基環丁腈(1.20 mg, 5.68 mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加二異丙基胺基鋰(1.8 g, 17.03 mmol)。將混合物於-78℃下攪拌1小時。接著於-78℃下添加碘甲烷(1.61 g, 11.35 mmol)且將混合物於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-1-甲基-環丁腈(600 mg, 2.66 mmol, 46.9%產率)。 步驟3：3-羥基-1-甲基-環丁腈
Figure 02_image1952
向3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-1-甲基-環丁腈(1.0 g, 4.44 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加四丁基氟化銨三水合物(2.80 g, 8.87 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀3-羥基-1-甲基-環丁腈(770 mg, 6.93 mmol, 64.1%產率)。 步驟4：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1954
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600.0 mg, 1.14 mmol)、3-羥基-1-甲基-環丁腈(253.8 mg, 2.28 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(737.7 mg, 5.71 mmol)於二氯甲烷(12 mL)中之溶液中添加三光氣(338.8 mg, 1.14 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-60 /水中之0.1%NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 0.91 mmol, 79.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 663.3。 步驟5：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基-3-甲基環丁酯
Figure 02_image1956
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(590.0 mg, 0.89 mmol)於二氯甲烷(14 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(7.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：CHIRALPAK IA, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：EtOH；流速：16 mL/min；梯度：在16 min內50 B至50 B)純化殘餘物，以得到外消旋混合物。藉由對掌性製備型HPLC進一步分離混合物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1：化合物 537a (43.5 mg, 0.094 mmol, 10.6%產率)。RT 1.187 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE: EtOH = 50:50, 1 ml/min)。[M+H]+ = 463.1, RT 2.176 min，方法=  K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.08 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 4.30 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.00-2.87 (m, 2H), 2.33-2.20 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.55 (s, 3H)。
異構物2：化合物 537b (36.6 mg, 0.080 mmol, 8.9%產率)。RT 1.874 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE: EtOH = 50:50, 1 ml/min)。[M+H]+ = 463.1, RT 2.176 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.08 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 4.30 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.00-2.87 (m, 2H), 2.33-2.20 (m, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.55 (s, 3H)。實例 225 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯(化合物 538a 及化合物 538b )
Figure 02_image1958
步驟1：反式-4-羥基四氫呋喃-3-甲腈
Figure 02_image1960
於室溫下向3,4-環氧四氫呋喃(1.0 g, 11.62 mmol)於甲苯(40 mL)中之溶液中添加緩慢二乙基氰化鋁(2.58 g, 23.24 mmol)於甲苯中之溶液。攪拌隔夜後，藉由緩慢添加1.0N NaOH溶液小心地淬滅反應混合物(注意：放熱)且接著用水稀釋。用乙酸乙酯萃取水性混合物。用水及鹽水洗滌合併之有機物，乾燥(MgSO4 )，過濾且在減壓下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀反式-4-羥基四氫呋喃-3-甲腈(1 g, 8.841 mmol, 76.1%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 5.80-5.76 (m, 1H), 4.53-4.49 (m, 1H), 4.01-3.97 (m, 1H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.52-3.49 (m, 1H), 3.15-3.14 (m, 1H)。 步驟2：(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((4-氰基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1962
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.57 mmol)及反式-4-羥基四氫呋喃-3-甲腈(129.0 mg, 1.14 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加N ,N -二異丙基乙胺(0.5 mL, 2.86 mmol)。接著添加三光氣(120.0 mg, 0.40 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時，之後於室溫下攪拌2小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(50:1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((4-氰基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(230 mg, 0.346 mmol, 60.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 665。 步驟3：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氰基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1964
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(4-氰基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.30 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(8.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺將溶液之pH調節至pH 8。接著在真空下濃縮混合物。藉由製備型HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速60 mL/min；梯度：在7 min內13 B至43 B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：黃色固體狀(化合物 538a ) (7.9 mg, 0.0170 mmol, 5.6%產率)。RT 1.349 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE : EtOH = 70:30；1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ = 465.2, RT 1.886 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.36 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.6 Hz ,1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.44-5.41 (m, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.16-4.06 (m, 2H), 3.89 (t,J = 7.35 Hz ,2H), 3.62-3.57 (m, 1H), 3.36 (s, 2H), 1.92 (s, 3H)。
鏡像異構物2：黃色固體狀(化合物 538b ) (12.8 mg, 0.0274mmol, 9.1%產率)。RT 2.474 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm；3 µm；移動相：MTBE : EtOH = 70:30；1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ = 465.2, RT 1.886 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.36 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.6 Hz ,1H), 6.23 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.44-5.41 (m, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.16-4.06 (m, 2H), 3.89 (t,J = 7.35 Hz ,2H), 3.62-3.57 (m, 1H), 3.36 (s, 2H), 1.92 (s, 3H)。實例 226 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯(化合物 539a )
Figure 02_image1965
步驟1：7-(3-((((1r,3r)-3-((第三丁氧基羰基)(甲基)胺基)環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1967
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)、N-(3-羥基環丁基)-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(229 mg, 1.14 mmol)及N,N'-二異丙基乙胺(736 mg, 5.71 mmol)於二氯甲烷(18 mL)中之溶液於0℃下攪拌5 min。接著逐滴添加三光氣(169 mg, 0.57 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮混合物且藉由用乙酸乙酯/石油醚(4:1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁氧基羰基(甲基)胺基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.398 mmol, 69.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 753。 步驟2：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯
Figure 02_image1965
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁氧基羰基(甲基)胺基]環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(50 mg, 0.070 mmol)及TFA (1 mL)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (X-Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內11% B至31% B)純化粗產物，以得到淺黃色固體狀(1r,3r)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺基)環丁酯(17.2 mg, 0.0377 mmol, 56.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.2, RT 1.421 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.08 (p,J = 6.2 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.45-3.3.5 (m, 2H), 3.28-3.15 (m, 1H), 2.32-2.09 (m, 7H), 2.11-1.92 (m, 4H)。實例 227 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯鹽酸鹽(化合物 541a )
Figure 02_image1969
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1971
在氮氣下，於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.62 mmol)及DMAP (75.6 mg, 0.62 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之溶液中添加3-氟環丁醇(111.6 mg, 1.24 mmol)。將所得溶液於90℃下攪拌5小時且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(310 mg, 0.483 mmol, 78%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 642.3。 步驟2：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image1973
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-氟環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.47 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA將溶液之pH值調節至pH 8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內17% B至38% B)純化，以得到產物之游離鹼形式。接著將游離鹼溶解於甲醇中且用HCl (0.04 mL, 1 M，於二噁烷中)處理20分鐘。在真空下濃縮混合物，以得到橙色固體狀(1s,3s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟環丁酯鹽酸鹽(32.8 mg, 0.068 mmol, 14.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 442.2。RT 2.019 min；方法J。1 H NMR1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.78-4.82 (m, 1H), 4.58-4.62 (m, 1H), 4.48 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.48 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 2.97-2.86 (m, 2H), 2.22-2.33 (m, 2H), 2.02 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 228 (1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯(化合物 542a 及化合物 542b )
Figure 02_image1975
步驟1：順式 - 環丁烷-1,2-二醇
Figure 02_image1977
向1,2-(三甲基矽基氧基)環丁烯(3.0 g, 13.02 mmol)於四氫呋喃(100 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%, 800.0 mg, 6.35 mmol)。將混合物在氫氣下於室溫下攪拌12小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用乙酸乙酯/石油醚(2/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀順式-環丁烷-1,2-二醇(300 mg, 3.40 mmol, 26.2%產率)。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 4.59 (s, 2H), 4.19 (q,J = 3.7 Hz, 2H), 2.17-1.69 (m, 4H)。 步驟2：(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[2-羥基環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1979
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)、順式-環丁烷-1,2-二醇(54.6 mg, 0.62 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(37.8 mg, 0.31 mmol)於1,4-二噁烷(4 mL)中之溶液於90℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈0-65/水中之0.1% FA)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[2-羥基環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(90 mg, 0.141 mmol, 45.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =640.3。 步驟3：(1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯及(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-羥基環丁酯
Figure 02_image1981
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-羥基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(84.0 mg, 0.13 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (2.5 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (CHIRALPAK IC, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE，移動相B：MeOH；流速：35 mL/min；梯度：在30 min內50% B至50% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 542a (7 mg, 0.016 mmol, 11.8%產率)。RT 0.906 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1% DEA): MeOH = 50:50)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 440.2, RT 1.942 min. 方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.03-4.90 (m, 1H), 4.46 (t,J = 4.2 Hz, 2H), 4.30-4.32 (m, 1H), 3.47 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 2.15-1.98 (m, 6H), 1.85-1.89 (m, 1H)。
鏡像異構物2：化合物 542b (12 mg, 0.027 mmol, 19.6%產率)。RT 1.829 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE(0.1% DEA) : MeOH = 50:50)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 440.2, RT 1.942 min. 方法K.；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.03-4.90 (m, 1H), 4.46 (t,J = 4.2 Hz, 2H), 4.30-4.32 (m, 1H), 3.47 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 2.15-1.98 (m, 6H), 1.85-1.89 (m, 1H)。實例 229 (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯及(1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯(化合物 543a 及化合物 543b )
Figure 02_image1983
步驟1：2-(二碘甲基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環
Figure 02_image1985
在氮氣下，於-100℃下向三甲基硼酸酯(19 mL, 157 mmol)於四氫呋喃(250 mL)中之溶液中添加正丁基鋰(60 mL, 142 mmol, 2.5 M，於正己烷中)。將所得溶液於-100℃下攪拌40分鐘。接著添加二氯甲烷(10 mL, 157 mmol)。將混合物於-100℃下攪拌30分鐘。用HCl (30 mL, 5 N，於水中)淬滅反應。將反應混合物用水稀釋且用Et2 O萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。
將殘餘物溶解於甲苯(300 mL)中且接著添加頻哪醇(1.67 g, 141.3 mmol)。將溶液於110℃下攪拌18小時。在真空下濃縮溶液。將殘餘物重新溶解於丙酮(400 mL)中且添加碘化鈉(5.4 g, 361.1mmol)。將溶液於室溫下攪拌24小時。在真空下濃縮溶液，用水稀釋且用Et2 O萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。接著將殘餘物懸浮於己烷中。傾析混合物以去除黑色不溶性固體，之後用己烷重結晶，從而得到黃色固體狀2-(二碘甲基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環(8 g, 20.32mmol, 12.9%產率)。 步驟2：4,4,5,5-四甲基-2-[3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基]-1,3,2-二氧雜硼戊環
Figure 02_image1987
在氮氣下，將CrCl2 (5.5 g, 44.71 mmol)及TMEDA (5.2 g, 44.71mmol)於四氫呋喃(85 mL)中之溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加2-(二碘甲基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環(4.4 g, 11.18 mmol)， 將混合物於室溫下攪拌1小時。添加2,5-二氫呋喃(522.3 mg, 7.45 mmol)且將混合物於50℃下再攪拌20小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色油狀4,4,5,5-四甲基-2-[3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基]-1,3,2-二氧雜硼戊環(1.2 g, 5.57 mmol, 74.7%產率)。 步驟3：3-氧雜二環[3.1.0]己-6-醇
Figure 02_image1989
將4,4,5,5-四甲基-2-[3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基]-1,3,2-二氧雜硼戊環(1.15.0 g, 5.45 mmol)於四氫呋喃(26 mL)及水(26 mL)中之溶液於0℃下攪拌15 min。接著添加NaBO3 •4H2 O (2.52 g, 16.35 mmol)。將混合物於0℃下攪拌4小時。過濾反應混合物且用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀3-氧雜二環[3.1.0]己-6-醇(400 mg, 4.0 mmol, 73.3%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.29 (s, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.73 (d,J = 8.3 Hz, 2H), 3.60-3.46 (m, 2H), 1.64 (q,J = 1.8 Hz, 2H) 步驟4. 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image1991
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(210.0 mg, 0.40 mmol)、DIEA (516.4 mg, 4 mmol)及3-氧雜二環[3.1.0]己-6-醇(80.1 mg, 0.80 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中添加三光氣(83.0 mg, 0.28 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。將反應混合物用水淬滅且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(98/2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(112 mg, 0.17 mmol, 43%產率)。 步驟5：(1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯(化合物 543a )及(1R ,5S ,6r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基酯(化合物 543b )
Figure 02_image1993
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(3-氧雜二環[3.1.0]己-6-基氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物於室溫下攪拌3小時且在真空下濃縮。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA將溶液之pH調節至8。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內10% B至32% B)純化，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性HPLC進一步分離混合物，以得到兩種異構物。
異構物1：化合物 543a (54.6 mg, 0.12 mmol, 31.5%產率)。RT 2.331 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；移動相：(Hex:DCM = 3:1) (0.1% DEA):EtOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.1, RT 2.132 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.36 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.96 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.55 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.90 (d,J = 8.5 Hz, 2H), 3.72 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 3.60-3.66 (m, 2H), 3.52 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 2.27-2.01 (m, 5H)。
異構物2：化合物 543b (12 mg, 0.027 mmol, 6.9%產率)。RT 3.307 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；移動相：(Hex : DCM = 3 : 1) (0.1%DEA) : EtOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.1, RT 2.132 min；方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.36 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.96 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.55 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.90 (d,J = 8.5 Hz, 2H), 3.72 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 3.60-3.66 (m, 2H), 3.52 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 2.12-2.03 (m, 5H)。實例 230 (3R ,4S )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯( 化合物 544a 及化合物 544b )
Figure 02_image1994
步驟1：(±)-反式 - N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-3-吡啶基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image1996
向N -[5-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.62 mmol)、DIEA (801.9 mg, 6.20 mmol)及反式-4-甲基四氫呋喃-3-醇(316.9 mg, 3.10 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(184.2 mg, 0.62 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。將反應混合物用水淬滅且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀N-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-3-吡啶基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(200 mg, 0.33 mmol, 52.7%產率)。 步驟2：(3R ,4S )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image1994
向N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-(第三丁氧基羰基胺基)-4-甲基-3-吡啶基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(200.0 mg, 0.33 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於0℃下攪拌1.5小時。在真空下濃縮反應混合物，重新溶解於DCM中且用TEA將混合物之pH調節至pH 8。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5 B至28 B)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 544a (9.7mg,0.024mmol, 7.2%產率)。RT 2.031 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM = 3:1) (0.1%DEA) : EtOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 412.1, RT 0.963 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.99 (d,J = 1.9 Hz, 2H), 7.66 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 4.04-3.91 (m, 2H), 3.76 (dd,J = 10.5, 1.9 Hz, 1H), 3.34 (dd,J = 8.4, 4.7 Hz, 1H), 2.30-2.37 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.07 (d,J = 7.1 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：化合物 544b (5.1 mg, 0.012 mmol, 3.8%產率)。RT 2.527 min( CHIRALPAK IA-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA) : EtOH = 50:50)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 412.1, RT 0.963 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.99 (d,J = 1.9 Hz, 2H), 7.66 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 4.04-3.91 (m, 2H), 3.76 (dd,J = 10.5, 1.9 Hz, 1H), 3.34 (dd,J = 8.4, 4.7 Hz, 1H), 2.30-2.37 (m, 1H), 1.92 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.07 (d,J = 7.1 Hz, 3H)。實例 231 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯鹽酸鹽(化合物 447a )
Figure 02_image1999
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-(甲基胺基)環丁基]酯(90 mg, 0.20 mmol)及甲醛(40%, 9.0 mg, 0.22 mmol)於甲醇(8 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。接著添加硼氫化鈉(18 mg, 0.47 mmol)且將混合物於25℃下攪拌1小時。由水淬滅反應且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )；移動相B：MeOH；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內29% B至63% B)純化殘餘物，以得到(1R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯。接著向(1R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯於甲醇(10 mL)中之溶液中添加HCl之1,4-二噁烷溶液(2 ml, 1N )。將混合物於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮反應物，以得到紅色固體狀(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺基)環丁酯鹽酸鹽(50.7 mg, 0.101 mmol, 50.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.2, RT 1.469 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.80 (s, 1H), 10.29 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.20 (bs, 3H), 5.08 (d,J = 3.8 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.90-3.70 (m, 1H), 3.60-3.40 (m, 2H), 2.90-2.65 (m, 8H), 2.43 (d,J = 10.3 Hz, 2H), 1.99 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 232 (+/-)-反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(化合物 445ab )
Figure 02_image2001
Figure 02_image2003
步驟1：(+/-)-反式 - 7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)-3-氟六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2005
Figure 02_image2007
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 0.95 mmol)、(+/-)-反式-3-氟-4-羥基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(416 mg, 1.9 mmol)及DIEA (613 mg, 4.75 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於0℃下攪拌0.5小時。接著添加三光氣(146 mg, 0.49 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(65/35)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(+/-)-反式 - 7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)-3-氟六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600 mg, 0.778 mmol, 81.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771。 步驟2：(+/-)-反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image2009
Figure 02_image2011
將(+/-)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(800 mg, 1.04 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (4 m)中之溶液於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由具有MeOH/水(44/56)之反相層析純化，以得到黃色固體狀(+/-)-反式-7-[8-胺基-7-氟-3-[[3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(580 mg,1.0165 mmol, 97.9%產率)。GCMS (ESI) [M+H]+ = 471。 步驟3：(+/-)-反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image2001
Figure 02_image2003
將3-丙醇酸丙酯(534.82 mg, 7.42 mmol)及(+/-)-反式-7-[8-胺基-7-氟-3-[[3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(350 mg, 0.74 mmol)於甲醇(15 mL)中之溶液於室溫下攪拌10 min。接著添加四異丙醇鈦(849.82 mg, 2.99 mmol)。將混合物於60℃下攪拌2小時。接著添加NaCNBH3 (140.0 mg, 2.22 mmol)。將混合物於室溫下再攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用[MeOH]/[水] (66/34)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(+/-)-反式-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(3.2 mg,0.0061 mmol, 0.8000%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2, RT 1.522 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.83-6.78 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.48-4.67 (m, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.45-4.37 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.39-3.32 (m, 2H), 3.04-2.95 (m, 1H), 2.69-2.57 (m, 1H), 2.21-1.99 (m, 3H), 1.90 (s, 3H), 1.70-1.52 (m, 1H)。實例 233 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2S )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯及(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2R )-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯( 化合物 545a 及化合物 545b )
Figure 02_image2013
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2015
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.46 mmol)及1-boc-3-羥基氮雜環丁烷(350 mg, 2.02 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加DMAP (60 mg, 0.49 mmol)。將反應於60℃下攪拌16 h。在真空下濃縮所得溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.276 mmol, 59.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =725。 步驟2：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image2017
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-第三丁氧基羰基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.28 mmol)於二氯甲烷(8 mL)及TFA (2 mL)中之溶液於25℃下攪拌1 h。接著在真空下濃縮反應混合物。藉由反相層析(乙腈0-40/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(80 mg, 0.1885 mmol, 68.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 425。 步驟3：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1R ,2S)-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯及(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-((1S ,2R)-2-氟環丙烷-1-羰基)氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image2019
於25℃下向N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸氮雜環丁-3-基酯(80 mg, 0.19 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加反式-2-氟環丙烷羧酸(30 mg, 0.29 mmol)、DIEA (100 mg, 0.78 mmol)及HATU (80 mg, 0.21 mmol)。將反應物於25℃下攪拌1小時且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC及對掌性HPLC純化殘餘物，以得到兩種鏡像異構物。將兩種鏡像異構物用HCl之1,4-二噁烷溶液(0.04 M)處理，以得到其HCl鹽。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 545a ( 21.3 mg, 0.0389 mmol, 20.7%產率)。RT 2.853 min( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1%DEA):MeOH =在8 min內70:30；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 511.2, RT 1.943 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.45 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.91 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.62 (bs, 1H), 5.31-5.19 (m, 2H), 4.89 (s, 1H), 4.69-4.67 (m, 2H), 4.45-4.43 (m, 2H), 4.28-4.26 (m, 2H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.47-3.46 (m, 2H), 2.18 (dt,J = 17.6, 8.9 Hz, 1H), 2.00 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.50-1.36 (m, 1H), 1.13 (tt,J = 12.3, 5.5 Hz, 1H)。
鏡像異構物2：化合物 545b (20.8 mg, 0.038 mmol, 20.2%產率)。RT 4.366 min( CHIRALPAK IG-3, 0.46*5cm, 3 µm；MTBE(0.1% DEA):MeOH=在8 min內70:30；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 511.2, RT 1.943 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.45 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.91 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.62 (bs, 1H), 5.31-5.19 (m, 2H), 4.89 (s, 1H), 4.69-4.67 (m, 2H), 4.45-4.43 (m, 2H), 4.28-4.26 (m, 2H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.47-3.46 (m, 2H), 2.18 (dt,J = 17.6, 8.9 Hz, 1H), 2.00 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.50-1.36 (m, 1H), 1.13 (tt,J = 12.3, 5.5 Hz, 1H)。實例 234 (3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯(化合物 546a 及化合物 546b )
Figure 02_image2021
步驟1：(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-甲氧基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2023
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4 層析]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(3000.0 mg, 5.71 mmol)及反式-4-甲氧基四氫呋喃-3-醇(2040.0 mg, 17.27 mmol)於二氯甲烷(300 mL)中之溶液中添加DIEA (3690.0 mg, 28.6 mmol)。接著添加三光氣(1800.0 mg, 6.07 mmol)且藉由純化。將混合物於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-甲氧基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(2100 mg, 3.1357 mmol, 54.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 670. 步驟2：(±)-反式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2025
將(±)-反式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-甲氧基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1500.0 mg, 2.24 mmol)於二氯甲烷(10 mL)及TFA (10 mL)中之溶液於室溫下攪拌1 h。在真空下濃縮溶劑。將殘餘物用CH3 CN稀釋。用NaHCO3 將反應混合物調節至pH 8。過濾後，收集固體且藉由MeOH (50 mL)洗滌，以得到黃色固體狀(±)-反式-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲氧基四氫呋喃-3-基酯(602.8 mg, 1.252 mmol, 55.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 470.2, RT 2.543 min，方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 )δ 10.21 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.4 Hz ,1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15 (d,J = 4.8 Hz ,1H), 4.30-4.27 (m, 2H), 3.99-3.91 (m, 3H), 3.79 (d,J = 10.4 Hz ,1H), 3.69-3.36 (m, 1H), 3.37 (s, 5H), 1.92  (s, 3H)。
藉由對掌性SFC (Chiralcel OX；具有0.1% NH4 OH之等度50% MeOH)進一步純化外消旋混合物，以產生兩種單一鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 546a ) (39 mg)：RT 0.707 min (Chiralcel OX；具有0.1% NH4 OH之等度50% MeOH，2.5 min運行時間)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 470.2, RT 3.35，方法= N。1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 4.02 - 3.89 (m, 3H), 3.79 (m 1H), 3.68 (m, 1H), 3.37 (s, 5H), 1.92 (d, J = 1.6 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 546b ) (19 mg)：RT 0.901 min (Chiralcel OX；具有0.1% NH4 OH之等度50% MeOH，2.5 min運行時間)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 470.2, RT 3.36，方法= N。1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.21 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 4.02 - 3.89 (m, 3H), 3.79 (m 1H), 3.68 (m, 1H), 3.37 (s, 5H), 1.92 (d, J = 1.6 Hz, 3H)。實例 235 (R)-(8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 547a)
Figure 02_image2027
步驟1：N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N -(2-氰基烯丙基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2029
於0℃下向N -(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(3.2 g, 7.75 mmol)於DMF (80 mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.22 g, 9.17mmol)。將反應物於0℃下攪拌30 min。接著逐滴添加2-(溴甲基)丙-2-烯腈(1.5 g, 10.27 mmol)於DMF (5 ml)中之溶液。將所得混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N-(2-氰基烯丙基)胺基甲酸第三丁酯(3.3 g, 6.419 mmol, 82.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 478。 步驟2：7-溴-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2031
將氯化銦(416.0mg, 1.88mmol)及甲醇酸鈉(101.0 mg, 1.87 mmol)於THF (30 mL)中之溶液於25℃下攪拌30 min。添加二苯基矽烷(800 mg, 4.35 mmol)且將混合物於25℃下攪拌30 min。接著添加N-(5-溴-2-碘-4-甲基-3-吡啶基)-N-(2-氰基烯丙基)胺基甲酸第三丁酯(900 mg, 1.88 mmol)於THF (30 mL)及三乙基硼烷(185 mg, 1.888 mmol)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌4小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色油狀7-溴-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(325 mg, 0.924 mmol, 49.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 325。 步驟3：3-氰基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2033
在氮氣下，將7-溴-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.57 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(1.44 g, 5.67 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(92 mg, 0.11 mmol)及乙酸鉀(111 mg, 1.13 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之混合物於100℃下攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯(10 mL)稀釋且過濾。在減壓下濃縮濾液且藉由用乙酸乙酯/石油醚(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀3-氰基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(124mg,0.2888mmol, 50.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 400。 步驟4：N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯
Figure 02_image2035
在氮氣下，向8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(1.2 g, 3.72 mmol)、(R )-3-羥基四氫呋喃(0.65 g, 7.39 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(6.83 g, 37.12 mmol)於二氯甲烷(55 ml)中之混合物中添加二氯甲烷(5 ml)中之三光氣(1.1 g, 3.7 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(97/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀N-(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R)-四氫呋喃-3-基]酯(900 mg, 2.061 mmol, 55.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 437。 步驟5：7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2037
在氮氣下，於室溫下向3-氰基-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.25 mmol)、N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(131 mg, 0.30 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(40.9 mg, 0.050 mmol)及碳酸鉀(34.59 mg, 0.25 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加水(1 mL)。接著將反應混合物於90℃下攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋且過濾。在減壓下濃縮濾液。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(75 mg, 0.122 mmol, 48.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 582。 步驟6：7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2039
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(70 mg, 0.12 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(140 mg, 1.20 mmol)、Brettphos Pd G3 (22 mg, 0.020 mmol)及碳酸鉀(34 mg, 0.25 mmol)於1,4-二噁烷(3 ml)中之懸浮液於90℃下攪拌2小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(70 mg, 0.12 mmol)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 663。 步驟7：(R )-(8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2041
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氰基-8-甲基-3,4-二氫-2H -1,5-萘啶-1-甲酸第三丁酯(45 mg, 0.070 mmol)於二氯甲烷(2.5 mL)及TFA (0.60 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm, n；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5% B至25% B)純化，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-6-(7-氰基-4-甲基-5,6,7,8-四氫-1,5-萘啶-3-基)-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R)-四氫呋喃-3-基]酯(15.3 mg, 0.0321 mmol, 47.3%產率) (非鏡像異構物之混合物)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.2, RT 4.045 min.，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.01 (s, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.52-6.37 (m, 2H), 5.33-5.24 (m, 1H), 3.92-3.69 (m, 4H), 3.57 (dd,J = 24.2, 10.7 Hz, 3H), 3.48-3.35 (m, 2H), 2.28-2.12 (m, 2H), 2.09-1.94 (m, 4H)。實例 236 (R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 548a 及化合物 548b )
Figure 02_image2043
步驟1：5-溴-4-甲基-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-3-甲酸甲酯
Figure 02_image2045
將5-溴-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯(2500.0 mg, 10.87 mmol)及m-CPBA (3756.0 mg, 21.84 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。藉由硫代硫酸鈉水溶液淬滅反應。用飽和NaHCO3 水溶液將溶液之pH調節至pH 7-8。將所得溶液用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮，以得到白色固體狀5-溴-4-甲基-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-3-甲酸甲酯(2400 mg, 9.75 mmol, 89 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  246.0。 步驟2：2,5-二溴-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯
Figure 02_image2047
於室溫下向5-溴-4-甲基-1-氧離子基-吡啶-1-鎓-3-甲酸甲酯(1000.0 mg, 4.06 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加POBr3 (1161.0 mg, 4.07 mmol)。將混合物於65℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用NaHCO3 水溶液中和。將混合物用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1:1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀2,5-二溴-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯(500 mg, 1.62 mmol, 40%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =  307.9。 步驟3：5-溴-2-(3-甲氧基-3-側氧基-丙基)-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯
Figure 02_image2049
將Zn (2.96 g, 45.54 mmol)及I2 (771.0 mg, 3.04 mmol)於N ,N -二甲基乙醯胺(20 mL)中之懸浮液於室溫下攪拌10分鐘。接著添加3-碘丙酸甲酯(6.9 g, 32.24 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時且過濾。將濾液轉移至2,5-二溴-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯(2.33 g, 7.54 mmol)及Pd(PPh3 )4 (2.36 g, 1.52 mmol)於N ,N -二甲基乙醯胺(20 mL)中之混合物中。將混合物於70℃下攪拌2小時且接著用乙酸乙酯稀釋。將所得溶液用水洗滌。在真空下濃縮有機層且藉由用ACN/水(NH4 HCO3 10 mmol/L)溶析之反相層析純化，以得到黃色固體狀5-溴-2-(3-甲氧基-3-側氧基-丙基)-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯(1070 mg,3.38 mmol, 45%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 330.0。 步驟4：3-溴-4-甲基-5-側氧基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-6-甲酸甲酯
Figure 02_image2051
向5-溴-2-(3-乙氧基-3-側氧基-丙基)-4-甲基-吡啶-3-甲酸甲酯(1070.0 mg, 3.24mmol)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加NaOMe (1.2 mL, 6.48 mmol)。將混合物於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 )溶析之反相層析純化殘餘物，以產生白色固體狀3-溴-4-甲基-5-側氧基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-6-甲酸甲酯(372 mg, 1.31 mmol, 40 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 284.0。 步驟5：3-溴-4-甲基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-5-酮
Figure 02_image2053
將3-溴-4-甲基-5-側氧基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-6-甲酸甲酯(367.0 mg, 1.29 mmol)及LiCl (271.0 mg, 6.45 mmol)於DMSO (10 mL)及水(0.5 mL)中之溶液於100℃下攪拌1小時。藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 )溶析之反相層析純化殘餘物，以得到白色固體狀3-溴-4-甲基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-5-酮(234 mg, 1.035 mmol, 80 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 226.0。 步驟6：3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-5-醇
Figure 02_image2055
將3-溴-4-甲基-6,7-二氫環戊[b ]吡啶-5-酮(568.0 mg, 2.51 mmol)及NaBH4 (191.0 mg, 5.03 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌30 min。濃縮後，藉由用ACN/水(10 mmol/L)溶析之反相層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H-環戊[b ]吡啶-5-醇(535 mg, 2.34 mmol, 93 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 228.0。 步驟7：(3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-5-基)氧基-第三丁基-二甲基-矽烷
Figure 02_image2057
將3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-5-醇(630.0 mg, 2.76 mmol)、咪唑(1134.0 mg, 16.66 mmol)及第三丁基氯二甲基矽烷(1660.0 mg, 11.07 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(80/20)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以產生白色固體狀(3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H-環戊[b ]吡啶-5-基)氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(850 mg,2.48 mmol, 89 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 342.1。 步驟8：[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]硼酸
Figure 02_image2059
將(3-溴-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-5-基)氧基-第三丁基-二甲基-矽烷(800.0 mg, 2.34mmol), Pd(dppf)Cl2 (382.0 mg, 0.52 mmol)、B2 Pin2 (4750.0 mg, 18.7 mmol)及KOAc (688.0 mg, 7.02 mmol)於DMSO (10 mL)中之混合物於100℃下攪拌2小時。藉由用在30 min內5%至100%之ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 )溶析、接著用100% MeOH溶析之反相層析純化殘餘物，以產生褐色固體狀[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H-環戊[b ]吡啶-3-基]硼酸(510 mg,1.66 mmol, 71%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 308.2。 步驟9：N -[6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-8-氯-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯
Figure 02_image2061
將N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(476.0 mg, 1.09 mmol)、[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]硼酸(510.0 mg, 1.66 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (178.0 mg, 0.24 mmol)及K2 CO3 (451.0 mg, 3.27 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(2 mL)中之混合物於70℃下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(40/60)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以產生淺黃色固體狀N-[6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-8-氯-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(300 mg,0.52 mmol, 48 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 572.2。 步驟10：N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯
Figure 02_image2063
將N -[6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-8-氯-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(400.0 mg, 0.70 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(2040.0 mg, 17.41 mmol)、Pd2 (dba)3 •CHCl3 (142.0 mg, 0.14 mmol)、Brettphos (147.0 mg, 0.27 mmol)及Cs2 CO3 (680.0 mg, 2.09 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物於100℃下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(20/80)溶析之矽膠上急速層析來純化，以產生淺黃色固體狀N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(270 mg, 0.413 mmol, 59 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 653.3。 步驟11：N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯
Figure 02_image2065
將N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-6-[5-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-7-氟-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(240.0 mg, 0.37 mmol)及TBAF (233.0 mg, 0.74 mmol)於四氫呋喃(4 mL)中之混合物於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物且藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 )溶析之反相層析純化，以產生淺黃色固體狀N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-(5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(190 mg, 0.35 mmol, 96%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 539.2。 步驟12：(R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2067
將N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-[(5S )-5-羥基-4-甲基-6,7-二氫-5H -環戊[b ]吡啶-3-基]-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(150.0 mg, 0.28 mmol)及TFA (2.0 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC純化殘餘物，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種立體異構物。任意地分配醇之絕對立體化學.
異構物1 (化合物 548a ) (16.7 mg,0.038 mmol, 14%產率)；RT 1.297 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH = 90:10；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 539.2, RT 1.761 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.99 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 5.82-4.86 (m, 5H), 3.90-3.70 (m, 4H), 3.42-3.30 (m, 1H), 3.19-2.96 (m, 1H), 2.51-2.42 (m, 4H), 2.32-1.87 (m, 3H)。
異構物2 (化合物 548b ) (14.5mg,0.0331mmol, 11.9%產率)；RT 2.128 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE (0.1%DEA):MeOH = 90:10；1.0 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 539.2, RT 1.761 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.23 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.99 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 5.82-4.86 (m, 5H), 3.90-3.70 (m, 4H), 3.42-3.30 (m, 1H), 3.19-2.96 (m, 1H), 2.51-2.42 (m, 4H), 2.32-1.87 (m, 3H)。實例 237 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯(化合物 549a 及化合物 549b )
Figure 02_image2069
步驟1：2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]-2-甲基-丙腈
Figure 02_image2071
在氮氣下，於0℃下向2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]乙腈(2600 mg, 7.44 mmol)於四氫呋喃(130 mL)中之溶液中添加LDA (24 mL, 44.63 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌1 h。接著於0℃下添加碘甲烷(5200 mg, 36.62 mmol)且將混合物於室溫下攪拌3小時。藉由NH4 Cl水溶液淬滅反應。將所得混合物用乙酸乙酯萃取，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/二氯甲烷(2/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]-2-甲基-丙腈(1.6 g, 4.237 mmol, 57%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 378。 步驟2：2-(3-羥基環丁基)-2-甲基-丙腈
Figure 02_image2073
於室溫下向2-[3-[第三丁基(二苯基)矽基]氧基環丁基]-2-甲基-丙腈(1.6 g, 4.24 mmol)於THF (6 mL)中之溶液中添加TBAF (3.317 g, 12.71mmol)。將所得混合物於25℃下攪拌16 h。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀2-(3-羥基環丁基)-2-甲基-丙腈(450 mg, 3.233 mmol, 76.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 140。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2075
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.57 mmol)及2-(3-羥基環丁基)-2-甲基-丙腈(300 mg, 2.16 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加DIEA (800 mg, 6.20 mmol)。接著添加三光氣(200 mg, 0.6700mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.376 mmol, 65.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 691。 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(2-氰基丙-2-基)環丁酯
Figure 02_image2077
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(1-氰基-1-甲基-乙基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(2 mL, 0.38 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC及對掌性HPLC純化粗產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 549a ) (2.4 mg, 0.0049 mmol, 1.3%產率)。RT 2.064 min( ChIRALPAK IC-3, 0.46*5cm, 3 µm；(Hex: DCM = 3:1)(0.1% DEA):EtOH =在5 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 491.2, RT 1.334 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.04 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 4.29-4.28 (m, 2H), 3.40-3.38 (m, 2H), 2.60-2.58 (m, 1H), 2.44-2.21 (m, 4H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.26 (s, 6H)。
鏡像異構物2 (化合物 549b ) (47.3mg, 0.0964mmol, 25.6%產率)。RT 2.987 min( ChIRALPAK IC-3, 46*5cm, 3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 491.2, RT 1.343 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 5.04 (p,J = 6.7 Hz, 1H), 4.29-4.28 (m, 2H), 3.40-3.38 (m, 2H), 2.60-2.58 (m, 1H), 2.44-2.21 (m, 4H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.26 (s, 6H)。實例 238 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯(化合物 550a )
Figure 02_image2079
步驟1：反式 - 4-(3-苄基氧基環丁基)嗎啉
Figure 02_image2081
在氮氣下，將甲磺酸(3-苄基氧基環丁基)酯(400.0 mg, 1.56 mmol)於嗎啉(2.5 mL, 1.56 mmol)中之溶液於100℃下攪拌10小時。在真空下濃縮反應物。藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 ) (60/40)溶析之反相層析純化殘餘物，以得到淺黃色油狀反式-4-(3-苄基氧基環丁基)嗎啉(270 mg, 1.09 mmol, 70%產率)。LC/MS (ESI) [M+H]+ = 248.2。 步驟2：反式 - 3-嗎啉基環丁醇
Figure 02_image2083
在氫氣下，將反式-4-(3-苄基氧基環丁基)嗎啉(260.0 mg, 1.05 mmol)及Pd/C (10%, 130.0 mg)於甲醇(10 mL)中之混合物於40℃下攪拌24小時。過濾反應混合物且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀反式-3-嗎啉基環丁醇(165 mg, 1.05 mmol, 99 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 158.1。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.92 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 4.19-4.07 (m, 1H), 3.56 (t,J = 4.6 Hz, 4H), 2.79-2.65 (m, 1H), 2.23 (s, 4H), 2.09 (m, 2H), 1.83 (m, 2H)。 步驟3：反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-嗎啉基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2085
在氮氣下，於90℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(233.0 mg, 0.36 mmol)及DMAP (44.0 mg, 0.36 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加反式 - 3-嗎啉-4-基環丁醇(170.0 mg, 1.08 mmol)。將混合物攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由用ACN/水(10 mmol/L NH4 HCO3 ) (42/58)溶析之反相層析純化殘餘物，以得到白色固體狀反式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-嗎啉基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(110 mg, 0.15 mmol, 43%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 709.3。  步驟4：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-嗎啉基環丁酯(化合物 550a )
Figure 02_image2079
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-嗎啉基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100.0 mg, 0.14 mmol)及TFA (2.0 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由Prep-HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(0.1% FA):ACN = 在7 min內5% B至21% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-嗎啉基環丁基)酯(42 mg,0.083 mmol, 58 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.2；RT 1.063 min，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.25 (s, 1H), 10.07 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.84-5.07 (m, 3H), 5.22-5.10 (m, 1H), 4.35-4.30 (m, 2H), 4.14-3.90 (m, 4H), 3.71-3.64 (m, 2H), 3.50-3.32 (m, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 2.80-2.64 (m, 2H), 2.56-2.40 (m, 2H), 1.93 (s,J = 1.7 Hz, 3H)。實例 239 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-環丙基-3-羥基-環丁基)酯(化合物 551a )
Figure 02_image2087
步驟1：3-苄基氧基-1-環丙基-環丁醇
Figure 02_image2089
在氮氣下，於0℃下向3-(苄基氧基)環丁酮(500.0 mg, 2.84 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加環丙基溴化鎂(11 mL, 1 M, 11 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌1小時。由水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，以得到黃色油狀3-苄基氧基-1-環丙基-環丁醇(600 mg, 2.75 mmol, 96 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 219.1。 步驟2：1-環丙基環丁烷-1,3-二醇
Figure 02_image2091
在氫氣(1 atm)下，將3-苄基氧基-1-環丙基-環丁醇(750.0 mg, 3.44 mmol)及Pd/C (10%, 400.0 mg, 3.44 mmol)於甲醇(20 mL)中之懸浮液於40℃下攪拌24小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀1-環丙基環丁烷-1,3-二醇(200 mg, 1.56 mmol, 45 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 129.1。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.86 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 3.17 (d,J = 5.3 Hz, 2H), 2.18 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 0.98 - 0.81 (m, 1H), 0.34 - 0.23 (m, 2H), 0.18 (m, 2H)。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-環丙基-3-羥基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2093
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.310 mmol)及DMAP (38.0 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加1-環丙基環丁烷-1,3-二醇(119.0 mg, 0.93 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌24小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-環丙基-3-羥基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.20 mmol, 66 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 680.1。 步驟4：N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-環丙基-3-羥基-環丁基)酯
Figure 02_image2095
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-環丙基-3-羥基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100.0 mg, 0.15 mmol)及HCl (1.0 mL, 4M, 4 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；水(10 mmol/L NH4 HCO3 ): ACN = 在7 min內19% B至40% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-環丙基-3-羥基-環丁基)酯(4.2 mg,0.0088 mmol, 6%產率) (立體異構物之混合物)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 480.1, RT 4.468 min，方法M；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.04 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 5.15 - 5.03 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.35-4.25 (m, 2H), 3.42-3.35 (m, 2H), 2.35-2.19 (m, 2H), 2.01-1.88 (m, 5H), 1.10-0.99 (m, 1H), 0.41-0.32 (m, 2H), 0.31-0.28 (m, 2H)。實例 240 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯(化合物 552)
Figure 02_image2097
步驟1：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2099
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.29 mmol)及1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-醇(150 mg, 0.99 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加DIEA (350 mg, 2.71 mmol)。接著添加三光氣(90 mg, 0.30 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/5)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.1708 mmol, 59.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 703。 步驟2：(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(甲基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯
Figure 02_image2101
於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.17 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將反應於25℃下攪拌1 h且接著在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-甲基磺醯基氮雜環丁-3-基)酯(49.8 mg, 0.0991 mmol, 58%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =503.2, RT 0.961 min，方法K。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.42 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 5.77 (s, 1H), 5.21 (tt,J = 6.7, 4.7 Hz, 1H), 4.32 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.24 (dd,J = 9.5, 6.7 Hz, 2H), 3.94 (dd,J = 9.7, 4.7 Hz, 2H), 3.39 (d,J = 8.9 Hz, 2H), 3.08 (s, 3H), 1.94 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 241 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯( 化合物 445c 及化合物 445d )
Figure 02_image2103
步驟1：(±)-順式-7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)-3-氟六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2105
將7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1000 mg, 1.9 mmol)、(±)-順式-3-氟-4-羥基-六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(833 mg, 3.8 mmol)、三光氣(373 mg, 1.26 mmol)及DIEA (1226.0 mg, 9.5 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。在真空下濃縮有機層且藉由用石油醚/乙酸乙酯(80/20)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到白色固體狀(±)-順式-7-(3-((((1-(第三丁氧基羰基)-3-氟六氫吡啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1126 mg, 1.461 mmol, 76.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 771。 步驟2：(±)-順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image2107
將(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[1-第三丁氧基羰基-3-氟-4-六氫吡啶基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1116.0 mg, 1.45 mmol)於二氯甲烷(6 mL)及TFA (3 mL)中之溶液於25℃下攪拌6小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由反相層析(水(NH4 HCO3 )/MeOH(56/44))純化，以得到黃色固體狀(±)-順式 - N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-4-六氫吡啶基)酯(436 mg, 0.927 mmol, 64%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 471。 步驟3：(±)-順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
將(±)-順式 - N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氟-4-六氫吡啶基)酯(426.0 mg, 0.91 mmol)、3-丙醇酸丙酯(651.0 mg, 9.03 mmol)及四異丙醇鈦(1027.0 mg, 3.62 mmol)於甲醇(15 mL)中之溶液於60℃下攪拌2小時。接著添加NaCNBH3 (171.0 mg, 2.71 mmol)且將混合物於25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由反相層析(水(NH4 HCO3 )/ACN (35/65))純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(170 mg, 0.3229 mmol, 35.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 526。 步驟4：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯
Figure 02_image2109
將(±)-順式 - (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-(氧雜環丁-3-基)六氫吡啶-4-基酯(420 mg, 0.89 mmol)及3-丙醇酸丙酯(651.0 mg, 9.03 mmol)於甲醇(15 mL)中之溶液於室溫下攪拌10 min。接著添加四異丙醇鈦(1027 mg, 3.62 mmol)且將混合物於60℃下攪拌1小時。接著添加NaCNBH3 (172.0 mg, 2.73 mmol)且將混合物於室溫下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由Prep- HPLC (X Bridge Prep OBD C18管柱30×150 mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內15% B至26% B)純化，以得到外消旋物產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 445c ) (48 mg, 0.0912 mmol, 2.5%產率)。RT 2.267 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1):MeOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ =527.2, RT 1.444 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.94-4.78 (m, 2H), 4.53-4.26 (m, 6H), 3.51 (p,J = 6.4 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 2.78 (s, 1H), 2.51 (s, 1H), 2.45- 2.18 (m, 2H), 1.90-1.83 (m, 5H)。
鏡像異構物2 (化合物 445d )  (25 mg, 0.0475 mmol, 1.3%產率)。RT 3.911min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1):MeOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ =527.2, Rt=1.444 min；方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 4.94-4.78 (m, 2H), 4.53-4.26 (m, 6H), 3.51 (p,J = 6.4 Hz, 1H), 3.33 (s, 2H), 2.78 (s, 1H), 2.51 (s, 1H), 2.45- 2.18 (m, 2H), 1.90-1.83 (m, 5H)。實例 242 (3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3 S,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 441c 及化合物 441d )
Figure 02_image2111
步驟1：(±)-反式 - 4-甲基四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image2113
在氮氣下，於-60℃下向CuI (16.6 g, 87.16 mmol)於THF (750 mL)中之溶液中添加甲基氯化鎂(289.7 mL, 869.1 mmol, 3 M，於THF中)。於-60℃下將所得溶液攪拌30 min。接著添加3,4-環氧四氫呋喃(50.0 g, 580.8 mmol)且於-60℃下攪拌3 h。用氯化銨水溶液淬滅反應。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層且經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀(±)-反式-4-甲基四氫呋喃-3-醇(31 g, 303.53 mmol, 52.3%產率)。 步驟2：(±)-順式 - 4-硝基苯甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯
Figure 02_image2115
於0℃下向(±)-反式 - 4-甲基四氫呋喃-3-醇(1.0 g, 9.79 mmol)、4-硝基苯甲酸(3.27 g, 19.58 mmol)及PPh3 (6.42 g, 24.48 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加偶氮二甲酸二異丙酯(4.82 mL, 24.48 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌4小時。在真空下濃縮所得混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(±)-順式-4-硝基苯甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(1.5 g, 5.98 mmol, 61%產率)。 步驟3：(±)-順式 - (3R ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image2117
於室溫下向(±)-順式-4-硝基苯甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(1.5 g, 5.98 mmol)於水(5 mL)及四氫呋喃(15 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰(430.56 mg, 17.94 mmol)。將所得混合物於室溫下攪拌3小時。藉由水稀釋反應物且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀(±)-順式-4-甲基四氫呋喃-3-醇(330 mg, 3.23 mmol, 32.5%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.71 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 4.04 (qd,J = 4.6, 1.8 Hz, 1H), 3.83-3.72 (m, 2H), 3.52 (dd,J = 9.2, 1.8 Hz, 1H), 3.25 (dd,J = 10.1, 7.5 Hz, 1H), 0.93 (d,J = 6.8 Hz, 3H)。 步驟4：(±)-順式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2119
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(310.63 mg, 0.59 mmol)、(±)-順式-(3R ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-醇(120.0 mg, 1.17 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(0.31 mL, 1.76 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加三光氣(123.0 mg, 0.41 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌30 min且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/3)溶析之矽膠上急速管柱層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-順式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.49 mmol, 82.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 654.3。 步驟5：(3R ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3S ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2121
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(順式)-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.31 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5.0 mL, 64.9 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌30 min且在真空下濃縮。接著所得溶液藉由乙腈稀釋且用碳酸氫鈉水溶液調節至pH 8。過濾後，收集固體且藉由水洗滌。將固體溶解於甲醇中且用HCl (0.2 mL, 1 M，於二噁烷中)處理。接著在真空下濃縮所得混合物，以產生外消旋產物。藉由對掌性HPLC進一步分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：黃色固體狀化合物 441c (32.9 mg, 0.0618 mmol, 23.4%產率)。RT 1.493 min (CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3 µm；(Hex:DCM=3:1) (0.1% FA) : EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 454.2, RT 1.870 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.24 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.26-5.16 (m, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.08-3.87 (m, 2H), 3.84-3.71 (m, 1H), 3.57-3.30 (m, 3H), 2.49-2.33 (m, 1H), 2.00 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.03 (d,J = 6.8 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：黃色固體狀化合物 441d (31 mg, 0.0618 mmol, 22.3%產率)。RT 3.114 min (CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3 µm；(Hex:DCM = 3:1) ( 0.1% FA ) : EtOH=50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H] + = 454.2, RT 1.870 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.24 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.26-5.16 (m, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.08-3.87 (m, 2H), 3.84-3.71 (m, 1H), 3.57-3.30 (m, 3H), 2.49-2.33 (m, 1H), 2.00 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.03 (d,J = 6.8 Hz, 3H)。實例 243 (1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯及(1r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯鹽酸鹽(化合物 512a 及化合物 512b )
Figure 02_image2123
步驟1：3-(苄基氧基)-1-乙基環丁-1-醇
Figure 02_image2125
於0℃下向3-(苄基氧基)環丁酮(1.0 g, 5.68 mmol)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加乙基氯化鎂(8.51 mL, 17.03 mmol, 2 mol/L)。將混合物於室溫下攪拌2小時且接著藉由MeOH淬滅。濃縮後，藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/90)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀3-苄基氧基-1-乙基-環丁醇(300 mg, 1.454 mmol, 25.6%產率)。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 - 6.93 (m, 5H), 4.34 (s, 2H), 3.61 (p, J = 7.1 Hz, 1H), 2.31 (m, 1H), 1.88 (m 2H), 1.54 - 1.21 (m, 2H), 1.04 - 0.57 (m, 3H)。 步驟2：1-乙基環丁烷-1,3-二醇
Figure 02_image2127
向3-苄基氧基-1-乙基-環丁醇(300 mg, 1.45 mmol)於甲醇(6 mL)中之溶液中添加Pd/C (150 mg, 20%)。將混合物於40℃下在氫氣(1 atm)下攪拌8小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀1-乙基環丁烷-1,3-二醇(100 mg, 0.861 mmol, 59.2%產率)。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(((3-乙基-3-羥基環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2129
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(170 mg, 0.26 mmol)及1-乙基環丁烷-1,3-二醇(90 mg, 0.77 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之混合物中添加DMAP (32 mg, 0.26 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-乙基-3-羥基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.225 mmol, 85.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668。 步驟4：(1s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯鹽酸鹽及(1r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-乙基-3-羥基環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image2131
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-乙基-3-羥基-環丁氧基)羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(145.0 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌3小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內10% B至32% B)純化殘餘物，以得到兩種異構物。於室溫下將個別異構物用2 eq.之二噁烷中之HCl (4M)處理30 min。濃縮後，將每一異構物凍乾。任意地分配立體化學。
異構物1：化合物 512a (3.5 mg, 0.0069 mmol, 3.2%產率), LCMS (ESI) [M+H]+ = 468, RT = 2.635 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.10 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.39-4.51 (t,J = 6.7 Hz, 5H), 4.41 (d,J = 4.1 Hz, 2H), 3.44(m,2H), 2.31 (dd,J = 13.1, 7.4 Hz, 2H), 2.07-1.94 (m, 5H), 1.55 (q,J = 7.4 Hz, 2H), 0.82 (t,J = 7.3 Hz, 3H)。
異構物2：化合物 512b (27.8 mg, 0.0552 mmol, 25.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468, RT = 1.732 min，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.15 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.55-4.96 (m, 4H), 4.53 (q,J = 7.2 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.44 (dd,J = 6.9, 2.9 Hz, 2H), 2.12-2.04 (m, 2H), 1.98 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.44 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 0.84 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。實例 244 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯(化合物 477c 及化合物 477d )
Figure 02_image2133
步驟1：順式 - 4-硝基苯甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2135
在氮氣下，於室溫下向PPh3 (3.21 g, 12.25 mmol)於THF (40 mL)中之溶液添加偶氮二甲酸二異丙酯(2.41 mL, 12.25 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌1小時。接著添加THF中之反式-4-氟四氫呋喃-3-醇(1.0 g, 9.43 mmol)及4-硝基苯甲酸(1.58 g, 9.43 mmol)且將混合物於室溫下攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到白色固體狀順式-4-硝基苯甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯(3.5 g, 52%純度)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 256.1。 步驟2：順式 - 4-氟四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image2137
向順式-4-硝基苯甲酸(4-氟四氫呋喃-3-基)酯(3.5 g, 13.67 mmol)於甲醇(180 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (9.45 g, 68.35 mmol)且將混合物於室溫下攪拌1.5小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀4-氟四氫呋喃-3-醇(500 mg, 4.71 mmol, 50%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 5.26 (d,J = 6.0 Hz,1H), 5.02-4.56 (m, 1H), 4.26-4.14 (m, 1H), 3.98-3.78 (m, 3H), 3.43-3.38 (m, 1H)。 步驟3：(±)-順式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-氟四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2139
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)、4-二甲基胺基吡啶(60.0 mg, 0.49 mmol)及順式-4-氟四氫呋喃-3-醇(249.0 mg, 2.35 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液於60℃下攪拌隔夜。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(50/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到白色固體狀(±)-順式-7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((4-氟四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(270 mg, 0.41 mmol, 88.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 658。 步驟4：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-氟四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2141
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-氟四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260.0 mg, 0.40 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(4.0 mL, 51.92 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將混合物用二氯甲烷稀釋且用三乙胺將pH調節至pH 8。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內12 B至38 B)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性製備型HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學,
鏡像異構物1：化合物 477c (39.2 mg, 0.084 mmol, 21.2%產率)。RT 1.726 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA) : EtOH = 50:50. 1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ 458.2, RT 1.727 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.43 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.0 Hz ,1H), 5.43-5.18 (m, 2H), 4.47 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 4.01-3.92 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.47 (s, 2H), 2.01 (s, 3H)。
鏡像異構物2：化合物 477d (41 mg, 0.0873 mmol, 22.1%產率)。RT 2.403 min (CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA) : EtOH = 50:50. 1 ml/min)；LCMS (ESI): [M+H]+ 458.2, RT 1.727 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.43 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.0 Hz ,1H), 5.43-5.18 (m, 2H), 4.47 (t,J = 4.0 Hz, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 4.01-3.92 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.47 (s, 2H), 2.01 (s, 3H)。實例 245 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁酯(化合物 513a )
Figure 02_image2142
步驟1：1-((1s ,3s )-3-(苄基氧基)環丁基)-3,3-二氟氮雜環丁烷
Figure 02_image2144
將3,3-二氟氮雜環丁烷鹽酸鹽(3.7 g, 28.38 mmol)於甲醇(20 mL)中之溶液於室溫下攪拌5 min。接著於室溫下添加N ,N -二異丙基乙胺(3.7 g, 28.38 mmol)、3-(苄基氧基)環丁酮(1.0 g, 5.68mmol)及四異丙醇鈦(4.8 g, 17.03mmol)且將混合物於60℃下攪拌2小時。添加氰基硼氫化鈉(1.07 g, 17.03 mmol)且將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀1-(3-苄基氧基環丁基)-3,3-二氟-氮雜環丁烷(415 mg,1.6 mmol, 28.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =254。 步驟2：(1s ,3s )-3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁-1-醇
Figure 02_image2146
在氫氣下，將1-(3-苄基氧基環丁基)-3,3-二氟-氮雜環丁烷(360 mg, 1.42 mmol)及Pd/C (10%, 180 mg)於甲醇(8 mL)中之懸浮液於室溫下攪拌4小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀(1s,3s)-3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁-1-醇(150 mg, 0.91 mmol, 64.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =164。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.01-4.93 (m, 1H), 4.20-4.24 (m, 1H), 3.74-3.78 (m, 1H), 3.47-3.51 (m, 4H), 2.34-2.19 (m, 1H), 1.95-1.99 (m, 1H), 1.88-1.74 (m, 1H), 1.67-1.52 (m, 1H)。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s,3s)-3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2148
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(317.0 mg, 0.49 mmol)、(1s,3s)-3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁-1-醇(120.0 mg, 0.74 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(60.0 mg, 0.49 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於60℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(186 mg,0.26 mmol, 53%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 715。 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
Figure 02_image2150
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(170.0 mg, 0.24 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加TFA (1.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於DCM中且用TEA調節至pH 8。在真空下濃縮所得混合物。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Shield RP18 OBD管柱, 30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在8 min內27 B%至45% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-(3,3-二氟氮雜環丁-1-基)環丁基]酯(31.7 mg, 0.062 mmol, 25.9%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 515.2, RT 1.666 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.09 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.69-4.74 (m, 1H), 4.29 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.57 (t,J = 12.6 Hz, 4H), 3.38 (s, 2H), 2.99-3.04 (m, 1H), 2.55 (s, 2H), 1.96-1.80 (m, 5H)。實例 246 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯鹽酸鹽(化合物 514a )
Figure 02_image2152
步驟1：(1s ,3s )-甲磺酸3-(苄基氧基)環丁酯
Figure 02_image2154
向3-苄基氧基環丁醇(200.0 mg, 1.12 mmol)及TEA (350.0 mg, 3.47 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之混合物中添加甲基磺醯氯(200.0 mg, 1.75 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空下濃縮，以得到無色油狀甲磺酸(3-苄基氧基環丁基)酯(220 mg, 0.858 mmol, 76.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 257。 步驟2：1-((1r ,3r )-3-(苄基氧基)環丁基)-1H-咪唑
Figure 02_image2156
向(1s ,3s )-甲磺酸3-(苄基氧基)環丁酯(750 mg, 2.93 mmol)及咪唑(796 mg, 11.69 mmol)於DMF (15 mL)中之混合物中添加碳酸銫(4775 mg, 14.65 mmol)。將混合物於80℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由反相層析(乙腈0-60/水中之0.1% NH4 OH)純化所得殘餘物，以得到無色油狀1-((1r,3r)-3-(苄基氧基)環丁基)-1H-咪唑(356 mg, 1.559 mmol, 53.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 227。 步驟3：(1r ,3r )-3-(1H -咪唑-1-基)環丁-1-醇
Figure 02_image2158
向1-(3-苄基氧基環丁基)咪唑(358 mg, 1.57 mmol)於甲醇(5mL)中之溶液中添加Pd/C (800 mg, 10%)。將混合物在氫氣(1 atm)下於40℃下攪拌8小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀3-咪唑-1-基環丁醇(170 mg, 1.23 mmol, 78.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 139。 步驟4：7-(3-((((1r ,3r )-3-(1H -咪唑-1-基)環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2160
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.39 mmol)及3-咪唑-1-基環丁醇(245 mg, 1.77 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物中添加DMAP (50 mg, 0.41 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(90/10)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-咪唑-1-基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.203 mmol, 52.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 690。 步驟5：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image2162
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-咪唑-1-基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.20 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X Bridge Prep Phenyl OBD管柱, 5 µm,19*250mm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在9 min內29% B至45% B)純化殘餘物，以得到期望產物。將游離鹼物質用二噁烷中之HCl (5 ml, 3 mol/L)處理且於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮所得溶液，以得到橙色固體狀(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(1H -咪唑-1-基)環丁酯鹽酸鹽(55.2 mg, 0.105 mmol, 51.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 490.3, RT 1.560 min，方法J；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.33 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 9.34 (t,J = 1.5 Hz, 1H), 8.00 (dd,J = 3.6, 1.8 Hz, 2H), 7.77 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.17-5.71 (m, 3H), 5.21 (d,J = 7.3 Hz, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.96 (dt,J = 13.9, 7.0 Hz, 2H), 2.76 (ddd,J = 14.3, 8.5, 3.6 Hz, 2H), 1.99 (d,J = 1.7 Hz, 3H)。實例 247 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯(( 化合物 515a 及化合物 515b
Figure 02_image2164
步驟1：(±)-反式 - 4-乙基四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image2166
向CuI (331.0 mg, 1.74 mmol)於THF (50 mL)中之混合物中添加乙基氯化鎂(8.7 mL, 17.4 mmol, 2 mol/L)。將混合物於-40℃下攪拌30分鐘。接著添加3,4-環氧四氫呋喃(1000 mg, 11.62 mmol)且將混合物於-40℃下攪拌2小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮，以得到黃色油狀4-乙基四氫呋喃-3-醇(1100 mg, 9.469 mmol, 81.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 117.1。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.87 (d,J = 3.6 Hz, 1H), 3.94 - 3.84 (m, 2H), 3.72 (m,1H), 3.43 (m,1H), 3.32 (m, 1H), 1.83 (m, 1H), 1.44 - 1.31 (m, 1H), 1.28 - 1.12 (m, 1H), 0.89 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。 步驟2：(±)-反式 - 7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3S ,4R )-4-乙基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2168
在氮氣下，於60℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.46 mmol)及DMAP (57.0 mg, 0.47 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加4-乙基四氫呋喃-3-醇(161.0 mg, 1.39 mmol)。將混合物攪拌12小時且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀(±)-反式-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[4-乙基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.4493 mmol, 96.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668.3。 步驟3：(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-乙基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2170
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(4-乙基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.45 mmol)及TFA (2.0 mL, 0.45 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由Prep-HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內17% B至41% B)純化殘餘物，以得到外消旋物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 515a ) (27.4 mg, 0.0586 mmol, 13%產率)：RT 1.775 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH = 50:50；1.0ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.279 min.；方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.94 (dt,J = 4.4, 2.1 Hz, 1H), 4.30 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.98 (dd,J = 8.7, 6.8 Hz, 1H), 3.91-3.84 (m, 5H), 3.37 (d,J = 4.1 Hz, 3H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.49 (dd,J = 14.1, 7.0 Hz, 1H), 1.41-1.29 (m, 1H), 0.91 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 515b ) (24.4 mg, 0.0522 mmol, 11.6%產率)：RT 2.996 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH = 50:50；1.0ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.279 min；方法K；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.94 (dt,J = 4.4, 2.1 Hz, 1H), 4.30 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.98 (dd,J = 8.7, 6.8 Hz, 1H), 3.91-3.84 (m, 5H), 3.37 (d,J = 4.1 Hz, 3H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 1.91 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.49 (dd,J = 14.1, 7.0 Hz, 1H), 1.41-1.29 (m, 1H), 0.91 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。實例 248 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯及(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯(化合物 516a 及化合物 516b )
Figure 02_image2172
步驟1：(±)-反式 - 4-環丙基四氫呋喃-3-醇
Figure 02_image2174
向3,4-環氧四氫呋喃(1000 mg, 11.62 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中逐滴添加環丙基溴化鎂(17.4 mL, 1M，於THF中, 17.4 mmol)且接著將混合物於-40℃下攪拌2小時。藉由飽和NH4 Cl水溶液淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。濃縮後，藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-反式-4-環丙基四氫呋喃-3-醇(1300 mg, 10.143 mmol, 87.3%產率)。  步驟2：(±)-反式 - 7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((4-環丙基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2176
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300 mg, 0.46 mmol)及(±)-反式-4-環丙基四氫呋喃-3-醇(300 mg, 2.34mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物中添加DMAP (57.0 mg, 0.47 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(4-環丙基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(140 mg, 0.206 mmol, 44.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 680。 步驟3：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯及 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-環丙基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2178
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(4-環丙基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)。將混合物於室溫下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至43% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 516a (13.1 mg, 0.0254 mmol, 11.5%產率)。RT 1.826 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(Hex: DCM=3:1)(0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 480.2, RT 2.507 min；方法L；1 H NMR(300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.07 (dd,J = 4.7, 2.3 Hz, 1H), 4.51-4.42 (m, 4H), 4.16-3.96 (m, 3H), 3.75 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 3.52 (dd,J = 8.5, 4.6 Hz, 1H), 3.49-3.39 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.70 (s, 1H), 0.81-0.72 (m, 1H), 0.53- 0.42 (m, 2H), 0.29 (s, 1H), 0.20 (s, 1H)。
鏡像異構物2：黃色固體狀化合物 516b (12.5 mg, 0.0242 mmol, 11%產率)。RT 3.068 min (CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH = 50:50, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 480.2, RT 2.507 min；方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.89 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.07 (dd,J = 4.7, 2.3 Hz, 1H), 4.51-4.42 (m, 4H), 4.16-3.96 (m, 3H), 3.75 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 3.52 (dd,J = 8.5, 4.6 Hz, 1H), 3.49-3.39 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.70 (s, 1H), 0.81-0.72 (m, 1H), 0.53- 0.42 (m, 2H), 0.29 (s, 1H), 0.20 (s, 1H)。實例 249 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁酯(化合物 517a)
Figure 02_image2180
步驟1. 氮雜環丁-1-基((1s,3s)-3-羥基環丁基)甲酮
Figure 02_image2182
向順式 - 3-羥基環丁烷羧酸(300.0 mg, 2.58 mmol)、氮雜環丁烷(221.4 mg, 3.88 mmol)及DIEA (1.0 g, 7.74 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加HATU (1.47 g, 3.87 mmol)。將混合物於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到灰白色固體狀氮雜環丁-1-基((1s,3s)-3-羥基環丁基)甲酮(230 mg, 1.60 mmol, 62.2%產率)。 步驟2：7-(3-((((1s ,3s )-3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2184
於0℃下向7-[3-胺基-7-氟-8-(異丙氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.29 mmol)、氮雜環丁-1-基-(3-羥基環丁基)甲酮(91.5 mg, 0.59 mmol)及DIEA (111.0 mg, 0.86 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液中添加三光氣(61.5 mg, 0.21 mmol)。將混合物於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮所得溶液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/3)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-((((1s ,3s )-3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150 mg, 0.21 mmol, 72.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 707.3。 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁酯(化合物 517a)
Figure 02_image2180
向7-(3-((((1s ,3s )-3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.21 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(3.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮所得溶液。將殘餘物重新溶解於二氯甲烷中且用TEA調節至pH 8。藉由製備型HPLC (管柱：Xselect CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內9% B至39% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-(氮雜環丁烷-1-羰基)環丁基]酯(27.4 mg, 0.053 mmol,  25.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 507.2, RT 1.724  min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.09 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 4.87-4.94 (m, 1H), 4.28 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 4.07 (t,J = 7.6 Hz, 2H), 3.83 (t,J = 7.7 Hz, 2H), 3.31-3.37 (m, 2H), 2.77-2.63 (m, 1H), 2.46 (dd,J = 7.4, 2.8 Hz, 2H), 2.24-2.09 (m, 4H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 250 (R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯(化合物 518a 及化合物 518b )
Figure 02_image2186
步驟1：7-溴-3-氟-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮
Figure 02_image2188
在氮氣下，於室溫下向3-胺基-5-溴-4-甲基-吡啶-2-醇(6.0 mg, 29.55 mmol)及KF (6.87 g, 118.2 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(60 mL)中之溶液中添加溴氟乙酸乙酯(1.09 g, 59.1 mmol)。將所得溶液於80℃下攪拌5小時。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(1.4 g, 5.363 mmol, 24.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 261.1。 步驟2：7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪
Figure 02_image2190
在氮氣下，於0℃下向7-溴-3-氟-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(1.4 g, 5.36 mmol)於四氫呋喃(25 mL)中之溶液中添加BH3 (16.1 mL, 16.1 mmol, 1 M，於THF中)。將所得溶液於0℃下攪拌0.5 h且於60℃下攪拌2 h。於0℃下用MeOH淬滅反應。接著添加HCl (3 ml，6 M，於水中)且將混合物攪拌0.5 h。接著將混合物用NH3 •H2 O調節至pH 8且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(800 mg, 3.24 mmol, 60.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 247.1。 步驟3：7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2192
在氮氣下，於0℃下向7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(800.0 mg, 3.24 mmol)於THF (25 mL)中之溶液中添加NaHMDS (4.8 ml, 9.71 mmol, 2 M，於THF中)。將所得溶液於0℃下攪拌0.5 h。接著添加(Boc)2 O (2.12 g, 9.71 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1.5 h。用MeOH淬滅反應且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(5/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.44 mmol, 44.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 347.2。 步驟4：3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2194
在氮氣下，將7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 1.44 mmol)、B2 Pin2 (1.83 g, 7.2 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (235.2 mg, 0.29 mmol)及KOAc (424.0 mg, 4.32 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)中之混合物於100℃下攪拌3 h。在真空下濃縮反應混合物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(3/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg,1.27 mmol, 88.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 394.3。 步驟5：7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2196
在氮氣下，將N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸[(3R )-四氫呋喃-3-基]酯(500.0 mg, 1.15 mmol)、3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(541.8 mg, 1.37 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (186.9 mg, 0.23 mmol)及K2 CO3 (474.1 mg, 3.44 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)及水(1.5 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮所得混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R)-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380 mg,0.66 mmol, 57.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 577.0。 步驟6：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2198
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(380.0 mg, 0.66 mmol)、NH2 Boc (3.82 g, 32.93 mmol)、Brettphos Pd G3 (119.4 mg, 0.13 mmol)及Cs2 CO3 (428.1 mg, 1.32 mmol)於1,4-二噁烷(8 mL)中之混合物於90℃下攪拌3 h。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R)-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(270 mg, 0.41 mmol, 62.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 657.7。 步驟7：(R )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯及(R )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2200
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R )-四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(270 mg, 0.41 mmol)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液中添加TFA (3.6 mL)。將混合物於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN)純化殘餘物，以得到立體異構物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種立體異構物。接著將兩種異構物溶解於甲醇中，用HCl (0.1 ml, 1 M，於二噁烷中)處理且濃縮，以得到其HCl鹽。任意地分配噁嗪之絕對立體化學。
異構物1：(化合物 518a ) (8 mg, 0.016mmol, 6.7%產率)。RT 1.306 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：(MTBE (0.3%異丙胺):EtOH = 60:40)。LCMS(ESI): [M+H]+ = 457.4, RT 2.070 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.42 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.08 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.34 (d,J = 53.4 Hz, 1H), 5.52-5.36 (m, 1H), 4.02-3.94 (m, 3H) , 3.90 (td,J = 8.4, 4.4 Hz, 1H) , 3.72 (dd,J = 13.2, 4.2 Hz, 1H), 3.53-3.38 (m, 1H), 2.31 (dtd,J = 14.5, 8.5, 6.2 Hz, 1H), 2.24-1.98 (m, 4H)。
異構物2 (化合物 518b )  (6.1mg, 0.0124 mmol, 5.1%產率)。RT 1.2660 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相:(MTBE(0.3% IPA):EtOH = 60:40)。LCMS(ESI): [M+H]+ = 457.4, RT 2.070 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 9.42 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.08 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 6.34 (d,J = 53.4 Hz, 1H), 5.52-5.36 (m, 1H), 4.02-3.94 (m, 3H), 3.90 (td,J = 8.4, 4.4 Hz, 1H), 3.72 (dd,J = 13.2, 4.2 Hz, 1H), 3.53-3.38 (m, 1H), 2.31 (dtd,J = 14.5, 8.5, 6.2 Hz, 1H), 2.24-1.98 (m, 4H)。實例 251 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺甲醯基)環丁酯(化合物 519a)
Figure 02_image2202
步驟1：(1s ,3s )-3-羥基-N ,N -二甲基環丁烷-1-甲醯胺
Figure 02_image2204
於室溫下向3-羥基環丁烷羧酸(300.0 mg, 2.58 mmol)、N ,N -二甲胺(174.8 mg, 3.88 mmol)及DIEA (1.0 g, 7.74 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加HATU (1.47 g, 3.88 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌3小時。接著在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到灰白色固體狀(1s ,3s )-3-羥基-N ,N -二甲基環丁烷-1-甲醯胺(230 mg, 1.60 mmol, 62.2%產率)。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-(二甲基胺甲醯基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2206
於0℃下向7-[3-胺基-7-氟-8-(異丙氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.29 mmol)、3-羥基-N ,N -二甲基-環丁烷甲醯胺(81.7 mg, 0.57 mmol)及DIEA (110.7 mg, 0.86 mmol)於1,2-二氯乙烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(59.3 mg, 0.20 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌30 min且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/3)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-(二甲基胺甲醯基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.23 mmol, 80.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 695.3。 步驟3：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(二甲基胺甲醯基)環丁酯
Figure 02_image2202
向7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-(二甲基胺甲醯基)環丁氧基)羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(3.0 mL)。將混合物於室溫下攪拌30 min。接著在真空下濃縮所得溶液。用TEA將殘餘物之pH調節至pH 8。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內9% B至36% B)純化所得殘餘物。將純化產物溶解於甲醇中，用HCl (0.2 ml, 1 M，於二噁烷中)處理且濃縮，以得到白色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-(二甲基胺甲醯基)環丁基]酯鹽酸鹽(55.1 mg, 0.10 mmol, 46.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2, RT 1.786  min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.95 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.89-4.97 (m, 1H), 4.53 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.51 (d,J = 4.5 Hz, 2H), 3.00- 3.07 (m, 1H), 2.91 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 2.59-2.54 (m, 2H), 2.30-2.14 (m, 2H), 2.05 (d,J = 1.5 Hz, 3H)。實例 252 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺甲醯基)環丁酯鹽酸鹽(化合物 520a )
Figure 02_image2208
步驟1：3-羥基-N -甲基-環丁烷甲醯胺
Figure 02_image2210
於室溫下向順式 - 3-羥基環丁烷羧酸(300.0 mg, 2.58 mmol)、甲胺(120.4 mg, 3.88 mmol)及DIEA (1.0 g, 7.74 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加HATU (1.47 g, 3.87 mmol)。將所得混合物於室溫下攪拌3小時。接著在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到灰白色固體狀(1s,3s)-3-羥基-N-甲基環丁烷-1-甲醯胺(230 mg, 1.78 mmol, 68.9%產率)。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(甲基胺甲醯基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2212
於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.29 mmol)、3-羥基-N -甲基-環丁烷甲醯胺(73.7 mg, 0.57 mmol)及DIEA (110.7 mg, 0.86 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(59.3 mg, 0.20 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌30 min且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/3)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(甲基胺甲醯基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(120 mg, 0.18 mmol, 61.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 681。 步驟3：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基胺甲醯基)環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image2208
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(甲基胺甲醯基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(150.0 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(2.0 mL, 25.96 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌30 min。用TEA將反應混合物之pH調節至pH 8。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內5% B至33% B)純化粗產物。將純化產物溶解於甲醇中且用HCl (0.2 ml, 1 M，於二噁烷中)處理且在真空下濃縮，以得到橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[3-(甲基胺甲醯基)環丁基]酯鹽酸鹽(67.9 mg, 0.13 mmol, 58.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2, RT 1.771 min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.26 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.84 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.94 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.86-4.93 (m, 1H), 4.53 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.50 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 2.69-2.58 (m, 4H), 2.42-2.46 (m, 2H), 2.16-2.24 (m, 2H), 2.04 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。實例 253 (3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((S )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯；(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((R )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯；(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((S )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯；及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氟-1-((R )-四氫呋喃-3-基)六氫吡啶-4-基酯(化合物 569a 、化合物 569b 、化合物 569c 及化合物 569d )
Figure 02_image2214
將N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸((3S ,4R )-3-氟-4-六氫吡啶基)酯(300.0 mg, 1.28 mmol)及3-側氧基四氫呋喃(164 mg, 1.92 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌5 min。接著添加四異丙醇鈦(362.0 mg, 1.27 mmol)。將混合物於60℃下攪拌1小時。冷卻至室溫後，添加NaCNBH3 (120.0 mg, 1.62 mmol)且將混合物於25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol, NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內23% B至40% B)純化，以得到外消旋物產物。藉由對掌性HPLC (CHIRALPAK IA-3 2*25cm, 5 µm. 移動相A：MeOH (8 mmol/L MeOH中之NH3 )，移動相B：MDCM；流速20 ml/L，梯度：在17.4 min內30% B至30% B)分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物1：化合物 569a (22 mg, 0.0407 mmol, 3.2%產率)：RT 2.412 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；MeOH: DCM (0.1% DEA) = 70:30；1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3, RT 0.939 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.76 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.80 (s, 1H), 3.72 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 3.62 (q,J = 7.9 Hz, 3H), 3.12-2.92 (m, 2H), 2.75-2.54 (m, 1H), 2.40-2.19 (m, 1H), 1.91 (s, 5H), 1.84-1.70 (m,2 H)。
異構物2：化合物 569b (23 mg,0.0425 mmol, 3.9%產率)：RT 2.986 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；MeOH: DCM (0.1%DEA)=70:30；1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3, RT 0.939 min，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.76 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.80 (s, 1H), 3.72 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 3.62 (q,J = 7.9 Hz, 3H), 3.12-2.92 (m, 2H), 2.75-2.54 (m, 1H), 2.40-2.19 (m, 1H), 1.91 (s, 5H), 1.84-1.70 (m,2 H)。
使用類似程序使用N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸((3R ,4S )-3-氟-4-六氫吡啶基)酯作為起始材料製備其他2種異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物3：化合物 569c (13.8 mg, 0.0255 mmol, 2%產率)：RT 4.903 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=1:1)(0.1% DEA):MeOH = 40:60)；1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3, RT 1.882 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 3.85-3.77(m, 1H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.65-3.58 (m, 1H), 3.56-3.48 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.11-2.94 (m, 1H), 2.94-2.79 (m, 1H), 2.89-2.74 (m,1 H), 2.76-2.54(m,1 H), 1.93-1.88 (m, 5H), 1.84-1.74(m, 2H)
異構物4：化合物 569d (10.7 mg, 0.0198 mmol, 1.6%產率)：RT 6.596 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=1:1)(0.1%DEA):MeOH=40:60)；1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3, RT 1.882 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.18 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 3.85-3.77(m, 1H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.65-3.58 (m, 1H), 3.56-3.48 (m, 1H),  3.31 (s, 3H), 3.11-2.94 (m, 1H), 2.94-2.79 (m, 1H), 2.89-2.74 (m,1 H),2.76-2.54 (m,1 H), 1.93-1.88 (m, 5H),1.84-1.74 (m, 2H)。實例 254 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯(化合物 527a 及化合物 527b )
Figure 02_image2216
步驟1：N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2218
於-78℃下向5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(8000.0 mg, 42.77 mmol)於THF (400 mL)中之溶液逐滴添加NaHMDS (45 mL, 45 mmol, 1 mol/L，於THF中)。將反應物於-78℃下攪拌1小時。接著添加(Boc)2 O (11.60 g, 53.21mmol)。將混合物於-78℃下攪拌2小時。用甲醇淬滅反應且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(46/54)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(10 g, 34.825 mmol, 81.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 288。 步驟2：N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2220
於室溫下向N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(8000.0 mg, 27.86 mmol)及t-BuOK (4683.0 mg, 41.81 mmol)於THF (150 mL)中之溶液中添加碘甲烷(5937.0 mg, 41.81 mmol)。將反應於室溫下攪拌2小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(30/70)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到無色油狀N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(7900 mg, 26.23 mmol, 94.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 303。 步驟3：N-甲基-N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2222
將N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(7900.0 mg, 26.23 mmol)、B2 Pin2 (33.754 g, 132.89 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (3800.0 mg, 5.2 mmol)及KOAc (7800.0 mg, 79.59 mmol)於1,4-二噁烷(150 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色油狀N-甲基-N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(8000 mg, 22.973 mmol, 87.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 349。 步驟4：N-[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2224
將N-甲基-N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(13 g, 37.33 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(10 g, 31.01 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (4.5 g, 6.16mmol)及K2 CO3 (12 g, 86.96 mmol)於1,4-二噁烷(150 mL)及水(15 mL)中之混合物於70℃下攪拌2小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/90)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀N-[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(9000 mg, 21.589 mmol, 57.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 417。 步驟5：(5-(3-(((3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-3-甲基環丁氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶-3-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2226
將3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁醇(1061.0 mg, 4.90 mmol)、N-[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(1025.0 mg, 2.46 mmol)及DIEA (1585.0 mg, 12.29 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液於0℃下攪拌30 min。接著添加三光氣(509.0 mg, 1.72 mmol)。將混合物於0℃下攪拌1小時。在真空下濃縮反應物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(5-(3-(((3-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-3-甲基環丁氧基)羰基)胺基)-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-4-甲基吡啶-3-基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(1.375 g, 2.091 mmol, 85%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 660。 步驟6：N-[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2228
將N-[5-[3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-8-氯-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(5700.0 mg, 8.65 mmol)、NH2 Boc (20.1 g, 171.79 mmol)、Brettphos-Pd-G3 (1500.0 mg, 1.66 mmol)及K2 CO3 (1193.16 mg, 8.65 mmol)於1,4-二噁烷(100 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(44/56)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀N-[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(5000 mg, 6.757 mmol, 78.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 740。 步驟7：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯
Figure 02_image2230
將N -[5-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[3-[第三丁基(二甲基)矽基]氧基-3-甲基-環丁氧基]羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(2000.0 mg, 2.7 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物。用Et3 N將殘餘物之pH調節至8。接著濃縮混合物且藉由用水/ACN (47/53)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到(8-胺基-7-氟-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯(550 mg)。藉由SFC分離混合物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1( 化合物 527a) (154 mg, 0.365 mmol, 18%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 425.2, RT 1.086 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.45-5.36 (m, 1H), 5.12-5.01 (m, 1H), 4.98 (s, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.49-2.30 (m, 2H), 2.17-1.99 (m, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.32 (s, 3H)。
異構物2( 化合物 527b) (37 mg, 0.087 mmol, 3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 425.2, RT 1.106 min，方法K.1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.30 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.77(s, 1H), 6.93 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.46-4.39 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.69-4.59 (m, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.51-2.37 (m, 2H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.94(d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.11-1.02 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。實例 255 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯及(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯(( 化合物 525a 及化合物 525b )
Figure 02_image2231
步驟1：1-(3-苄基氧基環丁基)-3-氟-氮雜環丁烷
Figure 02_image2233
將3-(苄基氧基)環丁酮(550.0 mg, 3.12 mmol)、3-氟氮雜環丁烷鹽酸鹽(1050 mg, 9.41 mmol)、四異丙醇鈦(1775.0 mg, 6.25 mmol)及DIEA (1209.0 mg, 9.37 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液於60℃下攪拌2 h。接著添加NaCNBH3 (200.0 mg, 3.17 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。藉由MeOH淬滅反應且過濾。在真空下濃縮濾液。藉由具有水/CH3 CN (34/66)之反相層析純化殘餘物，以得到無色油狀1-(3-苄基氧基環丁基)-3-氟-氮雜環丁烷(620 mg, 2.635 mmol, 84.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 236。 步驟2：(1s ,3s )-3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁-1-醇
Figure 02_image2235
在氫氣(1 atm)下，將1-(3-苄基氧基環丁基)-3-氟-氮雜環丁烷(330.0 mg, 1.4 mmol)及Pd/C (100.0 mg, 1.4 mmol)於甲醇(3 mL)中之懸浮液於40℃下攪拌24 h。過濾後，在真空下濃縮濾液，以得到無色油狀3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁醇(180 mg, 1.24 mmol, 88.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 146。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-((((1s ,3s )-3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2237
將3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁醇(149.0 mg, 1.03 mmol)、7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(331 mg, 0.51 mmol)及DMAP (65.0 mg, 0.53 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液於60℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應物。藉由具有水/ACN (26/74)之反相層析純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(280 mg, 0.402 mmol, 39.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 697。 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯、(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁酯
Figure 02_image2239
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[3-(3-氟氮雜環丁-1-基)環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(275.51 mg, 0.40 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及TFA (1 mL)中之溶液於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮反應物且藉由製備型HPLC (X Select CSH PreC18 OBD管柱, 30*150 mm, 5 µm, 移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速60 mL/min；梯度：在7 min內7% B至16%)純化，以得到異構物之混合物。藉由對掌性HPLC分離混合物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
異構物1 (化合物 525a ) (2.5 mg, 0.0054 mmol, 1.7%產率)。RT 3.073 min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH = 50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 497.3, RT 1.237 min.，方法M；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86-6.78 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.30-4.95 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.60-3.44(m, 2H), 3.19-3.03 (m, 2H), 3.09-2.89 (m, 3H), 2.15-2.02 (m, 4H), 1.92 -1.89 (m, 3H)。
異構物2 (化合物 525b )  (17 mg,0.0323mmol, 9.5 %產率)。RT 3.911min( CHIRALPAK IG-3 0.46*5cm；3 µm；(Hex: DCM=3:1)(0.1% DEA):EtOH = 50:50, 1 mL/min)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 497.3, RT 1.589 min，方法K。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.05 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86-6.78 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.30-4.95 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.60-3.44(m, 2H), 3.19-3.03 (m, 2H), 3.09-2.89 (m, 3H), 2.15-2.02 (m, 4H), 1.92 -1.89 (m, 3H)。實例 256 (1R ,2R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯及(1S ,2S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯(( 化合物 526a 及化合物 526b )
Figure 02_image2240
步驟1：(Z)-丙-1-烯氧基]甲苯
Figure 02_image2242
將烯丙基苄基醚(1.0 g, 6.75 mmol)及t-BuOK (113 mg, 1.01 mmol)於二甲亞碸(10 mL)中之溶液於37℃下攪拌72小時。將反應物用乙酸乙酯稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1:10)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀(Z)-丙-1-烯氧基]甲苯(900 mg, 6.073 mmol, 90%產率)。 步驟2：(±)-順式 - 3-(苄基氧基)-2-甲基環丁-1-酮
Figure 02_image2244
向(Z) -丙-1-烯氧基]甲苯(8.0 g, 53.98 mmol)及Zn/Cu (53.0 g, 815.38 mmol)於二乙醚(250 mL)中之混合物中逐滴添加三氯乙醯氯(19.5 g, 107.73 mmol)。將混合物於20℃下攪拌30 min。添加NH4 Cl (44.0 g, 814.81mmol)於甲醇(200 mL)中之飽和溶液且將所得混合物回流10 min。過濾所得溶液且在真空下濃縮。藉由矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-順式-3-(苄基氧基)-2-甲基環丁-1-酮(3.4 g, 17.872 mmol, 33.1%產率)。 步驟3：(±)-(1R ,2S ,3S )-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇
Figure 02_image2246
於-78℃下向(±)-順式-3-苄基氧基-2-甲基-環丁酮(100 mg, 0.53 mmol)於四氫呋喃(1 mL)中之溶液中逐滴添加甲基氯化鎂(0.2 mL, 0.60 mmol)。將混合物於-78℃下攪拌1小時。由水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。將有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-(1R ,2S ,3S )-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇(60 mg, 0.291 mmol, 55.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 207。  步驟4：(±)-(1R ,2S ,3S )-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇
Figure 02_image2248
將(±)-(1R ,2S ,3SI)-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇(1.0 g, 4.85 mmol)及Pd/C (10%, 300.0 mg, 4.85 mmol)於甲醇(40 mL)中之混合物在氫氣下於25℃下攪拌3 h。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由用PE/EA (1/2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-(1R,2S,3S)-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇(400 mg, 3.44 mmol, 71%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 116。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) 4.75 (d,J = 6 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.72-3.63 (m, 1H), 2.12-2.06 (m, 1H), 1.82-1.73 (m, 1H), 1.64-1.58 (m, 1H), 1.17 (s, 3H), (d,J = 6 Hz, 1H)。 步驟5：(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2S ,3R )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2250
於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.48 mmol)及(±)-(1R ,2S ,3S )-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇(200.0 mg, 1.72 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液中添加DIEA (600.0 mg, 4.65 mmol)。接著添加三光氣(150.0 mg, 0.51 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用PE/EA (1/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2S ,3R )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.3744 mmol, 78.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668。 步驟6：(1r ,2r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯及(1s ,2s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
Figure 02_image2252
於室溫下向(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1R ,2R ,3S )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250.0 mg, 0.37 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h且濃縮。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內10% B至40% B)及對掌性HPLC (管柱：CHIRALPAK  IE, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MeOH (8mmol/L NH3 .MeOH)，移動相B：DCM；流速18 mL/min)純化粗產物，以得到單一鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 526a 將甲醇(10 mL)中之(1R ,2R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯用1,4-二噁烷中之HCl (4 mol/L, 2 eq)處理且於室溫下攪拌30 min。在真空下濃縮所得溶液且冷凍乾燥，以得到紅色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1R ,2R ,3S )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁基]酯鹽酸鹽(21.1 mg,0.0419 mmol, 11.2%產率)。RT 1.183 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm, 3 µm；DCM (0.1%DEA): MeOH =在3 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.940 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.91 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.50-5.90 (bs, 4H), 4.75-4.70 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 2.33-2.31 (m, 1H), 2.23-2.03 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 0.96 (d,J = 7.3 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：化合物 526b 於室溫下將甲醇(5 mL)中之(1S ,2S ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯用1,4-二噁烷中之HCl (4 mol/L, 2 eq)處理30 min。在真空下濃縮所得溶液且冷凍乾燥，以得到紅色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,2S ,3R )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁基]酯鹽酸鹽(20.2 mg, 0.0401mmol, 10.7%產率)。RT 1.840 min( CHIRALPAK IE-3, 0.46*5cm, 3 µm；DCM (0.1%DEA):MeOH=在3 min內50:50；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.141 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.91 (d,J = 5.9 Hz, 1H), 6.50-5.90 (bs, 4H), 4.75-4.70 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 2.33-2.31 (m, 1H), 2.23-2.03 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 0.96 (d,J = 7.3 Hz, 3H)。實例 257 (1S,2R,3S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯及(1R,2S,3R)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯(化合物 526c 及化合物 526d )
Figure 02_image2254
步驟1：(±)-(2r ,3s )-3-苄基氧基-2-甲基-環丁酮
Figure 02_image2256
於25℃下向(±)-(2S ,3S )-3-苄基氧基-2-甲基-環丁酮(4.8 g, 25.23 mmol)於二氯甲烷(150 mL)中之溶液中添加DBU (1.2 g, 7.89 mmol)。將所得溶液於25℃下攪拌16小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-(2R,3S)-3-苄基氧基-2-甲基-環丁酮(1.7 g, 8.94 mmol, 35.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 191。 步驟2：(±)-(1S,2R,3S)-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇
Figure 02_image2258
於-78℃下向(±)-(2R ,3S )-3-苄基氧基-2-甲基-環丁酮(1.7 g, 8.94 mmol)於THF (20 mL)中之溶液添加甲基溴化鎂(4.5 mL, 9 mmol)。將所得溶液於室溫下攪拌1小時。藉由飽和氯化銨(20 mL)淬滅反應。藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-(1S,2R,3S)-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇(1.3 g, 6.302 mmol, 70.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 207。 步驟3：(±)-(1S ,2R ,3S )-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇
Figure 02_image2260
將(±)-(1S ,2R ,3S )-3-苄基氧基-1,2-二甲基-環丁醇(1.0 g, 4.85 mmol)及Pd/C (10%, 300 mg, 4.85 mmol)於甲醇(20 mL)中之混合物在氫氣(1 atm)下於25℃下攪拌3 h。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/2)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到無色油狀(±)-(1S,2R,3S)-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇(330 mg, 2.84 mmol, 58.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 116。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.75 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.72-3.63 (m, 1H), 2.12-2.06 (m, 1H), 1.82-11.72 (m, 1H), 1.64-1.58 (m, 1H), 1.17 (s, 3H), 0.89 (d,J = 6.0 Hz, 3H)。 步驟4：(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R ,3S )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2262
在氮氣下，於室溫下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.49 mmol)及(±)-(1S,2R,3S)-1,2-二甲基環丁烷-1,3-二醇(120 mg, 1.03 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加DIEA (700 mg, 5.43 mmol)。接著添加三光氣(80 mg, 0.27 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。藉由用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R ,3S )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.389 mmol, 78.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668。 步驟5：(1s ,2r ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯及(1r ,2s ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-2,3-二甲基環丁酯
Figure 02_image2264
於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(1S ,2R ,3S )-3-羥基-2,3-二甲基-環丁氧基]羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.39 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將所得溶液於25℃下攪拌1 h。藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內12% B至37% B)及對掌性HPLC純化粗產物，以得到兩種鏡像異構物。將每一鏡像異構物溶解於甲醇中且於室溫下用HCl/1,4-二噁烷(0.04 M, 2 eq)處理30 min且濃縮，以得到相應鹽酸鹽。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 526c ) (28.4 mg, 0.0564 mmol, 14.5%產率)。RT 2.040 min( CHIRALPAK IC-3, 0.46*5cm, 3 m；(Hex: DCM=1:1)(0.1% DEA):IPA = 在4 min內60:40；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.151 min，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.66 (q,J = 7.3 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.48 (d,J = 5.3 Hz, 2H), 2.30 (dd,J = 12.0, 7.6 Hz, 1H), 2.13 (t,J = 6.9 Hz, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.91 (dd,J = 12.1, 7.1 Hz, 1H), 1.24 (s, 3H), 1.01 (d,J = 7.0 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 526d ) (25.9 mg, 0.0514 mmol, 13.2%產率)。RT 2.857 min( ChIRALPAK IC-3, 46*5cm, 3 µm；(Hex: DCM=1:1)(0.1%DEA):IPA=在4 min內60:40；1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 1.154 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.66 (q,J = 7.2 Hz, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.47 (s, 2H), 2.30 (dd,J = 12.1, 7.7 Hz, 1H), 2.13 (t,J = 7.1 Hz, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.91 (dd,J = 12.0, 7.3 Hz, 1H), 1.24 (s, 3H), 1.01 (d,J = 6.9 Hz, 3H)。實例 258 N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-胺基甲酸(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)酯鹽酸鹽(化合物 524 )
Figure 02_image2266
步驟1：3-苄基氧基-1-環丙基磺醯基-氮雜環丁烷
Figure 02_image2268
向3-苄基氧基氮雜環丁烷(1.0 g, 6.1 3mmol)、三乙胺(3.1 g, 30.69 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(224 mg, 1.83 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加環丙烷磺醯氯(2.6 g, 18.42 mmol)。將混合物於0℃下攪拌2小時。將反應溶液用水洗滌且在減壓下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(4/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀3-苄基氧基-1-環丙基磺醯基-氮雜環丁烷(900 mg, 3.37 mmol, 54.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 268。 步驟2：1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-醇
Figure 02_image2270
向3-苄基氧基-1-環丙基磺醯基-氮雜環丁烷(500 mg, 1.87 mmol)於甲醇(20 mL)中之溶液中添加Pd(OH)2 /C (800 mg, 1.87 mmol)。將反應物於45℃下攪拌2天。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用乙酸乙酯溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到無色油狀1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-醇(160 mg, 0.903 mmol, 48.3%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =178。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)-氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2272
向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.38 mmol)、1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-醇(100.0 mg, 0.56 mmol)及N ,N -二異丙基乙胺(490.0 mg, 3.8 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加三光氣(112 mg, 0.38 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。將混合物於0℃下攪拌2小時且在真空下濃縮。藉由用乙酸乙酯 /石油醚(1/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淡黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并-[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(168 mg, 0.2075 mmol, 54.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H] = 729。 步驟4：N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)酯鹽酸鹽
Figure 02_image2274
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)氧基羰基胺基]-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(160 mg, 0.22 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物於25℃下攪拌1小時且在真空下濃縮。藉由製備型HPLC (X-select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內15% B至39% B)純化殘餘物，以得到黃色固體狀(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(環丙基磺醯基)氮雜環丁-3-基酯(60 mg)。接著向純化產物於甲醇(8 mL)中之溶液中添加0.4 M甲醇中之HCl (0.5 mL)且將溶液於25℃下攪拌0.5小時。在真空下濃縮溶液，以得到紅色固體狀N-[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]-胺基甲酸(1-環丙基磺醯基氮雜環丁-3-基)酯鹽酸鹽(56.1 mg, 0.0989 mmol, 45%產率)。LCMS ( ESI) [M+H]+ = 529.1, RT 0.995 min，方法L；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.90 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.24 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 4.48-4.35 (m, 4H), 4.32-4.21 (m, 3H), 3.98 (dd,J = 9.5, 4.8 Hz, 2H), 3.52-3.40 (m, 2H), 2.90-2.70 (m, 1H), 1.99 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.11-0.93 (m, 4H)。實例 259 (1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯(化合物 528a )
Figure 02_image2276
步驟1：(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)甲苯
Figure 02_image2278
於0℃下向3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇(500.0 mg, 2.6 mmol)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加NaH (150.0 mg, 3.91mmol)。將混合物攪拌15分鐘。接著添加碘甲烷(1110.0 mg, 7.82 mmol)於THF (1 mL)中之溶液且將混合物於0℃下攪拌3小時。將反應物用甲醇稀釋且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(79/21)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到澄清油狀(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)甲苯(420 mg, 2.04 mmol, 78 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 267。 步驟2：3-甲氧基-3-甲基-環丁醇
Figure 02_image2280
將(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)甲苯(400 mg, 1.94 mmol)及Pd/C (10%, 200 mg, 1.94 mmol)於甲醇(10 mL)中之混合物在氫氣(1 atm)下於40℃下攪拌24小時。過濾反應物，且濃縮濾液，以得到澄清油狀3-甲氧基-3-甲基-環丁醇(372 mg, 1.92 mmol, 99 %產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 117.1。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2282
在氮氣下，於25℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600.0 mg, 0.93 mmol)及DMAP (114.0 mg, 0.93 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加3-甲氧基-3-甲基-環丁醇(322.0 mg, 2.77 mmol)。將所得溶液於60℃下攪拌24小時且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(450 mg, 0.67 mmol, 73%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668.3 步驟4：(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯
Figure 02_image2284
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-甲氧基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(450.0 mg, 0.67 mmol)及TFA (2.0 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select  CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；ACN:水(0.1% FA)= 梯度：在7 min內19% B至40% B；60 mL/min)純化殘餘物，以得到(1s,3s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯。
將(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯及二噁烷中之HCl (0.4 mL, 4M, 1.6 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液於室溫下攪拌10分鐘。在真空下濃縮混合物，以得到橙色固體狀(1s,3s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲氧基-3-甲基環丁酯HCl鹽(52.9 mg, 0.11 mmol, 17%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.053 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.74 (q,J = 7.2 Hz, 1H), 4.56-4.00 (m, 5H), 3.44-3.45 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 2.44-2.26 (m, 2H), 2.13-2.20 (m, 2H), 1.98 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.27 (s, 3H)。實例 260 (1r ,3r )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯及(1s ,3s )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯(化合物 529a 及化合物 529b )
Figure 02_image2286
步驟1：乙酸3-(苄基氧基)-1-甲基環丁酯
Figure 02_image2288
於0℃下向3-(苄基氧基)環丁酮(1.0 g, 5.68 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加乙基氯化鎂(8.51 mL, 17.03 mmol)。將混合物於室溫下攪拌2小時。藉由甲醇稀釋反應物，濃縮且藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/90)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到無色油狀3-苄基氧基-1-乙基-環丁醇(300 mg, 1.454 mmol, 25.6%產率)。 步驟2：乙酸3-羥基-1-甲基環丁酯
Figure 02_image2290
將乙酸(3-苄基氧基-1-甲基-環丁基)酯(500 mg, 2.13 mmol)及Pd/C (200 mg, 10 wt%)於甲醇(10 ml)中之混合物在氫氣下於40℃下攪拌8小時。接著過濾混合物且在真空下濃縮，以得到無色油狀乙酸3-羥基-1-甲基環丁酯(170 mg, 1.18 mmol)。 步驟3：7-(3-(((3-乙醯氧基-3-甲基環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2292
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(250 mg, 0.39 mmol)及乙酸(3-羥基-1-甲基-環丁基)酯(170 mg, 1.18 mmol)於二氯甲烷(50 mL)中之混合物中添加DMAP (50 mg, 0.41 mmol)。將混合物於60℃下攪拌12小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-(((3-乙醯氧基-3-甲基環丁氧基)羰基)胺基)-8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯。LCMS (ESI) [M+H]+ = 696.3。 步驟4：(1r ,3r )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯 及(1s ,3s )-乙酸3-(((8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺甲醯基)氧基)-1-甲基環丁酯鹽酸鹽
Figure 02_image2294
向7-[3-[(3-乙醯氧基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.29 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X Bridge Prep OBD C18管柱, 30×150mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至57% B)純化殘餘物，以得到兩種異構物。任意地分配立體化學。
非鏡像異構物1：黃色固體狀化合物 529a (3.4 mg, 0.0069 mmol, 2.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 496.2, 1.287 min.，方法J,1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.14 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.82 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 5.65 (s, 1H), 5.08-4.97 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 3.41-3.33 (m, 2H), 2.74 (dd,J = 13.8, 7.4 Hz, 2H), 2.23 (dd,J = 14.0, 4.3 Hz, 2H), 1.97 (s, 3H), 1.90 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.58 (s, 3H)。
非鏡像異構物2：橙色固體狀化合物 529b (40.1 mg, 0.0754 mmol, 26.2%產率) (在製備HCl鹽之後)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 496.2, 1.284 min.，方法J,1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.19 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 4.85-4.79 (m, 2H),4.40-4.35(m, 4H), 3.44 (s, 2H), 2.67 (td,J = 7.8, 7.0, 4.3 Hz, 2H), 2.37-2.23 (m, 2H), 1.97 (d,J = 5.8 Hz, 6H), 1.47 (s, 3H)。實例 261 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-酯( 化合物 567a 及化合物 567b )
Figure 02_image2295
步驟1：7-溴-3-氟-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮
Figure 02_image2297
在氮氣下，於0℃下向3-胺基-5-溴-4-甲基-吡啶-2-醇(5 g, 24.63 mmol)及K2 CO3 (10.195 g, 73.88 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(50 mL)中之溶液中添加2-氯-2-氟-乙醯氯(4191.51 mg, 32.01 mmol)。將所得混合物於室溫下攪拌1小時且於90℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(45/55)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(2500 mg, 9.576 mmol, 38.9%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 261.05。  步驟2：7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪
Figure 02_image2299
在氮氣下，於0℃下向7-溴-3-氟-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(2500.0 mg, 9.58 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液中添加BH3 ·THF (28.73 mL, 28.73 mmol)。將溶液於0℃下攪拌0.5小時且於60℃下攪拌1小時。於0℃下用甲醇淬滅反應。向反應混合物中添加1N HCl (10 ml)溶液。接著將混合物於室溫下攪拌30 min且用氫氧化銨調節至pH 8。將所得溶液用二氯甲烷萃取。合併有機層且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(26/74)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(1100 mg, 4.452 mmol, 46.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 246。 步驟3：7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2301
在氮氣下，於-78℃下向7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪(1100.0 mg, 4.45 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液中添加NaHMDS (2449.29 mg, 13.36 mmol)。將所得溶液於-78℃下攪拌0.5小時。接著添加(Boc)2 O (2923.2 mg, 13.36 mmol)且於-78℃下攪拌1小時。用MeOH淬滅反應且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯(14/86)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到白色固體狀7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(850 mg, 2.448 mmol, 55%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =347.2。 步驟4：3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2303
將7-溴-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(50.0 mg, 0.140 mmol)、KOAc (57.0 mg, 0.58 mmol)、B2 pin2 (110.0 mg, 0.43 mmol)及Pd(dppf)Cl2 (21.0 mg, 0.030 mmol)]於1,4-二噁烷(2 mL)中之混合物於100℃下攪拌16小時。過濾後，在減壓下濃縮濾液。藉由用石油醚/乙酸乙酯(70/30)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到淺黃色油狀3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(50 mg, 0.127 mmol, 88.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 395。 步驟5：(3R ,4S )- N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2305
在氮氣下，於0℃下向8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(800.0 mg, 2.48 mmol)、DIEA (1.6 g, 12.38 mmol)及(3S,4R)-4-甲基四氫呋喃-3-醇(507.0 mg, 4.96 mmol)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三光氣(514.0 mg, 1.74 mmol)。將反應物於0℃下攪拌0.5小時。在真空下濃縮所得溶液。藉由用二氯甲烷/甲醇(98/2)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到褐色固體狀(3R ,4S )-N-(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(720 mg, 1.598 mmol, 64.4%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ = 451。 步驟6：7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2307
在氮氣下，向N -(8-氯-7-氟-6-碘-3-異喹啉基)胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(100.0 mg, 0.22 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (24.0 mg, 0.030 mmol)、K2 CO3 (93.0 mg, 0.67 mmol)及3-氟-8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(96.0 mg, 0.24 mmol)於1,4-二噁烷(1.8 mL)及水(0.20 mL)中之溶液中於100℃下攪拌3.5小時。在真空下濃縮反應物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(35/65)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(70 mg, 0.1184 mmol, 53.4%產率)]。LCMS (ESI) [M+H]+ =592。 步驟7：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2309
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氟-3-[(4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(350.0 mg, 0.59 mmol)、BrettphosPd G3 (109.0 mg, 0.12 mmol)、K2 CO3 (247.0 mg, 1.78 mmol)及NH2 Boc (1.7 g, 14.66 mmol)於1,4-二噁烷(3 mL)中之混合物於90℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應物。藉由用石油醚/乙酸乙酯(25/75)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到褐色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.4764 mmol, 80.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ =671。 步驟8：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((S )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯及(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-((R )-3-氟-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2311
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-3-氟-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.45 mmol)於TFA (5 mL)及二氯甲烷(5 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應溶液。藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% TFA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在10 min內23% B至46% B)純化殘餘物，以得到外消旋物產物。藉由對掌性HPLC (CHIRAL ART Cellulose-SB,2*25cm, 5 µm；移動相A：己烷，移動相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：在10 min內30% B至30% B)分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。任意地分配噁嗪之絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 567a ) (42.9 mg, 0.0845 mmol, 18.9%產率)：RT 4.768 (CHIRAL Cellulose-SB4.6*100mm 3 µm. 移動相：移動相：:Hex(0.1%DEA):EtOH=70:30；1 ml/min)  LCMS(ESI) [M+H]+ = 472.2, RT 6.081 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), 3.82-3.71 (m, 1H), 3.64-3.53 (m, 1H), 3.65-3.54 (m, 2H), 2.43-2.26 (m, 1H), 1.98 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.12-1.02 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。
鏡像異構物2 (化合物 567b ) (50 mg,0.0984 mmol, 22%產率)：RT 5.717 (CHIRAL Cellulose-SB4.6*100mm 3 µm. 移動相：移動相：Hex (0.1%DEA):EtOH=70:30；1 ml/min)  LCMS(ESI) [M+H]+ = 472.2, RT 6.081 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.92 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), 3.82-3.71 (m, 1H), 3.64-3.53 (m, 1H), 3.65-3.54 (m, 2H), 2.43-2.26 (m, 1H), 1.98 (d,J = 1.6 Hz, 3H), 1.12-1.02 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。實例 262 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯(化合物 486b )及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-1-甲基環丁酯(化合物 554a )
Figure 02_image2313
步驟1：3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇
Figure 02_image2315
於-78℃下向3-(苄基氧基)環丁酮(5000.0 mg, 28.38 mmol)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液中逐滴添加甲基氯化鎂(28.4 mL, 85.13 mmol, 3 mol/L，於THF中)。將所得溶液於-78℃下攪拌2小時。用MeOH淬滅反應且在真空下濃縮。藉由用石油醚/乙酸乙酯溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇(4300 mg, 22.367 mmol, 78.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 193.1. 步驟2：1-甲基環丁烷-1,3-二醇
Figure 02_image2317
將3-苄基氧基-1-甲基-環丁醇(2000.0 mg, 10.4 mmol)及Pd/C (10 wt%, 400 mg, 0.52 mmol)於甲醇(30 mL)中之混合物在氫氣(1 atm)下於室溫下攪拌16小時。接著過濾混合物且在減壓下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色油狀1-甲基環丁烷-1,3-二醇(1100 mg, 10.232 mmol, 98.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 103.1。 步驟3：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((3-羥基-3-甲基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2319
在氮氣下，於0℃下向7-[3-胺基-8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1000.0 mg, 1.9 mmol)、1-甲基環丁烷-1,3-二醇(388.6 mg, 3.8 mmol)及DIEA (1229.52 mg, 9.51 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中添加三光氣(282.3 mg, 0.95 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌0.5小時。用水淬滅反應且用二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。藉由用二氯甲烷/甲醇(5%)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-羥基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1100mg,1.6827mmol, 88.4%產率)狀。LCMS (ESI) [M+H]+ =654.3。 步驟4：(1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-3-甲基環丁酯(化合物 486b )及(1s ,3s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基-1-甲基環丁酯(化合物 554b )
Figure 02_image2321
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(3-羥基-3-甲基-環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(1100.0 mg, 1.68 mmol)於二氯甲烷(25 mL)中之溶液中添加TFA (10 mL)。將所得溶液於室溫下攪拌3小時。在真空下濃縮混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm 5 µm, n；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內16% B至46% B；254 nm)純化，以得到兩種異構物。
異構物1( 化合物 486b ) (277.9 mg, 0.5672 mmol, 33.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 1.053 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.16 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.91 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.06 (tt,J = 7.4, 5.6 Hz, 1H), 4.47 (t,J = 4.5 Hz, 2H), 3.48 (d,J = 4.6 Hz, 2H), 2.45-2.26 (m, 2H), 2.11-2.03 (m, 2H), 2.01 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.34 (s, 3H)。
異構物2 (化合物 554a ) (10.4 mg, 0.0208 mmol, 1.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 1.710 min.，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.91 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 5.72 (s, 2H), 4.31 (t,J = 4.3 Hz, 2H), 3.90 (p,J = 7.2 Hz, 1H), 3.47 (d,J = 4.6 Hz, 2H), 2.56-2.52 (m, 2H), 2.14 (t,J = 9.7 Hz, 2H), 1.93 (d,J = 1.5 Hz, 3H), 1.47 (s, 3H)。實例 263 (3R ,4S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽(化合物 555a 及化合物 555b )
Figure 02_image2322
步驟1：8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2324
向7-溴-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg, 1.46 mmol)及B2 pin2 (1851 mg, 7.29 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加KOAc (428 mg, 4.37 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (213 mg, 0.29 mmol)。將混合物於90℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由用石油醚/乙酸乙酯(1/1)溶析之矽膠上急速層析來純化殘餘物，以得到黃色油狀8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 1.0249 mmol, 70.4%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 391.2。 步驟2：7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2326
向8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(483 mg, 1.5 mmol)及8-乙基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(758 mg, 1.94 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(2 mL)中之混合物中添加Pd(dppf)Cl2 (220 mg, 0.30 mmol)、K2 CO3 (620 mg, 4.49 mmol)。將混合物於90℃下攪拌3小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.697 mmol, 46.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 459.1。 步驟3：7-(8-氯-7-氟-3-(((((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2328
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.70 mmol)及4-甲基四氫呋喃-3-醇(214 mg, 2.1 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之混合物中添加三光氣(103 mg, 0.35 mmol)、DIEA (450 mg, 3.49 mmol)且接著將混合物於0℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-7-氟-3-[(4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.545 mmol, 78.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 587.2。 步驟4：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2330
向7-[8-氯-7-氟-3-[(4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(320 mg, 0.56 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(1913 mg, 16.33 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物中添加Pd2 (dba)3 CHCl3 (85 mg, 0.080 mmol)、BrettPhos (116 mg, 0.22 mmol)、碳酸銫(533 mg, 1.63 mmol)。將混合物於90℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(260 mg, 0.397 mmol, 71.2%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 668.3。 步驟5：(3R ,4S )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-乙基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-7-氟異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽
Figure 02_image2332
向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-乙基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200 mg, 0.30 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)且接著將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內15% B至45% B)純化殘餘物，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋物，以得到兩種鏡像異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1 (化合物 555a ) (17 mg, 0.0337 mmol, 11.3%產率)。RT 1.080 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. MTBE(0.1%DEA):EtOH=50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.030 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ 10.17 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 4.93-4.73 (m, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.03-3.77 (m, 4H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.46-3.17 (m, 3H), 2.43-2.16 (m, 3H), 1.04 (d,J = 7.2 Hz, 3H), 0.91 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。
鏡像異構物1 (化合物 555b ) (25 mg, 0.0496 mmol, 16.6%產率)。RT 1.735 min( CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm；MTBE(0.1%DEA) : EtOH = 50:50, 1 mL/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2, RT 2.031min.，方法J。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.88 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.20 (bs, 3H), 4.93-4.73 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.03-3.84 (m, 2H), 3.79-3.70 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.32 (dd,J = 8.4, 4.8 Hz, 1H), 2.42-2.22(m, 3H), 1.04 (d,J = 7.2 Hz, 3H), 0.92 (t,J = 7.3 Hz, 3H)。實例 264 (3R ,4S )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽(化合物 556a 及化合物 556b )
Figure 02_image2333
步驟1：7-(3-胺基-8-氯-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2335
在氮氣下，將8-氯-6-碘-異喹啉-3-胺(3.5 g, 11.49 mmol)、8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(4.76 g, 12.64 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (1.88 g, 2.3 mmol)及Na2 CO3 (3.66 g, 34.48 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)及水(3 mL)中之溶液於90℃下攪拌2 h。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(3 g, 7.02 mmol, 61.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 426.9。 步驟2：7-[8-氯-3-[[(3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2337
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.94 mmol)、反式-4-甲基四氫呋喃-3-醇(191.2 mg, 1.87 mmol)及DIEA (605.5 mg, 4.69 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加三光氣(139.0 mg, 0.47 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌1 h。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-氯-3-[[(反式)-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(530 mg, 0.88 mmol, 93.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 555.0。 步驟3：7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(3R ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2339
在氮氣下，將7-[8-氯-3-[[(反式)-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 0.90 mmol)、NH2 Boc (5.25 g, 45.04 mmol)、Brettphos Pd G3 (163.3 mg, 0.18 mmol)及Cs2 CO3 (587.4 mg, 1.8 mmol)於1,4-二噁烷(30 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg,0.56 mmol, 62.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 635.7。 步驟4：(3R ,4S )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽
Figure 02_image2333
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[[(反式)-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400.0 mg, 0.63 mmol)於二氯甲烷(15 mL)中之溶液中添加TFA (5 mL)。接著將溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘餘物重新溶解於乙腈中。用NaHCO3 水溶液將混合物之pH調節至pH 8。在真空下濃縮所得溶液且藉由製備型HPLC (管柱：X select CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內6% B至36% B)純化，以得到外消旋產物。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到兩種鏡像異構物。接著將每一鏡像異構物溶解於甲醇中，用HCl (0.1 ml, 1 M，於二噁烷中)處理且濃縮，以得到HCl鹽。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
鏡像異構物1：化合物 556a (36.7 mg, 0.0764 mmol, 16.2%產率)。RT 1.746 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(MTBE (0.1%DEA): EtOH = 70:30)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 435.5, RT 1.092 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.55 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.86 (dt,J = 4.5, 2.1 Hz, 1H), 4.47 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.08-3.92 (m, 2H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.47 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (dd,J = 8.5, 4.8 Hz, 1H), 2.43-2.26 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.07 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。
鏡像異構物2：化合物 556b (36.2 mg,0.0759 mmol, 16.1%產率)。RT 1.746 min( CHIRALPAK IC-3 0.46*5cm；3 µm；(MTBE (0.1%DEA): EtOH=70:30)。LCMS(ESI) [M+H]+ = 435.5, RT = 1.092 min；方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.31 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.55 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.86 (dt,J = 4.5, 2.1 Hz, 1H), 4.47 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.08-3.92 (m, 2H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.47 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.35 (dd,J = 8.5, 4.8 Hz, 1H), 2.43-2.26 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.07 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。實例 265 (1s ,3s )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯鹽酸鹽(化合物 557a )
Figure 02_image2341
步驟1：7-(8-氯-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2343
在氮氣下，於0℃下向7-(3-胺基-8-氯-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(300.0 mg, 0.70 mmol)、3-羥基環丁腈(136.5 mg, 1.41 mmol)及DIEA (454.1 mg, 3.51 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三光氣(104.3 mg, 0.35 mmol)。將所得溶液於0℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(21/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-(8-氯-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(434 mg, 0.62 mmol, 88.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 550.2。 步驟2：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2345
在氮氣下，將7-(8-氯-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(420.0 mg, 0.76 mmol)、NH2 Boc (4.43 mg, 38.18 mmol)、Brettphos Pd G3 (138.4 mg, 0.15 mmol)及Cs2 CO3 (497.9 mg, 1.53 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應物且藉由用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-((((1s ,3s )-3-氰基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(400 mg, 0.63 mmol, 83.1%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 631.3 步驟3：(1s ,3s )-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯鹽酸鹽(化合物 557a )
Figure 02_image2341
於0℃下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-3-[(3-氰基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(390 mg, 0.62 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加TFA (3 mL)。接著將溶液於室溫下攪拌2.5小時。在真空下濃縮反應物。將殘餘物用乙腈稀釋且用NaHCO3 水溶液將pH調節至8。在真空下濃縮所得混合物且藉由製備型HPLC (管柱：X Bridge Prep OBD C18管柱30×150 mm, 5 µm；移動相A：水(10 mmol/L NH4 HCO3 )，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內20% B至43% B)純化，以得到(1s,3s)-(8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-氰基環丁酯。接著，將產物溶解於甲醇中且用HCl (0.1 ml, 1 M，於二噁烷中)處理且濃縮，以得到橙色固體狀N -[8-胺基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(3-氰基環丁基)酯鹽酸鹽(33.7 mg, 0.072 mmol, 22.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 431.2, RT 1.067 min，方法J。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.28 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.88 (d,J = 1.4 Hz, 1H), 6.51 (d,J = 1.5 Hz, 1H), 4.95 (p,J = 7.5 Hz, 1H), 4.43 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.45 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.10-3.14 (m, 1H), 2.78-2.85 (m, 2H), 2.46-2.30 (m, 2H), 2.09 (s, 3H)。實例 266 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽 ( 化合物 558a 及化合物 558b )
Figure 02_image2348
步驟1：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2(3H )-酮
Figure 02_image2350
將7-溴-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(3 g, 12.34 mmol)、雙(頻哪醇)二硼(31.34 g, 123.43 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1.86 g, 2.51 mmol)及乙酸鉀(2.33 g, 37.29 mmol)於1,4-二噁烷(60 mL)中之混合物於90℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(70%)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到褐色固體狀8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(1778 mg ,6.128 mmol, 49.7%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 291.2。  步驟2：7-(3-胺基-8-氯-7-氟異喹啉-6-基)-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2(3H )-酮
Figure 02_image2352
在氮氣下，將8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(2955.9 mg, 9.17 mmol)、8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(1770 mg, 6.1 mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (920.4 mg, 1.24 mmol)及K2 CO3 (2531.1 mg, 18.31 mmol)於1,4-二噁烷(20 mL)及水(2 mL)中之混合物於70℃下攪拌3小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用二氯甲烷/甲醇(10:1)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(450 mg, 1.254 mmol, 20.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 359.1。 步驟3：(±)-反式 - (8-氯-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯
Figure 02_image2354
向7-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-8-甲基-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-2-酮(300 mg, 0.84 mmol)及4-甲基四氫呋喃-3-醇(171 mg, 1.67 mmol)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加N ,N -二異丙基乙胺(0.73 mL, 4.2 mmol)。將混合物於0℃下攪拌5 min。接著添加三光氣(174 mg, 0.59 mmol)且將混合物於0℃下攪拌1小時。用水淬滅反應且在真空下濃縮。藉由反相層析(乙腈5-55/水中之0.1% NH4 HCO3 )純化殘餘物，以得到黃色固體狀(±)-反式-(8-氯-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(100 mg, 0.205 mmol, 24.6%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 487.2。 步驟4：((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基) (7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3,8-二基)二胺基甲酸第三丁酯及((3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基) (7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3,8-二基)二胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2356
向(±)-(8-氯-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸反式-4-甲基四氫呋喃-3-基酯(268 mg, 0.55 mmol)及胺基甲酸第三丁酯(1913 mg, 16.33 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之混合物中添加Brettphos Pd G3 (50 mg, 0.060 mmol)、碳酸鉀(230 mg, 1.67 mmol)。將混合物於90℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸(4-甲基四氫呋喃-3-基)酯(200 mg, 0.352 mmol, 64%產率)。接著藉由對掌性HPLC (CHIRALPAK  IC, 2*25cm, 5 µm；移動相A：MTBE(10 mM NH3 )，移動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：在15 min內0% B至20% B；220/254 nm；RT 1:7.454 min；RT 2:12.621min)分離鏡像異構物之混合物，以得到兩種黃色固體狀鏡像異構物(鏡像異構物1：41 mg, 0.07 mmol；鏡像異構物2：40 mg, 0.07 mmol)。 步驟5：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽及(3S ,4R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯鹽酸鹽
Figure 02_image2358
向N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]酯(50 mg, 0.090 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)且將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select  CSH OBD管柱30*150mm 5 µm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內18% B至43% B)純化殘餘物。接著將產物溶解於MeOH中。添加1當量之HCl (4M 1,4-二噁烷中之HCl)。接著濃縮混合物，以產生橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3R ,4S)-4-甲基四氫呋喃-3-基]酯鹽酸鹽(化合物 558a ) (24.9 mg, 0.0494 mmol, 18.7%產率)。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。RT 1.354 min (CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE(0.1%DEA) : EtOH = 80:20, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2。RT 1.282 min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.57 (s, 1H), 10.24 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.92-6.90  (dd, 1H),  5.10 (brs, 3H), 4.91-4.85 (m, 1H), 4.85-4.78 (m, 2H), 4.03-3.95 (m, 2H), 3.80-3.75 (m, 1H), 3.35-3.30 (m, 1H), 2.45-2.21 (m, 1H), 2.12-2.07 (m, 3H), 1.09-1.03 (s, 3H)。
向N -[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基]酯(50.0 mg, 0.090 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加TFA (1 mL)且將混合物於室溫下攪拌1小時。濃縮後，藉由製備型HPLC (X select  CSH OBD管柱30*150mm 5 µm, n；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內18% B至43% B)純化殘餘物。接著將產物溶解於MeOH中。添加1當量之HCl (4M 1,4-二噁烷中之HCl)。接著濃縮混合物，以產生橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2-側氧基-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基]酯鹽酸鹽(化合物 558b ) (21.2 mg, 0.0421 mmol, 15.9%產率)。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。RT 2.020 min (CHIRALPAK IE-3 0.46*5cm；3 µm. 移動相：MTBE(0.1%DEA) : EtOH = 80:20, 1 ml/min)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2。RT 1.282min，方法J；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.57 (s, 1H), 10.24 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.74(s, 1H), 6.92-6.90  (dd, 1H),  5.10 (brs, 3H), 4.91-4.85 (m, 1H), 4.85-4.78 (m, 2H), 4.03-3.95 (m, 2H), 3.80-3.75 (m, 1H), , 3.35-3.30 (m, 1H), 2.45-2.21 (m, 1H), 2.12-2.07 (m, 3H), 1.09-1.03 (s, 3H)。實例 267 (1R ,2S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯、(1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯、(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯及(1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯(化合物 559a 、化合物 559b 、化合物 559c 及化合物 559d )
Figure 02_image2360
步驟1：7-(8-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟-3-(((2-甲基環丁氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2362
在氮氣下，於室溫下向7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-(苯氧基羰基胺基)-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(600.0 mg, 0.93 mmol)及DMAP (120.0 mg, 0.98 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加2-甲基環丁醇(240.0 mg, 2.79 mmol)。將溶液於60℃下攪拌24小時。在真空下濃縮反應物。藉由用二氯甲烷/甲醇(94/6)溶析之矽膠上急速層析純化殘餘物，以得到淺黃色固體狀7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-甲基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500 mg,0.78 mmol, 84 %產率)。LC/MS (ESI) [M+H]+ =638.3。 步驟2：(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯、(1S ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯、(1R ,2R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯及(1S ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯
Figure 02_image2364
將7-[8-(第三丁氧基羰基胺基)-7-氟-3-[(2-甲基環丁氧基)羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(500.0 mg, 0.78 mmol)及TFA (2.0 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液於25℃下攪拌2小時。濃縮後，藉由Prep- HPLC (管柱：Xselect CSH OBD管柱30*150mm, 5 µm；水(0.1% FA): ACN=在7 min內25% B至55 B%；60 mL/min)純化殘餘物，以得到(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯。藉由對掌性HPLC分離外消旋產物，以得到四種異構物。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物1( 化合物 559a )：RT 2.721 min (CHIRALPAK AS-H, 4.6*100cm, 3 µm；CO2 /MeOH(0.1% DEA) =在4 min內10%-50%；4 mL/min)，以得到橙色固體狀(1R ,2S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基環丁酯(58.7mg,0.1342mmol, 17.1%產率)，LCMS (ESI): [M+H]+ = 438.2, RT 1.428 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.20-5.80 (m, 3H), 4.98 (q,J = 7.5 Hz, 1H), 4.44 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.74-2.61 (m, 1H), 2.35-2.14 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.91-1.76 (m, 1H), 1.40 (t,J = 10.5 Hz, 1H), 1.06 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。
異構物2( 化合物 559b )：RT 2.951 min (CHIRALPAK AS-H, 4.6*100cm, 3 µm；CO2 /MeOH(0.1% DEA) =在4 min內10%-50%；4 mL/min)，以得到橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S ,2S )-2-甲基環丁基]酯(62.5 mg,0.1429 mmol, 18.2%產率)，LCMS (ESI) [M+H]+ = 438.2；RT 1.428 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.13 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.87 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 5.20-5.80 (m, 3H), 4.98 (q,J = 7.5 Hz, 1H), 4.44 (d,J = 4.7 Hz, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.74-2.61 (m, 1H), 2.35-2.14 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.91-1.76 (m, 1H), 1.40 (t,J = 10.5 Hz, 1H), 1.06 (d,J = 7.2 Hz, 3H)。
異構物3( 化合物 559c )：RT 3.001 min, (CHIRALPAK AS-H, 4.6*100cm, 3 µm；CO2 /MeOH(0.1% DEA) =在4 min內10%-50%；4 mL/min)，以得到橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1R,2S)-2-甲基環丁基]酯(25.7mg,0.0587mmol, 7.5%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 438.2, RT 1.453 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.13 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.52(s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.55-4.46 (m, 2H), 3.46-3.50(m, 2H), 2.74-2.52 (m, 1H), 2.51-2.19(m, 1H), 2.01-1.83 (m, 5H), 1.27-1.12 (m, 4H)。
異構物4 (化合物 559d )：RT :3.336 min, (CHIRALPAK AS-H, 4.6*100cm, 3 µm；CO2 /MEOH(0.1% DEA) =在4 min內10%-50%；4 mL/min)，以得到橙色固體狀N -[8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)-3-異喹啉基]胺基甲酸[(1S,2R)-2-甲基環丁基]酯(21.9 mg, 0.050 1mmol, 6.4%產率)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 438.2, RT 1.453 min.，方法K；1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ10.13 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.55-4.46 (m, 2H), 3.46-3.50 (m, 2H), 2.74-2.52 (m, 1H), 2.51-2.19 (m, 1H), 2.01-1.83 (m, 5H), 1.27-1.12 (m, 4H)。實例 268 (3R ,4S )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 561a)
Figure 02_image2365
步驟1：N-[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image2367
在氮氣下，將N-甲基-N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(13 g, 37.33 mmol)、8-氯-7-氟-6-碘-異喹啉-3-胺(10 g, 31.01 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (4.5 g, 6.16 mmol)及K2 CO3 (12 g, 86.96 mmol)於1,4-二噁烷(150 mL)及水(15 mL)中之混合物於70℃下攪拌2小時。過濾後，在真空下濃縮濾液且藉由用石油醚/乙酸乙酯(10/90)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀N-[5-(3-胺基-8-氯-7-氟-6-異喹啉基)-4-甲基-3-吡啶基]-N-甲基-胺基甲酸第三丁酯(9 g, 21.589 mmol, 57.8%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 505。 步驟2：7-(3-胺基-8-氯-7-氰基-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2369
在氮氣下，將7-(3-胺基-7-溴-8-氯-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(200.0 mg, 0.40 mmol)、Pd(PPh3 )4 (92.0 mg, 0.060 mmol)及Zn(CN)2 (25.0 mg, 0.22 mmol)於N ,N -二甲基乙醯胺(5 mL)中之混合物於100℃下攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由具有水/ACN (47/53)之反相層析純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀7-(3-胺基-8-氯-7-氰基-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(100 mg, 0.221 mmol, 56%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 452。 步驟3：7-(8-氯-7-氰基-3-(((((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2371
將7-(3-胺基-8-氯-7-氰基-6-異喹啉基)-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(80.0 mg, 0.18 mmol)、(3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-醇(36.0 mg, 0.35 mmol)及DIEA (114.0 mg, 0.88 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液於0℃下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物且藉由用石油醚/乙酸乙酯(60/40)溶析之矽膠上急速層析來純化，以得到黃色固體狀(87.2 mg, 85%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 580。 步驟4：7-(7-氰基-8-((二苯基亞甲基)胺基)-3-(((((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 02_image2373
在氮氣下，將7-[8-氯-7-氰基-3-[[(3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基]氧基羰基胺基]-6-異喹啉基]-8-甲基-2,3-二氫吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(70.0 mg, 0.12 mmol)、Pd(OAc)2 (6.0 mg, 0.030 mmol)、Xantphos (28.0 mg, 0.050 mmol)、Cs2 CO3 (118.0 mg, 0.36 mmol)及二苯甲酮亞胺(66.0 mg, 0.36 mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(1 mL)及甲苯(1 mL)中之混合物於100℃下攪拌3小時。過濾後，在真空下濃縮濾液。藉由具有水/ACN (35/65)之反相層析純化殘餘物，以得到黃色固體狀7-(7-氰基-8-((二苯基亞甲基)胺基)-3-(((((3R ,4S )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(50 mg, 0.0701 mmol, 58.1%產率)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 712。 步驟5：(3R ,4S )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 561a )
Figure 02_image2375
將7-(7-氰基-8-((二苯基亞甲基)胺基)-3-(((((3S ,4R )-4-甲基四氫呋喃-3-基)氧基)羰基)胺基)異喹啉-6-基)-8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-1-甲酸第三丁酯(40.0 mg, 0.060 mmol)於二氯甲烷(0.5 mL)及TFA (1 mL)中之溶液於室溫下攪拌2小時。在真空下濃縮反應混合物。藉由具有水/ACN (46/54)之反相層析純化所得殘餘物，以得到黃色固體狀(3R ,4S )-(8-胺基-7-氰基-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基四氫呋喃-3-基酯(40.0 mg, 0.060 mmol)。LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.2, RT 1.844，方法K1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.40 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.30 (s, 3H), 6.81 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.04-3.90 (m, 2H), 3.76 (d,J = 10.6 Hz, 1H), 3.41-3.42 (m, 2H ), 3.31-3.27 (m, 1H ), 2.24-2.28 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.10-1.02 (d,J = 6 Hz, 3H)。實例 269 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1R ,3S )-3-氰基環戊基)脲及1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((1S ,3R )-3-氰基環戊基)脲(化合物 726a 及化合物 726b )
Figure 02_image2377
Figure 02_image2379
遵循類似於上述程序之程序根據一般合成方法來合成。相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學。
異構物1：化合物 726a LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.2, RT = 3.306 min，方法N；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.35-7.20 (m, 2H), 6.75 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 2H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.50-2.26 (m, 2H), 2.10-1.85 (m, 5H), 1.70-1.50 (m, 2H)。
異構物2：化合物 726b LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.2, RT = 3.308 min，方法N；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.29 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.35-7.20 (m, 2H), 6.75 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.32-4.20 (m, 2H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.50-2.26 (m, 2H), 2.10-1.85 (m, 5H), 1.70-1.50 (m, 2H)。實例 270 (2S,3R)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯、(2R ,3S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯、(2S,3S)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯及(2R ,3R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸2-甲基四氫呋喃-3-基酯(化合物 510a 、化合物 510b 、化合物 510c 及化合物 510d )
Figure 02_image2381
Figure 02_image2383
Figure 02_image2385
Figure 02_image2387
遵循類似於本文所述程序之程序及業內已知之方法來合成。任意地分配相對立體化學及絕對立體化學。
異構物1：化合物 510a LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 3.413 min，方法N；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.34 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.70 - 5.62 (m, 1H), 5.20 (ddd,J = 6.1, 3.9, 2.0 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 3.97 - 3.82 (m, 2H), 3.64 (td,J = 8.6, 5.8 Hz, 1H), 2.41 - 2.26 (m, 1H), 2.06 - 1.89 (m, 4H), 1.27 - 1.15 (m, 5H)。
異構物2：化合物 510b LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 3.418 min，方法N；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.34 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 0.8 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.84 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (t,J = 2.8 Hz, 1H), 5.20 (ddd,J = 6.1, 3.9, 2.0 Hz, 1H), 4.33 - 4.25 (m, 2H), 3.97 - 3.82 (m, 2H), 3.64 (td,J = 8.6, 5.8 Hz, 1H), 3.37 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 2.33 (ddt,J = 12.8, 8.8, 6.5 Hz, 1H), 2.06 - 1.89 (m, 4H), 1.27 - 1.15 (m, 4H)。
異構物3：化合物 510c LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 3.498 min，方法N。
異構物4：化合物 510d LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2, RT 3.503 min，方法N；1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.11 (s, 1H), 9.33 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 8.00 - 7.94 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.66 (t,J = 2.7 Hz, 1H), 4.85 (dt,J = 6.5, 2.3 Hz, 1H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.03 - 3.86 (m, 2H), 3.78 (ddd,J = 9.5, 8.5, 6.5 Hz, 1H), 3.41 - 3.33 (m, 2H), 2.24 (dddd,J = 13.6, 9.5, 8.3, 6.4 Hz, 1H), 2.01 - 1.89 (m, 4H), 1.18 (d,J = 6.5 Hz, 3H)。實例 271 (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(氧雜環丁-3-基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯(化合物 575a )
Figure 02_image2389
遵循類似於本文所述程序之程序及業內已知之方法來合成。任意地分配立體化學。LCMS (ESI) [M+H]+ = 551.3, RT 2.427 min，方法N。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.22 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.83 (d,J = 6.1 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.70 - 5.62 (m, 1H), 4.75 (t,J = 3.7 Hz, 1H), 4.51 (p,J = 6.3 Hz, 4H), 4.29 (t,J = 4.4 Hz, 2H), 4.00 (d,J = 11.1 Hz, 2H), 3.67 (d,J = 11.0 Hz, 2H), 3.00 - 2.90 (m, 2H), 2.24 (d,J = 11.0 Hz, 2H), 1.92 (d,J = 1.6 Hz, 4H), 1.86 (d,J = 3.7 Hz, 3H), 1.65 (s, 1H)。實例 272
其他化合物係使用類似於上述方法及程序之方法及程序及業內已知之方法來合成。LC/MS分析數據提供於表A1中。表 A1
編號 結構 名稱 LCMS Rt (min)m/z 方法
403a
Figure 02_image2391
 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 2.126 440.0 M
403b
Figure 02_image2393
 (S )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸四氫呋喃-3-基酯 3.252 440.2 N
418a
Figure 02_image2395
 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-乙醯基吡咯啶-3-基酯 (任意地分配絕對立體化學) 3.104 481.2 N
431
Figure 02_image422
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-甲基-3-氮雜二環[3.1.1]庚-6-基酯 2.59 479.2 N
436
Figure 02_image432
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸異丙酯 3.78 412.2 N
439a
Figure 02_image2399
 (1R ,5S ,9s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯 (任意地分配絕對立體化學) 2.416 509.2 N
439b
Figure 02_image2401
 (1R ,5S ,9r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-甲基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯 (任意地分配絕對立體化學) 2.516 509.2 N
440a
Figure 02_image2403
 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-基酯 (任意地分配絕對立體化學) 2.39 483.2 N
440b
Figure 02_image2405
 (R )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸4-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-基酯 (任意地分配絕對立體化學) 2.41 583.2 N
474
Figure 02_image2407
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基酯 2.426 483.2 N
485b
Figure 02_image2409
 (1r ,3r )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-羥基環丁酯 2.968 440.2 N
499a
Figure 02_image2411
 (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-異丙基-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯 2.527 493.3 N
502a
Figure 02_image2413
 (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯 2.42 508.2 N
506a
Figure 02_image2415
 (1R,5S,9s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-異丙基-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯 (任意地分配立體化學) 2.588 537.3 N
507a
Figure 02_image2417
 (1R,5S,9s)-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸7-(2,2-二氟乙基)-3-氧雜-7-氮雜二環[3.3.1]壬-9-基酯 (任意地分配立體化學) 2.61 280.2, 559.3 N
521
Figure 02_image2419
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-(2-氟乙基)氮雜環丁-3-基酯 2.340 471.2 N
522a
Figure 02_image2421
 (1R ,5S ,6s )-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸3-(甲基磺醯基)-3-氮雜二環[3.1.0]己-6-基酯 3.386 529.2 N
540
Figure 02_image640
 (8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)胺基甲酸1-環丙基氮雜環丁-3-基酯 2.426 465.2 N
703a
Figure 02_image2424
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲 (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學) 2.63 484.2 N
703b
Figure 02_image2426
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲 (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學) 2.32 484.2 N
703c
Figure 02_image2428
 (±)-1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((順式)-3-氟-1-甲基六氫吡啶-4-基)脲 (任意地分配絕對立體化學) 2.30 484.3 N
704
Figure 02_image734
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-甲基脲 2.711 383.2 N
707
Figure 02_image740
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-環丁基脲 3.45 423.2 N
709
Figure 02_image744
 1-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲 3.05 506.2 N
710a
Figure 02_image746
 (±)-1-((順式)-1-乙醯基-3-氟六氫吡啶-4-基)-3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)脲 (任意地分配絕對立體化學) 3.05 512.3 N
721
Figure 02_image2434
  		 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-(1-(2,2,2-三氟乙基)氮雜環丁-3-基)脲 2.880 506.2 N
742
Figure 02_image2436
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1,1-二甲脲 2.693 397.2 N
745
Figure 02_image2438
 N-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)吡咯啶-1-甲醯胺 2.977 423.2 N
747a
Figure 02_image2440
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3S ,4S )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲 (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學) 3.124 471.2 N
747b
Figure 02_image2442
 1-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-((3R ,4R )-3-氟四氫-2H -哌喃-4-基)脲 (相對立體化學如所繪製。任意地分配絕對立體化學) 3.124 471.2 N
751
Figure 02_image828
 N-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-甲基氮雜環丁烷-1-甲醯胺 1.591 423.2 J
752
Figure 02_image830
 3-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-1-環丁基-1-甲基脲 3.453 437.2 N
753
Figure 02_image832
 N-(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯胺 2.996 479.2 N
754
Figure 02_image834
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯胺 2.648 439.2 N
755
Figure 02_image836
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)-3-氟-3-甲基氮雜環丁烷-1-甲醯胺 3.133 441.2 N
756
Figure 02_image838
 N -(8-胺基-7-氟-6-(8-甲基-2,3-二氫-1H -吡啶并[2,3-b ][1,4]噁嗪-7-基)異喹啉-3-基)氮雜環丁烷-1-甲醯胺 2.787 409.2 N
生物實例
測試示例性式(I)化合物以評價HPK-1之化合物抑制。實例 B1 ： HPK1-FL HTRF 酶分析 ( 「 HTRF 」 )
分析原理：在 1mM之ATP及不同濃度之測試化合物存在下，HPK-FL酶使生物素-SLP-76受質磷酸化。藉由FRET使用Eu-抗pSLP76 Ab及SA-XL665偵測產物。關於其他HTRF技術資訊，亦參見www.cisbio.com/HTRF。
儀器： Echo555化合物分配器；Agilent Bravo；Perkin Elmer Envision。最終分析條件： HPK全長，T165E S171E:       0.125 nM 生物素-SLP76：                       100 nM ATP：                                       1 mM (ATP Km = 20 µM) Eu-抗pSLP76：                       2 nM SA-XL665：                             8.3 nM 預培育時間：                           30 min 激酶反應時間：                       60 min 溫度：                                       ambient 總體積：                                   12 µl ATPapp Km：                            17.7 µM材料： 分析板：白色ProxiPlate 384 F (PerkinElmer目錄號6008289) 激酶：HPK全長雙重突變體 受質：生物素-SLP76 ATP：100 mM ATP BSG：2% BSG DMSO：DMSO (Sigma目錄號34869-100ML) 反應緩衝液：H2 O/50 mM HEPES, pH 7.5/10 mM MgCl2 /2 mM TCEP/0.01% Brij-35/0.01% BSG 偵測混合物：Eu-抗pSLP76/SA-XL665 (Cisbio，編號610SAXAC) 分析程序 Ki 測定：
向上面點樣有80 nL化合物或DMSO之384孔Proxiplate中添加4 µl/孔之激酶混合物。將混合物預培育30分鐘且接著添加4 µl/孔之受質混合物。將溶液培育60 min且接著添加4 µl/孔之偵測混合物。將溶液再培育60 min。接著將板裝載至Perkin Elmer Envision上且在615及665 nm下量測TR-FRET信號。使用665/620之比率以計算每一濃度之化合物下的活性%。實例 B2 ： HPK1 Lantha 結合分析 ( 「 Lanth 」 ) 材料：
試劑 供應商目錄號
白色ProxiPlate 384 F(分析板) PerkinElmer-6008289
384孔微板(化合物板) Labcyte-LP-0200
HPK1酶 Signalchem-M23-11G
示蹤劑-222 Invitrogen-PV6121
Eu-抗GST Ab Invitrogen-PV5594
分析緩衝液 2mM DTT(Sigma-43815), 0.01% BRIJ-35(Sigma-B4184), 10mM MgCl2 , 50mM HEPES(Invitrogen-15630130)
程序： I. 化合物稀釋：
藉由使用Bravo液體處置平台在第2及13列中製備12.5 µL/孔之5 mM化合物(100X)及在第3-12、14-23列中製備10 µL/孔之DMSO及在孔A1-H1及I24-P24中製備化合物板稀釋欲測試之化合物。對於參照化合物而言，最高濃度為1 mM。向板之孔J1-P1及A24-H24中添加10 µL 2 mM星狀孢菌素。使用Bravo液體處置平台實施11點5倍化合物連續稀釋。自板將第2列及第13列之2.5 µL溶液轉移至第3及14列等等中之10 µL DMSO中。將化合物板以2500 rpm離心1 min。使用Echo液體處置器系統自化合物板轉移80nl化合物至分析板中。一個化合物板製備兩個分析板。將每一分析板密封且儲存於N2 櫥中。II. 分析條件：
使用以下分析濃度及時間。2 nM HPK1、2 nM Eu-抗GST Ab及15 nM示蹤劑222，60 min培育時間。III. HPK Lantha 結合分析：
對於結合分析而言，使用Multidrop試劑分配器向分析板之每一孔中添加4 µL 2X HPK1及Eu-抗GST抗體。將溶液在23℃培育器中培育1h。使用Multidrop試劑分配器向分析板之每一孔中添加4 µL 2X示蹤劑-222。再次將溶液在23℃培育器中培育1h。使用具有以下參數之Envision讀板儀讀取分析結果：TR_FRET、340ex/615及665em；100 µsec延遲；及200 µsec積分。IV. 分析：
使用Morrison ki擬合模型在XL-擬合中分析化合物Ki a. 擬合 = (1-((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))-(((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))^2) -((4*E)*x))^0.5))/(2*E))) res = (y-擬合) b. 參數： E = 酶濃度 S= 示蹤劑222濃度，Kd = 示蹤劑222 Kd
所有量測結果皆係使用相同單位(nM)報告。
在HTRF結合分析中測試示例性化合物。所測定之Ki值列示於表B1中。表 B1
化合物編號 HPK1 Ki (nM)
401 0.019
402 0.11
403 0.023
403a ＜0.013
403b 0.064
404 0.030
405a 0.138
405b 0.158
406 0.40
407 0.030
408a 0.089
408b 0.069
409a 0.053
409b 0.048
410a 0.167
410b 0.029
411a 0.25
411b 0.20
412a 41
412b 0.29
413 0.65
414a 0.59
414b 21
415a 3
415b 16
416a 0.075
416b 0.075
417 ＜0.013
418a ＜0.013
419 0.061
420 ＜0.013
421 ＜0.013
422 0.023
423 ＜0.013
424 ＜0.013
425 ＜0.013
426 ＜0.013
427 ＜0.013
428 ＜0.013
429 0.028
430 ＜0.013
431 2.3
432a ＜0.013
433 ＜0.013
434 ＜0.013
435 0.187
436 0.014
437a ＜0.013
437b 0.054
439a ＜0.013
439b 0.48
440a 0.084
440b 0.277
441a ＜0.013
441b ＜0.013
441ab 0.037
441c 0.16
441d 0.32
442b 0.201
442c 0.154
442d 0.046
443 ＜0.013
444a ＜0.013
444b ＜0.013
445ab ＜0.013
445c 0.015
445d ＜0.013
447a ＜0.013
450 0.13
451a 0.14
451b ＜0.013
452a 0.030
452b 0.036
452c 0.17
452d ＜0.013
461a 0.891
461b 1.01
465 0.46
467a 0.031
467b 0.064
467c 0.027
467d ＜0.013
474 0.060
477a 0.034
477b 0.017
477c 0.15
477d 0.020
478a 0.25
478b ＜0.013
479a 0.021
479b ＜0.013
480a 0.034
480b 0.28
481a 0.184
481b 0.018
482a ＜0.013
482b ＜0.013
483a ＜0.013
484a ＜0.013
484b 0.015
485a ＜0.013
485b ＜0.013
486 ＜0.013
486b 0.018
487 ＜0.013
492 0.055
493 0.064
494 ＜0.013
499a ＜0.013
502a ＜0.013
504a ＜0.013
504b 0.76
506a ＜0.013
507a ＜0.013
510a 0.395
510b 0.308
510c ＜0.013
510d 0.016
511a ＜0.013
511b 0.017
512a 0.015
512b ＜0.013
513a 0.022
514a ＜0.013
515a 0.105
515b 0.017
516a 0.031
516b ＜0.013
517a ＜0.013
518a 0.069
518b 0.044
519a ＜0,013
520a ＜0.013
521 0.11
522a ＜0.013
523a 0.85
523b 8.75
524 0.020
525a ＜0.013
526a 0.015
526b 0.016
526c 0.015
526d 0.018
527a 0.538
527b 0.216
528a ＜0.013
529b 0.019
530a 0.26
530b 0.11
531a 0.055
531b 0.152
532 0.014
533a 0.035
533b 0.059
533c 0.014
533d 0.015
534a 0.14
535a ＜0.013
535b 0.029
536a ＜0.013
536b ＜0.013
537a 0.015
537b ＜0.013
538a 0.058
538b 0.016
539a ＜0.013
540 0.021
541a 0.014
542a 0.33
542b 0.078
542c 0.021
542d 0.014
543a ＜0.013
543b 0.083
544a 0.138
544b 2.7
545a 0.021
545b 0.018
546a ＜0.013
546b 0.051
548a 1.7
548b 93
549a ＜0.013
549b ＜0.013
550a ＜0.013
550b 0.054
551a ＜0.013
552 0.014
553a ＜0.013
554a 0.253
555a ＜0.013
555b ＜0.013
556a 0.032
556b ＜0.013
557a ＜0.013
558a 0.90
558b 3.75
559a 0.025
559b 0.14
559c ＜0.013
559d ＜0.013
560a 0.019
560b 0.32
562a 0.068
563a 0.219
563b 0.025
566a 0.293
566b 0.149
567a 0.330
567b 0.119
568a 0.185
568b 0.018
569a 0.277
569b 0.254
569c 0.029
569d 0.031
571a 0.014
571b ＜0.013
572a ＜0.013
573a 0.015
573b 0.019
573c 0.017
573d ＜0.013
574a 0.020
574b ＜0.013
575a ＜0.013
576a ＜0.013
577a 0.015
577b ＜0.013
578a 0.028
578b 0.15
579 0.85
580 ＜0.013
581a 0.43
582a 0.020
582b 0.020
583a 0.12
583b 0.021
583c 0.099
583d 0.72
584a 0.14
584b 2.1
601 ＜0.013
701 ＜0.013
702 ＜0.013
703a 0.022
703b ＜0.013
703c 0.030
704 ＜0.013
705 0.15
706 ＜0.013
707 ＜0.013
708 ＜0.013
709 ＜0.013
710a ＜0.013
711a ＜0.013
711b ＜0.013
712ab ＜0.013
713a ＜0.013
714 ＜0.013
719a 0.016
720 ＜0.013
721 ＜0.013
722a ＜0.013
722b ＜0.013
723a 0.469
723b 0.029
724a 0.019
724b 0.019
726a ＜0.013
726b 0.016
727a ＜0.013
727b ＜0.013
728a ＜0.013
729a 1.37
729b 0.015
730a ＜0.013
730b ＜0.013
730c ＜0.013
730d ＜0.013
732a ＜0.013
733a ＜0.013
734a ＜0.013
736a ＜0.013
736b ＜0.013
739 ＜0.013
740a ＜0.013
740b ＜0.013
742 1.12
745 0.29
746 ＜0.013
747a ＜0.013
747b ＜0.013
748a ＜0.013
748b 0.018
749 0.102
750a 0.96
750b ＜0.013
751 0.044
752 0.52
753 0.039
754 0.205
755 0.090
756 0.020
實例 B3 ：人類 T 細胞 IL2 誘導分析
分析原理： 抗CD3及抗CD28活化原代人類泛T細胞中之TCR信號傳導，從而導致IL-2啟動子誘導。藉由電致化學發光使用針對IL-2之捕獲抗體及經SULFO標籤標記之抗IL-2抗體偵測細胞培養上清液中分泌之IL-2。關於其他電致化學發光技術資訊，亦參見www.mesoscale.com。
分析程序： 於37℃及5% CO2 下將原代人類泛T細胞與改變濃度之測試化合物在加濕培育器中培育30分鐘。將細胞轉移至經固定濃度之抗人類CD3 (針對每一供體批次單獨測定)預塗覆之板且添加可溶性抗人類CD28 (最終濃度 = 1μg/ml)。於37℃及5% CO2 下在加濕培育起中將細胞刺激4小時。將25μl上清液轉移至經抗人類IL-2抗體預塗覆之MSD單斑點板。於4℃下在輕輕振盪下將MSD板培育隔夜。用洗滌緩衝液將MSD板洗滌4次。添加1:50稀釋度之SULFO標記之偵測抗體且於室溫下振盪培育2小時。用洗滌緩衝液將MSD板洗滌4次且添加150μl 2X MSD讀取緩衝液。在MSD儀器上讀數。將數據正規化至經刺激/未處理對照以計算每一化合物濃度下之活性%。材料： 冷凍之原代人類泛-T細胞(StemCell Technologies編號70024) 抗人類CD3 (OKT3純系) (eBioscience編號16-0037-81) 抗人類CD28 (CD28.2純系) (BD編號555725) 96孔人類IL-2組織培養套組(MSD編號K151AHB-4)儀器： 用於液體處置之Biomek FX(Beckman Coulter) MSD SECTOR S 600 (Meso Scale Discovery)
在人類T細胞IL-2誘導分析中測試示例性式(I)化合物。相對於未經處理之細胞針對由測試化合物處理之細胞中IL-2量測的增加%對於某些化合物提供於表B2中。表 B2
化合物編號 相對於未經處理之細胞的IL-2增加% 所分析之濃度 (μM)
409b 2838% 2.778
411a 2119% 2.778
416a 2989% 2.778
441b 1158% 2.778
445b 1436% 2.778
477b 1494% 5.469
477d 1745% 8.33
482a 737% 2.778
482b 1719% 2.778
484b 1782% 2.778
486 1400% 2.778
510c 700% 2.778
512b 2613% 2.778
526b 970% 2.778
526c 1677% 2.778
527 738% 2.778
535a 831% 2.778
536b 2280% 8.333
546a 914% 8.33
550a 1059% 2.778
574a 1634% 1.196
701 4163% 2.778
727b 938% 0.926
751 1363% 2.778
755 1061% 2.778
實例 B4 ： pSLP76 分析
分析原理： 抗CD3活化人類Jurkat細胞中之TCR信號傳導，從而導致由HPK-1磷酸化S376殘基處之SLP-76。藉由夾心式ELISA使用抗pSLP76(S376)捕獲抗體及生物素化抗SLP76偵測抗體偵測磷酸化-SLP76 (S376)。材料： Jurkat，純系E6-1 (ATCC目錄號TIB-152) 抗CD3 DynaBeads (Invitrogen, 目錄號111.51D) 抗pSLP76(S376)兔單株(Genentech) 生物素化抗SLP76兔多株 (Thermo，內部實施之生物素結合) 鏈黴抗生物素蛋白- 辣根過氧化物酶(GE，目錄號RPN4401V) TMB受質(Cell Signaling，目錄號7004) 停止溶液(Cell Signaling，目錄號7002)分析程序：
於37℃及5% CO2 下將Jurkat細胞與改變濃度之測試化合物在加濕培育器中培育30分鐘。以4:1珠粒:細胞比率添加抗CD3 DynaBeads。於37℃及5% CO2 下在加濕培育起中將細胞刺激10分鐘。添加冷緩衝液且於4℃下在振盪器上培育30分鐘。將細胞溶解物轉移至經捕獲抗體塗覆之預封阻ELISA板。於室溫下振盪培育2小時。用洗滌緩衝液將ELISA板洗滌5次且以0.5μg/ml之最終濃度添加25μl生物素化偵測抗體。於室溫下振盪培育1小時。用洗滌緩衝液將ELISA板洗滌5次且以1:8000之最終稀釋度添加25μl鏈黴抗生物素蛋白酶結合物。於室溫下振盪培育20分鐘。用洗滌緩衝液將ELISA板洗滌5次且添加25μl TMB受質溶液。於室溫下在黑暗中振盪培育20分鐘。添加25μl停止溶液且在SoftMax Pro上讀取450nm下之吸光度。
在pSLP76分析中測試示例性式(I)化合物。針對某些化合物量測之IC50 值提供於表B3中。表 B3
化合物編號 pSLP76 IC50 (μM) HHep清除率(mL/min/kg) MDCK AB Papp (× 10-6 cm/s)
401 0.097 9.2 18
403a 0.048 7.7 10
441b 0.036 6.9 15
477d 0.066 5.7 16
482a 0.038 11 15
484b 0.026 7.9 19
510c 0.062 8.7 20
527 0.064 11 13
546a 0.062 6.5 10
555b 0.024 13 15
574a 0.032 8.3 12
751 0.041 ＜6.2 11
755 0.046 6.8 10
實例 B5 ：滲透性分析
在gMDCKI細胞株中評價相關化合物之細胞滲透性，該等gMDCKI細胞株係最初自美國模式培養物保藏所(Manassa, VA)獲取且在Genentech產生之經修飾MDCKI (Madin-Darby犬腎)。在使用之前4天(聚對苯二甲酸乙二酯膜，1 mm孔徑)於37˚C與5% CO2 及95%濕度下以2.5 × 105 個細胞/mL之接種密度將細胞接種於24孔Millicell板(Millipore, Billerca, MA)上。在頂端至底側(A-B)及底側至頂端(B-A)方向上以10 µM測試檢品。將測試化合物溶解於由漢克氏(Hank’s)平衡鹽溶液及10 mM HEPES (Invitrogen公司，Grand Island, NY)組成之轉移緩衝液中。使用經上皮電阻(TEER)及螢蝦黃(LY)滲透性以分別監測實驗開始及結束時之單層完整性。藉由LC-MS/MS分析檢品。
2小時培育後，在頂端至A-B及B-A方向上之表觀滲透性(Papp )計算為： Papp = (dQ/dt)•(1/AC0 ) 其中：dQ/dt = 接收室中化合物之出現速率；A = 插入物之表面積；C0 = T0 時之初始受質濃度。流出比(ER)計算為 (Papp , B-A/Papp , A-B)。
評價示例性式(I)化合物之細胞滲透性。對於某些化合物之MDCK AB Papp 值列示於表B3中。實例 B6: 肝細胞穩定性分析
使用肝細胞穩定性分析評價化合物之代謝穩定性。將來自10個供體池之冷凍保藏之人類肝細胞於37℃下快速解凍，懸浮於預加熱之In VitroGRO™ HT培養基中，且接著於室溫下以100×g離心10 min。棄去上清液，且將細胞重新懸浮於5 mL杜貝克氏改良鷹氏培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium，DMEM)培養基中。在Hepatometer® Vision (Lonza, NC)上對懸浮液中之細胞存活率進行計數，且接著將活細胞在DMEM中調節至1.0 × 106 個細胞/mL。首先將化合物用DMEM培養基稀釋至2 μM，且接著將125 μL含有藥物之培養基之等份試樣轉移至96孔未經塗覆之板。藉由添加125 μL肝細胞懸浮液起始培育，以產生250 μL之總培育體積。每一化合物之最終濃度為1 μM，且最終細胞密度為0.5×106 個細胞/mL。於37℃下在加濕培育器中執行培育。以不同時間間隔(0, 60, 120及180 min)取出50 μL培育培養基之等份試樣，且立刻與100 μL含有50 nM普萘洛爾(propranolol) (內標準品)之冰冷乙腈混合。接著將樣品以10,000 x g離心10 min，且取出80 μL上清液且用160 μL水稀釋，之後進行LC/MS-MS分析。如Obach等人J. Pharmacol. Exp. Ther. 283 :46-58 (1997)中所述測定活體外固有清除率及放大肝清除率。
根據上述方案評價示例性式(I)化合物之人類肝細胞穩定性。某些化合物之人類肝清除率(HHep)值列示於表B3中。實例 B7 ：藥物動力學 (PK) 研究
大鼠中之藥物動力學研究：在 PK研究中使用體重介於200g至300g範圍內之雄性Sprague Dawley大鼠，該等大鼠係自Lingchang/Vital River Laboratory Animal Technology有限公司(中國上海/背景)獲得。向一組3隻大鼠給予1 mg/kg靜脈內濃注(IV)劑量之溶液調配物中之檢品，且量一組3大鼠給予2或5 mg/kg經口(PO)劑量之呈具有0.2% Tween 80之0.5%甲基纖維素(MCT)懸浮液形式或呈溶液形式之檢品。在IV或PO投與後0.033、0.083、0.25、0.5、1、2、4、6及8小時自每一大鼠經由股動脈中之導管連續收集血樣(每個時間點250µL)。將血樣收集至預冷卻之含有鉀(K2) EDTA之管中且於2至8℃下在收集之1小時內以3,200g離心10分鐘以收穫血漿。將血漿樣品儲存於-70℃下直至LC/MS/MS分析為止。藉由未驗證之LC/MS/MS測定每一血漿樣品中之濃度。使用具有針對每一化合物監測之特定過渡的多反應監測(MRM)獲取數據。
藥物動力學分析： 藉由如Gibaldi及Perrier (Gibaldi及Perrier, 1982)中所述之非隔室方法使用Phoenix® WinNonlin® 6.4版(Certara L.P.)計算藥物動力學參數。在PO投與後，藉由用在每一PO劑量後獲得之外推至無限之血漿濃度-時間曲線下劑量正規化面積(AUCinf )除以藉由IV注射投用之動物的平均劑量正規化AUCinf 來測定每一動物之生物利用度百分比(% F)。所有PK參數皆表示為平均值± 標準偏差(SD)。
在大鼠中執行示例性式(I)化合物之藥物動力學研究。對於某些化合物，測定之生物利用度百分比(%F)值以及研究中所用之劑量、媒劑及形式列示於表B4中。表 B4
化合物編號 % F 劑量(mg/kg) 媒劑 形式
401 16% 5 MCT 懸浮液
403a 4% 5 10/90 DMSO/MCT 懸浮液
441b 30% 2 10/90 DMSO/MCT 溶液
477d 43% 2 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
482a 41% 5 MCT，pH=2.5 懸浮液
484b 16% 5 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
510c 28% 2 MCT 懸浮液
527 12% 2 MCT 懸浮液
546a 22% 5 10%DMSO/35%PEG400/55%水 溶液
555b 34% 2 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
574a 16% 2 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
751 9.4% 2 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
755 4% 5 10%DMSO/60%PEG400/30%水 溶液
應注意，術語「一個(a或an)」實體係指一或多個該實體；例如，「多肽」理解為表示一或多種多肽。因此，術語「一(a)」(或「一(an)」)、「一或多個(one或more)」及「至少一個(at least one)」可在本文中互換使用。
本文所用之所有技術及科學術語具有相同含義。關於所用數字(例如量、溫度等)已努力確保準確度，但應慮及一些實驗誤差及偏差。
貫穿本說明及申請專利範圍，詞語「包含(comprise、comprises及comprising)」以非排他意義使用，只是上下文另有需要除外。應理解，本文所述實施例包括「由實施例組成」及/或「基本上由實施例組成」。
如本文所用術語「約」在指一值時意欲涵蓋自指定量在一些實施例中± 50%、在一些實施例中± 20%、在一些實施例中± 10%、在一些實施例中± 5%、在一些實施例中± 1%、在一些實施例 ± 0.5%及在一些實施例中± 0.1%的變化，因此該等變化適於實施所揭示方法或採用所揭示組合物。
在提供值之範圍的情況下，應理解，本發明內涵蓋介於範圍之上限與下限之間的每一插入值(除非上下文另外明確指示，否則精確至下限之單位之十分之一)以及該所述範圍內之任何其他所述值或插入值。本發明內亦涵蓋可獨立地包括於更小範圍內之該等小範圍的上限及下限，該等上限及下限任何特別地排除限於所述範圍內。在所述範圍包括限值之一者或二者的情況下，排除所包括彼等限值中之一者或二者的範圍亦包括於本發明中。
該等發明所屬之熟習此項技術者受益於前述說明及相關圖示中提供之教示，將想到本發明之許多修改形式及其他實施例。因此，應理解，本發明並不限於所揭示之具體實施例且修改形式及其他實施例意欲包括於隨附申請專利範圍之範疇內。儘管本文中採用特定術語，但其僅係以通用及說明性含義適用且並不用於限制目的。
Figure 108135733-A0101-11-0001-1

Claims (42)

  1. 一種式(I)化合物
    Figure 03_image001
    (I) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R15 係-OR16 、-SR16 或-NR17 R18 ； 各R16 獨立地係C1-6 烷基、C3-10 環烷基、7至14員雜芳基或3至14員雜環基；其中R16 之該C1-6 烷基、該C3-10 環烷基、該7至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； R17 係氫或C1-6 烷基； R18 係C1-6 烷基、C3-10 環烷基或3至14員雜環基；其中R18 之該C1-6 烷基、該C3-10 環烷基及該3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R17 及R18 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； R3 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、3至14員雜環基或-OR7 ；其中R3 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基及該3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； R4 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的5至14員雜芳基； R5 係氫、鹵素、氰基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)R6 、-C(O)OR7 、-C(O)NR8a R8b 、-OR7 、-OC(O)R6 、-OC(O)NR8a R8b 、-SR7 、-S(O)R9 、-S(O)2 R9 、-S(O)2 NR8a R8b 、-P(O)R9a R9b 、-NR8a R8b 、-N(R8 )C(O)R6 、-N(R8 )C(O)OR7 、-N(R8 )C(O)NR8a R8b 、-N(R8 )S(O)2 R9 或-N(R8 )S(O)2 NR8a R8b ；其中R5 之該C1-6 烷基、該C2-6 烯基、該C2-6 炔基、該C3-8 環烷基、該C6-14 芳基、該5至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R6 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R6 之該C1-6 烷基、該C2-6 烯基、該C2-6 炔基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至14員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R7 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R7 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至14員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R8 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各R8a 及R8b 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R8a 及R8b 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至14員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R8a 及R8b 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R9 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基或3至12員雜環基；其中R9 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至14員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 各R9a 及R9b 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至14員雜芳基、3至12員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中R9a 及R9b 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至14員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代； 或R9a 及R9b 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R10 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra 、-C(O)ORb 、-C(O)NRc Rd 、-ORb 、-OC(O)Ra 、-OC(O)NRc Rd 、-SRb 、-S(O)Re 、-S(O)2 Re 、-S(O)(=NH)Re 、-S(O)2 NRc Rd 、-NRc Rd 、-N(Rf )C(O)Ra 、-N(Rf )C(O)ORb 、-N(Rf )C(O)NRc Rd 、-N(Rf )S(O)2 Re 、-N(Rf )S(O)2 NRc Rd 或-P(O)Rg Rh ；其中R10 之該C1-6 烷基、該C2-6 烯基、該C2-6 炔基、該C3-8 環烷基、該C6-14 芳基、該5至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Ra 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Ra 之該C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基及3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rb 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rb 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rc 及Rd 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Rc 及Rd 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 或Rc 及Rd 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的4至12員雜環基； 各Re 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至12員雜環基；其中Re 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 各Rf 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg 及Rh 獨立地係C1-6 烷基、C3-8 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至12員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg 及Rh 之該C1-6 烷基、該C3-8 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至12員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代； 或Rg 及Rh 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R11 之取代基取代的4至12員雜環基； 各R11 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至8員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra1 、-C(O)ORb1 、-C(O)NRc1 Rd1 、-ORb1 、-OC(O)Ra1 、-OC(O)NRc1 Rd1 、-SRb1 、-S(O)Re1 、-S(O)2 Re1 、-S(O)2 NRc1 Rd1 、-NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )C(O)Ra1 、-N(Rf1 )C(O)ORb1 、-N(Rf1 )C(O)NRc1 Rd1 、-N(Rf1 )S(O)2 Re1 、-N(Rf1 )S(O)2 NRc1 Rd1 或-P(O)Rg1 Rh1 ；其中R11 之該C1-6 烷基、該C2-6 烯基、該C2-6 炔基、該C3-6 環烷基、該C6-14 芳基、該5至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Ra1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Ra1 之該C1-6 烷基、該C2-6 烯基、該C2-6 炔基、該C3-6 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rb1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rb1 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rc1 及Rd1 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Rc1 及Rd1 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 或Rc1 及Rd1 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的4至8員雜環基； 各Re1 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基或3至8員雜環基；其中Re1 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 各Rf1 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg1 及Rh1 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6-10 芳基、5至10員雜芳基、3至8員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg1 及Rh1 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6-10 芳基、該5至10員雜芳基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代； 或Rg1 及Rh1 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R12 之取代基取代的4至8員雜環基； 各R12 獨立地係側氧基、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基、3至6員雜環基、鹵素、氰基、-C(O)Ra2 、-C(O)ORb2 、-C(O)NRc2 Rd2 、-ORb2 、-OC(O)Ra2 、-OC(O)NRc2 Rd2 、-S(O)2 Re2 、-S(O)2 NRc2 Rd2 、-NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )C(O)Ra2 、-N(Rf2 )C(O)ORb2 、-N(Rf2 )C(O)NRc2 Rd2 、-N(Rf2 )S(O)2 Re2 、-N(Rf2 )S(O)2 NRc2 Rd2 或-P(O)Rg2 Rh2 ；其中R12 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6 芳基、該5至6員雜芳基及該3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Ra2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Ra2 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6 芳基、該5至6員雜芳基及該3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rb2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至6員雜環基；其中Rb2 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基及該3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rc2 及Rd2 獨立地係氫、C1-6 烷基、C3-6 環烷基或3至8員雜環基；其中Rc2 及Rd2 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 或Rc2 及Rd2 與其連接之氮原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的4至6員雜環基； 各Re2 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、C6 芳基、5至6員雜芳基或3至6員雜環基；其中Re2 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基、該C6 芳基、該5至6員雜芳基及該3至6員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 各Rf2 獨立地係氫或C1-6 烷基； 各Rg2 及Rh2 獨立地係C1-6 烷基、C3-6 環烷基、3至8員雜環基或-O-C1-6 烷基；其中Rg2 及Rh2 之該C1-6 烷基、該C3-6 環烷基及該3至8員雜環基各自視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代； 或Rg2 及Rh2 與其連接之磷原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R13 之取代基取代的4至6員雜環基；且 各R13 獨立地係側氧基、鹵素、羥基、-O(C1-6 烷基)、氰基、C1-6 烷基或C1-6 鹵代烷基。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R3 為氫。
  3. 如申請專利範圍第1項或第2項之化合物，其中R5 為氫、氟或氯。
  4. 如申請專利範圍第3項之化合物，其中R5 為氟。
  5. 如申請專利範圍第1項至第4項中任一項之化合物，其中R4 為
    Figure 03_image301
    ， 其中波形線表示連接點，R4a 、R4b 及R4c 各自獨立地係氫或R10 ，或兩個鄰位R4(a-c) 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合5至10員雜環基或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的稠合C5-8 環烷基。
  6. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中R4 係
    Figure 03_image309
    ，其中R4a 係C1-6 烷基，且R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基。
  7. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中R4 係選自由以下組成之群：
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    及
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    ； 其中波形線表示連接點。
  8. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中R4 係
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    、
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    及
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    ： 其中波形線表示連接點。
  9. 如申請專利範圍第1項至第8項中任一項之化合物，其中R15 係-OR16 。
  10. 如申請專利範圍第9項之化合物，其中R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。
  11. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R16 係具有1或2個獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子且視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的4至10員雜環基。
  12. 如申請專利範圍第9項之化合物，其中R16 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-8 環烷基。
  13. 如申請專利範圍第9項之化合物，其中R16 係-(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 獨立地係C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 ；其中R19 之該C3-10 環烷基、該C6-14 芳基、該5至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。
  14. 如申請專利範圍第13項之化合物，其中R19 係視情況地經1、2、3或4個獨立地選自R10 之取代基取代的5或6員雜芳基。
  15. 如申請專利範圍第9項之化合物，其中R16 係選自由以下組成之群：
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    ；
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    、
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    、
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    、
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    及
    Figure 03_image288
    ； 其中波形線表示連接點。
  16. 如申請專利範圍第1項至第8項中任一項之化合物，其中R15 係-NR17 R18 。
  17. 如申請專利範圍第16項之化合物，其中R17 係氫。
  18. 如申請專利範圍第16項或第17項之化合物，其中R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的3至14員雜環基。
  19. 如申請專利範圍第18項之化合物，其中R18 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image010
    、
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    、
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    ；
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    、
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    及
    Figure 03_image250
    ；其中波形線表示連接點。
  20. 如申請專利範圍第16項或第17項之化合物，其中R18 係視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代的C3-10 環烷基。
  21. 如申請專利範圍第20項之化合物，其中R18 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image098
    、
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    、
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    及
    Figure 03_image280
    ； 其中波形線表示連接點。
  22. 如申請專利範圍第16項或第17項之化合物，其中R18 係C1-6 烷基、C1-6 鹵代烷基或-(C1-6 伸烷基)-R19 ，其中R19 獨立地係C3-10 環烷基、C6-14 芳基、5至14員雜芳基、3至14員雜環基、氰基、-OR7 、-NR8a R8b 或-S(O)2 R9 ；其中R19 之該C3-10 環烷基、該C6-14 芳基、該5至14員雜芳基及該3至14員雜環基各自獨立地視情況地經1、2、3、4或5個獨立地選自R10 之取代基取代。
  23. 如申請專利範圍第22項之化合物，其中R18 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image282
    、
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    、
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    、
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    、
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    及
    Figure 03_image166
    ；其中波形線表示連接點。
  24. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IA)：
    Figure 03_image006
    (IA)； 其中R3 、R4 、R5 及R16 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  25. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IA-1)：
    Figure 03_image346
    (IA-1)； 其中R4 及R16 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  26. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IA-2)：
    Figure 03_image348
    (IA-2)； 其中R4a 係C1-6 烷基；R4b 及R4c 獨立地係氫或R10 ，或R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；且R1 、R10 及R16 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  27. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IB)：
    Figure 03_image350
    (IB)； 其中R3 、R4 、R5 及R18 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  28. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IB-1)：
    Figure 03_image352
    (IB-1)； 其中R4 及R18 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  29. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物具有式(IB-2)：
    Figure 03_image354
    (IB-2)； 其中R4a 係C1-6 烷基；R4b 及R4c 獨立地係氫或R10 ，或R4b 及R4c 與其連接之原子一起形成視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合5至10員雜環基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；或視情況地經1、2、3或4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的稠合C5-8 環烷基：C1-6 烷基、羥基、鹵素及氰基；且R1 、R10 及R18 係如申請專利範圍第1項中所定義。
  30. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係選自由以下組成之群：表1中之化合物編號401-584、601及701-756，或其醫藥學上可接受之鹽。
  31. 一種醫藥組合物，該醫藥組合物包含如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，以及醫藥學上可接受之賦形劑。
  32. 如申請專利範圍第31項之醫藥組合物，其中該組合物進一步包括化學治療劑。
  33. 一種抑制HPK1之方法，該方法包括使個體中之HPK1與有效量之如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物接觸。
  34. 一種增強有需要之個體之免疫反應的方法，其中該方法包括向該個體投與有效量之如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物。
  35. 如申請專利範圍第33項或第34項之方法，其中該個體患有癌症。
  36. 一種治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包括向有需要之個體投與有效量之如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物。
  37. 如申請專利範圍第36項之方法，其中該HPK1依賴性病症係癌症。
  38. 如申請專利範圍第35項或第37項之方法，其中該癌症包含至少一種選自由以下組成之群之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰臟癌、血液惡性病及腎細胞癌。
  39. 如申請專利範圍第33項至第38項中任一項之方法，其中該方法進一步包括向該個體投與化學治療劑。
  40. 如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物；用於如申請專利範圍第33項至第39項中任一項之方法中。
  41. 一種如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物的用途；用於製造用於如申請專利範圍第33項至第39項中任一項之方法中的藥劑。
  42. 一種如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如申請專利範圍第31項或第32項之醫藥組合物的用途；用於如申請專利範圍第33項至第39項中任一項之方法中。
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7129420B6 (ja) 2017-03-30 2024-02-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｐｋ１阻害剤としてのイソキノリン
EP3856724A1 (en) * 2018-09-30 2021-08-04 F. Hoffmann-La Roche AG Cinnoline compounds and for the treatment of hpk1-dependent disorders such as cancer
US11612606B2 (en) 2018-10-03 2023-03-28 Genentech, Inc. 8-aminoisoquinoline compounds and uses thereof
CA3116347A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
LT3873903T (lt) 2018-10-31 2024-05-10 Gilead Sciences, Inc. Pakeistieji 6-azabenzimidazolo junginiai, kaip hpk1 inhibitoriai
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
WO2022268520A1 (de) * 2021-06-21 2022-12-29 Bayer Aktiengesellschaft Verwendung von substituierten pyrrolidinonen oder deren salzen zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen.
EP4373817A1 (en) 2021-07-20 2024-05-29 Astrazeneca AB Substituted pyrazine-2-carboxamides as hpk1 inhibitors for the treatment of cancer
CN117229202B (zh) * 2023-11-15 2024-01-26 苏州美诺医药科技有限公司 一种brd9靶向降解化合物的中间体的制备方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
BRPI0613361A2 (pt) 2005-07-01 2011-01-04 Medarex Inc anticorpo monoclonal humano isolado, composição, imunoconjugado, molécula biespecìfica, molécula de ácido nucleico isolada, vetor de expressão, célula hospedeira, camundongo transgênico, método para modular uma resposta imune num indivìduo, método para inibir crescimento de células tumorais num indivìduo, método para tratar uma doença infecciosa num indivìduo, método para aumentar uma resposta imune a um antìgeno num indivìduo, método para tratar ou prevenir uma doença inflamatória num indivìduo e método para preparar o anticorpo anti-pd-l1
US20110223188A1 (en) 2008-08-25 2011-09-15 Solomon Langermann Targeted costimulatory polypeptides and methods of use to treat cancer
KR20210060670A (ko) 2008-12-09 2021-05-26 제넨테크, 인크. 항-ｐｄ-ｌ１ 항체 및 ｔ 세포 기능을 향상시키기 위한 그의 용도
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
BR122021025338B1 (pt) 2009-11-24 2023-03-14 Medimmune Limited Anticorpo isolado ou fragmento de ligação do mesmo contra b7-h1, composição farmacêutica e seus usos
KR20240000617A (ko) * 2015-06-25 2024-01-02 유니버시티 헬스 네트워크 Hpk1 억제제 및 이의 사용 방법
JP7129420B6 (ja) * 2017-03-30 2024-02-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｐｋ１阻害剤としてのイソキノリン

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