TW202019405A - 用於治療晚期非小細胞肺癌之標靶性TGF-β抑制之組合療法 - Google Patents

用於治療晚期非小細胞肺癌之標靶性TGF-β抑制之組合療法 Download PDF

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Abstract

本揭示內容概言之係關於用於治療經診斷患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之個體之方法，其涉及雙功能融合蛋白之標靶性TGF-β抑制與投與全身性化學治療劑之組合，其中本揭示內容之該雙功能融合蛋白與全身性化學治療劑之該組合相比於單獨之全身性化學治療劑增強抗癌效能。

Description

用於治療晚期非小細胞肺癌之標靶性TGF-β抑制之組合療法
本揭示內容概言之係關於用於治療經診斷患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之個體之方法，其涉及雙功能融合蛋白之標靶性TGF-β抑制與全身性化學治療劑之組合。
NSCLC係異質性腫瘤群體，其可廣泛地分類為鱗狀或非鱗狀的。非鱗狀NSLC包括肺腺癌及大細胞未分化癌。
所有患有NSCLC之患者中大約有一半在診斷時呈現晚期(IV期)或轉移性疾病。已顯示，基於鉑之傳統雙聯化學療法改良晚期NSCLC患者之生活品質且延長存活，但在目前可用之治療下此患者組視為無法治癒的且患有晚期NSCLC之患者之中值存活為8至10個月。利用標準化學治療劑培美曲塞(pemetrexed)延長治療(或「繼續維持療法」)之研究顯著地改良存活(例如，參見V. Polo及B. Besse，Maintenance Strategies in Stage IV Non-Small-Cell Lung Cancer (NSCLC): In Which Patients, With Which Drugs? 25 ANNALS OF ONCOLOGY 1283-1293 (2014)；亦參見 L.G. Paz-Ares等人，PARAMOUNT: Final Overall Survival Results of the Phase III Study of Maintenance Pemetrexed Versus Placebo Immediately After Induction Treatment With Pemetrexed Plus Cisplatin for Advanced Nonsquamous Non-Small-Cell Lung Cancer , 31 JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 2895-2902 (2013))。然而，早期第二線化學療法(「轉換性維持療法」)尚未顯示出任何臨床益處。將第三化學治療劑加入至第一線治療方案中未能改良效能。例如，參見S. Ramalingam及C. Belani，Systemic Chemotherapy for Advanced Non-Small Cell Lung Cancer: Recent Advances and Future Directions , 13 THE ONCOLOGIST 5-13 (增刊1) (2008)。此外，添加第三藥劑觀察到毒性增加。出處同上。
最近改良針對晚期NSCLC之療法之努力集中在向基於鉑之標準化學療法方案添加標靶性藥劑(例如EGFR抑制劑或貝伐珠單抗(bevacizumab))。出處同上。然而，該等努力均不具有治癒性。出處同上。因此，需要相比於基於鉑之雙聯化學療法改良針對晚期及轉移性NSCLC之療法之結果。
以引用方式併入本文中之美國專利申請公開案號US 20150225483 A1闡述一種雙功能融合蛋白，其將抗程式化死亡配體1 (PD-L1)抗體與作為TGFβ中和性「陷阱」之II型腫瘤生長因子β受體(TGFβRII)之可溶性細胞外結構域組合成單一分子。具體而言，該蛋白質係異四聚體，其係由抗PD-L1之兩條免疫球蛋白輕鏈及兩條重鏈組成，該兩條重鏈包含抗PD-L1之經由撓性甘胺酸-絲胺酸連接體遺傳融合至人類TGFβRII之細胞外結構域之重鏈(參見圖1)。此抗PD-L1/TGFβ陷阱分子經設計以靶向腫瘤微環境中之兩種主要免疫抑制機制。美國專利申請公開案號US 20150225483 A1闡述以基於患者體重之劑量投與該陷阱分子。
本揭示內容提供用於治療初次接受治療個體或經診斷患有晚期NSCLC或PDx失敗轉移性NSCLC個體之方法，該NSCLC包括鱗狀及非鱗狀NSCLC二者，其係利用抗PD-L1/TGFβ陷阱分子與投與全身性化學治療劑之組合來實施。
為有效治療經診斷患有晚期NSCLC之患者，本揭示內容提供治療晚期NSCLC且改良晚期NSCLC患者之疾病預後及總體存活之治療方案。所治療之晚期NSCLC可係鱗狀或非鱗狀NSCLC，且與基線PD-L1表現程度無關。
在一態樣中，本揭示內容提供治療晚期NSCLC之方法，其係藉由投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑之組合以誘導腫瘤細胞死亡，同時靶向兩種免疫抑制路徑PD-L1及TGF-β來實施。在一態樣中，本揭示內容提供利用雙功能融合蛋白與全身性化學治療劑組合之標靶性TGF-β抑制之體重獨立性劑量方案，其用於治療經診斷患有晚期NSCLC之初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體之方法中。
在一態樣中，本揭示內容提供治療有需要之初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制NSCLC腫瘤生長之兩步方法，其中第一步驟涉及向個體投與至少1200 mg (例如2400 mg)劑量之抗PD-L1/TGFβ陷阱，同時進行全身性化學療法，且第二步驟涉及投與至少1200 mg (例如2400 mg)之抗PD-L1/TGFβ陷阱。NSCLC可係鱗狀或非鱗狀NSCLC。全身性化學療法可係基於鉑之化學療法，例如包括順鉑(cisplatin)或卡鉑(carboplatin)與吉西他濱(gemcitabine)、多西他賽(docetaxel)或太平洋紫杉醇(paclitaxel) (奈米粒子白蛋白結合( nab)型太平洋紫杉醇或白蛋白非結合型太平洋紫杉醇)之組合。
在一態樣中，本揭示內容提供治療有需要之初次接受治療個體之晚期非鱗狀NSCLC或抑制非鱗狀NSCLC腫瘤生長之兩步方法，其中第一步驟涉及向該個體投與至少1200 mg (例如2400 mg)劑量之抗PD-L1/TGFβ陷阱，同時進行包括培美曲塞之全身性化學療法，且第二步驟涉及投與至少1200 mg (例如2400 mg)之抗PD-L1/TGFβ陷阱與培美曲塞之組合作為唯一之化學治療劑。第一步驟中之全身性化學療法可係基於鉑之化學療法，例如包括順鉑或卡鉑與培美曲塞之組合。
在一態樣中，本揭示內容提供治療有需要之初次接受治療個體之晚期非鱗狀NSCLC或抑制非鱗狀NSCLC腫瘤生長之兩步方法，其中第一步驟涉及向該個體投與約2400 mg劑量之抗PD-L1/TGFβ陷阱，同時進行包括培美曲塞之全身性化學療法，且第二步驟涉及投與約2400 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱與培美曲塞之組合。全身性化學療法可係基於鉑之化學療法，例如包括順鉑/卡鉑與培美曲塞之組合。
在一態樣中，本揭示內容提供治療個體之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該個體在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該個體投與至少1800 mg劑量之如本揭示內容中所提供之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與至少1800 mg之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質之第二步驟。
在一態樣中，本揭示內容提供治療個體之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該個體在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該個體投與約2400 mg劑量之如本揭示內容中所提供之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與約2400 mg之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質之第二步驟。
本揭示內容之雙功能蛋白質(抗PD-L1/TGFβ陷阱分子)包括第一及第二多肽。該第一多肽包括：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ) (例如可溶性片段)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段。該第二多肽包括結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，其中該第一多肽之重鏈及該第二多肽之輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點(例如本文所闡述之任一抗體或抗體片段)。由於本揭示內容之雙功能蛋白質結合至兩個靶標，即(1) 主要為膜結合之PD-L1及(2) 在血液及間質中可溶之TGFβ，因此BW獨立性投藥方案需要不僅有效抑制腫瘤部位處之PD-L1且亦足以抑制TGFβ之劑量。
本揭示內容亦係關於促進TGFβ之局部耗竭之方法。該方法包括投與上文所闡述之蛋白質，其中該蛋白質結合溶液中之TGFβ，結合細胞表面上之PD-L1，且將所結合之TGFβ攜載至細胞中(例如癌細胞)。
本揭示內容亦係關於抑制細胞(例如癌細胞或免疫細胞)中之SMAD3磷酸化之方法，該方法包括使腫瘤微環境中之細胞暴露於上文所闡述之蛋白質。
下文呈現本揭示內容之其他實施例及細節。
相關申請案之交叉參考
本申請案主張於2018年7月2日提出申請之美國臨時專利申請案第62/693,042號及於2019年2月4日提出申請之美國臨時專利申請案第62/801,014號之權益及優先權，該等臨時專利申請案之全部揭示內容係以引用的方式併入本文中。 序列表
本申請案含有序列表，其已以ASCII格式電子提交，且係以全文引用的方式併入本文中。於2019年6月19日創建之該ASCII拷貝命名為EMD-011WO_SL_ST25.txt且大小為75,851個位元組。
「TGFβRII」或「TGFβ受體II」意指具有野生型2型人類TGFβ受體同種型A序列(例如NCBI參照序列(RefSeq)登錄號NP_001020018 (SEQ ID NO: 8)之胺基酸序列)之多肽，或具有野生型2型人類TGFβ受體同種型B序列(例如NCBI RefSeq登錄號NP_003233 (SEQ ID NO: 9)之胺基酸序列)或具有與SEQ ID NO: 8或SEQ ID NO: 9之胺基酸序列實質上一致之序列之多肽。TGFβRII可保留野生型序列之TGFβ結合活性之至少0.1%、0.5%、1%、5%、10%、25%、35%、50%、75%、90%、95%或99%。所表現TGFβRII之多肽缺少信號序列。
「能夠結合TGFβ之TGFβRII片段」意指NCBI RefSeq登錄號NP_001020018 (SEQ ID NO: 8)或NCBI RefSeq登錄號NP_003233 (SEQ ID NO: 9)之任一部分，或與SEQ ID NO: 8或SEQ ID NO: 9實質上一致之序列，其長度為至少20個(例如至少30個、40個、50個、60個、70個、80個、90個、100個、110個、120個、130個、140個、150個、160個、175個或200個)胺基酸且保留野生型受體或相應野生型片段之至少一些TGFβ結合活性(例如至少0.1%、0.5%、1%、5%、10%、25%、35%、50%、75%、90%、95%或99%)。通常此片段係可溶性片段。例示性此片段係具有SEQ ID NO: 10之序列之TGFβRII細胞外結構域。能夠結合TGFβ之人類TGFβRII之某些其他例示性片段由SEQ ID NO: 50、51、52、53或54之序列表示。
「初次接受治療」係指自經診斷患有晚期NSCLC (IV期)以來尚未接受針對該疾病之先前全身性治療之個體或患者。
「PDx失敗轉移性NSCLC」係指在先前利用PD-(L)1抑制劑(抗PD-1或抗PD-L1抑制劑(例如抗體))與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用PD-(L)1抑制劑(抗PD-1或抗PD-L1抑制劑(例如抗體))治療時或在先前利用PD-(L)1抑制劑(抗PD-1或抗PD-L1抑制劑(例如抗體))、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時已具有轉移性NSCLC疾病進展之個體或患者之晚期NSCLC。
「PD-L1陽性」或「PD-L1+」指示≥ 1% PD-L1陽性腫瘤細胞，如(例如)藉由Dako IHC 22C3 PharmDx分析或藉由VENTANA PD-L1 (SP263)分析所測定。
「PD-L1高」或「高PD-L1」係指如藉由PD-L1 IHC 73-10分析(Dako)所測定≥ 80% PD-L1陽性腫瘤細胞，或如藉由Dako IHC 22C3 PharmDx分析所測定腫瘤比例評分(TPS) ≥ 50% (TPS係與IHC 22C3 PharmDx分析有關之專門術語，其描述具有部分或完全膜染色(例如針對PD-L1進行染色)之活腫瘤細胞之百分比)。IHC 73-10及IHC 22C3分析二者均在其各別截止值處選擇類似的患者群體。在某些實施例中，與22C3 PharmDx分析(參見Sughayer等人，Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol. , (2018))具有高度一致性之VENTANA PD-L1 (SP263)分析亦可用於測定PD-L1高表現程度。
「實質上一致」意指多肽與參照胺基酸序列展現至少50%、期望地60%、70%、75%或80%、更期望地85%、90%或95%且最期望地99%之胺基酸序列一致性。比較序列之長度通常將為至少10個胺基酸、期望地至少15個鄰接胺基酸、更期望地至少20個、25個、50個、75個、90個、100個、150個、200個、250個、300個或350個鄰接胺基酸且最期望地為全長胺基酸序列。
「患者」意指人類或非人類動物(例如哺乳動物)。「患者」、「個體」、「有需要之患者」及「有需要之個體」可在本揭示內容中互換使用，且係指患有或易於患有可藉由使用本揭示內容中所提供之方法及組合物進行投與來治療之疾病或病狀之活生物體。
如本揭示內容中所使用之術語「治療(treat、treating或treatment)」及其他文法等同物包括緩和、減弱、改善或預防疾病、病狀或症狀、預防其他症狀、改善或預防症狀之潛在代謝原因、抑制疾病或病狀，例如阻止疾病或病狀之發展、減輕疾病或病狀、使疾病或病狀消退、使由疾病或病狀引起之病狀減輕或終止疾病或病狀之症狀，且意欲包括預防。該等術語進一步包括達成治療性益處及/或預防性益處。治療性益處意指消滅或改善所治療之潛在病症。同樣，藉由根除或改善一或多種與潛在病症相關之生理症狀來達成治療性益處，使得在患者中觀察到改良，但患者可能仍受到潛在病症之折磨。
在本揭示內容之治療方案背景中，術語「鞏固」係如業內所通常理解進行使用。舉例而言，根據國家癌症研究院(National Cancer Institute)，術語「鞏固療法」係「在初始療法後癌症已消失之後給予之治療。鞏固療法用於殺死可能留在體內之任何癌細胞。其可包括放射療法、幹細胞移植或利用殺死癌細胞之藥物進行治療。亦稱為強化療法及緩解後療法」。https://www.cancer.gov/publications/dictionaries/cancer-terms/def/consolidation-therapy，最後一次訪問於2018年6月9日。
術語「無進展存活」或PFS定義為自隨機化(其可在治療起始後6週或更多週發生)至在不存在疾病進展之情形下第一次記錄之腫瘤進展或死亡事件之日期之時間。術語「總體存活」定義為自隨機化直至任何原因之死亡之時間。研究者根據RECIST 1.1版評價無進展存活作為預先定義之敏感性分析。
「癌症」意指局部晚期及/或轉移性非小細胞肺癌(NSCLC)，包括鱗狀或非鱗狀NSCLC。晚期/IV期NSCLC係根據其普通及通常含義來使用，且係指NSCLC之IVA或IVB期，其特徵在於(例如)轉移至一或多個部位。因此，在各個實施例中，癌症係轉移性NSCLC。
術語「風險」、「處於風險下」及「風險因素」在本文中係如業內照慣例所理解來使用。舉例而言，風險因素係增加發生疾病或損傷之可能性之個體之任何屬性、特性或暴露。在某些實施例中，處於發生疾病、病症或病狀之風險下之人意指該人暴露於有助於或增強該疾病、病症或病狀之發病機率之風險因素。
在整個本揭示內容之說明書及申請專利範圍中，詞語「包含(comprise)」及該詞語之其他形式(例如「包含(comprising及comprises)」)意指包括但不限於，且不意欲排除(例如)其他組分。
「共投與」意指本文所闡述之組合物係與其他療法同時、在其即將投與之前或緊接其投與之後投與。本揭示內容之蛋白質及組合物可單獨投與或可與第二、第三或第四治療劑一起向患者共投與。共投與意欲包括個別地或以組合方式(一種以上治療劑)同時或依序投與蛋白質或組合物。
術語「一(a)」並不意味著限制為單數。在某些實施例中，術語「一(a)」可係指複數形式。除非上下文另外明確指示，否則如整個本揭示內容中所使用，單數形式「一(a、an)」及「該(the)」包括複數個指示物。因此，舉例而言，對「組合物」之提及包括複數種此等組合物以及單一組合物。
「重構」調配物係藉由將凍乾調配物溶解於水性載劑中而製備之調配物，從而使得雙功能分子溶解於該重構調配物中。重構調配物適於靜脈內投與(IV)有需要之患者。
術語「約」係指在調配物之製備及疾病或病症之治療中不改變藥劑之效能之藥劑濃度或量之任何微小改變。在實施例中，術語「約」可包括指定數值或資料點±15%。
範圍在本揭示內容中可表述為自「約」一個特定值及/或至「約」另一特定值。當表述此一範圍時，另一態樣包括自一個特定值及/或至另一特定值。類似地，當藉由使用先行詞「約」將值表述為近似值時，應理解，該特定值形成另一態樣。應進一步理解，每一範圍之端點在與另一端點有關及與另一端點無關之兩種情形下均具有意義。亦應理解，本揭示內容中揭示多個值，且每一值除該值自身以外亦揭示為「約」該特定值。亦應理解，在整個本申請案中，資料係以多種不同格式提供，且該等資料代表資料點之任一組合之端點及起始點以及範圍。舉例而言，若揭示特定資料點「10」與特定資料點「15」，則應理解視為揭示大於、大於或等於、小於、小於或等於及等於10及15以及10與15之間。亦應理解，亦揭示兩個特定單元之間的每一單元。舉例而言，若揭示10與15，則亦揭示11、12、13及14。
「等滲」調配物係與人類血液具有基本上相同之滲透壓之調配物。等滲調配物通常將具有約250 mOsmol/kgH2 O至350 mOsmol/kgH2 O之滲透壓。術語「高滲透壓」用於描述滲透壓高於人類血液之調配物。舉例而言，可使用蒸氣壓或冰凍型滲透壓計量測等滲性。
術語「緩衝劑」係指當添加至水溶液時能夠保護溶液在添加酸或鹼時或在用溶劑稀釋時免受pH變化之一或多種組分。除磷酸鹽緩衝劑以外，亦可使用甘胺酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽緩衝劑及諸如此類，在該情形下，鈉、鉀或銨離子可用作相對離子。
「酸」係在水溶液中產生氫離子之物質。「醫藥上可接受之酸」包括在調配其之濃度及方式下無毒之無機酸及有機酸。
「鹼」係在水溶液中產生羥基離子之物質。「醫藥上可接受之鹼」包括在調配其之濃度及方式下無毒之無機鹼及有機鹼。
「凍乾保護劑」係在與所關注蛋白質組合時防止或降低該蛋白質在凍乾及後續儲存時之化學及/或物理不穩定性之分子。
「防腐劑」係降低細菌作用之試劑且可視情況添加至本文調配物。添加防腐劑可例如促進多用途(多劑量)調配物之產生。潛在防腐劑之實例包括十八烷基二甲基苄基氯化銨、氯化六甲雙銨、苯紮氯銨(benzalkonium chloride)(烷基苄基二甲基氯化銨之混合物，其中該等烷基係長鏈化合物)及苄索氯銨(benzethonium chloride)。其他防腐劑類型包括芳香族醇，例如苯酚、丁醇及苄醇；對羥基苯甲酸烷基酯，例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3戊醇；及間甲酚。
「表面活性劑」係含有疏水性部分(例如烷基鏈)及親水性部分(例如羧基及羧酸酯基)二者之表面活性分子。可將表面活性劑添加至本發明之調配物。適用於本發明之調配物中之表面活性劑包括(但不限於)聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20或80)；泊洛沙姆(poloxamer) (例如泊洛沙姆188)；去水山梨醇酯及衍生物；Triton；月桂基硫酸鈉；辛基醣苷鈉；月桂基-、肉豆蔻基-、亞麻油基-或硬脂醯基-磺基甜菜鹼；月桂基-、肉豆蔻基-、亞麻油基-或硬脂醯基-肌胺酸；亞麻油基-、肉豆蔻基-或鯨蠟基-甜菜鹼；月桂醯胺基丙基-、椰子醯胺基丙基-、亞麻油醯胺基丙基-、肉豆蔻醯胺基丙基-、棕櫚油醯胺基丙基-或異硬脂醯胺基丙基-甜菜鹼(例如月桂醯胺基丙基)；肉豆蔻醯胺基丙基-、棕櫚油醯胺基丙基-或異硬脂醯胺基丙基-二甲胺；甲基椰油基牛黃酸鈉或甲基油基牛磺酸二鈉；及MONAQUATTM 系列(Mona Industries, Inc., Paterson, N.J.)、聚乙二醇、聚丙二醇及乙二醇與丙二醇之共聚物(例如Pluronics、PF68等)。體重獨立性投藥方案
根據由分子之多個臨床前及臨床評價結果提供之資訊，已開發出涉及向初次接受治療之患者投與至少1200 mg本文所闡述之雙功能抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之體重獨立性投藥方案。兩項研究研究了分子之安全性、耐受性及藥物動力學，且包括對自所治療患者之血液獲得之外周血單核細胞之PD-L1靶標佔有率之評價及TGFβ1、TGFβ2及TGFβ3濃度之量測。該等評價係基於來自總計350名個體之資料(在實體腫瘤中1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg及20 mg/kg之劑量遞增群組，及在所選腫瘤類型中3 mg/kg、10 mg/kg、500 mg及1200 mg之擴展群組)。 PK/ 效能模型 ( 小鼠模型 )
亦進行實驗以測定抗PD-L1/TGFβ陷阱分子在腫瘤模型中之效能。使用來自EMT-6異種移植物之效能結果來確立PK/效能模型。所確立之小鼠中之PK模型用於模擬效能實驗設定之抗PD-L1/TGFβ陷阱血漿暴露。所估計之參數報告於表1中。所估計之KC50值為55.3 µg/mL，其代表可達成抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之最大抗腫瘤活性之50%之平均血漿濃度。
模型之基本診斷圖顯示無模型設定誤差。模型預測能夠捕獲腫瘤體積分佈。條件加權殘差為正態分佈，其中均值為0且方差為1，無趨勢。然後使用不同劑量下之人類預測濃度-時間輪廓，使用PK/效能模型來模擬腫瘤生長抑制(TGI)。
表 1 ：抗PD-L1/TGFβ陷阱分子在EMT-6異種移植物小鼠中之小鼠PK/效能模型參數
Figure 108123091-A0304-0001
 基於 PD-L1 佔有率之反應分析 ( 在小鼠模型中 )
使用效能實驗，藉由腫瘤消退或腫瘤停滯對小鼠中之反應進行分析及分類，且已基於整合之PK/RO模型預測PK及PD-L1受體佔有率(RO)。該方法證實，達到腫瘤消退需要抗PD-L1/TGFβ陷阱分子血漿濃度介於40 µg/mL與100 µg/mL之間同時腫瘤中PD-L1 RO高於95%。達到腫瘤停滯需要抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之血漿濃度介於10 µg/mL與40 µg/mL之間同時外周中PD-L1 RO高於95%。
小鼠中之反應分析及預測之PK/RO參見圖7A-7C，其匯總抗PD-L1/TGFβ陷阱分子在小鼠中之PK/RO/效能。在40 µg/mL之血漿濃度下達成95%之PD-L1 RO，其中預期/估計TGI為僅約65%。將濃度增加至40 µg/mL以上使得腫瘤生長抑制額外增加。在約100 µg/mL之平均血漿濃度下達成95%之腫瘤生長抑制。
基於下文所闡述之群體PK模型，需要每兩週投與一次至少500 mg之均一劑量以維持約100 µg/mL之平均濃度，而需要每兩週投與一次約1200 mg之均一劑量以維持約100 µg/mL之Ctrough 。在某些實施例中，向個體投與約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg等)之本揭示內容之蛋白質產品(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)。在某些實施例中，每兩週向個體投與一次約1200 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱分子。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約2400 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱分子。
在實施例中，向個體投與約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg等)之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，向個體投與約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg等)之蛋白質產品，其具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。
在某些實施例中，每兩週向個體投與一次約1200 mg之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約1800 mg之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約2100 mg之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約2400 mg之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。
在某些實施例中，每兩週向個體投與一次約1200 mg之蛋白質產品，其包括包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約1800 mg之蛋白質產品，其包括包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約2100 mg之蛋白質產品，其包括包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週向個體投與一次約2400 mg之蛋白質產品，其包括包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。 確立體重獨立性投藥方案
藉由臨床及臨床前資料得知，已創建用於投與抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之新的體重獨立性投藥方案，以達成與mg/kg投藥相比較少之暴露可變性，降低投藥誤差，減少劑量製備所必需之時間且降低藥物浪費，由此促進有利之治療結果。根據一實施例，可投與至少500 mg之均一劑量，而不管患者之體重如何。根據另一實施例，可投與至少1200 mg之均一劑量，而不管患者之體重如何。根據另一實施例，可投與1800 mg之均一劑量，而不管患者之體重如何。通常，此等劑量將重複投與，例如每兩週一次或每3週一次。舉例而言，可每兩週投與一次1200 mg之均一劑量，或可每三週投與一次1800 mg、2100 mg或2400 mg之均一劑量。 人類中之藥物動力學 (PK) 分析取樣
下文所闡述之實驗提供測定抗PD-L1/TGFβ陷阱之最佳均一劑量之藥物動力學分析之實例。
在第一劑量開始之前及在第一劑量後之以下時間點收集用於藥物動力學(PK)資料分析之血清樣品：在第1天緊接輸注之後及在輸注開始後4小時；在第2天在第1天輸注結束後至少24小時；及在第8天及第15天。在所選後續投藥情形中，在第15天、第29天、第43天收集投藥前、輸注結束及輸注結束後2至8小時之樣品。對於第57天、第71天及第85天之後期時間點，收集或將要收集投藥前樣品，之後為每6週一次之PK取樣直至12週，然後每12週一次之PK取樣。在擴展階段，進行稀疏PK取樣。
使用上文所闡述之PK資料來產生群體PK模型且實施可能之投藥方案之模擬。將Gastonguay, M.，Full Covariate Models as an Alternative to Methods Relying on Statistical Significance for Inferences about Covariate Effects: A Review of Methodology and 42 Case Studies , (2011)第20頁，摘要2229中所闡述之稱為全方法模型之建模方法應用於自模擬獲得之群體模型資料以獲得具有以下特徵之參數：具有線性消除之2室PK模型、針對CL、V1及V2之IIV、組合加性及成比例殘餘誤差、針對CL及V1之全共變量模型。最終模型中包括以下基線共變量：年齡、體重、性別、種族、白蛋白、CRP、血小板計數、eGFR、肝損傷、ECOG評分、腫瘤大小、腫瘤類型及利用生物製劑之先前治療。獲得本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)之藥物動力學之典型參數估計值之以下估計值：清除率(CL) 0.0177 L/h (6.2%)、中央分佈體積(V1) 3.64 L (8.81%)、外周分佈體積(V2) 0.513 L (25.1%)及室間清除率(Q) 0.00219 L/h (17.8%)。CL之患者間可變性為22%，V1之患者間可變性為20%且V2之患者間可變性為135%。體重係CL及V1二者之相關共變量。為支持均一劑量投藥方法，探索投藥策略對本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)之暴露可變性之影響。具體而言，使用每兩週一次1200 mg之均一劑量投藥方法對每兩週一次17.65 mg/kg (對應於對於68 kg個體每兩週一次1200 mg)或每兩週一次15 mg/kg (對應於對於80 kg個體1200 mg)之BW調整投藥方法實施模擬以比較暴露分佈。使用每兩週一次500 mg之均一劑量投藥方法對每兩週一次7.35 mg/kg之BW調整投藥方法(對應於對於68 kg個體每兩週一次500 mg)實施進一步模擬以比較暴露分佈。另外，實施模擬以評價每三週一次之以下均一劑量：1200 mg、1400 mg、1600 mg、1800 mg、2000 mg、2200 mg、2400 mg、2600 mg、2800 mg、3000 mg。
使用以下用於模擬之方法：使用最終PK模型方差-協方差矩陣，自參數估計值之多變量正態分佈抽取N=200組參數估計值。對於每一參數估計值，自$OMEGA多變量正態分佈抽取200個IIV估計值，得到總計40000 (200 × 200)個主體。對原始資料集(N=380)進行重新取樣並替換，以生成40000組匹配共變量，且針對每一投藥方案生成穩態暴露度量(AUC、Cavg 、Ctrough 及Cmax )。
模擬顯示，在寬BW範圍中，基於BW之投藥之暴露可變性與固定投藥相比略高。對於68 kg之中值體重，在17.65 mg/kg及1200 mg均一劑量或7.35 mg/kg及500 mg均一劑量下之暴露分佈之實例分別示於圖6A及6E中。模擬亦顯示在整個患者群體中，跨體重四分位數之暴露分佈呈相反趨勢：低體重患者在固定投藥之情形下具有較高暴露，而高體重患者在BW調整投藥之情形下具有較高暴露。 在人類中確立有效劑量 / 投藥方案：在每 2 週一次 (q2w) 抗 PD-L1/ TGFβ 陷阱投藥後，第 2 線非小細胞肺癌 (2L NSCLC) 中之初步劑量反應
藉由下文所闡述之臨床研究確立抗PD-L1/TGFβ陷阱之治療效能之實例。
將在第1線標準治療(無先前免疫療法)後進展之未針對PD-L1進行選擇之患有晚期NSCLC之患者隨機化以每兩週一次(q2w)接受500 mg或1200 mg之本揭示內容之抗PD-L1/TGFβ陷阱(每個群組n=40)，直至疾病進展、毒性不可接受或試驗退出為止。主要目標係根據實體腫瘤中之反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors) 1.1版(RECIST v1.1)評價最佳總體反應(BOR)。其他目標包括劑量探索及安全性/耐受性評價。將腫瘤細胞PD-L1表現程度(Ab純系73-10 (Dako) [＞80% = Ab純系22C3 (Dako) ＞50%])表徵為PD-L1 ＜1%、≥1% (PD-L1+)或≥80% (PD-L1高)。可在75名患者中評估腫瘤細胞PD-L1表現。
截至分析時之資料截止點，80名患者接受抗PD-L1/TGFβ陷阱達11.9週之中值時間(範圍，2-66.1)，其中隨訪中值時間為51.1週。10名患者仍在接受治療。研究者評價確認之總體反應率(ORR)為23.8% (500 mg ORR, 20.0%；1200 mg ORR, 27.5%)，其中跨越兩個劑量量觀察到18個部分反應(PR)，且在1200 mg下觀察到1個完全反應(CR)。如表2中所示，跨越PD-L1表現程度觀察到臨床活性：在1200 mg下，在PD-L1+中ORR為37.0%且在PD-L1高患者中ORR為85.7%。最常見之治療相關不良事件(TRAE)係搔癢症(20.0%)、斑狀丘疹(18.8%)及食欲下降(12.5%)。在23名患者(28.8%)中發生3級TRAE，且在2名患者中發生4級TRAE。8名患者(500 mg, n=2；1200 mg, n=6)由於TRAE而中斷治療。未發生治療相關之死亡。
表 2 ： 在每2週一次利用500 mg或1200 mg抗PD-L1/TGFβ陷阱治療之2L NSCLC患者中觀察到之反應率
Figure 108123091-A0304-0002
該等結果展現，抗PD-L1/TGFβ陷阱單一療法耐受性良好且顯示跨越PD-L1子組之效能，其中在1200 mg下，在PD-L1+及PD-L1高患者中，ORR分別為37.0%及85.7%。鑒於在較高之PD-L1腫瘤細胞表現(例如以1200 mg治療之患者)下反應率顯著改良，作為2L治療觀察到之此有希望之抗PD-L1/TGFβ陷阱活性預期在初次接受治療PD-L1高或PD-L1非依賴性NSCLC患者中轉化或提升為第一線(1L)療法。確立各種投藥頻率之投藥方案
已創建各種投藥頻率之資料方案以容許較低頻率之投與及/或容許合併用藥之協調投藥時間表。具體而言，已使用上文所闡述之初步群體PK建模及模擬方法來模擬各種投藥方案之暴露及比較基於暴露之方案。
基於該等模擬，對於典型個體，需要每兩週投與一次至少500 mg之均一劑量以維持約100 µg/mL之平均濃度，而需要每兩週投與一次約1200 mg之均一劑量以維持約100 µg/mL之Ctrough 。
基於針對Cavg 之模擬，每兩週一次1200 mg相當於每三週一次1800 mg，而對於Ctrough ，每兩週一次1200 mg相當於每三週一次2400 mg。且對於Cavg ，每兩週一次500 mg相當於每三週一次750 mg；對於Ctrough ，每兩週一次500 mg相當於每三週一次1,167 mg。
對於抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學療法(其經常以每三週一次時間表投與)之同時投與，選擇每三週一次2400 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱作為Ib/II期劑量。對於每三週一次劑量之選擇，穩態下投藥間隔內之Ctrough,ss 及平均濃度應與在每兩週一次1200 mg投藥之情形下所達成者類似或更高，且大多數患者之Ctrough,ss 應高於50 μg/mL之目標濃度。預期每三週一次2400 mg投藥之投藥間隔內之中值穩態濃度為大約328 μg/mL。預期每兩週一次1200 mg投藥之投藥間隔內之中值穩態濃度為大約246 μg/mL。TGFβ 作為癌症靶標
本揭示內容允許藉由使用可溶性細胞介素受體(TGFβRII)捕獲TGFβ來局部減少腫瘤微環境中之TGFβ，該可溶性細胞介素受體(TGFβRII)系鏈至靶向在某些腫瘤細胞或免疫細胞外表面上發現之細胞免疫檢查點受體之抗體部分。本揭示內容之針對免疫檢查點蛋白之抗體部分之實例係抗PD-L1。本揭示內容之雙功能分子(有時在本文中稱為「抗體-細胞介素阱」)正由於抗受體抗體與細胞介素阱係物理連接的而係有效的。由此而產生之優點(相比於例如將抗體及受體作為單獨分子投與)部分係由於細胞介素主要在局部環境中經由自分泌及旁分泌功能起作用。抗體部分藉由中和局部免疫抑制自分泌或旁分泌效應將細胞介素阱引導至腫瘤微環境，在此其可最有效。此外，在其中抗體靶標在抗體結合時內化之情形下，提供清除細胞介素/細胞介素受體複合物之有效機制。顯示PD-L1之抗體介導之靶標內化，且抗PD-L1/TGFβ陷阱顯示具有與抗PD-L1類似之內化率。此係優於使用抗TGFβ抗體之獨特優點，此乃因第一，抗TGFβ抗體可能不係完全中和的；且第二，抗體可作為延長細胞介素半衰期之載體。
實際上，如下文所闡述，由於同時阻斷腫瘤細胞上之PD-L1與免疫細胞上之PD-1之間的相互作用且中和腫瘤微環境中之TGFβ，利用抗PD-L1/TGFβ陷阱進行治療引發協同抗腫瘤效應。不受限於理論，此大概係由於自同時阻斷兩種主要之免疫逃逸機制且另外由單一分子實體耗竭腫瘤微環境中之TGFβ而獲得之協同效應。此耗竭係藉由以下來達成：(1) 抗PD-L1靶向腫瘤細胞；(2) TGFβ陷阱結合腫瘤微環境中之TGFβ自分泌物/旁分泌物；及(3) 經由PD-L1受體介導之胞吞作用破壞結合之TGFβ。此外，TGFβRII融合至Fc (IgG之結晶片段)之C末端較TGFβRII置於Fc之N末端之TGFβRII-Fc強效若干倍。
TGFβ由於其作為癌症之分子雙面怪(Jekyll and Hyde)之矛盾性作用而在癌症免疫療法中一直係有些可疑之靶標(Bierie等人，Nat. Rev. Cancer , 2006;6:506-20)。如同一些其他細胞介素，TGFβ活性依賴於發育階段及環境。實際上，TGFβ可作為腫瘤促進劑或腫瘤抑制劑，從而影響腫瘤起始、進展及轉移。TGFβ之此雙重作用之潛在機制尚不明確(Yang等人，Trends Immunol. 2010;31:220-227)。儘管已假定Smad依賴性信號傳導介導TGFβ信號傳導之生長抑制，而Smad非依賴性路徑有助於其腫瘤促進效應，但亦有資料顯示Smad依賴性路徑參與腫瘤進展(Yang等人，Cancer Res. 2008;68:9107-11)。
已深入研究TGFβ配體及受體二者作為治療靶標。存在三種配體同種型，即TGFβ1、2及3，其全部均作為同二聚體存在。亦存在三種TGFβ受體(TGFβR)，其稱為I型、II型及III型TGFβR (López-Casillas等人，J. Cell Biol. 1994;124:557-68)。TGFβRI在信號傳導鏈中且不能結合配體。TGFβRII以高親和力結合配體TGFβ1及3，但不以高親和力結合TGFβ2。TGFβRII/TGFβ複合物募集TGFβRI以形成信號傳導複合物(Won等人，Cancer Res. 1999;59:1273-7)。TGFβRIII係TGFβ與其信號傳導受體結合之正向調節劑且以高親和力結合所有3種TGFβ同種型。在細胞表面上，TGFβ/TGFβRIII複合物結合TGFβRII且然後募集TGFβRI，其取代TGFβRIII以形成信號傳導複合物。
儘管該三種不同TGFβ同種型均經由相同受體發出信號，但已知其在活體內具有差異表現模式及非重疊之功能。該三種不同TGF-β同種型剔除小鼠具有不同表型，此指示多種非補償性功能(Bujak等人，Cardiovasc. Res. 2007;74:184-95)。雖然TGFβ1缺失小鼠具有造血及血管發生缺陷且TGFβ3缺失小鼠展示肺發育及有缺陷之齶發生，但TGFβ2缺失小鼠顯示各種發育異常，最突出者為多發性心臟畸形(Bartram等人，Circulation 2001;103:2745-52；Yamagishi等人，Anat. Rec. 2012;295:257-67)。此外，TGFβ涉及在缺血及再灌注損傷後之心肌損害修復中起主要作用。在成人心臟中，心肌細胞分泌TGFβ，其作為自分泌物以維持自發搏動速率。重要的是，心肌細胞所分泌TGFβ之70%-85%為TGFβ2 (Roberts等人，J. Clin. Invest. 1992;90:2056-62)。儘管利用TGFβRI激酶抑制劑進行治療產生心臟毒性問題，但本申請人已觀察到抗PD-L1/TGFβ陷阱在猴中缺乏毒性、包括心臟毒性。
中和TGFβ之治療方法包括使用TGFβ受體之細胞外結構域作為可溶性受體阱且中和抗體。在受體阱方法中，可溶性TGFβRIII由於其結合所有該三種TGFβ配體而似乎可係明顯選擇。然而，作為280-330 kD葡糖胺聚醣(GAG)-醣蛋白天然存在且細胞外結構域為762個胺基酸殘基之TGFβRIII係用於生物治療劑開發之極複雜蛋白質。不含GAG之可溶性TGFβRIII可在昆蟲細胞中產生，且已顯示為強效TGFβ中和劑(Vilchis-Landeros等人，Biochem. J. , (2001), 355:215)。TGFβRIII之兩個單獨結合結構域(內皮糖蛋白相關及尿調節素相關)可獨立地表現，但其親和力顯示較可溶性TGFβRIII之親和力低20至100倍，且中和活性顯著減弱(Mendoza等人，Biochemistry 2009;48:11755-65)。另一方面，TGFβRII之細胞外結構域之長度僅為136個胺基酸殘基，且可作為25-35 kD之醣基化蛋白質產生。進一步顯示重組可溶性TGFβRII以200 pM之KD 結合TGFβ1，此與細胞上全長TGFβRII之50 pM之KD 非常類似(Lin等人，J. Biol. Chem . 1995;270:2747-54)。作為抗癌劑測試可溶性TGFβRII-Fc，且其顯示抑制腫瘤模型中已確立之鼠類惡性間皮瘤生長(Suzuki等人，Clin.Cancer Res ., 2004; 10:5907-18)。由於TGFβRII不結合TGFβ2，且TGFβRIII以低於TGFβRII之親和力結合TGFβ1及3，因此TGFβRIII之內皮糖蛋白結構域及TGFβRII之細胞外結構域之融合蛋白在細菌中產生且在基於細胞之分析中顯示較TGFβRII或RIII更有效地抑制TGFβ1及2之信號傳導(Verona等人，Protein Eng’g. Des. Sel. 2008;21:463-73)。
中和TGFβ配體之所有三種同種型之另一方法係篩選泛中和性抗TGFβ抗體或阻斷受體結合至TGFβ1、2及3之抗受體抗體。GC1008係對於TGFβ之所有同種型均具有特異性之人類抗體，其處於患有晚期惡性黑色素瘤或腎細胞癌之患者之I/II期研究中(Morris等人，J. Clin. Oncol . 2008;26:9028 (會議摘要))。儘管發現治療安全且耐受性良好，但僅觀察到有限之臨床效能，且因此在不進一步表徵免疫效應之情形下將難以解釋抗TGFβ療法之重要性(Flavell等人，Nat. Rev. Immunol . 2010;10:554-67)。在診療所中亦測試TGFβ同種型特異性抗體。美替木單抗(Metelimumab)係TGFβ1特異性抗體，其在2期臨床試驗中作為對預防青光眼手術之手術後過度結瘢之治療進行測試；且樂德木單抗(Lerdelimumab)係TGFβ2特異性抗體，在3期研究中發現其安全但在改良眼部手術後之結瘢方面無效(Khaw等人，Ophthalmology 2007;114:1822-1830)。阻斷受體結合至所有三種TGFβ同種型之抗TGFβRII抗體(例如抗人類TGFβRII抗體TR1及抗小鼠TGFβRII抗體MT1)亦已在小鼠模型中顯示出一些抵抗原發性腫瘤生長及轉移之治療效能(Zhong等人，Clin.Cancer Res . 2010;16:1191-205)。然而，在最近抗體TR1 (LY3022859)之I期研究中，儘管進行預防性治療，但由於不受控制之細胞介素釋放，故超過25 mg (均一劑量)之劑量遞增視為不安全的(Tolcher等人，Cancer Chemother. Pharmacol. 2017;79:673-680)。迄今為止，關於TGFβ標靶性抗癌治療之絕大多數研究、包括通常具有相當毒性之TGFβ信號傳導之小分子抑制劑大部分處於臨床前階段，且所獲得之抗腫瘤效能受限(Calone等人，Exp Oncol. 2012;34:9-16；Connolly等人，Int. J. Biol. Sci. 2012;8:964-78)。
本揭示內容之抗體-TGFβ陷阱係雙功能蛋白質，其含有能夠結合TGFβ之人類TGFβ受體II (TGFβRII)之至少一部分。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽係能夠結合TGFβ之2型人類TGFβ受體同種型A之可溶性部分(SEQ ID NO: 8)。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽至少含有SEQ ID NO: 8之胺基酸73-184。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽含有SEQ ID NO: 8之胺基酸24-184。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽係能夠結合TGFβ之2型人類TGFβ受體同種型B之可溶性部分(SEQ ID NO: 9)。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽至少含有SEQ ID NO: 9之胺基酸48-159。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽含有SEQ ID NO: 9之胺基酸24-159。在某些實施例中，TGFβ陷阱多肽含有SEQ ID NO: 9之胺基酸24-105。在某些例示性實施例中，TGFβ陷阱多肽含有SEQ ID NO: 10、50、51、52、53或54之序列。
在另一實施例中，本揭示內容之抗體-TGFβ陷阱係WO 2018/205985中所揭示融合蛋白中之一者。在一些實施例中，融合蛋白係此公開案之表2中所列示構築體中之一者，例如其構築體9或15。在其他實施例中，此公開案之具有SEQ ID NO: 11之重鏈序列及SEQ ID NO: 12之輕鏈序列[分別對應於本揭示內容之SEQ ID NO: 61及62]之抗體經由連接序列(G4 S)x G (其中x係4至5)融合至該公開案之SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 15 [分別對應於本揭示內容之SEQ ID NO: 50及51]之TGFβRII細胞外結構域序列。作用機制
靶向T細胞抑制檢查點用以使治療性抗體去抑制之方法係深入研究之領域(對於綜述，參見Pardoll，Nat. Rev. Cancer 2012; 12:253-264)。在一種方法中，抗體部分或其抗原結合片段靶向T細胞上之T細胞抑制檢查點受體蛋白質，例如：CTLA-4、PD-1、BTLA、LAG-3、TIM-3或LAIR1。在另一方法中，抗體部分靶向抗原呈遞細胞及腫瘤細胞上之反受體(該等細胞共同選擇該等反受體中之一些以用於其自身免疫逃避)，例如：PD-L1 (B7-H1)、B7-DC、HVEM、TIM-4、B7-H3或B7-H4。
本揭示內容涵蓋抗體TGFβ陷阱，該等抗體TGFβ陷阱經由其抗體部分或其抗原結合片段靶向T細胞抑制檢查點以供去抑制。為此，申請人已測試將TGFβ陷阱與靶向各種T細胞抑制檢查點受體蛋白質之抗體(例如抗PD-1、抗PD-L1、抗TIM-3及抗LAG3)組合之抗腫瘤效能。
程式化死亡1 (PD-1)/PD-L1軸係腫瘤免疫逃避之重要機制。長期感應抗原之效應T細胞呈現由PD-1表現標記之衰竭表型，一種腫瘤細胞藉由上調PD-L1參與之狀態。另外，在腫瘤微環境中，骨髓細胞、巨噬細胞、實質細胞及T細胞上調PD-L1。阻斷該軸恢復該等T細胞中之效應功能。抗PD-L1/TGFβ陷阱亦結合TGFβ (1、2及3同種型)，其係在腫瘤微環境中由包括細胞凋亡嗜中性球、骨髓源抑制細胞、T細胞及腫瘤之細胞產生之抑制性細胞介素。可溶性TGFβRII對TGFβ之抑制以與CD8+ T細胞抗腫瘤效應增加相關之方式降低惡性間皮瘤。不存在由活化CD4+ T細胞及Treg細胞所產生之TGFβ1已顯示抑制腫瘤生長，且保護小鼠免於自發性癌症。因此，TGFβ似乎對於腫瘤疫逃避係重要的。
TGFβ對正常上皮細胞具有生長抑制性效應，其作為上皮細胞穩態之調節劑起作用，且其在早期癌形成期間起腫瘤抑制劑之作用。隨著腫瘤朝向惡性病進展，TGFβ對腫瘤之生長抑制性效應經由一或多種TGFβ路徑信號傳導組分中之突變或經由致癌重編程而喪失。在喪失對TGFβ抑制之敏感性後，腫瘤繼續產生高含量之TGFβ，然後其用於促進腫瘤生長。TGFβ細胞介素在各種癌症類型中過表現，其與腫瘤階段相關。腫瘤微環境中之許多細胞類型產生TGFβ，包括腫瘤細胞自身、不成熟之骨髓細胞、調節性T細胞及基質纖維母細胞；該等細胞共同在細胞外基質中產生較大TGFβ儲庫。TGFβ信號傳導藉由促進轉移、刺激血管生成且抑制先天性及適應性抗腫瘤免疫而有助於腫瘤進展。作為廣泛之免疫抑制因子，TGFβ直接下調經活化之細胞毒性T細胞及NK細胞之效應功能且強效地誘導初始CD4+ T細胞向免疫抑制性調節性T細胞(Treg)表型之分化。另外，TGFβ使巨噬細胞及嗜中性球極化為與免疫抑制性細胞介素之產生相關之傷口癒合表型。作為治療策略，藉由恢復有效之抗腫瘤免疫性、阻斷轉移及抑制血管生成，中和TGFβ活性具有控制腫瘤生長之潛能。
本揭示內容提供利用抗PD-L1/TGFβ陷阱分子與標準化學治療劑之組合之標靶性TGF-β抑制之劑量方案，其用於治療經診斷患有晚期NSCLC之初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體之方法中。所治療之晚期NSCLC可係鱗狀或非鱗狀NSCLC，且與基線PD-L1表現程度無關。
伴隨阻斷PD-1及TGFβ可恢復促發炎細胞介素。抗PD-L1/TGFβ陷阱包括(例如)人類TGFβ受體TGFβRII之細胞外結構域，其經由甘胺酸/絲胺酸連接體共價接合至全人類IgG1抗PD-L1抗體之每一重鏈之C末端。鑒於其中反應明顯但效應大小仍有增加空間之抗PD-1/PD-L1類別之新出現情形，假定共靶向互補免疫調節步驟將改良腫瘤反應。類似之TGF靶向劑夫蘇木單抗(fresolimumab)係靶向TGFβ1、2及3之單株抗體，其在患有黑色素瘤之個體之I期試驗中顯示出腫瘤反應之初步證據。
本揭示內容所提供之實驗展現抗PD-L1/TGFβ陷阱(阱對照「抗PDL-1(mut)/ TGFβ陷阱」)之TGFβRII部分引發抗腫瘤活性。舉例而言，在Detroit 562人類咽癌模型中皮下植入後，抗PDL1(mut)/ TGFβ陷阱在以25 µg、76 µg或228 µg投與時引發腫瘤體積之劑量依賴性降低(圖 5 )。
本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質同時結合至PD-L1及TGFβ二者(圖 2 )。
本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)在活體外抑制PD-L1及TGFβ依賴性信號傳導。本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質在活體外經由阻斷PD-L1介導之免疫抑制增強T細胞效應功能，如藉由在超抗原刺激後之IL-2誘導分析所量測(圖 3 )。在大約100 ng/ml下，本揭示內容之蛋白質在活體外誘導IL-2含量之急劇增加(圖 3 )。
本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)在活體內引起來自血液之TGFβ耗竭。利用55 µg或164 µg或492 µg本揭示內容之蛋白質處理JH小鼠中正位植入之EMT-6乳癌細胞使得TGFβ1有效且特異性耗竭(圖 4A )、TGFβ2 (圖 4B )及TGFβ3 (圖 4C )。此外，本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質佔據PD-L1靶標，此支持本揭示內容之蛋白質適合EMT-6腫瘤系統中之受體結合模型之觀念(圖 4D )。
本揭示內容所提供之實驗展現本揭示內容之蛋白質有效地、特異性地且同時結合至PD-L1及TGFβ，在多種小鼠模型中具有強效抗腫瘤活性，抑制腫瘤生長及轉移，且延長存活(例如長達且包括6個月、12個月、18個月、22個月、28個月、32個月、38個月、44個月、50個月、56個月、62個月、68個月、74個月、80個月、86個月、92個月、98個月、104個月或110個月之存活)且賦予長期保護性抗腫瘤免疫性。在某些實施例中，延長存活係至少108個月。 抗PD-L1抗體
本揭示內容之抗PD-L1/TGFβ陷阱分子可包括業內所闡述之任一抗PD-L1抗體或其抗原結合片段。抗PD-L1抗體可商業購得，例如29E2A3抗體(Biolegend，目錄號329701)。抗體可係單株、嵌合、人類化或人類的。抗體片段包括Fab、F(ab’)2、scFv及Fv片段，其在下文中進一步詳細闡述。
例示性抗體闡述於PCT公開案WO 2013/079174中。該等抗體可包括重鏈可變區多肽，該重鏈可變區多肽包括HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3序列，其中： (a) 該HVR-H1序列係X1 YX2 MX3 (SEQ ID NO: 21)； (b) 該HVR-H2序列係SIYPSGGX4 TFYADX5 VKG (SEQ ID NO: 22)； (c) 該HVR-H3序列係IKLGTVTTVX6 Y (SEQ ID NO: 23)； 此外其中：X1 係K、R、T、Q、G、A、W、M、I或S；X2 係V、R、K、L、M或I；X3 係H、T、N、Q、A、V、Y、W、F或M；X4 係F或I；X5 係S或T；X6 係E或D。
在一個實施例中，X1 係M、I或S；X2 係R、K、L、M或I；X3 係F或M；X4 係F或I；X5 係S或T；X6 係E或D。
在另一實施例中，X1 係M、I或S；X2 係L、M或I；X3 係F或M；X4 係I；X5 係S或T；X6 係D。
在另一實施例中，X1 係S；X2 係I；X3 係M；X4 係I；X5 係T；X6 係D。
在另一態樣中，多肽進一步包括根據下式並置在HVR之間的可變區重鏈框架序列：(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)。
在另一態樣中，框架序列源自人類共有框架序列或人類種系框架序列。
在另一態樣中，框架序列中之至少一者係以下： HC-FR1係EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS (SEQ ID NO: 24)； HC-FR2係WVRQAPGKGLEWVS (SEQ ID NO: 25)； HC-FR3係RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 26)； HC-FR4係WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 27)。
在另一態樣中，重鏈多肽進一步與可變區輕鏈組合，該可變區輕鏈包括HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其中： (a) 該HVR-L1序列係TGTX7 X8 DVGX9 YNYVS (SEQ ID NO: 28)； (b) 該HVR-L2序列係X10 VX11×12 RPS (SEQ ID NO: 29)； (c) 該HVR-L3序列係SSX13 TX14 X15×16 X17 RV (SEQ ID NO: 30)； 此外其中：X7 係N或S；X8 係T、R或S；X9 係A或G；X10 係E或D；X11 係I、N或S；X12 係D、H或N；X13 係F或Y；X14 係N或S；X15 係R、T或S；X16 係G或S；X17 係I或T。
在另一實施例中，X7 係N或S；X8 係T、R或S；X9 係A或G；X10 係E或D；X11 係N或S；X12 係N；X13 係F或Y；X14 係S；X15 係S；X16 係G或S；X17 係T。
在另一實施例中，X7 係S；X8 係S；X9 係G；X10 係D；X11 係S；X12 係N；X13 係Y；X14 係S；X15 係S；X16 係S；X17 係T。
在另一態樣中，輕鏈進一步包括根據下式並置在HVR之間的可變區輕鏈框架序列：(LC-FR1MHVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
在另一態樣中，輕鏈框架序列源自人類共有框架序列或人類種系框架序列。
在另一態樣中，輕鏈框架序列係λ輕鏈序列。
在另一態樣中，框架序列中之至少一者係以下： LC-FR1係QSALTQPASVSGSPGQSITISC (SEQ ID NO: 31)； LC-FR2係WYQQHPGKAPKLMIY (SEQ ID NO: 32)； LC-FR3係GVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYC (SEQ ID NO: 33)； LC-FR4係FGTGTKVTVL (SEQ ID NO: 34)。
在另一實施例中，本揭示內容提供抗PD-L1抗體或抗原結合片段，其包括重鏈及輕鏈可變區序列，其中： (a) 重鏈包括HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3，此外其中：(i) 該HVR-H1序列係X1 YX2 MX3 (SEQ ID NO: 21)；(ii) 該HVR-H2序列係SIYPSGGX4 TFYADX5 VKG (SEQ ID NO: 22)；(iii) 該HVR-H3序列係IKLGTVTTVX6 Y (SEQ ID NO: 23)，且； (b) 輕鏈包括HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，此外其中：(iv) 該HVR-L1序列係TGTX7 X8 DVGX9 YNYVS (SEQ ID NO: 28)；(v) 該HVR-L2序列係X10 VX11×12 RPS (SEQ ID NO: 29)；(vi) 該HVR-L3序列係SSX13 TX14 X15×16 X17 RV (SEQ ID NO: 30)；其中：X1 係K、R、T、Q、G、A、W、M、I或S；X2 係V、R、K、L、M或I；X3 係H、T、N、Q、A、V、Y、W、F或M；X4 係F或I；X5 係S或T；X6 係E或D；X7 係N或S；X8 係T、R或S；X9 係A或G；X10 係E或D；X11 係I、N或S；X12 係D、H或N；X13 係F或Y；X14 係N或S；X15 係R、T或S；X16 係G或S；X17 係I或T。
在一個實施例中，X1 係M、I或S；X2 係R、K、L、M或I；X3 係F或M；X4 係F或I；X5 係S或T；X6 係E或D；X7 係N或S；X8 係T、R或S；X9 係A或G；X10 係E或D；X11 係N或S；X12 係N；X13 係F或Y；X14 係S；X15 係S；X16 係G或S；X17 係T。
在另一實施例中，X1 係M、I或S；X2 係L、M或I；X3 係F或M；X4 係I；X5 係S或T；X6 係D；X7 係N或S；X8 係T、R或S；X9 係A或G；X10 係E或D；X11 係N或S；X12 係N；X13 係F或Y；X14 係S；X15 係S；X16 係G或S；X17 係T。
在另一實施例中，X1 係S；X2 係I；X3 係M；X4 係I；X5 係T；X6 係D；X7 係S；X8 係S；X9 係G；X10 係D；X11 係S；X12 係N；X13 係Y；X14 係S；X15 係S；X16 係S；X17 係T。
在另一態樣中，重鏈可變區包括一或多個如下並置在HVR之間的框架序列：(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)，且輕鏈可變區包括一或多個如下並置在HVR之間的框架序列：(LC-FR1 MHVR-L1 )-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
在另一態樣中，框架序列源自人類共有框架序列或人類種系序列。
在另一態樣中，重鏈框架序列中之一或多者係以下： HC-FR1係EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS (SEQ ID NO: 24)； HC-FR2係WVRQAPGKGLEWVS (SEQ ID NO: 25)； HC-FR3係RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 26)； HC-FR4係WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 27)。
在另一態樣中，輕鏈框架序列係λ輕鏈序列。
在另一態樣中，輕鏈框架序列中之一或多者係以下： LC-FR1係QSALTQPASVSGSPGQSITISC (SEQ ID NO: 31)； LC-FR2係WYQQHPGKAPKLMIY (SEQ ID NO: 32)； LC-FR3係GVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYC (SEQ ID NO: 33)； LC-FR4係FGTGTKVTVL (SEQ ID NO: 34)。
在另一態樣中，重鏈可變區多肽、抗體或抗體片段進一步包括至少CH 1結構域。
在更特定態樣中，重鏈可變區多肽、抗體或抗體片段進一步包括CH 1、CH 2及CH 3結構域。
在另一態樣中，可變區輕鏈、抗體或抗體片段進一步包括CL 結構域。
在另一態樣中，抗體進一步包括CH 1、CH 2、CH 3及CL 結構域。
在另一特定態樣中，抗體進一步包括人類或鼠類恆定區。
在另一態樣中，人類恆定區係選自由以下組成之群：IgG1、IgG2、IgG2、IgG3、IgG4。
在另一特定態樣中，人類或鼠類恆定區係IgG1。
在另一實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體，其中： (a) 重鏈包括HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3，其分別與SYIMM (SEQ ID NO: 35)、SIYPSGGITFYADTVKG (SEQ ID NO: 36)及IKLGTVTTVDY (SEQ ID NO: 37)具有至少80%總體序列一致性，且 (b) 輕鏈包括HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其分別與TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 38)、DVSNRPS (SEQ ID NO: 39)及SSYTSSSTRV (SEQ ID NO: 40)具有至少80%總體序列一致性。
在特定態樣中，序列一致性為81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。
在另一實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體，其中： (a) 重鏈包括HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3，其分別與MYMMM (SEQ ID NO: 41)、SIYPSGGITFYADSVKG (SEQ ID NO: 42)及IKLGTVTTVDY (SEQ ID NO: 37)具有至少80%總體序列一致性，且 (b) 輕鏈包括HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3，其分別與TGTSSDVGAYNYVS (SEQ ID NO: 43)、DVSNRPS (SEQ ID NO: 39)及SSYTSSSTRV (SEQ ID NO: 40)具有至少80%總體序列一致性。
在特定態樣中，序列一致性為81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。
在另一態樣中，在本揭示內容之抗體或抗體片段中，與HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3之序列相比，至少如下藉由加下劃線突出表示之彼等胺基酸保持不變： (a) 在HVR-H1中SY IM M (SEQ ID NO: 35)， (b) 在HVR-H2中SIYPSGGITFYADTVKG (SEQ ID NO: 36)， (c) 在HVR-H3中IKLGTVTTVDY (SEQ ID NO: 37)； 且此外其中，與HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3之序列相比，至少如下藉由加下劃線突出表示之彼等胺基酸保持不變： (a) HVR-L1 TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 38) (b) HVR-L2D VSNRPS (SEQ ID NO: 39) (c) HVR-L3SS YTSSSTRV (SEQ ID NO: 40)。
在另一態樣中，重鏈可變區包括一或多個如下並置在HVR之間的框架序列：(HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)，且輕鏈可變區包括一或多個如下並置在HVR之間的框架序列：(LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
在另一態樣中，框架序列源自人類種系序列。
在另一態樣中，重鏈框架序列中之一或多者係以下： HC-FR1係EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS (SEQ ID NO: 24)； HC-FR2係WVRQAPGKGLEWVS (SEQ ID NO: 25)； HC-FR3係RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 26)； HC-FR4係WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 27)。
在另一態樣中，輕鏈框架序列源自λ輕鏈序列。
在另一態樣中，輕鏈框架序列中之一或多者係以下： LC-FR1係QSALTQPASVSGSPGQSITISC (SEQ ID NO: 31)； LC-FR2係WYQQHPGKAPKLMIY (SEQ ID NO: 32)； LC-FR3係GVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYC (SEQ ID NO: 33)； LC-FR4係FGTGTKVTVL (SEQ ID NO: 34)。
在另一特定態樣中，抗體進一步包括人類或鼠類恆定區。
在另一態樣中，人類恆定區係選自由以下組成之群：IgG1、IgG2、IgG2、IgG3、IgG4。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體，其中： (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMVWRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADWKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 44)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSN RPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVL (SEQ ID NO: 45)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 44具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 45具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 44且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 45。
在某些實施例中，本揭示內容提供包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體，其中： (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSMYMMMWVRQAPGKGLEVWSSIYPSGGITFYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAIYYCARIKLGTVTTVDYWG QGTLVTVSS (SEQ ID NO: 46)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGAYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNR PSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVL (SEQ ID NO: 47)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 46具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 47具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 46且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 47。
在另一實施例中，抗體結合至人類、小鼠或食蟹猴PD-L1。在特定態樣中，抗體能夠阻斷人類、小鼠或食蟹猴PD-L1與各別人類、小鼠或食蟹猴PD-1受體之間的相互作用。
在另一實施例中，抗體以5×10-9 M或更小之KD、較佳地以2×10-9 M或更小之KD且甚至更佳地以1×10-9 M或更小之KD結合至人類PD-L1。
在另一實施例中，本揭示內容係關於抗PD-L1抗體或其抗原結合片段，其結合至功能性表位，該功能性表位包括人類PD-L1之殘基Y56及D61。
在特定態樣中，該功能性表位進一步包括人類PD-L1之E58、E60、Q66、R113及M115。
在更特定態樣中，抗體結合至構形表位，該構形表位包括人類PD-L1之殘基54-66及112-122。
在某些實施例中，本揭示內容係關於抗PD-L1抗體或其抗原結合片段，其與如本文所闡述之本揭示內容抗體交叉競爭結合至PD-L1。
在某些實施例中，本揭示內容係關於蛋白質及多肽，其包括上文所闡述抗PD-L1抗體中之任一者與至少一種醫藥上可接受之載劑之組合。
在某些實施例中，本揭示內容係關於編碼多肽之經分離核酸或如本文所闡述之抗PD-L1抗體或其抗原結合片段之輕鏈或重鏈可變區序列。在某些實施例中，本揭示內容提供編碼抗PD-L1抗體之輕鏈或重鏈可變區序列之經分離核酸，其中： (a) 重鏈包括HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3序列，其分別與SYIMM (SEQ ID NO: 35)、SIYPSGGITFYADTVKG (SEQ ID NO: 36)及IKLGTVTTVDY (SEQ ID NO: 37)具有至少80%序列一致性，或 (b) 輕鏈包括HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3序列，其分別與TGTSSDVGGYNYVS (SEQ ID NO: 38)、DVSNRPS (SEQ ID NO: 39)及SSYTSSSTRV (SEQ ID NO: 40)具有至少80%序列一致性。
在特定態樣中，序列一致性為81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。
在另一態樣中，重鏈之核酸序列係：
Figure 02_image001
(SEQ ID NO: 48) 且輕鏈之核酸序列係：
Figure 02_image003
(SEQ ID NO: 49)。
可用於抗PD-L1/TGFβ陷阱中之其他例示性抗PD-L1抗體闡述於美國專利申請公開案US 2010/0203056中。在本揭示內容之一個實施例中，抗體部分係YW243.55S70。在本揭示內容之另一實施例中，抗體部分係MPDL3289A。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體部分，其中： (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 12)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR (SEQ ID NO: 13)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 12具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 12且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 13。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體部分，其中： (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO: 14)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR (SEQ ID NO: 13)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 14具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 13具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 14且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 13。
可用於抗PD-L1/TGFβ陷阱中之其他例示性抗PD-L1抗體闡述於美國專利申請公開案US 2018/0334504中。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體部分，其中 (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISNDYWTWIRQHPGKGLEYIGYISYTGSTYYNPSLKSRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARSGGWLAPFDYWGRGTLVTVSS (SEQ ID NO: 55)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLFYHSNQKHSLAWYQQKPGQPPKLLIYGASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYGYPYTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 56)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 55具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 56具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 55且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 56。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈可變區序列之抗PD-L1抗體部分，其中 (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGRIGPNSGFTSYNEKFKNRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGGSSYDYFDYWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 57)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIHGTHLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEAEDTANYYCQQSFEDPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO: 58)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 57具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 58具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 57且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 58。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈序列之抗PD-L1抗體部分，其中 (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISNDYWTWIRQHPGKGLEYIGYISYTGSTYYNPSLKSRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARSGGWLAPFDYWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 59)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLFYHSNQKHSLAWYQQKPGQPPKLLIYGASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYGYPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 60)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 59具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 60具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 59且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 60。
在某些實施例中，本揭示內容係關於包括重鏈及輕鏈序列之抗PD-L1抗體部分，其中 (a) 該重鏈序列與以下重鏈序列具有至少85%序列一致性： QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGRIGPNSGFTSYNEKFKNRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGGSSYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGA (SEQ ID NO: 61)，且 (b) 該輕鏈序列與以下輕鏈序列具有至少85%序列一致性： DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIHGTHLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEAEDTANYYCQQSFEDPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 62)。
在各個實施例中，該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少86%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少86%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少87%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少87%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少88%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少88%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少89%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少89%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少90%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少90%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少91%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少91%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少92%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少92%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少93%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少93%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少94%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少94%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少95%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少95%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少96%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少96%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少97%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少97%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少98%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少98%序列一致性；該重鏈序列與SEQ ID NO: 61具有至少99%序列一致性，且該輕鏈序列與SEQ ID NO: 62具有至少99%序列一致性；或該重鏈序列包含SEQ ID NO: 61且該輕鏈序列包含SEQ ID NO: 62。
可用於抗PD-L1/TGFβ陷阱中之其他例示性抗PD-L1抗體闡述於美國專利公開案US 7,943,743中。
在本揭示內容之一個實施例中，抗PD-L1抗體係MDX-1105。
在某些實施例中，抗PD-L1抗體係MEDI-4736。恆定區
本揭示內容之蛋白質及肽可包括免疫球蛋白之恆定區或該恆定區之片段、類似物、變體、突變體或衍生物。在某些實施例中，恆定區源自人類免疫球蛋白重鏈，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其他類別。在某些實施例中，恆定區包括CH2結構域。在某些實施例中，恆定區包括CH2及CH3結構域或包括鉸鏈-CH2-CH3。或者，恆定區可包括鉸鏈區、CH2結構域及/或CH3結構域之全部或一部分。
在一個實施例中，恆定區含有降低對Fc受體之親和力或降低Fc效應功能之突變。舉例而言，恆定區可含有消除IgG重鏈恆定區內之醣基化位點之突變。在一些實施例中，恆定區在對應於IgG1之Leu234、Leu235、Gly236、Gly237、Asn297或Pro331之胺基酸位置處(胺基酸係根據EU命名法來編號)含有突變、缺失或插入。在具體實施例中，恆定區在對應於IgG1之Asn297之胺基酸位置處含有突變。在替代實施例中，恆定區在對應於IgG1之Leu281、Leu282、Gly283、Gly284、Asn344或Pro378之胺基酸位置處含有突變、缺失或插入。
在一些實施例中，恆定區含有源自人類IgG2或IgG4重鏈之CH2結構域。較佳地，CH2結構域含有消除CH2結構域內之醣基化位點之突變。在一個實施例中，突變改變IgG2或IgG4重鏈之CH2結構域內之Gln-Phe-Asn-Ser (SEQ ID NO: 15)胺基酸序列內之天冬醯胺。較佳地，突變使天冬醯胺變為麩醯胺酸。或者，突變改變Gln-Phe-Asn-Ser (SEQ ID NO: 15)胺基酸序列內之苯丙胺酸及天冬醯胺二者。在一個實施例中，Gln-Phe-Asn-Ser (SEQ ID NO: 15)胺基酸序列經Gln-Ala-Gln-Ser (SEQ ID NO: 16)胺基酸序列替代。Gln-Phe-Asn-Ser (SEQ ID NO: 15)胺基酸序列內之天冬醯胺對應於IgG1之Asn297。
在另一實施例中，恆定區包括CH2結構域及鉸鏈區之至少一部分。鉸鏈區可源自免疫球蛋白重鏈，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其他類別。較佳地，鉸鏈區源自人類IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其他適宜類別。更佳地，鉸鏈區源自人類IgG1重鏈。在一個實施例中，IgG1鉸鏈區之Pro-Lys-Ser-Cys-Asp-Lys (SEQ ID NO: 17)胺基酸序列中之半胱胺酸經改變。在某些實施例中，Pro-Lys-Ser-Cys-Asp-Lys (SEQ ID NO: 17)胺基酸序列經Pro-Lys-Ser-Ser-Asp-Lys (SEQ ID NO: 18)胺基酸序列替代。在某些實施例中，恆定區包括源自第一抗體同型之CH2結構域及源自第二抗體同型之鉸鏈區。在某些實施例中，CH2結構域源自人類IgG2或IgG4重鏈，而鉸鏈區源自經改變之人類IgG1重鏈。
改變Fc部分及非Fc部分之接合處附近之胺基酸可顯著地延長Fc融合蛋白之血清半衰期(PCT公開案WO 0158957，其揭示內容係以引用的方式併入本文中)。因此，本揭示內容之蛋白質或多肽之接合區相對於免疫球蛋白重鏈及促紅血球生成素之天然序列可含有改變，其較佳地位於接合點之約10個胺基酸內。該等胺基酸變化可引起疏水性增加。在一個實施例中，恆定區源自其中C末端離胺酸殘基經替代之IgG序列。較佳地，IgG序列之C末端離胺酸經非離胺酸胺基酸(例如丙胺酸或白胺酸)替代，以進一步延長血清半衰期。在另一實施例中，恆定區源自IgG序列，其中恆定區C末端附近之Leu-Ser-Leu-Ser (SEQ ID NO: 19)胺基酸序列經改變以消除潛在之接合T細胞表位。舉例而言，在一個實施例中，Leu-Ser-Leu-Ser (SEQ ID NO: 19)胺基酸序列經Ala-Thr-Ala-Thr (SEQ ID NO: 20)胺基酸序列替代。在其他實施例中，Leu-Ser-Leu-Ser (SEQ ID NO: 19)區段內之胺基酸經其他胺基酸(例如甘胺酸或脯胺酸)替代。在IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其他免疫球蛋白類別分子之C末端附近產生Leu-Ser-Leu-Ser (SEQ ID NO: 19)區段之胺基酸取代之詳細方法已闡述於美國專利公開案第20030166877號中，其揭示內容係以引用的方式併入本文中。
本揭示內容之適宜鉸鏈區可源自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4及其他免疫球蛋白類別。IgG1鉸鏈區具有三個半胱胺酸，其中兩個參與免疫球蛋白之兩條重鏈之間的二硫鍵。該等相同半胱胺酸允許在Fc部分之間形成有效且一致之二硫鍵結。因此，本揭示內容之鉸鏈區源自IgG1，例如人類IgG1。在一些實施例中，使人類IgG1鉸鏈區內之第一半胱胺酸突變為另一胺基酸，較佳地突變為絲胺酸。IgG2同型鉸鏈區具有四個二硫鍵，其往往在重組系統中之分泌期間促進寡聚化及可能不正確之二硫鍵結。適宜鉸鏈區可源自IgG2鉸鏈；前兩個半胱胺酸各自較佳地突變為另一胺基酸。已知IgG4之鉸鏈區低效地形成鏈間二硫鍵。然而，本揭示內容之適宜鉸鏈區可源自IgG4鉸鏈區，較佳地含有增強重鏈源部分間二硫鍵之正確形成之突變(Angal S.等人(1993) Mol.Immunol. , 30:105-8)。
根據本揭示內容，恆定區可含有源自不同抗體同型之CH2及/或CH3結構域及鉸鏈區，例如雜合恆定區。舉例而言，在一個實施例中，恆定區含有源自IgG2或IgG4之CH2及/或CH3結構域及源自IgG1之突變鉸鏈區。或者，在雜合恆定區中使用來自另一IgG亞類之突變鉸鏈區。舉例而言，可使用容許在兩條重鏈之間有效二硫鍵結之IgG4鉸鏈之突變形式。突變鉸鏈亦可源自其中前兩個半胱胺酸各自突變為另一胺基酸之IgG2鉸鏈。此等雜合恆定區之組裝已闡述於美國專利公開案第20030044423號中，其揭示內容係以引用的方式併入本文中。
根據本揭示內容，恆定區可含有一或多個本文所闡述之突變。Fc部分中突變之組合可對於延長雙功能分子之血清半衰期及增加活體內功效具有加性或協同效應。因此，在一個例示性實施例中，恆定區可含有(i) 源自IgG序列之區，其中Leu-Ser-Leu-Ser (SEQ ID NO: 19)胺基酸序列經Ala-Thr-Ala-Thr (SEQ ID NO: 20)胺基酸序列替代；(ii) C末端丙胺酸殘基而非離胺酸；(iii) 源自不同抗體同型之CH2結構域及鉸鏈區，例如IgG2 CH2結構域及經改變之IgG1鉸鏈區；及(iv) 消除IgG2源CH2結構域內之醣基化位點之突變，例如IgG2源CH2結構域內之Gln-Ala-Gln-Ser (SEQ ID NO: 16)胺基酸序列而非Gln-Phe-Asn-Ser (SEQ ID NO: 15)胺基酸序列。 抗體片段
本揭示內容之蛋白質及多肽亦可包括抗體之抗原結合片段。例示性抗體片段包括scFv、Fv、Fab、F(ab’)2 及單一結構域VHH片段，例如駱駝科動物起源之彼等。
單鏈抗體片段亦稱為單鏈抗體(scFv)，其係通常結合抗原或受體之重組多肽；該等片段含有至少一個抗體可變重鏈胺基酸序列(VH )之片段，其在有或沒有一或多個互連連接體之情形下系鏈至至少一個抗體可變輕鏈序列(VL )之片段。此一連接體可係短的撓性肽，其經選擇以確保在VL 及VH 結構域連接後產生正確之三維摺疊以便維持該單鏈抗體片段所源自之全抗體之靶分子結合特異性。通常，VL 或VH 序列之羧基末端藉由此一肽連接體共價連接至互補性VL 及VH 序列之胺基酸末端。單鏈抗體片段可藉由分子選殖、抗體噬菌體展示文庫或類似技術來產生。該等蛋白質可在真核細胞或原核細胞(包括細菌)中產生。
單鏈抗體片段含有具有本說明書中所闡述全抗體之至少一個可變區或CDR但缺少彼等抗體之一些或全部恆定結構域之胺基酸序列。該等恆定結構域對於抗原結合不係必需的，但係構成全抗體結構之主要部分。因此，單鏈抗體片段可克服一些與使用含有一部分或全部恆定結構域之抗體相關之問題。舉例而言，單鏈抗體片段往往不具有生物分子與重鏈恆定區之間不期望之相互作用或其他不需要之生物活性。另外，單鏈抗體片段顯著小於全抗體，且因此可具有較全抗體大之毛細管滲透性，從而容許單鏈抗體片段更有效地定位並結合至靶標抗原結合位點。而且，抗體片段可在原核細胞中以相對較大之規模產生，從而促進其生產。此外，單鏈抗體片段之相對較小之大小使得其與全抗體相比較不可能在接受者中引發免疫反應。
亦可存在與全抗體具有相同或相當結合特性之抗體片段。此等片段可含有一個或兩個Fab片段或F(ab’)2 片段。抗體片段可含有全抗體之所有六個CDR，但含有少於所有此等區(例如三個、四個或五個CDR)之片段亦具有功能性。 醫藥組合物
本揭示內容亦係關於醫藥組合物，其含有治療有效量之本文所闡述蛋白質。該組合物可經調配用於多種藥物遞送系統中。該組合物中亦可包括一或多種生理上可接受之賦形劑或載劑用於適當調配。用於本揭示內容中之適宜調配物參見Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, Pa.，第17版，1985。關於藥物遞送方法之簡單綜述，參見(例如) Langer (Science 249:1527-1533, 1990)。
在一態樣中，本揭示內容提供靜脈內藥物遞送調配物，其用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中，該調配物包括500 mg - 2400 mg之包括第一多肽及第二多肽之蛋白質，該第一多肽包括：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段，該第二多肽包括結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且該第一多肽之重鏈及該第二多肽之輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
在某些實施例中，本揭示內容之蛋白質產品包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，本揭示內容之蛋白質產品包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。
在本揭示內容之某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之靜脈內藥物遞送調配物可包括約1200 mg至約2400 mg劑量(例如約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至2400 mg、約1400 mg至2400 mg、約1500 mg至2400 mg、約1600 mg至2400 mg、約1700 mg至2400 mg、約1800 mg至2400 mg、約1900 mg至2400 mg、約2000 mg至2400 mg、約2100 mg至2400 mg、約2200 mg至2400 mg或約2300 mg至2400 mg)之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括約2100 mg至約2000 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括約2100 mg劑量之本揭示內容之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括2100 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括約1200 mg劑量之本揭示內容之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括1200 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括約1800 mg劑量之本揭示內容之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括1800 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。
在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括約2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質產品，其具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))。
在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括1800 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括2100 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽))。在某些實施例中，靜脈內藥物遞送調配物可包括2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽))。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之靜脈內藥物遞送調配物可包括約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg、約2900 mg至約3000 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg、約2500 mg、約2600 mg、約2700 mg、約2800 mg、約2900 mg或約3000 mg)之本揭示內容之蛋白質產品(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)。在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之靜脈內藥物遞送調配物可包括約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg、約2900 mg至約3000 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg、約2500 mg、約2600 mg、約2700 mg、約2800 mg、約2900 mg或約3000 mg)具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之靜脈內藥物遞送調配物可包括約1200 mg、約1225 mg、約1250 mg、約1275 mg、約1300 mg、約1325 mg、約1350 mg、約1375 mg、約1400 mg、約1425 mg、約1450 mg、約1475 mg、約1500 mg、約1525 mg、約1550 mg、約1575 mg、約1600 mg、約1625 mg、約1650 mg、約1675 mg、約1700 mg、約1725 mg、約1750 mg、約1775 mg、約1800 mg、約1825 mg、約1850 mg、約1875 mg、約1900 mg、約1925 mg、約1950 mg、約1975 mg、約2000 mg、約2025 mg、約2050 mg、約2075 mg、約2100 mg、約2125 mg、約2150 mg、約2175 mg、約2200 mg、約2225 mg、約2250 mg、約2275 mg、約2300 mg、約2325 mg、約2350 mg、約2375 mg或約2400 mg之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包含含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽)。
用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之本揭示內容之靜脈內藥物遞送調配物可含於袋、筆或注射器中。在某些實施例中，袋可連接至包含管及/或針之通道。在某些實施例中，調配物可係凍乾調配物或液體調配物。在某些實施例中，調配物可冷凍乾燥(凍乾)且含於約12至60個小瓶中。在某些實施例中，調配物可經冷凍乾燥，且可將約45 mg冷凍乾燥調配物含於一個小瓶中。在某些實施例中，可將約40 mg至約100 mg冷凍乾燥調配物含於一個小瓶中。在某些實施例中，將來自12個、27個或45個小瓶之冷凍乾燥調配物合併以在靜脈內藥物調配物中獲得治療劑量之蛋白質。在某些實施例中，調配物可係以下物質之液體調配物：具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品，且儲存為約250 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶(例如約250 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1900 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1800 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1700 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1600 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1500 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1400 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1300 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1200 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1100 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約1000 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約900 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約800 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約700 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約600 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約500 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約400 mg/小瓶、約250 mg/小瓶至約300 mg/小瓶、約300 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約400 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約500 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約600 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約700 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約800 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約900 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1000 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1100 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1200 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1300 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1400 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1500 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1600 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1700 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶、約1800 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶或約1900 mg/小瓶至約2000 mg/小瓶)。在某些實施例中，調配物可係液體調配物且儲存為約600 mg/小瓶。在某些實施例中，調配物可係液體調配物且儲存為約1200 mg/小瓶。在某些實施例中，調配物可係液體調配物且儲存為約1800 mg/小瓶。在某些實施例中，調配物可係液體調配物且儲存為約2400 mg/小瓶。在某些實施例中，調配物可係液體調配物且儲存為約250 mg/小瓶。
本揭示內容提供液體水性醫藥調配物，其在緩衝溶液中包括治療有效量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱)，從而形成用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之調配物。
該等用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之組合物可藉由習用滅菌技術來滅菌，或可經無菌過濾。所得水溶液可經包裝以按原樣使用或凍乾，在投與之前將凍乾製劑與無菌水性載劑合併。製劑之pH通常將介於3與11之間、更佳地介於5與9之間或介於6與8之間且最佳地介於7與8之間，例如7至7.5。可將呈固體形式之所得組合物包裝於多個單一劑量單元中，每一單元含有固定量之上文所提及之一或多種藥劑。亦可將呈固體形式之組合物包裝於用於靈活量之容器中。
在某些實施例中，本揭示內容提供具有延長儲放壽命之調配物，其用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中，該調配物包括本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))與甘露醇、檸檬酸一水合物、檸檬酸鈉、磷酸氫二鈉二水合物、磷酸二氫鈉二水合物、氯化鈉、聚山梨醇酯80、水及氫氧化鈉之組合。
在某些實施例中，製備用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之水性調配物，其包括於pH緩衝溶液中之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。本發明緩衝液之pH可在約4至約8範圍內，例如約4至約8、約4.5至約8、約5至約8、約5.5至約8、約6至約8、約6.5至約8、約7至約8、約7.5至約8、約4至約7.5、約4.5至約7.5、約5至約7.5、約5.5至約7.5、約6至約7.5、約6.5至約7.5、約4至約7、約4.5至約7、約5至約7、約5.5至約7、約6至約7、約4至約6.5、約4.5至約6.5、約5至約6.5、約5.5至約6.5、約4至約6.0、約4.5至約6.0、約5至約6或約4.8至約5.5，或可具有約5.0至約5.2之pH。在以上所列舉pH中間之範圍亦意欲係本揭示內容之一部分。舉例而言，意欲包括使用以上所列舉值中之任一者之組合作為上限及/或下限之值的範圍。將pH控制在此範圍內之緩衝液之實例包括乙酸鹽(例如乙酸鈉)、琥珀酸鹽(例如琥珀酸鈉)、葡萄糖酸鹽、組胺酸、檸檬酸鹽及其他有機酸緩衝液。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之調配物包括含有檸檬酸鹽及磷酸鹽以將pH維持在約4至約8範圍內之緩衝系統。在某些實施例中，pH範圍可為約4.5至約6.0或約pH 4.8至約5.5，或在約5.0至約5.2之pH範圍內。在某些實施例中，緩衝系統包括檸檬酸一水合物、檸檬酸鈉、磷酸氫二鈉二水合物及/或磷酸二氫鈉二水合物。在某些實施例中，緩衝系統包括約1.3 mg/ml檸檬酸(例如1.305 mg/ml)、約0.3 mg/ml檸檬酸鈉(例如0.305 mg/ml)、約1.5 mg/ml磷酸氫二鈉二水合物(例如1.53 mg/ml)、約0.9 mg/ml磷酸二氫鈉二水合物(例如0.86)及約6.2 mg/ml氯化鈉(例如6.165 mg/ml)。在某些實施例中，緩衝系統包括約1 mg/ml-1.5 mg/ml檸檬酸、約0.25 mg/ml至約0.5 mg/ml檸檬酸鈉、約1.25 mg/ml至約1.75 mg/ml磷酸氫二鈉二水合物、約0.7 mg/ml至約1.1 mg/ml磷酸二氫鈉二水合物及6.0 mg/ml至6.4 mg/ml氯化鈉。在某些實施例中，利用氫氧化鈉調整調配物之pH。
調配物中亦可包括用作張力調節劑(tonicifier)且可穩定抗體之多元醇。將多元醇添加至調配物，其量可相對於調配物之期望等滲性而變化。在某些實施例中，水性調配物可係等滲的。所添加多元醇之量亦可相對於多元醇之分子量而改變。舉例而言，與二醣(例如海藻糖)相比，可添加較低量之單醣(例如甘露醇)。在某些實施例中，可作為張力劑用於調配物中之多元醇係甘露醇。在某些實施例中，甘露醇濃度可為約5 mg/ml至約20 mg/ml。在某些實施例中，甘露醇之濃度可為約7.5 mg/ml至約15 mg/ml。在某些實施例中，甘露醇之濃度可為約10 mg/ml至約14 mg/ml。在某些實施例中，甘露醇之濃度可為約12 mg/ml。在某些實施例中，多元醇山梨醇可包括在調配物中。
亦可將清潔劑或表面活性劑添加至調配物。例示性清潔劑包括非離子性清潔劑，例如聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20、80等)或泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)。所添加清潔劑之量使得所調配抗體之聚集降低及/或使調配物中微粒之形成最小化及/或降低吸附。在某些實施例中，調配物可包括表面活性劑，其係聚山梨醇酯。在某些實施例中，調配物可含有清潔劑聚山梨醇酯80或Tween 80。Tween 80係用以描述聚氧乙烯(20)去水山梨醇單油酸酯之術語(參見Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe, Editio Cantor Verlag Aulendorf，第4版，1996)。在某些實施例中，調配物可含有介於約0.1 mg/mL與約10 mg/mL之間或介於約0.5 mg/mL與約5 mg/mL之間的聚山梨醇酯80。在某些實施例中，可將約0.1%聚山梨醇酯80添加於調配物中。 凍乾調配物
用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之凍乾調配物包括抗PD-L1/TGFβ陷阱分子及凍乾保護劑。凍乾保護劑可係糖，例如二醣。在某些實施例中，凍乾保護劑可係蔗糖或麥芽糖。凍乾調配物亦可包括以下中之一或多者：緩衝劑、表面活性劑、增積劑及/或防腐劑。
可用於穩定凍乾藥物產品之蔗糖或麥芽糖之量可為至少1:2蛋白質對蔗糖或麥芽糖之重量比。在某些實施例中，蛋白質對蔗糖或麥芽糖重量比可為1:2至1:5。
在某些實施例中，在凍乾之前，可藉由添加醫藥上可接受之酸及/或鹼來設定調配物之pH。在某些實施例中，醫藥上可接受之酸可係鹽酸。在某些實施例中，醫藥上可接受之鹼可係氫氧化鈉。
在凍乾之前，可將含有本揭示內容之蛋白質之溶液的pH調整為介於約6至約8之間。在某些實施例中，凍乾藥物產品之pH範圍可為約7至約8。
在某些實施例中，可以約10 mM至約200 mM之量添加鹽或緩衝劑組分。鹽及/或緩衝劑係醫藥上可接受的，且源自各種已知酸(無機及有機)及「成鹼」金屬或胺。在某些實施例中，緩衝劑可係磷酸鹽緩衝劑。在某些實施例中，緩衝劑可係甘胺酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽緩衝劑，在該情形下，鈉、鉀或銨離子可用作相對離子。
在某些實施例中，可添加「增積劑」。「增積劑」係增加凍乾混合物之質量且有助於凍乾餅之物理結構之化合物(例如促進產生維持開孔結構之基本上均勻之凍乾餅)。說明性增積劑包括甘露醇、甘胺酸、聚乙二醇及山梨醇。本發明之凍乾調配物可含有此等增積劑。
可視情況向本文調配物中添加防腐劑以降低細菌作用。添加防腐劑可例如促進多用途(多劑量)調配物之產生。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之凍乾藥物產品可利用水性載劑來組構。本文所關注之水性載劑係在醫藥上可接受(例如，對於投與人類而言安全且無毒)且可用於在凍乾之後製備液體調配物之水性載劑。說明性稀釋劑包括無菌注射用水(SWFI)、抑菌性注射用水(BWFI)、pH緩衝溶液(例如磷酸鹽緩衝鹽水)、無菌鹽水溶液、林格氏溶液(Ringer's solution)或右旋糖溶液。
在某些實施例中，本揭示內容之凍乾藥物產品係利用無菌注射用水USP (SWFI)或0.9%氯化鈉注射液USP來重構。在重構期間，將凍乾粉末溶解至溶液中。
在某些實施例中，將本揭示內容之凍乾蛋白質產品組構至約4.5 mL注射用水中且用0.9%鹽水溶液(氯化鈉溶液)稀釋。 液體調配物
在實施例中，將本揭示內容之蛋白質產品調配為用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之液體調配物。液體調配物可以10 mg/mL濃度存在於USP / Ph Eur I型50R小瓶中，該小瓶用橡膠塞封閉並用鋁捲邊密封閉合件密封。塞子可由符合USP及Ph Eur之彈性體製得。在某些實施例中，小瓶可填充有約61.2 mL之蛋白質產品溶液以容許可提取60 mL之體積。在某些實施例中，液體調配物可用0.9%鹽水溶液稀釋。在某些實施例中，小瓶可含有約61.2 mL約20 mg/mL至約50 mg/mL (例如約20 mg/mL、約25 mg/mL、約30 mg/mL、約35 mg/mL、約40 mg/mL、約45 mg/mL或約50 mg/mL)之蛋白質產品(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽))溶液，以容許可提取60 mL之體積以用於將約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg、約2900 mg至約3000 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg、約2500 mg、約2600 mg、約2700 mg、約2800 mg、約2900 mg或約3000 mg)之蛋白質產品(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品))遞送至個體。
在某些實施例中，小瓶可含有約61.2 mL約20 mg/mL至約50 mg/mL (例如約20 mg/mL、約25 mg/mL、約30 mg/mL、約35 mg/mL、約40 mg/mL、約45 mg/mL或約50 mg/mL)之蛋白質產品溶液(具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)，以容許可提取60 mL之體積以用於將約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg、約2900 mg至約3000 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg、約2500 mg、約2600 mg、約2700 mg、約2800 mg、約2900 mg或約3000 mg)之蛋白質產品遞送至初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體。
在某些實施例中，可將用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之液體調配物製備為與穩定含量之糖組合之10 mg/mL濃度溶液。在某些實施例中，可在水性載劑中製備液體調配物。在某些實施例中，可以不大於可能造成黏度不期望或不適於靜脈內投與之量添加穩定劑。在某些實施例中，糖可係二醣，例如蔗糖。在某些實施例中，液體調配物亦可包括緩衝劑、表面活性劑及防腐劑中之一或多者。
在某些實施例中，可藉由添加醫藥上可接受之酸及/或鹼來設定液體調配物之pH。在某些實施例中，醫藥上可接受之酸可係鹽酸。在某些實施例中，鹼可係氫氧化鈉。
除聚集以外，去醯胺亦係肽及蛋白質之常見產物變體，其可在發酵、收穫/細胞澄清、純化、原料藥/藥物產品儲存期間及樣品分析期間發生。去醯胺係NH3 自蛋白質之損失，從而形成琥珀醯亞胺中間體，其可經歷水解。琥珀醯亞胺中間體使得母體肽之質量減少17 u。隨後之水解使得質量增加18 u。由於在水性條件下不穩定，故難以分離琥珀醯亞胺中間體。因此，通常可將去醯胺檢測為1 u質量增加。天冬醯胺之去醯胺產生天冬胺酸或異天冬胺酸。影響去醯胺速率之參數包括pH、溫度、溶劑介電常數、離子強度、一級序列、局部多肽構形及三級結構。毗鄰肽鏈中Asn之胺基酸殘基影響去醯胺速率。蛋白質序列中Asn後之Gly及Ser使得更易於發生去醯胺。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之液體調配物可在防止蛋白質產品去醯胺之pH及濕度條件下保藏。
本文所關注之水性載劑係在醫藥上可接受(對於投與人類而言安全且無毒)且可用於製備液體調配物之水性載劑。說明性載劑包括無菌注射用水(SWFI)、抑菌性注射用水(BWFI)、pH緩衝溶液(例如磷酸鹽緩衝鹽水)、無菌鹽水溶液、林格氏溶液或右旋糖溶液。
可視情況向本文調配物中添加防腐劑以降低細菌作用。添加防腐劑可例如促進多用途(多劑量)調配物之產生。
在特定情況下靜脈內(IV)調配物可係較佳投與途徑，例如當住院患者在移植後經由IV途徑接受所有藥物時。在某些實施例中，在投與之前將液體調配物用0.9%氯化鈉溶液稀釋。在某些實施例中，經稀釋之注射用藥物產品係等滲的且適於藉由靜脈內輸注投與。
在某些實施例中，鹽或緩衝劑組分可以10 mM - 200 mM之量添加。鹽及/或緩衝劑係醫藥上可接受的，且源自各種已知酸(無機及有機)及「成鹼」金屬或胺。在某些實施例中，緩衝劑可係磷酸鹽緩衝劑。在某些實施例中，緩衝劑可係甘胺酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽緩衝劑，在該情形下，鈉、鉀或銨離子可用作相對離子。
可視情況向本文調配物中添加防腐劑以降低細菌作用。添加防腐劑可例如促進多用途(多劑量)調配物之產生。
本文所關注之水性載劑係在醫藥上可接受(對於投與人類而言安全且無毒)且可用於製備液體調配物之水性載劑。說明性載劑包括無菌注射用水(SWFI)、抑菌性注射用水(BWFI)、pH緩衝溶液(例如磷酸鹽緩衝鹽水)、無菌鹽水溶液、林格氏溶液或右旋糖溶液。
可視情況向本文調配物中添加防腐劑以降低細菌作用。添加防腐劑可例如促進多用途(多劑量)調配物之產生。治療癌症或抑制腫瘤生長之方法
在一態樣中，本揭示內容提供治療有需要之初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法，該方法包括向該個體投與至少1200 mg劑量之包括第一多肽及第二多肽之蛋白質與全身性化學治療劑之組合。該第一多肽包括：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段。該第二多肽包括結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且該第一多肽之重鏈及該第二多肽之輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
在某些實施例中，本揭示內容之治療晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法涉及向初次接受治療個體投與包括兩種肽之蛋白質，其中第一多肽包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且第二多肽包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。在某些實施例中，本揭示內容之治療晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法涉及向PDx失敗轉移性NSCLC個體投與包括兩種肽之蛋白質，其中第一多肽包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且第二多肽包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。在某些實施例中，蛋白質係抗PD-L1/TGFβ陷阱分子。
在某些實施例中，與本揭示內容之雙功能蛋白質組合投與之全身性化學治療劑係基於鉑之藥劑，例如順鉑或卡鉑。在某些實施例中，基於鉑之藥劑係與其他化學治療劑一起投與，該等其他化學治療劑係例如太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)、吉西他濱或培美曲塞。在某些實施例中，與本揭示內容之雙功能蛋白質組合投與之全身性化學治療劑係基於非鉑之藥物，例如多西他賽。如熟習此項技術者將容易地瞭解，該等化學治療劑之劑量可根據FDA批准之方案來投與且根據從業醫師之判斷來調整。
本文涵蓋治療初次接受治療個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法，其係藉由投與全身性化學治療劑與本揭示內容之雙功能蛋白質之組合來實施。舉例而言，在一些實施例中，本揭示內容提供治療初次接受治療個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法，其係藉由向初次接受治療個體投與全身性化學治療劑(例如順鉑或卡鉑)與本揭示內容之雙功能蛋白質之組合來實施。在某些實施例中，順鉑或卡鉑係與其他化學治療劑一起投與，該等其他化學治療劑係例如太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)、吉西他濱或培美曲塞。
本文涵蓋治療PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法，其係藉由投與全身性化學治療劑與本揭示內容之雙功能蛋白質之組合來實施。舉例而言，在一些實施例中，本揭示內容提供治療PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法，其係藉由向PDx失敗轉移性NSCLC個體投與多西他賽與本揭示內容之雙功能蛋白質之組合來實施。
在一實施例中，根據本文所揭示之方法治療之初次接受治療個體未接受本揭示內容之雙功能蛋白質(抗PD-L1/TGFβ陷阱分子)之先前療法。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症患者不具有選自以下之突變：表皮生長因子受體(EGFR)敏化(活化)突變、間變性淋巴瘤激酶(ALK)易位、ROS1突變及BRAF V600E突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有表皮生長因子受體(EGFR)敏化(活化)突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有間變性淋巴瘤激酶(ALK)易位(即，不為ALK陽性)。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有ROS1突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有BRAF V600E突變。
在某些實施例中，本揭示內容提供治療個體之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該個體在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該個體投與至少1800 mg劑量之如本揭示內容中所提供之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與至少1800 mg之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質之第二步驟。
在某些實施例中，本揭示內容提供治療個體之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該個體在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該個體投與約2400 mg劑量之如本揭示內容中所提供之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與約2400 mg之抗PD-L1/ TGFβ陷阱蛋白質之第二步驟。
在某些實施例中，本揭示內容之治療晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法涉及向初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱分子(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品))，其劑量為約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg、約2900 mg至約3000 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg、約2500 mg、約2600 mg、約2700 mg、約2800 mg、約2900 mg或約3000 mg)。在某些實施例中，每兩週一次向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與約1200 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱分子。在某些實施例中，每三週一次向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與約1800 mg之抗PD-L1/TGFβ陷阱分子。在某些實施例中，每兩週一次向初次接受治療個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與約1200 mg之蛋白質產品，該蛋白質產品具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週一次向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與約1800 mg之蛋白質產品，該蛋白質產品具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，每三週一次向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與約1800 mg之蛋白質產品，該蛋白質產品具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。
在某些實施例中，向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與之劑量可為約1200 mg、約1225 mg、約1250 mg、約1275 mg、約1300 mg、約1325 mg、約1350 mg、約1375 mg、約1400 mg、約1425 mg、約1450 mg、約1475 mg、約1500 mg、約1525 mg、約1550 mg、約1575 mg、約1600 mg、約1625 mg、約1650 mg、約1675 mg、約1700 mg、約1725 mg、約1750 mg、約1775 mg、約1800 mg、約1825 mg、約1850 mg、1875 mg、約1900 mg、約1925 mg、約1950 mg、約1975 mg、約2000 mg、約2025 mg、約2050 mg、約2075 mg、2100 mg、約2125 mg、約2150 mg、約2175 mg、約2200 mg、約2225 mg、約2250 mg、約2275 mg、約2300 mg、約2325 mg、約2350 mg、約2375 mg或約2400 mg。
在某些實施例中，向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與之劑量可每兩週投與一次。在某些實施例中，向初次接受治療晚期NSCLC個體或PDx失敗轉移性NSCLC個體投與之劑量可每三週投與一次。在某些實施例中，蛋白質可藉由靜脈內投與來投與，例如利用預填充袋、預填充筆或預填充注射器來投與。在某些實施例中，蛋白質係自250 ml鹽水袋以靜脈內方式投與，且靜脈內輸注可持續約1小時(例如50至80分鐘)。在某些實施例中，袋連接至包含管及/或針之通道。
在一些實施例中，晚期NSCLC展現鱗狀或非鱗狀組織學。舉例而言，在一實施例中，該方法治療鱗狀晚期NSCLC。在一些實施例中，該方法治療非鱗狀晚期NSCLC。
在某些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由靜脈內投與至少1200 mg (例如約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg或更多)之抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療，該抗PD-L1/TGFβ陷阱包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。在某些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由靜脈內投與至少1200 mg (例如約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg或更多)之抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療，該抗PD-L1/TGFβ陷阱包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。
在某些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由靜脈內投與約1200 mg至約2400 mg (例如約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約2400 mg、約1400 mg至約2400 mg、約1500 mg至約2400 mg、約1600 mg至約2400 mg、約1700 mg至約2400 mg、約1800 mg至約2400 mg、約1900 mg至約2400 mg、約2000 mg至約2400 mg、約2100 mg至約2400 mg、約2200 mg至約2400 mg或約2300 mg至約2400 mg)之抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療，該抗PD-L1/TGFβ陷阱包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽。
在某些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由靜脈內投與約1200 mg至約2400 mg (例如約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約2400 mg、約1400 mg至約2400 mg、約1500 mg至約2400 mg、約1600 mg至約2400 mg、約1700 mg至約2400 mg、約1800 mg至約2400 mg、約1900 mg至約2400 mg、約2000 mg至約2400 mg、約2100 mg至約2400 mg、約2200 mg至約2400 mg或約2300 mg至約2400 mg)之抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療，該抗PD-L1/TGFβ陷阱包括含有SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽。
在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每2週一次以約1200 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每2週一次以1200 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以約1800 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以1800 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以約2400 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以2400 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。
在某些實施例中，欲治療之晚期NSCLC係PD-L1陽性的。舉例而言，在某些實施例中，欲治療之晚期NSCLC展現PD-L1表現(例如PD-L1陽性或高PD-L1表現)。在某些實施例中，欲治療之晚期NSCLC不展現PD-L1表現。在例示性實施例中，治療晚期NSCLC而不管PD-L1表現如何。
在某些實施例中，使用抗PD-L1抗體檢測晚期NSCLC中之PD-L1表現程度。組織樣品可係經福馬林固定、石蠟包埋之晚期IV期NSCLC組織。
舉例而言，在一些實施例中，PD-L1高可定義為≥ 80% PD-L1陽性腫瘤細胞(腫瘤比例評分[TPS])，如藉由73-10分析所測定。在一些實施例中，PD-L1高可定義為腫瘤比例評分(TPS) ≥ 50%，如藉由PD-L1 IHC 22C3 pharmDx分析所測定。檢測癌症或腫瘤上之生物標記物(例如PD-L1)之方法在業內係常規的且涵蓋於本文中。非限制性實例包括免疫組織化學、免疫螢光及螢光活化細胞分選(FACS)。舉例而言，在一些實施例中，藉由VENTANA PD-L1 (SP263)分析測定PD-L1表現程度，該分析係使用兔單株抗PD-L1純系SP263之定量免疫化學分析，其意欲用於對經福馬林固定、石蠟包埋(FFPE)之癌症組織中之PD-L1蛋白之評價中。PD-L1狀態係藉由任何膜染色高於背景之腫瘤細胞百分比或藉由具有高於背景之任何染色(IC+)強度之腫瘤相關免疫細胞百分比來測定。舉例而言，US FDA批准之用於鑑別最有可能受益於德瓦魯單抗(durvalumab)之患有局部晚期或轉移性尿路上皮癌之患者之SP263測試，使用任何腫瘤相關之免疫細胞(所存在之免疫細胞，ICP)所佔據之腫瘤區域百分比來確定IC+，其係展現PD-L1陽性免疫細胞染色之ICP之面積百分比。若滿足以下條件中之任一者，則認為PD-L1狀態為高：≥ 25%之腫瘤細胞展現膜染色；或ICP ＞ 1%且IC+ ≥ 25%；或ICP = 1%且IC+ = 100%。檢測NSCLC上之PD-L1之方法闡述於「PD-L1 expression testing in non-small cell lung cancer,」 Teixidó等人，Ther. Adv. Med. Oncl. (2018), 10中。在某些實施例中，招募患者而不管PD-L1表現如何。
在一些實施例中，初次接受治療個體或患有PD-L1高、晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每2週一次以約1200 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有PD-L1高、晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以約1800 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有PD-L1高、晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以約2100 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，初次接受治療個體或患有PD-L1高、晚期NSCLC (例如鱗狀或非鱗狀晚期NSCLC)之患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體係藉由每3週一次以約2400 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。
在一些實施例中，欲治療之初次接受治療個體或患者不具有選自以下之突變：EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變。舉例而言，在一些實施例中，初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如具有非鱗狀組織學之轉移性NSCLC)但不具有選自EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變之突變之患者係藉由以至少500 mg (例如約500 mg、約600 mg、約700 mg、約800 mg、約900 mg、約1000 mg、約1100 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、約1500 mg、約1600 mg、約1700 mg、約1800 mg、約1900 mg、約2000 mg、約2100 mg、約2200 mg、約2300 mg、約2400 mg或更多)之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，不具有選自EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變之突變之初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如具有非鱗狀組織學之轉移性NSCLC)之患者係藉由每2週一次以約1200 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，不具有選自EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變之突變之初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如具有非鱗狀組織學之轉移性NSCLC)之患者係藉由每3週一次以約1800 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，不具有選自EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變之突變之初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如具有非鱗狀組織學之轉移性NSCLC)之患者係藉由每3週一次以約2100 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。在一些實施例中，不具有選自EGFR敏化突變、ALK易位、ROS1突變及BRAF V600E突變之突變之初次接受治療個體或患有晚期NSCLC (例如具有非鱗狀組織學之轉移性NSCLC)之患者係藉由每3週一次以約2400 mg之劑量靜脈內投與抗PD-L1/TGFβ陷阱來治療。
在一些實施例中，本文所揭示之治療方法使個體或患者產生疾病反應或經改良之存活(例如高達且包括6個月、12個月、18個月、22個月、28個月、32個月、38個月、44個月、50個月、56個月、62個月、68個月、74個月、80個月、86個月、92個月、98個月、104個月或110個月之存活)。在某些實施例中，改良之存活為至少108個月。舉例而言，在一些實施例中，疾病反應可係完全反應、部分反應或穩定疾病。舉例而言，在一些實施例中，改良之存活(例如高達且包括6個月、12個月、18個月、22個月、28個月、32個月、38個月、44個月、50個月、56個月、62個月、68個月、74個月、80個月、86個月、92個月、98個月、104個月或110個月之存活)可係無進展存活(PFS)或總體存活(OS)。在某些實施例中，PFS及/或OS之改良存活為至少108個月。在一些實施例中，改良(例如PFS之改良)係相對於利用本揭示內容之抗PD-L1/TGFβ陷阱起始治療之前之時期來測定。測定癌症或腫瘤療法之疾病反應(例如完全反應、部分反應或穩定疾病)及患者存活(例如PFS、總體存活(例如高達且包括6個月、12個月、18個月、22個月、28個月、32個月、38個月、44個月、50個月、56個月、62個月、68個月、74個月、80個月、86個月、92個月、98個月、104個月或110個月之存活))之方法在業內係常規的且涵蓋於本文中。在某些實施例中，患者存活為至少108個月。在一些實施例中，在經治療患者經受受影響區域(例如胸部/腹部及骨盆，覆蓋自胸廓入口之上部範圍至恥骨聯合之區域)之對比增強之電腦斷層攝影(CT)或磁共振成像(MRI)之後，根據RECIST 1.1評估疾病反應。遞送裝置
在一態樣中，本揭示內容提供用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置，其中該裝置包括包含約500 mg至約3000 mg蛋白質之調配物，該蛋白質包括第一多肽及第二多肽，該第一多肽包括：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段，該第二多肽包括結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且該第一多肽之重鏈及該第二多肽之輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
在某些實施例中，裝置可係袋、筆或注射器。在某些實施例中，袋可連接至包含管及/或針之通道。
在本揭示內容之某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置可包括約1200 mg至約3000 mg (例如約1200 mg至約3000 mg、約1200 mg至約2900 mg、約1200 mg至約2800 mg、約1200 mg至約2700 mg、約1200 mg至約2600 mg、約1200 mg至約2500 mg、約1200 mg至約2400 mg、約1200 mg至約2300 mg、約1200 mg至約2200 mg、約1200 mg至約2100 mg、約1200 mg至約2000 mg、約1200 mg至約1900 mg、約1200 mg至約1800 mg、約1200 mg至約1700 mg、約1200 mg至約1600 mg、約1200 mg至約1500 mg、約1200 mg至約1400 mg、約1200 mg至約1300 mg、約1300 mg至約3000 mg、約1400 mg至約3000 mg、約1500 mg至約3000 mg、約1600 mg至約3000 mg、約1700 mg至約3000 mg、約1800 mg至約3000 mg、約1900 mg至約3000 mg、約2000 mg至約3000 mg、約2100 mg至約3000 mg、約2200 mg至約3000 mg、約2300 mg至約3000 mg、約2400 mg至約3000 mg、約2500 mg至約3000 mg、約2600 mg至約3000 mg、約2700 mg至約3000 mg、約2800 mg至約3000 mg或約2900 mg至約3000 mg)之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。在某些實施例中，藥物遞送裝置可包括約1200 mg至約2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽)。在某些實施例中，藥物遞送裝置可包括約1800 mg、約2100 mg或約2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。
在某些實施例中，藥物遞送裝置包括約1200 mg、約1800 mg、約2100 mg或約2400 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置包括約1800 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，其包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置包括約1200 mg、約1800 mg、約2100 mg或約2400 mg劑量之具有包括SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及包括SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置包括約1200 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品))。在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置包括約1800 mg劑量之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽；或具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品))。
在某些實施例中，用於治療初次接受治療癌症患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或抑制腫瘤生長之方法中之藥物遞送裝置可包括約1200 mg、約1225 mg、約1250 mg、約1275 mg、約1300 mg、約1325 mg、約1350 mg、約1375 mg、約1400 mg、約1425 mg、約1450 mg、約1475 mg、約1500 mg、約1525 mg、約1550 mg、約1575 mg、約1600 mg、約1625 mg、約1650 mg、約1675 mg、約1700 mg、約1725 mg、約1750 mg、約1775 mg、約1800 mg、約1825 mg、約1850 mg、約1875 mg、約1900 mg、約1925 mg、約1950 mg、約1975 mg、約2000 mg、約2025 mg、約2050 mg、約2075 mg、約2100 mg、約2125 mg、約2150 mg、約2175 mg、約2200 mg、約2225 mg、約2250 mg、約2275 mg、約2300 mg、約2325 mg、約2350 mg、約2375 mg或約2400 mg之本揭示內容之蛋白質(例如抗PD-L1/TGFβ陷阱，例如具有包含SEQ ID NO: 35、36及37之胺基酸序列之第一多肽及包含SEQ ID NO: 38、39及40之胺基酸序列之第二多肽之蛋白質產品)。 蛋白質產生
抗體-細胞介素阱蛋白質通常係使用含有經工程化以表現該蛋白質之核酸之哺乳動物細胞以重組方式產生。儘管適宜細胞系及蛋白質產生方法之一個實例闡述於US 20150225483 A1之實例1及2中，但眾多種適宜載體、細胞系及蛋白質產生方法已用於產生基於抗體之生物醫藥且可用於該等抗體-細胞介素阱蛋白質之合成中。 治療適應症
本申請案中所闡述之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質(例如包括含有SEQ ID NO: 3之胺基酸序列之第一多肽及含有SEQ ID NO: 1之胺基酸序列之第二多肽)以及包含該等抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質之所揭示之靜脈內藥物遞送調配物及遞送裝置可用於治療初次接受治療患者或PDx失敗轉移性NSCLC個體之晚期NSCLC或降低其腫瘤生長。
欲利用抗PD-L1/ TGFβ陷阱治療之晚期NSCLC或腫瘤可係鱗狀或非鱗狀NSCLC。欲利用抗PD-L1/ TGFβ陷阱治療之晚期NSCLC或腫瘤可具有PD-L1及/或TGFβ在腫瘤中之表現、其表現程度與預後或疾病進展之相關性及關於腫瘤對靶向PD-L1及TGFβ之治療之敏感性之臨床前及臨床經驗。在某些實施例中，欲利用抗PD-L1/ TGFβ陷阱治療之晚期NSCLC或腫瘤在腫瘤中不表現PD-L1。
在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有選自以下之突變：表皮生長因子受體(EGFR)敏化(活化)突變、間變性淋巴瘤激酶(ALK)易位、ROS1突變及BRAF V600E突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有表皮生長因子受體(EGFR)敏化(活化)突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有間變性淋巴瘤激酶(ALK)易位(即，不為ALK陽性)。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC)))患者不具有ROS1突變。在一些實施例中，欲根據本揭示內容之方法治療之初次接受治療癌症(例如具有非鱗狀組織學之晚期NSCLC (即，轉移性NSCLC))患者不具有BRAF V600E突變。 實例
現大概闡述本揭示內容，藉由參考以下實例將更易於理解本揭示內容，該等實例僅出於說明本揭示內容之某些態樣及實施例之目的而包括在內，且不意欲以任何方式限制本揭示內容之範圍。 實例1：靜脈內藥物調配物之包裝
抗PD-L1/TGFβ陷阱之調配物製備為凍乾調配物或液體調配物。為製備凍乾調配物，將冷凍乾燥抗PD-L1/TGFβ陷阱滅菌且儲存於一次性玻璃小瓶中。然後將若干個此等玻璃小瓶包裝於套組中，以用於將特定體重獨立性劑量遞送至經診斷患有癌症或腫瘤之個體。端視於劑量要求而定，套組含有12至60個小瓶。或者，製備調配物且作為液體調配物包裝並儲存為250 mg/小瓶至1000 mg/小瓶。舉例而言，調配物係液體調配物且儲存為600 mg/小瓶或儲存為250 mg/小瓶。在另一實例中，將抗PD-L1/TGFβ陷阱調配為10 mg/mL溶液且於USP/Ph Eur I型小瓶中供應，該等小瓶經填充以容許可提取60 mL (600 mg/60 mL)之體積且利用符合USP及Ph Eur之血清形式之橡膠塞及鋁捲邊密封閉合件封閉。
向經診斷患有晚期NSCLC之個體靜脈內投與含有1800 mg至2400 mg抗PD-L1/TGFβ陷阱之調配物。舉例而言，每三週一次向個體靜脈內投與1800 mg抗PD-L1/TGFβ陷阱或每三週一次2100 mg或2400 mg抗PD-L1/TGFβ陷阱。靜脈內投與係來自鹽水袋。向個體投與之抗PD-L1/TGFβ陷阱之量與個體之體重無關。實例 2 ：晚期 NSCLC 患者群組之抗 PD-L1/TGFβ 陷阱投與與伴隨化學療法
在例示性實施例中，利用以下來治療患有非鱗狀晚期IV期NSCLC之初次接受治療患者，而不管PD-L1表現如何：第一步驟為投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學療法(順鉑或卡鉑與培美曲塞之組合)之組合，之後為投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與培美曲塞之組合之第二步驟(群組A) (圖 8 )。在例示性實施例中，利用以下來治療患有鱗狀或非鱗狀晚期IV期非小細胞肺癌(NSCLC)之初次接受治療患者，而不管PD-L1表現如何：第一步驟為投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學療法(順鉑或卡鉑與吉西他濱之組合(群組C)，或卡鉑與太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇之組合(群組B))之組合，之後為僅投與抗PD-L1/TGFβ陷阱之第二步驟(圖 8 )。在例示性實施例中，利用以下來治療患有鱗狀或非鱗狀晚期IV期NSCLC且患有PDx失敗轉移性NSCLC之患者，而不管PD-L1表現如何：第一步驟為投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與多西他賽之組合，之後為僅投與抗PD-L1/TGFβ陷阱之第二步驟(群組D) (圖 8) 。
若靶向療法被批准，則群組A至C中之患者不得具有表皮生長因子受體(EGFR)敏化突變或間變性淋巴瘤激酶(ALK)易位、(及若測試到) ROS1突變或BRAF V600E突變。
在一個例示性實施例中，全身性化學療法係以順鉑/卡鉑與吉西他濱同時來投與。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以100 mg/m2 之劑量靜脈內投與順鉑，同時在每21天之第1天、第8天及第15天以1000 mg/m2 之劑量靜脈內投與吉西他濱，持續至少四個週期，且在第二步驟中中斷全身性化學療法。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以AUC 4-6之劑量靜脈內投與卡鉑，同時在每21天之第1天、第8天及第15天以1000 mg/m2 之劑量靜脈內投與吉西他濱，持續至少四個週期，且在第二步驟中中斷全身性化學療法。
在一個例示性實施例中，全身性化學療法係以卡鉑與太平洋紫杉醇(結合或不結合至白蛋白)同時來投與。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以AUC 4-6之劑量靜脈內投與卡鉑，同時經3小時以225 mg/m2 之劑量靜脈內投與太平洋紫杉醇(結合或不結合至白蛋白)，持續至少四個週期，且第二步驟中斷全身性化學療法。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以AUC 4-6之劑量靜脈內投與卡鉑，同時在每21天之第1天、第8天及第15天以100 mg/m2 之劑量靜脈內投與白蛋白結合型太平洋紫杉醇，持續至少四個週期，且第二步驟中斷全身性化學療法。
在一個例示性實施例中，全身性化學療法係以順鉑/卡鉑與培美曲塞同時來投與非鱗狀NSCLC患者。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以75 mg/m2 之劑量靜脈內投與順鉑，同時以500 mg/m2 之劑量靜脈內投與培美曲塞，持續至少四個週期，且在第二步驟中在每21天之第1天以500 mg/m2 之劑量靜脈內投與單獨之培美曲塞與抗PD-L1/TGFβ陷阱。在一個例示性實施例中，在第一步驟中在每21天之第1天以AUC 4-6之劑量靜脈內投與卡鉑，同時以500 mg/m2 之劑量靜脈內投與培美曲塞，持續至少四個週期，且在第二步驟中在每21天之第1天以500 mg/m2 之劑量靜脈內投與單獨之培美曲塞與抗PD-L1/TGFβ陷阱。
在一個例示性實施例中，向PDx失敗轉移性NSCLC個體投與多西他賽與抗PD-L1/TGFβ陷阱之組合。多西他賽係在第一步驟中每3週以75 mg/m2 之劑量經60分鐘靜脈內投與。舉例而言，多西他賽係在每21天之第1天投與，持續至少四個週期。在一個例示性實施例中，多西他賽係在每21天之第1天投與，持續四個週期。
根據當地指南來投與標準前驅用藥，其係由H2阻斷劑、止吐藥、地塞米松(dexamethasone)(口服或靜脈內)組成。對於接受太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)之患者，根據當地標準之由25-50 mg苯海拉明(diphenhydramine)、H2阻斷劑及地塞米松(口服或IV係可接受的)組成之標準前驅用藥應在太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)之前至少30分鐘給予。對於接受卡鉑及太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)之患者，卡鉑將在投與太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)之後與標準止吐藥一起給予。
在一個例示性實施例中，抗PD-L1/TGFβ陷阱係以1800 mg之BW獨立性劑量每三週一次向患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之癌症患者投與。該投與以靜脈內方式實施約1小時(-10分鐘/ +20分鐘，例如50分鐘至80分鐘)。在一個例示性實施例中，抗PD-L1/TGFβ陷阱係以2100 mg之BW獨立性劑量每三週一次向患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之癌症患者投與。該投與以靜脈內方式實施約1小時(-10分鐘/ +20分鐘，例如50分鐘至80分鐘)。
對於其中抗PD-L1/TGFβ陷阱係與全身性化學療法組合投與之Ib/2期、2期及3期研究，使用建模方法來選擇抗PD-L1/TGFβ陷阱之每三週一次之劑量。由於大多數化學療法係每三週投與一次，因此可採用相同之用於抗PD-L1/TGFβ陷阱之投藥間隔以獲得便捷性及順從性。對於每三週一次劑量之選擇，可達成與每兩週一次1200 mg劑量相當之效能特徵。穩態下投藥間隔內之Ctrough,ss 及平均濃度與每兩週一次1200 mg投藥所達成者類似或更高，且大多數患者可具有高於50 μg/mL目標濃度之Ctrough,ss 。基於在劑量遞增及基於群體PK之模擬之投藥期間表徵之藥物動力學-藥效學(PK-PD)輪廓，預期每三週一次2400 mg達成類似於每兩週一次1200 mg投藥之中值Ctrough,ss 。若抗PD-L1/TGFβ陷阱之消除半衰期為約7天，則近似加倍之劑量將利用每三週一次投藥維持與每兩週一次投藥相同之Ctrough 。
在一個例示性實施例中，抗PD-L1/TGFβ陷阱係以2400 mg之BW獨立性劑量每三週一次向患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之癌症患者投與。該投與以靜脈內方式實施約1小時(-10分鐘/ +20分鐘，例如50分鐘至80分鐘)。在一個例示性實施例中，抗PD-L1/TGFβ陷阱係以2600 mg、2800 mg或3000 mg之BW獨立性劑量每三週一次向患有晚期非小細胞肺癌(NSCLC)之癌症患者投與。該投與以靜脈內方式實施約1小時(-10分鐘/ +20分鐘，例如50分鐘至80分鐘)。在一或多個例示性實施例中，為減輕潛在輸注相關之反應，對於前2次輸注，在每一抗PD-L1/TGFβ陷阱劑量之前大約30至60分鐘投與抗組織胺及對乙醯胺基酚(乙醯胺酚)之前驅用藥(例如，25-50 mg苯海拉明及500-650 mg對乙醯胺基酚[乙醯胺酚] IV或口服等效形式)。若在前兩次輸注期間觀察到≥ 2級之輸注反應，則不停止前驅用藥。不允許類固醇作為前驅用藥。
以下闡述此實例中所使用之患者納入準則。患者： 　-    在知情同意時≥ 18歲，包括18歲 　-    具有組織學證實之晚期NSCLC診斷 　-    基於RECIST 1.1 (參見Eisenhauer等人，EJC. 2009;45:228-247)患有可量測之疾病 　-    自診斷為晚期NSCLC以來未接受先前全身性療法治療或靶向T細胞共調控蛋白(免疫檢查點)之任何抗體或藥物(例如抗PDL1或抗CTLA-4抗體) (容許完成利用細胞毒性化學療法、生物療法及/或輻射進行治療作為前導性/輔助療法之一部分，只要療法在診斷為轉移性疾病之前至少6個月完成即可) (入選於群組A、B及C中) 　-    在先前利用PD-(L)1抑制劑與化學療法之組合進行治療時或在利用化學療法治療、之後利用PD-(L)1抑制劑治療時或在PD-(L)1抑制劑、之後基於鉑之化學療法時具有疾病進展(入選於群組D中) 　-    預期壽命為至少12週(基於醫師對診斷後患者預後之評價) 　-    具有足夠之可獲得之腫瘤材料(＜ 6月齡)用於生物標記物分析 　-    美國東岸癌症臨床研究合作組織體能狀態(Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status，ECOG PS)為0至1 　-    具有足夠的肺功能，其定義為1秒內之用力呼氣量(FEV1 ) ≥ 1.2公升或≥在隨機化之前3週內所量測之預測正常量之50% 　-    具有足夠的由絕對嗜中性球計數(ANC) ≥ 1.5 × 109 /L、血小板計數≥ 100 × 109 /L且Hgb ≥ 9 g/ dL定義之造血功能 　-    具有足夠的由總膽紅素含量≤ 1.5 ×正常值上限(ULN)、天冬胺酸轉胺酶(AST)含量≤ 3.0 × ULN、丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤ 3.0 × ULN且鹼性磷酸酶≤ 2.5 ULN定義之肝功能。對於腫瘤累及肝臟之參與者而言，天冬胺酸轉胺酶(AST) ≤ 5.0 × ULN、丙胺酸轉胺酶(ALT) ≤ 5.0 × ULN且膽紅素≤ 3.0 × ULN係可接受的 　-    具有足夠的由肌酸酐≤ 1.5 × ULN或經計算之肌酸酐清除率＞ 30 mL/min定義之腎功能；且 　-    具有足夠的凝血功能，其定義為國際正規化比率(INR)或凝血酶原時間(PT) ≤1.5× ULN (除非參與者正在接受抗凝劑療法)，且活化部分凝血活素時間(aPTT) ≤1.5× ULN (除非參與者正在接受抗凝劑療法)。實例 3 ： 抗 PD-L1/TGFβ 陷阱及伴隨化學療法在治療晚期 NSCLC 患者中之治療效能
目標： 此研究之目的係評估抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑之組合作為針對患有晚期鱗狀或非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)之患者之治療之安全性、耐受性及效能，而不管PD-L1腫瘤表現如何。該研究之另一目的係評估抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑之組合作為針對PDx失敗轉移性NSCLC患者之治療之安全性、耐受性及效能。在該等NSCLC患者群組中使用抗PD-L1/TGFβ陷阱之原理在於抗PD-L1/TGFβ陷阱靶向PD-L1及TGFβ，其為腫瘤微環境中免疫抑制之兩種主要機制。臨床前資料表明，抗PD-L1/TGFβ陷阱在小鼠腫瘤模型中強烈地增強抗腫瘤活性且延長存活，其效應高於單獨之抗PD-L1抗體阿維魯單抗(avelumab)或TGFβ陷阱對照。因此，與全身性化學治療劑組合同時中和已知抑制腫瘤免疫活化之分子TGF-β可刺激患者之臨床反應。
研究設計 ：此研究評估疾病反應及存活主要端點以評價抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑之組合作為針對患有晚期NSCLC之患者或PDx失敗轉移性NSCLC患者之治療之臨床益處。此研究中之患者滿足實例2中所闡述之患者納入準則，且未接受針對其晚期NSCLC之先前全身性療法治療(群組A、B或C中之患者係初次接受治療的)或PDx失敗轉移性NSCLC患者(群組D中之患者)。
根據如實例2中所闡述之兩步法，向患者投與靜脈內劑量之抗PD-L1/TGFβ陷阱及全身性化學治療劑。在一個例示性實施例中，如實例2中所闡述，在第一步驟中向患有鱗狀或非鱗狀NSCLC之參與者投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與順鉑/卡鉑及吉西他濱之組合，且然後在第二步驟中僅投與抗PD-L1/TGFβ陷阱。在一個例示性實施例中，如實例2中所闡述，在第一步驟中向患有鱗狀或非鱗狀NSCLC之參與者投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與卡鉑及太平洋紫杉醇(或nab-太平洋紫杉醇)之組合，且然後在第二步驟中僅投與抗PD-L1/TGFβ陷阱。
在一個例示性實施例中，如實例2中所闡述，在第一步驟中向患有非鱗狀NSCLC之參與者投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與順鉑/卡鉑及培美曲塞之組合，且然後在第二步驟中投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與僅培美曲塞。
在一個例示性實施例中，如實例2中所闡述，在第一步驟中向PDx失敗轉移性NSCLC患者投與抗PD-L1/TGFβ陷阱與多西他賽之組合，且然後在第二步驟中僅投與抗PD-L1/TGFβ陷阱。
繼續治療直至根據實體腫瘤中之反應評估準則1.1版(RECIST 1.1)確認進行性疾病(PD)、不可接受之毒性或長達24個月為止。在PD之情形下，若患者之美國東岸癌症臨床研究合作組織體能狀態(ECOG PS)保持穩定且若參與者將受益於繼續治療，則可在PD初始確定或確認PD後繼續治療。經歷穩定疾病(SD)、部分反應(PR)或完全反應(CR)之患者將繼續治療直至24個月結束，但可進行額外治療。
在整個治療中，經由基線醫學病狀、不良事件(AE)、體檢發現(包括生命徵象、ECOG體能狀態及實驗室測試)之記錄、報告及分析評價安全性。對於8名參與者之每一群組，當在8名可評估參與者中之≤ 2者中觀察到DLT (劑量限制性毒性)時，組合視為安全的。
藥物動力學輪廓： 根據在即將輸注結束時之濃度(Ceoi )及即將進行下一投藥前之濃度(Ctrough )產生抗PD-L1/TGFβ陷阱之藥物動力學(PK)特徵曲線。在一個例示性實施例中，根據AUC0-t 、AUC0-∞ 、Cmax 、tmax 及t½評估抗PD-L1/TGFβ陷阱在參與者(例如該研究之安全性部分中之參與者)之藥物動力學(PK)輪廓。[AUC0-t =自時間零(=投藥時間)至濃度為量化下限或高於量化下限之最後一次取樣時間(tlast )之濃度-時間曲線下之面積(AUC)。使用混合對數線性梯形法則(線性向上，對數向下)計算；AUC0-∞ =基於tlast 處濃度之預測值，自時間零(投藥時間)外推至無窮大之AUC，如使用來自λz確定之線性回歸所估計。AUC0-∞ = AUC0-t +Clast pred/ λz；Cmax =投藥後所觀察到之最大血清濃度]。
免疫原性： 藉由自篩選直至最後一次安全性隨訪之抗藥物抗體(ADA)分析量測PD-L1/TGFβ陷阱之免疫原性。
效能評價： 藉由CT掃描或MRI評價腫瘤對抗PD-L1/TGFβ陷阱之反應。在後續隨訪時重複在基線時實施之掃描。一般而言，在後續腫瘤評估隨訪時，使用相同之成像方法及較佳相同之成像設備跟蹤在基線時檢測到之病灶。使用測徑器之量測值，若其滿足靶標病灶之RECIST 1.1，則皮膚轉移可根據RECIST 1.1用作靶標病灶。
血液及腫瘤中之潛在臨床反應標記物： 來自血液及腫瘤之若干潛在臨床反應標記物可與臨床結果相關。舉例而言：血漿中及腫瘤組織中之腫瘤突變負荷(TMB)、血漿中循環性腫瘤DNA (CtDNA)之含量、腫瘤中所評價之基因或基因印記及/或腫瘤中利用免疫組織化學(IHC)獲得之PD-L1表現程度與臨床結果相關。
結果： 藉由總體反應率(ORR)評估客觀腫瘤反應，其定義為達到完全反應(CR)或部分反應(PR)之最佳總體反應(BOR)之參與者數除以分析群體中之參與者數。無進展存活定義為自隨機化至如根據RECIST 1.1所評價之客觀疾病進展(PD)之第一次記錄或由於任何原因所致死亡(以先發生者為準)之時間。預期利用抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑之組合進行治療在初次接受治療晚期NSCLC患者中產生初始臨床活性。經治療之患者展現疾病反應(例如部分反應、完全反應、穩定疾病)及/或改良之存活(例如無進展存活及/或總體存活)。預期在初次接受治療晚期NSCLC患者或已接受基於鉑之化學療法及抗PD-1或抗PD-L1作為單一療法且其未成功之患者中，利用抗PD-L1/TGFβ陷阱與全身性化學治療劑組合治療、之後用抗PD-L1/TGFβ陷阱鞏固治療與單獨之全身性化學療法相比產生優異存活。
總之，發現抗PD-L1/TGFβ陷阱係經設計以同時靶向2種免疫抑制路徑PD-L1及TGF-β之創新首創雙功能融合蛋白，其在與全身性化學治療劑組合投與時改良晚期NSCLC之治療。序列 SEQ ID NO: 1 所分泌抗PD-L1 λ輕鏈之肽序列 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECSSEQ ID NO: 2 抗PDL1之所分泌H鏈之肽序列 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKSEQ ID NO: 3 抗PDL1/TGFβ陷阱之所分泌H鏈之肽序列 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGIPPHVQKSVNNDMIVTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 4 自抗PD-L1 λ輕鏈之轉譯起始密碼子至轉譯終止密碼子之DNA序列(在VL前之前導序列係來自尿激酶纖維蛋白溶酶原活化劑之信號肽)atgagggccctgctggctagactgctgctgtgcgtgctggtcgtgtccgacagcaagggc CAGTCCGCCCTGACCCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGCTCCCCTGGCCAGTCCATCACCATCAGCTGCACCGGCACCTCCAGCGACGTGGGCGGCTACAACTACGTGTCCTGGTATCAGCAGCACCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGATGATCTACGACGTGTCCAACCGGCCCTCCGGCGTGTCCAACAGATTCTCCGGCTCCAAGTCCGGCAACACCGCCTCCCTGACCATCAGCGGACTGCAGGCAGAGGACGAGGCCGACTACTACTGCTCCTCCTACACCTCCTCCAGCACCAGAGTGTTCGGCACCGGCACAAAAGTGACCGTGCTGggccagcccaaggccaacccaaccgtgacactgttccccccatcctccgaggaactgcaggccaacaaggccaccctggtctgcctgatctcagatttctatccaggcgccgtgaccgtggcctggaaggctgatggctccccagtgaaggccggcgtggaaaccaccaagccctccaagcagtccaacaacaaatacgccgcctcctcctacctgtccctgacccccgagcagtggaagtcccaccggtcctacagctgccaggtcacacacgagggctccaccgtggaaaagaccgtcgcccccaccgagtgctcaTGASEQ ID NO: 5 自轉譯起始密碼子至轉譯終止密碼子之DNA序列(mVK SP前導序列：小寫加下劃線；VH：大寫；具有K至A突變之IgG1m3：小寫字母；(G4S)×4-G (SEQ ID NO: 11)連接體：粗體大寫字母；TGFβRII：粗體加下劃線之小寫字母；兩個終止密碼子：粗體加下劃線之大寫字母)atggaaacagacaccctgctgctgtgggtgctgctgctgtgggtgcccggctccacaggc GAGGTGCAGCTGCTGGAATCCGGCGGAGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCAGCTACATCATGATGTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGTCCTCCATCTACCCCTCCGGCGGCATCACCTTCTACGCCGACACCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGATCAAGCTGGGCACCGTGACCACCGTGGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCCgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagagagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctatagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtccccgggtgctGGCGGCGGAGGAAGCGGAGGAGGTGGCAGCGGTGGCGGTGGCTCCGGCGGAGGTGGCTCCGGAatccctccccacgtgcagaagtccgtgaacaacgacatgatcgtgaccgacaacaacggcgccgtgaagttccctcagctgtgcaagttctgcgacgtgaggttcagcacctgcgacaaccagaagtcctgcatgagcaactgcagcatcacaagcatctgcgagaagccccaggaggtgtgtgtggccgtgtggaggaagaacgacgaaaacatcaccctcgagaccgtgtgccatgaccccaagctgccctaccacgacttcatcctggaagacgccgcctcccccaagtgcatcatgaaggagaagaagaagcccggcgagaccttcttcatgtgcagctgcagcagcgacgagtgcaatgacaacatcatctttagcgaggagtacaacaccagcaaccccgacTGATAA SEQ ID NO: 6 抗PD-L1(mut)/ TGFβ陷阱之所分泌λ輕鏈之多肽序列，其具有突變A31G、D52E、R99Y QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTYVFGTGTKVTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECSSEQ ID NO: 7 抗PD-L1(mut)/ TGFβ陷阱之所分泌重鏈之多肽序列 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSMYMMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAIYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGAGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGIPPHVQKSVNNDMIVTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 8 人類TGFβRII同種型A前體多肽(NCBI RefSeq登錄號：NP_001020018) MGRGLLRGLWPLHIVLWTRIASTIPPHVQKSDVEMEAQKDEIICPSCNRTAHPLRHINNDMIVTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDLLLVIFQVTGISLLPPLGVAISVIIIFYCYRVNRQQKLSSTWETGKTRKLMEFSEHCAIILEDDRSDISSTCANNINHNTELLPIELDTLVGKGRFAEVYKAKLKQNTSEQFETVAVKIFPYEEYASWKTEKDIFSDINLKHENILQFLTAEERKTELGKQYWLITAFHAKGNLQEYLTRHVISWEDLRKLGSSLARGIAHLHSDHTPCGRPKMPIVHRDLKSSNILVKNDLTCCLCDFGLSLRLDPTLSVDDLANSGQVGTARYMAPEVLESRMNLENVESFKQTDVYSMALVLWEMTSRCNAVGEVKDYEPPFGSKVREHPCVESMKDNVLRDRGRPEIPSFWLNHQGIQMVCETLTECWDHDPEARLTAQCVAERFSELEHLDRLSGRSCSEEKIPEDGSLNTTKSEQ ID NO: 9 人類TGFβRII同種型B前體多肽(NCBI RefSeq登錄號：NP_003233) MGRGLLRGLWPLHIVLWTRIASTIPPHVQKSVNNDMIVTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDLLLVIFQVTGISLLPPLGVAISVIIIFYCYRVNRQQKLSSTWETGKTRKLMEFSEHCAIILEDDRSDISSTCANNINHNTELLPIELDTLVGKGRFAEVYKAKLKQNTSEQFETVAVKIFPYEEYASWKTEKDIFSDINLKHENILQFLTAEERKTELGKQYWLITAFHAKGNLQEYLTRHVISWEDLRKLGSSLARGIAHLHSDHTPCGRPKMPIVHRDLKSSNILVKNDLTCCLCDFGLSLRLDPTLSVDDLANSGQVGTARYMAPEVLESRMNLENVESFKQTDVYSMALVLWEMTSRCNAVGEVKDYEPPFGSKVREHPCVESMKDNVLRDRGRPEIPSFWLNHQGIQMVCETLTECWDHDPEARLTAQCVAERFSELEHLDRLSGRSCSEEKIPEDGSLNTTKSEQ ID NO: 10 人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 IPPHVQKSVNNDMIVTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 11 (Gly4 Ser)4 Gly連接體 GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGSEQ ID NO: 12 抗PD-L1抗體MPDL3289A之所分泌重鏈可變區之多肽序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSSEQ ID NO: 13 抗PD-L1抗體MPDL3289A之所分泌輕鏈可變區之多肽序列 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRSEQ ID NO: 14 抗PD-L1抗體YW243.55S70之所分泌重鏈可變區之多肽序列 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSASEQ ID NO: 50 截短之人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 GAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 51 截短之人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 VKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 52 截短之人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 VTDNNGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 53 截短之人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 LCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 54 突變之人類TGFβRII同種型B細胞外結構域多肽 VTDNAGAVKFPQLCKFCDVRFSTCDNQKSCMSNCSITSICEKPQEVCVAVWRKNDENITLETVCHDPKLPYHDFILEDAASPKCIMKEKKKPGETFFMCSCSSDECNDNIIFSEEYNTSNPDSEQ ID NO: 55 抗 PD-L1 抗體之重鏈可變區之多肽序列 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISNDYWTWIRQHPGKGLEYIGYISYTGSTYYNPSLKSRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARSGGWLAPFDYWGRGTLVTVSSSEQ ID NO: 56 抗 PD-L1 抗體之輕鏈可變區之多肽序列 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLFYHSNQKHSLAWYQQKPGQPPKLLIYGASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYGYPYTFGGGTKVEIKSEQ ID NO: 57 抗 PD-L1 抗體之重鏈可變區之多肽序列 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGRIGPNSGFTSYNEKFKNRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGGSSYDYFDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 58 抗 PD-L1 抗體之輕鏈可變區之多肽序列 DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIHGTHLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEAEDTANYYCQQSFEDPLTFGQGTKLEIKSEQ ID NO: 59 抗 PD-L1 抗體之重鏈之多肽序列 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISNDYWTWIRQHPGKGLEYIGYISYTGSTYYNPSLKSRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARSGGWLAPFDYWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKSEQ ID NO: 60 抗 PD-L1 抗體之輕鏈之多肽序列 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLFYHSNQKHSLAWYQQKPGQPPKLLIYGASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYGYPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGECSEQ ID NO: 61 抗 PD-L1 抗體之重鏈之多肽序列 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGRIGPNSGFTSYNEKFKNRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGGSSYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGASEQ ID NO: 62 抗 PD-L1 抗體之輕鏈之多肽序列 DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIHGTHLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEAEDTANYYCQQSFEDPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC以引用方式併入
本文中所引用之每一專利文件及科學論文之全部揭示內容出於所有目的係以引用的方式併入。等效內容
本揭示內容可在不背離其精神或基本特性之情形下以其他特定形式體現。因此，應在所有方面將前述實施例視為說明性而非限制本文中所闡述之揭示內容。不同實施例之各個結構要素及所揭示之各個方法步驟可以各種組合及排列來使用，且所有此等變體均應視為本揭示內容之形式。因此，本揭示內容之範圍係由隨附申請專利範圍而非由前述說明來指示，且本揭示內容意欲涵蓋歸屬於申請專利範圍之等效內容之含義及範圍內之所有改變。
圖 1 係抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之示意圖，其包括經由(Gly4 Ser)4 Gly (SEQ ID NO: 11)連接體融合至TGFβ受體II之兩個細胞外結構域(ECD)之一種抗PD-L1抗體。
圖 2 顯示兩步ELISA之圖表，其展現抗PD-L1/TGFβ陷阱同時結合至PD-L1及TGFβ二者。
圖 3 係顯示抗PD-L1/TGFβ陷阱誘導IL-2含量急劇增加之圖表。
圖 4A 係顯示TGFβ1因應於抗PD-L1/TGFβ陷阱之活體內耗竭之圖表。線圖代表未經處理、同型對照及三個不同劑量，如圖例中所指示。圖 4B 係顯示TGFβ2因應於抗PD-L1/TGFβ陷阱之活體內耗竭之圖表。線圖代表未經處理、同型對照及三種不同劑量，如圖例中所指示。圖 4C 係顯示TGFβ3因應於抗PD-L1/TGFβ陷阱之活體內耗竭之圖表。線圖代表未經處理、同型對照及三種不同劑量，如圖例中所指示。圖 4D 係顯示在EMT-6腫瘤系統中抗PD-L1/TGFβ陷阱對PD-L1之佔有率支持受體結合模型之圖表。
圖 5 係顯示抗PD-L1/TGFβ陷阱對照(抗PD-L1(mut)/TGFβ)在Detroit 562異種移植物模型中之抗腫瘤效能之圖表。
圖 6A 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(1200 mg)相對於基於mg/kg之投藥(17.65 mg/kg)之整個群體的Cavg 分佈之盒鬚圖。圖 6B 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(1200 mg)相對於基於mg/kg之投藥(17.65 mg/kg)之整個群體的暴露AUC分佈之盒鬚圖。圖 6C 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(1200 mg)相對於基於mg/kg之投藥(17.65 mg/kg)之整個群體的Ctrough 分佈之盒鬚圖。圖 6D 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(1200 mg)相對於基於mg/kg之投藥(17.65 mg/kg)之整個群體的Cmax 分佈之盒鬚圖。
圖 6E 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(500 mg)相對於基於mg/kg之投藥(7.35 mg/kg)之整個群體的Cavg 分佈之盒鬚圖。圖 6F 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(500 mg)相對於基於mg/kg之投藥(7.35 mg/kg)之整個群體的暴露AUC分佈之盒鬚圖。圖 6G 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(500 mg)相對於基於mg/kg之投藥(7.35 mg/kg)之整個群體的Ctrough 分佈之盒鬚圖。圖 6H 係在68 kg中值體重之模擬群體中，固定(500 mg)相對於基於mg/kg之投藥(7.35 mg/kg)之整個群體的Cmax 分佈之盒鬚圖。
圖 7A 至7C 係顯示在與小鼠中腫瘤停滯相關之劑量及時間表下，抗PD-L1/TGFβ陷阱分子之所預測之PK及PD-L1受體佔有率(「RO」)之圖表。圖 7A 係顯示所預測之血漿濃度對時間之圖表。圖 7B 係顯示所預測之PBMC中之PD-L1 RO對時間之圖表。圖 7C 係顯示所預測之腫瘤中之PD-L1 RO對時間之圖表。
圖 8 係實例2中所闡述之研究設計之示意圖。圖中所使用之縮寫：DLT =劑量限制性毒性，PD =疾病進展，NSCLC =非小細胞肺癌，Q3W=每3週。
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Claims (103)

  1. 一種治療有需要之初次接受治療患者之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之包含第一多肽及第二多肽之蛋白質、同時進行全身性化學療法之第一步驟，及包含投與至少1800 mg之該蛋白質之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且 其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  2. 如請求項1之方法，其中該第一多肽包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。
  3. 如請求項1或2之方法，其中該劑量係1800 mg至3000 mg。
  4. 如請求項1至3中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg至2400 mg。
  5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg。
  6. 如請求項1至4中任一項之方法，其中該劑量係2400 mg。
  7. 如請求項1至4中任一項之方法，其中該蛋白質係每三週投與一次。
  8. 如請求項7之方法，其中該劑量係2100 mg，每三週投與一次。
  9. 如請求項7之方法，其中該劑量係2400 mg，每三週投與一次。
  10. 如請求項1至3中任一項之方法，其中該劑量係3000 mg，每三週投與一次。
  11. 如請求項1至10中任一項之方法，其中該全身性化學療法包含卡鉑(carboplatin)或順鉑(cisplatin)。
  12. 如請求項11之方法，其中該全身性化學療法包含卡鉑，其每三週投與一次。
  13. 如請求項12之方法，其中該卡鉑係在每21天之第1天以AUC 4至AUC 6 IV投與達至少四個週期。
  14. 如請求項11之方法，其中該全身性化學療法包含順鉑。
  15. 如請求項14之方法，其中該順鉑係在每21天之第1天以75-100 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  16. 如請求項11至15中任一項之方法，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與吉西他濱(gemcitabine)或太平洋紫杉醇(paclitaxel)。
  17. 如請求項16之方法，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與吉西他濱。
  18. 如請求項17之方法，其中該吉西他濱係在每21天之第1天及第8天以1000-1250 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  19. 如請求項16之方法，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與太平洋紫杉醇。
  20. 如請求項19之方法，其中該太平洋紫杉醇係在每21天之第1天以175-225 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  21. 如請求項19之方法，其中該太平洋紫杉醇係在每21天之第1天、第8天及第15天以100 mg/m2 白蛋白結合型投與達至少四個週期。
  22. 如請求項1至21中任一項之方法，其中該第二步驟進一步包含投與全身性化學治療劑。
  23. 如請求項1至22中任一項之方法，其中該NSCLC係鱗狀NSCLC。
  24. 如請求項1至22中任一項之方法，其中該NSCLC係非鱗狀NSCLC。
  25. 一種治療有需要之初次接受治療患者之晚期非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制非鱗狀NSCLC腫瘤生長之方法，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之包含第一多肽及第二多肽之蛋白質、同時進行包含培美曲塞(pemetrexed)之全身性化學療法之第一步驟，及向該患者投與至少1800 mg之該蛋白質與由培美曲塞組成之全身性化學療法之組合之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且 其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  26. 如請求項25之方法，其中該第一多肽包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。
  27. 如請求項25或26之方法，其中該劑量係1800 mg至3000 mg。
  28. 如請求項25至27中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg至2400 mg。
  29. 如請求項25至28中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg。
  30. 如請求項25至28中任一項之方法，其中該劑量係2400 mg。
  31. 如請求項25至28中任一項之方法，其中該蛋白質係每三週投與一次。
  32. 如請求項31之方法，其中該劑量係2100 mg，每三週投與一次。
  33. 如請求項31之方法，其中該劑量係2400 mg，每三週投與一次。
  34. 如請求項25至27中任一項之方法，其中該劑量係3000 mg，每三週投與一次。
  35. 如請求項25至34中任一項之方法，其中該全身性化學療法包含卡鉑或順鉑，其每三週投與一次。
  36. 如請求項35之方法，其中該全身性化學療法包含卡鉑。
  37. 如請求項36之方法，其中該卡鉑係在每21天之第1天以AUC 4至AUC 6 IV投與達至少四個週期。
  38. 如請求項35之方法，其中該全身性化學療法包含順鉑。
  39. 如請求項38之方法，其中該順鉑係在每21天之第1天以75 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  40. 如請求項25至39中任一項之方法，其中該培美曲塞係每三週投與一次。
  41. 如請求項25至40中任一項之方法，其中該培美曲塞係在每21天之第1天以500 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  42. 如請求項1至41中任一項之方法，其中該NSCLC為PD-L1陽性，或該NSCLC不為PD-L1陽性。
  43. 一種治療患者之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法，該患者在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之包含第一多肽及第二多肽之蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與至少1800 mg之該蛋白質之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  44. 如請求項43之方法，其中該第一多肽包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。
  45. 如請求項43或44之方法，其中該劑量係1800 mg至3000 mg。
  46. 如請求項43至45中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg至2400 mg。
  47. 如請求項43至46中任一項之方法，其中該劑量係2100 mg。
  48. 如請求項43至46中任一項之方法，其中該劑量係2400 mg。
  49. 如請求項43至46中任一項之方法，其中該蛋白質係每三週投與一次。
  50. 如請求項49之方法，其中該劑量係2100 mg，每三週投與一次。
  51. 如請求項49之方法，其中該劑量係2400 mg，每三週投與一次。
  52. 如請求項45之方法，其中該劑量係3000 mg，每三週投與一次。
  53. 如請求項43至52中任一項之方法，其中該免疫療法包含抗PD-L1或抗PD-1抗體。
  54. 如請求項43至53中任一項之方法，其中該多西他賽係在每21天之第1天以75-100 mg/m2 IV投與達四個週期。
  55. 如請求項43至54中任一項之方法，其中該NSCLC係鱗狀NSCLC。
  56. 如請求項43至54中任一項之方法，其中該NSCLC係非鱗狀NSCLC。
  57. 如請求項1至56中任一項之方法，其中該治療使該患者產生疾病反應或經改良之存活。
  58. 如請求項57之方法，其中該疾病反應係完全反應、部分反應或穩定疾病。
  59. 如請求項57之方法，其中該存活係無進展存活(PFS)。
  60. 如請求項1至59中任一項之方法，其中該蛋白質係藉由靜脈內投與來投與。
  61. 如請求項60之方法，其中該靜脈內投與係利用包含含有該蛋白質之調配物之預填充袋、預填充筆或預填充注射器來實施。
  62. 如請求項61之方法，其中該袋連接至包含管及/或針之通道。
  63. 如請求項1至62中任一項之方法，其中該第二步驟持續31個或更多個週期。
  64. 一種包含第一多肽及第二多肽之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其用於治療有需要之初次接受治療患者之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法中，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之該蛋白質、同時進行全身性化學療法之第一步驟，及包含投與至少1800 mg之該蛋白質之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且 其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  65. 一種包含第一多肽及第二多肽之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其用於治療有需要之初次接受治療患者之晚期非鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制非鱗狀NSCLC腫瘤生長之方法中，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之該蛋白質、同時進行包含培美曲塞之全身性化學療法之第一步驟，及向該患者投與至少1800 mg之該蛋白質與由培美曲塞組成之全身性化學療法之組合之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且 其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  66. 一種包含第一多肽及第二多肽之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其用於治療患者之晚期非小細胞肺癌(NSCLC)或抑制NSCLC腫瘤生長之方法中，該患者在先前利用免疫療法與化學療法之組合進行治療時或在先前利用化學療法進行治療、隨後利用免疫療法治療時或在先前利用免疫療法、隨後利用基於鉑之化學療法進行治療時指示具有轉移性NSCLC疾病進展，該方法包含向該患者投與至少1800 mg劑量之該蛋白質、同時進行包含多西他賽之全身性化學療法之第一步驟，及投與至少1800 mg之該蛋白質之第二步驟， 其中該第一多肽包含：(a) 結合至人類蛋白質程式化死亡配體1 (PD-L1)之抗體之重鏈之至少可變區；及(b) 能夠結合轉變生長因子β (TGFβ)之人類轉變生長因子β受體II (TGFβRII)或其片段， 其中該第二多肽包含結合PD-L1之抗體之輕鏈之至少可變區，且其中該第一多肽之該重鏈及該第二多肽之該輕鏈在組合時形成結合PD-L1之抗原結合位點。
  67. 如請求項64至66中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該第一多肽包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列。
  68. 如請求項64至67中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係1800 mg至3000 mg。
  69. 如請求項64至68中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係2100 mg至2400 mg。
  70. 如請求項64至69中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係2100 mg。
  71. 如請求項64至69中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係2400 mg。
  72. 如請求項64至69中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該蛋白質係每三週投與一次。
  73. 如請求項72所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係2100 mg，每三週投與一次。
  74. 如請求項72所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係2400 mg，每三週投與一次。
  75. 如請求項64至68中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該劑量係3000 mg，每三週投與一次。
  76. 如請求項64或65或依附於請求項64或65之請求項67至75中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含卡鉑或順鉑。
  77. 如請求項76所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含卡鉑，其每三週投與一次。
  78. 如請求項77所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該卡鉑係在每21天之第1天以AUC 4至AUC 6 IV投與達至少四個週期。
  79. 如請求項76所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含順鉑。
  80. 如請求項79所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該順鉑係在每21天之第1天以75-100 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  81. 如依附於請求項64之請求項76至80中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與吉西他濱或太平洋紫杉醇。
  82. 如請求項81所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與吉西他濱。
  83. 如請求項82所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該吉西他濱係在每21天之第1天及第8天以1000-1250 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  84. 如請求項81所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該全身性化學療法包含向該患者同時投與太平洋紫杉醇。
  85. 如請求項84所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該太平洋紫杉醇係在每21天之第1天以175-225 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  86. 如請求項84所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該太平洋紫杉醇係在每21天之第1天、第8天及第15天以100 mg/m2 白蛋白結合型投與達至少四個週期。
  87. 如請求項64或依附於請求項64之請求項67至86中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該第二步驟進一步包含投與全身性化學治療劑。
  88. 如請求項64或依附於請求項64之請求項67至87中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該NSCLC係鱗狀NSCLC。
  89. 如請求項64或依附於請求項64之請求項67至87中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該NSCLC係非鱗狀NSCLC。
  90. 如請求項65或依附於請求項65之請求項67至80中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該培美曲塞係每三週投與一次。
  91. 如請求項65或依附於請求項65之請求項67至80或90中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該培美曲塞係在每21天之第1天以500 mg/m2 IV投與達至少四個週期。
  92. 如請求項64或65或依附於請求項64或65之請求項67至91中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該NSCLC為PD-L1陽性，或該NSCLC不為PD-L1陽性。
  93. 如請求項66或依附於請求項66之請求項67至75中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該免疫療法包含抗PD-L1或抗PD-1抗體。
  94. 如請求項66或依附於請求項66之請求項67至75或93中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該多西他賽係在每21天之第1天以75-100 mg/m2 IV投與達四個週期。
  95. 如請求項66或依附於請求項66之請求項67至75或93至94中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該NSCLC係鱗狀NSCLC。
  96. 如請求項66或依附於請求項66之請求項67至75或93至94中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該NSCLC係非鱗狀NSCLC。
  97. 如請求項64至96中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該治療使該患者產生疾病反應或經改良之存活。
  98. 如請求項97所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該疾病反應係完全反應、部分反應或穩定疾病。
  99. 如請求項97所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該存活係無進展存活(PFS)。
  100. 如請求項64至99中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該蛋白質係藉由靜脈內投與來投與。
  101. 如請求項100所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該靜脈內投與係利用包含含有該蛋白質之調配物之預填充袋、預填充筆或預填充注射器來實施。
  102. 如請求項101所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該袋連接至包含管及/或針之通道。
  103. 如請求項64至102中任一項所使用之抗PD-L1/TGFβ陷阱蛋白質，其中該第二步驟持續31個或更多個週期。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2023534738A (ja) * 2020-07-24 2023-08-10 ▲邁▼威（上海）生物科技股▲フン▼有限公司 ＴＧＦ－β ＲＩＩ突然変異体及びその融合タンパク質
CN114573701A (zh) * 2020-12-02 2022-06-03 上海华奥泰生物药业股份有限公司 抗PD-L1/TGF-β双功能抗体及其用途

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130110045A1 (en) * 2011-10-31 2013-05-02 Ming-Yuan Wu Single use intravenous therapy administering device with needle safety covers
DK3105246T3 (da) * 2014-02-10 2021-06-14 Merck Patent Gmbh Målrettet TGF-beta-inhibering
EP3471726A4 (en) * 2016-06-21 2019-10-09 X4 Pharmaceuticals, Inc. CXCR4 INHIBITORS AND USES THEREOF
SG11201901126UA (en) * 2016-08-12 2019-03-28 Merck Patent Gmbh Combination therapy for cancer
SG11201906157YA (en) * 2017-01-07 2019-08-27 Merck Patent Gmbh Dosing regimens and dosage forms for targeted tgf-b inhibition
TW202011954A (zh) * 2018-06-13 2020-04-01 德商馬克專利公司 第三期nsclc之治療及與該治療相關之病理症狀之減緩

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