TW201943423A - 芡實萃取物於抑制icam-1基因表現之應用 - Google Patents
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Abstract
一種使用芡實萃取物於製造一組合物之用途，其中該組合物係用於抑制ICAM-1基因表現，從而達到治療、預防或調節與ICAM-1基因相關之疾病或生理機能的效果。
Description
本發明係關於芡實萃取物之應用，包括使用該萃取物於治療、預防或調節與ICAM-1
基因相關之疾病或生理機能，尤其是使用該萃取物於治療及／或預防心血管疾病。
近年，心血管疾病在各國的發生率屢屢居高不下，且致死率極高，每年約造成1700萬人死亡。已知，心血管疾病的發生與血管內皮發炎相關，其中又以動脈粥狀硬化最為常見的心血管疾病。所謂動脈粥狀硬化，係指血管中的膽固醇逐漸累積在血管壁上形成粥狀斑塊，導致血管壁增厚、變硬、失去彈性，使得血液無法順暢流過血管的病變狀態，可能引發其他心血管疾病（例如缺血性心臟病、中風及週邊動脈阻塞等）。已知，患有高血壓、高血脂、糖尿病等疾病之患者、有抽菸或喝酒習慣者、缺乏運動者、以及肥胖者，皆是動脈粥狀硬化的高危險群。
目前臨床上，常使用降血壓藥、降血糖藥、降血脂藥、或抗凝血劑等藥物對動脈粥狀硬化的高危險群或患者進行控制或治療。當患者的情況嚴重時，則採血管內膜剝除術或血管內支架放置術等外科手術方式進行治療，但前述手術治療方式皆屬於有創手術、術後恢復較慢，因此，持續開發可有效治療及／或改善動脈粥狀硬化等心血管疾病的藥物或方法乃有其必需性及迫切性。
已知，ICAM-1
基因的表現量增加會造成血管內皮發炎，進而導致心血管疾病的發生。此外，研究亦顯示，乳癌及沾黏性關節囊炎的發生與ICAM-1
基因的過度表現相關，此可參見例如：Caridad Rosette等人發表於 2005 的文獻，Role of ICAM1 in invasion of human breast cancer cells、以及Yang-Soo Kim等人發表於 2013 的文獻，Intercellular Adhesion Molecule-1 (ICAM-1, CD54) Is Increased in Adhesive Capsulitis，該等文獻之全文併於此處以供參考。
因此，若可有效抑制ICAM-1
基因的表現，即可達到抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、預防沾黏性關節囊炎、幫助維持血管彈性、及輔助關節保健的效果。
本案發明人研究發現，芡實萃取物具有抑制ICAM-1
基因的表現之效果，故可用於抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、預防沾黏性關節囊炎、幫助維持血管彈性、及／或輔助關節保健的效果。
本發明之一目的，在於提供一種使用芡實萃取物於製造一組合物之用途，其中該組合物係用於抑制ICAM-1
基因表現。較佳地，該芡實萃取物係芡實之極性溶劑萃取物，該極性溶劑係選自以下群組：水、C1-C4醇類、及前述之組合。
根據本發明所提供之組合物可以是一醫藥組合物或一食品組合物，其中，該根據本發明所提供之醫藥組合物係可用於抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎（adhesive capsulitis）、及預防沾黏性關節囊炎之至少一者。舉例言之，該根據本發明所提供之醫藥組合物係可用於治療及／或預防動脈粥狀硬化。此外，該根據本發明所提供之食品組合物係可用於幫助維持血管彈性、及輔助關節保健的至少一者。
本發明之另一目的，在於提供一種抑制ICAM-1
基因表現的方法，其係包含對一有需要之個體投予一有效量之芡實萃取物。本發明方法可用於以下之至少一者：抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、預防沾黏性關節囊炎、幫助維持血管彈性、及輔助關節保健。舉例言之，該根據本發明之方法係可用於治療及／或預防動脈粥狀硬化。於根據本發明之方法中，所採用之芡實萃取物係可以上述之組合物的形式投予至該有需要之個體。
本發明之詳細技術內容及部分具體實施態樣，將描述於以下內容中，以供本發明所屬領域具通常知識者據以明瞭本發明之特徵。
以下將描述根據本發明之部分具體實施態樣；惟，在不背離本發明精神下，本發明尚可以多種不同形式之態樣來實踐，不應將本發明保護範圍解釋為限於說明書所具體陳述者或後附申請專利範圍所界定者。
除非文中有另外說明，於本說明書中（尤其是在後述專利申請範圍中）所使用之「一」、「該」及類似用語應理解為包含單數及複數形式；所謂「治療」，不應被解釋為治療一個體直至完全恢復，而應包括將一個體之疾病進展或症狀維持在一實質上靜態之程度、增加一個體之恢復速率、改善一具體病況的嚴重性、或提高一患者之生命品質；所謂「預防」係指抑制或防止一具體病況的發作、或維持敏感個體之良好健康狀態或建立該個體對疾病的耐受性；所謂「調節」係指正向調控（包括誘導、刺激、及增強）或負向調控（包括抑制、及減弱）以使個體朝向所述生理機能之正常狀態者；所謂「個體」係指哺乳動物，該哺乳動物可以為人類或非人動物。
芡實（Euryale seed，或稱「qian shi」），係睡蓮科芡屬植物的種子。本案發明人研究發現，芡實萃取物具有抑制ICAM-1
基因表現的效果。因此，本發明係關於使用芡實萃取物以抑制ICAM-1
基因表現之應用，此包括：使用芡實萃取物於製備一組合物之用途、以及一使用該芡實萃取物之方法，包含對一有需要之個體投予一有效量之芡實萃取物，以抑制ICAM-1
基因表現。
根據本發明所採用之芡實萃取物，係可透過萃取製程而提供。具體言之，本發明所採用之芡實萃取物可透過包含如下步驟之操作而提供：（a）以一萃取溶劑萃取芡實，以提供一萃取液；（b）對該萃取液進行離心處理，取上清液進行過濾，以提供一濾液；（c）對該濾液進行減壓濃縮，以獲得一芡實萃取物。
於步驟（a）中，該萃取溶劑係一極性溶劑，且該極性溶劑可以為水、醇（例如C1-C4醇）、或其組合。此外，萃取溶劑的用量並無特殊限制，通常係採用可以分散原料之用量。舉例言之，可於步驟（a）中採用萃取溶劑：芡實 = 1~20：1的體積比用量。於本發明之一具體實施態樣中，係以萃取溶劑：芡實 = 10：1之體積比用量進行步驟（a）之萃取。
於步驟（a）中，可視所採用之萃取溶劑來選用合宜的萃取時間。以採用水作為萃取溶劑，且萃取溶劑：芡實之體積比為約10~20：1為例，通常萃取歷時0.5~2小時。此外，可視需要於進行步驟（a）之前或之時，輔以例如加溫、冷卻、攪拌、超音波等一或多個其它操作，以提高萃取效果。舉例言之，於本發明一具體實施態樣中，係於進行步驟（a）之前進行攪拌操作，並於85°C下進行步驟（a），歷時0.5小時。為儘可能達到最大的萃取效益，視需要地，可於進行步驟（b）之前，以相同或不同的萃取溶劑對芡實進行重複萃取，並合併多次萃取所得之萃取液以提供進行步驟（b）之萃取液；亦可重複進行步驟（b）。
於步驟（c）中，可視需要調整減壓濃縮時的溫度，以避免芡實萃取物中的有效成分變性。舉例言之，可於45至70°C進行步驟（c）之減壓濃縮，以維持芡實萃取物中有效成分之安定性。於本發明一具體實施態樣中，係於55至65°C進行步驟（c）之減壓濃縮以提供所需之芡實萃取物。
根據本發明所提供之組合物係一醫藥組合物或一食品組合物。其中，根據本發明所提供之醫藥組合物係可用於以下之至少一者：抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、及預防沾黏性關節囊炎。其中，該心血管疾病尤其是指動脈粥狀硬化。根據本發明所提供之食品組合物，係可用於以下之至少一者：幫助維持血管彈性、及輔助關節保健。
根據本發明所提供之醫藥組合物係可呈任何合宜的型式，並無特殊限制，端視所欲之用途而呈對應之合宜劑型。舉例言之，但不以此為限，該醫藥組合物可以口服或非經口服（例如：經皮、靜脈注射或皮下注射）之投藥方式施用至有需要之個體上。其中，視使用形式及用途而定，可選用合宜之載劑以提供該醫藥組合物，其中，該載劑包括賦形劑、稀釋劑、輔助劑、安定劑、吸收延遲劑、崩散劑、增溶劑、乳化劑、抗氧化劑、黏合劑、結合劑、增黏劑、分散劑、懸浮化劑、潤滑劑、吸濕劑等。
以適於口服之劑型為例，於根據本發明所提供之醫藥組合物中係可含有任何不會不利影響活性成分（即，芡實萃取物）之所欲效益的醫藥上可接受之載劑，例如：水、食鹽水、葡萄糖（dextrose）、甘油、乙醇或其類似物、纖維素、澱粉、糖膨潤土（sugar bentonite）、及前述之組合。可利用任何合宜之方法，將該醫藥組合物以適於口服投藥的劑型提供，例如：錠劑（例如糖衣錠）、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、流浸膏劑、溶液劑、糖漿劑、懸液劑、酊劑等。
以適於經皮投予之劑型為例，根據本發明所提供之醫藥組合物可呈供直接外用之貼布、乳液、乳霜、凝膠（例如水凝膠）、膏狀物（例如分散膏、軟膏）、噴霧劑、或溶液（例如懸浮液）等形式，但不以此為限。
至於適於皮下、或靜脈內注射之針劑或點滴劑型，則可於根據本發明所提供之醫藥組合物中含有一或多種例如等張溶液、鹽類緩衝液（如磷酸鹽緩衝液或檸檬酸鹽緩衝液）、增溶劑、乳化劑、5%糖溶液、以及其他載劑等成分，以靜脈輸注液、乳劑靜脈輸注液、乾粉注射劑、懸液注射劑、或乾粉懸液注射劑等劑型提供該醫藥組合物。或者，將該醫藥組合物製備成一注射前固體，以可溶於其他溶液或懸浮液中之劑型、或可乳化之劑型提供該注射前固體，並於投予至有需要之個體之前，將該注射前固體溶於其他溶液或懸浮液中或將其乳化，以提供所欲之注射劑。
根據本發明所提供之醫藥組合物係可以一日一次、一日多次、或數日一次等不同投藥頻率施用，端視投予個體之需求、年齡、體重、及健康況狀而異。於根據本發明所提供之醫藥組合物中，可視實際應用需求，調整芡實萃取物於組合物中的含量比例。此外，該醫藥組合物可視需要另含一或多種其他活性成分（例如降血脂藥、降血壓藥、及抗凝血劑等），或者與含該一或多種其他活性成分之藥物併用，以進一步加強該醫藥組合物之功效或增加製劑配方的運用靈活性與調配度，只要該其他活性成分對本發明活性成分（即，芡實萃取物）之效益沒有不利的影響即可。
視需要地，可於根據本發明所提供之醫藥組合物或食品組合物中另含有合宜用量之添加劑，例如可提高該醫藥組合物或食品組合物於服用時的口適感及視覺感受之調味劑、調色劑、著色劑等，以及可改善該醫藥組合物或食品組合物的穩定性及儲存性之緩衝劑、保存劑、防腐劑、抗菌劑、抗真菌劑等。
根據本發明所提供之食品組合物可以是健康食品、保健食品、機能性食品、營養補充食品或特殊營養食品，且可製成例如乳製品、肉類加工品、麵包類、麵食品、餅乾、口含錠、膠囊、果汁類、茶類、運動飲料、營養飲料等產品，但不以此為限。較佳地，根據本發明所提供的食品組合物係以健康食品的型式提供。
根據本發明所提供之健康食品、保健食品、機能性食品、營養補充食品及特殊營養食品係可以一日一次、一日多次、或數日一次等不同頻率食用，端視投予個體之年齡、體重、及健康狀況而異。亦可針對特定族群之需要，調整根據本發明所提供之健康食品、保健食品、機能性食品、營養補充食品及特殊營養食品中芡實萃取物的含量，例如，調整至每日應服用的量。
針對根據本發明所提供之健康食品、保健食品、機能性食品、營養補充食品及／或特殊營養食品，可於其外包裝上標示建議使用量、特定族群（例如中風患者、心臟病患者、及孕婦等）的使用標準及條件、或與其他食品或醫藥共同服用的建議事項等，以利使用者在無醫師、藥師或相關執事人員指導下自行服用而無安全疑慮。於根據本發明所提供之食品組合物中，有關該芡實萃取物之態樣以及相關之應用，均如上述之說明。
本發明亦提供一種抑制ICAM-1
基因表現的方法，其係包含對一有需要之個體投予一有效量之芡實萃取物。較佳地，該方法係用以治療、預防或調節與ICAM-1
基因相關之疾病或生理機能，尤其係用於治療及／或預防心血管疾病。於根據本發明之方法中，所採用之芡實萃取物係可以一組合物的形式投予至該有需要之個體。有關該組合物之投予態樣、投予途徑、投予形式、施用頻率、以及相關之應用，均如上述之說明。
茲以下列實施例進一步例示說明本發明。其中該等實施例僅提供作為說明，而非用以限制本發明之保護範圍。本發明保護範圍係如後附申請專利範圍所示。
實施例
於以下實施例中，所使用的物料來源如下： 1. 芡實：購自台灣四季有機國際有限公司。 2. 人類臍帶靜脈內皮細胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVEC）：購自BCRC，產品編號H-UV001。 3. EC培養基：M200培養基（購自Gibco，產品編號M-200-500）+10% LSGS（Low Serum Growth Supplement，購自Gibco，產品編號S-003-10）。 4. LPS（Lipopolysaccharides）：購自Gibco，產品編號00-4976。 5. RNA萃取套組（RNA Extraction Kit）：購自GENEmark。 6. 反轉錄酶（SuperScript® III Reverse Transcriptase）：購自Invitrogen。 7. KAPA SYBR FAST qPCR套組：購自KAPA Biosystems。 8. Step One Plus儀器：購自ABI。
[
製備實施例
]
芡實萃取物之製備
對芡實進行以下操作處理，以提供芡實萃取物： 1. 將芡實（未去皮）與水混合（芡實與水之體積比為1：10），並於85°C下進行萃取，歷時0.5小時，以提供一萃取液； 2. 取步驟1之萃取液進行離心，取上清液後，以濾網進行過濾，以提供一濾液； 3. 於55至65°C下，對步驟2之濾液進行減壓濃縮，以提供一芡實萃取物。
實施例
1
：本發明芡實萃取物於抑制
ICAM-1
基因表現的效果
將人類臍帶靜脈內皮細胞接種於6-孔盤（每孔1 x 105
個細胞）中，培養1小時後，將細胞分為控制組、LPS組及萃取物組，並分別以如下培養基進行培養，歷時3小時： 1. 控制組：EC培養基； 2. LPS組：含有1微克／毫升LPS之EC培養基； 3. 萃取物組：含有1微克／毫升LPS、及0.5毫克／毫升由[製備實施例B]獲得之芡實萃取物之EC培養基。
其後，分別收集上述各組細胞，以RNA萃取套組進行RNA萃取，再以反轉錄酶將該RNA反轉錄為cDNA。接著，使用ABI Step One Plus儀器及KAPA SYBR FAST qPCR套組對前述之cDNA進行qPCR（quantitative polymerase chain reaction），以檢測各組細胞之ICAM-1
基因的表現量。
上述實驗係進行三重複，將該三重複之結果平均後，再以控制組的結果為基準（即，將控制組的基因表現量設定為1倍），計算LPS組及萃取物組的基因相對表現量。結果示於圖1。
由圖1可知，相較於控制組，LPS組的ICAM-1
基因表現量顯著上升，顯示LPS確實可以誘發血管內皮發炎。相較於LPS組，萃取物組的ICAM-1
基因表現量則顯著下降，顯示本發明芡實萃取物可顯著降低LPS所引起的ICAM-1
基因表現量上升。前述結果顯示，本發明芡實萃取物確實可有效抑制ICAM-1
基因表現量，故可用於抑制血管內皮發炎、治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、預防沾黏性關節囊炎、幫助維持血管彈性、及輔助關節保健。
圖1係顯示本發明芡實萃取物於抑制ICAM-1
基因表現的效果，其中，「控制組」係於不含LPS及芡實萃取物之培養液中培養3小時的人類臍帶靜脈內皮細胞，「LPS組」係於含有LPS但不含芡實萃取物的培養液中培養3小時的人類臍帶靜脈內皮細胞，「萃取物組」則係於含有LPS及芡實萃取物的培養液中培養3小時的人類臍帶靜脈內皮細胞（#表示與LPS組有顯著差異，p＜0.05）。
Claims (6)
- 一種使用芡實萃取物於製造一組合物之用途，其中該組合物係用於抑制ICAM-1 基因表現。
- 如請求項1之用途，其中該芡實萃取物係芡實之極性溶劑萃取物，該極性溶劑係選自以下群組：水、C1-C4醇類、及前述之組合。
- 如請求項1至2中任一項之用途，其中該組合物係一醫藥組合物，用於抑制血管內皮發炎。
- 如請求項1至2中任一項之用途，其中該組合物係一醫藥組合物，用於以下之至少一者：治療心血管疾病、預防心血管疾病、治療乳癌、預防乳癌、治療沾黏性關節囊炎、及預防沾黏性關節囊炎。
- 如請求項4之用途，其中該心血管疾病係動脈粥狀硬化。
- 如請求項1至2中任一項之用途，其中該組合物係一食品組合物，用於幫助維持血管彈性、及輔助關節保健的至少一者。
Priority Applications (2)
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| TW107112288A TW201943423A (zh) | 2018-04-10 | 2018-04-10 | 芡實萃取物於抑制icam-1基因表現之應用 |
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| CN110368417A (zh) * | 2018-04-12 | 2019-10-25 | 百岳特生物技术（上海）有限公司 | 芡实萃取物于抑制icam-1基因表现的应用 |
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