TW201533014A - 使用環己烯酮化合物之治療方法及組成物 - Google Patents

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Abstract

本發明係針對涉及環己烯酮化合物之治療方法與組成物，其中該化合物會抑制法尼基轉移酶(farnesyltransferase)或Ras。該治療方法(譬如用於治療癌症)包含以一環己烯酮化合物和一抗癌劑接觸腫瘤。

Description

使用環己烯酮化合物之治療方法及組成物
本發明係有關使用環己烯酮化合物之治療方法及組成物。
發明背景
Ras是給予在包括人類細胞之細胞內所發現的一類相關蛋白家族的名稱。所有的Ras蛋白家族成員屬於一類稱作小型GTPase的蛋白，並涉及在細胞內傳遞信號(細胞信號轉導)。Ras是Ras蛋白超級家族的原型成員，該等蛋白之3D結構皆相關並調控多元分歧的細胞行為。
當Ras被到來的信號所「啟動」時，它隨後啟動其他蛋白，最終啟動涉及細胞生長、分化與存活的基因。結果，Ras基因的突變可能導致產生永久激活的Ras蛋白。此可能造成細胞內部非預期與過度活躍的信號傳導，即使並無到來的信號。因為彼等信號引致細胞生長和分裂，過度活躍的Ras信號傳導最終可能導致癌症。Ras是在人類癌症中最常見的致癌基因-永久激活Ras的突變在20-25%的所有人類腫瘤及高達90%的某類癌症(譬如胰臟癌)中發現到。為此，Ras抑制劑正被研究而供用於治療癌症以及帶 有Ras過度表現之其他疾病。
Ras蛋白係作用為控制細胞內信號傳導網絡的二元分子開關。由Ras調控的信號路徑係控制諸如肌動蛋白細胞骨架完整性、增殖、分化、細胞黏附、凋亡、和細胞遷移的過程。Ras和Ras-相關蛋白在癌症中經常失去調控，從而導致增多之侵襲與轉移、以及減少之凋亡。
MAPK/ERK路徑(亦被稱為Ras-Raf-MEK-ERK路徑)是細胞內的蛋白鏈，其溝通來自細胞表面上的受體至細胞核中的DNA的信號。該信號係於信號傳導分子結合至細胞表面上的受體時啟始並於細胞核中的DNA表現出一蛋白且細胞內產生若干變化，例如細胞分裂時結束。該路徑包括眾多蛋白，包括了MAPK(絲裂原激活蛋白激酶，最初被稱作為ERK，細胞外信號調控激酶)，其藉由添加磷酸基團至鄰近蛋白以作為「開」或「關」之開關來進行溝通。整體而言，該細胞外絲裂原係結合至膜配位體。此使得Ras的GDP替換成GTP。現在，GTP可以激活MAP3K(譬如Raf)，MAP3K激活了MAP2K，而MAP2K了激活MAPK。MAPK現在可激活轉錄因子，例如myc。
發明概要
在一態樣中，本案提供的是數種用於抑制一個體中的法尼基轉移酶的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥投予該對其有需要之個體： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基(glucosyl)，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在另一態樣中，本案提供的是數種用於抑制一個體中的Ras的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥、以及Ras抑制劑投予該對其有需要之個體： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基、和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在另一態樣中，本案提供的是數種用於治療一人類個體中的癌症的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及Ras-PI3K-Akt-mTOR路徑之抑制劑投予一對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在另一態樣中，本案提供的是數種用於在一個體中以次優量(sub-optimal amount)之Ras抑制劑來治療疾病的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥投予該對其有需要之個體： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
又在另一態樣中，本案提供的是數種用於治療一人類個體中的癌症的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及一或多個抗癌劑投予一對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在另一態樣中，本案提供的是數種用於在施用抗癌療法之前致敏化(sensitizing)癌症細胞的方法，該方法包含以一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥接觸該癌症細胞： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、 C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在另一態樣中，本案提供的是一種用於治療對Ras、mTOR、PI3K或Akt抑制劑具抗性(resistant)、頑性(refractory)或無反應之癌症患者的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥投予該對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔 基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
併入本案以為參照之內容
本說明書提及之所有公開案、專利、和專利申請案係以參照方式併入本案，正如同每件個別公開案、專利、或專利申請案被明確地且個別地指明以參照方式併入之相同程度。
本發明的新穎特徵係尤其載列於隨附之請求項。藉由參照載列例示具體例之下列詳細說明，將獲得對本發明特徵與優點的更佳理解，其中使用了本發明原理，以及其隨附圖式：圖1顯示化合物1在HepG2、A549、與H838細胞株中刺激ERK磷酸化作用的例示性結果。HepG2、A549、與H838細胞株係血清挨餓(serum-starved)過夜並以指定濃度的化合物1攻毒1小時。隨後，全細胞裂解液(Whole cell lysates)以磷化-ERK1/2抗體進行免疫墨點分析，並以對β-肌動蛋白具專一性的抗體再次探測。一複本薄膜則以總體ERK1/2抗體進行探測。p-ERK1/2對β-肌動蛋白的相對表現位準以光密度測定法(densitometry)定量。該實驗重覆進 行了三次。
圖2A-C顯示例示性化合物1在數種癌症細胞株中抑制Ras加工的繪示性有效結果。(2A)A549與H838細胞以不同濃度的化合物1進行處理，並使之生長於含血清(10% FBS)或無血清(無FBS)條件下歷時24小時。(2B)H838、(2C)HepG2與K562細胞以不同濃度的化合物1進行處理，並使之生長於無血清(無FBS)條件下歷時24小時。全細胞裂解液隨後以Ras抗體進行免疫墨點分析。一複本薄膜以GAPDH抗體進行探測。未經加工相對經加工Ras的相對表現位準以光密度測定法加以定量。該實驗重覆進行了三次。直條代表平均值±SEM。*P<0.05，**P<0.01
圖3A-C係顯示化合物1於活體外抑制法尼基轉移酶的異戊二烯基化(prenylation)活性並在細胞內和FPP相競爭的繪示性有效結果。(3A)化合物1與FPP的化學結構。(3B)H838細胞如圖所示以化合物1或FPP刺激24小時。全細胞裂解液隨後以Ras抗體進行免疫墨點分析。一複本薄膜以GAPDH抗體進行探測。未經加工相對經加工Ras的相對表現位準以光密度測定法加以定量。該實驗重覆進行了三次。(3C)由FTase所調控之以NBD-FPP進行之異戊二烯基化作用後的螢光標記H-Ras-GST的SDS-PAGE。下方欄位顯示以考馬斯亮藍(Coomassie blue)進行染色的相同凝膠。
圖4A-D係顯示人類FTase和化合物1、由CIFM所衍生之L739、750擬肽及FPP受質相複合的模型結構。(4A)複合有化合物1之FTase的條帶狀卡通示意圖。(4B)化合物1 (綠)與FPP(紫)同時結合至FTase。(4C)複合有化合物1之FTase的條帶狀卡通示意圖。推斷之氫鍵以虛線表示。(4D)複合有化合物1和由CIFM所衍生之L739、750之FTase的條帶狀卡通示意圖。
圖5A-C顯示化合物1在H838細胞中引發自噬活性的繪示性有效結果。H838細胞以不同濃度的化合物1進行處理，並使之於無血清條件下生長。(5A)細胞於處理後0、24與48小時收獲，並接受以貝克林-1(Beclin-1)抗體進行的免疫墨點分析。(5B)在處理24小時之後製備出全細胞裂解液，並以LC3B抗體進行免疫墨點分析。一複本薄膜以GAPDH抗體予以探測。LC3B-I相對LC3B-II的相對表現位準以光密度測定法加以定量。(5C)內源性LC3B在自噬體內的分佈係以共焦顯微鏡進行偵測。該實驗重覆進行了三次。直條代表平均值±SEM。*P<0.05，**P<0.01
圖6係顯示在癌症細胞株中化合物1的細胞毒性活性和Ras與EGFR蛋白位準之間的繪示性關聯性。全細胞裂解液以SDS-PAGE進行解析並以Ras抗體進行免疫墨點分析。一複本薄膜以對於EGFR或GAPDH具專一性的抗體進行探測。該實驗重覆進行三次。
圖7係顯示一例示性示意圖，其繪示出化合物1的推測作用機制。帶有末端箭頭的直線指示激活，而末端帶有垂直條的直線表示抑制。紅色表示向下調控且藍色表示向上調控。帶點狀圓圈的灰色代表尚未被驗證的分子。虛線邊緣指示尚未被驗證的交互作用。「P」表示磷酸化作 用。
發明詳細說明
法尼基轉移酶(Farnesyltransferase；FTase)是異戊二烯基轉移酶群組中三種酶的其中之一者。法尼基轉移酶的目標包括由對細胞週期進程至關重要之小型GTP-結合蛋白所構成的Ras超級家族的成員。據信FTase在早衰症(progeria)和各種形式癌症的發展上扮演重要角色。
Ras是給予在包括人類細胞之細胞內所發現的一個相關蛋白家族的名稱。所有Ras蛋白家族成員屬於一類稱作小型GTPase的蛋白，並涉及在細胞內傳遞信號(細胞信號轉導)。轉譯後，Ras經歷四個修飾步驟：異戊二烯化作用(isoprenylation)、蛋白水解作用(proteolysis)、甲基化作用(methylation)和棕櫚醯化作用(palmitoylation)。異戊二烯化作用涉及法尼基轉移酶(FTase)，其從法尼基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate；FPP)將法尼基轉移至前-Ras蛋白。再者，一種相關的酶，亦即香葉基香葉基轉移酶I(geranylgeranyltransferase I；GGTase I)，具有將香葉基香葉基基團轉移至K與N-Ras(此含義於下文討論)的能力。法尼基就Ras附著至細胞膜上而言是必需的。若不附著至細胞膜上，Ras無法傳遞來自於胞膜受體的信號。
Ras蛋白似乎參與了許多信號傳導路徑，進而導致複雜且分歧的效應。Ras蛋白的激活係由轉譯後修飾作用(post-translational modification)所調控，包括了由FTase 所調控之Ras的異戊二烯基化作用。異戊二烯基化作用對於Ras蛋白超級家族的正常功能和轉化活性而言不可或缺。於是，已發展出阻斷Ras異戊二烯基化作用的藥劑，以干擾癌症細胞存活與增殖。本案所敘述的例示性化合物1是從牛樟芝(Antrodia camphorate)單離出來的一種新穎法尼基化(farnesylated)環己烯酮衍生物。對接(Docking)研究顯示，類似於FPP的法尼基基團，化合物1的法尼基異戊二烯尾部會嵌入FTase β-次單元的中央空洞(見圖5)。FTase抑制試驗顯示出，化合物1於活體外以劑量相依方式抑制FTase(見實施例10)。再者，未經加工相對於經加工Ras的比例在投予化合物1後會上升(見圖2)。這些資料皆支持例示性化合物1及類似者會和FTase交互作用，而阻止癌症細胞內的Ras加工。
經顯示，化合物1在本案所述癌症細胞株內的IC50值與Ras和上皮生長因子受體(EGFR)的表現有關聯。本案所述數據指出，Ras與EGFR的蛋白位準才是化合物1在癌症細胞內引起細胞毒性的主要決定因素，而非Ras與EGFR基因中存在有突變。
分子模型分析和以對接為基礎(docking-based)的方法係用於驗證GGTase-I與化合物1之間交互作用的可能性。先前的研究顯示，化合物1是經由包括AMPK、PI3K(磷脂醯肌醇-4,5-二磷酸3-激酶)和mTOR(雷帕黴素(rapamycin)的哺乳動物標靶)在內的數個信號傳導分子來引發抗腫瘤活性(參閱譬如Kumar VB,et al.,Mutat Res 2011 Feb 10；707(1-2)：42-5229；Yu C-C,et al.,The Journal of nutritional biochemistry 23(8)：900-907；Chiang P-C,et al.,Biochemical Pharmacology 79(2)：162-171)。在此，在一些具體例中提供了例示性環己烯酮化合物(譬如化合物1)經由抑制FTase活性而抑制了Ras加工。有助於由化合物1所調控之抗腫瘤活性的可能信號傳導路徑係概示於圖7。與增殖、移動、代謝和分化有關的Ras-PI3K-Akt-mTOR路徑係回應化合物1而被抑制。其他的關鍵性信號傳導分子，例如ERK1/2與AMPK，在回應化合物1處理時會被誘導。數項研究發現到，ERK1/2與AMPK參與不同層面的凋亡性和自噬性細胞死亡。據推論，多重信號傳導路徑會回應化合物1刺激而被同時激活。於是，在一些具體例中，本案提供的環己烯酮化合物(譬如化合物1)係藉由調節導致凋亡和自噬現象之複雜信號傳導網絡中的串擾現象(cross talk)而促進抗癌效應。
抑制異戊二烯基轉移酶的活性壓抑了多重信號傳導分子的異戊二烯基化作用，干擾了下游信號傳導。Ras在調節正常細胞生長與轉化成惡性的數個層面之複雜網絡中是一個重要的信號傳導蛋白。激活Ras的突變-尤其是K-Ras-在人類癌症中經常發生。於是，標定Ras是治療癌症的一個很有希望的策略。基於生化定性與分子對接分析，本案所提供的環己烯酮化合物(譬如化合物1)係透過抑制法尼基轉移酶而抑制Ras加工，最終導致細胞死亡。
在一些具體例中，本案所提供的是在一個體中的 抑制方法，其藉由將本案所述環己烯酮化合物投予該個體(譬如人類)。該環己烯酮化合物提供治療益處給予為了抑制法尼基轉移酶而接受治療之個體(參閱實施例1-13)。在一些具體例中，該環己烯酮化合物係獲得自於天然產物的萃取物，並提供較少併發症及/或副作用。在一些具體例中，本發明提供了例示性環己烯酮化合物(譬如化合物1)在抑制一個體中的法尼基轉移酶上的治療與預防潛力。
在一些具體例中，提供有數種用於在一個體中抑制Ras的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及Ras抑制劑，投予該對其有需要之個體： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8 炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在一些具體例中，該Ras抑制劑係選自於由提比法尼(tipifarnib)、沙里昔伯(salirasib)和GI-4000所組成之群組。在一些具體例中，該個體為人類。參見實施例2-13。
在一些具體例中，提供有數種用於治療一人類個體中的癌症的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及Ras-PI3K-Akt-mTOR路徑之抑制劑，投予一對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔 基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在一些具體例中，該抑制劑為Ras抑制劑。在某些具體例中，該Ras抑制劑係選自於由提比法尼、沙里昔伯和GI-4000所組成之群組。在一些具體例中，該抑制劑為mTOR抑制劑。在某些具體例中，該mTOR抑制劑係選自於由下列所組成之群組：依維莫司(everolimus)、AZD-8055、OSI-027、INK-128、雷帕黴素、CCI-779、RAD001、AP-23573和PP-242。在一些具體例中，該抑制劑為PI3K抑制劑。在某些具體例中，該PI3K抑制劑係選自於由下列所組成之群組：LY294002、PWT-458、PX-866、CAL-101、XL-147、ZSTK474、GDC-0941、(NVP)-BEZ235、AS-252424、TGX-221、XL-765、渥曼青黴素(Wortmannin)、AEZS-129、AEZS-131、AEZS-132、BKM120、BAY80-6946、AR245409和PI-103。在一些具體例中，該抑制劑為Akt(亦被稱為蛋白激酶B)抑制劑。在某些具體例中，該Akt抑制劑係選自於由下列所組成之群組：曲西立濱(Triciribine)(API-2)、SR13668、AR-67(DB-67)、AR-42、GSK690693、GSK2141795、KP372-1、VQD-002(API-2)、A-443654、 MK-2206、MK-2206和哌立福新(Perifosine)(KRX-0401)。
在一些具體例中，提供有數種用於在一個體中以次優量之Ras抑制劑來治療疾病的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥投予該對其有需要之個體： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在其他具體例中，提供有一種用於在一人類個體中治療癌症的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥， 以及一或多個抗癌劑，投予一對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在某些具體例中，該一或多個抗癌劑包含吉西他濱(gemcitabine)、伊達比星/阿糖胞苷(idarubicin/cytarabine)、依托泊苷磷酸酯(etopside phosphate)、格列衛(gleevac)、替莫唑胺(temozolomide)、保特佐米(bortezomib)、來曲唑(letrozole)、爾必得舒(cetuximab)、貝伐單抗(bevacizumab)、結合白蛋白之太平洋紫杉醇(nab-paclitaxel)、多烯紫杉醇(docetaxel)、厄 洛替尼(erlotinib)、培美曲唑(pemetrexed)、培美曲唑/佳鉑帝(pemetrexed/carboplatin)、太平洋紫杉醇(paxlitaxel)/佳鉑帝、來曲唑/塞克羅邁得(letrozole/cyclophsphamide)、坦羅莫司(temsirolimus)、貝伐單抗/坦羅莫司(bevacizumab/temsirolimus)、伊匹單抗(lpilimumab)、RAD001、帕唑帕尼(Pazopanib)、FOLFIRI、BKM120、GSK1120212、PF-05212384/愛萊諾迪肯(irinotecan)、AZD2171、PF-04691502、塞克羅邁得、順鉑(cisplatin)、阿糖胞苷/佐柔比星(daunorubcin)、特羅莫司(tersirolimus)、厄洛替尼/坦羅莫司、截瘤達(capecitabine)、他莫昔芬(tamoxifen)、硼替佐米(bortezomib)、曲妥單抗(trastuzumab)、多烯紫杉醇/截瘤達、曲妥單抗/提比法尼、提比法尼/吉西他林(gemcitabline)、托泊替康(tootecan)或彼等之組合。
在一些具體例中，本案提供的是數種用於在施用抗癌療法之前致敏化癌症細胞的方法，該方法包含以一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥接觸該癌症細胞： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3； R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在某些具體例中，該抗癌療法為放療、化療、抗血管生成療法，或是和本案所述環己烯酮化合物互補的其他適宜抗癌療法。
在一些具體例中，本案提供的是數種用於治療對於Ras、mTOR、PI3K或Akt抑制劑具抗性、頑性或無反應之癌症患者的方法，該方法包含將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥投予該對其有需要之患者： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3； R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在某些具體例中，該癌症對於選自下列之藥物具有抗性、頑性或無反應：索拉非尼(Sorafenib)、PLX4032、XL281、RAF265、885-A、ZM336372、L-779450、AZ628、AAL881、LBT613、MCP110、17-DMAG、CI1040、AZD6244/ARRY142886、PD0325901、SB590885、DP3346、和DP2514。在某些具體例中，該癌症具有一選自於K-Ras或PI3K之突變或畸變(aberration)。
在一些具體例中，具有結構 的環己烯酮化合物係由任何適宜起始材料以合成方式或半合成方式製備而成。在其他具體例中，該環己烯酮化合物係藉由發酵或類似方式製備而成。舉例來說，化合物1和3-7係由有機溶劑萃取物單離而來。非設限之例示性化合物繪 示於下。
在其他具體例中，具有結構 的環己烯酮化合物係單離自於牛樟芝的有機溶劑萃取物。在一些具體例中，該有機溶劑係選自於醇類(譬如甲醇、乙醇、丙醇或類似者)、酯類(譬如乙酸甲酯、乙酸乙酯或類似者)、烷類(譬如戊烷、己烷、庚烷或類似者)、鹵化 烷類(譬如氯甲烷、氯乙烷、氯仿、二氯甲烷及類似者)等等。舉例來說，例示性化合物1-7係單離自於有機溶劑萃取物。在某些具體例中，該有機溶劑為醇。在某些具體例中，該醇為乙醇。在一些具體例中，該環己烯酮化合物係單離自於牛樟芝的水性萃取物。
在一些具體例中，R為氫、C(=O)C3H8、C(=O)C2H5或C(=O)CH3。在一些具體例中，R1為氫或甲基。在某些具體例中，R2為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些具體例中，R3為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些具體例中，R4為鹵素、NH2、NHCH3、N(CH3)2、OCH3、OC2H5、C(=O)CH3、C(=O)C2H5、C(=O)OCH3、C(=O)OC2H5、C(=O)NHCH3、C(=O)NHC2H5、C(=O)NH2、OC(=O)CH3、OC(=O)C2H5、OC(=O)OCH3、OC(=O)OC2H5、OC(=O)NHCH3、OC(=O)NHC2H5或OC(=O)NH2。在一些具體例中，R4為C2H5C(CH3)2OH、C2H5C(CH3)2OCH3、CH2COOH、C2H5COOH、CH2OH、C2H5OH、CH2Ph、C2H5Ph、CH2CH=C(CH3)(CHO)、CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3)、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基。在某些具體例中，R4為CH2CH=C(CH3)2。在某些具體例中， 該化合物為
某些藥學與醫學詞彙
除另有述明外，用於本申請案，包括說明書和請求項在內，的下列用語具有下文給定的定義。必須注意到的是，在用於說明書與隨附請求項時，單數形式「一(a)」、「一(an)」與「該(the)」包括複數指涉物，除非上下文另有明白規定。除另有指示外，採用了質譜、NMR、HPLC、蛋白質化學，生物化學，重組DNA技術和藥理學之習用方法。在本申請案中，使用「或(or)」或「及(and)」的意思是「及/或(and/or)」，除非另有陳述。再者，「包括(including)」用語以及其他形式，例如「包括(include)」、「包括(includes)」與「被包括(included)」的使用並無限制。本案中使用的章節標題僅供組織目的，而不應被解讀為限制所述標的。
「烷基」基團指的是脂族烴基。烷基基團可為飽和烷基基團(意思是該基團不含有任何碳-碳雙鍵或碳-碳參鍵)或者烷基基團可為不飽和烷基基團(意思是該基團含有至少一碳-碳雙鍵或碳-碳參鍵)。烷基部分無論是飽和或不飽和皆可為分支或直鏈。
「烷基」基團可具有1至12個碳原子(在本案中無論何時出現，例如「1至12」等數字範圍指的是給定範圍內的每一個整數；譬如「1至12個碳原子」的意思是烷基基團可由下列構成：1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等等 到至多為包括有12個碳原子，儘管本定義亦涵蓋無指定數字範圍的「烷基」用語)。本案所述化合物的烷基基團可指定為「C1-C8烷基」或類似名稱。僅為舉例，「C1-C8烷基」指的是在烷基鏈中有一、二、三、四、五、六、七或八個碳原子。在一態樣中，烷基係選自於由下列所組成之群組：甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、及三級丁基。典型的烷基基團包括但絕不限於甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、戊基、新戊基、己基、烯丙基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基甲基、環己基甲基及類似者。在一態樣中，烷基為C1-C8烷基。
「烯基」此用語指的是二價烷基。上文所提到的任何單價烷基基團可藉由從烷基減去第二氫原子而成為烯基。在一態樣中，烯基為C1-C12烯基。在另一態樣中，烯基為C1-C8烯基。典型的烯基基團包括但不限於-CH2-、-CH(CH3)-、-C(CH3)2-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2C(CH3)2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-及類似者。
如本案所使用，「芳基(aryl)」此用語指的是芳香環，其中形成環的每個原子皆為碳原子。芳香環係由五、六、七、八、九或超過九個碳原子所形成。芳基基團係經任擇地取代。在一態樣中，芳基為苯基或萘基。在一態樣中，芳基為苯基。在一態樣中，芳基為C6-C10芳基。視結構而定，芳基基團可為單基(monoradical)或雙基(diradical)(即亞芳基基團)。在一態樣中，亞芳基為C6-C10亞芳基。 例示性的亞芳基包括但不限於亞-1,2-苯基、亞-1,3-苯基和亞-1,4-苯基。
「芳族(aromatic)」此用語指的是具有非定域π-電子系統、含有4n+2個π電子的平面環，其中n為整數。芳香環可由五、六、七、八、九、十或多於十個原子所形成。芳族係經任擇地取代。「芳族」此用語包括碳環芳基(即「芳基」，譬如苯基)與雜環芳基(或稱「雜芳基」或「雜芳族」)基團(譬如吡啶)。該用語包括單環或稠合環多環(即共享毗鄰碳原子對的環)基團。
「鹵基」此用語或是「鹵素」或「鹵化物」等替代性用語的意思是氟基、氯基、溴基或碘基。
「內酯」用語指的是環狀酯，其可視同為同一分子內的醇基團-OH與羧酸基團-COOH的縮合產物。特點在於由二或多個碳原子與單一氧原子構成的密閉環，且酮基=O位在毗鄰另一氧的其中一個碳上。
「雜環」或「雜環的」此用語指的是雜芳環(亦被稱為雜芳基)與雜環烷基環(亦被稱為雜脂環基團)，其於一或多個環中含有一至四個雜原子，而環中的各個雜原子係選自於O、S與N，其中各個雜環基團在其環系具有4至10個原子，但是任一環皆不含有兩個毗鄰的O或S原子。非芳族雜環基團(亦被稱為雜環烷基)包括在其環系中僅有3個原子的基團，但芳雜環基團在其環系必須具有至少5個原子。雜環基團包括苯并稠合環系。3-員雜環基團的一個例子為氮基(aziridinyl)。4-員雜環基團的一個例子為氮 呾基(azetidinyl)。5-員雜環基團的一個例子為噻唑基。6-員雜環基團的一個例子為吡啶基，以及10-員雜環基團的一個例子為喹啉基。非芳族雜環基團的例子為吡咯啶基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、唑啶酮基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、四氫硫代哌喃基(tetrahydrothiopyranyl)、哌啶基、啉基、硫代啉基、噻基(thioxanyl)、哌基、氮基、氮呾基、氧呾基、硫呾基、高哌啶基、氧基(oxepanyl)、硫基(thiepanyl)、氧氮呯基(oxazepinyl)、偶氮呯基(diazepinyl)、硫氮呯基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氫吡啶基、吡咯啉-2-基、吡咯啉-3-基、吲哚啉基、2H-哌喃基、4H-哌喃基、二氧基(dioxanyl)、1,3-二氧基(1,3-dioxolanyl)、吡唑啉基、二硫基(dithianyl)、二硫基(dithiolanyl)、二氫哌喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑啶基、咪唑基、咪唑啶基、3-氮雜雙環[3.1.0]己烷基、3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹基。芳族雜環基團的例子為吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異唑基、噻唑基、唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、啉基、吲唑基、吲基、呔基、嗒基、三基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、二唑基、噻二唑基、呋呫基、苯并呋呫基、苯并硫代苯基、苯并噻唑基、苯并唑基、喹唑啉基、喹啉基、啶基和呋喃并吡啶基(furopyridinyl)。前述基團 若可能的話可為經C-接附或經N-接附。舉例而言，衍生自吡咯的基團可為吡咯-1-基(經N-接附)或吡咯-3-基(經C-接附)。又，衍生自咪唑的基團可為咪唑-1-基或咪唑-3-基(皆經N-接附)或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基(皆經C-接附)。雜環基團包括苯并稠合環系。非芳族雜環可被取代有一或二個伸氧基(=O)部分，例如吡咯啶-2-酮。
本案所用的「烯基」用語的意思是直鏈、分支或環狀(在該情況中，亦被稱為「環烯基」)的烴，含有2-10個碳並含有至少一個由去掉兩個氫所形成的碳-碳雙鍵。在一些具體例中，視結構而定，烯基基團為單基或二基(即亞烯基基團)。在一些具體例中，烯基基團係經任擇地取代。烯基的例示性例子包括但不限於乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基和3-癸烯基(3-cecenyl)。
本案所用的「炔基」用語的意思是直鏈、分支或環狀(在該情況中，亦被稱為「環炔基」)的烴，含有2-10個碳並含有至少一個由去掉四個氫所形成的碳-碳參鍵。在一些具體例中，視結構而定，炔基基團為單基或二基(即亞炔基基團)。在一些具體例中，炔基基團係經任擇地取代。炔基的例示例子包括但不限於乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基及類似者。
本案所用的「烷氧基」此用語的意思是如本案所定義的烷基基團經由氧原子而接合至母分子部分。烷氧基的例示性例子包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基、2- 丙氧基、丁氧基、三級丁氧基、戊氧基和己氧基。
本案所用的「環烷基」此用語的意思是僅含有碳與氫的單環或多環基，並包括飽和、部分不飽和或完全不飽和者。環烷基基團包括具有3至10個環原子的基團。環的代表性例子包括但不限於下列部分： 。在一些具體例 中，視結構而定，環烷基基團為單基或二基(譬如環烯基基團)。
本案所用的「鹵烷基」、「鹵烯基」、「鹵炔基」和「鹵烷氧基」等用語包括烷基、烯基、炔基與烷氧基結構，其中至少一個氫被鹵素原子所置換。在其中二或多個氫原子被鹵素原子所置換的某些具體例中，該等鹵素原子皆彼此相同。在其中二或多個氫原子被鹵素原子所置換的其他具體例中，該等鹵素原子並非皆彼此相同。「氟烷基」與「氟烷氧基」等用語分別包括鹵烷基與鹵烷氧基基團，其中鹵基為氟。在某些具體例中，鹵烷基經任擇地取代。
本案所用的「葡糖基(glucosyl)」用語包括D- 或L-型葡糖基基團，其中葡糖基基團係經由葡萄糖環上任一羥基基團進行連接。
本案所用的「可接受的」用語就調配物、組成物或成分而言，其意指對接受治療個體的一般健康沒有持續性的有害效應。
樟芝屬(Antrodia)是薄孔菌科(Meripilaceae)的一個真菌屬。樟芝物種具有通常平舖或伸展在生長表面上的子實體，而子實層暴露在外；邊緣可翻轉，以便形成狹窄的支架。大多數物種在溫帶和寒帶森林發現，並引起褐腐病。
本案所用的「載劑(carrier)」此用語指的是促進化合物併入細胞或組織的相對不具毒性的化學化合物或試劑。
本案所用的「共同投予(co-administration)」此用語或類似者係意欲涵蓋投予數種選定的治療劑至單一患者，並意欲包括以相同或不同時間藉由相同或不同投藥途徑投予多個藥劑的治療方案。
本案所用的「稀釋劑」用語指的是在輸送前用於稀釋相關化合物的化學化合物。稀釋劑亦可用於安定化合物，因為彼等可提供更安定的環境。溶解於緩衝溶液中的鹽類(其亦可提供pH的控制或維持)在本領域係用作稀釋劑，其包括但不限於經磷酸鹽緩衝化之食鹽水溶液。
本案所用的「有效量」或「治療有效量」等用語指的是投予之藥劑或化合物足以使所治療疾病或病況之一 或多個症狀減輕至一定程度的份量。該結果可為疾病的癥候、症狀或成因之減少及/或緩解，或是生物系統的任何其他所希望達成的變化。舉例來說，就治療用途而言，「有效量」是包含本案揭示之化合物的組成物提供疾病症狀在臨床上顯著減少所需的份量。適當的「有效」量在任何個別情況中可使用諸如藥量遞增研究之技術測定。
本案所用的「增強(enhance)」或「增強(enhancing)」等用語的意思是增加或延長所欲效應的效力或時程。因此，就增強治療劑之效應而言，「增強」此用語指的是增加或延長一系統上的其他治療劑之效應的效力或時程的能力。本案所用的「增強-有效量」指的是適於增強所欲系統中另一治療劑之效應的份量。
本案所揭示之化合物的「代謝物(metabolite)」是當該化合物被代謝時所形成的化合物衍生物。「活性代謝物」此用語指的是當一化合物被代謝時所形成之該化合物的生物活性衍生物。本案所用的「被代謝(metabolized)」用語指的是特定物質被一生物體改變的過程總和(包括但不限於，水解反應和被酶所催化的反應)。因此，酶可對一化合物造成特定的結構變動。舉例來說，細胞色素P450催化各式各樣的氧化還原反應，而二磷酸尿苷葡萄糖醛酸基轉移酶則催化被激活的葡萄糖醛酸分子轉移至芳族醇類、脂族醇類、羧酸類、胺類和游離巰基基團。本案所揭示之化合物的代謝物係任擇地藉由將化合物投至一宿主並分析得自該宿主的組織樣本，抑或是藉由於活體外培育化合物 和肝細胞並分析所得化合物來辨識。
本案所用的「藥學組合」此用語的意思是由混合或組合多於一個活性成分所造成，且包括活性成分之固定與非固定組合的產品。「固定組合」此用語的意思是數種活性成分，譬如一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)和共劑(co-agent)係以單一實體(entity)或劑型之形式同時地投予患者。「非固定組合」用語的意思是數種活性成分，譬如一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)和共劑係呈分離的實體同時地、同步地或依序地投予患者，而無特定時間間隔限制，其中此類投藥係提供兩化合物在患者體內的有效位準。後者亦應用至雞尾酒療法，譬如投予三或更多種活性成分。
「藥學組成物」用語指的是由一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)與諸如載劑、安定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑及/或賦形劑等其他化學組分所構成的混合物。該藥學組成物有助於將化合物投至生物體。許多用於投予化合物的技術存在於本領域，其包括但不限於：靜脈、口服、氣霧、經腸胃道外、經眼、經肺和局部投藥。
「個體(subject)」或「患者(patient)」此用語涵蓋哺乳動物。哺乳動物的例子包括但不限於，哺乳動物綱的任何成員：人類、非人類靈長類動物，例如黑猩猩和其他猿和猴之物種；農場動物，例如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家畜，例如兔、狗和貓；實驗動物，包括齧齒類動物，例 如大鼠、小鼠與天竺鼠，以及類似者。在一具體例中，哺乳動物為人類。
本案所用的「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」等用語包括緩解、減弱或改善疾病或病況的至少一症狀、防止額外症狀、抑制疾病或病況，譬如扼止疾病或病況加劇、減輕疾病或病況、造成疾病或病況減退、減輕疾病或病況所造成的狀況，或是預防性地及/或治療性地停止疾病或病況的症狀。
投藥途徑與劑量
適宜的投藥途徑包括但不限於，口服、靜脈內、直腸、氣霧、腸胃道外、經眼、經肺、黏膜、穿皮、陰道、經耳、經鼻和局部投藥。此外，僅為舉例，腸胃道外輸送包括肌內、皮下、靜脈內、髓內注射以及鞘內、直接腦室內、腹腔內、淋巴管內和鼻內注射。
在某些具體例中，本案所述化合物係以局部性而非全身性方式投予，舉例來說，通常以貯庫(depot)製劑或持續釋放調配物之形式而將化合物直接地注射至一器官。在特定具體例中，長效調配物係以植入(舉例來說，皮下或肌內)投藥或藉由肌內注射投藥。再者，在其他具體例中，藥物係在一靶向藥物輸送系統中傳輸，舉例來說，在包覆有器官專一性抗體的脂質體中傳輸。在此類具體例中，脂質體係靶向器官並選擇性地被該器官所攝入。在其他具體例中，本案所述化合物係以快速釋放調配物的形式、延長釋放調配物的形式或中度釋放調配物的形式提 供。在其他具體例中，本案所述化合物係局部地投予。
在一些具體例中，該環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥係以腸胃道外或靜脈方式投予。在其他具體例中，該環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥係以注射投予。在一些具體例中，該環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥係以口服投予。
在患者病況沒有改良的情況中，依照醫生的自由判斷，化合物之投藥可慢性地投予，亦即投予一段延長時間，包括患者的生命持續時間，以改善或者控制或限制患者的疾病或病況的症狀。在患者的狀態確實有改良的情況中，依照醫生的自由判斷，化合物之投藥可連續給予或暫時延緩若干時間長度(即「停藥期」)。
前述範圍僅是建議性的，因為就個別治療方案而言的變數數量很多，所以大幅度偏離該等建議值並不罕見。此類劑量可視眾多變數而更動，變數不限於所用化合物的活性、欲治療的疾病或病況、投藥模式、個別個體需求、欲治療疾病或病況的嚴重性和醫師的診斷。
此類治療方案的毒性和療效可藉由在細胞培養或實驗動物的標準藥學程序測定，包括但不限於，測定LD50(50%群體的致死藥量)和ED50(50%群體的治療有效藥量)。毒性和治療效應之間的藥量比例為治療指數並可以LD50與ED50的比例表示。展現高治療指數的化合物係較佳 的。從細胞培養試驗與動物研究獲得的資料可用來調配一系列的劑量供人類使用。此類化合物的劑量較佳位於包括ED50之一系列循環濃度以內，以達最小毒性。視運用的劑型與使用的投藥途徑而定，劑量可在此範圍內變動。
藥學調配物
在一些具體例中提供了數種藥學組成物，其包含一治療有效量之環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及一藥學上可接受的賦形劑，該環己烯酮化合物具有下列結構：
其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基； R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
在一些具體例中，該藥學組成物的環己烯酮化合物具有下列結構：
其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12；或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥。
在一些具體例中，R為氫、C(=O)C3H8、C(=O)C2H5或C(=O)CH3。在一些具體例中，R1、R2與R3個別獨立地為 氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。在某些具體例中，R1為氫或甲基。在某些具體例中，R2為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些具體例中，R3為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些具體例中，R4為鹵素、NH2、NHCH3、N(CH3)2、OCH3、OC2H5、C(=O)CH3、C(=O)C2H5、C(=O)OCH3、C(=O)OC2H5、C(=O)NHCH3、C(=O)NHC2H5、C(=O)NH2、OC(=O)CH3、OC(=O)C2H5、OC(=O)OCH3、OC(=O)OC2H5、OC(=O)NHCH3、OC(=O)NHC2H5或OC(=O)NH2。在某些具體例中，R4為C2H5C(CH3)2OH、C2H5C(CH3)2OCH3、CH2COOH、C2H5COOH、CH2OH、C2H5OH、CH2Ph、C2H5Ph、CH2CH=C(CH3)(CHO)、CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3)、5或6-員內酯、芳基或葡糖基，其中該5或6-員內酯、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基。在某些具體例中，R4為CH2COOH、C2H5COOH、CH2OH、C2H5OH、CH2Ph、C2H5Ph、CH2CH=C(CH3)(CHO)、CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3)、5或6-員內酯、芳基或葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基。
在某些具體例中，該化合物係選自於由下列所組 成之群組： 以及
在某些具體例中，該化合物係選自於由下列所組成之群組： 以及
在一些具體例中，本案所述化合物係配製成藥學組成物。在特定具體例中，藥學組成物係以習用方式配製，該組成物使用一或多種生理上可接受的載劑，並包含有助 於活性化合物加工成可在藥學上使用之製劑的賦形劑與助劑。合宜的調配物係取決於所選擇的投藥途徑。任何藥學上可接受的技術、載劑和賦形劑係視適宜地被使用於調配本案所述之藥學組成物：Remington：The Science and Practice of Pharmacy,Nineteenth Ed(Easton,Pa.：Mack Publishing Company,1995)；Hoover,John E.,Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania 1975；Liberman,H.A.and Lachman,L.,Eds.,Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；以及Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,Seventh Ed.(Lippincott Williams & Wilkins1999)。
本案所提供的是包含一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)和藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載劑的藥學組成物。在某些具體例中，所述化合物係呈藥學組成物投予，其中一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係和其他活性成分混合，如同於組合療法。本案所涵蓋的是載列於以下組合療法章節與本案整體揭示內容中之活性物(actives)的所有組合。在特定具體例中，該藥學組成物包括一或多個化合物(即本案所述環己烯酮化合物)。
本案所用的藥學組成物意指由一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)與諸如載劑、安定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑及/或賦形劑等其他化學組分所構成的混合物。在某些具體例中，該藥學組成物有助於將化合 物投至生物體。在一些具體例中，在實行本案提供之治療方法或用途時，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)之治療有效量係於藥學組成物中投予患有欲治療疾病或病況的哺乳動物。在特定具體例中，該哺乳動物為人類。在某些具體例中，治療有效量係視疾病嚴重性、個體的年齡與相對健康、所用化合物的效力及其他因素而變動。本案所述化合物係單獨地使用或作為混合物組分和一或多個治療劑組合使用。
在一具體例中，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係調配成水溶液。在特定具體例中，水溶液係選自-僅為舉例-生理上可相容的緩衝液，例如韓克氏液(Hank’s solution)、林格氏液(Ringer’s solution)或生理食鹽水緩衝液。在其他具體例中，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係調配成經黏膜投予。在特定具體例中，經黏膜之調配物包括適用於欲滲透屏障的滲透劑。在本案所述化合物係調配成其他腸胃道外注射液的再其他具體例中，適當的調配物包括水性或非水性溶液。在特定具體例中，此類溶液包括生理上可相容的緩衝液及/或賦形劑。
在另一具體例中，本案所述化合物係調配成口服投予。本案所述化合物，包括一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)，係藉由將活性化合物和譬如藥學上可接受的載劑或賦形劑予以組合而配製出來。在各種具體例中，本案所述化合物係配製成口服劑型，其包括例如錠劑、粉末、丸劑、糖衣丸劑、膠囊、液體、凝膠、糖漿、酏劑、漿液、 懸浮液及類似者。
在某些具體例中，口服使用的藥學製劑係藉由下列方式獲得：將一或多個固體賦形劑與一或多種本案所述化合物加以混合、任擇地研磨所得混合物，並且在有需要時於添加適宜助劑後，將粒狀混合物予以加工，以獲得錠劑或糖衣丸芯。適宜的賦形劑尤其為填料，例如糖，包括乳糖、蔗糖、山梨糖醇、或甘露醇；纖維素製劑，例如：舉例來說，玉蜀黍澱粉、小麥澱粉、稻米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉；或其他，例如：聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚維酮)或磷酸鈣。在特定具體例中，崩解劑係任擇地添加。僅為舉例，崩解劑包括交聯羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。
在一具體例中，諸如糖衣丸芯與錠劑之劑型設有一或多個適宜的包衣。在特定具體例中，濃縮糖溶液供用於包覆該劑型。糖溶液任擇地含有額外組分，例如，僅為舉例，阿拉伯樹膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波凝膠(carbopol gel)、聚乙二醇及/或二氧化鈦、清漆(lacquer)溶液，以及適宜的有機溶劑或溶劑混合物。染料及/或色素亦任擇地加至包衣，以供辨識目的。此外，染料及/或色素係任擇地用於表徵活性化合物藥量的不同組合。
在某些具體例中，本案所述化合物中之至少一者的治療有效量係配製成其他口服劑型。口服劑型包括由明膠製成的配套式(push-fit)膠囊，以及由明膠和諸如甘油 或山梨糖醇之塑化劑製成的軟質密封膠囊。在特定具體例中，配套式膠囊係含有混摻有一或多種填料的活性成分。填料包括，僅為舉例，乳糖、諸如澱粉等黏結劑，及/或諸如滑石或硬脂酸鎂等潤滑劑，以及任擇地包括有安定劑。在其他具體例中，軟質膠囊係含有溶於或懸浮於適宜液體中的一或多種活性化合物。適宜的液體包括，僅為舉例，一或多種脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。此外，任擇地添加有安定劑。
在其他具體例中，本案所述化合物中之至少一者的治療有效量係調配成頰內或舌下投予。適用於頰內或舌下投予的調配物包括，僅為舉例，錠劑、口含片或凝膠。在其他具體例中，本案所述化合物係配成用於腸胃道外注射，包括了適用於單彈注射(bolus injection)或連續輸注的調配物。在特定具體例中，注射用調配物係呈單位劑型(譬如置於安瓿)或置於多劑容器中。注射調配物任擇地添加有防腐劑。在其他具體例中，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的藥學組成物係配製成適用於腸胃道外注射的形式，例如無菌懸浮液、溶液或是溶於油性或水性載體的乳劑。腸胃道外注射調配物任擇地含有調配劑(formulatory agents)，例如懸浮劑、安定劑及/或分散劑。在特定具體例中，用於腸胃道外注射的藥學調配物包括呈水溶性形式之活性化合物的水溶液。在另外的具體例中，活性化合物的懸浮液係視需要製備成油性注射懸浮液。用於本案所述藥學組成物的適宜親油性溶劑或載體包括，僅 為舉例，例如芝麻油等脂肪油類，或是例如油酸乙酯或三酸甘油酯類等人造脂肪酸酯類，抑或是脂質體。在某些特定具體例中，水性注射懸浮液含有增加懸浮液之黏性的物質，例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或葡聚糖。任擇地，懸浮液含有適宜的安定劑或增加化合物溶解度之試劑，以容許製備高度濃縮溶液。替代性地，在其他具體例中，活性成分係呈粉末形式，用於在使用前以適宜載體復原，譬如無菌無熱原水。
在一態樣中，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係如本案所述或本領域所習知般被製備成腸胃道外注射溶液並以自動注射器投藥，例如揭示於美國專利第4,031,893號、第5,358,489號、第5,540,664號、第5,665,071號、第5,695,472號和WO/2005/087297者(各案的揭示內容以參照方式併入本案)係為習知。一般而言，所有自動注射器含有包括化合物(即本案所述環己烯酮化合物)之一定體積的欲注射溶液。一般而言，自動注射器包括持有溶液的貯蓄器，其和用於送藥的針以流體傳輸，以及自動地開針、將針插至患者並送藥至患者的機制。例示注射器提供約0.3毫升、0.6毫升、1.0毫升或其他適宜體積的溶液，濃度為每1毫升溶液約0.5毫克至50毫克化合物(即本案所述環己烯酮化合物)。每個注射器只能遞送一劑化合物。
在其他具體例中，該化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係局部地投予。本案所述化合物係配製成眾多不同的可局部投予組成物，例如溶液、懸浮液、乳液、凝 膠、糊膏、藥棒、香膏、乳霜或軟膏。此類藥學組成物任擇地含有助溶劑、安定劑、張力增強劑、緩衝劑與防腐劑。
在其他具體例中，該化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係調配成穿皮投予。在特定具體例中，穿皮調配物係採用穿皮遞送裝置與穿皮遞送貼片並可為親油性乳劑或經緩衝的水溶液、溶解及/或分散於聚合物或黏著劑。在不同具體例中，此類貼片係建構成供連續、脈衝、或視需求遞送藥劑。在另外的具體例中，化合物(即本案所述環己烯酮化合物)之穿皮遞送係藉由離子導入(iontophoretic)貼片及其類似方式完成。在某些具體例中，穿皮貼片提供化合物(即本案所述環己烯酮化合物)之經控制遞送。在特定具體例中，吸收速率係藉由使用速率控制薄膜或藉由使化合物困在聚合物基質或凝膠之內來減緩。在替換具體例中，吸收增強劑係用於增加吸收。吸收增強劑或載劑包括了幫助通過皮膚之可吸收之藥學上可接受的溶劑。舉例來說，在一具體例中，穿皮裝置係呈繃帶形式，包含了背襯件、任擇地連同載劑之含化合物的貯蓄器、以經控制預定速率遞送化合物至宿主皮膚達一段延長時期之任擇的速率控制屏障、以及將該裝置固定至皮膚的物件。
本案所述穿皮調配物可使用本領域已說明的眾多不同裝置來投予。舉例來說，此類裝置包括但不限於美國專利第3,598,122號、第3,598,123號、第3,710,795號、第3,731,683號、第3,742,951號、第3,814,097號、第3,921,636 號、第3,972,995號、第3,993,072號、第3,993,073號、第3,996,934號、第4,031,894號、第4,060,084號、第4,069,307號、第4,077,407號、第4,201,211號、第4,230,105號、第4,292,299號、第4,292,303號、第5,336,168號、第5,665,378號、第5,837,280號、第5,869,090號、第6,923,983號、第6,929,801號和第6,946,144號。
本案所述穿皮劑型可併入本領域習用之某些藥學上可接受的賦形劑。在一具體例中，本案所述穿皮調配物包括至少三個組分：(1)化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的調配物；(2)滲透增強劑；以及(3)水性佐劑。此外，穿皮調配物可包括額外的組分，例如但不限於膠凝劑、乳膏和軟膏基底、及類似者。在一些具體例中，該穿皮調配物進一步包括織造或不織背襯材料，以增強吸收並防止穿皮調配物移離皮膚。在其他具體例中，本案所述穿皮調配物係維持飽和或超飽和狀態，以促進擴散進入皮膚。
在其他具體例中，該化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係調配成藉由吸入投予。適用於吸入投予的各種形式包括但不限於氣霧、液狀噴霧或粉末。化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的藥學組成物係以加壓包或霧化器呈現的氣霧噴霧形式，加上使用適宜的推進劑(譬如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適宜的氣體)來方便地遞送。在特定具體例中，加壓氣霧的劑量單位係藉由設置一閥以遞送經計量之份量來測定。在某些具體例中，供吸入器與吹藥器用的由-例如， 僅為舉例-明膠製成的膠囊和匣盒係配成含有該化合物和適宜粉末基底-例如乳糖或澱粉-的混粉。
鼻內調配物係本領域所習知者並說明於，舉例來說，美國專利第4,476,116號、第5,116,817號與第6,391,452號，各案以參照方式明確地併入本案。根據本領域眾所周知之該等及其他技術製備之包括一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的調配物係製備成溶於食鹽水的溶液，採用苯甲醇或其他適宜的防腐劑、氟碳化合物及/或本領域習知的其他助溶劑或分散劑。參閱，舉例來說，Ansel,H.C.et al.,Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,Sixth Ed.(1995)。較佳地，該等組成物與調配物係以適宜之藥學上可接受的無毒成分製備。該等成分可在下列來源找到，例如本領域的標準文獻REMINGTON：THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY，第21版，2005。適宜載劑的挑選係高度取決於所欲經鼻劑型的確切本質，譬如溶液、懸浮液、軟膏或凝膠。除了活性成分以外，經鼻劑型一般含有大量的水。亦可出現少量其他成分，例如pH調整劑、乳化劑或分散劑、防腐劑、表面活性劑、膠凝劑或緩衝劑及其他安定劑與助溶劑。較佳地，經鼻劑型應和鼻分泌物等張。
就吸入投予而言，本案所述化合物可為氣霧、液狀噴霧或粉末形式。本案所述藥學組成物係以加壓包或霧化器呈現的氣霧噴霧形式，加上使用適宜的推進劑-譬如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或 其他適宜的氣體-來方便地遞送。在加壓氣霧的情況中，劑量單位係藉由設置一閥以遞送經計量之份量來測定。例如，僅為舉例，供吸入器與吹藥器用的明膠膠囊和匣盒係配製成含有本案所述化合物與諸如乳糖或澱粉等適宜粉末基底所構成的粉末混合物。
在其他具體例中，該化合物(即本案所述環己烯酮化合物)係配製成直腸用組成物，例如灌腸劑、直腸用凝膠、直腸用泡沫、直腸用氣霧、栓劑、膠凍栓劑或滯留型灌腸劑，該等含有習用栓劑基質，例如可可脂或其他甘油酯、以及合成聚合物，例如聚乙烯基吡咯烷酮、PEG、及類似者。在組成物的栓劑形式中，低熔點蠟，例如但不限於脂肪酸甘油酯的混合物，且任擇地合併有可可脂，係先熔化。
在某些具體例中，藥學組成物係以任何習用方式配製，該組成物使用一或多個生理上可接受的載劑並包含有助於活性化合物加工成可在藥學上使用之製劑的賦形劑與助劑。合宜的調配物係取決於所選擇的投藥途徑。任何藥學上可接受的技術、載劑和賦形劑係任擇地視適宜及視本領域所理解般使用。包含一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的藥學組成物可以習用方式製造，例如，僅為舉例，藉由習用混合、溶解、造粒、製糖衣丸、研磨、乳化、封囊、包埋或壓縮製程。
藥學組成物包括至少一藥學上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑以及作為活性成分之至少一本案所述化合物 (即本案所述環己烯酮化合物)。活性成分係呈游離酸或游離鹼形式、或呈藥學上可接受的鹽類形式。此外，本案所述方法與藥學組成物包括使用晶質形式(亦習知為多晶型物)，以及該等化合物之具有同種活性的活性代謝物。本案所述化合物的所有互變異構物皆包括在本案所呈現之化合物的範疇以內。此外，本案所述化合物係涵蓋非溶劑化形式以及藥學上可接受的溶劑，例如水、乙醇、及類似者的溶劑化形式。本案所呈現之化合物的溶劑化形式亦被視為本案所揭示者。此外，該藥學組成物任擇地包括其他醫藥或藥學之劑、載劑、佐劑，例如防腐劑、安定劑、濕潤劑或乳化劑、促溶劑、調節滲透壓的鹽類、緩衝劑及/或其他在治療上有價值的物質。
用於製備包含本案所述化合物之組成物的方法係包括將該化合物和一或多個惰性、藥學上可接受的賦形劑或載劑調配在一起，以形成固體、半固體或液體。固體組成物包括，但不限於，粉末、錠劑、可分散粒劑、膠囊、藥片(cachet)和栓劑。液體組成物包括溶有化合物的溶液、包含化合物的乳劑、或是含有包含本案所揭示化合物之脂質體、微胞、或奈米顆粒的溶液。半固體組成物包括，但不限於，凝膠、懸浮液和乳霜。本案所述藥學組成物的形式包括適用於在使用前溶於或懸浮於液體、或如同乳劑的液體溶液或懸浮液、固體形式。該等組成物亦任擇地含有少量無毒的輔助物質，例如濕潤劑或乳化劑、pH緩衝劑、以及等等。
在一些具體例中，包含至少一化合物(即本案所述環己烯酮化合物)的藥學組成物例示性地採取液體的形式，其中該多個劑係呈現為溶液、懸浮液或兩者。通常，當該組成物係作為溶液或懸浮液投予時，該劑的第一部分係呈現為溶液且該劑的第二部分係呈現為懸浮於液體基質中的微粒形式。在一些具體例中，液體組成物包括凝膠調配物。在其他具體例中，液體組成物為水性。
在某些具體例中，藥學水性懸浮液包括作為懸浮劑的一或多個聚合物。聚合物包括水溶性聚合物，例如纖維素型聚合物，譬如羥丙基甲基纖維素，以及非水溶性聚合物，例如含羧基之交聯聚合物。某些本案所述之藥學組成物包括黏膜黏附聚合物，選自於，舉例來說，羧甲基纖維素、卡波姆(carbomer(丙烯酸聚合物))、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯醯胺、聚卡波非(polycarbophil)、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、藻酸鈉和葡聚糖。
藥學組成物亦任擇地包括助溶劑，以幫助化合物(即本案所述環己烯酮化合物)溶解。「助溶劑」用語一般包括讓該劑形成微胞溶液或真溶液之多個劑。某些可接受的非離子性表面活性劑，例如聚山梨醇酯80，可供用作安定劑，眼科可接受的乙二醇、聚乙二醇，譬如聚乙二醇400、和乙二醇醚亦可。
再者，藥學組成物任擇地包括一或多種pH調節劑或緩衝劑，包括酸，例如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸和氫氯酸；鹼，例如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸 檬酸鈉、乙酸鈉、乳酸鈉和參羥基甲基胺基甲烷；以及緩衝劑，例如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉和氯化銨。此類酸、鹼與緩衝劑係以維持組成物pH所需、在可接受範圍以內的份量被包括。
此外，藥學組成物任擇地包括使組成物滲透壓位於可接受範圍所需之份量的一或多種鹽類。此類鹽包括具有鈉、鉀或銨陽離子和氯離子、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或亞硫酸氫根陰離子者；適宜的鹽包括氯化鈉、氯化鉀、硫代硫酸鈉、亞硫酸氫鈉和硫酸銨。
其他藥學組成物任擇地包括一或多個抑制微生物活性的防腐劑。適宜防腐劑包括含汞物質，例如硝酸苯汞(merfen)與硫柳汞(thiomersal)；安定化二氧化氯；以及四級銨化合物，例如氯化苯甲烷銨(benzalkonium chloride)、十六烷基三甲基溴化銨和氯化十六烷基吡啶。
又其他的藥學組成物包括一或多個表面活性劑，以增強物理安定性或用於其他目的。適宜的非離子表面活性劑包括聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，譬如聚氧乙烯(60)氫化蓖麻油；以及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，譬如辛苯聚醇10(octoxynol 10)、辛苯聚醇40。
其他的藥學組成物可包括一或多個抗氧化劑，有需要的話，以增強化學安定性。適宜的抗氧化劑包括，僅為舉例，抗壞血酸和焦亞硫酸鈉。
在某些具體例中，藥學水性懸浮液組成物係包裝 在單劑之不可再封口容器中。另擇地，使用多個劑之可再封口容器，在該情況中，組成物中通常包括防腐劑。
在替換具體例中，採用了用於疏水性藥學化合物之其他遞送系統。脂質體與乳劑是本案的遞送載體或載劑例子。在某些具體例中，亦採用有機溶劑，例如N-甲基吡咯烷酮。在另外的具體例中，本案所述化合物係使用持續釋放型系統來遞送，例如含有治療劑之由固態疏水性聚合物製成的半滲透基質。本案可使用各種持續釋放型材料。在一些具體例中，持續釋放型膠囊係釋放化合物達數小時至高達超過24小時。視治療試劑的化學本質與生物安定性而定，可採用用於安定蛋白質的另外對策。
在某些具體例中，本案所述調配物包括一或多個抗氧化劑、金屬螯合劑、含硫醇化合物及/或其他一般安定劑。此類安定劑的例子包括但不限於：(a)約0.5%至約2% w/v甘油、(b)約0.1%至約1% w/v甲硫胺酸、(c)約0.1%至約2% w/v單硫代甘油、(d)約1mM至約10mM EDTA、(e)約0.01%至約2% w/v抗壞血酸、(f)0.003%至約0.02% w/v聚山梨醇酯80、(g)0.001%至約0.05% w/v.聚山梨醇酯20、(h)精胺酸、(i)肝素、(j)葡聚醣硫酸酯、(k)環糊精、(l)多硫酸戊聚醣和其他類肝素(heparinoids)、(m)二價陽離子，例如鎂與鋅；或(n)彼等之組合。
組合治療的一般性考量
一般而言，在組合型療法係基於本案作用模式運用的具體例當中，本案所述組成物及其他劑不必在同一藥 學組成物內投予，而在一些具體例中，由於不同物理和化學特性，係藉由不同途徑投予。在一些具體例中，初始投藥係根據已建立流程進行，隨後，基於觀察到的效應，劑量、投藥模式與投藥次數係由有經驗的臨床醫師來做更動。
在一些具體例中，治療有效劑量在藥物使用於治療組合時係有所不同。組合治療又包括在不同時間啟始和停止的週期性治療，以協助患者的臨床管理。就本案所述組合療法而言，共同投予之化合物的劑量係視採用之共同藥物類型、視採用之特定藥物、視治療之疾病、病症、或病況以及等等而有所不同。
咸應理解，在一些具體例中，用以治療、預防、或改善尋求減輕之(多個)病況的劑量方案係根據眾多因素而變更。該等因素包括個體所罹患的病症、以及個體的年齡、體重、性別、飲食、和醫療條件。於是，在其他具體例中，確實採用的劑量方案差別很大且因此偏離本案所載列之劑量方案。
實施例 實施例1.製備例示性環己烯酮化合物
將得自於牛樟芝的一百克菌絲體、子實體或此兩者的混合物置於燒瓶中。將適量水與醇(70-100%醇溶液)加進燒瓶中並於20-25℃下予以攪拌至少1小時。使該溶液透過濾器與0.45μm濾膜過濾，並收集濾液而成作為萃取物。
將牛樟芝濾液投至高效液相層析(HPLC)分析。 在RP18管柱進行分離，動相由甲醇(A)與0.3%乙酸(B)構成，梯度條件為0-10分鐘95%-20% B、10-20分鐘20%-10% B、20-35分鐘10%-10% B、35-40分鐘10%-95% B，流速為1毫升/分鐘。管柱沖提物以UV-可見光偵測器監控。
將第21.2至21.4分鐘所收集到的餾分液集中並濃縮生成化合物5，呈淺黃色液體之產物。化合物5被分析為4-羥基-5-(11-羥基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-2,3-二甲氧基-6-甲基環己-2-烯酮，分子量為408(分子式：C24H40O5)。1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)=1.21,1.36,1.67,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.68,4.05,5.71和5.56。13C-NMR(CDCl3)δ(ppm)：12.31,16.1,16.12,17.67,25.67,26.44,26.74,27.00,30.10,40.27,43.34,59.22,60.59,71.8,120.97,123.84,124.30,131.32,134.61,135.92,138.05,160.45、和197.11。
化合物54-羥基-5-(11-羥基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-2,3-二甲氧基-6-甲基環己-2-烯酮
將第23.7至24.0分鐘所收集到的餾分液集中並濃縮生成化合物7，呈淺黃色液體之產物。化合物7被分析為4-羥基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-6-甲基環己-2-烯酮，分子量為422 (C25H42O5)。1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)=1.21,1.36,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.24,3.68,4.05,5.12,5.50、和5.61.13C-NMR(CDCl3)δ(ppm)：12.31,16.1,16.12,17.67,24.44,26.44,26.74,27.00,37.81,39.81,40.27,43.34,49.00,59.22,60.59,120.97,123.84,124.30,135.92,138.05,160.45和197.12。
化合物7：4-羥基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-6-甲基環己-2-烯酮
將第25至30分鐘所收集到的餾分液集中並濃縮生成4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮(化合物1)，呈淺黃棕色液體之產物。化合物1的分析顯示分子式為C24H38O4，分子量為390，熔點為48至52℃。NMR光譜顯示1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)=1.51,1.67,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.68,4.05,5.07、和5.14；13C-NMR(CDCl3)δ(ppm)=12.31,16.1,16.12,17.67,25.67,26.44,26.74,27.00,39.71,39.81,40.27,43.34,59.22,60.59,120.97,123.84,124.30,131.32,135.35,135.92,138.05,160.45和197.12。
化合物1：4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮
化合物27-化合物1的代謝物-係由動物研究中餵食化合物1的大鼠尿液樣本獲得。化合物27被測定為4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3-甲基-2-己烯酸)環己-2-烯酮，分子量為312(C16H24O6)。化合物25被測定為2,3-二甲氧基-5-甲基-6-((2E,6E)-3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2,5-二烯-1,4-二酮(分子量為386.52，C24H34O4)，係由純化方法獲得。
亦藉由純化方法製備出化合物26，4-羥基-2-甲氧基-6-甲基-5-((2E,6E)-3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮，分子量為350.53(C23H36O3)。亦製備出化合物28。
替代性地，例示性化合物可由4-羥基-2,3-二甲氧 基-6-甲基環己-2,5-二烯酮或類似者製備出。
同樣地，具有結構的其他環己烯酮化 合物係單離自牛樟芝或由適宜起始材料以合成或半合成方式製備出。熟習此藝者將輕易地為此類合成運用適當條件。
實施例2.細胞株與細胞培養製備
人類肝細胞癌(HepG2、Hep3B)、人類肺腺癌(A549、H838)和人類骨髓性白血病(K562)細胞株係獲自美國典型培養物保存中心(American Type Culture Collection(Rockville,MD,USA))。人類前列腺癌細胞株(LNCaP與DU145)、人類乳腺癌(MCF-7)、人類膀胱癌(TSGH 8301)和人類胰腺癌(BxPC-3)係獲自BCRC(生物資源保存及研究中心，新竹，台灣)。HepG2、DU145與MCF-7細胞株於阿爾發最低基本培養基(Minimum Essential Medium Alpha)(Invitrogen/Gibco BRL,Grand Island,NY,USA)中培養。A549細胞於都貝氏改良之伊格氏培養基(Dulbecco’s modified Eagle's medium)(Invitrogen/Gibco BRL)中培養。H838、TSGH 8301、BxPC-3 LNCaP與K562細胞株於RPMI-1640培養基(Invitrogen/Gibco BRL)中培養。所有細胞於37℃、5% CO2下在補充有10%胎牛血清(FBS)(Invitrogen/Gibco BRL)與100單位/毫升鏈黴素與青黴素(Invitrogen/Gibco BRL)的培養基中進行培養。為用於處理，將細胞以每井6.25×105 個細胞的數量接種在六井盤中。第二天，將培養基換成無血清培養基，使細胞血清挨餓24小時。將化合物1溶於DMSO並以無血清培養基稀釋成所需濃度。隨後照指示般以稀釋的化合物1處理培養物。處理後，細胞以冷的磷酸鹽緩衝化食鹽水(PBS)加以洗滌，並使用含有磷酸酶和蛋白酶抑制劑的RIPA緩衝液來裂胞。
實施例3：免疫墨點分析
使用布萊弗試驗(Bradford assay)(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO,USA)測得六十微克總蛋白裂解液，於12.5% SDS-聚丙烯醯胺凝膠上進行解析。電泳於180V恒定電壓進行50分鐘。凝膠於280mA恒定電流轉移至PVDF薄膜上，共90分鐘。印跡以3%胎牛血清白蛋白(BSA)固定並以對抗磷化-p44/42(ERK1/2)(Thr202/Tyr204)(Cell Signaling Technology,Danvers,MA,USA)、p44/42MAPK(ERK1/2)、貝克林-1(Beclin-1，Cell Signaling Technology)、LC3B(Novus Biologicals,Cambridge,UK)、EGFR(Epitomics Inc,Santa Clara,CA)、Ras、GAPDH或β-肌動蛋白(Sigma-Aldrich)之抗體的1：1,000稀釋液進行探測。二級抗體係綴合於辣根過氧化物酶，其使用3,3’-二胺基聯苯胺受質套組(Vector Laboratories,Burlingame,CA)進行偵測。免疫反應譜帶係藉由光密度測定法使用Image-Pro Plus軟體(Media Cybernetics,Silver Spring,MD)來定量。
實施例4：CCK-8細胞存活率試驗
細胞計數套組-8(CCK-8)容許靈敏的比色檢測，以測定細胞增殖和細胞毒性試驗中的細胞存活率。CCK-8的偵測靈敏度係高於其餘四唑鹽，例如MTT、XTT、MTS或WST-1。
細胞存活率係使用細胞計數套組-8(CCK-8,Enzo Life Sciences,Farmingdale,NY)測量。在此試驗中，WST-8係於細胞中藉由脫氫酶還原，產生可溶於培養基質的黃色產物甲(formazan)。甲的生成量和活細胞的數量成正比。處理後，將CCK-8溶液加至每個井中，並培育4小時。甲濃度以分光光度計於450nm吸收波長測量。細胞存活率以相應控制組的百分比表示。
實施例5：以SDS-PAGE為基礎的異戊二烯基轉移酶試驗
在混合有3微克FTase(Jena,Germany)、25μM NBD-FPP和2微克H-RasGST的反應緩衝液(50mM HEPES、pH 7.2、50mM NaCl、5mM MgCl2、5mM DTT和20μM GDP)中，於存有不同濃度的化合物1或不存有化合物1下，於活體外進行異戊二烯基化反應。反應於37℃下培育3小時，添加20μl微升2×SDS-PAGE樣本緩衝液來淬熄反應，並於95℃沸騰3分鐘。最後，混合物以15% SDS-PAGE解析之。凝膠使用Typhoon 9400掃描器(GE Healthcare,UK)(激發雷射，473nm；發射截止濾波器，510nm)進行掃描，接著以考馬斯藍染色。螢光譜帶係使用Image-Pro Plus軟體加以定量(Media Cybernetics,Silver Spring,MD,USA)。
實施例6：免疫螢光和DAPI染色
將細胞接種在六井板的蓋玻片上。培育過夜後， 細胞以指定濃度的化合物1處理24小時。待處理後，細胞以溶於PBS的4%多聚甲醛固定5分鐘，並以溶於PBS的0.1% Triton X-100通透化5分鐘。細胞在作為阻斷劑的3% BSA中培育30分鐘。細胞隨後以對抗LC3B的兔多株抗體(Sigma-Aldrich)於室溫培育90分鐘。以溶於PBS的0.1% Triton X-100連續洗滌三次後，細胞和綴合有異硫氰酸螢光素-之二級抗體(Invitrogen Life Technologies,Paisley,Scotland,UK)一起於室溫下培育60分鐘。將細胞設在Dapi-Fluoromount-GTM(SouthernBiotech,Birmingham,AL,USA)上，並使用Zeiss LSM 780加上ELYRA S.1藉由共焦螢光顯微鏡目視觀察。
實施例7：測定化合物1及其衍生物、類比物(analogues)、和代謝物的細胞毒性效應
為了測定化合物1的細胞毒性效應是否和Ras突變的存在有關，使用帶有野生型Ras(H838、Hep3B和K562)或突變型Ras(A549、HepG2和THP-1)之衍生自人類肺癌(A549和H838)、肝癌(HepG2和Hep3B)和白血病(K562和THP-1)的細胞株。細胞存活率在化合物1處理48小時後測量。細胞株及其IC50之遞增順序為THP-1(2.22μM)<A549(3.24μM)<H838(3.32μM)<Hep3B(3.74μM)<K562(5.12μM)<HepG2(6.42μM)(表1)。因此，對化合物1的感受性和Ras基因狀態無關，因為化合物1在所有本案所述細胞株中皆展現絕佳的細胞毒性活性。
數值以平均±S.E.M.表示
結果指出，對例示性化合物1的感受性和Ras基因狀態無關，因為化合物1在所有細胞株中皆展現絕佳的細胞毒性活性。再者，以化合物1類比物(化合物25至31)在H838細胞中的IC50值為基準，顯示化合物1的4’-羥基與法尼基對其細胞毒性效應而言極為重要。
實施例8：評估化合物1對磷酸化ERK1/2位準的影響
為評估化合物1對MAP激酶信號傳導的影響，HepG2、A549和H838細胞以範圍廣泛的化合物1濃度加以處理，且進行磷酸化與總體ERK1/2的免疫墨點分析。化合物1在HepG2與A549細胞中引致ERK1/2的磷酸化作用，而總體ERK1/2表現位準則不受影響(圖1)。然而，在H838細胞中，在化合物1處理後，ERK1/2磷酸化作用的增加與總體ERK1/2的增多表現相互一致。因此，一般而言，化合物1在癌症細胞株中會致使ERK1/2磷酸化作用增加。
實施例9：以化合物1研究A549細胞中的ERK1/2磷酸化作用
在先前的報告中，顯示化合物1會抑制A549細胞中的PI3K信號傳導(Kumar VB,et al.,Mutat Res 2011 Feb 10；707(1-2)：42-52)。在此，顯示例示性化合物1向上調控A549細胞中的ERK1/2磷酸化作用。Ras是PI3K與ERK1/2的上游調控者。為進一步瞭解導致化合物1所調控之癌症細胞死亡的細胞信號傳導路徑，且更精確地識別化合物1的胞質標的，就Ras的分佈情形進行了檢驗。實驗係使用A549與H838細胞於血清與無血清條件下進行，以不同濃度的化合物1處理24小時。在探測Ras的免疫墨點上檢測到兩條相互區別的譜帶。遷移較慢的譜帶對應於未經加工的Ras，而遷移較快的譜帶則代表經完全加工的Ras。於血清與無血清條件下，化合物1在兩細胞株中皆造成未經加工Ras的累積(圖2A)。再者，化合物1在H838、HepG2與K562細胞中造成未經加工Ras的劑量相依性累積(圖2B與2C)。結果顯示化合 物1抑制癌症細胞中的Ras加工。
實施例10：在細胞培養物中評估化合物1對蛋白FTase活性與FPP-依賴性Ras異戊二烯基化作用的效應
Ras的轉譯後修飾對其活化而言不可或缺。將Ras變得有活性的第一個步驟為藉由FTase酶進行的異戊二烯基化作用。比對化合物1與FPP-Ras的異戊二烯基供體-的化學結構，顯示兩化合物具有相同的C15脂質鏈(圖3A)。於是，在細胞培養物中評估了化合物1對蛋白FTase活性與FPP-相依性Ras異戊二烯基化作用的效應。該等結果指出，化合物1獨自顯著地增強了未經加工Ras的累積。又，FPP獨自增強H838細胞中的Ras加工。競爭試驗顯示，FPP在低至10μM的濃度下能夠中和化合物1對Ras加工的效應(圖3B)。此外，活體外酶解活性試驗顯示，化合物1達成對FTase活性的劑量相依性抑制(圖3C)。該等結果顯示，在細胞培養物中，化合物1抑制了蛋白FTase活性，且與FPP相互競爭。
實施例11：化合物1在蛋白FTase上的分子對接
從國家生技資料中心(National Center for Biotechnology Information)的蛋白質資料庫下載FTase的胺基酸序列(登錄號：1JCQ_A)。以CDOCKER-A CHARMm-為基礎的分子對接演算法係應用於預測及評估化合物1與FTase CAAX盒之間的交互作用(參閱譬如Wu G,et al.,Vieth M(2003)Detailed analysis of grid-based molecular docking：A case study of CDOCKER-A CHARMm-based MD docking algorithm.Journal of Computational Chemistry 24(13)：1549-1562)。為了節制偏差，所有使用者可調整的參數係維持其原始設定值。
為預測FTase與本案所述例示性環己烯酮化合物(譬如化合物1)之間的推測性交互作用，使用Dock Ligands(CDOCKER)程式來進行分子對接研究。使用FTase(PDB ID 1JCQ)的結晶結構作為模板，吾人建立了一個對接模型，以鑑定化合物1與FTase內CAAX模序(motif)之間的交互作用。對接研究顯示，化合物1與FPP係以類似方位結合至FTase的活性位址(圖4A-B)。化合物1的法尼基位於疏水性空洞，並與數個守恆性芳族殘基產生交互作用。化合物1的官能基環結構與FPP的二磷酸部分係位於α/β-次單元界面附近。化合物1類比物的細胞毒性效應指出，異戊二烯單元的長度與2’-羥基在調控細胞毒性活性時扮演至為重要的角色。
對接模型亦可用於解釋化合物1類比物的細胞毒性屬性的差異。經顯示，異戊二烯單元的數量影響異戊二烯類對FTase的結合親和力。化合物1的4’-羥基可和酪胺酸殘基Y300b形成分子內氫鍵(圖4C)。此外，化合物1的環結構空間排列指出，3-甲氧基係位在FTase次單元界面附近的未佔據空間。於是，似乎去甲氧基-化合物1會顯示出略低於原型化合物1的IC50。這些結果為化合物1與FTase內CAAX模序的特定架構提供了重要的結構性見解(圖4D)，其有助於合理設計本案所述環己烯酮活性化合物(譬如化合物1類比物)。
實施例12：化合物1增強癌症細胞的自噬活性
吾人先前的研究指出，化合物1在人類癌症細胞株中透過PI3K/mTOR路徑引致凋亡及/或自噬性細胞死亡。Ras位於PI3K上游，並已在經RasVal12-轉化之NIH3T3細胞中證實負向調控自噬活性。在此，化合物1在肺癌細胞株中所引致自噬的位準係以貝克林-1與LC3B的免疫墨點分析測量。含LC3B的自噬體係藉由共焦顯微鏡目視觀察。結果指出，貝克林-1的表現在化合物1處理後的24小時與48小時會增加(圖5A-B)。化合物1亦會致使LC3B-1自噬性轉換成為LC3B-II。又，藉由共焦顯微鏡觀察到LC3B-II-相關的自噬體(綠色螢光點)(圖5C)。
統計分析
實施例的結果係以三個獨立實驗的平均±平均標準差(SEM)表示。執行單因子成對ANOVA統計分析，以測定差異的重要性。小於0.05的雙尾P-值被視為顯著。
實施例13：Ras-PI3K-Akt-mTOR路徑抑制劑和化合物1對於抑制癌症細胞生長的疊加效應 13-1. Ras抑制劑提比法尼和化合物1
基於實施例9顯示例示性化合物1會抑制癌症細胞內Ras加工的結果，測試了化合物1和Ras抑制劑提比法尼的協同作用。舉例來說，當HCT116細胞以例如由提比法尼與化合物1所構成之組合來處理時，相較於以任一單獨藥物處理，化合物1的IC50值降低了，且提比法尼的IC50值降低了。同樣地，以提比法尼與化合物1進行的第二個K-Ras-突 變細胞株DLD1的組合處理造成單一藥劑的1050值降低。請注意，提比法尼在組合療法中達到治療效果所需的用量遠遠較低(次優量)。
13-2. mTOR抑制劑雷帕黴素和化合物1
基於實施例12顯示例示性化合物1會抑制mTOR的結果，測試了化合物1和mTOR抑制劑雷帕黴素的協同作用。當HCT116細胞以例如由雷帕黴素與化合物1所構成之組合來處理時，相較於以任一單獨藥物處理，化合物1的1050值降低了，且雷帕黴素的1050值降低了。同樣地，以雷帕黴素與化合物1進行的第二個K-Ras-突變細胞株DLD1的組合處理造成單一藥劑的1050值降低。請注意，雷帕黴素在組合療法中達到治療效果所需的用量遠遠較低(次優量)。
13-3. PI3K抑制劑LY294002和化合物1
基於實施例12顯示例示性化合物1會抑制PI3K的結果，測試了化合物1和PI3K抑制劑LY294002的協同作用。當HCT116細胞以例如由LY294002與化合物1所構成之組合來處理時，相較於以任一單獨藥物處理，化合物1的1050值降低了，且LY294002的1050值降低了。同樣地，以LY294002與化合物1進行的第二個K-Ras-突變細胞株DLD1的組合處理造成單一藥劑的1050值降低。請注意，LY294002在組合療法中達到治療效果所需的用量遠遠較低(次優量)。
13-4. Akt抑制劑曲西立濱和化合物1
基於實施例12顯示例示性化合物1抑制Akt的結果，測試了化合物1和Akt抑制劑曲西立濱的協同作用。當HCT116細胞以例如由曲西立濱和化合物1所構成之組合處理時，相較於以任一單獨藥物處理，化合物1的1050值降低了且曲西立濱的1050值降低了。同樣地，以曲西立濱與化合物1進行的第二個K-Ras-突變細胞株DLD1的組合處理造成單一藥劑的1050值降低。請注意，曲西立濱在組合療法中達到治療效果所需的用量遠遠較低(次優量)。
實施例14：口服調配物
為製備出供口服輸送用的藥學組成物，將100毫克例示性化合物1和100毫克玉米油混合。將該混合物併入適用於口服投予之膠囊的口服劑量單元。
在一些情況中，將100毫克本案所述化合物和750毫克澱粉混合。將該混合物併入例如適用於口服投予之硬質明膠膠囊的口服劑量單元。
實施例15：舌下(硬質口含片)調配物
為製備出供頰部輸送用的藥學組成物，例如硬質口含片，將100毫克本案所述化合物與420毫克砂糖混合，並與1.6毫升淡玉米糖漿、2.4毫升蒸餾水和0.42毫升薄荷萃取物混合。將該混合物輕輕混拌並傾入模具中，以形成適用於頰部投予的口含片。
實施例16：吸入組成物
為製備出供吸入輸送用的藥學組成物，將20毫克本案所述化合物和50毫克無水檸檬酸與100毫升0.9%氯化 鈉溶液混合。將該混合物併入吸入輸送單元，例如適用於吸入投予的霧化器。
儘管本案已展示並說明本發明之較佳具體例，但對熟習此藝者而言極明顯的是此類具體例係僅為舉例而提供。熟習此藝者現將產生眾多更動、改變、和置換，而無逸離本發明。應理解到的是在實施本發明時，可運用本案所述之本發明具體例的各式替換例。所意圖的是下列請求項係界定本發明之範疇以及藉此涵蓋在該等請求項及其等效項之範疇以內的方法與結構。

Claims (32)

  1. 一種將具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥用於抑制一個體中的法尼基轉移酶(farnesyltransferase)的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  2. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的 鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及一個Ras抑制劑，用於抑制一個體中的Ras的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  3. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥、以及一個Ras-PI3K-Akt-mTOR路徑之抑制劑，用於治療一人類個體中的癌症的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  4. 如請求項3之用途，其中該抑制劑為Ras抑制劑。
  5. 如請求項2或請求項4之用途，其中該Ras抑制劑係選自於由提比法尼(tipifarnib)、沙里昔伯(salirasib)和GI-4000所組成之群組。
  6. 如請求項3之用途，其中該抑制劑為mTOR抑制劑。
  7. 如請求項6之用途，其中該mTOR抑制劑係選自於由依維莫司(everolimus)、AZD-8055、OSI-027、INK-128、 雷帕黴素(Rapamycin)、CCI-779、RAD001、AP-23573和PP-242所組成之群組。
  8. 如請求項3之用途，其中該抑制劑為PI3K抑制劑。
  9. 如請求項8之用途，其中該PI3K抑制劑係選自於由LY294002、PWT-458、PX-866、CAL-101、XL-147、ZSTK474、GDC-0941、(NVP)-BEZ235、AS-252424、TGX-221、XL-765、渥曼青黴素(Wortmannin)、AEZS-129、AEZS-131、AEZS-132、BKM120、BAY80-6946、AR245409和PI-103所組成之群組。
  10. 如請求項3之用途，其中該抑制劑為Akt抑制劑。
  11. 如請求項10之用途，其中該Akt抑制劑係選自於由曲西立濱(Triciribine(API-2))、SR13668、AR-67(DB-67)、AR-42、GSK690693、GSK2141795、KP372-1、VQD-002(API-2)、A-443654、MK-2206、MK-2206和哌立福新(Perifosine(KRX-0401))所組成之群組。
  12. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥用於在一個體中以次優量(sub-optimal amount)之Ras抑制劑來治療疾病的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基； R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  13. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥，以及一或多個抗癌劑，用於治療一人類個體中的癌症的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基， 其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  14. 如請求項13之用途，其中該一或多個抗癌劑包含吉西他濱(gemcitabine)、伊達比星/阿糖胞苷(idarubicin/cytarabine)、依托泊苷磷酸酯(etopside phosphate)、格列衛(gleevac)、替莫唑胺(temozolomide)、保特佐米(bortezomib)、來曲唑(letrozole)、爾必得舒(cetuximab)、貝伐單抗(bevacizumab)、結合白蛋白之太平洋紫杉醇(nab-paclitaxel)、多烯紫杉醇(docetaxel)、厄洛替尼(erlotinib)、培美曲唑(pemetrexed)、培美曲唑/佳鉑帝(pemetrexed/carboplatin)、太平洋紫杉醇/佳鉑帝(paxlitaxel/carboplatin)、來曲唑/塞克羅邁得(letrozole/cyclophsphamide)、坦羅莫司(temsirolimus)、貝伐單抗/坦羅莫司(bevacizumab/temsirolimus)、伊匹單抗(lpilimumab)、RAD001、帕唑帕尼(Pazopanib)、FOLFIRI、BKM120、GSK1120212、PF-05212384/愛萊諾迪肯(irinotecan)、 AZD2171、PF-04691502、塞克羅邁得、順鉑(cisplatin)、阿糖胞苷/佐柔比星(daunorubcin)、特羅莫司(tersirolimus)、厄洛替尼/坦羅莫司、截瘤達(capecitabine)、他莫昔芬(tamoxifen)、硼替佐米(bortezomib)、曲妥單抗(trastuzumab)、多烯紫杉醇/截瘤達、曲妥單抗/提比法尼、提比法尼/吉西他林(gemcitabline)、托泊替康(tootecan)，或彼等之組合。
  15. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥用於在施用抗癌療法之前致敏化癌症細胞的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基； R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基；R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  16. 如請求項15之用途，其中該抗癌療法為放療、化療或抗血管生成療法。
  17. 一種將一具有下列結構之化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥用於治療對於Ras、mTOR、PI3K或Akt抑制劑具抗性(resistant)、頑性(refractory)或無反應之癌症患者的用途： 其中X與Y個別獨立地為氧、NR5或硫；R為氫或C(=O)C1-C8烷基；R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基或(CH2)m-CH3；R4為NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、鹵素、5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6-員內酯、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基；R5與R6個別獨立地為氫或C1-C8烷基； R7為C1-C8烷基、OR5或NR5R6；m=1-12；以及n=1-12。
  18. 如請求項17之用途，其中該癌症對於選自於下列之藥物具抗性、頑性或無反應：索拉非尼(Sorafenib)、PLX4032、XL281、RAF265、885-A、ZM336372、L-779450、AZ628、AAL881、LBT613、MCP110、17-DMAG、CI1040、AZD6244/ARRY142886、PD0325901、SB590885、DP3346和DP2514。
  19. 如請求項17之用途，其中該癌症具有選自於K-Ras或PI3K之突變或畸變。
  20. 如請求項1-19中任一項之用途，其中該化合物或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥係以口服、腸胃道外或靜脈方式投予。
  21. 如請求項1-19中任一項之用途，其中該化合物、或其藥學上可接受的鹽類、代謝物、溶劑合物或前驅藥係以注射投予。
  22. 如請求項1-21中任一項之用途，其中該個體為人類。
  23. 如請求項1-22中任一項之用途，其中該化合物係由牛樟芝(Antrodia camphorate)單離出來。
  24. 如請求項1-23中任一項之用途，其中R為氫、C(=O)C3H8、C(=O)C2H5或C(=O)CH3。
  25. 如請求項1-24中任一項之用途，其中R1、R2與R3個別獨立地為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。
  26. 如請求項25之用途，其中R1為氫或甲基。
  27. 如請求項25之用途，其中R2為氫或甲基。
  28. 如請求項1-27中任一項之用途，其中R4為鹵素、NH2、NHCH3、N(CH3)2、OCH3、OC2H5、C(=O)CH3、C(=O)C2H5、C(=O)OCH3、C(=O)OC2H5、C(=O)NHCH3、C(=O)NHC2H5、C(=O)NH2、OC(=O)CH3、OC(=O)C2H5、OC(=O)OCH3、OC(=O)OC2H5、OC(=O)NHCH3、OC(=O)NHC2H5或OC(=O)NH2。
  29. 如請求項1-27中任一項之用途，其中R4為C2H5C(CH3)2OH、C2H5C(CH3)2OCH3、CH2COOH、C2H5COOH、CH2OH、C2H5OH、CH2Ph、C2H5Ph、CH2CH=C(CH3)(CHO)、CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3)、5或6-員內酯、芳基或葡糖基，其中該5或6-員內酯、芳基、和葡糖基係任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基。
  30. 如請求項29之用途，其中R4為C1-C8烷基，其任擇地取代有選自於下列的一或多個取代基：NR5R6、OR5、OC(=O)R7、C(=O)OR5、C(=O)R5、C(=O)NR5R6、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環烷基和C1-C8鹵烷基。
  31. 如請求項29之用途，其中R4為CH2CH=C(CH3)2。
  32. 如請求項1-31中任一項之用途，其中該化合物為
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