TW201524354A - 保存血管導管之溶液 - Google Patents

Abstract

本發明藉由將調配物分離成具有pH至少7之第一溶液及具有pH小於7之第二溶液而提供具有改進安定性儲存壽命之器官及組織保存調配物。該第一溶液包括在pH 7.0或以上儲存時具有改進安定性的組分，及該第二溶液包括在pH低於7.0儲存時具有改進安定性的組分。該第一溶液於pH至少7.0，包括水、平衡鹽溶液、糖及L-精胺酸。該第二溶液於pH小於7.0且較佳自pH 6.9至約pH 2.8，包括水、抗壞血酸及還原之麩胱甘肽。在使用期間，混合第一及第二溶液以形成最終調配物，其可在生理pH用於保存組織或器官之功能。

Description

保存血管導管之溶液

本發明係關於用於保存組織及器官功能之調配物，及更特定言之係關於用於在移植之前保存組織及器官功能(特定而言血管導管之功能)之儲存穩定的調配物。

用於個體之植入或移植之組織及器官係體外儲存在保存組織及器官功能的液體調配物中直到移植為止。組識及器官保存調配物係已知曉。一種相關調配物敘述於美國專利第7,981,596號，其以引用方式全文併入本文。敘述於美國專利第7,981,596號中之組織及器官保存調配物在文獻中一般稱為GALA調配物，表示麩胱甘肽、抗壞血酸及L-精胺酸。GALA調配物係基於漢克平衡鹽水溶液(Hank's balanced saline solution)(HBSS)，一種市售的生理鹽溶液，其包含D-葡萄糖1g/L、氯化鈣(無水)0.14g/l、氯化鉀0.4g/l、磷酸鉀0.06g/l、六水合氯化鎂0.1g/l、七水合氯化鎂0.1g/l、氯化鈉8g/l、碳酸氫鈉0.35g/l及磷酸鈉0.048g/l。如在‘596專利中所揭示，將抗壞血酸(維生素C)、還原型麩胱甘肽、L-精胺酸及肝素添加至HBSS。此溶液提供自由基清除劑、抗氧化劑、一氧化氮(NO)基質、還原劑、能量來源(葡萄糖)、抗凝結劑、及生理濃度之電解質及緩衝劑。

由於調配物中各種組分之不安定性，GALA調配物之儲存壽命有限。GALA調配物之相對短的儲存壽命可限制其有用性。因此，需要 改進GALA調配物，以改進其組分之安定性及因此增長其儲存壽命。

文中敘述相比原始調配物具有改進安定性及增加儲存壽命之GALA調配物的改進。亦敘述該等經改進調配物的使用方法。

本發明係基於實現：組織保存調配物(特定言之GALA調配物)之安定性可藉由將調配物分離成具有至少7之pH之第一溶液及具有小於7之pH之第二溶液來改進。該第一溶液包括當在7.0或以上之pH下儲存時具有改進安定性的組分，及該第二溶液包括當在低於7.0之pH下儲存時具有改進安定性的組分。該第一溶液包括處於至少7.0之pH及較佳而言在pH 7.0至約pH 8.5之範圍內之pH的水、平衡鹽溶液、諸如D-葡萄糖之糖及L-精胺酸。該第二溶液包括處於小於7.0之pH及較佳而言自pH 6.9至約pH 2.8的水、諸如抗壞血酸之抗氧化劑及諸如還原型麩胱甘肽之還原劑。在使用點時，一起混合該等第一及第二溶液，以形成可在約pH 7.4之生理pH下用於保存組織或器官之功能的最終調配物。

10‧‧‧容器

12‧‧‧第一隔室

14‧‧‧第二隔室

16‧‧‧公部件

18‧‧‧母部件

22‧‧‧第一容器

24‧‧‧第二容器

26‧‧‧氧吸收劑

28‧‧‧小袋

經併入及構成本說明書之一部份的附圖說明本發明之各種實施例，及連同以上給出之本發明之綜述及以下給出之實施例之詳細敘述，充當說明本發明之實施例。

圖1為根據本發明之實施例之多室袋的透視圖。

圖2為根據本發明之實施例具有第一容器及第二容器之套組的透視圖。

除非另有定義，否則文中所用之所有技術及科學術語具有本發明所屬之領域之一般技術者通常理解的相同含義。儘管在本發明之實踐或測試中可使用與文中所述之彼等類似或相當的任何方法及材料， 但敘述較佳的方法及材料。出於本發明之目的，以下定義下列術語。

如文中所用，「器官」包括但不限於心臟、靜脈、動脈、肺、肝、胰及腎。亦涵蓋器官之一部份。

如文中所用，「無菌水」包括但不限於(a)注射用無菌水，USP，(b)無菌蒸餾去離子水，及(c)灌洗用無菌水。

如文中所用，「抗氧化劑」為當存在於包含可氧化基質生物分子之混合物或結構中時，可延遲或防止基質生物分子氧化的物質。例如，抗壞血酸為抗氧化劑。

如文中所用，「平衡鹽溶液」係定義為滲透上平衡以防止急性細胞或組織損壞的水溶液。

如文中所用，「生理溶液」係定義為藉由與正常間質流體等滲而與正常組織相容的鹽水溶液。

如文中所用，「移植物」係定義為在身體的一部份中移植或植入以修復缺陷的組織。

如文中所用，「心臟停搏」包括但不限於心臟麻痹。

如文中所用，「細胞還原劑」係定義為容易失去電子從而引起其他物質化學還原的物質。

本發明提供一種兩部份組織保存套組，其最終形成GALA溶液，該溶液包括水、平衡鹽溶液、糖、L-精胺酸、抗壞血酸及細胞還原劑(諸如還原之麩胱甘肽)。

GALA調配物之安定性可藉由將調配物分離成具有pH至少7之第一溶液及具有pH小於7之第二溶液而改進。第一及第二溶液混合在一起以形成最終等滲GALA調配物，其可在約pH 7.4之生理pH用於保存組織或器官之功能。

該第一溶液包括在pH7.0或以上儲存時具有改進安定性的組分。該第一溶液包括水、平衡鹽溶液、糖(諸如D-葡萄糖、果糖或甘露糖) 及L-精胺酸。平衡鹽溶液包括選自如下之鹽：二水合氯化鈣、氯化鉀、磷酸二氫鉀、六水合氯化鎂、七水合硫酸鎂、氯化鈉、碳酸氫鈉、七水合磷酸氫二鈉及其組合。以第一及第二溶液混合在一起時將產生等滲溶液之濃度提供平衡鹽溶液。在一個例示性實施例中，平衡鹽溶液包括約0.14克/公升二水合氯化鈣、約0.4克/公升氯化鉀、0.06克/公升磷酸二氫鉀、約0.1克/公升六水合氯化鎂、約0.1克/公升七水合硫酸鎂、約8克/公升氯化鈉、約0.35克/公升碳酸氫鈉及約0.05克/公升七水合磷酸氫二鈉。

第一溶液可具有pH至少pH 7.0且較佳pH在pH 7.0至約pH 8.5之範圍內。在一個較佳實施例中，第一溶液具有pH至少pH 8.0且較佳pH係在約pH 8.0至約pH 8.5之範圍內。

第二溶液包括在pH低於7.0儲存時具有改進安定性的組分。第二溶液係由水、抗氧化劑(諸如抗壞血酸)及細胞還原劑(諸如還原之麩胱甘肽)組成。以第一溶液與第二溶液混合時產生等滲最終調配物之相對濃度提供第二溶液之組分。在一個例示性實施例中，第二溶液包括約0.3106克還原之L-麩胱甘肽/50毫升水及約0.09克L-抗壞血酸/50毫升水。第二溶液之pH係小於7且較佳約pH 6.9至約pH 2.7。在另一較佳實施例中，第二溶液之pH係小於約pH 4且較佳約pH 4至約pH 2.7。在另一實施例中，第二溶液之pH係在約pH 3.3至約pH 2.7之範圍內且較佳約pH 3。

在一個例示性實施例中，第一溶液與第二溶液之體積比為約19：1。在一個較佳實施例中，950ml第一溶液與50ml第二溶液混合以產生用於保存組織或器官之功能的最終調配物。

第一或第二調配物可視需要包括足以幫助防止組織或器官之血管內之血液凝結之含量的抗凝結劑。示例性抗凝結劑包括肝素及水蛭素，但可使用其他抗凝結劑。一種示例性實施例包括在約50單位/公 升至約250單位/公升之濃度範圍內的肝素。

在使用期間，一起混合第一及第二溶液，以形成可在介於約pH 7.2及約pH 7.6之間之範圍內及較佳而言約pH 7.4之生理pH下用於保存組織或器官之功能的最終調配物。若第一及第二溶液之混合物不具有介於約pH 7.2及約pH 7.6之間之範圍內的生理pH，則可利用鹼或酸調節混合物之pH至生理pH。

可以套組提供本發明之實施例，其中該等第一及第二溶液係提供於可在使用點時混合以產生最終調配物之分開的隔室或容器中。

圖1說明一種包括一示例性容器10之套組，該容器具有一第一隔室12，其藉由一可移除隔離物與一第二隔室14分離，該隔離物包括一公部件16及一母部件18。第一溶液係保存在第一12或第二14隔室之一者中及第二溶液係保存在第一12或第二14隔室之另一者中。藉由移除該可移除隔離物可混合該等第一及第二溶液，其導致第一及第二隔室現形成包含用於保存組織功能之最終調配物的單一隔室。接著可按需要使用混合物。

圖2說明一種替代性套組，其具有一第一容器22及一第二容器24。第一溶液係提供於第一容器22中及第二溶液係提供於第二容器24中。在使用期間，將第二溶液從第二容器24轉移至第一容器22，在此該等第一及第二溶液混合形成用於保存組織或器官功能之最終調配物。該套組可視需要包括防腐劑(諸如氧吸收劑26)，及一用於保護及視需要儲存第一22及第二24容器之一者或兩者的小袋28。該套組亦可視需要包括一種用於將其中一個容器之內容物轉移至另一容器的裝置，諸如注射器(未圖示)。

在圖2所示之實施例中，將第一溶液無菌填充至第一容器24，諸如預先滅菌之耐潔(Nalgene)瓶中，隨後利用預先滅菌之HDPE螺帽固定。第一容器可標示為瓶A。

將第二溶液無菌填充至第二容器26，諸如預先滅菌之矽酸硼I型玻璃小瓶中，再利用預先滅菌之利用撕裂式密封件固定位的斯太米(Stelmi)隔膜固定。按照製造商建議的壓接設置，利用有效的壓接過程，將撕裂式密封件壓接至瓶上。第二容器可標示為瓶B。瓶B在混合及填充過程期間經氬氣脫氣以減少氧的存在。接著將瓶B放置在一小袋28(諸如經填充氬氣及氧吸收劑28之米萊(Mylar)小袋)中，以減少在其儲存壽命期間之氧暴露。然後標示瓶及小袋。

接著將包含第一溶液之第一容器22及包含容納第二溶液之第二容器的小袋28放置在包裝(諸如卡紙預印刷盒)中。亦將仿單放置在包裝中及密封及標示盒子以供配銷。

套組之示例性實施例將產生約1公升的最終調配物及將分為約950毫升之第一溶液及約50毫升之第二溶液。儘管預期套組中提供之第一及第二溶液的混合物將產生具有期望生理pH的混合物，但該等套組可視需要包括用於測量混合物之pH的裝置，諸如石蕊試紙，及一組pH調節劑，即鹼(例如，84% NaHCO₃水溶液)及酸(例如，4N HCl)，用來調節混合物之pH以產生具有期望生理pH的最終調配物。

下表提供第一及第二溶液之示例性調配物。

可使用其他鹽來提供活性離子，只要由第一及第二溶液之混合物形成之最終調配物為等滲性即可。

文中所述之調配物及方法不限定用於特定的組織、器官或細胞類型。例如，本發明之實施例可用於經摘取之隱靜脈、上腹壁動脈、胃網膜動脈、及用於冠狀動脈繞道術之橈動脈。本發明之實施例亦可用於在移植手術期間保存器官及組織。涵蓋本發明之實施例可用於包括但不限於心臟、肺、腎、腦、肌肉、移植物、皮膚、腸道、骨骼、牙齒、附屬器官、眼及其部份的器官及組織。本發明之實施例亦可用作原位組織或器官防腐劑。本發明之實施例亦可用於洗滌或浸泡尚未從個體移除的組織及器官。例如，本發明之實施例可用於在心臟停搏期間保存組織及器官。本發明之實施例亦可用於急救程序，其中需將 組織或器官浸泡於調配物中以保存其功能直到可進行手術或獲得其他醫療護理為止。就此而言，本發明之實施例可供醫院環境及「現場」(即，在救護車或臨時緊急醫療設施中)之緊急醫療人員使用。

實例1 製備第一及第二溶液及評估調配物的安定性

第一溶液為包括在7或更高之pH下安定之組分的水溶液。第一溶液具有950毫升的最終體積及包括平衡鹽溶液及1克/公升D-葡萄糖、0.15克/公升L-精胺酸及950毫升已經氬氣飽和之無菌水。平衡鹽溶液包括約0.14克/公升二水合氯化鈣、約0.4克/公升氯化鉀、0.06克/公升磷酸二氫鉀、約0.1克/公升六水合氯化鎂、約0.1克/公升七水合硫酸鎂、約8克/公升氯化鈉、約0.35克/公升碳酸氫鈉及約0.05克/公升七水合磷酸氫二鈉。第一溶液之最終pH為pH 8.3±0.2。

第二溶液為包括在小於7之pH下安定之組分的水溶液。第二溶液具有50毫升的最終體積及包括0.3106克L-麩胱甘肽(還原型)及0.09克L-抗壞血酸及50毫升無菌水。第二溶液之最終pH為pH 3.0±0.2。

將第一及第二溶液混合在一起，及用84% NaHCO₃水溶液或4N HCl調節pH至pH 7.4以形成1公升的最終調配物。

實例2

分析第二溶液及實例1之最終調配物以評估抗壞血酸及還原之麩胱甘肽在室溫下一段時期的安定性。

藉由將第一及第二溶液混合在一起形成最終調配物及將其pH調節至約7.4。根據實例1之程序製備具有pH約3.0之分開體積的第二溶液。在兩種溶液中歷時一段時期測定抗壞血酸之安定性及還原之麩胱甘肽之安定性。將最終調配物及第二溶液儲存在室溫。

針對該研究發展及採用之層析方法可再現地分離抗壞血酸及麩胱甘肽且在該等組分或其分解產物之間無任何相互干擾。利用電噴灑 質譜法以+ve選定離子監測模式檢測兩種組分。另外，亦藉由在190-400nm範圍內吸收之光電二極體陣列檢測L-抗壞血酸及L-麩胱甘肽。各組分峰之整合層析強度係其於分析溶液中之莫耳量的量度。亦針對各樣本測量pH、傳導性及滲透度。

在40℃±2℃/75%RH±5%相對濕度(RH)下評估指示GALA性質的安定性。使用具有一致及恆定溫度及相對濕度的合格安定性室來儲存產品容器。每日記錄該室之溫度計及數位顯示器(digital readout)。所提安定性研究所收受的樣本係以樣本收據及儲存日誌記錄及追蹤及維持在2-8℃直到研究開始。將第一及第二溶液之各代表性批料裝置之最少21個容器放置在維持於40℃±2℃/75%RH±5% RH的安定性室中。將該日期記錄為零時間點。在0、5、9、15、30、50及80天間隔從安定性室中取出第一及第二溶液的各三個容器進行測試。

具有約3.0 pH之第二溶液中之抗壞血酸的衰減速率為約3mg/天，而具有約7.4 pH之最終調配物中之抗壞血酸的衰減速率為約15mg/天。具有約3.0 pH之第二溶液中之還原麩胱甘肽的衰減速率為約3mg/天，而具有約7.4 pH之最終調配物中之還原麩胱甘肽的衰減速率為約6mg/天。該等數據證實，抗壞血酸及還原之麩胱甘肽在具有約3.0 pH之分開溶液中儲存時的安定性與該等化合物在具有約7.4 pH之水溶液中儲存時的安定性相比顯著增加。

儘管已藉由敘述具體實施例說明本發明，及儘管已相當詳細地敘述該等實施例，但不欲以該等細節限制或以任何方式限定隨附申請專利範圍之範疇。可單獨地或以任何組合使用文中所述之各種特徵。熟悉技藝人士當可輕易明瞭其他優勢及修改。因此，本發明的更廣態樣不受限於所展示及敘述之具體細節、代表性裝置及方法及說明性實例。因此，在不脫離本發明之總體概念的範疇或精神下可背離該等細節。

22‧‧‧第一容器

24‧‧‧第二容器

26‧‧‧氧吸收劑

28‧‧‧小袋

Claims (20)

1. 一種用於保存組織或器官之功能的套組，其包括：包含第一溶液之第一容器，其中該第一溶液包括水、平衡鹽溶液、糖及L-精胺酸且具有至少7.0之pH；包含第二溶液之第二容器，其中該第二溶液係由水、還原之麩胱甘肽、及抗壞血酸組成且具有低於4.0之pH。
2. 如請求項1之套組，其中該平衡鹽溶液包括選自由二水合氯化鈣、氯化鉀、磷酸二氫鉀、六水合氯化鎂、七水合硫酸鎂、氯化鈉、碳酸氫鈉、七水合磷酸氫二鈉及其組合組成之群的鹽。
3. 如請求項1之套組，其中該平衡鹽溶液包括約0.14克/公升二水合氯化鈣、約0.4克/公升氯化鉀、0.06克/公升磷酸二氫鉀、約0.1克/公升六水合氯化鎂、約0.1克/公升七水合硫酸鎂、約8克/公升氯化鈉、約0.35克/公升碳酸氫鈉及約0.05克/公升七水合磷酸氫二鈉。
4. 如請求項1至3中任一項之套組，其中該第二溶液包括約0.3106克還原之L-麩胱甘肽/50毫升水及約0.09克L-抗壞血酸/50毫升水。
5. 如請求項1至3中任一項之套組，其中該第一溶液與該第二溶液之體積比為約19：1。
6. 如請求項1至3中任一項之套組，其中該第一溶液之pH係在約pH 8至約pH8.5之範圍內。
7. 如請求項1至3中任一項之套組，其中該第二溶液之pH係在約pH 2.7至約pH 3.3之範圍內。
8. 如請求項1至3中任一項之套組，其中該第一溶液及該第二溶液之混合物形成具有pH在約pH 7.2至約pH 7.6範圍內之最終調配物。
9. 如請求項1之套組，其中該套組包括一個包含第一隔室及第二隔室之單一容器，其中該第一隔室為包含第一溶液之第一容器及該第二隔室為包含第二溶液之第二容器，其中第一及第二隔室係藉由隔離物維持為分開的隔室，該隔離物可移除而容許第一及第二溶液混合以形成用於保存組織或器官之功能的最終調配物。
10. 一種製備用於保存組織或器官功能之調配物的方法，其包括：提供第一溶液，其中該第一溶液包括水、平衡鹽溶液、糖及L-精胺酸且具有至少7.0之pH；提供第二溶液，其中該第二溶液係由水、還原之麩胱甘肽、及抗壞血酸組成且具有低於4.0之pH；及混合該第一溶液與該第二溶液以形成用於保存組織或器官之功能的完整調配物。
11. 如請求項10之方法，其中該平衡鹽溶液包括選自由二水合氯化鈣、氯化鉀、磷酸二氫鉀、六水合氯化鎂、七水合硫酸鎂、氯化鈉、碳酸氫鈉、七水合磷酸氫二鈉及其組合組成之群的鹽。
12. 如請求項10之方法，其中該平衡鹽溶液包括約0.14克/公升二水合氯化鈣、約0.4克/公升氯化鉀、0.06克/公升磷酸二氫鉀、約0.1克/公升六水合氯化鎂、約0.1克/公升七水合硫酸鎂、約8克/公升氯化鈉、約0.35克/公升碳酸氫鈉及約0.05克/公升七水合磷酸氫二鈉。
13. 如請求項10至12中任一項之方法，其中該第二溶液包括約0.3106克還原之L-麩胱甘肽/50毫升水及約0.09克L-抗壞血酸/50毫升水。
14. 如請求項10至12中任一項之方法，其中該第一溶液與該第二溶液之體積比為約19：1。
15. 如請求項10至12中任一項之方法，其中該第一溶液之pH係在約pH 8至約pH 8.5之範圍內。
16. 如請求項10至12中任一項之方法，其中該第二溶液之pH係在約pH 2.7至約pH 3.3之範圍內。
17. 如請求項10至12中任一項之方法，其中該第一溶液及該第二溶液之混合物之pH係在約pH 7.2至約pH 7.6之範圍內。
18. 如請求項10至12中任一項之方法，其進一步包括：提供具有第一隔室及第二隔室之容器，其中該等隔室係藉由隔離物維持為分開的隔室，其中該第一隔室包含第一溶液及該第二隔室包含第二溶液，移除該隔離物而容許第一及第二溶液混合以形成用於保存組織或器官之功能的完整調配物。
19. 如請求項10至12中任一項之方法，其進一步包括：提供包含該第一溶液之第一容器；提供包含該第二溶液之第二容器；混合該第二容器之內容物與該第一容器之內容物，以形成用於保存組織或器官之功能的完整調配物。
20. 一種保存組織或器官之功能的方法，其包括：提供第一溶液，其中該第一溶液包括水、平衡鹽溶液、糖及L-精胺酸且具有至少7.0之pH；提供第二溶液，其中該第二溶液包括水、還原之麩胱甘肽、及抗壞血酸且具有低於4.0之pH；混合該第一溶液與該第二溶液以形成用於保存組織或器官之功能的完整調配物；及使組織或器官與該完整調配物接觸。