TW201521734A - 一種化合物用於製備抗發炎藥物的用途 - Google Patents

Abstract

一種化合物用於製備抗發炎藥物的用途，該化合物係藉由降低巨噬細胞產生細胞激素以抑制發炎反應，包含：將一有效劑量之該化合物施予一所需個體，以降低該所需個體之發炎反應；其中，該化合物係為(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇。

Description

一種化合物用於製備抗發炎藥物的用途

本發明係關於一種化合物的用途，特別是一種(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇用以製備藥物，以預防發炎反應的用途。

發炎是身體為了對抗外來刺激(如細菌感染、外傷等)而產生的免疫反應，顯現於生理組織的現象多為水腫、發紅、發熱及疼痛。一般而言，發炎是身體為移除有害病原體及促進組織修復的保護措施，但是長期發炎將造成人體不適，甚或惡化而破壞生理組織導致壞死；因此發炎反應一旦發生，應密切注意並避免惡化。

目前已開發出如吲哚美辛(indomethacin)等習知抗發炎藥物，該些習知抗發炎藥物屬於抗生素，雖然能抑制發炎反應，但不當使用吲哚美辛容易導致個體產生嘔吐、胃出血甚至穿孔、過敏、肝腎功能損傷等副作用，因此，吲哚美辛的使用必須非常謹慎，且可能在對抗發炎的同時帶來其他不適之後遺症。

相對於許多抗生素會帶來抗藥性等副作用，由天然食物衍生而來的習知天然抗發炎成份，如薑黃素(curcumin)，因被期待在發揮抗發炎的療效之餘亦能減少副作用的產生，而日漸受到重視；然而薑黃素為高脂溶性物質，除了因不易溶於水而不易被人體利用外，薑黃素於血清中的 半衰期更只有數十分鐘，難以持續發揮功效。

據此，若能夠研發來自天然食物來源的一化合物，該化合物能夠降低發炎反應，進而提供製備抗發炎藥物的用途，且作用時間較習知天然抗發炎成份更長，將可以於較少副作用的狀況下減少發炎反應帶來的不適，以減少發炎者的痛苦。

本發明之主要目的係提供一種化合物的用途，係用於製備抗發炎藥物，以減輕發炎反應者。

為達到前述發明目的，本發明所運用之技術手段及藉由該技術手段所能達到之功效包含有：一種化合物用於製備抗發炎藥物的用途，係包含：將一有效劑量之該化合物施予一所需個體，以降低該所需個體之發炎反應；其中，該化合物係為(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇。

本發明之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，其中，該化合物較佳係以塗抹方式施予該所需個體。

本發明之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，其中，該化合物之該有效劑量較佳係為0.3125μg/mL/塗抹單位面積。

本發明之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，係藉由降低該所需個體中iNOS及COX-2等發炎物質之表現，以及抑制NF-κB訊息傳遞路徑，以達到抗發炎之功效。

第1圖：本發明化合物的化學式。

第2圖：本發明化合物對RAW264.7細胞株的存活度測試結果。

第3a圖：於RAW264.7細胞株投予不同濃度LPS，以西方墨點法偵測其誘發之iNOS蛋白表現量。

第3b圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之薑黃素，以西方墨點法偵測LPS誘發之iNOS蛋白表現量。

第3c圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以西方墨點法偵測LPS誘發之iNOS及COX-2蛋白表現量。

第4圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以西方墨點法偵測LPS誘發之MAPK及IκBα訊息傳遞路徑相關蛋白表現量。

第5圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以冷光酶活性法偵測NF-κB與DNA之結合率。

第6a圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以ELISA偵測LPS誘導之TNF-α分泌量。

第6b圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以ELISA偵測LPS誘導之IL-6分泌量。

第6c圖：於RAW264.7細胞株投予LPS，並同時投予不同濃度之本發明化合物，以ELISA偵測LPS誘導之IL-1β分泌量。

第7圖：以TPA誘導鼠耳腫脹，續投予不同濃度之本發明化合物，觀察不同時間後之鼠耳消腫程度。

為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂，下文特舉本發明之較佳實施例，並配合所附圖式，作詳細說明如下：本發明所指EMCDO，係為名為(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇 (5β,19-epoxy-25-methoxycucurbita-6,23(E)-dien-3β-ol)的化合物，為使全案敘述簡潔，以下皆以EMCDO取代(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇；其中，EMCDO的化學式請參照第1圖所示。

本發明為一種EMCDO用於製備抗發炎藥物的用途，係包含：將一有效劑量之該EMCDO投予一所需個體，以降低該所需個體發炎之嚴重性。

是以，本發明之EMCDO可以降低發炎反應，進而提供製備抗發炎藥物的用途，該EMCDO係可以與醫藥學上可以接受之載劑或賦形劑組合形成一醫藥組合物，而以塗佈於患部的方式供所需個體外用，或是以腹腔注射或靜脈注射等針劑方式送入所需個體，或是以錠劑、膠囊、粉劑、粒劑或液劑等口服方式供該所需個體服用；該EMCDO亦可以與其他食品或飲料組合，以一適於經口服用之樣態送入該所需個體。

本發明所指EMCDO，其萃取方式包含：取得含有該EMCDO的一天然物質；以甲醇先行萃取後，以乙酸乙酯與水進行分配萃取，再以正丁醇進行萃取，得到一萃取液；將該萃取液進行純化，以得到該EMCDO。其中，該天然物質係可為苦瓜等天然食品，其純化可由高效能液向層析法(HPLC)、膠體分離純化法等擇一；惟，化學合成之該EMCDO亦具有相同功效，此為本領域具通常知識者所能理解，容不多加贅述。另外，為了減少萃取液之體積，係可進減壓濃縮、風乾、烘乾、冷凍抽乾等方式以濃縮該萃取液。

較佳地，EMCDO係自苦瓜(Momordica charantia)萃取純化而來。詳而言之，取苦瓜果實乾重30公斤，處理成粉末後，利用60公升的100%甲醇(MeOH)浸泡萃取共重複三次，每次間隔一週，得到三份浸泡液，並將共180公升的該浸泡液進行減壓濃縮而成一粗萃取物(約6.3公斤)。加入8公升水至該粗萃取物中，使該粗萃取物成懸浮狀後，先以8 公升乙酸乙酯(EtOAc)進行分配萃取三次得乙酸乙酯層671克，再以4公升正丁醇(n-BuOH)進行萃取三次得正丁醇層966克，最後剩餘的為水層部分4566克。

將正丁醇層萃取物溶解在20%甲醇中，並以Diaion HP 20為固定相充填管柱，水與甲醇混合液為移動相，進行玻璃管柱色層分析(150×10cm)；其中，初始沖提溶劑中水與甲醇的體積比為4：1，之後以沖提出樣品減少量做為更換水與甲醇比例依據，逐步增加甲醇比例至100%，共可獲得25個區分的初萃取液。

25個區分的初萃取液中，水與甲醇的體積比分別為：區分1(6000mL，水比甲醇為4：1)、區分2(4000mL，水比甲醇為38：12)、區分3(3000mL，水比甲醇為36：14)、區分4(5000mL，水比甲醇為34：16)、區分5(5000mL，水比甲醇為32：18)、區分6(3000mL，水比甲醇為3：2)、區分7(4000mL，水比甲醇為28：22)、區分8(6000mL，水比甲醇為26：24)、區分9(4000mL，水比甲醇為24：26)、區分10(5000mL，水比甲醇為22：28)、區分11(3000mL，水比甲醇為20：30)、區分12(3000mL，水比甲醇為18：32)、區分13(5000mL，水比甲醇為16：34)、區分14(4000mL，水比甲醇為14：36)、區分15(4000mL，水比甲醇為12：38)、區分16(2000mL，水比甲醇為10：40)、區分17(3000mL，水比甲醇為9：41)、區分18(3000mL，水比甲醇為8：42)、區分19(3000mL，水比甲醇為7：43)、區分20(2000mL，水比甲醇為6：44)、區分21(3000mL，水比甲醇為5：45)、區分22(3000mL，水比甲醇為4：46)、區分23(4000mL，水比甲醇為3：47)、區分24(3000mL，水比甲醇為1：49)與區分25(8000mL，甲醇為100%)。

取得區分16的初萃取液並乾燥後，約可獲得6.1克的一初萃取粉末，將該初萃取粉末溶解於10mL的甲醇後，以150克Sephadex LH-20膠體為固定相進行管柱分離(5×50cm)，並以水與甲醇的體積比為1：1~0：1混合液沖提，獲得6個區分的次萃取液(次萃取液A~次萃取液F，其水與甲醇的體積比分別為50：50、40：60、30：70、20：80、10：90及0：100)，每個區分的次萃取液為800mL。

取得次萃取液B並乾燥後，可獲得約5.2克的次萃取粉末，以120克矽膠為固定相進行玻璃管柱色層分析(3×45cm)，並以二氯甲烷與乙酸乙酯的體積比為10：1~0：1混合液沖提，獲得5個區分的細萃取液(該細萃取液A~該細萃取液E，其二氯甲烷與乙酸乙酯的體積比分別為10：1、8：2、6：4、4：6及0：1)，每個區分的該細萃取液為100mL。獲得該細萃取液C後，以高效能液相層析儀方法(管柱為Lichrosorb silica gel 60，250×10mm，粒徑尺寸5μm，)，移動相為正己烷：乙酸乙酯體積比例為8：2的混和液，流速為每分鐘2mL，在滯留時間23.3分鐘即可純化出EMCDO約102mg。

上述EMCDO係可以作為治療藥劑，投予所需個體，其中，該所需個體係為具有發炎反應的個體。

為驗證EMCDO確實具有對抗發炎的效果，接著進行下列實驗。巨噬細胞(macrophage)是發炎反應中主要參與的細胞，會分泌多種細胞激素(cytokine)而引起發炎反應；本發明使用的巨噬細胞株是RAW264.7細胞株，係培養於含有10%FBS、100U/mL之penicillin及100μg/mL之streptomycin的DMEM培養液中，培養於溫度37℃之細胞培養箱中；該EMCDO係溶於DMSO中。

(A)EMCDO對RAW264.7細胞株的存活度測試實驗

本實驗將RAW264.7細胞株種植於96孔盤(5000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，於第0小時分別投予1.25、2.5、5、10及20μg/mL之EMCDO，以未添加該EMCDO的該RAW264.7細胞株作 為對照組(存活度為100%)，並於第24、48及72小時吸去培養液中的懸浮細胞，以錐蟲藍(trypan blue，0.2%)細胞染色法進行貼盤細胞的存活度測試。

請參照第2圖所示，在加入不同濃度的EMCDO培養24小時後，測得該EMCDO對RAW264.7細胞株的半致效濃度(EC₅₀)為7.75μg/mL，而當培養時間拉長至72小時，半致效濃度降低為1.78μg/mL；此結果表示當施予該EMCDO達24小時，該EMCDO在濃度5μg/mL以下皆不具細胞毒性，因此後續以濃度為5μg/mL的該EMCDO進行實驗。。

(B)以西方墨點法進行EMCDO對RAW264.7細胞株中發炎反應誘發之相關蛋白反應實驗

為刺激RAW264.7細胞株發生發炎反應，本實驗將RAW264.7細胞株種植於48孔盤(10,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，分別施予0.1、0.5及1μg/mL的LPS(lipopolysaccharide，為格蘭氏陰性菌外膜共有的脂多糖，溶解於PBS中)，並以未添加LPS的該RAW264.7細胞株作為對照組，續培養24小時後，自各組細胞中萃取總蛋白質；本實驗係於每個樣品槽中係注入50μg的總蛋白質，並選用抗iNOS(誘導型一氧化氮合成酶)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)、抗COX-2(環氧化酶-2)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)及抗GAPDH抗體(1：3000，購自Santa Cruz)作為一級抗體，另以可以辨識該等一級抗體之二級抗體(辣根過氧化物酶標記二級抗體，Horseradish peroxidase-conjugated secondary antibodies，1：5000、購自Fermentas)進行西方墨點法之分析。

請參照第3a圖所示，GAPDH的表現不受LPS的加入影響，但隨著LPS添加量增加，RAW264.7細胞株被刺激而表現的iNOS也隨之增加；當細胞培養液中含有1μg/mL的LPS，會使該RAW264.7細胞株的 iNOS表現量為未添加LPS之對照組者的4.9倍；當該RAW264.7細胞株表現的iNOS量增加，表示該RAW264.7細胞株的發炎反應越強烈。接著，續以1μg/mL的LPS做為誘發該RAW264.7細胞株發炎反應之條件。

接著，將RAW264.7細胞株種植於48孔盤(10,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，分別加入1.875、3.75及7.5μg/mL的薑黃素(溶解於DMSO)，並以未添加薑黃素的該RAW264.7細胞株作為對照組，續培養2小時後，以1μg/mL的LPS刺激24小時，自各組細胞中萃取總蛋白質，以進行西方墨點法的分析。

請參照第3b圖所示，以未添加薑黃素的對照組中iNOS表現量作為1倍，隨著薑黃素添加量增加，RAW264.7細胞株被刺激而表現的iNOS也隨之減少；相較於對照組者，當細胞培養液中含有7.5μg/mL的薑黃素，會使該RAW264.7細胞株的iNOS表現量降低為0.1倍，表示在本實驗設計中，薑黃素可作為陽性對照組。

接著，將RAW264.7細胞株種植於48孔盤(10,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，分別加入薑黃素或EMCDO(各組別的實驗條件請參照第1表所示)，續培養2小時後，以1μg/mL的LPS刺激24小時，自各組細胞中萃取總蛋白質，以進行西方墨點法的分析。

請參照第3c圖所示，為依照第1表實驗條件所得到的RAW264.7細胞株進行西方墨點法之結果；其中，COX-2與iNOS同為該RAW264.7細胞株產生發炎反應的正向分子指標。本實驗中各組之iNOS與COX-2表現量，皆以第A1組作為表現量為1倍的對照組；相對於第A1組，僅加入LPS的第A2組中iNOS與COX-2表現量分別為5.3倍及3.8倍，而在同時加入LPS及薑黃素的第A6組中，iNOS與COX-2表現量則分別降低為15.3倍及1.9倍。

然而比較添加EMCDO的組別中iNOS表現量，僅加入1.25μg/mL的該EMCDO(第A3組)，即可使iNOS表現量降低至與添加薑黃素之第A6組相近，在添加2.5μg/mL的該EMCDO(第A4組)後，iNOS表現量更降低至比第A6組更低；比較COX-2表現量後，發現添加2.5μg/mL的該EMCDO(第A4組)即降低至比第A6組更低。

本結果顯示EMCDO降低RAW264.7巨噬細胞株中iNOS與COX-2表現量，進而發揮抗發炎的效果，且其抗發炎效果更優於習知天然抗發炎成分一薑黃素。接著，從分子機制探討該EMCDO如何抑制發炎。

(C)以西方墨點法探討EMCDO在RAW264.7細胞株中抑制發炎反應之機制實驗

本實驗將RAW264.7細胞株種植於48孔盤(10,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，分別加入薑黃素或EMCDO(各組別的實驗條件請參照第2表)，續培養2小時後，以1μg/mL的LPS刺激24小時，自各組細胞中萃取總蛋白質，以進行西方墨點法的分析。其中，係選用抗磷酸化JNK(p-JNK)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)、抗磷酸化p38(p-p38)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)、抗磷酸化ERK(p-ERK)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)、抗磷酸化IκBα(p-IκBα)抗體(1：1000，購自Cell Signaling Technology)作為一級抗體，並以抗GAPDH抗體(1：3000，購自Santa Cruz)作為內部控制組，另以可以辨識該等一級抗體之二級抗體(辣根過氧化物酶標記二級抗體，Horseradish peroxidase-conjugated secondary antibodies，1：5000、購自Fermentas)進行分析

請參照第4圖所示，磷酸化JNK、磷酸化p38、磷酸化ERK及磷酸化IκBα的表現量，皆以未施予LPS的第B1組為表現量1倍之對照組。在施予LPS的第B2~B6組中，不論添加薑黃素或不同劑量的EMCDO，對於磷酸化MAPK(絲裂原活化蛋白激酶)途徑中的成員(包含磷酸化JNK、磷酸化p38、磷酸化ERK)並無顯著差異；而在IκBα的磷酸化方面，相較於第B2組，在施予5μg/mL的該EMCDO後磷酸化IκBα即完全消失(第B5組)，表示EMCDO抗發炎的效果係與IκBα相關途徑有關，而與MAPK相關途徑無關。

IκBα在體內是與NF-κB結合的負調控蛋白，但當IκBα被磷酸化後，磷酸化IκBα會被降解而失去抑制NF-κB活性的能力，使NF-κB 引起發炎反應；因此，上述實驗結果中，EMCDO抑制IκBα的磷酸化，即暗示該EMCDO抑制NF-κB引起發炎的能力。為驗證該EMCDO係透過NF-κB路徑以抗發炎，續進行下列實驗。

(D)以冷光酶活性探討EMCDO與NF-κB之結合實驗

本實驗將RAW264.7細胞株種植於48孔盤(10,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，共同轉染50ng NF-κB-Luc及20ng pRKbetaGAL，於反應24小時之後，續分別如第3表加入薑黃素或不同濃度之EMCDO培養3小時，再以1μg/mL的LPS刺激3小時，取各組細胞溶解液測其冷光活性及β-galactosidase活性。

請參照第5圖所示，濃度為1.25、2.5及5μg/mL之EMCDO(第C3~C5組)均可以有效抑制LPS所誘發之NF-κB結合於啟動子之能力，表示該EMCDO係經由抑制NF-κB與啟動子之結合，以達到調控下游基因之表現或活性的功效。

由於發炎反應係可以經由增加體內的TNF-α、IL-6及IL-1β等細胞激素的表現以達成，為驗證EMCDO的抗發炎能力是否與抑制TNF-α、IL-6及IL-1β相關，續進行以下實驗。

(E)以ELISA探討EMCDO對TNF-α、IL-6及IL-1β之分泌量影響實驗

本實驗將RAW264.7細胞株種植於96孔盤(5,000顆細胞/孔)中，待細胞貼盤後(約16小時)，先分別投予薑黃素或不同濃度的EMCDO(各組別實驗條件請參照第4表所示)，2小時後再以1μg/ml的LPS刺激24小時，收集各組別之培養液後，以mouse cytokine ELISA套組(購自eBioscience)分別進行培養液中TNF-α、IL-6及IL-1β分泌量之ELISA偵測。

請一併參照第6a~6c圖所示，分別為培養液中TNF-α、IL-6及IL-1β分泌量之ELISA偵測結果。隨著EMCDO的濃度增加(第D3~D5組)，該培養液中的TNF-α、IL-6及IL-1β分泌量逐漸減少，表示該EMCDO能夠抑制TNF-α、IL-6及IL-1β的表現，該EMCDO的抗發炎效果確實與抑制TNF-α、IL-6及IL-1β等細胞激素相關。

(F)EMCDO抑制發炎引起的腫脹實驗

為驗證EMCDO的抗發炎能力於個體之有效劑量，本實驗於 測量8週大之Balb/c小鼠耳發炎前的厚度後，於鼠耳塗佈TPA(12-O-tetradecanoylphorbol acetate，12-氧-十四烷醯佛汲醇乙酸酯)，使鼠耳被刺激產生發炎反應而水腫，於塗佈TPA後1小時測得鼠耳發炎後的厚度(此為消腫程度0%之陰性對照組，如第5表之第E1組)，實驗組則於塗佈TPA後10分鐘續塗佈不同濃度的該EMCDO(0.3125、0.325及1.25μg/mL，各塗佈10μL，如第5表之第E3~E5組)，另以塗佈0.5mg之吲哚美辛(indomethacin，同樣塗佈10μL，如第5表之第E2組)作為陽性對照組，比較陰性對照組之鼠耳厚度後，即得到各組別於塗佈該EMCDO或吲哚美辛後對鼠耳厚度的消腫程度(%)；其中，各組別實驗條件請參照第5表所示，消腫程度係分別於塗佈該EMCDO或吲哚美辛不同時間(第6、16及24小時)測量。

請參照第7圖所示，在不同測量時間點，僅塗佈TPA陰性對照組(第E1組)之鼠耳的消腫程度皆設定為0%，而塗佈1.25μg/mL的EMCDO(第E3組)經過6小時後，鼠耳的消腫程度為約35%，比塗佈吲哚美辛的陽性對照組者(第E2組，約27%)更佳，顯示該EMCDO具有較習知抗發炎藥物更佳的抗發炎效果；另外，1.25μg/mL的該EMCDO(第 E3組)對鼠耳的消腫效果至第16小時仍維持在約35%，顯示該EMCDO較習知天然抗發炎成份具有更長時間的抗發炎能力。

(G)投予EMCDO的小鼠之血液生化檢驗及臟器檢驗

為確認EMCDO對所需個體不造成急性毒性，本實驗係將高劑量500mg/kg的該EMCDO以腹腔注射施予Balb/c小鼠，並以施予500mg/kg玉米油的小鼠作為對照組，施予後的前2天密切觀察實驗組小鼠活動進食及反應，係與對照組無顯著差別，且實驗組小鼠全數存活至第14天，另於第14天時抽血解剖，血清檢驗4個指標，臟器外觀觀察及秤重量。。其中，GOT(麩草酸轉氨基酶)與GPT(麩丙酮酸轉氨基酶)皆為肝功能指標，當肝臟發炎或肝細胞損傷破裂時會大量釋出至血液中；BUN(尿素氮)與CRE(肌酸酐)則為腎功能指標，當大量釋出表示腎功能不全。

請參照第6表所示，投予EMCDO的小鼠不論是GOT、GPT、BUN或CRE的數值與對照組相比皆無差異，臟器重量與體重也與對照組相似，表示投予該EMCDO並不造成個體的肝腎障礙或臟器功能失調；其中，沒有任何小鼠出現不適症狀或是死亡。

結合以上於小鼠施予EMCDO的實驗結果，該EMCDO不僅可以有效退抗發炎，且不造成該小鼠之肝腎機能障礙或臟器損傷，故該EMCDO沒有如消炎痛等習知抗發炎藥物之副作用，綜合上述，本發明之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，其中，(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇係萃取自天然食物，但作用時間較習知天然抗發炎成份(如薑黃素)更長；(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇降低發炎反應的功效係透過抑制NF-κB路徑(包含IκBα)以抑制iNOS及COX-2的作用，並且與減少TNF-α、IL-6及IL-1β等細胞激素之磷酸化相關，除了能夠確實降低所需個體發炎患部的腫脹反應，更無肝腎機能損傷等習知抗發炎藥物之副作用，藉以達到安全抗發炎之功效。

雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內，相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。

Claims (3)

1. 一種化合物用於製備抗發炎藥物的用途，係包含：將一有效劑量之該化合物施予一所需個體，以降低該所需個體之發炎反應；其中，該化合物係為(23E)-5β,19-環氧-25-甲氧基葫蘆-6,23-二烯-3β-醇。
2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，其中，該化合物係塗抹於該所需個體之患部。
3. 如申請專利範圍第1項所述之化合物用於製備抗發炎藥物的用途，其中，該化合物之該有效劑量係為0.3125μg/mL/次。