TW200924790A - Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease - Google Patents

Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease Download PDF

Info

Publication number
TW200924790A
TW200924790A TW097141895A TW97141895A TW200924790A TW 200924790 A TW200924790 A TW 200924790A TW 097141895 A TW097141895 A TW 097141895A TW 97141895 A TW97141895 A TW 97141895A TW 200924790 A TW200924790 A TW 200924790A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
etoac
solution
mmol
stirred
reaction mixture
Prior art date
Application number
TW097141895A
Other languages
English (en)
Inventor
Srikanth Venkatraman
F George Njoroge
Wanli Wu
Viyyoor M Girijavallabhan
Brian A Mckittrick
Jing Su
Francisco Velazquez
Patrick A Pinto
Original Assignee
Schering Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=40122958&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TW200924790(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Schering Corp filed Critical Schering Corp
Publication of TW200924790A publication Critical patent/TW200924790A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C07K5/06069—Ser-amino acid

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

200924790 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎C型肝炎病毒（"HCV")蛋白酶抑制劑’ 含有一或多種此種抑制劑之醫藥組合物，製備此種抑制劑 之方法，及使用此種抑制劑以治療C型肝炎及相關病症之 方法。本發明另外揭示新穎巨環化合物作為HCV NS3/NS4a 絲胺酸蛋白酶之抑制劑。 【先前技術】 φ C型肝炎病毒(HCV)為㈩-有意義單股RNA病毒，其已被牽 連為非A型、非B型肝炎（NANBH)中之主要病因劑，特別是 在血液有關聯之NANBH (BB-NANBH)中（參閱國際專利申請 案公報案號 WO 89/04669，相當於 US 2003162167)。NANBH 係 與其他類型之病毒所引致之肝病有區別，譬如A型肝炎病 毒（HAV)、B型肝炎病毒（HBV)、<5型肝炎病毒（HDV)、巨細 胞病毒（CMV)及愛氏頓-巴爾（Epstein-Barr)病毒（EBV)，以及其 他肝病形式，譬如酒精中毒與原發性膽硬化。 ® 最近，多肽處理與病毒複製所必須之HCV蛋白酶已被確 認、無性繁殖及表現（參閱，例如美國專利5,712,145)。此種 大約3000胺基酸之多蛋白，從胺基末端至羧基末端，係含 有殼包核酸蛋白質（C)、包膜蛋白質（E1與E2)及數種非結構 性蛋白質（NS1，2, 3, 4a，5a及5b)。NS3為大約68 kda蛋白質，被 HCV基因組之大約1893個核苷酸編碼，且具有兩個獨特功 能部位：⑻絲胺酸蛋白酶功能部位，包含大約200個N-末端 胺基酸；與（b) RNA依賴性ATPase功能部位在蛋白質之C-末 135510-1 -16- 200924790 端處。由於蛋白質順序、整體三次元結構及催化作用機制 上之類似性，故NS3蛋白酶被認為是胰凝乳蛋白酶原族群 之一個成員。其他似胰凝乳蛋白酶原酵素為彈性蛋白酶、 Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、 tPA及PSA。HCV NS3絲胺酸蛋白酶係負責多肽（多蛋白）在 NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a 及 NS5a/NS5b 接合處之蛋白 水解，且因此負責在病毒複製期間產生四種病毒蛋白質。 這已使得HCV NS3絲胺酸蛋白酶成為抗病毒化學療法之吸 ❹ 引人之標的。本發明化合物可抑制此種蛋白酶。其亦可調 制C型肝炎病毒（HCV)多肽之處理。 已測定出NS4a蛋白質，一種大約6 kda之多肽，係為NS3 之絲胺酸蛋白酶活性之輔因子。NS3/NS4a接合處藉由 NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶之自動分裂係以分子内方式（意即廣 式）發生，然而其他分裂位置係以分子間方式（意即及4’） 進行。 HCV蛋白酶之天然分裂位置之分析，揭發半胱胺酸存在 於Π處，而絲胺酸存在於ΡΓ處，且此等殘基係在NS4a/NS4b、 NS4b/NS5a及NS5a/NS5b接合處嚴格地保守。NS3/NS4a接合處 含有蘇胺酸在P1處，與絲胺酸在P1'處。NS3/NS4a處之Cys— Thr取代被主張係負責此接合處之順式處理之要求條件，而 非反式。參閱，例如 Pizzi 等人（1994) Proc. Natl. Acad. Sci (USA) 91 : 888-892，Failla 等人（19%)折疊與設計 1 : 35-42。NS3/NS4a 分裂位置亦比其他位置較容許致突變。參閱，例如 Kollykhalov 等人（1994) J. Virol. 68 : 7525-7533。亦已發現在分裂 135510-1 17 200924790 位置上游區域中之酸性殘基係為有效分裂所需要。參閱， 例如 Komoda 等人（1994) J. Virol. 68 : 7351-7357。 已經報告之HCV蛋白酶抑制劑，包括抗氧化劑（參閱國際 專利申請案公報案號WO 98/14181) '某些肽與肽類似物（參閱 國際專利申請案公報案號WO 98/17679，相當於US 2002032175)，Landro 等人（1997) Biochem. 36: 9340-9348，Ingallinella 等人（1998) Biochem. 37: 8906-8914，Llinas-Brunet 等人（1998) Bioorg. Med. Chem. Lett. 8 ·· 1713-1718)、以 70-胺基酸多肽也葛林 c (eglin © c)為基礎之抑制劑（Martin 等人（1998) Biochem. 37 : 11459-11468) ，親和力抑制劑，選自人類胰分泌胰蛋白酶抑制劑（hPSTI-C3) 與微小物體存庫（MBip) (Dimasi等人（1997)丨丫丨1*〇丨.71:7461-7469)，cVHE2 ("駱駝化”可變功能部位抗體片段）（Martin等人 (1997) Protein Eng. 10 : 607-614)及《1-抗胰凝乳蛋白酶原（ACT) (Elzouki等人（1997) J. Hepat. 27 : 42-28)。經設計以選擇性地破 壞C型肝炎病毒RNA之核糖酵素最近已被揭示（參閱 5/oWorW 7^町 9(217) : 4 (1998 年 11 月 10 曰））。
G 亦參考PCT公報案號1998年4月30日公告之WO 98/17679 (Vertex醫藥公司）；1998年5月28日公告之WO 98/22496 (相當 於 U.S. 6,018,020 與 U.S. 5,866,684; F. Hoffmann-La Roche AG);及 1999 年 2 月 18 日公告之 WO 99/07734 (相當於 U.S. 6，143,715; Boehringer Ingelheim Canada 公司）。 HCV係牽連肝硬化及誘發肝細胞癌。對於患有HCV感染 之病患之預後，目前是很貧乏的。HCV感染比其他肝炎形 式更難以治療，此係由於缺乏與HCV感染有關聯之免疫或 135510-1 -18- 200924790 緩解所致。目前資料顯示，肝硬化診斷後第四年低於50% 之存活率。被診斷患有局部可切除肝細胞癌之病患具有 10-30%之五年存活率，然而患有局部不可切除肝細胞癌者 具有低於1%之五年存活率。 參考 WO 00/59929 (相當於 US2〇〇4〇02448 與 U.S. 6,608,027;讓受 人：Boehringer Ingelheim (Canada)公司；2000 年 10 月 12 日公告）， 其係揭示下式肽衍生物：
參考 A. Marchetti 等人，办ntoi，S1，1000-1002 (1999)，其係描述 HCV NS3蛋白酶抑制劑之雙環狀類似物之合成。其中所揭示 之一種化合物具有下式：
亦參考 W. Han 等人，Sioorgiwic & Medidna/ CTiem. Leii，（2000) 10, 711-713，其係描述含有烯丙基與乙基官能基之某些酮醯 胺、α-酮酯類及α-二酮類之製備。 亦參考 W0 00/09558 (讓受人：Boehringer Ingelheim 有限公 司；2000年2月24日公告），其係揭示下式肽衍生物： 135510-1 -19- 200924790 r2
其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物 為：
亦參考 WO 00/09543 (相當於 US2002016442 與 US2002037998 ; 讓受人：Boehringer Ingelheim有限公司；2000年2月24日公告）， 其係揭示下式肽衍生物： 135510-1 20- 200924790
r3
其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物 為：
〇 C型肝炎之現行療法包括干擾素-a (INFα)，及使用三唑 核誓與干擾素之組合療法。參閱，例如Beremguer等人（1998) Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2) : 98-112。此等療法遭遇到低 持續回應率及頻繁之副作用。參閱，例如Hoofnagle等人（1997) N. Engl. J. Med. 336 : 347。目前，無疫苗可用於HCV感染。 進一步參考WO 01/74768 (相當於US 2003236242 ;讓受人： Vertex醫藥公司），2001年10月11日公告，其係揭示某些下列 135510-1 -21 - 200924790 通式化合物（R係定義於其中）作為C型肝炎病毒之NS3-絲胺 酸蛋白酶抑制劑：
前文所提及之WO 01/74768中所揭示之一種特定化合物具 有下式：
02/08256； WO 02/08187； WO 02/08244； WO 02/48172； WO 02/08251 ； 及2002年1月18曰提出申請之待審美國專利申請案序號 10/052,386，係揭示各種類型之肽及/或其他化合物，作為c 型肝炎病毒之NS-3絲胺酸蛋白酶抑制劑。此等申請案之揭 示内容均併於本文供參考。 仍需要關於HCV感染之新穎治療藥品與療法。仍需要可 135510-1 •22· 200924790 種病徵之化合 用於治療或預防或改善c型肝炎之—或多 物0 法仍需要治療或預防或改善c型肝炎之—或多種病徵之方 性文中所提供之化合物調制絲胺酸蛋白酶活 陡之方法，特別是hcvnss/ns^絲胺酸蛋白酶。 :需要使用本文中所提供之化合物調制Hcv多肽處 万法。
【發明内容】 2005年2月24日提出申請之美國專利申請案序號應伽 (:、係於2005年6月2日公告為2_119168)，其整體揭示内容 係以指稱方式併於本文。 在本發明之許多#體實施例中，纟係提供新顆化合物作 為HCV蛋白酶抑制劑，含有一或多種此等化合物之醫藥組 合物，製備包含一或多種此種化合物之醫藥配方之方法， 使用一或多種此種化合物或一或多種此種配方治療或預防 HCV或改善C型肝炎之一或多種病徵之方法，及使用一或 夕種此種化合物或一或多種此種配方調制HCV多肽與HCV 蛋白酶交互作用之方法。本發明係揭示化合物，以及該化 合物之藥學上可接受鹽類、溶劑合物或酯類，該化合物係 選自列示於下文結構之化合物： 135510-1 -23- 200924790
135510-1 -24- 200924790
135510-1 -25- 200924790
135510-1 -26- 200924790
135510-1 -27- 200924790
135510-1 -28- 200924790
135510-1 -29- 200924790
135510-1 -30- 200924790
135510-1 31 · 200924790
135510-1 -32- 200924790
135510-1 -33- 200924790
本發明之i隹—止 ❹ 步特徵為醫藥纟且人你 。 ❹ 份之至少-種本發明化合物(或其：’=有作為活性成 伴隨著藥學上可接受合物或 本發明亦提供製備本發明化合物之方法，： 之方法，gHCV、趣（後天免疫不 7治療疾病 症。關於μ· #、Λ + 候族）及相關病 ϋ此種治療之方法係包括對患有—或多種上述疾病 S 3夕種相關疾病之病患投予治療上有效量之至少一種 本發明化合物，或包含至少一種本發明化合物之醫藥組合 物。 該 亦揭示至少一種本發明化合物於藥劑製造上之用途， 藥劑係用於治療HCV、AIDS及相關病症。 135510-1 -34- 200924790 進步揭π種治療c型肝炎病毒有關聯病症之方法， 其包括投予有效量之1多種本發明化合物。 於又再進一步且體營7丨丄 貫施例中’係提供調制C型肝炎病毒 (HCV)蛋白酶活性之方法，其包括使hcv蛋白酶與一或多種 本心明化合物接觸’以及治療或預防hcv或改善c型肝炎 之-或多種病徵之方法’其包括投予有效量之一或多種本 發明化合物。此種調告丨丨、、△念 ^療、預防或改善亦可以本發明 ❹
之醫藥組合物或配方達成。不希望受限於理論，咸認HCV 蛋白酶可為NS3或NS4a蛋白酶。本發明化合物可抑制此種蛋 白酶。其亦可調制c型肝炎病毒(hcv)多肽之處理。 發明說明 當使用於上文及在整個本揭示内容中時，下列術語，除 非另有指出，否則應明瞭係具有下述意義： "病患”包括人類與動物兩者。 哺乳動物''係意謂人類及其他哺乳動物。 烷基”係意謂脂族烴基，其可為直鏈或分枝狀且包含 約1至約20個碳原子在此鏈中。較佳烷基含有約i至約12個 碳原子在此鏈中。更佳烷基含有約丨至約6個碳原子在此鏈 中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基譬如甲基、乙基或丙 基，被連接至線性烷基鏈。”低碳烷基"係意謂具有約】至 約6個碳原子之基團在此鏈中，其可為直鏈或分枝狀。烷基 可視情況被一或多個可為相同或不同之取代基取代，各取 代基係獨立選自包括_基、烷基、芳基、環烷基、氰基、 羥基、烧氧基、烷硫基、胺基、_NH(烧基）、_NH(環烷基）、 135510-1 -35- 200924790 -N(烧基h、羧基及-C(0)0-烷基。適當烷基之非限制性實例包 括甲基、乙基、正-丙基、異丙基及第三_ 丁基。 ”炔基”係意謂含有至少一個碳-碳參鍵之脂族烴基，且其 可為直鏈或分枝狀，並包含約2至約15個碳原子在此鏈中。 較佳炔基具有約2至約12個碳原子在此鏈中；且更佳為約2 至約4個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷 基，譬如曱基、乙基或丙基，被連接至線性炔基鏈。”低碳 炔基”係意謂約2至約6個碳原子在此鏈中，其可為直鏈或 分枝狀。適當炔基之非限制性實例，包括乙炔基、丙炔基、 2-丁炔基及3-甲基丁炔基。”經取代之炔基，，一詞，係意謂炔 基可被一或多個可為相同或不同之取代基取代，各取代基 係獨立選自包括烷基、芳基及環烷基。 月曰紅係思谓且包括烧屬烴、稀烴或块烴碳原子之直鏈 或分枝鏈。脂族基團可視情況被一或多個可為相同或不同 之取代基取代，各取代基係獨立選自包括Η、齒基、函素、 〇 烷基、芳基、環烷基、環烷胺基、烯基、雜環族、炔基、 環烷胺基羰基'羥基、硫基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫 基、胺基、-ΝΗ(烷基）' -ΝΗ(環烷基）、_Ν(烷基)2、羧基、_c(〇)〇_ 烷基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、芳烯基、雜芳烷基、 烷基雜芳基、雜芳烯基、雜烷基、羰基、羥烷基、芳氧基、 芳烷氧基、醯基、芳醯基、硝基、胺基、醯胺基、酯、羧 酸芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、 雜芳基磺醯基、烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基 '雜芳基亞 磺醯基、烷硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、芳烷硫基、雜 135510-1 -36- 200924790 芳烧基硫基、環烯基、雜環基、雜環缔基、胺基甲酸酿、 尿素、酮、醛、氰基、磺醯胺、亞砜、砜、磺醯脲、碏醯 基、醯肼、異羥肟酸酯、S(烧基）Υι 1 N_烷基…H 烷基_、 ΥιΥ2Ν’及yiY2NS〇2_，其中1與义可為相同或不同，且 係獨立選自包括氫、烷基、芳基及芳烷基。 ”雜脂族"係意謂其他方面為脂族基目，其含有至少—個 雜原子(譬如氧、氮或硫)。雜脂族一詞包括經取代之雜脂 族0 e ”芳基”係意謂芳族單環狀或多環狀環系統，包含約仏 約！4個碳原+，較佳為約6至約1〇個碳原子。芳基可視 被-或多個”環系統取代基”取代，其可為相同或不同，且 均如本文定義。適當芳基之非限制性實例，包括苯 基0 、 ’:雜烷基’’係意謂如上文定義之烷基’其中一或多個氫原 子係被選自N、S或〇之雜原子取代。 ’、 ”雜芳基”係意謂芳族單環狀或多環狀㈣統，包含約$ 至約14個環原子，較佳為約5至約扣 個環原子為碳以外之元素，例如氮、氧或:子二=多 車又佳雜方基含有約5至約6個環原子。”雜芳基”可視情況被 -或多個，，環系統取代基”取代，其可為相同或不同，且均 =本文定義。雜芳基字根名稱前之字首氮' 氧或硫，係意 5胃至少—個氮、氧或硫原子個別存在作為環原+。雜芳: 之:個氮原子可視情況被氧化成其相應之N·氧化物。^ 雜方基之非限制性實例，包括叶卜定基、㈣基、吱嚼= 135510-] •37- 200924790 嘧吩基、嘧啶基、吡啶酮（包括N-取代之吡啶酮）、異号嗤 基、異嘍唑基、噚唑基、噻唑基、吡唑基、呋咕基、峨哈 基、吡唑基、三唑基、1，2,4-嘧二唑基、吡畊基、塔呼基、 喳喏啉基、呔畊基、噚哟哚基、咪唑并吡啶基、咪唑 并[2，l-b]嘧唑基、苯并呋咕基、吲哚基、氮啕哚基、苯并咪 唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、嘍吩并吡啶基、喳 唑啉基、嘍吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基 '咪唑并吡啶基、 異4:淋基、苯并氮吲哚基、1，2,4-三畊基、苯并p塞唑基等。，, ® 雜芳基"一詞亦指部份飽和雜芳基部份基團，例如四氫異喹 淋基、四氫P奎B林基等。 ”芳烷基”或”芳基烷基”係意謂芳基_烷基_基團，其中芳 基與烧基均如前文所述。較佳芳院基係包含低碳烧基。適 當芳烷基之非限制性實例，包括苄基、2笨乙基及莕基甲 基。對母體部份基團之鍵結係經過烷基。 "烷基芳基"係意謂烷基-芳基_基團，其中烷基與芳基均 〇 如前文所述。較佳烷基芳基係包含低碳烷基。適當烷基芳 基之非限制性實例為甲苯基。對母體部份基團之鍵結㈣ 過芳基。 "環烧基"係意謂非芳族單_或多環狀環系統，包含約3至 約10個碳原子，較佳為約5至約10個碳原子。較佳環烷基環 含有約5至約7個環原子。環烷基可視情況被一或多個，，環 系統：代基”取代’其可為相同或不同，且均如上文定義。 «單環^我基之非限制性實例，包括環丙基、環戍基、 %己基、％庚基等。適當多環狀環院基之非限制性實例， 135510-1 •38- 200924790 包括1-十氫莕基、正福基、金鋼縣等，以及部份飽和物 種’例如氫茚基、四氫莕基等。 鹵素"係意謂氟、氣、溴或碘。較佳為氟、氣及溴。 、”環系統取代基，，係意謂連接至芳族或非芳族環系統之取 代基，其例如係置換環系統上之可取用氫。環系統取代基 可為相同或不同，各獨立選自包括烷基、烯基、炔基、芳 基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基'雜芳基烯基、 ❹雜芳基炔基、烧基雜芳基m n 基、方烷氧基、醯基、芳醯基、鹵基、硝基、氰基、羧基、 垸氧敢基、芳氧基羰基、芳烧氧基幾基'院基績酿基、芳 基石黃醯基、雜芳基續醯基、烧硫基、芳基硫基、雜芳基硫 基、芳烷硫基、雜芳烷基硫基、環烷基、雜環基、 -c(=n-cn)-nh2、-C(=NH)_NH2、_C(=NH)_NH(烧基）、m 基、次乙二氧基、 下之部份基團： J 〜，丨*〜丨"巫々貝們馮亞甲二氧 -C(CH3)2_及其類似物，其係形成例如以
”或”雜環族”係意謂非芳族飽和 包含約3至約10個環原子，較佳為
YlY2N_院基-、γιγπ(〇)-、y】y2nso2-及-S〇2NYiY2，其中 Y1與Y2可為相同或不同，且獨立選自包括氫、烷基、芳基、 Q d基及芳烧基。”環系統取代基„亦可意謂單—部份基團， 其同時置換環系統上兩個相鄰碳原子上之兩個可採用氫 (―個Η在每一個碳上）。此種部份基團之實例為亞甲二氣 雜環基”或"雜環烷基 單環狀或多環狀環系統，
135510.J -39- 200924790 〇 ❹ ，5至約1〇個環原子’其中在此環系統中之一或多個原子為 炭、外之元素例如氮、氧或硫，單獨或併用。沒有相鄰 氧及/或硫原子存在於此環系統中。較佳雜環基含有約5至 =個環原子。在雜環基字根名稱前之字首氮、氧或硫，係 忍明至J -個虱、氧或硫原子個別存在作為環原子。雜環 基環中之任何-ΝΗ可經保護存在，例如作成娜⑽、_N(cBz)、 -N(T〇s)基團等：此種保護亦被認為是本發明之—部份。雜 環基可視情況被—或多個’I系統取代基"取代，其可為相 同或不同’且均如本文定義。雜環基之氮或硫原子可視情 況被氧化成其相應之N_氧化物、5_氧化物或-二氧化物。 適當單環狀雜環基環之非限制性實例包括六氫峨咬基、四 ^比洛基、六氫t井基、嗎料基、硫代嗎科基”塞唾 。疋基、Μ·二氧陸圜基、四氫呋喃基、四氫硫笨基、内醯胺、 内酯等。 ^意的1在本發明含有雜原子之環系統中，沒有經 丞在鄰近Ν、〇戎s之石患甩工ι_ 、斤s 之厌原子上，以及沒有N或S基團在鄰 4rA 、2
近另-個雜原子之碳上。因此，例如在以下環中· 沒有-OH直接連接至標記2與5之碳。 亦應注意的是，互變異構 ^ $式例如以下部份基團： IT I Η 與
OH 135510-1 200924790 於本發明之某些具體實施例中被認為是相等的。 ”炔基烷基”係意謂炔基-烷基-基團，其中炔基與烷基均 如前文所述。較佳炔基烧基含有低碳炔基與低竣烧基。對 母體部份基團之鍵結係經過烷基。適當炔基烷基之非限制 性實例包括炔丙基甲基。 ”雜芳烷基”係意謂雜芳基-烷基-基團，其中雜芳基與烷 基均如前文所述。較佳雜芳烷基含有低碳烷基。適當芳烷 基之非限制性實例，包括吡啶基甲基與喹啉-3-基曱基。對 母體部份基團之鍵結係經過烷基。 "羥烷基”係意謂HO-烷基-基團，其中烷基係如前文定義。 較佳羥烷基含有低碳烷基。適當羥烷基之非限制性實例， 包括羥曱基與2-羥乙基。 ”醯基”係意謂H-C(O)-、烷基-C(O)-或環烷基-C(O)-基團， 其中各種基團係如前文所述。對母體部份基團之鍵結係經 過羰基。較佳醯基含有低碳烷基。適當醯基之非限制性實 例，包括甲醯基、乙醯基及丙醯基。 "芳醯基"係意謂芳基-C(O)-基團，其中芳基係如前文所 述。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。適當基團之非限 制性實例，包括苯曱醯基與1-莕曱醯基。 ”烷氧基''係意謂烷基-0-基團，其中烷基係如前文所述。 適當烷氧基之非限制性實例，包括曱氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基及正-丁氧基。對母體部份基團之鍵結係 經過醚氧。 ”芳氧基’'係意謂芳基-0-基團，其中芳基係如前文所述。 135510-1 -41 - 200924790 適當芳氧基之非限制性實例，包括苯氧基與莕氧基。對母 體部份基團之鍵結係經過醚氧。 ”芳烷氧基”係意謂芳烷基-〇-基團，其中芳烷基係如前文 所述。適當芳烷氧基之非限制性實例，包括苄氧基與1-或 2-莕曱氧基。對母體部份基團之鍵結係經過醚氧。 "烷硫基”係意謂烷基-S-基團，其中烷基係如前文所述。 烷硫基之非限制性實例適當，包括曱硫基與乙硫基。對母 體部份基團之鍵結係經過硫。 〇 "芳基硫基''係意謂芳基-S-基團，其中芳基係如前文所 述。適當芳基硫基之非限制性實例，包括苯硫基與莕基硫 基。對母體部份基團之鍵結係經過硫。 芳烷硫基”係意謂芳烷基-S-基團，其中芳烷基係如前文 所述。適當芳烷硫基之非限制性實例為苄硫基。對母體部 份基團之鍵結係經過硫。 "烷氧羰基”係意謂烷基-0-C0-基團。適當烷氧羰基之非 _ 限制性實例，包括甲氧羰基與乙氧羰基。對母體部份基團 ❹ 之鍵結係經過羰基。 "芳氧基羰基”係意謂芳基-o-c(o)-基團。適當芳氧基羰基 之非限制性實例，包括苯氧基羰基與莕氧基羰基。對母體 部份基團之鍵結係經過羰基。 ”芳烷氧基羰基"係意謂芳烷基-o-c(o)-基團。適當芳烷氧 基羰基之非限制性實例為芊氧羰基。對母體部份基團之鍵 結係經過羰基。 ”烷基磺醯基”係意謂烷基-s(o2)-基團。較佳基團係為其 135510-1 -42- 200924790 中烧基為低碳烷基者。對母體部份基團之鍵結係經過績酿 基。 "芳基磺醯基，，係意謂芳基_s(〇2)_基團。對母體部份基團 之鍵結係經過確醯基。 Ο ❹ '·經取代，，一詞，係意謂在所指定原子上之一或多個氫係 被選自所指示之基團取代，其條件是，不會超過所指定原 子於存在情況下之正常價鍵，且此取代會造成安定化合物。 取代基及/或變數之組合，只有在此種組合會造成安定化合 物下才可允許。所謂"安定化合物"或，，安定結構”，係意指 化合物足夠強健而自反應混合物中留存著，單離至有 度，及調配成有效治療劑。 視情況經取代”-詞，係意謂以特定基團、原子團或部 份基團之選用取代。 關於化合物之，，經單離"或"呈單離形式”術語，係指該化 合物自合成方法或天然來源或其組合單離後之物理狀身:。 關於化合物之，，經純化”或”呈純化形式，，術語，係指該：人 物得自本文中所述或熟練技師所f知之—或多種純化方^ 後之物理狀態’其係呈充分純度’可藉由本文中所述或熟 練技師所習知之標準分析技術特徵鑒定。 亦應注意的是’在本文之内文、圖式、實例及表格中， 具有未滿足價鍵之任何碳以及雜原子係被假定為具有足夠 數目之氫原子’以滿足該價鍵。 這意謂該基團 排除經保護位 當化合物中之官能基被稱為"經保護”時 係呈經改質形式，以在化合物接受反應時 135510-1 -43· 200924790 置處之不想要副反應。適當保護基係為具有此藝中之一般 技術者以及參考標準教科書所明瞭，例如T w Greene等人x 才滅合4 之获護基（1991)，Wiley, New York。 當任何變數（例如芳基、雜環、R2#)在任何成份中或在 ^發明中出現超過-次時，其在各存在處之定義係與其在 每一個其他存在處之定義無關。 於本文中使用之"組合物，，一詞，係意欲涵蓋一種以特定 ❹2含特定成份之產物’以及直接或間接由特定成份以特 定量組合所形成之任何產物。 本發明化合物之前體藥物與溶劑合物，亦意欲被涵蓋於 此處。當於本文中採用時前體藥物”—詞係表示—種藥 物先質之化合物，其在投予病患時，係藉由代謝或化學過 程進行化學轉化，而產生本發明化合物或其鹽及/或溶劑合 物。前體藥物之討論係提供於T.HiguchiMStella，咸邀痹# 作4舞廣/##肩旄（1987) 14, A c s論集系列，與在赛匆設殄 〇 户之立场豕逆歲齋，（1987) Edward B. Roche編著，美國醫藥協 會與Pergamcm出版社_，此兩者均併於本文供參考。 岭劑合物”係意謂本發明化合物與一或多種溶劑分子之 物理締合。此物理締合係涉及不同程度之離子與共價鍵結， 包括氫鍵。在某些情況中，溶劑合物能夠隔離，例如當一 或夕個/谷劑分子被併入結晶性固體之晶格中時。π溶劑合物 係涵蓋溶液相與可隔離之溶劑合物。適當溶劑合物之非限 制性實例包括乙醇化物、甲醇化物等。"水合物,,為溶劑合 物’其中溶劑分子為Η2〇。 135510-1 • 44 · 200924790 有效量”或”治療上有效量,.，係意欲描 或組合物有效抑制所要疾病之量，且因此產生所要之二 改善、抑制或預防效果。 ’、 f合物可形成鹽，其亦在本發明之範圍内。於本 文中才曰稱之本發明化合物，應明瞭係包括指稱其鹽， 另有指出。當於本文中採用味， 鹽詞係表示以無機及/ 或有機酸類形成之酸性醆， ..A ^ 及以無機及/或有機鹼類形成 之驗性鹽。此外，各太路日日儿人 〇 田 化5物含有鹼性部份基團譬如 旦不限於吡啶或咪。坐，與酸,^ ^ ^ ^ 、敗江口 刀基團譬如但不限於羧酸 時’可形成兩性離子（丨，内越，,、，η γ A人 ,, 卞（円现），且係包含在如本文中使用之 鹽一詞内。藥學上可接 又（思即無毒性 '生理學上可接受） 之鹽為較佳，惟其他鹽亦可 _ "M更用。本發明化合物之鹽可例 如經由使本發明化合物盥某— ，、呆 數篁之酸或鹼，譬如等量， 在媒質中，譬如鹽會沉澱 I, - ^ . 、/、T者’或在水性媒質中反應， 接著冷凍乾燥而形成。 ©舉例之酸加成鹽，包括萨响膝^ ^ 0 ?古®曰醆鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、 馱性坆酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟 腦酸鹽、樟腦績酸鹽、 卜 故丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、 氫碘酸鹽、乳酸鹽、順 負丁烯—酸鹽、甲烷磺酸鹽、莕磺酸 鹽、石肖酸鹽、草酸鹽、域絲故 *酸鹽、丙酸鹽、柳酸鹽、破珀酸 爪酉文風酒石i文鹽、硫氰酸鹽、曱苯磺酸鹽⑼luenesulf〇nate) (亦稱為曱苯石黃酸鹽（t〇sylate))等。此夕卜一般被認為適合由 驗性醫藥化合物形成筚風 圾1樂予上可使用鹽之酸類，係由例如P.
Stahl 等人，camiiie g.(編菩、逛—* 、私考、醫樂鹽手冊.性質、選擇及用途， 1355I0-] 200924790 (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge 等人，醫#矜學游 ^(1977) 66(1) 1-19 ； P. Gould, & mM Μ 7^(1986) 33 201-217 ； Anderson 等人，務（1996)，大學出版社，New York;及#犮# (食品藥物管理局，Washington, D.C.在其網站上）討論。此等揭 示内容均併於本文供參考。 舉例之鹼性鹽包括銨鹽，鹼金屬鹽，譬如鈉、鋰及鉀鹽， 鹼土金屬鹽，譬如鈣與鎂鹽，與有機鹼（例如有機胺類）之 鹽，該鹼類譬如二環己基胺類、第三-丁基胺類，及與胺基 ® 酸之鹽，該胺基酸譬如精胺酸、離胺酸等。鹼性含氮基團 可以作用劑四級化，譬如低碳烷基鹵化物（例如甲基、乙基 及丁基氣化物、溴化物及碘化物）、二烷基硫酸鹽（例如二 甲基、二乙基及二丁基硫酸鹽）、長鏈鹵化物（例如癸基、 月桂基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物）、芳烷基鹵化物 (例如芊基與苯乙基溴化物）及其他。 所有此種酸鹽與鹼鹽係意欲成為本發明範圍内之藥學上 _ 可接受鹽，且對本發明之目的而言，所有酸與鹼鹽係被認 〇 為相當於相應化合物之自由態形式。 一或多種本發明化合物亦可以溶劑合物存在，或視情況 被轉化成溶劑合物。溶劑合物之製備係為一般已知。因此， 例如 M. Caira 等人，丄·P/iarmaceMficai Sd.，93(3)，601-611 (2004)係描 述抗真菌劑氟康唾（fluconazole)在醋酸乙酯中以及自水之溶 劑合物之製備。溶劑合物、半溶劑合物、水合物等之類似 製備係由 E. C. van Tonder 等人，尸5(1)，論文 12 (2004);與 A. L. Bingham 等人，CTzem. Commim” 603-604 (2001)描 135510-1 -46- 200924790 =、田種典型非限制方法係涉及使本發明化合物在高於環 兄'皿度下,解於所I量之所要溶劑(有機物或水或其混合 、；）中使冷液在足以形成結晶之速率下冷卻，然後藉標 ;法單離之。分析技術，例如IR光譜學，顯示溶劑（或 水）存在於結晶中’作為溶劑合物（或水合物）。 、本t月化σ物及其鹽、溶劑合物、自旨類及前體藥物，可 以其互變異構形式存在（例如作為醯胺或亞胺基醚）。所有 此種互變異構形式係意欲被涵蓋在本文中，作為本發明之
“考:月化口物(包括化合物之鹽、溶劑合物、酯類及前體 :，以及剛肢藥物之鹽與溶劑合物)之所有立體異構物(例 口幾何異構物、光學異構物等），譬如可由於不同取代基上 之不對稱碳所致而存在者，包括對掌異構物形式（其甚至可 :不對稱碳不存在下存在）、旋轉異構形式、非向性異構物 隹對映"構物形式，係意欲被涵蓋在本發明之範圍内， 為位置異構物(例如4令定基與3_ρ比咬基)。本發明化合物 之個別立體異構物可例如實f上不含其他異構物，或可例 :經混合成為外消旋物’或與所有其他或其他經選擇之立 異構物混合。本發明之對掌中心可具有如由娜⑽4建 等:斤定義之…組態。”鹽，，、’’溶劑合物，，、”前體藥物” 广之使用，係意欲同樣地適用於本發明化合物之對掌 ::物、立體異構物、旋轉異構物、互變異構物、位置異 物、外消旋物或前體藥物之鹽、溶劑合物及前體藥物。 本發明化合物及本發明化合物之鹽、溶劑合物及前體藥 ^5510-] •47· 200924790 物之多晶形式，欲被包含於本發明中。 於一項具體實施财，本發明係揭示本發明化合物，作 為HCV蛋白酶尤其是HCV N讀％絲胺酸蛋白酶之抑制劑， 或其藥學上可接受之衍生物，其令各種定義係示於上文。 於另一項具體實施例中，Rl為綱醯胺、酸、㈣、酮酿、 酮醛、二酮、二羥基硼烷或三氟酮。 於又再本發明之另一方面，係提供一種醫藥组合物，其 ❹ ❹ 包含作為活性成份之本發明化合物，其係用於治療與咖 有關聯之病症。此組合物係一般性地包含藥學上可接受之 载劑。此組合物可含有一或多種其他藥劑，例如抗病毒劑、 干擾素或經^化之干擾素等。較佳抗病毒劑為三唾„， 而較佳干擾素為α-干擾素。 此種：：療與HCV蛋白酶有關聯病症之方法係包括對需要 :種治療之病患投予治療上有效量之本發明化合 口腔或皮下。！之本發明化合物之醫藥組合物。投藥可為 有化合物可用於製造藥劑，以治療病與HCV蛋白酶 ==症，例如此方法包括使本發明化合物密切接觸 本發明之此等及其他方面係進-步 在上迷具體實施例中，本發明係揭示本發明化合物 是-一絲胺酸蛋白酶之抑制劑，或 上可接受之衍生物，其中各财義係示於上文。 ;另—項具體實施财，本發明純供包含本發明 135510-1 -48- 200924790 份之醫藥組合物。此等醫藥組合物通常另外包含 樂予上可接受之載劑稀釋劑、賦形劑或載劑（於本文中總稱 為載劑物質）。由於此種醫藥組合物之Hcv抑制活性，故其 在化療C型肝炎及相關病症上具有利用性。抑制活性 :可導致本發明化合物及/或組合物關於治療與HCV有關 如或與其連接之疾病（例如AIDS等）之用途。
於又另-項具时施例巾，本發明係揭示製備包含本發 明化合物作為活性成份之醫藥組合物之方法。在本發明之 醫藥組合物與方法中，活性成份典型上係與適當載劑物質 混合投予，適當地針對所意欲之投藥形式作選擇，意即口 服片劑、膠囊（無論是固體充填、半固體充填或液體充填）、 供賦形用之粉末、口服凝膠、酏劑、可分散顆粒、糖漿' 懸浮液等’並與習用醫藥實務一致。例如，對於呈片劑或 膠囊形式供口服投藥而言’可將活性藥物成份與任何口服 :毒性藥學上可接受之惰性載劑合併，譬如乳糖、澱粉、 蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘 路醇、乙醇（液體形式）等。再者，當想要或需要時，適當 黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑亦可被掺入混合物中。 粉末與片劑可包含約5至約95百分比之本發明組合物。 適畠黏合劑包括殿粉、明膠、天然糖類、玉米增甜劑， 天然與合成膠質，譬如阿拉伯膠、海藻酸鈉、羧曱基纖維 素、聚乙二醇及蠟類。在潤滑劑中，特別可指出硼酸、笨 曱酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉等供使用於此等劑型。崩解劑包 括救粉、曱基纖維素、瓜爾膠等。 135510-1 -49- 200924790 增甜與矯味劑及防腐劑，在適當情況下亦可加入。一此 ,文指出之術語’意、即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、黏合劑 等’係更詳細地討論於下文。 Ο
此外’本發明之组合物可被調配在持續釋出形式中，以 提供任—種❹種組份或活性成份之速率受控釋出，以使 治療作用意即HCV抑制活性等達最佳化。供持續釋出之適 當劑型，包括層合片劑’其含有數層不同崩解速率層，或 受控釋出聚合體基質，其係以活性成份浸潰，且被製成片 劑形式’或含有此種經浸潰或包覆多孔性聚合體基質之膠 —液體形式製劑包括溶液、懸浮液及乳化液。以下述作為 貫例’、可指出水或水—丙二醇溶液，用於非經腸注射液，或 添加增甜劑與鎮靜劑，用於口服溶液、懸浮液及乳化液。 液體形式製劑亦可包括供鼻内投藥之溶液。 適用於吸人之氣溶膠製劑可包括溶液及呈粉末形式之固 體其可併用藥學上可接受之載劑，譬如情性壓縮氣體， 例如氮。 匕為^備栓劑’係首先使低熔點蠟熔解，譬如脂肪酸甘油 S日之Μ物’譬如可可豆脂’並藉由㈣或類似混合，使 成伤均勻地分散於其中。然後，將熔融態均勻混合物 Ή入σ且大小模具中，使其冷卻及藉以固化。 '、 固肢形式製劑’其係意欲在使用之前不久，被轉 化成液體形式製劑’無論是供口服或非經腸投藥。此種液 體形式料液及乳化液。 135510-1 -50- 200924790 本發明化合私y + Λ客 物亦可以經皮方式傳輸。經皮組合物可採取 ^、氣轉及/或乳化液之形式，並可被包含在基 貝或儲為型之經皮貼藥中，如同此項技藝中習用於此 的之方式。 本發明化合私2女 物亦可以經口方式、靜脈内方式、鼻内方式 或皮下方式投藥。 本發明化合物亦可包括呈單位劑型之製劑。在此種形式 *剤係被再分成適當大小之單位劑量，含有適當量之 β活性成份，例如達成所要目的之有效量。 本發明活性組合物在單位劑量製劑中之量可以-般方式 改變或調整，從約1Ό毫克至約！，_毫克，較佳為約1.0至約 ㈣毫克，更佳為約L〇至約50〇毫克’及典型上為約1至約250 毫克’根據特定應用而定。所採用之實際劑量可依病患之 2齡：性別、體重及被治療症狀之嚴重性而改變。此種技 術係為熟諳此藝者所習知。 Ο ° 3有活性成份之人類口服劑型可每天投予1 或人板藥之里與頻率係根據負貴臨床師之判斷作調整。 供口服投藥之-般建議每日劑量服法在單—或分離劑量 中’可涵蓋從每天約1Ό毫克至約1，_毫克之範圍。 些可使用之術語係描述於下文： 膠囊-係指特殊容器或封閉物，製自甲基纖維素、聚乙稀 醇或變性明膠或澱粉，用以容納或含有包含活性成份之組 合物。硬殼膠囊典型上1 係1自相對較高凝膠強度骨質與豬
皮明膠之摻合物。膠糞太I 身了 3有少量染料、不透明化劑、 135510-1 -51 - 200924790 增塑劑及防腐劑。 片劑-係指含有活性成份與適t稀釋劑之經壓 ㈣劑型。片劑可藉由1 縮混合物或藉由濕式造粒、乾式 &粒所獲得之粒化物或藉由壓實製成。 口服凝膠係指經分散或增溶於親水性半固體基質中之 活性成份。 θ τ < 賦心用杯末係指含有活性成份與適#稀釋劑之粉末推合 物’其可被懸浮於水或汁液中。 ^ ❹ #釋劑·係指經常構成組合物或劑型之主要部份之物質。 適當㈣劑包括_ ’譬如乳糖、嚴糖、甘露醇及花揪醇； 歲粉，何生自小麥、玉米、稻米及馬鈴著；及纖維素，學 如微晶性纖維素。稀釋劑在組合物中之量可涵蓋從約㈣ 約·之範圍，以全部組合物之重量計，較佳為約25至約 75:，更佳為約3〇至約6〇重量％，又更佳為約12至約㈣。 崩解劑-係指被添加至組合物中，以幫助其破裂開來（崩 〇 解）並釋出藥劑之物質。適當崩解劑包括澱粉；，'冷水溶性" 變性殺粉，譬如竣甲基殿粉鈉；天然與合成膠質，譬如刺 槐丑、刺梧桐、瓜爾膠、西黃蓍樹膠及瓊脂；纖維素衍生 物，譬如甲基纖維素與叛曱基纖維素鈉；微晶性纖維素與 交聯微晶性纖維素，譬如交聯羧曱基纖維素鈉；海藻酸鹽， 譬如海藻酸與海藻酸鈉；黏土，譬如膨土；及起泡混合物。 崩解劑在組合物中之量可涵蓋從約2至約15%之範圍，以組 合物之重量計，更佳為約4至約10重量％。 黏合劑-係指使粉末結合或"膠黏，，在一起，並藉由形成顆 135510-1 -52- 200924790 粒使彼等内聚之物質，因 u此在配方中充作”黏著劑”。黏合 黏人^可取用於稀釋劑或膨鬆财之内聚強度。適當 . 括糖類’譬如薦糖；殿粉，衍生自小麥、玉米、 稻米及馬鈴薯，·天然豚皙，辟 '言如阿拉伯膠、明膠及西黃蓍 树骖；海藻衍生物，壁 °海溱馱、海藻酸鈉及藻酸銨鈣； 纖維素物質，譬如甲其磁％ ° 土、’、維素與羧子基纖維素鈉及羥丙甲 ^纖維素；聚乙絲四氫^各酮；及無機物質，譬如石夕酸
叙紹、。黏合劑在組合物中之量可涵蓋從約2至約2〇%之範 圍，以組合物之會吾兮+ 兩 °十更佳為約3至約1〇重量％，又更佳 為約3至約6重量％。 潤滑劑-係指被加入劑型中以使得片劑、顆粒等在被麼縮 後能夠藉由減少摩擦或磨損，而自模具或模口釋出之物質。 適當潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，譬如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣 或硬脂酸鉀；硬脂酸；高炫點堪類；及水溶性潤滑劑，譬 氯化納笨甲酸納、醋酸納、油酸納、聚乙二醇及奶·白 ©胺酸。潤滑劑經常在壓縮前之那個最後步驟添加，因其必 須存在於顆粒之表面上，及位在彼等與壓片機配件之間。 潤滑劑在組合物中之量可涵蓋從約02至約5%之範圍，以組 合物之重量計，較佳為約〇 5至約2%，更佳為約〇 3至約i 5 重量％。 /月β預防成塊並改良粒化物之流動特性之物質，以致使 流動平滑且均勻。適當滑劑包括二氧化矽與滑石。滑劑在 組合物中之量’可涵蓋從全部組合物之約0.1%至約5重量％ 之範圍’較佳為約0.5至約2重量％。 135510-1 •53- 200924790 著色劑-對組合物或劑型提供著色之賦形劑。此種賦形劑 可包括食品級染料，及被吸附至適當吸附劑譬如黏土或氧 化鋁上之食品級染料。著色劑之量可從約0.1改變至約5%， 以組合物之重量計，較佳為約〇 1至約1%。 生物利用率-係指當與標準物或對照組比較時，活性藥物 成份或治療部份基團從所投予之劑型被吸收至系統循環中 之速率與程度。 製備片劑之習用方法係為已知。此種方法包括乾式方法， ® 譬如直接壓縮及藉由壓實所製成粒化物之壓縮，或濕式方 法或其他特殊程序。製造其他投藥形式例如膠囊、栓劑等 之習用方法，亦為習知。 本發明之另一項具體實施例，係揭示上文所揭示之醫藥 組合物於治療疾病例如C型肝炎等之用途。此方法包括對 患有此一或多種疾病且需要此種治療之病患，投予治療上 有效量之本發明醫藥組合物。 ❹ 於又另一項具體實施例中，本發明化合物可在人類中用 於治療HCV，其係在單一療法模式中，或在組合療法（例如 雙重組合、三重組合等）模式中，例如併用抗病毒及/或免 疫調制劑。此種抗病毒及/或免疫調制劑之實例包括三唑核 洛（得自 Schering-Plough 公司，Madison, New Jersey)與 LevovirinTM (得自 ICN 醫藥，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(得自 Viropharma 公司，Exton, Pennsylvania)、ISIS 14803TM(得自 ISIS 醫 藥，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(得自 Ribozyme 醫藥，Boulder, Colorado)、VX 497T M (得自 Vertex 醫藥，Cambridge, Massachusetts)、 135510-1 -54- 200924790
ThymosinTM(得自 SciClone 醫藥，San Mateo, California)、 MaxamineT M (Maxim 醫藥，San Diego, California)、分枝盼酸莫非替 (mycophenolate mofetil)(得自 Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、 干擾素（例如干擾素-a、PEG-干擾素α共輛物）等。"PEG-干 擾素a共軛物”係為以共價方式連接至PEG分子之干擾素 a分子。說明性PEG-干擾素共輕物包括干擾素CK-2a (RoferonT M，得自 Hoffman La-Roche, Nutley，New Jersey)，呈 PEG 化 干擾素a-2a形式（例如以商標名PegasysT M鎖售），干擾素a
A w -2b (IntronT M，得自 Schering-Plough 公司），呈 PEG 化干擾素 a-2b 形式（例如以商標名PEG-IntronTM銷售），干擾素a-2c (Berofor AlphaTM，得自 Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)，或同感 干擾素，如藉由天然生成干擾素α之同感順序測定所定義 者（InfergenTM，得自 Amgen, Thousand Oaks, California)。 【實施方式】 如前文陳述，本發明亦包括本發明化合物之互變異構物、 Q 旋轉異構物、對掌異構物及其他立體異構物。因此，正如 熟諳此藝者所明瞭，一些本發明化合物可以適當異構形式 存在。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍内。 本發明之另一項具體實施例係揭示一種製造本文中所揭 示化合物之方法。此等化合物可藉由此項技藝中已知之數 種技術製備。代表性說明程序係概述於下列反應圖式中。 本文中所揭示之本發明係接著進一步藉由製備實例與實例 化合物舉例說明，其不應被解釋為限制本發明之範圍，該 範圍係被定義於隨文所附之請求項中。替代之機制途徑與 135510-1 -55- 200924790 類似結構，將為熟諳此藝者所顯而易見。 應明瞭的是，雖然下述說明性合成圖式係描述少數代表 性本發明化合物之製備，但任何天然與非天然胺基酸類兩 者之適當取代，將會造成所要化合物之形成，以此種取代 為基礎。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍内。 對於下文所述之程序，係使用下列縮寫：
AcOH :醋酸 ADDP : 1，Γ-(偶氮二羰基）雙六氫吡啶 ® Boc係意謂第三-丁基氧基或第三-丁氧羰基 ιΒιι、TBu 或 Βιι1 :第三-丁基 Cbz :芊氧羰基
Bop :苯并三唑-1-基-氧基-參（二曱胺基）六氟磷酸鹽 Bn或Bzl :芊基 Bz :苯曱醯基 Chg :環己基甘胺酸 ❹ Cp :環戊二烯基 DCM係意謂二氯曱烷； DCC : 1,3-二環己基碳化二亞胺 DEAD :偶氮二羧酸二乙酯 DMAP : 4-N，N-二曱胺基吡啶 DMF係意謂Ν,Ν-二曱基曱醯胺； DMSO係意謂二甲亞颯； EDCI : 1-(3-二曱胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽；
Et :乙基； 135510-1 -56- 200924790
EtOAc係意謂醋酸乙酉旨；
Et20 :乙醚； HATU係意謂0-(7-氮苯并三唑-1-基）-1,1,3,3-四曱基錁； HOOBt : 3-羥基-1，2,3-苯并三畊-4(3H)-酮； HOBt : N-羥基苯并三唑； iBoc :異丁氧基羰基； iPr :異丙基； KHMDS係意謂鉀六曱基二矽烷基胺；
LiHMDS係意謂六曱基二石夕氮化物；
Me :甲基； MS係意謂質譜； nBuLi係意謂正-丁基鋰； NMM係意謂N-甲基嗎福啉； NMR係意謂核磁共振；
Phg :苯基甘胺酸；
Ph :笨基；
Pd/C係意謂鈀/炭觸媒；
PyBrOP :六氟填酸漠-參-四氫p比咯基鎮； TBuNCO係意謂異氰酸第三-丁酯； TEMPO : 2,2,6,6-四曱基-1-六氫吡啶基氧基； THF係意謂四氫呋喃； THP係意謂四氫呋喃； TMSI係意謂碘化三甲基矽烷； T3 N係意謂三乙胺； 135510-1 -57- 200924790
Ts :對-曱苯磺醯基。 下文合成程序中所使用之數種中間物及/或製備實例已 被揭示於 WO 01/77113 ; WO 01/081325 ; WO 02/08198 ; WO 02/08256； WO 02/08187； WO 02/08244 ； WO 02/48172； WO 02/08251 ； 及2002年1月18日提出申請之待審美國專利申請案序號 10/052,386中。此等申請案之揭示内容均併於本文供參考。 本發明化合物可使用關於2005年2月24日提出申請之美 國專利申請案序號10/948367 (其係於2005年6月2曰經公告 〇 為2005/0119168)中所揭示製備實例之圖式與程序進行合成’ 其整體揭示内容係以指稱方式併於本文。 關於製備實例之一般製備圖式及程序 圖式1
135510-1 -58- 200924790
圖式2
CH3^,ch3
圖式3 ch3x^ch3
關於製備實例之程序 製備實例1 135510-1 -59- 200924790
步驟A
lb 之合成可使用⑴ Myers, A. G.; Gleason, J. L.; Yoon, Τ·; Kung, D. W. ； J. Am. Chem. Soc 1997, 119, 656 I (2) Myers, A. G. ； Schnider, P.； Kwon, S. ; Kung, D. W. ; C/iem., 1999, 64, 3322.;或（3) Myers, A. G. ; Gleason, J. L. ; Og. 1998, 76, 57 之程序達成。 將胺la (24克，120毫莫耳）在THF (300毫升）中之溶液以無 水LiCl (16.80克，400毫莫耳）處理，歷經0.5小時，並攪拌， 直到反應混合物轉變成均勻為止。使反應混合物冷卻至0°C ，且以LiHMDS之THF溶液（66.80克，400毫莫耳，在300毫升 THF中）處理，歷經20分鐘。將反應混合物在0°C下攪拌0.5 小時，並以6-溴基己烯（19.44克，120毫莫耳）處理，且於室 溫下攪拌24小時。使反應混合物溶於1M HC1水溶液中，及 在真空中濃縮，以移除THF。將主要水層進一步以3M HC1 水溶液（300毫升）稀釋，並以醚（2 X 200毫升）萃取。使用NaOH 水溶液（50%)使水層鹼化至pH 14，且以CH2C12(3 X 300毫升） 萃取。使合併之有機層以MgS04脫水乾燥，過濾，在真空中 濃縮，而產生粗製lb (15.1克），將其使用於下一步驟，無需 135510-1 -60- 200924790
進一步純化。 步驟B
使lb之溶液（12.5克，41.2毫莫耳）溶於NaOH水溶液（1M， 88.0毫升，88毫莫耳）中，並於回流下加熱3小時。使反應 混合物冷卻至室溫，並以CH2C12(3 X 100毫升）萃取。將水層 以100毫升二氧陸圜、接著NaHC03 (8.00克，95.2毫莫耳）及二 碳酸二-第三丁酯（8.95克，41毫莫耳）處理，且於室溫下攪拌 5小時。以醚（2 X 250毫升）萃取反應混合物，及以HC1水溶 液使水層酸化至pH〜2，並以CH2C12(2 X 200毫升）萃取。使合 併之有機層以MgS04脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，而產 生酸lc (10.8克），為無色油。
步驟C
BocHN
於〇°C下，將酸1C (5克，19.44毫莫耳）與胺Id (3.98克，19.44 毫莫耳）在CH2C12(30毫升）、DMF (30毫升）中之溶液，以HATU (8.87克，23.31毫莫耳）與NMM (4.91克，5.33毫升）處理，並在 〇°C下攪拌過夜。使反應混合物在真空中濃縮，且以650毫 升CH2C12稀釋。將水層以HC1水溶液（1M，2 X 300毫升）、 NaHC03水溶液（1M，2 X 300毫升）洗滌。使有機層以MgS04 135510-1 -61 - 200924790 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（si〇2，丙 酮/己烷5:1)，而產生le，為無色油（5.5克）。 NMR ： (CD3OD, 300 MHz) δ 5.87-5.76 (m, 1H), 4.97-4.92 (dd, 2H), 4.26 (bt, 1H, J=7.8 Hz), 3.98 (d, 1H, J=10.2 Hz), 3.61 (dd, 2H, J=5.1, 5.1 Hz), 3.73 (s, 3H), 2.14-2.07 (m, 2H), 1.74-1.42 (m, 9H), 1.41 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 0.92 (s, 3H). 13 C NMR ： (CD3OD, 75 MHz), d 173.8, 173.2, 158.0, 139.8, 115.0, 80.4, 60.91, 53.42, 52.80, 34.7, 33.5, 32.3, 31.4, 29.8, 28.7, 26.4, 26.1, 20.6, 〇 12.9.
步驟D
將酯le (4克，9.79毫莫耳）在THF (20毫升）、H20 (20毫升） 及MeOH (10毫升）中之溶液，以LiOH · H20 (575毫克，14毫莫 耳）處理，並於室溫下攪拌4小時。使反應混合物在真空中 濃縮，以移除THF與MeOH。以HC1水溶液使主要水層酸化， 且於CH2C12(3 X 100毫升）中萃取。使合併之有機層以MgS04 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及以本身使用。 於0°C下，將得自le之水解作用之酸、胺鏈段If (2.02克， 9.79毫莫耳）在DMF (40毫升）、CH2C12(40毫升）中之溶液，以 HATU (4.46克，11.84毫莫耳）與NMM (3.5克，35毫莫耳）處理， 並於〇°C下攪拌24小時。使反應混合物在真空中濃縮，且以 HC1水溶液（100毫升）稀釋。以CH2C12(3 X 75毫升）萃取水層。 135510-1 -62- 200924790 將合併之有機層以飽和NaHC03水溶液（3 χ 100毫升）、鹽水洗 滌，以MgS04脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉矽膠層 析純化（EtOAc/己烷1:3)，而產生lg (4.5克），為無色泡沫物。
步驟E
將二烯lg (1.1克，2.0毫莫耳）在無水CH2C12(20毫升）中之 溶液以 Grubbs 觸媒[(Cy)3RuCl2=CHC6H5，83.8 毫克，0.1 毫莫耳] 處理，並於室溫下攪拌24小時。使反應混合物在真空中濃 縮，及藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷1:3)，而產生lh (501毫 克），為無色固體，與E/Z異構物之混合物。 1R NMR (CDC13, 300 MHz) 5 , 7.38 (d, 1H, J=8.1 Hz), 5.30-5.18 (m, 2H), 4.55 (dt, 1H, J=2.4, 9.6 Hz), 3.92 (bs, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.79-3.77 (bm, 1H), 2.06-2.1 (bm, 3H). 1.95-1.81 (m, 2H), 1.79-1.77 (m, 13H), 1.31 ❹ (s, 9H), 1.05 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). MS (ESI), m/z，相對強度 542 [(M+Na)+45]，464 (20)，448 (25) 420
(100). 步驟F
將酯lh (100毫克，0.19毫莫耳）在無水THF (1毫升）中之溶 135510-1 -63· 200924790 液，以LiBH4(在THF中之2M溶液，0.2毫升）處理，並於室溫 下攪拌16小時。以HC1水溶液（1M，30毫升）使反應混合物淬 滅，且以CH2C12(3 X 30毫升）萃取。將合併之有機層以NaHC03 水溶液（100毫升）、鹽水洗滌，以MgS04脫水乾燥，過濾， 在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:3)，而產 生li (70毫克），為非晶質固體。 1R NMR (CDC13, 300 MHz) δ 6.96 (d, 1H, J=8.1 Hz), 5.32-5.21 (m, 2H), 4.43-4.37 (m, 2H) 4.01-3.93 (m, 1H), 3.77 (dd, 1H, J=5.7, 4.8 Hz), 3.65 (dd, 1H, J=3.9, 6.6 Hz), 3.53 (dd, 1H, J=6.0, 10.8 Hz), 2.11-1.77 (m, 6H), 1.55-1.31 (m, 12H), 1.45 (s, 9H), 1.05 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). MS (ESI), m/z,相對強度 530 [(M+K)+, 10], 514 [(M+Na)+, 70], 492 [(M+l)+, 20], 392 (100).
步驟H
將醇li (70毫克，0.15毫莫耳）在CH2C12(3毫升）中之溶液， 以Dess Martin試劑（85毫克，0.2毫莫耳）處理，並於室溫下攪 拌2小時。以Na2S203溶液（10%，10毫升）與飽和NaHC03溶液 (10毫升）使反應混合物淬滅，且於室溫下攪拌0.5小時。以 CH2C12(50毫升）萃取反應混合物。使有機層以MgS04脫水乾 燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷 4:1)，而產生lj (50毫克），為無色絨毛狀固體。 lU NMR (CDCI3, 300 MHz) ¢5 9.54 (s, 1H), 7.43 (d, 1H, J=7.8 Hz), 135510-1 -64- 200924790 5.30-5.19 (m, 2H), 4.55-4.40 (m, 2H), 3.93 (d, 1H, J=10.2 Hz), 3.77 (dd, 1H, J=5.4, 5.1 Hz), 2.04-1.78 (m, 4H), 1.55-1.27 (m, 14), 1.31 (s, 9H), 1.02 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). MS (ESI)，m/z,相對強度 512 [(M+Na)+，80], 490 [(M+l)+, 10], 434 (20), 390 (100).
步驟I
將醛lj (50毫克，0.11毫莫耳）在無水CH2C12 (2毫升）中之溶 液，以CH3COOH (19毫克，0.31毫莫耳）與異氰基醋酸曱酯（31 毫克，0.31毫莫耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌48小 時，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/ 己烷1:2)，而產生lk (50毫克），為非對映異構物之混合物。 MS (ESI)，m/z,相對強度 671 [(M+Na)+，45]，649 [(M+l)+, 30]，549 (100).
❹ 將甲酯lk (50毫克，0.078毫莫耳）在THF (2毫升）、H20 (2 毫升）及CH3OH (2毫升）中之溶液，以LiOH· H20 (20毫克，0.5 毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。在反應完成後，以 135510-1 -65- 200924790 HC1水溶液（2毫升）使其酸化，及在真空中濃縮。使殘留物 在真空中乾燥，且以本身使用，無需進一步純化。 使此酸溶於CH2C12(2毫升）、DMF (2毫升）中，並以 H-Phg-N(CH)2 · HC1 (26 毫克，0.12 毫莫耳）、NMM (32 毫克，0.32 毫莫耳）、HATU (45毫克，0.12毫莫耳）處理，且於0°C下攪 拌24小時。使黃色溶液在真空中濃縮，並以CH2C12 (70毫升） 稀釋。將有機層以飽和NaHC03水溶液、HC1水溶液及鹽水洗 滌。使反應混合物脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮， 〇 及以本身使用於下一步驟（47毫克）。
步驟K
將醇11 (50毫克，0.066毫莫耳）在CH2C12 (2毫升）中之溶液， 以Dess-Martin試劑（60毫克，0.14毫莫耳）處理，並於室溫下攪 拌2小時。將反應物以Na2S203水溶液與NaHC03水溶液（各20 毫升）稀釋，且以CH2C12(50毫升）萃取。將有機層以飽和 NaHC03、鹽水洗條，以MgS04脫水乾燥，過濾、，在真空中 濃縮，及藉層析純化（丙酮/己烷2:3)，而產生1 (22毫克）， 為無色固體。 MS (ESI)，m/z，相對強度 773 [(M+Na)+，80]，751 [(M+l)+, 60]，651 (100). 製備實例2 135510-1 -66- 200924790
步驟A
將醇li (1.1克，2.25毫莫耳）在曱醇（30毫升）中之溶液以 Pd/C (10% w/w，100毫克）處理，並於60 psi下氫化3小時。使 反應混合物經過矽藻土填充柱過濾，在真空中濃縮，而產 生2a，將其使用於下一步驟，無需進一步純化。
步驟B
按照類似步驟Η (製備實例1)之程序，將得自步驟A之粗 製2a使用Dess-Martin試劑（1.14克，2.68毫莫耳）氧化，而產生 2b (760毫克），為無色泡沫物。 MS (ESI), m/z,相對強度 1005 [(2M+Na)+, 10]，530 [(M+K)+, 20]， 514 [(M+Na)+, 90], 492 [(M+l)+, 30], 436 (40), 392 (100).
步驟C 135510-1 -67- 200924790
按照類似步驟I (製備實例1)之程序，使用CH3 COOH (60毫 克）與異氰基醋酸甲酯（99毫克，1毫莫耳），使得自步驟b 之化合物2b (200毫克，0.41毫莫耳）轉化成2c (250毫克），為 非對映異構物之混合物。
NMR (CDC13，300 MHz,非對映異構物之混合物）8.05, 7.93 (d, 1H), 6.60 (d, 1H, J=7.8 Hz), 5.20,5.09 (d, 1H), 4.58-4.49 (bt, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.34-4.31 (bt, 1H), 4.11-4.06 (m, 1H), 3.95-3.86 (m, 3H), 3.73, 3.71 (s, 3H), 2.21, 2.19 (s, 3H), 1.99-1.06 (m, 31H), 0.99-0.94 (6H). MS (ESI), m/z,相對強度 689 [(M+K)+, 5]，673 [(M+Na)+, 30]，651
[(M+l)+, 35], 551 (100). 步驟D
2d 如製備實例1步驟J中所概述，使用LiOH · H20 (42毫克，1 毫莫耳）’使甲酯2c (250毫克，0.39毫莫耳）水解成酸，並使 用NMM (126毫克，1.26毫莫耳）與HATU (160毫克，0.42毫莫 耳），偶合至H-Phg-N(CH)2 · HC1 (90毫克，0.42毫莫耳）而產生 粗製2d，直接使用於氧化作用。
步驟E 135510-1 -68- 200924790 ch3^ch3
Ο
BocHN^Wn Ο 、Ο
2d
CH, 、CH3 將羥基醯胺2d使用Dess-Martin試劑（200毫克，0.48毫莫耳） 氧化，使其藉層析純化（Si02，丙酮/CH2C12 1:4)，而產生2 (110 毫克），為無色固體。
MS (ESI), m/z，相對強度 775 [(M+Na)+，60], 753 [(M+l)+, 50]，653 (100), 277 (80), 232 (60), 162 (30), 162 (40), 148 (80), 217 (95). 製備實例3
?h3 n、ch3
將2 (40毫克，0.0053毫莫耳）在HCOOH (2毫升）中之溶液， 於室溫下攪拌2小時，及在真空中濃縮。使殘留物重複溶於 曱苯中，並在真空中乾燥，以移除殘留甲酸。使殘留物溶 於CH2C12/DMF (各1毫升）中，且在0°C下，以tBuNCO (10微升） 與NMM (15微升）處理，並在冷藏室中留置12小時。使反應 混合物在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:2)， 而產生3 (21毫克），為無色固體。 135510-1 -69- 200924790 MS (ESI)，m/z，相對強度 774 [(M+Na)+，50]，752 [(M+l)+，70]，653 (90)，420 (30)，297 (30)，148 (100)，134 (40). 製備實例4
將醛2b (100毫克，0.2毫莫耳）在CH2C12(2毫升）中之溶液， 以Et3N (50毫克，0.5毫莫耳）與2-氰化丙醇（43毫克，0.5毫莫 耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，及在真空中 濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/己烧1:4)，而產生 4a (100毫克），為無色固體。 MS (ESI)，m/z,相對強度 541 [(M+Na)+，60], 519 [(M+l)+，10]，463 (30)，419 (100).
將氰醇4a (100毫克，0.2毫莫耳）在DMSO (3毫升）中之溶 135510-1 -70- 200924790 液，以H202(35%，0.3毫升）與K2C03(43毫克，0.3毫升）處理， 並於室溫下攪拌4小時。將反應混合物以CH2C12(150毫升） 稀釋，且以Na2S203水溶液（10%，30毫升）與鹽水（30毫升） 洗滌。使反應混合物脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃 縮，及直接使用於步驟C，無需進一步純化。
步驟C
於〇°C下，將羥基醯胺4b (100毫克，0.18毫莫耳）在曱笨 /DMSO (1:1，5毫升）中之溶液，以EDCI (356毫克，1.86毫莫 耳）與Cl2CHCOOH (120毫克，0.93毫莫耳）處理，並於0°C下攪 拌3小時。以EtOAc (150毫升）稀釋反應混合物，且以飽和 NaHC03水溶液（100毫升）與鹽水（100毫升）洗蘇。使醋酸乙酉旨 層脫水乾燥（MgS04)，濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己 Q 烷2:3)，而產生4 (20毫克），為無色固體。MS (ESI), m/z,相 對強度 435 [(M+l)+，85], 390 (100). 製備實例5
步驟A 135510-1 -71 - 200924790
^員乜製備實例3步驟A之程序，使胺基曱酸酯4 (40毫 克，0.1毫莫耳）轉化成脉5 (7.5毫克）。 製備實例6
步驟A
❹ 6之合成係使用類似5之合成之程序達成。將4 (180毫克， 0.34宅莫耳）在HCOOH (3.0毫升）中之溶液，於室溫下搜拌3 小時’在真空中濃縮。使殘留物在真空中乾燥，並溶於 CHzCl2 (4毫升）中，且以環己基異氰酸甲酯（72毫克，0.52毫 莫耳）與Et3N (52毫克，0.52毫莫耳）處理。將反應混合物在〇 °C下攪拌16小時，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化 呀〇2，丙_/己烧1:3)，而產生6(10毫克），為無色固體。 MS (ESI)，m/z，相對強度 574 [(M+l)+，20]，435 (1〇〇)，390 (50). 製備實例7 135510-1 • Ύλ· 200924790
7之合成係使用類似5之合成之程序達成。將4 (180毫克 0.34毫莫耳）在HCOOH (3.0宅升）中之溶液’於室溫下撲拌3 小時’及在真空中濃縮。使50毫克(0.12毫莫耳）此殘留物在 真空中乾燥，並溶於CH2C12(4亳升）中，且以第三-丁基甘胺 酸第三丁酯之異氰酸酯（74毫克，0.0.35毫莫耳）與Et3 N (35毫 克，0.0.35毫莫耳）處理。將反應混合物在〇°c下攪拌16小時， 及在真空中濃縮。將殘留物以CH2C12稀釋，並以HC1水溶液、 飽和NaHC〇3水溶液及鹽水洗務。使有機層脫水乾燥（MgS〇4) ’及藉層析純化（Si〇2，丙酮/己烷1:3)，而產生7 (15毫克）， 為無色固體。 MS (ESI)，m/z，相對強度 648 [(M+l)+，45]，592 (25), 435 (100). 製備實例8 135510-1 -73- 200924790
將甲酯2c (100毫克，0.15毫莫耳）在THF (2毫升）、η2 Ο (2 毫升）及CHgOH (2毫升）中之溶液，以Li〇H · Η2〇 (41毫克，ι·〇 毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。在反應完成後，以 HC1水溶液（2毫升）使其酸化，及在真空中濃縮◊使殘留物 在真空中乾燥’且以本身使用，無需進一步純化。 使此酸溶於CH2 (¾ (2毫升）、DMF (2毫升）中，並以爷胺（1〇7 宅克，0.22毫莫耳）、NMM (42毫克，0.42毫莫耳）、HATU (53 毫克’ 0.14毫莫耳）處理，且於〇°c下攪拌24小時。使黃色溶 液在真空中濃縮，並以CH2C12(100毫升）稀釋。將有機層以 飽和NaHC〇3水溶液、HC1水溶液及鹽水洗滌。使反應混合物 脫水乾燥（MgS〇4)，過濾，在真空中濃縮，及以本身使用於 下一步驟（63毫克）。
步驟B
BocHN
135510-1 8 •74- 200924790 將CH2 Cl2 (3毫升）中之羥基醯胺8a (62毫克）以Dess-Martin試 劑（62毫克，0.15毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌1.5小時。將 反應混合物以CH2C12(20毫升）稀釋，且以Na2S203水溶液 (10%，25毫升）與飽和NaHC03 (25毫升）處理，及攪拌20分鐘。 分離水層，並再一次以CH2C12萃取。使合併之有機層脫水 乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02， 丙酮/己烷1:2)，而產生8，為無色固體（21毫克）。 MS (ESI)，m/z，相對強度 704 [(M+Na)+, 40]，682 [(M+l)+，20]，582
(100), 150 (70), 117 (30). 製備實例9
步驟A
COOCH3 將酸9a (3.6克，18.1毫莫耳）、胺9b (5.53克，18.1毫莫耳）、 HATU (8.59毫莫耳，22.62毫莫耳）及NMM在CH2C12(50毫升）、 DMF (50毫升）中之溶液，於0°C下攪拌過夜。使反應混合物 在真空中濃縮，並以HC1水溶液（1M，500毫升）稀釋，且以 CH2C12(3 X 250毫升）萃取。將合併之有機層以HC1水溶液(500 毫升）、飽和NaHC03水溶液（500毫升）、鹽水（300毫升）洗滌， 135510-1 -75- 200924790 及藉層析純化（Si02 ’丙酮/己烷l:4) ’而產生9c (6.7克），為 無色固體。 MS (ESI), m/z，相對強度 495 (M+Na)+，，90], 473 [(M+l)+，60], 429 (70), 391 (40), 200 (100), 140 (30).
步驟B
將曱酯 9c (5.5 克，11.59 毫莫耳）在 CH3 0H/THF/H20 (300 毫升） 中之溶液，以LiOH.H2O(700毫克，16.7毫莫耳）處理，並於 室溫下攪拌i·5小時。將反應混合物以HC1水溶液稀釋，且 於CH2C12(700毫升）中萃取。使有機層以MgS04脫水乾燥，過 濾，在真空中濃縮，及以本身使用於後續步驟中。 將粗製酸在CH2C12(50毫升）、DMF (50毫升）中之溶液，以 HATU (5.5 克，Π.35 毫莫耳）、NMM (4.07 克，40.32 毫莫耳）處 〇 理，並於0°C下攪拌24小時。使反應混合物在真空中濃縮， 且溶於HC1水溶液（300毫升）中。將酸性層於CH2C12(2 X 200 毫升）中萃取，並將合併之有機層以飽和NaHC03、鹽水洗滌， 及藉層析純化（Si〇2，丙酮/己烷4:1)，而產生9d (7.1克），為 無色固體。
步驟C 135510-1 -76- 200924790
將二烯9d (2.0克，3.2毫莫耳）在CH2C12 (64毫升）中之溶液， 以 Grubbs 觸媒（[(Cy)3RuCl2=CHC6H5，404 毫克，0.48 毫莫耳）處 理，並於室溫下攪拌24小時。使反應混合物在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷1:3)，而產生9e (1.1克），為 褐色固體，與E/Z異構物之混合物。 XH NMR (CDC13, 300 MHz) δ , 7.36 (bm, 5Η), 7.13 (d, 1H, 4.5 Hz), 5.73 (d, 1H, J=8.1 Hz), 5.28 (m, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.75 (m, 1H), 4.65 (m, 2H), 4.52-4.46 (m, 1H), 3.90 (bd, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.61 (dd, 1H, J=15.6, 11.1 Hz), 3.44 (dd, 1H, J=6.9, 7.2 Hz), 2.12-2.01 (m, 5H), 1.79-1.67 (m, 3H), 1.49-1.43 (m, 3H), 1.36-1.34 (m, 4H), 1.26 (bs, 5H), 1.16 (bs, 3H).
MS (ESI), m/z,相對強度 606 [(M+Na)+70], 584 (100)，540 (30). 步驟D
將酯9e (200毫克，0.32毫莫耳）在無水THF (5毫升）中之溶 液，以LiBH4 (在THF中之2M溶液，0.32毫升）處理，並於室 溫下攪拌3小時。以HC1水溶液（1M，100毫升）使反應混合物 淬滅，且以CH2C12(3 X 50毫升）萃取。將合併之有機層以 NaHC03水溶液（100毫升）、鹽水洗滌，以MgS04脫水乾燥， 135510-1 -77- 200924790 過滤’在真空中濃縮’及藉層析純化（Si02，丙嗣/己炫 1:3)， 而產生9f (2.1克）。 1U NMR (CDC13, 300 MHz) δ . MS (ESI), m/z，相對強度 578 [(M+Na)+，40], 556 [(M+l)+，80]，512, (30), 295 (100).
步驟E
將醇9f(100毫克，0.19毫莫耳）在CH2C12(3毫升）中之溶液， 以Dess Martin試劑（106毫克，0.25毫莫耳）處理，並於室溫下 攪拌2小時。以Na2S203溶液（10%，1〇毫升）與飽和NaHC03溶 液（10毫升）使反應混合物淬滅，且於室溫下授拌0.2小時。 以CH2C12萃取反應混合物。使有機層以MgS04脫水乾燥，過 濾’在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷3:1)， 〇 而產生9g (80毫克）。 NMR (CDCI3, 300 MHz) δ 9.52 (s, 1Η), 7.36 (bs, 5H), 7.11 (d, 1H, J=7.2 Hz), 5.67 (d, 1H, J=7.8 Hz), 5.24-5.11 (m, 2H), 5.11 (s, 2H), 4.77-4.45 (m, 5H), 3.92 (d, 1H, J=12 Hz), 3.58 (dd, 1H, J=6.6, 5.5 Hz), 3.51-3.46 (m, 1H), 2.17-1.00 (m, 25H). MS (ESI), m/z,相對強度 576 [(M+Na)+, 15], 554 [(M+l)+, 100], 510 (40).
步驟F 135510-1 -78- 200924790
將醛9g (80毫克，0.15毫莫耳）在無水CH2C12 (2毫升）中之溶 液，以CH3COOH (30毫克，0.50毫莫耳）與異氰基醋酸曱酯（50 毫克，0.50毫莫耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌24小 時，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/
己烷1:3)，而產生9h，為非對映異構物之混合物。 MS (ESI), m/z,相對強度 735 [(M+Na)+，70], 713 [(M+l)+，100]·
步驟F
如製備實例1步驟J中所概述，使用LiOH · H20，使甲酯9h (600毫克，0.92毫莫耳）水解成酸，並使用NMM (303毫克，3.0 毫莫耳）與HATU (437毫克，1.15毫莫耳），偶合至H-Phg-N(CH)2 • HC1 (235毫克，1.09毫莫耳），而產生9i，將其直接使用於 氧化作用。
步驟G
135510-1 -79- 200924790 按照類似步驟Η (製備實例1)之程序，將得自步驟F之粗 製9j (470毫克，0.58毫莫耳）使用Dess-Martin試劑（424毫克， 1.00毫莫耳）氧化，而產生9j (310毫克），為無色固體。 MS (ESI), m/z,相對強度 869 [(M+CH3 OH+Na)+, 100], 815 [(M+l)+, 40], 770 (30).
將9h (200毫克，0.3毫莫耳）在甲醇（5毫升）中之溶液，以 Pd(OH)2/C (潤濕，10%)處理，並氫化3小時。使反應混合物 經過矽藻土填充柱過濾，且在真空中濃縮濾液。使殘留物 溶於二氯曱烷中，並以二碳酸二-第三丁酯（200毫克，0.92 毫莫耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌24小時，及藉層 析純化（Si02，丙酮/己烷1:2)，而產生10a (85毫克），為無色 固體。
步驟B 135510-1 -80- 200924790
如製備實例1步驟J中所概述，使用LiOH · H20 (41毫克，1 毫莫耳），使甲酯l〇a (80毫克，0.15毫莫耳）水解成酸，並使 用NMM (40毫克，0.40毫莫耳）與HATU (64.6毫克，0.17毫莫耳） ，偶合至H-Phg-N(CH)2 · HC1 (32毫克，0.15毫莫耳），而產生 l〇b，直接使用於氧化作用。
步驟C
將羥基醯胺10b (60毫克，0.08毫莫耳）使用Dess-Martin試劑 (60毫克，0.14毫莫耳）氧化，使其藉層析純化（Si02，丙酮 /CH2C12 1:2)，而產生10c (21毫克），為無色固體。
MS (ESI), m/z，相對強度 805 [(M+Na)+，20]，783 [(M+l)+, 20]，683 (30), 369 (40), 210 (70), 116 (100). 製備實例11
步驟A 135510-2 -81 - 200924790
❹ 將搭9g (400毫克，〇73毫莫耳）在ch2c12中之溶液，以Et3N (150毫克’ h5毫莫耳）與2-氰化丙醇（170毫克，1.5毫莫耳）處 理。將反應混合物在室溫下攪拌3小時，及在真空中濃縮。 使殘留物藉層析純化（Si〇2，丙酮/己烷1:4)，而產生4a (286 毫克），為無色固體。 MS (ESI), m/z，相對強度 603 [(M+Na)+，60]，581 [(M+l)+，70]，464 (50)，420 (100).
步驟B
將氰醇lla (600毫克，1.1毫莫耳）在DMSO (12毫升）中之溶 液’以H202(35%，ι·〇毫升）與k2c〇3 (43毫克，0.3毫升）處理， 並於室溫下攪拌8小時。將反應混合物以CH2C12(150毫升） 稀釋’且以Na2S2〇3水溶液（1〇%)與鹽水（30毫升）洗滌。使反 應混合物脫水乾燥（MgS〇4)，過濾，在真空中濃縮，及直接 使用於步驟C ’無需進一步純化。 MS (ESI)，m/z，相對強度 621 [(M+Na)+，70]，599 [(M+l)+，100], 554 (40).
步驟C 135510-2 -82- 200924790
於〇°C下，將羥基醯胺lib (320毫克，0.54毫莫耳）在曱苯 /DMSO (1:1，10毫升）中之溶液，以EDCI (1.1克，5.40毫莫耳） 與Cl2CHCOOH (350毫克，2.7毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌 4小時。將反應混合物以CH2C12(150毫升）稀釋，且以飽和 NaHC03 溶液與鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，濃 縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:2)，而產生11 (173毫 克），為無色固體。 MS (ESI)，m/z，相對強度 619 [(M+l)+，20]，597 (100). 製備實例12
將11a之溶液使用Pd/C氫化，並使所獲得之胺溶於CH2C12 中，且在0°C下以第三-丁基異氰化物處理。將反應混合物 在室溫下攪拌12小時，並以水稀釋。以CH2C12 (30毫升）萃取 135510-2 -83- 200924790 反應混合物，且使合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾， 在真空中濃縮，獲得lib，將其使用於氧化作用，無需進一 步純化。
步驟B
0 於0°C下，將羥基醯胺lib (320毫克，0.54毫莫耳）在甲苯 /DMSO (1:1，10毫升）中之溶液，以EDCI (1.1克，5.40毫莫耳） 與Cl2CHCOOH (350毫克，2.7毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌 4小時。將反應混合物以CH2C12(150毫升）稀釋，且以飽和 NaHC03 7jc溶液與鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，濃 縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:2)，而產生11 (173毫 克），為無色固體。 MS (ESI), m/z,相對強度 619 [(M+l)+，20]，597 (100). © 製備實例13
步驟A 135510-2 -84- 200924790
將醛2b (50毫克，0·1毫莫耳）在無水CH2C12(5毫升）中之溶 液，以CH3COOH (21毫克，0.3毫莫耳）與TOSMIC (59毫克，0.3 毫莫耳，3.0當量）處理。將反應混合物在室溫下攪拌40小 時，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，EtOAc/ 己烷2:3)，而產生lk (60毫克），為非對映異構物之混合物。 MS (ESI), m/z，相對強度 769 [(M+Na)+, 30]，747 [(M+l)+，20], 647 (100).
步驟B
13a
將13a (60毫克，0.08毫莫耳）在曱醇中之溶液，以8滴濃HC1 〇 處理，並於室溫下攪拌12小時。使醋酸酯水解，伴隨著Boc 基團之部份去除保護，使其以二碳酸二-第三丁酯（16毫克， 0.073毫莫耳）再保護。 將CH2Cl2中之羥基醯胺（46毫克，0.07毫莫耳）以Dess-Martin 試劑（55毫克，0.13毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌10分鐘。 添加飽和Na2 S2 〇3水溶液，且將反應混合物於CH2 Cl2中萃 取。使反應混合物脫水乾燥（MgS04)，過渡，在真空中濃縮， 及藉層析純化，而產生13 (61毫克）。 135510-2 85· 200924790 MS (ESI), m/z，相對強度 703 [(M+l)+，11]，603 (100). 製備實例14
步驟A
ch3 14a
於-78°C下，將異丁酸甲酯（2.0克，19.5毫莫耳）在THF中之 溶液，逐滴添加至KHMDS在THF中之溶液（4.65克，23.5毫莫 耳）内，並攪拌0.5小時。將反應混合物以5-溴基-1-戊烯（3.5 克，23.5毫莫耳）處理，且在室溫下攪拌1小時。以HC1水溶 液使反應混合物淬滅，並於醚（150毫升）中萃取。使有機層 脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化 (EtOAc/己烷1:19)，而產生2.1克14b，為無色液體。 ❿ 1H NMR ： (CDC13, 300 MHz) <5 5.83-5.70 (m, 1H), 5.00-4.91 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 2.01 (dt, 2H), 1.53-1.48 (m, 2H), 1.35-1.30 (m, 2H), 1.1 (s, 9H).
步驟B
於-78°C下，將酯（2.6克，16毫莫耳）在醚（30毫升）中之溶 液，以LiAlH4 (在THF中之1M溶液，20毫升）處理，並溫熱至 室温。以khso4溶液使反應混合物淬滅，且經過矽藻土與 135510-2 -86- 200924790
MgS04之填充柱過濾。使濾液在真空中濃縮，及以本身使用 於下一步驟。
步驟C Ο
14d 14c
於-78°C下，將氣化草醯（1.48克，11.7毫莫耳）在無水CH2C12 中之溶液，以DMSO (1.53克，19.5毫莫耳）處理，並攪拌15 分鐘。於此混合物中，添加醇14c (1.1克，7.8毫莫耳）且於-78 °C下攪拌15分鐘。添加三乙胺（5.0毫升，35.5毫莫耳），並使 反應混合物溫熱至室溫。使反應混合物酸化，且以EtO Ac (200毫升）萃取。將合併之有機層以HC1水溶液洗滌，脫水 乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及使用於下一反應。 1H NMR (CDC13，300 MHz)占 9.42 (s，1H)，5.82-5.68 (m，1H)， 5.00-4.91 (m, 2H), 2.03 (dt, 2H), 1.48-1.23 (m, 4H), 1.03 (s, 3H).
步驟D
0
14d
將醛14d (18克，129毫莫耳）在CH2C12(150毫升）中之溶液， 以（R)-苯基甘胺醇（20.33克，148.3毫莫耳）處理，並於0°C下攪 拌1小時。將反應混合物以TMS-CN (25.6克，258毫莫耳）處 理，且於室溫下攪拌12小時。以飽和NaHC03水溶液使反應 混合物淬滅，並以EtOAc (3 X 150毫升）萃取。使合併之有機 層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及使殘留物溶 135510-2 -87- 200924790 於THF (100毫升）中，並以HC1水溶液（100毫升）處理。以NaOH 水溶液（1M)使水層鹼化，且以（EtOAc，450毫升）萃取。使合 併之有機層脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及以層析純 化（Si02，EtOAc/己烷6:1)，而產生14e 21克，為無色油。
步驟E
© 於0°C下，將14e (20克）在CH3 OH (200毫升）中之溶液，以 H2O2(60毫升）與LiOH · H20 (5.88克，209.6毫莫耳）處理。將反 應混合物在室溫下攪拌12小時，並冷卻至0°C，且小心地以 Na2S203水溶液（10%)使反應淬滅。使反應混合物在真空中濃 縮，並以EtOAc (600毫升）萃取水層。將合併之有機層以 Na2S203水溶液廣泛地洗滌，脫水乾燥（MgS04)，在真空中濃 縮，及藉結晶化作用（EtOAc/己烷）純化，而產生純非對映異 構物，直接使用於下一反應。 1H NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7.30 (bs, 5H), 6.25 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 5.79-5.66 (m, 2H), 4.98-4.89 (m, 2H), 3.71-3.60 (m, 3H), 2.68 (bs, 1H), 1.98-1.90 (3H), 1.03 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 1.03-0.99 (m, 1H).
步驟F
於〇°C下，將醯胺14f (8.00克，26.3毫莫耳）在CH2C12(160毫 135510-2 -88- 200924790 升）、CH3OH (80毫升）中之溶液，在0°c下以Pb(OAc)4(13.45毫 莫耳，30_3毫莫耳）處理1小時。將黃色溶液以NaHC03水溶 液（250毫升）處理，並攪拌15分鐘。過濾反應混合物，及在 真空中濃縮。將主要水層在CH2C12(3 X 300毫升）中萃取，於 真空中濃縮，並直接使用於進一步反應。 使粗製亞胺之溶液溶於THF (200毫升）中，並以HC1水溶液 (1M，200毫升）處理，且於室溫下攪拌1小時。使反應混合 物在真空中濃縮，並以醚（2 X 250毫升）萃取。在0°C下，以 © NaOH水溶液（50%)使水層鹼化，且以CH2C12(600毫升）萃取。 將合併之有機層以鹽水萃取，脫水乾燥（MgS04)，過濾，在 真空中濃縮，及直接使用於下一反應。 使殘留物溶於CH2C12(200毫升）中，並冷卻至-78°C，且以 NMM (4.2克，40毫莫耳）與Cbz-Cl (5.4克，31.58毫莫耳）處理。 將反應混合物在室溫下攪拌12小時，且以HC1水溶液洗滌。 分離有機層，及以CH2C12(200毫升）萃取水層。將合併之有 機層以鹽水萃取，脫水乾燥，及藉層析純化（Si02，EtOAc/ 己烷2:3)，而產生14g (6.8克），為無色固體。 NMR (CDC13, 300 MHz) 5 7.37-7.30 (m, 5H), 6.23 (bs, 1H), 5.86 (bs, 1H), 5.82-5.64 (m, 1H), 5.63 (d, 1H, J=9.3 Hz), 5.12-4.93 (m, 4H), 4.07 (d, 1H, J=9 Hz), 2.0-1.9 (m, 2H), 1.42-1.30 (m, 4H), 0.96 (s, 6H). MS (ESI), m/z,相對強度 341 [M+Na)+，100], 319 [(M+l)+，30], 274 (50), 230 (70), 213 (30), 140 (30).
步驟G 135510-2 -89- 200924790
將醯胺14g (6.8克，21.4毫莫耳）在CH2C12(200毫升）中之溶 液，以 Me3OBF4(10.36 克，69.9 毫莫耳）與 Κ3Ρ04(12.11 克，69.52 毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌12小時。使反應混合物在真 空中濃縮，且溶於CH3OH (280毫升）與HC1水溶液（140毫升， 1M)中，及在回流下加熱1小時。使反應混合物濃縮，並將 水層進一步以CH2C12 (3 X 150毫升）萃取。使合併之有機層脫 〇 水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02， EtOAc/己烷1:19)，而產生14h (5.6克），為無色油 NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7.36 (bs, 5H), 5.85-5.71 (m, 1H), 5.32 (d, 1H, J=9.9 Hz), 5.10 (dd, 2H, J=12, 3.9 Hz), 5.03-4.93 (m, 2H), 4.27 (d, 1H, J=9.9 Hz), 3.72 (s, 3H), 2.05-1.98 (m, 2H), 1.47-1.24 (m, 4H), 0.93 (s, 9H). MS (ESI), m/z,相對強度 356 [M+Na)+, 95], 334 [(M+l)+，10], 290 (100), 230 (60), 213 (20).
❿步驟H
於〇°C下，將酸14i (4.5克，17.64毫莫耳）與胺If (3.66克，17.64 毫莫耳）在CH2C12(50毫升）、DMF (50毫升）中之溶液，以HATU (8.39克，22.05毫莫耳）與NMM (5.35克，52.92毫莫耳）處理， 並在0°C下攪拌過夜。使反應混合物在真空中濃縮，且以450 毫升CH2C12稀釋。將水層以HC1水溶液（1M，2 X 300毫升）、 135510-2 -90- 200924790
NaHC03水溶液（1M，2 x 300毫升）洗滌。使有機層以MgS04 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙 酮/己烧5:1)，而產生14j，為無色油（5.8克）。 XH NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7.03, 6.39 (d, 1H, J=7.5 Hz), 5.8-5.7 (m, 1H), 4.99-4.90 (m, 2H), 4.66-4.54 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.62-3.42 (m, 2H), 2.01 (bs, 2H), 1.88-1.63 (m, 4H), 1.61, 1.43 (s, 9H), 1.6-1.3 (m, 4H), 1.02 (s, 3H), 0.90 (s, 3H). MS (ESI), m/z,相對強度 431 [(M+Na)+, 60], 409 [(M+l)+, 40]，353 (40)，309 (100), 110 (80).
步驟I
將酯14h (5.4克，16.2毫莫耳）在H20 (30毫升）、THF (30毫 升）及CH3 OH (30毫升）中之溶液與LiOH · H20 (1.36克，32.42 ^ 毫莫耳）一起攪拌24小時，及在真空中濃縮。以HC1水溶液 (1M)使水層酸化，並於CH2C12(400毫升）中萃取。使合併之 有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及以本身 使用於進一步反應。 於〇°C下，將酸（4.0克，12.5毫莫耳）與去除保護之胺*在 CH2C12(30毫升）、DMF (30毫升）中之溶液，以HATU (7.15克， 18.79毫莫耳）與NMM (4.5克，45.0毫莫耳）處理，並於0°C下 攪拌48小時，及25°C，歷經24小時。使反應混合物在真空 中濃縮，且以300毫升CH2C12稀釋。將水層以HC1水溶液 135510-2 -91 - 200924790 (1M，3 χ 100毫升）、NaHC03水溶液（飽和，3 χ 100毫升）洗 務。使有機層以MgS04脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及 藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷3:1)，而產生14k，為無色油（4 克純14k與2克部份不純14k)。 XH NMR (CDC13, 300 MHz) 5 7.34-7.32 (bs, 5H), 6.92 (d, 1H, J=7.5
Hz), 5.48-5.69 (m, 2H), 5.37 (d, 1H, J=9.9 Hz), 5.08-4.92 (m, 6H), 4.56-4.33 (m, 1H), 3.97-3.93 (m, 2H), 3.84-3.80 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.03-1.97 (m, 4H), 1.86-1.87-1.39 (m, 12H), 1.12 (s, 3H), 0.98 (s, 6H), 084 (s, 3H) 〇 MS (ESI), m/z,相對強度 632 [(M+Na)+, 20], 610 [(M+l)+, 100], 309 (60).
*胺係藉由14j以二氧陸圜中之4M HC1之去除保護而獲得 步驟J
於室溫下，使二烯14k (4.00克，6.57毫莫耳）在CH2C12 (65.0 毫升）中之溶液以N2飽和，並以Grubbs觸媒（551毫克，0.657 毫莫耳）處理，且攪拌24小時。使反應混合物在真空中濃 縮，及藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷1:3)，而產生141 (1.7克）， 為黃褐色固體。 XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 7.34-7.31 (bs, 5H), 7.08 (d, 1H, J=7.8 Hz), 5.43 (d, 1H, J=10.2 Hz), 5.28 (m, 2H), 5.13-5.02 (m, 2H), 4.56-4.32 (m, 1H), 4.49-4.28 (m, 2H), 3.96-3.79 (m, 2H), 3.74 (s, 9H), 2.05-1.29 (m, 16H), 1.0 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 135510-2 -92- 200924790 MS (ESI), m/z,相對強度 550 [(M+l)+, 50], 450 (100).
步驟K
將烯烴141 (200毫克，0.35毫莫耳）在CH3 OH (20毫升）中之 溶液，以Pd/C (5%，200毫克）、二碳酸二-第三丁酯（200毫克， 0.92毫莫耳）處理，並在室溫下氫化12小時。使反應混合物 經過矽藻土填充柱過濾，及在真空中濃縮。使反應混合物 藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:5)，而產生14m (81毫克）。 NMR (CDC13, 300 MHz) 5 6.84 (d, 1H, J=7.8 Hz), 5.14 (d, 1H), 4.61-4.55 (m, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.22 (d, 1H, J=10 Hz), 4.03 (d, 1H, J=10.5 Hz), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 1.89-1.76 (m, 1H), 1.59-1.76 (m, 28H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). MS (ESI), m/z,相對強度 610 [(M+AcOH+l)+, 40], 550 [(M+l)+, ❹ 50], 450 (100), 309 (20).
步驟L
Wle^Me
將酯14m (80毫克，0.15毫莫耳）在無水THF (2毫升）中之溶 液，以LiBH4 (在THF中之2M溶液，0.1毫升）處理，並於室溫 下攪拌4小時。以HC1水溶液（1M，數滴）使反應混合物淬 135510-2 -93- 200924790 滅，且以CH2C12(3 χ 30毫升）萃取。將合併之有機層以NaHC03 水溶液（100毫升）、鹽水洗滌，以]^^504脫水乾燥，過濾， 在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:3)，而產 生14η (70毫克），為非晶質固體。 MS (ESI), m/z，相對強度 544 [(M+Na)+，30]，522 [(M+l)+，40]，422 (100). 步驟Μ ❹
將醇14η (30毫克，0.05毫莫耳）在CH2C12 (2毫升）中之溶液， 以Dess Martin試劑（30毫克，0.07毫莫耳）處理，並於室溫下攪 拌2小時。以Na2S203溶液（10%，10毫升）與飽和NaHC03溶液 (10毫升）使反應混合物淬滅，且於室溫下攪拌0.5小時。將 反應混合物以CH2C12(3 χ 10毫升）萃取。使有機層以MgS04 Q 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及以本身使用於進一步 反應。 MS (ESI), m/z，相對強度 552 [(M+l)+, 100]，248 (40).
按照類似步驟I (製備實例1)之程序，使用CH3COOH (20微 135510-2 -94- 200924790 升）與異氰基醋酸甲酯（20微升），使得自步驟Μ之化合物14ο 轉化成14ρ (40毫克），為非對映異構物之混合物。 MS (ESI)，m/z，相對強度 711 [(M+l)+，100]，240 (20).
將甲酯14ρ (80毫克，0.12毫莫耳）在THF (3毫升）、Η20 (3 毫升）及CH3OH (3毫升）中之溶液，以LiOH · Η20 (41毫克，1 毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。在反應完成後，以 HC1水溶液（15毫升）使其酸化，且以CH2C12(3 X 30毫升）萃取。 使合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，及在真空中濃 縮。使殘留物在真空中乾燥，且以本身使用，無需進一步 純化。 使此酸溶於CH2C12(2毫升）、DMF (2毫升）中，並以 〇 H-Phg-N(CH)2 · HC1 (40 毫克，0.2 毫莫耳）、NMM (40 毫克，0.4 毫莫耳）、HATU (68毫克，0.16毫莫耳）處理，且於(TC下攪 拌24小時。使黃色溶液在真空中濃縮，並以CH2C12 (75毫升） 稀釋。將有機層以飽和NaHC03水溶液、HC1水溶液及鹽水洗 滌。使反應混合物脫水乾燥（MgS04)，過滤，在真空中濃縮， 及以本身使用於下一步驟（90毫克）。
步驟P 135510-2 -95- 200924790
將醇14q (90毫克，0.11毫莫耳）在CH2C12(2毫升）中之溶液， 以Dess-Martin試劑（100毫克，0.24毫莫耳）處理，並於室溫下 攪拌2小時。將反應物以Na2S203水溶液（30毫升）與NaHC03 水溶液（各30毫升）稀釋，且以CH2C12(50毫升）萃取。將有機 0 層以飽和NaHC03、鹽水洗滌，以MgS04脫水乾燥，過濾， 在真空中濃縮，及藉層析純化（丙酮/己烷2:3)，而產生14 (22 毫克），為無色固體。 MS (ESI), m/z,相對強度 813 [(M+l)+, 100]，768 (20). 製備實例15
步驟A
在氮大氣下，於45毫升THF，二異丙基胺（4.70毫升，33.51 毫莫耳，2當量）與LiCl (4.26克，6當量）中，在-78°C下添加 nBuLi (20.4毫升，1.95當量）。10分鐘後，將la/30毫升THF之 溶液轉移至上述溶液，歷經10分鐘。20分鐘後，使褐黃色 135510-2 -96- 200924790 混合物溫熱至0°C。再20分鐘後，溶液變成不透明鮮明黃色， 並以逐滴方式添加4-碘基-1-丁烯（3.35克，1.1當量）。溶液變 得又較鮮明，且60分鐘後，添加115毫升1M HC1，以使反應 淬滅。移除THF，及添加150毫升EtOAc，以供萃取。將有機 層以115毫升1M HC1進一步洗滌。合併水層，且在0°C下， 藉由6M NaOH調整至pH 14。以二氯曱烷110毫升X 4進行萃 取。使有機層以碳酸鈉脫水乾燥。經過矽藻土過濾，及移 除溶劑，獲得4克油狀物，其係在靜置時變成固體。以5:5:90 〇 Et3 N/MeOH/DCM急驟式層析，提供2.63克純15a，57%產率（Rf= 0.64, 5:5:90 Et3N/MeOH/DCM)。 1H NMR (4:1旋轉異構物比例.*表示較少之旋轉異構物吸 收峰.CDC13) : 5 0.96* (d, 3H, J=6.7 Hz) 1.15 (d, 3H, J=6.9 Hz) 1.45- 1.55 (m, 2H) 2.05-2.20 (m, 2H) 2.80 (s, 3H) 2.92* (s, 3H) 3.55-3.60 (m, 2H) 4.00* (m, 1H) 4.35-4.45* (m, 1H) 4.60-4.65 (m, 2H) 4.92-5.02 (m, 2H) 5.68-5.80 (m, 1H) 7.20-7.40 (m, 5H). 13C NMR (CDC13) ： 5 11.26 15.68 31.11 35.67 47.17 52.22 76.92 ❹ 116.46 127.50 128.67 129.34 138.60 143.19 178.08 MS ： C]6H24N202 ： 277 (M+H)+ ； HRMS :計算值：277.1916 ;實測值：277.1917.
步驟B
HN^qooh 15b 將1.9克15a (6.88毫莫耳，1當量）以2N NaOH (7.0毫升，2當 135510-2 -97- 200924790 量）、7毫升水處理，並於100°c下回流3小時。使混合物冷 卻至室溫。添加2Q毫升DCM、10毫升水，且分離有機層。 以20毫升DCM洗滌水層。進一步以10毫升水洗滌合併之有 機層。將合併之水層以1.3毫升12N HC1處理。添加20毫升二 氧陸圜，並藉由添加飽和NaHC03將溶液調整至pH 8-9。添加 1.48克iBOC-OSU (1當量），且將混合物攪拌過夜。將溶劑體 積減少至一半10毫升水後，及添加10毫升DCM供萃取。然 後，將水層以12N HC1逐滴處理，直到其係沉澱（pH 2)為止。 Ο 以EtOAc 40毫升X2萃取，接著為MgS04脫水乾燥，及矽藻土 過濾，獲得1.52克無色油15b，90%產率。 NMR (CDC13)： 5 0.88 (d, 6H, J=6.6 Hz) 1.78-2.00 (m, 3H) 2.10-2.20 (m, 2H) 3.80-3.82 (m, 2H) 4.40 (m, 1H) 5.00-5.06 (m, 2H) 5.10 (m, 1H) 5.80 (m, 1H). 13 C NMR (CDCI3) ： (5 20.0 26.2 29.0 32.8 54.2 117.0 138.0 157.8 177.6. 對 ChHmNC^ 之 MS : 230 (M+H)+.
步驟C
將亞胺15c (942克，31.88毫莫耳，1當量）與Corey氏觸媒（/. Am. C/zem. Soc.，1997, 119, 12414) (1.93 克，0.1 當量）、氫氧化鉋 單水合物（53.55克，10當量）在150毫升DCM中混合。使溶液 冷卻至-60°C，接著於氮氣下添加5-碘基-1-戊烯（25克，4當 135510-2 -98- 200924790 量）。當添加100毫升乙醚時，將粗製物攪拌60小時。在以 水100毫升X 2與鹽水70毫升X 1洗滌後，使有機層以MgS04 脫水乾燥。矽藻土過濾，及移除溶劑，獲得粗製28.56克。 首先，使5.1克粗製物以純己烷，接著以1:40至1·.20 EtOAc/己 烷層析。獲得2.56克15d、5-碘基-1-戊烯及二苯曱酮之混合 物（1:2.5:0.8)。（15d : Rf= 0.39, 1:20 EtOAc/ 己烷）。
步驟D
Η
Boc-N^COOtBu 15d I5e 當TLC顯示起始物質消失時，將0.5克上文粗製15d (2.56 克）以4毫升HOAc/THF/水1:1:1處理90分鐘。添加兩全吸量管 之飽和NaHC03。添加10毫升水與20毫升己烷以供萃取。然 後，使水層再鹼化至pH 9-10。添加（Boc)20 (0.15克）與二氧陸 圜4毫升，且2.5小時後，移除溶劑，及將溶液之pH值調整 至3-4。以醚萃取，接著以1:10 EtOAc/己烷層析，獲得0.16克 〇 15e，48% 總產率，得自 15c。（Rf= 0.44, 1:10 EtOAc/ 己烷）。
步驟E
Boc—N、/COOtBu 15e
Boc-N^CHO 15f 於-78°C下，使4.88克15e (13.87毫莫耳）溶於20毫升甲苯中， 並以21毫升LiAlH4(lM，在Et20中，1.6當量）處理40分鐘。 使混合物溫熱至〇°C，且藉由EtOAc與20毫升5% NaHS04使反 應淬滅。以醚萃取，經過矽藻土過濾，及移除溶劑，獲得 135510-2 -99- 200924790 殘留物，使其以1/5 EtOAc/己烷層析。獲得2.8克所要之醛15f (Rf= 0.4)，伴隨著醇（1.43 克，Rf= 0.04)。後者可經由 Dess-Martin 反應轉化成醛。
步驟F
將1.26克15f (5.55毫莫耳，1當量）、異氰基醋酸曱酯（0.50 毫升，1當量）、醋酸(0.32毫升，1當量）在20毫升DCM中混
克 15g，51% 產率。（Rf= 0.29, 1:1 EtOAc/ 己烷）。 1H NMR (CDC13): d 1.42 (s，9H) 1.50-1.60 (m，2H) 1.99-2.20 (m，4H) 2.18 (s, 3H) 3.76與3.78 (兩個單峰，3H, 1:1非對映異構物）3.90-4.20 (m, 4H) 4.90-5.00 (m, 2H) 5.20 (br s, 1H) 5.70 (m, 1H) 6.62 (br s, 1H). 13 C NMR (CDC13) ： 5 21.93 26.26 29.46 31.25 34.41 41.99 52.53 53.50 75.57 80.41 115.74 139.14 156.28 168.91 169.38 170.79. 對C18H3QN207 之 HRMS :計算值：387.2131 (M+H)+ ;實測值 387.2133.
步驟G
將6毫升MeOH中之化合物15g (1.08克，2.8毫莫耳，1當 量）、60毫克K2C03 (0.15當量）於室溫下攪拌1小時，然後於 40°C下再2小時。移除固體，接著急驟式層析，獲得所要之 135510-2 100 200924790 產物15h，為白色固體（0.65克，68%產率）。 XH NMR (CDCI3)： δ 1.40 (s, 9H) 1.40-1.70 (m, 4H) 1.99-2.10 (m, 2H) 3.70 (s, 3H) 3.80 (br, 1H) 4.00-4.25 (m, 4H) 4.90-5.00 (m, 2H) 5.10 (br s, 1H) 5.30 (m, 1H) 5.78 (m, 1H) 7.40 (br s, 1H). 13 C NMR (CDCI3) ： 5 26.83 29.48 30.76 34.53 42.03 53.51 54.95 75.05 81.07 115.76 139.30 157.92 170.84 174.16. C]6H28N206 ： 345 (M+H)+. HRMS :計算值：345.2026 ;實測值：345.2033. ❹步驟Η
15h 15i 當固體沉澱形成時，將化合物15h (0.39克，1.13毫莫耳） 與二氧陸園中之4M HC1 (4毫升）在室溫下一起攪拌2小時。 移除溶劑，並添加20毫升DCM。利用Hunig氏鹼調整pH值至 7。然後移除溶劑，且將殘留物以10毫升THF、Boc-Pro-OH (0.73 〇 克，3當量）、HATU (1.29克，3當量）、Hunig氏驗（1.18毫升， 6當量）及1毫升DMF處理。在室溫下攪拌7小時後，於真空 中移除溶劑。使殘留物溶於20毫升EtOAc中，並以10毫升飽 和NaHC03、10毫升0.5M HC1兩次、水20毫升及鹽水5毫升洗 滌，層析提供 0.68 克 15i (Rf= 0.31，在 DCM 中之 5% MeOH)。
135510-2 • 101 - 200924790 將15i以2毫升DCM、3毫升在二氧陸圜中之4M HC1處理1 小時。添加30毫升DCM，接著在0°C下以Hunig氏鹼中和。 移除溶劑，並使粗製物溶於5毫升DCM、10毫升THF中。於 添加15b (0.26克，1當量）、HATU (0.43克，1當量）及Hunig氏 鹼（0.41毫升，2.1當量）後，並攪拌4小時，移除溶劑，及添 加30毫升EtOAc。接著，將溶液以10毫升飽和NaHC03、10 毫升1M HC1、10毫升0.5M HC1、水20毫升、鹽水5毫升洗滌， 層析獲得所要之產物15j (0.3克，48%，得自15h)。 © 13 C NMR (CDC13) ： 5 20.20 26.26 26.72 29.18 29.55 30.58 33.25 34.60 41.95 48.57 52.90 53.00 53.40 54.68 61.56 72.34 75.68 115.64 116.73 138.07 139.33 157.47 171.04 171.15 173.06 174.23 C27H44N408 : 553 (M+H)+. HRMS :計算值：553.3237 ;實測值：553.3259.
步驟J
於氮氣下，將化合物15j (0.37克，0.67毫莫耳）以223毫升 DCM中之0.138克Grubbs氏觸媒（0.25當量）處理。在室溫下攪 拌65小時後，NMR顯示混合物含有S.M.15j、所要之產物15k (約 20% 產率）及 POCQH] ] )3。此三種之 Rf，在 5% HOAc/EtOAc 中，個別為0.34, 0.24, 0.74。重複急驟式層析可提供15k之純 試樣。 1H NMR (CDC13) ： (5 0.90 (d, 6H, J=6.6 Hz) 1.40-2.00 (m, 14H) 135510-2 -102- 200924790 2.05-2.50 (m, 3H) 3.60 (m, 1H) 3.70 (s, 3H) 3.75-4.00 (m, 3H) 4.00-4.20 (m, 2H) 4.50 (m, 1H) 4_70 (d，1H, J=7.5 Hz,非對映異構物）4.81 (d, 1H, J=7.9 Hz,另一種非對映異構物）5.38 (m, 1H) 5.58 (m, 1H) 5.65 (br s, 1H) 7.20 (d, 1H, J=7.0 Hz) 7.38 (d, 1H, J=7.1 Hz). 13 C NMR (CDC13) ： (5 20.26 23.05 26.54 27.02 27.67 27.73 29.21 31.06 34.03 41.97 48.71 52.40 52.80 53..53 60.54 72.43 75.08 130.44 130.56 157.02 171.13 172.01 173.13 173.38. LC/MS : Tr = 5.11分鐘（梯度液A (乙腈）/B (具有0.1% TFA之 O 水）：從 5% A/B 至 95% A/B，在 10 分鐘内）C25H40N4〇8 : 525 (M+l)+
HRMS :計算值：525.2924 ;實測值：525.2908. 步驟K
當TLC顯示S.M完全消失時，將5毫升MeOH中之化合物15k ® (92毫克，0_18毫莫耳，1當量）、60毫克K2C03(2.5當量）於40 °C下攪拌2小時。於移除溶劑後，添加44毫升在DCM中之 0.01M HC1 (2.5當量），以使溶液中和。移除溶劑，接著添加 10 毫升 THF、1 毫升 DMF、PhG-O-tBu (HC1 鹽，51 毫克，1.2 當 量）、80毫克HATU (1.2當量）、0.11毫升Hunig氏驗（3.5當量）。 將混合物攪拌12小時。在移除溶劑後，直接層析提供產物 151 (97 毫克，79% 產率，得自 15j . Rf= 0.32, 5% MeOH/DCM)。 XH NMR (CDCI3)： δ 0.90 (d, 6H, J=6.6 Hz) 1.30 (s, 9H) 1.40-2.00 (m, 135510-2 -103 - 200924790 14H) 2.15-2.20 (m, 1H) 3.60 (m, 1H) 3.75-3.90 (m, 3H) 4.00-4.09 (m, 1H) 4.10-4.35 (m, 2H) 4.50 (m, 1H) 4.62 (d, 1H，J=7.5 Hz,非對映異構物） 4.72 (d，1H，J=7.9 Hz,另一種非對映異構物）5.20-5.38 (m, 1H) 5.44 (d, 1H, J=6.6 Hz) 5.50 (m, 1H) 5.98 (m, 1H) 7.30 (m, 5H) 7.45 (d, 1H, J=7.0 Hz) 7.55 (d, 1H, J=7.1 Hz) 7.70 (br s, 1H). 13C NMR (CDC13) : 5 20.30 23.35 26.38 26.78 27.29 28.02 29.18 31.42 34.89 43.97 48.70 51.90 52.93 58.22 60.40 72.44 74.96 75.93 83.80 120.88 128.10 128.12 129.63 129.70 130.33 137.74 157.20 169.32 170.69 173.70 174.47. LC/MS : Tr = 6.61分鐘（梯度液A (乙腈）/B (具有0.1% TFA之 水）：從 5% A/B 至 95% A/B，在 10 分鐘内）.MS : C36H53N509 : 700 (M+H)+ .
步驟L
Q 於室溫下，將化合物151 (90毫克，0.13毫莫耳）以10毫升 DCM中之109毫克Dess-Martin試劑（2當量）處理12小時。於移 除溶劑後，以7:3 EtOAc/己烷直接層析，提供15m (40%)，為 白色固體。 XH NMR (CDC13)： 5 0.95 (d, 6H, J=6.6 Hz) 1.40 (s, 9H) 1.50-2.10 (m, 14H) 2.20-2.30 (m, 1H) 3.60 (m, 1H) 3.75-3.90 (m, 3H) 3.93 (dd, 1H, J=5.9, 16.8 Hz) 4.10 (m, 1H) 4.50 (dd, 1H, J=8.0, 13.9 Hz) 4.80 (d, 1H, J=6.6 Hz) 5.20-5.40 (m, 3H) 5.41 (d, 1H, J=6.6 Hz) 5.60 (dd, 1H, J=7.3, 10 135510-2 104 200924790
Hz) 6.82 (d, 1H, J=7.3 Hz) 7.30 (m, 5H) 7.50 (m, 1H) 7.80 (d, 1H, J=6.7 Hz). 13C NMR (CDC13) : 5 20.29 23.65 26.34 26.75 29.02 29.20 30.37 30.95 31.56 35.07 43.71 48.83 52.95 54.20 58.14 60.23 72.54 84.15 128.03 129.41 129.68 129.87 130.62 137.60 156.99 160.33 167.41 171.37 173.84 187.26 196.36. LC/MS : Tr = 6.81分鐘（梯度液A (乙腈）/B (具有0.1% TFA之 水）：從 5% A/B 至 95% A/B，在 10 分鐘内）· MS : C36H5iN509 : 〇 698 (M+H)+ HRMS :計算值 698.3765 實測值 698.3762. 步驟Μ
於氫氣瓶下，將化合物15m (4毫克）以5毫升MeOH、2毫 克Pd-C處理1.5小時。經過矽藻土過濾溶液。使濾液在真空 Ο 中乾燥，且NMR顯示15之唯一形成。 1H NMR (CDC13)： δ 0.95 (d, 6H, J=6.6 Hz) 1.40 (s, 9H) 1.50-2.10 (m, 16H) 2.20-2.30 (m, 1H) 3.60 (m, 1H) 3.75-3.90 (m, 3H) 3.93 (dd, 1H, J=5.9, 16.8 Hz) 4.10 (m, 1H) 4.50 (dd, 1H, J=8.0, 13.9 Hz) 4.80 (d, 1H, J=6.6 Hz) 5.30 (m, 1H) 5.41 (d, 1H, J=6.6 Hz) 5.55 (d, 1H, J=7.0 Hz) 6.82 (d, 1H, J=7.3 Hz) 7.30 (m, 5H) 7.50 (m, 1H) 7.80 (d, 1H, J=6.7 Hz). LC/MS : Tr = 5.26分鐘（梯度液A (乙腈）/B (具有0.1% TFA之 水）：從 5% A/B 至 95% A/B，在 10 分鐘内）.MS : C36H53N5〇9 : 135510-2 105 - 200924790 700 (M+H)+.
HRMS :計算值：700.3922 ;實測值：700.3925. 製備實例16
將醛14〇 (590毫克，1.15毫莫耳）在CH2C12(10毫升）中之溶 液，以Et3N (240毫克，2.4毫莫耳）與2-氰化丙醇（240毫克，2.82 毫莫耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，及在真 空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/己烧1:4)，而 產生16a (600毫克），為無色固體。
MS (ESI)，m/z，相對強度 569 [(M+Na)+，20]，547 [(M+l)+, 40]，447
(100). 步驟B
v
將氰醇16a (600毫克，1.1毫莫耳）在DMSO (10毫升）中之溶 液，以H202(35%，1.5毫升）與K2C03(252毫克，1.83毫莫耳） 135510-2 -106- 200924790 處理，並於室溫下攪拌15小時。將反應混合物以CH2C12(200 毫升）稀釋，且以Na2S203水溶液（10%，50毫升）與鹽水（30毫 升）洗滌。使反應混合物脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空 中濃縮，及直接使用於氧化作用，無需進一步純化。 將羥基醯胺在曱苯/DMSO中之溶液（2:1，15毫升）以EDCI (1.9克，10.00毫莫耳）與Cl2CHCOOH (317毫克，2.49毫莫耳） 處理，並於0°C下攪拌3小時。將反應混合物以CH2C12(300毫 升）稀釋，且以飽和NaHC03水溶液（2 X 100毫升）與鹽水（100 〇 毫升）洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，濃縮，及藉層析 純化（Si02，丙酮/己烷1:5)，而產生16，為無色固體。 MS (ESI), m/z，相對強度 617 [(M+CH3OH+Na)+, 20]，595 [(M+CH3OH+l)+, 40], 507 [(M+l)+, 20], 463 (100). 製備實例17
步驟A
將16 (300毫克0.54毫莫耳）在HCOOH (10Ό毫升）中之溶液， 於室溫下攪拌2小時，及在真空中濃縮。使殘留物在真空中 135510-2 -107- 200924790
乾燥，並使用於進一步反應，無需進一步純化。 步驟B
Me^Me A
將17a (100毫克）在DMF/CH2C12(1:1，3毫升）中之溶液，以 t.BuNCO (50微升）與NMM (52毫克，0.52毫莫耳）處理。將反 應混合物在室溫下攪拌16小時，及在真空中濃縮。並以 CH2C12(60毫升）稀釋，且以HC1水溶液（1M , 2 X 30毫升）洗滌， 乾燥，在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/ 己烷1:2)，而產生17 (34毫克），為無色固體。 MS (ESI), m/z，相對強度 584 [(M+l)+，30], 463 (100). 製備實例18
步驟A
將17a (100毫克）在DMF/CH2C12(1:1，3毫升）中之溶液，以 第三-丁基甘胺酸之第三丁酯之異氰酸酯（100毫克，0.46毫莫 耳）與NMM (52毫克，0.52毫莫耳）處理。將反應混合物在室 135510-2 -108- 200924790 溫下攪拌16小時，及在真空中濃縮，並以CH2C12(60毫升） 稀釋，且以HC1水溶液（1M，2 X 30毫升）洗滌，乾燥，在真 空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si〇2，丙酿I /己烧1:2)，而 產生18 (42毫克），為無色固體。 MS (ESI), m/z,相對強度 698 [(M+Na)+，40]，676 [(M+l)+, 100], 463 (20). 製備實例19
步驟A
將17a (100毫克）在DMF/CH2C12(1:1，3毫升）中之溶液，以 曱基-環己胺之異氰酸酯（100微升）與NMM (52毫克，0.52 毫莫耳）處理。將反應混合物在室溫下攪拌16小時，及在真 空中濃縮，並以CH2C12(60毫升）稀釋，且以HC1水溶液（1Μ， 2 X 30毫升）洗滌，乾燥，在真空中濃縮。使殘留物藉層析 純化（Si02，丙酮/己烷1:2)，而產生20 (21毫克），為無色固 體。 MS (ESI), m/z，相對強度 624 [(M+Na)+, 30], 602 [(M+l)+, 15]，463 (100), 449 (20), 129 (30). 135510-2 -109- 200924790 製備實例20
步驟A
BocHN 、ch3 Ο
Λ 20a
-BocHN
o ch3 使非環狀二烯20a (6.00克，10.954毫莫耳）在無水甲苯(500 毫升）中之溶液以氬脫氣0.5小時，以Grubbs觸媒（1.35克，1.643 毫莫耳）處理，並在60°C下加熱12小時。使反應混合物在真 空中濃縮，及藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷1:3)，而產生20b， 為褐色泡洙物。 ❹
步驟B
〇 ch3
〇 ch3 將烯烴20b (5.00克毫克，0.865毫莫耳）在曱醇（100毫升）中 之溶液，以Pd/C (1.2克，5% w/w)處理，並於50 psi下氫化3 小時。使反應物經過矽藻土填充柱過濾，及在真空中濃縮。 將殘留物藉層析，使用10-40%之THF/己烷梯度液純化，單 135510-2 -110- 200924790
離20c (3.00克），為無色固體。 步驟C
20c 20d 將酯20c (3.00克，5.75毫莫耳）在無水THF (50毫升）中之溶 液，以LiBH4(在THF中之2M溶液，3.5毫升，6.90毫莫耳）處 q 理，並於室溫下攪拌3小時。藉TLC (EtOAc/己烷1:2)追蹤反 應。以曱醇（2毫升）使反應淬滅，且以HC1水溶液（1M，30 毫升）稀釋，並於CH2C12(3 X 100毫升）中萃取。將合併之有 機層以飽和NaHC03水溶液（30毫升）、鹽水洗滌，脫水乾燥 (MgS04)，過渡，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si〇2，丙酮 /己烷1:2)，而產生20d (2.21克），為無色固體。MS (m/z，相對 強度）518 [(M+K)+，15]，480 [(M+H)+，75]，380 (100).
步驟D
20d 20e 將醇20d (2.2克，4.58毫莫耳）在無水CH2C12(50毫升）中之溶 液，以Dess-Martin試劑（2.91克，6.880毫莫耳）處理，並於室溫 下攪拌2小時。將反應混合物以Na2S203水溶液（5%，50毫升） 與飽和NaHC03水溶液（50毫升）稀釋，並於室溫下攪拌15分 135510-2 -111 - 200924790 鐘。以CH2C12 (500毫升）萃取反應混合物，且使合併之有機 層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，而產生粗製20e (1.9克），將其使用於下一反應，無需進一步純化。
步驟E
使粗製20e (1.00克，2.094毫莫耳）在CH2C12(15毫升）中之溶 液冷卻至0°C，並以2-氰化丙醇（356毫克，4.187毫莫耳）與三 乙胺（424毫克，4.187毫莫耳）處理。將反應混合物在0°C下攪 拌12小時，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si02， EtOAc/己烷1:5— 1:1)，而產生20f (500毫克），為無色油。
步驟F
將氰醇20f (500毫克，〜1.00毫莫耳）在DMSO (5毫升）中之溶 液，以H202(5毫升）、K2C03(276毫克，2.00毫莫耳）處理， 並於室溫下攪拌12小時。將反應混合物以Na2S203水溶液 (5%，100毫升）稀釋，且以CH2C12(2 X 100毫升）萃取。使合 併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，而產 生20g，將其以本身使用於進一步氧化作用，無需純化。 135510-2 -112- 200924790 步驟G :
20g 20h 將羥胺20g (850毫克，1.626毫莫耳）在甲苯（5毫升）與DMSO (5毫升）中之溶液，以EDCI (3.117克，16.26毫莫耳）與二氯醋 酸（1.048克，8.13毫莫耳，698微升）處理，並於室溫下攪拌3 小時。將反應混合物以CH2Cl2 (200毫升）稀釋，且以餘和 NaHC03水溶液（200毫升）、HC1水溶液（1M , 200毫升）、鹽水 (30毫升）洗滌，脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:2)，而產生20h (300毫克）， 為無色固體。 步驟Η :
20h 20i
將Boc保護酮醯胺20h在曱酸（5毫升）中之溶液，於室溫下 攪拌3小時，並在真空中濃縮，及以本身使用於下一步驟， 無需進一步純化。
135510-2 -113- 200924790 將胺20i (40毫克，0.1毫莫耳）在二氣甲烷（3 〇毫升）中之溶 液’以NMM (30毫克’ 0.3毫莫耳）處理，並冷卻至〇。〇。添 加異氰酸酯在CF^Cl2中之溶液，且將反應混合物在室溫下 攪拌1.5小時。以二氣曱烷（6〇毫升）稀釋反應混合物，並以 HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS〇4)脫水乾 燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si〇2，丙酮/己烷 20—50%)，而產生20,為無色固體。Ms (m/z，相對強度）588 [(M+H)+，100]，421 (40).對 C3 丨 H5 〇 N5 〇6 之 HRMS (ESI)計算值： © 588.3761 (M+H)+ ;實測值：588.3751. 製備實例21 :
20i 21 將胺20i (40毫克，0.1毫莫耳）在二氯甲烷(3 〇毫升）中之溶 液’以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至〇〇c。添 加2-環己基-μ環丙基_2-異氰酸基乙酮（0,15毫莫耳）在CH2Cl2 中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌15小時。以二氣 甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫 升）洗滌。使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過濾，在真空中 135510-2 -114- 200924790 濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷20— 50%)，而產生21， 為無色固體。 製備實例22
步驟A :
將醛20e (100毫克，0.210毫莫耳）在二氣曱烷(4毫升）中之 溶液，以烯丙基異氰化物（28.01毫克，0.411毫莫耳）與醋酸 處理，並於室溫下攪拌12小時。使反應物在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷1:4— 1··1)，獲得22a (75毫克）， 為無色固體。MS (m/z,相對強度）605 [(M+H)+，100]，505 (98). 步驟B :
BocHN
22a
BocHN
將22b (275毫克，0.454毫莫耳）在曱醇（4毫升）、THF (4.0毫 升）及水（4.0毫升）中之溶液，以LiOH · H20 (22毫克，0.55毫 135510-2 -115 - 200924790 莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。將反應混合物以hci 水溶液（1Μ，30毫升）稀釋，且在CH2C12(2 X 40毫升）中萃取。 使合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮， 及以本身使用於下一步驟，無需進一步純化。 步驟C :
將醇22b (300毫克，0.534毫莫耳）在無水CH2C12(15毫升）中 之溶液，以Dess-Martin試劑（453毫克，1.06毫莫耳）處理，並 於室溫下攪拌2小時。將反應混合物以Na2S203水溶液（5%， 30毫升）與飽和NaHC03水溶液（30毫升）稀釋，並於室溫下攪 拌15分鐘。將反應混合物以CH2C12 (3 X 50毫升）萃取，且使 合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及 藉層析純化（Si02，丙酮/己烷0:1— 1:1)，而產生22，為無色 © 固體。MS (m/z,相對強度）561 [(M+H)+，100]，461 (99).對 C3〗H50N5O6iHRMS (ESI)計算值：588.3761 (M+H)+ ;實測值： 588.3751. 製備實例23
135510-2 -116- 200924790 步驟A :
23a 23b 於0°C下，將胺23a (900毫克，3.40毫莫耳）在CH2C12中之溶 液，以NMM (511毫克，5.10毫莫耳）與氯化曱烷磺醯（585毫 克，5.10毫莫耳）處理，並於0°C下攪拌12小時。將反應混合 物以CH2C12 (300毫升）稀釋，且以過量HC1水溶液（1M，500毫 升）洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃 ❹ 縮，及藉層析純化（Si02，己烷/EtOAc 1:9— 1:1)，而產生甲基 石黃醯胺23b (1.00克）。 步驟Β :
23b 23c 將曱烷磺醯胺23b (1.0克，2.9毫莫耳）在甲醇（30毫升）中之 溶液，以纪（200毫克，10% wt/C)處理，並於60 psi下氫化3小 © 時。使反應混合物經過矽藻土填充柱過濾，在真空中濃縮 濾液。將殘留物直接使用於進一步反應，無需進一步純化。 於〇°C下，將去除保護之胺在CH2C12(10毫升）、飽和NaHC03 水溶液（10毫升）中之溶液，以光氣（5毫升，在甲苯中之15% 溶液）處理，並於0°C下攪拌2小時。以CH2C12(50毫升）稀釋 反應混合物，且將有機層以冷NaHC03水溶液洗滌。使有機 層脫水乾燥（MgS04)，過濾，及進一步以10毫升曱苯稀釋， 使二氯曱烷層濃縮，並以23c之溶液使用。 135510-2 200924790
將胺20i (40毫克，0.1毫莫耳）在二氯甲烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸S旨23在CH2 Cl2中之溶液，且將反應混合物在室溫 0 下攪拌1.5小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並 以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水 乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/ 己烷 50%)，而產生 23。MS (m/z，相對強度）693 [(M+K)+，10], 677 [(M+Na)+，20]，655 [(M+H)+, 100]，449 (30), 421 (30);對 C3 ] H54N6〇7SNa 之 HRMS (ESI)計算值 677.3672 (M+Na)+ ;實測 值：677.3685. 製備實例24
135510-2 -118- 200924790 將Boc保護酮醯胺22 (220毫克，0.39毫莫耳）在甲酸（5毫 升）中之溶液，於室溫下攪拌3小時，並在真空中濃縮，及 以本身使用於下一步驟，無需進一步純化。 步驟B :
將胺24a (40毫克，0.1毫莫耳）在二氣甲烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸酯在CH2C12中之溶液，且將反應混合物在室溫下 攪拌1.5小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾 燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷 20— 50%)，而產生 24 (27 毫克）MS (m/z,相對強度）734 [(M+K)+， 10]，695 [(M+H)+，100]，461 (20)，443 (20);對 C3 4 H5 9 N6 07 S 之 HRMS (FAB)計算值 695.4166 (M+H)+ ;實測值：695.4161. 製備實例25
步驟A :
23a 25a 135510-2 -119 200924790 於〇°C下，將胺23a (900毫克，3.40毫莫耳）在CH2C12中之溶 液，以NMM (511毫克，5.10毫莫耳）與氯化嘧吩磺醯（928毫 克，5.10毫莫耳）處理，並於0°C下攪拌12小時。以CH2C12(300 毫升）稀釋反應混合物，且以過量HC1水溶液（1M，500毫升） 洗蘇。使有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si〇2，己炫/EtOAc 1:9— 1:1)，而產生績醯胺25a (1.00克），為無色固體。 步驟B :
25a 25b 於〇°C下，將Cbz-保護化合物25a (1.00克，2.118毫莫耳）之 溶液，以TFA (30毫升）與硫化二甲烷(7.78毫升）處理，並於 室溫下攪拌3小時。使反應混合物在真空中濃縮，及以NaOH 水溶液（100毫升）稀釋。將胺以二氯曱烷(2 X 100毫升）萃取， 且使合併之有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃 Q 縮，及產生25b (800毫克），將其使用於進一步反應，無需 純化。MS (m/z,相對強度）277 [(M+H)+，100]，190 (50). 步驟C :
25b 25c 於〇°C下，將去除保護之胺25b (800毫克，2.9毫莫耳）在 CH2C12(10毫升）、飽和NaHC03水溶液（10毫升）中之溶液，以 光氣（5毫升，在曱苯中之15%溶液）處理，並於0°C下攪拌2 135510-2 -120- 200924790 小時。以CH2C12(50毫升）稀釋反應混合物且將有機層以冷 NaHC03水溶液洗蘇。使有機層脫水乾燥（MgS04),過濾，及 進一步以10毫升甲苯稀釋，使二氣曱烷層濃縮，並以25c之 溶液使用。 步驟D :
將胺24a (40毫克，0.1毫莫耳）在二氯甲烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸酯在CH2C12中之溶液，且將反應混合物在室溫下 攪拌1.5小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾 燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷 20- 50%)，而產生25 (39毫克），為無色固體。MS (m/z，相對 © 強度）801 [(M+K)+，10]，763 [(M+H)+，100]，461 (15)，277 (20);對 C37H58N607S2Na 之 HRMS (ESI)計算值785.3706 (M+Na)+ ;實測 值：785.3706. 製備實例26
135510-2 121 26 200924790 步驟A :
將胺20i (40毫克，0.1毫莫耳）在二氣曱烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸酯在CH2 Cl2中之溶液，且將反應混合物在室溫下 攪拌1.5小時。以二氯曱烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 HC1水溶液（1M ’30毫升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾燥， 過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮/己烷20— 50%)，而產生26，為無色固體（31毫克）。MS (m/z，相對強度） 761 [(M+K)+，10]，720 [(M+H)+，100]，421 (20);對 C34H54N607S2Na 之 HRMS (ESI)計算值 745.3393 (M+Na)+ ;實測值：745.3396. 製備實例27
步驟A :
27b 將酸27a (100毫克，0.385毫莫耳）在甲苯(5毫升）中之溶液， 135510-2 -122· 200924790 以 DPPA (116.5 毫克，0.425 毫莫耳）與 Et3N (42.5 毫克，0.425 毫 莫耳）處理，並於回流下攪拌1.5小時。將反應混合物以飽 和NaHC03 (30毫升）稀釋，且於CH2C12 (2 X 20毫升）中萃取。 將合併之有機層以NaHC03水溶液（30毫升）、鹽水（30毫升） 洗滌，脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及以異氰 酸酯在曱苯中之溶液使用。 步驟B :
將胺24a (40毫克，0.1毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸酯27b (3當量）在CH2C12中之溶液，且將反應混合物 在室溫下攪拌1.5小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合 物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS04) Q 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙 酮/己烷20— 50%)，而產生27，為無色固體。MS (m/z，相對 強度）720 [(M+H)+，85]，461 (100);對 C37H6iN507SNa2HRMS (ESI)計算值 742.4189 (M+Na)+ ;實測值：742.4200. 製備實例28
135510-2 -123- 200924790
將胺20i (40毫克，0.1毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。添 加異氰酸酯27b (3.00當量）在CH2C12中之溶液，且將反應混合 ❹ 物在室溫下攪拌1.5小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混 合物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以 (MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化 (Si02，丙酮/己烧20— 60%)，而產生28 (29毫克），為無色固 體。MS (m/z，相對強度）718 [(M+K)+，10], 702 [(M+Na)+，20]，680 [(M+H)+, 80]，421 (100);對 C3 4 H5 7 N5 07 SNa 之 HRMS (ESI)計算值 702.3876 (M+Na)+ ;實測值：702.3889. 製備實例29
步驟A :
135510-2 -124- 200924790 將胺24a(50毫克，0_1毫莫耳）在二氯甲烷（3〇毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，〇.3毫莫耳）處理，並冷卻至〇£>c。添 加異氰酸酯在Ct^Cl2中之溶液，且將反應混合物在室溫下 攪拌1.5小時。以二氣曱烷（6〇毫升）稀釋反應混合物，並以 HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS〇4)脫水乾 燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（si〇2，丙酮/己烷 20— 50%)，而產生29，為無色固體（41毫克）。MS (m/z，相對 強度）628 [(M+H)+，100], 129 (35). 〇 製備實例30
將胺24a (50毫克，0.1毫莫耳）在二氣甲烷（3 〇毫升）中之溶 液，以NMM (30毫克，0.3毫莫耳）處理，並冷卻至〇。〇。添 加異氰酸酯（3.0當量）在CH2C12中之溶液，且將反應混合物 在至溫下授拌1.5小時。以二氯甲烷（6〇毫升）稀釋反應混合 物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。使有機層以（MgS〇4) 135510-2 -125- 200924790 脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（si〇2，丙 酮/己烷20-> 50%)，而產生30，為無色固體。MS (m/z，相對 強度）668 [(M+H)+, 100]，169 (50)，128 (80). 製備實例31:下式之製備：
步驟A :
按製備實例1步驟C，使Boc-Glu-OBn31a (1.8克，5.36毫莫耳） 與胺Id (1克，4.87毫莫耳）之溶液反應，並藉矽膠層析純化 (10% 至 25% EtOAc/ 己烷），獲得 31b (1.28 克）。 步驟B :
將芊基酯31b (1.25克，2.56毫莫耳）之溶液以EtOH中之10% 135510-2 -126- 200924790
Pd/C處理，並氫化（1大氣壓，室溫），歷經12小時。使反應 混合物經過矽藻土填充柱過濾，及在真空下濃縮，而得 (997毫克），將其使用於下一反應，無需進一步純化。
步驟C
® 使酸31c(20.4克，48/7毫莫耳）在thf_毫升）中之溶液冷 卻至（TC，並以EW (7.47毫升’ 53.6毫莫耳）與氣甲酸乙酿 (4.89¾升，51.2毫莫耳）處理，且攪拌2小時。過濾所形成之 白色沉殿物，及以冷THF洗蘇。使遽液冷卻至叱，並添加 NaBH4(2.39克，63.4毫莫耳）。逐滴添加Me〇H (2〇毫升），歷 經1小時’且再攪拌2.5小時。在真空下移除溶劑，添加CH2(^ ’及以水、鹽水洗滌，並以Na2S〇4脫水乾燥。過濾犯與， 及將溶劑移除至乾酒。使殘留物藉石夕膠層析純化（5〇%至9〇% EtOAc/ 己烷），獲得 31d (8.15 克）。 步驟D :
於室溫下’將醋3ld(8克，20.8毫莫耳^Me〇H(i2〇毫升） 與％ Ο (24毫升）中之溶液，以U0H · % 〇 (2说克，位5毫莫耳） 135510-2 -127 - 200924790 處理12小時。將溶劑在真空 、 移除至乾，固。添加CH2 Cl2， 並與1N.HC1(72.9毫莫耳）—起擾掉5分鐘。分離CH仰層，以 鹽水洗蘇’及以Na2抑脫水乾n慮Na2SQ4，且將溶劑 移除至乾涸，獲得白色固體31e (7.65克）。 步驟E : ch3 ch3
OH HO
ch3 NHCbz
使酸31e在無水DMF (75毫升）與無水CH2Cl2(75毫升）中之 浴液冷卻至〇C，並與HOOBt (3.68克，22.5毫莫耳）、NMM (6 77 毫升，61.6毫莫耳）及EDCI (5·11克，26.7毫莫耳）一起攪拌5 分鐘。添加H-Lys(Z)-OMe.HCl (7.13 克，21.5 毫莫耳;），並在 〇 C下搜拌3.5小時。在5°C下保持反應12小時，然後移除 CH2C12 ’ 添加 EtOAc，及以飽和 NaHC03、5% H3P〇4、鹽水洗 滌’並經過NasSO4過濾。將溶劑在真空下移除至乾涸，獲 得 31f (12.7 克）。
步驟F
ch3 CH
HO
NHCbz
將31f (5.5克，8.51毫莫耳）之溶液以EtOH中之l〇% Pd/C (10〇 135510-2 -128· 200924790 毫升）處理’並氫化（1大氣壓，室溫），歷經12小時。使反 應混合物經過矽藻土填充柱過濾，及在真空下濃縮，而得 31g (4.25 克）。 步驟G :
將胺31g (4.25克，8.3毫莫耳）在無水CH2 (¾ (750毫升）中之 溶液與三乙胺（1.5毫升，10.7毫莫耳）及氣甲酸4-硝基笨西旨 (2.0克，9.96毫莫耳）’於室溫下一起攪拌5小時。將溶劑在 真空下移除至〜200毫升’然後以飽和NaHC03、水、5% H3P〇4、鹽水洗滌，並經過Na2S〇4過濾。過濾Na2S04，及移 除溶劑，獲得31h (5.82克）。 步驟Η :
於室溫下，將31h (5.8克’ 8.3毫莫耳）在無水THF (6〇〇毫升） 中之溶液，以60% NaH (996毫克，24.9毫莫耳）處理22小時。 藉由添加Η2 Ο (5毫升）使反應淬滅’接著為in.HCI (50毫升）， 歷經3分鐘。在真空下移除溶劑，添加CH2C12，並以5% 135510-2 129· 200924790 H3 P〇4、鹽水洗蘇，且經過Na2 S〇4過濾。過濾、Na2 S〇4，移除 溶劑，及使殘留物於矽膠管柱上，以0.25%至3% MeOH/CH2Cl2 層析，獲得31i (2.86克，64%產率）。
步驟I : Ο 按製備實例1步驟F，使31i (613毫克，1.13毫莫耳）之溶液 反應，並藉矽膠層析純化（3%至6% MeOH/CH2Cl2)，獲得醇31j (500毫克）。 步驟J :
© 按製備實例1步驟Η，使醇31j (480毫克，0.94毫莫耳）之溶 液反應，並藉矽膠層析純化（30%至60%丙酮/己烷），獲得醛 31k (383 毫克）。 步驟K :
ch3s^ch3
135510-2 -130· 200924790 按製備實例22步驟A，使醛31j (365毫克，0.71毫莫耳）之 溶液反應，並藉矽膠層析純化（30%至50%丙酮/己烷），獲得 31k (426 毫克）。 步驟L :
按製備實例22步驟B，使311 (357毫克，0.56毫莫耳）之溶 液反應，獲得31m (426毫克）。 步驟Μ :
按製備實例22步驟C，使31m (350毫克，0.59毫莫耳）之溶 液反應，並藉矽膠層析純化（30%至50%丙酮/己烷），獲得31 (335 毫克）。MS (ES) m/z 相對強度 492 [(M-BOC+l)+, 80] ; 592 [(M+l)+, 100].對 C29H46N508[M+1]+之計算值：592.3346;實測 值 592.3359. 製備實例32 :下式之製備： 135510-2 200924790
步驟A :
〇 將醛20e (200毫克，0.42毫莫耳）在二氯曱烷（10毫升）中之 溶液，以環丙基異氰甲烷（66.5毫克，4.11毫莫耳）與醋酸（50 毫克，0.82毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌12小時。使反應 物在真空中濃縮，及使殘留物藉層析純化（Si02，丙酮/己烷 1:9— 1:1)，獲得32a (230 毫克）。 MS (ES) m/z 相對強度 641 [(M+Na)+，70] ; 619 [(M+l)+, 100]，519 (50). 步驟B :
將醋酸酯32a (230毫克，0.371毫莫耳）在甲醇（5.0毫升）、THF (5.0毫升）及水（5.0毫升）中之溶液，以LiOH · H20 (25毫克， 0.55毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌1小時。以HC1水溶液 (1M，30毫升）稀釋反應混合物，且在CH2C12(2 X 50毫升）中 135510-2 -132- 200924790 萃取。使合併之有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中 濃縮，及以本身使用於下一步驟，無需進一步純化。 將醇在無水CH2C12中之溶液（15毫升）以Dess-Martin試劑 (237毫克，0.558毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。將 反應混合物以Na2S203水溶液（5%，30毫升）與飽和NaHC03水 溶液（30毫升）稀釋，且於室溫下攪拌15分鐘。以CH2C12 (3 X 50 毫升）萃取反應混合物，並使合併之有機層脫水乾燥 (MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮 〇 /己烷0:1— 1:1)，而產生32，為無色固體（275毫克）。 MS (ES) m/z 相對強度 629 [(M+ 異丁烯）+，40]，575 [(M+l)+，100], 475 (90). 類似程序係用以合成化合物：33與34，對步驟A使用環 丙基與乙基異氰化物··製備實例32 : 製備實例35 :下式之製備：
使32 (200毫克，0.39毫莫耳）藉由溶於甲酸20毫升中，且 靜置2小時而去除保護。在真空中濃縮反應混合物，而產生 135510-2 -133 - 200924790 35a，並使用於進一步反應，無需純化。 步驟B :
將胺35a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 0 添加異氰酸酯25c (1毫升，0.25毫莫耳）在CH2C12中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氣曱烷（150毫 升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。 使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si02，EtOAc/CH2Cl250— 100%)，而產生35，為無色 固體。 MS (ES) m/z 相對強度 799 [(M+Na)+，60] ; 777 [(M+l)+，100]. 製備實例36 :下式之製備：
步驟A : BocHN
❹ Υ 。 使33 (200毫克，0.39毫莫耳）藉由溶於甲酸20毫升中，且 135510-2 -134- 200924790
36a，並使用於進一步反應，無需純化 步驟B : 而產生
將胺36a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氯甲烷（3 〇毫升）中之 〇 溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷卻至ot。 添加異氰酸酯25c (1毫升’ 0·25毫莫耳）在CH2Cl2中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氣曱烧（15〇毫 升）稀釋反應混合物，並以HCI水溶液（1M，30毫升）洗務。 使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過濾、，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si〇2，EtOAc/CH2Cl2〇— 100%)，而產生36，為無色 固體。MS (ES) m/z 相對強度 785 [(M+Na)+，50]; 763 [(M+l)+, 1〇〇]; 593 (60). 〇 製備實例37:下式之製備：
步驟A : 135510-2 -135· 200924790
使34 (200毫克，0.39毫莫耳）藉由溶於曱酸20毫升中，且 靜置2小時而去除保護。在真空中濃縮反應混合物，而產生 37a，並使用於進一步反應，無需純化。
步驟B :
將去除保護之胺37a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氯甲烷（3.0 毫升）中之溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷 卻至0°C。添加異氰酸酯25c (1毫升，0.25毫莫耳）在CH2C12 中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氣 Q 曱烷（150毫升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫 升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中 濃縮，及藉層析純化（Si02，EtOAc/CH2Cl250— 100%)，而產生 37 ° MS (ES) m/z相對強度773 [(M+Na)+，100] ; 751 [(M+l)+, 70]. 製備實例38 :下式之製備： 135510-2 -136- 200924790
τ CH3^CH3 η
步驟A : ch3x/ch3
CH3v γη.
XH3
將去除保護之胺37a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氣曱烷（3.0 毫升）中之溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷 卻至0°C。添加異氰酸酯27b (1.5毫升，0.25毫莫耳）在CH2C12 中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氯 曱烷（150毫升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫 升）洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中 濃縮，及藉層析純化（Si02，EtOAc/CH2Cl250~> 100%)，而產生 38，為無色固體。MS (ES) m/z 相對強度 730 [(M+Na)+, 30] ; 708 [(M+l)+, 100] ； 409 (30). 製備實例39 :下式之製備：
步驟A : 135510-2 137- 200924790
將胺36a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氯甲烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 添加異氰酸酯27b (1毫升，0.25毫莫耳）在CH2C12中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氣曱烷（150毫 升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。 使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si02，EtOAc/CH2Cl250— 100%)，而產生 39。MS (ES) m/z相對強度742 [(M+Na)+, 70] ; 720 [(M+l)+，100] ; 461 (40).對 C37H62N507S [M+l]+ 之 HRMS 計算值：720.4370 ;實測值 720.4350. 製備實例40 :下式之製備：
將胺32a (70毫克，0.13毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (50毫克，0.5毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 135510-2 -138- 200924790 添加異氰酸酯27b (1毫升，0.25毫莫耳）在CH2C12中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。以二氯曱烷（150毫 升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，30毫升）洗滌。 使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si02，EtOAc/CH2Cl250— 100%)，而產生 40。 1 H NMR (DMSO, 500 MHz), (5 , 8.80 (t, 1H, J=6.0 Hz), 8.37 (d, 1H, J=9.5 Hz), 6.22 (d, 1H, J=8.8 Hz), 5.88 (s, 1H), 5.31 (dt, 1H, J=2.8 & 9.5 Hz), 4.35 (s, 1H), 4.28-4.22 (m, 1H), 3.85 (d, 1H, J=10 Hz), 3.76 (q, 1H, 〇 J=5.4 Hz), 3.59 (t, 1H, J=13.5 Hz), 3.41 (d, 1H, J=13.9 Hz), 3.07-2.95 (m, 2H), 2.22-2.15 (m, 2H), 1.69-1.00 (b, 23H), 1.25 (s, 9H), 0.99 (s, 3H), 0.99-0.70 (m, 1H), 0.88 (s, 3H), 0.42-0.38 (m, 2H), 0.21-0.18 (m, 2H). 13CNMR (DMSO, 125 MHz) 5 ,198.5, 172.1, 171.3, 162.0, 157.3, 60.5, 60.1, 54.4, 52.8, 51.5, 47.6, 43.8, 35.4, 35.1, 34.8, 32.3, 31.6, 31.4, 28.3, 28.0, 27.9, 27.3, 26.9, 26.6, 25.8, 25.6, 24.6, 23.4, 22.4, 21.5, 19.5, 13.7, 11.5. MS (ES) m/z 相對強度 756 [(M+Na)+, 45] ; 734 [(M+l)+, 100] ； 475 (20).對 C38H64N507S [M+l]+ 之 HRMS 計算值： ❹ 734.4526 ;實測值 734.4535. 製備實例41 :下式之製備： 135510-2
步驟A
200924790
使中間物22b (300毫克，0.54毫莫耳）之溶液溶於甲醇（25 毫升）中，並以10% Pearlman氏觸媒處理，且於50 psi下氫化4 小時。使反應混合物經過celite®填充柱過濾，及在真空中濃 縮，而產生經還原之產物，將其使用於進一步反應，無需 Q 純化。 將經還原醇在無水CH2C12中之溶液（5毫升）以Dess-Martin 試劑（350毫克，0.82毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌2小時。 將反應混合物以Na2S203水溶液（5%，30毫升）與飽和NaHC03 水溶液（30毫升）稀釋，並於室溫下攪拌15分鐘。以CH2C12(3 X 75毫升）萃取反應混合物，且使合併之有機層脫水乾燥 (MgS04)，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化（Si02，丙酮 /己烷0:1— 1:1)，而產生41 (270毫克），為無色固體。 ® 製備實例42 :下式之製備：
步驟A : 135510-2 *140- 200924790
使41藉由溶於甲酸20毫升中，且靜置2小時而去除保 屢在真空中濃縮反應混合物’而產生42a，並使用於進一 步反應，無需純化。 步驟B :
騎胺42a(100毫克，0.196毫莫耳）在二氯甲烷(3〇毫升）中之 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至〇乞。 添加異氰酸酯25c (1.5毫升，0.25毫莫耳，0.38毫莫耳）在曱苯 中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氯甲 〇 烷（100毫升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，50毫升） 洗滌。使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si〇2 ’醋酸乙酯/己烧i:i_> i:〇)，產生42 (65毫 克），為無色固體。1H NMR (DMSO, 500 ΜΗζ)，δ，8.71 (t, 1H, J=6.3 Hz)，8.36 (d，1H，J=9 Hz), 8.00 (dd，1H，J=1.3 & 5.0 Hz)，7.65 (dd，1H， J=1.3 & 2.5 Hz), 7.25 (dd, 1H, J=3.8 & 1.3 Hz), 6.15 (d, 1H, J=9.〇 Hz), 5.88 (d, 1H, J=l〇 Hz), 5.31 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.93 (d, 1H, J=l〇.5 Hz), 3.79-3.75 (q, 1H, J=5.0 Hz), 3.67-3.62 (dt, 1H, J=4.1 & 5.6 135510-2 14】- 200924790
Hz), 3.12-3.05 (m, 2H), 2.95-2.91 (m, 2H), 2.67 (s, 3H), 1.70-1.61 (m, 2H) 1.40-1.00 (b, 20H), 0.99 (s, 3H), 0.85 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 0.83 (t, 3H). 13C NMR (DMSO, 125 MHz) 5 , 198.5, 172.0, 171.7, 162.2, 158.3, 137.7, 133.9, 133.1, 129.0, 60.5, 55.8, 55.7, 52.7, 51.6, 51.5, 47.6, 36.0, 35.0, 32.2, 31.6, 31.3, 28.5, 27.9, 27.4, 27.1, 26.9, 26.7, 26.3, 24.4, 22.8, 22.3, 19.5, 13.7, 12.1. MS (ES) m/z相對強度 788 [(M+Na)+, 50] ; 765 [(M+l)+, 100]. 製備實例43 :下式之製備：
步驟A : ch3v/ch. π
、CHa CH3 ch3 r\ ch3^ch3
、ch3
將胺42a (100毫克，0.196毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 添加異氰酸酯27b (3毫升，0.1M溶液，0.3毫莫耳）在甲苯中 之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氣曱烷 (100毫升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，50毫升） 洗滌。使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮， 及藉層析純化（Si02，EtOAc/己烷1:1— 1:0)，產生43 (42毫克）， 為無色固體。NMR (DMSO, 500 MHz) 5 , 8.71 (t，1H，J=6.0 Hz), 135510-2 -142- 200924790 8.36 (d, 1H, J=9.0 Hz), 6.22 (d, 1H, J=8.5 Hz), 5.88 (s, 1H), 5.29 (dt, 1H, J=9.5 & 2.5 Hz), 4.34 (s, 1H), 4.23 (t, 1H, J=9.0 Hz), 3.86 (d, 1H, J=10.5 Hz), 3.76 (dd, 1H, J=5.0 & 5.5 Hz), 3.60 (d, 1H, J=13.5 Hz), 3.41 (d, 1H, J=13.5 Hz), 3.13-3.04 (m, 2H), 2.23-2.15 (m, 2H), 1.67-0.9 (bm, 30H), 1.25 (s, 9H), 0.99 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.83 (t, 3H, J=7.0 Hz). 13C NMR (DMSO, 125 MHz) <5 , 198.5, 172.1, 171.3, 162.1, 157.3, 60.5, 60.1, 55.8, 54.3, 52.8, 51.0, 47.6, 35.4, 35.1, 32.3, 31.7, 31.3, 28.3, 28.0, 27.9, 27.3, 26.9, 26.6, 26.2, 25.8, 24.6, 23.3, 22.8, 21.5, 19.5, 13.7, 12.2. MS (ES) m/z © 相對強度 744 [(M+Na)+, 40] ; 722 [(M+l)+, 100]· 製備實例44 :下式之製備：
步驟A :
於 〇°C 下，將去除保護之胺 44a (Busacca, C. Α·,; Grossbach，D·,; Spinelli, E. .· Asymmeio；) ,· 2000，9，1907)在 CH2Cl2(l〇 毫 升）、飽和NaHC03水溶液（10毫升）中之溶液，以光氣（5毫升， 在甲苯中之15%溶液）處理，並於0°C下攪拌2小時。以CH2C12 (50毫升）稀釋反應混合物，且將有機層以冷NaHC03水溶液 洗蘇。使有機層脫水乾燥（MgS04)，過遽，及進一步以10毫 升曱苯稀釋，使二氯曱烷層濃縮，及以溶液使用。 步驟B : 135510-2 -143- 200924790
將胺24a (100毫克，0.196毫莫耳）在二氯甲烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 添加異氰酸酯44b (2.5毫升，0.25毫莫耳）在曱苯中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氣曱烷（100毫
使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si02，醋酸乙酯/己烷1:1— 1:0)，產生44 (31毫克）， 為無色固體。MS (ES) m/z 相對強度 755 [(M+Na)+, 40] ; 733 [(M+l)+, 100], 製備實例45 :下式之製備：
步驟A :
於〇°C下，將胺45a* (2.00克，9.20毫莫耳）在CH2C12中之溶 液，以（C2H5)3N(3.7克，37毫莫耳）與氣化2-吡啶磺醯(2.4克， 11.2毫莫耳）處理，並於室溫下攪拌12小時。以CH2C12(300 毫升）稀釋反應混合物，且以過量NaHC03水溶液（1M，500 135510-2 200924790 毫升）洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中 濃縮，及藉層析純化（Si〇2，丙酮/己烷0:14 1:1)，而產生績 醯胺（2.3克）。使Boc-保護胺之溶液藉由溶於（2.1克，5.7毫莫 耳）HC1在二氧陸圜中之4M溶液内而去除保護，並於室溫下 攪拌2小時。在真空中濃縮反應混合物，及以本身使用於下 一步驟’無需進一步純化。 *藉由第三-白胺酸-N-曱基醯胺（TCI-Jpn)以二碳酸二第三 丁酯之保護，且以THF中之BHs.DMS後續還原作用（回流2 小時）而獲得。 步驟B :
於〇°C下，將胺45b (300毫克，1毫莫耳）在CH2C12(3亳升）、 飽和NaHC〇3水溶液（3毫升）中之溶液，以光氣（2 5毫升，在 曱苯中之15%溶液）處理’並於〇°c下攪拌2小時。以Ch2 α (30毫升）稀釋反應混合物’且將有機層以冷NaHC〇3水溶液 洗滌。使有機層脫水乾燥（MgSOO，過濾，及進一步以3毫 升曱笨稀釋，使二氣甲烧層濃縮，並以溶液使用。 步驟C :
將胺24a (100毫克，0.197毫莫耳）在二氯甲烷（3.〇毫升）中之 135510-2 -145- 200924790 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至此。 添加異氰酸酯45c (2.5毫升，0.25毫莫耳）在曱苯中之溶液， 且將反應混合物在室溫下授掉2小時。以二氣曱烧（1〇〇毫 升）稀釋反應混合物’並以HC1水溶液（1M，50毫升）洗條。 使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，及藉 層析純化（Si〇2，醋酸乙酯/己烷1:1-> 1:〇)，產生產物45，為 無色固體。將粗製混合物使用HPLC進一步純化，而產生純 產物 45 (27 毫克）。1 H NMR (DMSO, 500 MHz) <5 8.89 (t, 1H, J=7.〇 ® Hz), 8.72 (d, 1H, J=6.0 Hz), 8.37 (d, 1H, 1=10.5 Hz), 8.07 (t, 1H, J=9.0 Hz), 7.88 (d, 1H, J=9.0 Hz), 7.66 (dd, 1H, J=6.5 & 3.5 Hz), 6.12 (d, 1H, J=ll Hz), 5.84-5.75 (m, 2H), 4.27 (s, 1H), 4.22 (bt, 1H, J=11.5 Hz), 3.92 (d, 1H, J=13 Hz), 3.77-3.60 (m, 4H), 3.33 (bd, 1H), 3.06 (bt, 1H, J=12.5 Hz), 2.75 (s, 3H), 1.68-1.59 (m, 2H), 1.44-1.12 (m, 18H), 0.98 (s, 3H), 0.83 (s, 3H), 0.78 (s, 9H). 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ , 198.3, 172.1, ❹ 171.7, 162.1, 158.3, 157.1, 151.0, 139.6, 135.0, 127.9, 123.3, 116.4, 60.5, 55.8, 52.8, 52.2, 51.5, 36.4, 35.0, 28.0, 27.1, 26.9, 26.3, 19.5, 13.7. MS (ES) m/z 相對強度 780 [(M+Na)+，50] ; 758 [(M+l)+，100]. 製備實例46 :下式之製備：
135510-2 -146 - 200924790 於〇°C下，將（S)-第三-白胺醇（5.0克，42.7毫莫耳，Aldrich) 46a 在CH2C12(100.0毫升）中之溶液，以氣甲酸苄酯（6.7毫升，47.0 毫莫耳），接著以Hunig氏鹼(9.3毫升，53.3毫莫耳）處理。使 反應混合物溫熱至室溫，並攪拌過夜。以醋酸乙酯（500毫 升）稀釋反應混合物，以10% KH2P〇4、接著飽和NaHC03及鹽 水洗滌。使有機層以MgS04脫水乾燥，及濃縮，而產生保護 之白胺醇（10.7克，100%)，將其使用於進一步反應，無需無 任何純化。 於保護之白胺醇（粗製）（10.7克，42/7毫莫耳）在CH2Cl2 (100.0毫升）中之溶液内，在〇。〇下添加吡咬（20.0毫升）與氯化 曱烧磺醯（3.63毫升’ 47.0毫莫耳）。使反應混合物溫熱至室 溫’並攪拌過夜’濃縮，再溶於醋酸乙酯（5〇〇毫升）中，以 飽和NaHC〇3與鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS〇4)，濃縮， 及在Si〇2上藉急驟式層析，使用醋酸乙酯/己烷（1:4)純化， 而產生 46b (14.0 克，1〇〇%)。 步驟B :
將46b (3.1克，9.9毫莫耳）在甲苯(72毫升）中’含有水(4〇〇 微升）之溶液，以（C4H9)4NBr (582毫克，1.8毫莫耳）、K2C03 (2.72克，1.97毫莫耳）及2-羥基吡啶（937毫克，9.85毫莫耳）處 理。使反應混合物回流過夜，並授拌，過濾，及在真空中 濃縮濾液。使殘留物於Si〇2上藉急驟式層析，使用醋酸乙 酉曰/CH2C12(1:9至1:1)純化，而產生46c(U5克，35%)，為無色 135510-2 -147- 200924790 步驟c :
將吡啶酮46c (1.15克）在MeOH (50毫升）中之溶液，以Pd/C (10% w/w，450毫克）處理，並置於Parr®振盪器中，且於40 psi 下氫化4小時。使反應混合物經過celite®填充柱過濾，及在 真空中濃縮，而產生46d，將其使用於下一步驟，無需進一 步純化。 步驟D :
於〇°C下，將胺46d (600毫克，3.03毫莫耳）在CH2C12(10毫 升）、飽和NaHC03水溶液（10毫升）中之溶液，以光氣（5毫升， 在甲苯中之15%溶液）處理，並於0°C下攪拌2小時。以CH2C12 Q (50毫升）稀釋反應混合物，且將有機層以冷NaHC03水溶液 洗滌。使有機層脫水乾燥（MgS04)，過濾，及進一步以3毫 升甲苯稀釋，使二氣甲烧層濃縮，並以曱苯中之溶液使用。 步驟E :
將胺24a (100毫克，0.197毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之 135510-2 -148 - 200924790 溶液，以NMM (60毫克’ 0.6毫莫耳）處理，並冷卻至〇°c。 添加異氰酸酯46e (1.5毫升，0.25毫莫耳）在甲苯中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氣甲烷（1〇〇毫 升）稀釋反應混合物，及以HC1水溶液（1M，50毫升）洗滌。 使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，並藉 層析（Si02，醋酸乙酯/己烷1:1-> 1:〇)及1〇0%醋酸乙酯純化， 而產生46 (30 毫克），為無色固體。lHNMR(DMSO,500 MHz) δ ,8.92 (t, 1H, J=6.5 Hz), 8.39 (d, 1H, J=9.0 Hz), 6.17 (d, 1H, J=9.0 Hz), o 5.81 (m, 1H), 5.69 (d, 1H, J=l〇.5 Hz), 5.29 (bt, 1H, J=10.0 Hz), 5.13-5.10 (m, 2H), 4.33 (s, 1H), 4.30-4.26 (m, 1H), 3.86-3.65 (m, 6H), 3.50 (bt, 1H, J=12 Hz), 3.15-3.08 (m, 2H), 2.21-2.05 (m, 2H), 1.74-1.54 (bm, 6H), 1.46-1.11 (bm, 18H), 0.99 (s, 3H), 0.84 (s, 3H), 0.82 (s, 9H). 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ , 198.2, 172.1, 171.3, 169.3, 162.1, 158.2, 135.0, 116.4, 60.5, 55.8, 55.1, 52.8, 51.5, 48.3, 47.6, 47.0, 41.7. 34.6, 33.0, 32.4, 31.5, 28.3, 28.0, 27.8, 27.2, 26.9, 26.2, 24.5, 23.7, 22.4, 21.9, 19.5, 13.7. o 製備實例47 :下式之製備：
使胺 47a (C. A. Busacca 等人，reim/iei/ran .. ,. (2000), 9 1907) (1.5克’ 6.9毫莫耳，i當量）溶於無水二氣曱烷(2〇毫升） 135510-2 -149- 200924790 中，並冷卻至-78°C。添加3毫升（3當量）Et3N，接著緩慢添 加已溶於DCM中之氣化二曱基胺磺醯（1.5當量，Sigma-
Aldrich)。使溫度保持在-78°C下，直到完成添加為止，然後 攪拌過夜，使其上升至室溫。以二氯曱烷稀釋，且以水、 IN HC1水溶液及最後鹽水洗滌。使有機層以無水硫酸鈉脫 水乾燥，過濾，及在真空中濃縮。使經單離之粗產物經由 急驟式管柱純化（10— 30% EtOAc-己烷），而得1.27克（58%) 47b。4 NMR (CDC13, 300 MHz) 6，4.6 (d，1H)，3.45 (m，1H)，3.25 (d, Ο ^ 1H), 2.89 (s, 6H), 1.89 (bs, NH), 1.22 (s, 9H), 0.98 (s, 9H). MS (ESI)，m/z，相對強度 324 [(M+l) 85]，268 (100)，224 (50). 步驟B :
在惰性大氣下，於DMF (10毫升）中之Boc保護確醯脲47b (440毫克，1.25毫莫耳，1當量）内，在0°C下添加Cs2C03(613 毫克，1.5當量，1.88毫莫耳）與Mel (6.36毫莫耳，5當量，0.601 毫升）。將反應混合物於室溫下攪拌90分鐘，並以水使反應 淬滅。以EtOAc萃取水層，以水與鹽水洗務4次。使有機層 以無水硫酸鈉脫水乾燥，過濾，及蒸發出溶劑，而得420毫 克（91%) 47c，將其使用於下一反應，無需進一步純化。1Η NMR (CDC13, 300 MHz) δ 4.59 (d, 1Η), 3.62-3.58 (m, 1H), 3.29-3.22 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.79 (s, 6H), 1.89 (bs, NH), 1.22 (s, 9H), 0.98 (s, 9H). MS (ESI), m/z，相對強度 338 [(M+l) 60]，282 (100)，238 (90). 步驟C : 135510-2 -150- 200924790
在室溫下，於Boc-保護之磺醯脲47c (890毫克，1當量）中， 添加HC1在二氧陸圜中之4M溶液（25毫升），並攪拌1小時。 於起始物質消失（TLC)後，使反應混合物濃縮，且與己烷及 醚共沸。將殘留物以醚研製，並過濾分離出之固體，及在 真空中乾燥，而得淡黃色固體（72〇毫克，〜1〇〇%)。將其使用 於進一步反應，無需純化。
步驟D :
於二氣甲烷（15毫升）中之胺鹽酸鹽47d (720毫克，2.63毫莫 耳）内，添加15毫升飽和NaHC〇3水溶液，並在〇。(：下激烈攪 拌5分鐘。將光氣溶液（2當量，2〇%，在曱笨中）注射出至下 層’並立即恢復激烈攪拌。在一些時間下及2小時後確認 TLC ’其顯示起始物質完全消耗。分離二氣曱烷層，且以 二氯甲烷（30毫升）萃取水層。使合併之有機層以無水硫酸 鈉脫水乾燥，過濾，及在減壓下，於室溫下，使用迴轉式 蒸發器濃縮至一半體積’然後以&沖洗15分鐘。將溶液以 二氣曱烷稀釋至130毫升’及以〇 Q2M溶液使用於進一步反 應中。 步驟E : 135510-2 •151 - 200924790
Ο Ο 將胺24a (100毫克，0.197毫莫耳）在二氯曱烷（3 〇毫升）中之 溶液，以ΝΜΜ (60毫克，〇·6毫莫耳）處理，並冷卻至〇£>c。 添加異氰酸酯47e (1.5毫升，〇.25毫莫耳）在甲苯中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氣曱烷（1〇〇亳 升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，50毫升）洗滌。 使有機層以（MgS〇4)脫水乾燥，過遽，在真空中濃縮，且藉 層析（Si〇2，醋酸乙酯/己烷1:1_> 1:0)及1〇〇%醋酸乙酯純化， 而產生47 (49毫克），為無色固體。 1 H NMR (DMSO, 500 MHz) δ , 8.89 (t, 1Η, J=6 Hz), 8.37 (d, 1H, J=9.0 Hz), 6.15 (d, 1H, J=9.0 Hz) 5.83-5.76 (m, 2H), 5.31-5.27 (m, 2H), 4.33 (s, 1H), 4.30-4.28 (m, 1H), 3.91 (d, 1H, J=10.5 Hz), 3.80-3.70 (m, 4H),
3.63-3.59 (m, 1H), 2.93 (dd, 1H), 2.7 (s, 3H), 2.69 (s, 6H), 1.73-1.65 (m, 2H), 1.51-1.02 (m, 18H), 0.99 (s, 3H), 0.84 (s, 3H), 0.81 (m, 9H) 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ , 198.3, 172.1, 171.7, 162.1, 158.2, 135.0, 116.5, 60.5, 55.8, 52.8, 51.7, 1.3, 47.6, 41.1, 38.5, 36.0, 34.9, 32.3, 31.6, 31.3，28.5, 28.4，27.9，27.4，27.4，27.1· MS (ES) m/z 相對強度 746 [(M+Na)+，40] ; 724 [(M+l)+，100]. 製備實例48 :下式之製備： 135510-2 -152· 200924790
NHBoc ch3n/ch3 ο
N、 /.〇 、CH? 步驟A : h2n
48a
CO〇Me
48b NHBoc
根據關於化合物45b之製備所述之程序，化合物48b係製 自48a與氣化2-曱氧羰基-3-嘧吩磺醯。 步驟B :
C02Me 48b /NHBoc Η
^NHBocII H
48c
OH 於酯48b (4.65克，11.1毫莫耳）在無水甲苯（40毫升）中之溶 液内，在-78°C下添加DIBAL-H在曱苯中之溶液（23.0毫升，34.5 毫莫耳）。將混合物於-78°C下攪拌20分鐘，並在室溫下2小 q 時。添加甲醇（20毫升），接著為10%擰檬酸水溶液（100毫升）。 在攪拌5分鐘後，添加EtOAc (200毫升），且分離液層。以EtOAc (2 x 100毫升）萃取水溶液。合併有機溶液，脫水乾燥（MgS04) ，過濾，及濃縮。將殘留物藉急驟式管柱層析，使用10-50% 丙酮/己烷純化，獲得4.6克（定量）48c。
135510-2 -153- 200924790 於48c (1.04克’ 2.65毫莫耳）在CI^CV (50毫升）中之溶液 内，在0°C下添加氯化甲烷磺醯（0.23毫升，2.97毫莫耳）與三 乙胺（0.80毫升，5.74毫莫耳）。使混合物溫熱至室溫，伴隨 著冰浴，並攪拌18小時。添加EtOAc (200毫升）與5% H3 P〇 溶液（100毫升），且分離液層。將有機溶液以爪碳酸鈉溶液 (100毫升）洗滌，然後脫水乾燥（MgS〇4)，過濾，及濃縮。將 殘留物藉急驟式管柱層析，使用10_50%丙酮/己烷純化，獲 得 0.80 克（73%) 48d。
將48d (1.17克，2.85毫莫耳）與碳酸铯（1.40克，4.30毫莫耳） 在無水DMF (1〇〇毫升）中之懸浮液，於室溫下攪拌18小時。 添加水（50毫升）、鹽水(50毫升）及Et0Ac (3〇〇毫升），並分離 液層。將有機溶液以水(3 X 150毫升）洗滌，然後使其脫水乾 根據關於化合物45b與45c之製備所述之程序，化合物48f 係製自48e。 步驟F : 135510.2 -154- 200924790
將胺24a (100毫克，0.197毫莫耳）在二氯甲烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 添加異氰酸酯48f (2毫升，0.25毫莫耳）在甲苯中之溶液，且 將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氣曱烷（100毫升） 稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，50毫升）洗滌。使有 機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，且藉層析 (Si02，醋酸乙酯/己烷1:1— 1:0)及100%醋酸乙酯純化，而產 生48，為無色固體。 製備實例49 :下式之製備：
〇 步驟A :
使2M LDA/THF-庚烷（Acros化學公司）在50毫升THF中之溶 液冷卻至-70°C，在<“60°C下，逐滴添加環己烷羧酸甲酯49a。 於-70°C下再攪拌0.5小時後，在<-60°C下逐滴添加40毫升醚 中之氯化2-甲基吡啶。然後，使溫度慢慢上升至室溫，歷 經2小時，並再攪拌2小時。在200毫升20% KH2P04水溶液與 135510-2 -155 - 200924790 5毫升12N HC1之冷混合物中，使反應淬滅，以EtOAc萃取混 合物，將萃液以鹽水洗滌，接著以MgS04脫水乾燥。過濾混 合物，蒸發濾液，使殘留物自二曱苯蒸發兩次，及使最後 殘留物於矽膠上層析（1:3 Et20-CH2C12至1:1丙酮-CH2C12)，獲 得 49b。 步驟B :
49b 49c
〇 將酯49b在20毫升二氧陸圜中之溶液，以30毫升IN LiOH 水溶液處理，並將混合物於100°C下攪拌6小時。在冰水中 使混合物淬滅，以醚萃取，且以3N HC1使冷水溶液慢慢酸 化至pH~4。過濾沉澱物，以水洗滌，及乾燥，留下產物酸， 將其使用於下列步驟，無需進一步純化。酸之轉化成異氰 酸酯49c係與27b在製備實例27中之合成相同。
將胺24a (100毫克，0.197毫莫耳）在二氯曱烷（3.0毫升）中之 溶液，以NMM (60毫克，0.6毫莫耳）處理，並冷卻至0°C。 添加異氰酸酯49c (2.9毫升，0.25毫莫耳）在甲苯中之溶液， 且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。以二氯甲烷（100毫 升）稀釋反應混合物，並以HC1水溶液（1M，50毫升）洗滌。 使有機層以（MgS04)脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，且藉 135510-2 -156- 200924790 層析（Si02，醋酸乙酯/己烧1:1— 1:0)及100%醋酸乙酯純化 而產生49 ’為無色固體。 製備實例50:下式之製備：
步驟A :
將吡畊羧酸SOa (Aldrich，3克）在150毫升無水二氯曱院與 150毫升無水DMF中之溶液，於0°C下授拌，並以HATU (1.4 當置’ 6.03克）處理。以少量分次添加L-環己基甘胺酸_甲基 酯鹽酸鹽（1.2當量，6.03克）。然後逐滴添加N-甲基嗎福啉（4 當量，10毫升，d 0.920)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫， 且攪拌20小時。在真空下移除所有揮發性物質，及使殘留 物溶於500毫升醋酸乙酯中。將有機層以水（1〇〇毫升）、1N HC1水溶液（100毫升）、飽和碳酸氬鈉水溶液（1〇〇毫升）及鹽 水（100毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及 在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己 烷；5:95至3:7) ’而得產物50b (6.5克，95%)，為白色固體。 步驟B : 135510-2 -157- 200924790
使曱酯50b (6.5克）在270毫升THF/Me0H/H20之1:1:1混合物 中之溶液冷卻至0°C，並以氫氧化鋰單水合物（2.5當量，2.45 克）處理。將混合物攪拌，且藉TLC監測（丙酮/己烷；2:8)。 當所有起始物質已消耗時，將反應混合物以100毫升IN HC1 水溶液處理，及使混合物在真空中濃縮。添加二氯甲烷（250 Q 毫升），並分離液層。以二氣曱烷（3 X 80毫升）萃取水層。使 合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮，而得酸 50c。 步驟C :
使酸24a (100毫克，0.197毫莫耳）在無水CH2C12 (2毫升）與 DMF (2毫升）中之溶液冷卻至0°C，並以酸50c (51.8毫克，0.197 毫莫耳）、HATU (94毫克，0.25毫莫耳）及NMM (45毫克，0.45 毫莫耳）處理。將反應物在〇°C下攪拌12小時，及在真空中 濃縮。使殘留物溶於CH2C12(100毫升）中，且以HC1水溶液 (1M，2 X 30毫升）、飽和NaHC〇3水溶液（2 X 30毫升）、鹽水（30 毫升）洗滌，脫水乾燥（MgS04)，過濾，在真空中濃縮。使 粗製二肽藉層析純化（Si02，丙酮/己烷0:1— 1:1)，而產生50。 ]H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 9.16 (δ , 1Η, J=12 Hz), 8.89 (d, 1H, 135510-2 -158- 200924790 J=2.4 Hz), 8.74 (s, 1H), 8.59 (d, 1H, J=7.4 Hz), 8.43-8.38 (m, 2H), 5.81-5.75 (m, 1H), 5.28 (t, 1H, J=10.8 Hz), 5.11-5.03 (m, 2H), 4.45-4.31 (m, 3H), 3.88-3.70 (m, 5H), 1.65-1.22 (m, 31H), 0.97 (s, 3H), 0.83 (s, 3H).
MS (ES) m/z 相對強度 728 [(M+Na)+, 4] ; 706 [(M+l)+, 80]. 製備實例51 :下式之製備：
於惰性大氣中，將醇51a(1.00克，4.6毫莫耳）在無水Ch2C12 (30毫升）中之溶液，以三苯膦（1 52克，5 %毫莫耳）與二甲 基戊二醯亞胺（780毫克，5.52毫莫耳）處理。使反應混合物 冷卻至0°C，並以DIAD(930毫克，4.60毫莫耳，在4毫升CH2Cl2 Φ 中）逐滴處理，且溫熱至室溫《將其在室溫下攪拌5小時， 及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化（Si〇2，己烷/丙酮1:〇 —1:1)，獲得51b (600毫克）’為無色固體。 步驟B :
將51b (500毫克，1.5毫莫耳）在HC1 (15毫升，在二氧陸圜 中之4M溶液）中之溶液’於室溫下攪拌1小時，及在真空_ 濃縮。將殘留物使用於進一步反應’無需純化。於〇£>c下， J 355 J 0-2 •159- 200924790 將經去除保護之胺在毫升）、飽和NaRc〇3水溶液 (ίο毫升）中之溶液，以光氣（5毫升，在甲苯中之15%溶液） 處理，並於(TCT搜拌2小時。以〇^2(5〇毫升）稀釋反應混 合物，且將有機層以冷腿〇)3水溶液洗滌。使有機層脫水 乾燥（MgS04)，過渡，及進一步以3毫升甲苯稀釋，使二氣 甲虎層濃縮，並以溶液使用。 步驟C :
溶液’以NMM (60毫克’ 〇.6毫莫耳）處理，並冷卻至〇〇c。 添加異氣酸醋51c (2¾升’ 0.5毫莫耳）在曱苯中之溶液，且 將反應混合物在室溫下授拌2小時。以二氣曱烧（1〇〇毫升） 稀釋反應混合物’並以HC1水溶液（1M，50毫升）洗蘇。使有 ® 機層以（Mgs〇4)脫水乾燥’過濾，在真空中濃縮，及藉層析 純化（Si02丙酮/己烷0:1— 1:1)，產生51，為無色固體。1h NMR (DMSO, 500 MHz) δ 8.91 (d, 1H), 6.19 (d, 1H, J=8.5 Hz), 5.84-5.57 (m, 1H), 5.58 (d, 1H, J=10.5 Hz), 5.28 (t, 1H, J=7.0 Hz), 5.10-5.05 (m, 2H), 4.31 (s, 1H), 4.18 (t, 1H, J=8.5 Hz), 3.83-3.57 (m, 7H), 2.44-2.38 (AB, 4H), 1.66-1.62 (m, 2H), 1.44-1.03 (m, 18H), 0.98 & 0.96 (2s, 9H), 0.84 & 0.81 (2s, 12H). 13C NMR (DMSO, 125 MHz) δ , 198.2, 172.7, 172.1, 171.3, 162.1, 158.1, 135.0, 116.4, 60.5, 55.5, 52.9, 51.3, 47.5, 46.4, 41.7, 39.6, 135510-2 -160- 200924790 35.0, 32.4, 31.5, 31.3, 29.3, 28.3, 27.9, 27.0, 26.9, 26.6, 26.1，24.5, 22.4, 19.5, 13.7. MS (ES) m/z 相對強度 749 [(M+Na)+，20] ; 727 [(M+l)+， 100]. 製備實例52:下式之製備： ❹ 步驟A :
〇
使 N-Boc-L-Ser-OMe (3.6 克，Aldrich)在 150 毫升無水 THF 中之
溶液脫氣（真空/N2-沖洗），並以烯丙基碳酸甲酯（1.4當量， 2,6毫升，d 1.022)處理。添加催化量之肆（三笨膦）纪（〇 〇2莫耳 % ’ 379毫克）。使微黃色混合物再一次脫氣，並在6〇〇c下加 熱約3小時，直到TLC分析（丙酮/己烷；2:8)不再顯示起始 物質留下為止（反應混合物變成褐色）。在減壓下移除 THF ’且將殘留物以300毫升醋酸乙酯稀釋，並以8〇毫升飽 和碳酸氫鈉水溶液與80毫升鹽水洗滌。使有機層以硫酸鎂 脫水乾燥，過濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於石夕膠上層 析（梯度液：丙酮/己烧；5:95至2:8) ’而得產物52b，為透明 油（2.7 克，64%)。 步驟B : 135510-2 200924790
將甲醋S2b (1.5克）在90毫升THF/MeOH/H2 〇之混合物（1:u) 中之溶液，以氳氧化鋰單水合物（25當量，63〇毫克）處理。 將反應物於室溫下攪拌，並藉TLC監測（丙酮/己烷；1:9)。
:分鐘後，在減壓下移除所有揮發性物質。使殘留物於抝 毫升1NHCI水溶液與毫升二氣甲烷之間作分液處理。將 水層以—虱甲烧(2χ8〇毫升）逆萃取。使合併之有機層以硫 酉夂鎮脫水乾燦’過遽，及在減藶下濃縮，而得產物级，為 透明油（1·4克，95%)。 步驟C :
將酸52c (6毫莫耳）在4〇毫升無水二氯甲烧與奶毫升無水 聊中之溶液，於(re下擾拌，並以HATU (14當量，32幻 處H續添加胺鹽酸鹽輝3當量，16克）與队甲基嗎福 當量’ 2.6毫升’纽·)。使反應混合物逐漸溫熱至室 咖’且㈣過仪。在真^ τ移除所㈣發性物質，及使殘 留物溶入毫升醋酸乙醋中。將有機層幻NHCl7jc溶液（5〇 毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶液⑼毫升）及鹽水（5〇毫升）洗 務。使有機層以硫酸賴水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。 135510-2 -162- 200924790 使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；5:95至2:8)， 而得所要之產物52d (2.23克，93%)，為透明油。 步驟D :
X X
於〇°C下，將甲酯52d (2.23克）在45毫升THF/MeOH/l·^ Ο之混 合物（1:1:1)中之溶液，以氫氧化鋰單水合物（2.5當量，300毫 克）處理。移除冷卻浴，並將反應混合物在室溫下攪拌，且 藉TLC監測（丙酮/己烷；2:8)。1小時後，添加10毫升IN HC1 水溶液，及在減壓下移除所有揮發性物質。使殘留物於30 毫升IN HC1水溶液與100毫升二氣曱烷之間作分液處理。將 水層以二氣甲烷（2 X 50毫升）逆萃取。使合併之有機層以硫 酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得產物52e (1.88 克，88%)，為透明油。 步驟E :
將酸52e (830毫克）在20毫升無水二氯甲烷與20毫升無水 DMF中之溶液，於0°C下攪拌，並以HATU (1.4當量，1.15克） 處理。將胺鹽酸鹽If (1.1當量，227毫克）添加在10毫升二氣 135510-2 -163 - 200924790 甲烧中’接著為N-甲基嗎福淋（4當量，0.95毫升，d 0.920)。 使反應混合物在冷凍庫（_2〇。(：）中保持48小時。在真空下移 除所有揮發性物質’且使殘留物溶於200毫升醋酸乙醋中。 將有機層以水（50毫升）、1NHC1水溶液（50毫升）、飽和碳酸 氫鈉水溶液（50毫升）及鹽水（5〇毫升）洗滌。使有機層以硫酸 鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上 層析（梯度液：丙酮/己烷；5:95至3:7)，而得產物52f (68〇毫 克），為白色固體，伴隨著較少非對映異構產物（13〇毫克）， 關於合併之產率為70%。 步驟F :
使二烯52f (670毫克）在甲苯中之〇 〇1M溶液脫氣3〇分鐘 Ο (氬起泡），並以Grubb氏觸媒（0.2當量，205毫克）處理。將粉 紅色溶液加熱至60。(：，歷經16小時（於加熱1〇分鐘後，溶液 變成暗色）。於減壓下移除溶劑，及使殘留物於矽膠上層析
毫克，90%)，為E-與Z-異構物之混合物（約4:1)。 步驟G : 135510-2 -164- 200924790
Ο 將烯烴52g (570毫克）在20毫升甲醇中之溶液，以二氮氧 化把/碳（0.1莫耳％，78毫克20% Pd(〇H)2/〇處理。使混合物 於50 psi下氫化，直到所有起始物質已消耗為止。將反應混 合物以100毫升二氣曱烷稀釋，並經過短路徑之矽藻土過 渡。使濾液濃縮’及使殘留物於矽膠上層析，而得產物5此 (590毫克’ 70%)，為透明油。 步驟Η :
❹ 將甲酯52h(580毫克）在20毫升無水THF中之溶液，以硼氫 化鋰（2_1當量，1.2毫升在THF中之2M溶液）處理。將反應混 合物在室溫下攪拌，並藉TLC監測（丙酮/己烷；3:7)起始物 質之消失。5小時後，藉由添加飽和氣化銨水溶液（3毫升）， 使過1硼氳化鋰淬滅。使混合物於醋酸乙酯（1〇〇毫升）與飽 和石反酸氫鈉水溶液（5〇毫升）之間作分液處理。將水層以醋 酸乙酯（2 X 30毫升）與二氯甲烷（2 χ 3〇毫升）逆萃取。使合併 之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使 殘留物於石夕膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；1:9至5:5)，而得 135510-2 -165- 200924790 Ο
產物52i (360毫克，68%)，為白色固體 步驟I :
將醇52ι (350毫克）在20毫升無水二氣曱烷中之溶液，以 Dess-Martin過碘烷（3當量，925毫克）處理。將反應混合物於 室溫下攪拌45分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液（15 ΐ升）與飽和碳酸氫納水溶液（15毫升）處理，並授拌15分 鐘。以二氣甲烷（3 X 50毫升）萃取混合物。使合併之有機層 以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層 析（梯度液.丙I同/己烷；1:9至4:6) ’而得產物52j (285毫克， 83%)，為無色固體。 步驟J :
將醛52j· (270毫克）在10毫升無水二氯曱烷中之溶液，以烯 丙基異氰化物（2當量，77毫克）與醋酸(2當量，〇 〇64毫升， υ·〇49)處理。將混合物攪拌約5小時。在真空下移除所有揮 發性物質，及使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷. 1:9至1:1)，而得產物52k(303毫克，9〇%)，為白色固體。凡， 步驟K: 135510-2 -166- 200924790
混合物中，並以氫氧化鋰單水合物（2.5當量，51毫克）處理。 反應之流量係藉TLC (丙酮/己烷；4:6)追蹤。15分鐘後，在 迴轉式蒸發器中濃縮反應混合物，且使殘留物於二氯曱烷 (80毫升）與飽和碳酸氫鈉水溶液（20毫升）之間作分液處理。 將水層以二氯曱烷（3 X 50毫升）逆萃取。使合併之有機層以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使用粗產物521 (276毫克， 98%)，無需進一步純化。 步驟L :
將羥基醯胺521 (276毫克）在20毫升無水二氣甲烷中之溶 液，以Dess-Martin過碘烷（3當量，424毫克）處理。將反應混 合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶 液（20毫升）與飽和碳酸氫鈉水溶液（10毫升）處理，並攪拌10 分鐘。以二氣曱烷（3 X 20毫升）萃取混合物。使合併之有機 層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上 層析（梯度液：丙酮/己烷；1:9至4:6)，而得產物52 (236毫克， 86%)，為白色固體。1 H NMR (500 MHz, CDC13) : δ , 7.47 (d，1H， 135510-2 -167- 200924790 J=7.56 Hz), 7.03 (dd, 1H, J=5.68, 5.99 Hz), 5.88 (ddt, 1H, J=5.6, 10.0, 17.0 Hz), 5.50 (d, 1H, J=8.83 Hz), 5.46 (m, 1H), 5.28 (dd, 1H, J=0.9, 17.0 Hz), 5.25 (dd, 1H, J=0.9, 10.0 Hz), 4.61 (m, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.99 (dt, 2H, J=1.2, 5.6 Hz), 3.88 (dd, 1H, J=5.0, 10.8 Hz), 3.83 (d, 1H, J=11.0 Hz), 3.66 (m, 2H), 3.48 (dd, 2H, J=4.7, 5.6 Hz), 1.95 (m, 1H), 1.81 (d, 1H, J=7.56 Hz), 1.47 (s, 9H), 1.27-1.63 (m, 12H), 1.09 (s, 3H), 0.93 (s, 3H)； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) ： δ 196.7, 170.9, 170.7, 159.3, 155.6, 133.2, 117.9, 80.4, 71.0, 70.8, 61.2, 54.5, 52.9, 48.2, 42.1, 31.4, 29.3, 28.7, 27.8, 26.8,
❹ 26,6, 26.4, 23.6,23.4, 19.2, 13.2 ppm;對 C29H47N407[M+H]+之 HRMS 計算值：563.3445，實測值 563.3457. 製備實例53:下式之製備： \/
步驟A :
使N-Boc保護胺52 (6C 4M HC1溶液内，並於室 揮發性物質，且將產物 (99%)進行進—步純化。 漫月女52 (60毫克）溶於1〇毫升在二氧陸園中之 並於至/JDL下授拌1小時。在減壓下移除所有 且將產物在高真空下放置3小時。未對產物53a 步驟B : 135510-2 -168- 200924790 hcih2n
使胺鹽53a (31毫克）溶於5毫升無水二氣甲烷中，並冷卻 至〇°C。然後添加10滴飽和碳酸氫納水溶液。1〇分鐘後，添 加異氰酸酯27b之溶液（2.5當量，0.8毫升在曱苯中之0.2M溶 液），且持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，及將混合物於室溫
下攪拌3小時。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己 烷；1:9至4:6) ’而產生產物53 (25毫克，58%)，為白色固體。 'HNMR (500 MHz, CDC13) ： 5 , 7.90 (d, 1H, J=8.5 Hz), 7.38 (br s, 1H), 5.9 (ddt, 1H, J=5.6, 10.4, 17.0 Hz), 5.61 (ddd, 1H, J=1.6, 8.8, 10.4 Hz), 5.27 (dd, 1H, J=1.26, 17.3 Hz), 5.24 (dd, 1H, J=1.26, 10.0 Hz), 4.9 (dd, 1H, J=3.4, 8.8 Hz), 4.53 (s, 1H), 3.94-4.08 (m, 4H), 3.62 (dd, 1H, J=8.5, 8.8 Hz), 3.56 (m, 1H), 3.47 (dd, 1H, J=4.0, 7.9 Hz), 3.37 (ddd, 1H, J=2.2, 7.2, 9.4), 3.15 (d, 1H, J=13.5 Hz), 2.4 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.85 Q (m, 1H), 1.27-1.70 (m, 20H), 1.4 (s, 9H), 1.2 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.92 (m, 1H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) ： δ 198.0, 172.1, 171.0, 159.5, 157.0, 133.3, 117.7, 70.8, 70.5, 61.0, 60.8, 54.9, 53.8, 51.0, 48.4, 42.2, 36.2, 32.0, 30.5, 28.7, 27.9, 27.2, 27.0, 26.8, 25.9, 24.1, 23.9, 23.5, 21.9, 21.8, 19.3, 13.4 ppm;對 C36H60N5O8S [M+H]+之 HRMS 計算 值：722.4163，實測值 722.4193. 製備實例54:下式之製備： 135510-2 -169- 200924790 Ο
將胺鹽53a (17毫克）在2毫升無水二氯曱烷中之溶液， 固態碳酸氫鈉（3當量 8毫克）處理，接著添加異氰酸酯54a 以 (2,5當罝，0.26毫升在甲苯中之〇 3〇7M溶液）。將所形成之不 均勻混合物於室溫下攪拌大約3小時。將混合物以5〇毫升醋 酸乙酯稀釋，並以1M HC1水溶液（10毫升）與鹽水（10毫升） 洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃 縮°使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至1:1)， 而產生產物54 (8毫克’ 34%)，為白色固體。1 η NMR (500 MHz, CDC13) ： δ , 7.91 (br s, 1H), 7.40 (m, 1H), 6.37 (br s, 1H), 5.91 (ddt, 1H, J=5.6, 10.4, 17.3 Hz), 5.88 (br s, 1H), 5.62 (dt, 1H, J=1.26, 9.45 Hz), 5.28 (dd, 1H, J=1.26, 17.3 Hz), 5.23 (dd, 1H, J=1.26, 10.4 Hz), 4.92 (ddd, 1H, J=3.46, 8.5, 8.5 Hz), 4.77 (dd, 1H, J=4.7, 8.8 Hz), 4.55 (s, 1H), 3.94-4.06 (m, 4H), 3.63 (t, 1H, J=8.2 Hz), 3.54 (ddd, 1H, J=3.4, 6.6, 9.7 Hz), 3.47 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 2.09 (ddd, 1H, J=4.4, 7.8, 12.3 Hz), 1.91 (m, 2H), 0.91-1.83 (m, 27H), 1.07 (s，3H), 0.94 (s，3H);對 C36H56N507[M+H]+ 之 HRMS 計算值：670.4180，實測值 670.4177. 135510-2 • 170· 200924790 製備實例55 :下式之製備： \/
〇 將胺鹽53a (17毫克）在2毫升無水二氣曱烷中之溶液，以 固態碳酸氫鈉（3當量，8毫克）處理，接著添加異氰酸酯 (2.5當量’ 0.45毫升在甲苯中之〇.i8M溶液）。將所形成之不 均勻混合物於室溫下攪拌大約3小時。以5〇毫升醋酸乙醋稀 釋混合物’且以1M HC1水溶液（10毫升）與鹽水（1〇毫升）洗 滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。 使殘留物於矽膠上層析（梯度液··丙酮/己烷；2:8至1:1)，而 產生產物55 (8毫克，30%)，為白色固體。對C36H57N6〇8s2 [M+H]+之 HRMS 計算值：765.3679，實測值 765.3687. 製備實例56 :下式之製備：
步驟A : 135510-2 • 171 · 200924790
56a Ο
使4,4-一曱基戊二醯亞胺56a (Aidrich，1 5當量，4 86克）在 200宅升無水THF中之溶液冷卻至ye，並以三苯膦（3當量， 18.〇7克）與S-B0C-第三_丁基甘胺醇5你（Α1ώΜι，5克）處理。 ❹
逐滴添加偶氮二叛酸二異丙酯（2.5當量，11.3毫升，d 1.027) ，並將所形成之溶液在〇t下攪拌。1〇分鐘後，混合物變成 衆液，且持續搜拌過夜（0至25°C )。使混合物在減壓下濃 縮，及使殘留物溶於80毫升醚中。添加己烷（1〇〇毫升），並 濾出已沉澱之固體。使濾液濃縮至其體積之一半，且再一 次添加己烷（100毫升）。濾出固體。在減壓下濃縮濾液。使 殘留物於矽膠上層析（醋酸乙酯/己烷；2:8)，而得產物5知 (4.0克，51%)，為白色固體。 步驟B :
使N-Boc保護胺56c (4.0克）溶於2〇〇毫升在二氧陸圜中之 4M HC1溶液内，將混合物於室溫下攪拌，且1〇分鐘後，白 色固體沉澱。將混合物再攪拌2小時。在減壓下移除所有揮 發性物質’而得產物56d (3.24克’ 98%)，為白色固體。 步驟C : 〇
-^^nh2hci 0 冬 56d
將胺鹽酸鹽56d (1.5克）在60毫升二氣甲烷中之溶液，以沁 135510-2 -172- 200924790 毫升飽和碳酸氫鈉水溶液處理，並在〇°c下激烈授掉1〇分 鐘。停止授拌，且將液層分離。使光氣（15毫升在曱苯中之 20%溶液）經過針頭，以一份添加至有機層（下層）中。將混 合物直接激烈攪拌’在0°C下添加1〇分鐘後，並於室溫下再 攪拌2.5小時。將混合物以1〇〇毫升二氯曱烷稀釋，且分離液 層。將有機層以40毫升冷飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，及以 硫酸鎂脫水乾燥。過濾有機層，並以5〇毫升甲苯稀釋。使 產物56e (1.44克，98%)以甲苯中之〇.216M溶液保持。
使N-Boc胺52 (200毫克）溶於20毫升在二氧陸圜中之4厘 HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氣甲烷中，且冷卻至 〇C。接著添加1〇滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後，逐滴 添加異氰酸酯56e溶液（1.2當量，1.97毫升在甲苯中之〇.216M 洛液）’並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室 溫下擾拌2小時。以二氯甲烷（70毫升）稀釋反應混合物，並 以飽和碳酸氫鈉水溶液（2〇毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂 脫水乾燥’過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層 析（梯度液：丙酮/己烷；15:85至55:45)，而得產物56 (172毫 克，66%)，為白色固體。1H NMR (400 MHz, CDC13 ) : 6，7.95 (d， 135510-2 .173- 200924790 1H, J=8.8 Hz), 7.59 (br s, 1H), 5.91 (br s, 1H), 5.84 (dd, t, 1H, J=5.8, 10.2, 16.8 Hz), 5.61 (ddd, 1H, J=1.5, 8.7, 10.2 Hz), 5.21 (dd, 1H, J=1.4, 17.5 Hz), 5.17 (dd, 1H, J=1.4, 10.2 Hz), 5.13 (br s, 1H), 4.86 (br s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.05 (d, 1H, J=10.2 Hz), 3.80-3.99 (m, 6H), 3.50 (m, 2H), 3.27 (m, 2H), 2.51 (d, 2H, J=16.8 Hz), 2.43 (d, 2H, J=16.8 Hz), 1.88 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 0.84-1.58 (m, 12H), 1.05 (s, 6H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.81 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) ： δ 198.6, 172.8, 172.0, 171.2, 159.3, 157.8, 133.4, 117.7, 71.4, 70.8, 60.7, 57.0, 53.5, 48.5, 46.8, 42.2, © 40.0, 34.9, 32.1, 30.9, 29.4, 28.7, 28.1, 27.7, 27.4, 26.9, 24.3, 19.3, 13.5 ppm ;對 C3 8 H61N6 08 [M+H]+ 之 HRMS 計算值：729.4551，實測值 729.4529.
製備實例57 :下式之製備：
使N-Boc保護胺52 (101毫克）溶於1〇毫升甲酸中，並於室溫 下攪拌1小時。在旋轉蒸發中移除所有揮發性物質，及使殘 留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得甲 醯基化產物57 (35毫克，40%)，為白色固體。i H NMR (5〇〇 MHz， 135510-2 •174- 200924790 CDC13) (5 ,8.24 (s, 1H), 7.35 (d, 1H, J=7.8 Hz), 7.07 (br s, 1H), 6.83 (d, 1H, J=6.9 Hz), 5.89 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.0, 17.0 Hz), 5.47 (m, 1H), 5.28 (dd, 1H, J=1.2, 17.3 Hz), 5.25 (dd, 1H, J=1.2, 10.4 Hz), 4.95 (ddd, 1H, J=3.1, 5.9, 8.5 Hz), 4.51 (s, 1H), 3.99 (m, 2H), 3.92 (dd, 1H, J=5.3, 11.0 Hz), 3.75 (d, 1H, J=11.0 Hz), 3.74 (m, 1H), 3.70 (dd, 1H, J=5.6, 9.1 Hz), 3.48 (m, 2H), 1.96 (m, 1H), 1.77 (d, 1H, J=7.8 Hz), 1.76 (m, 1H), 1.27-1.63 (m, 11H), 1.10 (s, 3H), 0.92 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 196.8, 170.5, 169.4, 160.8, 159.3, 133.1, 117.9, 71.3, 70.0, 61.5, 54.4, 50.8, ® 48.2, 42.1, 32.0, 31.5, 29.4, 28.6, 27.8, 26.7, 26.6, 23.6, 23.5, 19.3, 14.5, 13.2??1!1;對(：25%91^〇6[1^+11]+之}«11^計算值：491.2870,實 測值 491.2882. 製備實例58 :下式之製備：
使N-B〇c保護胺52 (8〇毫克）溶於5毫升在二氧陸 τ ^ 4Μ HC1溶液内，並於室溫下攪拌幻分鐘。在減壓下移除所 發性物質，且將殘留物在高真空下放置3小時。使所形撺 胺鹽溶於3毫升無水二氯曱烷中，及以Ν甲基嗎福咻3: ^當 135510-2 -175- 200924790 量，0·05毫升，d 0.920)處理。將異氰酸酯58a添加於溶液（2 當量，3.8毫升在甲苯中之0·075Μ溶液）中。將反應混合物在 室溫下攪拌約3小時。以醋酸乙酯（50毫升）稀釋混合物，並 以1M HC1水溶液（10毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶液（1〇毫升） 及鹽水（10毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過渡， 及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/ 己烧；3:7至7:3) ’而得產物58 (16毫克，16%)，為白色固體。 Ή NMR (500 MHz, CDC13) <5 , 8.19-8.39 (br s, 1H), 8.05 (d, 1H, J=8.5 ® Hz), 6.22 (br s, 1H), 5.91 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.0, 17.0 Hz), 5.71 (dd, 1H, J=9.4, 10.0 Hz), 5.33 (d, 1H, J=9.4 Hz), 5.28 (m, 1H), 5.26 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.20 (dd, 1H, J=1.2, 10.4 Hz), 4.96 (ddd, 1H, J=4.0, 9.4, 9.4 Hz), 4.60 (s, 1H), 4.32 (t, 1H, J=12.6 Hz), 4.12 (d, 1H, J=10.7 Hz), 3.86-4.07 (m, 4H), 3.49-3.63 (m, 3H), 3.38 (dd, 1H, J=4.1, 7.9 Hz), 3.31 (m, 1H), 3.16 (m, 1H), 2.66 (dd, 1H, J=2.8, 13.8 Hz), 2.39 (dt, 1H, J=5.6, 17.3 Hz), 2.27 (dt, 1H, J=6.6, 17.3 Hz), 1.89-2.04 (m, 2H), 1.71-1.87 (m, 4H),
_ 0.88-1.64 (m, 11H), 1.03 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.90 (s, 3H) ； 13C NMR ❹ (CDC13, 125 MHz) δ 196.2, 171.8, 171.3, 159.5, 158.2, 133.7, 117.3,71.4, 70.8, 60.6, 55.7, 53.5, 51.0, 48.3, 48.1, 46.5, 42.2, 34.3, 32.7, 31.8, 31.0, 28.7, 27.8, 27.6, 27.0, 26.9, 24.6, 24.4, 23·5, 21.7, 19.2, 13.5 ppm ;對 C3 6 H5 9 N6 〇7 [M+H]+ 之 HRMS 計算值：687.4445，實測值 687.4434. 製備實例59 :下式之製備： 135510-2 -176-
V 200924790
使N-Boc胺52 (56毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之41^11〇 溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氣甲烷中，且冷卻至 然後添加15滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後，逐滴添加 異氰酸酯59a之溶液（1.0當量），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷 卻浴，且將混合物於室溫下攪拌2小時。以醋酸乙酯（5〇毫 升）稀釋反應混合物，並以1M HC1水溶液（1〇毫升）與鹽水（1〇 毫升）洗務。使有機層以硫酸鎮脫水乾燥，過濾，及在減壓 下浪縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8 至6:4)，而得產物59 (35毫克’ 50%)，為白色固體。對 C383N6〇7[M+H]之HRMSs十鼻值：715.4758，實測值715.4739 製備實例60:下式之製備： 135510-2 •177- 200924790
將醛52j (405毫克）在15毫升無水二氣曱烷中之溶液，以環 丙基異氰化物（Oakwood Prod.，2當量，117毫克）與醋酸(之當 量，0.1毫升，d 1.049)處理。將混合物於室溫下授拌過夜。 在減壓下移除所有揮發性物質，及使殘留物於矽膠上層析 (梯度液：丙嗣/己烧；1:9至1:1)，而得產物6〇a (5〇〇毫克， 98%)，為白色固體。 步驟B :
將醋酸酯60a (500毫克）在15毫升THF/Me〇H/水之1:1:1混合 物中之溶液’以氳氧化鋰單水合物（2 5當量，86毫克）處理， 並攪拌約30分鐘’直到當藉ΤΙχ分析（醋酸乙酯/己烷；6:4) 測定時，所有起始物質已消耗為止。將反應混合物以30毫 升飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋，並以二氣甲烷(3 χ 5〇毫升）萃 135510-2 •178- 200924790 取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮， 而得粗產物60b (464毫克，98%)，為無色半固體，使用之而 無需進一步純化。
將經基醯胺60b (0.824毫莫耳）在2〇毫升無水二氣曱烷中 之溶液，以Dess-Martin過碘烷（2.〇當量，698毫克）處理。將反 應混合物在室溫下攪拌3〇分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉 水溶液（15耄升）處理’並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉 水溶液（20毫升）’且再持續攪拌1〇分鐘。將混合物以二氯 曱烷（3 X 50毫升）萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥， 過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己 烧’ 5:95至35:65) ’而得產物6〇c (333毫克，72%)，為白色固 體。 步驟D :
使N-Boc胺60c (70毫克）溶於1〇毫升在二氧陸園中之4M HC1 /合液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌犯分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質’並將殘留物在高真空下放置過夜。 135510-2 -179- 200924790 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烧中，且冷卻至〇〇c。 然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酷5知之 溶液（1.3當量’ 0.7毫升在曱笨中之0.241M溶液），並持續擾 拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫下攪拌2小時。 以二氣曱烷（50毫升）稀釋反應混合物，並以飽和碳酸氫鈉 水溶液（10毫升）洗務。使有機層以硫酸鎮脫水乾燥，過遽， 及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/ 己烷；2:8至55:45) ’而得產物60 (70毫克，77%)，為白色固 〇 體。1 H NMR (500 MHz, CDC13): (5 7.95 (br s，1H)，7.56 (br s，1H)，5.86 (br s, 1H), 5.65 (t, 1H, J=8.8 Hz), 5.09 (br s, 1H), 4.91 (br s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.07 (d, 1H, J=10.4 Hz), 3.98 (dd, 1H, J=5.0, 10.7 Hz), 3.91 (m, 3H), 3.54 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 2.88 (ddd, 1H, J=3.7, 7.5, 15.1 Hz), 2.56 (d, 2H, J=16.7 Hz), 2.50 (d, 2H, J=16.7 Hz), 1.94 (m, 1H), 0.87-1.76 (m, 15H), 1.11 (s, 6H), 1.03 (s, 3H), 0.97 (s, 9H), 0.86 (s, 3H), 0.70 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13125 MHz) δ 198.0, 172.9, 172.0, 171.2, 160.8, 157.7, 71.5, ❾
70.8, 60.7, 56.9, 53.4, 51.1, 48.4, 46.8, 39.9, 34.9, 32.1, 30.8, 29.4, 28.7, 28.1, 27.7, 27.5, 26.9, 26.8, 24.4, 23.0, 19.2, 13.5, 6.8, 6.7 ppm. M C38H6iN608[M+H]+之 HRMS 計算值：729.4551，實測值729.4558. 製備實例61 :下式之製備：
步驟A : 135510-2 • 180- 200924790
使N-Boc胺60c (56毫克）溶於1〇毫升在二氧陸園中之4m HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小
時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至 〇 C。然後添加20滴飽和碳酸氳鈉水溶液，接著為異氰酸酯 59a在甲笨中之溶液（1.3當量），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷 卻浴，且將混合物於室溫下攪拌2小時。以二氯甲烷（6〇毫 升）稀釋反應混合物，並以飽和碳酸氫鈉水溶液（2〇毫升）洗 滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。 使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而 得產物61 (52毫克，73%)，為白色固體。1 η NMR (500 MHz, CDC13) : (5 8.30-8.53 (br s, 1H), 8.15 (d, 1H, J=8.8 Hz), 6.13 (br s, 1H), 5.74 (dd, 1H, J=8.8, 9.7 Hz), 5.38 (d, 1H, J=9.1 Hz), 4.96 (br s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.35 (dd, 1H, J=12.9, 12.9 Hz), 4.10 (d, 1H, J=10.4 Hz), 4.01 (dd, 1H, J=5.0, 10.4 Hz), 3.94 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.50 (dd, 1H, J=8.5, 8.8 Hz), 3.31 (m, 2H), 3.17 (ddd, 1H, J=5.6, 6.0, 12.3 Hz), 2.91 (ddd, 1H, J=4.0, 7.8, 15.4 Hz), 2.67 (dd, 1H, J=3.4, 13.5 Hz), 2.17 (d, 1H, J=17.0 Hz), 2.10 (d, 1H, J=17.0 Hz), 1.94 (m, 3H), 1.24-1.70 (m, 12H), 1.14 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.89 (s, 3H), 0.84 (m, 2H), 0.73 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) <5 199.9, 171.9, 171.3, 171.0, 160.9, 158.0, 71.4, 70.9, 60.4, 55.4, 53.2, 48.2, 46.3, 45.0, 35.8, 34.6, 135510-2 -181 - 200924790 31.7, 30.3, 28.8, 28.7, 27.8, 27.7, 27.6, 27.1，26.9, 26.8, 24.8, 24.7, 23.2, 19.1，13_4，6.4 ppm.對 C38H63N6〇7[M+H]+之 HRMS計算值： 715.4758，實測值 715.4768. 製備實例62 :下式之製備：
〇 步驟A :
使N-Boc胺60c (60毫克）溶於1〇毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至 0 C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酯 27b在甲笨中之溶液（1.2當量），及持續攪拌1〇分鐘。移除冷 卻浴，並將混合物於室溫下攪拌2小時。以二氣甲烷（60毫 升）稀釋反應混合物，且以飽和碳酸氫鈉水溶液（2〇毫升）洗 滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥’過濾，及在減壓下濃縮。 使殘留物於石夕膠上層析（梯度液：丙酮/己烧；2:8至6:4)，而 得產物62 (65毫克，85%) ’為白色固體。1H NMR (500 MHz， CDC13) '· δ 7.84 (d, 1H, J=8.2 Hz), 7.28 (br s, 1H), 5.73-6.02 (br s, 1H), 135510-2 •182- 200924790 5.57 (ddd, 1H, J=1.9, 8.2, 8.5 Hz), 5.22 (br s, 1H), 4.88 (dd, 1H, J=3.4, 8.5 Hz), 4.51 (s, 1H), 4.01 (m, 3H), 3.62 (dd, 1H, J=8.5, 8.5 Hz), 3.55 (ddd, 1H, J=3.7, 6.3, 9.7 Hz), 3.48 (dd, 1H, J=4.0, 8.1 Hz), 3.38 (m, 1H), 3.18 (d, 1H, J=13.5 Hz), 2.86 (ddd, 1H, J=3.8, 7.2, 14.8 Hz), 2.41 (d, 1H, J=11.6 Hz), 2.24 (d, 1H, J=11.6 Hz), 1.93 (m, 1H), 1.72-1.89 (m, 4H), 1.40 (s, 9H), 1.28-1.70 (m, 16H), 1.21 (m, 1H), 1.06 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.91 (m, 2H), 0.70 (m, 2H) ； 1 3C NMR (CDC13, 125 MHz) 5 197.9, 172.0, 171.0, 160.9, 157.0, 70.8, 70.6, 61.0, 60.8, 54.9, 53.7, 51.1, 48.4, 36.2, 32.0, 30.5, 28.7, ® 27.9, 27.2, 26.9, 26.8, 25.9, 24.1, 23.8, 23.5, 23.0, 21.9, 21.8, 19.3, 13.4, 6.9, 6.8 ppm. 製備實例63:下式之製備： \/
步驟A :
使胺63a (2.0克）在loo毫升無水二氣甲烷中之溶液冷卻至 0 C，並以吡啶（3.0當量，2.24毫升，d 0.978)與氣化乙烷磺醯 (1.2當量，1_05毫升，d 057)處理。將所形成之黃色均勻溶 液攪拌過夜（溫度0至25。〇。以200亳升醚稀釋混合物，且 以1M HC1水溶液（1〇〇毫升）與鹽水（1〇〇毫升）洗滌。使有機層 以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層 135510-2 -183- 200924790 m梯度rr二氯甲烧至醋酸乙醋/二氣甲院3:7)，而得產物 63b (850毫克，30%)，為白色固體。 步驟B :
Ο
將乙確醯胺63b_毫克）在無水卿（3〇毫升）中之溶液， 以礙酸铯（3.0當量’ 2.74克）與磁甲烧(3〇#量，〇51毫升，d 2.280)處理。將反應混合物授拌大約4小時。似分析⑺朗/ 己烷；2:8)顯示所有起始物質已消耗。以醋酸乙酯⑽毫升) 稀釋混合物，並以水(3x5〇毫升）與鹽水（1χ5〇毫升）洗務。 使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及 得產㈣C(_毫克W白色固體。未對^于: 一步純化。 運 步驟C :
^n^NH2HCI 63d 使n-b〇c保護胺63c (850毫克）溶於1〇〇毫升在二氧陸園中 之4M HC1，谷液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌，直到者 藉TLC(丙酮/己烧；2:8)測定時，所有起始物質已消耗為止备。 在減壓下移除所有揮發性物質，並將殘留物放置在高真空 下’而得產物63d (680毫克’ 98%)。 步驟D :
135510-2 -184- 200924790 將胺鹽酸鹽63d (2.636毫莫耳）在40毫升二氯甲烧中之溶 液以40宅升飽和奴酸風納水溶液處理，並在〇°c下激列搜掉 10分鐘。停止攪拌，且將液層分離。使光氣（1〇毫升在曱苯 中之20%溶液）經過針頭，以一份添加至有機層（下層）中。 於0 C下添加10分鐘後，將混合物直接激烈攪拌，並於室溫 下再攪拌2.5小時。以100毫升二氯甲烷稀釋混合物，且分離 液層。將有機層以30毫升冷飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，及 以硫酸鎂脫水乾燥。過濾有機層，並將濾液以5〇毫升甲苯 ^ 稀釋。使產物63e (654毫克，98%)濃縮，及以曱苯中之〇131M 溶液（溶液含有約2毫升二氣曱烷）保持。 步驟E :
使N-Boc胺52 (60宅克）溶於1〇毫升在二氧陸圜中之hq Q 溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質’並將殘留物在高真空下放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至〇〇c。 然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水落液。分鐘後，逐滴添加 異氰酸酯63e之溶液（1.2當量，0.97毫升在曱苯中之〇·ΐ3ΐΜ溶 液），並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下搜拌2小時。以二氣曱烷(7〇毫升）稀釋反應混合物，並以 飽和碳酸氫鈉水溶液（20毫升）洗蘇。使有機層以硫酸鎂脫 水乾燥，過濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯 135510-2 •185- 200924790
度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物63 (49毫克，65%)， 為白色固體。1 H NMR (500 MHz，CDC13) : δ 8.04 (d, 1H, J=8.5 Hz), 7.52 (br s, 1H), 6.04 (br s, 1H), 5.89 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.4, 17.0 Hz), 5.65 (dd, 1H, J=8.8, 10.4 Hz), 5.26 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.22 (dd, 1H, J=1.2, 10.0 Hz), 5.17 (d, 1H, J=10.0 Hz), 4.99 (br s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.19 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.02 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.60 (dd, 1H, J=8.1, 9.1 Hz), 3.54 (m, 1H), 3.49 (d, 1H, 1.9 Hz), 3.44 (m, 1H), 3.32 (m, 1H), 3.07 (m, 3H), 2.94 (s, 3H), 1.93 (m, 1H), 1.35 (t, 3H, J=7.5 Hz), 1.27-1.62 (m, ❿ 15H), 1.16 (m, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.91 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) 5 , 198.6, 172.3, 171.3, 159.4, 158.0, 133.4, 117.6, 71.1, 70.6, 60.7, 54.7, 53.5, 51.0, 50.6, 48.4, 45.8, 42.2, 34.8, 34.5, 32.0, 30.9, 28.7, 27.8, 27.3, 27.0, 26.9, 24.3, 24.2, 19.2, 13.5, 8.6 ppm ； fi C34H59N608S [M+H]+ 之 HRMS 計算值：711.4115，實測值 711.4133. 製備實例64 :下式之製備：
使N-Boc胺60c (60毫克）溶於1〇毫升在二氧陸圜中之4M 135510-2 186- 200924790 HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至 〇 c。然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後，逐滴 添加異氰酸酯63e之溶液（1.2當量，0.97毫升在曱苯中之 0.131M溶液），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合 物於室溫下攪拌2小時。以二氯甲烷（70毫升）稀釋反應混合 物’並以飽和碳酸氫鈉水溶液（20毫升）洗滌。使有機層以 ® 硫酸鎂脫水乾燥’過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物制（62 毫克，82%)，為白色固體。in NMR (500 MHz, CDC13) : (5 8.10 (br s, 1H), 7.47 (br s, 1H), 5.94-6.19 (br s, 1H), 5.65 (dd, 1H, J=8.8, 10.7 Hz), 5.21 (d, 1H, J=7.8 Hz), 5.00 (dd, 1H, J=3.7, 9.4 Hz), 4.59 (s, 1H), 4.21 (d, 1H, 1=10.7 Hz), 4.02 (dd, 1H, J=5.0, 10.7 Hz), 3.93 (dd, 1H, J=9.1, 9.7 Hz), 3.55 (m, 2H), 3.48 (d, 1H, J=12.6 Hz), 3.40 (m, 1H), 3.29 (m, 1H), 3.07 (q, 2H, J=7.2 Hz), 3.06 (m, 1H), 2.93 (s, 3H), 2.85 (dddd, 1H, J=1.8, 4.0, 7.5, 15.1 Hz), 1.91 (m, 1H), 1.34 (t, 3H, J=7.2 Hz), 1.25-1.61 (m, 12H), 1.13 (m, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.89 (s, 3H), 0.87 (m, 2H), 0.69 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.9, 172.3, 171.4, 160.9, 158.0, 71.0, 70.6, 60.6, 53.2, 50.9, 50.6, 48.4, 45.9, 34.8, 34.5, 32.1, 31.1, 28.7, 27.8, 27.5, 27.0, 26.9, 24.4, 23.0，19·2, 13.6, 8.6, 6.7 ppm;對 C3 4 H5 9 N6 08 S [M+l]+之 HRMS計算值：711.4115，實測值711.4133. 製備實例65:下式之製備： 135510-2 -187 ^ 200924790
步驟A
使（S)-別-蘇胺酸-OMe鹽酸鹽65a (Chem-Impex，5克）在無水
氯曱烷中之二碳酸二-第三-丁酯（1.1當量，7.0克）處理。逐 滴添加N-曱基嗎福啉（2.5當量，8.1毫升，d 0.920)，且將混合 物攪拌30分鐘。移除冷卻浴，並將混合物再攪拌3小時。將 混合物濃縮至其體積之三分之一，然後以醋酸乙酯（300毫 升）稀釋，且以1M HC1水溶液（100毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶 液（80毫升）及鹽水（80毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾 燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得產物65b (6.78克，98%)， 為無色油。 步驟B :
使Boc-L-別-Thr-OMe65b (6·8克）在250毫升無水THF中之溶 液脫氣（真空/Ν2-沖洗），並以烯丙基碳酸甲酯（1.3當量，4.3 毫升，d 1.022)處理。添加催化量之肆（三苯膦）鈀（0.02莫耳％， 135510-2 -188- 200924790 673毫克）。使微黃色混合物再一次脫氣，並在6〇°c下加熱 約3小時，直到TLC分析（丙酮/己烷；2:8)不再顯示起始物 質留下為止（反應混合物變成褐色）。使混合物在減壓下濃 縮’及使殘留物於矽膠上層析（醋酸乙酯/己烷；1:9)，而得 產物6Sc (5.72克，72%)，為無色油。 步驟C :
使曱酯65c (1.45克）在250毫升THF/水/MeOH之4:2:1混合物 中之浴液冷卻至0 C ’並以氫氧化鐘單水合物（2.5當量，2·19 毫克）處理。30分鐘後，移除冷卻浴’且將混合物於室溫下 再攪拌4小時，直到當藉TLC分析（丙酮/己烷；15:85)測定時， 所有起始物質已消耗為止。將反應混合物以2〇〇毫升HC1 水/谷液（混合物之pH值=1)處理，並使產物溶入二氣曱烧（4 χ 100毫升）中。使合併之有機萃液以硫酸鎂脫水乾燥，過濾， 〇 及在減壓下濃縮，而得產物。未對產物65d (5.42克，98%) 進行進一步純化。 步驟D :
將酸65d (20.92毫莫耳）在2〇〇毫升無水二氯甲烷與1〇〇毫升 135510-2 •189· 200924790 無水DMF中之溶液，於〇°c下攪拌，並以HATU (1,4當量，UJ6 克）處理。添加胺鹽ld (12當量，5 16克），接著為N_甲基嗎 福淋（4當量，9.19毫升，d 0.920)。將反應混合物攪拌過夜。 在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於5〇〇毫升酷 酸乙酯中。將有機層以水（2〇〇毫升）、HC1水溶液（1〇〇毫 升）、飽和碳酸氫鈉水溶液（100毫升）及鹽水（1〇〇毫升）洗滌。 使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使 殘留物於矽膠上層析（醋酸乙酯/己烷；2:8)，而得產物65e
A V (7.6克，88%)，為無色油，伴隨著少量其相應之非對映異構 產物。 步驟E :
使曱酯65e (7.6克）在300毫升thF/水之2:1混合物中之溶液 冷卻至0。(：，並以氫氡化鋰單水合物（2.5當量，1.93毫克）處 理。30分鐘後，移除冷卻浴，且將混合物於室溫下再授拌4 小時’直到當藉TLC分析（醋酸乙酯/己烷；25:75)測定時， 所有起始物質已消耗為止。將反應混合物以2〇〇毫升iM HC1 水溶液（混合物之PH值=1)處理，並使產物溶入二氣曱烧（4 X 100毫升）中。使合併之有機萃液以硫酸鎂脫水乾燥，過濾， 及在減壓下濃縮’而得產物65f (6.86克，93%)，為無色固體。 步驟F : 135510-2 -190- 200924790
將酸65f (6.86克）在100亳升無水二氣甲烷與1〇〇毫升無水 DMF中之溶液，於0°C下攪拌，並以HATU(14當量，923克） 處理。將胺鹽If (U當量，4.21克）添加在1〇〇毫升二氣甲烷 中，接著添加N-曱基嗎福啉（4當量，7 6毫升，d 〇 92〇)。將 Ο 反應混合物在OC下攪拌過夜。在真空下移除所有揮發性物 質，並使殘留物溶於500毫升醋酸乙酯中。將有機層以水（2 X 100毫升）、1M HC1水溶液（1〇〇毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶液 (100毫升）及鹽水（100毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾 燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（醋酸 乙酯/己烷；3:7)，而得產物65g (8 17克，84%)，為無色油。
使二烯65g (8.17克）在u升甲苯中之溶液脫氣3〇分鐘（氬 起泡），並以Grubb氏觸媒（〇 2當量，2 38克）處理。將粉紅色 溶液加熱至6〇°C ’歷經18小時（於加熱1〇分鐘後，溶液變成 暗色）。於減墨下移除溶劑，及使殘留物於矽膠上層析（醋 酸乙酯/己炫· ； 3:7)，而得烯烴產物65h (7.0克，90%)，為E- 135510-2 -191 - 200924790 與2_異構物之混合物（約4:1)。 步驟Η :
^將烯fe 65h (7.0克）在300毫升甲醇令之溶液，以鈀/碳（〇1 莫耳％，1.37克10% Pd/C)處理。使混合物於35批下氫化，直 ❾到所有起始物質已消耗為止（約3小時）。將反應混合物以 300 ¾升二氣甲烷稀釋，並經過短路徑之矽藻土過濾。濃縮 濾液，及使殘留物於矽膠上層析（醋酸乙酯/己烷；3:7)，而 得產物65i (5.33克，76%)，為白色固體。 步驟I :
將乙酯65ι (5.33克）在1〇〇毫升無水THF中之溶液，以硼氫 化鋰（2.1當量，10.4毫升在THF中之2M溶液）處理。將反應混 合物在室温下攪拌，並藉TLC監測（丙酮/己烷；3:7)起始物 質之消失。2小時後，添加更多硼氫化鋰溶液（丨當量），且 持續搅拌1小時。藉由添加飽和氣化鍵水溶液，使過量颂氣 化鋰淬滅。使混合物於醋酸乙酯（300毫升）與飽和碳酸氫鈉 水〉谷液（100毫升）之間作分液處理。將水層以醋酸乙醋（2 χ 100毫升）逆萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過 135510-2 •192· 200924790 濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（丙酮/己烷； 3:7) ’而得產物65j (3.93克，80%)，為白色固體。 步驟J :
❹ Dess-Martin過碘烷（1.5當量，1.28克）處理。將反應混合物在 至溫下授拌3小時。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液（1〇毫 升）處理，並擾拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉水溶液（3〇毫 升）’且再持續攪拌10分鐘。將混合物以二氣曱烷（3 X 8〇毫 升）萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃 縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：醋酸乙酯/己烷；4:6 至8:2) ’而得產物65k (75〇毫克，75%)，為無色固體。 步驟K :
將越65k (750毫幻在20毫升無水二氣曱院中之溶液，以 烯丙基異氰化物（2當量，0.26毫升，d0.8)與醋酸(2當量，〇17 毫升，d 1.〇49)處理。將混合物於室溫下攪拌約5小時。在真 二下移除所有揮發性物質，及使殘留物於矽膠上層析（梯度 液·丙S同/己烷；1:9至45:55)，而得產物65丨（7〇〇毫克，7攸）， 135510-2 •193· 200924790 為白色固體。 步驟L :
將醋酸酯651 (700毫克）在2〇毫升THF/水之2:1混合物中之 溶液，以氫氧化鋰單水合物（2 5當量，118毫克）處理，並攪 Ο 芈’力刀鐘直到當藉TLC分析（醋酸乙自旨/己烧；8:2)測定 時，所有起始物質已消耗為止。將反應混合物以5〇毫升飽 和石厌酸氫鈉水溶液稀釋，並以二氣曱烷（3 χ 8〇毫升）萃取。 使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮，而得 產物65m (651毫克’ 98%) ’為無色半固體，使用之而無需進 一步純化。 步驟Μ :
將羥基醯胺65m (1.127毫莫耳）在25毫升無水二氣曱烷中 之溶液’以Dess-Martin過碘烷（2〇當量，956毫克）處理。將反 應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉 水溶液（20耄升）處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉 水溶液（30毫升）’且再持續攪拌1〇分鐘。以二氯曱烷（3χ8〇 毫升）萃取混合物。使合併之有機層以硫酸⑽水乾燥，過 135510-2 -194- 200924790 遽’及濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷； 1.9至45:55)，而得產物65n (585毫克，9〇%)，為白色固體。 步驟N :
使N-Boc胺65η (60毫克）溶於1〇毫升在二氧陸園中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 ® 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至 〇 C。然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後，逐滴 添加異氣酸醋56e之溶液（1.2當量，0.57毫升在曱苯中之 0.216M溶液），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合 物於室溫下攪拌2小時。以二氯甲烷（7〇毫升）稀釋反應混合 物’並以硫酸鎂脫水乾燥’過濾，及在減壓下濃縮。使殘 0 留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；15:85至5:5)，而得 產物65 (50宅克，65%)，為白色固體。1H NMR (5〇〇 MHz, CDC13) ： δ 8.13 (br s, 1H), 7.42-7.82 (br s, 1H), 6.30 (br s, 1H), 5.90 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.4, 17.0 Hz), 5.71 (br s, 1H), 5.38 (br s, 1H), 5.27 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.23 (dd, 1H, J=1.2, 10.4 Hz), 4.63 (dd, 1H, J=7.8, 8.1 Hz), 4.50 (br s, 1H), 4.23 (d, 1H, J=l〇.4 Hz), 4.05 (m, 2H), 3.98 (dd, 1H, J=5.6, 5.9 Hz), 3.95 (d, 1H, J=ll.〇 Hz), 3.88 (dd, 1H, J=10.7, 10.8 Hz), 3.82 (q, 1H, J=11.6 Hz), 3.71 (m, 1H), 3.62 (ddd, 1H, J=5.0, 5.3, 9.4 Hz), 3.20 (m, 1H), 2.55 (d, 2H, J=16.7 Hz), 2.47 (d, 2H, J=16.7 Hz), 1.73-1.97 (m, 4H), 135510-2 -195- 200924790 1.14 (d, 3H, J=6.0 Hz), 1.10 (s, 6H), LOO (s, 3H), 0.99 (s, 9H), 0.83 (s, 3H) ； ,3C NMR (CDC13, 125 MHz) <5 198.0, 172.8, 171.5, 159.4, 157.8, 117.7, 75.5, 68.1, 60.8, 57.2, 55.9, 48.7, 46.8, 42.3, 35.2, 29.3, 28.7, 28.3, 27.8，27.6，26.9, 26.8，24.7, 24.4, 19.4, 16.3，13·6 ppm ;對 C3 9 H6 3 N6 08 [M+H]+ 之 HRMS 計算值：743.4707，實測值 743.4717.
製備實例66:下式之製備：
❾ 使N-Boc胺65η (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置過 夜。使所形成之胺鹽溶於5毫升二氯曱烷中，且冷卻至〇它。 然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水溶液。10分鐘後，逐滴添加 "氰酸西曰63e之溶液（1 2當量，〇 95毫升在曱苯中之〇 131M溶 液）’並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下攪拌3小時。以二氣曱烷(7〇毫升)稀#反應混合物，並以 硫酸儀脫水乾燥，㈣，及在減壓下H使殘留物於_ 膠上層析（梯度液：丙酮/己H8至6:4)，而得產物66 (55 135510-2 -196- 200924790 毫克，73%)，為白色固體。NMR (500 MHz，CDC13) : (5 8.20 (d, 1H, J=6.6 Hz), 7.58-7.77 (br s, 1H), 6.13 (br s, 1H), 5.90 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.0, 17.0 Hz), 5.76 (br s, 1H), 5.27 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.22 (dd, 1H, J=1.2, 10.0 Hz), 5.15 (d, 1H, J=9.1 Hz), 4.69 (dd, 1H, J=8.8, 8.8 Hz), 4.57 (s, 1H), 4.29 (d, 1H, J=10.7 Hz), 3.91-4.09 (m, 4H), 3.61 (m, 2H), 3.47 (dd, 1H, J=11.9, 13.5 Hz), 3.19 (m, 1H), 3.07 (m, 3H), 2.94 (s, 3H), 1.95 (m, 1H), 1.35 (t, 3H, J=7.5 Hz), 1.27-1.69 (m, 12H), 1.22 (d, 3H, J=6.3 Hz), 1.14 (m, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.89 (s, 3H) ； 13C NMR ® (CDC13, 125 MHz) δ 199.0, 172.8, 171.5, 159.3, 158.1, 133.5, 117.5, 75.8, 68.4, 60.7, 56.2, 50.4, 48.6, 45.6, 42.2, 34.7, 34.5, 32.0, 31.6, 28.6, 27.7, 27.0，26.9，26.7，24.8，24.6，19.3，16.2，14.5，13.5，8.5 ppm ;對 c3 5 H6 丨 N6 〇8 S [M+H]+ 之 HRMS 計算值：725.4272，實測值 725.4285. 製備實例67 :下式之製備：
步驟A :
使N-Boc胺33 (60宅克）溶於1〇毫升在二氧陸圜中之4Μ Ηα /合液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置過夜。 135510-2 •197- 200924790 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至〇t>c。 然後添加N-甲基嗎福啉（2當量，〇〇3毫升，d〇92〇)。ι〇分鐘 後，逐滴添加異氰酸酯56e之溶液（15當量，〇 8毫升在甲苯 中之0.2M溶液），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混 合物於室溫下攪拌2小時。以醋酸乙酯（5〇毫升）稀釋反應混 合物’並以1M HC1水溶液（1〇毫升）與鹽水（1〇毫升）洗滌。使 有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘 留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至1:1)，而得產 © 物 67 (50 毫克，64%)，為白色固體。iH NMR (5〇〇 MHz，CDCl3): δ 8.14 (d, 1H, J=6.9 Hz), 7.66-7.82 (br s, 1H), 6.11 (br s, 1H), 5.70 (br s, 1H), 5.32 (br s, 1H), 4.63 (br s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.19 (d, 1H, J=10.0 Hz), 3.96 (dd, 1H, J=5.0, 10.0 Hz), 3.91 (m, 3H), 2.91 (ddd, 1H, J=3.7, 7.8, 15.1 Hz), 2.57 (d, 2H, J=16.7 Hz), 2.50 (d, 2H, J=16.7 Hz), 1.86 (m, 3H), 1.69 (m, 1H), 1.18-1.61 (m, 16H), 1.10 (s, 6H), 1.01 (s, 3H), 0.95 (s, 9H), 0.89 (m, 2H), 0.87 (s, 3H), 0.71 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 199.2, 173.5, 172.9, 171.9, 160.7, 158.0, 60.5, 56.6, 51.5, 48.5, 46.8, 39.9, o 35.0, 34.2, 31.4, 29.4, 28.1, 27.8, 27.6, 27.4, 27.3, 27.0, 26.9, 26.5, 26.1, 23.4, 23.1, 19.4, 13.6, 6.8, 6.7 ppm. 製備實例68:下式之製備：
步驟A : 135510-2 - 198- 200924790
使N-B0c胺34 (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4Μ Ηα 溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至〇<t。 然後添加N-甲基嗎福淋（2當量，〇.〇2毫升，d 0.920)。10分鐘 後，逐滴添加異氰酸酯56e之溶液（1.4當量，〇·6毫升在甲苯 中之0.241M溶液），並持續搜拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將 混合物於室溫下攪拌2小時。以醋酸乙酯（5〇毫升）稀釋反應 混合物，並以1M HC1水溶液（1〇毫升）與鹽水（10毫升）洗滌。 使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使 殘留物於石夕膠上層析（梯度液：丙酮/己烧；1:9至45:55)，而 得產物68 (44毫克，56%)，為白色固體。1H NMR (500 MHz, ❹ CDC13) ·· δ 8.08 (br s, 1H), Ί.52-1.11 (br s, 1H), 6.06 (br s, 1H), 5.70 (br s, 1H), 5.26 (br s, 1H), 4.63 (m, 2H), 4.20 (d, 1H, J=10.0 Hz), 3.97 (dd, 1H, J=5.0, 10.0 Hz), 3.92 (m, 3H), 3.43 (m, 2H), 2.57 (d, 2H, J=16.7 Hz), 2.50 (d, 2H, J=16.7 Hz), 1.90 (m, 1H), 1.74 (m, 2H), 1.27 (t, 3H, J=7.2 Hz), 1.20-1.62 (m, 17H), 1.11 (s, 6H), 1.02 (s, 3H), 0.96 (s, 9H), 0.88 (s, 3H)； ,3C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 199.1, 173.5, 172.9, 171.8, 159.3, 157.9, 60.6, 56.6, 51.5, 48.5, 46.8, 40.0, 34.9, 34.8, 34.1, 32.8, 29.4, 28.1, 27.8, 27.5, 27.4, 27.3, 27.0, 26.9, 26.5, 26.0, 25.1, 23.4, 19.4, 14.8, 13.6 ppm ； 對 C3 8 H6 3 N6 07 [M+H]+ 之 HRMS 計算值：715.4758,實測值 715.4751. 135510-2 199· 200924790 製備實例69 :下式之製備：
步驟A :
"分丄υ宅开隹二軋陸園肀之4M HC1洛液内。將所形成之溶液於室溫下授拌如分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小
夺使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氣甲烷中，且冷卻至 C…、:後添加N-甲基嗎福琳（2當量，〇.〇4毫升，d 0.920)。1〇 刀鐘後，逐滴添加異氰酸酯S9a在曱笨中之溶液〇 2當量）， 並持、λ攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫下攪 拌2小時。以醋酸乙酯（50毫升）稀釋反應混合物，並以1Μ 谷液（10毫升）與鹽水（10毫升）洗蘇。使有機層以硫酸 鎮脫水、卜口 ’ ' ι踩’過濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上 層析（梯度液：丙酮/己烷；1:9至45:55)，而得產物69 (45毫 克 38%) ’ 為白色固體。！h NMR (500 MHz，CDC13): δ 8.26-8.67 (1)Γ S，1H)，8,17 (br s, 1H), 6.19 (br s, 1H), 5.92 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.4, 17.3 HZ)，5.74 (dd，取 J=8.8, 9.1 Hz), 5.41 (br s，1H), 5.26 (dd，1H，J=1.2, 17.3 HZ)’ 5.20 (d，取 J=l〇.〇 Hz), 4.67 (br s, 1H)，4.62 (s, 1H), 4.35 (dd，1H, 135510-2 200924790 J=1.9, 12.9 Hz), 4.20 (d, 1H, J=9.8 Hz), 3.99 (m, 4H), 3.58 (ddd, 1H, J=5.9, 6.9, 12.6 Hz), 3.18 (ddd, 1H, J=5.9, 5.9, 11.9 Hz), 2.69 (d, 1H, J=10.7 Hz), 2.18 (d, 1H, J=17.0 Hz), 2.12 (d, 1H, J=17.0 Hz), 1.96 (m, 1H), 1.18-1.89 (m, 20H), 1.12 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.91 (s, 3H) ； ,3C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 199.3, 173.3, 171.8, 171.1, 159.4, 158.2, 133.7, 117.3, 60.4, 55.3, 51.5, 48.3, 46.3, 45.0, 42.3, 35.8, 34.6, 34.0, 31.2, 30.3, 28.6, 27.8, 27.7, 27.6, 27.3, 27.2, 27.0, 26.3, 25.9, 25.4, 23.2, 19.3, 13.5 ppm. ❹ 製備實例70 :下式之製備： γ
步驟A :
使队：6〇〇胺34 (73宅克）溶於10毫升在二氧陸圜中之41^11€1 溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至〇〇c。 然後添加N-曱基嗎福啉（2當量，〇.〇3毫升，d 0.920)。1〇分鐘 後’逐滴添加異氰酸酯59a在曱苯中之溶液（1.2當量），並持 續授拌10分鐘。移除冷卻浴’且將混合物於室溫下授摔2 135510-2 -201 · 200924790 小時。以醋酸乙酯（50毫升）稀釋反應混合物，並以1M HCl 水溶液（10毫升）與鹽水（1〇毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫 水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯 度液：丙酮/己烷；1:9至45:55)，而得產物70 (63毫克，69%)， 為白色固體。丨 H NMR (500 MHz, CDC13): <5 8.20-8.43 (br s, 1H)，8·17 (br s, 1H), 6.20 (br s, 1H), 5.75 (dd, 1H, J=8.2, 9.4 Hz), 5.41 (br s, 1H), 4.66 (d, 1H, J=9.1 Hz), 4.63 (s, 1H), 4.36 (dd, 1H, J=12.6, 13.2 Hz), 4.18 (d, 1H, J=l〇.4 Hz), 3.96 (m, 2H), 3.57 (m, 1H), 3.41 (m, 2H), 3.18 (ddd, ^ 1H, J=5.9, 11.9 Hz), 2.69 (d, 1H, J=13.2 Hz), 2.19 (d, 1H, J=17.0 Hz), 2.14 (d, 1H, 17.0 Hz), 1.76-1.99 (m, 4H), 1.25 (t, 3H, J=7.2 Hz), 1.18-1.75 (m, 17H), 1.12 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.91 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) <5 199.9, 173.3, 171.8, 171.1, o 步驟A : 159.4, 158.2, 60.4, 55.2, 53.5, 51.5, 48.3, 46.3, 35.8, 34.8, 34.6, 31.3, 30.3, 28.7, 27.8, 27.7, 27.6, 27.3, 27.0, 26.4, 26.0, 23.2, 19.3, 14.8, 13.5 ppm ； 對 C3 8 H6 5 N6 06 [M+H]+ 之 HRMS 計算值：701.4966，實測值 701.4960. 製備實例71:下式之製備：
135510-2 -202- 200924790
將31 (100毫克，0.169毫莫耳）在二氧陸圜中之4Ν· HCl (5毫 升）内之溶液，於室溫下攪拌1小時。將溶劑移除至乾涸， 獲得71a (120毫克），使用之而無需進一步純化 步驟B :
將71a (89毫克，0.169毫莫耳）在CH2C12(10毫升）中之溶液， 以異氰酸酯27b (3當量）、飽和NaHC03 (3毫升）處理，並激烈 攪拌2小時。使溶液在5°C下靜置12小時。分離CH2C12層， 以水、鹽水洗滌，並經過Na2S04過濾。將溶劑移除至乾涸， 及使殘留物於矽膠管柱上純化（40%至60%丙酮/己烷），而得 71 (73 毫克）。MS (ES) m/z 相對強度 773 [(M+Na)+，20] ; 751 [(M+l)+，100]·對 C36H59N609S [M+l]+之計算值：751.4064;實 測值 751.4075. 製備實例72 :下式之製備： 135510-2 -203· 200924790 CH； CH；
步驟A : CH3^CH3
將71a (89毫克，0.169毫莫耳）在CH2C12 (10毫升）中之溶液， 以異氰酸酯51c (1.5當量）、飽和NaHC03 (4毫升）處理，並激 烈攪拌30分鐘。使溶液在5°C下靜置12小時。分離CH2C12層， 以水、鹽水洗滌，且經過Na2 S04過濾。將溶劑移除至乾涸， 及使殘留物於矽膠管柱上純化（40%至50%丙酮/己烷），而得 72 (95 毫克）。MS (ES) m/z 相對強度 790 [(M+CH3 ΟΗ+1)+，40]; 758 [(厘+1)+,100].對(：38：^9&〇9以+1]+之計算值：758.4453;實測 值 758.4449· 製備實例73 :下式之製備：
步驟A : 135510-2 •204· 200924790 riv Z3s N-(第三·丁氧職)-L_絲胺酸 及共同研究者所叙程序（Arn〇w，LD系根據藉由·⑽ τ r / a ^ ' Ka]antar, Τ. Η. ； Vederas, J. C. J. Am. Chem. Soc, 1985, 107, 7105-7l〇Q),, τ ς Πττ pa J, 自市購可得之N-Boc- L-Ser-OH開始而製成。 步驟B :
YTtf 73a x ^ H YV" 〇
ΌΗ NH 73b 於環境溫度下，將N-(第三-丁氧某铠且 ^ 孔I斂基）-L-絲胺酸-;5-内酯 a (1毫莫耳）在20毫升無水乙腈中 之冷液添加至烯丙基胺 (5毫莫耳）在3G毫升無水乙腈中之經攪拌溶液内，歷經^小 時。2小時後，使溶液在減壓下濃縮。將殘留物以乙猜配成 衆液’及藉過濾回收酸產物731^
於室溫下，將酸2 (1毫莫耳）在飽和破酸氫鈉水溶液&毫 升）與水（1毫升）中之溶液’以丙酮（1毫升）中之氯甲酸辛醋 (1.12毫莫耳）處理。將反應混合物攪拌2小時。使混合物^ 醚(20毫升）與水(20毫升）之間作分液處理。使水層在冰水浴 中冷卻，使用5%HC1水溶液達到PH2 ’並以二氣甲烷（3χ3〇 135510-2 •205, 200924790 毫升）萃取。使合併之有機層以硫酸鎮脫水乾燥，過濾，及 濃縮，而得酸產物73c。 步驟D :
73c 〇
OH
DMF中之溶液，於0°C下攪拌，並以HATU (1.4毫莫耳）處理。 連續添加胺鹽酸鹽（1.3毫莫耳）與N-曱基嗎福啉(4亳莫耳）。 使反應混合物逐漸溫熱至室溫，並攪拌過夜。在真空下移 除所有揮發性物質，且使殘留物溶入1〇〇毫升醋酸乙酯中。 將有機層以水（20毫升）、IN HC1水溶液（20毫升）、飽和碳酸 氫納水溶液（20毫升）及鹽水（20毫升）洗務：。使有機層以硫酸 鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使產物73d於矽膠上 藉管柱層析純化。 步驟E :
於〇°C下，將曱酯73d (1毫莫耳）在15毫升THF/Me0H/H20之 混合物（1:1:1)中之溶液，以氫氧化鋰單水合物（2.5毫莫耳）處 135510-2 -206- 200924790 理。移除冷卻浴，並將反應混合物於室溫下授拌，且藉TLC 監測（丙酮/己烧；2:8)。1小時後’添加1〇毫升in HC1水溶 液.，及在減壓下移除所有揮發性物質。使殘留物於3〇毫升 IN HC1水溶液與1〇〇毫升二氯甲烷之間作分液處理。將水層 以二氣甲烷（2 X 50毫升）逆萃取。使合併之有機層以硫酸鎂 脫水乾燥’過遽’及在減壓下滚縮，而得酸產物73e。 步驟F :
將酸73e (1毫莫耳）在1〇毫升無水二氣曱烷與1〇毫升無水 DMF中之溶液，於〇〇c下攪拌，並以HATU (1 4當量，i 15克） 處理。將胺鹽酸鹽7 (1.2毫莫耳）添加在10毫升二氯甲烷中， 接著為N-甲基嗎福啉（4毫莫耳）。將反應混合物攪拌過夜 〇 (溫度從0至25。(：）。在冑空下移除所有揮發性物冑，且使殘
留物洛於100毫升醋酸乙酯中。將有機層以水（20毫升）、1N HC1水〉谷液（2〇毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶液(20毫升）及鹽水 (20毫升）洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在 減壓下濃縮。使產物73f於矽膠上藉管柱層析純化。 步驟G : 135510-2 -207- 200924790
」吏一、73f (1毫莫耳)在甲苯中之〇.瞻溶液脫氣沁 (氬起泡）’並以Grubb氏觸媒（〇2毫莫耳）處理。將粉紅= 液加熱至60。〇，屛铋】a丨± 色/合 歷左16小日守。在減壓下移除溶劑， "3析，而得烯烴產物7知，為Ε-與Ζ-異構物之 混合物。 饵物之 步驟Η :
_ 73h H 山將烯烴73g (1毫莫耳）在2〇毫升曱醇中之溶液，以5%纪/ 留物於矽膠h & ^
炭(〇莫耳％)處理。使混合物於5〇网下氫化，直到使所有 起始物貝’肖耗為止。將反應混合物以100毫升二氣甲烷稀 釋，並經過紐路徑之矽藻土過濾。濃縮濾液，及使產物73h 於石夕膠上藉管柱層析純化。
73i 135510-2 200924790 將巨環狀胺73h(1毫莫耳）在10毫升二氣甲烧中之溶液， 以碳酸卸(2毫莫耳)與氣化(三甲基石夕燒基)乙賴(ι毫莫 耳）處理。將混合物授拌^ ’並蒸發溶劑。使產物诎於石夕 膠上藉管柱層析純化。 步驟j:
將曱酉曰73ι (1毫莫耳）在10毫升無水THF中之溶液，以爛氯 化鋰（2.1毫莫耳）處理。將反應混合物於室溫下攪拌。$小時
後，藉由添加飽和氯化銨水溶液（3毫升）使過量硼氫化鋰淬 ❹ 滅。使混合物於醋酸乙酯（50毫升）與飽和碳酸氫鈉水溶液 (3〇毫升）之間作分液處理。將水層以醋酸乙酯（2 X 30毫升） 與一氯甲烷(2 X 30毫升）逆萃取。使合併之有機層以硫酸鎂 脫水乾秌，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層 析’而得產物73j。
將醇73j (1毫莫耳）在2〇毫升無水二氯曱烷中之溶液，以 Dess-Martin過碘烷（15毫莫耳）處理。將反應混合物於室溫下 135510-2 200924790 攪拌45分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液（ι〇毫升）與 飽和碳酸氫鈉水溶液（20毫升）處理，並攪拌15分鐘。將= 合物以二氯曱烷（3 x4〇毫升）萃取。使合併之有機層以硫酸 鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析，而 得醛產物73k。
步驟L :
將醛73M1毫莫耳)在1〇毫升無水二氯甲烷中之溶液，以 烯丙基異氰化物(2毫莫耳)與醋酸(2毫莫耳)處理。將混合 物攪拌約5小時。在真空下移除所有揮發性㈣，並使殘留 物於石夕膝上層析’而得醋酸酯產物731。 步驟Μ : 〇
X V
使醋酸酯73丨（1毫莫耳）溶於16毫升THF/水之1:1混合物 中，亚以虱氧化鋰單水合物（2 5毫莫耳）處理。3〇分鐘後， 使此。物於—氯甲烷(5〇毫升）與飽和碳酸氫鈉水溶液（2〇毫 升）之間作分液處理。將水層以二氯f烧(3 χ 3〇毫升）逆萃 取。使合併之有機層以硫酸賴水乾燥，過濾，及濃縮。 135510-2 -210· 200924790 使用羥基醯胺產物73m，無需進一步純化。 步驟N :
將羥基醯胺73m (1毫莫耳）在20毫升無水二氯甲烷中之溶 液，以Dess-Martin過填烧（2.5毫莫耳）處理。將反應混合物於 0 室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液（20 毫升）與飽和碳酸氫鈉水溶液（10毫升）處理，並攪拌15分 鐘。將混合物以二氯甲烷（3 X 30毫升）萃取。使合併之有機 層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使酮醯胺產物73η 藉管柱層析純化。 步驟Ο :
使N-Boc保護胺73η (0.1毫莫耳）溶於5毫升在二氧陸圜中 之4Μ HC1溶液内。將所形成之溶液攪拌30分鐘，然後在減 壓下蒸發，獲得胺鹽酸鹽產物73〇。 步驟Ρ : 135510-2 -211 - 200924790 ❹
使胺鹽酸鹽73〇 (0.1毫莫耳）溶於5毫升_翕 ， —虱T烷中，並以 20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著以異氰酸酯釘c (〇 η毫莫 耳）在甲苯中之溶液處理。將混合物攪拌5小時，然後以％ 毫升二氣甲烷稀釋，且以硫酸鎂脫水乾燥。過濾混合物 及在減壓下濃縮。使產物73ρ於矽膠上藉管柱層析純化。 步驟Q :
使SES'保護胺73Ρ (0.1毫莫耳）溶於2毫升DMF中，並以氟 化鉋（0.4毫莫耳）處理。將反應混合物於室溫下攪拌4小時， 且傾倒在水（1〇毫升）上。將混合物以醋酸乙酯（3 χ 2〇毫升） 萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減 壓下漢縮。使巨環狀胺73於矽膠上藉管柱層析純化。 製備實例74 :下式之製備： 步驟A : 135510-2
212- 200924790
使N-B〇c胺65η (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至 〇 C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酉旨 ^ 27b在曱苯中之溶液（1.2當量，0.6毫升在甲苯中之α2Μ溶 液）’並持續擾拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下授拌2小時。以二氯曱烧（60毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於石夕 膠上層析（梯度液：丙酮/己烧；1:9至1:1)，而得產物74 (45 毫克 ’ 59%) ’ 為白色固體。1 H NMR (500 MHz, CDC13) : 5 8,11 (br s, 1H), 7.40-7.69 (br s, 1H), 6.08-6.43 (br s, 1H), 5.91 (dd, t, 1H, J=5.6, q 10.4, 17.3 Hz), 5.70 (br s, 1H), 5.29 (dd, 1H, J=1.2, 17.3 Hz), 5.24 (dd, 1H, J=1.2, 10.4 Hz), 4.66 (d, 1H, J=9.4 Hz), 4.46 (br s, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.25 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.06 (m, 2H), 3.98 (m, 1H), 3.71 (dq, 5.6, 11.6 Hz), 3.64 (ddd, 1H, J=5.0, 5.3, 9.7 Hz), 3.25 (m, 1H), 2.88 (d, 1H, J=13.5 Hz), 2.47 (br s, 1H), 2.19 (d, 1H, J=11.6 Hz), 1.39 (s, 9H), 1.28-1.99 (m, 22H), 1.21 (d, 3H, J=5.6 Hz), 1.13 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 0.91 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.7, 173.0, 171.3, 159.4, 157.0, 133.4, 117.7,75.2, 67.7, 61.2, 60.8, 55.6, 54.6, 48.7, 42.2, 36.3, 31.6, 28.9, 27.9, 27.8, 27.1,
26.8, 25.9, 24.8, 24.0, 23.6, 21.9, 21.5, 19.4, 15.8, 13.4 ppm ； M 135510-2 -213- 200924790 C37H62N5〇8S [M+H]+ 之 HRMS 計算值：7364319，實測值 736.4325. 製備實例75:下式之製備：
步驟A :
二氣曱烷中之溶液，以 環丙基異氰化物（Oakwood Prod.，2,0當量，ο.%毫升，d 〇 8) Ο 與醋酸（2當量，0.16毫升，dl.〇49)處理。將混合物於室溫下 攪拌5小時。在減壓下移除所有揮發性物質，及使殘留物於 矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；15:85至55:45)，而得產物 75a (740毫克，83%)，為白色固體。 步驟B :
將醋酸酯75a (740毫克）在20毫升THF/水之2:1混合物中之 溶液’以氫氧化鋰單水合物（2 5當量，125毫克）處理，並搜 135510-2 -214- 200924790 拌约30刀鐘，直到當藉TLC分析（醋酸乙酯/己烷；8:2)測定 寺所有起始物質已消耗為止。將反應混合物以5〇毫升飽 和碳酸氫納水溶液稀釋，並以二氯甲燒(3χ8〇毫升）萃取。 使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮，而得 產物75b (688毫克’ 98%)，為無色半固體，使用之而無需進 一步純化。 步驟C :
將羥基醯胺75b (1.192毫莫耳）在25毫升無水二氯曱烷中 之溶液’以Dess-Martin過碘烷（2.0當量，L01克）處理。將反 應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉 水溶液（30毫升）處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉 水溶液（30毫升），且再持續攪拌1〇分鐘。以二氣曱烷（3χ8〇 〇 毫升）萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過 滤’及濃縮。使殘留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷； 5:95至4:6)，而得產物7Sc (476毫克，69%)，為白色固體。 步驟D :
使N-Boc胺75c (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 135510-2 •215- 200924790 下移除所有揮發性物質’並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至 0 c。然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後，逐滴 添加異氰酸酯56e之溶液（1.2當量’ 0.59毫升在甲苯中之 α216Μ溶液），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合 物於室溫下攪拌2小時。以二氣曱烷（7〇毫升）稀釋反應混合 物’並以硫酸鎂脫水乾燥，過濾’及在減壓下濃縮。使殘 留物於矽膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；1:9至1:1)，而得產 物 75 (41 毫克 ’ 53%)，為白色固體。1H NMR (500 MHz, CDC13): δ 8.12 (br s, 1H), 7.40-7.70 (br s, 1H), 6.28 (br s, 1H), 5.68 (br s, 1H), 5.37 (br s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.49 (br s, 1H), 4.22 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.05 (dd, 1H, J=5.0, 10.4 Hz), 3.94 (d, 1H, J=1.6 Hz), 3.88 (dd, 1H, J=10.4, 10.7 Hz), 3.82 (q, 1H, J=11.0 Hz), 3.69 (m, 1H), 3.62 (ddd, 1H, J=5.0, 5.6, 9.4 Hz), 3.20 (m, 1H), 2.89 (ddd, 1H, J=3.4, 7.2, 14.8 Hz), 2.55 (d, 2H, J=17.0 Hz), 2.48 (d, 2H, J=17.0 Hz), 1.79-1.99 (m, 4H), 1.28-1.69 (m, 10H), 1.14 ❹(d, 3H, J=6.0 Hz), 1.10 (s, 6H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 9H), 0.90 (m, 2H), 0.83 (s, 3H), 0.71 (m, 2H) ； 13 C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.8, 172.8, 171.5, 160.9, 157.8, 75.5, 68.1, 60.8, 57.2, 55.9, 48.7, 46.8, 35.2, 29.3, 28.6, 28.3, 27.7, 26.9, 26.8, 24.8, 24.4, 23.1, 19.3, 16.3, 13.6, 6.8 ppm ； M C39H63N608[M+H]+之HRMS計算值：743.4707，實測值743.4686. 製備實例76 :下式之製備： 135510-2 -216- 200924790
步驟A :
使㈣〇c胺75c(60毫克）溶於1〇毫升在二氧陸園中之彻 HCW液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置過 夜。使所形成之胺鹽溶於5毫升二氯甲烷中，且冷卻至〇。〇。 然後添加10滴飽和碳酸氫鈉水溶液。1〇分鐘後逐滴添加 異氰酸酯63e之溶液（1.2當量，〇95毫升在甲苯中之〇131厘溶 液），並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下擾拌3小時。以二氯甲烷（70毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物76 (54 毫克，72%)，為白色固體。1 H NMR (500 MHz，CDC13) : δ 8.22 (br s, 1H), 7.58 (br s, 1H), 6.13 (br s, 1H), 5.75 (br s, 1H), 5.15 (d, 1H, J=8.5 Hz), 4.68 (br s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.28 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.06 (dd, 1H, J=4.7, 10.4 Hz), 3.99 (dd, 1H, J=9.1, 9.7 Hz), 3.60 (m, 2H), 3.47 (dd, 1H, J=12.2, 13.2 Hz), 3.19 (m, 1H), 3.07 (m, 3H), 2.94 (s, 3H), 2.87 (ddd, 1H, J=4.0, 7.8, 15.1 Hz), 1.72-1.99 (m, 4H), 1.37 (t, 3H, J=7.5 Hz), 135510-2 •217· 200924790 1.27-1.68 (m, 9H), 1.21 (d, 3H, J=6.0 Hz), 1.13 (m, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.89 (s, 3H), 0.87 (m, 2H), 0.71 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 199.5, 172.8, 171.6, 160.8, 158.1, 75.8, 68.4, 60.6, 56.2, 54.4, 50.4, 48.5, 45.7, 34.7, 34.5, 32.1, 31.6, 28.6, 27.8, 27.7, 27.0, 26.9, 26.7, 24.9, 24·6, 23.0, 19.2, 16.2, 13.5, 8.5, 6.7 ppm;對 C35 H6 06 00 [M+H]+
之 HRMS 計算值：725.4272，實測值 725.4292. 製備實例77:下式之製備：
使N-Boc胺75c (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氣甲烷中，且冷卻至 0 C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酯 27b在甲笨中之溶液（i 2當量’0.6毫升在曱苯中之〇 溶 液）’並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下攪拌2小時。以二氯曱烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 135510-2 •218- 200924790 膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物77 (50 毫克 ’ 65%)，為白色固體。1 H NMR (500 MHz, CDC13) : <5 8.12 (br s, 1H), 7.33-7.63 (br s, 1H), 6.07-6.47 (br s, 1H), 5.67 (br s, 1H), 4.65 (d, 1H, J=9.7 Hz), 4.45 (br s, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.24 (d, 1H, J=l〇.7 Hz), 4.07 (dd, 1H, J=5.0, 10.7 Hz), 3.70 (dq, 1H, 5.9, 9.7 Hz), 3.64 (ddd, 1H, J=5.0, 5.6, 9.7 Hz), 3.24 (m, 1H), 2.89 (ddd, 1H, J=3.7, 7.5, 14.5 Hz), 2.88 (m, 1H), 2.47 (br s, 1H), 2.18 (d, 1H, J=12.6 Hz), 1.74-1.97 (m, 5H), 1.39 (s, 9H), 1.27-1.73 (m, 17H), 1.20 (d, 3H, J=6.3 Hz), 1.11 (m, 1H), 1.04 (s, ® 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (m, 2H), 0.73 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.7, 173.0, 171.3, 161.0, 157.0, 75.2, 67.8, 61.1, 60.8, 55.5,
54.6, 50.1, 48.6, 36.3, 31.6, 28.8, 27.9, 27.0, 26.9, 25.9, 24.8, 24.0, 23.6, 23.1，21.9，21.5, 19.4，15.8，13.4，6.9，6.8 ppm,對 C37H62N508S
[M+l]+之 HRMS 計算值：736.4319，實測值 736.4329. 製備實例78
步驟A :
使N-Boc胺65n (60毫克）溶於10毫升在二氧陸圜中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘。在減壓 135510*2 -219- 200924790 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至 〇 C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酯 59a在曱笨中之溶液（1 2當量，〇6毫升在甲苯中之〇 2M溶 液），並持續擾拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下攪拌3小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎮脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/(己院-二氣甲烧；1:1) ; 1:9至1:1)， 而得產物78 (51毫克，67%) ’為白色固體。1 η NMR (CDC13,500 MHz) δ 8.17 (br s, 1H), 6.42-6.79 (br s, 1H), 5.90 (dd, t, 1H, J=5.6, 10.7, 17.0 Hz), 5.73 (br s, 1H), 5.57 (br s, 1H), 5.27 (d, 1H, J=17.0 Hz), 5.22 (d, 1H, J=10.0 Hz), 4.62 (dd, 1H, J=9.1, 9.7 Hz), 4.52 (br s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.86-4.11 (m, 4H), 3.64 (m, 3H), 3.17 (m, 2H), 2.74 (d, 1H, J=11.9 Hz), 2.24 (d, 1H, J=17.3 Hz), 2.10 (d, 1H, J=17.0 Hz), 1.95 (m, 4H), 1.24-1.68 (m, 11H), 1.16 (d, 3H, J=5.9 Hz), 1.11 (m, 1H), 1.02 (s, 3H), 1.01 (s, 6H), ^ 0.95 (s, 9H), 0.87 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) 5 196.8, 172.9, Ό 171.6, 170.7, 159.4, 158.2, 133.6, 117.5, 75.7, 68.2, 60.8, 56.0, 55.3, 48.5, 46.8, 46.2, 44.9, 42.3, 35.7, 34.8, 32.3, 31.6, 30.2, 28.6, 28.4, 27.8, 27.7, 27.1，27.0，26.8，24.8，24.5, 19.3，16.5，13.6 ppm.對 C39H65N607 [M+l]+之 HRMS計算值：729.4915，實測值 729.4917. 135510-2 -220- 200924790 製備實例79
步驟A :
/ w /八川笔斤隹一虱陲園中之4 & HC1/奋液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至 0 c然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酯 %在甲苯中之溶液（1.2當*，G.6毫升在曱苯中之〇·2Μ溶 液），並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 G下擾拌3小時。以二氯甲烷（60毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/(己烷-二氯甲烷1:1) ; 1:9至1:1)，而 得產物79 (36毫克’ 48%)，為白色固體。1 η NMR (CDC13, 500 MHz) δ 8.19 (br s, 1H), 6.38-6.70 (br s, 1H), 5.73 (br s, 1H), 5.55 (d, 1H, J=7.8 Hz), 4.61 (t, 1H, J=9.7 Hz), 4.51 (br s, 1H), 4.27 (m, 2H), 4.05 (dd, 1H, J=5.0, 10.4 Hz), 3.95 (dd, 1H, J=9.4, 9.7 Hz) ； 3.62 (m, 3H), 3.18 (m, 2H), 2.90 (ddd, 1H, J=3.7, 7.2, 14.8 Hz), 2.73 (d, 1H, J=12.6 Hz), 2.21 (d, 135510-3 221 · 200924790 1H, J=17.0 Hz), 2.09 (d, 1H, J=17.3 Hz), 1.93 (br s, 4H), 1.27-1.68 (m, 11H), 1.15 (d, 3H, J=5.9 Hz), 1.11 (m, 1H), 1.02 (s, 3H), 1.00 (s, 6H), 0.94 (s, 9H), 0.87 (m, 2H), 0.86 (s, 3H), 0.73 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 197.1, 172.9, 171.6, 170.6, 160.9, 158.2, 75.6, 68.3, 60.7, 56.0, 55.3, 48.5, 46.7, 46.3, 44.9, 35.7, 34.8, 32.4, 31.6, 30.2, 29.7, 28.6, 28.5, 27.8, 27.7, 27.0, 26.7, 24.8, 24·7, 23.1, 19.3, 16.5, 13.6, 6.7, 6.6 ppm.對 C39H6 5 N607[M+1]+之HRMS計算值：729.4915，實測值 729.4926. 製備實例80
〇 使N-Boc胺52 (60毫克）溶於l〇毫升在二氧陸圜中之4Μ Ηα 溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘《在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯曱烷中，且冷卻至〇 C然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異i酸醋 8〇a在曱苯中之溶液（1.2當量，〇8毫升在甲苯中之〇155厘溶 液），亚持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下攪拌3小時。以二氯甲烷（6〇毫升）稀釋反應混合物，並以 135510-3 -222- 200924790 硫酸鎂脫水乾燥，過濾’及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/己烧；2:8至6:4)，而得產物80 (41 毫克，61%)，為白色固體。iH NMR (CDC13500 MHz) 5，8.01 (d， 1H，J=8.2 Hz), 7.65 (br s，1H)，6.01 (br s，1H)，5.91 (dd，t，1H，J=5.6, 10.0, 17.0 Hz), 5.68 (dd, 1H, J=9.1, 9.4 Hz), 5.27 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.23 (dd, 1H, J=1.2, 10.0 Hz), 5.20 (m, 1H), 4.98 (br s, 1H) ； 4.59 (s, 1H), 4.13 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.01 (m, 3H), 3.89 (ddd, 1H, J=2.2, 10.4, 10.7 Hz), 3.79 (dd, 1H, J=3.4, 12.9 Hz), 3.76 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.36 (dd, 1H, J=4.1, o 7.5 Hz), 3.31 (m, 1H), 3.18 (br s, 1H), 3.14 (br s, 1H), 2.22 (d, 1H, J=10.7 Hz), 2.07 (br s, 2H), 1.73-2.00 (m, 5H), 1.25-1.70 (m, 11H), 1.16 (m, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.96 (s, 9H), 0.86 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.8, 177.4, 172.1, 171.3, 159.3, 157.9, 133.4, 117.7, 71.4, 70.7, 60.7, 56.7, 53.4, 50.8, 48.6, 45.4, 45.2, 42.2, 39.4, 34.7, 33.1, 32.2, 31.0, 28.7, 27.7, 27.5, 27.3, 26.9, 24.3, 19.3, 13.5 ppm.對 C38H59N608[M+1]+之 HRMS 計算值：727.4394,實測值 727.4387.
步驟A :
135510-3 -223 - 200924790 使N-B〇c胺65η (60毫克）溶於10毫升在二氧陸園中之4M HC1溶液内。將所形成之溶液於室溫下攪拌3〇分鐘。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時。使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至 〇 C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸西旨 80a在甲笨中之溶液（1.2當量，〇.8毫升在甲苯中之〇 J55M溶 液）’並持續攪拌1〇分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 下攪拌3小時。以二氯甲烷(60毫升）稀釋反應混合物，並以 ❹ 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物81 (54 毫克 ’ 70%) ’ 為白色固體。1 H NMR (CDC13，500 MHz) <5，8.12 (br s, 1H), 7.39-7.79 (br s, 1H), 6.29 (br s, 1H), 5.91 (dd, t, 1H, J=5.9, 10.4, 17.0 Hz), 5.71 (br s, 1H), 5.40 (br s, 1H), 5.27 (dd, 1H, J=1.2, 17.0 Hz), 5.23 (dd, 1H, J=1.2, 10.4 Hz), 4.67 (dd, 1H, J=7.8, 8.1 Hz)； 4.50 (br s, 1H), 4.24 (d, 1H, J=10.7 Hz), 4.07 (dd, 1H, J=5.3, 10.4 Hz), 4.03 (m, 1H), 3.97 (ddd, 1H, J=5.6, 5.9, 15.7 Hz), 3.81 (m, 2H), 3.73 (m, 1H), 3.67 (d, 1H, tl J=12.2 Hz), 3.62 (m, 1H), 3.20 (s, 2H), 3.07 (s, 1H), 2.29 (d, 1H, J=11.0 Hz), 2.07 (br s, 3H), 1.93 (br s, 2H), 1.83 (br s, 3H), 1.28-1.68 (m, 10H), 1.17 (d, 3H, J=5.9 Hz), 1.11 (m, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 9H), 0.83 (s, 3H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) <5 198.5, 177.1, 172.8, 171.5, 159.4, 158.0, 133.4, 117.7, 75.5, 68.1, 60.8, 57.4, 55.9, 48.7, 45.4, 42.3, 40.4, 34.8, 32.8, 31.7, 28.6, 27.8, 27.6, 27.4, 26.9, 26.8, 24.7, 24.4, 19.4, 16.2, 13.5 ppm.對 C39H61N608[M+1]+之 HRMS計算值：741.4551，實測值 741.4543. 135510*3 -224·
V 200924790 製備實例82
步驟A :
使N-Boc胺75c (6〇毫克）溶於1〇 HC1溶液内。
。在減壓 下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小 時使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氯甲烷中，且冷卻至 〇C。然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸酯 8〇a在甲苯中之溶液（12#量，〇8毫升在甲苯中之㈣和容 液），並持續攪拌10分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫 G 下攪拌3小時。 以二氣甲炫（60毫升）稀釋反應混合物，並以 硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽 膠上層析（梯度液：丙酮/己烷；2:8至6:4)，而得產物82 (50 毫克 ’ 65%) ’ 為白色固體。1 η NMR (CDC13，500 MHz) <5 8.12 (br s, 1H), 7.38-7.68 (br s, 1H), 6.28 (br s, 1H), 5.68 (br s, 1H), 5.39 (br s, 1H), 4.66 (dd，1H，J=7.5, 7.5 Hz), 4.49 (br s，1H), 4.23 (d，1H, J=10.4 Hz)，4.06 (dd, 1H, J=5.〇, 10.4 Hz) ； 3.81 (m, 2H), 3.71 (m, 1H), 3.67 (d, 1H, J=12.2
Hz), 3.61 (m, 1H)} 3.19 (br s, 2H), 3.07 (s, 1H), 2.89 (ddd, 1H, J=3.7, 7.5, 135510-3 -225- 200924790 14.8 Hz), 2.29 (d, 1H, J=11.0 Hz), 1.98-2.13 (m, 3H), 1.75-1.96 (m, 6H), 1.26-1.67 (m, 9H), 1.17 (d, 3H, J=5.9 Hz), 1.10 (m, 1H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 9H), 0.90 (m, 2H), 0.83 (s, 3H), 0.72 (m, 2H) ； 13C NMR (CDC13, 125 MHz) δ 198.9, 178.8, 172.8, 171.5, 160.9, 158.0, 75.5, 68.1, 60.8, 57.4, 55.9, 48.7, 45.4, 40.2, 34.8, 32.8, 31.7, 28.6, 27.8, 27.7, 27.4, 26.9, 26.8, 24.8, 24.4, 23.1, 19.3, 16.2, 13.5, 6.9, 6.8 ppm. 製備實例83
❹
使N-Boc胺33 (60毫克）溶於i〇毫升在 礼1¾ El甲之4M
溶液内°將所形成之溶液於室溫下授拌3G分鐘。在減壓下 移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真訂放置3小時。 使所形成之胺鹽溶於5毫升無水二氣甲烧中，且冷卻至叱。 然後添加20滴飽和碳酸氫鈉水溶液，接著為異氰酸雜&在 甲笨中之溶液U.2當量，〇,8毫升在甲笨中之〇讀溶液）， f持續㈣K)分鐘。移除冷卻浴，且將混合物於室溫下授 拌3小時。以二氯甲烷（6〇毫 稀釋反應此合物’並以硫酸 、無，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於石夕膠上 135510-3 -226- 200924790 層析（梯度液：丙酮/己烷；I:9至1:1)，而得產物83 (63毫克， 81%) ’為白色固體。 實例化合物係示於表1中。關於化合物之Ki值係按下述 分級： 關於Ki值之種類"A"小於100nM ’關於幻值之種類，·Β，，大於 或等於ΙΟΟηΜ，但小於1 ’及關於幻值之種類C大於或 等於1 _。 表1
-227 - 135510-3 200924790 ❹
5Z 6Z 飞〇斗。 7Z H -V^N】NYNY^^ 0 8Z /-f H hWAN^ -° 9Z H h^YMA* - 10Z X ▽ 0 OvN^A^nh 135510-3 -228- 200924790
11Z A H义广 〇 12Z Y J J H H^yW^ 13Z Y 。J W〇 H 14Z y 。彳 u h 息 ^iNtC〇 15Z 〇^H %iNtC0 16Z ^iNtC0 135510-3 -229- 200924790
17Z 18Z V 0 ^ 乂 η η 19Z Ο^Η 息 Μ/η %TNtC〇 20Z V 0， η Η Η〇ΎΚΤν^ 21Z X Η ^ η η η WntVnh ^xNtC0 22Z X Η ^ ^ Ο Η hWN^YNH ^iNtC0 135510-3 -230- 200924790
❿ 23Z 〇 H 24Z V 0 J 〇 Η H W U 25Z X 〇 y Ο,Ηη hWWH 26Z X 〇 v ^HH hWWH ^iNtC〇 27Z A H ^ Y ^ Η H WNrVNH 免u。 28Z X γ 0 "^ySVh n 0ntn^° 0 j) ° 135510-3 -231 - 200924790
29Z X 〇 Η hWNyVNH ° 30Z α η 9 y Ο "VynyVh 。夕。 31Z X 1 〇,Η„ %τΝχΧό 32Z X J c^YX^°。夕。 33Z X 。J Ο,ηη h^yVN^ %τΝχΧό 34Z X 。J α Η Η WN( %τΝ丈。）。 135510-3 -232- 200924790
35Z η ^ y α η h WnyVnh %tn丈。）。 36Z r>HH 37Z Oh Η^γΜ/Η 38Z v 0 γ aH h W'fi1 39Z X h x Y 〇 Η H WNX\NH 40Z r〇^xNtC〇 135510-3 - 233 - 200924790
41Z U H 0 42Z r〇 H H $YRA- 43Z an 44Z Π Η H WKVV^ VS^NYN^^。0 N ° 45Z %INtCj 46Z U ^ Η H ^X'r1/ 135510-3 -234- 200924790
135510-3 47Z 48Z y >CN^h — °) 〇 49Z A H XY ^γ^ΝύΝΗ 50Z ^ hh〇^syV^ 0 51Z I Η 〜Tt^j〇 52Z 1 η ^TNtC〇 - 235 - 200924790
53Z 1 X Η ^ ^ 54Z V 〇 y 〇 Η hWWH ^τΝχ^ 55Z / Γ\ Η ί Υ Λ Η h\VyVnh 56Z 57Z V 0 γ U，Η h5TWH "kc5iNt^ 58Z V 0 一 ^τΝχ^ 135510-3 - 236 - 200924790
59Z 、〇 " Wd 吃丫 ° 60Z V 0 γ ，Η Η W WH 61Z A Η i Υ Η Η WN^VNH 〇^Υχ^_} 62Z 够Ν々少 63Z X 〇 γ 64Z V 0 J °V 135510-3 - 237 - 200924790
65Z V o J 。妙丈》 66Z Γ^ν^Λ^η 0 67Z j "^VA^ τό^ΥΧ^0 0 j) 〇 68Z 义乂 H息^^ 69Z y 0 ^ ^5ιΝτ^° V 70Z V 0 γ .W H HWfT1 135510-3 - 238 · 200924790
71Z y 〇 一 0 72Z \ X Η 1 Υ Η η 9WVh 〇V^NTNr^) 73Z η h&M/h 七 TNtCj〇 74Z ^ Η Η 〇ύκύ\ν^ ^NYNY^J 0 75Z 如 Ntco 76Z V 0 γ 数Η 77Z 135510-3 - 239- 200924790
78Z Ο 冬 Ο 79Z 冬 Ο 80Z ,ΗΗ$Ϊ^ ^TNtCO 81Z ,ΗΗ$γ^ ^τΝχΧό 82Z X ν ν.〇_Η 83Z X 0 ^ 84Z -η η Η^γΜχ^ ^TNtC〇 135510-3 •240- 200924790
85Z λχΗ ^5τΝχΧό° 86Z 1 Η ΗθγΚχν^ 87Z ^TNtC〇 ° 88Z 89Z Η Η $υηΛΥη 90Z Q Η 够 ΝχΧό 91Z Ύ' 0 # J Η ΗΦγΜγΝΗ 4了丫NyV £丫 135510-3 -241 - 200924790 92Z Y A \ y h ^5iNtC〇° 93Z X A \ H 0 94Z Y A - OcHH ^xNtC〇° 95Z Q H 96Z 97Z Q H 響tco 98Z y . η h An^ ^xNtCj° 135510-3 -242- 200924790
99Z 一ν)ηη 100Z 入乂 101Z ο=ζ^ ki。 〇 r<! 102Z ^TNxiCj d、o 103Z J H H^A^H yCr\uYH^〇° 104Z 0 h 。够 Nx^j 135510-3 -243 · 200924790
105Z Q Η 106Z 0 H hWKtV^ ^TNtCj° 107Z '〇v η η^Ά^η 够 NtC0〇 108Z X 。/ 够N tco 109Z W H hVYyV 够 NtCO 110Z y^° h h^A^H 135510-3 -244- 200924790
111Z H A1 Y丫 〇 112Z 〇 F 113Z 114Z χΗ Η$Υ^ F 115Z 〆 H Η^γΜ/Η F 135510-3 •245 - 200924790
116Z 。1乃丫 F 117Z 々 η ^NTNr^- 0 118Z x 十〇 119Z yA η η5υΚΑ^Η 〇 120Z R Η Η^υΜί/η 口。β F 135510-3 -246- 200924790
121Z
122Z
123Z
124Z
125Z
135510-3 247- 200924790
表1之化合物具有下列結合活性。化合物1Z-10Z、12Z-51Z、 53Z-57Z、59Z-100Z、103Z-110Z、112Z、115Z-117Z、119Z-122Z、 124Z、125Z、127Z及128Z具有種類A結合活性。化合物52Z、 58Z、102Z、111Z、114Z、118Z 及 123Z 具有種類 B 結合活性。 ® 化合物113Z具有種類C結合活性。 本發明係關於新穎HCV蛋白酶抑制劑。此利用性係以其 抑制HCV NS2/NS4a絲胺酸蛋白酶之能力明示，如藉由下述活 體外檢測所証實。 HCV蛋白酶抑制活性之檢測： 分光光度測定檢測：對HCV絲胺酸蛋白酶之分光光度測定 檢測係在本發明化合物上，按照由R. Zhang等人， 所oc/zemki?% 270 (1999) 268-275所述之程序進行，其揭示内容係 135510-3 - 248 - 200924790 併於本文供參考。以色原質酯受質之蛋白水解為基礎之檢 測，係適用於連續監測HCV NS3蛋白酶活性。該受質係衍生 自 NS5A-NS5B 接合順序之 P 侧（Ac-DTEDVVX(Nva)，其中 X = A 或P)。其C-末端羧基係以四種不同發色團醇類（3-或4-硝基 酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮酚）之一酯化。下文 所提出者為此等新穎分光光度測定酯受質之合成、特徵鑒 定，及應用至HCV NS3蛋白酶抑制劑之高通過量篩檢與詳細 動力學評估。 ®物料與方法： 物料：供檢測相關緩衝劑用之化學試劑係得自Sigma化學 公司（St. Louis, Missouri)。供肽合成用之試劑係得自Aldrich化 學品，Novabiochem (San Diego, California)、Applied Biosystems (Foster City, California) A Perseptive Biosystems (Framingham, Massachusetts) ° 肽係以手動方式或在自動化ABI 431A型合成器（得自Applied Biosystems)上合成。UV/VIS 分光計 LAMBDA 12 型係得自 Perkin ❾ Elmer (Norwalk, Connecticut)，而 96-井 UV 板係得自 Coming (Coming, New York)。預熱板塊可得自 USA 科學（Ocala, Florida)， 而96-井板旋渴器係得自Labline儀器（Melrose Park，Illinois)。具 有單色計之Spectramax Plus微滴定板讀取器係得自Molecular裝 置（Sunnyvale, California)。 酵素製備：重組異種二聚體HCV NS3/NS4A蛋白酶（菌種la) 係利用先前發表之程序（D. L. Sali等人，历37 (1998) 3392-3401)製成。蛋白質濃度係藉由Biorad染色方法，使用先 前藉由胺基酸分析定量之重組HCV蛋白酶標準物測定。在 135510-3 -249- 200924790 檢測引發之前，利用Biorad Bio-Spin P-6預填充柱，將酵素儲 存緩衝液（50 mM磷酸鈉pH 8.0, 300 mM NaCl，10%甘油，0.05%月 桂基麥芽苷及10 mM DTT)交換成檢測缓衝液（25 mM MOPS pH 6.5, 300 mM NaCl，10% 甘油，0.05% 月桂基麥芽：y：，5；c/M EDTA 及 5 //M DTT)。 受質合成與純化：受質之合成係按由R. Zhang等人（同前 出處）所報告進行，並經由使用標準擬案，將Fmoc-Nva-OH 固定至氣化2-氯基三笨曱烷樹脂而引發（Κ· Barios等人，/m. /.
A 好 /Voidw 办又，37 (1991)，513-520)。接著使用 Fmoc 化學，將肽 組合在一起，無論是以手動方式或在自動ABI 431型肽合成 器上。使經N-乙醯化及完全保護之肽片段自樹脂分裂，無 論是藉由二氣曱烷（DCM)中之10%醋酸（HOAc)與10%三氟乙 醇（TFE)，歷經30分鐘，或藉由DCM中之2%三氟醋酸（TFA)， 歷經10分鐘。使合併之濾液與DCM洗液以共沸方式蒸發（或 藉由Na2C03溶液重複萃取），以移除使用於分裂中之酸。使 ❹ DCM相以Na2S04脫水乾燥，並蒸發。 使用標準酸-醇偶合程序，將酯受質組合在一起（K. Holmber 等人，Acto C/iem. Scam/.，B33 (1979) 410-412)。使肽片段溶 於無水吡啶（30-60毫克/毫升）中，於其中添加10莫耳當量發 色團與催化量（0.1當量）之對-甲苯磺酸（pTSA)。添加二環己 基碳化二亞胺（DCC，3當量），以引發偶合反應。產物形成 係藉HPLC監控，並可在室溫下反應12-72小時之後發現完 成。於真空下蒸發吡啶溶劑，並藉由與曱苯共沸蒸發而進 一步移除。使肽酯以DCM中之95% TFA去除保護兩小時，並 135510-3 -250· 200924790 以無水乙醚萃取三次，以移除過量發色團。使經去除保護 之受質於C3或C8管柱上藉由逆相HPLC，以30%至60%乙腈 梯度液（使用六份管柱體積）純化。在HPLC純化後之總產率 可為大約20-30%。分子質量可藉由電喷霧離子化作用質量 光譜確認。將受質於乾燥下以乾粉形式儲存。 受質與產物之光譜：受質及其相應發色團產物之光譜， 係在pH 6.5檢測緩衝液中獲得。消光係數係使用多重稀釋 液，在1公分比色杯中之最適宜偏離峰波長（對3-Np與HMC ® 為340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫微米） 下測得。最適宜偏離峰波長係被定義為在受質與產物間之 吸光率上產生最大分率差異（產物OD -受質OD)/受質OD)之 波長。 蛋白酶檢測：HCV蛋白酶檢測係於30°C下，在96-井微滴 定板中，使用200微升反應混料進行。使檢測緩衝液條件（25 mM MOPS pH 6.5, 300 mM NaCl，10% 甘油，0.05% 月桂基麥芽甞， ^ 5 /zM EDTA及5 _ DTT)，對NS3/NS4A異種二聚體達最佳化（D. L. Sali等人，同前出處）。典型上，係將150微升缓衝劑、受 質及抑制劑之混合物放置在井中（DMSO之最後濃度$ 4 % v/v)，並允許在30°C下預培養大約3分鐘。然後，使用五十 微升檢測緩衝液中之預先溫熱蛋白酶（12 nM，30°C )，以引 發反應（最後體積200微升）。板係使用裝有單色計之 Spectromax Plus微滴定板讀取器，監測適當波長（對3-Np與 HMC為340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫 微米）下之吸光率變化，歷經檢測長度（60分鐘）（可接受之結 135510-3 -251 - 200924790 果I以利用截止濾器之板讀取器獲得）。於Nva與發色團間 之s旨鏈結蛋白分解之分裂作用係於適當波長下，對著作為 對.¾組進行非酵素水解作用之無酵素空白試驗進行監測： 受質動力學參數之評估係涵蓋3〇倍受質濃度範圍（〜㈣〇以 M)進行。初速度係使用、線性回歸測得，而動力學常數係經 由使用非線性回歸分析，使數據吻合至MichaeUsMenten方程 式而獲得（Mac曲線吻合U，K.Raner)。計算轉換數u，假 設酵素為完全活性。 抑制劑與失活劑之評估：競爭性抑制劑Ac_D_(D Gla)_L i_ (Cha)-C-0H (27)、Ac_DTEDVVA(Nva) 〇H 及 Ac DTEDvvp(N㈣ 之抑制常數（κ〇，係於酵素與受質之固定濃度下，根據關 於競爭性抑制動力學之重排Michaelis_Menten方程式：V。/% = + [I]〇/(Ki(1 + [S]°/Km》’其中v。為未被抑制之初速度，Vi為在任 何特疋抑制劑濃度（[I]。）之抑制劑存在下之初速度，而[S]。 為所使用之受質濃度，經由將V0/Vi對抑制劑濃度作圖， 〇 以實驗方式測得。使用線性回歸，使所形成之數據吻合， 並使用所形成之斜率WKid+^o/Kd計算Ki*值。 關於本發明各種巨環所獲得之幻值係示於表1中。自此 等試驗結果’熟練技師將顯而易見的是，本發明化合物具 有作為NS3-絲胺酸蛋白酶抑制劑之優越利用性。 135510-3 - 252-

Claims (1)

  1. 200924790 十、申請專利範圍： 1· 一種顯示HCV蛋白酶抑制活性之化合物或該化合物之對 莩異構物、立體異構物、旋轉異構物、互變異構物或外消 旋物或該化合物或該對掌異構物、立體異構物、旋轉異構 物、互變異構物或外消旋物 或醋，該化合物係選自包括下 了接-鹽或溶劑合物 X j文所列示結構之化合物： ❹ ❹ /NT^X°°
    135510-3 200924790
    135510-3 -2- 200924790
    135510-3 200924790
    135510-3 -4- 200924790
    135510-3 200924790
    135510-3 200924790
    135510-3 •Ί · 200924790
    135510-3 200924790
    135510-3 200924790
    135510-3 -10- 200924790
    2. —種醫藥組合物，其包含至少一種如請求項1之化合物作 為活性成份。 3. 如請求項2之醫藥組合物，其係用於治療與HCV有關聯之 病症。 4.如請求項2之醫藥組合物，其另外包含至少一種藥學上可 接受之載劑。 135510-3 -11 - 200924790 5. 6. 如請求項4之醫藥紐合物，其另外含有至少/種抗病毒劑。 J长頁5之邊藥組合物’其又另外含有至少-種干擾素。 々用长項6之醫藥組合物，#中該至少一禮抗病毒劑為三 唑核：y：，而續5 _ "v —種干擾素為α-干擾素戒經PEG化之干 擾素。 種、、二疵#&HeV有關聯病症之方法’該方法包括對需要此 之至1之病患投予一種醫藥組合物’其包含治療上有效量 〇 種如請求項1之化合物。 9. 如請求項8 、 <方法，其中該投藥為口腔或皮下。 10. 如請求項 / 之化合物，其係呈純化形式。 0 135510-3 12- 200924790 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明: 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：
    135510-1 200924790
    135510-1 -6- 200924790
    135510-1 200924790
    135510-1 200924790
    135510-1 200924790
    135510-1 •10- 200924790
    135510-1 -11 - 200924790
    135510-1 -12- 200924790
    135510-1 -13- 200924790
    135510-1 -14- 200924790
    135510-1 -15-
TW097141895A 2007-10-31 2008-10-30 Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease TW200924790A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11/931,408 US20110150835A1 (en) 2003-09-26 2007-10-31 Macrocyclic Inhibitors of Hepatitis C Virus NS3 Serine Protease

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW200924790A true TW200924790A (en) 2009-06-16

Family

ID=40122958

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW097141895A TW200924790A (en) 2007-10-31 2008-10-30 Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20110150835A1 (zh)
EP (1) EP2209796A1 (zh)
JP (1) JP2011519818A (zh)
CN (1) CN101910195A (zh)
AR (1) AR069098A1 (zh)
CA (1) CA2701787A1 (zh)
CL (1) CL2008003267A1 (zh)
MX (1) MX2010004704A (zh)
PE (1) PE20091164A1 (zh)
TW (1) TW200924790A (zh)
WO (1) WO2009058856A1 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8377962B2 (en) 2009-04-08 2013-02-19 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US9284307B2 (en) 2009-08-05 2016-03-15 Idenix Pharmaceuticals Llc Macrocyclic serine protease inhibitors
MY159958A (en) 2009-12-18 2017-02-15 Idenix Pharmaceuticals Inc 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
US9353100B2 (en) 2011-02-10 2016-05-31 Idenix Pharmaceuticals Llc Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating HCV infections
JP6150726B2 (ja) 2011-03-09 2017-06-21 Jitsubo株式会社 新規な非ペプチド性架橋構造を含む架橋ペプチド、ならびに該架橋ペプチドの合成方法および該方法に用いる新規な有機化合物
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
SG11201509144YA (en) * 2013-06-10 2015-12-30 Sanofi Sa MACROCYCLIC UREA DERIVATIVES AS INHIBITORS OF TAFI<sb>A</sb>, THEIR PREPARATION AND THEIR USE AS PHARMACEUTICALS
US9365615B2 (en) 2013-09-09 2016-06-14 Jitsubo Co., Ltd. Cross-linked peptides containing non-peptide cross-linked structure, method for synthesizing cross-linked peptides, and novel organic compound used in method
EP3046924A1 (en) 2013-09-20 2016-07-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015134560A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
US20170135990A1 (en) 2014-03-05 2017-05-18 Idenix Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
WO2023133174A1 (en) * 2022-01-07 2023-07-13 Merck Sharp & Dohme Llc Protease inhibitors for treating or preventing coronavirus infection

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5698390A (en) * 1987-11-18 1997-12-16 Chiron Corporation Hepatitis C immunoassays
AU7675491A (en) * 1990-04-04 1991-10-30 Chiron Corporation Hepatitis c virus protease
US7244721B2 (en) * 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
TWI280964B (en) * 2003-09-26 2007-05-11 Schering Corp Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease

Also Published As

Publication number Publication date
JP2011519818A (ja) 2011-07-14
CL2008003267A1 (es) 2010-04-16
EP2209796A1 (en) 2010-07-28
AR069098A1 (es) 2009-12-30
US20110150835A1 (en) 2011-06-23
CA2701787A1 (en) 2009-05-07
WO2009058856A1 (en) 2009-05-07
CN101910195A (zh) 2010-12-08
MX2010004704A (es) 2010-05-27
PE20091164A1 (es) 2009-08-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI280964B (en) Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
TW200924790A (en) Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
EP1939213B1 (en) Novel compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
EP1730110B9 (en) Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
JP5368089B2 (ja) Ｈｃｖインヒビター
CA2546290A1 (en) Depeptidized inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
CA2557247A1 (en) Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
JP2007513971A (ja) Ｃ型肝炎ウイルスｎｓ３／ｎｓ４ａプロテアーゼの阻害剤
MXPA06013404A (es) Prolinas sustituidas como inhibidores de serina proteasa ns3 de virus de hepatitis c.
CA2681598A1 (en) Hydrazido-peptides as inhibitors of hcv ns3-protease
JP2010522172A (ja) Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼのｐ１−非エピメリ化ケトアミド阻害剤
MXPA06009811A (en) Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
MXPA06009812A (en) Novel compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
MXPA06009809A (en) Cyclobutenedione groups-containing compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
MXPA06009810A (en) Novel ketoamides with cyclic p4&#39;s as inhibitors of ns3 serine protease of hepatitis c virus
MXPA06009814A (en) Inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease